PENGARUH FERMENTASI LIMBAH RUMPUT LAUT Gracilaria sp. DENGAN Bacillus subtilis TERHADAP POPULASI PLANKTON Chlorophyceae
EFFECT OF WASTE SEAWEED FERMENTATION OF Gracilaria sp. WITH Bacillus subtilis AGAINST ON PLANKTON POPULATIONS OF Chlorophyceae
Moch. Amin Alamsjah, Rani Frisca Christiana dan Sri Subekti
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
One  of  Indonesia's  marine  living  resources  is  seaweed.  There  are  about  18,000  species  of seaweed around the world and 25 species of which have high economic value. In indonesia, there are 555 types  of  seaweed  and  four  types  of  which  are  known  as  export  commodities,  that  is Euchema sp., Gracilaria sp., Gelidium sp.  and Sargasum sp.  One  type  of  algae  is  much  cultivated  in  the  waters  of Indonesia is Gracilaria sp. Seaweed is widely cultivated because it has an important role in the effort to increase fish production and preservation of biological resources. However, sometimes the other result are found a lot of waste of seaweed in the field. Utilization of seaweed waste of Gracilaria sp. can be applied into organic fertilizer that is through a biological fermentation process using microbial proteolytic.
The  aims  of the  study to  determine the effect of  the waste  seaweed  fermentation of Gracilaria sp. with Bacillus subtilis on plankton populations of Chlorophyceae. The research was perform in August 2011 at the Laboratory of Fisheries Education, Faculty of Fisheries and Marine, University of Airlangga, Surabaya. The design of experiments  in this study using Completely Randomized  Design (CRD)  with 6 treatments  and  4  replications.  The  treatments  were:  (A)  control,  (B)  10ml/l  of  seaweed  waste  liquid without fermentation, (C) 5ml/l of seaweed waste liquid using fermentation, (D) 10ml/l of seaweed waste liquid using fermentation, (E) 15ml/l of seaweed waste liquid using fermentation, (F) 20ml/l of seaweed waste  liquid  using  fermentation.  The  main  parameter  is  plankton  populations  of  Chlorophyceae,  while supporting parameter water quality. Data analysis using analysis of variance (ANOVA), when there is a difference followed by Duncan's Multiple range test.
The results showed that the  utilization  of   waste  seaweed  of Gracilaria sp. Using  fermentation with isolated bacterial of Bacillus subtilis produce significantly different population (p <0.05) and D the treatment that  is  10ml/l  of  seaweed  waste  liquid  using  fermentation,  showed  the  highest  cell  density  of 264,252 cells / ml. Based on the results of Duncan's Multiple range test showed that the D treatment give the best effect among all of the treatments. Water quality parameters during the study remained within the tolerance limit  for the growth of Chlorophyceae,  pH 7-8 and the water temperature ranges between 27- 29 o C.
Keywords : Gracilaria, fermentation, Bacillus subtilis, Chlorophyceae

## Pendahuluan
Indonesia merupakan negara kepulauan terbesar di dunia  yang terdiri dari 17.508 pulau dengan  garis  pantai  sepanjang  81.000  km  dan luas  laut  sekitar  3,1  juta  km²  (Dahuri,  2004). Salah  satu  kekayaan  hayati  laut  Indonesia adalah  rumput  laut.  Terdapat  sekitar  18.000 jenis  rumput  laut  di  seluruh  dunia  dan  25  jenis diantaranya  memiliki  nilai  ekonomi  tinggi. Indonesia  terdapat  555  jenis  rumput  laut  dan empat    jenis    diantaranya  dikenal  sebagai komoditas ekspor, yaitu Euchema sp., Gracilaria sp., Gelidium sp. dan Sargasum sp. Salah  satu  jenis  alga  yang banyak dibudidayakan  di  perairan  Indonesia  adalah Gracilaria  sp. yang  merupakan  penghasil  agar.
Namun,  penggunaannya  selama  ini  masih terbatas  untuk  pemanfaatan  produk  makanan dan obat. Belum ada upaya pengembangan lebih lanjut  pada  produk  lain  yang  punya  nilai ekonomis lebih tinggi (Irwan, 2003).
Rumput  laut  banyak  dibudidayakan karena  memiliki  peranan  penting  dalam  usaha meningkatkan produksi perikanan serta menjaga kelestarian  sumber  hayati.    Dari  hasil  budidaya tersebut  banyak  limbah  rumput  laut.  Limbah tersebut berupa batang thallus yang pendek dan rumput  laut  yang  berwarna  kusam.  Limbah yang  dihasilkan  oleh  pembudidaya  rumput  laut biasanya  hanya  dibiarkan  menumpuk  di  lokasi penimbunan.  Limbah  panen  tersebut  bagitu banyak  jumlahnya  perlu  dimanfaatkan  secara
maksimal.  Salah  satu  pemanfaatannya  dengan cara  membuat  pupuk  organik  dari  limbah rumput laut (Anonim, 1994).
Pemanfaatan limbah panen rumput laut Gracilaria sp.  dapat  diaplikasikan  menjadi pupuk  organik  yaitu  melalui  proses  fermentasi secara  biologis  dengan  menggunakan  mikroba proteolitik  (Hidayat  dkk,  2007).    Mikroba proteolitik  dapat  menghasilkan  enzim  protease yang  mampu  mengubah  protein  menjadi  asam amino. B. subtilis merupakan mikroba proteolitik  yang  menghasilkan  enzim  protease yang  menghidrolisis  protein  menjadi  senyawa polipeptida, oligopeptida dan asam-asam amino (Halama, 1990).
Proses  fermentasi  bertujuan  untuk menghidrolisis dinding sel rumput  laut  menjadi rantai  nitrogen  yang  paling  pendek,  sehingga dapat dimanfaatkan fitoplankton untuk memenuhi nutriennya. Dalam proses fermentasi diperlukan  enzim  untuk  menghirolisis  rantai nitrogen  menjadi  rantai  nitrogen  yang  paling pendek    (Fardiaz,  1992).  Manfaat  dari fermentasi limbah rumput laut dengan menggunakan B. subtilis adalah untuk menambah  ketersediaan  nutrien  fitoplankton (Indrawan, 2003). Fitoplankton memerlukan nutrien untuk  mendukung  pertumbuhannya,  semakin meningkat  kandungan  nutrien  di  perairan semakin meningkat pula
pertumbuhan fitoplankton. Menurut Wetzel (2001) kelompok fitoplankton  di  perairan  tawar  yang  umum dijumpai  dalam  jumlah  melimpah  adalah Chlorophyceae. Green  water  system ialah  salah satu  adanya  pertumbuhan  Chlorophyceae  di perairan yang di maksudkan untuk menstabilkan kualitas  air.  Tenden  (2003)  menyatakan  bahwa kondisi lingkungan yang stabil dengan pertumbuhan plankton dari kelas Chlorophyceae mampu  memberikan  kondisi  lingkungan  yang baik. Dengan adanya kelimpahan Chlorophyceae  di  perairan  menunjukkan  unsur hara yang tinggi (Suryanto, 2006). Berdasarkan latar belakang
permasalahan  tersebut,  dilakukan  penelitian penggunaan B.  subtilis pada  proses  fermentasi sebagai  upaya  peningkatan  nutrisi  limbah rumput laut Gracilaria sp. untuk meningkatkan N  dan  P  sebagai  pupuk  untuk  pertumbuhan populasi  Chlorophyceae  di  perairan  sebagai kelompok  organisme  yang  menguntungkan  di lingkungan perairan.
Pada  penelitian  ini  diharapkan  dapat mengetahui pengaruh fermentasi limbah rumput laut Gracilaria sp.  dengan  bakteri B.  subtilis terhadap  populasi  plankton  Chlorophyceae  di
perairan  sebagai  kelompok  organisme  yang menguntungkan di lingkungan perairan.
Manfaat  dari  penelitian  ini  adalah memberi informasi tentang pengaruh fermentasi limbah  rumput  laut Gracilaria sp.  dengan bakteri B.  subtilis terhadap  populasi  plankton Chlorophyceae .

## Materi dan Metode
Penelitian akan dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran  Hewan,  Universitas  Airlangga  dan Laboratorium  Pendidikan  Perikanan,  Fakultas
Perikanan  dan  Kelautan,  Universitas  Airlangga pada bulan Agustus 2011.
Peralatan  yang  akan  digunakan  dalam penelitian  ini,  meliputi  :  botol  air  mineral ukuran 1500 ml sebanyak 24 botol untuk media sampel  air  kolam,  pH  paper,  gelas  ukur,  pipet, mikroskop, Sedgewich Rafter (50 mm x 20 mm x 1  mm) ,thermometer, plankton net, Handtally Counter ,  rekraktometer,  filtrasi,  selang  filtrasi dan pisau, kertas label, tabung erlermeyer.
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  limbah  panen  rumput  laut Gracilaria sp.  yang  diperoleh  dari  tambak budidaya  rumput  laut  di  Desa  Pulokerto, Kecamatan Kraton, Kabupaten Pasuruan,  isolat
B.  subtilis yang  diperoleh  dari  laboratorium bakteri  dan  mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Hewan,  Universitas  Airlangga,  sampel  air kolam Pendidikan Perikanan Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga.
Metode  penelitian  yang  digunakan
dalam penelitian ini adalah metode experimental.  Penelitian  eksperimental  pada dasarnya adalah ingin menguji hubungan antara suatu  sebab  dengan  akibat.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  kemungkinan hubungan sebab akibat dengan cara memberikan satu atau lebih perlakuan pada satu atau  lebih  penelitian  dan  membandingkannya dengan  kontrol  yang  tidak  diberikan  perlakuan (Silalahi, 2003).
Penelitian    pendahuluan    dilaksanakan pada    bulan  Juli  2011.  Tujuan  dari  penelitian pendahuluan  adalah  menentukan  dosis  terbaik dari  perlakuan  pupuk  cair  rumput  laut.  Dosis pupuk yang digunakan pada penelitian pendahuluan  adalah  10  ml/l,  20  ml/l,  40  ml/l dan  0  ml  (kontrol).  Hasil  dari  penelitian pendahuluan  tersebut    didapatkan  bahwa konsentrasi yang menghasilkan dominasi plankton terbaik adalah 10ml/l.
Rancangan Penelitian
Rancangan  percobaan  yang  digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap yaitu rancangan  percobaan  yang  dipergunakan  bila
media dan bahan percobaan seragam atau dapat dianggap seragam (Kusriningrum, 2008).
Penelitian ini menggunakan 6 perlakuan dan 4 ulangan, yaitu :
A:  1 liter air kolam tanpa cairan limbah rumput laut (kontrol)
B: 1 liter air kolam +  10 ml limbah rumput laut tanpa difermentasi (kontrol)
C:  l  lter  air  kolam  +  5  ml  fermentasi  limbah rumput laut
D:  1  liter  air  kolam  +  10  ml  fermentasi  limbah rumput laut
E:  1  liter  air  kolam  +  15  ml  fermentasi  limbah rumput laut
F:  1  liter  air  kolam  +  20ml  fermentasi  limbah rumput laut Kusriningrum (2008) menyatakan bahwa  ulangan  adalah  frekuensi  suatu  macam perlakuan yang dicobakan dalam suatu percobaan.  Hubungan  antara  perlakuan  dengan ulangan adalah :
Keterangan : t   =  banyaknya perlakuan n  =  banyaknya ulangan
Peralatan  yang  akan  digunakan  dalam penelitian  dicuci  dengan  sabun  pencuci  piring dan  dibilas  dengan  air  bersih,  kemudian  dicuci lagi  dengan  klorin  12  ppm,  selanjutnya  dicuci dengan  air  bersih  dan  dikeringkan  di  bawah sinar matahari.
Masing-masing wadah penelitian  diletakkan  pada  rak  dengan  posisi pada desain penelitian.
Gracilaria sp. yang digunakan adalah limbah rumput laut yang berasal dari sisa panen
tambak  budidaya  yang  telah  dibersihkan  secara langsung  saat  pengambilan  dari  habitatnya. Kemudian  dilakukan  proses  pembuatan  cairan dengan  dipotong  kecil  lalu depressed untuk diambil sarinya.
Sediaan  isolat  pada  media  agar  bakteri B. subtilis diremajakan  terlebih  dahulu  di Nutrient  Agar  (NA)  dan  diinkubasi  selama  24 jam  dengan  suhu  37 o C.  Setelah  dikultur  pada media  agar,  kemudian  dikultur  pada  media  cair (nutrient  broth),  selanjutnya  diinkubasi  pada shaker  inkubator  dengan  kecepatan  250  Rpm, suhu  40 o C  selama  24  jam  dengan  kepadatan Bakteri  berdasarkan  ketetapan  Mc’Farland  3  x 10 8 cfu/ml  (Lamid,  dkk,  2006),  selanjutnya bakteri siap digunakan.
Cairan  rumput  laut Gracilaria sp.  yang telah didapat dan diukur sebanyak 500  ml akan difermentasi  menggunakan  isolat B.  subtilis . Fermentasi  adalah  pengubahan  bahan  organik menjadi  bentuk  lain  dengan  menggunakan bantuan  mikroba  (Judoamijoyo  dkk.,  1990). Mikroba  melakukan  proses  fermentasi  dengan cara mengubah bahan organik komplek menjadi molekul-molekul  yang  lebih  sederhana  (Amri, 2007). Sebagai aktivator adalah tetes. Proses ini diawali  dengan  mencampur  0,3%  tetes,  500  ml cairan rumput laut dan isolat B. subtilis , diaduk secara  merata.  Cairan  tersebut  dimasukkan  ke dalam  toples  dengan  sedikit  udara  kemudian disimpan  pada  ruang  gelap  selama  1  minggu Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Inckle et  al (2005) yang menjelaskan bahwa waktu fermentasi  antara  satu  sampai  dua  minggu. Jangka  waktu  fermentasi  disesuaikan  dengan perlakuan yang diinginkan.
t(n-1) ≥ 15
Kolam  merupakan  lahan  yang  dibuat untuk  menampung  air  dalam  jumlah  tertentu sehingga  dapat  digunakan  untuk  pemeliharaan ikan  atau  hewan  air  lainnya.  Berdasarkan pengertian  teknis  kolam  merupakan  suatu perairan  buatan  yang  luasnya  terbatas  dan sengaja  dibuat  manusia  agar  mudah  dikelola. Kolam  selain  sebagai  media  hidup  ikan  dapat berfungsi  sebagai  sumber  pakan  alami  bagi ikan,  artinya  kolam  berpotensi  untuk  dapat menumbuhkan  pakan  alami  (Susanto,  1992). Sampel air diambil sebanyak 6 liter
menggunakan  timba  lalu  disaring  dengan plankton net agar plankton dan kotoran di dalam kolam terpisah.
Kultur  semi  outdoor  plankton  bertujuan untuk  mengetahui  kelimpahan  dan  jenis-jenis plankton  pada  perairan  tercemar.  Kultur  ini dilakukan  dengan  cara  memberi  aerasi  pada  air tercemar  selama  2  hari  kemudian  diamati  apa saja  plankton  yang  teridentifikasi  di  dalam perairan  tersebut  dan  berapa  kelimpahan plankton yang terdapat di dalamnya.
Gambar 1.  Kerangka Penelitian
Identifikasi  dan  penghitungan  populasi plankton  dilakukan    menggunakan Sedgewich Rafter (50  mm  x  20  mm  x  1  mm)  dan mikroskop.  Pengamatan  plankton  dilakukan setiap  hari  sekali  selama  6  hari.  Perhitungan jumlah  kelimpahan  plankton  dilakukan  dengan rumus (Ekawati, 2005):
n d N 2 ) 2 / ( 14 , 3 1000
Keterangan: N =   Kepadatan Chlorophyceae (sel/ ml) d  =  Diameter bidang pandang (mm)
n  =  Jumlah rata-rata Chlorophyceae per bidang pandang (unit/ ml)
Indeks dominansi (D) (Shannon-Wiener) dalam Pirzan (2008) :
ni D = (Pi) 2 Pi = N dimana : D =   Indeks dominansi
ni =   Jumlah individu jenis ke-i N =   Jumlah total individu
Pi =   Proporsi spesies ke-i
Parameter  utama  dalam  penelitian  ini adalah populasi plankton . Perhitungan populasi plankton dilakukan setiap hari sampai populasinya menurun. Parameter utama
digunakan  untuk  mencari  populasi  maksimum selama pemeliharaan.
Pertumbuhan populasi dihitung dengan menggunakan sedgwick  rafter  counter  cell , dengan  bantuan  mikroskop  dan Handtally Counter . Pengukuran suhu menggunakan termometer,  pengukuran  pH  menggunakan kertas  pH.  Pengukuran  terhadap  suhu  dan  pH dilakukan  setiap  hari.  Parameter  pendukung digunakan untuk melengkapi data dari parameter utama.
Analisis  data  menggunakan  Analisis Varian  (ANAVA)  dengan  rancangan  penelitian adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  untuk mengetahui adanya perbedaan dalam perlakuan. Jika  terdapat  perbedaan  pada  perlakuan  maka dilakukan  uji  jarak  Duncan  dengan  derajat kepercayaan  0,05  untuk  mengetahui  perbedaan diantara semua perlakuan (Kusriningrum,
2008).
Hasil dan Pembahasan Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh limbah panen rumput laut
Gracilaria sp.  yang  di  fermentasi  dengan B. subtilis yang  dapat  menghasilkan      populasi plankton  Chlorophyceae  terbaik.  Parameter  uji utama  penelitian  ini  adalah  pertumbuhan populasi plankton Chlorophyceae yang dilakukan  selama  6  hari.  Hasil  identifikasi plankton kelas Chlorophyceae selama penelitian,  ditemukan  6  spesies    Klasifikasi plankton seperti pada Tabel 1. berikut ini: Tabel 1. Jenis Plankton yang Ditemukan Kelas Spesies Chlorophyceae Chlorella Scenedesmus Oocystus Volvox Chlamidomonas Hasil  pengamatan  penelitian  berupa dominasi Chlorophyceae selama masa pemeliharaan  (Gambar  2).  Hari  pertama plankton  yang  paling  mendominasi  adalah
Chlorella dilanjutkan Scenedesmus,  Oocystus, Volvox,  Chlamidomonas .  Pada  hari  kedua didomonasi  oleh  Chlorella,  urutan  kedua Oocystus dilanjutkan Scenedesmus,  Volvox, Chlamidomonas .  Hari  ketiga  yang  paling mendominasi  adalah Chlorella dilanjutkan Oocystus, Volvox, Scenedesmus, Chlamidomonas .  Hari  keempat  yang  paling mendominasi  adalah Chlorella dilanjutkan Oocystus, Volvox, Chlamidomonas, Scenedesmus . Hari kelima yang paling mendominasi  adalah Chlorella dilanjutkan Oocystus, Volvox, Scenedesmus, Chlamidomonas .  Hari  keenam  yang  paling mendominasi adalah Chlorella, Oocystus,
Volvox, Scenedesmus, Chlamidomonas.
Hasil  pengamatan  penelitian  berupa perhitungan  populasi  Chlorophyceae.  Data harian  yang  diperoleh  selama  penelitian  diuji dengan analisis varian (ANAVA) (Lampiran 3). Hasil  Analisis  Varian  (ANAVA)  pada  hari pertama  sampai  hari  keenam  menunjukkan bahwa  terdapat  pengaruh  yang  berbeda  nyata (p<0,05) pada tiap perlakuan terhadap pertumbuhan  Chlorophyceae  (Lampiran  2) kemudian dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan  untuk  mengetahui  perbedaan  tiap perlakuan.  Data  pertumbuhan  populasi  dengan tujuh  perlakuan  dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Sedangkan  grafik  pertumbuhan  populasi  dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 2. Grafik Harian Dominasi Plankton Chlorophyceae
Tabel 2.  Data Pertumbuhan Populasi Chlorophyceae (sel/ml) Setelah Penambahan Fermentasi Limbah Rumput Laut Gracilaria sp. Hari Pertama Hingga Hari Keenam
Perlakuan Kepadatan Chlorophyceae (unit/sel) pada hari ke- 1 2 3 4 5 6 A (kontrol 0ml/l) 42197,45 f 49539,5 c 59872,61 a 55971,34 e 45063,69 d 37898,089 f B (tanpa fermentasi) 146894,91 e 154538 b 164888,5 bc 178821,68 d 150850,79 c 133359,87 e C (5ml/l) 150636,95 d 151354 b 166719,7 bc 201035,03 c 160755,16 c 147133,76 d D (10ml/l) 183359,87 a 187102 a 199840,7 a 264251,60 a 251592,3 a 237101,91 a E (15ml/l) 157283,78 b 158201 b 190843,9 ab 222691,08 b 192595,5 b 189410,83 b F (20ml/l) 157006,37 c 157404 b 169426,7 bc 197372,61 c 164331,21 c 131767,51 c
Keterangan: Superskrip berbeda dalam satu kolom menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0,05)
Gambar 3.   Grafik  Pertumbuhan  Populasi  Chlorophyceae  (sel/ml)  Setelah  Penambahan Fermentasi Rumput Laut Gracilaria sp. Hari Pertama Hingga Hari Keenam.
Pada  perlakuan  A  (kontrol  0ml/l) puncak  populasi  didapatkan  pada  hari  ke-3  dan menurun  pada  hari  ke  5  dan  perlakuan  B (kontrol  tanpa  fermentasi),  C  (5ml/l),  D (10ml/l), E (15ml/l) dan pucak populasi didapat pada  hari  ke-4  pertumbuhan,  populasi  terbaik pada hari ke-3 maupun pada hari ke-4 diperoleh perlakuan D (10ml/l) dengan kepadatan 264252 sel/ml  dan  terendah  pada  perlakuan  B  (kontrol tanpa  difermentasi)  dengan  kepadatan  178822 sel/ml.
Hasil  uji  jarak  berganda  Duncan  pada masa  penelitian  yaitu  pada  hari  pertama,  ke-2, ke-4,  ke-5  dan  ke-5  menunjukkan  bahwa perlakuan  D  (10  ml/l)  berbeda  nyata  (p<0,05) dengan  semua  perlakuan.  Pada  hari  ketiga menunjukkan  bahwa perlakuan D (10  ml/l) dan E berbeda nyata (p<0,05) perlakuan  F (20ml/l), C  (5ml/l),  B  (kontrol  tanpa  fermentasi),  A (kontrol  0ml/l).  Perlakuan  D  (10  ml/l)  tidak berbeda nyata dengan perlakuan E (15ml/l).
Pertumbuhan  Chlorophyceae  selain dipengaruhi  oleh  ketersediaan  nutrien  juga dipengaruhi oleh faktor lingkungan. Pengukuran kualitas  air  dilakukan  setiap  hari  selama  masa pemeliharaan.  Pengukuran  suhu  dan  pH dilakukan  setiap  hari  pagi  dan  sore  data parameter  kualitas  air  harian  terdapat  pada (Lampiran  4).  Pengukuran  suhu  pagi  dan  sore selama  masa  pemeliharaan  berkisar  27 o C sampai  29 o C,  sedangkan  pH  air  berkisar  7-8. Nilai  kisaran  kualitas  air  dapat  dilihat  pada Tabel 3.
Tabel  3.  Nilai  Kisaran  Kualitas  Air  Selama Enam Hari Parameter Kisaran Suhu (°C) pH 27-29 8
Dari  Hasil  Analisis  Data  Nitrogen  (N)
Dan Fosfor (P) Limbah Rumput Laut Gracilaria
Sp. Dapat Dilihat Pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil Uji Nitrogen (N) dan Fosfor (P) Uji Cairan Gracilaria sp. Sebelum Sesudah difermentasi Nitrogen (%) 0,1649 0,2354 Fosfor (%) 0,02 0,06 Sumber :   Hasil pengujian Laboratorium Kedokteran Hewan
Dalam  suatu  ekosistem  perairan, fitoplankton  mempunyai  kedudukan  yang  amat penting,  karena  berfungsi  sebagai  produsen
primer  bahan  organik.  Produksi  bahan  organik dari  unsur  anorganik,  yang  dilakukan  oleh fitoplankton dengan  melalui proses  fotosintesis, merupakan sumber energi utama yang mendasari  struktur  tropik  ekosistem  perairan (Wetzel,  1983).  Suatu  perairan  dapat  dikatakan subur  apabila  perairan  itu  dapat  mendukung semua aspek  yang dibutuhkan untuk kebutuhan fitoplankton.
Dari  hasil  pengamatan  didapatkan fitoplankton  yang  mendominasi  di  perairan tawar  adalah  kelas  Chlorophyceae  (Lampiran 1).  Diduga  perairan  tersebut  memiliki  nutrien yang  dapat  mencukupi  kebutuhan  nutrien Chlorophyceae,  hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Smith  (1982) dalam Garno  (2008)  yang menyatakan dalam pertumbuhannya setiap jenis fitoplankton  mempunyai  respon  yang  berbeda terhadap kandungan nutrien yang terlarut dalam perairan.  Oleh  karena  itu  kandungan  nutrien, khususnya  nitrogen  dan  fosfor  terlarut  sangat menentukan  dominasi  suatu  jenis  fitoplankton di  perairan  (Kilham and Kilham,  1978 dalam Yulianto  dan  Muri  1998).  Untuk  melakukan proses  fotosintesis  fitoplankton  membutuhkan nutrien, nutrien yang dibutuhkan oleh fitoplankton  adalah    unsur  nitrogen.  Nitrogen diperlukan untuk membantu
proses pembentukan  klorofil,  fotosintesis,  protein,
lemak dan senyawa organik lainnya.
Kandungan  nitrogen  dari  limbah rumput  laut  sebesar  0,16  %  dan  fosfor  0,02  %. Untuk  meningkatan  kandungan  nitrogen  dan fosfor  dari  limbah  rumput  laut  maka  dilakukan proses  fermentasi  dengan  menggunakan  bakteri B. subtilis sebagai fermentor. Bakteri B. subtilis dapat  digunakan  sebagai  fermentor  karena bersifat  proteolitik  yaitu  bakteri  yang  dapat menghidrolisis  protein  menjadi  asam  amino sehingga  dapat  dimanfaatkan  oleh  fitoplankton khususnya  Chlorophyceae  dalam  penelitian  ini. Dari hasil ANAVA  (Lampiran 3) menunjukkan bahwa penggunaan limbah rumput laut Gracilaria sp.  yang  difermentasi  dengan menggunakan isolat bakteri B. subtilis menghasilkan populasi yang berbeda nyata pada masing-masing perlakuan (p<0,05). Data pertumbuhan Chlorophyceae terjadi
peningkatan  populasi  pada  hari  ketiga  untuk perlakuan A (0ml/l). Puncak populasi perlakuan B  (cairan  rumput  laut  tanpa  difermentasi),  C (5ml/l),  D  (10ml/l),  E  (15ml/l),  F  (20ml/l). Peningkatan  tersebut  diduga  karena  adanya pengaruh  yang  nyata  dari  pemberian  cairan limbah  rumput  laut Grcilaria sp.  yang  telah difermentasi dengan menggunakan isolat bakteri B.  subtilis .  Dalam  meningkatkan  jumlah populasi  Chlorophyceae  diperlukan  adanya
kandungan  nutrient  makro  seperti  nitrogen  dan fosfor.
Dari hasil penelitian didapat perlakuan  D  dengan  dosis  10  ml/l  memberikan kepadatan  populasi  tertinggi  yaitu  264251,593 sel/ml.    Kepadatan  populasi  terendah  didapat oleh  perlakuan  A  (0ml/l)  tanpa  penambahan dosis  yang  merupakan  kontrol  pertumbuhan. Diduga  pada  perlakuan  A  (0ml/l)  fitoplankton kekurangan nutrien sehingga mendapatkan dosis terendah, sedangkan untuk perlakuan D (10ml/l) diduga  karena  dosis  yang  diberikan  sesuai dengan  kebutuhan  nutrien  Chlorophyceae. Menurut  Salundik  dan  Simamora  (2006) kekurangan nitrogen dapat menyebabkan pertumbuhan    menjadi  lambat  karna  nitrogen berfungsi  dalam  proses  fotosintesis.  Menurut Hastuti  dan  Handajani  (2001)  apabila  nutrien diberikan  pada  media  kultur    dalam  jumlah berlebih  maka  bersifat  racun  yang  dapat menghambat pertumbuhan.
Dari  hasil  identifikasi,  perairan  air tawar  yang  telah  di  kultur  dengan  pupuk fermentasi  limbah  rumput  laut Grcilaria sp. yang mendominasi adalah dari genus Chlorella . Fitoplankton ini mendominasi di banding  genus lain  dari  kelas  Chlorophyceae  yang  ditemukan. Hal  ini  diduga  karena  kandungan  nitrogen  dan fosfor mencukupi kebutuhan nitrogen dan fosfor
Chlorella . Kandungan nitrogen pupuk fermentasi    limbah  rumput  laut Gracilaria sp sebesar  0,24%  dan  kandungan  fosfor  sebesar 0,06%.  Menurut  Eyster  (1976)  Kebutuhuan nitrogen  dan    fosfor Chlorella sebesar 0,00039% dan 0,00155%.
Pertumbuhan  Chlorophyceae yang  baik selain  dipengaruhi  oleh  kandungan  nutrisi  juga dipengaruhi  oleh  kondisi  lingkungan.  Faktor lingkungan  yang  mendukung  pertumbuhan Chlorophyceae  adalah  suhu  air  dan  pH  (Cornet et al , 1992).
Hasil  pengukuran  suhu  air  selama penelitian  berkisar  antara  27-29 o C.  Suhu  air mempunyai  pengaruh  yang  besar  terhadap proses  metabolisme.  Kenaikan  suhu  sampai batas  tertentu  dapat  mempercepat  proses metabolisme (Suriawiria, 1985).
Nilai  pH  merupakan  salah  satu  faktor yang  penting  bagi  kehidupan  Chlorophyceae . Nilai  pH  yang  berada  pada  ambang  batas normalnya dapat menurunkan kecepatan tumbuh  dari  fitoplankton.  pH  berhubungan dengan  kelarutan  CO 2 dalam  media  kultur, karena  CO 2 akan  berikatan  dengan  ion  H + sehingga  akan  membentuk  asam  karbonat  yang bersifat  asam.  Hasil  pengukuran  pH  pada pemeliharaan  Chlorophyceae  selama  penelitian adalah 7-8.

## Kesimpulan
Penggunaan limbah rumput laut
Gracilaria sp.  yang  difermentasi  dengan menggunakan  isolat  bakteri Bacillus  subtilis sebagai  pupuk  organik  untuk  petumbuhan populasi  plankton  Chlorophyceae berpengaruh nyata  terhadap  pertumbuhan  populasi  plankton Chlorophyceae. Pertumbuhan populasi plankton Chlorophyceae  dapat  ditingkatkan  dengan menggunakan  pupuk  fermentasi  limbah  rumput laut Gracilaria sp.  dengan  dosis  10  ml/  l. Dibutuhkan    penelitian  lebih  lanjut  mengenai kebutuhan  nitrogen  dan  fosfor  untuk  plankton Chlorophyceae .

## Daftar Pustaka
Abdullah, Irwan. 2003. Penelitian Berwawasan Gender Dalam Ilmu Sosial . Humaniora volume XV no 3/2003.
Alaerts.,  Santika.  1987.  Metoda  Penelitian
Kualitas  Air. Penerbit Usaha Nasional. Surabaya – Indonesia. 309 hal.
Amri,  M.  2007.  Pengaruh  Bungkil  Inti  Sawit Fermentasi  Dalam  Pakan  Terhadap Pertumbuhan  Ikan  Mas.  Universitas Bung Hatta. Padang.
Anggadireja, J. T., A. Zatnika., H. Purwoto dan
S.  Istini.  2006. Rumput  Laut .  Penebar Swadaya. Jakarta. hal 39-47.
Anonim.  1994.  Pengolahan  dan  Pemanfaatan Limbah  Hasil  Perairan  Seri  I.  Dirjen Perikanan. Jakarta. hal 5.
Aslan,  M.  Laode.  1998.  Budidaya  Rumput Laut.  Penerbit  Kanisius.  Yogyakarta. 105 hlm.
Atmaja.  W.  S.,  A.  Kadi.,  Sulistijo  dan Rachmaniar.  1996.  Pengenalan  Jenis  – Jenis  Rumput  Laut  di  Indonesia. Puslitbang  Oseano.  LIPI-JAKARTA. 109
Basmi,  J.  1997.  Planktonologi  :  Terminologi dan Klasifikasi Fitoplankton Laut.
Bold,  C.  H.  and  M.  J.  Wynne.  1977.
Introduction to the algae: Structure and reproduction. Grentice-Hall  Biologycal Sciences  Series  (W.D.  Mc.  Elroy  and Swanson eds .)  India  New  Delhi  :  706 pp.
Brown, Alfred. 2009. Benson’s Microbiological
Application  Laboratory  Manual  in General  Microbiology.  Short  version. 11th ed. McGraw Hill. p. 294.
Chen,    J.    X.    1994. Gracilaria Culture    in China. http://www.fao.org. 01/03/
2011. 7 pp.
Cornet  J.  F.,  C.  G.  Dussap  and  G.  Dubertret. 1992. A Structured Model for Simulation of Cultures of the
Cyanobacterium Spirulina  platensis in Photobioreactors:  I.  Coupling  Between Light  Transfer  and  Growth  Kinetics.
Biotechnol. Bioeng. 40, 817D825. Dahuri,  R.  2004.  Pengelolaan  Sumber  Daya Wilayah  Pesisir  dan  Lautan  Secara Terpadu, Edisi Revisi. Pradnya Paramita. Jakarta. Davis, C.C. 1955. The Marine and Fresh Water Plankton.  Michigan  State  University
Press, Michigan. 562 pp.
Dhiantani,  D.  2003.  Identifikasi  Jenis  Plankton Di  Perairan  Muara  Badak,  Kalimantan Timur.  Makalah  Falsafah  Sains  (PPS 702) Program Pasca Sarjana/S3 Institut
Pertanian Bogor. 7 Hal. Effendi,  I.  2002. Probiotics  for  Marine Organism Disease Protection . Pekanbaru:  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu Kelautan Universitas Riau. Effendi.  2003.  Telaah  Kualitas  Air  Bagi Pengelolaan Sumberdaya dan Lingkungan Perairan. Penerbit Kanisius. Yogyakarta. Fardiaz,  S.  1987. Fisiologi  Fermentasi ,  Pusat Antar Universitas. Lembaga Sumberdaya Informasi  IPB. Farid, Muh S. 2002. Peranan Fitoplankton Laut Dalam  Kehidupan.  Makalah  Falsafah Sains (PPs 702). Program Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. IPB Garno,  Y.S.  2008.  Kualitas  Air  Dan  Dinamika Fitoplankton Di Perairan Pulau Harapan.  Peneliti  Di  Pusat  Teknologi Lingkungan  Badan  Pengkajian  Dan Penerapan  Teknologi.  Bpp  Teknologi,
107-113
Graumann,  P.  2007. Bacillus :  Cellular  and Molecular  Biology.  Caister  Academic press. USA.
Halama,  D.  1990.  Single  Cell  Protein. In: K.Boda (Eds). Nonconventional
Feedstuffs  in  the  Nutrition  of  Animal.
Elsevier  Science  Publishing  Company. Inc.New York. P. 45-46. Hastuti  dan  Handajani.  2001.  Budidaya  Pakan Alami.  Jurusan  Perikanan.  Fakultas Peternakan Perikanan Universitas
Muhammadiyah Malang. Malang. Holt,  J.  G.,  N.R.  Krieg,  P.H.A.  Sneath,  J.T.
Staley  and  S.T.  Williams.  1994.
Bergey’s  Manual  of  Determinative Bacteriology .  9nd  Ed.  William  &
Wilkins. 377-390p Indrawan,  B.  2003.  Penggunaan  Kotorn  Ayam Yang Difermentasi Effective Microorganisme  4  (EM4)  Sebagai Substitusi  Pakan  Komersial  Terhadap
Pertambahan  Berat  Badan  Konsumsi Dan  Konversi  Pakan  Ayam  Ras Pedaging  Jantan.  Fakultas  Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya. Hal 8 -9. Inckle,  M.  Peter,  D.  S..  Tim,  T  and  Tom  V. 2005.  The  Preparation  and  Use  of Compost. Agromisa Foundation. Wageningen. Netherlands. p 11-12. Irwan.  2003.  Menggali  Manfaat  Rumput  Laut. Riset Unggulan ITB. Bandung http://www.kompas.com/. 25/05/2010.
Junaedi,  W.  A.  2004. Rumput  Laut,  Jenis  dan Morfologinya.  Departemen Pendidikan Dan  Kebudayaan.  Nabire. http.//www. smkn1nabire.com. 10/03/2011. 56 hal.
Kalkam. I., I. Rayendran and C. L, Angel. 1991. Seaweed (Gracilaria) farming in vedelai  and  chinna  palam.  India http  :
//www. ftp.fao.org.1/7/2008 . 12 hal Kilham,  S.S,  dan  P.  Kilham,  1978.  "Natural community  bioasaays:  Predictions  of result based on  nutrien physiology and competition",  Int.  Ver.  Theor.  Angew. Limnol. Verh., 20, 68-74. Kobayashi, K. 2003. "Essential Bacillus subtilis genes". Proc Natl Acad Sci . USA . Kostamo, K. 2008. The Life Cycle And Genetic Structure Of The Red Algae Fulcellaria
Lumbricalis  On  A  Salinity  Gradient. http://www.oa.doria.fi. 24/01/2009. 34pp Kusriningrum, R.S. 2008. Perancangan Percobaan. Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga. Airlangga  University  Press.  Surabaya. Hal 5-69. Lamid, M., S. Chuzaemi, N. N. T. Puspaningsih dan  Kusmartono.  2006.  Inokulasi Bakteri Xilanolitik Asal Rumen sebagai  Upaya  Peningkatan  Nilai Nutrisi Jerami Padi. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya. http//www. mirnilamid@yahoo.com. 11/03/2010. 7 hal
Lawlor,  D.  W.  1993.  Photosynthesis.  2nd edition.  Logman  group  UK  Limited. London. P. 9-23 . Lewmanomont,  K.  1995. A  Review  Paper  on The  Taxonomy  of  Gracilaria  in  Asian Countries . http://www.fao.org.12/03/2011. 11 pp. Luning, K. 1990. Seaweeds Their Environment, Biogeography and Ecophisiology . John
Wiley & Sons. New York. p. 328.
Muliani.  M,  Atmomarsono.  M.  I,  Madeali.
1997. Pengaruh Penggunaan
Kekerangan Sebagai Biofilter Terhadap Kelimpahan  Dan  Komposisi  Jenis Bakteri  Pada  Budidaya  Udang  Windu Dengan  Sistem  Sirkulasi  Air.  Laporan
Penelitian Perikanan Pantai. Maros. 13 Hal. Munawar,  M.,  Stadelman,  P.,  and  Munawar, I.F.,  1974.  Phytoplankton  biomass, Species  composition  and  primary production  at  a  nearshore  and  a midlake station of Lake Ontario during IFYGL.  Proceedings  of  the  17 th
Conference  on  the  Great  Lakes Research.  International  Association  of Great Lakes Research, pp. 629-652. Nardoyo. S, . T. H. 1981. Kriferia  Kualifas Air untuk Keperluan Pertanian dan Perikanan  dalam  Analisi  Dampak Lingkungan. Training  Analisa Dampak Lingkungan 19-31 Januari 1981.
Bogor.
Nontji.,  A.  1987.  Laut  Nusantara.  Djambatan. Jakarta. 397 hal. Noirot,  P.  2007.  Replication  of  The  Bacillus Subtilis Chromosome. Caister Academic Press. Odum.  E.  P.  1996.  Dasar-dasar  Ekologi.  Edisi ketiga. Terjemahan Tjahjon Samingan.  Gadjah  Mada  University Press. Yogyakarta: 697 Hlm Odum,  E.  P.  1998. Dasar-dasar  Ekolog i  . Fourth Edition. Gadjah Mada University Press: Yogyakarta. Okaviana,B.  1995.  Isolasi  Dan  Karakteristik Bakteri Pengikat Merkuri Pada Perairan Sungai. Tesis Program Pascasarjana. FMIPA. UGM. Yogyakarta Parakkasi,  A.  1995.  Ilmu  Nutrisi  dan  Makanan Ternak Ruminansia. UI. Jakarta. Pelczer,  M.  J.  and  E.  C.  S.  Chan.  1988.  Dasar- dasar Mikrobiologi. Universitas
Indonesia Press. hal. 99-105. Pelczar, M.J.Jr, E. C. S Chan, and N. R. Krieg.
1997. Microbiology . McGraw-Hill
Book Company Inc. New York, p: 183- 184 Pirzan,  A.  M.,  dan  P.R.  Pong-Masak.  2008. Hubungan  Keragaman  Fitoplankton Dengan Kualitas Air Di Pilau Bauluang, Kabupaten Takalar, Sulawesi  Selatan,  Jurusan  Biologi Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan  Alam.  Universitas  Negri Surakarta. Surakarta. 5 Hal. Purnomo, A. 2004. Teknologi Proboitik Untuk Mengatasi Permasalahan Tambak Udang  Dan  Lingkungan  Budidaya.
Makalah  Disajikan  Dalam  Simposium Nasional  Pengembangan  Ilmu  Dan Inovasi Teknologi Dalam Budidaya 27 - 29 Januari. Semarang. 24 hal. Rao, M. B., 1998. Molecular and Biotechnological Aspects Of Microbial Proteases  Microbiology  and  Molecular
Biology Rev, Sci Am. 597–635 pp. Reynolds  and  E.  F.  James.  1982.  Martindale,
The  Extra  Pharmacopeia.  28 th Ed.  The
Pharmacentical  Press.  London.  p.  114- 117. Sachlan,M.  1972  Planktonology.  Direktorat Jenderal Perikanan. Departemen Pertanian. Jakarta. Center. 32 hal. Sachlan,  M.,  1980,  Planktonologi,  Fakultas Peternakan  dan  Perikanan,  UNDIP
Semarang, 103 hal.
Sachlan,  M.  1982. Plankfonologi. Fakultas Peternakan  dan  Perikanan.  Universitas
Diponegoro. Semarang. 117p.
Salundik dan Simamora, S. 2006. Meningkatkan
Kualitas Kompos. Agromedia Pustaka.
Jakarta. hal.10.
Sarwono, J. 2006. Metode Penelitian Kuantitatif Dan Kualitatif. Yogyakarta Smith, V.H., 1982. The nitrogen and phosphorus dependence of algal biomass  in  Lakes:  An  empirical  and theoritical Analysis. Limnol. Oceanogr., 27:1101- 1112 Subarijanti,  H.  U.  2002.  Unsur  Karbon, Nitrogen  dan  Fosfor  sebagai  Kunci Eutrofikasi. Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang. Hal 6 Sumadi.  2007.  Nutrient  Mineral. http://www.
elearing.unej.ac.id . 19/05/2009.7 hal. Sunarto.  2008.  Karakteristik  Biologi  dan
Peranan  Plankton  Bagi  Ekosistem
Laut.  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu
Kelautan. Universitas Padjajaran. Bandung. 41 hal. Sulistijo  dan  W.S  Atmaja.  1993.  Diverifikasi Pemanfaatan  Tambak  dan  Budidaya
Rumput Laut Gracilaria. Makalah Pada
Simposium  Perikanan  Indonesia  I.
Jakarta 25-27 Agustus. 1993
Surawiria.  U.  1995.  Pengantar  Mikrobiologi Umum. Penerbit Angkasa. Bandung. Suryaningrum,  D.,  T.  Wikanta,  H.  Kristiana. 2006. Uji Aktivitas Senyawa Antioksidan dari Rumput Laut Halymenia  harveyana dan Eucheuma cottoni . Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi  Kelautan  dan  Perikanan Vol 1 No 1. Semarang. 13 hal
Suryanto.  A.  M.  2006.  Diktat  Planktonologi (Peran Unsur Hara Bagi  Fitoplankton).
Departemen Pendidikan Nasional Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang Waluyo,  L.  2004.  Mikrobiologi  Umum. Universitas  Muhammadiyah  Malang. Malang Waspodo.  I.S.,  2001  Efek  Probiotik,  Prebiotik Dan Simbiotik Bagi Kesehatan.
http://www.kompas.com/ .kompascetak/
0109/iptek/efek22.htm.4
Wibisono,  M.  S.  2005. Pengantar  Ilmu Kalautan .  Penerbit  PT.  Gramedia Widiasarana Indonesia, Jakarta. Wetzel,  1983.  “Limnology”,  second  edition. Saunders College Publishing, Philadelphia, Pennsylvania, pp 438448. Wetzel, R.G. 2001. Limnology. Lake and River Ecosystems.  Third  Ed.  Academic Press,  San  Diego.  xvi,  1006  pp. ISBN 0-12-744760-1 Yulianto  dan  Muri,  A.  1998.  Pemanfaatan Fitoplankton Untuk Menentukan Tingkat  Produktifitas  Waduk  Sermo. Buletin  Penalaran  Mahasiswa,  Volume 4 Nomer 2. Hal 27-30.