UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK BUAH SENGGANI (Melastoma malabathricum L.)  METODE DPPH (2,2-Diphenyl-1- picrylhidrazyl) SERTA APLIKASINYA PADA KRIM ANTIOKSIDAN
Dian Kartikasari*, Hairunisa, Meri Ropiqa Akademi Farmasi Yarsi Pontianak
Email: diankartikasari223@gmail.com

## ABSTRAK
Buah  senggani  berwarna  ungu  ketika  matang,  mengindikasikan  tingginya kandungan  antioksidannya.  Antioksidan  digunakan  untuk  melindungi  kulit  dari oksidasi sehingga dapat mencegah penuaan dini. Pada sediaan krim, bagian yang berperan dalam menentukan sifat fisik dan stabilitas adalah emulgator. Tween 80 dan span 80 merupakan emulgator yang sering digunakan bersamaan. Penelitian ini bertujuan mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak buah senggani dengan melihat nilai  IC 50 dengan  metode  reaksi  DPPH  ( 2,2-Diphenyl-1-picrylhidrazyl )  serta memformulasikannya  menjadi  sediaan  krim  dengan  perbandingan  konsentrasi tween  80  dan  span  80,  kemudian  dievaluasi  sifat  fisik  krim.  Ekstrak  diformulasi dalam  sediaan  krim  kemudian  dievaluasi  sifat  fisik  meliputi,  uji  organoleptis, homogenitas,  daya  sebar,  tipe  krim,  pH,  dan  viskositas.  Nilai  IC 50 yang  didapat yaitu 52,032 ppm. Hasil evaluasi sifat fisik krim yang menghasilkan sediaan yang baik adalah formula 3 dengan konsentrasi 8% tween 80 dan 4% span 80.
Kata kunci : ekstrak buah senggani, antioksidan, krim, tween 80 dan span 80

## ABSTRACT
The  ripe  senggani  fruit  is  purple,  which  indicates  the  high  content  of antioxidants in it. Antioxidants are used to protect the skin from oxidative damage so as to prevent premature aging. In cream preparations, a part that plays a role in determining the physical properties and stability of the cream is the emulsifier. Tween  80  and  span  80  are  emulgators  that  are  often  used  simultaneously.  This study aims to find out the antioxidant activity of extract of senggani fruit by looking at IC 50 value was done by DPPH reaction method ( 2,2-Diphenyl-1-picrylhidrazyl ) and formulate it into cream preparation with comparison concentration of tween 80 and span 80 then do the evaluation of physical properties of cream. The extracts were formulated in cream dosage form and then evaluated the physical properties includes organoleptis test, homogenity, dispersion, cream type, pH, and viscosity. IC 50 value obtained is 52.032 ppm. The result of evaluation of physical properties of cream yielding good preparation is formula 3 with concentration of tween 80 is 8% and span 80 is 4%
Keywords: senggani fruit extract, antioxidant, cream, tween 80 and span 80

## PENDAHULUAN
Buah senggani merupakan salah  satu  tanaman  liar  yang  oleh masyarakat  daerah  tertentu  daunnya dimanfaatkan  sebagai  obat  luka  dan sariawan.  Buah  senggani  matang berwarna  ungu,  mengindikasikan tingginya  kandungan  antioksidan  di dalamnya. Antioksidan adalah senyawa yang memilki berat molekul kecil,  tetapi  mampu  menginaktivasi (menangkal)  radikal  bebas  dengan cara  mengikatnya,  digunakan  untuk melindungi  kulit  dari  kerusakan akibat  oksidasi  sehingga  mencegah penuaan dini (Masaki, 2010).
Radikal  bebas  adalah  molekul yang  kehilangan  atau  kelebihan  satu elektron  tidak  berpasangan  sehingga menjadi  tidak  stabil  dan  berusaha untuk  mengambil  elektron  dari molekul  lain.  Radikal  bebas  bisa berasal  dari  metabolisme  tubuh ataupun  faktor  luar  seperti  asap rokok,  sinar  ultra  violet,  ataupun  zat kimia pada makanan dan polutan lain.
Salah  satu  sediaan  kosmetika yang  biasa  digunakan  adalah  krim. Krim  merupakan  sediaan  setengah padat  berupa  emulsi  kental  yang mengandung  air  tidak  kurang  dari
60% dan dimaksudkan untuk pemakaian  luar  (Depkes  RI,  1979). Keuntungan  penggunaan  krim  yakni memiliki  nilai  estetika  yang  cukup baik, merupakan sediaan yang mudah dicuci,  tidak  lengket,  melembabkan kulit,  serta  memilki  kemampuan penyebaran yang baik.
Tween 80 dan span 80 merupakan  emulgator  yang  sering digunakan  secara  bersamaan  pada sediaan  krim.  Tween  80  memiliki nilai HLB tinggi (hidrofil), sedangkan span  80  memiliki  nilai  HLB  rendah (lipofil).  Kombinasi  emulgator  ini menghasilkan  emulsi  yang  lebih stabil dibandingkan dengan penggunaan surfaktan tunggal (Walter, 2002).

## METODE PENELITIAN

## A. Alat dan Bahan
Alat: blender, lemari pengering ( drying cabinet ), evaporator, spektrofotometer  UV-Visibel,  labu ukur,  neraca  analitik,  wadah  sampel, kertas saring, gelas ukur, erlenmeyer, batang  pengaduk,  corong  gelas, tabung reaksi.
Bahan:  buah  senggani,  etanol 96%, DPPH, vitamin c, asam stearat,
adepslanae,  tween  80,  span  80, propilenglikol,  metil  paraben,  propil paraben, minyak mawar, aquadest.
B. Prosedur Penelitian
1. Penyiapan ampel
Buah senggani
diambil sebanyak  5  kg,  dibersihkan  dari kotoran  yang  menempel,  dicuci dengan  air  mengalir  dan  dirajang. Selanjutnya  dihaluskan  dengan  cara diblender.
2. Pembuatan ekstrak etanol buah senggani
Buah  senggani  yang  sudah dihaluskan ditimbang sebanyak 500 g dan  dimasukkan  ke  dalam  bejana maserasi,  kemudian  ditambahkan etanol  96%  sampai  terendam  merata (± 2 L) dan didiamkan sambil sesekali dilakukan pengadukan. Proses perendaman dilakukan selama 1 x 24 jam,  kemudian  disaring.  Filtrat  yang diperoleh dievaporasi hingga didapat ekstrak  kental,  selanjutnya  dihitung rendemennya.
3. Uji antioksidan
a. Pembuatan  larutan  DPPH  0,05 mM
Sebanyak 0,98 mg DPPH
dilarutkan  dengan  etanol  dalam labu takar sampai 50 mL sehingga
diperoleh larutan dengan konsentrasi 0,05 mM.
b. Pembuatan  larutan  ekstrak  etanol buah senggani
Dibuat larutan sampel konsentrasi 1000 ppm dengan menimbang 100 mg  sampel  ekstrak  etanol  buah senggani dilarutkan dalam 100 mL air.
c. Penentuan  Panjang  Gelombang Maksimum
Sebanyak 2 mL larutan DPPH 0,05 mM ditambah 2 mL air, dibiarkan selama  30  menit  di  tempat  gelap, kemudian serapannya diukur dengan spektrofotometer UV-
Visibel. Panjang gelombang absorbansi maksimum yang ditunjukkan  merupakan  panjang gelombang DPPH.
d. Penentuan aktivitas antioksidan
Larutan  sampel  dibuat  dengan  5 konsentrasi  berbeda  (20,  40,  60, 80,  100  ppm)  dari  larutan  stok 1000 ppm yang diencerkan menjadi  100  µg/mL.  Larutan vitamin  C  digunakan  sebagai pembanding.  Setiap  konsentrasi larutan dipipet ke dalam botol vial, ditambahkan  larutan  DPPH  0,05 mM  dengan  perbandingan  1  :  1. Campuran  dihomogenkan  dan
dibiarkan  selama  30  menit  di tempat  gelap,  diukur  serapannya dengan spektrofotometer UV-
Visibel.
4. Pembuatan krim ekstrak buah senggani
Fase  minyak  dibuat  dengan
berturut-turut
meleburkan adepslanae,  setil  alkohol,  asam stearat, span 80, di atas  penangas air pada  suhu  70ºC.  Fase  air  dibuat dengan  melarutkan  tween  80  dalam air  yang  telah  dipanaskan  hingga 70 º C,  kemudian  ditambah  propilen glikol. Krim dibuat dengan menambahkan fase minyak ke dalam fase  air,  ditambah  metil  paraben sambil  diaduk  dengan  pengaduk elektrik  selama  2  menit,  kemudian didiamkan  20  detik  lalu  diaduk kembali  sampai  homogen.  Ekstrak digerus  dalam  mortir  yang  sudah dipanaskan,  ditambahkan  basis  krim sedikit  demi  sedikit  dan  diaduk sampai  homogen.  Setelah  homogen ditambah  minyak  mawar  kemudian diaduk lagi hingga homogen.
5. Evaluasi  krim  ekstrak  buah senggani
a. Uji organoleptis
Uji organoleptis dilakukan dengan melihat bau, warna dan tekstur dari
krim  yang  dibuat.  Pengujian organoleptis  dilakukan  oleh  3 sukarelawan dengan membandingkan  krim  masing- masing formula.
b. Uji homogenitas
Krim  dioleskan  tipis  merata  pada kaca  bening  dan  diarahkan  pada cahaya. Tidak  boleh  terlihat adanya bahan tidak homogen.
c. Uji daya sebar
Daya  sebar  dilakukan  dengan meletakkan  0,5  gram  krim  di antara 2 lempeng  kaca. Lempeng kaca bagian atas ditimbang terlebih dahulu kemudian diletakkan di atas krim dan biarkan 1  menit.  Di  bagian  atasnya  diberi beban 150 g, biarkan 1 menit, lalu diukur besarnya diameter sebarnya.
d. Uji tipe emulsi
Kertas  saring  ditetesi  krim  yang telah  dibuat.  Jika  kertas  saring terjadi  noda  minyak  berarti  krim tipe A/M, tetapi jika basah berarti krim tipe M/A.
e. Uji pH
Pengujian pH menggunakan kertas pH  Universal  dengan  cara  krim ditimbang  sebanyak  1  g  dan
diencerkan dengan 10 mL aquades.  Kemudian  gunakan  pH universal dan baca berapa pH yang
dihasilkan.  pH  yang  diinginkan adalah  antara 4,5 sampai 6,5 agar sama dengan pH kulit. Tabel 1. Formulasi krim ekstrak buah senggani tiap 50 gram Bahan Formula 1 (%) Formula 2 (%) Formula 3 (%) Ekstrak buah senggani 1 1 1 Asam stearat 2 2 2 Setil alkohol 3 3 3 Adepslanae 2 2 2 Tween 80 4 6 8 Span 80 2 3 4 Propilenglikol 10 10 10 Metil paraben 0,3 0,3 0,3 Propil paraben 0,02 0,02 0,02 Minyak mawar 0,05 0,05 0,05 Aquadest ad 100 ad 100 ad 100

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Buah  senggani  ( Melastoma malabathricum L.)  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  dalam  bentuk simplisia.  Rendemen  ekstrak  yang didapatkan  sebesar  13,164%  dengan berat ekstrak etanol 65,82 g.
Pengukuran aktivitas antioksidan dilakukan dengan
mereaksikan  larutan  sampel  dengan DPPH.  Larutan  DPPH  yang  semula berwarna ungu akan berubah menjadi warna  kuning  yang  mengindikasikan bahwa DPPH telah tereduksi menjadi
DPPH-H. Panjang gelombang maksimum  (λmaks)  DPPH  yang didapatkan  adalah  518  nm.  Hasil pengujian  persen  inhibisi  aktivitas
antioksidan  ekstrak  etanol  buah senggani dapat dilihat pada tabel 2.
Nilai
IC 50 merupakan konsentrasi  yang  dibutuhkan  untuk mereduksi  DPPH  sebesar  50%.  IC 50 dihitung dengan menggunakan persamaan  regresi  linier,  konsentrasi sampel  sebagai  sumbu  x  dan  persen inhibisi sebagai sumbu  y. Persamaan linier  untuk  ekstrak  etanol  buah senggani  berdasarkan  data  yang didapatkan  yaitu  y  =  0,8467x  + 5,9443 dengan nilai koefisien korelasi (r²) = 0,9829. Dari persamaan tersebut didapat nilai IC 50 ekstrak etanol buah senggani  sebesar  52,032  ppm  yang termasuk  dalam  kategori  antioksidan
kuat karena nilai IC ₅₀ berkisar antara 50 - 100 ppm.
Antioksidan  yang  digunakan sebagai  pembanding  pada  penelitian ini  ialah  vitamin  C.  Konsentrasi vitamin C sebesar 1, 2, 3, 4, 5 µ g/mL dan masing-masing konsentrasi
menghasilkan  nilai  persen  inhibisi seperti pada tabel 3.
Berdasarkan data tersebut didapat nilai persamaan regresi linier yaitu y = 7,42x + 21,491 dengan nilai koefisien korelasi (r²) = 0,9992. Dari persamaan tersebut didapat nilai IC 50 vitamin C sebesar 3,842 ppm.
Tabel 2. Hasil persen inhibisi ekstrak etanol buah senggani Konsentrasi µ g/mL % Inhibisi 20 18,936 40 42,025 60 60,612 80 75,086 100 87,077
Tabel 3. Hasil persen inhibisi vitamin C Konsentrasi µ g/mL % Inhibisi 1 29,274 2 36,088 3 43,305 4 51,338 5 58,749
Ekstrak  etanol  buah  senggani yang  memiliki  aktivitas  antioksidan
kuat selanjutnya dibuat sediaan krim.
Krim  antioksidan  dibuat  dalam  3 formulasi dengan menggunakan komposisi tween 80 dan span 80 yang berbeda, kemudian dilakukan
evaluasi  sifat  fisiknya.  Pengujian evaluasi sifat fisik meliputi
organoleptis, homogenitas, daya sebar,  tipe  emulsi,  uji  pH  dan
viskositas krim ekstrak buah senggani.
Gambar 1. Krim ekstrak buah senggani
Hasil  pengujian  organoleptis krim  ekstrak  etanol  buah  senggani dapat dilihat pada tabel 4. Warna yang
F1
F2 F3
dihasilkan pada krim disebabkan oleh zat  aktif  dari  ekstrak  etanol  buah senggani, sedangkan bau khas minyak mawar karena adanya
penambahan  corigens  odoris  mawar untuk menutupi bau asli sediaan krim yang  kurang  sedap  akibat  bau  khas dari tween 80 dan span 80.
Tabel 4. Hasil pengujian organoleptis krim ekstrak etanol buah senggani No Formula Replikasi Hasil 1 Formula I Replikasi I Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu Replikasi II Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu Replikasi III Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu 2 Formula II Replikasi I Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu Replikasi II Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu Replikasi III Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu 3 Formula III Replikasi I Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu Replikasi II Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu Replikasi III Bau khas minyak mawar, tekstur lembut, warna ungu Tabel 5. Hasil pengujian homogenitas krim ekstrak etanol buah senggani No Formula Replikasi Hasil 1 Formula I Replikasi I Homogen Replikasi II Homogen Replikasi III Homogen 2 Formula II Replikasi I Homogen Replikasi II Homogen Replikasi III Homogen 3 Formula III Replikasi I Homogen Replikasi II Homogen Replikasi III Homogen Pengujian homogenitas dilakukan  untuk  melihat  apakah bahan yang digunakan sudah tercampur  sempurna.  Homogenitas berpengaruh pada penyebaran krim di kulit. Hasil pengamatan homogenitas ketiga sediaan menunjukkan tidak ada butiran  kasar  pada  plat  kaca  saat diujikan.  Hasil  dapat  dilihat  pada tabel 5.
Pengujian daya sebar
dimaksudkan untuk mengetahui seberapa  besar  krim  menyebar  pada kulit. Semakin besar daya sebar maka semakin besar zat aktif yang dihantarkan  ke  dalam  kulit  (Voight, 1995).  Hasil  pengujian  daya  sebar menunjukkan  dengan  bertambahnya berat  beban  terhadap  krim,  maka semakin  luas  penyebaran  krim  yang terbentuk.  Hal  ini  menunjukkan
dengan adanya peningkatan konsentrasi  tween  80  dan  penurunan konsentrasi  span  80  pada  semua formula
berpengaruh dalam penurunan  daya  sebar.  Hasil  dapat dilihat  pada tabel 6.
Pengujian tipe emulsi dilakukan untuk  melihat  tipe  krim  yang dihasilkan. Pada penelitian ini volume fase terdispersi (fase minyak) yang  digunakan  dalam  krim  lebih kecil dari pada fase pendispersi (fase air).  Hasil  pengujian  dapat  dilihat pada tabel 7.
Pengujiaan pH dilakukan untuk melihat kemanan krim terhadap kulit. Kulit manusia memiliki nilai rentang
pH  4,5  -  6,5  (Tranggono,  2007).  pH sediaan  tidak  boleh  terlalu  asam karena  dapat  mengiritasi  kulit  dan tidak  boleh  terlalu  basa  karena  akan menjadikan  kulit  bersisik  Hasil pengujian dapat dilihat pada tabel 8. Pengujian  viskositas  bertujuan  untuk menentukan  nilai  kekentalan  suatu zat. Semakin tinggi nilai viskositasnya  maka  semakin  tinggi tingkat  kekentalan  zat  tersebut. Menurut  SNI  16-4399-1996  tentang standar mutu sediaan krim, viskositas sediaan  yang  baik  berkisar  antara 2000  -  50.000  cps.  Hasil  pengujian viskositas dapat dilihat pada tabel 9.
. Tabel 6. Hasil pengujian daya sebar krim ekstrak etanol buah senggani
No Formula Beban (gram) Diameter Daya Sebar (cm) Rata-rata diameter (cm) Luas Daya Sebar (cm 2 ) 1 Formula 1
0 2,13
5,08 20,25 50 4,84 100 5,79 150 6,18 200 6,50 2 Formula 2
0 2,40
4,96 19,31 50 4,88 100 5,30 150 5,98 200 6,23 3 Formula 3
0 1,58
4,53 16,10 50 4,59 100 5,27 150 5,54 200 5,69
Tabel 7. Hasil pengujian tipe krim ekstrak etanol buah senggani
Formula Replikasi Hasil 1 1 M/A 2 M/A 3 M/A 2 1 M/A 2 M/A 3 M/A 3 1 M/A 2 M/A 3 M/A Tabel 8. Hasil pengujian pH krim ekstrak etanol buah senggani Formula Replikasi Hasil 1 1 6 2 6 3 6 2 1 6 2 6 3 6 3 1 6 2 6 3 6 Tabel 9. Hasil pengujian viskositas krim ekstrak etanol buah senggani Formula Hasil 1 900 cps 2 1100 cps 3 2000 cps
Berdasarkan  tabel  9  hasil
pengujian viskositas, hanya formula 3 yang  memenuhi  standar  mutu  krim menurut SNI. Semakin tinggi konsentrasi  tween  80  dan  semakin rendah  konsentrasi  span  80,  maka viskositas  krim  semakin  tinggi.  Hal ini disebakan karena komposisi krim yang  lebih  banyak  mengandung tween  80  yang  bersifat  hidrofil  akan mengikat bagian air dalam komposisi
krim sehingga semakin kental (Sugihartini, 2010).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak etanol  buah  senggani  memiliki  nilai IC 50 sebesar  52,032  ppm,  yang termasuk  dalam  kategori  antioksidan kuat.  Formula  krim  antioksidan ekstrak  etanol  buah  senggani  yang
dapat  menghasilkan  sediaan  yang baik  adalah  formula  3  dengan konsentrasi tween 80 : span 80 adalah 8% : 4%.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Peneliti  ucapkan  terimakasih kepada  Akademi  Farmasi  Yarsi
Pontianak atas bantuan dana penelitian  dalam  program  Hibah Penelitian  Dosen  Akademi  Farmasi
Yarsi Pontianak.

## DAFTAR PUSTAKA
Depkes RI, 1979, Farmakope Indonesia Edisi III, Departemen Kesehatan  Republik  Indonesia, Jakarta Masaki, H.. 2010, Role of
Antioxidants  in  the  skin:  Anti- aging effects. Journal of Dermatological  Science ,  58,
85-90
Standar  Nasional  Indonesia,  1996,
Sediaan  Tabir  Surya,  Badan
Standarisasi  Nasional,  Jakarta, SNI 16-4399-1996.
Sugihartini, N,  2010,  Optimasi
Komposisi  Emulgator  Krim Ekstrak  Teh  Hijau  ( Camellia
sinensis L)  sebagai  Sediaan Kemopreventif  Kanker  Kulit dengan Metode Factorial Design,  Lembaga  Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Tranggono,  I.R.,  Latifah  F.,  2007, Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan  Kosmetik,  PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Voight,  R,  1995,  Buku  Pelajaran Teknologi  Farmasi,  Edisi  V, diterjemahkan  oleh  Soendadi
Noerono  Soewdanhi,  Edisi  ke- 5,  Gadjah  Mada  University Press, Yogyakarta.