## UJI ANTIFUNGI RAMUAN TRADISONAL MADURA “SUBUR KANDUNGAN”

## Evika Sandi Savitri
Jurusan Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi UIN Maulana Malik Ibrahim Malang
*Corresponding author: evikasandi@yahoo.com

## Abstract
Jamu  herb  Madura  "Kandungan  Subur"  for  women's  reproductive  health  widely  consumed  to overcome  the  problem  of  reproduction.  Some  species  are  used  traditional  ingredients  "Lush content"  is  Curcuma  longa,  Curcuma  zedoria,  Centella  asiatica,  Foeniculi  dulcis;  there  has  been no  scientific  studies  and  standardization  adequate  to  ensure  the  safety  and  usefulness.  To  answer these problems, need to be screened early stage potential medicinal plants used in herbal Madura is an analysis of potential medicinal plants such as antifungal and phytochemical content contained. The extraction of active compounds with maceration, test active phytochemical compounds with the test  reagents.  Antifungal  test  includes  a  minimum  inhibitory  concentration  and  minimum  killing concentration.  Compounds  contained  in  the  herb  "Fertile  Content"  are  flavonoids  and  alkaloids. Ethanol extract of 70% and 100% can inhibit the growth of fungi at a concentration of 1%.
Keywords: Grammatophyllum scriptu var citrinum, in vitro,  BAP, NAA

## PENDAHULUAN
Obat  tradisional  atau  lebih  dikenal sebagai  jamu  secara  umum  masih  digunakan oleh  masyarakat  Indonesia  sebagai  salah  satu metode alternatif dalam menolong diri sendiri terhadap keluhan kesehatan atau sebagai  cara untuk menjaga kesehatan. Data Riset Kesehatan  Dasar  2010  menunjukkan  bahwa 56%  masyarakat  Indonesia  pernah  meng- konsumsi  jamu dan  untuk  Provinsi  Jawa Timur mencapai 71,84%.
Sebagian  besar  (95,60%)  pengguna jamu  menyatakan  bahwa  ramuan  ini  mampu meningkatkan  daya  tahan  tubuh.  Di  samping itu,  pengguna  jamu  umumnya  didominasi oleh wanita (61,87 %) karena wanita memiliki peran  ganda  dalam  menjaga  kesehatan  baik kesehatan  tubuh  maupun  kesehatan  repro- duksi (Armas, 1995).
Permasalahan dalam melakukan pengembangan  ramuan  madura  adalah  belum terstandarisasinya bahan baku yang digunakan  untuk  ramuan  madura,  karana bahan baku tersebut sebagian besar dibeli dari pasar  tradisional.  Hal  ini  menyebabkan standarisasi  ramuan  madura  sulit  untuk dilakukan.  Di  samping  itu,  dosis  yang
digunakan  untuk  setiap  bungkus  juga  belum terstandarisasi dengan baik, hal ini menyebabkan  tidak  diketahuinya  kandungan senyawa  aktif  yang  terdapat  dalam  ramuan madura tersebut. Berdasarkan pada kondisi di atas,  maka  perlu  dilakukan  skrining  terhadap ramuan  madura  yang  memiliki  potensi sebagai  antifungi  untuk  menjaga  kesehatan reproduksi pada wanita.

## MATERIAL DAN METODE Pembuatan Ramuan
Sampel  tanaman  rizoma Curcuma zedoaria , rizoma Kaempferia  galanga L , biji Foeniculum vulgare Mill  dan  daun Centella Asiatica dicuci  bersih,  dikeringanginkan. Selanjutnya  sampel  dipotong  kecil-kecil dengan  gunting  atau  pisau  dan  dikeringkan dengan  oven  pada  suhu  30–37 o C  selama  1 sampai  2  jam.  Kemudian  sampel  kering dihaluskan  dengan  blender  sampai  menjadi serbuk  dan  diayak  dengan  ayakan  60  mesh. Ramuan  “Kandungan  Subur”  dibuat  dengan mencampurkan  4  macam  bahan  tanaman dengan  komposisi  masing-masing  25%. Kemudian ramuan tersebut digunakan sebagai sampel proses ekstraksi.

## Proses Ekstraksi
Metode ekstraksi yang digunakan adalah metode maserasi dengan pelarut etanol seperti yang  dilakukan  oleh  Rita  (2008)  dengan sedikit modifikasi. Serbuk ramuan “Kandung- an  Subur”  ditimbang  sebanyak  60  g,  lalu diekstraksi dengan perendaman menggunakan 300  mL  pelarut  etanol  selama  24  jam, kemudian dishaker selama 3 jam, selanjutnya disaring dan ampas yang diperoleh dimaserasi kembali  dengan  pelarut  yang  sama  dan dilakukan  sebanyak  3  kali  pengulangan sampai  filtratnya  berwarna  bening.  Hasil penyaringan  dilakukan  evaporasi  dengan rotary evaporator , pada suhu 40 o C selama 30 menit.  Hasil  dari  proses  evaporasi  kemudian disimpan  pada  suhu  4 o C  untuk  selanjutnya dilakukan uji fitokimia.
Uji Fitokimia Uji Alkaloid (Harbone, 1987). Ekstrak ramuan  “Subur  Kandungan”  diambil  seba- nyak  2  mg  dan  dimasukkan  dalam  tabung reaksi, ditambah 0,5 mL HCl 2 % dan larutan dibagi dalam dua tabung. Tabung I ditambahkan  0,5  mL reagen Dragendorff , tabung II ditambahkan 0,5 mL reagen Meyer . Jika  tabung  I  terbentuk  endapan  jingga  dan pada  tabung  II  terbentuk  endapan  kekuning- kuningan, menunjukkan adanya alkaloid.
Uji Flavonoid (Indrayani et al ., 2006).
Ekstrak  ramuan  “Subur  Kandungan”  diambil sebanyak  2  mg  dimasukkan  dalam  tabung reaksi  kemudian  dilarutkan  dalam  1–2  mL metanol  panas  50  %.  Setelah  itu  ditambah logam  Mg  dan  0,5  mL  HCl  pekat.  Larutan berwarna  merah  atau  jingga  yang  terbentuk, menunjukkan adanya flavonoid.
Uji Triterpenoid dan Steroid (Indrayani,  2006). Ekstrak  ramuan  “Subur Kandungan”  diambil  sebanyak  2  mg dimasukkan  dalam  tabung  reaksi,  dilarutkan dalam  0,5  mL  kloroform  lalu  ditambah dengan  0,5  mL  asam  asetat  anhidrat. Campuran ini selanjutnya ditambah dengan 1 –  2  mL  H 2 SO 4 pekat  melalui  dinding  tabung tersebut.  Jika  hasil  yang  diperoleh    berupa cincin kecoklatan  atau violet  pada perbatasan dua pelarut menunjukkan adanya triterpenoid, sedangkan jika terbentuk warna hijau kebiruan menunjukkan adanya steroid.
Uji  Saponin  (Halimah,  2010). Ekstrak ramuan “Subur Kandungan” diambil sebanyak  2  mg  dimasukkan  dalam  tabung reaksi  ditambah  air  (1:1)  sambil  dikocok selama  1  menit,  apabila    menimbulkan  busa ditambahkan  2  tetes  HCl  1  N  dan  dibiarkan selama  10  menit,  bila  busa  yang  terbentuk bisa  tetap  stabil  maka  ekstrak  positif mengandung saponin.
Uji  Tanin (Indrayani et  al .,  2006).
Ekstrak ramuan “Subur Kandungan” sebanyak  2  mg  dimasukkan  kedalam  tabung reaksi,  kemudian  ditambahkan  dengan  2-3 tetes  larutan  FeCl 3 1  %.  Jika  larutan  meng- hasilkan  warna  hijau  kehitaman  atau  biru tinta, maka bahan tersebut mengandung tanin. Pengujian Aktifitas Antifungi Uji  Daya  Hambat  Minimum. Ekstrak etanol  jamu  subur  kandungan  dibuat  dalam beberapa  konsentrasi  (0,05;  0,5;  1;  5;  10%). Selain pengujian  aktifitas antifungi  dilakukan juga penentuan Kon-sentrasi Hambat Minimum (KHM).
Uji  Daya  Bunuh  Minimum. Uji  daya bunuh  minimum  dilakukan  menggunakan media  padat.  Penetapan  potensi  bahan  uji dilakukan  dengan  terlebih  dulu  membuat  seri konsentrasi    larutan  ekstrak  1,2  dan  3% masing-masing pada ekstrak akuades, ethanol 70% dan ethanol 100%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Fitokimia Ramuan “Subur Kandungan”.
Pengujian  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui  senyawa  aktif  yang  terkandung ramuan “Subur Kandungan”.  Hasil pengujian fitokimia dapat dilihat pada Tabel 1.
Berdasarkan pada hasil pengujian fitokimia  (Tabel  1)  didapatkan  hasil  bahwa senyawa  yang  terdapat  pada  ramuan  “Subur Kandungan”  ialah  flavonoid  dan  alkaloid. Jamu subur kandungan terdiri dari 4 (spesies) yaitu Kaempferia  galanga,  Centella  asiatica, Curcuma  domestica dan Foeniculi  dulcis. Kaempheria  galanga Spesies  Kaempferia yang digunakan masih satu family Zingiberaceae,  seperti  jahe  dan  kunyit  yang terlebih  dulu  diketahui  mempunyai  aktivitas antibakteri dan antifungi (Hutapea, 1991).
Uji  Aktivitas  Antifungi  Ekstrak  Jamu Subur Kandungan
Konsentrasi Hambat Minimum.
Metode dilusi  bertujuan untuk  mencari KHM
(Konsentrasi  Hambat  Minimum).  Metode dilusi ini menggunakan antimikroba dengan
Gambar 1 . Uji daya hambat minimum beberapa ekstrak ramuan “Subur Kandungan”
Tabel 1 . Hasil Uji Fitokimia ramuan “Subur Kandungan”
Penapisan fitokimia Hasil Flavonoid Positif (++) Alkaloid Positif (++) Saponin Negatif (-) Tanin Negatif (-) Gambar 2 .  Uji daya hambat antifungi ekstrak akuades (A), ethanol 70% (B) dan ethanol 100% jamu subur kandungan
kadar yang menurun secara bertahap menggunakan metode cair. Jamur uji diinokulasikan pada media tersebut, kemudian ditambahkan  larutan  uji  dengan  konsentrasi yang  dapat  menghambat  atau  mematikan jamur Candida  albicans. Gambar  uji  dilusi disajikan pada Gambar 1.
Uji  dilusi  untuk  konsentrasi  hambat minimum  digunakan  standart  McFarland sebagai  standart  konsentrasi Candida yaitu sebesar  10 8 CFU.    Konsentrasi  ekstrak  yang digunakan  ialah  0,05%;  0,5%;  1%;  5%  dan 10%.  Pengujian pada beberapa jenis ekstraksi yaitu  ekstrak  akuades,  ethanol  70%  dan ethanol  100%.  Hasil  pengujian  menunjukkan
bahwa pada semua jenis ekstrak menunjukkan pada konsentrasi  0,05%  sudah memiliki daya
hambat terhadap tumbuhnya fungi. Tabel 1 .  Hasil uji aktivitas antifungi ekstrak jamu subur kandungan Konsentrasi esktrak (ppm) Diameter daerah hambat (mm) Diameter daerah hambat rata-rata Nilai KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) (%) Ketokonazole 9 9,5 10 9,50 Ekstrak akuades 1% 0 0 0 1,66 2% 0 0 0 1,66 3% 0 0 0 1,66 Ekstrak ethanol 70% 1% 2,5 3 2,5 2,66 1 2% 3 2,5 2,5 2,66 3% 3 2,5 2,5 2,66 Ekstrak ethanol 100% 1% 2 1,5 1,5 1,66 1 2% 1,5 2 1,5 1,66 3% 2 1,5 1,5 1,66
Uji  dilusi  untuk  konsentrasi  hambat minimum  digunakan  standart  McFarland sebagai  standar  konsentrasi Candida yaitu sebesar  10 8 CFU.    Konsentrasi  ekstrak  yang digunakan  ialah  0,05%;  0,5%;  1%;  5%  dan 10%.  Pengujian pada beberapa jenis ekstraksi yaitu  ekstrak  akuades,  ethanol  70%  dan ethanol  100%.  Hasil  pengujian  menunjukkan bahwa pada semua jenis ekstrak menunjukkan pada konsentrasi  0,05%  sudah memiliki daya hambat terhadap tumbuhnya fungi.
Konsentrasi Bunuh Minimum. Pengujian aktivitas antifungi dilakukan dengan metode dilusi agar yang menggunakan kertas  cakram  sebagai  medianya.  Dasar pemilihan metode ini adalah karena pengerjaannya  yang  sering  dilakukan  di laboratorium mikrobiologi  untuk  menentukan kepekaan mikroba terhadap bermacam- macam  bahan  uji.  Konsentrasi  ekstrak  yang digunakan  ialah  1%,  2  %  dan  3%.    Uji  daya bunuh minimum disajikan pada Gambar 1B.
Pengujian  konsentrasi  bunuh  minimum menggunakan  beberapa  ekstrak  jamu  subur kandungan  yaitu  ekstrak  ethanol  70%  dan
ethanol 100% dengan control positif menggunakan  ketokonazole  200mg  sebagai antifungi (Tabel 1). Hasil pengujian menunjukkan  bahwa  konsentrasi  1%  sudah menunjukkan  adanya  penghambatan  pada semua ekstrak.  Daya bunuh minimum dengan diameter  zona  hambat  tertinggi  didapatkan pada  ekstrak  ethanol  70%.    Daya  bunuh minimum ini lebih kecil dibandingkan dengan control  positif  yaitu  Ketokonazole.    Hal  ini disebabkan  karena  ekstrak  yang  digunakan ialah  ekstrak  kasar  yang  belum  bisa menyamai  aktivitas  antifunginya  disbanding- kan  control  positif  yang  merupakan  bahan antibiotik  pabrikan.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian  Ghalib  (2011)  tentang  ekstrak etanol rimpang kencur ( Kaemferagalanga L.) pada  uji in  vitro dengan  metode  dilusi hasilnya  menunjukkan  efek  daya  hambat terhadap  pertumbuhan  koloni Trichophyton verrucosum isolat  lokal.  Nilai  Konsentrasi Hambat  Minimal  (KHM)  adalah  1  %.  Obat ketokonazol  sebagai  kontrol  positif  nilai KHM-nya adalah < 0,25%.

## KESIMPULAN DAN SARAN
1. Senyawa  yang  terdapat  dalam  ramuan “Kandungan  Subur”  ialah  flavonoid  dan alkaloid
2. Ekstrak  ethanol  70%  dan  100%    ramuan tradisional subur kandungan dapat menghambat  pertumbuhan  koloni  fungi Candida albicans
3. Esktrak  ethanol  70%  dan  100%  dapat menghambat  pertumbuhan  fungi  pada konsentrasi 1%
Perlu  pengujian  lebih  lanjut  secara in vivo daya antifungi ekstrak ramuan tradisional Subur  Kandungan  dan  uji  lanjutan  untuk menganalisis  senyawa  yang  diduga  berfungsi sebagai antifungi

## DAFTAR PUSTAKA
Armas,  E.  J.  (1995).  Learning  Together.  A woman’s  Story.  In:  Learning  about Sexuality. A Practical Beginning.
Editor:  Sondra  Zeidenstein  and  Kristen Moore.  New  York,  The  Population Council  International  Women’s  Health Coalition. 33-44.
Badan  Penelitian  dan  Kesehatan.  (2010).
Riset Kesehatan Dasar 2010 . Departemen Kesehatan. Jakarta. Ghalib,  D.  (2011).  Uji  Daya  Antifungi Ekstrak Etanol Rimpang Kencur ( Kaemfera Galanga L.) Terhadap Pertumbuhan Jamur Trichophyton Verrucosum Secara In Vitro
(Antifungal  Effect  Of  Kencur  Tuber ( Kaemfera  galanga L.)  Ethanol  Extract on  Mold  Trichophyton  Verrucosum  by in  Vitro  Test)  Seminar  Nasional
Teknologi Peternakan dan Veteriner.
Handayani,  L.  (2003).  Membedah  Rahasia Ramuan  Madura.  Jakarta,  Agromedia
Pustaka. Handayani, L. & Kristiana. (2011). Pemanfaatan  Jamu  Untuk  Gangguan Kesehatan Reproduksi  Wanita, Analisis Lanjut  Data  Riset  Kesehatan  Dasar Tahun  2010.  Buletin  Penelitian  Sistem Kese-hatan. 14(3), 301-309. Harborne,  J.  B.  (1987). Metode  Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan .  Padmawinata  K,  Soedira  I, penerjemah.  Bandung:  Penerbit  Institut Teknologi  Bandung.  Terjemahan  dari: Phytochemical methods.
Halimah,  N.  (2010).  Uji  Fitokimia  dan  Uji
Toksisitas  Ekstrak  Tanaman  Anting- Anting ( Acalypha indica Linn.)
Terhadap  Larva  Udang Artemia  salina Leach.    Skripsi Diterbitkan.  Malang:
Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas  Islam  Negeri  Maulana Malik Ibrahim Malang.
Hutapea,  J.  R.  (1991).  Inventaris  Tanaman Obat Indonesia III. Litbang Departemen Kesehatan RI. Jakarta.
Indriyani,  L.  H.  Soepjipto,  L.  Sihasaie. (2006).  Skrining  Fitokimia  dan  Uji Toksisitas  Ekstrak  Daun  Pecut  Kuda (Stachy-tarpheta  jamaicensis  L.  Vahl) Terhadap  Larva  Udang Artemia  salina Leach. Berk. Panael. Hayati . 12, 57-61. Ketaren,  S.  (1986). Pengantar  Teknologi Minyak dan Lemak Pangan . Jakarta: UI Press.