## PENETAPAN KADAR KLOROFIL DAUN KELOR (Moringa oleifera Lam.) DAN APLIKASINYA DALAM FORMULASI SEDIAAN GEL

## Determination of Chlorophyll Levels in Moringa (Moringa oleifera Lam.) Leaves and Their Application in Gel Preparations
Beta Ria Erika Marita Dellima 1*) , Mega Karina Putri 1) ,  Anggita Manda Liung 1)
1 Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Akbidyo, Yogyakarta, Indonesia
* e-mail: rifqiree@gmail.com

## ABSTRAK
Radikal bebas yang dapat menyebabkan permasalahan pada kulit dapat dicegah dengan senyawa  antioksidan  seperti  klorofil  yang  terdapat  pada  daun  kelor.  Pemanfaatan  klorofil untuk  antioksidan  pada  kulit  dapat  dilakukan  dengan  memformulasikannya  menjadi  bentuk sediaan  farmasetis  seperti  gel.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  sampel  yang memiliki  kadar  klorofil  tertinggi  untuk  diaplikasikan  pada  sediaan  gel.  Pengujian  klorofil menggunakan  metode  spektrofotometri  UV  Vis  dilakukan  pada  sampel  segar,  simplisia  dan ekstrak  etanol  daun  kelor.  Formulasi  gel  dilakukan  optimasi  pada  konsentrasi gelling  agent HPMC  yang  memberikan  massa  gel  yang  baik.  Konsentrasi  HPMC  yang  digunakan  pada formula 1 sebesar 2 %, formula 2 sebesar 3 % dan formula 3 sebesar 4 %. Sediaan gel yang terbentuk  kemudian  diuji  parameter  fisik  sediaan  gel.  Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan kadar  klorofil  tertinggi  diperoleh  pada  sampel  ekstrak  etanol  daun  kelor  yaitu  sebesar  8,087 mg/g.  Formula  1  dan  2  yaitu  pada  konsentrasi  HPMC  2  %  dan  3  %  memenuhi  persyaratan fisik sediaan gel.
Kata kunci : daun kelor, gelling agent , HPMC

## ABSTRACT
Free  radicals  that  can  cause  skin  problems  can  be  prevented  with  antioxidant compounds  such  as  chlorophyll  found  in  Moringa  leaves.  Utilization  of  chlorophyll  for antioxidants in the skin can be done by formulating it into a pharmaceutical dosage form such as a gel. This study aims to determine which samples have the highest chlorophyll content to be  applied  to  gel  preparations.  Chlorophyll  testing  using  the  UV  Vis  spectrophotometry method  was  carried  out  on  samples  of  fresh  leaves,  simplicia  and  ethanol  extract.  The  gel formulation  was  optimized  at  the  concentration  of  HPMC  gelling  agent  which  gave  a  good gel  mass.  The  HPMC  concentration  used  in  formula  1  was  2%,  formula  2  was  3%  and formula  3  was  4%.  The  gel  preparation  that  was  formed  was  then  tested  for  the  physical parameters of  the gel  preparation.  The results obtained showed that the highest chlorophyll content was obtained in the ethanol extract sample of Moringa leaves, which was 8.087 mg/g. Formulas  1  and  2,  i.e.  at  2%  and  3%  HPMC  concentrations,  fulfilled  the  physical requirements of gel preparations .
Keywords: moringa leaves, gelling agent, HPMC

## PENDAHULUAN
Paparan  sinar  UV  menyebabkan  terjadinya  peningkatan  pembentukan  radikal  spesies oksigen  reakstif  (ROS)  pada  kulit.  Akumulasi  ROS  dalam  tubuh  menyebabkan  terjadinya stress  oksidatif,  yang  lebih  lanjut  dapat  menyebabkan  terjadinya photoaging (Andarina  & Djauhari, 2017; Haerani dkk., 2018).
Daun  kelor  mengandung  senyawa  klorofil  (Fajri  dkk.,  2018).  Klorofil  memiliki aktivitas  antioksidan  melalui  mekanisme  langsung  dan  tak  langsung.  Mekanisme  langsung klorofil  sebagai  antioksidan  yaitu  melalui  kemampuannya  untuk  menangkap  radikal  bebas, sedangkan  mekanisme  tak  langsung  melalui  metabolisme  jalur  detoksifikasi  (Galvez  et  al., 2020). Klorofil dapat diukur kadarnya menggunakan metode spektrofotometri dengan pelarut aseton atau etanol(Ajiningrum, 2018).
Pemanfaatan  klorofil  untuk  antioksidan  pada  kulit  dapat  dilakukan  dengan memformulasikannya menjadi bentuk sediaan farmasetis. Formulasi senyawa fitokimia yang berperan  sebagai  antioksidan  perlu  memperhatikan  beberapa  hal  terkait  stabilitas, kompatibilitas  dan  daya  penetrasi  sediaan  ke  dalam  kulit  untuk  menghasilkan  sediaan  yang stabil  dan  efektivitasnya  tercapai  (Haerani  dkk.,  2018).  Ekstrak  etanol  daun  kelor  yang diformulasikan dalam bentuk gel memberikan aktivitas antioksidan lebih tinggi dibandingkan krim (Safitri & Parfati, 2020). Dalam pembuatan sediaan gel, pemilihan bahan pembentuk gel merupakan  salah  satu  faktor  yang  perlu  diperhatikan.  Bahan  pembentuk  gel  atau  disebut Gelling  agent merupakan  eksipien  yang  dapat  meningkatkan  viskositas  sediaan  dan menstabilkan  sediaan  gel.  HPMC  merupakan gelling  agent yang  memberikan  stabilitas sediaan yang baik (Elisya dkk., 2023).

## METODE

## Peralatan
Timbangan  analitik  (Ohaus),  spektrofotometer  UV  Vis  (Genesys  150),  mortir  dan stamper, pH meter (HI pH edge), alat uji daya sebar, alat uji daya lekat.

## Bahan
Daun  kelor  segar,  etanol  96%  (teknis),  aseton  (p.a.),  HPMC  (teknis),  propilen  glikol (teknis),  metil  paraben  (teknis),  propil  paraben  (teknis),  akuades  (teknis).  Daun  kelor  segar diperoleh di daerah Imogiri, larutan kimia dan bahan formulasi diperoleh dari Kimia ARD.

## Penyiapan Sampel
Simplisia daun kelor dibuat  dengan cara pengeringan daun kelor segar menggunakan almari  pengering  pada  suhu  50 o C  yang  dilanjutkan  dengan  proses  penyerbukan.  Ekstrak etanol 96% daun kelor dibuat menggunakan metode maserasi dengan modifikasi konsentrasi etanol kemudian dipekatkan hingga diperoleh ekstrak kental (Safitri & Parfati, 2020).

## Analisis Kadar Klorofil dalam Sampel
Sampel (daun segar, simplisia dan ekstrak etanol daun kelor) ditambah 10 mL aseton 80%, diaduk kemudian disaring dan dilanjutkan dengan pengukuran absorbansi pada panjang gelombang  645,    646  dan  663  nm  menggunakan  metode  spektrofotometri  UV  Vis  (Sari  & Putri, 2023).

## Formulasi dan Pembuatan Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Kelor
Pembuatan sediaan gel ekstrak etanol daun kalor menggunakan formula yang disajikan pada tabel 1.
Tabel 1. Formula Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Kelor
No Bahan Formula (%) Fungsi F1 F2 F3 1 Ekstrak etanol daun kelor 20 20 20 Zat aktif 2 HPMC 2 3 4 Gelling agent 3 Propilen glikol 15 15 15 Humektan 4 Metil paraben 0,2 0,2 0,2 Pengawet 5 Propil paraben 0,05 0,05 0,05 Pengawet 6 Aquadest ad 100 100 100 Pelarut
Bahan yang digunakan dalam formulasi gel tertera pada Tabel 1. Tahapan pembuatan gel diawali dengan preparasi gelling agent HPMC. HPMC dengan variasi konsentrasi sesuai formula  dikembangkan  menggunakan  akuades  panas  sebanyak  20  kali  berat  HPMC  dengan bantuan  penggerusan  pada  mortar  hingga  diperoleh  massa  gel.  Campurkan  bahan  lain  ke dalam massa gel. Simpan sediaan gel ke dalam wadah yang sesuai (Dellima & Putri, 2022).

## Pengujian Parameter Sifat Fisik Sediaan Gel
Gel ekstrak etanol daun kelor kemudian dievaluasi sifat fisik sediaan (Zhelsiana dkk., 2016).
a. uji organoleptis
Parameter yang diamati secara langsung yaitu tekstur, warna dan bau.
b. uji homogenitas
Uji homogenitas sediaan dilakukan dengan cara meletakkan sejumlah sediaan pada kaca objek  dan  menutupnya  menggunakan  kaca  objek  yang  lainnya  kemudian  diamati homogenitas sediaan.
c. uji daya sebar Uji  daya  sebar  sediaan  dilakukan  menggunakan  2  buah  kaca  ukuran  15  x  15  cm.
Sejumlah sampel diletakkan di  atas kaca pertama kemudian ditutup  dengan kaca kedua. Pengujian  juga  dilakukan  dengan  menambahkan  beban  di  atas  kaca  uji  dan  dihitung diameter penambahannya.
d. uji daya lekat
Sejumlah  sampel  diletakkan  dalam  kaca  pada  alat  uji  daya  lekat.  Waktu  daya  lekat dihitung saat beban dilepaskan sampai kedua kaca uji terlepas.
e. uji pH
Uji dilakukan menggunakan alat pH meter.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil  Penetapan Kadar Klorofil dalam Sampel
Klorofil  merupakan  derivat  porfirin  yang  merupakan  pigmen  yang  terdapat  dalam kloroplas.  Kadar  klorofil  tertinggi  pada  daun  kelor  ada  di  daerah  dengan  ketinggian  tempat tumbuh  0  –  150  mdpl  (Fajri  dkk.,  2018).  Sampel  daun  kelor  diperoleh  dari  daerah  Imogiri dengan  ketinggian  sekitar  58  mdpl.  Penetapan  kadar  klorofil  dapat  dilakukan  menggunakan metode spektrofotometri UV Vis dengan pelarut  etanol atau aseton  (Ajiningrum, 2018; Fajri dkk., 2018). Hasil penetapan kadar klorofil dalam sampel ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Penetapan Kadar Klorofil dalam Sampel (mg/g)
Bahan Segar Simplisia Ekstrak Etanol Daun Kelor Klorofil A 1,3537 1,4649 3,4293 Klorofil B 0,8573 -0,5858 4,6604 Klorofil Total 2,2104 0,8791 8,087
Berdasarkan  Tabel  2  diketahui  bahwa  proses  pengeringan  pada  pembuatan  simplisia daun  kelor  menurunkan  kadar  klorofil  total.  Ekstraksi  bertujuan  untuk  menyari  kandungan fitokimia  dalam  tanaman  sehingga  memperoleh  kadar  senyawa  fitokimia  yang  lebih  banyak dibandingkan dalam bentuk simplisia. Ekstrak etanol daun kelor menunjukkan kadar klorofil total sebesar 8,087 mg/g.

## Hasil Uji Sifat Fisik Sediaan Gel Ektrak Etanol Daun Kelor
Ekstrak  etanol  daun  kelor  digunakan  sebagai  zat  aktif  dalam  formulasi  karena mempunyai  kadar  klorofil  total  paling  tinggi  dibandingkan  daun  kelor  segar  atau  simplisia daun  kelor.  Dalam  formulasi  sediaan  gel  pemilihan  bahan  pembentuk  massa  gel  sangat penting karena menentukan tekstur gel dan stabilitas gel. Penelitian ini menggunakan gelling agent HPMC  dengan  konsentrasi  yang  berbeda  untuk  mengetahui  konsentrasi  HPMC  yang memberikan  tampilan  gel  yang  sesuai  persyaratan.    Sifat  zat    aktif  yang  terkandung  dalam ekstrak dapat mempengaruhi tampilan gel. Penggunaan HPMC pada konsentrasi tinggi dapat menyebabkan permasalahan dalam proses homogenisasi sediaan (Dellima & Putri, 2022).
Tabel 3. Hasil Uji Sifat Fisik Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Kelor Parameter Fisik Formula I Formula II Formula III Syarat (Puspitasari dkk., 2023) Organoleptis Gel dengan tekstur agak kental, berwarna hijau pekat, bau khas Gel dengan tekstur kental, berwarna hijau pekat, bau khas Gel dengan tekstur kental berwarna hijau pekat, bau khas Semisolid pH 5,84 5,85 5,91 4,5-6,5 Daya Sebar (cm) 6,80 5,00 3,70 5-7 Daya Lekat (detik) 3,40 3,80 5,00 >1
Secara  organoleptis  konsentrasi gelling  agent HPMC  4%  memberikan  tekstur  gel paling  kental  dibandingkan  formula  lainnya.  Konsentrasi  HPMC  yang  tinggi  menyebabkan viskositas gel semakin tinggi (Agustiani dkk., 2022).
Nilai pH (Tabel 3) yang diperoleh pada semua formula memenuhi persyaratan sediaan yaitu berada pada rentang pH kulit (4,5-6,5). Hal ini sesuai dengan penelitian Dellima & Putri (2022)  yang  mana  penggunaan  HPMC  sebagai gelling  agent dalam  berbagai  konsentrasi tetap  menghasilkan  sediaan  yang  memenuhi  persyaratan  pH.  Nilai  pH  sediaan  yang  berada pada  rentang  pH  kulit  memberikan  kenyamanan  saat  sediaan  tersebut  digunakan  karena sediaan tidak menimbulkan reaksi yang tidak dikehendaki pada kulit seperti iritasi dan kondisi kulit bersisik (Teodhora, 2020).
Daya  sebar  sediaan  gel  menggambarkan  kenyamanan  penggunaan  dan  efektivitas sediaan. Kemampuan menyebar sediaan dalam tempat aplikasinya dapat dikorelasikan dengan kemudahan  sediaan  saat  dioleskan  dan  kemampuan  zat  aktif  dalam  sediaan  untuk  kontak dengan kulit sebagai tempat aksi semakin luas (Sayuti, 2015; Yati dkk., 2018). Hasil uji daya sebar ditunjukkan pada  Tabel  3. Gel  pada formula HPMC 2% memberikan tekstur gel  yang tidak terlalu kental dibandingkan dengan gel pada formula HPMC 3 % dan 4 %. HPMC dapat mengembang menjadi kental dengan adanya akuades (Dellima & Putri, 2022), semakin tinggi konsentrasi  HPMC,  semakin  kecil  akuades  yang  ditambahkan  dalam  formula,  sehingga  gel yang  terbentuk  semakin  kental.  Gel  yang  semakin  kental  memberikan  nilai  daya  sebar semakin kecil. Formula  3 dengan konsentrasi  HPMC 4 % tidak memenuhi  persyaratan daya sebar.
Kemampuan  sediaan  gel  untuk  melekat  pada  kulit  sebagai  tempat  aplikasinya  dapat dikorelasikan dengan lamanya sediaan tersebut kontak pada kulit (Zhelsiana dkk., 2016). Pada Tabel 3 terlihat bahwa semakin kental tekstur gel memberikan hasil daya lekat yang semakin lama. Tekstur gel yang semakin kental memberikan perlekatan gel di tempat aksinya semakin lama  (Dellima  &  Putri,  2022).  Ketiga  formula  dengan  variasi  konsentrasi gelling  agent HPMC 2 %, 3 % dan 4 % memenuhi syarat daya lekat sediaan gel.

## KESIMPULAN
Kadar klorofil tertinggi didapatkan dari sampel ekstrak etanol daun kelor. Kadar klorofil tertinggi  yaitu  ekstrak  etanol  daun  kelor  digunakan  sebagai  zat  aktif  sediaan  gel. Gelling agent HPMC 2% dan 3% dapat memberikan sediaan gel yang memenuhi persyaratan.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustiani, F. R. T., Sjahid, L. R., & Nursal, F. K. (2022). Kajian Literatur : Peranan Berbagai Jenis  Polimer  Sebagai  Gelling  Agent  Terhadap  Sifat  Fisik  Sediaan  Gel. Majalah Farmasetika , 7 (4), 270–287. https://doi.org/10.24198/mfarmasetika.v7i4.39016
Ajiningrum,  P.  S.  (2018).  Kadar  Total  Pigmen  Klorofil  Tanaman  Avicennia  marina  Pada Tingkat Perkembangan Daun yang Berbeda. Stigma , 11 (2), 52–59. https://jurnal.unipasby.ac.id/index.php/stigma/article/view/1734/1569
Andarina,  R.,  &  Djauhari,  T.  (2017).  Antioksidan  dalam  Dermatologi. JKK , 4 (1),  39–48. https://ejournal.unsri.ac.id/index.php/jkk/article/view/6094
Dellima, B. R. E. M., & Putri, M. K. (2022). Formulasi dan Evaluasi Sediaan Gel Infusa Daun Kelor (Moringa oleifera  Lam.). Jurnal Ilmu Kesehatan Bhakti Setya Medika , 7 (1), 14– 19. http://www.jurnal.poltekkes-bsi.ac.id/index.php/bsm/article/view/79
Elisya, Y., Wardiyah, Junaedi, & Hamidah, F. (2023). Formulasi Gel Hand Sanitizer Ekstrak Daun  Paliasa  (Kleinhovia  hospita  Linn)  dengan  Gelling  Agent  HPMC. Jurnal  Ilmiah Ibnu Sina (JIIS): Ilmu Farmasi
Dan Kesehatan , 8 (1), 96–106. https://doi.org/10.36387/jiis.v8i1.1268
Fajri, Rahmatu, R., & Alam, N. (2018). Kadar Klorofil dan Vitamin C Daun Kelor (Moringa oleifera Lam) dari Berbagai Ketinggian Tempat Tumbuh. J. Agrotekbis , 6 (2), 152–158. http://jurnal.faperta.untad.ac.id/index.php/agrotekbis/article/view/270/263
Galvez, A. P., Viera, I., & Roca, M. (2020). Carotenoids and Chlorophylls as Antioxidants. In
Antioxidant4 (Vol. 9, Issue 505,
pp. 1–34). MDPI. https://doi.org/10.3390/antiox9060505
Haerani, A., Chaerunisa, A. Y., & Subarnas, A. (2018). Artikel Tinjauan : Antioksidan Untuk
Kulit. Farmaka ,
16 (2),
135–151. https://jurnal.unpad.ac.id/farmaka/article/view/17789/pdf
Puspitasari, F., Saraswati,  I., &  Wulandari,  F. (2023). Formulasi dan Evaluasi  Fisik Sediaan Emulgel  Ekstrak  Daun  Kelor  (Moringa  oleifera  Lam.)  sebagai  Antioksidan  dengan Gelling Agent HPMC. Generics : Journal of Research in Pharmacy Accepted , 3 (1), 36– 44. https://ejournal.seaninstitute.or.id/index.php/healt/article/view/1446
Safitri,  E.  G.,  &  Parfati,  N.  (2020).  Stabilitas  Fisika-Kimia  Sediaan  Krim  Dan  Gel  Esktrak
Kental Daun Kelor (Moringa Oleifera). Calyptra , 9 (1), 1–21. https://journal.ubaya.ac.id/index.php/jimus/article/view/4674/3442
Sari, E. K., & Putri, M. K. (2023). Pengaruh Waktu Penyimpanan Terhadap  Kadar Klorofil dan  Karotenoid  Brokoli  (Brassica  oleracea  L.  var.  italica  Plenck)  dengan  Metode Spektrofotometri  Uv-Vis. Jurnal  Farmasi  Dan  Kesehatan  Indonesia , 3 (1),  47–55. https://journal.ukrim.ac.id/index.php/jfki/article/view/422/310
Sayuti, N. A. (2015). Formulasi dan Uji Stabilitas Fisik Sediaan Gel Ekstrak Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.). Jurnal Kefarmasian Indonesia , 5 (2), 74–82. https://media.neliti.com/media/publications-test/105051-formulasi-dan-uji-stabilitas- fisik-sedia-da092e4b.pdf
Teodhora,  T.  (2020).  Pengaruh  Konsentrasi  Hpmc  Sebagai  Basis  Gel  Ekstrak  Ciplukan Terhadap  Aktivitas  Antibakteri. Farmasains :  Jurnal  Ilmiah  Ilmu  Kefarmasian , 7 (2), 75–82. https://doi.org/10.22236/farmasains.v7i2.5633
Yati, K., Jufri, M., Gozan, M., & Dwita, L. P. (2018). Pengaruh Variasi Konsentrasi Hidroxy Propyl  Methyl  Cellulose  (HPMC)  terhadap  Stabilitas  Fisik  Gel  Ekstrak  Tembakau (Nicotiana  tabaccum  L.)  dan  Aktivitasnya  terhadap  Streptococcus  mutans. Pharmaceutical Sciences and Research (PSR) , 5 (3), 133–141.
https://scholarhub.ui.ac.id/cgi/viewcontent.cgi?article=1116&context=psr
Zhelsiana, D. A., Pangestuti, Y. S., Nabilla, F., Lestari, N. P., & Wikantyasning, E. R. (2016).
Formulasi dan Evaluasi Sifat Fisik Masker Gel Peel-Off Lempung Bentonite. The 4 Th Univesity Research Coloquium , 1 (1), 42–45.
https://publikasiilmiah.ums.ac.id/bitstream/handle/11617/7730/Mahasiswa%20(Student %20Paper%20Presentation)(1)_6.pdf?sequence=1