Profil fitokimia selada laut (Ulva lactuca) dan mikro alga filamen (Spirogyra sp) sebagai bahan alam bahari potensial dari perairan Indonesia
Ari Sri Windyaswari 1 , Elfahmi 2 , Fahrauk Faramayuda 1 , Soraya Riyanti 1 , Oktiyas Muzaky Luthfi 3 ,Inna Puspa Ayu 4 ,Niken Tunjung Murti Pratiwi 4 , Khaerunnisa Harisqi Nurul Husna 1 ,Ridzka Maghfira 1
1 Kelompok Keahlian Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, UNJANI
2 Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung
3 Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, UNBRAW
4 Departemen Manajemen Sumberdaya Perairan,Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, IPB Corresponding author email: ari.sri.w@lecture.unjani.ac.id

## Abstrak
Perairan  Indonesia  merupakan  habitat  bagi  berbagai  spesies  makro  dan  mikro  alga.  Selada laut (Ulva lactuca) adalah salah satu makroalga hijau yang secara empiris digunakan sebagai makanan  oleh  masyarakat  Indonesia  yang  hidup  dipesisir  pantai.  Pada  perairan  tawar, mikroalga hijau ( Spirogyra sp ) merupakan mikroalga filamen yang berperan penting sebagai bioindikator  dalam  sistem  akuatik.  Beberapa  penelitian  membuktikan  bahwa  polisakarida sulfat dari beberapa alga hijau yang hidup di laut dan air tawar berpengaruh secara signifikan terhadap  aktivitas  antioksidan  in-vitro  dan  ini  merupakan  prospek  bahan  baku  di  bidang farmasi.  Disisi  lain,  terbatasnya  informasi  mengenai  profil  fitokimia  selada  laut  dan mikroalga  filamen  air  tawar  di  perairan  Indonesia,  mendorong  penelitian  ini.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  profil  fitokimia  yang  meliputi  pemeriksaan  organoleptik, mikroskopik,  penapisan  fitokimia  metabolit  primer  dan  sekunder  serta  potensi  antioksidan yang  dimiliki  oleh  selada  laut  dan  ganggang  hijau  yang  tumbuh  di  perairan  Indonesia, sehingga  dapat  dimanfaatkan  sebagai  sumber  antioksidan  alam.  Hasil  pengujian  kualitatif pada  selada  laut (Ulva  lactuca) menunjukkan  kandungan  metabolit  primer  dan  sekunder berturut-turut  adalah  karbohidrat,  protein,  alkaloid,  flavonoid,  mono  dan  seskuiterpenoid. Sementara  itu  mikroalga  ( Spirogyra  sp )  mengandung  karbohidrat,  protein,  alkaloid, flavonoid, fenolik, tannin, kuinon, mono dan seskuiterpenoid. Pola kromatogram selada laut (Ulva lactuca) dan mikroalga ( Spirogyra sp) mendeteksi aktivitas antioksidan yang dimiliki oleh  metabolit  sekunder  yaitu  fenol,  tannin,  flavonoid,  mono  dan  seskuiterpenoid.  Profil senyawa  antioksidan  memiliki  tingkat  semipolar  hingga  polar.  Hasil  uji  pendahuluan aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode  dinamolisis  menunjukkan  selada  laut (Ulva lactuca) dan mikroalga filamen ( Spirogyra sp) memiliki aktivitas antioksidan dan berpotensi untuk dikembangkan sebagai sumber antioksidan alam.
Kata kunci: selada  laut (Ulva  lactuca), ganggang  hijau  ( Spirogryra  sp ),  antioksidan, Indonesia.
The phytochemical profile of Ulva lactuca and Spirogyra sp is a bioprospective marine natural product from the waters of Indonesia

## Abstract
Indonesian islands and coastals are natural environment for various macro and micro algae species. Sea lettuce Ulva lactuca is one of the green macroalgae that is empirically used as food  by  Indonesian.  In  freshwater, Spirogyra  sp is  one  of  filament  microalgae  that  play  an
DOI: 10.26874/kjif.v7i2. 288
important role as bioindicator in the aquatic system. Previous research proved that marine antioxidants  were  caused  by  sulphate  polysaccharide  and  its  promising  as  bioprospective marine source in pharmacy fields. In contrast, there is limited information of phytochemical profile  from  sea  lettuce  and  filament  micro  algae.  The  aim  of  this  research  is  profiling phytochemical  substances  from  sea  lettuce  and  freshwater  filament  micro  algae  including several  parameters  such  as  organoleptic,  microscopic,  phytochemical  screening  and  pre eliminary  antioxidant  activity,  that  its  completed  basic  data  as  marine  product  for antioxidant source, as well. The results of Ulva lactuca qualitative analysis identified several primary  and  secondary  metabolites,  such  as  carbohydrates,  protein,  alkaloids,  flavonoids, mono, and sesquiterpenoids, respectively. On the other hand, Spirogyra sp had been reported for  carbohydrates,  proteins,  alkaloids,  flavonoids,  phenolics,  tannins,  quinones,  mono,  and sesquiterpenoids as the result for phytochemical screening. The chromatogram pattern of sea lettuce Ulva lactuca and Spirogyra sp had identified the antioxidant activity. However, there are  correlation  between  thin  layer  chromatograms  pattern  and  antioxidant  activity  that caused by secondary metabolites such as phenol, flavonoids, mono and sesquiterpenoids due to  the  polarity.  To  conclude,  the  sea  lettuce Ulva lactuca and and  freshwater  filament microalge Spirogyra sp are potentially marine antioxidant product.
Keywords : Ulva lactuca , Spirogyra sp , green algae, antioxidant, Indonesia.

## Pendahuluan
Dalam  beberapa  tahun  terakhir  ini, penggunaan  bahan  alam  bahari  sebagai persediaan  zat  bioaktif  baru  di  didunia farmasi  telah  berkembang  sangat  pesat. Salah  satu  kekayaan  bahari  tersebut  adalah makro  alga  laut  dan  mikro  alga  filamen  air tawar. Kemampuan alga untuk menghasilkan metabolit sekunder yang memberikan aktivitas biologis beragam seperti antioksidan, antibakteri,  antivirus, antijamur, antineoplastika, anti-inflamasi, antiproliferatif antihiperlipidemia dan antioksidan memberikan peluang bagi perkembangan  ilmu  farmasi  di  Indonesia, mengingat Indonesia adalah negara kepulauan  dengan  wilayah  perairan  yang luas.  Alga  memiliki  beberapa  keuntungan dari  segi  produktivitas,  tidak  adanya  variasi musiman,  lebih  mudah  diekstraksi,  dan bahan mentah yang berlimpah, sehingga alga bernilai  potensial  untuk  dijadikan    bahan baku  pada  industri  farmasi.  (Madalena  dkk., 2013).
Selada  laut  adalah  salah  satu  ganggang laut  yang  memiliki  genus  Clorophyta  yang pertama  kali  di  indentifikasi  oleh  Linnaeus pada  tahun  1753.  Selada  laut (Ulva  lactuca) adalah  jenis  makroalga  yang  tersebar  luas baik  di  laut  maupun  di  perairan  air  tawar
Indonesia  (Ktari,  2017).    Selada  laut merupakan polimer terbarukan karena memiliki karakteristik dinding sel selada laut yang  mengandung  polisakarida  sulfat  yaitu karagenan  (alga  merah),  ulvan  (alga  hijau) dan fucoidan (alga  coklat).  Ulvan  adalah polisakarida  sulfat  yang  memiliki  metabolit sekunder  dan  aktivitas  biologi  yang  dapat dimanfaatkan pada bidang agrikultur, farmaseutikal dan biomedikal. Hasil penelitian  menunjukkan  ulvan  mengandung 12,80-23%  sulfat,  12,73-45%  ramnosa,  2- 12%  xilosa  dan    6,5-25,96%  asam  uronat (Kidgell et  al. , 2019). Polisakarida tersulfasi ini  menunjukkan  banyak  aktivitas  biologis yang bermanfaat seperti antikoagulan, antivirus, antioksidan, antitumor, imunomodulasi,  antikolesterol,  dan  aktivitas antihepatotoksik. Oleh karena itu, polisakarida  turunan ganggang laut memiliki potensi  besar  untuk  pengembangan  lebih lanjut sebagai nutraceutical food dan sebagai senyawa  bioaktif  baru  pada  dunia  farmasi (Wang et al. , 2014)
Didalam  ekosistem  perairan,  mikro  alga adalah  komponen  penting  yang  berperan dalam siklus biogeokimia lingkungan sehingga  memiliki  dampak  besar  pada peningkatan  konsentrasi  senyawa  dalam kolom air dan kemampuan untuk membentuk
ikatan  kimia  dengan  polutan  lingkungan sehingga  menjadi  bioindikator  yang  tepat untuk  mengevaluasi  dan  memantau  polusi ekosistem perairan (Banaee et al., 2018).
Mikroalga air tawar menghasilkan beberapa  senyawa  aktif  yaitu  asam  lemak, steroid,  karotenoid,  polisakarida,  lektin, vitamin  dan  protein,  asam  amino,  mineral makanan,  senyawa  terhalogenasi,  polipetida, racun,  dan  beragam  antioksidan  (Kumar et al. ,  2015;  Champa et  al .,  2016),  sulfat  dan serat  makanan  (Surayot et  al. ,  2015).    Salah satu mikroalga air tawar yang dikenal adalah (Spirogyra  sp) merupakan  alga  berfilamen, berlendir,  sel-selnya  membentuk  setiap filamen  terdiri  dari  rantai  luas  sel  identik, merupakan  genus  Zygnemataceae  yang paling  umum  dan  merupakan  alga  hijau (Ahmed.  S.  Dwaish,  2016;  J,  Prarthana, 2017).  Mikroalga  filamen  sering  ditemukan dalam  habitat  air  tawar  yang  beroksigenasi dengan baik, terutama dalam media asam, di perairan  yang  tergenang  dan  air  yang mengalir.  Alga  tumbuh  di  air  yang  bersih. Untuk  kualitas  air  jernih,  tingkat  kekeruhan tidak  akan  melebihi  10 Nephelometric Turbidity Unit (NTU), suhu 15-27° C dan pH 6-7,8.      (Deethae et  al. ,  2018).  Genus Spirogyra sp.  berlimpah  di  habitat  air  tawar di  seluruh dunia, dan terdiri  dari sekitar 380 jenis  (Takano et  al. ,  2019).  Mikroalga filamen air tawar (Spirogyra sp) menghasilkan  metabolit  sekunder  seperti alkaloid,  steroid,  flavonoid,  tanin  dan terpenoid (Mesbahzadeh dkk., 2018), fenolat,  glikosida,  dan  saponin  (Taya et  al. , 2016). Sejumlah besar produk ganggang juga dapat  menjadi  bahan  baku  dalam  industri makanan,  kosmetik,  biokimia  dan  farmasi. (Liu et al. , 2020).
Penelitian  mengenai  aktivitas  antioksidan mengalami  peningkatan  seiring  dengan bertambahnya permintaan untuk memproduksi  sumber  antioksidan  alam  bagi industri  makanan,  farmasi  dan  kosmetika (Yaich et al. , 2017).
Potensi  mikro  dan  makro  alga  hijau  ini belum termanfaatkan secara optimal walaupun  keanekaragaman  flora  bahari memiliki  senyawa  kimia  yang  bermanfaat
bagi  manusia.  Pemanfaatan  selada  laut  dan mikroalga  filamen  dalam  industri  dalam negeri  terbatas  kepada  produksi  bahan  baku biodiesel  serta  pengolahan  bahan  baku makanan  untuk  memenuhi  ekspor  dunia. Sementara  itu, trend produk  kosmetik dengan  bahan  baku  bahari  menguasai  pasar dunia.  Metabolit  primer  polisakarida  serta metabolit  sekunder  karotenoid  dan  polifenol dari  biota  laut  dan  air  tawar  memiliki aktivitas  antioksidan,  anti  penuaan  dini  dan anti inflamasi yang dapat diproduksi menjadi kosmetik  berdaya  jual  tinggi.  (Brunt  dan Burgess, 2016).
Penelitian  mengenai  profil  fitokimia kedua  alga  hijau  tersebut  diharapkan memberikan  informasi  ilmiah  mengenai kandungan  metabolit  primer  dan  sekunder serta aktivitas antioksidan yang dimiliki oleh selada  laut (Ulva  lactuca) dan  mikro  alga filamen (Spirogyra  sp) yang  tumbuh  di perairan Indonesia sehingga dapat meningkatkan  pemanfaatan  selada  laut  dan mikroalga filamen secara optimal.

## Metode Penelitian
Pengumpulan dan Pengambilan sampel uji. Pemanenan  selada  laut (Ulva  lactuca) dari  perairan  Nusa  Dua,  Bali-Indonesia dilakukan  pada  siang  hari  di  bulan  Juni 2019.  Selada  laut  segar  dicuci  dibawah  air mengalir,  dikeringkan  pada  suhu  40  C. Simplisia  selada  laut  kemudian  dihaluskan menjadi  serbuk  kasar  dan  disimpan  dalam wadah  tertutup  terlindung  dari  cahaya. Pemanenan  mikroalga  filamen  ( Spirogyra sp )  dari  mata  air  perairan  Karst  Ciampea, Bogor-Indonesia  dilakukan  pada  bulan  Mei 2019.  Mikroalga  filamen  segar  dicuci dibawah air mengalir, dikeringkan pada suhu 40  C. Simplisia mikroalga filamen kemudian diserbukkan menjadi serbuk kasar dan disimpan dalam wadah tertutup terlindung dari cahaya.
Standarisasi  Simplisia. Standarisasi simplisia  dan  ekstrak  secara  kualitatif  yang dilakukan meliputi parameter spesifik ekstrak  dan  simplisia  yaitu  pemeriksaan organoleptis, mikroskopik, penapisan fitokimia dan penentuan pola
DOI: 10.26874/kjif.v7i2. 288
kromatogram.(Departemen  Kesehatan  RI, 2000).
a. Pemeriksaan Organoleptik.
Pemeriksaan organoleptik dilakukan terhadap  sampel  segar  dan  simplisia, meliputi  pemeriksaan  bentuk,  warna, aroma dan  rasa   (Departemen Kesehatan RI, 2000).
b. Pemeriksaan Mikroskopik. Pemeriksaan mikroskopik meliputi pemeriksaan  fragmen  pengenal  yang terdapat pada simplisia dibawah mikroskop  dengan  menggunakan  pelarut kloral hidrat dan air.
c. Penapisan Fitokimia  Simplisia. Penapisan  fitokimia  dilakukan  untuk mendeteksi  golongan  metabolit  primer yaitu karbohidrat dan protein keberadaan metabolit tersebut dan golongan metabolit sekunder yaitu alkaloid, flavonoid,  tannin,  polifenol,  kuinon, saponin,  steroid,  triterpenoid,  terpenoid, monoterpen dan seskuiterpen yang terdapat pada sampel uji.
Metabolit Primer Uji Barfoed (Analisis Karbohidrat)
- (Barfoed,  1873;  Surayot et  al. ,  2015; Nurjannah et al. , 2017)
- Serbuk  simplisia  sebanyak  5,0  g dipanaskan  dengan  100  mL  air, kemudian disaring. Pada 1 mL filtrat, ditambahkan 1 mL pereaksi  Barfoed. Campuran tersebut dipanaskan di atas
penangas air selama 2 menit.
Terbentuknya endapan merah menunjukkan reaksi positif. Uji Ninhidrin (Analisis Protein) (MEYER,  1957;  Mesbahzadeh et  al. , 2018)
- Serbuk  simplisia  sebanyak  5,0  g dipanaskan  dengan  100  mL  air, kemudian  disaring.  Pada  2  ml  filtrat, ditambahkan 2 tetes pereaksi Ninhidrin. Campuran
tersebut dipanaskan  di  atas  penangas  air, diperhatikan  warna  yang  terjadi. Terbentuknya warna
biru menunjukkan reaksi positif. Metabolit Sekunder.
Identifikasi alkaloid,  flavonoid,  polifenol,  tanin,
saponin,  kuinon,  monoterpenoid  dan seskuiterpenoid, serta steroid dan triterpenoid  merujuk  kepada  metode (Farnsworth, 1966; Adusei et al. , 2019) d. Pola Pemantauan Kromatogram. Teknik Kromatografi Lapis Tipis dengan variasi  fasa  gerak  dan  penampak  bercak spesifik dilakukan sebagai uji konfirmasi untuk  golongan metabolit sekunder pada kedua sampel uji. Masing-masing sampel uji  dilarutkan  dalam  3  pelarut  yang berbeda  kepolarannya  (n-heksana,  etil asetat  dan  etanol)  lalu  ditotolkan  pada plat  KLT  GF 254 menggunakan  variasi fasa gerak yang sesuai. Pola kromatogram  terbaik  akan  dipilih  dari masing-masing  simplisia  untuk  diuji aktivitas pendahuluan antioksidan.
e. Uji Pendahuluan Aktivitas
Antioksidan. Pola  kromatogram  terpilih dari  masing-masing  simplisia  akan  diuji aktivitas antioksidan menggunakan penampak  bercak  radikal  bebas  DPPH 0,2%  dalam  metanol.  Dilakukan  teknik dinamolisis terhadap masing-masing menggunakan  pelarut  etanol  dan  fase diam  keras  Whatmann.  Kedalam  kertas Whatman  tersebut  lalu  disemprotkan penampak  bercak  DPPH.  Perubahan warna  kuning  dengan  latar  belakang ungu  menunjukkan  adanya  aktivitas antioksidan.

## Hasil dan Pembahasan
Standarisasi Simplisia. Standarisasi simplisia dilakukan untuk mengetahui kualitas  bahan  yang  digunakan.  Standarisasi simplisia yang dilakukan meliputi pemeriksaan organoleptis, mikroskopik, penapisan  fitokimia  dan  penentuan  pola kromatogram.
Pemeriksaan Organoleptik. Pemeriksaan organileptik terhadap serbuk simplisia meliputi  pemeriksaan  warna,  aroma,  dan rasa. Hasil pemeriksaan makroskopik terhadap simplisia dapat dilihat pada gambar 2, tabel 1 untuk simplisia (Ulva lactuca) dan gambar  2,  tabel  2  untuk  mikroalga  filamen (Spirogyra sp).
Gambar 1. (A) (Ulva lactuca) segar, (B) Simplisia (Ulva lactuca), (C) Awetan (Ulva lactuca) dalam etanol 95%
Tabel 1. Pemeriksaan Organoleptik Serbuk Simplisia (Ulva lactuca) Parameter Pemeriksaan Simplisia (Ulva lactuca) Bentuk Serbuk Warna Hijau kemerahan Aroma Aroma ganggang Rasa Asin (A) (B)
Gambar 2. Ganggang hijau (Spirogyra sp), (A) Segar, (B) Simplisia (Spirogyra sp)
Tabel 2. Pemeriksaan Makroskopik  Simplisia (Spirogyra sp) Parameter Pemeriksaan Simplisia (Spirogyra sp) Bentuk Serbuk Warna Hijau kehitaman Aroma Aroma ganggang Rasa Asin
Selada  laut (Ulva  lactuca) segar  dan simplisia selada laut (Ulva lactuca) berwarna hijau  kemerahan,  dengan  aroma  khas ganggang  dan  rasa  yang  asin.  Warna  hijau disebabkan  oleh  klorofil-a  yang  terkandung dalam selada laut (Ulva lactuca). Kandungan klorofil-a dalam selada laut sangat tergantung  terhadap  suhu,  ketinggian  serta mikroorganisme  yang  terkandung  dalam habitat perairannya. (Tabarsa et al. , 2012) Mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) segar dan  simplisia (Spirogyra  sp) berwarna  hijau pekat, dengan aroma khas ganggang dan rasa yang  asin.  Warna  hijau  disebabkan  oleh klorofil-a  dan  klorofil-b  yang  terkandung
dalam  mikroalga  filamen  hijau (Spirogyra sp). Kandungan  klorofil-a  dan  b  dalam  alga berperan dalam proses fotosintesis, biosintesis karbohidrat dan proses metabolisme  energi.  (Van  de  Poel et  al. , 2016)
Pemeriksaan Mikroskopik. Pemeriksaan mikroskopik terhadap serbuk simplisia  selada  laut (Ulva  lactuca) dan ganggang  hijau (Spirogyra  sp) dilakukan dengan  menggunakan  pelarut  air  dan kloralhidrat  (Yoon et  al. ,  2013;  Taya et  al. , 2016;  Takano et  al. ,  2019).  Pelarut  air berguna untuk pengamatan amilum. Sementara  itu,  pelarut  kloralhidrat  dapat
melarutkan  pati,  protein,  klorofil,  resin,  dan minyak mudah menguap. Sel yang mengerut akan mengembang ketika direaksikan dengan kloralhidrat sehingga fragmen pengenal  dapat  terlihat  jelas  (Takano et  al. , 2019).  Hasil  pemeriksaan  mikroskopik terhadap  simplisia  dapat  dilihat  pada  pada gambar  3  untuk  simplisia  selada  laut (Ulva lactuca) dan gambar 4 untuk (Spirogyra sp). Dalam  genus Ulva, ciri  khas  bentuk kloroplast,  tipe  thallus,  ukuran  dan  warna akan mejadi fragmen pengenal antar spesies. Selada laut (Ulva lactuca) memiliki ciri khas ukuran  sel  yang  kecil,  permukaan  thallus yang  lembut  dengan  pinggiran  berlipit  serta letak  kloroplas  yang  bersebrangan  dengan sel  tetangga  (Guidone et  al. ,  2013).  Ciri mikroskopik  menggunakan  pelarut  air  yang ditemukan  pada  simplisia  selada  laut (Ulva lactuca) dari  perairan  Indonesa  adalah  tipe thallus bercabang  dengan  pinggiran  berlipit besar,  sel  poligonal  berwarna  hijau  dan
berukuran  sedang.  Sementara  itu  ciri mikroskopik  menggunakan  pelarut  kloral hidrat  yang ditemukan pada simplisia selada laut (Ulva  lactuca) dari  perairan  Indonesia adalah sel produktif berbentuk poligonal dan mengandung  minyak  serta  kumpulan  pati poligonal (Lee, Kang dan Kim, 2019).
Simplisia  mikroalga  filamen (Spirogyra sp) dalam  pelarut  air  dan  kloral  hidrat, perbesaran  100x  menunjukkan  keberadaan sel  spiral  khas.  Menurut  (Takano et  al. , 2019)  sel  spiral  yang  terdapat  pada mikroalga  filamen  ( Spirogyra  sp) berfungsi sebagai  sel  vegetatif.  Bentuk  sel  vegetatif antar genus Spirogyra bervariasi berdasarkan jumlah  kloroplast  dan  bentuk  dinding  sel. Ciri  mikroskopis  sel  vegetatif  pada  pelarut air  dan  kloralhidrat  mikroalga  filamen ( Spirogyra  sp) dari  perairan  Indonesia  yaitu sel  vegetatif  dengan  dua  lapisan  mesospora berselang-seling yang berisi kloroplast.
(A)
(B)
Gambar  3.  Simplisia (Ulva  lactuca) perbesaran  100x  (A)  Pelarut  kloral  hidrat,  (i) Thallus (ii)  sel  poligonal berwarna hijau (B) Pelarut air, (i) kumpulan pati poligonal, (ii) sel fertil yang mengandung minyak.
(A) (B)
Gambar 4.   Simplisia (Spirogyra  sp) dengan  fragmen  pengenal sel  spiral  ditunjukkan  dgn  tanda  panah, perbesaran 100x. (A) Pelarut air (B) Pelarut kloral hidrat.

## Penapisan Fitokimia Simplisia
Tabel 3. Penapisan Fitokimia Metabolit Primer Simplisia
Golongan Jenis Pengujian (Ulva lactuca) (Spirogyra sp) Karbohidrat Barfoed + + Protein Ninhidrin + +
Keterangan:  (+) = mengandung senyawa yang dianalisis (-) = tidak mengandung senyawa yang dianalisis
Tabel 4. Penapisan Fitokimia Metabolit Sekunder Simplisia Golongan Metabolit Sekunder Hasil (Ulva lactuca) (Spirogyra sp) 1. Alkaloid - Mayer (+) (+) - Dragendorff (+) (+) 2. Flavonoid - Amil alkohol (+) (+) 3. Polifenol - FeCl3 (-) (+) 4. Tanin - Gelatin (-) (+) - Steasny (-) (-) 5. Saponin - HCl encer (-) (-) 6. Mono-seskuiterpenoid - Anisaldehid SO4 (+) (+) 7. Steroid Triterpenoid - Liebermann Burchard (-) (-) 8. Kuinon - KOH 5% (-) (+)
Keterangan:   (+) = mengandung senyawa yang dianalisis (-) = tidak mengandung senyawa yang dianalisis
Penapisan  fitokimia  bertujuan  untuk mengidentifikasi metabolit primer dan sekunder yang terkandung di dalam simplisia, sehingga digunakan sebagai prediksi awal metabolit  yang terdapat dalam tanaman.  Pada  umumnya  metabolit  tersebut memiliki  aktivitas  farmakologi  yang  khas. Metabolit  primer  berperan  dalam  proses pertumbuhan  dan  pembentukan  energi, sementara  metabolit  sekunder  merupakan produk  samping  dari  biosintesis  tanaman yang berperan sebagai protektor tanaman.
Golongan Metabolit Primer. Data golongan  metabolit  primer  disajikan  dalam tabel 3.  Simplisia selada laut (Ulva lactuca) dan (Spirogyra  sp) mengandung  karbohidrat yang  ditandai  dengan  endapan  merah  merah bata  kupri  oksida  (Cu 2 O)  pada  pemanasan selama  2-3  menit  pada  pengujian  Barfoed. Endapan tersebut mengindikasikan monosakarida,  karena  monosakarida  adalah agen  pereduksi  yang  kuat  dan  mampu
membentuk ion kupri dalam reagent Barfoed (Barfoed, 1873; Bajpai, 2016).Dapat disimpulkan bahwa kedua simplisia mengandung gula-gula sederhana. Uji Ninhidrin  digunakan  untuk  uji  protein, karena  semua  asam  amino  bereaksi  dengan ninhidrin  membentuk  senyawa  aldehid  yang lebih  rendah  disertai  pembebasan  CO 2 dan NH 3 menghasilkan  warna  biru    (MEYER, 1957; J, Prarthana, 2017). Dapat disimpulkan bahwa kedua simplisia mengandung protein. Golongan Metabolit Sekunder
Golongan Alkaloid. Deteksi awal simplisia (Ulva  lactuca) dan  simplisia (Spirogyra sp) dinyatakan positif mengandung alkaloid karena mampu bereaksi  dengan  Mayer  (endapan  putih)  dan Dragendorff (endapan jingga). Terbentuknya reaksi  positif  ketika  sampel  direaksikan dengan  pereaksi  Mayer  karena  pereaksi Mayer  dapat  berikatan  dengan  alkaloid  dari sampel melalui ikatan koordinasi antara atom
N  alkaloid  dan  Hg  dari  pereaksi  Mayer sehingga  menghasilkan  endapan  senyawa kompleks  merkuri  non  polar.  Pereaksi Dragendorff  dapat  mengendapkan  alkaloid karena  di  dalam  senyawa  alkaloid  terdapat gugus  nitrogen  yang  memiliki  satu  pasang elektron bebas menyebabkan alkaloid nukleofilik sehingga alkaloid mampu mengikat  ion  logam  berat  (J,  Prarthana, 2017).  Penelitian  (Anjali et  al. ,  2019) menunjukkan  kandungan  selada  laut  adalah alkaloid,  flavonoid,  saponin,  steroid  dam terpenoid.  Hasil  penapisan  selada  laut  dan mikroalga  filamen  dari  perairan  Indonesia yang telah diuji mengidetifikasikan keberadaan alkaloid.  Namun,  terdeteksinya kandungan  protein  pada  selada  laut  dan mikroalga filamen, maka perlu dilakukan uji konfirmasi  agar  tidak  terjadi  reaksi  positif palsu  alkaloid    karena  pereaksi-pereaksi alkaloid dapat mengendapkan protein (Farnsworth, 1966).
Golongan  Flavonoid. Prinsip  identifikasi golongan  flavonoid  adalah  reaksi  Cyanidin Willstater  yang  dapat  mendeteksi  γ- benzopiron, dengan syarat  terdapat  gugus  γ- benzopiron dan ikatan rangkap di C2 dan C3 yang  beresonansi  dan  membentuk  rangka sianidin  dengan  H + .  Akan  tetapi  metode  ini sulit  untuk  mengidentifikasi  secara  jelas beberapa heterosida dan aglikon. Kalkon dan auron  tidak  memberikan  reaksi  pada  reaksi ini. Tujuan penambahan serbuk Mg dan HCl untuk  memutuskan  ikatan  antara  glikosida dengan  flavonoid.  Kemudian,  ditambahkan dengan amil alkohol untuk menarik flavonoid  yang  bersifat  polar  (  Haneefa et al. ,  2010;  Santos, et  al .,  2019).  Berdasarkan hasil  pengujian  pada  kedua  sampel,  cincin yang terbentuk pada permukaan lapisan amil alkohol berwarna jingga. Berdasarkan (Farnsworth,  1966)  terbentuknya  warna kuning  kemerahan  hingga  hingga  merah muda  teridentifikasi  kedalam  golongan flavonoid  pigmen  antosianin.  Penelitian (Anjali et al. , 2019) menunjukkan kandungan  selada  laut  adalah  alkaloid, flavonoid,  saponin,  steroid  dan  terpenoid. Namun  perlu  dilakukan  uji  konfirmasi  agar tidak  terjadi  reaksi  positif  palsu  dengan
kuinon.  Disisi  lain,  flavonoid  merupakan metabolit  sekunder  yang  memiliki  aktivitas antioksidan dan antikanker.
Golongan  Polifenol. Golongan  polifenol akan  membentuk  kompleks  Fe(OH) 3 yang berwarna  biru  hitam  apabila  direaksikan dengan  pereaksi  FeCl 3 (J,  Prarthana,  2017). Pada pengujian ini, hanya simplisia (Spirogyra  sp) yang  memberikan  reaksi positif.  Hal  ini  sesuai  denganpenelitian (Kumar et  al. ,  2015)  yang  menyatakan kandungan  polifenol  total  dari  ekstrak mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) sangat tinggi.  Sementara  itu,  tidak  terdeteksinya golongan  polifenol  pada  simplisia (Ulva lactuca) dapat  diakibatkan  oleh  jumlah polifenol  yang  sedikit,  karena  itu  perlu dilakukan    penyemprotan  penampak  bercak FeCl 3 pada  plat  kromatogram  lapis  tipis dilakukan  untuk  memastikan  keberadaan polifenol pada simplisia (Ulva lactuca) . Golongan  Tanin. Reaksi  positif  golongan tannin  terhidrolisis  ditunjukkan  simplisia (Spirogyra  sp) karena  terbentuk  endapan putih  setelah  penambahan  pereaksi  gelatin. Tidak  terbentuknya  endapan  merah  muda setelah kedua simplisia ditambahkan pereaksi Steasny membuktikan kedua simplisa  tidak  mengandung  tanin  katekat (tanin  terkondensasi).  Penelitian  (Anjali et al. ,  2019)  menunjukkan  kandungan  selada laut  adalah  alkaloid,  flavonoid,  saponin, steroid dan terpenoid. Seringkali protein juga memberikan  reaksi  yang  positif  dalam identifikasi  tanin  karena  protein  juga  dapat memberikan  ikatan  yang  kompleks  dengan polifenol  yang  merupakan  sekelompok  tanin alami.  Oleh  karena  itu  perlu,    untuk  reaksi positif  palsu  tannin  dengan  menggunakan  3 bagian,  bagian  pertama  diisi  larutan  NaCl, bagian  kedua  diisi  gelatin  dan  bagian  ketiga campuran  NaCl-gelatin.  Apabila  terjadi pengendapan  pada  bagian  dua  dan  tiga membuktikan  keberadaan  tannin.    Pada penelitian yang telah dilakukan, uji konfirmasi  tannin  menggunakan  penampak bercak  FeCl 3 pada  plat  kromatogafi  lapis tipis (Farnsworth, 1966).
Golongan  Monoterpen  dan  Seskuiterpen. Golongan monoterpen dan seskuiterpen yang
terdeteksi  pada  kedua  simplisia  disebabkan oleh  reaksi  oksidasi  dan  eliminasi  antara anisaldehid  asam  sulfat  dengan  sampel sehingga mengakibatkan terbukanya komponen  siklik  mono-  atau  seskuiterpen dan  berubah  menjadi  gugus  kromofor  yang terdeteksi  melalui  perubahan  warna.  (Liu et al. , 2020). Penelitian (Sahayaraj et al. , 2019) menunjukkan bahwa terpenoid terindetifikasi pada selada laut.
Golongan Kuinon.
Pereaksi KOH digunakan  dalam  analisis  karena  dapat menambah  gugus  hidroksil  pada  struktur senyawa  sehingga    golongan  kuinon  dapat teridentifikasi  (J,  Prarthana,  2017).  Pada deteksi  awal,  simplisia  mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) dinyatakan  mengandung kuinon.  Namun,  penelitian  sebelumnya menyatakan bahwa mikroalga filamen (Spirogyra sp) mengandung proantosianidin, flavonoid dan polifenol (Kumar et al. , 2015). Perlu  dilakukan  uji  konfirmasi  kuinon  pada simplisia  mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) perairan Indonesia agar tidak tertukar dengan golongan flavonoid.
Sementara itu, berdasarkan hasil penelitian,  simplisia  selada  laut (Ulva lactuca) dinyatakan  negatif  mengandung kuinon.  Ini  menunjukkan  bahwa  simplisia tidak  mengandung  kuinon  atau  kuinon  yang tersedia terikat dengan gula sebagai glikosida  seperti  dimer  kuinol  yang  tampak tidak  berwarna  (Awad et  al. ,  2001).  Hal  ini
sesuai dengan penelitian (Anjali et al. , 2019) yang  menyatakan  tidak  terdeteksi  kuinon pada sampel selada laut.
Pola Pemantauan

## Kromatogram.
Kromatografi  lapis  tipis  adalah  teknik  yang digunakan  untuk  memastikan  keberadaan senyawa  metabolit  sekunder  berdasarkan pergerakan  spot,  nilai  Rf  serta  fluoresensi (Windyaswari et al. , 2019). Pola kromatogram  kedua  simplisia  disajikan dalam tabel 5 dan 6 berikut:
Data  pola  kromatogram  lapis  tipis  pada tabel  5,  selada  laut  ( Ulva  lactuca )  dari perairan  Indonesia  menggunakan  3  sistem fase gerak berturut-turut yaitu n- heksana:CHCl3 (3,3:7,7), etil asetat: kloroform  (5:5)  dan  n-heksana:etil  asetat (9:1),  Rf=0,67  dengan  spot  yang  berwarna warni.
Menurut  (Markham,  1982)  warna  spot yang  berfluoresensi  menjadi  ungu  dibawah sinar UV 365nm mengidentifikasikan flavonoid golongan flavon,flavonol, flavanon, isoflavon dan khalkon. Sementara itu, warna spot  yang  berfluoresensi  menjadi  hijau terang dibawah sinar UV 365nm mengidentifikasikan flavonoid golongan auron  dan  warna  spot  yang  berfluoresensi menjadi biru dibawah sinar UV 365nm mengidentifikasikan flavonoid golongan flavanon,  flavon,  khalkon,  flavonol  dan isoflavon.
Tabel 5. Data KLT Selada Laut  ( Ulva lactuca) Fase diam/ pelarut Sistem fase gerak Perbandingan Fase Gerak Rf Pengamatan Visual  UV 254 nm UV 365 nm DPPH 0,2% Silika GF 254 /EtOH n-heksana:CHCl 3 (3,3:7,7) - Hijau Hitam Ungu (+) Kuning Silika GF 254 /EtOAc EtOAc:CHCl 3 (5:5) - Hijau Hitam Hijau terang (+) Kuning Silika GF 254 /EtOAc EtOAc:CHCl 3 (5:5) - Hijau Hitam Biru (+) Kuning Silika GF 254 / n-heksana n-heksana:EtOAc (9:1) 0,67 Hijau kuning Hitam Merah muda (+) Kuning Tabel 6. Data  KLT Mikroalga Filamen (Spirogyra sp) Fase diam/ pelarut Sistem fase gerak Perbandingan Fase Gerak Rf Pengamatan Visual  UV 254 nm UV 365 nm DPPH 0,2% Silika GF 254 /EtOH EtOAc:asam format:air (17:2:1) 0,53 Hijau Hitam Ungu kehijauan (+) Kuning Silika GF 254 /EtOH EtOAc:asam format:air (17:2:1) 0,43 Hijau Hitam Kuning terang (+) Kuning Silika GF 254 /EtOAc EtOAc:CHCl 3 (9:1) 0,67 Hijau Hitam Hijau terang (+) Kuning Silika GF 254 /n- heksana n-heksana:EtOAc (4:6) 0,37 Hijau kuning Hitam Merah muda, jingga (+) Kuning
DOI: 10.26874/kjif.v7i2. 288
Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  (Anjali et  al. ,  2019)  yang  menyatakan  salah  satu kandungan  selada  laut  adalah  flavonoid. Untuk  memastikan  golongan  flavonoid diperlukan uji konfirmasi dengan menggunakan  uap  ammonia  serta  penampak bercak  spesifik  citroborat  dan  aluminum klorida.  Disisi  lain,  salah  satu  metabolit sekunder  yang terkandung dalam selada laut (Ulva  lactuca) dari  selat  Bosphorus  bersifat sebagai antioksidan adalah golongan flavonoid  yaitu  katekin  hidrat,  rutin  hidrat, kuersetin yang bersifat polar (lipofilik), yang teridentifikasi  dalam  system  polar  yaitu methanol:air  (Aslan et  al. ,  2019).  Pada  pola kromatogram  lapis  tipis  selada  laut (Ulva lactuca) dari perairan Indonesia, seluruh spot dengan  variasi  sistem  fase  gerak  semi  polar memberikan reaksi positif peredaman radikal bebas  DPPH  yaitu  perubahan  warna  kuning pada  latar  ungu.  Dalam  hal  ini,  terlihat perbedaan  kepolaran  flavonoid,  hal  ini membuktikan bahwa habitat tumbuh mempengaruhi biosintesis metabolit sekunder  pada  suatu  spesies.    Hal  lain  yang menarik  adalah  keberadaan  spot  dibawah sinar  UV 365nm berwarna  merah  muda  pada sistem  fase  gerak  nonpolar  n-heksana:etil asetat  (9:1)  dengan  nilai  Rf  =  0,67  yang memberikan reaksi positif peredaman radikal bebas DPPH. Berdasarkan penelitian (Sahayaraj et  al. ,  2019)  selada  laut (Ulva lactuca) dari pesisir pulau Thoothukudi Har, Tamil  Nadu,  India  memiliki  kandungan terpenoid  dan  asam  palmitat  yang  berperan sebagai agen pereduksi. Terpenoid merupakan  metabolit  sekunder  yang  bersifat non  polar  dan  banyak  ditemukan  pada ekstrak  dengan  pelarut  non  polar  (n-heksan, benzen).  Keberadaan  golongan  terpenoid pada selada laut (Ulva lactuca) dari perairan Indonesia  perlu  dipastikan  dengan  pereaksi spesifik anisaldehida-asam sulfat.
Data  pola  kromatogram  lapis  tipis  pada tabel  6,  mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) dari  perairan  Indonesia  menggunakan  3 sistem  fase  gerak  berturut-turut  yaitu  etil asetat:  asam  format:  air  (17:2:1),    Rf  =  0,53 dan  0,  43;  etil  asetat:kloroform    (9:1),  Rf  = 0,67 dan n-heksana:etil asetat (4:6), Rf=0,37
dengan  spot  yang  berwarna  warni.  Menurut (Markham, 1982) warna spot yang berfluoresensi  menjadi  ungu  dibawah  sinar UV 365nm mengidentifikasikan flavonoid golongan flavon,flavonol, flavanon, isoflavon  dan  khalkon.  Sementara  itu,warna spot  yang  berfluoresensi  menjadi  merah muda  dan  kuning  terang  dibawah  sinar UV 365nm merupakan  flavonoid  golongan flavonol, auron, antosianidin, dan warna spot yang  berfluoresensi  hijau  terang  dibawah sinar UV 365nm mengidentifikasikan flavonoid golongan  auron.  Hal  ini  sejalan  dengan penelitian  (Kumar et  al. ,  2015)  yang menyatakan bahwa ekstrak mikroalga filamen (Spirogyra  sp) pada  habitat  kolam gurun pasir dingin trans-Himalaya mengandung  proantosianidin,  flavonoid  dan polifenol yang tinggi. Hal ini juga menjelaskan terdeteksinya golongan polifenol  pada  penapisan  fitokimia  dengan pereaksi  FeCl 3. Golongan  polifenol  dan flavonoid  merupakan  antioksidan  alam dengan kemampuan memutus reaksi berantai radikal bebas.
Uji  Aktivitas  Antioksidan. Penelitian (Sahayaraj et  al. ,  2019)  selada  laut (Ulva lactuca) memiliki  kandungan  terpenoid  dan asam  palmitat  yang  berperan  sebagai  agen pereduksi.  Penelitian  (Anjali et  al. ,  2019) menunjukkan  kandungan  selada  laut  adalah alkaloid,  flavonoid,  saponin,  steroid  dan terpenoid yang memiliki aktivitas antioksidan dan antikanker.
Disisi  lain,  penelitian  (Kumar et  al. , 2015)  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) pada habitat  kolam gurun  pasir  dingin  trans- Himalaya mengandung proantosianidin, flavonoid  dan  polifenol  yang  tinggi,  diduga bertanggung jawab atas aktivitas antioksidan,  antikanker  dan  antibakteri  pada mikroalga filamen (Spirogyra sp).
Hal  ini melatarbelakangi penelitian untuk melakukan uji pendahuluan sederhana deteksi  aktivitas  antioksidan  dari  sampel  uji dengan  penampak  bercak  radikal  bebas DPPH 0,02% dalam methanol menggunakan teknik dinamolisis.
Tabel 7. Uji Pendahuluan Aktivitas Antioksidan Simplisia Pelarut Uji Pendahuluan Antioksidan Luas zona (cm) Ulva lactuca Etanol (+) kuning jingga 1,56 Etil asetat (+) kuning jingga 1,78 n-heksana (+) kuning lemah 0,89 Spirogyra sp Etanol (+) kuning terang 3,23 Etil asetat (+) kuning terang 3,50 n-heksana (+) kuning 2,67 Hasil  uji  pendahuluan  dapat  dijadikan landasan untuk menentukan kekuatan aktivitas antioksidan suatu sampel secara in- vitro  dan  in-vivo.  Data  uji  pendahuluan aktivitas  antioksidan  pada  kedua  sampel dengan metode dinamolisis tersaji pada tabel 7.
Dari hasil pengujian aktivitas pendahuluan  yang  dilakukan  pada  tabel  7, kedua simplisia memiliki aktivitas antioksidan. Keberadaan aktivitas antioksidan  dinyatakan  dengan  perubahan zona  kuning  pada  latar  belakang  ungu diakibatkan  oleh  reaksi  oksidasi  reduksi antara  senyawa  antioksidan  dengan  radikal bebas DPPH yang berwarna ungu. Terbentuknya zona kuning setelah disebabkan  oleh  senyawa  antioksidan  dalam sampel  yang  dapat  mendonorkan  atom hidrogen  ketika  bereaksi  dengan  molekul DPPH  sehingga  mengakibatkan  molekul DPPH tereduksi dan menyebabkan perubahan  warna  radikal  bebas  DPPH  dari ungu  menjadi  kuning  (Kannan,  Arumugam dan  Anantharaman,  2010).  Namun,  besaran luas zona kuning tidak memastikan kekuatan antioksidan tersebut. Kemampuan penangkapan  radikal  DPPH  oleh  suatu antioksidan  dinyatakan  dengan  nilai  persen peredaman  radikal  bebas.  Nilai  yang semakin  tinggi  menunjukkan  bahwa  sampel senyawa  yang  diduga  memang  berpotensi sebagai  antioksidan.  Menurut  (Taya et  al. , 2016)  intensitas  antioksidan  dinyatakan berdasarkan  konsentrasi  IC 50. Suatu antioksidan  dinyatakan  sangat  kuat  apabila memiliki  nilai  IC 50 <50  ppm.  Untuk memastikan  kekuatan  aktivitas  antioksidan dari  simplisia  selada  hijau  ( Ulva  lactuca) dan  mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) perlu dilakukan  penentuan  nilai  IC 50 dari  masing-
masing  sampel  uji  (Windyaswari et  al. , 2019).

## Kesimpulan
Selada hijau (Ulva lactuca) dan mikroalga  filamen  mengandung  karbohidrat dan  protein.  Metabolit  sekunder  yang terdeteksi  pada  simplisia  selada  hijau (Ulva lactuca) adalah  alkaloid,  flavonoid,  mono dan  seskuiterpenoid.  Disisi  lain,  simplisia mikroalga filamen ( Spirogyra sp ) mengandung  alkaloid,  flavonoid,  fenol, kuinon  serta  mono  dan  seskuiterpenoid. Berdasarkan kepolaran, senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan pada simplisia selada  laut (Ulva  lactuca) dan  simplisia mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) termasuk kedalam  golongan  semi  polar  hingga  polar yang  terpola  dalam  kromatogram  dengan system  pengelusi  bervariasi.    Umumnya, metabolit  sekunder  yang  memiliki  aktivitas antioksidan  alam  golongan  semi  polar hingga  polar  adalah  golongan  fenolik  dan turunannya  yaitu  tannin,  flavonoid  serta senyawa  terpenoid  sederhana  (mono  dan seskuiterpen). Penelitian ini berhasil mengidentifikasi  aktivitas  antioksidan  pada simplisia  selada  hijau (Ulva  lactuca) dan mikroalga  filamen (Spirogyra  sp) secara kualitatif.  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan penetapan  kadar  aktivitas  secara  kuantitatif dengan parameter uji adalah nilai peredaman radikal bebas adalah IC 50 . Jika nilai IC 50 <50 ppm    maka  kedua  simplisia  bahari  yaitu selada  laut  ( Ulva  lactuca) dan  mikrolaga filamen  ( Spirogyra  sp )  memiliki  intensitas sangat kuat sebagai antioksidan dan merupakan  bahan  alam  bahari    potensial untuk dikembangkan menjadi sumber antioksidan alam. (Taya et al. , 2016).

## Ucapan Terimakasih
Ucapan  terimakasih  kami  sampaikan kepada LPPM UNJANI yang telah mendanai penelitian  ini  serta  penyediaan  sampel  uji yang difasilitasi oleh Fakultas Perikanan dan Ilmu  Kelautan  Universitas  Brawijaya  dan Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan Institut Pertanian Bogor.

## Daftar Pustaka
Adusei,  S. et  al. (2019)  “Phytochemical analysis,  antioxidant  and  metal  chelating capacity  of  Tetrapleura  tetraptera,”
Heliyon .
Ahmed. S. Dwaish, D. Y. M. Y. and S. N. L. (2016)  “Use  of  Spirogyra  sp.  Extract Against  Multidrug  Resistant  Bacterial pathogens,” International  Journal  of Advanced Research , 4(4), hal. 144–149.
Anjali, K. P. et al. (2019) “Bioprospecting of seaweeds
(Ulva lactuca and
Stoechospermum marginatum):
The compound characterization and functional applications  in  medicine-a  comparative study,” Journal  of  Photochemistry  and Photobiology B: Biology . Elsevier, 200(April), hal. 111622.
Aslan,  E. et  al. (2019)  “Monitoring  the antioxidant  activities  by  extracting  the polyphenolic  contents  of  algae  collected from  the  Bosphorus,” Marine  Pollution Bulletin .  Elsevier,  141(February),  hal. 313–317.
Awad,  H.  M. et  al. (2001)  “Structure  - Activity  study  on  the  quinone/quinone methide chemistry of flavonoids,” Chemical  Research  in  Toxicology ,  14(4), hal. 398–408.
Bajpai,  V.  K.  (2016)  “Antimicrobial bioactive  compounds  from  marine  algae: A  mini  review,” Indian  Journal  of  Geo- Marine Sciences , hal. 1076–1085.
Banaee,  M.,  Taheri,  S.  dan  Hedayatzadeh (2018)  “Effects  of  Cadmium  and Dimethoate  on  Some  Biological  and Biochemical  Indices  in  Freshwater  Green Algae, Spirogyra sp,” 4(4), hal. 593–603.
Barfoed, C. (1873) “Ueber die Nachweisung des  Traubenzuckers  neben  Dextrin  und verwandten  Körpern,” Zeitschrift  für Analytische Chemie , 12(1), hal. 27–32.
Brunt,  E.  .  dan  Burgess,  J.  .  (2016)  “The promise  of  marine  molecules  as  cosmetic active  ingredients,” International  Journal of  Laboratory  Hematology ,  38(1),  hal. 42–49.
Champa, P. dan et al (2016) “Determination of phytochemical compound from Spirogyra  sp.  using  ultrasonic  assisted extraction,” International  Journal  of GEOMATE , 11(2), hal. 2391–2396.
Deethae,  A. et  al. (2018)  “Inhibitory  effect of  Spirogyra  spp.  algal  extracts  against herpes  simplex  virus  type  1  and  2 infection.,” journal of applied microbiology , 124(6), hal. 1441–1446.
Departemen Kesehatan RI (2000) Parameter Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat . Pertama.  Jakarta:  Direktorat  Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan.
Farnsworth,  N.  .  (1966)  “Biological  and Phytochemical  Screening  of  Plants,”
Pharmaceutical  Science ,  151(3712),  hal. 874–875.
Guidone,  M. et  al. (2013)  “Molecular  and morphological  diversity  of  Narragansett Bay (RI, USA) Ulva (Ulvales, Chlorophyta)  populations,” Journal  of Phycology , 49(5), hal. 979–995.
J,  Prarthana,    et  al  (2017)  “Screening  of Phytochemicals & Bioactive Antibacterial Activity  in  Spirogyra  Sp.,” International Journal  of  Advanced  Research ,  5(7),  hal. 1145–1154.
Kannan,  R.  R.  R.,  Arumugam,  R.  dan Anantharaman,  P.  (2010)  “In  vitro antioxidant  activities  of  ethanol  extract from  Enhalus  acoroides  (L.F.)  Royle,” Asian Pacific  Journal  of Tropical Medicine , 3(11), hal. 898–901.
Kidgell,  J.  T. et  al. (2019)  “Ulvan:  A systematic review of extraction, composition and function,” Algal
Research . Elsevier, 39(March), hal.
101422.
Ktari,  L.  (2017)  “Pharmacological  Potential of  Ulva  Species:  A  Valuable  Resource,” Journal  of  Analytical  &  Pharmaceutical Research , 6(1), hal. 1–4.
Kumar, J. et al. (2015)  “Chemical composition  and  biological  activities  of trans-Himalayan alga Spirogyra porticalis (Muell.)  Cleve,” PLoS  ONE ,  10(2),  hal. 1–24.
Lee,  H.  W.,  Kang,  J.  C.  dan  Kim,  M.  S. (2019)  “Taxonomy  of  ulva  causing blooms  from  jeju  island,  korea  with  new species, u. Pseudo-ohnoi sp. nov. (ulvales, chlorophyta),” Algae , 34(4), hal. 253–266.
Liu, H. et al. (2020) “Chemical composition, algicidal,  antimicrobial,  and  antioxidant activities of the essential oils of Taiwania flousiana Gaussen,” Molecules , 25(4).
Madalena silva,  Luis  Veira, A. P. A. and A. K. (2013) “The Marine Macroalgae of the Genus Ulva: Chemistry, Biological
Activities  and  Potential  Applications,”
Oceanography: Open Access , 01(01), hal. 1–6.
Markham,  K.  .  (1982) Techniques  of flavonoid  identification .  Academic  Press Inc.(London) ltd.
Mesbahzadeh,  B. et  al. (2018)  “Beneficial effects  of  Spirogyra  Neglecta  Extract  on antioxidant  and  anti-inflammatory  factors in  streptozotocin-induced  diabetic  rats,” Biomolecular  Concepts ,  9(1),  hal.  184– 189.
MEYER, H. (1957) “The ninhydrin reaction and  its  analytical  applications.,” The Biochemical journal , 67(2), hal. 333–340.
Mohammed  Haneefa,  K.  P. et  al. (2010) “Formulation and evaluation of herbal gel of  Pothos  scandens  Linn,” Asian  Pacific Journal  of  Tropical  Medicine ,  3(12),  hal. 988–992.
Nurjannah,  L. et  al. (2017)  “Produksi  Asam Laktat  oleh  Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus dengan Sumber Karbon
Tetes  Tebu,” Jurnal  Teknologi  dan Industri Pertanian Indonesia , 9(1), hal. 1–
9.
Van de Poel, B. et al. (2016) “Transcriptome profiling  of  the  green  alga  Spirogyra pratensis (Charophyta) suggests an ancestral...,” Plant  Physiology ,  hal.  705– 720.
Sahayaraj, K. et al. (2019)  “Green preparation of seaweed-based silver nano- liquid  for  cotton  pathogenic  fungi management,” IET  Nanobiotechnology , 13(2), hal. 219–225.
Santos,  M.,  Fortunato,  R.  H.  dan  Spotorno, V.  G.  (2019)  “Analysis  of  flavonoid glycosides with potential medicinal properties  on  Bauhinia  uruguayensis  and Bauhinia  forficata  subspecies  pruinosa.,”
Natural  Product  Research .  Taylor  &
Francis, 33(17), hal. 2574–2578.
Surayot,  U. et  al. (2015)  “Characterization and  immunomodulatory  activities  of polysaccharides  from  Spirogyra  neglecta (Hassall) Kützing,”
Bioscience,
Biotechnology  and  Biochemistry ,  79(10), hal. 1644–1653.
Tabarsa,  M. et  al. (2012)  “Chemical compositions of the marine algae Gracilaria  salicornia  (Rhodophyta)  and Ulva  lactuca  (Chlorophyta)  as  a  potential food  source,” Journal  of  the  Science  of Food and Agriculture , 92(12), hal. 2500– 2506.
Takano, T. et al. (2019) “Identification of 13
Spirogyra  species  (Zygnemataceae)  by traits  of  sexual  reproduction  induced under  laboratory  culture  conditions,”
Scientific Reports , 9(1), hal. 1–11.
Taya,  S. et  al. (2016)  “Preventive  effects  of Spirogyra  neglecta  and  a  polysaccharide extract  against  dextran  sodium  sulfate induced  colitis  in  mice,” Asian  Pacific Journal of Cancer Prevention , 17(4), hal. 2235–2245.
Wang,  L. et  al. (2014) Overview  on Biological Activities and Molecular Characteristics of Sulfated
DOI: 10.26874/kjif.v7i2. 288
Polysaccharides  from  Marine  Green Algaein Recent Years .
Windyaswari, A. S. et al. (2019) “Phytochemical  profile  of  sea  grass extract  (Enhalus  acoroides):  A  new marine  source  from  Ekas  Bay,  East Lombok,” IOP  Conference  Series:  Earth and Environmental Science , 278(1).
Yaich,  H. et  al. (2017)  “Effect  of  extraction procedures  on  structural,  thermal  and antioxidant properties of ulvan from Ulva lactuca  collected  in  Monastir  coast,”
International Journal of Biological Macromolecules .  Elsevier  B.V.,  105,  hal.
1430–1439.
Yoon,  M. et  al. (2013)  “Proteomic  analysis of  Spirogyra  varians  mutant  with  high starch content and growth rate induced by gamma  irradiation,” Bioprocess  and Biosystems  Engineering ,  36(6),  hal.  765– 774.