## SYNTHESIS OF Fe NANOPARTICLES USING BIOREDUCTOR OF PHYTOPLANKTON EXTRACT OF Spirulina platensis
Sintesis Nanopartikel Fe Menggunakan Bioreduktor Ekstrak Fitoplankton

## Spirulina platensis
Isti Nurillah 1* , Indah Raya 2 , Maming 3
1 Department of Chemistry, Faculty of Science, University of Hasanuddin Jl. Perintis Kemerdekaan 90245, Makassar-Indonesia
2 Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, University of Hasanuddin, Jl. Perintis Kemerdekaan 90245, Makassar-Indonesia
3 Department of Chemistry, Faculty of Science, University of Hasanuddin Jl. Perintis Kemerdekaan 90245, Makassar-Indonesia
*Corresponding author, tel: +6285299472819, email: andisti.chemzt@gmail.com
Received:  Dec 2015 Published: Jan 2016

## ABSTRACT
This  study aims to synthesize  Fe  nanoparticles  by  bioreduction using the phytoplankton extract of S. platensis that acts as a reducing agent. Synthesis process is done by adding extracts of S. platensis to a solution of 1 mM FeCl 3 .  The  formed  nanoparticles  characterized  by  UV-Vis  spectrophotometer, Fourier  Transform  Infra  Red Spectroscopy (FTIR), Scanning  Electron  Microscopy (SEM)  and Energy  Disperse  X-Ray  Spectroscopy (EDX/EDS), X-Ray Diffraction (XRD) and X-Ray Flourosence (XRF). The results showed that the solution of Fe 3+ ions can be reduced by phytoplankton extract of S. platensis Fe nanoparticles formed. The average size of the  particles  based  on  the  Debye-Scherrer  equation  was  68.10  nm.  While  the  morphology  of  Fe  nanoparticles was spherical shape.
Keywords : Synthesis, Fe nanoparticles, phytoplankton, Spirulina platensis .

## PENDAHULUAN
Beberapa  tahun  terakhir,  nanoteknologi telah  membangkitkan  perhatian  yang  besar  bagi para  ilmuwan  di  seluruh  dunia  dan  saat  ini merupakan  bidang  riset  yang  paling  diminati (Zhang, et al ., 2011). Nanoteknologi adalah ilmu dan rekayasa dalam penciptaan material, struktur fungsional, maupun piranti dalam skala nanometer . Dibandingkan  material  berukuran besar  ( bulk ),  material  dalam  dimensi  nanometer menunjukkan  sifat  kimia  dan  fisika  yang  lebih unggul  karena  memiliki  sifat  optik,  termal, listrik, kimia, dan fisika yang unik (Panigrahi, et al .,  2004).  Salah  satu  nanomaterial  yang  paling menarik dikembangkan saat ini adalah nanopartikel Fe.
Nanopartikel  Fe  atau  yang  biasa  dikenal dengan nano-scaled  zero  valensi  iron (nZVI), merupakan  nanopartikel  yang  unggul  dalam proses  remediasi  lingkungan.  Dibandingkan dengan  partikel zero  valensi  iron (ZVI)  yang berukuran  besar  ( bulk ),  nZVI  mempunyai
reaktifitas yang lebih tinggi karena memiliki luas permukaan  yang  besar.  Beberapa  studi  telah menunjukkan  potensi  nanopartikel  Fe  untuk remediasi lingkungan, diantaranya yang dilakukan  oleh  (Shahwan, et  al .,  2011)  yang menggunakan  Fe  NPs  untuk  mendegradasi polutan  organik  dan  anorganik.  Selain  itu, (Wang, et  al ,  2014)  menggunakan  Fe  NPs  yang disintesis  untuk  pengolahan  air  limbah  eutrofik. Fe  NPs  digunakan  untuk  mendegradasi  polutan organik  terklorinasi  (Smuleac, et  al .,  2011), sedangkan (Weng, et al ., 2013, dan Huang, et al ., 2014)  menggunakan  Fe  NPs  dan  berhasil mendegradasi  polutan  zat  pewarna malachite green (MG).
Umumnya  nanopartikel  logam  disintesis melalui  beberapa  metode  fisika  dan  kimia. Namun metode sintesis nanopartikel secara fisika dan  kimia  harus  menggunakan  energi  yang tinggi, menggunakan beberapa bahan kimia yang mahal dan dianggap berbahaya. Oleh karena  itu, para peneliti di bidang sintesis nanopartikel telah beralih ke metode green synthesis (sintesis hijau)
dengan menggunakan ekstrak tumbuhan (Ahmad, et  al .,  2003).  Pendekatan  sintesis  hijau memberikan perkembangan yang jauh lebih baik karena  dilakukan  pada  tekanan  dan  suhu  kamar, ekonomis,  serta  bebas  dari  penggunaan  bahan kimia  beracun  (Rajeshkumar, et  al .,  2012). Ekstrak  tumbuhan,  jamur,  ragi,  bakteri,  virus, dan  alga  yang  berpotensi  sebagai  media  sintesis nanopartikel (Seabra, et al ., 2013).
Alga  disebut  pabrik  bionano  karena  alga dapat  menyintesis  nanopartikel  dengan  stabilitas tinggi  dan  mudah  ditangani  (Song  dan  Kim, 2009).  Ekstrak  uniseluler  mikro  alga Chlorella vulgaris digunakan  untuk menyintesis nanoplate perak. Diperkirakan bahwa protein dalam ekstrak memberikan  fungsi  ganda  untuk  mereduksi  dan mengendalikan  bentuk  dalam  proses  sintesis nanopartikel  perak,  dimana  gugus  karboksil dalam  aspartat  dan  atau  residu  glutamin  dan gugus  hidroksil  dalam  residu  tirosin  dari  protein diperkirakan  menjadi  agen  yang  bertanggung jawab  dalam  mereduksi  ion  perak  (Xie, et  al ., 2007 dalam Kiran, et al ., 2011).
Mikro  alga  atau  fitoplankton  spesies Spirulina platensis merupakan fitoplankton yang memiliki kandungan senyawa bioaktif polisakarida,  protein.  pigmen  bioaktif  klorofil-a, karotenoid  (xantofil  dan  β-karoten),  dan fikosianin. Spirulina  platensis menunjukkan potensi  sebagai  sumber  protein  yang  tinggi mencapai  72%  dengan  kandungan  asam  amino yang  seimbang  (Finocchio, et  al .,  2010). Menurut beberapa penelitian, telah mengungkapkan  bahwa  molekul  bioaktif  yang kemungkinan  besar  berperan  sebagai  agen pereduksi dan pengstabil dalam proses biosintesis nanopartikel yaitu protein, polisakarida,  tanin,  flavonoid,  terpenoid  (Mittal, et  al .,  2013),  senyawa  dengan  gugus  fungsi hidroksil, karboksil, dan  amina (Mahdavi, et  al ., 2013).
Beberapa  penelitian  sintesis  nanopartikel logam  yang  menggunakan  ekstrak  fitoplankton S.  platensis yaitu  sintesis  nanopartikel  perak (Sharma, et  al .,  2015;  Verma, et  al .,  2014; Tsibakhashvili, et al ., 2011; dan Mahdieh, et al ., 2012), dan nanopartikel emas (Govindaraju, et al .,  2008).  Oleh  karena  sintesis  nanopartikel  Fe menggunakan  ekstrak  fitoplankton S.  platensis belum  pernah  dilaporkan  sebelumnya,  dan melihat potensi kandungan bioaktif dari Spirulina platensis di atas yang diharapkan dapat
dijadikan  sebagai  agen  pereduksi  dan  agen capping dalam  proses  sintesis  nanopartikel, maka  perlu  dilakukan  sintesis  nanopartikel  Fe menggunakan  ekstrak Spirulina  platensis dalam langkah  yang  sederhana,  dengan  penggunaan bahan  kimia  yang  tidak  beracun  (non  toksik), murah, cepat, dan ramah lingkungan.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melakukan sintesis nanopartikel Fe melalui proses bioreduksi Fe 3+ menggunakan ekstrak fitoplankton Spirulina platensis , mengkarakterisasi nanopartikel Fe yang terbentuk  serta  mengetahui  biomolekul  yang berperan  sebagai  agen  pereduksi  dalam  sintesis nanopartikel Fe.

## METODOLOGI
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah biakan fitoplankton Spirulina  platensis ,  air  laut  steril,  akuabides, medium kultur ( Conway ), FeCl 3 . 6H 2 O (Merck), kertas  saring Whatman No. 42,  kertas  label,  tisu dan aluminium foil.

## Prosedur Penelitian
1. Pembuatan ekstrak fitoplankton Spirulina platensis
Ekstrak  fitoplankton S.  platensis dibuat dengan cara dididihkan selama 10-15 menit pada suhu  90 o C  kemudian  disentrifus  untuk dipisahkan endapannya. Filtrat ekstrak fitoplankton Spirulina platensis dapat digunakan langsung  atau  disimpan  di  lemari  pendingin ketika tidak dipakai.

## 2. Sintesis Nanopartikel Fe
Sintesis  nanopartikel  Fe  dilakukan  dengan cara  mencampur  larutan  FeCl 3 1  mM  dengan ekstrak Spirulina  platensis dalam  gelas  kimia, dengan  perbandingan  larutan  logam  dan  ekstrak fitoplankton  1:4,  (v/v).  Reaksi  dilakukan  pada suhu  ruangan  (27 o C)  sambil  diaduk  dengan menggunakan magnetic  stirrer selama  10  menit dan diukur pH larutan. Pembentukan nanopartikel Fe diindikasikan dengan berubahnya  warna  larutan  dari  hijau  muda menjadi  kuning  kecoklatan,  dan  diukur  kembali pH  larutan  nanopartikel  besi  yang  telah terbentuk.
3. Karakterisasi Nanopartikel Fe
Koloid  nanopartikel  besi  dikarakterisasi dengan  cara  mengukur  panjang  gelombang maksimum (adsorbsi maksimum) dengan menggunakan  spekstroskopi  UV-Visible  pada daerah panjang  gelombang 300-700 nm. Sampel padatan nanopartikel Fe diambil untuk dikarakterisasi  dengan X-Ray  Diffraction (XRD) untuk  melihat  kemurnian  dan  mengkonfirmasi struktur  kristal  dari  nanopartikel  besi  yang dihasilkan.  Analisis  pola  XRD  didapatkan dengan  menggunakan  difraktometer  sinar-X model MiniFlex2, dengan Cu/30kv/15mA dan kα radiasi  (panjang  gelombang  λ  =  0,1542  nm). Jarak  scan  yang  dilakukan  dari  5000  –  70000 deg, dengan kecepatan 2000 deg/menit.
Karakterisasi  menggunakan Fourier Transform InfraRed (FTIR) dilakukan untuk mengidentifikasi potensi biomolekul pada ekstrak  fitoplankton Spirulina  platensis yang bertanggung  jawab  dalam  mereduksi  dan mengstabilkan nanopartikel besi yang terbentuk.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Telah dilakukan penelitian sintesis
nanopartikel  Fe  yang  ramah  lingkungan  dan murah dengan menggunakan ekstrak
fitoplankton S. platensis . Ekstrak fitoplankton S. platensis dicampur dengan larutan FeCl 3 dan ion Fe 3+ tereduksi  menjadi  Fe o yang  diamati  dengan mengukur spektrum UV-Vis dari media reaksi.
Gambar 1. Perbandingan spektrum UV-Vis nanopartikel Fe, ekstrak fitoplankton
S. platensis dan larutan FeCl 3
Gambar  1  menunjukkan  bahwa  spektrum ekstrak  fitoplankton S.  platensis terjadi  pada serapan  panjang  gelombang  257,5  nm.  Setelah ekstrak direaksikan dengan ion Fe 3+ , pembentukan  nanopartikel  Fe  diamati  terjadi pada  penyerapan  panjang  gelombang  sebesar 258,5  nm  dengan  nilai  absorbansi  yang  lebih tinggi  setelah  24  jam  pencampuran.  Perubahan warna  dari  hijau  muda  menjadi  kuning kecoklatan    kemungkinan  disebabkan  karena adanya  eksitasi  elektron  akibat  penyerapan energi foton. Hasil spektrum UV-Vis yang  sama juga  dijumpai  dalam  sintesis  nanopartikel  Fe yang  dilakukan  oleh  Huang, et  al .  (2014)  yang menggunakan  bioreduktor  ekstrak  daun  teh oolong  dan  oleh  Kumar, et  al .,  (2014)  yang menggunakan bioreduktor ekstrak buah Passiflora tripartita .
Ukuran  rata-rata  partikel  nanopartikel  Fe dapat  dihitung  menggunakan  persamaan  Debye- Scherrer  :  D  =  k  λ  /  β  cos  θ,  dimana  D  adalah ketebalan nanokristal, k adalah konstanta (0,9), λ adalah panjang gelombang sinar-X

## Gambar 2. Difraktogram XRD nanopartikel Fe
Ukuran  rata-rata  partikel  nanopartikel  Fe dapat  dihitung  menggunakan  persamaan  Debye- Scherrer  :  D  =  k  λ  /  β  cos  θ,  dimana  D  adalah ketebalan nanokristal, k adalah konstanta (0,9), λ adalah panjang gelombang sinar-X (0,15406 nm) dan β merupakan lebar keseluruhan dari setengah maksimal  refleksi  (110)  pada  sudut  Bragg  2θ. Pola  XRD  (Gambar  2)  menunjukkan  puncak yang  kuat  pada  spektrum  dengan  jarak  nilai  2θ dari  25  sampai  70.  Diameter  kisi  kristal  dari nanopartikel Fe adalah 68,10 nm yang diperoleh dari puncak FWHM sesuai dengan bidang (110).
Data  Fe  standar  diperoleh  dari database software PDXL 2 dan database JCPDS (Dey, et al ., 2012). Tabel 1 menunjukkan  telah terbentuk
1500 1750 2000 2250 2500 40 50 60 ** (1 1 0 ) (2 0 0 ) 2  (deg) In te n si ta s (c p s) 0 1 2 3 300 400 500 600 296 258,5 FeCl 3 Ekstrak S. platensis Nanopartikel Fe 257,5 nm. A b s .
Fe  NPs.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan  nilai  2θ yaitu  44,38 0 dengan  nilai  d  (A 0 )  sebesar  2,039 yang  hampir  mendekati  nilai  Fe  standar.  Data tersebut  menunjukkan  indeks  Miller  (110).  Hal ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Dey, et  al .  (2012)  yang  mendapatkan  pola difraksi  Fe  NPs  dengan  indeks  Miller  (110)  dan (200).
Tabel 1. Perbandingan data XRD FeNPs dan Fe NPs standar
Berdasarkan scanning  electron  micrograph , morfologi FeNPs diamati dan kira-kira berbentuk bola  (Gambar  3).  Analisis  dengan energy dispersive spectroscopy (EDX/EDS) dari FeNPs, dipastikan  adanya  sinyal  unsur  logam  (Gambar 4).  Spektrum  EDS  menunjukkan  adanya  puncak unsur Fe dengan persentase Fe sebesar 2,61%.
Gambar 3. Hasil analisis SEM Fe NPs
Hal  ini  menegaskan  unsur  Fe  terdapat  pada permukaan  Fe  NPs.  Namun,  Fe  NPs  mungkin tersebar  dan  ditutup  (dilapisi)  oleh  komponen ekstrak S.  platensis ,  mengindikasikan  bahwa beberapa  bagian  dari  Fe  NPs  tidak  terdeteksi oleh  EDS  (Huang et  al .,  2014).  Selain  itu, analisis  FTIR  diidentifikasi  adanya  keberadaan agen capping dari ekstrak S. platensis . Hasil FTIR  ekstrak S.  platensis sebelum  sintesis FeNPs  pada  Gambar  5a  diidentifikasi  bilangan gelombang  3423,65  cm -1 menunjukkan  adanya gugus  O-H  regangan.  Kurva 5 a  menunjukkan spektrum  FTIR  dari  ekstrak S.  platensis yang mengindikasikan adanya protein.
Gambar 5. Hasil spektrum FTIR ekstrak fitoplankton S. platensis (a) dan Nanopartikel Fe (b).
Pada  spektrum  FTIR  nanopartikel  Fe Gambar  5b,  terdapat  vibrasi  pada  2926,01  cm -1
yang menunjukkan  gugus  fungsi  C-H  regangan 40 80 120 160 200 1000 2000 3000 4000 420.48 1238.30 1240.23 349.12 1056.99 1541.12 1647.21 2926.01 3442.94 345.26 1045.42 1541.12 1645.28 2931.80 3423.65 b a cm -1 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 keV 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 cps/eV Fe Fe Mg Al S S P Ca Ca O Gambar 4. Hasil analisis sampel menggunakan SEM EDS
alifatik,  vibrasi  1647,21  cm -1 ,  1541,12  cm -1 dan 1238,30  cm -1 secara  berturut-turut  menunjukkan adanya  ikatan  amida  I  (tumpang  tindih  C=O regangan dan  CN  regangan),  amida  II  (tumpang tindih NH bending dan CN regangan), dan amida III  (tumpang  tindih  C-O-C bending dan  OH bending ),    yang  merupakan  gugus  fungsi dari biomolekul protein (Govindaraju et al , 2008, dan Finocchio, et al , 2010). Hal ini mengindikasikan bahwa molekul protein yang berasal dari ekstrak fitoplankton S.  platensis bertindak  sebagai  agen capping dalam pembentukan nanopartikel Fe. Pada  spektrum  FTIR  nanopartikel  Fe  5b terdapat  sinyal  dari  serapan  420,48        cm -1 mengindikasikan  adanya  ikatan  Fe-O  regangan yang  membuktikan  telah  terjadi  pembentukan nanopartikel Fe. Hal ini sesuai dengan penelitian yang  dilakukan  oleh  Wang, et  al .,  (2014). Adanya gugus fungsi O-H dan C=O mengindikasikan  bahwa  gugus  fungsi  dari biomolekul  ekstrak S.  platensis dapat  mereduksi ion Fe 3+ menjadi Fe 0 .

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian, dapat disimpulkan bahwa ekstrak fitoplankton Spirulina  platensis dapat  digunakan  untuk sintesis  nanopartikel  Fe.  Biomolekul  yang berperan  dalam  mereduksi  ion  Fe 3+ menjadi  Fe o adalah  protein.  Fe  NPs  menunjukkan  serapan panjang gelombang maksimum dari Fe NPs pada 258,5  nm.  Ukuran  rata-rata  partikel  yang disintesis adalah 68,10 nm dengan  indeks Miller (110) dan (200).

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  A.,  Senapati,  S.,  Islam  Khan,  M., Kumar,  R.,  Sastry,  M.,  2003,  Extracellular biosynthesis of monodisperse gold nanoparticles  by  a  novel  extremophilic actinomycete, Thermomonospora sp . Langmuir, 19: 3550 – 3553.
Dey,  R.,  Mukherjee,  N.,  Ahammed,  S.,  dan Ranu,  B.,  C.,  2012,  Highly  selective reduction of nitroarenes by iron(0) nanoparticles in water, The Royal Society of Chemistry , 1-38.
Finocchio,  E.,  Lodi,  A.,  Solisio,  C.,  dan Converti, A., 2010, Chromium (VI) removal by methylated biomass of Spirulina
platensis: The effect of methylation process,
Chemical  Engineering  Journal ,  156:  264– 269.
Govindaraju,  K.,  Basha,  K.,  Kumar,  G.,  dan Singaravelu,  G.,  2008,  Silver,  gold  and bimetallic  nanoparticles  production  using single-cell  protein  ( Spirulina  platensis ) Geitler. Journal Of Materials Science . Huang,  L.,  Weng,  X.,  Chen,  Z.,    Megharaj,  M., dan  Naidu,  R.,  2014,  Synthesis  of  iron- based nanoparticles using oolong tea extract for  the  degradation  of  malachite  green, Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy ,  117: 801–804. Kiran,  G.  S.,  Selvin,  J.,  Manilal,  A.,  dan  Sujith,
S.,  2011,  Review  Article:  Biosurfactants  as green stabilizers for the biological synthesis of  nanoparticles, Critical  Reviews  in Biotechnology , 31 (4): 354 – 364.
Kumar,  B.,  Smita,  K.,  Cumbal,  L.,  dan  Debut, A.,  Biogenic  synthesis  of  iron  oxide nanoparticles for 2-arylbenzimidazole
fabrication, 2014, Journal of Saudi Chemical Society , 1-6.
Mahdavi,  M.,  Namvar,  F.,  Ahmad,  M.  B.  dan
Mohamad, R.,  2013, Article: Green Biosynthesis and Characterization of Magnetic Iron Oxide (Fe3O4) Nanoparticles Using Seaweed  ( Sargassum  muticum ) Aqueous  Extract, Molecules ,  18:  5954  – 5964.
Mahdieh,  M.,  Zolanvari,  A.,  Azimee,  A,  S.,  dan Mahdieh,  M.,  2012,  Green  biosynthesis  of silver  nanoparticles  by Spirulina  platensis , Scientia Iranica F , 19: 926 – 929. Mittal,  A.  K.,  Chisti,  Y.  dan  Banerjee,  U.  C., 2013,  Synthesis  of  Metallic  Nanoparticles Using  Plant  Extract, Biotechnol.  Adv .,  31: 346 – 356.
Panigrahi,  S.,Kundu,  S.,  Ghosh,  S.  K.,  Nath,  S., dan  Pal,  T.,  2004,  General  method  of synthesis for metal nanoparticles, Journal of Nanoparticle Research , 6, 411-414.
Rajeshkumar,  S.,  Kannan,  C.,  Annadurai,  G.,
2012, Green synthesis of silvernanoparticles using  marine  brown  algae Turbinaria conoides and its antibacterial activity, Int. J. Pharm. Bio. Sci ., 3(4): 502 – 510.
Seabra, A, B., Haddad, P., dan Duran, N., 2013,
Biogenic  synthesis  of  nanostructured  iron compounds:  applications  and  perspective,
IET Nanobiotechnol , 7: 90 - 99.
Shahwan,  T.,  Sirriah,  S,  A.,  Nairat,  M.,  Boyaci, E., Eroglu,  A,  E.,  Scott,  T,  B., dan  Hallam, K,  R.,  2011,  Green  Synthesis  of  iron nanoparticles  and  their  application  as  a Fenton-like  catalyst  for  the  degradation  of aqueous cationic and anionic dyes, Chemical  Engineering  Journal ,  172:  258  – 266.
Smuleac,  V.,  Varma,  R.,  Sikdar,  S.,  dan Bhattacharyya, D., 2011, Green synthesis of Fe  and  Fe/Pd  bimetallic  nanoparticles  in membranes  for  reductive  degradation  of chlorinated  organics, Journal  of  Membrane Science , 379: 131– 137.
Song,  J.  Y.  dan  Kim,  B.S.,  2009,  Rapid biological  synthesis  of  silver  nanoparticles using plant leaf extracts, Bioprocess Biosyst. Eng ,. 32: 79 – 84.
Tsibakhashvili,  N,  Y.,  Kirkesali,  E,  I.,  Pataraya, D, T., Gurielidze, M,  A., Kalabegishvili,  T, L.,    Gvarjaladze,  D,  N.,  Tsertsvadze,  G,  I.,
Frontasyeva,  M,  V.,  Zinicovscaia,  I,  I., Wakstein,  M,  S.,  Khakhanov,  S,  N., Shvindina,  N,  V.,  dan  Shklover,  V,  Y., 2011, Microbial synthesis of silver nanoparticles  by Streptomyces  glaucus and Spirulina platensis , Nanomaterials , 2: 306 –
310.
Verma,  S.,  Kumari,  B.,  dan  Shrivastava,  J,  N.,
2014, Green synthesis of silver nanoparticles  using  single  cell  protein  of Spirulina  platensis , Int.  J.  Pharm.  Bio.  Sci ,
5 (2): 458 – 464.
Wang,  T.,  Jin,  X.,  Chen,  Z.,  Megharaj,  M.,  dan Naidu,  R.,    2014,  Green  synthesis  of  Fe nanoparticles  using  eucalyptus  leaf  extracts for  treatment  of  eutrophic  wastewater, Science of the Total Environment , 466–467: 210–213
Weng,  X.,  Huang,  L.,  Chen,  Z.,  Megharaj,  M., dan  Naidu,  R.,  2013,  Synthesis  of  iron- based nanoparticles by green tea extract and theirdegradation  of  malachite, Industrial Crops and Products, 51: 342– 347.
Zhang, X., Yan, S., Tyagi, R. D., dan Surampalli, R.  Y.,  2011,  Synthesis  of  Nanoparticles  by Microorganisms  and  Their  Application  in Enhancing  Microbiological  Reaction  Rates, Chemosphere , 82:     489 – 494.