Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi

## FUNGSI REPRODUKSI DAN GAMBARAN HISTOLOGI ORGAN REPRODUKSI MENCIT (Mus musculus) BETINA PASCA PEMBERIAN KOPI
Ananda 1) , Herbert Sipahutar 2) , dan Meida Nugrahalia 2)
1 Fakultas Peternakan, Universitas Andalas
2 Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Medan email: ananda@ansci.unand.ac.id

## Abstrak
Tujuan penelitian ini untuk mengetahui efek pemberian kopi terhadap fungsi reproduksi dan  gambaran  histologi  organ  reproduksi  mencit  (Mus  musculus)  betina.  Penelitian  ini menggunakan metode eksperimental dengan dua kelompok perlakuan: kelompok kontrol dan kelompok pemberian kopi dengan dosis yang telah dikonversi setara dengan tiga cangkir kopi pada manusia. Pemberian kopi dilakukan selama 21 hari untuk mengukur berat badan, berat uterus,  panjang  siklus  estrus,  jumlah  folikel  primer,  jumlah  folikel  sekunder,  diameter pembuluh ovarium, tinggi epitel endometrium, dan ketebalan endometrium. Pemberian kopi dilanjutkan  hingga  kebuntingan  pada  hari  ke-19  untuk  mengukur  daya  fertilisasi.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  kopi  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  folikel sekunder pada ovarium mencit dan tinggi epitel endometrium mencit, dan tidak berpengaruh terhadap  berat  badan,  berat  uterus,  panjang  siklus  estrus,  daya  fertilitas,  folikel  primer, diameter pembuluh darah ovarium, dan ketebalan endometrium.
Keywords: kopi, fungsi reproduksi, dan gambaran histologi

## 1. PENDAHULUAN
Kopi  sudah  menjadi  minuman  utama  saat  bersantai  atau  menghadapi  pekerjaan sehari-hari,  dan  juga  menjadi  menu  utama  rapat  atau  pertemuan  bisnis.  Menurut European Coffee Federation (2019) dunia mengonsumsi sekitar 2 miliar cangkir kopi setiap hari. Minuman ini sudah menjadi tradisi dan kebiasaan di hampir semua negara di dunia, terutama di Eropa dan Amerika Serikat, dan sudah menjadi gaya hidup yang sangat populer, sehingga tidak lagi hanya untuk menambah semangat atau mengatasi kantuk semata.
Kopi sering dipandang sebagai minuman maskulin karena sering dikonsumsi oleh pria. Namun, bagi wanita yang bekerja lebih dari delapan jam, telah menjadikan kopi sebagai minuman yang dibutuhkan. Sebagian wanita, baik yang berkarir dengan tingkat
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
sosialitas  yang  tinggi  seperti  pengusaha, artis, public  figure ,  dll,  mulai  menganggap kopi sebagai kebutuhan dalam aktivitas sehari-hari. Garriguet (2009) mengatakan tren konsumsi kopi mencapai puncaknya pada usia 31-50 tahun dimana usia tersebut adalah usia produktif bagi seorang wanita baik dalam bekerja maupun dalam perkembangan fisiologi  reproduksinya.  Garriguet  (2009)  juga  menambahkan  bahwa  tren mengonsumsi kopi mulai menurun pada usia 71 tahun dimana kebanyakan wanita tidak produktif pada usia ini.
Ada beberapa efek yang muncul ketika seseorang minum kopi. Efek negatif kopi dapat  bermanifestasi  sebagai  gangguan  tidur,  penurunan  kesuburan,  menyebabkan cacat  lahir,  keguguran,  dan  migrain.  Efek  yang  menguntungkan  adalah  mencegah peningkatan  kadar  asam  urat  darah  dan  kadar  glukosa  serta  mengurangi  resiko terjadinya sirosis (Ehichioya et al., 2016). Minum kopi juga ditengarai memiliki efek terhadap  masalah  kesehatan  wanita,  termasuk  kesehatan  reproduksi.  Kafein  yang terkandung pada kopi dapat memengaruhi fungsi ovarium untuk mengatur pelepasan estrogen dan progesteron, menghambat terjadinya fertilisasi, komplikasi endometrium, dan meningkatkan kerentanan sel telur (Qian et al., 2020).
Penulusaran  yang  dilakukan  oleh  Cappelletti  et  al.  (2015)  menyatakan  bahwa asupan  kafein  meningkatkan  sirkulasi  adenosin  monofosfat  (cAMP),  yang mengganggu perkembangan sel. Selain itu, Cnattingius et al. (2000) sebelumnya juga melaporkan  efek  kafein  pada  aborsi  spontan  dan  kerentanan  rahim.  Studi  lain  pada hewan  laboratorium  menunjukkan  bahwa  kafein  merangsang  produksi  dan peningkatan  prostaglandin  uterus  pada  marmot.  Kondisi  ini  memungkinkan  bahwa kafein  mengambil  peran  penting  terhadap  gangguan  menstruasi  yang  dialami  oleh beberapa wanita yang rutin mengonsumsi kopi (Naderali & Poyser, 1994). Dorostghoal et  al.  (2011)  menunjukkan  bahwa  asupan  kafein  selama  kehamilan  dan  menyusui memengaruhi  tahap  awal  perkembangan  folikel  ovarium  dan  mengurangi  efisiensi reproduksi  pada  keturunan  tikus  Wistar.  Sehinga  penting  dilakukannya  suatu  studi mengenai efek pemberian kopi secara tunggal untuk medapatkan gambaran yang lebih
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
mendalam  terhadap  fungsi  reproduksi  dan  struktir  histologi  dengan  menggunakan hewan percobaan mencit ( Mus musculus ) betina.

## 2. METODE PENELITIAN
2.1. Alat dan Bahan

## 2.1.1. Alat
Alat yang digunakan adalah gavage /sonde lambung, spuit 1 ml, cotton bud , object glass , cover glass , pipet tetes, mikroskop, dissecting set , bak parafin, botol film, cawan petri, baker glass , pinset, jar , oven, dan mikrotom.

## 2.1.2. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah bubuk kopi robusta, air hangat, larutan Giemsa, formalin-PBS 10% sebagai larutan fiksatif, praplast (titik leleh 56 o C) sebagai  campuran  parafin,  alkohol  (ethanol)  absolut  sebagai  larutan  fiksatif,  xylen (xylol)  sebagai  larutan  fiksatif,  hematoksilin  dan  eosin  sebagai  pewarna  jaringan, parafin sebagai media jaringan yang di sayat, albumen mayer sebagai perekat, gliserol sebagai larutan fiksatif organ, canada balsem untuk melekatkan cover glass dan object glass , dan aquadest sebagai larutan kontrol.

## 2.1.3. Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  mencit  ( Mus  musculus ) betina  berumur  empat  bulan  dengan  berat  badan  20-28  gram.  Hewan  uji  dipelihara secara  berkelompok  (2  ekor  per  kandang)  dalam  kandang  terbuat  dari  bahan  Non Plastik ukuran 25 x 20 x 9 cm dan botol untuk minum mencit dengan ukuran 500 ml air. Dasar kandang dialasi dengan sekam dengan ketebalan lebih kurang 1 cm. Kondisi penerangan di dalam kandang adalah 12 jam terang (pukul 06.00 sampai dengan pukul 18.00)  dan  12  jam  gelap  (pukul  18.00  sampai  dengan  pukul  06.00).  Selama pemeliharaan, hewan uji diberi pakan berupa pellet (202C) dan air minum secara ad libitum .  Kandang  dibersihkan  sekali  dalam  dua  hari.  Temperatur  dan  kelembapan rumah hewan dibiarkan pada kondisi alamiah.
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi

## 2.2. Metode Penelitian

## 2.2.1. Penentuan Dosis
Kopi yang digunakan dalam penelitian ini adalah bubuk kopi robusta varietas biji kopi Sidikalang Sumatera Utara. Penentuan dosis berdasarkan konversi kopi manusia. Menurut National Coffee Association (2022), masyarakat Amerika Serikat (US) rata- rata mengonsumsi kopi sebanyak 3 cangkir per hari dengan konsentrasi 7 gram bubuk kopi per cangkir. Berdasarkan tabel perbandingan luas permukaan tubuh hewan coba (Laurance & Bacharach, 1964), konversi larutan untuk mencit adalah 0,0026 kali dosis manusia. Sehingga jika dalam 3 cangkir kopi terdapat 21 gram kopi maka bubuk kopi yang  dibutuhkan  sebanyak  0,0546  gram  yang  selanjtuyanya  dilarutkan  dalam  air mendidih sebanyak 0,5 ml.

## 2.2.2. Pemberian Kopi
Larutan  kopi  diberikan  secara  oral  setiap  hari  0.5ml/ekor  dengan  menggunakan sonde/gavage (ketelitian  1  ml)  dan  diberikan  selama  21  hari,  pada  pagi  hari  (pukul 08.00  –  10.00  WIB).  Pemberian  larutan  kopi  dilakukan  setelah  mencit  ditimbang. Untuk  pengamatan  daya  fertilisasi,  pemberian  kopi  dilanjutkan  hingga  hari  ke-19 kebuntingan.

## 2.2.3. Rancangan Penelitian
Mencit ( Mus musculus ) betina yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 32 ekor dengan pendistribusian sebanyak 16 ekor kelompok kontrol dan 16 ekor kelompok perlakuan. Kelompok kontrol tidak diberikan kopi dan kelompok perlakuan diberikan kopi  yang  sudah  dikonversikan  sebanyak  0,5ml.  Pada  kelompok  perlakuan  16  ekor mencit diberi kopi secara oral selama 21 hari dan dilakukan terminasi pada hari ke-22. Sementara itu sisanya (8 ekor) dikawinkan hingga kebuntingan mencapai hari ke-19. Pembedahan  dilakukan  untuk  mengamati  daya  fertilisasi  dan  mengambil  sampel histologis.
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi

## Gambar 2.1. Desain Penelitian

## 2.2.4. Pengumpulan Data
a. Berat Badan
Berat  badan  diperoleh  dengan  menggunakan  timbangan  analitik  (Ohause, ketelitian  0,1  g)  yang  ditimbang  setiap  hari  selama  21  hari.  Penimbangan  dilakukan sebelum pemberian perlakuan.
b. Pengamatan Siklus Estrus
Pengamatan siklus estrus didapat dari preparat ulas vagina yang dibuat setiap tiga jam per hari selama satu minggu. Panjang siklus estrus dihitung mulai dari penampakan sel  epitel  vagina  tahap  estrus  akhir  hingga  estrus  awal  (Ajayi  &  Akhigbe,  2020; Goldman et al., 2007). Satuan yang digunakan adalah satuan jam.
c. Daya Fertilisasi
Mencit  diterminasi  pada  kebuntingan  hari  ke-19  dengan  cara  dislokasi  leher. Ovarium dikoleksi dan dihitung jumlah korpus luteum di bawah lensa mikroskop stereo perbesaran  100x.  Uterus  dikoleksi,  dibuka  dan  difiksasi  dengan  jarum  pentul, kemudian  uterus  ditetesi  dengan  larutan Bouin ,  kemudian  implantasi  dihitung.
Ovarium yang didapat kemudian dicuci dengan larutan NaCl 0,9% dan direndam dalam larutan Bouin selama 24 jam. Data jumlah corpus luteum dibandingkan dengan jumlah implantasi dan disajikan dalam satuan persen (%).
d. Preparasi Histologi
Ovarium dan uterus dikoleksi dan difiksasi dengan menggunakan larutan formalin- PBS  10%,  selanjutnya  dilakukan  pembuatan  preparat  jaringan  dengan  metode
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
histoteknik  menggunakan  pewarnaan  rutin  Hematoksilin-Eosin  (HE).  Pengukuran dilakukan dengan menghitung jumlah folikel primer, folikel sekunder, dan mengukur diameter  pembuluh  darah  ovarium,  ketebalan  endometrium  dan  tinggi  sel  epitel endometrium.

## 2.2.5. Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisis dengan menggunakan uji statistik t dan ditampilkan secara grafis.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa perbedaan rerata bobot badan mencit betina selama 21 hari lebih tinggi pada kelompok kontrol (25,74 ± 2,21) dibandingkan dengan kelompok  perlakuan  (25,27  ±  0,62).  Perbedaan  nilai  rata-rata  diduga  dikarenakan sonde yang digunakan untuk mendistribusikan kopi ke dalam saluran pencernaan dapat menyebabkan stres, meskipun tingkat stres tidak diketahui. Mediasi oleh radikal bebas yang  dapat  memicu  stres  akan  turut  mempengaruhi  keadaan  patofisiologi,  seperti cedera dan kelainan biokimia, yang menyebabkan gangguan metabolisme. Gangguan metabolisme ini menyebabkan terjadinya hambatan sintesis zat yang diperlukan untuk regenerasi  (pebelahan  sel)  dan  pematangan  sel  somatik  serta  akumulasi  simpanan energi  tubuh  dalam  bentuk  lemak  dan  karbohidrat  (Gunawan  et  al.,  2007).  Namun, penurunan  berat  badan  yang  terjadi  tidak  signifikan.  Kafein  dalam  kopi  disinyalir mampu  mengaktifkan  sistem  saraf  simpatik  dan  kelenjar  adrenal,  menyebabkan hipoglikemia  dan  meningkatkan  nafsu  makan.  Meskipun  kebanyakan  orang menganggap  kafein  dalam  kopi  sebagai  bahan  yang  dapat  menurunkan  berat  badan, tapi terdapat efek lain dimana terjadi peningkatan kadar kortisol yang keberlanjutannya dapat merangsang nafsu makan (Tabrizi et al., 2019).
Pengamatan panjang siklus estrus kelompok perlakuan menunjukkan hasil lebih tinggi (96±10,67) dibandingkan dengan kelompok kontrol (91,5±3,87). Hal ini diduga terdapat  keterkaitan  antara  kafein  dengan  hormon  estrogen  dan  progesteron  pada
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
ovarium. Perkembangan dan kemampuan ovarium untuk menghasikan estrogen dapat dilihat  secara  tidak  langsung  melalui  perubahan  sitologi  pada  sel  epitel  vagina. Menurut  Schliep  et  al.  (2012)  kandungan  kafein  pada  kopi  dapat  mempengaruhi regulasi  hormon  FSH  yang  fungsinya  untuk  mengatur  pengeluaran  estrogen  dan progesteron pada ovarium, sehingga dalam hal ini kafein diduga dapat menyebabkan terjadinya pemanjangan waktu siklus estrus pada mencit kelompok perlakuan. Namun, berdasarkan hasil uji-t, kopi terbukti tidak berpengaruh nyata terhadap lamanya siklus estrus pada mencit. Terdapat beberapa faktor yang mungkin dapat mempengaruhi hal ini, antara lain jumlah/dosis kopi yang dikonsumsi dan bagaimana proses metabolisme yang  dapat  ditoleransi  oleh  hati  sebagai  salah  satu  organ  yang  terlibat  dalam homeostasis dalam tubuh.
Pemberian  kopi  pada  penelitian  ini  tidak  menunjukkan  efek  yang  signifikan terhadap daya fertilisasi. Mencit kelompok kontrol memiliki rata-rata daya fertilisasi lebih tinggi (74,48 ± 0,042) dibandingkan dengan mencit kelompok perlakuan (67,72 ±  0,066).  Kafein  dalam  kopi  bersifat  xenobiotik  dan  menyebabkan  kerusakan  sel dengan  cara  memprovokasi  permeabilitas  membran  sel,  homeostasis  osmotik, integritas  enzim,  dan  kofaktor  lainnya  yang  dapat  menekan  pertumbuhan  dan perkembangan sel, sehingga diduga dapat menyebabkan kerusakan dan menyebabkan perubahan morfologi sel (Bode & Dong, 2007). Kuper et al. (2000) menjelaskan bahwa kafein  juga  dapat  menghambat  reaksi poly  (ADP-ribosil)asi siklus  sel  sehingga keberlanjutannya  akan  mempengaruhi  struktur  dan  fungsi  DNA.  Kafein  dalam  kopi juga  dapat  mengganggu  mitosis  sel  telur  pasca  fertilisasi  sehingga  mengakibatkan kegagalan perkembangan embrio (Supriati et al., 2010).
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
Gambar 1. Grafik efek pemberian kopi terhadap fungsi reproduksi mencit ( Mus musculus ) betina
Sebuah studi  yang dilakukan oleh Dixon et al. (2011) menemukan bahwa terjadi peningkatan kadar cAMP sitosol dikarenakan kafein dalam kopi bekerja dengan cara menghambat  PDEs  ( Phosphodiesterase ).  Saat  hiperpolarisasi,  membran  potensial mengalami  pergeseran  dan  juga  membuka  kanal  Ca 2+ sehingga  terjadi  relaksasi. Hiperpolarisasi  yang  menyebabkan  aktivasi  kanal  KATP  tersebut  menyebabkan penghambatan kontraksi otot tuba fallopi secara spontan yang merupakan mekanisme penting untuk menghantar sel telur sepanjang tuba fallopi, sehingga dengan kata lain
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
implantasi gagal terjadi karena sel telur gagal mencapai uterus.
Analisis gambaran histologi ovarium pada mencit yang diberi kopi selama 21 hari menunjukkan jumlah folikel primer pada masing-masing kelompok tidak berpengaruh signifikan, hal ini diduga disebabkan karena folikel primer sudah terbentuk sejak fetus. Perlakuan kopi diberikan setelah hewan betina memasuki masa pubertas sehingga tidak memengaruhi jumlah folikel primer yang terkandung dalam ovarium. Setelah hewan memasuki  masa  pubertas  hingga  dewasa,  folikel  primer  akan  berkembang  menjadi folikel sekunder yang ditandai dengan pertumbuhan sel-sel yang mengelilinginya. Sel- sel  tersebut  membentuk  lapisan  teka  folikuli  yang  keberlanjutannya  akan  terjadi pemisahan  teka  folikuli  menjadi  teka  eksterna  dan  teka  interna  (Heffner  &  Schust, 2008).
Gambar 2.  Gambaran  histologi  ovarium  mencit  ( Mus  musculus )  betina  pasca  pemberian  kopi:  A. folikel  primer  pada  kelompok  kontrol;  B.  folikel  primer  pada  kelompok  perlakuan;  C. folikel sekunder kelompok kontrol; D. folikel sekunder kelompok perlakuan; E. Diameter pembuluh  darah  ovarium  kelompok  kontrol;  F.  Diameter  pembuluh  darah  ovarium kelompok perlakuan.
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
Perubahan  yang  terjadi  pada  regulasi  hormon  ovarium  yang  dinyatakan  oleh Heffner  &  Schust  (2008)  diduga  juga  memiliki  keterkaitan  dengan  kadar  kolesterol yang  merupakan  prekursor  utama  hormon  steroid.  Hormon  steroid  disintesis  oleh beberapa  organ  seperti  adrenal,  testis,  ovarium,  plasenta,  dan  pada  tingkat  tertentu disintesis dibeberapa jaringan perifer. Kolesterol merupakan prekursor hormon steroid yang  dihasilkan  melalui  sintesis denovo atau  melalui  ambilan  dari Low  Density Lipoprotein (LDL).  Kolesterol  ini  dilepaskan  melalui  stimulasi  esterase  kolesterol ketika  organ  penghasil  kolesterol  dirangsang.  Kolesterol  ini  berikutnya  akan  terlibat dalam pembentukan hormon steroid atau steroidogenesis (Ping et al., 2012). Ovarium merupakan  salah  satu  organ  penghasil  hormon  steroid  dengan  sistem  dua  sel.  Pada ovarium,  lapisan  terluar  pada  folikel  yang  disebut  sel  teka  akan  menginduksi pembentukan  androgen  setelah  mendapatkan  rangsangan  dari  FSH-LH.  LH menyebabkan sel teka akan meningkatkan pembentukan sejumlah reseptor  LDL dan kemudian  membuka  jalan  untuk  mengambil  kolesterol.  Androgen  yang  dihasilkan selanjutnya  akan  berdifusi  ke  lapisan  sel  yang  berada  dibawahnya,  yaitu  lapisan  sel granulosa untuk selanjutnya mengubah androgen menjadi estrogen. FSH akan memicu peningkatan  aktivitas  enzim  aromatase  di  dalam  sel  granulosa.  Androgen  yang berdifusi kedalam sel granulosa akan mengalami metabolisme oleh enzim aromatase menjadi  estrogen.  Konsentrasi  estrogen  dalam  darah  akan  mengendalikan  produksi LDL sehingga profil LDL akan selalu berada di bawah ambang batas (Sumoked et al., 2016). Penelitian yang dilakukan oleh (Lane et al., 1994) menemukan bahwa konsumsi kafein  akan  meningkatkan  konsentrasi  LDL  dalam  darah,  dengan  artian  bahwa konsumsi  kafein  diduga  telah  menurunkan  fungsi  ovarium  dalam  menghasilkan estrogen yang ditandai dengan meningkatnya konsentrasi LDL dalam darah.
Pengamatan  pada  diameter  pembuluh  darah  pada  ovarium  menunjukkan  bahwa pemberian  kopi  tidak  berpengaruh  signifikan  terhadap  diameter  pembuluh  darah ovarium. Meskipun sedikit, namun tetap terjadi peningkatan diameter pembuluh darah pada  ovarium.  Hal  ini  diduga  dikarenakan  metabolisme  kafein  menjadi  theobromin
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
dapat menyebabkan pelebaran pada pembuluh darah (Echeverri et al., 2010). Kafein diketahui dapat menyebabkan meningkatnya efek vasodilatasi arteri (Lelyana, 2008). Echeverri  et  al.  (2010)  juga  mengungkapkan  bahwasanya  kafein  yang  telah dimetabolisme  menjadi  bentuk  xantin  dalam  tubuh  memiliki  banyak  efek  dan mekanisme yang berkaitan dengan jaringan vaskular. Dalam sel endothelium, xantin mampu  meningkatkan  kadar  kalsium  dengan  menstimulasi  produksi  Nitrit  Oksida. Nitrit  Oksida  yang  diproduksi  akan  berdifusi  dalam  jaringan  vaskular  yang mengakibatkan pelebaran pembuluh darah (vasodilatasi). Mekanisme ini selanjutnya akan memblokade reseptor adenosin yang berfungsi untuk melakukan vasokonstriksi, dalam artian konsumsi kafein dalam dosis tertentu berpotensi meningkatkan pelebaran pembuluh darah.
Gambar 3. Gambaran histologi uterus mencit ( Mus musculus ) betina pasca pemberian kopi: A. tinggi sel  epitel  endometrium  pada  kelompok  kontrol;  B.  tinggi  sel  epitel  endometrium  pada kelompok  perlakuan;  C.  ketebalan  endometrium  pada  kelompok  kontrol;  D.  ketebalan endometrium pada kelompok perlakuan.
Hasil analisis gambaran histologi uterus mencit yang telah diberi perlakuan kopi selama 21 hari diketahui bahwa pemberian kopi berpengaruh nyata terhadap tinggi sel epitel  endometrium  dan  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  ketebalan  endometrium. Namun,  rata-rata  ketebalan  endometrium  mencit  pada  kelompok  perlakuan
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
memperlihatkan  penurunan  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol.  Kafein  yang terkandung  pada  kopi  telah  diketahui  dapat  memengaruhi  sekresi  hormon  estradiol yang  diduga  bertanggung  jawab  atas  perubahan  yang  terjadi  pada  struktur  histologi uterus  kelompok  perlakuan.  Perubahan  yang  terjadi  pada  ovarium  juga  turut mempengaruhi  perubahan  yang  terjadi  pada  uterus.  Uterus  berubah  secara  berkala selama siklus ovarium berlangsung secara normal (Sari, 2011). Selama fase praovulasi siklus reproduksi, sel-sel endometrium berproliferasi hebat dibawah pengaruh estrogen (Heffner & Schust, 2008), hal ini diperkuat dari hasil penelitian Ananda et al. (2019) dimana  sel-sel  endometrium  mengalami  perkembangan  ketika  diberikan  asupan estrogen secara in vitro. Gangguan hormonal yang terjadi pada ovarium seperti yang telah diuraikan sebelumnya diduga juga turut memengaruhi tampilan histologi uterus termasuk  ketinggian  sel  epitel  endometrium.  Selain  itu  efek  kafeinisme  berupa kecemasan  juga  cenderung  akan  mengacaukan  kadar  LH,  dan  menyebabkan peningkatan  konsentrasi  prolaktin.  Konsentrasi  prolaktin  yang  tinggi  dapat menghambat sekresi LH yang merupakan hormon gonadotropin. Terjadinya penekanan sekresi  gonadotropin  menyebabkan  penurunan  produksi  FSH  dan  LH  di  pituitari anterior dan menyebabkan rendahnya konsentrasi estrogen dalam darah (Senger, 2005) sehingga menyebabkan terjadinya perubahan pada histologi uterus seperti penurunan tinggi sel epitel endometrium, ketebalan endometrium, dan ketebalan miometrium.

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN

## 4.1 Kesimpulan
Pemberian kopi berpengaruh terhadap terhadap  jumlah folikel  sekunder ovarium dan  tinggi  epitel  endometrium  mencit  ( Mus  musculus ).  Namun,  tidak  berpengaruh terhadap  berat  badan,  panjang  siklus  estrus,  daya  fertilisasi,  jumlah  folikel  primer, diameter pembuluh darah ovarium, dan ketebalan endometrium mencit ( Mus musculus ).

## 4.2 Saran
Penelitian yang lebih spesifik dengan menggunakan kafein tunggal perlu dilakukan untuk  menemukan  pengaruh  yang  nyata  terhadap  kesehatan  reproduksi  dengan mengukur profil-profil hormon reproduksi dalam darah.
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi

## 5. REFERENSI
Ajayi, A.  F., & Akhigbe, R. E. (2020). Staging of the estrous cycle and induction of estrus in experimental  rodents:  an  update. Fertility  Research  and  Practice , 6 (1),  1–15. https://doi.org/10.1186/s40738-020-00074-3
Ananda,  Kaiin,  E.  M.,  Karja,  N.  W.  K.,  &  Setiadi,  M.  A.  (2019).  Perkembangan  Sel
Endometrium Domba setelah Inkubasi dalam Kolagenase dan Dikultur In Vitro dengan Estradiol dan Progesteron. Jurnal Veteriner , 20 (3), 298. https://doi.org/10.19087/jveteriner.2019.20.3.298
Bode, A. M., & Dong, Z. (2007). The enigmatic effects of caffeine in cell cycle and cancer.
Cancer Letters , 247 (1–2), 26–39. https://doi.org/10.1016/j.canlet.2006.03.032
Cappelletti, S., Daria, P., Sani, G., & Aromatario, M. (2015). Caffeine: Cognitive and Physical Performance Enhancer or Psychoactive Drug? Current Neuropharmacology , 13 (1), 71– 88. https://doi.org/10.2174/1570159x13666141210215655
Cnattingius, S., Signorello, L. B., Annerén, G., Clausson, B., Ekbom, A., Ljunger, E., Blot, W. J., McLaughlin, J. K., Petersson, G., Rane, A., & Granath, F. (2000). Caffeine Intake and the  Risk  of  First-Trimester  Spontaneous  Abortion. Obstetric  and  Gynecologic  Survey , 343 (25), 259–260. https://doi.org/10.1097/00006254-200105000-00006
Dixon, R. E., Hwang, S. J., Britton, F. C., Sanders, K. M., & Ward,  S. M. (2011). Inhibitory effect of caffeine on pacemaker activity in the oviduct is mediated by cAMP-regulated conductances. British Journal
of Pharmacology , 163 (4), 745–754. https://doi.org/10.1111/j.1476-5381.2011.01266.x
Dorostghoal,  M.,  Mahabadi,  M.  K.,  &  Adham,  S.  (2011).  Effects  of  maternal  caffeine consumption  on  ovarian  follicle  development  in  Wistar  rats  offspring. Journal  of Reproduction and Infertility , 12 (1), 15–22.
Echeverri, D., Montes, F. R., Cabrera, M., Galán, A., & Prieto, A. (2010). Caffeine’s vascular mechanisms  of  action. International  Journal  of  Vascular  Medicine , 2010 . https://doi.org/10.1155/2010/834060
Ehichioya, D. E., Oyesola, T. O., Ogbonna, R. C., Oyesola, O. A., & Ajiboye, K. I. (2016).
Habitualcaffeine Consumption and Its Influence on Myocardial Fibers, Blood Pressure and Oxidative Status in Pregnant Albino Wistar Rats. International Journal of Advanced Research , 4 (10), 1845–1854. https://doi.org/10.21474/ijar01/1994
European  Coffee  Federation.  (2019). European  Coffee  Report  2018/2019 .  European  Coffee Federation.  https://www.ecf-coffee.org/wp-content/uploads/2020/09/European-Coffee- Report-2018-2019.pdf
Garriguet, D. (2009). Beverage consumption of Canadian adults. Statistics Canada , 19 (4), 1– 53. http://www5.statcan.gc.ca/access_acces/archive.action?loc=/pub/82-003-
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
s/2005000/pdf/9087-eng.pdf&archive=1
Goldman,  J.  M.,  Murr,  A.  S.,  &  Cooper,  R.  L.  (2007).  The  rodent  estrous  cycle: Characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies. Birth Defects Research (Part B) , 80 , 84–97. https://doi.org/10.1002/bdrb.20106
Gunawan,  Setiatin,  E.  T.,  Rosadi,  B.,  Hine,  T.  M.,  &  Parakkasi,  A.  (2007).  Performansi Reproduksi  Tikus  Betina  dengan  Pemberian  Lendir  Lidah  Buaya. Jurnal  Kedokteran Hewan , 1 (1), 1–6. https://doi.org/10.21157/j.ked.hewan.v1i1.3101
Heffner,  L.  J.,  &  Schust,  D.  J.  (2008). The  Reproductive  System  at  a  Glance (Second  Ed.).
Erlangga.
Kuper, H., Titus-Ernstoff, L., Harlow, B. L., & Cramer, D. W. (2000). Population based study of coffee, alcohol and tobacco use and risk of ovarian cancer. International Journal of Cancer , 88 ,  313–318.  https://doi.org/10.1002/1097-0215(20001015)88:2<313::AID- IJC26>3.0.CO;2-5
Lane, J. D., Pieper, C. F., Barefoot, J. C., Williams, R. B., & Siegler, I. C. (1994). Caffeine and Cholesterol :  Interactions  With  Hostility  Despite  more  than  two  decades  of  research  , there is still no conclusive answer to the question of whether coffee drinking increases the risk of coro- nary heart disease ( CHD ). Initial studies from. Psychosomatic Medicine ,
266 , 260–266. https://doi.org/0.1097/00006842-199405000-00013
Laurance, D. R., & Bacharach, A. L. (1964). Evaluation of Drug Activities (D. R. Laurance &
A. L. Bacharach (eds.); 1st ed.). Academic Press.
https://www.elsevier.com/books/evaluation-of-drug-activities/laurence/978-1-4832- 2845-7
Lelyana, R. (2008). Pengaruh Kopi Terhadap Kadar Asam Urat Darah Studi Eksperimen Pada Tikus  Rattus  Norwegicus  Galur  Wistar  [Universitas  Diponegoro].  In Universitas  Di Ponegoro . http://eprints.undip.ac.id/19270/1/Rosa_Lelyana.pdf
Naderali, E. K., & Poyser, N. L. (1994). The effect of caffeine on prostaglandin output from the  guinea‐pig  uterus. British  Journal  of  Pharmacology , 113 (1),  103–110. https://doi.org/10.1111/j.1476-5381.1994.tb16180.x
National Coffee Association. (2022). Coffee consumption hits two-decade high - Spring 2022 National Coffee Data Trends report . National Coffee Association. https://www.ncausa.org/Newsroom/Coffee-consumption-hits-two-decade-high-2022- NCDT
Ping,  J.,  Lei,  Y.  Y.,  Liu,  L.,  Wang,  T.  T.,  Feng,  Y.  H.,  &  Wang,  H.  (2012).  Inheritable stimulatory effects of caffeine on steroidogenic acute regulatory protein expression and cortisol  production  in  human  adrenocortical  cells. Chemico-Biological  Interactions , 195 (1), 68–75. https://doi.org/10.1016/j.cbi.2011.11.001
Fungsi Reproduksi dan Gambaran Histologi Organ Reproduksi Mencit ( Mus musculus ) Betina Pasca Pemberian Kopi
Qian, J., Chen, Q., Ward, S. M., Duan, E., & Zhang, Y. (2020). Impacts of Caffeine during Pregnancy. Trends in Endocrinology and Metabolism , 31 (3), 218–227. https://doi.org/10.1016/j.tem.2019.11.004
Sari,  R.  M.  (2011). Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  dan  Fraksi  daun  Katuk  (Sauropus androgynus (L.) Merr) Terhadap Proses Involusi Uterus Tikus Putih (Rattus norvegicus) . Institut Pertanian Bogor.
Schliep, K. C., Schisterman, E. F., Mumford, S. L., Pollack, A. Z., Zhang, C., Ye, A., Stanford, J. B., Hammoud, A. O., Porucznik, C. A., & Wactawski-Wende, J. (2012). Caffeinated beverage  intake  and  reproductive  hormones  among  premenopausal  women  in  the BioCycle  Study. American  Journal  of  Clinical  Nutrition , 95 ,  488–497. https://doi.org/10.3945/ajcn.111.021287
Senger, P. (2005). Pathways to Pregnancy and Parturition. In Curent Conception, Inc. (Second Rev). Washington State University Research & Technology Park.
Sumoked,  P.  D.  D.,  Tendean,  H.  M.  M.,  &  Suparman,  E.  (2016).  Profil  Lipid  Wanita Menopause  di  Panti  Werdha  Damai  Manado  Universitas  Sam  Ratulangi,  Manado. E- CliniC , 4 (1), 405–411.
Tabrizi, R., Saneei, P., Lankarani, K. B., Akbari, M., Kolahdooz, F., Esmaillzadeh, A., Nadi- Ravandi, S., Mazoochi, M., & Asemi, Z. (2019). The effects of caffeine intake on weight loss: a systematic review and dos-response meta-analysis of randomized controlled trials.
Critical Reviews in Food Science and Nutrition , 59 (16), 2688–2696. https://doi.org/10.1080/10408398.2018.1507996
Utami,  E.  T.,  Fitrianti,  R.,  Mahriani,  &  Fajariyah,  S.  (2009).  Efek  Kondisi  Hiperglikemik terhadap  Struktur  Ovarium  dan  Siklus  Estrus  Mencit  (  Mus  musculus  L). Jurnal  Ilmu Dasar , 10 (2), 219–224.