EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr
Pseudomonas sp., Moraxella sp., Vibrio sp. Dari Sedimen Mangrove Sebagai Antibakteri Terhadap Escherichia coli, Staphylococcus aureus dan Salmonella thypi

## Sylvia Sari Indah Dongoran*, Subagiyo, Wilis Ari Setyati
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. H. Soedarto S.H, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia *Corresponding author, e-mail : sylviasariindahdgr@gmail.com
ABSTRAK: Resistensi  bakteri  merupakan  isu  global  yang  sangat  penting.  Infeksi  penyakit disebabkan oleh resistensi bakteri. E. coli , S. aureus dan S. thypi merupakan bakteri patogen yang menyebabkan infeksi. Pengendalian resistensi bakteri dapat dilakukan dengan eksplorasi sumber senyawa baru. Bakteri sedimen mangrove berpotensi sebagai antibakteri terhadap E. coli , S. aureus dan S. thypi . Tujuan dari penelitian ini dilakukan untuk memperoleh jenis bakteri sedimen mangrove yang memiliki aktivitas antibakteri  terhadap E. coli, S. aureus dan S. thypi .  Penelitian terdiri dari beberapa  tahapan  dimulai  dari  isolasi,  purifikasi,  uji  aktivitas  antibakteri  dan  uji  biokimia.  Hasil isolasi yang diperoleh berjumlah 33 isolat, 3 diantaranya memiliki aktivitas antibakteri terhadap E. coli,  S.  aureus dan S.  thypi. Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan,  Aktivitas  antibakteri  SS.2  ISP tergolong  kuat  terhadap E.  coli dan  tergolong  sedang  terhadap S.  aureus dan S.  thypi .  Aktivitas antibakteri SS.4 ISP tergolong sedang terhadap E. coli, S. aureus dan S. thypi sedangkan SK.1 MA tergolong  sedang  terhadap E.  coli dan S.  aureus dan  tergolong  lemah  terhadap S.  thypi . Berdasarkan  identifikasi  biokimia  isolat  SS.2  ISP,  SS.4  ISP  dan  SK.1  MA  teridentifikasi  sebagai genus Pseudomonas sp., Moraxella sp. dan Vibrio sp..
Kata kunci: antibakteri; bakteri; mangrove; sedimen
Pseudomonas sp., Moraxella sp., Vibrio sp. From Mangrove Sediment As Antibacterial Against Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi
ABSTRACT: Bacterial resistance is a very important global issue. Infectious diseases are caused by bacterial resistance. E. coli, S. aureus and S. thypi are pathogenic bacteria that cause infection. Control  of  bacterial  resistance  can  be  done  by  exploring  new  sources  of  compounds.  Mangrove sediment  bacteria  have  the  potential  as  antibacterial  against  E.  coli,  S.  aureus  and  S.  thypi.  The purpose  of  this  study  was  to  obtain  types  of  mangrove  sediment  bacteria  that  have  antibacterial activity against E. coli, S. aureus and S. thypi. The research consisted of several stages starting from isolation, purification, antibacterial activity test and biochemical test. The isolation results obtained were 33 isolates, 3 of which had antibacterial activity against E. coli, S. aureus and S. thypi. Based on the results obtained, the antibacterial activity of SS.2 ISP was strong against E. coli and moderate against S. aureus and S. thypi. The antibacterial activity of SS.4 ISP was moderate against E. coli, S. aureus and S. thypi, while SK.1 MA was moderate against E. coli and S. aureus and weak against S. thypi. Based on the biochemical identification of isolates SS.2 ISP, SS.4 ISP and SK.1 MA were identified as the genus Pseudomonas sp., Moraxella sp. and Vibrio sp.

## Keywords: antibacterial; bacteria; mangrove; sediment

## PENDAHULUAN
Resistensi  bakteri  menjadi  isu  global  karena  infeksi  penyakit.  Resistensi mikroba  patogen diprediksi  akan  membunuh  10  juta  jiwa  manusia  hingga  tahun  2050  jika  tidak  segera  dilakukan
tindakan  penanganannya  (Romano et  al. 2018).  Resistensi  disebabkan  oleh  meningkatnya  imun sehingga mengakibatkan terjadinya mutasi, transfer  gen dan inaktivasi enzim  (Indraningrat et al. , 2021).  Menurut World  Health  Organization (2019), E.  coli menyebabkan  kematian  pada  370.000 anak  akibat  infeksi  saluran  pencernaan.  Infeksi yang  disebabkan  oleh S.  thypi diperkirakan  telah menyebabkan 105.500 kematian (Stanaway et al. , 2019; Saha et al. , 2020). Survei yang dilakukan pada pasien penyakit kulit menunjukkan 48% diakibatkan oleh S. aureus (Khorvash et al. , 2012). Upaya  pengendalian  resistensi  mikroba  dapat  dilakukan  dengan  eksplorasi.  Eksplorasi  dilakukan untuk memperoleh alternatif senyawa baru untuk meminimalisir resistensi dari mikroba (Cheng et al. ,  2016;  Ariffin et  al. ,  2017).  Ekosistem  mangrove  menjadi  salah  satu  lingkungan  laut  yang berpotensi  sebagai  penghasil  senyawa  bioaktif  (Kumar  dan  Jadeja,  2016).  Pengaruh  lingkungan menjadi  faktor  adaptasi  sebagai  jalur  metabolisme  yang  mengarah  pada  produksi  metabolit sekunder (Lee et al. , 2014). Tanah kaya akan aktinomisetes, eubacteria dan fungi yang berpotensi sebagai  sumber  penting  antimikroba  (Qureshi et  al. ,  2020).  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  perlu dilakukan  untuk  memperoleh  jenis  bakteri  sedimen  mangrove  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap E. coli, S. aureus dan S. thypi .

## MATERI DAN METODE
Materi yang digunakan pada penelitian ini yaitu E. coli, S. aureus dan S. thypi merupakan koleksi Laboratorium Tropical  Marine  Biotechnology ,  Universitas  Diponegoro  dan  jenis  bakteri  sedimen mangrove  dari  Pulau  Menjangan  Besar,  Karimunjawa  dan  Desa  Tapak,  Semarang.  Metode penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimental laboratory (Festinger et  al. ,  2005).  Penelitian  terdiri  dari  6 tahapan,  yaitu  pengambilan  sampel  sedimen,  isolasi  bakteri sedimen mangrove, purifikasi, uji aktivitas antibakteri dan identifikasi biokimia. Peta lokasi penelitian dapat dilihat di gambar 1.
Pengambilan Sampel Sedimen dilakukan berdasarkan teknik purposive (Setyati dan Subagiyo, 2012; Subagiyo et al. , 2017) dengan mengambil sedimen pada kedalaman ±10 cm. Sampel sedimen dimasukkan  ke  dalam ziplock .  Isolasi  dilakukan  dengan  pengenceran  bertingkat  mulai  dari  10 -1 sampai  10 -5 (Davies-Bolorunduro et  al. ,  2019).  Media  yang  digunakan  yaitu International Streptomyces Project 1, Marine Agar (Zobell) dan Humic Acid Vitamin Agar. Masing-masing media ditambahkan nystatin sebanyak  60  mg/L.  Purifikasi  menggunakan  metode streak  plate (Davies- Bolorunduro et al. , 2019) dengan mengamati bentuk, warna, margin, ukuran dan elevasi (James et al. ,  2019;  Pringgenies et  al. ,  2021).  Uji  aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode disc  diffusion (Wijaya, 2021). Isolat bakteri sedimen mangrove dikultur pada media NB dan di shaker dengan
Pulau Menjangan Besar
Kota Semarang
Gambar 1 . Titik Sampling Lokasi Penelitian
Journal of Marine Research Vol 11, No.3 Agustus 2022, pp. 475-482
kecepatan 100 rpm. E. coli, S. aureus dan S. thypi diremajakan pada media NB kemudian disesuaian kekeruhannya  dengan  larutan  0,5 Mc  Farland. Bakteri  uji  di swab pada media  NA  menggunakan cotton  swab .  Setelah  isolat  bakteri  sedimen  mangrove  dishaker  dengan  kecepatan  100rpm, sebanyak  50µL  supernatan  didifusikan  pada paper  disc (8mm  Advantec).  Pengamatan  dilakukan untuk  melihat  zona  hambat  pada  media  (Sibero et  al. ,  2018).  Isolat  yang  berpotensi  pada  ketiga bakteri uji diidentifikasi biokimia. Identifikasi bakteri yang dilakukan yaitu pewarnaan gram (James et al. , 2019). ujimotil, indol H 2 S (Nalini et al. , 2020; Sabdaningsih dan Lunggani, 2020; Nofiani et al. , 2022).  Uji  sitrat  (Sardiani et  al. ,  2015;  Barkey  dan  Nursaputra,  2019;  Nofiani et  al. ,  2022).  Uji fermentasi glukosa, laktosa dan sukrosa (Sardiani et al. , 2015; Javid et al. , 2020). Uji Methyl Red/ Voges Proskauer (Gergonius & Sine, 2016). Uji urea dan oksidasi (James et al. , 2019; Javid et al. , 2020).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  November  2021  hingga  Mei  2022.  Sampel  sedimen mangrove diambil dari  daerah Pulau Menjangan Besar, Karimunjawa dan Desa Tapak, Tugurejo, Semarang.

## Tabel 1 . Hasil Isolasi bakteri
Media Jumlah Isolat Pulau Menjangan Besar Desa Tapak Marine Agar 6 6 ISP 1 8 4 Humic Acid 4 5 Tabel 2 . Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Isolat Pulau Menjangan Besar Kode Isolat Diameter Zona Hambat (mm) E. coli S. aureus S. thypi 24 jam 48 jam 24 jam 48 jam 24 jam 48 jam SK.1 MA 6,1 ± 0,14 6,35±0,21 7,85±0,21 8 ±0,28 3,2±0,28 3,45±0,07 SK.2 MA - - - - - - SK.3 MA - - - - - - SK.4 MA - - - - - - SK.5 MA - - 0,7±0,42 0,5±0,07 - - SK.6 MA 3,6±0,56 3,9±0,56 3,0±0,14 3,1±0,21 - - SK.1 ISP - - 1,25±0,35 1,1±0,42 - - SK.2 ISP - - - - - - SK.3 ISP - - - - - - SK.4 ISP - - - - - - SK.5 ISP - - - - - - SK.6 ISP - - - - - - SK.7 ISP - - - - - - SK.8 ISP - - - - - - SK.1 HVA - - - - - - SK.2 HVA - - - - - - SK.3 HVA - - - - - - SK.4 HVA - - - - - -
Keterangan:  Rata-rata  zona  hambat  (n=2)  ±  Standar  deviasi;  Hasil  zona  hambat  telah  dikurangi diameter paper disc sebesar 8 mm
Tabel 3 . Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Isolat Desa Tapak
Kode Isolat Diameter Zona Hambat (mm) E. coli S. aureus S. thypi 24 jam 48 jam 24 jam 48 jam 24 jam 48 jam SS.1 MA - - - - - - SS.2 MA - - - - - - SS.3 MA - - - - - - SS.4 MA - - - - - - SS.5 MA - - - - - - SS.6 MA - - - - - - SS.1 ISP 0,55±0,07 0,75±0,7 3,95±0,07 4,05±0,21 - - SS.2 ISP 12,25±0,35 12,55±0,35 9,25±0,35 9,35±0,21 5,9±0,14 6,25±0,21 SS.3 ISP 1,8±0,28 2,05±0,07 - - - - SS.4 ISP 7,85±0,21 8,0±0,14 7,0±0,14 7,2±0,14 9,25±0,35 9,85±0,21 SS.1 HVA - - - - - - SS.2 HVA - - - - - - SS.3 HVA 1,9±0,14 1,75±0,28 0,9±0,56 1,2±0,28 - - SS.4 HVA - - - - - - SS.5 HVA - - - - - -
Keterangan:  Rata-rata  zona  hambat  (n=2)  ±  Standar  deviasi;  Hasil  zona  hambat  telah  dikurangi diameter paper disc sebesar 8 mm
Tabel 4 . Hasil Isolat Kandidat Antibakteri
Kode Isolat Diameter Zona Hambat (mm) E. coli S. aureus S. thypi 24 jam 48 jam 24 jam 48 jam 24 jam 48 jam SK.1 MA 6,1 ± 0,14 6,35±0,21 7,85±0,21 8 ±0,28 3,2±0,28 3,45±0,07 SS.2 ISP 12,25±0,35 12,55±0,35 9,25±0,35 9,35±0,21 5,9±0,14 6,25±0,21 SS.4 ISP 7,85±0,21 8,0±0,14 7,0±0,14 7,2±0,14 9,25±0,35 9,85±0,21
Keterangan:  Rata-rata  zona  hambat  (n=2)  ±  Standar  deviasi;  Hasil  zona  hambat  telah  dikurangi diameter paper disc sebesar 8 mm
Isolasi  dilakukan  dengan  media  berbeda  untuk  mendapatkan  isolat  yang  bervariasi (Pringgenies dan Setyati, 2021). HVA dan ISP1 merupakan media yang bersifat selektif (Anggelina et al. , 2021; Qasim & Risan, 2021) sedangkan MA adalah media non-selektif . Nutrisi yang ada pada media mempengaruhi suatu pertumbuhan dari mikroorganisme yaitu fenotip seperti warna (Barka et al. , 2016). Isolat bakteri sedimen mangrove yang tumbuh pada media isolasi selanjutnya dipilih untuk dilakukan  purifikasi.  Total  isolat  yang  diperoleh  dari  Pulau  Menjangan  Besar,  Karimunjawa berjumlah 18 dengan rincian 6 isolat dari media Marine Agar, 8 isolat dari media ISP 1 dan 4 isolat dari  media  HVA.  Total  isolat  yang  diperoleh  dari  Desa  Tapak,  Tugurejo,  Semarang  berjumlah15 dengan rincian 6 isolat dari media Marine Agar, 4 isolat dari media ISP 1 dan 5 isolat dari media HVA. Hasil dari uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa terdapat 3 isolat kandidat dari 33 isolat yaitu SS.2 ISP, SS.4 ISP dan SK.1 MA yang memiliki potensi antibakteri terhadap Staphylococcus aureus , Escherichia coli dan Salmonella thypi .
Aktivitas  antibakteri  dapat  dikategorikan sebagai  bakteriostatik menghambat  pertumbuhan bakteri melalui sintesi protein. Aktivitas antibakteri secara bakteriosidal bekerja dengan menurunkan permeabilitas membran bakteri (Wilapangga dan Syaputra, 2018; Wijaya, 2021). Isolat SS.2 ISP, SS.4 ISP dan SK.1 MA memiliki aktivitas antibakteri secara bakteriosidal. Aktivitas antibakteri dapat dilihat dari nilai zona bening yang semakin besar pada setiap pengamatan. Perbedaan hasil dari uji

## Journal of Marine Research
Vol 11, No.3 Agustus 2022, pp. 475-482
antibakteri tersebut dipengaruhi oleh variasi strain, jenis isolat dan jenis habitat yang berbeda (Rai, 2018). Nilai hambatan paling tinggi yang didapat pada waktu 24 jam, yaitu SS.2 ISP terhadap E. coli sebesar 12,2±0,35 sedangkan nilai hambatan terendah pada waktu 24 jam, yaitu SK.1 MA terhadap S. thypi sebesar 3,2 ± 0,28. Nilai hambatan paling tinggi pada waktu 48 jam, yaitu SS.2 ISP terhadap E. coli sebesar 12,5±0,35 sedangkan nilai hambatan terendah pada waktu 48 jam, yaitu SK.1 MA terhadap S. thypi sebesar 3,2 ± 0,28. Zona hambat yang nilainya kurang dari 5 mm dikategorikan antibakteri yang lemah, zona hambat yang nilainya 5-10 mm dikategorikan antibakteri yang sedang, zona hambat yang nilainya 10-20 mm dikategorikan sebagai antibakteri yang kuat (Cahyadi et al. , 2019).  Mikroorganisme  dapat  mengeluarkan  metabolit  sekunder  sebagai  mekanisme  pertahanan diri  (Kumar  dan  Verma,  2018).  Isolat  bakteri  yang  berasal  dari  Desa  Tapak  lebih  besar  nilai hambatannya dibandingkan dengan isolat Karimunjawa karena daerah semarang dipengaruhi oleh aktivitas  manusia  dan  aktivitas  industri  (Siregar  dan  Koropitan,  2016)  sedangkan  daerah Karimunjawa  populasinya  lebih  kecil  dan  minimnya  kegiatan  industri  serta  deerah  yang  masih terpencil (Anggelina et al. , 2021).
Isolat SS.2 ISP, SS.4 ISP dan SK.1 MA termasuk dalam bakteri gram negatif. Bakteri gram negatif memiliki lapisan peptidoglikan lebih tipis dibandingkan dengan lapisan gram positif (James et al. , 2019). Uji motil isolat SS.2 ISP, SS.4 ISP dan SK.1 MA menunjukkan hasil negatif. Bakteri yang bersifat non-motil tidak memiliki alat gerak (Utomo dan Rahardja, 2019). Isolat SS.2 ISP, SS.4 ISP  dan  SK.1  MA  pada  uji  H 2 S  memperoleh  hasil  negatif.  Uji  H 2 S  dilakukan  untuk  mengetahui apakah bakteri memproduksi hidrogen sulfida (Habib et al. , 2015). Isolat SK.1 menunjukkan hasil positif pada uji indol. Uji indol dapat dikatakan positif apabila bakteri dapat mendegradasi triptofan menjadi  indol  (Nalini et  al. ,  2020).  Hasil  uji  sitrat  isolat  SS.2  ISP,  SS.4  ISP  dan  SK.1  MA menunjukkan  hasil  positif.  Uji  sitrat  dikatakan  positif  jika  bakteri  menggunakan  sitrat  untuk memproduksi  karbon  dioksida  (Gergonius  dan  Sine,  2016).  Uji  fermentasi  dilakukan  untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam fermentasi karbohidrat (Javid et al. , 2020). Isolat SK.1 MA dan SS.2 ISP menunjukkan hasil positif fermentasi glukosa. Isolat SS.2 ISP, SS.4 ISP dan SK.1 MA memperoleh hasil negatif pada uji sukrosa atau laktosa. Hasil uji urea pada isolat SS.2 ISP, SS.4 ISP dan SK.1 MA menunjukkan hasil negatif. Kemampuan bakteri dalam memproduksi enzim urase daapat  dilakukan  dengan  uji  urea  (Gergonius  dan  Sine,  2016).  Uji  MR/VP  dilakukan  untuk mengetahui bakteri dalam mengoksidasi glukosa. Isolat SS.4 ISP dan SK.1 MA memperoleh hasil negatif pada uji MR dan uji VP sedangkan isolat SS.2 ISP positif pada uji. Sitokrom oksidase pada bakteri dapat diketahui melalui uji oksidase (Javid et al. , 2020). Ketiga isolat SS.2 ISP, SS.4 ISP dan SK.1 MA menunjukkan
Tabel 5 . Identifikasi Biokimia
Uji Biokimia Isolat SS.2 ISP SS.4 ISP SK.1 MA Pewarnaan gram Negatif Negatif Negatif Bentuk Batang Batang Batang Melengkung (Koma) Indole - - + Motil - - - H 2 S - - - Sitrat + + + Glukosa + - + Laktosa - - - Sukrosa - - - Urea - - - MR + - - VP - - + Oksidasi + + +
Keterangan: (+) = Positif; (-) = Negatif; SKS 2 ISP = Genus Pseudomonas sp.; SKS 4 ISP = Genus Moraxella sp.; SKK 1 MA = Genus Vibrio sp. hasil  positif.  Berdasarkan  uji  biokimia  yang  disesuaikan  menurut Bergey’s  Manual  of  Systematic Bacteriology ketiga isolat teridentifikasi yaitu SS.2 ISP teridentifikasi sebagai genus Pseudomonas sp., isolat SS.4 ISP teridentifikasi sebagai genus Moraxella sp. dan SK.1 MA teridentifikasi sebagai Vibrio sp.

## KESIMPULAN
Bakteri  sedimen  mangrove  memiliki  potensi  antibakteri  terhadap E.  coli,  S. aureus dan S. thypi . Aktivitas antibakteri Pseudomonas sp. tergolong kuat terhadap E. coli dan tergolong sedang terhadap S. aureus dan S. thypi . Aktivitas antibakteri Moraxella sp. tergolong sedang terhadap E. coli , S. aureus dan S. thypi sedangkan Vibrio sp. tergolong sedang terhadap E. coli dan S. aureus dan tergolong lemah terhadap S. thypi. Berdasarkan hasil identifikasi biokimia, isolate SK.2 ISP, SK. 4  ISP  dan  SK.1 MA  teridentifikasi  sebagai  genus Pseudomonas sp., Moraxella sp  dan Vibrio sp. Pengambilan sampel di dua lokasi penelitian dilakukan untuk melihat aktivitas antibakteri dari bakteri sedimen mangrove pada daerah tanpa polusi (Pulau Menjangan Besar) dan daerah dengan polusi (Desa Tapak).

## DAFTAR PUSTAKA
Anggelina,  A.C.,  Pringgenies,  D.  &  Setyati,  W.A.  2021.  Presence  of  biosynthetic  gene  clusters (NRPS/PKS)  in  actinomycetes  of  mangrove  sediment  in  Semarang  and  Karimunjawa, Indonesia. Environment and Natural Resources Journal , 19(5):391 –401.
Ariffin, S., Abdullah, M.F.F. & Mohamad, S.A.S. 2017. Identification and antimicrobial properties of malaysian mangrove actinomycetes. International Journal on Advanced Science , Engineering and Information Technology , 7(1):71 –77.
Barka, E.A., Vatsa, P., Sanchez, L., Gaveau-Vaillant, N., Jacquard, C., Meier-Kolthoff, J.P., Klenk,
H.P., Clément, C., Ouhdouch, Y. & van Wezel, G.P. 2016. Correction for Barka et al., Taxonomy, Physiology,  and  Natural  Products  of  Actinobacteria. Microbiology  and  Molecular  Biology Reviews , 80(4):1 –43.
Barkey,  R.  &  Nursaputra,  M.  2019.  Isolation  and  characterization  of  bacteria  from  mangrove sediment at coastal area in Pangkep South Sulawesi Isolation and characterization of bacteria from mangrove sediment at coastal area in Pangkep South Sulawesi. IOP Publishing , 1 –6. Cahyadi,  M.A.,  Sidharta,  B.R.  & To’bungan,  N.  2019.  Karakteristik  dan  Efektivitas  Salep  Madu Klanceng dari Lebah Trigona sp. Sebagai Antibakteri dan Penyembuh Luka Sayat. Biota : Jurnal Ilmiah Ilmu-Ilmu Hayati , 4(3):104-109.
Cheng, G., Dai, M., Ahmed, S., Hao, H., Wang, X. & Yuan, Z. 2016. Antimicrobial drugs in fighting against antimicrobial resistance. Frontiers in Microbiology, 7(4):1 –11.
Davies-Bolorunduro, O.F., Adeleye, I.A., Akinleye, M.O. & Wang, P.G. 2019. Anticancer potential of metabolic  compounds  from  marine  actinomycetes  isolated  from  Lagos  Lagoon  sediment. Journal of Pharmaceutical Analysis , 9:201 –208.
Festinger, D., Marczyk, G. & David, D. 2005. Essentials of Research Design and Methodology . John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, New Jersey.
Gergonius, F. & Sine, Y. 2016. Isolasi Dan Uji Biokimia Bakteri Selulolitik Asal Saluran Pencernaan Rayap Pekerja (Macrotermes Spp.). Bio-Edu: Jurnal Pendidikan Biologi , 1(2):27 –29.
Habib, F., Rind, R., Durani, N., Latif Bhutto, A., Buriro, R.S., Tunio, A., Aijaz, N., Lakho, S.A., Bugti,
A>G.  &  Shoaib,  M.  2015.  Morphological  and  Cultural  Characterization  of  Staphylococcus Aureus Isolated from Different Animal Species. Journal of Applied, Environmental and Biological Sciences, 5(2):15 –26.
Indraningrat,  A.A.G., Wijaya,  M.D.,  Suryanditha,  P.A.,  Siskayani,  A.S.  & Janurianti,  N.M.D.  2021. Antibacterial Screening of Bacterial Isolates Associated with Mangrove Soil from the Ngurah Rai Mangrove Forest Bali. Biology, Medicine, & Natural Product Chemistry, 10(2):129 –133.
James, G., Cappuccino, Chad, T. & Welsh. 2019. Microbiology: A Laboratory Manual, 12th Edition. ed. Pearson Education Limited : Pearson.
Javid, P., Shahabadi, Z., Amirkhani, H., Biuki, N.A. & Ranjbar, M.S. 2020. Isolation and identification of halophilic and halotolerant bacteria from the sediments of the qeshm island mangrove forest. Advances In Oceanography and Llmmunology, 11(1):1 –10.
Khorvash, F., Abdi, F., Kashani, H.H., Naeini, F.F. & Narimani, T. 2012. Staphylococcus aureus in acne  pathogenesis:  A  case-control  study. North  American  Journal  of  Medical  Sciences, 4(11):573 –576.
Kumar, A. & Verma, J.P. 2018. Does plant —Microbe interaction confer stress tolerance in plants: A review. Microbiological Research, 207: 41 –52.
Kumar, R.R. & Jadeja, V.J. 2016. Isolation of Actinomycetes: A Complete Approach. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences , 5(5):606 –618.
Lee, L.H., Zainal, N., Azman, A.S., Eng, S.K., Goh, B.H., Yin, W.F., Ab Mutalib, N.S. & Chan, K.G. 2014.  Diversity  and  antimicrobial  activities  of  actinobacteria  isolated  from  tropical  mangrove sediments in Malaysia. Scientific World Journal , 2014:1 –14.
Nalini, B.S., Muthuraju, R., Tamil Vendan, K., Brahmaprakash, G. P., Nanja Reddy, Y. A., Nagaraju,
N., & Veena, S. A. 2020. Isolation of plant growth promoting actinobacteria from the rhizosphere of finger millet and cowpea. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, 9(6): 1103 –1107. Nofiani, R., Rizky, Briliantoro, R. & Ardiningsih, P. 2022. Anti-bacteria and toxicity potential of a rare Actinobacterium  Pseudonocardia  sp.  SM1A,  isolated from  Mangrove  Park, West  Kalimantan, Indonesia. Biodiversitas , 23(1):453 –458.
Pringgenies, D. & Setyati, W.A. 2021. Antifungal strains and gene mapping of secondary metabolites in  mangrove  sediments  from  Semarang  city  and  Karimunjawa  islands,  Indonesia. AIMS Microbiology , 7(4): 499 –512.
Pringgenies,  D.,  Setyati,  W.A.,  Djunaedi,  A.,  Pramesti,  R.,  Rudiyanti,  S.  &  Ariyanto,  D.  2021. Exploration  of  Antimicrobial  Potency  of  Mangrove  Symbiont  Against  Multi-Drug  Resistant Bacteria. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan , 13(2):222-232.
Qasim, B. & Risan, M.H. 2021. Screening of bacteria Streptomyces Waksman and Henrici 1943 ( Streptomycetaceae)  Isolates  from  Soil  Samples  in  Iraq. International  Journal  of  Advanced Biological and Biomedical Research , 9(4):340 –351.
Qureshi, K.A., Seroor, M.,  AI-Masabi, A., Saykhan, M.A., Mutairi, Y.A., Elhassan, G.O. & Khan, R.A. 2020. Bio-characterizations of some marine bacterial strains isolated from mangrove sediment samples  of  four  major  cities  of  Saudi  Arabia. Journal  of  Environmental  Biology ,  41(5):1003 – 1012.
Rai, K. 2018. Actinomycetes: Isolation, Characterization and Screening for Antimicrobial Activity from Different  Sites  of  Chitwan,  Nepal. International  Journal  of  Microbiology  and  Biotechnology , 3(1):25-30.
Sabdaningsih, A., & Lunggani, A.T. 2020. Isolasi dan Karakterisasi Morfologi Bakteri Halofilik dari Bledug Kuwu, Kabupaten Grobogan. Bioma: Berkala Ilmiah Biologi , 22(1): 2598 –2370.
Saha,  S.,  Sajib,  M.S.I.,  Garrett,  D.  &  Qamar,  F.N.  2020.  Antimicrobial  resistance  in  typhoidal salmonella: Around the world in 3 days. Clinical Infectious Diseases , 71(Suppl 2): 91 –95.
Sardiani, N., Litaay, M., Budji, R.G., Priosambodo, D., Syahribulan, dan Dwyana, Z.. 2015. Potensi Tunikata Rhopalaea sp Sebagai Sumber Inokulum Bakteri Endosimbion Penghasil Antibakteri; 1. Karakterisasi Isolat. Jurnal Alam dan Lingkungan, 6(11):1 –10.
Setyati,  W.A.  &  Subagiyo.  2012.  Isolasi  dan  Seleksi  Bakteri  Penghasil  Enzim  Ekstraseluler (proteolitik,  amilolitik,  lipolitik  dan  selulolitik)  yang  Berasal  dari  Sedimen  Kawasan  Mangrove (Isolation and Selection of Extracellular Enzyme Producing Bacteria Originating from Mangrove Sedimen. Ilmu Kelautan: Indonesian Journal of Marine Sciences, 17(3):164 –169.
Sibero,  M.T.,  Radjasa,  O.K.,  Sabdono,  A.,  Trianto,  A.,  Triningsih,  D.W.  &  Hutagaol,  I.D.  2018.
Antibacterial activity of indonesian sponge associated fungi against clinical pathogenic multidrug resistant bacteria. Journal of Applied Pharmaceutical Science , 8(2):088 –094.
Siregar, V. &. Koropitan, A.F. 2016. Land Use Change and its Impact to Marine Primary Production in Semarang Waters. Procedia Environmental Sciences , 33:520 –531.
Stanaway,  J.D.,  Reiner, R.C.,  Blacker,  B.F., Goldberg,  E.M.,  Khalil, I.A., Troeger,  C.E.,  Andrews, J.R., Bhutta, Z.A., Crump, J.A., Im, J., Marks, F., Mintz, E., Park, S.E., Zaidi, A.K.M., Abebe, Z.,
Abejie, A.N., Adedeji, I.A., Ali, B.A., Amare, A.T., Atalay, H.T., Avokpaho, E.F.G.A., Bacha, U.,
Barac, A., Bedi, N., Berhane, A., Browne, A.J., Chirinos, J.L., Chitheer, A., Dolecek, C., El Sayed Zaki, M., Eshrati, B., Foreman, K.J., Gemechu, A., Gupta, R., Hailu, G.B., Henok, A., Hibstu, D.T., Hoang, C.L., Ilesanmi, O.S., Iyer, V.J., A. Kahsay, A. Kasaeian, T.D. Kassa, E.A. Khan,
Y.H.  Khang,  H.  Magdy  Abd  El  Razek,  M.  Melku,  D.T.  Mengistu,  K.A.  Mohammad,  S.
Mohammed,  A.H.  Mokdad,  J.B.  Nachega,  A.  Naheed,  C.T.  Nguyen,  H.L.T.  Nguyen,  L.H. Nguyen, N.B. Nguyen, T.H. Nguyen, Y.L. Nirayo, T. Pangestu, G.C. Patton, M. Qorbani, R.K. Rai, S.M. Rana, C.L. Ranabhat, K.T. Roba, N.L.S. Roberts, S. Rubino, S. Safiri, B. Sartorius, M. Sawhney, M.S. Shiferaw, D.L. Smith, B.L. Sykes, B.X. Tran, T.T. Tran, K.N. Ukwaja, G.T. Vu, L.G. Vu, F. Weldegebreal, M.K. Yenit, Murray, C.J.L. & Hay, S.I.. 2019. The global burden of typhoid and paratyphoid fevers: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017. The Lancet Infectious Diseases, 19(4): 369 –381.
Subagiyo, S., Djarod, M.S.R. & Setyati, W.A.. 2017. Potensi Ekosistem Mangrove Sebagai Sumber Bakteri  Untuk  Produksi  Protease,  Amilase  Dan  Selulase. Jurnal  Kelautan  Tropis ,  20(2):106 – 111.
Utomo,  P.,  &  Rahardja,  B.  2019.  Identification  of  Proteolytic  Bacterial  Isolates  in  Sediment Ecosystem of Gunung Anyar Mangrove Forest, Surabaya. iopscience.iop.org , 1 –7.
Wijaya,  P.A.  2021.  Antibacteria  Activity  of  Gastropod  Association  Bacteria  From  Mangrove Ecosystem  Against Bacillus  Cereus and Escherichia  Coli and  It’s  Potency  of  Application  for Belanak Fish ( Mugil Subviridis) . JFMR-Journal of Fisheries and Marine Research , 5(1): 15 –21. Wilapangga, A. & Syaputra, S. 2018. Analisis Antibakteri Metode Agar Cakram Dan Uji Toksisitas Menggunakan  Bslt ( Brine  Shrimp  Lethality  Test )  Dari  Ekstrak Metanol  Daun  Salam ( Eugenia Polyantha ). Indonesian Journal of Biotechnology and Biodiversity , 2(2):50 –56.