HKSA secara In-Silico Senyawa 1-Benzil-3- Benzoilurea dan Analognya sebagai Penghambat Reseptor Bruton Tyrosine Kinase (BTK)
Denis Cristian Sudarno 1 * , Farida Suhud 1 , Siswandono 2
1 Fakultas Farmasi Universitas Surabaya, Universitas Surabaya, Surabaya-Indonesia
* corresponding author: deniscristian1212@gmail.com
Abstract — In  this  study,  a  new  anticancer  drug  design  for  non-Hodgkin’s  lymphoma  was  carried  out,  with  a  molecular  docking approach from the compound 1-benzyl-3-benzoylurea parent and its analog as an anticancer compound. The purpose of the study was to obtain the best quantitative structure-activity relationship (QSAR). The in-silico activity test was carried out on the new 1- benzyl-3-benzoilurea  and  its  analog  compound  against  the  Bruton  Tyrosine  Kinase  receptor  (BTK)  PDB  code  (5FBN)  by  using  the Molegro Virtual Docker 5.5 program and producing a RS (Rerank Score) value for the test compound and Acalabrutinib was used as a  comparison.  This  study  also  conducted  bioavailability  by  predicting  the  value  of  F  (intestinal  human  absorption)  in  the  pkCSM program  and  toxicity  studies  by  predicting  LD50  values  using  the  Protox  II  program.  Correlation  and  regression  were  performed using  the  RS,  F,  and  LD50  values  that  we  obtained  on  the  physicochemical  properties  of  the  test  compound  using  the  IBM  SPSS version 24 program. The best equation is obtained as follows: (1) F = 0.851 Es Taft - 6.116  σ - 1.969 π² + 3.620 π + 90.809;  (2) RS = 4.376 Es Taft - 88.802; (3) LD50 = 672.518 CMR - 669.385 ClogP - 813.806. From the results of the best equation is obtained that the activity is influenced by the parameters of steric physicochemical properties (Es Taft).
Keywords: 1-benzyl-3-benzoylurea, code pdb:5fbn, in-silico, non-hodgkin lymphoma
Abstrak —Pada penelitian ini dilakukan rancangan obat baru antikanker Limfoma non-Hodgkin, dengan pendekatan penambatan molekul  dari  senyawa  induk  1-benzil-3-benzoilurea  dan  analognya  sebagai  senyawa  antikanker.Tujuan  penelitian  ini  untuk mendapatkan  persamaan  hubungan  struktur  aktivitas  (HKSA)  terbaik.  Uji  aktivitas in-silico dilakukan  terhadap  senyawa  baru  1- benzil-3-benzoilurea  dan  analognya  terhadap  reseptor  Bruton  Tyrosine  Kinase  (BTK)  kode  PDB  5FBN  dengan  menggunakkan program Molegro  Virtual  Docker  5.5 dan  menghasilkan  nilai  RS  ( Rerank  Score )  untuk  senyawa  uji  dan  Acalabrutinib  digunakan sebagai  pembanding.  Penelitian  ini  juga  dilakukan  studi  bioavaibilitas  dengan  memprediksi  nilai  F  ( intestinal  human  absorbtion ) pada  program  pkCSM  dan  studi  toksisitas  dengan  memprediksi  nilai  LD50  menggunakan  program Protox  II .  Korelasi  dan  regresi dilakukan menggunakan nilai RS, F dan LD50 yang telah diperoleh terhadap parameter sifat fisikokimia senyawa uji menggunakan program IBM SPSS versi 24. Persamaan terbaik yang diperoleh sebagai berikut: (1) F = - 1.969 π² + 0.851 Es Taft - 6.116 σ + 3.620 π + 90.809  (2) RS = 4.376 Es Taft - 88.802 (3) LD50 = 672.518 CMR - 669.385 ClogP - 813.806. Dari hasil persamaan terbaik tersebut diperoleh bahwa aktivitas dipengaruhi oleh parameter sifat fisikokimia sterik (Es Taft).
Kata kunci: 1-benzil-3-benzoilurea, in-silico, kode pdb: 5fbn, limfoma non-hodgkin

## PENDAHULUAN
Kanker  Limfoma  merupakan  istilah  untuk  kanker  yang  dimulai  dalam  sel-sel  getah bening. Ada dua jenis utama kanker limfoma, yaitu limfoma Hodgkin dan limfoma non-Hodgkin (LNH)  (American  Cancer  Society,  2017). Penderita  kanker  limfoma  90%  merupakan  penderita limfoma  non-Hodgkin,  dan  sisanya  10%  adalah  limfoma  Hodgkin.Sel-B  dan  sel-T  yang bermutasi  pada  sistem  limfatik  menjadi  penyebab  terjadinya  Limfoma  non-Hodgkin (Shankland, Amitage, & Hancock, 2012). Menurut  data  dari  Globocan  (2018) International  Agency  for  Research  on  Cancer (IARC) di  Indonesia  untuk  kanker  secara  umum  diperkirakan  sekitar  348.809  kasus  baru  dan untuk  mortalitas  diperkirakan  sekitar  207.210.  Limfoma  non-hodgkin  berada  pada  urutan ketujuh  dengan  presentase  4.1%  atau  sekitar  14.164  untuk  kasus  baru,  dan  untuk  mortalitas limfoma  non-hodgkin  berada  pada  urutan  kesembilan  dengan  presentase  3.7%  atau  sekitar 7.565. Dari data  tersebut kanker limfoma non-  hodgkin dapat terjadi akibat beberapa faktor- faktor  umum  yaitu:  usia,  genetik,  sistem  kekebalan  tubuh  yang  melemah,  jenis  kelamin  dan paparan zat kimia  beracun (Kemenkes RI, 2015).

## Original Research
Pengobatan untuk kanker saat ini yang paling umum adalah kemoterapi, pembedahan, target  terapi,  dan  radioterapi  (Arruebo, et  al., 2011).  Kemoterapi  memiliki  beberapa kekurangan  dan  efek  samping  yang  serius  seperti  depresi  sum-sum  tulang  belakang, neurotoksisitas, mukositis dan reaksi alergi (Anwar et al., 2013). Obat-obat kemoterapi secara klinis digunakan untuk membunuh sel tumor dengan menghambat mekanisme pembelahan sel tumor.  Tetapi  obat  antikanker  tidak  spesifik  membunuh  sel  kanker  saja,  menjadikan  obat tersebut  bersifat  toksik  bagi  semua  sel  yang  sedang  membelah,  termasuk  sel  normal  (Koda- Kimble et  al .,  2008).  Oleh  karena  itu  perlu  untuk  menemukan  obat  baru  antikanker  yang spesisfik yang dapat membunuh sel kanker saja. Target terapi mejadi salah satu pilihan dalam dunia  pengobatan,  karena  jenis  pengobatan  ini  menggunakan  obat  atau  zat  lain  untuk mengindentifikasi dan menyerang sel kanker secara selektif tanpa merusak  sel normal. Terapi monoklonal,  terapi  inhibitor  proteasome,  dan  terapi  inhibitor  kinase  merupakan  jenis  terapi bertarget  yang digunakan  untuk  mengobati  kanker  limfoma  non-Hodgkin  pada  orang  dewasa ( National Cancer Institute , 2019).
Pengembangan  obat-obat  termasuk  obat  antikanker  membutuhkan  waktu  yang  lama dan biaya yang sangat mahal, Sehingga banyak dikembangkan  penelitian- penelitian baru yang berbasis  komputasi.  Metode-metode  seperti  CADD (computer-  aided  drug  design )  dan  CAMD ( computer-aided molecular design ) sekarang banyak digunakan dalam merancang, menemukan dan  melakukan  optimasi  molekul  bioaktif  sebagai  calon  obat  yang  menjanjikan  (Siswandono, 2016).  Dalam  metode  CADD  terdapat  dua  pendekatan,  yaitu Structure-Based  Drug  Design (SBDD) dan Ligand-Based Drug Design (LBDD) (Suhud, 2015). Pendekatan SBDD dan LBDD telah diterapkan  sebagai alat  penemuan  obat  yang  berharga,  baik  di  dunia  akademis  dan  industri. Molecular  docking merupakan  metode  komputasi  yang  berbasis  ligan,  metode  ini  bertujuan untuk  meniru  interaksi  antara  ligan  dengan  protein  (Motiejunas et  al .,  2006). Molekular docking menjadi salah satu metode yang sering digunakan dalam LBDD karena kemampuannya untuk memprediksi, dengan tingkat keakuratan yang besar dan menghemat biaya serta waktu yang digunakan (Ferreira et al ., 2015).
Acalabrutinib  (Calquence)  adalah  obat  yang  telah  disetujui  oleh  FDA  ( Food  and  Drug Administration )  dan  termasuk  obat  terapi  inhibitor  kinase  untuk  pengobatan  leukemia limfositik kronis, limfoma limfositik kecil dan pada pasien dewasa dengan penyakit Mantle cell limfoma (MCL)  (Astor,  2019).  Acalabrutinib  merupakan inhibitor molekul  kecil  yang  tersedia dari Bruton  Tyrosine  Kinase (BTK)  yang  merupakan  bagian  penting  dalam  jalur  pensinyalan reseptor  sel-B  dan  digunakan  dalam  terapi  keganasan  sel-B.  Penghambatan  dalam  jalur  ini mencegah  aktivasi  sel-B,  mencegah  diferensiasi, dan poliferasi ( National Institutes of Health , 2019) . Reseptor  BTK  bertindak  sebagai penyedia  tempat  untuk  menyatukan  beragam  protein pensinyalan  dan  terlibat  dalam  jalur  pensinyalan  sitokin  (Drugbank,  2016),  BTK  terutama bekerja pada sel b dan juga terlibat dalam jalur pensinyalan sel b dan memiliki peran penting dalam fisiologis dan proliferasi limfosit b yang ganas (Zhang & Qiu, 2019).
Pada  penelitian  ini  akan  diuji  senyawa  1-benzil-3-benzoilurea  dan  senyawa  analognya sebagai  calon  senyawa  antikanker  melalui  hambatan  reseptor  BTK.  Senyawa  1-benzil-3- benzoilurea  diperoleh  dengan  memodifikasi  senyawa  induk  dengan  memasukkan  gugus bersifat lipofilik seperti gugus aril dan alkil dan penambahan subtituen yang mengandung atom elektronegatif seperti gugus nitro dan halogen untuk meningkatkan sifat elektroniknya. Gugus benzilurea  berperan  sebagai  farmakofor  untuk  dikembangkan  menjadi  senyawa  antikanker yang lebih poten, sehingga pada penelitian ini gugus benzoil di modifikasi melalui pendekatan lipofilik, elektronik dan sterik sebagai parameter sifat fisikokimia. Pada penelitian ini dipilih 20 substituen  dengan  penempatan sebagai  berikut:  (2-kloro,  3-  kloro,  4-kloro,  2,4-dikloro,  3,4- dikloro,  4-klorometil,  3-  klorometil,  4-bromometil,  4-bromo,  4-propil,  3-triflourometil,  2- triflourometil, 4-etil, 3- etil, 4-metil, 4-t-butil, 4-fluoro, 4-metoksi, dan 4-nitro) (Suhud, 2017).
Penambatan ( docking ) akan dilakukan pada senyawa induk 1-benzil-3- benzoilurea dan senyawa  analognya  dengan  reseptor  Bruton  Tyrosine  Kinase,  dengan  kode  PDB  (5FBN)  dan ligan 4-[8-azanyl-3-[(3~{R})-1-(3-methyloxetan-3- yl)carbonylpiperidin-3-yl]imidazo[1,5-
a]pyrazin-1-yl]-~{N}  [4(trifluoromethyl)  pyridin-2-  yl]benzamide.  Kode  PDB  5FBN  dipilih berdasarkan  kemiripan  struktur  farmakofor  obat  pembanding  Acalabrutinib  yaitu  pada  gugus benzamida.
Gambar 1. Struktur acalabrutinib yang memiliki kesamaan dengan senyawa uji (Suhud, 2015 ; Drugbank, 2016).

## METODE
Pada  penelitian  ini  dilakukan  studi  Hubungan  Kuantitatif  Struktur-Aktivitas  (HKSA) secara in-silico, dalam  upaya  pengembangan  senyawa  antikanker  baru  untuk  terapi  kanker limfoma  non-Hodgkin.  Studi  HKSA  merupakan  upaya  dalam  desain  obat,  untuk  membuat persamaan hubungan struktur dengan aktivitas biologis dari suatu senyawa.
Pada  penelitian  ini  diperlukan  makromolekul  protein  dari  reseptor.  Reseptor yang dipilih  pada  penelitian  ini  yaitu  reseptor  Bruton  Tyrosine  Kinase  (BTK)  dengan  kode makromolekul  protein  (PDB)  5FBN,  yang  dapat  diunduh  pada  website Protein  Data  Bank. Gambar  struktur  2D  dari  senyawa  uji  1-benzil-3benzoilurea  dan  analognya  dan  senyawa pembanding Acalabrutinib, yang dapat dibuat dengan menggunakan program Chemdraw ultra 12. Gambar struktur 3D dari senyawa uji dapat dibuat dengan program  Chembio3D Ultra 12 . Sifat fisikokimia senyawa diperoleh dengan menggunakan program Chemdraw, Chembio3D dan tabel  Hansch. Molecular  docking dilakukan  dengan  menggunakan  program  Molegro  Virtual Docker  5.5,  Prediksi  ADME  dilakukan  dengan  program  web  online  pkCSM  dan  prediksi toksisitas  dilakukan  dengan  menggunakan  program  web  online  Protox  II.  Semua  data  yang diperoleh  diolah  dengan  menggunakan  program  statistika  IBM  SPSS  versi  24,  untuk mengetahui hubungan dan membuat persamaan HKSA.
Parameter  yang  diamati  pada  penelitian  ini  yaitu  parameter  sifat  fisikokimia  meliputi (1) Parameter Lipofilik (ClogP, tetapan π Hansch), (2) Parameter  Elektronik (Etot, dan tetapan σ Hammet),  (3)  Parameter  Sterik  (Es  taft  dan  CMR).  Parameter  Bioavailabilitas  yaitu  nilai Intestinal  absorption (F),  parameter  Aktivitas  yaitu  nilai rerank  score dan  RMSD,  parameter Toksisitas yaitu nilai LD50.
Langkah  pertama,  mengunduh  file  makromolekul  reseptor  BTK  dengan  kode 5FBN.
Dilanjutkan dengan membuat struktur 2D dan 3D dari senyawa uji 1-benzil-3- benzoilurea dan analognya menggunakan program berturut-turut Chemdraw ultra 12 dan Chembio3D ultra 12. Struktur 3D dilakukan penstabilan terlebih dahulu sebelum digunakan untuk molecular docking dengan  fitur MM2  minimization pada  program  Chembio3D  ultra  13.  Struktur  3D  yang  sudah stabil  digunakan  untuk molecular  docking dengan  menggunakan  program  Molegro  Virtual Docker  5.5  untuk  memperoleh  nilai rerank  score , RMSD dan  melihat  ikatan  obat  dengan reseptor. Prediksi ADME dilakukan  dengan  menggunakan  program  pkCSM  dengan  menginput
file  3D  senyawa  uji  yang sudah  dikonversi  ke  bentuk  SMILE  file,  hasil  yang  diperoleh  yaitu prediksi  nilai intestinal  human  absorbtion (F).  Prediksi  toksisitas  dilakukan  dengan menggunakan program Protox II dengan menginput file 2D dari senyawa uji dalam bentuk txt file,  hasil  yang  diperoleh  yaitu  prediksi  nilai  LD50.  Tahap  terakhir  yang  dilakukan  yaitu membuat persamaan HKSA untuk melihat hubungan antara parameter sifat fisikokimia dengan parameter  bioavailabilitas,  aktivitas  dan  toksisitas,  dengan  menggunakan  program  statistika IBM SPSS versi 24.

## HASIL Parameter Bioavaibilitas (F)
Pada  uji  prediksi  bioavailabilitas  dengan  menggunakan  program  web  online  pkCSM dapatkan hasil senyawa pembanding memiliki nilai F (bioavailabilitas) lebih tinggi dari senyawa uji.  Senyawa  uji  yang  memiliki  nilai  F  (bioavailabilitas)  terbaik  yaitu  senyawa  1-Benzil-3-(4- OCH3-benzoil)urea dengan nilai 93,277 % sedangkan senyawa pembanding yang diperoleh dari Acalabrutinib dengan nilai F (bioavailabilitas) 94,184 %. Hasil uji dapat dilihat pada Tabel 1.

## Parameter Aktivitas (RS)
Pada  uji  aktivitas  dapatkan  hasil  prediksi  nilai Rerank  Score paling  baik  dari semua senyawa  uji  lain,  yaitu  senyawa  1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea  dengan  nilai Rerank  Score - 103.9030 kkal/mol, lebih besar dibandingkan dengan senyawa pembanding yaitu Acalabrutinib dengan  nilai Rerank  Score -154.1513  kkal/mol  dengan  nilai  RMSD  0,5552  Å.  Rendahnya  nilai Rerank Score Acalabrutinib menunjukkan senyawa obat pembanding ini memiliki aktivitas yang lebih  baik  dibandingkan  senyawa  uji  1-  Benzil-3-Benzoilurea  dan  analognya..  Ini menggambarkan  semakin  rendah  nilai Rerank  Score maka  semakin  rendah  juga  energi  yang dibutuhkan  untuk  berikatan,  sehingga  ikatan  yang  terbentuk  semakin  stabil.  Hasil  uji  dapat dilihat pada Tabel 2.

## Tabel 1
Hasil Prediksi Nilai Bioavailabilitas (F) Dari Senyawa 1-Benzil-3-Benzoilurea   dan Analognya
Nama Senyawa F (%) Nama Senyawa F (%) 1-Benzil-3-benzoilurea 92,029 1-Benzil-3-(4-C3H7-benzoil)urea 91,355 1-Benzil-3-(2-Cl-benzoil)urea 90,368 1-Benzil-3-(4- t -C4H9-benzoil)urea 90,533 1-Benzil-3-(3-Cl-benzoil)urea 91,239 1-Benzil-3-(4-F-benzoil)urea 91,783 1-Benzil-3-(4-Cl-benzoil)urea 90,827 1-Benzil-3-(2-CF3-benzoil)urea 88,755 1-Benzil-3-(2,4-di-Cl-benzoil)urea 89,166 1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea 89,906 1-Benzil-3-(3,4-di-Cl-benzoil)urea 90,496 1-Benzil-3-(4-CH2Br-benzoil)urea 90,834 1-Benzil-3-(4-CH2Cl-benzoil)urea 91,009 1-Benzil-3-(4-OCH3-benzoil)urea 93,277 1-Benzil-3-(3-CH2Cl-benzoil)urea 90,890 1-Benzil-3-(4-NO2-benzoil)urea 82,229 1-Benzil-3-(4-CH3-benzoil)urea 92,285 1-Benzil-3-(4-Br-benzoil)urea 90,760 1-Benzil-3-(4-C2H5-benzoil)urea 92,083 Acalabrutinib 94,184 1-Benzil-3-(3-C2H5-benzoil)urea 91,964

## Tabel 2
Hasil Uji Aktivitas dari Senyawa 1-benzil-3-benzoilurea dan Analognya

## Parameter Toksisitas (LD50)
Pada uji LD50 (toksisitas) dapatkan hasil uji toksisitas (nilai LD50) yang tertinggi yaitu senyawa  1-Benzil-3-(2-Cl-benzoil)urea,1-Benzil-3-(3-CH2Cl-benzoil)urea,  1-Benzil-3-  (2-CF3- benzoil)urea  dengan  nilai  LD50  3000  mg  dan  toksisitas  kelas  5.  Lebih  besar  apabila dibandingkan dengan senyawa pembanding yaitu Acalabrutinib dengan nilai LD50 135 mg dan toksisitas kelas 3. Nilai dan kelas toksisitas tersebut menandakan bahwa senyawa uji mungkin berbahaya jika tertelan. Hasil uji dapat dilihat pada Tabel 3.
No. Nama Senyawa Rerank Score I II III Rata-rata 1 1-Benzil-3-benzoilurea -87.4983 -90.7377 -91.1108 -89.7823 2 1-Benzil-3-(2-Cl-benzoil)urea -78.7147 -83.1877 -81.9761 -81.2928 3 1-Benzil-3-(3-Cl-benzoil)urea -91.1085 -86.7141 -86.4327 -88.0851 4 1-Benzil-3-(4-Cl-benzoil)urea -83.7347 -83.1124 -85.0553 -83.9675 5 1-Benzil-3-(2,4-di-Cl-benzoil)urea -74.8406 -78.913 -80.8924 -78.2153 6 1-Benzil-3-(3,4-di-Cl-benzoil)urea -86.1932 -90.6174 -87.6998 -88.1710 7 1-Benzil-3-(4-CH 2 Cl-benzoil)urea -85.6967 -90.1372 -82.0237 -85.9525 8 1-Benzil-3-(3-CH 2 Cl-benzoil)urea -90.6750 -94.6627 -95.5919 -93.6432 9 1-Benzil-3-(4-CH 3 -benzoil)urea -84.2295 -78.5429 -85.5080 -82.7601 10 1-Benzil-3-(4-C 2 H 5 -benzoil)urea -89.7963 -88.3818 -91.0948 -89.7576 11 1-Benzil-3-(3-C 2 H 5 -benzoil)urea -98.3457 -93.3203 -95.7457 -95.8039 12 1-Benzil-3-(4-C 3 H 7 -benzoil)urea -88.7189 -99.4989 -95.3863 -94.5347 13 1-Benzil-3-(4- t -C 4 H 9 -benzoil)urea -88.5737 -97.4096 -100.821 -95.6014 14 1-Benzil-3-(4-F-benzoil)urea -88.3184 -91.2561 -92.4993 -90.6913 15 1-Benzil-3-(2-CF 3 -benzoil)urea -89.1847 -97.0757 -86.5028 -90.9211 16 1-Benzil-3-(3-CF 3 -benzoil)urea -102.965 -106.091 -102.653 -103.9030 17 1-Benzil-3-(4-CH 2 Br-benzoil)urea -93.6182 -90.8014 -81.8780 -88.7659 18 1-Benzil-3-(4-OCH 3 -benzoil)urea -89.6315 -95.7558 -95.0823 -93.4899 19 20 21 1-Benzil-3-(4-NO 2 -benzoil)urea 1-Benzil-3-(4-Br-benzoil)urea Acalabrutinib -94.075 -86.3085 -154.0640 -93.5481 -86.8358 -154.1470 -89.8186 -88.0009 -154.2430 -92.4806 -87.0484 -154.1513

## Tabel 3
Hasil Uji Toksisitas Dari Senyawa 1-Benzil-3-Benzoilurea dan Analogny

## Analisis Hukum 5 Lipinski
Analisis terhadap Hukum Lima Lipinski didapat hasil bahwa semua senyawa memenuhi syarat,  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  senyawa  -  senyawa  tersebut  diprediksi  memiliki kemampuan untuk menembus membran yang baik. Dan dapat juga diprediksi bahwa senyawa – senyawa tersebut memiliki absorbsi yang baik. Hasil dapat dilihat pada Tabel 4.
No Nama Senyawa LD50 (mg/kg) Kelas Toksisitas 1 1-Benzil-3-benzoilurea 1950 4 2 1-Benzil-3-(2-Cl-benzoil)urea 3000 5 3 1-Benzil-3-(3-Cl-benzoil)urea 2000 4 4 1-Benzil-3-(4-Cl-benzoil)urea 2000 4 5 1-Benzil-3-(2,4-di-Cl-benzoil)urea 2000 4 6 1-Benzil-3-(3,4-di-Cl-benzoil)urea 2000 4 7 1-Benzil-3-(4-CH 2 Cl-benzoil)urea 1950 4 8 1-Benzil-3-(3-CH 2 Cl-benzoil)urea 3000 5 9 1-Benzil-3-(4-CH 3 -benzoil)urea 818 4 10 1-Benzil-3-(4-C 2 H 5 -benzoil)urea 2000 4 11 1-Benzil-3-(3-C 2 H 5 -benzoil)urea 2000 4 12 1-Benzil-3-(4-C 3 H 7 -benzoil)urea 2000 4 13 1-Benzil-3-(4- t -C 4 H 9 -benzoil)urea 2000 4 14 1-Benzil-3-(4-F-benzoil)urea 2000 4 15 1-Benzil-3-(2-CF 3 -benzoil)urea 3000 5 16 1-Benzil-3-(3-CF 3 -benzoil)urea 2000 4 17 1-Benzil-3-(4-CH 2 Br-benzoil)urea 1950 4 18 1-Benzil-3-(4-OCH 3 -benzoil)urea 2000 4 19 1-Benzil-3-(4-NO 2 -benzoil)urea 2850 5 20 1-Benzil-3-(4-Br-benzoil)urea 2000 4 21 Acalabrutinib 135 3

## Tabel 4
Analisis Hukum Lima Lipinski Dari Sifat Fisikokimia Senyawa 1-Benzil-3-Benzoilurea Dan

## Analognya
No Nama Senyawa BM Log P Ikatan H Donor Ikatan H Aseptor Ketentuan <500 <5 <5 <10 1 1-Benzil-3-benzoilurea 254,289 2,3262 2 2 2 1-Benzil-3-(2-Cl-benzoil)urea 288,734 2,9796 2 2 3 1-Benzil-3-(3-Cl-benzoil)urea 288,734 2,9796 2 2 4 1-Benzil-3-(4-Cl-benzoil)urea 288,734 2,9796 2 2 5 1-Benzil-3-(2,4-di-Cl-benzoil)urea  323,179 3,633 2 2 6 1-Benzil-3-(3,4-di-Cl-benzoil)urea  323,179 3,633 2 2 7 1-Benzil-3-(4-CH 2 Cl-benzoil)urea 302,761 3,065 2 2 8 1-Benzil-3-(3-CH 2 Cl-benzoil)urea 302,761 3,065 2 2 9 1-Benzil-3-(4-CH 3 -benzoil)urea 268,316  2,63462 2 2 10  1-Benzil-3-(4-C 2 H 5 -benzoil)urea 282,343 2,8886 2 2 11  1-Benzil-3-(3-C 2 H 5 -benzoil)urea 282,343 2,8886 2 2 12  1-Benzil-3-(4-C 3 H 7 -benzoil)urea 296,37 3,2787 2 2 13  1-Benzil-3-(4- t -C 4 H 9 -benzoil)urea  310,397  3,6237 2 2 14  1-Benzil-3-(4-F-benzoil)urea 272,279 2,4653 2 2 15  1-Benzil-3-(2-CF 3 -benzoil)urea 322,286 3,345 2 2 16  1-Benzil-3-(3-CF 3 -benzoil)urea 322,286 3,345 2 2 17  1-Benzil-3-(4-CH 2 Br-benzoil)urea  347,212  3,2211 2 2 18  1-Benzil-3-(4-OCH 3 -benzoil)urea 284,315 2,3348 2 2 19  1-Benzil-3-(4-NO 2 -benzoil)urea 299,286 2,2344 2 2 20  1-Benzil-3-(4-Br-benzoil)urea 333,185 3,0887 2 2 21  Acalabrutinib 474,26 4,077 2 5
Pada penelitian ini dilakukan pengamatan terhadap ikatan obat dengan reseptor. Hasil pengamatan pada penelitian ini hanya ditemukan ikatan hidrogen yang dapat dilihat pada Tabel 5  dan  interaksi  sterik  yang  dapat  dilihat  pada  Tabel  6.  Pada  penelitian  ini  tidak  ditemukan adanya ikatan elektronik.

## Correlation Matrix
Pada uji korelasi diperoleh hasil sebagai berikut:
1. σ Hammet berpengaruh secara signifikan pada p<0,01 terhadap bioavailabilitas dengan nilai korelasi Pearson -0,773 dengan signifikansi 0,000 dan juga berpengaruh signifikan pada p<0,05 terhadap toksisitas dengan nilai korelasi Pearson 0,481 dengan signifikansi 0,032.
2. Es Taff berpengaruh secara signifikan pada p<0,05 terhadap bioavailabilitas dengan nilai korelasi Pearson 0.447 dengan signifikansi 0,048 dan Es Taft juga berpengaruh siginifikan pada p<0,05 terhadap aktivitas dengan nilai korelasi Pearson 0,551 dengan signifikansi 0,012.
Hipotesa diuji dengan menggunakan analisis regresi secara linier. Hasil yang didapat lebih obyektif  yaitu  berupa  persamaan  yang  lebih  mudah  dipahami.  Regresi  yang  dilakukan yaitu  satu  parameter,  dua  parameter  dan  tiga  parameter  variabel  bebas sifat  fisikokimia dengan variabel tergantung bioavailabilitas, aktivitas dan toksisitas.

## Tabel 5
Ikatan Hidrogen Antara Asam Amino Dengan Senyawa Acalabrutinib, 1-Benzil- 3-Benzoilurea dan Analognya Terhadap Reseptor BTK
No  Nama Senyawa Ser Asp Met Glu Thr 538 539 477 475 474 1.  1-Benzil-3-benzoilurea 2+ - - - + 2.  1-Benzil-3-(2-Cl-benzoil)urea - 2+ - - - 3.  1-Benzil-3-(3-Cl-benzoil)urea - 2+ - - - 4.  1-Benzil-3-(4-Cl-benzoil)urea + + - - + 5.  1-Benzil-3-(2,4-di-Cl-benzoil)urea + - - - - 6.  1-Benzil-3-(3,4-di-Cl-benzoil)urea + + - - + 7.  1-Benzil-3-(4-CH 2 Cl-benzoil)urea + + - - - 8.  1-Benzil-3-(3-CH 2 Cl-benzoil)urea + + - - - 9.  1-Benzil-3-(4-CH 3 -benzoil)urea + + - - - 10.  1-Benzil-3-(4-C 2 H 5 -benzoil)urea + + - - - 11.  1-Benzil-3-(3- C 2 H 5 -benzoil)urea 2+ - - - - 12.  1-Benzil-3-(4-C 3 H 7 -benzoil)urea - - - - - 13.  1-Benzil-3-(4- t -C 4 H 9 -benzoil)urea + - - - 2+ 14.  1-Benzil-3-(4-F-benzoil)urea + + - - - 15.  1-Benzil-3-(2-CF 3 -benzoil)urea + - - - - 16.  1-Benzil-3-(3-CF 3 -benzoil)urea + + - - + 17.  1-Benzil-3-(4-CH 2 Br-benzoil)urea - - - - + 18.  1-Benzil-3-(4-OCH 3 -benzoil)urea - + - - + 19.  1-Benzil-3-(4-NO 2 -benzoil)urea - - + + 2+ 20.  1-Benzil-3-(4-Br-benzoil)urea + + - - + 21.  Acalabrutinib 2+ + + + +

## Tabel 6
Interaksi Sterik Antara Asam Amino Dengan Senyawa Acalabrutinib, 1-Benzil- 3-Benzoilurea dan Analognya Terhadap Reseptor BTK
No    Nama Senyawa Ser  Asp  Leu  Leu  Lys Met Thr Ala 538  539  408  460  430 477 474 428 1 1-Benzil-3-benzoilurea - - - - - - + - 2 1-Benzil-3-(2-Cl-benzoil)urea + 2+ - 2+ + - - - 3 1-Benzil-3-(3-Cl-benzoil)urea - - - - 2+ - + - 4 1-Benzil-3-(4-Cl-benzoil)urea + - - - - - 2+ + 5 1-Benzil-3-(2,4-di-Cl-benzoil)urea + 2+ - - - - + - 6 1-Benzil-3-(3,4-di-Cl-benzoil)urea + - - - - - - + 7 1-Benzil-3-(4-CH 2 Cl-benzoil)urea - - - - - - + - 8 1-Benzil-3-(3-CH 2 Cl-benzoil)urea - - - - - - + + 9 1-Benzil-3-(4-CH 3 -benzoil)urea - - - - - - + - 10  1-Benzil-3-(4-C 2 H 5 -benzoil)urea - - - - + + + + 11  1-Benzil-3-(3- C 2 H 5 -benzoil)urea + - - - - - - - 12  1-Benzil-3-(4-C 3 H 7 -benzoil)urea - - - - - 2+ + - 13  1-Benzil-3-(4- t -C 4 H 9 -benzoil)urea + - - - - - + - 14  1-Benzil-3-(4-F-benzoil)urea + + - + + - - + 15  1-Benzil-3-(2-CF 3 -benzoil)urea + - - 2+ + - + + 16  1-Benzil-3-(3-CF 3 -benzoil)urea + - - - - + - - 17  1-Benzil-3-(4-CH 2 Br-benzoil)urea - - - - - + + + 18  1-Benzil-3-(4-OCH 3 -benzoil)urea - - - - - - - - 19  1-Benzil-3-(4-NO 2 -benzoil)urea - - - - - - - - 20  1-Benzil-3-(4-Br-benzoil)urea + - - - - - 2+ - 21  Acalabrutinib + - 2+ - - - - -

## Analisis Regresi Sifat Fisikokimia Terhadap Bioavaibilitas
Persamaan  HKSA  dari  satu  parameter  yang  paling  baik  terhadap  bioavailabilitas diperoleh persamaan linier sebagai berikut: y = -5,999 σ  +  91,558 dengan nilai r = 0,773; SE = 1,457; F = 26,734; Sig = 0,000 dan n = 20.
Persamaan  dari  dua  parameter  yang  paling  baik  terhadap  bioavailabilitas  diperoleh persamaan nonlinier sebagai berikut: y = -2,655 π² + 4,367 π  - 6,551  σ + 90,749 dengan nilai r = 0,906; SE = 1,033; F = 24,347; Sig = 0,000 dan n = 20.
Persamaan  dari  tiga  parameter  yang  paling  baik  terhadap  bioavailabilitas  diperoleh persamaan nonlinier sebagai berikut: y = -1,969 π² + 3,620 π - 6,116 σ + 0,851 Es Taft + 90,809 dengan nilai r = 0,936; SE = 0,883; F = 26,703; Sig = 0,000 dan n = 20.

## Analisis Regresi Sifat Fisikokimia Terhadap Aktivitas (RS)
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  persamaan  HKSA  dari  satu  parameter  yang  paling baik terhadap Aktivitas diperoleh persamaan linier sebagai berikut: y = 4.376 Es Taft - 88.802 dengan nilai r = 0.551; SE = 5.00450; F = 7.851; Sig = 0.012 dan n = 20.
Pada  persamaan  dari  dua  parameter  yang  paling  baik  terhadap  Aktivitas  diperoleh persamaan nonlinier sebagai berikut: y = 4.489 Es Taft + 3.443 σ - 89.334 dengan nilai r = 0.577; SE = 5.04245; F = 4.232; Sig 0.032 dan n = 20.
Pada persamaan dari tiga parameter tidak diperoleh hasil yang signifikan.

## Analisis Regresi Sifat Fisikokimia Terhadap Toksisitas (LD50)
Persamaan  HKSA  pada  satu  parameter  yang  paling  baik  terhadap  Toksisitas  diperoleh persamaan  linier  sebagai  berikut:  y  =  839,932  σ  +  1990,251  dengan  nilai  r  =  0,481;  SE  = 453,248; F = 5,414; Sig = 0,032; n = 20.
Persamaan  dari  dua  parameter  yang  paling  baik  terhadap  Toksisitas  diperoleh persamaan linier sebagai berikut: y = -669,385 ClogP - 672,518 CMR - 813,806 dengan nilai r = 0,547; SE = 445,280; F = 3,630; Sig = 0,049; n = 20. Pada persamaan dari tiga parameter tidak diperoleh hasil yang signifikan.

## BAHASAN
Prediksi  data  bioavailabilitas  diperoleh  melalui  program  web  onlinepkCSM- Pharmakokinetics,  dengan  cara  menginput  data SMILE dan  dipilih  opsi  prediksi  admet, kemudian program akan melakukan analisa, dan diperoleh data berupa prediksi nilai intestinal absorption  (Human). Nilai  bioavaibilitas  merupakan  presentase  dan  kecepatan  dari  zat  aktif senyawa  obat  untuk  mencapai  sirkulasi  sistemik  dalam  bentuk  aktif.  Nilai  dari intestinal absorption  (Human) dianggap  sebagai  nilai  bioavaibilitas.  Senyawa  obat  dikatakan  memiliki bioavaibilitas yang baik jika nilai dari senyawa obat diatas 70% (BPOM, 2005). Pada penelitian ini  diperoleh  hasil  senyawa  pembanding  lebih  tinggi  dari  senyawa  uji.  Senyawa  uji  yang memiliki nilai F (bioavaibilitas) terbaik yaitu senyawa 1- Benzil-3-(4-OCH 3 -benzoil)urea dengan nilai 93,277 %, sedangkan senyawa uji yaitu Acalabrutinib memiliki nilai F (bioavaibilitas) 94.184
%.
Prediksi  data  aktivitas  diperoleh  dengan  melakukan molecular  docking pada  program Molegro Virtual Docker versi 5.5. Parameter yang di dapatkan dari molecular docking ini adalah Rerank  Score,  RMSD,  Hbond,  dan  Muldock  Score.  Rerank  Score (RS)  menggambarkan  prediksi aktivitas senyawa obat yang merupakan parameter penting dalam molecular docking ini, rerank score merupakan  nilai  dari  hasil  pengurutan  kembali energi  kimia  seperti muldock  score dan energi  sterik  lainnya  yang  telah  diminimalkan,  dan  mempertimbangkan  faktor  lain  seperti RMSD  ( Root  Mean  Square  Deviation). Pada  penelitian  ini  diperoleh  hasil  nilai Rerank  Score senyawa  uji  memiliki  nilai  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  senyawa  pembanding  yaitu Acalabrutinib.  Semakin  rendah  nilai rerank  score menunjukkan  semakin  rendah  energi  yang dibutuhkan  untuk  berikatan,  sehingga  ikatan  yang  terbentuk  semakin  stabil.  Prediksi  nilai Rerank  Score terendah  dari  senyawa  uji  yaitu  1-Benzil-3-(3-CF 3 -benzoil)urea  dengan  nilai Rerank Score -103,9030 kkal/mol, sedangkan senyawa pembanding yaitu Acalabrutinib dengan nilai Rerank  Score -154,1513  kkal/moldengan  nilai  RMSD  0,5552  Å.  Rendahnya  nilai Rerank Score Acalabrutinib menunjukkan  senyawa  obat  pembanding  ini  memiliki  aktivitas yang  lebih baik dibandingkan senyawa uji 1-Benzil-3-Benzoilurea dan analognya.
Prediksi  data  toksisitas  diperoleh  melalui  program webonline  Protox  II, data  yang diperoleh berupa nilai LD50 dan kelas toksisitas dari senyawa tersebut. Nilai LD50 merupakan median dosis atau jumlah dosis yang mampu mematikan 50% dari subjek uji setelah terpapar senyawa  yang  diujikan  dan  kelas  toksisitas  merupakan  klasifikasi  palabelan bahan kimia yang telah  diselaraskan  dengan  nilai  LD50  (Banerjee  P.,  2019)  dengan  klasifikasi  oleh webonline Protox II sebagai berikut:
 Kelas 1 : fatal jika tertelan (LD50≤ 5)
 Kelas 2 : fatal jika tertelan (5 <LD50 ≤ 50)
 Kelas 3 : beracun jika tertelan (50 <LD50 ≤ 300)
 Kelas 4 : berbahaya jika tertelan (300 <LD50 ≤ 2000)
 Kelas 5 : mungkin berbahaya bila tertelan (2000 <LD50 ≤ 5000)
 Kelas 6 : tidak beracun (LD50> 5000)
Hasil prediksi toksisitas dapat dilihat pada Tabel 4.5, dari penelitian ini diperoleh hasil nilai LD50 (toksisitas) yang terbaik adalah senyawa 1-Benzil-3-(2-Cl- benzoil)urea,1-Benzil-3-(3- CH 2 Cl-benzoil)urea,  1-Benzil-3-(2-CF 3 -benzoil)ureadengan  nilai LD50  3000  mg  dan  toksisitas kelas  5.  Sedangkan  nilai  LD50  terendah  pada  senyawa  uji  yaitu  818  mg/kg  dengan  toksisitas kelas  4  pada  senyawa  1-Benzil-3-(4-CH 3 -benzoil)urea.  Senyawa  pembanding  yaitu Acalabrutinibmemiliki  nilai  LD50132  mg/kg  dan  toksisitas  kelas  3.  Oleh  karena  itu,  dapat disimpulkan  seluruh  senyawa  uji  yaitu  1-Benzil-3-Benzoilurea  dan analognya mempunyai nilai LD50 dan kelas toksisitas lebih besar daripada senyawa pembanding Acalabrutinib.
Berdasarkan analisis terhadap Hukum Lima Lipinski, hasil semua senyawa memenuhi syarat  yang  bisa  disimpulkan.  Bahwa  senyawa-senyawa  tersebut  diprediksi  mempunyai kemampuan  menembus  membran  yang  baik  serta  diprediksi  senyawa-  senyawa  tersebut memiliki absorbsi yang baik. Berikut syarat aturan dari lima Lipinski
1. Massa molekul kurang dari 500
2. Nilai terhitung dari log P kurang dari 5
3. Kurang dari sepuluh akseptor ikatan hidrogen, misal : -O-,-N- dll
4. Kurang dari lima kelompok donor ikatan hidrogen, misal : NH, OH dll
5. Mempunyai ikatan H aseptor yang dinyatakan dengan jumlah atom O dan N lebih besar 10.
Pada  pengamatan  ikatan  obat  dengan  reseptor  senyawa  uji  memiliki  jumlah  ikatan yang berbeda beda dan dengan asam amino yang berbeda. Kemiripan ikatan dan interaksi yang sama  dengan  senyawa  pembanding  ditemukan  pada  salah  satu  senyawa  uji.  Senyawa pembanding  Acalabrutinib  memiliki  interaksi  sterik  dengan  asam  amino  Ser 538  dan  Leu  408 serta memiliki ikatan hidrogen dengan asam amino Ser 538, Asp 539, Met 477, Glu 475 dan Thr 474. Senyawa uji yang memiliki interaksi sterik dan ikatan hidrogen yang sama dengan senyawa pembanding Acalabrutinib yaitu 1-Benzil-3-(3-CF 3 -  benzoil)urea, pada interaksi sterik terdapat asam amino Ser 538 serta ikatan hidrogen dengan asam amino Ser 538, Asp 539 dan Thr 474. Senyawa  uji  1-Benzil-3-(3-CF 3 -  benzoil)urea  diprediksi  memiliki  mekanisme  kerja  yang  sama dengan senyawa pembanding Acalabrutinib.
Pada uji korelasi diperoleh hasil sebagai berikut:
1. σ Hammet berpengaruh secara signifikan pada p<0,01 terhadap bioavailabilitas dengan nilai korelasi Pearson -0,773 dengan signifikansi 0,000 dan juga berpengaruh signifikan pada p<0,05 terhadap toksisitas dengan nilai korelasi Pearson 0,481 dengan signifikansi 0,032.
2. Es Taff berpengaruh secara signifikan pada p<0,05 terhadap bioavailabilitas dengan nilai korelasi Pearson 0.447 dengan signifikansi 0,048 dan Es Taft juga berpengaruh siginifikan pada p<0,05 terhadap aktivitas dengan nilai korelasi Pearson 0,551 dengan signifikansi 0,012.
Hipotesa  diuji  dengan  menggunakan  analisis  regresi  secara  linier.  Hasil  yang  didapat lebih  obyektif  yaitu  berupa  persamaan  yang  lebih  mudah  dipahami.  Regresi yang dilakukan yaitu  satu  parameter,  dua  parameter  dan  tiga  parameter  variabel  bebas  sifat  fisikokimia dengan variabel tergantung bioavailabilitas, aktivitas dan toksisitas.
Dari  uji  regresi  satu  parameter,  dua  parameter  dan  tiga  parameter  terhadap  parameter bioavaibilitas  (F)  diperoleh  satu  persamaan  terbaik.  Dapat  disimpulkan  persamaan  terbaik ditunjukkan melalui persamaan hasil uji regresi terhadap tiga parameter. Pemilihan parameter tersebut  berdasarkan  dari  nilai  R  dan  nilai  signifikan  dari  masing-masing  persamaan. Persamaan yang terbaik yaitu harus memiliki nilai P ( probability) atau  signifikansi  kurang  dari p <0.05,  nilai  r  mendekati  satu,  nilai  SE  ( Standart  Eror )  paling  rendah  dan  F  yang  tinggi  dari masing-masing  persamaan.  Jadi  parameter  bioavaibilitas  dipengaruhi  oleh  parameter  sifat
fisikokimia  (lipofilik,  elektronik,  dan  sterik)  sehingga  untuk  mendapatkan  bioavaibilitas  yang optimal, perlu dilakukan tinjauan terhadap parameter sifat fisikokimia lipofilik (π Hansch dan π² Hansch), elektronik (σ Hammet) dan sterik (Es Taff).
Dari  uji  regresi  satu  parameter,  dua  parameter  dan  tiga  parameter  terhadap parameter aktivitas (RS) yang diperoleh persamaan terbaik. Dan dapat disimpulkan persamaan terbaik  ditunjukkan  pada  persamaan  satu  parameter.  Persamaan  yang  terbaik  yaitu  harus memiliki  nilai  signifikansi  paling  rendah,  nilai  R  mendekati  satu,  nilai  SE  paling  rendah  dan mempunyai nilai F yang paling tinggi. Jadi parameter aktivitas dipengaruhi oleh parameter sifat fisikokimia  (lipofilik,  elektronik,  dan  sterik)  sehingga  untuk  mendapatkan  nilai  aktivitas  yang optimal, perlu dilakukan tinjauan terhadap parameter sifat fisikokimia sterik (Es Taft).
Dari  uji  regresi  pada  satu  parameter,  dua  parameter  dan  tiga  parameter  terhadap parameter  toksisitas  (LD50)  dapat  disimpulkan  persamaan  terbaik  yang  ditunjukkan  melalui hasil uji regresi satu parameter. Persamaan yang terbaik yaitu harus memiliki  nilai  signifikansi paling  rendah,  nilai  R  mendekati  satu,  nilai  SE  paling  rendah dan  mempunyai  nilai  F  yang paling tinggi. Jadi parameter toksisitas dipengaruhi oleh parameter sifat fisikokimia (elektronik) sehingga untuk mendapatkan  nilai  toksisitas yang optimal, perlu dilakukan tinjauan terhadap parameter sifat fisikokimia elektronik (σ).
Dari data uji yang telah di analisa maka dapat diinterpretasikan senyawa uji yang paling potensial  untuk  dilanjutkan  ke  tahap  berikutnya  sebagai  terapi  antikanker  limfoma  non- hodgkin  adalah  1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea.  Senyawa  uji  1-Benzil-3-(3-  CF3-benzoil)urea diprediksi  memiliki  nilai  bioavaibilitas  yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  senyawa pembanding yaitu Acalabrutinib, senyawa 1-Benzil-3-(3-CF3- benzoil)urea memiliki selisih nilai bioavaibilitas yang tidak terlalu jauh dengan senyawa pembanding. Acalabrutinib memiliki nilai biavaibilitas intestinal absorbtion (Human) 94,184 % sementara senyawa uji 1-Benzil-3-(3-CF3- benzoil)urea memiliki nilai bioavaibilitas intestinal absorbtion (Human) 89,906%. Untuk hukum lima  Lipinski,  senyawa  uji 1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea sudah memenuhi persyaratan dan di prediksi mampu untuk menembus membran dengan baik dan memiliki mekanisme kerja yang sama dengan Acalabrutinib,   karena memiliki interaksi sterik dengan asam amino Ser 538 serta ikatan hidrogen dengan asam amino Ser 538, Asp 539 dan Thr 474 yang sama dengan senyawa pembanding Acalabrutinib yang diperoleh menggunakan program Molegro Virtual Docking 5.5 pada bagian Ligand map.
Berdasarkan  Toksisitas,  senyawa  uji  yaitu  1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea mempunyai nilai kelas toksisitas 5 dengan nilai LD50 3000 mg/kg lebih tinggi dibandingkan dengan senyawa pembanding yaitu Acalabrutinib yang mempunyai nilai kelas toksisitas 3 dengan nilai LD50 135 mg/kg. Sehingga senyawa uji 1-Benzil-3-(3-CF3- benzoil)urea lebih aman di bandingkan dengan senyawa  pembanding  Acalabrutinib.  Dilihat dari prediksi aktivitas, senyawa 1-Benzil-3-(3-CF3- benzoil)urea  memiliki  aktivitas  yang  cukup  tinggi  yaitu  -103,9030  kkal/mol  dibandingkan dengan senyawa pembanding Acalabrutinib yaitu -154,1513 kkal/mol. Berdasarkan dari semua hasil nilai senyawa uji, untuk senyawa 1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea merupakan senyawa yang memiliki  nilai  aktivitas  tertinggi,  dan  dilihat  dari  semua  aspek  uji  yang  telah  dilakukan  pada penelitian  ini  senyawa  1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea  adalah  senyawa  yang  paling  potensial untuk di kembangkan ke tahap yang lebih lanjut.

## SIMPULAN
Diperoleh  hubungan  nonlinier  antara  sifat  fisikokimia,  parameter  lipofilik, elektronik dan  sterik  terhadap  prediksi  bioavailabilitas  dari  senyawa  1-benzil-3-benzoilurea  dan analognya yang ditunjukkan oleh persamaan bioavailabilitas terbaik yang diperoleh yaitu F = - 1.969 π² + 0.851 Es Taft - 6.116 σ + 3.620 π + 90.809 dengan nilai r = 0.936; SE = 0.88289; F = 26.703; Sig = 0,000 dan n = 20.
Diperoleh  hubungan  linier  antara  sifat  fisikokimia,  parameter  lipofilik,  elektronik  dan sterik  terhadap  prediksi  aktivitas  dari  senyawa  1-benzil-3-benzoilurea  dan  analognya yang ditunjukkan oleh persamaan aktivitas terbaik yang diperoleh yaitu RS = 4.376 Es Taft - 88.802
dengan nilai r = 0.551; SE = 5.00450; F = 7.851; Sig = 0.012 dan n = 20.
Diperoleh  hubungan  linier  antara  sifat  fisikokimia,  parameter  lipofilik,  elektronik  dan sterik  terhadap  prediksi  toksisitas  dari  senyawa  1-benzil-3-benzoilurea  dan  analognya  yang ditunjukkan  oleh  persamaan  toksisitas  terbaik  yang  diperoleh  yaitu  LD50  =  672.518  CMR  - 669.385  ClogP  - 813.806  dengan nilai r = 0.547;  SE = 445.27976; F = 3.63; Sig = 0.049 dan n = 20.

## SARAN
Senyawa  1-Benzil-3-(3-CF3-benzoil)urea  berpotensi  untuk  ke  tahap  lebih  lanjut,yaitu dengan melakukan sintesis dan uji in vitro dan in vivo pada kanker limfoma non- Hodgkin.
Dari persamaan terbaik yang didapat dapat dikembangkan untuk memodifikasi turunan yang  lain  dari  senyawa  induk  1-Benzil-3-Benzoilurea  yang  mempunyai  aktivitas  lebih  tinggi disertai bioavaibilitas yang tinggi dan toksisitas yang rendah.

## PUSTAKA ACUAN
American Cancer Society. (2017). Lymphoma Cancer.
Anwar,  A.  D.,  Harsono,  A.  B.,  Sasotya,  R.  S.,  Amarullah,  M.  N.,  &  Hidayat,  D.  (2013). Bandung Controversies and Consensus in Obstetrics & Gynecology.
Arruebo, M., Villaboa, N., Saez-Gutierrez, B., Lambea, J., Tres, A., Valladares, M., & Gonzalez- Fernandez,  A.  (2011).  Assessment  of  the  Evolution  of  Cancer  Treatment  Therapies. Cancers . Astor,  L.  (2019,  11  21). FDA  Approves  Acalabrutinib  for  CLL/SLL .  Retrieved  from  Targeted Oncology: https://www.targetedonc.com/news/fda-approves-acalabrutinib-for- cllsll Drugbank.  (2016,  Oktober  20). Acalabrutinib .  Retrieved  Januari  10,  2020,  from  Drugbank: https://www.drugbank.ca/drugs/DB11703
Ferreira,  L.  G.,  Dos  Santos,  R.,  Olivia,  G.,  &  Andricopulo,  A.  (2015).  Molecular  Docking  and Structure-Based Drug Design Strategies. Molecules , 13384-13421.
Kemenkes RI. (2015). Data dan Kondisi Penyakit Limfoma. InfoDATIN .
Globocan. (2018). Cancer Today. Retrieved September 2019, from International Agency for  Research  on  Cancer:  http://gco.iarc.fr/today/data/factsheets/populations/900- world-fact-sheets.pdf
Koda-Kimble, M. A., Alldredge, B. K., Young, L. Y., Corelli, R. L., Guglielmo, B. J., Kradjan, W. A., & Williams, B. R. (2008). Applied Therapeutics The Clinical Use of Drugs. National  Cancer  Institute.  (2019,  June  14). Adult  Non-Hodgkin  Lymphoma  Treatment (PDQ®)–Patient  Version .  Retrieved  July  2019,  26,  from  National  Cancer  Institute: https://www.cancer.gov/types/lymphoma/patient/adult-nhl-treatment- pdq#_190