EduMatSains
Jurnal Pendidikan, Matematika dan Sains http://ejournal.uki.ac.id/index.php/edumatsains

## PENGARUH KONSENTRASI EKSTRAK BIJI DAN KULIT BUAH

## PINANG ( Areca catechu L.) TERHADAP MORTALITAS LARVA NYAMUK Aedes aegypti
Anjela Noya 1* , Djoko Rahardjo 2 , Vinsa Cantya Prakasita 3
1,2,3 Program Studi Biologi, Fakultas Bioteknologi, Universitas Kristen Duta Wacana Diterima: 01 November 2021     Direvisi: 31 Desember 2021     Diterbitkan : 31 Januari 2022

## ABSTRACT
Dengue fever cases in Jayapura often fluctuate, as evidenced by 79 cases in 2019 decreasing to 51 cases in 2020. The  data  shows  that  various  controls  have  been  carried  out  by  the  Jayapura  City  Government  such  as  using abate,  but  the  control  is  considered  to  have  an  adverse  impact  on  the  environment.  Environmentally-friendly control is needed, such as biolarvacides from areca nut. The purpose of this study is to determine the potential extract of areca nut ( Areca catechu L.) seeds, skin and the combination of the two extracts in killing the Aedes aegypti larvae. This study used a Completely Randomized Design in the seed extract test with a concentration of 16000, 17000, 18000, 19000 and 20000 ppm and skin extract with concentrations of 7000, 8000, 9000, 10000 and 11000 ppm. The factorial design was used in the combined extract of 0:100; 25:75; 50:50; 75:25 and 100:0. Each treatment  used  4 replications.    Data  were  analyzed  by  ANOVA  and then  continued  by  Tukey,  LSD  and Duncan tests. The last, data were analyzed by probit analysis to determine LC 50 and LC 90 . The result indicates that areca nut  seed  and  skin  contain  flavonoid,  alkaloid,  palmitic  acid, phenols, terpenoids and  steroids  which are toxic. The killing power of seed extract was 64-97% (24hours) and 100% in all treatments (48hours). Skin extract was 52-88% (24hours) and 58-93% (48hours), while the combination extract was 55 -93% (24hours) and 95-100% (48hours). Concentration of 19000 ppm of seed extract with 95% mortality at 24 hours was effective when  compared to  the  WHO  standard (2005),  while the  skin  extract had  a lower  LC  value  than  the  other two extracts.
Keywords: aedes aegypti, areca nut (areca catechu l.), biolarvacides, mortality

## PENDAHULUAN
Demam  Berdarah Dengue (DBD) merupakan salah satu permasalahan kesehatan  yang  terjadi  di  Indonesia  dan seringkali  mengalami  fluktuasi  kasus  setiap tahun,  begitu  juga  yang  terjadi  di  Kota Jayapura. Kasus DBD di Kota Jayapura pada tahun 2019 mencapai angka 79 kasus dengan kasus tertinggi didapatkan pada Distrik/Puskesmas Abepura dengan 24 kasus.  Pada  tahun  2020  kasus  DBD  di  Kota Jayapura  mengalami  penurunan  menjadi  51
kasus  dengan  kasus  tertinggi  terdapat  pada distrik/puskesmas  Abepura  dengan  21  kasus (Dinas  Kesehatan  Jayapura,  2019;  Dinas Kesehatan Jayapura, 2020).
Pada  data  kasus  DBD  di  atas, pemerintah telah melakukan upaya pengendalian  seperti  penyemprotan  maupun pembagian  insektisida  sintetis  seperti  abate. Pemakaian insektisida sintetis secara berkala akan  mengakibatkan  zat  kimia  terakumulasi pada  makhluk  biologis  yang  masuk  melalui rantai makanan. Hal tersebut dapat
memberikan  dampak  yang  buruk  bagi lingkungan, mempengaruhi keragaman hayati  flora  dan  fauna,  menyebabkan resistensi terhadap vektor, bahkan organisme non  target  yaitu  manusia  (ICMR,  2003). Oleh  sebab  itu  perlu  adanya  pengendalian vektor  menggunakan  bahan  alami  yang ramah lingkungan seperti biolarvasida.
Menurut  Nugroho  (2011),  bahwa pemakaian  larvasida  alami  (biolarvasida) diharapkan  tidak  menimbulkan  resistensi terhadap  vektor  serangga  itu  sendiri  dan tidak  menimbulkan  efek  samping  yang merugikan manusia dan lingkungan.
Penentuan bahan yang akan digunakan untuk pembuatan  larvasida  alami  harus  aman terhadap  manusia  ataupun  organisme  non target  lainnya,  bahan  yang  digunakan  tidak sulit  didapatkan  dan  tidak  memberikan dampak  buruk  pada  kesehatan  manusia (Pratiwi, 2012). Berdasarkan penelitian yang dilakukan  oleh  Mading,  et  al.  (2018)  bahwa pinang  ( Areca  catechu L.)  bermanfaat sebagai  biolarvasida  dalam  membunuh  larva Anopheles  vagus yaitu  vektor  pembawa malaria.  Biji  pinang  ( Areca  catechu L.) mengandung  metabolit  sekunder  bersifat racun  bagi  larva  seperti  flavonoid,  alkaloid, tanin  dan  saponin  (Amudhan  et  al.,  2012). Hasil  penelitian yang  dilakukan  oleh
Cahyani,  et  al.  (2020),  menjelaskan  bahwa dalam  ekstrak  dan  fraksi  kulit  buah  pinang
terdapat senyawa yang sama seperti biji buah pinang  yaitu  flavonoid,  alkaloid,  tanin  dan saponin.  Pemilihan  buah  pinang  dalam penelitian  ini  dikarenakan  buah  pinang merupakan  salah  satu tanaman  yang  tumbuh dalam  segala  musim  dan  tumbuh  subur  di Papua  serta  penggunaan  kulit  buah  belum dimanfaatkan  dengan  baik  oleh  masyarakat lokal  di  Papua,  bahkan  biji  pinang  yang dimakan  pun  kurang  dimanfaatkan  dengan baik.  Oleh  sebab  itu,  pentingnya  dilakukan penelitian  ini  untuk  mengetahui  peran ekstrak biji, kulit  maupun kombinasi  ekstrak kulit  buah  dengan  biji  buah  pinang  terhadap mortalitas larva Aedes aegypti .

## METODE PENELITIAN

## A. Lokasi Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  Fisiologi  Hewan,  Fakultas Bioteknologi,  Universitas  Kristen  Duta Wacana.

## B. Bahan Penelitian
Bahan  utama  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  buah  pinang  yang diperoleh  dari  Jayapura,  Papua,  dan  larva Aedes  aegypti instar  III yang  didapatkan dengan cara melakukan rearing nyamuk.
C. Tahapan Penelitian
1. Preparasi  dan  Ekstraksi  Biji  dan Kulit Buah Pinang
Buah  pinang  dibersihkan  dan  dicuci, setelah itu dibelah dan dipisahkan bagian biji
dan  kulit  kemudian  dikeringkan,  dihaluskan dan  dimaserasi.  Maserasi  yang  dilakukan pada penelitian ini yaitu maserasi bertingkat. Maserasi ini dilakukan selama 3 hari dengan tiga kali pengambilan maserat dan mengganti pelarut  dengan  pelarut  yang  baru.  Simplisia biji  buah  pinang  sebanyak  800  g  dan  dibagi menjadi  2  toples  masing-masing  sebanyak 400 g. Setiap toplesnya dimaserasi bertingkat menggunakan  pelarut  etanol  70%  dengan perbandingan  secara  berturut-turut  1:6,  1:3 dan 1:2.
Simplisia  kulit  buah  pinang  sebanyak 1373  g  dibagi  menjadi  9  toples  masing- masing  sebanyak  150  g.  Setiap  toplesnya dimaserasi  bertingkat  menggunakan  pelarut etanol  70%  dengan  perbandingan  secara berturut-turut  1:10,  1:9  dan  1:7.  Maserat yang  dihasilkan  akan  disaring  menggunakan kain  saring  dan  kertas  saring,  lalu  pelarut dalam  filtrat  akan  diuapkan  memakai rotary evaporator dengan suhu 40℃ dan kecepatan putar  sebesar  50  rpm  sampai  filtrat  agak mengental  dan  sisa  pelarut  yang  tertinggal akan  diuapkan  memakai  oven  dengan  suhu 40℃  hingga  didapatkan crude  extract (ekstrak kental).

## 2. Uji Kuantitatif
Tujuan  pengujian  kuantitatif  untuk mendeteksi  semua  kandungan  metabolit sekunder yang ada pada ekstrak biji dan kulit buah  Pinang,  khususnya  kandungan  yang
dapat  bersifat  racun  bagi  larva.  Pengujian secara  kuantitatif  dilakukan  di  Laboratorium LPPT  UGM  Unit  II  dengan  memakai  GC- MS. Sampel yang dikirim memakai perbandingan 1:1 (Pelarut : Ekstrak).
3. Uji Bioassay
Uji bioassay bertujuan untuk mengetahui kemampuan ekstrak biji, ekstrak kulit  dan  kombinasi  kedua  ekstrak  biji  dan kulit  buah  pinang  dalam  membunuh  larva Aedes  aegypti .  Konsentrasi  yang  dibuat ditentukan  setelah  uji  pendahuluan  terlebih dahulu. Mortalitas pada larva diamati 24 jam sampai  48  jam  dengan  menggunakan  LC 50 dan  LC 90 sebagai  parameternya.  Pengujian bioassay  dinyatakan  berhasil  ketika  larva yang  dipakai  dalam  keadaan  sehat,  ukuran larva  ≥  3,8  mm  dan  ≤  5  mm  atau  lebih  dari larva 2 dan kurang dari larva 4.
Dalam  penelitian  ini  digunakan  2 rancangan berbeda yaitu rancangan percobaan  RAL  dan  factorial.  RAL  dipakai dalam  perlakuan  percobaan  masing-masing ekstrak biji dan kulit buah Pinang, sedangkan perlakuan kombinasi kedua ekstrak memakai rancangan  faktorial.  Perlakuan  ekstrak  kulit memakai  5  konsentrasi  yaitu  7000  ppm, 8000 ppm, 9000 ppm, 10000 ppm dan 11000 ppm,  sedangkan  pada  ekstrak  biji  dipakai  5 konsentrasi  juga  yaitu  16000  ppm,  17000 ppm,  18000  ppm,  19000  ppm  dan  20000 ppm.  Perlakuan  kombinasi  bertujuan  untuk
mengetahui  efektivitas  kombinasi  kedua ekstrak. Perlakuan uji kombinasi  memakai 5 perbandingan  yaitu  0:100  ml;  25:75  ml; 50:50  ml,  75:25  ml  dan  100:0  ml.  Kontrol positif  menggunakan  abate  1%,  dan  control negatif  menggunakan  akuades  dan  etanol 1%.  Setiap  perlakuan  dilakukan  4  replikasi. Setiap  perlakuan  menggunakan  25  larva stadium instar III yang dimasukkan ke dalam wadah  yang  dapat  menampung  100-200  mL air  dengan  kedalaman  5  cm  dan  10  cm. Larva  yang  telah  menjadi  pupa  atau  tidak sehat, ataupun terlalu kecil harus diganti dan tidak bisa digunakan bahkan harus dilakukan pengujian  dulang  (WHO,  2005).  Pada  jam ke-24  dilakukan  pengukuran  parameter  pada pH, suhu air dan TDS meter, serta kekeruhan dan  bau  yang  dilihat  berdasarkan  visualisasi mata.

## 4. Analisis Data
Analisis  data  yang  dipakai  yaitu  one  way ANOVA untuk mengetahui kemampuan dan efektivitas  dari  kemampuan  biolarvasida antar  konsentrasi.  Setelah  dilakukan  analisis ANOVA,  dilakukan  analisis  regresi  probit untuk  melihat  nilai  LC50  dan  LC90  pada perlakuan konsentrasi masing-masing ekstrak.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Potensi  dan  Pengaruh  Ekstrak  Biji,

## Kulit  dan  “Kombinasi”  (Campuran) Sebagai Biolarvasida.
Peran  ketiga  ekstrak  tersebut  sangat mempengaruhi mortalitas larva Aedes aegypti, dapat  dilihat  dari  signifikansi  yang didapatkan dari analisis ANOVA yaitu 0,000 yang  berarti  nilai  p  (sig.)  <  0,05. Berdasarkan  nilai  signifikansi  ketiga  uji  di atas  bahwa  terdapat  hasil  rerata  mortalitas Aedes  aegypti pada  ketiga  perlakuan  ekstrak biji,  kulit  dan  kombinasi  berbeda  secara signifikan.  Hasil  ANOVA  yang  didapatkan dilanjutkan  dengan  uji  Tukey,  LSD  dan Duncan. Uji-uji tersebut dipakai karena pada uji  ANOVA  terdapat  perbedaan  yang  nyata, maka dilakukan adanya uji lanjutan tersebut.
Pada  kelompok  ekstrak  biji  buah pinang,  daya  bunuh  tertinggi  terdapat  pada perlakuan 20000 ppm sebesar 97%, sedangkan  pada  ekstrak  kulit  terdapat  pada perlakuan  11000  ppm  sebesar  88%.  Pada ekstrak  kombinasi  dengan  rancangan  acak faktorial  daya  bunuh  tertinggi  terdapat  pada perbandingan  kombinasi 100:0  sebesar 93%. Dari  ketiga  ekstrak  yang  diujikan  terlihat bahwa  ekstrak  biji  buah  pinang  mempunyai daya  bunuh  yang  lebih  tinggi  terhadap  larva Aedes yaitu  pada  jam  ke-48  pada  semua konsentrasi  daya  bunuh  yang  dihasilkan
yaitu  100% karena  konsentrasi  yang  dipakai termasuk dalam konsentrasi yang tinggi.
Menurut  Mading,  et  al.  (2018)  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  dari  biji buah  pinang  ( Areca  catechu L.)  maka semakin  tinggi  persentase  yang  dihasilkan. Faktor  banyaknya  jenis  senyawa  dan  jumlah
bahan  aktif  pada  ekstrak  biji  dan  kulit  buah pinang  diduga  mengambil  peranan  besar terhadap  kematian  larva.  Hal  ini  dibuktikan pada  pengujian  kualitatif  dan  kuantitatif ekstrak biji dan kulit buah pinang yang dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 1. Mortalitas Larva Aedes aegypti selama 24 dan 48 jam Perlakuan Konsentrasi 24 Jam 48 Jam Efektivitas (%)  Efektivitas (%) Biji 16000 ppm 64% 100% 17000 ppm 80% 100% 18000 ppm 94% 100% 19000 ppm 95% 100% 20000 ppm 97% 100% Kulit 7000 ppm 52% 58% 8000 ppm 56% 69% 9000 ppm 75% 81% 10000 ppm 83% 84% 11000 ppm 88% 93% Kombinasi Biji Kulit 0 100 93% 95% 25 75 55% 97% 50 50 81% 99% 75 25 88% 99% 100 0 93% 100% Kontrol Positif Abate 1% 100% 100% Kontrol Negatif Akuades 4% 8% Etanol 1% 4% 10%
Berdasarkan pada tabel 2., dalam ekstrak biji dan  kulit  buah  pinang  terdapat  senyawa- senyawa  yang  dapat  membunuh  larva Aedes aegypti ,  senyawa-senyawa  tersebut  bersifat toksik  pada  larva Aedes  aegypti instar  III. Peran  metabolit  sekunder  sendiri  terbagi menjadi empat yaitu sebagai racun
perut/pencernaan,  racun  kontak,  racun  saraf, maupun  menjadi  racun  pernapasan.  Dalam hal  ini  senyawa-senyawa  dalam  ekstrak  biji dan kulit buah pinang yang berperan sebagai racun  perut/pencernaan  adalah  asam  lemak organik,  alkaloid  dan  terpenoid  Senyawa toksik  akan  menembus  membran  peritrofik
dan  menembus  sel  epitel  hingga  terjadi kerusakan  dan  juga  menembus  membran basal. Sel epitelium midgut ini akan lisis dan terjadi  penurunan  pada  selaput  mukosa. Penurunan tegangan ini akan mengakibatkan terganggunya proses penyerapan dan pencernaan  makanan  sehingga  sel  midgut yang  rusak  akan  membuat  aktivitas  dari enzim dan proses pencernaan tidak optimum
dan  metabolisme  pada  tubuh  larva  akan kacau  sehingga  larva  akan  mati  (Mading, 2018; Ahdiyah & Purwani, 2015).
Senyawa  asam  lemak  organik  yang terdapat  dalam  ekstrak  kulit  dan  biji  buah pinang  juga  berperan  sebagai  racun  perut dengan  cara  yang  sama  yaitu  dengan mengganggu proses metabolisme dan penyerapan nutrisi oleh larva.
Tabel 2. Hasil Uji Kualitatif dan Uji Kuantitatif Ekstrak Biji dan Kulit Buah Pinang
Metabolit Sekunder Biji Buah Pinang  Kulit Buah Pinang Alkaloid - ✓ Arecoline - 5.89% Flavonoid - ✓ 4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5- dihydroxy-6-methyl- - 1.05% Fenol - ✓ (E)-4-(3-Hydroxyprop-1-en-1-yl)-2- methoxyphenol - 4.41% Vanillic acid - 2.01% Asam lemak organik ✓ ✓ 9-Hexadecenoic acid - 1.09% Hexadecanoic acid, methyl ester - 11.35% Hexadecanoic acid, ethyl ester - 2.34% n-Hexadecanoic acid 100% 7.01% Hexadecanoic  acid,  14-methyl-,  methyl ester - 0.53% Methyl 16-hydroxy-hexadecanoate - 0.27% Terpenoid/triterpenoid - ✓ Tetraacetyl-d-xylonic nitrile - 0.41% Phytol (modifikasi oleh alkaloid) - 2.72% Steroid - ✓ Ethyl iso-allocholate - 0.6% 9,12,15-Octadecatrienoic acid, (Z,Z,Z)- - 7.17%
Menurut  penelitian  yang  dilakukan  oleh Putri, et  al .  (2018)  bahwa  senyawa hexadecanoic acid akan membuat pergerakan larva  menjadi  lemah  sehingga  larva  akan mati.  Senyawa  terpenoid  dalam  kulit  buah pinang  akan  bekerja  dengan  baik  sebagai racun perut seperti phytol.
Senyawa-senyawa  dalam  kulit  dan  biji buah  pinang  yang  berperan  sebagai  racun kontak  yaitu  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid dan  steroid. Senyawa-senyawa tersebut akan masuk menembus  kutikula larva  dan merusak  membran  sel  dan  mengakibatkan permeabilitas  rongga  pada  badan  larva sehingga badan larva menjadi rusak (Mading et  al.,  2018).  Menurut  Putri,  et  al.  (2018) bahwa  senyawa  terpenoid  dalam  ekstrak kulit buah pinang dapat menembus kutikula, sedangkan  menurut  Dina  Pratiwi  dalam Yulianti,  et  al.  (2017)  cara  kerja  steroid dalam membunuh larva yaitu membuat larva mengganti  kulit  sehingga  dinding  sel  kitin akan  terjadi  penebalan  dan  pertumbuhan larva akan terganggu sehingga larva mati.
Senyawa  yang bertindak sebagai racun pernafasan  yaitu  alkaloid,  flavonoid  dan terpenoid  dengan  cara  ketika  larva  sedang lemas  karena  senyawa  toksik  yang  masuk secara  kontak  langsung  maupun  masuk  ke dalam pencernaan akan  membuat larva tidak mampu  menutupi  spirakel  sehingga  air  yang masuk  ke  dalam  spirakel  bertambah  banyak
dan  membuat  larva  susah  untuk  melakukan respirasi (Wahyuni & Loren, 2015).
Racun  saraf  yang  berperan  dalam membunuh larva Aedes  aegypti pada penelitian  ini  adalah  alkaloid  dan  phytol. Cara  kerja  racun  saraf  menurut  Ahdiyah  & Purwani  (2015)  yaitu  metabolit  sekunder seperti alkaloid akan mendegradasi membran sel  yang  terdapat  pada  saluran  pencernaan sehingga  dapat  masuk  dan  membuat  sel rusak  serta  akan  mengganggu  sistem  saraf dari  larva  yaitu  dengan  memberhentikan enzim  asetilkolinesterase  sehingga  enzim  ini tidak  dapat  menyalurkan  pengiriman  kepada saluran  pencernaan midgut dan  pergerakan larva  tidak  dapat  terkendali.  Menurut  Putri, et  al.  (2018)  senyawa  terpenoid  yang  sudah termodifikasi  alkaloid  yaitu  phytol  akan bekerja menyerang ganglia pada sistem saraf pusat larva.
Senyawa  terpenoid  bersifat  non-polar sehingga  dengan  mudah  masuk  ke  dalam membran  sel  pada  sisi  hidrofobik  dan membentuk misel sehingga senyawa terpenoid  yang  non  polar  akan  berinteraksi dengan  membrane  sel  yang  bersifat  non polar  dan  mengakibatkan  permeabilitas membran sel terganggu. Menurut Mathivanan, et  al .  (2010)  dalam  Sogandi  & Gunarto  (2020)  bahwa  sinergisme  antara terpenoid dengan alkaloid akan
mengakibatkan  terhambatnya  mitosis  sel pada tubuh larva.
Berdasarkan  WHO  (2005)  bahwa persentase  mortalitas  sebesar  95%  dikatakan efektif,  maka  pada  ekstrak  biji  dengan konsentrasi  19000  ppm  yang  menghasilkan efektivitas  sebesar  95%  pada  jam  ke-24 dikatakan efektif karena sesuai dengan WHO (2005).  Berdasarkan  hasil  efektivitas  dan pengelompokan  yang  ditunjukkan  pada ketiga  ekstrak  tersebut  memperlihatkan bahwa  ekstrak  biji  dan  kulit  buah  Pinang termasuk  dalam  racun  lambat  dikarenakan mortalitas  yang  dihasilkan  pada  konsentrasi- konsentrasi  yang  dipakai  tidak  satupun menghasilkan efektivitas sebesar 100% pada jam  ke-24,  sehingga  harus  menunggu  pada jam ke-48.

## 2. Nilai LC 50 dan LC 90
Penentuan nilai LC 50 dan LC 90
bertujuan untuk menentukan tingkat toksisitas  ekstrak  dapat  membunuh  sebesar 50%  dan  90%  pada  hewan  uji  yaitu  larva Aedes  aegypti yang  ditentukan  dengan analisis probit.
Tabel 3. Nilai LC 50 dan LC 90 Perlakuan LC 50 LC 90 Biji 15291,612  18080,859 Kulit 8773,071 11974,883 Kombinasi 0,828 3,443
Berdasar  hasil  perhitungan  pada  tabel  3  di atas,  diperoleh  hasil  nilai  LC 50 dan  LC 90 pada  ekstrak  kulit  secara  berturut-turut  yaitu 8773,071 ppm dan 11974,883 ppm dibanding dengan ekstrak biji yang LC 50 dan LC 90 terdapat  pada  15291,612  ppm  dan 18080,859  ppm.  Nilai  LC 50 dan  LC 90 pada ekstrak kombinasi mendapatkan nilai sebesar 0,828  dan  3,443  yang  jika  disetarakan  pada regresi  linier  LC 50 terdapat  pada  perlakuan 25:75  dan  LC 90 terdapat  pada  perlakuan 75:25.
Nilai  LC  yang didapatkan oleh ekstrak biji  buah  pinang  sangat  tinggi  dibandingkan dengan  nilai  LC  pada  ekstrak  kulit  buah pinang.  Nilai  LC  pada  penelitian  ini  lebih tinggi  jika  dibandingkan  dengan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Mading,  et  al.  (2018) mendapatkan  nilai  LC 50 sebesar  2650,236 ppm,  sedangkan  nilai  LC 90 terdapat  pada konsentrasi 4162,762 ppm. Beda halnya pada ekstrak  biji  dan  kulit  buah  pinang  yang mendapatkan  LC 50 dan  LC 90 sangat  tinggi dibandingkan  dengan  penelitian  Mading,  et al.,  2018).  Penelitian  oleh  Ali  (2020)  yang menggunakan  keseluruhan  buah  pinang sebagai  larvasida  dan  mendapatkan  hasil pada  konsentrasi  5000  ppm,  ekstrak  buah pinang dapat membunuh secara 100%.
LC 50 dan  LC 90 yang  dihasilkan  pada penelitian ini masih termasuk dalam konsentrasi  yang  tinggi.  Dalam  beberapa
penelitian yang telah dilakukan menggunakan beberapa bagian dari tumbuhan  pinang  seperti  daun,  biji  dan keseluruhan bagian buah pinang mendapatkan  hasil  bahwa  tidak  perlu konsentrasi  yang  tinggi  untuk  membunuh larva. Nilai  LC  yang tinggi pada ekstrak biji buah  pinang  yang  dibandingkan  dengan ekstrak  kulit  buah  pinang  yang  rendah dipengaruhi oleh faktor-faktor berupa konsentrasi  yang  diujikan,  jenis  dan  jumlah kandungan  bahan  aktif.  Jenis  kandungan bahan  aktif  yang  terdapat  dalam  ekstrak  biji buah  pinang  hanya  terdapat  asam  palmitat saja  jika  dibandingkan  dengan  ekstrak  kulit buah  pinang  yang  memiliki  banyak  jenis kandungan bahan aktif di dalamnya (tabel 2).
Disimpulkan  bahwa  nilai  LC  yang didapatkan pada kulit buah pinang merupakan nilai LC yang rendah dibandingkan  dengan  nilai  LC  pada  ekstrak biji  dan  ekstrak  kombinasi  karena  semakin kecil nilai LC yang dihasilkan maka semakin baik  untuk  diterapkan  di  dalam  masyarakat. Hal  ini  didukung  oleh  WHO    (2009)  bahwa larvasida  yang  digunakan  harus  memiliki toksisitas yang rendah dan tidak boleh secara signifikan  mengubah  warna,  bau  dan  rasa dari  air  tersebut.  Maka  dari  itu  walaupun nilai LC dari kulit  buah pinang  lebih rendah tetapi efektivitas yang dihasilkan juga belum efektif,  sehingga  ketiga  ekstrak  tersebut
perlu  dikembangkan  lebih  lanjut  lagi  untuk menghasilkan  ekstrak  yang  memiliki  nilai LC yang jauh lebih rendah.
3. Pengaruh Penggunaan Ekstrak terhadap Kualitas Air
Kualitas  air  yang  dihasilkan  dalam penggunaan  ekstrak  biolarvasida  menjadi salah  satu  tolak  ukur  untuk  menerapkan biolarvasida  ke  dalam  masyarakat.  Banyak faktor yang dapat mempengaruhi kualitas air yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  biji  dan  kulit buah  pinang.  Faktor-faktor  tersebut  berupa pH, bau, suhu, kelembaban udara dan warna ataupun  kekeruhan  yang  dihasilkan  oleh pemberian ekstrak biji dan kulit buah pinang.
Berdasarkan  tabel  4.  bahwa  parameter pH  yang  diukur  pada  ketiga  ekstrak tersebut didapatkan  rentang  pH  4,83  –  6,04.  Pada ketiga  uji  ekstrak  di  atas  menunjukkan bahwa  ekstrak  biji  dan  kulit  buah  pinang ( Areca  catechu L.)  memiliki  rentang  pH asam  (<  7)  dan  terlihat  bahwa  pada  ekstrak kulit  dengan  konsentrasi  yang  kecil  yaitu 7000  ppm,  pH  yang  dihasilkan  sebesar  5,01 dibandingkan  dengan  ekstrak  biji  pada konsentrasi  yang  terkecil  yaitu  16000  ppm, pH  yang  dihasilkan  yaitu  5,81  yaitu  dengan konsentrasi  yang  kecil  maka  ekstrak  kulit akan menghasilkan pH yang asam.
PH  yang  asam  memiliki  pengaruh terhadap  mortalitas  larva,  menurut  WHO (2009)  di  dalam  Susanti  &  Suharyo  (2017)
dan  Hidayat,  et  al.  (1997)  bahwa  larva nyamuk  yang  akan  menjadi  nyamuk  dewasa akan terhambat perkembangan dan pertumbuhan larva jika terjadi penurunan pH maupun  kenaikan  pH.  Penurunan  pH  air menjadi  asam  akan  menghambat  enzim sitokrom  oksidase  yang  berperan  dalam metabolisme  larva.  Tinggi  dan  rendahnya kadar  oksigen  terlarut  di  air  mempunyai pengaruh dalam proses  pembentukan enzim
tersebut.  Keadaan  kondisi  air  yang  asam membuat  kadar  oksigen  terlarut  semakin tinggi  dan  pada  kondisi  ini  pertumbuhan mikroba  semakin  pesat  sehingga  kadar oksigen  yang  dibutuhkan  meningkat,  alhasil oksigen  yang  terlarut  akan  berkurang.  Pada kondisi  seperti  itulah  yang  membuat  larva Aedes  aegypti terganggu  pertumbuhan  dan perkembangannya sehingga larva dapat mati.
Tabel 4. Pengamatan pH, Suhu Air, TDS, Bau dan Kekeruhan
Ket: + = Agak Keruh/Bau; ++ = Keruh/Bau; +++ = Sangat Keruh/Bau
Salah satu faktor yang dapat mendukung  kematian  larva Aedes  aegypti yaitu  suhu.  Menurut  Yahya,  et  al.  (2019) bahwa  pertumbuhan  larva Aedes  aegypti akan terhenti apabila suhu < 10 ˚C atau  > 40 ˚C.  Dalam  penelitian  ini  parameter  suhu
yang  diukur  memiliki  rentang 25,45  – 27,18 pada  ketiga  uji  tersebut,  maka  dapat disimpulkan  bahwa  suhu  yang  diukur  pada penelitian  ini  tidak  mempunyai  pengaruh terhadap mortalitas larva Aedes aegypti.
Perlakuan Konsentrasi pH Suhu  Air (⸰C) TDS (gr/L) Kekeruhan  Bau Biji 16000 ppm 5,81 25,93 196 + ++ 17000 ppm 5,72 25,95 202 + ++ 18000 ppm 5,53 25,93 237,5 ++ ++ 19000 ppm 5,60 25,95 237 ++ +++ 20000 ppm 5,69 25,45 219,25 ++ +++ Kulit 7000 ppm 5,01 26,98 964,75 + ++ 8000 ppm 4,99 26,95 1128 ++ ++ 9000 ppm 4,96 26,95 1251,5 ++ +++ 10000 ppm 4,96 26 1379,75  ++ +++ 11000 ppm 4,94 26,95 1516,75  +++ +++ Kombinasi Biji Kulit 0 100 4,83 26,75 1800,75  +++ +++ 25 75 4,85 27,00 1420,50  +++ +++ 50 50 4,92 27,18 1019,25  +++ +++ 75 25 5,17 26,90 613,50 +++ ++ 100 0 6,04 27,00 174,75 ++ ++
Parameter  TDS  merupakan  salah  satu parameter  yang  dapat  dikaitkan  dengan faktor  kekeruhan  karena  semakin  besar angka  TDS  yang  dihasilkan  maka  akan semakin  keruh.  Hasil  yang  didapatkan  pada tabel  4  di  atas  menunjukkan  bahwa  angka TDS  pada  ekstrak  kombinasi  menunjukkan angka  yang  besar  pada  perbandingan  0:100; 25:75;  50:50  dan  75:25  yaitu  1800,75  g/L, 1420,50  g/L,  1019,25  g/L  dan  613,50  g/L. Hal  ini  dikarenakan  pada  ekstrak  kombinasi tersebut  ekstrak  kulit  mempunyai  pengaruh yang  cukup  besar  dibuktikan  dengan  angka TDS  yang  dihasilkan  pada  uji single ekstrak kulit terlihat bahwa pada konsentrasi terkecil yaitu 7000 ppm angka TDS yang didapatkan 964,75  g/L,  sedangkan  pada  konsentrasi tertinggi  11000  ppm  angka  TDSnya  yaitu 1516,75  g/L  yang  mengindikasikan  bahwa penambahan  ekstrak  kulit  buah  pinang terhadap  ekstrak  kombinasi  memberikan angka  TDS  yang  tinggi  dengan  begitu kualitas  air  yang  dihasilkan  juga  akan semakin  keruh.  Angka  TDS  pada  uji single ekstrak  biji  buah  pinang  didapatkan    hasil yang  berbanding  terbalik  dari  pemberian ekstrak  kulit,  pada  uji  single  biji  buah pinang,  angka  TDS  yang  dihasilkan  kecil yaitu  pada  konsentrasi  terkecil  16000  ppm didapatkan  hasil  196  gr/L,  sedangkan  pada konsentrasi  terbesar  20000  ppm  angka TDSnya  219,25  gr/L,  dapat  dilihat  pada  uji
kombinasi  yaitu  perbandingan  100:0  tanpa pemberian  ekstrak  kulit  menunjukkan  hasil 174,75  gr/L terlihat  bahwa  ekstrak  biji  tidak menyebabkan air terlalu keruh dibandingkan dengan pemberian ekstrak kulit.
Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh Susanti & Halwany (2019) terhadap pemberian  ekstrak  kayu  gemor  memberikan kekeruhan  yang  berbeda-beda  dan  semakin keruh air yang dihasilkan maka kualitas yang dihasilkan  semakin  menurun.  Begitu  juga dengan  bau  yang  dihasilkan  pada  pemberian ekstrak  biji  dan  kulit  buah  pinang  maupun kombinasi  terlihat  bahwa  semakin  besar konsentrasi  maka  bau  yang  dihasilkan semakin kuat. Bau yang dihasilkan disebabkan  karena  pH  yang  asam  dari ekstrak  biji  dan  kulit  buah  pinang.  Faktor bau  dan  kekeruhan  mempunyai  pengaruh yang  besar terhadap keefektifan  biolarvasida yang akan diterapkan ke dalam masyarakat.
Efektif atau tidaknya suatu biolarvasida  dapat  dilihat  dari  penilaian masyarakat  terhadap  biolarvasida  tersebut. Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Pratiwi  (2012)  terhadap  pengaplikasian ekstrak  larvasida  dari  tanaman  serai  yang diaplikasikan  pada  bak-bak  mandi  bahwa para responden sebanyak 72% tidak berkenan  menerapkan  biolarvasida  ke  dalam bak-bak  mandi  maupun  penampungan  air
minum.  Ekstrak  tersebut  menimbulkan  bau dan  terlihat  keruh  sehingga  bagi  masyarakat air  tersebut  tidak  layak  untuk  dipakai maupun dikonsumsi. Ada beberapa responden  yang  juga  menyetujui  dalam pengaplikasian  biolarvasida  apabila  tidak menimbulkan perubahan bau dan warna pada air yang ada di penampungan.
Berdasarkan  riset  oleh  Pratiwi  (2012) pemakaian abate juga tidak menerima respon yang baik oleh masyarakat dan pemakaiannya  bersifat  sementara  karena masyarakat  lebih  memilih  untuk  menguras bak  penampungan  air  dibandingkan  harus memakai  abate.  Hal  ini  menunjukkan  perlu adanya pengembangan terhadap biolarvasida yang  akan  diterapkan  ke  dalam  masyarakat. Berdasarkan  WHO  (2009)  perilaku Aedes aegypti yang  menyimpan  telur  di  dalam penyimpanan air bersih atau bak mandi maka larvasida  yang  dipakai  harus  memiliki toksisitas  yang  rendah  pada  organisme  non target  dan  tidak  boleh  secara  signifikan mengubah warna, bau dan rasa dari air bersih tersebut.
Dengan begitu berdasarkan hasil parameter yang sudah diukur bahwa biolarvasida  dari  biji  dan  kulit  buah  pinang ini  harus  diperbaiki  terlebih  dahulu  kualitas ekstrak  agar  warna  maupun  bau  yang dihasilkan  tidak  begitu  keruh  dan  tidak menghasilkan  bau  yang  tidak  enak.  Perlu
adanya penelitian tentang pendapat masyarakat terhadap pengaplikasian biolarvasida  biji  buah  pinang  maupun  kulit buah pinang.

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian “Pengaruh Konsentrasi  Ekstrak  Biji  dan  Kulit  Buah Pinang ( Areca catechu L.) terhadap Mortalitas  Larva  Nyamuk Aedes  aegypti ” dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak  biji,  kulit  dan  kombinasi  biji  dan kulit buah pinang berpotensi untuk dikembangkan  sebagai  biolarvasida  dengan kemampuan  daya  bunuh  biji  terhadap  larva aedes  sebesar  64-97%  pada  jam  ke-24, sedangkan  pada  jam  ke-48  sebesar  100% pada  semua  perlakuan.  Pada  ekstrak  kulit sebesar  52-88%  pada  jam  ke-24,  sedangkan pada  jam  ke-48  sebesar  58-93%,  sedangkan Ekstrak kombinasi sebesar 55-93% pada jam ke24 dan 95-100% pada jam ke-48.
2. Jenis ekstrak dan konsentrasi berpengaruh signifikan (0,000 < 0,05) terhadap mortalitas Aedes aegypti.  Ekstrak  biji  buah  pinang dengan  konsentrasi  19000  ppm  dengan persentase  mortalitas  sebesar  95%  pada  jam ke-24  terbilang  efektif  dibandingkan  dengan standar WHO (2005).
3. Nilai  LC 50 dan  LC 90 ekstrak  biji  dan kombinasi lebih besar dibanding dengan nilai
LC 50 dan  LC 90 ekstrak  kulit  yaitu  sebesar sebesar 8773,071 dan 11974,883 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahdiyah,  I.,  &  Purwani,  K.  I.  2015. Pengaruh  Ekstrak  Daun  Mangkokan. Jurnal Sains Dan Seni ITS 4(2): 2337–
3520.
Ali,  H.  2020.  Efektivitas  Ekstrak  Buah Pinang  Muda  (Areca  catechu  L.) terhadap  kematian  larva  Aedes  sp . 8(2): 37–45.
Amudhan,  M.  S.,  Begum,  V.  H.,  &  Hebbar, K. B. 2012. A review on phytochemical  and  pharmacological potential  of  Areca  catechu  L.  Seed. Asian  Journal  of  Pharmaceutical  and Clinical Research 3(11): 4151–4157.
Cahyani,  I.  S.,  Hadriyati,  A.,  &  Yulianis.
2020. Antioxidant Activity Test
Extract  And  Areca  Peel  (Areca Catechu  L)  Rind  Fraction  From Tanjung Jabung Barat District. Journal of Healthcare Technology and Medicine 6(1): 179–184.
Dinas  Kesehatan  Jayapura.  2019. Data
Penderita  Demam  Berdarah  Kota Jayapura Tahun 2019 .
Dinas  Kesehatan  Jayapura.  2020. Data Penderita  Demam  Berdarah  Kota Jayapura Tahun 2020 .
Hidayat,  M.  C.,  Ludfi,  S.,  &  Hadi,  S.  1997. Pengaruh pH Air Perindukan Terhadap Pertumbuhan  dan  Perkembangbiakan Aedes  aegypti  Pra  Dewasa. Cermin Dunia Kedokteran . 47–49.
ICMR.  2003.  Prospects  of  using  herbal products  in  the  control  of  mosquito vectors. ICMR Bulletin 33 (1).
Mading,  M.,  Kazwaini,  M.,  Utomo,  B.,
Arwati,  H.,  &  Yotopranoto,  S.  2018. Effects  of  Areca  Catechu  L.  Seed Extract  on  Mortality Anopheles  vagus Larvae. Jurnal  Kesehatan  Masyarakat
13(3): 366–373.
Mading,  M.,  Rohmah,  E.  A.,  Utomo,  B.,  & Arwati,
H. 2018.
Perubahan Hispatologi  Midgut  Larva An.  vagus (Diptera :  Culicidae)  Akibat  Papapran Ekstrak Biji Pinang ( Areca catechu L). Buletin  Penelitian  Kesehatan 46 (4): 269–274.
Nugroho,  A.  D.  2011.  Kematian  Larva Aedes  Aegypti  Setelah  Pemberian
Abate Dibandingkan
dengan
Pemberian Serbuk Serai. Jurnal Kesehatan  Masyarakat 7(1):  3071–
3074.
Pratiwi,  A.  2012.  Penerimaan  Masyarakat terhadap  Larvasida  Alami. Jurnal
Kesehatan Masyarakat 8(1): 88–93.
Putri,  D.  M.,  S.,  M.  A.,  &  Supriatno.  2018.
Efektivitas  Larvasida  Ekstrak  Etanol
Daun  Alpukat  terhadap  Mortalitas Larva  Aedes  aegypti  dan  Culex
quinquefasciatus. Jurnal EduBio Tropika 6(1): 67–72.
Sogandi,  S.,  &  Gunarto,  F.  2020.  Efek Larvasida  Fraksi  Etil  Asetat  Daun Bangun-bangun (Plectranthus amboinicus) terhadap Mortalitas Larva Aedes  aegypti. ASPIRATOR  -  Journal of Vector-Borne Disease Studies 12(1):
27–36.
Susanti, P. D., & Halwany, W. 2019. Quality
Improvement  of  Water  Exposed  to
Biolarvacide of Gemor Bark (Nothaphoebe  coariacea  K.). Jurnal Ilmu  Pertanian  Indonesia 24(4):  313– 318.
Susanti,  S.,  &  Suharyo,  S.  2017.  Hubungan
Lingkungan  Fisik  Dengan  Keberadaan Jentik  Aedes  Pada  Area  Bervegetasi Pohon Pisang. Unnes Journal of Public Health 6(4): 271–276.
Wahyuni,  D.,  &  Loren,  I.  2015.  Perbedaan
Toksisitas  Ekstrak  Daun  Sirih  ( Piper
betle L.)  dengan  Ekstrak  Biji  Srikaya
( Annona  squamosa L.) terhadap  Larva
Nyamuk Aedes  aegypti L. Jurnal Saintifika 17(1): 38–48.
WHO  (World  Health  Organization).  2005.
Guidelines  for  laboratory  and  field testing  of  mosquito  larvicides. World Health Organization , 1–41.
WHO  (World  Health  Organization).  2009.
Dengue  Guidelines  for  Diagnosis, Treatment,  Prevention  and  Control.
Encyclopedia of Insects , 257–259.
Yahya,  Ritawati,  &  Rahmiati,  D.  P.  2019.
Pengaruh  Suhu  Ruangan,  Kelembapan Udara,  pH  dan  Suhu  Air  Terhadap Jumlah  Pupa  Aedes  aegypti  Strain Liverpool. Spirakel 11(1):16–28.
Yulianti, L., Supriadin, A., & Rosahdi, T. D.
2017.  Efek  Larvasida  Hasil  Fraksinasi Ekstrak  N-Heksana  Daun  Kirinyuh ( Chromolaena  odorata L.)  terhadap Larva Aedes  aegypti . Al-Kimiya 4(1): 38–44.