## Uji aktivitas antibiofilm ekstrak daun kirinyuh
( Chromolaena odorata l.) dari kawasan geotermal Ie Seum terhadap staphylococcus aureus
A ntibiofilm activity test of kirinyuh (chromolaena odorata l. ) leaves extract from  the geothermal area of Ie Seum against staphylococcus aureus
Berwi Fazri Pamudi 1 , Munira Munira 2 *, Muhammad Nasir 3

## Abstract
Background: Food is a basic human necessity for survival. The existence of food handlers provides an important role in maintaining food quality.  Food consumed must meet safety standards so as not to pose a health risk. So knowledge about personal hygiene and food sanitation is needed to be key in preventing the risk of contamination. Food handlers should gain increased knowledge and behavior through education to prevent health risks caused by lack of knowledge Objectives: This study aims to explore the influence of education related to hygiene and sanitation through the media of videos, posters, and educational mirrors on increasing knowledge and attitudes of food handlers.
Methods: This study uses the SLR method of special research design sourced from google scholar and, Pubmed from the last 10 years using inclusion and exclusion criteria in this study following the approach of Population / Problem, Intervention, Comparison Outcome and Study design type (PICOS).
Results: The results included three articles that assessed the effects of education using video communication media, posters,  and  educational  mirrors  on  improving  the  knowledge  and  attitudes  of  food  handlers.  The  installation  of personal  hygiene  posters  is  effective  in  all  age  groups,  while  visual  media  such  as  videos  have  a  significant  positive impact with visual media having a positive impact on increasing one's knowledge by 75%-87%.
Conclusion: Education through media through the media of videos, posters, and educational mirrors can help increase the knowledge and attitude of food handlers, support safety and hygiene in food provision

## Keywords
Hygiene education, communication media, knowledge and attitudes of food handlers

## Abstrak
Latar Belakang: Makanan merupakan kebutuhan pokok manusia untuk kelangsungan hidup. Adanya penjamah makanan memberikan peran penting dalam menjaga kualitas makanan yang dikonsumsi dalam memenuhi standar keamanan agar tidak  menimbulkan  risiko  kesehatan.  Sehigga  diperlukan  pengetahuan  tentang  personal  hygiene  dan  sanitasi  makanan menjadi kunci dalam mencegah risiko kontaminasi. Penjamah makanan harus mendapatkan peningkatan pengetahuan dan perilaku melalui edukasi pencegahan risiko kesehatan yang disebabkan kurangnya pengetahuan Tujuan: Penelitian  ini  bertujuan untuk ekplorasi pengaruh  edukasi  terkait hygiene dan  sanitasi  melalui  media  video, poster, dan cermin edukasi terhadap peningkatan pengetahuan dan sikap penjamah makanan Metode: Penelitian ini menggunakan Metode SLR desian penelitian khsusus yang bersumber dari google scholar dan, Pubmed dari 10 tahun terakhir menggunakan kriteria inklusi dan eksklusi dalam penelitian ini mengikuti pendekatan Population/Problem, Intervention, Comparison Outcome dan Study design type (PICOS).
Hasil: Hasil  penelitian  mencakup  tiga  artikel  yang  menilai  efek  dari  edukasi  menggunakan  media  komunikasi  video, poster,  dan  cermin  edukasi  mampu  meningkatkan  pengetahuan  dan  sikap  penjamah  makanan.  Pemasangan  poster personal hygiene efektif di semua kelompok umur, sementara media visual seperti video memberikan dampak positif yang signifikan dengan media visual peningkatan pengetahuan seseorang sebesar 75%-87%.
1 Jurusan Farmasi, Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, Aceh, Indonesia.  E-mail: berwi.fazripamudi@poltekkesaceh.ac.id
2 Jurusan Farmasi, Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, Aceh, Indonesia.  E-mail: munira.ac@gmail.com
3 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Syiah Kuala, Aceh, Indonesia. E-mail: m_nasir@unsyiah.ac.id
Penulis Koresponding:
Munira: Jurusan Farmasi, Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, Jalan Soekarno -Hatta, Lampeuneurut, 23352, Aceh. Besar, Aceh. E-mail: munira.ac@gmail.com
SAGO: Gizi dan Kesehatan 2024, Vol. 5(3) 788-794
© The Author(s) 2024
DOI: http://dx.doi.org/10.30867/gikes.v5i3.1844 https://ejournal.poltekkesaceh.ac.id/index.php/ gikes Poltekkes Kemenkes Aceh
Uji aktivitas antibiofilm ekstrak daun kirinyuh....
Kesimpulan: Edukasi melalui media melalui media video, poster, dan cermin edukasi  dapat membantu meningkatkan pengetahuan dan sikap penjamah makanan, mendukung keamanan dan kebersihan dalam penyediaan makanan.

## Kata Kunci
Edukasi hygiene, media komunikasi, pengetahuan dan sikap penjamah makanan

## Pendahuluan
enyakit infeksi adalah penyakit menular yang disebabkan  oleh  agen  biologis  seperti  virus, bakteri,  dan  parasit  (Thambirajoo  et  al., 2021).  Permasalahan  dalam  menangani  penyakit infeksi adalah adanya mikroba yang kebal terhadap antibiotik  (Shaaban  et  al.,  2020).  Antibiotik  yang sebelumnya  efektif menjadi  tidak efektif  terhadap patogen tertentu (Jalalifar et al., 2024). Salah satu faktor  yang  menyebabkan  resistensi  ini  adalah pembentukan  biofilm  oleh  bakteri.  Biofilm  adalah kumpulan  sel  mikroba  yang  dilapisi  matriks substansi  polimerik  ekstraseluler  (EPS)  (Samrot  et al.,  2021).  Setelah  biofilm  terbentuk,  bakteri menjadi  terlindungi  dari  respons  imun  host  dan kebal  terhadap  berbagai  antibiotik  (Mishra  et  al., 2020).  Biofilm  dapat  meningkatkan  resistensi bakteri  hingga  1000  kali  lebih  kuat  dibandingkan dengan bakteri dalam bentuk planktonik (Mohamed et al., 2020).
Staphylococcus  aureus adalah  salah  satu bakteri  Gram  positif  yang  menunjukkan  resistensi. Bakteri ini awalnya sensitif terhadap penisilin, namun pada  tahun  1960-an  muncul  galur  Methicillin Resistant S. aureus (MRSA) dalam infeksi nosokomial. MRSA  menyebabkan  berbagai  infeksi  seperti necrotizing  fasciitis,  pneumonia,  meningitis,  dan endokarditis (Al-Hajjaj et al., 2021). Resistensi terjadi karena  bakteri  membentuk  lapisan  biofilm  yang melindunginya  dari  sistem  imun  dan  antibiotik  yang digunakan (Nourbakhsh et al., 2022).
Bakteri  dapat  membentuk  biofilm  yang memungkinkan mereka kebal terhadap pertahanan tubuh inang dan antibiotik (Thambirajoo  et  al.,  2021).  Berbagai  penelitian telah  dilakukan  untuk  menemukan  agen  yang efektif  untuk  melawan  biofilm  bakteri S.  Aureus (Hamid  et  al.,  2020).  Penelitian  ini  terutama difokuskan  pada  bahan  alami  dengan  aktivitas antibakteri.  Salah  satu  tanaman  yang  diketahui memiliki aktivitas sebagai antibakteri adalah kirinyuh ( Chromolaena Odorata ) (Yanuar et al., 2022).
Tanaman  kirinyuh  ( C.  Odorata )  adalah  salah satu gulma yang mudah tumbuh di berbagai tempat (Okalia  et  al.,  2022).  Tanaman  ini  juga  dapat
ditumbuh  di  daerah  geothermal,  yang  merupakan wilayah dengan sumber energi panas bumi. Provinsi Aceh  memiliki  beberapa  kawasan geothermal, salah satunya  adalah  daerah  mata  air  panas  Ie  Seum  di Kabupaten  Aceh  Besar.  Di  daerah geothermal tersebut,  suhu  dan  kadar  pH  tanah cenderung  lebih tinggi dibandingkan dengan daerah tidak terpengaruh  dengan geothermal (Hidayat,  2018) . Kondisi  ini  kemungkinan  akan  mempengaruhi kandungan  senyawa  kimia  yang  terdapat  dalam tanaman yang tumbuh dalam kawasan ini.
Daun  kirinyuh  mengandung  beberapa senyawa kimia seperti alkaloid, flavonoid, saponin, steroid,  triterpenoid  dan  tannin,  yang  berpotensi sebagai  antibakteri  (Wulandari  et  al.,  2024). Beberapa  penelitian  sebelumnya  telah  meneliti ekstrak  daun  kirinyuh  sebagai  antibakteri, menunjukkan  bahwa  ekstrak  tersebut  mampu menghambat  pertumbuhan Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus (Munira et al., 2022) . Hasil penelitian  lainnya  juga  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun  kirinyuh  dapat  menghambat pertumbuhan S.  aureus dan Salmonella  typii (Sari et  al.,  2023) . Penelitian  terbaru  menunjukkan bahwa daun kirinyuh yang tumbuh dalam kawasan geothermal Ie Seum, memiliki aktivitas antibakteri yang  lebih  kuat  daripada  yang  tumbuh  di  luar kawasan geothermal (Munira et al., 2022).
Sampai saat ini, belum ditemukan studi yang melaporkan tentang aktivitas ekstrak daun kirinyuh dari  kawasan  geothermal  Ie  Seum,  Aceh  Besar, dalam  menghambat  aktivitas  biofilm  terhadap S. aureus .  Oleh  sebab  itu  perlu  dilakukan  kajian tentang pengujian aktivitas antibiofilm dari ekstrak daun  kirinyuh  dari  kawasan  geothermal  Ie  Seum terhadap bakteri S. aureus .

## Metode
Penelitian ini merupakan eksperimen laboratorium yang  bertujuan  menguji  aktivitas  antibiofilm  dari ekstrak  daun  kirinyuh  yang  tumbuh  di  kawasan geothermal Ie Seum, Aceh Besar, terhadap bakteri S.  aureus .  Penelitian  dilakukan  di  laboratorium Kimia FKIP Universitas Syiah Kuala dan

## P
Mei – Agustus 2024
Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Gigi Universitas Syiah Kuala tahun 2024.
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  meliputi blender ,  timbangan  analitik,  wadah maserasi,  gelas  ukur,    erlenmeyer, beaker  glass , botol  kecil  ( vial ),  corong, microplate dan vacuum rotary  evaporator .  Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah daun kirinyuh yang tumbuh di kawasan  geothermal  Ie  Seum,  etanol,  aquades, bakteri Staphylococcus  aureus , media Nutrien Broth ,  kertas  pembungkus,  kapas,  cakram,  kapas, korek api, kertas label, masker, dan sarung tangan.

## Pengumpulan dan persiapan sampel
Simplisia  daun  kirinyuh  yang  digunakan  berasal  dari dalam  kawasan  geothermal  Ie  Seum,  Aceh  Besar. Daun  kirinyuh  segar  ditimbang  sebanyak  10  kg, dicuci bersih dan dipotong-potong. Selanjutnya daun tersebut dikeringkan dengan diangin-anginkan dalam ruangan.  Seletlah  kering,  simplisia  daun  kirinyuh ditimbang  dan  kemudian  dihancurkan  menjadi serbuk menggunakan blender.

## Proses ekstraksi
Serbuk  daun  kirinyuh  dari  kawasan  geothermal  Ie Seum,  Aceh  Besar,  ditimbang  sebanyak  600  gram dan  dimasukkan  ke  dalam  wadah  maserasi. Selanjutnya, ditambahkan pelarut etanol sebanyak 6 liter, lalu direndam selama 6 jam pertama sambil sesekali  diaduk,  kemudian  didiamkan  selama  18 jam.  Maserasi  dipisahkan  melalui  filtrasi,  dan penyarian diulangi dengan menggunakan setengah dari  volume  pelarut  yang  digunakan  pada penyarian  pertama.  Semua  maserat  yang  telah diperoleh dikumpulkan, kemudian  diuapkan menggunakan vacum rotary  evaporator hingga diperoleh ekstrak kental (Depkes, 2013).

## Uji biofilm
Uji  aktivitas  penghambatan  biofilm  dilakukan menggunakan  teknik crystal  violet  binding  assay (Lahkar  et  al.,  2017).  Suspensi  bakteri S.aureus yang  digunakan  setara  standar  McFarland  0,5
(1,5x108  CFU/  mL),     sebanyak  10 %  v/v  dari total suspensi uji. Pengujian dilakukan dengan konsentrasi  10%,  20%  dan  30%  (µg/µl)  dalam media NB dan suspensi bakteri dengan total volume 200  µL  tiap well, serta  suspensi  bakteri  saja  sebagai kontrol  negatif.  Suspensi  uji  dan  suspensi  bakteri dimasukkan ke dalam mikroplat, kemudian mikroplat ditutup  dan  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  42 jam. Setelah diinkubasi, isi mikroplat dikeluarkan dan dicuci  dengan  PBS.  Mikroplat  diberikan  pewarna dengan  menambahkan  200  µL  larutan  kristal  violet 1% dan diinkubasi selam 15 menit pada suhu ruang. Setelah  kering,  sebanyak  200  µL  etanol  96% dimasukkan  ke  dalam  mikroplat  dan  diinkubasi selama  15  menit  pada  suhu  ruang.  Mikroplat kemudian  diukur  menggunakan microplate  reader pada densitas optik 595 nm (Bjarnsholt et al., 2011). Pengujian dilakukan tiga kali ulangan.

## Analisa data
Persentase  penghambatan  pembentukan  biofilm dihitung  menggunakan  formula  modifikasi  berikut (Nicolic et al., 2014):
%penghambatan biofilm=OD kontrol negatif-OD sampel x 100% OD kontrol negatif

## Hasil
Aktivitas  antibiofilm  dari  ekstrak  daun  kirinyuh yang  berasal  dari  kawasan  geothermal  Ie  Seum, Aceh  Besar, terhadap S.aureus . Pengujian dilakukan  dengan  menggunakan  ekstrak  daun kirinyuh  yang  terdiri  dari  beberapa  konsentrasi yaitu  10%,  20%  dan  30%  serta  kontrol  positif berupa tetrasiklin 0,1%. Optimasi waktu pembentukan  biofilm        pada S.  aureus telah dilakukan selama 48 jam atau 2 hari menggunakan alat Elisa  Reader dengan  panjang  gelombang  595 nm.  Hasil  yang  diperoleh  berupa    absorbansi  atau optical density (OD), serta persentase penghambatan  biofilm,  sebagaimana  tercantum dalam Tabel 1.
Tabel 1. Hasil  pengukuran optical  density (OD)  dan  persentase  penghambatan  biofilm  ekstrak  daun kirinyuh dari kawasan geothermal terhadap S. aureus
Ulangan Absorbansi OD ( λ = 595 nm) % Penghambatan Biofilm 10% 20% 30% K+ K- 10% 20% 30% K+ K- 1 0,115 0,061 0,054 0,045 0,145 20,7 57,9 62,8 69,0 0,0 2 0,113 0,062 0,053 0,048 0,121 6,6 48,8 56,2 60,3 0,0 3 0,098 0,056 0,057 0,038 0,115 14,8 51,3 50,4 67,0 0,0 Rata-rata 0,109 0,060 0,055 0,044 0,127 14,2 52,8 56,7 65,4 0,0
Keterangan: OD= optical density , K+=Tetrasiklin 0,1%, K-=Aquades steril
Uji aktivitas antibiofilm ekstrak daun kirinyuh....
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  ekstrak  pada semua konsentrasi berhasil dan mampu menghambat  terbentuknya  biofilm  oleh  bakteri S. aureus, dengan persentase penghambatan tertinggi  terjadi  pada  konsentrasi  ekstrak    30% yaitu  mencapai  56,7%.  Persentase  penghambatan yang  dihasilkan  semakin  besar  dengan  semakin besar konsentrasi ekstrak.

## Pembahasan
Pengujian  penghambatan  pembentukan  biofilm dalam penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas  dari  ekstrak  daun  kirinyuh  dari  kawasan geotermal Ie Seum, Aceh Besar, dalam menghambat  pembentukan  biofilm S.  aureus . Pembentukan  biofilm  diukur  secara  kuantitatif dengan metode kristal violet assay .
Optimasi  waktu  pembentukan  biofilm S. aureus telah  dilakukan  selama  48  jam  atau  2  hari menggunakan  alat Elisa  Reader dengan  panjang gelombang  595  nm.  Dalam  penelitian  ini,  panjang gelombang  595  nm  dipilih  berdasarkan  penelitian oleh  Tobi  et  al.,  (2022),  yang  melakukan  optimasi dengan  menggunakan  tiga  variasi  panjang gelombang:  490  nm,  595  nm,  dan  655  nm.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa panjang gelombang  595  nm  adalah  yang  paling  optimal untuk pembacaan biofilm, dengan absorbansi atau OD  terbesar  pada  setiap  pembacaan.  Oleh karena itu,  penelitian  ini  memilih  menggunakan  panjang gelombang  595  nm  untuk  membaca  biofilm  dari bakteri uji menggunakan microplate reader . Hasil pengujian penghambatan pembentukan  biofilm  ekstrak  daun  kirinyuh  dari kawasan  geotermal  pada  konsentrasi  10%,  20% dan 30% serta kontrol positif mampu menghambat biofilm  pada S.  aureus .  di  mana  ekstrak  dengan konsentrasi  30%  memiliki  persentase  tertinggi dalam  menghambat pembentukan biofilm  (56,7%) tetapi  tidak  lebih  besar  dari  kontrol  positif  (Tabel 1).  Kontrol  positif  dalam  penelitian  ini  adalah antibiotik  tetrasiklin  0,1%.  Tetrasiklin  merupakan jenis antibiotik yang terbukti mampu menghambat pertumbuhan biofilm bakteri S. aureus (Dewi et al., 2020).  Hasil  pengujian  persentase  penghambatan pembentukan biofilm menunjukkan bahwa tetrasiklin  memiliki  rata-rata  penghambatan pembentukan biofilm sebesar 65,4%.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak,  semakin  besar persentase penghambatan yang dihasilkan
(Gambar  1).  Peningkatan  konsentrasi  ekstrak sejalan  dengan  peningkatan  jumlah  senyawa bioaktif,  yang  menyebabkan  aktivitas  ekstrak dalam menghambat biofilm semakin kuat.
Nilai  rata-rata  persentase  penghambatan pembentukan biofilm yang ditunjukkan pada tabel 1 meningkat seiring dengan peningkatan konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan.  Sebaliknya, nilai  absorbansi/OD  menurun  dengan  meningkat konsentrasi  ekstrak.  Data  yang  terlihat  pada  tabel 1 diperoleh dari perhitungan persentase penghambatan biofilm berdasarkan hasil absorbansi atau optical density (OD). Nilai OD yang mencerminkan  ketebalan  biofilm  yang  terbentuk, dengan  nilai  OD  yang  lebih  tinggi  menunjukkan biofilm yang lebih tebal.
Gambar  1 .  Grafik  persentase  penghambatan biofilm ekstrak daun kirinyuh terhadap S. aureus.
Pembentukan  biofilm  dimulai  ketika  bakteri menempel pada suatu permukaan melalui molekul organik. Berbagai faktor seperti kondisi permukaan,  sifat  permukaan,  karakteristik  media cair,  sifat  permukaan  sel  mikroba,  serta mekanisme  regulasi  gen  dan  kuorum  sensing, mempengaruhi  tingkat  penempelan  mikroba  pada permukaan  tersebut  (Mahami  &  Gyamfi,  2011). Pembentukan  biofilm  dapat  terjadi  pada  berbagai permukaan dan dalam berbagai kondisi lingkungan di mana bakteri ditempatkan. Bakteri dan molekul organik  atau  ini  bersama  dengan  mikroorganisme berpindah  ke  permukaan  melalui  difusi  atau mengikuti aliran cairan. Transfer nutrisi cenderung lebih  efisien  dalam  biofilm  daripada  fase  cair (Morris Jr & Vugia, 2021).
Kondisi  biofilm  memainkan  peran  penting dalam proses pelekatan. Polimer organik dari media yang  terendam  permukaan  mempengaruhi  tingkat dan kekuatan pelekatan mikroba. Biofilm dapat mulai
0,00 14,17 52,76 56,69 65,35 0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 Kontrol negatif 10% 20% 30% Kontrol positif P er sen tase Perlakuan
terbentuk  hanya  dalam  beberapa  menit  setelah paparan  dan  terus  berkembang  selama  beberapa jam.  Faktor-faktor  seperti  tingkat  nutrisi,  pH, kekuatan  ion,  dan  suhu  media  cair  dapat  juga mempengaruhi  tingkat  pelekatan  mikroba  pada permukaan (Krsmanovic et al., 2021).
Proses pembentukan biofilm pada permukaan padat  terdiri  dari  tahap.  Tahap  pertama  melibatkan pertumbuhan  sel  dan  produksi Extracellular Polymeric  Substances (EPS),  yang  menyebabkan akumulasi  sel-sel  biofilm.  Tahap  kedua  melibatkan kemungkinan pelepasan atau kembali melekat sel-sel tersebut.  Untuk  pencegahan  pertumbuhan  biofilm, strategi yang dapat dilakukan termasuk menghambat atau  menghilangkan  pertumbuhan  sel  serta mencegah pembentukan EPS. Jika tahap perkembangan biofilm tidak dihambat, maka biofilm yang  terbentuk  akan  terus  bertambah  dan membentuk  struktur  tiga  dimensi  yang  terdiri  dari kelompok sel yang terhubung satu sama lain (Alotaibi & Bukhari, 2021).
Kemampuan  ekstrak  daun  kirinyuh  dari kawasan geothermal dalam menghambat pembentukan  biofilm  pada S.  aureus disebabkan kandungan  senyawa  dalam  ekstrak  tersebut. Menurut  hasil  Penelitian  (Munira  et  al.,  2022), ekstrak  daun  kirinyuh  dari  geothermal  Ie  Seum, Aceh  Besar,    mengandung  flavonoid,  fenolik, steroid  dan  saponin.  Senyawa-senyawa  ini memiliki  kemampuan  untuk    menghambat  dan memecahkan  biofilm  dengan  mekanisme  yang dapat  menyebabkan  degradasi  matriks  biofilm, kematian sel, dan kebocoran sel (Salsabila, 2020).
Flavonoid  salah  satu  senyawa  yang  memiliki dampak  dalam  menghambat  molekul  adhesif  yang penting dalam proses pembentukan biofilm (Besan et al.,  2023).  Flavonoid  bekerja  dengan  cara  mengikat protein  adhesif  bakteri  yang  berfungsi  sebagai reseptor  pada  permukaan  bakteri.  Dampaknya adalah  mengakibatkan  penurunan  kemampuan bakteri  untuk  melekat  dan  menghambat  sintesis protein yang diperlukan untuk pembentukan dinding sel (Inanta et al., 2023).
Flavonoid menghambat pembentukan biofilm oleh S. aureus melalui mengganggu secara fisik.  Kehadiran  senyawa  flavonoid  secara  fisik dapat  mengganggu  proses  penempelan  protein yang terkait dengan biofilm (BAP) dan pembentukan  polimerisasi  BAP  (Nurilma,  2016). Senyawa  fenol  mengacaukan  metabolisme  sel bakteri (Putri & Trimulyono, 2023). Sementara itu, saponin mengganggu kestabilan matriks
ekstraseluler polisakarida dan menghambat pembentukan  biofilm  oleh S.  aureus dengan berikatan  pada  sisi  aktif  enzim  mannitol dehydrogenase  dan  eDNA  yang  berperan  dalam sintesis  alginat.  Alginat  adalah  komponen  utama  dari matriks ekstraseluler polisakarida (Rosyada et al., 2023).

## Kesimpulan
Penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak pada  semua  konsentrasi  mampu  menghambat pembentukan  biofilm  pada  bakteri S.aureus dan persentase penghambatan yang dihasilkan semakin  besar  dengan  semakin  besar  konsentrasi ekstrak.

## Deklarasi Konflik Kepentingan
Peneliti  menegaskan  bahwa  dalam  studi  ini  tidak ada  pertentangan  kepentingan,  baik  dari  institusi terkait  maupun  faktor  lain  yang  berpotensi memengaruhi hasil penelitian. Selain itu, nilai-nilai yang  menjadi  landasan  identitas  peneliti  dan maksud publikasi tidak berdampak pada hasil atau penafsiran dari penelitian ini.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Direktur Poltekkes  Aceh  dan  semua  pihak  yang  telah membantu terlaksananya penelitian ini.

## Daftar Rujukan
Abd El-Hamid, M. I., Y. El-Naenaeey, E., M kandeel,
T., Hegazy,  W.  A. H., Mosbah, R.  A.,  Nassar, M.  S.,  Bakhrebah,  M.  A.,  Abdulaal,  W.  H., Alhakamy,  N.  A.,  &  Bendary,  M.  M.  (2020).
Promising antibiofilm agents: Recent breakthrough  against  biofilm  producing methicillin-resistant  Staphylococcus  aureus.
Antibiotics , 9 (10), 667.
https://doi.org/10.3390/antibiotics9100667
Al-Hajjaj,  Y.  A.,  Kabli,  S.  A.,  Al-Garni,  S.  M.,
Moqaddam,  S.  A.,  &  El-Tayeb,  M.  A.  (2021). Molecular  characterization  of  cassette chromosome  mec  groups  in  methicillin- resistant  staphylococcus  aureus. Journal  of Applied  Sciences  Research , 17 (3),  1 – 8. https://doi.org/10.22587/jasr.2021.17.3.1
Uji aktivitas antibiofilm ekstrak daun kirinyuh....
Alotaibi,  G.  F.,  &  Bukhari,  M.  A.  (2021).  Factors influencing  bacterial  biofilm  formation  and development. Am. J. Biomed. Sci. Res , 12 (6), 617 – 626. https://doi.org/ 10.34297/AJBSR.2021.12.001820 Besan,  E.  J.,  Rahmawati,  I.,  &  Saptarini,  O.  (2023).
Aktivitas antibiofilm ekstrak dan fraksi-fraksi bunga  telang  (clitoria  ternatea  l.)  terhadap staphylococcus  aureus. PHARMACY:  Jurnal Farmasi  Indonesia  (Pharmaceutical  Journal of  Indonesia) , 20 (1),  1 – 11.  https://doi.org/
10.30595/pharmacy.v0i0.14437
Bjarnsholt, T., Jensen, P. Ø., Moser, C., & Høiby, N.
(2011). Biofilm infections . Springer. https://link.springer.com/book/10.1007/978 -1-4419-6084-9
Depkes, R. I. (2013). Suplemen III farmakope herbal indonesia,  Edisi  I. Jakarta.  Kementrian Kesehatan RI .
Dewi,  M.,  Darmawi,  D.,  Nurliana,  N.,  Karmil,  T.  F., Helmi, T.  Z., Fakhrurrazi, F., Erina, E.,  Abrar, M.,  AK,  M.  D.,  &  Admi,  M.  (2020).  Aktivitas antibiotik  terhadap  biofilm  staphylococcus aureus isolat preputium sapi aceh (antibiotic activities  to  staphylococcus  aureus  biofilms of aceh cattle preputium isolate). Jurnal Sain Veteriner , 38 (1), 1 – 6. https://doi.org/ 10.22146/jvs.35219
Hidayat,  M.  (2018).  Analisis  vegetasi  dan keanekaragaman  tumbuhan  di  kawasan manifestasi  geotermal  Ie  Suum  Kecamatan Mesjid  Raya  Kabupaten  Aceh  Besar. BIOTIK: Jurnal Ilmiah Biologi Teknologi Dan Kependidikan , 5 (2), 114. https://doi.org/10.22373/biotik.v5i2.3019
Inanta,  N.  S.,  Bhernama,  B.  G.,  &  Muslem,  M.
(2023).  Uji  konsentrasi  hambat  minimum (khm)  dan  konsentrasi  bunuh  minimum (kbm)  dari  ekstrak  etanol  daun  kirinyuh (chromolaena  odorata  l)  terhadap  bakteri staphylococcus  epidermidis. AMINA , 5 (3), 127 – 140. https://doi.org/10.22373/amina Jalalifar,  S.,  Razavi,  S.,  Mirzaei,  R.,  Irajian,  G.,  & Pooshang  Bagheri,  K.  (2024).  A  hope  for ineffective antibiotics to return to treatment:  investigating  the  anti-biofilm potential  of  melittin  alone  and  in combination  with  penicillin  and  oxacillin against multidrug resistant-MRSA and-VRSA. Frontiers  in  Microbiology , 14 ,  1269392. https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1269392 Krsmanovic,  M.,  Biswas,  D.,  Ali,  H.,  Kumar,  A.,
Ghosh,  R.,  &  Dickerson,  A.  K.  (2021). Hydrodynamics  and  surface  properties influence  biofilm  proliferation. Advances  in Colloid  and  Interface  Science , 288 ,  102336. https://doi.org/10.1016/j.cis.2020.102336 Lahkar, V., Saikia, L., Patgiri, S. J., Nath, R., & Das, P. P.  (2017).  Estimation  of  biofilm,  proteinase &  phospholipase  production  of  the  Candida species  isolated  from  the  oropharyngeal samples in HIV-infected patients. The Indian Journal  of  Medical  Research , 145 (5),  635. https://doi.org/10.4103/ijmr.IJMR_1773_14
Mahami,  T.,  &  Adu-Gyamfi,  A.  (2011).  Biofilm- associated infections: public health implications. International  Research  Journal of Microbiology (IRJM)(ISSN: 2141-5463) Vol ,
2 (10), 375 – 381. https://doi.org/ 10.22146/jvs.35219 Mishra,  R.,  Panda,  A.  K.,  De  Mandal,  S.,  Shakeel, M.,  Bisht,  S.  S.,  &  Khan,  J.  (2020).  Natural anti-biofilm  agents:  strategies  to  control biofilm-forming  pathogens. Frontiers  in Microbiology , 11 , 566325. https://doi.org/10.3389/fmicb.2020.566325
Mohamed, M. S. M., Mostafa, H. M., Mohamed, S. H.,  Abd  El-Moez,  S.  I.,  &  Kamel,  Z.  (2020). Combination  of  silver  nanoparticles  and vancomycin to overcome antibiotic resistance  in  planktonic/biofilm  cell  from clinical  and  animal  source. Microbial  Drug
Resistance , 26 (11), 1410 – 1420.
https://doi.org/10.1089/mdr.2020.008
Morris Jr, J. G., & Vugia, D. J. J. (2021). Foodborne infections and intoxications . Academic Press. Munira,  M.,  Rasidah,  R.,  Zakiah,  N.,  &  Nasir,  M. (2022).  Identification of  chemical  compunds and antibacterial activity test of kirinyuh leaf extract  (Chromolaena  odorata  L  .)  from  Ie Seum  Geothermal  area,  Regency  of  Aceh Besar,  Indonesia. Rasayan  Journal  of
Chemistry , 15 (4), 2852 – 2857.
https://doi.org/10.31788/RJC.2022.1548031 Nourbakhsh, F., Nasrollahzadeh, M. S., Tajani, A. S.,
Soheili, V., & Hadizadeh, F. (2022). Bacterial biofilms  and  their  resistance  mechanisms:  a brief  look  at  treatment  with  natural  agents. Folia Microbiologica , 67 (4), 535 – 554. https://doi.org/10.1007/s12223-022-00955-8 Nurilma,  A.  D.  (2016). Potensi  ekstrak  nicotiana tabacum  sebagai  anti  microfouling .  Institut Teknologi  Sepuluh  Nopember  Surabaya. https://repository.its.ac.id/76202/1/151210
0015-Undergraduate_Thesis.pdf Okalia, D., Nopriadi, D. A., Marlina, G., KM, J. G. S., Pineapple  Gardens,  J.,  &  Bay,  K.  (2022). Potential  of  kirinyuh  weed  (chromolaena odorata) as a source of green fertilizer in two district in Kuantan Singingi District .
https://doi.org/ 10.36378/juatika.v4i2.2367
Putri, D., & Trimulyono, G. (2023). Uji daya hambat ekstrak  daun  pepaya  (carica  papaya  l.) terhadap
pertumbuhan bakteri staphylococcus  aureus  secara  in  vitro. LenteraBio:  Berkala  Ilmiah  Biologi , 12 (2), 172 – 178. https://doi.org/10.26740/lenterabio.v12n2. p172-178
Rosyada,  A.  G.,  Prihastuti,  C.  C.,  Sari,  D.  N.  I., Setiawati,  S.,  Ichsyani,  M.,  Laksitasari,  A., Andini,  R.  F.,  &  Kurniawan,  A.  A.  (2023). Aktivitas  antibiofilm  ekstrak  etanol  kulit bawang  merah  (Allium  cepa  L.)  dalam menghambat pembentukan biofilm Staphylococcus  aureus  ATCC  25923. Jurnal Kedokteran  Gigi  Universitas  Padjadjaran , 35 (1), 34 – 42. Salsabila,  F.  S.  (2020). Efektivitas  ekstrak  daun pucuk  merah  (Syzygium  myrtifolium  Walp.) sebagai  antimikroba  terhadap  Salmonella typhi .  Universitas  Islam  Negeri  Maulana Malik Ibrahim.
http://etheses.uin- malang.ac.id/id/eprint/21887 Samrot,  A.  V,  Abubakar  Mohamed,  A.,  Faradjeva,
E., Si Jie, L., Hooi Sze, C., Arif, A., Chuan Sean, T., Norbert Michael, E., Yeok Mun, C., & Xiao
Qi,  N.  (2021).  Mechanisms  and  impact  of biofilms  and  targeting  of  biofilms  using bioactive  compounds — A  review. Medicina ,
57 (8), 839. https://doi.org/10.3390/medicina57080839
Sari,  Y.  E.  S.,  Azizah,  F.,  Artanti,  D.,  Arimurti,  A.  R. R.,  &  Santoso,  A.  P.  R.  (2023).  Sensitivity  of tekelan  leaves  (Chromolaena  odorata)  on the  growth  of  salmonella. Bali  Medical
Journal , 12 (3), 3251 – 3256.
https://doi.org/10.15562/bmj.v12i3.4395
Shaaban, M., Abd El-Rahman, O. A., Al-Qaidi, B., & Ashour,  H.  M.  (2020).  Antimicrobial  and antibiofilm activities of probiotic Lactobacilli on  antibiotic-resistant  Proteus  mirabilis. Microorganisms , 8 (6), 960. https://doi.org/10.3390/microorganisms806 0960 Thambirajoo,  M.,  Maarof,  M.,  Lokanathan,  Y.,
Katas, H., Ghazalli, N. F., Tabata, Y., & Fauzi, M.  B.  (2021).  Potential  of  nanoparticles integrated  with  antibacterial  properties  in preventing biofilm  and  antibiotic  resistance.
Antibiotics , 10 (11), 1338. https://doi.org/10.3390/antibiotics10111338
Tobi, C. H. B., Saptarini, O., & Rahmawati, I. (2022).
Aktivitas antibiofilm ekstrak dan fraksi-fraksi biji  pinang  (Areca  catechu  L.)  terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923. J Pharm Sci , 1 , 57. DOI: 10.20961/jpscr.v7i1.43698 Wulandari,  I.,  Wirasutisna,  K.  R.,  Mariani,  R.,  & Wibowo,  D.  P.  (2024).  Literature  riview: Ethnoparmacognosy,  chemical  content,  and pharmacological activity of Kirinyuh (chromolaena  odorata  L.)  leaves. Journal  of Midwifery  and  Nursing , 6 (1),  158 – 164. https://doi.org/10.35335/jmn.v6i1.4496
Yanuar,  E.,  Umam,  K.,  Sarwana,  W.,  Huda,  I., Wijaya,  D.,  Roto,  R.,  &  Mudasir,  M.  (2022). Preparation  and  vibrio  sp  antibacterial activity  of  silver  nanoparticles  mediated  by chromolaena  odorata  leaf  extract  using different  temperatures. Asian  Journal  of Biology , 14 (1), 25 – 37. https://doi.org/10.9734/ajob/2022/v14i130203