UJI BIOLOGIS EKSTRAK KASAR DAN ISOLAT ALBUMIN IKAN GABUS ( Ophiocephalus striatus ) TERHADAP BERAT BADAN DAN

## KADAR SERUM ALBUMIN TIKUS MENCIT
Matheus Nugroho
Dosen Program Studi Teknologi Hasil Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Yudharta  Pasuruan

## Abstrak
Tujuan penelitian ini untuk menentukan kualitas biologis ekstrak kasar dan isolat  albumin  ikan  gabus  yang  optimal  terhadap  berat  badan  dan  kadar serum albumin tikus mencit. Analisa data penelitian ini adalah  uji kualitas biologis  ekstrak  kasar  dan  isolat  albumin  pada  tikus  mencit,  perbedaan hasil  tiap  perlakuannya  dianalisa  dengan  Rancangan  Acak  Kelompok (RAK)  faktor  tunggal.  Hasil  terbaik  uji  kualitas  biologis  ekstrak  albumin kasar  dan  isolat  albumin  pada  tikus  Mencit  ( Mus  musculus  L. )  adalah berat  badan tertinggi 28,48 g,  pada mencit yang diberi perlakuan ekstrak albumin kasar. Kadar albumin serum tertinggi 2,22 g/dl pada mencit yang diberi perlakuan ekstrak albumin kasar.
Kata kunci : ikan gabus ( Ophiocephalus striatus ), kualitas biologis ekstrak kasar dan isolat albumin, tikus mencit ( Mus musculus L.)

## Abstract
The  objective  of  this  study  to  determine  the  biological  quality  of  crude extracts  and  albumin  isolates  of  gabus  fish  that  optimal  towards  body weight  and albumin  serum content  of murine rodents.  Analysis of data of this  study  is  to  test  the  biological  quality  of  crude  extract  and  isolate albumin  in  rats  mice,  differences  in  the  results  of  each  treatment  group were  analyzed  by  Randomized  Design  (RAK)  a  single  factor.  The  best results  test  of  the  biological  quality  of  crude  albumin  extract  and  albumin isolates  in  murine  rodents  ( Mus  musculus L.)  is  the  highest  weight  28.48 g, in rodent treated crude albumin extract. The highest contents of serum albumin 2.22 g / dl in rodent treated crude albumin extract.
Key words : gabus fish ( Ophiocephalus striatus ), the biological quality of crude extract and isolate albumin, murine rodents ( Mus musculus L.) Pendahuluan Salah satu protein sederhana  dalam  plasma  darah adalah  albumin.  Albumin  dalam tubuh  disintesa  di  dalam  hati dengan  jumlah  sangat  kecil. Kekurangan albumin dalam serum dapat mempengaruhi pengikatan  dan  pengangkutan senyawa-senyawa  endogen  dan
eksoden,  termasuk  obat-obatan, karena seperti diperkirakan distribusi obat keseluruh tubuh itu pengikatannya melalui fraksi albumin  (Goldstein et  al .,  1968;
Vallner,  1977;  Tandra et  al .,
1988).  Jika  kadar  albumin  serum berada  dibawah  nilai  normal, maka  fraksi  obat  yang  terikat protein tersebut berkurang, dengan  kata  lain  fraksi  obat bebas  banyak  sehingga  keadaan ini  dapat  menimbulkan  pengaruh obat yang tidak diinginkan.
Pengadaan  albumin  terutama untuk kasus bedah saat ini mencapai 91%, 2/3 albumin tersebut dipakai di bagian bedah dan sisanya
1/3  bagian  dipergunakan  untuk penanganan  penyakit  dalam.  Harga serum albumin untuk infus mencapai kurang  lebih  Rp.  1.500.000,-  per botol  kemasan  100  ml-20%  albumin (Alexander et al ., 1979; Tullis, 1997). Ikan gabus diketahui mengandung  protein  yang  lebih tinggi dibandingkan jenis ikan lainnya.  Kadar  protein  ikan  gabus mencapai 25,5%, lebih tinggi dibandingkan  protein  ikan  bandeng (20,0%),  ikan  emas  (16,05),  ikan kakap (20,0%), maupun ikan sarden (21,1%),  Kadar  albumin  ikan  gabus bisa  mencapai  6,22%  (Carvalo, 1998). Hasil  penelitian  Suprayitno (2003) tentang tingkat kesembuhan  luka  pada  tikus putih yang mengalami penurunan kadar albumin (1,8 g/dl) memberikan hasil yang siginifikan. Uji coba telah dilakukan  oleh  instalasi  gizi  dan bagian  bedah  RSUD.  Dr.  Syaiful Anwar  Malang  selama  1979-
1998,  berupa  pemberian  filtrat dari 2 kg/hari ikan gabus
terhadap  pasien  pasca  operasi, ibu  yang  baru  melahirkan  dan beberapa  pasien  luka  tusukan,
yang  mempunyai  kadar  albumin rendah (2,8 g/dl), selama 2-4 hari terjadi peningkatan albumin tubuh menjadi 4,4-5,5 g/dl (kadar
albumin  normal  tubuh  manusia), dan  permukaan  luka  mengalami penutupan.  Proses  pengukusan tersebut  dilakukan  pada  suhu  air mendidih (Soemarko, 1997).
Para praktisi kesehatan telah  memanfaatkan  ekstrak  ikan gabus sebagai makanan tambahan  (menu  ekstra)  untuk penderita terindikasi hipoalbuminemia, luka bakar, dan diet setelah operasi. Dari berbagai studi kasus dan penelitian diketahui bahwa ekstra ikan  gabus  secara  nyata  dapat meningkatkan kadar albumin pada  kasus-kasus  albuminemia dan mempercepat proses penyembuhan  luka  pada  kasus pasca  operasi  (Asikin,  1999; Sugihastutik, 2002; Nilasanti, 2003). Mudjiharto (2007) menjelaskan  bahwa  ikan  gabus merupakan bahan sumber albumin  yang  potensial.  Albumin ikan  gabus  dapat  digunakan sebagai  biofarma  dan  bahan substitusi albumin manusia. Agustini (2006) menjelaskan bahwa albumin ikan gabus secara nyata dapat meningkatkan kadar albumin serum dan mempercepat  penutupan  luka pada tikus percobaan.
Pengaruh  perlakuan  suhu tinggi  menyebabkan  perubahan melemahnya  enzim  proteinase dan  nilai  daya  cerna  protein (Nielsen et  al. ,  1988;  Deshpande and Damodaran, (1989). Perlakuan  panas  pada  albumin akan  menghasilkan  perubahan struktur  yang  tidak  dapat  balik ( irreversible ), yang terlihat
dengan meningkatnya protein yang  tidak  larut  dalam  air.
Pengaruh  perlakuan  panas  pada struktur albumin juga dapat melepaskan  terbukanya  struktur albumin, sehingga diperlukan perlakuan panas yang tepat pada struktur  protein  tersebut  (Stryer,
1981;  Slavik,  1982;  Arakawa et al ., 1991; Wicker et al ., 1986 dan Arntfield et al ., 1989). Albumin, sebagaimana protein  umumnya  sangat  retan terhadap pengaruh suhu, sehingga  penerapan  suhu  yang tepat  sangat  diperlukan  dalam proses untuk menghasilkan ekstrak  ikan  yang  berkualitas baik.  Karena  pemanasan  akan mempengaruhi permiabilitas dinding  sel  sehingga  proses pengeluaran plasma dari jaringan bisa lebih cepat. Penerapan suhu proses antara 70-80 o C
memberikan  hasil  yang  baik.
Pemanasan  pada  suhu  90 o C selama 10 menit telah menggumpalkan  sebagian  besar protein  plasma,  sehingga  tidak dapat diekstrak (de Man, 1977). Berdasarkan hasil penelitian  pada  ikan  gabus  dan ikan  tomang  didapatkan  kadar albumin  sebesar  1332,7  mg/100 g dan 1188,05 mg/100 g (Carvallo,  1998).  Analisa  kadar albumin  pada  filtrat  ikan  gabus hasil  pengukusan  suhu  98 o C adalah  19,4%  (Martini,  1998). Hasil analisa sterilisasi ikan gabus  pada  suhu  121 o C  selama
25 menit didapatkan kadar albumin  filtrat  adalah  116,419  ± 22,660 mg/100 g (Hidayati, 1999).
Hal ini semua memperkuat alasan  untuk  memperoleh  isolat albumin  hasil  ekstraksi  secara
pengukusan  ikan  gabus  untuk diuji  kualitas  biologis  terhadap tikus  mencit.  Ekstrak  albumin ikan  gabus  diharapkan  dapat sebagai pengganti serum albumin impor  dalam  upaya  membantu mempertahankan dan meningkatkan nilai gizi dan kesehatan  manusia,  sehingga dapat mengurangi anggaran biaya  kesehatan  yang  makin mahal.

## Materi dan Metode
Peralatan yang dipergunakan  pembuatan  ekstrak kasar  ikan  gabus  antara  lain  : pisau, gunting,
waterbath,
thermokopel, thermometer 100 o C, timbangan gelas ukur, kain saring,  plastik  dan  press  hidrolik. Peralatan  untuk  analisa  kadar albumin  antara  lain  :  kuvet diameter 1 cm, Shimadzu spectrophotometer UV-100-02 dan spectrophotometer SMA autoanalyzer . Kolom filtrasi gel ukuran (2,5 x  60  cm)  dengan  bahan  isian sephadex G-75 untuk memurnikan ekstrak kasar albumin. Bahan-bahan yang digunakan untuk ekstraksi adalah ikan  gabus  yang  diperoleh  dari bendungan  Karangkates  dalam keadaan  hidup  dan  aquadest. Bahan  untuk  uji  kadar  albumin menggunakan metode brom cresol green adalah buffer succinate (7 mmol/l pH 4,2), brom cresol  green  0,15  mmol/l,  brij  35 dan  aquadest  dapar  succinate (0,01  M;  pH  4,2),  untuk  kadar albumin setelah pemurnian kolom filtrasi  gel  pengujiannya  dengan UV,  bahannya  antara  lain  BSA
standar  0,5  g/l,  buffer  phosphat 0,1 M pH 7,1 dan aquadest. Bahan yang digunakan untuk  pemurnian  ekstrak  kasar albumin  terdiri  dari  1  g  sephadex G-7,  buffer  phosphat  (0,1  M  pH 7,1), glasswool dan  natrium  azid 0,2%. Analisa data yang digunakan dalam penelitian adalah uji kualitas biologis ekstrak  kasar  dan  isolat  albumin pada  tikus  mencit,  perbedaan hasil setiap perlakuannya dianalisa dengan Rancangan Acak  Kelompok  (RAK)  faktor tunggal. Hasil dan Pembahasan Berdasarkan Tabel 1. Menunjukkan bahwa berat  badan dan  kadar  albumin  serum  tikus mencit,  sebagai parameter status gizi mengalami peningkatan
setelah  pemberian  ekstrak  kasar
ikan  gabus  15  ml/hari.  Berat badan  tikus  setelah  diberi  makan gaplek  dan  isolat  albumin  ikan gabus  (setelah  pemurnian  kolom filtrasi gel sephadex G-75) bertambah  5,4%  dibandingkan berat  badan  sebelum  perlakuan, dan bertambah 32% dibandingkan  berat  badan  tikus kontrol  (diberi  pakan  gaplek, tanpa  ekstrak  kasar  ataupun isolat albumin). Begitu juga dengan tikus yang diberi perlakuan  pakan  gaplek  dan ekstrak  kasar  (tanpa  pemurnian), berat  badan  bertambah  14,9% dibandingkan berat badan sebelum perlakuan, dan bertambah  58%  dibandingkan berat badan tikus kontrol, sementara  berat  badan  tikus kontrol  mengalami  penurunan 22,7%,  jika  dibandingkan  berat badan sebelum perlakuan. Tabel  1.  Berat  Badan  dan  Kadar  Albumin  Serum  Tikus  Mencit  setelah perlakuan 15 hari (n = 18) Ransum Pakan Berat Badan (g) Kadar Albumin (g/dl) Pra Pasca 1.  Gaplek  +  air  putih +  isolat  albumin (n1) 22,67 23,89b (5,4;32)% 1,95b (33%) 2.  Gaplek  +  air  putih +  ekstrak  kasar (n2) 24,79 28,48c (14,9;58)% 2,22b (51%) (14%) 3.  Gaplek  +  air  putih (nc) 23,35 18,04a (22,7%) 1,47a (0%) BNT (  = 0,01) BNT (  = 0,01)
Keterangan  :  angka  berat  badan  dan  kadar  albumin  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama  pada kolom yang sama adalah tidak berbeda nyata, pada uji BNT (  =0,01)
 Pra = pra perlakuan; pasca = paska perlakuan
 Gaplek dan air putih diberikan ad libitum (tidak terbatas)
 Ekstrak kasar dan isolat albumin yang diberikan = 15 ml/hari
 n1 = tikus percobaan 1; n2 = tikus percobaan 2; nc = tikus kontrol
Protein rendah (15%), dapat menurunkan  secara  bermakna berat  badan  tubuh  hewan  coba itu.  Pengurangan  berat  badan  ini
terutama disebabkan karena berkurangnya lemak  tubuh akibat konsumsi  lemak  yang  terbatas  di dalam  gaplek  (0,7%).  Beberapa peneliti tersebut menyatakan bahwa  ada  korelasi  yang  tinggi (r  =  0,90-0,97)  antara  lemak tubuh dan berat badan. Pertambahan  berat  badan  untuk tikus  yang  diberi  ekstrak  ikan gabus  (ekstrak  kasar  ataupun isolat  albumin),  diduga  karena kandungan  lemak  ekstrak  ikan gabus  cukup  memadai  untuk konsumsi tubuh, yaitu 1,7% berat basah  dan  4%  berat  kering (Sediaoetama, 1985).
Hasil  analisis  ragam  (Tabel 1.) menunjukkan bahwa perlakuan  ransum  pakan  yang berbeda,  yaitu  kombinasi  gaplek dan  ekstrak  ikan  gabus  (isolat albumin  dan  ekstrak  kasar), dengan yang hanya diberi gaplek,
ternyata berpengaruh sangat nyata  terhadap  berat  badan  tikus (  = 0,01).
Berdasarkan data (Tabel 1.) menunjukkan bahwa berat  badan tikus tertinggi adalah 28,48 g, dan terjadi  pada  perlakuan  kombinasi antara  gaplek  dan  ekstrak  kasar, sementara untuk perlakuan
kombinasi  gaplek  dan  isolat albumin  berat  badan  adalah 23,89 g. Berdasarkan data (Tabel 1.) menunjukkan bahwa kadar albumin serum tikus untuk perlakuan kombinasi pakan gaplek dan isolat albumin (setelah  pemurnian  kolom  filtrasi gel  sephadex  G-75),  bertambah 33% dibandingkan  kadar albumin serum tikus kontrol (gaplek tanpa ekstrak  ikan  gabus).  Begitu  juga kadar  albumin  serum  tikus  untuk perlakuan kombinasi pakan
gaplek  dan  ekstrak  kasar,  jika dibandingkan dengan tikus kontrol  hasilnya  bertambah  51%, sementara  bila  kadar  albumin serum tikus hasil perlakuan kombinasi  pakan  gaplek  dan isolat albumin hasilnya bertambah  14%.  Bertambahnya kadar albumin serum tikus setelah  diberi  ekstrak  ikan  gabus (ekstrak kasar dan isolat albumin),  diduga  adanya  asam- asam  amino  penyusun  albumin yang  terdapat  pada  ekstrak  ikan gabus,  sementara  berkurangnya kadar albumin serum tikus kontrol, bila dibandingkan dengan tikus percobaan yang diberi perlakuan  ekstrak  ikan  gabus adalah  karena  akibat  kandungan protein  (albumin)  dalam  gablek sangat kurang. Rusli et al . (2006) menjelaskan hasil penelitian mengenai peningkatan kadar
albumin  pada  tikus  putih  setelah pemberian  ekstrak  ikan  gabus  2 ml/200 g = 0,36 g/dl; ekstrak ikan gabus  2,5  ml/200  g  =  0,56  g/dl; ekstrak  ikan  gabus  3  ml/200  g  = 1,0  g/dl.  Ekstrak  ikan  gabus dapat meningkatkan kadar albumin  tikus  putih  yang  telah mengalami  kerusakan  hati  akibat induksi karbontetraklorida. Pike  and  Brown  (1984), menjelaskan dalam penelitiannya, bahwa pengurangan kadar albumin
serum  tikus  setelah  diberi  diet gaplek  adalah  akibat  konsumsi asam  amino  yang  sangat  kurang dan  dalam  waktu  yang  relatif lama,  sehingga  sintesis  protein albumin  oleh  hepar  mengalami hambatan. Pada saat pembedahan  untuk  pengambilan darah, secara visual terlihat adanya  kecenderungan cardiac
vascular tikus  kontrol  mudah pecah,  hal  tersebut  diduga  tikus dengan  kadar  proteinnya  yang rendah, ketahanan tubuhnya menjadi berkurang. Koneman (1971), menjelaskan dalam penelitiannya  bahwa  tikus  yang lapar gizi, individu tersebut cenderung mudah terserang infeksi. Peningkatan  kadar  albumin serum  tikus  yang  diberi  ekstrak kasar  mencapai  51%,  hal  ini diduga kandungan protein ekstrak  kasar  masih  kompleks dan  tinggi  (protein  globulin  dan lipoprotein),  dengan  komposisi asam  amino  yang  relatif  masih lengkap,  yang  meliputi  asam amino  esensial  dan  asam  amino non  esensial  dibandingkan  isolat albumin. Buchanan (1978), melaporkan  bahwa  pengurangan albumin serum tikus juga
dipengaruhi oleh hambatan sintesa fraksi globulin oleh hepar, sebab pada kondisi kadar globulin turun tikus mudah terserang infeksi, sehingga menurunkan kondisi normal albumin  serum.  Suryadi et  al ., (1991)    menjelaskan  bahwa menurunnya sintesa albumin karena  akibat  kurang  gizi,  hal tersebut  dapat  tercermin  dari kadar biokimia darah, yang meliputi turunnya fraksi-fraksi albumin,  globulin,  lipoprotein  dan total  protein  dalam  tubuh.Tandra et  al. (1988),  menyatakan  bahwa asam  amino  utama  penyusun albumin  adalah  asam  aspartat dan  glutamat.  Suprayitno  (2003), menyatakan  kadar  asam  amino tertinggi  dalam  albumin  ikan gabus  adalah  asam  glutamat, leusin dan asam aspartat, seperti tersaji pada Tabel 2. Tabel 2.  Kadar asam amino dalam albumin yang terdapat 100 gram dari setiap gram bagian yang dapat dimakan Ikan gabus NO Jenis Asam Amino Albumin Ikan Gabus (%) 1 Fenialanin 7,5 2 Isoleusin 8,34 3 Leusin 14,98 4 Metionin 0,81 5 Valin 8,66 6 Treonin 8,34 7 Lisin 17,02 8 Histidin 4,16 9 Asam Aspartat 17,02 10 Asam Glutamat 30,93 11 Alanin 10,07 12 Prolin 5,19 13 Serin 11,02 14 Glisin 6,99 15 Sistein 0,16 16 Tirosin 7,49 Sumber : Suprayitno (2003) Hasil  analisis  ragam  (Tabel 1.) menunjukkan bahwa perlakuan ransum pakan berbeda,  yang  meliputi  gaplek dengan ekstrak ikan gabus (isolat albumin  dan  ekstrak  kasar),  dan
yang hanya diberi gaplek, ternyata berpengaruh sangat
nyata  terhadap  kadar  albumin serum  tikus  (  =  0,01),  tetapi untuk perbandingan antara perlakuan  kombinasi  gaplek  dan isolat albumin dengan gaplek dan ekstrak kasar, hasil analisis ragam  tidak  berbeda  nyata,  hal ini menunjukkan bahwa meskipun kedua  jenis  ekstrak  ikan  gabus mempunyai  kadar  albumin  yang berbeda  yaitu  1,77  mg/g  untuk isolat  albumin,  dan  152  mg/g untuk  ekstrak  kasar,  namun karena  proses  absorpsi  protein terlarut  dalam  saluran  cerna tubuh  tikus  menghasilkan  kadar albumin  serum  tikus  yang  tidak berbeda  nyata,  artinya  secara kuantitas  protein  dalam  isolat albumin  hasil  pemurnian  kolom filtrasi  gel  sephadex  G-75  jauh lebih  mudah  terabsorpsi  dalam saluran  cerna  tikus,  dibandinkan protein ekstrak kasar.

## Kesimpulan
Uji  kualitas  biologis  ekstrak albumin  kasar  dan  isolat  albumin pada tikus Mencit ( Mus musculus L. )  adalah  berat  badan  tertinggi 28,48  g,  pada  mencit  yang  diberi perlakuan  ekstrak  albumin  kasar. Kadar  albumin  serum  tertinggi 2,22 g/dl pada mencit yang diberi perlakuan ekstrak albumin kasar.
Saran
Berdasarkan  hasil  terbaik penelitian tersebut diatas, disarankan untuk dilakukan penelitian  lanjutan  lainnya  yang terkait yaitu bagaimana pengaruh ekstrak albumin ikan gabus terhadap kadar protein dan
perkembangan pembentukan jaringan  sel  baru  akibat  luka  pada tikus mencit

## Daftar Pustaka
Agustini,  D.F.,  2006.  Pengaruh Pemberian  Serbuk  Albumin Ikan  Terhadap  Penutupan Luka  Pada  Tikus  Putih
Wistar  ( Rattus  novergicus ). Fakultas Perikana. Universitas Brawijaya. Malang.  Tidak  Diterbitkan. Hal. 102
Alexander,  M.R.  J.J.  Ambre,  B.I. Liskon  and  D.C.  Trash,  1979. Therapeutic  Use  Of  Albumin. JAMA., 241 : 2527-2529.
Arakawa, T., Y.A. Kita and  L. Narhi, 1991. Protein-Ligand Interaction    as  a    Method  to Study  Surface    Properties    of Proteins.    Pages  87-125    in:
Methods    of    Biochemical Analysis.    C.    H.   Suelter,   ed. J. Wiley  & Sons:  New York Arntfield,  S.D.,  E.D.  Murray,  M.A.H. Ismond  and  A.M.  Bernatsky, 1989.  Role  of  The  Thermal Denaturation-Aggregation Relationship  in  Determining The  Rheological  Properties  of Heat  Induced  Networks  for Ovalbumin and Vicilin. J. Food Sci. 54: 1624- 1631 Asikin,  A.,  1999.  The  Impact  of
Snakehead  Filtrate  Extra
Menu  Administration for  Pre and  Post-operative  Patients in  Saiful  Anwar  General Hospital  Malang,  (Thesis). (in Indonesian)
Buchanan, N., 1978. Drug Kinetics in Protein –  Energy  Malnutrition.
S. Afr. J. Med., Page. 53:327 Carvallo,  Y.  N.,  1998.  Study  Profit Asam Amino, Albumin, Mineral Zn pada Ikan Gabus
( Ophiocephalus  sriatus )  dan Ikan  Tomang  (Ophiocephalus
Micropeltus). Fakultas Perikanan. Universitas Brawijaya. Malang. Hal 28-30. De Man, J. M., 1997. Kimia Pangan. Edisi 2. Penerbit Institut Teknologi Bandung. Bandung. 550 hal Deshpande, S.S. and S. Damodaran,  1989.  Structure Digestibility Relationship of Legume Proteins. J. Food Sci., 54: 108-113 Goldstein,  A.,  L.  Aronow  and  S.  M. Kalman,  1968.  Principles  of Drug  Action-The  Basis  of Pharmacology. New York. Page, 45-112. Hidayati,  O.,  1999.  Study  Kadar Albumin,  Zn  dan  TVB  Filtrat Ikan  Gabus  ( Ophiocephalus sriatus )  pada  Lama  Sterilisasi dan Penyimpanan yang Berbeda.  Laporan  Penelitian. Fakultas Perikanan. Universitas Brawijaya.  Malang. Hal 36. Koneman, E.W., 1971. Inflammation. Dalam  Mincler, J., H.B. Anstall dan T.M. Mincler (eds) Pathobiology = an Introduction. The C.V. Mosby Co. St. Louis. Page. 184-204 Martini, N. D., 1998. Pengaruh Lama Pengukusan Terhadap Kandungan  Albumin,  Asam Amino  dan  Zn  pada  Ikan Gabus ( Ophiocephalus sriatus ).  Laporan  Penelitian. Fakultas Perikanan. Universitas Brawijaya.  Malang. Hal. 36. Mudjiharto,  2007.  Fish  as  Human Serum Albumin Substitute. http://www.prasetya.brawijaya. ac.id.  Retrieved  18  August 2009 Nielsen,  S.,  1998.  Food  Analysis. London. Glisers Nilasanti,  I.,  2003.  Administration  of Snakehead  Fish  as  an  Extra Menu  for  Hypoalbuminemia Patient  in  Bapelkes  Ward General Hospital Ngudi Waluyo Wlingi, Blitar. (Thesis), Polytechnic  of  Health  MoH Malang. (in Indonesian) Pike, R. and M. Brown, 1984.
Nutrition: an integrated approach. New York: Macmillan Rusli,  Jumain  dan  M.  Saud.  2006. Terapi  Albumin  dalam  Ekstrak Ikan Gabus Terhadap Kerusakan  Hati  Tikus  Putih. Jurusan  Farmasi  Politeknik Kesehatan  Makasar.  Hal.  95- 98
Sediaoetama,  A.D.,  1985.  Ilmu  Gizi. Jilid  1.  Dian  Rakyat.  Jakarta. Hal : 10-125 Slavik,  J.,  1982.  Anilinonaphtalene Sulphonate  as  a  Probe  of Membrane  Composition  and Function.  Biochim.  Biophys. Acta, 694, 1 –25 Soemarko,  1997.  Pengaruh  Diet Ikan Kutuk dan Telur Terhadap Peningkatan Albumin dan Penutupan Luka Operasi. Rumah Sakit Dr. Saiful Anwar. Malang. Hal 1-28. Stryer,  L.,  1981.  Biochemistry.  2nd.
949  pp.  San  Fransisco:W.H. Freeman & Co. Sugihastutik, 2002. Administration of Snakehead  Fish  Filtrate  for Hypoalbuminemia  Patients  in General  Hospital  Dr.  Subandi Jember  (Thesis).  Polytechnic of  Health  MoH  Malang.  (in Indonesian)
Suprayitno,  E.  2003.  Penyembuhan
Luka  dengan  Ikan  Gabus. Fakultas Perikanan. Universitas Brawijaya. Malang Suyardi,  A.,  S.  Sayogo  dan  E.R. Soegih,  1996.  Kadar  Biokimia
Darah  pada  Wanita  Hamil Trimester  III  dengan  Keadaan
Gizi  Kurang  di  Rumah  Sakit Bersalin DKI Jaya. J. Medika Tandra, H., H.W. Soemartono dan A. Tjokroprawiro, 1988. Metabolisme  dan  Aspek  Klinik Albumin. J. Med., 3 : 249-258.
Tullis,  J.  L.,  1997.  Albumin  2
Guidelines  for  Clinical  Use. JAMA., 237 : 460-463. Vallner, J. J., 1977. Binding of Drugs By Albumin and Plasma Protein.  J.  Pharm  Sci.,  66  ; 447-449. Wicker, L., T.C. Lanier, D.D. Hamann  and  T.  Akahane, 1986.  Thermal  Transitions  in
Myosin-ANS Fluorescence and Gel  Rigidity.  J.  Food  Sci.  51: 1540-1543, 1562