## MODIFIKASI TEKNIK ISOLASI BIOPOLIMER KITOSAN DARI CANGKANG KERANG MUTIARA (PINCTADA MAXIMA) SEBAGAI ADSORBEN ZAT WARNA METILEN BLUE
Nurlaili 1) , Siti Alaa 1) , Susi Rahayu 1)
1) Program Studi Fisika, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Mataram, Indonesia
Corresponding author : Susi Rahayu E-mail : susirahayu@unram.ac.id
Diterima 16 Oktober 2022, Direvisi 03 November 2022, Diterima 03 November 2022

## ABSTRAK
Biopolimer kitosan memiliki banyak aplikasi diantaranya sebagai  biosorben, scaffold, bahan pengawet ikan,  dan  anti  mikroba  pada  makanan.  Dalam  beberapa  penelitian,  kitosan  sangat  efektif  dalam mengadsorpsi ion zat warna Metilen biru. Adapun tujuan dari penelitian ini untuk identifikasi karakteristik kitosan  hasil  isolasi  dari  cangkang  kerang  Mutiara.  Proses  isolasi  biopolimer  kitosan  menggunakan metode deasetilasi bertahap. Dimana proses isolasi dilakukan dengan tiga proses yaitu deproteinasi, demineralisasi,  dan  deasetilasi.  Serbuk  hasil  isolasi  diidentifikasi  rendemennya,  diukur  densitasnya, analisis gugus fungsi yang terbentuk dengan FTIR, dan menghitung kemampuan dalam mengadsorbsi zat warna  metilen  blue  dengan  Uv-Vis.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kitosan  yang  dihasilkan berbentuk  serbuk  berwarna  putih  keabuan,  rendemen  33,71%,  densitas  curah  kitosan  sebesar  1,21 gr/ cm 3 , serta didapat derajat deasetilasi dari kitosan sebesar 57,50 %. Efisiensi penyerapan zat warna Metilen  biru  oleh  kitosan  di  setiap  konsentrasi  rata-rata  bernilai  90  %.  Oleh  karena  itu,  biopolimer kitosansangat efektif dalam mengadsorbsi zat warna metilen blue.
Kata kunci: deasetilasi bertahap; efisiensi penyerapan; karakteristik kitosan.

## ABSTRACT
Chitosan biopolymer has many applications including as a biosorbent, scaffold, fish preservative, and antimicrobial in food. In several studies, chitosan was very effective in adsorption of methylene blue dye ions. The purpose of this study was to identify the characteristics of chitosan isolated from pearl shells. The  process  of  isolation  of  chitosan  biopolymer  uses  the  stepwise  deacetylation  method.  Where  the isolation  process  is  carried  out  by  three  processes,  namely  deproteination,  demineralization,  and deacetylation. The isolated powder was identified its yield, measured its density, analyzed the functional groups formed by FTIR, and calculated the ability to adsorb methylene blue dye with UV-Vis. The results show that the chitosan is a grayish-white powder, the yield is 33.71%, the bulk density of chitosan  is 1.21  gr/cm 3 ,  and  the  degree  of  deacetylation  of  chitosan  is  57.50%.  The  absorption  efficiency  of methylene blue dye by chitosan at each concentration averaged 90%. Therefore, chitosan biopolymer is very effective in adsorbing methylene blue dye.
Keywords: gradual deacetylation; absorption efficiency; chitosan characteristics.

## PENDAHULUAN
Kitosan merupakan salah satu biopolimer  yang  sumber  bahan  bakunya berlimpah di alam. Kitosan bersifat biodegradable dan non-toxic (Kusumawati, 2009).  Biasanya  kitosan  dapat  diaplikasikan sebagai  bahan  pengawet  ikan,  anti  mikroba pada  makanan,  material  untuk scaffold ,  serta berperan sebagai adsorben  (Ariyani & Yennie, 2008)(Sarwono,  2010)(Seol  et  al.,  2004). Beberapa  sumber  kitosan  yakni  dari    kerang- kerangan  ( bivalvia )  seperti  kerang  mutiara ( pinctada maxima ) dan udang vanami (Rahayu et  al.,  2018) . Selain  sebagai  bahan  baku kitosan,  cangkang  kerang  mutiara  juga  sering
digunakan  sebagai  sumber  hidroksiapatit (Kurniawidi  et  al.,  2022).  Kerang  mutiara  jenis pinctada  maxima sangat  cocok  hidup  di perairan  Lombok,  Nusa  Tenggara  Barat (Syachruddin et al., 2018).
Saat  ini,  pemanfaatan  cangkang  dari kerang mutiara di Lombok terbatas hanya pada pembuatan perhiasan, bahan pembuatan cukli, dan  bahan  dasar  pembuatan  cat  metalik. Sedangkan  pemamnfaatan  cangkang  kerang mutiara  sebagai  biopolimer  kitosan  masih jarang  dilakukan.  Adapun  kitosan  hasil  isolasi sebelumnya    didapatkan  masih  dalam  bentuk endapan protein-kitin (Zentz et al.,
2001)(Pereira ‐ Mouriès  et  al.,  2002).  Namun
adapula  isolasi  kitosan  dari  cangkang  mutiara telah  berhasil  dilakukan  dengan  nilai  derajat deasetilasi  sebesar  80,35  %  (Dewi,  2021). Selain  itu,  isolasi  kitosan  juga  telah  berhasil dilakukan dengan memperoleh derajat deasetilasi  hingga  100%.  Dimana  kitosan diisolasi dari limbah cangkang udang (Ramadhan  et  al.,  2010).  Proses deasetilasi dapat  dimodifikasi  guna  meningkatkan  derajat deasetilasi yaitu melalui deasetilasi bertahap.
Setiap  kitosan  yang  diperoleh  dari  hasil isolasi akan memiliki karakteristik yang berbeda tergantung bahan  baku  dan proses isolasinya. Karakteristik yang dimiliki kitosan akan berpengaruh pada jenis aplikasinya. Kemurnian kitosan tergantung pada derajat deasetilasinya. Dimana  kemurnian  kitosan  akan  berperan penting pada jenis aplikasi. Salah satu aplikasi kitosan  yang  banyak  digunakan  yaitu  sebagai adsorben. Karakteristik  yang  membedakan kitosan dengan biosorben lainnya yaitu terletak pada  gugus  fungsi  yang  dimiliki.    Keberadaan gugus hidroksil dan juga amina yang ada pada kitosan sangat efektif dalam mengadsorpsi ion zat warna yakni zat warna Metilen biru (Arifin et al., 2012)(Arunachalam, 2021)(Tanasale et al., 2012).
Keragaman manfaat dan aplikasi kitosan baik  dalam  bidang  medis  maupun  lingkungan mendorong  peneliti  dalam  mengeksplorasi sumber  alam  menjadi  kitosan.  Salah  satu sumber  bahan  baku  lokal  khas  Lombok  yang dapat  dieksplorasi  yaitu  cangkang  kerang mutiara.  Penelitian  ini  diharapkan  mampu memberikan kontribusi dalam ilmu pengetahuan  di  bidang  biopolimer,  dan  dapat menghasilkan inovasi baru terkait pemanfaatan cangkang  kerang  mutiara  jenis Pinctada maxima .

## METODE PENELITIAN
Pada  penelitian  ini  kitosan  diisolasi  dari cangkang  kerang  mutiara  jenis Pinctada maxima yang  diperoleh  dari  perairan  di  Nusa Tenggara  Barat.  Secara  garis  besar  prosedur yang  dilakukan  dalam  penelitian  meliputi preparasi  cangkang  kerang  mutiara,  isolasi kitosan,  menghitung  rendemen,  mengukur densitas,  analisis  gugus  fungsi  dengan  FTIR, dan analisis kemampuan adsorbsi dengan Uv- Vis.  Adapun  preparasi  dilakukan  dengan membersihkan  cangkang kerang  mutiara ( Pinctada  maxima )  dan  dikeringkan  dibawah sinar  matahari.  Selanjutnya  isolasi  kitosan dilakukan dengan tiga proses yakni deproteinasi,  demineralisasi  dan  deasetilasi bertahap. Proses deproteinasi dilakukan dengan  mencampurkan  serbuk  cangkang kerang mutiara ke dalam NaOH konsentrasi 4% menggunakan perbandingan 1:10 (w/v).
Kemudian  proses  demineralisasi  dilakukan dengan  mencampurkan  hasil  dari  deproteinasi dengan  larutan  HCl  1    M  menggunakan perbandingan  1:15. Setelah  itu,  proses deasetilasi dengan metode deasetilasi bertahap  dilakukan  3  tahap  diiringi  dengan penambahan  NaOH  60%  dalam 3 × 1 jam (Bahri et al., 2015).
Untuk  meninjau  karakteristik  serbuk bioplolimer  kitosan  yang  diperoleh,  ada beberapa  metode  uji  dan  pengukuran  yang dilakukan.  Dalam  penentuan  warna  serbuk, dilakukan dengan meninjau secara organoleptik.  Sedangkan  densitas  kitosan dihitung mengikuti persamaan berikut:
𝜌 𝑏 = 𝑚 𝑉 (1)
dimana 𝜌 𝑏 merupakan  parameter bulk  density (g/ cm 3 ),  kemudian m merupakan  massa sampel  (g),  dan V merupakan  volume  serbuk kitosan yang dipadatkan ( cm 3 ) (Grumezescu & Holban,  2018).  Selain  itu,  kitosan  hasil  isolasi dikarakterisasi menggunakan Spektrofotometer FTIR  guna  mengetahui  derajat  deasetilasi. Adapun untuk menentukan derajat deasetilasinya,  kitosan  dapat  diestimasikan dengan  pendekatan Baseline oleh  Domzy dan Roberts mengikuti persamaan:
Derajat Deasetilasi = 100 − [( 𝐴 1655 𝐴 3450 ) ×
100
1,33 ] (2)
dimana 𝐴 1655 adalah  nilai  absorbansi  pada bilangan  gelombang  1655 cm −1 , kemudian 𝐴 3450 merupakan  nilai  absorbansi  pada bilangan gelombang 3450 cm −1 , dan bilangan 1,33 menyatakan rasio dari ( 𝐴 1655 /𝐴 3450 ) pada derajat deasetilasi 100% (Imtihani et al., 2020) Dalam  eksperimen  ini  digunakan  zat warna  metilen  blue  sebagai  zat  yang teradsorbsi. Adsorbsi metilen blue menggunakan  5  variasi  konsentrasi  yakni  5 ppm, 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm, dan 25 ppm. Hasil  adsorpsi  dikarakterisasi  menggunakan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 665 nm. Data yang didapat dari uji adsorpsi  Metilen  biru  diantaranya  kapasitas adsorpsi dan efisiensi adsorpsi, yang diperoleh melalui persamaan (3) dan (4) :
𝑞 𝑒 = ( 𝐶0− 𝐶𝑒 𝑚 ) × 𝑉 (3)
% Efisiensi Adsorpsi = (𝐶 0 − 𝐶 𝑒 ) 𝐶 0 ⅹ 100 % (4)
dimana 𝐶 0 adalah  konsentrasi  awal  (ppm), 𝐶 𝑒 merupakan  konsentrasi  akhir  (ppm),  m merupakan massa adsorben (g), V merupakan
volume adsorbat ( L ), kemudian 𝑞 𝑒 merupakan kapasitas adsorpsi pada
keadaan kesetimbangan (mg/g) (Tanasale et al., 2012) (Mulyati, 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Karakteristik Biopolimer Kitosan
Kitosan  telah  berhasil  diisolasi  dari cangkang kerang Mutiara (gambar 1).  Adapun dalam setiap tahapan isolasi terjadi pengurangan massa sampel di setiap prosesnya.
Gambar  1 .  Serbuk  Kitosan  dari  cangkang kerang mutiara ( Pinctada maxima )
Hasil  isolasi  kitosan  cangkang  kerang mutiara  didapat  rendemen  sebesar  33,71%. Karakteristik  fisik  serbuk  kitosan  berbentuk serbuk  berwarna  putih  keabuan  mirip  seperti kitosan  yang  dihasilkan  dari  cangkang  kerang darah ( Anadara granosa ) (Masindi & Herdyastuti,  2017).  Adapun  densitas  kitosan didapat  sebesar  1,26  g/ cm 3 .  Hal  ini  berbeda dengan  kitosan  cangkang  kepiting  komersil berkisar  antara  0,18  g/ cm 3 hingga  0,33  g/ cm 3 dan  kitosan  cangkang  udang  windu  berkisar antara  0,166  g/ cm 3 hingga  0,178  g/ cm 3 (No  et al.,  1996).  Perbedaan  terjadi  karena  kitosan dengan  sumber  bahan  baku  yang  berbeda memiliki densitas yang berbeda pula. Berdasarkan hal tersebut, kitosan dari cangkang udang  memiliki  densitas yang relatif lebih besar dari kitosan dari cangkang kepiting maupun cangkang kerang Mutiara.
Analisis senyawa kitosan secara kimia menggunakan Spektrofotometer Fourier Transform  Infrared (FTIR).  Ada  beberapa karakteristik  dari  kitosan  yang  dapat  dilihat melalui FTIR yakni gugus fungsi, mode vibrasi, derajat  deasetilasi  serta  kristalinitas  secara kualitatif.  Berikut  spektra  FTIR  kitosan  dari cangkang kerang mutiara dari hasil percobaan ditunjukkan pada gambar 2.
Gambar 2 . Gambar grafik uji alat karakterisasi FTIR kitosan
Analisis  gugus  fungsi  dan  mode  vibrasi  dari pembacaan  hasil  analisis  FTIR  terhadap kitosan  cangkang  kerang  mutiara  dapat  dilihat pada tabel 1.
Tabel  1. Gugus  Fungsi  dan  Bilangan Gelombang pada Kitosan
Gugus Fungsi Bilangan Gelombang ( 𝒄𝒎 −𝟏 ) Literatur [8] Penelitian (v) O-H tumpang tindih (va-s) 𝑁𝐻 2 3434,660 3404,160 (vb) C-H 2348,000 2368,760 C=O [Amida sekunder] 1626,110 1621,480 (vsd) C-H 1466,680 1443,820 (v) C-O-C 1103,850 - (v) C-O - 1139,630 *Keterangan: (v): vibrasi sretching , (vb): vibrasi bending ,  (vsd):  vibrasi symmetric deformasi,
(va-s): vibrasi anti - symmetric stretching.
Pada gambar (2) dan tabel (1) menunjukkan gugus  fungsi  yang  terbentuk.    Pada    pita serapan  bilangan  gelombang  3404,16 cm −1 menunjukkan  adanya  gugus  fungsi  amina dengan mode vibrasi stretching . Hasil analisisi juga menunjukkan gugus fungsi –OH tumpang tindih  dengan NH 2 (vibrasi anti-symmetric stretching ). Kemudian pada bilangan gelombang  1621,48 cm −1 yang  menunjukkan gugus  fungsi  amida  I  (-CO).  Berdasarkan analisis  karakteristik  spektrum  inframerah menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang  signifikan  antara  refrensi  dengan  hasil eksperimen.  Adanya  spektrum  utama  yakni gugus  fungsi  hidroksil  dan  amina.  Adapun gugus fungsi lain yaitu amida mengindikasikan bahwa senyawa hasil reaksi deasetilasi  dalam penelitian adalah kitosan.
Karakteristik  lain  dari  kitosan  yang  penting untuk  dilihat  yakni  derajat  deasetilasi.  Nilai
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 0 6 12 18 24 30 cm -1 CH CH 2 C-O OH, NH 2 CO %T
derajat deasetilasi dapat diestimasi menggunakan  pendekatan  Baseline  oleh Domzy  dan  Roberts  dalam  persamaan  (2) (Imtihani  et  al.,  2020).  Analisis  derajat deasetilasi  hasil  isolasi  kitosan  dari  cangkang kerang  mutiaran  sebesar  57,50  %.  Adapun derajat deasetilasinya rendah, akibat pengadukan pada proses deasetilasi yang tidak sempurna.  Hal  tersebut  dapat  menyebabkan interaksi antara kitin dengan larutan NaOH tidak bereaksi  secara  maksimal.  Oleh  karena  itu, gugus  amina  yang  terbentuk  sedikit  dan menghasilkan  nilai  derajat  deasetilasi  yang rendah  (Citrowati  et  al.,  2017).  Proses deasetilasi  pada  kitin  hampir  tidak  pernah selesai, dalam kitosan  masih  ada gugus asetil yang  terikat.  Sehingga,  tinggi  rendahnya derajat  deasetilasi  kitosan  menunjukkan  tinggi rendahnya  gugus  asetil    dari  kitosan  hasil isolasi.  Semakin  banyak  gugus  asetil  yang terlepas,  semakin  tinggi  kemurnian  kitosan yang dihasilkan.  Kitosan yang memiliki derajat deasetilasi  rendah  dapat  diaplikasikan  dalam pengolahan  air limbah,  salah  satunya  yakni sebagai adsorben (Bastaman, 1989).

## Kemampuan Adsorbsi Metilen Blue
Kemampuan
kitosan dalam mengadsorbsi metilen blue di analisis menggunakan Uv-Vis. Hasil pengukuran dianalisis melalui kurva pada gambar 3. Adapun konsentrasi  akhir  dari  suatu  larutan  uji  dapat ditentukan dengan menentukan kurva kalibrasi. Untuk  itu  kurva  kalibrasi  dari  kelima  variasi konsentrasi  Metilen  biru  dapat  dilihat  pada gambar 3 berikut:
Gambar 3 . Gambar Kurva Hubungan
Absorbansi terhadap Konsentrasi
Persamaan regresi linear yang diperoleh  yakni,  y  =  0,00524  +  0,01359x,  dan diperoleh  koefisien  determinasi  ( 𝑅 2 )  bernilai 0,99819.  Berdasarkan  kurva  pada  gambar  3, absorbansi  yang  diperoleh  sebesar  99,819%. Adapun hasil koefisien determinasi menunjukkan  kelayakan  penggunaan  grafik dalam pengujian (Huda & Yulitaningtyas, 2018).
Sehingga kurva kalibrasi zat warna Metilen blue yang diperoleh layak digunakan dalam analisis hasil  adsorpsi  oleh  kitosan.  Adapun  kapasitas adsorpsi dan juga efisiensi adsorpsi zat warna Metilen blue ditunjukkan pada tabel 2 berikut: Tabel 2 . Tabel Konsentrasi, Kapasitas Adsorpsi dan  Efisiensi  Adsorpsi  hasil  Adsorpsi  Metilen Biru Konsentr asi Awal (ppm) Konsentr asi Akhir (ppm) Kapasit as Adsorp si (mg/g) Efisien si Adsor psi (%) 5 0 0,262 100 10 0.571 0,471 94,290 15 1,601 0,670 89,325 20 0,350 0,982 98,249 25 1,086 1,203 96,828
Berdasarkan    tabel  2  kapasitas adsorpsi  Metilen  blue  semakin  meningkat. Pada proses adsorpsi, konsentrasi awal larutan sebanding dengan jumlah adsorbat yang akan terserap.  Pada  tabel  2  juga  terlihat  adsorpsi pada  konsentrasi  15  ppm  terjadi  penurunan. Hal ini terjadi karena pada proses pengadukan menggunakan magnetik stirrer tidak berlangsung secara menyeluruh, akibatnya zat warna  yang  terserap  lebih  sedikit  dari seharusnya.
Dari  tabel  2,  nilai  efisiensi  adsorpsi menggunakan kitosan cukup bagus yaitu rata- rata  90%.  Hal  ini  karna  dua  faktor  yaitu konsentrasi  adsorbat  dan  jenis  adsorbat. Pertama,  konsentrasi  awal  zat  warna  Metilen blue berhubungan dengan jumlah sisi aktif yang terdapat  pada  permukaan  kitosan.  Bila  jumlah sisi aktif cukup besar dibandingkan dengan ion adsorbat maka nilai dari efisiensi adsorpsi akan tinggi.  Kemudian  faktor  kedua  yakni  jenis adsorbat  yang  digunakan.  Dari  segi  pH digunakan  zat  warna  basa  yakni  zat  warna Metilen  blue.  Jika  menggunakan  zat  warna anionik  yang  bersifat  asam,  maka  gugus  aktif yang  ada  pada  kitosan  yakni  gugus  amina ( NH 2 )  akan  terprotonasi  menjadi NH 3 + .  Adapun zat  warna  Metilen  blue  dalam  larutan cenderung  terionisasi  menjadi  ( 𝐶 16 𝐻 18 𝑁 3 𝑆 ) + . Sehingga  pada  saat  terjadi  protonasi  akan terjadi  penolakan  dengan  gugus NH 3 + (Tammi et  al.,  2013).  Keoptimalan  hasil  efisiensi adsorpsi  yang  rata-rata  hasilnya  90%,  terjadi karena  gugus  aktif NH 2 ,  tidak  terprotonasi sehingga  muatan  pada  gugus  ini  dalam keadaan negatif.

## SIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  kitosan yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini  memiliki
0 5 10 15 20 25 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0 0.074 0.147 0.209 0.283 0.338 y = 0.00524 + 0.01359x R 2 = 0.99819 Absor ba nsi ( %) Konsentrasi (ppm)
karakteristik  berbentuk  serbuk  dengan  warna putih  keabuan.  Adapun  densitas  curah  yang dihasilkan  sebesar  1,26  g/ 𝑐𝑚 3 dan  derajat deasetilasi
sebesar 57,50%. Bahkan
kemampuan adsorbsi
kitosan
yang teridentifikasi  memiliki  kemampuan  adsorpsi rata-rata 90%.
Dari  hasil  penelitian,  kemurnian  kitosan yang  diperoleh  belum  mencapai  standar  SNI. Sehingga untuk mengoptimalkan kemurniannya perlu dilakukan modifikasi mulai dari  preparasi  hingga  proses  isolasi.  Ketelitian dalam  penelitian  juga  sangat  berpengaruh terhadap hasil yang diperoleh.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian ini merupakan data eksperimen  untuk  memenuhi  syarat  dalam menyelesaikan    tugas  akhir  program  strata  1. Eksperimen ini bagian dalam roadmad penelitian  kelompok  bidang  minat  material program  studi  fisika  FMIPA  Universitas Mataram. Ucapan terimakasih  diberikan pada tim laboratorium fisika lanjut dibawah naungan fisika material.

## DAFTAR RUJUKAN
Arifin, Z., Irawan, D., Rahim, M., & Ramantiya,
F. (2012). Adsorpsi zat warna direct black 38 menggunakan kitosan berbasis limbah udang  delta  Mahakam. Jurnal  Ilmiah Berkala  Sains  Dan  Terapan  Kimia , 6 (1), 35 –45.
Ariyani,  F.,  &  Yennie,  Y.  (2008).  Pengawetan Pindang Ikan Layang (Decapterus russelli)  Menggunakan  Kitosan. Jurnal Pascapanen  Dan  Bioteknologi  Kelautan Dan Perikanan , 3 (2), 139 –146. Arunachalam,  K.  D.  (2021).  Bio-adsorption  of methylene  blue  dye  using  chitosan- extracted  from  Fenneropenaeus  indicus shrimp shell waste. J. Aquac. Mar. Biol , 10 , 146 –150.
Bahri, S., Rahim, E. A., & Syarifuddin, S. (2015). Derajat deasetilasi kitosan dari cangkang kerang darah dengan  penambahan naoh secara bertahap. KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 1 (1).
Bastaman,  S.  (1989). Studies  on  Degradation and Extraction of Chitin and Chitosan from Prawn Shells (Nephrops Norvegicus).
Citrowati, A. N., Satyantini, W. H., & Mahasri, G. (2017).  Pengaruh  kombinasi  NaOH  dan suhu  berbeda  terhadap  nilai  derajat deasetilasi  kitosan  dari  cangkang  kerang kampak  (Atrina  pectinata). Journal  of Aquaculture and Fish Health , 6 (2), 48 –56. Dewi,  H.  (2021). Studi  Adsorpsi  Logam  Fe Menggunakan Kitosan Cangkang Kerang Mutiara  (Pinctada  maxima) .  Universitas
Mataram.
Grumezescu,  A.  M.,  &  Holban,  A.  M.  (2018).
Therapeutic,
probiotic, and unconventional foods . Academic Press.
Huda, T., & Yulitaningtyas, T. K. (2018). Kajian adsorpsi  methylene  blue  menggunakan selulosa  dari  alang-alang. Indonesian Journal  of  Chemical  Analysis  (IJCA) ,
1 (01), 9 –19.
Imtihani, H. N., Wahyuono, R. A., & Permatasari, S.  N.  (2020). Biopolimer  kitosan  dan penggunaannya  dalam  formulasi  obat . Penerbit Graniti.
Kurniawidi, D. W., Alaa, S., Nurhaliza, E., Safitri, D.  O.,  Rahayu,  S.,  Ali,  M.,  &  Amin,  M. (2022). Synthesis and Characterization of Nano  Chitosan  from  Vannamei  Shrimp Shell  (Litopenaeus  vannamei). Jurnal Ilmiah  Perikanan  Dan  Kelautan , 14 (2),
380 –387.
Kusumawati,  N.  (2009).  Pemanfaatan  limbah kulit udang sebagai bahan baku pembuatan membran ultrafiltrasi. INOTEKS , 13 (2).
Masindi,  T.,  &  Herdyastuti,  N.  (2017).
Karakterisasi Kitosandari CangkangKerang Darah (Anadara
granosa). UNESA  Journal  of  Chemistry , 6 (3).
Mulyati, T. A. (2017). Preparasi dan karakterisasi  karbon  aktif  dari  limbah ampas tebu menggunakan aktivator KOH. Indonesian  Chemistry  and  Application Journal , 1 (2), 61 –67.
No,  H.  K.,  Cho,  Y.  I.,  &  Meyers,  S.  P.  (1996).
Dye binding capacity of commercial chitin products. Journal of Agricultural and Food Chemistry , 44 (7), 1939 –1942. Pereira ‐ Mouriès,  L.,  Almeida,  M.,  Ribeiro,  C., Peduzzi,  J.,  Barthélemy,  M.,  Milet,  C.,  & Lopez, E. (2002). Soluble silk ‐ like organic matrix in the nacreous layer of the bivalve Pinctada  maxima:  A  new  insight  in  the biomineralization  field. European  Journal of Biochemistry , 269 (20), 4994 –5003. Rahayu,  S.,  Kurniawidi,  D.  W.,  &  Gani,  A. (2018).  Pemanfaatan  Limbah  Cangkang Kerang Mutiara (Pinctada maxima) Sebagai  sumber  Hidroksiapatit. Jurnal Pendidikan  Fisika  Dan  Teknologi , 4 (2), 226 –231. Ramadhan, L., Radiman, C. L., Wahyuningrum, D.,  Suendo,  V.,  Ahmad,  L.  O.,  & Valiyaveetiil,  S.  (2010).  Deasetilasi  kitin secara bertahap dan pengaruhnya terhadap  derajat  deasetilasi  serta  massa molekul  kitosan. Jurnal  Kimia  Indonesia ,
5 (1), 17 –21.
Sarwono,  R.  (2010).  Pemanfaatan  Kitin  I Kitosan  Sebagai  Bahan  Anti  Mikroba.
Jurnal Kimia Terapan Indonesia , 12 (1).
Seol,  Y.-J.,  Lee,  J.-Y.,  Park,  Y.-J.,  Lee,  Y.-M., Ku, Y., Rhyu, I.-C., Lee, S.-J., Han, S.-B., & Chung, C.-P. (2004). Chitosan sponges as  tissue  engineering  scaffolds  for  bone formation. Biotechnology  Letters , 26 (13), 1037 –1041.
Syachruddin, A. R., Syukur, A., & Suryaningsih, S.  (2018).  Perbedaan  berat  (gram)  bibit kerang  mutiara  (Pinctada  Maxima)  antar warna  cangkang  di  perairan  Tekalok Lombok Timur NTB. Jurnal Biologi Tropis , 18 (1), 34 –44.
Tammi,  T.,  Suaniti,  N.  M.,  &  Manurung,  M.
(2013).  Variasi  Konsentrasi  Dan  Ph Terhadap  Kemampuan  Kitosan  Dalam
Mengadsorpsi  Metilen  Biru. Jurnal  Kimia (Journal of Chemistry) . Tanasale, M. F., Killay, A., & Laratmase, M. S. (2012).  Kitosan  dari  limbah  kulit  kepiting rajungan  (Portunus  sanginolentus  L.) sebagai adsorben zat warna biru metilena. Jurnal Natur Indonesia , 14 (1), 165 –171. Zentz, F., Bédouet, L., Almeida, M. J., Milet, C., Lopez, E., & Giraud, M.  (2001). Characterization  and  quantification  of chitosan  extracted  from  nacre  of  the abalone  Haliotis  tuberculata  and  the oyster Pinctada maxima. Marine Biotechnology , 3 (1), 36 –44.