Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
Volume 5 Nomor 1, Maret 2019 Editorial ................................................................................................................. i Daftar Isi ............................................................................................................... ii
Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya,
Indonesia Salomo Christian, Wahyu Irawati2 .............................................................................. 1-10
Tingkat Ploidi Paku Sayur ( Diplazium Esculentum ) pada Ketinggian yang Berbeda di Gunung
Merbabu, Boyolali, Jawa Tengah, Indonesia Anggun Wulandari, Rina Dian Rahmawati ................................................................. 11-15 Analisis Pertumbuhan Ikan Nila yang Dibudidaya pada Air Musta’mal Oktapiandi, Joko Sutrisno, Sunarto ............................................................................. 16-20 Estimasi Emisi Gas Rumah Kaca yang Dihasilkan dari Tempat Pemrosesan Akhir (TPA) di Jawa Tengah Setyo Prabowo, Pranoto, Sri Budiastuti ....................................................................... 21-33
Aktivitas Antibakteri Biji Jeruk Manis ( Citrus sinensis ) Terhadap Bakteri Escherichia coli Mohammad Arfi Setiawan, Mita Dewi Retnoningrum ................................................ 34-38 Analisis Tingkat Kemiripan Orthoptera Menggunakan Indeks Sorensen dan Dendogram di Hutan Bromo Karanganyar Jawa Tengah, Indonesia Dwi Setyo Astuti, Ruslan ............................................................................................ 39-47
Potensi Ekstrak Sirsak ( Annona muricata ) sebagai Larvasida Pengendali Populasi Aedes albopictus
Dyah Ayu Widyastuti, Praptining Rahayu; Lussana Rossita Dewi ............................... 48-54

## POTENSI ANTI BAKTERI MUCUS IKAN-IKAN NATIVE DI PERAIRAN DANAU LIMBOTO, GORONTALO, INDONESIA
Syam S. Kumaji, Zuliyanto Zakaria .............................................................................
55-60
Andy Arsalan, Evi Gravitiani, dan Heru Irianto. (2020). Biomasa di Atas Tanah dan Penghitungan Simpanan Karbon Hutan Kalibiru Kabupaten Kulon Progo. Journal Bioeksperimen. Vol. 6 (1) Pp. 1-8 . Doi: 10.23917/bioeksperimen. v6i1.2795

## BIOMASA DI ATAS TANAH DAN PENGHITUNGAN SIMPANAN KARBON HUTAN KALIBIRU KABUPATEN KULON PROGO
Andy Arsalan 1) , Evi Gravitiani 2) , dan Heru Irianto 3)
Ilmu Lingkungan Pascasarjana Universitas Sebelas Maret, Jl. Ir. Sutami 36A, Surakarta, 57126 1) Fakultas Ekonomi dan Bisnis, Universitas Sebelas Maret 2)
Fakultas Pertanian, Jurusan Agribisnis, Universitas Sebelas Maret 3)
E-mail korespondensi: andy.arsalan@gmail.com Paper submit : 21 Agustus 2017, Paper publish : Maret 2020
Abstract - Above Ground Biomass (AGB) forest ecosystem is one of the fundamental parameters to describe each of its functions. Carbon in the forest ecosystem accumulates through absorption of CO 2 in the atmosphere and is assimilated into biomass. The study of forest vegetation biomass is important for determining carbon storage in dominant tree components and calculating carbon cycles at regional and global levels. Kalibiru Forest carbon storage information is not yet available, so it is necessary to calculate carbon potential. This study aims to calculate aboveground biomass and estimate carbon stocks in the Kalibiru Forest. The study was conducted in Kalibiru Hamlet, Hargowilis Village, Kokap District, Kulon Progo Regency. The research conducted the indirect method (non-destructed) to calculate biomass and carbon by using the allometric equation. Base on the calculation, Kalibiru Forest has 5.086,52 tons of biomass or 175,40 tons per hectare in average. The potential for carbon storage in the Kalibiru Forest is 2.543,26 tons of carbon or 87,7 tons per hectare in average. This figure means that preserving 1 hectare of Kalibiru Forest can avoid the impact of atmospheric damage due to the greenhouse gas effect as many as 87,70 tons per year. Results of this study provide an insight for the surrounding community about the importance of the existence of the Kalibiru Forest as an absorber of CO 2 gas in the atmosphere. As another benefit, it provides motivation for the surrounding community to continue in preserving the forest.
Keywords: biomass, Kalibiru, carbon cycle, carbon storage

## Pendahuluan
Perhatian tentang perubahan iklim dan pemanasan global terfokus pada penumpukan gas rumah kaca (GRK) di atmosfer. Karbon merupakan gas rumah kaca yang bertanggung jawab mempengaruhi pemanasan global. Sistem biologi, termasuk hutan, dapat menyimpan, menangkap, dan melepas karbon (Sedjo & Sohngen, 2012). Konsentrasi karbon dioksida di atmosfer telah meningkat 30% sejak revolusi industri dimulai sampai dengan tahun 1992, karena pembakaran bahan bakar fosil dan perubahan penggunaan lahan (Heil & Selden, 2001 dalam Terakunpisut, Gajaseni, & Ruankawe, 2007). Hutan tropis merupakan tempat penyimpanan karbon yang penting,
sekitar 47% dari total karbon global (Malhi et al., 2002).
Biomasa diatas tanah ( Above Ground Biomass /AGB) ekosistem hutan adalah salah satu parameter fundamental untuk menggambarkan masing-masing fungsinya (Behera et al., 2017). Karbon dalam ekosistem hutan terakumulasi melalui penyerapan CO 2 di atmosfer dan terasimilasi menjadi biomassa (Malhi et al., 2002). Biomassa dapat menjadi bagian dari jaringan pohon hidup atau mati, misalnya batang, cabang, daun, dan akar. Karbon disimpan di dalam sel tanaman. Sel tumbuhan, tidak seperti sel hewan, memiliki dinding sel yang memberikan struktur dan dukungan bagi organisme. Karbon diperlukan untuk membangun senyawa selulosa dan lignin oleh
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
karena itu akan terkumpul di dalam jaringan tanaman (Sedjo & Sohngen, 2012). Kurang lebih 50% dari biomassa kering pohon adalah karbon (Brown, 1997; Malhi et al., 2002; Sedjo & Sohngen, 2012).
Studi tentang biomassa vegetasi hutan sangat penting untuk menentukan penyimpanan karbon dalam komponen pohon yang dominan dan menghitung siklus karbon di tingkat regional maupun global (Behera et al., 2017). Perkiraan simpanan karbon dan distribusinya pada ekosistem yang berbeda penting untuk memahami tingkat C yang teralokasi pada komponen labil dan stabil (Sierra et al., 2007). Hutan Kalibiru mempunyai peran penting bagi masyarakat sekitar khususnya dan Kabupaten Kulon Progo secara umum. Informasi simpanan karbon Hutan Kalibiru yang belum tersedia, sehingga perlu untuk dilakukan penghitungan potensi karbon. Penelitian ini bertujuan untuk menghitung biomassa diatas tanah dan memperkirakan simpanan karbon Hutan Kalibiru.
Manfaat penelitian ini dapat menjadi sumber informasi bagi pembuat kebijakan untuk pengelolaan Hutan Kalibiru yang lestari. Hasil penelitian dapat memberikan gambaran bagi masyarakat sekitar, arti penting keberadaan Hutan Kalibiru sebagai penyerap gas CO 2 di atmosfer. Manfaat lainnya, dapat memberikan motivasi bagi masyarakat sekitar agar tetap menjaga kelestarian hutan.

## METODE PENELITIAN

## 1.  Subjek Penelitian
Penelitian dilakukan di Hutan Kalibiru, Dusun Kalibiru, Desa Hargowilis, Kecamatan Kokap, Kabupaten Kulon Progo. Kabupaten Kulon Progo terletak di bagian barta- laut Provinsi Daerah Istimewa Yogyakarta. Wilayahnya mempunyai topografi berbukit yang sebagian besar merupakan Perbukitan Menoreh. Luas hutan di wilayah Kabupaten Kulon Progo sekitar 856,5 ha (1,5%) dari luas wilayah kabupaten (58.627,54 ha).
Gambar 1. Peta lokasi penelitian penelitian Sumber: (Peta Tematik Indonesia, 2013; Tentang Hutan Kemasyarakatan, 2001)
Hutan Kalibiru merupakan bagian dari Hutan di Perbukitan Menoreh yang berada di sebelah utara Kabupaten Kulon Progo. Hutan Kalibiru yang dijadikan lokasi penelitian terletak pada petak 28 dan 29 dengan luas 29 ha. Penelitian dilakukan selama tiga bulan, yaitu Januari – Maret 2017.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)

## 2.  Alat dan Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah pohon sample di kawasan Hutan Kalibiru. Peralatan yang digunakan adalah pita ukur/meteran, GPS, kompas, peta, patok, palu, laptop, dan software Excel .

## 3.  Metode dan Desain Penelitian
Perkiraan simpanan karbon Hutan Kalibiru dapat diketahui dengan terlebih dahulu menghitung berat biomassa diatas permukaan tanah (AGB). Biomassa pohon dalam satuan kilogram. Metode yang digunakan untuk menghitung AGB dengan metode tidak langsung ( non - destruktif ), yaitu dengan menggunakan persamaan allometrik. Metode tersebut digunakan karena Hutan Kalibiru berstatus hutan lindung, sehingga tidak memungkinkan menggunakan metode destruktif. Sampel diambil dengan cara simple random sampling, dengan pertimbangan belum ada data awal perkiraan sebaran cadangan karbon. Jumlah plot sampel ditentukan dengan menggunakan rumus yang umum digunakan dalam inventarisasi hutan (Manuri et al., 2011) yakni dengan pendekatan dari Indriyanto (2012):
. i N n A = (1)
n adalah jumlah plot sampel, i adalah intensitas sampling, N adalah luas hutan yang disurvey (m 2 ), dan A adalah luas plot sampel utama (m 2 ). Intensitas sampling menurut Indriyanto (2012) sebesar 2%-10%, dengan mengambil intensitas sampling 5% dan luas Hutan Kalibiru 29 ha maka jumlah plot sample adalah:
2 2 5%.290.000 7,25 ~ 8 2.000 m n plot sampel plot sampel m = =
Delapan plot sampel tersebut ditempatkan secara random pada Hutan Kalibiru. Plot sampel ditempatkan dengan pertimbangan rata-rata tutupan vegetasi dan dapat mewakili kawasan Hutan Kalibiru. Ukuran plot sampel utama adalah 20 m x 100 m dan sub plot ukuran 10 m x 50 m.

## 4.  Teknik Pengumpulan Data
Data untuk keperluan penelitian berupa data primer dan data sekunder. Data primer berupa nama lokal pohon, jumlah pohon, dan diameter setinggi dada orang dewasa (dbh). Data sekunder berupa nama latin pohon dan berat jenis kayu.
Biomassa pancang berdiameter 5-30 cm dihitung dengan menginventarisasi jenis pohon, diameter (dbh), jumlah pohon yang terdapat dalam sub plot berukuran 10mx50m (500m 2 ). Biomassa pohon berdiameter >30 cm dihitung dengan menginventarisasi jenis pohon, jumlah pohon, dan diameter (dbh) yang terdapat dalam plot utama berukuran 20mx100m (2.000m 2 ). hasil inventarisasi dicatat dalam lembar hasil pengukuran lapangan ( tally sheet ) (Lugina et al., 2011).
5.  Analisis dan Interpretasi Data Biomassa pada pohon berdaun lebar dihitung dengan persamaan allometrik yang dikembangkan oleh Chave et al . (2005):
( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 2 3 1.499 2.148 0.207 0.028 ( ) 1 Y exp ln D ln D ln D ρ = −
+ + − (2)
Pohon berdaun jarum ( conifer ) menggunakan persamaan dari Brown (1997):
( ) { } 1.170 2.119( Y exp ln D = − + (3)
Pohon tidak bercabang menggunakan persamaan dari Hairiah et al . (1999):
2 / 40 Y D h s π = (4)
Pohon Pisang menggunakan persamaan dari Noordwijk et al . (2002):
2.13 0.030 Y D = (5)
Y adalah biomassa pohon (kg), D adalah diameter setinggi dada (dbh)/atau diameter setinggi 1,3 m (cm), h adalah tinggi pohon (m), ρ adalah berat jenis kayu (kg/cm 3 ).
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
Biomasa total seluruh jenis pohon (Aliansi Relawan untuk Penyelamatan Alam, 2014; Lugina et al., 2011):
Tp i Y Y = ∑ (6)
Y Tp adalah biomasa total seluruh jenis pohon pada semua plot (ton), dan Y i adalah jumlah biomasa tiap jenis pohon (ton).
Biomasa per ha (Aliansi Relawan untuk Penyelamatan Alam, 2014; Lugina et al., 2011):
2 10.000 Tp total Y m Y x n Lplot = (7)
Y total adalah biomasa per ha (ton/ha), n adalah jumlah plot, L plot adalah luas plot (m 2 ). Potensi karbon dihitung dengan menggunakan faktor konversi 0,5 dari potensi biomassa, dengan asumsi bahwa 50 % biomassa pohon adalah karbon (Brown, 1997; Malhi et al ., 2002; Sedjo & Sohngen, 2012)
0,5. total
C Y = (8)
C adalah jumlah karbon yang tersimpan pada pohon (ton/ha).
Kerapatan spesies pohon merupakan jumlah pohon per satuan ruang (Indriyanto, 2012):
jumlah pohon
K luas seluruh plot sampel = (9)
K merupakan kerapatan spesies pohon (pohon/ ha), luas plot sampel dalam hektar.

## Hasil dan Pembahasan
Jenis pohon dominan dengan diameter diatas 30 cm ada tiga yaitu: Jati, Sonokeling, dan Pinus seperti ditampilkan pada Gambar 1. Pohon Jati terdapat hampir disetiap plot sample . Pohon Pinus hanya terdapat di plot sample 6,7, dan 8. Pohon Sonokeling terdapat di plot sample 1, 2, 3, dan 6, namun jumlahnya tidak banyak.
Gambar 2. Kerapatan spesies pohon berdiameter diatas 30 cm
Pohon berdiameter 5-30 cm didominasi oleh empat jenis yaitu Kayu putih, Jati, Pinus, dan Mahoni seperti pada Gambar 2. Kayu putih banyak terdapat di sub plot sample 3, selain itu terdapat juga di sub plot sample 4, 5,
dan 8. Pohon Mahoni tersebar merata hampir diseluruh sub plot sample . Pohon Jati terdapat di sub plot sample 1, 2, 4, dan 5, namun jumlahnya sedikit.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795
UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
Biomassa pohon berdiameter diatas 30 cm didominasi oleh Jati yaitu sebesar 51,11 ton/ ha dengan kandungan karbon sebesar 25,55 ton/ha. Biomassa total dari pohon berdiameter diatas 30 cm adalah 115,37 ton/ha atau 57,68 ton/ha karbon, selengkapnya seperti Tabel 1.
Gambar 3. Kerapatan spesies pohon berdiameter 5-30 cm
Tabel 1. Biomassa dan serapan karbon pohon berdiameter diatas 30 cm Nama pohon AGB (ton/ha) Karbon (ton/ha) Lokal Latin Jati Tectona grandis 51,11 25,55 Sono Keling Dalbergia latifolia 30,58 15,29 Pinus Pinus merkusii 25,38 12,69 Akasia Acacia longifolia 5,37 2,69 Kayu putih Melaleuca leucadendra 2,93 1,46 Total 115,37 57,68
Biomassa pohon berdiameter 5-30 cm didominasi oleh Kayu putih yaitu sebesar 23,17 ton/ha atau 11,58 ton/ha karbon. Biomassa total pohon berdiameter 5-30 cm adalah 60,03 ton/ha atau 30,01 ton/ha karbon, selengkapnya seperti pada Tabel 2.
Tabel 2. Biomassa dan serapan karbon pohon berdiameter 5-30 cm Nama pohon AGB (ton/ha) Karbon (ton/ha) Lokal Latin Kayu Putih Melaleuca leucadendra 23,17 11,58 Jati Tectona grandis 13,26 6,63 Pinus Pinus merkusii 8,96 4,48 Mahoni Swietenia macrophylla 7,52 3,76 lainnya - 7 4 Total 60,03 30,01
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
Pohon berdiameter  diatas 30 cm mempunyai rata-rata biomassa 115,37 ton/ha atau menyimpan karbon sebanyak 57,68 ton/ha. Pohon berdiameter 5-30 cm mempunyai rata- rata biomassa 60,03 ton/ha atau menyimpan karbon sebanyak 30,01 ton/ha. Biomassa total (Y tp ) Hutan Kalibiru sebesar 5.086,52 ton atau rata-rata 175,40 ton/ha.  Malau et al . (2013); S., Sinukaban, Purwanto, Sanim, & Tarigan (2011); Fauzi (2012) menyatakan pohon berdiameter diatas 30 cm pada suatu penggunaan lahan memberikan sumbangan yang cukup berarti terhadap total cadangan karbon. Hasil penelitian La Baco. et al . (2011) di Sub DAS Konaweha Hulu mendapatkan potensi karbon pohon sebanyak 125,65 ton/ha dan tiang sebanyak 12,64 ton/ha.
Total potensi karbon (Y total ) yang diserap oleh Hutan Kalibiru adalah 2.543,26 ton atau rata-rata 87,70 ton/ha. Angka tersebut bermakna bahwa melestarikan 1 Ha Hutan Kalibiru dapat menghindari dampak kerusakan atmosfer akibat efek gas rumah kaca (CO 2 ) sebanyak 87,70 ton per tahun. Potensi karbon rata-rata Hutan Kalibiru lebih kecil dari Hutan Gayo Lues sebesar 216,85 ton/ha (Fauzi, 2012). Hasil yang hampir sama dengan Hutan Kalibiru dikemukakan oleh Bhattarai et al . (2012) bahwa rata-rata potensi karbon hutan di Nepal Tengah adalah 73,2 ton/ha. Potensi penyerapan karbon hutan Kalibiru masih lebih tinggi dibanding penyerapan karbon hutan di Kabupaten Langkat yang berkisar 56,76-63 ton/ha (Malau et al., 2013).
Potensi simpanan karbon yang berbeda tersebut disebabkan antara lain 1) usia hutan/ pohon yang berpengaruh pada diameter pohon (Bhattarai et al., 2012); 2) tipe hutan; 3) iklim; dan 4) tingkat akurasi metode yang digunakan dalam analisis vegetasi (LaBaco et al., 2011). Tipe hutan primer mempunyai potensi karbon lebih besar daripada hutan sekunder (Fauzi, 2012). Menurut Brown (1997) pohon pada hutan zona iklim lembab mempunyai biomassa lebih besar dibandingkan zona iklim kering.
Hairiah, Ekadinata, Sari, & Rahayu (2011) menyatakan bahwa tidak ada perbedaan yang nyata pada cadangan karbon untuk pohon- pohon berdiameter <60 cm, tetapi untuk dbh >60 cm penaksiran menggunakan rumus Ketterings, Coe, van Noordwijk, Ambagau’, & Palm, (2001) menunjukkan hasil yang jauh lebih besar dari rumus Basuki, Van Laake, Skidmore, & Hussin (2009), Brown, Gillespie, & Lugo (1989), Chave et al . (2005).
Hasil perhitungan simpanan karbon Hutan Kalibiru lebih kecil dari estimasi Brown and Pearce (1994) dalam Yulian, Syaufina, & Putri (2011) untuk hutan sekunder sebesar 194 ton/ ha. Namun, masyarakat sekitar Hutan Kalibiru telah ikut berkontribusi dalam menghindari dampak pemasanan global akibat gas (CO 2 ) di atmosfer, karena dengan langkah konservasi yang dilakukan. Masyarakat sekitar Hutan Kalibiru telah ikut andil dalam menghindari kerusakan atmosfer akibat efek gas rumah kaca (CO 2 ) sebanyak 87,70 ton per hektar per tahun.

## Simpulan
Biomassa total Hutan Kalibiru sebesar 5.086,52 ton atau rata-rata 175,40 ton/ha. Total simpanan karbon Hutan Kalibiru adalah 2.543,26 ton atau rata-rata 87,70 ton/ha. Angka tersebut bermakna bahwa melestarikan 1 Ha Hutan Kalibiru dapat menghindari dampak kerusakan atmosfer akibat efek gas rumah kaca (CO 2 ) sebanyak 87,70 ton per tahun.

## Ucapan Terimakasih
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Kementerian Pertanian yang telah memberikan pendaan untuk penelitian ini. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada ketua dan anggota Kelompok Tani Hutan Kemasyarakatan (KTH) Mandiri, Dinas Pertanian dan Kehutanan Kabupaten Kulon Progo, dan Kantor Lingkungan Hidup Kabupaten Kulon Progo yang telah membantu penelitian.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)

## Daftar Pustaka
Aliansi Relawan untuk Penyelamatan Alam. (2014). Menghitung Cadangan Karbon di Hutan Rakyat Panduan bagi Para Pendamping Petani Hutan Rakyat (Pertama). Biro Penerbit ARuPA. http:// arupa.or.id/sources/uploads/2014/08/Panduan-Praktis-Menghitung-Cadangan-Karbon- Hutan-Rakyat.pdf
Basuki, T. M., Van Laake, P. E., Skidmore, A. K., & Hussin, Y. A. (2009). Allometric equations for estimating the above-ground biomass in tropical lowland Dipterocarp forests. Forest Ecology and Management , 257 (8), 1684–1694.
Behera, S. K., Sahu, N., Mishra, A. K., Bargali, S. S., Behera, M. D., & Tuli, R. (2017). Aboveground biomass and carbon stock assessment in Indian tropical deciduous forest and relationship with stand structural attributes. Ecological Engineering , 99 , 513–524. https://doi.org/10.1016/j. ecoleng.2016.11.046
Bhattarai, T., Skutsch, M., Midmore, D., & Rana, E. B. (2012). The carbon sequestration potential of community based forest management in Nepal. International Journal of Climate Change ,
3 (2), 233–254.
Brown, S. (1997). Estimating Biomassa and Biomassa Change of Tropical Forests: a Primer (No. 134). Food and Agriculture Organization of the United Nations. http://www.fao.org/docrep/ w4095e/w4095e06.htm#3.1.1 general equation
Brown, S., Gillespie, A. J. R., & Lugo, A. E. (1989). Biomass estimation methods for tropical forests with applications to forest inventory data. Forest Science , 35 (4), 881–902.
Chave, J., Andalo, C., Brown, S., Cairns, M. A., Chambers, J. Q., Eamus, D., Fölster, H., Fromard, F., Higuchi, N., Kira, T., & others. (2005). Tree allometry and improved estimation of carbon stocks and balance in tropical forests. Oecologia , 145 (1), 87–99.
Fauzi. (2012). Strategi Pengelolaan Sumberdaya Hutan Kabupaten Gayo Lues, Provinsi Aceh . (Tesis Pascasarjana). Institut Pertanian Bogor.
Hairiah, K., Ekadinata, A., Sari, R. R., & Rahayu, S. (2011). Pengukuran Cadangan Karbon: dari tingkat lahan ke bentang alam (Edisi Kedu). World Agroforestry Centre, ICRAF SEA Regional Office, University of Brawijaya (UB), Malang, Indonesia.
Hairiah, K., van Noordwijk, M., Palm, C., Murdiyarso, D., & Suyamto, D. A. (1999). Methods for sampling above and below ground organic pools. IC-SEA Report , 6 . Heil, M. T., & Selden, T. M. (2001). Carbon emissions and economic development: future trajectories based on historical experience. Environment and Development Economics , 6 (1), 63–83.
Indriyanto. (2012). Ekologi Hutan (Cetakan ke). PT. Bumi Aksara.
Ketterings, Q. M., Coe, R., van Noordwijk, M., Ambagau’, Y., & Palm, C. A. (2001). Reducing uncertainty in the use of allometric biomass equations for predicting above-ground tree biomass in mixed secondary forests. Forest Ecology and Management , 146 (1–3), 199–209. https://doi. org/10.1016/S0378-1127(00)00460-6
LaBaco, S., Sinukaban, N., Purwanto, Y. J., Sanim, B., & Tarigan, S. D. (2011). Valuasi ekonomi hutan di Sub DAS Konaweha Hulu Provinsi Sulawesi Tenggara . 21 (2), 143–151. http:// repository.ipb.ac.id/handle/123456789/63555
Lugina, M., Ginoga, K. L., Wibowo, A., Bainnaura, A., & Partiani, T. (2011). Prosedur Operasi Standar untuk Pengukuran dan Perhitungan Stok Karbon di Kawasan Konservasi . Badan Penelitian dan Pengembangan Kehutanan Kementarian Kehutanan. http://www.forda-mof.
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
org/files/SOP Pengukuran Stok Karbon.pdf Malau, Y. D. P., Rahmawaty, R., & Riswan, R. (2013). Pendugaan Cadangan Karbon Above Ground Biomass (AGB) pada Tegakan Agroforestri di Kabupaten Langkat (The Estimate of Carbon Stocks Above Ground Biomass (AGB) on Agroforestry Stands in Langkat). Peronema Forestry Science Journal , 2 (1), 106–110. http://jurnal.usu.ac.id/index.php/PFSJ/article/view/2687
Malhi, Y., Meir, P., & Brown, S. (2002). Forests, carbon and global climate. Philosophical Transactions of the Royal Society of London A: Mathematical, Physical and Engineering Sciences , 360 (1797), 1567–1591.
Manuri, S., Putra, C. A. S., & Saputra, A. D. (2011). Tehnik pendugaan cadangan karbon hutan. Merang REDD Pilot Project, German International Cooperation--GIZ. Palembang .
Noordwijk, M. Van, Farida, A., Rahayu, S., Verbist, B., Wulan, Y. C., & Hairiah, K. (2002). Carbon stock assessment for a forest-to-coffee conversion landscape in Sumber-Jaya (Lampung, Indonesia): from allometric equations to land use change analysis. Science in China , 45 , 75– 86. http://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/30099
Peta Tematik Indonesia. (2013). administrasi-kulonprogo.jpg (1488×1053) . https://petatematikindo. files.wordpress.com/2013/06/administrasi-kulonprogo.jpg
Sedjo, R., & Sohngen, B. (2012). Carbon Sequestration in Forests and Soils. Annual Review of Resource Economics , 4 (1), 127–144. https://doi.org/10.1146/annurev-resource-083110-115941
Sierra, C. A., del Valle, J. I., Orrego, S. A., Moreno, F. H., Harmon, M. E., Zapata, M., Colorado, G. J., Herrera, M. A., Lara, W., Restrepo, D. E., Berrouet, L. M., Loaiza, L. M., & Benjumea, J. F. (2007). Total carbon stocks in a tropical forest landscape of the Porce region, Colombia. Forest Ecology and Management , 243 (2–3), 299–309. https://doi.org/10.1016/j.foreco.2007.03.026 Tentang Hutan Kemasyarakatan, (2001). http://storage.jak-stik.ac.id/ProdukHukum/kehutanan/
KEPUTUSAN MENTERI KEHUTANAN Nomor 31Kpts-II2001.pdf
Terakunpisut, J., Gajaseni, N., & Ruankawe, N. (2007). Carbon sequestration potential in aboveground biomass of Thong Pha Phum national forest, Thailand. Applied Ecology and Environmental Research , 5 (2), 93–102.
Yulian, E. N., Syaufina, L., & Putri, E. I. K. (2011). Valuasi Ekonomi Sumberdaya Alam Taman Hutan Raya Bukit Soeharto Di Provinsi Kalimantan Timur. Jurnal Pengelolaan Sumberdaya Alam Dan Lingkungan , 1 (1), 38.