## PENINGKATAN DERAJAT DEASETILASI DALAM SINTESIS KITOSAN DARI CANGKANG KERANG DARAH
Muhammad Hakam, Firnanti Praditama, Ely Kurniati *
Program Studi Teknik Kimia Universitas Pembangunan Nasional ”Veteran” Jawa Timur Jalan Raya Rungkut Madya No.1 Gunung Anyar, Surabaya, Jawa Timur 60249, Indonesia Penulis korespondensi: hakammedali@gmail.com

## Abstrak
Cangkang kerang darah yang dihasilkan dari konsumsi kerang darah memberikan kontribusi timbulnya limbah  cangkang  kerang  darah.  Limbah  yang  menumpuk  tanpa  dilakukan  pengolahan  menyebabkan pencemaran terhadap lingkungan. Cangkang kerang darah dapat diolah menjadi kitosan. Mutu kitosan yang baik  dapat  diketahui  dari  nilai  derajat  deasetilasi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh konsentrasi larutan NaOH dan waktu reaksi terhadap peningkatan nilai derajat deasetilasi sehingga diketahui konsentrasi larutan NaOH dan lama waktu reaksi terbaik dalam meningkatkan nilai derajat deasetilasi serta memperoleh produk kitosan dengan kualitas yang berdasarkan standar SNI. Sintesis kitosan cangkang kerang darah  dilakukan melalui tahap  deproteinasi, demineralisasi, dan deasetilasi. Variabel penelitian ini  adalah tahap  deasetilasi  digunakan  konsentrasi  larutan  NaOH  sebesar  30%;  35%,  40%;  45%;  50%  dan  waktu pengadukan sebesar 0,5 jam; 1 jam; 1,5 jam; 2 jam; 2,5 jam.  Hasil penelitian menunjukkan sintesis cangkang kerah darah menjadi kitosan dengan penambahan konsentrasi NaOH dan waktu reaksi dapat meningkatkan nilai derajat deasetilasi. Hasil terbaik pada penelitian diperoleh nilai rendemen sebesar 30,5% dan derajat deasetilasi hasil analisa (FTIR) sebesar 86,0365% yang telah memenuhi dengan standar SNI kitosan tahun 2018. Hasil ini didapatkan pada konsentrasi NaOH sebesar 50% dengan waktu reaksi selama 2,5 jam.
Kata kunci: cangkang kerang darah; derajat deasetilasi; kitosan

## INCREASING DEGREE OF DEACETYLATION IN THE SYNTHESIS OF CHITOSAN FROM THE SHELLS OF BLOOD CLAMS

## Abstract
Blood clam shells produced from the consumption of blood clams contribute to the emergence of blood clam shell waste. Waste that accumulates without processing causes pollution to the environment. Blood clam shells  can  be  processed  into  chitosan.  The  excellent  quality  of  chitosan  can  be  seen  from  the  degree  of deacetylation. This study seeks to determine the relationship between the concentration of NaOH solution and reaction  time  to  increase  the  value  of  the  degree  of  deacetylation  to  establish  the  optimal  concentration  of NaOH  solution  and  time  of  response.  The  next  goal  is  to  get  high-quality  chitosan  products  based  on  SNI requirements. The deacetylation stage employs a 30% concentration of NaOH solution, 35%, 40%, 45%, and 50%, and stirring times of 0.5; 1; 1.5; 2; 2.5 hours variables. The outcomes demonstrated that the degree of deacetylation was raised during the synthesis of blood clam shells into  chitosan with the addition of NaOH concentration and reaction time. By the 2018 SNI chitosan standard, the best findings in this investigation had a yield value of 30.5% and a degree of deacetylation from the FTIR analysis of 86.0365%. These results were obtained at a NaOH concentration of 50% with a reaction time of 2.5 hours.
Keywords: blood clam shell; chitosan; degree of deacetylation

## PENDAHULUAN
Berdasarkan  data  Kementerian  Kelautan  dan Perikanan  (KKP),  sekitar  62%  wilayah  Indonesia merupakan  laut  dan  perairan.  Hal  ini  menjadikan
Indonesia  memiliki  potensi  keanekaragaman  biota laut  yang  dapat  dimanfaatkan,  salah  satunya  ialah keanekaragaman berbagai jenis kerang. Kerang darah adalah  salah  satu  jenis  kerang  yang  banyak dikonsumsi  masyarakat.  Daging  kerang  darah  dapat
diolah  menjadi  berbagai  olahan  kuliner.  Namun, sejauh  ini  pemanfaatan  kerang  darah  lebih  banyak pada  bagian  dagingnya  sedangkan  cangkang  kerang darah  dibuang  menjadi  limbah  atau  diolah  sebagai pakan ternak dan kerajinan tangan.
Kerang  darah  dengan  nama  latin Anadara granosa sering dijumpai di daerah Asia Timur serta Asia  Tenggara.  Kandungan  hemoglobin  dapat ditemukan  dalam  cairan  merah  pada  kerang  darah. Kandungan  berupa  cairan  merah  inilah  masyarakat menyebutnya  sebagai  kerang  darah.  Bila  ditinjau lebih  lanjut,  potensi  kandungan  utama  dalam cangkang kerang darah berupa kitin, CaCO 3 , kalsium hidrosiapatit, dan Ca 3 (PO 4 ) 2 dapat disintesis menjadi produk bernilai jual (Masindi, 2017).
Kitin  merupakan  polisakarida  yang  memiliki berat molekul yang tinggi, dikenal juga dengan istilah β-(1-4)-2asetamida-2-dioksi-D-glukosa  (N-asetil-D Glukosamin). Pada kitin dapat ditemukan gugus asetil (-CH 3 COO).  Kitosan  dapat  dikatakan  sebagai molekul kitin yang telah terdeasetilasi. Pada kitosan gugus  asetil  telah  dihilangkan  menyisakan  gugus amina (-NH 2 ). Selain itu, kitin memiliki nilai derajat deasetilasi hingga 10%, sedangkan kitosan memiliki nilai  derajat  deasetilasi  di  atas  70%.  Kitosan  juga memiliki  reaktivitas  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  kitin.  Kitosan  tidak  beracun  dan  sulit  larut pada  air  dikarenakan  kitosan  memiliki  rantai  yang panjang.  Kitosan  juga  sering  kali  dikenal  sebagai bahan  biokoagulan  alami  yang  ramah  lingkungan, terbarukan,  biokompatibel  dan  mudah  mengalami biodegradasi.
Pada  proses  pembuatan  kitosan  secara kimiawi, menurut Fadli (2017) terdapat 3 tahap yaitu:
1. Deproteinasi
Tahap  deproteinasi  berfungsi  menghilangkan kandungan  protein  dalam  cangkang  kerang darah.  Protein  yang  terdapat  pada  cangkang kerang darah dapat mempercepat pertumbuhan mikroorganisme pembusuk sehingga tahap ini dapat memperpanjang masa simpan dari kitin. Penghilangan  protein  yang  terikat  pada  kitin dapat dilakukan dengan menggunakan larutan basa seperti NaOH.
2. Demineralisasi Tahap demineralisasi dilakukan dengan tujuan untuk menghilangkan kandungan mineral pada cangkang  kerang  darah.  Umumnya  garam mineral  yang  terikat  adalah  senyawa  kalsium karbonat (CaCO 3 ) dan kalsium fosfat (Ca(PO 4 ) 2 ). Semakin besar kandungan mineral yang ada dalam cangkang kerang darah, maka semakin  kecil  daya  serap  yang  ada  apabila dimanfaatkan lebih lanjut.
3. Deasetilasi Tahap deasetilasi berfungsi melepaskan gugus asetil  (-CH 3 COO)  pada  kitin  sehingga terbentuk  gugus  amina  (-NH 2 )  dengan penggunaan larutan basa berkonsentrasi tinggi.
Gugus  asetil  yang  berhasil  dilepaskan dinyatakan sebagai derajat deasetilasi. Derajat deasetilasi  merupakan  penentu  kualitas,  nilai jual,  serta  kegunaan  kitosan.  Setiap  industri yang  menggunakan  kitosan  sebagai  bahan bakunya  memiliki  standar  persentase  derajat deasetilasi  tersendiri  yang  disesuaikan  sesuai kebutuhannya.
Gambar  1 .  Reaksi  deasetilasi  kitin  menjadi  kitosan dengan penambahan larutan NaOH
Kitosan  memiliki  banyak  pengaplikasian  di berbagai  bidang.  Ratnawulan  (2018)  menyebutkan bahwa  kitosan  berperan  baik  dalam  mengatasi pencemaran  lingkungan.  Hal  ini  dilakukan  dengan melalui tahapan koagulasi dan filtrasi, kitosan dapat menjernihkan  air  serta  menurunkan  tingkat  warna, pH,  COD  dan  BOD,  adsorbsi  logam  berat  dan  zat warna,  serta  mereduksi  TSS.  Pratiwi  (2014)  juga menyebutkan  bahwa  penggunaan  bahan  kimia  dan pestisida  dalam  sektor  pertanian  dapat  dikurangi dengan penggunaan kitosan. Kitosan dapat berperan sebagai  biokontrol  pada  tumbuhan  serta  dapat merangsang  enzim  pertumbuhan.  Dalam  bidang pangan, inovasi kitosan dapat ditemui sebagai bagian dari  komposisi  makanan.  Kitosan  dapat  berguna sebagai  perangkap  lemak,  sehingga  kitosan  berguna dalam upaya mendukung program diet. Kitosan juga mampu  meningkatkan  keawetan  bahan  pangan  dan sering  ditemui  pada  produk  olahan  seperti  bakso, sosis, nugget, buah-buahan dan bahan pangan lainnya dikarenakan  kitosan  memiliki  aktivitas  antioksidan dan antimikroba.
Dalam  rangka  memenuhi  kebutuhan  kitosan agar dapat diaplikasikan sesuai peruntukannya maka mutu kitosan harus dipenuhi sesuai standar mutu yang telah  ditetapkan.  Salah  satu  parameter  mutu  kitosan adalah  nilai  derajat  deasetilasi.  Nilai  derajat deasetilasi dapat digunakan sebagai indikator kemur- nian  kitosan.  Persyaratan  nilai  derajat  deasetilasi kitosan  menurut  SNI  minimal  bernilai  75%.  Nilai derajat deasetilasi yang lebih tinggi maka kemurnian dari kitosan lebih baik pula (Purbowati, 2016). Data pada Tabel 1 adalah standar mutu dari kitosan yang dikeluarkan  oleh  Standar  Nasional  Indonesia  (SNI) pada tahun 2018.
Tabel 1 . Standar mutu kitosan (SNI, 2018)
No Parameter Satuan Keterangan 1. Warna - Coklat muda sampai putih 2. Benda asing - Negatif
3. Derajat deasetilasi % Min. 75 4. pH - 7-8 5. Kadar abu % Maks. 5 6. Kadar air % Maks. 12
Nilai  derajat  deasetilasi  kitosan  dipengaruhi beberapa  parameter  penting  meliputi  konsentrasi reagen basa, temperatur, dan waktu reaksi deasetilasi (Citrowati,  2017).  Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui pengaruh konsentrasi reagen basa, dalam hal ini NaOH, dan waktu reaksi deasetilasi cangkang kerang darah sehingga diperoleh konsentrasi larutan NaOH  dan  waktu  reaksi  terbaik  dalam  upaya peningkatan nilai derajat deasetilasi kitosan cangkang kerang darah berdasarkan ketentuan SNI.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Pada  penelitian  ini  digunakan  cangkang kerang darah sebagai bahan dasar pembuatan kitosan. Cangkang kerang ini didapatkan dari pasar ikan kota Mojokerto.  Selain  itu,  digunakan  bahan  lain  berupa asam klorida (HCl), natrium hidroksida (NaOH) serta aquadest dari toko bahan kimia Surabaya.

## Alat
Peralatan yang digunakan pada penelitian  ini dirangkai sebagaimana pada Gambar 2.
Gambar 2 . Rangkaian alat sintesis kitosan cangkang kerang darah.
Keterangan: 1. Thermometer; 2. Beaker glass; 3. Hot plate magnetic stirrer

## Prosedur
Proses sintesis cangkang kerang darah menjadi kitosan  untuk  diketahui  nilai  derajat  deasetilasi sebagai  parameter  mutu  kitosan  melalui  beberapa tahapan.
Pencucian Cangkang Kerang Darah Pengeringan Pengayakan Sampel Serbuk Cangkang Kerang Darah
Gambar 3 . Diagram alir pretreatment cangkang kerang darah
Filtrasi (kondisi pH larutan 10) Deproteinasi (±65 o C, 2 jam, pengadukan 200 rpm) Larutan NaOH 3,5% Serbuk Cangkang Kerang Darah 100 gram Pencucian (kondisi pH 7) Pengeringan dengan oven suhu 100 o C selama 4 jam Aquadest Residu Filtrat Serbuk cangkang hasil deproteinasi
Gambar  4 .  Diagram  alir  tahapan  deproteinasi cangkang kerang darah
Filtrasi (kondisi pH larutan 4) Demineralisasi (±30 o C, 1 jam, pengadukan 200 rpm) Larutan HCL 1 N Serbuk cangkang kerang darah hasil deproteinasi Pencucian (kondisi pH 7) Pengeringan dengan oven suhu 100 o C selama 4 jam Aquadest Residu Filtrat Kitin Gambar  5 .  Diagram  alir  tahapan  demineralisasi cangkang kerang darah Filtrasi (kondisi pH larutan 10) Deasetilasi (±120 o C,variasi lama waktu pengadukan, pengadukan 200 rpm) Variasi Larutan NaOH Kitin Pencucian (kondisi pH 7)
Pengeringan dengan oven suhu 100 o C selama 4 jam Aquadest Residu Filtrat Kitosan Perhitungan rendemen Analisa FTIR Gambar  6 .  Diagram  alir  tahapan  deasetilasi cangkang kerang darah

## Uraian Prosedur Pembuatan Serbuk Cangkang Kerang Darah
Secara  garis  besar,  tahap  pembuatan  serbuk cangkang  kerang  darah  disajikan  sebagaimana  pada Gambar  3.  Pembersihan  limbah  cangkang  kerang darah  dilakukan  dengan  menghilangkan  sisa  daging dan  kotoran  yang  masih  menempel  pada  cangkang kerang  darah  kemudian  dibilas  dengan  air  bersih. Cangkang  kerang  darah  dijemur  dibawah  terik matahari sekitar 2-3 hari sampai didapatkan cangkang kerang  darah  kering.  Setelah  itu  cangkang  kerang darah  kering  dihaluskan  dan  dilakukan  pengayakan ukuran 100 mesh.

## Pembuatan Kitosan Cangkang Kerang Darah
1. Tahap Deproteinasi Pada tahap deproteinasi (Gambar 4), digunakan  larutan  NaOH  3,5%  dengan  rasio  sebuk cangkang  kerang  darah  dan  larutan  NaOH  3,5% sebesar 1:10(b/v). Campuran ini dipanaskan menggu- nakan hot  plate  magnetic  stirrer dengan  temperatur ±65 o C.  Pengadukan  dilakukan  sekitar  2  jam  dengan kecepatan  pengadukan  200  rpm.  Hasil  pengadukan difiltrasi,  kemudian  dicuci  dengan  akuades  sampai pH  netral.  Endapan  yang  diperoleh  dikeringkan menggunakan oven pada temperatur 100 o C sekitar 4 jam.

## 2. Tahap Demineralisasi
Pada  tahap  demineralisasi  (Gambar  5), digunakan  larutan  HCL  1N  dengan  rasio  sebuk cangkang kerang darah dan larutan HCL 1N sebesar 1:15  (b/v).  Campuran  ini  dipanaskan  menggunakan hot plate magnetic stirrer dengan temperatur ±30 o C. Pengadukan  dilakukan  selama  1  jam  dengan kecepatan  pengadukan  200  rpm.  Hasil  pengadukan difiltrasi,  kemudian  dicuci  dengan  akuades  sampai dihasilkan pH netral. Endapan (kitin) yang diperoleh dikeringkan  menggunakan  oven  pada  temperatur 100 o C sekitar 4 jam.

## 3. Tahap Deasetilasi
Pada tahap deasetilasi (Gambar 6), digunakan larutan  NaOH  30%;  35%;  40%;  45%;  50%  dengan rasio  kitin  dan  variasi  larutan  NaOH  1:20  (b/v). Campuran  ini  dipanaskan  menggunakan hot  plate magnetic stirrer dengan temperatur ±30 o C. Pengadukan  dilakukan  dengan  variasi  waktu  reaksi 0,5;  1;  1,5;  2;  2,5  jam  disertai  pengadukan  dengan pengadukan  kecepatan  200  rpm.  Hasil  pengadukan difiltrasi, kemudian dicuci dengan akuades hingga pH netral. Pengeringan endapan dilakukan menggunakan oven pada  temperatur  100 o C  sekitar  4  jam  untuk selanjutnya  dihitung  kadar  rendemennya  dan dianalisa  nilai  derajat  deasetilasinya  menggunakan spektroskopi  IR  metode baseline .  Perhitungan  ini dikemukakan oleh Baxter dkk., (1992).
% 𝑑𝑒𝑟𝑎𝑗𝑎𝑡 𝑑𝑒𝑎𝑠𝑒𝑡𝑖𝑙𝑎𝑠𝑖 = 1 − [ 𝐴 1.655 𝐴 3.450 𝑥 155]
Dimana: A 1.655 = Absorbansi bil. gelombang 1.655 cm -1 A 3.450 = Absorbansi bil. gelombang 3.450 cm -1 155
=  Konstanta  dari  perbandingan  A 1.655 /A 3.450
untuk  kitosan  yang  terdeasetilasi  sempurna dengan asumsi A 1.655 /A 3.450 x 115 menghasilkan nilai 0.
Nilai  absorbansi  untuk  gugus  amina  dan asetamida diperoleh dari persamaan matematis yang dikemukakan  oleh  Sabnis  &  Block  dalam  Khan (2002).
𝐴 1.655 = 𝐿𝑜𝑔 [ DF 2 DE ] 𝐴 3.450 = 𝐿𝑜𝑔 [ 𝐴𝐶 AB ]
Nilai  DF 2 ,  DE,  AC,  dan  AB  diperoleh  dari spektra IR seperti pada Gambar 7.
Gambar 7 . Metode baseline (Khan, 2022)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pembuatan Serbuk Cangkang Kerang Darah
Limbah cangkang kerang darah diperoleh dari pasar  ikan  Mojokerto.  Cangkang  kerang  darah tersebut  direbus  sekitar  15  menit.  Setelah  itu dilakukan pembersihan sisa daging dan kotoran yang masih menempel kemudian dibilas dengan air bersih. Pengeringan  selama  3  hari  dilakukan  untuk memudahkan penghalusan cangkang kerang darah.
Gambar  8. (a)  Cangkang  kerang  darah;  (b)  Serbuk cangkang kerang darah

## Isolasi Kitin Tahap deproteinasi
Pada tahap ini, protein yang terkandung dalam cangkang kerang darah dihilangkan. Protein ini dapat dihilangkan  dengan  menggunakan  larutan  NaOH 3,5% dengan rasio  1:10 (b/v) (Fadli, 2017). Protein akan terlepas dan membentuk natrium proteinat yang dapat larut serta hilang dalam proses pencucian dan filtrasi  (Kurniasih,  2011).  Reaksi  yang  terjadi  pada tahap ini sebagai berikut.
𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛 + 𝑁𝑎𝑂𝐻 → 𝑁𝑎 − 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎𝑡 +   𝐻 2 𝑂

## Tahap Demineralisasi
Pada tahap ini, kandungan mineral atau garam anorganik dalam cangkang kerang darah dihilangkan dengan  penambahan  larutan  HCL  1N  dengan perbandingan  1:15  (b/v).  Mineral  yang  banyak terkandung  dalam  cangkang  kerang  darah  adalah Ca 3 (PO 4 ) 2 dan CaCO 3 (Masindi, 2017). Pada proses demineralisasi terbentuk buih dan gelembung udara yang berlangsung sekitar 5 menit. Hal ini disebabkan oleh  terbentuknya  gas  CO 2 dan  air  dipermukaan larutan  sesuai  dengan  reaksi  demineralisasi  yang ditunjukkan Persamaan (1) dan (2).
CaCO 3(s) +2HCl (l) → CaCl 2(l) +H 2 O (l) +CO 2(g) ………(1)
Ca 3 (PO 4 ) 2 (s) +6HCL (aq) → 3CaCl 2 (aq) +2H 3 PO 4(aq) ....(2)

## Isolasi Kitosan
Pada  tahap  deasetilasi  bertujuan  menghilang- kan  gugus  asetil  pada  kitin  menjadi  gugus  amina sehingga  diperoleh  kitosan.  Deasetilasi  dilakukan dengan  penambahan  larutan  NaOH  yang  bervariasi dan  juga  waktu  reaksi  yang  bervariasi.  Kitosan cangkang kerang darah  (Gambar 9)  yang dihasilkan berupa  serbuk  berwarna  coklat  muda  dimana  warna kitosan  berdasarkan  SNI  kitosan  tahun  2018  adalah coklat  muda  sampai  putih.  Dalam  tahap  deasetilasi gugus asetil (-CH 3 COO) pada kitin dipecah menjadi gugus amina (-NH 2 ).
Gambar 9 . Kitosan cangkang kerang darah
Pengaruh  Lama  Waktu  Reaksi  dan  Konsentrasi NaOH terhadap Rendemen Kitosan
Pada Gambar 10 menunjukkan bahwa seiring dengan  peningkatan  konsentrasi  NaOH  dan  lama waktu reaksi diketahui bahwa rendemen kitosan yang diperoleh  akan  semakin  rendah.  Hasil  penelitian
a b
menunjukkan  rendemen  kitosan  paling  rendah sebesar 30,5% diperoleh pada penggunaan konsentrasi NaOH 50% dengan lama waktu reaksi 2,5 jam  (variabel  tertinggi  yang  digunakan)  sedangkan rendemen  kitosan  paling  tinggi  sebesar  67,5% diperoleh  pada  penggunaan  konsentrasi  NaOH  30% dengan waktu reaksi 0,5 jam (variabel terendah yang digunakan).
Pada  penelitian  sebelumnya  yang  dilakukan oleh (Setha, 2019) dijelaskan bahwa terjadinya reaksi substitusi  pada  gugus  asetil  menjadi  optimal disebabkan  dari  adanya  peningkatan  konsentrasi NaOH.  Selain  itu,  kenaikan  lama  waktu  reaksi menyebabkan  peristiwa  adisi  molekul  NaOH  ke molekul  kitin  semakin  banyak  sehingga  rendemen kitosan  mengalami  penurunan.  Oleh  karena  itu, kenaikan  konsentrasi  NaOH  dan  semakin  lamanya waktu  reaksi  berdampak  pada  penurunan  hasil rendemen  kitosan  yang  berarti  gugus  asetil  yang dilepaskan juga semakin besar.
Gambar 10 . Pengaruh lama waktu reaksi (jam) dan konsentrasi NaOH terhadap rendemen kitosan

## Analisa Gugus Fungsi Kitosan Menggunakan FTIR
Pada  Gambar 11, terdeteksi gugus  –OH pada bilangan  gelombang  3398,69  cm -1 berupa  vibrasi uluran  dengan  puncak  melebar.  Ikatan  C-H  alkana terdeteksi pada puncak bilangan gelombang 2922,25 cm -1 . Ikatan C-C terdeteksi pada bilangan gelombang 1876,80 cm -1 . Vibrasi tekuk dari gugus –NH primer terdeteksi pada puncak khas kitosan dengan bilangan gelombang  1627,97  cm -1 .  Menurut  Silverstain  & Webster  dalam  (Wafi,  2020)  dijelaskan  getaran tekuk-NH  primer  terdapat  diantara  rentang  bilangan gelombang 1640-1560 cm -1 .
Nilai  derajat  deasetilasi  dihitung  dengan metode baseline yang dikemukakan oleh Baxter et al (1992).  Pada  Gambar  12,  penentuan  nilai  panjang titik yang ditetapkan agar lebih akurat dibantu dengan software Origin  sehingga  diperoleh  data  panjang AC=4,7874  cm;  panjang  AB=0,5893  cm;  panjang DF 2 =2,8582 cm; panjang DE=2,0738 cm; A 3450 =0,9119;  A 1655 =0,1393.  Setelah  dilakukan
perhitungan diperoleh nilai derajat deasetilasi sebesar 76,3202%. Menurut SNI spesifikasi derajat deasetilasi  kitosan  yang  sesuai  dengan  mutu  yang ditetapkan  minimal  bernilai  75%.  Nilai  derajat deasetilasi kitosan tersebut telah memenuhi dari batas minimal derajat deasetilasi yang ditetapkan oleh SNI.
Gambar  11. Hasil  analisa  spektra  IR  kitosan cangkang kerang darah
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 54 55 56 57 58 59 60 61 D A B C F2 E Gambar  12 .  Metode baseline spektra  IR  kitosan cangkang kerang darah

## Pengaruh Waktu Reaksi dan Konsentrasi NaOH terhadap Nilai Derajat Deasetilasi
Pada Gambar 13 menunjukkan bahwa seiring dengan  peningkatan  konsentrasi  larutan  NaOH  dan lama  waktu  reaksi  maka  terjadi  peningkatan  nilai derajat  deasetilasi  yang  dihasilkan.  Konsentrasi larutan NaOH 30% dengan lama waktu reaksi 0,5 jam menghasilkan  nilai  derajat  deasetilasi  terendah sebesar  74,4444%.  Nilai  derajat  deasetilasi  tertinggi diperoleh sebesar 86,0365% pada konsentrasi larutan NaOH  50%  dengan  waktu  reaksi  selama  2,5  jam. Pada proses deasetilasi, umumnya gugus asetil yang mampu  dihilangkan  tidak  keseluruhan.  Persentase keberhasilan menghilangkan gugus asetil ini disebut dengan  derajat  deasetilasi.  Hasil  terbaik  pada penelitian  telah  menunjukkan  bahwa  kitosan  telah memenuhi  standar  mutu  kitosan  sesuai  Standar Nasional  Indonesia  (SNI)  pada  tahun  2018.  Derajat deasetilasi  dari  kitosan  bervariasi  antara  56-99%, rata-rata  80%  tergantung  dari  sumber  dan  metoda pembuatannya (Safitra, 2015).
0 20 40 60 80 0 1 2 3 Rendem en Kitosan Lama Waktu Reaksi (Jam) 30% 35% 40% 45 %
50%
Hasil  penelitian  yang  diperoleh  menyatakan kenaikan konsentrasi dari NaOH yang digunakan dan lama  waktu  reaksi  pada  tahap  deasetilasi  cangkang kerang  darah  maka  terjadi  peningkatan  nilai  derajat deasetilasi  yang  dihasilkan.  Hal  ini  menunjukkan kesesuaian  dengan  penelitian  Tobing  dkk.  (2011) yang  menyebutkan  bahwa  peningkatan  nilai  derajat deasetilasi disebabkan oleh peningkatan lama waktu perendaman.  Pemecahan  gugus  asetil  disebabkan oleh  kenaikan  konsentrasi  NaOH  pada  rentang tertentu. Menurut Fadli dkk. (2015) dan Mursida dkk. (2018)  disebutkan  bahwa  kenaikan  konsentrasi reagen  basa  dan  lama  waktu  reaksi  pada  proses deasetilasi berdampak pada peningkatan nilai derajat deasetilasi.
Gambar 13 . Pengaruh lama waktu reaksi (jam) dan konsentrasi NaOH terhadap nilai derajat deasetilasi

## SIMPULAN
Konsentrasi  NaOH  dan  lama  waktu  reaksi yang  digunakan  memiliki  pengaruh  yang  signifikan terhadap peningkatan nilai derajat deasetilasi dimana semakin  tinggi  konsentrasi  NaOH  dan  waktu  reaksi yang semakin besar, semakin besar pula nilai derajat deasetilasi  yang  diperoleh.  Hasil  terbaik  pada penelitian  ini  didapatkan  nilai  rendemen  sebesar 30,5%  dan  derajat  deasetilasi  hasil  analisa  Forier Transform Infra-Red (FTIR) sebesar 86,0365% yang telah  memenuhi  batas  minimal  nilai  derajat deasetilasi  kitosan  sebesar  75%  sesuai  Standar Nasional  Indonesia  (SNI)  kitosan  tahun  2018.  Hasil ini didapatkan pada konsentrasi NaOH sebesar 50% dengan waktu reaksi selama 2,5 jam.

## SARAN
Pada penelitian peningkatan derajat deasetilasi dalam  sintesis  kitosan  cangkang  kerang  darah, kitosan  dengan  nilai  derajat  deasetilasi  lebih  tinggi bisa  dihasilkan  dengan  melakukan  redeasetilasi (meregenerasi NaOH secara bertahap) sesudah tahap
deproteinasi dan demineralisasi agar proses pengua- pan tidak cepat berlangsungnya sehingga kehilangan larutan yang menguap dapat diminimalkan.

## DAFTAR PUSTAKA
Baxter,  A.,  Dillon,  M.,  Taylor,  K.D.A.,  Roberts,
G.A.F.  1992.  Improved  Method  for  i.r. Determination  of  The  Degree  of  N- acetylation  of  Chitosan,  Journal  Biol Macromol, 14(1), pp.166-169.
Citrowati,  A.  N.,  Satyantini,  W.  H.,  Mahasri  & Gunanti.,  2017.  Pengaruh  Kombinasi  NaOH dan  Suhu  Berbeda  Terhadap  Nilai  Derajat Deasetilasi  Kitosan  dari  Cangkang  Kerang Kampak.  Journal  of  Aquaculture  and  Fish Health, 6(2).
Fadli,  A.,  Drastinawati.,  Alexander,  O.  &  Huda,  F., 2017.  Pengaruh  Rasio  Massa  Kitin/NaOH dan  Waktu  Reaksi  Terhadap  Karakteristik Kitosan yang disintesis dari Limbah Industri Udang Kerin. Jurnal Sains Materi Indonesia, 18(2).
Khan,  T.  A.,  Peh,  K.  K.,  &  Chang,  H.  S.  2002,
Reporting Degree of Deacetylaton Values of Chitosan:  The  Influence  of  Analytical Methods,  Journal  Pharm.Sci,  5(3),  pp.205- 212.
Masindi, Tiki & Herdyastuti, N., 2017. Karakterisasi Kitosan  dari  Cangkang  Kerang  Darah (Anadara  granosa).  UNESA  Journal  of Chemistry, 6(3), pp.137.
Mursida, T. & Sahriawati., 2018. Efektifitas Larutan Alkali pada Proses Deasetilasi dari Berbagai Bahan  Baku  Kitosan.  Jurnal  Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 21(2), pp.357.
Pratiwi,  R.,  2014.  Manfaat  Kitin  dan  Kitosan  bagi Kehidupan  Manusia.  Jurnal  Oseana,  39(1), pp.41.
Purbowati,  P.,  2016.  Upaya  Peningkatan  Derajat Deasetilasi  pada  Kitosan  Cangkang  Kerang Kampak  (Atrina  pectinata)  Melalui  Proses
Deasetilasi Kitin Secara Bertahap.
Undergarduated  Thesis.  Surabaya:  Program Studi  Budidaya  Perairan  Fakultas  Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga.
Ratnawulan,  A.,  Noor,  E.  &  Suptijah,  P.,  2018.
Pemanfaatan Kitosan dalam Daur Ulang Air sebagai  Aplikasi  Teknik  Produksi  Bersih. JPHPI, 21(2), pp.277-278.
Safitra,  E.  R.,  Budhijanto  &  Rochmadi.,  2015.
Optimasi dan Pemodelan Matematis Deasetilasi Kitin Menjadi Kitosan Menggunakan KOH. Jurnal Rekayasa Proses, 9(1), pp.17.
72.5 75 77.5 80 82.5 85 87.5 0 1 2 3 %Derajat Deasetilasi Waktu Reaksi (Jam) Konsentrasi NaOH 30%
35% 40% 45% 50%
Setha,  B.,  Rumata,  F.  &  Silaban,  B.,  2019.
Karakteristik  Kitosan  dari  Kulit  Udang
Vaname  dengan  Menggunakan  Suhu  dan Waktu yang Berbeda dalam Proses Deasetilasi. Jurnal Pengolahan Hasil
Perikanan Indonesia, 22(3). SNI,  2018.  SNI  Produk  Perikanan  Non  Pangan, Jakarta: Kementerian Kelautan dan Perikanan RI. Tobing, M. T. L., Prasetya, N. B. A. & Khabibi, K., 2011. Peningkatan Derajat Deasetilasi Kitosan  dari  Cangkang  Rajungan  dengan Variasi  Konsentrasi  NaOH  dan  Lama Perendaman.  Jurnal  Kimia  Sains  dan Aplikasi, 14(3), pp. 83-88. https://doi.org/10.14710/jksa.14.3.83-88. Wafi, A., Atmaja, L. & Ni’mah, Y. L., 2020. Analisis Kuat  Tarik  dan  Elongasi  Film  Gelatin- Kitosan. Jurnal Of Chemistry, 8(1).