N. S. Aminah, et al.

## SKOPOLETIN SUATU SENYAWA FENILPROPANOID DARI EKSTRAK ETIL
ASETAT UMBI UBI JALAR ( Ipomoea batatas L.)
Choirotul Isma, Nanik Siti Aminah* dan Alfinda Novi Kristanti 1
1 Prodi S-1 Kimia, Departemen Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga, Surabaya
*email: nanik-s-a@fst.unair.ac.id
Received 20 October 2018 Accepted 20 December 2018

## Abstrak
Telah  berhasil  diisolasi  senyawa  golongan  fenil  propanoid  dengan  nama  “ skopoletin” dari ekstrak etil asetat umbi Ubi Jalar ( Ipomoea batatas L. ). Ekstraksi senyawa fenolik dilakukan dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  metanol,  dilanjutkan  partisi  menggunakan  n- heksana  dan  etilasetat.  Pemurnian  dilakukan  dengan  kromatografi  kolom  gravitasi  dan ktomatografi  radial  menghasilkan  senyawa  golongan  fenil  propanoid.  Struktur skopoletin diidentifikasi berdasarkan data spektrum UV, 1D dan 2D NMR.
Kata kunci : fenil propanoid, skopoletin , dan Ipomoea batatas L.

## Abstract
Phenylpropanoid group compound has been isolated as “ scopoletin” from ethylacetate extract of tuber flesh Sweet potatoes ( Ipomoea batatas L. ). Extraction of phenolic compound was done by maceration method using methanol solvent, then partition with n-hexana and ethylacetate, respectively.  The  process  of  purification  using  various  chromatographic  techniques  yielded compound of phenylpropanoid group. Structure of scopoletin is identified based on UV, 1D, and 2D NMR spectra.
Keyword : phenyl propanoid, scopoletin, dan Ipomoea batatas L.

## Pendahuluan
Ubi  jalar  dengan  nama  latin Ipomoea batatas  L .  merupakan  tanaman  yang mengandung  senyawa  metabolit  sekunder dan memiliki banyak manfaat, salah satunya adalah  golongan  fenolik  ubi  jalar  adalah golongan senyawa fenolik. Senyawa fenolik yang  terdapat  pada  ubi  jalar  misalnya senyawa- senyawa golongan fenil propanoid,  flavonoid,  dan lignan. (Meira et al ,  2014).  ).  Senyawa  fenilpropanoid  yang sering  ditemukan  yaitu  turunan  asam sinamat  dan  kumarin.  Sedangkan  senyawa golongan  flavonoid  yang sering ditemukan
yaitu  golongan  antosianin,  jadi  masih  ada peluang  cukup  besar  untuk  diteliti  lebih lanjut.  Ubi  jalar  ( Ipomoea  batatas  L. ) mempunyai  enam  varietas  unggul  pada daerah  Malang,  Jawa  Timur  anata  lain,  ubi IR melati, ubi ungu, ubi Gunung Kawi, ubi Sari,  ubi  Mr.  Ong,  dan  ubi  Steven.  Pada penelitian  ini  menggunakan  ubi  jalar  IR karena  merupakan  varietas  yang  banyak terdapat  di  daerah  Malang  (Ariadi,  2006). Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi senyawa  fenolik  dari  umbi  ubi  jalar  putih ( Ipomoea  batatas  L. ).  Umbi  ubi  jalar merupakan bagian umbi yang sudah dikupas
N. S. Aminah, et al.
dan  diperkecil  hingga  membentuk  serbuk kasar.  Tahap  pertama  untuk  isolasi  dari senyawa  fenolik  pada  umbi  ubi  jalar ( Ipomoea  batatas  L. )  meliputi  ekstraksi dengan cara maserasi menggunakan metanol untuk mendapatkan ekstrak. Ekstrak metanol ubi jalar dipartisi dengan n- heksana dan etil asetat. Umbi ubi jalar yang terdapat pada fraksi  etil  asetat kemudian dipisahkan masing-masing           senyawa dengan menggunakan berbagai teknik kromatografi. Penentuan  struktur  senyawa  hasil  isolasi dilakukan dengan metode spektroskopi yang meliputi:  spektrofotometer  UV-Vis  dan NMR. Uji aktivitas antioksidan menggunakan  ekstrak  etil  asetat  umbi  ubi jalar  karena  jumlah  senyawa  yang  berhasil diisolasi sedikit.

## Metode Penelitian
Umum Kromatografi kolom gravitasi
menggunakan  Si-gel  G60,  kromatografi radial  menggunakan  Si-gel  60  PF 254 ,  dan analisis  KLT  menggunakan  plat  KLT Kieselgel 60 GF 254 0.25 mm. Spektrum UV ditetapkan  dengan  spektrometer  Shimadzu UV-1800, spektrum 1 H-NMR dan 13 C-NMR ditentukan  dengan  spektrometer  BRUKER yang beroperasi pada 600 MHz ( 1 H) dan 150 MHz  ( 13 C)  menggunakan  pelarut  DMSO. Penentuan  sifat  antioksidan  menggunakan uji DPPH dengan menghitung nilai IC 50 .

## Bahan Tanaman
Bahan  tumbuhan  yaitu  Bahan  tanaman yang  diteliti  adalah  ubi  jalar  ( Ipomoea batatas  L. )  merupakan  varietas  IR-Melati yang diperoleh dari Desa Pamotan, Kecamatan  Dampit,  Kabupaten  Malang, Jawa Timur.

## Ekstraksi dan isolasi.
Serbuk umbi ubi jalar (3,5 kg) diekstraksi dengan  metode  maserasi  menggunakan metanol sebanyak dua kali. Ekstrak metanol yang   diperoleh   dipekatkan   dengan    alat
penguap bertekanan rendah sehingga diperoleh  ekstrak  kental  metanol.  Ekstrak metanol  selanjutnya  dipartisi  dengan  n- heksan dan etil asetat. Ekstrak etil asetat (6,8 g)  dipisahkan  dengan  kromatografi  kolom gravitasi dengan campuran eluen n-heksana : etil asetat (10% sampai 100%) menghasilkan lima fraksi utama A,B, C, D, dan  E.  Pemisahan  fraksi  D  dengan kromatografi  radial  (eluen  campuran n - heksana:etil asetat = 8:2) menghasilkan lima subfraksi  D1,  D2,  D3,  D4,  dan  D5. . Pemurnian subfraksi D2 dengan kromatografi  radial  (eluen n -heksana  :  etil asetat  =  7:3)  diperoleh  senyawa  golongan fenilpropanoid  (3,3  mg)  yaitu skopoletin . Penentuan  struktur skopoletin dilakukan dengan  analisis  dpektrum  UV,  1D  dan  2D NMR.
Hasil dan Pembahasan Skopoletin
merupakan senyawa golongan  fenilpropanoid  yang  berbentuk padatan  kuning  pucat  memiliki  massa  3,3 mg. Analisis KLT menggunakan tiga sistem eluen dari senyawa 1 menggunakan eluen n- heksana:etil  asetat  (6:4),  aseton:etil  asetat (9:1), n-heksana:etil asetat (7:3) menunjukkan noda tunggal dengan Rf untuk masing-masing eluen yaitu; 0,43, 0,40,   dan 0.32.
Skopoletin, spektrum UV (MeOH)  maks nm (log ε ) : 388,50 (4,38) dan 229,00 (4,58). Data  spektrum 1 H  NMR  dan 13 C-NMR (Aseton) 600 MHz : H3 6,15; H4 7,82;   H5 7,16;  H8 6,77;  6-OMe 3,88;  C2 161,3; C3 113,2; C4 144,6; C5 110,0;     C6 146,0; C7
151,9; C8 103, 7; C8a 151,1; C8b 112,0;  6- OMe 56,7.
Analisis  Spektrofotometer  UV-Vis  dari senyawa skopoletin dilakukan  dengan melarutkan  0.1  mg  sampel  dalam  5  ml metanol.  Hasil  spektrum  UV  menunjukkan panjang gelombang maksimum (log ε) untuk senyawa skopoletin adalah  388,50  (4,38) nm  dan  229,0  (4,58)  nm  yang  karakteristik untuk   senyawa   kumarin   dan  turunannya
N. S. Aminah, et al.
(Scott,  A.  I.,  1964).  Pengukuran  dengan penambahan pereaksi geser NaOH dilakukan  untuk  mengetahui  adanya  gugus hidroksi yang terikat pada benzena (Harbone,  1984).  Nilai  panjang  gelombang (log  ε)  spektrum  UV  dengan  penambahan pereaksi  geser  NaOH  adalah  346,0 (3,95) nm dan 297,0 (3,64).
Spektrum 1 H-NMR  senyawa skopoletin dalam  Aseton  memperlihatkan  dua  sinyal doublet  (J=9,5)  δ H 6,15  ppm  dan  δ H 7,82 ppm  merupakan  proton  olefinik  dengan geometri cis . Dua sinyal singlet pada daerah aromatik  δ H 6,77  ppm  dan  δ H 7,16  ppm menunjukkan proton aromatik yang terletak pada posisi para . Sinyal singlet δ H 3,88 ppm muncul pada daerah hidroksi yang merupakan sinyal subtituen metoksi .
Analisis  spektrum 13 C-NMR  muncul sinyal  karbon  kuartener   pada   pergeseran kimia  (δ c 112,0;  146,0;  151,1;  151,9  dan 161,3  ppm),  Sinyal  karbon  metin  pada pergeseran  kimia  (δ c 103,7;  110,0;  113,2; dan 144,6 ppm), dan sinyal karbon metoksi pada  daerah  δ c 56,7  ppm.  Proton  aromatik dengan pergeseran (δ H 6,77 ppm, s) pada C8 berkorelasi  dengan  sinyal  karbon  kuartener (δ C 112,0;  151,1;  151,9;  dan  146,0 ppm). Berdasarkan 1 H dan 13 C NMR dari senyawa 1 diprediksi bahwa struktur kerangka dasar senyawa 1 adalah kumarin.
Analisis  HSQC  menunjukkan  lima kontur  yang  menggambarkan  hubungan antara proton dan karbon dalam satu ikatan. Sinyal  proton  yang  muncul  sebanyak  5 sinyal  sehingga  dalam  spektrum  HSQC muncul 5 titik korelasi dengan sinyal karbon dalam  satu  ikatan.  Spektrum  HSQC menunjukkan ikatan karbon (δ c 103,7 ppm) berikatan dengan proton (δ H 6,77 ppm,    s),
karbon  (δ c 110,0  ppm)  dengan  proton  (δ H 7,16 ppm, s), karbon (δ c 113,2 ppm) dengan proton (δ H 6,15 ppm; d; J=9,5), dan karbon (δ c 144,6  ppm)  dengan  proton  (δ H 7,82;  d; J=9,5 Hz).
Berdasarkan  spektrum  HMBC,  pada proton  (δ H 7,16  ppm,  s)  yang  berkorelasi terhadap  sinyal  karbon  dengan  pergeseran kimia  (δ C 144,6;  151,1;  151,9;  dan 146,0 ppm). Proton olefinik pada karbon nomer 3 mempunyai pergeseran kimia δ H 6,15  ppm. Proton  ini  berkolerasi  dengan  dengan  atom (δ C 110,0 ppm) dan karbon karbonil C2 (δ C 161,3  ppm).  Proton  doublet  δ H 7,82  ppm pada olefinik mengikat pada C4
menunjukkan kontur-kontur yang berkorelasi  dengan  atom  karbon  (δ C 161,3 ppm),  (δ C 110,0  ppm)  dan  (δ C 151,1  ppm). Berdasarkan  analisis  spektrum  COSY muncul korelasi antara sinyal proton olefinik dengan  pergeseran  (δ H 6,15  dan  7,82  ppm) yang  terikat  pada  karbon  C-3  dan  C-4. Korelasi untuk sinyal proton metoksi δ H 3,88 ppm  dengan  atom  karbon  oksiaril  pada pergeseran  δ C 146,0  ppm  menunjukkan bahwa  atom  karbon  tersebut  merupakan atom  karbon  C-6.  Spektrum  NOESY menunjukkan bahwa terdapat korelasi sinyal proton  antara  δ H 3,88  ppm  dengan  δ H 7,16 ppm; δ H 7,82 ppm dengan δ H 7,16 ppm; dan δ H 7,82 ppm dengan δ H 6,15 ppm.  Korelasi antara  δ H 3,88  ppm  dan  δ H 7,16  ppm menunjukkan  bahwa  atom  karbon  dengan pergeseran  δc  146,0  ppm  terletak  pada karbon  C-6.  Sehingga  atom  karbon  C7 memiliki  pergeseran  kimia  δc  151,9  ppm dan mengikat gugus hidroksi (Silverstein et al,  2005).  Korelasi  proton  dan  karbon berdasarkan spektrum HMBC terdapat pada gambar 1.
N. S. Aminah, et al.
HO 8 8a
1
O O H 7 2 6 6a O 5 8b 3
4 H H H H
Gambar 1. Korelasi proton dan karbon berdasarkan spektrum HMBC.
Tabel 1. Data spektrum 1D dan 2D NMR senyawa skopoletin C δC δH (mult, J) ppm HMBC 2 161,3 - - 3 113,2 6,15 (d, J=9,5 Hz) C-2, C-8b 4 144,6 7,82 (d, J=9,5 Hz) C-2, C-5, C-8a 5 110,0 7,16 (s) C-4, C-6, C-7, C-8a 6 146,0 - - 6a 56,7 3,88 (s) C-4 7 151,9 - - 8 103,7 6,77 (s) C-6, C-7, C-8a, C-8b 8a 151,1 - - 8b 112,0 - - Berdasarkan data HMBC, HSQC, COSY, dan NOESY tersebut maka struktur senyawa golongan  fenilpropanoid  yang  berhasil diisolasi adalah 7-hidroksi-6-metoksi-
kroman-2-on   yang  dikenal   dengan  nama
skopoletin (Forino  et  al,  2016).  Analisis data  NMR  untuk  senyawa skopoletin menunjukkan  gambar  struktur  senyawa skopoletin pada gambar 2.
H C H
N. S. Aminah, et al.
H 6,77 (s) 1 HO 8 (103,7) O O 7 (151,9) 8a (151,1) H 2 (161,3) 6 (146,0) 8b (112,0) 3 (113,2) H C 6a (56 O ,7) 5 (110,0) 4 (144,6) H 6,15 (d, J=9,5 Hz) H 3,88 (s) H 7,16 (s) H 7,82 (d, J=9,5 Hz)
Gambar 2 . Struktur senyawa skopoletin dengan pergeseran kimia proton dan karbon
( merah = δ C (ppm) dan biru = δ H (ppm)).
Berdasarkan  jurnal  Forino et  al ,  (2015) spektrum 1 H-NMR  dan 13 C-NMR  dari skopoletin hasil  isolasi  dengan  jurnal  ini nilai  pergeseran  kimianya  hampir  sama. Pada     jurnal     ini     juga     menunjukkan
skopoletin yang  diperoleh  mempunyai struktur  seperti  gambar  2.  Perbandingan pergeseran  kimia  sinyal  karbon  dan  proton dengan  jurnal  dari  senyawa skopoletin terdapat pada tabel 2.
Tabel 2. Pergeseran kimia skopoletin dibandingkan dengan data NMR dari jurnal Forino et al , (2015)
C δC senyawa 1 δH (mult, J) ppm senyawa 1 δC ppm (Forino et al , 2015) δH ppm (Forino et al , 2015) 2 161,3 - 164,2 - 3 113,2 6,15 (d, J=9,5 Hz) 112,8 6,18 4 144,6 7,82 (d, J=9,5 Hz) 146,3 7,84 5 110,0 7,16 (s) 110,2 7,10 6 146,0 - 147,2 - 6a 56,7 3,88 (s) 56,9 3,88 7 151,9 - 153,1 - 8 103,7 6,77 (s) 104,1 6,75 8a 151,1 - 151,6 - 8b 112,0 - 112,7 -
Jadi,  identifikasi  senyawa  1  dengan analisis UV, 1D, dan 2D NMR menunjukkan bahwa  senyawa  1  merupakan  senyawa turunan  kumarin  yaitu skopoletin (7- hidroksi-6-metoksi-kroman-2-on).

## Kesimpulan
Senyawa  golongan  fenilpropanoid  telah berhasil diisolasi dari ekstrak etil asetat umbi ubi  jalar  ( Ipomoea  batatas  L. )  dan diidentifikasi dengan spektrum UV, 1D dan 2D NMR sebagai skopoletin (7-hidroksi-6- metoksi-kroman-2-on).
N. S. Aminah, et al.

## Daftar Pustaka
Ariadi, Y., B., 2006, Perbandingan Berbagai Varietas  Ubi  Jalar  Ditinjau  Dari Pendapatan  Usahatani  dan  Pemasaran Di  Kabupaten  Malang  Comparison Among Various Sweet Potato Varieties Focused  From  Farm  Income  Dan Marketing At Malang Regency, Jurnal Pembangunan  Pedesaan , 6 (2), 1411-
9250
Forino,  M.,  Luciana,  T.,  Dell’Averssana,
C., Ciminielo,   2015,  O.,      NMR- Based  Identification  of  The  Phenolic
Profile of Fruits Of Lycium  Barbarum
(Goji Berries). Isolation  and  Structural Determination Of A  Novel  N-Feruloyl Tyramine Dimer As The Most Abundant  Antioxidant  Polyphenol  Of Goji Berries, Elsevier , 194, 1254-1259. Meira,  M.,  Da  Silva,  E.  P.,  David,  J.  M., David,  J.  P.,  2012,  Review  of  the genus  Ipomoea:      traditional      uses, chemistry  dan  biological  activities,
Revita Brasileira , 22 (3), 682-71
Scott,  A.  I.,  1964, Interpretation  of  The Ultraviolet Spectra of Natural Product ,
Pergamon Press Ltd : Oxford. Silverstein,  R.M.,  Webster,  F.X.,  Kiemle, D.J., 2005, Spectrometric
Identification  of  organic  Compound,
7 th Edittion, John Willey & Sons Ltd : United States.