Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
Pemberian Ekstrak Sargassum sp. melalui Pakan Komersil Terhadap Nilai Hematokrit dan Diferensial Leukosit pada Ikan Bawal Bintang
Trachinotus blochii
Azminar Yuliana, Rika Wulandari, Aminatul Zahra.
Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji.
INFO NASKAH

## ABSTRAK
Kata kunci:
Saergassum sp., Limfosit,
Monosit, Neutrofil, Ikan bawal bintang.
Sargassum sp. merupakan bahan alami yang dapat digunakan untuk meningkatkan status kesehatan ikan. Penelitian ini bertujuan untuk menguji konsentrasi ekstrak Sargassum sp. yang  dicampur  ke  pakan  komersil  terhadap  profil  hematologi  ikan  bawal  bintang. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan September – November 2020. Proses ekstraksi dan uji toksisitas bahan dilakukan di Marine Chemistry Laboratory FIKP, selanjutnya uji in- vivo  dilakukan  di  Desa  Madong,  Kelurahan  Kampung  Bugis.  Adapun  profil  darah  ikan dianalisis di Marine Biotechnology Laboratory FIKP. Metode penelitian yang digunakan adalah eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 3 ulangan yaitu Kontrol (0 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan), perlakuan A (38 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan), perlakuan B (58 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan), dan perlakuan C (78 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan). Hasil penelitian  menunjukkan nilai hematokrit  tertinggi  sebesar  54,65%,  persentase  limfosit  tertinggi  sebesar  87,67%, persentase  monosit  tertinggi  sebesar  6,00%,  dan  persentase  neutrofil  tertinggi  sebesar 7,33%.  Pemberian  ekstrak  S argassum sp.  pada  dosis  58  ppm  melalui  pakan  komersil memberikan  pengaruh  terhadap  nilai  hematokrit  dan  persentase  limfosit  namun  tidak memberikan pengaruh terhadap persentase monosit dan neutrofil pada ikan bawal bintang.
Gedung FIKP Lt. II Jl. Politeknik Senggarang, 29115, Tanjungpinang, Telp : (0771- 8041766, Fax. 0771-7004642. Email: 160254243007@student.umrah.ac.id. rika.wulandaridwan.umrah.ac.id. aminatul.zahra@gmail.com.
Provision of Sargassum sp. Extract Through Commercial Feed Against Hematocrit Value and Leukocyte Differential in Pomfret Trachinotus blochi
Azminar Yuliana, Rika Wulandari, Aminatul Zahra.
Department of Aquaculture, Faculty of Marine Science and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University.
ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Keywords:
Sargassum sp.,  Lymphocytes, Monocytes, Neutrophils, Silver pompano.
Sargassum sp. is a natural ingredient that can be used to improve the health status of fish. This  study  aims  to  test  the  extract  concentration  of Sargassum sp.  which  is  mixed  into commercial  feed  against  the  hematological  profile  of  star  pomfret.  This  research  was conducted  in  September  -  November  2020.  The  process  of  extraction  and  toxicity  tests was carried out at the Marine Chemistry Laboratory FIKP, then in-vivo tests were carried out in Madong Village, Kampung Bugis Village. The fish blood profiles were analyzed at the Marine Biotechnology Laboratory FIKP. The research method used was experimental using a completely randomized design (CRD) with 4 treatments and 3 replications, namely control (0 ppm extract of Sargassum sp. + feed), treatment A (38 ppm extract of Sargassum sp. + feed), treatment B (58 ppm extract of Sargassum sp. + feed), and treatment C (78 ppm extract of Sargassum sp. + feed). The results showed that the highest hematocrit value was  54.65%,  the  highest  lymphocyte  percentage  was  87.67%,  the  highest  monocyte percentage  was  6.00%,  and  the  highest  neutrophil  percentage  was  7.33%.  Provision  of S argassumExtract sp.. at a dose of 58 ppm through commercial feed has an effect on the hematocrit  value and the percentage  of lymphocytes but does  not have an  effect  on the percentage of monocytes and neutrophils in pomfret fish.
Gedung FIKP Lt. II Jl. Politeknik Senggarang, 29115, Tanjungpinang, Telp : (0771- 8041766, Fax. 0771-7004642. Email: 160254243007@student.umrah.ac.id. rika.wulandaridwan.umrah.ac.id. aminatul.zahra@gmail.com
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49

## 1. PENDAHULUAN
Ikan  bawal  bintang Trachinotus  blochii merupakan  salah  satu  spesies  yang menjadi komoditas prospektif dan mempunyai nilai ekonomis cukup tinggi baik di pasar  lokal  hingga  internasional  seperti  Singapura,  Jepang,  Kanada,  Taiwan,  dan Hongkong  (Retnani et  al. 2013).  Ikan  bawal  bintang  tersebut  dijual  dengan  harga bisa mencapai rata- rata Rp. 95.000/kg dan target produksi ikan bawal bintang untuk memenuhi kebutuhan pasar lokal di Provinsi Kepulauan Riau masih perlu sekitar 3- 4 ton per bulannya agar bisa menjanjikan, (DJBP 2020).
Oleh  karena  target  produksi  cukup  tinggi  perbulannya  maka  perlu  adanya penanganan  khusus  agar  target  produksi  ikan  bawal  bintang  terpenuhi.  Penangan khusus  dapat  dilakukan  dengan  cara  pemberian  bahan  alami  melalui  pakan  untuk meningkatkan status kesehatan ikan agar ikan tetap sehat dan terjaga kualitasnya.
Penggunaan  bahan  alami  merupakan  salah  satu  cara  yang  dapat  digunakan untuk  meningkatkan  kesehatan  ikan,  karena  bahan  alami  selain  berfungsi  sebagai anti  mikroba  juga  dapat  meningkatkan  kekebalan  tubuh  ikan  terhadap  lingkungan serta  merangsang  sistem  imun  dan  fungsi  organ  yang  berhubungan  dengan pembentukan  sel  darah.  Bahan alami  yang  dapat  digunakan adalah Sargassum sp. dari jenis alga coklat yang keberadaanya sangat melimpah di Kepulauan Riau namun hanya dimanfaatkan sebagai sumber pakan alternatif manusia maupun hewan ternak.
Menurut  penelitian  Dolorosa et  al. (2017),  jenis  alga  coklat  mengandung senyawa  antioksidan  dan  nilai  nutrisi  yang  tinggi.  Senyawa-  senyawa  aktif  yang terkandung pada Sargassum sp. antara lain saponin, flavanoid, fenolik, tanin, steroid, glikosida  serta  alkaloid  dan  jenis  bioaktif  lainnya  yang  memiliki  potensi  sebagai imunostimulator (Yunus et al. 2009), yang dapat meningkatkan profil leukosit dalam darah.  Penggunaan Sargassum sp.  juga  perlu  diketahui  kosentrasi  yang  tepat  dari suatu  senyawa  agar  penggunaanya  tidak  bersifat  toksik  yang  dapat  menyebabkan kemematikan 50% hewan uji, sehingga dapat berdampak terhadap profil darah dari ikan.
Darah merupakan salah satu parameter kesehatan yang dapat digunakan untuk melihat kelainan yang terjadi pada ikan, baik yang terjadi karena penyakit ataupun karena keadaan lingkungan. Ikan yang sakit akan mengalami perubahan pada profil hematologinya  seperti  nilai  hematokrit  dan  kelimpahan  sel  darah  putih.  Studi hematologi  ini  merupakan  kriteria  penting  untuk  mendiagnosis  dan  menentukan kesehatan ikan, (Hidayat et al. 2014).
Salah satu penelitian telah melaporkan tentang penggunaan ekstrak Sargassum sp. pernah dicoba pada ikan lele ( Clarias gariepinus) untuk melihat jumlah eritrosit dan diferensial leukosit dan mendapatkan hasil ekstrak sargassum sp. berpengaruh terhadap peningkatan jumlah eritrosit dan persentase limfosit darah ikan lele dumbo, (Rahma 2015).
Penelitian tentang profil hematologi dengan pemberian ekstrak sargassum sp. pada ikan bawal bintang belum pernah dilakukan. Oleh karena itu penulis tertarik
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
untuk  melakukan  kajian  mengenai  profil  hematologi  ikan  bawal  bintang  dengan membandingkan efek pemberian ekstrak dengan kontrol.

## BAHAN DAN METODE
Ikan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  ikan  bawal  bintang rachinotus blochii ikan diperoleh dari kelompok pembudidaya maju mandiri Desa Madong,  Kelurahan  Kampung  Bugis  dengan  ukuran  panjang  12,69±0,21  cm  dan bobot  31,70±0,73  g.    Pakan  yang  digunakan  yaitu  pakan  megami  GR-  04  dan ekstrak Sargassum sp. yang diperoleh dari hasil pembuatan di laboratorium Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan.
Penelitian ini menggunakan metode dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) ang terdiri  dari  4  perlakuan  dan  3  kali  ulangan.  Perlakuan  dan  dosis  yang digunakan dalam penelitian sebagai berikut:
Kontrol
: 0 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan Perlakuan A : 38 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan Perlakuan B : 58 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan Perlakuan C : 78 ppm ekstrak Sargassum sp. + pakan
Penelitian  ini  mengacu  pada  hasil  praskrining  bahan  alami Sargassum sp. yang dilakukan uji toksisitas dengan menggunakan metode brine shrimp lethal test dan mendapatkan hasil LC 50 dengan kosentrasi yang dapat mematikan 50% hewan adalah 58 ppm, dari hasil tersebut kosentrasi 58 ppm dijadikan nilai tengah untuk menentukan dosis yang akan dilakukan pada uji in-vivo dengan cara diturunkan dan dinaikkan sebanyak 20 ppm.

## Prosedur Kerja

## 1. Persiapan Wadah
Waring yang digunaka sebanyak 12 buah dengan ukuran waring 80 x 60 x 70 cm 3 . diletakkan dikeramba jaring apung (KJA) ukuran 3x3x3m 3 . Sebelum digunakan waring dicek terlebih dahulu apakan layak digunakan atau tidak. Kemudian setelah dilakukan pengecekan waring dipasang pada sisi keramba diikat kuat lalu dipasang pemberat pada setiap sisi sudutnya.

## 2. Persiapan Ikan Uji
Ikan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  ikan  bawal  bintang  dari kelompok  budidaya  ikan  bawal  bintang  Desa  Madong.  Ikan  bawal  bintang  yang digunakan berukuran panjang 12,69 ± 0,21 cm dengan bobot tubuh ikan 31,70 ± 0,73 g  dengan  jumlah  ikan  yang  digunakan  sebanyak  120  ekor  dengan  padat  tebar  10 ekor/wadah.  Ikan  bawal  bintang  dilakukan  adapatasi  selama  2  hari  sebelum dilakukan  pemberian  pakan  perlakuan.  Ikan  bawal  bintang  yang  akan  digunakan
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
dalam penelitian ini aklimatisasi selama 2 hari untuk penyesuaian pada wadah yang
digunakan, setelah hari ke-3 ikan dipuasakan selama ± 24 jam agar sisa pakan yang ada di saluran pencernaannya habis sebelum mulai diberikan pakan perlakuan.
3. Persiapan Pakan Uji
Pakan  yang  digunakan  adalah  pakan  komersil  dengan  merk Megami  GR-4. Pakan  yang  sudah  ditimbang  sebanyak  1  kg  kemudian  dipisahkan  untuk  setiap perlakuannya.  Selanjutnya  ekstrak Sargassum sp.  yang  sudah  disiapkan  dengan kosentrasi sesuai dengan perlakuan dicampur dengan putih telur sebanyak 2 ml lalu dikocok hingga homogen. Larutan ekstrak yang sudah homogen tersebut dicampur merata  diseluruh  permukaan  pakan,  pemberian  ekstrak  dilakukan  dengan  metode penyemprotan spray . Setelah larutan disemprot merata, pakan tersebut dikeringkan selama ±1 hari di suhu ruangan lalu disimpan kedalam wadah kering yang tertutup rapat.
4. Pemeliharan
Pemeliharaan ikan bawal bintang dilakukan selama 30 hari dengan pemberian pakan yang mengandung ekstrak Sargassum sp. sebelum dilakukan pemberian pakan perlakuan  ikan  bawal  bintang  terlebih  dahulu  diaklimatisasi  untuk  menyesuaikan keadaan ikan dalam wadah penelitian. Pemberian pakan dilakukan secara ad satiation dengan frekuensi pemberian pakan 2 kali sehari pada pagi dan sore hari pukul 09:00 dan 16.00 WIB dengan FR 5% dari biomassa ikan bawal bintang yang dipeliharan, (Anriyono 2018).
5. Pengukuran Kualitas Darah
Pengukuran kualitas darah dilakukan sebanyak 2 kali yaitu sebelum pemberian pakan  perlakuan,  dan  setelah  pemberian  pakan  perlakuan.  Sebelum  dilakukan pengambilan  darah  pada  ikan  tersebut  terlebih  dahulu  dipingsankan  dengan menggunakan es batu pada suhu 9-10 O C sejalan dengan pendapat (Pratasari 2010). Kemudian  setelah  ikan  tersebut  pingan  pengambilan  sampel  darah  diambil  secara intramuscular dengan  menggunakan syringe 1  ml  yang  telah  dibasahi  dengan antikoagulan  EDTA.  Darah  dihisap  perlahan  sebanyak  0,2  ml  kemudian  jarum syringe dilepas,  dan  sampel  darah  dipindahkan  kedalam microtube yang  telah dibasahi  dengan  EDTA dan  ditutup  rapat  agar  darah  tidak  tumpah.  Selanjutnya dilakukan  pembuatan  preparat  ulas  darah  untuk  pengukuran  kualitas  darah  yang meliputi:
a. Nilai Hamatokrit (Anderson dan Siwicky 1993).
Perhitungan nilai hematokrit dilakukan dengan cara sampel darah ikan dihisap menggunakan tabung mikrohematokrit hingga mencapai mencapai ¾ bagian tabung, kemudian salah satu ujung ditutup dengan parafin sedalam kira- kira 1 cm, sehingga terbentuk  disumbat critoseal .  Tabung  yang  telah  berisi  darah disentrifuge dengan kecepatan  3500  rpm  selama  15  menit.  Nilai  kadar  hematokrit  dilakukan  dengan membandingkan volume padatan sel darah merah dengan volume total darah dengan skala hematokrit.
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
b. Diferensial Leukosit (Aqualex 2008).
Pengamatan diferensial leukosit dilakukan untuk menentukan persentase tiap jenis leukosit yang ada di dalam darah. Pengamatan diferensial leukosit dilakukan
dengan  mengamati  preparat  ulas  darah  di  bawah  mikroskop.  Pembuatan    preparat ulas  darah  dilakukan  dengan  menempatkan  setetes  darah  pada  gelas  obyek.  Gelas obyek pertama diletakkan dengan sudut 45 di atas gelas obyek  pertama, lalu digeser ke  belakang  menyentuh  darah  sehingga  darah  menyebar.  Gelas  obyek  kedua kemudian digeser ke arah yang berlawanan sehingga membentuk suatu lapisan tipis darah.
Preparat  ulas  darah  dibiarkan  kering  dalam  udara.  Setelah  itu  dilanjutkan dengan proses fiksasi, dengan cara merendam preparat di dalam metanol selama 5 menit,  lalu  dikeringkan.  Preparat  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  larutan  Giemsa selama 30 menit, setelah itu dicuci dan dikeringkan. Selanjutnya preparat diamati di bawah mikroskop dengan pembesaran 1000x, dan dilakukan penghitungan masing- masing jenis leukosit hingga mencapai jumlah 100 sel leukosit.

## 6. Parameter Penelitian
a. Nilai Hematokrit
Nilai  hematoktir  adalah  persentase  volume  endapan  eritrosit  setelah  sampel darah dipisahkan dalam waktu dan kecepatan tertentu Anderson et al. (1993). Perhitungan kadar hematokrit dihitunggu dengan rumus:
Nilai hematokrit (%) = 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒔𝒆𝒍 𝒅𝒂𝒓𝒂𝒉 𝒎𝒆𝒓𝒂𝒉 𝒗𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆 𝒕𝒐𝒕𝒂𝒍 𝒅𝒂𝒓𝒂𝒉 𝒙 𝟏𝟎𝟎%

## a. Diferensial Leukosit
Perhitungan jumlah absolut dari masing- masing jenis leukosit dihitung dengan rumus:
Jumlah jenis leukosit (sel/mm 3 ) = 𝒋𝒖𝒎𝒍𝒂𝒉 𝒔𝒆𝒍 𝒅𝒂𝒓𝒊 𝒋𝒆𝒏𝒊𝒔 𝒍𝒆𝒖𝒌𝒐𝒔𝒊𝒕
𝟏𝟎𝟎 x 100%

## Analisis Data
Data  hasil  perhitungan  analisis  menggunakan  uji  ANOVA  ( Analysis  of Variance ) SPSS IBM 25 untuk melihat pengaruh nyata antara perlakuan terhadap konsentrasi ekstrak. Data yang berbeda signifikan (F hitung > F tabel) diuji lanjut dengan  uji  tukey.  untuk  melihat  perbedaan  konsentrasi  ekstrak  antar  perlakuan. Data tersebut disajikan dalam bentuk diagram batang.

## HASIL
1. Nilai Hematokrit
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
Hasil  perhitungan  nilai  hematokrit    pada  ikan  bawal  bintang  selama  30 penelitian dapat dilihat pada gambar 1 dibawah ini:
Gambar 1. Nilai hematokrit ikan bawal bintang selama penelitian
Hasil penelitian nilai hematokrit pada ikan bawal bintang pra perlakuan pakan mendapatkan nilai rata -rata tertinggi ada pada K (46,88±0,15%), diikuti perlakuan A  (46,81±0,24%),  perlakuan  C  (46,81±0,22%),  dan  perlakuan  B  (46,62±0,20%). Setelah  dianalisis  menggunakan  One-Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  nilai hematokrit pra perlakuan pakan tidak berbeda signifikan (P> 0,05). Sedangkan nilai hematokrit  pada  ikan  bawal  bintang  pasca  perlakuan  pakan  dengan  penambahan ekstrak Sargassum sp. mendapatkan nilai rata – rata tertinggi ada pada perlakuan B (54,65±0,27%),  diikuti  oleh  perlakuan  A  (52,49±0,37%),  perlakuan  C (52,16±0,37%), dan Kontrol (47,73±0,21%). Setelah dianalisis menggunakan One- Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  nilai  hematokrit  pasca  perlakuan  pakan  berbeda signifikan (P< 0,05).

## 1. Diferensial Leukosit
Diferensial  leukosit  merupakan  pengamatan  darah  yang  dilakukan  untuk mengetahu jumlah sel darah putih dari setiap pengamatan dengan menghitung jumlah sel dari jenis leukosit dibagi 100 kemudian dikali 100% pengamatan tersebut meliputi limfosit, monosit dan neutrofil.
a. Persentase Limfosit
Hasil  persentase  limfosit  pada  ikan  bawal  bintang  selama  penelitian  dapat dilihat pada gambar 2.
46.88 ±0.15 a 46.81 ±0.24 a 46.63 ±0.20 a 46.81 ±0.22 a 46.73 ±0.21 a 52.49 ±0.37 b 54.65 ±0.27 c 53.16 ±0.37 b 42.00 44.00 46.00 48.00 50.00 52.00 54.00 56.00 K A B C Nil ai Hem at ok rit (%) Perlakuan Pra perlakuan Pasca perlakuan
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49

## Gambar 2. Persentase limfosit pada ikan bawal bintang
Hasil penelitian persentase limfosit ikan bawal bintang pra perlakukan pakan mendapatkan nilai rata- rata tertinggi pada perlakuan K, A dan C dengan nilai yang sama yaitu (85,00%) dan terendah pada perlakuan B yaitu (84,67±0,47%).  Setelah dianalisis  menggunakan  One-Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  persentase  limfosit pra perlakuan pakan tidak berbeda signifikan (P> 0,05). Sedangkan pasca perlakuan pakan mendapatkan nilai rata- rata tertinggi ada pada perlakuan B (87,67±0,47%), diikuti oleh perlakuan C (87,33±0,47%),  perlakuan A (86,33±0,84%), dan kontrol (85,00±0,82%).  Setelah  dianalisis  menggunakan  One-Way  ANOVA  didapatkan bahwa persentase limfosit pasca perlakuan pakan berbeda signifikan (P< 0,05).
b. Persentase Monosit
Hasil  persentase  monosit  pada  ikan  bawal  bintang  selama  penelitian  dapat dilihat pada gambar 3.
Gambar 3. Persentase monosit  pada ikan bawal bintang
Hasil  penelitian  persentase  monosit ikan bawal  bintang  pra  perlakuan  pakan mendapatkan nilai rata- rata tertinggi pada perlakuan B (6,67±0,47%), diikuti oleh
85.00 ±0.82 a 85.00 ±0 .0 0 a 84.67 ±0.47 a 85.00 ±0.82 a 85.00 ±0.82 a 86.33 ±0 .4 7 a b 87.67 ±0.47 b 87.33 ±0.47 a b 82.00 83.00 84.00 85.00 86.00 87.00 88.00 89.00 K A B C P er se n tas e L im fos it Perlakuan Pra perlakuan Pasca perlakuan
6.00 ±0 .00 a 6.33 ±0.47 a 6.67 ± 0 .47 a 6.33 ±0.47 a 6.00 ± 0.00 a 6.00 ±0.82 a 5.33 ± 0.47 a 5.67 ±0.47 a 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 K A B C P er sen ta se M onos it Perlakuan Pra perlakuan Pasca perlakuan
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
perlakuan  A  dan  C  (6,33±0,47%),  dan  Kontrol  (6,00±0,00%).  Sedangkan  pasca perlakuan  pakan  mendapatkan  nilai  rata-  rata  tertinggi  ada  pada  perlakuan  A (6,00±0,82%), diikuti oleh perlakuan Kontrol (6,00±0,00%), perlakuan C
(5,67±0,47%), dan perlakuan B (5,33±0,47%). Setelah dianalisis menggunakan One- Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  persentase  monosit  pasca  perlakuan  pakan  tidak berbeda signifikan (P< 0,05).

## c. Persentase Neutrofil
Hasil  persentase  neutrofil  pada  ikan  bawal  bintang  selama  penelitian  dapat dilihat pada gambar 4.
Gambar 12.  Persentase neutrofil pada ikan bawal bintang
Hasil  penelitian  persentase  neutrofil  ikan  bawal  bintang  pra  perlakuan  pakan mendapatkan nilai rata- rata tertinggi pada perlakuan B dan C (8,67±0,47%), diikuti oleh perlakuan Kontrol dan A (8,33±0,47%). Setelah dianalisis menggunakan One- Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  neutrofil  pra  perlakuan  pakan  tidak  berbeda signifikan (P<0,05).
Sedangkan  Persentase  neutrofil  pada  ikan  bawal  bintang  pasca  perlakuan pakan  mendapatkan  nilai  rata-  rata  tertinggi  ada  pada  perlakuan  kontrol (7,33±0,51%), diikuti oleh perlakuan C (7,00±0,00%), perlakuan A (6,71±0,51%), dan  perlakuan  B  (6,67±0,47%).  One-Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  persentase monosit pasca perlakuan pakan tidak berbeda signifikan (P< 0,05).

## PEMBAHASAN
Kadar  hematokrit  merupakan  perbandingan  antara  sel  darah  merah  dengan plasma darah, serta berpengaruh terhadap pengaturan sel darah merah. Pengukuran ini  merupakan  persentase  eritrosit  dalam  darah  lengkap  setelah  spesimen  darah disentrifugasi  dari  hasil  pemeriksaan  terhadap  hematokrit  dapat  dijadikan  sebagai indikator  untuk  menentukan  keadaan  kesehatan  ikan.  Hasil  pengamatan  nilai hematokrit setelah dilakukan pemberian pakan ekstrak Sargassum sp. pada perlakuan
8.33 ±0.47 a 8.33 ±0 .4 7 a 8.67 ±0.47 a 8.67 ±0.47 a 7.33 ±0 .4 7 a 6.71 ±0.51 a 6.67 ±0.47 a 7.00 ±0.00 a 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 K A B C P er sen tas e Neu tr of il Perlakuan Pra perlakuan Pasca perlakuan
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
A,  B, dan C menunjukan peningkatan dibandingkan kontrol dengan nilai tertinggi ada pada perlakuan B yaitu sebesar (54,65±0,27%). Hal ini sejalan dengan penelitian
Azuwarita  (2020),  bahwa  peningkatan  kadar  hematokrit  pada  ikan  yang  diberi ekstrak Sargassum sp.  cenderung  meningkat  serta  mampu  menstimulasi  respon dalam bentuk peningkatan kadar hematokrit sampai kisaran tertentu.
Menurut  Astuti et  al. (2017),  bahwa  meningkatnya  persentase  hematokrit, diduga karena pengaruh dari pemakaian imunostimulan. Imunostimulan berpengaruh terhadap nilai hematokrit walaupun dengan presentase yang kecil. Kadar hematokrit juga  dapat  digunakan  untuk  mengetahui  pengaruh  dari  pemakaian  imunostimulan sehingga dapat digunakan sebagai petunjuk untuk mengetahui kondisi ikan setelah pemberian imunostimulan, (Putra et al. 2015).  Data hematokrit normal pada ikan bawal bintang dapat dilihat pada gambar 6 bahwa nilai hematokrit normal berkisar antara 46,63%- 46,88%. Menurut Yuni et al. (2019), nilai hematokrit standar adalah sekitar 45% namun nilai ini dapat berbeda-beda tergantung spesies. Menurut Talpur dan  Ikhwanuddin  (2013),  menyatakan  bahwa  rendahnya  kadar  hematokrit  dapat menjadi  indikasi  ikan  terserang  anemia,  karena  ikan  berhenti  makan  akibat  stress atau serangan penyakit.
Pada  diagram  diatas  menujukkan  terjadi  penurunan  nilai  hematokrit  pada perlakukan C dengan nilai (52,16±0,37%) penurunan tersebut masih berada dalam kisaran normal untuk ditoleransi. Penurunan nilai hematokrit pada perlakukan C ini diperkirakan pada kosentrasi pemberian ekstrak Sargassum sp.  ikan tidak mampu mencerna  makanan  dengan  baik,  dikarenakan  kosentrasi  yang  diberikan  bersifat toksik, hal tersebut susuai dengan uji pendahuluan yang diperoleh pada kosentrasi 58 ppm dapat mematikan 50%  hewan uji larva Artemia salina . Menurut Naina et al.
(2019), Sargassum sp.  yang di ekstraksi dengan menggunakan pelarut etanol 96% secara  maserasi  mengandung  senyawa  flavonoid.  Senyawa  flavonoid  ini  dapat menghambat daya makan larva sebagai stomach poisoning atau racun perut.
Pada penelitian ini dapatkan dikatakan rata- rata nilai hematokrit normal untuk ikan  bawal  bintang  berada  pada  kisaran  46%  sesuai  hasil  pada  kontrol  sebelum dilakukan  pemberian  pakan  perlakuan,  namun  setelah  dilakukan  pemberian  pakan perlakuan mendapatkan kenaikan nilai hematokrit pada ikan bawal bintang tertinggi pada  perlakuan  B  dibandingkan  tanpa  diberi  pakan  yang  mengandung  bahan imunostimulan dengan nilai kenaikan yang didapatkan sebesar 7,77%. Bahan yang dimaksud  adalah  ekstrak Sargassum sp.  yang  mengandung  senyawa  flavonoid. Flavonoid  telah  dilaporkan  memiliki  aktivitas  antioksidan,  antibakteri,  antivirus, antiradang, antialergi, dan antikanker, (Miller 1996).
Kenaikan  nilai  hematokrit  setelah  dilakukan  pemberian  pakan  yang mengandung bahan imunostimulan tidak berpengaruh apabila sewaktu- waktu ikan tersebut  terserang  pathogen  berupa  bakteri  dari  luar  dengan  melihat    penurunan persentase  hematokrit.  Penelitian  sebelumnya  telah  melaporkan  bahwa  pemberian ekstrak Sargassum sp.  pada  ikan  kakap  putih  setelah  diuji  tantang  dengan  bakteri
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
Vibrio  alginolyticus mengalami  penurunan  sebesar  25%  dari  nilai  hematokrit tertinggi setelah diberi pakan perlakuan Azuwarita (2020). Penurunan tersebut terjadi
dikerenakan jumah sel darah merah dalam tubuh menurun dikarenakan jumlah sel darah putih dalam tubuh sedang diproduksi untuk membersihkan benda asing yang masuk dalam tubuh.
Limfosit  merupakan  sistem  kekebalan  tubuh  non  spesifik  yang  mampu melindungi  tumbuh  dari  serangan  mikroba.  Hasil  persentase  limfosit  ikan  bawal bintang dapat dijadikan sebagai indikator untuk menentukan status kesehatan ikan, dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  didapatkan  nilai  persentase  rata-  rata  limfosit sebesar  85%,  nilai  tersebut  merupakan  hasil  pengamatan  sebelum  dilakukan pemberian  ekstrak Sargassum sp.  dan  setelah  pemberian  ekstrak Sargassum sp. terjadi peningkatan persentase sebesar 2,67% dengan perlakuan B. persentase nilai limfosit tersebut masih berada dalam kisaran normal untuk ikan laut. Limfosit pada ikan berjumlah sekitar 20- 30% dari sel darah putih yang beredar. Limfosit banyak ditemukan  pada    hapusan  darah  ikan.  Menurut  Bijanti et  al. (2010),  limfosit berbentuk  bulat  dengan  inti  yang  besar  dan  sitoplasma  yang  sedikit.  Gambaran limfosit teserbut dapat dilihat pada gambar 2.
Hasil pengamatan dari persentase limfosit setelah dilakukan pemberian pakan ekstrak Sargassum sp.  pada  perlakuan  A,  B,  dan  C  menunjukan  peningkatan dibandingkan  kontrol  dengan  nilai  tertinggi  ada  pada  perlakuan  B  yaitu  sebesar (86,67±0,47%). Data persentase limfosit pada ikan bawal bintang dapat dilihat pada gambar 8 bahwa persentase limfosit normal berkisar antara 84,67%  - 85,00% hasil tersebut merupakan kondisi normal pada ikan bawal bintang yang dipelihara. Hasil tersebut sejalan dengan pendapat Preager et al. (2016) kisaran normal limfosit ikan lele yaitu berkisar antara 74-86%.
Hasil  pada  gambar  8  didapatkan  bahwa  terjadi  penurunan  pada  persentase limfosit  pada  perlakukan  C  hal  tersebut  diduga  bahwa  penurunan  tersebut  terjadi dikarenakan bahan asing yang masuk dalam tubuh ikan tidak mampu diserap dengan maksimal. Peningkatan persentase limfosit pada tubuh ikan menandakan sistem imun ikan  semakin  meningkat.  Dari  hasil  yang  telah  didapatkan  jumlah  limfosit  lebih banyak dari monosit dan neutrofil, hal tersebut sesuai dengan pernyataan Rustikawati (2012),  bahwa  persentase  limfosit  pada  ikan  lebih  banyak  dibandingkan  jumlah monosit dan neutrofil. Novita et al. (2020), sel limfosit memiliki presentasi tertinggi dibandingkan dengan sel lain. Proporsi yang tinggi disebabkan oleh fungsinya dalam menyediakan  zat  kebal  tubuh.  Limfosit  tersebut  akan  membesar  yang  kemudian membentuk antibodi spesifik sesuai dengan antigen memberikan rangsangan.
Peningkatan persentase limfosit dikarenakan adanya benda asing yang masuk kedalam  tubuh.  Benda  asing  tersebut  berupa  ekstrak Sargassum sp.  (makro  alga) yang  dicampur  melalui  pakan  (Rahma et  al. 2015),  dan  merupakan  bahan imunostimulan  sehingga  mampu  meransang  pembentukan  kekebalan  tubuh  non- spesifik  ikan.  Pengingkatan  persentase  limfosit  merupakan  refleksi  keberhasilan
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
sistem imunitas ikan dalam megembangkan respon imunitas seluler (non spesifik) sebagai pemicu untuk respon kekebalan. Pada dasarnya sel limfosit terdiri dari sel B
dan Sel T. Sel B mempunyai kemampuan untuk bertranformasi menjadi sel plasma yaitu  sel  yang  memproduksi  antibodi.  Sedangkan  sel  T  sangat  berperan  dalam kekebalan berprantaraan sel dan mengontrol respon imun.
Menurut  Mundriyanto et  al. (2002),  mekanisme  kerja  limfosit  dalam peranannya  untuk  sistem  kekebalan  tubuh  berfungsi  menyediakan  zat  kebal  untuk pertahanan  tubuh  dengan  cara  mengenali  antigen  melalui  reseptor  spesifik  pada membran sel. Pada limfosit T, ketika tubuh atau jaringan terpapar oleh antigen, maka limfosit T tidak mampu mengenal antigen tersebut sendirian tanpa melalui reseptor spesifik. Dengan adanya sel reseptor spesifik ini memungkinkan sel T lebih cepat mengenali antigen  yang  ada  sehingga  langsung  memberikan  reaksi  kekebalan  dan menstimulasi sel B untuk mengeluarkan antibodi. Pemberian ekstrak Sargassum sp. ini  akan  menstimulir  proses  produksi  lisozim  dan  komplemen  yang  akan mengaktifkan  limfosit  B  untuk  berdiferensiasi  sehingga  akan  lebih  aktif  dalam memproduksi antibodi spesifik.
Menurut  Inanova et  al. (1994),  bahwa  banyak  pendapat  yang  melaporkan penelitian yang berhubungan dengan aktivitas dari makro alga Sargassum sp. sebagai imunostimulan dalam upaya melawan serangan penyakit pada manusia dan serangan hewan  darat  lainnya.  Dari  hasil  penelitian  yang  sudah  dilakukan  bahwa  dari  jenis bahan tersebut dapat merangsang perkembangan limfosit secara in-vivo dan in-vitro.
Monosit  berperan  sebagai  magrofag  dan  banyak  dijumpai  pada  daerah peradangan  atau  infeksi.  Hasil  pengamatan  jumlah  monosit  dari  setiap  perlakuan selama  penelitian  yaitu  berkisar  antara  5,33  –  6,67%  dengan  persentase  tertinggi setelah  dilakukan  pemberian  pakan  dengan  ekstrak Sargassum sp.  yaitu  pada perlakuan A sebesar (6,00±0,82%), dibandingkan dengan Kontrol. Data persentase monosit  pada  ikan  bawal  bintang  dapat  dilihat  pada  gambar  10  bahwa  persentase monosit  normal  berkisar antara  6,000%  -  6,67%  hasil  tersebut  merupakan  kondisi normal pada ikan bawal bintang yang dipelihara.. Hal tersebut menunjukkan bahwa pemberian pakan mengandung ekstrak Sargassum sp. dan tanpa pemberian ekstrak Sargassum sp.  tidak  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan  terhadap  persentase monosit  ikan  bawal  bintang.  Persentase  monosit  pada  penelitian  ini  masih  berada dalam kisaran normal untuk ikan air laut. Hal ini diperkuat oleh  Hardi (2006), bahwa persentase monosit normal ikan kakap putih sebanyak 100% dan 10% diatas kisaran normal sedangkan 0% dibawah kisaran normal. Persentase monosit di dalam  darah ikan  sekitar  0,1%  dari  total  populasi  leukosit  yang  bersirkulasi.  Pernyataan  ini didukung  oleh  pernyataan  Rustikawati  (2012),  bahwa  jumlah  sel  limfosit  paling banyak, kemudian sel neutrofil dan jumlahyang paling sedikit adalah sel monosit.
Hasil yang diperoleh saat pengamatan mendapatkan bentuk sel monosit intinya berbentuk  seperti  ginjal  atau  bilobus  dan  bentuknya  bermacam-  macam,  pada umumnya  mencapai  50%  dari  volume  sitoplasma,  bentuk  sel  monosit  tidak
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
beraturan. Pengecatan menggunakan bantun giemsa maka inti sel akan bewarna biru atau sitoplamsa bewarna biru kepucatan. Kromatin inti monosit lebih bergranuler dan
kurang memadat jika dibandingkan dengan inti.
Monosit  bersifat  lebih  kuat  untuk  melakukan  fagosit  dibandingkan  dengan neutrofil dan dapat memfagosit partikel- partikel yang lebih besar. Oleh karena itu fagositosit yang matang disebut magrofag dan beredar dalam jaringan (Bijanti et al. 2010). Hasil yang didapakan dari persentase monosit cenderung menurun dikarena tidak adanya infeksi yang dapat meransang monosit dalam tubuh ikan bawal bintang. Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Utami et  al. (2013),  bahwa  rendahnya  proporsi monosit berkaitan dengan fungsi monosit itu sendiri yaitu sebagai magrofag, dimana monosit  tidak  terlau  banyak  dibutuhkan  untuk  memfagosit,  dikarenakan  belum adanya infeksi yang masuk dalam tubuh yang merangsang produksi monosit.
Pengamatan  terhadap  rataan  persentase  neutrofil  dalam  darah  ikan  bawal bintang  menunjukkan  bahwa  jumlah  neutrofil  cenderung  menurun  saat  dilakukan pengamatan pada hari ke-30. Setelah dilakukan pemberian pakan ekstrak Sargassum sp.  menunjukan  persentase  neutrofil  tertinggi  pada  kontrol  yaitu  sebesar (7,33±0,47%)  dibandingkan  dengan  perlakuan  A,  B,  dan  C  yang  diberi  dengan ekstrak Sargassum sp. penurunan jumlah neutrofil tersebut dikarenakan tidak adanya infeksi yang dilakukan selama penelitian. Data persentase neutrofil pada ikan bawal bintang  dapat  dilihat  pada  gambar  12  bahwa  persentase  neutrofil  normal  berkisar antara  8,33%  -  8,67%  hasil  tersebut  merupakan  kondisi  normal  pada  ikan  bawal bintang  yang  dipelihara.  Hasil  tersebut  sejalan  (Robert  2012),  persentase  neutrofil pada ikan lele normal adalah 6- 8% dari proporsi leukosit yang ada.
Menurut Delma dan Brown (1989), persentase neutrofil cenderung meningkat pada  saat  terjadi  penyakit  bakteri  karena  neutrofil  keluar  dari  pembuluh  darah menuju daerah infeksi. Karena susuai fungsi utama neutrofil adalah  menghancurkan bahan  asing  melalui  proses  fagositik.  Hartika et  al .  (2014),  juga  mengemukakan bahwa  presentasi  neutrofil  yang  rendah  menunjukkan  tidak  adanya  serangan mikroorganisme  sehingga  neutrofil  belum  banyak  diproduksi  oleh  tubuh  ikan. Sedangkan Mahasri et al . (2011), melaporkan bahwa berdasarkan fungsinya neutrofil tidak terlalu berperan dalam proses pertahanan tubuh terhadap lingkungan sehingga tubuh  ikan  tidak  melakukan  produksi  sel  neutrofil  dan  presentasinya  dalam  darah menjadi berkurang.
.

## KESIMPULAN
Kesimpulan  dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  adalah  bahwa  pemberian ekstrak Sargassum sp.  berpenaruh  terhadap  peningkatan  nilai  hematokrit  dan persentase limfosit pada ikan bawal bintang pada dosis yang tertinggi di perlakuan B yaitu  59  ppm.  Hasih  hematokrit  yang  didapatkan  sebesar  54,65%  dan  persentase limfosit sebesar 87,67%.
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakah penulis ucapakan kapadah semua pihak yang ikut membantu dari
awal penelitian hingga terselesainya jurnal ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson,  D.P.,  Siwicky,  A.K.  1993.  Basic  Haematology  and  Serology  for  Fish Health  Program.  Paper  Presented  in  Second  Symposium  on  Disease  in  Asia Aquaculture Aquatic Animal Health and Eviroment Phuket Thailand.
Anriyono.  2018.  Pertumbuhan  Benih  Ikan  kakap  Putih  ( Lates  calcarifer )  dengan Pemberian Dosis Pakan yang Berbeda. [Skripsi]. Universitas Maritim Raja Ali Haji. Tanjungpinang.
Aqualex. 2008b. Cortisol. http://id.wikipedia.org/wiki/Ikan Mas. [3 Juli 2008]. Astuti, A.P.K., Hastuti, S., Haditomo, A.H.C. 2017. Pengaruh Ekstrak Temulawak pada Pakan sebagai Imunostimulan pada Ikan Tawes ( Puntius javanicus )
dengan  Uji  Tantang  Bakteri.  Journal  of  Aquaculture  Management  and Technology. 6 (3): 10-19.
Azuwarita,  M.  2020.  Efektivitas  Ekstrak Sargassum sp.  Terhadap  kelangsungan hidup  ikan  kakap  putih    ( lates  calcarifer )  yang  diinfeksi  bakteri vibrio alginolyticus. [Skripsi]. Universitas Maritim Raja Ali Haji.
Bawal  Bintang,  Atasi  Dampak  PERMEN  KP  NO  1/2015.  [Internet}.  [diacu 2019 Okober 11] http://www.djbp.kkp.go.id/index.php/mobile/.html Bijanti,  R.  2010.  Hematokrit  Ikan  (Teknik  Pengambilan  Darah  dan  Pemeriksaan Hematologi  Ikan).  Edisi  2.  Fakultas  Kedokteran  Hewan.  Universitas Airlangga. Surabaya: Pt Rerkapetra Media. ISBN: 978602798231-
Dellman,  H.  D  dan  E.  M.  Brown.  1989.  Buku  Teks  Veteriner  I.  Terjemahan  :  R. Hartanto, Universitas Indonesia Press. Jakarta.
DJPB. 2020. Direktorat Jendral Budidaya Perikanan. KKP Kembangkan Budidaya Dolorosa,  T.M.,  Nurjanah,  Purwaningsih,  S.,  Effionora,  A.,  Taufik,  H.  2017.
Kandungan senyawa bioaktif bubur rumput laut Sargassum plagyophyllum dan Eucheuma cottonii sebagai bahan baku krim pencerh kulit. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 20(3): 633- 644.
Hartika,  R.,  Mustahal  dan  A.N.  Putra.  2014.  Gambaran  Darah  Ikan  Nila ( Oreochromis  niloticus )  dengan  Penambahan  Dosis  Probiotik  yang  Berbeda dalam Pakan. Jurnal Periakanan dan Kelautan. Vol. 4 (1) : 259-267.
Hidayat, R., E. Harpeni dan Wardiyanto, 2014, Profil Hematologi Kakap Putih ( Lates calcallifter )  yang  Distimulasi  dengan  Jintan  Hitam  ( Nigela  sativa )  dan Efektivitasnya terhadap Infeksi Vibrio dengan Alginolyticus , Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan, vol. 3 no. 1, hal: 327-334, diakses tanggal 29 November 2015.
Hidayat, R., E. Harpeni dan Wardiyanto, 2014, Profil Hematologi Kakap Putih ( Lates calcallifter )  yang  Distimulasi  dengan  Jintan  Hitam  ( Nigela  sativa )  dan Efektivitasnya terhadap Infeksi Vibrio dengan Alginolyticus , Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan, vol. 3 no. 1, hal: 327-334, diakses tanggal 29 November 2015.
Miller, A., L. 1996. Antioxidant Flavonoids: Structure, Function and Clinical Usage. Alt. Med. Rev. 1(2).
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 36-49
Mahasri, G., P.Widyastuti., L.Sulmatiwi. 2011. Gambaran Leukosit Darah Ikan Koi ( Caprynus  carpio )  yang  Terinfeksi Ichthypohthirius  multifillis pada  Derajat Infestasi yang Berbeda dengan Metode Kohabitasi. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan.Vol. 3 (1) : 91-96.
Naina, Y., Wulandari, R., Tengku, R.S. 2019. Skrining Komponen Bioaktif  Ethanol 96% Sargassum sp.  Sebagai  Antibakteri  Terhadap Vibrio  harveyi .  Intek Akuakultur. 2 (2): 22 – 23.
Novita, Setyowati, D.N, Astriana, B.H. 2020. Profil Darah Ikan Kakap Putih yang Diinfeksi  Bakteri Vibrio sp.  Dengan  Pemberian  Lidah  Buaya  ( Aloe  Vera ). Jurnal Perikanan. Vol.10 (1) : 55- 69.
Pratisari,  D.  2010.  Transportasi  Ikan  Nila  ( Oreochremis  niloticus )  Hidup  System Kering  Dengan  Menggunkan  Pembiusan  Suhu  Rendah  Secara  Langsung [Skripsi]  Bogor:  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Institut  Pertanian Bogor.
Putra,  G.P.,  Mulyana,  F.S.,  Mumpuni.  2015.  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak Temulawak ( Curcuma xanthorrhiza Roxb) terhadap Mortalitas dan Gambaran Benih  Ikan  Nilem  ( Osteochilus  hasselti )  dengan  Uji  Tantang  Menggunakan Bakteri Aeromonas hydrophila. J. Mina Sains. 1 (2): 6 - 78.
Rahma,  F.W.,  Mahasari,  G.,  Gunanti,  M.,  2015.  Pengaruh  pemberian  ekstrak sargassum sp.  Dengan  pelarut  metanol  pada  pakan  terhadap jumlah  eritrosit dan differensial leukosit ikan lele dumbo ( clarias gariepinus ). Vol.7:2. Retnani, H.T., A. Nurlita. (2013). Pengaruh Salinitas Terhadap Kandungan Protein dan  Pertumbuhan  Ikan  Bawal  Bintang  Trachinotus  blochii.  Jurnal  Biologi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Institut Teknologi Sepuluh November (ITS).
Rustikawati, I. 2012. Efektivitas ekstrak Sargassum sp. terhadap diferensiasi leukosit ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus )  yang  diinfeksi Streptococcus  iniae .  Jurnal Akuatika, 3(2).
Robert, R. J. 2012. Fish Pathology. WileyBlackwell. Iowa. 123 P.
Talpur,  A.D.,  Ikhwanuddin,  M.  2013. Azadirachta  indica (neem)  Leaf  Dietary Effects on the Immunity Response and Disease Resistance of Asian Seabass, Lates calcarifer Challenged with Vibrio harveyi . Fish Shellfish Immunol. 34: 254 – 264.
Utami,  D.T.,  S.B.  Prayitno,  S.  Hastuti  dan  A.  Santika.  2013.Gambaran  Parameter Hematologis Pada Ikan Nila ( Oreochromis Niloticus ) yang diberi Vaksin DNA Streptococcus  Iniae  dengan  Dosis  yang  Berbeda. Journal  of  Aquaculture Management and Technology . Vol. 2. (4):7-20.
Yuni,  P.,  Hasan,  H.,  Prasetio,  E.  2019.  Studi  Hematologi  Ikan  Semah  ( Tor Douronens is,  Jelawat  ( Leptobarbus  Hoeveni ),  Tengadak  ( Barbonymus Schwanenfeldi ),  Blawan  ( Helostoma  Temmincki ),  dan  Botia  ( Chromobotia Macracan thus). Jurnal Ruaya. 7 (1): 65 – 69.
Yunus,  A.  Apri,  W.A.  Indah.  2009.  Daya  hambat  ekstrak  metanol  rumput  laut ( Euchema spinosum ) terhadap bakteri Aeromonas hydrophila . Jurnal kelautan, Volume 2, No 2.