MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 1, 2022, Hal, 115-126 e-ISSN: 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL 96% DAUN SAMBILOTO ( Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees TERHADAP Propionibacterium acnes
I Putu Gede Adi Purwa Hita 1 , Putu Yudhistira Budhi Setiawan 2 , I Gusti Septiari 3 , I Gusti Ngurah Agung Windra Wartana Putra 4 1,2,3,4) Universitas Bali Internasional, Jl. Seroja Denpasar - Bali 80114 e-mail: 1) adipurwah.1@gmail.com
2) yudhistirabudhi@gmail.com
3) igustiseptiari@gmail.com
4) agungwindra@gmail.com

## ABSTRAK
Acnes vulgaris merupakan salah satu penyakit kulit yang dapat mengurangi rasa percaya diri pada masa remaja dan dewasa. Penyakit ini dapat disebabkan oleh infeksi bakteri Propionbacterium acnes dan pengobatan penyakit ini menggunakan antibiotika  banyak  menimbulkan  resistensi.  Salah  satu  alternatif  yang  dapat dikembangkan  untuk  mengatasinya  adalah  penggunaan  bahan  obat  herbal. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  96%  daun  sambiloto  ( Androgaphis  paniculata (Burm.f.)  Nees)  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Propionbacterium  acnes .  Metode  maserasi digunakan  dalam  pembuatan  ekstrak  dan  dilakukan  uji  kandungan  senyawa aktif  secara  kualitatif. Uji aktivitas  antibakteri  dilakukan  menggunakan metode disc  diffusion .  Teridentifikasi  secara  kualitaif  kandungan  senyawa  alkaloid, flavonoid,  tanin,  triterpenoid  dan  saponin.  Ekstrak  etanol  96%  daun  sambiloto dengan  konsentrasi  25,  50,  75,  dan  100%b/v  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acnes ditandai dengan adanya diameter zona hambat  pada  masing-masing  konsentrasi,  dimana  kategori  aktivitas  antibakteri yang kuat didapatkan pada sampel konsentrasi 75 dengan diameter zona hambat yang  terbentuk  yaitu  11,26±0,44  mm.  Terdapat  perbedaan  bermakna  pada analisis  statistik One-Way  ANOVA pada  hasil  diameter  zona  hambat  antara kelompok kontrol dengan ekstrak dengan nilai p < 0,05.
Kata kunci : Andrographis paniculata (Bum.f.) Nees , antibakteri, disc diffusion, ekstrak etanol 96%, Propionibacterium acnes

## ABSTRACT
Acnes  vulgaris  is  a  skin  disease  that  can  reduce  self-confidence  in  adolescence  and adulthood. This disease can be caused by infection with Propionbacterium acnes bacteria and treatment of this disease using antibiotics causes a lot of resistances. One alternative that can be developed to overcome this problem is the use of herbal medicines. The purpose of this study was to determine the antibacterial activity of 96% ethanol extract sambiloto leaf  (Androgaphis  paniculata (Burm.f.)  Nees )  in  inhibiting  the  growth  of Propionbacterium acnes bacteria. The maceration method was used in the preparation of extracts  and  a  qualitative  test  of  active  compounds  was  carried  out.  The  antibacterial activity test was carried out using the disc diffusion method. Qualitatively identified in
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 1, 2022, Hal, 115-126 e-ISSN: 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487
the  extract  contains  several  active  compounds  like  alkaloids,  flavonoids,  tannins, triterpenoids and saponins. 96% ethanol extract of sambiloto leaf with concentrations of 25,  50,  75,  and  100%  w/v  had  antibacterial  activity  against  Propionibacterium  acnes indicated by the diameter of the inhibition zone at each concentration, where the category of strong antibacterial activity was found in samples with concentrations of 75 and 100% w/v  with  the  diameter  of  the  inhibition  zone  formed  respectively  11.26±0.44  mm  and 16.52 ± 1.33 mm. There was a significant difference in the One-Way ANOVA statistical analysis on the results of the inhibition zone between the control group and the extract with p value < 0.05.
Keywords : Andrographis paniculata (Bum.f.) Nees , antibacterial, disc diffusion, 96% ethanol extract , Propionibacterium acnes

## PENDAHULUAN
Jerawat  ( Acnes  vulgaris )  merupakan  salah  satu  penyakit  kulit  yang  sering terjadi terutama pada masa remaja dan dewasa muda dimana dapat mengurangi rasa  percaya  diri  akibat  berkurangnya  keindahan  pada  wajah  (Susanto  dan Made,  2013).  Faktor  yang  dapat  menyebabkan  timbulnya  jerawat  antara  lain faktor  genetik,  endokrin,  psikis,  musim,  stres,  makanan,  keaktifan  kelenjar sebasea,  infeksi  bakteri,  kosmetika,  dan  infeksi  bakteri Propionibacterium  acnes (Al-Hoqail, 2003; Chomnawang et al. , 2007).
Propionibacterium  acnes merupakan  bakteri  gram  positif  berbentuk  batang dan  merupakan  flora  normal  kulit  yang  ikut  berperan  dalam  pembentukan jerawat  (Harahap,  2002).  Pada  tahun  2007  resistensi  antibiotik  terhadap Propionibacterium acnes semakin meningkat, mulai dari eritromisin, klindamisin, kontrimoksazol,  dan  tetrasiklin  (Tan et  al. ,  2007).  Oleh  karena  itu,  diperlukan terapi  alternatif  lain  yang  dapat  digunakan  sebagai  antibakteri.  Salah  satunya adalah  dengan  memanfaatkan  tanaman  herbal  yang  memiliki  kandungan sebagai antibakteri.
Salah  satu  tanaman  herbal  di  Indonesia  adalah  tanaman  sambiloto ( Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) yang memiliki kandungan senyawa aktif yaitu andrografolida (diterpenlakton),  flavonoid, asam quinik, steroid, alkaloid, saponin,  tannin,  dan  senyawa  lainnya.  Selain  itu,  daun  sambiloto  juga mengandung saponin, alkaloid, dan tannin (Li et al. , 2019; Mussard et al. , 2020;,
Hossain et  al. ,  2021).  Sambiloto  memiliki  banyak  aktivitas  farmakologi berdasarkan banyaknya jenis kandungan senyawa aktif yang terkandung, yaitu sebagai antibakteri, antivirus, antibiofilm, antijamur, antimalarial, antiinflamasi, antiagregasi platelet, antidiabetes, dan memiliki peran dalam peningkatan sistem imun  (Hossain et  al. ,  2021;  Rajanna et  al. ,  2021).  Berdasarkan  uraian  tersebut,
peneliti  tertarik  untuk  meneliti  kandungan  senyawa  yang  terdapat  pada  daun sambiloto  dan  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  96%  daun  sambiloto ( Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) terhadap Propionibacterium acnes.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bahan
Simplisia daun sambiloto ( Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees), aquadestilata, bakteri Propionibacterium acnes , kapas, alumunium foil, media Muller Hinton Agar (MHA),  etanol  96  %,  aquadest  steril,  larutan  Mc  Farland,  NaCl  0,85%  dan klindamisin gel.

## Alat
Alat  maserasi,  alat-alat  gelas  (Pyrex),  rotary  evaporator  (IKA),  corong  Buchner (Merk),  timbangan  analitik  (Acic  AD-  2100H),  pinset,  autoklaf  (GEA),  kertas saring, kapas, mikro pipet, inkubator, oven, lampu spritus, dan jarum ose.

## Penyiapan Estrak
Persiapan  sampel  simplisia  daun  sambiloto  ( Andrographis  paniculata (Burm.f.) Nees) yang diperoleh dari Desa Pejeng, kabupaten Gianyar. Simplisia yang  telah  dilakukan  sortasi  basah  dan  dilakukan  pengeringan  menggunakan oven  kemudian  diblender  hingga  dihasilkan  serbuk  halus.  Serbuk  simplisia sebanyak  500  gram  ditimbang  dan  diekstraksi  dengan  metode  maserasi (perendaman bahan) dengan 5 liter etanol 96 % selama 5 hari. Filtrat dari proses maserasi  pertama  kemudian  dikumpulkan  dan  kemudian  dilakukan  maserasi kembali terhadap simplisia hasil saringan. Filtrat dari proses keseluruhan proses maserasi  kemudian  diuapkan  dengan rotary  evaporator pada  suhu  50 0 C  hingga dihasilkan ekstrak kental (Hita et al. , 2021).
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol 11, No 1, 2022, Hal, 115-126 e-ISSN: 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487

## Evaluasi ekstrak
1. Uji  persentase  rendemen:  hasil  ekstrasi  dihitung  deangan  menggunakan rumus sebagai berikut % rendemen = Berat ekstrak uji/berat sampel x 100%.
2. Uji  organoleptis:  ambil  sampel  lalu  lakukan  pengamatan  terhadap  bentuk, aroma,  rasa  dan  warna  dari  Daun  Sambiloto  ( Andrographis  paniculata (Burm.f.) Nees).
3. Uji kadar air: uji kadar air dilakukan dengan menimbang sebanyak 1 sampai 2 g pada temperatur 105°C selama 30 menit atau sampai berat konstan, yang dinyatakan sebagai nilai persen (%). Syarat kadar air yang baik adala kurang dari 10% (Hita et al. , 2021; DepKes RI, 2008).  Perhitungan kadar air = bobot awal-bobot akhir/bobot awal x 100% (DepKes RI, 2000);.

## Skrining Senyawa Aktif
1. Uji Senyawa Alkaloid : ekstrak daun sambiloto sebanyak 10 mg ditambahkan 5mL ammonia 25%, lalu ditambahkan 20mL kloroform. Jika terbentuk warna orange  dengan  pereaksi  dragendroff  atau  terbentuk  endapan  putih  dengan penambahan  pereaksi  mayer  berarti  ekstrak  mengandung  alkaloid  (Hita et al. , 2021; Kristanti et al. , 2008).
2. Uji Flavonoid : sebanyak 10 mg ekstrak daun sambiloto ditambahkan serbuk magnesium  0,1  mg  dan  0,4mL  amil  alkohol  dan  4mL  alkohol  kemudian campuran  dikocok.  Reaksi  positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna merah, kuning atau jingga. (Hita et al. , 2021; Kristanti et al. , 2008).
3. Uji Saponin: Saponin dideteksi dengan  uji busa dalam air panas. Busa yang stabil  akan  terus  terlihat  selama  5  menit  dan  tidak  hilang  dengan penambahan 1 tetes HCl 2 N menunjukkan adanya saponin  (Hita et al. , 2021;
Kristanti et al. , 2008).
4. Uji  Tanin:  2  gram  ekstrak  daun  sambiloto  dilarutkan  dengan  air  lalu direaksikan dengan larutan besi (III) klorida 10%, jika terjadi warna biru tua atau hitam kehijauan menunjukkan adanya tannin (Hita et al. , 2021; Kristanti et al. , 2008).
5. Uji  Triterpenoid:  sampel  yang  sudah  halus  dicampurkan  dengan  1  ml aquades  dicampur  dengan  2  ml  kloroform  dan  3  ml  asam  sulfat. Terbentuknya warna merah kecoklatan pada antar permukaan menunjukkan adanya triterpenoid. (Hita et al. , 2021; Kristanti et al. , 2008).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Bakteri Propionibacterium acnes diinokulasi pada media Muller Hinton Agar (MHA) dengan mengusapkan suspensi bakteri standar kekeruhan 0,5 McFarland menggunakan  lidi  kapas  steril.  kertas  cakram  diteteskan  larutan  uji  (25%, 50%, 75%  dan  100%)  dan  larutan  kontrol  (positif  dan  negatif)  sebanyak  20  µL  dan didiamkan selama ± 15 menit. Kertas cakram diletakkan dan beri sedikit tekanan pada media dengan jarak kertas cakram antara satu dengan lainnya sebesar 3 cm dan dari tepi media sebesar 2 cm.  Kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24  -  48  jam  dalam  kondisi  anaerob.  Aktivitas  antibakteri  diamati  berdasarkan diameter  daerah  hambat  yang  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  zona  bening disekeliling  kertas  cakram  (Hita et  al. ,  2020).  Diameter  zona  hambat  diukur menggunakan jangka sorong. Dengan pengulangan dilakukan sebanyak 4 kali.

## Analisis Data
Data dari hasil pengujian konsentrasi ekstrak daun sambiloto ( Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees)  dibandingkan  dengan  diameter  zona  hambat pertumbuan  bakteri Propionicbacterium  acnes dianalisa  secara  statistik menggunakan  metode One  Way Anova  pada  program  SPSS  dengan menggunakan  tingkat  kepercayaan  95  %  atau  α  =  0,05.  Sebelum  dianalisis dengan  uji  ANOVA  dilakukan  uji  normalitas  dengan  uji Shapiro-Wilk dan  uji homogenitas dengan uji Levene. Jika data tersebar normal dan variansinya sama (p>0,05)  maka  dilanjutkan  dengan  uji  LSD  ( Least  Significantly  Different )  untuk mengetahui  kelompok  mana  saja  yang  berbeda  signifikan.  Hasil  uji One-way ANOVA dan LSD dikatakan signifikan apabila didapatkan nilai R<0,05 dengan tingkat kepercayaan 95% (Sopiyudin, 2011).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi  dilakukan  di  LIPI-UPT  Balai  Konservasi  Tumbuhan  Kebun Raya  “Eka  Karya”  Bedugul  pada  Bulan  Maret  Tahun  2020 .  Berdasarkan  data determinasi,  bahan  tanaman  sambiloto  dalam  penelitian  ini  memiliki  nama spesies Andrographis paniculatan (Burm.f.) Nees. Dari hasil penelitian yang telah dilakukan  dengan  metode  ekstraksi  maserasi  pada  daun  sambiloto menggunakan etanol  sebagai pelarut didapatkan nilai persen rendemen adalah 6 %b/v. Besar kecilnya nilai rendemen menunjukkan keefektifan proses ekstraksi, efektifitas  proses  ekstraksi  dipengaruhi  oleh  jenis  pelarut  yang  digunakan sebagai  penyari,  ukuran  partikel,  metode  ekstraksi  dan  lama  waktu  ekstraksi. Semakin banyak rendemen yang dihasilkan maka semakin banyak kemungkinan zat  aktif  yang  diinginkan  tersari  dalam  pelarut  yang  digunakan.  Secara organoleptis ekstrak daun sambiloto memiliki bentuk ekstrak kental, warna hijau kehitaman, bau khas daun sambiloto dan rasa pahit. Hasil uji kadar air ekstrak etanol  96%  daun  sambiloto  adalah  sebesar  3,269±0,541%.  Nilai  kadar  air  ini sesuai  dengan  persyaratan  ekstrak  kental  yang  baik  yaitu  tidak  melewati  10% (Hita et al. , 2020).
Gambar 1. Diameter zona hambat pada sampel kontrol dan ekstrak daun sambiloto ( Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees)
Tabel 1. Hasil Skrining Senyawa Aktif Parameter Pereaksi Sampel Ekstrak Etanol Daun Sambiloto Perubahan yang terjadi Alkaloid Mayer Dragendrof + + Terbentuk endapan berwarna putih Terbentuk warna orange Flavonoid HCl pekat + Terbentuk warna merah kekuningan Terpenoid Kloroform + asam sulfat + Terbentuk warna ungu kemerahan Saponin Aquadest + Terbentuk busa yang stabil Tanin FeCl 3 1% + Warna hitam kehijauan

## Tabel 2. Hasil pengukuran diameter zona hambat
Perlakuan R1 (mm) R2 (mm) R3 (mm) R4 (mm) Mean ± SD (mm) Kekuatan aktivitas antibakteri Kontrol + 23,43 25,26 24,1 25,25 24,51 ± 0.90  Sangat kuat Kontrol - 0 0 0 0 0 ± 0 - 25% 5,95 7,21 7,98 8,25 7,34 ± 1.03 Sedang 50% 10,01 9,18 7,94 8,46 8,89 ± 0.89 Sedang 75% 10,80 11,06 11,36 11,84 11,26 ± 0.44 Kuat 100% 15,19 15,63 17,25 18,01 16,52 ± 1.33 Kuat
Keterangan : R1: Replikasi 1; R2 : Replikasi 2; R3 : Replikasi 3; R4 : Replikasi 4
Hasil  uji  skrining  fitokimia  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  96%  daun sambiloto  secara  kualitatif  mengandung  metabolit  sekunder  yaitu  flavonoid, alkaloid,  tanin,  triterpenoid dan  saponin  (Tabel  1.).  Pada  pengukuran diameter zona  hambat  ekstrak  etanol  96%  daun  sambiloto ( Andrographis  paniculata (Burm.f.)  Nees) terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes ATCC  11827,  hasil menunjukkan terdapat zona hambat yang terbentuk disekitar paper disck Gambar 1 . Hasil pengukuram dapat dilihat pada Table 2.
Berdasarkan  hasil  analisis  statistika  menggunakan  uji Shapiro-Wilk dan Levenne test , menunjukkan data memiliki distribusi normal dan sebaran yang homogen dengan  nilai  p  >  0,05.  Analisis  selanjutnya  adalah  uji One  Way ANOVA, didapatkan  nilai  signifikansi  sebesar  0,000  <  0,05  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa rata-rata kelima data konsentrasi 100%, 75%, 50%, 25% dan kontrol positif tersebut  memiliki  perbedaan  signifikan  secara  keseluruhan.  Dari  hasil  uji Post Hoc Test dengan LSD dapat disimpulkan bahwa antar masing-masing kelompok memiliki perbedaan yang bermakna dengan nilai p < 0,05.
Uji aktivitas antibakteri dengan metode difusi bertujuan untuk mengetahui kepekaan suatu mikroorganisme terhadap zat antibakteri tertentu yang ditandai dengan  terbentuknya zona  bening  disekitar paper  disk (Hita et  al. ,  2021).  Dalam penelitian  ini  digunakan  dua  kontrol  untuk  membandingkan  hasil  uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  96%  daun  sambiloto,  yaitu  gel  klindamisin  (Clinium 1%)  sebagai  kontrol  positif  dan  aquadest  sebagai  kontrol  negatif.  Klindamisin digunakan  sebagai  kontrol  positif  karena  mempunyai  aktivitas  sebagai bakteriostatik  dan  bakterisal  tergantung  pada  konsentrasi  obat,  tempat  infeksi dan  organisme  penyebab  infeksi.  Berdasarkan  spektrumnya  klindamisin termasuk  golongan  antibiotik  berspektrum  sempit  atau  mempunyai  aktivitas sempit  yang  bekerja  hanya  terhadap  bakteri  gram  positif  (Pratiwi,  2008). Aquadest  digunakan  sebagai  kontrol  negatif  karena  tidak  mempunyai  aktifitas antibakteri  (Indarto et  al. ,  2019).  Konsentrasi  sampel  ekstrak daun  sambiloto  25 dan 50 %b/v memiliki aktivitas antibakteri sedang, sedangkan untuk konsentrasi 75  dan  100  %b/v  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  kuat  terhadap pertumbuhan  bakteri Propionibacterium  acnes .  Respon  hambat  pertumbuhan bakteri  dapat  diklasifikasikan  menjadi  4  kategori  yaitu,  sangat  kuat  jika menghasilkan diameter  zona hambat ≥20 mm, aktivitas kuat jika menghasilkan diameter zona  hambat 10-20  mm, aktivitas  sedang  jika memiliki  diameter zona hambat  5-10  mm dan  aktivitas  lemah  jika menghasilkan diameter zona  hambat ≤5  mm (Jannata et  al. ,  2014).  Hal  ini  terjadi  karena  semakin  meningkatnya konsentrasi ekstrak maka kandungan senyawa yang bersifat antibakteri semakin banyak sehingga daya hambat terhadap bakteri akan semakin besar (Nugroho et al. , 2016).
Penghambatan  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium  acnes oleh  ekstrak etanol  96%  daun  sambiloto  diduga  karena  kandungan  senyawa  kimia  yang terdapat  pada  daun  sambiloto yaitu  flavonoid,  tanin,  saponin,  triterpenoid  dan alkaloid.  Andrografolida  adalah  senyawa  golongan  terpenoid  yang  paling potensial  dan  banyak  terkandung  di  dalam  sambiloto  (Hossain et  al. ,  2021).
Senyawa  ini  memliki  banyak  sekali  aktivitas  dalam  berdasarkan  penelitian- penelitian  terbaru,  diantaranya  memiliki  potensi  yang  sangat  bagus  dalam menghambat bakteri gram positif dan negatif (Banerjee et al. , 2017; Mishra et al. , 2009).  Sahalan  et  al.  pada  2007  menambahkan  bahwa  ekstrak  daun  sambiloto menghasilkan potensi yang lebih besar dalam menghambat bakteri gram positif dibandingkan dengan bakteri gram negatif.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  96%  daun  sambiloto  ( Andrographis  panuculata (Burm.f.) Nees)  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium  acnes dimana  kategori  aktivitas  antibakteri  yang  kuat didapatkan  pada  sampel  konsentrasi  75  dan  100  %b/v  dengan  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  yaitu  11,26±0.44  mm  dan  16,52  ±  1.33  mm.  Terdapat perbedaan  bermakna  pada  analisis  statistik One-Way  ANOVA pada  hasil diameter zona hambat antara kelompok kontrol dengan ekstrak dengan nilai p < 0,05.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Hoqail, I. A. 2003. Knowledge, Beliefs and Perception of Youth Toward Acne Vulgaris. Saudi Med J 24 (7): 765-768
Banerjee,  M.,  Moulick,  S.,  Bhattacharya, K.K.,  Parai, D.,  Chattopadhyay,  S., and Mukherjee,  S.K.  2017.  Attenuation  of Pseudomonas  aeruginosa quorum sensing,  virulence  and  biofilm  formation  by  extracts  of Andrographis paniculata . Microb. Pathog 113: 85-93
Chomnawang,  M.  T.,  Suvimol,  S.,  Veena,  S.N.,  and  Wandee,  G.  2007.  Effect  of Garcinia  mangostana  on  Inflammation  Caused  by Propionibacterium  acnes . Fitoterapia 78 (6): 401-408
Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan
Departemen  Kesehatan  RI.  2008. Farmakope  Herbal  Indonesia .  Jakarta:  Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan
Harahap, M. 2002. Ilmu Penyakit Kulit. Jakarta: Hipokrates
Hita,  I.P.G.A.P.,  Arimbawa,  P.E.,  and  Suryaningsih,  N.P.A.,  2021. Characterization and Screening Active Phytochemical Compounds of 70% Ethanol  Extract  of  Mahogany  Seed  ( Swietenia  mahagoni Jacq.), Ad- Dawaa’ Journal of Pharmaceutical Sciences 4 (1): 1-8
Hita,  I.P.G.A.P.,  Arimbawa,  P.E.,  Windydaca,  D.B.P.,  2020.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  70%  Daun  Binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.) Steenis) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus . MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan 9 (2): 49-54
Hossain,  S.,  Urbi,  Z.,  Karuniawati,  H.,  Mohiuddin,  R.B.,  Moh,  Q.A.,  Allzrag, A.M.M.,  Ming,  L.C.,  Pagano,  E.,  and  Capasso,  R.  2021. Andrographis paniculata (Burm. f.) Wall. ex Nees: An Updated Review of Phytochemistry, Antimicrobial Pharmacology, and Clinical Safety and Efficacy. Life 11: 348
Indarto,  Narulita,  W.,  Anggoro,  B.  S.,  dan  Novitasari,  A.  2019.  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Binahong Terhdap Propionibacterium acnes. Jurnal
Tadris Biologi 10 (1) : 67-78
Jannata, Rabbani, H., Achmad, G., dan Tantin, E. 2014. Daya Antibakteri Ekstrak Kulit  Apel  Manalagi  ( Malus  sylvestris Mill.)  Terhadap  Pertumbuhan Streptococcus mutans . e-Jurnal Pustaka Kesehatan 2 (1): 23-28
Kristanti,  A.  N.,  Aminah,  N.  S.,  Tanjung,  M.,  dan  Kurniadi,  B.  2008. Buku  Ajar Fitokimia . Surabaya: Airlangga University Press
Li, X., Yuan, K., Zhu, Q., Lu, Q., Jiang, H., Zhu, M., Huang, G., and Xu, A. 2019. Andrographolide  Ameliorates  Rheumatoid  Arthritis  by  Regulating  the Apoptosis-NETosis Balance of Neutrophils. Int. J. Mol. Sci 20: 5035
Mishra,  U.S.,  Mishra,  A.,  Kumari,  R.,  Murthy,  P.N.,  and  Naik,  B.S.  2009. Antibacterial Activity of Ethanol Extract of Andrographis paniculata . Indian J.
Pharm. Sci 71: 436-438
Mussard,  E.,  Jousselin,  S.,  Cesaro,  A.,  Legrain,  B.,  Lespessailles,  E.,  Esteve,  E., Berteina-Raboin,  S.,  and  Toumi,  H.  2020. Andrographis  paniculata and  Its Bioactive  Diterpenoids  Against  Inflammation  and  Oxidative  Stress  in Keratinocytes. Antioxidants 9: 530
Nugroho,  A.,  Rahardianingtyas,  E.,  Putro,  D.,  dan  Wianto,  R.  2016.  Pengaruh
Ekstrak  Daun  Sambiloto (Andrographis  paniculata Ness.)  Terhadap  Daya Bunuh Bakteri Leptospira Sp. Media litbangkes 26 (2): 77-84 Pratiwi, S.T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: EGC
Rajanna, M., Bharathi, B., Shivakumar, B.R., Deepak, M., Prashanth, D.,
Prabakaran, D., Vijayabhaskar, T., and Arun, B. 2021. Immunomodulatory effects of Andrographis paniculata extract in healthy adults e An open-label study. Journal of Ayurveda and Integrative Medicine 12: 529-534
Sahalan, A.Z., Sulaiman, N., Mohammed, N., Ambia, K.M., and Lian, H.H. 2007. Antibacterial  activity  of Andrographis  paniculata and Euphorbia  hirta methanol extracts. J. Sains Kesihat. Malays. 5: 1-8
Sopiyudin,  D.  2011. Statistika  Untuk  Kedokteran  dan  Kesehatan. Jakarta:  Salemba Medika
Susanto, R.C. dan Ari, G.A.M.M. 2013. Penyakit Kulit Dan Kelamin . Yogyakarta : Nuha Medika
Tan,  H.H.,  A.W.H.  Tan.,  T.  Barkham.,  X.  Y.  Yan.,  M.  Zhu.  2007.  Community Based Study of Acne Vulgaris in Adolescents in Singapore. British Journal of Dermatology 157 (3): 547-551