## ARTIKEL PENELITIAN
UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL DAUN SANGKAREHO ( Callicarpa longifolia Lam.)

## TERHADAP Escherichia coli
Rezqi Handayani 1, Gabrile Natasia 2
1 Dosen Program Studi D-III Farmasi Universitas Muhammadiyah Palangkaraya 2 Mahasiswa Program Studi D-III Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Palangkaraya
Email : rezqi.handayani@gmail.com ,

## ABSTRAK
Tanaman obat adalah salah satu diantara obat tradisional yang paling banyak digunakan secara  empiris  oleh  masyarakat  dalam  rangka  menanggulangi  masalah  kesehatan  yang dihadapinya,  baik  dengan  maksud  pemeliharaan,  pengobatan,  maupun  pemilihan  kesehatan. Salah  satu  tanaman  dari  Puruk  Cahu  yang  dapat  digunakan  sebagai  obat  tradisional  serta banyak  khasiatnya  adalah  daun  Sangkareho  ( Callicarpa  longifolia Lam.).  Berdasarkan  hasil penelitian  Akhmad  Khadafi  S.  (2016),  pada  daun  Sangkareho  ( Callicarpa  longifolia Lam.) terkandung  beberapa  zat  aktif  seperti flavonoid,  steroid,  alkaloid,  dan tanin.  Berdasarkan  data empiris  masyarakat  Puruk  Cahu,  daun  Sangkareho  ( Callicarpa  longifolia Lam.)  mempunyai khasiat dan dimanfaatkan sebagai obat tradisional untuk mengobati penyakit diare. Salah satu bakteri yang menjadi pemicu diare adalah bakteri Escherichia coli .
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan  daya  hambat  ekstrak  daun Sangkareho  yang  digunakan  sebagai  obat  tradisional  untuk  mengobati diare  yang  disebabkan oleh  bakteri Escherichia  coli serta  untuk  konsenstrasi  ekstrak  daun  Sangkareho  yang  mampu menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli .
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Ilmu  Kesehatan Universitas Muhammadiyah Palangkaraya. Kegiatan penelitian yang dilakukan adalah ekstraksi daun  Sangkareho  ( Callicarpa  longifolia Lam.)  dan  uji  daya  hambat  ekstrak  etanol  daun Sangkareho ( Callicarpa longifolia Lam.) terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli . Hasil  yang  didapat  dari  penelitian  ini  adalah  ekstrak  daun  Sangkareho  menunjukkan bahwa  tidak  ada  respon  hambatan  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli .  Antibiotik Cotrimoxazole  sebagai  kontrol  positif  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli pada  semua  konsentrasi.  Rata-rata  diameter  zona  hambat  Cotromoksazole  pada konsentrasi  1%  sebesar  7,7  mm,  pada  konsentrasi  5%  sebesar  16,3  mm,  pada  konsentrasi 10%  sebesar  18,4  mm,  dan  pada  konsentrasi  15%  sebesar  20,6  mm.  Sedangkan  untuk diameter zona hambat ekstrak daun Sangkareho pada semua konsentrasi di dapatkan 0 mm.
Kata Kunci : Daun Sangkareho ( Callicarpa longifolia Lam.), Uji daya hambat, Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Obat  tradisional  menurut  Undang- Undang  Republik  Indonesia  Nomor  39 Tahun 2009 tentang Kesehatan merupakan bahan  atau  ramuan  yang  berupa  bahan tumbuhan,  bahan  hewan,  bahan  mineral, sediaan sarian (galenik) atau campuran dari bahan tersebut secara umum turun menurun telah digunakan untuk pengobatan dan dapat diterapkan sesuai dengan norma yang berlaku di masyarakat. Obat tradisional  di  Indonesia  sangat  besar peranannya  dalam  pelayanan  kesehatan masyarakat  di  Indonesia,  sehingga  obat tradisional sangat berpotensi untuk dikembangkan. Indonesia kaya akan tanaman  obat-obatan,  yang  mana  masih belum  dimanfaatkan  secara  optimal  untuk kesehatan.  Obat  tradisional  merupakan warisan  budaya  bangsa  yang  perlu  terus dilestarikan dan dikembangkan untuk menunjang pembangunan kesehatan
sekaligus untuk meningkatkan perekonomian rakyat (Notoatmodjo, 2007).
Kemajuan teknologi dan ilmu pengetahuan  modern  yang  semakin  pesat dan canggih di zaman sekarang ini ternyata tidak mampu menggeser atau mengesampingkan begitu saja obat tradisional, tetapi justru hidup berdampingan  dan  saling  melengkapi.  Hal ini terbukti dan banyaknya peminat pengobatan tradisional. Namun yang menjadi  masalah  dan  kesulitan  bagi  para
peminat  obat  tradisional  adalah  kurangnya pengetahuan  dan  informasi  yang  memadai mengenai  berbagai  jenis  tumbuhan  dipakai sebagai  obat  tradisional  untuk  pengobatan penyakit tertentu (Dalimartha, 2000).
Prospek  pengembangan  produksi tanaman  obat  semakin  pesat,  mengingat perkembangan  industri  obat  modern  dan obat tradisional terus meningkat. Kondisi ini terus dipengaruhi oleh kesadaran masyarakat yang semakin meningkat tentang  manfaat  tanaman  sebagai  obat. Masyarakat semakin sadar akan pentingnya kembali  ke  alam  ( back  to  nature )  dengan memanfaatkan  obat-obat  alami.  Memang obat  modern  berkembang  cukup  pesat, namun  potensi  obat  tradisional  terutama yang berasal dari tumbuhan tetap tinggi. Hal ini  disebabkan  obat  tradisional  dapat diperoleh  tanpa  resep dokter,  dapat  diramu sendiri, bahan baku tidak perlu diimpor, dan tanaman  obat  dapat  ditanam  sendiri  oleh peamakainya  (Djauhariya  dan  Hernani, 2004).
Penggunaan  obat  tradisional  secara luas  oleh  masyarakat  disebabkan  selain karena alami, mudah didapat, serta harganya murah, penggunaan obat ramuan tumbuhan  secara  tradisional  ini  tidak menghasilkan efek samping yang ditimbulkan seperti yang sering terjadi pada pengobatan secara kimiawi, selain itu masih banyak  orang  yang  beranggapan  bahwa penggunaan  obat  tradisional  lebih  aman
dibandingkan dengan obat sintesis (Thomas, 1989).
Pengobatan  tradisional  khususnya yang  menggunakan  tanaman  obat,  tetap berlangsung  di  zaman  modern  ini,  bahkan cenderung meningkat. Salah satu faktornya disebabkan karena pada penggunaan obat- obatan modern dapat menimbulkan berbagai macam efek samping, diantaranya seperti : hiperasiditas lambung dan penurunan  tekanan  darah  yang  terjadi secara  mendadak.  Pemberian  obat-obatan tradisional  merupakan  salah  satu  cara pencegahan dari penyakit infeksi, baik yang disebabkan  oleh  bakteri  maupun  jamur. Obat  tradisional/herbal  banyak  digunakan masyarakat  karena  hasilnya  yang  paten meskipun khasiatnya dapat dirasakan dalam jangka waktu cukup lama serta tanpa adanya efek samping (Meira, 2014).
Indonesia  kaya  akan  sumber  daya alam  khususnya  sumber  daya  hayati  yang meliputi  berbagai  jenis  tumbuhan.  Dari 40.000  jenis  tumbuhan  yang  tumbuh  di Indonesia,  hampir  1.000  jenis  diantaranya dapat  digunakan  sebagai  bahan  obat tradisional (Sarson, et al ., 2014). Kekayaan hayati  ini  tersebar  di  pulau-pulau  besar Indonesia, salah satunya di pulau
Kalimantan  banyak  terdapat  tanaman  yang dapat  dijadikan  bahan  obat  tradisional, khususnya Kalimantan Tengah yang termasuk  salah  satu  kawasan  dengan banyak menyimpan keanekaragaman hayati
yang  sudah  dimanfaatkan  oleh  masyarakat setempat  sejak  puluhan  tahun  lamanya untuk pengobatan. Penggunaan obat tradisional  di  Kalimantan  Tengah  semakin diminati  masyarakat  karena  khasiatnya diyakini  tidak  kalah  dengan  obat-obatan produksi  pabrikan.  Sebagian  masyarakat Kalimantan Tengah ada yang hidup terpencil,  jauh  dari  jangkauan  pengobatan modern, dalam usaha menjaga dan mepertahankan kesehatan, masyarakat menggunakan  obat  tradisional  yang  diramu dari bahan alam tanaman tersebut. Tanaman  obat  adalah  salah  satu  diantara obat tradisional yang paling banyak digunakan  secara  empiris  oleh  masyarakat dalam  rangka  menanggulangi  masalah kesehatan  yang  dihadapinya,  baik  dengan maksud pemeliharaan, pengobatan, maupun  pemilihan  kesehatan  (Hembing, 2003). Salah satu tanaman dari Kalimantan Tengah yang dapat digunakan sebagai obat tradisional  serta  banyak  khasiatnya  adalah daun  Sangkareho  ( Callicarpa  longifolia Lam.). Daun Sangkareho ( Callicarpa longifolia Lam.)  digunakan  masyakarat setempat  sebagai  obat  untuk  mengobati luka, pasca pendarahan setelah melahirkan, dan diare.
Berdasarkan hasil penelitian Akhmad  Khadafi  S.  (2016),  pada  daun Sangkareho  ( Callicarpa  longifolia Lam.) terkandung  beberapa  zat  aktif  seperti flavonoid, alkaloid, dan steroid.
Berdasarkan data empiris masyarakat Puruk  Cahu,  daun  Sangkareho  ( Callicarpa longifolia Lam.)  mempunyai  khasiat  dan dimanfaatkan sebagai obat tradisional untuk mengobati  penyakit  diare.  Diare  umumnya disebabkan  oleh  infeksi  virus,  protozoa; ( Giardia  lambdia,  Entamoeba  hystolitica ), bakteri;  yang  memproduksi  enterotoksin ( Staphylococcus aureus, Clostridium perfringen ), Escherichia coli, Vibrio cholera, Clostridium  difficile dan  yang  menimbulkan inflamasi  mukosa  usus  (Shigella  sp., Salmonella  sp.,  Yersinia)  (Djojoningrat, 2006).  Salah  satu  bakteri  yang  menjadi pemicu diare adalah bakteri Escherichia coli (Sinthamurniwati, 2006).

## METODELOGI PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di laboratorium
Mikrobiologi dan
Farmakognosi  Fakultas  Ilmu  Kesehatan Universitas  Muhammadiyah  Palangkaraya. Waktu  penelitian  ini  selama  3  bulan, kegiatan penelitian ini dimulai dari pengambilan tumbuhan Kelakai, pembuatan ekstrak  dan  uji  daya  hambat  ekstrak  etanol daunSangkareho( Callicarpa longifolia Lam.) terhadap bakteri Escherichia coli .

## PembuatanEkstrak
Pembuatan ekstrak daun Sangkareho ( Callicarpalongifolia Lam.)
denganmetodeperkolasi  dilakukan  dengan caraMenimbang  serbuk  simplisia  daun Sangkareho ( Callicarpalongifolia Lam.) sebanyak  300  gram.Memasukkan  serbuk
simplisia daun
Sangkareho ( Callicarpalongifolia Lam.) ke dalam perkolator.  Menambahkan  pelarut  etanol hingga  serbuk  terendam  dalam  pelarut berada  2  cm  di  atas  serbuk,  kemudian menutup  perkolator  sambil  sesekali  diaduk. Rendam  selama  3  kali  24  jam  sambil dilakukan  pengadukan  dan  setiap  24  jam dilakukan  penyaringan.  Mengambil  ekstrak cair  yang  didapat  dan  ekstrak  tersebut  di evaporasi  menggunakan evaporator hingga kadar etanol berkurang setengahnya. Menguapkan  ekstrak  tersebut  di  atas waterbath menggunakan  cawan  porselin pada  suhu  95ºC  hingga  diperoleh  ekstrak kental.  Selanjutnya  menimbang  ekstrak kental yang didapat.
Uji Daya Hambat
Uji  daya  hambat  ekstrak  daun Sangkareho terhadap Escherichia coli dilakukan  sebagai  berikut  :beberapa  koloni isolat Escherichia  coli diambil  lalu  di  kultur ke  media Mueller  Hinton  Agar (MHA) dengan  cara  di  oleskan  di  permukaan  agar yang  telah  mengeras.  Media  yang  telah  di oles  bakteri,  diatasnya  diletakkan  kertas cakram/disk  yang  telah  direndam  di  dalam larutan  ekstrak  daun  Sangkareho  dengan konsentrasi 1%, konsentrasi 5%, konsentrasi  10%,  dan  konsentrasi  15%, serta  antibiotik  Cotrimoxazole  sebagai kontrol  positif  dengan  konsentrasi  yang sama  seperti  konsentrasi  ekstrak  daun Sangkareho. Selanjutnya, diinkubasi
selama  24  jam  pada  suhu  37°C.  Zona hambat  yang terbentuk dari  masing-masing kertas  cakram/disk  diukur  menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan Ekstrak Daun Sangkareho
Metode yang digunakan untuk memperoleh  ekstrak  daun  Sangkareho adalah metode perkolasi.
Menurut Parameter Standar Umum Ekstrak
Tumbuhan Obat, perkolasi adalah ekstraksi dengan  pelarut  yang  selalu  baru  sampai sempurna  ( exhaustive  extraction )  yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan.  Proses  terdiri  dari  tahapan pengembangan  bahan,  tahap  maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya
(penetesan/penampungan  ekstrak),  terus menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat)  yang  jumlahnya  1-5  kali  bahan. Ekstrak  cair  yang  diperoleh  kemudian evaporasi dan dikentalkan dengan menggunakan waterbath. Metode ini digunakan  karena  cara  perkolasi  mudah dan  sederhana  dilakukan,  serta  peluang resiko pengotor sangat kecil.
Uji Daya Hambat Daun Sangkareho terhadap Bakteri E.Coli
Hasil pengujian daya hambat kontrol
positif obat Cotrimoxazole terhadap pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli yang diperoleh  dapat  dilihat  pada  Tabel  1 dibawah ini :
Tabel 1.Hasil uji daya hambat kontrol positif obat Cotrimoxazole terhadap bakteri Escherichia coli Konsentrasi Diameter zonahambat (mm) Rata-rata (mm) Keterangan Percobaa n 1 Percobaan 2 Percobaan 3 1% 8,5 7,3 7,3 7,7 Resistant 5% 17,4 17,7 13,9 16,3 Susceptible 10% 19,5 18,2 17,5 18,4 Susceptible 15% 21,5 20,6 19,7 20,6 Susceptible
Sedangkan  hasil  pengujian  daya
hambat  ekstrak  daun  Sangkareho terhadap
pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli yang
diperoleh  dapat  dilihat  pada  Tabel  2 dibawah ini :
Tabel 2. Hasil uji daya hambat ekstrak daun Sangkareho terhadap bakteri Escherichia coli
Konsentrasi Diameter zonahambat (mm) Rata- rata (mm) Keterangan Percobaan 1  Percobaan 2  Percobaan 3 1% Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada Rendah 5% Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada Rendah 10% Tidak ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada Rendah 15% Tidak ada Tida ada Tidak ada Tidak ada Rendah
Hasil  uji  daya  hambat  ekstrak  daun Sangkareho  dan  kontrol  positif  antibiotik Cotrimoxazole  terhadap bakteri Escherichia coli diperoleh  melalui  pengamatan  yang dilakukan  dengan  3  kali  pengulangan. Kepekaan  bakteri  terhadap  antibiotik  atau bahan  anti  bakteri  dapat  diamati  dengan terbentuknya  zona  hambat  (daerah  bening di sekeliling sumur) (Kairupan, et al ., 2014).
Menurut  Oroh,  Stery  B., et  al (2014),  daya hambat  ekstrak  yang  diuji  ditunjukkan dengan  adanya  zona  bening  di  sekitar kertas  cakram.  Zona  bening  di  sekitar kertas  cakram  merupakan  daerah  difusi ekstrak  yang  mempengaruhi  pertumbuhan bakteri.  Besar  diameter  dari  zona  hambat yang terbentuk dapat menunjukkan kekuatan  anti  bakteri  dari  ekstrak  yang digunakan.
Pengujian untuk kontrol positif menggunakan antibiotik spektrum luas yaitu
Cotrimoxazole. Cotrimoxazole adalah sediaan  kombinasi  tetap trimetoprim dan sulfametoksazol dengan perbandingan 1 : 5 yang  mempunyai  aktivitas  bakterisida. Antibiotik  Cotrimoxazole  dapat  digunakan untuk  mengobati  berbagai  infeksi,  salah satunya  adalah  infeksi  saluran  pencernaan seperti  diare  yang  disebabkan  oleh  bakteri Escherichia  coli .  Pengujian  ini  dilakukan dengan  perlakuan  yang  sama  seperti ekstrak daun Sangkareho yang
menggunakan antibiotik Cotrimoxazole dengan  konsentrasi  1%,  5%,  10%,  dan 15%.  Menurut  standar  CLSI  ( Clinical  and Laboratory Standart Institute ), zona diameter
antibiotik
Cotrimoxazole
(Trimethoprim-Sulfamethoxazole)  terhadap bakteri Escherichia coli adalah Resistant ≤10 mm, Intermediate 11-15 mm, dan
Susceptible ≥16 mm.
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian,
antibiotik Cotrimoxazole mampu menghambat
pertumbuhan bakteri Escherichia  coli pada  semua  konsentrasi. Rata-rata  diameter  zona  hambat  pada konsentrasi  1%  sebesar  7,7  mm,  pada konsentrasi  5%  sebesar  16,3  mm,  pada konsentrasi  10%  sebesar  18,4  mm,  dan pada  konsentrasi  15%  sebesar  20,6  mm. Tujuan  uji  pengamatan  terhadap  kontrol positif  ini  dilakukan  untuk  membuktikan bahwa  pada  media Mueller  Hinton  Agar (MHA)  yang  digunakan  pada  pengujian ekstrak  daun  Sangkareho  terdapat  adanya pertumbuhan bakteri Escherichia coli (Fitriani,  2011). Escherichia  coli merupakan bakteri  gram  negatif  yang  dapat  dihambat oleh Cotrimoxazole yang merupakan antibiotik dengan spektrum luas.
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian yaitu penanaman disk ekstrak daun Sangkareho  pada  media Mueller  Hinton Agar (MHA) yang berisikan bakteri Escherichia  coli tidak  mampu  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli baik dari  konsentrasi  1%,  5%,  10%,  maupun 15%.  Rata-rata  diameter  zona  hambat ekstrak  daun  Sangkareho  baik  pada konsentrasi 1%, 5%, 10%, dan 15% yaitu 0 mm,  yang  dibandingkandengantabel  Pan Chen  Wu  Tang  and  Zhao  (2009)  maka termasuk respon hambatannya yaitu rendah (0-3  mm).  Hasil  pengujian  daya  hambat ekstrak  daun  Sangkareho  menunjukkan
bahwa respon hambatannya rendah terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli .  Hal  ini  dapat  disebabkan  karena  pada konsentrasi  ini,  zat  aktif  yang  berperan sebagai  anti  bakteri  pada  ekstrak  tanaman uji  ini  jumlahnya  sedikit  sehingga  belum dapat  menghambat  aktivitas  pertumbuhan bakteri Escherichia coli (Sulastrianah, et al ., 2014).  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan oleh  beberapa  faktor  yaitu        bakteri Escherichia  coli tidak  sensitif  terhadap ekstrak daun Sangkareho atau kemungkinan  ekstrak  daun  Sangkarehod apatmenghambat  pertumbuhan  bakteri  lain, serta kurang tepatnya pemilihan konsentrasi yang  digunakan  dalam  pengujian  daya hambat  ekstrak  daun  Sangkareho terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian yang  telah  dilakukan,  dapat  disimpulkan sebagai berikut :
1.  Ekstrak  daun  Sangkareho  dengan konsentrasi  1%,  5%,  10%,  dan  15% tidak mampu menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli sehingga  hasil  yang  didapatya  itu negatif.
2.  Pada  konsentrasi  1%,  5%,  10%, maupun 15% ekstrak daun Sangkareho tidak  terdapat  zona  hambat  terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli .

## DAFTAR PUSTAKA
Clinical  Laboratory  Standart  Institute.  2013.
Performance Standart for
Antimicrobial  Susceptibility  Testing; Twentieth  Information  Supplement. USA..
Dalimartha,  S.  2000. Atlas  Tumbuhan Obat Indonesia  Jilid  I .  Jakarta  :  Trubus Agriwidya.
Djauhariyah,  E.,  dan  Hernani.  2004. Gulma Berkhasiat  Obat .  Jakarta  :  Seri Agrisehat.
Djojoningrrat. 2006. Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam : Dispepsia Fungsional . Jakarta  :  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC.
Hembing.  2003.  dalam Latar  Belakang . Bandung  :  Fakultas  Kedokteran Universitas Kristen Maranatha.
Kairupan,  Christy  Priskila;  Fatimawali;  A. Lolo, Widya. 2014. Uji Daya Hambat Ekstrak  Etanol  Daun  Kembang Sepatu  (Hibiscus  rosa-sinensis L ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia  coli .  Manado  :  Jurnal Ilmiah  Farmasi  Universitas  Sam Ratulangi.
Meira,  Raina.  2014. Latar  Belakang . Semarang  :  Universitas  Muhammadiyah Semarang.
Notoatmodjo,  S.  2007. Promosi  Kesehatan dan  Ilmu  Perilaku .  Jakarta  :  Rineka Cipta.
Pan  Chen  Wu  Tang  and  Zhao.  2009.
Klasifikasi Respon Hambatan Ekstrak Terhadap Pertumbuhan Bakteri dalam  Artikel  Penelitian Rezqi  Handayani.  2016. “Uji  Daya Hambat  Ekstrak  Metanol  dan  Fraksi Rimpang  Lengkuas  Merah  (Alipinia purpuruta  K  Schoum)  Terhadap Bakteri Escheria coli” .  Palangkaraya :  Jurnal  Surya  Medika  Volume  1 No.2. Saputra, Akhmad Khadafi. 2016. Uji Identifikasi Farmakognostik Tanaman  Sangkareho  (Callicarpa longifolia Lam. )  Asal  Kalimantan Tengah .  Palangkaraya  :  Karya  Tulis Ilmiah  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya.
Sarson,  Moh.  Rizki  S.;  Wuisan,  Jane; Awaloei,  Henoch.  2014. Uji  Daya Hambat  Ekstrak  Daun  Bawang Merah  (Allium  cepa  L.)  Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  Escherichia coli .  Manado  :  Bagian  Farmakologi Fakultas Kedokteran Sam Ratulangi.
Sinthamurniwati. 2006. Faktor-Faktor Risiko Kejadian  Diare  Akut  Pada  Balita . Semarang : Tesis UNDIP.
Thomas,  A.  N.  S.  1989. Tanaman  Obat Tradisional .  Yogyakarta  :  Kanisius.