BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 1, Nomor 2 (2019): 48-55 E-ISSN: 2714-8564
Pengaruh Interaksi BAPdan IAAterhadap Multiplikasi Tunas Talas Satoimo ( Colocasia esculenta (L.) Schott var . antiquorum) secara In Vitro

## Muhammad Ilham*, Sugiyono dan Lucky Prayoga
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Jalan dr. Suparno 63 Purwokerto 53122 *Email : ilhambawazier04@gmail.com
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 23/08/2019
Disetujui  : 16/10/2019
Abstract Satoimo ( Colocasia esculenta (L.) Schott var. antiquorum ) is a type of taro with small tuber size ( small  corm  taro )  and  called  Japanesse  taro  or  satoimo.  The  conventional  method  of  satoimo propagation  takes  relatively  long  time,  therefore  propagation  techniques  of  satoimo  shoot in vitro can be an alternative method to meet the increasing need of satoimo seed. The objectives of research were to study the interaction effect BAP and IAA on multiplication of satoimo shoot as well  as  to  determine  the  best  concentrations  of  BAP  and  IAA  for  satoimo  shoot multiplication.This research has been conducted experimentaly using a Completely Randomised Design (CRD) with a factorial treatment pattern. The first factor was BAP concentration (B) with 4 levels i.e B 1 : 5 µM, B 2 : 7.5 µM, B 3 : 10 µM and B 4 : 12.5 µM. The second factor was IAA concentrations (I) with 4 levels i.e I 1 : 1 µM, I 2 : 2 µM, I 3 : 3 µM and I 4 : 4 µM.The combination of these two factors resulted in 16 treatment combinations. Each combinations repeated 3 times, there  were  48  experimental  units.  The  variables  observed  were  taro  shoot  growth  with parameters  measured  included  the  number  of  shoot,  leaf  and  root  produced.  The  data  obtained were analyzed using Analysis of Variance (ANOVA) at a 95% level of confidence, followed by a Least Significant Difference (LSD) Test at 5% error rate.The research results showed that the interaction betweem BAP and IAA stimulated shoot and root formation during multiplication of satoimo shoot in in vitro culture. The addition of 5 µM BAP and 2 µM IAA resulted in the best multiplication rate of shoot satoimoin in vitro culture. Keywords: BAP, IAA, Talas Satoimo

## Abstrak
Talas  satoimo  ( Colocasia  esculenta (L.)  Schott  var. antiquorum )  adalah  jenis  talas  yang memiliki  ukuran  umbi  kecil  ( small  corm  taro )  dan  disebut  sebagai  talas  Jepang  atau  satoimo. Metode  perbanyakansatoimo  secara  konvensional  memerlukan  waktu  relatif  lama,  oleh karenanya teknik perbanyakan tunas satoimo secara in vitro menjadi alternatif untuk memenuhi kebutuhan  bibit  satoimo  yang  terus  meningkat.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan  untuk mempelajari  pengaruh  interaksi  antara  BAP  dan  IAA  pada  multiplikasi  tunas  satoimo  dan menentukan  konsentrasi  BAP  dan  IAA  paling  baik  untuk  multiplikasi  tunas  satoimo.Penelitian dilaksanakan  secara  eksperimental  dengan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  pola perlakuan faktorial. Faktor pertama adalah konsentrasi BAP (B) dengan 4 taraf yaitu B 1 : 5 µM, B 2 : 7,5 µM, B 3 : 10 µM dan B 4 : 12,5 µM. Faktor kedua adalah konsentrasi IAA (I) dengan 4 taraf  yaitu  I 1 :  1  µM,  I 2 :  2  µM,  I 3 :  3  µM  dan  I 4 :  4  µM.  Kombinasi  kedua  faktor  ini menghasilkan  16  perlakuan.  Setiap  kombinasi  perlakuan  diulang  sebanyak  3  kali,  sehingga terdapat    48  unit  percobaan.  Variabel  yang  diamati  adalah  pertumbuhan  tunas  talas,  dengan parameter  yang  diukur  meliputi  jumlah  tunas,  jumlah  daun,  dan  jumlah  akar.  Data  hasil penelitian  yang  diperoleh  dianalisis  dengan  Analisis  Ragam  dengan  tingkat  kepercayaan  95%, dilanjutkan  dengan  uji  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  pada  tingkat  kesalahan  5%.Hasil  penelitian menunjukkan bahwa interaksi antara BAP dan IAA memacu pembentukan tunas dan akar pada multiplikasi  tunas  satoimo  dalam  kultur in  vitro .  BAP  dengan  konsentrasi  5  µM  dan  IAA konsentrasi 2 µM merupakan konsentrasi terbaik untuk memacu multiplikasi talas satoimo dalam kultur in vitro . Kata kunci : BAP, IAA, Talas Satoimo

## PENDAHULUAN
Talas merupakan tanaman tropis dan sub-tropis dan termasuk kedalam  tumbuhan  monokotil  familia Araceae .  Talas  dibudidayakan  untuk  diambil  pada bagian  umbi  (batang  bawah  tanah). Dua  varietas talas  yang  umum  dibudidayakan  yaitu  C .  Esculenta (L.) Schott var. esculenta yang memiliki umbi pusat
silinder  besar  diklasifikasikan  sebagai  jenis  talas 'dasheen' .  Varietas  lainnya  adalah C.  esculenta (L.)
Schott  var . antiquorum yang  memiliki  umbi  pusat globular  kecil  dengan  beberapa  umbi  yang  relatif besar  yang  muncul  dari  umbi  utama,  varietas  ini disebut  sebagai  jenis  talas 'eddoe' (El-Sayed et  al .,
2016).
Talas  satoimo    adalah  jenis  talas  yang memiliki  ukuran  umbi  kecil    yang  disebut  sebagai talas Jepang atau satoimo. Keberadaan C. esculenta (L.)  Schott  var. antiquorum di  Indonesia  berawal dari bentuk kerjasama dengan Jepang. Orang Jepang menjadikan  talas  satoimo  sebagai  makanan  pokok (Immanuella et al ., 2017).Talas satoimo  merupakan tanaman  pangan  yang  diminati  masyarakat  secara internasional dan usaha bertani sepanjang tahun. Hal tersebut  membuka  peluang  ekspor  Indonesia  ke negara  tersebut  dan  telah  mendorong  pemerintah daerah di Indonesia antara lain Kepahiang, Cisarua, Bantaeng,  Malang  dan  Buleleng  untuk  melakukan budidaya  satoimo  sebagai  komoditas  ekspor (Marreta et al., 2016).
Budidaya  satoimo  secara  masal  di  Indonesia dihadapkan  pada  permasalahan  keterbatasan  lahan, faktor  iklim  dan  penyediaan  bibit  talas  satoimo. Metode penanaman talas secara tradisional memerlukan  waktu  relatif  lama,  sehingga  perlu menggunakan pendekatan bioteknologi yang menguntungkan  dan  mempersingkat  waktu.  Guna mengatasi kelangkaan bibit satoimo, dapat dilakukan  budidaya  bibit  satoimo  menggunakan teknik  kutur in  vitro .    Kultur in  vitro dapat diterapkan  untuk  propagasi  bibit  dalam  jumlah besar. Di samping itu, tunas apikal dan tunas aksilar yang  dihasilkan  dapat  meminimalisir  perubahan genetik talas (Immanuella et al., 2017). Kultur in  vitro banyak  dikembangkan  karena dapat menghasilkan  tanaman  dalam jumlah banyak, waktu yang singkat, bebas hama dan penyakit, tidak tergantung  musim  serta  kebutuhan  bibit  awal  yang lebih  sedikit.  Salah  satu  tahap  penting  dalam  kultur in  vitro adalah  multiplikasi  tunas,  yang  merupakan tahapan paling penting untuk menghasilkan tanaman dalam  jumlah  banyak  (Marreta et  al., 2016). Perbanyakan  talas  satoimo  dengan  teknik  kultur in vitro memerlukan zat pengatur tumbuh.
Zat pengatur tumbuh tumbuhan (ZPT) merupakan  senyawa  yang  sangat  penting  pada perbanyakan  tanaman.  Zat  pengatur  tumbuh  dari golongan auksin antara lain Indole-3-acetic acid (IAA), Napthaleneacetic acid (NAA), Indole-3- butyric  acid (IBA),  dan 2,4-dichloropenoxyacetic acid (2,4-D).    Zat  pengatur  tumbuhan  dari  golongan sitokinin  yang  sering  digunakan  antara  lain  kinetin dan BAP ( 6-Benzilaminopurine ). Auksin merupakan asam  organik  yang  memiliki  berat  molekul  yang rendah,  mengandung  cincin  aromatik  dan  gugus karboksil. Auksin endogen yang paling banyak yaitu IAA  yang  mampu  menunjukkan  perkembangan tumbuhan dan respon terhadap lingkungan (Sauer et al .,  2013). Indole-3-acetic  acid (IAA)  termasuk golongan  auksin  yang  berfungsi  untuk  memacu pertumbuhan  sel,  menginduksi  kalus,  mempercepat perkembangan  akar,  dan  memacu  diferensiasi jaringan vaskular (Widuri et al ., 2016).
BAP  ( 6-Benzilaminopurine )merupakan  jenis sitokinin  dari  senyawa  golongan  purin  substitusi.
BAP  mampu  menginduksi  tunas  pucuk  dan  tunas aksilardalam  kultur in  vitro. Pertumbuhan  yang dipacu  oleh  BAP  mencakup  pembelahan  dan pembesaran  sel  yang  lebih  cepat.  Aktivitas  BAP baik  untuk  inisiasi  akar  pada C.  Esculenta (Immanuella et  al .,  2017).  BAP  memiliki  struktur yang  mirip  dengan  kinetin  dan  juga  aktif  dalam pertumbuhan  dan  proliferasi  kalus  sehingga  BAP merupakan  sitokinin  yang  paling  aktif(Nursetiadi et al .,  2016).BAP  berfungsi  sebagai  perangsang pertumbuhan tunas, berpengaruh terhadap metabolisme  sel,  dan  berfungsi  sebagai  pendorong proses  fisiologis  yang  bergantung  pada  konsentrasi yang  digunakan  (Mashud,  2013).Talas  satoimo merupakan tanaman pangan yang diminati masyarakat  secara  internasional  dan  usaha  bertani sepanjang tahun.
Berdasarkan uraian diatas, masalah yang dikaji pada  penelitian  ini  adalah  bagaimana  pengaruh interaksi antara sitokinin dan auksin pada multiplikasi  tunas  talas  satoimodan  berapakah konsentrasi  IAA  dan  BAP  paling  baik  untuk multiplikasi  tunas  talas  satoimo.Penelitian  ini dilakukan dengan tujuan sebagai berikut :
1) Mempelajari  pengaruh  interaksi  antara  sitokinin dan auksin pada multiplikasi tunas talas satoimo.
2) Menentukan  konsentrasi  IAA  dan  BAP  paling baik untuk multiplikasi tunas talas satoimo.
Manfaat  yang  diharapkan  dari  penelitian  ini adalah  untuk  memberikan  informasi  ilmiah  tentang konsentrasi  IAA  dan  BAP  paling  baik  untuk memacu  perumbuhan  talas  satoimo  dan  dalam jangka  panjang  membantu  usaha  penyediaan  bibit talas satoimo.

## MATERI DAN METODE
Materi  penelitian  yang  digunakan  terdiri  dari bahan  dan  alat  penelitian.  Bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  tunas  talas  satoimo ( Colocasia esculenta (L.) Schott var. antiquorum) hasil kultur yang diperoleh dari SEAMEO  BIOTROP  Bogor,  alkohol  96%,  media dasar MS-1968, HCl 1 N, NaOH 1 N, gula, aquades, phytagel ,  BAP(6- benzylaminopurine )  dan  IAA ( Indole -3- aceticacid ).  Penelitian  dilaksanakan  pada Febuari  -  Mei  2019  di  Laboratorium  Fisiologi Tumbuhan  Fakultas  Biologi  Universitas  Jenderal Soedirman, Purwokerto, Jawa Tengah, Indonesia. Penelitian  dilaksanakan  secara  eksperimental.
Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  pola perlakuan  Faktorial.    Faktor  yang  dilakukan  adalah konsentrasi BAP dengan 4 taraf (5; 7,5 ; 10 dan 12,5 µM) dan konsentrasi IAA terdiri atas 4 taraf  ( 1, 2, 3  dan  4    µM  ).    Kombinasi  kedua  faktor  ini menghasilkan  16  perlakuan.  Masing  masing perlakuan  diulang  tiga  kali  sehingga  diperoleh  48 unit percobaan.
Variabel  yang  diamati  dalam  penelitian  ini adalah  pertumbuhan  tunas  talas,  dengan  parameter
2,4 2,64 1,44 1,64 1.86 1,47 2,34 2,42 1,65 2,39 1,52 2,20 2,04 2,32 2,26 2.08 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 B1I1 B1I2 B1I3 B1I4 B2I1 B2I2 B2I3 B2I4 B3I1 B3I2 B3I3 B3I4 B4I1 B4I2 B4I3 B4I4
yang  diukur  yaitu  jumlah  tunas,  jumlah  daun,  dan jumlah akar yang terbentuk.
Pengukuran  parameter  penelitian  dilakukan pada  akhir  penelitian  (8  minggu  setelah  tanam), meliputi:Jumlah  tunas,  akar,  dan  daun  dihitung  dan dicatat kemudian dilakukan analisis data. Data hasil penelitian  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan Analisis  Ragam  pada  tingkat  kepercayaan  95%, yang  dilanjutkan  uji  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT) dengan tingkat kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan, setelah  talas  satoimo  disub-kultur  selama  12  hari tanpa pemberian zat pengatur tumbuh dengan tujuan didapatkan  fase  pertumbuhan  yang  sama.  Hal  ini sesuai  dengan  pernyataan  Rodinah  &  Chatimatun (2018),  sub-kultur  bertujuan  memenuhi  kebutuhan unsur  hara  dalam  media  untuk  perkembangan eksplan  kearah  pembentukan  tunas,  sehingga  tunas akan terus bertambah. (Gambar 1.).
Gambar 1. Sub-Kultur 12 hari
Pertumbuhan  talas  satoimo  membutuhkan nutrisi  yang  sesuai  didalam  media.  Oleh  karena  itu membutuhkan  pemilihan  media  yang  tepat  dalam pertumbuhannya.  Media  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  media  dasar Murashige  and Skoog (1962)  atau  disingkat  dengan  media  MS. Media  MS  merupakan  yang  banyak  digunakan dalam  kultur  jaringan  dan  memberikan  respon positif  terhadap  eksplan.  Media  MS  memiliki beberapa kandungan seperti nitrat, kalium, amonium,  dan  garam  yang  tinggi  sehingga dibutuhkan oleh tanaman. Namun kandungan garam yang tinggi tidak selalu optimal untuk pertumbuhan eksplan  dan  planlet in  vitro (Setiawati et  al .,  2018). Eksplan yang disub-kultur pada media MS tanpa zat pengatur  tumbuh  mengalami  pertumbuhan  yang ditandai terbentuknya tunas dan akar.
Gambar 2. Histrogram Rataan hasil Interaksi BAP dan IAA terhadap Jumlah Tunas Talas Satoimo
Multiplikasi  tunas  merupakan  salah  satu  tahap penting  untuk  memproduksi  bibit  secara in  vitro . Tahap multiplikasi tunas terbagi menjadi dua tahap. Tahap pertama yaitu tunas induksi membentuk tunas baru  yang  di  induksi  pada  media  induksi  tunas. Tahap  kedua  yaitu  tunas  hasil  induksi  disub-kultur pada media elongasi untuk meningkatkan pertumbuhan  tinggi  tanaman    Menurut  Louw et  al.
(2018),  Pertumbuhan  tunas  yang  baik  akan merangsang  organ  vegetatif  seperti  daun  dan  akar. Jumlah  tunas  menjadi  faktor  terpenting  dalam metode in vitro , karena  semakin banyak tunas  yang terbentuk maka akan muncul tunas-tunas baru dalam jumlah yang banyak.
Data  rataan  jumlah  tunas  yang  diperoleh setelah  8  mst  (Gambar  2)  menunjukkan  bahwa
perlakuan  B 1 I 2 (BAP  5  µM  dan  IAA  2  µM) menghasilkan  rataan  jumlah  tunas  paling  tinggi yaitu  mencapai  2,64  tunas.  Hasil  anali sis  da ta jumlah  tunas  menunjukkan  bahwa  interaksi  antara BAP  dan  IAA  berpengaruhpada  jumlah  tunas  yang terbentuk
Kemunculan  tunas  dipengaruhi  oleh  zat pengatur tumbuh sitokinin dari golongan BAP yang ditambahkan pada media perlakuan dalam konsentrasi yang rendah akan memacu pertumbuhan tunas.  Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan jumlah  tunas  talas  satoimoperlakuan  B 1 I 2 (BAP  5 µM  dan  IAA  2  µM)  menghasilkan  jumlah  tunas yang  banyak  mencapai  2,64  tunas  (Gambar  3). Menurut  Laow et  al. (2018),  BAP  merupakan  zat pengatur  tumbuh  yang  banyak  digunakan  dalam memacu  pertumbuhan  tunas  dengan  aktivitas  yang kuat  sehingga  mendorong  terjadinya  pembelahan sel.  Kombinasi  antara  sitokinin  dan  auksin  dapat memacu  pembentukan  tunas  dan  morfogenesis. BAP  digunakan  karena  aktif  pada  konsentrasi  yang rendah,  bersifat  stabil,  mudah  diserap  dan  mudah dimetabolismekan (Sugiyono, 1993).
Gambar 3. Kemunculan tunas perlakuan B 1 I 2
Hasil  uji  lanjut  BNT  jumlah  tunas  akibat pengaruh  interaksi  BAP  dan  IAA  menunjukkan bahwa  perlakuan  B 1 I 2 (BAP  5  µM  dan  IAA  2  µM) juga  menghasilkan  nilai  rataan  jumlah  tunas tertinggi yaitu 2,64 tunas/eksplan dan berbeda nyata dengan  perlakuan  (B 3 I 1 ,  B 1 I 4 ,  B 3 I 3 ,  B 2 I 2 ,  dan  B 1 I 3 ) (Tabel  1).  Hasil  yang  didapat  menunjukkan  bahwa konsentrasi  BAP  (B 1 5  µM)  dan  IAA  (I 2 2  µM) mampu  memacu  pembentukan  tunas  dengan  baik. Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Pierik  (1987), bahwa  konsentrasi  sitokinin  yang  rendah  dapat menginisiasi  pertumbuhan  tunas  lateral  sedangkan konsentrasi  yang  tinggi  dapat  meningkatkan pertumbuhan  tunas  aksilar.  George  &  Sherrington (1984),  menambahkan  bahwa  sitokinin  eksogen yang diberikan tanaman akan memberikan pengaruh pada  kandungan  total  sitokinin  endogen.  BAP berfungsi  dalam  pembelahan  sel,  mendorong proliferasi  tunas,  diferensiasi  tunas  adventif  dari kalus  dan  organ  dan  mempercepat  sintesis  protein (Wattimena, 1998).
Tabel  1. Hasil  uji  BNT  interaksi  BAP  dan  IAA terhadap Jumlah Tunas
No Perlakuan Jumlah Tunas 1 B 1 I 2 2,637 a 2 B 2 I 4 2,417 ab 3 B 2 I 3 2,407 abc 4 B 1 I 1 2,400 abc 5 B 3 I 2 2,387 abcd 6 B 4 I 2 2,320 abcd 7 B 4 I 3 2,263 abcd 8 B 3 I 4 2,197 abcd 9 B 4 I 4 2,083 abcd 10 B 4 I 1 2,040 abcd 11 B 2 I 1 1,857 abcd 12 B 3 I 1 1,653 bcd 13 B 1 I 4 1,643 bcd 14 B 3 I 3 1,520 cd 15 B 2 I 2 1,470 d 16 B 1 I 3 1,437 d
Daun  merupakan  organ  tumbuhan  yang menjadi  tempat  dimana  zat  nutrisi  diproduksi  pada sebagian besar tumbuhan. Jumlah daun berhubungan dengan proses fotosintesis, metabolisme  tanaman  dan  penyerapan  hara,  karena daun  merupakan  organ  utama  berlangsungnya proses  fotosintesis  (Widiastoety,  2014).Berdasarkan data  rataan  jumlah  daun  yang  diperoleh  setelah  8 mst (Gambar 4) menunjukkan bahwa perlakuan B 1 I 2 (BAP  5  µM  dan  IAA  2  µM)  juga  menghasilkan rataan  jumlah  daun  paling  tinggi  yaitu  24,67  daun dan per-lakuan B 4 I 1 (BAP 12,5 µM dan IAA 1 µM) menghasilkan  rataan  jumlah  daun  paling  rendah yaitu  11,67  daun.  Menurut  Muliati et  al. (2017), BAP  pada  konsentrasi  rendah  akan  merangsang pembentukan  kalus  dan  tunas,  tunas  merangsang pertumbuhan daun sehingga jumlah daun bertambah.  Bogale  (2018),  menambahkan  bahwa penggunaan  BAP  dan  IAA  diatas  level  optimum akan  mengurangi  proses  proliferasi  tunas  sehingga proses pembentukan tunas dan daun terhambat.
Hasil  analisis  ragam  pengaruh  BAP  dan  IAA terhadap jumlah daun menunjukkan bahwa perlakuan  yang  dilakukan  tidak  berpengaruh  nyata terhadap  pembentukan  jumlah  daun.  Hal  tersebut terjadi  karena  sel  memiliki  kepekaan  yang  berbeda terhadap  perlakukan  yang  dilakukan.  Faktor  zat pengatur tumbuh  yang tidak  konstan dalam eksplan sehingga  menghasilkan  respon  yang  tidak  sesuai (Santoso  &  Nursandi,  2004).  Louw et  al. (2018), menambahkan  bahwa  konsentrasi  IAA  yang diberikan semakin tinggi akan menghambat pertumbuhan  daun.Berdasarkan  penelitian  yang dilakukan jumlah daun talas satoimo perlakuan B 1 I 2 (BAP  5  µM  dan  IAA  2  µM)  menghasilkan  jumlah daun terbanyak (Gambar 5).
8,33 10,67 14 10,67 9 10 10 9,67 12,33 7 11,33 9 12,33 12 9,33 5,67 0,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 12,00 14,00 16,00 B1I1 B1I2 B1I3 B1I4 B2I1 B2I2 B2I3 B2I4 B3I1 B3I2 B3I3 B3I4 B4I1 B4I2 B4I3 B4I4 16,67 24,67 13,33 13,67 14,67 12,67 17 16,33
13,33
18 12 15,33 11,67 19 17,33 17,67 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00

## B1I1 B1I2 B1I3 B1I4 B2I1 B2I2 B2I3 B2I4 B3I1 B3I2 B3I3 B3I4 B4I1 B4I2 B4I3 B4I4
Gambar 4. Histrogram Rataan Hasil Interaksi BAP dan IAA Terhadap Jumlah Daun Talas Satoimo.
Gambar 5. Kemunculan daun perlakuan B 1 I 2
Gambar 6. Histrogram Rataan Hasil Interaksi BAP dan IAA Terhadap Jumlah Akar Talas Satoimo.
Akar  merupakan  organ  yang  beperan  penting dan  harus  dimiliki  eksplan.  Akar  berfungsi  untuk menyerap  unsur  hara  dari  media  tanam  untuk perumbuhan  dan  perkembangan  eksplan.  Perakaran harus  memiliki  kualitas  yang  baik  untuk  proses aklimatisasi  berjalan  dengan  baik  (Louw et  al., 2018).  Berdasarkan  data  rataan  jumlah  akar  yang diperoleh  setelah  8  mst  (Gambar  6)  menunjukkan
bahwa  perlakuan  B 1 I 3 (BAP  5  µM  dan  IAA  3  µM) menghasilkan rataan jumlah akar paling tinggi yaitu 14  akar.  Hal  ini  diduga  bahwa  konsentrasi  auksin yang diberikan dalam konsentrasi yang rendah akan memacu  pembentukan  akar,  namun  konsentrasi auksin yang diberikan dalam konsentrasi yang tinggi akan  menghambat  terjadinya  pembentukan  akar. Hambatan tersebut diduga terkait dengan
meningkatnya  gas  etilen  apabila  auksin  eksogen ditambahkan,  karena  auksin  mampu  memacu sintesis etilen (Salisbury & Ross, 1995).
Hasil  analisis  ragamdata  pengaruh  pemberian BAP  dan  IAA  terhadap  jumlah  akar    menunjukkan bahwa perlakuan  yang dilakukan tidak berpengaruh nyata  terhadap  pembentukan  jumlah  akar.  Hal  ini sesuai dengan pernyataan Saifuddin (2016),
Konsentrasi  sitokinin  dan  auksin  yang  semakin tinggi  akan  mengakibatkan  pertumbuhan  eksplan yang  terhambat  dan menyebabkan  kematian eksplan.  Hasil  analisis  ragam  pengaruh  interaksi berpengaruh  nyata  terhadap  BAP  dan  IAA  yang menunjukan bahwa pemberian konsentrasi IAA dan BAP  yang  tinggi  akan  menghambat  pertumbuhan akar.  Hal  sesuai  dengan  penelitian  Louw et  al. (2018),  eksplan  sudah  memiliki  kandungan  auksin endogen  yang  cukup  untuk  pertumbuhan  akar, apabila  diberikan  auksin  eksogen  yang  tinggi  pula akan  menghambat  pertumbuhan  akar  maupun  akar menjadi  pendek.  Hal  ini  didukung  oleh  Marlin (2005),  eksplan  dapat  tumbuh  dan  berkembang menjadi tanaman baru tanpa pemberian zat pengatur tumbuh  seperti  auksin  dan  sitokinin  akan  tetap tumbuh  dan  mengalami  elongasi.  Penambahan auksin  dan  sitokinin  eksogen  yang  berlebih  akan menghambat pertumbuhan akar
Gambar7. Kemunculan akar perlakuan B 1 I 3
Hasil  uji  lanjut  interaksi  BAP  dan  IAA menunjukkan bahwa perlakuan B 1 I 3 (BAP 5 µM dan IAA  3  µM)  memiliki  nilai  rataan  jumlah  akar tertinggi  yaitu  14,00  akar  berbeda  nyata  dengan perlakuan  (B 2 I 4 B 4 I 3 , B 3 I 4, B 2 I 1 ,  B 2 I 1, B 3 I 2 dan  B 4 I 4 ) (Tabel  2).  Hasil  yang  didapat  menunjukkan  zat pengatur tumbuhan berupa auksin berpengaruh baik terhadap  eksplan.  Konsentrasi  BAP  5  µM  dan  IAA 3  µM  mampu  memacu  pertumbuhan  akar  dengan baik  (Gambar  7).  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan Fatima et  al. (2011),  kombinasi  antara  sitokinin yang  tinggi  dan  auksin  yang  rendah  secara  sinergis mempengaruhi  pembelahan  sel,  pembentukan  akar dan regenerasi tanaman in vitro . Widiastoety (2014), menambahkan  bahwa  pembentukan  akar  eksplan berhubungan  dengan  kadar  sitokinin  dan  auksin endogen  dalam  jaringan  tanaman  yang  selanjutnya diikuti oleh proses pemanjangan dan pembembelahan sel meristemjung akar.
Tabel 2. Hasil uji BNT interaksi BAP dan IAA terhadap Jumlah Akar
No Perlakuan Jumlah Akar 1 B1I3 14,0a 2 B3I1 12,3ab 3 B4I1 12,3ab 4 B4I2 12,0ab 5 B3I3 11,3ab 6 B1I2 10,7abc 7 B1I4 10,7abc 8 B2I2 10,0abc 9 B2I3 10,0abcd 10 B2I4 9,7bcd 11 B4I3 9,3bcd 12 B3I4 9,0bcd 13 B 2 I 1 9,0 bcd 14 B 1 I 1 8,3 bcd 15 B 3 I 2 7,0 cd 16 B 4 I 4 5,7 d
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  jumlah akar  talas  satoimo  perlakuan  B 1 I 3 (BAP  5  µM  dan IAA  3  µM)  menghasilkan  jumlah  akar  terbanyak (Gambar  7).Pembentukan  akar  yang  dipacu  oleh auksin dimulai dengan pembentukan lokus meristematis dari dediferensiasi sel dan multiplikasi sel  menjadi  sekumpulan  sel  membentuk  jaringan meristematis akar dan pemanjangan sel pada bagian pangkal  meristem akar sehingga akar  mulai  muncul (Schwart, et  al .,  2005).  Menurut  Hayati et  al. (2010),  pemanjangan  sel  yang  dipengaruhi  IAA akan  berdifusi  kedalam  sel  eksplan  melalui  luka pada  ujung-ujung  eksplan.  IAA  akan  mengaktivasi pompa  ion  H + memasuki  dinding  sel,  sehingga  pH dinding  sel  menjadi  lebih  rendah.  Pompa  ion  H + yang  aktif  memutuskan  ikatan  hidrogen  diantara mikrofibril  selulosa  dinding  sel  yang  menyebabkan dinding  sel  mengalami  peregangan  dan  sel  menjadi plastis,  sel  mudah  mengambil  air  melalui  osmosis dan sel akan bertambah panjang.
Berdasarkan  hasil  penelitian  setelah  8  mst eksplan  talas  satoimo  yang  ditanam  berkembang dengan  baik.Perkembangantanaman  dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti unsur hara makro mikro yang  terkandung  di  dalam  media,  zat  pengatur tumbuh  yang  seimbang.  Widiastoety  (2014), menambahkan bahwa intensitas cahaya yang rendah dapat  merangsang  zat  pengatur  tumbuh  endogen untuk  bekerja  lebih  aktif  untuk  melakukan  proses pertumbuhan dan perkembangan akar.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  maka  dapat disimpulkan  bahwa  Pemberian  BAP  dan  IAA terdapat  interaksi  dengan  terbentuknya  akar  dan tunas  pada  multiplikasi  tanaman  talas  secara  in vitro.  BAP  dengan  konsentrasi  5  µM  dan  2  µM IAA  merupakan  konsentrasi  terbaik  untuk  memacu multiplikasi tanaman talas satoimo  secara invitro .

## DAFTAR REFERENSI
Bogale,  A.,  2018.  Micro-propagation  of  Colocasia esculenta (cv. Bolosso I) from corm and sprout tip explants. Journal of Agricultural Biotechnology  and  Sustainable  Development, 10(7), pp. 147-156.
Dewi,  N.,  Purwoko,  B.  S.,  Purwito,  A.  &  Dewi  ,  I. S., 2012. Perbanyakan dan Konservasi In vitro Plasma Nutfah Talas (Colocasia esculenta (L.) Schoot).  Jurnal  AgroBiogen  ,  8(3),  pp.  105- 112.
El-Sayed,  S.  F.,  Gharib,  A.  A.,  El-Sawy,  A.  M.  & Darwish,O. S., 2016. Micropropagation protocol  of  Egyptian  native  cultivar  of  taro. International Journal of Advanced Research in Biological Sciences, 3(1), pp. 17-26.
Fatima, N., Ahmad, N.,& Anis, M., 2011. Enhanced in vitro Regeneration and Change in Photosynthetic  Pigments,  Biomass and  Proline content  in  Withania  somnifera  L.(Dunal) induced  by  Copper  and  Zinc  ions.  Plant Physiol. Biochem. 49, pp. 1465–1471.
George,  E.  F.  &  Sherrington,  P.  D.,  1984.  Plant Propagation  By  Tissue  Culture.  England  : Exgetics.
Hayati,  S.  K.,  Nurchayati,  Y.,  &  Setiari,  N.,  2010.
Induksi Kalus dari Hipokotil Alfalfa (Medicago  sativa  L.)  Secara  In  Vitro  dengan Penambahan Benzyl  Amino purine (BAP) dan A-Napthalene  Acetic  Acid  (NAA).  Bioma, 12(1), pp 6-12.
Immanuella,  E.  L.  &  Sofia,  D.  Y.,  2017.  Pengaruh Benzilaminopurin Dengan Penambahan KNO3 Pada  Multiplikasi  Tunas  (Colocasia  esculenta (L.) Schott var. antiquorum. Prosiding Seminar Nasional, pp. 237-244.
Louw,  A.  E.,  Kesaulya,  H.  &  Lawalata,  I.  J.,  2018. Perbanyakan  Mikro  Colocasia  esculenta  (L.) Schott  var.  antiquorum  melalui  penggunaan IAA. Jurnal Budidaya Pertanian, I(14), pp. 28- 34.
Marlin.,  2005.  Regenerasi  In  Vitro  Plantlet  Jahe Bebas  Penyakit  Layu  Bakteri  Pada  Beberapa Taraf Konsentrasi BAP dan NAA. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia, 7, pp. 9.
Marreta,  D.,  Handayani,  D.  P.,  Rosdayant,  H.  & Tanjung,  A  2016.  Multiplikasi  Tunas  Dan Induksi  Umbi  Mikro  Satoimo  (Colocasia esculenta (L.) Schott) Pada Beberapa Konsentrasi  Sukrosa  Dan  Benzilamonipurin. Bioteknologi dan Biosains Indonesia , 3(2), pp. 81-88.
Mashud, N., 2013. Efek Zat Pengatur Tumbuh BAP
Terhadap Pertumbuhan  Planlet  Kelapa  Genjah Kopyor  dari  Kecambah  yang  Dibelah.  B. Palma, 14(2), pp. 82-87.
Muliati.,  Nurhidayah,  T.,  &  Nurbaiti.,  2017. Pengaruh NAA, BAP dan Kombinasinya Pada Media  MS  Terhadap  Perekmbangan  Eksplan Sansevieria macrophylla Secara In Vitro, JOM FAPERTA, 4(1), pp. 1-13.
Nursetiadi,  E.,  E.  Y.  &  Putri,  R.  B.  A.,  2016. Pengaruh  macam  media  dan  konsentrasi  BAP terhadap multiplikasi tanaman manggis (Garcinia mangostana) secara in vitro. Bioteknologi, 13(2), pp. 63-72.
Pierik,  R.  L.  M.,  1987.  In  vitro  Culture  of  Higher Plants.  Dordrecht,  Netherlands  :  Martinus Nijhoff Pub.
Rodinah  &  Chaimatun,  N.,  2018.  Formulasi  Zat Pengatur  Tumbuh  Dengan  Interval  Waktu Subkultur  Terhadap  Inisiasi  Dan  Multiplikasi Pisang Talas (Musa paradisiaca var. sapientum L.) Secara in vitro.ZIRAA'AH, 43(2), pp. 141- 148.
Saifuddin,  F.,  2016.  Pengaruh  Indole  Acetic  Acid (IAA)  Terhadap  Hasil  Berat  Basah  Akhir Planlet  Kultur  Jaringan  Tanaman  Jernang (Daemonorops draco (Willd.) Blume). JESBIO, 5(1), pp. 14-17.
Salisbury,  F.  B  &  C.  W.  Ross.,  1995.  Fisiologi Tumbuhan. Jilid ke 3. Bandung : ITB.
Schwart,  O.  J.,  Sharma  ,  A.  R.  &  Beaty,  R.  M., 2005.  Propagation  from  non  meristematic tissue:  Organogenesis.  In:  Propagation  from non  meristematic  tissue:  Organogenesis.  New York: s.n., pp. 159-172.
Seameo,  2013.  Talas  Jepang  (Satoimo)  Tissue Culture-Service  Laboratory  Seameo  Biotrop  : Bogor.
Setiawati, T., Zahra, A., Budiono, R., & Nurzaman, M.,  2018.  Perbanyakan  In  Vitro  Tanaman Kentang  (Solanum  tuberosum  L.  cv.  Granola) Dengan  Penambahan  Meta-Topolin  Pada Media  Modifikasi  MS  (Murashige  &  Skoog). Jurnal Metamorfosa, 5(1), pp. 44-50.
Sugiyono, 1993. Pengaruh Hormon 2,4-D dan BAP terhadap Multiplikasi Kalus Purwaceng (Pimpinella  pruatjan  Molken)  pada  Kultur Aseptis. Skripsi. Tidak Dipubikasikan. Departemen  Pendidikan  Nasional  Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman.
Santoso,  U.  &  Nursansi,  F.,  2004.  Kultur  Jaringan
Tanaman. Malang: Universitas Muhammadiyah Malang.
Sauer, M., Robert, S. &  Vehn, J. K., 2013. Auxin : Simply  Complicated.  Journal  of  Experimental Botany, 64(9), pp. 2565-2577.
Widiastoety,  D.,  2014.  Pengaruh  Auksin  dan Sitokinin Terhadap Pertumbuhan Planlet
Anggrek  Mokara.  Jurnal  Hortikultura,  3(24), pp. 230-238.
Widuri, L.I., Dewanti, P., & Sugiharto, B., 2016. A Simple  Protocol  for  Somatic  Embryogenesis Induction  of  in  vitro  Sugarcane  (Saccharum officinarum L.) by 2,4-D and BAP. Biovalentia : Biological Research Journal, 2(1), pp. 1-9.
Wattimena,  G.  A.,  1998.  Zat  Pengatur  Tumbuh Tanaman. PAU Bioteknologi. Bogor : IPB.