## Isolasi Senyawa Artonin E dari Ekstrak Kulit Akar Artocarpus elasticus
Lita Amalia dan Taslim Ersam Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia
e-mail : paktichem@gmail.com
Abstrak —Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi senyawa flavonoid dari kulit akar Artocarpus elasticus yang berasal  dari  Alor,  Nusa  Tenggara  Timur  (NTT).  Proses ekstraksi  dilakukan  dengan menggunakan pelarut metanol dan  dilanjutkan  dengan  metode  fraksinasi  menggunakan Kromatografi  Cair  Vakum  (KCV)  dan  Kromatografi Kolom  Gravitasi  (KKG).  Pemurnian  dilakukan  dengan metode  rekristalisasi.  Senyawa  yang  berhasil  diisolasi berupa serbuk berwarna kuning dengan titik leleh 205-206 °C.  Penentuan  struktur  senyawa  dilakukan  menggunakan analisis  UV,  IR, 1 H  dan 13 C  NMR  dan  diketahui  bahwa senyawa  hasil  isolasi  merupakan  artonin  E  ( 1 )  yang  telah dilaporkan sebelumnya.
Kata  Kunci — Artocarpus elasticus ,  flavonoid,  artonin E .

## I. PENDAHULUAN
ndonesia  adalah  negara  kepulauan  yang  terletak  di garis  khatulistiwa  dan  mempunyai  hutan  hujan  tropis terbesar  kedua  di  dunia.  Berdasarkan  hal  tersebut, Indonesia  kaya  akan  sumber  daya  alam  hayati  karena memiliki  curah  hujan,  tingkat  kelembaban  dan pencahayaan  matahari  yang  cukup.  Keanekaragaman hayati  ini  telah  lama  dikenal  memiliki  manfaat  sebagai obat-obatan tradisional. Salah satu famili tumbuhan yang dikenal  mempunyai  banyak  manfaat  adalah  Moraceae dengan  jumlah  persebaran  di  nusantara  sebanyak  17 genus  dan  80  spesies  [1].  Genus  yang  termasuk  famili Moraceae  salah  satunya  yaitu Artocarpus .  Genus  ini sudah sejak lama diketahui manfaatnya sebagai obat dan buah-buahan  yang  dapat  dikonsumsi  [2]. Artocarpus merupakan  spesies  yang  kaya  senyawa  fenolik  termasuk flavonoid, stilbenoid, arilbenzofuron, dan jacalin [3].
Salah  satu  spesies  dari  genus Artocarpus adalah Artocarpus elasticus . Beberapa penelitian telah dilakukan  untuk  mengisolasi  senyawa  yang  terkandung dalam  spesies  ini  serta  untuk  mengetahui  manfaat  dari senyawa  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan  tersebut. Senyawa-senyawa  yang  telah  ditemukan  pada A. elasticus yaitu: moracalkon A; kudraflavon C; artokarpin; sikloartokarpin; isosiklomorusin dan artoindonesianin E-1, senyawa tersebut dapat diklasifikasikan ke dalam turunan flavonoid [4].
Uji  farmakologi  terkait  menunjukkan  kulit  batang A. elasticus berkhasiat sebagai obat sakit perut dan getahnya sebagai obat disentri, sementara seduhan kulit batangnya dimanfaatkan  sebagai  anti-fertilitas  dan  pereda  demam akibat malaria [5]. Berdasarkan hasil penelitian lain juga diketahui  bahwa  beberapa  senyawa  yang  telah  diisolasi dari A. elasticus ini memiliki aktivitas biologi antara lain sifat  sitotoksik,  antiinflamasi,  anti  tumor,  anti  kanker, antibakteri, antivirus, antijamur dan antidiabetes [6].
Menurut  Musthapa et  al., 2009, suatu  tumbuhan  yang tumbuh di habitat berbeda akan berpeluang menghasilkan senyawa metabolit sekunder yang berbeda pula.  Hal  ini  dikarenakan  perbedaan  ekosistem  dapat menyebabkan  potensi  pertahanan  diri  yang  berbeda. Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Musthapa et  al. pada tahun  2009  menggunakan  sampel A.  elasticus yang berasal  dari  Jawa  Barat.  Oleh  sebab  itu,  maka  perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengetahui adanya  senyawa  flavonoid  pada  tumbuhan A.  elasticus dengan  kondisi  lingkungan  yang  berbeda  dari  penelitian yang  sudah  dilakukan.  Pada  penelitian  ini  sampel A. elasticus diperoleh  dari  Alor,  Nusa  Tenggara  Timur (NTT).

## II. METODOLOGI PENELITIAN

## Ekstraksi dan Fraksinasi
Sebanyak  2,4  Kg  sampel  kulit  akar  A.  elasticus  yang sudah  halus  dimaserasi  dengan  10  L  metanol  selama 1x24  jam.  Hasil  ekstrak  disaring  dan  dipekatkan menggunakan alat rotary evaporator . Ekstrak pekat yang dihasilkan  kemudian  difraksinasi  dengan  metode Kromatografi Cair Vakum (KCV).
Proses  KCV  diawali  dengan  eluen  etil  asetat:metilen klorida  15%  kemudian  dilanjutkan  dengan  eluen  yang sama  dengan  peningkatan  kepolaran  50%,  100%  dan metanol  100%.  Pemantauan  hasil  fraksinasi  dengan metode  KLT  menggunakan  eluen  etil  asetat:metilen klorida 50%. Pada proses fraksinasi pertama dihasilkan 4 fraksi yaitu fraksi A, B, C dan D.
Selanjutnya  dilakukan  proses  pemisahan  kembali untuk  fraksi  C  dengan  metode  Kromatografi  Kolom Gravitasi (KKG). Proses KKG diawali dengan eluen etil asetat: n -heksana 5% dan dilanjutkan dengan peningkatan kepolaran  8%,  15%  dan  35%.  Selama  proses  pemisahan dilakukan  pemantauan  dengan  KLT menggunakan  eluen etil asetat: n -heksana 40%. Berdasarkan nilai Rf dan pola noda  yang  sama,  hasil  fraksinasi  dapat  dikelompokkan menjadi  3  subfraksi  yaitu  C 1 ,  C 2 dan  C 3 .  Setelah  itu dilakukan  pemantauan  kembali  menggunakan  KLT  dan dapat  diketahui  bahwa  profil  noda  subfraksi  C 2 cenderung  tunggal  sehingga  perlu  dilakukan  proses pemurnian untuk mendapatkan senyawa murni.
Dilakukan  pula  proses  pemisahan  untuk  fraksi  B dengan  metode  KCV  menggunakan  eluen  etil  asetat: n- heksana  10%,  12%,  15%  dan  30%.  Pemantauan  selama proses  pemisahan  dilakukan  dengan  metode  KLT menggunakan  eluen  etil  asetat: n- heksana  40%.  Dari proses pemisahan fraksi B diperoleh 3 subfraksi yaitu B 1 , B 2 dan  B 3 .  Berdasarkan  hasil  KLT  yang  dilakukan kembali, profil noda B 2 dan B 3 cenderung sama sehingga kedua subfraksi tersebut digabung dan diberi label B 23 .
I
Kemudian  dilakukan  pemisahan  untuk  subfraksi  B 23 dengan  metode  KCV  menggunakan  eluen  metanol  1% dalam etil asetat: n- heksana (1:9); (3:17); (1:4) dan (1:1). Proses pemantauan KLT dilakukan dengan menggunakan eluen  etil  asetat: n- heksana  30%.  Dari  hasil  KLT diketahui  terdapat  3  kelompok  yang  memiliki  nilai  Rf dan pola noda yang sama yaitu subfraksi e, f dan g.
Proses pemisahan berikutnya dilakukan untuk fraksi D. Pemisahan dilakukan dengan metode KKG menggunakan  eluen  etil  asetat: n -heksana  dengan peningkatan  kepolaran  5%,  8%,  15%,  20%,  35%  dan terakhir digelontor menggunakan etil asetat dan metanol. Eluen  etil  asetat:n-heksana  40%  digunakan  untuk pemantauan KLT. Dari proses pemisahan ini diperoleh 4 subfraksi  yaitu  D 1 ,  D 2 ,  D 3 dan  D 4 .  Berdasarkan  hasil KLT,  subfraksi  yang  memiliki  pola  noda  yang  hampir sama  dengan  hasil  pemisahan  sebelumnya  adalah gelontoran  etil  asetat.  Selanjutnya,  gelontoran  etil  asetat digabung dengan subfraksi f dan C 3 dan diberi label Gb. Proses  pemisahan  untuk  subfraksi  Gb  dilakukan dengan  metode  KKG.  Eluen  yang  digunakan  yaitu  etil asetat: n- heksana yang ditingkatkan kepolarannya diawali dengan  15%,  20%  dan  30%.  Untuk  pemantauan  KLT digunakan  eluen  etil  asetat: n- heksana  40%.  Dari  proses pemisahan ini diperoleh 4 subfraksi yaitu Gb 1 , Gb 2 , Gb 3 dan  Gb 4 .  Hasil  KLT  menunjukkan  bahwa  pola  noda subfraksi  Gb 2 cenderung  tunggal  sehingga  perlu dilakukan proses pemurnian. Dilakukan pula KLT untuk membandingkan subfraksi C 2 dan Gb 2 sehingga diketahui bahwa  nilai  Rf  dan  pola  noda  kedua  subfraksi  tersebut sama.

## Proses Pemurnian dan Uji Kemurnian
Subfraksi  C 2 dimurnikan  dengan  metode  rekristalisasi menggunakan  satu  sistem  pelarut,  yaitu  metilen  klorida. Uji kemurnian dilakukan dengan KLT menggunakan tiga eluen  yang  berbeda  tingkat  kepolarannya  antara  lain yaitu  metanol:metilen  klorida  20%  (atas),  etil  asetat:n- heksana 50% (tengah) dan etil asetat:metilen klorida 7% (bawah).  Selain  uji  tiga  eluen  juga  dilakukan  uji  titik leleh untuk mengetahui kemurnian senyawa hasil isolasi. Dilakukan  pula  proses  pemurnian  untuk  subfraksi  Gb 2 dengan metode yang sama.

## Pengujian Spektrofotometer UV
Sebanyak  1  mg  sampel  dilarutkan  dalam  10  mL metanol  p.a.  dan  digunakan  sebagai  larutan  stok  dalam pengujian. Larutan metanol-sampel diukur absorbansinya pada  λ  200-600  nm  dengan  menggunakan  blanko metanol.  Larutan  sampel  yang  sama  ditambah  3  tetes NaOH dan diukur absorbansinya.
Larutan  sampel  yang  baru  ditambah  6  tetes  AlCl 3 dan diukur  pula  absorbansinya.  Dilakukan  hal  yang  sama untuk  larutan  sampel  yang  telah  ditambah  AlCl 3 dan  3 tetes  HCl.  Kemudian  diambil  larutan  sampel  baru  dan ditambah  ±  100  mg  CH 3 COONa  lalu  diukur  pula absorbansinya.  Prosedur  yang  sama  dilakukan  untuk larutan  sampel  yang  telah  ditambah  CH 3 COONa  dan  ± 100 mg H 3 BO 3 .

## Pengujian Spektrofotometer IR
Senyawa  hasil  isolasi  diambil  ±  1  mg  dan  digerus dalam  KBr  sampai  homogen.  Dibuat  pelet  dengan ketebalan  ±  1 mm  dan  diukur  serapannya  pada  bilangan gelombang                 400-4000 cm -1 .

## Pengujian Spektrofotometer NMR
Sebanyak  20  mg  senyawa  hasil  isolasi  dilarutkan dalam  DMSO.  Larutan  sampel  yang  sudah  disiapkan diinjeksikan  ke  dalam  tabung injection dan  dianalisis untuk mengetahui spektra 1 H-NMR dan 13 C-NMR.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi dan Fraksinasi
Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi selama  1x24  jam.  Sebanyak  2,4  Kg  sampel  kering  kulit akar A. elasticus dimaserasi dalam 10 L metanol. Setelah 24  jam,  hasil  ekstrak  disaring  kemudian  dilakukan pemantauan  dengan  KLT  untuk  mengetahui  konsentrasi senyawa  yang  terekstrak.  Hasil  ekstrak  yang  sudah disaring  berupa  cairan  berwarna  coklat  kehitaman. Ekstrak  cair  ini  kemudian  diuapkan  sebagai  proses pemisahan  dari  pelarut  (metanol)  dengan  menggunakan rotary  evaporator .  Dari  tahap  inilah  diperoleh  ekstrak pekat berbentuk pasta berwarna hitam seberat 82,4086 g.
Proses  fraksinasi  dilakukan  untuk  memisahkan senyawa  sehingga  nantinya  diperoleh  kelompok- kelompok  senyawa  yang  lebih  sederhana.  Fraksinasi pertama  dilakukan  dengan  metode  KCV.  Eluen  yang dipilih  adalah  etil  asetat:metilen  klorida  dengan peningkatan kepolaran (15%, 50% dan 100%). Kelebihan metode  ini  adalah  waktu  pengerjaan  yang  relatif  cepat dan diperoleh fraksi yang lebih sederhana dengan jumlah yang  lebih  banyak.  Akan  tetapi  dalam  tahap  persiapan dibutuhkan  ketelitian  agar  adsorben  dapat  memberikan kinerja yang optimum.
Massa  sampel  pada  fraksinasi  ini  adalah  82,4086  g. Terlebih  dahulu  sampel  dibagi  menjadi  dua  dan  diberi label (a) dan (b). Untuk masing-masing sampel dilakukan fraksinasi  dengan  eluen  yang  sama  secara  bergantian sehingga  nantinya  diperoleh  hasil  fraksinasi  untuk sampel  (a)  dan  (b).  Selama  proses  pemisahan  dengan metode  ini  dilakukan  pemantauan  dengan  KLT menggunakan  eluen  etil  asetat:metilen  klorida  50% kemudian  disemprot  dengan  penampak  noda  larutan serium sulfat (CeSO 4 ). Setelah dikelompokkan berdasarkan  nilai  Rf  dan  pola  noda  yang  sama,  masing- masing  fraksi  gabungan  dipekatkan  dalam  alat rotary evaporator dan diperoleh  4 fraksi yaitu A (1,1597 g); B (0,9652 g); C (0,8054 g) dan D (1,8988 g).
Selanjutnya  dilakukan  pemisahan  fraksi  C  dengan metode Kromatografi Kolom Gravitasi (KKG). Kelebihan  metode  ini  adalah  proses  pemisahan  yang lebih baik karena hanya dipengaruhi oleh gravitasi, akan tetapi  metode  ini  membutuhkan  waktu  yang  lebih  lama dari  KCV.  Dari  pemisahan  fraksi  C  dihasilkan  3 subfraksi  yaitu  C 1 (0,2897  g),  C 2 (0,2016  g)  dan  C 3 (0,2314  g).  Subfraksi  C 2 memiliki  profil  noda  yang cenderung tunggal sehingga dilakukan proses pemurnian. Akan  tetapi  hasil  yang  diperoleh  dari  proses  pemurnian dinilai  relatif  sedikit  sehingga  dilakukan  pemisahan kembali untuk fraksi lainnya.
Proses  pemisahan  selanjutnya  adalah  untuk  fraksi  B dengan  menggunakan  metode  KCV.  Dari  hasil pemisahan diperoleh 3  subfraksi yaitu  B 1 (0,4372 g), B 2 (0,1579  g)  dan  B 3 (0,4086  g).    Hasil  penampakan  noda pada  KLT  menunjukkan  subfraksi  B 2 dan  B 3 memiliki nilai Rf dan pola noda yang hampir sama sehingga kedua subfraksi tersebut digabungkan. Hal ini dilakukan karena
dimungkinkan senyawa-senyawa yang terkandung didalamnya merupakan senyawa yang sama. Penggabungan dilakukan untuk memperoleh massa yang lebih  banyak  sehingga  dapat  digunakan  untuk  proses pemisahan  kembali,  harapannya  proses  pemisahan  dapat dilakukan secara optimal.
Gabungan  subfraksi  B 2 dan  B 3 yang  kemudian  diberi label B 23 difraksinasi kembali dengan metode KCV. Dari proses  pemisahan  ini  dihasilkan  3  subfraksi  yaitu  e (0,1205  g),  f  (0,2924  g)  dan  g  (0,1136  g).  Subfraksi  f yang  memiliki  massa  292,4  mg  mempunyai  profil  noda yang hampir sama dengan subfraksi C 2 . Selanjutnya, dilakukan pula pemisahan untuk fraksi D dengan metode KKG, dihasilkan 4 subfraksi (D 1 (0,2573 g), D 2 (0,0267 g), D 3 (0,1218 g) dan D 4 (0,1525 g)) dan subfraksi  etil  asetat  100%  (1,3019  g).  Berdasarkan  hasil KLT  diketahui  bahwa  subfraksi  pekat  etil  asetat mempunyai  profil  noda  yang  sama  dengan  subfraksi  f dan  C 3 .  Ketiga  subfraksi  tersebut  digabung  dan  diberi label  Gb  serta  dilakukan  pula  proses  pemisahan  dengan metode  KKG.  Dari  proses  pemisahan  ini  dihasilkan  4 subfraksi  yaitu    Gb 1 (0,2258  g),  Gb 2 (0,2568  g),  Gb 3 (0,0875  g)  dan  Gb 4 (0,1574  g).  Subfraksi  Gb 2 memiliki profil  penampakan  noda  yang  cenderung  tunggal sehingga  selanjutnya  dilakukan  proses  pemurnian. Kemudian  subfraksi  Gb 2 dibandingkan  dengan  C 2 menggunakan  KLT  dan  keduanya  menunjukkan  profil noda yang sama.

## Proses Pemurnian dan Uji Kemurnian
Proses  rekristalisasi  subfraksi  C 2 dilakukan  dengan menggunakan  satu  sistem  pelarut  dengan  prinsip  yaitu pelarut  yang  digunakan  dapat  melarutkan  sampel  dan pengotor  pada  kondisi  panas,  kemudian  pada  kondisi dingin sampel akan mengendap sementara pengotor tetap larut [7]. Oleh karena itu, dipilih pelarut  metilen klorida panas  untuk  melarutkan  sampel  sampai  larut  sempurna. Seiring  dengan  penurunan  suhu,  maka  terbentuklah serbuk  berwarna  kuning.  Setelah  dianggap  proses rekristalisasi berjalan dengan optimal, dilakukan penyaringan  dan  diperoleh  serbuk  seberat  12,7  mg. Proses  rekristalisasi  dilakukan  pula  untuk  subfraksi  Gb 2 dengan  metode  yang  sama  dan  dihasilkan  serbuk berwarna  kuning  seberat  169,7  mg.  Senyawa  hasil rekristalisasi  kedua  subfraksi  tersebut  adalah  sama sehingga keduanya disebut senyawa 1.
Selanjutnya dilakukan uji kemurnian senyawa menggunakan  KLT  dengan  3  eluen  yang  memiliki kepolaran  berbeda  dan  uji  titik  leleh.  Pengujian dilakukan  dengan  menggunakan  tiga  komposisi  eluen yang  diantaranya  yaitu  metanol:metilen  klorida  20% (atas),  etil  asetat:n-heksana  50%  (tengah)  dan  etil asetat:metilen  klorida  7%  (bawah)  yang  menunjukkan noda  tunggal  dengan  Rf  yang  berbeda.  Selanjutnya dilakukan  uji  titik  leleh  yang  menunjukkan  hasil  bahwa titik  leleh  senyawa 1 adalah  205-206  °C.  Hasil  tersebut sesuai  dengan  salah  satu  indikator  senyawa  murni  yaitu memiliki  rentang  titik  leleh  ±  1  °C  yang  merupakan rentang  suhu  saat  mulai  meleleh  sampai  meleleh seluruhnya.

## Penentuan Struktur
Spektrum  UV-Vis  (Gambar  3.1)  menunjukkan  2 puncak  serapan  yaitu  pada 288 nm  (pita II)  dan 345 nm (pita  I)  yang  identik  dengan  spektrum  flavonoid  [8].
Panjang  gelombang  288  nm  merupakan  indikasi  adanya eksitasi  elektron  dari  -  *  yang  merupakan  kromofor khas  sistem  ikatan  rangkap  terkonjugasi  (-C=C-C=C-) pada  cincin  aromatik.  Sedangkan  panjang  gelombang 345  nm  (pita  I)  menunjukkan  adanya  eksitasi  elektron dari  n-  *  yang  merupakan  kromofor  khas  untuk  sistem terkonjugasi  dari  heteroatom  dengan  ikatan  rangkap terkonjugasi (-C=C=C=O).
Gambar 3.1 Spektrum UV-Vis senyawa 1 dalam MeOH dan MeOH+NaOH
Setelah  dilakukan  penambahan  NaOH  dapat  diketahui bahwa  terjadi  pergeseran  merah  atau  batokromik  pada pita  I  sebesar  115  nm  dari  panjang  gelombang  yang semula  345  nm  menjadi  460  nm.  Terjadinya  pegeseran merah ini umumnya dipengaruhi oleh auksokrom, seperti gugus –OH [9]. Gugus hidroksi tersebut yang merupakan pendorong elektron kemudian mengalami kesetimbangan keto-enol  dengan  gugus  karbonil  yang  terletak  pada posisi para (Gambar 3.2) [10].
Gambar 3.2 Kesetimbangan keto-enol dengan NaOH
Penambahan AlCl 3 sebagai pereaksi geser menyebabkan  terjadinya  pergeseran  batokromik  sebesar 71 nm. Dari data tersebut dapat diketahui bahwa senyawa 1  mempunyai  gugus  OH  khelat  dan  sistem o -dihidroksi yang  tersubstitusi  pada  kerangka  dasar  senyawa  fenolat [11].  Analisis  ini  diperkuat  oleh  data  pergeseran  setelah penambahan  CH 3 COONa  yang  menunjukkan  terjadinya pergeseran  batokromik,  begitupun  setelah  penambahan H 3 BO 3 . Dari analisis spektra UV senyawa 1 dimungkinkan berupa senyawa golongan flavonoid yang memiliki  khelat  dan  gugus  hidroksi  yang  tersubstitusi pada posisi orto .
Gambar 3.3 Spektrum senyawa 1 dalam plat KBr
Analisis selanjutnya yaitu berdasarkan spektra inframerah (IR) pada bilangan gelombang 400-4000 cm- 1 (Gambar 3.3) yang memperlihatkan pita-pita yang khas
OH 2 R OH O O - + NaOH R O R O O - Na + +
untuk  beberapa  gugus  fungsi.  Pita-pita  serapan  yang dimaksud  diantaranya  pada  bilangan  gelombang  3421 cm -1 , 3057 cm -1 , 2982 cm -1 , 2918 cm -1 , 1658 cm -1 , 1462 cm -1 ,  1290  cm -1 dan  1111  cm -1 .    Serapan  pita  pada bilangan  gelombang  3421  cm -1 merupakan  ciri  khas adanya  gugus  hidroksi  terikat  (-OH).  Kemudian  serapan pada  bilangan  gelombang  3057  cm -1 menunjukkan adanya  gugus  -CH  sp 2 ,  diperkuat  dengan  serapan  pada 1290  cm -1 yang  merupakan  serapan  khas  -CH  sp 2 bending .  Kedua  pita  tersebut  diperkirakan  teridentifikasi dari  adanya  cincin  aromatik,  hal  ini  dapat  dilihat  pula pada  daerah finger  print terdapat  serapan  yang  khas cincin aromatik [12].
Sementara  itu  juga  terdapat  gugus  -CH  sp 3 ,  diketahui dari  serapan  khas  pada  bilangan  gelombang  2918-2982 cm -1 dan diperkuat dengan adanya serapan khas -CH sp 3 bending pada  bilangan  gelombang  1462  cm -1 .    Gugus  - CH  sp 3 ini  merupakan  gugus  alifatik  yang  tersubstitusi pada  kerangka  dasar  senyawa  flavonoid.  Serapan  pita selanjutnya  terdeteksi  pada  bilangan  gelombang  1658 cm -1 yang  menunjukkan  ciri  khas  gugus  karbonil terkhelat (C=O). Selanjutnya ditunjukkan adanya serapan pada  bilangan  gelombang  1111  cm -1 yang  merupakan serapan  khas  gugus  C-O  eter  [12].  Dengan  demikian berdasarkan  analisis  spektra  UV-Vis  dan  IR  dapat diperoleh  informasi  bahwa  senyawa 1 merupakan flavonoid  yang  memiliki  substituen  alkil  dan  hidroksi dengan sistem o -dihidroksi.
Analisis struktur berikutnya menggunakan NMR, baik 1 H-NMR maupun 13 C-NMR. Proses analisis menggunakan  pelarut  DMSO  dan  diukur  pada  frekuensi 500 MHz. Data yang diperoleh berupa pergeseran (  ) 1 H- NMR  dan 13 C-NMR  yang  berisi  informasi  tentang  jenis lingkungan  proton  maupun  karbon,  multiplisitas  dan jumlah  proton  atau  integritas.  Dalam 1 H-NMR  juga dikenal data berupa konstanta kopling yang memberikan informasi berupa jarak antara 2 pergeseran pada serapan proton yang sama.
Analisis  spektrum 1 H-NMR  senyawa 1 berdasarkan sinyal-sinyal yang terdeteksi pada pergeseran kimia (  H ) (ppm)  6,68  (1H, s );  6,53  (1H, d , J =10,0  Hz);  6,45  (1H, s );  6,21  (1H, s );  5,70  (1H, d , J =10,0  Hz);  5,06  (1H, t , J =15,0  Hz);  3,04  (2H, d , J =5,00  Hz);  1,56  (3H, s )  dan 1,41 (9H, s ). Serapan proton pada pergeseran kimia (  H ) 1,41  ppm  merupakan  pergeseran  dari  9  proton  yang memiliki jenis lingkungan hampir sama. Serapan tersebut berada  pada  daerah upfield sehingga  dapat  diketahui bahwa 9 proton tersebut merupakan 3 gugus metil. Data pada  pergeseran  kimia  (  H )  1,41  dan  1,56  ppm  masing- masing  sejumlah  3  proton  dengan  multiplisitas  singlet;  H 5,06  ppm  sejumlah  1  proton  dengan  multiplisitas triplet  yang  memiliki  konstanta  kopling  15,0  Hz  dan  H 3,04  ppm  sejumlah  2  proton  dengan  multiplisitas  duplet yang memiliki konstanta kopling 5,0 Hz mengindikasikan  adanya  gugus  prenil  yang  terikat  pada kerangka dasar flavonoid. Pada genus Artocarpus , prenil secara  khas  tersubstitusi  pada  C-3  kerangka  dasar flavonoid.
Serapan  proton  pada  pergeseran  kimia  (  H )  1,41  ppm sejumlah  6  proton;  6,53  dan  5,70  ppm  masing-masing sejumlah  1  proton  dengan  multiplisitas  duplet  yang memiliki  konstanta  kopling  masing-masing  10,0  Hz, merupakan  data  yang  identik  dengan  pergeseran  kimia gugus  kromen.  Gugus  kromen  dapat  tersubstitusi  secara
linear maupun angular terhadap kerangka dasar flavonoid (Gambar 3.4), yang kemudian dibuktikan dengan analisis serapan  karbon.  Sementara  itu,  serapan  proton  pada  H 13,19 ppm sejumlah 1 proton dengan multiplisitas singlet menunjukkan  adanya  khelat  hidroksi.  Serapan  pada  H (ppm)  8,54;  9,25  dan  9,45  masing-masing  sejumlah  1 proton dengan multiplisitas singlet menunjukkan 3 gugus hidroksi  yang  tersubstitusi  pada  cincin  B  dengan  2 hidroksi  terikat  secara o -dihidroksi.  Dengan  demikian dari  analisis  spektrum 1 H-NMR  disarankan  senyawa 1 memiliki struktur sebagai berikut:
Gambar 3.4 Posisi gugus kromen terhadap kerangka dasar flavonoid: (a) kromen tersubstitusi angular dan (b) kromen tersubstitusi linear.
Analisis spektrum 13 C-NMR memperlihatkan sinyal-sinyal  pada  pergeseran  kimia  (  C )  (ppm)  181,80; 161,63; 160,90: 158,46: 151,70; 148,75; 148,48; 138,01; 131,31; 127,66; 121,44; 119,84; 116,07; 114,15; 109,24: 104,20;  103,86;  100,44;  98,78;  78,06;  27,68;  25,47; 23,69 dan 17,35. Adanya pergeseran pada  C 181,80 ppm merupakan data khas untuk karbonil terkhelat dari suatu senyawa  flavonoid.  Dari  data  pergeseran  kimia  diatas yang diantaranya adalah  C (ppm) 119,84; 23,69; 121,44; 131,31;  25,47  dan  17,35  menunjukkan  pola  yang  sama dengan  serapan  karbon  untuk  gugus  prenil.  Serapan lainnya  yaitu  pada  C 78,06  ppm  merupakan  serapan khas  kromen,  diperkuat  oleh  adanya  serapan  pada  C (ppm)  100,44;  114,15;  127,66  dan  27,68.  Pergeseran kimia  C 27,68 ppm merupakan serapan khas metil pada kromen.
Untuk  mengetahui  posisi  kromen  terhadap  kerangka dasar  flavonoid  dapat  ditinjau  dari  serapan  karbon.  Jika terdapat  serapan  karbon  (  C )  di  sekitar  95  ppm  maka dapat  diindikasikan  merupakan  kromen  dengan  posisi linear  terhadap  kerangka  dasar  flavonoid.  Akan  tetapi, jika serapan karbon terdeteksi pada  C 98 ppm atau lebih maka  diindikasikan  kromen  tersubstitusi  pada  posisi angular  terhadap  kerangka  dasar  flavonoid  [13].  Pada penelitian  ini,  tidak  terdapat  serapan  karbon  pada  C sekitar 95 ppm sehingga dapat disarankan posisi kromen adalah  angular.  Struktur  seperti  ini  identik  dengan struktur  senyawa  artonin  E  yang  telah  dilaporkan sebelumnya,  sehingga  perlu  adanya  perbandingan spektrum  NMR  antara  senyawa 1 dengan  artonin  E (Tabel 3.1).
T ABEL 3.1 D ATA PERBANDINGAN PERGESERAN (  ) 1 H-NMR DAN 13 C- NMR SENYAWA 1 DAN ARTONIN E [13]
No.  H (ppm)  C (ppm)
Senyawa 1 Artonin E Senyawa 1 Artonin E 2 - - 161,63 163,2 3 - - 119,84 122,0 4 - - 181,80 183,9 4a - - 104,20 105,9 5 - - 160,90 162,7 6 6,21 (1H, s ) 6,14 (1H, s ) 98,78 100,1 7 - - 158,46 160,5 8 - - 100,44 102,2 8a - - 151,70 153,8 9 3,04 (2H, d, J =5,0 Hz)
3,11 (2H, brd , J =7,0 23,69 24,9
Hz)
10 5,06 (1H, t,
J= 15,0 Hz) 5,10 (1H, m ) 121,44 122,6 11 - - 131,31 133,0 12 1,56 (3H, s ) 1,59 (3H, brs ) 25,47 25,9 13 1,41 (3H, s ) 1,41 (3H, brs ) 17,35 17,6 14 6,53 (1H, d ,
J =10,0 Hz) 6,61 (1H, d , J =10,0 Hz) 114,15 115,8 15 5,70 (1H, d , J =10,0 Hz) 5,59 (1H, d , J =10,0 Hz) 127,66 128,2 16 - - 78,06 79,1 17 1,41 (6H, s ) 1,43 (6H, s ) 27,68 28,4 18 28,4 1’ - - 109,24 111,7 2’ - - 148,75 150,1 3’ 6,45 (1H, s ) 6,45 (1H, s ) 103,86 104,7 4’ - - 148,48 150,0 5’ - - 138,01 139,4 6’ 6,68 (1H, s ) 6,69 (1H, s) 117,2
Berdasarkan  analisis  perbandingan 1 H-NMR  dan 13 C- NMR dinyatakan bahwa senyawa 1 memiliki pergeseran yang sama dengan artonin E sehingga dapat disimpulkan senyawa 1 merupakan  artonin  E  yang  telah  dilaporkan pada  penelitian  sebelumnya  dengan  struktur  senyawa sebagai berikut:

## ( 1 )

## IV. KESIMPULAN
Senyawa  artonin  E  ( 1 )  berupa  serbuk  berwarna kuning  dengan  titik  leleh  205-206  °C  berhasil  diisolasi dari  kulit  akar A.  elasticus yang  berasal  dari  Alor,  Nusa Tenggara  Timur  (NTT).  Senyawa  tersebut  merupakan senyawa  yang  baru  ditemukan  pada  spesies  ini  akan tetapi pernah dilaporkan pada penelitian sebelumnya dari spesies lain.
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada  tim penelitian Laboratorium Kimia Bahan Alam dan Sintesis, Jurusan Kimia FMIPA ITS serta semua pihak yang turut membantu.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Heyne, K. (1987). Tumbuhan Berguna Indonesia, Jilid 3 . Jakarta: Departemen Kehutanan.
[2] Hari,  A.,  Revikumar,  K.  G.,  Divya,  D.  (2014). Artocarpus :  A Review  of  Its  Phytochemistry  and  Pharmacology. Journal  of Pharma Search, 9 (1), 7 .
[3] Jagtap, U. B. dan Bapat, V. A. (2010). Artocarpus : A Review of Its  Traditional  Uses,  Phytochemistry  and  Pharmacology. Ethnopharmacol 129 (2), 142-66 .
[4] Musthapa,  I.,  Lia,  D.,  Juliawaty,  Syah,  Y.  M.,  Hakim,  E.  H., Latip,  J.,  Ghisalberti,  E.  L.  (2009).  An  Oxepinoflavone  from Artocarpus  elasticus with  Cytotoxic  Activity. Arch Pharm  Res. 32(3), 191-194 .
[5] Boonphong,  S.,  Baramee,  A.,  Kittakoop,  P.,  Puangsombat,  P.. (2007).  Antitubercular  and  Antiplasmodial  Prenylated  Flavones from The Roots of Artocarpus altilis . Chiang Mai J. Sci. 34, 339- 344 .
[6] Wu, D., Mei, H., Tan, P., Lu, W., Zhu, J., Wang, W., Huang, J., Li,  J.  (2015).  Total  Synthesis  of  The  2-Arylbenzo[ b ]furan- Containing  Natural  Products  from Artocarpus . Tetrahedron Letter .
[7] Alfinda, N. K. (2008). Buku Ajar Fitokimia . Surabaya: Airlangga University Press.
[8] Markham,  K.R.  (1988). Cara  Mengidentifikasi  Flavonoid . Bandung: Institut Teknologi Bandung.
[9] Cairns, D. (2008). Intisari Kimia Farmasi, Edisi 2 . Jakarta: EGC/
[10] Ito, C., Miyamoto, Y., Nakayama, M., Kawai, Y. (1997). A Novel Depsidone  and  Some  New  Xanthones  from Garcinia Spesies. Chemical and Pharmaceutical Bulletin . 45 (9), 1403-1413 .
[11] Purwaningsih, Y. dan Ersam, T. (2007). Senyawa Santon Sebagai Antioksidan  dari  Kayu  Batang Garcinia  tetranda Pierre. Akta Kimindo 2, 103-108 .
[12] Robinson,  J.  W.,  Frame,  E.  M.  S.,.  Frame  II,  G.  M.  (2005). Undergraduate  Instrumental  Analysis,  Sixth  Edition .  New  York: Marcel Dekker.
[13] Jayasinghe, U. L. B., Samarakoon, T. B., Kumarihamy, B. M. M., Hara, N., Fujimoto, Y.. (2008). Four New Prenylated Flavonoids and  Xanthones  from  The  Root  Bark  of Artocarpus  nobilis .
Fitoterapia 79, 37-41 . O OH O O OH HO HO 2 3 9 14 3' 5' 4a 8a 18 12