## ISOLASI DAN KARAKTERISASI KITIN DARI LIMBAH UDANG
Mahyudin A. R 1 , Rahmat Yuliandri dan Amry Syaawalz 2
1 Peneliti Teknologi Bioindustri BPPT Jakarta, 2 FMIPA Universitas Nusa Bangsa
2 e-mail : nusabangsa@unb.ac.id

## ABSTRACT

## Isolation and Characterization of Chitin From Shrimp Waste
Chitin is a natural biopolymer that is widespread in nature and the second abundance only to cellulose organic compounds are available in the earth. In general, in nature chitin are not included in the free state, but binds  to  the protein,  mineral  and  pigment  in  various  animal  skeletons  group of  arthropoda, annelida,  mollusk, coelenterata, nematodes, insects, and some classes of fungi and the  organic constituent part is very important. Average  shrimp  shell  contains  25-40%  protein,  40-50%  CaCO3  and  15-20%  chitin,  but  the  magnitude  of  the component  content  is  still  dependent  on  species  and  habitats.  Although  chitin  is  widespread  in  nature,  but  the main source that can be utilized as a source of chitin is the use of shrimp waste. This is because the shrimp waste easily  obtained  in  large  quantities  that  can  be  produced  commercially.  The  purpose  of  this  study  was  to determine  how  the  isolation  of  chitin  from  shrimp  waste  by  chemical  processes  and  their  characterization  and compare  in  detail  the  content  of  chitin  found  in  the  head,  body  and  tail  skin  of  the  shrimp.  In  addition,  to determine the effect of insulating phases of chitin to chitin produced. This study is an experimental research by isolation of chitin in the head, body and tail skin of the shrimp. In the early stages of shrimp waste preparation where  the  head and  skin of the body  and  tail of  each  shrimp  was  separated,  cleaned, dried,  and milled.  Chitin isolation process is done by two ways in which the first stage on the way deproteination done first and subsequent demineralization  stages.  While  in  the  second  stage  of  demineralization  way  done  first,  followed  deproteination stage. In phase deproteinasi  NaOH  1N solution with a ratio of 1: 10 (by weight of shrimp sample: NaOH 1N). This process was carried out at a temperature of 65 o C for three hours. While in the process of demineralization using HCl 2N solution and soaked for 2 hours with a comparison between the  shells samples with HCl used are 1: 15. After that just do the bleaching process. Each repetition of the way done twice. Research results show that the insulating phase difference of chitin used apparently affect the yield and ash content obtained, where the first way  yield  of  chitin  and  ash  content    obtained  was  higher  yield  compared  to  the  results  obtained  of  the  latter, while  the  drying  process  was  done  would  affect  water  levels    obtained.  In  the  solubility  test,  partially  chitin produced solved in LiCl or dimethylacetamide. Overall chitin obtained meet the requirements of the specification of  commercial  chitin.  In  addition,  from  the  head,  the  skin  of  the  body  and  the  tail  of  shrimp  the  higest  chitin content ever found was on the skin of the body
Key words : Isolation, Characterization, Chitin, and Shrimp Waste

## ABSTRAK
Kitin  adalah  biopolimer  alami  yang  tersebar  luas  di  alam  dan  merupakan  senyawa  organik  kedua setelah selulosa yang sangat melimpah di bumi. Pada umumnya kitin di alam tidak terdapat dalam keadaan bebas, akan  tetapi  berikatan  dengan  protein,  mineral  dan  berbagai  macam  pigmen  pada  kerangka  hewan  golongan Arthropoda , Annelida , Molusca , Coelenterata , Nematoda ,  beberapa  kelas  serangga  serta  jamur  dan  merupakan bagian  konstituen  organik  yang  sangat  penting.  Rata-rata  kulit  udang  mengandung  25-40%  protein,  40-50% CaCO 3 dan  15-20%  kitin,  tetapi  besarnya  kandungan  komponen  tersebut  juga  masih  tergantung  kepada  spesies dan  habitat.  Walaupun  kitin  tersebar  luas  di  alam,  akan  tetapi  sumber  utama  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai sumber kitin adalah penggunaan limbah udang. Hal ini dikarenakan limbah udang mudah diperoleh dalam jumlah banyak  sehingga  dapat  diproduksi  secara  komersial.Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  cara isolasi  kitin  dari  limbah  udang  dengan  proses  kimia  beserta  karakterisasinya  dan  membandingkan  secara terperinci kandungan kitin yang terdapat pada bagian kepala, kulit bagian badan dan ekor udang. Selain itu juga untuk  mengetahui  pengaruh  dari  tahapan  isolasi  kitin  terhadap  kitin  yang  dihasilkan.  Penelitian  ini  merupakan penelitian eksperimental dengan melakukan isolasi kitin pada bagian kepala, kulit bagian badan dan ekor udang. Pada  tahap  awal  dilakukan  preparasi  limbah  udang  dimana  bagian  kepala,  kulit  bagian  badan  dan  ekor  udang masing-masing dipisahkan dan dibersihkan, lalu dikeringkan dan digiling. Proses isolasi kitin dilakukan dengan dengan  dua  cara  dimana  pada  cara  pertama  tahap  deproteinasi  dilakukan  terlebih  dahulu  dan  berikutnya  tahap demineralisasi.  Sementara  pada  cara  kedua  tahap  demineralisasi  dilakukan  terlebih  dahulu,  lalu  diikuti  tahap deproteinasi. Pada tahap deproteinasi menggunakan larutan NaOH 1N dengan perbandingan 1 : 10 (berat sampel kulit  udang  :  NaOH  1N).  Proses  ini  dilakukan  pada  suhu  65 o C  selama  tiga  jam.  Sementara  pada  proses
demineralisasi  menggunakan  larutan  HCl  2N  dan  direndam  selama  2  jam  dengan  perbandingan  antara  sampel kulit  udang  dengan  HCl  yang  digunakan  adalah  1  :  15.  Setelah  itu  baru  dilakukan  proses  pemutihan.  Masing- masing  cara  dilakukan  pengulangan  sebanyak  dua  kali.  Hasil  Penelitian  menunjukkan  bahwa  perbedaan  tahap isolasi  kitin  yang  digunakan  ternyata  berpengaruh  terhadap  rendemen  hasil  dan  kadar  abu  yang  didapatkan, dimana pada cara pertama rendemen hasil kitin dan kadar abu yang didapatkan lebih tinggi dibandingkan dengan rendemen  hasil  yang  didapatkan  pada  cara  kedua,  sedangkan  proses  pengeringan  yang  dilakukan  akan berpengaruh terhadap kadar air yang didapatkan. Pada uji kelarutan, kitin yang dihasilkan larut sebagian dengan LiCl atau dimetilasetamida. Secara keseluruhan kitin yang diperoleh memenuhi persyaratan dari spesifikasi kitin niaga. Selain itu dari bagian kepala, kulit bagian badan dan ekor udang kandungan kitin terbanyak terdapat pada kulit bagian badan
Kata kunci : Isolasi, karakterisasi, kitin, dan limbah udang
PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Negara Indonesia memiliki wilayah  perairan  yang  luas  dan  sebagian besar  merupakan  wilayah  perikanan  yang potensial.  Salah  satu  hasil  perikanan  yang penting dan menjadi sumber devisa negara adalah  udang.  Kandungan  gizi  dan  rasa yang  dimiliki  udang  merupakan  salah  satu daya tarik yang membuat tingkat permintaan  konsumen,  baik  di  pasaran domestik  maupun  internasional  selalu mengalami kenaikan.
Saat  ini  areal  tambak  udang nasional  seluas  380.000  hektar,  meliputi 75%  dikelola  secara  tradisional,  15%  lagi secara  semi-intensif,  dan  10%  dilakukan dengan  sistem  intensif.  Total  produksi udang  nasional  pada  tahun  2004  adalah 242.560  ton.  Dari  total  produksi  itu  15% dikonsumsi  dalam  negeri,  selebihnya diekspor.  Negara  tujuan  ekspor  udang antara lain Jepang (60%), Amerika Serikat (16,5%)  dan  Uni  Eropa  (12,5%)  dengan nilai total ekspor mencapai 840,4 juta dolar (Anonim, 1981 dan BPS, 2004).
Ekspor udang umumnya dilakukan dalam  keadaan  beku,  setelah  terlebih dahulu  dipisahkan  kepala  atau  kepala  dan kulitnya. Akibat dari proses pemisahan itu, diperoleh  hasil  samping  berupa  kepala, kulit dan kaki udang yang dapat mencapai 25%  dari  keseluruhan  produk  yang kemudian menjadi limbah. Altschul (1976) mengatakan bahwa kulit
udang mengandung  25-40%  protein,  40-50% CaCO 3 dan  15-20%  kitin,  tetapi  besarnya kandungan  komponen  tersebut  juga  masih tergantung kepada spesies dan habitat.
Limbah  ini  bersifat bulky atau menyita  ruangan,  sehingga  memerlukan tempat yang cukup luas dan tertutup untuk penampungannya.  Dengan  kecenderungan permintaan akan daging beku udang untuk pasaran  domestik  maupun  internasional yang meningkat secara tajam dari tahun ke tahun,  akan  berakibat  pula  terhadap peningkatan  limbah  pabrik  pengolahannya berupa  kepala,  kulit  dan  kaki  udang. Limbah udang ini berpotensi menimbulkan masalah  lingkungan  seperti  menimbulkan polusi  udara  berupa  bau  yang  cukup mengganggu  dan  juga  dapat  menaikkan BOD  ( Biological  Oxygen  Demand )  dan COD  ( Chemical  Oxygen  Demand )  dalam perairan  (Damajanti,  1998).  Selama  ini limbah  kepala  udang  telah  dimanfaatkan sebagai  campuran  untuk  kerupuk  udang, terasi,  atau  petis  dan  kulitnya  kadang- kadang  dicampurkan  dalam  pakan  ternak. Tetapi  karena  jumlah  limbah  yang  cukup besar, maka pemanfaatan tersebut dirasakan belum dapat mengatasi permasalahan (Hartati et al, 2002)). Dari penelitian-penelitian
terdahulu,  diketahui  bahwa  pada  golongan
Crustaceae atau udang-udangan dan kerangka  serangga  banyak  mengandung senyawa kitin dalam kulit atau cangkangnya,  demikian  juga  pada  dinding sel  jamur,  alga  hijau,  serta  beberapa  alga merah (Pujiastuti, 2001). Proses pemanfaatan  limbah  kulit  udang  menjadi kitin  memiliki  prospek  yang  baik  untuk dikembangkan.  Beberapa  negara  telah mencoba mengatasi masalah limbah udang dengan  memanfaatkannya  sebagai  bahan pembuatan  kitin,  bahkan  di  negara-negara maju  seperti  Jepang  dan  Amerika  Serikat, produk  kitin  yang  berasal dari  kulit  udang
dan produk-produk turunannya telah diproduksi secara komersial (Abdurachman dkk, 1996). Kitin  adalah  biopolimer  alami yang mempunyai banyak kelebihan, seperti mempunyai sifat biokompatibilitas, biodegradabilitas dan tidak beracun. Ornum  (1992)  menyatakan  bahwa  kitin mudah mengalami degradasi secara biologis,  tidak  beracun,  tidak  larut  dalam air,  asam  organik  encer  dan  asam-asam organik,  tetapi  larut  dalam  larutan  dimetil asetamida  dan  lithium  klorida.  Sifat  daya serap kitin yang baik dapat didayagunakan untuk  menangani  cemaran  logam  beracun dan  zat  pewarna  tekstil  yang  terakumulasi dalam  perairan  dan  dapat menyerap  bahan berprotein  yang  terdapat  dalam  air  limbah industri  pengolahan  pangan.  Kitin  juga berpotensi  sebagai  komoditas  dibidang industri,  misalnya  sebagai  aditif  pada industri kertas, tekstil dan industri makanan.  Dalam  bidang  biomedis  dan farmakologi,  kitin  juga  berpotensi  sebagai bahan antibiotika dan benang operasi yang aman  (Austin et  al ,  1981).  Kitin  yang digunakan  dalam  bidang  biomedis  dan farmakologi  diusahakan  dalam  bentuk yang  semurni  dan  sealami  mungkin. Sedangkan untuk penanganan limbah, kitin yang  didapatkan  tidak  harus  dalam keadaan  benar-benar  murni  (Damajanti, 1998).
Pada umumnya kitin di alam tidak terdapat  dalam  keadaan  bebas,  akan  tetapi berikatan  dengan  protein,  mineral,  dan berbagai  macam  pigmen  (Carroad  dan
Tom, 1978). Oleh karena itu, ada beberapa faktor yang dapat mempengaruhi keberhasilan  isolasi  kitin,  antara  lain adalah  jenis  bahan  baku  dan  proses ekstraksi  kitin,  yang  meliputi  deproteinasi dan  demineralisasi.  Untuk  mendapatkan kitin  dengan  kualitas  tinggi,  proses deproteinasi dan demineralisasi merupakan proses  yang  paling  penting  (Knorr,  1991). Muzzarelli (1985) berpendapat bahwa kitin dan  turunannya  dapat  diisolasi  dengan proses kimia yang cukup sederhana. Untuk proses deproteinasi dapat dilakukan dengan  penambahan  NaOH  yang  disertai dengan pemanasan secara kontinyu,
sedangkan  proses  demineralisasi  dapat dilakukan dengan menggunakan HCl.
Penelitian ini bertujuan untuk :
1. Mengetahui  cara  isolasi  kitin  dari limbah udang dengan proses kimia.
2. Mengetahui dan membandingkan secara  terperinci  kandungan  kitin yang  terdapat  pada  bagian  kepala, kulit  bagian  badan  dan  ekor  udang setelah mengalami proses deproteinasi dan demineralisasi.
3. Mengetahui  pengaruh  dari  tahapan isolasi  kitin  terhadap  kitin  yang didapatkan, dimana pada cara pertama menggunakan proses deproteinasi dan demineralisasi  secara  berurutan.  Pada cara  kedua  proses  demineralisasi dilakukan  terlebih  dahulu  lalu  diikuti oleh proses deproteinasi.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Alat
1. Bahan penelitian : Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  limbah  kulit udang  yang  diperoleh  dari  pabrik pengolahan  udang  di  daerah  Tanjung Priok.
2. Bahan kimia yang digunakan :
Bahan-bahan  kimia  yang  digunakan adalah  HCl  2N,  NaOH  1N,  NaOCl 0,3% dan LiCl/dimetilasetamida.
3. Alat-alat yang digunakan : Alat-alat  yang  diperlukan  dalam percobaan  ini  adalah  alat-alat  yang lazim  digunakan  di  laboratorium, neraca  analitik,  neraca  kasar,  oven, spektrofotometer  IR  (Lampiran  3h), eksikator, tanur dan lain-lain.

## Cara Kerja
Penelitian ini merupakan penelitian  eksperimental,  meliputi  isolasi dan karakterisasi kitin
dengan menggunakan prosedur kerja yang diambil dan digabungkan dari beberapa penelitian- penelitian sebelumnya.

## 1. Isolasi Kitin

## Preparasi bahan limbah
Limbah udang yang masih bercampur dengan sedikit daging dibersihkan menggunakan air bersih sambil  dipisahkan  bagian  kepala,  kulit bagian badan dan ekornya. Masing-masing bagian  dipisahkan  dari  daging  yang  masih menempel  lalu  dicuci  dengan  air  bersih dalam  wadah  saringan.  Bagian-bagian yang  telah  bersih  tersebut  dikeringkan  di bawah  terik  matahari  sampai  kering,  lalu digiling  untuk  mendapatkan  partikel- partikel  yang  lebih  kecil,  selanjutnya  siap untuk
tahap proses
berikutnya (Abdurachman, 1996).
Untuk  tahap  selanjutnya,  lakukan dengan cara sebagai berikut :

## a. Cara I
(1). Proses deproteinasi
Kandungan  protein  dalam  kulit udang dapat dihilangkan
dengan
menggunakan  larutan  NaOH  1N.  Larutan NaOH  yang  digunakan  sebanyak  10  liter untuk  setiap  kg  kulit  udang  yang  telah dikeringkan  (  1  :  10,  berat  serbuk  kulit udang : NaOH 1 N ). Proses ini dilakukan pada suhu 65 o C selama tiga jam (Suhardi,1993).
Hasil dari proses deproteinasi  ini  kemudian  disaring  dan dicuci dengan air bersih untuk menghilangkan sisa-sisa NaOH, lalu dikeringkan  dengan  menggunakan  oven pada suhu 60 o C selama enam jam.
(2). Proses demineralisasi
Proses penghilangan mineral
dilakukan  dengan  merendam  serbuk  kulit udang  hasil  proses  deproteinasi  dengan
HCl  2N  selama  dua  jam.  Perbandingan antara  serbuk  kulit  udang  dan  HCl  yang digunakan  adalah  1  :  15  (Suhardi,  1993). Hasil  dari  proses  tersebut  kemudian disaring  dan  dicuci  dengan  air  bersih dikeringkan  dengan  menggunakan  oven dengan suhu 60 o C selama enam jam.
(3). Pemutihan
Setelah dilakukan proses deproteinasi  dan  demineralisasi,  sebagian besar  komponen  non-kitin  lainnya  sudah dapat  dihilangkan.  Kitin  hasil  isolasi tersebut  masih  berwarna  kekuningan. Untuk memutihkan kitin itu dapat dilakukan dengan merendam dalam larutan NaOCl 0,3% selama lima menit, kemudian disaring  dan  dicuci  dengan  air  bersih  lalu dikeringkan  dengan  menggunakan  oven dengan suhu 60 o C selama enam jam.

## b. Cara II
Pada  cara  II    isolasi  kitin  yang dilakukan  hanya  berbeda  pada  tahap prosesnya saja, dimana pada cara II proses deproteinasi  dilakukan  setelah  melalui proses  demineralisasi,  sehingga  urutan langkah kerjanya menjadi seperti berikut :
(1).  Demineralisasi.
(2).  Deproteinasi.
(3).  Pemutihan.

## 2. Analisis Kadar Air
Penentuan  kadar  air  dilakukan dengan cara sebagai berikut, pertama-tama cawan  porselen  yang  akan  digunakan dikonstankan beratnya dengan cara dipanaskan  dalam  oven  110 O C,  kemudian didinginkan  dalam  eksikator.  Setelah dingin  ditimbang.  Perlakuan  ini  diulang sampai  berat  cawan  konstan.  Setelah beratnya  konstan  ke  dalam  cawan  di masukkan sejumlah tertentu sampel, kemudian  dilakukan  perlakuan  seperti diatas sampai beratnya konstan.
Perhitungan :
:

## 3. Analisis Kadar Abu
Penentuan  kadar  abu  dilakukan dengan  cara  sebagai  berikut,  cawan porselen yang akan
digunakan dikonstankan beratnya dengan cara dipanaskan  dalam  tanur  600 O C,  kemudian didinginkan  dalam  eksikator.  Setelah dingin  ditimbang.  Perlakuan  ini  diulang sampai  berat  cawan  porselen  konstan. Setelah beratnya konstan, ke dalam cawan di  masukkan  sejumlah  tertentu  sampel, kemudian  dilakukan  perlakuan  seperti diatas  selama  enam  jam  (atau  sampai beratnya konstan).
Perhitungan :

## 4. Pemeriksaan Gugus Fungsi
Untuk  pemeriksaan  gugus  fungsi dilakukan  dengan  menggunakan  metode spektrofotometer  infra  merah  dengan  cara sebagai  berikut,  sejumlah  tertentu  sampel di  masukkan  ke  dalam  stemper  kemudian ditambahkan  KBr  sehingga  konsentrasi cuplikan  1%,  kemudian  digerus,  dibuat pellet dan dianalisa dengan spektrofotometer  infra  merah.  Kemudian dilakukan scanning pada bilangan gelombang  4000  cm -1 sampai  dengan  400 cm -1 .  Lakukan  pembacaan  gugus  fungsi dari hasil scanning tersebut.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Udang merupakan produk perikanan  yang  memiliki  potensi  besar untuk dikembangkan. Limbah yang dihasilkan  berupa  kulit  udang  yang  masih mengandung zat yang dapat dimanfaatkan. Kulit  udang  memiliki  kandungan  kitin, protein  ,  lemak,  pigmen  dan  senyawa flavor (No et al . 1989). Kulit udang secara keseluruhan memiliki  pigmen merah kecoklat-coklatan  dan  putih  dengan  corak kehitaman  tergantung  varietas  udang tersebut.  Kulit  udang  yang  dihasilkan  dari industri  terdiri  dari  kepala,  badan,  dan ekor. Bagian kepala membutuhkan penanganan khusus karena masih mengandung daging.
Faktor  yang  menjadi  tolok  ukur pembuatan  kitin  adalah  protein  dan mineral,  sehingga  proses  isolasi  kitin  dari limbah  udang  sangat  ditentukan  oleh  dua faktor  yang  dapat  mempengaruhi  kualitas kitin  yaitu  proses  deproteinasi  dan  proses demineralisasi. Selain kedua faktor tersebut, semakin besar kandungan protein, lemak  dan  mineral  awal  yang  terkandung dalam kulit udang juga akan mempengaruhi rendemen kitin yang dihasilkan  setelah  proses  demineralisasi maupun deproteinasi.

## A. Sampel
Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  ini  berasal  dari  limbah  pabrik pengolahan  udang  di  daerah  Tanjung Priok.  Jenis  udang  yang  digunakan  oleh pabrik tesebut bervariasi, tidak bergantung pada  satu  spesies  udang  tertentu  dan berasal  dari  berbagai  daerah  di  Indonesia. Hal  ini  akan  memberikan  pengaruh terhadap  kitin  yang  didapatkan  karena kandungan  kitin  yang  ada  pada  limbah udang  juga  dipengaruhi  oleh  spesies udang,  habitat  dan  makanan  yang  di konsumsi oleh udang tersebut.

## B. Preparasi Sampel
Setelah  sampel  dibersihkan  dan dikeringkan, sampel perlu digiling terlebih dahulu untuk mendapatkan ukuran partikel
sampel  yang  lebih  kecil  lagi  (Lampiran
3a). Tujuannya adalah memperluas permukaan  sampel  yang  kontak  dengan NaOH  maupun  HCl  sehingga  proses penghilangan  protein  dan  mineral  yang terkandung pada sampel berlangsung lebih sempurna. Dari penelitian-penelitian sebelumnya diketahui bahwa ukuran kehalusan  sampel  sangat  berpengaruh terhadap tingkat keberhasilan
penghilangan  kandungan  protein  dan mineral yang terdapat pada sampel dimana semakin kecil ukuran partikel sampel maka proses  deproteinasi  dan  demineralisasi akan  berlangsung  lebih  efektif  hingga mencapai  suatu  titik  dimana  ukuran partikel  sampel  tidak  berpengaruh  lagi terhadap proses deproteinasi dan demineralisasi.

## C. Proses Isolasi Kitin
1.    Proses  Deproteinasi  (Lampiran  3b dan Lampiran 3f)
Deproteinasi adalah proses penghilangan  kadar  protein  pada  suatu bahan. Ikatan peptida yang menghubungkan  asam-asam  amino  pada molekul protein akan diputus dalam proses ini dengan reaksi hidrolisis. Selama proses deproteinasi, hidrolisis protein menghasilkan  asam-asam  amino.  Setiap jenis  protein  menghasilkan  jenis-jenis asam  amino  yang  khas  setelah  proses hidrolisis,  dan  bila  asam-asam  amino diuraikan  lebih  jauh  akan  membentuk gugus  asam  karboksilat  dan  amina. Menurut  No et  al. (1989),  kulit  udang mengandung  asam  amino  67,2  mg/g dengan  komposisi  asam  amino  tersebut adalah  asam  aspartat  (4,3  mg/g),  treonin (2,1  mg/g),  serin  (2,4  mg/g)  prolin  (3,8 mg/g),  asam  glutamat  (5,2  mg/g),  glisin (4,1  mg/g),  alanin  (2,6  mg/g),  valin  (2,1 mg/g),  sistein  (0,2  mg/g),  metionin  (0,3 mg/g),  isoleusin  (1,4  mg/g),  leusin  (2,5 mg/g), tirosin (28,4 mg/g), penilalanin (2,3 mg/g), lisin (2,2 mg/g), histidin (0,7 mg/g) dan  arginin  (2,6  mg/g).  Penggunaan larutan  NaOH  pada  proses  deproteinasi disebabkan  bahwa  kelarutan  protein  pada suasana  basa  lebih  besar  dibandingkan
pada  suasana  asam  (No et  al ,  1989). Dengan  demikian,  diharapkan  proses deproteinasi yang terjadi berlangsung lebih maksimal.  Penggunaan  konsentrasi  NaOH 1N  dan    pemilihan  suhu  65 o C  selama  ±  3 jam pada proses deproteinasi adalah untuk meminimalkan  kerusakan  yang  mungkin terjadi  pada  isolat  kitin.  Selain  itu  dari beberapa penelitian mengenai tahap penghilangan  protein  pada  proses  isolasi kitin  umumnya  digunakan  suhu  antara 60 o C hingga 70 o C (Hong dkk, 1989).
2.    Proses  Demineralisasi  (Lampiran  3c dan Lampiran 3e).
Komposisi  utama  mineral  yang terdapat dalam kulit udang adalah kalsium karbonat  (CaCO 3 )  dan  kalsium  fosfat (Ca 3 (PO 4 ) 2 )  (Bastaman,  1989).  Mineral tersebut biasanya berasosiasi dengan protein  dan  polimer  kitin  dalam  kulit udang.  Proses  menghilangkan  kandungan mineral (demineralisasi) dalam kulit udang dilakukan  dengan  merendam  kulit  udang yang  telah  dipisahkan  antara  bagian kepala, kulit bagian badan dan ekor dalam larutan  HCl  dengan  tujuan  agar  mineral (senyawa-senyawa anorganik dalam bentuk  garamnya)  akan  bereaksi  dengan HCl membentuk garam klorida yang larut. Mengingat  tingginya  kandungan  mineral dari  kulit  udang  tentunya  diperlukan penambahan  HCl  pada  konsentrasi  tinggi dan waktu perendaman yang lama. Namun apabila dikenakan kondisi ini, dikhawatirkan  terjadi  degradasi  dari  kitin yang  terkandung  dalam  kulit  udang, terutama  yang  disebabkan  oleh  terjadinya hidrolisis. Oleh karena itu konsentrasi HCl untuk  proses  ini  dipilih  pada  konsentrasi 2N dengan lama perendaman selama 2 jam dengan  asumsi  bahwa  konsentrasi  dan waktu  perendaman  ini  tidak  cukup  kuat untuk menimbulkan terjadinya hidrolisis.
Pada  awal  perendaman  sampel dalam larutan HCl 2N, timbul gelembung- gelembung  yang  menandakan  terjadinya reaksi  antara  kalsium  karbonat  dengan larutan  HCl  yang  menghasilkan  kalsium klorida, air dan kabondioksida.
Gelembung-gelembung yang terjadi  ini  akan  hilang  dengan  sendirinya
setelah beberapa lama perendaman. Reaksi yang  terjadi  antara  kalsium  karbonat dengan HCl adalah sebagai berikut :
CaCO 3 +  2 HCl       CaCl 2 +  H 2 CO 3 H 2 CO 3 H 2 O  +  CO 2 CaCO 3 +  2 HCl       CaCl 2 + H 2 O +CO 2

## 3. Proses Pencucian
Menurut  Angka  dan  Suhartono (2000),  selama  proses  deproteinasi  dan demineralisasi dapat terjadi kerusakan kitin oleh  proses  penguraian  hidrolitik  pada keadaan  atau lingkungan  reaksi  yang  agak keras. Kerusakan ini terjadi karena adanya ikatan  asam  amino  bebas  dengan  asam- asam yang digunakan dan penyerapan sisa asam  pada  saat  pengeringan.  Untuk menghindarinya  bisa  dilakukan  dengan penambahan  larutan  alkali (NaOH)  sedikit demi  sedikit  untuk  mencapai  pH  netral pada  proses  pencucian  setelah  proses demineralisasi  dan  penambahan  larutan asam  (HCl)  pada  proses  pencucian  setelah proses  deproteinasi  untuk  mencapai  pH netral.

## 4. Pengeringan (Lampiran 3d)
Proses  pengeringan  memegang peranan  penting  terhadap  kadar  air  yang terkandung  pada  kitin,  dimana  kadar  air merupakan  salah  satu  parameter  dari standar  baku  kitin  niaga.  Penggunaan temperatur yang tinggi untuk mempercepat proses  pengeringan  sedapat  mungkin dihindarkan  untuk  mencegah  terjadinya kerusakan  kitin.  Pada  penelitian  ini,  pada mulanya  proses  pengeringan  dilakukan  di bawah  terik  matahari.  Namun  ternyata pengeringan dengan cara ini membutuhkan waktu yang lama yaitu lebih dari satu hari dan  selama  proses  pengeringan  terjadi kontaminasi  kotoran  seperti  debu  pada bahan  yang  sedang  dikeringkan.  Oleh sebab  itu,  untuk  proses  pengeringan selanjutnya  menggunakan  oven  pada temperatur  60 o C  selama  enam  jam. Pemilihan  waktu  tersebut  didasarkan  pada kenyataan  bahwa  sebelum  enam  jam sampel  masih  belum  kering  benar.  Selain
itu juga untuk mendapatkan kadar air yang serendah mungkin.

## D. Rendemen Hasil (Lampiran 3g)
Kitin  merupakan  suatu  padatan berwarna  putih,  tidak  larut  dalam  air, larutan basa  yang  encer  dan  pekat,  larutan asam  yang  encer  dan  pelarut–pelarut organik,  akan  tetapi  kitin  larut  dalam asam–asam  mineral  yang  pekat  seperti HCl,  H 2 SO 4 ,  HNO 3 ,  H 3 PO 4 dan  HCOOH anhidrid.
Kitin kurang reaktif dibandingkan  dengan  selulosa.  Sistem pelarut yang efektif dalam melarutkan kitin adalah  campuran  pelarut  yang  terdiri  dari
N,N-dimetilasetamida  yang  mengandung 5% LiCl yang terlarut (DMAc-LiCl). Kitin dapat terurai secara hayati ( biodegradable ),  terutama  oleh  bakteri penghasil enzim lisosim dan kitinase. Kitin mempunyai  berat  molekul  tinggi  sekitar 1,2  x  10 6 (Bastaman  dkk,  1990).  Kitin termasuk golongan homopolisakarida yang mempunyai  berat  molekul  tinggi  dan merupakan  polimer  linier  dari  anhidro  N- asetil-D-glukosamin  (N-asetil-2-amino-2- deoksi-D-glukosa)  (Gambar  2)  (Carroad dan Tom, 1978).
Dari  isolasi  kitin  yang  telah dilakukan  dengan  menggunakan  cara  I (deproteinasi-demineralisasi)  dan  cara  II (demineralisasi-deproteinasi) dengan masing-masing cara dilakukan pengulangan  sebanyak  dua  kali,  diperoleh rendemen  hasil  rata-rata  yang  bervariasi antara  bagian  kepala,  kulit  bagian  badan dan  ekor  udang  (Gambar  2  dan  Lampiran 1) i :
Dari histogram di atas dapat dilihat bahwa kulit bagian badan udang mengandung  senyawa  kitin  yang  lebih dominan  bila  dibandingkan  dengan  bagian kepala  maupun  ekor  udang.  Hal  ini disebabkan  pada  udang,  kitin  berfungsi sebagai komponen struktur yang
memberikan sifat elastis dari kerangka luar udang  bersama  dengan  senyawa  lain,
terutama  protein  dan  kalsium  yang memberikan  sifat  keras.  Kulit  bagian badan  bersifat  lebih  elastis  dibandingkan
bagian kepala dan ekor udang yang bersifat lebih keras karena pada kulit bagian badan mengandung  kitin  lebih  banyak  tetapi kandungan  kalsium  dan  protein  lebih sedikit. Pada bagian kepala dan ekor udang kandungan  kitin  lebih  sedikit  dengan kandungan kalsium dan protein yang lebih banyak. Selain hal tersebut, pada pertumbuhannya  udang  akan  mengalami pergantian  kulit.  Hal  ini  ditandai  dengan bertambah besarnya udang sehingga kulitnya  akan  pecah  dan  diganti  oleh  kulit baru yang tipis dan lunak untuk sementara. Peristiwa  ini  disebut  dengan moulting . Untuk  proses  pembentukan  kulit  baru, udang  membutuhkan  kalsium,  protein  dan kitin  dalam  jumlah  yang  banyak.  Hal  ini juga menjadi penyebab mengapa kandungan  kitin  pada  kulit  bagian  badan udang  menjadi  lebih  tinggi  dibandingkan dengan bagian kepala dan ekor udang.
Tinggi  rendahnya  rendemen  yang diperoleh juga dipengaruhi oleh kemurnian isolat  yang  didapatkan.  Semakin  murni isolat  yang  didapatkan,  dengan  kata  lain makin  berkurangnya  pengotor  yang  tidak diinginkan  dalam  isolat  tersebut,  akan berakibat  semakin  rendahnya  rendemen yang  diperoleh.  Namun  hal  ini  akan meningkatkan  kualitas  dari  isolat  yang diperoleh.  Dari  isolasi  kitin  yang  telah dilakukan,  pada  cara  I  keseluruhan  bagian udang  memberikan  rendemen  hasil  yang lebih  tinggi    dibandingkan  dengan  cara  II (Gambar  4),  namun  pada  cara  I  diperoleh kandungan  kadar  abu  yang  juga  lebih tinggi  pada  keseluruhan  bagian  udang  bila dibandingkan  dengan  cara  II  (Tabel  4, Tabel  5  dan  Lampiran  1).  Perbedaan rendemen hasil yang didapatkan pada cara I  dan  cara  II  terutama  dipengaruhi  oleh kadar abu.

## E. Karakteristik Kitin
Dari  karakterisasi  yang  telah dilakukan  terhadap  isolat  kitin  yang didapatkan,  diperoleh  data-data  seperti pada Tabel 1 dan Tabel 2.

## Gambar 2. Struktur Kimia Kitin
Gambar 3. Histogram Rendemen Hasil Isolasi Kitin Menggunakan Cara I dan Cara II
Tabel  1.  Karakteristik  Kitin  yang  Terdapat  Pada  Kepala,  Kulit  Bagian  Badan  dan  Ekor
Udang Dengan Menggunakan Cara I
Karakteristik Kitin Standar* Kepala Kulit Bagian Badan Ekor Ukuran partikel Serpihan- serbuk Serpihan Serpihan Serpihan Kadar air (% b/b) ≤ 10,0 6,66 7,18 6,70 Kadar abu (% b/b) ≤ 2,0 1,84 1,79 1,98 Kelarutan : Air Tidak larut Tidak larut Tidak larut Tidak larut LiCl/dimetilasetamida Sebagian larut Sebagian larut Sebagian larut Sebagian larut Catatan: *Anonim (1987)
Tabel  2.  Karakteristik  Kitin  yang  Terdapat  Pada  Kepala,  Kulit  Bagian  Badan  dan  Ekor Udang dengan Menggunakan Cara II
Karakteristik Kitin Standar* Kepala Kulit Ekor Ukuran partikel Serpihan – serbuk Serpihan Serpihan Serpihan Kadar air (% b/b) ≤ 10,0 6,50 7,26 7.06 Kadar abu (% b/b) ≤ 2,0 1,33 1,25 1,53 Kelarutan : Air Tidak larut Tidak larut Tidak larut Tidak larut LiCl/dimetilasetamida Sebagian larut Sebagian larut Sebagian larut Sebagian larut Catatan: *Anonim (1987) 1.    Ukuran Partikel Pada  proses  preparasi  bahan limbah, setelah kering bagian kepala, kulit bagian  badan  dan  ekor  udang  kemudian digiling untuk mendapatkan ukuran
partikel  yang  lebih  kecil  hingga  menjadi serpihan dengan tujuan untuk memperluas bidang  permukaan  yang  kontak  dengan NaOH dan HCl sehingga proses deproteinasi dan demineralisasi berlangsung dengan lebih sempurna.

## 2. Kadar Air
Kadar  air  erat  kaitannya  dengan daya  simpan.  Adanya  kandungan  air  di atas  nilai  standar  dapat  mempengaruhi daya  tahan  kitin  terhadap  serangan mikroba  sehingga  menjadi  lebih  cepat rusak.  Tinggi  atau  rendahnya  kadar  air yang  didapatkan  tergantung  suhu  dan waktu  yang  digunakan  pada  proses pengeringannya.  Dari  hasil  penelitian, baik  pada  cara  I  maupun  cara  II didapatkan kitin dengan kadar air terendah  adalah  6,49%  sedangkan  kadar
air  tertinggi  adalah  7,26%.  Dari  data tersebut,  produk  kitin  yang  dihasilkan memenuhi  persyaratan  dari  spesifikasi kitin niaga.

## B. Kadar Abu
Kadar  abu  merupakan  faktor penting  dalam  proses  pembuatan  kitin. Abu adalah zat anorganik sisa pembakaran  suatu  bahan  organik.  Kadar abu  merupakan  penghitungan  jumlah mineral  yang  terkandung  dalam  suatu bahan.  Dengan  demikian,  hasil  analisis kadar  abu  yang  terdapat  pada  kitin  erat kaitannya dengan mineral yang terkandung  pada  kitin  dan  berpengaruh langsung  terhadap  kualitasnya.  Semakin rendah kadar abu yang terdapat pada kitin semakin  rendah  pula  kandungan  mineral yang terdapat  pada kitin  sehingga kualitasnya semakin bagus, demikian pula sebaliknya.  Kadar  abu  yang  tinggi  atau dengan  perkataan  lain  kadar  mineral tinggi tidak dikehendaki pada penggunaan–penggunaan  tertentu  dari kitin  seperti  misalnya  penggunaan  kitin
pada  teknik  kromatografi  terutama  untuk tujuan  pemisahan  –  pemisahan  protein. Kulit  udang  merupakan  bahan  baku  kitin yang  memiliki  kadar  abu  cukup  tinggi sehingga  proses  demineralisasi  akan sangat berpengaruh terhadap kualitas kitin yang  dihasilkan.  Dari  hasil  penelitian, pada  cara  I  didapatkan  persentase  kadar abu  yang  lebih  tinggi  bila  dibandingkan dengan  persentase  kadar  abu  pada  cara  II walaupun  secara  keseluruhan  persentase kadar  abu  yang  didapatkan  pada  cara  I dan  II  masih  memenuhi  persyaratan  dari spesifikasi  kitin  niaga  yaitu  ≤  dari  2,0%. Dengan  demikian,  proses  penghilangan mineral  akan lebih efektif dengan menggunakan  cara  II.  Lebih  efektifnya penghilangan  mineral  pada  cara  II kemungkinan disebabkan proses
penghilangan  mineral  tidak  hanya  terjadi pada proses demineralisasi saja tetapi juga pada  saat  proses  deproteinasi.  Hal  yang sama kemungkinan tidak terjadi pada cara I.  Perbedaan  ini  bisa  saja  terjadi  karena pengaruh dari ikatan antara kitin, kalsium dan protein.
C. Kelarutan Pada  uji  kelarutan,  produk  kitin yang  dihasilkan  tidak  larut  dengan  air, tetapi larut
sebagian dengan menggunakan LiCl/dimetilasetamida.

## F. Karakteristik Gugus Fungsi
Penentuan  karakteristik  gugus fungsi  dari  kitin  dilakukan  dengan menggunakan spektrofotometer infra merah. Berdasarkan spektrum infra merah kitin  (Lampiran  2)  didapati  pita  –  pita sebagai  berikut:  pita  memiliki  intensitas yang  tajam  pada  bilangan  gelombang 3437,61  cm -1 yang  merupakan  pita  khas dari  rentangan  gugus  O-H.  Pita  pada bilangan gelombang 2933,43 cm -1 merupakan pita rentangan uluran C-H dari CH 3 .  Adanya  gugus  C=O  ditunjukkan oleh    pita  pada  bilangan  gelombang 1662,00  cm -1 ,  sedangkan  pita  pada bilangan gelombang 1557,77 cm -1 merupakan  pita  dari  gugus  NH.  Gugus-
gugus  fungsi  tersebut  merupakan  bagian dari senyawa kitin.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## A. Kesimpulan
Limbah udang mengandung bahan-bahan  yang  dapat  dimanfaatkan dan memberikan nilai tambah yang tinggi. Salah  satu  bahan  yang  terkandung  pada limbah  udang  dan  mempunyai  nilai tambah  yang  tinggi  adalah  kitin.  Isolasi kitin  dari  limbah  udang  dapat  dilakukan dengan  proses  kimia  meliputi  proses deproteinasi  dan  demineralisasi.  Dari penelitian yang telah dilakukan, perbedaan  tahap  isolasi  kitin  yang digunakan  ternyata  berpengaruh  terhadap rendemen atau jumlah kitin yang dihasilkan  dimana  pada  cara  I  diperoleh kitin  dari  bagian  kepala,  kulit  bagian badan  dan  ekor  udang  secara  berturut- turut adalah 18,76%, 26,62% dan 23,32%. Dengan  menggunakan  cara  II  kitin  yang diperoleh dari bagian kepala, kulit bagian badan  dan  ekor  udang  adalah  sebesar 16,70%,  25,32%  dan  22,04%.  Dari  hasil tersebut dapat diketahui bahwa penggunaan  cara  I  pada  proses  isolasi kitin  dari  kulit  udang  akan  memberikan persentase hasil yang lebih besar dibandingkan  dengan  menggunakan  cara
II. Baik cara I maupun cara II sama-sama memberikan kenyataan bahwa kandungan tertinggi  kitin  terdapat  pada  kulit  bagian badan  udang,  diikuti  oleh  bagian  ekor udang  dan  paling  sedikit  terdapat  pada bagian kepala udang.
Perbedaan tahap isolasi kitin yang digunakan  juga  berpengaruh  terhadap kadar  abu  yang  didapatkan  pada  kitin, dimana  pada  cara  I  diperoleh  kadar  abu sebesar  1,84%  pada  kitin  yang  berasal dari  bagian  kepala  udang,  1,79%  pada kitin yang berasal dari kulit bagian badan udang  dan  1,98%  pada  kitin  yang  berasal dari  ekor  udang.  Sedangkan  pada  cara  II diperoleh  kadar  abu  yang  lebih  rendah yaitu  sebesar  1,33%,  1,25%  dan  1,53%. Namun  dari  hasil  karakterisasi  secara keseluruhan, kitin yang didapatkan dengan  menggunakan  cara  I  ataupun  cara
II  sama  –  sama  memenuhi  persyaratan spesifikasi  kitin  niaga.  Oleh  sebab  itu, penggunaan  cara  isolasi  kitin  yang  akan digunakan  bergantung  pada  spesifikasi kitin yang dibutuhkan.
Dari  karakterisasi  gugus  fungsi yang  telah  dilakukan  terhadap  isolat  kitin yang  dihasilkan  dengan  menggunakan spektrofotometer  infra  merah  diketahui bahwa  isolat  yang  diperoleh  adalah senyawa  kitin,  hal  ini  diketahui  dari munculnya  pita-pita  dari  bilangan  – bilangan  gelombang  yang  mencerminkan adanya gugus NHCOCH 3 yang
merupakan  bagian  dari  kitin  dan  juga membandingkan  spektrum  yang  muncul dengan spektrum standar kitin.

## B. Saran
Dari hasil dan pengalaman sewaktu melakukan penelitian ini,
sebaiknya  pada  saat  preparasi  bahan limbah,  pengeringan  dilakukan  dengan menggunakan  oven.  Hal  ini  untuk mencegah  terjadinya  kontaminasi  limbah udang  yang  telah  dibersihkan  dengan debu atau pengotor lainnya, selain itu juga dapat mempersingkat waktu pengeringan.
Sebelum  dilakukan  proses  isolasi kitin,  sebaiknya  dilakukan  pengujian kadar  protein  dan  mineral  awal  yang terdapat pada limbah udang. Hal ini untuk mengetahui tingkat efektifitas
penghilangan  kandungan  protein  dan mineral  dari  masing  –  masing  cara  yang digunakan.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdurachman,  M.,  Zainuddin,  M.S.,  T. Mayanti,    1996. Isolasi  dan Karakterisasi  Kitin  dari  Kulit Kepiting, Transformasi Isolat Kitin  dan  Upaya  Penggunaannya Dalam  Kromatografi  Afinita  Zat Warna . Bandung.
Academic Press : New York.
Altschul A. M., 1976. New Protein Foods .
Anonim, 1987. Chitin . Protan Laboratories, USA. Austin, P. R., Brine, C. J. Castle, J. E. dan J.  P.  Zikakis,  1981. Chitin  :  New Facets of Research. Science. 212: 749. Bastaman, S., 1989. Studies on Degradation  and  Extaction  of Chitin  and  Chitosan  from  Prawn Shell ( Nephrops norvegicus ). Thesis.  The  Departement  of Mechanical, Manufacturing, Aeronautical and Chemical Engineering, Faculty opf Engineering The Queen’s University of Belfast. Bastaman,  dkk.,  1990. Penelitian  Limbah
Udang  sebagai  Bahan  Industri Khitin  dan  Khitosan .  BBIHP, Bogor.
BPS., 2004. Sektor dan Komoditas Ekspor Non-Minyak  dan  Gas  Indonesia , 2001-2002 (27 Juli 2005).
Carroad,  P.  A  and  R.  A  Tom,  1978 . Bioconvertion  of  Shellfisf  Chitin Waste  :  Process  and  Selection  of Microorganism .  Journal  Food Science. 43(4) : 1158.
Damajanti,  N.,  1998. Kitin  dan  Kitosan: Kulit  Udang  Sebagai  Alternatif Pemecahan  Masalah  Limbah. Techno No I/I-1998.
Hartati, F. K., T. Susanto, S. Rakhmadino, L.  A.  Santoso,  2002. Faktor- Faktor yang Berpengaruh Terhadap  Tahap  Deproteinasi Menggunakan  Enzim  Protease Dalam  Pembuatan  Kitin  dari
Cangkang  Rajungan ( Portunus pel agicus).
Hong K. No., S.P. Meyer, K.S. Lee, 1989. Isolation  and  Characterization  of Chitin from Crawfish Shell Waste . Journal  of  Agricultural  and  Food
Chemistry.
Knorr, D., 1991. Recovery and Utilisation of  Chitin  and  Chitosan  in  Food Processing  waste  Management. Journal  Food  Technology.  5  (5)  :
144-121. Muzzarelli, RAA., 1984. New Derivatives of Chitin and Chitosan : Properties and Aplications . Dalam  New  Development  in Industrial Polysaccharides. Garden  and  Breach  Science Publishers : New York. No,  H.  K.,  S.P.  Meyers  dan  K.S  Lee, 1989. Isolation and Characterization  of  Chitin  fronm Crawfish  Shell  Waste .  J.  Agric.
Food Chem. 37(3):575-579.
Ornum, J., 1992. Shrimp Waste Must it be Waste?. Info Fish 6/92. 48-51.
Pujiastuti,  P.,  2001. Kajian  Transformasi Kitin  Menjadi  Kitosan  Secara Kimiawi dan Enzimatik . Prosiding Seminar  Nasional  Kimia,  169- 177. Suhardi.,  M.  S.,  1993. Kitin  dan  Kitosan . Pusat  Antar  Universitas  Pangan dan  Gizi.  Universitas  Gajah Mada. Yogyakarta.