## Degradasi Karbohidrat pada Pakan Udang oleh Isolat Kapang Endofit Mangrove
Sri Lintang Artono 1 , Agus Trianto 1,2 *, Nur Taufiq Syamsudin Putra Jaya 1 , Agus Sabdono 1 , Subagiyo 1 , Delianis Pringgenies 1 , Rignolda Djamaludin 3 , Aiyen Tjoa 4
1 Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia
2 Laboratorium Marine Natural Product, UPL-Laboratorium Terpadu, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang 50275, Jawa Tengah, Indonesia
3 Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi Jl. Kampus Unsrat, Kleak-Bahu, Manado 95115, North Sulawesi, Indonesia
4 Fakultas Pertanian, Universitas Tadulako Jl. Soekarno Hatta Km. 9, Tondo, Mantikulore, Palu 94148, Central Sulawesi, Indonesia Email: agustrianto.undip@gmail.com

## Abstract

## Carbohydrate Degradation in Shrimp Feed by Endophytic Mangrove Mold Isolates
Feed quality is a very important factor in shrimp farming because it will affect shrimp growth, water quality and even the emergence of pathogenic bacteria. High quality feed can be well digested by shrimp so that it can improve the growth and do not leave plenty of residue. Mold is capable of producing cellulase which can be used to improve feed quality  by  shortening  carbohydrate  chains.  This  paper  will  discuss  the  application  of  endophytic  molds  to  simplify cellulose in shrimp feed. Mold isolates were collected from mangrove ecosystems in North Sulawesi. The media used for culturing  mold  are  potato  dextrose  agar  (PDA)  and  potato  dextrose  broth  (PDB).  Fermentation  test  was  conducted using the fungal isolates; Hypocreales sp. and Diaporthe stewartii and consortia and controls. Fermentation results were checked by TLC and Fehling's test to determine the composition of the compounds and the presence of reducing sugar either mono or di-saccharide. Fermented shrimp feed shows differences in texture and  color. Fermented feed extract with Hypocreales sp. 2.69 g (3.36%), Diaporthe stewartii 4.9 g (6.13%), and consortium 3.75 g (4.69%). TLC results neither under  UV  light  nor  visualization  of  vanillin  sulfate  did  not  show  any  differences  of  compounds  in  the  c ontrol  and  the fermented feed. The results of the Fehling test showed that the mold was able to degrade cellulose that can be utilized to increase the shirmp feed quality.
Keywords : Diaporthe stewartii, Fermentation, Hypocreales sp ., Shrimp Feed

## Abstrak
Kualitas  pakan  merupakan  faktor  yang  sangat  berpengaruh  dalam  budidaya  udang  karena  akan  mempengaruhi pertyumbuhan  udang,  kualitas  air  bahkan  timbulnya  bakteri  pathogen.  Pakan  yang  baik  mudah  dicerna  oleh  udang sehingga  dapat  meningkatkan  pertumbuhan  secara  maksimal  dan  tidak  terlalu  banyak  meninggalkan  residu.  Kapang mampu memproduksi  selulase yang dapat digunakan untuk meningkatkan kualitas  pakan dengan memperpendek  rantai karbohidrat. Tulisan ini akan membahas aplikasi kapang endofit untuk menyederhanakan selulosa pada pakan udang. Isolat kapang dikoleksi dari ekosistem mangrove di Sulaweri Utara. Media yang digunakan untuk mengkultur kapang adalah potato dextrose agar ( PDA) dan potato dextrose broth (PDB). Uji fermentasi dengan kapang Hypocreales sp. dan Diaporthe stewartii dan konsorsium serta kontrol. Hasil fermentasi dicek dengan TLC dan uji Fehling untuk mengetahui komposisi senyawa dan keberadaan mono-karbohidrat.  Pakan udang yang difermentasi menunjukkan perbedaan tekstur dan warna. Ekstrak pakan fermentasi dengan Hypocreales sp. sebesar 2,69 g (3,36%), Diaporthe stewartii sebesar 4,9 g (6,13%), dan konsorsium sebesar 3,75 g (4,69%). Hasil TLC dan visualisasi vanillin sulfat tidak menunjukkan perbedaan jenis senyawa pada pakan kontrol dan pakan terfermentasi. Hasil uji Fehling menunjukkan bahwa  kapang mampu mendegradasi selulosa yang dapat digunakan untuk meningkatkan kualitas pakan udang.
Kata kunci : Diaporthe stewartii, Fermentasi, Hypocreales sp., Pakan Udang

## PENDAHULUAN
Budidaya Udang komersial memiliki nilai ekonomi yang sangat tinggi. Pada tahun 2018, nilai perdagangan  udang  internasional  bernilai  hampir  USD  25,7  miliar  atau  sekitar  16  %  dari  semua
komoditas  perikanan,  sehingga  mendorong  peningkatan  pendapatan  per  kapita  dunia  Sumber perikanan laut tradisional yang berasal dari penangkapan menjadi stagnan sejak pertengahan 1980- an,  di  sisi  lain,  total  produksi  perikanan  terus  meningkat  hasil  teknologi  produksi  baru  sehingga akuakultur menjadi semakin penting (Anderson et al ., 2018).
Pakan adalah salah satu faktor kunci pada keberhasilan budidaya udang (Zuliyan et al ., 2017). Menurut Tahe dan Suwoyo (2011), 60-70% dari total biaya produksi adalah untuk pakan. Salah satu kekurangan adalah kandungan gizi yang rendah dan kurang sesuai untuk udang (Rahman et al ., 2018)).  Pakan  udang mengandung kadar  protein  kasar  berkisar antara 25  %  dan 40% lebih  tinggi daripada yang digunakan untuk hewan ternak misalnya: unggas, babi dan sapi (Amaya et al ., 2007; Nunes et  al .,  2014).  Lebih  lanjut  Nunes  (2022)  menjabarkan  bahwa  pakan  udang  mengandung protein dan asam amino 57,86 %, karbohidrat 33 %, lemak 3,35 %, vitamin dan mineral 5,29 %, dan non-nutrien 0,50 %.
Secara alami, kapang merupakan adalah mikroorganisme yang saprofit atau penyakit yang mendegradasi jaringan tumbuhan. Selulosa merupakan komponen utama dari lignoselulosa, yang tersusun atas hemiselulosa, lignin, pektin dan lilin pada dinding sel tumbuhan Mulyadi (2019). Kapang memiliki kemampuan untuk memecah selulosa pada jaringan tanaman mati menjadi senyawa yang lebih sederhana dengan menghasilkan enzim ekstra seluler, misalnya selulosa dan lignase (Utami et al ., 2019). Kapang juga mampu melakukan dekomposisi selulosa terlarut (Raghukumar, 2017, Razie et al ., 2011). Kemampuan kapang menghasilkan enzim selulosa dapat digunakan dalam proses hidrolisis selulosa  dalam  bioindustri,  misalnya  dalam  produksi  bioetanol  (Saravanakumar et  al .,  2016). Fermentasi  juga  dapat  digunakan  untuk  meningkatkan  kualitas  pakan  dengan  mengubah  atau menyederhanakan  struktur  kimia  senyawa  organik  dengan  bantuan  enzim  (Rahman et  al .,  2018). Pada  proses  fermentasi  bahan – bahan  yang  sulit  dicerna  seperti  selulosa  diubah  menjadi  gula sederhana  sehingga  dapat  mempercepat  pertumbuhan  dan  mengurangi  residu  (Zuliyan et  al ., 2017).  Kapang  menjadi  mikroorganisme  yang  berpotensi  memproduksi  selulase  yang  dapat diaplikasikan pada industry pakan udang. Dibandingkan dengan produksi dan sistem kerja selulase bakteri atau organisme lain, produksi dan sistem kerja selulosa kapang lebih sederhana (Imran et al ., 2016).
Mangrove merupakan ekosistem pesisir yang memiliki keanekaragaman yang tinggi, termasuk kapang. Kapang  dari  ekosistem mangrove  memiliki potensi  bioteknologi  sebagai  penghasil  enzim selulosa  untuk  meningkatkan  produksi  etanol  generasi  kedua  dari  sumber  yang  berbeda  dan alternatif (Immaculatejeyasanta et al ., 2011, Ramesh et al ., 2014). Tulisan ini akan membahas aplikasi kapang endofit untuk menyederhanakan selulosa pada pakan udang.

## MATERI DAN METODA
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Juli  2020  hingga  Januari  2021  di  Laboratorium Marine Natural  Product ,  UPT  Laboratorium  Terpadu,  Universitas  Diponegoro,  Semarang.  Materi  yang digunakan dalam penelitian ini yaitu pakan udang ecobest , Hypocreales sp., dan D. stewartii . Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu eksperimen laboratoris.
Isolat kapang  19MT-5-3  dan 19  MSr-C4-3 berasal  dari ekosistem  mangrove  di sekitar  Manado yang  merupakan  koleksi  Laboratoium  Marine  Natural  Product-UPTLT  Universitas  Diponegoro.    Isolat kapang 19MT-5-3 dan 19 MSr-C4-3 sudah diidentikasi secara molekuler sebagai Hypocreales sp., dan D. stewarti (Trianto et al , 2021).
Prosedur  fermentasi  pakan  meliputi  penyegaran  kapang  pada  media Potato  Dextrose  Agar (PDA), penyiapan starter pada media cair Potato Dextrose Broth (PDB). Kapang Hypocreales sp. dan Diaporthe stewartii dilakukan selama masing - masing 7 hari. Fermentasi dilakukan dengan 3 variabel, yaitu:  kontrol  pakan  udang,  fermentasi  dengan  isolat Hypocreales sp., D.  stewartii, serta  fermentasi pakan menggunakan konsorsium kedua kapang yang dilakukan selama 7 hari.
Ekstraksi  pakan  udang  dilakukan  dengan  metoda  maserasi  dengan  pelarut  etil  asetat. Perendaman sampel dilakukan selama 24 jam dengan 3 kali ulangan. Menurut Hasnaeni et al . (2019), analisis  data  untuk  menghitung  persentase  ekstrak  yang  didapatkan  saat  ekstraksi,  menggunakan rumus:
Uji TLC dilakukan untuk mengetahui perbedaan komposisi senyawa antara pakan kontrol dengan pakan terfermentasi, hasil TLC di visualisasi menggunakan sinar UV (366nm) (Santiago dan Strobel, 2013), serta visualisasi  menggunakan  reagent  vanillin  sulfat  untuk  menampakkan  senyawa  yang  tidak  terlihat dibawah  sinar UV-Vis (Stahl, 1966).
Uji fehling menggunakan reagent fehling, yang mana metode ini digunakan untuk mendeteksi gula tereduksi (Kunz et al ., 2011).  Sebanyak 2 mL larutan sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan reagent Fehling A dan Fehling B masing-masing 2 mL kedalam tabung tersebut. Setelah itu, larutan NaOH 10% sebanyak 4 tetes ditambahkan kedalam tabung reaksi. Tabung reaksi lalu dipanaskan  di  atas  Bunsen  hingga  mendidih.  Reaksi  positif  pada  uji  Fehling  diindikasikan  adanya endapan merah bata.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada media PDA, kapang dapat tumbuh dengan baik karena PDA ini mempunyai beberapa nutrisi essensial untuk pertumbuhan kapang (Westphal et al ., 2021).  Menurut Gabriel et al . (2018), kapang tumbuh dengan baik dan menyebar ke setiap sudut petri untuk memaksimalkan pencarian nutrisi  pada  media.  Kapang Hypocreales sp.  mempunyai  koloni  berwarna  coklat  kehitaman, berspora,  dengan  pola  pertumbuhan irregular dengan  elevasi raised dan  bermargin lobate . Sedangkan  kapang D.  stewartii memiliki  koloni  berwarna  putih,  berukuran  besar  dengan  elevasi convex dan bermargin filamentous (Gambar 1).
Pada  Gambar  2  menunjukkan  pertumbuhan  kapang  pada  media  PDB  dalam  vial  100  mL. Kapang dapat tumbuh dengan baik dan dengan cepat pada media PDB. Menurut Shi et al . (2012), ukuran  inokulum,  volume  media  dan  temperature  sangat  mempengaruhi  pertumbuhan  kapang. Inokulum yang terlalu kecil akan mengakibatkan pertumbuhan sel yang lambat sedangkan ukuran inokulum yang terlalu besar akan menyebabkan degradasi sel dalam jangka waktu tertentu. Rasio media  terhadap  wadah  yang  rendah  dapat  menyebabkan  pertumbuhan  kapang  yang  tinggi karena kecukupan ruang dan udara. Kapang tumbuh dengan cepat pada suhu yang ideal. Basu et al . (2015), menyebutkan bahwa media pertumbuhan kapang yang optimal memiliki kandungan karbohidrat dan nitrogen yang tinggi, pH 5 - 6 dan suhu 25º - 37ºC.
a. b.
Gambar 1. Kultur kapang (a) Hypocreales sp. (b) D. stewartii
Pertumbuhan  kapang  pada  pakan  ditunjukkan  dengan  adanya  gumpalan – gumpalan pakan,  serta  terdapat  beberapa  miselia  ataupun  spora  yang  dapat  diamati  dengan  mudah. Metode  fermentasi  yang  dilakukan  pada  penelitian  ini  yaitu  metode solid-state  fermentation . Menurut Ibarruri et al . (2021) jamur  memiliki kemampuan khusus  untuk menembus  zat padat dan memiliki  laju  oksigenasi  yang  tinggi.  Jamur  juga  dikenal  dapat  menghasilkan  enzim  yang  dapat mendegradasi  dinding  bahan  organik.  Fermentasi  pakan  menggunakan  isolat Hypocreales sp. (19MT-05-3) memiliki karakteristik tumbuhnya miselia coklat dan spora berwarna hitam pada pakan, fermentasi  pakan  menggunakan  isolat D.  stewartii (19MSr-C4-3)  memiliki  karakteristik  tumbuhnya miselia  putih  pada  pakan,  sedangkan  untuk  fermentasi  konsorsium  memiliki  ciri – ciri  tumbuhnya spora hitam dan miselia putih pada pakan. Ciri – ciri umum yang terjadi dalam fermentasi pakan ini yaitu terdapat gumpalan – gumpalan pakan yang mana pakan tersebut terikat dengan tumbuhnya miselia. Pertumbuhan kapang saat fermentasi ini tergolong sangat cepat karena dalam waktu tujuh hari, kapang mampu menyebar ke seluruh bagian pakan. Menurut Karimi et al . (2018), pada proses fermentasi,  kapang  memanfaatkan  nutrisi  pada  substrat  dan  akan  menghasilkan  produk metabolism seperti asam organik dan bioethanol dengan bantuan enzim ekstra-seluler. Pakan yang difermentasi  diekstrak  dengan  metoda  maserasi  selama  tiga  hari  dengan  penggantian  pelarut ekstrak setiap harinya. Hasil analisis data ekstraksi dapat dilihat pada Tabel 1.
Gambar 2. Kultur cair sampel Hypocreales sp., D. stewartii , dan Konsorsium untuk starter fermentasi.
a b c
Gambar 3. Fermentasi pakan menggunakan isolat kapang a) Hypocreales sp., D. stewartii 19MT-5-3, b) 19 MSr-C4-3, c) Konsorsium
Tabel 1 .  Hasil ekstraksi pakan fermentasi Hypocreales sp. (19MT-05-3), D. stewartii (19MSr-C4-3) dan konsorsium.
Nama Berat sampel (g) Berat Ekstrak (g) Rendemen Ekstrak (%) 19MT-05-3 80 2,69 3,36 19MSr-C4-3 4,9 6,13 Konsorsium 3,75 4,69
Menurut Gallo et al . (2017), maserasi adalah metode termurah untuk menghasilkan ekstrak. Berat ekstrak methanol pada pakan fermentasi Hypocrales sp. sebanyak 2,69 g dengan rendemen 3,36%, pada fermentasi dengan D. stewartii sebanyak 4,9 g dengan rendemen 6,13% serta ekstrak dengan konsorsium sebanyak 3,75 g dengan  rendemen  4,69%.  Rendemen ekstrak   menunjukkan jumlah senyawa aktif pada suatu sampel (Hasnaeni et al ., 2019).  Hasil uji TLC baik dengan visualisasi dengan  sinar  UV  maupun  dengan  reagent  vanillin  sulfat  dalam  etanol  menunjukkan  tidak  ada perbedaan komposisi senyawa pada ekstrak semua pakan fermentasi dan kontrol (Gambar 4). Hal ini  menunjukkan  tidak  adanya  perubahan  senyawa  non  polar  dan  semi  polar  pada  saat  proses fermentasi.    Reagent  vanillin  sulfat  digunakan  untuk  menunjukkan  spot  yang  tidak  nampak  saat visualisasi  sinar  UV  (Spangenberg et  al .,  2011).    Penggunaan  eluen  yang  berbeda  akan menyebabkan  pemisahan  yang  berbeda  terutama  pada  senyawa-senyawa  yang  mempunyai polaritas cukup dekat, penggunaan dua eluen penting untuk memastikan komposisi senyawa pada suatu ekstrak.
Uji Fehling digunakan untuk mendeteksi gula tereduksi pada pakan terfermentasi (Kunz et al ., 2011). Teknik ini juga dapat menentukan keberadaan glukosa dalam bentuk polisakarida, polimer glucopyranoside  dan  polyalcohol  (Antonio et  al .,  2018).  Uji  fehling  menggunakan  sampel  yang berupa  pakan  kontrol  dan  pakan  terfermentasi,  serta  mendapatkan  hasil  seperti  Gambar  7  dan Tabel 2. Pada hasil, dapat dilihat bahwa terdapat perubahan warna dan terbentuknya endapan merah pada sampel pakan terfermentasi yang menunjukkan terjadinya pemecahan karbohidrat kompleks menjadi gula yang lebih sederhana.
Sesuai  dengan  Yadav  dan  Majumder  (2017)  yang  menyatakan  bahwa  indikasi  perubahan warna  pada    uji  gula  tereduksi  metode  Fehling  dengan  adanya  suspensi  berwarna  hijau  dan endapan berwarna merah. Antonio et al. (2018), menyatakan uji Fehling dengan 1 mg glukosa
a1 a2 b2
b2
Gambar 4 .  Hasil TLC sampel pakan dan pakan difermentasi dengan isolate jamur 19MSr-C4-3, 19MT- 5-3 dan pakan fermentasi kapang konsorsium a) visualisasi dengan sinar UV, b) visualisasi dengan vanillin sulfat (a. pelarut n-Hexane : etil asetat = 1 : 2, b. pelarut n-Hexane : etil asetat = 2 : 1 )
Gambar 6. Hasil uji fehling a. Sampel pakan, b. Fermentasi D. stewartii, c. Fermentasi Hypocreales sp., d. Fermentasi konsorsium.
mampu  membentuk  endapan  berwarna  merah.  Pada  pakan  control  tidak  terdapat  perubahan warna sehingga diduga tidak terdapat sukrosa atau glukosa. Kunz et al. , (2011), menjelaskan bahwa pada  pH  rendah,  glukosa  atau  sukrosa  tidak  mampu  mereduksi  sehingga  tidak  menyebabkan perubahan warna biru pada larutan Cu 2+ .  Fleischer (2019) juga menyatakan bahwa glukosa tidak teroksidasi  menjadi  glukonat  atau  asam  glukonat  oleh  larutan  alkali  senyawa  tembaga  (II). Ngamput dan Herrani (2019), membuktikan bahwa perubahan warna larutan dipengaruhi endapan Cu 2 O  yang  terbentuk  oleh  gula  pereduksi  yang  bereaksi  dengan  reagen  Fehling.  Reaksi  Fehling dapat  terjadi  pada  suhu  ruangan  (Fleischer,  (2019);  Jhon et  al., (2015)).  Sumari et  al. (2018) menjelaskan  bahwa  warna  pada  uji  fehling  akan  semakin  terang  apabila  semakin  banyak  gula reduksi pada larutan tersebut.

## KESIMPULAN
Kesimpulan pada penelitian ini yaitu kapang isolat Hypocreales sp., D. stewartii dan konsorsium memiliki kemampuan memecah karbohidrat kompleks menjadi gula yang lebih sederhana. Kedua kapang  baik  dalam  bentuk  isolat  tunggal  maupun  konsorsium  dapat  diaplikasikan  untuk meningkatkan kualitas pakan udang.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kami tujukan kepada Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Diponegoro  yang  telah  membantu  sebagian  kegiatan  penelitian  dan  publikasi  ini  melalui  dana hibah  penelitan  FPIK  UNDIP  Sumber  dana  selain  APBN  UNDIP  2022  dengan  no.  kontrak: 254/UN7.5.10.2/PP/2022

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson, J.L., Asche, F. & Garlock, T. (2018). Globalization and commoditization: The transformation of the seafood market, Journal of Commodity Markets , 12, 2-8.
Antonio, M.D.C., Carrera, D.C.M., Tapia, J.A.R., Reyes, R.P., Almora, P.M., Cruz, M.S., López, A.M. & Lara, H.L. (2018). Detection of Polysaccharides in Ganoderma lucidum Extracts. Nova Scientia , 10(2), 247 – 257. doi: 10.21640/Ns.V10i21.1538
Ashari,  B.H.,  Wibawa,  B.M.  &  Persada,  S.F.  (2017).  Analisis  Deskriptif  dan  Tabulasi  Silang  pada Konsumen Online Shop di Instagram (Studi Kasus 6 Universitas di Kota Surabaya). Jurnal Sains dan Seni Its , 6 (1), 17 – 21. doi: 10.12962/J23373520.V6i1.21403
Basu, S., Bose, C., Ojha, N., Das, N., Das, J., Pal, M. & Khurana, S. (2015). Evolution of Bacterial and Fungal Growth Media. Bioinformation , 11(4), 182 – 184.
a b c d
Fleischer,  H.  (2019).  The  Iodine  Test  for  Reducing  Sugars – a  Safe,  Quick  and  Easy  Alternative  to Copper(ii) and Silver(i) Based Reagents. World Journal Of Chemical Education , 7(2), 45 – 52. doi: 10.12691/Wjce-7-2-3
Gabriel,  Y.A.,  Aguilar,  C.B.,  Orijel,  R.G.,  Ferrer,  N.M.,  Maass,  S.F.  &  Mata,  G.  (2018).  Genetic Characterization,  Evaluation of  Growth and Production of Biomass  of  Strains from Wild Edible Mushrooms of Lyophyllum of Central Mexico. Brazilian Journal of Microbiology , 49(3), 632 – 640. doi: 10.1016/J.Bjm.2017.12.002
Gallo, M., Formato, A., Ianniello, D., Andolfi, A., Conte, E., Ciaravolo, M., Varchetta, V. & Naviglio, D. (2017).  Supercritical  Fluid  Extraction  of  Pyrethrins  from  Pyrethrum  Flowers  ( Chrysanthemum cinerariifolium ) Compared to Traditional Maceration and Cyclic Pressurization Extraction. Journal of Supercritical Fluid s, 119, 104 – 112. doi: 10.1016/J.Supflu.2016.09.012
Hasnaeni,  Wisdawati,  &  Usman,  S.  (2019).  Pengaruh  Metode  Ekstraksi  Terhadap  Rendemen  dan Kadar  Fenolik  Ekstrak  Tanaman  Kayu  Beta-Beta  ( Lunasia  amara Blanco). Jurnal  Farmasi Galenika , 5 (2), 175 – 182. doi: 10.22487/J24428744.2019.V5.I2.13149
Ibarruri, J., Cebrián, M. & Hernández, I. 2021. Valorisation of Fruit and Vegetable Discards by Fungal Submerged and Solid-State Fermentation for Alternative Feed Ingredients Production. Journal of Environmental Management , 281 (111901), 1 – 8. doi: 10.1016/J.Jenvman.2020.111901
Immaculatejeyasanta, K., Madhanraj, P., Patterson, J. & Panneerselvam, A. 2011. Case study on the extra  cellular  enzyme  of  marine  fungi  associated  with  mangrove  driftwood  of  Muthupet Mangrove , Tamil Nadu , India, J ournal of Pharmacy Research , 4, 1385 – 1387.
Imran, M., Anwar, Z., Irshad, M., Asad, M.J., & Ashfaq, H. (2016). Cellulase production from species of fungi and bacteria from agricultural wastes and its utilization in industry: a review. Advances in Enzyme Research, 4, 44 – 55. doi: 10.4236/aer.2016.42005
Karimi, S., Soofiani, N.M., Mahboubi, A. & Taherzadeh, M.J. (2018). Use of Organicwastes and Industrial By-Products to Produce Filamentous Fungi with Potential as Aqua-Feed Ingredients. Sustainability (Switzerland) , 10(3296), 1 – 19. doi: 10.3390/Su10093296
Kunz,  T.,  Lee,  E.J.,  Schiwek,  V.,  Seewald,  T.  &  Methner,  F.J.  (2011).  Glucose  -  a  reducing  sugar? reducing properties of sugars in beverages and food. Brewing Science, 64(7 – 8), 61 – 67. Mulyadi, I. (2019). Isolasi Dan Karakterisasi Selulosa : Review. Jurnal Saintika UNPAM , 1(2), 177 – 182. Nunes, A.J.P, Dalen, L.T., Leonardi, G. & Burri, L. (2022). Developing sustainable, cost-effective and high-performance shrimp feed formulations containing low fish meal levels, Aquaculture Reports, 27(101422), 1-12.
Ngamput, H.M.A., & Herrani, R. (2019). The Effect of Differentiation of Hydrolysis Time Towards Ethanol Levels  Produced  Through  Ulva  Lactuca  Fermentation. Journal  of  Physics:  Conference  Series , 1241(012010), 1 – 8. doi: 10.1088/1742-6596/1241/1/012010 Raghukumar,  S.  (2017).  Fungi  in  Coastal  and  Oceanic  Marine  Ecosystems:  Marine  Fungi. Springer International Publishing. Springer. doi: 10.1007/978-3-319-54304-8
Rahman, R., Lahming, & Fadilah, R. (2018). Evaluasi Komponen Gizi pada Pakan Udang Fermentasi.
Jurnal Pendidikan Teknologi Pertanian , 4, 101 – 111. doi: 10.26858/Jptp.V4i2.6617
Razie, F., Anas, I., Sutandi, A., Gunarto, L. & Sugiyanta, S. (2011). Aktivitas Enzim Selulase Mikroba yang Diisolasi dari Jerami Padi di Persawahan Pasang Surut di Kalimantan Selatan. Jurnal Ilmu Tanah dan Lingkungan , 13(2), 43 – 48. doi: 10.29244/Jitl.13.2.43-48
Ramesh, K., Natarajan, M., Sridhar, H., Uma Vanitha, M. & Umamaheswari, S. 2014. Anti-vibrio activity of  mangrove  and  mangrove  associates  on  shrimp  pathogen, Vibrio  harveyi VSH5Global Veterinaria, 12, 270 – 276.
Saravanakumar, K., Rajendran, N., Kathiresan, K. & Chen, J. (2016). Bioprospects of Microbial Enzymes from  Mangrove-Associated  Fungi  and  Bacteria.  Advances  In  Food  and  Nutrition  Research. Elsevier Inc. doi: 10.1016/Bs.Afnr.2016.08.003
Shi, J., Zeng, Q., Liu, Y., & Pan, Z. (2012). Alternaria Sp. Mg1, a Resveratrol-Producing Fungus: Isolation, Identification,  and  Optimal  Cultivation  Conditions  for  Resveratrol  Production. Applied Microbiology and Biotechnology , 95 , 369 – 379. doi: 10.1007/S00253-012-4045-9 Siyoto, S. & Sodik, M.A. (2015). Dasar Metodologi Penelitian. Literasi Media Publishing. Spangenberg, B., Poole, C.F., & Weins, C. (2011). Quantitive Thin-Layer Chromatograph: a Practical Survey . Springer Heidelberg Dordrecht London. doi: 10.1007/978-3-642-10729-0
Stahl,  E.  (1966).  Thin-layer  Chromatography:  A  Laboratory  Handbook.  Journal  of  Colloid  and Interface Science. doi: 10.1007/978-3-642-88488-7
Sumari,  Sholihah,  N.,  Aisiyah,  M.M.,  Oktaviani,  I.,  Khilmi,  N.  &  Prakasa,  Y.F.  (2018).  Effectiveness  of Modified  Natural  Zeolite  Through  Acid  Activation  As  a  Catalyst  on  Cellulose  Conversion  Into Glucose from Cotton Assisted by Ultrasonic. Journal of Physics: Conference Series , 1093(012011),
1 – 9. doi: 10.1088/1742-6596/1093/1/012011
Tahe, S.  &  Suwoyo, H. Suryanto. (2011). Pertumbuhan dan Sintasan  Udang Vaname  ( Litopenaeus vannamei ) dengan Kombinasi Pakan Berbeda dalam Wadah Terkontrol. Jurnal Riset Akuakultur, 6(1), 31 – 40.
Trianto, A., Radjasa, O.K, Subagiyo, Purnaweni H., Bahry, M.S., Djamaludin, R, Tjoa, A, Singleton, I., Diele, K. & Evan, D. (2021),  Potential of fungi isolated from a mangrove ecosystem in Northern Sulawesi, Indonesia: Protease, cellulase and anti-microbial capabilities, Biodiversitas, 22(4):1717- 1724.
Utami, A.P., Setyaningsih, R., Pangastuti, A. & Lusi, S.S.A. (2019). Optimasi Produksi Enzim Selulase Dari Jamur  Penicillium  sp.  SLL06  Yang  Diisolasi  Dari  Serasah  Daun  Salak (Salacca  edulis). Prosiding Seminar  Nasional  Masyarakat  Biodiversitas  Indonesia 5(2),  145 – 149. doi:  10.13057/psnmbi/ m050201
Westphal, K.R., Heidelbach, S., Zeuner, E.J., Jensen, M. R., Nielsen, M.E., Vestergaard, S.Z., Bekker, N.
S.,  Skovmark,  J.,  Olesen,  C.K.,  Thomsen,  K.H.,  Niebling,  S.K.,  Sørensen,  J.L.  &  Sondergaard,  T.E.
(2021). The Effects of Different Potato Dextrose Agar Media on Secondary Metabolite Production in Fusarium. International Journal of Food Microbiology , 347(109171), 1 – 17. doi: 10.1016/J.Ijfood micro.2021.109171
Yadav, P. & Majumder, C.B. (2017). Production of Glucose Syrup by The Hydrolysis of Starch Made from Rotten Potato. Journal of Integrated Science and Technology , 5(1): 19 – 22.
Zuliyan,  B.,  Agustono,  &  Satyantini,  W.H.  (2017).  Pengaruh  Substitusi  Kedelai  dengan  Fermentasi Tepung Daun Lamtoro pada Pakan Udang  Vaname  ( Litopenaeus vannamei )  Terhadap  Nilai Kecernaan Protein dan Kecernaan Energi. Journal of Aquaculture and Fish Health , 6(3), 129 – 134.