## PENGARUH PEMBERIAN SEDIAAN NANOPARTIKEL KITOSAN EKSTRAK
ETANOL ROSELA ( Hibiscus sabdariffa L .) PADA TIKUS HIPERKOLESTEROL TERHADAP PROFIL LIPID.
Meta Safitri, Nurkhasanah, Laela Hayu Nurani Program Pascasarjana Farmasi Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta Email : metasafitri@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  Sediaan  Nanopartikel Kitosan  Ekstrak  Etanol  Rosela  (SNKEER)  terhadap  profil  lipid  tikus  galur  Sprague  Dawley yang  diinduksi  hiperkolesterol.  Pembuatan  SNKEER  dilakukan  berdasarkan  hasil  optimasi dengan  perbandingan  2:1:1/10  (ekstrak  etanol  rosela  (EER)  :  kitosan  :  TPP),  selanjutnya dilakukan uji in vivo dengan menggunakan Tikus putih betina galur Sprague Dawley (SD) umur 6-8  minggu  sejumlah  25  ekor  dibagi  menjadi  5  kelompok,  yaitu  kelompok  I  (K1)  adalah kelompok  kontrol  diberi  pakan  standar;  kelompok  II  (K2)  diinduksi  hiperkolesterol;  serta kelompok  III  (3),  IV  (4),  dan  V  (5)  diinduksi  hiperkolesterol  dan  SNKEER  masing-masing dengan    dosis  25,  50,  dan  100  mg/kgBB,  selama  30  hari.  Pada  hari  ke  31  semua  hewan  uji diambil  darahnya  melalui  vena  orbitalis  mata  untuk  dilakukan  pengukuran  profil  lipid (Kolesterol Total, kadar LDL, HDL, Trigliserida). Analisis yang dilakukan terhadap penelitian ini  adalah  One  Way  Analisis  Of  Variance  (ANOVA)  dengan  uji  lanjutan  Tukey  5  %.  Hasil penelitian rata-rata pengukuran profil lipid adalah sebagai berikut : pada pengukuran Kolesterol K1,  K2,  K3,  K4,K5  berturut-turut  yaitu  106,76;  233,45;  197,63;  158,61;  133,94  mg/dl, Trigliserida  :  73,33;  125,51;  107,97;  90,43;  80,87  mg/dl,  HDL:  44,41;  14,45;  18,19;  23,68; 30,90mg/dl  ,  LDL:  51,58;  72,24;  63,16;  54,61;  51,84  mg/dl.    Hasil  dari  analisis  data menunjukkan  bahwa  kelompok  SNKEER  dosis  (25,  50,  100  mg/kgBB)  dapat  berpengaruh signifikan  terhadap  perbaikan    profil  lipid  terutama  dalam  menurunkan  kadar  kolesterol  total, trigliserida,  dan  kadar  LDL  serta  dapat  meningkatkan  kadar  HDL  secara  signifikan  bila dibandingkan  dengan  kelompok  hiperkolesterol  (K2).  Adapun  kelompok  perlakuan  yang memberikan hasil perbaikan profil lipid  terbaik adalah kelompok SNKEER dosis 100 mg/kgBB bila dibandingkan dengan semua kelompok perlakuan (P<0,05).
Kata kunci  : Rosela, Nanopartikel, Hiperkolesterol, Profil lipid

## ABSTRACT
The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of  chitosan  nanoparticles  preparation Ethanol  Extract  Roselle  (SNKEER)  on  the  lipid  profile  of  Sprague  Dawley  rat  strain-induced hypercholesterolemia.  Making  SNKEER  done  based  on  the  results  of  the  optimization  with  a ratio of 2: 1: 1/10 (ethanol extract of roselle (EER): chitosan: TPP), further in vivo tests using female  white  rat  strain  Sprague  Dawley  (SD)  age  of  6-8  weeks  a  number  of  25  were  divided into  5  groups:  group  I  (K1)  is  the  control  group  were  fed  a  standard;  group  II  (K2)  induced hypercholesterolemia;  and  group  III  (3),  IV  (4),  and  V  (5)  induced  hypercholesterolemia  and SNKEER each at a dose of 25, 50, and 100 mg /  kg, for 30 days. On day 31, all test animals orbital venous blood drawn through the eye to be measured lipid profile (total cholesterol, LDL cholesterol,  HDL,  triglycerides).  Analysis  for  this  study  is  followed  by  Tukey  follow-up  test 5%. The results  of the  study  the  average  measurements  of  lipid  profile  is  the  measurement  of cholesterol  K1,  K2,  K3,  K4,  K5  were  106.76;  233.45;  197.63;  158.61;  133.94  mg  /  dl respectively,  Triglycerides:  73.33;  125.51;  107.97;  90.43;  80.87  mg  /  dl,  HDL:  44.41;  14.45; 18.19; 23.68; 30,90mg / dl, LDL: 51.58; 72.24; 63.16; 54.61; 51.84 mg / dl. The results of the data  analysis  showed  that  the  group  SNKEER  doses  (25,  50,  100  mg  /  kg  body  weight)  can
significantly have effect on the increasing of the lipid profile, especially in the lower levels of total cholesterol, triglycerides, and LDL levels and HDL levels significantly when compared to hypercholesterolemia  (K2).  The  treatment  group  that  produces  the  best  improvements  in  lipid profiles was SNKEER group with dose of 100 mg / kg when compared to all treatment groups (P <0.05).
Key words :  Roselle, Nanoparticles, hypercholesterolemia, lipid profile

## PENDAHULUAN
Pola  makan  yang  banyak  mengandung kolesterol, serta gaya hidup yang tidak sehat, strees,  merokok  diserta  intensitas  makan yang tinggi, membuat kadar kolesterol darah sangat  sulit  dikendalikan  yang    dapat menimbulkan kondisi
hiperkolesterol (Muchtar et al , 2012).
Hiperkolesterol merupakan suatu keadaan dimana  terjadi  peningkatan  kadar    kolesterol dalam  darah,    peningkatan  kadar  Low Density  Lipoprotein  (LDL)  dan  LDL teroksidasi  yang  penting  dalam  proses pembentukan plak arterosklerosis. Arterosklerosis  sendiri  merupakan  penyebab utama dari penyakit jantung koroner (Agoreyo, et al 2008).
Penyakit  jantung  koroner  merupakan masalah  kesehatan  masyarakat  yang  penting karena  morbiditas  dan  mortalitasnya  yang tinggi.  Diperkirakan bahwa diseluruh dunia, PJK  (Penyakit  Jantung  Koroner)  pada  tahun 2020  menjadi  pembunuh  pertama  yakni sebesar  36%  dari  seluruh  kematian,  menurut Badan  Kesehatan  Dunia  (WHO),  60%  dari seluruh  penyebab  kematian  penyakit  jantung adalah  penyakit  jantung  koroner  (PJK) (WHO, 2006).
Tanaman  sebagai  bahan  obat  telah dimanfaatkan  masyarakat  indonesia  sejak dahulu,  salah  satu  tanaman  yang  banyak digunakan  sebagai  bahan  obat  saat  ini  yaitu bunga  rosela  ( Hibiscus  sabdariffa  L .). Antosianin, flavonoid, dan polifenol merupakan  zat  kardioprotektif  pencegah penyakit kardiovaskuler yang terdapat dalam bunga rosela.
Antosianin yang umumnya menjadi fokus penelitian  pada  bunga  rosela  merupakan senyawa  pewarna  yang  paling  penting  dan paling  tersabar  luas,  antosianin  memiliki stabilitas yang rendah dan mudah rusak oleh faktor  lingkungan,  tidak  stabil  dalam  larutan basa  atau  netral,  dan  dalam  larutan  asam
warnanya  dapat  memudar  perlahan-lahan akibat terkena cahaya (Harbone, 1973). Oleh karena  itu  diperlukan  adanya  upaya  untuk meningkatkan  stabilitas  dan  penyerapan  dari kandungan  senyawa  yang  terkandung  dalam bunga rosela, yaitu dengan membuat sediaan nanopartikel,    dapat  meningkatkan  luas permukaan,  sehingga  dapat  meningkatkan jumlah  obat  yang  terabsorsi,  serta    dapat meningkatkan  aseptabilitas.  (Grupta et  al , 2006)
Nanopartikel  merupakan  partikel  koloid dan  padat  yang  mempunyai  ukuran  diameter antara 10-1000 nm, diformulasikan menggunakan polimer biodegradable maupun  non biodegradable yang  mana bahan  obat  dapat  terjebak,  diabsorbsi  atau bergandengan secara kimia (Shoo & Labhasetwar, 2006 cit Banne 2011).
Nanopartikel  menyebabkan  ekstrak  mudah menyebar  dalam  darah  dan  lebih  akurat dalam mencapai target (Populain & Nakache 1998).
Kitosan merupakan hasil ekstraksi limbah kulit  hewan  golongan Crustacea (Hu et  al , 2007).    Kitosan  bersifat biodegradable , biokompatibel,  non  imunogenik  serta  non karsinogenik  sehingga  cocok  digunakan dalam teknologi farmasi. Salah satu upaya yang dapat dikembangkan untuk mengatasi permasalahan tersebut adalah dengan membuat sediaan menjadi bentuk nanopartikel dengan penyalut kitosan, penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui pengaruh  pemberian  nanopartikel  kitosan ekstrak  etanol  rosela  terhadap  profil  lipid tikus hiperkolesterol.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  dengan  desain  penelitian  ― Post  Test  Control  Group  Design ‖.    Hewan coba  yang  digunakan  adalah  25  ekor  tikus
betina  galur sprague  dawley yang  diperoleh dari  UPHP  Yogyakarta  sebagai  obyek penelitian.
Hewan coba dibagi menjadi lima kelompok  perlakuan,yaitu  kelompok  kontrol negatif  (1)  yang  hanya  diberi  pakan  standar sebanyak  20g/hari/ekor,  kelompok  kontrol positif  (2)  (hiperkolesterol)  yang  diberikan induksi  hiperkolesterol  dan  pakan  standar, serta kelompok terapi yang diberikan induksi hiperkolesterol, pakan standar, dan kemudian diterapi dengan Sediaan Nanopartikel Kitosan  Ekstrak  Etanol  Rosela  (SNKEER) dengan  dosis  25  mg/kg  BB  (3),  dosis  50 mg/kg BB (4), dan dosis 100 mg/kg BB (5).
Sebelum  diberi  perlakuan,  25  ekor  tikus diadaptasikan terlebih dahulu dengan keadaan  laboratorium  selama  7  hari  dengan pemberian  pakan  standar.    Pakan  diberikan sebanyak 20 g per hari, dan air minum secara ad libitum.  Sisa pakan ditimbang setiap hari, sebelum  diganti  dengan  pakan  yang  baru. Berat  badan  tikus  ditimbang  setiap  minggu. Kandang  yang  digunakan  adalah  kandang individu yang dibersihkan setiap hari.
Setelah  diadaptasikan  selama  7  hari, kemudian    kelompok  tikus  2,  3,4,  dan  5 diinduksi  pakan  hiperkolesterol  selama  30 hari,  sedangkan  kelompok  3,4,  dan  5  mulai diterapi  dengan  SNKEER    dengan  dosis  25 mg/kg  BB  (3),  dosis  50  mg/kg  BB  (4),  dan dosis  100  mg/kg  BB  (5).    Pada  hari  ke-30 tiap  kelompok  di  uji  kadar  kolesterol, dikatakan  hiperkolesterol  apabila  kadarnya telah > 140 mg/dl (Hirunpanich et al, 2006), maka pada  hari ke-31, kelompok 1,2,3,4 dan 5 di nekropsi.  Diambil melalui vena orbitalis mata  yang  kemudian  digunakan  untuk pemeriksaan  kolesterol  total,  kadar  LDL, HDL  dan  trigliserida  menggunakan  CHOD- PAP.
Komposisi Pakan Standar. Pakan standar  yang  diberikan  setiap  hari  adalah sebesar  20  gram  yang    terdiri  dari  comfeed PARS  (dengan  kandungan  air  12%,  protein 11  %,  lemak  4%,  serat  7%,  abu  8%,  Ca  1,1 %, fosfat 0,9%, antibiotik, coccidiostat 53%), dan tepung terigu 23,5%, dan air 23,5%.
Induksi  Hiperkolesterol. Setiap  tikus diberikan  induksi  hiperkolesterol  dengan
komposisi  kolesterol  2%  dan  asam  kolat  1% dari  pakan,  yang  dilarutkan  dengan  aquades sampai volume 2 ml.

## Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Rosela.
Simplisia  dikeringkan  dalam  oven  dengan suhu  40ºC  selama  7  jam.  Sebanyak  1500 gram  serbuk  simplisia  diekstraksi  dengan pelarut  etanol  60%  sebanyak  7,5  liter  (1:5) menggunakan  metode  maserasi  dengan pengadukan  menggunakan  stirrer  selama kurang  lebih  1  jam,  kemudian  didiamkan sampai  24  jam  sembari  sesekali  di  aduk- aduk.  Maserat  dipisahkan  dan  disaring menggunakan  kain  flannel.  Filtrat  hasil penyaringan  diuapkan  dengan vacum  rotary evaporator dengan suhu 60 o C dan kecepatan 100  rpm  hingga  diperoleh  ekstrak  kental. Ekstrak  kental  ditimbang  dan  dihitung rendemennya (Anonim, 2004).
Pembuatan Sediaan Nanopartikel Kitosan  Ekstrak  Etanol  Kelopak  Bunga Rosela  (Hibiscus  sabdariffa  L.)  (Riski,
2014). Pembuatan  dapar  asetat  PH  4,  yaitu dengan  menimbang  natrium  asetat  715,4  mg di  larutkan  dengan  aquades  sampai  volume 500  ml. Cek PH, jika PH nya belum 4 maka di tambahkan asam asetat sampai PH 4.
Pembuatan  larutan  kitosan,  yaitu  dengan menimbang  1  g  kitosan  dan  dilarutkan dengan dapar asetat PH 4 sampai volume 500 ml  dan  di  stirer  ±  20  menit  pada  suhu  60ºc hingga benar-benar terlarut.
Pembuatan larutan ekstrak etanol kelopak bunga  rosela,  yaitu  dengan  menimbang  2 gram ekstrak dan di larutkan dalam etanol 70 %  sebanyak  500  ml,  stirer  ±20  menit  pada suhu  60º  hingga  benar-benar  terlarut, kemudian di saring.
Pembuatan  larutan  TPP,  yaitu  dengan menimbang  TPP  sebanyak  100  mg  dan dilarutkan  dalam  aquades  sebanyak  50  ml, stirer ±20 menit pada suhu 60º hingga benar- benar terlarut.
Pembuatan  sediaan  nanopartikel,  yaitu dengan  mencampur  larutan  kitosan  dan larutan  ekstrak  sambil  di  stirer  pada  suhu 60ºc  ±  10  menit,  setelah  itu  tambahkan larutan TPP, stirer pada  suhu 60 ºc selama 5 menit kemudian ultrasonifikasi pada suhu 30 ºc selama 30 menit.
Pemberian Sediaan Nanopartikel Kitosan Ekstrak Etanol Rosela (SNKEER). Pemberian  diberikan  dengan cara sonde oral dengan dosis pada kelompok 3,  4,  dan  5  berturut-turut  adalah  25 mg/kgBB/hari,  50  mg/kgBB/hari,  dan  100 mg/kgBB/hari  selama  30  hari.  Dosis  terapi yang diberikan di sesuaikan dengan rata-rata berat  badan  tikus  yang  di  timbang  setiap harinya dengan volume pemberian 2 ml/hari.
Pengambilan  Serum. Darah  mencit diambil  melalui  vena  orbitalis  mata    dan ditampung dalam apendrof. Darah
didiamkan  selama  15  menit  dan  disentrifus selama  20  menit  dengan  kecepatan  3000 rpm.    Serum  diambil  dan  disimpan  dalam pendingin.
Metode
pemeriksaan.
Metode
pemeriksaan  kolesterol  total,  trigliserida,
LDL,  dan  HDL  dengan  menggunakan CHOD-PAP dengan prinsip spektrofotometri enzimatis.
Analisis data. Data numerik dari pemeriksaan  dengan  metode  CHOD-PAP yang  menunjukkan  profil  lipid  dalam  darah pada  masing-masing  kelompok  diproses dengan  program  SPSS  versi  16.0.  bila  hasil analisis ragamnya berbeda nyata (signifikan), maka  untuk  mengetahui  perlakuan  mana yang berbeda digunakan uji lanjut Tukey α = 5%.
HASIL DAN PEMBAHASAN Penentuan kadar kolesterol total, trigliserida,  HDL,  dan  LDL  darah  mencit pada penelitian ini dilakukan dengan metode enzimatis menggunakan alat
spektrofotometer.  Dalam  periode  induksi hiperkolesterol terjadi peningkatan kolesterol total, trigliserida, kadar LDL dan HDL.
Hasil  pemeriksaan  Post  test  rata-rata kadar  kolesterol  total,  trigliserida,  LDL,  dan HDL  hewan  coba  hiperkolesterol  yang diterapi    dengan  SNKEER  ditunjukkan dengan  hasil  analisis  data      menggunakan SPSS  16.0,  dan  didapatkan  hasil  rata-rata kadar adalah sebagai berikut (Tabel .1)
Pada  tabel  1  dapat  dilihat  bahwa  kadar kolesterol total, trigliserida, serta kadar LDL tikus  hiperkolesterol  yang  diterapi  dengan SNKEER  dosis  25mg/kgBB    ,   50mg/kgBB, dan  100mg/kgBB  terjadi  penurunan  yang signifikan    jika  dibandingkan  dengan  tikus hiperkolesterol,  sedangkan  kadar  HDL  pada tikus  hiperkolesterol  yang  diterapi  dengan SNKEER  dosis    25mg/kgBB  (18,19±1,856 mg/dl),   50mg/kgBB (23,68±2,0398 mg/dl), dan  100mg/kgBB  (30,90±1,2866  mg/dl) terjadi kenaikan yang signifikan jika dibandingkan    dengan  tikus  hiperkolesterol (14,45±3,1939 mg/dl).
Hiperkolesterol merupakan suatu keadaan yang  meliputi  kenaikan    kadar  kolesterol total,  trigliserida,  LDL,  dan  atau  penurunan kadar  HDL.    Adanya  peningkatan  LDL  dan penurunan HDL pada keadaan hiperkolesterol, disebabkan adanya penimbunan  kolesterol  dalam  darah  akibat induksi hiperkolesterol. Tabel. 1 Rata-rata Kadar Kolesterol Total, Trigliserida, HDL dan LDL. Kelompok Mean (mg/dl) ± SD Mean ± SD Kolesterol Total Trigliserida Kadar HDL Kadar LDL Normal (K1) 106,76 ± 3,8611 73,33 ± 3,0052 44,41±2,2485 51,58±2,30 Hiperkolesterol (K2) 233,45 ± 4,1520 (a)(b) 125,51±5,5754 (a) (b) 14,45±3,1939 (a) (b) 72,24±4,4958 (a) (b) SNKEER 25mg/kgBB (K3) 197,63 ± 5,0875 (a)(b) 107,97±3,9357 (a) (b) 18,19±1,856 (a) (b) 63,16±2,9421 (a) (b) SNKEER 50mg/kgBB (K4) 158,61 ± 2,0076 (a) (b) 90,43±2,0750 (a) (b) 23,68±2,0398 (a) (b) 54,61±1,0402 (a) (b) SNKEER 100mg/kgBB (K5) 133,94 ± 3,9357 (a) (b) 80,87±4,7129 (a) (b) 30,90±1,2866 (a) (b) 51,84±1,883 (a) (b)
Keterangan: SD = Standar Deviasi.  (a) adalah nilai signifikansi kelompok perlakuan terhadap kelompok  hiperkolesterol  (p  <0,05)  (b)  adalah  nilai  signifikansi  kelompok perlakuan terhadap kelompok normal  (p<0,05).
Gambar. 1 Diagram kadar rata-rata profil lipid tiap kelompok
Selanjutnya penumpukan kolesterol dalam  tubuh  diikuti  dengan  aktivitas  radikal bebas  yang  dapat  menyebabkan  adanya kerusakan oksidatif pada jaringan. Peningkatan radikal bebas pada hiperkolesterol berhubungan dengan peningkatan  oksidasi  LDL  pada  dinding arteri  yang  mendorong  terjadinya  disfungsi sel endotel,
dan pengembangan aterosklerosis  (Aikawa  dan  Libby,  2004; Takehashi et al , 2005).
Bunga  rosela  telah  diketahui  banyak mengandung senyawa seperti alkaloid, antosianin, arachidic  acid ,  anisaldehida, cyanidin -3- rutinoside , procatechuic  acid , polisakarida,  quercetin.    Senyawa  polifenol yang terkandung dalam  bunga rosela  diduga memiliki peranan penting dalam mengurangi stress  oksidatif  ,  melalui  mekanismenya sebagai antioksidan langsung pada lipoprotein-partikel  (V.  Hirunpanich et  al , 2006).    Flavonoid  dan  senyawa  polifenol dapat  menangkap  radikal  bebas  dan  dapat memicu  aktivitas  berbagai  sistem  enzim karena  dapat  berinteraksi  dengan  berbagai molekul, kebanyakan senyawa fenolik memiliki  efek  positif  pada  tubuh  karena dapat  menangkap        radikal  bebas.  Senyawa fenolik  secara  struktural  mempunyai  cincin fenolik  dan  sunstituen  hidroksil  yang  mirip dengan  vitamin  E    yang  dapat  berfungsi
efektif sebagai antioksidan karena
kemampuannya  dapat  menetralkan  hidroksil yang merupakan radikal bebas.
Efek  antioksidan  seduhan  kelopak  kering bunga rosela telah diteliti di berbagai study in vivo  dan  in  vitro  (Dinayati,  2010  ;  Angelo, 2010  ;  wijayanti,  2012).    Namun study mengenai  pengaruh  pemberian  Sediaan Nanopertikel  Kitosan  Ekstrak  Etanol  Rosela (SNKEER)  masih belum banyak dilaporkan. Dari hasil penelitian yang diperoleh pengobatan  tikus  hiperkolesterol  dengan menggunakan SNKEER dosis 25mg/kgBB  , 50mg/kgBB,  dan  100mg/kgBB  selama  30 hari dapat menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida,  LDL,  serta  dapat  meningkatkan kadar HDL secara signifikan, dan bila dilihat pada grafik diatas antara dosis 25mg/kgBB  , 50mg/kgBB, dan 100mg/kgBB menunjukkan bahwa  terjadi  peningkatan  efektifitas  seiring dengan  adanya  peningkatan  dosis.  Hal  ini juga dikarenakan adanya modifikasi menjadi nanopartikel  dengan  tujuan  dapat  membantu meningkatkan  penyerapan  senyawa-senyawa yang  terkandung  dalam  ekstrak  rosella, menurut  Grupta et  al (2006),    dengan membuat  sediaan  menjadi  nanopartikel  akan dapat meningkatkan luas permukaan, sehingga  dapat  meningkatkan  jumlah  obat yang  terabsorsi,  serta    dapat  meningkatkan aseptabilitas  karena  dapat  memperbaiki  sifat
0 50 100 150 200 250 Normal Hiperkolesterol Dosis SNKEER
25 mg/kg BB Dosis SNKEER 50 mg/kg BB Dosis SNKEER 100 mg/kg BB K a da r ra ta -ra ta m g /dl Kelompok kolesterol triglisrde HDL LDL
fisik  dari  senyawa  aktif  yang  mempunyai sifat  asam  (Mohanraj  dan  Chen,  2006).  Hal ini  sejalan  dengan  penelitian  yang  telah dilakukan  oleh  Rizki  (2014)  dengan  hasil optimasi  formulasi  terbaik  untuk  sediaan nanopartikel  kitosan  ekstrak  etanol  rosela (SNKEER)  memiliki  perbandingan  2:1:1/10 (Ekstrak  Etanol  Rosela  :  Kitosan  :  TPP) dengan  pelarutan  kitosan  pada  pH  4  ukuran partikel  101,7  nm  dan entrapment  efficiency sebesar  80,24%  yang  selanjutmya  telah dilakukan  pengukuran  kadar  MDA  aecara invitro  hasilnya  bahwa  SNKEER  dapat menurunkan  kadar  MDA  bila  dibandingkan dengan kelompok yang tidak diberi
SNKEER.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  di  atas  menunjukkan  bahwa modifikasi menjadi bentuk sediaan nanopartikel  meurunkan  kadar  kolesterol total, trigliserida, dan kadar LDL, serta dapat meningkatkan  kadar  HDL  bila  dibandingkan dengan kelompok normal. Adapun kelompok yang  paling  baik  dalam  menurunkan  kadar kolesterol  total,  trigliserida  ,  LDL,  serta meningkatkan  kadar  HDL  yaitu  pada kelompok  5  pada  dosis  pemberian  SNKEER 100 mg/kgBB/hari.

## DAFTAR PUSTAKA
Agoreyo,  F.  O.,  B.  O.  Agoreyo,  and  M.  N. Onuorah.  2008.  ―Effect  of  Aqueous Extracts  of  Hibiscus  Sabdariffa  and
Zingiber  Officinale  on  Blood  Cholesterol and  Glucose  Levels  of  Rats.‖ African Journal of Biotechnology 7(21).doi:10.4314/ajb.v7i21.59487.http:// www.ajol.info/index.php/ajb/article/view/ 59487.
Aikawa,M.,Libby,P.,2004.Thevulnerableathe roscleroticplaque:pathogenesisandtherape uticapproach.CardiovascularPathology13,
125–138.
Angelo,  M.,  2010,  Pengaruh  Pemberian
Seduhan  Kelopak  Kering  Bunga  Rosela (Hibiscus  sabdariffa)  Terhadap  Kadar Trigliserida Serum Tikus SD Hiperkolesterolemik, Karya  Tulis  Ilmiah ,
Program  Pendidikan  Sarjana  Kedokteran
Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang. Anonim., 2004, Ekstrak Tumbuhan Indonesia,  Volume  2 ,  Badan  Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia.
Dinayati,  T.,  2010,  Pengaruh  Pemberian Seduhan  Kelopak  Kering  Bunga  Rosela (Hibiscus  sabdariffa)  Terhadap  Kadar Kolesterol Total Serum Tikus SD.
Gupta,  V.  Karar,  P.  Ramesh,  S.  Misra,  S. And  Gupta,  A.  2010. Nanoparticle Formulation for Hydrophilic & Hydrophobic  Drugs .  Int.  J.  Res.  Pharm. Sci. Vol-1, Issue-2, 163-169. Harborne, J.B., 1973, Phytochemical methods,  London.  Chapman  and  Hall, Ltd., Pp. 49-188. Hirunpanich  v,  Anocha  Utaipat,  Noppawan Phumala Marales, Nuntavan Bunyapraphatsara, Hitoshi Sato, Angkana Herunsale, Chuthamanee Suthisisang, 2006, Hypocholesterolemic and antioxidant  effects  of  aqueous  extracts from  the  dried  calyx  of  Hibiscus sabdariffa L. in
Mohanraj  and  Chen,  2006, Nanoparticles – A Review, Trop J Pharm Res, June 2006;
5 (1) : 561-573.
Muchtar,  H.,  Reci  Ariati.,  Helmi  Arifin  , 2012,    Pengaruh  fraksi  air  kelopak bungarosella  (Hibiscus  sabdariffa  L.) terhadap  kadar  kolesterol  darah  tikus putih jantan hiperkolesterol dan hiperkolesterol-disfungsi hati, Tesis, Universitas Andalas, Sumatra Barat. Poulain,  N.  and  Nakache,  E.  1998, Nanoparticles from vesicles polymerization.  II.  Evaluation  of  their encapsulation  capacity.  J.  Polym.  Sci.  A Polym. Chem., 36: 3035–3043.
Riski  I.,  2014, Formulasi  Nanopartikel Kitosan  Ekstrak  Bunga  Rosella  (Hibiscus Sabdariffa L.) Dan Uji Aktivitas Antioksidan  Pada  Sel  Darah  Merah Domba , Tesis, Universitas Ahmad
Dahlan, Yogyakarta. Shoo,  S.K.  and  Labhasetwar,  V.,  2006, Nanopartikel  interface:  An  Important
Determinant  in  Nanoparticles-Mediated
Drug/Gene  Delivery  in  Nanoparticle Technology  for  Drug  Delivery,  Taylor  & Francis Group, New York, pp. 140-150. Takahashi,Y.,Zhu,H.,Yoshimoto,T.,2005. Essential  roles  of  lipoxygenases  in  LDL oxidation and development
of
atherosclerosis.    Antioxidant  and  Redox Signaling 7,425–431. Wijayanti,  R.,  2013, Efek  Ekstrak  Etanol Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus Sabdariffa  L.)  Terhadap  Penurunan Kadar Gula Darah, Kolesterol, Trigliserida Serta Histopatologi Pankreas Tikus  Putih  Galur  Sprague  Dawley  Yang diinduksi  7,12  Dimetilbenz(α)Antrasen, Tesis, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta. WorldHealthOrganization.2006. Mortality country fact sheet. WorldHealthStatistica.