## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK DAUN DURIAN
( Durio zybethinus ) TERHADAP PERTUMBUHAN

## Candida albicans SECARA IN VITRO
Fryano Kandoli 1) ,  Jimmy Abijulu 2) ,  Michael Leman 1)
1) Program Studi Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran UNSRAT
2) Jurusan Kimia FMIPA UNSRAT

## ABSTRACTS
Candidiasis is fungi infection that common found in dentistry practice. The cause is Candida where seventy percent of  Candida species that infecting is Candida albicans. Durian (Durio zybethinus) is original tropical fruit from Indonesia that enriched with many benefits. Durian leaf contains Saponin and Flavanoid compound that can be used as antifungal agent.  The purpose of this research is to find out  the  effectiveness  of  durian  leaves  against  Candida  albicans.  This  research  is  experimental research  with  Post  test  only  control  group  design  plan.  The  method  in  this  antifungal  test  is Kirbybauer  modification  method  using  Paper  disk.  The  concentration  of  durian  leaf  used  in  this research  is  100%,  positive  control  Ketokonazole,  and  aquades  as  negative  control.  The  Candida albicans  are  taken  from  the  fungus  storage  in  Chemistry  laboratory  of  Mathematics  and  Science Faculty  of  Sam  Ratulangi University  Manado.The  result  of  this  research  showed  that  the  extract  of durian  leaf  contains  antifungal  activity  from  the  inhibition  zone  that  formed  around  the  paper  disk contained durian leaf’s extract. This research conclude that durian leaf extract has antifungal activity in inhibiting Candida albicans’s growth as the main cause of Candidiasis.
Key words : Durian leaf (Durio zybethinus), Candida albicans, antifungi

## ABSTRAK
Kandidiasis  merupakan  infeksi  jamur  yang  sering  dijumpai  dalam  praktek  kedokteran gigi.Penyebabnya  adalah  jamur  Candida  dimana  sekitar  tujuh  puluh  persen    spesies  Candida  yang menginfeksi adalah Candida albicans . Durian ( Durio zybethinus ) merupakan tanaman buah tropis asli Indonesia yang kaya akan beragam  manfaat. Daun durian memiliki senyawa Saponin dan Flavanoid yang  memiliki  efek  antijamur.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  meneliti  efektivitas  ekstrak  daun  durian dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur Candida  albicans. Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  dengan  rancangan  penelitian Post  test  only  control  group  design .  Metode  yang digunakan  sebagai  uji  antijamur  adalah  metode  modifikasi  Kirbybauer  menggunakan Paper  Disk . Konsentrasi  ekstrak  daun  durian  yang  dipakai  dalam  penelitian  ini  yaitu  100%,  kontrol  positif Ketoconazole, serta kontrol negatif menggunakan aquades.  Jamur Candida albicans diambil dari stok jamur  Laboratorium  Kimia  Fakultas  MIPA  Universitas  Sam  Ratulangi  Manado.  Hasil  penelitian menunjukan  bahwa  ekstrak  daun  durian  mempunyai  efek  anti  jamur  yang  ditunjukan  dengan terbentuknya  daerah  zona  hambat  di  sekitar  paper  disk  yang  diberi  ekstrak  daun  durian.  Dari penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  durian  memiliki  efek  antijamur  dalam menghambat pertumbuhan Candida albicans sebagai jamur penyebab Kandidiasis .
Kata kunci : Daun durian (Durio zybethinus ), Candida albicans , antijamur

## PENDAHULUAN
Kandidiasis  adalah  infeksi  primer atau  sekunder  dari  genus Candida, terutama Candida  albicans  (C.albicans). Kandidiasis telah menjadi masalah kesehatan  yang  penting  karena  semakin meningkatnya  pasien  yang  mengalami penyakit immunodeficiency seperti  pasien HIV,  pasien  yang  menjalani  perawatan kemoterapi, dan pasien
yang mengkonsumsi obat-obatan antibiotik dalam  jangka  waktu  yang  lama.  Candida adalah  flora  normal  penghuni  rongga mulut  yang  bersifat  oppurtunistik  dan dapat  menjadi  dominan  dan  menginfeksi apabila keseimbangan flora dan kebersihan mulut  terganggu  atau  daya  tahan  tubuh melemah  ( immunodeficiency ).  Lebih  dari 150  spesies  candida  telah  teridentifikasi dan  sebanyak  paling  sedikit  tujuh  puluh persen kandidiasis disebabkan oleh Candida albicans . 6,7
Berbagai  jenis  obat  antijamur  telah diciptakan untuk mengobati infeksi candida (kandidiasis) dalam rongga mulut, namun  obat-obatan  tersebut  mempunyai efek  samping  yang  berat,  spektrum antijamur  yang  sempit,  penetrasi  yang buruk,  dan  munculnya  jamur yang resisten. 8,9 Daun  durian  memiliki  senyawa flavanoid dan saponin yang  bersifat antijamur sehingga perlu diteliti efektivitas daun durian dalam menghambat Candida  albicans. Ekstrak  daun  durian perlu diteliti sebagai obat herbal antijamur untuk  mengobati  kandidiasis  yang  lebih aman  dan  efisien  untuk  dikonsumsi masyarakat.

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat-alat  yang digunakan dalam penelitian ini yaitu:
a. Alat  pembuat  ekstrak: Petridish ,  kertas saring,  corong  kaca,  sendok stainless steel ,  timbangan,  tabung  Erlenmeyer, kompor  listrik, vacuum  evaporator , oven.
b. Alat pengujian jamur: Petridish, micropipet ,  kertas  saring,  sterilisator dry  heat ,  inkubator,  api  bunsen,  jangka sorong,  timbangan,  tabung erlenmeyer , kompor listrik.
c. Lain-lain:  kamera,  masker,  handskun, perforator, jas lab
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian: Daun durian, etanol 96%, jamur
Candida  albicans ,  agar Potato  Dextrose Agar, aquades, kloramfenikol, ketokonazol.

## Pembuatan Jamur
Jamur  diperoleh  dari  laboratorium Farmasi,  Fakultas  MIPA  Universitas  Sam Ratulangi  Manado,  berupa  sediaan  jamur murni Candida  albicans yang  didapatkan dengan  cara  mengambil  hapusan  pada rongga  mulut  pasien  penderita  kandidiasis oral.  Jamur  dioleskan  pada  media  agar Potato  Dextrose  Agar yang  telah  dimasak bercampur  kloramfenikol  yang  dimasukan dalam petridish kemudian diisolasi menggunakan isolasi  band dan  diisi  pada coolbox steril  kemudian  dibawa  ke laboratorium penelitian

## Sterilisasi alat
Petridish, pinset,  kertas  saring  dan  tabung Erlenmeyer  dicuci  terlebih  dahulu  dengan menggunakan  sabun  antiseptik  kemudian dimasukkan  kedalam  sterilisator dry  heat bersama  dengan  corong  kaca  dan  kertas saring  untuk  disterilkan  dengan  suhu  200 o C selama 10 menit.

## Pembuatan ekstrak daun durian
Pembuatan  ekstrak  daun  durian
( Durio zybethinus ) dilakukan di Laboratorium  Kimia  Fakultas  M-IPA Universitas Sam Ratulangi Manado dengan  cara  sebagai  berikut:  Daun  durian segar  berumur  satu  sampai  dua  bulan  dan telah  berwarna  hijau  tua  dicuci  dan dikeringkan  dengan  cara  dianginkan  di dalam  ruangan.  Setelah  kering,  dilakukan penggilingan.  Serbuk  yang  diperoleh ditimbang seberat 200 g.Serbuk yang telah ditimbang  kemudian  dilakukan  maserasi menggunakan pelarut etanol 96 % sebanyak  1000  mL  selama  72  jam. Kemudian  filtrat  disaring  menggunakan kertas  saring.  Filtrat  hasil  saringan diuapkan  dengan evaporator selama  lima jam  dengan  suhu  70 o C.  Setelah  itu, dimasukkan kedalam oven dengan suhu 40 o C  selama  dua  hari  untuk  membuang  sisa air.  Ekstrak  murni  kemudian  dimasukkan kedalam petridish steril.
Pembuatan media agar Sabaoud’s
Dextrose
Aquades sebanyak  500  mL  dimasukkan kedalam  tabung  Erlenmeyer  kemudian dimasukkan  21  gram Potato  Dextrose Agar. Setelah  itu,  campuran  digoyang- goyangkan agar tercampur merata. Setelah itu, campuran dipanaskan di kompor listrik selama  15  menit.  Kemudian  disterilkan dalam  sterilisator dry  heat selama  15 menit.  Setelah  itu,  tuang  campuran  agar cair  yang  sudah  disterilkan  tersebut kedalam  wadah  petridish  steril  kemudian dicampurkan  kloramfenikol  10  mL  pada setiap wadah petridish, lalu dinginkan pada suhu ruangan.

## Penanaman  jamur  pada  media  agar Potato Dextrose Agar
Jamur yang diambil dari biakkan kemudian  dicampurkan  dengan  akuades lalu  dioleskan  secara  merata  pada  media agar Potato  Dextrose  Agar. Selanjutnya cakram  kertas  saring  dicelupkan  dalam ekstrak  murni  daun  durian  dan  diletakan dengan  pinset  pada  satu  bagian petridish . Setelah itu cakram kertas saring kelompok kontrol  yang  tidak  mengandung  ekstrak daun  durian  diletakan  pada  dua  bagian yang  lain.  Setiap  pekerjaan  laboratorium dilakukan  di  dekat  api  Bunsen  agar sterilitas  terjaga.  Setelah  itu  dimasukan kedalam  inkubator  dan  diinkubasi  pada suhu 37 o C selama 24 jam.

## Metode Pengujian
Metode  yang  digunakan  adalah metode difusi lempeng agar ( Kirby-Bauer ) yang  merupakan  metode  uji  kepekaan langsung.
Agar Potato Dextrose
disediakan sebanyak lima petridish .
Candida albicans diambil dari sediaan dan dioles  pada  permukaan  agar Potato Dextrose, lima  cakram  kemudian  diberi ekstrak  daun  durian,  lima  cakram  diberi akuades sebagai kelompok kontrol negatif, dan  lima  cakram  diberi  ketokonazol sebagai  kelompok  kontrol  positif.  Cakram tersebut  lalu  diletakan  di  media  agar Sabaroud’s Dextrose yang sudah dioleskan jamur Candida albicans diatasnya  kemudian  dimasukan  kedalam inkubator  dan  diinkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37 o C.  Setiap petridish terdiri dari satu cakram kelompok intervensi, satu cakram kelompok kontrol negatif, dan satu cakram kelompok kontrol positif. Diameter  zona  hambat  dihitung  dalam satuan  millimeter  (mm)  menggunakan jangka  sorong.  Kemudian  diameter  zona
hambat  tersebut  dikategorikan  kekuatan daya  antijamur  berdasarkan  penggolongan Davis  dan  Stout  (1971),  yaitu  sebagai berikut:
a. Diameter  zona  hambat  diatas  20 mm  artinya  daya  hambat  sangat kuat
b. Diameter zona hambat 11 - 20 mm artinya daya hambat kuat
c. Diameter  zona  hambat  5  -  10  mm artinya daya hambat sedang
d. Diameter  zona  hambat  0  -  4  mm artinya daya hambat lemah
Diameter  zona  hambat  diukur dengan rumus: Keterangan: : Zona hambat Dv : Diameter vertikal Dh : Diamater horizontal Dc : Diameter cakram Gambar  1.  Luas  zona  hambat  yang terbentuk menunjukkan adanya efek antifungi dari ekstrak daun durian.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Cawan  petri  yang  telah  diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C dalam inkubator  diambil  lalu  dilihat zona  hambat  yang  terbentuk, kemudian zona hambat tersebut diukur  dengan  menggunakan  jangka
sorong  dalam  satuan  milimeter  dan dimasukan  dalam  tabel  pengamatan. Zona  hambat  yang  terbentuk  dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Zona hambat yang terbentuk pada media PDA (A) Zona hambat antijamur ekstrak daun durian (B) cakram ekstrak daun durian (C) zona hambat ketokonazole (D) cakram kontrol positif ketoconazole (E) cakram kontrol negatif Aquades
Tabel 1 menunjukan bahwa diameter  rerata  zona  hambat  ekstrak daun durian sebesar 5,6 mm, sedangkan  zona  hambat    kontrol
positif antijamur ketokonazole sebesar 19,2  mm  dan  kontrol  negatif  aquades tidak menunjukan adanya zona hambat.
Tabel  1. Hasil pengukuran diameter zona hambat bakteri Staphylococcus aureus
Diameter zona hambat (mm) Pengulangan Ekstrak daun durian { Durio zybethinus } Kontrol positif ( Ketokonazole ) Kontrol negatif (aquades) 1 3 24 0 2 4 22,5 0 3 4 21 0 4 3 21 0 5 3,75 25,5 0 Rerata 3,55 22,9 0
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun durian memiliki zona hambat yang  ditandai  dengan  terbentuknya  zona hambat  yang  terlihat  bening  dibandingkan dengan  daerah  sekitarnya.  Zona  yang bening menandakan pertumbuhan jamur di sekitar ekstrak daun durian terhambat pada daerah tersebut.
Terbentuknya daerah yang bening ini karena  ekstrak  daun  durian  memiliki kemampuan  menghambat  pertumbuhan jamur,  sehingga  dalam  kurun  waktu  24 jam  terbentuk  zona  hambat  di  sekitar kertas  cakram  yang  mengandung  ekstrak daun durian. Hal ini berbeda dengan kertas cakram yang mengandung akuades dimana tidak  terdapat  zona  hambat  di  sekitar kertas cakram yang menandakan terjadinya pertumbuhan  jamur  di  kertas  cakram tersebut.    Jika  dibandingkan  dengan  zona hambat yang dimiliki ketokonazole, terlihat bahwa ketokonazole memiliki zona hambat  yang  lebih  luas  dan  jernih, menandakan  pertumbuhan  jamur  telah dihambat.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang dilakukan  sebanyak  lima  kali  pengujian, diameter  zona  hambat  yang  terbentuk bervariasi.  Diameter  zona  hambat  yang terbentuk pada masing-masing pengulangan  3  mm;  3,75  mm;  dan,  4  mm dengan rata-rata hasil uji daya sebesar 3,55 mm.  Penilaian  kekuatan  daya  hambat menggunakan  kategori  Davis  dan  Stout dan  didapatkan  bahwa  efek  antijamur  dari ekstrak daun durian memiliki daya hambat yang lemah karena memiliki diameter zona hambat dengan rerata 3,55 mm.
Zona hambat yang terbentuk disebabkan  karena  adanya  zat-zat  aktif yang terkandung dalam daun durian seperti Saponin dan flavonoid yang  berfungsi sebagai  antijamur.  Daya  hambat  yang lemah dari ekstrak daun durian menandakan kurangnya konsentrasi senyawa Saponin dan Flavanoid yang terkandung  di  dalamnya  sehingga  tidak memiliki  daya  hambat  yang  kuat  terhadap jamur Candida  albicans. Hal  ini  juga dikarenakan  belum  diketahuinya  kadar
konsentrasi senyawa fitokimia dalam daun durian  yang  dapat  menghambat  jamur Candida albicans. Di sekitar kertas cakram yang  diberikan  akuades  sebagai  kontrol negatif tidak ditemukan terbentuknya zona hambat.
Hasil  penelitian  ini  didukung  oleh penelitian  sebelumnya  tentang  aktivitas antimikroba  yang  dimiliki  ekstrak  daun durian.  Hasil  dari  penelitian  sebelumnya menunjukkan  adanya  kemampuan  daya hambat  daun  durian  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus (Maradona,  2013), tetapi  kemampuan  daya  hambat  terhadap jamur  Candida  albicans  lebih  kecil. Hasil ini  mungkin  dipengaruhi  karena  belum adanya  standarisasi  dalam  pembuatan ekstrak sehingga bila dilakukan di laboratorium  yang  berbeda  dengan  cara ekstraksi  yang  berbeda,  mungkin  dapat menyebabkan  hasil  yang  berbeda  pula (Diassanti,2011). Faktor-faktor  yang dapat mempengaruhi  mutu  ekstrak  yaitu  jenis dan  jumlah  senyawa  kimia,  metode ekstraksi,  dan  pelarut  yang  digunakan (Anonim,  2000).  Selain  perbedaan  tempat dan metode ekstraksi, faktor-faktor lingkungan seperti suhu udara, kelembaban  relatif,  radiasi  matahari, angin,  suhu  tanaman,  ketersediaan  air, ketercukupan cahaya dalam proses fotosintetis  sangat  mempengaruhi  fungsi fisiologis,  bentuk  anatomis  dan  siklus hidup tumbuhan (Hilmanto, 2015). Faktor- faktor  inilah  yang  dapat  mempengaruhi senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan oleh daun.
Hasil  penelitian  menunjukkan  rerata zona  hambat  ketokonazole  lebih  besar yaitu  22,9  mm,  dibandingkan  dengan rerata  diameter  zona  hambat  ekstrak  daun durian  yang  tergolong  lemah  yaitu  3,55 mm.  Perbedaan  ini  menunjukkan  bahwa efek antijamur  yang dimiliki ketokonazole
terhadap Candida  albicans lebih  baik dibandingkan dengan  ekstrak daun durian. Rerata  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  pada  ekstrak  daun  durian  lebih kecil  dibandingkan  dengan  antijamur ketoconazole. Hal ini mungkin disebabkan karena  belum  diketahuinya  konsentrasi dari  senyawa  aktif  pada  daun  durian  yang bertanggung  jawab  memberikan  efek antijamur,  sehingga  rerata  zona  hambat dari  ekstrak  daun  durian  yang  terbentuk tergolong lebih kecil dibandingkan dengan rerata  zona  hambat  yang  terbentuk  dari antijamur  ketokonazole  sebagai  kontrol positif.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak  daun  durian  memiliki  daya hambat dalam menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans . 2. Rerata diameter zona hambat
Ketokonazole
lebih besar dibandingkan dengan rerata diameter zona hambat dari daun durian.

## SARAN
Diharapkan dapat dilakukan penelitian  lebih  lanjut  meneliti  manfaat akar  dan  kulit  batang  pohon  durian terhadap  jamur  dan  bakteri  lainnya , efek ekstrak  daun  durian  terhadap  jamur  atau bakteri  lain  yang  dapat  menimbulkan masalah  kesehatan  gigi  dan  mulut,  efek ekstrak  daun  durian  terhadap  jamur Candida  albicans dengan  menggunakan metode sumuran.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  2000.  Parameter  Standar  Umum Ekstrak  Tumbuhan  Obat,  Jakarta: Depkes RI,. h. 10-11.
Diassanti A. 2011. Uji ekstrak etanol daun mengkudu (Morinda citrifolia)
sebagai antimikroba terhadap
Methicillin Resistant Staphyloccocus aureus)  secara  in  vitro.  Skripsi.
Malang: Universitas Brawijaya.
Hilmanto  R.  2015.Indikator  Ekologi  pada waktu tanam sebagai inovasi
masyrakat  lokal  dalam  menghadapi dampak  negatif  perubahan  iklim.
http://ejurnal.bppt.co.id  diakses  pada tanggal 6 september 2015.
Maradona D. 2013.Uji aktivitas antibakteri ekstrak  etanol  daun  durian  (Durio zybethinus L), daun lengkeng, (Dimocarphus  longan  Lour),  dan daun rambutan (Nephelium lappaceum L) terhadap bakteri staphylococcus  aureus  ATCC  25925 dan  Escherichia  coli  ATCC  25922. Skripsi.  Fakultas  Kedokteran  UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. p.33