Jurnal Pharmascience, Vol 2, No. 1, Februari 2015, hal: 26 – 34 ISSN : 2355 – 5386
Research Article
Daya Larut Ekstrak Etanol  Daun Kembang Bulan ( Tithonia diversifolia ) Terhadap Batu Ginjal Kalsium

## Secara In Vitro
*Liling Triyasmono 1 , dan Eko Suhartono 2
1 Prodi Farmasi FMIPA Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru 2 Prodi Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru *Email: liling_imeru@yahoo.com
Abstrak
Telah dilakukan penelitian tentang daya larut ektrak etanol daun kembang bulan ( Tithonia diversifolia )  terhadap  batu  ginjal  kalsium  secara in  vitro .  Identifikasi  flavonoid  dilakukan  dengan KLT  menghasilkan  senyawa  yang  terkandung  adalah  jenis  flavon,  sedangkan  uji  kualitatif  batu ginjal  dengan  difraktometer  sinar  X  dan  FTIR  menunjukkan  bahwa  batu  ginjal  yang  digunakan adalah  jenis  kalsium  oksalat.  Ekstrak  dibuat  dengan  3  konsentrasi  berbeda  yaitu  0,125%,  0,25%, dan  0,5%.  Batu  ginjal  kemudian  dimasukkan  sebanyak  100  mg  ke  dalam  masing-masing konsentrasi dan diinkubasi selama 6 jam (37 o C). Hasil filtrat didestruksi dan diukur kadar kalsium menggunakan  spektrofotometer  serapan  atom  pada  422,7  nm.  Hasil  pengukuran  rata-rata konsentrasi kalsium yang terlarut dalam ekstrak etanol pada konsentrasi 0,125%, 0,25%, dan 0,5% adalah  0,2893  ppm,  0,8809  ppm,  dan  0,0554  ppm.  Hasil  uji Kruskal-Wallis diperoleh  (nilai  sig sebesar  0,027  <  0,05)  dan  disimpulkan  bahwa  konsentrasi  kalsium  terlarut  dalam  masing-masing konsentrasi  ekstrak  etanol  yang  dibuat  berbeda  signifikan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  daun  Kembang  Bulan  dapat  melarutkan  batu  ginjal  kalsium  secara in  vitro. Konsentrasi 0,25% memiliki daya larut batu ginjal kalsium in vitro yang paling tinggi.
Kata kunci:   Batu ginjal kalsium, Kembang Bulan (Tithonia diversifolia) , daya larut ekstrak etanol, spektrofotometer serapan atom

## Abstract
In  vitro  solubility  activity  test  of  ethanol  extract  of  mexican  sunflower  leaves  (Tithonia diversifolia) on calcium kidney stone has been carried out. Identification of flavonoids by TLC showed that a compound contained is kind of flavon, while qualitative test of kidney stones by X-ray diffraction and  FTIR  showed  that  the  kidney  stone  is    type  of  calcium  oxalate.  The  variation  of  ethyl  acetate fraction was made at concentration of 0.125; 0.25; 0.5 % ( w / v ). Each ethanol extract was added 100 mg of kidney stone and incubated for 6 hours at a temperature of 37 o C. Filtrate is destructed and measured of calcium concentration was measured using atomic absorption spectrophotometer at  422.7 nm. The average  of  result  measurement  of  calcium  concentration  dissolved  in  ethyl  acetate  concentration  of 0.125;  0.25;  0.5  %  ( w / v )    is  0.2893;  0.8809;  and  0.0554  ppm.  Based  on  Kuskal  Wallis  test,  obtained (sig=0.027<0.05).  It  can  be  concluded  that  the  dissolved  calcium  concentration  in  each  ethanolic extract  were  significantly  different.  Ethanolic  exctract    0.25%  has  the  largest  ability  in  dissolving calcium kidney stones in vitro.
Keywords: Calcium kidney stones, Tithonia diversifolia, solubility, ethanolic extract, Atomic Absorbtion Spectroscopy

## I. PENDAHULUAN
Batu ginjal adalah endapan yang terbentuk akibat pekatnya  kadar  garam  di  dalam  air  seni  yang kemudian  akan  mengkristal.  Batu  ginjal  dijumpai pada  1  dari  1.000  orang,  biasanya  lebih  banyak dijumpai pada pria (berumur 30-50 tahun) daripada wanita,  juga  banyak  dijumpai  di  daerah  tertentu (Hadipratomo,  2008).  Di  Indonesia,  penyakit tersebut  masih  menempati  porsi  terbesar  dari jumlah  pasien  di  Klinik  Urologi,  dengan  insidensi belum  dapat  ditetapkan  dengan  pasti  (Rochani, 2007).
Penatalaksanaan pasien dengan batu ginjal sangat tergantung  dari  beberapa  hal  untuk  menentukan jenis  terapi  apa  yang  harus  diterima.  Misalnya tergantung  dari  besar  batu,  lokasi  batu,  ada  infeksi sekunder atau tidak, jenis batu, sumbatan total atau parsial  saluran  kencing,  batu  bertambah  besar  atau tidak  setelah  diberi  obat,  dan  lain-lain.  Biasanya operasi merupakan pilihan terakhir, jika dengan diit yang  benar,  obat-obatan,  ESWL  (Extracorporeal Shock  Wave  Lithotripsy)  atau  teknologi  kejut, ureteroscopy,  atau  percutaneous  nephrolithotomy tidak  berhasil.  Berdasarkan  penatalaksanaan  yang dipaparkan,  terlihat  bahwa  penanganan  untuk  batu ginjal  ini  memerlukan  biaya  yang  sangat  mahal bahkan  sampai  jutaan  rupiah  untuk  operasi  batu ginjal (Hudzaifah, 2006).
Melihat  begitu  mahalnya  penanganan  untuk  batu ginjal  ini,  maka  diperlukan  suatu  alternatif pengobatan yang biayanya lebih murah, serta relatif lebih aman karena efek samping yang kecil dengan
menggunakan  tanaman  obat.  Beberapa  peneliti telah melakukan penelitian terhadap beberapa jenis tanaman  yang  dapat  melarutkan  batu  ginjal. Menurut  Ratri  (2008),  fraksi  air  dan  fraksi  etil asetat  daun  jagung  mempunyai  kemampuan melarutkan batu ginjal. Kamal (2007) membuktikan bahwa  fraksi  air  20%  dan  fraksi  etil  asetat  12,5% daun  meniran  dapat  melarutkan  batu  ginjal. Menurut Rusdiana (2009) ekstrak seledri konsentrasi  1%  mampu  melarutkan  batu  ginjal kalsium  dan  magnesium.  Ratri  (Pramono et  al ., 1993)  telah  membuktikan  bahwa  flavonoid  daun tempuyung memiliki kemampuan untuk membentuk kompleks dengan batu ginjal berkalsium. Berdasarkan penelitian-penelitian tersebut yang berperan dalam proses peluruhan batu ginjal adalah senyawa flavonoid.
Kembang  Bulan  (Tithonia  diversifolia)  adalah salah satu tumbuhan yang jumlahnya sangat banyak di  daerah  Hulu  Sungai  Selatan.  Kandungan  kimia yang  terdapat  dalam  tumbuhan  Kembang  Bulan adalah flavonoid, saponin, triterpenoid dan polifenol  (Lingga et  al ,  2010).  Infus  Daun Kembang  Bulan    telah  terbukti  dapat  melarutkan batu  ginjal  kalsium  in  vitro  (Triyasmono,  2009). Berdasarkan    hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan maka  potensi  kembang  bulan  sebagai  salah  satu alternatif pengobatan diperlukan kajian lebih lanjut yaitu  dengan  menentukan  daya  larut  ekstrak  etanol daun  kembang  bulan  terhadap  batu  ginjal  kalsium in vitro .

## II. METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  mulai  bulan  Januari 2011  sampai  bulan  April  2011  di  Laboratorium Kimia  Farmasi,  Sub  Lab  Farmasi  Laboratorium Dasar Fakultas MIPA Unlam Banjarbaru.

## A. Bahan
Sampel  daun  kembang  bulan,  akuades,  batu ginjal  kalsium,  etanol  teknis,  n-heksana  pa,  etil asetat  pa,  plat  KLT  silika  GF  254,  asam  asetat, asam klorida pekat, ammonia, lantanum oksida 5%, asam perklorat, asam nitrat pekat, aqua bidestillata, dan kalsium karbonat standar.

## B. Cara Penelitian
1. Pengambilan bahan
Tumbuhan  kembang  bulan  diambil  di  desa  Hulu Banyu Kec. Loksado Kab. HSS Kalimantan Selatan. Tumbuhan  diambil  secara  utuh  meliputi  akar, batang  dan  daun.  Kemudian  mengambil  daunnya sebanyak ± 2 kg.
2. Determinasi tumbuhan kembang bulan
Determinasi  dilakukan  di  Laboratorium  Dasar Fakultas MIPA Unlam.
3. Pengolahan bahan
Daun  kembang  bulan  yang  telah  diperoleh dibersihkan,  dicuci,  dirajang  dan  dikeringkan  di tempat  yang  tidak  terkena  sinar  matahari  langsung sampai  didapat  sampel  kering.  Sampel  kering disortasi,  diserbuk  dan  diayak  dengan  ayakan  5/8.
Sedangkan  untuk  sampel  batu  ginjal  digerus menggunakan  mortar  dan  diayak  dengan  ayakan berukuran  60  mesh  agar  diperoleh  partikel  batu ginjal homogen.

## 4. Ekstraksi daun kembang bulan
Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara  soxhletasi melalui 2 tahap. Tahap pertama dengan menimbang 50  g  serbuk  daun  kembang  bulan  dan  diekstraksi dengan  pelarut  n-heksana  selama  5  hari  pada  suhu 70-80°C  dengan  siklus  4  sirkulasi/jam.  Ekstrak  n- heksana  diambil  dan  residu  dikeringkan,  kemudian residu diekstraksi tahap kedua menggunakan etanol 96%  dengan  sirkulasi  dan  suhu  sama  seperti  tahap pertama.  Ekstrak  cair  yang  diperoleh  diuapkan hingga  diperoleh  ekstrak  kering  daun  kembang bulan.  Ekstrak  kering  daun  kembang  bulan  dibuat menjadi  tiga  konsentrasi  yaitu  0,125;  0,25;  dan 0,5  %  yang  nantinya  digunakan  untuk  merendam batu ginjal kalsium.
5. Identifikasi  flavonoid  ekstrak  etanol  daun kembang  bulan  menggunakan  kromatografi lapis tipis
Plat  Kromatografi  Lapis  Tipis  yang  digunakan adalah silika gel GF 254 dengan eluen yang dipakai yaitu n-butanol : asam asetat : air (9:2:6) (Rohyami, 2007). Pertama-tama eluen dijenuhkan dengan cara meletakkan  kertas  saring  pada chamber yang  telah berisi eluen lalu didiamkan selama kurang lebih 15 menit  sampai  terjadinya  elusi  pada  kertas  saring yang  dimasukkan.    Langkah  selanjutnya  adalah
penotolan  bercak  dengan  cara  menotolkan  ekstrak etanol  yang  telah  dilarutkan  lagi  dengan  pelarut  di atas  plat  KLT  sampai  terbentuk  noda.  Plat  KLT tersebut dimasukkan ke dalam chamber yang berisi eluen  yang  sudah  dijenuhkan  dan  dikeluarkan setelah  terjadi  elusi  sampai  pada  batas  0,5  dari ujung  plat,  lalu  diamati  noda  yang  terbentuk  pada sinar  UV  254  dan  366  nm.  Noda  pada  plat  KLT kemudian  diuapi  dengan  uap  amonia  (NH 3 )  dan akan  terbentuk  noda  kuning  sebagai  tanda  hasil positifnya  dan  diamati  kembali  pada  sinar  UV dengan  panjang  gelombang  254  dan  366  nm. Pereaksi  lain  yang  digunakan  juga  yaitu  sitroborat yang  akan  memberikan  noda  kuning  yang berfluoresensi di bawah sinar UV 366 nm lalu hasil tersebut didokumentasikan dan ditentukan harga Rf nya (Sulistijowati, 2001).
6. Uji  kualitatif  kalsium  batu  ginjal  dengan difraktometer sinar x dan FTIR
Serbuk batu ginjal sebanyak 1 g diletakkan dalam sample  holder hingga  mendapatkan  permukaan yang  datar  dan  distribusi  acak  dari  orientasi- orientasi  kisi. Sampel holder dimasukkan ke dalam alat  difraktometer  sinar  x  dan  dilakukan  pengujian pada sudut 2  dari 10 o hingga 90 o . Sebagai sumber sinar  difraksi  adalah  sinar  X.  Hasil  yang  didapat dianalisis,  dengan  membandingkan  difraktogram sampel  terhadap  PDF  ( Powder  Diffraction  File ) (Masrukan, 2008). Selanjutnya dibuat dengan pelet KBR-batu  ginjal  untuk  dianalisis  menggunakan FTIR.
7. Uji  daya  larut  ekstrak  etanol  terhadap  batu ginjal kalsium
Pembuatan  kurva  baku  kalsium  dilakukan dengan membuat larutan kalsium standar konsentrasi 0,2 ;  0,4 ; 0,8 ; 1,6 ; dan 3,2 ppm  dan diukur serapannya dengan spektrofotometer serapan atom  pada  panjang  gelombang  (λ)=  422,7  nm hingga diperoleh persamaan kurva baku y = Bx + A (Khopkar, 1990).
Ekstrak  etanol  daun  kembang  bulan  dibuat variasi  konsentrasi  0,125%,  0,25%,  dan  0,5  %. Kemudian  serbuk  batu  ginjal  ditimbang  sebanyak 100  mg  dan  direndam  dalam  variasi  ekstrak  etanol daun  kembang  bulan  masing-masing  sebanyak  100 mL.  Larutan  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  6 jam  disertai  penggojokan  dengan  interval  waktu  1 jam  (Maryati et  al ,  2009).  Larutan  hasil perendaman  disaring  dengan  kertas  saring  sampai diperoleh filtrat.
Filtrat  diambil  sebanyak  10  mL,  didestruksi dengan  asam  nitrat  dan  asam  perklorat  (5  :  1)  di atas  penangas  air  sampai  jernih  dan  ditambahkan 0,2  mL  lantanum  oksida  5%  serta  aqua  bidestillata sampai  diperoleh  volume  10  mL  (Maryati et  al , 2009). Larutan dibaca serapannya dengan menggunakan  spektrofotometer  serapan  atom  pada panjang  gelombang  (λ)=  422,7  nm  untuk  analisis kalsium (Khopkar, 1990).
8. Analisis data
Hasil  yang  diperoleh  dari  pengukuran  serapan sampel dianalisis statistik menggunakan SPSS 17.0.
Untuk  uji  distribusi  normal  dan  homogenitas menggunakan shapiro wilk dan levena statistic, dan jika  data  terdistribusi  normal  dan  homogen dilakukan  analisis  one  way  anova  pada  tingkat kepercayaan  95%.  Jika  terdapat  perbedaan  yang signifikan  dilanjutkan  dengan  analisis  Post  Hoc Tukey.  Sedangkan,  jika  data  tidak  terdistribusi normal dan tidak homogen maka dilakukan analisis non  parametrik  dengan  uji  Kruskal-Wallis  pada tingkat  kepercayaan  95%  dan  dilanjutkan  dengan uji  Mann-Whitney  jika  terdapat  perbedaan  yang signifikan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. HASIL
1. Hasil determinasi
Hasil  determinasi  menunjukkan  tumbuhan  yang digunakan  memang  benar  kembang  bulan  dengan spesies Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray.

## 2. Deskripsi batu ginjal (batu kalsium oksalat)
Batu  ginjal  yang digunakan berupa padatan  agak keras, bentuknya tidak beraturan dengan permukaan yang agak kasar, dan warnanya coklat kehitaman.

## 3. Hasil ekstraksi daun kembang bulan
Hasil  ekstraksi  yang  diperoleh  sebesar  52,25  g dengan  rendemen  sebesar  8,17  %.  Hasil  ekstrak yang  diperoleh  telah  ditimbang  sampai  bobot tetap/konstan  dimana  menandakan  bahwa  pelarut etanol telah habis menguap.
4. Hasil identifikasi  flavonoid  ekstrak etanol  daun kembang bulan
Terlihat jelas pemisahan  yang terjadi  pada noda  II yang  berwarna  kuning  disimpulkan  adalah  noda dari  senyawa  flavonoid.  Hal  tersebut  disimpulkan berdasarkan  warna  yang  terlihat  jelas  sebagai  ciri khas  dari  senyawa  flavonoid  (warna  kuning)  dan nilai  Rf  yang  diperoleh  yaitu  0,66.  Senyawa flavonoid memiliki banyak golongan seperti flavon, flavonol, isoflavon, flavanon dan lainnya, dari hasil nilai  Rf  yang  diperoleh  terlihat  noda  kuning  pada kromatogram  bisa  disimpulkan  bahwa  golongan yang  lebih  dominan  terlihat  adalah  flavonoid golongan  flavon.  Hal  ini  didasarkan  atas  literatur yang  diperoleh  bahwa  pada  warna  kuning  dalam UV 254 + uap NH 3 atau pada uap NH 3 saja dengan eluen  forestall  dan  nilai  Rf  tersebut  adalah flavonoid golongan flavon.

## Tabel I. Hasil identifikasi menggunakan KLT
5. Hasil  uji  kualitatif  kalsium  batu  ginjal  dengan difraktometer sinar x
Hasil  difraktogram  dari  sampel  batu  ginjal
dianalisis dengan cara membandingkan
difraktogram  sampel  batu  ginjal  terhadap  PDF ( Powder  Diffraction  File )  kalsium  oksalat.  Hasil analisis dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar  1. Hasil  analisis  kalsium  oksalat  pada difraktogram sampel batu ginjal
Hasil  analisis  seperti  yang  tertera  pada  gambar  1 menunjukkan  bahwa    dalam  sampel  batu  ginjal terkandung  kalsium  oksalat.  Hal  ini  terbukti  dari puncak-puncak yang terdapat pada profil difraktogram  sampel  batu  ginjal  letaknya  sama dengan  puncak-puncak  yang  dimiliki  oleh  PDF standar  dari  kalsium  oksalat.  Puncak-puncak  yang menunjukkan  adanya  kalsium  oksalat  tersebut muncul  pada  sudut  2  sebesar  14,90872 o ; 24,37384 o ; dan 30,09652 o .

## 6. Hasil uji kualitatif dengan menggunakan FTIR
Berdasarkan gambar hasil spektrum FTIR di atas menunjukkan  bahwa  jenis  batu  ginjal  sampel whewellite  yang  tergolong  oksalat  dengan  adanya spektra  pada  bilangan  gelombang  3425  cm-1  dan 1620  cm-1  sehingga  dapat  dipastikan  bahwa  batu
ginjal  yang  digunakan  sebagai  sampel  adalah  batu ginjal kalsium
Gambar  2 .  Hasil  analisis  batu  ginjal  kalsium dengan FTIR
7. Hasil uji daya larut ekstrak etanol terhadap batu ginjal kalsium
Persamaan  kurva  baku  yang  diperoleh  dari  hasil pengukuran serapan  larutan standar kalsium  adalah y = 0,02887x – 9,833.10 -4 dengan r = 0,9968. Hasil pembacaan  sampel  pada  spektrofotometer  serapan atom dengan konsentrasi 0,125%; 0,25%; dan 0,5% sebanyak  3  kali  replikasi  dapat  dilihat  pada  tabel dibawah ini.
Tabel  II. Hasil  pengukuran  sampel  pada spektrofotometer serapan atom
Berdasarkan hasil tersebut bisa diperoleh data rata- rata  untuk  setiap  konsentrasi  Ca  terlarutnya  dapat dilihat pada tabel di bawah ini.
Tabel III. Konsentrasi rata-rata Ca terlarut
Berdasarkan  data  dari  konsentrasi  rata-rata Ca  telarut  diatas,  maka  dapat  dibuat  sebuah  grafik hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun kembang bulan dengan konsentrasi Ca terlarut yang lebih jelas terlihat pada gambar 3.
Gambar  3. Grafik  hubungan  antara  konsentrasi ekstrak  etanol  daun  kembang  bulan dengan konsentrasi Ca terlarut
8. Analisis data
Berdasarkan  data  dari  hasil  uji  daya  larut  daun kembang  bulan  terhadap  batu  ginjal  kalsium  yang diperoleh  berupa  konsentrasi  Ca  yang  terlarut  di dalam  ekstrak  daun  kembang  bulan  (Tithonia diversifolia) dengan konsentrasi yang telah ditentukan diuji normalitasnya dengan
menggunakan    uji  Saphiro-Wilk  dan  diuji homogenitasnya  dengan  uji  Levene.  Pertama-tama dilakukan analisis uji Saphiro-Wilk yang menunjukkan hasil bahwa data yang diperoleh tidak normal dikarenakan memiliki nilai sig < 0,05  yaitu 0,039,  lalu  dilanjutkan  pada  uji  Levene  dan menunjukkan  bahwa  data  yang  didapat  tersebut homogen yaitu 0,439 (sig > 0,05).
Berdasarkan  hasil  tersebut  bahwa  data  tidak normal  dalam  hal  sebaran  datanya  dan  homogen maka dilanjutkan dengan analisis lanjutan menggunakan uji Kruskal-Wallis dan menunjukkan hasil  yang  terdapat  adanya  perbedaan  yang signifikan pada konsentrasi Ca yang terlarut karena memiliki  nilai  sig  <  0,05  yaitu  0,027.  Hasil  data tersebut  dilanjutkan  lagi  dengan  menggunakan  uji Mann-Whitney, yang membandingkan antara konsentrasi  ekstrak  0,125%  dengan  konsentrasi ekstrak  0,25%,  antara  konsentrasi  ekstrak  0,125% dengan konsentrasi ekstrak 0,5%  antara konsentrasi ekstrak  0,25%  dengan  konsentrasi  ekstrak  0,5%, dan  diperoleh  hasil  adanya  perbedaan  yang signifikan  antara  ketiga  konsentrasi  yang  berbeda tersebut yaitu nilai sig 0,05 (sig ≤ 0,05).
Uji  Mann-Whitney  tersebut  tidak  seperti  uji  Post Hoc  Tukey  yang  menjelaskan  secara  detail  yang mana yang lebih baik dalam perbedaan yang terjadi pada setiap konsentrasinya, karena hanya menentukan bahwa dari  ketiga konsentrasi  tersebut terdapat  perbedaan  yang  signifikan.  Cara  untuk melihat perbedaan konsentrasi yang lebih baik yaitu dengan  melihat  hasil  rata-rata  konsentrasi  Ca  yang
terlarut  bahwa  yang  lebih  besar  menunjukkan konsentrasi  yang lebih baik  dalam melarutkan batu ginjal kalsium secara in vitro.

## B. PEMBAHASAN
Hasil  yang  lebih  baik  dapat  disimpulkan  bahwa pada  konsentrasi  0,25%  ekstrak  etanol  dapat  dapat melarutkan  paling  baik  batu  ginjal  kalsium  dengan hasil  yang  diperoleh  sebesar  0,8809  ppm, sedangkan yang paling kecil dari ketiga konsentrasi tersebut  adalah  pada  konsentrasi  0,5%  yang  hanya melarutkan sebesar 0,0554 ppm. Hal tersebut terjadi kemungkinan  disebabkan    karena  adanya  kalsium yang  berasal  dari  tumbuhan  kembang  bulan  itu sendiri ditunjukkan dengan absorbansi blanko yang cukup  besar  sehingga  akan  mempengaruhi  ikatan flavonoid yang ada pada tumbuhan dengan kalsium yang  ada  pada  batu  ginjalnya.  Hal  tersebut  diduga terjadi  karena  kalsium  yang  ada  pada  tumbuhan lebih dahulu berikatan dengan senyawa flavonoidnya  sehingga  menyebabkan  pengurangan senyawa  flavonoid  pada  tumbuhan  untuk  berikatan dengan  kalsium  yang  ada  pada  batu  ginjal  dan menyebabkan  terjadinya  penurunan  kelarutan  batu ginjal  kalsium  oleh  tumbuhan  kembang  bulan ( Tithonia diversifolia ) jika konsentrasi diperbesar.
Penggunaan  ekstrak  etanol  daun  kembang  bulan ( Tithonia  diversifolia )  ternyata  terbukti  melarutkan batu  ginjal  kalsium  dengan  cukup  baik  pada konsentrasi  0,25%.  Hasil  yang  diperoleh  tersebut dapat  menunjukkan  bahwa  hipotesis  yang  telah dikemukakan  sebelumnya  memiliki  kebenaran
bahwa  tumbuhan  kembang  bulan  dapat  melarutkan batu  ginjal  kalsium  secara in  vitro .  Hal  ini  juga menunjukan  bahwa  senyawa  aktif  yang  ada  dalam tumbuhan  kembang  bulan  ( Tithonia  diversifolia ) dapat  melarutkan  batu  ginjal  kalsium  yang  salah satunya  adalah  flavonoid,  dimana  flavonoid tersebut  kemungkinan  memecah  ikatan  kalsium yang  ada  pada  batu  ginjal  dan  mengikat  sebagian kalsium  tersebut,  akan  tetapi  mekanisme  kerjanya masih  belum  bisa  dipastikan  secara  jelas  dan memerlukan penelitian lanjutan.
Penelitian yang dilakukan ini dapat menjadi dasar untuk  penelitian  lanjutannya  yaitu  pengambilan senyawa  aktif  yang  lebih  spesifik  melalui  fraksi- fraksi  seperti  fraksi  etil  asetat,  fraksi  n-butanol, fraksi  air,  dan  fraksi  lainnya  sehingga  diperoleh senyawa  yang  lebih  sederhana  berdasarkan  tingkat kepolarannya serta menjadi dasar untuk melakukan penelitian secara in vivo dan pencarian struktur dari senyawa  aktif  yang melarutkan batu  ginjal  tersebut serta  mekanisme  kerja  yang  terjadi  hingga diperoleh suatu produk farmasi untuk penyakit batu ginjal pada manusia.

## IV. KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  kembang  bulan  ( Tithonia diversifolia )  ternyata  terbukti  melarutkan  batu ginjal  kalsium  secara in  vitro pada  konsentrasi 0,25%  yang  paling  optimal  pada  seri  konsentrasi penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Autherhoff  &  Kovar.  2002. Identifikasi  Obat. Penerbit ITB . Bandung Hadipratomo, Y.  2008. Batu Ginjal, Penyebab dan Pencegahannya . http://www.f-buzz.com/2008/06/26/batu- ginjal-penyebab-pencegahannya/            Diakses tanggal 20 Desember 2010.
Harborne,  I.B.  1987 Metode  Fitokimia  Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan , Cetakan II. Penerbit ITB. Bandung.
Hudzaifah.  2006. Singkirkan  Batu  Ginjal  Tanpa Operasi ,http://www.hudzaifah.org/Article334.pht ml, Diakses tanggal 20 Desember 2010.
Kamal, Z. 2007. Uji Kelarutan Batu Ginjal Kalsium dalam  Fraksi  Air  dan  Etil  Asetat  Daun  Meniran (Phyllanthus  niruni  L)  secara  In  Vitro  dengan Pengaktifan Neutron Cepat. MEDIKA . 33: 654. Khopkar, S.M. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik . UI Press. Jakarta
Lingga, HN, Satrio W.R, M. Fathurrakhman, Raina H.  2010.  Kajian  aktivitas  Infusa  Daun  Kembang Bulan  (Tithonia  diversifolia)  sebagai  Alternatif Antidiabetes. Laporan  PKM  DIKTI  2010. Universitas  lambung  Mangkurat,  Banjarbaru .
(tidak dipublikasikan).
Markham,  K.  R.  1988. Cara  Mengindentifikasi
Flavonoid ,  terjemahan  Kosasih  Padmawinata. Penerbit ITB. Bandung.
Maryati, Azizahwati & Kadarsih. P. 2009. Aktivitas Sari  Lobak  (Raphanus  sativus  L.)  terhadap Kelarutan  Batu  Ginjal  Kalsium  secara  In  Vitro.
Jurnal Bahan Alam Indonesia . 7: 32-35.
Masrukan.  2008.  Analisis  Kualitatif  dengan Menggunakan  Teknik  Difraksi  Sinar  X  Pada Penambahan  Unsur  Zr  terhadap  Pembentukan Fasa Paduan U-Zr. Urania . 14: 65-76.
Nisma,  F.  2011.  Pengaruh  Penambahan  Ekstrak Etanol  70%  Buah  Anggur  Biru  (Vitis  vinifera  L) terhadap  Kelarutan  Kalsium  Batu  Ginjal. Skripsi Jurusan Farmasi FMIPA . Uhamka. Jakarta.
Ratri,  W.  N.  2008.  Uji  Kelarutan  Batu  Ginjal Kalsium  dalam  Fraksi  Air  dan  Etil  Asetat  Daun Jagung  (Zea  Mays  L)  secara  in  vitro  dengan metode  Spektrofotometri  Serapan  Atom. Skripsi.
Fakultas  Farmasi ,  Universitas  Muhammadiyah,
Surakarta. (dipublikasikan). Rochani. 2007. Guidelines Penatalaksanaan
Penyakit Batu Saluran Kemih . Hal 1-45 Sulistijowati, A & D. Gunawan. 2001. Efek Ekstrak Daun  Kembang  Bulan  ( Tithonia  diversifolia A. Gray)  terhadap  Candida  albicans  serta  Profil Kromatografinya. Cermin Dunia Kedokteran . 130: 32-36.
Triyasmono, 2009., Kajian Aktivitas Infusa Daun Kembang Bulan Terhadap Kelarutan Batu Ginjal Kalsium In Vitro, Laporan Penelitian DIPA FMIPA ., Unlam.