## RIMPANG KECOMBRANG (Etlingera elator Jack.) SEBAGAI SUMBER FENOLIK
Rezki Amriati Syarif 1 , Firdha Sari 2 , Aktsar Roskiana Ahmad 3
Universitas Muslim Indonesia, Jl. Urip Sumiharjo KM 5 Makassar 90132, Indonesia
1 amriati.syarif@ymail.com

## ABSTRACT
Kecombrang  (Etlingera  elatior  Jack.)  is  one  of  the  plants  growing  in  the  area  of Palopo, South  Sulawesi. Kecombrang included in the Zingiberaceae family and rhizome of kecombrang widely used by the community as an antioxidant.  This  research  aimed  to  determine  the  phenolic  content  on  the  methanol  extract  of  the  rhizome kecombrang. Methanol extract of rhizhome kecombrang obtained by maceration method with methanol P. Chemical component analysis used thin layer chromatography (TLC) is characterized by the appearance of spot. Determination of  the  phenolic  content  of  the  methanol  extract  of  rhizomes  kecombrang  used  the  TLC-densitometry. The  results showed  that  the  phytochemical  assay  on  methanol  extract  of  kecombrang  rhizomes  positively  countains  144.43  µg phenolic compounds.
Key words : Kecombrang (Etlingera elatior Jack.), rhizhome, phenolic, TLC-densitometry

## I. PENDAHULUAN

## A. Latar Belakang
Kecombrang  merupakan  salah  satu  tanaman di  Indonesia  yang  sering  digunakan  sebagai  bahan sayuran  seperti  pecel  atau    sebagai  lalapan,  tanaman ini  memiliki  nama  latin  (Etlingera  elatior Jack.). Beberapa          tahun  terakhir  ini, kecombrang  menjadi pusat perhatian besar beberapa peneliti karena adanya aktivitas antibakteri dan antioksidan.
Komponen antioksidan pada bunga kecombrang  ternyata  memiliki  kekuatan  yang  cukup besar untuk meredam senyawa radikal bebas sehingga mencegah  terjadinya  oksidasi  yaitu  sebesar  92.92  %, dalam  0.5  g/ml  ekstrak  kecombrang  dengan  pelarut etanol (Krismawati, 2007).
Potensi  ekstrak  etanol  rimpang  kecombrang 11,61 ppm memiliki daya hambat terhadap Trichphyton  rubrum dan  10,27  ppm  terhadap Trichphyton  mentagrophytos.  Aktivitas  antifungi tersebut  memiliki  derajat  penghambatan  yang  setara dengan standar klotrimazol (Haris, 2009).
Tanaman kecombrang mengandung senyawa bioaktif seperti polifenol, alkaloid, flavonoid, steroid, saponin  dan  minyak  atsiri  yang  diduga  memiliki potensi  sebagai  antioksidan  (Haraguchi et  al 1998  ; Hudaya, 2010 ;  Akbar, 2008).
Bagian  bunga  kecombrang  mengandung beberapa  senyawa  kimia  yaitu  :  alkaloid,  flavonoid, polifenol,  steroid,  saponin,  dan  minyak  atsiri (Naufalin,  2005).  Hidayat  dan  Hutapea  (1991) meyatakan  bahwa  daun,  batang,  bunga  dan  rimpang patikala  atau  kecombrang  mengandung  saponin  dan
flavonoid di samping itu rimpangnya juga mengandung polifenol dan minyak atsiri.
Fungsi  fenolik  yang  berpotensi  sebagai antimikroba  dan  antioksidan,  maka  penelitian mengenai  kadar  fenolik  total  yang  terdapat  pada ekstrak rimpang kecombrang (Etlingera elatior Jack) dengan  menggunakan  metode  KLT-densitometri dianggap  perlu  dilakukan  dalam  penelitian  ini untuk menambah  data  ilmiah  tumbuhan  ini,  sehingga peranannya sebagai obat komplementer dan alternative  untuk  pencegahan  maupun  pengobatan terhadap penyakit dapat ditingkatkan dengan maksimal serta penggunaanya dapat lebih dipertanggungjawabkan oleh masyarakat.

## II. METODE PENELITIAN A. Pengambilan dan Pengolahan sampel
Rimpang  kecombrang  (Etlingera  elatior Jack.)  yang  telah  dipanen,  selanjutnya  dibersihkan dari kotoran yang melekat dengan cara dicuci dengan air  mengalir  kemudian  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan  pada  tempat  yang  tidak  terkena sinar  matahari  secara  langsung  kemudian  dipotong kecil-kecil, diserbukkan dan siap untuk diekstraksi.

## B. Ekstraksi
Serbuk rimpang kecombrang sebanyak 500 g dimasukkan  ke  dalam  wadah  maserasi,  lalu ditambahkan  pelarut metanol  sebanyak 2000  mL hingga simplisia tersebut terendam, dibiarkan selama 3  hari  dalam  bejana  tertutup  dan  terlindung  dari cahaya  matahari  langsung  sambil  diaduk  secara
periodik,    setelah  3  x  24  jam  dilakukan  penyaringan dan  ampasnya  dimaserasi  kembali  dengan  cairan penyari  yang  baru.  Maserasi  dilakukan  sebanyak  3 kali  dan  diperoleh  ekstrak metanol  cair.  Hasil penyarian yang diperoleh kemudian diuapkan dengan menggunakan  rotavapor sehingga  akan  diperoleh ekstrak kental.

## C. Pengujian Kualitatif Senyawa Fenolik
Ekstrak  kental sampel  dan  asam  galat secukupnya masing-masing dilarutkan dengan metanol,  selanjutnya  ditotolkan  pada  lempeng  KLT. Kemudian  lempeng  dielusi  dengan  campuran  pelarut butanol  ;  asam  galat  ;  air (BAW)  dengan perbandingan (6:1:3). Spot noda yang diperoleh pada lempeng setelah kering, lalu disemprot dengan FeCl 3 . Jika spot noda hasil penyemprotan tersebut berwarna biru  kehitaman  maka  sampel  tersebut  positif mengandung senyawa fenolik.

## D. Pengujian Kuantitatif Senyawa Fenolik 1. Pembuatan larutan standar asam galat
Asam  galat  ditimbang sebanyak 10  mg kemudian  dilarutkan  dengan  10  mL  metanol  p.a diperoleh  konsentrasi  1000  ppm  larutan  stok. Kemudian  dibuat  variasi  konsentrasi 100,  200,  300, 400,  dan  500  ppm dari  larutan  stok  dan dicukupkan dengan metanol p.a hingga 5 mL.

## 2. Pembuatan  larutan  ekstrak  metanol rimpang kecombrang
Ekstrak kental rimpang kecombrang ditimbang sebanyak  10  mg  kemudian  dilarutkan  dengan  10  mL metanol p.a.

## 3. Pengukuran pada KLT-Densitometri
Variasi  konsentrasi  larutan  stok  dan  larutan sampel  yang telah  dibuat,  masing-masing  ditotolkan sebanyak 5 µ L dengan menggunakan mikropipet pada lempeng  KLT  ukuran  10  x  10  cm.  Kemudian lempeng  dielusi  dalam  chamber  dengan  campuran pelarut  BAW  (6:3:1).  Noda  yang  terpisah  diamati dibawah  lampu  UV  254  nm,  lalu  diukur  dengan mengggunakan  KLT-Densitometri  pada  panjang gelombang maksimum 734 nm dan dilakukan analisis terhadap hasil scan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Tabel  1. Persen rendamen  ekstrak rimpang kecombrang (Etlingera elatior Jack.)
Tabel 2. Pengujian kualitatif senyawa fenolik ekstrak rimpang kecombrang (Etlingera elatior Jack.)
Keterangan  :    (+)    menunjukkan  adanya  senyawa fenolik
Tabel  3. Nilai  Rf  spot  noda  dibawah  lampu UV  254
nm Pelarut Berat sampel kering (g) Berat ekstrak (g) Rendamen (%) Metanol 500 32,43 2,76 Sampel Uji fenolik dengan FeCl3 Hasil pengamatan Nilai Rf Ekstrak metanol rimpang kecombrang Biru kehitaman + 0,9 No. Sampel Nilai Rf 1 2 3 4 5 6 7 8 Pembanding 1 Pembanding 2 Pembanding 3 Pembanding 4 Pembanding 5 Sampel 1 Sampel       2 Sampel       3 0,82 0,82 0,83 0,83 0,85 0,76 0,75 0,80
Tabel  4. Perhitungan  kadar  rata-rata  asam  galat  pada  ekstrak  metanol  rimpang  kecombrang    menggunakan  KLT- densitometri.
B. Pembahasan
Kecombrang (Etlingera elatior Jack.) merupakan  salah  satu  jenis  tananaman  rempah- rempah  asli  indonesia  yang  termasuk  dalam  familia Zingiberaceae yang  secara  tradisional  sudah  lama digunakan  dan  dimanfaatkan  masyarakat  sebagai obat-obatan dan penyedap rasa.
Kandungan  kimia  yang  paling banyak ditemukan  pada  tanaman  adalah  fenolik,  dimana senyawa  golongan  fenolik  diketahui  sangat  berperan terhadap  aktivitas  antioksidan,  semakin  besar kandungan  senyawa  golongan  fenolnya  maka semakin besar aktivitas antioksidannya.
Senyawa  fenol  meliputi  aneka  ragam senyawa  yang  berasal  dari  tumbuhan  yang  meliputi ciri  sama  yaitu  cincin  aromatik  yang  mengandung satu  atau  dua  penyulih  hidroksil.  Senyawa  fenol cenderung  mudah  larut  dalam  pelarut  polar  karena umumnya  mereka  sering  kali  berikatan  dengan  gula sebagai  glikosida,  dan  biasanya  terdapat  dalam vakuola  sel.  Salah  satu  contoh  senyawa  fenol  adalah asam galat.
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  menetukan kadar fenolik rimpang kecombrang (Etlingera elatior Jack.)  yang  berasal  dari  daerah  Palopo  Sulawesi Selatan.  Rimpang  kecombrang  tersebut  merupakan limbah yang tidak digunakan lagi, sehingga dari hasil penelitian  yang  diperoleh  nantinya  dapat  bermanfaat untuk pengembangan ilmu pengetahuan dan standarisasi obat bahan alam.
Sampel  rimpang  kecombrang  yang  telah dikeringkan  dibawah  sinar  matahari,  dimana  sampel rimpang  kecombrang  ini  dikeringkan  dibawah  sinar matahari  karena  tekstur  yang  keras.  Tujuan dikeringkannya rimpang kecombrang, dimana diketahui  bahwa  air  merupakan  media  pertumbuhan mikroorganisme yang dapat merusak sampel.
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  adalah maserasi dengan pelarut metanol. Maserasi merupakan  cara  penyarian  sederhana  yang  dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan
penyari.  Maserasi  sampel  dilakukan  lebih  dari  satu kali atau biasa dikenal dengan remaserasi. Remaserasi berarti  dilakukan  pengulangan  penambahan  pelarut setelah  dilakukan  penyaringan  maserat  pertama  dan seterusnya.  Alasan  penggunaan  pelarut  metanol karena  pelarut  ini  sangat  umum  digunakan dan mampu  untuk  mengekstraksi komponen-komponen fenolik dari bahan alam.
Dari  proses  ekstraksi  dengan  metode maserasi  dihasilkan  ekstrak  cair  yang  kemudian diuapkan  hingga  diperoleh  ekstrak  kental  sebanyak 32,43  g  dengan  persen  rendamen  6,48  %.  Penentuan persen  rendamen  ini bertujuan  untuk  mengetahui kadar  metabolit  sekunder  yang  terbawa  oleh  pelarut, namun  tidak  dapat  menentukan  jenis  senyawa  yang terbawa  tersebut.  Sehingga  dilanjutkan  dengan penelitian analisis kadar fenolik dengan menggunakan KLT-densitometri.
Uji  kualitatif  ekstrak  metanol  rimpang kecombrang  (Etlingera  elatior Jack.)  menggunakan metode kromatografi lapis tipis (KLT). Kromatografi lapis  tipis  adalah  salah  satu  cara  analisis  yang digunakan untuk memisahkan komponen secara cepat berdasarkan  prinsip  adsorbsi  dan  partisi  (Harborne, 1987).  Pada  uji  ini  digunakan  pembanding  fenolik yaitu  asam  galat  dan  digunakan  eluen  n-butanol  : asam  asetat  :  air  (6  :  1  :  3).  Pada  uji  ini  lempeng dielusi  dan  diperoleh  noda yang  kemudian  diamati dibawah  sinar  UV 254 lalu  disemprotkan  dengan pereaksi  spesifik  FeCl 3 .  Dan  pada  saat  diamati menunjukkan  hasil  positif  yang  ditandai  dengan munculnya  noda  yang  berfluoresensi  dengan  warna biru  kehitaman  pada  lempeng.  Berdasarkan  hasil skrining fitokimia ekstrak metanol rimpang kecombrang  pada  uji  kualitatif  diperoleh  nilai  Rf1 0,58  dan  nilai  Rf  untuk  pembanding  asam  galat  Rf1 0,58.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol rimpang  kecombrang  (Etlingera  elatior Jack.)  positif mengandung senyawa fenolik.
Analisis  kuantitatif dari suatu senyawa yang telah  dipisahkan  dapat  dilakukan  dengan  metode
Sampel Replikasi Luas area Kadar asam galat (µg/mL) Kadar rata- rata (µg/mL) Ekstrak metanol rimpang kecombrang 1 2 3 2720,46 3751,17 1575,91 145,91 185,97 101,43 144,43
analisis instrumental berdasarkan radiasi elektromagnetik dengan analit berupa noda pada plat. Penentuan  kadar  suatu  senyawa  dapat  menggunakan alat  KLT-Densitometri  dengan  cara  noda-noda  yang telah  terpisah  pada  lempeng  KLT  dimasukkan kedalam  alat  tersebut  kemudian  ditentukan  kadarnya berdasarkan  hubungan Area  Under  Curva (AUC) masing-masing  noda  pada  plat  (Schunack,  1990; Sherma, 1994).
Mekanisme  alat  KLT-Densitometri  sama seperti  dengan  alat  spektrofotometer,  perbedaannya terletak pada sampel kompartemen yaitu spektrofotometer  menggunakan  kuvet  sedangkan  alat KLT-Densitometri menggunakan lempeng. Rangkaiannya  berupa  sumber  cahaya menuju monokromator  untuk  mengubah  cahaya  polikromatik menjadi monokromatik
kemudian
cahaya dipancarkan  ke  sampel  kompartemen  (lempeng)  lalu dipantulkan,  cahaya  yang  dipantulkan  dideteksi dengan detektor dan diperkuat pembacaannya dengan amplivier dan hasil  yang diperoleh dibaca pada layar baca atau visual display (Sherma, 1994).
Penentuan  kadar  fenolik  pada  ekstrak metanol  rimpang  kecombrang  (Etlingera  elatior (Jack))  dilakukan  menggunakan  alat  Densitometer, dimana  keuntungannya  yaitu  pengerjaanya  lebih sederhana, bianyanya murah, waktu pengerjaan cepat, memiliki  kepekaan  tinggi  dalam  menganalisis senyawa  yang  akan  dideteksi. Dalam  pengerjaannya harus  diperhatikan  cara  penotolan  dan  volume  yang ditotolkan  harus  sama  (Kurniawan,  2014). Analisis ini menggunakan larutan  standar  fenolik  asam  galat dengan konsentrasi yakni 100, 200, 300, 400, dan 500 ppm. Digunakan  asam  galat  sebagai  larutan  standar karena  merupakan  salah  satu  fenol  alami  dan  stabil, serta  relatif  murah  dibanding  lainnya.  Asam  galat termasuk  dalam  senyawa  fenolik  turunan  asam hidroksibenzoat yang tergolong asam fenol sederhana.  Asam  galat  menjadi  pilihan  sebagai standar  ketersediaan  substansi  yang  stabil  dan  murni (Viranda,  2009).  Dan  pada  uji  ini  lempeng  dielusi dengan menggunakan eluen  n-butanol : asam asetat : air (6 : 1 : 3). Digunakan eluen tersebut karena eluen inilah yang cocok mengelusi sampel dan pembanding senyawa fenolik.
Analisis ekstrak metanol rimpang kecombrang secara  KLT-Densitometri  pada  panjang gelombang  254  nm,  diperoleh  nilai  Rf  untuk pembanding  asam  galat  100  ppm  adalah  0,82, pembanding  200  ppm  adalah    0,82,  pembanding  300 ppm adalah 0,83 dan nilai Rf untuk pembanding 400 ppm 0,83 dan  500  ppm  adalah  0,85.    Nilai  Rf  untuk sampel  I adalah  0,76, II  adalah  0,75 dan  nilai  Rf untuk  sampel  III  adalah  0,80.  Perbedaan  nilai  Rf disini kemungkinan pada saat  mengelusi dipengaruhi oleh  beberapa  faktor  misalnya  kejenuhan  chamber,
jumlah  analit  yang  ditotolkan,  serta  cara  penotolan yang  kurang  baik,  namun  perbedaan  tersebut  sangat kecil (Kurniawan, 2014).
Dari  hasil  analisis  kuantitatif  dihasilkan kadar  fenolik  pada  ekstrak      metanol rimpang kecombrang (Etlingera elatior
Jack.) dengan menggunakan
KLT-Densitometri
didapatkan persamaan  linier  y = 25,728x - 1033,7 dan diperoleh kadar    rata-rata  dari    3    replikasi    yaitu    sebanyak 0,14443 µg/ml.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan dapat  disimpulkan  bahwa,  ekstrak  metanol  rimpang kecombrang  memiliki  kadar  fenolik  sebanyak 0,14443 µg/mL.

## DAFTAR PUSTAKA
Adelia, 2010 . Penetapan Kadar Fenolik Total Ekstrak Metanol  Daun  Gedi (Abelmoschus  manihot (L)  Medik)  menggunakan  spektrofotometri UV-VIS.
Akbar  ,  J.  2008.  Pemanfaatan  ekstrak  bunga kecombrang  (Nicolaia  speciosa  Horan) terhadap penyembuhan infeksi jamur saprolegnia sp pada ikan nila merah.
Chang,  C.  Yang,  M.  Wen,  H.  and  Chern  J.
2002.Estimation  of  totalflavonoid  content  in Propolis by two complementary colorimetric methods. . Food and Drug A.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
2000.Penelitian  Tanaman  Obat Dibeberapa Perguruan  Tinggi  Indonesia  Edisi  X. Percetakan Negara : Jakarta.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia,  2007 INSIDE (inspirasi dan ide) Litbangkes P2B2 vol  II  ; Aedes  aegypti  vampir  mini  yang mematikan.
Badan peneliti dan pengembangan Kesehatan Depkes RI Jakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1987.Analisis  Obat  Tradisional.  Percetakan Negara ; Jakarta. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan,1986. Materi  Medika  Indonesia. Departemen Kesehatan RI; Jakarta
Ditjen  POM,  1989. Materi  Medika  Indonesia (Vol.5).Departemen Kesehatan RI: Jakarta.
Ditjen  POM,  2000. Parameter  Standar  Umum Ekstrak Ekstrak Tumbuhan Obat.Departemen Kesehatan RI: Jakarta
Haraguchi, H. et all. 1998. Antifungal activity from A.
Galanga and the competition for incorporation  of  unsarturated  Fatty  acid  in cell growth. Plant medicine.

## Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia  :  Penuntun
Cara  Modern  Menganalisa  Tumbuhan.
Terbitan Kedua. Terjemahan Kosasih Padmawinata  dan  Iwang  Soediro.ITB  :
Bandung.
Heinrich, M, 2009.Farmakognosi
dan
Fitoterapi.TerjemahanWinny  R.  Syarief,
EGC ; Jakarta.
Hudaya,  A.  2010.  Uji  antioksidan  dan  antibakteri ekstark  air  bunga  kecombrang (Etlingera elatior) sebagai  pangan  fungsional  terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.
Program  study  biologi,  FST,  Universitas Islam Negri Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Hodgson,  J.M.,  and  Kevin  D.C.,  2006,  Review Dietary flavonoids:effectson endothelial function and blood pressure, Sci Food Agric.
Kurniawan  A,  Malik,  A.  Najib,  2014. Comprative study  of  HPTLC  Finggerprint  Of-Asarone Content  between  Leaves  and  Rhizome  Of- Acorus  Calamus  L.  Fakultas  Farmasi. Universitas Muslim Indonesia: Makassar.
Muawanah et all, 2012. Laboratorium pengembanagan  teknologi  industri  agro  dan biomedika, BPPT-Puspitek Serpong.
Rohman,  A.  2007. Kimia  Farmasi  Analisis.  Pustaka Pelajar ; Yogyakarta.
Rohman, A. 2009. Kromatografi untuk Analisis Obat. Yogyakarta ; Graha Ilmu
Schunack,  W.  1990.Buku  pelajaran  kimia  farmasi (Edisi  2).  Yogyakarta;  Universitas  Gadjah Mada.
Shekar,  Chandra.  2009.  Classification  of  Documents Using  Kohonen’s  Self  O rganizing  Map. International  Journal  of  Computer  Theory dan  Engineering, Vol.1No.5  December
2009.
Sherma, J. 1994. Handbook of Thin-Layer Chromatography Third Edition. New York ; Marcel Dekker Inc.
Srivastava,M  .  2011.  High-Performance  Thin-Layer Chromatography  (HPTLC).  London  New York ; Springer Heidelberg Dordrecht.
Soegihardjo,C.J.  2013. Farmakognosi.Yogyakarta  ;
Citra aji Parama.
Seafast,  2012.Biosintesis  Senyawa  Fenolik.                14 September 2014. Seafast.ipb.ac.idtpc- projectw 2-biosintesis.pdf.
Sudjadi.  2010. Kimia  Analisis  Farmasi.  Pustaka Pelajar; Yogyakarta.
Tampubolon, O.T, Suhatsyah S, dan Sastraprajda. S. 1983. Penelitian pendahuluan kimia kecombrang (Nicolaia  speciosa  Horan)  . Risalah  Simposium  Penelitian  Tumbuhan Obat III. Fakultas Farmasi UGM yogyakarta.
Waterhouse,  1999. Folin – Ciocalteu  Micro  Method For  Total  Phenol  In  Wine.Department ofViticulture  &  Enology  University  Of California, Dav.