P-ISSN: 2579-4752, E-ISSN: 2620-7397
1 Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar Korespondensi:  Jurusan  Akuakultur,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Universitas  Teuku  Umar, Kampus UTU Meulaboh, Alue Peunyareng 23615, Telp: +62 81360272409, email: farahdiana@utu.ac.id

## PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN KARI
(Murraya koenigii)  UNTUK MENGOBATI BENIH IKAN PATIN SIAM (Pangasianodon hypophthalmus) YANG TERINFEKSI BAKTERI Staphylococcus aureus

## THE INFLUENCE GIVING OF EXTRACT CURRY LEAVES
(Murraya koenigii) TO TREAT SEED FISH SIAMESE CATFISH (Pangasianodon hypophthalmus) INFECTED WITH THE BACTERIA Staphylococcus Aureus
Farah Diana 1) , Nabila Ukhty 2) , Ajurullah 2)
1 Jurusan Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat
2 Jurusan Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat Korespondensi : farahdiana@utu.ac.id

## ABSTRAK
Ikan  patin  ( Pangasius  hypophtalmus) merupakan  ikan  asli  Indonesia  yang  paling  banyak dibudidayakan  untuk  memenuhi  kebutuhan  gizi  keluarga.  Dalam  sistem  budidaya,  ikan  patin umumnya  mengalami  kematian  karena  disebabkan  serangan  bakteri  salah  satunya  bakteri Staphylococcus  aureus. Adapun  tujuan  penelitian  yaitu  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak Murraya koenigii dalam pengendalian infeksi bakteri Staphylococcus aureus dan untuk mengetahui konsentrasi  yang  tepat  dalam  pengendalian  infeksi  bakteri Staphylococcus  aureus. Rancangan penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL). Penelitian di lakukan melalui 2 tahap uji, yaitu : uji in vitro; dan uji in vivo. Pada uji in vitro menggunakan 6 konsentrasi yaitu : K = 0%; P1 = 3,125%; P2 = 6,25%; P3 = 25%; P4 = 50%; dan P5 = 100%. pada uji in vivo menggunakan 3 perlakuan  dan 1 kontrol yaitu : Kontrol = 0 ppm; P1 = 500 ppm; P2 = 700 ppm; dan P3 = 900 ppm. Hasil penelitian menunjukan ekstrak Daun Kari (Murraya koenigii) memilki  daya  hambat  ketegori  kuat  pada  konsentrasi  bahan  100%  dan  ektrak  daun  kari  mampu memberikan tingkat kelangsungan hidup sebesar 93,33% pada konsentrasi 700 ppm.
Kata kunci : Murraya koenigii, P. hypophthalmus, Bakteri, S. aureus

## ABSTRACT
Catfish (Pangasius hypophtalmus) is a fish native to Indonesia the most widely cultivated to meet the nutritional needs of the family. In the system of cultivation, fish Catfish are generally experiencing death due to bacterial attack caused one of the bacteria Staphylococcus aureus . As for research purposes i.e. to know the influence of Murraya koenigii extract in the control of bacterial infections Staphylococcus  aureus and  to  know  the  right  concentration  in  the  control  of  bacterial infections Staphylococcus aureus . The design of the research used in this study was a randomized Complete  Design  (RAL).  Research  on  phase  2  trials  do  through,  namely:  in  vitro  test;  and  test  in vivo. In the in vitro test used 6 concentration as follows: K = 0%; P1 = 3.125%; P2 = 6.25%; P3 = 25%; P4 = 50%; and P5 = 100%. in vivo tests using 3 treatment and 1 control: Control = 0 ppm; P1 = 500 ppm; P2 = 700 ppm; and P3 = 900 ppm. Results of the study showed extracts of Curry Leaf (Murraya  koenigii) have  strong  inhibitory  power  requirements  on  the  concentration  of  100% materials and extract of curry leaves is able to provide the survival rate of 93.33% at concentrations of 700 ppm.
Keywords : Murraya koenigii, P. hypophthalmus, Bakterial, S. aureus

## PENDAHULUAN
Ikan  patin  ( Pangasius  hypopthalmus) merupakan  ikan  asli  Indonesia  yang  paling banyak  dibudidayakan  untuk  memenuhi kebutuhan gizi keluarga. Ikan patin berpotensi besar  sebagai  komoditas  ekspor  karena memiliki  daging  berwarna  putih  yang  disukai oleh konsumen di luar negeri seperti Amerika Serikat  dan  Eropa  (Hadinata,  2009).  Kendala Indonesia dalam mengekspor patin dikarenakan  produksinya  yang  masih  sangat rendah  yakni  hanya  mencapai  100  ton  per hari,  sedangkan  ekspor  Indonesia  hanya mencapai  700  ton.  Harga  ikan  patin  dalam bentuk  fillet  mencapai  2,6-2,8  dollar  AS  per kilogram. Konsumen ikan patin di dunia yakni di  Eropa  yang  mencapai  20%,  karena komoditas  tersebut  mampu  menggantikan udang  yang  harganya  lebih  tinggi  (Susanto, 2009).  Dalam  sistem  budidaya,  ikan  patin umumnya mengalami kematian karena disebabkan  hama  dan  penyakit.  Selain  karena penyakit  non  infeksi,  penyakit  utama  yang sering  menyerang  adalah  penyakit  bakterial yang  disebabkan  oleh  bakteri Staphylococcus aureus .  Menurut  Atyah et  al .  (2010) Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri gram  positif  yang  dapat  menyebabkan penyakit  pada  ikan  dengan  merusak  organ ginjal,  limpa  dan  berperan  sebagai  bakteri penyebab infeksi pada ikan.
Penanganan  infeksi  bakteri  pada  saat pembenihan  dan  pembesaran  ikan  patin umumnya  menggunakan  antibiotik  dan  bahan kimia lainnya.  Penggunaan antibiotik saat ini tidak diperbolehkan karena dapat menyebabkan  resisten  pada  bakteri  pathogen yang terdapat di dalam media pembenihan dan pembesaran serta dapat mengakibatkan
pencemaran lingkungan. Solusi untuk mengatasi  masalah  dalam    pembenihan  dan pembesaran  tersebut,  maka  perlu  adanya bahan  alternatif  yang  lebih  aman  dan  dapat mengendalikan penyakit akibat bakteri Staphylococcus aureus . Salah satu bahan yang berpotensi  tinggi  adalah  penggunaan  bahan alami yaitu daun kari (Murraya koenigii) yang
bersifat  anti  bakteri.  Penggunaan  bahan  alami seperti daun kari memiliki beberapa kelebihan yaitu  bahan  mudah  didapatkan,  ramah terhadap  lingkungan,  dan  tidak  menyebabkan resistensi pada ikan.
Daun kari (Murraya koenigii) merupakan  daun  yang  sangat  familiar  dan banyak  di  temukan  hampir  diseluruh  wilayah Indonesia  dan  terkhususnya  di  Aceh,  daun kari  umumnya  digunakan  sebagai  bumbu masakan  karena  akan  memberikan  citra  rasa yang khas dan aroma yang kuat. Menurut Jain et  al. (2012)  dalam  dunia  farmasi  daun  kari merupakan  daun  yang  banyak  mengandung zat  metabolit  seperti O-methyl  mahanine, Isomahanine,
O-methyl
murrayanine,
Koenimbine, Bismahanine, Euchrestine,
Murrayanol,  Grinimbine dan Mahanine yang berfungsi  sebagai  anti  peradangan,  analgesic, anthelmentik dan gatal-gatal. Das et al. (2011) melaporkan dari beberapa penelitian daun kari memiliki aktivitas biologis sebagai antimikroba terhadap bakteri Gram positif dan negatif,  dan  juga  memiliki  aktivitas  anti kanker  serta  jamur. Berdasarkan  studi Murugesh et  al .  (2005)  daun  kari  kaya  akan alkaloid, senyawa flavonoid, terpenoid, steroid,  dan  antioksidan  seperti  tokoferol,  β- karoten  dan  lutein.  Daun  kari (Murraya koenigii) umumnya digunakan sebagai penyedap  makanan  berbagai  masakan  khas Aceh  (Rastina, et  al. 2015).  Namun, penggunaan  daun  kari  atau Murraya  koenigii sebagai bahan pengendalian bakteri
Staphylococcus aureus pada ikan patin belum dilakukan.
Dengan demikian, untuk mengetahui  potensi Murraya  koenigii perlu dilakukan  penelitian  pada  benih  ikan  patin (Pangasius  hyphotalamus) yang  terinfeksi bakteri Streptococcus aureus.

## METODE PENELITIAN

## Prosedur Penelitian
1. Pembuatan  Ekstrak  Daun  Kari  ( Murraya koenigii) Murraya koenigii segar dicuci dan dibersihkan dari kotoran dengan menggunakan air bersih. Kemudian dikering anginkan. Sampel Murraya koenigii dipotong-potong dengan ukuran ± 1  cm.  Kemudian  dikeringkan  dengan menggunakan  sinar  UV  sampai  berat kering  konstan.  Setelah  kering,    sampel Murraya  koenigii dihaluskan  dengan blender  sehingga  diperoleh  bubuk  kering.
Kemudian dimaserasi dengan
menggunakan  pelarut  metanol  dengan perbandingan  1:1  selama  3  x  24  jam. Murraya  koenigii kemudian  disaring dengan  menggunakan  kertas  saring  dan filtrate ditampung dalam erlenmeyer sehingga  diperoleh  filtrat  ekstrak  metanol yang bebas dari kotoran. Ekstrak methanol yang  terkumpul  kemudian  dievaporasi dengan  menggunakan rotary  evaporator pada  suhu  45 o C  sampai  tidak  terjadi  lagi pengembunan  pelarut  pada  kondensor. Kemudian  di  oven  selama  ±  3  jam  pada suhu  50 o C  dengan  tujuan  menghilangkan pelarut yang masih terjebak dalam senyawa aktif (Iswani, 2007).
2. Uji Fitokimia Murraya koenigii
Uji  fitokimia  dilakukan  untuk  menentukan senyawa  fitokimia  yang  terdapat  dalam sampel.  Sampel  ekstrak Murraya  koenigii diuji  untuk  mendeteksi  adanya  senyawa alkaloid,  flavonoid,  steroid,  saponin,    dan fenol.  Pengujian  fitokimia  dinilai  dan  di evaluasi berdasarkan metode kualitatif  zat yang terkandung dalam bahan uji (Behbahani et al. 2018).
a. Pengujian Alkoloid
Metode uji alkaloid yaitu sebanyak 5 mg ekstrak  sampel  dilarutkan  dalam    2  ml asam sulfat (H 2 SO 4 ) 2 N, dikocok hingga
membentuk  lapisan  atas  dan  bawah. Larutan  dibagi  menjadi  tiga  bagian. Tabung  pertama  ditambahkan  1  tetes pereaksi  Dragendorff,  tabung  kedua ditambahkan 1 tetes pereaksi Meyer,  dan tabung  ketiga  ditambahkan  1  tetes pereaksi Wagner. Reaksi positif ditunjukkan  dengan  endapan  merah hingga jingga pada pereaksi Dragendorff,
endapan  putih  kekuningan  pada  pereaksi Meyer,  dan  endapan  cokelat  pada pereaksi Wagner.
b. Pengujian flavonoid Metode  uji  flavonoid  yaitu  sebanyak  5 mg  ekstrak  sampel  ditambahkan  0,1  mg serbuk  magnesium,  0,4  ml  amil  alkohol (campuran asam klorida 37% dan alkohol 95% pada volume yang sama), dan 4 mL alkohol.  Campuran  kemudian  dikocok. Reaksi positif ditunjukkan dengan terbentuknya  warna  merah,  kuning,  dan jingga pada lapisan amil alkohol.
c. Pengujian Steroid Metode  uji  steroid  yaitu  sebanyak  5  mg ekstrak  sampel  dilarutkan  dalam    2  ml kloroform  dalam  tabung  reaksi.  Sampel ditambahkan 10 tetes anhidra asetat dan 3 tetes  asam  sulfat  (H 2 SO 4 )  pekat.  Reaksi positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya larutan  berwarna  merah  untuk  pertama kali  kemudian  berubah  menjadi  biru  dan hijau.
d. Pengujian saponin
Metode uji saponin dilakukan dengan uji busa  dalam  air  panas.  Ekstrak  sampel sebanyak  5  mg  ditambahkan  air  panas.
Busa  yang  stabil  selama  30  menit  dan tidak  hilang  setelah  penambahan  1  tetes HCl 2 N menunjukkan reaksi positif.
e. Pengujian golongan fenolik
Metode  uji  fenol  yaitu  sebanyak  0,1  g ekstrak sampel ditambahkan 2 ml alkohol 70%.  Larutan  yang  dihasilkan  kemudian diambil  sebanyak  1  ml  kemudian
ditambahkan 2 tetes  larutan  FeCl dengan adanya warna hijau atau hijau biru.
3. Uji in Vitro
Uji  in  vitro  dilakukan  untuk  mengetahui daya antibakteri dari Murraya koenigii dan menentukan  konsentrasi  terbaiknya  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus .    Konsentrasi terbaik  yang  didapatkan  dari  uji in vitro akan  digunakan    dalam    uji in  vivo .    Uji ini    dilakukan    dengan    menggunakan metode Kirby-Bauer atau kertas cakram.
Dalam uji in vitro , pertama-tama disiapkan
isolat murni bakteri Staphylococcus aureus ,  kemudian  secara  aseptik  diambil isolat  bakteri  tersebut  sebanyak  satu  ose dan  di  biakan  dalam  media  LB.  Setelah umur bakteri dalam media LB mencapai 18 jam,  bakteri  dapat  dipanen  dan  dilakukan pengenceran  berseri  sampai  kepadatan  10 5 cfu/ml  sesuai  (Ashry,  2007).  Setelah  itu disiapkan  media  TSA  dalam  cawan  petri sebagai  media  tempat  hidup  bakteri Staphylococcus  aureus .  Isolat  cair  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  kepadatan
10 5 diambil sebanyak 0.1 ml menggunakan mikropipet  dan  disebar  menggunakan jarum ose dalam cawan petri.
Pengujian  antibakteri  dilakukan  dengan metode  kertas  cakram,  sehingga  perlu disiapkan  kertas  cakram  steril.  Kertas  cakram yang  digunakan  adalah  kertas  Whatman no.42      berdiameter      6      mm      yang mempunyai      kemampuan      dalam  menyerap bahan  sebanyak  15  µm.  Sebelum  digunakan, kertas cakram disterilkan menggunakan autoclave selama 15 menit. Setelah itu, kertas cakram  direndam  dalam  larutan Murraya koenigii pada  berbagai  konsentrasi.    Setelah ±15  menit,  kertas  cakram  diambil  secara aseptik dan dimasukkan ke dalam cawan petri yang  telah  disebar  bakteri.  Kemudian  cawan petri  diinkubasi  selama  24  jam  dan  diukur zona hambat yang terbentuk.
Pengenceran Murraya  koenigii dibuat dari konsentrasi 100%, 90%, 80%, 70%, 60% dan  50%  dalam  jumlah  1  ml.  Disiapkan    7 tabung  reaksi  dengan  cara  pengenceran tersebut  adalah  sebagai  berikut  :  tabung pertama  berisi  1  ml  ekstak Murraya  koenigii (100%), tabung kedua berisi 0,90 ml ekstrak + 0,10  ml  aquades  (90%),  tabung  ketiga  berisi 0,80 ml ekstrak + 0,20 aquades (80%), tabung ke  empat  berisi  0,70  ml  ekstrak  +  0,30 aquades  (70%),      tabung  ke  lima  berisi  0,60 ml  ekstrak  +  0,40  aquades  (60%),  tabung  ke enam  berisi  0,50  ml  ekstrak  +  0,50  aquades (50%),  tabung  ke  tujuh  berisi  aquades (control).

## 4. Uji In Vivo
a. Persiapan Wadah
Wadah yang digunakan berkapasitas 15 liter  yang  telah  dicuci  bersih  dan dikeringkan.  Selanjutnya  wadah  diisi air 10 liter.
b. Aklimatisasi Ikan
Aklimatisasi  ikan  dilakukan  dengan mengadaptasikan  kondisi  ikan  dari tempat  asalnya  di  tempat  yang  baru, karena  semua  perubahan  lingkungan bisa  dianggap  sebagai  penyebab  stres bagi ikan. Aklimatisasi ikan patin diberi pakan pellet FF 999 sebanyak 5%/bobot tubuh  dan  diberikan  2  kali  sehari  serta dilakukan  penyifonan  apabila  air  sudah kotor.
c. Persiapan Ikan Uji
Ikan  uji  yang  digunakan  adalah  ikan patin (Pangasius hyphotalamus) berasal dari  BBI  Krueng  Batee  Kabupaten Aceh  Barat  Daya  (ABDYA).  Dipilih ikan  patin  yang  sehat  sebanyak  100 ekor  dengan  ukuran  3-5  cm/ekor.  Ikan yang digunakan sebanyak
5
ekor/wadah    penelitian    dengan    total keseluruhan    pada    wadah  penelitian sebanyak 60 ekor ikan.
d. Penginfeksian Bakteri Berdasarkan penelitian yang dilakukan  Laili  (2007),  ikan  diinfeksi
menggunakan  bakteri  dengan  kepadatan 5x10 7 sel/ml  dengan  cara  perendaman selama  24  jam.  Caranya  yaitu  bakteri dengan kepadatan awal 10 9 sel/ml diencerkan dalam 10 liter air tawar hingga kepadatan  bakteri  menjadi  5x10 2 sel/ml. Setelah  itu  ikan  sejumlah  100  ekor dimasukkan dalam akuarium penginfeksian  dan  direndam  selama  ±24 jam  atau  ikan  menunjukkan    gejala-gejala terserang Staphylococcus aureus . Sebelum  penginfeksian  ikan  dipuasakan selama satu hari. Kemudian ikan dipindahkan ke dalam akuarium pemeliharaan  dengan  volume  10  liter  yang telah  diberikan  ekstrak Murraya  koenigii pada berbagai kosentrasi, Selama
penginfeksian ikan tidak diberi pakan.

## Parameter Uji

## Tingkat Kelangsungan Hidup (SR)
Kelangsungan  hidup  benih  ikan  patin diamati dengan cara menghitung jumalah ikan yang hidup pada sampling terakhir. Persantase kelangsungan  hidup  benih  ikan  patin  setelah pemberian ekstrak daun kari.

## Prevalensi ikan mas
Perhitungan prevalensi dilakukan sebelum  penghitungan  kelulushidupan  (SR) yang bertujuan untuk melihat sebarapa banyak
ikan yang terinfeksi bakteri disetiap perlakuan. Kualitas Air Parameter yang diukur untuk pengamatan  kualitas  air  adalah  suhu,  pH,  dan DO. Pengukuran dilakukan pada awal, tengah dan  akhir  penelitian.  Untuk  lebih  jelas  dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Parameter kualitas air No Parameter Kualitas air Alat 1 Suhu ( o C) Thermometer 2 pH pH meter

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dari  penelitian  ini berupa  data  prevalensi,  dan  kelangsungan hidup  ikan  mas  dianalisis  secara  statistik menggunakan  analisis  ragam  (Uji  F).  Bila terdapat  perbedaan  nyata  dilanjutkan  dengan uji lanjut Beda Nyata Terkecil (BNT) dan data kualitas air dianalisa secara deskriptif (Hanafiah, 2004).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen Ekstrak Daun Kari
Pada awal penelitian sebelum dilakukan analisis  senyawa  kimia,  daun  kari  diekstraksi dengan  senyawa  metanol.  Rendemen  dari daun kari yang diekstraksi dengan menggunakan  metanol  didapatkan  sebesar
2%, hal ini dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Rendemen Ekstrak Daun Kari
Bahan Daun Kari Berat Bahan (gram) Hasil Ekstraksi (gram) Rendemen (%) 1000 28.3 2.83
Menurut  Yanto  (2017)  Besar  kecilnya nilai  rendemen  menunjukkan  keefektifan proses  ekstraksi,  keefektifan  proses  ekstraksi dapat  dipengaruhi  oleh  jenis  pelarut  yang digunakan,  ukuran  partikel  sampel,  lamanya waktu  ekstraksi,  dan  metode  ekstraksi  yang digunakan.
Rendemen    hasil    ekstraksi  yang terkandung didalam daun kari sebanyak  2%.
Rendemen  merupakan  bagian  bahan  baku yang dapat dimanfaatkan. Banyaknya
rendemen  mempengaruhi  sifat  kelarutan komponen bioaktif. Kusumawati et  al . (2008) menyatakan  bahwa  rendemen  merupakan persentase  bagian  bahan  baku  yang  dapat digunakan.  Rendemen  yang  semakin  besar menandakan  bahwa  bahan  baku  tersebut memiliki  peluang  yang  lebih  besar  untuk dimanfaatkan  dibandingkan  bahan  baku  yang memiliki nilai rendemen yang rendah.

## Kandungan  Senyawa  Fitokimia  Ekstrak Daun Kari
Pengujian  fitokimia      secara  kualitatif meliputi  pengujian  flavonoid,  alkaloid,  tanin, triterpenoid,  dan  steroid.  Analisis  fitokimia merupakan  salah  satu  cara  untuk  mengetahui kandungan  metabolit  sekunder  pada  suatu sampel  (Harborne  1987).  Hasil  pengujian fitokimia  tabel  3,  menunjukkan  terdapat senyawa alkanoid, steroid, terpenoid, flavonoid  dan  fenolik;    Sedangkan  pengujian saponin  dan  tanin  pada  ektrak  daun  kari menunjukan  hasil    negatif.  Pada  dasarnya metode  analisis  tersebut  merupakan  reaksi pengendapan  yang  terjadi  karena  adanya pergantian molekul (Yanto 20017).
Tabel 3. Hasil engujian fitokimia daun kari Kandungan Kimia Reagen Fitokimia Alkoloid Steroid Terpenoid Saponin Flavonoid Tanin Fenolik Mayer Uji Liebermann Uji Liebermann Pengocokan 0,5 g Mg dan HCl MgCl 3 MgCl 3 + + +
- +
- +
Hasil  identifikasi  secara  kualitatif kandungan senyawa aktif kimia pada Tabel 5, daun  kari  mengandung  fenolik,  steroid, alkaloid,  terpenoid  dan  flavonoid.  penelitian Choudhury & Garg (2007) menyatakan bahwa kandungan  yang  dimiliki  daun  kari  yaitu carbazol alkaloid, lutein  dan terpenoid.

## Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kari
Berdasarkan  hasil  uji  daya  hambat ekstrak daun kari terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dengan  metode  difusi agar,  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  kari mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri. Hal  ini  diketahui  dengan  terbentuknya  zona hambat  setelah  media  diinkubasi  selama  24 jam,  yang  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun kari  memiliki sifat antibakteri (Gambar 2).
a b c
Gambar 1. Zona hambat ekstrak daun kari
( Murraya koenigii )
Aktivitas  zona  hambat  yang  dihasilkan diindikasikan dengan nampaknya zona bening pada  sekitar  kertas  cakram  ekstrak  daun  kari. Menurut  Pratama  (2005),  zona  bening  di sekitar  paper  disc  menunjukkan  adanya aktivitas antibakteri. Terbentuknya area bening  di  sekitar  kertas  cakram  menunjukkan adanya  daya  kerja  antibakteri  (Setiaji,  2009). Zona hambat yang kecil menunjukkan adanya aktifitas  antibakteri  yang  rendah,  sedangkan zona hambat yang besar menunjukkan adanya aktivitas  antibakteri  yang  tinggi.  Tinggi
rendahnya  diameter  zona  hambat  yang terbentuk diduga karena adanya enzim papain, alkaloid  carpain,  tocophenol,  dan  flavonoid yang  terkandung  dalam    dalam    bahan ekstraksi  (Julinsyah,  2016).  Hasil  pengukuran luas  zona  hambat  ekstrak  daun  kari  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dapat  dilihat pada gambar 2.
Rosyidah et    al .  (2010)    menyatakan bahwa  senyawa  steroid/triterpenoid  memiliki aktivitas    sebagai    senyawa    antibakteri. Senyawa    steroid  atau  triterpenoid  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan mekanisme  penghambatan  terhadap  sintesis protein karena terakumulasi dan menyebabkan perubahan  komponen  penyusun  sel  bakteri. Senyawa  steroid/triterpenoid  mudah  larut dalam lipid, faktor tersebut yang mengakibatkan  senyawa  steroid/triterpenoid mudah menembus dinding sel bakteri.
Gambar  2  menunjukkan  bahwa  zona hambat  ekstrak  duan  kari  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus yang tertinggi terdapat pada  perlakuan  P6  dengan  konsentrasi kandungan bahan 100% dimana diameter rata- rata  terbentuk  adalah  17  mm,  sedangkan untuk  perlakuan  terendah  dan  tidak  memiliki daya  hambat  terdapat  pada  perlakuan  P0 dengan konsentrasi 0% dimana diameter rata- rata terbentuk adalah 0 mm.
Gambar  2.  Diameter  zona  hambat  ekstrak daun kari terhadap S. aureus
Berdasarkan Hasil perhitungan ANOVA  menunjukan  bahwa  penggunaan ekstrak daun  kari sebagai antibakteri
Staphylococcus aureus pada benih  ikan patin berpengaruh  nyata    terhadap    zona    hambat bakteri   (P>0,05). Berdasarkan hasil  uji  lanjut (Duncan)  pada  selang  kepercayaan  95%, diperoleh  hasil  berbeda  nyata  pada  setiap perlakuan kecuali perlakuan P2 (60%) dengan perlakuan  P3  (70%).  Selain  itu  daun  kari menunjukkan  hasil  positif  terhadap  senyawa flavonoid.  Flavonoid  merupakan  senyawa yang  menunjukkan  aktivitas  biokimia  yaitu antioksidan, antivirus, antibakteri, dan antikanker.  Flavonoid  merupakan  salah    satu golongan    dari    senyawa    fenol    dengan struktur    kimia    C6-C3-C6  (Vermerris  dan Nicholson  2006).  Sabir  (2005)  Menyatakan bahwa senyawa flavonoid memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri.  Mekanisme  menghambat  bakteri tersebut  adalah  gugus  hidroksil  yang  terdapat pada struktur
senyawa flavonoid menyebabkan  perubahan  komponen  organik dan  transpor  nutrisi  yang  akhirnya  akan mengakibatkan timbulnya efek toksik terhadap bakteri.
Berdasarkan  Khanum et  al. (2000), daun  kari  kaya  akan  antioksidan  seperti tokoferol,  β-karoten,  senyawa  flavonoid  dan steroid.  Hasil  pengamatan  yang  dilakukan oleh  de-Fatima et  al .  (2006),  ekstrak  etanol dari  daun  kari,  mengandung  flavonoid,  fenol, glikosida  fenolik,  saponin  dan cyanogenic glikosida,  merupakan  metabolit  sekunder, berfungsi  sebagai  pengaturan  struktural  dan sifat  dan  sebagai  antibiotik,  sehingga  baik digunakan dalam perawatan kesehatan.

## Gejala Klinis Setelah Perendaman  Ekstrak Daun Kari
Gejala  klinis  yang  tampak  pada  ikan patin (Pangasius  hypophtalamus) setelah infeksi  bakteri Staphylococcus  aureus yaitu mengalami  perubahan  tingkah  laku  dan morfologi  tubuh.  Perubahan  tingkah  laku setelah  diinfeksi  bakteri,  diantaranya  yaitu pergerakan  renang  melambat  dan  penurunan respon  pakan,  berenang  tidak  teratur,  tingkah laku  ikan  yang  mendekati  aerasi,  sedangkan
0 5.5 7.5 7.5 10 10.5 17 0 5 10 15 20 0% 50% 60% 70% 80% 90% 100% Dia m et er Zo n a
H a m b a t (m m ) Perlakuan
perubahan  morfologi  diketahui  dengan  warna tubuh  memudar,    terjadi  peradangan  pada tubuh  di  bagian  operculum  dan  anus  yang tampak  berwarna  merah,  serta  adanya pembengkakan dan luka pada bagian perut.
Morfologi ikan patin pada hari pertama setelah  diinfeksi  adanya  perubahan  warna menjadi  pudar  pada  hari  ke-1  (Gambar  3a). Timbulnya peradangan pada bagian operculum dan anus juga terjadi pada hari ke- 1 (Gambar 3b). Bagian tubuh ikan mengalami berantakan  pada  terjadi  pada  hari  ke-2  pada setiap perlakuan  (Gambar 3c). Terjadi bercak luka  dan  luka  membesar  pada  hari  ke-2  pada setiap  perlakuan,  selanjutnya  pada  perlakuan kontrol  mulai  terjadi  kematian  pada  hari  ke-3 dan  seterusnya.  Sedangkan  pada  perlakuan 500 ppm, 700 ppm, dan 900 ppm mulai terjadi reaksi  penyembuhan  dimulai  pada  hari  ke-4. Luka  mulai  menutup  pada  tubuh  ikan  terjadi pada hari ke-6 (Gambar 3d).
Gejala  klinis  selama  penelitian  ikan patin  diamati  setelah  diinfeksi  bakteri S. aureus ,  mengalami  perubahan  dalam  tingkah laku  dan  perubahan  morfologi.  Perubahan tingkah  laku  terjadi  pada  semua  perlakuan diantaranya  respon  pakan  menurun,  berenang lambat  dan  mendekati  aerasi.  Hal  ini sependapat  dengan  Plumb  (1999),  yang
menyatakan  ikan  terinfeksi  bakteri  akan kehilangan  nafsu  makan  dan  penurunan respon  makan  yang  disebabkan  kerusakan organ  hati.  Perubahan  morfologi  ikan  patin setiap  perlakuan  mengalami  perbedaan    yaitu
perubahan warna kulit yang memudar, bagian sirip  ekor  berantakan,  peradangan  dari operculum sampai anus.
(a) Terjadi peradangan pada operculum dan anus

## (b) Bagian ekor berantakan
(c) bercak luka membesar
(d) Luka pada ikan menutup
Gambar 3. Gejala Klinis Ikan Patin setelah infeksi S. aureus
Keadaan  morfologi  ikan  patin  pasca perendaman  ditandai  dengan  adanya  warna tubuh  mulai  kembali  normal  pada  hari  ke-4 berlanjut  pada  peradangan  bagian operculum dan  anus  mulai  menghilang.  Ikan  patin mengalami kematian pasca diinfeksi bakteri S. aureus dan  pasca  perendaman  ekstrak  daun kari  yang  ditunjukan  pada  setiap  perlakuan. Kematian beberapa pada ikan setiap Perlakuan diduga ikan tidak mampu beradaptasi  dengan  ekstrak  daun  kari  yang bereaksi  terhadap  bakteri S.  aureus pada tubuh ikan.

## Tingkat Kelangsungan Hidup (SR)
Hasil    laju    kelangsungan    hidup    (SR) benih    ikan    patin  yang    dipelihara  selama penelitian  berada  pada  kisaran    13,33  – 93,33%  (Gambar  4).  Hasil  perhitungan ANOVA  menunjukan  bahwa  pemberian ekstrak  daun  kari  memberikan  pengaruh nyata  terhadap  kelangsungan  hidup  benih ikan patin. Nilai  kelangsungan  hidup maksimum  terdapat  pada  perlakuan  P3  yaitu 93,33%,  diikuti  P3  dengan  rata-rata  86,66% selanjutnya P1 yaitu 66,66% dan perlakuan P0 sebesar 13,33%.
Gambar  4.  Kelangsungan  hidup  benih  ikan  patin yang  terinfeksi S.  aureus dengan perendaman ekstrak daun kari
(Murraya koenigii)
Berdasarkan hasil   uji   lanjut   (Duncan) pada    selang  kepercayaan    95%,    diperoleh hasil    berbeda    nyata    antara  perlakuan  700 ppm  (P2)  dengan  perlakuan  0  ppm  (P0), selanjutnya  diperoleh  hasil  tidak  berbeda nyata  antara  perlakuan  700  ppm  (P2)  dengan perlakuan  900  ppm  (P3),  dan  perlakuan  900 ppm (P3) dengan perlakuan 500 ppm (P1).
Kelangsungan hidup merupakan perbandingan  antara  ikan  yang  hidup  pada awal    pemeliharaan  dengan  jumlah  ikan  yang hidup  di  akhir  pemeliharaan  (Tang,  2000). Tingkat  kelangsungan  hidup  benih  ikan  patin selama  penelitian  berkisar  antara  13,33  – 93,33%.  Berdasarakan  hasil  perhitungan ANOVA      menunjukan      bahwa      pemberian ekstrak      daun  kari,        berpengaruh        nyata terhadap    kelangsungan    hidup  benih  patin. Menurut  Effendie  (2002)  beberapa  sebab kematian  terhadap  populasi  ikan  adalah diambil  oleh  orang (fishing), pemangsaan, penyakit,  dan  kecelakaan.  Jadi,  penyakit merupakan bagian dari menurunya kelangsungan hidup ikan. Persentase
kelangsungan hidup terendah selama penelitian  terjadi  pada  perlakuan  kontrol 13,33%,  sedangkan  persentase  kelangsungan hidup  tertinggi  terjadi  pada  perlakuan  700 ppm  yaitu  93,33%.  Hal  ini  membuktikan
13.33 66.66 93.33 86.66 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 ppm 500 ppm 700 ppm 900 ppm K e la n gsun ga n H id u p (% ) Perlakuan
bahwa  konsentrasi  700  ppm  merupakan konsentrasi optimal daun  kari pada ikan patin terhadap  infeksi  bakteri S.  aureus. Menurut Ajizah  (2004),  semakin  kecil  dosis,  semakin sedikit  jumlah  zat  aktif  yang  terkandung didalamnya  untuk  menghambat  pertumbuhan suatu bakteri.
Menurut  pendapat  Effendie  (1979) faktor  yang  mempengaruhi  tinggi  rendahnya kelangsungan  hidup  adalah  abiotik  dan  biotik antara  lain  kompetitor,  kepadatan,  populasi, umur  dan  kemampuan  organisme  beradaptasi dengan lingkungannya. Hasil penelitian
Sunarto dan Sabariah (2009) juga menunjukkan bahwa perbedaan dosis pemberian  pakan  tidak  berpengaruh  terhadap tingkat kelulushidupan   ikan   semah. Hal   ini dapat      disimpulkan      bahwa      tingkat kelulushidupan tidak dipengaruhi oleh frekuensi pemberian pakan melainkan dipengaruhi oleh kesehatan ikan dan lingkungan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil pengamatan
Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Daun  Kari ( Murraya  koenigii )  Untuk  Mengobati  Benih Ikan Patin Siam ( Pangasianodon hypophthalmus )  Yang  Terinfeksi  Bakteri
Staphylococcus  aureus dapat  disimpulkan bahwa :
1. Ekstrak  Daun  Kari  ( Murraya  koenigii )
mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus pada benih ikan patin (Pangasius hypophtalamus) . 2. Konsentrasi yang baik dalam pengendalian infeksi bakteri Staphylococcus  aureus pada  ikan  patin siam terdapat pada perlakuan 700 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah,  A.  2004.  Sensitivitas  Salmonella typhimurium  terhadap  ekstrak  daun Psidium  guajava  . Jurnal  Bioscientiae . 1(1):31-38.
Amri,  2002.Hubungan  Kondisi  Oseanografi (Suhu Permukaan Laut, Khlorofil-a dan Arus)  Dengan  Hasil  Tangkapan  Ikan Pelagis  Kecil  di  Perairan  Selat  Sunda. Tesis.  Program  Pascasarjana.  Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Ashry,  N.  2007.  Pmenfaatan  ekstrak  daun ketapang  Terminalia  cattapa  untuk pencegahan  dan  pengobatan  ikan  patin (Pangasius hypopthalamus) yang
terinfeksi Aeromonas hydrophila. Departemen Budidaya Perairan. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelauatan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Atyah,  M.A.S.,  M.Z.  Saad  and  A.S.  Zahrah,
(2010).  First  report  of methicillin- resistant  Staphylococcus  aureus from cage-cultured tilapia ( Oreochromis niloticus ).. .: Jurnal Veterinary

## Microbiology 144:502-504
Behbahani,  A.,  Yazdi,  B.T.,  Shahidi,  F.,
Noorbakhsh, F., Vasiee, H., Alghooneh, A.,  Ali.  2018.  Phytochemical  analysis and  antibacterial  activities  extracts  of mangrove  leaf  against  the  growth  of some pathogenic bacteria . Jurnal Microbial  Pathogenesis.  Vol  114,  ISSN
: 08824010 : 225-232
Biswas,  A.K.,  M.K.  Chatli,  and  J.  Sahoo. 2012.    Anti  oxidant  potential  of    curry (Murraya  koenigii  L.) and  mint (Mentha spicata) Leaf extracts and their effect  on  colour  and  oxidative  stability of  raw  ground  Pork  meat  during refrigeration  storage. Journal.  Food Chem . (133):467-472.
[BSN]  Badan  Standarisasi  Nasional.  2008. Metode  pengujian  cemaran  mikroba dalam  daging,  telur,  dan  susu,  serta hasil olahannya . BSN. Jakarta.
[BSN]  Badan  Standarisasi  Nasional.  2009. Batas  Maksimum  Cemaran  Mikroba dalam Pangan . BSN. Jakarta. Choudhory,  P.R.  and  A.N.  Garg.  2007.
Variation  in  essential,  trace,  and  toxic elemental  contents  in  Murraya  koenigii a  spice  and  medicinal  herb  from
different  Indian  states. Journal.  Food Chem . (104):1454-1463.
Chusniati,  S.  dan  Lia,  P.A.  2010.  Uji  in  vitro perasan  daun  sirih  ( Piper  betle  linn ) terhadap  bakteri Staphylacoccus  sp
yang  diisolasi  dari  luka.  Departemen Mikrobiologi. Fakultas Kedokteran Hewan. Universitas Erlangga
Das,  A.K.,  V.  Rajkumar,  and  D.K.  Dwivedi.
2011.  Antioxidant  effect  of  curry  leaf
(Murraya  koenigii) powder  on  quality of  ground  and  cooked  goat  meat.  J. International  Food  Research.  (18):563- 569.
de-Fatima,  A.,  L.V.  Modolo,  L.S.  Conegero, R.A.  Pilli,  C.V.  Ferreira,  L.K.  Kohn, and  J.E.  de-Carvalho.  2006.  Lactones and their derivatives: biological activities,  mechanisms  of  action  and potential leads for drug design. Journal.
Med. Chem . (13):3371-3384. Djarijah,  A.S.  2001. Budidaya  Ikan  Patin . Kanisius. Yogyakarta. Djide,  N.  2004. Mikrobiologi  Farmasi .
Laboratorium  Mikrobiologi  Farmasi Fakultas MIPA UNHAS, Makassar. Effendie  MI.  2002.  Biologi  Perikanan. Yayasan Pustaka Nusantara: Yogyakarta. Effendie M.I. 1979. Metode Biologi Perikanan.  Yayasan  Dewi  Sri.  Bogor. 112 Hal. Entjang, I. 2003. Mikrobiologi dan Parasitologi untuk akademi keperawatan .  PT  Citra  Aditya  Bhakti. Bandung
Gahlawat,  D.K.  Jakhar,  S.  Dan  Pushpa,  D. 2014. Murraya koenigii (L.) Spreng : an ethnobotanical, phytochemical and pharmacological  review. Journal  of Pharmacognosy  and  Phytochemistry.
Vol  :    3  Page  :  109-119  :  ISSN  2278- 4136
Gufran  dan  Kodi.  2009.  Budidaya  Perairan Jilid 2. PT Citra Aditya Bakti. Bandung Goldman, E. dan Green, L.H. 2009. Practical Handbook  of  Microbiology,  Second
Edition .  Boca  Raton  :  CRC  Press.  Hal: 150 Hadinata, F. 2009. http//google.com. Pembenihan Ikan Patin Djambal. Balai Budidaya Air Tawar Jambi . Ds. Sungai Gelam Kecamatan Kumpeh Ulu Kabupaten Muaro Jambi. Harbone,  JB.,  1987.  Metode  Fitokimia  : Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis
Tumbuhan.  Ed  ke-2.  Terjemahan  K. Padmawinata  dan  I.  Soediro.  Institut Tekhnologi Bandung. Bandung. Iswani,  S.  2007. Preparasi  Ekstrak  Kasar (Crude Extract) Etanol dari Makroalga Untuk Uji Farmakologi . Buletin Teknologi Aquakultur Vol. 6 No. 1. Jain,  H.  Momin,  M.  dan  Kirti,  L.  2012. Murraya Koenigii : An Updated Review. International  Journal  Of Ayurvedic  And  Herbal  Medicine Vol  : 2:4 Page 607:627. ISSN : 2249-5746
Jawetz,  E,  J.  melnick,  et  al.,  2005.
Mikrobiologi Kedokteran . Jakarta: Julinsyah.  2016.  Efektivitas  Batang  Serai (Cymbopogon citratus) Sebagai Antibakteri Aeromonas hydrophila Pada  Benih  Ikan  Mas  ( Cyprinus carpio). [Skripsi].  Universitas  teuku Umar. Meulaboh. khanum, F., K.R. Anilakumar, K.R. Sudarshana,  K.R.  Viswanathan,  and  K. Santhanam.  2000.  Anticarcinogenic effects of curry leaves in dimethylhydrazine-treated  rats. Journal
Plant Food Human Nutrition . (55):347- 355.
Khusnan,  Salasia,  SIO,  Soegiyono.  2008. Isolasi , identifikasi, karaterisasi bakteri Staphylococcus  aureus dari  limbah pembenihan  dan  karkas  ayam  potong. Jurnal Veteriner. 9 : 45-41 Kordi,  K.M.G.H.,  Tancung  A.B.  2010. Pengelolaan  Kualitas    Air  Dalam Budidaya  Perairan.  Rineka  Cipta, Jakarta.
Kordi,  M.G.H.  dan  A.B.  Tancung.  2007. Pengelolaan  Kualitas  Air.  PT  Rineka
Cipta, Jakarta Kusumaningrum, A., P. Widyaningrum, dan I. Mubarok. 2009. Penurunan total bakteri daging  ayam  dengan  perendaman infusa daun salam (Syzygium polyantum). Jurnal MIPA 36:14-19.
Kusumawati  R,  Tazwir,  Wawasto  A.  2008. Pengaruh  perendaman  dalam  asam klorida  terhadapkualitas  gelatin  tulang kakap  merah (Lutjanus  sp.).  Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan . 3(1): 63-68.
Leboffe,  M.J.  and  Pierce,  B.E.  2011. A Photographic Atlas for The
Microbiology
Laboratory . Fourth
Edition. Morton Publishing. Colorado. Monalisa,  S.  S.  dan  Infa  Minggawati.  2010. Kualitas  Air  yang  Mempengaruhi Pertumbuhan  Ikan  Nila  (Oreochromis sp.)  di  Kolam  Beton  dan  Terpal. Journal  of  Tropical  Fisheries ,  5(2)  : 526 -530. Murugesh, K.S., V.C. Yeligar, B.C. Maiti, and T.K. Maiti. 2005. Hepato protective and antioxidant  role  of  Berberis  tinctorial Lesch  leaves  on  paracetamol  induces hepatic  damage  in  rats.  IJPT.  (41):64- 69. Nagappan,  T.,  P.  Ramasamy,  M.E.A.  Wahid, T.C.  Segaran,  and  C.S.  Vairappan.
2011.  Biological  activity  of  carbazole alkaloids  and  essential  oil  of  Murraya koenigii  against  antibiotic  resistant microbes and Cancer cell lines. Journal Molecules . (16):9651-9664.
Novi  S,  Normalina  A,  Novia  ME.  2015. Potency  of  Curry (Murraya  koenigii) and  Salam (Eugenia  polyantha) leaves as  natural  antioxidant  sources. Journal Nutrtion . 14(3): 131-135.
Plumb,  J.  A.  1999.  Overview  of  Warmwater Fish  Diseases. Journal  of  Applied Aquaculture ., 9(2):1-10 p.