STUDI HISTOLOGI PANKREAS TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus L. ) SETELAH
PEMBERIAN CUKA DARI KULIT NANAS (Ananas comosus L. Merr )
Christin Monica Hermawati * , Agung Janika Sitasiwi, Siti Nur Jannah
Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro *Corresponding author : monicahermaw@students.undip.ac.id

## Abstract
Diabetes  mellitus  is  a  metabolic  disease  that  occurs  due  to  impaired  insulin  secretion  caused  by  progressive destruction of beta cells. Pineapple peel vinegar containing acetic acid and antioxidants has the potential to help improve the structure of beta cells in the Langerhans islet. This study aims to examine the effectiveness of pineapple peel  vinegar  towards  the  histological  improvement of  Langerhans  islet  in  diabetic  rats.  Twenty-four  rats  were divided  into  6  groups,  normal  control,  positive  control  (diabetes  +  0,4  ml  apple  vinegar),  negative  control (diabetes + water), test groups dose I, II, and III (0,2 ml; 0,4 ml; 0,8 ml pineapple vinegar). The treatment group that  given  0.4  ml  pineapple  peel  vinegar  showed  improvement  in  islet's  structure  as  indicated  by  its  size  and number that close to normal. The results of the statistical analysis using Kruskal-Wallis followed by Mann-Whitney showed that the diameter of the Langerhans islet in group P2 (treated by 0,4 ml pineapple peel vinegar) was close to normal. The improved structure of the Langerhans islet resulted in a decrease in blood sugar levels by 41,63%. This percentage is still lower than the K+ group (treated by 0,4 ml apple vinegar) by 52,89%. The antioxidant activity in vinegar improves the structure of the Langerhans islet by binding to free radicals that cause damage. The acetic acid in vinegar inhibits disaccharidase activity so that it can control blood sugar levels.
Keywords : Diabetes mellitus, alloxan, pineapple peel vinegar, antioxidants, acetic acid

## PENDAHULUAN
Diabetes melitus merupakan penyakit gangguan  metabolik  menahun  akibat pankreas tidak memproduksi cukup insulin atau tubuh tidak dapat menggunakan insulin yang  diproduksi  secara  efektif.  Insulin adalah hormon yang mengatur
keseimbangan kadar gula darah. Peningkatan  konsentrasi  glukosa  di  dalam darah  (hiperglikemia)  akan  terjadi  ketika insulin  tidak  bekerja  secara  optimal (Kemenkes  RI,  2014).  Berbagai  macam obat  kimia  sintetis  banyak  dikembangkan industri  farmasi  untuk  terapi  farmakologis diabetes.  Penelitian  Putra  et  al.  (2016) membuktikan  bahwa  penggunaan  obat sintetis untuk diabetes masih memunculkan berbagai efek samping seperti hipoglikemia,
mual, pusing, tremor, muntah, dan konstipasi.  Penggunaan  cuka  untuk  terapi diabetes  sudah  cukup  banyak  diteliti  oleh para  ilmuwan  baik  di  Indonesia  maupun mancanegara. Cuka merupakan cairan yang diproduksi  oleh  bahan  yang  mengandung pati dan gula melalui dua tahap fermentasi, yaitu  fermentasi  alkohol  dan  fermentasi asam  asetat.  Asam  asetat  yang  terkandung dalam  cuka  memiliki  kemampuan  untuk memperlambat  enzim  disakaridase  dalam proses  metabolisme  karbohidrat  sehingga dapat  menurunkan  glukosa  dalam  darah (Zubaidah, 2011).
Salah satu buah yang berpotensi untuk dijadikan cuka yaitu nanas. Selain dikonsumsi sebagai buah segar, nanas juga banyak  digunakan  sebagai  bahan  baku
industri. Industri pengolahan nanas ini tiap jam  dapat  menghasilkan  limbah  sebanyak 50-65  %  atau  sebesar  15-19,5  ton  limbah. Limbah  industri  nanas  ini  kebanyakan masih  belum  termanfaatkan,  padahal  kulit nanas  mengandung  flavonoid,  alkaloid, tanin,  dan  steroid.  Kulit  nanas  juga mengandung enzim bromelin yang memiliki aktivitas anti-inflamasi, antiedematous, dan antitrombotik (Pavan et al., 2012). Berdasarkan kandungan senyawa  bioaktif  yang  dimilikinya,  kulit nanas  berpotensi  tinggi  untuk  diolah menjadi pangan fungsional (Ketnawa et al. , 2012).  Kulit  nanas  dapat  diproses  menjadi vinegar atau cuka melalui proses fermentasi. Perubahan  biokimia  yang  terjadi  selama fermentasi turut mengubah rasio komponen nutrisi dan antinutrisi
sehingga
mempengaruhi sifat produk seperti bioaktivitas  dan  kecernaan  (Zhang et  al ., 2012).
Penelitian  Zubaidah  &  Nuril  (2015) menunjukkan  bahwa  pada  tikus  percobaan kontrol  negatif  yang  diberi  diabetagon (induktor diabetes) menunjukkan degenerasi sel endokrin  yang menuju pada nekrosis sel. Kerusakan ini ditandai dengan adanya  ruang  kosong  pada  islet,  dan ketidakteraturan  bentuk  sel  (polimorf). Kerusakan  sel  endokrin  ini  menyebabkan produksi  insulin  terhambat,  sehingga regulasi  glukosa dalam tubuh pun menjadi terganggu.  Pemberian  cuka  apel  dan  cuka
salak  juga  mampu  memberikan  efek perbaikan islet Langerhans meskipun belum dapat  mengembalikan  ke  kondisi  normal. Hal  ini  ditunjukkan  dengan  penurunan presentase  nekrosis  sel  endokrin  pada pengamatan  histologi  pankreas  dengan pewarnaan Haematoxylin-Eosin.
Penelitian ini adalah menguji efektivitas  cuka  kulit  nanas  terhadap perbaikan struktur histologi islet Langerhans  tikus  putih (Rattus  norvegicus L. ) diabetes  Pemanfaatan  kulit  nanas sebagai  cuka  ini  diharapkan  bisa  menjadi alternatif  untuk  terapi  penyakit  diabetes baik  secara  represif,  maupun  kuratif. Penelitian  ini  juga  diharapkan  dapat menjadi  acuan  untuk  riset  terkait  aktivitas antidiabetes selanjutnya.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di
Laboratorium
Bioteknologi dan Laboratorium  Biologi  Struktur  dan  Fungsi Hewan,  Departemen  Biologi,  Fakultas Sains  dan  Matematika  (FSM),  Universitas Diponegoro (UNDIP). Pembuatan preparat histopatologi dilakukan Laboratorium Patologi,  Fakultas  Kedokteran  Hewan, Universitas Gadjah Mada.

## Persiapan Hewan Coba
Hewan  coba  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  tikus  putih  ( Rattus norvegicus L.)    jantan  dari  strain  Wistar dengan  bobot  ±  200  gram,  berumur  2-3
Christin Monica Hermawati et al. : Studi Histologi Pankreas Tikus Putih (Rattus norvegicus L. ) Setelah Pemberian Cuka dari Kulit Nanas (Ananas comosus L. Merr )
bulan,  dan  berada  dalam  keadaan  normal. Tikus yang digunakan dalam penelitian ini total berjumlah 24 yang telah dikondisikan diabetes dengan pemberian aloksan melalui injeksi intraperitoneal. Hewan diberi pakan dan minum secara ad libitum.

## Metode
Penelitian ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  3  (tiga) kelompok uji dan 3 (tiga) kelompok kontrol dimana  masing-masing  kelompok  terdiri dari  atas  4  (empat)  ekor  tikus.  Adapun pembagian kelompok uji dan kontrol adalah sebagai berikut.
K0  :  Kontrol  normal,  tikus  normal  tanpa perlakuan K+  :  Kontrol  positif,  tikus  diabetes  diberi 0,4 cc cuka apel K-  :  Kontrol  negatif, tikus  diabetes diberi air minum P1  :  Kelompok  Uji  Dosis  I,  tikus  diabetes diberi cuka kulit nanas dosis 0,2 cc P2 : Kelompok Uji Dosis II, tikus diabetes diberi cuka kulit nanas dosis 0,4 cc P3 : Kelompok Uji Dosis III, tikus diabetes diberi cuka kulit nanas dosis 0,8 cc Selama masa uji, dilakukan pengukuran  terhadap  kadar  gula  darah, bobot  tubuh,  konsumsi  pakan  dan  minum. Pengukuran  kadar  gula  darah  dan  bobot hewan coba dilakukan pada hari ke 0, 7, 14, 21,  dan  28    untuk  mengetahui  adanya perubahan  sebelum  dan  setelah  perlakuan.
Pakan dan minum hewan coba juga diukur dengan  mengumpulkan  dan  menimbang pakan  dan  minum  sisa  dinyatakan  dalam satuan gram (pakan) dan mililiter (minum). Pembuatan Preparat Histologi Pankreas Pembuatan  preparat  histopatologi pankreas  yang  dilakukan  meliputi  proses nekropsi, isolasi sampel, fiksasi, dehidrasi, penjernihan ( clearing ), penanaman ( embedding ), pemotongan jaringan, pewarnaan  ( staining ),  dan  pengamatan dengan mikroskop cahaya. Pankreas dipisahkan, lalu dicuci dengan menggunakan larutan fisiologis NaCl 0.9% selama 30 menit. Organ kemudian difiksasi dengan  larutan  BNF  10%  selama  minimal 24 jam. Pankreas kemudian dipotong kecil dengan  ukuran  10mmx10mmx3mm  dan diletakkan  dalam tissue  cassete .  Tahap selanjutnya  yakni  dehidrasi  dalam  seri larutan alkohol dengan konsentrasi bertingkat (70%, 80%, 90%, 95%) masing- masing selama 1 jam. Dehidrasi dilanjutkan dengan  merendam  sampel  dalam  alkohol absolut  sebanyak  2  kali,  masing-masing selama  1  jam.  Penjernihan  dilakukan dengan clearing agent xilol sebanyak 2 kali pada  larutan  yang  berbeda  selama  1  jam. Infiltrasi  parafin  dilakukan  merendam sampel menggunakan larutan paraffin cair I, II,  dan  III  dalam  oven  dengan  suhu  60 0 C masing-masing selama 1 jam (Nowacek  & Kiernan, 2010).
Pemotongan jaringan dilakukan menggunakan rotary  microtom dengan ketebalan 3-4µm. Sayatan diletakkan di atas gelas benda. Deprafinasi dilakukan dengan larutan  xilol  I,  II,  dan  III  selama  2  menit, kemudian  dilanjurkan  dengan  rehidrasi alkohol  mulai  dari  alkohol  absolut  I,  II. Rehidrasi  dilanjutkan  dengan  konsentrasi menurun  mulai  dari  95%,  90%,  80%,  dan 70%  masing  masing  selama  3  menit. Sediaan kemudian dibilas menggunakan air selama 5 menit.
Pewarnaan  menggunakan  metode Hematoksilin-Eosin dimulai dengan deparafinasi dan rehidrasi alkohol. Sediaan ditetesi dengan larutan Hematoksilin selama 4 menit, kemudian dibilas menggunakan  air  mengalir.  Pewarnaan dilanjutkan  dengan  meneteskan  pewarna Eosin  selama  5  menit,  dan  dibilas menggunakan  air.  Tahapan  selanjutnya yakni  dehidrasi  alkohol  bertingkat  (70%, 80%, 90%, 95%, absolut I, II, III) selama 5 menit.  Penjernihan  kemudian  dilakukan dengan xilol I dan II selama 2 menit. Tahap terakhir dari proses ini, yakni mounting atau penempelan  gelas  penutup  pada  sediaan dengan bantuan perekat entelan.

## Pengamatan Preparat Histologi
Pengamatan preparat histologi struktur pankreas tikus putih diabetes yang diberi perlakuan cuka kulit nanas dilakukan di  Laboratorium  Biologi  Dasar  Kampus
FSM UNDIP Semarang. Preparat
histopatologi  diamati  di  bawah  mikroskop dengan  perbesaran  200x  dan  1000x  dan dicatat perubahan mikroskopik yang ditemukan  pada  5  (lima)  bidang  pandang yang  dipilih  secara  acak.  Parameter  yang diamati  ialah  jumlah  dan  diameter  islet Langerhans  serta  presentase  degenerasi serta nekrosis sel beta pankreas.
Data hasil penelitian kemudian dikumpulkan  dan  diuji  normalitasnya dengan  uji  Kolmogorov-Smirnov  dan homogenitasnya  dengan  uji  Levene.  Uji statistik  One  Way  Anova  pada  taraf kepercayaan 95% dilakukan untuk menganalisis  data  bobot  pankreas  dan jumlah  islet  Langerhans.    Data  diameter islet  Langerhans  dianalisis  dengan  uji Kruskal-Wallis  H  karena  tidak  memenuhi asumsi homogenitas. Uji Kruskal-Wallis H untuk  melihat  apakah  terdapat  perbedaan pada  setiap  perlakuan.  Uji  Mann-Whitney U dilanjutkan untuk menunjukkan kelompok mana yang memberikan perbedaan paling signifikan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Cuka  kulit  nanas  yang  diberikan kepada  hewan  coba  yakni  cuka  yang diproduksi dengan penambahan gula sebesar  2%.  Cuka  tersebut  memiliki  kadar asam asetat sebesar 1.42%. Uji antioksidan terhadap cuka yang digunakan menunjukkan  nilai  rata-rata  %  inhibisi sebesar 51,46% (data tidak dipublikasikan).
Christin Monica Hermawati et al. : Studi Histologi Pankreas Tikus Putih (Rattus norvegicus L. ) Setelah Pemberian Cuka dari Kulit Nanas (Ananas comosus L. Merr )
Gambar 1. Histologi Pankreas Tikus Normal dan Diabetes Pre-treatment
Keterangan : A. Histologi pankreas tikus normal pada perbesaran 400x; B. Histologi pankreas tikus diabetes menunjukkan nekrosis sel asinar. Tidak ditemukan islet Langerhans; C. Sel asinar pada tikus normal, perbesaran 1000x; D. Pembengkakan sel asinar pankreas dan nekrosis jaringan
Sel Beta       Sel asinar normal       Sel asinar mengalami onkosis
Piknosis sel asinar       Kariolisis sel asinar
Pengamatan  histologi  pada  preparat pankreas  tikus  normal  dan  tikus  diabetes pre-treatment menunjukkan  struktur  yang berbeda seperti pada Gambar 1. Berdasarkan  hasil  pengamatan  tampak pada  perbesaran  400x  islet  Langerhans ditemukan  pada  pankreas  tikus  normal. Komposisi islet tampak kompak dan berisi banyak  sel  endokrin.  Sementara  itu, pengamatan  pankreas  yang  diinduksi aloksan pada perbesaran 400x menunjukkan  komponen  eksokrin  pada pankreas mengalami nekrosis. Berdasarkan pernyataan  Pringgoutomo  (2002)  jaringan nekrotik  seluruhnya  berwarna  kemerahan,
tidak  mengambil  zat  warna  hematoksilin, sering  pucat  apabila  diamati  secara mikroskopis.  Seluruh  sel  asinar  yang tampak  pada  perbesaran  1000x  tampak mengalami onkosis atau pembengkakan sel yang  menunjukkan  tahap  awal  nekrosis pada sel. Suarsana et al. (2010) menjelaskan  bahwa  pada  induksi  diabetes eksperimental menggunakan aloksan menyebabkan  nekrosis  pada  40-50%  sel beta pankreas. Jumlah sel beta menunjukkan penurunan secara nyata pada kondisi diabetes derajat sedang, sedangkan pada  diabetes  parah  sel  beta  bahkan  tidak ditemukan.
Tabel 1. Jumlah dan Diameter Langerhans
Kelompok Perlakuan Σ Islet Langerhans (Mean ± SD) Diameter Langerhans (Mean ± SD) K0 9,5±1,732 123,996 * ±7,114 K+ 6±3,367 83,605±13,391 K- 4,5±2,082 65,232±23,127 P1 8±1,633 86,744±8,544 P2 6,5±2,646 89,531 * ±38,751 P3 6,75±3,202 56,435±3,202
Keterangan :  Tanda * menunjukkan kemiripan dengan  nilai signifikansi paling besar  berdasarkan Uji Kruskall-Wallis H dan Mann- Whitney U (taraf nyata 95%
Kerusakan yang terjadi pada pankreas tikus pre-treatment setelah  injeksi  aloksan menunjukkan  kerusakan  seperti  pada Gambar  1.B dan Gambar  1.D .  Aloksan mengahasilkan Reactive  Oxygen Species (ROS)  yang  terakumulasi  pada  transporter glukosa 2 ( GLUT2 ) (Rohilla & Ali, 2012).
ROS akan memicu autofagi, apoptosis dan nekrosis  sel.  Kondisi  stres  oksidatif  ini mengakibatkan stres pada retikulum endoplasma (RE) dan destabilisasi lisosom yang  menstimulasi  nekrosis  sel  (Ghorbani et al., 2019).
Islet  Langerhans  paling  banyak ditemukan  pada  perlakuan  kontrol  (K0), diikuti kelompok uji dosis I (P1), kelompok uji dosis III (P3), kelompok kontrol positif (K+), dan kelompok uji dosis  II (P2).  Islet Langerhans  paling  sedikit  ditemukan  pada kelompok kontrol negatif (P1). Berdasarkan analisis ANOVA yang dilakukan pada taraf kepercayaan  95%  menunjukkan  bahwa tidak ada perbedaan bermakna jumlah islet Langerhans antar masing-masing perlakuan.
Kelompok  kontrol  memiliki  rerata ukuran  islet  Langerhans  paling  besar disbanding  kelompok  perlakuan  yang  lain dengan rerata diameter 123,996±7,114 µm. Kelompok  uji  dosis  II  (P2)  tampak  pula memiliki  islet  Langerhans  paling  besar dibandingkan kelompok tikus diabetes yang lain  (K+,  K-,  P1  dan  P3).  Uji  Mann- Whitney  menunjukkan  nilai  signifikansi paling besar antara kelompok kontrol (K0) dan  kelompok  uji  dosis  II  (P2).  Hasil analisis ini menunjukkan bahwa pemberian cuka dengan dosis 0,4 ml (P2) memberikan dampak terhadap regenerasi islet Langerhans  yang  ditunjukkan  dengan ukuran islet Langerhans mendekati normal.
Berdasarkan  data  penelitian,  dapat dijelaskan bahwa pada tikus kontrol normal (K0)  ditemukan  banyak  islet  Langerhans berukuran  besar.  Islet  Langerhans  pada kontrol positif (K+) dan kelompok uji dosis II (P2) juga ditemukan dalam jumlah cukup banyak  dan  berukuran  besar  (rerata diameter > 80µm).
Christin Monica Hermawati et al. : Studi Histologi Pankreas Tikus Putih (Rattus norvegicus L. ) Setelah Pemberian Cuka dari Kulit Nanas (Ananas comosus L. Merr )
Gambar 2. Histologi Pankreas Tikus setelah Pemberian Cuka Kulit  Nanas 1,42%
Keterangan : Perbesaran 1000x K0 menunjukkan histologi islet Langerhans normal; K+ regenerasi islet Langerhans oleh cuka apel 0,4 ml; K- vakuolisasi dan fragmentasi islet  Langerhans akibat diabetes (K-); P1 vakuolisasi islet Langerhans masih ditemukan pada uji dosis I; P2 regenerasi islet Langerhans menyerupai kontrol positif; P3 fragmentasi masih ditemukan pada uji dosis III
Sel Beta Normal       Vakuolisasi      Fragmentasi         Piknotis       Karioreksis
Suarsana  (2010)  menjelaskan  bahwa pada  tikus  diabetes  derajat  sedang, ditemukan  hampir  67%  pulau  Langerhans berdiameter kurang dari 150 μm, sedangkan pada tikus normal jumlah pulau Langerhans yang berdiameter lebih dari 150 μm sekitar 50%. Selain terjadi perubahan pada ukuran, dan  bentuk  juga  terjadi  fragmentasi  pulau Langerhans.  Farid  (2014)  mejelaskan bahwa perubahan ini diduga terjadi karena glukotoksisitas  pada  sel  beta  pulau
Langerhans yang
menyebabkan menurunnya massa selnya.
Berdasarkan hasil pengamatan histologi  pada  masing-masing  perlakuan, tampak  bahwa  kondisi  islet  Langerhans pada  kelompok  K+  dan  P2  mengalami regenerasi menuju normal. Kedua kelompok ini menunjukkan perbaikan islet
Langerhans  oleh  aktivitas  dari  cuka  kulit nanas. Pankreas K- tampak paling rusak di antara  yang  lain,  walaupun  di  dalamnya masih  terdapat  sel  beta  dan  sel  endokrin lainnya  yang  tampak  normal.  Vakuolisas dan  fragmentasi tampak  jelas pada gambaran  histopatologi  pankreas  K-. Kelompok  P1  dan  P3  menunjukkan histopatologi  pankreas  yang  belum  pulih, dikarenakan masih terdapat fragmentasi dan tampak  beberapa  sel  yang  mengalami nekrosis. Suarsana et al. (2010) menjelaskan  bahwa  pada  kondisi  diabetes akibat induksi aloksan dapat menyebabkan nekrosis,  degenerasi,  infiltrasi  fibrosa, vakuolisasi, hingga insulitis.
Aktivitas  senyawa  bioaktif  dalam cuka  seperti  antioksidan  dan  asam  asetat berperan dalam regenerasi sel beta pankreas.
Hamidatun  (2014)  menyatakan  bahwa perbaikan sel  beta pankreas  terkait dengan aktivitas antioksidan yang terkandung pada cuka  buah.  Antioksidan  mampu  mengikat radikal bebas  penyebab  kerusakan sel  beta pankreas  dan  menghambat  kerusakan  sel beta pankreas sehingga sel beta yang tersisa masih tetap berfungsi. Metabolisme glukosa  akan  kembali  normal  seiring dengan perbaikan fungsi sel beta.
Kandungan flavonoid dan asam asetat pada  cuka  kulit  nanas  berperan  sebagai penangkal radikal bebas (ROS) yang akibat paparan aloksan. Widowati (2008) menyatakan  bahwa  pemberian  komponen senyawa  polifenol,  termasuk  flavonoid dapat  menangkap  radikal  bebas  dan mengurangi stres oksidatif akibat pemberian  aloksan.  Senyawa  flavonoid mampu  memperbaiki  dengan  berbagai mekanisme, salah satunya dengan meningkatkan  enzim  katalase  yang  akan memecah  hidrogen  peroksida  menjadi oksigen dan air yang tidak berbahaya untuk sel  dan  pertumbuhan  sel.  Aktivitas antioksidan  juga  turut  mempengaruhi  laju proliferasi sel beta (Wang & Wang, 2017).
Penambahan senyawa flavonoid pada sel  juga  dapat  mengurangi  jumlah  ROS sehingga  dapat  membantu  mengembalikan integritas sel dan menambah viabilitas suatu sel  (Patel,  2008).  Semakin  baik  struktur histologis pankreas diduga karena senyawa flavonoid  yang  terkandung  bahan  pangan
mampu  mengikat  dan  mengurangi  jumlah ROS,  penyebab  nekrosis  pada  sel  beta pankreas.  Mekanisme  flavonoid  melawan radikal  bebas  yakni  dengan  menekan pembentukan  ROS,  mengikat  ROS,  dan meningkatkan  regulasi  atau  perlindungan pertahanan antioksidan. Flavonoid mengikat  ROS  dengan  menyumbangkan atom  hidrogren  dan  elektronnya  untuk radikal hidroksil, peroksil, dan peroksinirit. Flavonoid  menekan  pembentukan  ROS dengan menghambat aktivitas enzim superoksida  dismutase  yang  terlibat  dalam pembentukan  ROS  (Kumar  &  Pandey, 2013).
Hasil  pengukuran  gula  darah  setiap minggu selama 28 hari perlakuan menunjukkan  penurunan  pada  kelompok K+,  K-,  P2,  dan  P3.  Presentase  penurunan gula  darah  terbesar  terjadi  pada  kelompok kontrol  positif  (K+)  yang  diberi  cuka  apel sebanyak  0,4  ml  sebesar  52,89%.  Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  potensi  cuka kulit  nanas  1,42%  dengan  dosis  0,4  ml memiliki  efektivitas  dalam  menurunkan gula darah hampir setara dengan cuka apel.
Cuka  kulit  nanas  1,42%  memiliki kandungan  utama  asam  asetat  sebagai produk  hasil  fermentasi.  Hasil  penelitian dari  Ogawa  (2002)  memperkuat  asumsi tersebut.  Asam  asetat  mampu  menurunkan aktivitas enzim glikosidase. Enzim glikosidase berperan menghidrolisis disakarida menjadi monosakarida pada usus
Christin Monica Hermawati et al. : Studi Histologi Pankreas Tikus Putih (Rattus norvegicus L. ) Setelah Pemberian Cuka dari Kulit Nanas (Ananas comosus L. Merr )
halus. Mitrou et al. (2015) menjelaskan pula bahwa  asam  asetat  menghambat  glikolisis. Sebaliknya, asam asetat mendorong sintesis glikogen  yang  dibuktikan  dengan  adanya akumulasi glukosa-6-fosfat karena penekanan glikolisis.

## KESIMPULAN
Pengujian  aktivitas  antidiabetes  cuka kulit  nanas  dengan  dosis  0,4  ml  mampu memperbaiki histopatologi islet Langerhans yang  ditunjukkan  dengan  rata-rata  jumlah serta diameter islet yang mendekati normal.

## DAFTAR PUSTAKA
Farid M, E Darwindan & D Sulastri. 2014. Pengaruh hiperglikemia terhadap gambaran histopatologis pulau langerhans  Mencit. Andalas  Journal of Health, 3(3): 420-427.
Ghorbani A, R Rashidi & R Shafiee-Nick.
2019.  Flavonoids  for  preserving pancreatic  beta  cell  survival  and function:  A  mechanistic  review.
Biomedicine  and  Pharmacoterapy. 111: 947-957.
Hamidatun H. 2014 . Efek pemberian cuka
Salak (Salacca  vinegar )  terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  dan histopatologi  pankreas  Tikus  Wistar Jantan diabetes mellitus yang diinduksi dengan Streptozotocin
(STZ). Prosiding Elektronik (e- Proceedings) PIMNAS.
Kemenkes  RI.  2014.  InfoDATIN  :  Situasi dan analisis diabetes melitus . Jakarta:
Pusat Data dan Informasi Kementrian Kesehatan RI.
Ketnawa  S,  P  Chaiwut  &  S  Rawdkuen,
2012. Pineapple  wastes:  A  potential source for bromelain extraction. Food
and  Bioproducts  Processing ,  90(3):
385–391.
Kumar  S  &  Pandey  AK.  2013.  Chemistry and biological activities of flavonoids: An  overview. The  Scientific  World Journal . 2013: 162750.
Lenzen S. 2008. The mechanisms of alloxan- and treptozotocin-induced diabetes. Diabetologia. 51, 216–226. Mitrou P, E Petsiou & E Papakonstantinou. 2015. Vinegar consumption increases insulin-stimulated  glucose  uptake  by the  forearm  muscle  in  humans  with Type 2 Diabetes. Journal of Diabetes Research , 2015.
Nowacek  JM  &  JA  Kiernan.  2010.
Education guide special stains and H & E 2 nd Edition . California: Daco. Ogawa  NH,  H  Satsu,  M  Watanabe,  Y
Fukaya,Y  Tsukamoto,  M  Miyamoto &  Shimizu.  2002.  Acetic  acid suppresses the increase in disaccharidase  activity  that  occurs during culture of Caco-2 cells. J Nutr, 130: 507–513.
Patel JM. 2008. A review of potential health benefits  of  flavonoids. Lethbridge Undergraduate Res . Journal , 3: 2.
Pavan  R,  S  Jain,  Shraddha  &  A  Kumar.
2012.  Properties  and  therapeutic application of bromelain: a review. Biotechnology research international , 2012 , 976203.
doi:10.1155/2012/976203.
Pringgoutomo  S,  S  Himawan  &  A  Tjarta.
2002. Buku  ajar patologi  I .  Jakarta: Sagung Seto.
Putra,  RJS,  A  Anisyah  &  RP  Hananditia.
2017. Kejadian efek samping potensial  terapi  obat  anti  diabetes pasien diabetes  melitus berdasarkan algoritma  naranjo. Pharmaceutical Journal Of Indonesia, 2(2): 45–50. Rohilla A & S Ali. 2012. Alloxan induced diabetes:  Mechanisms  and  effects. International  Journal  of  Research  in Pharmaceutical and Biomedical Sciences, 3(2): 819-823.
Suarsana IN, BP Priosoeryanto, M Bintang
&  T  Wresdiyat.  2010.  Profil  glukosa
darah  dan  ultrastruktur  sel  beta pankreas tikus yang diinduksi senyawa aloksan . JITV , 150: 118-123.
Wang J & H. Wang.  2017. Oxidative stress
in pancreatic beta cell regeneration . Oxidative Medicine and Cellular Longevity , 2017. https://doi.org/10.1155/2017/1
930261 . Widowati  W.  2008.  Potensi  antioksidan sebagai antidiabetes. Jurnal Kesehatan Masyarakat , 7: 1-10.
Zhang Z, Lv G, H Pan, L Fan, CR Soccol &
A  Pandey.  2012.  Production  of powerful antioxidant supplements via
solid-state  fermentatin  of  wheat ( Triticum aestivum Linn.) by cordyceps militaris. Food Technology and Biotechnology, 50(1): 32-39.
Zubaidah E & I. Nuril. 2015. Efek cuka apel dan  cuka  salak  terhadap  penurunan glukosa  darah  dan  histopatologi pankreas  Tikus  Wistar  diabetes. Jurnal Kedokteran Brawijaya, 28(4): 297-301.
Zubaidah  E.  2011.  Pengaruh  pemberian cuka  apel  dan  cuka  salak  terhadap kadar glukosa darah Tikus Wistar  15. yang  diberi  diet  tinggi  gula. Jurnal Teknologi Pertanian , 12(3):163-169.