JIKSH: Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada https://akper-sandikarsa.e-journal.id/JIKSH Volume 10| Nomor 1| Juni|2021 e-ISSN: 2654-4563 dan p-ISSN: 2354-6093 DOI: https:/doi.org/10.35816/jiskh.v10i1.575

## Research article
Perbandingan Trombosit dengan Antikoagulan K2EDTA
Syuhada Syuhada 1 , Abdurrohman Izzuddin 2 , Hendri Yudhistira 3
1 Departemen Patologi Klinik, Fakultas Kedokteran Universitas Malahayati
2 Departemen Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Malahayti
3 Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Malahayati
Article Info Abstrak History Article: Received:28-01-2021
Reviewed:20-02-2021 Revised:06-03-2021 Accepted:22-04-2021 Published:30-06-2021

## Keywords:
Pemeriksaan hematologi; K2EDTA;
Volume darah ;
Pendahuluan:  kesulitan  pengambilan  sampel  darah  pasien  sering terjadi  pada  pasien  obesitas,  bayi  baru  lahir,  dan  pengambilan sampel  darah  pada  pasien  dengan  vena  kecil  juga  menyebabkan pengambilan volume darah tidak mencukupi. Tujuan: mengetahui apakah  terdapat  perbedaan  antara  hasil  pemeriksaan  hematologi trombosit  pada  volume  sampel  darah  3  mL,  2  mL,  dan  1  mL dengan antikoagulan K2EDTA. Metode: Penelitian menggunakan metode  analitik  observasional  dengan  desain  cross  sectional. menghitung. Hasil: Rata-rata jumlah trombosit pada volume darah 2 mL dan 3 mL pada tabung vacutainer lebih tinggi dibandingkan dengan sampel darah 1 mL. Kesimpulan: tidak terdapat perbedaan yang signifikan pada hasil perbandingan jumlah trombosit antara volume  darah  1  mL,  2  mL,  dan  3  mL  pada  tabung  vacutainer K2EDTA.
Abstract.  Introduction:  difficulty  in  taking  patient  blood  samples often  occurs  in  obese  patients,  newborns,  and  blood  sampling  in patients  with  small  veins  also  causes  insufficient  blood  volume collection.  Objective:  to  determine  whether  there  is  a  difference between the results of the platelet hematology examination in the blood  sample  volume  of  3  mL,  2  mL,  and  1  mL  with  the anticoagulant  K2EDTA.  Methods:  This  study  used  an observational  analytic  method  with  a  cross  sectional  design. calculate.  Results:  The  mean  number  of  platelets  in  the  blood volume of 2 mL and 3 mL in the vacutainer tube was higher than that of the 1 mL blood sample. Conclusion: There is no significant difference  in  the  results  of  the  comparison  of  platelet  counts between blood volumes of 1 mL, 2 mL, and 3 mL in the K2EDTA vacutainer tube. Corresponding author : Hendri Yudhistira Email
: ythendri0@gmail.com
About CrossMark

## JIKSH: Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada Volume 10 Nomor 1 Juni 2021

## Pendahuluan
Laboratorium klinik merupakan bagian yang menempati posisi penting dalam pelayanan kesehatan.  Pemeriksaan  laboratorium  penting  untuk  penapisan  awal,  diagnosis,  pemantauan penyakit  dan  pemantauan  pengobatan.  Ada  tiga  tahap  dalam  pemeriksaan  laboratorium,  yaitu tahap pra analitik, analitik, dan pasca analitik (Maripah, 2017).
Di  Indonesia,  tahap  analitik  lebih  mendapat  atensi,  sedangkan  tahap  pra  analitik berkontribusi 61% dari seluruh kesalahan, diikuti dengan tahap analitik sebesar 25%, serta pasca analitik  14%  (Mengko,  2013).  Hak  ini  sejalan  dengan  pendapat  menurut  Barbara  (2019), kesalahan  pre-analitik  sebesar  49-73%,  kesalahan  analitik  sebesar  7-13%,  dan  kesalahan pasca analitik sebesar 38-66% (Barbara, 2019). Adapun menurut Narula (2019), kesalahan yang sering terjadi seperti  sampel yang menggumpal sebanyak 1332 sampel (0,28%), volume sampel  yang tidak mencukupi sebanyak 328 sampel (0,06%), tanpa label sebanyak 24 sampel (0,005%), dan label yang salah sebanyak 22 sampel (0,005%). Dari data yang ada, kesalahan kerap terjadi pada tahap pra analitik (Narula, 2019). Volume sampel darah yang kurang dapat meningkatkan masa pembekuan.  Namun  dikarenakan  berbagai  sebab  dan  sulitnya  mendapatkan  spesimen, pengambilan darah tidak selalu mencapai volume yang diinginkan (Marson, 2018). Pengambilan sampel  harus  dilakukan  dengan  benar  sesuai  dengan  standar  operasional  prosedur  yang  ada (Riswanto,  2013).  Proteksi  volume  darah  pada  pasien  sering  menjadi  perhatian,  terutama  pada penderita  anemia,  bayi  baru  lahir,  dan  pengambilan  darah  pada  pasien  dengan  vena  kecil  juga dapat menyebabkan pengumpulan volume darah yang tidak mencukupi (Lippi, 2018).
Trombosit  merupakan  fragmen  atau  potongan-potongan  kecil  dari  sitoplasma megakariosit (Apriliani, 2016). . Fungsi utama trombosit adalah pembentuk sumbatan mekanis selama respon haemostati normal terhadap luka vascular (Hall, 2018; Sherwood, 2017). Hitung jumlah  trombosit  merupakan  salah  satu  pemeriksaan  yang  diperlukan  umtuk  memperkuat diagnosis,  pemantauan  hasil  terapi,  perjalanan  suatu  penyakit,  penentuan  prognosis  serta perkiraan berat atau tidaknya suatu penyakit (Sujud, dkk., 2015). Satuan hitung jumlah trombosit dapat  dinyatakan  dalam  sel/mm3,  sel/µL,  x  103  sel/ml,  x  106  sel/L.  satuan  yang  lebih  sering digunakan  dalam  hitung  jumlah  trombosit  adalah  sel/mm3  atau  sel/µL  (Kuman,  2019). Penghitungan dengan metode otomatis memiliki CV ≤ 4 % di sampel darah normal (Radheya, 2018).  Umumnya  rentang  trombosit  normal  adalah  sekitar  150.000-400.000/µL  atau  sekitar 250x109 /L (150- 400x109 /L)  (Sysmex, 2014 ; Kemenkes, 2015).
Pada  beberapa  pemeriksaan  hematologi  diperlukan  antikoagulan  untuk  mencegah membekunya  darah  di  luar  tubuh, Ethylene  Diamine  Tetraacetic  Acid (EDTA)  merupakan antikoagulan  yang  dianjurkan  untuk  pemeriksaan  hematologi  karena  tidak  mempengaruhi morfologi  dari  komponen  darah,  sehingga  baik  dalam  pemeriksaan  hematologi,  seperti pemeriksaan  hemoglobin,  hematokrit,  LED,  hitung  lekosit,  hitung  trombosit,  retikulosit,  dan lainnya.  Tiap  1  mg  EDTA  menghindari  membekunya  1  ml  darah  (Gandasoebrata  2013). K2EDTA merupakan antikoagulan EDTA yang dianjurkan oleh ICSH ( International Council for Standardization in Hematology ) dan NCCL ( National Comitte for Clinical Laboratory Standard ), jumlah K2EDTA serbuk digunakan 1mg dalam 1 mL darah (Nurrachmat, 2015 ; Nugraha, 2015).
Menurut  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Xu,  et  al  (2010)  didapatkan  bahwa  terjadi peningkatan nilai pada pengisian volume darah 0,5 ml dibandingkan dengan 4 ml pada K2EDTA dengan kapasitas tabung vacutainer 4 ml. Pengisian volume sampel darah 0,5 ml, 1 ml, dan 2 ml dan 4 ml pada tabung 4 ml mendapatkan terjadinya peningkatan palsu terhadap jumlah trombosit.
Sedangkan,  hal  tersebut  berbeda  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Deviani,  dkk. (2017), bahwa hasil rata-rata jumlah trombosit pada volume darah 1 mL sebesar 273.222 mm3 , pada volume darah 2 mL sebesar 256.655 mm3 dan pada volume darah 3 mL sebesar 233.111 mm3,  yang  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  jumlah  trombosit terhadap variasi volume darah dalam tabung vacutainer EDTA.
Pada penelitian ini, penulis ingin melakukan penelitian terhadap komponen lain, yaitu 3 mL, 2 mL, dan 1 mL dan antikoagulan K2EDTA dengan pemeriksaan hematologi yang diteliti adalah trombosit.

## Metode
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  observasional  analitik  dalam  bidang  pemeriksaan hematologi  dengan  rancangan  Cross  sectional.  Dengan  subjek  penelitian  pendonor  sukarela  di UTD  RSUD  Dr.  H.  Abdul  Moeloek  Bandar  Lampung  sebanyak  40  subjek  dengan  total  120 sampel  hematologi  yang  telah  memenuhi  kriteria  inklusi  (Laki-laki  &  Perempuan,  Usia  18-49 tahun, Tanda Vital dalam batas normal) dan eksklusi (Mengkonsumsi obat-obatan, mempunyai penyakit komorbid, terdiagnosa penyakit kronis). Penelitian dilakukan dari 23 November sampai dengan  15  Januari  2021.  Alat  yang  digunakan  untuk  mendukung  penelitian  berupa  hasil laboratorium  darah  lengkap  di  Unit  Transfusi  Darah  di  RSUD  Dr.  H  Abdul  Moeloek  Bandar Lampung. Pada penelitian ini menggunakan uji Analisisis bivariat dengan Uji One Way Anova. Untuk  menentukan  signifikasi  antara  data  yang  diobservasi  dengan  data  yang  di  harapkan dilakukan batas kemaknaan (p < 0,05), dimana dinyatakan memiliki hubungan yang bermakna apabila p< 0,05 dan dinyatakan tidak memiliki hubungan yang bermakna apabila p ˃ 0,05.

## Hasil Dan Pembahasan
Tabel 1. Distribusi Frekuensi Karakteristik Pendonor Berdasarkan Jenis Kelamin Jenis Kelamin Frekuensi Persentase (%) Laki-laki 20 50,0 Perempuan 20 50,0 Total 40 100,0 17-25 26-35 21 52,5 9 22,5 36-45 10 25,0 Total 40 100,0
Berdasarkan  tabel  1  di  atas  dapat  dilihat  bahwa  dari  40  subjek  penelitian  berdasarkan jenis  kelamin,  didapatkan  responden  laki-laki  sebanyak  20  orang  (50,0%)  dan  responden perempuan  sebanyak  20  orang  (50,0%).  Dapat  dilihat  distribusi  frekuensi  subjek  penelitian berdasarkan Usia. Responden didominasi dari usia 17 tahun sampai dengan 25 tahun  dengan 21 orang (52,5%).
Tabel 2 Hasil Pemeriksaan Jumlah Trombosit Pada Sampel Darah Keseluruhan Pendonor Volume Sampel Nilai Terendah Trombosit Nilai Tertinggi Trombosit Rerata Jumlah Trombosit 1 mL 184.000 504.000 311.700 2 mL 161.000 505.000 316.775 3 mL 86.000 506.000 316.350 Jenis Kelamin Volume Sampel Nilai Terendah Trombosit (mm 3 ) Nilai Tertinggi Trombosit (mm 3 ) Rerata Jumlah Trombosit (mm 3 ) Laki-laki 1 mL 184.000 377.000 279.000 2 mL 161.000 388.000 281.900 3 mL 86.000 363.000 279.050
Perempuan 1 mL 253.000 504.000 344.400 2 mL 237.000 505.000 351.650 3 mL 254.000 506.000 353.650
Berdasarkan  Tabel  2  diketahui  bahwa  dari  40  responden  yang  diteliti,  terlihat  bahwa pada  jumlah  trombosit  pendonor  menunjukkan  bahwa  dari  tiga  volume  sampel  yang  berbeda ditemukan hasil pemeriksaan terendah dan tertinggi pada volume sampel darah 3 ml yaitu sebesar 86.000 mm3 dan 506.000 mm3. Berdasarkan jenis kelamin, nilai rerata tertinggi laki-laki pada volume  sampel  2  mL  yaitu  281.900  mm3  dan  rerata  tertinggi  pada  perempuan  pada  volume sampel 3 mL yaitu 353.650 mm3. Menurut (Khasanah, 2016) bahwa pemeriksaan trombosit bisa diambil dari darah vena dan darah kapiler, namun pada pengambilan darah kapiler bisa terjadi kelemahan akibat pengenceran darah oleh cairan jaringan sehingga jumlahnya menurun.
Tabel 3
Hasil Pemeriksaan Jumlah Trombosit Pada Sampel Darah Berdasarkan Pengelompokan Usia
Menurut Depkes RI Rentang Usia Volume Sampel Nilai Terendah Jumlah Trombosit (mm 3 ) Nilai Terendah Jumlah Trombosit (mm 3 ) Rerata Jumlah Trombosit (mm 3 ) 17-25 1 mL 184.000 377.000 280.714 2 mL 161.000 388.000 283.857 3 mL 86.000 363.000 281.666 26-35 1 mL 273.000 504.000 381.666 2 mL 276.000 505.000 386.333 3 mL 293.000 506.000 389.888 36-45 1 mL 253.000 396.000 313.800 2 mL 237.000 402.000 323.300 3 mL 254.000 404.000 323.000
Berdasarkan  Tabel  5  diketahui  bahwa  pada  jumlah  trombosit  pendonor  berdasarkan rentang usia menunjukkan bahwa jumlah trombosit dalam darah tidak terlalu berpengaruh dengan pertambahan usia dengan nilai rerata teringgi pada rentang usia 26-35 tahun pada volume sampel darah 3 mL yaitu 389.888 mm3.
Tabel 4 Uji Normalitas Shapiro-Wilk Volume Sampel Darah 1mL, 2mL, dan 3mL P-Value Volume Sampel Darah 1 Ml 0,051 Volume Sampel Darah 2 Ml 0,559 Volume Sampel Darah 3 Ml 0,134
Setelah  dilakukan  uji  normalitas,  data  yang  ada  terdistribusi  normal  (p-value>0,05). Sehingga menggunakan Uji One Way Anova atau satu faktor dengan dilakukan Uji Homogenitas terlebih dahulu untuk menentukan varian pengukuran dan didapatkan nilai signifikan p = 0,932 (p-value<0,05)  maka  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  hasil  memiliki  varian  yang  sama. Dikarenakan  Uji  One  Way  Anova  bermakna  dan  memiliki  varian  yang  sama,  maka  dilakukan analisis  Post  Hoc  Bonferroni  untuk  mengetahui  perbedaan  yang  bermakna  antar  kelompok. Menurut  (Yusmaidi  et  al.,  2020)  bahwa  penggunaan  oxaliplatin  yang  merupakan  kemoterapi
berbasis  platina  memiliki  efek  samping berupa  toksisitas  hematologi  (myelosuppression)  salah satunya adalah jumlah trombosit.
Tabel 5 Uji One Way-Anova Volume Sampel Darah Perbedaan Rerata Standar Deviasi Interval Kepercayaan 95% Nilai p 1 mL 311.700 66752,970 290351,36 - 333048,64 0,939 2 ml 316.775 70762,690 294143,99 – 339406,01 3 mL 314.941 75612,558 292167,93 – 340532,07
Rerata jumlah trombosit pada volume sampel darah 1 mL 311.700 dengan standar deviasi 66752,970.  Rerata  jumlah  trombosit  pada volume  sampel  darah  2  mL 316.775  dengan  standar deviasi  70762,690.  Rerata  jumlah  trombosit  pada  volume  sampel  darah  3  mL  314.941  dengan standar deviasi 75612,558. Hasil dari Uji One Way-Anova, didapatkan nilai p = 0,939 (p-value >0,05)  maka  dapat  disimpulkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  pada  jumlah trombosit antar volume sampel darah. Menurut  (Syuhada et al., 2020) bahwa pengelolaan darah donor dan kualitas darah donor di lokasi dalam kondisi baik sehingga darah donor dapat diberikan kepada penerima, tanpa ada perubahan komponen yang berarti.
Tabel 6 Perbandingan Hasil Jumlah Trombosit Volume Sampel Darah Perbedaan Rerata Nilai p p-value 1 mL vs 2 mL -5075,000 1,000 >0,05 3 ml vs 1 mL 4650,000 1,000 >0,05 3 mL vs 2 mL -425,000 1,000 >0,05
Hasil  Uji  Analisis  Post  Hoc  Bonferroni  terhadap  hasil  hitung  jumlah  trombosit  dapat ditarik kesimpulan bahwa p = 1,000 (p-value<0,05) karena nilai signifikan lebih besar dari taraf signifikansi yang digunakan, sehingga H0 diterima dan Ha ditolak dan dapat ditarik kesimpulan bahwa tidak ada perbedaan hasil pemeriksaan hitung jumlah trombosit pada sampel darah volume 1 mL, 2 mL, dan 3 mL dengan tabung vacutainer K2EDTA dengan volume darah standar 3 mL. Menurut  (Arviananta  et  al.,  2020)  bahwa  pengambilan  darah,  eritrosit  donor  akan  mengalami kerusakan, setiap hari kelangsungan hidup eritrosit terus menurun karena penurunan kadar ATP (Adenosine Triphosphate), sehingga bila kadar ATP menurun maka terjadi hilangnya membran lipid, maka membran menjadi kaku setiap hari, dan bentuk cakram menjadi bulat (tanpa kutub pusat dan ukuran kecil), hal ini menyebabkan kalium keluar dan natrium masuk ke dalam sel.

## Simpulan Dan Saran
Bahwa  tidak  ada  perbandingan  yang  bermakna  dari  hasil  pemeriksaan  hitung  jumlah trombosit pada sampel darah 1 mL, 2 mL, dan 3 mL dengan tabung vacutainer K2EDTA dengan volume darah standar 3 mL.

## Ucapan Terimakasih
Ucapan Terimakasih ini disampaikan kepada pihak-pihak yang telah mendukung pelaksanaan penelitian.

## Daftar Rujukan
Apriliani,  T.  (2016).  Gambaran  hitung  jumlah  trombosit  dengan  antikoagulan  K3EDTA  10% volume 5, 10 dan 15 µl.
De  la  Salle,  B.  (2019).  Pre‐and  postanalytical  errors  in  haematology.  International  journal  of laboratory hematology, 41, 170-176. DOI: 10.1111/ijlh.13007.
Deviani, S. (2017). Perbedaan Variasi Volume Darah Dalam Tabung Vacutainer EDTA Terhadap Jumlah Trombosit (Doctoral dissertation, Universitas Muhammadiyah Semarang).
Gandasoebrata,  R.  (2013).  Penuntun  laboratorium  Klinik.  cetakan  keenambelas.  Jakarta:  Dian Rakyat.
Hall,  J.  E.,  &  Hall,  M.  E.  (2018).  Guyton  and  Hall  textbook  of  medical  physiology  e-Book. Elsevier Health Sciences.
Kemenkes RI. (2015). Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 91 Tahun 2015 tentang Standar Pelayanan Transfusi Darah. Berita Negara Republik Indonesia Tahun 2016 Nomor 36. Jakarta
Kuman,  M.  (2019).  Perbedaan  Jumlah  Eritrosit,  Leukosit  Dan  Trombosit  Pada  Pemberian Antikoagulan  Konvensional  dan  EDTA  Vacutainer.  (Doctoral  dissertation,  Poltekkes Kemenkes Kupang).
Arviananta, R., Syuhada, S., & Aditya, A. (2020). The difference in the number of erythrocytes between fresh and stored blood. Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada , 9 (2 SE-Articles). https://doi.org/10.35816/jiskh.v12i2.388
Khasanah, U. (2016). Perbedaan Hasil Pemeriksaan Hitung Jumlah Trombosit Pada Darah Vena Dan Darah Kapiler Dengan Metode Tabung. Skripsi .
Syuhada,  S.,  Aditya,  A.,  &  Candrawijaya,  I.  (2020).  Difference  between  Hematocrit  of  Fresh Blood and Save Blood (30 Days). Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada , 9 (2 SE-Articles). https://doi.org/10.35816/jiskh.v12i2.379 Yusmaidi,  Y.,  Rafie,  R.,  Nur,  M.,  &  Nabilah,  B.  (2020).  Derajat  Toksisitas  Trombosit  pada Penderita  Kanker  Kolorektal  yang  Mendapat  Kemoterapi  CapeOX. Jurnal  Ilmiah Kesehatan Sandi Husada , 11 (1), 313–320.
Lippi,  G.,  Von  Meyer,  A.,  Cadamuro,  J.,  &  Simundic,  A.  M.  (2019).  Blood  sample  quality. Diagnosis, 6(1), 25-31.
Marpiah, S. (2017). Pengaruh Penundaan Darah K3EDTA Terhadap Jumlah Trombosit Metode Automatic  Hematology  Analyzer  (Doctoral  dissertation,  Universitas  Muhammadiyah Semarang).
Marson, F. A. (2018). Perbedaan Teknik Pemasangan Tourniquet Terhadap Kadar Kalium Serum. Jurnal Kesehatan, 11(2), 91-98.
Mengko, R. (2013). Instrumen Laboratorium Klinik.
Narula, A., Yadav, S. K., Jahan, A., Verma, A., Katyal, A., Anand, P., ... & Singh, S. (2019). Pre- analytical error in a hematology laboratory: an avoidable cause of compromised quality in reporting. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM), 57(10), e262-e264.
Nugraha,  G.  (2015).  Panduan  Pemeriksaan  Laboratorium  Hematologi  Dasar.  CV  Trans  Info Medika. Jakarta.
Nurrachmat,  H.  (2005).  Perbedaan  Jumlah  Eritrosit,  Leukosit  Dan  Trombosit  Pada  Pemberian Antikoagulan Edta Konvensional Dengan Edta Vacutainer (Doctoral dissertation, Program Pascasarjana Universitas Diponegoro).
Radheya, I. P. (2018). Pengaruh Variasi Volume Darah Pada Tabung Vacutainer Tripotassium Ethylenediaminetetraacetate  (K3EDTA)  Terhadap  Jumlah  Trombosit  (Doctoral dissertation, Jurusan Analis Kesehatan).
Riswanto, (2013). Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. (Yogyakarta: Alfamedika dan Kanal Medika).
Sherwood, L. (2020). Fisiologi manusia dari sel ke sistem. Sujud, dkk. (2015). Perbedaan Jumlah Trombosit Pada Daerah EDTA yang Segera Diperiksa dan
Penundaan Selama 1 Jam Di Laboratorium RSJ Grhasia, Yogyakarta.
Sysmex. (2014). Automated Hematology Analyzer XP series XP-100 Instruction for Use. (Kobe: Sysmex Corporation).
Xu, M., Robbe, V. A., Jack, R. M., & Rutledge, J. C. (2010). Under‐filled blood collection tubes containing K2EDTA as anticoagulant are acceptable for automated complete blood counts, white  blood  cell  differential,  and  reticulocyte  count.  International  journal  of  laboratory hematology, 32(5), 491-497.