Online : http://ejurnal.setiabudi.ac.id/ojs/index.php/farmasi-indonesia

## Formulasi dan Uji Aktivitas Nanoemulsi Minyak Atsiri Daun Kemangi
( Ocimum basilicum L.) Terhadap Salmonella typhii
Nanoemulsion Formulation And Activity Test Of Essential Oil  Basil Leaves ( Ocimum basilicum L.) Against Salmonella typhii
Monica Kristiani * , Septiana Laksmi Ramayani, Klara Yunita, Meilina Saputri Prodi D3 Farmasi, Politeknik Katolik Mangunwijaya, Semarang, Indonesia, email : monicakristia@gmail.com

## Abstrak
Minyak  atsiri  daun  kemangi  ( Ocimum  basilicum L.)  dengan  konsentrasi  2,5%  diketahui dapat menunjukkan adanya diameter zona hambat dengan nilai rata-rata 8,67 ± 0,58 mm. Minyak atsiri  memiliki  karakteristik  mudah  menguap,  dan  mudah  teroksidasi  menjadi  resin,  sehingga dapat  mempengaruhi  aktivitasnya  sebagai  antibakteri.Untuk  meningkatkan  stabilitasnya  maka minyak atsiri dari hasil destilasi daun kemangi perlu dikemas dalam suatu sistem penghantaran khusus yaitu nanoemulsi.
Nanoemulsi  dibuat  dengan  metode  emulsifikasi  spontan.  Nanoemulsi  selanjutnya  diuji karakteristik fisiknya meliputi ukuran droplet, indeks polidispersitas, potensial zeta dan morfologi nanoemulsi  menggunakan  alat Transmission  Electron  Microscope (TEM).  Sediaan  tersebut selanjutnya diuji aktivitasnya terhadap Salmonella thypii . Metode yang digunakan adalah metode difusi cakram Kirby-Bauer.
Dari  uji  karakteristik  fisik  diperoleh  hasil  rata-rata  ukuran  partikel  10,6  nm,  indeks polidispersitas  0,03  dan  potensial  zeta  -36,4.  Hasil  pengamatan  menggunakan  TEM  bentuk partikel  yang dihasilkan berbentuk sferis. Hasil uji antibakteri ditunjukkan dengan terbentuknya zona hambat minyak atsiri daun kemangi (9,3 mm), kontrol positif (6,6 mm), kontrol negatif (7,5 mm),  nanoemulsi  minyak  atsiri  daun  kemangi  (8,3  mm),  dan Virgin  Coconut  Oil (7  mm). Berdasarkan  hasil  analisa  statistik  diketahui  terdapat  perbedaan  yang  tidak  bermakna  pada perlakuan antar kelompok.
Kata kunci : Daun kemangi ( Ocimum basilicum L.), Minyak atsiri, Nanoemulsi, Salmonela thypii

## Abstract
Essential oil of basil ( Ocimum basilicum L.) leaves with a concentration of 2.5% can be estimated to have a diameter of inhibition zone with an average value of 8.67 ± 0.58 mm. Essential oils have volatile characteristics, and are easily oxidized so that they can affect their antibacterial activitiesl. To increase the stability, essential oils of basil leaves need to be packaged in a special delivery system.
Nanoemulsion  is  made  by  spontaneous  emulsification  method.  Nanoemulsion  was further  tested  for  physical  characteristics  including  droplet  size,  polydispersity  index,  zeta potential and nanoemulsion morphology using a Transmission Electron Microscope (TEM). The preparation  was  then  tested  for  its  activity  against  Salmonella  thypii  using  Kirby-Bauer  disk diffusion method.
The  physical  characteristics  test  obtained  the  average  particle  size  of  10.6  nm, polydispersity index 0.03 and zeta potential -36.4. The results of the observation using TEM form the  particles  produced  are  spherical.  Antibacterial  test  results  were  shown  by  the  formation  of inhibition zones of basil leaf essential oil (9.3 mm), positive control (6.6 mm), negative control (7.5 mm), nanoemulsion of basil leaf essential oil (8.3 mm), Virgin Coconut Oil (7 mm). Based on the results of statistical analysis it was found that there were no significant differences in treatment between groups.
Key word : Basil leaves ( Ocimum basilicum L.), Essential oil, Nanoemulsion, Salmonela thypi

## PENDAHULUAN
Thypoid  fever (demam  tifoid) adalah  penyakit  yang  disebabkan karena adanya infeksi bakteri
Salmonella  typhii yang  ditandai dengan demam selama satu minggu atau  lebih,  dan  disertai  gangguan pada  saluran  pencernaan  (Widodo, 2007).  Pengobatan  utama  untuk demam tifoid adalah dengan pemberian antibiotik. Kloramfenikol merupakan antibiotik  terpilih  untuk  pengobatan demam  tifoid, tetapi pada tahun 80- an  dilaporkan  terdapat  peningkatan bakteri resisten terhadap kloramfenikol  (Lesser    dan  Miller, 2001),  hal  ini  disebabkan  karena penggunaan  antibiotik  yang  tidak rasional (Brooks.,dkk.,2002). Berdasarkan permasalahan tersebut kemudian mulai dikembangkan pengobatan menggunakan obat tradisional.  Salah  satu  tanaman yang  memiliki  khasiat  sebagai  obat adalah  daun  kemangi  ( Ocimum basilicum L.)
Menurut  Zukhruf.,dkk  (2014)
pada  hasil  uji  aktivitas minyak  atsiri kemangi terhadap S. typhii I dengan konsentrasi  2,5%;  5%;  7,5%;  10%;
15%; 25%; 35%; dan 45%, menunjukkan bahwa pada konsentrasi  terkecil  minyak  atsiri sudah menunjukkan adanya
diameter  zona  hambat  dengan  nilai rata-rata  8,67  ±  0,58  mm.  Minyak atsiri memiliki sifat mudah menguap, dan  mudah  teroksidasi  menjadi resin, sehingga dapat mempengaruhi aktivitasnya sebagai antibakteri.  Untuk  meningkatkan stabilitasnya,  maka  minyak  atsiri
perlu  dikemas  dalam  suatu  sistem penghantaran khusus.
Sistem penghantaran menggunakan  nanopartikel  telah banyak  dikembangkan.  Kelebihan sistem  penghantaran  nanopartikel adalah kemampuan untuk
menembus  ruang-ruang  antar  sel yang  hanya  dapat  ditembus  oleh ukuran partikel koloidal (Buzea.,dkk, 2007).  Kelebihan  yang  lain  adalah adanya    peningkatan  afinitas  dari sistem  karena    peningkatan  luas permukaan  kontak  pada  jumlah yang  sama  (Kawashima,  2000). Sistem  penghantaran  yang  sesuai untuk  bahan  aktif  berupa  minyak atsiri  adalah  nanoemulsi.  Konsep dari  teknologi  ini  adalah  formulasi antara minyak, surfaktan, dan kosurfaktan yang mengandung obat. Pada penelitian ini akan dilakukan formulasi nanoemulsi menggunakan  variasi  konsentrasi surfaktan dan kosurfaktan tween 80 :  PEG  400  masing-masing  10:5, 20:10, 30:15, 40:20, 50:25. Nanoemulsi  minyak  atsiri  daun kemangi  diuji  karakteristik  fisik  dan aktifitasnya  terhadap  bakteri S. typhi .  Pengujian  karakteristik  fisik yang  dilakukan  diantaranya  adalah ukuran droplet , indeks
polidispersitas,  potensial  zeta  dan morfologi permukaan nanoemulsi.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  alat  destilasi , Spektrofotometer UV-VIS, vortex,
Particle  Size  Analyzer (PZA), micro
tube ,  vial,  gelas  ukur, Transmission Electron Microscopy (TEM), petri disk . Minyak  atsiri  kemangi,  VCO, tween  80,  PEG  400,  akuades,  toluene, etil  asetat,  silika  gel  F254  nm,  kertas saring,  penampak  bercak  vanillin-asam sulfat,
1.  Determinasi Tanaman
Determinasi  tanaman  dilakukan dengan  mencocokkan  ciri-ciri  tanaman dengan kunci determinasi.

## 2.  Destilasi minyak atsiri daun kemangi
Destilasi  minyak  atsiri  kemangi dilakukan  dengan  3  perbandingan simplisia-pelarut  (1:1,  1:1,5  dan  1:2). Ditimbang daun kemangi sebanyak 250 g, ditambahkan akuades masing- masing sebanyak 250 mL, 375 mL dan 500  mL.    Ditambahkan  batu  didih, kemudian  dipanaskan  selama  4-5  jam pada suhu 70-80ºC.

## 3.  Identifikasi minyak atsiri
Identifikasi minyak atsiri
dilakukan  dengan  dua  metode  yaitu metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT) menggunakan  fase  gerak  toluene  :  etil asetat  (97:3)  dan  Kromatografi  Gas Spektrometri Massa (GC-MS).
4. Pembuatan matriks nanoemulsi
Pembuatan  nanoemulsi  diawali dengan  pembuatan  matriks,  terdiri  dari VCO, tween 80, PEG 400, dan akuades dengan
berbagai konsentrasi.
Komponen matriks nanoemulsi dinyatakan dalam Tabel I. Nanoemulsi dibuat dengan
metode  emulsifikasi  spontan  dengan menggunakan vortex. Disiapkan tabung konikal volume 25 mL,  dipipet tween 80 menggunakan  micro  pipet,  dimasukkan ke  dalam  tabung  konikal.  Ditambahkan VCO  dan  divortex  selama  dua  menit.
Campuran tersebut selanjutnya ditambahkan  PEG  400    dan  divortex selama tiga menit. Akuades ditambahkan  ke  dalam  campuran  fase minyak surfaktan dan kosurfaktan yang telah  bercampur  dan  divortex  kembali
selama sepuluh menit
5. Formulasi nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi. Pembuatan  nanoemulsi  minyak atsiri  daun  kemangi  diawali  dengan pembuatan matriks, Formulasi
nanoemulsi  yang  terpilih  berdasarkan nilai  uji  transmitan  dan  pengamatan secara  visual,  kemudian  ditambahkan minyak  atsiri  daun  kemangi.  Fase minyak  yang  terdiri  dari    minyak  atsiri daun kemangi dan VCO divortex selama dua  menit.  Surfaktan  yaitu  tween  80 ditambahkan ke dalam fase minyak dan divortex selama dua menit. Fase minyak dan  surfaktan  yang  telah  tercampur kemudian  ditambahkan  PEG  400  dan divortex  kembali  selama  dua  menit.
Akuades ditambahkan ke dalam Tabel 1. Matriks Nanoemulsi Formula matriks (%) Bahan I II III IV V VCO 1 1 1 1 1 Tween 80 10 20 30 40 50 PEG 400 5 10 15 20 25 Aqua 81,5 66,5 51,5 36,5 2,5 Total 100 100 100 100 100
campuran  fase  minyak,  surfaktan  dan kosurfaktan  divortex  selama  30  menit. Sediaan  nanoemulsi  yang  terbentuk selanjutnya dilakukan karakterisasi nanoemulsi.

## 6. Karakterisasi nanoemulsi
Formula  nanoemulsi  yang  telah dibuat kemudian dikarakterisasi meliputi ukuran  droplet,  indeks  polidispersitas dan potensial zeta menggunakan Particle Size Analyzer (Beckman Coulter). Pengukuran dilakukan dengan
cara  sampel  dimasukkan  ke  dalam kuvet dengan indeks refraksi 1,3332 dan viskositas 0,8858 cP, pada suhu 24,9 o C, kemudian  ditentukan  rata-rata  ukuran partikel,  potensial  zeta  dan  distribusi partikel pada tiga kali pengulangan.
Pengamatan morfologi nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi dilakukan menggunakan alat Transmission Electron Microscopy (TEM) dengan prosedur 1 tetes sampel dari  formula  yang  terpilih  diteteskan
pada copper  grid yang  telah  dilapisi dengan alat Auto Carbon Coated (JOEL JEC-560,  Japan).  Sampel  nanoemulsi kemudian  dibiarkan  mengering  dengan didiamkan  pada  suhu  kamar  selama  1 hari.  Sampel  yang  telah  mengering kemudian dimasukkan ke dalam holder dan  dianalisis  pada  percepatan  120  kV dengan magnifikasi 60000.
7. Uji Aktivitas antibakteri
Uji aktivitas antibakteri dilakukan terhadap  bakteri Salmonella  typhi, . Pengujian antibakteri dilakukan dengan metode disc difusi.  Cara  kerja  metode difusi  adalah  bakteri  uji  yang  telah diremajakan  diinokulasikan  kedalam Nutrient  Agar lalu  diratakan.  Ke  dalam medium yang berisi bakteri lalu
dimasukkan  kertas  cakram  diameter  6 mm  yang  telah  direndam  dengan minyak atsiri, VCO, suspensi kloramfenikol,  pembawa  nanoemulsi,
nanoemulsi  kemangi,  VCO  selama  2 menit.
Selanjutnya  disimpan  selama  24 jam  pada  suhu  37ºC  dalam  incubator, kemudian diukur diameter hambat yang terbentuk.  Masing-masing  pengujian dilakukan replikasi sebanyak 3 kali.

## HASIL DAN PEMBAHASAN 1.  Determinasi Tanaman
Hasil  determinasi  menunjukkan bahwa tanaman yang digunakan dalam penelitian ini merupakan spesies Ocimum basilicum L. 2.  Destilasi minyak atsiri daun kemangi
Destilasi minyak atsiri daun kemangi  dilakukan  dengan  metode destilasi  air  dengan  perbandingan simplisia  dan  pelarut1:1  ;  1:1,5  ;  1:2 selama  4  jam.  Semakin  lama  waktu destilasi air, maka kontak bahan dengan pelarut semakin lama dan minyak atsiri yang  dihasilkan  semakin  banyak.  Hasil proses destilasi air selama 4 jam dan 5 jam  tidak  menunjukkan  penambahan volume minyak atsiri kemangi, sehingga waktu  optimum  untuk  destilasi  air minyak  atsiri  daun  kemangi  adalah  4 jam.  Hasil  destilasi  minyak  atsiri kemangi dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2  menunjukkan  bahwa minyak  atsiri  kemangi  yang  dihasilkan dengan berbagai rasio simplisia-pelarut memiliki  organoleptis  yang  sama  tetapi jumlah  rendemen yang dihasilkan berbeda-beda.

## Tabel 2. Rendemen Minyak Atsiri Kemangi dengan Berbagai Rasio Bahan-pelarut
Pengujian Rasio Bahan Pelarut 1:1 1:1,5 1:2 Bentuk Cairan Cairan Cairan Warna Kuning Kuning Kuning Bau Khas Khas Khas Rasa Pedas Pedas Pedas Rendemen 0,24% 0,31% 0,23% Rasio bahan-pelarut 1:1,5 menunjukkan jumlah rendemen terbesar, dan berdasarkan  analisa  statistik  memiliki perbedaan  yang  signifikan  dengan jumlah  rendemen  minyak  atsiri  dengan rasio  perbandingan  simplisia-pelarut lainnya.  Hasil  destilasi  dengan  rasio bahan pelarut 1:1 dan 1:2 menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan. Rendemen minyak atsiri akan meningkat seiring dengan
bertambahnya  pelarut.  Kontak  antara pelarut dan bahan akan semakin besar, sampai larutan menjadi jenuh dan daya ekstraknya menurun (Effendi, 2014).

## 3.  Identifikasi minyak atsiri
a.  Metode KLT
Identifikasi minyak atsiri kemangi secara KLT dapat dilihat pada Tabel III dan IV Tabel III. Nilai Rf sebelum penyemprotan dengan penampang  bercak  vanillin-asam sulfat Noda Deteksi Sinar UV 254 Warna Rf 1 Ungu Tua 0,97 2 Ungu Tua 0,79 3 - - 4 - -
Tabel  3  menunjukkan  noda  yang tampak  pada  sinar  UV    254  nm
didapatkan  dua  noda  berwarna  ungu dengan Rf 0,97 dan 0,79.
Tabel 4. Nilai Rf setelah penyemprotan dengan penampang bercak vanillin-asam sulfat Noda Deteksi Penampak Bercak vanilin-asam sulfat Warna Rf 1 Ungu Tua 0,97 2 Ungu Tua 0,79 3 Ungu Tua 0,58 4 Ungu Tua 0,43
Pada  Tabel  4  menunjukkan  Noda yang tampak setelah disemprot dengan penampak  bercak  vanilin-asam  sulfat pekat  didapatkan empat noda berwarna ungu tua yaitu noda pertama didapatkan Rf  0,97;  noda  kedua  Rf  0,79;  noda ketiga  Rf  0,58;  dan  noda  keempat  Rf 0,43.
Menurut Wagner dan Bladt (1996), minyak  atsiri  daun  kemangi  dengan penampak  bercak  vanilin-asam  sulfat pekat    menghasilkan  noda  berwarna merah  violet  Rf  0,50  menunjukkan senyawa  metilkavikol,  noda  berwarna biru  Rf  0,95  menunjukkan  senyawa linalool,  dan  noda  berwarna  kuning coklat  Rf  0,47  menunjukkan  senyawa eugenol.  Berdasarkan  hasil  tersebut dapat  dilihat  bahwa  noda  dengan  Rf 0,97  yang  mendekati  Rf  linalool  yaitu
0,95  sehingga    minyak  atsiri  daun kemangi yang digunakan diduga mengandung senyawa linalool dan noda dengan  Rf  0,43  mendekati  Rf  eugenol yaitu  Rf  0,47  sehingga    minyak  atsiri daun  kemangi  yang  digunakan  diduga juga mengandung senyawa eugenol. b. Kromatografi Gas Spektrometri Massa (GC-MS) Hasil analisa GC-MS menunjukkan bahwa perbandingan rasio bahan-pelarut menghasilkan komposisi  minyak  atsiri  kemangi  yang berbeda-beda.  Minyak  atsiri  kemangi rasio  bahan-pelarut  1:1  dan  1:1,5 menghasilkan 50 komposisi, sedangkan pada rasio bahan-pelarut 1:2 menghasilkan 40 komposisi. Perbedaan rasio bahan-pelarut berpengaruh terhadap  komposisi-komposisi  minyak atsiri  yang  dihasilkan  karena  jumlah pelarut yang
berbeda dapat
mempengaruhi kemampuan mengekstrak senyawa yang terdapat di dalam minyak atsiri (Djafar, 2010). Hasil komposisi minyak atsiri dengan berbagai  rasio  bahan-pelarut  dapat dilihat pada Tabel 5. 4.  Pembuatan dan pengamatan matriks nanoemulsi Dari hasil pengamatan organoleptis dan uji transmitan
didapatkan  matrix  nanoemulsi  yang paling  stabil  adalah  pada  formula  4 dengan  konsentrasi  tween  80  sebesar 40% menunjukkan nilai transmitan yang tinggi dan stabil dari hari pertama hingga hari  kelima.  Hasil  yang  didapat  telah sesuai  dengan  Suciati  dkk.,  (2014) menyebutkan bahwa perbandingan tween  80  dengan  PEG  400  (2:1) berhasil membentuk sediaan nanoemulsi  dengan  diameter  globul yang seragam.

## Tabel 5. Komposisi Utama Minyak Atsiri Kemangi Dengan Berbagai Perbandingan Rasio Bahan-Pelarut
No Nama Senyawa Rasio Bahan Pelarut 1:1 1:1,5 1:2 1  Verbenol 28,95 34,24 - 2  Z-citral 6,93 28,14 3  Linalool 8,21 - 2,5 4  Trans-geraniol - 15,72 - 5  Geraniol - - 7,4 6  Trans-alphabisabolene - - - 7  H- benzocycloheptene,2,4a,5,6,7,8,9,9a- octahydro-3,5,5-trimethyl-9-methylene,(4aS-cis)- (CAS) 4,73 - - 8 Trans-Caryophylen 4,43 2,28 4,60 9 h-benzocyc lohepten - 3,00 - 10  6-methyl-5 hepten-2-one 4,02 2,58 - 11  Methylsulfidtiol 2,04 - - 12  Carane, 4,5 epoxy - 2,11 - 13  Carbamimidoyl - -          3,46

## 5.  Formulasi  Nanoemulsi  minyak atsiri daun kemangi
Matrix  nanoemulsi  kemudian diformulasi  dengan  minyak  atsiri  daun kemangi dan direplikasi sebanyak 3 kali Nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi dibuat  dalam  sediaan  10  mL  dengan formula pada Tabel 6.
Tabel 6. Formula nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi ( O. basilicum L.) Bahan Formula Konsentrasi Minyak atsiri daun kemangi 2,5 VCO 2 Tween 80 40 PEG 400 20 Aquadest 35,5 Nanoemulsi  minyak  atsiri  daun kemangi  yang  dihasilkan  yaitu  berupa cairan  kental,  jernih,  bau  khas  minyak atsiri, dan tidak berasa. Hasil nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi dengan  3  replikasi  dapat  dilihat  pada
Gambar 1. 6.  Karakteristik nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi Nanoemulsi  minyak  atsiri  daun
kemangi selanjutnya dikarakterisasi
menggunakan  alat Particle  Size Analyzer (PSA)  yang  meliputi  ukuran partikel,  indeks  polidispersitas,  dan
potensial  zeta.  Hasil  uji  karakteristik nanoemulsi minyak atsiri daun kemangidapat dilihat pada Tabel 7. Tabel  7.  Karakteristik  nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi Karakteristik Fisik Hasil Ukuran Partikel 10,6 Indeks Polidispersitas 0,03 Potensial Zeta -36,4 Ukuran partikel nanoemulsi penting untuk diketahui karena untuk
menentukan  laju  pelepasan  obat  dan absorpsi obat (Vilas dkk., 2014). Hasil uji pengukuran  partikel  menggunakan  alat PSA    didapatkan    sebesar  10,6  nm. Semakin  kecil  ukuran  partikel  maka proses absorpsi semakin cepat dan efek farmakologis  yang  dihasilkan  lebih cepat.  Ukuran  tersebut  sesuai  dengan teori  yang  dikemukakan  oleh  Kumar dkk.,  (2010)  bahwa  ukuran  partikel dalam  sistem  nanoemulsi  memiliki ukuran kurang dari 200 nm.
Hasil pengukuran indeks polidispersitas yaitu sebesar 0,030, hasil tersebut  menunjukkan  bahwa  partikel- partikel  di  dalam  formula  nanoemulsi minyak  atsiri  daun  kemangi  memiliki distribusi ukuran yang seragam.
Gambar 1. Formula nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi (Replikasi 1-3)
Indeks  Polidispersitas  memiliki  range nilai  dari  0  sampai  1,  ukuran  partikel dikatakan seragam apabila nilai indeks polidispersitas yang didapat mendekati angka 0 yang mengindikasikan dispersi yang homogen (Kurniawan, 2012).
Potensial  zeta  adalah  nilai    yang menunjukkan gaya tolak menolak antar partikel.  Sistem  larutan  koloid  dapat stabil  karena  adanya  gaya  tolak menolak antar partikel sehingga partikel akan sulit berdekatan
membentuk  agregat  (Jahanshahi  dan Babaei, 2008). Nilai potensial zeta lebih besar  dari +30 mV atau kurang dari   - 30  mV  biasanya  memiliki  derajat stabilitas  tinggi  (Gupta  dkk.,  2010). Pada  penelitian  ini  memberikan  hasil pengukuran potensial zeta  sebesar   - 36,4  mV.  Hasil  tersebut  menunjukkan bahwa  nanoemulsi  minyak  atsiri  daun kemangi  yang  dihasilkan  memiliki stabilitas  yang  baik  karena  memiliki nilai kurang dari  -30 mV.
Nilai negatif menunujukkan bahwa  partikel  di  dalam  sediaan nanoemulsi    sebagian  besar  memiliki muatan  negatif,  sehingga  terjadi  tolak menolak  antar  partikel. Tolak  menolak antar  partikel  membuat  sediaan  tidak
akan  cepat  mengendap  atau  tidak terjadi sedimentasi.
7.  Pengamatan morfologi nanoemulsi  minyak  atsiri  daun kemangi Pengamatan morfologi nanoemulsi menggunakan alat Transmission Electron Microscope (TEM). Hasil pengamatan menggunakan TEM menunjukkan bahwa    bentuk  partikel  nanoemulsi yang  dihasilkan  berbentuk  sferis.
Bentuk partikel nanoemulsi yang kurang  sferis  akan  mempermudah kontak antar partikel sehingga berujung pada  agregasi  (Couvreur  dkk.,  2002). Hasil  morfologi  nanoemulsi  minyak atsiri daun kemangi dapat  dilihat pada Gambar 2.
Gambar  2  menunjukkan  partikel nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi terlihat bulatan cairan yang dilapisi oleh garis tebal. Garis tebal adalah emulsifier    yang  melindungi  minyak, sedangkan  lingkaran  yang  terdapat  di dalam  garis  tebal  adalah  fase  minyak yaitu  campuran  VCO  dengan  minyak atsiri.
Metode uji antibakteri yang digunakan adalah metode difusi cakram Kirby-Bauer.
Gambar 2. Morfologi nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi
Aktivitas antibakteri ditunjukkan dengan terbentuknya hallo /zona bening disekitar  kertas  cakram.  Media  yang digunakan  adalah Nutrient  Agar (NA) yang merupakan media universal untuk pertumbuhan bakteri. Hasil uji
antibakteri  sediaan  nanoemulsi  minyak atsiri  daun  kemangi  dapat  dilihat  pada Tabel VIII. Tabel VII. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Nanoemulsi Minyak Atsiri Daun Kemangi terhadap bakteri Salmonella thypii Perlakuan Zona Hambat (mm) Minyak atsiri daun kemangi 9,3 Kontrol  positif  (Suspensi kloramfenikol) 6 Kontroll  Negatif  (Matriks nanoemulsi) 7,5 Nanoemulsi  minyak  atsiri daun kemangi 8,3 VCO 7 Tabel  VIII  menunjukkan  bahwa sediaan  nanoemulsi  minyak  atsiri  daun kemangi  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri Salmonella thypii yang dtunjukkan  dengan  terbentuknya  zona bening disekitar cakram dengan diameter  8,3mm.  Aktivitas  antibakteri sediaan  nanoemulsi  minyak  atsiri  daun kemangi  lebih  kecil  daripada  aktivitas antibakteri minyak  atsiri daun  kemangi, hal  ini  disebabkan  karena  konsentrasi minyak  atsiri  yang  terkandung  dalam nanoemulsi minyak atsiri daun kemangi lebih sedikit
karena sudah
diformulasikan  dengan  bahan  lainnya dalam nanoemulsi.
Menurut  Noriko,  dkk  (2014), VCO memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Salmonella thypi. Hasil serupa ditunjukkan pada hasil penelitian ini  yaitu  terbentuknya  zona  bening disekitar cakram sebesar 7mm. berdasarkan  hasil  analisa  statistik diketahui terdapat perbedaan yang tidak bermakna pada perlakuan antar kelompok.

## KESIMPULAN
1.  Minyak  atsiri  daun  kemangi  ( O. basilicum L.)  dapat  diformulasikan dalam sediaan nanoemulsi, dengan komponen  formula  sebagai  berikut
:  Minyak  atsiri  (2,5%),  VCO  (2%), Tween  80  (40%),  PEG  400  (20%),
Aquadest (35,5%).
2.  Karakteristik  nanoemulsi  minyak
atsiri  daun  kemangi  ( O.  basilicum L.) adalah sebagai berikut: Ukuran partikel : 10,6 nm Indeks Polidispersitas : 0,03 Potensial Zeta : -36,4 3.  Nanoemulsi  minyak  atsiri  daun kemangi memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Salmonella thypii .

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan Terima kasih kami sampaikan kepada Yayasan Bernardus sekolah-sekolah Theresiana  yang  telah membiayai penelitiasni ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Brooks GF, Butel JS, Morse SA. Dalam:
Jawetz, Melnick, 2002, penyunting    Adelberg's Medical Microbiology .  Edisi  ke-21.  New
York: Mc Graw-Hill Companies;. p.
217-21.
Buzea, C., Blandino, I.I.P., dan Robbie, K., 2007,
Nanomaterial  and  nanoparticles: sources and toxicity, Biointerphases, 2: MR170 – MR172. Couvreur,  P.,Barratt,  G.,Fattal,  E.,dan
Vauthier,  C.,2002.  Nanocapsule
Technology:  A  Review.  Critical
Reviews and Trade; in Therapeutic Drug carrier System.
Djafar,  Fitriana.,M.  Dani  Supardan,dan Asri Gani, 2010. Pengaruh Ukuran Partikel, Sfrasio Dan Waktu Proses Terhadap Rendemen Pada  Hidrodistilasi  Minyak  Jahe. Hasil Penelitian Industri 23 (2). Effendi.,VP, Simon Bambang Widjanarko, 2014. DISTILASI KARAKTERISASI  Minyak  Atsiri Rimpang Jeringau ( Acorus calamus )  Dengan  Kajian  Lama
Waktu Distilasi Dan Rasio Bahan :
Pelarut. Jurnal Pangan dan Agroindustri 2(2). 1-8. Malang. Gupta,  R.B  dan  Kompella,  U.B  (Eds.), 2006. Nanoparticle Technology for Drug Delivery, 1 Edition. Ed. CRC Press. Kawashima, Y., Yamamoto, H., Takeuchi, H.,  and Kuno, Y., 2000, Mucoadhesive DL- lactide/glycolide copolymer nanospheres coated with chitosan to improve oral delivery of elcatonin, Pharmaceutical Development  and  Technology , 5(1): 77-85. Kumar, et al. 2012. Nanotechnology as
Emerging  Tool  for  Enhancing Solubility  of  Poorly  Water-Soluble
Drugs. J  Of  BioNanoSci Vol  2:
227-250.
Lesser    CF,    Miller    S,  2001 Harrison's
principles    of  internal    medicine ,
Edisi  ke-15.  New  York:  Mc Graw Hill Companies.
Noriko.  N,  Agus  Masduki,  Rahmat Azhari,  Grariani  Nufadianti,  2014. Uji  In  Vitro  Daya  Anti  Bakterial Virgin  Coconut  Oil  (VCO)  pada
Salmonella typhi . Jurnal AL-
AZHAR Indonesia Seri Sains Dan Teknologi 2(3) 188-192.
Suciati,    T.,    Aliyandi,    A.,    Satrialdi, 2014. Development of transdermal nanoemulsion  formulation    for simultaneous    delivery    of  protein vaccine  and  artin-m  adjuvant. Int. J.Pharm. Pharm. Sci . 6: 536 –546. Vilas,  P.C.,  Gujarathi,    N.A.,    dan Bhushan, R.R., 2014. Preparasion and In Vitro Evaluation of Self- Nanoemulsifying    Drug    Delivery System    (SNEDDS)  Containing Clopidogrel. International  Journal of Pharmaceutical Science Review
and Research , 25: 10-15. Wagner, H., Bladt, S., 1996, Plant Drug Analysis:A Thin Layer Chromatography  Atlas,  Second Edition, 359, 362, 364, New York, Springer.
Widodo, D., 2007,  Demam Tifoid, Ilmu Penyakit Dalam, Edisi IV., Jakarta, Fakultas  Kedokteran  Universitas Indonesia.
Zukhruf Naelaz W. K, Ika Trisharyanti D.
K, dan Rima Munawaroh, Aktivitas antibakteri kombinasi minyak atsiri kemangi ( Ocimum  basilicum L) dengan kloramfenikol dan gentamisin  terhadap  Salmonella typhi , Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta.