Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. terhadap Aktifitas Fagositosis Ikan Kakap Putih ( Lates calcarifer ) yang diinfeksi Bakteri Vibrio alginolyticus
Monica Azuwarita 1 , Rika Wulandari 1 , Aminatul Zahra 1*
1 Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji
INFO NASKAH

## ABSTRAK
Kata  Kunci:
Aktifitas Fagositosis, Bakteri Vibrio alginolyticus , Ikan Kakap Putih, Sargassum sp.
Sargassum sp. sebagai salah satu produk sintesis alami  memiliki sejumlah metabolit bioaktif seperti flavonoid yang dapat meningkatkan sistem pertahanan tubuh ikan dari serangan  penyakit. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian  ekstrak Sargassum sp.  yang  dicampurkan  ke  pakan  terhadap  aktifitas fagositosis ikan kakap putih yang diinfeksi bakteri Vibrio alginolyticus . Penelitian ini dilakukan menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap dengan 4 perlakuan dan 3 ulangan, dengan perlakuan K (ekstrak Sargassum sp. 0 ppm), A (ekstrak Sargassum sp.  50  ppm),  B  (ekstrak  Sargassum  sp.  70  ppm),  dan  C  (ekstrak  Sargassum  sp.  90 ppm).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak Sargassum sp.  pada pakan ikan kakap putih dan setelah diuji  tantang dengan bakteri Vibrio alginolyticus mampu  memberikan  pengaruh  terhadap  aktifitas  fagositosis.    Konsentrasi  terbaik didapatkan  pada  perlakuan  B  dengan  ekstrak Sargassum sp.  70  ppm  dengan  nilai aktifitas  fagositosis  tertinggi  sebesar  77,33%,  dan  kelangsungan  hidup  tertinggi 43,33%.
Gedung FIKP Lt. II Jl. Politeknik Senggarang, 29115, Tanjungpinang, Telp : (0771- 8041766, Fax. 0771 - 7004642. *Email: aminatulzahra@umrah.ac.id.
Effect  of Sargassum sp.  Extract  on  Phagocytic  Activity  of  White  Snapper ( Lates calcarifer ) Infected by Vibrio alginolyticus Bacteria
Monica Azuwarita 1 , Wulandari Rika 1 , Aminatul Zahra 1*
1 Department of Aquaculture, Faculty of Marine Science and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University
ARTICLE INFO ABSTRACT Keywords : Bacteria Vibrio
alginolyticus , Phagocytosis
Activity, Sargassum sp., White snapper .
Sargassum sp. as a natural synthesis product it has bioactive metabolites as flavonoid which  can  increase  the  fish  body's  defense  system  from  attacks  of  disease.  The purpose of this study was to determine the effect of Sargassum sp. added into the feed against  the  phagocytic  activity  of  white  snapper  infected  by Vibrio  alginolyticus bacteria. This research was conducted using a completely randomized design method with  4  treatments  and  3  replications,  with  K  treatments  ( Sargassum sp.  extract  0 ppm),  A  ( Sargassum sp.  extract  50  ppm),  B  ( Sargassum sp.  extract  70  ppm),  and  C ( Sargassum sp.  extract  90  ppm).  The  results  showed  that  the  administration  of Sargassum sp. extract in white snapper feed and after infected by Vibrio alginolyticus bacteria was able to giving effect  on phagocytic activity.  The  best concentration was obtained  in  treatment  B  with Sargassum sp.  extract.  70  ppm  with  the  highest phagocytosis  activity  value  of  77.33%,  and  the  highest  survival  rate  of  43.33%.
Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp  : (0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. *Email: aminatulzahra@umrah.ac.id.

## PENDAHULUAN
Salah  satu  komoditi  di  Kepulauan  Riau  adalah  ikan  kakap  putih  ( Lates calcarifer )  yang  banyak  diminati  oleh  konsumen  dan  mempunyai  harga  pasar yang  cukup  tinggi.  Menurut  Hikmayani et  al .  (2013)  permintaan  pasar  maupun ekspor ikan kakap putih cukup tinggi yaitu 98,86 ton/tahun. Hal ini membuat para pembudidaya  mengupayakan  jumlah  ikan  tetap  tersedia  untuk  permintaan  pasar dalam negeri dan ekspor. Salah satu indikator keberhasilan dalam usaha budidaya ikan  adalah  kondisi  kesehatan  ikan.  Sementara  itu  organisme  patogen  seperti bakteri  selalu  ada  dalam  perairan  yang  sewaktu  –  waktu  dapat  menginfeksi organisme  budidaya.  Salah  satu  penyakit  yang  sering  menginfeksi  ikan  kakap putih  adalah Vibriosis dimana  dapat  menyebabkan  kematian  massal  di  atas  50% pada  ikan  kakap  putih  dalam  waktu  1-2  minggu  paska  infeksi  (Mahardika  dan Mastuti,  2013).  Bakteri  tersebut  dapat  menurunkan  kualitas  daging  ikan  yang terinfeksi sehingga tidak sehat untuk dikonsumsi dan menimbulkan kerugian yang cukup besar pada usaha budidaya.  Oleh karena itu serangan penyakit merupakan masalah yang sangat penting untuk ditangani secara serius.
Pencegahan  terhadap  serangan  bakteri  pada  ikan  biasanya  dilakukan dengan  pemberian  antibiotik  dari  bahan  –  bahan  kimia.  Namun,  antibiotik menimbulkan  resistensi  mikrobia,  munculnya  sifat  resistensi  dan  infeksi patogenitas bakteri membuat para ilmuwan berupaya untuk menemukan alternatif obat  tanpa  residu.  Sahan et  al. (2015)  menyatakan  bahwa  alternatif penanggulangan  penyakit  adalah  memberikan  pakan  bernutrisi  yang  sekaligus memperkuat  kekebalan  atau  pertahanan  tubuh  ikan  itu  sendiri.  Salah  satu  upaya yang dilakukan adalah pemanfaatan organisme laut sebagai agen antibakteri alami (Setyaningsih et al. 2012). Berdasarkan hal tersebut, penggunaan alternatif bahan herbal  yang  dicampurkan  ke  dalam  pakan  yang  lebih  aman,  murah  dan  ramah lingkungan  perlu  dikembangkan. Sargassum sp.  merupakan  salah  satu  tumbuhan laut  yang  masih  kurang  pemanfaatannya  di  Kepulauan  Riau.  Menurut  hasil penelitian  Kurniawan  (2017)  ditemukan  makroalga  jenis Phaeyophyta (alga cokelat)  dengan  spesies  S argassum  polycarpum di  perairan  Desa  Teluk  Bakau,
Kabupaten  Bintan.  Selama  ini,  tumbuhan  laut  tersebut  hanya  dimanfaatkan sebagai  sumber  pakan  alternatif  manusia  atau  ternak.  Dolorosa et  al. (2017) menyatakan  bahwa Sargassum sp.  mengandung  senyawa  bioaktif  seperti Fucoxantin, steroid, phlorotannin, flavonoid, steroid, tannin, saponin, quinon dan alkaloid yang banyak digunakan dalam pengobatan dan industri farmasi. Beberapa  penelitian  telah  melaporkan  manfaat Sargassum sp.  sebagai salah  satu  produk  sintesis  alami  yang  memiliki  sejumlah  metabolit  bioaktif sebagai  senyawa  antibakteri.  Ridlo  dan  Pramesti  (2009)  melaporkan  bahwa pemberian  ekstrak Sargassum sp.  dengan  dosis  10  g/kg  pakan  mampu meningkatkan sistem pertahanan non spesifik aktifitas fagositosis pada udang ( Litopennaeus  vannamei ).  Penelitian  tentang  pemberian  ekstrak Sargassum sp. terhadap  aktifitas  fagositosis  ikan  kakap  putih  belum  pernah  dilakukan.  Oleh karena  itu,  perlu  dilakukan  penelitian  tentang  pemberian  ekstrak Sargassum sp. yang dicampurkan ke dalam pakan untuk meningkatkan  aktifitas fagositosis  ikan kakap putih yang diinfeksi bakteri Vibrio alginolyticus .

## BAHAN DAN METODE
Bahan  –  bahan  yang  akan  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu  sampel Sargassum sp.  di  dapatkan  dari  Pantai  Trikora,  Kabupaten  Bintan,  Provinsi Kepulauan  Riau,  ikan  kakap  putih  ( Lates  calcarifer ), Artemia  salina, bakteri Vibrio alginolyticus diperoleh  dari  koleksi  di  Balai  Perikanan  Budidaya  Laut Batam,  etanol  96%,  larutan  BaCl  1%,  larutan  H2SO4  1%,  putih  telur,  pellet Megami  Gr-4,  media  NB,  EDTA  ( Ethylene  Diamine  Tetra  Acid ),  alkohol, aquadest , tissu, kapas, aluminium foil, kertas saring whatman no 45, kertas label, kantong sampel, minyak cengkeh dan air laut.
Penelitian  ini  menggunakan  metode  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4 perlakuan  dan  3  ulangan.  Perlakuan  dan  dosis  yang  digunakan  dalam  penelitian sebagai berikut :
Perlakuan K : Ekstrak Sargassum sp. 0 ppm Perlakuan A : Ekstrak Sargassum sp. 50 ppm Perlakuan B : Ekstrak Sargassum sp. 70 ppm Perlakuan C : Ekstrak Sargassum sp. 90 ppm
1. Persiapan Ekstrak Sargassum sp. Sampel Sargassum sp.  diambil  di  Pantai Trikora  dan  dikeringkan  dengan cara  dijemur  dibawah  sinar  matahari  setelah  kering  sampel  diblender  hingga halus.  Sampel Sargassum sp.  ditimbang  sebanyak  500  g  dan  dibasahi  dengan pelarut  etanol  96%  sebanyak  1000  ml  (1  :  2)  kemudian  di  ekstraksi  dengan metode maserai.
2. Persiapan Wadah dan Ikan uji
Wadah yang digunakan yaitu 12 akuarium dengan ukuran 80 x 40 x 40 cm. Akuarium dicuci kemudian diisi air laut dari tandon. Ikan yang digunakan adalah ikan  kakap  putih  dengan  panjang  12  –  13  cm  dan  berat  27  –  29  g  sebanyak  210 ekor.
3. Persiapan Pakan dengan Penambahan Ekstrak Sargassum sp. Ekstrak Sargassum sp.  dengan  konsentrasi  sesuai  dengan  perlakuan dicampur  dengan  putih  telur  sebanyak  2  ml  sebagai  perekat.  Setelah  itu  larutan dikocok  hingga  tercampur  lalu  disemprot  hingga  merata  ke  pakan  kemudian pakan dikering anginkan setelah itu disimpan di wadah tertutup.
4. Pemeliharaan Hewan Uji
Ikan  terlebih  dahulu  diaklimatisasi  selama  3  hari.  Pada  hari  ke  4  ikan dipuasakan  ±  24  jam.  Pada  hari  ke  5  diberikan  pakan  perlakuan  selama  7  hari sebanyak  5%  dari  bobot  tubuh  ikan  (Anriyono  2018).    Pada  hari  ke  8  dilakukan uji tantang.
5. Uji Tantang
Uji tantang dilakukan dengan cara penyuntikan secara intra peritoneal (IP) pada  bagian  perut  dengan  konsentrasi  bakteri Vibrio  alginolyticus 1,2  x  10 9 CFU/ml  sebanyak  0,1  ml/ekor.  Pengamatan  dilakukan  selama  7  hari  dengan mengamati gejala klinis dan kelangsungan hidup ikan.
6. Pengukuran Kualitas Darah
Ikan  terlebih  dahulu  dipingsankan  menggunakan  minyak  cengkeh kemudian setelah pingsan sampel darah diambil secara intramuscular. Selanjutnya dilakukan pembuatan preparat ulas darah untuk pengamatan aktifitas fagositosis.
7. Parameter Penelitian
7.1. Aktifitas Fagositosis
Aktifitas fagositosis merupakan kemampuan organisme dalam memfagosit benda-benda  asing  yang  akan  menyerang  sistem  kekebalan.  Aktifitas  fagositosis diukur  berdasarkan  presentase  sel-sel  fagosit  yang  menunjukkan  proses fagositosis (Anderson dan Siwicki 1993).
Aktifitas fagositosis (%) = 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑒𝑙 𝑓𝑎𝑔𝑜𝑠𝑖𝑡 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑚𝑒𝑙𝑎𝑘𝑢𝑘𝑎𝑛 𝑓𝑎𝑔𝑜𝑠𝑖𝑡𝑎𝑠 jumlah sel fagosit yang diamati 𝑋 100

## 7.2. Kelangsungan Hidup (Survival Rate)
Penghitungan  kelangsungan  hidup  benih  ikan  kakap  putih  dengan  cara menghitung  jumlah  benih  yang  hidup  dan  yang  mati.  Adapun  rumus  yang digunakan untuk menghitung kelangsungan hidup menurut Effendi (2004) adalah:
SR (%) = 𝑁𝑡 𝑁0 x 100 Keterangan : SR = Kelangsungan Hidup (SR) Nt = Jumlah larva ikan yang hidup pada akhir pemeliharaan (ekor) N0 = Jumlah larva ikan yang hidup pada awal pemeliharaan (ekor)

## 7.3. Gejala Klinis
Pengukuran  gejala  klinis  diamati  dan  dicatat  selama  7  hari  pada  saat  uji tantang  dengan  bakteri Vibrio  algynoliticus .  Pengamatan  gejala  klinis  dilakukan dengan mengobservasi tingkah laku dan perubahan secara fisik ikan kakap putih.

## 7.4. Kualitas Air
Pengamatan  kualitas  air  dilakukan  dengan  mengukur  pH,  suhu,  salinitas dan  oksigen  terlarut.  pH,  suhu,  dan  oksigen  terlarut  diukur  menggunakan multitester sedangkan pengukuran salinitas menggunakan refraktometer.

## 8. Analisis Data
Data  penelitian  dianalisis  secara  kuantitatif  berupa  tabel  dan  grafik menggunakan  aplikasi  perangkat  lunak  pengolah  angka Microsoft  Excel dan pengolah  data  pada  uji  ANOVA  ( Analysis  of  Variance )  menggunakan  aplikasi statistik  IBM  SPSS  Statistic  25,  apabila  berbeda  signifikan  P  <  0,05  maka dilakukan uji lanjut dengan menggunakan Uji Tukey. Data kualitas air dianalisis secara deskriptif dan disajikan dalam bentuk tabel.

## HASIL
1. Aktifitas Fagositosis
Aktifitas fagositosis merupakan kemampuan organisme dalam memfagosit benda  asing  yang  akan  menyerang  sistem  kekebalan  tubuh.  Hasil  perhitungan aktifitas fagositosis pada ikan kakap putih dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1. Aktifitas fagositosis pada ikan kakap putih selama penelitian Keterangan  :  K  (Kontrol),  A  (Ekstrak Sargassum sp.  50  ppm),  B  (Ekstrak Sargassum sp. 70 ppm), C (Ekstrak Sargassum sp. 90 ppm). Huruf superscript yang berbeda di atas bar menunjukkan hasil yang berbeda nyata (P<0.05)
Gambar  1  menunjukkan  bahwa  aktifitas  fagositosis  pada  ikan  kakap putih  pra  perlakuan  pakan  mendapatkan  nilai  rata  –  rata  tertinggi  ada  pada perlakuan B (47,67±8,96%), diikuti oleh perlakuan C (47,67±3,21%), perlakuan A (47,00±5,57%),  dan  Kontrol  (46,67±8,33%).    Setelah  dianalisis  One  –  Way ANOVA  didapatkan  bahwa  aktifitas  fagositosis  pra  perlakuan  pakan  tidak berbeda signifikan (P > 0,05).
Aktifitas  fagositosis  pada  ikan  kakap  putih  pasca  perlakuan  pakan mendapatkan nilai rata – rata tertinggi ada pada perlakuan kontrol (46,67±5,69%), diikuti  oleh  perlakuan  C  (46,33±6,66%),  perlakuan  A  (45,67±2,08%),  dan perlakuan B (44,33±5,86%).  Setelah dianalisis One  – Way  ANOVA didapatkan bahwa  aktifitas  fagositosis  pasca  perlakuan  pakan  tidak  berbeda  signifikan  (P  > 0,05).
Aktifitas fagositosis pada ikan kakap putih pasca uji tantang mendapatkan nilai  rata  –  rata  tertinggi  ada  pada  perlakuan  B  (77,33±5,86%),  diikuti  oleh perlakuan  C  (72,67±3,06%),  perlakuan  A  (65,67±4,73%),  dan  kontrol (45,67±4,73%).    Setelah  dianalisis  One  –  Way  ANOVA  didapatkan  bahwa aktifitas  fagositosis  pasca  uji  tantang  berbeda  signifikan  (P  <  0,05)  kemudian dilakukan uji lanjut yaitu uji tukey. Setelah dilakukan uji lanjut pada parameter ini didapat  lah  kesimpulan  yaitu  perlakuan  kontrol  berbeda  nyata  dengan  perlakuan A,  B,  dan  C.  Perlakuan  A  berbeda  nyata  dengan  Kontrol  tetapi  tidak  berbeda nyata  dengan  Perlakuan  B  dan  C.  Perlakuan  B  berbeda  nyata  dengan  Kontrol tetapi tidak berbeda nyata dengan perlakuan A dan C. Perlakuan C berbeda nyata dengan  Kontrol  tetapi  tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  A  dan  B.  Proses penempelan  dan  penelanan  bakteri Vibrio  alginolyticus oleh  sel  leukosit  dapat dilihat pada gambar 2.
a a a a a a a a a b b b 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 90.00 K A B C A kt if it as F ago si to si s (% ) Perlakuan Pra perlakuan Pakan Pasca Perlakuan Pakan Pasca Uji Tantang
Gambar 2. A. Proses Penempelan, B. Proses Penelanan bakteri Vibrio Alginolyticus

## 2. Kelangsungan Hidup
Kelangsungan  hidup  ikan  kakap  putih  merupakan  hasil  dari  jumlah  ikan pada  akhir  penelitian  dibagi  dengan  jumlah  ikan  pada  awal  penelitian  dikali dengan 100%. Hasil pengamatan parameter kelangsungan hidup pada ikan kakap putih selama penelitian dapat dilihat pada gambar 3 :
Gambar 3. Kelangsungan hidup ikan kakap putih setelah uji tantang Keterangan:  K  (Kontrol),  A  (Ekstrak Sargassum sp.  50  ppm),  B  (Ekstrak Sargassum sp. 70 ppm), C (Ekstrak Sargassum sp. 90 ppm).
Gambar 3 menunjukkan bahwa nilai kelangsungan hidup benih ikan kakap putih  selama  penelitian  dimana  nilai  rata-rata  kelangsungan  hidup  tertinggi  ada pada  perlakuan  B  (46,67±5,77  %),  diikuti  oleh  perlakuan  C  (43,33±5,77  %), perlakuan A (36,67±5,77 %), dan Kontrol (33,33±5,77 %).  Setelah dianalisis One – Way  ANOVA didapatkan bahwa parameter kelangsungan hidup tidak berbeda signifikan (P > 0,05).

## 3. Gejala Klinis
Pengamatan mengenai gejala klinis ikan kakap putih yang diinfeksi bakteri Vibrio  alginolyticus menunjukkan  bahwa  gejala  klinis  pada  saat  setelah penyuntikan  pada  semua  perlakuan  yaitu  ikan  berenang  tidak  normal  (lemah
33.33±5.77 a 36.67±5.77 a .46.67±5.77 a 43.33 ±5.77 a 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 K A B C K el an gs u n ga n H idup ( % ) Perlakuan a a a a A B
Intek Akuakultur. Volume 5. Nomor 1. Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 27-39
dipermukaan  dan  posisi  tubuh  miring)  dan  nafsu  makan  berkurang,  gejala  klinis lainnya mulai terlihat pada semua perlakuan setelah 24 jam pasca infeksi dengan pembengkakan  dan  warna  merah  pada  bekas  suntikan,  sisik  mengelupas,  geripis pada  sirip  ekor  disusul  dengan  munculnya ulcer (luka  terbuka  atau  borok), haemoragi (kemerahan),  perut kembung  berisi cairan warna kuning muda, organ dalam  berwarna  pucat,  dan necrosis (kematian)  setelah  36  jam  pasca  infeksi. Berdasarkan  hasil  gejala  klinis  yang  diperoleh  menunjukan  bahwa  ikan  kakap putih  mencirikan  terinfeksi  oleh  bakteri Vibrio  alginolyticus .    Infeksi Vibrio alginolyticus menyebabkan  proses  pembengkakan  dan haemorragic di  antara jaringan epidermis dan dermis. Zona pembengkakan berwarna merah yang secara bertahap  dapat  meluas.  Kerusakan  jaringan  terjadi  dengan  adanya  pembentukan pusat ulcer pada permukaan tubuh, menyerang pada sisi lambung karena diinjeksi secara  intraperitoneal  pada  bagian  perut. Gejala  –  gejala  kllinis  pada  ikan  kakap putih yang terinfeksi bakteri Vibrio alginolyticus dan ikan sehat dapat dilihat pada gambar 4.
Gambar 4. Gejala – gejala kllinis ikan yang terinfeksi dan ikan sehat. Keterangan : A. Borok ( ulcer ), B. Sisik mengelupas, C. Sirip ekor geripis, D. Kemerahan ( haemoragi ), dan E. Ikan Sehat

## 4. Kualitas Air
Data  kualitas  air  pada  penelitian  ini  disajikan  dalam  bentuk  tabel. Parameter kualitas air yaitu suhu, salinitas, pH, dan DO diukur untuk mengetahui nilai kualitas air di setiap wadah perlakuan. Data kualitas air diambil dengan cara pengukuran sebanyak 3 kali yaitu pada pemeliharaan hari ke 0 atau pra perlakuan pakan, hari ke 9 atau pasca perlakuan pakan, dan hari ke 16 atau pasca uji tantang. Hasil parameter kualitas air pada penelitian dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil parameter kualitas air
No Parameter Nilai Standart Baku Mutu (SNI 2014) 1 Suhu 28,8 - 29°C 28 - 32°C 2 Salinitas 32 ppt 28 – 33 ppt 3 pH 7,5 – 7,7 7,0 – 8,5 4 DO 6,5 – 6,7 ppm Minimal 4 ppm D B C E A

## Intek Akuakultur. Volume 5. Nomor 1. Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 27-39
Hasil pengukuran kualitas air selama penelitian ini berada dalam rentang kondisi  yang  layak  untuk  pemeliharaan  ikan  kakap  putih  sesuai  dengan  rentang baku  mutu  Standart  Nasional  Indonesia  (SNI)  2014  untuk  pemeliharaan  ikan kakap putih.

## PEMBAHASAN

## 1. Aktifitas Fagositosis
Aktifitas  fagositosis  merupakan  proses  pemangsaan  benda-benda  asing atau mikroorganisme yang masuk ke dalam tubuh oleh sel-sel fagosit (Payung dan Manoppo 2015). Fagositosis merupakan mekanisme pertahanan non-spesifik yang secara  umum  mampu  melindungi  adanya  serangan  patogen.  Sel  fagosit  ini berfungsi  untuk  melakukan  fagositosis  terhadap  benda  asing  yang  masuk  ke dalam tubuh inang (Lusiastuti et al. 2013). Hasil pengamatan menunjukkan bahwa aktifitas fagositosis pada ikan kakap putih yang diberikan perlakuan pakan dengan penambahan  ekstrak Sargassum sp.  dan  setelah  di  uji  tantang  dengan  bakteri Vibrio  alginolyticus mendapatkan  nilai  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  kontrol yaitu  terdapat  pada  perlakuan  B  sebesar  77,33%.  Hal  ini  sesuai  dengan  hasil penelitian Rustikawati (2012) yang mengatakan bahwa ikan uji yang telah diberi ekstrak Sargassum sp. mempunyai indeks fagositosis  yang lebih besar dan kadar antibodi  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  ikan  uji  yang  tidak  diberikan ekstrak Sargassum sp.  Hal  ini  diduga  karena  ekstrak Sargassum sp.  dapat meningkatkan  aktifitas  fagositosis  karena  mengandung  flavonoid  dan  vitamin  C. Kandungan  dari  senyawa  bioaktif  ini  bisa  menjadi  imunostimulan  untuk meningkatkan  respon  imun  dan  memfagositosis  agen  penyakit  yang  masuk  ke dalam tubuh ikan. Hal ini sesuai dengan Mulyadi et al. (2019) yang menyatakan bahwa  ekstrak Sargassum sp.  memiliki  kandungan  senyawa  bioaktif  seperti flavanoid  sehingga  dianggap  memiliki  potensi  sebagai  imunostimulan  dalam meningkatkan  sistem  pertahanan  tubuh  organisme  budidaya  dan  juga  vitamin  C yang berfungsi sebagai zat antioksidan (Ivandari et al. 2019). Menurut Hazzulli et al. (2015)  penambahan  vitamin  C  pada  pakan  dapat  memberikan  respon  imun adaptif  yang  tinggi  terbukti  dari  ikan  uji  mampu  membentuk  dan  meningkatkan produksi antibodi.
Meningkatnya  aktifitas  fagositosis  disebabkan  oleh  adanya  mekanisme perlawanan  dari  tubuh  ikan  terhadap  serangan  dari  bakteri Vibrio  alginolyticus dan  menunjukan  terjadinya  peningkatan  imun.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan Santoso (2013) yang mengatakan bahwa salah satu senyawa yang berperan dalam meningkatkan  sistem  imun  adalah  flavanoid.  Flavanoid  merupakan  senyawa metabolit  sekunder  yang  dimungkinkan  memiliki  efek  imunostimulator. Imunomodulator merupakan bahan yang dapat mengembalikan ketidakseimbangan  sistem  imun  (Mulyadi et  al. 2019).  Flavonoid  dapat membentuk  kompleks  dengan  protein  ekstraseluler  yang  dapat  merusak  dinding sel  bakteri  yaitu  terjadi  kebocoran  sehingga  mengakibatkan  keluarnya  senyawa intraseluler  (Sahara  2017).  Vitamin  C  akan  direspon  ikan  dengan  peningkatan aktivitas  dan  reaktivitas  sel  pertahanan  seluler  maupun  humoral,  selain  itu penambahan  vitamin  C  dapat  memberikan  peningkatan  aktifitas  fagositosis (respon  imun  non  spesifik)  pada  ikan  (Ilmiah et  al. 2009).  Imunostimulan
Intek Akuakultur. Volume 5. Nomor 1. Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 27-39
memiliki  reseptor  spesifik  terhadap  sel-sel  fagositik  (neutrofil,  monosit,  dan makrofag)  dan  berikatan  dengan  molekul  reseptor  pada  permukaan  sirkulasi  dan jaringan  fagosit.  Ikatan  tersebut  dapat  meningkatkan  aktivitas  fagositik  dalam proses penelanan, killing, dan mencerna bakteri (Elala et al. 2013). Sel-sel  fagositik  memiliki  fungsi  yang  penting  dalam  pertahanan  tubuh.
Hal ini yang menyebabkan terjadinya peningkatan pada sel darah putih meskipun belum  terjadi  infeksi  (Elala et  al. 2013).  Aktifitas  fagositosis  makrofag  terjadi apabila  adanya  benda  asing  termasuk  patogen.  Proses  penelanan  bakteri  terjadi karena  fagosit  membentuk  tonjolan  pseudopodia,  membentuk  kantung mengelilingi  bakteri  sehingga  terperangkap  dalam  vakuola  fagosom.  Patogen masuk  ke  dalam  sel  dengan  cara  endositosis  dan  oleh  proses  pembentukan fagosom, patogen terperangkap dalam kantong fagosom seolah-olah ditelan untuk dihancurkan,  baik  dalam  proses  oksidasi-reduksi  maupun  oleh  derajat  keasaman yang ada dalam fagosit.

## 2. Kelangsungan Hidup
Kelangsungan hidup atau survival rate merupakan persentase ikan uji yang hidup  pada  akhir  pemeliharaan  dalam  suatu  wadah.  Hasil  pengamatan  terhadap kelangsungan hidup ikan kakap putih didapatkan berdasarkan data kematian atau mortalitas  ikan  yang  telah  di  beri  pakan dengan  penambahan ekstrak Sargassum sp.  sebagai  bahan  immunostimulan  kemudian  di  uji  tantang  dengan  diinfeksi bakteri Vibrio  alginolyticus dengan  pengamatan  selama  7  hari.  Hasil  yang diperoleh  menunjukkan  bahwa  selama  7  hari  pengamatan  bahwa  kelangsungan hidup  ikan  uji  yang  diberi  ekstrak Sargassum sp.  bervariasi.  Hasil  yang  tidak berbeda  signifikan  di  setiap  perlakuan  diduga  karena  waktu  pemberian  pakan yang  ditambahkan  ekstrak Sargassum sp.  selama  7  hari  belum  optimal  untuk meningkatkan  respons  imun  tubuh  ikan  kakap  putih.  Menurut  Sajeevan et  al.
(2009)  kunci  keberhasilan  penggunaan  imunostimulan  dalam  proses  pencegahan dan  pengobatan  dapat  dilihat  dari  dosis  dan  lama  waktu  pemberian  pakan  yang tepat.
Nilai  kelangsungan  hidup  paling  tinggi  pada  penelitian  ini  adalah  pada perlakuan  B  yaitu  sebesar  46,67%.  Hal  ini  diduga  karena  penambahan  ekstrak Sargassum sp.  pada  pakan  dengan  dosis  70  ppm  mampu  memberikan  respon kekebalan  tubuh  ikan  karena  bahan  aktif  yang  terkandung  pada Sargassum sp. yaitu  flavonoid  dan  juga  vitamin  C  dapat  membunuh  bakteri  dengan  cara mendenaturasi protein dan merusak membran sel. Pada perlakuan C dengan dosis ekstrak Sargassum sp.  90  ppm  yang  diberikan  mengalami  penurunan  nilai kelangsungan hidup  yaitu 43,33%. Hal ini sesuai dengan pernyataan Rustikawati (2012)  yang  mengatakan  bahwa  semakin  tinggi  dosis  ekstrak Sargassum sp., semakin  besar  bahan  immunostimulan  yang  dikandungnya,  namun  bahan immunostimulan yang terlalau tinggi dapat berdampak negatif bagi ikan.
Rendahnya  tingkat  kelangsungan  hidup  ikan  uji  pada  kontrol mengindikasikan  bahwa  kekebalan tubuh  alami  yang  terdapat  pada  ikan  tersebut rendah.  Hal  ini  terjadi  karena  ikan  pada perlakuan  kontrol  tidak  diberikan  bahan immunostimulan  berupa  ekstrak Sargassum sp.  yang  terdapat  senyawa  bioaktif berupa  flavonoid  dan  juga  vitamin  C  yang  dapat  meningkatkan  imunitas  tubuh ikan  untuk  melawan  serangan  patogen  dari  bakteri Vibrio  alginolyticus .  Hal  ini
sesuai  dengan  pernyataan  Rustikawati  (2012)  yang  mengatakan  bahwa imunostimulan  berperan  mengaktifkan  mekanisme  pertahanan  non  spesifik, cell mediated  immunity dan  respon  imun  spesifik.  Bahan  alami  lain  yang  dapat digunakan sebagai immunostimulan adalah rumput laut (alga laut) antara lain alga cokelat Sargassum sp.  Vitamin  C  merupakan  salah  satu  bahan  yang  sering digunakan  dalam  pencegahan  penyakit  ikan.  Vitamin  C  dalam  tubuh  ikan berperan  mengurangi  stress  dan mempercepat  proses  penyembuhan  luka  (Aris et al. 2019)
Senyawa  aktif  akan  menunjukkan  aktifitasnya  jika  dapat  mencapai  di lokasi  targetnya  yang  berarti  harus  dapat  diserap  oleh  darah  dari  saluran pencernaan  untuk  selanjutnya  dibawa/ditransfer  ke  tempat  dimana  zat  itu  akan memberikan  efek  aktifitasnya  atau  jumlah  senyawa  aktif  lebih  kecil  dari  jumlah minimal  yang  diperlukan  untuk  memunculkan  efek  imunostimulan  atau  bahkan sebaliknya  dosisnya  terlalu  tinggi  sehingga  tidak  memberikan  efek  atau berperilaku  sebagai  inhibitor  (Ridlo  dan  Pramesti  2009).  Kandungan  senyawa bioaktif  yaitu  flavonoid,  dimana  mekanisme  kerja  dari  senyawa  bioaktif  tersebut bersifat  sidal.  Senyawa  bioaktif  yang  bersifat  bakteriosidal  yaitu  senyawa  yang dapat merusak pertahanan dan organ tubuh bakteri yang menyebabkan kerusakan sel  dan  pada  akhirnya  menyebabkan  kematian  pada  bakteri  yang  diserang (Pangestuti et al. 2017).

## 3. Gejala Klinis
Gejala klinis adalah gambaran secara visual pada kondisi tubuh ikan yang terserang penyakit. Hasil pengamatan gejala klinis pada saat setelah penyuntikan isolat bakteri Vibrio alginolyticus pada semua perlakuan yaitu ikan berenang tidak normal (lemah dipermukaan dan posisi tubuh miring) dan nafsu makan berkurang, gejala  klinis  lainnya  mulai  terlihat  pada  semua  perlakuan  setelah  24  jam  pasca infeksi  dengan  pembengkakan  dan  warna  merah  pada  bekas  suntikan,  sisik mengelupas, geripis pada sirip ekor disusul dengan munculnya ulcer (luka terbuka atau  borok)  dan  haemoragi  (kemerahan),  perut  kembung  berisi  cairan  warna kuning  muda,  organ  dalam  berwarna  pucat  ,dan  necrosis  (kematian)  setelah  36 jam pasca infeksi. Hal ini sesuai dengan pernyataan Ode (2012) yang mengatakan bahwa gejala yang ditimbulkan jika terinfeksi Vibrio tergantung tingkat serangan, yaitu  kronis  dan  akut.  Pada  tingkat  kronis,  gejala  penyakit  yang  ditimbulkan cukup  jelas.  Beberapa  gejala  yang  terlihat  adalah  punggung  kehitam-hitaman, bercak  merah  pada  pangkal  sirip,  sisik  tegak,  bergerak  lamban,  keseimbangan terganggu,  dan  nafsu  makan  kurang.  Gejala  lain  yang  sering  terjadi  adalah  mata menonjol  (exopthalmia),  perut  kembung  berisi  cairan  warna  kuning  muda, pendarahan (hemorhagi) pada insang, mulut, tubuh, usus, dan organ dalam.

## 4. Kualitas Air
Pengelolaan  air  dalam  wadah  budidaya  sangat  penting  karena merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi keberhasilan kegiatan budidaya. Kualitas air memiliki  pengaruh  terhadap  keseimbangan  fisiologis  dari  tubuh  ikan.  Data parameter kualitas air yang didapat pada penelitian serta perbandingannya dengan standar  baku  mutu  yang  telah  dibuat  oleh  SNI  (2014)  dapat  dilihat  pada  tabel  7 dimana  hasil  tersebut  merupakan  hasil  pengukuran  selama  masa  pemeliharaan.
Intek Akuakultur. Volume 5. Nomor 1. Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 27-39
Suhu air pada wadah akuarium selama penelitian yaitu berkisar 28,8  - 29°C yang masih tergolong baik dan layak untuk kehidupan ikan kakap putih. Menurut SNI (2014),  nilai  suhu  yang  baik  untuk  kelangsungan  hidup  benih  ikan  kakap  putih berkisar antara 28 – 32°C.  Parameter pH pada wadah akuarium selama penelitian yaitu  berkisar  7,5  –  7,7  yang  masih  tergolong  baik  dan  layak  untuk  kehidupan ikan kakap putih. Menurut SNI (2014), pH  yang baik untuk kelangsungan hidup benih ikan kakap putih berkisar antara 7,0 – 8,5.
Parameter  DO  ( Dissolved  Oxygen )  pada  wadah  akuarium  selama penelitian yaitu berkisar 6,5 – 6,7 ppm yang masih tergolong baik dan layak untuk kehidupan  ikan  kakap  putih.  Menurut  SNI  (2014),  oksigen  terlarut  yang  baik untuk  kelangsungan  hidup  benih  ikan  kakap  putih  minimal  4  ppm.    Oksigen terlarut  sangat  penting  untuk  kehidupan  ikan  dan  hewan  lainnya  untuk  bernafas dan  proses  metabolisme,  kualitas  air  yang  baik  dalam  perairan  adalah  dengan kandungan oksigen terlarut yang cukup.  Ketersediaan oksigen bagi biota air juga menentukan  lingkaran  aktivitasnya,  konversi  pakan,  laju  pertumbuhan,  dengan ketentuan faktor kondisi lainnya berada dalam kondisi optimum (Primaningtyas et al. 2015).    Parameter  salinitas  pada  wadah  akuarium  selama  penelitian  yaitu berkisar 32 ppt yang masih tergolong baik dan layak untuk kehidupan ikan kakap putih.  Menurut  SNI  (2014),  nilai  salinitas  untuk  pemeliharaan  ikan  kakap  putih minimal adalah 28 ppt. Salinitas adalah konsentrasi ion yang terdapat di perairan. Toleransi terhadap salinitas tergantung dari umur stadium ikan (Hardayani 2013).
Kisaran pengukuran parameter kualitas air selama penelitian berada dalam rentang kondisi  yang  layak  untuk  pemeliharaan  ikan  kakap  putih.  Selain  itu  dilakukan penyiponan  setiap  hari  sebelum  pemberian  pakan  yaitu  pada  pagi  dan  sore  hari untuk  membersihkan  feses  dan  sisa-sisa  makanan.  Adanya  penambahan  aerasi yang cukup dapat membantu dalam menjaga kualitas air agar tetap normal (Khalil et al. 2015)

## KESIMPULAN
Pemberian ekstrak Sargassum sp. pada pakan ikan kakap putih dan setelah diuji  tantang  dengan  bakteri Vibrio  alginolyticus mampu  memberikan  pengaruh terhadap  aktifitas  fagositosis.    Konsentrasi  terbaik  didapatkan  pada  perlakuan  B dengan  ekstrak Sargassum sp.  70  ppm  dengan  nilai  aktifitas  fagositosis  tertinggi sebesar 77,33%, dan kelangsungan hidup tertinggi 43,33%.

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson,  D.P.,  Siwicki,  A.K.  1993.  Basic  Hematology  and  Serology  for  Fish Health  Programs.  Paper  Presented  in  Second  Symposium  on  Diseases  in Asian Aquaculture “Aquatic Animal Health and the Environment”. Phuket, Thailand. 185-202.
Anriyono.  2018.  Pertumbuhan  Benih  Ikan  kakap  Putih  ( Lates  calcarifer )  dengan Pemberian  Dosis  Pakan  yang  Berbeda.  [Skripsi].  Universitas  Maritim  Raja Ali Haji. Tanjungpinang.
Aris,  M.,  Juharni,  Abdullah,  A.  Pemanfaatan ekstrak  Wortel  (Daucus  carrota  L.) sebagai imunostimulan pada ikan Kakap Putih (Lates calcarifer). Budidaya Perairan. 7 (2): 38 – 43.
Intek Akuakultur. Volume 5. Nomor 1. Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 27-39
Dolorosa,  T.M.,  Nurjanah,  Purwaningsih,  S.,  Effionora,  A.,  Taufik,  H.  2017.
Kandungan Senyawa Bioaktif Bubur Rumput Laut Sargassum plagyophyllum dan Eucheuma cottonii sebagai Bahan Baku Krim Pencerah Kulit. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 20 (3): 633-644.
Effendi, M.I. 2004. Metode biologi perikanan. Penerbit Dwi Sri. Bogor Elala,  N.A.,  Marzouk,  M.,  Moustafa,  M.  2013.  Use  of  Different Saccharomyces cerevisiae Biotic  Forms  as  Immune-modulator  and  Growth  Promoter  for Oreochromis niloticus Challenged with Some Fish Pathogens.  International Journal of Veterinary Science and Medicine. 1: 21-29.
Hazzulli,  N.J.,  Setyawan,  A.,  Harpeni,  E.  Imunogenisitas  Kombinasi  Vaksin Inaktif Whoce Cell Aeromonas salmonicida dan Vitamin C pada Ikan Mas ( Cyprinus carpio ). Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan. 3 (2): 359 – 366.
Hardayani,  Y.  2013.  Kelangsungan  Hidup  dan  Pertumbuhan Juvenil  Ikan  Kakap Putih ( Lates calcarifer ) dipelihara pada Media Air Hijau, Wadah Gelap, dan Transparan. [Skripsi]. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Hikmayani, Y., Rismutia, H.D., Zahri, N. 2013. Evaluasi Kebijakan Peningkatan Produksi  Perikanan  Budidaya.  Jurnal  Evaluasi  dan  Strategi  Peningkatan Keberhasilan Program. 3(1): 47 - 65.
Ilmiah,  Triana,  S.T.  H.,  Tassakka,  A.C.M.A.R.,  Rantetondok,  A.,  Anshary,  H. 2009.  The  Effect  of  Vitamin  C  and  Aeromonas  Vaccine  On  The  Immune Response  and  Disease  Resistance  Of  Grouper  ( Epinephelus  fuscoguttatus ). Mar. Res. Indonesia. 34: 81 – 85.
Ivandari,  I.R.,  Linayati,  Mardiana,  T.Y.  Pengaruh  Pemberian  Imunostimulan dengan  Dosis  Berbeda  terhadap  Pertumbuhan  Ikan  Kakap  Putih  ( Lates calcarifer ). Jurnal Litbang Kota Pekalongan. 16: 19 – 31. Khalil,  M.,  Mardhiah,  A.,  Rusydi,  R.  2015.  Pengaruh  Penurunan  Salinitas terhadap  Laju  Konsumsi  Oksigen  dan  Pertumbuhan  Ikan  Kerapu  Lumpur (Epinephelus tauvina). Acta Aquatica 2 (2): 114 – 121.
Kurniawan,  R.  2017.  Keanekaragaman  di  Perairan  Laut  Desa  Teluk  Bakau Kabupaten Bintan Kepulauan Riau. [Skripsi]. Universitas Maritim Raja Ali Haji. Tanjungpinang.
Lusiastuti,  A.M.,  Maryanti,  S.D.,  Purwaningsih,  U.  2013.  Probiotik Bacillus cereus untuk  Pengendalian  Penyakit  Streptococcosis  Pada  Ikan  Nila,
Oreochromis niloticus . Jurnal Riset Akuakultur. 8 (1): 109 - 119. Mahardika,  K.,  I.  Mastuti.  2013.  Studi  histopatologi:  Pembentukan  Sel  -  Sel Membesar  pada  Organ  Ikan  Kerapu  setelah  Terinfeksi Megalocytivirus . Konferensi Akuakultur. 132-138.
Mulyadi, Nur, I., Iba, W. 2019.  Uji Fitokimia Ekstrak Bahan Aktif Rumput Laut Sargassum sp. Jurnal Sains dan Inovasi Perikanan. 3 (1): 14 – 17.
Ode, I. 2012. Patologi Bakteri Vibrio pada Ikan. Bimafika. 3: 355 – 359.
Pangestuti,  I.E.,  Sumardianto,  Amalia,  U.  2017.  Skrining  Senyawa  Fitokimia Rumput Laut Sargassum sp. dan Aktivitasnya sebagai Antibakteri terhadap Staphylooccus  aureus dan Eschericia  coli .  Saintek  Perikanan.  12  (2):  98  – 102.
Intek Akuakultur. Volume 5. Nomor 1. Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 27-39
Payung,  C.N.,  Manoppo,  H.  2015.  Peningkatan  Respon  Kebal  Non  Spesifik  dan Pertumbuhan  Ikan  Nila (Oreochromis  niloticus) Melalui  Pemberian  Jahe, Zingiber officinale. Jurnal Budidaya Perairan. 3 (1) : 11 – 18. Primaningtyas,  A.W.,  Hastuti,  S.,  Subandiyono.  2015.  Performa  Produksi  Ikan Lele  (Clarias  gariepinus)  yang  dipelihara  dalam  Sistem  Budidaya  Berbeda. Journal of Aquaculture Management and Technology. 4 (4): 51 - 60.
Ridlo,  A.,  Pramesti,  R.  2009 . Aplikasi  Ekstrak  Rumput  Laut  Sebagai  Agen Imunostimulan Sistem Pertahanan Non Spesifik Pada Udang ( Litopennaeus vannamei. Ilmu Kelautan. 14 (3): 133 - 137. Rustikawati,  I.  2012.  Efektivitas  Ekstrak Sargassum sp.  terhadap  Diferensiasi Leukosit  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus )  yang  diinfeksi Streptococcus iniae . Jurnal Akuatika. III (2): 125 - 134.
Sahan, A., Tasbozan, O., Aydin, F., Ozutok, S., Erbas, C.D.S., Uslu, L., Ozcan, F. 2015.  Determination  of  Some  Haematological  and  Nonspecific  Immune Parameters  in  Nile  Tilapia  ( Oreochromis  Niloticus L.,  1758)  Fed  with Spirulina  ( Spirulina  Platensis )  Added  Diets.  Journal  of  Aquaculture Engineering and Fisheries Research. 1 (3): 133 – 139.
Sajeevan, T.P., Philip, R., Singh, I.S.B. 2009. Dose/frequency: A critical Factor in the  Administration  of  Glucan  as  Immunostimulant  to  India  White  Shrimp Fenneropenaeus indicus . Aquaculture 287. 248-252. Sahara,  R.  2017.  Suplementasi  Tepung  Alga  Coklat Sargassum  cristaefolium dalam  Pakan  terhadap  Kinerja  Pertumbuhan  dan  Respons  Imun  Ikan  Nila Oreochromis sp. [Skripsi]. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Santoso,  J.  2013.  Chemical  Composition  and  Antioxidant  Activity  of  Tropical Brown Alga Padina australis from Pramuka Island, Distric of Seribu Island, Indonesia. Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis. 5 (2): 287 - 297.
Setyaningsih,  I.,  Desniar,  Purnamasari,  E.  2012.  Antimikroba  dari Chaetoceros gracilis yang  Dikultivasi  dengan  Lama  Penyinaran  Berbeda.  Jurnal Akuatika. III (2): 180 – 189.
SNI 6145.4:2014. Produksi Benih Ikan Kakap Putih ( Lates calcarifer , Bloch 1790).