Kajian Pengaruh Pelarut Terhadap Aktivitas Antioksidan Alga Coklat
Genus Sargassum dengan Metode Dpph
Ni Putu Yunika Candra Riskiana 1 , Rissa Laila Vifta 2
1,2 Program Studi Farmasi, Universitas Ngudi Waluyo, Ungaran
Email : rissalailavifta@unw.ac.id

## ABSTRAK
Alga  coklat  genus Sargassum mengandung  senyawa  fenolik,  klorofil  dan karotenoid  yang  berfungsi  sebagai  antioksidan  yang  paling  efektif.  Penarikan senyawa aktif dari bahan alam dipengaruhi oleh sifat kepolaran suatu pelarut. Pada penelitian ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh variasi pelarut terhadap aktivitas antioksidan  dan  senyawa  metabolit  sekunder  pada  genus  ( Sargassum) dengan metode DPPH. Penelitian ini dilakukan dengan metode review jurnal menggunakan data sekunder. Pelarut yang digunakan yaitu etanol dan metanol (polar), etil asetat (semi  polar)  dan  n-heksan  (non  polar).  Aktivitas  antioksidan  ( Sargassum )  pada pelarut etil asetat yaitu IC 50 = 68,89 mg/L, methanol = 69,27 mg/L, etanol = 239,51
mg/L dan n-heksan = 148,16 mg/L. Kandungan senyawa metabolit sekunder yang memiliki aktivitas antioksidan adalah senyawa fenolik sebesar 1.348,18 ± 2.57 mg GAE/g,  klorofil    sebesar  2,84 mg/g  dan  karotenoid  sebesar  2,69  µmol/g.  Variasi pelarut memberikan pengaruh terhadap aktivitas antioksidan.
Kata kunci
: Sargassum, Antioksidan, Pelarut, Fenolik

## ABSTRACT
Study  of  the  Effect  of  Solvents  on  Antioxidant  Activity  of  Brown  Algae  Genus Sargassum Using the DPPH Method
Brown algae of the genus Sargassum contain phenolic, chlorophyll and carotenoid compounds  that  function  as  the  most  effective  antioxidants.  The  withdrawal  of active  compounds  from  natural  ingredients  is  influenced  by  the  nature  of  the polarity of a solvent. This study aims to examine the effect of solvent variations on antioxidant activity and secondary metabolites in the genus sargassum using the DPPH method . : This research was conducted using a journal review method using secondary data The solvents used were ethanol and methanol (polar), ethyl acetate (semi  polar)  and  n-hexane  (non  polar).  Antioxidant  activity  Sargassum  in  ethyl acetate  solvent,  namely  IC50  =  68.89  mg/L,  methanol  =  69.27  mg/L,  ethanol  = 239.51 mg/L and n-hexane = 148 ,16 mg/L. The content of secondary metabolites that  have  antioxidant  activity  is  phenolic  compounds  of  1,348.18  mg  GAE/g, chlorophyll of 2.84 mg/g and carotenoids of 2.69 mol/g. The solvent variation has an influence on the antioxidant activity.
Keywords: Sargassum, Antioxidant, Solvent, Phenolics

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  merupakan suatu  senyawa  atau  molekul  yang mengandung satu atau lebih elektron yang  tidak  berpasangan.  Adanya elektron tidak berpasangan menyebabkan senyawa tersebut
sangat  reaktif  mencari  pasangan
dengan  menyerang  elektron  molekul yang  ada  disekitarnya,  sehingga radikal bebas dinetralisir oleh adanya antioksidan  (Fakriah et  al .,  2019).
Antioksidan  merupakan  senyawa pemberi elektron yang dapat menghambat  reaksi  oksidasi  dengan menghambat  radikal  bebas  dari molekul  yang  sangat  reaktif  (Nur et al. ,  2016).  Tubuh  manusia  tidak memiliki antioksidan cadangan untuk menangkal  radikal  bebas,  sehingga memerlukan sumber antioksidan tambahan dari luar.
Antioksidan  sintetik  yang sering  digunakan  adalah  BHA  (Butil Hidroksianisol)  dan  BHT  (Butil
Hidroksitoluena), akan tetapi senyawa  tersebut  dicurigai  dapat menyebabkan  kerusakan  hati  dan karsinogenik pada hewan uji
(Rachmawati  et  al.,  2014).  Hal tersebut  mendasari  antioksidan  dari bahan alam lebih diminati dan mulai dikembangkan.  Sumber  antioksidan alami  memiliki  peranan  penting dalam melawan stress oksidatif yang berkaitan  dengan  degenerative  di antaranya kanker, penyakit kardiovaskuler,  diabetes,  penyakit Alzheimer dan proses penuaan (Mudgal et al. 2010). Beberapa bahan alam  yang  sudah  dimanfaatkan sebagai  antioksidan  antara  lain  biji kesumba  keling  (Souhoka et  al ., 2019), daun matoa (Citra et al., 2015), daun  nipah  (Gazali et  al .,  2019), lemon (Verdiana et al ., 2018), bunga lotus  (Romadanu et  al .,  2014),
parijoto (Vifta & Dian, 2018). Salah satu tumbuhan laut yang melimpah keberadaannya di Indonesia  adalah  alga.  Kelimpahan alga sebanyak 555  jenis  alga dikelompokkan  menjadi  tiga  jenis yaitu rumput laut merah
(Rhodophyta), rumput  laut  hijau
(Chlorophyta) dan rumput laut coklat
(Sargassum) (Maharani et al., 2017). Di perairan Indonesia terdapat sekitar 28  spesies  alga  coklat  yang  berasal dari  enam  genus  yakni Dyctyota,
Sargassum,  Padina,  Hormophysa, Turbinaria, dan Hydroclarthus
(Pakidi et  al. ,  2017) .  Sargassum polycystum merupakan salah satu alga coklat yang termasuk kedalam genus Sargassum dan termasuk dalam kelas
Phaeophyceae .  Produksi  alga  di Indonesia meningkat cukup signifikan dengan peningkatan mencapai  76,4%  dari  5,2  juta  ton basah  rumput  laut  pada  tahun  2011 dan  menjadi  9,2  juta  ton  pada  tahun 2013 (KKP, 2014).
Alga  coklat  genus sargassum memiliki  kandungan  karbohidrat, protein, abu, air, vitamin dan mineral dalam  bentuk  makro  dan  mikro elemen  kalium  (K),  natrium  (Na), magnesium (Mg), fosfat (P), iodin (I) dan  besi  (Fe)  (Gazali  et al .,  2018). Alga  coklat  genus  s argassum kaya senyawa  metabolit  sekunder  seperti fenolik,  flavonoid,  tannin,  sterol, terpenoid,  saponin,  dan  alkaloid (Gazali et  al. ,  2018).  Senyawa  fenol dan  flavonoid  memiliki  kontribusi linier  terhadap  aktivitas  antioksidan, sehingga  semakin  tinggi  kadarnya maka semakin baik/tinggi antioksidannya (Zuraida et al ., 2017). Senyawa  fenolik  merupakan  salah satu  antioksidan  yang  paling  efektif dalam  alga  coklat.  Kandungan  lain yang terdapat pada alga coklat genus s argassum adalah senyawa golongan terpenoid yaitu karotenoid dan fukosantin (Sedjati et al ., 2018).
Penarikan  senyawa  aktif  dari bahan  alam  dipengaruhi  beberapa faktor  seperti  metode  ekstrasi  dan pemilihan  pelarut  (Hasnaeni et  al., 2019).  Metode  ekstraksi  cara  dingin seperti  maserasi  dan  perkolasi  lebih banyak dipilih pada ekstraksi
senyawa termolabil (Mukhtarini, 2011).  Jenis  dan  jumlah  pelarut pengekstraksi  juga  mempengaruhi jumlah senyawa aktif yang terkandung  dalam  ekstrak,  dimana senyawa  yang  bersifat  polar  akan larut dalam pelarut polar dan senyawa yang  bersifat  non  polar  akan  larut dalam  pelarut  non  polar ( Arifianti et al. ,  2014).  Bahan  aktif  akan  terlarut oleh  zat  pelarut  yang  sesuai  sifat kepolarannya. Senyawa fenolik yaitu fukosantin  adalah  senyawa  yang bersifat polar (Lestari & Mahmudati, 2019),  sehingga  diperlukan  pelarut yang  bersifat  polar.  Pelarut  yang bersifat  polar  diantaranya  adalah etanol,  methanol,  aseton  dan  air. Pelarut  yang  bersifat  semi  polar diantaranya  etil  asetat  dan  pelarut yang bersifat non polar diantaranya n- heksan (Zuraida et al., 2017). Penentuan aktivitas antioksidan secara in-vitro di antaranya  metode  DPPH,  aktivitas peredaman radikal superoksida, aktivitas penghambat radikal hidroksil, metode kekuatan pereduksi,  metode  ABTS,  kapasitas serapan  radikal  oksigen,  metode FRAP,  lipid  peroksidasi  mikrosomal atau  uji  asam  tobarbiturat  (Febriani, 2012). Salah satu metode uji aktivitas antioksidan  yang  sering  digunakan adalah metode DPPH. Metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) dipilih karena sederhana, mudah, cepat, dan peka serta hanya memerlukan sedikit sampel.  Senyawa  antioksidan  akan bereaksi dengan radikal DPPH melalui  mekanisme  donasi  atom hidrogen dan menyebabkan terjadinya  peluruhan  warna  DPPH dari ungu ke kuning (Setiawan et al. , 2018).
Berdasarkan  latar  belakang
diatas, maka peneliti akan melakukan penelitian  dengan  pendekatan  studi
literatur  menggunakan  5  jurnal  yang terdiri  dari  4  Jurnal  Nasional  yang telah terakreditasi di Indonesia, serta 1  Jurnal  Internasional  untuk  dapat mengkaji  pengaruh  variasi  pelarut terhadap  aktivitas  antioksidan  dan senyawa  metabolit  sekunder  yang berperan sebagai aktivitas
antioksidan  pada  alga  coklat  genus sargassum dengan  metode  DPPH (1,1-diphenyl-2 pikrilhidrazil).

## METODE
Metode  penelitian  dilakukan dengan  metode study  literature yang mengkaji  artikel  baik  dari  jurnal Nasional Internasional. Adapun langkah  penelitian  dilakukan  dengan menentukan  dan  mempelajari  topik penelitian  yang  akan  dirangkum, mencari  sekaligus  mengumpulkan sejumlah  penelitian  dengan  topik yang  telah  ditentukan,  melakukan perbandingan dengan artikel sebelumnya tanpa melakukan analisis statistik,  serta  menarik  kesimpulan dan menginterpretasikan hasil. Penelitian disusun
menggunakan lima jurnal acuan yang digunakan sebagai dasar penyusunan hasil  serta  pembahasan  yang  akan  di analisa.  Artikel  yang  digunakan terdiri dari empat artikel yang berasal dari  jurnal  Nasional  terindeks  Sinta dan  satu  artikel  yang  berasal  dari Jurnal Internasional bereputasi. Artikel  yang  digunakan  merupakan artikel  dengan  topik  yang  sejenis yakni mengenai “Aktifitas Antioksidan pada Alga Coklat Genus
Sargassum”.  Selain  itu,  artikel  yang digunakan merupakan hasil penelitian yang dipublikasi pada rentang waktu tahun 2016-2019 (10 tahun terakhir).

## HASIL
Senyawa Metabolit Sekunder Alga
Coklat  ( Sargassum sp)  secara kualitatif Metode ekstraksi yang digunakan untuk mendapatkan senyawa  metabolit  sekunder  adalah metode  maserasi.  Seluruh  artikel yang dianalisis menggunakan metode maserasi.  Maserasi  adalah  proses ekstraksi  simplisia  menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengadukan  pada  suhu  ruangan. Prosedurnya dilakukan dengan merendam  simplisia  dalam  pelarut yang  sesuai  dalam  wadah  tertutup. Pengadukan dilakukan dapat meningkatkan  kecepatan  ekstraksi (Mukhtarini,  2011).  Kelebihan  dari metode  maserasi  adalah  sederhana, relatif  murah,  tidak  memerlukan peralatan  yang  rumit,  terjadinya kontak  antara  sampel  dan  pelarut yang cukup lama dan dapat
menghindari  kerusakan  komponen senyawa  yang  tidak  tahan  panas. Kelemahan metode ini adalah
membutuhkan  waktu  yang  cukup lama  dan  menggunakan  jumlah pelarut  yang  banyak  (Susanty  dan Bachmid, 2016).
Penelitian ini bertujuan untuk dapat  mengkaji  pengaruh  pelarut terhadap  aktivitas  antioksidan  serta mengetahui senyawa metabolit berperan  pada  aktivitas  antioksidan alga coklat genus sargassum. Penarikan  senyawa  aktif  dan  pelarut yang digunakan dapat memperngaruhi kandungan metabolit sekunder yang terkandung dalam alga coklat.  Adapun  pengujian  senyawa metabolit  sekunder  dalam  kajian penelitian ini dilakukan secara kualitatif  maupun  kuantitatif.  Hasil analisis  metabolit  sekunder  secara kualitatif disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Senyawa Metabolit Sekunder Kualitatif Spesies Alga Coklat Genus Sargassum Metabolit sekunder Etanol /Metanol Etil Asetat N-Heksan Hasil uji positif Sargassum Sp. Alkaloid (Mayer) + - + Sedimentasi putih Flavonoid - - - - Fenol - + - Hijau Saponin - - - - Tanin - - - - Steroid - - - - Terpenoid + + + Merah S.polycystum Alkaloid - - - - Flavonoid - - - - Fenol + ++ - Hijau pekat Saponin - - - - Terpenoid + + + Merah Steroid +++ +++ +++ Hijau Kebiruan Keterangan : +++ : kandungan senyawa lebih banyak (warna sangat pekat) ++ : mengandung senyawa (warna cukup pekat) + : mengandung senyawa (sedikit berwarna) - : tidak mengandung senyawa
Senyawa Metabolit Sekunder Alga Coklat  ( Sargassum sp)  secara kuantitatif Pengujian  senyawa  metabolit sekunder  pada  alga  coklat  juga dilakukan  secara  kuantitatif  untuk mengetahui kadar senyawa metabolit
yang terkandung di dalamnya. Senyawa  metabolit  yang  dianalisis antara  lain  karotenoid,  klorofil,  dan fenoli.  Senyawa-senyawa  tersebut
dimungkinkan  berpotensi  sebagai antioksidan pada alga coklat. Adapun hasil analisis kuantitatifnya disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2 Senyawa Metabolit Sekunder Kuantitatif Judul Sampel Pelarut Parameter Hasil Artikel 1 Sargassum Sp. Metanol Karotenoid Fenolik Klorofil 2,63 µmol/g 57,97 mgGAE/g 2,84 mg/g Artikel 2 Sargassum Sp. Fraksi Etil Asetat Fenolik 64,42 mgGAE/g Artikel 3 Sargassum Sp. Etanol Etil Asetat N-Heksan Fenolik 563,22 ± 15,54 mgGAE/g 1.348,18 ±2,57 mgGAE/g 39,610 ± 28,28 mgGAE/g Aktivitas  Antioksidan  Alga  coklat ( Sargassum sp) Aktivitas  antioksidan  pada jurnal  yang  dianalisis  dilakukan dengan metode DPPH. Prinsip pengujian  metode  DPPH  adalah senyawa antioksidan akan mendonorkan atom hidrogennya pada radikal DPPH, sehingga menyebabkan DPPH menjadi bentuk tereduksi  yang  bersifat  nonradikal menyebabkan  terjadinya  peluruhan warna  DPPH  dari  ungu  ke  kuning yang diukur pada panjang gelombang 517  nm  (Wulansari,  2018).  Radikal DPPH  yang  memiliki  elektron  tidak berpasangan memiliki warna komplementer  dan  menghasilkan absorbansi  maksimum  pada  panjang gelombang 515-520 nm. Hasil pengukuran  yang  memberikan  peak maksimum itulah panjang gelombangnya  yaitu  sekitar  panjang gelombang  yang  disebutkan  diatas. Panjang  gelombang  yang  digunakan pada penelitian kelima artikel adalah 517  nm  dan  515  nm.  Radikal  DPPH adalah  suatu  senyawa  organic  yang mengandung  nitrogen  yang  tidak stabil  dengan  absorbansi  kuat  dan panjang pada gelombang 517 nm dan berwarna gelap (Fensia, 2016).
Pengurangan intensitas warna yang  terjadi  berhubungan  dengan jumlah elektron DPPH yang menangkap atom hidrogen. Pengurangan intensitas warna mengindikasikan peningkatan kemampuan antioksidan untuk
menangkap  radikal  bebas.  Radikal DPPH adalah suatu senyawa organik yang  mengandung  nitrogen  tidak stabil  dan  berwarna  ungu  gelap. Setelah  bereaksi  dengan  senyawa antiradikal maka DPPH tersebut akan tereduksi dan warnanya akan berubah menjadi  kuning.  Perubahan  warna tersebut disebabkan karena berkurangnya ikatan rangkap terkonjugasi  pada  DPPH  karena adanya  penangkapan  satu  elektron oleh zat antiradikal yang menyebabkan tidak adanya kesempatan  elektron  tersebut  untuk beresonansi  dimana  perubahan  ini dapat  diukur  dan  dicatat  dengan spektrofotometer spektrofotometer (Asih et al., 2012). Kelebihan dari metode DPPH adalah lebih mudah diterapkan karena senyawa  radikal  yang  digunakan bersifat  lebih  stabil  dibandingkan dengan  metode  lainnya.  Sedangkan kelemahan  dari  metode  ini  adalah radikal DPPH hanya dapat dilarutkan
dalam  media  organik,  tidak  pada media  yang  bersifat  air  sehingga membatasi kemampuan dalam penentuan peran antioksidan hidrofilik.  Parameter  DPPH  yang digunakan adalah nilai IC 50 didefinisikan sebagai nilai konsentrasi inhibisi larutan uji
terhadap kemampuan meredam aktivitas radikal bebas sebanyak 50%, semakin  kecil  nilai IC 50 maka semakin besar aktivitas antioksidannya  (Tristantini et  al ., 2016). Hasil analisis antioksidan alga coklat ( Sargassum sp) disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3 Aktivitas Antioksidan Alga Coklat (Genus Sargassum)
Judul Sampel Pelarut IC 50 (ppm) Artikel 1 Sargassum Sp. Metanol 96% 69,27 Artikel 2 Sargassum Sp. Metanol, Fraksinasi Etil Asetat 1.289 Artikel 3 Sargassum Sp. Ethanol Etil asetat N-Heksan 239,51 ± 10,60 68,89 ± 5,36 148,16 ± 2,5 Artikel 4 S. latifolium Metanol 66,3363 ± 0,031373 Artikel 5 S. polycystum Metanol Etil asetat N-Heksan 491,02 411,80 502,70

## PEMBAHASAN
Senyawa Metabolit Sekunder Alga Coklat  ( Sargassum sp)  secara kualitatif Proses ekstraksi yang dilakukan pada artikel kedua dilanjutkan dengan tahapan fraksinasi dengan  tujuan  untuk  memisahkan senyawa berdasarkan tingkat kepolaran  yang  berbeda  dalam  dua pelarut yang memiliki tingkat kepolaran  yang  berbeda.  Fraksinasi merupakan tahapan kedua dari proses pemisahan senyawa. Fraksinasi adalah teknik pemisahan dan pengelompokan  kandungan  kimia ekstrak  berdasarkan  kepolaran.  Pada proses  fraksinasi  digunakan  dua pelarut  yang  tidak  tercampur  dan memiliki  tingkat  kepolaran  yang berbeda.  Senyawa-senyawa yang
terdapat  dalam  ekstrak  akan  terpisah menurut kepolarannya (Pratiwi et. al. , 2016). Berdasarkan  penelitian  yang
telah dilakukan terhadap ekstrak alga coklat genus sargassum dapat diketahui  bahwa  genus  alga  coklat
mengandung senyawa metabolit sekunder diantaranya alkaloid, flavonoid, fenol, saponin, steroid dan triterpenoid.  Aktivitas  antioksidan ekstrak berhubungan dengan kandungan  metaboli  sekunder  yang terkandung di dalamnya. Berdasarkan hasil uji fitokimia pada Tabel 1 diatas menunjukkan bahwa spesies Sargassum  Sp. ekstrak  etanol  dan  n- heksan  menunjukkan  hasil  positif terhadap  senyawa  alkaloid  pada pereaksi mayer yang ditandai dengan adanya  sedimentasi  berwarna  putih, namun  pada  ekstrak  etil  asetat menunjukkan  hasil  negatif.  Pada pelarut etil asetat positif mengandung senyawa  fenol  sedangkan  pelarut etanol  dan  n-heksan  menunjukkan negatif fenol.
Spesies S.  polycystum positif mengandung  flavonoid  pada  pelarut methanol  dan  n-heksan  ditunjukkan dengan  warna  yang  sedikit  kuning. Pada  spesies  ini  positif  mengandung fenol  hanya  pada  pelarut  etil  asetat yang  ditunjukkan  dengan  warna hijau.  Pada  pelarut  methanol  positif
senyawa  saponin  yang  ditunjukkan dengan terbentuknya busa yang tidak hilang.  Pada  pelarut  methanol,  etil asetat  dan  n-heksan  positif  senyawa terpenoid yang sangat kuat ditunjukkan  dengan  terbentukknya warna merah yang pekat. Pada pelarut methanol postif mengandung senyawa  steroid  yang  cukup  kuat, sedangkan pelarut etil asetat menunjukkan  senyawa  steroid  yang sangat kuat dan pada pelarut n-heksan steroid  yang  terkandung  cukup  kuat ditandai dengan terbentukknya warna hijau kebiruan.
Pada  spesies S.  polycystum positif  mengandung  senyawa  fenol pada pelarut methanol yang ditemukan  sedikit  sedangkan  pada pelarut etil asetat ditemukan senyawa fenol ang cukup kuat. Pada spesies ini positif  mengandung  sedikit  senyawa terpenoid pada pelarut methanol, etil asetat  dan  n-heksan  diunjukkan dengan warna merah yang terbentuk. Pada pelarut methanol, etil asetat dan n-heksan positif mengandung senyawa  steroid  yang  sangat  kuat diunjukkan  dengan  warna  hijau kebiruan. Alkaloid berkhasiat sebagai anti  diare,  antidiabetes,  anti  mikroba dan  anti  malaria.  Alkaloid  adalah senyawa metabolit sekunder terbanyak yang memiliki atom nitrogen  yang  ditemukan  dalam jaringan tumbuhan. Alkaloid umumnya  ditemukan  dalam  kadar yang kecil dan harus dipisahkan dari campuran senyawa lainnya (Ningrum et  al .,,  2016).Senyawa  flavonoid memiliki  kontribusi  linier  terhadap aktivitas antioksidan, sehingga
semakin tinggi kadarnya maka semakin  baik/tinggi  antioksidannya (Zuraida et  al .,  2017).  Hasil  yang positif  terhadap  senyawa  saponin ditunjukkan  dengan  timbulnya  busa
yang  tidak  hilang  selama  10  menit (Sami et al., 2019).
Pelarut  yang  positif  senyawa fenol  ditandai  dengan  larutan  uji membentuk warna hijau tua. Senyawa fenol memiliki aktivitas penghambatan oksidasi LDL, Angiotensin Coverting Enzym (ACE), α-amilase, α- glukosidase, antioksidan  (Nagappan et  al., 2017) dan  berpotensi  memberikan  efek terapeutik serta perlindungan terhadap beberapa penyakit degenerative terutama kanker (Padua et  al., 2015).  Etil  asetat  merupakan pelarut  semi  polar  yang  dapat melarutkan komponen senyawa antioksidan  yang  bersifat  polar maupun non-polar sehingga menghasilkan beragam senyawa antioksidan  yang  memiliki  aktivitas sangat  kuat  walaupun  rendemennya rendah  di  bandingkan  pelarut  polar (Tensiska et  al, 2006).  Seluruh ekstrak  dengan  variasi  pelarut  yang berbeda  yaitu  etanol/methanol,  etil asetat  dan  n-heksan  mengandung senyawa  steroid  ditunjukkan  dengan warna  hijau  kebiruan  yang  sangat pekat.

## Senyawa Metabolit Sekunder Alga
Coklat  ( Sargassum sp)  secara kuantitatif
Berdasarkan  pada Tabel  2 diatas,  hasil  pengujian  pigmen  pada ekstrak metanol alga coklat mengandung  pigemen  klorofil  2,84 mg/g  dan  karotenoid  sebesar  2,63 µmol/g.  Kandungan  pigmen  pada ekstrak  methanol  alga  coklat  yang diduga  sebagai  sumber  antioksidan adalah  klorofil  dan  karotenoid. Karotenoid  dan  klorofil  termasuk golongan senyawa antioksidan potensial. Penghilangan klorofil sebelum pengambilan ekstrak methanol  maupun  etanol  ternyata
menurunkan total fenolik dan kemampuan antioksidannya. Senyawa  karotenoid  diduga  mampu meredam  oksigen  singlet  melalui ikatan  konjugasi  C=C  pada  rantai karbon  kerangka  dasar  polyene.
Pigmen  karotenoid  dapat  beraksi dengan  radikal  peroksil  sehingga membentuk radikal karotenoid peroksil selanjutnya menjadi karotenoid  peroksida  yang  bersifat kurang  radikal  dan  mudah  terurai sehingga  tidak  berbahaya  bagi  sel hidup. Berdasarkan penelitian Sedjati
et  al. (2018)  menyatakan  bahwa karotenoid dominan pada alga coklat adalah Fukosantin. Tingginya kandungan  fukosantin  dalam  ekstrak alga  coklat  dapat  mempengaruhi aktivitas antioksidan yang tinggi.
Kadar  total  fenolik  ekstrak methanol  alga  coklat  hasil  penelitian adalah 57,97 mgGAE/g, pada pelarut methanol dengan fraksinasi etil asetat adalah 64,42 mgGAE/g, pada pelarut etanol  adalah  563,22  ±  15,54 mgGAE/g,  pada  pelarut  etil  asetat adalah 1.348,18 ± 2,57 mgGAE/g dan pada  pelarut  n-heksan  adalah  39,610 ± 28,28 mgGAE/g.  Pengukuran total fenol  seluruh  ekstrak  menggunakan asam  galat.  Asam  galat  dijadikan sebagai  pembanding  dalam  uji  total fenol karena pada umumnya tumbuhan  mengandung  asam  galat.
Nilai aktivitas antioksidan yang tinggi pada  ekstrak  etil  asetat  berkorelasi positif terhadap kandungan total fenol (Salma et al ., 2019).
Ekstrak  etil  asetat  dapat
menghasilkan kandungan fenolat
paling  tinggi  yaitu  1.348,18  ±  2,57 mgGAE/g  dimana  etil  asetat  lebih efektif  melarutkan  senyawa  fenolat dari  pada  pelarut  lainnya.  Senyawa fenol  sebagai  metabolit  sekunder dalam  tanaman  yang  berpotensi sebagai antioksidan karena
keberadaan  gugus  hidroksil  dalam senyawa fenol. Gugus hidrosil berfungsi  sebagai  penyumbang  atom hidrogen  ketika  bereaksi  dengan senyawa  radikal  melalui  mekanisme transfer  elektron  sehingga  proses oksidasi  dihambat  (Gazali et  al ., 2018).  Senyawa  fenolik  merupakan salah  satu  jenis  antioksidan  yang efektif menahan radikal bebas (Gazali et al ., 2018).

## Aktivitas  Antioksidan  Alga  coklat
( Sargassum sp) Hasil  pengujian  antioksidan pada Tabel 3 dengan variasi pelarut memberikan hasil yang berbeda. Pada pengujian  artikel  pertama  dengan pelarut methanol memberikan aktivitas antioksidan yang kuat hal ini disebabkan  karena  ekstrak  methanol terbukti  mampu  meredam  radikal bebas  dengan  cara  mendonorkan elektron untuk radikal DPPH (Sedjati et  al .,  2018).  Pada  pengujian  artikel kedua dengan pelarut methanol yang dilanjutkan  dengan  fraksinasi  etil asetat  memiliki  aktivitas  antioksidan alga coklat disebutkan sangat lemah. nilai IC 50 sebesar  1.289  ppm.  Pada artikel kedua disebutkan penyebabnya  adalah  suhu  pada  saat proses pengeringan alga coklat terlalu tinggi menyebabkan kandungan aktivitasnya  berkurang.  Selain  hal tersebut pada artikel kedua disebutkan  bahwa  faktor  lain  seperti zat  pengotor,  parameter  lingkungan,
lokasi pengambilan sampel dan jenis sampel  seperti  suhu  dan  sanitasi cahaya matahari mempengaruhi kandungan  antioksidannya.  Proses biosentesis senyawa antioksidan akan menghasilkan  senyawa  yang  optimal apabila  kondisi  lingkungan  juga mendukung (Salma et al ., 2019).
Hasil  pada  pengujian  artikel ketiga  dengan  variasi  pelarut  yaitu
etanol,  etil  asetat  dan  n-heksan memberikan  aktivitas  antioksidan yang berbeda. Artikel ketiga memperoleh  hasil  penelitian  bahwa etil asetat memiliki aktivitas antioksidan yang paling baik dibanding  pelarut  etanol  dan  n- heksan.  Pada  artikel  ketiga  aktivitas antioksidan etil asetat yaitu 68,89±5,36  ppm.  Nilai IC 50 yang rendah  menunjukkan  kemampuan yang kuat dari ekstrak untuk berperan sebagai donor atom hydrogen (Sarini et  al., 2014).  Pada  pengujian  artikel keempat  dengan  pelarut  methanol memberikan  aktivitas  antioksidan yang  kuat  yaitu  dengan  nilai IC 50 yaitu  spesies S.  latifolium  sebesar 66,3363  ±  0,031373  ppm.  Hal  ini disebabkan  karena  ekstrak  methanol terbukti  mampu  meredam  radikal bebas  dengan  cara  mendonorkan elektron untuk radikal DPPH (Sedjati et al ., 2018). Pada pengujian artikel kelima dengan variasi pelarut yaitu methanol,  etil  asetat  dan  n-heksan memberikan  aktivitas  antioksidan yang  berbeda.  Pada  kedua  spesies yang diujikan memiliki aktivitas yang lemah  yaitu  pada  spesies  yaitu  pada spesies S. polycystum dengan pelarut methanol memili IC 50 sebesar 491,02 ppm,  pada  pelarut  etil  asetat  411,80 ppm  dan  pada  pelarut  n-heksan 502,70  ppm.  Pada  artikel  kelima disebutkan bahwa aktivitas antioksidan yang lemah karena masih belum  murni  yang  terdiri  dari berbagai  komponen  senyawa  (Sami, 2016). Perbandingan aktivitas antioksidan pada pelarut yang berbeda  menunjukkan  nilai  yang relatif  berbeda.  Perbedaan  pelarut memberikan pengaruh terhadap
aktivitas  antioksidan.  Pelarut  etil asetat  lebih  banyak  mengandung
senyawa  isoflavon  baik  non-polar (aglikon)  maupun  polar  (glikon) (Gazali et  al .,  2018).  Molyneux
(2004)  menyatakan  bahwa  jika  di dalam suatu bahan memiliki kandungan  senyawa  fenol  maka aktivitas  antioksidan  dalam  bahan tersebut juga tinggi. Perbedaan aktivitas
antioksidan  dengan  pelarut  yang sama,  salah  satunya  disebabkan karena  pengaruh  suhu  pada  proses pengeringan  simplisia.  Pada  artikel pertama, artikel kedua, artikel keempat dan artikel kelima menggunakan  pelarut  yang  sama yaitu  methanol.  Perbedaan  aktivitas antioksidan disebabkan karena adanya  perbedaan  perlakuan  sampel. Sampel  pada  artikel  pertama,  tidak adanya  proses  pengeringan  sebelum di ekstraksi menyebabkan kandungan metabolit  sekunder  yang  memiliki aktivitas antioksidan tidak terhidrolisis  oleh  panas  atau  rusak, sehingga  aktivitas  antioksidan  yang dihasilkan  lebih  besar  dibandingkan dengan artikel lain yang menggunakan pelarut yang sama. Aktivitas antioksidan termasuk  katagori  lemah,  hal  ini terjadi karena senyawa-senyawa golongan  terpenoid  dan  steroid  tidak dapat  mendonorkan  atom  hidrogen untuk meredam radikal DPPH ( Sami et  al .,  2019).  Sedangkan  beberapa ekstrak  yang  mengandung  golongan flavonoid  dan  fenol  tidak  cukup banyak sehingga aktivitas
antioksidannya  lemah.  Selain  hal tersebut  diduga  ekstrak  juga  dapat memberikan  aktivitas  yang  lemah karena  masih  belum  murni  yang terdiri  dari  berbagai  komponen senyawa (Sami et al ., 2019).

## KESIMPULAN
Vol. 3, No. 2 September 2021
Variasi  pelarut  memberikan pengaruh terhadap aktivitas antioksidan.  Senyawa  yang memiliki aktivitas  antioksidan  terbesar  adalah senyawa fenol, klorofil dan karotenoid yang berasal dari senyawa terpenoid.  Kandungan  fenolik  total tertinggi  adalah  1.348,18  ±  2.57  mg GAE/g  pada  pelarut  etil  asetat, klorofil  sebesar  2,84  mg/g  dan kandungan  karotenoid  sebesar  2,69 µmol/g. Aktivitas antioksidan ( Sargassum )  pada  pelarut  etil  asetat yaitu IC 50 = 68,89  mg/L,  methanol  = 69,27  mg/L,  etanol  =  239,51  mg/L dan n-heksan = 148,16 mg/L.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terimakasih  kepada
Ibu  Rissa  Laila  Vifta,  S.Si.,  M.Sc selaku  pembimbing  yang  bersedia meluangkan waktunya untuk memberikan bimbingan dan masukan yang sangat berguna hingga terselesaikannya kajian penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Asih I. A. R. Astiti & Setiawan I M. A. (2010). Senyawa Golongan  Flavonoid  pada Ekstrak n-Butanol Kulit Batang Bungur (Lagerstroemia speciosa Pers.). Jurnal  Kimia  Riset. Bali: Jurusan Kimia Fakultas Maemaika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas  Udaya,  Bukit Jimbaran. ISSN 1907-9850. Fensia  Analda  Souhoka.,  Hattu, Nikmans & Huliselan Marsye,  (2019).  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Biji Kesumba Keling (Bixa  Orellana L ). Indonesia Journal
Chemitry. Ambon.Universita s Pattimura. 7(1), 25-31. Gazali, M., Nurjanah, N., & Zamani, N.  P.  (2018).  Eksplorasi Senyawa Bioaktif Alga Coklat Sargassum sp. Agardh sebagai Antioksidan dari  Pesisir  Barat  Aceh. Jurnal  Pengolahan  Hasil
Perikanan  Indonesia , 21 (1),
167.
https://doi.org/10.17844/jph pi.v21i1.21543 Hasnaeni.,  Wisdawati.,  &  Usman, Suriati.  (2019).  Pengaruh Metode  Ekstraksi  Terhadap Rendemen Dan Kadar Fenolik  Ekstrak  Tanaman Kayu  Beta-Beta  ( Lunasia amara Blanco ). Jurnal Farmasi GAlenika (Galenika Journal of Pharmacy). 5 (2): 175-182.
KKP.  Kelautan dan perikanan dalam angka  tahun  (2014).  Pusat Data Statistik dan Informasi Kementrian  Kelautan  dan Perikanan.
Maharani,  A.A.  (2017). Pengaruh Metode  Ekstraksi  Terhadap Karakteristik Natrium Alginat Rumput Laut Sargassum fluitans. (Skripsi). Tidak dipublikasikan. Fakultas Pertanian. UGM, Yogyakarta. Molyneux,  P.  (2004).  The  use  of stable free radical diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Journal
of  Science  and  Tecnology,
26( 2), 211-219. Mudgal  VN.,  Madaan  A.  Mudgal, Misra., (2010). Dietary Polyphenols  and  Human Health. Asian Journal Biochemistry. 5: 211-219. Mukhriani,. (2011). Ekstraksi, Pemisahan  Senyawa,  Dan Identifikasi  Senyawa  Aktif. Jurnal  Kesehatan , VII (2), 361–367.
https://doi.org/10.24817/jkk. v32i2.2728 Nagappan H, Pee PP, Kee SHY, Ow JT,  Yan  SW,  Chew  LY  & Kong KW. (2017). Malaysian Brown Seaweeds Sargassum siliquosumand Sargassum  polycycstum  : Low Densitylipoprotein (LDL) Oxidation, Angiotensincoverting Enzyme  (ACE),  α-Amilase and α-Glucosidase Inhibitional Activities. Food Reasearch International. 1-9. Antioxidant Activity. Journal Science Technology. 26(2) : 211-219 Ningrum,  Retno.,  Purwati,  Elly  & Sukarsono., (2016). Identifikasi Senyawa Alkaloid Dari Batang Karamuning  ( Rhodomyrtus tomentosa )  Sebagai  Bahan
Ajar  Biologi  Untuk  SMA Kelas  X. Jurnal  Pendidikan
Biologi  Indonesia. Malang. FKIP Universitas Muhammdiyah Malang. 2(3) 231-236. Nursid,  M ., (2017).  Kandungan Fukosantin Dan Fenolik Total  Pada  Rumput  Laut Coklat Padina  Australis Yang  Dikeringkan  Dengan Sinar Matahari. Jurnal Pengolahan  Produk  dan Bioteknologi  Kelautan  dan Perikanan 12(2): 117-124. Padua  D,  Rocha  E,  Gargiulo  D,  & RamosAA. (2015). Bioactive  Compounds  from Brown Seaweeds: Phloroglucinol, Fucoxanthin and Fucoidan as Promisingtherapeutic  agents against breast cancer. Phytochemistry  Letters. 14: 91-98.
Pakidi,  Chalvun  S  dan  Suryanto Suwoyo,  Hidayat.,  (2017). Potensi  Dan  Pemanfaatan Bahan  Aktif  Alga  Coklat Sargassum  sp.    Jurnal  Ilmu Perikanan. Papua.  Fakultas PertanianUniversitas Musamus, Merauke .
Prasetyo,  Kurnawa  Adi  &  Laily,
Ainun  Nikmati., (2015). Uji Konsentrasi  Klorofil  Daun Temu  Mangga  ( Curcuma manga Val.),  Temulawak ( Curcuma xanthorrhiza ), dan  Temu  Hitam  ( Curcuma aeruginosa )  dengan  Tipe Kertas Saring  yang  Berbeda
Menggunakan Spektrofotometer. Jurnal Ilmu Kelautan. Malang. UIN Maulana Malik Ibrahim Malang. Pratiwi,  Liza.,  Fudholi,  Achmad., MArtien, Ronny & Pramono, Suwidjiyo., (2016). Ekstrak etanol,
Ekstrak etil asetat, Fraksi etil asetat,  dan  Fraksi  n-heksan Kulit  Manggis  ( Garcinia mangostana L.)  Sebagai Sumber Zat Bioaktif Penangkal  Radikal  Bebas. Journal  of  Pharmaceutical Science and Clinical Researce. Yogyakarta. Universitas  Gadjah  Mada. 71-82. Prayudho, A.N.O., Novian, Setyadi & Antaresti.  (2015).  Koefisien Transfer  Massa  Kurkumin Dari Temulawak. Junal Ilmiah Widya Teknik 14(1). Salma, Hafida., Sedjati, Sri., & Ridlo, Ali. (2019). Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat Dari Ekstrak Metanol Sargassum  sp.  Journal  of Marine Research . Semarang. Universitas Diponegoro. 8 (1): 41-46. Sami, Fitriyanti Jumaetri & Rahimah, Sitti  (2016).  Uji  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol  Bunga  Brokololi ( Brassica  oleracea L.  var. Italica) Dengan Metode DPPH (2,2 diphenyl-1- picrylhydrazyl)  dan  Metode ABTS (2,2 azinobis(3- etilbenzotiazolin)-6 asam sulfonat). Jurnal Kimia Riset. Makassar.  Sekolah
Tinggi Farmasi Makasar. Sarini AW, Aishah HN, & Zaini NM. (2014)  Determination  of Antioxidant Activity Forseven Types of Macroalgae. International Conference on Food
Engineering and Biotechnology. 65:51-56. Sedjati, Sri ., Endang Supriyantini, Ali Ridlo, Nirwani Soenardjo & Victorina Yulina Santi (2018). Kandungan Pigmen, Total  Fenolik Dan Aktivitas Antioksidan  Sargassum  sp. Jurnal Kelautan Tropis 21(2): 137-144. Septiana  AT,  Asnani  A.  (2013). Aktivitas Antioksidan Ekstrak Rumput Laut Sargassum duplicatum. Jurnal Teknologi Pertanian. 14(2): 79-86. Setiawan, F., Yunita, O., & Kurniawa,  A.  2018.”  Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kayu Secang ( Caesalpinia sappam) Menggunakan Metode DPPH,  ABTS  dan  FRAP”. Jurnal  FArmasi  Udayana, 7(2), 77. Susanty,  S.&  Bachmid,  F.  2016. Perbandingan Metode Ekstraksi Maserasi Dan Refluks  Terhadap  Kadar Fenolik Dari Ekstrak Tongkol Jagung ( Zea mays ).
Jurnal  Konversi. 5(2),  87- 92.
Tensiska,  E.  Sukarminah  &  D. Natalia.  (2006). Ekstraksi Pewarna  Alami  dari  Buah Arben (Rubus idaeus Linn.)) dan Aplikasinya pada Sistem Pangan. http://digilib.umm.ac.id. Diakses pada 12 Mei 2021.
Tristantini, D., Ismawati, A., Pradana,
B.T.,  &  Gabriel,  J.  (2016). Pengujian Aktivitas Antioksidan  Menggunakan Metode  DPPH  pada  Daun Tanjung (Mimusops  elengi L).  Paper  presented  at Seminal  NAsional  Teknik Kimia Kejuangan, Yogyakarta. Vifta,  &  Dian.  (2018).  Skrining Fitokimia  ,  Karakterisasi  , dan Penentuan Kadar Flavonoid Total Ekstrak dan Fraksi-Fraksi  Buah  Parijoto ( Medinilla  speciosa B.).
Prosiding Seminar Nasional Unimus , 1 , 8–14.
Wulansari,  A.N.  (2018).  Alternatif
Cantigi  Ungu (Vaccinium varingiaefolium) Sebagai Antioksidan Alami: Review. Farmaka  Suplemen, 16, 419-429. Zuraida., Sulistiyani., Dondin Sajuthi.,  &  Herawati,  Irma Suparto., (2017). Fenol, Flavonoid, Dan Antioksidan Pada  Ekstrak  Kulit  Batang
Pulai (Alstonia  scholaris R. Br). Jurnal Penelitian Hasil Hutan 35 (3): 211-219.