Bioeskperimen Volume 1 No. 1, (Maret 2015) ISSN 2460­1373
Pengaruh Konsumsi Minuman Instan Dengan Frekuensi Berbeda Terhadap Kadar Ureum Darah Mencit ( Mus musculus )
Inﬂ uence of Diﬀ erent Frequency of Instant Drinking Consumption to the Blood Ureum of Mouse (Mus musculus)
Agung Mulyatmo 1) , Hariyatmi 2)
Prodi P. Biologi FKIP UMS, Jl. A. Yani Tromol Pos 1 Pabelan, Surakarta, 57162
Abstrak  – Minuman  instan  yang  dikemas  dalam  kantong  plastik  dapat  dijual  dan ditemukan  pada  toko­toko,  warung  kecil,  dan  pedagang  kaki  lima  dengan  bebas. Masyarakat tidak menyadari bahwa mengkonsumsi minuman instan berlebihan dapat mengganggu kesehatan, karena dalam komposisi minuman instan tersebut terdapat bahan pemanis buatan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsumsi minuman  instan  dengan  frekuensi  berbeda  terhadap  kadar  ureum  darah  mencit ( Mus  musculus ).  Penelitian  dilakukan  dengan  metode  eksperimen,  yang  mengguna­ kan sampel 20 ekor mencit jantan, berumur 2­3 bulan dan berat 20­40 g yang terbagi ke  dalam  4  kelompok,  yaitu  Placebo,  kelompok  1,  kelompok  2,  dan  kelompok  3. Bahwa pemberian minuman instan dengan volume 0,5 ml/20g BB selama 10 hari ada pengaruh terhadap kadar ureum darah mencit ( Mus musculus ). Kemudian dilakukan uji  lanjut  Duncan  antara  kelompok  perlakuan  placebo,  perlakuan  1,  dan  perlakuan 2 tidak menunjukkan hasil yang bermakna, sedangkan ke­lompok perlakuan 3 yang menunjukkan perlakuan yang paling berpengaruh terhadap kadar ureum darah mencit ( Mus  musculus ).  Sehingga  dari  hasil  penelitian  dan  analisa  data  dapat  disimpulkan bahwa pemberian minuman instan merk Marimas rasa jeruk dengan volume 0,5ml/20 g BB berpengaruh terhadap kadar ureum darah mencit ( Mus musculus ), dan perlakuan yang  paling  berpengaruh yaitu  kelompok  perlakuan 3 dengan pemberian  minuman sachet merk Marimas rasa jeruk tiga kali sehari diwaktu pagi, siang dan sore selama 10 hari dibandingkan dengan kelompok placebo, perlakuan 1 dan perlakuan 2.
Kata kunci : ureum darah, minuman instan, mencit, Mus musculus

## PENDAHULUAN
Minuman  serbuk  instan  adalah minuman  yang  diproduksi  oleh  suatu industri  minuman  yang  dikemas  dalam kantong  plastik.  Minuman  tersebut  dijual dan  dapat  ditemukan  pada  toko­toko, warung kecil dan bahkan dapat ditemukan
atau dijual di kaki lima dengan bebas. Pada kemasan  dalam  bentuk  instan  tersebut, ada  yang  mencantumkan  komposisinya dan  ada  yang  tidak.  Dari  bermacam  merk ada  yang  mencantumkan  nama  pemanis yang  digunakan,  tetapi  tidak  dituliskan berapa  kadarnya.  Pemanis  sintesis  yang
Bioeskperimen
Volume 1 No. 1, (Maret 2015) ISSN 2460­1373
sering  digunakan  adalah  jenis  siklamat, karena harganya murah dan tidak ada rasa ikutan  pahit  jika  penambahannya  tidak sesuai  dengan  perbandingannya.  Hasil kajian  Badan  Perlindungan  Konsumen Negara (BPKN) masih menemukan adanya penyalahgunaan  Bahan  Tambahan  Pangan (BTP) yang melebihi volume yang diizinkan anatara  lain  pada  penggunaan  pemanis buatan  seperti  sakarin  dan  siklamat (Anonim, 2007).
Menurut Food  and  Drug  Agency (FDA)  Amerika  Serikat,  BTP  adalah  zat yang  secara  sengaja  ditambahakan  ke dalam  makanan  untuk  menghasilkan  sifat fungsional  tertentu  pada  makanan  baik secara  langsung  maupun  tidak  langsung dan menjadi bagian dari makanan tersebut (termasuk  zat  yang  digunakan  selama produksi, pengemasan, pengolahan, transportasi dan penyimpanan).
Meningkatnya  kadar  urea  darah BUN  ( Blood  Urine  Nitrate) dan  kreatinin merupakan  salah  satu  indikasi  kerusakan pada  ginjal  (Doloksaribu,  2008).  Semakin buruk  fungsi  ginjal,  semakin  tinggi  kadar ureum darah. Kadar ureum normal adalah kurang  dari  40  mg/dl,  jika  kadar  ureum darah  sudah  lebih  dari  150  mg/dl  maka dapat  mengalami  (uremia)  keracunan
ureum (Nadesul, 2009).
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut, maka  akan  dilakukan  penelitian  tentang minuman sachet merek Marimas rasa jeruk dengan tujuan untuk mengetahui pengaruh konsumsi minuman instan dengan frekuensi  berbeda  terhadap  kadar  ureum darah mencit (Mus musculus) . Penelitian ini diharapkan  dapat  memberikan  informasi tentang kadar  ureum  darah  mencit  setelah pemberian minuman instan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Hewan  Biologi  Universitas
Muhammadiyah  Surakarta  untuk  tempat pemeliharaan hewan percobaan dan pemberian perlakuan. Laboratorium Klinik Fakultas Ilmu Kesehatan  Universitas Muhammadiyah  Surakarta  sebagai  tempat uji  kadar  ureum  darah  mencit  (Mus musculus). Penelitian Ini dilakukan selama lima  bulan  Desember  2013  sampai  bulan April 2014.
Penelitian  ini  dilakukan  dengan metode  eksperimen  dan  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan pola  satu  faktor  yaitu  minuman  instan merek Marimas. Adapun rancangan percobaan pada tabel dibawah ini:

## Tabel 1.  Rancangan Percobaan
No Perlakuan Ulangan Ke­ 1 2 3 4 5 1. P0 P0.1 P0.2 P0.3 P0.4 P0.5 2. P1 P1.1 P1.2 P1.3 P1.4 P1.5 3. P2 P2.1 P2.2 P2.3 P2.4 P2.5 4. P3 P3.1 P3.2 P3.3 P3.4 P3.5
Keterangan :
P0 :   Kelompok placebo yang diberi air sumur dengan volume 0,5 ml/20 g BB satu kali dalam sehari pada pagi hari jam 09.00­10.00 WIB selama 10 hari
P1 :  Kelompok mencit yang diberi minuman instan marimas rasa jeruk dengan volume 0,5 ml/20 g BB satu kali sehari pada pagi hari jam 09.00­10.00 WIB selama 10 hari

## Bioeskperimen
Volume 1 No. 1, (Maret 2015) ISSN 2460­1373
P2 :  Kelompok mencit yang diberi minuman instan marimas rasa jeruk dengan volume 0,5 ml/20 g BB dua kali dalam  sehari pagi hari jam 09.00­10.00 WIB dan siang hari jam 12.00­13.00 WIB selama 10 hari P3 :  Kelompok mencit yang diberi minuman instan marimas rasa jeruk dengan volume 0,5 ml/20 g BB tiga kali dalam sehari pada pagi hari jam 09.00­10.00 WIB, siang hari jam 12.00­13.00 WIB dan sore hari jam 16.00­ 17.00 WIB selama 10 hari
Pemberian  minuman  instan Marimas dengan volume 0,5 ml/20 g BB pada mencit karena kapasitas maksimal volume lambung mencit  20  g  yaitu  1  ml  (Ngatidjan,  1991 dalam Susilowati 2009) sehingga pemberian volume  minuman  instan  tidak  melebihi kapasitas maksimal lambung mencit.
1.  Tahap Penelitian a.  Persiapan hewan uji
Mencit  ditimbang  terlebih  dahulu kemudian  diberi  tanda  menggunakan spidol pada bagian ekor mencit. Kemudian mencit  diaklimasi  selama  satu  minggu supaya  mencit  dapat  beradaptasi  dengan lingkungan  dan  suhu  yang  baru,  selama pemeliharaan  mencit  diberi  makanan berupa pellet merk BR conﬁ t dan minuman air  sumur.  Bila  saat  aklimasi  berlangsung, terdapat  mencit  yang  sakit maka langsung diganti  dengan  mencit  yang  sehat  dengan kriteria sama diambil secara acak.
b.  Pengelompokkan hewan uji
Mencit dikelompokkan menjadi empat kelompok  secara  random,  dan  masing­ masing  kelompok  terdiri  dari  lima  mencit. Besar  sampel  penelitian  sesuai  dengan kriteria  (WHO,  1993  dalam  Jean  Rischa, 2010), yaitu minimal lima ekor dalam setiap perlakuan,  oleh  karena  terdapat  empat kelompok  perlakuan  dengan  jumlah  lima ekor setiap perlakuan maka dibutuhkan 20 ekor mencit untuk satu kali ulangan.
c.  Tahapan pengujian kadar ureum darah Pengambilan sampel darah dilakukan dari  sinus  orbitalis  mencit  dengan  cara memasukan  pipa  kapiler  ke  bagian  tepi mata  sampai  darah  mengalir  ke  dalam tabung hematokrit. Pengujian kadar ureum
darah  menggunakan  uji  Bertholet  dengan alat  spektrofotometer  (Boehringer  4010). Darah  diambil  dengan  menggunakan mikro­hematokrit  kemudian  dimasukkan ke  eppendorf  yang  diberi  EDTA  sebanyak 0,01  g.  Kemudian  centrifuge  dengan kecepatan  1500  rpm  selama  10  menit. Serum  diambil  dengan  menggunakan mikropipet  sebanyak  10  micron  (0,01  ml) dimasukkan  pada  vacutainer,  kemudian ditambahi  dengan  larutan  reagent  warna I,  1000  micron/1  ml  dengan  menggunakan mikropipet  dan  ditambah  dengan  larutan reagen  warna  II  1000  micron/1  ml  dengan menggunakan  mikropipet.  Setelah  itu, diinkubasi  selama  5  menit  dengan  suhu 37 0 C. Proses terakhir adalah membaca pada spektrofotometer (Boehringer 4010) dengan panjang gelombang 578. F 80.
2.  Analisis Data Analisis data menggunakan program computer SPSS (Statistic Product and Service Solution) dengan uji statistic Non­Parametrik uji  lanjut  menggunakan  uji  Kruskal­Wallis H,  karena  sebaran  data  kadar  ureum darah  mencit  normal  dan  tidak  homogen, selanjutnya  dilakukan  uji  Duncan  untuk mengetahui  kelompok  perlakuan  yang paling berpengaruh terhadap kadar ureum darah mencit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1.  Hasil
Berdasarkan  hasil  uji  kadar  ureum darah pada mencit (Mus musculus) sebelum dan  sesudah  pemberian  minuman  instan merek  Marimas  rasa  jeruk  dengan  volume 0,5 ml/20g BB mencit. (tabel 2).
Bioeskperimen Volume 1 No. 1, (Maret 2015) ISSN 2460­1373 Tabel 2. Rata­Rata Kadar Ureum Darah Mencit (Mus musculus) Kelp. Frekuensi ∑ Awal (mg/dl) ∑ Akhir (mg/dl) Kenaikan kadar ureum (%) Placebo (0,5 ml/20 g BB 1x/hari) 30,64 ± 1,42 31,92 ± 0,86 4,32 P 1 (0,5 ml/20 g BB 1x/hari) 23,08 ± 4,14 24,38 ± 3,94 5,95 P 2 (0,5 ml/20 g BB 2x/hari) 30,58 ± 0,83 33,6 ± 2,09 9,84 P 3 (0,5 ml/20 g BB 3x/hari) 27 ± 0,86 31,8 ± 2,75 17,66
Berdasarkan  tabel  2.  maka  dapat dilihat  rata­rata  kadar  ureum  darah mencit  setelah  10  hari  perlakuan,  pada perlakuan  awal  tertinggi  pada  kelompok Placebo  (30,64  mg/dl)  dan  terendah  pada kelompok  perlakuan  P1  (23,08  mg/dl), sedangkan untuk perlakuan akhir tertinggi pada  kelompok  Placebo  (31,92  mg/dl)  dan terendah  pada  kelompok  perlakuan  P1
Tabel 3.   Hasil analisa Normalitas Kadar Ureum Darah Mencit (Mus musculus)
Perlakuan mencit Kolmogorov-Smirnov(a) Shapiro­Wilk Statistic Df Sig. Statistic Df Sig. Selisih P0 ,240 5 ,200(*) ,868 5 ,258 P1 ,300 5 ,161 ,813 5 ,103 P2 ,260 5 ,200(*) ,819 5 ,115 P3 ,268 5 ,200(*) ,844 5 ,175
* Ini adalah batas bawah dari makna sebenarnya.
a Hubungan bermakna menurut Liliafors
Berdasarkan  tabel  3  maka  dapat disimpulkan  bahwa  dari  semua  perlakuan menunjukkan  nilai  α  lebih  dari  5%  (P  > 0,05),  yang  artinya  bahwa  sebaran  data kadar ureum darah berdistribusi normal.
Untuk  mengetahui  apakah  sebaran data  tersebut  homogen  atau  tidak,  maka dilakukan  uji  homogen.  Adapun  hasilnya pada  (tabel  4).  Berdasarkan  tabel  4  maka
dapat  disimpulkan  bahwa  nilai  Sign.  lebih dari  5%  (0,007  >  0,05), yang artinya  bahwa sebaran  data  kadar  ureum  darah    tidak homogen.
Berdasarkan  sebaran  data  kadar ureum darah berdistribusi  normal dan tidak homogen,  maka  dilanjutkan  dengan  uji non­parametrik menggunakan uji Kruskal­ Wallis. Adapun hasilnya pada (tabel 5).
Tabel 4. Hasil analisa Homogenitas Kadar Ureum Darah Mencit (Mus musculus) Levene Statistic df1 df2 Sig. Selisih Based on Mean 5,731 3 16 ,007 Based on Median 1,333 3 16 ,299 Based on Median and with adjusted df 1,333 3 11,707 ,311 Based on trimmed mean 5,611 3 16 ,008
(24,38 mg/dl). Kenaikan kadar ureum pada setiap  kelompok,  tertinggi  pada  kelompok P3  yaitu  (17,66  %)  dan  terendah  pada kelompok Placebo yaitu (4,32 %).
Untuk  mengetahui  apakah  sebaran data berdistribusi normal atau tidak, maka dilakukan uji normalitas. Adapun hasilnya pada (tabel 3).
Bioeskperimen Volume 1 No. 1, (Maret 2015) ISSN 2460­1373
Tabel 5. Hasil analisa Kruskal­Wallis terhadap Kadar Ureum Darah Mencit (Mus musculus) perlakuan mencit N Mean Rank Selisih P0 5 5,80 P1 5 6,90 P2 5 13,10 P3 5 16,20 Total 20 Selisih % Chi­Square 10,638 Df 3 Asymp. Sig. ,014
Berdasarkan  tabel  5  diperoleh  nilai Asymp.  Sig.  =  0,014,  jadi  nilai  Asymp. Sig.  (0,014  <  0,05)  maka  H0  ditolak. Kesimpulannya bahwa pemberian minuman instan merek marimas rasa jeruk dengan volume 0,5 ml/ 20g BB ada pengaruh terhadap  kadar  ureum  darah  mencit (Mus musculus) selama 10 hari.
Untuk mengetahui
kelompok perlakuan yang paling berpengaruh terhadap kadar ureum darah mencit, maka dilakukan uji lanjut duncan dengan taraf α = 0,05 (tabel 6).
Berdasarkan  tabel  6  dapat  dilihat bahwa  kadar  ureum  mencit  terendah yaitu  P0  (1,280)  dan  kadar  ureum  mencit tertinggi  yaitu  P3  (4,800).  Jadi  P3  berada pada  kelompok  sendiri,  berbeda  pada kelompok  P0,  P1  dan  P2  berada  dalam satu kelompok. Hal tersebut menunjukkan bahwa  pemberian  minuman  instan  merek Marimas  rasa  jeruk  dengan  volume  0,5 ml/20 g BB mencit tidak menunjukkan hasil yang  bermakna  diantara  P0,  P1  dan  P2, sedangkan P3 berada  pada kolom berbeda yang  menunjukkan  perlakuan  tersebut paling berpengaruh terhadap kadar ureum darah mencit.
Tabel 6.  Hasil analisa Duncan Kadar Ureum Darah Mencit (Mus musculus) perlakuan mencit N Subset for alpha = .05 1 1 2 P0 5 1,280 P1 5 1,300 P2 5 3,020 P3 5 4,800 Sig. ,101 ,080
Rata­rata untuk kelompok dalam subset homogen ditampilkan a menggunakan rata­rata harmoni sampel dengan ukuran = 5,000.

## 2.  Pembahasan
Pada  dasarnya  ureum  merupakan hasil akhir metabolisme protein, berasal dari asam amino yang telah dipindah amonianya di  dalam  hati  dan  mencapai  ginjal,  dan
diekskresikan rata­rata 30 g sehari. Menurut (Lustgathen,  1972  dalam  Amiria,  2008) kadar ureum normal pada mencit yaitu 17­ 28  mg/dl.  Ginjal  merupakan  organ  yang berfungsi  mengatur  keseimbangan  cairan
Bioeskperimen
Volume 1 No. 1, (Maret 2015) ISSN 2460­1373
tubuh  dengan  cara  membuang  sampah­ sampah sisa metabolisme dan menahan zat­ zat yang dibutuhkan tubuh.
Dapat diketahui mengkonsumsi
minuman instan dapat menggangu kesehatan.  Menurut  (Darmansyah,  2007 dalam  Iswendi,  2010),  menyarankan  agar konsumen  berhati­hati    mengkonsumsi produk  dengan  pemanis  buatan.  Jika pemanis  buatan  seperti  aspartam  dan siklamat digunakan dalam jumlah tertentu tidak  bermasalah,  terutama  bagi  mereka yang  sedang  diet  gula.  Konsumsi  terus menerus  bisa  berdampak  kurang  baik bagi kesehatan, misalnya gangguan pengelihatan, gangguan pendengaran, masalah jantung, mual­mual, sulit bernapas, rasa  nyeri  ketika  menelan  makanan,  diare dan  gangguan  indera  perasa.  Gangguan tersebut  diakibatkan  adanya  komposisi kandungan  zat  pemanis  buatan  yaitu aspartam  dan  natrium  siklamat  yang terdapat  dalam  minuman  instan  merek Marimas rasa jeruk.
Pada  komposisi  bahan  minuman instan Marimas terdapat kandungan pemanis buatan natrium siklamat 128,8 mg/ saji  (ADI:  11  mg/kg  berat  badan/hari)  dan aspartam 26,4 mg/saji (ADI: 50 mg/kg berat badan/hari). Batas maksimum penggunaan aspartam  menurut  ADI (Acceptable  Daily Intakae) yang  dikeluarkan  oleh  BPOM (2004)  ialah  50  mg/kg  berat  badan  sedang untuk  siklamat  0­11  mg/kg  berat  badan. Sehingga dapat diketahui bahwa komposisi bahan  pemanis  buatan  aspartam  dan siklmat minuman sachet marimas rasa jeruk terdapat  pada  ambang  batas  paling  akhir dalam  ketentuan  ADI (Acceptable  Daily Intakae) .
Berdasarkan penjelasan tersebut, dapat  diketahui  bahwa  mengkonsumsi minuman  instan Marimas menyebabkan kenaikan  kadar  ureum  darah  tapi  masih dalam  batas  normal.  Apabila  minuman tersebut  dikonsumsi  secara  berlebihan
dapat  mengganggu  kesehatan,  karena dalam  komposisi Marimas terdapat  bahan pemanis  buatan  berupa  natrium  siklamat dan aspartam.

## KESIMPULAN DAN SARAN
1.  Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  dan  analisa  data menunjukkan  bahwa  pemberian  minuman instan  merek Marimas rasa  jeruk  dengan volume 0,5 ml/20 g BB mencit berpengaruh terhadap  kadar  ureum  darah  mencit  ( Mus musculus )  selama  10  hari,  dan  pengaruh paling  besar  terdapat  pada  perlakuan  3 dengan pemberian  minuman instan  merek Marimas rasa jeruk tiga kali sehari diwaktu pagi,  siang  dan  sore  dengan  jumlah kenaikan kadar ureum sebanyak 17,66 %.
2.  Saran Untuk penelitian selanjutnya, sebaiknya dalam pemberian volume minuman lebih bervariasi atau lebih dari 10 hari  perlakuan  dan  menggunakan  sampel minuman  selain  merek Marimas .  Adaptasi sebelum perlakuan sebaiknya 2 hari dengan pengkondisian  7  hari.  Hati­hati  dalam penggunaan  spet  injeksi  bekanul  yang dapat  melukai  hewan  percobaan  apabila penggunaannya tidak sesuai dengan prosedur. Jangan berlebihan mengkonsumsi minuman  sachet  yang  dapat  mengganggu kesehatan.

## DAFTAR PUSTAKA
Amiria, Fita Dwi. 2008. Uji Toksisitas. Jakarta: FMIPA Universitas Indonesia.
Anonim. 2007. Hasil Kajian BPKN di Bidang Pangan Terkait Perlindungan Konsumen. Jakarta. Doloksaribu, Bernike. 2008. Pengaruh
Proteksi  Vitamin  C  Terhadap  Kadar Ureum,  Kreatinin  dan  gambaran Histopatologis  Ginjal  Mencit  yang Dipapar  Plumbun.  Tesis:  Universitas Sumatra Utara.
Bioeskperimen Volume 1 No. 1, (Maret 2015) ISSN 2460­1373
Iswendi. 2010. Penentuan Kadar Siklamat Pada Jajanan  Anak  Sekolah  Dasar  Kota Padang Dalam Bentuk Minuman yang di  Produksi  Secara  Home  Industry Dengan  Metode  Spektrofotometri. Penelitian,  Kimia  FMIPA  UNP Padang.
Jean,  Rischa.  2010. Pengaruh  Pemberian  Teh Hitam  (camellia  sinensis)  terhadap Gambaran Histopatologi Ginjal mencit  balb/c .  Skripsi:  Universitas Diponegoro.
Nadesul,  Handrawan.  2009.  Resep  Mudah Tetap  Sehat  Cerdas  Menaklukan Semua  Penyakit  Semua  Orang Sekarang. Kompas, 5 Januari 2009.
Susilowati,  Agnes  Eﬁ .  2009. Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Bunga  Rosella (Hibiscus  sabdariﬀ a  L.)  Terhadap Kerusakan  Sel­sel  Hepar  Mencit (Mus  musculus)  Akibat  Paparan Parasetamol. Skripsi:  Universitas Sebelas Maret.