## KADAR INTERLEUKIN 6 (IL-6) SEBAGAI INDIKATOR PROGRESIVITAS PENYAKIT REUMATOID ARTHRITIS (RA)
Putu Oky Ari Tania 1 , Dorta Simamora 1 , Wahyuni Dyah Parmasari 2 , Febtarini Rahmawati 3 1 Bagian Biomedik Penelitian Biomolekuler Fakultas Kedokteran Universitas Wijaya Kusuma Surabaya
2 Bagian Gigi dan Mulut Fakultas Kedokteran Universitas Wijaya Kusuma Surabaya 3 Bagian Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Wijaya Kusuma Surabaya 1 Email : putu.oky@gmail.com

## Abstrak
Reumatoid  Arthritis  (RA)  merupakan  penyakit  autoimun  yang  menyerang  persendian  dan sinovium.  Pada  RA  terjadi  proses  inflamasi  yang  melibatkan  produksi  beberapa  sitokin proinflamasi  antara  lain  interleukin  6  (IL-6.  Peningkatan  IL-6  berkorelasi  terhadap  terjadinya aktivitas  dan  progresivitas  penyakit  ini.  Untuk  itu  perlu  diteliti  apakah  IL-6  dapat  digunakan sebagai  indikator progresivitas pada RA.  Metode yang digunakan untuk  mengukur kadar IL-6 menggunakan ELISA ( Enzyme Linked Immunosorbent Assay ), dengan mengetahui ikatan antara antigen  dan  antibody  IL-6.  Pada  kelompok  tahap  awal  ( early )  terdapat  9  orang  pasien  antara lain  S1,  S2,  S3,  S4, S7,  S8,  S9,  S10  dan  S14,  dengan  kadar  IL-6  rata-rata  3,640  pg/ml.  Pada tahap lanjutan ( intermediate ) terdapat 3 orang pasien S06, S13 dan S15 dengan rata-rata kadar IL-6 12,453 pg/ml. Pada tahap akhir ( late ) terdapat 3 orang pasien antara lain S5, S11 dan S12, dengan rata-rata dengan rata-rata 59,349 pg/ml.
Kata Kunci : Reumatoid arthritis, progresivitas penyakit, interleukin-6 (IL-6)

## INTERLEUKIN-6 (IL-6) LEVEL AS AN INDIKATOR OF PROGRESIVITY RHEUMATOID ARTHRITIS (RA) DISEASE

## Abstract
Rheumatoid  Arthritis  (RA)  is  autoimmune  disease  that  attacks  joints  and  synovial  tissues. Rheumatoid  Arthritis  is  characterized  by  inflammation  that  involves  production  of  cytokines such  as  Interleukin  6  (IL-6).  Increasing  of  interleukin  6  has  correlation  with  activity  and progressivity of the disease. This research was designed to know whether IL- 6 could be used as indicator progressivity of RA. The method that used for measuring IL-6 level is ELISA ( Enzyme Linked  Immunosorbent  Assay ), using  the  principle  antigen-antibody  binding.  In  early  stage there were 9 persons (S01, S02, S03, S04, S07, S08, S09, S10 and S14) with of IL-6 level (mean :  3.640  pg/mL),  intermediate  stage  there  were  3  persons  (S06,  S13  and  S15)  with  IL-6  level (mean : 12.453 pg/mL), late stage : 3 persons (S05, S11 and S12) with IL-6 level (mean : 59.349 pg/mL).
Keywords : Rheumatoid Arthritis, Disease Progressivity, Interleukin 6 (IL-6)

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Rheumatoid arthritis
(RA) merupakan  penyakit  otoimun  inflamasi kronis  yang terkait di  beberapa jaringan dan organ,  khususnya  sinovia  dan  sendi 1 .
Karakteristik  klinis  RA  meliputi  bengkak, nyeri  dan  kaku  di  sendi.  Prevalensi  RA terdapat  dalam  kisaran  0,5%  -  1%  di beberapa  populasi,  dengan  frekuensi  pada wanita tiga kali  lebih sering dibanding  pada pria. Frekuensi pada wanita sekitar 3,6% dan pada  pria  sekitar  1,7%.  Angka  kejadian  RA tiap  tahun  menunjukkan  sekitar  30  per 100.000  kejadian.  Munculnya  penyakit  ini mencapai  puncaknya  pada  usia  30  –  55 tahun 2,3 .
Penyebab  RA  antara  lain  faktor genetik, hormon, dan faktor lingkungan. Jika salah  satu  faktor  tersebut  muncul  sebagai pemicu  dapat  menyebabkan  aktivasi  sistem imun 4 .  Sistem  imun tersusun  atas beberapa komponen.  Salah  satu  komponen  sistem imun  yang  berperan  penting  adalah  sitokin. Jika sistem imun teraktivasi akan menyebabkan  peningkatan  sitokin.  Peranan sitokin  sangat  besar  terhadap  patogenitas dan progresivitas atau keparahan RA.
Telah diketahui bahwa pada RA terjadi masukan/  influks  limfosit  T  ke  persendian
diikuti  oleh  peningkatan  makrofag  dan fibroblast  yang  disebabkan  oleh  pelepasan sitokin 5 .  Aktivasi  limfosit  Th1  akan melepas molekul sitokin proinflamasi antara lain  interleukin-2  (IL-2),  interf eron  γ (IFN γ ), tumor  necrosis  factor α (TNF α ), granulocyte-macrophage  colony-stimulating factor yang  bertanggungjawab  terhadap reaksi  hipersensitivitas  tipe  lambat,  yang umum muncul pada tahap awal ( early stage ) RA.  Aktivasi  Th2  memproduksi  sejumLah sitokin  interleukin-4  (IL-4),  interleukin-5 (IL-5),  interleukin  6  (IL-6)  dan  interleukin 10 (IL-10) 6 .
Interleukin-6 merupakan sitokin proinflamasi  yang  bersifat  pleiotropik  dan merupakan  pengatur  respon  fase  akut  pada RA. Peranan IL-6 dalam aktivitas biologikal termasuk pengaturan respon imun, inflamasi dan  hematopoeisis.  Interleukin-6  memiliki peranan penting dalam pathogenesis RA 1,13 . Ketika terdapat pencetus penyakit  ini,  maka IL-6  akan  meningkat  dan  produksi  antibodi akan  berlebih  yang  pada  gilirannya  akan menyebabkan  serangan imun  terhadap jaringan terutama persendian. Pada
penderita
RA terjadi peningkatan konsentrasi  serum  IL-6 7 .  Peningkatan  IL-6
serum dan cairan sinovia berkorelasi dengan aktivitas dan progresitivitas penyakit RA 2 . Terdapat  beberapa  tahapan  RA,  yaitu tahap  atau stage awal  ( early ),  lanjutan ( established )  dan  tahap  akhir  ( late )  yang mengacu  pada  progresivitas  penyakit  ini 8 .
Progresivitas yang meningkat akan berakibat penurunan kualitas hidup, harapan hidup dan tentunya  memberikan  beban  finansial  untuk penderita. Belum pernah ditemukan penelitian  lain  yang  menentukan kadar  IL-6 serum  di  tiap  tahap  progresivitas  RA, sehingga  berdasarkan  latar  belakang  di  atas penelitian  ini  adalah  untuk  menentukan
kadar  IL-6  serum  sebagai  indikator  dalam progresivitas  penderita  RA,  sehingga  dapat diketahui  sedini  mungkin  untuk  mencegah komplikasi lebih lanjut penyakit ini.

## BAHAN DAN METODA
Rancangan  penelitian  ini  adalah penelitian Gambaran Potong Lintang (Deskriptif cross  sectional), yaitu  untuk mengetahui  perbedaan  ciri  tiap  tahap  yang mengacu  pada  progresivitas  RA  dan  kadar IL-6  sebagai  indikator  progresivitas  atau keparahannya.
Gambar 1. Alur Penelitian
Sentrifuse 3000 rpm untuk didapatkan serumnya Serum dapat disimpan di suhu -20 0 C sampai semua sampel terkumpul
Penentuan konsentrasi IL-6 dengan metode Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) 19 orang pasien di berikan pertanyaan 4 orang dengan Sampel darah tepi dari  tiap orang
normal (K)
15 orang dengan Sampel darah tepi dari tiap orang dengan RA (S)
Kelompok early stage (tahap awal) Kelompok established stage (tahap lanjut) Kelompok late stage
(tahap akhir)
Pengukuran  kadar  atau  konsentrasi IL-6  dengan  Uji  ELISA.  Sampel  darah  tepi diambil dari individu dengan RA atau tanpa RA  melalui  spuit  steril  3  mL  (Terumo)  dan dimasukkan  dalam  venoject plain ukuran  5 mL. Kemudian dilakukan pemusing/ sentrifuse  pada  3000  rpm  selama  15  menit untuk  memisahkan  serum  dari  endapan/ pellet dalam 30 menit sesudah pengambilan. Serum  yang  didapat  harus  disimpan  pada suhu  -20 0 C,  jika  tidak  langsung  dianalisis.
Setelah  itu  dilakukan  tes  ELISA  untuk menentukan tingkat IL-6 dengan menggunakan    Human  IL-6  Immunoassay Quantikine  ELISA  kit  no.  catalog    D6050, dan  kuantifikasi menggunakan  ELISA Reader  (iMark  Microplate  Absorbance Reader).
Dari  15  sampel  penelitian  penderita RA (S), dibagi menjadi 3 tahap progresivitas penyakit.  Pada  penelitian  ini  pembagian kelompok berdasarkan lamanya pasien menderita  RA. Stage awal  :  pasien  telah menderita  selama  2  bulan  sampai  2  tahun; Stage lanjutan  :  pasien  telah    menderita selama 4 bulan sampai 2 tahun; Stage akhir : pasien menderita RA lebih dari 2 tahun 8 .

## HASIL
Dua  puluh  serum  pada  sampel  yaitu 15  serum  penderita  RA  (S)  dan  5  serum kontrol normal (K), selanjutnya diukur kadar IL-6 nya dengan metode ELISA. Konsentrasi (kadar) IL-6 pada pasien RA (S) dan pasien normal/ kontrol (K) dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Konsentrasi IL-6 pada Pasein dengan RA (S) dan pasien normal/ kontrol (K)
Penderita RA dibagi menjadi 3 stage (tahap) progresivitas atau keparahan penyakit, yaitu stage awal ( early ), lanjutan ( established )  dan  tahap  akhir  ( late ).
Konsentrasi  atau  kadar    IL-6  tertinggi terdapat  pada  pasien  RA  (S12)  yaitu dengan  nilai  83,456  pg/mL,  sedangkan nilai terendah pada pasien RA (S01) yaitu 0,500  pg/mL.Pada  kelompok  tahap  awal ( early ) terdapat 9 orang pasien  antara lain
S01,  S02,  S03,  S04,  S07,  S08,  S09,  S10 dan  S14.  Kadar  IL-6  pada  kelompok  ini berada pada kisaran (0,500 - 6,882 pg/mL) dengan rata-rata 3,640 pg/mL.
Tahap lanjutan ( intermediate ) terdapat 3 orang pasien S06, S13 dan S15 dengan  kisaran  kadar  IL-6  antara  (9,313  - 15,086  pg/mL),  rata-rata  kadar  IL-6  pada kelompok  ini  adalah  12,453  pg/mL.  Pada tahap  akhir  ( late )  terdapat  3  orang  pasien antara  lain  S05,  S11  dan  S12.  Kadar  IL-6 berkisar  antara  (37,572  -  83,456  pg/mL), dengan rata-rata 59,349 pg/mL.
Perbandingan  rerata  kadar  IL-6  pada Kelompok Kontrol (K), Kelompok penderita  RA  (S)  dapat  dilihat  pada Gambar 3.
Gambar 3. Perbandingan Rata-rata Kadar IL-6 Berdasarkan Progresivitas Penyakit (Tahap Awal, Lanjutan dan Akhir)
Tabel 1. Karakteristik Klinik pasien RA (tahap awal, lanjutan, akhir) dan pasien normal
Variable Pasien Reumatoid Arthritis (RA) Pasien Normal (Kontrol) Tahap Awal (n = 9) Tahap Lanjutan (n = 3) Tahap akhir (n = 3) Jenis kelamin (W/P) 8/1 1/2 3/0 3/1 Lamanya gejala RA 1-12 bulan 12-24 bulan >24 bulan - Rerata Kadar IL-6 (pg/mL) 3.64 +  2.159 12.453 +  2.919 59.349 + 23.031 2.096 + 0.674

## PEMBAHASAN
Pada  penderita  RA  diperkirakan terdapat  beberapa  sitokin  yang  berperan terhadap  patogenesis  penyakit  ini,  sitokin tersebut antara lain Tumor necrosis factor α (TNF- α), Intereukin  1 (IL-1) ,  Interferon γ (IFN- γ ), dan Intereukin 6 (IL-6) 9 .
Intereukin  6 merupakan  sitokin pleiotropik  yang  memiliki  kisaran  aktivitas biologi  yang  luas. Interleukin  6 diproduksi di  beberapa  jenis  sel  limfoid  maupun  non limfoid,  antara  lain  sel  T,  sel  B,  monosit, fibroblast,  keratinosit,  sel  endotel,  sel mesangial,  dan  beberapa  sel  tumor 10 , artinya  sitokin  ini  tidak  spesifik  untuk menunjukkan parameter penyakit tertentu.
Pada  Gambar  3.  dapat  diihat  kadar IL-6  pada  kelompok  RA  lebih  tinggi dibandingkan  kontrol.  Kadar  IL-6  juga tampak semakin meningkat pada pasien RA
tahap  awal  (3.64  +  2.159  pg/mL)  lanjutan (12.453 +  2.919 pg/mL) dan akhir (59.349 +  23.031  pg/mL).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  kadar  IL-6  akan  meningkat  seiring dengan progresivitas atau keparahan penyakit. Interleukin  6 merupakan  sitokin yang  menyebabkan  respon  inflamasi  akut, dan  memegang  peranan  penting  dalam pathogenesis  beberapa  penyakit  inflamasi, termasuk RA 11,12 .
Pada  pasien  yang  menderita  RA,  di jaringan  sinovianya  terdapat  infiltrasi  sel inflamasi seperti monosit dan limfosit yang diduga  merupakan  sumber solube  IL-6 receptor (sIL-6R) 4 ,  sehingga  semakin meningkat aktivitas penyakit, atau semakin progresif  penyakitnya  akan  ditunjukkan dengan  beberapa  perubahan  klinis,  seperti pembengkakan  jaringan  lunak  disekeliling
sendi  terkait  karena  infiltrasi  sel  infamasi atau peradangan yang mengakibatkan kadar IL-6  juga  ikut  meningkat.  Produksi  yang berlebihan  IL-6  ditemukan  di  jaringan synovia dan darah penderita RA.
Peningkatan kadar IL-6  berkorelasi dengan kerusakan  jaringan  dan  inflamasi  yang diakibatkan.
Beberapa faktor juga diduga memegang peran penting dalam
perkembangan  RA,  antara  lain  umur,  jenis kelamin,  faktor  hormonal  dan  gaya  hidup seperti  merokok 13 .  Pada  penelitian  ini, penderita RA lebih banyak didominasi oleh jenis  kelamin  perempuan,  walaupun  data yang  didapatkan  kurang  mewakili  karena sedikit jumlah sampel. Pada tahap awal RA perbandingan  penderita  perempuan  :  laki- laki  adalah  8  :  1,  tahap  lanjutan  2  :  1,  dan tahap  akhir  3  :  0.  Keterkaitan  faktor  jenis kelamin  ini  masih  belum  diketahui  dengan jelas,  tapi  diduga  disebabkan  pengaruh hormon  kelamin  ( sex  hormone )  pada wanita.
Dari  pembahasan  di  atas,  dapat diketahui bahwa kadar IL-6 dapat digunakan  sebagai  indikator  progresivitas RA,  namun  bukan  satu-satunya  parameter untuk  diagnosis,  karena  beberapa  sitokin
juga  berperan  dalam  patogenitas  penyakit ini.

## KESIMPULAN
Dari  penelitian  ini  dapat  diambil kesimpulan  bahwa  kadar  IL-6  dapat digunakan  sebagai  indikator  progresivitas penyakit  Reumatoid  arthritis  (RA),  yaitu dapat dilihat dari peningkatan kadar IL-6 di setiap tahap progresivitas penyakit.
Rerata  kadar  IL-6  pada  tahap  awal ( early ) : 3.64 +  2.159 pg/mL. Rerata kadar IL-6  pada  tahap  lanjutan  ( estabished )  :
12.453  +    2.919  pg/mL,  dan  rerata  kadar IL-6  pada  tahap  awal  ( late )  :  59.349  + 23.031 pg/mL.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Hashizume,  M.  and  M.  Mihara,  The Roles of Interleukin-6 in the Pathogenesis of Rheumatoid Arthritis, Arthritis , 2011.
2. Patel,  AM.  And  LW.  Moreland, Interleukin-6 inhibition for treatment of  rheumatoid  arthritis:  A  review  of tocilizumab  therapy, Drug  Design,
Development and Therapy . 2010; 4 : 263–278.
3. Dewing, KA.,Stephen M. Setter, and Barbara  A.  Slusher,  Osteoarthritis and  Rheumatoid  Arthritis  2012:
Pathophysiology, Diagnosis, and Treatment, Nurse Practitioner Healthcare Foundation , 2012.
4. McInnes,  IB.,  and  G.  Schett,  The
Pathogenesis of Rheumatoid Arthritis,  The  New  England Journal of Medicine , 2011, 365;23.
5. Grover, HS, N. Gaba, A. Gupta, CN. Marya,  Rheumatoid arthritis:  a review and dental care considerations,  Nepal  Med  Coll  J, 2011; 13(2): 74-76. 6. Holt, K., A Review of Pathophysiology and Medicinal Treatment  Options  of  Rheumatoid Arthritis, 2011.
7. Wellby,  ML.,  Kennedy  JA.,  True BS., Barreau P., Serum interleukin-6 and thyroid  hormones  in rheumatoid arthritis. Metabolism . 2001;
50(4):463-7.
8. Przybysz,  M.,  K.  Borysewicz  ,  J. Szechinski and I. Katnik-Prastowska,
Synovial  fibronectin  fragmentation and domain expressions in relation to rheumatoid arthritis progression,
Rheumatology. 2007; 46:1071–1075.
9. Robak,  A.  Gladalska,  H.  Stepie´n and  E.  Robak.  Serum  levels  of interleukin-6  type  cytokines  and soluble  interleukin-6  receptor  in patients  with  rheumatoid  arthritis, Mediators  of Inflammation ,  1998;  7:
347–353.
10. Naka,  Tetsuji,  N.  Nishimoto  and T.Kishimoto,  The  paradigm  of  IL-6: from  basic  science  to  medicine, Arthritis  Res ,  2002,  4  (suppl  3):
S233-S242.
11. Chung,  Soo-Jin,  Yong-Jin  Kwon,
Min-Chan  Park,  Yong-Beom  Park, and  Soo-Kon  Lee,.  The  Correlation between Increased Serum Concentrations of Interleukin-6 Family Cytokines and Disease Activity  in  Rheumatoid  Arthritis Patient, Yonsei  Med  J .  2011;
52(1):113-120.
12. Alvarez,  JLP.,  Interleukin  6  in  the Physiopathology of Rheumatoid Arthritis, Reumatol  Clin. 2009;
5(1):34-39. 13. Ardvidson,  NG.,  Disease  Activity  in Rheumatoid Arthritis, Doctoral thesis  at  Uppsala  University  2003 from  the  Department  of  Medical Sciences. 2003.
Reviewer Prof. Dr. dr. Prihatini, Sp. PK.(K)