Efek Preventif Isolat Kasein Yoghurt Susu Kambing Terhadap Kadar Malondialdehida (MDA) Tikus Putih (Rattus Norvegicus) dan Histopatologi Lambung yang Dipapar 2,3,7,8- Tetrachloro-Dibenzo-P- Dioxin (TCDD)
The Preventive Effect of Isolate Casein Yoghurt Milk to Malondialdehyde (MDA) Level and Histopatology Picture of Gastric in ( Rattus norvegicus ) Exposed to

## 2,3,7,8-Tetrachlorinedibenzo-P-Dioxin (TCDD)
Muhammad Habibie Robbie 1* , Chanif Mahdi 2 , Ajeng Erika Prihastuti Haskito 1
1 Program Studi Kedokteran Hewan, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Brawijaya
2 Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya
*email: hbbrobbie@gmail.com

## ABSTRAK
Dioksin  merupakan  senyawa  toksik  yang  termasuk  dalam  senyawa organoklorin  bersifat  sangat  reaktif  dan  menghasilkan  radikal  bebas  yang  dapat merusak sel lambung. 2,3,7,8-Tetrachlorinedibenzo-p-dioksin (TCDD) merupakan jenis dioksin yang memiliki toksisitas paling tinggi. Penelitian ini bertujuan mengetahui efek  preventif  pemberian  yoghurt  susu  kambing  terhadap  paparan  dioksin  yang diamati  kadar  malondialdehida  (MDA)  dan  gambaran  histopatologi  lambung. Penelitian  bersifat  eksperimental  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Tikus putih ( Rattus norvegicus ) dibagi 6 kelompok perlakuan yaitu kelompok normal, kontrol kasein, kontrol positif, perlakuan 1, perlakuan 2, dan perlakuan 3. Kadar MDA lambung    diukur  menggunakan  metode  uji  Thiobarbituric  Acid  (TBA)  dengan pengukuran  spektrofotometri  UV-Vis  panjang  gelombang  530  nm  dan  gambaran histopatologi lambung  menggunakan pewarnaan Hematoksilin Eosin (HE) diamati berupa  kerusakan  sel  mukosa  lambung.  Kadar  MDA  lambung  dianalisis menggunakan uji statistik one way ANOVA, α =5% dan analisis histopatologi lambung diolah secara deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan kasein yoghurt susu kambing dengan  dosis  600  dan  900  mg/kgBB  merupakan  dosis  terbaik  dalam  mencegah kenaikan kadar MDA lambung dari tikus putih ( Rattus norvegicus ) terpapar TCDD secara signifikan (p<0,01), dan dosis 900mg/kgBB mencegah terjadi erosi sel mukosa lambung.  Kesimpulan  penelitian  yaitu  pemberian  kasein  yoghurt  susu  kambing mampu mencegah kenaikan kadar MDA dan terjadi erosi sel mukosa lambung akibat TCDD.
Kata  kunci:  Dioksin,  Kasein  yoghurt  susu  kambing,  Lambung,  MDA,  Gambaran histopatologi

## ABSTRACT
Dioxins  are  toxic  compounds  belonging  to  organochlorine  compounds  are highly  reactive  and  produce  free  radicals  that  can  damage  stomach  cells.  2,3,7,8- Tetrachlorinedibenzo-p-dioxin (TCDD) is the type of dioxin that has the highest toxicity. This study aims to determine the preventive effect of goat milk yoghurt on exposure to  dioxin  observed  levels  of malondialdehyde (MDA)  and  gastric  histopathology. Experimental research using Completely Randomized Design (RAL). The white rats ( Rattus norvegicus ) were divided into 6 groups treatment, such as the normal group, casein  control,  positive  control,  treatment  1,  treatment  2,  and  treatment  3.  Gastric MDA levels were measured using the Thiobarbituric Acid (TBA) assay method with 530  nm  wavelength  UV-Vis  spectrophotometric  measurement  and  gastric histopathology using Hematoxylin Eosin (HE) staining observed in the form of gastric mucosal  cell  damage.  Gastric  MDA  levels  were  analyzed  using  one  way  ANOVA statistical test, α = 5% and gastric histopathology analysis was descriptively processed. The results showed that goat milk yoghurt with dose of 600 and 900 mg / kgBW was the best dose in preventing the increase of MDA level of gastric from white rat ( Rattus norvegicus ) exposed TCDD significantly (p <0,01), and dose 900mg / kgBB prevented erosion of gastric mucosal cells. The conclusion of this research is giving goat milk goat yoghurt able to prevent the increase of MDA level and erosion of gastric mucosal cells caused by TCDD.
Keywords : Dioxin, Casein goat milk yoghurt, Gastric, MDA, Gastric histopathology

## PENDAHULUAN
Dioksin merupakan pencemar udara yang dapat timbul dikarenakan berbagai kegiatan seperti hasil samping industri atau pembakaran mengandung klor (UNEP, 2003). 2,3,7,8- tetrachlorinedibenzo-p-dioksin (TCDD)
merupakan  jenis  dioksin  yang  paling toksik diantara jenis dioksin yang lain TCDD dapat mengakibatkan berbagai  gangguan  kesehatan  karena sifat  yang  persisten  dan  dapat terbioakumulasi  dalam  lemak  tubuh, seperti  gangguan  jantung.  TCDD merupakan zat kimia yang memproduksi  oksigen  radikal  dalam inti sel. Radikal bebas sebagai senyawa reaktif  yang  dapat  merusak  sel  pada tubuh.  Jika  tubuh  tidak  mampu
menetralisir  radikal  bebas  yang  ada, maka  radikal-radikal  bebas  tersebut dapat mengganggu sel jaringan ataupun organ (Price dan Wilson, 2006).
Sel  jaringan  yang  dapat  terganggu adalah  lambung.    Malondialdehida (MDA) merupakan salah satu indikator untuk  mengukur  stress  oksidatif  yang disebabkan  karena  terdapat  akumulasi radikal bebas (Arkhaesi, 2008). Semakin tinggi  kadar  radikal  bebas  pada  suatu organ maka semakin tinggi kadar MDA organ  tersebut  (Luczaj  dan  Elzbieta,
2003).
Yoghurt  merupakan  produk  yang dihasilkan dari susu yang difermentasikan  dengan starter Bakteri Asam  Laktat  (BAL)  (Shah,  2003). Komponen  protein  utama  dalam  susu
adalah kasein yang merupakan sumber peptida  dan  memiliki  pengaruh kesehatan  sebagai  antioksidan.  Susu fermentasi  (yoghurt)  terbukti  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  lebih  tinggi dibandingkan susu murni (Liu, 2005).
Penggunaan  kasein  yoghurt  susu kambing  diharapkan  mampu  menjadi alternatif untuk mencegah peningkatan maupun  mengurangi  jumlah  radikal bebas akibat paparan TCDD.

## METODE

## 1.1 Bahan Kimia
Preventif  diberikan  berupa  kasein yoghurt susu kambing, yang dibuat dari susu  kambing  Peranakan  Etawa  (PE) segar dari Surabaya Valenta Goat Milk dengan starter yoghurt  ( Yógourmet Yoghurt  Starter,  LYO-SAN.  INC  500 Aéroparc, C. P. 598, Lachute, QC.Canada, J8H  4G4) ,  yang  mengandung  bakteri
Lactobacillus
bulgaricus,
Streptococcusthermophilus, dan Lactobacillus  acidophilus. Induksi  TCDD sebagai  induktor  toksik  jantung digunakan 2,3,7,8– tetrachloro-dibenzo-p- dioxin ( 2,3,7,8-TCDD  Sigma  48599 ). Pemberian  TCDD  dilarutkan  dengan minyak jagung setiap 100 ng/ml TCDD dalam 100 ml minyak jagung.
1.2 Pembuatan  kasein  yoghurt  susu kambing
Yoghurt  susu  kambing  disentrifus dengan kecepatan 12000rpm selama 10 menit  pada  suhu  5 0 C  dan  disaring menggunakan  kertas  saring  untuk memisahkan  kasein  dengan water soluble extract (WSE) . Hasil penyaringan
yang  dihasilkan  di freeze  dried dan disimpan  pada  suhu  -20 0 C,  proses tersebut untuk menjaga kestabilan pH.

## 1.3 Hewan coba
Hewan coba yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih ( Rattus norvegicus )  strain Wistar ,  jantan, berumur  8-12  minggu  dengan  berat badan 150-250 gram sebanyak 24 ekor. Hewan  coba  diadaptasikan  selama tujuh hari untuk menyesuaikan dengan kondisi di laboratorium.
1.4 Rancangan penelitian Penelitian  ini  dilakukan  bersifat eksperimental menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Hewan  coba  tikus  putih  ( Rattus norvegicus) dibagi menjadi 6 kelompok yang terdiri dari kontrol negatif, kontrol kasein  (kasein  yoghurt  susu  kambing dosis  600  mg/kg  BB),  kontrol  positif (TCDD dosis 100 ng/kg BB), perlakuan 1  (kasein  yoghurt  susu  kambing  300 mg/kg  BB  dan  TCDD  100  ng/kg  BB), perlakuan  2  (kasein  yoghurt  susu kambing 600 mg/kg BB dan TCDD 100 ng/kg  BB)  dan  perlakuan  3  (kasein yoghurt  susu  kambing  900  mg/kg  BB dan  TCDD  100  ng/kg  BB).  Volume kasein  yoghurt  susu  kambing  dan TCDD yang masuk ke setiap tikus putih ( Rattus norvegicus)  sebanyak  1  ml.
Hewan  coba  dieutanasia  dengan  cara dislokasi  leher,  kemudian  dibedah dengan  membuat  sayatan  pada  bagian abdomen tepat pada linea alba dengan membuka  kulit  dan  fascia.  Lambung diperoleh  dengan  mengeluarkan  isi
abdomen  terlebih  dahulu  dan  dicuci dengan NaCl fisiologis 0,9%. Lambung dipotong  menjadi  2  bagian.  Bagian pertama di bungkus dengan aluminium foil, dicelupkan  kedalam  nitrogen  cair selama  10  detik,  kemudian  disimpan dalam lemari es pada suhu 2 0 C sebagai bahan untuk pemeriksaan MDA. Bagian kedua dimasukkan ke pot organ berisi formaldehide untuk pemeriksaan histopatologi lambung.
1.5 Analisa data
Pengukuran  kadar  MDA  dengan metode  TBA  menggunakan  lambung yang di potong kecil-kecil dan digerus. Dihomogenisasi  dengan  mensentrifus pada  kecepatan  1000rpm  selama  10 menit.  Supernatan  yang  dihasilkan diukur
absorbansi
dengan spektofotometer  pada λ =532  nm.  Data yang  diperoleh  dari  hasil  perlakukan dianalisa dengan menggunakan Microsoft Office Excel dan SPSS versi 22 untuk Windows dengan  analisis  ragam one  way  Analysis  of  Variance (ANOVA) dan uji lanjutan Beda Nyata Jujur (BNJ) α = 5%. Histopatologi lambung dengan metode pewarnaan Hematoksilin-Eosin (HE) diamati erosi sel mukosa lambung dengan menggunakan mikroskop Nikon  H600L,  camera  DS  Fi2  300 megapixel, pembesaran 400x.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  efek  preventif  pemberian kasein yoghurt susu kambing terhadap kadar  MDA  lambung  tikus  putih ( Rattus norvegicus )  yang dipapar 2,3,7,8- tetrachlorinedibenzo-p-dioksin (TCDD) menunjukkan  perbedaan  yang  nyata
dari masing-masing kelompok perlakuan  yang  dapat  dilihat  pada Tabel  1 .  Hasil  pengujian  kadar  MDA dengan analisa statistika menggunakan uji one  way ANOVA  yang  kemudian dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Jujur atau Tukey dengan tingkat kepercayaan 95%.  Rata-rata  nilai  kadar  MDA lambung tikus putih ( Rattus novergicus ) kelompok perlakuan dapat dilihat pada Tabel 1 .
Tabel 1. Rata-rata Kadar MDA
Lambung Kel. Rata-rata kadar MDA(ng/ml) K (–) 1644,50±89,09 a KK 1588,38±76,63 a K (+) 1928,38±116,10 c P (1) 1857,75±97,01 bc P (2) 1715,13±77,45 ab P (3) 1685,25±80,35 ab
Keterangan:  Nilai  kadar  MDA  dengan notasi  berbeda  menunjukkan  perbedaan yang  nyata  (p<0,05)  antara  kelompok perlakuan.
Kelompok  K(-)  berbeda  nyata (p<0,05)  dengan  kelompok  K  (+)  dan kelompok  P  (1),  namun  tidak  berbeda nyata dengan kelompok P (2) dan P (3), dan  bernotasi  sama  dengan  kelompok KK.  Nilai  kelompok  kontrol  negatif merupakan  standar  nilai  kadar  MDA tikus  putih  ( Rattus  novergicus )  dalam keadaan  normal  yang  dimana  tikus tidak diberikan TCDD. Perbedaan dari kelompok K(-) dan KK, yaitu pada KK diberikan preventif kasein yoghurt susu kambing  dengan  dosis  600mg/kg  BB, sehingga  diharapkan  terdapat  efek perubahan  kadar  MDA  dari  preventif yang diberikan. Kelompok KK berbeda
nyata  dengan  kelompok  K  (+)  dan kelompok  P  (1),  tetapi  tidak  berbeda nyata dengan kelompok P (2) dan P (3), dan  bernotasi  sama  dengan  kelompok K(-).  Kadar  MDA  yang  ditunjukkan pada  hasil  pemeriksaan  membuktikan bahwa dalam keadaan tubuh tikus yang sehat  masih  terdapat  kandungan radikal  bebas  yang  didukung  dari pernyataan Guyton & Hall (1996) yaitu, konsekuensi  dari  proses  metabolisme tersebut  sistem  biokimiawi  (oksidasi biologi) dalam tubuh mampu menghasilkan  radikal  bebas  sebanyak 2.5% dari total kebutuhan oksigen atau sebanyak 3.4 kg/24 jam.
Pada kelompok K (+) berbeda nyata dengan  kelompok  K(-),  kelompok kontrol kasein, kelompok P (2) dan P (3), namun  tidak  berbeda  nyata  dengan kelompok P (1). Menunjukkan paparan TCDD akan memicu terbentuk Reactive Oxygen  Species (ROS)    sehingga menyebabkan  stress  oksidatif  pada lambung  yang  dapat  meningkatkan kadar MDA (Doi et. al., 2013).
Pada kelompok P (1) berbeda nyata dengan  kelompok  K(-)  dan  KK, sedangkan tidak berbeda nyata dengan kelompok K (+), kelompok P (2) dan P (3). Berdasarkan data tersebut, menunjukkan  kasein  yoghurt  susu kambing  berperan  sebagai  antioksidan yang  mencegah  kenaikan  kadar  MDA pada  lambung  walaupun  pada  kadar preventif 300 mg/kgBB belum menunjukkan  rata-rata  kadar  MDA yang  mendekati  kadar  MDA  pada kelompok kontrol negatif (A).
Kelompok P (2) tidak berbeda nyata dengan  kelompok  KK,  kelompok  K(-), dan  kelompok  P  (1),  namun  berbeda nyata  dengan  kelompok  K  (+),  dan memiliki  notasi  yang  sama  dengan kelompok  P  (3).  Pada  kelompok  P  (3) berbeda nyata dengan kelompok K (+), tidak  berbeda  nyata  dengan  kelompok K(-) dan kelompok KK, dan mempunyai notasi  yang  sama  dengan  kelompok  P (2). Berdasarkan hasil uji Tukey rata-rata kelompok perlakuan 2 dengan kelompok  perlakuan  3  memiliki  notasi yang  sama  dengan  kelompok  kontrol negatif.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kelompok  perlakuan  dengan  terapi kasein  yoghurt  600  mg/kgBB  (E)  dan 900  mg/kgBB  (F)  sama-sama  memiliki efek  penurunan  kadar  MDA  organ lambung yang sama.
Kelompok perlakuan dengan terapi kasein  yoghurt  susu  kambing  600 mg/kgBB  (E)  dan  900  mg/kgBB  (F) menunjukkan  penurunan  kadar  MDA organ  lambung  dikarenakan  yoghurt susu  kambing  mengandung  peptida bioaktif yang bekerja sebagai antioksidan melalui proses penghambatan peroksidasi lipid dengan scavenger (perangkap)  radikal bebas. Hal ini sesuai dengan pernyataan Korhonen  &  Pihlanto  (2006),  bahwa peptida bioaktif yoghurt susu kambing dapat menurunkan kadar MDA melalui penghambatan peroksidasi lipid secara enzimatik  dan  nonenzimatik.  Radikal superoksida  ditangkap  oleh  peptida bioaktif  kasein  yoghurt  susu  kambing dan akan mencegah        kejadian inisiasi pembentukan radikal lipid yang bersifat
tidak  stabil  karena  kehilangan  satu atom  hidrogen  (H)  dari  molekul  lipid. Selain  itu,  dapat  menghambat  transfer elektron  molekul  oksigen  pada  radikal peroksil dan mencegah proses propagansi  sehingga  radikal  bebas tidak  akan  bereaksi  dengan  oksigen (Kullisaar et. al., 2003).
Hasil histopatologi lambung masing-masing  kelompok  perlakuan menunjukkan  perbedaan  kerusakan pada  sel  mukosa  lambung,  nekrosis piknotik,  infiltrasi  sel  neutrofil,  dan jumlah sel chief.
Keterangan :
(   ) erosi epitel mukosa lambung;
(   ) infiltrasi sel neutrofil;
(   ) nekrosis piknotik;
(   ) sel chief Gambar preparat lambung kelompok  kontrol  negatif  (tikus  sehat) ( A ) menunjukkan pada bagian mukosa terlihat adanya epitel kolumnar simplek dengan  sel  parietal  dan  sel  chief  yang masih  tertata  dan  berjajar  rapi  dengan bentuk silindris simplek. Hal ini sesuai dengan pendapat Puspitasari (2008), sel chief  bersifat  basofilik  karena  banyak mengandung mitokondria dan granula untuk memproduksi enzim pepsinogen,  sedangkan  sel  parietal bersifat  asidofilik  karena  sel  ini memproduksi HCL atau asam
lambung.  Morfologi  sel  parietal  yang berbentuk bulat telur dan besar adalah normal. Terlihat juga masih adanya sel neutrofil  dalam  jumlah  sedikit  yang masih normal karena neutrofil memiliki peran untuk melawan agen-agen asing yang bersifat patogen.
Berbeda dengan gambaran
histopatologi  pada  kelompok  kontrol positif ( C ) yang menunjukkan kerusakan  sel  yang  berat.  Senyawa TCDD dapat meningkatkan kadar ROS yang  terdapat  pada  lambung.  Melalui perantara ROS, TCDD akan menyebabkan  peroksidasi  lipid  pada membran  sel  dan  akan  membentuk radikal  lipid.  Radikal  lipid  yang terbentuk  akan  berikatan  dengan
oksigen dan membentuk rantai radikal bebas  sehingga  mengakibatkan  stress oksidatif. Induksi TCDD menyebabkan stress  oksidatif  dimana  suatu  kondisi ketidakseimbangan antara radikal bebas  dan  antioksidan,  merupakan mekanisme etiologis yang penting dari banyak  penyakit  (Ciftci et.  al., 2011; Yoshida and Ogawa,  2000).  Akibat adanya stress oksidatif dapat mengarah pada  adanya  kerusakan  pada  mukosa lambung. Pada gambaran histopatologi terlihat  adanya  erosi  pada  epitel  yang disertai  infiltrasi  sel  radang  (neutrofil) jika  dibandingkan  dengan  kontrol negatif. Erosi yang terjadi pada mukosa lambung  sebagai  efek  dari  adanya radikal  bebas  yang  menstimulasi  sel darah  putih  menuju  sel  mukosa lambung  yang  terlihat  banyak  pada gambaran histopatologi. Sel darah putih akan  menghasilkan  H 2 O 2 untuk membunuh  beberapa  jenis  bakteri  dan jamur  serta  untuk  pertumbuhan  sel, namun  ia  tidak  menyerang  sasaran spesifik,  sehingga  ia  juga  akan menyerang  asam  lemak  tidak  jenuh ganda  dari  membran  sel,  organel  sel, atau DNA, sehingga dapat menyebabkan  kerusakan  struktur  dan fungsi  sel  (Winarti,  2007).  Terlihat adanya  infiltrasi  sel  radang  yang melibatkan sel inflamasi seperti neutrofil,  limfosit,  monosit,  dan makrofag,  namun  sel-sel  radang  yang mendominasi adalah neutrofil.
Neutrofil adalah jenis sel leukosit yang  paling  banyak  dalam  bagian  sel darah  putih  yaitu  50-70%  diantara  sel leukosit  yang  lain.  Terdapat  2  macam
neutrofil  yaitu  neutrofil  batang  dan (Stab) dan neutrofil segmen (Polimorfonuklear)  (Kiswari,  2014). Perbedaan dari keduanya yaitu neutrofil  batang  merupakan  bentuk muda dari neutrofil segmen yang sering disebut  sebagai  neutrofil  tapal  kuda yang  mempunyai  inti  bentuk  tapal kuda. Seiring dengan proses terjadinya pematangan,  bentuk  intinya  akan bersegmen  dan  akan  menjadi  neutrofil bersegmen.  Menurut  Riswanto  (2013), sel  itu  mempunyai  sitoplasma  luas berwarna pink pucat dan granula halus berwarna  ungu.  Neutrofil  berfungsi sebagai garis pertahanan tubuh terhadap  zat  asing  terutama  terhadap bakteri. Sirkulasi neutrofil dalam darah yaitu  sekitar  10  jam  dan  dapat  hidup selama 1-4 hari pada saat berada dalam jaringan ekstravaskuler (Kiswari, 2014). Menurut  Fournier  (2012),  neutrofil bertanggung  jawab  dalam  proses penarikan  sel-sel  inflamasi  lainnya untuk melokalisir terjadinya kerusakan dengan  melepaskan  sitokin  pro- inflamasi,  selain  itu  neutrofil  juga berperan  dalam  perbaikan  mukosa. Satu  jam  setelah  terjadi  luka  pada jaringan,  neutrofil  akan  tertarik  dan menjadi  sel  dominan  pada  jaringan yang  luka  selama  2  hari  pertama  dan jumlahnya  akan  meningkat  pada  hari kedua.  Neutrofil  akan  menfagositosis sel yang rusak dan membunuh bakteri, selain itu neutrofil akan mengeluarkan protease untuk memecah jaringan yang rusak,  selanjutnya  neutrofil  akan mengalami  apopotosis  (kematian  sel
terprogram)  dan  di  degradasi  oleh makrofag (Martin and Leibovich, 2005).
Kerusakan  sel  mukosa  lambung oleh TCDD juga mengakibatkan adanya nekrosis. Nekrosis adalah kematian sel yang  disebabkan  keadaan  patologik dan  bersifat  irrevesibel  (Tambayong, 2000).  Nekrosis  yang  terlihat  adalah nekrosis  piknotik  dimana  inti  sel tampak berwarna gelap dan mengkerut karena DNA berkorelasi menjadi massa yang  padat.  Menurut  Hidayat  dkk. (2013),  terjadinya  paparan  zat  yang dapat  menimbulkan  radikal  bebas secara terus menerus akan mengakibatkan nekrosis dan kerusakan sel.
Gambaran  histopatologi  pada kelompok  perlakuan  1  ( D )  dengan pemberian  terapi  kasein  yoghurt  300 mg/kgBB  tidak  berbeda  jauh  dengan gambaran kelompok kontrol positif ( C ) hanya terlihat berkurangnya erosi pada epitel  sel  mukosa  lambung  dan  masih terlihat  adanya  nekrosis  piknotik walaupun  tidak  sebanyak  kelompok kontrol positif. Pada kelompok perlakuan  2  ( E )  dengan  terapi  kasein 600  mg/kgBB  menunjukkan  adanya perbaikan dari erosi epitel, tidak adanya nekrosis piknotik, dan disertai berkurangnya sel radang bila dibandingkan dengan kelompok perlakuan 1. Pada kelompok perlakuan 3 ( F ) dengan dosis terapi kasein yoghurt 900  mg/kgBB,  nekrosis  piknotik  dan erosi  epitel  sudah  jauh  berkurang menunjukkan hasil yang lebih baik bila dibandingkan dengan kelompok perlakuan  3  dan  menunjukkan  hasil
sama persis dengan lambung tikus yang sehat.  Berdasarkan  hasil  pengamatan pada  perlakuan  terapi  kasein  yoghurt 900  mg/kgBB  merupakan  dosis  yang paling  efektif  dalam  menurunkan  efek yang ditimbulkan akibat TCDD.
Gambaran  histopatologi  pada kelompok  kontrol  kasein  ( B )  dengan terapi  kasein  yoghurt  600  mg/kgBB, menunjukkan hasil yang sama baiknya dengan  kelompok  kontrol  negatif. Tujuan  dilakukan  uji  kontrol  kasein untuk  melihat  efek  yang  hanya diberikan  kasein  saja.  Telah  terbukti bahwa  kasein  yoghurt  susu  kambing berperan  sebagai  antiinflamasi  dan antioksidan.  Kandungan  didalamnya mengandung  peptida  bioaktif  dan bakteri  asam  laktat  yang  berperan dalam mengeliminasi mikroba patogen (Pessione  and  Simona,  2016).  Kasein susu  kambing  yang  bertindak  sebagai antioksidan mengubah radikal peroksil (hasil peroksidasi lipid) menjadi kurang reaktif  dan  memutus  reaksi  radikal bebas yang berantai (Jetawattana, 2005).

## KESIMPULAN
Pemberian  terapi  preventif  kasein yoghurt  susu  kambing  dengan  dosis 600mg/kg  BB  dan  900mg/kg  BB memiliki  pengaruh  yang  sama  dan merupakan  dosis  terbaik  karena  dapat mencegah  peningkatan  kadar  MDA lambung tikus putih ( Rattus norvegicus ) yang dipapar TCDD dengan penurunan kadar  MDA  mendekati  kadar  MDA kelompok  normal  (K-).  Dan  dosis 900mg/kg BB merupakan dosis terbaik yang  mampu  mencegah  kerusakan
fundus  lambung  tikus  putih  ( Rattus norvegicus ) yang dipapar TCDD.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih kepada
Laboratorium Kesehatan Masyarakat Veteriner FKH UB, Laboratorium Biosains UB, Laboratorium FAAL FK UB,
Laboratorium Patologi Anatomi FK UB dan Laboratorium Pengujian Mutu dan Keamanan  Pangan  FTP  UB  yang  telah membantu dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Arkhaesi, N. 2008. Kadar Malondialdehida  (MDA)  Serum Sebagai  Indikator  Prognosis Keluaran Pada Sepsis Neonatorum  [Tesis].  Program Pascasarjana Magister Ilmu Biomedik dan Program Pendidikan  Dokter  Spesialis-I Ilmu Kesehatan Anak. Universitas Diponegoro. Semarang.
Ciftci,  O.,  Murat,  O.  D.  and  Timurkan,
N.  2012. Protective  effects  of protocatechuic  acid  on  TCDD- induced
oxidative and histopathological  damage  in  the heart tissue of rats . Toxicology and Industrial  Health  29(9)  806-811. Department  of  Pharmaceutical Toxicology, University of Inonu,
Turkey.
Doi,  H.,  T.  Baba,  C.  Tohyama  and  K.
Nohara. 2013. Functional Activation  of  Arylhydrocarbon recepror (Ahr) in primary T-cell by 2,3,7,8 tetrachlorodibenzo-p-dioxin .
Guyton & Hall. Volume Paru. In: Fisiologi Kedokteran . Ed 9th Penerbit Buku
Kedokteran  EGC  Jakarta  1996; 604 .
Hidayat, A., Christijanti, W.., Marianti, A.  2013.  Pengaruh  Vitamin  E terhadap Kadar SGPT dan SGOT Tikus  Putih  Galur  Wistar  yang Dipapar  Timbal. Unnes  Journal Pangan  dan  Argoindustri .  3(4)  :
1412-1422.
Jetawattana,  S.  2005.  Malondialdehida (MDA),  A  Lipid  Oxidation Product  :  Free  Radicals  In Biology  and  Medicine. Journal Biology Mediciene . Department of Radiation Oncology Free Radical and  Radiation  Biology.  The University  of  Iowa  for  77:222, Spring 2005 Iowa City, IA 52242- 1181.
Korhonen,  H  and  Pihlanto,  A.  2006. Bioactive Peptides: Production And Functionality . International  dairy journal 16: 945-960.
Kullisaar,  T.,  Songisepp,  E.,  Mikelsaar, M., Zilmer, K., Vihalemm, T. and Zilmer,  M.  2003.  Antioxidative Probiotic  Fermented  Goats  Milk Decreases Oxidative-Stress- Mediated Atherogenicity in
Human Subjects. British Journal of Nutrition 90:449-456.
Liu, J. R., et al . Antioxidative Activities Of Kefir . Asian-Aust J Anim Sci 2005;
Vol 18, No 4: 567-573.
Luczaj,  W.  and  Elzbieta,  S.  2003. DNA Damage Caused by Lipid Peroxidation  Products .  Cellular and  Molecular  Biologi  Letter  8: 391-413.
Martin,  P.,  and  Leibovich,  S.  J.  2005 . Inflammatory  cells  during  wound repair:  the  good,  the  bad,  and  the
ugly .  Trends  in  Cells  Biology  15 (11): 599-607.
Pessione  E.,  and  Simona,  C.  2016. Bioactive  molecules  released  in food  by  Lactic  Acid  Bacteria  : Encrypted Peptides and Biogenic Amines. Journal  Frontiers  in Microbiology .
Doi
:
10.3389/fmicb.2016.D0876.
Price,  S.  A.  dan  Wilson,  L.  M.  2006.
Patofisiologi. Ed 6 . Jakarta: EGC.
Puspitasari,  D.  A.  2008. Gambaran Histopatologi Lambung Tikus Putih (Rattus novergicus) Akibat
Pemberian  Asam  Asetil  Salisilat .
Institut Pertanian Bogor.
Shah, N., Caballero, B., Trugo, L. C., and Finlas,  P.  M.  2003.Yoghurt:  The Product  and  its  Manufacture. In Encyclopedia  of  Food  Sciences  and Nutrition  Academic  Press :  New York, U.S.A. pp 6252-6259.
Tambayong,  J.  2000. Patofisiologi  untuk Keperawatan .  Buku  Kedokteran EGC. Jakarta.
UNEP.  (2003). Standardized  toolkit  for identification  and  quantification  of dioxin and furan releases. Geneva- Switzerland:  Inter-Organization Programme  for  the  Sound Management of Chemicals. Diambil  2  September  2004,  dari http://www.pops.int/documen ts/guidance/Toolkit_2003.pdf.
Yoshida,  R.,  and  Y.  Ogawa.  2000. Oxidative Stress Induced by 2,3,7,8- TCDD: An Application of Oxidative Stress  Markers  to  Cancer  Risk Assessment  of  Dioxins .  Indust. Health. Journal. 38: 5-14.