Pengaruh pemberian inokulan Azotobacter sp. dan bahan organik dalam fitoremediasi tanaman rami (Boehmeria nivea) pada tanah yang dicemari limbah minyak bumi
Rara R. Risanti 1 , Pujawati Suryatmana 2
1 Program Pasca Sarjana Ilmu Tanah, Fakultas Pertanian, Universitas Padjadjaran Jl. Raya Jatinangor, Sumedang 45363, Indonesia
2 Departemen Ilmu Tanah, Fakultas Pertanian, Universitas Padjadjaran Jl. Raya Jatinangor, Sumedang 45363, Indonesia
Correspondence: rara.risanti@gmail.com Abstract. Phytoremediation  in  soil  contaminated  with  petroleum  hydrocarbon  is  a technology  to  remediate  contaminant by using  plant  as  nutrient  availability facilitator  for  degrading microbial in  the  rhizosphere.  Phytoremediation  can  be promoted by inoculant Azotobacter sp. for improving soil fertility, also produces bio surfactant. This  research  aimed  to  analyze  the  effect  of  inoculant  Azotobacter sp. and organic materials in the form of cow manure interaction in phytoremediation of ramie plants on petroleum waste contaminated soil. This research was conducted at Soil  Biology  Laboratory  and  Green  House  of  Faculty  of  Agriculture,  Padjadjaran University from February 2019 to April 2019. This research method used factorial randomized block design was used three replications. The first factor was bacterial inoculant: (a 0 ) without inoculant and (a 1 ) inoculant Azotobacter sp. and the second factor  was  organic  matter  with  different  doses:  (b 0 )  dose  0%  and  (b 1 )  dose  100%. The result showed that there was an interaction between Azotobacter sp. inoculant and  without  organic  matter  application  could  increase  the  dry  weight  of  roots  in ramie plants.
Keywords: Azotobacter, Boehmeria nivea, Petroleum Hydrocarbons,

## Phytoremediation
Abstrak. Fitoremediasi  dalam  tanah  yang  terkontaminasi  dengan  petroleum hidrokarbon  adalah  teknologi  untuk  meremediasi  kontaminan  menggunakan tanaman  sebagai  fasilitator  ketersediaan  nutrisi  untuk  mendegradasi  mikroba  di perakaran. Fitoremediasi  dapat  ditingkatkan oleh  inokulan Azotobacter sp.  Untuk meningkatkan  kesuburan  tanah,  juga  menghasilkan  biosurfaktan. Penelitian  ini bertujuan untuk menguji pengaruh interaksi dari inokulan Azotobacter sp. dan bahan organik  berupa  pupuk  kandang  sapi  dalam  fitoremediasi  tanaman  rami  pada  tanah yang  dicemari  limbah  minyak  bumi.  Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Biologi  Tanah  dan  Rumah  Kaca  Fakultas  Pertanian,  Universitas  Padjadjaran  dari bulan Februari 2019 sampai dengan April 2019. Metode penelitian ini menggunakan Rancangan  Acak Kelompok pola faktorial, faktor pertama adalah inokulan bakteri: (a 0 ) tanpa inokulan dan (a 1 ) inokulan Azotobacter sp. dan faktor kedua adalah bahan organik  dengan  dosis  yang  berbeda:  (b 0 )  dosis  0%  dan  (b 1 )  dosis  100%.  Hasil penelitian menunjukan bahwa terdapat interaksi antara inokulan bakteri Azotobacter sp. dan tanpa pemberian bahan organik dapat meningkatkan berat kering akar pada tanaman rami.
Kata-kata kunci: Azotobacter, Boehmeria nivea,,fitoremediasi, Petroleum Hydrocarbons

## PENDAHULUAN
Teknik  pengelolaan  lingkungan  fitoremediasi  adalah  salah  satu  penanganan  limbah  dengan menggunakan  tanaman  sebagai  akumulator  untuk  penyerapan  kandungan  tercemar  dan  dapat berasosiasi  dengan  mikroorganisme.  Tanaman  yang digunakan  dalam  proses fitoremediasi  dalam penelitian  ini  yaitu  tanaman  rami  (Boehmeria  nivea)  karena  mempunya  kemampuan  penghasil  serat yang  tinggi  serta  serbagai  akumulator  pada  lingkungan  yang  tercemar  seperti  limbah  minyak  bumi (Suherman et al. 2016, Pratiwi et al. 2018).
Bakteri Azotobacter sp. merupakan bakteri non simbiotik yang hidup di daerah sekitaran rhizosfer dan  mampu mendegradasi limbah  seperti  logam  berat  pada  tanah  yang  tercemar  (Khotimah  dan Zulaika 2014). Penggunaan inokulan Azotobacter mampu  menurunkan konsentrasi hidrokarbon pada tanah yang tercemar limbah minyak bumi (Fauzi dan Suryatmana 2016). Penambahan inokulan bakteri Azotobacter pada proses fitoremediasi dapat membantu dalam meningkatkan ketersediaan unsur hara di dalam tanah terutama unsur nitrogen.
Penggunaan  bahan  organik  pada  lahan  tercemar  dapat  membantu  proses  fitoremediasi  yaitu ameliorasi tanah, sehingga bahan organik mampu memperbaiki kondisi tanah baik secara fisik, kimia, dan biologi (Widyati 2009). Kombinasi aplikasi dari inokulan Azotobacter dan bahan organik dalam mekanisme  fitoremediasi  diduga  mampu  dalam  memenuhi  ketersediaan  nutrisi  yang  cukup  bagi tanaman untuk tumbuh dan memproduksi eksudat akar yang baik. Eksudat akar yang dihasilkan oleh tanaman merupakan sumber nutrisi bagi mikroba tanah yang hidup dalam tanah, sehingga kondisi ini dapat  meningkatkan  degradasi  hidrokarbon.  Pemberian  bakteri Azotobacter dapat  menghasilkan biosurfaktan yang diperlukan untuk meningkatkan kelarutan limbah minyak bumi dalam air, sehingga mempercepat proses pemecahan rantai hidrokarbon oleh mikroba pendegradasi minyak bumi (Eckford et al. 2002).
Pada  penelitian  sebelumnya  menurut Fauzi  and  Suryatmana (2016) gabungan  inokulan Azotobacter sp. dosis 1%  dan  jamur  petrofilik dosis 2%  mampu  meningkatan  laju  degradasi hidrokarbon  sebesar  0.22  ppm/hari.  Kemudian  pada  penelitian Pratiwi  et  al. (2018)  membuktikan bahwa  dengan  memberikan  inokulan Azotobacter sp.  dosis  2%  dan jamur  pelarut  fosfat  dosis  2% dapat  meningkatkan jumlah  klorofil  sebesar  25.33  cci  pada  tanaman  rami  yang  terkontaminasi  oleh crude oil. Oleh karena itu, penggunaan teknologi fitoremediasi dengan memanfaatkan inokulan bakteri Azotobacter yang digabungkan dengan bahan organik pada tanah yang dicemari limbah minyak bumi perlu  dikaji  untuk  mengetahui  pengaruh  antara  faktor  perlakuan  terhadap  efisiensi  degradasi hidrokarbon, peningkatan total populasi bakteri Azotobacter, kemasaman tanah, volume akar dan berat kering akar tanaman rami.

## MATERI DAN METODE

## Bahan dan Metode
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Tanah  dan  Rumah  Kaca  Fakultas  Pertanian, Universitas  Padjadjaran.  Penelitian  ini  dilaksanalan  dari  bulan  februari  sampai  bulan  April  2019. Metode penelitian ini menggunakan rancangan acak kelompok pola faktorial dengan 3 ulangan. Faktor pertama adalah inokulan bakteri: (a 0 ) tanpa inokulan dan (a 1 ) inokulan Azotobacter sp. dosis 4% dari jumlah  beban  limbah  minyak  bumi. Faktor  kedua  adalah  bahan  organik  dengan  dosis  yang  berbeda: (b 0 ) dosis 0% dan (b 1 ) dosis 100% dari 10 ton.ha -1 . Pengujian data analisis statistik dilakukan dengan menggunakan Uji jarak Berganda Duncan pada taraf nyata 5%.
Tanaman  rami  yang  digunakan  yaitu  varietas  Lembang berasal  dari  Wonosobo,  Jawa  tengah diperbanyak dengan cara stek (rizome) selama 90 hari dan saat penanaman dipangkas pada ketinggian 50  cm  secara  merata  pada  setiap  tanaman.  Dosis  inokulan Azotobacter sp. yang  digunakan  4%  dari beban limbah minyak bumi yang diaplikasikan yaitu sebesar 7% (378 gram) pada pot dengan volume tanah sebanyak 5 kg, diperoleh dosis inokulan Azotobacter sp. yaitu 15.12 ml untuk setiap pot.

## Prosedur Percobaan
Analisis tanah awal pada tanah Inceptisols Jatinangor yang digunakan pada penelitian ini meliputi analisis fisika (tekstur tanah), biologi (populasi total bakteri Azotobacter), dan analisis kimia (pH H 2 O, pH KCl, N total, C/N, P 2 O 5 , KTK, dan kejenuhan basa). Sampel tanah yang diambil dari beberapa titik kemudian dikompositkan, kedalaman pengambilan sampel 10 cm dari permukaan tanah. Sampel tanah dibersihkan  dari sisa-sisa  tanaman,  kemudian  dikeringkan,  dihaluskan  lalu  disaring  menggunakan saringan ukuran 2 mm.
Bakteri Azotobacter sp. yang  digunakan  pada  penelitian  ini  diisolasi  dari  tanah  Inceptisol  pada perakaran  tanaman  ubi  cilembu.  Selanjutnya  bakteri Azotobacter sp. ditumbuhkan  pada  media  cair ashbys selama satu minggu dengan jumlah populasi kepadatan 45 × 10 -7 cfu.ml -1 untuk diaplikasikan pada tanaman rami. Bahan organik yang digunakan berupa pupuk kandang sapi, dengan aplikasi dosis untuk tanaman rami yaitu 10 ton.ha -1 yang diaplikasikan sebelum tanam, setelah itu diinkubasi selama 5  hari.  Tanah  yang  sudah  aplikasikan  bahan  organik  kemudian  dicampurkan  dengan  minyak  limbah bumi  sesuai  dengan  perlakuan,  setelah  itu  dinkubasi  selama  satu  hari.  Selanjutnya  aplikasi  inokulan Azotobacter sesuai  perlakuan  dan  dilanjutkan  dengan  penanaman  rami.  Pemberian  pupuk  anorganik urea, sp36 dan KCl diberikan seminggu setelah penanaman rami. Dosis yang digunakan yaitu ½ dari dosis  anjuran  untuk  tanaman  rami,  aplikasi  pertama  diberikan  ¼  dosis  pada  saat  seminggu  setelah tanam dan sisanya diberikan 2 minggu setelah tanam. Pengamatan yang diamati pada tanaman rami ini diantaranya  efisiensi  degradasi  hidrokarbon menggunakan  metode  gravimetri,  peningkatan  populasi bakteri Azotobacter sp. menggunakan  metode Total  Plate  Count, kemasaman  tanah diukur menggunakan alat pH meter tanah, volume akar dihitung dengan cara merendam akar pada gelas ukur dan diamati peningkatan volume air saat perendaman akar dalam gelas ukur tersebut dan berat kering akar tanaman  rami diukur  dengan  cara  menghitung  berat  basah  tanaman  untuk  berat  awal  dikurangi berat kering yang telah dikeringkan di oven selama 2 hari pada suhu 70 o C .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Efisiensi Degradasi Hidrokarbon pada Tanaman Rami
Berdasarkan  pada  Tabel  1.  memperlihatkan bahwa  faktor  inokulan Azotobacter sp.  dan  bahan organik  tidak  terdapat  interaksi  terhadap  efisiensi  degradasi  hidrokarbon.  Hal  ini  disebabkan  oleh beberapa  faktor  seperti  mikroorganisme  tanah,  kemasaman  tanah,  dan  C/N  rasio dari  bahan  organik yang  kurang mendukung  untuk  pertumbuhan  tanaman  rami  dan  biodegradasi  hidrokarbon  minyak bumi.
Tabel 1. Efisiensi  degradasi  hidrokarbon  tanaman  rami  selama  70  hari  setelah  perlakuan  akibat pemberian inokulan Azotobacter sp. dan bahan organik
Faktor perlakuan Efisiensi Degradasi Hidrokarbon (%) Inokulan bakteri Azotobacter sp. (A) A 0 : Kontrol 77.43 A 1 : Azotobacter sp. 77.38 Bahan organik (B) B 0 : dosis 0% 82.85 B 1 : dosis 100% 71.95
Keterangan : Nilai  rata- rata  perlakuan  yang  tidak  diberi notasi  huruf  menandakan  faktor  perlakuan  tidak  berpengaruh nyata terhadap respon berdasarkan analisis ragam pada taraf nyata 5%
Tanaman  rami  memiliki  perakaran  kuat  serta  berfungsi  sebagai  tempat  menimbun  cadangan energi untuk proses pertumbuhan tanaman tersebut (Subandi 2011). Kemampuan tanaman rami dapat hidup  di lahan  tercemar,  salah satu  penelitian  yang  diamati  pada tanaman  rami dapat  hidup  di  tanah yang  terkontaminasi  seperti  As,  Cd,  Pb  dan  Zn  mampu  tumbuh  dan  memiliki  ketebalan  kulit  pohon rata-rata 10% dari diameter batang (Yang et al. 2010). Sistem perakaran yang kuat pada tanaman rami sehingga dapat hidup di lingkungan tanah yang terkonaminasi limbah minyak bumi.
Mikroorganisme  dalam  tanah  biasanya  berkoloni  pada  daerah  sekitar  perakaran  karena  akar mengeluarkan sekresi berupa eksudat akar. Akar tanaman dapat menghasilkan eksudat akar sebanyak 10-20% dari hasil fotosintesis tanaman (Salt et al. 1998), sehingga dapat menunjang pertumbuhan dan aktivitas metabolisme bakteri yang ada di perakaran tanaman.
Adapun penyebab lainnya C/N rasio dari bahan organik pupuk kandang sapi belum matang ketika diaplikaiskan. Berdasarkan data analisis bahan organik menunjukkan bahwa jumlah C/N rasio berada di 33.76. Jumlah tersebut dikatakan belum matang untuk diaplikaiskan pada tanaman, C/N rasio yang baik  untuk  tanaman  yaitu  dibawah  20  untuk  pupuk  kandang  sapi (Hartatik  dan  Widowati 2013). Penggunaan aplikasi inokulan Azotobacter sp. dan bakteri indigenous yang melimpah di tanaman rami diduga  berperan  ganda  dalam  mematangkan  bahan  organik  serta  menyediakan  unsur  hara  untuk tanaman.

## Peningkatan Total Populasi Azotobacter sp. pada Tanaman Rami
Tabel 2. memperlihatkan faktor perlakuan inokulan Azotobacter sp. dan bahan organik tidak ada interaksi  terhadap  peningkatan  total  populasi Azotobacter sp.  pada  waktu  T0  dan  T70.  Pada  awal pengamatan menunjukkan bahwa perlakuan kontrol populasi bakteri Azotobacter sp. lebih tinggi dan populasi aplikasi tanpa bahan organik lebih tinggi saat pengamatan hari ke-70. Hal ini disebabkan oleh adanya bakteri pemfiksasi nitrogen indigenus yang dominan pada tanah yang dicemari limbah minyak bumi.  Sejalan  dengan  pernyataan Fibach-Paldi et  al. (2012) bahwa  bakteri  indigenous  dapat mengkolonisasi disekitaran rizosfer tanaman untuk meningkatkan pertumbuhan dan produksi tanaman serta lebih adaptif terhadap lingkungan yang tercekam.

## Tabel 2. Peningkatan populasi bakteri Azotobacter sp. pada tanaman rami akibat pemberian inokulan
Azotobacter sp. dan bahan organik
Faktor perlakuan Populasi Azotobacter sp. (cfu.ml -1 ) T0 (10 -4 ) T70 (10 -7 ) Inokulan bakteri Azotobacter sp. (A) a 0 : Kontrol 5.90 8.65 a 1 : Azotobacter sp. 5.53 8.68 Bahan organik (B) b 0 : 0% 5.56 8.67 b 1 : 100% 5.88 8.66
Keterangan : Nilai rata- rata perlakuan yang tidak diberi notasi huruf menndakan faktor perlakuan tidak berpengaruh nyata terhadap respon berdasarkan analisis ragam pada taraf nyata 5%
Ketersediaan  sumber  karbon  yang  terbatas  untuk  bakteri Azotobacter karena  adanya  kompetisi. Mikroba-mikroba yang ada dalam tanah maupun di sekitaran rizosfer berkompetisi dalam memperoleh sumber  nutrisi  untuk  aktivitas  metabolismenya (Franchi et  al. 2017). Sumber  karbon  yang  terbatas mengakibatkan  pembentukan  biomassa  sel  bakteri  menjadi  terhambat,  karena  sumber  karbon  yang dibutuhkan sebanyak 50% untuk pembentukan sel (Nugroho 2006).

## Kemasaman Tanah pada Tanaman Rami
Pada Tabel 3. menunjukkan bahwa faktor perlakuan inokulan bakteri Azotobacter sp. dan bahan organik  tidak  ada  interaksi  terhadap  kemasaman  tanah  pada  tanaman  rami.  Hal  ini  disebabkan oleh faktor  dekomposisi  bahan  organik  yang  ada  di  dalam  tanah.  Bahan  organik  yang  diaplikasikan  pada tanah  memiliki  rasio  C/N  cukup  tinggi  yaitu  sebesar  33.76,  hal  tersebut  berpengaruh  terhadap dekomposisi bahan organik dalam tanah.
Kecepatan dekomposisi bahan organik dipengaruhi dari nilai C/N rasio, semakin tinggi nilainya maka  akan  sulit  untuk  didekomposisi (Supadma dan  Arthagama 2008).  Dekomposisi  pertama  saat bahan  organik  diaplikasikan  ke  dalam  tanah  yaitu  pematangan  bahan  organik  dibantu  oleh mikroorganisme  didalamnya  dan  menghasilkan  dari  proses  tersebut  berupa  ion  H + . Selanjutnya dekomposisi  bahan  organik  oleh  mikroorganisme  menghasilkan  berupa  unsur-unsur  yang  dapat dimanfaatkan  oleh  tanaman  serta  unsur  berupa  ion  H + yang  menyebabkan  kadar  kemasaman meningkat (Winarni et  al. 2015).  Akumulasi  jumlah  ion  H + dalam  tanah  dari  proses  dekomposisi
tersebut  mempengaruhi  tingkat  kemasaman  pada  tanaman  rami,  sehingga  rata-rata  nilai  kemasaman berada di angka 5.
Tabel 3. Kemasaman tanah pada tanaman rami akibat pemberian inokulan Azotobacter sp. dan bahan organik
Faktor perlakuan Kemasaman Tanah Inokulan bakteri Azotobacter sp. (A) a 0 : Kontrol 5.36 a 1 : Azotobacter sp. 5.50 Bahan organik (B) b 0 : dosis 0% 5.53 b 1 : dosis 100% 5.30
Keterangan : Nilai rata- rata perlakuan  yang tidak diberi notasi huruf menndakan faktor perlakuan tidak berpengaruh nyata terhadap respon berdasarkan analisis ragam pada taraf nyata 5%

## Volume Akar pada Tanaman Rami
Berdasarkan Tabel 4. faktor perlakuan inokulan bakteri Azotobacter sp. dan bahan organik tidak ada  interaksi  terhadap  volume  akar  pada  tanaman  rami.  Namun  pada  perlakuan  mandiri  inokulan Azotobacter sp. memperlihatkan volume akar lebih besar dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Hal ini  dikarenakan  bakteri Azotobacter sp.  dapat  berasosiasi  dengan  akar  tumbuhan (Puspitasari et  al. 2012).
Tabel 4. Volume  akar  pada  tanaman  rami  akibat  pemberian  inokulan Azotobacter sp.  dan  bahan organik
Faktor Perlakuan Volume Akar (ml) Inokulan bakteri Azotobacter sp. (A) a 0 : Kontrol 62.33 a 1 : Azotobacter sp. 83.16 Bahan organik (B) b 0 : dosis 0% 74.33 b 1 : dosis 100% 71.16
Keterangan : Nilai rata- rata perlakuan yang tidak diberi notasi huruf menndakan faktor perlakuan tidak berpengaruh nyata terhadap respon berdasarkan analisis ragam pada taraf nyata 5%
Peningkatan  jumlah  volume  akar  pada  tanaman  rami  adalah  salah  satu  hasil    pertumbuhan tanaman yang kompetitif dalam pemanfaatan hasil asimilasi (Gardener et al. 1991) dalam (Setiawati et al. 2014). Ketersediaan unsur hara nitrogen yang cukup pada tanah dapat meningkatkan volume akar tanaman rami akibat pemberian pupuk anorganik serta ditunjang dengan inokulan bakteri Azotobacter sp. sebagai penambat nitrogen (Danapriatna dan Simarmata 2011).

## Berat Kering Akar pada Tanaman Rami
Interaksi antara inokulan bakteri Azotobacter sp. dan bahan organik berpengaruh nyata terhadap berat kering akar tanaman rami. Jumlah berat kering akar yang paling tinggi terdapat pada perlakuan a 1 b 0 (inokulan  bakteri Azotobacter sp.  +  bahan  organik  0%)  dan  a 0 b 1 (tanpa  inokulan bakteri Azotobacter sp.  +  bahan  organik  100%)  masing  masing  sebesar  71,02  gram  dan  69.73  gram.  Nilai jumlah  berat  kering  akar yang  tinggi  pada  perlakuan  a 1 b 0 (inokulan  bakteri Azotobacter sp.  +  bahan organik 0%) disebabkan oleh adanya senyawa biosurfaktan yang dihasilkan Azotobacter sp.
Tabel 5. Pengaruh  Inokulan Azotobacter sp.  dan Bahan  Organik  terhadap  Berat  Kering  Akar Tanaman Rami (gram)
Faktor perlakuan Inokulan Bakteri Azotobacter sp. (A) Bahan organik (b) a 0 (kontrol) a 1 (Azotobacter sp.) b 0 (dosis 0%) 35.89 a A 71.02 b
A b 1 (dosis 100%) 69.73 a 46.79 a
B A
Biosurfaktan  dapat  mengubah  tegangan  permukaan  antara  air  dan  minyak  bumi  menjadi menurun,  sehingga  kondisi  ini  menyebabkan  terbentuknya  minyak  dan  air (Suryatmana 2006). Biosurfaktan menyebabkan sel mikroba lebih mudah dalam menggunakan substrat hidrokarbon karena sel bakteri menjadi lebih hidrofobik (Helmy et al. 2008). Penggunaan sustrat karbon sebagai sumber energi  memudahkan  bakteri Azotobacter sp.  untuk  melaukan  fiksasi  nitrogen  dari  atmosfer. Ketersediaan  nitrogen  yang  cukup  pada  perlakuan  a 1 b 0 (inokulan  bakteri Azotobacter sp.  + bahan organik  0%) dapat  meningkatkan  berat  kering  akar    tanaman  rami  karena  nitrogen  merupakan  unsur hara yang berepran penting dalam pembentukan akar (Danapriatna dan Simarmata 2011).
Perlakuan  a 0 b 1 (tanpa  inokulan  bakteri Azotobacter sp.  +  bahan  organik  100%)  memiliki  nilai yang  tinggi  pada  berat  kering  akar tanaman  rami  disebabkan  oleh  aktivitas  bakteri Azotobacter indigenus  dalam  meningkatkan  unsur  hara  nitrogen  tersedia  bagi  tanaman  rami.  Bakteri  indigenus Azotobacter yang  mengkolonisasi  di  bagian  perakaran  tanaman  mampu  memfiksasi  nitrogen  untuk menyediakan  unsur  hara  bagi  tanaman (Fibach-Paldi et  al. 2012).  Kebutuhan  unsur  hara  nitrogen ditunjang  juga  dengan  pemberian  pupuk  anorganik  pada  tanaman  rami,  sehingga  pertumbahan tanaman terutama bagian akar dapat meningkat.

## SIMPULAN
Faktor  inokulan Azotobacter sp.  dan  dosis  bahan  organik  tidak  menunjukkan  adanya  pengaruh interaksi terhadap  parameter  efisiensi  degradasi  hidrokarbon,  peningkatan  total populasi Azotobacter sp.,  kemasaman  tanah,  dan  volume  akar  tanaman  rami.  Interaksi  inokulan  bakteri Azotobacter sp. dengan  dosis  bahan  organik  memberikan  hasil  terbaik  terhadap  berat  kering  akar  tanaman  rami. Perlakuan a 1 b 0 (inokulan Azotobacter sp. + tanpa bahan organik) memperlihatkan nilai tertinggi pada parameter  berat  kering tanaman.  Bahan  organik  tidak  berpengaruh  diakibatkan pupuk  kandang  sapi yang  belum  matang  dicirikan  dengan  C/N  rasio  yang  masih  tinggi,  sehingga  perlakuan  kombinasi inokulan Azotobacter sp. dan bahan organik kurang optimum pada penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Danapriatna N, T Simarmata. 2011. Viabilitas pupuk hayati penambat nitrogen (Azotobacter dan Azospirillum) ekosistem padi sawah pada berbagai formulasi bahan pembawa. J. Agribisnis dan Pengemb. Wil. 3(1): 1 – 10. Eckford R, FD Cook, D Saul, J Aislabie, R Eckford, FD Cook, D Saul, J Aislabie, J Foght. 2002. Free-Living Heterotrophic  Nitrogen-Fixing  Bacteria  Isolated  from  Fuel-Contaminated  Antarctic  Soils. Am.  Soc. Michrobiology 68(10): 5181 – 5185.
Fauzi M, P Suryatmana. 2016. Bioremediation of crude oil waste contaminated soil using petrophilic consortium and Azotobacter sp. J. Degrad. Min. Lands Manag. 3(January): 521 – 526.
Fibach-Paldi S, S Burdman, Y Okon. 2012. Key physiological properties contributing to rhizosphere adaptation and plant growth promotion abilities of Azospirillum brasilense. FEMS Microbiol. Lett. 326(2): 99 – 108. Franchi  E,  E  Rolli,  R  Marasco,  G  Agazzi,  S  Borin,  P  Cosmina,  F  Pedron,  I  Rosellini,  M  Barbafieri,  G Petruzzelli.  2017.  Phytoremediation  of  a  multi  contaminated  soil:  mercury  and  arsenic  phytoextraction assisted  by  mobilizing  agent  and  plant  growth  promoting  bacteria. J.  Soils  Sediments 17(5):  1224 – 1236Available at http://dx.doi.org/10.1007/s11368-015-1346-5. Hartatik W, LR Widowati. 2013. Pupuk Kandang. Bogor. Helmy Q, P Suryatmana, E Kardena, N Funamizu. 2008. Biosurfactants Production from Azotobacter sp . and its Appli- cation in Biodegradation of Petroleum Hydrocarbon. J. Appl. Ind. Biotechnol. Trop. Reg. 1: 1 – 5. Khotimah K, E Zulaika. 2014. Azotobacter sebagai Bioakumulator Merkuri. J. Sains Pomits 3(2): 7 – 9. Nugroho A. 2006. Biodegradasi Sludge Minyak Bumi dalam Skala Mikrokosmos : Simulasi Sederhana Sebagai Kajian Awal Bioremediasi Land Treatment. MAKARA, TEKONOLOGI 10(2): 82 – 89.
Pratiwi  GA,  D Herdiyantoro, P Suryatmana.  2018.  Pengaruh  Pupuk  Hayati  dan  Dosis Azotobacter  Sp.  dalam Fitoremediasi Menggunakan Tanaman Rami (Boehmeria Nivea L. Gaud) pada Tanah Tercemar Hidrokarbon Minyak Bumi. J. Teknol. Pertan. Andalas 22: 13 – 21.
Puspitasari  FD,  M  Shovitri,  ND Kuswytasari.  2012.  Isolasi  dan  Karakterisasi  Bakteri  Aerob  Proteolitik  dari Tangki Septik. J. SAINS DAN SENI ITS 1(1): 3 – 6. Salt DE, RD Smith, I Raskin. 1998. Phytoremediation. Annu. Rev. Plants Physiol. 49: 644 – 661.
Setiawati  MR,  R  Wulansari,  E Pranoto.  2014.  Perbandingan  Efektivitas  Pupuk  Hayati  Konsorsium  dan  Pupuk Hayati Endofitik terhadap Produktivitas dan Kesehatan Tanaman Teh Menghasilkan Klon GMB 7. J. Penelit.
Teh dan Kina 17(2): 71 – 82 Available at https://tcrjournal.com/index.php/tcrj/article/download/48/29. Subandi M.  2011.  Budidaya  Tanaman  Perbenunan  (Bagian  Tanaman  Rami)  (M  Subandi,  Ed.).  Gunung  Djati Press, Bandung.
Suherman C, A Nuraini, R Damayanthi. 2016. Pengaruh konsentrasi giberelin dan pupuk organik cair asal rami terhadap  pertumbuhan  dan  hasil  tanaman  rami  (Boehmeria  nivea  L.  (Gaud))  klon  Ramindo  1. J.  Kultiv. 15(3): 164 – 171.
Supadma  AN, DM Arthagama.  2008.  Uji  Formulasi  Kualitas  Pupuk  Kompos  yang  Bersumber  dari  Sampah Organik dengan Penmabhan Limbah Ternak  Ayam, Sapi, Babi, dan tanaman Pahitan. J. Bumi Lestari 8(2): 113 – 121.
Suryatmana P.  2006.  Biodegradasi  Hidrokarbon  Minyak  Bumi  dengan  Penambahan  Azotobacter  chroococcum AC04 sebagai Bakteri Penghasil Biosurfaktan Suryatmana, P. 2006 [Disertasi]. Bandung : Institut Teknologi Bandung. Disertasi Bandung(Institut Teknologi Bandung): 2006.
Widyati E.  2009.  Pemanfaatan  Sludge  Industri  Pulp  dan  Kertas  Sebagai  Amelioran  Tanah  untuk  Memacu Rehabiltasi Lahan. J. Selulosa 44(1): 41 – 48.
Winarni M, P Yudono, D Indradewa. 2015. Karakterisasi Pola Mineralisasi N Pupuk Organik Pada Tanah Sawah Organik. J. Agri-Tek 16: 93 – 103.
Yang  B,  M  Zhou,  WS  Shu,  CY Lan,  ZH  Ye,  RL  Qiu,  YC  Jie,  GX  Cui,  MH Wong.  2010.  Constitutional tolerance to heavy metals of a fiber crop, ramie (Boehmeria nivea), and its potential usage. Environ. Pollut. 158: 551 – 558.