Aktivitas antihiperurisemia teh asam daun tin ( Ficus carica ) terhadap tikus putih ( Rattus norvegicus )
Sierra Aprilia Junaidah Az-zahro, Siti Humaira Umami, Uswatun Hasanah, Ernanin Dyah Wijayanti
Farmasi, Akademi Farmasi Putra Indonesia, Malang, Indonesia Corresponding author email: sierraaprilia9@gmail.com

## Abstrak
Tin  ( Ficus  carica )  merupakan  tanaman  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan  sehingga  dapat digunakan  sebagai  alternatif  pengobatan  penyakit  degeneratif  salah  satunya  yaitu hiperurisemia.  Aktivitas  antioksidan  tersebut  dapat  ditingkatkan  melalui  proses  fermentasi. Hasil  dari  proses  fermentasi  tersebut  berupa  teh  asam.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  aktivitas  antihiperurisemia  teh  asam  daun  tin  pada  tikus  putih  ( Rattus norvegicus ).  Pengujian  dilakukan  terhadap  5  kelompok  kontrol  negatif  (Pakan  tinggi  purin 10,8 ml/kgBB), kontrol positif (Allopurinol 9 ml/kgBB), teh asam daun tin dosis 20, 25 dan 30  ml/kgBB.  Pemberian  sediaan  uji  setiap  hari  selama  8  hari.  Pengukuran  kadar  asam  urat dengan menggunakan metode fotometrik enzimatis. Pengambilan sampel darah melalui vena jantung pada hari ke 22. Hasil pengukuran kadar asam urat dengan pemberian teh asam daun tin  dengan  dosis  30  ml/kgBB  menunjukkan  kadar  asam  urat  paling  rendah  dibandingkan dengan  kontrol  positif.  Dapat  disimpulkan  bahwa  teh  asam  daun  tin  dengan  dosis  30 mL/kgBB memiliki aktivitas antihiperurisemia terhadap hewan uji.
Kata Kunci : antihiperurisemia, fermentasi kombucha, teh asam daun tin.
Antihyperuricemic activity of fig (Ficus carica) sour tea on male rat (Rattus norvegicus)

## Abstract
Fig  (Ficus  carica)  are  known  to  have  antioxidant  activity,  thus  it  can  be  used  as  an alternative  treatment  of  degenerative  diseases,  such  as  hyperuricemia.  The  antioxidant activity of  Fig  can be increased by the fermentation  process.  The result of  the fermentation process  is  sour  tea.  This  study  aimed  to  investigate  the  antihyperuricemic  activity  of  Fig (Ficus carica) sour tea on male rat (Rattus norvegicus). This research was a True experiment study  with  the  design  of  Post  Test  Control  Group.  Research  samples  were  divided  into  5 groups,  in  which  there  were  3  rat  in  each  group.  Group  1  was  the  positive  control (Allopurinol 1,8 ml/200grBW), and Group II was the negative control (High purin diet 2,16 ml/grBW). In addition,  the Group III, IV, and V were the experimental group with different dose  of  sour  tea  of  Fig;  4ml/200grBW/day,  5ml/200grBW/day,  and  6ml/200grBW/day  for  8 days.  Identification  of  uric  acid  levels  was  performed  using  enzymatic  photometric  method. Meanwhile, the serum samples were taken from the heart vein on the 22 nd day of experiment. The  results  the  best  dose  of  sour  tea  of  Fig  in  lowering  the  level  of  uric  acid  in  male  rat (Rattus  norvegicus)  was  6  ml/200grBW/day  (3,87  mg/dl)  compared  to  the  positive  controls which  had  the  average  level  of  4,2  mg/dl.  In  addition,  the  result  of  One  Way  ANOVA demonstrated the significant difference in the probability value of 0,05. Therefore, it can be concluded that sour tea of Fig (Ficus carica) can effectively lower the uric acid level of male (Rattus norvegicus).
Keywords : antihyperuricemic, kombucha fermentation, sour tea of Fig leaves.

## Pendahuluan
Hiperurisemia terjadi ketika ada peningkatan  kadar  asam  urat  melebihi  batas normal yaitu 3,5-7 mg/dl pada pria dan 2,6-6 mg/dl  pada  wanita  (Fitriana,  2015).  Riset Kesehatan  Dasar  (Riskesdas)  tahun  2013 menyatakan  bahwa  prevalensi  penyakit persendian  di  Indonesia  sebesar  11,9%  dan berdasarkan  diagnosis  atau  gejala  yaitu sebesar 24,7%. Hiperurisemia dapat ditimbulkan  akibat  terjadinya  peningkatan produksi  asam  urat,  penurunan  pengeluaran asam urat ataupun kombinasi antar keduanya (Hidayat et al ., 2009). Asam urat merupakan produk  akhir  dari  metabolisme  purin  dan dapat  membentuk  kristal  putih  (Noviyanti, 2015).  Pengobatan  penyakit  hiperurisemia dapat  dilakukan  dengan  menggunakan  obat sintetik ataupun obat bahan alam. Salah satu mekanisme pengobatan penyakit hiperurisemia  adalah  dengan  menghambat kerja  enzim xantin oksidase sehingga terjadi penurunan  pada  kadar  asam  urat  di  dalam darah,  dan  Allopurinol  tergolong  obat sintetik yang bekerja secara spesifik terhadap inhibitor  enzim  xantin  oksidase  (Mycek et al ., 2001).
Salah satu tanaman yang dapat dimanfaatkan untuk mengobati hiperurisemia yaitu  tanaman  tin.  Tanaman  tin  merupakan suatu  tanaman  dari  genus  Ficus  yang memiliki  beranekaragam  varietas  (Mawa et al .,  2013).  Berdasarkan  pengalaman  secara empiris,  bagian  tanaman  tin  yang  sering digunakan oleh masyarakat sebagai pengobatan yaitu daun tin. Menurut Mawa et al .,  (2013),  daun  tin  mengandung  senyawa fenolik, antosianin, triterpenoid, asam organik. Beberapa senyawa dalam tumbuhan yang  umumnya  bersifat  antioksidan  alami adalah senyawa fenolik  atau polifenolik dari golongan  flavonoid,  turunan  asam  sinamat, kumarin,  tokoferol,  dan  asam-asam  organik polifungsional (Simanjuntak, 2012). Golongan senyawa flavonoid bersifat antioksidan meliputi flavon, flavonol, isoflavon,  katekin  dan  kalkon.  Daun  tin memiliki  aktivitas  antioksidan  (Al-Snafi, 2017).  Berdasarkan  penelitian  Trifunschi, (2015),  ekstrak  etanol  daun  tin  memiliki
aktivitas antioksidan sebesar 44,22%. Aktivitas  antioksidan  yang  terkandung  pada daun tin dapat menghambat Reactive Oxygen Species  ( ROS)  dan Reactive  Nitrogen Species  ( RNS)  yang  dapat  menyebabkan mutasi  pada  DNA  yang  dapat  menyebabkan perubahan  xantin  menjadi  asam  urat. Aktivitas  antoksidan  yang  terkandung  pada daun  tin  tersebut  dapat  ditingkatkan  melalui proses fermentasi menggunakan  kultur kombucha (Pratama et al ., 2015).
Fermentasi  dapat  didefiniskan  sebagai proses  perubahan  kimiawi  suatu  senyawa organik kompleks melalui pengaruh beberapa  enzim  yang  dihasilkan  oleh mikroba  (Naland,  2008).  Fermentasi  dapat meningkatkan atau mempertahankan aktivitas antioksidan (Wijayanti et al ., 2017). Berdasarkan penelitian Sukrama, (2015), teh kombucha  dapat  berpotensi  menurunkan kadar  asam  urat  pada  tikus  melalui penghambatan xantin oksidase dan penurunan  kada  MDA  ( Malondialdehid ) yang  terbentuk  selama  proses  pembentukan asam  urat.  Teh  kombucha  merupakan produk  olahan  hasil  fermentasi  oleh  khamir dan  bakteri  asam  asetat  pada  media  yang mengandung gula (Naland, 2004). Kombucha merupakan kumpulan dari koloni ragi  (yeast)  dengan  beberapa  bakteri  salah satunya  yaitu Saccharomyces  ludwigii yang bersimbiosis  dengan Acetobacter  xylinum dan  membentuk  berupa  lembaran  gelatin (gel)  dengan  ketebalan  0,3-1,2cm  (Naland, 2004). Pada penelitian ini, proses fermentasi dilakukan melalui dua tahap yaitu fermentasi alkohol yang dilakukan oleh khamir ( Saccharomyces  cerevisiae )  dan  fermentasi asam  asetat  oleh  bakteri  asam  asetat. Penelitian ini diharapkan dapat menghasilkan  produk  alternatif  pengobatan antihiperurisemia dengan meningkatkan aktivitas  antioksidan  the  asam  daun  tin melalui  fermentasi  menggunakan  kultur kombucha pada tikus putih ( Rattus norvegicus ) dan.

## Metode Penelitian
Alat. Neraca  analitik  digital  (Ohaus), spektrofotometer  Uv-Vis  (Merk  Thermo
fisher  scientific),  seperangkat  alat  gelas (Pyrex),  sonde,  spuit  dengan  jarum  suntik (Terumo),  pipa  kapiler  hematokrit,  tabung vacutainer (Onemed Healthcare), microcentrifuge,  centrifuge  (Hettich  EBA 20),  timbangan  digital  (Camry),  restraint holder rat, seperangkat alat bedah, easytouch GCU,  strip  asam  urat  ( easytouch  blood  uric acid ).
Bahan. Simplisia  daun  tin,  starter kombucha ,  allopurinol,  pakan  tikus  (A1), aquadest,  air  hangat,  kit  reagen  ( Thermo Scientific Konelab/Uric acid AOX ), hati sapi, limpa sapi, biji melinjo, kacang tanah, pasir.
Proses Pembuatan Teh Asam. Simplisia daun  tin  di  fermentasi  menggunakan  starter kombucha.  Proses  fermentasi  dilakukan selama 12 hari dengan suhu ruang dan gelap. Hasil  dari  fermentasi  berupa  teh  asam  dan dilakukan  penyimpanan  pada  suhu  dingin berkisar 2-8 . Proses Pembuatan Induksi
Hiperurisemia. Induksi hiperurisemia menggunakan makanan tinggi purin diantaranya  yaitu  25  gram  kacang  tanah,  25 gram hati sapi, 25 gram limpa sapi, 25 gram emping  melinjo.  Masing-masing  komposisi dilarutkan  dengan  120  ml  air  suling.  Biji melinjo  diolah  terlebih  dahulu untuk dijadikan  emping.  Pengolahan  biji  melinjo dan  kacang  tanah  dilakukan  dengan  cara dipanaskan  secara  langsung  di  teflon (menggunakan  pasir).  Induksi  hiperurisemia diberikan  secara  per  oral  selama  14  hari sebanyak 10,8 ml/kgBB/hari
Pengujian  pada  Hewan  Uji. Hewan  uji yang  digunakan  adalah  tikus  putih  (galur wistar) dengan berat rata-rata ±150 gram dan berumur  ±8  minggu.  Hewan  uji  dibagi menjadi  enam  kelompok,  masing-masing kelompok  terdiri  dari  4  ekor,  yaitu  kontrol negatif  (aquadest  0,5  mL),  (Allopurinol  9 ml/kgBB),  teh  asam  daun  tin  dosis  20,  25 dan 30 ml/kgBB.
Pengambilan Sampel Darah. Pengambilan  sampel  darah  hewan  uji dilakukan  pada  hari  ke  22.  Hewan  uji dikorbankan  terlebih  dahulu  menggunakan kloroform  dan  dilakukan  pengambilan  darah melalui  vena  jantung.  Darah  di  sentrifugasi
pada  kecepatan  3000  rpm  selama  15  menit. Serum  dianalisa  kadar  asam  urat  serum berdasarkan  reaksi  enzimatik  menggunakan reagen  uric  acid  pada  spektrofotometer  UV- Vis  dengan  panjang  gelombang  540  nm. Kadar  asam  urat  serum  yang  didapatkan dirata-rata dan di analisa menggunakan SPSS ( Statistical  Product  and  Service  Solutions ) menggunakan  uji  homogenitas  ( Levene’s Test ),  uji  normalitas  ( Kolmogorov-Smirnov Test )  dan uji one way anova

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  determinasi  tanaman  menunjukkan bahwa  sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah Ficus  carica  L .  Hasil pengujian  karakteristik  pada  teh  asam  daun tin  meliputi  pengujian  organoleptis  yaitu didapatkan  warna  kuning  keemasan,  aroma khas kombucha, rasa asam dan hasil rata-rata pengujian pH yaitu 3,004.
Hasil pengujian aktivitas antihiperurisemia  dilakukan  pada  hari  ke-22 dengan  menggunakan  serum  darah.  Hasil pengukuran  kadar  asam  urat  serum  dapat dilihat pada gambar 1.

## Gambar 1.  Grafik kadar asam urat serum (mg/dl) setelah perlakuan
Analisa  data  uji  homogenitas  kadar  asam urat  tiap  kelompok  dilakukan  menggunakan SPSS  mendapatkan  nilai  probabilitas  0,561 (p>0,05),  dimana  berarti  kadar  asam  urat serum  adalah  homogen.  Sedangkan  analisa uji normalitas mendapatkan nilai probabilitas
0,917  (p>0,05)  yang  berarti  distribusi  data normal.
Data  akhir  kadar  asam  urat  serum  tikus pada  hari  ke-22  menunjukkan  adanya perbedaan kadar asam urat dari variasi dosis pemberian teh asam  daun tin terhadap kadar asam  urat  serum  tikus  putih  jantan  ( Rattus norvegicus ).  Hasil  analisa  dengan  uji one way  anova, didapatkan  nilai  probabilitas 0,013 (p<0,05)  yang berarti  bahwa teh asam daun  tin  ( Ficus  carica ) memiliki  aktivitas antihiperurisemia terhadap tikus putih ( Rattus  norvegicus ).  Pustaka  menyebutkan pada  tikus  jantan  strain  wistar  kadar  asam urat normal adalah 4,37 mg/dl (Deviandra et al .,  2013),  sedangkan  pada  penelitian  ini mendapatkan  nilai  kadar  asam  urat  pada kelompok  yang diberi  teh asam  daun tin  20, 25  dan  30  mL/kgBB  berturut-turut  adalah 5,67;  4,53  dan  3,87  mg/dl  dan  kelompok kontrol  positif  yang  diberi  Allopurinol adalah  4,2  mg/dl.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  teh  asam  daun  tin  30  ml/kgBB memiliki  aktivitas  antihiperurisemia  lebih baik  jika  dibandingkan  dengan  kontrol positif  (Allopurinol  1,8ml/200gBB).  Oleh karena  itu,  dosis  optimal  untuk  pengobatan antihiperurisemia  yaitu  30  ml/kgBB  setara dengan  330  ml  teh  asam  daun  tin  untuk manusia.  Menurut  Naland,  (2008),  dosis minuman  kombucha  yang  aman  dikonsumsi oleh  manusia  yaitu  100-600cc  per  hari.  Jika konsumsi  teh  asam  daun  tin  dalam  jangka panjang,  maka  diperlukan  penelitian  lebih lanjut mengenai pengujian toksisitas pada teh asam  daun tin untuk  mengetahui  efek toksik yang dapat ditimbulkan.
Salah  satu  kandungan  teh  asam  daun  tin adalah flavonoid, yang diduga dapat menghambat  kerja  xantin  oksidase  dan superoksidase  dan  dapat  mengurangi  kadar asam  urat  di  dalam  darah  (Juwita et  al ., 2017).  Struktur  flavonoid  menyebabkan senyawa  tersebut  berpotensi  menghambat xantin  oksidase  secara  kompetitif,  dimana flavon  dan  flavonol  mampu  menghamat enzim  tersebut  lebih  baik  dibandingkan dengan  golongan  flavonoid  lainnya.  Selain senyawa flavonoid terdapat senyawa metabolit  sekunder  lainnya  yang  memiliki
aktivitas antihiperurisemia akan tetapi diperlukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai senyawa  lainnya  yang  dapat  berpotensi sebagai antihiperurisemia. Berdasarkan penelitian  Sukrama,  (2015),  teh  kombucha dapat  berpotensi  menurunkan  kadar  asam urat pada tikus melalui penghambatan xantin oksidase dan penurunan kada MDA ( Malondialdehid )  yang  terbentuk  selama proses pembentukan asam urat.

## Kesimpulan
Teh  asam  daun  tin  dengan  dosis 6mL/200gBB memiliki aktivitas antihiperurisemia terhadap tikus putih ( Rattus norvegicus ).

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  dipersembahkan kepada Kemenristekdikti yang telah menyediakan  dana  penelitian  melalui  Hibah Program Kreativitas Mahasiswa 2018

## Daftar Pustaka
Al-Snafi,  A.  E.  (2017). Nutritional  and pharmacological  importance  of  Ficus carica -A  review.  IOSR  Journal  of Pharmacy, 7 (3), 33–48.
Deviandra,  R.,  Safitri,  F.,  &  Handaja,  D., 2017,  Efek  Pemberian  Seduhan  Seledri (Apium  graveolens  L.)  Terhadap  Kadar Asam Urat Pada Tikus Putih Jantan Strain Wistar (Rattus norvegicus) Hiperurisemia. Saintika Medika , 9(2), 75–81.
Fitriana,  Rahmatul,  2015, Cara  Cepat  Usir Asam Urat . Yogyakarta: Medika.
Hidayat, Rudy, 2009, Gout dan Hiperurisemia .  Medicinus.  Vol.  22  (1): 47-50.
Mawa, S., Husain, K., Jantan, I., 2013, Ficus carica  L.  (Moraceae) : Phytochemistry, Traditional Uses and Biological Activities . University Kebangsaan Malaysia.
Mycek, M. J., Harvey, R. A., Champe, P. C., &  Fisher,  B.  D,  2001, Farmakologi Ulasan Bergambar. Edisi, 2, 419-420.
Naland,  Henry,  2004, Kombucha  Teh  Ajaib
Pencegah dan Penyembuh Aneka Penyakit . Jakarta:  PT.  Agro  Madia Pustaka.
Naland,  H,  2008, Kombucha  Teh  dengan Seribu Khasiat . AgroMedia.
Noviyanti,  2015, Hidup  Sehat  Tanpa  Asam Urat . Yogyakarta: Notebook.
Pratama,  N.,  &  Pato,  U.  2015. Kajian Pembuatan  Teh  Kombucha  dari  Kulit
Buah Manggis (Garcinia Mangostana L.) . Jurnal Online Mahasiswa Fakultas Pertanian Universitas Riau, 2(2), 1–12. Riset Kesehatan Dasar, 2013, Laporan Hasil Riset Kesehatan Dasar Indonesia ,
Departemen Kesehatan RI, 94-95. Simanjuntak,  K,  2012. Peran  Antioksidan Flavonoid dalam Meningkatkan Kesehatan .  Jakarta:  BINA  WIDYA,  23, 135–140. Sukrama,  I. D. M., 2015, Xanthine Oxydase Inhibition Of Kombucha Tea In Hyperuricemia Induced Wistar Rat: decrease  of  uric  acid,  malondialdehyde, and  8-hydroxy-2’-deoxyguanosine. Bali Medical Journal . Vol.4(1): 32-36.
Trifunschi,  S.  I.,  Munteanu,  M.  F.  F., Ardelean,  D.  G.,  Orodan,  M.,  Osser,  G. M., & Gligor, R. I., 2015, Flavonoids and polyphenols  content  and  antioxidant activity  of  Ficus  carica  L.  extracts  from Romania. Zbornik  Matice  srpske  za prirodne nauke , (128), 57–65.
Wijayanti,  E.D.  &  N.C.E.  Setiawan,  2017, The  effect  of  lactic  acid  fermentation  on fig ( Ficus carica ) fruit flavonoid, Journal of Biological Researches , 23 (1): 39-44