DOI: https://doi.org/10.31933/ejpp.v1i1 Received: 02/10/2020, Revised: 25/10/2020, Publish: 22/11/2020

## PERAN ISOLAT RHIZOBAKTERIA DAN ZAT PENGHAMBAT TUMBUH DALAM PEMBENTUKAN DAN PERTUMBUHAN AKAR TANAMAN KENTANG

## Henny Puspita Sari1, Warnita2, dan Indra Dwipa3
1) Program studi Agroteknologi Universitas Ekasakti Padang
Email: hpssp.henny@gmail.com
2) Jurusan Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Andalas Kampus
Limau Manis, Padang
E-mail: warnita_irnu@yahoo.com
3) Jurusan Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Andalas Kampus Limau Manis, Padang E-mail: 1965indradwipa@gmail.com

## ABSTRAK
PGPR  adalah  bakteri  hidup bebas  yang  berada  di  tanah.  Mereka  baik  secara  langsung  atau tidak  langsung  membantu  perakaran.  Akar  merupakan  organ  yang  sangat  penting  bagi tanaman,  peran  akar  yang  paling  utama  yaitu  dalam  pertumbuhan  dan  perkembangan tanaman.  Tujuan  untuk  mendapatkan  interaksi  isolat  rizobakteria  dengan  konsentrasi  zat penghambat  tumbuh  coumarin  dalam  meningkatkan  pembentukan  umbi  dan  pertumbuhan tanaman kentang, serta mendapatkan isolat rhizobakteria dan konsentrasi pemberian coumarin yang terbaik dalam pertumbuhan dan pembentukan umbi tanaman kentang.
Penelitian  ini  mengunakan  pola  faktorial  dalam  rancangan  acak  lengkap  dari  dua  faktor dengan  tiga  ulangan.  Faktor  pertama  adalah  isolat  rhizobakteria  yaitu  tanpa  isolat,  isolat BT.4.1,  isolat  BT.4.2,  isolat  BT.4.3  dan  faktor  kedua  adalah  konsentrasi  zat  penghambat tumbuh coumarin, yaitu konsentrasi coumarin 0, 50, 100 dan 150 mg/l.
Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  interaksi  pemberian  isolat  rhizobakteria  dan  coumarin dapat  menekan  panjang  akar  tanaman  kentang  diperoleh  pada  isolat  BT.4.1  dengan konsentrasi coumarin 50 mg l ˉ ¹, sehingga energi yang digunakan bisa untuk pembentukan biji. Sedangkan  pemberian  coumarin  secara  tunggal  tidak  mempengaruhi,  tetapi  coumarin  dapat menekan panjangan akar dan bobot basah akar.
Keywords: Coumarin, Isolat, Rhizobakteria, Tanaman kentang, Pertumbuhan.

## ABSTRACT
PGPR is a free-living bacteria that resides in the soil. They either directly or indirectly assist rooting. Roots  are  very  important  organs  for  plants,  the  most  important  role  of  roots  is  in plant  growth  and  development.  The  aim  was  to  get  the  interaction  of  rhizobacteria  isolates with the concentration of growth inhibitor coumarin in increasing tuber formation and potato plant growth, as well as to obtain the best rhizobacteria isolates and the best concentration of coumarin in the growth and formation of potato tubers.
This  study  used  a  factorial  pattern  in  a  completely  randomized  design  of  two  factors  with three replications. The first factor was rhizobacteria isolates, namely without isolates, BT.4.1 isolates,  BT.4.2  isolates,  BT.4.3  isolates  and  the  second  factor  was  the  concentration  of coumarin growth inhibitors, namely coumarin concentrations of 0, 50, 100 and 150 mg / l. The  results  showed  that  the  interaction  between  giving  rhizobacteria  and  coumarin  isolates could  suppress  the  root length  of  potato  plants  obtained  in  BT.4.1  isolates  with  a  coumarin concentration of 50 mg l ˉ ¹, so that the energy used could be used for seed formation. While coumarin  alone  did  not  affect  it,  but  coumarin  could  suppress  root  length  and  root  wet weight.
Keywords: Coumarin, Isolates, Rhizobacteria, Potatoes, Growth.

## PENDAHULUAN
Pupuk  kimia  pada  umumnya  digunakan  untuk  pasokkan  nutrisi  bagi  tanaman.  Namun, harga,  ketersediaan,  dan  masalah  lingkungan  dari  pupuk  kimia  menjadi  masalah  nyata  bagi pertanian saat ini. Menurut Majeed, Kaleem Abbasi, Hameed, Imran, & Rahim (2015) penerapan pupuk  kimia  dalam  lanskap  miring  di  bawah  curah  hujan  tahunan  yang  tinggi  biasanya  tidak efektif,  karena  permukaan  run  o ﬀ  dan  pencucian.  Oleh  karena  itu,  ada  kebutuhan  mendesak untuk  menemukan  strategi  alternatif  yang  dapat  memastikan  hasil  panen  yang  kompetitif, memberikan  keamanan  lingkungan,  dan  perlindungan  serta  mempertahankan  keseimbangan ekologis  jangka  panjang  dalam  agroekosistem.  Penggunaan  inokulan  mikroba  atau  rhizobateria pemacu  pertumbuhan  tanaman  (PGPR)  untuk  peningkatan  produksi  pertanian  berkelanjutan menjadi praktik yang lebih banyak diterima dalam pertanian.
Banyak  produk  mikroba  digunakan  untuk  pertanian  organik,  dan  pertanian  komersial berskala  besar  di  Cina,  Amerika  Serikat,  dan  Eropa  mulai  mengadopsi  bahan  biologis  sebagai pengganti pupuk  kimia  dan pestisida (Parnell et al. 2016),  yang sangat penting untuk pertanian keberlanjutan (Kecskés et al. 2016).
PGPR adalah bakteri hidup bebas yang berada di tanah. Mereka baik secara langsung atau tidak  langsung  membantu  perakaran  (Kumar  and  Sharma  2017).  Akar  merupakan  organ  yang sangat  penting  bagi  tanaman,  peran  akar  yang  paling  utama  yaitu  dalam  pertumbuhan  dan perkembangan tanaman. Akar tidak hanya menyediakan air dan nutrisi, tetapi juga memberikan dukungan  mekanis  dari  mulai  pembibitan  dan  pengembangan,  menyediakan  hormon pertumbuhan ke tanaman, meningkatkan kandungan bahan organik tanah, yang berfungsi untuk meningkatkan sifat fisik, kimia, dan biologis tanah, menghasilkan hasil panen yang lebih tinggi.
Pertumbuhan awal akar yang kuat telah terbukti menjadi faktor utama dalam meningkatkan serapan N dalam gandum (Noulas et al. 2010). Sistem akar yang lebih besar memberikan kontak akar  dan  tanah  yang  lebih  besar,  yang  sangat  penting  untuk  penyerapan  P  (Gahoonia  dan Nielsen,  2004),  sedangkan  untuk  nutrisi  yang  kurang  bergerak,  seperti  P  dan  K,  deplesi seringkali berkaitan erat dengan panjang akar (Fageria. N. K, 2013).
Akar berkolonisasi di rhizosphere dan melindungi tanaman dari patogennya, menghasilkan metabolit  sekunder seperti  santibiotik  yang  menekan  rhizobacteria  yang  berbahaya, menghasilkan  siderofor,  dan  phytohormones,  dapat  memperbaiki  nitrogen  atmosfer,  dan membantu menyediakan penyerapan nutrisi dengan melarutkan fosfat dan menghasilkan zat aktif biologis  yang  memengaruhi  pertumbuhan  dan  perkembangan  tanaman  (Kumar  and  Sharma 2017)
Menariknya,  tanaman  yang  kekurangan  fosfat  melepaskan  metabolit  ke  dalam  rhizosfer yang  juga  muncul  selama  kondisi  kekurangan  zat  besi  (Ziegler  et  al.  2016).  Tanaman menanggapi  perubahan  dalam  lingkungan  biotik  atau  abiotik  mereka  menunjukkan  perubahan eksudasi  akar  (Carvalhais  et  al.  2013),  yang  pada  gilirannya  mempengaruhi  komposisi mikrobioma  akar.  Untuk  itu  diperlu  biosintesis  senyawa  fenolik  yang  memobilisasi  zat  besi, untuk ekskresi selanjutnya ke rhizosfer (Zamioudis C, Hanson J, Pieterse CMJ, 2014), yatiu zat penghambat pertumbuhan jenis coumarin.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  di  kebun  percobaan  Pusat  Alih  Teknologi  dan  Pengembangan Kawasan  Pertanian  Universitas  Andalas,  Alahan  Panjang,  Kabupaten  Solok,  Sumatera  Barat, pada  ketinggian  tempat  1,616  m  dpl.  Kisaran  curah  hujan  selama  penelitian  rata-rata  505  mm dengan rata-rata 15 hari hujan.
Percobaan  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  2  faktor  dan  3  ulangan. Faktor pertama adalah 4 isolat bakteri (Tanpa bakteri isolat, BT.4.1, BT.4.2, BT.4.3) dan faktor kedua  adalah  4  konsentrasi  coumarin  (0,  50,  100,150  mg  L-1).  Setiap  kombinasi  dilakukan dengan  3  kali  ulangan,  sehingga  didapatkan  48  unit  percobaan  dan  masing-masing  unit  terdiri dari 10 tanaman dengan total 480 populasi tanaman.
Media  tanam  yang  digunakan  adalah  campuran  tanah  dan  pupuk  kandang  (20  ton  ha-1) dengan perbandingan 2 : 1 (disterilkan terlebih dahulu) dan dimasukkan kedalam polibag ukuran 5  kg. Suspensi  isolat  rizobakteri  dengan  kepadatan  inokulum  10 ⁸  di  aplikasikan  sebanyak  dua kali  yaitu saat sebelum penanaman, dan pada umur 28 HST (Hari Setelah Tanam) sebanyak 10 ml  dengan  cara  disiram  di  tanah  sekitar  perakaran  tanaman  kentang.  Perlakuan  konsentrasi coumarin dilakukan dengan cara disemprotkan pada seluruh bagian tajuk tanaman (50 ml tan-1) pada  umur  28,  35,  42  HST.  Benih  kentang  yang  digunakan  adalah  varietas  granola  (G0)  yang berasal  dari  Dieng  Banjarnegara,  Jawa  Tengah.  Benih  G0  yang  digunakan  untuk  merbanyak benih tanaman kentang yang bermutu.
Pengamatan  karakterisasi  morfologi  rhizobakteri  meliputi:  bentuk  koloni,  elevasi  koloni, tepi  koloni,  ukuran,  warna,  uji  gram  untuk  mengetahui  apakah  bakteri  bersifat  gram  positif
(Resistensi terhadap alkali (1% KOH) larut) atau negatif (Resistensi terhadap alkali (1% KOH) lebih pekat) dan uji hipersensitif dengan cara menyuntikan suspensi rizobakteri indigenus secara interseluler  pada  jaringan  permukaan  bawah  daun  tanaman  Mirabillis  Jalapa  dan  mengamati perkembangan gejala selama 2 x 24 jam (Yanti, et.,al 2013). Pengamatan meliputi panjang akar, dan bobot akar. Data hasil pengamatan dianalisis dengan uji F, dilanjutkan dengan uji BNJ pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Panjang Akar (g)
Hasil  analisis ragam  menunjukan  bahwa  pemberian  isolat  rhizobakteria  dan  konsentrasi coumarin  berpengaruh  nyata  terhadap  penekanan  panjang  akar  tanaman  kentang, sedangkan pengaruh isolat rhizobakteria meningkatkan panjang akar. Tabel 1 menunjukkan bahwa panjang akar  terpanjang  dipengaruhi  oleh  isolat  rhizobakteria,  yaitu:  isolat  BT.4.1  dengan  tanpa konsentrasi  coumarin  memiliki  panjang  akar  63,97  cm;  isolat  BT.4.2  dengan  tanpa  konsentrasi coumarin  memiliki  panjang  akar  75,27  cm;  isolat  BT.4.3  dengan  tanpa  konsentrasi  coumarin memiliki  panjang  akar  66,30  cm.  Diduga  bahwa  pengaruh  rhizobakteria  terhadap  panjang  akar tanaman  kentang,  disebabkan  karena  kemampuannya  untuk  menghasilkan  hormon  tumbuh seperti asam indol asetat (IAA)  yang berperan dalam memacu pertumbuhan akar, pemanjangan akar  dan  pengembangan  akar  lateral,  yang  membantu  tanaman  memperoleh  air  maksimal  dan nutrisi.
Tabel 1. Panjang  akar  tanaman  kentang  periode  63  HST  pada  pemberian  isolat  rhizobakteria  dan konsentrasi coumarin.
Jenis Rhizobakteria Coumarin Tanpa 50 mg l ˉ ¹ 100 mg l ˉ ¹ 150 mg l ˉ ¹ ----------------------------------- cm ------------------------------- Tanpa 44,97 a 58,47 a 52,20 a 43,13 a A B A A BT.4.1 63,97 b 41,37 a 48,97 ab 43,37 a B A A A BT.4.2 75,27 b 51,90 a 49,30 a 42,40 a B AB A A BT.4.3 66,30 b 47,30 a 43,30 a 52,80 ab B A A A
KK = 10,40 %
Keterangan: *  Angka-angka pada arah horizontal (baris) yang diikuti huruf kecil yang sama dan angka-angka pada arah vertikal (kolom) yang diikuti oleh huruf besar yang sama berbeda tidak nyata berdasarkan uji BNJ Taraf 5%.
Hal  yang  sama  juga  dikemukakan  oleh  Tkachenko et  al.,  (2015)  dari  ke  empat  kultivar tanaman  kentang  yang  di  inokulasi  dengan  rhizobakteria  memiliki  efek  yang  positif  terhadap pertumbuhan panjang akar dibandingkan dengan tanaman kontrol. Menurut Deka Boruah (2003)
bakterinisasi  secara  signifikan  meningkatkan  panjang  akar  dibandingkan  dengan  kontrol, peningkatan panjang akar berkisar dari 13 % sampai 17 %.
Lakshmanan,  Selvaraj  dan  Bais,  (2014)  menyatakan  bahwa akar  tanaman  melepaskan beragam  nutrisi  organik,  sehingga  sinyal  ini  mampu  menarik  populasi  mikroba.  Sel  bakteri tunggal  menempel  pada  permukaan  akar  setelah  pembelahan  sel  dan  perkembangbiakan, membentuk  agregat  padat  yang  disebut  sebagai macrocolonies atau  biofilm  (Rudrappa et  al., 2008).  Beberapa  penelitian  menyatakan  bahwa  pembentukan  biofilm  merupakan  sifat  esensial bagi tanaman dalam kolonisasi akar (Chen et al., 2013). Didukung oleh hipotesis Beauregard et al., (2013) pada pemeriksaan mikroskop bakteri pada akar gandum dan akar A. Thaliana, biofilm dipicu  oleh  berbagai  sinyal  yang  berbeda  dari  satu  spesies  bakteri  ke  spesies  lain.  Khususnya bakteri dengan karakteristik Gram negatif (Martínez Gil et al., 2010).
Menurut  Van  Puyvelde et  al., (2011)  strain  bakteri  gram  negatif  menunjukkan  respon transkripsi auksin indole-3-acetic acid (IAA), yang dihasilkan oleh bakteri dan tanaman dari efek biofilm.  Diduga  IAA  disintesis  oleh  rhizobakteria  dari  triptofan,  yang  ditemukan  pada konsentrasi  yang  berbeda  pada  eksudat  akar  menurut  genotipe  tanaman.  Hal  serupa  dijelaskan oleh Jacquot et al.,  (2015) bahwa rhizobakteria mensintesis IAA dari triptofan dengan jalur yang berbeda,  bakteri fitopatogenik menggunakan  jalur indole  acetamide untuk  mensintesis  IAA, sedangkan jalur indole piruvat acid digunakan oleh PGPR.
Selanjutnya  Niro et  al., (2016)  menjelaskan  bahwa  eksudat  akar  juga  mempengaruhi efektivitas  mikroorganisme  dan  ketersediaan  coumarin,  sehingga  terjadinya  interaksi  antara rhizobakteria  dan  coumarin  dengan  respon  yang  berbeda-beda.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa pada  tingkat  IAA  rendah  yang  dihasilkan  oleh  rhizobakteria,  coumarin  dan  IAA  menghasilkan efek aditif terutama pada penghambatan perpanjangan akar primer dan mendorong pembentukan akar lateral. Namun, pada  konsentrasi  IAA tinggi  yang dihasilkan oleh  rhizobakteria, tidak  ada efek aditif yang di amati dengan coumarin. Hal ini sesuai dengan pendapat Hossain et al., (2008) pada  konsentrasi  IAA  rendah,  coumarin  dapat  meningkatkan  konsentrasi  IAA  endogen, transportasi  atau  sensitivitas  yang  mendorong  aktivitasnya,  sementara  pada  konsentrasi  IAA tinggi,  sinyal  yang  mengaktifkan  pembentukan  akar  lateral  menutupi  efek  aditif  dari  IAA  dan coumarin.
Interaksi isolat rhizobakteria dan konsentrasi coumarin menunjukan penekan pada panjang akar tanaman kentang, yaitu : isolat BT.4.1 dengan konsentrasi coumarin 50 mg l ˉ ¹, 100 mg l ˉ ¹, 150  mg  l ˉ ¹,  memiliki  nilai  sebesar  41,37  cm,  48,97  cm,  43,37  cm;  isolat  BT.4.2  dengan konsentrasi coumarin 50 mg l ˉ ¹, 100 mg l ˉ ¹, 150 mg l ˉ ¹, memiliki nilai sebesar 51,90 cm, 49,30 cm,  42,40  cm;  isolat  BT.4.3  dengan  konsentrasi  coumarin  50  mg  l ˉ ¹,  100  mg  l ˉ ¹,  150  mg  l ˉ ¹, memiliki nilai sebesar 47,30 cm, 43,30 cm, 52,80 cm.
Dapat dilihat bahwa senyawa coumarin lebih efektif dalam menekan panjangan akar, tetapi mendorong  pertumbuhan  akar  lateral  (Lampiran  14).  Hal  ini  diduga  bahwa  pemberian konsentrasi  coumarin  melalui  daun  dapat  merangsang  peningkatan  konsentrasi  coumarin endogen  di  dalam  tanaman,  di  mana  hormon  coumarin  endogen  ditemukan  menumpuk  di
jaringan akar (Kai et al., 2006). Menurut Terraza et al., (2016) efek paling nyata dari coumarin adalah menekan pertumbuhan akar, modifikasi morfologi dan histologi akar.
Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  Lupini et  al., (2014)  bahwa  pemberian  coumarin mempengaruhi perkembangan akar pada bibit A. thaliana, pada konsentrasi rendah, akar primer dan akar lateral sedikit  meningkat, sedangkan  konsentrasi tinggi secara  signifikan  menghambat pertumbuhan akar primer dan meningkatkan pertumbuhan akar lateral. Penekanan pertumbuhan akar pada tanaman berkisar 70 - 90% (Chattha et al., 2016b). Hal ini diduga dari proses stimulasi IAA yang mengakibatkan pemanjang dinding sel dan dihambat oleh senyawa coumarin endogen yang menumpuk pada akar dengan mempengaruhi metabolisme IAA yan dihasilkan oleh bakteri, dimana  dalam  penelitian  Lupini et  al., (2010)  menyatakan,  coumarin  berinteraksi  dengan  jalur sinyal  auksin,  sehingga  menyebabkan  penghambatan  panjang  akar  primer  dan  menstimulasi perkembangan  akar  lateral.  Hal  ini sejalan  dengan  pendapat  Alexieva et  al.,  (1995)  senyawa coumarin mempengaruhi metabolisme IAA, dalam meningkatkan atau mengambat IAA-oksidasi didalam tanaman.
Gambar 1. Rata - rata panjang akar tanaman kentang periode 35 HST - 63 HST akibat pemberian (A) isolat rhizobakteria dan (B) konsentrasi coumarin (mg l ˉ ¹).
Pada  Gambar  1A  menunjukkan  peningkatan  pertumbuhan  panjang  akar  pada  setiap minggunya  bervariasi,  hal  ini  disebabkan  karena  bakteri  merupakan  komponen  aktif  dan  juga responsif  terhadap  perubahan  kondisi  lingkungan.  Komposisi  strain  mikroba  dari  rizosfer ditentukan pengaruh dari berbagai faktor biotik dan abiotik. faktor biotik dan abiotik seperti jenis tanah, musim, tahap perkembangan tanaman, jarak ke akar, arsitektur akar, spesies tanaman dan kultivar dapat mempengaruhi struktur jenis mikroba dalam rhizosfer (Lakshmanan et al., 2014), tanaman dapat memilih strain bakteri dari dalam tanah dengan ekskresi eksudat akar (Huang et al., 2014).  Arsitektur  akar  di  asumsikan  mempengaruhi  kerapatan  relatif  dari  mikroorganisme tanah di sekitar akar (Somers, Vanderleyden, dan Srinivisam, 2004).
Pada Gambar 1B penekanan pertumbuhan akar disebabkan oleh perlambatan metabolisme dan  menghalangi  mitosis  di  jaringan  akar  yang  disebabkan  oleh  interaksi  rhizobakteri  dengan tanaman  inang,  diduga  coumarin  mengganti  polaritas  pertumbuhan  sel  akar,  yang  berakibat menekan pemanjangan sel akar. Menurut Abenavoli et al., (2004) coumarin dapat mempengaruhi proses fisiologis dan biokimia, pada pertumbuhan akar. Di mana dalam penelitian Goodwin dan Taves (1950) menjelaskan, turunan coumarin yang paling kuat dalam menghambat pertumbuhan akar, adalah : 7,8-dihidroksi coumarin, 7,8-dihidroksi-4-methylcoumarin, 8-metil  coumarin dan asam coumarin-3-karboksilat.

## Bobot Segar Akar (g)
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  pemberian  isolat  rhizobakteria  dan  konsentrasi coumarin memberikan pengaruh terhadap bobot segar akar tanaman kentang, yaitu: Tanpa isolat rhizobakteria dengan konsentrasi coumarin 100 mg l ˉ ¹, 150 mg l ˉ ¹ memiliki nilai sebesar 25 g, 24 g;  isolat  BT.4.1  dengan  konsentrasi  coumarin  100  mg  l ˉ ¹  memiliki  nilai  sebesar  39  g;  isolat BT.4.2  dengan  konsentrasi  coumarin  50  mg  l ˉ ¹,  100  mg  l ˉ ¹,  150  mg  l ˉ ¹  memiliki  nilai  sebesar 27,1 g, 24 g, 20,9 g; isolat BT.4.3 dengan konsentrasi coumarin 50 mg l ˉ ¹, 100 mg l ˉ ¹, 150 mg l ˉ ¹ memiliki nilai sebesar 30,10 g, 37 g, 30 g.
Tabel 2. Bobot  segar  akar  tanaman  kentang  periode  63  HST  pada  pemberian  isolat  rhizobakteria  dan konsentrasi coumarin.
Jenis Rhizobakteria Coumarin Tanpa 50 mg l ˉ ¹ 100 mg l ˉ ¹ 150 mg l ˉ ¹ --------------------------- gr --------------------------- Tanpa 19,03 a 19,00 a 25,00 b 24,00 ab AB A A B BT.4.1 17,00 a 15,00 a 29,00 b 11,13 a A A A A BT.4.2 24,07 ab 27,10 b 24,00 ab 20,90 a B B A B BT.4.3 16,03 a 30,10 b 37,00 c 30,00 b A B B C
KK = 8,47 %
Keterangan: *  Angka-angka pada arah horizontal (baris) yang diikuti huruf kecil yang sama dan angka-angka pada arah vertikal (kolom) yang diikuti oleh huruf besar yang sama berbeda tidak nyata berdasarkan uji BNJ Taraf 5%.
Bobot segar akar yang tertinggi pada pemberian isolat BT.4.3 dengan konsentrasi coumarin 100  mg  l ˉ ¹,  yaitu:  37,00  g,  sedangkan  bobot  segar  akar  terendah  pada isolat  BT.4.1.  dengan konsentrasi coumarin 150 mg l ˉ ¹,  yaitu: 11,13  g. Diduga pengaruh  antara kedua faktor tersebut tergantung  pada  isolat  rhizobakteria  dalam  mengasilkan  hormon  IAA  dan  tinggi  rendahnya konsentrasi  coumarin  yang  diberikan.  Menurut  Bruto et  al., (2014)  beberapa  PGPR  mampu untuk mengkolonisasi akar tanaman dan memacu pertumbuhan tanaman secara langsung melalui penghasil fitohormon seperti indole acetic acid (IAA). Menurut Naqqash et al., (2016) inokulasi rhizobakteria  pada  tanaman  kentang  menghasilkan  IAA  dalam  jumlah  yang  tinggi.  Sehingga
coumarin  berinteraksi  dengan  jalur  sinyal  auksin  dalam  menekan  panjang  akar  dan  mendorong pertumbuhan akar lateral sehingga meningkatkan bobot segar akar tanaman.
Menurut  Svensson  (1972)  pada  konsentrasi  pemberian  1,5  x  10 ˉ 5 M  coumarin meningkatkan  lebar  akar  dan  bobot  segar  akar  pada  tanaman  gandum  meskipun  pertumbuhan panjang  akar  dihambat,  namun  pada  konsentrasi  yang  lebih  tinggi  dari  2,5  x  10 -5 M  tidak mempengaruhi  bobot  segar  akar  gandum.  Hal  yang  sama  dikemukakan  oleh  Imanparast et  al., (2013) bahwa bobot segar akar tanaman kentang meningkat pada pemberian 15 mg l ˉ ¹ coumarin.
Gambar 2. Rata - rata bobot segar akar tanaman kentang periode 35 HST - 63 HST akibat pemberian (A) isolat rhizobakteria dan (B) konsentrasi coumarin (mg l ˉ ¹).
Gambar  2A  dan  2B  menunjukkan  peningkatan  bobot  segar  akar  pada  tanaman  kentang umur  56  HST.  Peningkatan  bobot  segar  dipicu  oleh  keberhasilan  isolat  rhizobakteria  dalam mengkolonisasi  akar  tanaman  merupakan  langkah  awal  dalam  memacu  pertumbuhan  tanaman. Lingkungan  rizosfer  yang  dinamis  dan  kaya  sumber  energi  dari  senyawa  organik  yang dikeluarkan  oleh  akar  tanaman  merupakan  habitat  bagi  rhizobakteria  yang  berperan  sebagai PGPR.  Asam  amino  dan  bahan  organik  lainnya  yang  di  ekresikan  oleh  akar  tanaman  kentang selanjutnya  dimanfaatkan  oleh  tanaman  dan  senyawa  coumarin  untuk  proses  penghambatan pemanjangan akar, sehingga mengakibatkan akar menjadi lebar dan bobot segar akar meningkat.
Hal  yang  serupa  juga  dilaporkan  oleh Sari,  Warnita,  &  Dwipa  (2019) di  mana  efek coumarin  menghambat  panjang  akar,  dan  mendorong  perkembangan  lebar  akar,  sehigga menyebabkan penambahan pada bobot segar akar tanaman. Chattha (2016a) menyatakan bahwa hampir  seluruh  senyawa  coumarin  pada  konsentrasi  0,1  dan  0.01  mM  menyebabkan  stimulasi bobot segar akar tanaman dan peningkatan bobot segar pada akar mencapai 40 - 49%.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat  diperoleh  kesimpulan  sebagai berikut:  Interaksi  pemberian  isolat  rhizobakteria  dan  coumarin  dapat  menekan  panjang  akar tanaman kentang diperoleh pada isolat BT.4.1 dengan konsentrasi coumarin 50 mg l ˉ ¹, sehingga energi  yang  digunakan  bisa  untuk  pembentukan  biji.  Sedangkan  pemberian  coumarin  secara tunggal  tidak  mempengaruhi,  tetapi  coumarin  dapat  menekan  panjangan  akar  dan  bobot  basah akar.

## REFERENSI
Abenavoli,  M.R..,  A.  Sorgonà,  S.  Albano  and  G.  Cacco.  2004.  Coumarin  differentially  affects the  morphology  of  different  root  types  of  maize  seedlings.  Journal  of  Chemical  Ecology. 30:1871-83.
Beauregard, P.B., Y. Chai, H. Vlamakis, R. Losick and R. Kolter. 2013. Bacillus subtilis biofilm induction by plant polysaccharides. Proceedings of the National Academy of Sciences, 110 (17), E1621-E1630.
Bruto,  M.,  C.  Prigent-Combaret,  D.  Muller  and  Y.  Moenne-Loccoz.  2014.    Analysis  of  genes contributing  to  plant-beneficial  functions  in  Plant  Growth-Promoting  Rhizobacteria  and related Proteobacteria. Scientific Reports, 4, p. 6261.
Carvalhais, Lilia C., Paul G. Dennis, Dayakar V. Badri, Gene W. Tyson, Jorge M. Vivanco, and Peer M. Schenk. 2013. “Activation of the Jasmonic Ac id Plant Defence Pathway Alters the Composition of Rhizosphere Bacterial Communities.” PLoS ONE 8(2):1 – 5.
Chattha, F.A, M. Nisa, M.A. Munawer and S. Kousar. 2016a. Coumarin ‐Based Heteroaromatics as Plant Growth Regulators. University of the Punjab, Pakistan. DOI: 10.5772/64854.
Chattha,  F.A,  M.  Nisa,  M.A.  Munawer  and  S.  Kousar.  2016b.  2-Methylquinolin-4(1H)-on-3- acetic acids as Inhibitors of seed germination and early growth of seedlings. International Journal  of  Agronomy  and  Agricultural  Research  (IJAAR)  Vol.  9,  No.  4,  p.  9-15.  ISSN: 2223-7054.
Chen,  Y.,  F.  Yan,  Y.  Chai,  H.  Liu,  R.  Kolter.  and  R.  Losick..  2013.  Biocontrol  of  tomato  wilt disease by Bacillus subtilis isolates from natural environments depends on conserved genes mediating biofilm formation. Environmental Microbiology, 15(3), 848-864.
Deka  Boruah,  H.,  B.  Rabha,  N.  Saikia  and  B.S.  Kumar.  2003.  Fluorescent  Pseudomonas influences  palisade  mesophyll  development  and  spatial  root  development  in  Phaseolus vulgaris. Plant and Soil 256: 291 – 301, 2003.
Fageria. N. K. 2013. The Role of Plant Roots in Crop Production. CRC Press, New York .
Gahoonia, T. S. and N. E. Nielsen. 2004. Root traits as tools for creating phosphorus efficient crop varieties. Plant Soil 260:47 – 57..
Goodwin, R. H and C. Taves. 1950. The effect of coumarin derivatives on the growth of Avena roots. Amer. Journ. Bot., 3"1: 224-23.
Hossain,  M.,  J.  Li,  S.  Guo  and  M.  Fujit.  2008.  Suppressive  Effects  of  Coumarins  on  Pumpkin Seedling  Growth  and  Glutathione  S-Transferase  Activity.  Journal  of  Crop  Science  and Biotechnology. Vol 11 (3) : 187-192.
Huang,  X.  F.,  J.M.  Chaparro,  K.F.  Reardon,  R.  Zhang,  Q.  Shen  and  J.M.  Vivanco.  2014. Rhizosphere  interactions:  root  exudates,  microbes,  and  microbial  communities.  Canadian Journal of Botany, 92, 267-275.
Imanparast,  F.,  A.  Tobeh,  A.  Gholipouri,  D.  Hassanpanah  and  L.  Imanparast.  2013.  Coumarin and  Jasmonic  acid  interaction  and  main  effectson  twopotato  mini-tubers  cultivars  yield, and  yield  components  gradation.  International  Journal  of  Agriculture  and  Crop Sciences (IJACS). Vol., 5 (16), 1800-1812.
Jacquot,  J.P  and  P.  Gadal.  2015.  Advances  In  Botanical  Research  Plant  Microbe  Interactions. London. Elsevier. ISBN: 978-0-12-420116-3.
Kai,  K.,  B.  Shimizu,  M.  Mizutani,  K.  Watanabe  and  K.  Sakata.  2006.  Accumulation  of coumarins in Arabidopsis thaliana. Phytochemistry. Vol. 67:379-86.
Kecskés, M. L., A. T. M. A. Choudhury, A. V. Casteriano, R. Deaker, R. J. Roughley, L. Lewin, R. Ford, and I. R. Kennedy. 2016. “Effects of Bacterial Inoculant Biofertilizers on Grow th, Yield and Nutrition of Rice Australia.” Journal of Plant Nutrition 39(3):377 – 88.
Kumar,  Vijay  and  Nivedita  Sharma.  2017.  “Plant  Growth  Promoting  Rhizobacteria  as  Growth
Promoters for Wheat : A Review.” Agricultural Research & Technology 12(4).
Lakshmanan,  V.,  G.  Selvaraj  and  H.P.  Bais.  2014.  Functional  soil  microbiome:  belowground solutions to an aboveground problem. Plant Physiology, 166, 689-700.
Lupini,  A.,  A.  Sorgonà,  Anthony,  J.  Miller  and  M.R.  Abenavoli.  2010.  Short-term  effects  of coumarin  along the  maize  primary  root  axis.  Plant  Signaling  and  Behavior  5:11,  1395- 1400.
Lupini, A., F. Araniti, F. Sunseri and M.R. Abenavoli. 2014. Coumarin interacts with auxin polar transport to modify root system architecture in Arabidopsis thaliana. Plant Growth Regul. Springer Science. DOI 10.1007/s10725-014-9893-0.
Majeed,  Afshan,  M.  Kaleem  Abbasi,  Sohail  Hameed,  Asma  Imran,  and  Nasir  Rahim.  2015. “Isolation  and  Characterization  of  Plant  Growth -Promoting  Rhizobacteria  from  Wheat Rhizosphere  and  Their  Effect  on  Pl ant  Growth  Promotion.” Frontiers  in  Microbiology 6(198):1 – 10.
Martínez-Gil, M., F. Yousef-Coronado and M.  Espinosa-Urgel. 2010. LapF, the second largest Pseudomonas putida protein, contributes to plant root colonization and determines bio ﬁlm architecture. Molecular Microbiology, 77, 549-561.
Naqqash,  T.,  S.  Hameed,  A.  Imran,  M.K.  Hanif,  A.  Majeed  and  J.  Elsas.  2016.  Differential Response  of  Potato  Toward  Inoculation  with  Taxonomically  Diverse  Plant  Growth Promoting Rhizobacteria. Frontiers in Plant Science. 7: 144.
Niro, E., R. Marzaioli, S. Crescenzo, B. Abrosca, S. Castaldi, A. Esposito, A. Fiorentino and F. Rutigliano.  2016.  Effects  of  the  allelochemical  coumarin  on  plants  and  soil  microbial community. Soil Biology and Biochemistry. 95. 30-39.
Noulas, Christos, Markus  Liedgens,  Peter  Stamp,  Ioannis Alexiou, and Juan  M. Herrera. 2010. “Subsoil  Root  Growth  of  Field  Grown  Spring  Wheat  Genotypes  (Triticum  Aestivum  L.) Differing in Nitrogen Use Efficiency Parameters.” Journal of Plant Nutrition 33(13):1887 – 1903.
Parnell,  J.  Jacob,  Randy  Berka,  Hugh  A.  Young,  Joseph  M.  Sturino,  Yaowei  Kang,  D.  M. Barnhart,  and  Matthew  V.  Dileo.  2016.  “From  the  Lab  to  the  Farm:  An  Industrial Perspective  of  Plant  Beneficial  Microorganisms.” Frontiers  in  Plant  Science 7(AUG2016):1 – 12.
Rudrappa, T., K.J. Czymmek, P.W. Paré and H.P. Bais. 2008. Root-secreted malic acid recruits beneficial soil bacteria. Plant Physiology, 148, 1547-1556.
Sari, Henny Puspita, Warnita Warnita, and Dan Indra Dwipa. 2019. “Pemberian Rizobakteri Dan Coumarin  Pada  Pertumbuhan  Dan  Pembentukan  Umbi  Tanaman  Kentang  (Solanum Tuberosum L).” Jurnal Agronomi Indonesia (Indonesian Journal of Agronomy) 47(2):188 – 95.
Svensson, S.B. 1972. The effect of coumarin on root growth and root histology. Physiol Plantar. 24:446-70.
Terraza,  P.,  A.  Villarroya,  P.  Fourcroy,  J.  Briat,  A.  Abadía,    F.  Gaymard,  J.  Abadía  and  A. Fernández. 2016. Accumulation and Secretion of Coumarinolignans and other Coumarins in Arabidopsis thaliana Roots in Response to Iron Deficiency at High pH. Front. Plant Sci. 7:1711.
Tkachenko, O., N. Evseeva,N. Boikova, L. Matora, Burygin, Y. Lobachev and S. Shchyogolev. 2015.  Improved  potato  microclonal  reproduction  with  the  plant  growth-promoting rhizobacteria Azospirillum. Agronomy for Sustainable Development. Volume 35, Issue 3, pp 1167 – 1174.
Van  Puyvelde,  S.,  L.  Cloots,  K.  Engelen,  F.  Das,  K.  Marchal  and  J.  Vanderleyden.  2011. Transcrip  to  meanalysis  of  the  rhizosphere  bacterium  Azospirillum  brasilen  sereveals  an extensive auxin response. Microbial Ecology, 61(4), 723-728.
Ziegler,  Jörg,  Stephan  Schmidt,  Ranju  Chutia,  Jens  Müller,  Christoph  Böttcher,  Nadine Strehmel,  Dierk  Scheel,  and  Steffen  Abel.  2016.  “Non -Targeted  Profiling  of  Semi-Polar Metabolites  in  Arabidopsis  Root  Exudates  Uncovers  a  Role  for  Coumarin  Secretion  and Lignification  during  the  Local  Response  to  Phosphate  Limitation.” Journal  of Experimental Botany 67(5):1421 – 32.