## Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan
EFEK EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH NAGA MERAH TERHADAP FAGOSITOSIS BAKTERI OLEH MONOSIT
(THE EFFECT OF RED DRAGON FRUIT SKIN ETHANOL EXTRACT ON
BACTERIAL PHAGOCYTOSIS BY MONOCYTES)
Muhammad Raihan Ramdhan 1 , Nurjanah Sriyanti 1 , Sri Betha Putri 2 , Fauzia Rahma Cahyani 2 , Iis Herawati 3 , Eko Fuji Ariyanto 4,5
1 Program Studi Kedokteran Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran, Bandung, Jawa Barat, Indonesia
2 Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran, Bandung, Jawa Barat,
Indonesia
3 Teknologi Laboratorium Medis Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Jawa Barat,
Indonesia
4 Divisi Biokimia dan Biologi Molekuler Departemen Ilmu Kedokteran Dasar Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran, Bandung, Jawa Barat, Indonesia
5 Pusat Studi Genetika Medis Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran, Bandung, Jawa Barat, Indonesia
Email korespondensi: fuji@unpad.ac.id

## ABSTRAK
Prevalensi penyakit infeksi di Indonesia masih tinggi, di antaranya Infeksi Saluran Pernapasan Atas (ISPA) 9,3% dan diare 8%. Penyakit infeksi menjadi penyebab kematian kedua tertinggi pada kelompok usia > 55 tahun setelah penyakit pada sistem peredaran darah. Buah naga  merah ( Hylocereus lemairei (Hook.) Britton & Rose) memiliki manfaat bagi kesehatan, namun saat ini  kulit  buah  naga  merah  belum  dimanfaatkan.  Ekstrak  etanol  kulit  buah  naga  juga  telah diketahui berpotensi sebagai antioksidan yang tinggi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek  ekstrak  kulit  buah  naga  merah  terhadap  fagositosis  bakteri  oleh  monosit.  Penelitian dilakukan  dengan  tahapan:  pembuatan  ekstrak  etanol  kulit  buah  naga  merah,  pengambilan sampel darah manusia dan isolasi peripheral blood mononuclear cells (PBMC) dan monosit, pemberian ekstrak etanol kulit buah naga merah ke dalam sumuran monosit, pengujian bakteri uji  menggunakan Staphylococcus  aureus ATCC  29213  dan Escherichia coli ATCC  25922, pengambilan  dan  pengkulturan  bakteri  uji,  dan  penghitungan  jumlah  koloni  bakteri  yang tumbuh. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian ekstrak kulit buah naga merah dengan konsentrasi  10  μg/ml  menghasilkan  efek  yang  paling  besar  dalam  meningkatkan  jumlah S. aureus yang  difagositosis,  yaitu  sebesar  4,31%  dan  ekstrak  dengan  konsentrasi  5  μg/ml meningkatkan  jumlah E.  coli yang  difagositosis  sebesar  1,26%.  Analisis  statistik  tidak menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna  antargrup  ( p >  0,05).  Penelitian  ini  menunjukkan
DOI :
DOI DOI ARTIKEL PENELITIAN
bahwa pemberian ekstrak etanol kulit buah naga merah tidak memberikan efek yang bermakna terhadap fagositosis bakteri oleh monosit.
Kata kunci : Bakteri, ekstrak kulit buah naga, fagositosis, immunomodulator, monosit

## ABSTRACT
The prevalence of  infectious diseases in Indonesia  is still high, including  Upper Respiratory Tract  Infections  (URTI)  9.3%  and  diarrhea  8%.  Infectious  diseases  are  the  second-leading cause of death among people in the age >55 years after diseases of the circulatory system. Red dragon fruit (Hylocereus lemairei (Hook.) Britton & Rose) has been reported to have several benefits for health, while the red dragon fruit skin  has not been used. Ethanol extract  of red dragon fruit skin was known to have high antioxidant potential. This study aims to determine the effect of red dragon fruit skin extract on bacterial phagocytosis by monocytes. This study was  conducted  in  several  steps:  ethanolic  extraction  of  red  dragon  fruit  skin,  human  blood sampling  and  isolation  of  peripheral  blood  mononuclear  cells  (PBMC)  and  monocytes, administration  of  red  dragon  fruit  skin  ethanol  extract  into  monocyte-containing  wells,  and bacterial  growth  testing  and  counting  using  Staphylococcus  aureus  ATCC  29213  and Escherichia coli ATCC 25922. The result showed that red dragon fruit skin ethanol extract with 10  μg/ml  of  concentration  would  produce  the  highest  effect  in  increasing  the  number  of  S. aureus  phagocytosed,  with  a  total  percentage  of  4.31%.  Meanwhile,  the  5  μg/ml  extract increased  the  number  of  E.  coli  phagocytosed  by  1.26%.  Statistical  analysis  did  not  show significant difference among groups (p>0.05). The administration of the ethanol extract did not have a significant effect on bacterial phagocytosis by monocytes.
Keywords:  Bacteria,  immunomodulator,  monocytes,  phagocytosis,  red  dragon  fruit  peel extract

## PENDAHULUAN
Prevalensi  penyakit  infeksi  bakteri di Indonesia masih cukup tinggi, contohnya penyakit  demam  tifoid,  pneumonia,  diare, dan  Infeksi  Saluran  Pernapasan  Akut (ISPA) dengan prevalensi secara berurutan sebesar 1,6%, 4%, 8%, dan 9,3%. 1,2 Di sisi lain,  dengan  kekayaan  flora  Indonesia, penelitian  untuk  menemukan  bahan  baku obat-obatan  untuk  mengatasi  penyakit infeksi berpeluang sangat besar. Salah satu tanaman  yang  dapat  diteliti  dan  digunakan sebagai  bahan  dasar  dari  obat-obatan fitofarmaka  adalah  kulit  buah  naga  merah
( Hylocereus  lemairei (Hook.)  Britton  & Rose).
Kulit  buah  naga  merah  kaya  akan senyawa  fenolik,  flavonoid,  karotenoid, antosianin,  dan  terpenoid.  Selain  itu, terkandung  β-sitosterol,  pektin,  asam galakturonat,  mannose,  galaktosa,  dan xilosa. 3,4 Kulit  buah  naga  merah  telah diketahui dapat mempercepat penyembuhan  luka  akibat  tanin  dan flavonoid  yang  terkandung  di  dalamnya. Kulit buah naga dapat pula memperpendek waktu  perdarahan  pada  dosis  1  mg/BB mencit. 5 Selain itu, kulit buah naga merah
memiliki  aktivitas  antiproliferatif  lebih tinggi  dari  daging  buah  pada  sel  kanker melanoma B16F10. 6 Kulit buah naga merah bersifat  antibakteri  pada Salmonella  typhi dan  ekstrak  kloroform  pada  bakteri  gram positif  dan  negatif  yang  lebih  tinggi  dari kulit buah naga putih. 6,7 Disamping sebagai anti  bakteri,  kulit  buah  naga  merah  juga dapat menurunkan kolesterol total, trigliserida  dan  meningkatkan  level high density  lipoprotein (HDL). 8 Ekstrak  kulit buah  naga  merah  dapat  juga  menurunkan interleukin-1beta (IL-1β) dan  faktor pertumbuhan endotel vaskuler pada endometrium. 9 Penelitian  menunjukkan bahwa  kulit  buah  naga  memiliki  aktivitas antioksidan. 10,11 Diketahui  bahwa  aktivitas antioksidan  ekstrak  etanol  pada  kulit  buah naga  (IC50  0,3  mg/mL)  lebih  tinggi daripada aktivitas antioksidan pada daging  buahnya (IC50 > 1 mg/mL). 12 Kulit buah naga juga memiliki senyawa triterpenoid yang memiliki efek imunomodulator  melalui  kemampuannya menghambat  faktor  transkripsi,  yaitu nuclear  factor  kappa  B (NF-kB), nuclear factor  of  activated  T-cells (NF-AT),  dan signal  transducer  and  activation  of transcription (STATs). 13 Terpenoid  yang terkandung yaitu lupeol. 14,15
Lupeol diketahui  memiliki  aktivitas  antioksidan, mampu  meningkatkan  proliferasi  limfosit dan  produksi Nitric  Oxide (NO)  sehingga potensial sebagai imunostimulan. 16
Perlindungan sistem imun di dalam tubuh  ada 2 jenis, yaitu adaptive immunity (kekebalan  adaptif)  yang  bersifat  lambat namun  spesifik  terhadap  mikroba  tertentu melalui  diferensiasi  limfosit  dan innate immunity (kekebalan bawaan) yang bersifat perlindungan cepat yang langsung bereaksi dengan mikroba yang memasuki jaringan. 17
Salah  satu  sel  pada innate  immunity yaitu sel  monosit  yang  ada  di  dalam  darah. 18
Monosit mempunyai peran dalam memfagositosis  mikroba  di  dalam  saluran peredaran  darah.  Peredaran  monosit  di dalam  darah  sangat  singkat  dan  monosit harus  melakukan  apoptosis  setelah  24 jam. 19 Untuk  memodulasi  fungsi  dan aktivitas  dari  sistem  imun  tubuh  manusia, terdapat  senyawa  yang  dinamakan  dengan imunomodulator. 20 Penelitian  sebelumnya telah  menemukan  efek  ekstrak  kulit  buah naga  merah  terhadap  peningkatan  jumlah sel  leukosit  pada  mencit  putih  jantan, namun belum melihat fungsi dari leukosit. 21
Penelitian  lebih  lanjut  diperlukan  untuk melihat efek ekstrak kulit buah naga merah terhadap  aktivitas  leukosit  secara  spesifik terhadap monosit dalam memfagosit bakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  efek  ekstrak  kulit  buah  naga merah  terhadap  fagositosis  bakteri  oleh monosit.

## BAHAN DAN METODE
Alat-alat  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah tabung kultur sel, pipet
tetes, rak tabung reaksi, rotary evaporator , tabung  falcon,  tabung  heparin,  mesin sentrifugasi, syringe ,  mikroskop  inversi, haemocytometer improved neubauer,
macerator ,  kertas  saring,  corong,  gelas beker,  gelas  ukur,  cawan  penguap, colony counter ,  labu  alas  bundar,  labtip,  blender, botol timbang, oven, dan inkubator.
Bahan-bahan  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah kulit buah naga merah, bakteri Staphylococcus  aureus ATCC 29213,  bakteri Escherichia coli ATCC 25922, histopaque-1077 hybri-max , larutan turk,  medium  RPMI  1640,  larutan buffer fosfat, plate  count  agar  (PCA) ,  akuades, tisu,  kloroform,  asam  sulfat  pekat,  HCl pekat, etanol 70%, dan etanol 96%.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah Naga
Kulit  buah  naga  merah  segar dikeringkan  sehingga  menjadi  simplisia. Selanjutnya  ditimbang  dan  dilakukan meserasi  dengan  merendam  simplisia  kulit buah naga dalam campuran pelarut HCl 1% sebanyak 111 mL dan etanol 96% sebanyak 1  liter  selama  24  jam  sambil  sesekali diaduk.  Kemudian  dilakukan  remaserasi dua  kali  dengan  campuran  pelarut  yang sama  selama  24  jam  untuk  setiap remaserasi.  Maserat  diuapkan  dengan bantuan rotary  vacuum  evaporator suhu 60 ° C.  Hasil  evaporasi  dikentalkan  di  atas waterbath dengan  suhu  60-70 ° C  sehingga didapat  ekstrak  kental. 10 Pada  proses  ini
didapatkan ekstrak kental sebanyak 50,6104  gram  dengan  berat  simplisia  awal 500  gram  sehingga  didapat  rendemen ekstrak sebesar 10,12208%.

## Pengambilan Darah Manusia dan Isolasi Sel Monosit
Pengambilan  darah  dilakukan  pada pembuluh  darah  vena  dengan  jumlah  40 mL.  Darah  lalu  dicampur  dengan  medium RPMI  dengan  perbandingan  1:1  dan ditambah larutan Ficoll-Paque PLUS 1.077 g/mL, 1:1 v/v dan disentrifugasi menggunakan  mesin  sentrifugasi  untuk memisahkan  antara  supernatan  PBMC dengan  komponen  darah  lainnya. 22 Proses sentrifugasi diulang 3 kali dengan dilakukan pencucian menggunakan PBS di setiap  pengulangannya.  Supernatan  yang telah  mengandung  PBMC  ditambahkan medium RPMI 10 mL lalu dihitung jumlah selnya dengan menggunakan hemositometer Improved  Neubauer dan ditemukan  bahwa  jumlah  monosit  adalah 140.000 sel/ml. Setelah dilakukan penghitungan  jumlah  selnya,  kemudian supernatan  PBMC  tersebut  ditambahkan lagi 3 mL medium RPMI lalu dimasukkan ke  dalam  13  sumuran  dan diinkubasi  dalam  inkubator  CO 2 selama  1 jam  agar  monosit  dapat  melekat  pada sumuran. Setelah 1 jam, sumuran dikeluarkan,  lalu  dilakukan  pencucian PBMC  menggunakan  PBS  agar  limfosit

## yang tersisa dari  PBMC bisa terbuang dan hanya ada monosit pada sumuran tersebut.

## Pemberian  Ekstrak  Kulit  Buah  Naga Merah ke dalam Tabung Kultur Monosit
Pada  sumuran  yang  berisi  sel monosit  dimasukkan  medium  RPMI  dan ekstrak  kulit  buah  naga  merah  dengan variasi konsentrasi 5, 10, 20, 40, 80 μg/ml, dan  disisakan  2  sumuran  sebagai  kontrol positif tanpa ekstrak kulit buah naga merah dan  1  sumuran  sebagai  kontrol  negatif untuk  mengontrol  sterilitas.  Sumuran  lalu digoyangkan secara merata dan diinkubasi, sehingga  dapat  terjadi  interaksi  antara ekstrak  kulit  buah  naga  merah  dengan monosit.

## Penghitungan  Jumlah  Bakteri  yang Ditambahkan ke Sumuran
Ke dalam 2 buah tabung steril berisi 5  mL  NaCl  fisiologis  dimasukkan  koloni bakteri  uji, Staphylococcus  aureus ATCC 29213  yang  mewakili  Gram  positif  dan Escherichia  coli ATCC  25922  yang mewakili  Gram  negatif.  Suspensi  bakteri yang terbentuk diukur dengan menggunakan  Nephelometer  Mac  Farland, sehingga  diperoleh  kekeruhan  1,  5  x  10 8 CFU/mL (0,5 Mac Farland). Kemudian dari setiap  tabung  dilakukan  pengenceran sehingga  didapatkan  stok  suspensi  dengan jumlah bakteri yaitu 10 4 CFU/mL. Selanjutnya dari stok dilakukan pengenceran kembali sebanyak 10, 10 2 dan
10 3 kali. Dari setiap pengenceran diambil 1 mL  dan  ditanam  pada  medium  PCA, diinkubasi 24 jam pada suhu 37 ° C. Jumlah koloni yang tumbuh kemudian dihitung.

## Pengujian Bakteri Uji ke dalam Tabung Kultur Monosit
Medium pada semua sumuran yang berisi  monosit  yang  telah  disuplementasi oleh  berbagai  konsentrasi  ekstrak,  diambil dan  dibuang.  Kemudian  seluruh  sumuran dicuci  dengan  larutan  PBS  agar  tidak  ada ekstrak kulit buah naga merah yang tersisa. Ke  dalam  sumuran  ditambahkan  kembali larutan  PBS  dengan  volume  sama  pada setiap sumuran. Bakteri uji Staphylococcus aureus ATCC  29213  dan Escherichia  coli ATCC  25922  dimasukkan  dengan  jumlah bakteri  10 4 CFU/mL  ke  setiap  sumuran perlakuan  dan  sumuran  kontrol  positif. Sumuran  yang  sudah  ditambahkan  bakteri selanjutnya  diinkubasi  lagi  selama  30 menit,  untuk  memberikan  kesempatan monosit  melakukan  fagositosis  terhadap bakteri.

## Pengkulturan  Bakteri Uji  yang     Tidak Difagosit oleh Monosit
Mengetahui  jumlah  bakteri  yang  tidak difagosit oleh monosit dari masing-masing perlakuan,  suspensi  dari  setiap  sumuran ditanam sebanyak 0,1 mL ke dalam medium PCA,  dan  selanjutnya  diinkubasi  24  jam pada suhu 37 ° C.

## Penghitungan  Jumlah  Koloni  Bakteri yang Tumbuh
Banyaknya  koloni  yang  tumbuh pada setiap medium dihitung menggunakan colony  counter ,  sehingga  diperoleh  data untuk  dibandingkan  jumlah  koloni  bakteri yang  tumbuh  antara  kelompok  kontrol (tidak  diberikan  suplementasi  ekstrak  kulit buah naga merah) dan kelompok perlakuan. Banyaknya koloni yang tumbuh menunjukkan bakteri
yang tidak
difagositosis  oleh  monosit.  Jumlah  bakteri yang difagositosis oleh monosit didapatkan dengan  menghitung  selisih  antara  jumlah bakteri  yang  diujikan  dan  jumlah  bakteri yang tidak difagositosis oleh monosit.

## Persetujuan Etik
Penelitian  ini  telah  mendapatkan persetujuan etik dari Komisi Etik Penelitian Universitas  Padjadjaran  dengan  nomor: 642/UN6.KEP/EC/2021.

## Analisis Statistik
Hasil penghitungan bakteri ditampilkan dalam rerata ± standar deviasi (SD).  Analisis  statistik  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah One  Way ANOVA  yang  diikuti  dengan  uji  post  hoc Bonferroni  menggunakan  perangkat  lunak IBM SPSS  Statistic versi  25.  Perbedaan antar kelompok dianggap signifikan secara statistik pada nilai p ≤ 0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jumlah  Bakteri  yang  Ditambahkan  ke Sumuran
Mengetahui  secara  pasti  jumlah  bakteri yang  diujikan,  dilakukan  perhitungan menggunakan metode perhitungan makroskopis yang hasilnya tercantum pada Tabel 1 dan 2.
Tabel 1 Jumlah bakteri E.coli yang diujikan
No Pengenceran Jumlah Koloni Jumlah Bakteri/mL 1 10 1 1163 1,163 x 10 4 2 10 2 157 1,57 x 10 4 3 10 3 18 Tidak dihitung (tidak berada di rentang 30-300) Rerata Jumlah Bakteri (Pembulatan) 1,4 x 10 4 Tabel 2 Jumlah bakteri S.aureus yang diujikan No Pengenceran Jumlah Koloni Jumlah Bakteri/mL 1 10 1 1987 1,987 x 10 4 2 10 2 351 3,51 x 10 4 3 10 3 51 5,1 x 10 4 Rerata Jumlah Bakteri (Pembulatan) 3,5 x 10 4

## Hasil Pengujian Fagositosis Bakteri oleh Monosit
Pengujian efek fagositosis
dilakukan  dengan  menambahkan  bakteri yaitu S.aureus mewakili  bakteri  Gram positif  dan E.coli mewakili  bakteri  Gram negatif masing-masing sejumlah 10 4
CFU/mL  ke  dalam  kultur  monosit  yang telah  diberikan  ekstrak  kulit  buah  naga merah, sehingga diharapkan terjadi
interaksi dimana monosit akan
memfagositosis bakteri  yang ditambahkan.
Selanjutnya  untuk  menilai  efek  fagositosis monosit terhadap bakteri dilakukan dengan menghitung  selisih  jumlah  bakteri  yang ditambahkan  dengan  jumlah  bakteri  yang tidak difagosit (bakteri yang masih tumbuh ketika dikultur dalam medium PCA). Hasil perbandingan kemampuan fagositosis monosit  yang  telah  diberikan  berbagai konsentrasi  ekstrak  kulit  buah  naga  merah terhadap  bakteri E.  coli dan S  aureus terlihat pada tabel 3 dan 4 berikut :
Tabel 3 Efek fagositosis monosit terhadap Bakteri E. coli
Konsentrasi ekstrak yang disuplementasi Kontrol tanpa monosit Kontrol monosit tanpa ekstrak Konsentrasi Ekstrak 5 μg/ml 10 μg/ml 20 μg/ml 40 μg/ml 80 μg/ml Rerata jumlah bakteri yang tumbuh 14.000 1.065 900 1.121 1.072 1.123 962 Rerata jumlah bakteri yang difagositosis 0 12.935 13.100 12.879 12.928 12.880 13.039 Bakteri yang difagositosis terhadap kontrol tanpa monosit (%) - 92,4 93,6 92,0 92,3 92,0 93,1 Kenaikan fagositosis terhadap kontrol monosit tanpa ekstrak (%) - - 1,27 - 0,43 -0,05 -0,43 0,80

## Tabel 4 Efek fagositosis Monosit terhadap Bakteri
S. aureus Konsentrasi ekstrak yang disuplementasi Kontrol tanpa monosit Kontrol monosit tanpa ekstrak Konsentrasi Ekstrak 5 μg/ml 10 μg/ml 20 μg/ml 40 μg/ml 80 μg/ml Rerata jumlah bakteri yang tumbuh 35.000 1.928 1.752 440 1.911 1.850 1.801 Rerata jumlah bakteri yang difagositosis 0 33.072 33.284 34.560 33.089 33.150 33.201 Bakteri yang difagositosis terhadap kontrol tanpa monosit (%) - 94,5 95,0 98,7 94,5 94,7 94,9 Kenaikan fagositosis terhadap kontrol monosit tanpa ekstrak (%) - - 0,53 4,50 0,05 0,24 0,39
Efek  Pemberian  Ekstrak  Etanol  Kulit Buah  Naga  Merah  pada  Monosit terhadap Fagositosis Bakteri Uji
Pada  tabel  3  terlihat  bahwa  ekstrak etanol  kulit  buah  naga  merah  dengan konsentrasi  5  μg/ml  dan  80  μg/ml meningkatkan  kemampuan  monosit  dalam memfagositosis  bakteri E.coli ditandai dengan  peningkatan  persentase  secara berurutan  1,26%  dan  0,8%  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  kontrol  yang  tidak diberi  suplementasi  ekstrak.  Pemberian ekstrak  etanol  kulit  buah  naga  merah dengan konsentrasi 10 μg/ml, 20 μg/ml, dan 40  μg/ml  menyebabkan  penurunan  pada jumlah  bakteri  yang  difagositosis  secara
berurutan  sebanyak  0,43%,  0,05%,  dan 0,43%.
Sedangkan efek fagositosis terhadap S.  aureus terlihat  pada  tabel  4  dimana ekstrak  etanol  kulit  buah  naga  dengan konsentrasi  10  μg/ml  lebih  optimal  dalam memfagositosis  bakteri S.aureus, ditandai dengan rerata jumlah bakteri yang difagositosis 4,31% lebih tinggi dibandingkan  dengan  kontrol  yang  tidak diberi  suplementasi  ekstrak.  Pemberian ekstrak  etanol  kulit  buah  naga  merah dengan  konsentrasi  5  μg/ml,  20 μg/ml,  40 μg/ml,  dan  80  μg/ml  masing-masing meningkatkan jumlah bakteri yang difagositosis  secara  berurutan  sebesar 0,53%;  0,05%;  0,24%;  dan  0,39%  lebih
tinggi  dibandingkan  dengan  kontrol  yang tidak diberi suplementasi ekstrak.
Analisis statistik menggunakan one way  ANOVA menunjukkan  bahwa  efek fagositosis  monosit  terhadap E.  coli maupun S aureus tidak terdapat  perbedaan bermakna  antar  grup  monosit  yang diberikan  ekstrak  kulit  buah  naga  merah 5%, 10%, 20%, 40% dan 80%
dibandingkan  kontrol,  dengan  nilai p = 0,052  untuk E.coli dan p =  0,095  untuk S. aureus ( p >0,05).
Monosit yang merupakan prekursor makrofag adalah sel fagosit dengan ukuran terbesar  yang  berada  di  dalam  darah. Fagositosis monosit terhadap bakteri didahului  dengan  persinyalan  intraseluler oleh  reseptor  permukaan  transmembran. Selanjutnya setelah bakteri difagosit, terjadi pembunuhan  antigen  oleh  enzim-enzim lisosom, yaitu phagocyte oxidase , inducible nitric  oxide  syntethase (iNOS),  dan lysosomal  protease. Pada  penelitian  ini, untuk  meningkatkan  kemampuan  aktifitas fagositosis  monosit,  digunakan  ekstrak etanol  kulit  buah  naga  merah  dengan kandungan  senyawa  triterpenoid  yang memiliki  efek  imunomodulator  melalui kemampuannya menghambat faktor transkripsi,  yaitu nuclear  factor  kappa  B (NF-kB), nuclear factor of activated T-cells (NF-AT),  dan signal  transducer  and activation of transcription (STATs). 13
Penelitian sebelumnya telah
melaporkan bahwa pemberian ekstrak kulit buah  naga  merah  menghasilkan  efek imunomodulator melalui peningkatan jumlah  monosit  pada  mencit  yang  diberi perlakuan selama 6 hari. 21 . Namun ternyata berdasarkan hasil penelitian, efek imunomodulator ini tidak menunjukkan hal yang sama terhadap kemampuan fagositosisnya.  Hasil  penelitian  yang  telah dilakukan didapatkan bahwa tidak terdapat perbedaan  bermakna  jumlah  bakteri  yang difagosit  antara  kontrol  dan  perlakuan. Ekstrak  kulit  buah  naga  merah  tidak mempunyai kemampuan dalam meningkatkan  efek  fagositosis  monosit terhadap monosit. Hal ini mengindikasikan bahwa  senyawa  triterpenoid  pada  ekstrak kulit  buah  naga  merah  tidak  dapat menstimulasi aktivasi dari reseptor permukaan  transmembran  pada  monosit untuk  aktif  memfagosit  bakteri  uji  yang diberikan.
Ada dua analisis yang menyebabkan tidak  ditemukannya  efek  ekstrak  etanol kulit  buah  naga  merah  pada  fagositosis bakteri oleh monosit di dalam penelitian ini. Analisis  pertama  yaitu  hasil  aktivitas fagositosis  yang  didapatkan  sudah  jenuh sehingga  dibutuhkan  optimasi.  Optimasi yang  pertama,  memilih  subjek  yang monositnya subnormal, seperti pada orang- orang dengan kondisi imunodefisiensi, dan optimasi yang kedua adalah perlu dilakukan
penambahan bakteri uji, karena kemungkinan  bakteri  yang  diujikan  terlalu sedikit.
Analisis kedua yaitu terdapat penambahan  aktivitas  fagositosis  monosit namun tidak terlihat karena efek sitotoksik dari  ekstrak  yang  menyebabkan  jumlah monosit berkurang seiring dengan penambahan  ekstrak.  Oleh  sebab  itu, diperlukan penelitian lanjutan yang menganalisis efek ekstrak etanol kulit buah naga  merah  terhadap  fagositosis  makrofag dengan  melakukan  stimulasi  perubahan monosit  menjadi  makrofag  terlebih  dahulu sebelum pemberian ekstrak.
Penelitian ini memiliki keterbatasan,  yaitu  pengulangan  yang dilakukan  hanya  dua  kali  sehingga  dapat mempengaruhi kebermaknaan analisis statistik  dan  terdapat  satu plate bakteri S.aureus yang tidak tumbuh.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol  kulit  buah  naga  merah  tidak memberikan  efek  yang  bermakna  terhadap fagositosis bakteri oleh monosit. Penelitian lebih  lanjut  diperlukan  untuk  menganalisis efek ekstrak kulit buah naga merah terhadap fagositosis bakteri oleh makrofag.
KONFLIK KEPENTINGAN
Tim peneliti tidak memiliki konflik kepentingan dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Tim  peneliti  mengucapkan  terima kasih  kepada Universitas  Padjadjaran  dan Kementerian  Pendidikan,  Kebudayaan, Riset,  dan  Teknologi  (Kemdikbudristek) atas dukungan dan fasilitas yang diberikan dalam  Program  Kreativitas  Mahasiswa (PKM) Tahun 2021.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Kementerian  Kesehatan  RI.  Laporan Riskesdas  2018  [Internet].  Laporan Nasional Riskesdas 2018. 2018. p. 149.
Available
from: http://www.yankes.kemkes.go.id/asset
s/downloads/PMK No. 57 Tahun 2013 tentang PTRM.pdf 2.   Kementerian Kesehatan RI.
RISKESDAS  2013.  Badan  Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Jakarta; 2013.
3.   Muhammad  K,  Nur  NI,  Gannasin  SP, Mohd.  Adzahan  N,  Bakar  J.  High methoxyl  pectin  from  dragon  fruit ( Hylocereus  polyrhizus )  peel.  Food Hydrocoll. 2014;42(P2):289–97.
4.   Wahdaningsih S, Wahyuono S,
Riyanto S, Murwanti R. Β-sitosterol of red dragon fruit ( Hylocereus polyrhizus )  and  its  response  to macrophage and nitric oxide. Indones J
Pharm. 2021;32(3):399–407. 5.   Kusumastuti DM, Cholid Z, Adriatmoko W. Pengaruh ekstrak kulit buah naga merah ( Hylocereus polyrhizus ) terhadap waktu perdarahan (bleeding  time)  pada  mencit  strain Balb-C.  STOMATOGNATIC  -  J Kedokt Gigi. 2021;18(2):61–4.
6.   Chia  SL,  Chong  GH.  Effect  of  drum
rrying on
physicochemical characteristics  of  dragon  fruit  peel (Hylocereus  polyrhizus).  Int  J  Food
Eng. 2015;11(2):285–93.
7.   Ortiz-Hernández  YD,  Carrillo-Salazar JA. Pitahaya ( Hylocereus spp.): a short
review. Comun Sci. 2012;3(4):220–37.
8.   Hernawati,  Setiawan  NA,  Shintawati
R,  Priyandoko  D.  The  role  of  red dragon fruit peel ( Hylocereus polyrhizus ) to improvement blood lipid levels of hyperlipidaemia male mice. J Phys Conf Ser. 2018;1013(1):1–5.
9.   Eka Y, Hendarto H, Widjiati. Effect of
Hylocereus  polyrhizus rind  extract toward interleukin-1β, vascular endothelial  growth  factor  expression, endometriosis implant area. Int J Pharm Clin Res. 2017;9(8):617–21.
10.  Putri  NKM,  Gunawan  I,  Suarsa  I.
Aktivitas antioksidan antosianin dalam ekstrak  etanol  kulit  buah  naga  super merah  ( Hylocereus  costaricensis )  dan analisis  kadar  totalnya.  J  Kim. 2015;9(2):243–51.
11.  Pribadi  YS,  Sukatiningsih,  Sari  P.
Formulasi tablet effervescent berbahan baku kulit buah naga merah ( Hylocereus  polyrhizus )  dan  buah salam  ( Syzygium  polyanthum [Wight.] Walp). Berk Ilm Pertan. 2014;1(4):86– 9.
12.  Nurliyana,  Zahir  S,  Suleiman  M,
Aisyah, Rahim K. Antioxidant study of pulps  and  peels  of  dragon  fruits :  a comparative  study.  Int  Food  Res  J.
2010;17:367–75.
13.  Rios  J.  Effects  of  triterpenes  on  the immune  system.  J  Ethnopharmacol. 2010;128:1–14.
14.  Huang H, Jiang Y. Chemical
composition  of  the  cuticle  membrane of pitaya fruits ( Hylocereus polyrhizus ). Agriculture. 2019;9:1–11.
15.  Wahdaningsih S, Wahyuono S,
Riyanto  S,  Murwanti  R.  Terpenoid- lupeol of red dragon fruit ( Hylocereus polyrhizus ) and its immunomodulatory activity. Pak J Pharm Sci.
2020;33(2):505–10.
16.  Wahdaningsih S, Wahyuono S, Riyanto  S,  Murwanti  R.  Lymphocyte proliferation and nitric oxide- producing  activities  of  lupeol  isolated from  red  dragon  fruit  ( Hylocereus polyrhizus )  extract.  Mol  Cell  Biomed Sci. 2021;5(1):8–12.
17.  Smith  NC,  Rise  ML,  Christian  SL.  A comparison of the innate and adaptive
immune  systems  in  cartilaginous  fish, ray-finned  fish,  and  lobe-finned  fish. Front Immunol. 2019;10.
18.  Abbas AK, Lichtman  andrew H, Pillai S.  Basic  immunology :  functions  and disorders of the immune system. Fifth Edit. Missouri: Elsevier; 2016.
19.  Monie TP. The innate immune system.
The  Innate  Immune  System.  London: Academic Press; 2012.
20.  Devagaran  T,  Diantini  A.  Senyawa immunomodulator dari tanaman.
Students e-Journals. 2012;1(1).
21.  Rahman  H,  Aldi  Y,  Mayanti  E.
Aktifitas  imunomodulator  dan  jumlah sel leukosit dari ekstrak kulit buah naga merah  ( Hylocereus  lemairei (Hook.) Britton  &  Rose)  pada  mencit  putih jantan. J Farm Higea. 2016;8(1):44–58.
22.  Herawati  I,  Husin  UA,  Sudigdoadi  S.
Pengaruh  ekstrak  etanol  propolis terhadap aktivitas dan kapasitas fagositosis pada kultur makrofag yang diinfeksi Enteropathogenic
Escherichia  coli (EPEC).  Maj  Kedokt
Bandung. 2015;47(2).