BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 2, Nomor 1 (2020):  131 - 137 E-ISSN: 2714-8564
Optimasi Waktu Inkubasi dan pH Ganoderma sp. dari Kebun Raya Baturraden untuk Dekolorisasi RBBR
Maria Pricilia Gita Permana Putri 1 , Ratna Stia Dewi 1 , Ajeng Arum Sari* 2
1 Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman
2 Pusat Penelitian Kimia, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) *Email : ajeng.a.sari@gmail.com
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  :  26/08/2019
Disetujui  :  25/04/2020

## Abstract
White rot fungi are known to have the ability to decolorize dyes, one of them is Ganoderma sp fungi.  From  the  Baturraden  Botanical  Garden.  The  fungus  is  able  to  decolorize Remazol Brillliant Blue R (RBBR) which is toxic, mutagenic, carcinogenic, and stable to physical and chemical  treatments.  The  decolorization  process  can  be  influenced  by  environmental  factors such as incubation time and pH. Every White rot fungus has an optimum incubation time and pH different in decolorizing the dye. This study aims to determine the ability of Ganoderma sp. Isolates  from  Baturraden  Botanical  Garden  with  different  incubation  times  and  pH  in decolorizing RBBR dyes, as well as knowing the incubation time and pH variations that show the best results. This study used an experimental method with a Completely Randomized Design (CRD) with variation treatment in this study consisting of incubation time of 24, 48, 72, 96, and 120  hours  with  pH  3,  4,  5,  6,  dan  7.  Results  of  the  study  showed  that Ganoderma sp.  of Baturraden Botanical Garden able to decolte RBBR at the time incubation and pH differ with the  percentage  of  decolorization  4,10%  -  83,04%.  The  percentage  decolorization  highest indicated at the time incubation 96 hours and pH 6, that is 83.04%. It proved that Ganoderma sp. from Baturraden Botanical Garden has an optimum incubation time of 96 hours, an optimum pH of 6 to decolorize RBBR.
Keywords : Decolorization; Ganoderma sp. ; pH; RBBR; incubation time
Abstrak Jamur  pelapuk  putih  diketahui  memiliki  kemampuan  untuk  mendekolorisasi  pewarna,  salah satunya  jamur Ganoderma sp.  dari  Kebun  Raya  Baturraden.  Jamur  tersebut  mampu mendekolorisasi Remazol  Brillliant  Blue  R (RBBR)  yang  bersifat  toksik,  mutagenik, karsinogenik,  dan  stabil  terhadap  perlakuan  fisika  maupun  kimia.  Proses  dekolorisasi  dapat dipengaruhi oleh faktor lingkungan seperti waktu inkubasi dan pH. Setiap jamur pelapuk putih memiliki  waktu  inkubasi  dan  pH  optimum  yang  berbeda  dalam  mendekolorisasi  pewarna. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan isolat Ganoderma sp. dari Kebun Raya Baturraden  dengan  waktu  inkubasi  dan  pH  berbeda  dalam  mendekolorisasi  pewarna  RBBR, serta mengetahui variasi waktu inkubasi dan pH yang menunjukkan hasil terbaik. Penelitian ini menggunakan  metode  eksperimental  dengan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan Perlakuan variasi pada penelitian ini terdiri dari waktu inkubasi yaitu 24, 48, 72, 96, dan 120 jam, serta pH 3, 4, 5, 6, dan 7. Hasil penelitian menunjukkan bahwa Ganoderma sp. dari Kebun Raya Baturraden mampu mendekolorisasi RBBR pada waktu inkubasi dan pH berbeda dengan persentase  dekolorisasi  4,10%  -  83,04%.  Persentase  dekolorisasi  tertinggi  ditunjukkan  pada waktu inkubasi 96 jam dan pH 6, yaitu 83,04%. Hal tersebut membuktikan bahwa Ganoderma sp. dari Kebun Raya Baturraden memiliki waktu inkubasi optimum 96 jam, serta pH optimum 6 untuk mendekolorisasi RBBR.
Kata kunci : Dekolorisasi; Ganoderma sp.; pH; RBBR; waktu inkubasi

## PENDAHULUAN
Jamur  pelapuk  putih  merupakan  agen  biologi yang  banyak  digunakan  dalam  proses  dekolorisasi pewarna  sintetik  karena  memiliki  efisiensi  yang tinggi  dan  ramah  lingkungan  (Rao et  al .,  2014; Upadhyay et  al .,  2016).  Beberapa  penelitian  telah membuktikan  bahwa  jamur  pelapuk  putih,  seperti Ganoderma sp.  mampu  mendekolorisasi  berbagai jenis pewarna (Bilal et al ., 2015). Jamur ini memiliki tubuh buah yang keras dengan permukaan yang tidak rata dan tepinya bergelombang (Hasanuddin, 2014). Jamur dari ordo Polyporales tersebut memiliki suhu
optimum pertumbuhan berkisar antara 25-30 o C. Hal ini  dapat  dilihat  dari  beberapa  studi  yang menunjukkan  adanya Ganoderma sp.  di  beberapa negara  beriklim  tropis  (Almaguer et  al .,  2014;
Agrawal et  al .,  2018;  Nguyen et  al .,  2019;  Torres- Farrada et  al .,  2019).  Salah  satu  kawasan  berikim tropis  yang  berpotensi  ditumbuhi Ganoderma sp. adalah Kebun Raya Baturraden. Hasil eksplorasi dan seleksi  yang  dilakukan  oleh  Sari  dan  Dewi  (2019) yaitu di kawasan ini ditemukan jamur Ganoderma sp. yang memiliki kemampuan mendekolorisasi pewarna Remazol Briliant Blue R (RBBR).
RBBR  merupakan  salah  satu  pewarna  sintetik yang banyak digunakan dalam industri tekstil karena memiliki  gugus  kromofor  yang  mudah  memberikan warna-warna cerah dan tidak mudah luntur (Hidayati et al ., 2016). Pewarna ini dijadikan sebagai salah satu pewarna  antrakuinon  yang  mewakili  jenis  polutan organik yang beracun dan rekalsitran karena turunan dari antrasena (C 14 H 10 ) yang merupakan hidrokarbon aromatik polisiklik (Fouillaud et al ., 2017; Lazim et al ., 2015). Rahmat et al . (2016) menambahkan bahwa RBBR memiliki struktur kimia yang stabil, sehingga sulit didegradasi oleh perlakuan kimia maupun fisika. Perlu dilakukan suatu upaya yang lebih efektif untuk mendegradasi pewarna RBBR tersebut, salah satunya dengan metode biologi menggunakan jamur pelapuk putih (Hadibarata & Kristanti, 2012).
Dekolorisasi  pewarna  menggunakan  jamur dipengaruhi  oleh  jenis  jamur  yang  digunakan  dan kondisi lingkungan seperti pH,  waktu inkubasi, dan temperatur  (Saetang  &  Babel,  2010).  pH  berbeda menyebabkan  nilai  dekolorisasi  yang  berbeda  pula (Dewi et  al .,  2019a).  Waktu  inkubasi  dan  pH optimum  yang dibutuhkan tiap jamur pelapuk putih berbeda  untuk  mendekolorisasi  pewarna.  Lamanya waktu  inkubasi  akan memengaruhi  aktivitas pertumbuhan  jamur  dan  pH  memengaruhi  aktivitas enzim  dalam  merombak  zat  warna  (Muslimah  & Kuswytasari, 2013). Beberapa penelitian menunjukkan bahwa Ganoderma sp. dapat mendekolorisasi berbagai jenis pewarna pada waktu inkubasi optimum 96 jam pada pH 6 (Ma et al ., 2014; Lu et al ., 2015; Sudiana et al ., 2018).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kemampuan isolat Ganoderma sp. dari Kebun Raya Baturraden  dengan  waktu  inkubasi  dan  pH  berbeda dalam  mendekolorisasi  pewarna  RBBR,  serta mengetahui variasi waktu inkubasi dan pH manakah yang menunjukkan hasil terbaik dalam mendekolorisasi pewarna RBBR.

## MATERI DAN  METODE
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kimia Pusat  Penelitian  Kimia  LIPI,  Serpong,  Tangerang, pada  bulan  Februari  –  Juli  2019.  Objek  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  satu  isolat Ganoderma sp. hasil koleksi   Ajeng Arum Sari dan Ratna  Stia  Dewi.  yang  diisolasi  dari  Kebun  Raya Baturraden.
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini bor  gabus  (diameter  6  mm), shaker ,  autoklaf, oven , pH meter, timbangan analitik, UV-Vis spektrofotometer, dan Laminar Air Flow (LAF). Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  pewarna Remazol  Brilliant  Blue  R (RBBR), kertas saring Whatman No.1, larutan buffer pH (4 dan 6,8), NaOH 1N, HCl 1N, medium Potato Dextrose Agar (PDA), dan medium Potato Dextrose Broth (PDB).
Penelitian menggunakan metode eksperimental dengan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Variabel bebas  pada  penelitian  ini  adalah  kemampuan  jamur
dalam  mendekolorisasi  pewarna  RBBR,  sedangkan variabel  terikatnya  adalah  waktu  inkubasi  dan  pH. Parameter  utama  yang  diukur  adalah  persentase dekolorisasi  pewarna  RBBR,  sedangkan  parameter pendukung  yang  diukur  adalah  bobot  kering miselium.

## Peremajaan Isolat Jamur
Isolat  jamur  yang  digunakan  diremajakan  ke dalam  cawan  petri  yang  berisi  medium  PDA, kemudian diinkubasi selama 7 hari pada suhu ruang.

## Pembuatan Inokulum Jamur
Isolat murni diambil sebanyak 5 plug (1,2 cm), lalu diinokulasikan ke dalam medium PDB sebanyak 100  mL  dalam  labu  Erlenmeyer  250  mL  secara aseptis,  kemudian  diinkubasi  pada shaker dengan kecepatan 70 rpm selama 7 x 24 jam.

## Dekolorisasi Pewarna RBBR
Setelah diinkubasi 7 x 24 jam, inokulum jamur yang  sudah  terbentuk  dipisahkan  dari  medium pertumbuhannya  secara  aseptis.  Inokulum  jamur yang sudah terpisah, kemudian ditambahkan pewarna RBBR  dengan  konsentrasi  100  ppm  sebanyak  100 mL  secara  aseptis,  lalu  diinkubasi  menggunakan shaker pada kecepatan 70 rpm dengan variasi waktu inkubasi 24, 48, 72, 96, dan 120 jam serta variasi pH 3, 4, 5, 6, dan 7.

## Pengukuran dekolorisasi pewarna RBBR
Penurunan  pewarna  RBBR  diukur  dengan metode  spektrofotometri.  Sampel  pewarna  sesudah perlakuan  dan  kontrol  diambil  sebanyak  5  mL,  lalu diukur absorbansinya menggunakan UV-Vis spektrofotometer dengan panjang gelombang maksimum  (λ max )  pewarna  RBBR  yaitu  595  nm. Persentase  dekolorisasi  pewarna  RBBR  dihitung menggunakan rumus:
absorbansi awal−absorbansi akhir absorbansi awal x 100%

## Pengukuran bobot kering miselium
Miselium hasil dekolorisasi disaring menggunakan  kertas  saring,  kemudian  dimasukkan ke  dalam  oven  dengan  suhu  60 o C  sampai  mencapai bobot  konstan.  Bobot  kering  miselium  dihitung dengan  cara  menghitung  selisih  bobot  miselium jamur  dan  bobot  kertas  saring  dengan  bobot  kertas saringnya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa perlakuan Ganoderma sp.  dari  Kebun  Raya Baturraden  dengan  variasi  waktu  inkubasi  dan  pH mampu  mendekolorisasi  pewarna  RBBR.  Rata-rata persentase dekolorisasi RBBR menggunakan Ganoderma sp.  dari  Kebun  Raya  Baturraden disajikan  pada  Gambar  1.  Persentase  dekolorisasi tertinggi ditunjukkan oleh perlakuan 96 jam pada pH 6,  yaitu  83,04%,  sedangkan  yang  terendah  pada perlakuan  24  jam  dengan  pH  3,  yaitu  4,10%.  Hasil
4 ,1 0 1 5 ,2 9 5 0 ,0 5 4 8 ,4 7 3 5 ,9 8 2 2 ,7 0 3 5 ,6 0 3 2 ,0 2 6 3 ,9 8 6 3 ,9 4 4 7 ,7 7 5 5 ,3 6 4 2 ,7 8 2 6 ,7 5 5 4 ,2 9 5 5 ,7 4 6 6 ,4 5 5 3 ,8 3 8 3 ,0 4 7 2 ,3 7 5 7 ,7 4 5 1 ,1 7 3 7 ,2 8 6 4 ,7 7 6 6 ,4 5 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 P er sen tase Dek o lo ris asi (%) Perlakuan
tersebut sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Papadopoulou et  al. (2013)  yang  membuktikan bahwa Ganoderma sp.  mampu  mendekolorisasi berbagai  macam  pewarna,  salah  satunya  RBBR. Oliveira et al . (2018) menyatakan dalam penelitiannya  bahwa, Ganoderma sp.  memiliki kemampuan mendekolorisasi RBBR lebih dari 40%.
Menurut  Zhuo et  al .  (2011), Ganoderma sp.  lebih efisien  dalam  mendekolorisasi  pewarna  karena memiliki  kemampuan  mendekolorisasi  lebih  cepat dibandingkan  jamur  pelapuk  putih  lainnya  dan membutuhkan  waktu  inkubasi  yang  singkat  untuk mendekolorisasi pewarna dengan maksimal.
Gambar 1. Histogram rata – rata persentase dekolorisasi pewarna RBBR menggunakan Ganoderma sp. dengan waktu inkubasi dan pH berbeda
Keterangan : RW1P1 = RBBR pada waktu inkubasi 24 jam dan pH 3 RW1P2 = RBBR pada waktu inkubasi 24 jam dan pH 4 RW1P3 = RBBR pada waktu inkubasi 24 jam dan pH 5 RW1P4 = RBBR pada waktu inkubasi 24 jam dan pH 6 RW1P5 = RBBR pada waktu inkubasi 24 jam dan pH 7 RW2P1 = RBBR pada waktu inkubasi 48 jam dan pH 3 RW2P2 = RBBR pada waktu inkubasi 48 jam dan pH 4 RW2P3 = RBBR pada waktu inkubasi 48 jam dan pH 5 RW2P4 = RBBR pada waktu inkubasi 48 jam dan pH 6 RW2P5 = RBBR pada waktu inkubasi 48 jam dan pH 7 RW3P1 = RBBR pada waktu inkubasi 72 jam dan pH 3
RW3P2 = RBBR pada waktu inkubasi 72 jam dan pH 4
RW3P3 = RBBR pada waktu inkubasi 72 jam dan pH 5
RW3P4 = RBBR pada waktu inkubasi 72 jam dan pH 6 RW3P5 = RBBR pada waktu inkubasi 72 jam dan pH 7 RW4P1 = RBBR pada waktu inkubasi 96 jam dan pH 3 RW4P2 = RBBR pada waktu inkubasi 96 jam dan pH 4 RW4P3 = RBBR pada waktu inkubasi 96 jam dan pH 5 RW4P4 = RBBR pada waktu inkubasi 96 jam dan pH 6 RW4P5 = RBBR pada waktu inkubasi 96 jam dan pH 7 RW5P1 = RBBR pada waktu inkubasi 120 jam dan pH 3 RW5P2 = RBBR pada waktu inkubasi 120 jam dan pH 4 RW5P3 = RBBR pada waktu inkubasi 120 jam dan pH 5 RW5P4 = RBBR pada waktu inkubasi 120 jam dan pH 6 RW5P5 = RBBR pada waktu inkubasi 120 jam dan pH 7
Hasil uji BNJ dengan tingkat kesalahan 5% dan 1%  (Tabel  2.)  menunjukkan  antar  perlakuan menunjukkan  perbedaan  yang  nyata.  Hal  tersebut menunjukkan bahwa perlakuan dekolorisasi menggunakan Ganoderma sp.  pada  waktu  inkubasi dan  pH  berbeda  berpengaruh  terhadap  dekolorisasi
RBBR.  Rata-rata  persentase  dekolorisasi  tertinggi diperoleh pada perlakuan 96 jam dengan pH 6 yaitu 83,04%. Hasil ini membuktikan bahwa perlakuan 96 jam  dengan  pH  6  merupakan  perlakuan  terbaik karena berbeda nyata dengan perlakuan lainnya.
Tabel  2. Uji  Beda  Nyara  Jujur  (BNJ)  persentase dekolorisasi pewarna RBBR menggunakan Ganoderma sp. dengan  waktu  inkubasi  dan  pH  berbeda  pada  tingkat kesalahan 5% dan 1%
Perlakuan Rata-Rata Persentase Dekolorisasi (%) RW 1 P 1 4,10        m
RW 1 P 2 15,29        l RW 1 P 3 50,05        efg RW 1 P 4
48,47        fg
RW 1 P 5 35,98        hi RW 2 P 1 22,70        kl RW 2 P 2
35,60        hij
RW 2 P 3 32,02        ij
RW 2 P 4 63,98        bcd RW 2 P 5
63,94        bcd RW 3 P 1 47,77        fg RW 3 P 2 55,36        def RW 3 P 3 42,78        gh
RW 3 P 4 26,75        jk RW 3 P 5
54,29        ef RW 4 P 1
55,74        def
RW 4 P 2
66,45        bc
RW 4 P 3 53,83        ef RW 4 P 4 83,04        a RW 4 P 5 72,37        b RW 5 P 1
57,74        cde
RW 5 P 2 51,17        efg RW 5 P 3 37,28        hi RW 5 P 4
64,77        bc
RW 5 P 5 66,45        bc
Keterangan :  Angka yang diikuti huruf yang sama berbeda tidak nyata pada BNJ 5% dan 1%
Waktu  inkubasi  optimum  yang  didapatkan pada penelitian ini adalah 96 jam. Penelitian Lu et al . (2015)  membuktikan  bahwa  dalam  waktu  96  jam Ganoderma sp. dapat mendekolorisasi RBBR. Lama waktu  inkubasi  akan  memengaruhi  aktivitas  jamur dalam merombak zat warna (Novak et al ., 2001). Saat waktu inkubasi 96 jam, diduga jamur memasuk fase eksponensial. Dekolorisasi terbesar terjadi pada fase eksponensial  karena  pada  fase  ini  jumlah  dan aktivitas  sel  meningkat  (Sumathi  &  Phatak,  1999; Gandjar et  al .,  2007),  sehingga  diduga  produksi enzim untuk dekolorisasi juga meningkat.
Chen  dan  Ting  (2015)  menyatakan  bahwa lakase  merupakan  enzim  lignolitik  yang  berperan dalam  dekolorisasi  pewarna.  Menurut  Zeng et  al . (2011),  lakase  lebih  efisien  dalam  mendekolorisasi pewarna antrakuinon dibandingkan dengan pewarna lainnya.  Waktu  inkubasi  dapat  memengaruhi aktivitas  lakase  karena  semua  enzim  memiliki kemampuan  untuk  mempertahankan  stabilitas  sisi aktifnya  dalam  waktu  tertentu.  Kemampuan  ini bersifat  spesifik  dan  berbeda  antara  satu  enzim dengan yang lain (Noviendri et al ., 2008).
Nilai  pH  optimum  pada  penelitian  ini ditunjukkan oleh pH 6. Hal ini diduga karena adanya peningkatan aktivitas enzim lignolitik yang berperan dalam  dekolorisasi  pada  pH  tersebut.  Penelitian
Adebayo-Tayo et  al .  (2016)  menunjukkan  bahwa aktivitas lakase tertinggi  pada pH 6  yaitu lebih dari 135,48 U l -1 dalam dekolorisasi pewarna. pH larutan pewarna  dapat  memengaruhi  muatan  permukaan adsorben  yang  berperan  dalam  adsorbsi  (Fu  & Viraraghavan,  2001).  Apabila  pH  larutan  pewarna terlalu rendah, jumlah muatan negatif pada biosorben lebih  sedikit.  pH  yang  terlalu  rendah  tidak menguntungkan untuk adsorbsi kation pewarna yang bermuatan positif karena ion H + yang banyak dalam larutan  membuat  kation  pewarna  harus  bersaing dengan ion H + untuk menempel pada situs aktif dari biosorben, yaitu miselium jamur. Sebaliknya, bila pH pewarna  meningkat,  jumlah  situs  permukaan  yang bermuatan  negatif  lebih  banyak  karena  adanya deprotonisasi gugus  fungsional pada biosorben. Hal ini  dapat  meningkatkan  gaya  elektrostatik  antara biosorben  yang  bermuatan  negatif  dan  ion  postif pewarna,  sehingga  dapat  meningkatkan  proses adsorbsi (Saeed et al ., 2009).
Proses dekolorisasi pewarna disebabkan karena adanya proses adsorbsi oleh miselium jamur sebagai sistem  non  enzimatik  dilanjutkan  dengan  adanya kemampuan  degradasi  oleh  isolat  karena  terjadinya aktivitas  metabolisme  dengan  sistem  enzimatik (Dewi  &  Lestari,  2010).  Adsorbsi  atau  penyerapan adalah  proses  pemisahan  komponen  tertentu  dari suatu fluida berpindah ke suatu permukaan zat padat penyerap  (adsorben)  (Purnama  &  Setiati,  2004). Sistem enzimatik melibatkan enzim lignolitik seluler, yaitu mangan peroksidase (MnP), lignin peroksidase (LiP),  dan  lakase  (Lac)  (Saito et  al .,  2018).  Enzim tersebut  bersifat  tidak  spesifik  pada  ikatan  rantai aromatik,  sehingga  berpotensi  dalam  mendegradasi stuktur  aromatik  dengan  batasan  yang  luas,  salah satunya pewarna sintetik (Abadulla et al ., 2000).
Mekanisme dekolorisasi pewarna dengan enzim lignolitik diawali dari oksidasi enzim lignolitik oleh oksigen, selanjutnya enzim lignolitik dalam keadaan teroksidasi  tersebut mengoksidasi  zat warna (Yesiladal et  al .,  2006).  Sehingga,  enzim  lignolitik dapat merombak senyawa aromatik, polimer sintetik, dan  zat  warna  melalui  reaksi  redoks,  dimana  enzim tersebut  akan  mengoksidasi  secara  sempurana senyawa  senyawa  karbon  menjadi  CO 2 dan  H 2 O (Siswanto et al ., 2007). Menurut Dewi et al. (2019b), enzim  ligninolitik  berperan  dalam  dekolorisasi pewarna  RBBR.  Osma et  al .  (2010)  menyatakan bahwa  enzim  lignolitik,  khususnya  lakase,  dapat mendegradasi  RBBR  menjadi  dua  sub  produk  dan memecah  kromofor  pewarna  menjadi  bentuk molekul  yang  lebih  kecil  dengan  tingkat  toksisitas yang rendah.
24 jam 48 jam 72 jam 96 jam 120 jam pH 3 pH 4 pH 5 pH 6 pH 7
Gambar 2. Grafik bobot kering miselium
Gambar  2.    menunjukkan  bahwa  bobot  kering miselium  tertinggi pada  waktu inkubasi 96 jam dan pH  6,  yaitu  0,6  gram.  Hal  tersebut  membuktikan bahwa  bobot  kering  miselium  jamur  berkorelasi dengan hasil dekolorisasi yang diperoleh.
Peningkatan  adsorbsi  oleh  miselium  jamur  dengan pewarna berkaitan dengan umur kultur. Hal tersebut akan meningkatkan massa dinding sel jamur (Zhou & Banks, 1993). Dinding  sel jamur  tersusun dari  kitin atau  kitosan  yang  berperan  dalam  penyerapan berbagai  zat,  sehingga  apabila  massa  dinding  sel jamur meningkat, maka persentase kitin atau kitosan juga akan meningkat (Volesky, 1990; Zhou & Banks, 1993) dan memengaruhi dekolorisasi pewarna. Nilai  pH  larutan  pewarna  dapat  memengaruhi ionisasi zat warna dan muatan permukaan biomassa (Aksu et al., 2008; Cardoso et al., 2012). Persenatase dekolorisasi tertinggi yang disertai dengan pertumbuhan  biomassa  yang  signifikan  pada  pH  6 menunjukkan  bahwa  jamur  dapat  menggunakan pewarna sebagai sumber karbon untuk pertumbuhannya (El-Rahim et al., 2009).

## SIMPULAN
Ganoderma  sp.  dari  Kebun  Raya  Beturraden dengan  perlakuan  waktu  inkubasi  dan  pH  berbeda mampu  dalam  mendekolorisasi  pewarna  RBBR. Hasil  perlakuan  kombinasi  waktu  inkubasi  dan  pH terbaik dalam mendekolorisasi RBBR adalah 96 jam pada  pH  6  dengan  persentase  dekolorisasi  83,04% dan bobot kering miselium 0,6 gram.

## DAFTAR REFERENSI
Abadulla,  E.,  Karl,  H.R.  &  Georg,  M.G.,  2000.
Enzymatic  Decolorization  of  Textile  Dyeing Effluents. Journal  Textile  Research ,  70(5), pp.409-414.
Adebayo-Tayo,  B.,  Olaseinde,  K.,  Odeniyi,  O.A., Wakil, S.M. & Onilude, A.,  2016.  Catalytic Activity  and  Purification  of  Thermostable Lignases  from  Ganoderma  sp.  ADE468  and
Its Potential Application in The
Decolourization of Dyes. Suranaree Journal of Science and Technology, 23(3), pp.309-323.
Agrawal, N., Verma, P. & Shahi, S.K., 2018.Degradation  of  Polycyclic  Aromatic Hydrocarbon  (Phenanthrene  and  Pyrene)  by The  Ligninolytic  Fungi  Ganoderma  lucidum Isolated  from  The  Hardwood  Stump. Bioresources and Bioprocessing, 5(11), pp. 1- 9.
Aksu, Z., Tatli, A. & Tunç, O., 2008. A Comparative Adsorption/Biosorption  Study  of  Acid  Blue 161:  Effect  of  Temperature  on  Equilibrium and Kinetic Parameters. Chemical Engineering Journal, 142, pp.23-39.
Almaguer,  M.,  Rojas-Flores,  T.,  Rodríguez-Rajo,  J. & Aira, M.J., 2014. Airborne Basidiospores of Coprinus  and  Ganoderma  in  a  Caribbean Region. Aerobiologia, 30, pp.197–204.
Bilal,  M.,  Asgher,  M.  &  Ramzan,  M.,  2015.
Purification and Biochemical
Characterization  of  Extracellular  Manganese Peroxidase from Ganoderma lucidum IBL-05 and  Its  Application.  Academic  Journal, 10(14), pp.1-9
Cardoso,  N.F.,  Lima,  E.C.,  Royer,  B.M.,  Bach,  V., Dotto,  G.L.,  Pinto,  L.A.  &  Calvete,  T., 2012.Comparison  of  Spirulina  platensis Microalgae and Commercial Activated Carbon  as  Adsorbents  for  The  Removal  of Reactive  Red  120  Dye  from  Aqueous Effluents. Jornal of Hazardous Materials, 241- 242, pp.146-153.
Chen, S.H. & Ting, A.S.Y., 2015. Biodecolorization and  Biodegradation  Potential  of  Recalcitrant Triphenylmethane  Dyes  by  Coriolopsis  sp. Isolated from Compost. Journal of Environmental  Management,  150,  pp.274- 280.
Dewi, R.S. & Lestari, S., 2010. Dekolorisasi Limbah Batik  Tulis  Menggunakan  Jamur  Indigenous Hasil  Isolasi  pada  Konsentrasi  Limbah  yang Berbeda. Molekul, 5(2), pp.75-82.
Dewi,  R.S.,  Kasiamdari,  R.S.,  Martani,  E.  and Purwestri,  Y.A.,  2019a,  April.  Optimization of  the  conditions  for  the  decolorization  of batik wastewater by Aspergillus sp. 3. In AIP Conference Proceedings (Vol. 2094, No. 1, p. 020036). AIP Publishing LLC.
Dewi,  R.S.,  Ilyas,  M.  and  Sari,  A.A.,  2019b. Ligninolitic  Enzyme  Immobilization  from
Pleurotus  ostreatus  for  Dye  and  Batik
Wastewater Decolorization.
Jurnal
Pendidikan IPA Indonesia, 8(2), pp.220-229.
El-Rahim, W.M.A., El-Ardy, O.A.M. & Mohammad, F.H.A.,  2009.  The  Effect  of  pH  on Bioremediation Potential for The Removal of Direct  Violet  Textile  Dye  by  Aspergillus niger. Desalination, 249(3), pp.1206-1211.
Fouillaud,  M.,  Caro,  Y.,  Venkatachalam,  M., Grondin, I. & Dufossé, L., 2017. Anthraquinones. England: Taylor and Francis Group.
Fu,  Y.  &  Viraraghavan,  T.,  2001.  Fungal Decolorization  of  Dye  Wastewaters:  A Review. Bioresource Technology, 79, pp.251- 262.
Gandjar,  I.,  Sjamsuridzal,  W.  &  Oetari,  A.,  2007.
Mikologi Dasar dan Terapan. Jakarta: Yayasan Buku Obor.
Hadibarata,  T.  &  Kristanti,  R.A.,  2012.  Effect  of Environmental Factors in The Decolorization of Remazol Brilliant Blue R by Polyporus sp. S133.  Journal  of  The  Chilean  Chemical Society, 57(2), pp.1095-1098.
Hasanuddin,  2014.  Jenis  Jamur  Kayu  Makroskopis Sebagai  Media  Pembelajaran  Biologi  (Studi di  TNGL  Blangjerango  Kabupaten  Gayo Lues). Jurnal Biotik, 2(1), pp.1-76.
Hidayati, P., Ulfin, I. & Juwono, H., 2016. Adsorpsi Zat  Warna  Remazol  Brilliant  Blue  R Menggunakan Nata De Coco: Optimasi Dosis Adsorben dan Waktu Kontak. Jurnal Seni dan Sains ITS, 5(2), pp.134-136.
Lazim,  Z.M.,  Mazuin,  E.,  Hadibarata,  T.  &  Yusop, Z., 2015. The Removal of Methylene Blue and Remazol  Brilliant  Blue  R  Dyes  by  Using Orange  Peel  and  Spent  Tea  Leaves.  Journal Teknologi, 74, pp.129-135.
Lu,  R.,  Ma,  L.,  He,  F.,  Yu,  D.,  Fan,  R.,  Zhang,  Y., Long, Z., Zhang, X. & Yang, Y., 2015. White- Rot Fungus Ganoderma sp.En3 Had a Strong Ability  to  Decolorize  and  Tolerate  The Anthraquinone, Indigo and Triphenylmethane Dye  with  High  Concentrations.  Bioprocess and  Biosystems  Engineering,  39(3),  pp.381- 390.
Ma, L., Zhuo, R., Liu, H., Yu, D., Jiang, M., Zhang, X. & Yang, Y., 2014. Efficient Decolorization and  Detoxification  of  The  Sulfonated  Azo Dye  Reactive  Orange  16  and  Simulated Textile  Wastewater  Containing  Reactive
Orange  16  by  The  White-Rot  Fungus Ganoderma sp. En3 Isolated from The Forest of Tzu-chin Mountain in China. Biochemical Engineering Journal, 82, pp.1-9.
Muslimah,  S.  &  Kuswytasari,  N.D.,  2013.  Potensi Basidiomycetes  Koleksi  Biologi  ITS  sebagai Agen  Biodekolorisasi  Zat  Warna  RBBR. Jurnal Sains dan Seni Pomits, 2(1), pp.2337- 3520.
Nguyen, B.T.T., Ngo, N.X., Le, V.V., Nguyen, L.T., Kana,  R.  &  Nguyen,  H.D.,  2019.  Optimal culture  conditions  for  mycelial  growth  and fruiting  body  formation  of  Ling  Zhi mushroom  Ganoderma  lucidum  strain  GA3. Vietnam Journal of Science, Technology and Engineering, 61(1), pp.62-67.
Novak,  J.T.,  Robert,  C.H.  &  Clifford,  W.R.,  2001.
Biological  Treatment  of  a  Synthetic  Dye Water  and  an  Industrial  Textile  Wastewater Containing Azo Dye Compounds. Blacksburg Viriginia:  Virginia  Polytechnic  Institute  and State University.
Noviendri, D., Fawzya, Y.N. & Chasanah, E., 2008.
Karakteristik  dan  Sifat  Kinetika  Enzim Kitinase dari Isolat Bakteri T5a1 Asal Terasi. Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, 3, pp.123-129.
Oliveira,  S.F.,  Luz,  J.M.R.,  Kasuya,  M.C.M., Ladeira,  L.O.  &  Ary  Correa  Junior.,  2018.
Enzymatic Extract Containing Lignin Peroxidase Immobilized on Carbon Nanotubes:  Potential  Biocatalyst  in  Dye Decolourization.  Saudi  Journal  of  Biological Sciences, 25, pp.651-659.
Osma,  J.F.,  Herrera,  J.L.T.  &  Couto,  S.R., 2010.Transformation  Pathway  of  Remazol Brilliant  Blue  R  by  Immobilised  Laccase. Bioresource Technology, 101, pp.8509-8514.
Papadopoulou, K., Kalagona, I.M., Philippoussis, A. &  Rigas,  F.,  2013.  Optimization  of  Fungal Decolorization  of  Azo  and  Anthraquinone Dyes  iaBox-Behnken  Design.  International Biodeterioration  &  Biodegradation,  77, pp.31-38.
Purnama,  H.  &  Setiati.,    2004.  Adsorbsi  Limbah Tekstil  Sintesis  dengan  Jerami  Padi.  Jurnal Teknik Gelagar, 15(1), pp.1-9.
Rahmat,  N.A.,  Ali,  A.A.,  Salmiati,  Hussain,  N., Muhamad, M.S., Kristanti, R.A. & Hadibarata,  T.,  2016.  Removal  of  Remazol Brilliant  Blue  R  from  Aqueous  Solution  by Adsorption Using Pineapple Leaf Powder and Lime  Peel  Powder.  Water,  Air  and  Soil Pollution, 227, pp.105-115.
Rao,  M.A.,  Scelza,  R.,  Acevedo,  F.,  Diez,  M.C.  & Gianfreda, L., 2014. Enzymes as Useful Tools for  Environmental  Purposes.  Chemosphere, 107, pp.145-162,
Saeed,  A.,  Iqbal,  M.  &  Zafar,  S.I.,  2009. Immobilization  of  Trichoderma  viride  for Enhanced Methylene Blue Biosorption: Batch and  Column  Studies.  Journal  of  Hazardous Materials, 168, pp.406-415.
Saetang, J. & Babel, S., 2010. Fungi Immobilization for  Landfill  Leachate  Treatment.  Water Science  and  Technology,  62(6),  pp.1240- 1247
Saito, Y., Tsuchida, H., Matsumoto, T., Makita, Y.,
Kawashima,  M.,  Kikuchi,  J.  &  Matsui,  M., 2018. Screening of Fungi for Decomposition of  Lignin-Derived  Products  from  Japanese Cedar. Journal of Bioscience and Bioengineering, 126(5), pp.573-579.
Sari,  A.A.  &  Dewi,  R.S.,  2019.  The  Study  of Basidiomycota and Glomeromycota
Biodiversity in Baturraden Botanical Garden, Indonesia.  Report  Research.  Research  Grant Programme, NEF.
Siswanto, S., Suharyanto & Rosy, F., 2007. Produksi dan  Karakterisasi  Lakase  Omphalina  sp. Menara Perkebunan, 75(2), pp.106-115.
Sudiana, I.K., Sastrawidana, I.D.K. & Sukarta, I.N., 2018. Decolorization Study of Remazol Black B  Textile  Dye  Using  Local  Fungi  of Ganoderma  sp.  and  Their  Ligninolytic Enzymes.  Journal  of  Environmental  Science and Technology, 11(1), pp.16-22.
Sumathi, S. & Phatak, V., 1999. Fungal Treatment of Bagasse  Based  Pulp  and  Paper  Mill  Wastes. Environmental Technology, 19, pp.93-98.
Torres-Farradá,  G.,  Manzano-León,  A.M.,  Rineau, F.,  Leal,  M.R.,  Thijs,  S.,  Jambon,  I.,  Put,  J.,
Czech,  J.  Rivera,  G.G.,  Carleer,  R.  & Vangronsveld,  J.,  2019.  Biodegradation  of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons by Native Ganoderma  sp.  Strains:  Identification  of Metabolites and Proposed Degradation Pathways. Applied Microbiology and Biotechnology, pp.1-13.
Upadhyay,  P.,  Shrivastava,  R.  &  Agrawal,  P.K., 2016.  Bioprospecting  and  Biotechnological Applications  of  Fungal  Laccase.  3  Biotech, 6(1), pp.15.
Volesky,  B.,  1990.  Biosorption  by  Heavy  Metals. Florida: CRC Press.
Yesiladal,  K.S.,  Pekin,  G.L.,  Bermek,  H.,  Alaton, I.A.,  Orhon,  D.  &  Tamerler,  C.,  2006. Bioremediation  of  Textile  Azo  Dyes  by Trichophyton rubrum LSK-27. World Journal of  Microbiology  &  Biotechnology,  22, pp.1027-1031.
Zeng,  X.,  Cai,  Y.,  Liao,  X.,  Zeng,  X.,  Li,  W.  & Zhang, D., 2011. Decolorization of Synthetic Dyes  by  Crude  Laccase  from  A  Newly Isolated  Trametes  trogii  Strain  Cultivated  on Solid  Agro-Industrial  Residue.  Journal  of Hazardous Materials, 187, pp.517-525.
Zhuo, R., Ma, L., Fan, F., Gong, Y., Wan, X., Jiang, M.,  Zhang,  X.  &  Yang,  Y.,  2011. Decolorization of Different Dyes by a Newly Isolated  White-Rot  Fungi  Strain  Ganoderma sp.En3 and Cloning and Functional  Analysis of  Its  Laccase  Gene.  Journal  of  Hazardous Materials,192, pp.855-873.