## Antagonisme Bacillus terhadap Infeksi Layu Fusarium pada Bibit Pisang
Hasil Kultur Jaringan
Bacillus Antagonism toward Fusarium Wilt on Banana Seedling

## Originated from Tissue Culture
Hadiwiyono 2) , Arief Widyantoro 1) , Salim Widono 1)

## ABSTRACT
Fusarium wilt ( Fusarium oxysporum f.sp. cubense ) is an important disease in banana. Fusarium wilt was hard to control  because  the  pathogen  can  survive  in  many  kind  of  soils  type  although  there  is  no  host.  Therefore, overcoming the disease is urgently needed such as biological control. The endophytic Bacillus of banana was begun to use as antagonist agent to the pathogen. This research aimed to study the mechanism of antagonism and physiological character of Bacillus. There were 27 Bacillus isolates examined in-vitro to test the production of IAA, HCN, chitinase, pectinase, and antagonism. The top ten isolates based on the test in vitro were used to test in planta. The research showed that Bacillus were able to produce IAA, HCN, chitinase, pectinase, and able to retard the growth of Foc colony. The application of isolat B25 on banana seedling could decrease the disease intensity but still unable to prevent the fusarium wilt infection.
Keywords : banana, fusarium wilt, in vitro antagonism, Bacillus

## PENDAHULUAN
Pengembangan  komoditas  pisang  di  Indonesia masih terhambat adanya penyakit layu fusarium yang disebabkan  oleh Fusarium  oxysporum  f.sp.  cubense (Foc).  Volume  ekspor  pisang  mencapai  angka  5,17 juta  ton  kemudian  menurun  sampai  0,14  juta  ton  di tahun  2006.  Produksi  pisang  nasional  tahun  2009 sebesar 6,30 juta lalu mengalami penurunan di tahun 2010  sebesar  5,80  juta  ton  dan  tahun  2011  sebesar 0,80 juta ton (BPS 2012). Pengendalian penyakit layu fusarium  direkomendasikan  seperti  penggunaan fungisida  dan  kultur  teknis,  namun  belum  mampu menekan kejadian penyakit di lapangan (Nasir  et  al.  2005).  Pengendalian  hayati  diarahkan seiring  perkembangan  penelitian  mengenai  agens antagonis.  Bacillus  merupakan  salah  satu  genus bakteri  yang  dilaporkan  mampu  meningkatkan resistensi  tanaman  (Rebib  et  al.  2012).  Bacillus mampu  memproduksi  senyawa  antifungal  yang menyebabkan pembengkakan hifa Foc secara in vitro (Adeline  et  al.  2008,  Arrebola  et  al.  2010).  Karakter morfologi dan fisiologis serta mekanisme penghambatan Bacillus perlu dipelajari untuk mengetahui  pengaruhnya  terhadap  infeksi  layu fusarium pisang.
1) Undergraduate Student of Study Program of
Agrotechnology,  Agricultural  Faculty  of    Universitas Sebelas Maret (UNS) in Surakarta.
2) Lecturer of Study Program of Agrotechnology, Agricultural Faculty of  Universitas Sebelas Maret (UNS) in Surakarta.
Contact Author: hadi_hpt@yahoo.com

## METODE PENELITIAN

## Karaterisasi Morfologi Koloni Bacillus
Pengujian  secara  in  vitro  dilaksanakan  di Laboratorium  Hama  dan  Penyakit  Tumbuhan  dan Laboratorium  Biologi  Tanah  UNS  serta  untuk pengujian  in  planta  dilakukan  di  rumah  kasa  UNS bulan  Januari  sampai  Desember  2013.  Karakterisasi morfologi  koloni Bacillus dilaksanakan  pada  di Laboratorium  Hama  dan  Penyakit  Tumbuhan  dengan bahan isolat Bacillus endofit  pisang.  Morfologi  koloni Bacillus diamati  menurut  bentuk,  tepi,  elevasi, permukaan,  dan  warna  dalam  media  biakan  agar nutrien (NA).
Karakterisasi Fisiologi Bacillus
Karakterisasi  fisiologi Bacillus meliputi  uji  produksi indole  acetic  acid (IAA),  hidrogen  sianida  (HCN), aktivitas  kitinase,  dan  aktivitas  pektinase  dengan bahan  berupa  isolat Bacillus ,  sejumlah  media  biakan dan IAA sintetis. Produksi IAA Bacillus diukur menurut metode  Bresson  dan  Borges  (2003)  dengan  indikator nilai absorbansi. Produksi HCN secara kualitatif diukur menurut  Reddy  et  al.  (2008)  dengan  indikator  warna. Aktivitas  kitinase  dan  pektinase  diukur  berdasarkan koloni Bacillus pada  4  hari  inkubasi  pada  perlakuan media biakan NA.

## Uji Antagonisme In Vitro
Uji  antagonisme  in  vitro  menggunakan  rancangan acak  lengkap  (RAL)  dengan  metode  kultur  ganda Bacillus terhadap Foc. Persentase hambatan diukur:
dengan r1 = jari-jari Focmenjauhi Bacillus , r2 = jari-jari Foc  mendekati Bacillus .  Analisis  data  dengan  uji F taraf 5% dan uji Duncan taraf 5%.

## Uji Filtrat In Vitro
Uji  filtrat Bacillus terhadap  Foc  in  vitro  disusun menggunakan RAL dengan metode kultur ganda pada sejumlah Bacillus yang  telah  dinonaktifkan  melalui perlakuan  tekanan  tinggi.  Pengamatan  persentase hambatan  dan  analisis  data  sama  pada  uji antagonisme in vitro.

## Uji Volatil In Vitro
Uji  volatil  (uap  biakan)  dilakukan  menggunakan RAL dengan bahan 27 isolat Bacillus dan Foc sebagai perlakuan  serta  dua  kontrol  berupa  air  steril  dan pembawa Bacillus . Masing-masing isolat ditangkupkan satu sama lain pada media biakan yang berbeda,  NA  untuk Bacillus dan  PDA  untuk  Foc. Pertumbuhan  diameter  koloni  Foc  diamati  setiap  2 hari sekali selama 8 hari.

## Uji Antagonisme In Planta
Uji antagonisme in planta dilakukan di rumah kasa pada  bibit  pisang  Ambon  Kuning  secara  RAL menggunakan  10  isolat  terbaik  uji  in  vitro.  Inokulasi Bacillus dilakukan  dengan  pengocoran  sebanyak  25 ml  dengan  metode  pelukaan  pada  akar.  Intensitas penyakit (IP) dihitung :
% 100 ) (      Z N v n IP dengan; n =  Jumlah  tanaman  menunjukan  skor tertentu; v = Skor tanaman (skor=layu daun); N = skor tertinggi; Z = seluruh tanaman. LBKPP dihitung :
dengan LBKPP =  Luas  bawah  kurva  perkembangan penyakit; Xi =  Intensitas  penyakit  saat  pengamatan minggu  ke-I; ti =  Waktu  pengamatan  ke-I; n = Pengamatan pada saat terminal penyakit.  Laju infeksi dihitung dengan rumus:
r =
dengan r =  laju  infeksi  (per  unit  per  minggu); t = interval  pengamatan  (mingguan); X0 =  proporsi penyakit awal pengamatan; dan Xt = proporsi penyakit pengamatan ke t .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Morfologi Koloni Bacillus
Karakter  morfologi  koloni  Bacillus  asal  beberapa tempat  di  wilayah  Surakarta  menunjukkan  sifat  yang bervariasi (Tabel 1). Hal ini terlihat pada bentuk, tepi, elevasi,  permukaan,  dan  warna  koloni  berbeda-beda. Menurut  Hatmanti  (2002)  bentuk  koloni Bacillus dan responsnya  terhadap  faktor  lingkungan  cenderung berbeda-beda pada media biakan.
Karakter Fisiologi Bacillus
Uji produksi IAA 27 isolat Bacillus dengan inkubasi 24  jam  menghasilkan  konsentrasi  berbeda  (Tabel  2). Isolat B1, B3, B6, B9 memproduksi IAA tinggi berkisar 9,000  ppm,  namun  pada  B12  dan  B30  memproduksi IAA  rendah  dengan  nilai  4,920  ppm  dan  4,822  ppm. Perbedaan  ini  dipengaruhi  oleh  lokasi  sampel  dan kemampuan Bacillus dalam  mengkonversi  triptofan yang terkandung dalam media King’s B menjadi IAA.
Tabel 1. Karakter koloni isolat Bacillus
Isolat Asal Karakter Koloni Bentuk Tepi Elevasi Permukaan Warna B1 Mojolaban Circular Entire Raised Smooth, Glistening Putih B2 Mojolaban Irregular Undulate Umbonate Wrinkle Krem B3 Mojolaban Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih B4 Jaten Rhizoid Lobate Umbonate Smooth, Glistening Putih B5 Jaten Irregular Undulate Raised Smooth, Glistening Putih B6 Jaten Filamentous Filamentous Umbonate Smooth, Glistening Putih B7 Jaten Rhizoid Lobate Umbonate Smooth, Glistening Putih B8 Jaten Rhizoid Lobate Umbonate Wrinkle Krem B9 Karanganyar Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih B10 Karanganyar Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih B11 Karanganyar Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih B12 Karanganyar Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih B13 Jebres Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih B14 Tasikmadu Circular Entire Raised Smooth, Glistening Putih B15 Karanganyar Filamentous Filamentous Umbonate Smooth, Glistening Putih B16 Karanganyar Rhizoid Lobate Umbonate Smooth, Glistening Putih B17 Karanganyar Circular Entire Raised Smooth, Glistening Putih B18 Karanganyar Filamentous Filamentous Umbonate Smooth, Glistening Putih B20 Mojolaban Rhizoid Lobate Umbonate Wrinkle Krem B21 Jebres Irregular Undulate Raised Smooth, Glistening Putih B22 Jebres Circular Entire Raised Smooth, Glistening Putih B23 Jebres Irregular Undulate Raised Smooth, Glistening Putih B24 Tasikmadu Irregular Undulate Raised Smooth, Glistening Putih B25 Tasikmadu Irregular Undulate Raised Smooth, Glistening Putih B26 Karanganyar Irregular Undulate Raised Smooth, Glistening Putih B28 Karanganyar Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih B30 Ngargoyoso Irregular Undulate Umbonate Smooth, Glistening Putih
Tabel 2. Karakter fisiologi isolat Bacillus Isolat Karakter Fisiologi IAA (ppm) HCN Aktivitas Kitinase Aktivitas Pektinase B1 9.661 - + + B2 6.851 - + + B3 9.580 - + + B4 6.149 - + + B5 6.851 - + + B6 9.132 - + + B7 5.172 - + + B8 5.839 - + + B9 9.615 - + + B10 6.402 - + + B11 7.247 - + + B12 4.920 - + + B13 6.121 - + + B14 7.408 - + + B15 6.592 - + + B16 5.086 - + + B17 6.759 - + + B18 5.592 - + + B20 8.586 - + + B21 6.868 - + + B22 6.075 - + + B23 5.856 - + + B24 5.184 - + + B25 6.747 - + + B26 7.678 - + + B28 5.845 - + + B30 4.822 - + +
Keterangan:  Produksi HCN: warna kertas saring +++merah bata, ++coklat tua, + coklat muda,  -kuning (tidak memproduksi HCN).
Aktivitas  kitinase  dan  pektinase:  +  positif  (mendegradasi  kitin/pektin),  -  negatif  (tidak  mendegradasi kitin/pektin).
Menurut  Lee  et  al.  (2004)  triptofan  adalah prekursor yang berfungsi untuk biosintesis auksin baik mikrob  maupun  tanaman.  Leveau  dan  Lindow  (2004) menambahkan  bahwa  tanaman  dapat  mensintesis hormon  auksin  dari  mikrob  untuk  meningkatkan pertumbuhannya.
Hasil  menunjukkan  semua  isolat Bacillus tidak menghasilkan  senyawa  sianida.  Kertas  saring  yang berwarna  kuning  menunjukkan  isolat  uji  tidak memproduksi  HCN.  Menurut  Sutariati  et  al.  (2006) pada  uji  produksi  HCN  berbagai  isolat Bacillus , Pseudomonas , dan Serratia , menunjukkan bahwahanya isolat Pseudomonas yang dapat menghasilkan sianida.
Semua  isolat  Bacillus  menghasilkan  kitinase  dan pektinase  ditandai  terbentuknya  koloni  pada  agar kitin  maupun  pektin.  Degradasi  kitin  di  alam  dapat dilakukan  oleh  beberapa  jenis  bakteri,  jamur antagonis, aktinomisetes, dan tumbuhan. Dinding sel perakaran  tanaman  tersusun  atas  pektin  sehingga diduga  Bacillus  mampu  masuk  secara  alami  dengan mendegradasi  pektin  melalui  produksi  enzim.  Enzim kitinase dan pektinase dimanfaatkan mikroorganisme sebagai  sumber  karbon  (Tamimi  dan  Herdyastuti 2013, Salvador et al. 2005) .

## Antagonisme In Vitro
Hasil  antagonisme  in  vitro  menunjukkan  bahwa semua  isolat  Bacillus  mampu  menghambat  diameter koloni  Foc  (Gambar  1).  Persentase  hambatan tertinggi  dihasilkan  oleh  B11  (93,17%)  sedangkan terendah  dihasilkan  oleh  B18  (11,80%).  Hal  ini menunjukan isolat-isolat Bacillus yang diuji secara in vitro  mempunyai  berpotensi  sebagai  penghambat pertumbuhan  patogen  dalam  media  biakan.  Hasil  ini didukung  dengan  hasil  uji  filtrat  Bacillus  terhadap koloni Foc.

## Uji Filtrat In Vitro
Hasil menunjukkan daya hambat yang tinggi isolat Bacillus terhadap Foc terdapat pada isolat-isolat asal Karanganyar dan Mojolaban. Filtrat B3, B7, B9, B11, B12,  B18,  B24,  B26  dan  B30  mampu  menekan pertumbuhan  koloni  Foc  secara  in  vitro  dengan persentase hambatan berkisar 80-100% (Gambar 2).
Hasil mengindikasikan semua isolat Bacillus dapat memproduksi  senyawa  antibiotik  yang  mampu menekan  pertumbuhan  koloni  Foc. Bacillus dapat menghasilkan  antibiotik  lebih  dari  66  jenis  yang bersifat  racun  terhadap  mikroba  lain  salah  satunya yaitu basitrasin yang dapat menghambat
pembentukan  dinding  sel  patogen  (Mochizuki  et  al. 2005, Soesanto et al. 2008).  Hasil uji antagonisme in
vitro dan filtrat Bacillus ini didukung dengan uji volatil (uap biakan) agens antagonis.
Keterangan:      Angka  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  nyata  pada  uji  jarak  berganda  Duncan  ( P <0,05),  K(+)  = Pembawa Bacillus , K(-) = Air steril, Bx = Foc dengan Bacillus ke-x (x = nomor isolat)
Gambar 1. Histogram pengaruh isolat Bacillus endofit terhadap koloni Foc
Keterangan:    Angka  yang  diikuti  huruf  sama  tidak  berbeda  nyata  pada  uji  jarak  berganda  Duncan  ( P <0,05),  K(+)  = Pembawa Bacillus , K(-) = Air steril, Bx = Foc dengan Bacillus ke-x (x = nomor isolat)
Gambar 2. Histogram pengaruh filtrat Bacillus terhadap pertumbuhan koloni Foc

## Uji Volatil In Vitro
Foc pada media biakan PDA yang ditangkupkan di atas  biakan  isolat  Bacillus  pada  media  biakan  NA menunjukkan diameter koloni patogen yang bervariasi.  Isolat  Foc  tanpa  agens  antagonis  mampu tumbuh  secara  maksimal  pada  media  biakan  dengan diameter  rata-rata  5,67  cm  pada  inkubasi  8  hari, artinya  koloni  Foc  telah  tumbuh  melingkupi  seluruh media biakan.
Berbeda  dengan  ke-27 isolat  uji  yang  masing-masing perlakuan  telah  ditangkupkan  isolat  Bacillus  mampu menghentikan pertumbuhan koloni Foc pada inkubasi 4  hari.  Hal  ini  menunjukkan  isolat  Bacillus  mampu menghentikan  pertumbuhan  Foc  ditandai  diameter koloni yang bervariasi (Gambar 3).
Isolat  B3,  B15  dan  B16  mampu  menekan pertumbuhan Foc secara maksimal dengan diperoleh diameter koloni 1,00 cm. Hal tersebut berarti ada zat penghambat  berupa  gas  yang  perannya  menahan pembentukan  koloni  Foc.  Sudhanta  et  al.  (2011) menambahkan  terhambatnya  koloni  Foc  diduga
karena  agens  antagonis  mampu  mengeluarkan antibiotik atau alkaloid yang mudah menguap.

## Antagonisme In Planta
Sepuluh isolat Bacillus mampu menekan infeksi Foc in  planta,  namun  tidak  semua  isolat  mampu mengimbas  ketahanan  bibit  pisang  di  rumah  kasa (Tabel  3).  Isolat  B25  mampu  menghambat  Foc  in planta  dengan  intensitas  penyakit  layu  terendah sebesar 22,22% dengan laju infeksi 0,03 unit minggu -1 dan nilai LBKPP paling rendah (525,00).
Laju  infeksi  berkaitan  dengan  perkembangan penyakit  yang  sangat  dipengaruhi  oleh  faktor lingkungan.  Samson  et  al.  (2004)  menambahkan bahwa  suhu  optimum  pertumbuhan  Foc  berkisar  25- 30 o C  dengan  suhu  minimum  5 o C  dan  maksimum mencapai  37 o C.  Kondisi  lingkungan  saat  penelitian berpengaruh  terhadap  keaktifan  patogen,  kerentanan inang,  dan  interaksi  dalam  medium  pertumbuhan (Agrios 2005).
Hasil  menunjukkan  bahwa  isolat  B6  tidak  mampu menghambat Foc. Menurut Susanna (2006)
ditambahkan  oel  Sudhanta  dan  Suprapta  (2011) bahwa keefektifan agens antagonis sangat dipengaruhi  oleh  senyawa  metabolit  yang    mampu menekan  infeksi  patogen  dan  kemampuannya  dalam mengkolonisasi perakaran. Peningkatan pertumbuhan akar  merupakan  tanda  yang  dapat  diamati  apabila
tanaman  telah  diinokulasikan  oleh  bakteri  endofit (Backman  dan  Sikora  2008).  Bernal  et  al.  (2002) menambahkan  agens  antagonis  dengan  jumlah  10 8 - 10 9 spk  ml -1 mampu  mengkolonisasi  perakaran namun  populasi  dapat  menurun  karena  kekurangan nutrisi dan kompetisi terhadap organisme lain.
Keterangan:   Angka yang diikuti huruf sama tidak berbeda nyata pada uji jarak berganda Duncan ( P <0,05), K(+) = Pembawa Bacillus , K(-) = Air steril, Bx = Foc dengan Bacillus ke-x (x = nomor isolat)
Gambar 3. Histogram pengaruh uap biakan (volatil) Bacillus terhadap diameter koloni Foc
Tabel 3. Intensitas penyakit, laju infeksi, dan LBKPP perlakuan bibit pisang in planta
Isolat Intensitas Penyakit (%) Laju Infeksi(unit minggu -1 ) LBKPP Pembawa Bacillus 79.63±3.21 c 0.20 3188.89±67.36 e Tanpa Bacillus 77.78±0.00 c 0.19 3227.78±172.83 e B1 33.33±5.56 ab 0.05 1088.89±67.36 bc B2 35.19±3.21 ab 0.05 1088.89±89.11 bc B3 38.89±9.62 b 0.06 991.67±172.83 b B5 37.04±8.49 b 0.06 1380.56±185.49 c B6 68.52±3.21 c 0.14 2592.59±78.58 d B11 31.48±5.24 ab 0.05 1024.07±191.83 b B17 27.78±9.62 ab 0.04 933.33±275.67 b B23 31.48±6.42 ab 0.05 1045.14±118.81 bc B25 22.22±5.56 a 0.03 525.00±84.76 a B28 40.74±13.98 b 0.07 1108.33±224.24 bc
Keterangan:  Angka pada kolom sama yang diikuti huruf sama tidak berbeda nyata pada uji jarak berganda Duncan ( P <0.05)

## KESIMPULAN DAN SARAN
Infeksi  Foc  pada  pisang  dapat  ditekan  oleh Bacillus melalui  mekanisme  kompetisi,  antibiosis, produksi auksin, kitinase dan pektinase. Aplikasi isolat B25 pada bibit pisang mampu  menurunkan intensitas penyakit  layu  fusarium  sebesar  22,22%  dengan penekanan  laju  infeksi  mencapai  0,03  unit  minggu -1 tetapi belum dapat mencegah terjadinya penyakit layu fusarium.  Perlu  penelitian  lanjutan  untuk  mempelajari sifat fisiologi Bacillus dengan metode yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Adeline  SYT,  Sariah  M,  Jugah  K,  Son  R,  Gurmit  S. 2008.  Endophytic  microorganisms  as  potential growth of banana. J Biocont 53: 541-553.
Agrios  GN.  2005.  Plant  pathology.  5Ed.  San  Diego (SD): Elsevier Academic Press.
Arrebola E, Jacobs R, Korsten L. 2010. Iturin A is the principal  inhibitor  in    the    biocontrol    activity    of Bacillus  amyloliquefaciens    PPCB004  against postharvest    fungal    pathogens.  J  Appl  Microbiol 108: 386-395.
Backman  PA,  Sikora  RA.  2008.  Endophytes  an emerging  tool  for  biological  control.  J  Biocont 46(1): 1-3.
Bernal  G,  Illanes  A,  Ciampi  L.  2002.  Isolation  and partial  purification  of  a  metabolite  from  a  mutant strain  Bacillus  sp.  with  antibiotic  activity  against platn pathogenic agents. J Biotech 5(1):1-8.
5, 67i 5, 42i 3, 00f gh 1, 92bc def g 1, 00 a 1, 83abc def
2, 58f gh
2, 25def g 1, 83abc def 2, 25def g 2, 67f gh
1, 58abc de 1, 58abc de
1, 28abc d 1, 50abc d
1, 08ab 1, 00a 1, 00a 1, 92bc def g 2, 42ef g 2, 50ef g 1, 33abc 2, 17c def g 1, 83abc def 1, 83abc def
2, 42ef g 2, 75f g 2, 58 fgh 3, 25g 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 K (+ ) K (- ) B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7 B8 B9 B10 B11 B12 B13 B14 B15 B16 B17 B18 B20 B21 B22 B23 B24 B25 B26 B28 B30 Dia m e te r ( c m ) Isolat Bacillus
Badan Pusat Statistik [BPS]. 2008. Production of fruits in Indonesia.
Badan Pusat
Statistik. http://www.bps.go.id/. Diakses 10 Januari 2013. Badan  Pusat  Statistik  [BPS].  2012.  Produksi  buah- buahan menurut provinsi tahun 2009-2011. Badan
Pusat  Statistik.  http://www.bps.go.id/.  Diakses  28 Januari 2013.
Hatmanti  A.  2002.  Introduction  to Bacillus spp.  J Oseana 25(1): 31-41.
Lee  S,  Encarnacion  MF,  Zentella  MC,  Flores  LG, Escamilla  JE,  Kennedy  C.  2004.  Indole-3-acetic acid  bisynthesis  is  deficient  in  Gluconacetobacter diazotrophicus strains with mutations in cytochrome  c  biogenesis  genes.  J  Am  Soc Microbiol 186(16): 5384-5391.
Leveau  JH,  Lindow  SE.  2004.  Utilization  of  plant hormone  indole-3-acetic  acid  for  growth  by Pseudomonas  putida  strain  1290.  J  Am  Soc Microbiol 1(5): 2365-2370.
Mochizuki  M,  Nishijima  T,  Toyota  K.  2005. Predominant culturable Bacillus species in Japanese  arable  soils  and  their  potential  as biocontrol agents. J Microb Environ 20(1): 61-68.
Nasir N, Jumjunidang, Riska. 2005. Distribusi penyakit layu  Fusarium  dan  layu  bakteri  Ralstonia  pada lokasi sumber bibit dan sekolah lapang pengendalian hama terpadu pisang di Sumatera. J Hort 15(3): 215-222.
Rebib H, Abdeljabbar H, Marc R, Abdellatif B, Ferid L, Najla  SN.  2012.  Biological  control of  fusarium  foot rot  of  wheat  using  fengycin-producing  Bacillus subtilis isolated from salty soil. Af J Biotech 11(34): 8464-8475.
Reddy BP, Reddy KRN, Subbarao M, Rao KS. 2008. Efficacy of antimicrobial metabolites of Pseudomonas  fluorescens against  rice  fungal pathogens. Curr Trends Biotechnol Phar 2(1): 178- 182.
Salvador S, Fontana RC, Silveira MM. 2005. Influence of    pectin    and  glucose    on  growth    and
polygalacruronase  production    by Aspergillus niger in  solid-state  cultivation.  J  Microbiol  Biotech 32: 371-377.
Samson  RA,  Hoekstra  ES,  Frisvad  JC.  2004. Introduction  to  food-  and  airborne  fungi.  7Ed. Utrecht : Centraalbureau voor Schimmelcultures.
Soesanto L, Rokhlani, Prihatiningsih. 2008.
Penekanan  beberapa  mikroorganisme  antagonis terhadap penyakit layu gladiol. J Agrivita 30(1): 75- 83.
Sudhanta  IM,  Kusnarta  IM,  Sudana  IN.  2011.  Uji antagonisme beberapa jenis jamur saprofit terhadap  jamur Fusarium  oxysporum f.sp. cubense penyebab  penyakit  layu  pada  tanaman  pisang serta potensinya sebagai agens pengurai seresah. J Agroteksos 21(2): 106-119.
Susanna.  2006.  Pemanfaatan  bakteri  antagonis sebagai  agen  biokontrol    penyakit  layu  ( Fusarium oxysporum f.sp. cubense ) pada tanaman pisang. J Floratek 2: 114-121.
Sutariati  GAK,  Widodo,  Sudarsono,  Ilyas  S.  2006. Karakter fisiologis dan keefektifan isolat rizobakteri sebagai  agens  antagonis Colletotrichum  capsici dan  rizobakteri  pemacu  pertumbuhan  tanaman cabai. J Kultura 4(1): 28-34.
Tamimi  M,  Herdyastuti  N.  2013.  Analysis  functional groups  using  ft-ir  spectroscopy  of  chitin  variation as Pseudomonas sp.  tnh-54  substrates.  J  Chem 2(2): 47-51.