## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK AIR REBUSAN DAUN
MANGROVE SEGAR Sonneratia alba DI DESA WORI KABUPATEN MINAHASA UTARA
( Antibacterial Activity of Water Extract of Fresh Mangrove Sonneratia alba Leaf Decoction In Wori Village, North Minahasa Regency )
Gisella Aisyah Linggama 1 , Lita A.D.Y. Montolalu 2 , Netty Salindeho 2 , Nurmeilita Taher 2 , Silvana D. Harikedua 2 , Daisy M. Makapedua 2 , Lena Damongilala 2
¹Mahasiswa pada Program Studi Teknologi Hasil Perikanan FPIK UNSRAT Manado. ²Staf Pengajar pada Program Studi Teknologi Hasil Perikanan FPIK UNSRAT Manado.
E-mail: eghylinggama@gmail.com

## ABSTRACT
Sonneratia  alba is  one  type  of  mangrove  whose  trees  are  always  green,  grow  scattered,  the height is sometimes up to 15 m and has compounds that are antibacterial. The purpose of this study was to  determine  the  antibacterial  activity  found  in  extracts  of Sonneratia  alba mangrove  leaf  decoction  in inhibiting Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria. Using the infusion extraction method by boiling  it  for  40  and  50  minutes  after  that  it  is  boiled  again  with  small  fire  water  then  dried  in  an  oven with  a  temperature  of  75–80°C  with  an  extract  concentration  of  5%  and  10%,  positive  control (chloramphenicol),  and  negative  control  (aquades).  The  antibacterial  activity  assay  method  used  was agar  diffusion  (disc  diffusion  Kirby  and  Bauer)  which  has  been  modified.  The  result s  obtained  were obtained antibacterial activity from extracts of fresh mangrove leaf boiled water extract and antibacterial activity was shown against both test bacteria and explained the broad spectrum antibacterial compounds. Keyword: Sonneratia alba, antibacterial, infusion.
Sonneratia  alba merupakan  salah  satu  jenis  mangrove  yang  pohon  selalu  hijau,  tumbuh tersebar, ketinggian kadang-kadang hingga 15 m dan memiliki senyawa yang bersifat antibakteri. Tujuan dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  yang  terdapat  pada  ekstrak  air  rebusan daun mangrove Sonneratia alba dalam menghambat bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Menggunakan  metode  ekstraksi  infusa  dengan  cara  direbus  selama  40  dan  50  menit  setelah  itu  direbus kembali  dengan  air  api  kecil  kemudian  dikeringkan  dalam  oven  dengan  suhu  75–80°C  dengan konsentrasi  ekstrak  5%  dan  10%,  kontrol  positif  (kloramfenikol),  dan  kontrol  negatif  (akuades). Pengujian aktivitas antibakteri yang digunakan adalah difusi agar ( disc diffusion Kirby and Bauer ) yang telah  dimodifikasi.  Hasil  yang  diperoleh  yaitu  didapatkan  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  air  rebusan daun  mangrove  segar  dan  aktivitas  antibakterinya  ditunjukkan  terhadap  kedua  bakteri  uji  dan menjelaskan senyawa antibakteri tersebut berspektrum luas.
Kata kunci: Sonneratia alba, antibakteri, infusa.

## PENDAHULUAN
Mangrove merupakan potensi sumberdaya  alam  yang  sangat  besar.  Berbagai produk  dari  mangrove  dapat  dihasilkan  baik secara  langsung  maupun  tidak  langsung, diantaranya  adalah  kayu  bakar,  keperluan rumah  tangga,  sumber  bahan  obat  tradisional dan memiliki peranan penting dalam melindungi  pantai  dari  gelombang,  angin  dan badai (Noor et.al. , 2006). Tumbuhan Sonneratia alba merupakan  salah  satu  jenis  tumbuhan mangrove  yang  banyak  terdapat  di  Kabupaten Tanjung  Jabung  Timur  Provinsi  Jambi.  Secara tradisional masyarakat sekitar banyak memanfaatkan  buahnya  sebagai  obat  mual (Latief et.al. ,  2015).  Menurut  Sukardjo  (1984),
daun  muda Sonneratia  alba dapat  dibuat  sayur atau dapat dimakan mentah sebagai lalapan dan seduhan  air  buahnya  dapat  digunakan  sebagai obat  untuk  menghaluskan  kulit  dan  menjaga ketahanan  kulit  terhadap  sengatan  panas matahari.
Menurut Boynauw et.al. , (2017) ekosistem hutan mangrove di Teluk Labuan Uki Desa  Sauk  Kabupaten  Bolaang  Mongondow Sulawesi  Utara,  telah  memberikan  manfaat yang  besar  terhadap  masyarakat  sekitar,  seperti pemanfaatan kayu sebagai kayu bakar, kerangka bangunan  rumah  tiang  kapal,  alat  penangkapan ikan,  serta  hiasan  untuk  menunjang  kehidupan mereka,  dan  menurut  Putri et.al. ,  (2016) masyarakat  di  daerah  Desa  Tanah  Kuning
Kabupaten Bulungan
Kalimantan Utara, memanfaatkan  daun Sonneratia  alba sebagai bahan  tambahan  untuk  bedak  dingin  maupun sebagai obat cacar.
Selanjutnya  menurut  Kurniaji  (2014), menyatakan  bahwa  ekstrak  daun  mangrove Sonneratia alba mampu menghambat
pertumbuhan  bakteri Vibrio  harveyi secara in Vitro .  Berdasarkan  fakta  tersebut,  maka  diduga Sonneratia  alba mengandung  senyawa  aktif yang  dapat  dimanfaatkan  bagi  kebutuhan manusia.  Menurut  Dotulong et.al. ,  (2018) bahwa  pada  daun  muda  mangrove Sonneratia alba yang  diekstrak  dengan  etanol  dengan metode soxhlet terdapat  komponen  bioaktif yaitu fenol, flavonoid, steroid, saponin, triterpenoid,  tanin  dan  alkaloid  yang  dapat bekerja sebagai antibakteri.
Berdasarkan  uraian  di  atas,  peneliti tertarik  untuk  melakukan  penelitian  mengenai uji  antibakteri  yang  terdapat  pada  daun mangrove muda Sonneratia alba .

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  waktu Desember  2018–Mei  2019  di  Laboratorium Teknologi  Penanganan  dan  Pengolahan  Hasil Perikanan  dan  Laboratorium  Biologi  Molekuler &  Farmasitika  Laut  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu Kelautan Univ. Sam Ratulangi Manado.

## Bahan dan Alat
Bahan  yang digunakan  dalam  penelitian adalah  daun  muda  mangrove Sonneratia  alba , Staphylococcus  aureus DSM ( Deutsche Sammlung  Von  Mikroorganisme  und  Zell kulturen GMBH), Escherichia  coli DSM  498 ( Deutsche  Sammlung  Von  Mikroorganisme  und Zell  kulturen GMBH),  akuades,  NB  ( Nutrient Broth ),  MHA  ( Mueller  Hinton  Agar ),  agar swallow, kloramfenikol 250 mg.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian adalah laminar air flow , autoclave , Spektrofotometri  T60  UV-Vis  190–1100  nm, magnetic  stirrer ,  vortex,  cawan  petri,  tabung reaksi, erlenmeyer, gelas ukur, spatula, mikropipet  dan  tip,  pinset,  jarum  ose,  lampu bunsen,  botol  kaca,  kompor,  oven  Yenaco YNC-OV30L, penggaris, panci, wadah, saringan,  gunting,  timbangan,  kertas  cakram, alumunium foil, wrapping , kertas label, tissue.
Pengambilan sampel
Sampel  mangrove Sonneratia  alba diambil  di  Desa  Wori  Kabupaten  Minahasa Utara,  Sulawesi  Utara.  Sampel  mangrove  yang diambil adalah daun mangrove muda (3–4 helai dari  pucuk)  dan  dibawa  ke  Laboratorium Teknologi  Penanganan  dan  Pengolahan  Hasil Perikanan  Universitas  Sam  Ratulangi  untuk dilakukan proses ekstraksi.

## Ekstraksi
Daun  dicuci  bersih  dengan  air  mengalir kemudian  digunting  kecil-kecil  dan  ditimbang sebanyak 1 kg (dalam satu perlakuan). Didihkan air  sebanyak  4  liter  (dalam  satu  perlakuan), setelah  air  mendidih  masukkan  daun  mangrove yang  sudah  digunting-gunting  dan  direbus selama  40  dan  50  menit  dengan  suhu  97°C. Kemudian disaring dan air rebusannya dimasukkan  ke  dalam  panci  untuk  direbus kembali  dengan  menggunakan  api  kecil  selama 2  jam.  Setelah  itu  dikeringkan  di  dalam  oven selama  10–12  jam  dengan  suhu  80°C.  Setelah mendapatkan ekstrak kering, dihitung rendemennya  dan  kemudian  dibuat  larutan konsentrasi untuk pengujian antibakteri. (Dirjen POM, 2000 yang dimodifikasi).

## Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini seperti cawan petri, tabung reaksi, dan pinset dicuci bersih, dikeringkan, dibungkus  kemudian  disterilkan  dalam  oven pada  suhu  150°C  selama  2  jam  (sterilisasi kering). Media untuk pertumbuhan mikroorganisme  disterilisasi  dalam  autoclave pada  suhu  121°C  selama  15  menit  (sterilisasi basah) (Lay,1994).

## Peremajaan Bakteri Uji
Bakteri  Staphylococcus  aureus  dan Escherichia  coli  diambil  sebanyak  1  ose  dari stok  bakteri  dan  dicampurkan  ke  media  cair Nutrient Broth (NB) 5 mL dalam tabung reaksi, kemudian  ditutup  dengan  kapas  dan  dibiarkan selama  24  jam  (Dwidjoseputro,  1994  yang dimodifikasi).
Penentuan Optical Density (OD) Sediakan 3 kuvet, 1 kuvet dibuat blanko dengan  cara  masukkan  4  mL Nutrient  Broth ke dalam  kuvet  dan  2  kuvetnya  lagi  masukkan masing-masing  bakteri  sebanyak  0,4  mL  dan tambahkan Nutrient  Broth sebanyak  3,6  mL (penghitungan  dalam  10  kali  pengenceran  yang
diperkecil).  Setelah  itu  diukur  absorbansinya dengan  menggunakan  alat  Spektrofotometri UV-VIS  dengan  panjang  gelombang  600  nm (Ramadan, 2017).

## Pembuatan Media Padat MHA
Pembuatan  media  ini  menggunakan metode  tuang  ( pour  plate ).  Ditimbang  MHA ( Mueller  Hinton  Agar )  sebanyak  4,8  gram  dan agar  swallow  2  gram  kemudian  dimasukkan  ke dalam masing-masing erlenmeyer dan dilarutkan dalam akuades sebanyak 200 mL dan diaduk  dengan  menggunakan magnetic  stirrer . Setelah itu disterilisasi pada suhu 121°C selama 15 menit kemudian campurkan bakteri Staphylococcus aureus 24 µL di satu erlenmeyer  dan  bakteri Escherichia  coli 38  µL di erlenmeyer yang satu lagi dan diaduk dengan magnetic  stirrer .  Setelah  itu  dituangkan  ke dalam  cawan  yang  sudah  diberi  kode  (Sutedjo, 1996 dalam Pratama 2017 yang dimodikasi).

## Pembuatan Kontrol Positif dan Negatif
Sebagai  tolak  ukur  untuk  melihat  ada atau  tidaknya  zona  hambat  atau  aktivitas antibakteri dari sampel yaitu dengan menggunakan obat kloramfenikol sebagai kontrol  positif  dengan  melarutkan  250  mg  obat kloramfenikol  ke  dalam  250  mL  akuades  dan akuades  sebagai  kontrol  negatif  (Yusriana et.al. , 2014 yang dimodifikasi).

## Uji AKtivitas Antibakteri
Pengujian  antibakteri  yang  digunakan adalah  cara  difusi Kirby-Bauer yang  telah dimodifikasi pada konsentrasi 5% dan 10%.
Teteskan  ekstrak  uji  40  dan  50  menit, kontrol  positif  dan  negatif  sebanyak  50  µL  di kertas  cakram  dan  dibiarkan  sampai  meresap. Setelah  meresap  letakkan  kertas  cakram  di  atas permukaan media yang sudah dipadatkan dalam cawan.  Kemudian  dibungkus  dengan wrapping lalu  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu ruangan.  Setelah  itu  dilakukan  pengamatan  dan diukur  zona  beningnya  dengan  menggunakan penggaris.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen
Hasil  rendemen  ekstrak  air  rebusan daun  mangrove  dengan  pelarut  air  pada perlakuan  40  menit  2,58%±0,3  dan  50  menit 2,66%±0,3.  Semakin  lama  waktu  perebusan maka semakin besar rendemen yang dihasilkan.
Tabel 1.  Hasil Ekstraksi Air Rebusan Daun Mangrove Sonneratia alba . Perlakuan (menit) Berat Ekstrak Kering (gram) Rata- rata (gram) Rendemen (%) 1 2 3 40 25,55 26,16 25,82 25,84 2,58 50 26,35 26,86 26,52 26,67 2,66
Menurut  Wijaya et.al., (2018),  hasil rendemen  dari  ekstrak  daun  rambai  laut ( Sonneratia  caseolaris L.  Engl)  dengan  metode soxhletasi  menghasilkan  rata-rata  rendemen tertinggi  yaitu  28,38%,  dengan  metode  refluks 25,57%,  metode  maserasi  21,28%,  dan  dengan metode infundasi menghasilkan rata-rata rendemen terendah yaitu 17,20%. Perbandingan metode  ekstraksi  juga  dapat  memberikan  hasil yang berbeda-beda.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Tabel 2.  Hasil Diameter Zona Hambat Pada Bakteri Escherichia coli
Perlakuan Konsentrasi 10% Konsentrasi 5% 1 2 3 Rata-rata 1 2 3 Rata-rata 40 min 11,5 10,0 11,0 10,8±0,8 8,5 8,5 8,0 8,3±0,3 50 min 9,0 8,5 8,5 8,7±0,3 9,0 8,0 8,5 8,5±0,5 Kontrol (+) 27,0 28,5 27,5 27,7±0,8 29,0 27,5 28,0 28,2±0,8 Kontrol (-) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
Tabel 3. Hasil Diameter Zona Hambat Pada Bakteri Staphylococcus aureus
Perlakuan Konsentrasi 10% Konsentrasi 5% 1 2 3 Rata-rata 1 2 3 Rata-rata 40min 8,0 8,5 8,5 8,3±0,3 8,0 7,0 8,0 7,8±0,6 50min 8,5 8,0 8,0 8,2±0,3 8,0 7,0 8,5 8,0±0,9 Kontrol (+) 28,5 29,5 28,5 28,8±0,6 28,0 28,0 30,0 28,7±1,2 Kontrol (-) 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
Menurut  Davis dan  Stout, (1971) dalam Mahmudah  dan  Atun,  (2017)  menjelaskan bahwa  klasifikasi  respon  hambatan  pertumbuh- an  bakteri  yang  dilihat  berdasarkan  diameter
zona  bening  terdiri  atas  4  kelompok  yaitu  res- pon lemah (diameter ≤5 mm), sedang (diameter 5–10  mm),  kuat  (diameter  10–20  mm),  dan  sa- ngat  kuat  (diameter  ≥20  mm).  Ekstrak  air
rebusan  ini mampu  menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli (Tabel  2  dan  3).  Hal  ini  ditunjukkan  dengan adanya  zona  hambat  yang  terbesar  ada  pada bakteri Escherichia  coli dengan  konsentrasi 10%. Pada perlakuan 40 menit 10,8±0,8 (tergo- long  kuat)  dan  zona  hambat  yang  terkecil  ada pada  bakteri Staphylococcus  aureus dengan konsentrasi  5%  pada  perlakuan  40  menit 7,8±0,6 (tergolong sedang).
Semakin  besar  diameter  zona  hambat yang  terbentuk  maka  semakin  sedikit  bakteri yang  tumbuh.  Hal  ini,  menunjukkan  bahwa ekstrak  air  rebusan  mangrove  dengan  diameter zona  hambat  yang  besar  mempunyai  aktivitas hambatan  dengan  merusak  membran  dan dinding  sel  bakteri,  denaturasi  atau  mengham- bat  sintesis  protein  dan  sintesa  asam  nukleat serta mengubah permeabilitas membran (Jawetz et.al. , 2007 dalam Widyasanti et.al. , 2015). Dari hasil yang ditujukkan di atas, daya hambat  bakteri  gram  negatif  lebih  besar  zona hambatnya daripada bakteri gram positif. Lebih besar  zona  hambat  pada  bakteri Escherichia coli dibandingkan dengan Staphylococcus aureus menunjukkan  bahwa  untuk  menembus membran  suatu  bakteri  gram  negatif  yang mengandung  lebih  kuat  fosfatidiletanolamin (komponen fosfolipid pada membran), diperlukan  komposisi  senyawa  antibakteri  yang lebih  kuat  lagi.  Komposisi  fosfatidiletanolamin dalam  jumlah  banyak  akan  menyebabkan kurang  sensitifnya  bakteri  terhadap  suatu senyawa antibakteri (Widyasanti, et.al. , 2015). Pada  penelitian  yang  telah  dilakukan, bahwa  kontrol  positif  (kloramfenikol)  jauh lebih  efisien  untuk  menghambat  pertumbuhan kedua  bakteri  uji  yaitu  zona  hambatnya  27,7– 28,8  mm.  Faktor  yang  mempengaruhi  hal  ini karena  kloramfenikol  memiliki  mekanisme  aksi menghambat pertumbuhan bakteri dengan mekanisme menghambat sintesis protein dengan jalan  mencegah  pemanjangan  rantai  protein dengan  menghambat  aktivitas  enzim  peptidil transferase  pada  ribosom  bakteri  (Bara, et.al. , 2013 dalam Bara, et.al. , 2015).
Kontrol  negatif  yang  dalam  penelitian ini  akuades  menunjukkan  perbedaan  terhadap kontrol  positif  maupun  sampel  ekstrak  uji lainnya.  Pada  penelitian  ini  kontrol  negatif berfungsi  untuk  melihat  media  yang  digunakan tercemar atau tidak. Kontrol tersebut menunjuk- kan  tidak  adanya  zona  hambat  pada  pengujian antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus
aureus dan Escherichia  coli ,  sehingga  daya hambat  yang  terbentuk  tidak  dipengaruhi  oleh pelarut  melainkan  karena  aktivitas  senyawa aktif  yang  terdapat  pada  air  rebusan  daun mangrove Sonneratia alba (Opa, et.al. , 2018). Senyawa  antibakteri  dapat  digolongkan juga  sebagai  spektrum  luas  dan  spektrum sempit. Spektrum luas artinya senyawa tersebut bekerja aktif terhadap banyak jenis bakteri baik bakteri  Gram  positif  dan  bakteri  Gram  negatif. Sedangkan  spektrum  sempit  artinya  suatu senyawa  bekerja  aktif  hanya  terhadap  satu golongan  bakteri  saja  baik  hanya  pada  bakteri Gram  positif  ataupun  hanya  pada  bakteri  Gram negatif  (WHO,  2014 dalam Opa, et.al. ,  2018). Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa senyawa  antibakteri  dari  ekstrak  air  rebusan mangrove Sonneratia  alba tergolong  berspek- trum  luas  dikarenakan  kemampuannya  meng- hambat bakteri Gram positif dan Gram negatif.
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan, senyawa uji ekstrak air rebusan daun mangrove muda Sonneratia alba hanya mampu mengham- bat  pertumbuhan  bakteri  (bakteriostatik)  dan bukan  merupakan  antibakteri  yang  dapat  mem- bunuh bakteri (bakteriosida).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian,  maka disimpulkan  bahwa  Pertama,  ekstrak  air  rebus- an daun mangrove segar Sonneratia alba berha- sil  memperoleh  rendemen  sebanyak  40  menit (2,58%)  dan  50  menit  (2,66%)  dengan  melalui proses  infusa.  Kedua,  ekstrak  air  rebusan  daun mangrove  segar Sonneratia  alba mempunyai aktivitas  terbesar  pada  bakteri Escherichia  coli dengan  konsentrasi  10%  pada  perlakuan  40 menit  10,8±0,8  (tergolong  kuat)  dan  aktivitas terkecil ada pada bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 5% pada perlakuan 40 menit 7,8±0,6  (tergolong  sedang).  Ketiga,  ekstrak  ini hanya mampu menghambat pertumbuhan bakte- ri  (bakteriostatik)  dan  senyawa  tersebut  ber- spektrum luas.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  yang  lebih lanjut  untuk  menguji  ekstrak  air  rebusan  daun mangrove  dengan  konsentrasi  yang  berbeda. Disamping  itu  perlu  juga  menguji  antibakteri ekstrak  daun  mangrove  dengan  menggunakan pelarut  lain  dan  bisa  dijadikan  obat  minuman tradisional.

## DAFTAR PUSTAKA
Bara,  R.  A.,  Kandou,  G.  D.,  Ola,  A.R.  B.,  Posangi,  J. 2015.  Analisis  Senyawa  Amtibiotik  dari  Jamur Simbion  yang  Terdapat  dalam  Ascidians Didemnum molle di  Sekitar  Perairan  Bunaken  Sulawesi  Utara. Jurnal  LPPM  Bidang  Sains  dan  Teknologi.  Volume  2 Nomor 2.
Boynauw,  M.  Y.,  Lasabuda,  R.,  Rembet,  U.  N.  W.  J. 2017.  Studi  Manfaat  Ekonomi  Ekologi  Ekosistem Mangrove Di Desa Sauk Kecamatan Lolak Kabupaten Bolaang Mongondow. Jurnal Ilmiah Platax. Volume 5 no 2.
Dirjen  POM.  2000.  Parameter  Standar  Umum  Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI Dotulong, V.,  Wonggo, D., Montolalu,  L.  A. D.  Y. 2018.
Phytochemical Content, Total Phenols, and Antioxidant  Activity  of  Mangrove  Sonneratia  alba Young  Leaf  Through  Different  Extraction  Methods and  Solvents .  International  Journal  of  ChemTech Research. Vol. 11 No. 11, pp 356-363.
Dwidjoseputro,  D.  1994.  Dasar-dasar  Mikrobiologi.
Djambatan, Jakarta.
Kurniaji,  A.  2014.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun Mangrove Sonneratia  alba pada  Bakteri Vibrio harveyi secara In  vitro .  Skripsi.  Fakultas  Perikanan dan Ilmu Kelautam. Universitas Halu Oleo, Kendari. Latief,  M.,  Nazarudin,  dan  Nelson.  2015.  Aktivit as Antioksidan Ekstrak Daun dan Buah Prepat ( Sonneratia  alba )  Asal  Tanjung  Jabung  Timur Provinsi  Jambi.  Prosiding  SEMIRATA  bidang  MIPA BKS-PTN Barat.
Lay, W. B. 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Raja Grafindo Persada, Jakarta.
Mahmudah,  F.  L  dan  Atun,  S.  2017.  Uji  Aktivitas Antibakteri Dari Ekstrak
Etanol Temukunci ( Boesenbergia Pandurata ) Terhadap Bakteri
Streptococcus  Mutans .  Jurnal Penelitian Saintek, Vol. 22, Nomor 1.
Noor,  Y.  R.,  Khazali, M., dan Suryadiputra, I.N.N. 2006. Panduan  Pengenalan  Mangrove  di  Indonesia.  Cetakan
Kedua.  Ditjen  PHKA  &  Wetlands  International- Indonesia Programme, Bogor.
Opa,  S.  L.,  Bara,  R.  A.,  Gerung,  G.  S.,  Rompas,  R.  M., Lintang,  R.  S.  J.,  Sumilat,  D.  A.  2018.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Fraksi  N-Heksana,  Metanol  dan  Air  Dari Ascidan Lissoclinum sp.  Jurnal  Pesisir  dan  Laut Tropis. Volume 1 Nomor 1.
Pelczar, M.J, Chan, E.C.S. 2008. Dasar-dasar Mikrobiologi.  Jakarta:  UI-Press.  Terjemahan  dari: Elements  of  Micribiology.Lee.  J.,  and  Park.  J.  W. 2017.  Roles  Of  TMAOase  In  Muscle  And  Drips  Of Alaska Pollock Fillets At Various Freeze/Thaw Cycle. Journal Of Food Processing And Preservation. Hal 1 Pratama,  D.  2017.  Pembuatan  Media  Pertumbuhan Mikroba  dan  Pemindahan  Secara  Aseptik.  Laporan Akhir  Praktikum  Biokimia.  Fakultas  Matematika  dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Andalas Padang.
Putri,  R,  R.,  Hasanah,  R.,  dan  Kusimaningrum,  I.  2016.
Uji  Aktivitas  Antibakteri  dan  Uji  Fitokimia  Ekstrak Daun  Mangrove Sonneratia  alba .  Jurnal  Sains  dan Teknologi Akuakultur. Vol. 2 (1): 43-50. ISSN: 2460- 9226.
Ramadan,  F.  A.  2017.  Substansi  Anti  Bakteri  dari  Jamur Endofit  Pada  Mangrove Avicennia  marina .  Skripsi. Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan.  Universitas Sam Ratulangi Manado.
Yusriana,  C.  S.,  Budi,  C.  S.,  Dewi,  T.  2014.  Uji  Daya
Hambat Infusa Daun Nangka ( Artocarpus heterophyllus ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  aureus .  Jurnal  Permata  Indonesia. Volume 5 no 2.
Widyasanti, A. Hajar, S dan Rohdiana, D. 2015. Aktivitas antibakteri  ekstrak  teh  putih  terhadap  bakteri  gram positif  dan  negatif.  Jurnal  Penelitian  Teh  dan  Kina, 18(1), 2015: 55-60.
Wijaya,  H.,  Novitasari.,  Jubaidah,  S.  2018.  Perbandingan Metode  Ekstraksi  Terhadap  Rendemen  Ekstrak  Daun Rambai  Laut  ( Sonneratia  caseolaris L.  Engl).  Jurnal Ilmiah Manuntung, 4(1), 79-83.