ISOLASI  DAN  IDENTIFIKASI  BAKTERI  PADA  BENIH  IKAN KERAPU  CANTANG  ( Epinephelus sp .) DARI  KOLAM  PENDEDERAN BALAI PERIKANAN  BUDIDAYA AIR PAYAU (BPBAP) SITUBONDO, JAWA TIMUR
Isolation  and  Identification  Bacteria  on  the  Seeds  Cantang  Grouper  ( Epinephelus sp .) From Nursery Pond at Fisheries Center Brackish Water Aquaculture, Situbondo, East Java
Dahlia 1 *, Hari Suprapto 2 dan Rahayu Kusdarwati 2 1 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya
2 Departemen Manajemen Kesehatan Ikan dan Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Airlangga, Surabaya *dahlialia951@gmail.com

## Abstrak
Usaha  budidaya  ikan  kerapu  mempunyai  prospek  yang  cukup  baik  untuk  dikembangkan. Perkembangan produksi ikan kerapu cantang ( Epinephelus sp.) menunjukkan kinerja yang cukup baik dengan peningkatan  produksi  rata-rata  dari  tahun  2010-2014  sebesar  9,61%.  Kendala  yang  sering  dihadapi  pada kegiatan  budidaya  ikan  kerapu  adalah  terjadinya  serangan  bakteri,  salah  satunya  bakteri  patogen.  Serangan bakteri  patogen  menimbulkan  penurunan  kualitas  dan  tingkat  produksi  pada  usaha  pembenihan  maupun pendederan ikan kerapu, bahkan kematian serta kegagalan panen dapat terjadi. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei-Juni 2016. Penelitian dilakukan di laboratorium Kesehatan dan Lingkungan BPBAP Situbondo dan di Laboratorium Bakteri Balai Karantina Ikan Kelas I Juanda, Surabaya. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui jenis bakteri pada benih ikan kerapu cantang di kolam pendederan BPBAP Situbondo . Metode yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  observasi.  Observasi  yaitu  melakukan  pengamatan  secara langsung  ke  objek  penelitian  untuk  melihat  dari  dekat  kegiatan  yang  dilakukan.  Data  yang  diperoleh  dari penelitian  isolasi  dan  identifikasi  bakteri  pada  benih  ikan  kerapu  cantang  dianalisis  secara  deskriptif  dan disajikan  dalam  bentuk gambar  dan  tabel.   Hasil  dari  penelitian  ini  menunjukkan   adanya  bakteri pada  benih ikan  kerapu  cantang  dari  kolam  pendederan  Balai  Perikanan  Budidaya  Air  Payau  (BPBAP)  Situbondo,  Jawa Timur  yaitu  bakteri Vibrio  alginolitycus,  Vibrio  harveyi dan Streptococcus  iniae. Faktor  terbesar  yang mempengaruhi tertularnya bakteri pada benih ikan kerapu cantang antara lain adanya agen patogen dari pakan ikan rucah yang kualitasnya kurang bagus serta sifat kanibalisme ikan yang menyebabkan luka di permukaan tubuh ikan sehingga bakteri mudah masuk ke tubuh ikan dan menimbulkan infeksi.
Kata Kunci: Isolasi, Identifikasi, Bakteri, Benih, Epinephelus sp.

## Abstract
The  cultivation  of  grouper  have  good  prospects  for  development.  Production  development  cantang grouper ( Epinephelus sp.) showed a good performance with an increase in average production from 2010-2014 amounted  to  9.61%.  often  mistake  encountered  on  grouper  aquaculture  is  the  attack  bacteria,  one  of  which pathogenic bacteria. The attack pathogenic bacteria cause a decrease in the quality and level of production at the hatchery  and  nursery  businesses  grouper,  as  well  as  crop  failure  and  even  death  can  occur.  This  study  was conducted in May-June 2016. The study was conducted in the laboratory of Health and Environment BPBAP Situbondo and in laboratory bacteria Fish Quarantine Class I Juanda, Surabaya. The purpose of this study was to know  kind  bacteria  on  the  seeds  cantang  grouper  from  nursery  pond  at  fisheries  center  brackish  water aquaculture, Situbondo. The method used in this research is an observation method. Observation  is a research direct to the object for a close look at the activities undertaken. The data obtained from the study of isolation and identification  of  bacteria  on  the  seed  grouper  cantang  analyzed  descriptively  and  presented  in  the  form  of images and tables. The results of this study indicate the presence of bacteria on the seed cantang grouper fish at nursery  pond  At  Fisheries  Center  Brackish  Water  Aquaculture,  Situbondo,  East  Java  is Vibrio  alginolitycus , Vibrio harveyi and Streptococcus iniae . The biggest factor affecting the transmission of bacteria on the seeds of grouper cantang among others feeding trash fish quality is not good and cannibalistic nature of fish that causes sores on the body surface of the fish so that the bacteria easily enter the body of the fish then infect it.
Keywords: Isolation, Identification, Bacteria, Brood, Epinephelus Sp.

## PENDAHULUAN
Ikan  kerapu  merupakan  salah  satu komoditas unggulan budidaya di Indonesia disamping  tiga  komoditas  lainnya  seperti udang, ikan nila, dan rumput laut. Produksi ikan  kerapu  pada  tahun  2010-2014 menunjukkan  kenaikan  produksi  rata-rata per  tahun  sebesar  9,61%.  Kementerian Kelautan  dan  Perikanan  pada  tahun  2014 menargetkan  volume  produksi  budidaya sebesar  16,8  juta  ton,  dalam  hal  ini Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan mengadakan penyediaan benih ikan kerapu yang  bermutu  di  Unit  Pelaksana  Teknis dan  Unit  Pembenihan  Skala  Rumah Tangga (KKP, 2014).
Salah  satu  inovasi  teknologi  dari Unit  Pelaksana  Teknis  dan  Direktorat Jenderal Perikanan Budidaya adalah meng- kawinsilangkan  (hibridisasi)  ikan  kerapu macan  ( Epinephelus  fuscoguttatus )  dan ikan kerapu kertang ( Epinephelus lanceolatus) menghasilkan  benih  hibrida ikan kerapu cantang di Balai Budidaya Air Payau  Situbondo.  Benih  hibrida  ikan kerapu  cantang  menambah  diversifikasi spesies serta mempunyai prospek budidaya yang  berpeluang  untuk  meningkatkan produksi  perikanan.  Pemantapan  produksi benih  hibrida  ikan  kerapu  cantang  sangat diperlukan untuk menghasilkan benih yang mempunyai  kuantitas  dan  kualitas  yang baik  dan  pada  akhirnya  diharapkan  dapat membantu  kebutuhan  benih  pada  kegiatan budidaya (Ismi dkk., 2013).
Kendala yang sering dihadapi pada kegiatan  budidaya  ikan  kerapu  adalah  ter- jadinya serangan bakteri. Serangan bakteri dapat  menimbulkan  penurunan  tingkat kuantitas dan kualitas produksi pada usaha pembenihan  maupun  pendederan  ikan kerapu,  bahkan  kematian  serta  kegagalan panen  dapat  terjadi  (Hatmanti,  2008). Salah  satu  contoh  benih  ikan  kerapu cantang  yang  pernah  mengalami  kematian berada  di  kolam  pendederan  BPBAP Situbondo . Kematian  benih  tidak  terjadi secara  massal  namun  terjadi  secara
bertahap  dan  terus-menerus  dalam  hal  ini sangat  merugikan  budidaya  dalam  kolam pendederan.  Kematian  benih  ikan  kerapu juga  terjadi  pada  Balai Sea  Farming di Perairan  Pulau  Semak  Daun  dan  Karang Congkak Kepulauan Seribu, Jakarta bahwa benih  ikan  kerapu  yang  didederkan terinfeksi  penyakit  dengan  gejala  klinis adanya  borok  pada  tubuh,  penggeripisan ekor  serta  warna  kulit  yang  memutih  dan menyebabkan  kematian  mencapai  80% dari total populasi.
Ikan  budidaya  sangat  rentan  terha- dap  infeksi  mikroorganisme  patogen seperti  virus,  bakteri,  jamur  dan  parasit. Menurut  Shickney  (2000)  bakteri  yang pernah  ditemukan  pada  golongan  ikan kerapu adalah Vibrio sp, S treptococcus sp dan Flexibacter sp. Pengendalian penyakit bakteri  pada  budidaya  ikan  kerapu  dapat dilakukan dengan mengetahui jenis bakteri yang menyerang pada ikan. Salah satu cara untuk  mengetahui  jenis  bakteri  apa  saja yang  menyerang  pada  budidaya  ikan kerapu  adalah  dilakukannya  identifikasi bakteri.

## METODOLOGI Waktu dan Tempat
Penelitian ini telah dilaksanakan di laboratorium  Kesehatan  dan  Lingkungan BPBAP  Situbondo  dan  di  Laboratorium Bakteri  Balai  Karantina  Ikan  Kelas  I Juanda,  Surabaya  pada  bulan  Mei-Juni 2016.

## Materi Penelitian
Peralatan Penelitian
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini antara lain alat tulis, nampan, cawan petri, tabung reaksi, jarum ose , cool box , objek  glass ,  erlenmeyer,  gelas  ukur, timbangan analitik, magnetis stirer , mikro- skop,  kertas  label,  kapas,  tisu, paper oxsidase,  aluminium  foil,  sectio  set ,  spa- tula,  bunsen,  oven, autoclave , laminar  air flow, inkubator  dan refrigerator. Alat untuk  pengukuran  kualitas  air  meliputi  :
Disetujui/ accepted: 15 Maret 2017
pH meter, DO meter, termometer, refrakto- meter.
Bahan Penelitian Bahan-bahan  yang  digunakan  da- lam penelitian ini adalah benih ikan kerapu cantang,  alkohol  70%,  media  TSA  2%, media TSIA ( Triple Sugar Iron Agar), LIA ( Lysine  Iron  Agar ),  MIO (Motility  Indol Ornitin), O/F ( Oksidatif/Fermentatif), MR- VP, Simmons  Citrate ,  media  selektif, media  gula  (glukosa,  laktosa,  sukrosa, maltosa,  arbinosa,  manitol,  dan  inositol), antibiotik novobiocin 30  mg, larutan perioksida  3%, Methyl  Red, KOH  40%, minyak  imersi,  serta  bahan  uji  pewarnaan Gram  (crystal  violet,  lugol,  alkohol  95%, safranin dan aquades).

## Metode Penelitian
Dalam  penelitian  ini  meggunakan metode  observasi.  Observasi  yaitu  mela- kukan  pengamatan  secara  langsung  ke objek  penelitian  untuk  melihat  dari  dekat kegiatan  yang  dilakukan  (Susanti,  2010). Observasi  dalam  penelitian  ini  dilakukan terhadap  berbagai  hal  yang  berhubungan dengan isolasi dan identifikasi bakteri pada benih  ikan  kerapu  cantang  dari  kolam pendederan BPBAP Situbondo.

## Prosedur Kerja
Dalam  penelitian  ini  pengambilan sample  ikan  menggunakan  metode purpo- sive sampling. Metode purposive sampling yaitu  mengambil  sampel  sesuai  dengan karakteristik yang ditentukan oleh peneliti. Benih  ikan  yang  dijadikan  sampel  meru- pakan  ikan  yang  memiliki  panjang  8,8-11 cm  sebanyak  20  ekor  dan  menunjukkan gejala  terinfeksi  bakteri  seperti  tubuh lemah,  timbul  borok,  bercak  merah ( erythema )  pada  pangkal  sirip,  mata menonjol  ( exophthalmia), pendarahan ( hemorrhage )  pada  insang,  mulut  dan tubuh.
Mengisolasi  bakteri  dilakukan  di dalam laminary  air  flow dengan  sumber isolat  adalah  permukaan  kulit  ikan  dan ginjal.  Isolasi  dilakukan  dengan  mengam-
bil  lendir  di  luka  pada  permukaan  kulit ikan menggunakan jarum ose steril kemu- dian  menggoreskan  ke  media  TSA  2% secara  zig  zag.  Hasil  isolasi  bakteri diinkubasi  pada  suhu  antara  26-30ºC selama 24-48 jam.
Pemurnian  bakteri  dilakukan  de- ngan  mengambil  bakteri  yang  terdapat pada  media  yang  memililiki  bentuk, warna,  dan  ukuran  koloni  yang  seragam kemudian  menginokulasi  berulang  pada media tumbuh bakteri (media TSA 2%).
Pengamatan  morfologi  koloni  bak- teri dilakukan setelah mendapatkan biakan murni.  Pengamatan  morfologi  koloni  bak- teri dengan melihat warna, bentuk, tepian, permukaan  koloni  (elevasi)  secara  lang- sung dari media tumbuh bakteri.
Pewarnaan  Gram  merupakan  salah satu teknik identifikasi bakteri yang sangat penting  dalam  menentukan  jenis  bakteri. Prosedur  pewarnaan  bakteri  yaitu  mem- buat ulasan bakteri pada objek glass kemu- dian  dikeringkan  dengan  cara  difiksasi diatas  api.  Kemudian  di  lakukan  pewar- naan  dengan  larutan  kristal  violet,  larutan lugol,  alkohol  95%  dan  safranin.  Preparat yang  sudah  kering  kemudian  ditetesi  de- ngan  minyak  imersi  untuk  diamati  meng- gunakan  mikroskop  dengan  perbesaran 1000x.
Uji  biokimiawi  merupakan  suatu cara  yang  dilakukan  untuk  mengetahui reaksi  kimia  yang  terjadi  di  dalam  tubuh mikroorganisme.  Hasil  uji  biokimiawi dapat  digunakan  untuk  mengidentifikasi suatu  mikroorganisme.  Menurut  (Buller, 2004)  uji  biokimiawi  yang  dipakai  dalam kegiatan identifikasi bakteri antara lain: uji katalase, oksidase, O/F, MIO, TSIA, gela- tin, LIA, MR-VP, Citrate dan uji gula.
Pengamatan kualitas air yang meli- puti  suhu,  pH,  oksigen  terlarut,  amonia dan  salinitas  menggunakan  termometer, pH  meter,  DO  meter,  dan  refraktometer. Pengamatan  kualitas  air  dilakukan  karena kualitas  air  merupakan  media  hidup  ikan yang  dapat  mempengaruhi  kesehatan  dan pertumbuhan.

## Parameter Penelitian
Parameter utama yang diamati ada- lah  jenis  bakteri  pada  benih  ikan  kerapu cantang  dari  kolam  pendederan  BPBAP Situbondo.  Parameter  penunjang  yang diamati  adalah  kualitas  air  meliputi  pH, suhu,  amonia,  oksigen  terlarut  dan salinitas.

## Analisis Data
Data  hasil  isolasi  dan  identifikasi bakteri  pada  benih  ikan  kerapu  cantang dianalisis  secara  deskriptif  dan  disajikan dalam bentuk gambar dan tabel. Data yang didapat  akan  dibandingkan  dengan  buku identifikasi  bakteri  “ Cowan  and  Steel’s Manual  for  the  Identification  of  Medical Bacteria” dan “ Buller, Bacteria from Fish and  Other  Aquatic:  A  Practical  Identi- fication Manual”.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi  Bakteri  dari  Benih  Ikan  Kerapu Cantang
Pada  penelitian  dilakukan  kegiatan isolasi  dan  identifikasi  bakteri  pada  benih ikan kerapu cantang. Benih yang dijadikan sampel  pada  penelitian  adalah  benih  ikan kerapu  cantang  yang  diduga  terinfeksi bakteri  dan  menunjukkan  gejala  klinis terinfeksi  penyakit  bakteri.  Sampel  benih ikan  kerapu  cantang  yang  terinfeksi penyakit  bakteri  ditunjukkan  adanya bercak  merah  di  permukaan  tubuh,  mata menonjol,  warna  tubuh  pucat,  ikan  lemah (menyendiri) dan bagian ekor yang geripis. Gambar  ikan  yang  yang  terinfeksi  bakteri dapat dilihat pada Gambar 1.1.
a b c d
Sampel  benih  ikan  kerapu  cantang yang  diambil  dari  dua  kolam  pendederan BPBAP  Situbondo  sebanyak  dua  puluh ekor.  Isolasi  dengan  mengambil  organ target  luka  di  permukaan  kulit  dan  ginjal dan  menggoreskan  pada  media  TSA  2% secara zig-zag (streak plate) menggunakan ose  steril.  Isolasi  dengan  metode streak
plate memiliki  kelebihan  dibandingkan dengan  metode  lainnya  yaitu  koloni bakteri  yang  dihasilkan  merupakan  koloni tunggal,  bakteri  yang  kontaminan  mudah dibedakan,  dan  dapat  membuat  goresan dengan  pola  tertentu.  Pengisolasian  awal didapatkan isolat bakteri sebanyak 40.
Gambar 1.1 Gejala klinis benih ikan kerapu cantang: (a) Bercak merah pada tubuh ikan (b) Mata menonjol (c) Warna tubuh ikan pucat (d) Sirip geripis
Dari 40 isolat bakteri yang didapat- kan  kemudian  dilakukan  pemurnian  bak- teri  pada  media  TSA  2%.  Setelah  pemur- nian  dilakukan  penyeleksian  berdasarkan kesamaan  morfologi  koloni  bakteri  dari segi  warna,  bentuk,  elevasi  dan  tepian dalam  hal  ini  didapatkan  3  isolat  bakteri pada  benih  ikan  kerapu  cantang.  Ketiga isolat  bakteri  yang  didapatkan  lalu  diberi
kode A, B, C.  Pemberian kode ini didasar- kan  pada  perbedaan  morfologi  koloni  tiap isolat bakteri.  Hasil uji pewarnaan bakteri Gram  positif  dan  Gram  negatif  secara mikroskopis  dapat  dilihat  pada  Gambar 1.2.  Berikut  merupakan  hasil  pengamatan morfologi  koloni  bakteri  dan  sel  bakteri pada benih ikan kerapu cantang dari kolam pendederan.
Tabel 1.1  Morfologi Koloni Bakteri dan Sel Bakteri pada Benih Ikan Kerapu Cantang dari Kolam Pendederan.
Kode isolate Morfologi koloni Morfologi sel Bentuk Tepi Elevasi Warna Bentuk Gram A Menyebar Berlekuk Flat Kuning kecoklatan Bacil - B Menyebar Berlekuk Raised Kuning kecoklatan Bacil - C Bulat Rata Raised Kuning Coccus + a b c Gambar 1.2  Hasil Pengamatan Isolat Bakteri secara Mikroskopis:
a) Kode isolat A, berbentuk bacil, Gram negatif dengan ukuran 100 µ m b) Kode isolat B, berbentuk bacil, Gram negatif dengan ukuran 100 µ m
c) Kode isolat C, berbentuk coccus, Gram positif dengan ukuran 100 µ m (Sumber: Dokumetasi pribadi, 2016)
Disetujui/ accepted: 15 Maret 2017
Pada  uji  pewarnaan  Gram,  semua bakteri  Gram  positif  berwarna  biru  atau violet  hal  ini  dikarenakan  bakteri  Gram positif  mempunyai  lapisan  peptidoglikan yang  tebal  dan  menahan  kristal  violet selama  pewarnaan  gram,  sedangkan  bak- teri  Gram  negatif  berwarna  merah  karena lapisan  peptidoglikan  yang  tipis  yang me- nyebabkan  kristal  violet  terbuang  setelah pemberian  alkohol  dan  pada  tahap  selan-
jutnya  pemberiaan  safranin  memberikan warna merah pada bakteri Gram negatif.

## Hasil Uji Biokimiawi
Dari  ketiga  isolat  bakteri  A,  B,  C yang telah dimurnikan dan diuji morfologi sel  selanjutnya  dilakukan  uji  biokimiawi. Hasil ketiga isolat bakteri yang telah di uji biokimiawi dapat dilihat pada tabel berikut ini.
Tabel 1.2  Hasil Perbandingan Uji Biokimiawi Isolat A,B,C dengan Pustaka
Karakteristik Isolat A Vibrio alginolyticus (Cowan, 2003) Isolat B Vibrio harveyi (Cowan , 2003 ) Isolat C Streptococcus Iniae (Cowan , 2003) Oksidase + + + + - - Katalase + + + + - - O/F F F F F F F TSIA – H 2 S - - - - - - LIA + + + + - - Motil + + + + - - Indol + + + + - - Ornitin + + + + - - MR + + + + + + VP + - - - - - Simmon Citrate + - - + + - Novobiocin S S S S R R Gelatin + - - + + - Glukosa + + + + + + Maltosa + + + + + + Sukrosa + + + + - + Arbinosa - - - - s- - Manitol + + + + + + Inositol - - - - - -
Keterangan = S/R (Sensitif/Resisten), O/F (Oksidatif/fermentatif), +/- (Positif/Negatif)
Ciri-ciri  utama  suatu  bakteri  yang perlu  diketahui  dalam  mengkarakterisasi bakteri  adalah  melalui  beberapa  uji  mor- fologi  dan  uji  biokimiawi.  Pengujian  bio- kimiawi  yang  dilakukan  dalam  penelitian ini  meliputi  uji  oksidase,  katalase,  O/F, TSIA,  LIA, MIO, MR, VP, Citrate, gela- tin dan uji gula (glukosa, maltosa, sukrosa, arbinosa, manitol dan inositol).
Dari  hasil  pengamatan  morfologi dan  uji  biokimiawi  yang  dibandingkan dengan  buku Cowan  and  Steel’s,  Manual for the Identification of Medical Bacteria”
dan “Buller, Bacteria from Fish and Other Aquatic:  A  Practical  Identification  Ma- nual )  didapatkan  kecocokan  karakteristik dengan  bakteri Vibrio  alginolyticus .  Kode isolat  bakteri  A  memiliki  kecocokan  de- ngan  bakteri Vibrio  alginolyticus sebesar 94  %.  Kode  isolat  bakteri  B  memiliki kecocokan  dengan  bakteri Vibrio  harveyi sebesar  89  %.  Kode  isolat  bakteri  C memiliki  kecocokan  dengan  bakteri Streptococcus iniae sebesar 84%. Deskriptif  bakteri Vibrio  alginoli- tycus pada  proses  identifikasi  termasuk
Disetujui/ accepted: 15 Maret 2017
bakteri Gram negatif, bentuk morfologi sel bacil (batang), warna koloni kuning kecok- latan, menyebar, bagian tepi berlekuk serta elevasi flat (ketinggian sama medium), dan uji  biokimiawi  bersifat  oksidase  dan  kata- lase  positif,  bersifat  fermentatif,  motil, indol positif, ornitin positif, gelatin positif, MR  dan  VP  positif,  uji  gula  glukosa, maltosa,  sukrosa,  manitol  positif  sedang- kan  arbinosa  inositol  negatif.  Bakteri Vibrio alginolitycus sangat umum ditemu- kan pada perairan payau dan laut. Menurut Desrina dkk., (2006) dari beberapa spesies bakteri  yang  sering  ditemukan  pada  ikan kerapu  yang  sakit  adalah  bakteri Vibrio alginolitycus. Ikan  kerapu  yang  sakit memiliki gejala klinis seperti bercak merah pada  permukaan  tubuh,  mulut  dan  sirip, benih  ikan  terlihat  lemah,  berenang menyendiri,  nafsu  makan  berkurang, penggeripisan  sirip,  serta  adanya  luka  di permukaan kulit.
Deskriptif  bakteri Vibrio  harveyi pada  proses  identifikasi  hampir  mirip dengan bakteri Vibrio alginolitycus. Perbe- daan  bakteri Vibrio  alginolitycus dan Vibrio  harveyi terletak  pada  uji  biokimia MR/VP  dan  morfologi  koloni  yaitu berwarna  kuning  kecoklatan,  menyebar, bagian  tepi  berlekuk  serta  elevasi raised (ketinggian nyata terlihat). Menurut Irianto (2005)  bakteri Vibrio  harveyi bersifat sebagai  bakteri  oportunistik  dan  merupa- kan  bakteri  yang  sangat  ganas  serta berbahaya pada budidaya ikan laut karena dapat  bertindak  sebagai  patogen  primer dan  sekunder.  Sebagai  patogen  primer bakteri  masuk  tubuh  ikan  melalui  kontak langsung ikan, sedangkan sebagai patogen sekunder bakteri menginfeksi ikan dengan adanya luka akibat organisme lain/gesekan ikan  yang  dipelihara  dengan  kepadatan tinggi.
Padat tebar benih ikan kerapu can- tang  dikolam  pedederan  BPBAP  Situ- bondo  tergolong  baik  karena  kepadatan benih ikan yang berukuran 7-10 cm sekitar 100  ekor/m 3 dalam  kategori  optimum. Menurut Mursitorini dan Ramdhani (2013) kepadatan  optimum  benih  ikan  kerapu
pada fase pendederan sekitar 150-200 ekor dari  volume  kolam  1,5  m 3 dengan  ukuran ikan  9-12  cm.  Gejala  klinis  benih  ikan kerapu  cantang  yang  terserang  bakteri Vibrio  harveyi mirip  dengan  gejala  klinis benih  ikan  kerapu  cantang  yang  terserang bakteri Vibrio  alginolitycus .  Menurut Schubert  (1987)  bakteri  yang  memilliki genus Vibrio yang  menginfeksi  ikan  laut pada stadia benih selain tubuh ikan lemah juga  tubuh  memproduksi  lendir  yang berlebihan  dan  pada  tingkat  akut  sirip punggung dan sirip ekor geripis.
Keganasan  bakteri  genus  vibrio berkaitan dengan produksi siderofor (agen penyapit zat besi) yang berfungsi mengikat zat  besi  dari  darah  inang  (Desrina  dkk, 2006).  Zat  besi  dalam  sel  darah  merah berperan dalam memproduksi hemoglobin, hemoglobin  berfungsi  dalam  mengangkut oksigen  dari  insang  ke  jaringan  tubuh untuk  proses  metabolisme  sel,  jika  proses metabolisme  sel  terganggu  hal  ini  dapat mempengaruhi  sistem  kerja  organ  se- hingga  mengakibatkan  suatu  keadaan abnormal didalam tubuh (penyakit). Angka (1990)  juga  menambahkan  bahwa  salah satu sifat dari bakteri Gram negatif adalah dapat melisiskan hemoglobin dalam hal ini bakteri genus vibrio termasuk bakteri gram negatif yang dapat melisiskan hemoglobin dan  mempengaruhi  proses  metabolisme sel.  Kadar  hemoglobin  yang  rendah  dapat menjadi salah satu indikasi pada ikan atas terjadinya  infeksi  bakteri.  Bakteri Vibrio pada  media  selektif Thiosulfat  Citrat  Bile Sucrose  (TCBS) memperlihatkan  warna kuning,  bulat  hal  ini  sesuai  dengan pendapat Buller (2004).
Deskriptif  bakteri Streptococcus iniae pada  proses  identifikasi  termasuk bakteri  Gram  positif  bentuk  morfologi  sel coccus, warna koloni kuning, bulat, bagian tepi  rata  serta  elevasi raised (ketinggian nyata terlihat), dan uji biokimiawi bersifat oksidase  dan  katalase  negatif,  bersifat fermentatif, nonmotil, indol negatif, ornitin negatif, gelatin positif, MR positif dan VP negatif,  uji  gula  glukosa,  maltosa,  dan manitol  positif  sedangkan  sukrosa,  arbi-
nosa  dan  inositol  negatif.  Genus Strep- tococcus sp  pada  medium  padat  memiliki warna  koloni  kuning,  bulat  transparan, elevasi raised (ketinggian  nyata  terlihat) dan Gram positif (Nagazawa, 2004). Bak- teri Streptococcus  iniae dalam  penelitian telah  dilakukan  penanaman  bakteri  dalam media  diferensial Blood  Agar (BA)  untuk melihat  tipe  bakteri  dalam  menghemolisis darah.  Hasil  dari  penanaman  bakteri  pada media  diferensial  menunjukkan  bakteri bersifat beta  hemolisis hal  ini  sesuai dengan Buller  (2004) Beta  hemolisis di media diferensial Blood Agar (BA) terlihat zona  bening  sekeliling  koloni  hal  ini dikarenakan  terjadi  lisis  sel  darah  merah dilengkapi  kerusakan  dan  penggunaan hemoglobin  oleh  mikroorganisme. Beta hemolisis di media diferensial Blood Agar (BA) dapat dilihat pada Gambar 1.3
Gambar 1.3 Beta hemolisis pada media diferensial
Menurut  Irianto  (2005)  penularan penyakit Streptococcosis dapat  melalui kontak  langsung  dengan  inang  yang  sakit, ketahanan  tubuh  benih  ikan  yang  masih rentan,  dan  pakan  yang  terkontaminasi. Pakan  yang  diberikan  pada  benih  ikan kerapu cantang pada saat penelitian adalah ikan rucah dengan membuang isi perut dan kepala.  Pemberian  pakan  ikan  rucah  pada benih  menggunakan  metode ad  satiation , yakni  memberi  makan  ikan  sekenyangnya hal  ini  bertujuan  menghindari  sifat kanibalisme antar benih ikan. Kanibalisme antar  benih  dapat  menjadi  pemicu  luka pada ikan dan masuknya bakteri ke dalam tubuh  ikan. Ikan  rucah  memiliki  kandu- ngan  nutrisi  yang  sangat  tinggi  serta memiliki  harga  yang  murah  bila  diban- dingkan dengan pellet namun ketersediaan
ikan  rucah  tergantung  musim  dan  tidak semua  kualitas  ikan  rucah  bagus  hal  ini yang  menyebabkan  ikan  bisa  tertular  bak- teri.  Menurut  Novriadi  (2014)  pemberian pakan  ikan  rucah  bisa  menjadi  perantara sumber  penyakit  yang  bisa  menular  pada ikan  budidaya  walaupun  pemberian  mem- buang  isi  perut  dan  kepala  karena  bagian tersebut mengandung banyak patogen.
Ditemukannya  bakteri Vibrio  algi- nolitycus,  Vibrio  harveyi, dan Strepto- coccus  iniae pada  benih  ikan  kerapu cantang  dari  kolam  merupakan  indikasi lemahnya  ketahanan  tubuh  benih  ikan kerapu  cantang.  Benih  ikan  yang  digu- nakan  dalam  penelitian  merupakan  benih ikan  yang  memiliki  ukuran  8,8-10  cm. Menurut  Azhar  (2011)  ukuran  benih  ikan kerapu  8,8-11  cm  merupakan  ukuran  titik rawan  untuk  terjadinya  infeksi  vibriosis. Persentase bakteri yang ditemukan dari 20 sampel  benih  ikan  kerapu  cantang  yang telah  diidentifikasi  diketahui Vibrio  algi- nolitycus sekitar  35%,  bakteri Vibrio harveyi sekitar  27,5%,  bakteri Strepto- coccus  iniae sekitar  30%.  Ditemukan bakteri Vibrio  alginolitycus dan Vibrio harveyi pada  penelitian  ini  sama  dengan bakteri  yang  ditemukan  pada  penelitian Hidayat  (2014)  yaitu  terdapat  bakteri Vibrio  alginolitycus dan Vibrio  harveyi dari  ikan  kerapu  sunu  yang  sakit.  Jumlah persentase  tertinggi  dari  bakteri  yang ditemukan pada benih ikan kerapu cantang adalah  bakteri Vibrio  alginolitycus karena menurut  Rahayu  (2009)  bakteri Vibrio alginolitycus merupakan jenis bakteri yang paling  patogen  pada  ikan  kerapu  diban- dingkan dengan jenis bakteri lainnya.
Penyakit  pada  ikan  muncul  akibat ketidakseimbangan  antara  ikan  sebagai inang, patogen (mikroorganisme penyebab penyakit)  serta  lingkungan.  Faktor  ling- kungan yang dapat menimbulkan penyakit adalah kualitas air. Hasil pengukuran kua- litas  air  dari  kolam  pendederan  BPBAP Situbondo dapat dilihat pada tabel berikut
Tabel 1.3 Kualitas Air dari Kolam Pendederan BPBAP Situbondo.
Kualitas Air Waktu Tempat Suhu (°C) pH Oksigen Terlarut (ppm) Salinitas (ppt) Amoniak (ppm) Pagi Kolam 1 30 8 5,5 32 0,003 Kolam 2 28 8 5,3 32 0,031 Siang Kolam 1 28,1 8 5,5 31 0,009 Kolam 2 31 8 5,6 31 0,047 Sore Kolam 1 30 8 4,8 32 <0,001 Kolam 2 31 8 5,7 32 <0,001
Penyakit  pada  ikan  muncul  akibat ketidakseimbangan  antara  ikan  sebagai inang, patogen (mikroorganisme penyebab penyakit) serta lingkungan. Faktor lingku- ngan  yang  dapat  menimbulkan  penyakit adalah  kualitas  air.  Pengujian  sampel  air dari kolam pendederan BPBAP Situbondo menunjukkan kualitas air di kolam pende- deran  tergolong  dalam  kategori  ideal karena  memiliki  suhu  antara  28-31°C, salinitas 31-32 ppt, amoniak <0,5 ppm, pH 8 serta kandungan oksigen terlarut 4,8- 5,7 ppm hal ini sesuai sesuai dengan pendapat Aprilia  (2008)  kualitas  air  yang  cocok untuk pertumbuhan ikan kerapu yaitu tem- peratur  28-32°C,  salinitas  berkisar  30-32 ppt,  amoniak  <0,5  ppm,  pH  antara  6,5-9 dan  kandungan  oksigen  terlarut  berkisar >5  ppm.  Oksigen  memegang  peranan penting sebagai indikator kualitas perairan dalam  kelangsungan  hidup  ikan  karena berperan  untuk  pernafasan  dan  meta- bolisme  ikan.  Menurunnya  kadar  oksigen terlarut dalam suatu perairan dapat mengu- rangi  nafsu  makan  ikan  yang  pada  akhir- nya menyebabkan pertumbuhan terganggu serta  menjadikan  ikan  stres  sehingga sistem  imun  menjadi  menurun.  Pada  saat itu,  serangan  penyakit  akan  mudah  masuk ke  dalam  tubuh  ikan,  baik  berupa  bakteri ataupun parasit Shafrudin dkk., (2006).

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Dari  penelitian  ini  ditemukan  bak- teri  pada  benih  ikan  kerapu  cantang  dari kolam  pendederan  Balai  Perikanan  Budi- daya Air Payau (BPBAP) Situbondo, Jawa Timur  yaitu  bakteri Vibrio  alginolitycus,
Vibrio  harveyi dan Streptococcus  iniae. Faktor  terbesar  yang  mempengaruhi tertularnya bakteri pada benih ikan kerapu cantang  antara  lain  adanya  agen  patogen dari  pakan  ikan  rucah  yang  kualitasnya kurang  bagus  serta  sifat  kanibalisme  ikan yang  menyebabkan  luka  di  permukaan tubuh ikan sehingga bakteri mudah masuk ke tubuh ikan dan menimbulkan infeksi.

## Saran
Untuk  meningkatkan  kualitas  dan kuantitas  produksi  benih  ikan  kerapu cantang,  maka  perlu  dilakukan  penelitian lebih  lanjut  mengenai  tambahan  bahan imunostimulant/vaksin  yang  dapat  memi- nimalisir  bakteri  pada  benih  ikan  kerapu cantang  terutama  bakteri  yang  merugikan budidaya.

## DAFTAR PUSTAKA
Aprilia,  T.  2008.  Aplikasi  Pengkayaan Rotifera dengan  Asam  Amino Bebas  Untuk  Larva  Kerapu  Bebek Cromileptes altivelis . Skripsi. Program  Studi  Teknologi  dan Manajemen  Akuakultur.  Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan. Institut Pertanian Bogor. hal 11. Angka,  S.L.  1990.  The  Pathology  of  The Walking Catfish, Clarias batrachus Infected  Intraperitoneally  with Aeromonas hydrophila . Asian Fish. Journal Sciences. 3:343-351 Azhar, F. 2011. Vibriosis pada Pendederan Ikan  Kerapu  Bebek Cromileptes altivelis di  Pulau  Payung  Kepu- lauan  Seribu.  Skripsi.  Fakultas
Disetujui/ accepted: 15 Maret 2017
Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan. Institut Pertanian Bogor. hal. 43. Balai  Budidaya  Air  Payau.  2012.  Ikan Kerapu  Cantang  Hibrida  Antara Ikan  Kerapu  Cantang  Macan  Beti- na  dengan  Ikan  Kerapu  Kertang Jantan.  Balai  Budidaya  Air  Payau Situbondo. http://bbapsitubondo.com.  Diakses Tanggal 13 Januari 2016. hal. 6. Buller, N.B. 2004. Bacteria from Fish and Other Aquatic: A Practical Identifi- cation  Manual.  CABI  Publising CAB  International  Wallingford Oxford  shire  OX108DE.  United Kingdom. pp. 161.
Cowan,  S.  T.  2003.  Cowan  and  Steel’s Manual  for  the  Identification  of Medical  Bacteria,  2 nd edn.  Cam- bridge  University  Press,  Cam- bridge. hal. 23.
Desrina,  T.  Arief,  Ambariyanto  dan S.Susiani.  2006.  Uji  Keganasan Bakteri  Vibrio  pada  Ikan  Kerapu Macan. Jurnal Ilmu Kelautan. 11(3) : 125
Hatmanti,  A.,  A.  Nuchsin  dan  Y.
Darmayati.  2008.  Studi  Penyakit Bakterial  pada  Budidaya  Ikan  Ke- rapu dan Bakteri Penghambatnya di Perairan  Teluk  Lampung.  Jurnal Akuakultur Indonesia, 7(1): 51–58. Hidayat,  A.  S.  2014.  Isolasi  dan  Iden- tifikasi  Bakteri Vibrio sp dari Ikan Kerapu  Sunu  ( Plectropomus  leo- parddus ). Jurnal Teknosains. hal. 8.
Irianto,  A.  2005.  Patologi  Ikan  Teleostei.
Gadjah  Mada  University  Press. Yogyakarta. hal. 256.
Ismi,  S.,  Y.N.  Asih,  dan  D.  Kusumawati .
2013. Peningkatan  Produksi  dan Kualitas  Benih  Ikan  Kerapu  Mela- lui  Program  Hibridisasi.  Jurnal Ilmu  dan  Teknologi  Kelautan  Tro- pis. hal. 333-342.
Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan. 2014.  Laporan  Kinerja  Kemen- terian. Jakarta. hal.176.
Mursitorini,  E  dan  P.  Ramdhani.  2013. Penyakit Ikan Kerapu. Loka Peme- riksaan  Penyakit  dan  Lingkungan. Direktorat  Jenderal  Kementerian Kelautan  dan  Perikanan  Budidaya. hal. 4.
Nagazawa,  K  and  E.R.C.  Lacierda.  2004. Disease  Cultured Groupers. South- east  Asian  Fisheries  Development Center  Aquaculture  Department. Government  of  Japan  Trust  Fund. pp. 19.
Rahayu,  A.M.  2009.  Keragaman  dan Keberadaan Penyakit Bakterial dan Parasitik  Benih  Kerapu  Macan ( Epinephelus fuscoguttatus) di Karamba  Jaring  Apung  Balai  Sea Farming  Kepulauan  Seribu.  Skrip- si.  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan.  Institut  Pertanian  Bogor. Jakarta. hal. 25.
Novriadi, R.  2014. Penyakit Ikan Air Laut di  Indonesia.  Kementerian  Kelau- tan  dan  Perikanan,  Direktorat  Jen- deral  Perikanan  Budidaya,  Direk- torat  Kesehatan  Ikan  dan  Lingku- ngan. hal.28.
Shafrudin,  D.,  Yuniarti  dan  M.  Setiawati, 2006.  Pengaruh  Kepadatan  Benih Ikan  Lele  Dumbo  ( Clarias sp . ) terhadap Produksi Pada Sistem Bu- didaya dengan Pengendalian Nitro- gen  Melalui  Penambahan  Tepung Terigu.  Jurnal  Akuakultur  Indo- nesia 5 (2) : 137-147.
Schubert,  G.  1987.  Fish  Diseases  a Complete  Introduction.  T.F.H. Publications Inc. USA. pp. 125.
Shickney,  R.  R.,  2000.  Encyclopedia  of Aquaculture. John Wiley and Sons.
Inc. pp. 418-421.
Susanti, M.N.I. 2010. Statistika Deskriptif dan  Induktif.  Graha  Ilmu.  Yogya- karta. hal. 122.