UJI EFEK TONIKUM EKSTRAK ETANOL DAUN SAMBILOTO ( Andrographis paniculata, Nees. ) TERHADAP MENCIT JANTAN ( Mus musculus L. ) GALUR SWISS
Susi Endrawati, Feni Indriyani
Program Studi DIII Farmasi Poltekkes Bhakti Mulia Sukoharjo Email: susiendrawati5@gmail.com

## ABSTRACT
Background: The tonic is a substance that can improve our body strength. It can recover the staff our body shortly. It can also make our body stronger and can stimulates our appetite.
Objective : Knowing the most effective tonic effect dose variation among ethanol extract of bitter leaf on male mice (Mus musculus L.) Swiss Strain.
Methods :  This  study  is  an  experimental  research  design  with  True  experimental  design approach  Posttest  Pretest with  control  group.  The  ethanol  extract  of  bitter  leaf  is  made  with  bitter  leaf  quote  using  ethanol  96%  with maceration  method.  The  provision  of  treatment  in  test  animals  distinguished  on  several  variations  of  dosage.  In preparation extracts there are 5 groups, namely: group I, II, III, IV, V treated positive control caffeine 13 mg / kg, cooking  oil  as  a  negative  control,  the  ethanol  extract  at  a  dose  of  50  mg  /  kg,  100  mg  /  kg,  200  mg  /  kg.  Data obtained  tonic  effect  of  added  time  the  mice's  ability  to  defend  itself  when  direnangkan.  Data  were  analyzed  by ANOVA  using  SPSS  18.0  for windows  followed  by  a  test  post  hoc  test  and  ED50  probit  analysis  to  determine  the most effective dose as a tonic.
Result: Ethanol extract of bitter leaf at a dose of 50 mg / kg have a tonic effect of 9.2 minutes, a dose of 100 mg / kg have a tonic effect of 13.4 minutes, and a dose of 200 mg / kg have a tonic effect 23 minutes. Results yield of ethanol extract of bitter leaf maceration 7.8% b/b.
Conclusion: The ethanol extract of bitter leaf tested in test animals male mice (Mus muculus L.) at all doses provide a tonic effect, and the effect will increase along with increasing doses of test substance preparation.
Key Words : Tonic effect, Extract, Sambiloto (Andrographis paniculata, Nees.,), Male mice (Mus musculus L.)

## 1. PENDAHULUAN
Indonesia memiliki 3000 jenis tanaman obat namun  baru  sekitar  450  saja  yang  sudah diketahui  khasiatnya  sehingga  perkembangan obat  di  Indonesia  belum  pesat.  Obat  tradisional belum  bisa  diterima  sepenuhnya  oleh  kalangan medis  dan  dunia  kedokteran  modern.  Namun akhir  -  akhir  ini  penelitian  mengenai  obat tradisional  semakin  banyak  dilakukan  baik  oleh kalangan  akademis,  medis  maupun  instansi swata  dan  pemerintah  (Prapanza  dan  Marianto, 2003:  1).  Penggunaan  obat  penambah  stamina pada  zaman  sekarang  ini  semakin  meluas.  Hal ini  seiring  dengan  kebutuhan  masyarakat  yang semakin  meningkat  pola  aktivitas  kerjanya. Masyarakat  pada  era  ini  membutuhkan  kerja ekstra keras karena semakin banyaknya tuntutan atau  persaingan  untuk  memenuhi  kebutuhan sosial  dan  ekonomi.  Masyarakat  yang  dituntut bekerja  ekstra  keras  akan  membutuhkan  tenaga ekstra.  Obat  penambah  stamina  dibutuhkan untuk meningkatkan stamina.
Tonikum merupakan zat yang dapat meningkatkan stamina untuk memulihkan tenaga  dalam  waktu  singkat.  Tonikum  adalah obat  yang  menguatkan  badan  dan  merangsang selera  makan.  Tonikum  adalah  istilah  yang dahulu  digunakan  untuk  kelas  preparat  obat  - obatan  yang  dipercaya  mempunyai  kemampuan mengembalikan  tonus  normal  pada  jaringan. Tonikum  mempunyai  efek  yang  menghasilkan tonus  normal  yang  ditandai  dengan  ketegangan terus - menerus (Mutschler, 1986: 157).
Salah  satu  tanaman  yang  dapat  digunakan sebagai obat yaitu tanaman sambiloto ( Andrographis  paniculata,  Nees. ).  Tanaman  ini mengandung  bahan  kimia  diantaranya  senyawa andrographolid  yang  menyebabkan  rasa  pahit terutama  bagian  daun  dan  batangnya.  Senyawa ini  merupakan  bahan  aktif  daun  sambiloto ( Andrographis  paniculata,  Nees. )  yang  banyak mengandung  unsur  -  unsur  mineral  seperti kalium,  natrium,  kalsium  dan  asam  kersik. (Prapanza dan Marianto, 2003: 9).
Penelitian  yang  sudah  dilakukan  oleh Warditiani  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol terpurifikasi  herba  sambiloto  ( Andrographis paniculata, Nees. ) positif mengandung golongan flavonoid  dan  terpenoid  dimana  senyawa tersebut  diduga  dapat  menimbulkan  efek tonikum. Selain daun, bagian lain dari sambiloto juga berguna, V.Ravi et all dari India melakukan penelitian  bunga  sambiloto  yang  diekstraksi dengan metanol untuk menghambat pertumbuhan bakteri, dengan mengukur diameter zona penghambat.
Daun  sambiloto  ( Andrographis  paniculata, Nees. ) juga mempunyai khasiat sebagai antioksidan, antidiabetes dan obat tifus. Berdasarkan  penelitian  Yellita  (2011)  bahwa ekstrak methanol daun sambiloto dapat digunakan  sebagai  antioksidan,  secara  biologis antioksidan  adalah  senyawa  yang  mampu menangkal  atau  meredam  dampak  negatif oksidan  dalam  tubuh.  Keseimbangan  oksidan dan antioksidan sangat penting karena berkaitan dengan  berfungsinya  sistem  imunitas  tubuh, penelitian  tersebut  relevan  dan  dikuatkan  oleh penelitian  Shirisha,  K  and  Mastan,  M  (2013) dari india.
Banyaknya manfaat daun sambiloto tersebut dan  pentingnya  masyarakat  untuk  mengetahui, manfaat  herbal  obat  tradisional,  menjadi  dasar dalam  latar  belakang  penelitian  ini  apakah ekstrak  etanol  daun  sambiloto  ( Andrographis paniculata,  Nees. )  mempunyai  efek  tonik  pada mencit.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  Mengetahui efek tonikum paling efektif diantara variasi dosis ekstrak  etanol  daun  sambiloto  pada  mencit jantan  ( Mus  musculus  L. )  Galur  Swiss.  Adapun manfaat  penelitian  ini  yaitu  untuk  memperoleh data  ilmiah  mengenai  khasiat  daun  sambiloto yang  mempunyai  efek  tonik  dan  dapat dimanfaatkan  oleh  masyarakat  dan  sebagai tambahan  pengetahuan  untuk  pengembangan serta pemanfaatan daun sambiloto dalam bidang farmasi.

## 2. METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  eksperimental  dilakukan  di Laboratorium  Farmakognosi  dan  Farmakologi
Prodi DIII Farmasi Politeknik Kesehatan Bhakti Mulia  Sukoharjo  untuk  mengetahui  efek tonikum  ekstrak  etanol  dan  infusa  daun Sambiloto  ( Andrographis  paniculata,  Nees. ) terhadap  hewan  uji  mencit  galur  swiss.  Sampel dari  penelitian  ini  adalah  daun  sambiloto  yang diambil  di  wilayah  kabupaten  Pacitan,  Jawa Timur dan mencit jantan galur swiss. Pengolahan  daun  sambiloto  dilakukan  dengan cara  daun  yang  berwarna  hijau  dicuci  bersih, ditiriskan, dipotong kecil-kecil kemudian dikeringkan  dalam  oven  lalu  dibuat  ekstrak dengan metode maserasi.
Alat yang digunakan yaitu batang pengaduk, gelas  ukur,  cawan  penguap,  pipet  tetes,  kain flanel,  kertas  saring,  beker  glass,  spuit  peroral, handuk  pengering,  timbangan  analitik,  blender, waterbath, stopwatch dan bejana air. Bahan yang digunakan  yaitu  simplisian  daun  sambiloto, etanol  96%,  minyak  goreng,  kafein  dan  hewan uji mencit.
Prosedur  dalam  penelitian  ini  adalah sebagai berikut:
1. Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun  Sambiloto dengan metode Maserasi
Daun  sambiloto  100  gram  dimasukkan  ke dalam wadah maserasi, ditambahkan etanol 96% sebanyak  750  ml  hingga  terendam  sempurna. Didiamkan selama 18 jam  aduk sesekali selama 6 jam. Didiamkan lagi selama 18 jam. Kemudian disaring menggunakan kain flanel dan ampasnya dibilas  dengan  sisa  etanol  sebanyak  250  ml. Ekstrak  etanol  yang  diperoleh  diuapkan  diatas waterbath  hingga  diperoleh  ekstrak  kental. (Dirjen POM,1986:11).
Gambar 1 . Daun Sambiloto
2. Pembuatan  larutan  kafein  dosis  13  mg/kg BB  dibuat  dengan  menimbang  kafein sebanyak  13  mg  kemudian  dilarutkan dengan  minyak  goreng  sebanyak  25  ml.
Dosis  ekstrak  etanol  daun  sambiloto  50 mg/kgBB dibuat dengan menimbang ekstrak 50  mg  dilarutkan  dengan  minyak  goreng sampai  25  ml.  Dosis  ekstrak  etanol  daun sambiloto  100  mg/kgBB  dibuat  dengan menimbang  ekstrak  sebanyak  100  mg kemudian dilarutkan dengan minyak  goreng
sampai  25  ml.  Dosis  ekstrak  etanol  daun sambiloto  200  mg/kgBB  dibuat  dengan menimbang  ekstrak  sebanyak  200  mg kemudian dilarutkan dengan minyak  goreng sampai 25 ml.
Gambar 2 . Proses a. penimbangan, b. maserasi, c. penyaringan, d.penguapan, e.hasil maserasi
3. Pemilihan dan penyiapan hewan uji
Hewan uji yang digunakan adalah mencit jantang galur swiss yang berumur  1-2 bulan dengan berat badan 20 – 30 gram. Diadaptasi dengan lingkungan sekitar selama satu minggu.
Gambar 3. a.penandaan, b. penimbangan, c. ekstrak, d. perlakuan peroral
4. Perlakuan Hewan Uji Mencit
Hewan uji dipuasakan selama 8 jam sebelum diuji  cobakan.  Hewan  uji  berjumlah  25  ekor mencit  terbagi  dalam  5  kelompok,  masing- masing  terdiri  dari  5  ekor  mencit.  Kelompok  I kontrol positif, kelompok II kontrol negative, III, IV,  V  perlakuan  secara  peroral  ekstrak  etanol daun  sambiloto,  dosis  50  mg/kg  BB,  dosis  100 mg/kg  BB, dan dosis 200 mg/kg BB. Perlakuan hewan  uji  mencit  dengan  menggunakan  metode ketahanan  berenang.  Aktivitas  motorik  diuji dengan cara mencit dimasukkan kedalam wadah yang  berisi  air,  30  menit  setelah  pemberian sediaan. Ketahanan berenang diukur berdasarkan waktu mencit mulai berenang sampai tenggelam, yaitu  mencit  berada  dibawah  permukaan  air selama  7  detik.  Data  yang  diperoleh  dari  hasil pengamatan yaitu dengan mencatat waktu timbul kelelahan dari masing – masing perlakuan. Data yang  diperoleh  dianalisis  dengan  uji  ANOVA
menggunakan SPSS 18.0 for windows dilankutkan dengan uji post hoc test dan analisa probit ED 50 untuk menentukan dosis yang paling efektif sebagai tonikum.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Pelarut  yang  digunakan  dalam  pembuatan ekstrak  adalah  etanol  96  %,  karena  etanol  96% mempunyai tingkat kepolaran semipolar. Terpenoid  diduga  zat  yang  menyebabkan tonikum  memiliki  tingkat  kepolaran  semipolar, sehingga  dapat  larut  dalam  etanol  96%. Penelitian daun sambiloto ini menghasilkan efek tonik  yang  baik.  Pada  simplisia  daun  sambiloto sebanyak 100 mg yang dimaserasi dengan etanol 96% sebanyak 1000 ml diperoleh ekstrak kental sebanyak  7,80  gram,  rendemen  yang  diperoleh adalah  7,8 %.  Penelitian  relevan juga  dilakukan oleh  Warditiani  (2012)  yang  menghasilkan ektrak  terpurifikasi  dari  herba  sambiloto
a b
c d d
a b c d
( Andrographis  paniculata,  Nees. ).  Ekstrak positif mengandung golongan senyawa flavonoid  dan terpenoid, hanya  bedanya  ekstrak terpurifikasi dibuat dengan mengekstraksi
serbuk herba sambiloto ( Andrographis paniculata,  Nees. )  dengan  metode  maserasi menggunakan  etanol  90%,  kemudian  dilakukan purifikasi  bertahap  menggunakan  pelarut  n- heksan. Senyawa terpenoid merupakan golongan stimulan. Alasan Ekstrak etanol digunakan yaitu, lebih  selektif,  kapang  dan  kuman  sulit  tumbuh dalam  etanol  20%  keatas,  tidak  beracun,  netral, absorbsinya  baik,  etanol  dapat  bercampur
dengan  air  pada  segala  perbandingan,  panas yang diperlukan untuk pemekatan sedikit. Selain itu zat aktif yang berefek sebagai stimulant yaitu flavonoid dan terpenoid larut dalam etanol.
Berbeda  halnya  dengan  penelitian  uji tonikum biji cola yang dilakukan oleh Wahyuni (2008), penarikan ekstrak dilakukan dengan cara infudasi  karena  alkaloid  golongan  xantin  yang terkandung  pada  biji  cola  dapat  larut  dalam  air, meskipun  tidak  dapat  larut  sempurna.  Hal tersebut menyebabkan efek tonik yang ditimbulkan rendah.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Lama Waktu Bertahan yang Digunakan oleh Mencit Setelah Pemberian Ekstrak Etanol
Daun Sambiloto dengan Metode Ketahanan Berenang Replikasi Kontrol Positif (menit) Kontrol Negatif (menit) Ekstrak Dosis 50 mg (menit) Ekstrak Dosis 100 mg (menit) Ekstrak Dosis 200 mg (menit) I 22 1 7 13 24 II 12 2 9 12 23 III 24 1 9 15 22 IV 20 1 11 14 23 V 19 3 10 13 23 Rata - rata 19,4 1,6 9,2 13,4 23
Gambar 4 . Grafik Rata-Rata Efek Tonik
Gambar 5 . Grafik Selisih Waktu dan Log dosis
Hasil  analisis  uji One  Way  Anova yang diperoleh  menunjukkan  nilai  α  >  Sig,  dimana nilai  α  =  0,05  dan  nilai  Sig.=  0.0001  maka  H 0 ditolak,  jadi  kesimpulannya  ada  perbedaan signifikan  daya  tonikum  ekstrak  etanol  daun sambiloto  pada  mencit  jantan.  Kemudian dilanjutkan dengan analisis Post Hoc Test untuk mengetahui  secara  rinci  apakah  ada  perbedaan yang  bermakna  antar  kelompok  perlakuan dengan  uji  LSD.  Hasil  uji  lanjutan  dengan analisis Post  Hoc  Test, pada  pengamatan  lama waktu  mencit  berenang  menunjukkan  bahwa terdapat perbedaan efek yang signifikan atau ada perbedaan efek yang bermakna antara kelompok kontrol  dan  kelompok  perlakuan  ekstrak  etanol daun  sambiloto  dosis  50  mg/kg  BB,  100  mg/kg BB  dan  200  mg/kg  BB.  Pemberian  ekstrak etanol  daun  sambiloto  dosis  50  mg/kg  BB menunjukkan  efek  tonikum  yang  lebih  pendek pada  mencit  dengan  menggunakan  ketahanan berenang  rata  –  rata  9,2  menit,  ekstrak  etanol daun sambiloto dosis 100 mg/kg BB menunjukkan  efek  tonikum  pada  mencit menggunakan  ketahanan  berenang  rata  –  rata 13,4  menit  dan  pemberian  ekstrak  etanol  daun sambiloto  dosis  200  mg/kg  BB  menunjukkan efek  tonikum  yang  paling  tinggi  pada  mencit menggunakan ketahanan berenang rata – rata 23 menit,  untuk  pemberian  minyak  goreng  sebagai kontrol  negatif  menunjukkan  lama  waktu ketahanan  berenang  yang  sangat  pendek  yaitu rata  –  rata  sebesar  1,6  menit,  sedangkan pemberian  kafein  13  mg/kg  BB  rata  –  rata sebesar 19,4 menit. Hal ini menunjukkan bahwa dosis  200  mg/kg  BB  ekstrak  etanol  daun sambiloto dapat memberikan efek tonikum lebih lama.
Data  efek  tonik  dari  setiap  dosis  uji efektifitas dianalisis menggunakan analisa Probit dan  diperoleh  ED 50 dari  ekstrak  etanol daun  sambiloto  sebesar  74,554  mg/kg  BB.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  pada  dosis  ekstrak etanol  daun  sambiloto  74,554  mg/kg  BB senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam  ekstrak etanol daun sambiloto mampu memberikan 50% efek tonikum pada hewan uji mencit.
Manfaat  daun  sambiloto  yang  banyak  juga dikuatkan  pleh  penelitian  yang  dilakukan  oleh
Yulinah  (2001)  bahwa  ekstrak  etanol  herba sambiloto  ( Andrographis  paniculata,  Nees. ) mempunyai  efek  menurunkan  glukosa  darah pada  uji  toleransi  glukosa  dengan  efek  yang meningkat  dengan  peningkatan  dosis  pada  kisar dosis  yang  diberikan  0,5  –  2,0  g  /  kg  BB. Perbedaan  penelitian  ini  dengan  penelitian Yulinah  (2001)  yaitu  uji  toleransi  glukosa  pada tikus dan mencit diabetes yang diinduksi dengan aloksan,  sedangkan  pada  penelitian  ini  ekstrak etanol daun sambiloto ( Andrographis paniculata,  Nees. )  pada  kisar  dosis  50  –  200 mg/kg  BB  dapat  memberikan  efek  tonikum dengan  metode  ketahanan  tubuh  yaitu  dengan cara  mencit  direnangkan  setelah  diberi  ekstrak. Jadi,  pada  dosis  rendah  ekstrak  etanol  daun sambiloto memiliki efek tonikum dan pada dosis tinggi  ekstrak  etanol  daun  sambiloto  dapat menurunkan glukosa darah.
Hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun sambiloto  semakin  lama  ketahanan  berenang mencit.  Hal  ini  kemungkinan  dapat  disebabkan oleh  efek  tonik  dari  ekstrak  etanol  daun sambiloto  yang  terjadi  karena  efek  stimulan yang  dilakukan  terhadap  sistem  saraf  pusat sehingga  dapat  menambah  gairah  atau  stamina mencit.  Hal  ini  sesuai  dengan  teori  yang dikemukakan  Gunawan  (2006)  bahwa  tonikum adalah zat yang digunakan untuk mengembalikan  kondisi  normal  jaringan  atau untuk merangsang nafsu makan. Sehingga dapat mengembalikan tenaga yang hilang, memulihkan  stamina,  melancarkan  peredaran darah,  menambah  gairah  dan  menjaga  berat badan.

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Hasil  penelitian  disimpulkan  bahwa  ekstrak etanol daun sambiloto ( Andrograpolis panicullata, Ness) pada dosis 50 mg/kg BB, 100 mg/kg  BB  dan  200  mg/kg  BB  dengan  metode ketahanan  berenang  menunjukkan  efek  tonikum pada  mencit,  dan  memberikan  efek  tonik  yang efektif  berdasarkan  analisa probit dengan  uji ED 50 adalah pada dosis 74,554 mg/kg BB.

## Saran
Penelitian lebih lanjut kandungan kimia atau khasiat yang terdapat dalam ekstrak etanol daun sambiloto  ( Andrograpolis  panicullata, Ness) yang  dapat  memberikan  efek  tonik  pada  hewan uji  menggunakan  metode  Kromatografi  Lapis Tipis  atau  membandingkan  efek  tonik  sediaan ekstrak etanol dan infusa daun sambiloto sebagai efek tonikum.

## DAFTAR PUSTAKA
Dirjen  POM.  1986. Sediaan  Galenik .  Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia Gunawan,  Didik,  2006, Resep  –  resep  Ramuan Tradisional  untuk  Keharmonisan  Suami
Istri,
Mutschler, E. 1986. Dinamika Obat ,
diterjemahkan  oleh  Widianto,  MB,  dan Ranti,  AS  Edisi  Kelima.  Bandung: Penerbit ITB
Prapanza,  I,  dan  Marianto  LA.  2003. Khasiat dan Manfaat Sambiloto. Jakarta: Agromedia Pustaka Shirisha,  K  and  Mastan,M.  2013.  Andrographis Paniculata and its Bioactive
Phytochemical  Constituents  For  oxidative
Damage:  Asystemic  review. Journal Pharmacophore  USA  Coden.  Pharm 7. ISSN 2229-5402 Vol 4(6), 212-229.
Wahyuni,  SA,  dan  Kusumawati,  F.  2008.  Efek Tonik  Ekstrak  Air  Biji  Cola  ( Cola  nitida Schott & Endl ) pada Mencit Jantan. Jurnal Penelitian  Sains  &  Teknologi Vol.  9  (2): 137 – 143
Warditiani, NK, Larasanty, LPF, Widjaja, LNK, Juniari,  NPM,  Nugroho,  AE,  Pramono,  S. 2012.  Identifikasi  Kandungan  Kimia Ekstrak Terpurifikasi Herba Sambiloto.
Jurnal Farmasi Universitas Udayana : 22 – 25 Yellita  Y,  Cahyaningsih  U,  Pradono  DI,
Winarsih  W,  Manalu  W.2011.  Ekstrak
Sambiloto Menurunkan Patogenesis Ookista Eimeria TenellaI. Jurnal Veteriner Vol 12 (4): 307-318 Yulinah  E,  Sukrasno  dan  Muna  AF.  2001. Aktivitas  Antidiabetika  Ekstrak  Etanol Herba Sambiloto ( Andrographis
panicullata  Nees (Acanthaceae)). Jurnal Farmasi FMIPA ITB Vol 6 (1): 13 - 20
V.  Ravi  et  al.  Antimicrobial  Activity  of Andrographis  Paniculata  Flower  Extracts . Journal  IJRRPAS, 2(3)  604-610,  ISSN: 2249-1236.