## Ekstraksi dan Penetapan Nilai SPF Ekstrak Etanol Beras Hitam (Oryza sativa L indica) Secara In Vitro dengan Metode Spektrofotometri
Extraction dan SPF Value Determination of Black Rice Extract by in Vitro Assay Using Spectrofotometric Method
Sri Rejeki 1 , Firda Sukmajati 2 , Surati Ningsih 3
Politeknik Kesehatan Bhakti Mulia rejekisri1005@yahoo.co.id , firda.skmjt@gmail.com , suratiningsihbm@gmail.com
Abstract : Black  rice  (Oryza  sativa  L.  indica)  contains  flavonoid  compounds  which  have  antioxidant activity  that  can  be  used  as  sunscreen.  Antioxidants  can  overcome  the  effects  of  major  damage  to human  skin  caused  by  free  radicals  which  are  a  major  factor  in  the  aging  process  and  skin  tissue damage.This study purpose to extraction and determine the SPF value produced by black rice extract. This research was done by extracting black rice with a remaceration method using 96% ethanol,  and the SPF value of the extract was tested using UV-VIS spectrophotometry.The results of  organoleptic extrac was viscous extract form,  purplish black color, the disthinctive smell of rice flour and bitter taste. The results of value determination of black rice extract  at a concentration of 500 ppm, 600 ppm, 700 ppm, 800 ppm and 900 ppm were 8.02 ± 0.015 respectively; 10.22 ± 0.024; 13.43 ± 0.01; 17.57 ± 0.01; 20.50  ±  0.015.  Based  on  the  Food  and  Drug  Administration  (FDA)  the  SPF  value  is  included  in  the moderate  protection  category  because  it  has  an  SPF  value  between  12-30.  Black  rice  extract  has potential as a sunblock . Keyword : black rice, ethanol extract of black rice, Sunblock, SPF
Abstrak . Beras hitam ( Oryza sativa L. indica ) mengandung senyawa flavonoid yang memiliki aktivitas sebagai  antioksidan yang dapat digunakan sebagai tabir surya. Antioksidan dapat mengatasi efek-efek kerusakan utama pada kulit manusia yag diakibatkan oleh radikal bebas yang merupakan faktor utama pada proses penuaan dan kerusakann jaringan kulit. Penelitian ini bertujuan untuk mengekatraksi dan mengetahui  nilai SPF yang  dihasilkan  ekstrak  etanol  beras  hitam.  Ekstraksi  beras  hitam  dilakukan dengan remaserasi menggunakan pelarut etanol 96%, ekstrak dievaluasi secara organoleptis, dihitung rendemen  dan  diuji  nilai SPF menggunakan  Spektrofotometri  UV-VIS.  Hasil  evaluasi  ekstrak  beras hitam  bentuk  ekstrak  kental,  warna  hitam  keunguan,  bau  khas  tepung  beras  dan  rasa  pahit  dengan rendemen 0,84%b/b.. Hasil pengujian nilai SPF ekstrak beras hitam pada konsentrasi 500  ppm, 600 ppm, 700 ppm, 800 ppm dan 900 ppm masing-masing sebesar 8,02 ± 0,02; 10,22 ± 0,02; 13,43 ± 0,01; 17,57 ± 0,01; 20,50 ± 0,02.Ekstrak beras hitam berpotensi sebagai tabir surya.
Kata kunci : Beras hitam, Ekstrak etanol beras hitam,Tabir surya, SPF.

## I. PENDAHULUAN
Beras ( Oryza sativa L. indica) merupakan  sumber  makanan  pokok  di indonesia,  selain  mengandung  karbohidrat, beras  juga  mempunyai  manfaat    yang  baik untuk  kulit  wajah.  Beras  dapat  membantu melembabkan kulit
dengan cara
meningkatkan  produksi  kolagen  sehingga meningkatkan  elastisitas  kulit  yang  membuat kulit  terlihat  lebih  cerah  dan  tampak  lebih muda. Oleh karena itu beras memiliki banyak manfaat untuk  kecantikan. Beras di Indonesia beragam  mulai  dari  beras  putih,  beras  hitam dan  beras  hitam.  Beras  hitam  ( blackrice ) merupakan sumber
makanan yang
mempunyai  kandungan  antioksidan  tinggi dibandingkan  dengan  jenis  beras  lainnnya (Kristamtini 2009).
Masyarakat  Indonesia  terutama  di pedesaan  secara  tradisional  menggunakan endapan  dari  cucian  beras  sebagai  masker, sehingga  beras  dapat  berpotensi  sebagai bahan  alam  yang  dapat  digunakan  sebagai perawatan pada kulit.
Peningkatan
pemahaman tentang back to nature menyebabkan peningkatan pula akan permintaan  bahan  alami  yang  mengandung antioksidan tinggi. Salah satu alternatif bahan alam  lokal  di  Indonesia  yang  berpotensi mengandung antioksidan adalah beras. Beras sebagai  substrat  memiliki  beberapa  macam dan  warna  yang  berbeda,  secara  genetik antara  lain  beras  hitam  yang  berwarna  ungu agak  gelap  karena  memiliki  kandungan aleuron  dan  amilosa  sekitar  20%.  Sumber
warna  ungu  dari  beras  hitam  yang  sangat langka disebabkan oleh aleuron dan endospermia memproduksi
antosianin dengan  intensitas  tinggi  sehingga  berwarna ungu  pekat  mendekati  hitam  (Abdullah  B,
2017 didalam Fanani et al , 2019). Beras hitam ( Oryza sativa L Indica) merupakan beras lokal yang  mengandung  pigmen  paling  baik dibandingkan beras lainnya, beras ini memiliki khasiat  yang  lebih  banyak  dibandingkan beras lainnya. Beras hitam mulai dikonsumsi oleh  sebagian  kecil  masyarakat  sebagai bahan pangan
untuk meningkatkan kesehatan.Meskipun Indonesia adalah
negara  agraris  yang  sebagian  besar  adalah penghasil  beras,  namun  beras  hitam  belum dikembangkan secara optimal sebagai antioksidan  (Kristamtini et  al ,  2012).Beras hitam merupakan beras lokal yang mengandung pigmen paling baik dibandingkan beras lainnya, beras ini memiliki khasiat  yang  lebih  banyak  dibandingkan beras lainnya. Beras hitam memiliki kandungan antioksidan tinggi termasuk kandungan  antosianin  yang  tinggi  3,26 mg/100 g (Sutharut & Suadrat, 2012 didalam Alviyani, 2012).
Hasil  analisis  fitokimia  oleh  Hartati  & Fadjar  (2016),  evaluasi  fitokimia  aktivitas antioksidan  dan  imunodilator  beras  hitam mengandung  senyawa  flavonoid,  sebesar 37,75 ± 0,23 mg. Senyawa fenolik khususnya golongan flavonoid mempunyai potensi sebagai  tabir  surya  karena  adanya  gugus kromofor  yang  mampu  menyerap  sinar  UV sehingga  mengurangi  intensitasnya  pada kulit.
Penelitian  lain  Fanani  et  al  (2019) menunjukkan  bahwa  ekstrak  beras  hitam memiliki  potensi  untuk  dijadikan  tabir  surya. Ekstrak beras hitam diperoleh hasil  nilai Sun Protecting Factor (SPF) pada konsentrasi 100 ppm,  200  ppm,  300  ppm,  400  ppm  dan  500 ppm  didapat  hasil  berturut-turut  2,31;  4,13; 5,49;  7,58  dan  10,3  sehingga  proteksi maksimal diperoleh pada konsentrasi 500ppm. Sinar  matahari  sangat  dibutuhkan  oleh semua  makhluk  hidup  untuk  kelangsungan hidupnya.  Di  satu  pihak,  sinar  matahari diperlukan  oleh  manusia  sebagai  sumber energi  dan  penyehat  kulit  dan  tulang, misalnya  dalam  pembentukan  vitamin  D  dan pro-vitamin  D yang mencegah  penyakit polio atau  riketsia.  Namun,  sinar  matahari  yang ampai  di  permukaan  bumi  mempunyai dampak  negatif  terhadap  kulit  yaitu  sinar Ultraviolet A ( UV A) dan Ultraviolet B (UV B) (Shovyana  et  al,2013).  Pada  penyinaran matahari  yang  terjadi  secara  berlebihan,
jaringan  epidermis  kulit  tidak  cukup  mampu melawan  efek  negatif  tersebut,  sehingga dapat  menyebabkan  eritema  dan  sunburn (kulit  terbakar)  dan  dapat  menimbulkan perubahan  degenerasi  pada  kulit  (penuaan dini) dan kanker kulit (Wihelmina,2011).
Sinar  UV  beberapa  tahun  ini  sering dihubungkan  dengan  penyakit  dan  kelainan pada  pertumbuhan.  Ketika  kulit  terpapar radiasi ultraviolet dalam waktu yang lama, hal tersebut  dapat  meningkatkan  radikal  bebas. (Walters  HA,  Roberts  MS,  2008 didalam Fanani et  al ,  2019).  Paparan  radikal  bebas semakin  banyak  terdapat  pada  lingkungan, seperti  paparan  dari  bahan  pencemar  udara (timbal,  asap  knalpot  yang  mengandung timah  hitam,  asap  rokok,  radiasi  sinar matahari dan sinar X. Selain faktor lingkungan,  tanpa  disadari  radikal  bebas terbentuk  secara  terus  menerus  didalam tubuh manusia baik melalui proses metabolisme  sel  niormal,  peradangan  dan kekurangan  gizi.  Tingginya  radikal  bebas dalam  tubuh  ditunjukkan  dengan  rendahnya aktivitas  enzim  antioksidan  dan  tingginya kadar  malondialdehid  (MDA)  dalam  plasma (Winarsi, 2011).
Antioksidan dapat membantu peremajaan sel-sel tubuh sehingga sel tubuh dapat  bergenerasi.  Tumor  dan  kanker  kulit merupakan  penyakit  kulit  yang  diakibatkan oleh paparan radikal bebas yang berasal dari sinar  matahari  maupun  polutan  udara, faktor lain  yaitu  paparan  zat  karsinogenik,  faktor generik  dan  jenis  kulit.  Antioksidan  dapat melindungi kulit dari efek negatif radikal yang dapat  mengakibatkan  penyakit  kulit  dapat dilindungi dengan tabir surya karena mengandung  senyawa  yang  melindungi  kulit dari  sengatan  sinar  matahari  atau  sinar  UV dengan cara menghamburkan cahaya secara efektif  dengan  mengabsorbsinya,  sehingga diketahui  adanya  keterkaitan  antara  aktivitas antioksidan dan tabir surya sebagai pelindung kulit dan jaringan (Adzkiya, 2011).
Kemampuan  suatu  zat  untuk  menahan sinar  ultraviolet  dari  tabir  surya  dinilai  dalam faktor proteksi sinar (Sun Protecting Factor/SPF) yaitu perbandingan antara dosis minimal  yang  diperlukan  untuk  menimbulkan eritema pada kulit yang diolesi oleh tabir surya dengan  yang  tidak.  Nilai  SPF  ini  berkisar antara  0  sampai  100,  dan  kemampuan  tabir surya yang dianggap baik berada diatas 15.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  apakah  ekstrak  etanol  beras hitam  (Oryza  sativa  L  Indica)  memiliki  nilai SPF  dan  mengetahui  besarnya  nilai  SPF ekastrak  etanol  beras  hitam  ( Oryza  sativa L. Indica).

## II. METODE PENELITIAN
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  beras  hitam  (Sukoharjo),  etanol 96% (Teknik), etanol 96% (Pro analisis). Alat yang  digunakan  adalah      spektrofotometer UV-Vis  (Hitachi  U-2900,  japan),  timbangan analitik  (sonic),    waterbath  (lokal)  alat-alat gelas (pyrex) 1.  Pembuatan Ekstrak Beras  hitam  yang  disortasi,  dicuci, diangin-anginkan,  dihaluskan  dengan blender  dan  diayak.  Serbuk  beras  hitam diekstraksi  dengan  metode  maserasi menggunakan penyari etanol 96%. Serbuk beras hitam sebanyak 300 gram, masukkan  dalam  bekergelas  di  tambah etanol 96% sebanyak 750ml.
Perendaman  dilakukan    selama  2  hari sambil  diaduk  berulang-ulang,  disaerkai dengan  kain  flanel  hingga  didadapatkan filtrat.  Ampas  dimaserasi  lagi  dengan etanol  96%  sebanyak  750  ml  dan dibiarkan selama 2 hari, diserkai dengan kain  flanel.  Filtrat  yang  dihasilkan dijadikan satu, diuapkan di atas waterbath sampai  diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak yang dihasilkan dievaluasi secara organoleptis  dan  dihitung  rendemen dengan  rumus  :  (berat  ekstrak  dibagi berat simpilisia) dikalikan 100%
2.  Pembuatan larutan uji Ekstrak beras hitam 50 mg dilarutkan  dalam  etanol  96%  hingga volume 50 ml. Larutan tersebut diencerkan  menjadi  500  ppm,  600  ppm, 700  ppm,  800  ppm  dan  900  ppm  dalam etanol 96%.
3.  Penetapan nilai SPF
Larutan uji diukur absorbansinya (A) tiap  5  nm  pada  rentang  panjang gelombang 290 nm – 320 nm, kemudian dihitung  luas  daerah  dibawah  kurva (AUC).  Perhitungan  luas  area  daerah dibawah kurva (AUC) antara panjang dua gelombang yang berurutan menggunakan rumus : A(p) : Absorbansi pada panjang
gelombang  lebih  tinggi  diantara  dua panjang gelombang
A(p-a)  : Absorbansi pada panjang
gelombang  yang  lebih  rendah  diantara dua panjang   gelombang berurutan λ(p) :  Panjang  gelombangng  lebih tinggi diantara dua panjang gelombang
λ (p-a)  :  Panjang  gelombang  yang  lebih rendah diantara  dua panjang gelombang berurutan
AUC : Jumlah serapan λn dan serapan λn-1 dibagi 2 λn : Panjang gelombang yang menghasilkan serapan 0,05

## III. HASIL PENELITIAN 1.  Hasil Ekstraksi
Hasil  ekstraksi  dari  300g  serbuk  beras hitam  didapatkan  ekstrak  kental  2,53g seperti tercantum pada tabel 1.
a.  Organoleptis
Tabel 1. Hasil uji organoleptis Ekstrak Etanaol Beras Hitam
Organoleptis  Hasil
pengamatan Bentuk Warna Bau Rasa Ekstrak kental Hitam keunguan Khas tepung beras Pahit b.  Hasil Rendemen
Rendemen   = 𝐻𝑎𝑠𝑖𝑙 𝑟𝑒𝑚𝑎𝑠𝑒𝑟𝑎𝑠𝑖 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑆𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑎𝑠𝑖𝑎 x 100%
= 2,53 𝑔𝑟𝑎𝑚 300 𝑔𝑟𝑎𝑚 x 100%
= 0,84 % b/b

## 2.  Hasil Uji nilai SPF
Hasil  uji  nilai SPF    ekstrak  beras  hitam pada konsentrasi 500ppm, 600ppm, 700ppm,  800ppm  dan  900ppm  seperti tercantum pada tabel 2.
Tabel  2. Hasil  uji  nilai SPF ekstrak  beras hitam
Konsentrasi AUC Nilai rata- rata SPF ± SD 500 ppm 27,162 8,02 ± 0,02 600 ppm 30,318 10,22 ± 0,02 700 ppm 33, 851 13,43 ± 0,01 800 ppm 37, 342 17,57 ± 0,01 900 ppm 39, 368 20,50 ± 0,02

## IV. PEMBAHASAN
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  maserasi  menggunakan pelarut etanol 96%, dimana teknik penyariannya adalah remaserasi yaitu jumlah pelarut yang digunakan dibagi dua, digunakan
Log SPF = ΣAUC λn-λ1
{AUC} 𝜆𝑝 𝜆𝑝−𝐴 = A(p−a)+ A(p) 2 {λ(p) – λ(p-a)}
untuk  menyari  serbuk  beras  hitam  sebanyak 2x. Hal ini dilakukan karena penyarian dengan teknik  tersebut  dihasilkan  ektrak  yang  lebih banyak daripada bila seluruh pelarut digunakan untuk 1x penyarian.
Uji  nilai SPF ekstrak  beras  hitam dilakukan
dengan
menggunakan
Spektrofotometer  UV-Vis.  Spektrofotometer
UV-Vis dapat melakukan penentuan terhadap sampel  yang  berupa  larutan,  gas  atau  uap. Untuk  sampel  yang  berupa  larutan  perlu diperhatikan perlarut yang dipakai antara lain pelarut yang tidak mengandung sistem ikatan rangkap terkonjugasi pada struktur molekulnya dan tidak berwarna. Tidak terjadi interaksi  dengan  molekul  senyawa  yang dianalisis.  Kemurniannya  harus  tinggi  atau derajat untuk analisis (Dutra & Olivera, 2004).
Penentuan  potensi  tabir  surya  ekstrak beras hitam dilakukan secara in vitro dengan metode spektrofotometerUV-Vis pada rentang  panjang  gelombang  sinar  ultraviolet yaitu  pada  Panjang  gelombang  290-320nm. Dari  pengujian  tersebut  diperoleh  hasil dimana  nilai  rata-rata  SPF  konsentrasi  500 ppm,  600  ppm,  700  ppm,  800  ppm  dan  900 ppm berturut-turut sebesar 8,02 ± 0,02; 10,22 ±  0,02;  13,43  ±  0,01;  17,57  ±  0,01;  20,50  ± 0,015.
Berdasarkan  kategori  tabir  surya  dari Food  and  Drug  Administration  (FDA,  2003) dimana    tabir  surya  dengan  SPF  2-12 memberikan pelindungan minimal, tabir surya dengan SPF12-30  memberikan perlindungan sedang dan tabir surya dengan  SPF 30 atau lebih  memberikan  perlindungan  tinggi,  maka hasil  uji  nilai  SPF  ekstrak  beras  hitam  yang pada  konsentrasi  500ppm  dan  600ppm termasuk  dalam  ketegori  minimal  karena memiliki nilai SPF 8,02±0,02 dan 10,22±0,02. Nilai  SPF  ekstrak  beras  hitam  pada konsentrasi  700  ppm,  800ppm  dan  900ppm termasuk  kategori  dalam  kategori  sedang karena  memiliki  nilai SPF masing-masing 13,43±0,01  ;  17,57±  0,01  dan  20,50±  0,02. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bahawa ekstrak beras hitam memiliki potensi sebagai  sumber SPF alami  yang  dapat dikembangkan menjadi sediaan kosmetik siap pakai.

## V. SIMPULAN
1.  Ekstrak  beras  hitam  ( Oryza  sativa L . indica ) mempunyai nilai SPF. 2.  Nilai SPF ekstrak beras hitam konsentrasi pada  500  ppm,  600  ppm,  700  ppm,  800 ppm  dan 900 ppm  berturut-turut  sebesar 8,02  ±0,02;  10,22±  0,02  ;  13,43±  0,01; 17,57± 0,01 dan 20,50 ±0,02.

## DAFTAR PUSTAKA.
Adzkiya, MAZ. 2011. Kajian Potensi Antioksidan Beras Hitam dan Pemanfaatan  pada  Minuman  Beras Kencur .IPB.
Alviyani,  EB.  2012.  Uji  Antioksidan  Ekstrak Etanol  Beras  Hitam  Menggunakan Metode DPPH. Skripsi . Bandung: ProgramStudiFarmasiFakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan AlamUNISBA.
Dutra, EA. Olivera, DA. 2004. Determination of  Sun  Protecting  Factor  (SPF)  of Sunscreen by Ultraviolet
Spectrophotometry .  Brazilian  Journal Of Pharmaceutical Sciences. M.I.
Fanani, Z. Masithoh, AR. Wariana, KM. 2019. Analisis Potensi Tabir Surya dari  Beras Hitam. The  10 th University  Research Colloqium . Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Muhammadiyah Gombong.
Food  and  Drug  Administration  (FDA).  2003. Guidance  for  Industry  Photosafety Testing, Pharmacology Toxycology Coordinating  Committee  in  the  Centre for  Drug  Evaluation  and  Research (CDER) at the FDA.
Hartati,  MP.  Fadjar  K.  2016. Evaluasi Fitokimia  Aktivitas  Antioksidan  dan Imunodilator Beras Hitam (Oryza Sativa L.Indica). Surabaya. Lembaga penelitian Dr. Soetomo. Kristamtini.  2009. Potensi  Pengembangan Beras Sebagai Plsma Nutfah .
Yogyakarta .
BalaiPengkajianTeknologiPertanianYog yakarta.
Kristamtini,  Widyayanti  S.  Sudarmadji,  S. Wiranti, E. 2012. Pelestarian Parsitipasif Padi  Beras  Hitam  Lokal  di  Yogyakarta. In: Prosiding  Seminar  Nasional  Sumber Daya Genetik Pertanian . Bogor. P. 101- 109.
Muktisari,  RD.  Fadjar,  KH.  2018.  Analisis Aktivitas Antioksidan Pada Beras Hitam dan Tepung  Beras Hitam ( Oryza sativa L. indica ). Food Science and Technology Journal. 1 : 20-27
Wihelmina.Cynthya E. 2011. Pembuatan dan Penentuan Nilai  SPFNanoemulsi Tabir Surya Menggunakan Minyak Kencur(Kaemferia galanga L.) Sebagai Fase Minyak . Depok: FMIPA ProgramStudi  Farmasi.
Winarsi,  H.  2011. Antioksidan  Alami  dan Radikal Bebas.Yogyakarta : EGC.