## Dekolorisasi Limbah Cair Batik Menggunakan Miselium Jamur yang Diisolasi dari Limbah Baglog Pleurotus ostreatus
Anna Yulita, Sri Lestari, Ratna Stia Dewi
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Purwokerto Jl. Dr. Soeparno No.63 PURWOKERTO 53122 E-mail address: anna.yulita@gmail.com , ratna_stiadewi@yahoo.co.id

## Diterima Maret 2013 disetujui untuk diterbitkan Mei 2013

## Abstract
Batik  industries  have  negative  impacts  on  the  environment  from  the  dye  used.  An alternative  method  for  decolorization  in  batik  wastewater  using  the  fungi Pleurotus ostreatus was grown in baglog . Spent mushroom ( baglog ) still contains fungal mycelium of P.  ostreatus and  contaminant  fungus  such  as Penicillium sp.,  and Aspergillus sp.). Those  fungi  have  a  potential  to  decoloring  dyes  in  batik  wastewater.  The  aim  of  this research was to determine the ability of fungal mycelium isolated from spent mushroom P. ostreatus at  decoloring  batik  wastewater,  and  determine  the  most  effective  fungal mycelium to decoloring batik  wastewater. The  results showed that the mycelium isolated from sewage baglog P. ostreatus was able to decoloring batik wastewater. Penicillium sp. mycelium is most effective at decoloring batik wastewater.
Keywords : decolorization, spent mushroom, batik wastewater, fungal mycelium.

## Abstrak
Industri batik menghasilkan pengaruh  negatif terhadap  lingkunbgan dalam  hal  penggunaan pewarna.    Metode  alternatif  untuk  dekolorisasi  limbah  batik  menggunakan  jamur Pleurotus ostreatus yang  ditanam  pada baglog .    Jamur  ini  masih  mengandung  miselium P. ostreatus dan  jamur  kontaminan  antara  lain Penicillium sp.,  dan Aspergillus sp.    jamur tersebut  memiliki  potensi  untuk  dekolorisasi  limbah  batik.    Tujuan  penelitian  ini  adalah untuk  menentukan  kemampuan  miselium  jamur  yang  diisolasi  dari P.  sotreatus untuk mendekoloruisasi  limbah  batik.    Hasil  poenelitian  ini  menujukkan  bahwa  miselium  yang diisolasi dari limbah P. ostreatus dapat mendekolorisasi limbah batik sementara miselium Penicillium sp. merupakan merupakan bahan yang paling efektif untuk dekolorisasi limbah batik.
Kata kunci : dekolorisasi, jamur, limbah batik, miselium jamur.

## Pendahuluan
Perkembangan industri batik
mengalami  kemajuan  yang  cukup  pesat sehingga mempunyai nilai positif terhadap perekonomian masyarakat, tetapi kegiatan tersebut juga
menimbulkan  dampak  negatif  terhadap lingkungan. Industri batik dapat menghasilkan  cemaran  yang  dapat merusak  ekosistem,  cemaran  tersebut berasal  dari  pewarna  yang  digunakan. Dominansi  penggunaan  pewarna  pada industri  batik  adalah  pewarna  sintetis yang tidak mudah terurai secara alami.
Pembuangan limbah batik ke perairan  menimbulkan  dampak  negatif terhadap organisme-organisme yang
terdapat di badan air karena mengandung zat toksik dan dapat masuk ke  rantai  makanan, serta dapat merusak nilai estetika badan air, berupa perubahan  warna air dan bau yang tidak sedap. Kusumawati (2008)
mengungkapkan  bahwa  zat  pewarna memiliki  toksisitas  yang  tinggi  terhadap mamalia  dan  organisme  air.  Agustina et al. (2011)  menambahkan,  penurunan kualitas  air  diantaranya  ditunjukkan dengan  meningkatnya  kekeruhan  air yang  disebabkan  adanya  polusi  zat warna, sehingga menghalangi masuknya cahaya matahari  ke dasar perairan yang dapat mengganggu keseimbangan proses  fotosintesis,  dan  adanya  efek
mutagenik  serta  karsinogenik  dari  zat warna tersebut.
Pengolahan limbah cair batik untuk dekolorisasi dapat menggunakan metode biologi, metode tersebut lebih menguntungkan  daripada  metode  kimia ataupun  fisika,  karena  lebih  sederhana, murah,  ramah  lingkungan,  dan  tidak menghasilkan  limbah  sekunder  berupa sedimentasi  lumpur dalam  jumlah besar. Salah  satu  perlakuan  secara  biologi adalah  dengan  menggunakan  teknik biosorpsi  menggunakan  jamur.  Jamur dipilih sebagai agen biodekolorisasi yang mampu  mendegradasi  komponen  warna yang  bersifat  toksik  karena  mempunyai kemampuan  untuk  transformasi,  yaitu merubah  dari  bahan  kimia  berbahaya pada limbah menjadi bentuk yang kurang atau  tidak  berbahaya  (Awaludin et  al ., 2001 dan Singh, 2006).
Dekolorisasi  pada  limbah  batik dapat menggunakan jamur pelapuk putih ( white  rot  fungi ),  yaitu  jamur  yang tergolong Basidiomycetes.
Jamur pelapuk putih dapat mendegradasi senyawa-senyawa yang bersifat
rekalsitran  dari  berbagai  jenis  pewarna (Sathiyamoorthi et al ., 2007). P. ostreatus merupakan  salah  satu  jenis jamur  pelapuk  putih  yang  ditumbuhkan pada baglog (medium  tanam  jamur). Limbah baglog yang  telah  diteliti  oleh Romsiyah  (2012)  dan  Wulandari  (2013) mampu mendekolorisasi limbah pewarna indigosol yellow . Penelitian  tersebut  juga mengisolasi jamur-jamur kontaminan yang  terdapat  pada  limbah baglog ,  yaitu Aspergillus sp.  dan Penicillium sp. Penelitian  bertujuan  untuk  mengetahui kemampuan miselium jamur yang diisolasi  dari  limbah baglog  P.  ostreatus dalam mendekolorisasi  limbah cair batik, dan  menentukan  miselium  jamur  yang paling  efektif  dalam  mendekolorisasi limbah cair batik.
Materi dan Metode
Isolat jamur yang digunakan adalah isolat koleksi penelitian sebelumnya, yaitu Penicillium sp.,
Aspergillus sp., dan P.  ostreatus .  Isolat jamur diremajakan  ke dalam cawan petri yang berisi medium PDA ( Potato Dextrose  Agar ),  kemudian  diinkubasi selama  5  hari  pada  suhu  ruang.  Jamur yang telah diremajakan kemudian dikultivasi  sebanyak  5  plug  (lingkaran isolat  jamur  yang  dibuat  dengan  bor gabus dengan diameter 5 mm) menggunakan  medium  PDYB  ( Potato Dextrose  Yeast  Broth )  100  ml  pada setiap unit eksperimen, kemudian diinkubasi  menggunakan shaker  orbital dengan  kecepatan  55  rpm  pada  suhu ruang selama 5 hari.
Limbah  cair  batik  yang  digunakan adalah limbah akhir dan limbah indigosol.  Limbah  cair  batik  tersebut berasal  dari  salah  satu  industri  batik  di Kecamatan Sokaraja Kabupaten
Banyumas.  Limbah  batik  ditempatkan dalam  erlenmeyer  (250  ml)  sebanyak 100  ml  untuk  setiap  unit  eksperimen, kemudian disterilisasi menggunakan autoklaf  dengan  suhu  121 o C  selama  20 menit  dengan  tekanan  2  atm.  Miselium jamur  yang  telah  dikultivasi  dipisahkan dari  medium  kultivasinya.  Kemudian limbah  cair  batik  yang  telah  disterilisasi dimasukkan  dalam  erlenmeyer  berisi miselium jamur tersebut. Mulut erlenmeyer  ditutup  menggunakan  kapas dan  dilapisi  dengan wrapper ,  kemudian diinkubasi  menggunakan shaker  orbital dengan  kecepatan  55  rpm  pada  suhu ruang selama 8 hari.
Pengukuran  dekolorisasi  dilakukan di  setiap  perlakuan  dengan  metode stpektrofotometri  (menggunakan  U-3900 UV-VIS spektrofotometer) . Sampel limbah  sebelum dan sesudah perlakuan diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 645 nm. Persentase dekolorisasi  diukur  menurut  rumus  dari Rani, et al. (2011), yaitu:
awal absorbansi akhir absorbansi awal absorbansi si Dekolorisa %   x 100 %.
pH  diukur  menggunakan  pH  meter  digital  sebelum  dan  sesudah  perlakuan. Sebelum dilakukan pengukuran pH, pH meter dikalibrasi dengan larutan buffer pH (4 dan
9).  Elektroda  dikeringkan  menggunakan tissue kemudian  dicelupkan  ke  dalam  akuades dan  dikeringkan  kembali  menggunakan tissue .  Pengukuran  pH  dilakukan  dengan mencelupkan elektroda ke dalam botol perlakuan sampai menunjukkan nilai konstan (SNI 2004; 06-6989.11-2004).
Suhu  diukur  sebelum  dan  sesudah  perlakuan,  dengan  mencelupkan  termometer ke dalam sampel perlakuan selama beberapa menit sampai menunjukkan angka konstan (SNI 2005; 06-6989.23-2005).
Data  persentase  dekolorisasi  limbah  cair  batik  dianalisis  menggunakan  analisis ragam  (uji  F)  pada  tingkat  kepercayaan  95%  dan  99%.  Perlakuan  berpengaruh  sangat nyata, sehingga pengujian dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Jujur (BNJ), dengan tingkat kepercayaan 95% dan 99%.

## Hasil dan Pembahasan
Limbah  cair  batik  sebelum  perlakuan  diukur  absorbansinya  untuk  mengetahui kemampuan dekolorisasi dari miselium  jamur yang digunakan, yaitu sebesar 10,74 pada limbah  akhir,  sedangkan  pada  limbah  indigosol  sebesar  90,4.  Absorbansi  warna  limbah cair batik setelah perlakuan mengalami penurunan, absorbansinya berkisar antara 0,071- 2,645.
Hasil  pengukuran  absorbansi  terhadap  dekolorisasi  limbah  cair  batik  menunjukkan bahwa rata-rata absorbansi limbah cair batik setelah perlakuan yaitu antara 0,11-2,06 dari absorbansi  awal  sebesar  10,74  pada  limbah  akhir,  sedangkan  pada  limbah  indigosol sebesar  90,4,  dengan  persentase  dekolorisasi  antara  90,71-99,5%.  Hal  tersebut menunjukkan  bahwa  absorbansi  limbah  cair  batik  mengalami  penurunan  yang  sangat tajam.  Rata-rata  persentase  dekolorisasi  pada  limbah  cair  batik  yaitu  97,43%.  Rata-rata persentase  dekolorisasi  tertinggi  adalah  adalah  pada  perlakuan  limbah  indigosol  yang ditambahkan  miselium Penicillium sp.  yaitu  sebesar  99,5%,  sedangkan  yang  terendah pada  perlakuan  limbah  akhir  yang  ditambahkan  miselium P.  ostreatus yaitu  sebesar 90,71%. Data selengkapnya dapat dilihat pada lampiran 5, dan data rata-rata persentase penyerapan Zn pada Gambar 1.
Gambar 1. Histogram rata-rata persentase dekolorisasi menggunakan  miselium  jamur yang diisolasi dari limbah Baglog P. ostreatus.
Figure 1. Histogram  of    average  percentage  decolorization  using  fungal  mycelium isolated from spent mushroom P. ostreatus.
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan bahwa  miselium  yang  digunakan  dalam
penelitian  sangat  berpengaruh  terhadap nilai  persentase  dekolorisasi  limbah  cair Aspergillus sp.
Penicillium sp.
batik.  Hal  tersebut  berarti  bahwa  setiap perlakuan miselium jamur tersebut berpotensi dalam mendekolorisasi
limbah  cair  batik.  Hipotesis  pertama dalam penelitian diterima, karena penggunaan miselium jamur yang diisolasi  dari  limbah baglog  P.  ostreatus
mampu  mendekolorisasi  limbah  cair batik.  Hasil  analisis  ragam  (uji  F) kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  Beda Nyata  Jujur  (BNJ)  untuk  mengetahui pengaruh antar perlakuan miselium yang diisolasi  dari  limbah baglog  P.  ostreatus terhadap dekolorisasi limbah cair batik.
Tabel 1. Analisis  ragam  persentase  dekolorisasi  menggunakan  miselium  jamur  yang diisolasi dari limbah baglog P. ostreatus
Table 1. Analysis of variance percentage decolorization using fungal mycelium isolated from spent mushroom P. ostreatus Sumber Keragaman Derajat Bebas Jumlah Kuadrat Kuadrat Tengah F. Hitung F. Tabel 5% 1% Perlakuan 5 486,97 97,39 95,66** 2,77 4,25 Error 18 18,33 1,02 Total 23 505,29 Keterangan: ** = berbeda sangat nyata.
Tabel 2. Uji Beda Nyata Jujur (BNJ) pengaruh antar perlakuan miselium yang diisolasi dari limbah baglog P. ostreatus terhadap dekolorisasi limbah cair batik
Table 2. Honestly  Significant  Difference  (HSD)  test  treatments  influence  of  mycelium isolated  from  spent  mushroom P.  ostreatus for  decolorization  of  batik wastewater
No. Perlakuan Rata-rata (%) 1. Limbah akhir dengan miselium P. ostreatus (A1) 90,71 d 2. Limbah akhir dengan miselium Aspergillus sp. (A2) 99 ab 3. Limbah akhir dengan miselium Penicillium sp . (A3) 98,67 bc 4. Limbah indigosol dengan miselium P. ostreatus (B1) 97,72 c 5. Limbah indigosol dengan miselium Aspergillus sp. (B2) 98,95 ab 6. Limbah indigosol dengan miselium Penicillium sp. (B3) 99,5 a Keterangan : Angka yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata pada BNJ  5%
Berdasarkan hasil uji BNJ, dekolorisasi  limbah  cair  batik  pada perlakuan  B3  menunjukkan  pengaruh yang  nyata  terhadap  perlakuan  A1,  A3, dan  B1.  Hal  tersebut  ditunjukkan  oleh rata-rata persentase dekolorisasi perlakuan  B3  yang  memiliki  rentang terjauh  terhadap  perlakuan  A1,  A3,  dan B1.  Perlakuan  miselium Penicillium sp. pada  limbah  indigosol  tersebut  memiliki nilai  rata-rata  tertinggi.  Hasil  tersebut menunjukkan  bahwa Penicillium sp. memiliki kemampuan dekolorisasi limbah cair  batik  yang  lebih  baik  daripada Aspergillus sp.,  sehingga  hipotesis  yang kedua ditolak.
Penicillium sp.  diduga  memiliki ketahanan yang lebih baik saat
dikondisikan  dalam  lingkungan  yang ekstrim,  dalam  hal  ini  limbah  cair  batik yang  sangat  pekat,  serta  jamur  tersebut mampu  beradaptasi  dalam  limbah  cair batik yang mengandung pewarna tersebut.  Penelitian  Bergsten-Torralba et al. (2009) melaporkan bahwa Penicillium simplicissimum mampu  mendekolorisasi limbah tekstil sebesar  100 %.  Rajendran et al. (2012) menyebutkan bahwa proses dekolorisasi lebih efektif oleh jamur yang mampu  menghasilkan  enzim  laccase lebih  tinggi, Penicillium sp.  mampu menghasilkan enzim laccase sebanyak 2 IU/ml,  sedangkan Aspergillus sp.  hanya mampu  menghasilkan  sebanyak  1,632 IU/ml.Proses  dekolorisasi  terjadi  secara enzimatik  dan  non  enzimatik  (Singh,
2006).  Mekanisme  awal  diduga  terjadi secara  non  enzimatik,  yaitu  adsorbsi limbah  cair  batik  oleh  dinding  sel  jamur. Hal  tersebut  dibuktikan  oleh  perubahan warna miselium dari putih menjadi coklat pada  perlakuan  limbah  akhir  dan  hijau pada perlakuan limbah indigosol.
Mekanisme dekolorisasi secara enzimatik  yaitu  melalui  aktivitas  enzim ekstraseluler yang terlibat dalam biodegradasi  zat  warna  serta  dalam penghapusan  warna  melalui  pemutusan ikatan  aromatik  yang  terdapat  pada pewarna.  Menurut  Singh  (2006),  enzim ekstraseluler  tersebut  meliputi  LiP,  MnP dan lakase.
Proses  dekolorisasi  oleh  miselium berpengaruh  terhadap  perubahan  pH dan  suhu.  Nilai  pH  setelah  perlakuan berkisar  antara  5,26-6,84.  Griffin  (1994) menyatakan bahwa pada kisaran pH 4-7, jamur  dapat  tumbuh  dengan  baik.  Suhu sebelum  perlakuan  pada  limbah  cair batik berkisar antara 26-27 o C. Nilai suhu setelah  perlakuan  adalah  29 o C.  Hasil tersebut  menunjukkan  kecenderungan penurunan pH dan  kenaikan suhu akibat adanya  substrat  berupa  limbah  batik. Gandjar et  al. (2006)  mengungkapkan bahwa penguraian
substrat menyebabkan  pH mengalami penurunan dan  suhu  meningkat  akibat  metabolisme fungi.

## Simpulan
Berdasarkan
hasil dan
pembahasan,  maka  dapat  disimpulkan bahwa  miselium Penicillium sp.  pada limbah  indigosol  paling  efektif  dalam mendekolorisasi.

## Ucapan Terima Kasih
Tulisan ini merupakan bagian dari skripsi penulis yang ditempuh di Fakultas Biologi  Universitas  Jenderal  Soedirman. Terima  kasih  disampaikan  kepada  Ibu Sri Lestari S.Si., M.Si. dan Ibu Ratna Stia Dewi,  S.Si.  M.Sc.  atas  bimbingan, bantuan, saran, dan masukannya.

## Daftar Pustaka
Agustina, T.E., E. Nurisman, Prasetyowati, N. Haryani, L.
Cundari, A. Novisa, dan O. Khristina.  2011.  Pengolahan  air limbah  pewarna  sintetis  dengan menggunakan reagen fenton. Prosiding Seminar Nasional AVoER ke-3 : 260-266.
Awaludin, R., Darah S., Ibrahim C. D and Uyub A. M. 2001. Decolorization of commercially  available  synthetic dyes  by  the  white  rot  fungus Phanerochaete  chrysosporium ME 446  (ATCC  34541). Journal  Fungi and Bactery , 62(1): 55-63. Bergsten-Torralba, L.R., M.M. Nishikawa,  D.F.  Baptista,  D.P.
Magalhães,  and  M. Silva.  2009. Decolorization  of  different  textile dyes by Penicillium simplicissimum and  toxicity  evaluation  after  fungal treatment. Brazilian  Journal  of Microbiology , 40(4).
Gandjar,  I.,  W.  Syamsuridzal,  A.  Oetari.
2006. Mikologi Dasar dan Terapan. Yayasan Obor Indonesia, Jakarta.
Griffin,  D.H.  1994.  Fungal  Physiology Second  Edition.  Wiley  Science Paperbook Series, New York.
Kusumawati,  N.  2008.  Studi  Degradasi Zat  Pewarna  Naftol  menggunakan Ferrat (FeO 4 ) 2- . Inotek , 12 (1): 1-9.
Rajendran,  R.,  S.K.  Sundaram,  K. Yasodha,  K.Umamaheswari.  2012. Comparison  of  fungal  laccase production on different solid substrates,  immobilization  and  its decolorization potential on synthetic textile dyes. IIOAB Journal , 3(5): 1-6.
Rani,  C.,  Asim,  K.J.,  Ajay,  B.  2011. Studies  on  the  biodegradation  of azo  dyes  by  white  rot  fungi Daedalea flavida in the absence of external carbon Source. 2nd International Conference on Environmental Science and Technology,6 . IACSIT Press, Singapore.
Romsiyah. 2012. Pengaruh bobot massa
limbah medium tanam jamur
Pleurotus  ostreatus terhadap  daya dekolorisasi  limbah  batik.  Skripsi (tidak dipublikasikan). Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. Sathiyamoorthi,  P.,  S.  Periyarselvam,  A. Sasikalaveni,  K.  Murugesan,  and P. T. Kalaichelvan. 2007.
Decolorization  of  textile  dyes  and their effluents using white rot fungi.
African Journal of Biotechnology, 6 (4): 424-429.
Singh, H. 2006. Mycoremediation : Fungal Bioremediation. John Wiley & Sons, Inc, Hoboken, New Jersey.
SNI-06-6989.11-2004.  2004.  Air  dan  air limbah  –  Bagian  11:  Cara  uji derajat  keasaman  (pH)  dengan menggunakan alat  pH meter.
Badan Standarisasi Nasional. SNI-06-6989.23-2005.  2005.  Air  dan  air limbah  –  Bagian  23:  Cara  uji  suhu dengan termometer. Badan Standarisasi Nasional. Wulandari,  F.  2013.  Dekolorisasi  limbah batik
menggunakan limbah medium tanam Pleurotus ostreatus pada waktu inkubasi yang berbeda. Skripsi (tidak dipublikasikan). Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto.