## Research Articles
Perbedaan  jumlah  koloni  jamur Trichophyton  rubrum pada  media Sabouraud Dextrose Agar dan modifikasi glukosa 3 gr
Natalia 1* , Rosnita Sebayang 2 , Ian Kurniawan 2
1 Mahasiswa Magister Ilmu Forensik, Universitas Airlangga
2 Dosen, Program Studi DIV Analis Kesehatan, Universitas Katolik Musi Charitas
Received 26 Juni 2021; Accepted 30 Agustus 2021; Published 21 September 2021
Keywords:
SDA ( Sabaroud Dextrose Agar ); Glucose;
Trichophyton rubrum
ABSTRACT: Mushroom is one of the causes of infectious diseases, especially in tropical countries.  The  fungus  that  can  cause  infection  is  Trichophyton  rubrum.  Laboratory tests for Trichophyton rubrum mushroom culture using SDA (Sabaroud Dextrose Agar) media.  The  addition  of  glucose  is  intended  to  increase  the  fertility  rate  in  SDA (Sabaroud Dextrose Agar) media which will help the growth process of Trichophyton rubrum  mushrooms  become  more  numerous.  The  purpose  of  this  study  was  to determine the differences in the number of Trichophyton rubrum mushroom colonies on  Sabouraud  Dextrose  Agar  (SDA)  media  and  modifications  with  3  gr  glucose.  The research method used is true experiment. The sample used in this study was a strain of Trichophyton rubrum culture that was equated with standard 0.5 Mac Farland with 10 2 dilutions.  The  results  of  the  study  were  obtained  by  calculating  the  number  of Trichophyton rubrum mushroom colonies on day 6. The average number of T.rubrum mushroom  colonies  in  the  media  SDA  as  many  as  142,  while  3  gram  glucose modification media as much as 204. Value p = 0.000 with 2- way significance level (α = 0.05) then p <α. Then there is a significant difference between the number of T.rubrum mushroom colonies on SDA media and modified media with 3 g glucose, and modified media  with  3  g  glucose  can  be  an  alternative  medium  to  increase  fungal  growth. @2021 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University
Kata Kunci:
SDA ( Sabaroud Dextrose Agar ); Glukosa; Trichophyton rubrum
ABSTRAK: Jamur merupakan salah satu penyebab penyakit infeksi terutama di negara- negara  tropis.  Jamur  yang  dapat  menyebabkan  infeksi  salah  satunya  adalah Trichophyton  rubrum .  Pemeriksaan  laboratorium  untuk  kultur  jamur Trichophyton rubrum ini menggunakan media SDA ( Sabaroud Dextrose Agar ). Penambahan glukosa dimaksudkan  meningkatkan  tingkat  kesuburan  pada  media  SDA  ( Sabaroud  Dextrose Agar ) yang akan membantu proses pertumbuhan koloni jamur Trichophyton rubrum menjadi lebih banyak. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui perbedaan jumlah koloni  jamur Trichophyton  rubrum pada  media Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA)  dan modifikasi  dengan  glukosa  3  gr.  Metode penelitian  yang  digunakan  adalah  true experimen.  Sampel  yang  digunakan  strain  biakan Trichophyton  rubrum yang disetarakan  dengan  standar  0,5 Mac  Farland dengan  pengenceran  10 2 .  Data  hasil penelitian  diperoleh  dengan  menghitung  jumlah  koloni  jamur Trichophyton  rubrum pada hari ke 6. Rata rata jumlah koloni jamur T. rubrum pada media SDA sebanyak 142, sedangkan  media  modifikasi  glukosa  3  gr  sebanyak  204.  Nilai  p=0.000  dengan  taraf signifikansi  2  arah  (α=0.05)  maka  p<α.  Maka  terdapat  perbedaan  yang  bermakna antara jumlah koloni jamur T. rubrum pada media SDA dan media modifikasi dengan glukosa 3 gr, dan media modifikasi dengan glukosa 3 gr dapat menjadi media alternatif untuk  memperbanyak  pertumbuhan  jamur.  @2021  Published  by  UP2M,  Faculty  of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index
∗ Corresponding author. E-mail address: Natalia030917@gmail.com
2597-7059 Online, 1410-7058 print/ @2021 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara beriklim  tropis  yang  memiliki  suhu  dan  kelembaban tinggi,  sehingga  kondisi  tersebut  membuat  suasana yang baik bagi pertumbuhan jamur dan menyebabkan jamur  dapat  ditemukan  hampir  di  semua  tempat, contohnya Mikosis superfisialis [1].
Mikosis superfisialis yang menginfeksi manusia berjumlah  lebih  dari  20  -25%  populasi  dunia  dan merupakan  penyebab  infeksi  kulit  sebesar  30  -  70% oleh  jamur  [2,3].  Di  Indonesia  penyakit  kulit  yang disebabkan  oleh  jamur  pada  tahun  2009  -  2011 berkisar  2,93  -  27%.  Spesies  yang  menjadi penyebabnya yaitu Trichophyton rubrum [4].
Trichophyton  rubrum memiliki  koloni  dengan permukaan seperti kapas  berwarna putih dan bagian belakang  berwarna  merah  gelap.  Mikroskopis  yang dimiliki oleh Trichophyton rubrum yaitu hifa bersepta dan  makrokonidia  berdinding  halus  silindris  dengan ukuran  4  x  8 – 8  x  15  µm  dengan  8  -  10  septum, mikrokonidia berbentuk kecil dengan ukuran 2 - 4 µm biasanya terbentuk disepanjang sisi hifa [5].
Diagnosis etiologi untuk menentukan penyakit kulit  akibat  jamur Trichophyton  rubrum dapat dilakukan dengan pemeriksaan laboratorium mikologi.  Pemeriksaan  laboratorium  mikologi  terdiri dari tiga tahapan yaitu pre analitik, analitik, dan pasca analitik. Adapun tahap pre analitik meliputi persiapan pasien, persiapan pengambilan sampel, pengelolahan sampel,  pengiriman  dan  penyimpanan  sampel.  Pada tahap  analitik  dilakukan  pemeriksaan  terhadap spesimen.  Pemeriksaan  yang  dapat  dilakukan  antara lain  pemeriksaan  mikroskopis,  pemeriksaan  kultur (biakan), serologis, biomolekuler, biopsi jaringan dan penyinaran,  sedangkan  pada  tahap  pasca  analitik merupakan tahapan akhir dari pemeriksaan laboratorium  mikologi  yang  meliputi  pelaporan  hasil dan pencatatan hasil pemeriksaan [6].
Metode  biakan  merupakan  cara  identifikasi jamur,  utamanya  dilakukan  dengan  melihat  ciri-ciri morfologi  jamur.  Morfologi  yang  dapat  dilihat  yaitu warna koloni, bentuk koloni dan konidia pada media biakan.  Fungsi  dari  suatu  media  biakan  adalah memberikan  tempat  dan  kodisi  yang  mendukung untuk pertumbuhan dan perkembangbiakan mikroorganisme secara optimal [7].
Faktor - faktor yang mempengaruhi pertumbuhan  jamur  secara  umum  adalah  substrat, kelembaban, suhu, derajat keasaman lingkungan (pH)
dan  media  tidak  mengandung  zat-zat  penghambat, media  harus  steril,  dan  media  harus  mengandung semua nutrisi yang mudah digunakan mikroorganisme [8,9]. Nutrisi-nutrisi yang dibutuhkan mikroorganisme untuk pertumbuhan meliputi karbon, nitrogen, unsur non  logam  seperti  sulfur  dan  fosfor,  unsur  logam seperti Ca, Zn, Na, K, Cu, Mn, Mg, dan Fe, vitamin, air, dan energi [10].
Salah satu faktor yang berperan penting dalam suatu pertumbuhan jamur adalah kandungan nutrient yang  ada  dalam  media  pertumbuhan  salah  satunya glukosa.  Glukosa  (dekstrosa)  merupakan  salah  satu jenis monosakarida yang menjadi sumber energi dan sebagai  media  perkembangan  dan  pertumbuhan jamur [11].
Media komersial yang sering digunakan untuk menumbuhkan  jamur  adalah Sabouraud  Dextrose Agar (SDA). Media ini merupakan media standar yang paling banyak digunakan secara universal dalam ilmu mikologi dan merupakan media rujukan internasional dengan  kandungan  glukosa  (dextrose)  sebanyak  4% yang merupakan nutrient optimum untuk pertumbuhan jamur karena semakin tinggi konsentrasi glukosa pada media pertumbuhan jamur akan menyebabkan ganguan keseimbangan antara sel jamur  dengan  lingkungan  diluar  [8].  Penambahan glukosa  3gr  dapat  membuat  waktu  inkubasi  jamur Candida albicans lebih cepat dan pertumbuhan koloni lebih subur [11].
Penambahan  glukosa  3gr  pada  penelitian  ini dimaksudkan  agar  dapat  meningkatkan  taraf kesuburan  media Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA) yang  akan  membantu  proses  pertumbuhan  koloni jamur Trichophyton  rubrum ini  menjadi  lebih  cepat. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan penambahan  glukosa  3  gr  pada  media Sabouraud Dextrose  Agar (SDA)  terhadap  pertumbuhan  jamur Trichophyton rubrum.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Tempat
Penelitian dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi  dan  Laboratorium  Media  Reagensia Fakultas  Ilmu  Kesehatan  Universitas  Katolik  Musi Charitas  Palembang  pada  tanggal  20-25  Mei  2019.

## Prosedur Penelitian

## Sterilisasi media
Siapkan  media  SDA  dan  media  SDA  yang ditambahkan  glukosa. Inkubasi  media  tersebut  pada incubator  selama  48  jam  pada  suhu  28 0 C. Lihat pertumbuhan  koloni. Jika  terdapat  pertumbuhan koloni,  hal  ini  menandakan  bahwa  media  tersebut tidak  steril  dan  tidak  dapat  digunakan. Jika  tidak terdapat pertumbuhan koloni maka media Sabaroud Dextrose  Agar yang  dibuat  layak  digunakan  untuk melakukan pembiakan jamur.
Verifikasi uji strain Trichophyton rubrum Pemeriksaan Mikroskopis:
Menggunakan ose yang sudah disterilkan ambil strain  biakan  jamur Trichophyton  rubrum. Letakkan pada  objek  gelas  dengan  meneteskan  alkohol  70%. Sebarkan  menggunakan  ose  dilanjutkan  dengan meneteskan  LPCB  dan  tutup  dengan  deck  glass . Periksa dibawah mikroskop dengan pembesaran 10X sampai 40x untuk melihat morfologinya.
Pemeriksaan Hidrolisis urea:
Menggunakan ose yang sudah disterilkan ambil strain  biakan  jamur Trichophyton  rubrum dan inokulasi pada permukaan media urea.Inkubasi pada suhu  30 O C  selama  5  hari.  Reaksi  positif  ditandai dengan  perubahan  warna  kuning  menjadi  merah muda.
Penanaman Trichophyton  rubrum pada  media  SDA dan SDA dengan glukosa
Sampel berupa suspensi Trichophyton rubrum yang  disetarakan  dengan  standar  0,5 Mac  Farland dengan  pengenceran  10 2 kemudian  diinokulasi dengan  16  kali  pengulangan  menggunakan  2 perlakuan  yaitu  penanaman  pada  media Sabouraud Dextrose  Agar (SDA)  dan Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA)  dengan  glukosa  3  gr  dengan  metode Spread (penyebaran). Media yang telah diinokulasi kemudian diinkubasi selama 6 hari pada suhu 28˚C. Perhitungan jumlah  koloni  kemudian  dianalisis  secara  parametrik dengan uji T berpasangan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  Uji  Sterilitas  Media  SDA  dan  Media  SDA yang Ditambahkan Glukosa
Gambar 1. a). uji sterilitas media SDA dengan penambahan glukosa 3 gr; b).
Berdasarkan  gambar  a  dan  gambar  b  hasil penujian  sterilitas  media  menunjukan  bahwa  media yang  akan  digunakan  steril  karena  tidak  ditumbuhi bakteri  atau  jamur  yang  dapat  menghambat pertumbuhan Trichophyton rubrum .
Hasil Verifikasi Uji Strain Trichophyton rubrum Identifikasi  strain  biakan  jamur Trichophyton rubrum . dapat dilakukan menggunakan uji makroskopis dan mikroskopis.
Gambar 2. Hasil uji strain Trichophyton rubrum secara makroskopis
Gambar 3. Hasil uji strain Trichophyton rubrum secara mikroskopis Gambar 4. Hasil uji Urease strain Trichophyton rubrum Tabel 1 Identifikasi T. rubrum
Pengujian Karakteristik T.rubrum (Irianto, 2014) Hasil Pengujian Makroskopis Permukaan koloni velvety , berwarna  putih  latar  belakang merah ceri sampai merah tua. Permukaan  koloni velvety berwarna  putih  latar belakang merah ceri sampai merah tua Mikroskopis Hifa bersepta dengan mikrokonidia lonjong  seperti  tetesan  air  mata, makrokonidia tidak khas Hifa  bersepta  dengan  mikrokonidia  lonjong seperti tetesan air mata, makrokonidia tidak khas Urease Negatif  (Kuning,  tidak  terjadi perubahan warna) Negatif (Kuning, tidak terjadi perubahan warna)
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan,  telah  didapatkan  hasil  jumlah  pada  koloni Trichophyton rubrum pada media Sabouraud Dextrose Agar (SDA) dan Sabouraud Dextrose Agar (SDA) dengan Glukosa 3 gr yang dapat dilihat pada tabel 2.

## Tabel 2 Jumlah Koloni Pada Media
No Jumlah Koloni Pada Media CFU/mL. SDA SDA + Glukosa 3 gr 1 120 151 2 120 163 3 120 164 4 122 170 5 131 170 6 132 177 7 133 186 8 139 190 9 140 193 10 145 199 11 150 209 12 154 210 13 164 225 14 165 274 15 166 286 16 175 312 Uk. Pem (Mean) 142 204 Uk. Peny (Std. Deviasi) 18,638 47,310
Mikrokonidia
Makrokonidia
Gambar 5. Pertumbuhan Trichophyton rubrum pada media SDA(a) dan Media SDA dengan glukosa 3 gr (B)

## Pembahasan
Dari hasil penelitian didapatkan jumlah koloni jamur Trichophyton rubrum pada media SDA dengan glukosa 3 gr lebih banyak dengan mean 204 CFU/mL dan  SD  47,310.  Sedangkan  pada  media  SDA  dengan mean 142 CFU/mL dan SD 18,638.
Hasil jumlah koloni yang didapatkan kemudian diolah  secara  statistic  dengan  menggunakan  uji  T berpasangan  dan  didapatkan  nilai  p  =  0,000.  Nilai probabilitas  yang  didapatkan  dari  hasil  uji  statistic lebih  kecil  dari  nilai  signifikannya  yaitu  0,05,  maka perbedaan jumlah koloni jamur Trichophyton rubrum pada  media Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA)  dan modifikasi dengan glukosa 3 gr.
Glukosa merupakan salah satu jenis monosakarida  yang  menjadi  sumber  energi  dan sebagai  media  perkembangan  dan  pertumbuhan jamur dalam sistem metabolisme. Kandungan glukosa dalam  media  ( Sabaroud  Dextrose  Agar )  SDA  ini menyebabkan jamur memperoleh sumber nutrisi yang baik untuk pertumbuhannya [11].
Kebutuhan unsur karbon (glukosa) bagi jamur sangatlah penting karena jamur membutuhkan unsur karbon  dalam  jumlah  yang  besar  dari  pada  unsur- unsur yang lain dan karbon merupakan nutrisi pokok dan terpenting bagi jamur. Hal ini terlihat dari sekitar 50%  berat  kering  sel  jamur  terdiri  dari  karbon. Senyawa  organik  ini  dipergunakan  sebagai  struktur utama  dalam  penyediaan  energi  untuk  sel  [12]. Sumber  karbon  diperlukan  untuk  kebutuhan  energi dan struktural sel jamur [13].
Karbohidrat  merupakan  komponen  esensial semua  organisme  dan  zat  yang  paling  banyak menyusun  sel.  Fungsi  karbohidrat  adalah  sebagai sumber  energi  dan  membentuk  struktur  sel  [14]. Glukosa  merupakan  salah  satu  jenis  monosakarida yang  menjadi  sumber  energi  dansebagai  media perkembangan dan pertumbuhan jamur dalam sistem
metabolisme. Monosakarida merupakan gula sederhana  penyusun  karbohidrat  yang  tidak  dapat diuraikan  secara  hidrolisis.  Bentuk  alami  (D-glukosa) dapat  disebut  juga  dengan  dekstrosa.  Glukosa berperan  sebagai  sumber  karbon  bagi  pertumbuhan jamur.  Kandungan  glukosa  dalam  media  ( Sabaroud Dextrose  Agar )  SDA  ini  menyebabkan  jamur memperoleh  sumber  nutrisi  yang  baik.  Untuk pertumbuhannya.  Penambahan  glukosa  3  gr  dalam penelitian ini dimaksudkan dapat meningkatkan taraf kesuburan media SDA ( Sabaroud Dextrose Agar ) yang menimbulkan variasi jumlah koloni jamur Trichophyton rubrum pada media ( Sabaroud Dextrose Agar ) [11].
SDA  yang  ditambahkan  glukosa  3  gr.  Pada penelitian  ini  pertumbuhan  jamur Trichophyton rubrum pada  media  ( Sabaroud  Dextrose  Agar )  SDA dengan penambahan glukosa 3gram ditandai dengan jumlah  koloni  yang  semakin  hari  semakin  besar  dan banyak,  yang  menunjukkan  bahwa  glukosa  dapat meningkatkan  pertumbuhan  koloni  jamur  dalam kadar 3 gr. Kandungan dextrose (glukosa) yang tinggi merupakan sumber energi untuk jamur dermatophyte [15].  Perbandingan  Pertumbuhan  Jamur  Aspergillus flavus  Pada  Media  PDA  dan  Media  Alternatif  yang menjelaskan  bahwa  sumber  karbon  (karbohidrat) adalah nutrisi yang paling penting bagi pertumbuhan jamur  dan  harus  tersedia  dalam  jumlah  yang  lebih besar  dari  nutrisi  yang  lain  [16].  Karbohidrat merupakan komponen esensial semua organisme dan zat  yang  paling  banyak  menyusun  sel.  Fungsi karbohidrat  adalah  sebagai  sumber  energi  dan membentuk struktur sel [14].

## KESIMPULAN
Terdapat perbedaan jumlah koloni Tricophyton rubrum pada  Media Sabouraud  Dextrose  Agar (SDA) rata-rata sebesar 142 CFU/mL dan Media Sabouraud
Dextrose  Agar (SDA)  +  Glukosa  3  gr  sebesar  204 CFU/mL dengan nilai probabilitas (sig) (2-tailed) 0.000 < 0.05.

## REFERENSI
[1] Rosida  Fatma,  Ervianti  Evy  (2017).  Penelitian Retrospektif:  Mikosis  Superfisialis. Berkala  Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin . 29(2).
[2] Teklebirhan  G,  Bitew  A  (2015).  Prevalence  of Dermatophytic  Infection  and  the  Spectrum  of Dermatophytes in Patients Attending a Tertiary Hospital  in  Addis  Ababa,  Ethiopia. Hindawi, (2015) ID: 653419.
[3] Peres NT de Aguiar, Maranhao FC Albuquerque, Rossi A, Rossi NM Martinez (2010).
Dermatophytes:  Host-Pathogen  Interaction  and Antifungal  Resistance. Anais  Brasileiros  de Dermatologia , 5(85): 658.
[4] Kurniati,  Rosita  Cita  SP  (2008).  Etiopatogenesis Dermatofitosis. Berkala Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin , 20(3):243-250.
[5] Jawetz,  Melnick,  Adelberg  (2017).  Mikrobiologi Kedokteran Edisi Dua Puluh Tujuh. Jakarta: EGC, pp:73-78.
[6] Behzadi  P,  Behzadi  E,  Ranjbar  R  (2014). Dermatophyte  fungi:  Infections,  Diagnosis  and Tresatment. SMU Medical Journal , 1(2): 50-59.
[7] Bastian,  Aeni  MN,  Kurniawan  Ian  (2017). Perbedaan  Jumlah  Koloni  Jamur Trichophyton rubrum Pada  Media Sabauraud  Dextrosa  Agar (SDA)  dan  Media  Modifikasi  Dengan  Ubi  Kayu. Avoer IX , ISBN: 978-979-19072-1-7.
[8] Nuryati  A,  Nuryani  S,  Ramadhani  AR  (2015). Pengaruh Penambahan Variasi Konsentrasi Gula Pasir  Pada  Media Sabauraud  Dextrosa  Agar
(SDA) Terhadap Pertumbuhan Jamur Saccharomyces  cerevisiae . Jurnal  Teknologi
Laboratorium , 4(2): 96-100.
[9] Jutono (1980). Pedoman Praktikumn
Mikrobiologi  Umum.  Yogjakarta,  Indonesia: Fakultas Pertanian UGM.
[10] Cappuccino,  J.G.  &  Sherman  N.  (2014).  Manual Laboratorium Biologi. Jakarta, Indonesia: EGC.
[11] Getas IW, Wiadnya Ida BR, Waguriani LA (2014). Pengaruh  Penambahan  Glukosa  dan  Waktu Inkubasi  Pada  Media  SDA  ( Sabauraud  Dextrosa Agar )  Terhadap  Pertumbuhan  Jamur Candida albicans. Media  Bina  Ilmiah ,  8(1)  ISSN:  1978- 3787.
[12] Sari  EP  (2007).  Pengaruh  Macam,  pH,  dan penggoyangan  Media  Terhadap  Pertumbuhan Cendawan Fusarium  oxysporum .  Institute Pertanian Bogor. Skripsi.
[13] Wahidah  BF,  Saputra  FA  (2015).  Perbedaan Pengaruh  Media  Tanam  Serbuk  Gergaji  dan Jerami Padi Terhadap Pertumbuhan Jamur Tiram Putih ( Pleurotus ostreatus ). Biogenesis . 3(1) ISSN 2302-1616.
[14] Wulandari  E  (2012).  Pemanfaatan  sebagai Sumber  Karbohidrat  untuk  Perkembangbiakan Mikroorganisme . Limbah Molas . 2(5).  ISSN: 565- 572.
[15] Husseine AA (2005). Perfect Media for Isolation of Fungi from Patients with
Dermatophytosis  Journal  of  The  University  of Kerbala, 3 (12): 18-21.
[16] Octavia Artha, Wantini Sri (2017). Perbandingan Pertumbuhan  Jamur  Aspergillus  flavus  Pada Media  PDA  (Potato  Dextrose  Agar  )  dan  Media Alternatif. Jurnal Analis Kesehatan, 6(2).