## Pengaruh Obat Nyamuk Bakar dan Semprot Terhadap Motilitas Sperma Tikus (Rattus norvegicus)
Silvani Permatasari 1* , Agnes Frethernety 2 Herlina Eka Shinta 3
1,2,3 Fakultas Kedokteran Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia
*Korespondensi penulis: Silvani Permatasari, Fakultas Kedokteran Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia, email. silvani.permatasari@med.upr.ac.id

## ABSTRAK
Gigitan  nyamuk  dapat  membahayakan  bagi  kesehatan  tubuh. S alah  satu  upaya untuk memberantas nyamuk  dalam  kehidupan  sehari-hari  yang  umum  digunakan  adalah  dengan  menggunakan  obat nyamuk. Obat  nyamuk  terbanyak  yang  dipakai  di  masyarakat  Indonesia  adalah  jenis  obat  nyamuk bakar  dan  semprot.  Kandungan  dalam  obat  nyamuk  yaitu  berbahan  aktif  pyrethroid,  yang  memiliki efek  bila  dalam  jangka  waktu  lama  digunakan  dapat  menganggu  kesehatan  tubuh.  Salah  satunya gangguan  terhadap  reproduksi  pada  pria.  Oleh  sebab  itu  tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui pengaruh  obat  nyamuk  bakar  dan  semprot  terhadap  motilitas  sperma  tikus  galur  wistar.  Penelitian eksperimental  in  vivo  ini  menggunakan  desain post-test  randomized  control  design dengan menggunakan  5  kelompok  tikus.  Kelompok  ini  terbagi  menjadi  kontrol,  paparan  obat  nyamuk semprot 5 mL/hari selama 20 hari, paparan obat nyamuk semprot 5 mL/hari selama 35 hari, paparan obat nyamuk bakar 4,5 gr/hari selama 20 hari, paparan obat nyamuk bakar 4,5 gr/hari selama 20 hari. Hasil  penelitian  secara  mikroskopis  menunjukkan  penurunan  motilitas  bermakna  (p<0,05)  pada kelompok  tikus  yang  diberi  obat  nyamuk  semprot  dan  bakar  sejak  dipaparkan  20  hari  lamanya  dan penurunan paling signifikan pada obat nyamuk bakar 35 hari. Obat nyamuk semprot dan bakar yang digunakan rutin dan dalam waktu lama dapat menurunkan motilitas sperma.
Kata kunci : obat nyamuk semprot, obat nyamuk bakar, motilitas, sperma, pyrethroid

## ABSTRACT
Mosquito bites can be harmful to our health. One effort to eradicate mosquitoes in daily is commonly used  mosquito  repellent.  The  more  mosquitos  repellent  used  in  Indonesian  society  is  a  type  of mosquito coil and spray. The content in mosquito repellent is that it is made from active pyrethroid, which  has  an  effect  if  used  for  a  long  time  can  disrupt  the  health  of  the  body.  One  of  them  is interference with reproduction in men. Therefore the purpose of this study was to determine the effect of  mosquito  coils  and  spray  on  the  sperm  motility  of  Wistar  strain  rats.  This  in  vivo  experimental study uses a post-test randomized control design using 5 groups of mice. This group was divided into controls, exposure to mosquito spray 5 mL / day for 20 days, exposure to  mosquito spray 5 mL / day for 35 days, exposure to mosquito coils 4.5 gr / day for 20 days, exposure to mosquito coil 4, 5 gr / day for 20 days. Microscopic results showed a statistically decrease in motility (p <0.05) in the group of mice given exposed for 20 days by mosquito spray and coils and significantly decrease in 35-day mosquito coils. Routine and prolonged use of mosquito coil and spray can reduce the sperm motility.
Keywords : mosquito coils, mosquito spray, motility, sperm, pyrethroid

## Pendahuluan
Masyarakat  Indonesia  menggunakan  obat nyamuk  untuk  mengatasi  gangguan  nyamuk  sehari- hari.  Obat  nyamuk  dipublikasikan  di  media  massa sangat mudah untuk digunakan dan bermanfaat untuk membunuh  dan  mengusir  nyamuk.  Gigitan  nyamuk dapat  menimbulkan  banyak  masalah  kesehatan  yang membahayakan  seperti  demam  berdarah  dengue  dan malaria. 1,2
Beragam  jenis  obat  nyamuk  diantaranya obat nyamuk semprot, bakar, dan elektrik.
Penggunaan obat nyamuk paling  banyak  adalah  obat nyamuk bakar yang biasa digunakan di pedesaan dan kota,  kemudian  terbanyak  berikutnya  adalah  obat nyamuk  semprot  yang  banyak  dipilih  masyarakat. 3 Banyak  kelebihan  produk  obat  nyamuk  yang ditawarkan  seperti  efektif  mengusir  nyamuk  10  jam, tanpa  dijelaskan  efek  jangka  panjangnya  bila digunakan dengan salah oleh masyarakat. 4
Perbedaan  beragam  obat  nyamuk  terletak pada  bentuk  dan  konsentrasi  zat  yang  terkandung  di dalamnya. Akan tetapi produk obat nyamuk memiliki kesamaan  dalam  hal  kandungan  bahan  kimia  yang berdampak  terhadap  kesehatan,  yaitu  bahan  aktif pyrethroid.  Zat  aktif  yang  berasal  dari  pyrethroid antara  lain  yaitu transfluthrin,  allethrin ,  dan sifluthrin . pyrethroid merupakan  insektisida  kelas utama  yang  beredar  di  dunia  dan  umum  digunakan untuk membasmi parasit dan disinfektan. 4,5
Penelitian membuktikan obat nyamuk bakar dan cair yang dipaparkan selama masa pubertas tikus selama  20  hari  dapat  menyebabkan  perubahan  organ reproduksi  berupa  penurunan  ukuran  penis  dan perubahan histologi kelenjar prostat. Dalam penelitian  tersebut  tidak  ada  perubahan  pada  berat testis. 6 Hasil  penelitian  Sakr  dan  Azab  menunjukkan perubahan  histologi  testis  dan  menurunnya  berat
testis  yang  dapat  berakibat  pada  terganggunya spermatogenesis  sehingga  sperma  yang  dihasilkan berkurang. 7
Dari  uraian  tersebut,  dilakukan  penelitian lebih lanjut untuk mengetahui pengaruh paparan obat nyamuk bakar dan semprot terhadap motilitas sperma pada  tikus  jantan  yang  dipaparkan  dalam  durasi waktu 20 dan 35 hari lamanya.

## METODE
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental in  vivo dengan  desain post-test randomized  control  design . P enelitian  ini  telah mendapat  persetujuan  etik  dari  Komite  Etik Penelitian Kesehatan Fakultas Kedokteran Universitas Palangka Raya dengan nomor 84/UN24.9/LL/2019  Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah hewan coba tikus jantan dewasa umur 8 minggu strain Wistar.
Alat  yang  dipakai  dalam  penelitian  ini adalah kandang tikus berukuran 40 cm x 20 cm x 20 cm,  obat  nyamuk  bakar,  dan  semrpot,  alat  bedah, hemocytometer, hand  counter ,  mikroskop,  gelas benda,  kaca  penutup,  pertridisk,  kaca  arloji, timbangan analitik, dan alat tulis.
Jumlah  sampel  yang  digunakan  adalah  30 ekor  tikus  yang  terbagi  menjadi  5  kelompok  yaitu kontrol,  kelompok  terpapar  obat  nyamuk  semprot selama  20  hari,  kelompok  terpapar  obat  nyamuk semprot  35  hari,  kelompok  terpapar  obat  nyamuk bakar  20  hari,  dan  kelompok  kelima  terpapar  obat nyamuk  bakar  35  hari.  Tikus  terdiri  dari  6  ekor  di masing-masing  kelompok.    Dosis  yang  diberikan untuk  paparan  obat  nyamuk  semprot  adalah  5 mL/hari  pada  tikus  yang  disemprotkan  di  ruangan tertutup khusus. Dosis pemberian obat nyamuk bakar adalah  4,5  gr/hari.  Dosis  yang  digunakan  merujuk pada dosis maksimum dari perhitungan konversi dari
tubuh  manusia  ke  tikus  yang  dikalikan  berat  badan tikus  dengan  melihat  kandungan  transflutrin  yang merupakan senyawa turunan pyrethroid pada masing- masing  jenis  obat  nyamuk  bakar  dan  semprot  yang digunakan. 8,9
Setelah  semua  perlakuan  yaitu  pada  hari  ke 21  dan  36,  tikus  dilakukan  anestesi  menggunakan kombinasi  ketamine  xylazine  dengan  dosis  ketamine 80mg/200g  BB  dan  dosis  xylazyne  10mg/200gBB. kemudian  diterminasi  dengan cervical  dislocation . Cauda epididimis dipisahkan dengan cara memotong bagian proksimal corpus epididimis dan bagian distal vas deferens. Cauda epididimis dimasukkan ke dalam cawan petri berisi 1 ml NaCl 0,9%, bagian proksimal cauda  dipotong  sedikit  dengan  gunting  lalu  cauda ditekan  perlahan  hingga  sekresi  cairan  epididimis keluar dan tersuspensi dengan NaCl 0,9%.
Diambil  10  ul  suspensi  sperma  dan diteteskan eosin 1% lalu dilakukan smear dan ditutup dengan  kaca  penutup  untuk  kemudian  diamati menggunakan  mikroskop  perbesaran  400x.  sperma dihitung  hingga  berjumlah  200.  Adapun  penilaian motilitas terbagi menjadi 4 yaitu : A. bergerak cepat dan lurus,
B. bergerak lambat,
C. bergerak di tempat, dan D. tidak bergerak. Rumus  % motilitas = A + B  x 100%. 10
200 Semua data akan dilakukan analisis statistik menggunakan  aplikasi  SPSS  dan  dilakukan  uji normalitas menggunakan Shapiro-Wilk. Untuk mengetahui signifikansi hasil motilitas tiap kelompok dilakukan  analisa  Anova  one  way  dan  multiple comparison dengan postHoc LSD dengan p<0,05.

## HASIL
Obat nyamuk bakar dan semprot berpengaruh  terhadap  motilitas  sperma  yang  dilihat pada  tabel  1.  Motilitas  sperma  tikus  mengalami penurunan yang diberi paparan obat nyamuk semprot dan  bakar  dari  20  hari  hingga  35  hari.  Penurunan signifikan secara statistik adalah pada kelompok tikus yang dipapar obat nyamuk bakar 35 hari.
Tabel 1. Pengaruh obat nyamuk bakar dan semprot pada motilitas sperma di berbagai kelompok tikus
Ulangan Motilitas sperma (%) pada kelompok Kontrol  Obat semprot 20 hari Obat semprot 35 hari Obat bakar 20 hari Obat bakar 35 hari 1 76 58 38 41 27 2 62 57.5 42 52 36 3 65 52 39.5 43.5 30.5 4 70 59.5 43 54 39 5 80 60 47.5 45.5 35 6 72 60 50 38 25 Rerata 70.83 a 57.83 b 43.33 c,d 45.67 d,c 32.08 e SD 6.71 3.04 4.62 6.2 5.48 SEM 3.88 1.76 2.67 3.61 3.17 Keterangan:  a,b,c,d,e superskrip dengan  huruf berlainan  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan (p<0.05).
Dari  hasil  pengamatan  juga  terlihat  pada gambar 1 yang menunjukkan sperma pada kelompok perlakuan.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  terlihat sperma  pada  kelompok  tikus  yang  terpapar  obat nyamuk semprot dan bakar selama 20 hari jumlahnya lebih  banyak  dibandingkan  kelompok  tikus  yang terpapar obat nyamuk bakar 35 hari.
2 1 a b c d
Gambar  1.  Pengamatan  sperma  pada  kelompok perlakuan  obat  nyamuk  semprot  dan  bakar.  a: paparan  obat  nyamuk  semprot  20  hari,  b:  paparan obat  nyamuk  bakar  20  hari,  c:  paparan  obat  nyamuk semprot  35  hari,  d:  paparan  obat  nyamuk  bakar  35 hari.  Panah  nomor  1  menunjukkan  sperma  normal dan  nomor  2  menunjukkan  sperma  abnormal  dan mati. Pengamatan mikroskop perbesaran 400x.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  motilitas  sperma  yang diamati  menunjukkan  penurunan  motilitas  sperma bergerak  lurus  dan  cepat  serta  bergerak  lambat  yang disesuaikan  dengan  kriteria  perhitungan  motilitas oleh  WHO.  Penurunan  secara  statistik  terjadi  pada kelompok  tikus  yang  terpapar  obat  nyamuk  semprot dan  bakar 20  hari  dan  35  hari  dibandingkan  kontrol. Penurunan  motilitas  semakin  jelas  terlihat  pada kelompok  perlakuan  semprot  dan  bakar  35  hari.  Hal ini disebabkan menumpuknya pyrethroid yang berada dalam tubuh.
Zat  aktif  yang  terkandung  di  dalam  obat nyamuk bermacam-macam seperti dichlorvos, propoxur,  pyrethroid  dan  diethyltoluamide  (DEET) serta bahan kombinasinya. Kebanyakan obat nyamuk di  Indonesia  mengandung  d-allethrin,  transfultrin,
bioallethrin,  d-phenithrin,  proallethrin,  cypenothrin atau  esbiothrin,  yang  merupakan  turunan  pyrethroid. Pyrethroid dikelompokkan ke dalam racun insektisida kelas  menengah  yang  dapat  menyebabkan  iritasi kulit,  mata  dan  asma.  D-allethrin  dapat  masuk  ke dalam  tubuh  secara  inhalasi  dalam  waktu  yang  lama dan  dapat  menyebabkan  gangguan  paru-paru  dan hati. 11 Penelitian  Kurniati  (2012)  menunjukkan bahwa  paparan  obat  nyamuk  elektrik  yang  berbahan aktif  d-allethrin  dapat  mempengaruhi  fetus  mencit ( Mus  musculus ).  Paparan  4,8,12  jam/hari  selama  30 hari  memyebabkan  reabsorbsi  dan  kematian  fetus mencit. 12
Pyrethroid  dalam  obat  nyamuk  dapat menyebabkan pembentukan radikal bebas yang dapat merusak membran sel mitokondria. Radikal bebas ini berikatan  dengan  membran  sel  dengan  mengubah fluiditas, struktur dan fungsi membran. Radikal bebas akan  berikatan  dengan  atom  stabil  dan  mengambil elektron di sekitarnya untuk mempertahankan muatan elektron.  Bila  semakin  banyak  paparan  pyrethroid yang membuat  terjadinya  penumpukan  radikal bebas sehingga dapat memicu stres oksidatif. 13
Mitokondria adalah organel penghasil energi dalam bentuk adenosine trifosfat (ATP) Energi untuk motilitas  sperma  disuplai  dalam  bentuk  ATP  oleh mitokondria  pada  bagian  ekor.  Apabila  terjadi kerusakan membran sel mitokondria akan mempengaruhi  persediaan  ATP  sehingga  menjadi sedikit.  Kerusakan  membran  sel  mitokondria  ini mengakibatkan  terganggunya  metabolisme  sperma yang menyebabkan penurunan motilitas. 14 Oleh sebab itu terjadi penurunan motilitas pada semua kelompok perlakuan  dibandingkan  kontrol  dan  semakin signifikan di hari ke 35.
Mitokondria menghasilkan ATP yang diperlukan  untuk  konversi  testosteron  dalam  sel
Leydig.  Shu,  2007  menyatakan  bahwa  radikal  bebas dari  pyrethroid  mengganggu  biosintesis  testosteron dengan  cara  mengurangi  pengiriman  kolesterol  ke mitokondria  dan  menurunkan  konversi  kolesterol menjadi pregnenolone yang dikatalisis oleh cytochrome P450 sidechain cleavage (P450scc) yang menyebabkan    menurunnya    produksi  testosteron. 15
Penurunan  produksi  testosteron  akan  membuat terganggunya proses spermatogenesis.
Zat pyrethroid menginduksi reactive oxygen species  (ROS)  di  mitokondria  dan  stres  retikum endoplasma yang akan menginduksi kerusakan DNA sehingga  menyebabkan  penghentian  siklus  sel  dan penghambatan proliferasi. Hal ini sesuai dengan Zou, 2017 bahwa efek domino yang  disebabkan penumpukan ROS akan menginduksi apoptosis di sel leydig dan sel sertoli. 16

## KESIMPULAN
Obat nyamuk semprot dan bakar mengandung  zat  aktif pyrethroid yang  berpengaruh terhadap  penurunan  motilitas  sperma.  Paparan  obat nyamuk  semprot  dan  bakar  dalam  waktu  lama  dapat menurunkan motilitas sperma.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Hoedojo,  R.  2013.  Morfologi,  Daur  Hidup  dan Perilaku Nyamuk dalam Parasitologi Kedokteran. Ed.6. Fakultas Kedokteran Universitas  Indonesia.  Jakarta:  Penerbit  Gaya Baru.
2. Ariani, R., Kurniati, R., dan Rahmawati, S. 2012. Pengaruh  Pemakaian  Obat  Nyamuk  Elektrik Berbahan Aktif  D-Allethrin Terhadap Sel Darah Tikus  Spargue  Dawley  (Mus  musculus  L),
Jurusan Biologi FMIPA Universitas
Mulawarman.
3. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. 2013. Riset Kesehatan Dasar Riskesdas. Kementerian Kesehatan RI.
4. Yuningtyaswari,  Fauzi,  B  L,  Fadhiah,  A  N, 2016.  Pengaruh  Pendedahan  Obat  Nyamuk Spray  dan  One  Push  Terhadap  Gambaran Histologi  Sistem  Respirasi  (Studi in  vivo pada Tikus Putih). Universitas Muhammadiyah Yogyakarta.
5. Almahdy,  A.  Dachriyanus,  Maryorie.R.,  2014. UJi  Efek  Teratoge  Anti  Nyamuk  Bakar yang Mengandung    Transfluthrin  terhadap    Fetus Mencit  Putih.  Scientia Vol.2(2): 46-50.
6. Winarni.  2004.  Alteration  of  Rat  Reproductive Organ  in  adulthood  caused  by  the  Exposure  of Foreign  Estrogenic  Compounds  (Mosquito Insecticides). During early life. Thesis. Semarang:  Master  Program  in  Biomedical Science Diponegoro University.
7. Sakr    SA    dan  Azab    AE.    2001    Effect    of Pyrethroid Inhalation  on  Testis  of  Albino  Rat. Journal  of  Biological  Sciences. 4(2): 498-500.
8. Deepak  D,  Dinakar  S,  Anoop  K,  Abhishek  K, dan  Neelima  S.  2015.  Prophylactic  Role  of Piperine  and  Curcumin  in  Allethrin  Altered Hematological  and  Biochemical  Parameters  in Swiss  Albino  Mice.  Pharmacologia  6(8):  396- 412.
9. Srivastava,A,  M.K.Srivastava,  dan  Rajendra  R. Raizada.  2006.  Ninenty-Day  Toxicity  and  One- Generation Reproduction Study in Rats Exposed to Allethrin-Based liquid Mosquito
Repellent.The Journal of Toxicological Sciences. Vol.31:1-7.
10. WHO.  2010.  Examination  and  Processing  of Human Semen fifth Edition. WHO Library.
11. Iswara A. 2009. Pengaruh pemberian Antioksidan Vitamin C dan E Terhadap Kualitas Spermatozoa  Tikus  Putih  Terpapar  Allethrin. [Skripsi].  Jurusan  Biologi  FMIPA  Universitas Negeri Semarang. Semarang.
12. Kurniati  R,  Aryani  R,  Wati  L.  2012.  Pengaruh pemaparan  pralahir  obat  nyamuk  elektrik  yang berbahan  aktif  dallethrin  terhadap  fetus  mencit ( Mus  musculus L).  Mulawarman  Scientifie. 11(2):175
13. Aly  HAA,  El-beshbishy  HA,  Banjar  ZM. Mitochondrial  dysfunction  induced  impairment of spermatogenesis in LPS-treated rats : Modulatory role of lycopene. Eur J
Pharmacol.2012;677(1-3):31-8.
14. Zhang  Jin,  dkk.  2018.  PM2.5  Induces  Male Reproductive Toxicity Via
Mitochondrial Dysfunction, DNA Damage and RIPK1 Mediated  Apoptotic  Signaling  Pathway. Sci
Total Environ.634:1435-44.
15. Shu-Yun  Zhang,  dkk.2007.Permethrin  May
Disrupt
Testosterone Biosynthesis
via
Mitochondrial  Membrane  Damage  of  Leydig Cells  in  Adult  Male  Mouse.  Journal  The Endocrine Society 148(3):3941–9.
16. Zou  L,  dkk.2017.  Nickel  Sulfate  Induced Apoptosis Via Activating ROS-Dependent
Mitochondria and Endoplasmic Reticulum Stress Pathways  in  Rat  Leydig  Cells. Environ Toxicol.32(7):1918-26