Efektifitas Nanopartikel Magnetik (MnFe 2 O 4 ) Berlapis HSA Tertarget Reseptor Folat Terhadap Sel Kanker
Fasih Bintang Ilhami
Prodi S2 Teknobiomedik, Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Kampus B Universitas Airlangga,  Jalan Airlangga 4-6, Surabaya e-mail: fasih.ilhami17@yahoo.co.id

## Abstrak
Kanker merupakan suatu penyakit ditandai dengan adanya pertumbuhan tidak normal sel jaringan  tubuh  dimana  dalam  perkembanganya,  kanker  dapat  menyebar  hingga  menyebabkan kematian.  Secara  biomedis, Nanopartikel  Magnetik  (MNPs)  merupakan  thyranostic  yang  dapat dijadikan  sebagai  media  penghantar  obat dengan  memanfaatkan  perbedaan  karakteristik  sel kanker dan sel sehat dengan tujuan untuk melihat konsentrasi MnFe 2 O 4 terhadap sel kanker pada hewan coba secara in vivo.
Untuk mengetahui ukuran partikel, dilakukan analisis Dynamic Light Scattering (DLS) dan diperoleh  ukuran  partikel  sebesar  184.5nm.  Analisis  voltametri  dilakukan  untuk  menguji efektifitas  MnFe 2 O 4 sebagai  media  delivery  system  terhadap  sel  kanker  menggunakan  standar persamaan sumbu Y=A+Bx dengan persamaan Y = -1.5906 + 1,6156X .
Berdasarkan  voltametri  terdapat  54%  MnFe 2 O 4 yang  terdistribusi  di  dalam  sel  kanker kelompok  intervensi,  dan  34%  yang  terdistribusi  di  dalam  sel  kanker  kelompok  kontrol  positif sehingga  disimpulkan  bahwa  MnFe 2 O 4 berlapis  HSA  tertarget  reseptor  folat  efektif  sebagai media delivery system. Berdasarkan uji  independent t-test diperoleh nilai p=0,013>0,05 hal ini menunjukkan  ada  perbedaan  antara  kelompok  kontrol  dan  intervensi  sebagai  delivery  system terhadap sel kanker.
Pengembangan MNPS selanjutnya masih dapat dilakukan dalam beberapa aspek, salah satunya dengan mengukur sejauh mana kemampuan delivery system tersebut mampu menembus lapisan  sel  kanker  dapat  menjadi  salah  satu  bahan  yang  ideal  untuk  dijadikan  media penghantaran obat kanker.
Kata kunci — Nanopartikel Magnetik, Penghantaran Obat, Kanker

## Abstract
Cancer is a disease characterized by the abnormal growth of body tissue cells where the cancer can spread the death. In the world of biomedicine, Magnetic Nanoparticles (MNPs) is one of  thyranostic  that  can  be  used  as  a  drugs  delivery  system. Thus,  in  this  study,  carried  out  the development of MNPs as a media for drug delivery to see the consentration of MnFe 2 O 4 in vivo. To  find  out  the  results  of  the  study,  conducted  the  analysis  Dynamic  Absorbsion Spectofotometer (DLS) shows that MnFe 2 O 4 coated Human Serum Albumin (HSA) has a particle size  with  average  of  184.5  nm.  Based  on  SPSS  test,  shows  that  the  MnFe2O4  coated  Human Serum Albumin (HSA) targeted folic receptor is effective as media delivery system because that found  54%  MnFe 2 O 4 in  cancer  cells.  Based  Independent  T-Test  test  obtained  by  value p=0,013<0,05  so  there  is  a  difference  between  the  control  group  and  the  intervention  as  a delivery system against cancer cells.
MNPS  development  still  further  can  be  done  in  several  aspects,  one  of  them  with  a measure the extent of the delivery system ability to penetrate the layer of cancer cells that MNPS can be material that is ideal to be used as media drugs delivery.
Keywords— Magnetic Nanoparticle, delivery system, cancer

## 1. PENDAHULUAN
Kanker  merupakan  suatu  penyakit  yang ditandai  dengan  adanya  pertumbuhan  tidak normal dari sel jaringan tubuh. Dimana dalam perkembanganya,  sel-sel  kanker  ini  dapat menyebar  kebagian  tubuh  lain  sehingga  dapat menyebabkan kematian (Lindsey et al ., 2015). Kanker termasuk ke dalam salah satu masalah kesehatan  masyarakat  terbesar  pada  berbagai negara  di  dunia.  Pada    tahun  2012  kanker menjadi  penyebab  kematian  sekitar  8,2  juta orang.  Berdasarkan    Data    GLOBOCAN, International    Agency    for    Research    on Cancer    (IARC), diketahui    bahwa    pada tahun    2012  terdapat  14.067.894  kasus  baru kanker  dan  8.201.575  kematian  akibat  kanker di seluruh dunia.
Riset  Kesehatan  Dasar  (Riskesdas)  tahun 2013  melaporkan  secara  nasional  prevalensi penyakit  kanker  pada  penduduk  semua  umur di  Indonesia  adalah  sebesar  1,4%  atau diperkirakan  sekitar  347.792  orang,  Provinsi Jawa  Tengah  dan  Provinsi  Jawa  Timur merupakan provinsi dengan estimasi penderita kanker  terbanyak,  yaitu  sekitar  68.638  dan 61.230 orang.
Nanopartikel Magnetik (MNPs)
merupakan  salah  satu thyranostic (terapi  dan diagnostik)  dalam  dunia  biomedis  yang  dapat dijadikan  sebagai  media  penghantar  obat, pencitraan  resonansi  magnetik  (MRI),  terapi hipertermia,  dan  pelacakan  in  vivo  dari  sel karena memiliki biokompatibilitas yang tinggi, dan  tingkat  toksisitas  yang  rendah  sebagai bahan medis yang akan dimasukkan ke dalam tubuh (Daishun Ling et al., 2015).
Sebagai salah satu prinsip delivery system yaitu  tepat  sasaran,  maka  pengembangan MNPs perlu  dilakukan  dengan  menggunakan targeted agent agar membantu proses endositosis pada sel kanker. Beberapa penggunaan
agen penarget seperti
polyethylene  glycol  (PEG) , lactic-co-glycolic
acid (PLGA), human epidermal growth factor receptor (EGFR),  asam  folat,  silika,  dan hormon somatostatin /pertumbuhan (GH) telah banyak dikembangkan.
Berdasarkan  p enelitian  yang  dilakukan oleh  Fransesco  M  Veronese  tahun  2005 diketahui  bahwa PEG  merupakan  salah  satu agen  penarget  kanker  yang  baik  karena  dapat mengurangi toksisitas obat kemoterapi terhadap  sel  kaker,  akan  tetapi  PEG  hanya dapat  di  eksresikan  melalui  urin  dan  feses sedangkan  sebagian  molekul  dari  PEG  juga terakumulasi  pada  organ  hati  sehingga  hal  ini dapat berdampak terhadap terjadinya makromolekular  sindrom.  Selain  itu,  PEG merupakan  salah  satu  bahan  polimer  yang menjadikan  bahan  tersebut  kurang  spesifik sebagai  media delivery  system karena  bahan ini  hanya  akan  menghasilkan  molekul  dalam ukuran mikro.
Penelitian lain yang dilakukan oleh Kytai Truong  Nguyeng  tahun  2011  menyatakan bahwa  PLGA  juga  memiliki  tingkat  toksisitas yang  rendah  sebagai  media  penghantar  obat, namun  memiliki  sifat biodegredable yang cepat  di  dalam  sirkulasi  sehingga  tidak  dapat bertahan lama di dalam jaringan tubuh sebagai media delivery  system ,  begitu  pula dengan bahan silikon/silika yang masih belum banyak dilakukan penelitian mengenai tingkat toksisitas bahan tersebut sehingga penggunaannya  sangat  berpotensi  terhadap resiko masalah kesehatan.
Kanker  merupakan  salah  satu  sel  yang memiliki  reseptor  folat  sebagai  sumber pemenuhan  nutrisi,  sehingga  semakin  cepat pembelahan  sel  terjadi  maka  akan  diikuti dengan  peningkatan  kebutuhan  nutrisi  dalam sel  sehingga  reseptor  folat  juga  akan  semakin banyak.  Hal  ini  sesuai  dengan  jurnal review yang  dilakukan  oleh  Grant.,  et.,al.  Tahun 2012,  bahwa asam  folat telah  secara  ekstensif dieksplorasi  sebagai  target  untuk  pengobatan
kanker  dibandingkan  dengan targeted  agent lainnya  karena  selain  mengurangi  tingkat toksisitas  dan biodegredable yang  panjang, asam  folat  juga  memiliki  spesifisitas  yang tinggi terhadap sel kanker.
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut, maka  pengembangan  sistem  penghantaran obat  ( delivery  system )  berukuran  nano  sangat mungkin  dilakukan  dengan  memanfaatkan perbedaan  karakteristik  sel  kanker  dan  sel sehat melalui dua hal yaitu keadaan kebocoran vaskularisasi  serta  tingkat  keasaman  di lingkungan  sel  dan  proses  pertumbuhan  sel yang tidak terkontrol (Grant, L et al., 2012).

## 2. TINJAUAN PUSTAKA

## 2.1 Nanopartikel Magnetik
Nanopartikel  merupakan  jenis  partikel yang  berukuran  antara  1-100  nanometer. Nanopartikel  dapat  diperoleh  dari  senyawa- senyawa organik maupun anorganik, selain itu nanopartikel  juga dapat terbentuk dari senyawa logam, sehingga nanopartikel memiliki jenis yang bermacam-macam, seperti nanopartikel polisakarida,
nanopartikel karbon,  dan  nanopartikel  magnetik  (Kenneth. e t al., 2008).
Sintesis  nanopartikel  dapat  dilakukan dalam  fasa  padat,  cair,  maupun  gas.  Proses sintesis  pun  dapat  berlangsung  secara  fisika atau  kimia.  Proses  sintesis  secara  fisika  tidak melibatkan reaksi kimia (Daishun Ling, et al., 2015). Proses sintesis secara kimia melibatkan reaksi  kimia  dari  sejumlah  material  awal ( precursor )  sehingga  dihasilkan  material  lain yang  berukuran  nanometer  (Jingying  wang., 2009).
Tujuan  pembuatan  nanopartikel  yaitu untuk  meningkatkan  stabilitas    senyawa  aktif terhadap  degradasi  lingkungan  (oksidasi, hidrolisis, dan penguraian enzimatis), memperbaiki sistem penghantaran obat melalui  suatu  rute  tertentu,  memperbaiki absorbsi  senyawa  seperti    makromolekul, mempermudah  penanganan  bahan  toksik, menutupi rasa dan bau yang kurang menyenangkan dari suatu zat aktif, mengurangi  efek  iritasi  zat  aktif  terhadap
saluran  pencernaan,  memodifikasi  pelepasan zat  aktif,  dan  meningkatkan  kelarutannya dalam air.
Gambar 1. Hasil pencitraan TEM nanopartikel MnFe 2 O 4
Berdasarkan beberapa penelitian dilaporkan  bahwa  susepsibilitas  magnet  dari MnFe 2 O 4 lebih tinggi dari ferrit lainnya seperti Fe 3 O 4 ,  CoFe 2 O 4 dan  NiFe 2 O 4 dengan  spin magnetik  sebesar  5 μ b.  Hal  ini  dikarenakan Momen  magnetik  Mn  ferit  (MnFe 2 O 4 )  sesuai dengan skema kopling N'eel (Rosita., 2014).

## 2.2 Human Serum Albumin (HSA)
HSA  adalah  protein  plasma  yang  paling melimpah  (35-50  g/L)  dengan  rata-rata  19 hari.  HSA  adalah  globular  yang  sangat  larut dalam  protein  monomer  dan  terdiri  dari  585 residu  asam  amino  dengan  relatif  berat molekul  6.500  Da  dan  berisi  35  residu cysteinyl membentuk satu kelompok sulfhidril dan  17  jembatan  disulfida.  HSA  memiliki  pH yang  kuat  (stabil  di  kisaran  pH  4-9),  suhu (dapat  dipanaskan  pada  suhu  60°C  hingga  10 h)  dan  pelarut  organik.  Ketika  HSA  dipecah, asam  amino  akan  memberikan  nutrisi  ke jaringan perifer.
Gambar 2. Struktur HSA HSA  adalah  protein  rantai  tunggal  yang disintesis  dan  disekresi  dari  sel-sel  hati. Biasanya,  itu  adalah  protein  sederhana  yaitu tidak  memiliki  prostetik  kelompok  dan karbohidrat  kovalen  terikat  dan  lipid.  HSA memiliki 585 asam amino dan massa molekul 66,5  kDa.  Karena  sejumlah  besar  dari  asam (98  Glu  +  Asp)  dan  dasar  (83  Lys  +  Arg) residu, protein sangat larut dalam media air (> 20%b / b). Tiga – dimensi struktur, tanpa atau dengan ligan terikat, telah ditentukan crystallographically di beberapa laboratorium, dan  sekarang  struktur  dikenal  di  resolusi  2,3 Å.  protein  memiliki  ca.  67  %  α  -  helix  tapi tidak  ada  β  -  sheet,  dan  berisi  tiga  domain homolog  yang  berkumpul  untuk  membentuk berbentuk molekul. Masing-masing domain (I- III)  terdiri  dari  dua  subdomain  (A  dan  B).  A dan B subdomain memiliki enam dan empat α -  heliks,  masing-masing,  dihubungkan  dengan loop fleksibel. Semua tapi satu (Cys34) dari 35 residu sistein yang terlibat dalam pembentukan  menstabilkan  ikatan  disulfida. Berdasarkan hasil studi depolarisasi-
hidrodinamik  pemodelan  gabungan  telah menyarankan  bahwa  konformasi  keseluruhan HSA dalam larutan netral sangat mirip dengan yang  diamati  dalam  struktur  kristal  (Ulrich., 2013).
Sifat biodegradasi dan minimnya toksisitas membuatnya HSA menjadi kandidat yang ideal untuk dijadikan sebagai penghantar obat ( Ahmed O. Elzoghby, et al., 2012) .

## 2.3 Folat dan Folat Reseptor
Glycosylphosphatidylinositol merupakan salah  satu  reseptor  folat  yang  berada  pada sebagian  besar  permukaan  sel  kanker  dan sangat terbatas pada jaringan serta organ yang sehat. Reseptor folat tersebut dapat ditemukan dalam epitel kanker ovarium, serviks, payudara,  paru,  ginjal,  usus,  dan  otak. Sedangkan  pada  jenis  limfoma,  kanker pankreas,  testis,  kandung  kemih,  prostat,  dan hati  tidak  menunjukkan  peningkatan  kadar reseptor folat yang signifikan (Grant, L. et al., 2012).
Berdasarkan  beberapa  penelitian  yang dilakukan  pada  pasien  yang  didiagnosis
kanker  pada  ovarium,  ditemukan  tingkat  folat reseptor  berlebih  dan  selanjutnya  berkorelasi dengan  nilai  histologis  yang  lebih  tinggi  dan lebih  pada  stadium  lanjut  kanker.  Pada jaringan  normal,  reseptor  folat  terbatas  pada paru-paru,  ginjal,  plasenta,  koroid  dan  hanya terdapat pada terbatas permukaan apikal epitel yang  dikenal  sebagai pteroylglutamate ,  yaitu sebuah  non-imunogenik  yang  larut  dalam  air dan  vitamin  B  untuk  proses  sintesis  DNA, metilasi, dan perbaikan sel (Lu, Y., 2016).
Gambar  3. Proses  endositosis asam  folat  dan reseptor folat
Asam folat memiliki beberapa sifat antara lain  stabil  dalam  berbagai  suhu  dan  nilai  pH, non-imunogenik, dan mampu berikatan dengan reseptor folat. Setelah folat menempel pada reseptor yang terletak di dalam caveolae melalui jalur endocytotic . Selanjutnya endosome akan berada pada pH 5 sehingga hal tersebut  menstimulasi  folat  memisahkan  dari reseptor.  Akurasi  dan  deteksi  sensitivitas  dari folat  terhadap  sel  kanker  menggunakan  agen pencitraan  mendapatkan  hasil  yang  baik, karena  hanya  terdapat  sedikit  serapan  pada organ  lain  yaitu  pada  ginjal  dan  hati  yang pernah  diamati  pada  pasien  dengan  tumor jinak.

## 2.3 Konsep Kanker
Kanker  merupakan  penyakit  sel,  yang ditandai  dengan  hilangnya  kontrol  terhadap mekanisme  yang  mengatur  proses  bertahan hidup, proliferasi dan diferensiasi sel.
Proliferasi  sel  yang  berlebihan,  akan mengakibatkan  terbentuknya  benjolan  pada
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Fasih Bintang Ilhami
bagian  tubuh  tertentu  yang  disebut  tumor. Tumor  yang  terdiri  dari  sel  abnormal  dan bersifat  ganas  disebut  kanker (cancer). Suatu sel  normal  dapat  berubah  menjadi  sel  kanker karena  berbagai  sebab  yang  mengakibatkan terjadinya  perubahan  dan Deoxyribonucleid Acid (DNA) sel tersebut. Sel normal yang telah mengalami  transformasi  menjadi  sel  kanker, mengekspresikan  protein-protein  khusus  pada permukaan  sel,  menunjukkan  tanda-tanda imaturitas dan abnormalitas kromosom. Abnormalitas kromosom terjadi karena adanya berbagai traslokasi pada urutan gen (Cotran et al., 2005 dalam Firdaus., 2015).
Gen  yang  terlibat  dalam  pengaturan proliferasi  dan  diferensiasi  sel  normal  disebut protoonkogen. Protoonkogen dapat mengalami aktifasi  oleh  paparan  bahan  karsinogen, menjadi onkogen aktif dan memacu proliferasi sel  secara  belebihan.  Pada  kondisi  normal proliferasi  sel  yang  meningkat  akan  segera dikendalikan  oleh  gen  penghambat  tumor (tumor  supresor  gen), sehingga  proliferasi  sel menjadi normal kembali. Bila terjadi kerusakan  DNA  karena  berbagai  sebab,  gen P53  sebagai  gen  penghambat  tumor  akan menghentikan replikasi DNA pada check point dan  memberi  kesempatan  kepada  DNA  untuk memperbaiki diri. Bila proses perbaikan DNA yang  mengalami  kerusakan  ini  gagal,  maka gen P53 akan memacu terjadinya kematian sel melalui  dua  mekanisme,  yaitu  penghentian siklus sel dan aktifasi jalur apoptosis. Jika gen P53  mengalami  mutasi,  maka  akan  terganggu fungsinya sebagai penghambat tumor, sehingga  DNA  yang  abnormal  dapat  terus berproliferasi.  Proliferasi  sel  abnormal  yang terus terjadi dan tidak dapat dikendalikan oleh mekanisme pengendalian proliferasi sel normal,  selanjutnya  berkembang  menjadi klonal  sel  kanker  (Oliviera  et  al.,  2007  dalam Firdaus., 2015).
Penyebab  kanker  hingga  saat  ini  belum diketahui secara pasti, tetapi diyakini beberapa faktor  yang  diyakini  meningkatkan  risiko terjadinya  kanker.  Faktor-faktor  tersebut diantaranya  adalah  faktor  genetik,  pola  dan jenis  makanan,  aktifitas  fisik  (olahraga), paparam bahan karsinogen dan lain-lain. Suatu bahan  yang  dapat  menyebabkan  atau  memicu terjadinya kanker disebut bahan karsinogen.
Menurut  cara  kerjanya,  karsinogen  dapat dikelompokkan  menjadi  dua  kelompok  utama
yaitu  karsinogen  genotoksik  dan  karsinogen non  genotoksik  (Murray et  al., 2009).  Bahan karsinogen dapat langsung berinteraksi dengan molekul  sasaran  (karsinogen  direk)  dan sebagian  ada  yang  memerlukan  metabolisme terlebih  dahulu  menjadi  unsur  karsinogenik (prokarsinogenik).
Gambar 4. Ikatan kovaen B(a)P-7,8-diol-9,10 oxide dengan DNA
Benzopyrene merupakan bahan prokarsinogenik yang akan menjadi karsinogen jika  terbentuk  senyawa promimate carcinogen  dan  ultimate  carcinogen dengan hanya  aktivitas  enzimatik.  Pada  tahap  awal, B(a)P  di  dalam  sel  mengalami  realksi epoksidasi  pada  posisi  7,8  oleh Mixed Function  Oxidase (MFO)  yang  mengandung berbagai  bentuk  sitokrom  p-450  berlokasi pada  membran  retikulum  endoplasma  dan DNA  inti  sel.  Senyawa  7,8  arenoksia  B(a)P melalui  reaksi  non  enzimatik.  Senyawa  7,8- arenoksida  B(a)P  akan  menjadi  karsinogen dikatils oleh enzim epoksida hidrolase menjadi 7,8-diol, lalu dioksidasi oleh enzim monooksigenase membentuk
ultimate carcinogen yaitu 7,8-diol-9,10-oxide yang merupakan  senyawa  yang  sangat  reaktif. Mekanisme  onkogenesis  yang  merupakan proses  perubahan protooncogene  menjadi oncogene terjadi  dengan  cara  mengikat  basa guanin  DNA  sehingga  terjadi  gangguan replikasi DNA mengakibatkan terjadi pertumbuhan tumor (Pudjiastuti, 1997 ; Guo et al. , 2002 dalam Ira Arundina., 2008).

## 3. METODE PENELITIAN
Jenis penelitian ini adalah true- experiment dengan  rancangan one  shot  case study (Wijono.,  2008).  Dimana  sampel
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Fasih Bintang Ilhami
dihitung  menggunakan  rumus frederer dan diperoleh  besar  sampel  penelitian  berjumlah 20  dengan  pembagian  pada  tiap  kelompok perlakuan  yang  digunakan  adalah  10  ekor tikus.
Variabel independen  dalam  penelitian  ini
adalah adalah Nanopartikel Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin
(HSA) tertarget  reseptor  folat.  Variabel dependen  dalam  penelitian  ini  adalah  media delivery  system terhadap  sel  kanker  tikus strain wistar . Instrumen yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah DLS  (Dynamic  Light Scattering),  Voltametri dan ultraviolet (UV). Dimana untuk melihat adanya perbedaan antar kelompok dilakukan dengan  menggunakan uji T  2  sampel  bebas dengan  tingkat  kemaknaan 95% (α=0.05).

## 3.1 Prosedur Induksi Sel Kanker
Serbuk benzopyrene dilarutkan  ke dalam minyak zaitun dengan perbandingan 1:1  (1mg  larutan benzopyrene :  1  ml minyak  zaitun).  Kemudian  di  injeksi benzopyrene 0,3ml/kgBB/2x  seminggu secara subcutan pada area sekitar payudara selama 4 mingggu.

## 3.1 Prosedur Preparasi Voltametri
Jaringan  sel  kanker  yang  telah  di ambil  kemudian  direndam  dalam  larutan formalin buffer 10  %  selama  18  –  24  jam dan  dipanaskan  selama  2  jam  pada  suhu 108°C.  Jaringan  kemudian  diberikan larutan  asam  nitrat  dan  asam  perklorat dengan  perbandingan  3  :  2  vol/vol  (3ml asam  nitrat  :  2  asam  perkolat)  dan dipanaskan  kembali  pada  suhu  250 0 C selama 15 menit dibawah ruangan asam.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1  Hasil  Karakterisasi Dynamic  Light
Scattering (DLS) Hasil karakterisasi senyawa
menggunakan instrumen Dynamic Light
Scattering  (DLS) dijelaskan berupa  grafik intensitas ukuran partikel seperti pada  gambar dibawah ini :
Gambar 5. (a) Hasil karakterisasi Nanopartikel Magnetik (MnFe 2 O 4 ) (b) Hasil karakterisasi Nanopartikel Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human Serum Albumin (HSA) menggunakan Dynamic Light Scattering (DLS)
Berdasarkan  gambar  5  (a)  terdapat  tiga peak  yang  menunjukkan  distribusi  ukuran partikel  MnFe 2 O 4 .  Pada  peak  pertama  sebesar 1203nm  memiliki  intensitas  sebanyak  58%, peak  kedua  sebesar  9.010nm  memiliki intensitas  sebanyak  27.5%,  dan  peak  ketiga sebesar 37.38nm memiliki intensitas sebanyak 8.2%. Dengan rata-rata ukuran yang terbentuk sebesar  181.3nm.  Begitu  pula  pada  gambar  5 (b) diperoleh hasil bahwa ukuran partikel pada peak  pertama  sebesar  227.3nm  memiliki intensitas  sebanyak  100%.  Sebagaimana  yang dijelaskan  oleh  Mohanra  dan  Chen,  (2006) bahwa  suatu  partikel  yang  memiliki  ukuran sekitar  10-500nm  dapat  dikatakan  sebagai nanopartikel.
a
b
© (2016) Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
Dalam  penelitian  yang  dilakukan  oleh Fahmi  (2014)  dijelaskan  bahwa  perbandingan konsentrasi Bovine  Serum  Albumin  (BSA) dengan senyawa aktif dapat memberi pengaruh  terhadap  ukuran  partikel  yang terbentuk,  semakin  besar  konsentrasi  BSA yang  digunakan  dalam  pencampuran,  maka nanopartikel  yang  terbentuk  akan  semakin kecil.  Hal  tersebut  juga  berlaku  pada perbandingan konsentrasi menggunakan Human  Serum  Albumin  (HSA) terhadap ukuran  partikel  yang  terbentuk  dari  suatu senyawa aktif.

## 4.2 Hasil Analisis Voltametri
Untuk  mengetahui  tingkat  konsentrasi nanopartikel  magnetik  berbahan  dasar  Mn dalam  jaringan  kanker  maka  dibuat  model standar  untuk  menentukan  konsentrasi  Mn menggunakan beberapa larutan dengan konsentrasi  ppm  yang  berbeda  (1,  2,  4,  dan  8 ppm).  Sebelumnya,  juga  dilakukan  pengujian pada  sampel  induk  MnFe 2 O 4 sebanyak  4ml dan  ditemukan  konsentrasi  sebesar  7.0875 ppm/4ml  dimana  dalam  1cc  mengandung 0.0070 ppm/1cc MnFe 2 O 4 .

## 4.2.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi MnFe
2 O 4
Data  hasil  pengukuran  larutan  MnFe 2 O 4 pada  berbagai  konsentrasi  dapat  dilihat  pada gambar kurva kalibrasi berikut :
Gambar  6. Kurva  kalibrasi  larutan  MnFe 2 O 4 .
yang diukur menggunakan voltametri Berdasarkan  gambar  6  dapat  dilihat bahwa  semakin  besar  konsentrasi  maka  nilai absorbansinya  akan  semakin  besar  dan
diperoleh  persamaan  regresi Y= 1,5906 + 1,6156 X.
Gambar  7. Konsentrasi  MnFe 2 O 4 pada kelompok  intervensi  (Nanopartikel Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin  (HSA) tertarget reseptor folat)
Berdasarkan  gambar  7  diperoleh  hasil bahwa  terdapat  konsentrasi  MnFe 2 O 4 dalam sel  kanker  kelompok  intervensi  dengan  nilai rata-rata  sebesar  0.0038.  Hal  ini  menujukkan bahwa  54%  MnFe 2 O 4 yang  telah  dinjeksikan secara  intravena  pada  tikus  strain  wistar sampai pada sel kanker.
y = A+Bx = 1,5906 + 1,6156X r 2 = 0,994055
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Fasih Bintang Ilhami
Gambar  8. Konsentrasi  MnFe 2 O 4 pada kelompok kontrol positif (Nanopartikel Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human
Serum  Albumin  (HSA)  non- target reseptor folat)
Berdasarkan  gambar  8  diperoleh  hasil bahwa  terdapat  konsentrasi  MnFe 2 O 4 dalam sel  kanker  kelompok  kontrol  positif  dengan nilai  rata-rata  sebesar  0.0024.  Hal  ini menujukkan  bahwa  34%  MnFe 2 O 4 yang  telah dinjeksikan  secara  intravena  pada  tikus  strain wistar sampai pada sel kanker.

## 4.3 Hasil Uji SPSS
Berdasarkan  hasil  uji kolmogrof  smirnov diketahui  bahwa p-value pada  kelompok kontrol  positif  adalah  0.026  dan  pada kelompok  intervensi  yaitu  0.034.  Hal  tersebut menunjukkan bahwa data berdistribusi normal dikarenakan p-value <  α  (0,05).  Kemudian untuk  dilakukan  analisis  menggunakan  uji independent t-test maka harus dilihat homogenitas  varians  dari  data  tersebut menggunakan leavent  test dan  diperoleh p- value sebesar  0.203  hal  ini  menunjukkan bahwa  varians  dari  data  tersebut  bersifat homogen dikarenakan nilai p-value > α (0,05).
Tabel 1. Hasil analisis uji independent t-test Kelompok Mean Median SD± P Intervensi 0,0038 0,0038 0,0008 0,013 Kontrol Positif 0,0024 0,0019 0,0011
Berdasarkan  hasil  analisis independent  t- test diperolah  nilai p-value sebesar  0,013 <  α (0,05)  hal  ini  menunjukkan  bahwa  terdapat pebedaan antara Nanopartikel Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin (HSA) tertarget reseptor folat dan Nanopartikel Magnetik  (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum Albumin  (HSA) non-target  reseptor  folat sebagai  media delivery  system terhadap  sel kanker tikus strain wistar.
4.4  Konsentrasi  Nanopartikel  Magnetik (MnFe 2 O 4 )
Berlapis Human Serum Albumin  (HSA) Tertarget  Reseptor  Folat Terhadap Sel Kanker Tikus S train Wistar
Berdasarkan  hasil  analisis  voltametri, diketahui  bahwa  terdapat  54%  konsentrasi MnFe 2 O 4 yang  terdistribusi  di  dalam  sel kanker  tikus  strain  wistar  8  jam  setelah  di injeksikan  sebanyak  1cc  MnFe 2 O 4 secara intravena,  hal  tersebut  dapat  terjadi  akibat ukuran MnFe 2 O 4 yang bersifat nano (184,5nm) sehingga  memungkinkan  untuk  masuk  ke
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Fasih Bintang Ilhami
dalam sel melalui adanya kebocoran pembuluh darah  pada  sel  kanker.  Nanopartikel  juga memiliki  kemampuan  yang  baik  untuk menembus  bagian  interstitial  pembuluh  darah dari  sel  kanker  dengan  waktu  retensi  lebih tinggi dibandingkan pada sel sehat. Selain itu, pertumbuhan  sel  kanker  yang  tidak  terkendali senantiasa  akan  membutuhkan  vaskularisasi lebih  cepat  dan  meningkatkan  permeabilitas dari vaskular tersebut sehingga dengan mudah dapat di akses oleh nanopartikel. Sebagaimana hasil  penelitian  yang  diungkapkan  oleh  Hui  S Huang  tahun  2013,  dijelaskan  bahwa  secara farmakokinetik konsentrasi iron dapat terdeteksi  pada  sel  tumor  dalam  8-24  jam pertama setelah di injeksikan secara intravena.
Dalam  penelitiannya,  Hui  S  Huang (2013)  juga  menyebutkan  bahwa  pada  8  jam setelah dilakukan injeksi nanopartikel sebanyak  1.7gFe/kg  secara  intravena  melalui ekor  tikus  ditemukan  adanya  distribusi nanopartikel  di  dalam  sel  tumor,  sel  otot,  dan di  dalam  darah.  Sedangkan  pada  24  jam setelah  injeksi  ditemukan  adanya  distribusi nanopartikel  pada  organ  hati,  hal  ini  sesuai dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Mannuel  Arraebo  (2007)  bahwa  partikel dengan  ukuran  100-1000nm  akan  dibuang melalui  hati,  dan  limpa.  Dalam  penelitian lainnya  juga  disebutkan  bahwa  partikel berukuran  ±100nm  sebanyak  60-90%  akan dieliminasi  melalui  organ  hati  (Jana,  dkk., 2010).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  adanya konsentrasi  sebesar  54%  dari  konsentrasi induk  yang  di  injeksikan  secara  intravena menggambarkan  bahwa  MnFe 2 O 4 berlapis Human  Serum  Albumin  (HSA) tertarget reseptor  folat  efektif  untuk  dijadikan  sebagai delivery system terhadap sel kanker sebagaimana  dalam  penelitian  yang  dilakukan oleh  Hui  S  Huang  (2013)  dimana  konsentrasi nanopartikel  yang  teridentifikasi  di  dalam  sel tumor pada 1 jam pertama sebesar 23%, 3 jam sebesar  35%,  8  jam  sebesar  35%,  24  jam sebesar 52%, dan 96 jam sebesar 20.58%.
Selain itu, lapisan Human Serum Albumin (HSA) juga  berperan  dalam  proses  masuknya MnFe 2 O 4, ke  dalam  sel  kanker,  hal  tersebut terjadi melalui adanya perbedaan pH antara sel sehat dan sel kanker, dimana tingkat keasaman
di  lingkungan  sel  kanker  yang  tinggi  akan mengarahkan MnFe 2 O 4 bergerak menuju pada sel kanker ( Ahmed O. Elzoghby et al., , 2012 ). Adanya  perubahan  pH  asam  pada  sel  kanker yang berada pada pH 5 akan membuat struktur HSA  membuka  dan  menstimulasi  pelepasan folat  dari  MnFe 2 O 4 sehingga  MnFe 2 O 4 dapat masuk ke dalam sel kanker.
Media delivery  system menggunakan bahan  Nanopartikel  Magnetik  (MnFe 2 O 4 ) Berlapis Human  Serum  Albumin  (HSA) tertarget  Reseptor  Folat  semakin  efektif disertai  dengan  adanya  asam  folat  sebagai targeted  agent yang  akan  bergerak  menuju folat  reseptor  yang  ada  pada  sel  kanker. Menurut  penelitian  yang  dilakukan  oleh Grant,  L.  e t  al., tahun  2012  dijelaskan  bahwa akurasi  dan  deteksi  sensitivitas  dari  folat terhadap  sel  kanker  menggunakan  agen pencitraan  mendapatkan  hasil  yang  baik, karena  hanya  terdapat  sedikit  serapan  folat reseptor  pada organ lain yaitu pada ginjal dan hati  yang  pernah  diamati  pada  pasien  dengan tumor jinak.
Fahmi  (2014)  dalam  penelitiannya  juga mengungkapkan  bahwa  berdasarkan  hasil analisis secara mikroskopik konvokal ditemukan nanopartikel magnetik yang dilapisi dengan bovine serum albumin (BSA) di dalam sitoplasma  sel  kanker  yang  dibiakkan  (kultur) secara  in-vitro.  Hal  tersebut  terjadi  akibat adanya  konten  asam  folat  sebagai  material yang  memungkinkan  untuk  menembus  sel membran  dan  berikatan  dengan  folat  reseptor pada sel kanker.
4.5 Konsentrasi  Nanopartikel  Magnetik (MnFe 2 O 4 )
Berlapis Human Serum Albumin  (HSA) Non-target  Reseptor  Folat Terhadap Sel Kanker Tikus S train Wistar
Berdasarkan  hasil  analisis  voltametri, diketahui  bahwa  terdapat  34%  konsentrasi MnFe 2 O 4 yang ditemukan di dalam sel kanker tikus  strain  wistar  8  jam  setelah  di  injeksikan sebanyak  1cc  MnFe 2 O 4 secara  intravena,  hal tersebut dapat terjadi akibat adanya perbedaan karakteristik  sel  kanker  dan  sel  sehat  yaitu keadaan  kebocoran  vaskularisasi  menjadikan Nanopartikel  Magnetik  berukuran  antara  1-
1000  nanometer  dapat  dengan  mudah  masuk ke  dalam  sel  kanker  (Jin  Hee  Maeng et  al., 2010). Dalam penelitian lain, juga
diungkapkan  bahwa  sel  kanker  memiliki kondisi  vaskular  yang  rapuh  karena  proses angiogenesis yang tidak sempurna (Wahajuddin., 2012).
Sebagaimana hasil penelitian yang diungkapkan  oleh  Hui  S  Huang  tahun  2013, bahwa  secara  farmakokinetik  konsentrasi  iron sebesar 1.9  ±  0.3  mg  Fe/cc dapat  terdeteksi pada  8-24  jam  pertama  setelah  di  injeksikan secara  intravena.  Menurut  penelitian  lainnya, diungkapkan  bahwa  nanopartikel  dengan ukuran  10-500nm  dapat  bertahan  di  dalam sirkulasi  dalam  beberapa  periode  waktu  jika nanopartikel  tersebut  di  injeksikan  secara intravena  (Heebom,  Ko.  2011).  Akan  tetapi tingkat  konsentrasi  yang  pada  kelompok kontrol  positif  dengan  Nanopartikel  Magnetik (MnFe 2 O 4 ) Berlapis Human  Serum  Albumin (HSA) Non-target  Reseptor  Folat  tersebut masih  kurang  efektif  untuk  dijadikan  sebagai media delivery  system terhadap  sel  kanker karena  hanya  terdapat  34%  dari  konsentrasi tersebut yang ditemukan di dalam sel kanker.
Selain  adanya  kebocoran  vaskularisasi, lapisan Human  Serum  Albumin  (HSA) juga berperan dalam proses masuknya MnFe 2 O 4, ke dalam  sel  kanker,  hal  tersebut  terjadi  melalui adanya  perbedaan  PH  antara  sel  sehat  dan  sel kanker, dimana tingkat keasaman di lingkungan sel kanker yang tinggi mengarahkan  MnFe 2 O 4 menuju  pada  sel kanker  ( Ahmed  O.  Elzoghby et  al., ,  2012 ).
Adanya  perubahan  pH  asam  pada  sel  kanker yang berada pada pH 5 akan membuat struktur HSA  membuka  dan  menstimulasi  pelepasan folat  dari  MnFe 2 O 4 sehingga  MnFe 2 O 4 dapat masuk ke dalam sel kanker.
Dimana adanya perubahan pH asam pada sel  kanker  yang  berada  pada  pH  5  akan membuat struktur HSA membuka dan menstimulasi  pelepasan  folat  dari  MnFe 2 O 4 sehingga  hal  ini  tetap  memungkinkan  adanya konsentrasi  MnFe 2 O 4 di  dalam  sel  kanker meski dalam konsentrasi yang sedikit.
4.6 Perbedaan Konsentrasi  Nanopartikel Magnetik  (MnFe 2 O 4 ) Berlapis Human Serum  Albumin  (HSA) Tertarget  dan  Non- target Reseptor Folat Terhadap Sel Kanker Tikus S train Wistar
Berdasarkan hasil uji independent t-test, ditemukan adanya pebedaan konsentrasi antara Nanopartikel  Magnetik  (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin  (HSA) tertarget reseptor  folat  dan  Nanopartikel  Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin (HSA) non-target  reseptor folat  sebagai  media delivery  system terhadap  sel  kanker  tikus strain wistar.
Adanya  perbedaan  tingkat  konsentrasi Nanopartikel  Magnetik  (MnFe 2 O 4 ) Berlapis Human  Serum  Albumin  (HSA) Tertarget  dan Non-target Reseptor Folaf yang terdistribusi di dalam sel kanker tersebut terjadi akibat adanya asam  folat  sebagai targeted  agent yang  akan bergerak  menuju folat  reseptor  yang  ada  pada sel kanker. Menurut penelitian yang dilakukan oleh    Grant,  L.  e t  al., tahun  2012 mengungkapkan  bahwa  akurasi  dan  deteksi sensitivitas  dari  folat  terhadap  sel  kanker menggunakan  agen  pencitraan  mendapatkan hasil  yang  baik,  karena  hanya  terdapat sedikit serapan folat reseptor pada organ lain.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Lu,  Y, tahun  2016  juga  mengungkapkan  bahwa resesptor folat akan terdistribusi secara normal pada epitel sel sehat dan meningkat pada epitel sel  ganas.  Reseptor  folat  juga  mengaktifkan terjadinya proses endositosis sehingga Nanopartikel  Magnetik  (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin  (HSA) tertarget reseptor  folat  dapat  dengan  mudah    masuk kedalam sitoplasma sel. Hal ini memungkinkan  agar  bahan  menggunakan targeted  agent berupa  asam  folat  memiliki konsentrasi  yang  lebih  besar  di  dalam  sel kanker.
5. KESIMPULAN DAN SARAN

## 5.1 Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian,  diperoleh kesimpulan bahwa bahan Nanopartikel Magnetik  (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum Albumin  (HSA) tertarget  reseptor  folat  efektif untuk dijadikan sebagai media delivery system terhadap  sel  kanker  tikus strain  wistar. Sedangkan  bahan  Nanopartikel  Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin (HSA) non-target  reseptor  folat  masih  kurang efektif untuk dijadikan sebagai media delivery system terhadap sel kanker tikus strain wistar. Hal  tersebut  terjadi  karena  ditemukan  adanya perbedaan  konsentrasi  Nanopartikel  Magnetik (MnFe 2 O 4 ) berlapis Human  Serum  Albumin (HSA) tertarget  dan  non-target  reseptor  folat sebagai  media delivery  system terhadap  sel kanker tikus strain wistar.

## 5.2 Saran
Pengembangan  Nanopartikel  Magnetik (MNPs) selanjutnya dalam dunia medis masih dapat  dilakukan  dalam  beberapa  aspek,  salah satunya  dengan  mengukur  sejauh  mana kemampuan delivery  system tersebut  mampu menembus  lapisan  sel  kanker  yang  dapat dibuktikan secara mikroskopis sehingga MNPs dapat  menjadi  salah  satu  bahan  yang  sangat ideal untuk dijadikan sebagai media penghantaran obat-obatan kanker.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih tak terhingga dan penghargaan  yang  setinggi-tingginya  saya ucapkan kepada Dr. Andi Hamim Zaidan.,M.Si  Pembimbing Ketua yang dengan penuh  perhatian  telah  memberikan  dorongan, bimbingan dan saran
sehingga terselesaikannya tesis ini.
Terimakasih sebesar-besarnya dan penghargaan yang setinggi-tingginya juga saya
ucapkan kepada Dr. Bambang Purwanto.,dr.,M.Kes, Pembimbing yang dengan  penuh  perhatian  telah  memberikan dorongan, bimbingan, dan saran.

## DAFTAR PUSTAKA
Agneizka.  W.  Wilczewska, et  al .  2012. Nanoparticles  as  drug  delivery  systems. Jurnal Review. Institute of Pharmacology Polish Academy of Sciences.
Ahmed  O.  Elzoghby,  dkk,  2012 . Albumin- based nanoparticles as potential controlled  release  drug  delivery  systems.
Journal of Controlled Release. Alexandria University. Egypt. Anne Larea dkk, 2015. Microfluidic Continuous  Approaches  to  Produce Magnetic Nanoparticles with Homogeneous  Size  Distribution. Journal of Chemical, Molecular, Nuclear, Materials and Metallurgical Engineering. Arundina,  Ira.  2008. Efek  Fraksi  n-Heksana  : Etil Asetat Artemisia Vulgaris L.
Terhadap  Ekspresi  Protein  RAS,  P53, PCNA,  C.MYC  dan  Apoptosis  Pada  Sel Mukosa  Rongga  Mulut  yang  Mengalami Transformasi Akibat Induksi Benzopirine.

## Disertasi. Universitas Airlangga.
Crum  CP,  Lester  SC,  Cotran  RS,  2010.  The Female  Genitale  System  and  Breast.  In (Kumar  V,  Abbas  A,  Fausto  N,  Mitchell R)  basic  Pathology  11 th ed.  Elsevier  Inc, New York USA.
Daishun  Ling,  dkk.  2015. Chemical  Synthesis and  Assembly  of  Uniformly  Sized  Iron Oxide Nanoparticles for Medical Applications. Accounts  of  Chemical Research Fahima,  Dilnawaz.  2010. Dual  drug  loaded superparamagnetic iron oxide
nanoparticles for targeted cancer therapy. Journal Biomaterials. India.
Fahmi,  Z.  Mochammad.  2014. Simple  Phase Trasferr  Methods  on  Providing  Water- Soluble  Nanoparticles  For  Cancer  Cell Detection And Therapeutics. Disertation. Fahmi, Z. Mochammad. 2014. Development of bovine serum albumin-modified
JBP Vol. 18, No. 2, Agustus 2016— Fasih Bintang Ilhami
hybrid nanoclusters
for magnetofluorescence  imaging  and  drug delivery. Journal. Firdaus.  A.  Leo,  2013. Pengaruh  Ekstrak Etanol  Tumbuhan  Cayratia  Trifolia  L (Domin)  Terhadap  Peningkatan  Sel  NK dan  Limfosit  T  Sitotoksik  (CD8 + )  Pada Tikus  Putih  (Rattus  Norvegicus)  Strain Sprague  Dawley  Model  Kanker. Tesis. Universitas Airlangga. Grace, et  al. 2008. Molecular  Origins  Of Cancer Oncogenes And Cancer. The New England  Journal  of  Medicine.  Review Article.
Grant,  L.  2012. Utilizing  the  folate  receptor for active targeting of cancer nanotherapeutics. Jurnal Review Heeboom,  Ko.,  et.,al.  2011. In  Vivo  Targeted Delivery  of  Nanoparticles  forTheranosis Journal.
Hilger,  Ingrid, et  al .  2002. Thermal  Ablation of Tumors Using Magnetic Nanoparticles An In Vivo Feasibility Study.
Hiroshi  Maeda,  2013 The  EPR  effect  for macromolecular  drug  delivery  to  solid tumors:  Improvement  of  tumor  uptake, lowering of systemic toxicity, and distinct tumor  imaging  in  vivo. DDS  Research Institute, Sojo University. Japan. Hui  S  Huang.,  et.,al.  2013. Intravenous magnetic nanoparticle cancer hyperthermia. International  Journal  of nanomedicine.
Jana,  Choumocka, et  al. 2010. Magnetic
Nanoparticle and Targeted Drug
Delivering. Pharmacological Research Jin  Hee  Maeng,  dkk.  2010. Multifunctional doxorubicin  loaded  superparamagnetic iron oxide nanoparticles for chemotherapy  and  magnetic  resonance imaging in liver cancer.
Jingying,  Wang. et  al. 2009. Solvothermal synthesis and magnetic properties of size- controlled  nickel  ferrite  nanoparticles.
Journal of Alloys and Compounds
Kenneth, et. Al. 2008. Magnetic Nanoparticle- Peptide  Conjugates  for  in  Vitro  and  in Vivo Targeting and Extraction of Cancer Cells. Articles
Kristen  D.  Tabaga.  2015. Efek  Seduhan  Teh Hijau (Camelia Sinesis) Terhadap Gambaran Histopatologi Payudara Mencit  yang  Diinduksi  Benzopyrene. Jurnal Biomedik
Kuntoro,  Haji.  2010. Metode  Samplig  dan Penentuan  Besar  Sampel. Surabaya  : Pustaka Melati
Kyong-Hoon  Choi,  2014. Synthesis  and Characterization of Photo-functional
Magnetic  Nanoparticles  (Fe3O4@HP) for Applications in Photodynamic Cancer Therapy. Journal  of  the  Korean  Physical Society.
Lindsey,  A.  Tore  dkk,  2015. Global  Cancer Statistic, 2012.
Lu.,  Y.,  et.al.,  2016. Folate-mediated  delivery of macromolecular
anticancer therapeutic agents. Department of
Chemistry , 1393 Brown Building , Purdue University , West  Lafayette , IN 47907,

## USA
Mannueal  Arraebo  2007. Manps  for  drug delivery . Nanoscience Institute of
Aragon, University of Zaragoza, Spain.
Murray, et  al. 2009. Guidance  for  Life,  Cell Death,  and  Colorectal  Neoplasia  by
Netrin Dependence Receptors. Nguyen, T. Kytai. 2011. Targeted Nanoparticles for Cancer Therapy:
Promises  and  Challenges. Department  of Bioengineering,  University  of  Texas  at Arlington, Arlington, TX, USA.
Pusat  Data  dan  Informasi  2015.  Buletin
Kanker : Situasi Penyakit Kanker.
Pusat Data dan Informasi Kementrian
Kesehatan  RI 2015.  Stop  Kanker  :
Situasi Penyakit Kanker. Rosita, D. Tawanailla. 2014. Sintesis Nanopartikel Manganese Ferrite (MnFe2O4) dengan Metode Kopresipitasi dan  Karakterisasi  Sifat  Kemagnetannya. Jurnal  Fisika  Indonesia.  Universitas Gadjah Mada
Ulrich  Kragh-Hansen,  2013. Molecular  and practical  aspects  of  the  enzymatic properties  of  human  serum  albumin  and of  albumin–ligand  complexes. Jurnal. Department  of  Biomedicine,  University of Aarhus. Denmark.
Veronese,  M.  Fransesco, et  al. 2005.
PEGylation,  Successful  Approach  to Drug Delivery. Jurnal Review.
Department  of  Pharmaceutical  Sciences, Padua University . Wahajuddin.,  et.,al.  2012. Superparamagnetic iron oxide nanoparticles: magnetic nanoplatforms as drug carriers. Wijono,  Djoko.  2008. Paradigma  dan Metodologi Penelitian Kesehatan. Surabaya : CV. Duta Prima Airlangga Zakaria, Sunarni. 2013. Studi Farmakodinamik Fraksi Alkaloid Achyranthes Asperal Terhadap Ekspresi  Protein  CDK 1 ,  BAX,  dan Ras  Sel  Kanker  Payudara  Mencit Hasil Induksi Benzophyrene .
Disertasi.
APPENDIX