Volume 7, No 1, Januari – Juni 2024 e-ISSN: 2598-7453 DOI: 10.31539/bioedusains.v7i1.9870

## PENGARUH PENAMBAHAN VARIASI KONSENTRASI KARBON AKTIF PADA MEDIA KULTUR IN VITRO UNTUK PERTUMBUHAN ANGGREK Dendrobium welirang
Andien Narita Putri Warisman 1 , Praptining Rahayu 2 , Eko Retno Mulyaningrum 3
Universitas PGRI Semarang 1,2,3
mhs20320029@upgris.ac.id 1 , praptiningrahayu@upgris.ac.id 2 , ekoretno@upgris.ac.id 3

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  perbedaan  konsentrasi penambahan karbon aktif dan menentukan konsentrasi optimal pada media tanam kultur in  vitro anggrek Dendrobium  welirang untuk  meningkatkan  pertumbuhan tanaman. Jenis penelitian yang digunakan adalah True Experiment . Penelitian ini menggunakan  desain  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dan  sampel  dalam penelitian  ini  adalah  spesies  anggrek Dendrobium  welirang .  Instrumen  yang digunakan  berupa  tabel.  Jenis  data  yang  digunakan  adalah  data  kuantitatif.  Data dianalisis  secara  statistik  dengan  uji  Anova.  Pengambilan  data  dilakukan  pada bulan  ketiga  setelah  tanam.  Data  yang  diambil  mencakup  panjang  daun,  jumlah daun,  panjang  akar,  dan  jumlah  akar.  Hasil  dari  penelitian  menunjukkan  bahwa penambahan  variasi  konsentrasi  karbon  aktif  pada  media  kultur in  vitro berpengaruh  terhadap  parameter  jumlah  akar,  panjang  akar,  panjang  daun,  dan jumlah daun anggrek Dendrobium welirang . Simpulan, penambahan karbon aktif memiliki pengaruh nyata terhadap pertumbuhan anggrek Dendrobium welirang .
Kata Kunci : Dendrobium welirang , Karbon Aktif, Kultur in vitro

## ABSTRACT
This  research  aims  to  determine  the  effect  of  different  concentrations  of  added activated carbon  and determine the optimal concentration  in  the in  vitro culture growing medium for Dendrobium welirang orchids to increase plant growth. The type  of  research  used  is  true  experimentation.  This  research  used  a  Completely Randomized Design (CRD), and the sample used in this research was the orchid species Dendrobium welirang. The instrument used is in the form of a table. The type of data used is quantitative data. The data were analyzed statistically using the ANOVA test. Data collection was carried out in the third month after planting. The data taken includes leaf length, number of leaves, root length, and number of roots.  The  results  of  the  research  showed  that  adding  variations  in  activated carbon  concentration  to  the  in  vitro  culture  medium  affected  the  parameters  of root  number,  root  length,  leaf  length,  and  number  of  leaves  of  the  Dendrobium welirang  orchid.  In  conclusion,  the  addition  of  activated  carbon  has  a  real influence on the growth of Dendrobium welirang orchids.
Keywords : Dendrobium welirang, Activated Carbon, In vitro Culture.

## PENDAHULUAN
Anggrek  adalah  salah  satu  jenis  tanaman  hias  yang  terkenal  karena keindahan  dan  kecantikan  bunganya.  Tanaman  dari  genus Orchidaceae ini
memiliki  warna,  corak,  dan  jenis  yang  unik  dan  beragam,  sehingga  banyak diminati  oleh  berbagai  kalangan,  mulai  dari  kolektor,  breeder,  hingga  pecinta tanaman  hias  (Ambarwati  et  al.,  2021).  Permintaan  akan  bibit  anggrek  yang berkualitas terus meningkat seiring dengan tingginya minat di pasar. Perbanyakan benih anggrek menggunakan teknik kultur jaringan menjadi sangat penting untuk memenuhi  kebutuhan ini. Anggrek memiliki  nilai ekonomi tinggi  dan berpotensi menjadi  sumber  pendapatan  serta  memperluas  lapangan  kerja.  Kebutuhan tanaman anggrek mengalami tantangan dan hambatan, terutama dalam budidaya. Kultur  jaringan  merupakan  salah  satu  metode  alternatif  untuk  mengatasi keterbatasan bibit, karena dapat meningkatkan jumlah tanaman dengan cepat dan dalam jumlah besar, serta menghasilkan kualitas yang unggul.
Salah  satu  jenis  anggrek  yang  populer  di  Indonesia  adalah  jenis Dendrobium . Dendrobium sp. adalah anggrek simpodial yang tumbuh berumpun, terdiri  dari  sekumpulan  batang  semu  ( pseudobulb )  (Bhattacharjee  &  Hossain, 2015).  Kultur  jaringan  dipilih  untuk  menyelamatkan  dan  mengembangkan anggrek Dendrobium karena memiliki beberapa keunggulan, seperti pertumbuhan eksplan yang cepat, keseragaman genetik, kondisi steril yang bebas dari patogen, seleksi  tanaman,  produksi  stok  mikro  yang  dapat  diperbanyak  kapan  saja, lingkungan  yang  terkontrol,  pelestarian  keragaman  genetik,  produksi  tanaman sepanjang  tahun,  dan  perbanyakan  tanaman  yang  sulit  dilakukan  secara konvensional(Zulkarnain, 2011).
Salah  satu  spesies  anggrek  yang  banyak  diminati  adalah Dendrobium welirang ,  yang  merupakan  hasil  persilangan  antara Dendrobium  boonchoo  gold dan Dendrobium  erlyna .  Anggrek  ini  dikenal  dengan  bunganya  yang  besar berwarna kuning, dengan satu malai memiliki 12-16 kuntum bunga. Dendrobium welirang termasuk cepat berbunga,  yaitu dalam  waktu  satu  hingga satu  setengah tahun.
Kinerja  teknik  kultur  jaringan  dipengaruhi  oleh  komposisi  media  yang digunakan.  Media Vacin  and  Went (VW)  sering  digunakan  sebagai  media  dasar dalam  kultur  jaringan  tanaman  anggrek  karena  mengandung  nutrisi  makro  dan mikro  serta  N-organik  (Sucandra  et  al.,  2015).  Kultur  jaringan  melibatkan penanaman  bagian  tanaman  dalam  kondisi  aseptik,  seperti  dalam  wadah  steril (Ikenganyia  et  al.,  2017).  Media  yang  digunakan  dalam  kultur  jaringan  harus mengandung  komponen  penting  seperti  nutrisi  makro,  mikro,  asam  amino, vitamin,  dan  myoinositol  (Silva,  2013).  Metode  kultur in  vitro telah  lama digunakan  dalam  budidaya  anggrek,  tetapi  inovasi  lebih  lanjut  diperlukan  untuk meningkatkan  efektivitas  dan  efisiensinya,  seperti  penambahan  bahan  organik dalam medium.
Salah  satu  bahan  organik  kompleks  yang  digunakan  adalah  karbon  aktif. Karbon  aktif  adalah  karbon  yang  diaktivasi  melalui  proses  fisik  atau  kimia,  dan efektif  dalam  menyerap  kation,  anion,  serta  molekul  senyawa  anorganik  dan organik  dalam  bentuk  gas  atau  cair  (Lempang,  2014).  Karbon  aktif  berperan penting dalam berbagai proses pertumbuhan tanaman, seperti perkecambahan biji, pembungaan,  stimulasi  pertumbuhan  akar,  pembentukan  umbu,  pemanjangan batang,  penyediaan  nutrisi,  penyerapan  vitamin,  ion  logam,  serta  pengaruh terhadap  perubahan  dan  penggelapan  media  kultur  (Thomas,  2008).  Arang  aktif juga  membantu  menekan  keluarnya  senyawa  fenol  yang  toksik  bagi  tanaman, yang dapat  menghambat pertumbuhan dan proses diferensiasi  (Heriansyah et  al.,
2014).  Penambahan  karbon  aktif  dalam  media  kultur in  vitro sering  dilakukan untuk menyerap senyawa beracun atau penghambat yang dihasilkan oleh tanaman atau media (Ismaini, 2021).
Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa penambahan karbon aktif dapat meningkatkan pertumbuhan berbagai jenis tanaman, termasuk anggrek. Misalnya, penggunaan myoinositol dengan arang aktif pada media kultur menunjukkan hasil terbaik dalam pertumbuhan jumlah dan panjang akar anggrek Dendrobium . Selain itu,  penambahan  karbon  aktif  proanalisis  atau  norit  juga  meningkatkan pertumbuhan  tinggi  planlet,  luas  daun,  jumlah  tunas  anak,  dan  jumlah  akar  pada anggrek Oncidium (Widiastoeti  et  al.,  2013).  Penelitian  lain  juga  menunjukkan bahwa penambahan arang aktif dapat meningkatkan pertumbuhan eksplan pisang barangan(Nisyawati & Kariyana, 2013).
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut,  penelitian  ini  dilakukan  untuk mengembangkan  penelitian  sebelumnya  dengan  menambahkan  konsentrasi karbon aktif yang lebih tinggi, yaitu sebanyak 3 gram, serta menggunakan spesies anggrek Dendrobium  welirang sebagai  objek  penelitian.  Penelitian  ini  bertujuan untuk mengetahui pengaruh penambahan variasi konsentrasi karbon aktif terhadap pertumbuhan  tanaman  anggrek Dendrobium  welirang .  Hipotesis  penelitian  ini adalah  bahwa  perbedaan  konsentrasi  karbon  aktif  dapat  memberikan  pengaruh nyata pada pertumbuhan planlet anggrek Dendrobium welirang .

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  yaitu True  Experiment .  Rancangan penelitian  eksperimental  asli  ( True  Experiment  Design )  adalah  penelitian eksperimental  yang  menguji  kemungkinan  terjadinya  interaksi  antara  kelompok eksperimen  (kelompok  eksperimen)  dan  kelompok  kontrol  (tanpa  eksperimen) sebelum  membandingkan  kedua  kelompok  tersebut  (K  &  Fathnur,  2018) . Penelitian  menggunakan  desain  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  tiga perlakuan, dengan delapan kali pengulangan, sehingga terdapat  dua puluh empat unit  percobaan.  Perlakuan  tersebut  yaitu,  a)  K1  (Media  VW  +  Karbon  aktif  0 gram);  b)  K2  (Media  VW  +  karbon  aktif  2  gram);  c)  K3  (Media  VW  +  Karbon aktif 3 gram)
Populasi  dalam  penelitian  ini  yaitu  seluruh  jenis  anggrek  Dendrobium, sampel dalam penelitian ini yaitu spesies anggrek Dendrobium welirang . Populasi dalam  penelitian  ini  adalah  spesies  anggrek Dendrobium  welirang ,  yang  berusia kurang lebih tiga bulan dari masa biji yang sudah tumbuh akar dan daun. Sampel penelitian  ini  adalah  anggrek Dendrobium  welirang itu  sendiri,  dengan  melihat pertumbuhannya  pada  24  botol  kultur  percobaan,  dengan  masing  masing  5 tanaman dalam satu botol.
Instrumen  penelitian  yang  digunakan  yaitu  instrumen  eksperimen  atau percobaan.  Dalam  hal  ini  peneliti  menggunakan  tabel,  yang  berisi  kolom perlakuan, parameter (Panjang akar, jumlah akar, Panjang daun, dan jumlah daun) jumlah masing masing parameter, dan rata rata masing masing parameter
Alat dan bahan yang digunakan untuk penelitian yaitu, Alat : botol kultur,
Pinset, Sendok kecil, Penggaris, Kaos tangan latex, Mangkok kecil, Autoclave, pH meter,  pengaduk,  panci  besar,  blender.  Bahan:  Planlet  anggrek Dendrobium welirang berumur  kurang  lebih  tiga  bulan,  (Pemilihan  usia  tanaman  anggrek  ini dikarenakan  pada  usia  kurang  lebih  tiga  bulan  dari  biji,  tanaman  anggrek  yang
ditanam di media kultur akan melalui tahap pemindahan pada media baru supaya pertumbuhannya  lebih  optimal,  dan  untuk  menunjang  pertumbuhan  tanaman anggrek dibutuhkan suatu senyawa misalnya bahan organik seperti karbon aktif). Karbon aktif, buah Pisang, Buah tomat, Air kelapa, dan media Vacint and went . Media kultur dibuat dengan cara terlebih dahulu menimbang bahan-bahan yang diperlukan sesuai dengan perlakuan. Pisang 150 gr dihaluskan menggunakan blender  dengan  air,  ditambahkan  air  kelapa  sebanyak  150  ml.  kemudian  diaduk menggunakan  pengaduk  dan  ditambahkan  bubuk  agar  agar.  Jika  sudah  semua bahan larut, pH media disesuaikan ke angka 5,5. Jika pH media berada di bawah 5,5,  maka  Natriuum  Hidroksida  ditambahkan  secukupnya,  sedangkan  jika  pH melebihi  5,5,  maka  ditambahkan  HCl.  Selanjutnya,  arang  aktif  sebanyak  2  gram atau  3  gram  (sesuai  perlakuan)  dan  agar-agar  sebanyak  7  gram  dimasukkan  ke dalam  media.  Campuran  ini  kemudian  dimasak  dalam  panci  hingga  mendidih. Setelah  media  dimasak  selanjutnya  dituangkan  ke  dalam  botol-botol  kaca  yang telah  disterilkan,  masing-masing  dengan  volume  50  ml,  dan  botol-botol  tersebut ditutup rapat menggunakan tutup botol.
Selanjutnya,  media  akan  mengalami  proses  sterilisasi  menggunakan autoclave  selama  2  jam.  Setelah  media  diambil  dari  autoclave,  mereka ditempatkan  di  rak  kultur  selama  beberapa  hari  untuk  memeriksa  apakah  terjadi kontaminasi  atau  tidak.  Penelitian  menggunakan  3  perlakuan  dengan  delapan ulangan,  masing  masing  ulangan  terdiri  dari  lima  bibit  anggrek  berumur  kurang lebih tiga bulan dengan menghomogenkan akar menjadi 2 buah. Setelah ditanam, botol  kultur  diletakkan  di  laboratorium.  Penelitian  akan  berlangsung  selama  tiga bulan, dan setiap minggunya akan dipantau perkembangannya. Setelah tiga bulan semua tanaman dikeluarkan kemudian diukur untuk mengetahui pertumbuhannya. Jenis  data  penelitian  yang  digunakan  yaitu  data  kuantitatif.  Penelitian  ini menggunakan  CRD  sebagai  kerangka  metodologi.  Data  yang  telah  terkumpul akan  diuji  secara  statistik  menggunakan  analisis  varians  (Anova).  Apabila  hasil analisis  menunjukkan  adanya  perbedaan  signifikan,  maka  akan  dilanjutkan dengan uji Duncan. Selain itu, seluruh data juga akan dianalisis secara kualitatif.

## HASIL PENELITIAN
Tabel 1 menyajikan hasil pengamatan rata-rata jumlah daun, jumlah akar, panjang  daun,  dan  panjang  akar  pada  tanaman  yang  diberikan  perlakuan  karbon aktif.
Tabel 1. Tabel Hasil Pengamaan Rata-Rata Jumlah Daun, Jumlah Akar, Panjang Daun, dan Panjang Akar dengan Perlakuan Karbon Aktif
Perlakuan Jumlah daun Jumlah akar Panjang daun Panjang akar K = Karbon aktif K0 3.50* 4.75* 2.50* 2.01* K2 4.50* 6.75* 2.99* 2.89* K3 6.00* 4.50* 3.66* 2.24* Keterangan:  * = berbeda i nyata i pada i taraf 5% i tn = tidak i berbeda i nyata i pada i taraf 5%
Tabel  1.  menampilkan  hasil  analisis  statistik  rata-rata  jumlah  daun, panjang  daun,  jumlah  akar,  dan  panjang  akar  setelah  pemberian  karbon  aktif.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  arang  aktif  pada Dendrobium welirang ,  khususnya  pada  konsentrasi  2  g/l,  menghasilkan  parameter  terbaik dalam  pertumbuhan  jumlah  akar  dan  panjang  akar.  Dan  pada  konsentrasi  3g/l menghasilkan  parameter  terbaik  dalam  pertumbuhan  jumlah  daun  dan  panjang daun.  Terdapat  peningkatan  jumlah  rata-rata  daun  hingga  6  helai,  panjang  daun maksimum mencapai 3.66 cm, jumlah akar tertinggi mencapai 6.75, dan panjang akar  terpanjang  mencapai  2.89  cm.  Hasil  pengamatan  diperoleh  parameter  yang berpengaruh  nyata  yaitu  pada  semua  parameter  (parameter  Jumlah  akar,  panjang akar, jumlah daun, dan panjang daun).

## Perbandingan Jumlah Akar Berdasarkan Uji ANOVA dan Uji Duncan
Tabel  2  menyajikan  hasil  uji  ANOVA  untuk  jumlah  akar  yang  diamati pada tanaman dengan perlakuan karbon aktif yang berbeda.
Tabel 2. Uji Anova Jumlah Akar
df Mean Square F Sig. Between i Groups Within Groups Total 2 19.500 8.713 0.02 21 2.238 23
Sig<0,05 : ada pengaruh yang nyata terhadap penambahan karbon aktif
Tabel  3  menampilkan  hasil  Uji  Duncan  untuk  jumlah  akar  pada  berbagai perlakuan karbon aktif.
Tabel 3. Uji Duncan Jumlah Akar

## Perbandingan Panjang Akar Berdasarkan Uji ANOVA dan Uji Duncan
Tabel 4 menyajikan hasil uji ANOVA untuk panjang akar, dengan tujuan untuk  mengidentifikasi  apakah  perlakuan  karbon  aktif  memberikan  pengaruh signifikan  terhadap  parameter  ini.  Nilai  F  yang  dihasilkan  dari  analisis  ini menunjukkan  sejauh  mana  variasi  antar  kelompok  lebih  besar  dibandingkan variasi  dalam  kelompok.  Nilai  signifikansi  (sig.)  yang  lebih  kecil  dari  0,05 menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan  secara  statistik  dalam  panjang akar di antara kelompok perlakuan.
Tabel 4. Uji Anova Panjang Akar
df Mean Square F sig Between Groups Within Groups Total 2 1.666 8.292 0.02 21 .201 23 Sig<0,05 : ada pengaruh yang nyata terhadap penambahan karbon aktif PERLAKUAN N Subset for alpha = 0.05 1 2 K0 8 3.75 K3 8 4.50 K2 8 6.75 Sig. .327 1.000
Tabel  5  menyajikan  hasil  Uji  Duncan  untuk  panjang  akar  pada  tanaman dengan berbagai perlakuan karbon aktif.
Tabel 5. Uji Duncan Panjang Akar
PERLAKUAN N Subset for alpha = 0.05 1 2 K0 8 2.013 K3 8 2.243 K2 8 2.893 Sig. .317 1.000

## Perbandingan Jumlah Daun Berdasarkan Uji ANOVA dan Uji Duncan
Tabel  6  menyajikan  hasil  uji  ANOVA  untuk  jumlah  daun  pada  tanaman dengan berbagai perlakuan karbon aktif. Analisis ini membantu mengidentifikasi apakah  variasi  dalam  jumlah  daun  antara  kelompok  perlakuan  berbeda  secara statistik signifikan. Nilai F dan nilai signifikansi (Sig.) yang disajikan dalam tabel menunjukkan  sejauh  mana  perbedaan  antar  kelompok  lebih  besar  dibandingkan dengan  variasi  dalam  kelompok,  yang  dapat  mengindikasikan  efektivitas perlakuan karbon aktif terhadap peningkatan jumlah daun.
Tabel 6. Uji Anova Jumlah Daun

## Sig<0,05 : ada pengaruh yang nyata terhadap penambahan karbon aktif
Tabel  7  menyajikan  hasil  Uji  Duncan  untuk  jumlah  daun  pada  tanaman yang diberikan perlakuan karbon aktif.
Tabel 7. Uji Duncan Jumlah Daun
PERLAKUAN N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 K0 8 3.50 K2 8 4.50 K3 8 6.00 Sig. 1.000 1.000 1.000

## Perbandingan Panjang Daun Berdasarkan Uji ANOVA dan Uji Duncan
Tabel  8 menyajikan hasil  uji ANOVA untuk  panjang daun pada tanaman dengan perlakuan karbon aktif yang berbeda.
Tabel 8. Uji Anova Panjang Daun
df Mean Square F Sig. Between Groups 2 2.726 9.253 0.01 Within Groups 21 .295 Total 23 Sig<0,05 : ada pengaruh yang nyata terhadap penambahan karbon aktif df Mean Square F Sig. Between Groups Within Groups Total 2 12.667 19.000 <0.01 21 .667 23
Tabel  9  menyajikan  hasil  Uji  Duncan  untuk  panjang  daun  tanaman  yang menerima perlakuan karbon aktif.
Tabel 9. Uji Duncan Panjang Daun
PERLAKUAN N Subset for alpha = 0.05 1 2 K0 8 2.50 K2 8 2.99 K3 8 3.66 Sig. .087 1.000

## PEMBAHASAN Jumlah Akar
Parameter  jumlah  akar  bibit  anggrek  yang  diberi  perlakuan  karbon  aktif dilakukan uji beda nyata dan hasilnya menunjukkan adanya pengaruh yang nyata, dapat dilihat pada Tabel 2, pada tabel 3 menampilkan rata-rata jumlah akar yang dihitung  dengan  menggunakan  uji  beda  nyata  jujur  (BNJ)  pada  tingkat signifikansi 5%. Dampak penting lainnya terhadap jumlah akar adalah penerapan 2  g/L  karbon  aktif  pada  tanaman  sudah  mencukupi  untuk  mengkondisikan medium  menjadi  gelap  dan  menstimulus  sintesis  auksin  endogen  yang  berperan pada akar dan daun. Intensitas cahaya yang rendah dapat merangsang zat tumbuh endogen  untuk  bekerja  lebih  aktif  dalam  melakukan  proses  pertumbuhan  dan perkembangan  akar.  Juga  menurut  Gautheret  (1955)  dalam  (Fachrina  Wibowo, Armaniar,  2023)  yang  menyatakan  bahwa  auksin  berperan  dalam  pembentukan dan pertumbuhan akar
Media kultur jaringan sering kali menyertakan arang aktif karena manfaat yang  diberikannya  pada  media  tersebut.  Satu-satunya  tujuan  karbon  aktif,  yang bukan  merupakan  pengatur  tumbuh,  adalah  untuk  mengubah  komposisi  media tanam  guna  mendorong  pertumbuhan  tanaman.  Arang  aktif  dibuat  dengan  cara memaparkannya  pada  suhu  tinggi,  biasanya  uap  atau  udara  panas,  untuk  jangka waktu  yang  lama.  Senyawa  beracun  yang  menghambat  pertumbuhan  tanaman dapat  diserap  oleh  arang  aktif.  Karbon  aktif  meningkatkan  sirkulasi  udara  di media pertumbuhan anggrek dan menyerap etilen, zat pengatur tumbuh, menurut sebuah  penelitian.  Karbon  aktif  dapat  menghilangkan  fenol  dari  eksplan  selain etilen.  Kegunaan  lain  karbon  aktif  dalam  kultur  jaringan  adalah  untuk  menyerap bahan  kimia  penghambat  atau  beracun  yang  mungkin  dilepaskan  tanaman  ke dalam  media  tanam  (Fachrina  Wibowo,  Armaniar,  2023).  Studi  statistik menunjukkan  bahwa  penambahan  karbon  aktif  pada  kultur in  vitro anggrek dendrobium  berpengaruh  signifikan  terhadap  pertambahan  jumlah  akar.  Karbon aktif  pada  media  pertumbuhan  menghalangi  sebagian  cahaya  yang  seharusnya mencapai  tanaman.  Intensitas  cahaya  mempunyai  dampak  besar  terhadap kapasitas  regenerasi  plantlet;  tingkat  cahaya  rendah  dapat  mengaktifkan  zat pertumbuhan  endogen  yang  mendorong  pertumbuhan  dan  perkembangan  akar secara  lebih  efektif,  sedangkan  tingkat  cahaya  tinggi  meningkatkan  kapasitas  ini secara  signifikan.  (Martin  Urdiroz  et  al,  2004)  dalam  (Yusron,  Tri  Nopsagiarti, 2020).
Suatu  studi  menyatakan  bahwa  penggunaan  AC  dalam  kultur  jaringan tanaman  termasuk  meningkatkan  pembentukan  kultur  protoplas  (Kunitake  dkk., 1995), mencegah perkembangan bibit tanaman yang tidak normal (Ziv dan Gadasi
1986),  meningkatkan  embriogenesis  somatik,  pembentukan  tunas,  pemulihan tanaman,  dan  perakaran  (Buter  dkk.,  1993;  Dumas  dan  Monteuuis  1995;  Fuchs 1991;  Mathews  dkk.,  1993;  Patel  dan  Thorpe  1986;  Sinha  dan  Mallick  1991). Selain  itu,  penurunan  kemampuan  regenerasi  dari  kalis  jangka  panjang  adalah fenomena  umum  dalam  berbagai  sistem  dan  AC  dapat  mengembalikan kemampuan embriogenesis somatik dan sebagai hasilnya regenerasi tanaman dari kalis  jangka  panjang  dari  berbagai  spesies  yang  dikultur  ulang  dalam  kombinasi media yang berbeda (Zaghmout dan Torello, 1988). Dalam (Thomas, 2008).

## Panjang Akar
Hasil  dari  analisis  data,  menunjukkan  bahwa  penambahan  karbon  aktif berpengaruh  nyata  pada  pertumbuhan  Panjang  akar,  dapat  diketahui  rata-rata panjang  akar  pada  plantlet,  perlakuan  dengan  penambahan  karbon  aktif  (K1,  K2 dan  K3)  berbeda  nyata  setelah  dilakukan  analisis  dengan  uji  Duncan.  Hal  ini disebabkan  karbon  aktif  berfungsi  dalam  menciptakan  kondisi  medium  yang mendukung pertambahan panjang akar (menggelapkan media). Arang aktif dalam media  tumbuh  mampu  mengurangi  cahaya  yang  masuk  dalam  media  tumbuh. Intensitas  cahaya  yang  rendah  dapat  merangsang  zat  tumbuh  endogen  bekerja lebih  aktif  dalam  melakukan  inisiasi  akar  dan  juga  karena  pada  kondisi  gelap merupakan  kondisi  dimana  sel-sel  akar  akan  lebih  aktif  membelah  dan menyebabkan  pertumbuhan  akar  menjadi  lebih  baik.  Zaffari  et  al.,  (2000)  dalam (Baskara,  D.  R.,  Wijayani,  A.,  &  Srilestari,  2018).  menyatakan  bahwa pertumbuhan  panjang  akar  disebabkan  terjadinya  proses  pembelahan  sel  pada meristem ujung akar, selanjutnya diikuti proses pemanjangan dan pembesaran sel. Sedangkan pada perlakuan kontrol menunjukkan panjang akar yang relatif pendek hal  ini  disebabkan  pada  kontrol  terhambat  pertumbuhannya  oleh  adanya pencoklatan  yang  muncul  karena  fenol  yang  terbentuk  tidak  diikat  oleh  zat penghambat pencoklatan.   Menurut (Campbell  & Manalu,  2003) auksin endogen disintetik pada bagian meristem apikal suatu tunas tanaman dan ditransportasikan ke bagian akar dan berperan penting pada pertumbuhan dan perkembangan akar. Adapun  sitokinin  dengan  konsentrasi  yang  optimal  dapat  berperan  dalam meningkatkan pembelahan sel pada proses sitokinesis terutama sintesis RNA dan protein (Sari et al., 2015) dikombinasikan dengan arang aktif yang berperan dalam menciptakan  medium  yang  tepat  untuk  proses  sintesis  auksin  endogen  menjadi faktor penting bagi pertambahan panjang akar.
Pertumbuhan  akar  yang  paling  optimal  terlihat  ketika  arang  aktif ditambahkan ke dalam media pertumbuhan. Kemampuan arang aktif mengurangi cahaya  yang  masuk  ke  dalam  media  menjadi  penyebabnya.  Penurunan  intensitas cahaya  mendorong  zat  tumbuh  endogen  untuk  lebih  aktif  dalam  mengatur pertumbuhan  dan  perkembangan  akar.  Suatu  penelitian  menunjukkan  bahwa keadaan  cahaya  yang  terang  memiliki  dampak  signifikan  pada  peningkatan kemampuan  regenerasi  planlet.  Meskipun  auksin  dapat  tetap  aktif  dalam kegelapan,  sintesis  auksin  justru  terjadi  pada  kondisi  terang.  (Widiastoeti  et  al., 2013).  Menurut  Gautheret  (1955)  auksin  berperan  dalam  pembentukan  dan pertumbuhan  akar.  Suatu  studi  yang  menyatakan  bahwa  auksin  memiliki penggunaan  yang  luas  dalam  kultur  jaringan,  dimana  digunakan  untuk merangsang  pertumbuhan  kalus,  suspensi  sel,  organ,  mempromosikan pemanjangan  pada  jaringan  koleoptil,  menghambat  pertumbuhan  tunas  samping,
memicu  aktivitas  kambium,  dan  merangsang  pertumbuhan  akar.  (Fachrina Wibowo, Armaniar, 2023).

## Jumlah Daun
Hasil uji anova pada parameter jumlah daun plantlet anggrek dendrobium dengan pemberian perlakuan arang aktif memberikan pengaruh nyata. Pemberian Arang  Aktif  terhadap  jumlah  daun  tanaman  Anggrek  dengan  perbedaan pertumbuhan  tanaman  merupakan  daya  adaptasi  morfologis,  yang  pada  akhirnya akan  mempengaruhi  daya  tumbuh  dan  hasil  suatu  tanaman.  Sehingga  dapat dikatakan  bahwa  dengan  konsentrasi  3  gr/L  sudah  mencukupi  untuk mengkondisikan medium menjadi gelap dan menstimulus sintesis auksin endogen yang  berperan  pada  akar  dan  daun.  Intensitas  cahaya  yang  rendah  dapat merangsang  zat  tumbuh  endogen  untuk  bekerja  lebih  aktif  dalam  melakukan proses pertumbuhan dan perkembangan akar, pernyataan ini didukung oleh suatu studi  yang  menyatakan  bahwa  auksin  berperan  dalam  pembentukan  dan pertumbuhan  akar  (Fachrina  Wibowo,  Armaniar,  2023).  Suatu  studi  menyatakan dalam  kultur  jaringan,  arang  aktif  dapat  menyerap  senyawa  racun  dalam  media atau menyerap senyawa inhibitor yang disekresikan oleh planlet, menstabilkan pH media,  merangsang  pertumbuhan  akar  dengan  mengurangi  jumlah  cahaya  yang masuk  kedalam  planlet,  mencegah  atau  mengurangi  pembentukan  kalus,  dan merangsang morfogensis (Yusron, Tri Nopsagiarti, 2020). Senyawa-senyawa hasil oksidasi  fenol  sangat  toksik  bagi  tanaman  dan  dapat  menghambat  pertumbuhan serta proses diferensiasi. Untuk menekan keluarnya senyawa fenol tersebut, dalam media kultur diberi senyawa arang aktif.(Widiastoeti et al., 2013).
Menurut  penelitian  oleh  (Marwoto,  2004)  Perlakuan  arang  aktif proanalisis  dapat  meningkatkan  pertumbuhan  luas  daun  terbesar,  karena  arang aktif  proanalisis  mampu  menyerap  senyawa  toksik  yang  terdapat  dalam  media atau  senyawa  toksik  yang  disekresikan  oleh  tanaman  kultur  itu  sendiri.  Di samping itu pertumbuhan dan perkembangan daun dikontrol oleh beberapa homon atau  zat  tumbuh  seperti  auksin,  sitokinin,  giberelin,  dan  nutrient  lain  yang terkandung  dalam  media  tumbuh.    Masalah  yang  timbul  dalam  menggunakan karbon  aktif  dalam  media  kultur  adalah  kemampuannya  menyerap  senyawa- senyawa  yang  tidak  diinginkan,  serta  potensinya  untuk  menyerap  hormon- hormon,  vitamin,  atau  ion  logam  seperti  Cu  +2  dan  Zn  +2  yang  diperlukan.  Hal ini  menyulitkan  para  peneliti  untuk  memastikan  jumlah  yang  tepat  dari  setiap komponen  media  yang  tersedia  untuk  tanaman.  (Sakularat  et  al.,  2015) menyatakan  bahwa  daya  serap  arang  aktif  berpengaruh  secara  spesifik  terhadap komposisi  media  kultur.  Beberapa  zat  seperti  thiamin-HCl  dan  asam  nikotinat dapat terbuang dari media, sedangkan inositol dan sukrosa tetap tidak terganggu. Meski  begitu,  mayoritas  studi  yang  telah  dipublikasikan  mengenai  penggunaan arang aktif dalam kultur jaringan tanaman cenderung menunjukkan dampak yang lebih positif daripada negatif.

## Panjang Daun
Hasil uji statistik anova terhadap parameter panjang daun plantlet anggrek dengan  perlakuan  pemberian  karbon  aktif  memberikan  pengaruh  yang  nyata. Dalam  hal  ini,  karbon  aktif  berperan  sebagai  bahan  untuk  menyerap  senyawa fenol  pada  tumbuhan  yang  dikultur.  Senyawa  fenolik  dihasilkan  sebagai  respon
tumbuhan  karena  stress.  Pencoklatan  merupakan  hasil  oksidasi  senyawa  fenolik yang  diproduksi  jaringan  dan  oksigen  dalam  botol  kultur.  Stress  pada  jaringan kemaitan  dapat  terjadi  karena  eksplan  kemaitan  disayat  terlebih  dahulu  sebelum ditanam pada mediatanam. Jaringan  yang stress tersebut kemudian menghasilkan senyawa  fenolik  yang  bereaksi  dengan  oksigen  dalam  botol  kultur.  Senyawa fenolik  terutama  ditemukan  pada  eksplan  yang  berasal  dari  alam  (Palacio  et  al. 2012)  dalam  (Sudrajad  et  al.,  2016).  Adanya    senyawa  fenol    yang    terkandung dalam  daun  duku  menyebabkan  pencoklatan  dan  eksplan  gagal  beregenrasi akibat      senyawa      fenol      yang      keluar      dari      pelukaan      jaringan      pada eksplan.(Haniawasniati  et  al.,  2022).  Menurut  (Prassetio  et  al.,  2015)  dalam penelitiannya    untuk    mengatasi    terjadinya  pencoklatan  dalam  mengurangi senyawa    fenol  yaitu  denganmembilas    terus    menerusdengan    air    atau aquades,melakukan subkultur  berulang,memberikan arang   aktif   danpengaturan pH  (5.7), karena  enzimpolifenol  oksidase  bereaksi  optimal pada  pH  6.5.
Menurut  (E.  F.  George,  1984)  menyatakan  bahwa  Secara  keseluruhan, arang  aktif  memiliki  pengaruh  dalam  mengadsorpsi  senyawa-senyawa  beracun yang  ada  dalam  media  kultur,  senyawa  beracun  tersebut  mengakibatkan terhambatnya  pertumbuhan  kultur.  Selain  itu,  arang  aktif  juga  mencegah terbentuknya  kalus  yang  tidak  diharapkan,  serta  merangsang  pembentukan  akar dengan  cara  mengurangi  intensitas  cahaya  yang  mencapai  bagian  eksplan  di dalam  media.  Auksin  adalah  hormon  yang  memicu  perpanjangan  sel  pada  tunas yang  sedang  tumbuh,  sehingga  tunas  terus  tumbuh  ke  arah  yang  lebih  tinggi. (Campbell & Manalu, 2003). Penambahan panjang daun terjadi karena percepatan pembelahan  sel  dan  stimulasi  proses  diferensiasi.  Proses  pembelahan  sel membutuhkan  tingkat  energi  yang  tinggi  yang  didukung  oleh  auksin,  sitokinin, dan  nutrisi  lainnya.(Widiastoety,  2014).  Hal  tersebut  didukung  oleh  penelitian (Marwoto,  2004),  yang  menyatakan  arang  aktif  proanalisis  dapat  menyerap senyawa-senyawa  toksik  atau  racun  dalam  media  kultur  dengan  baik.  Akibatnya metabolisme dapat menghasilkan energi yang digunakan untuk biosintesis hormon dan aktivitas meristemati, yang meliputi pembelahan dan pemanjangan sel.

## SIMPULAN
Dari hasil penelitian dapat  ditarik  kesimpulan bahwa penambahan variasi konsentrasi  karbon  aktif  pada  media  kultur in  vitro berpengaruh  nyata  pada pertumbuhan  anggrek Dendrobium  welirang ,  yaitu  pada  parameter  jumlah  akar, Panjang  akar,  Panjang  daun,  dan  jumlah  akar  Anggrek Dendrobium  welirang. Karena karbon aktif memiliki fungsi untuk menggelapkan media kultur sehingga dapat merangsang pertumbuhan akar, selain itu, karbon aktif juga dapat menyerap senyawa  fenol  yang  beracun  dan  menghambat  pertumbuhan  tanaman  Anggrek Dendrobium welirang .

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Bapak Ary Sudibyo dan Ibu Eni Asri selaku pemilik Candi  Orchid  telah  memberikan  izin  penelitian  di  laboratorium  candi  orchid, sehingga  peneliti  dapat  melakukan  penelitian  dengan  baik.  Serta  terima  kasih kepada  dosen  pembimbing  satu  dan  dua  yakni  Ibu  Praptining  Rahayu,  S.Si., M.Pd.,  dan  Ibu  Retno  Mulyaningrum,  S.Pd.,  M.Pd.  yang  telah  membimbing dalam menyusun artikel ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ambarwati,  I.  D.,  Alfian,  F.  N.,  &  Dewanti,  P.  (2021).  Respon  Anggrek Dendrobium sp., Oncidium sp., dan Phalaenopsis sp . Terhadap Pemberian Empat Jenis Nutrisi Organik yang Berbeda pada Tahap Regenerasi Planlet.
Agrikultura , 32 (1), 27. https://doi.org/10.24198/agrikultura.v32i1.32366 Bhattacharjee, D., & Hossain, M. (2015). Effects of Plant Growth Regulators And Explants  on  Propagation  In  The  Monopodial  And  Sympodial  Orchid:  A Study In vitro . J. Orchid Soc. , 29 , 91–102. https://orchidsocietyindia.org/wp-content/uploads/2018/09/Journal- 2015.pdf#page=88 Campbell, N. A., & Manalu, W. (2003). Biology (Ed. 5).
http://opac.lib.ulm.ac.id/id/opac/detail.php?q1=574&q2=BIO&q3=2004&
q4=979-688-470-4 E. F. George, P. D. S. (1984). Plant propagation by tissue culture : handbook and directory of commercial laboratories . Exegetics Ltd.
https://books.google.co.id/books/about/Plant_Propagation_by_Tissue_Cult ure.html?id=rX8nzgEACAAJ&redir_esc=y
Fachrina  Wibowo,  Armaniar,  N.  A.  (2023). Perbanyakan  Vegetatif  Tunas  Mikro Anggrek  Dendrobium  (Dendrobium  sp)  Secara  In  vitro  Dengan Pemberian Bap Dan Arang Aktif . 25 (1), 910–916. http://dx.doi.org/10.37159/j. p agros.v25i1.2525
Ferziana. (2013). Pengaruh Pupuk Daun dan Arang Aktif pada Media Subkultur II terhadap  Pertumbuhan  Bibit  Anggrek  Phalaenopsis  Effect  of  Foliar Fertilizers and Activated Charcoal on Media Subcultures II on Growth of Phalaenopsis Orchid Seed Ferziana. Jurnal Penelitian Pertanian Terapan , 13 (3), 144–150. https://doi.org/https://doi.org/10.25181/jppt.v13i3.178 Haniawasniati, N., Nurokhman, A., Habisukan, U. H., Rahayu, S. C., Sari, V. W.,
Novitasari,  L.,  Metalisa,  E.,  &  Indriani,  A.  (2022). Morfologi  Eksplan Daun ( Folium ) Duku Terhadap Kultur Jaringan Pada Media Murashige and Skoog ( Ms ) . 221–227. https://proceedings.radenfatah.ac.id/index.php/semnaspbio/article/view/70 5
Heriansyah,  P.,  Sagiarti,  T.,  Program  Studi  Agroteknologi,  R.,  Pertanian Universitas Islam Kuantan Singingi, F., Kuantan Jln Gatot Subroto, T. K.,
Telp,  J.,  &  Kuantan,  T.  (2014).  Pengaruh  Pemberian  Myoinositol  dan Arang  Atif  pada  Media  Subkultur  Jaringan  Tanaman  Anggrek (Dendrobium sp.). Jurnal Agroteknologi , 5 (1), 9–16.
https://doi.org/http://dx.doi.org/10.24014/ja.v5i1.1142
Ikenganyia, E., Anikwe, M., Omeje, T., & Adinde, J. (2017). Plant Tissue Culture Regeneration  and  Aseptic  Techniques. Asian  Journal  of  Biotechnology and Bioresource Technology , 1 (3), 1–6.
https://doi.org/10.9734/ajb2t/2017/31724
Ismaini,  L.  (2021).  Pengaruh  Komposisi  Media  Pada  Perbanyakan  Medinilla
Beamanii  Secara In  vitro . Semnas  Biologi  Ke-9  Tahun  2021  FMIPA
Universitas Negeri Semarang , 10–16.
https://proceeding.unnes.ac.id/index.php/semnasbiologi/article/view/751
K,  S.,  &  Fathnur.  (2018). Metodologi  Penelitian  Farmasi  Komunitas  dan Eksperimental . Deepublish. https://repo.stikes-
ibnusina.ac.id/xmlui/handle/123456789/322
Khuraijam,  J.  S.,  Sharma,  S.  C.,  &  Roy,  R.  K.  (2017).  Orchids:  Potential ornamental  crop  in  north  india. International  Journal  of  Horticultural  & Crop Science Research , 7 (1), 1–8. https://www.ripublication.com/ijhcsr17/ijhcsrv7n1_01.pdf Lempang, M. (2014). Pembuatan dan Kegunaan Karbon Aktif. Jurnal Info Teknis EBONI , 11 (2), 65–80. http://ejournal.forda-mof.org/ejournal-
litbang/index.php/buleboni/article/view/5041/4463arang
Marwoto, D. B. (2004). Pengaruh Berbagai Sumber Arang dalam Media Kultur In vitro terhadap Pertumbuhan Plantlet Oncidium. Jurnal Hortikultura , 14 (1), 1–5. http://124.81.126.59/handle/123456789/7935
Miranti,  I.  P.,  &  Andriani,  V.  (2022).  Aplikasi  Sari  Akar  Eceng  Gondok  Pada Media Murashige And Skoog (MS) Sebagai Media Multiplikasi Tanaman Krisan  (Chrysanthemum  morifolium  Ramat,  Varietan  Puspita  Nusantara) Secara In vitro . Quagga: Jurnal Pendidikan Dan Biologi , 14 (2), 169–174. https://doi.org/10.25134/quagga.v14i2.4500
Nisyawati, & Kariyana, K. (2013). Effect  Of Ascorbic Acid,  Activated  Charcoal And Light Duration On Shoot Regeneration Of Banana Cultivar Barangan (  Musa  Acuminata  L  .) In  vitro Culture. In  vitro , 15 (April),  13–17. https://www.cabdirect.org/cabdirect/abstract/20133290250
Prassetio,  A.,  Silvina,  F.,  &  Murniati.  (2015). Respon  Eksplan  Duku  (Lansium
Domesticum  Corr.)  Terhadap  Pemberian  Auksin  Dan  Sitokinin  Dalam Medium Murashige And Skoog Duku . 17 (4), 306–314. https://jom.unri.ac.id/index.php/JOMFAPERTA/article/view/5507/5385
Qomusuddin,  I.  F.,  &  Romlah,  S.  (2022). Analisis  Data  Kuantitatif  dengan
Program  IBM  SPSS  Statistic  20.0 (p.  125).  Depublish  Publisher. https://books.google.co.id/books?id=P3tmEAAAQBAJ&lpg=PP1&ots=H OQolLvY2l&dq=data kuantitatif adalah &lr&hl=id&pg=PR4#v=onepage&q=data kuantitatif adalah&f=false Sakularat,  S.,  Tiwa,  R.,  &  Sorapong,  B.  (2015).  Influence  of  different  type  of Culture  Media  and  activated  charcoal  on  Callus  Induction  and ShootMultiplication of Cadaminelyrata Sakularat. Journal of Agricultural Technology , 11 (8), 1697–1704. www.journal.uta45jakarta.ac.id
Sandra, E. (2013). Cara  mudah memahami dan menguasai kultur jaringan skala rumah tangga (p. 124). IPB Press.
https://sip.unper.ac.id/index.php?p=show_detail&id=3107
Sari,  D.  I.,  Suwirmen,  &  Nasir,  N.  (2015).  Pengaruh  Konsentrasi  Thidiazuron (TDZ) dan Arang Aktif pada Sub Kultur Tunas Pisang Kepok Hijau (Musa paradisiaca  L.). Jurnal  Online  Ilmu  Pengetahuan  Alam , 4 (3),  280–289. http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/ejurnalfmipa/article/view/5133 Silva,  J.  A.  T.  da.  (2013).  Ammonium  to  Nitrate  Ratio  Affects  Protocorm  Like Bodies  PLB  Formation In  vitro of  Hybrid  Cymbidium. Journal  of Ornamental  Plants  (Journal  of  Ornamental  and  Horticultural  Plants) ,
3 (3), 155–160. https://www.researchgate.net/publication/280494138_Ammonium_to_Nitr ate_Ratio_Affects_Protocorm_Like_Bodies_PLB_Formation_In_vitro_of
_Hybrid_Cymbidium
Sucandra, A., Silvina, F., Arnis, D., & Yulia, E. (2015). UJi Pemberian Beberapa
Konsentrasi  Glisin  pada  Media  Vacin  And  Went  (VW)  terhadap Pertumbuhan  Plantlet  Anggrek  (Dendrobium  Sp.)  secara In  vitro . Jom Faperta , 2 (1), 1–11. https://jom.unri.ac.id/index.php/JOMFAPERTA/article/view/5849 Sudrajad,  H.,  Suharto,  D.,  &  Rahmawati  Wijaya,  N.  (2016).  Inisiasi  Kalus Sanrego  (Lunasia  Amara  Blanco.)  dalam  Kultur  Jaringan. Proceeding Biology Education Conference , 13 (1), 619–623. https://simdos.unud.ac.id/uploads/file_pendidikan_1_dir/ddeec13c19c352
d21ccca286966a08ec.pdf
Sugiyono.  (2018). Metode  penelitian  manajemen :  Pendekatan  kuantitatif, kualitatif,  kombinasi  (  mixed  methods  ),  penelitian  tindakan  (  action research  ),  penelitian  evaluasi (Setiyawarni  (ed.)).  https://inlislite.uin- suska.ac.id/opac/detail-opac?id=27802
Suranthran, P., Sinniah, U. R., Sreeramanan Subramaniam, M. A. A., Gantait, & Saikat, N. R. and. (2011). Effect of activated charcoal, culture media and plant  growth  regulators  on in  vitro germination  and  development  of  elite dura  oil  palm  (Elaeis  guineensis  Jacq.)  zygotic  embryos. Plant  Cell Biotechnology and Molecular Biology , 20 (7–8), 314–323. https://doi.org/10.5897/AJB11.964 Thomas,  T.  D.  (2008).  The  role  of  activated  charcoal  in  plant  tissue  culture. Biotechnology Advances , 26 (6), 618–631. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2008.08.003 Widiastoeti, D., Santi, A., & Solvia, N. (2013). Pengaruh Myoinositol dan Arang Aktif  terhadap  Pertumbuhan  Planlet  Anggrek  Dendrobium  dalam  Kultur In vitro . Jurnal Hortikultura , 22 (3), 205. https://doi.org/10.21082/jhort.v22n3.2012.p205-209 Widiastoety, D. (2014). Effect of Auxin and Cytokinin on the Growth of Mokara Orchid Plantlets. Jurnal Hortikultura , 24 (3), 230–238. https://dx.doi.org/10.21082/jhort.v24n3.2014.p230-238
Yusron,  Tri  Nopsagiarti.  (2020).  Respon  Pertumbuhan  Eksplan  Jeruk  Kasturi (Citrus Microcarpa) Terhadap Pemberian Benzyl Amino Purin (Bap) Dan Arang  Aktif  Pada  Media  MS. Jurnal  Agro  Indragiri , 6 (2),  1–16. https://doi.org/10.32520/jai.v6i2.1471
Zulkarnain.  (2011). Kultur  Jaringan  Tanaman:  Solusi  Perbanyakan  Tanaman Budi Daya, (1 st ed.). Jakarta : Bumi Aksara