DOI : 10.35311/jmpi.v9i2.413
Kadar  Fenolik  Total,  Kadar  Flavonoid,  dan  Aktivitas  Antioksidan  Dari Ekstrak Kulit Buah Nanas ( Ananas comosus (L.) Merr.) Varietas Pemalang Novi Irwan Fauzi 1 , Irma Erika Herawati 1 *, Ginayanti Hadisoebroto 2
1 Program Studi Profesi Pendidikan Apoteker, Sekolah Tinggi Farmasi Indonesia, Bandung
2 Jurusan Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas al-Ghifari, Bandung

## ABSTRAK
Nanas  ( Ananas  comosus (L.)  Merr.  varietas  Pemalang  merupakan  buah  yang  dapat dikonsumsi dalam bentuk segar maupun olahannya. Nanas yang terdapat di Indonesia sangat  bervariasi,  salah  satunya  adalah  varietas  Pemalang.  Nanas  varietas  Pemalang memiliki  ukuran  yang  lebih  kecil  dibandingkan  dengan  buah  nanas  lainnya.  Buah nanas  memiliki  bagian  yang  dapat  dibuang  seperti  kulit  dan  menjadikannya  sebagai limbah.  Kulit  nanas  diketahui  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  yang bermanfaat  seperti  vitamin  C,  karotenoid,  dan  flavonoid.  Tujuan  dari  penelitian  ini adalah  untuk  memanfaatkan  limbah  kulit  buah  nanas  dan  mengetahui  kadar  fenolik total,  flavonoid,  dan  aktivitas  antioksidannya.  Kulit  buah  nanas  diekstraksi menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  70%,  penetapan  kadar  fenolik total  menggunakan  pembanding  asam  galat,  sedangkan  penetapan  kadar  flavonoid menggunakan pembanding kuersetin, Uji aktivitas antioksidan menggunakan metode penghambatan  radikal  bebas  DPPH  (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).  Metode  Folin- Ciocalteu  digunakan  untuk  menentukan  kadar  fenolik,  sementara  metode  Chang digunakan untuk menentukan kadar flavonoid. Kadar fenolik total dan flavonoid dari penelitian ini berturut-turut adalah 63,44 mg GAE/g; 50,43 mg  QE/g. Sementara nilai IC 50 untuk aktivitas antioksidan dari ekstrak kulit buah nanas sebesar 296,97 ppm yang termasuk ke dalam kategori sangat lemah.
Kata kunci: Fenolik, Flavonoid, Antioksidan, Kulit Buah Nanas

## ABSTRACT
Ananas ( Ananas comosus (L.) Merr. variety Pemalang) is a fruit that can be consumed in fresh or processed form. Ananas found in Indonesia are very varied; one of them is the variety Pemalangs. The pineapple has parts that can be removed, like leather, and made into waste. Ananas skin is known to contain beneficial secondary metabolite compounds such  as  vitamin  C,  carotenoids,  and  flavonoids.  The  aim  of  the  study  was  to  use  the residues of the skin of the pineapple and find out its total phenolic levels, flavonoids, and  antioxidant  activity.  The  skin  of  the  pineapple  is  extracted  using  a  maseration method with a 70% ethanol solvent, the determination of total phenolic levels using a flavonoid  comparator,  and  the  fixation  of  the  flavonoid  level  using  a  quercetin comparator.  The  test  of  antioxidant  activity  was  done  using  a  DPPH  free  radical inhibitor  method.  (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).  The  Folin-Ciocalteu  method  is  used  to determine phenolic levels, while the Chang method is used to measure flavonoid levels. The total phenolic and flavonoid levels of this study in sequence were 63.44 mg GAE/g and 50.43 mg QE/g. While the IC 50 value for the antioxidant activity of the pineapple skin extract of 296.97 ppm that belongs to this category is very weak,
Keywords: Phenolic, Flavonoid, Antioxidant Activity, Pineapple Peel

## PENDAHULUAN
Nanas  merupakan  salah  satu  buah yang banyak terdapat di negara tropis seperti Indonesia,  selain  dikonsumsi  secara  segar, nanas  juga banyak  digunakan  sebagai  bahan baku  industri  makanan  dan  diolah  menjadi berbagai produk, seperti selai, manisan, sirup,
dodol,  kripik,  dan  lain  sebagainya.  Nanas memiliki  bagian-bagian  yang  dapat  dibuang seperti kulit. Kulit nanas dibuang begitu saja padahal kulit nanas mengandung vitamin C, karotenoid, dan flavonoid (Hatam et al., 2013). Kulit buah-buahan mengandung antioksidan lebih   tinggi  dibandingkan  dengan  jaringan
Sitasi: Fauzi, N. I., Herawati, I. E., & Hadisoebroto, G. (2023). Kadar Fenolik Total, Kadar Flavonoid, dan Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Kulit Buah Nanas ( Ananas comosus (L.) Merr.) Varietas Pemalang. Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, 9(2), 492-500. https://doi.org/10.35311/jmpi. v9i2.413
Submitted: 19 Oktober 2023 Accepted: 11 Desember 2023 Published: 27 Desember 2023
*Penulis Korespondensi: Irma Erika Herawati Email: irmaerika@stfi.ac.id
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License
yang lebih dalam, sehingga kulit buah-buahan dapat dimanfaatkan sebagai sumber antioksidan.  Kulit  buah  nanas  menurut (Hatam  et  al.,  2013)  memiliki  kandungan fenolik  dan  flavonoid  lebih  tinggi  dengan menggunakan  metode  ekstraksi  soxhletasi dibandingkan  dengan  metode  maserasi  dan refluks.    Golongan  fenolik,  flavonoid,  beta- karoten, katekin, vitamin C dan E merupakan senyawa  kimia  yang  tergolong  dalam kelompok antioksidan yang dapat menangkal radikal bebas (Hernani & Raharjo, 2006).
Radikal  bebas  didefinisikan  sebagai spesies  kimia  yang  memiliki  elektron  yang tidak  berpasangan  dan  bersifat  tidak  stabil, berumur  pendek,  dan  sangat  reaktif  untuk penarikan elektron molekul lain dalam tubuh untuk mencapai stabilitas yang menyebabkan potensi  kerusakan  pada  biomolekul  dengan merusak  integritas  lipid,  protein,  dan  DNA yang  mengarah  pada  peningkatan  stress oksidatif  seperti  penyakit  neurodegeneratif, diabetes  mellitus,  penyakit  kardiovaskular, proses  penuaan  dini,  bahkan  kanker. (Herawati & Hanifah, 2018).
Penelitian  mengenai  kandungan  dari kulit  buah  nanas,  terutama  nanas  varietas Pemalang  masih  terbatas,  sehingga  tujuan dari penelitian ini adalah langkah awal untuk mengeksplorasi  pemanfaatan  kulit  buah nanas  varietas  Pemalang,  dimulai  dari penetapan  kadar  fenolik  total  dan  flavonoid, juga kemampuannya sebagai antioksidan.

## METODE PENELITIAN
Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian
ini adalah Spektrofotometer
UV-Vis (Shizuma), rotary  vaporator (Buchi),  labu  alas bundar, labu ukur, pipet tetes, pipet volume, kertas saring, corong, dan timbangan.
Bahan
Kulit buah nanas pemalang
dikumpulkan dari daerah
Lembang, Kabupaten  Bandung  Barat,  Jawa  Barat, Indonesia. Tanaman dideterminasi di Herbarium  Bandungense,  Program  Studi Biologi,  Sekolah  Ilmu  dan  Teknologi  Hayati,
Institut  Teknologi  Bandung  dengan  Nomor surat 452/II.CO2.2/PL/2020 menyebutkan bahwa tanaman yang digunakan adalah benar tanaman  nanas  ( Ananas  comosus (L.)  Merr.) Var.  Pemalang.  Semua  bahan  kimia  yang digunakan merupakan pelarut analitis (Merck, Jerman).

## Jenis Penelitian
Jenis penelitian ini termasuk ke dalam jenis  penelitian  eksperimental  laboratorium. Uji  aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  kulit buah  nanas  dilakukan  secara in  vitro menggunakan  metode  DPPH  (2,2-difenil-1- pikrilhidrazil).

## Pembuatan Simplisia Kulit Buah Nanas
Sebanyak 5 kg kulit nanas dibersihkan dari  kotoran,  membuang  sisa  daging  nanas yang terdapat di kulit nanas, dicuci dengan air mengalir,  ditiriskan,  kemudian  dirajang menjadi bagian-bagian yang lebih kecil. Kulit nanas tersebut dikeringkan dengan kombinasi cahaya  matahari  dan  oven  pada  suhu  50 0 C selama 24 jam dan kemudian disortasi kering.

## Pembuatan Ekstrak Kulit Buah Nanas
Simplisia kulit buah nanas diekstraksi dengan  etanol  70%  dengan  metode  maserasi selama tiga hari, dengan penggantian pelarut setiap 24 jam. Ekstrak cair dikumpulkan dan diuapkan  dengan rotary  vaporator pada  suhu 50˚C (Rusli et al ., 2023).

## Penapisan Fitokimia
Penapisan fitokimia dilakukan
terhadap  simplisia  dan  ekstrak  kulit  buah nanas dengan menggunakan metode Fransworth, yang meliputi metabolit sekunder alkaloid, flavonoid, tanin, polifenol, saponin, monoterpen dan seskuiterpen.

## Identifikasi Alkaloid
Sebanyak 500 mg sampel ditambahkan 1  mL  HCl  2N  dan  9  mL  air,  kemudian dipanaskan  di  penangas  air  selama  2  menit, didinginkan dan disaring sehingga diperoleh filtrat. Filtrat kemudian dibagi 3 yaitu a) 1 mL filtrat  ditambahkan  2  tetes  pereaksi  Mayer, jika  terbentuk  endapan  putih,  maka  positif mengandung  alkaloid;  b)  1  mL  filtrat ditambahkan  2  tetes  pereaksi  Dragendorff,
jika  terbentuk  endapan  berwarna  jingga coklat, maka mengandung alkaloid; c) Filtrat ketiga digunakan sebagai blanko.

## Identifikasi Flavonoid
Sebanyak 500 mg sampel ditambahkan 4 mL akuades, kemudian dipanaskan sampai mendidih.  Setelah  dingin,  filtrat  kemudian disaring.  Sebanyak  2  mL  filtrat  ditambahkan 0,1gram serbuk magnesium dan 10 tetes HCl pekat, apabila terbentuk warna merah jingga sampai  merah  ungu  menunjukkan  adanya flavonoid.

## Identifikasi Tanin
Sebanyak 500 mg sampel ditambahkan 4 mL akuades, kemudian dipanaskan sampai mendidih.  Setelah  dingin,  filtrat  kemudian disaring.  Filtrat  yang  didapatkan  ditetesi beberapa  tetes  FeCl 3 1%  dan  gelatin  1%. Adanya  senyawa  tanin  tanin  ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau kehitaman atau biru kehitaman dan sampel larut dalam gelatin

## Identifikasi Polifenol
Sebanyak 500 mg sampel ditambahjan dengan  akuades  sebanyak  10  mL,  kemudian disaring.  Filtrat  diencerkan  dengan  akuades sampai  tidak  berwarna.  Larutan  diambil sebanyak  2  mL  dan  ditambahkan  1-2  tetes pereaksi FeCl 3 1%. Positif polifenol ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna hijau, biru, atau hitam.

## Identifikasi Saponin
Sebanyak 500 mg sampel dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  10 mL  air  panas,  kemudian  didinginkan  dan dikocok  kuat  selama  10  detik.  Terbentuknya buih  yang  mantap  setinggi  1  hingga  10  cm selama  tidak  kurang  dari  10  menit  atau dengan  penambahan  1  tetes  HCl  2N  buih tidak  hilang,  menunjukkan  adanya  senyawa saponin.

## Identifikasi Terpenoid/Steroid
Sebanyak 10 mg sampel ditambahkan 5 mL eter dan diuapkan pada cawan penguap. Residu  ditambahkan  2  tetes  pereaksi Lieberman-Burchard.  Ekstrak  mengandung
sterol  atau  terpen  apabila  terbentuk  warna merah-hijau atau violet-biru.

## Metode Penentuan Kadar Fenolik Total
Kadar  fenolik  total  dilakukan  dengan menggunakan metode Folin-Ciocalteu menurut Chun et al (2003) dengan modifikasi. Sampel  dibuat  pada  konsentrasi  3000  ppm dengan pelarut etanol 70%. Sebanyak 0,5 mL sampel  ditambahkan  dengan  5  mL  pereaksi Folin-Ciocalteu (yang telah diencerkan dengan akuades pada perbandingan 1:10) dan 4  mL  natrium  karbonat  1M.  Campuran diinkubasi  selama  15  menit,  kemudian absobansi  diukur  pada  panjang  gelombang maksimum. Total fenol dihitung menggunakan  persamaan  regresi  linear (y=ax+b) dari kurva kalibrasi asam galat.

## Metode Penentuan Kadar Flavonoid
Kadar flavonoid dilakukan menggunakan  metode  Chang  et  al.,  2020 dengan  modifikasi.  Sampel  dibuat  pada konsentrasi 20.000 ppm menggunakan etanol 70%.  Sebanyak  0,5  mL  sampel  ditambah dengan  1,5  mL  etanol  70%,  kemudian ditambahkan dengan 0,1 mL AlCl 3 10% 0,1 mL natrium  asetat  1  M  dan  2,8  mL  akuades. Campuran  diinkubasi  selama  30  menit, absorbansi  larutan  sampel  diukur  dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang  maksimum.  Total  flavonoid dihitung  menggunakan  persamaan  regresi linear (y=ax+b) dari kurva kalibrasi kuersetin.

## Metode Pengukuran Aktivitas Antioksidan
Dilarutkan  4  mg  DPPH  (2,2-difenil-1- pikrilhidrazil) dengan etanol 96% dalam labu ukur  100  mL  (40  g/mL).  Dilarutkan  5  mg vitamin  C  dan  50  mg  sampel  (ekstrak  kulit buah  nanas)  dengan  etanol  96%,  masing- masing  dalam  labu  ukur  100  mL,  kemudian diencerkan  untuk  mendapatkan  konsentrasi 2,4,6,8, dan 10 ppm untuk vitamin C dan 100, 200, 300, 400, dan 500 ppm untuk ekstrak kulit buah nanas. Sebanyak 2 mL dari ekstrak dan vitamin C, dimasukkan masing-masing dalam tabung,  ditambahkan  3  mL  40  g/mL  DPPH. Campuran  divorteks  dan  diinkubasi  dalam ruang  gelap  selama  20  menit,  kemudian
absorbansinya diukur pada 517 nm menggunakan  spektrofotometer  (Shizuma). Blanko yang digunakan adalah 96% etanol. Persentase  aktivitas  antoksidan  dihitung menggunakan rumus:

## % penghambatan DPPH = [(Ab-Aa)/Ab] x 100
Dimana  Aa  dan  Ab  masing-masing  adalah nilai  absorbansi  sampel  dan  blanko.  Sebuah persen kurva penghambatan versus konsentrasi  diplot  dan  konsentrasi  sampel yang  diperlukan  untuk  penghambatan  50% ditentukan  dan  dinyatakan  sebagai  nilai  IC 50 (Saptarini & Herawati, 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Kulit Buah Nanas
Maserasi  merupakan  ekstraksi  cara dingin dengan cara perendaman bahan dalam suatu pelarut. Metode ini dapat menghasilkan ekstrak dalam jumlah banyak serta terhindar dari  perubahan  kimia  senyawa-senyawa tertentu  karena  pemanasan  (Kusuma et  al .,
2017).    Pada  maserasi  simplisia  direndam dengan  pelarut,  sehingga  pelarut  dapat menembus  dinding  sel  dan  masuk  ke  dalam rongga  sel  tempat  terdapatnya  metabolit sekunder. Perbedaan konsentrasi yang antara larutan zat aktif di dalam dan di luar sel yang menyebabkan zat aktif larut (Rusli et al., 2023). Simplisia yang digunakan sebanyak 500 gram, dan ekstrak yang didapatkan adalah sebanyak 131,85  g  sehingga,  rendemen  ekstrak  yang didapatkan sebesar 26,37%.

## Penapisan Fitokimia
Tujuan dilakukannya penapisan fitokimia adalah untuk mengetahui golongan metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada simplisia  dan  ekstrak.  Hasil  penapisan fitokimia  menunjukkan  bahwa  tidak  ada perubahan  kandungan  metabolit  sekunder dari simplisia dan ekstrak. Hal ini membuktikan  bahwa  metode  ekstraksi  yang digunakan tidak merusak metabolit sekunder pada simplisia.
Tabel 1. Hasil Penapisan Fitokimia No. Metabolit Sekunder Pustaka Simplisia Ekstrak 1 Alkaloid a. Pereaksi Mayer b. Pereaksi Dragendorff Endapan berwarna putih Endapan berwarna merah-coklat Endapan berwarna putih Endapan berwarna merah-coklat Endapan berwarna putih Endapan berwarna merah-coklat 2 Fenolik Warna hijau kehitaman Warna hijau kehitaman Warna hijau kehitaman 3 Flavonoid Warna orange pada lapisan amil alkohol Warna kuning pada lapisan amil alkohol Warna kuning pada lapisan amil alkohol 4 Tanin Warna hijau kehitaman Tidak terbentuk warna hijau kehitaman Tidak terbentuk warna hijau kehitaman 5 Saponin Terbentuk busa yang stabil Tidak terbentuk busa Tidak terbentuk busa 6 Steroid dan Terpenoid Steroid: terbentuk warna biru Terpenoid: terbentuk warna merah atau ungu Terbentuk warna biru (mengandung steroid) Terbentuk warna biru (mengandung steroid)

## Penentuan Kadar Fenolik Total
Penentuan  kadar  fenolik  total  pada penelitian ini dilakukan menggunakan metode  Folin-Ciocalteu.  Prinsip  dari  metode ini adalah adanya reaksi reduksi fosfomolibdat-fosfotungstat oleh inti aromatis senyawa fenolik sehingga terbentuk kompleks
molybdenum  tungsten  yang  berwarna  biru (Senet  et  al.,  2018).  Reaksi  antara  pereaksi Folin-Ciocalteu  dan  senyawa  fenolik  hanya dapat  terjadi  pada  suasana  basa,  sehingga diperlukan  penambahan  natrium  karbonat untuk  membuat  lingkungan  menjadi  basa. Suasana  basa  ini  dapat  mendisosiasi  proton

## pada  senyawa  fenolik  menjadi  ion  fenolat
(Alfian & Susanti, 2012).
Gambar 1. Kurva Kalibrasi Asam Galat (n=3)
Tabel 2. Hasil Penentuan Kadar Fenolik Total
No. Sampel Replikasi Konsentrasi (ppm) Absorbansi Kadar Fenolik Total (mg GAE/g) Rerata Kadar Fenolik Total (mg GAE/g) 1 Ekstrak 1 3000 0,372 64,98 63,44±0,1112 2 0,376 65,72 3 0,343 59,61 Asam galat dipilih
sebagai pembanding  karena  merupakan  salah  satu senyawa  fenolik  dengan  struktur  sederhana, memiliki sifat yang stabil, dan tersedia dalam keadaan  murni  (Senet  et  al.,  2018).  Melalui kurva standar asam galat seperti yang tertera di Gambar 1, maka akan diperoleh persamaan regresi  linier  yang  akan  digunakan  untuk menentukan kadar fenolik ekstrak kulit buah nanas.  Pengukuran  absorbansi  asam  galat dilakukan pada panjang gelombang maksimum 751 nm. Penentuan kadar fenolik ekstrak  kulit  buah  nanas  dilakukan  dengan mengukur  absorbansi  sampel  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis.  Hasil  penentuan kadar fenolik ekstrak kulit buah nanas dapat dilihat  pada  tabel  2,  yaitu  sebesar  63,44  mg GAE/g.

## Hasil Penentuan Kadar Flavonoid
Penentuan  kadar  flavonoid  pada penelitian ini menggunakan metode Chang et al., 2020. Di mana prinsip pada metode Chang
adalah  adanya  reaksi  antara  AlCl 3 dengan flavonoid, terjadinya pembentukan kompleks yang stabil dengan C-4 gugus keto, serta pada C-3 atau C-5 gugus hidroksil dari flavon dan flavonol.  Dengan  adanya  penambahan AlCl 3 akan membentuk kompleks asam yang stabil dengan  gugus  orthohidroksil  pada  cincin-A atau B dari senyawa-senyawa flavonoid. Pembanding yang digunakan adalah kuersetin,  karena  kuersetin  merupakan flavonoid  golongan  flavonol  yang  memiliki gugus  keto  pada  atom  C-4  dan  juga  gugus hidroksil  pada  atom  C-3  dan  C-5  yang bertetangga (Azizah et al., 2014).
Dari  kurva  kalibrasi  kuersetin  pada Gambar  2,  didapat  persamaan  regresi  linier yang  digunakan  untuk  menentukan  kadar flavonoid ekstrak kulit buah nanas. Pengukuran  absorbansi  kuersetin  dilakukan pada panjang gelombang maksimum 435 nm. Penentuan  kadar  flavonoid  total  dilakukan menggunakan spektrofotometer UV-Vis, dengan memasukkan nilai absorbansi sampel
y = 0,0054x + 0,0211 R² = 0,9973 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 0 50 100 150 Abs o rba nsi Konsentrasi (ppm)
ke  dalam  persamaan  kurva  baku  kuersetin. Hasil penentuan kadar flavonoid dari ekstrak
kulit buah nanas adalah 50,43 mg QE/g seperti yang tertera pada Tabel 3.
Gambar 2. Kurva Kalibrasi Kuersetin (n=3)
Tabel 3. Hasil Penentuan Kadar Flavonoid
No. Sampel Replikasi Konsentrasi (ppm) Absorbansi Kadar Flavonoid (mg QE/g) Rerata Kadar Flavonoid (mg QE/g) Ekstrak 1 20000 0,281 49,42 50,43±0,005 1 2 0,297 51,35 3 0,290 50,51

## Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan
Pengukuran aktivitas antioksidan yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil), di mana  metode  ini  merupakan  metode  yang sensitif, cepat dan mudah dalam menentukan aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  tanaman (Saptarini  et  al.,  2019). Aktivitas  antioksidan diamati  melalui  perubahan  warna  larutan
DPPH,  dari  warna  ungu  menjadi  warna kuning,  di  mana  intensitas  warna  yang terbentuk sebanding dengan jumlah molekul yang distabilkan (Saptarini et al., 2019). Panjang  gelombang  maksimum  DPPH  yang digunakan  adalah  515,5  nm  sesuai  dengan literatur  yang  menyebutkan  bahwa  panjang gelombang  DPPH  berada  di  antara  500-520 nm (Molyneux P, 2004).
Gambar 3. Kurva Kalibrasi Ekstrak Kulit Buah Nanas (n=3)
y = 0,0083x - 0,1292 R² = 0,9968 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0 20 40 60 80 100 120 A bsorba nsi Konsentrasi (ppm) y = 0,0645x + 30,845 R² = 0,9955 0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 0 100 200 300 400 500 600 % Inhibisi Konsentrasi (ppm)
Tabel 4.  Hasil Aktivitas Antioksidan No. Sampel Konsentrasi (ppm) Absorbansi %Inhibisi Persamaan Linier  IC 50 (ppm) 1 Vitamin C (standar) 2 4 6 8 10 0,864 ± 0,0101 0,833 ± 0,0127 0,813 ± 0,0116 0,785 ± 0,0055 0,759± 0,0045 15,25 29,54 43,98 55,63 72,22 y=7,0019x+ 1,3142 6,95 2 Ekstrak 100 200 300 400 500 0,553 ± 0,0107 0,498 ± 0,0124 0,436 ± 0,0197 0,373 ± 0,0072 0,332 ± 0,0020 37,12 43,45 50,49 57,65 62,27 y=0,0645x+ 30,845 296,97
Nilai IC 50 dari ekstrak kulit buah nanas dihitung  menggunakan  persamaan  regresi linier dari kurva kalibrasi ekstrak seperti yang tertera  pada  Gambar  3.  Pada  penelitian  ini digunakan  vitamin  C  sebagai  pembanding. Vitamin  C  merupakan  vitamin  yang  paling umum  digunakan  sebagai  antioksidan. Vitamin C mampu menetralkan stres oksidatif melalui  proses  donasi/transfer  elektron. Mekanisme  vitamin  C  sebagai  antioksidan adalah  dengan  cara  menyumbang  elektron untuk  mencegah  senyawa  lain  yang  sedang teroksidasi dan mengambil anion superoksida,  radikal  hidroksil,  dan  lipid hidroperoksida (Caritá et al., 2020).
Aktivitas antioksidan dari ekstrak kulit buah nanas  di  bawah  aktivitas  dari  vitamin  C sebagai  kontrol  pembanding  seperti  yang terlihat pada tabel 4. Hal ini dapat disebabkan oleh  beberapa  hal,  salah  satunya  adalah karena  ekstrak  bukan  merupakan  senyawa murni dibandingkan dengan vitamin C yang sudah merupakan senyawa murni.
Houghton  &  Raman,  1998  mengkategorikan aktivitas antioksidan menjadi tiga, yaitu kuat (IC 50 50-100 ppm), sedang (IC 50 100-150 ppm), lemah  (IC 50 150-200  ppm),  dan  sangat  lemah (IC 50 >200  ppm).  Ekstrak  kulit  buah  nanas termasuk  kategori  sangat  lemah,  hal  ini sejalan  juga  dengan  kecilnya  nilai  kadar fenolik total dan flavonoid yang didapat dari ekstrak kulit buah nanas. Lemahnya aktivitas antioksidan  dari  ekstrak  kulit  buah  nanas diduga diakibatkan karena senyawa flavonoid  yang  ada  dalam  kulit  nanas  masih
berikatan  dengan  gugus  glikosida,  karena menurut  Fukumoto  &  Mazza,  2000,  aktivitas antioksidan akan meningkat dengan bertambahnya  gugus  hidroksil  dan  akan menurun  dengan  adanya  gugus  glikosida. Sehingga  untuk  meningkatkan  kadar  fenolik total dan flavonoid, juga menambah kemampuan  aktivitas  antioksidan  dari  kulit buah nanas, sebaiknya menggunakan ekstraksi cara panas, karena menurut Jeong et al.,
2004 perlakukan panas dapat membebaskan dan mengaktifkan  berat molekul rendah dari sub unit molekul polimer yang berberat molekul tinggi sehingga efektif untuk  dapat  meningkatkan  kandungan fenolik  dalam  tanaman.  Kadar  fenolik  dan flavonoid  yang  ada  pada  kulit  buah  nanas termasuk kecil, sehingga hal ini kemungkinan yang menyebabkan lemahnya kategori antioksidan dari kulit buah nanas.

## KESIMPULAN
Ekstrak  kulit  buah  nanas  memiliki kadar  fenolik  total  sebesar  63,44  mg  GAE/g, kadar  flavonoid  sebesar  50,43  mg  QE/g,  dan juga  aktivitas  antioksidan  dengan  kategori lemah,  yaitu  sebesar  296,97  ppm.  Walaupun demikian,  pemanfaatan  kulit  buah  nanas masih  dapat  dieksplorasi  lebih  lanjut  untuk memanfaatkan limbah dari hasil pangan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  Dwiki  Muhamad  Ramdhan  atas bantuan teknisnya pada penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Alfian,  R.,  dan  Susanti,  H.  2012.  Penetapan Kadar  Fenolik  Total  Ekstrak  Metanol Kelopak  Bunga  Rosella  Merah  ( Hibiscus sabdariffa Linn)  dengan  Variasi  Tempat
Tumbuh Secara Spektrofotometri. Jurnal Ilmu Kefarmasian, 2(1), 73–80. http://dx.doi.org/10.12928/pharmaciana.
v2i1.655
Azizah,  D.  N.,  Kumolowati,  E.,  dan Faramayuda,  F.  2014.  Penetapan  kadar flavonoid  metode  AlCl 3 pada  ekstrak metanol  kulit  buah  kakao  ( Theobroma
cacao L.). Kartika: Jurnal Ilmiah Farmasi,
2(2),
33--37.
http://dx.doi.org/10.26874/kjif.v2i2.14
Caritá, A. C., Fonseca-Santos, B., Shultz, J. D., Michniak-Kohn,  B.,  Chorilli,  M.,  dan Leonardi,  G.  R.  2020.  Vitamin  C:  One compound,  several  uses.  Advances  for delivery, efficiency and stability.
Nanomedicine: Nanotechnology,
Biology  and  Medicine,  24,  102117. https://doi.org/10.1016/j.nano.2019.10211
7
Chang,  C.-C.,  Yang,  M.-H.,  Wen,  H.-M.,  dan
Chern,  J.-C.  2020.  Estimation  of  total flavonoid  content  in  propolis  by  two complementary  colometric  methods. Journal of Food and Drug Analysis, 10(3). https://doi.org/10.38212/2224-6614.2748
Fukumoto,  L.  R.,  dan  Mazza,  G.  2000.
Assessing  Antioxidant  and  Prooxidant
Activities  of  Phenolic  Compounds. Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry, 48(8), 3597–3604. https://doi.org/10.1021/jf000220w
Hatam,  S.  F.,  Suryanto,  E.,  dan  Abidjulu,  J.
2013. Aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak kulit  nanas  ( Ananas  comosus (L)  Merr). Pharmacon, 2(1).
https://doi.org/10.35799/pha.2.2013.880
Herawati,  E.  I.,  dan  Hanifah,  N.  H.  2018. Antioxidant activity from ethanol extract and  fractions  of  red  flame  ivy ( Hemigraphis  colorata Hall.  F.)  leaf  using
1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl.
10(Special Issue 5), 3791–3793. Hernani,  dan  Raharjo,  M.  2006.  Tanaman Berkhasiat Antioksidan. Penebar Swadaya.
Houghton,  P.,  dan  Raman,  A.  1998. Laboratory Handbook of the Fractination of Natural Extracts. Chapman & Hall.
Jeong,  S.-M.,  Kim,  S.-Y.,  Kim,  D.-R.,  Jo,  S.-C., Nam,  K.  C.,  Ahn,  D.  U.,  dan  Lee,  S.-C. 2004.  Effect  of  Heat  Treatment  on  the Antioxidant  Activity  of  Extracts  from Citrus Peels. Journal of Agricultural and Food  Chemistry,  52(11),  3389–3393. https://doi.org/10.1021/jf049899k
Kusuma,  S.,  Herawati,  I.,  &  Yuliasih,  N.  I.
(2017). In vitro antifungal activity of the orange  jasmine  (Murraya  paniculata  [L] Jack)  leaves  ethanol  extract  from Indonesia against Candida albicans. Int J Sci Eng Appl Sci , 273–278.
Molyneux  P.  2004.  The  use  of  stable  free radical  diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH) for  estimating  antioksidan  activity.  J  Sci Tech, 26, 211–219.
Rusli,  N.,  Saehu,  Muh.  S.,  dan  Fatmawati,  F.
2023.  Aktivitas  Antioksidan  Fraksi  Etil Asetat  Daun Meistera  chinensis dengan Metode DPPH (1,1 –difenil-2- pikrilhidrazil). Jurnal Mandala Pharmacon  Indonesia,  9(1),  43–48. https://doi.org/10.35311/jmpi.v9i1.296
Saptarini,  M.  N.,  dan  Herawati,  E.  I.  2017.
Antioxidant  activity  of  waterapple ( Syzigium  aqueum )  fruit  and  fragrant mango  ( Mangifera  odorata )  fruit.  Asian  J Pharm Clin Res, Special issue (May), 54– 56.
http://dx.doi.org/10.22159/ajpcr.2017.v10 s2.19487
Saptarini, N., Rahayu, D., dan Herawati, E. I. 2019.  Antioxidant  activity  of  crude bromelain  of  pineapple  ( Ananas  comosus (L.)  Merr)  crown  from  Subang  district, Indonesia.  Journal  of  Pharmacy  and
Bioallied Sciences, 11(8), 551. https://doi.org/10.4103/jpbs.JPBS_200_19
Senet, M., Raharja, I., Darma, I., Prastakarini, K.,  Dewi,  N.,  dan  Parwata,  I.  2018. Penentuan  kandungan  total  flavonoid dan total fenol dari akar kersen ( Mutingia calabura )  serta  aktivitasnya  sebagai antioksidan.  Jurnal  Kimia,  12(1),  13--18. https://doi.org/10.24843/JCHEM.2018.v1
2.i01.p03
Siddiqui,  N.,  Rauf,  A.,  Latif,  A.,  dan Mahmood,  Z.  2017.  Spectrophotometric determination  of  the  total  phenolic content,  spectral and  fluorescence  study of  the  herbal  Unani  drug  Gul-e-Zoofa ( Nepeta bracteata Benth). Journal of Taibah University  Medical  Sciences,  12(4),  360– 363. https://doi.org/10.1016/j.jtumed.2016.11.0 06