## OPTIMASI FORMULA DAN UJI IRITASI PRIMER KUALITATIF PADA KELINCI PUTIH BETINA DENGAN KRIM W/O EKSTRAK ETANOLIK BUAH MAHKOTA DEWA [ Phaleria macrocarpa
(Scheff.) Boerl.]

## OPTIMIZING FORMULA AND QUALITATIVE PRIMARY
IRRITATION TEST IN FEMALE WHITE RABBIT OF W/O CREAM THE ETHANOLIC EXTRACT OF PHALERIA FRUIT [ Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.]

## Lusty Grace Toding, A. Karim Zulkarnain
Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada

## ABSTRAK
Krim w/o ekstrak  etanolik  buah  mahkota  dewa  [ Phaleria  macrocarpa (Scheff.) Boerl.]  sebesar  10%  telah  diuji  mempunyai  aktivitas  sebagai  tabir  surya.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  formula  optimal,  stabilitas  fisik,  dan  aktivitas  iritasi  primer krim w/o ekstrak  etanolik  buah  mahkota  dewa.  Optimasi  formula  menggunakan  metode simplex  lattice  design dengan software  Design  Expert® versi  8.0.7.1  program mixture design melalui modifikasi komposisi cera alba, span 80, dan minyak mineral. Sebanyak 10 formula  krim w/o dievaluasi  sifat  fisiknya  yang  meliputi  uji  viskositas,  daya  lekat,  daya sebar,  pH,  rasio  volume  pemisahan,  dan  tipe  emulsi.  Area  optimal  diperoleh  pada komposisi 18,504% cera alba, 5,231% span 80, dan 44,265% minyak mineral. Berdasarkan uji-t  satu  sampel,  formula  optimal krim w/o yang diperoleh  mempunyai respon  viskositas dan daya sebar  yang berbeda tidak signifikan dengan nilai prediksi respon yang diberikan oleh software  Design  Expert ®  versi  8.0.7.1,  sedangkan  respon  daya  lekat  berbeda signifikan  dengan nilai  prediksi software .  Uji-t  berpasangan  digunakan  untuk mengetahui stabilitas  fisik  krim w/o selama  penyimpanan.  Formula  optimal  krim w/o stabil  selama  4 minggu penyimpanan berdasarkan respon rasio volume pemisahan dan pH serta krim tidak menimbulkan eritema ataupun edema pada hewan uji.

## ABSTRACT
W/O  cream  of  10  %  ethanolic  extract  from  Phaleria  fruit  [Phaleria  macrocarpa (Scheff.) Boerl.] have been tested have activity as a sunscreen. This study aims to determine the  optimal  formula,  physical  stability  and  activity  of  primary  irritant  w/o  cream  of ethanolic  extract  from  Phaleria  fruit.  Optimization  of  formulation  using  simplex  lattice design  method  with  Design  Expert®  software  version  8.0.7.1  mixture  design  program through of composition modification of cera alba, span 80, and mineral oil as much as 10 formulas.  Evaluation  of  the  physical  characteristics  of  w/o  cream  that  are  viscosity, adhesion,  power  spread,  acidity,  ratio  of  separation  volume,  and  type  of  emulsion.  The optimal  area  obtained  at  18,504%  of  cera  alba,  5,231%  of  span  80,  and  44,265%  of mineral oil. Based on one sample t-test, the w/o cream of optimation formula has viscosity and power spread responses which is not different significantly from the predicted value of responses  given  by  Design  Expert®  except  the  adhesion  response.  Paired  t-test  used  to determine  the  physical  stability  of  w/o  cream  during  the  storage.  In  addition  to  optimal formula of w/o cream stable for 4 weeks of storage based on the ratio of separation volume and acidity responses, the cream didn’t cause erythema or edema in animal test.

## PENDAHULUAN
Radiasi  sinar  UV  dari  matahari  dapat menimbulkan  efek  yang  merugikan  pada  kulit
manusia  seperti sunburn ,  pigmentasi  kulit,  dan penuaan  dini.  Oleh  karena  itu,  dibutuhkan  tabir surya untuk dapat melindungi kulit dari bahaya sinar
matahari  (Wang et  al .,  2008).  Selain  tabir  surya sintetik,  terdapat  pula  tabir  surya  alami  di  alam. Adanya kecenderungan pola hidup kembali ke alam menyebabkan masyarakat lebih memilih menggunakan  obat  alami  yang  diyakini  tidak memiliki  efek  samping      dan  harga  yang  lebih terjangkau daripada obat sintetik.
Buah  mahkota  dewa  secara  tradisional digunakan  dalam  pengobatan  berbagai  penyakit (Harmanto,  2004).  Penelitian  melaporkan  bahwa dalam  ekstrak  metanolik  buah  mahkota  dewa mengandung  4,5-dihidroksi-4’-metoksibenzofenon- 3-O-β-D-glukosida  (phalerin)  (Wahyuningsih et  al., 2005).  Phalerin  yang  terkandung  dalam  mahkota dewa  merupakan  senyawa  glikosida  benzofenon. Kerangka  dasar  phalerin  yang  berupa  benzofenon ini  yang  memungkinkan  phalerin  dapat  digunakan sebagai  zat  aktif  tabir  surya.  Phalerin  memiliki aktivitas  fotoproteksi  terhadap  radiasi  sinar  UV berdasarkan uji in vitro (Pawening, 2009). Untuk mengembangkan
dan
mengoptimalkan  pemanfaatannya,  ekstrak  etanolik buah  mahkota  dewa  diformulasikan  sebagai  krim water in oil ( w/ o).  Krim didefinisikan  sebagai  cairan kental  atau  emulsi  setengah  padat,  baik  tipe  air dalam minyak atau minyak dalam air (Ansel, 1989). Pembuatan  krim w/o mengggunakan  bahan-bahan tambahan  seperti  cera  alba,  span  80,  dan  minyak mineral.  Sifat  fisis  dalam  sediaan  krim  akan menentukan  keefektifan  sediaan  tersebut  saat diaplikasikan  di  kulit.  Sifat  fisis  dan  stabilitas  krim dipengaruhi  oleh  bahan-bahan  tambahan  yang terdapat dalam krim.
Karena  pentingnya  memperoleh  sediaan krim dengan sifat fisis dan stabilitas yang baik, maka penelitian tentang optimasi komposisi bahan-bahan tambahan krim perlu dilakukan. Simplex lattice design merupakan  metode  yang  dapat  digunakan  untuk optimasi  formula  pada  berbagai  jumlah  komposisi bahan  yang  berbeda  (Bolton,  1997).  Untuk mengetahui  apakah  sediaan  krim  yang  dibuat mempunyai  potensi  untuk  mengiritasi,  dapat dilakukan  dengan  uji  iritasi  pirmer  kualitatif menggunakan  hewan  percobaan.  Iritasi  primer merupakan  respon  lokal  kulit  yang  terjadi  karena adanya  suatu  reaksi  kulit  terhadap  zat  kimia misalnya  alkali  kuat,  asam  kuat,  pelarut,  dan deterjen, sehingga menyebabkan inflamasi atau luka pada  daerah  pemejanan  (Prottey,  1978;  Lu,  1995). Eritema  dan  edima  merupakan  jenis  iritasi  primer. Eritema  adalah  reaksi  radang  yang  berupa  warna kemerahan  pada  kulit  akibat  dilatasi  pada  kapiler yang  disebabkan  racun  kimia  atau sunburn .  Edema adalah akumulasi berlebihan dari cairan serosa atau air  dalam  sel,  jaringan  atau  rongga  serosa (Darelanko dan Hollinger, 1995).

## METODE PENELITIAN Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  buah  mahkota  dewa  [ Phaleria macrocarpa (Scheff.)  Boerl.]  yang  diperoleh  dari daerah  Kulon  Progo  pada  bulan  Agustus  2011. Bahan  lain  adalah  etanol  70%  (derajat  teknis),  plat silika gel F254 (Merck®), metanol (derajat analisis), etil  asetat  (derajat  analisis),  kloroform  (derajat analisis),  cera  alba  (kualitas  farmasi),  span  80 (kualitas farmasi), minyak mineral (kualitas farmasi), metilparaben  (kualitas  farmasi),  propilparaben (kualitas farmasi), dan akuades.
Alat Alat yang digunakan antara lain, bejana gelas, Buchner vacum ,  penangas  air,  kompor  listrik (Robusta ® ),  bejana  kromatografi,  lampu  UV,  oven (Shimadzu ®) , eksikator, neraca
analitik (Adventurer™,  Ohaus),  alat-alat  gelas,  cawan porselen,  alat  pendispersi  ULTRA-TURRAX  T25, waterbath , pot krim, alat uji daya sebar (Laboratorium Teknologi Farmasi, Fakultas Farmasi UGM), alat uji daya  lekat  (Laboratorium  Teknologi  Farmasi, Fakultas Farmasi UGM), viscotester VT-04 (Rion Co. Ltd, Jepang), stopwatch (Alba Digital Stopwatch), dan alat uji sentrifugasi.
Hewan Uji Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  kelinci putih  betina  yang  diperoleh  dari  kandang  Fakultas Farmasi UGM, Yogyakarta.

## Jalannya Penelitian
Determinasi  tanaman  mahkota  dewa [ Phaleria  macrocarpa (Scheff).  Boerl.]  dilakukan  di laboratorium  Biologi  Farmasi  Fakultas  Farmasi UGM  dengan  mengamati  ciri-ciri  sampel  tanaman dan  mencocokkan  ciri-ciri  tersebut  dengan  ciri-ciri tanaman yang terdapat dalam pustaka.
Sebanyak  600  gram  serbuk  simplisia  buah mahkota  dewa  dimaserasi  dengan  cara  direndam dengan  4  liter etanol  70%  teknis  dalam  maserator. Maserasi  dilakukan  selama  4  hari.  Maserat  yang dihasilkan  disaring  menggunakan  corong  Buchner dengan  bantuan  sistem  pompa  hisap.  Kemudian filtrat yang diperoleh diuapkan di atas penangas air sampai  diperoleh  ekstrak  kental  buah  mahkota dewa. Ekstrak kental yang diperoleh ditimbang dan dihitung rendemennya kemudian disimpan di dalam eksikator.

## Uji sifat fisika-kimia ekstrak
Uji  yang  dilakukan  adalah  pengamatan organoleptik,  susut  pengeringan,  daya  lekat,  dan kromatografi  lapis  tipis  (KLT).  Ekstrak  yang  telah dilarutkan  dalam  metanol  ditotolkan  menggunakan pipa  kapiler  diatas  plat  silika  gel  F254.  Plat  KLT kemudian  dielusi  menggunakan  fase  gerak kloroform:etil  asetat  (1:4  v/v)  dengan  pembanding
phalerin.    Keberadaan  glikosida  benzofenon  di dalam ekstrak dideteksi menggunakan sinar UV 254 nm  dan  UV  366  nm,  kemudian  dihitung  nilai  hRf bercak yang terdapat pada plat KLT.
Formulasi  krim w/o  ekstrak  etanolik  buah mahkota dewa
Formula  krim  ekstrak  etanolik  buah mahkota  dewa  tipe water  in  oil ( w/o ) yang  dijadikan acuan  dalam  pembuatan  krim  tabir  surya  adalah formula  modifikasi  dari  formula  standar  yang diambil  dari  Howard  (1974)  seperti  ditunjukkan pada tabel I.
Optimasi  formula  krim water  in  oil ( w/o ) ekstrak etanolik daging buah mahkota dewa ( Phaleria macrocarpa (Scheff).  Boerl.)  menggunakan  metode Simplex lattice design . Berdasarkan simplex lattice design untuk  tiga  variabel  bebas  (campuran  tiga komponen)  maka  dibuat  tujuh  formula  dan  tiga formula validasi pada berbagai komposisi campuran untuk ketiga komponen yang akan dioptimasi yaitu cera  alba,  span  80,  dan  minyak  mineral.    Formula krim dengan metode simplex lattice design ditunjukkan melalui tabel II.
Uji sifat fisik dan stabilitas  krim w/o mahkota dewa
Uji  organoleptik  yang  dilakukan  meliputi pengamatan  warna,  bau,  konsistensi,  homogenitas, dan  pengukuran  pH  krim.  Uji  viskositas menggunakan  viskosimeter  VT-04,  rotor  nomor  2.
Uji  daya  lekat  dan  daya  sebar  menggunakan  alat yang  terdapat  pada  Laboratorium  Teknologi Farmasi  UGM.  Uji  rasio  volume  pemisahan menggunakan  tabung  reaksi  berskala  sampai  skala tertentu.  Jika  tidak  terdapat  pemisahan  maka digunakan  uji  stabilitas  emulsi  yang  dipercepat dengan  metode  sentrifugasi.  Uji  tipe  emulsi menggunakan  metode  pengenceran.  Uji  viskositas, daya lekat, daya sebar, pH, rasio volume pemisahan, dan  tipe  emulsi  dilakukan  selama  4  minggu penyimpanan.

## Uji iritasi primer kualitatif
Hewan  uji yang  digunakan  adalah  kelinci putih  betina  dengan  waktu  percobaan  selama  72 jam. Kelinci putih betina yang digunakan sebanyak 3 ekor.  Setiap  kelinci  yang  telah  dicukur  bagian punggungnya  diaplikasikan  sebanyak  0,5  gram formula  optimum  krim w/o ekstrak  etanolik  buah mahkota  dewa,    kontrol  positif  krim w/o benzofenon  3%,  dan  kontrol  negatif  yaitu  basis krim w/o, kemudian ditutup dengan   menggunakan kassa.  Pengamatan  eritema  dan  edema  yang  terjadi dilakukan pada jam ke-24 dan 72 setelah pemejanan (Lu, 1995).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  determinasi  menunjukkan  bahwa tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah benar  merupakan  tanaman  mahkota  dewa  [ Phaleria macrocarpa (Scheff).  Boerl.].  Rendemen  ekstrak etanolik  kental  buah  mahkota  dewa  diperoleh sebesar  15,03%  terhadap  bobot  serbuk  kering. Ekstrak  kental  etanolik  buah  mahkota  dewa mempunyai  rasa  yang  pahit,  warna  coklat  tua,  bau khas  mahkota  dewa,  dan  konsistensi  yang  kental. Susut  pengeringan  yang  diperoleh  sebesar  19% dengan  daya  lekat  rata-rata  4,22  detik.  Analisis kualitatif dengan KLT  menunjukkan bahwa ekstrak etanolik buah mahkota dewa dan phalerin memiliki hrF sebesar 6,25 dengan pemadaman biru di bawah UV  254  nm  dan  berfluoresensi  biru  di  bawah  UV 366  nm.  Hasil  analisis  KLT  ditunjukkan  pada gambar 1.
Tabel I. Formula Ekstrak Buah Mahkota Dewa Nama Komponen Jumlah Ekstrak buah mahkota dewa 10% Cera alba optimasi Span 80 dengan Minyak mineral SLD Metilparaben 0,1% Propilparaben 0,2% Akuades ad 100%
Tabel II. Formula Krim Ekstrak Buah Mahkota Dewa dengan Metode Simplex lattice design
Bahan (g)
A B C AB AC BC
ABC VA VB VC Ekstrak 15 15 15 15 15 15
15 15 15 15 Cera alba 28,5 22,5 22,5 25,5 25,5 22,5 24,5 28,5 22,5 22,5 Span 80 7,5 13,5 7,5 10,5 7,5 10,5 9,5 7,5 13,5 7,5 Minyak mineral 66 66 72 66 69 69
68 66 66 72 Metil paraben 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 Propil paraben 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 Akuades ad 150 150 150 150
150 150
150 150 150 150
Stabilitas  fisik  krim w/o ekstak  etanolik buah mahkota dewa
Hasil pengukuran viskositas, daya lekat, dan daya  sebar  sepuluh  formula  krim w/o ekstrak etanolik  buah  mahkota  dewa  dapat  dilihat  pada tabel III, IV, dan V.
Penentuan  formula  optimum  krim w/o dengan  metode Simplex  lattice  design menggunakan software  Design  Expert®
versi 8.0.7.1
Optimasi  formula  dengan software  Design Expert versi  8.0.7.1  menghasilkan  suatu  luas  area optimal  pada simplex  space dengan  salah  satu  titik memiliki perbandingan formula 18,504% cera alba, 5,231%  span  80,  dan  44,265%  minyak  mineral .
Gambar  1.  Hasil  Identifikasi  Ekstrak  Etanolik  Buah
Mahkota  Dewa  dengan  Fase  Diam  Silika  Gel  F 254  dan  Fase  Gerak  Kloroform  :  Etil  Asetat  (1:4 V/V)  yang  Diamati  Menggunakan  (A)  UV  254 Nm; (B) UV 366 Nm
Tabel III. Viskositas Sepuluh Formula  Krim W/O Ekstrak Etanolik  Buah  Mahkota  Dewa  dengan  Variasi Cera Alba, Span 80, dan Mineral Oil sebagai Bahan
Tambahan
Formula Viskositas (dPa.s) A Validasi A
B Validasi B C
Validasi C AB AC BC ABC 263,300 ± 15,280 270,000 ± 20,000
236,670 ± 15,275 233,330 ± 15,275 161,670 ± 12,583 166,670 ± 15,275 216,670 ± 23,094 231,670 ± 28,431 186,670 ± 32,146
241,670 ± 38,188
Tabel IV. Daya Lekat Sepuluh Formula Krim W/O Ekstrak Etanolik  Buah  Mahkota  Dewa  dengan  Variasi Cera Alba, Span 80, dan Mineral Oil sebagai Bahan Tambahan Formula
Daya lekat (detik)
A Validasi A
B Validasi B C Validasi C AB AC BC ABC 0,820 ± 0,015 0,860 ± 0,051 0,730 ±  0,017
0,750 ± 0,090 0,700 ± 0,020 0,670 ± 0,075 0,780 ± 0,032 0,670 ± 0,060 0,600 ± 0,065
0,580 ± 0,075
Tabel V. Daya Sebar Sepuluh Formula Krim W/O Ekstrak Etanolik  Buah  Mahkota  Dewa  dengan  Variasi Cera Alba, Span 80, dan Mineral Oil sebagai Bahan
Tambahan
Formula Diameter sebaran (cm) A Validasi A B Validasi B C Validasi C AB AC BC ABC 3,150 ± 0,025 3,070 ± 0,058 3,300 ± 0,200 3,330 ± 0,058 3,200 ± 0,361 3,130 ± 0,115 3,170 ± 0,153 2,830 ± 0,153 3,230 ± 0,153 3,160 ± 0,115
Keterangan: nilai di atas merupakan nilai rata-rata dari tiga kali replikasi ± SD Gambar 2. Superimposed dari Contour Plot Respon Viskositas, Daya  Lekat,  dan  Daya  Sebar  Ekstrak  Etanolik  Buah Mahkota Dewa
Contour plot respon viskositas, daya lekat, daya sebar formula  krim w/ o  ekstrak  etanolik  buah  mahkota dewa,  dan formula  optimal  terletak  pada  daerah berwarna  kuning  pada gambar  di  bawah,  hasil  dari superimposed  contour  plot viskositas,  daya  lekat,  dan daya sebar, ditunjukkan melalui gambar 2.
Selain  memprediksi  komposisi  campuran, software Design  Expert  juga  memberi  prediksi  nilai parameter sifat fisik yang menjadi parameter untuk mendapat  formula  optimal.  Prediksi  yang  didapat dari software adalah viskositas sebesar 257,722 dPas, nilai  daya  lekat  sebesar  0,792  detik,  dan  nilai  daya sebar sebesar 3,059 cm.
Evaluasi sifat fisik formula optimal krim w/o ekstrak etanolik buah mahkota dewa Hasil  uji-t  satu  sampel  respon  prediksi  dan respon percobaan formula optimum disajikan pada tabel  VI.  Tabel  VI  menunjukkan  respon  viskositas dan daya sebar yang berbeda tidak signifikan antara prediksi software Design Expert® versi 8.0.7.1 dengan hasil  percobaan,  sedangkan  respon  daya  lekat menunjukkan  hasil yang berbeda signifikan.
Evaluasi  stabilitas  fisik  krim w/o ekstrak etanolik  buah  mahkota  dewa  dengan formula optimal Viskositas Viskositas  krim w/o ekstrak  etanolik  buah mahkota  dewa  cenderung  menurun  selama  4 minggu  penyimpanan.  Penurunan  viskositas  krim dapat disebabkan karena krim mengalami dehidrasi sehingga  krim  menjadi  rapuh  dan  tidak  tahan terhadap pengadukan rotor viskosimeter. Ketahanan krim dapat berkurang untuk mengalir. Depolimerisasi  emulgator  yang  terjadi selama  penyimpanan  juga  dapat  menyebabkan penurunan  viskositas  krim.  Suhu  yang  tinggi  saat proses  pencampuran  dimungkinkan  juga  akan mengakibatkan  emulgator  tidak  berfungsi  secara
optimal  karena  mengalami  kerusakan  pada strukturnya  sehingga  tidak  dapat  menjaga  stabilitas krim  dengan  baik  selama  penyimpanan.  Hasil pengukuran  viskositas  krim w/o ekstrak  etanolik buah mahkota dewa tersaji dalam tabel VII. Daya lekat Tabel VIII menunjukkan daya lekat krim w/o yang  disimpan  selama  4  minggu  naik  turun  secara fluktuatif  namun  tidak  menunjukkan  perbedaan yang bermakna.

## Daya sebar
Formula optimum krim w/o ekstrak etanolik buah  mahkota  dewa  mempunyai  daya  sebar    yang cenderung  menaik  selama  penyimpanan.  Karena viskositas krim yang menurun selama penyimpanan, tahanan  cairan  untuk  mengalir  semakin  berkurang sehingga  daya  sebar  krim  meningkat.  Hasil pengukuran daya lekat dapat dilihat pada tabel IX.

## Derajat keasaman (pH)
Hasil  pengukuran  pH krim w/o tersaji  pada tabel  X.  Formula  optimum  krim w/o ekstrak etanolik buah mahkota dewa  mempunyai nilai pH yang  stabil  selama  penyimpanan  dari  minggu  ke-0 sampai minggu ke-4.

## Rasio volume pemisahan
Hasil  pengamatan  selama  4  minggu menunjukkan  bahwa  semua  krim w/o stabil  pada suhu  kamar  karena  tidak  terjadi  pemisahan  fase pada  ketiga  formula  krim  (F=1).  Hal  ini  dapat disebabkan  karena  viskositas  krim  yang  besar sehingga  tidak  terjadi  pemisahan  fase.  Hasil pengukuran  respon  rasio  volume  pemisahan formula  optimum  krim w/o ekstrak  etanolik  buah mahkota dewa tersaji dalam tabel XI.
Hasil  uji  stabilitas  emulsi  yang  dipercepat dengan  metode  sentrifugasi  menunjukkan  bahwa dengan  meningkatnya  kecepatan  sentrifugasi,
Tabel VI. Hasil Uji-T Satu Sampel Formula Optimum Krim W/O Hasil Prediksi Software Dibandingkan dengan Hasil Percobaan Respon Prediksi Percobaan Signifikansi 2-tailed Kesimpulan Viskositas 257,722 dPa.s 246,7 dPa.s 0,080 Berbeda tidak signifikan Daya Lekat 0,792 detik 0,753 detik 0,048 Berbeda signifikan Daya Sebar 3,059 cm 2,918 cm 0,065 Berbeda tidak signifikan
Tabel VII. Hasil Uji Stabilitas Fisik Formula Optimal Krim W/O Ekstrak Etanolik Buah Mahkota Dewa Minggu Viskositas (dPa.s) Daya lekat (detik) Diameter sebaran (cm) pH F 0 246,700 ± 5,774 0,753 ± 0,015 2,918 ± 0,065 5,5 ± 0 1,0 ± 0 1 236,667 ± 5,774 0,713 ± 0,015 2,958 ± 0,014 5,5 ± 0 1,0 ± 0 2 240,000 ± 10,000 0,727 ± 0,025 2,942 ± 0,038 5,5 ± 0 1,0 ± 0 3 230,000 ± 10,000 0,710 ± 0,01 3,000 ± 0,050 5,5 ± 0 1,0 ± 0 4 226,667 ± 11,547 0,727 ± 0,021 3,010 ± 0,036 5,5 ± 0 1,0 ± 0
volume  pemisahan  emulsi  juga  bertambah  (tabel XII dan gambar 3).

## Tipe emulsi
Uji  tipe  emulsi  menunjukkan  hasil  yaitu semua  krim  tidak  dapat  terdistribusi  merata  dalam medium  air.  Berdasarkan  hasil  pada  tabel  XIII terbukti bahwa krim ekstrak etanolik buah mahkota
dewa merupakan tipe w/o .

## Iritasi primer kualitatif
Hasil  pada  tabel  XIV  menunjukkan  bahwa kontrol positif benzofenon 3% dapat menyebabkan edema  pada  kelinci,  sedangkan  krim w/o ekstrak etanolik  buah  mahkota  dewa  dan  kontrol  negatif basis  tidak  menimbulkan  iritasi  baik  eritema maupun edema setelah pemejanan pada hewan uji.

## KESIMPULAN
Optimasi formula krim w/o ekstrak etanolik buah  mahkota  dewa  menggunakan  metode simplex lattice  design dengan software  Design  Expert ® versi 8.0.7.1 menghasilkan suatu area optimal pada komposisi  18,504% cera alba, 5,231% span
80, dan 44,265%  minyak mineral. Formula optimal yang  diperoleh  mempunyai  respon  viskositas  dan daya  sebar  yang  berbeda  tidak  signifikan  dengan nilai  prediksi  respon  yang  diberikan  oleh software Design Expert ® versi 8.0.7.1, sedangkan respon daya lekat berbeda signifikan. Formula optimal krim w/o stabil  selama  4  minggu  penyimpanan  berdasarkan respon  rasio  volume  pemisahan  dan  derajat keasaman. Krim w/o ekstrak etanolik buah mahkota dewa  tidak  menimbulkan  eritema  ataupun  edema setelah pemejanan pada hewan uji.
Tabel VIII. Data F Rata-Rata ± SD Menit Ke-5 dan Ke-30 Uji Sentrifugasi
Kecepatan (rpm) F (menit ke-) 5 30 1500 1,067 ± 0,058 1,167 ± 0,153 3000 1,267 ± 0,058 1,567 ± 0,115 4500 1,633 ± 0,058 1,867 ± 0,058 Tabel  IX.  Uji  Tipe  Emulsi  Formula  Optimal  Krim W/O Ekstrak Etanolik Buah Mahkota Dewa Replikasi Minggu ke- 0 1 2 3 4 1 - - - - - 2 - - - - - 3 - - - - -
Gambar 3. Perbandingan Volume Pemisahan Krim W/O pada Kecepatan Sentrifugasi 1500, 3000, dan 4500 Rpm Selama 30 Menit
Tabel X. Hasil Pengamatan Uji Iritasi Primer Akibat Pemejanan Senyawa Uji secara Kualitatif
Kelompok Replikasi Jam ke-24 Jam ke-72 Eritema Edema Eritema Edema Benzofenon 3% 1 - + - + 2 - + - + 3 - + - + Kontrol positif 1 - - - - 2 - - - - 3 - - - - Kontrol negatif 1 - - - - 2 - - - - 3 - - - -
Keterangan : (-) : Belum meninbulkan eritema dan edema (+) : Sudah menimbulkan eritema dan edema

## DAFTAR PUSTAKA
Ansel, H.C., 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi , Penerbit  Universitas  Indonesia  (UI-Press), Jakarta. Bolton, S., 1997, Pharmaceutical Statistics Practical  and
Clinical  Application , 3nd  Edition,  610-613, Marcel Dekker Inc, New York. Darelanko,  M.J.,  Holinger,  M.A.,  1995, CRC
Handbook  of  Toxicology ,  159,  CRC  Press  Inc, New York. Harmanto,  N.,    2004, Mahkota  Dewa  Obat  Pustaka Para  Dewa ,  Cetakan  IV,  Agro  Media  Pustaka, Jakarta. Lu,  F.C.,  1995, Toksikologi  Dasar,  Asas,  Organ Sasaran,  dan  Penilaian  Risiko ,  diterjemahkan oleh Nugroho, E., Edisi II, 250-251, UI-Press,
Jakarta.
Pawening, Y. E., 2009, Efektivitas Ekstrak Etanolik Buah  Mahkota  Dewa  (Phaleria  macrocarpa (Scheeff)boerl.  )  dalam  Sediaan  Tabir  Surya, Skripsi, Fakultas Farmasi Prottey,  C.,  1978,  The  Molecular  Basis  of  Skin Irritation,  in  Breurer,  M.M.,  (Ed.), Cosmetic Science,Volume  1,  275-277,  302,  304, Academic Press, London. Wang, S.Q., Stanfield, M.S., Osterwalder, U., 2008, In  Vitro  Assesment  of  UV  A  Protection  by Populer  Sunscreen  Available  in  the  United States, J Am Dermatol 59: 934-42. Wahyuningsih, M.S.H., Mubarika, S., Gandjar, I.G., Hamann, M.T., Rao, K.V., and Wahyuono, S., 2005, Phalerin a New Benzophenoic glucoside isolated  from  the  Methanol  Extract  of Mahkota  Dewa  (Phaleri  macrocarpa  (Scheff). Boerl.] Leaves, Majalah Farmasi Indonesia , 16 (1)
51-57.