## DOI: 10.30644/rik.v8i2.238
Potensi  antiinflamasi  ekstrak  etanol  daun  bisbul  (Diospyros  discolor  Willd)  terhadap edema mencit putih jantan (Mus musculus) terinduksi karagenan
Harry Noviardi  , Triyani Sumiati, Patoni Program Studi S1 Farmasi, Sekolah Tinggi Teknologi Industri dan Farmasi Bogor, Bogor, Indonesia, 16151
 Email korespondensi: harry.noviardi@gmail.com
Accepted: 31 Agustus 2019; revision: 12 September 2019; published: 31 Desember 2019

## Abstrak
Latar Belakang : Tanaman bisbul ( D. discolor Willd) merupakan tanaman yang tumbuh pada iklim tropis. Daun bisbul memiliki kandungan fitokimia berupa alkaloid, flavonoid, saponin, tanin dan steroid. Senyawa golongan  flavonoid  pada  daun  bisbul  dapat  berpotensi  sebagai  antiinflamasi.  Tujuan  dari  penelitian  ini adalah untuk menentukan potensi antiinflamasi dan dosis efektif dari ekstrak etanol daun bisbul terhadap edema mencit putih jantan terinduksi karagenan.
Metode: Daun bisbul diekstraksi dengan pelarut etanol 96% menggunakan metode maserasi. Sebanyak 5  kelompok  uji  disiapkan  untuk  penentuan  aktivitas  antiinflamasi.  Setiap  kelompok  terdiri  atas  5  ekor mencit  putih  jantan  ( Mus  musculus ).  Kelompok  I  (kontrol  negatif)  diberikan  0,5%  suspensi  Na-CMC; kelompok  II  (kontrol  positif)  natrium  diklofenak  0,13  mg;  sedangkan  kelompok  III,  IV,  dan  V  secara berturut-turut  diberikan  ekstrak  etanol  daun  bisbul  sebesar  0,5  g/Kg  BB,  1  g/Kg  BB  dan  1,5  g/Kg  BB. Masing-masing mencit kemudian diinduksi menggunakan karagenan secara intraplantar. Volume radang diukur dengan menggunakan alat pletismometer dilakukan selama 6 jam dengan interval waktu 60 menit. Hasil: Dosis  ekstrak  etanol  daun  bisbul  0,5  g/Kg  BB  mempunyai  persentase  inhibisi  edema  tertinggi, yaitu sebesar 77,78 % dibandingkan dengan dosis 1 g/Kg dan 1,5 g/Kg BB yang mempunyai persentase akhir yang sama, yaitu sebesar 66,67 %.
Kesimpulan: Ekstrak  etanol  daun  bisbul  dengan  dosis  0,5  g/Kg  BB  merupakan  dosis  yang  berpotensi sebagai antiinflamasi pada mencit jantan.
Kata Kunci : antiinflamasi, bisbul, daun, edema, inhibisi.

## Abstract
Background: The bisbul (D. discolor Willd) is a plant that grows in tropical climates. The leaves of Bisbul have  phytochemical  content  of  alkaloids,  flavonoids,  saponins,  tannins  and  steroids.  A  flavonoids compound  in  the  leaves  of  Bisbul  could  be  potentially  as  an  anti-inflammatory.  The  purpose  of  this research  was  to  determine  the  potential  for  antiinflammatory  and  effective  dose  of  ethanol  extract  of bisbul leaves to male white mice edema which induced caragenan.
Method: The bisbul leaves was extracted with an ethanol solvent 96% using maceration methods. A total of 5 test groups were prepared for the determination of anti-inflammatory activities. Each group consisted of  5 male  white mice (Mus  musculus).  Group  I  (negative  control)  was  given  0.5%  suspension  Na-CMC; group  II  (positive  control)  sodium  diclofenac  0.13  mg;  Meanwhile,  groups  III,  IV,  and  V  were  given consecutively by the leaves-type ethanol extract of 0.5 g/Kg BW, 1 g/Kg BW and 1.5 g/Kg BW. Each mice were  then  induced  by  an  intraplantar  caragenan.  The  inflammation  volume  was  measured  using  a plethysmometer performed for 6 hours with a time interval of 60 minutes.
Results:  The  dose  of  ethanol  extract  of  bisbul  leaves  0.5  g/Kg  BW  had  a  percentage  of  the  highest inhibition of the edema of 77.78% compared with a dose of 1 g/Kg BW and 1.5 g/Kg BW which has the same results of percentage at 66.67%.
Conclusion: Ethanol extract of bisbul leaves with a dose of 0.5 gram/Kg BW was a potential dose as an anti-inflammatory in male mice.
Key words: anti-inflammatory, bisbul, edema, inhibition, leaves.
Potensi  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Bisbul  ( Diospyros discolor Willd)  Terhadap  Edema  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ) Terinduksi Karagenan

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan salah satu negara  di  dunia  yang  kaya  akan  tumbuhan. Sebanyak  30.000  jenis  tumbuhan  tumbuh  di hutan tropis Indonesia. Sekitar 200 jenis dari jenis  tanaman  tersebut  berpotensi  sebagai obat  dan  menjadi  bahan  baku  obat  bagi industri obat 1,2 . Tanaman yang dapat digunakan  sebagai  obat  salah  satunya adalah  daun  bisbul.  Daun  bisbul D.  discolor Willd  memiliki  kandungan  senyawa  aktif triterpen  yang  dapat  berpotensi  sebagai antiinflamasi 3 .  Ekstrak  etil  asetat  daun  bisbul dapat menghambat peradangan pada edema tikus  sebesar  78,63%.  Nilai  ini  lebih  rendah dibandingkan  dengan  pembanding  natrium diklofenak 85,23% 3 .
Inflamasi  merupakan  respon  tubuh dalam  melindungi  diri  akibat  kerusakan jaringan  yang  disebabkan  oleh  trauma  baik secara fisik, kimia maupun mikrobiolgi. Tubuh akan  memperbaiki  jaringan  yang  rusak  serta mempertahan  dari  infeksi  yang  timbul  akibat efek trauma dengan cara inflamasi. Selain itu inflamasi  dapat  melokalisasi  agen  perusak maupun  jaringan  rusak 4,5 .  Inflamasi  ditandai dengan  timbulnya  peradangan  pada  edema, kulit  bewarna  merah,  panas,  perubahan fungsi serta nyeri 6 . Inflamasi dapat diobati dengan
menggunakan  dua  jenis  golongan  obat antiinflamasi, yaitu antiinflamasi steroid (AIS) maupun  antiinflamasi  non-steroid  (AINS) 7 . Golongan obat antiinflamasi tersebut memiliki efek  samping  yang  merugikan  bagi  tubuh 8 . AIS  dapat  menurunkan  imunitas  tubuh terhadap  infeksi.  Selain  itu  antiinflamasi  dari golongan  steroid  menyebabkan  timbulnya tukak  peptik,  osteoporosis,  diabetes,  atropi jaringan  lemak  dan  otot,  serta  meningkatkan tekanan  intra  okular.  AINS  memiliki  efek samping dalam menyebabkan tukak lambung,  gangguan  ginjal,  maupun  anemia 9 . Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan  penelitian dalam  mengembangkan  obat  antiinflamasi dengan  efek  samping  yang  minimal.  Bahan baku  obat  yang  memiliki  efek  samping minimum  adalah  obat  berbasis bahan  alam 1 .
Kandungan  senyawa  aktif  tanaman  yang berpotensi  sebagai  antiinflamasi  adalah senyawa  golongan  flavoniod.  Mekanisme kerja  senyawa  golongan  flavonoid  dengan cara  menghambat  enzim  siklooksigenase atau  lipooksigenase  serta  penghambatan akumulasi leukosit di daerah inflamasi 1,10 . Hasil studi pendahuluan fitokimia, daun tanaman bisbul memiliki kandungan flavonoid. Senyawa golongan flavonoid dapat diekstraksi  dengan  menggunakan  pelarut polar.  Salah  satu  jenis  pelarut  yang digunakan  adalah  pelarut  etanol.  Pelarut etanol dapat menarik senyawa flavonid 11 . Berdasarkan pada studi literatur tersebut,  perlu  dilakukan  penelitian  untuk menentukan potensi antiinflamasi dari ekstrak etanol  daun  tanaman  bisbul  serta  dosis ekstrak etanol daun bisbul terbaik yang dapat menghambat peradangan pada edema mencit putih jantan yang terinduksi karagenan. Penggunaan karagenan disebabkan oleh sifatnya yang tidak merusak jaringan  sehingga  tidak  menimbulkan  bekas pada  kulit  mencit 12 .  Tujuan  dari  penelitian  ini adalah menentukan potensi antiinflamasi dan dosis  efektif  dari  ekstrak  etanol  daun  bisbul terhadap  perubahan  penurunan  volume edema mencit yang terinduksi karagenan.

## METODE
Lingkup  kerja  ini  terdiri  atas  beberapa tahap, yaitu pembuatan simplisia, pembuatan ekstrak  etanol  daun  bisbul,  uji  penapisan fitokimia,  pembuatan  suspensi  karagenan dan  natrium  diklofenak  dan  pengujian terhadap  hewan  coba  mencit.  Penelitian dilakukan  di  Laboratorium  Sekolah  Tinggi Teknologi  Industri  dan  Farmasi  Bogor  serta Laboratorium Pusat Studi Biofarmaka, Institut Pertanian Bogor (LPSB-IPB).
Bahan dan Alat. Bahan yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  daun bisbul  ( D.  discolor Willd),  etanol  96%, karagenan,  akuades,  Na-CMC,  Natrium klorida  fisiologis  0,9%,  natrium  diklofenak tablet, serbuk magnesium, NH 4 OH , kloroform, pereaksi  Mayer,  Dragendroff,  Wagner,  HCl
Potensi  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Bisbul  ( Diospyros discolor Willd)  Terhadap  Edema  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ) Terinduksi Karagenan
(p), H 2 SO 4, FeCl 3 1%, asetat anhidrad dan air raksa.
Bahan  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah peralatan gelas, timbangan hewan (Camry),  neraca  analitik,  lumpang  dan  alu, sudip,  spatel  logam, cawan porselen, batang pengaduk,  penangas  air, vacuum  rotary evaporator ,  blender,  desikator,  sentrifugator, alumunium  foil,  spuit  injeksi  1  mL,  sonde, pletismometer (Pyrex), underpath dan stopwatch .
Ekstraksi  Daun  Bisbul. Sebanyak  4 kg  daun  bisbul  tua  (warna  hijau  pekat) dilakukan  sortasi  basah  dan  dicuci,  serta perajangan.  Daun  bisbul  dikeringkan  dengan cara  dijemur  tanpa  terkena  sinar  matahari langsung  selama  kurang  lebih  satu  minggu. Setelah  itu,  sampel  yang  telah  dikeringkan kemudian diserbukkan dengan menggunakan blender dan diayak. Selanjutnya serbuk daun bisbul disaring menggunakan ayakan dengan ukuran 40 mesh serta disimpan dalam wadah tertutup dan terlindung dari sinar matahari.
Sampel  simplisia  sebanyak  500  gram ditimbang  dan  dimaserasi  dengan  pelarut etanol  96%  sebanyak  1,5  liter.  Wadah maserasi  yang  berisi  sampel  diaduk  hingga pelarut  merata.  Ekstraksi  dilakukan  selama 3x24  jam  dan  diaduk  sesering  mungkin. Setiap  24  jam  disaring  dengan  kertas  saring ke  dalam  wadah  penampung.  Pelarut  etanol diganti untuk melarutkan residu sambil diaduk rata.  Filtrat  yang  diperoleh  dikumpulkan  dan digabungkan menjadi satu, kemudian dipekatkan dengan vacuum rotary evaporator suhu  40°C  sampai  diperoleh  ekstrak  kental. Selanjutnya  dilakukan  penapisan  fitokimia untuk identifikasi senyawa golongan alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan triterpenoid/steroid  dilakukan  pada  ekstrak kental.
Pembuatan  Suspensi  Ekstrak  Etanol Daun  Bisbul. Ekstrak ditimbang sebanyak 5 gram  kemudian  didispersikan  dengan  Na- CMC  0,5%  secukupnya  kemudian  diaduk hingga  homogen,  lalu  ditambahkan  akuades hingga  100  mL.  Sediaan  uji  ditimbang
masing-masing  0,5;  1;  dan  1,5  gram  dan diberikan pada hewan uji secara oral.
Pembuatan Suspensi
Natrium Diklofenak. Satu  tablet  Natrium  diklofenak 50  mg  digerus  dalam  lumpang  hingga  halus dan  homogen  lalu  dimasukkan  ke  dalam beaker  glass kemudian  tambahkan  Na-CMC 0,5%  dalam beaker  glass sampai  volume  50 mL, diaduk hingga homogen.
Pembuatan Larutan
Karagenan. Sebanyak  1  gram  karagenan  ditimbang,  dan dilarutkan  dengan  10  mL  NaCl  fisiologis dalam beaker  glass .  Larutan  karagenan diaduk sampai larut dan homogen.
Persiapan  Hewan  Uji. Mencit  putih jantan  ( M.  musculus )  dengan  bobot  tubuh rerata  35  gram,  umur  2-3  bulan  dengan kondisi  sehat  digunakan  sebagai  hewan  uji. Mencit  diadaptasikan  selama  1  minggu  di dalam  kandang  untuk  aklimatisasi.  Mencit dipuasakan selama ±18 jam sebelum perlakuan.  Sebanyak  25  ekor  dibagi  menjadi 5  kelompok  percobaan.  Setiap  kelompok terdiri atas 5 ekor mencit.
Uji  Aktivitas  Antiinflamasi. Kaki  kiri mencit yang akan diinduksi, diberi tanda pada mata  kaki  kiri  dan  diukur  volume  awal  kaki mencit  Telapak  kaki  masing-masing  mencit disuntik  dengan  larutan  karagenan  secara intraplantar  sebanyak  0,2  ml.  Volume  edema kaki  mencit  diukur  setelah  satu  jam  diinduksi karagenan  dengan  cara  memasukannya  ke dalam  pletismometer  hingga  tanda  batas. Kemudiaan  masing-masing  mencit  diberikan perlakuan  dengan  pemberian  per  oral  sesuai dengan kelompok perlakuan sebagai berikut: i. Kelompok  I:  suspensi  Na-CMC  0,5% sebagai kontrol negatif.
ii. Kelompok II: suspensi natrium diklofenak
0,13  mg  sebagai  kontrol positif.
iii. Kelompok  III:  suspensi  ekstrak  etanol daun bisbul 0,5 gram/Kg BB.
iv. Kelompok  IV:  suspensi  ekstrak  etanol daun bisbul 1 gram/Kg BB.
v. Kelompok  V:  suspensi  ekstrak  etanol daun bisbul 1,5 gram/Kg BB.
Potensi  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Bisbul  ( Diospyros discolor Willd)  Terhadap  Edema  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ) Terinduksi Karagenan
Volume edema telapak kaki kiri mencit diukur berdasarkan  pada  kenaikan  air  raksa  pada alat  pletismometer.  Pengukuran  dilakukan  1 jam sekali selama 6 jam.
Analisis  Data  Aktivitas  Antiinflamasi. Distribusi  normal  data  hasil  penelitian dianalisis  dengan  uji  Kolmogorov  Smirnov. Data  terdistribusi  normal  dan  homogen  jika nilai  (p  >  0,05)  dan  dilanjutkan  dengan  uji ANOVA  ( Analysis  of  Varians ) one-way dengan α sebesar 95%.

## HASIL
Hasil Karakteristik  Simplisia  dan Ekstrak  Daun  Bisbul. Daun  Bisbul  yang digunakan  pada  penelitian  ini  teridentifikasi dari  jenis  tanaman  dari  Bisbul  dengan  nama lain D.  discolor Willd  berdasarkan pada hasil determinasi tanaman oleh Herbarium Bogoriense ,  Bidang  Botani  Pusat  Penelitian Biologi-LIPI  Cibinong.  Daun  Bisbul  sebanyak 4  kg  disortasi  basah,  yaitu  dengan  cara dibersihkan  dari  kotoran  yang  menempel. Proses  pengeringan  ini  dilakukan  untuk mengeringkan  bahan  tanaman.  Simplisia kering  yang  diperoleh  dari  daun  bisbul  yaitu sebanyak  1530  gram  dengan  kadar  air sebesar 5,86%. Serbuk simplisia daun bisbul sebanyak  500  gram  dimaserasi  dengan pelarut etanol 96% sebanyak 1,5 liter. Proses ekstraksi dilakukan remaserasi sebanyak tiga kali.  Hasil  dari  maserasi  disaring  hingga mendapat filtrat, kemudian dievaporasi dengan menggunakan vacum rotary evaporator dengan suhu 40 o C untuk mendapatkan  ekstrak  yang  lebih  pekat. Ekstrak  daun  bisbul  yang  didapatkan,  yaitu sebanyak  86,68  gram  dari  bobot  simplisia 500  gram  dengan  persen  berat  rendemen 17,34%.
Hasil  penapisan  fitokimia. Golongan senyawa  flavonoid,  tanin,  alkaloid,  saponin, triterpenoid/  steroid  terkandung  pada  ekstrak etanol daun bisbul berdasarkan pada hasil uji penapisan  fitokimia.  Golongan  senyawa flavonoid merupakan senyawa target sebagai antiinflamasi.
Hasil  Penentuan  Aktivitas  Antiinflamasi. Pengujian antiinflamasi dilakukan menggunakan  hewan  percobaan  mencit  ( M. musculus )  jantan  dengan  metode Rat  hind paw  edema .  Pembengkakan  radang  buatan pada  telapak  kaki  kiri  hewan  uji  yang ditimbulkan  akibat  induksi  karagenan  diukur volumenya. Sebanyak 25 mencit dikelompokkan  menjadi  5  kelompok.  Mencit ditimbang bobot tubuhnya, untuk mengetahui volume  pemberian  obat  yang  sesuai  dan diberi  tanda  pada  kaki  kirinya  dengan  spidol permanen.  Volume  awal  kaki  kiri  mencit diukur dengan menggunakan alat pletismometer untuk mengetahui volume kaki pada waktu awal. Setiap kelompok perlakuan diinduksi  dengan  larutan  karagenan  dengan volume  penyuntikan  0,2  mL  dengan  cara disuntikan  secara  intraplantar  pada  bagian telapak  kaki  kiri  mencit.  Kemudian  diukur volume kaki kiri mencit setelah diinduksi satu jam.  Setelah  itu,  diberikan  ekstrak  etanol daun bisbul dosis 0,5; 1; dan 1,5 gram/KgBB, kontrol  positif  dan  kontrol  negatif  sesuai kelompok  perlakuannya.  Volume  penurunan udem diukur dan diamati selama 6 jam untuk melihat  penurunan  volume  udem  dari  tiap kelompok. Berdasarkan pada hasil penelitian yang  dilakukan  terhadap  volume  edema, setiap kelompok perlakuan, mengalami rerata penurunan  volume  edema  dimulai  pada  jam ke-2.  Hasil  persentase  perubahan  volume edema  dan  persentase  inhibisi  inflamasi edema mencit dapat dilihat pada Gambar 1.

## PEMBAHASAN
Metode Rat hind paw edema digunakan untuk  pengujian  aktivitas  antiinflamasi  pada mencit.  Prinsip  kerja  dari  metode  ini  adalah mengukur perubahan volume pembengkakan radang  buatan  pada  telapak  kaki  kiri  hewan uji  yang  diinduksi  karagenan  pada  sebelum dan sesudah diperikan perlakuan. Sederhana dan  mudah  dilakukan  terhadap  hewan  uji merupakan  keunggulan  yang  diberikan  oleh metode  ini.  Puasa  diterapkan  kepada  mencit sebelum diberikan perlakuan bertujuan meminimalkan pengaruh makanan terhadap
Potensi  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Bisbul  ( Diospyros discolor Willd)  Terhadap  Edema  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ) Terinduksi Karagenan
Gambar 1. (a) Hasil persentase perubahan volume edema dan (b) inhibisi inflamasi mencit jantan.
kandungan  bahan  pada  ekstrak  etanol  daun bisbul  yang  dapat  mempengaruhi  efek antiinflamasi yang ditimbulkan. Setiap kelompok perlakuan diinduksi dengan larutan karagenan  sebanyak  0,2  mL.  Kelebihan  dari penggunaan karagenan adalah tidak menimbulkan  kerusakan  jaringan  dan  bekas pada  kulit  yang  telah  diinduksi.  Selain  itu karagenan juga memiliki respon yang sensitif terhadap  obat  antiinflamasi  dibandingkan dengan  obat  antiiritan  yang  lain 12 .  Edema akan  terbentuk  dalam  tiga  fase  setelah diinduksi oleh karagenan. Pelepasan serotonin  dan  histamin  terjadi  pada  fase pertama.  Pelepasan  ini  terjadi  selama  90 menit.  Setelah  pelepasan  serotonin  dan histamin,  edema  akan  memasukki  fase kedua,  yaitu pelepasan bradikinin. Proses ini berlangsung  selama  kurang  lebih  2,5  jam setelah  induksi  dilakukan.  Setelah  3  jam terjadi  pelepasan  prostaglandin  yang  akan menjadi  fase  terakhir.  Volume  edema  akan bertambah  secara  maksimal  setelah  5  jam induksi 13 .
Berdasarkan hasil penelitian  yang diperoleh  terlihat  bahwa  pemberian  larutan Na-CMC pada kelompok kontrol negatif tidak terlalu  mempengaruhi  penurunan  persentase radang  pada  kaki  mencit.  Pada  kelompok kontrol  negatif  persentase  radang  yang
dihasilkan meningkat dan merupakan persentase  terbesar  dibandingkan  dengan kelompok  lainnya,  yaitu  sebesar  90%.  Na- CMC  digunakan  pada  penelitian  berfungsi sebagai pelarut obat.
Pada  kelompok  kontrol  positif  natrium diklofenak,  radang  meningkat  sampai  pada jam  kedua.  Setelah  itu  radang  akan mengalami  penurunan  sampai  pada  jam keenam.  Persentase  edema  pada  akhir pengamatan kelompok kontrol positif merupakan persentase terendah jika dibandingkan  dengan  kelompok  ekstrak etanol daun bisbul, yaitu 10%.
Pemberian  ekstrak  etanol  daun  bisbul pada  mencit  dengan  dosis  0,5;  1;  dan  1,5 gram/KgBB  menyebabkan penurunan rerata volume edema sampai jam keenam. Penurunan ini terjadi setelah terjadi peningkatan  volume  edema  setelah  2  jam diinduksi.  Ekstrak  etanol  daun  bisbul  ada dosis 0,5 gram/KgBB merupakan persentase terendah  kedua  setelah  kelompok  kontrol positif  dengan  persentase  edema  pada  akhir pengamatan rerata sebesar 20%, sedangkan pada  ekstrak  etanol  daun  bisbul  dosis  1 gram/KgBB  daun  1,5  gram/KgBB  pada  akhir pengamatan  menunjukan  persentase  yang sama, yaitu sebesar 30%.
a b
Potensi  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Bisbul  ( Diospyros discolor Willd)  Terhadap  Edema  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ) Terinduksi Karagenan
Aktivitas  antiinflamasi  dapat  dilihat  dari besarnya  persentase  inhibisi  edema  rerata pada  setiap  waktu  pengamatan.  Nilai  inhibisi adalah  nilai  yang  menunjukan  kemampuan obat  yang  diuji  untuk  menekan  edema  atau radang  pada  inflamasi.  Pada  kelompok kontrol negatif menghasilkan inhibisi sebesar 0%.  Hal  ini  dikarenakan  Na-CMC  tidak memiliki  aktivitas  inflamasi  sehingga  tidak dapat  mengurangi  volume  edema.  Na-CMC hanya  berfungsi  sebagai  pelarut  obat.  Oleh karena  itu  proses  penghilangan  mediator- mediator inflamasi dalam tubuh mencit hanya terjadi  secara  alamiah.  Sedangkan  pada kelompok kontrol positif menghasilkan inhibisi radang  sebesar  88,89%.  Natrium  diklofenak bekerja  dengan  menghambat  pembebasan mediator  peradangan  (serotonoin,  histamin, dan prostaglandin), dan migrasi sel ke tempat peradangan  serta  menekan  rasa  nyeri. Membran  lisosomal  juga  dapat  distabilkan oleh  natrium  diklofenak.  Pada  kelompok perlakuan  ekstrak  etanol  daun  bisbul  dosis 0,5 gram/KgBB menunjukan aktivitas antiinflamasi  sebesar  77,78%,  sedangkan pada  dosis  1  gram/KgBB  maupun  1,5 gram/KgBB memberikan aktivitas antiinflamasi dengan persentase inhibisi akhir yang  sama  dan  lebih  kecil  dibandingkan dengan  dosis  0,5  gram/KgBB,  yaitu  sebesar 66,67%.  Hasil  yang  didapat  pada  penelitian ini  tidak  berbeda  dengan  ekstrak  etil  asetat daun  bisbul  yang  telah  diteliti  sebelumnya, dimana ekstrak etil asetat dapat menghambat peradangan  pada  edema  tikus  sebesar 78,63% 3 .
Peningkatan dosis obat akan memberikan  respon  terhadap  peningkatan aktivitas  antiinflamasi.  Obat  dengan  dosis yang lebih tinggi akan menyebabkan pelepasan  histamin  secara  langsung  dari  sel mast . Hal  ini  akan  menimbulkan  sifat permeabilitas  pembuluh  darah  terhadap cairan plasma meningkat 14 .
Ekstrak  etanol  daun  bisbul  dosis  0,5 gram/KgBB lebih berpotensi dalam menghambat  edema,  hal  ini  terlihat  dari persentase  penghambatan  terbesar.  Hal  ini
dapat  diartikan  bahwa  dosis  0,5  gram/KgBB merupakan  dosis  yang  paling  efektif  jika dibandingkan  dengan  kedua  dosis  lainnya. Ekstrak  etanol  daun  bisbul  memiliki  potensi aktivitas  antiinflamsi.  Hal  ini disebabkan oleh kandungan metabolit sekunder berupa golongan  senyawa  flavonoid.  Flavonoid dapat menghambat kinerja enzim lipooksigenase.  Selain  itu  flavonoid  juga dapat  menghambat  kerja  metabolisme  asam arakidonat.  Metabolisme  asam  arakidonat akan menghasilkan prostaglandin. Prostaglandin  dan mediator inflamasi lainnya akan  mengalami  penurunan  dengan  adanya flavonoid. Penurunan mediator inflamasi akan menyebabkan  proses  proliferasi  radang terhambat 15 .
Data  yang  diperoleh  dianalisis  secara statistik, Analisis awal dilakukan uji Kolmogorov  Smirnov  untuk  melihat  distribusi normal  dari  data  persentase  penghambatan udem  telapak  kaki  mencit.  Hasil  analisis menunjukkan bahwa semua kelompok terdistribusi normal dan tidak berbeda secara nyata.  Selanjutnya  data  tersebut  dianalisis dengan  metode  pengujian  ANOVA one-way . Data yang dihasilkan menunjukan perbedaan yang  nyata  pada  pemberian  ekstrak  etanol daun  bisbul  terhadap  penurunan  persentase edema dan inhibisi telapak kaki mencit jantan terhadap  perlakuan  kontrol  negatif.  Untuk mengetahui kelompok yang berbeda dianalisis  lebih  lanjut  dengan  uji  jarak berganda  Duncan  (DMRT).  Hasil  uji  lanjut Duncan  pada  edema  menunjukan  bahwa pada  kontrol  positif  dan  ekstrak  etanol  daun bisbul  0,5  gram  Kg/BB  berada  di  dalam satu subset  yang  sama,  yaitu  subset  1,  yang artinya  pemberian  perlakuan  pada  kontrol positif  dan  ekstrak  etanol  daun  bisbul  0,5 gram  Kg/BB  memberikan  pengaruh  yang sama  terhadap  persen  edema  pada  mencit putih  jantan.  Sedangkan  kontrol  negatif berada  pada  subset  yang  berbeda,  yaitu subset 3,  yang artinya  pemberian  pemberian perlakuan kontrol negatif memberikan pengaruh yang berbeda terhadap persentase edema pada mencit putih jantan.
Potensi  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Bisbul  ( Diospyros discolor Willd)  Terhadap  Edema  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ) Terinduksi Karagenan

## KESIMPULAN
Simpulan  yang  didapat  dari  hasil penelitian  ini  adalah  ekstrak  etanol  daun bisbul  mempunyai  aktivitas  antiinflamasi terhadap  mencit  jantan  ( M.  Musculus )  yang diinduksi karagenan secara in vivo. Golongan senyawa  flavonoid, alkaloid, tannin, saponin, dan  triterpenoid/steroid  terkandung  di  dalam ekstrak  etanol  daun  bisbul.  Dosis  uji  ekstrak etanol daun bisbul 0,5 gram/KgBB mempunyai persentase inhibisi edema tertinggi, yaitu sebesar 77,78 % dibandingkan dengan  dosis  1  gram/KgBB  dan  1,5 gram/KgBB  yang  mempunyai  persentase akhir yang sama yaitu sebesar 66,67 %. Dan pada  jam  ke-5  menunjukkan  waktu  yang terbaik untuk penurunan edema.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Teima kasih penulis sampaikan kepada LPPM  dan  Laboratorium  STTIF  Bogor  yang telah mendukung atas terlaksananya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Pramitaningastuti  AS,  Anggraeny  EN. Uji  Efektivitas  Antiinflamasi  Ekstrak Etanol Daun Srikaya ( Annona squamosa .L)  terhadap  Edema  Kaki Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar.  J  Ilm Farm. 2017; 13(1) :8 –13.
2. Sriningsih,  Agung  EW.  Efek  Protektif Pemberian Ekstrak Etanol Herba Meniran (Phyllantus niruri L.) terhadap Aktivitas  dan  Kapasitas  Fagositosis Makrofag Peritoneum Tikus. Artocarpus  Media  Pharm  Indones. 2006; 6(2) :91 –6.
3. Ragasa  CY,  Rhyan  M,  Puno  A,
Sengson  MAP,  Shen C,  John  A,  et al. Bioactive  triterpenes  from  Diospyros blancoi. Nat Prod Res. 2009; 23(13) :1252 –8.
4. Agustina  R,  Indrawati  DT,  Masruhin MA.  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Salam ( Eugenia polyantha ) sebagai
Antiinflamasi Pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ).  J  Trop  Pharm  Chem. 2015; 3(2) :120 –3.
5. Semiawan  F,  Ahmad  I,  Masruhim  MA. Aktivitas  Antiinflamasi  Ekstrak  Daun Kerehau  ( Callicarpa  longifolia L.).  J Sains dan Kesehat. 2015; 1(1) :1 –4.
6. Rustam E, Atmasari I, Yanwirasti. Efek Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Kunyit (Curcuma  domestica  Val.)  Pada  Tikus Putih Jantan Galur Wistar. J Sains dan Teknol Farm. 2007; 12(2) :112 –5.
7. Widiyantoro A, Destiarti L, Kusharyanti I,  Supardi,  Halim  DG,  Niwick,  et  al. Aktivitas Antiinflamasi Senyawa Bioaktif  Dari  Kulit  Batang  Pauh  Kijang ( Irvingia  malayana  Oliv .  ex.  A.  Benn) Terhadap Tikus Putih (Rattus norvegicus) yang Diinduksi Karagenan. Kaunia. 2012; 8(2) :118 –26.
8. Ramadhani  N,  Sumiwi  SA.  Aktivitas Antiinflamasi Berbagai Tanaman Diduga Berasal Dari Flavonoid. Farmaka. 2016; 14(2) :111 –23. 9. Rinayanti A, Dewanti E, H MA. Uji Efek Antiinflamasi  Fraksi  Air  Daun  Mahkota Dewa  ( Phaleria  macrocarpa (Shecff.) Boerl  .)  terhadap  Tikus  Putih  (  Rattus norvegicus  L  .).  Pharm  Sci  Res. 2014; 1(2) :78 –85.
10. Narande  JM,  Wulur  A,  Yudistira  A.  Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Suji  (Dracaena  angustifolia  Roxb) Terhadap  Edema  Kaki  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar.  Pharmacon. 2013; 2(3) :14 –8.
11. Suryani  NC,  Permana  DGM,  Jambe AAGNA. Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap  Kandungan  Total  Flavonoid Dan  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Daun  Matoa  ( Pometia  pinnata ).  J  Ilmu dan Teknol Pangan. 2016; 5(1) :1 –10.
12. Wilches  I,  Tobar  V,  Penaherrera  E, Cuzco N, Jerves L, Heyden Y Vander, et  al.  Evaluation  of  anti-inflammatory activity  of  the  methanolic  extract  from Jungia  rugosa  leaves  in  rodents.  J Ethnopharmacol.2015; 173 :166 –71.
Potensi  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Bisbul  ( Diospyros discolor Willd)  Terhadap  Edema  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ) Terinduksi Karagenan
13. Morris  CJ.  Carrageenan-Induced  Paw Edema  in  the  Rat  and  Mouse.  In: WINYARD PG, Willoughby DA,
editors.  Methods  in  Molecular  Biology:
Inflammation  Protocols.  Totowa,  NJ, USA: Human Press; 2003. p. 115 –21. 14. Fitriyani  A,  Winarti  L,  Muslichah  S,
Nuri.  Uji  Antiinflamasi  Ekstrak  Metanol
Daun  Sirih  Merah  ( Piper  crocatum
Ruiz  &  Pav  )  Pada  Tikus  Putih.  Maj Obat Tradis. 2011; 16(1) :34 –42.
15. Nijveldt  RJ,  Nood  E  Van,  Hoorn  DEC Van,  Boelens  PG,  Norren  K  Van, Leeuwen  PA  Van.  Flavonoids:  a review  of  probable  mechanisms  of action and potential applications. Am J Clin Nutr. 2001; 74 :418 –25.