## POTENSI EKSTRAK ETANOL SELEDRI (Apium graveolens) UNTUK MASKULINISASI IKAN CUPANG (Betta sp)
Potential of Celery ( Apium Graveolens ) Ethanol Extract for Masculinization of Betta Fish ( Betta sp)
Awaludin 1* , Diana Maulianawati 1 , Muhammad Adriansyah 1
1 Akuakultur, FPIK Universitas Borneo Tarakan, Jl. Amal Lama, No.01, Tarakan *Korespondensi: awaludin@borneo.ac.id

## ABSTRAK
Ikan cupang salah satu ikan hias primadona karena memiliki nilai ekonomis yang tinggi.  Ikan  cupang  yang  bernilai  ekonomis  yaitu  ikan  cupang  jantan,  karena  memiliki bentuk  yang  indah.  Untuk  meningkatkan  produksi  ikan  jantan,  langkah  yang  dapat dilakukan dengan cara maskulinisasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak  seledri  sebagai  agen steroid  like yang  berperan  dalam  proses  maskulinisasi terhadap  persentase  ikan  cupang  jantan.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap (RAL) dengan 6 perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan dalam penelitian ini adalah larva  ikan  cupang  umur  7  hari  yang  direndam  dalam  media  ekstrak  seledri  dengan konsentrasi  berbeda  selama  8  jam.  Perlakuannya  adalah  penambahan  ekstrak  seledri sebanyak 5 mg / L (P1), 10 mg / L (P2), 20 mg / L (P3), 40 mg / L (P4), 80 mg / L (P5) dan  tanpa  penambahan  ekstrak  seledri  sebagai  kontrol  (P0).  Pengujian  Pengujian fitokimia menunjukkan ekstrak etanol seledri mengandung steroid, flavonoid, tannin dan fenol.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  penambahan  ekstrak  seledri  dengan konsentrasi  yang  berbeda,  berpengaruh  secara signifikan  pada  persentase  ikan  cupang jantan, namun tidak berpengaruh terhadap tingkat kelangsungan hidup.
Kata  Kunci:  Ekstrak  Etanol  Seledri;  Ikan  cupang;  Maskulinisasi;  Perendaman;  Sex Reversal

## ABSTRACT
Betta  fish  is  one  of  the  excellent  ornamental  fish  because  it  has  high  economic value. Betta fish that have economic value are male betta fish because it has a beautiful shape. To increase male fish production, steps can be done by masculinization. This study aims to determine the effect of celery extract as a steroid-like agent that plays a role in the process  of  masculinization  of  the  percentage  of  male  betta  fish.  This  study  uses  a completely randomized design (CRD) with 6 treatments and 3 replications. The treatment in this study was 7-day-old betta fish larvae soaked in celery extract media with different concentrations for  8  hours.  The  treatment is the addition  of  celery  extract as much  as 5 mg / L (P1), 10 mg / L (P2), 20 mg / L (P3), 40 mg / L (P4), 80 mg / L (P5) and without the  addition  of  celery  extract  as  a  control  (P0).  Testing  Phytochemical  testing  shows celery  ethanol  extract  containing  steroids,  flavonoids,  tannins,  and  phenols.  The  results showed  that  the  addition  of  celery  extract  with  different  concentrations  significantly affected the percentage of male betta fish, but did not affect the survival rate.
Keywords : Betta fish; Celery Ethanol Extract; Immersion; Masculinization; Reversal Sex

## PENDAHULUAN
Produksi ikan hias 2019 mencapai 33,89 juta ekor atau sekitar 66,78% dari jumlah  target,  sehingga  hal  ini  harus terus  ditingkatkan  jumlah  produksi  ikan hias  (KKP,  2019).  Salah  satu  ikan  hias yang  diproduksi  adalah  ikan  cupang ( Betta sp). Ikan cupang ( Betta sp) adalah ikan  air  tawar  yang  berasal  dari  daerah tropis dan banyak ditemukan di perairan Asia  Tenggara,  termasuk  Indonesia dengan beragam jenisnya. Ikan ini hidup di  alam  bebas  dengan  habitatnya  yang berada  di  rawa-rawa,  danau  dan  sungai dengan  arus  yang  tenang.  Ikan  cupang merupakan  ikan  air  tawar  yang  menjadi primadona  karena  nilai  ekonomis  tinggi dan  banyak  terdapat  di  pasaran  dan menjadi  salah  satu  komoditas  ekspor Indonesia
Ikan  cupang  memiliki  keinda-han bentuk  sirip  dan  warna,  sehingga kerapkali  diikutkan  dalam  ajang  kontes maupun  pameran  ikan  hias.  Biasanya penampakan  dari  warna  dan  keindahan bentuk  sirip  ikan  cupang  terdapat  pada ikan  jantannya.  Ikan  cupang  jantan memiliki warna mencolok, sirip panjang dan  tubuh  yang  lebih  kecil  daripada betinanya.  Karena  keindahan  bentuk sirip  dan  warnanya  inilah  ikan  cupang jantan  memiliki  harga  jual  yang  lebih tinggi dibandingkan dengan ikan cupang betina. Sehingga diperlukan upaya untuk meningkatkan  jumlah  produksi  ikan jantan  melalui  proses  maskulinisasi untuk mengarhakan ikan menjadi jantan.
Metode  maskulinisasi  telah  ba- nyak  diterapkan  dengan  berbagai  cara seperti penggunaan hormon dan peruba- han  lingkungan.  Pemberian  hormon androgen  pada  fase  diferensiasi  gonad pada  ikan  mampu  meningkatkan  proses maskulinisasi.  Dengan  pemberian  hor- mon ini mampu memicu ransangan pada sistem  syaraf  dan  memacu  pelepasan hormon  gonadotropin  untuk  pemben- tukan gonad jantan (Arfah et al. , 2013). Penggunaan  hormone  dalam  proses maskulinisasi  telah  banyak  dilakukan untuk meningkatkan ikan menjadi jantan. Upaya ini telah banyak dilakukan pada beberapa ikan dengan menggunakan  bahan  yang  berbeda, salah satunya hormon 17α- metiltestoteron,  tetapi  hormon  sintetis 17α-mt  termasuk  dalam  klasifikasi  obat keras  yang  berarti bahwa peredaran  dan pemanfaatannya menjadi semakin dibatasi  terkait  dengan  dampak  negatif yang dapat ditimbulkan, baik pada ikan, manusia maupun lingkungan. Homllin et al (2009)  melaporkan  bahwa  hormone 17α-metiltestosteron  telah  dilarang  da- lam kegiatan akuakultur karena sulit ter- degradasi  secara  alami  sehingga  berpo- tensi dapat merusak lingkungan. Sehing- ga  diperlukan  dicari  bahan  alam  peng- ganti  hormone  sistetik,  untuk  proses maskulinisasi.
Bahan  alam  yang  dapat  diguna- kan  dalam  proses  maskulinisasi  ikan Betta splendens yaitu ekstrak Pimpinella alpine mengandung bahan aktif stigmas- terol  yang  bersifat  afrodi-siak  (Afrah et al .,  2013)  dan tumbuhan  Lunasia  amara yang  bersifat  afrodisiak  yang  mampu meningkatkan  libido  rusa  Timur  jantan, sehingga  berpeluang  untuk  digunakan dalam  maskulinisasi  ikan  (Zumrotun et al .,  2006).  Selain  tumbuhan  tersebut yang  diduga  mampu  memberikan  mas- kulinisasi yaitu seledri ( Apium graveolens ). Seledri  mengandung  flavonoid,
fenol, saponin, kumarin, dan steroid atau triterpenoid.  Samejo et  al .,  (2013) mengemukakan  bahwa  steroid  merupa- kan terpenoid lipid yang dikenal dengan empat  cincin  kerangka  dasar  karbon yang menyatu. Struktur senyawanya pun cukup  beragam.  Perbedaan  tersebut disebabkan  karena  adanya  gugus  fungsi teroksidasi  yang  terikat  pada  cincin  dan terjadinya  oksidasi  cincin  karbonya. Putra  (2011), menyatakan bahwa  proses maskulinisasi menggunakan bahan alami  yang  memiliki  senyawa  steroid yang  sama  dengan  ginseng  yaitu purwoceng  (Pimpinella  alpina)  dengan dosis  20  mg/L  dan  lama  perendaman selama  8  jam  menghasilkan  ikan  nila jantan sebesar 73.3%. Selain purwoceng,  bahan  alami  lainnya  yakni akar  ginseng  yang  digunakan  oleh
Ferdian et  al., (2017)  untuk  maskuli- nisasi  dengan  dosis  3  mg/L  dan  lama perendaman larva  selama 8  jam mampu menghasilkan ikan cupang jantan sebesar 95,05%. Berdasarkan hal tersebut  peneliti  bermaksud  menggu- nakan  tumbuhan  seledri  ( A.  graviolens ) yang  mengandung  hormon  steroid  yang dapat  memacu  pembalikan  arah  jenis kelamin  pada  ikan  cupang,  maskulini- sasi  menggunakan  ekstrak  tumbuhan seledri diharapkan juga dapat diterapkan sehingga dapat meningkatkan persentase ikan jantan yang lebih unggul.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam
penelitian  antara  lain  beaker  glass, evaporator,  akuarium  volume  30  liter dan  Erlenmeyer.  Bahan  yang  digunakan antara lain larva ikan cupang ( Betta sp ) , daun seledri, aquades, ethanol 70%.
Ekstraksi Seledri (A. Graveolens) Ekstraksi dengan metode maserasi.  Daun  seledri  yang  digunakan terlebih  dahulu  dikeringkan,  kemudian blender  hingga  halus.  Ekstraksi  dengan pelarut alkohol 70%
dengan perbandingan  (3:1)  alkohol  (3  liter)  dan simplisia  (1  kg)  kemudian  direndam selama  3x24  jam  pada  suhu  kamar. Cairan  ekstrak  yang  telah  dimaserasi kemudian  disaring  dan  di  evaporasi. (Awaludin dan Ridwan, 2016).

## Uji Fitokimia
Pengujian  fitokimia  dilakukan dengan  metode  tabung  dengan  cara mengambil  ekstrak  ethanol  tumbuhan seledri,  kemudian  ditambahkan  reagen sesuai  dengan  senyawa  yang  akan diidentifikasi  yakni  alkaloid,  flavonoid dan  steroid  (Harborne,  1996).  Uji Fitokimia  meliputi  uji  alkaloid,  uji steroid/triterpenoid,  flavonoid,  tanin,
saponin dan fenol. Prosedur pengujiannya adalah sebagai berikut :

## a. Uji Alkaloid
Sampel  0,01  gram  dilarutkan dalam  beberapa  tetes  asam  sulfat  2N. Pengujian  menggunakan  3  pereaksi alkaloid  yaitu  pereaksi  Dragendorff, pereaksi Mayer dan pereaksi Wagner.

## b. Steroid/Triterpenoid
Sampel  0,01  gram  dilarutkan dalam  2  mL  kloroform  dalam  tabung reaksi yang kering, setelah itu ditambahkan 10 tetes anhidra asetat dan 3  tetes  asam  sulfat  pekat. Reaksi positif ditunjukkan dengan terbentuknya larutan  berwarna  merah  untuk  pertama kali kemudian berubah menjadi biru dan hijau.

## c. Flavonoid
Sampel  0,01  gram  ditambahkan 0,1  mg  serbuk  magnesium  dan  0,4  mL amil  alkohol  (campuran  asam  klorida 37%  dan  etanol  95%  dengan  volume yang sama) dan 4 mL alcohol kemudian dicampur  dikocok.  Adanya  flavonoid ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna merah,  kuning  atau  jingga  pada  lapisan amil alkohol.

## d. Saponin (Uji Busa)
Saponin  dapat  dideteksi  dengan uji  busa  dalam  air  panas.  Busa  yang stabil  selama  30  menit  dan  tidak  hilang pada  penambahan  1  tetes  HCL  2N menunjukkan adanya saponin.
e. Fenol (Pereaksi FeCl 3 )
Sampel  0,01  gram  diekstrak dengan 20 mL etanol 70%. Larutan yang dihasilkan  diambil  sebanyak  1  mL kemudian  ditambahkan  2  tetes  larutan FeCl 3 5%. Adanya senyawa fenol dalam bahan  ditunjukkan  dengan  terbentuknya warna hijau atau hijau biru.

## Uji BSLT
Pengujian BSLT dilakukan dengan  pembuatan  larutan  uji.  Larutan uji  kemudian  dibuat  dengan  konsentrasi 1000, 500, 300, 100, 50, 10, dan 0 mg/L,
masing-masing  dipipet  sebanyak  5  mL dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 20 ekor larva artemia yang telah berumur 1 hari.  Setiap  konsentrasi dilakukan  3  kali  pengulangan  dan dibandingkan dengan kontrol. Pengama- tan  I  dilakukan  selama  6  jam  dengan selang  waktu 1  jam.  Selanjutnya  penga- matan  II  dilakukan  pada  12,  18  dan  24 jam.  Jumlah  larva  artemia  yang  mati dihitung tiap 6, 12, 18 dan 24 jam.

## Pemijahan Induk Ikan Cupang
Pemijahan ikan cupang memodifikasi  dari  penelitian  Purwati et
al (2004).  Pemijahan  ikan  cupang dilakukan  dengan  cara  memasukkan induk  jantan  terlebih  dahulu  ke  dalam wadah  pemijahan,  selanjutnya  induk betina  yang  ditempatkan  pada  gelas plastik  transparan  ke  dalam  wadah pemijahan.  Tujuan  dari  penempatan induk  betina  plastik  di  dalam  gelas plastik transparan yaitu untuk
merangsang  induk  jantan  agar  segera membuat  sarang  berupa  gelembung- gelembung  busa  sebelum  terjadi  proses pemijahan,  selain  itu  untuk  mengurangi kontak fisik (serangan) dari induk jantan yang  dapat  menyebabkan  induk  betina mengalami  kerusakan  pada  bagian tubuh, terutama pada bagian sirip selama proses  pemijahan.  Penempatan  induk betina  di  dalam  gelas  plastik  transparan dilakukan  selama  kurang  lebih  12  jam hingga  induk  jantan  selesai  membuat sarang,  sehingga  ketika  induk  betina dilepaskan  dari  gelas  plastik  transparan kedalam  wadah  pemijahan,  proses pemijahan  akan  segera  berlangsung. Telur  hasil  proses pemijahan  yang  telah selesai  dibuahi  akan  menempel  pada sarang  di  bagian  tepi  wadah  pemijahan kemudian  kedua  induk  dikeluarkan  dari wadah pemijahan.

## Persiapan Wadah Pemeliharaan
Persiapan  wadah  pemeliharaan dimulai dengan pembersihan selanjutnya dilakukan  pemasangan  label  perlakuan sesuai rancangan penelitian dan diisi air dengan volume 30 L.

## Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan adalah larva  ikan  cupang  yang  berumur  7  hari yang diperoleh dari pemijahan alami.

## Perendaman Larva
Proses  perendaman  larva  dalam ekstrak  seledri  disesuaikan  dengan perlakuan.  Larva  yang  digunakan  beru- mur  7  hari.  Wadah  perendaman  meng- gunakan akuarium soliter bervolume 2 L pada  setiap  masing-masing  wadah  diisi sebanyak  20  ekor  larva  dalam  1  L ektrak.  Lama  waktu  perendaman  8  jam dan selama perendaman diamati kelang- sungan  hidupnya.  Setelah  8  jam,  larva dipindahkan  pada  wadah  pemeliharaan. Metode  penelitian  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  metode eksperimental  (percobaan).  Rancangan yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  rancangan  acak  lengkap  (RAL) dengan  6  perlakuan  dan  3  kali  ulangan. Perlakuan yang digunakan adalah perendaman  larva  ikan  cupang  yang berumur  7  hari  dengan  ekstrak  seledri dengan lama perendaman 8 jam (Ferdian et  al., 2017).  Pada  saat  perendaman wadah  disiapkan  berupa sterofoam soliter  berjumlah  18  buah  dengan volume  2  liter  yang  kemudian  diisi  air dengan ekstrak sebanyak 1 liter setelahnya  dimasukkan  beruayak  ikan cupang  sebanyak  20  ekor  perakuarium kemudian diamati sintasan selama perendaman  8  jam.  Adapun  dosis  yang digunakan adalah sebagai berikut :
P0 = Kontrol (tanpa ekstrak seledri) P1 = Konsentrasi ekstrak seledri 5 mg/L (Ferdian et al., 2017) P2  =  Konsentrasi  ekstrak  seledri  10
mg/L
P3  =  Konsentrasi  ekstrak  seledri  20
mg/L
P4  =  Konsentrasi  ekstrak  seledri  40 mg/L P 5 =  Konsentrasi  ekstrak  seledri  80 mg/L

## Pemeliharaan Larva
Larva yang telah direndam,
dipelihara  di  dalam  box  steroform dengan  volume  30  liter  selama  60  hari. Pada  waktu  pemeliharaan,  larva  diberi pakan  alami  berupa  Infusoria, Daphnia sp,  dan  Jentik  Nyamuk  secara ad libitum . Pakan alami Infusoria diberikan untuk  larva  setelah  kuning  telur  habis yaitu  pada  saat  larva  berumur  4  hari. Pada  hari  keempat,  larva  mulai  diberi pakan  alami  Infusoria  (4-15  hari), Daphnia sp  (10-30  hari)  dan  Jentik Nyamuk  (25-60  hari).  Pemberian  pakan dilakukan  secara ad  libitum (Sugandy, 2001).

## Identifikasi Kelamin Ikan
Identifikasi  kelamin  dilakukan dengan  pengamatan  secara  morfologi karena tidak perlu membunuh hewan uji untuk  melakukan  pengamatan  terhadap organ  reproduksi.  Cara  ini  ideal  untuk ikan-ikan  yang  memiliki  dimorfisme yang jelas antara jantan dengan betinanya.  Beberapa  jenis  ikan  hias seperti  guppy,  rainbow,  cupang  dan kongo  mudah  dibedakan  antara  jantan dengan  betina  berdasarkan  morfologi tubuhnya (Zairin, 2002).

## Parameter Penelitian
1. Persentase Ikan Cupang Jantan Pengukuran  ikan  cupang  jantan dilakukan dengan membandingkan jumlah  ikan  jantan  dengan  jumlah  ikan yang  hidup  pada  akhir  pemeliharaan. Rumus yang digunakan untuk menghitung  persentase  ikan  jantan menurut Zairin (2002) sebagai berikut :

## 2. Survival Rate Pasca Pemeliharaan
Kelangsungan  hidup  merupakan persentase jumlah ikan yang hidup pada akhir  penelitian  setelah  dibagi  jumlah ikan  pada  awal  penelitian.  Menurut Priyono et  al (2013),  kelangsungan hidup  ( survival  rate )  dapat  diketahui
dengan  menggunakan  rumus  sebagai berikut :
Dimana: SR = Survival rate (%)
Nt  =  Jumlah  ikan  yang  hidup  pada akhir  pengamatan (ekor)
No =  Jumlah ikan awal (ekor)

## 3. Kualitas Air
Kualitas  air  yang  diukur  dalam penelitian  ini  adalah  suhu,  derajat keasaman  (pH)  dan  oksigen  terlarut ( Disolved Oxygen ). Pengukuran parameter  tersebut  dilakukan  pada  awal pemeliharaan  dan  akhir  pemelihraan kemudian  dibuat  rentang  nilai  nya masing-masing parameter.

## Analisis Data
Data-data  yang  diperoleh  selama penelitian  kemudian  dianalisis  secara statistik  dengan  menggunakan  analisis varian ( One-Way ANOVA) untuk mengetahui  perbedaan  antara  perlakuan dan kontrol untuk mengetahui signifikansi  perbedaan  rata-rata  dengan tingkat kepercayaan 95%. Program yang digunakan  untuk  menganalisis  data tersebut  menggunakan  software  SPSS Versi 21 dan dilakukan uji lanjut Benda Nyata Terkecil apabila hasil menyatakan berbeda nyata.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Uji Fitokimia Ekstrak Seledri
Uji  fitokimia  digunakan  untuk mendeteksi  senyawa  tumbuhan  berda- sarkan  golongannya  sebagai  informasi awal dalam mengetahui golongan senya- wa  kimia  yang  mempunyai  aktivitas biologi dari suatu tanaman. Uji fitokimia dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan senyawa  aktif  yang  terdapat  pada tumbuhan  seledri.  Uji  Fitokimia  meli- puti  uji  alkaloid,  uji  steroid,  flavonoid, tanin,  saponin  dan  fenol.  Hasil  uji fitokimia dapat dilihat pada Tabel 1.
Uji  alkaloid  pada  ekstrak  seledri ini  dilakukan  dengan  menggunakan pereaksi  Meyer.  Pada  uji  alkaloid dengan pereaksi Meyer, indikator positif dari  pengujiannya  adalah  terbentuknya endapan  putih  setelah  ditambahkan pereaksi.  Hasil  uji  alkaloid  menunjuk- kan  bahwa  tidak  terbentuk  endapan putih pada ekstrak seledri (Gambar 1A). Hal  ini  menunjukkan  bahwa  sampel tersebut  negatif  mengandung  alkaloid.
Pada uji steroid, reaksi positif ditunjukkan dengan terbentuknya
larutan  berwarna  merah  untuk  pertama kali kemudian berubah menjadi biru dan hijau.  Senyawa  fenol  dalam  bahan ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna hijau  atau  hijau  biru.  Hasil  pengujian senyawa fenol dengan indicator berwarna  hijau  kecoklatan  menandakan positif  senyawa  fenol  (Gambar  1B). Adanya  flavonoid  ditunjukkan  dengan terbentuknya  warna  merah,  kuning  atau jingga  pada  lapisan  amil  alkohol. Terbentuknya  warna  kuning  kehijauan yang  menunjukkan  adanya  senyawa
flavonoid  pada  ekstrak  seledri  (Gambar 1C).  Terbentuknya  warna  hijau  pekat yang  menunjukkan  adanya  senyawa steroid  pada  ekstrak  tumbuhan  seledri (Gambar  1D).  Uji  tanin  menunjukkan terbentuknya  warna  hijau  kehitaman pada  sampel.  Indikator  positif  dari  uji tanin adalah terbentuknya warna biru tua atau hijau kehitaman pada sampel. Pada
Gambar 1E . menunjukkan bahwa ekstrak  seledri  positif  mengandung senyawa tannin. Saponin dapat dideteksi dengan  uji  busa  dalam  air  panas.  Busa yang  stabil  selama  30  menit  dan  tidak hilang  pada  penambahan  1  tetes  HCL 2N  menunjukkan  adanya  saponin,  dari hasil  pengujian  (Gambar  1F)  diketahui bahwa  tidak  terbentuknya  lapisan  busa pada  dengan  demikian  dapat  diketahui bahwa  ekstrak  seledri  negatif  mengan- dung  senyawa  saponin.  Martha  dan Zummah  (2018)  melaporkan  bahwa ekstrak  seledri  menunjukkan  positif adanya  flavonoid  dan  negatif  adanya alkaloid dan saponin.
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Seledri
Senyawa Aktif Warna Hasil Alkoloid Kuning Kecoklatan - Steroid Hijau Pekat + + + Flavonoid Kuning kehijauan + Tanin Kuning Kehijauan + Fenol Hijau Kecoklatan + + Saponin Tidak Ada Busa -
Keterangan : ( + ) = Menunjukkan Positif, (++) = Konsentrasi Pekat,
(+++) = Konsentrasi Sangat Pekat, ( - ) = Menunjukkan Negatif
Gambar  1.  Hasil  Uji  Fitokimia  Ekstrak  Seledri.  Keterangan:  A:  Uji  Alkaloid,  B:  Uji Fenol, C: Uji Flavonoid, D: Uji Steroid, E: Tanin, F: Saponin

## Uji BSLT
Metode  uji  toksisitas  larva  udang Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT) menggunakan Artemia  salina merupa- kan metode bioassay konvensional yang umum digunakan untuk menguji komponen  aktif  tumbuhan.  Penggunaan BSLT  sebagai  uji  bioaktivitas  memiliki beberapa  keuntungan  yaitu  mudah, cepat, murah, sederhana (tidak memerlukan  keterampilan  dan  peralatan khusus),  dan  hasilnya  dapat  dipercaya
(Meyer et  al .  1982).  Dalam  uji  ini diamati tingkat mortalitas larva udang A. salina yang  disebabkan  oleh  ekstrak tumbuhan  dengan  konsentrasi  tertentu.
Senyawa  tumbuhan  yang  aktif  akan menghasilkan  tingkat  mortalitas  yang tinggi.  Data  besarnya  mortalitas  yang diperoleh akan diolah untuk mendapatkan  LC 50 ( Lethal  Concen- tration 50%)  pada  tingkat  kepercayaan 95% dengan menggunakan Probit Analysis  Method sebagai  perbandingan
potensi  signifikan  secara  statistik.  LC 50 merupakan besarnya
konsentrasi (µg/mL)  ekstrak  yang  diuji  untuk  dapat mematikan  50%  dari  hewan  uji.  Uji BSLT  dilakukan  untuk  mengatahui tingkat  toksisitias  dari  suatu  senyawa, hasil  uji  toksisitas  dari  ekstrak  seledri dapat dilihat pada Tabel 2.
Pada  Tabel  2  dapat  diketahui bahwa tingkat kematian tertinggi berada pada  konsentrasi  1000  ppm  dengan jumlah  larva  yang  mati  sebanyak  20 ekor dengan persentase kematian sebesar  100%  pada  akhir  pengamatan, dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak menghasilkan jumlah  kematian  larva  yang  semakin tinggi  pula.  Nilai  probit  ektrak  etanol seledri  dengan  menggunakan  larva A.
salina sebesar 275, 368 mg/l, konsentrasi  ini  menunjukkan  ekstrak seledri  termaksud  dalam  golongan toksik  moderat  (Carballo et  al .,  2002).

## Tabel 2. Hasil Uji Toksisitas Ekstrak Seledri
Konsentrasi (mg/l) Larva yang mati Nilai probit (mg/l) 0 0 275,368 10 1
50 5 100 5 300 8 500 40 1000 20

## Persentase Ikan Cupang Jantan
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian ini,  dapat  dilihat  pada  Gambar  2  bahwa perendaman  larva  ikan  cupang  dalam ekstrak  seledri  dengan  dosis  masing- masing  0,  5,  10,  20,  40  dan  80  mg/L berpengaruh  terhadap  persentase  ikan cupang  jantan.  Berdasarkan  analisis sidik  ragam  dosis  pemberian  ekstrak seledri  pada  perendaman  larva  ikan cupang  berpengaruh  nyata  terhadap persentase  ikan  cupang  jantan.  Pada setiap  perlakuan  persentase  ikan  jantan masing-masing adalah Kontrol (45,00±5,00 %), P1 (68,33±7,64 %), P2 (73,33±10,41  %),  P3  (56,67±5,77  &), P4  (50,00±5,00  %)  dan  P5  (43,33±5,77 %)  dengan  persentase  ikan  cupang jantan tertinggi diperoleh pada perlakuan P2 yaitu sebesar (73,33±10,41 %),  sedangkan  persentase  ikan  cupang jantan terendah diperoleh pada perlakuan  P5  yaitu  sebesar  (43,33±5,77 %).  Berdasarkan  analisis  sidik  ragam dosis  pemberian  ekstrak  seledri  pada perendaman larva ikan cupang berpengaruh  nyata  terhadap  persentase ikan cupang jantan.
Berdasarkan Gambar 2 menunjuk- kan  bahwa  terjadi  peningkatan  persen- tase  ikan  cupang  jantan  seiring  dengan penambahan dosis ekstrak seledri sampai  10 mg/L.  namun  terjadi  penuru- rnan persentase ikan cupang jantan pada penambahan dosis ekstrak seledri sebesar  40  mg/L.  Zairin  (2002),  yang menyatakan  bahwa  terdapat  kecenderu- ngan  pada  pemberian  hormon  dan  dosis yang  digunakan,  yakni  pemberian  dosis yang  terlalu  rendah  menyebabkan  ikan menjadi  steril,  abnormalitas  dan  apabila
dosis  yang  digunakan  terlalu  tinggi dapat menyebabkan kematian pada ikan. Dari hasil uji fitokimia tumbuhan seledri peneliti  juga  menunjukkan  hasil  positif dari senyawa steroid yang menjadi kunci dalam  pembalikan  arah  kelamin  pada masa diferensiasi kelamin ikan cupang.
Piferrer  dan  Donaldson  (1989) bahwa  dosis  yang  tinggi  dan  waktu perendaman yang terlalu lama juga akan bersifat  paradoksial  yaitu  hasil  yang diperoleh  bukanlah  peningkatan  jumlah ikan jantan akan tetapi akan meningkatkan jumlah ikan betina.
Berdasarkan  hasil  uji  BNT,  perlakuan P2  berbeda  nyata  dibandingkan  dengan semua  perlakuan.  Perbedaan  morfologi ikan  cupang  jantan  dan  betina  setelah pemberian  ekstrak  seledri  dapat  dilihat pada Gambar 3.
Membedakan  ikan  cupang  jantan dan  betina  sangatlah  mudah  karena dapat dilihat langsung dari ciri sekunder atau morfologinya saja, umumnya untuk membedakan  antara  ikan  cupang  jantan dan  betina  dapat  dilihat  dari  warnanya, ikan cupang jantan berwarna lebih cerah dari  ikan  cupang  betina.  Hasil  penga- matan secara sekunder dari ikan cupang hasil  maskulinisasi  ekstrak  seledri  di- ketahui  ciri-ciri  morfologi  yaitu  ikan cupang  jantan  memiliki  ukuran  tubuh yang lebih kecil, sirip anal lebih panjang dan  bentuk  ekor  yang  lebih  besar  serta warna  yang  lebih  cerah,  sedangkan morfologi  ikan  cupang  betina  yaitu ukuran tubuh yang lebih besar, sirip anal yang  pendek  dan  bentuk  ekor  yang relative kecil dari ikan cupang jantannya serta  warna  yang  kurang  menarik  dari ikan cupang jantan.
Gambar 2. Rerata Persentase Kelamin Jantan. Keterangan: P0: Kontrol, P1: Perlakuan 5 mg/L,  P2:  Perlakuan  10  mg/L,  P3:  Perlakuan  20  mg/L,  P4:  Perlakuan  40 mg/L,  P2:  Perlakuan  80  mg/L.  a,  ab,  abc,  bc,  c  :  a  dan  ab:  Perbedaan signifikan (p <0,05) antara rata-rata ditentukan menggunakan ANOVA.
Gambar 3. Ciri Sekunder Ikan Cupang Hasil Maskulinisasi (A = Jantan, B = Betina)
Perbedaan morfologi antara ikan cupang jantan dan betina dapat dibedakan dari warnanya yang cerah dan menarik,  bentuk  perut  ramping,  serta sirip  ekor  dan  sirip  anal  panjang. Sementara  cupang  betina  berwarna kurang  menarik,  bentuk  perut  gemuk serta  sirip  ekor  dan  sirip  anal  pendek. Akibatnya, ikan cupang jantan memiliki nilai  komersial  tinggi  karena  sangat
disukai  dan  diburu  oleh  pecinta  ikan hias,  sehingga  akan  lebih  efektif  dan menguntungkan  bila  hanya  diproduksi dan  dipelihara  jantannya  saja.  Ikan jantan  sangat  agresif  dan  memiliki kebiasaan  saling  menyerang  apabila ditempatkan dalam satu wadah (Ostrow, 1989).

## Tingkat Kelangsungan Hidup Pemeliharaan
Berdasarkan  Gambar  4  diketa- hui  bahwa  persentase  kelangsungan hidup  larva  ikan  cupang  pada  akhir
pemeliharaan  adalah  63,33%  sampai 100%.  Berdasarkan  hasil  uji  statistik menunjukkan  bahwa  tingkat  kelangsu- ngan  hidup  ikan  cupang  berbeda  nyata
(P<0,05).
Gambar 4. Rerata  Tingkat Kelangsungan Hidup Ikan Cupang. Keterangan: P0: Kontrol, P1:  Perlakuan  5  mg/L,  P2:  Perlakuan  10  mg/L,  P3:  Perlakuan  20  mg/L,  P4: Perlakuan  40  mg/L,  P2:  Perlakuan  80  mg/L.  a,  b:  Perbedaan  signifikan  (p <0,05) antara rata-rata ditentukan menggunakan ANOVA.
Rendahnya  kelangsungan  hidup larva  ikan  cupang  pada  salah  satu perlakuan  selama  pemeliharaan  diduga pada  saat  awal  pemeliharaan  terdapat beberapa  larva  ikan  cupang  yang  mati karena  larva  ikan  cupang  yang  rentan terhadap  perubahan  media  yaitu  dari media  perendaman  ekstrak  seledri  ke media pemeliharaan tanpa ekstrak seledri  sehingga  menyebabkan  ikan stress  dan  menyebabkan  terjadinya kematian.  Kematian  larva  ikan  cupang terjadi  di  hari  ke-1  (pada  saat  ikan berumur  8  hari),  di  hari  ke-7  (pada  saat ikan  berumur  14  hari)  serta  pada  hari berikutnya  hingga  akhir  penelitian  tidak ada  ikan  yang  mati.  Selain  itu  kematian tertinggi pada P5 diduga bahwa pemberian  konsentrasi  ektrak  yang tinggi.

## Kualitas Air
Kualitas  air  merupakan  faktor penting  dalam  budidaya  ikan.  Pada penelitian  ini  kualitas  air  yang  diamati adalah  pH,  Suhu  dan  Oksigen  Terlarut ( Disolved  Oxygen )  yang  diukur  pada awal  dan  akhir  pemeliharaan.  Kualitas air  yang  baik  adalah  sesuai  dengan kebutuhan  biologis  ikan  atau  masih berada  dalam  batas  toleransi  untuk  ikan dapat  bertahan  hidup  (Ukhroy,  2008).
Kebutuhan ikan akan oksigen mempunyai  dua  aspek  yaitu  kebutuhan lingkungan  bagi  spesies  tertentu  dan kebutuhan  konsumtif  yang  tergantung keadaan pada metabolism ikan (Soelistyowati et al ., 2007). Oksigen terlarut ( Disolved oxygen )  merupakan  kandungan  oksigen yang  terlarut  di  dalam  air.  Oksigen terlarut menjadi salah satu factor penting yang harus diperhatikan demi
kelangsungan hidup ikan yang dibudidaya.  Kurangnya  kadar  oksigen terlarut  dalam  air  akan  berpengaruh negatif bagi ikan seperti stress, hypoxia, mudah  terserang  penyakit  dan  parasit bahkan  dapat  menyebabkan  kematian massal.  Rentang  Data  kualitas  air  pada pemeliharaan dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Kualitas air pemeliharaan No Parameter Kisaran 1 Suhu ( o C) 27,42 – 28,13 2 pH 7,04 – 7,34 3 Oksigen Terlarut (mg/L) 5,93 – 6,22 Selain penambahan ekstrak seledri,  suhu  merupakan  salah  satu faktor  yang  menunjang  keberhasilan proses  maskulinisasi  ikan.  Seperti  yang dinyatakan  oleh  Arafah et  al .,  (2013), bahwa  suhu  yang  relatif  tinggi  akan mempengaruhi  perkebangan  gonad  ikan menjadi  jantan.  Sebaliknya  jika  suhu relatif  rendah  maka  akan  berpengaruh terhadap  bentuk  kelamin  betina  pada ikan.  Pada  suhu  yang  rendah  ikan  akan lebih mudah terserang jamur yang dapat menyebabkan  kematian  pada  ikan. Kenaikan  suhu  pada  rentang  23-29  oC dapat meningkatkan populasi  ikan jantan.  Adapun  kisaran  pH  pada penelitian  ini  adalah  6,93–7,36  dan masih  dalam  batas  toleransi  untuk  ikan cupang daopat bertahan hidup.
Hubungan pH dengan kehidupan  ikan  sangat  erat.  Titik kematian  ikan  biasanya  terjadi  pada  pH
4  atau  asam  dan  pH  11  atau  basa. Dihabitat  asalnya,  ikan  cupang  sangat cocok  berkembang  dengan  kondisi  air yang  memiliki  pH  sebesar  6.5  –  7.5 (Atmadjaja  dan  Sitanggang,  2008). Apabiila derajat keasaman air yang akan digunakan  dalam  pemeliharaan  ikan cupang memiliki pH diatas normal, para pehobi  dan  pembudidaya  menggunakan daun ketapang untuk mencapai pH ideal. Ketidak  idealan  pH  air  yang  dipakai untuk budidaya ikan cupang akan sangat berpengaruh terhadap tingkat
pertumbuhan  dan  perkembangannya. Indikasi  awal  yang  dapat  dijadikan pedoman berkaitan dengan ketidakidealan  pH  air  dapat  dilihat  dari tingkah  laku  ikan  cupang  diantaranya yaitu  tidak  memiliki  nafsu  makan,  cara berenangnya tidak stabil, dan pertumbuhannya menjadi terhambat.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa penambahan ekstrak daun  seledri  ( A.  graveolens )  mampu menghasilkan  presentase  jenis  kelamin jantan  ≥  50%.  Daun  seledri  memiliki potensi  sebagai  agen  dalam  maskulini- sasi pada ikan cupang ( Betta. sp ).

## DAFTAR PUSTAKA
Arfah H, Soelistyowati D T dan Bulkini A.  2013. Masculinization of  betta fish  Betta  splendens  by  embryo immersion in extract of purwoceng Pimpinella alpina. Jurnal  Akuakultur  Indonesia  12
(2), 144-149.
Atmadjaja  J  dan  Sitanggang  M.  (2008).
Panduan  Lengkap  Budidaya  dan Perawatan Cupang Hias. Jakarta : Agromedia .
Awaludin,  dan  Ridwan  A.  (2016). Peningkatan  Survival  Rate  Benih Udang  Windu  (Peaneus  Mono- don) Dengan Perendaman Ekstrak Etanol  Karamunting  (Melastoma Malabahricum).  Jurnal  Harpodon Borneo, 9(1): 32-35.
Carballo  J  L,  Inda  Z  H,  Perez  P  dan Gravalos  M  D  G.  2002.  A Comparison  Between  two  Brine Shrimp  Assays  to  Detect  in  Vitro Cytotoxicity  in  Marine  Natural Products.  BMC  Biotechnology. 2:17.
Ferdian A, Muslim dan Fitrani, M. 2017. Maskulinisasi Ikan Cupang ( Betta sp.)  Menggunakan  Ekstrak  Akar Ginseng  ( Panax Sp.).  Jurnal
Akuakultur  Rawa  Indonesia,  5(1) :1-12 (2017). Harbone  J.  B.  1996.  Metode  fitokimia penuntun cara modern menganalisis tumbuhan. Bandung: Penerbit  ITB.
Homklin S, Watanodorn T, Ong S K dan Limpiyakorn  T.  2009.  Biode- gradation  of  17  alphamethyl  tes- tosterone  and  isolation  of  MT degrading  bacterium  from  sedi- ment  of  Nile  tilapia  masculini- zation  pond.  Water  Science  and Technology 59: 261–265.
Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan.
2019.  Laporan  Indikator  Kinerja Triwulan I-2019. Direktorat Jenderal Perikanan Budidaya. Martha  R  D  dan  Zummah,  A.  2018. Phytochemical Testing And Determination Of Kinetic Parameters  Enzyme  With  Water Infusion  Of  Celery  Extracts. Jurnal Wiyata . Vol. 5 No. 2.
Meyer B. N, Ferrigni N. R, Putnam J E, Jacobsen  L  B,  Nichols  D  E,  dan
Mc  Laughlin  J  L.  (1982).  Brine Shrimp: A Convenientgeneral bioassay  for  Active  Plant  Consti- tuents, Planta Medica, 45: 31-34.
Ostrow M  E.  1989.  Betta's.T.  F..H  Pub. Inc. Canada. h.91.
Piferrer  F.  dan  W.  Donaldson.  1989. Gonadal  differentiation  in  coho salmon,  oncorhynchus  kisutch after  a  single  treatment  with androgen  at  Different  stages during  ontogenis.  J.  Aquaculture. 234:229-239.
Priyono  E,  Muslim  dan  Yulisman. 2013.  Masculinitation  of  guppy (Poecilia  reticulata)  by  dipping pregnant  guppy  in  honey solution with different dipping time. Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia. 1(1):
14-22. Putra  D  A.  2011.  Maskulinisasi  Ikan Guppy (Poecilia reticulata)
Melalui Perendaman Induk dalam Berbagai  Aras  Dosis  Propolis.
Lampung.  Skripsi.  Universitas Lampung.
Purwati S, Carman O, Zairin M Jr. 2004. Feminisasi  Ikan  Betta  ( Betta splendens Regan)  Melalui  Peren- daman  Embrio  dalam  Larutan Hormon  Estradiol-17β  dengan Dosis  400  µg/1  Selama  6,12,18 dan  24  Jam. Jurnal  Akuakultur Indonesia , 3(3): 9-13
Samejo  M  Q,  Memon  S,  Bhanger  MI dan  Khan  K  M.  2013.  Isolation and  characterization  of  steroids from  Calligonum  polygonoides., J. Pharmacy Res., 6, 346-349.
Soelistyowati  D  T,  Martatih  E.  dan Arfah  H.  2007.  Efektifitas  peng- gunaan  madu  terhadap  penga- rahan  kelamin  ikan  gapi  (Poecilia reticulata).  J.  Akuakultur  Indo- nesia. 6(2):155-160.
Sugandy  dan  Irawan.  2001.  Budidaya Ikan  Cupang  Hias.  Penerbit  Agro Media Pustaka, Jakarta, hal 21-22.
Sumantadinata  K  dan  Carman  O.  1995. Teknologi  Ginogenesis  dan  Seks Reversal  dalam  Pemuliaan  Ikan.
Buletin  Ilmiah  Gukuryoku  I:  15-
20.
Syamsuhidayat  dan  Hutapea.  1991. Inventaris Tanaman Obat Indonesia,  305-306,  Departemen Kesehatan  Republik  Indonesia, Badan  Penelitian  dan  Pengem-
bangan Kesehatan, Jakarta.
Ukhroy  N  U.  2008.  Efektifitas  Peng- gunaan Propolis Terhadap Nisbah Kelamin  Ikan  Guppy  (Poecilia reticulata).
Zairin  J  R  M.  2002.  Sex  Reversal: Memproduksi  Benih  Ikan  Jantan atau  Betina.  Penebar  Swadaya.
Jakarta.
Zumrotun,  Masyud  B  dan  Thohari  AM. 2006.  Peranan  sanrego  Lunasia amara  Blanco  dalam  peningkatan
libido  seksual  rusa  timur  Cervus Timorensis  de  Blainville.  Media Konservasi 11: 72–76.