## ANALISIS KOMPONEN KIMIA PADA BERBAGAI TINGKAT UMUR BUAH MENGKUDU ( Morinda citrifolia L) MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI GAS
Dalton Sumolang 1) , Julius Pontoh 2) , Jemmy Abidjulu 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Jurusan Kimia FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
The  purpose  of  this  research  is  to  know  the  difference  of  chemical  component  of  Noni  fruit (Morinda  citrifolia.  L)  at  different  level  of  different  maturity.  The  samples  consist  of  green,  unripe  and mature Noni fruit. Samples were analyzed by gas chromatography (Shimadzu GC-2014) with temperature of  column  100 ℃ then  gradually  increased  by  10 ℃ /  min  until  temperature  240 ℃ then  240 ℃ temperature  was  maintained  for  10  min.  There  are  differences  in  the  number  and  concentration  of compounds  from  raw  noni  fruit  to  mature.  Gas  chromatographic  methods  can  be  used  to  analyze chemical components in noni fruit.
Keywords : Noni Fruit,  Morinda citrifolia L, Gas Chromatography

## ABSTRAK
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  perbedaan  komponen  kimia  buah  mengkudu ( Morinda  Citrifolia L)  pada  berbagai  tingkat  kematangan  yang  berbeda.  Sampel  terdiri  dari  buah mengkudu  muda,  buah  mengkudu  mengkal  dan  buah  mengkudu  masak.  Sampel  dianalisis  dengan kromatografi  gas  (Shimadzu  GC-2014)  dengan  suhu  kolom  100 ℃ kemudian  dinaikkan  secara  bertahap dengan kenaikan 10 ℃ sampai suhu 240 ℃ selanjutnya suhu 240 ℃ dipertahankan selama 10 menit. Terdapat  perbedaan jumlah  maupun  konsentrasi  senyawa  dari  buah  mengkudu  mentah  menjadi  matang. Metode kromatografi gas dapat digunakan untuk menganalisis komponen kimia pada buah mengkudu.
Kata Kunci : Mengkudu ( Morinda citrifolia L), Kromatografi Gas

## PENDAHULUAN
Mengkudu  telah  digunakan  untuk pengobatan  oleh  orang Polynesia selama lebih  dari  2000  tahun  lalu  dan  dilaporkan mempunyai  efek  terapeutik  luas  seperti antibakteri, antivirus, antitumor, antelmintik, analgesik,  hipotensif,  anti-inflamasi  dan peningkatan  sistem  imun  (Wang et  al , 2002).
Mengkudu (Morinda  citrifolia  L .) diketahui  memiliki  banyak  manfaat  untuk kesehatan  manusia.  Efek  buah  mengkudu diantaranya sebagai antitrombolitik, antioksidan,  analgesik,  anti  inflamasi  dan aktifitas xanthine oxidase inhibitor. Mengkudu  juga  dapat  menurunkan  tekanan darah  dan  vasodilatasi  pembuluh  darah. (Ayanblu et  al ,  2011).  Sejak  dahulu  buah mengkudu banyak digunakan untuk pengobatan herbal. Diantaranya untuk mengobati  penyakit  arthritis, diabetes, tekanan  darah  tinggi  (hipertensi),  sakit kepala,  penyakit  jantung,  ulkus  lambung, arteriosklerosis,  dan  masalah  pembuluh darah. (Wang et al , 2002).
Pada  umumnya  analisis  komponen- komponen kimia dalam suatu organ tanaman memerlukan  proses  yang  cukup  rumit diantaranya harus melewati beberapa tahapan  mulai  dari  proses  ekstraksi,  isolasi senyawa sampai dengan identifikasi senyawa  kimia  berdasarkan  pengamatan pada  reaksi  kimia  seperti  mengamati perubahan  pada  warna,  bau  dan  bentuk kristalnya.  Menurut  Sindora  (Sindora et  al , 2017) bahwa golongan senyawa antrakuinon diidentifikasi
menggunakan metode ekstraksi dengan cara
maserasi
menggunakan pelarut methanol lalu dipartisi dengan  pelarut  n-heksan  dan  kloroform.
Fraksi kloroform diuji menggunakan kromatografi vacum cair (KVC), Kromatografi kolom tekan (KKT), dan KLT preparative  kemudian  diidentifikasi  dengan cara uji fitokimia.
Penggunaan  Kromatografi  gas  relatif sederhana  dan  kurang  menggunakan  bahan namun  demikian  metode  ini  mengharuskan senyawa  yang  dianalisa  dapat  diubah menjadi  gas.  Senyawa-senyawa  yang  tidak menguap  diperlukan  teknik  derivatisasi. Derivatisasi  dilakukan  untuk  mengubah suatu  senyawa  menjadi  senyawa  lain, sehingga  senyawa  tersebut  memiliki  sifat- sifat  yang  sesuai  untuk  dilakukan  analisis menggunakan GC (Gandjar  &  Rohman, 2007).
Kromatografi  Gas merupakan  teknik instrumental  yang  dikenalkan  pertama  kali pada  tahun  1950-an. Kromatografi  Gas merupakan  metode  yang  dinamis  untuk pemisahan  dan  deteksi  senyawa-senyawa organik yang mudah menguap dan senyawa- senyawa gas anorganik dalam suatu campuran.  Perkembangan  teknologi  yang signifikan dalam bidang elektronik, komputer,  dan  kolom  telah  menghasilkan batas  deteksi  yang  lebih  rendah  serta identifikasi  senyawa  menjadi  lebih  akurat melalui teknik analisis dengan resolusi yang meningkat (Settle, 1997).
Berdasarkan uraian diatas maka mendorong  penulis  melakukan  penelitian untuk  menganalisa  komponen  kimia  pada berbagai  tingkat  umur  buah  mengkudu ( Morinda citrifolia L) menggunakan Kromatografi Gas

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  ialah,  mortar dan  alu,  desikator,  stopwatch,  alat  vortex, GC  (Shimadzu  GC-2014,  centrifuge  model PLC-025,  oven  model  DHG,  mikropipet, pemanas  air  (water  bath  evaporator  model WEV-101V).
Bahan-bahan yang ialah buah mengkudu  buah    mentah,  buah  mengkal, buah masak, Methanol (pa), aqua bidestilata (pa), n-heksan (pa), N-tert- Butyl- dimethylsilyl- N -methyltrifluoroacetamide (MTBSTFA).

## Prosedur Penelitian Pembuatan Simplisia
Simplisia  Buah  mengkudu  muda, buah  mengkal  dan  buah  masak  disediakan, kemudian dipotong kecil-kecil lalu ditimbang. Setiap sampel ditimbang sebanyak  10  g.  Sampel  diletakan  di  atas cawan  porselin  kemudian  dimasukkan  ke dalam dalam oven dengan suhu 50 ℃ selama 3 hari.
Analisis Kadar Air (AOAC, 2005) .
Sebanyak  0,8g  simplisia  ditimbang secara teliti dalam cawan porselin yang telah dikeringkan dan diketahui bobotnya. Cawan kemudian  dikeringkan  dalam  oven  pada suhu 105 ℃ selama 1 jam. Cawan kemudian dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator, kemudian ditimbang. Pengeringan dilanjutkan  lagi  dan  setiap  satu  jam didingankan dan ditimbang sampai diperoleh  berat  yang  konstan.  Kadar  air dihitung dengan persamaan : Kadar air (%) =
Persiapan  Sampel    Untuk  Pengujian Kromatografi Gas
Sebanyak  100  mg  simplisia  buah mengkudu (mentah/mengkal/matang)
ditimbang  dan  diletakan  di  atas  mortar selanjutnya  tambahkan  2  mL  campuran methanol dan air (perbandingan 4:1) sampel digerus.  Pindahkan  sampel  ke  dalam  2  mL tabung  Eppendorf  dan  divorteks  selama  5 menit.    Selanjutnya  tabung  eppendorf disentrifuge  selama  15  menit.  Pindahkan 100  µL  ekstrak  ke  dalam  tabung  eppendorf yang  baru  kemudian  ditiup  dengan  gas nitrogen sampai kering. Selanjutnya ditambahkan  MTBSTFA  sebanyak  100  µL lalu  dipanaskan  dalam  evaporator  pada temperatur  50 o C  selama  1  jam  selanjutnya aquades  sebanyak  200µL  ditambahkan  lalu dikocok,  tambahkan  heksan  sebanyak  200 µL  lalu  dikocok  kemudian  di  sentrifuge kembali. Bagian atas diambil dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  eppendorf baru  selanjutnya  sampel  disuntikan  ke kromatografi gas.

## Analisis komponen kimia
Sebanyak 1 mikroliter sampel diinjeksikan  ke  dalam  kromatografi  gas. Kondisi  alat  yang  digunakan  yaitu  suhu ruang  sampel  290 ℃ ,  tekanan  ruang  injeksi /sampel  1000 .  Jenis  detektor : Flame Ionization  Detector  (FID).Suhu  detector 290 ℃ . Suhu kolom didiamkan pada temperature  100 ℃ kemudian  dinaikkan secara  bertahap  dengan  kenaikan  10 ℃ sampai  suhu  240 ℃ selanjutnya  suhu 240 ℃ dipertahankan  selama  10  menit. Kolom adalah RTX-Wax, panjang kolom 30 meter,  ketebalan  lapisan  fase  diam  0,25 Micron, diameter kolom 0,25 mm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Kadar Air Buah Mengkudu
Hasil pengujian kadar air simplisia buah mengkudu muda yaitu 1,36 %
sedangkan pada simplisia buah mengkal yaitu 0,15% dan simplisia buah masak yaitu 0,19 %. Hasil pengujian ini memenuhi persyaratan simplisia oleh Menteri Kesehatan Republik Indonesia No.661/MENKES/SK/VII/1994 bahwa kadar air simplisia standar yaitu ≤ 10%.
Hasil Kromatogram Kromatografi Gas
Hasil  analisis  Kromatografi  Gas menghasilkan  kromatogram  seperti  yang dapat  dilihat  pada  gambar  1,  2  dan  3.  Pada kromatogram  tersebut  terdapat  puncak- puncak, dimana setiap puncak mewakili satu senyawa  dalam  sampel  yang  melewati detector.  Dapat  dilihat  bahwa  senyawa dalam  semua  sampel  relatif  kecil  yang ditandai  kecilnya  tinggi  puncak  dan  luas area.
Gambar 1 . Kromatogram sampel buah mengkudu muda
Datafile Name:Mengkudu 4.gcd Sample Name:Mengkudu Sample ID:Mengkudu
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5
15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 min 0 2500 5000 7500 10000 12500 15000 17500 20000 uV SFID1 1 .9 5 6 2 .0 9 9 2 .3 6 5 2 .9 3 0 3 .4 0 1 6 .8 0 8 7 .6 2 9 9 .4 7 5 1 0 .0 8 3 1 0 .9 8 6 1 1 .6 5 8 Gambar 2 . Kromatogram sampel buah mengkudu mengkal Datafile Name:Mengkudu 5.gcd Sample Name:Mengkudu Sample ID:Mengkudu 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 min 0 2500 5000 7500 10000 12500 15000 17500 20000 uV SFID1 1 .9 6 0 2 .1 0 5 2 .3 7 8 2 .9 4 5 3 .4 2 9 6 .8 1 9 7 .6 7 2 8 .3 1 3 9 .4 4 2 1 0 .0 9 0 1 1 .6 5 6 1 3 .7 6 7 Gambar 3 . Kromatogram sampel buah mengkudu masak Datafile Name:Mengkudu 6.gcd Sample Name:Mengkudu Sample ID:Mengkudu 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 min 0 2500 5000 7500 10000 12500 15000 17500 20000 uV SFID1 1 .9 6 1 2 .1 0 9 2 .3 9 1 3 .4 1 7 3 .5 5 3 4 .1 0 1 4 .8 8 4 5 .7 1 7 6 .8 2 1 9 .4 9 1 1 0 .1 0 4 1 1 .6 5 8 1 2 .4 2 6 1 4 .0 9 1 1 4 .8 3 1
Dari kromatogram diatas (Gambar 1, 2 dan  3)  terlihat  bahwa  terdapat  11  puncak pada  sampel  buah  mengkudu  muda,  12 puncak  pada  buah  mengkudu  mengkal  dan 15  puncak  pada  buah  mengkudu  masak. Puncak  pertama  dan  kedua  adalah  pelarut dan  senyawa  derivatisasi  yang  tidak  terurai secara  baik,  kedua  senyawa  ini  mempunyai luas  area  yang  terbesar.  Namun  demikian senyawa  yang  terdapat  dalam  sampel dimulai  dari  senyawa  dengan  waktu  retensi (tR) 2.93.
Hasil analisis kromatografi gas sampel buah  mengkudu  muda,  buah  mengkudu mengkal  dan  buah  mengkudu  masak  dapat dilihat dalam Tabel 1,2 dan 3. Waktu retensi (tR) masing-masing senyawa sedikit berbeda untuk  buah  muda,  mengkal  dan  masak. Namun  demikian  perbedaan  tR  masing- masing  senyawa  relative  kecil  bervariasi dari 0.01 sampai 0.04 menit.  Senyawa  yang tertinggi  konsentrasinya  adalah  senyawa dengan  tR  9.48.  Terdapat  5  senyawa  yang
terkandung dalam ketiga tingkat kematangan buah yaitu senyawa dengan tR 3.40, tR 6.81, tR 9.4, tR 10.08, dan tR 11.69.
Kandungan  senyawa  bervariasi  pada berbagai tingkat kematangan buah. Senyawa dengan tR 3.40 tinggi  pada buah mengkudu muda  menurun  pada  buah  mengkal  dan meningkat  pada  buah  mengkudu  masak. Senyawa  dengan  tR  6.81  tinggi  pada  buah mengkudu  muda  kemudian  berkurang  pada buah  mengkal  dan  terus  berkurang  pada buah mengkudu masak. Senyawa dengan tR 9.48  mempunyai  konsentrasi  tertinggi  pada buah mengkudu mengkal kemudian berkurang  pada  buah  mengkudu  masak. Senyawa  dengan  tR  10.08  mempunyai konsentrasi  tertinggi  pada  buah  mengkal kemudian  menurun  pada  buah  mengkudu masak. Senyawa dengan tR 11.69
mempunyai  konsentrasi  tertinggi  pada  buah muda  kemudian  berkurang  pada  buah mengkal dan meningkat pada buah matang.
.
Tabel 1. Waktu retensi buah mengkudu muda     Tabel 2. Waktu retensi buah mengkudu mengkal
Tabel 3. Waktu retensi buah mengkudu masak
Pematangan  buah  termasuk  perubahan biokimia,  fisiologis  dan  struktural  yang kompleks  seperti  hidrolisis  pati,  degradasi klorofil, produksi karotenoid, antosianin dan zat  fenolik,  akumulasi  gula  dan  asam organik,  modifikasi  dalam  truktur  dan komposisi polisakarida dinding sel, perubahan  warna,  rasa  dan  tekstur  (Speirs and  Brady,  1991;  Giovannoni,  2001,  2004; Gulao  dan  Olivera,  2008;  Borsani  et  al., 2009).  Menurut  Yang et  al. (2011), kematangan meningkatkan kandungan antioksidan, total fenol dan kandungan asam askorbat  dari  buah  mengkudu,  sehingga semakin matang, kandungan total fenol pada buah mengkudu semakin besar.
Menurut  (Bouzayen  et  al,  2010) Semua  perubahan  biokimia  dan  fisiologis selama  pematangan  buah  didorong  oleh ekspresi  terkoordinasi  dari  gen  yang
berkaitan  dengan  pematangan  buah.  Gen- gen ini mengkodekan enzim yang berpartisipasi langsung dalam proses biokimia dan fisiologis.
Hal-hal  yang  dilaporkan  tersebut  di atas,  dapat  menjadi  alasan  terjadinya perubahan jenis maupun konsentrasi senyawa  pada  buah  mengkudu  mentah menjadi  matang.  Berbagai  senyawa  telah dilaporkan terdapat di dalam buah mengkudu  seperti  yang  dilaporkan  oleh (Jayaraman  et  al,  2008)  bahwa  buah mengkudu teridentifikasi mengandung beberapa  senyawa  fitokimia  yang  umum yaitu acubin, lasperuloside, alizarin, scopoletin,  antraquinon,  octoanoic  acid, terpenoid,  alkaloids,  b-sitosterol,  karotene, flavone,  caproic  acid,  caprylic  acid,  ursolic acid,  dan  proxeronine .  Namun  demikian dalam  penelitian  ini  belum  dapat  dipastikan
Presentase luas area(%) = 𝑙𝑢𝑎𝑠 𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑙𝑢𝑎𝑠 𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑥
hubungan  antara  senyawa-senyawa  tersebut dengan  senyawa  yang  terindentifikasi  oleh kromatografi gas.
Untuk memastikan jenis senyawa yang terkandung  dalam  buah  mengkudu  dan hubungan  antara  hasil  analisis  dengan senyawa-senyawa  yang  telah  dilaporkan terkandung dalam buah mengkudu memerlukan  peralatan  tambahan yaitu merupakan  gabungan  dari  alat  kromatografi gas dan spektrometri masa (GC-MS).

## KESIMPULAN
1. Terdapat  perbedaan  jumlah  maupun konsentrasi senyawa dari buah mengkudu  muda  menjadi  masak .  P ada buah  mengkudu  muda  terdapat  8 senyawa, sedangkan pada buah
mengkudu  mengkal  terdapat  9  senyawa dan  buah  mengkudu  masak  terdapat  12 senyawa.
2. Metode kromatografi gas dapat digunakan untuk menganalisis komponen kimia pada buah mengkudu.

## DAFTAR PUSTAKA
Association  of  Official  Analytical  Chemist (AOAC).  2005. Official  Methods  of Analysis  (18  Edn). Association  of Official  Analytical  Chemist  Inc. Mayland. USA.
Ayanblu  F,  Wang  MY,  Peng  L,  Nowicki  J, Anderson  G,  Nowiciki  D.  Anti thrombotic effect of morinda
citrifolia  (noni)  fruit  juice  on  the jugular  vein  thrombosis  induced  by ferric  chloride  in  male  adult  sd  rats.
Functional  Foods  in  Health  and Disease. 2011; 1(9):297-309.
Bouzayen  ,  M  .  Latché  A.,  Nath,  P.  and Pech,  J.  C.  “Mechanism  of  fruit ripening,”  in  Plant  Developmental Biology-Biotechnological Perspectives,  vol.  1,  chapter  16, Springer,  New  York,  NY,  USA, 2010.
Borsani  J,  Budde  CO,  Porrini  L,  Lauxmann MA,  Lombardo  VA,  Murray  R, Andreo  CS,  Drincovich  MF,  Lara MV  (2009).  Carbon  metabolism  of peach  fruit  after  harvest:  changes  in enzymes  involved  in  organic  acid and  sugar  level  modifications.  J. Exp. Bot. 60:1823-1837.
Gandjar,  I.  G.,  Rohman,  A.  2007. Kimia
Farmasi Analisis . Yogyakarta
:Pustaka Pelajar.
Giovannoni  J  (2001).  Molecular  regulation of  fruit  ripening.  Ann.  Rev.  Plant Physiol.  Plant  Mol.  Biol.  52:725- 749.  Giovannoni  JJ  (2004).  Genetic regulation  of  fruit  development  and ripening. Plant Cell. 16:170-180.
Gulao  LF,  Olivera  CM  (2008).  Cell  wall modification  during  fruit  ripening: when  a  fruit  is  not  the  fruit.  Trends Food Sci. Technol. 19: 4-25.
Jayaraman, Satish Kumar, Muthu Saravanan
Manoharan, Seethhalakshmi Illanchezian.  2008.  Antibacterial, Antifungal and Tumor Cell
suppression  Potential  of Morinda citrifolia Fruit Extracts. International
Journal  of Integrative  Biology 3(1): 44-49.
Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia No.661/MENKES/SK/VII/1994 Tentang Persyaratan Obat Tradisional.
Settle,  F  (Editor).  1997. Handbook  of Instrumental Techniques for Analytical  Chemistry .  Prentice  Hall
PTR. New Jersey. USA.
Sindora, G., Allimudin, A, H., Harlia. 2017.
Identifikasi Golongan Senyawa Antraquinon  Pada  Fraksi  Kloroform
Akar  Kayu  ( Morinda  Citrifolia, L). FMIPA, Universitas Tanjungpura.
Wang MY, Brett J W, C Jarakae J, Diane N,
SU Chen, AfaK Palu, Gary
Anderson. Morinda citrifolia (Noni): A  literature  review  and  recent advances  in  Noni  research  Acta Pharmacol. USA. 2002:1127-1141.
Yang,  J.,  R.  Gadi  and  T.  Thomson.  2011. Antioxidant  capacity,  total  phenol and  ascorbic  acid  content  of  noni ( Morinda citrifolia ) Fruits and leaves at  various  stages  of  maturnity. Micronesica 41 : 167-176.