## UJI AKTIVITAS ANALGESIK DAUN TREMBESI
(Samanea saman (Jacq.) Merr.)

## ANALGETIC ASSAY OF TREMBESI LEAVES
(Samanea saman (Jacq.) Merr.)
1 Krisna Kharisma P * , 1 Dwi Wahyuni, 1 Rosa J. Hesturini, 1 Agustina D. Lestari
1 Fakultas Farmasi,Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata
Info Artikel Abstrak Sejarah Artikel : Latar  Belakang: Tanaman  trembesi  ( Samanea  saman (Jacq.)  Merr.) merupakan  tanaman  dari  genus  Samanea  yang  tumbuh  didaerah  tropis, termasuk di Indonesia. Daun tanaman ini memiliki beberapa kandungan kimia seperti  flavonoid,  alkaloid,  tanin,  saponin,  dan  steroid  atau  triterpenoid. Tujuan: Mengetahui aktivitas analgesik dan dosis efektif ekstrak etanol daun trembesi terhadap mencit putih jantan ( Mus musculus L.). Metode: Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan teknik Post-Test Only Control Group Design . Uji aktivitas analgesik dilakukan dengan metode induksi kimia menggunakan  asam  asetat  secara in  vivo dengan  perlakuan  kontrol  negatif (CMC-Na 0,5%), kontrol positif (aspirin 500mg), ekstrak etanol daun trembesi dengan  variasi  dosis  150,  300  dan  600mg/kgBB.  Data  dianalisis  dengan persamaan  Hendersoth  dan  Forsaith  untuk  mengetahui  jumlah  geliat  yang ditimbulkan  oleh  mencit.  Analisa  data  dilakukan  dengan  uji One  Way ANOVA dan  dilanjutkan  dengan  uji  LSD. Hasil: Hasil  penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun trembesi dengan dosisi 150, 300, 600 mg/kgBB  memberikan  memberikan  daya  analgesik  berturut-turut  16,6%; 45,8%  dan  69,6%. Simpulan: Ekstrak  etanol  daun  trembesi  pada  dosis  600 mg/kgBB  mempunyai  aktivitas  analgesik  yang  paling  efektif  setara  dengan aspirin 500mg (p=0,560).
Submitted:29 Juli 2019 Accepted : 30
Desember 2020 Publish Online : 30 Desember 2020

## Kata Kunci:
Daun Trembesi,
Analgesik, Mencit
Keywords: Trembesi
leaves,
Analgetic, Mice

## Abstract
Background:  Trembesi  (Samanea  saman  (Jacq.)  Merr.)  is  a  plant  of  the  genus Samanea  spread  in  tropical  areainclude  Indonesia.  This  plant  have  some chemical  ingredients  such  as  flavonoids,  alkaloids,  tannins,  saponins,    and steroids  or  triterpenoids.  Objective:  To  know  the  analgesic  activity  and  the effective dose of ethanol extract of leaves of trembesi  in  white male mice (Mus musculus L.). Method: This research is experimental with Post-Test Only Control Group  Design  techniques.  Analgesic  activity  test  was  performed  by  chemical induction  method  using  acetic  acid  in  vivo  with  a  negative  control  treatment (CMC-Na  0,5%),  a  positive  control  (aspirin  500mg),  dose  of  ethanol  extract  of trembesi  150,  300  and  600  mg/kgBB.  Data  were  analyzed with  Hendersoth  and Forsaith  equation  to  determine  the  amount  of  stretching  by  mice.  Analysis  by One  Way  ANOVA  test  and  LSD  test.  Results:  The  results  showed  the  analgesic power percent ethanol extract of trembesi leaves are respectively 16.6%, 45.8% and  69.6%.  Conclusions:  The  dose  of  ethanol  extract  of  trembesi  leaves  have analgesic  activity  with  the  most  effective  dose  is  600  mg/kgBB  is  equivalent  to 500mg of aspirin (p=0.560).
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020

## PENDAHULUAN
Nyeri  merupakan  salah  satu  sinyal  dan  mekanisme  proteksi  tubuh  yang  akan  muncul ketika  terjadi  kerusakan  jaringan  tubuh  (Bahrudin,  2017).  Apabila  nyeri  yang  muncul menyebabkan  gangguan  aktivitas,  maka  nyeri  dapat  dikurangi  atau  dihilangkan  dengan menggunakan analgesik. Penggunaan tanaman obat merupakan salah satu alternatif terapi yang dapat digunakan untuk menangani nyeri. Penggunaan analgesik sintetis telah banyak digunakan, namun  juga  menyebabkan  beberapa  efek  samping  seiring  dengan  peningkatan  potensi analgesiknya  (Parsei  dkk,  2016).  Trembesi  ( Samanea  saman (Jacq.)  Merr.)  adalah  tanaman kering  yang  hidup  di  daerah  tropis.  Pada  penelitian  terdahulu  ekstrak  daun  trembesi  dapat dimanfaatkan sebagai antiseptik (Tungadi dan Abdulkadir, 2015),  antibakteri (Sari dkk., 2015), antidiabetes  (Vinodhini  dan  Rajeswari,  2018),  dan  antijamur  (Sariningsih  dkk.,  2015).  Pada hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  daun  trembesi  yang  dilakukan  menunjukkan  adanya  senyawa flavonoid,  tanin,  steroid,  saponin,  dan  terpenoid  (Suteja  dkk.,  2016).  Keberadaan  senyawa- senyawa  ini  memberikan  sumbangsih  terhadap  aktivitas  farmakologi  dari  ekstrak  tanaman (Bulbul  dkk.  2017).  Selain  itu,  flavonoid  juga  memiliki  potensi  untuk  mencegah  kerusakan membran  lipid,  sehingga  terjadi  hambatan  rilisnya  enzim  siklooksigenase  I  yang  merupakan asal  mula  produksi  prostaglandin  yang  merupakan  mediator  nyeri  (Alyldrus  dkk,  2019). Penelitian ini di tujukan untuk mengetahui potensi daun trembesi sebagai agen analgetik.

## METODE PENELITIAN
Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah true  eksperimental dengan pendekatan Post-Test  Only  Control  Group  Design .  Sampel  yang  digunakan  adalah  daun trembesi  yang  didapatkan  dari  wilayah  Kota  Kediri.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  maserasi menggunakan ethanol. Perbandingan antara simplisia dan pelarut yang digunakan adalah 1:10. Setelah  7 hari  proses  maserasi  dan remaserasi,  maka  dilakukan  pemekatan  dengan  suhu 50ºC. Selanjutnya  dilakukan  uji  skrinning  kandungan  fitokimia  senyawa  pada  ekstrak  kental  yang didapatkan  serta  dilakukan  KLT  fase  normal  dengan  eluen  n-heksana  :  etil  asetat  (1:1)  sesuai dengan  hasil  optimasi.  Hewan  coba  yang  digunakan  adalah  mencit  putih  jantan  dengan  usia rata-rata 2 bulan dan berat rata-rata 25 gram sebanyak 25 ekor. Persiapan hewan coba diawali dengan  aklimatisasi  selama  7  hari.  Hewan  coba  dibagi  menjadi  5  kelompok  perlakuan  dengan variasi  dosis  perlakuan  didasarkan  pada  penelitian  Muzammil  A.S.,  dkk,  yang  dilakukan  pada 2014, yaitu sebagai berikut :
- Kelompok 1: Diberikan suspensi CMC-Na 0,5% (kelompok kontrol negatif)
- Kelompok 2: Diberikan suspensi aspirin 500mg (kelompok kontrol positif)
- Kelompok 3: Diberikan suspensi ekstrak etanol daun trembesi 150mg/kgBB
- Kelompok 4: Diberikan suspensi ekstrak etanol daun trembesi 300mg/kgBB
- Kelompok 5: Diberikan suspensi ekstrak etanol daun trembesi 600mg/kgBB
Setelah  30  menit  kemudian  semua  kelompok  mencit  diberi  induktor  nyeri  yaitu  asam asetat  0,5%  secara  intraperitonial.  Geliat  mencit  yang  terjadi  diamati  selama  1  jam.  Geliat ditandai  dengan  kedua  pasang  kaki  meregang  ke  depan  dan  ke  belakang  serta  perut  yang menempel  pada  lantai  (Febriyanti  dkk.,  2018).  Hasilnya  dikumulatifkan  sebagai  daya  geliat hewan  percobaan  perjam  menggunakan  persamaan  Hendersoth  dan  Forsaith  (Syamsul  dkk, 2016).
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020
Keterangan: P= Jumlah kumulatif geliat hewan uji setelah pemberian obat yang telah diuji K= Jumlah rata-rata geliat hewan uji kelompok kontrol
Analisis  dilakukan  dengan  menguji  normalitas  data  dengan  uji Saphiro  Wilk , selanjutnya  dilakukan  uji  homogenitas  dilakukan  dengan  uji Levene  test .  Analisis  dilanjutkan dengan  uji  statistic One  Way ANOVA  dan  untuk  mendapatkan  perbedaan  pengaruh  antar kelompok uji dilanjutkan dengan uji Post Hoc menggunakan uji LSD.

## HASIL PENELITIAN
Data hasil uji skrining fitokimia ekstrak etanol daun trembesi dapat dilihat pada tabel 1. Berdasarkan  uji  skrining  fitokimia  tersebut  pada  ekstrak  etanol  daun  trembesi  positif mengandung  flavonoid,  alkaloid,  tanin,  saponin,  dan  steroid  atau  triterpenoid.  Hal  tersebut sesuai dengan penelitian (Suteja dkk., 2016) bahwa dalam daun trembesi mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, tanin, saponin, dan steroid atau triterpenoid.
Tabel 1. Data hasil uji skrining fitokimia
Kandungan Kimia Metode Pengujian Hasil Pengujian Keterangan Flavonoid Serbuk  Mg  +  HCl pekat Warna jingga (+) Alkaloid Dragendorff Endapan jingga (+) Mayer Endapan putih (+) Wagner Endapan coklat (+) Tanin Aquadest  +  FeCl3 1% Warna hijau kehitaman (+) Saponin Aquadest  kemudian dipanaskan dan dikocok Terbentuk busa stabil  selama  30 detik (+) Steroid dan triterpenoid Asam  asetat  anhidrat + H2SO4 Terbentuk warna ungu (+)
Keterangan:
(+): Hasil positif
Data  hasil  uji  KLT  dapat  dilihat  pada  gambar  1.  Berdasarkan  uji  KLT  tersebut didapatkan  bahwa  pada  ekstrak  etanol  daun  trembesi  terdapat  bercak  noda  berwarna  coklat kehijauan yang diduga merupakan senyawa flavonoid.
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020
Gambar 1. Data hasil uji KLT (a)Setelah diuapi amonia, (b)Dilihat pada lampu UV 254nm, (c)Dilihat pada lampu UV 366nm
Data  pengamatan  rata-rata  jumlah  geliat  mencit  dapat  dilihat  pada  gambar  2. Berdasarkan  diagram  tersebut  bahwa  semakin  meningkat  dosis  ekstrak  etanol  daun  trembesi maka  jumlah  geliat  yang  ditimbulkan  mencit  semakin  menurun.  Penurunan  yang  paling  besar terdapat pada dosis 600mg/kgBB.
Gambar 2. Diagram rata-rata jumlah geliat mencit
Hasil  aktivitas  analgesik  ditunjukkan  dalam  bentuk  persentase  daya  analgesik.  Data persentase  daya  analgesik  setelah  pemberian  ekstrak  etanol  daun  trembesi  dapat  dilihat  pada tabel  2  dan  gambar  3.  Berdasarkan  grafik  tersebut  bahwa  semakin  meningkat  dosis  ekstrak etanol daun trembesi  maka  aktivitas  analgesik juga  meningkat.  Peningkatan  yang  paling  besar terdapat pada dosis 600mg/kgBB yaitu 69,6%.
a b c
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020
Kelompok Perlakuan Mencit Ke- Jumlah Geliat Total Kumulatif Rata-rata ± SD % Daya Analgesik Kelompok I: Kontrol negatif CMC- Na 0,5% 1 155 631 126,2±22,8 0% 2 106 3 100 4 133 5 137 Kelompok II: Kontrol positif aspirin 500mg 1 61 192 38,4±16,9 69,6% 2 24 3 52 4 26 5 29 Kelompok III: Ekstrak etanol daun trembesi 150mg/kgBB 1 99 526 105,2±26,5 16,6% 2 121 3 75 4 142 5 89 Kelompok IV: Ekstrak etanol daun trembesi 300mg/kgBB 1 49 342 68,4±18,3 45,8% 2 71 3 61 4 98 5 63 Kelompok V: Ekstrak etanol daun trembesi 600mg/kgBB 1 49 231 46,2±17,9 63,4% 2 41 3 72 4 47 5 22
Gambar 3. Diagram persentase daya analgesik mencit
Hasil  aktivitas  analgesik  dianalisis  uji  normalitas Saphiro  Wilk dengan  hasil  p>0.05 sehingga  data  dinyatakan  terdistribusi  normal.  Selanjutnya  uji  homogenitas  dilakukan  dengan
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020
Levene  Test dan  memberikan  hasil  p=0.595  sehinga  disimpulkan  bahwa  variasi  data  bersifat homogen.  Berdasarkan  hasil  normalitas  dan  homogenitas,  maka  data  memenuhi  persyaratan untuk  diuji  dengan One  Way ANOVA.  Berdasarkan  hasil  uji One  Way ANOVA  didapatkan hasil  p=0.000  yang  menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  antar  kelompok,  maka  uji dilanjutkan  dengan post  hoc LSD  untuk  mengetahui  perbedaan  antar  kelompok . Berdasarkan hasil  uji  LSD  di  dapatkan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  jumlah  geliat  antara kontrol  negatif  dengan  kelompok  yang  diberi  perlakuan  dengan  dosis  150  dan  300  mg/kgBB (p<0.05). Namun kelompok perlakuan dosis 600mg/kgBB tidak memililiki perbedaan signifikan dengan kelompok kontrol positif yang diberi aspirin 500mg (p>0.05).

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  aktivitas  analgesik  dari  ekstrak  etanol  daun trembesi  pada  mencit  putih  jantan.  Menurut  (Diniatik,  2015)  daun  yang  diambil  adalah  daun yang  sudah  tua,  karena  diharapkan  memperoleh  kandungan  kimia  yang  sudah  optimal.  Hasil ekstrak  etanol  daun  trembesi  diperoleh  rendemen  16,301%  dari  150  gram  simplisia  daun trembesi,  kemudian  dilakukan  uji  skrining  fitokimia dan  uji KLT.  Uji flavonoid  menunjukkan hasil  positif  yaitu  terbentuk  warna  jingga.  Menurut  (Nafisah  dkk.,  2014)  prinsip  reaksi  uji flavonoid  adalah  reaksi  oksidasi  reduksi,  dimana  senyawa  flavonoid  akan  direduksi  oleh  gas hidrogen  hasil  reaksi  antara  pita  Mg  dan  HCl.  Selanjutnya  senyawa  hasil  reduksi  akan membentuk  senyawa  komplek  dengan  Mg 2+ yang  merupakan  senyawa  berwarna  merah.  Uji alkaloid menunjukkan hasil positif yaitu terbentuk endapan berwarna kuning, merah, dan coklat pada  masing-masing  reagen.  Menurut  (Wardana  dan  Tukiran,  2016)  endapan  yang  terbentuk karena  senyawa  alkaloid  berikatan  koordinasi  dengan  ion  K + dari  reagen-reagen  Mayer, Dragendorff  dan  Wagner.  Perbedaan  warna  endapan  pada  setiap  penambahan  reagen dikarenakan adanya ligan berupa logam golongan transisi di dalam reagen Mayer, Dragendorff dan Wagner yang berbeda-beda. Uji tanin menunjukkan hasil positif yaitu terbentuk warna hijau kehitaman. Menurut (Munte dkk., 2015) senyawa tanin adalah suatu senyawa polifenol dimana senyawa tanin dapat menimbulkan warna biru tua, biru kehitaman atau hijau kehitaman karena penambahan  FeCl3  1%.  Perubahan  warna  terjadi  dengan  penambahan  FeCl3  karena  adanya gugus  hidroksil  yang  ada  pada  senyawa  tanin.  Uji  saponin  menunjukkan  hasil  positif  yaitu terbentuk  busa  stabil  selama  30  detik.  Menurut  (Wardana  dan  Tukiran,  2016)  saponin merupakan  senyawa  yang  mempunyai  gugus  hidrofilik  (polar)  dan  hidrofobik  (non  polar). Saponin pada saat digojok terbentuk buih karena adanya gugus hidrofilik yang berikatan dengan air sedangkan gugus hidrofobik akan berikatan dengan udara. Pada struktur misel, gugus polar menghadap ke luar sedangkan gugus non-polar menghadap ke dalam. Keadaan ini menunjukkan adanya  glikosida  yang  mampu  membentuk  buih  dalam  air.  Senyawa  glikosida    terhidrolisis menjadi  glikon    dan  aglikon.  Uji  steroid  atau  triterpenoid  menunjukkan  hasil  positif  yaitu terbentuk  warna  ungu  sehingga  menunjukkan  adanya  kandungan  triterpenoid.  Menurut (Wardana dan Tukiran, 2016) pengujian steroid atau triterpenoid didasarkan pada kemampuan senyawa untuk membentuk warna H 2 SO 4 pekat dalam pelarut asam asetat anhidrid warna merah jingga atau ungu untuk triterpenoid dan biru untuk steroid.
Hasil  KLT  ekstrak  etanol  daun  trembesi  mengandung  senyawa  flavonoid  yang menghasilkan noda berwarna coklat kehijauan ketika diuapi dengan amonia. Adanya flavonoid
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020
dipertegas  dengan  visual  warna  kehijauan  ketika  diamati  pada  lampu  UV  254nm.  Fase  gerak (eluen)  yang  digunakan  bersifat  sangat  polar  karena  mengandung  air.  Menurut  (Yasir  dkk., 2017)  kepolaran  fase  diam  dan  fase  gerak  hampir  sama,  tetapi  masih  lebih  polar  fase  gerak sehingga senyawa flavonoid yang dipisahkan terangkat mengikuti aliran eluen, karena senyawa flavonoid  bersifat  polar.  Eluen  n-butanol:asam  asetat  glasial:air  (BAA)  (4:1:5)  mampu memberikan  pemisahan  terbaik  karena  dari  komposisinya  eluen  tersebut  bersifat  sangat  polar sehingga bisa memisahkan senyawa flavonoid yang juga bersifat polar.
Dalam penelitian ini digunakan kontrol negatif  CMC-Na 0,5%  untuk membandingkan ada  tidaknya  daya  analgesik  terhadap  kontrol  positif  dan  ekstrak  etanol  daun  trembesi (Oktavianus  dkk.,  2014).  Pada  penelitian  ini  digunakan  aspirin  sebagai  faktor  pembanding, karena  aspirin  merupakan  prototipe  dan  standar  untuk  pengujian  obat  sejenis  (Atikaningrum dkk.,  2013).  Kontrol  positif  aspirin  500  mg  dipilih  karena  lebih  cepat  diabsorbsi  dan  dikenal oleh  masyarakat  sebagai  obat  yang  mampu  mengobati  nyeri  dengan  baik.  Aspirin  diketahui merupakan obat yang memiliki kemampuan analgesik. Aspirin menghambat COX-1 dan COX-2 dan  membatasi  produksi  prostaglandin  yang  berhubungan  dengan  rusaknya  jaringan  seperti analgetik  dan  inflamasi (Syamsul  dkk.,  2016).  Flavonoid  yang  digunakan  dalam  penelitian ini juga memiliki efek analgesik dalam menghambat terbentuknya enzim siklooksigenase, sehingga dapat  menghambat  sintesis  prostaglandin  yang  merupakan  mediator  yang  terbentuk  lebih banyak dalam timbulnya rasa nyeri, menstabilisasi reseptor nyeri, dan menjadi penentu lamanya nyeri (Ishak dkk., 2017).
Persentase daya analgesik yang diperoleh kontrol positif aspirin 500mg sebesar 68,0%, ekstrak  etanol  daun  trembesi  150mg/kgBB  sebesar  16,6%;  ekstrak  etanol  daun  trembesi 300mg/kgBB  sebesar  45,8%;  dan  ekstrak  etanol  daun  trembesi  600mg/kgBB  sebesar  69,6%. Menurut  (Syamsul  dkk.,  2016)  kemampuan  daun  trembesi  dalam  mengatasi  rasa  nyeri dikarenakan adanya kandungan flavonoid. Selain flavonoid terdapat senyawa lain dalam ekstrak etanol  daun  trembesi  yang  dapat  digunakan  sebagai  analgesik,  yaitu  tanin  dan  triterpenoid. Menurut (Hesturini dkk., 2017) mekanisme kerja tanin dan triterpenoid sebagai analgesik yaitu merangsang  biosintesis  protein  lipomodulin  yang  dapat  menghambat  kerja  enzimatik fosfolipase,  yaitu  enzim  yang  bertanggung  jawab  terhadap  pelepasan  asam  arakhidonat  dan mengeblok jalur siklooksigenase dan lipooksigenase sehingga metabolitnya yaitu prostaglandin, leukotrien, prostasiklin dan tromboksan juga tidak dapat terbentuk.
Pada  pengujian  analgesik  ini  metode  yang  dipilih  adalah  metode sigmund (metode geliat) karena metode ini cukup peka dalam menilai rangsang nyeri yang diberikan. Asam asetat 0,5%  dipilih  karena  dapat  memberikan  rangsangan  nyeri  yang  cukup  baik  terhadap  hewan  uji dengan cara memicu respon inflamasi lokal hasil pelepasan asam arakidonat bebas dari jaringan fosfolipid  melalui  siklooksigenase  (COX)  dan  biosentesis  prostaglandin,  peningkatan  kadar prostaglandin  dari  induksi  asam  asetat  meningkatkan  nyeri  inflamasi  dengan  meningkatkan permeabilitas kapiler dalam rogga peritoneum (Sasongko dkk., 2016).

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  trembesi    dosis  150  mg/kgBB,  300mg/kgBB  dan  600mg/kgBB positif  mempunyai  aktivitas  analgesik  pada  mencit  putih  jantan  dengan  persentase  daya analgesik berturut-turut sebesar 16,6%; 45,8% dan 63,4%.
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020
Ekstrak etanol daun trembesi  dosis 600mg/kgBB merupakan dosis yang paling efektif sebagai analgesik  pada  mencit  putih jantan  ditunjukkan  dengan  nilai signifikansi  uji Post  Hoc LSD  antara  aspirin  500mg  dengan  ekstrak  etanol  daun  trembesi  dosis  600mg/kgBB  adalah 0,560 (p>0,05), sehingga ekstrak etanol daun trembesi dosis 600mg/kgBB mempunyai aktivitas analgesik yang hampir sama dengan aspirin 500mg (p=0,056).

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  tentang  aktivitas  yang  lain  dari  ekstrak  daun trembesi dengan konsentrasi dosis yang berbeda.
Perlu  dilakukan  uji  aktivitas  analgesik  terhadap  kandungan  metabolit  sekunder  lain seperti alkaloid, tanin, saponin, steroid atau triterpenoid yang terdapat dalam daun trembesi.

## REFERENSI
Atikaningrum, Dian Ajeng. Ediningsih, Endang. Utari, Cr. Siti. 2013. Perbandingan Efektivitas Analgesik  Ekstrak  Daun  Sirih  Merah  (Piper  crocatum)  dan  Aspirin  Dosis  Terapi pada Mencit. Biofarmasi . 11 (1).
Diniatik. 2015. Penentuan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanolik Daun Kepel (Stelechocarpus burahol  (Bl.)  Hook  F.  &  Th.)  dengan  Metode  Spektrofotometri. Kartika-Jurnal Ilmiah Farmasi. 3 (1).
Febriyanti, Rizki. Purba, Anny Victor. Simanjuntak, Partomuan. 2018.  Uji Aktivitas Analgetik Kombinasi  Ekstrak  Buah  Belimbing  Wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L.)  dan  Daun Seledri  (Apium  graveolens  L.)  terhadap  Mencit  Putih  Jantan  dengan  Metode Geliat . Jurnal Para Pemikir. 7 (1).
Hastuti,  Siwi.  Safitri,  Inna  Ayu.  2015.  Aktivitas  Analgetik  Ekstrak  Etanol  Daun  Sligi (Phyllanthus  Buxifolius  Muell  .Arg  )  terhadap  Mencit  Galur  Balb/C. Indonesian Journal On Medical Science. 2 (1).
Hesturini,  Rosa  Juwita.  Herowati,  Rina.  Widodo,  Gunawan  Pamudji.  2017.  Uji  Aktivitas Analgetika  Fraksi-Fraksi  Ekstrak  Etanol  Daun  Gandarusa  ( Justicia  gendarussa Burm. f) dengan Metode Tail Flick. Jurnal Farmasi Indonesia. 15 (1).
Ishak,  Megawati.  Bodhi,  Widdhi.  Citraningtyas,  Gayatri.  2017.  Uji  Efek  Analgetik  Ekstrak Etanol Daun Lamtoro ( Leucaena Leucocephala (Lam) De Wit) pada Mencit Putih Jantan (Mus Musculus). Jurnal Ilmiah Farmasi. 6 (4).
Koirewoa,  Yohanes  Adithya.  Fatimawali.  Wiyono,  Weny  Indayany.  2015. Isolasi  dan Identifikasi  Senyawa  Flavonoid  dalam  Daun  Beluntas  (Pluchea  indica L. ) . Program Studi Farmasi Unsrat Manado. 1 (1).
Munte, Liliyanti. Runtuwene, Max Revolta. Citraningtyas, Gayatri. 2015. Aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Daun Prasman (Eupatorium triplinerve Vahl.). Jurnal Ilmiah Farmasi . 4 (3).
Krisna Kharisma P | Uji Aktivitas Analgesik Daun Trembesi…. Jurnal Wiyata, Vol. 7 No. 2 Tahun 2020
Muzammil  A.  S.,  Farhana  T.,  Salman  A.  2014.  Analgesic  Activity  of  Leaves  Extracts  of Samanea  saman  Merr.,  and  Prosopis  Cineraria  Druce. International  Research Journal Of Pharmacy. 4 (1).
Nafisah,  Minhatun.  Tukiran.  Suyatno.  Hidayati,  Nurul.  2014.  Uji  Skrining  Fitokimia  pada Ekstrak Heksan, Kloroform dan Metanol dari Tanaman Patikan Kebo (Euphorbiae hirtae). Prosiding Seminar Nasional Kimia Universitas Negeri Surabaya .
Natarajan,  P.  Reejo,  Babin  D.  A,  Thangathirupathi.  2013.  Preclinical  Appraisal  on  Leaves Extract  of  Samanea  Saman  (Jacq.)  Merr.  Against  Experimental  Diabetes. Indo American Journal of Pharmaceutical Research .
Notoatmodjo, Soekidjo. 2012. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta: Rineka Cipta.
Oktavianus, Stella. Fatimawali. Lolo, Widya A. 2014. Uji Efek Analgetik Ekstrak Etanol Daun Pepaya  (Carica  Papaya  L.)  pada  Mencit  Putih  Jantan (Mus  Mucculus) . Jurnal Ilmiah Farmasi. 3 (2).
Sari,  Putu  Puspita.  Rita,  Wiwik  Susanah.  Puspawati,  Ni  Made.  2015.  Identifikasi  dan  Uji Aktivitas  Senyawa  Tanin dari  Ekstrak  Daun  Trembesi  (Samanea  Saman  (Jacq.)  Merr) sebagai Antibakteri Escherichia Coli (E. Coli). Jurnal Kimia. 9 (1).
Sariningsih,  Putu.  Rita,  Wiwik  Susanah.  Puspawati,  Ni  Made.  2015.  Identifikasi  dan  Uji Aktivitas  Senyawa  Flavonoid  dari  Ekstrak  Daun  Trembesi  (Samanea  Saman  (Jacq.) Merr)  sebagai  Pengendali  Jamur  Fusarium  Sp.  pada  Tanaman  Buah  Naga. Jurnal Kimia. 9 (1).
Sasongko, Heru. Setyawan, Ahmad Dwi. Sugiyarto. Farida, Yeni. Efendi, Nur Rohman. Pratiwi, Diah.  2016.  Analgesic  Activity  of  Ethanolic  Extracts  of  Karika  Leaves  ( Carica pubescens ) In Vivo . Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research . 01.
Suteja, I Kadek Pater. Rita, Wiwik Susanah. Gunawan, I Wayan Gede. 2016. Identifikasi Dan Uji  Aktivitas  Senyawa  Flavonoid  dari  Ekstrak  Daun  Trembesi  (Albizia  Saman (Jacq.) Merr) sebagai Antibakteri Escherichia Coli. Jurnal Kimia. 10 (1).
Syamsul,  Eka  Siswato.  Andani,  Fitriya.  Soemarie,  Yulistia  Budianti.  2016.  Analgesic  Activity Study of  Ethanolic Extract  of Callicarpa Longifolia Lamk. in Mice. Trad., Med., J . 21 (2).
Tungadi,  Robert.  Abdulkadir,  Widysusanti.  2015.  Burn  Wound  Healing  Effect  of  Trembesi (Samanea  saman)  Leaves  Extract  Gel  on  Rats  (Rattus  novergicus). International Journal of PharmTech Research . 7 (4).
Wardana,  Andika  Pramudya.  Tukiran.  2016.  Skrining  Fitokimia  dan  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Kloroform  Tumbuhan  Gowok  (Syzygium  polycephalum). Prosiding Seminar Nasional Kimia dan Pembelajarannya .
Yasir,  Yadi.  Yuniati.  Paramita,  Swandari.  Zubaidah,  Mona.  Mu’ti,  Abdul.  Danial.  2017. Analisis Bioautografi dengan Kromatografi Lapis Tipis pada Ekstrak Etanol Daun Caesalpinia  Sumatrana  Roxb.  terhadap  Bakteri  Penyebab  Infeksi  Nosokomial. Jurnal Sains dan Kesehatan . 1 (7).