## Growth of Bacteria Bacillus cereus in Liquid Mediums with Different Carbohydrate Sources
Irma Ardila Nengsih 1* , Feliatra 2 , Irwan Effendi 2
1 Student of The Faculty of Fisheries and Marine Universitas Riau, Pekanbaru
2 Lecturer at the Faculty of Fisheries and Marine Universitas Riau, Pekanbaru Corresponding Author: irmaardilanengsih2006@gmail.com
Diterima/Received: 19 Agustus 2020; Disetujui/Accepted: 7 September 2020

## ABSTRACT
Bacteria  need  a  medium  to  grow Bacillus  cereus is  a  probiotic  bacterium.  Molasses  and  tofu liquid  waste  are  one  of  the  wastes  that  are  used  as  alternative  medium,  because  they  are  easy  to obtain,  cheap,  and  contain  nutrients  that  are  high  enough  in  the  form  of  carbohydrates.  This  study aimed to determine the optimal medium for the growth of these bacteria. This study used a completely randomized  factorial  design.  It  consists  of  three  factors,  namely  the  type  of  waste  (molasses  +  egg albumen and tofu liquid waste + egg albumen), then the combination of isolates ( B. cereus SN7 and consortium), and the concentration of liquid waste used for medium growth is (molasses is 1%; 1.5% ; and  2%  while  tofu  liquid  waste  is  8%;  10%;  and  12%).  Bacterial  cell  growth  was  measured  by  the Total  Plate  Count  (TPC)  method,  spectrophotometric  method,  and  biomass,  while  the  incubation period  for  cell  growth  was  measured  every  0,  6,  12,  18,  and  24  hours.  The  results  of  this  study indicated  that  molasses  +  egg  albumen  with  a  concentration  of  1%  was  the  best  medium  for  the growth of B. cereus bacteria along with consortium isolates
Keywords : Bacillus cereus, Carbohydrates, Molasses, Probiotic, Tofu Liquid Waste

## 1. PENDAHULUAN
Bakteri  merupakan  organisme  yang paling  banyak  jumlahnya  ditemukan  dan tersebar  luas  dibandingkan  makhluk  hidup lainnya.  Hal  tersebut  karena  bakteri  mampu hidup  pada  berbagai  habitat  dan  mampu menguraikan senyawa-senyawa kompleks menjadi senyawa-senyawa yang lebih sederhana  untuk  memperoleh  zat-zat  tertentu yang dibutuhkan dalam rangka mem- pertahankan  hidupnya.  Bakteri  mempunyai potensi  yang besar  untuk dikembangkan dalam bidang industri bioteknologi. Salah satu bakteri yang  memiliki  potensi  jika  dikembangkan adalah  bakteri Bacillus  cereus .  Bakteri  ini memiliki  potensi  sebagai  tambahan  pakan berupa  enzim  mananase  (El-Sharounya et  al ., 2015).
Untuk  menumbuhkan  mikroorganisme seperti  dalam  mengkultur  bakteri  diperlukan suatu  media.  Bahan-bahan  yang  digunakan harus  mengandung  nutrisi  yang  dibutuhkan untuk  pertumbuhan  bakteri  seperti  dari  bahan- bahan  yang  kaya  akan  karbohidrat  dan  protein (Anisah  &  Rahayu,  2015).    Salah  satu  limbah yang  dapat  dijadikan  media  pertumbuhan bakteri dengan memiliki kaya akan karbohidrat
adalah  limbah  molase  dan  limbah  cair  industri tahu. Limbah molase merupakan hasil samping dari  industri  pengolahan  gula  yang  memiliki kandungan  gula  cukup  tinggi  sebanyak  48%- 55% (Tyas, 2017). Sedangkan limbah cair tahu merupakan  hasil  samping  industri  tahu  yang berasal dari proses perebusan kedelai, penyaringan,  dan  pencetakan  tahu.  Setiap  1 kilogram  kedelai  akan  menghasilkan  limbah cair berkisar antara 1,5-2 liter. Limbah cair tahu memiliki  kandungan  karbohidrat  sebanyak 25%-50% (Maryana et al., 2016).

## 2. METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Metode  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  metode  eksperimen  Isolat  bakteri yang  digunakan  terdiri  dari  2  yaitu B.  cereus strain SN7 dan B. cereus konsorsium ( B. cereus strain SP4, S5, Xmb051, BF2, dan strain  SN7) yang  diulang  masing  -  masing  sebanyak  3  kali ulangan.

## Prosedur Penelitian
Media  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  dilarutkan  dengan  menggunakan  aquades sebanyak  100  ml.  Komposisi  media  perlakuan
yang  digunakan  adalah  1%;  1,5%;  dan  2% Molase  +  10%  putih  telur,  8%;  10%;  dan  12% Limbah  cair  tahu  +  10%  putih  telur  ditambah dengan KH 2 PO 4 , K 2 HPO 4 dan Vitamin B12. Biakan murni B. cereus berasal dari stok Laboratorium  Mikrobiologi  Laut  Universitas Riau  dibuat  sub  kultur  pada  media  NA  miring dan  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  ±  24 jam.  Isolat  yang  digunakan  pada  media perlakuan  yaitu  2  jenis B.  cereus yaitu  isolat bakteri B.  cereus strain  SN7  dan  isolat  bakteri konsorsium  ( B.  cereus strain  SP4,  strain  S5, strain Xmb051,strain BF2, dan strain SN7.
Untuk  membuat  100  ml  kultur  bakteri pada  media  perlakun  dilakukan  dengan  cara media  perlakuan  yang  sudah  dimodifikasi dicampurkan  kemudian  disterilkan  dengan autoklaf  pada  suhu  121 0 C,  tekanan  1  atm selama  15  menit  kecuali  susu  skim.  Sterilisasi putih  telur  dengan  cara  dipasteurisasi  yaitu dengan  dipanaskan  pada  suhu  67ºC  selama  30 menit,  menggunakan waterbath kemudian masing-masing  botol  kultur  perlakuan  diisi starter  bakteri B.  cereus strain  SN7  sebanyak 10  ml  dan  yang  konsorsium  masing-masing isolat  bakteri  sebanyak  2  ml  kemudian ditambahkan  putih  telur  sebanyak  10  ml kemudian  dilarutkan  dengan  100  ml  aquades. Kultur  bakteri  dengan  media  pertumbuhan tersebut  diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  di  dalam waterbath  shaker dan  penghitungan  jumlah  sel bakteri  dilakukan  setiap  6  jam  sekali  (0,  6,  12, 18, 24).

## Pengukuran Pertumbuhan Bakteri
Ada tiga metode
pengukuran pertumbuhan  bakteri  yang  digunakan,  yaitu (Effendi, 2020):
1. Metode Total Plate Count (TPC). Teknik  yang  digunakan  pada  metode
TPC  dalam  penelitian  ini  yaitu  teknik  cawan sebar  ( spread  plate ).  Langkah  pertama  dalam metode ini yaitu menyiapkan media PCA ( Plate Count  Agar )  yang  telah  dibuat,  disterilkan  dan ditempatkan  pada  cawan  petri  secara  aseptis. Sampel  bakteri  pada  media  pertumbuhan diencerkan terlebih dahulu sampai pengenceran 10 -5 ,  kemudian    0,1  ml  diambil  menggunakan mikropipet  dan  dimasukkan  kedalam  cawan petri  yang  berisi  media  PCA.  Sampel  bakteri pada  media  kemudian  disebar  dan  diratakan menggunakan  batang drigalski secara  aseptis didekat  bunsen, setelah  itu  sampel  bakteri diinkubasi  selama  24  jam  dalam  inkubator kemudian  koloni  bakteri  yang  tumbuh  pada
media  PCA  dihitung  menggunakan colony counter .  Hasil  jumlah  koloni  yang  didapat kemudian dimasukkan kedalam rumus perhitungan bakteri,yaitu:

## CFU/ml=
2. Metode Spektrofotometri
Sampel  bakteri  pada  media  diambil kemudian  dan  dimasukkan  kedalam  kuvet, kemudian kuvet diletakkan dalam spektrofotometer dan diukur nilai absorbansinya  dengan  panjang  gelombang  630 nm.  Nilai  absorbansi  kemudian  dikonversikan kedalam rumus regresi linear yang telah didapat dari  data  kurva  standar  McFarland,  maka didapat nilai kepadatan sel pada media sebagai hasilnya
3. Pengukuran Biomassa
Pengukuran  biomassa  bakteri  dilakukan dengan  cara  menetukan  berat  kering  pada  sel bakteri. Microtube yang  menjadi  wadah  sel bakteri  ditimbang  terlebih  dahulu  dengan timbangan  analitik,  dicatat,  dan  dimasukkan  1 ml  bakteri  yang  diambil  pada  media  kultur. Microtube yang berisi isolat bakteri disentrifugasi  dengan  kecepatan  3000  rpm selama  10  menit  (Setyati,  2015).  Isolat  yang telah disentrifugasi akan menghasilkan supernatan dan endapan sel bakteri dibawahnya.  Supernatan  yang  telah  terbentuk dibuang  menggunakan  pipet  tetes  yang  sudah disterilkan  dengan  alkohol  sampai  hanya endapan  sel  bakteri  yang  tersisa. Microtube yang  berisi  sel  bakteri  kemudian  di  oven dengan  suhu  100  °C  selama  15  menit.  Setelah di oven, mikrotube didinginkan dalam desikator kemudian  ditimbang  berat  keringnya.  Berat kering  yang  telah  didapatkan  dikurang  dengan berat microtube sebelumnya sehingga didapatkan  berat  kering  yang  sebenarnya  dari bakteri.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Jumlah Sel bakteri
Adapun  hasil  pengukuran  pertumbuhan jumlah sel bakteri B. cereus pada media limbah molase  +  telur  dan  limbah  cair  tahu  +  telur dengan  metode  TPC  ( Total  Plate  Count )  dapat dilihat pada Tabel 1
Tabel  1.    Hasil  TPC  ( Total  Plate  Count )  (CFU’s/ml)  bakteri B.  cereus pada  Media  Limbah Molase + Telur
Media Waktu Inkubasi (jam ke-) (× 10 8 CFU’s/ml) 0 6 12 18 24 R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD LM N 1% 0,58 ± 0,02 a 1,11 ± 0,10 a 0,44 ± 0,02 a 2,32 ± 0,04 b 2,37 ± 0,03 a N 1,5% 0,89 ± 0,10 b 2,27 ± 0,15 c 2,53 ± 0,03 e 2,73 ± 0,09 c 2,53 ± 0,02 a N 2% 1,21 ± 0,04 c 1,90 ± 0,27 bc 1,46 ± 0,05 b 2,75 ± 0,09 c 2,50 ± 0,13 a K 1% 1,48 ± 0,17 cd 2,32 ± 0,27 c 2,28 ± 0,25 de 2,91 ± 0,09 c 2,92 ± 0,11 b K 1,5% 1,36 ± 0,15 c 1,58 ± 0,10 b 1,99 ± 0,28 cd 2,87 ± 0,13 c 2,43 ± 0,15 a K 2% 0,62 ± 0,10 a 1,86 ± 0,17 bc 1,86 ± 0,17 c 1,82 ± 0,05 a 3,00 ± 0,20 b N (+) 2,10 ± 0,16 2,68 ± 0,11 2,78 ± 0,11 2,86 ± 0,06 2,95 ± 0,09 N (-) 0,73 ± 0,13 1,12 ± 0,05 1,26 ± 0,11 1,03 ± 0,10 0,57 ± 0,08 K (+) 1,85 ± 0,13 2,41 ± 0,16 2,33 ± 0,14 2,35 ± 0,12 2,21 ± 0,22 K (-) 0,87 ± 0,15 1,06 ± 0,09 1,21 ± 0,11 1,18 ± 0,19 0,76 ± 0,11 Berdasarkan Tabel 1, pada media limbah molase  +  telur  dengan  konsentrasi  1%  yang digunakan sebagai sumber karbohidrat merupakan  media  pertumbuhan  yang  paling optimal bagi bakteri B. cereus isolat konsorsium.  Hal  ini  sesuai  dari  pernyataan Endah et al. (2012), bahwa molase mengandung  gula  sebanyak  50%,  baik  dalam bentuk  sukrosa  maupun  dalam  bentuk  gula pereduksi  yang  artinya  molase  memiliki kandungan karbohidrat berupa gula  yang dapat dijadikan  sumber  energi  serta  gula-gula  yang terkandung  dalam  molases  mudah  dicerna  dan diserap  oleh  sel.  Hasil  pertumbuhan  yang
didapat  pada  isolat B.  cereus konsorsium menunjukkan pertumbuhan yang paling optimal karena melebihi dari pertumbuhan bakteri pada kontrol  positif.  Pertumbuhan  jumlah  koloni bakteri B.  cereus konsorsium  lebih  banyak dibandingkan dengan isolat SN7. Hal ini sesuai dengan pernyataan dari Asri  & Zulaika (2016), mengatakan  bahwa  penggunaan  konsorsium mikroba  cenderung  memberikan  hasil  yang lebih  baik  dibandingkan  penggunaan  isolat tunggal, dikarenakan kerja enzim dari tiap jenis mikroba  dapat  saling  melengkapi  untuk  dapat bertahan  hidup  menggunakan  sumber  nutrien yang tersedia dalam media pembawa tersebut.
Tabel 2. Hasil TPC ( Total Plate Count ) (CFU’s/ml) bakteri B. cereus pada Media Limbah Cair Tahu + Telur
Media Waktu Inkubasi (jam ke-) (× 10 8 CFU’s/ml) 0 6 12 18 24 R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD LCT N 8% 0,46 ± 0,03 b 0,93 ± 0,08 c 1,00 ± 0,15 bc 1,18 ± 0,06 b 1,92 ± 0,08 b N 10% 0,22 ± 0,03 a 0,49 ± 0,05 a 0,70 ± 0,03 a 1,79 ± 0,01 d 1,86 ± 0,01 b N 12% 0,58 ± 0,05 c 0,91 ± 0,08 c 1,12 ± 0,09 c 1,59 ± 0,02 c 2,19 ± 0,03 c K 8% 0,62 ± 0,07 c 0,80 ± 0,06 bc 0,81 ± 0,02 ab 1,23 ± 0,08 b 1,10 ± 0,10 a K 10% 0,82 ± 0,07 d 1,10 ± 0,10 d 1,20 ± 0,18 c 1,98 ± 0,04 e 1,00 ± 0,10 a K 12% 0,39 ± 0,03 b 0,68 ± 0,03 b 0,71 ± 0,09 a 0,93 ± 0,04 a 1,92 ± 0,13 b N (+) 2,10 ± 0,16 2,68 ± 0,11 2,78 ± 0,11 2,86 ± 0,06 2,95 ± 0,09 N (-) 0,73 ± 0,13 1,12 ± 0,05 1,26 ± 0,11 1,03 ± 0,10 0,57 ± 0,08 K (+) 1,85 ± 0,13 2,41 ± 0,16 2,33 ± 0,14 2,35 ± 0,12 2,21 ± 0,22 K (-) 0,87 ± 0,15 1,06 ± 0,09 1,21 ± 0,11 1,18 ± 0,19 0,76 ± 0,11
Tabel  2,  pertumbuhan  pada  media limbah  cair  tahu  +  telur  menunjukkan  bahwa pertumbuhan  koloni  bakteri B.cereus isolat SN7  dan  konsorsium  tidak  optimal  di- bandingkan  pada  media  limbah  molase  +  telur
karena  jumlah  koloni  bakteri B.  cereus yang tumbuh  pada  media  ini  dibawah  dari  jumlah koloni  bakteri B.  cereus pada  media  kontrol positif.
Gambar 1. Pertumbuhan Optimal Sel Bakteri B. cereus Konsorsium
Gambar  1,  dapat  dilihat  bahwa  hasil pertumbuhan  bakteri B.  cereus pada  media limbah molase + telur memiliki fase dan jumlah koloni  sel  bakteri  yang  hampir  sama  dengan media kontrol positif yaitu pada jam ke 0, 6, 12, dan  18  terjadi  fase  eksponensial  yaitu pertumbuhan  bakteri  mengalami  peningkatan yang  berbeda-beda  dan  ada  yang  tidak  terlalu signifikan,  kemudian  pada  jam  ke  24  bakteri mengalami fase stasioner.

## Jumlah Kepadatan Sel Bakteri
Hasil  nilai  absorbansi  yang  didapatkan diregresikan  ke  dalam  standar  Mcfarland, dengan nilai regresinya Y =– 0,8524 + 25,696x. Rata-rata  kepadatan  sel  bakteri  dengan  media molase + telur dan limbah cair tahu + telur hasil pengukuran  nilai  absorbansinya  yang  telah diregresikan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Rata-rata Kepadatan Sel (sel/ml) bakteri B. cereus pada Media Limbah Molase + Telur
Media Waktu Inkubasi (jam ke-) (× 10 8 sel/ml) 0 6 12 18 24 R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD LM N 1% 1,39 ± 0,01 a 1,72 ± 0,26 ab 2,11 ± 0,12 a 2,41 ± 0,15 abc 1,99 ± 0,12 N 1,5% 1,89 ± 0,45 ab 2,23 ± 0,35 bc 2,20 ± 0,10 a 2,53 ± 0,14 abc 2,34 ± 0,06 N 2% 2,54 ± 0,50 b 2,87 ± 0,29 c 3,09 ± 0,37 b 2,71 ± 0,40 bc 2,25 ± 0,21 K 1% 1,39 ± 0,15 a 1,41 ± 0,17 a 1,90 ± 0,04 a 1,92 ± 0,22 a 2,14 ± 0,22 K 1,5% 1,87 ± 0,30 ab 2,04 ± 0,24 ab 2,06 ± 0,10 a 2,28 ± 0,31 ab 2,21 ± 0,15 K 2% 2,65 ± 0,47 b 2,88 ± 0,53 c 2,99 ± 0,10 b 3,01 ± 0,30 c 2,33 ± 0,20 N (+) 0,11 ± 0,006 1,14 ± 0,081 1,26 ± 0,10 1,38 ± 0,09 1,66 ± 0,08 N (-) 0,06 ± 0,03 0,06 ± 0,01 0,05 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,008 ± 0,01 K (+) 1,13 ± 0,03 1,25 ± 0,09 1,44 ± 0,03 1,49 ± 0,07 1,60 ± 0,087 K (-) 0,06 ± 0,015 0,05 ± 0,01 0,04 ± 0,006 0,04 ± 0,006 0,02 ± 0,004
Tabel  3,  bahwa  pertumbuhan  yang optimal  dengan  jumlah  kepadatan  sel  bakteri yang  mendekati  jumlah  kepadatan  pada  media NB (kontrol positif) pada setiap waktu inkubasi terdapat  pada  bakteri B.  cereus isolat konsorsium  menggunakan  media  pertumbuhan limbah  molase  +  telur  dengan  konsentrasi  1%. Media  ini  menjadi  media  pertumbuhan  bakteri B.  cereus yang  optimal  karena  jumlah  koloni dan nilai absorbansi yang tinggi diantara media lainnya.  Hal  ini  sesuai  dari  pernyataan Lizayana et  al. (2016)  bahwa  semakin  keruh suatu  limbah  cair  sebagai  media  pertumbuhan maka  semakin  banyak  terdapat  endapan, endapan  tersebut  mengandung  sumber  nutrisi
bagi  bakteri  untuk  tumbuh  dan  berkembang. Maka  dapat  dikatakan  bahwa  media  limbah molase  +  telur  menjadi  media  pertumbuhan yang optimal karena endapan yang mengandung nutrient bagi pertumbuhan bakteri pada  media  tersebut  lebih  banyak  dari  yang lain.  Media  limbah  cair  tahu  +  telur  bakteri B.cereus isolat SN7 dan konsorsium menunjukkan  pertumbuhan  yang  tidak  optimal dengan  jumlah  kepadatan  sel  bakteri  pada setiap waktu inkubasi mengalami kenaikan dan penurunan yang tidak stabil.
Sedangkan rata-rata kepadatan sel media limbah  cair  tahu  +  telur  dapat  dilihat  pada Tabel 4.
1,85 2,41 2,33 2,35 2,21 1,48 2,32 2,35
2,91 2,92 0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00 0 6 12 18 24 Jum la h S el B akt er i ( x 10 8 C F U' s/m l) Waktu Pengukuran (Jam ke-) Kontrol Positif Molase + Telur 1%
Tabel 4. Kepadatan Sel (sel/ml) bakteri B. cereus pada Media Limbah Cair Tahu + Telur
Media Waktu Inkubasi (jam ke-) (× 10 8 sel/ml) 0 6 12 18 24 R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD LCT N 8% 2,85 ± 0,04 a 3,30 ± 0,14 a 3,22 ± 0,14 3,32 ± 0,09 3,46 ± 0,05 N 10% 3,34 ± 0,07 c 3,78 ± 0,03 b 3,70 ± 0,16 3,68 ± 0,20 3,49 ± 0,03 N 12% 3,90 ± 0,07 d 4,02 ± 0,08 c 3,34 ± 0,30 3,34 ± 0,34 3,81 ± 0,14 K 8% 3,00 ± 0,02 b 3,30 ± 0,11 a 3,37 ± 0,10 3,36 ± 0,11 3,38 ± 0,34 K 10% 3,40 ± 0,05 c 3,66 ± 0,05 b 3,61 ± 0,10 3,47 ± 0,27 3,28 ± 0,21 K 12% 4,08 ± 0,10 e 3,97 ± 0,05 c 3,54 ± 0,36 3,49 ± 0,40 3,33 ± 0,33 N (+) 0,11 ± 0,006 1,14 ± 0,081 1,26 ± 0,10 1,38 ± 0,09 1,66 ± 0,08 N (-) 0,06 ± 0,03 0,06 ± 0,01 0,05 ± 0,01 0,03 ± 0,01 0,008 ± 0,01 K (+) 1,13 ± 0,03 1,25 ± 0,09 1,44 ± 0,029 1,49 ± 0,07 1,60 ± 0,087 K (-) 0,06 ± 0,015 0,05 ± 0,01 0,04 ± 0,006 0,04 ± 0,006 0,018 ± 0,004

## Jumlah Biomassa Sel Bakteri
Pengukuran  jumlah  biomassa  sel  bakteri ini bertujuan untuk mengetahui berat sel kering setiap masa inkubasi. Biomassa didapatkan dari berat  kering  mikrotube  yang  berisi  sampel
dikurang  dengan  berat  mikrotube  kosong (0,9042  gram).  Rata-rata  jumlah  biomassa  sel bakteri  media  molase  +  telur  dan  limbah  cair tahu  +  telur  dapat  dilihat  pada  Tabel  5  dan Tabel 6.
Tabel  5.    Hasil  Pengukuran  Biomassa  (Berat  Kering)  (g/ml)  Bakteri B.  cereus pada  Media Limbah Molase + Telur
Media Waktu Inkubasi (jam ke-) (× 10 8 gram/ml) 0 6 12 18 24 R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD LM N 1% 0,041 ± 0,03 0,056 ± 0,05 0,097 ± 0,003 0,100 ± 0,01 0,056 ± 0,07 N 1,5% 0,109 ± 0,07 0,117 ± 0,03 0,076 ± 0,04 0,036 ± 0,02 0,066 ± 0,04 N 2% 0,099 ± 0,05 0,137 ± 0,02 0,127 ± 0,01 0,085 ± 0,07 0,091 ± 0,06 K 1% 0,009 ± 0,009 0,105 ± 0,07 0,039 ± 0,06 0,083 ± 0,05 0,103 ± 0,11 K 1,5% 0,008 ± 0,01 0,024 ± 0,01 0,120 ± 0,004 0,068 ± 0,06 0,095 ± 0,03 K 2% 0184 ± 0,26 0,088 ± 0,05 0,047 ± 0,07 0,097 ± 0,03 0,101 ± 0,04 N (+) 0,025 ± 0,01 0,040 ± 0,02 0,118 ± 0,05 0,117 ± 0,04 0,134 ± 0,001 N (-) 0,024 ± 0,02 0,134 ± 0,01 0,034 ± 0,01 0,001 ± 0,02 0,014 ± 0,01 K (+) 0,097 ± 0,03 0,116 ± 0,01 0,131 ± 0,02 0,128 ± 0,02 0,123 ± 0,01 K (-) 0,002 ± 0,01 0,035 ± 0,02 0,101 ± 0,02 0,024 ± 0,01 0,009 ± 0,004
Tabel  6.  Hasil  Pengukuran  Biomassa  (Berat  Kering)  (g/ml)  Bakteri B.  cereus pada  Media
Limbah Cair Tahu + Telur
Media Waktu Inkubasi (jam ke-) (× 10 8 gram/ml) 0 6 12 18 24 R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD R ± SD LCT N 8% 0,070 ± 0,07 0,050 ± 0,06 0,117 ± 0,05 0,062 ± 0,08 0,148 ± 0,08 N 10% 0,109 ± 0,05 0,058 ± 0,05 0,153 ± 0,01 0,118 ± 0,01 0,140 ± 0,06 N 12% 0,081 ± 0,03 0,092 ± 0,07 0,051 ± 0,01 0,069 ± 0,04 0,121 ± 0,04 K 8% 0,081 ± 0,05 0,095 ± 0,05 0,063 ± 0,06 0,064 ± 0,03 0,048 ± 0,02 K 10% 0,123 ± 0,002 0,075 ± 0,04 0,049 ± 0,05 0,089 ± 0,06 0,142 ± 0,02 K 12% 0,057 ± 0,09 0,097 ± 0,08 0,069 ± 0,05 0,018 ± 0,02 0,106 ± 0,03 N (+) 0,025 ± 0,01 0,040 ± 0,02 0,118 ± 0,05 0,116 ± 0,04 0,134 ± 0,001 N (-) 0,024 ± 0,02 0,133 ± 0,01 0,033 ± 0,01 0,001 ± 0,02 0,014 ± 0,01 K (+) 0,097 ± 0,03 0,116 ± 0,01 0,131 ± 0,02 0,128 ± 0,02 0,123 ± 0,01 K (-) 0,002 ± 0,01 0,035 ± 0,02 0,101 ± 0,02 0,024 ± 0,01 0,0090 ± 0,004
Berdasarkan  hasil  yang  telah  didapatkan dalam  pengukuran  ini  (Tabel  5  dan  6),  jumlah nilai  biomassa  bakteri B.cereus tertinggi terdapat  pada  isolat  konsorsium  dengan
konsentrasi  1,5%  media  molase  +  telur  dengan waktu  inkubasi  12  jam  sebesar  0,120  g/ml (Tabel 6). Hal ini sesuai dengan pernyataan dari Yeni et  al. (2016),  menyatakan  bahwa  media
pertumbuhan bakteri harus mengandung nutrisi sesuai  kebutuhan  bakteri  dan  harus  memiliki kesamaan  pada  media  produksi  sampai  dapat meminimalkan  waktu  adaptasi  dari  kultur starter,  mengurangi  fase  lag,  dan  meng- optimalkan waktu dari fase stasioner.
Dalam pengukuran biomassa ini memiliki  kesamaan  pada  pengukuran  TPC ( Total  Plate  Count )  dan  spektrofotometri bahwa B.  cereus mengalami  pola  pertumbuhan dengan  fase-fase  yang  hampir  sama  yaitu  pada jam  ke  0,  6,  12,  dan  18  merupakan  fase eksponensial  sampai  dapat  dikatakan  fase adaptasinya  cenderung  singkat,  dan  fase stasioner  yang  cukup  lama  yaitu  pada  jam  ke 24.  Sedangkan  pada  media  limbah  cair  tahu  + telur,  rata-rata  pertumbuhan B.cereus isolat SN7 dan konsorsium cukup tidak bagus karena fase  eksponensial  dan  stasioner  yang  lebih singkat  dibandingkan  media  limbah  molase  +
telur.

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan  bahwa  media  pertumbuhan  bakteri B.cereus yang  optimal  dengan  menggunakan sumber  karbohidrat  adalah  pada  media  limbah molase + telur sebanyak 1% dan menggunakan isolat konsorsium, pertumbuhan bakteri B.cereus isolat  SN7  dan  konsorsium  memiliki waktu  pertumbuhan  optimal  terletak  pada kisaran 12 sampai 24 jam waktu inkubasi.
Saran  dalam  penelitian  ini  ialah  perlu dilakukan  pengukuran  parameter  pada  media pertumbuhan yang digunakan seperti pH, suhu, salinitas,  serta  jumlah  komposisi  pada  media yang  digunakan  untuk  mengetahui  faktor pengaruh  pertumbuhan  bakteri B.  cereus terhadap media

## DAFTAR PUSTAKA
Anisah.  &  T.  Rahayu.  (2015).  Media  Alternatif  untuk  Pertumbuhan  Bakteri  Menggunakan  Sumber Karbohidrat yang Berbeda. Naskah Publikasi. Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Asri, C. A. & E, Zulaika. (2016). Sinergisme Antar Isolat Azotobacter yang Dikonsorsiumkan. Jurnal Sains dan Seni ITS. 5(2): 2337 – 3520.
Effendi, I. (2020). Metode Identifikasi dan Klasifikasi Bakteri. Pekanbaru: Oceanum Press. 142 hlm.
El-Sharounya,  E.E.,  N.M.K.  El-Toukhyb.,  N.A.  El-Sersyc  &  A.A.  El-Aal  El-Gayara.  (2015). Optimization  and  Purification  of  Mannanase  Produced  by  an  Alkaliphilic-thermotolerant Bacillus cereus N1 isolated from Bani Salama Lake in Wadi El-Natron. Biotechnol. Equip. 29: 315-323.
Endah, W., I. Tami & S. Ernawati. (2012). Limbah Molase: Pemanfaatan sebagai Sumber Karbohidrat untuk Perkembangbiakan Mikroorganisme. Valensi 2(5): 565-572.
Lizayana., Mudatsir &  Iswadi. (2016). Densitas Bakteri pada  Limbah Cair Pasar Tradisional. Jurnal Ilmiah Mahasiswa Pendidikan Biologi . 1(1): 95 -106.
Maryana, L.,  A.  Syariful  & W.N. Arsa. (2016). Produksi Protein  Sel  Tunggal dari Kultur Rhizopus oryzae Culture with the Medium of Tofu Wastewater. Journal of Pharmacy . 2(2): 132 -137.
Setyati,  W.  A.,  E.  Martani,  Triyanto,  Subagiyo  &  M.  Zainuddin.  (2015).  Kinetika  Pertumbuhan  dan Aktivitas  Protease  Isolat  36k  dari  Sedimen  Ekosistem  Mangrove,  Karimunjawa,  Jepara. Indonesia Journal of Marine Sciences . 20(3) : 163 -169.
Tyas, N. P. (2017). Pengaruh Molase Terhadap Aktivitas Konsorsium Bakteri Pereduksi Sulfat dalam Mereduksi Sulfat (SO 4 - ). Jurnal Viabel Pertanian . 11(2): 39 - 49.
Yeni,  A.  Meryandini  &  T.C.  Sunarti.  (2016).  Penggunaan  Substrat  Whey  Tahu  untuk  Produksi Biomassa oleh Pediococcus E . 1222. Jurnal Teknologi Industri Pertanian. 26(3): 284-293.