## JIUBJ
Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi, 22(3), Oktober 2022, 1458-1462 Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat universitas Batanghari Jambi ISSN 1411-8939 (Online), ISSN 2549-4236 (Print) DOI 10.33087/jiubj.v22i3.2268

## Daya Hambat Ekstrak Daun Mengkudu (Morinda citrifolia L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Bacillus cereus

## Afifah Izzatul Zahra, Yuziani, Mulyati Sri Rahayu
Fakultas Kedokteran Universitas Malikussaleh Correspondence email: afifah.180610084@mhs.unimal.ac.id, yuziani@unimal.ac.id, mulyatisrirahayu@unimal.ac.id
Abstrak. Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  adalah  tumbuhan  spesial  wilayah  tropis  termasuk  Indonesia,  yang  buah,  daun,  biji serta  akarnya  acapkali  digunakan  dalam  pengobatan  tradisional,  di  antaranya  menjadi  antibakteri.  Penelitian  ini  dilakukan bertujuan  mengetahui  zona  hambat  ekstrak  daun  mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  Uji  daya  hambat  dilakukan  sinkron  dengan metode Kirby-Bauer menggunakan 4 kali ulangan terhadap pertumbuhan Bacillus  cereus. Hasil penelitian  ini  didapatkan bahwa konsentrasi  25%  menghasilkan  rata-rata  zona  hambat  sebesar  9,075  mm,  konsentrasi  50%  menghasilkan  rata-rata  zona  hambat sebesar 8,650 mm, konsentrasi 75% menghasilkan rata-rata zona hambat sebesar 9,275 mm, konsentrasi 100% menghasilkan rata- rata  zona  hambat  sebesar  10,050  mm,  kontrol  positif  dengan  menggunakan  ciprofloxacin  menghasilkan  rata-rata  zona  hambat sebesar  30,475  mm  dan  kontrol  negatif  dengan  menggunakan  DMSO  menghasilkan  rata-rata  zona  hambat  sebesar  0,000  mm. Hasil  uji  banding  menggunakan  uji  statistik Kruskal-Wallis dengan  nilai p.  value sebesar  0,003  (p<0,005)  dan  hasil  uji Mann- Whitney memperlihatkan  terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antara  P2  dan  P4  dengan  nilai  0,042  (p<0,005).  Kesimpulan  yang didapatkan dari penelitian ini adalah ekstrak daun mengkudu memiliki zona hambat lemah terhadap pertumbuhan Bacillus cereus pada konsentrasi 100% sesuai dengan kriteria Greenwood.
Kata kunci: Antibakteri; Bacillus cereus; Daya Hambat; Ekstrak Daun Mengkudu
Abstract. Noni (Morinda citrifolia L.) is a plant typical of tropical regions including Indonesia,  whose fruits, leaves, seeds, and roots  are  often  used  in  traditional  medicine,  including  as  an  antibacterial.  This  research  was  conducted  to  determine  the inhibition zone of noni leaf extract (Morinda citrifolia L.). An inhibition test was carried out according to the Kirby-Bauer method with 4 replications on the growth of Bacillus cereus. The results of this  study showed that a concentration of 25% produced an average inhibition zone of 9.075 mm, a concentration of 50% produced an average inhibition zone of 8.650 mm, a concentration of  75%  produced  an  average  inhibition  zone  of  9.275  mm,  a  concentration  of  100%  produced  an  average  inhibition  zone  of 10,050 mm,  positive  control  using  ciprofloxacin  produced  an  average inhibition  zone of  30.475  mm and  negative control  using DMSO produced an average inhibition zone of 0.000 mm. The results of the comparative test using the Kruskal-Wallis statistical test  with a  p.  value  of  0.003  (p<0.005)  and  the  results of  the  Mann-Whitney  test  showed that there  was  a significant  difference between P2 and P4 with a value of 0.042 (p<0.005). The conclusion obtained from this study was that the noni leaf extract had a weak zone of inhibition on the growth of Bacillus cereus at a concentration of 100% according to Greenwood's criteria.
Keywords: Antibacterial; Bacillus cereus; Inhibition Effect; Noni Leaf Extract

## PENDAHULUAN
Insiden keracunan kuliner relatif acapkali terjadi pada  Indonesia.  dari  BPOM  RI  di  tahun  2011,  insiden Luar  Biasa  (KLB)  akibat  keracunan  kuliner  mencapai 128  masalah  berasal  25  provinsi  di  Indonesia.  Jumlah orang  yg  terpapar  mencapai  18.144  jiwa  dimana Attack Rate (AR)  mencapai  38,10%  (6.901  perkara)  dan Case Fatality  Rate (CFR)  mencapai  0,16%  (11  masalah).  di tahun  2012  kasus  keracunan  kuliner  pada  Indonesia sudah  mengalami  penurunan  mencapai  44%  asal  23 provinsi  dengan  jumlah  orang  yang  terpapar  sekitra 8.590 menggunakan AR sebanyak 37,66% (235 perkara) tetapi  jumlah  kematian  terus  meningkat  sebagai  0,58% (19  perkara).  Hal  ini  membagikan  bahwa  meskipun jumlah masalah cenderung mengalami penurunan namun angka  kematian  terus  semakin  tinggi,  sehingga  perkara keracunan  makanan  ini  merupakan  galat  satu  masalah asal  kesehatan  yang  perlu  ditangani  menggunakan  cara yang  sangat  serius.  (Pitriyanti  dkk,  2020).  Keracunan makanan pada umumnya disebabkan sel Bacillus cereus
yang  terkandung  didalam  makanan  dalam  jumlah  yang tinggi.  Keracunan  makanan  akan  timbul  apabila seseorang  menelan  makanan  atau  minuman  yang mengandung  bakteri  atau  spora  dan  kemudian  bakteri tersebut  akan  bereproduksi  dan  menghasilkan  toksin yang  berbahaya  di  dalam  usus  (Nabanan  dkk,  2015). Makanan  yang  berpotensi  memiliki  racun  disebabkan oleh  bakteri  Bacillus  cereus  memiliki  dua  jenis  toksin yang  berbeda  yaitu  jenis  emetik  yang  disebabkan  oleh nasi  goreng,  dan  juga  jenis  diare  yang  disebabkan  oleh hidangan  daging  atau  saus.  Gejala  yang  dapat  timbul dari  jenis  emetik  dapat  berupa  mual  muntah,  kram abdomen dan kadang-kadang swasirna dan diare. Gejala tersebut  akan  muncul  1-5  jam  setelah  mengkonsumsi makanan  yang  telah  terkontaminasi.  Sedangkan  pada jenis  diare  mempunyai  masa  inkubasi  yang  lebih  lama yaitu  selama  1-24  jam  dan  dapat  menimbulkan  gejala diare  hebat  disertai  nyeri  dan  kram  abdomen  tetapi muntah dan demam jarang terjadi (Jawetz, 2013). Strain pada  bakteri  Bacillus  cereus  lebih  bersifat  patogenik
Afifah  Izzatul  Zahra  et  al.,  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Bacillus cereus
sehingga  digolongkan  ke  dalam  bakteri  yang  dapat menyebabkan  intoksikasi  yang  dapat  ditularkan  melalui makanan (Nabanan dkk, 2015).
Pengobatan untuk infeksi bakteri Bacillus cereus adalah  dengan  pemberian  antibakteri  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  atau  mematikan  Bacillus cereus  yang  menginfeksi.  Tingginya  penggunaan antibakteri  secara  tidak  tepat  di  kalangan  masyarakat dapat  mengakibatkan  terjadinya  masalah  resistensi antibakteri  (Fauzziya  dkk,  2017).  Resistensi  terhadap antibakteri  semakin  meningkat  dan  menjadi  masalah kesehatan  di  seluruh  dunia.  Resistensi  antibakteri menyebabkan  angka  kematian  dan  biaya  kesehatan semakin  meningkat  (Morrison,  2020).  Tanaman  yang dimanfaatkan  sebagai  alternatif  adalah  tanaman  famili Rubiaceae  yaitu  tanaman  mengkudu  yang  dapat digunakan  sebagai  antibakteri  dan  obat  (Mahtuti  dan Ibaadillah, 2018). Tanaman mengkudu merupakan  salah satu  tanaman  obat  yang  cukup  banyak  ditemukan diseluruh  Indonesia.  Hampir  seluruh  bagian  dari tanaman  mengkudu  seperti  kulit  batang,  buah,  akar  dan daun  dapat  dimanfaatkan  untuk  pengobatan  berbagai penyakit  (Djuramang  dkk,  2018).  Mengkudu  banyak digunakan  sebagai  bahan  untuk  pengobatan  tradisional. Beberapa  khasiat  yang  terkandung  dalam  mengkudu anatara  lain  sebagai  antidepresan,  efek  kemoterapi,  anti mikroba, antioksidan, antidislipidemia, aktivitas hepatoprotektif  dan  efek  immunomodulator.  (Dandari dkk,  2017).  Manfaat  daun  mengkudu  selain  sebagai antibakteri dan obat, daun mengkudu juga dimanfaatkan untuk  kecantikan  dan  kesehatan  sebagai  sayuran  yang dikonsumsi  sehari-hari.  Daun  mengkudu  juga  dapat digunakan sebagai obat jerawat serta dapat meningkatkan  kekuatan  tulang  dan  pembersih  darah (Mahtuti dan Ibaadillah, 2018).
Daun  mengkudu  mengandung  senyawa  yang banyak  dilaporkan  memiliki  aktivitas  antibakteri. Senyawa yang terkandung didalam daun mengkudu yang memiliki  efek  antibakteri  yaitu  alkaloid,  saponin,  tanin, steroid,  flavonoid,  polifenol  dan  kuinon.  Senyawa tersebut  mampu  menghambat  berkembangnya  bakteri dalam  tubuh  (Erina  dkk,  2019).  Beberapa  penelitian telah membuktikan kemampuan daun mengkudu sebagai antibakteri.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  tentang  daya hambat  ekstrak  daun  mengkudu  guna  mengetahui pertumbuhan  bakteri  gram  positif  yaitu  di  bakteri Bacillus cereus.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  desain  penelitian eksperimental  laboratorik  dengan  rancangan  penelitian posttest  only  control  group  design.  Pada  penelitian  ini, sampel  yang  akan  digunakan  adalah  ekstrak  daun mengkudu,  masing-masing  dibuat  4  seri  konsentrasi (25%,  50%,  75%  dan  100%),  ciprofloxacin  digunakan sebagai  kontrol  positif,  dan  Dimethylsulfoxide  (DMSO) sebagai kontrol negatif.

## HASIL

## Tabel 1
Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Mengkudu Metabolit Sekunder Pereaksi Hasil Alkaloid Dragendroff; Bouhardat; Meyer + + + Flavonoid Serbuk Mg + Amil Alkohol + HCL P + Glikosida Molish + H 2 SO 4 + Saponin Air panas/dikocok + Tanin FeCl 3 + Triterpen/Steroid Lieberman-Bourchat +
Sumber: data olahan

## Tabel 2
Hasil Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Daun Mengkudu terhadap Bakteri Bacillus cereus Diameter Zona
Hambat (dalam satuan mm) Pengulangan P1 P2 P3 P4 K (+) K (-) I 9,6 9,9 9,7 10,1 29,7 0 II 9,3 8,1 9,3 10,5 32,2 0 III 7,8 8,3 7,9 9,2 30,7 0 IV 9,6 8,3 10,2 10,4 29,3 0 Rata-rata 9,075 8,650 9,275 10,050 30,475 0

## Sumber: data olahan
Tabel  2  menjelaskan  bahwa  data  diameter  zona hambat  yang  diperoleh  dari  hasil  penelitian  yang dilakukan melalui uji normalitas menggunakan Shapiro- Wilk dan  uji  homogenitas  dengan  menggunakan  uji Levene .  Tabel  3  menjelaskan  bahwa  hasil  uji  tersebut didapatkan  data  tidak  berdistribusi  normal  dan  varians data  homogen.  Tabel  4  menjelaskan  uji  beda menggunakan uji non parametrik Kruskal- Wallis karena data  tidak  berdistribusi  normal.  Sedangkan  Tabel  5 Mann-  Whitney untuk  mengetahui  kelompok  yang berbeda bermakna. Hasil uji Mann-Whitney menunjukkan  bahwa  terdapat  adanya  perbedaan  yang bermakna antara P2 dengan P4 dimana p<0,05 (0,042).
Tabel 3 Hasil Uji Normalitas dan Homogenitas Perlakuan Uji Normalitas Uji Homogenitas P1 0, 034 * P2 0,022 * P3 0,576 0, 648 P4 0,218 K(+) 0,602
* tidak signifikan p<0,05
Sumber: data olahan
Afifah  Izzatul  Zahra  et  al.,  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Bacillus cereus
Tabel 4 Hasil Uji Kruskal- Wallis Perlakuan Rata-rata Standar deviasi p. value KN 0,000 0,000 P1 9,075 0,861 P2 8,650 0,838 P3 9,275 0,987 0,003 P4 10,050 0,591 KP 30,475 1,291 Sumber: data olahan Tabel 5 Nilai p Pada Uji Mann- Whitney Tiap Konsentrasi Konsentrasi KN KP P1 P2 P3 P4 KN - 0,014* 0,013* 0,013* 0,014* 0,014* KP - 0,020* 0,020* 0,021* 0,021* P1 - 0,770 0,465 0,146 P2 - 0.561 0,042* P3 - 0,248 K4 - * Ada perbedaan bermakna (p<0,05)

## Sumber: data olahan
Hasil dari uji efektivitas ekstrak daun mengkudu dengan  menggunakan  metode  difusi  menunjukkan bahwa  konsentrasi  100%  terdapat  daya  hambat pertumbuhan  bakteri Bacillus  cereus dengan  zona hambat  sebesar  10,05  mm  dan  menurut  klasifikasi Greenwood  termasuk  kategori  lemah,  sedangkan  pada konsentrasi  25%,  50%  dan  75%  daya  hambat  tidak terlihat  pertumbuhannya  pada  bakteri Bacillus  cereus , hal  ini  terbukti  dari  terbentuknya  diameter  zona  hambat yang  kurang  dari  10  mm.  Pada  penelitian  uji  daya hambat ekstrak daun mengkudu terhadap berkembangnya  bakteri Bacillus  cereus terlihat  jelas bahwa  zona  hambat  yang  terbentuk  didasarkan  pada penurunan  di  konsentrasi  ekstrak  lebih  tinggi.  Biasanya diameter  zona  hambat  semakin  tinggi  seiring  dengan meningkatnya  konsentrasi  ekstrak.  tapi,  pada  penelitian ini  terjadi  berbanding  terbalik,  yang  mana  terjadi penurunan  luas  zona  hambat  di  konsentrasi  50%. Diameter zona hambat tidak selalu meningkat sebanding dengan peningkatan pada konsentrasi terkait  antibakteri, hal ini dapat muncul disebabkan adanya disparitas dalam kecepatan difusi senyawa antibakteri pada media supaya konsentrasi dan jenis senyawa antibakteri yang memiliki perbedaan jua menunjukkan diameter zona hambat yang tidak  selaras  pada  waktu  yang  lama  secara  eksklusif (Prasiska,  2019).  Rendahnya  daya  hambat  ekstrak  daun mengkudu yang dihasilkan dapat juga disebabkan karena bahan  aktif  antimikroba  yang  terdapat  didalam  daun mengkudu  belum  sempurna  terisolasi  melalui  cara pembuatannya  sehingga  membuat  daya  hambat  yang terbentuk  akan  rendah.  Nilai  hambatan  yang  terbentuk dipengaruhi  oleh  struktur Bacillus  cereus . Bacillus cereus merupakan bakteri gram positif yang mempunyai lapisan  peptidoglikan  yang  terdapat  pada  dinding  sel yang  lebih  tebal  dari  bakteri  gram  negatif,  sehingga
menghasilkan struktur yang kaku. Adanya peptidoglikan pada bakteri gram positif membuat senyawa antimikroba agak  berat  untuk  menembus  dinding  sel  bakteri  gram positif daripada bakteri gram negatif (Afrina, 2018).
Daya  hambat  konsentrasi  ekstrak  25%,  50%, 75%  dan  100%  masih  dibawah  nilai  daya  hambat ciprofloxacin  sebagai  kontrol  positif.  Ciprofloxacin membentuk daya hambat terbesar dari seluruh kelompok perlakuan.  Pemilihan  ciprofloxacin  sebagai  kontrol positif  dikarenakan  ciprofloxacin  merupakan  antibiotik golongan  fluoroquinolone  yang  memiliki  aktivitas sangat baik terhadap bakteri gram positif seperti Bacillus cereus .  Berdasarkan Clinical  Laboratory  Standards Institute (CLSI)  2018  ciprofloxacin  dikategorikan sensitif  apabila  terbentuk  zona  hambat  ≥21  mm, intermediate  apabila  terbentuk  zona  hambat  16-20mm dan resistensi apabila terbentuk ≤15mm. Hasil penelitian ini didapatkan bahwa zona hambat ciprofloxacin mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri Bacillus  cereus dengan diameter zona hambat ≥21 mm sehingga bakteri ini memiliki sensitivitas terhadap antibiotik ciprofloxacin  yang  digunakan.  Ciprofloxacin  adalah salah  satu  dari  antiobiotik  kelas  quinolone.  Antibiotik ciprofloxacin  bekerja  dengan  cara  menghentikan perkembangan bakteri atau bakteriostatik. Cara bekerjanya  Ciprofloxacin  adalah  dengan  menggunakan hambatan pada mekanisme kerja yang umum pada enzim DNA girase yang berperan dalam pembelahan sel bakteri (Muslim, 2020).
Dimethylsulfoxide  ( DMSO) adalah  kontrol negatif yang di pakai dalam eksperimen ini, dikarenakan dapat  mengontrol  secara  negatif  melalui  proses  yang sama  dengan  pelarut  yang  di  pakai  sebagai  bahan pencair  dari  bahan  yang  diuji.  Penelitian  ini  bertujuaan untuk  membandingkan  antara  penelitian  yang  lain, bahwa  pelarut  yang  digunakan  sebagai  pencair  tidak terlihat aktivitas antibakteri terhadap senyawa yang akan diuji. Hasil zona hambat DMSO terhadap perkembangan bakteri Bacillus  cereus adalah  0  (nol)  atau  tidak membentuk  zona  hamba.  Dengan  demikian,  dapat disimpulkan bahwa DMSO yang di pakai sebagai bahan kontrol  negatif  tidak  dapat  memberikan  pengaruh  pada hasil  uji  antibakteri  (Utomo,  2018).  Hasil  skrining fitokimia secara kualitatif pada penelitian ini, menemukan bahwa ekstrak daun mengkudu mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  glikosida, saponin,  tanin,  Triterpen/steroid.  Senyawa  metabolit sekunder  memberikan  efek  antibakteri  sehingga  adanya zona  hambat  terhadap  pertumbuhan  bakteri.  Identifikasi senyawa flavonoid ditandai dengan terjadinya perubahan warna  jingga.  Flavonoid  yang  terkandung  didalam  daun mengkudu  dapat  menyebabkan  kerusakan  pada  struktur protein yang terdapat didalam dinding sitoplasma bakteri dengan  cara  mengubah  sifat  fisik  dan  kimiawi sitoplasma  yang  didalamnya  mengandung  protein  dan dapat  mendenaturasi  beberapa  dinding  sel  bakteri, sehingga  dapat  merusak  pembentukan  komponen
Afifah  Izzatul  Zahra  et  al.,  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Bacillus cereus
peptidoglikan  pada  sel  bakteri  dan  dapat  juga menyebabkan lapisan dinding sel bakteri tidak berbentuk secara sempurna, sehingga dapat memunculkan kematian pada sel tersebut (Afrina, 2018).
Identifikasi  senyawa  saponin  ditandai  dengan terbentuknya  busa.  Secara  bahasa,  Saponin  berasal  dari bahasa  latin  yang  berarti Sapo.  Sapo sendiri  bermakna sabun,  disebabkan  beberapa  sifatnya  dapat  menyerupai sabun.  Saponin  dapat  mengganggu  permeabilitas memberan  sel  bakteri,  sehingga  pada  akhirnya  dapat memunculkan  kerusakan  pada  membrane  sel  dan menyebabkan keluarnya berbagai komponen yang sangat penting yang terdapat didalam sel bakteri seperti protein, nukleotida  dan  asam  nukleat  (Afiff,  2017).  Identifikasi senyawa  tanin  ditandai  dengan  timbulnya  warna  hijau kehitaman.  Senyawa  tanin  yang  terkandung  didalam daun  mengkudu  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang berhubungan  dengan  kemampuan  untuk  menginaktifkan adhesin  sel  mikroba  juga  menginaktifkan  enzim  dan dapat  juga  mengganggu transport protein  pada  lapisan dalam  sel.  Identifikasi  senyawa  glikosida  ditandai dengan  terbentuknya  cincin  pada  batas  kedua  cairan. Glikosida  yang  terkandung  didalam  ekstrak  daun mengkudu  merupakan  metabolit  sekunder  yang  dapat berfungsi  sebagai  pengaturan  struktural  dan  bersifat sebagai antibakteri (Trisia, 2018)
Identifikasi  senyawa  triterpen/steroid  ditandai dengan  timbulnya  warna  biru  kehijauan  pada  cawan. Mekanisme  kerja  senyawa  triterpen/steroid  adalah dengan  cara  beraksi  dengan  porin  pada  membrane  luar dinding  sel  bakteri,  sehingga  pada  akhirnya  lapisan dinding sel bakteri tidak terbentuk secara utuh dan dapat menyebabkan  kematian  pada  sel  tersebut.  Identifikasi senyawa  alkaloid  ditandai  dengan  timbulnya  endapan yang menggumpal pada tabung  I,  endapan  warna coklat sampai  hitam  pada  tabung  II  dan  terbentuk  endapan warna  merah  atau  jingga  pada  tabung  III.  Senyawa alkaloid  yang  terkandung  didalam  daun  mengkudu bekerja  dengan  proses  merusak  komponen  susunan  dari peptidoglikan  yang  terletak  pada  sel  bakteri,  sehingga pada  akhirnya  lapisan  dinding  sel  bakteri  tersebut  tidak bisa berbentuk secara sempurna, dengan demikian dapat menimbulkan kematian pada sel tersebut (Afiff, 2017)
Pertumbuhan tanaman mengkudu dapat dipengaruhi oleh faktor-faktor yang tidak dapat dikontrol seperti  penyiraman  tanaman,  pemberian  pupuk  dan pencahayaan sehingga faktor tersebut akan mempengaruhi  jumlah  zat  antibakteri  dan  senyawa fitokimia  yang  terdapat  pada  sampel  (Cowan,  1999). Terdapat  beberapa  faktor  yang  lain,  sehingga  dapat memberikan sedikit pengaruh, seperti faktor lingkungan, yang  mana  tempat  tanaman  itu  tumbuh,  dimana  lokasi tanaman  yang  berbeda  akan  menghasilkan  kandungan senyawa  metabolit  yang  berbeda  pula,  sehingga  pada akhirnya  aktivitas  yang  dimiliki  juga  akan  berbeda. Selain  itu,  unsur  zat  hara  pada  tanah  dan  juga  sinar matahari dapat mempengaruhi tingkat metabolit
sekunder.  Paparan  sinar  matahari  yang  diperoleh  oleh tanaman  dapat  memberikan  pertolongan  pada  proses produksi  metabolit  sekunder,  namun  apabila  paparan sinar  matahari  yang  didapatkan  agak  berlebihan  maka akan  menghasilkan  produksi  metabolit  sekunder menurun  dan  apabila  terjadi  kekurangan  unsur  zat  hara dalam  tanah  juga  akan  berpengaruh  terhadap  kualitas dan  kuantitas  metabolit  sekunder  tersebut  (Budifaka, 2017).
Daun mengkudu yang digunakan pada penelitian ini  merupakan  tanaman  yang  ditanam  didepan perkarangan  rumah.  Berdasarkan  hasil  wawancara pemilik  tanaman  tersebut  bahwa  tanaman  mengkudu dimulai dari pembibitan tetapi tidak diberikan pupuk dan tidak  ada  penyiraman  khusus  pada  tanaman  tersebut, melainkan  hanya mengandalkan  air  hujan serta tanaman tersebut  terpapar  langsung  dengan  sinar  matahari sehingga menyebabkan sedikitnya jumlah zat antibakteri dan  senyawa  fitokimia  yang  terkandung  di  dalam  daun mengkudu.  Penelitian  ini  berdasarkan  hasil  kajian  dari daun  mengkudu  yang  dipanen  pada  sore  hari,  daun kemudian  di  bawa  ke  laboratorium  pada  keesokan  hari, sehingga  daun  mengkudu  tidak  langsung  di  olah  dan menghilangkan  naturalitas  dari  aktivitas  biologis  yang ada  pada  daun  tersebut.  Sampel  daun  yang  digunakan pada penelitian ini merupakan daun segar yang berwarna hijau  gelap  yang  tidak  terlalu  tua.  Tanaman  mengkudu saat  pengambilan  dalam  keadaan  berbuah  dengan  usia tanaman yang dijadikan sampel berusia ± 2,5 tahun.
Hasil  dari  penelitian  ini  juga  tidak  jauh  berbeda dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  Radhika Elsavira  (2017)  tentang  uji  daya  hambat  ekstrak  daun mengkudu ( Morinda citrifolia L.) terhadap pertumbuhan bakteri  gram  positif  seperti Staphylococcous  aureu dengan variasi konsentrasi 25%, 50% dan 75% diperoleh dengan  hasil  rata-rata  diameter  zona  hambat  ekstrak daun  mengkudu  sebesar  6,35  mm,  6,73  dan  6,86  mm, yang  menunjukkan  bahwa  zona  hambat  yang  terbentuk dalam  kategori  tidak  efektif  (Erina,  2019).  Ada  juga penelitian  lainnya  yang  dilakukan  oleh  Nirawati  (2016) tentang  daya  hambat  ekstrak  daun  mengkudu  ( Morinda citrifolia L.)  terhadap  pertumbuhan  bakteri E.  coli menggunakan  5  perlakuan  ekstrak  yaitu  30%,  40%, 50%, 60% dan 70% dengan diameter zona hambat yang sangat  besar  yaitu  pada  konsentrasi  70%  dengan diameter  zona  hambat  sebesar  10,3  mm  dan  termasuk kedalam  kategori  lemah  (Cut,  2016).  Kedua  penelitian diatas  menggambarkan  bahwa  ekstrak  daun  mengkudu ( Morinda  citrifolia L.)  menghasilkan  zona  hambat seiring  dengan  bertingkatnya  konsentrasi  pada  ekstrak yang  diberikan  pada  saat  pengujian.  Penelitian  diatas bisa  juga  menjelaskan  bahwa  ekstrak  daun  mengkudu mempunyai kemampuan yang berbeda dalam menghambat  perkembangan  bakteri  gram  negatif maupun positif.
Afifah  Izzatul  Zahra  et  al.,  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Bacillus cereus

## SIMPULAN
Berdasarkan  dari  hasil  uji  efektivitas  ekstrak daun  mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  dengan menggunakan  metode  difusi  menunjukkan  bahwa konsentrasi  100%  terdapat  daya  hambat  pertumbuhan bakteri Bacillus  cereus dengan  zona  hambat  sebesar 10,05 mm dan menurut klasifikasi Greenwood termasuk kategori  lemah,  sedangkan  pada  konsentrasi  25%,  50% dan 75% tidak memiliki daya hambat pada perkembangan  bakteri Bacillus  cereus ,  hasil  ini  dapat dibuktikan  dengan  terbentuknya  diameter  zona  hambat yang minus dari 10 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
Afrina,  D.  F  dan  R.  2018,  Pemberian  ekstrak  daun mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  terhadap jumlah  total  cemaran  bakteri  pada  daging  sapi. Jimvet . 2(4), 460–467.
Afiff  F.,  Amilah  S.  2017,  Efektivitas  Ekstrak  Daun Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  Dan  Daun Sirih  Merah  ( Piper  crocatum  Ruiz & Pav ) Terhadap Zona Hambat Pertumbuhan Staphylococcus aureus . 10(1), 12–16.
Budifaka  M.  2014,  Profil  Fitokimia  dan  Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat di Sulawesi Tenggara Terhadap  Bakteri Salmonella  typhi YCTC.  564, 71–73.
Cowan  MM.  1999,  Plant  products  as  antimicrobial agents. Clinical  Microbiologi  Reviews .  12(4),
564–582.
Cut N. 2016, Uji Daya Hambat Ekstrak Daun dan Buah Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  terhadap Pertumbuhan Bakteri Escericia coli . Bioeksperimen Jurnal Penelitian Biologi . 106(1), 6465–6489.
Djuramang  RR  IR,  Retnowati  Y,  Bialangi  N.  2018, Pengaruh  Ekstrak  Buah  Mengkudu  ( Morinda citrifolia L.) Terhadap Pertumbuhan
Staphylococcus Aureus . 2(2), 62–68.
Dandari  DS,  Nahda  NA,  Dian  AP.  2017,  Formulasi Ekstrak Buah Mengkudu  ( Morinda citrifolia L.) dalam  Bentuk  Sediaan  Transdermal  Liposome Cream. Prosidinga  Seminar  Nasional  Biology Life Gowa . 9-25.
Erina,  Rinidar,  Armansyah  T,  Erwin,  Rusli,  Elsavira  R. 2019,  Uji  daya  hambat  ekstrak  etanol  daun mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  terhadap pertumbuhan . Jimvet . 3(3), 161–9.
Fauzziya  R,  Nurani  L,  Sulistyani  N.  2017,  Penelusuran Senyawa  Aktif  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Cabai Rawit  ( Capsicum  frutescens L.)  terhadap Klebsiella pneumoniae dan Mekanisme Kebocoran Sel., 166–174. Jawetz M & A. 2013, Mikrobiologi Kedokteran . 25th ed. Jakarta: Salemba Medika, 214–224 Morrison  L,  Zembower  TR.  2020,  Antimicrobial Resistance. Gastrointestinal  Endoscopy  Clinical
North America . 30(4), 619–635.
Mahtuti  EY,  Ibaadillah  AA.  2018,  Ekstrak  Mengkudu ( Morinda  citrifolia L.)  Sebagai  Antimicroba Terhadap Streptococcus  viridans Secara  In Vitro. Journal  Nurshing  Care  Biomoleculare . 2(2), 119.
Muslim  Z,  Novrianti  A,  Irnameria  D.  2020,  Resistance Test  Of  Bacterial  Causes  Of  Urinary  Tract Infection Against Ciprofloxacin And Ceftriaxone  Antibiotics. Jurnal  Teknologi  dan
Seni Kesehatan , 11(2), 203–212.
Nabanan  E.  2015,  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Etanol Daun  Kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  Terhadap Pertumbuhan Baketri Bacillus Cereus . 3–8. Pitriyanti  L,  Anak  Agung  Sagung  Sawitri,  I  Ketut  Gita, 2020, Outbreak Investigation of Food
Intoxication  of  Finger  Candy  (Case  Study  At Elementary School in Denpasar Bali, Indonesia).
Jurnal Kesehatan , 13(1), 1–10.
Prasiska YS. 2019, Uji Daya Hambat Kombinasi Ekstrak Buah  dan  Daun  Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli . Bioeksperimen Jurnal Penelitian Biologi . Trisia  A,  Philyria  R,  Toemon  AN.  2018,  Antibacterial Activity Test of Ethanol Extract from Kalanduyung Leaf ( Guazuma ulmifolia Lam.) on Staphylococcus  aureus Growth  with  Difussion Method  ( Kirby-Bauer ).  Anterior  J  [Internet].
17(2), 136–143.
Utomo  SB,  Fujiyanti  M,  Lestari  WP,  Mulyani  S.  2018, Antibacterial  Activity  Test  of  the  C-4- methoxyphenylcalix[4]resorcinarene  Compound Modified  by  Hexadecyl  trimethyl  ammonium- Bromide  against Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli Bacteria. JKPK  (Jurnal  Kimia dan Pendidikan Kimia . 3(3), 201.