## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH
KASTURI (Mangifera casturi Kosterm.)
Rahmi Muthia * , Helmina Wati Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Borneo Lestari
Email: rahmimuthia@stikesborneolestari.ac.id

## ABSTRAK
Kasturi ( Mangifera casturi Kosterm) merupakan tanaman khas Kalimantan Selatan  yang  memiliki  kandungan  senyawa  terpenoid,  steroid,  dan  fenolik. Penelitian ini bertujuan mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit buah kasturi.  Kulit  buah  kasturi  diekstraksi  secara  sinambung  menggunakan  sokhlet dengan  pelarut  etanol.  Uji  kualitatif  aktivitas  antioksidan  dengan  KLT menggunakan  fase  gerak  n-heksana  :  etil  asetat  (4  :  6).  Uji  kuantitatif  aktivitas antioksidan menggunakan metode peredaman radikal bebas DPPH (2,2-difenil-1- pikrilhidrazil). Hasil penelitian dari uji kualitatif ekstrak etanol kulit buah kasturi menunjukkan terdapat senyawa antioksidan. Uji kuantitatif dengan konsentrasi 50 μg/mL  menunjukkan  nilai  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  kulit  buah  kasturi dan kuersetin secara berturut-turut sebesar 97,87% dan 97,98%.  Nilai  IC 50 pada kulit buah tumbuhan kasturi dan kuersetin secara berturut-turut sebesar 9,82 μg/mL dan 4,17 μg/mL. Kulit buah kasturi memiliki aktivitas antioksidan yang kuat.
Kata kunci: kulit buah kasturi, ekstrak etanol, antioksidan, DPPH

## ABSTRACT
Mangifera casturi Kosterm is a typical plant of South Borneo that contains terpenoids,  steroids,  and  phenolics  compound.  The  aim  of  this  research  was  to determine  the  antioxidant  activity  of M.casturi rind.  The M.casturi rind  was extracted  continuously  used  soxhletion  method  with  ethanol.  Qualitative  test  of antioxidant activity in  thin layer chomatography (TLC) with the mobile phase n- hexane  :  ethyl  acetate  (4  :  6).  Quantitative  assay  using  free  radical  scavenging (DPPH). The results obtained from the qualitative test showed ethanol extract from M.casturi rind had antioxidant activity. Quantitative assay showed ethanol extract from M.casturi rind and quercetin with a concentration 50 μg/mL was  97.87% and 97.98%  respectively.  The  IC 50 value  from M.casturi rind  and  quercetin  was  9.82 μg/mL and 4.17 μg/mL respectively. M.casturi rind have potent antioxidant activity.
Keywords: Mangifera casturi rind, ethanol extract, antioxidant, DPPH

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  adalah  suatu atom  atau  molekul  yang  memiliki elektron  tidak  berpasangan  (Sarma dkk.,  2010).  Antioksidan  merupakan senyawa  yang  menghambat  atau menunda proses oksidasi dari radikal bebas  (Mandal  dkk.,  2009).  Kasturi merupakan salah satu dari 31 spesies mangga  yang  bisa  ditemukan  di Kalimantan  (Ayalasilva  dkk.,  2013).
Tumbuhan kasturi ( Mangifera casturi
Kosterm . ) mengandung senyawa
golongan  terpenoid  dan  fenolik
(Fakhrudin,  2013).  Senyawa  fenolik
dan flavonoid tersebut yang
bertanggung jawab terhadap aktivitas
antioksidan  (Karadeniz  dkk.,  2005).
Oleh karena itu, tujuan dari penelitian
ini adalah mengetahui daya antioksidan  ekstrak etanol  kulit buah tumbuhan  kasturi  menggunakan  uji kualitatif  dan  kuantitatif  dengan metode  peredaman  radikal  bebas DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).

## METODE PENELITIAN
A. Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  yaitu lemari  pengering  simplisia,  neraca analitik, seperangkat alat sokhlet, alat
gelas, rotavapor (IKA25) , spatula, cawan  penguap,  kuvet,  lampu  UV (Camag),  spektrofotometer  UV-sinar tampak (OPTIMA SP-3000 nano).
Bahan-bahan  yang  digunakan adalah simplisia kulit buah tumbuhan kasturi, aquadest, n-heksana (Merck), etil  asetat  (Merck),  etanol  (Merck), methanol (Merck), kertas saring, 2,2- difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH)
(Sigma  Aldrich),  kuersetin  (Sigma aldrich).

## B. Prosedur Penelitian
1. Pengambilan sampel
Sampel  penelitian  adalah  kulit buah  kasturi  yang  diperoleh  dari Kecamatan Astambul Kabupaten Banjar Kalimantan Selatan.

## 2. Pembuatan simplisia
Kulit  buah  kasturi  disortasi basah,  kemudian  dicuci  dengan  air mengalir untuk menghilangkan kotoran  menempel,  lalu  ditiriskan, selanjutnya dipotong kecil-kecil, dikeringkan  di  lemari  pengering dengan suhu 50 - 60°C selama 3 – 5 hari, dan kemudian disortasi kering.
3. Pembuatan ekstrak etanol kulit buah kasturi
Simplisia kemudian diekstraksi
secara sinambung menggunakan
sokhlet dengan pelarut etanol, setelah itu diuapkan menggunakan rotavapor
sampai diperoleh ekstrak etanol.
4. Penapisan fitokimia
a. Uji alkaloid
Ekstrak diambil 2 g, ditambahkan 1  mL  kloroform  dan  5  mL ammonia  10  %,  ditambahkan  10 tetes  asam  sulfat  2  N  untuk memperjelas  terbentuknya  2  fase berbeda. Fase bagian atas diambil,
ditambahkan reagen Mayer. Keberadaan alkaloid dalam sampel ditandai dengan terbentuknya
endapan merah.
b. Uji saponin
Ekstrak diambil  1 g, ditambahkan 10  mL  akuades,  dikocok  kuat selama  kurang  lebih  1  menit. Selanjutnya  didiamkan  selama  10 menit  dan  diamati  buih  atau  busa
yang terbentuk.
Keberadaan
senyawa    saponin    dalam  sampel
ditandai dengan terbentuknya buih yang  stabil  selama  10  menit
dengan tinggi 3 cm.
c. Uji flavonoid
Ekstrak diambil 1 g dan
ditambahkan  serbuk  magnesium secukupnya  untuk  mengoksidasi sampel. Ditambahkan lagi 10 tetes
asam  klorida  5  N.  Keberadaan
flavonoid ditandai dengan terbentuknya warna hitam kemerahan pada larutan.
d. Uji tanin
Ekstrak diambil 1 g dan
ditambahkan  dengan  10  mL  air panas, kemudian ditetesi besi  (III)
klorida.  Keberadaan    tanin  dalam sampel ditandai dengan timbulnya warna hijau kehitaman.
e. Uji steroid
Ekstrak diambil 1 g, ditambahkan
1 mL kloroform, kemudian dikocok.  Masing-masing  asetat anhidrat  dan  asam  sulfat  pekat sebanyak 2 tetes ditambahkan pada filtrat.  Perubahan  warna  merah pada  larutan  pertama  kali,  yang kemudian  berubah  menjadi  biru dan  hijau  menunjukkan  reaksi positif.
5. Uji kualitatif aktivitas
antioksidan  dengan  metode peredaman radikal bebas DPPH Uji kualitatif
aktivitas antioksidan  dilakukan  secara  KLT dengan fase  gerak  yang  sesuai  untuk setiap  ekstrak  dan  penampak  bercak
DPPH 0,2% dalam metanol, Sebanyak  10  μL  ekstrak  dengan
konsentrasi  1%  ditotolkan  pada  plat
KLT  silika  gel  60  GF 254 kemudian dikembangkan  dengan  fase  gerak  n- heksana-etil  asetat  (4  :  6).  Plat disemprot  penampak  bercak  DPPH
0,2% dalam methanol.
6. Uji kuantitatif aktivitas antioksidan  dengan  metode DPPH Sampel dilarutkan dalam
metanol  dengan  konsentrasi  50 μg/mL,  kemudian  ditambah  larutan DPPH dengan konsentrasi 50 μg/mL (perbandingan  volume  1  :  1).
Campuran tersebut diinkubasi selama 30  menit  dan  absorbansinya  diukur pada λ 517 nm (Lu & Foo, 2000; Zhu
dkk.,  2002).  Aktivitas  antioksidan sebagai persen penurunan absorbansi
DPPH  pada  sampel  uji  dihitung dengan rumus:
𝑄 = 100 (𝐴𝑜 − 𝐴𝑠) 𝐴𝑜
Keterangan:
Q  =  Persentase penurunan absorbansi DPPH (%) Ao  =  Absorbansi larutan DPPH As  =  Absorbansi  larutan  DPPH
setelah penambahan sampel
7. Penetapan  IC 50 peredaman radikal bebas DPPH
Dibuat lima variasi konsentrasi sampel  uji/pembanding,  kemudian diambil 2 mL dicampurkan dengan 2
mL DPPH (perbandingan volume 1 :
1).  Campuran  tersebut  diinkubasi selama  30  menit  dan  absorbansi diukur  pada  λ  517  nm.  Untuk
menentukan IC 50 diperlukan persamaan  regresi  linier  dari  kurva kalibrasi, dengan persentase
peredaman  sebagai  sumbu y dan konsentrasi  sampel  uji/pembanding sebagai  sumbu x. IC 50 dihitung dengan  cara  memasukkan  nilai  50% ke  dalam  persamaan  regresi  linier sebagai y ,  kemudian  dihitung  nilai x sebagai  konsentrasi  IC 50. Kuersetin digunakan sebagai pembanding.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Penapisan Fitokimia
Hasil  penapisan  fitokimia  pada ekstrak  etanol  kulit  buah  kasturi menunjukkan  hasil  positif  terhadap golongan senyawa
saponin,
flavonoid, tanin, dan steroid. B. Uji Kualitatif
Aktivitas
Antioksidan  Dengan  Metode DPPH
Uji  kualitatif  ekstrak  etanol kulit  buah  kasturi  bertujuan  untuk mendeteksi adanya komponen antioksidan  yang  bereaksi  positif terhadap  penampak  bercak  DPPH. Pada  penelitian  ini  didapatkan  hasil
positif  yang  ditunjukkan  oleh  Plat
KLT  yang  berwarna  kuning  dengan latar  belakang  ungu  (Molyneux, 2004) seperti terlihat pada gambar 1.
Metode KLT merupakan teknik yang mudah  dan  murah  sebagai  tes pendahuluan  untuk  uji  kuantitatif
aktivitas  antioksidan.  Uji  kualitatif menggunakan KLT juga memberikan keuntungan kecepatan dalam menentukan  hasil  ada  tidaknya senyawa  antioksidan  dan  mudah dalam aplikasinya (Olech dkk., 2012).
Kromatogram Gambaran
Gambar 1. Kromatogram lapis tipis pemantauan
aktivitas antioksidan kulit buah kasturi, fase diam
silika gel 60 GF 254, fase gerak n-heksana : etil asetat
( 4:6), disemprot DPPH 0,2% dalam metanol
A, B and C = bercak dari DPPH 0,2% b/v Fase gerak = n-heksana : etil asetat (4:6) v/v
Bercak  kuning  pada  kromatogram  A,  B,  dan  C dengan  nilai  HRf  secara  berturut-turt  yaitu  95; 56,67;  23,33  yang  mengindikasikan  komponen antioksidan.
C. Uji Kuantitatif Aktivitas Antioksidan  Dengan  Metode DPPH Konsentrasi yang diujikan untuk mengukur aktivitas antioksidan adalah  50  μg/mL.  Uji  kuantitatif
bertujuan  untuk  mengukur  aktivitas antioksidan.  Pada  penelitian  ini
didapatkan aktivitas antioksidan
sebesar 97,87% dibandingkan dengan kuersetin  sebesar  97,98%.  Hal  ini menunjukkan bahwa
aktivitas
antioksidan  pada  kulit  buah  kasturi hampir mendekati aktivitas
antioksidan pada kuersetin.
A B C
Gambar 2. Aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit buah kasturi dengan konsentrasi 50 μg/mL

## D. Penetapan  IC 50 Peredaman
Radikal Bebas DPPH
Aktivitas  antioksidan  dapat
dilihat  dari  IC 50 .  Pada  penelitian  ini, pembanding  yang  digunakan  adalah
kuersetin. IC 50
merupakan konsentrasi  yang  dapat  memberikan persen  penangkapan  radikal  bebas sebanyak  50%  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  melalui  suatu persamaan  regresi  linier.  Semakin kecil  nilai  IC 50 ,  maka  akan  semakin kuat  daya  antioksidannya  (Rohman, 2005).  Nilai  aktivitas  antioksidan ekstrak  etanol  kulit  buah  kasturi menggunakan  pereaksi  DPPH  yaitu 9,82  ppm  dibandingkan  dengan kuersetin  sebesar  4,17  ppm.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  kemampuan menangkap radikal bebas pada
kelompok  kulit  buah  kasturi  2  kali lebih kecil daripada kelompok kontrol (kuersetin).
Nilai  IC 50 pada  kulit  buah kasturi  sebesar  9,82  ppm  lebih  baik dibandingkan  dengan  nilai  IC 50 ekstrak  metanol  pada  buah  kasturi sebesar  112,43  µg/ml  (Sutomo  dkk., 2013).  Aktivitas  antioksidan  pada kulit buah kasturi dimungkinkan oleh senyawa golongan flavonoid. Senyawa golongan flavonoid
merupakan  salah  satu  kelompok antioksidan alami yang terdapat pada tumbuhan  (Martinez  dkk.,  2000). Pada ekstrak mangga yang mengandung  mangiferin  (salah  satu jenis  flavonoid)  diketahui  memiliki aktivitas antioksidan (Abubakar dkk., 2009).
97.98 97.87 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 kuersetin ekstrak etanol kulit buah kasturi Aktivi tas antiok sid an (% )
Gambar 3. Hubungan konsentrasi sampel dengan aktivitas antioksidan (%) a) kuersetin b) ekstrak etanol kulit buah kasturi
Gambar 4. Nilai IC 50 ekstrak etanol kulit buah kasturi
15.85 23.33 49.07 75.41 92.68 y = 11.465x + 3.1137 R² = 0.994 0 20 40 60 80 100 0 2 4 6 8 10 Aktivi tas a nti oksi da n (% ) Konsentrasi (μg/mL) 8.22 16.76 34.94 53.84 80.53 y = 4.0765x + 2.9851 R² = 0.9609 0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 20 25 Aktivi tas a nti oksi da n (% ) Konsentrasi (μg/mL) 4.17 9.82 0 2 4 6 8 10 12 kuersetin ekstrak etanol kulit buah kasturi IC 50 ( μ g/m L ) a) b)

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  kulit  buah
kasturi mempunyai aktivitas antioksidan yang kuat.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Kepada DIRJEN DIKTI melalui  skema  Penelitian  Dosen Pemula (PDP) yang telah
memberikan  dukungan  dana  untuk keberlangsungan penelitian ini.

## REFERENSI
Abubakar,  M.F.,  Mohamed,  M., Rahmat,  A.,  Fry,  E.  2009. Phytochemicals and antioxidant activity of different  parts  of  bambangan ( Mangifera pajang ) and Tarap (A rtocarpus  odoratissimus ). Food  chemistry .  113:  479– 483.
Ayalasilva,  T.,  Gubbuk,  H.,  Urbina, C.  2013.  Physico-chemical evaluation  of  Casturi  mango. Proc Fla State hort Soc . 126:
17–20.
Fakhrudin,  N.P.S.,  Putri.,  Sutomo.,
Wahyuono. 2013. Antiinflamatory  Activity  Of Methanolic Extract Of Mangifera Casturi In Thioglycollate-Induced Leukocyte Migration On
Mice. Trad.  Med.  J. 18  (3)  : 151-156.
Lu, Y.,  Foo, L. Y. 2000. Antioxidant
and radical scavenging
activities of polyphenols from apple pomace, Food Chemistry. 68: 81-85. Mandal,  S.,  Yadav,  S.,  Yadav,  S., Nema, R. K. 2009. Antioxidants: A Review. Journal  of  Chemical  and Pharmaceutical Research. Vol.1 (1):102-104. Martinez, G., Delgado, R.,  Perez, G., Garrido,  G.,  Nunezselles,  A.,
Sonia, G. 2000.  Evaluation of the in vitro antioxidant activity  of Mangifera  indica L. Extract (Vimang). Phytotherapy  research .    14: 424–427. Molyneux,  P.  2004.  The  Use  of  The Stable Free Radical Diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J.Sci. Technol . 26(2) : 211-219. Olech,  M.,  Komsta,  L.,  Nowak,  R., Ciesla,  L.,  Hajnos,  M.W. 2012. Assesment Of Antiradical  Activity  Of  Plant Material  By  Thin-  Layer Chromatography  With  Image
Processing,. Food Chemistry . DOI. 10.1016/j.foodchem.2011.10. 067.  132(1) : 549-553.
Rohman, A., Riyanto, S. 2005. Daya Antioksidan  ekstrak  etanol daun  kemuning  ( Muraya paniculata (L) Jack) secara in vitro. Majalah Farmasi Indonesia . 16 (3).
Sarma,  A.D.,  Mallick,  A.R.,  Ghosh,
A.K.,  2010.  Free  Radical  and
Their Role in Different Clinical Conditions: An
Overview, International Journal  of  Pharma  Sciences adn  Research  (IJPSR) .    Vol.
1(3) hal 185-192.
Sutomo.,  Wahyuono,  S.,  Rianto,  S., Setyowati, E.P. 2013. Isolation  and identification of Active  Compound  of  n- hexane  Fraction  from  Kasturi (Mangifera casturi Konsterm) against Antioxidant and Immunodulatory Activity. Journal of Biological Sciences . 13 (7): 596-604.
Zhu, Q.Y., Hackman, R. M., Ensunsa, J. L., Holt, R. R.,  Keen, C. L.
2002.  Antioxidative  activities of  oolong  tea. J.  Agric.  Food Chem . 50: 6929-6934.