PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN GAHARU ( Aquilaria Microcarpa Baill.) TERHADAP WAKTU PERDARAHAN PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
Rakhmat Fauzi, Noor Cahaya, Hidayaturrahmah Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat
Email: noorcahaya@unlam.ac.id

## ABSTRAK
Daun gaharu ( Aquilaria microcarpa Baill.) memiliki kandungan senyawa flavonoid dan  tanin  yang  berpotensi  sebagai  penyembuhan  luka.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  membuktikan  pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol  daun A.  microcarpa terhadap waktu perdarahan tikus putih jantan yang diinduksi heparin. Dua puluh tikus jantan dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok I (kontrol negatif), II (kontrol positif),  III,  IV  dan  V    (ekstrak  etanol  daun A.  microcarpa dosis  75mg/KgBB, 100mg/KgBB dan 150mg/KgBB). Hewan uji diberi injeksi heparin selama 5 hari, kemudian diberi sediaan selama 6 hari dicatat waktu tiap 2 hari. Hasil penelitian menunjukkan  persentase  penurunan  waktu  perdarahan yaitu  41.74%;  74.74%; 52.09%; 95.86%; 24.36. Hasil statistik menunjukkan perbedaan nyata penurunan waktu perdarahan oleh karena itu dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun A. microcarpa berpengaruh terhadap waktu perdarahan pada tikus putih jantan yang diinduksi heparin.
Kata Kunci : ekstrak gaharu, Aquilaria microcarpa Baill, waktu perdarahan

## ABSTRACT
Gaharu leaves (Aquilaria microcarpa Baill.) contains of flavonoid compound and tanin which is potentially could heal the wounds. The objective of this research is to prove the effect of ethanol extract of A. microcarpa to bleeding time to the male rat of wistar strain which have been induced with heparin. Twenty rat strains wistar are divided into 5 groups. Group I (negative control), II (positive control), III, IV, V (ethanol extract of  A. microcarpa leaves dosage 75mg/KgBB, 100mg/KgBB and 150mg/KgBB respectively). The subject is given the heparin injection for 5 days, then given the preparat for 6 days and bleeding time are recorded within 2 days. The research result shows the of bleeding time deflation 41.74%; 74.74%; 52.09%; 95.86%; 24.36. The statistic result shows that there is a significant difference of the decrease percentage of bleeding, Oherefore, it can be concluded that the ethanol extract of A. microcarpa leaves bleeding time possesses of activity in decreasing of induced with heparin.
Keywords: gaharu extract, Aquilaria microcarpa Baill , bleeding time

## PENDAHULUAN
Luka merupakan kondisi kerusakan  bagian  tubuh  yang  terjadi pada  kulit  yang  ditandai  dengan adanya  jaringan  kulit  yang  terputus, robek, rusak oleh suatu sebab (Stevens et  al. ,  1999).  Perbaikan  dan penyembuhan luka merupakan proses penggantian  sel-sel  mati  dengan  sel- sel  yang  berbeda  dari  sel  asalnya (Tambayong, 2000). Proses pembekuan  darah  bertujuan  untuk mengatasi perdarahan yang berlebihan (Bakta, 2003). Luka yang menyebabkan perdarahan maka trombosit  akan  membentuk  agregat untuk  sumbat  hemostasis  awal  yang selanjutnya berfungsi untuk merangsang  pembentukan  thrombin untuk  proses  koagulasi  (Sabiston, 1995). Banyak  tumbuhan  herbal  yang terbukti mempunyai efek penyembuhan  luka  yang  dimana tanaman tersebut mengandung
senyawa flavonoid dan senyawa tanin.
Salah satu tanaman yang mengandung senyawa  flavonoid  dan  tanin  adalah daun  gaharu  ( Aquilaria  microcarpa
Baill.).  Penelitian  yang  dilakukan
Amalina  (2015)  diketahui  ekstrak
etanol daun A.
microcarpa
menunjukkan  aktivitas  antioksidan sangat  aktif.  Selain  itu  daun A. microcarpa berpotensi sebagai antidiabetes dengan mekanisme antioksidan yang dapat meningkatkan jumlah  pulau  Langerhans  pada  tikus yang terkena diabetes (Andrunganyan, 2015). Pada penderita diabetes, proses penyembuhan luka berlangsung lambat. Antioksidan sangat diperlukan untuk  penyembuhan  luka  karena kekurangan antioksidan dapat
menyebabkan  luka  sulit  sembuh (Youngson,  2005).  Adanya  aktivitas antioksidan  tersebut  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  untuk  melihat jumlah  trombosit,  waktu  perdarahan dan  waktu  pembekuan  darah  pada tikus putih jantan galur wistar.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  pemberian ekstrak etanol daun gaharu ( Aquilaria microcarpa Baill.)  terhadap  waktu perdarahan  pada  tikus  putih  jantan yang diinduksi heparin.

## METODE PENELITIAN
Alat  yang  digunakan  meliputi blender (Cosmos), pengayak, timbangan  analitik,  timbangan  tikus
(Precise ® ), perkolator, rotary evaporator  (Merck ® ) ,  pisau  bedah,
sonde oral, kandang tikus, stop watch , vortex , hotplate ( Maspion ® ) , restrainer , corong, gelas beker, statif,
Erlenmeyer 250 mL, cawan penguap, sudip, spuit injeksi (Onemed ® ), mortir, stamper dan staple.
Bahan yang digunakan meliputi  sampel  daun A. microcarpa , etanol  70%,  kertas  saring  Whatman, ammonia,  air,  asam  traneksamat
(Octagon Chemicals Limited) , heparin ( Inviclot ),  larutan NaCl, HCl, FeCl 3 ,
Na-CMC 1%, methanol, kertas saring, alumunium  foil,  NaOH,  gelatin  +
NaCl, reagen meyer , reagen dragendroff , Fecl 3, dan hewan
percobaan  tikus  putih  jantan  galur wistar  umur  2-3  bulan  dengan  berat 150-250 gram.
Penelitian  ini  menggunakan sampel  bagian  daun  tanaman  gaharu ( Aquillaria  microcarpa Baill.)  yang berasal dari tanaman budidaya gaharu di kabupaten Barito Timur, Kalimantan  Tengah  dan  dilakukan determinasi  tanaman  di  Pusat  Botani
Herbarium Bogoriense LIPI Cibinong, Bogor.
Serbuk  kering  sebanyak  130 gram diperkolasi dengan etanol 70%.
Hasil  ekstraksi  diuapakan  dengan
rotary evaporator .
Hewan  uji  dibagi  menjadi  5 kelompok  dengan  masing-masing kelompok  terdiri  4  hewan  uji. Kelompok I (kontrol negatif Na-CMC 1%), kelompok II (kontrol positif asam traneksamat),  kelompok  III  (ekstrak etanol  daun A.  microcarpa dosis
75mg/KgBB) kelompok IV V
(ekstrak  etanol  daun A.  microcarpa dosis 100mg/KgBB) .dan kelompok V (ekstrak  etanol  daun A.  microcarpa dosis 150mg/KgBB).
Pembuatan  luka  dengan  cara insisi  yaitu  dengan  pensayatan  pada ekor  tikus.  Pengamatan  waktu perdarahan stopwatch dinyalakan dan waktu  perdarahan  dinyatakan  mulai dari ekor tikus berdarah sampai tidak terjadi  lagi  perdarahan  (Chen et  al. , 2014).  ).  Setelah  disayat  ekor  tikus tersebut dimasukkan ke dalam larutan garam  (NaCl).  Tujuan  dimasukkan dalam  larutan  garam  (NaCl)  untuk mengurangi rasa sakit pada ekor tikus (Norhalifah, 2015).
Pemberian ekstrak etanol daun
A. microcarpa dilakukan selama 6 hari dengan  cara  melalui  mulut  tikus menggunakan sonde oral. Pengamatan dilakukan  tiap  2  hari  setelah pemberian  ekstrak  etanol  daun A. microcarpa.
Data  yang  digunakan  untuk analisis  statistik  adalah  lamanya perdarahan  pada  saat  pengukuran
dengan stopwatch pada hari ke-2, hari ke-4  setelah  pemberian  heparin,  dan hari  10,  12,  14  setelah  pemberian ekstrak  etanol  daun A.  microcarpa.
Data  dianalisis  normalitas  dan homogenitas  dan  dilanjutkan  dengan uji anova satu arah dengan signifikansi 95%.  Kemudian  dilihat  adanya perbedaan bermakna maka dilanjutkan uji tukey.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Skrining  fitokimia  dilakukan untuk  mengetahui  kandungan  yang ada dalam daun A. microcarpa . Hasil skrining dapat dilihat pada tabel I. Tabel  I.  Skrining  fitokimia  daun A. microcarpa No. Metabolit Sekunder Hasil 1. Alkaloid (-) 2. Flavonoid (+) 3. Tanin (+) Hasil penurunan waktu perdarahan  pada  tikus  putih  jantan setelah pemberian ekstrak etanol daun
A. microcarpa dilihat pada hari ke 10 (T1), ke-12 (T2) dan ke-14 (T3). Daya penurunan dapat dilihat pada Tabel II.
Tabel  II. Daya  penurunan  (%)  waktu perdarahan  setelah  perlakuan
terhadap waktu perdarahan setelah injeksi heparin Kelompok Daya penurunan waktu perdarahan (%) T1 T2 T3 I. Ekstrak  etanol  daun A. microcarpa 75 mg/KgBB II. Ekstrak  etanol  daun A. microcarpa 100 mg/KgBB III. Ekstrak  etanol  daun A. microcarpa 150 mg/KgBB
IV. Asam Traneksamat V. CMC 1% 70.56 73.93 44.39 86.61 60.32 41.60 91.57 77.44 74.89 29.39 52.09 95.86 24.36 74.74 41.74 Simplisia  daun A.  microcarpa didapatkan  dari  tanaman  budidaya  di Kalimantan Tengah. Hal ini dikarenakan untuk mendapatkan kualitas simplisia yang baik. Skrining fitokimia  didapatkan  hasil  positif untuk flavonoid dan tanin.  Simplisia daun A.  microcarpa dikeringkan dengan  cara  diangin-anginkan  pada suhu ruangan agar kandungan metabolit sekunder lebih maksimal.
Metode  ekstraksi  yang  dipilih adalah  metode  perkolasi. Perkolasi
dipilih dengan  alasan  memiliki beberapa kelebihan, diantaranya adalah tidak terjadi kejenuhan. Hal ini disebabkan  oleh  adanya  aliran  cairan penyari sehingga  pergantian  larutan
terus  terjadi  yang  pada  akhirnya membantu  meningkatkan  difusi  zat- zat yang terdapat di dalam perkolator (Raaman, 2006). Kondisi ini pula yang menyebabkan rendemen yang
diperoleh  melalui  metode  perkolasi lebih  banyak  (Perwita,  2011).  Hasil ekstraksi  menggunakan  metode  ini diperoleh ekstrak kental sebesar 24,92 gram dan diperoleh rendemen sebesar 19,16%.
Pembuatan  luka  dengan  cara insisi  yaitu  dengan  pensayatan  pada ekor  tikus.  Kelompok  ekstrak  etanol daun A. microcarpa mampu menurukan waktu perdarahan sebanding dengan asam traneksamat. Tabel II di atas memperlihatkan pada kelompok ekstrak etanol A. microcarpa dosis 100 mg/KgBB memiliki waktu yang
paling  cepat  dalam  menghentikan perdarahan  karena  berbeda  nyata mulai  hari  ke-12.  Hasil  analisis statistik  dilakukan  secara  parametrik dengan  uji  anova  satu  arah pada  T3 dimana  pada  semua  kelompok didapatkan nilai sig < 0,05 maka antar grup terdapat varian data yang berbeda secara  signifikan  dengan  nilai  sig sebesar 0.008
Ekstrak  etanol  daun A. microcarpa dapat menurunkan waktu
perdarahan  karena      mengandung metabolit  sekunder  berupa  flavonoid dan  tanin.  Flavonoid  dan  tanin  ini dapat menghentikan perdarahan dengan mekanisme menghambat produksi  prostaglandin  kemudian terjadi  proses  vasokontriksi  pada pembuluh  darah  sehingga  luka
0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 T0 Th T1 T2
T3 Kontrol Na-CMC Kontrol Asam Traneksamat
Dosis 75 mg/KgBB
Dosis 100 mg/KgBB
Dosis 150 mg/KgBB
* * *
T0 = waktu sebelum pemberian heparin Th = waktu sesudah pemberian heparin T1 = waktu perlakuan hari 10 T2 = waktu perlakuan hari 12 T3 = waktu perlakuan hari 14 Ni la i r at a- ra ta w ak tu p erd ara h an ( d et ik ) Gambar 1. Penurunan waktu perdarahan terhadap waktu pengamatan
semakin cepat tertutup (Salawu et al.,
2008; Dougnon et al., 2012).

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol daun A.microcarpa berpengaruh  terhadap penurunan  waktu  perdarahan  pada tikus  putih  jantan  galur  wistar  yang diinduksi heparin.

## DAFTAR PUSTAKA
Amalina,  Y.  2015. Penetapan  Kadar Flavonoid  Total  dan  Uji
Aktivitas  Antioksidan  Secara
In  Vitro  Ekstrak  Etanol  Daun
Gaharu (aquilaria microcarpa
baill.) .  Skripsi , Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru. Andrunganyan,  R.  R.  2015. Aktivitas Ekstrak  Etanol  Daun  Gaharu (Aquilaria  microcarpa  Baill.) Terhadap Tes Toleransi Glukosa  Oral,  Glikogen  Hati Dan  Histopatologi  Pankreas Tikus  Putih  Yang  Diinduksi Aloksan .  Skripsi,  Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru. Bakta, I. M. 2003. Hematologi Klinik Ringkas . Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Chen, H., M. Jin., Y. F. Wang., Y. Q. Wang., L. Meng., R. Li., J. P. Wang., L. Gao., Y. Kong & J- F. Wei. 2014. Effect of Toona microcarpa Harms Leaf Extract  on  the  Coagulation System . BioMed  Research International . (2014): 1-7. Dougnon, T. V., Klotoe, J. R., Edorh, PA., Segbo, J. M., Sodipo, O. A., Dougnon, T. J., Dandjesso. C., Loko, F & Dramane.  K.  2012. In  Vitro Hemostatic Activity Screening of Sap of Jatropha Multifida L.
(Euphorbiaceae) used in Traditional Medicine at Cotonou  (Benin). J  Phys Pharm Adv . 2 (6): 227-234. Norhalifah, 2015. Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Air  Ikan Haruan  (channa  striata)  asal
Kalimantan  Selatan  terhadap
Bleeding  Time  dan  Clotting
Time  secara  In  Vivo. Skripsi, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru. Perwita,  F.  A.  2011. Teknologi Ekstraksi Daun Ungu (Graptophyllum pictum) dalam  Ethanol  70%  dengan Metode Perkolasi . Tugas Akhir,  Universitas  Sebelas
Maret, Surakarta.
Raaman,  N.  2006. Phytochemical Techniques. New India Publishing Agency, India.
Sabiston.  1995. Buku  Ajar  Bedah , diterjemahkan  oleh  Petrus Andrianto.  Penerbit  Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Salawu, OA., Aliyu, M & Tijani, AY. 2008.  Haematological  studies on  the  ethanolic  stem  bark extract of Pterocarpus erinaceus poir  (fabaceae). African Journal of Biotechnology . 7 (9):  1212-
Stevens, P. J. M., F. Bordui & J. A. G.
Van  der  Weyde.  1999 .  Ilmu Keperawatan. Jilid  2  Edisi  2,
diterjemahkan  Monica  Ester. Penerbit  Buku  Kedokteran EGC, Jakarta.
Tambayong,  J.  2000. Patofisiologi Untuk  Keperawatan .  Penerbit Buku Kedokteran
EGC,
Jakarta.
Youngson,  R.  2005. Antioksidan:
Manfaat  Vitamin  C  &  E  bagi
Kesehatan. Penerbit  Arcan, Jakarta.