## BIOSPECIES
ISSN : 19790902 E-ISSN : 2503-0426 DOI: 10.22437/biospecies.v16i1.21096
AKTIVITAS EKOENZIM NANAS ( Ananas comosus L. Merr.) Var. QUEEN SEBAGAI ANTIMIKOSIS DERMATOFITA ( Trichophyton rubrum )
Ecoenzyme Activity of Queen Variety Pineapple (Ananas comosus L. Merr.) as Antimycosis Dermatophytes (Trichophyton rubrum)
Saroci Dorratul Zahira 1 , Mahya Ihsan 2 , Hasna Ul Maritsa 3
1, 2,3 Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Jambi
*Email: zahirasarocidoratul@gmail.com
Ecoenzyme is a type of product made from fermented fruit/vegetable waste that can be used as an antimycosis. chemical compounds and acetic acid has the ability as an antimicrobial. Trichophyton rubrum is a type of dermatophyte fungus that can cause chronic dermatophysis. This  fungus  is  very  easy  to  grow  in  humid  conditions.    The  purpose  of  this  study  was  to determine  the  ability  of  pineapple  ecoenzymes  from  Tangkit  as  antimycosis  against Trichophyton rubrum fungus, to determine the antimycosis activity of pineapple ecoenzymes from  Tangkit  in  inhibiting  T.  rubrum  fungi  and  to  determine  the  content  of  compounds  in pineapple ecoenzymes from Tangkit. The test of the inhibition of this ecoenzyme was carried out  by  the  disc  diffusion  method.  The  treatments  in  the  test  were  positive  control (ketoconazole), negative control (aquadest), and ecoenzyme concentrations of 50%, 75% and 100%. Data analysis used ANNOVA and continued with Duncan's test. The results showed that  the  ecoenzyme  could  be  used  as  an  antimycotic  against  T.  rubrum.  50%  ecoenzyme concentration was the best test concentration in inhibiting the growth of T. rubrum with a large inhibition zone formed of 14,822. The compounds contained in the ecoenzyme are tannins, saponins and bromelain
Keywods : Trichophyton  Rubrum,    Pineapple  Ecoenzyme,  Antimycosis,    Tangkit  Pineapple, Dermatophytes
Ekoenzim  adalah  jenis  produk  yang  terbuat  dari  limbah  dari  buah/sayur  yang  difermentasi yang dapat digunakan sebagai antimikosis. Trichophyton rubrum merupakan salah satu jenis jamur  dermatofita  yang  dapat  menyebabkan  dermatofisis  kronis.  Jamur  ini  sangat  mudah tumbuh pada kondisi yang lembab. Kandungan senyawa kimia dan asam asetatnya memiliki kemampuan  sebagai  antimikroorganisme.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  Mengetahui kemampuan ekoenzim nanas dari Tangkit sebagai antimikosis terhadap jamur Trichophyton rubrum,  mengetahui  nilai  aktivitas  antimikosis  ekoenzim  nanas  dari  Tangkit  dalam menghambat  jamur  Trichophyton  rubrum  dan  mengetahui  kandungan  senyawa    pada ekoenzim nanas dari Tangkit. Pengujian daya hambat ekoenzim ini dilakukan dengan metode difusi  cakram.  Perlakuan  dalam  uji  yaitu  kontrol  positif  (ketoconazole),  kontrol  negatif (akuades),  serta  konsentrasi  ekoenzim  50%,  75%  dan  100%.  Analisis  data  menggunakan ANNOVA  dan  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan.Hasil  menunjukkan  bahwa  ekoenzim  dapat digunakan sebagai antimikosis terhadap T. rubrum. Konsentrasi ekoenzim 50% merupakan konsentrasi  uji  terbaik  dalam  menghambat  pertumbuhan  T.  rubrum  dengan  besar  zona hambat  yang  terbentuk  yaitu  14,822.  Senyawa  yang  terdapat  pada  ekoenzim  yaitu  tannin, saponin dan bromelin.
Kata  Kunci : Trichophyton  rubrum,  Ekoenzim  Nanas,  Antimikosis,  Nanas  Tangkit., Dermatofita
Abstract
Abstrak

## PENDAHULUAN
Buah  nanas  ( Ananas  comosus L.  Merr.) merupakan salah satu tanaman buah yang sudah lama  dikenal  luas  oleh  masyarakat.  Tanaman  ini cukup  mudah  untuk  dibudidayakan,  dan  iklim Indonesia  pun  ternyata  sangat  cocok  untuknya (Astoko,  2019).  Salah  satu  provinsi  di  Indonesia yang  memiliki  produksi  nanas  tertinggi  yaitu berada  di  Provinsi  Jambi,  yang  berada  di Kabupaten  Muaro  Jambi.    Desa  Tangkit  Baru dikenal  sebagai  daerah  produksi  nanas  terbesar di Kecamatan Sungai Gelam. Daerah ini memiliki wilayah  sebesar  1.611  Ha  (Nurfathiyah et  al ., 2018). Seluas ±1200 Ha diantaranya merupakan area perkebunan nanas, sehingga dapat dikatakan bahwa lebih dari setengah luas wilayah desa  Tangkit  Baru  menjadi  lahan  perkebunan nanas.
Ekoenzim merupakan enzim ramah lingkungan yang dapat menggantikan keberadaan enzim  komersial  yang  mahal  harganya.  Disebut ekoenzim karena dibuat dari bahan-bahan organik sisa  dari  buah-buahan  maupun  sayuran  seperti, kulit buah maupun potongan sayur yang sudah tak terpakai lagi (Rasit et al., 2019). Ekoenzim dapat digunakan  sebagai  cairan  pembersih  maupun desinfektan  dikarenakan  memiliki  kandungan alkohol  dan  juga  asam  asetat  dalam  cairannya yang diketahui mampu menghambat dan mematikan  mikroorganisme  patogen  (Rahayu et al ., 2021).
Indonesia  merupakan  Negara  yang  beriklim tropis  yang  memiliki  iklim  panas  dan  lembab, dengan  kondisi  iklim  tersebut  memberikan pengaruh  yang  besar  untuk  pertumbuhan  jamur, baik  itu  jamur  non-patogen  maupun  jamur patogen.  Jenis  jamur  patogen  yang  banyak ditemukan di Indonesia salah satunya jamur yang dapat  menginfeksi  kulit.  Salah  satu  penyakit infeksi  jamur  ialah dermatofisis  yang  disebabkan oleh dermatofita. Dermatofita merupakan golongan  jamur  yang  mampu  mencerna  keratin dan  epidermis. Trichophyton  rubrum merupakan salah  satu  jenis  jamur  dermatofita  yang  sering menyebabkan  dermatofitosis  kronis  (Khusnul et al., 2017).
Penelitian Ramadani et al , (2022), menyatakan  bahwa  ekoenzim  nanas  dapat digunakan sebagai antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Prapionibacterium acnes. Hasilnya, dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan konsentrasi masing-masing 50%,75% dan 100%. Adapun  konsentrasi  yang  paling  efektif  pada S. aureus dengan  konsetrasi  100%.  Kontrol  positif
digunakan Itrakonazole 8µg/gram karena merupakan  antijamur  yang  sensitive  terhadap jamur  golongan  dermatofita.  Berdasarkan  uraian diatas maka perlu dilakukan penelitian mengenai aktivitas ekoenzim nanas var. queen yang diambil dari  tangkit  terhadap  jamur  dermatofita  jenis Trichophyton rubrum

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Tempat
Penelitian  tentang  “Aktivitas  Ekoenzim  Nanas Varietas Tangkit Sebagai Antimikosis Dermatofita ( Trichophyton  rubrum) ”  akan  dilaksanakan  pada bulan  Juni  sampai  Agustus  2022.  Penelitian  ini akan  dilakukan  di  Laboratorium  Agroindustri Tanaman  Obat  dan  Bioteknologi  Fakultas  Sains dan Teknologi Universitas Jambi

## Bahan dan peralatan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah ekoenzim nanas varietas tangkit yang diambil dari desa  Tangkit  Baru,  media  SDA  (Sabourad Dextrose Agar), biakan dan suspensi Trichophyton rubrum yang diambil dari Laboratorium  Mikrobiologi  Universitas  Indonesia, antifungi  Ketoconazole,  NaCl,  aquades,  kertas cakram yang berukuran 0,5 cm, alkohol 70%, HCl 2N,  H 2 SO 4, FeCl3  1%,  reagen  Dragendorff, NaOH,  Penolftalein  1%,  reagen  Bouchardat, reagen Mayer dan Ninhidrin.
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah cawan petri, bunsen, autoklaf, jarum ose, tabung  reaksi,  beaker  glass,  Erlenmeyer,  hot plate,  inkubator,  shaker,  tabung  reaksi,  cawan porselin,  stirrer,  statif,  biuret,  pinset,  aluminium foil, mikropipet, alat tulis, dan kamera hp.

## Peremajaan Trichophyton rubrum
Trichophyton  rubrum diremajakan  dengan  cara mengambil  satu  jarum  inokulasi  dan  digores kedalam  media  SDA  pada  cawan  petri  dan diinkubasi  suhu  25ºC  selama  3x24  jam  (Melinda et al ., 2019).

## Persiapan suspense biakan jamur
Jamur yang akan diuji harus diremajakan terlebih dahulu  dengan  cara  mengambil  kultur  jamur menggunakan  jarum  ose  (4-5  kali)  yang dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  berisi  NaCl sebanyak  6  ml  Uji  aktivitas  anti  fungi  Ekoenzim nanas  terhadap  jamur T.  rubrum dengan menggunakan Metode Cakram Kertas
Penentuan aktivitas antimikosis T. rubrum dilakukan dengan metode apus Kirby-Bauer dengan menggunakan kertas cakram.
Metode ini dilakukan dengan prosedur yaitu media agar  SDA  sebanyak  20  ml  dituangkan  masing- masing kedalam cawan petri dan dibiarkan hingga padat, setelah itu ditambahkan 0,1 ml inoculum T. rubrum. Permukaan media diapus dengan cotton bud hingga tersebar merata. Kertas cakram steril yang berukuran 0,5 cm dimasukkan pada beaker glass yang berisi ekoenzim dengan berbagai taraf konsentrasi  dan  dibiarkan  selama  15  menit. Setelah  itu,  kertas  cakram  diletakkan  di  atas lempeng  agar  menggunakan  pinset.  Masing- masing  cawan  petri  ini  diinkubasi  selama  1x24 jam pada suhu 37ºC (Alfiah et al ., 2015). Pada uji ini  menggunakan  kontrol  positif  yaitu  antifungi Ketoconazole  2%  dan  kontrol  negatif  yaitu akuades. Zona hambat pertumbuhan di sekeliling kertas  cakram  menunjukkan  uji  positif  dan diameter  zona  hambat  diukur  menggunakan mistar.  Untuk  klasifikasi  respon  hambatan pertumbuhan jamur dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 4. Klasifikasi respon hambatan pertumbuhan jamur (Halawa et al., 2019).
Diameter Zona Bening Respon Hambatan Pertumbuhan >2 Cm Sangat Kuat 1,6-2 Cm Kuat 1-1,5 Cm Sedang <1 Cm Lemah

## Uji Identifikasi Asam Asetat dengan Metode Titrasi Asam
Pengukuran  kadar  asam  asetat  pada ekoenzim  dilakukan  dengan  cara  titrasi, masing-masing  sampel  ecoenzyme  diambil sebanyak  2  ml  kemudian  dipindahkan  ke dalam  erlenmeyer.  Sebelum  dititrasi  terlebih dahulu  diencerkan  dengan  menambahkan  8 ml  akuades,  selanjutnya  diberi  Indikator  PP 1%  sebanyak  2  tetes,  sampel  siap  dititrasi dengan  NaOH  0,1  N.  Titrasi  sampai  terjadi perubahan  warna  tepat  pada  titik  akhir ekuivalen  pada  pH  8,0-9,6  (Saputra et  al ., 2015).

## Perhitungan Asam Asetat dengan Metode Titrasi Asam
Untuk  menghitung  kadar  asam  asetat digunakan persamaan sebagai berikut (Saputra et al. 2015).
𝐊𝐀𝐀 = 𝐕 𝐍𝐚𝐎𝐇 𝐗 𝐍 𝐍𝐚𝐎𝐇 𝐗 𝐁𝐄 𝐀𝐬𝐚𝐦 𝐀𝐬𝐞𝐭𝐚𝐭 𝐗 𝐏𝐞𝐧𝐠𝐞𝐧𝐜𝐞𝐫𝐚𝐧
𝑴 𝒔𝒂𝒎𝒑𝒆𝒍 𝒙 𝟏𝟎𝟎𝟎
Keterangan : KAA = Kadar Asam Asetat, N NaOH = Molaritas NaOH  (0,1N),  BE  Asam  Asetat=  Massa  molar  60g.mol, Pengenceran = Faktor pengenceran, M Sampel = Konsentrasi sampel

## Identifikasi senyawa kimia pada ekoenzim
Metode  identifikasi  mengacu  terdiri  menjadi beberapa uji diantaranya sebagai berikut :

## a.  Uji flavonoid
1  ml  ekoenzim  direaksikan  dengan  2  mg  bubuk magnesium  (Mg)  dan  3  tetes  HCl  37%.  Hasil positif  diandai  dengan  adanya  perubahan  warna menjadi  merah,  kuning  dan  jingga/oranye (Ramadani et al., 2022).
Uji tannin 1  ml  ekoenzim  direaksikan  dengan  5  tetes  FeCl 1%.  Hasil  positif  ditandai  dengan  terjadinya perubahan  warna  menjadi  biru  kehitaman  atau hijau kehitaman (Ramadani et al., 2022). b. Uji saponin 1  ml  ekoenzim  dimasukkan  kedalam  tabung reaksi  ditambahkan  20  ml  air  panas,  kemudian kocok  kuat-kuat  selama  10  detik.  Positif mengandung saponin jika terbentuk busa setinggi 1-10  cm  selama  tidak  kurang  dari  10  menit  dan penambahan  1  tetes  HCl  2N  busa  tidak  hilang (Maharani et al ., 2021). c.  Uji alkaloid 1  ml  ekoenzim  dimasukkan  kedalam  tabung reaksi  ditambahkan  20  ml  air  panas  kemudian didinginkan  dan  disaring  dan  diambil  filtratnya, kemudian  dimasukkan  kedalam  3  tabung  reaksi yang  berbeda  yang  mana  masing-masing sebanyak  2  ml,  lalu  ditambahkan  1  ml  HCl  2N. tabung  l  ditambahkan  3  tetes  reagen  Mayer, kemudian  hasil  positif  apabila  larutan  terbentuk endapan  putih.  Tabung  II  ditambahkan  3  tetes reagen Bouchardat, kemudian hasil positif apabila larutan  terbentuk  endapan  jingga  hingga  coklat. Tabung III ditambahkan 3 tetes reagen Dragendorff, kemudian hasil positif apabila larutan terbentuk endapan jingga (Maharani et al ., 2021). d.  Uji bromelin
0,5  ml  ekoenzim  dilarutkan  dengan  10  ml  air panas  pada  cawan  porselin,  kemudian  ditunggu dingin.  Ditambah  larutan  ninhidrin.  Campuran dipanaskan  pada  suhu  100ºC  selama  15  menit sehingga muncul warna ungu yang menandakan terjadinya adanya reaksi dengan larutan ninhidrin. Bromelin positif jika terjadi warna ungu (Maharani et al ., 2021)

## Analisis Data
Pengamatan hasil aktivitas antimikroba ekoenzim dalam  menghambat  pertumbuhan T.  rubrum dilakukan  dengan  megukur  diameter  daerah hambat  (DDH).  Data  diameter  daerah  hambat
kemudian dianalisis menggunakan menggunakan uji Analisis of Varian (ANNOVA).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Aktivitas Daya Hambat Ekoenzim Nanas Var. Queen Terhadap Trichophyton rubrum
Hasil  uji  zona  hambat  yang  dihasilkan  ekoenzim nanas  var.  queen  yang  diambil  dari  tangkit terhadap jamur Trichophyton rubrum menunjukkan  bahwa  terbentuknya  zona  bening. Hasil  uji  aktivitas  antimikroba  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 8. Aktivitas Daya Hambat Ekoenzim Var. Queen (A), Koloni Trichophyton rubrum (B), Daya Hambat Ekstrak (E1) 50%, (E2) 75%, (E3) 100%, (E4) Kontrol Positif, (E5) Kontrol Negatif
Dari  gambar  diatas  dapat  diketahui  bahwa ekoenzim  nanas  var.  queen  dari  Tangkit  dapat menghambat Trichophyton rubrum yang  ditandai dengan  terbentuknya  zona  hambat  disekitar kertas  cakram.  Dan  dari  hasil  pengukuran  zona hambat yang terbentuk diketahui bahwa semakin tinggi  konsentrasi  ekoenzim  yang  digunakan, semakin kecil zona hambat yang terbentuk. Hal ini dapat  dilihat  pada  konsentrasi  ekoenzim  terkecil yaitu 50%, dapat membentuk zona hambat yang terbesar  yaitu  dengan  rata-rata  14,822  mm. Sedangkan  pada  konsentrasi  ekoenzim  75% membentuk  zona  hambat  yang  lebih  kecil  yaitu sebesar  8,025  dan  pada  konsentrasi  100%  tidak terbentuk zona hambat. Hasil yang didapatkan ini
tidak  berbanding  lurus  dengan  konsentrasi  yang digunakan. Tidak terbentuknya zona hambat/kecilnya zona hambat yang terbentuk.
Mekanisme  penghambatan  pertumbuhan jamur Trichophyton  rubrum melalui  perusakan permeabelitas membran sel. Kerusakan membran sel  dapat  menyebabkan  kebocoran  sehingga kompenen-kompenen penting di dalam sel seperti protein,  asam  nukleat,  nukleotida  dan  lain-lain dapat  mengalir  keluar.  Hal  ini  menyebabkan permeabilitas  sel  terganggu  sehingga  sel  tidak dapat melakukan aktivitas hidup dan pertumbuhannya  terhambat  atau  bahkan  mati (Sullistianingsih  dan  Mimi.,  2018).  Terbentuknya zona  hambat  oleh  ekoenzim  ini  juga  sejalan dengan  adanya  kandungan  senyawa  kimia  yang ada  pada  ekoenzim  nanas.  Adanya  kandungan kimia  seperti  tannin  pada  ekoenzim  ini  dapat membentuk kompleks protein fenol dengan ikatan yang  lemah  sehingga  segera  terurai  kemudian merusak membran sitoplasma dan menyebabkan kebocoran badan sel (Ramadhani et al 2022).

## Kadar Asam Asetat Ekoenzim Nanas
Berdasarkan data hasil penelitian, diperoleh hasil kadar  asam  asetat  pada  ekoenzim  sebesar 4,050%.  Hasil  ini  dapat  dilihat  dari  perhitungan kadar asam asetat dengan menggunakan rumus. Perhitungan kadar asam asetat pada ekoenzim ini menggunakan persamaan dari Kusmawati (2017). Pada uji kadar asam asetat ini digunakan indikator berupa fenolftalein 1% dan NaOH 0,1N. Uji kadar asam  asetat  ini  merupakan  jenis  uji  dari  asam lemah ke basa kuat sehingga digunakan indikator fenolftalein  1%  .  Hal  ini  juga  disebutkan  pada literatur senyawa fenolftalein merupakan indikator asam  lemah-basa  kuat,  mengalami  perubahan kesetimbangan ion yang diikuti perubahan warna dari  tidak  berwarna  pada  kondisi  asam  menjadi merah pada kondisi basa. Dari reaksi kesetimbangan, diketahui bahwa senyawa indikator  berada  dalam  bentuk  ion  yang  dapat menghasilkan perubahan warna merah. Perubahan warna tersebut karena senyawa fenol dalam bentuk ion  mengalami delokalisasi membentuk quinoid (Nuryanti et al ., 2010).
Asam  asetat  pada  ekoenzim  ini  terbentuk pada proses fermentasi ekoenzim selama 3 bulan. Asam asetat ini dihasilkan dari proses metabolisme bakteri secara alami terdapat dalam sisa  buah  dan  sayur.  Fungi  dan  beberapa  jenis bakteri  menghasilkan  alkohol  dalam  proses fermentasi,  sedangkan  kebanyakan  dari  bakteri menghasilkan  asam  asetat  (Viza.,  2022).  Dalam penelitian  Rohmah et  al (2020),  menggunakan kulit  nanas  sebagai  bahan  baku  ekoenzim  ini
menghasilkan produk berupa alkohol, asan asetat dan  asam  laktat.  Hal  ini  dikarenakan  nanas mengandung  senyawa  organik  terutama  glukosa atau pati yang dapat digunakan sebagai substrat dalam proses fermentasi alkohol. proses fermentasi glukosa dirombak untuk menghasilkan asam  piruvat.  Asam  piruvat  dalam  kondisi anaerob akan mengalami penguraian oleh piruvat dekarbosilase  menjadi  asetaldehid,  selanjutnya asetaldehid  diubah  oleh  alkohol  dehydrogenase menjadi  etanol  dan  karbondioksida,  dimana bakteri  Acetobacter  akan  merubah  alkohol menjadi  asetaldehid  dan  air,  yang  selanjutnya asetaldehid  akan  diubah  menjadi  asam  asetat (Atmanegara et  al .,  2015  dalam  Rohmah et  al .,2020).
Kandungan  asam  asetat  didalam  ekoenzim dapat  ditandai  dengan  adanya  bau  asam  khas yang  menyengat.  Hasil  fermentasi  ekoenzim nanas  var.  queen  yang  diambil  dari  tangkit memiliki bau asam menyengat serta warna kuning kecoklatan.  Hal  ini  sesuai  dengan  literatur  yang menyatakan  bahwa  produk  ekoenzim  dapat diproduksi  selama  tiga  bulan  yang  ditandai dengan  adanya  perubahan  warna  larutan  dari coklat gula aren menjadi coklat kekuningan serta bau  asam  khas  yang  segar.  Adanya  bau  asam khas  yang  segar  tersebut,  karena  produk ekoenzim  yang  dibuat  mengandung  gugus karboksilat  melalui  proses  esterifikasi  dan dihasilkan  hasil  akhir  asam  asetat  yang  mampu menekan  pertumbuhan  mikroorganisme  (Vika et al ., 2013).

## Identifikasi Senyawa Kimia pada Ekoenzim
Dari  uji  kandungan  senyawa  kimia  ini  diketahui bahwa ekoenzim nanas var. Queen yang diambil dari  daerah  tangkit  baru  mengandung  flavonoid, tannin dan saponin. Uji kandungan senyawa kimia ini  sengaja  dilakukan  karena  pada  dasarnya nanas memiliki banyak jenis senyawa kimia. Kulit nanas    banyak    mengandung    enzim  bromelin. Kulit  nanas  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  yaitu  flavonoid,  alkaloid,  tannin  dan asteroid  (Jauriah et  al .,  2018).  Selain  itu  nanas juga mengandung senyawa saponin seperti yang dijelaskan  oleh  Novia et  al (2022).,  bahwa kandungan  saponin  pada  kulit  nanas  dapat menyebabkan  hemolisis  dan  eryptosis.  Pada  uji ini,  terdapat  terdapat  beberapa  uji  yang  hasilnya negatif.
Pada uji flavonoid, hasil uji positifnya berupa terjadinya  perubahan  warna  menjadi  merah, kuning  ataupun  jingga.  Namun  pada  uji  yang dilakukan tidak terjadi perubahan warna melainkan  terbentuknya  buih  ketika  dimasukkan
bubuk  Mg.  Flavonoid  memiliki  kandungan antioksidan,  antibakteri,  antivirus,  antiradang, antialergi  dan  antikanker.  Senyawa  flavonoid adalah  senyawa  yang  mengandung  C 15 terdiri atas  dua  anti  fenolat  yang  dihubungkan  dengan tiga satuan karbon (Nugraha et al ., 2017).
Pada uji tannin terjadi perubahan warna pada ekoenzim menjadi hijau kehitaman setelah ditetesi oleh  FeCl  1%  hal  ini  mengindikasikan  masih terdapat tannin pada ekoenzim. Tanin merupakan senyawa  yang  termasuk  dalam  golongan  fenol. Mekanisme kerja tanin sebagai antimikroba yaitu dengan menginaktivasi adhesi sel mikroba.
Pada  uji  saponin,  terbentuk  buih  yang  stabil pada tabung reaksi yang mengindikasikan bahwa terdapat  saponin  pada  ekoenzim.  Namun,  buih yang dihasilkan tidak banyak. Saponin merupakan bentuk  glikosida  dari  sapogenin      sehingga bersifat   polar. Senyawa  ini  dapat  menimbulkan busa  jika  dikocok dalam  air  yang  menunjukkan adanya glikosida  yang mempunyai  kemampuan membentuk    buih   dalam   air  yang     terhidrolisis menjadi   glukosa   dan senyawa lainnya (Reiza et al., 2019).    Toksisitas  saponin  terhadap  bakteri umumnya  terjadi  dengan  cara  merusak  protein pembentuk membran sel bakteri dan menurunkan permeabilitasnya. Kerusakan permukaan membran  berakibat  terjadinya  lisis  dan  kematian pada bakteri (Mahyuni dan Trirakhma., 2018).
Uji  alkaloid  dilakukan  dengan  3  cara menggunakan  jenis  reagen  yang  berbeda  dan tabung  yang  berbeda.  Hasilnya  tidak  terjadi perubahan warna pada ekoenzim yang mengindikasikan  tidak  adanya  alkaloid  pada ekoenzim.  Pada  pengujian  alkaloid  dilakukan penambahan HCl sebelum ditambahkan pereaksi karena  alkaloid  bersifat  basa  sehingga  diekstrak dengan pelarut yang mengandung asam (Illing et al ., 2017).
Uji  terakhir  yang  dilakukan  adalah  uji bromelin yang mana hasil positifnya menghasilkan warna ungu. Hasilnya adalah postif mengandung bromelin yang mana terdapat warna ungu  pada  cawan  yang  berisi  larutan  ekoenzim yang  mengindikasikan  bahwa  terdapat  enzim bromelin  pada  ekoenzim.  Kandungan    bromelin pada  nanas  dapat digunakan sebagai antiseptick mulut,  antibakteri,  antifungi  dan  desinfektan. Enzim bromelain menjadi asam amino (Rahmat et al .,  2016).  Enzim  bromelin  merupakan  enzim protease seperti halnya renin (renet), papain dan fisin yang mempunyai sifat menghidrolisis protein. Hidrolisis  yang  terjadi  dengan  enzim  protease adalah  putusnya  ikatan  peptida  dari  ikatan substrat,  di  mana  enzim  protease  bertugas
sebagai katalisator di dalam sel dan bersifat khas (Masri., 2013).
Dari  hasil  uji  kandungan  senyawa  kimia ekoenzim  yang  dilakukan  dapat  diketahui  bahwa kandungan  senyawa  kimia  ini  merupakan  salah satu faktor lemahnya zona bening yang dibentuk pada  uji  zona  bening.  Karena  dari  literatur  yang didapatkan bahwa  kandungan  senyawa  kimia  ini berperan  penting  dalam  merusak  struktur mikroba. Seperti yang diketahui bahwa membrane sel  bakteri  dan  fungi  itu  memiliki  struktur membrane  sitoplasma  yang  berbeda.  Membran sel  pada  jamur  mengandung  sterol  sedangkan pada bakteri tidak. Hal ini memungkinkan bahwa ekoenzim ini lebih berpengaruh nyata digunakan sebagai antibakteri dibandingkan dengan antimikosis  dikarenakan  penyusun  membran  sel bakteri  lebih    rentan  rusak  apabila  terkena senyawa kimia. Hal ini juga didukung oleh Nuryani dan Jhunnison (2016)., yang menyatakan bahwa membran  sel  bakteri  yang  tersusun  atas  protein dan lipid  sangat rentan terhadap zat kimia yang dapat menurunkan tegangan permukaan.
Kerusakan  membrane  sel  dapat  menyebabkan terganngunya  transport  nutrisi  (senyawa  ion) sehinnga  sel  bakteri  mengalami  kekurangan nutrisi yang diperlukan bagi pertumbuhannya

## KESIMPULAN
1.  Ekoenzim nanas var. queen yang diambil dari daerah Tangkit  memiliki  kemampuan  sebagai antimikosis terhadap jamur dermatofita Trichophyton rubrum
2.  Konsentrasi terbaik ekoenzim dalam menghambat T.  rubrum berturut-turut  adalah 50%;  75%  dan  100%  dengan  diameter  zona hambat tersebut adalah 10, 22 mm; 8, 022 mm dan 0 mm.
3.  Jenis  senyawa  kimia  yang  terdapat  pada ekoenzim nanas var. queen yang diambil dari Tangkit yaitu tannin, saponin dan bromelin

## DAFTAR PUSTAKA
Alfiah,  R,  R.,  Siti,  K  dan  Masnur,  T.  2015.
Efektivitas Ekstrak Metanol Daun Sembung
Rambat (Mikania micrantha Kunth) Terhadap  Pertumbuhan  Jamur Candida albicans. Jurnal Probiont. 4(1): 52-57. Astoko, E,P.2019. Konsep Pengembangan Agribisnis  Nanas  ( Ananas  comosus L.
Merr)  di  Kabupaten  Kediri  Provinsi  Jawa Timur. Jurnal Habitat . 30(3) : 111-122. Illing, I., Wulan, S dan Erfiana. 2017, Uji Fitokimia Ekstrak  Buah  Dengen. Jurnal  Dinamika . 8(1): 66-84.
Jauriah,  S.,  Mega,  I,P  dan  Yuliana.  2018.
Efektifitas  Ekstrak  Etanol  Kulit  Nanas
( Ananas  Comosus L.  Merr)  terhadap Trichophyton  mentaghrophytes.  Journal  of Pharmacy and Science. 1(2) : 1-9. Kusmawati, W. 2017. Analisis Kadar Asam Asetat
Dalam Media Limbah Fermentasi Biji Kakao Akibat Penambahan Konsentrasi Acetobacter  aceti dan  Waktu  Inkubasi. Jurnal Filsafat Sains, Teknologi dan Sosial Budaya . 23(1).
Maharani, N., Siti, A dan Desi, P. 2021. Formulasi Mouthwash  Ekstrak  Kulit  Buah  Nanas ( Ananas comosus (L.) Merr) dengan Variasi Konsentrasi  Gliserin  sebagai  Antibakteri Terhadap Streptococcus  mutans ATCC 25175. Journal of Pharmacy . 10 (2) : 8-19. Mahyuni,  S.  dan  Trirakhma,  S.  2018.  Kadar Saponin  Dan  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Daun  Fillicium  Decipens  (Wight  &  Arn.) Thwaites Terhadap Staphylococcus aureus ,  Escherichia  coli  Dan  Candida  albicans . Jurnal Ilmiah Farmasi . 8(2): 1-9.
Masri, M. 2014. Isolasi dan Pengukuran Aktivitas Enzim Bromelin dari Ekstrak Kasar Bonggol Nanas  ( Ananas  comosus )  pada  Variasi Suhu  dan  pH. Jurnal  Ilmiah  Biologi .  2(2)  : 119-125.
Melinda,  T.,  Assegaf,  S,N  dan  Natalia,D.  2019.
Aktivitas  Antijamur  Ekstrak  Etanol  Daun Kesum ( Polygonumm minus Huds.) Terhadap Jamur Trichophyton Mentagrophytes . 42(3): 48-56. NiNurfathiyah,  P.,  Jefri,  M  dan  Tugiyo.  A.  2018. Pengembangan Media Pemasaran (Website)  Produk  Pertanian  di  Desa Tangkit  Baru  Kecamatan  Sungai  Gelam Muaro Jambi. Jurnal Karya Abdi
Masyarakat . 2(2) : 112-124.
Novia., Fajar, N., Siti, N,N., Inarah, F., Pratiwi, A., Hadi,  K  Dan  Liza,  P.  2022.  Pengaruh Ekstrak  Kulit  Pisang  dan  Kulit  Nanas Terhadap  Aktivitas  Motorik  dan  Perilaku Tikus  Wistar. Jornal  of  Syifa  Science  And Clinical Research . 4(1 ).
Nugraha,  A,C.,  Agung,  T,  P  dan  Sri,  M.  2017. Isolasi,  Identifikasi,  Uji  Aktivitas  Senyawa Flavonoid  Sebagai  Antibakteri  dari  Daun Manga. Indonesian  Journal  of  Chemical Science . 6(2): 1-6.
Nuryani,  S  dan  Jhunnison.  2016.  Daya  Antifungi Infusa Daun Kenikir ( Cosmos Caudatus K.) Terhadap  Pertumbuhan  Jamur Candida albicans Secara In Vitro. Teknolab . 5(1):5- 11.
Nuryanti,  S.,  Sabirin,  M.,  Chairil,  A  Dan  Tri,  J,R. 2010.  Indicator  Titrasi  Asam  Basa  Dari Ekstrak  Bunga  Sepatu  ( Hibiscus  rosa sinensis L.). Jurnal Agritech. 30(3). Rahayu, M,R.., Nengah, I, M., and Yohannes, P,S. 2021.  Acceleration  of  Production  Naturan Desinfectan  from  the  Combination  of
EcoEnzyme Domestic Organic Waste and  Frangipani  Flowers  (Plumeria  alba). Journal of Sustainable Enviroment Agricultural 5(1): 15-21.
Rahmat, D., Dian, R, L., Liliek, N dan Meilda, A,B.
2016.  Peningkatan  Aktivitas  Antimikroba Ekstrak  Nanas  ( Ananas  comosus  L .  Merr) Dengan Pembentukan Nanaopartikel. Jurnal  Sains  Dan  Kesehatan.  1(5)  :  236- 244.
Ramadani, A,H., Rizkya, K, and Riska S. N. 2022. Antibacterial  Activity  of  Pineapple  Peel ( Ananas  Comosus )  Eco-Enzyme  Against Acne Bacteria ( Staphylococcus aureus and Prapionibacterium acnes). Indonesian Journal  Of  Chemical  Research .  9(3):  201- 207.
Rasit, N., Lim,H,F., and Wan ,A, W, A ,K, G.2019. production  and  Characterisation  of  Eco- Enzyme  Produce  from  Tomato  and OrangeWaste  and  Influence  on  The Aquaculture Sludge International Journal of Civil  Engineering  and  Technology. 10(3)  : 967-980.
Reiza,  I,  A.,  Laode,  R  dan  Febrina,  M.  2019. Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Kulit
Nanas (Ananas comosus L. Merr). Mulawarman Pharmacy Conference.
Rohmah,N,U., Andari, P,A Dan Endang, T, W, M. 2020. Organoleptic Test of the Ecoenzyme Pineapple  Honey  with  Variations  in  Water Content. Seminar Nasional Edusaintek.
Sulistianingsih,  E  Dan  Mimi,  S.  2018.  Efektivitas Air Rebusan dan Perasan Lengkuas Merah ( Alpinia  purpurata K.  Schum)  Dalam Menghambat  Pertumbuhan  Trichophyton Rubrum  Jamur  Penyebab  Kutu  Air  (Tinea Pedis). Jurnal Kesehatan. 9(3): 1-7. Vika, M., Andari, P,A Dan Endang, T,W,M. 2020.
Perbandingan Uji Organoleptic Pada Delapan Variable Produk Ekoenzim. Seminar Nasional Edusaintek.
Viza,  R,Y.  2022.  Uji  Organoleptik  Eco-Enzyme dari Limbah Kulit Buah. Jurnal Bioedusains . 5(1): 1-7