ANALISA JUMLAH KOLONI BAKTERI Escherichia coli PADA MEDIA NUTRIENT AGAR DENGAN PELARUT AKUADES DAN AIR MINUM DALAM KEMASAN (AMDK) Bastian 1* , Indah Sari 1 , Annisa Fitri 1
1, Program Studi DIV Teknologi Laboratorium Medis IKesT Muhammadiyah Palembang Korespondensi Email : Bastiandarwin51@gmail.com

## ABSTRAK
Pendahuluan: Penyakit  diaere  yang  di  sebabkan Escherichia  coli patogen  bahwa  ada sekitar  dua  miliar  kasus  diare  diseluruh  dunia  setiap  tahun,  dan  1,9  juta  anak  balita meninggal akibat diare setiap tahunnya. Standar pelarut dalam pembuatan media nutrient agar  adalah  akuades,  Tetapi  di  daerah-daerah  tertentu  masih  belum  terjangkau  untuk mendapatkan  akuades,  selain  harganya  yang  mahal  jangkauan  untuk  mendapatkan akuades  tidaklah  mudah  karena  alat  untuk  pembuatan  akuades  masih  cukup  mahal. upaya  yang  dapat  dilakukan  adalah  menggunakan  pelarut  alternatif,  dimana  air  minum dalam kemasan adalah air baku yang telah diproses, dikemas, dan aman diminum. Tujuan untuk mengetahui perbedaan jumlah koloni bakteri E.coli pada media nutrien agar dengan pelarut  akuades  dan  air  minum  dalam  kemasan. Metode  Penelitian: Eksperimen laboratorium,  yang  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Sains  dan  Teknologi Institut Ilmu Kesehatan dan Teknologi Muhammadiyah Palembang. Sampel berupa Strain Murni  Bakteri Escherichia  coli ATCC  25922. Hasil: penelitian  didapatkan  jumlah  koloni pada  media nutrient  agar  dengan pelarut  akuades mendapatkan nilai  rata-rata  54  koloni, pada  pelarut  air  minum  dalam  kemasan  mendapatkan  rata-rata  59  koloni.  Dan  uji-T berpasangan (paired sampel T test) di dapatkan nilai p =>0.112. Kesimpulan: Penelitian ini  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  jumlah  koloni  bakteri E.coli pada  media nutrient agar dengan pelarut akuades dan air minum dalam kemasan Kata  Kunci  : Media  Nutient  Agar,  pelarut  Akuades,  Pelarut  Air  Minum  Dalam  Kemasan, Escherichia coli
Analysis Of The Number Of Colony Of Escherichia Coli Bacteria On Nutrient Agar Media With Aquades Solution And Packed Drinking Water (AMDK)

## ABSTRACT
Introduction:  Escherichia  coli pathogenic  diarrhea  Diseases  that  there  are  about  two billion  cases of  diarrhea  worldwide  every  year,  and  1.9  million  toddlers  die  from diarrhea every year. Standard solvent in the manufacture of media nutrient agar is aquisity, but in certain areas is not still affordable to get aquis, in addition to the expensive price range to get aquades is not easy because the tools for the manufacture of akuades are still  quite not  expensive.  where  bottled  dringking  water  is  raw  water  that  has  been  processed, packaget, and safe to drink . Purpose: Determine the difference in the bumber of colonies of E.coli bacteria in the nutrient medium agar with aquades solvents and bottled dringking water.  The  type  of  research  used by  laboratory  exposition,  condected  in  the  Microbiologi Laboratory  of  the  Faculty  of  Science  and  Technology  of  the  Muhammadiyah  Institute  of Health  Sciences  and  Technology  Palembang.  Sample  in  the  form  of  pure  strains  of Escherichia coli ATCC 25922 bacteria. Results: Study obtained the number of colonies in media nutrient agar with aquades solvents get an avarage score of 54 colonies, in solvents bottled dringking water get an avarage of 59 colonies. And paired T-test in the value p = 0,112. Conclusion: Study that there is no significant in the number of colinies of bacteria Escherichia coli in media nutrient agar with solvents akuades and bottled dringking water. Keywords :  Media  Nutrient  Agar,  Akuades  solvents,  bottled  dringking  water  (AMDK), Escherichia coli
10.52523/maskermedika.v9i1.457

## PENDAHULUAN
Escherichia  coli adalah  salah  satu jenis spesies utama bakteri gram negatif berbentuk batang yang tidak membentuk spora  dan  merupakan  flora  normal  di usus.  Bakteri Escherichia  coli banyak digunakan  sebagai  indikator  sanitasi Secara teoritis, ribuan jenis produk kimia bisa  dihasilkan  oleh  bakteri  ini  dengan syarat  genetikanya  sudah  direkayasa sedemikian rupa sehingga dapat menghasilkan jenis produk tertentu yang diinginkan. Mengingat besarnya peranan ilmu  bioteknologi  dalam  aspek-aspek kehidupan  manusia. Escherichia  coli tidak dapat dibunuh dengan pendinginan maupun  pembekuan,  Bakteri  ini  hanya bisa  dibunuh  oleh  antiobiotik,  sinar Ultraviolet  (UV),  atau  suhu  tinggi >100°C.  Suhu  tinggi  akan  merusak protein dalam sel (Kuswiyanto,2014).
Media merupakan sarana pertumbuhan  yang  mengandung  nutrisi yang  dibutuhkan  oleh  mikroorganisme sebagai  makanannya.  Nutrient  agar (NA)  adalah  salah  satu  contoh  media yang sering digunakan untuk
menumbuhkan
dan mengembangbiakkan  bakteri.  Unsur- unsur  yang  dibutuhkan  mikroorganisme untuk  pertumbuhan  meliputi  karbon, nitrogen,  unsur  non  logam seperti  sulfur dan  fosfor,  unsur  logam  seperti  Ca,  Zn, Na, K, Cu, Mn, Mg, dan Fe, vitamin, air, dan energi (Thohara, 2019).
Media nutrient agar dalam pembuatannya  menggunakan  pelarut akuades, tetapi di daerah-daerah tertentu  masih  belum  terjangkau  untuk mendapatkan  akuades,  selain  harganya yang mahal jangkauan untuk mendapatkan  akuades  tidaklah  mudah karena  alat  untuk  pembuaatan  akuades masih cukup mahal. Untuk itu digunakan pelarut alternatif yang mudah di jangkau dan  di  temui  di  daerah-daerah  yaitu  air minum dalam kemasan.
Air mineral (AMDK) dapat dikonsumsi dan dapat digunakan sebagai pelarut alternatif karena komponennya tidak bersifat toksik
terhadap organisma. Ketersediaan AMDK  mudah  di  temui  dimana  saja, proses  pembuatannya  relatif  mudah, harganya  murah  dibanding  akuades (Arpa, 2019).
Air minum dalam kemasan (AMDK) adalah  air  baku  yang  telah  diproses  dan dikemas serta aman untuk diminum. Pada dasarnya  Air  Minum  Dalam  Kemasan (AMDK)  diproses  melalui  3  tahap,  yaitu penyaringan,  disinfeksi,  dan  pengisian. Penyaringan dimaksudkan untuk menghilangkan partikel padat dan gas-gas yang  terkandung  dalam  air.  Disinfeksi bertujuan untuk membunuh bakteri patogen  dalam  air.  Pengisian  merupakan tahap  akhir  proses  produksi  dimana  air dimasukkan  melalui  sebuah  peralatan yang  dapat  melindungi  air  tersebut  dari kontaminasi  selama  pengisian  kemasan (Gafur dkk, 2017).
Identifikasi koloni bakteri dilakukan dengan  menggunakan  uji  biokimia  yang bertujuan  untuk  menentukan  kemampuan bakteri  memproduksi  gas  H 2 S,  adanya kemampuan  bakteri  untuk  menggunakan sumber  energi  lain  (uji  urea,  nitrat,  dan sitrat), sifat metabolisme (uji O/F), fermentasi gula (glukosa, sukrosa, manitol,  laktosa),  dan  produksi  asam campuran  (MR-VP)  serta  kemampuan bakteri untuk bergerak (uji SIM). Pengujian  dilakukan  dengan  cara  ose dipanaskan  sampai  berpijar  kemudian didinginkan,  setelah  itu  koloni  bakteri diambil  dan  ditanam  pada  media  uji biokimia  dan  diamati  perubahan  pada media setelah masa inkubasi 24 jam pada suhu 37°C (Sy a’baniar Lisa, 2017).
Berdasarkan uraian di atas penulis tertarik meneliti Perbedaan Jumlah Koloni Bakteri  Escherichia  Coli  Pada  Media Nutrient  Agar  Dengan  Pelarut  Akuades Dan AMDK.

## METODE
Jenis  Penelitian  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  eksperimen laboratorium. Desain penelitian ini menggunakan  rancangan  penelitia Post
test –  Only Control.  Penelitian  ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi  Fakultas  Ilmu  Teknologi
Institut  Ilmu  Kesehatan  dan  Teknologi Muhammadiyah  Palembang  pada  bulan april sampai mei 2021.
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  strain  murni  bakteri Escherichia  coli ATCC  25922,  media nutrient  agar  (NA),  akuades,  air  minum dalam kemasan  (AMDK),  NaCl,  Standar
Mc Farland. Prosedur Penelitian dilakukan  sterilisasi  alat,  pembuatan media nutrient agar (NA) dengan pelarut akudes,  dan  Pembuatan  media  nutrient agar  (NA)  dengan  pelarut  air  minum dalam kemasan (AMDK).
Data  berupa  jumlah  koloni  (rasio). Data yang di dapatkan dari pemeriksaan laboratorium,  di  olah  secara  elektronik dengan  program  SPSS.  Tes  normalitas menggunakan  uji Shopiro-wilk karena jumlah data <50. Hasil yang di dapatkan dilihat  dari  nilai  sig  >0,05  maka  data dinyatakan berdistribusi normal sedangkan apabila sig <0,05 maka data dinyatakan  tidak  berdistribusi  normal. Bila  hasil  terditribusi  normal  maka dilanjutkan  dengan  uji-t  berpasangan (paired  sampel  T  test)  uji  t  dua  sampel berpasangan
digunakan
untuk
membandingkan  selisih  dua  mean  dari dua  sampel  yang  berpasangan  dengan asumsi data berdistribusi normal (Priyanto, 2016). Bila  hasil  yang  di  dapat  tidak berdistribusi
normal
melakukan transformasi  data,  analisis  yang  di lakukan  bergantung  pada  sebaran  dan varian  hasil  transformasi.  Bila  sebaran tidak  normal  di  lanjutkan  dengan  uji wilcoxon (Dahlan, 2019).

## HASIL
Penelitian
dilakukan untuk
mengetahui  perbedaan  jumlah  koloni bakteri Escherichia  coli pada  media nutrien  agar  (NA)  dengan  pelarut akuades dan air minum dalam kemasan (AMDK).  Berdasarkan  rumus  federer pengulangan pada masing-masing pelarut  sebanyak  16  kali  pada  media
nutrient  agar  (NA)  dengan  pelarut akuades  dan  media  nutrient  agar dengan pelarut air minum dalam kemasan  (AMDK).  Perhitungan  Jumlah koloni  bakteri  dilakukan  setelah  media diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24 jam.
Jumlah  Koloni  Bakteri  Escherichia coli pada media nutrient agar dengan pelarut  akuades  dan  pelarut  air minum dalam kemasan (AMDK)
0 20 40 60 80 1 3 5 7 9 11 13 15

## Perbedaan Jumlah Koloni Bakteri
Escherichia coli ATCC 25922 AKUADES AMDK
Gambar  4.1 Grafik  perbedaan  jumlah koloni  Bakteri Escherichia  coli pada media nutrient agar (NA) dengan pelarut akuades  dan    pelarut  air  minum dalamkemasan (AMDK)
Analisa Data

## Tabel 1 Hasil uji normalitas
Pelarut Sig Batas Keberterimaan Kesimpul an Akuades  .192 p > 0,05* Data Normal AMDK .641 Data Normal
Hasil  tabel  1  mendapatkan  hasil analisis  uji  Tes  Normalitas Shapiro  wilk menunjukkan  bahwa  media  nutrient  agar dengan pelarut akuades di dapatkan hasil sig  0.192,  pada  media  nutrient  agar  (NA) dengan pelarut air minum dalam kemasan (AMDK)  di  dapatkan  hasil  0. 641.  Karena nilai yang didapat sig ≥ 0,05berdasarkan hasil tersebut  maka  normalitas  data  terdistribusi normal.
Tabel  2  Hasil  uji  T  Berpasangan
(paired  T-tes).
Pelarut Sig Batas Keberteri maan Kesimpul an Akuades 0.112 p > 0,05* Data Normal AMDK Data Normal Berdasarkan  tabel  2  mendapatkan hasil uji T berpasangan didapatkan rata- rata  jumlah  koloni  media  nutrient  agar (NA)  dengan  pelarut  akuades  adalah =54  dan  pada  jumlah  koloni  media nutrient  agar  (NA)  dengan  pelarut  air minum  dalam  kemasan  (AMDK)  adalah =59. Pada nilai di atas di dapatkan Nilai p ( Sig  2  Tailed)  =  0.112,  p  >  α  dengan ini nilai signifikan Ho diterima yaitu tidak terdapat perbedaan antara pelarut akuades dan air minum dalam kemasan (AMDK).

## PEMBAHASAN
Hasil  Penelitian  Koloni  Bakteri Escherichia  coli pada  media  nutrient agar (NA) dengan pelarut akuades rata- rata 54 koloni, pada media nutrient agar (NA)  dengan  pelarut  air  minum  dalam kemasan  di  dapatkan  jumlah  koloni dengan  rata-rata  sebanyak  59  koloni,
Sehingga AMDK bisa digunakan
sebagai pelarut alternatif untuk
pertumbuhan bakteri Escherichia coli . Jumlah  koloni  bakteri Escherichia coli pada  media  nutrient  agar  (NA) dengan  pelarut  akuades  dan  air  minum dalam  kemasan,  didapatkan  bahwa jumlah  koloni  pada  media  nutrient  agar dengan pelarut air minum dalam kemasan (AMDK) lebih banyak daripada media nutrient agar (NA) dengan pelarut akuades.
Media  nutrient  agar  (NA)  menjadi media  kultur  bakteri  umum  (universal) yang  memiliki  kandungan  yaitu  0,8% protein,  1,2%  agar  dan  sisanya  adalah air  (merck)  yang  mampu  isolasi  dan pertumbuhan  bakteri  dengan  baik  di laboratorium  mikrobiologi  (Iswara dkk , 2019).
Hasil uji secara mikroskopis bakteri Escherichia  coli adalah  bakteri gram  negatif  dan  berbentuk  batang pendek  (coccobasil).    Identifikasi  bakteri Escherichia  coli pada  uji  IMVIC  (Indol, Methyl  Red,  Voges  Proskauer  dan Simon  Citrate)  didapatkan  hasil  positif pada  uji  indol  dan  methyl  red  kemudian hasil  negatif  pada  uji  voges  proskauer dan  simon  citrate.  Pada  uji  TSIA didapatkan  hasil  positif.  Pada  uji  urea didapatkan  hasil  negatif,  kemudian  uji gula –  gula  (glukosa,  laktosa,  maltosa, manitol  dan  sukrosa)  didapatkan  hasil positif.
Syarat pelarut yang baik yaitu bisa melarutkan  media,  tidak  toksik,  tidak merubah  komponen  media  tersebut, tidak menghambat pertumbuhan bakteri, mempunyai  titik  didih  rendah,  dan mempunyai  pH  pelarut  yang  sesuai dengan kebutuhan mikroorganisme (Duryatmo, 2018).
Air mineral atau AMDK (Air Minum Dalam  Kemasan)  adalah  air  yang mengandung  mineral  dalam  jumlah tertentu  tanpa  menambahkan  mineral atau  tanpa  penambahan  oksigen  (O 2 ) dan  karbondioksida  (CO 2 )  (PerMenperin nomor 78 tahun 2016).
Tahapan  untuk  mendapatkan  air minum  dalam  kemasan  (AMDK)  dimulai dari proses pengambilan danpenampungan  air  baku,  setelah  itu dilakukan penyaringan
dengan makrofilter,  karbon  aktif,  dan  mikrofilter. Tahapan  selanjutnya  yaitu  dilakukan desinfeksi  dengan  ozon,  sinar  UV,  atau ion  silver,  lalu  dilakukan pengisian pada kemasan  yang  steril  kemudian  ditutup. Air  minum  dalam  kemasan  dapat ditambah  oksigen,  karbondioksia,  dan nitrogen. Dalam komposisinya, air minum dalam
kemasan masih mengandung  unsur-unsur  berikut  yang masih  aman  dalam  kebutuhan  manusia seperti  Nitrat  (NO 3 ),  Ammonium  (NH 4 ), Sulfat  (SO4),  Klorida  (CI),  Flourida  (F), Mangan  (Mn),  Besi  (Fe),  dan  Kromium (Cr)  (PerMenPerin  nomor  96  tahun 2011).

## KESIMPULAN  DAN SARAN Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang sudah di lakukan  tentang “Perbedaan  Jumlah Koloni  Bakteri Escherichia  coli pada Media Nutrien Agar (NA) dengan Pelarut
Akuades dan Air Minum Dalam
Kemasan  (AMDK)”  dapat  di  simpulkan bahwa. Berdasarkan penelitian rata- rata jumlah  koloni  bakteri Escherichia  coli pada  media  nutrient  agar  (NA)  dengan pelarut akuades sebanyak 54 koloni dan rata- rata jumlah koloni bakteri Escherichia  coli pada  media  Nutrient Agar  (NA)  dengan  pelarut  air  minum dalam  kemasan  (AMDK)  sebanyak  59 koloni  yang  artinya  tidak  Terdapat perbedaan  signifikan    jumlah  koloni bakteri Escherichia  coli pada  media nutrient  agar  (NA)  dengan  pelarut akuades dan air minum dalam kemasan (AMDK).

## Saran
Perlu  dilakukan  pengujian  untuk mengetahui  spesies  atau  bakteri  lainnya yang  dapat  tumbuh  pada  media  nutrient agar  dengan  pelarut  air  minum  dalam kemasan.  Bagi  peneliti  selanjutnya  perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  terhadap perbedaan karakteristik koloni Escherichia coli pada media nutrien agar (NA) dengan pelarut  akuades  dan  air  minum  dalam kemasan (AMDK).

## KONFLIK KEPENTINGAN :
Tidak  ada  potensi  konflik  kepentingan yang  dilaporkan  oleh  penulis,  jika  tidak memiliki  konflik  kepentingan  terhadap penelitan yang akan dipublikasikan.

## KEPUSTAKAAN
Arpa  Putri  Agustin.  2020. Perbedaan Jumlah  Koloni  Staphylococcus epidermidis  pada  media  Nutrient Agar  yang  menggunakan  pelarut akuades  dan  air  minum  dalam kemasan.
Dahlan  M.  S  2014. statistik  untuk kedokteran dan kesehatan deskriptif  bivariat  dan  multivariat dilengkapi aplikasi menggunakan spss.
Duryatmo,  Sard  (2018).  Pacu  Produksi dan Mutu Nilam. Jakarta : Trubus Swadaya . Gafur.  Abd,  Kartini  Andi  Rahmat,
Rahman.  2017. Studi  Kualitas Fisik Kimia dan Biologis pada Air Minum Dalam Kemasan Berbagai  Merek  yang  Beredar  di Kota Makassar Tahun 2106 . 3 (1) : 38-46 Juaria  Siti,  Sari  Wulan  Puspa.  2018. Pemanfaatan Limbah Cair Industri Tahu Sebagai MediaAlternatif    Pertumbuhan Bacillus  sp .  Analisis  Klinikal
Sains. 6 (1) : 24-28 Kuswiyanto.  2014. Bakteriologi  2 .  Buku Ajar Analis Kesehatan Peraturan Menteri Perindustrian Republik  Indonesia  Nomor  78 Tahun 2016. Tentang Pemberlakuan  Standar  Nasional Indonesia Air Mineral, Air Demineral,  Air  Mineral  Alami, Dan  Air  Minum  Embun  Secara Wajib. Peraturan Menteri Perindustrian Republik  Indonesia  Nomor  96 Tahun 2011. Tentang Persyaratan  Teknis  Industri  Air Minum Dalam Kemasan .
Priyanto  D.  2016. Belajar  alat  analisis data  dan  cara  pengolahannya dengan SPSS Thohari Nofriana Maria, Pastariati,
Istanto  Wisnu. 2019. Pemanfaat Tepung  Kacang  Hijau    (Vigna Radiata L) Sebagai Media Alternatif  NA  (Nutrient  Agar) Untuk Pertumbuhan Bakteri Escherichia Coli . Analisis Kesehatan Sains. 6 (1) : 24-28
Sugiyono.  2016. Metodelogi  Penelitian Kuantitatif, Kualitatif dan R&D Sya’baniar  Lisa,  Erina,  Sayuti  Arman. 2017. Isolasi  dan  identifikasi bakteri asam laktat (BAL) genus lactobacillus  dari  feses  orang utan  sumatera  (pango  abelii)  di kebun  binatang  kasang  kulim zoo  bangkinang  riau. JIMVET. 352-359(3