UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK BUAH MENGKUDU ( M. citrifolia, L) TERHADAP PERTUMBUHAN Streptococcus mutans SECARA IN

## VITRO
Feibe Malinggas 1) , D.H.C. Pangemanan 2) , Ni Wayan Mariati 1)
1) Program Studi Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran Universitas Sam Ratulangi
2) Bagian Fisiologi Fakultas Kedokteran, UNSRAT

## ABSTRACT
Streptococcus mutans is a bacteria wich exist in mouth and have an most important bacteria in the process  of  forming  tooth  caries.  As  the  development  of  ages  continue,  there  are  already  a  lot  of studies for antibiotic to inhibit Streptococcus mutans growth,but there are also a lot of antibiotics wich already resistant to this bacteria. Therefore, many scientists has started using natural plants instead  of  antibiotics.  One  of  the  natural  plants  that  contains  active  elements  as  antibacteria, anticancer  and  analgetic,  that  is  Noni  fruit  (M.  citrifolia,  L).The  purpose  of  this  study  is toacknowledge the inhibition power from noni fruit extract to Streptococcus mutans growth. This study is a laboratorium experimental study with post test only control group design and is done at Pharmacy  Laboratorium  of  Science  Faculty  Sam  Ratulangi  University  on  July  2015.From  the result, it is known that the average inhibit  zone diameter of noni fruit is 20,41 mm and the positive control  clindamycin  is  29,58  mm,  the  negative  control  aquades  has  no  inhibition  zone.  The inhibition zone extensive of noni fruit extract is 330,66 mm 2 , positive control clindamycin is 689,88 mm 2 , and negative control aquades is 0,00 mm 2 . From this study, it can be concluded that noni fruit extract can inhibit Streptococcus mutans growth.
Keywords : Streptococcus mutans, caries, noni fruit extract, antibacterial.

## ABSTRAK
Streptoccocus mutans merupakan bakteri yang terdapat dalam rongga mulut dan mempunyai peran penting dalam proses terjadinya karies gigi. Seiring dengan berkembangnya  zaman sudah banyak penelitian  yang  menggunakan  antibiotik  untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptoccocus mutans , namun sudah banyak antibiotik yang resisten terhadap bakteri ini. Oleh karena itu banyak peneliti  mulai  menggunakan  tumbuhan  alami  sebagai  pengganti  antibiotik.  Salah  satu  tanaman alami  yang  mengandung  senyawa  aktif  sebagai  antibakteri,  yaitu  buah  mengkudu  ( M.  citrifolia. L ).Tujuan  penelitian  adalah  untuk  mengetahui  adanya  daya  hambat  dari  ekstrak  buah  mengkudu terhadap  pertumbuhan Streptococcus  mutans .  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental laboratorium  menggunakan  rancangan post  test  only  control  group  design dan  dilakukan  di Laboratorium  Farmasi  Fakultas  MIPA  Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  pada  bulan  Juli 2015.Hasil penelitian didapatkan nilai rerata diameter zona hambat ekstrak buah mengkudu sebesar 20,41 mm, kontrol positif clindamycin sebesar 29,58 mm sedangkan kontrol negatif akuades tidak memiliki zona hambat. Nilai rerata luas zona hambat ekstrak buah mengkudu sebesar 330,66 mm 2 , kontrol  positif  clindamycin  sebesar  689,88  mm 2 dan  kontrol  negatif  akuades  sebesar  0,00  mm 2 . Dari  penelitian  ini  disimpulkan  bahwa  ekstrak  buah  mengkudu  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans .
Kata kunci : Streptococcus mutans , Karies, Ekstrak Buah Mengkudu, Antibakteri.

## PENDAHULUAN
Menurut  World  Health  Organization (WHO), 80% penduduk dunia masih menggunakan pengobatan tradisonal dan juga obat-obatan  herbal  dari  tanaman.  Salah satunya adalah buah mengkudu ( M. citrifolia, L). 1 Buah mengkudu terkenal sebagai Queen of the morinda yangmerupakan satu  dari  dua  puluh  spesies Morinda yang mempunyai nilai ekonomis tinggi dan mmiliki berbagai  macam  khasiat  yang  berpengaruh baik  bagi  kesehatan. 2 Menurut  beberapa peneliti buah mengkudu mengandung scopoletin,  Glikosida,  Alizarin  Acubin,  L. Asperuloside, dan flavonoid. 3
Selain itu terdapat juga bakteri yang sering dijumpai dalam mulut yaitu bakteri
Streptococcus
mutans . Mikroba ini merupakan bakteri yang penting dalam proses terjadinya  karies  gigi,  dalam  bahasa  latin karies  gigi  artinya  lubang  pada  gigi.  Karies gigi  merupakan  penyakit  pada  jaringan  keras gigi yaitu email, sementum dan dentin. 4,5
Salah  satu  alternatif  yang  dapat  dilakukan untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  mutans ialah  memanfaatkan kandungan  aktif  dalam  buah  mengkudu seperti  flavonoid  yang  telah  terbukti  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  E.Coli, E. aerogenes,B.  cereus,S.  saprophyticus . 6 Oleh karena  itu,  penulis  tertarik  melakukan penelitian untuk mengetahui daya hambat dari buah mengkudu terhadap Streptococcus mutans .
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui adanya  daya  hambat  dari  ekstrak  buah mengkudu ( M. citrifolia, L) terhadap pertumbuhan Streptococcus mutans.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  laboratorium,  menggunakan rancangan eksperimen
murni ( true experimental design ) dengan rancangan penelitian post test only control group design . Subjek  dalam  penelitian  ini  adalah  bakteri Streptococcus  mutans yang  diperoleh  dari sediaan Laboratorium Farmasi Fakultas MIPA Universitas  Sam  Ratulangi.  Ekstrak  buah mengkudu didapat dengan cara mengekstraksi buah  mengkudu  dengan  metode  maserasi. Pembuatan ekstrak buah mengkudu dilakukan di  Laboratorium  Farmasi  Fakultas  MIPA
Universitas  Sam  Ratulangi  Manado.  Sampel buah  mengkudu  diperoleh  dari  desa  Mokupa. Sampel  buah  mengkudu  sebanyak  30  buah dikupas  dan  dipotong  tipis-tipis,  dikeringkan dengan cara diangin-anginkan selama ± 3 hari dan  tidak  boleh  terkena  sinar  matahari langsung.  Setelah  kering  kemudian  diblender sampai terbentuk serat kasar. Serat kasar yang diperoleh  ditimbang  sebanyak  500  gram, kemudian dimasukan ke dalam labu erlenmeyer 1  liter  dan  ditambahkan  etanol 96%  sebanyak  500  ml,  kemudian  diaduk selama  satu  jam  untuk  mencapai  kondisi homogen  dalam  shaker  waterbath  dengan kecepatan  120  rpm  ( rotation  per  minute ). Selanjutnya larutan tersebut dimaserasi selama  24  jam  pada  suhu  kamar.  Setelah  24 jam,  larutan  difiltrasi  atau  dipisahkan  dengan menggunakan  penyaring Buchner .  Kemudian residu  penyaringan  diangin-anginkan  dan dilakukan  maserasi  ulang  sampai  3  kali.Hasil saringan 1-3 dicampur dan dipekatkan dengan rotary  vacuum  evaporator dengan  suhu  50 o C sampai  didapati  ekstrak  kental  dengan konsentrasi  100%.  Metode  pengujian  yang digunakan  adalah  metode  modifikasi  Kirby- Bauer  dengan  menggunakan  kertas  saring. Bakteri Streptococcus  mutans yang  disimpan dimedia  agar  yang  diambil  dari  stok  bakteri murni  yang  diperoleh  dari  Laboratorium Farmasi  Fakultas  MIPA  Universitas  Sam Ratulangi,  diambil  dengan  jarum  ose  steril lalu  ditanamkan  dalam  media  agar  miring dengan  cara  menggores.  Bakteri  yang  telah digores  pada  media  agar  diinkubasi  selama  1 x  24  jam  dalam  incubator  pada  suhu  37 0 C. Bakteri yang telah diinkubasi diambil koloninya dari media agar miring menggunkan  jarum  ose  streil  kemudian dimasukan  dalam  media  BHI-B  sampai kekeruhannya sama dengan standar kekeruhan McFarland.  Lidi  kapas  steril  dicelupkan  ke dalam  suspensi  bakteri  hingga  basah.  Lidi kapas  diperas  dengan  cara  menekan  pada dinding tabung reaksi bagian dalam, kemudian  digoreskan  merata  pada  media MHA sampai permukaannya tertutupi. Selanjutnya  kertas  saring  pertama  dicelupkan ke dalam larutan ekstrak buah mengkudu yang sudah  dilarutkan  dengan  etanol  96%.  Kertas saring  kedua  dicelupkan  dengan  kontrol positif yaitu clindamycin yang sudah dilarutkan  dengan  akuades.  Kertas  saring
ketiga  merupakan  kontrol  negatif  yang dicelupkan  ke  dalam  akuades.  Selanjutnya cawan  petri  diinkubasi  selama  24  jam  di dalam  inkubator  pada  suhu  37 0 C.  Zona hambat  yang  terbentuk  disekitar  kertas saring diukur diameter vertical dan diameter horizontalnya  dalam  satuan  milimeter (mm) menggunakan jangka sorong.
(DV - DC) + (DH – DC

## 2
Keterangan: D V : Diameter Vertikal
D H
: Diameter Horizontal
D C : Diameter Cakram
Gambar 1. Pengukuran diameter zona hambat

## HASIL PENELITIAN
Cawan  petri  yang  sudah  diinkubasi selama  24  jam  pada  suhu  37 0 C  dalam inkubator  diambil  lalu  dilihat  zona  hambat yang terbentuk. Kemudian zona hambat yang terbentuk  diukur  dengan  menggunakan satuan  millimeter  dan  pengaatan  yang  telah dilakukan dapat dilihat pada gambar 1.
A : Zona hambat ekstrak buah mengkudu B : Zona hambat clindamycin C : akuades
Gambar 1. Zona hambat yang terbentuk pada media MHA.
Tabel 1. Diameter Zona Hambat Ekstrak Buah Mengkudu, Clindamycin dan Akuades dengan
Lima Perlakuan.
Diameter zona hambat (mm) Perlakuan  Mengkudu Kontrol (+) Kontrol (-) 1 20,65 32,5 0 2 18,2 27,4 0 3 24,25 29,95 0 4 18,5 30,65 0 5 20,45 27,4 0 Total 20,41 29,58 0
Tabel  1.  Menunjukan  bahwa  diameter  rerata zona  hambat  ekstrak  buah  mengkudu  sebesar 20,41  mm,  zona  hambat  clindamycin  sebesar 29,58  mm  dan  kontrol  negatif  akuades  tidak menunjukan adanya zona hambat.
Berdasarkan  pengukuran  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  pada  kelompok ekstrak  buah  mengkudu  dapat  dilihat  rerata sebesar  20,41  mm  sedangkan  pada  kelompok kontrol  positif  terdapat  rerata  zona  hambat sebesar 29,58 mm dan pada kelompok kontrol negatif tidak terdapat zona hambat. Kemudian diukur luas zona hambatnya dengan menggunakan rumus (Tabel 2)
Tabel  2.  Perbandingan  Luas  Zona  Hambat Ekstrak  Buah  Mengkudu,  Clindamycin  dan Akuades dengan Lima Perlakuan Luas  zona hambat (mm2) Perlakuan  Mengkudu Kontrol (+) Kontrol (-) 1 334,74 829,156 0 2 260,0234 589,34 0 3 461,62 704,14 0 4 268,66 737,44 0 5 328,28 589,34 0 Total 330,66 689,88 0
A B C
Dari  Tabel  2  dilihat  rerata  luas  zona  hambat ekstrak  buah  mengkudu  sebesar  330,66  mm 2 , sedangkan  pada  kontrol  positif  clindamycin dengan  rerata  sebesar  689,88  mm 2 dan  pada kontrol  negatif  akuades  rerata  sebesar  0,00 mm 2 .

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  merupakan  uji  eksperimen untuk  mengetahui  adanya  daya  hambat  dari ekstrak  buah  mengkudu  dalam  menghambat pertumbuhan  koloni  bakteri Streptococcus mutans .  Penelitian  dilakukan  dengan  cara mengembangbiakan  bakteri Streptococcus mutans dalam  media  MHA  dan  diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 37 0 C selama 24 jam.  Hasilnya  terlihat  zona  hambat  yang terbentuk  pada  sekitar  kertas  saring  yang berisi  ekstrak  buah  mengkudu  menunjukan bahwa  efek  antibakteri  dari  ekstrak  buah mengkudu  memiliki  daya  hambat  karena adanya  kandungan  flavonoid  yang  berfungsi sebagai  antibakteri.  Lima  kriteria  kekuatan efek  antibakteri  berdasarkan  diameter  zona hambat  yakni  :  tidak  ada  zona  hambat, diameter  zona  hambat  ≤  5  mm  dikategorikan lemah,  diameter  zona  hambat  5-10  mm dikategorikan sedang, zona hambat 10-20 mm dikategorikan kuat dan zona hambat ≥ 20 mm dikategorikan  sangat  kuat. 7 Berdasarkan kriteria  zona  hambat  yang  terbentuk  disekitar kertas  saring  yang  berisi  ekstrak  buah mengkudu  dikategorikan  daya  hambat  sangat kuat  dengan  rerata  diameter  zona  hambat sebesar  20,41  mm  (Tabel  1).  Zona  hambat yang  terbentuk  pada  antibiotik  clindamycin sangat  kuat  dengan  rerata  29,58  mm, sedangkan pada akuades tidak terbentuk zona hambat  yang  berarti  tidak  dapat  menghambat pertumbuhan Streptococcus  mutans .  Daya antibakteri  dari  ekstrak  buah  mengkudu matang terjadi karena mengkudu mengandung zat  antibakteri  yaitu  senyawa  flavonoid, alizarin  dan  acubin.  Senyawa  alizarin  dan acubin  yang  terdapat  dalam  buah  mengkudu merupakan  golongan  dari  trapenoid  dan turunan dari senyawa fenol. Senyawa flavonoid merupakan senyawa yang
mempunyai  efek  antibakteri  dan  paling banyak  terdapat  pada  buah  mengkudu. 8 Flavonoid merupakan kelompok dari fitokimia  fenolik  yang  berfungsi  sebagai peredam  radikal  bebas  dan  bermanfaat melindungi  sel,  meningkatkan  efektifitas vitamin  C,  serta  sebagai  antibiotik  dengan mengganggu  fungsi  dari  mikroorganisme seperti bakteri dan virus. 9
Mekanisme  kerja  senyawa  flavonoid terjadi  dengan  caramendenaturasi  protein  sel dan  merusak  membran  sel  tanpa  dapat diperbaiki  lagi.  Dalam  flavonoid  terkandung senyawa fenol yang  merupakan suatu alkohol yang  bersifat  asam  sehingga  disebut  juga asam  karbolat.  Senyawa  fenol  ini  berperan sebagai antibakteri sehingga dapat
mengganggu pertumbuhan
bakteri Streptococcus  mutans . 10,11 Flavonoid  dalam buah mengkudu mempunyai aktifitas penghambatan  lebih  besar  terhadap  bakteri gram  positif,  hal  ini  dikarenakan  senyawa flavonoid  merupakan  bagian  yang  bersifat polar  sehingga  lebih  mudah  menembus lapisan  peptidoglikan  yang  bersifat  polar  dari pada  lapisan  lipid  yang  non  polar,  sehingga menyebabkan  aktifitas  penghambatan  pada bakteri  gram  positif  lebih  besar  dari  pada gram  negatif.  Aktifitas  penghambatan  dari kandungan buah mengkudu pada bakteri gram positif  menyebabkan  terganggunya  fungsi dinding sel sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan kematian sel. 6
Penelitian  ini  menunjukan  bahwa  ekstrak buah  mengkudu  memiliki  daya  hambat  yang sama  kuatnya  dengan  antibiotik  clindamycin pada  pertumbuhan  bakteri Streptococcus mutans ,  namun  kemampuan  ini  apabila dibandingakan  terlihat  ada  sedikit  perbedaan pada  besarnya  zona  hambat  yang  terbentuk. Hal  ini  mungkin  disebabkan  oleh  konsentrasi kepekatan  ekstrak  buah  mengkudu  belum diketahui minimal  inhibitor  concentration ekstrak terhadap bakteri Streptococcus mutans ,  sehingga  besar  zona  hambat  yang terbentuk  belum  sebanding  dengan  zona hambat  yang  terbentuk  pada  antibiotik clindamycin sebagai kontrol positif.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  buah mengkudu  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans .
SARAN  Perlu dilakukan lagi penelitian selanjutnya  untuk  mengenai  konsentrasi kepekatan ekstrak buah mengkudu
( minimal inhibitor concentration) .
 Perlu dilakukan penelitian dengan teknik yang berbeda untuk mengetahui efektifitas dari buah mengkudu.

## DAFTAR PUSTAKA
1. World  Health  Organization  (WHO). 2003. “Traditional
medicine”,
(http://www.who.int/mediacentre/factshe
ets/fs134/en/), diakses Januari 2006.
2. Djauhariya  E,  Raharjo  M,  Ma’un. Karakterisasi  Morfologi  dan  Mutu  Buah Mengkudu. Buletin Plasma Nutfah. 12(1)
: 1-8. 2006.
3. Fajar  KD.  Aktiftitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol Buah Mengkudu ( M. citrifolia, L )
Terhadap  bakteri  Pembusuk  Daging Segar [Skripsi]. Sebelas Maret Surakarta. 2010.
4. Assagaf A, Wowor M, Supit A. Uji Efek Antibakteri  Ekstrak  Lidah  Buaya  ( Aloe vera )  dalam  Menghambat  Pertumbuhan Koloni Streptococcus  mutans secara  in vitro .  Dentire  Journal  UNSRAT  Vol.1 No.1. 2012.
5. Kidd  EAM,  Bechal  SJ.  Dasar-dasar Karies Penyakit dan Penanggulangannya. Cetakan 1. Jakarta: EGC. 1991.
6. Fajar  KD.  Aktiftitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol Buah Mengkudu ( M. citrifolia, L )
Terhadap  bakteri  Pembusuk  Daging Segar [Skripsi]. Sebelas Maret Surakarta. 2010.
7. Davis  WW,  Stout  TR .  Disc  plate method of microbiology antibiotic assay. Microbiology. Jakarta. 1971.
8. Djauhariya  E.  Mengkudu  ( Morinda citrifolia L)  Tanaman  Obat  Potensial. Balai  Penelitian  Tanaman  Rempah  dan
Obat. Pengembangan  Teknologi  TRO . 15(1) : 1-16. 2003.
9. Waji  RA,  Surgani  A,  Makalah  kimia organik bahan alam flavonoid
(Quercetin).  Program  S2  Kimia  Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Unhas. 2009.
10. Dwyana  Z,  Johannes  E,  Saerong  W,  Uji Ekstrak  Kasar  Alga  Merah  Eucheuma cottonii  sebagai  anti  bakteri  terhadap bakteri patogen. 2011.
11. Dwidjoseputro, D. Dasar-dasar Mikrobiologi. Djambatan. Jakarta. 1994.