UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK DAN FRAKSI KARANG LUNAK (Sarcophyton sp.) DARI PERAIRAN PULAU BANGKA LIKUPANG TERHADAP PERTUMBUHAN  MIKROBA Staphylococcus aureus , Salmonella tyhpimurium , DAN Candida albicans
ANTIMICROBIAL ACTIVITY TEST OF EXTRACTS AND FRACTION OF SOFT CORAL (Sarcophyton sp.) FROM BANGKA ISLAND WATERS LIKUPANG AGAINTS MICROBIAL GROWTH OF Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium, AND Candida albicans
Mochamad I. Eda 1) , Defny S Wewengkang 1) , Surya Sumantri 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *m.ilhameda@gmail.com

## ABSTRACT
Sarcophyton sp. is able to produce bioactive materials, the bioactive material contained in Sarcophyton sp., is sarcophine. The purpose of this study is to find out whether the extracts from soft coral Sarcophyton sp., in Bangka Island waters Likupang performed antimicrobial activity against several pathogenic microbes, such as  Staphylococcus  aureus,  Salmonella  typhimurium,  and  Candida  albicans.  Samples  were  extracted  by maceration  method  with  ethanol  solvent  and  the  fractionation  method  used  was  liquid-liquid.The antimicrobial  activity  testing  method  used  in  this  study  is  the  Kirby  and  Bauer  disc  diffusion  method.  The results  obtained  from  the  antimicrobial  activity  test  on  Staphylococcus  aureus,  fractions  of  n-hexane  with result  8.27mm  and  fractions  of  chloroform  8.41mm.  In  Candida  albicans  ,  the  n-hexane  fraction  has  an 8.18mm and the chloroform fraction 8.06. While for Salmonella typhimurium has no activity. The conclusion of this study it was found that only some fractions have antimicrobial activity and categorized as moderate, such  as  the  fractions  of  n-hexane  and  chloroform  that  only  have  moderate  inhibiting  activity  against Stapphylococcus aureus and Candida albicans while for Salmonella typhimurium, the extracts and fractions of Sarcophyton sp., has no activity to the way to inhibit these bacteria.
Keywords :  Sarcophyton  sp.,  Antimicrobial,  Staphylococcus  aureus,  Salmonella  tyhpimurium,  Candida albicans

## ABSTRAK
Sarcophyton sp.  mampu  menghasilkan  bahan  bioaktif,  bahan  bioaktif  yang  terdapat  pada Sarcophyton sp adalah sarcophine .  Tujuan  dari  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengetahui  apakah  ekstrak  dari  Karang  Lunak Sarcophyton sp.,di  Perairan  Pulau  Bangka  Likupang  memiliki  aktivitas  antimikroba  terhadap  beberapa mikroba  patogen Staphylococcus  aureus,  Salmonella  typhi ,  dan Candida  albicans .  Sampel  diekstraksi dengan metode maserasi dengan pelarut etanol dan metode fraksinasi yang digunakan yaitu fraksinasi cair – cair. Metode pengujian aktivitas antimikroba yang digunakan dalam penelitian ini yaitu metode difusi agar ( disc  diffusion  Kirby  and  Bauer ).  Hasil  yang  didapat  dari  uji  aktivitas  antimikroba  pada  bakteri Staphylococcus aureus , fraksi n-heksan mendapatkan hasil 8.27mm dan pada fraksi kloroform 8.41mm. Pada jamur  Candida  albicans,  fraksi  n-heksan  mendapatkan  hasil  8.18mm  dan  pada  fraksi  kloroform  8.06mm, sedangkan  pada  bakteri  Salmonella  typhi  tidak  memiliki  aktivitas.  Kesimpulan  dari  penelitian  ini,  hanya sebagian fraksi yang memiliki aktivitas untuk penghambat antimikroba dengan dikategorikan sedang, seperti pada  fraksi  n-heksan  dan  klorofom  pada  bakteri Stapphylococcus  aureus dan  jamur Candida  albicans , sementara  untuk  bakteri Salmonella  tyhpi ekstrak  dan  fraksi  sampel  Karang  Lunak Sarcophyton  sp .  tidak memiliki aktivitas untuk menghambat bakteri tersebut.
Kata  Kunci : Sarcophyton sp.,  antimikroba, Staphylococcus  aureus , Salmonella  tyhpimurium , Candida albicans

## PENDAHULUAN
Sarcophyton sp.  adalah  salah  satu jenis karang lunak yang mampu menghasilkan bahan  bioaktif.  Bahan  bioaktif  yang  terdapat pada Sarcophyton sp.  adalah sarcophine . Namun  masalah  serius  dalam  pengembangan senyawa  bioaktif  dari  karang  lunak  adalah masalah  suplai,  karena  untuk  mendapatkan sejumlah  relatif  kecil  senyawa  bioaktif, diperlukan  sejumlah  besar  karang  lunak (Huda,  2011).  Senyawa  kimia  aktif  yang terdapat  pada  karang  lunak Sarcophyton sp., menunjukkan  aktivitas  sebagai  antimikroba, antibakteri, anti fungi, anti tumor, neurotoksik,  dan  anti  inflamantori  yang bermanfaat  bagi  industri  farmasi  (Sawant, 2006).
Antimikroba merupakan senyawa alami,  semi  sintetik  yang  menghalangi  atau menghambat  organisme    bersifat  komensal atau patogenik. Dengan sedikit atau tidak ada kerugian pada inangnya. Antimikroba diklasifikasikan  berdasarkan  spektrumnya, mekanisme  aksi,  strain  penghasil,  cara biosintesis,  maupun  struktur  biokimianya (Brooks et al ., 2005).
Staphylococcus  aureus merupakan bakteri Gram positif berbentuk bulat, tersusun dalam kelompok-kelompok yang tidak teratur seperti  buah  anggur,  fakultatif  anaerob,  tidak membentuk spora dan tidak bergerak. Bakteri ini  tumbuh  pada  suhu  optimum  37  ºC,  tetapi membentuk  pigmen  paling  baik  pada  suhu kamar  (20-25  ºC).  Koloni  pada  perbenihan padat  berwarna  abu-abu  sampai  kuning keemasan, berbentuk bundar, halus, menonjol dan berkilau (Brooks et al ., 1995).
Salmonella  typhi merupakan  bakteri yang  berbentuk  batang,  tidak  berspora, memiliki ukuran lebar antara 0,7 - 1,5 µm dan panjang  2,0  -  5,0  µm,  besar  koloni  rata-rata 24  mm,  dominan  bergerak  dengan  flagel peritrik  dan  termasuk  bakteri  gram  negatif (Batt & Tortorello, 2014).
Candida merupakan  jamur  yang mempunyai kemampuan untuk tumbuh dalam dua  bentuk  yang  berbeda  yaitu blastopore ( blasroconidia )  adalah  bentuk  fenotip  yang bertanggung  jawab  dalam  tranmisi  dan penyebaran,  serta germinated  yeast .  Oleh
karena  itu Candida disebut  jamur  dimorfik (Tortora,  2001).  Perbedaan  ini  tergantung pada  faktor  eksternal  yang  mempengaruhi selama  proses  pertumbuhan  berlangsung. Bentuk fenotip dapat menginvasi jaringan dan menimbulkan  simptomatik  karena  dapat menghasilkan mycelia (Wibowo, 2010).
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji aktivitas  antimikroba  ekstrak  dan  fraksi karang  lunak Sarcophyton sp. yang  diambil dari Perairan Pulau Bangka Likupang  dengan menggunakan  metode  difusi  agar  ( disc  diffu sion Kirby and Bauer ).

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November  2019  -  Juni  2020  di  laboratorium penelitian  lanjutan  Program  studi  Farmasi, Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi.

## Bentuk Penelitian
Bentuk penelitian ini ialah eksperimen laboratorium  yang  akan  menguji  komponen yang diekstrak dari Karang Lunak Sarcophyton sp. , yang diperoleh dari perairan Pulau Bangka Likupang Kabupaten Minahasa Utara.

## Alat dan Bahan Alat
Alat  yang digunakan dalam penelitian ini  yaitu  masker,  sarung  tangan,  pisau, gunting, telenan,scuba diving,kamera, kantong  plastik,  alat-alat  gelas, rotary evaporator ,  timbangan  analitik,  wadah  kaca, cawan  petri,  autoklaf,  pinset,  pembakar spritus,  magnetic  steerer,  pipet  tetes,corong pisah,  batang  pengaduk, Laminar  Air  Flow , lemari  pendingin,  incubator,  kertas  cakram, desikator, mikropipet, jangka sorong (kaliper),  label,  spidol  permanen,  tissue, aluminium foil, kertas saring, kapas

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu Karang  Lunak Sarcophyton sp.,  mikroba  uji Staphylococcus aureus , Salmonella typhi , dan Candida    albicans ,  etanol  96%,  akuades,
metanol,  n-heksan, kloroform, nutrient  broth , nutrien agar, potato dextrose agar , Kloramfenikol.

## Prosedur Penelitian Pengambilan dan Preparasi Sampel
Sampel  Karang  Lunak Sarcophyton sp.  diambil  di  perairan  Pulau  Bangka Likupang Kabupaten
Minahasa Utara menggunakan  alat  bantu  masker,  tabung udara,  snorkel  dan  fins.  Sampel  difoto kemudian  diambil  dan  dimasukan  kedalam kantong  plastik.  Kemudian  sampel  dirajang atau  dipotong  kecil-kecil  dengan  ukuran  1 cm²  dan  dimasukan  kedalam  botol  lalu diekstraksi  dengan  metode  maserasi  dengan menggunakan  etanol  96%  lalu  diberi  label serta  nomor  sampel,  kemudian  langsung dibawa  ke  Laboratorium  Fitokimia  dan Farmakognosi Program Studi Farmasi Universitas Sam Ratulangi.

## Ekstraksi dan Fraksinasi Ekstraksi
Ekstrak  Karang  Lunak Sarcophyton sp.,  diekstraksi  dengan  menggunakan  cara maserasi. Sampel dipotong kecil-kecil dengan ukuran 1 cm² lalu dimasukkan ke dalam botol dan  direndam  dengan  larutan  etanol  96% sampai  sampel  terendam  secara  keseluruhan dan  dibiarkan  selama  24  jam.  Sampel  yang direndam  disaring  dengan  menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat 1 dan debris 1.  Debris  1  direndam  dengan  larutan  etanol 96% sampai sampel terendam secara keseluruhan  kemudian  dibiarkan  selama  24 jam.  Sampel  tersebut  disaring  menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat 2 dan debris 2. Debris 2 kemudian direndam dalam larutan etanol  96%  sampai  sampel  terendam  secara keseluruhan  dan  dibiarkan  selama  24  jam, sampel tersebut  disaring menggunakan kertas saring  menghasilkan  filtrat  3  dan  debris  3. Filtrat  1,  2  dan  3  dicampur  menjadi  satu kemudian disaring, lalu dievaporasi menggunakan rotary  evaporator sehingga didapat ekstrak kasar Karang Lunak Sarcophyton sp., kemudian ditimbang menggunakan  timbangan  analitik,  diperoleh ekstrak  etanol  sampel  sebanyak  95  g  .
Selanjutnya  ekstrak  etanol  Karang  Lunak Sarcophyton sp.,  digunakan  dalam  fraksinasi dan pengujian antimikroba.

## Fraksinasi
Ekstrak etanol Karang Lunak
Sarcophyton  sp.,  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer  kemudian  dilarutkan  dengan metanol  80%  sebanyak  100  ml.  Setelah sampel  larut,  sampel  dimasukkan  ke  dalam corong  pisah  dan  ditambahkan  pelarut  n- heksan sebanyak 100 mL. Setelah itu dikocok dalam corong pisah sampai homogen. Sampel dibiarkan hingga membentuk lapisan metanol dan  lapisan  n-heksan.  Masing-masing  lapisan metanol  dan  lapisan  n-heksan  ditampung  di dalam wadah yang berbeda. Lapisan n-heksan selanjutnya  dievaporasi  menggunakan  rotary evaporator  hingga  kering,  lalu  ditimbang dengan  timbangan  analitik  dan  diperoleh fraksi  n-heksan.  Selanjutnya  lapisan  metanol ditambahkan  dengan  akuades  100  ml, kemudian  dipartisi  dengan  pelarut  kloroform menggunakan  perbandingan  1:1  v/v  setelah itu  dikocok  dalam  corong  pisah  hingga homogen.  Lapisan  metanol  dibiarkan  hingga membentuk dua lapisan yaitu lapisan metanol dan lapisan kloroform. Masing-masing lapisan  metanol  dan  lapisan  kloroform ditampung  ke  dalam  wadah  yang  berbeda. Lapisan  kloroform  dievaporasi  menggunakan rotary evaporator hingga kering lalu ditimbang  dengan  timbangan  analitik  dan diperoleh  fraksi  kloroform.  Lapisan  metanol yang  ditampung  pada  wadah  lain  dievaporasi menggunakan rotary evaporator hingga kering lalu ditimbang dengan timbangan analitik dan diperoleh  fraksi  metanol.  Ketiga  fraksi  yang diperoleh  akan  digunakan  dalam  pengujian antimikroba.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian aktivitas antimikroba ini disterilkan terlebih  dahulu.  Alat-alat  gelas  disterilkan dengan  autoklaf  pada  suhu  121˚C  selama  15 menit,  pinset  dibakar  dengan  pembakaran diatas  api  langsung  dan  media  disterilkan diautoklaf  pada  suhu  121˚C  selama  15  menit (Mpila, 2012).

## Pembuatan Media Cair
Bahan-bahan yang
digunakan ditimbang  seperti  pepton  0,5  gram,  beef extract 0,3  gram,  NaCl  0,3 gram  dimasukkan dalam  erlenmeyer  lalu  ditambahkan  aquades 100  ml.  Erlenmeyer  yang  telah  berisikan bahan  diaduk  hingga  homogen  lalu  ditutup dengan  kertas  alumunium  foil,  kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf untuk disterilkan pada suhu  121 o C selama 15 menit ( Pasodung et al., 2018).

## Pembuatan Media Uji
Pepton 0,5 g, beef extract 0,3 g, NaCl 0,3  g  ,  agar  1,5  g,dan  akuades  sebanyak  100 ml  diaduk  sampai  homogen  kemudian disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu  121˚C selama  15  menit  dan  setelah  itu  didinginkan. Setelah dingin, media cair B1 di tutup dengan aluminium foil (Dwijendra et a l, 2014).

## Pembuatan Kontrol Positif dan Negatif
Kontrol positif dalam pengujian aktivitas antimikroba ini menggunakan kloramfenikol  paper  disc.  Kontrol  negatif yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu menggunakan  pelarut  metanol,  dengan  cara membuat  larutan  stok  metanol  dengan mengambil  sebanyak  200  μL  metanol kemudian  di  totolkan  pada  paper  disc (Lalamentik, 2017).

## Pembuatan Larutan Uji
Dibuat  larutan  uji  dengan  cara ditimbang  ekstrak  kasar  karang  lunak sebanyak  1  mg,  kemudian  dilarutkan  dalam 200  μL  metanol,  sehingga  menghasilkan konsentrasi larutan uji sebesar 250 μg/50 μL. Perlakuan yang sama dilakukan pada fraksi n- heksan,  fraksi  kloroform  dan  fraksi  metanol (Ortez, 2005).

## Kultur Mikroba
Bakteri  yang  akan  digunakan  yaitu Staphylococcus  aureus  dan  Salmonella  tyhpi dan Candida  albicans. Bakteri  dan  jamur
yang  akan  dikultur  diambil  dari  lemari pendingin kemudian dipipet sebanyak 100 μL kedalam  masing-masing  tabung  reaksi  berisi media cair sebanyak 1 mL, kemudian ditutup dengan  menggunakan  aluminium  foil  dan diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37˚C selama 24 jam (Ortez, 2005).

## Pengujian Aktivitas Antimikroba
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  agar  (disc diffusion  Kirby  and  Bauer).  Pada  pengujian aktivitas antimikroba ini, cakram (paper disc) yang digunakan berukuran 6 mm dengan daya serap  50  μL  tiap  cakram.  Sebanyak  300  μL mikroba  yang  telah  dikultur,  dipipet  dan diinokulasi pada 30 ml media agar lalu diaduk hingga homogen dan kemudian dituangkan ke dalam  cawan  petri  dan  tunggu  sampai  media agar  mengeras.  Kemudian,  larutan  uji  yang telah  disiapkan  ditotolkan  pada  masing- masing cakram dengan menggunakan mikropipet.  Setelah  agar  mengeras,  kertas cakram  yang  telah  ditotolkan  sampel  karang lunak Sarcophyton  sp. kontrol  positif  dan kontrol  negatif  diletakkan  ke  dalam  cawan petri dengan menggunakan pinset. Selanjutnya,  cawan  petri  diberi  label  dan diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37 0 C selama 1 x 24 Jam (Ortez, 2005).

## Pengamatan  dan  Pengukuran  Diameter Zona Hambat
Pengamatan  dilakukan  setelah  24  jam masa inkubasi. Daerah pada sekitaran cakram menunjukkan  kepekaan  bakteri  terhadap antibiotik  atau  bahan  antibakteri  yang digunakan sebagai bahan uji yang dinyatakan dengan diameter zona hambat/bunuh. Diameter  zona  hambat  diukur  dalam  satuan millimeter (mm) menggunakan jangka sorong dengan  cara  diukur  diameter  total  zona bening/keruh  cakram.  Kemudian  diameter zona  hambat  tersebut  dikategorikan  kekuatan daya anti bakterinya berdasarkan penggolongan (Davis dan Stout, 1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Tabel 1. Randemen fraksi karang lunak Sarcophyton sp. No Sampel Berat (g) Rendemen (%) Warna 1. EE 12,57 0,13 hitam 2. FH 0,55 0,27 hijau 3. FK 0,20 0,10 Coklat 4. FM 0,80 0,40 kuning
Tabel  2. Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  ekstrak  dan  fraksi Sarcophyton  sp. terhadap Stapphylococcus aureus, Salmonella thypimurium dan Candida albicans EE FH FK FM C+ C- - 7,79 8,24 - Sa - 8,50 8,86 - 19,10 - 8,53 8,14 - Σ - 24,82 25,24 - Rata - rata - 8,27 8,41 - - 8,26 8,10 - Ca - 8,18 7,81 - 15,50 - 8,10 8,28 - Σ - 24,54 24,19 - Rata - rata - 8,18 8,06 - - - - - St - - - - 19,62 - - - - Σ - - - - Rata - rata - - - - Keterangan : EE : Ekstrak Etanol FH : Fraksi n-Heksan FK       : Fraksi Kloroform      FM      : Fraksi metanol C+ : Control Positif C- : Control Negatif

## Determinasi Sampel
Determinasi  karang  lunak Sarcophyton sp.,  dilakukan  di  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  Program  Studi Farmasi
Universitas Sam Ratulangi. Determinasi  dilakukan  agar  mengetahui sampel yang di ambil dan dilakukan
penelitian  adalah  sampel  yang  sesuai  yaitu karang lunak Sarcophyton sp .

## Ekstraksi dan Fraksinasi
Sacophyton sp.  di  ekstraksi  dengan menggunakan  metode  maserasi.  Metode  ini digunakan  karena  peralatan  dan  pengerjaan
yang  sederhana  dan  mudah  dilakukan. Perendaman  sampel dalam  maserasi  dapat membuat  dinding  sel  dari  sampel  pecah  dan membuat  senyawa-senyawa  yang  ada  dalam sampel  yang terdapat  dalam sitoplasma dapat ditarik  oleh  pelarut.  Dinding  sel  pecah  di karenakan  adanya  perbedaan  konsentrasi  di dalam  dan  di  luar  sel.  Konsentrasi  di  luar  sel lebih  tinggi  dibandingkan  konsentrasi  di dalam  sel  yang  rendah  sehingga  dinding  sel pecah karena tidak bisa menahan tekanan dari perbedaan konsentrasi (Harborne, 1987).
Maserasi  sampel  dilakukan  dengan pelarut  etanol  96  %,  karena  pelarut  ini memiliki  kemampuan  penyaring  dengan tingkat  popularitas  yang  lebar  mulai  dari senyawa  polar,  semi  polar  dan  non  polar. Proses  ekstraksi  dilakukan  selama  3x24  jam dan  setiap  24  jam  ekstrak  disaring  kemudian dimaserasi  kembali  menggunakan  pelarut yang  baru  hal  ini  disebut  dengan  remaserasi. Remaserasi  dilakukan  agar  senyawa  aktif dalam  sampel  dapat  ditarik  secara  optimum (Huliselan et  al ,  2015).  Hasil  ekstrak  Karang lunak Sarcophyton  sp. selanjutnya  diuapkan menggunakan  oven  dengan  suhu  40 o C, tujuannya  agar  air  dan  pelarut  yang  tersisa dalam  ekstrak  akan  menguap,  dan  juga bertujuan  untuk  tetap  menjaga  senyawa bioaktif  yang  terdapat  dalam  filtrat  karena biasanya  senyawa-senyawa  bioaktif  tidak tahan  terhadap  suhu  tinggi  (Kowal et  al ., 2018).
Hasil  ekstrak  kasar  Karang  Lunak Sarcophyton sp. yang telah diperoleh selanjutnya  di  lanjutkan  ke  tahap  fraksinasi. Fraksinasi  yang  digunakan  yaitu  fraksinasi cair  –  cair  berdasarkan  perbedaan  tingkat kepolaran  dari  setiap  pelarut,  yaitu  dimulai dari pelarut n-heksan, kloroform dan metanol. Pada  proses fraksinasi dilakukan pengocokan sebelum  didapat  2  lapisan  pelarut  hal  ini bertujuan agar kandungan kimia yang terdapat dalam  Karang  Lunak Sarcophyton sp. secara selektif  dapat  ditarik  oleh  pelarut  yang digunakan.  Masing–  masing  pelarut  akan memisahkan  kelompok  kandungan  senyawa berdasarkan  tingkat  kepolaran,  ekstrak  disari dengan  pelarut  yang  non  polar,  kemudian disari  dengan  pelarut  yang  semi  polar  dan
pelarut  polar  (Wewengkang et  al .,  2014). Pada  saat  fraksinasi  dengan  pelarut-  pelarut yang  berbeda  kepolaran,  akan  terbentuk  2 lapisan,  dimana  pelarut  dengan  masa  jenis yang lebih besar akan berada di bagian bawah dan  pelarut  dengan  masa  jenis  kecil  akan berada  di  lapisan  atas.  Kemudian  fraksi  yang diperoleh  di  uapkan  dengan  oven  pada  suhu 40 o C  dan  kemudian  digunakan  untuk  uji aktivitas antimikroba.
Dari  masing-masing  rendemen  ini disebabkan  oleh  berbagai  perbedaan  jenis pelarut  yang  dipakai.  Pelarut  yang  berbeda akan  melarutkan  senyawa-senyawa  yang berbeda  tergantung  berdasarkan  tingkan kepolaran.  Oleh  karena  itu,  jumlah  ekstrak yang  dihasilkan  tergantung  dari  jenis  pelarut yang  pakai  (Mujipradhana et  al. ,  2018). Perbedaan  ini  disebabkan  karena  perbedaan jenis  pelarut  yang  digunakan,  dimana  pelarut yang berbeda akan melarutkan senyawa  yang berbeda,  sehingga  jumlah  fraksi  pelarut metanol memiliki rendemen paling tinggi. Hal ini menunjukan bahwa dalam senyawa karang lunak  S arcophyton sp.,  terdapat  banyak senyawa yang bersifat polar.

## Uji Aktivitas Antimikroba
Pengujian aktivitas antimikroba dilakukan  dengan  menggunakan  metode difusi  agar  (difusi  Kirby-Bauer  yang  telah dimodifikasi).  Pengujian  dilakukan  terhadap bakteri Staphylococcus aureus yang mewakili bakteri  Gram  positif, Salmonella  tyhpi mewakili  bakteri  Gram  negatif dan Candida albicans yang  mewakili  Jamur.  Metode  ini dipilih karena dapat  digunakan untuk  melihat sensitivitas  berbagai  jenis  mikroba  terhadap antimikroba pada konsentrasi tertentu (Akhyar, 2010). Pengujian terhadap tiga jenis mikroba  ini  bertujuan  untuk  mengetahui apakah  ekstrak  dan  fraksi  dari  Karang  Lunak Sarcophyton sp. memiliki aktivitas antimikroba serta untuk mengetahui spektrum aktivitas  antimikroba  dari  Karang  Lunak Sarcophyton  sp. ,  apakah  memiliki  spektrum luas  yang  dapat  membunuh  banyak  jenis mikroba atau memiliki spektrum sempit  yang hanya  dapat  membunuh  salah  satu  jenis mikroba saja.
Berdasarkan hasil yang diperoleh pada pengujian  ini  adalah  zona  hambat  yang disekeliling  cakram  berukuran  6  mm  (  papar disc)  yang ditandai  oleh  adanya zona bening, hal ini menunjukan adanya kepekaan mikroba terhadap ekstrak atau fraksi dari karang lunak Sarcophyton sp.,  dan  anti  biotik  yang digunakan  sebagai  kontrol  positif.  Dilakukan pengamatan setelah diinkubasi pada suhu 37˚ C  selama  1  x  24  jam  dengan  3  kali pengulangan  pada  masing-masing  mikroba, pengulangan  dilakukan  untuk  mengakuratkan hasil  yang  diperoleh  (Mujipradana  et  al, 2018).
Untuk sebegai pembanding menggunakan  kontrol  positif  dan  negatif. Pada  pengujian  ini  digunakan  control  positif yaitu  kloramfenikol  dengan  spectrum  kerja yang  luas.  Penggunaan  kontrol  positif berfungsi sebagai kontrol dari zat uji, dengan membandingkan  diameter  daerah  hambat yang  terbentuk  (Dwijendra et  al ,  2014). Kontrol negatif yang  digunakan yaitu metanol.  Kontrol  negatif  digunakan  untuk mengetahui  ada  atau  tidaknya  pengaruh terhadap  pertumbuhan  mikroba  uji,  sehingga dapat diketahui bahwa aktivitas yang ditunjukan  oleh  ekstrak  atau  fraksi  yaitu  zat yang  ada  dalam  sampel  bukan  berasal  dari pelarut yang digunakan.
Kriteria yang digunakan dalam penelitian  ini  untuk  menggolongkan  daya hambat dari kontrol uji dan bahan uji Karang Lunak Sarcophyton sp. menggunkana kriteria kekuatan antibakteri menurut Davis dan Stout yaitu dapat dilihat pada tabel 3 dibawah ini:
Tabel 3. Kategori Kekuatan Daya Antimikroba
Berdasarkan hasil yang diperoleh pada tabel  2,  pada  ekstrak  etanol  sampel  Karang Lunak Sarcophyton  sp. terhadap  bakteri Stapphylococcus  aureus,  Salmonella  tyhpi, dan jamur Candida  albicans tidak  ada  zona bening,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada ekstrak  etanol  sama  sekali  tidak  ada  aktivitas untuk menghambat antimikroba.
Pada  Fraksi  n-heksan  hasil  yang  di dapat zona bening yang terbentuk hanya pada bakteri Stapphylococcus  aureus dengan  daya hambat yang dikategorikan sedang yaitu 8,27, dan  jamur Candida  albicans dimana  daya hambatnya  di  kategorikan  sedang  yaitu  8,18. Sementara  untuk  bakteri Salmonella  tyhpi, menunjukkan tidak adanya zona bening sama sekali,  hal  ini  menunjukkan  fraksi  n-heksan pada  bakteri Salmonella  tyhpi tidak  ada aktivitas menghambat antimikroba.
Pada fraksi  klorofom  hasil  yang didapat zona bening yang terbentuk hanya ada pada  bakteri Stapphylococcus  aureus dengan daya hambat yang dikategorikan sedang yaitu 8,41  dan  jamur Candida  albicans dimana daya  hambatnya  di  kategorikan  sedang  yaitu 8,06.  Sementara  untuk  bakteri Salmonella tyhpi, menunjukkan tidak adanya zona bening sama  sekali,  hal  ini  menunjukkan  fraksi klorofom  pada bakteri Salmonella tyhpi tidak ada aktivitas menghambat antimikroba.
Pada  fraksi  metanol  sampel  Karang Lunak Sarcophyton  sp. terhadap  bakteri Stapphylococcus  aureus  ,  Salmonella  tyhpi, dan jamur Candida  albicans tidak  ada  zona bening,  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada fraksi metanol sama sekali tidak ada aktivitas untuk menghambat antimikroba. Hasil  yang  didapat  dari  uji  aktivitas antimikroba pada mikroba uji
Stapphylococcus  aureus,  Salmonella  tyhpi, dan Candida albicans, diperoleh bahwa hanya sebagian fraksi yang memiliki aktivitas untuk penghambat  antimikroba  dengan  dikategori kan  sedang,  seperti  pada  fraksi  n  heksan  dan klorofom  yang  hanya  memiliki  aktivitas menghambat  yang  sedang  pada  bakteri Stapphylococcus  aureus dan  jamur Candida albicans Sementara  untuk  bakteri Salmonella tyhpi ekstrak dan fraksi sampel Karang Lunak
Diameter Zona Bening (mm) Kategori >20 Sangat Kuat 10 - 20 Kuat 5 - 10 Sedang <5 Lemah
Sarcophyton  sp. tidak  memiliki  aktivitas untuk menghambat bakteri tersebut.

## KESIMPULAN
Menurut hasil penelitian sampel Karang  Lunak Sarcophyton  sp. Memiliki aktivitas  antimikroba  yang  tergolong  sedang pada  fraksi  n  heksan  dan  fraksi  klorofom terhadap  bakteri Stapphylococcus  aureus dan jamur Candida  albicans Sementara  untuk bakteri Salmonella  tyhpi ekstrak  dan  fraksi sampel  Karang  Lunak Sarcophyton  sp. tidak memiliki aktivitas antimikroba.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap  Karang  Lunak Sarcophyton  sp. Dengan metode pengujian berbeda dan bahan uji seperti bakteri dan jamur lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Akhyar,  2010. Uji Daya Hambat dan Analisis KLT  Bioautografi  Ekstrak  Akar  dan Buah  Bakau  ( Rhizophora  stylosa Griff. )  terhadap  Vibrio  harveyi. [Skripsi]. Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin Makassar.
Batt,  C.  A.,  &  M.  L.  Tortorello.  2014.
Encyclopedia  Food  Microbiology  II . Elsevier, USA.
Brooks,  G.  F.,  J.  S.  Butel.,  &  S.  A.  Morse  . 1995. Mikrobiologi Kedokteran Jawetz,  Melnick, dan  Adelberg. ed. 20.  Edi  Nugroho  (alih  bahasa),1996, penerbit  Buku  Kedokteran,  EGC. Jakarta, Indonesia.
Brooks,  G.  F.,  J.  S.  Butel.,  &  S.  A.  Morse. 2005.  Jawetz,  Melnick,  Adelberg, Mikrobiologi  Kedokteran ,  Edisi  23, diterjemahkan  Hartanto,  H.,  Jakarta, Penerbit Buku Kedokteran, EGC.
David, W. W., & T.R. Stout. 1971. Disc plate method  of  microbiological  assay. Journal  of  microbiology 22 :  659- 665.
Dwijendra,  I.  M.,  D.  S.  Wewengkang.,  &  F. Wehantou.  2014.  Aktivitas  Anti bakteri  dan  Karakterisasi  Senyawa Fraksi  Spons Lamellodysidea  herba cea yang  diperoleh  dari  Teluk Manado. Pharmacon . 3(4): 1-9. Harbone,  J.B.  1987.  Metode  Fitokimia Penuntun Modern Menganalisis
Tumbuhan  Edisi  Kedua.  Diterjemah kan  oleh  Kosashi  Padmawinata  dan Iwang Soedira,  ITB Press, Bandung.
Huda,  C.,  &  M.  Salni.  2011.  Penapisan Aktifitas  Antibakteri  dan  Bakteri Yang  Berasosiasi  Dengan  Karang Lunak Sarcophyton sp. Jurnal
Program Studi Ilmu Kelautan . Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Sriwijaya.
Huliselan, Y. M., M. R. J. Runtuwene., & D. S.  Wewengkang.  2015.  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanol,  Etil, Asetat,  dan  n-heksan  dari  Daun Sesewanua  ( Clerodendron  squama tum  Vahl .). Jurnal  Ilmiah  Farmasi 4(3) : 155-163.
Kowal,  A.,  A.  Esther.,  K.  Nickson.,  K. Kurniati.,  Henky.,  &  M.  Deiske. 2018.  Potensi  antibakteri  karang lunak lobophytum sp.  Dari  perairan pangalisang  pulau  bunaken  terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus  aureus . Jurnal Ilmiah Platax . 6(2)
Lalamentik,  G.  2017. Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Karang  Lunak  Klyxum  sp. yang  Diperoleh  dari  Teluk  Manado . [ Skripsi ].  Program  Studi  Farmasi FMIPA  Universitas  Sam  Ratulangi, Manado.
Mpila,  D.  A.,  Fatimawali  .,&  I.  W.  Wiyono.
2012.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak      Etanol  Daun  Mayana
(Coleus atropurpureus benth)
Terhada p  Staphylococcus  aureus, Escherichia  coli dan Pseudomas aeruginosa Secara Invitro . Pharmacon . 1(1) : 13-21.
Mujipradana,  V.N.,  D.  S.  Wewengksng.,  &
E. Suryanto. 2018. Aktivitas Antimikroba  dari  Ekstrak  Ascidian
Herdmania  momus pada  Mikroba Patogen  Manusia. Pharmacon . 7(3): 338-347.
Ortez,  J.  H.  2005.  Disk  Diffusion  testing  in manual  of  antimicrobial  susceptib ility.
Pasodung,  P.A.,.  F.  Losung.,  D.E.  Angkow., R.  Lintang.,  &  D.  A.  Sumilat.  2018. Uji  Aktivitas  Antibakteri  Spons Plakirtis  Sp.  Yang  Dikoleksi  Dari Perairan  Bunaken  . Jurnal  Pesisir Dan Laut Tropis . 1(1) : 44-51.
Sawant,  S.,  D.  Youssef.,  A.  Mayer,.  P. Sylvester., V. Wall., M. Arant., & K. El-Sayed.  2006.  Anticancer  And Anti-Inflamantory  Sulphur-Containi ng  Semisynthetic  Derivatives  Of Sarcophine . Chem,  Pharm,  Bull,
54(8) : 1119-1123.
Tortora,  G.  J.,  B.  R.  Funke.,  &  C.  L  Case. 2001.  Microbiology  :  An  Introduc tion,  7th  edition,  San  Fransisco  : Benjamin Cummings, p. 125 .
Wewengkang,  D.S.,  D.  A.  Sumilat.,    &  H. Rotinsulu.  2014.  Karakterisasi  dan Bioaktif  Antibakteri  Senyawa  Spons Haliclona sp.  dari  Teluk  Manado. Jurnal  LPPM  Bidang  Sains  dan Teknologi . 1(1)
Wibowo,  S.  2010. Ilmu  Pangan  Nutrisi  dan Mikrobiologi  edisi  ke-2 .  Rajawali Press, Jakarta