PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## EFFECT OF GIVING CENTELLA (Centella asiatica) (L) Urb) LEAVES EXTRACT OINTMENT ON WOUND HEALING OF MALE WHITE RATS (Rattus norvegicus)
PENGARUH PEMBERIAN SALEP EKSTRAK DAUN PEGAGAN ( Centella asiatica) (L.) Urb. TERHADAP PENYEMBUHAN LUKA SAYAT  TIKUS PUTIH JANTAN
(Rattus norvegicus)
Debby E. Galomat 1)* , Edwin de Queljoe 1) , Olvie S. Datu 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *debbygalomat@gmail.com

## ABSTRACT
Centella  asiatica  is  a  plant  used  by  the  community  to  treat  wounds,  gotu  kola  contains  active compounds  of  saponins,  and  triterpenoids  that  can  heal  wounds  and  as  anti-inflammatory agents. This study aims to determine the effect of giving Centella asiatica leaf extract ointment on wound healing in male white rats  (Rattus norvegicus). The test animals were divided into 5 groups, each group consisting of 3 rats (ointment base, povidone iodine ointment 10%,Centella asiatica leaf ointment 8%, 16% and 24%). All rats were injured on the back 2 cm long and 0.2 cm  deep.  The  wound  is  smeared  twice  a  day  with  Centella  asiatica  leaf  ointment.  Wound observation was carried out every day (days 1 to 14). The mean of wound healing in group I was 9.6 days, group II was 8.6 days, group III was 8.3 days, group IV was 7.6 days and group V was 11 days. The results of statistical analysis using the ANOVA method  (α = <0.05) showed that there was no significant difference between each treatment group.
Keywords : Centella  asiatica  leaves (Centella  asiatica) ( L.)  Urb,  Wound  healing  time, Ointment.

## ABSTRAK
Pegagan merupakan  tanaman  yang  digunakan  masyarakat  untuk  mengobati  luka,  pegagan mengandung  senyawa  aktif  saponin,  dan  triterpenoid  yang  dapat  menyembuhkan  luka  dan sebagai  agen  antiinflamasi.  Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  efek  pemberian  salep  ekstrak daun  pegagan  terhadap  penyembuhan  luka  sayat  pada  tikus  putih  jantan (Rattus  norvegicus) . Hewan uji dibagi menjadi 5 kelompok masing-masing setiap kelompok terdiri dari 3 ekor tikus (basis salep, salep povidone iodine 10%, salep ekstrak daun pegagan 8%, 16% dan 24%). Semua tikus dilukai punggungnya sepanjang 2 cm dan kedalaman 0.2 cm.  Luka diolesi dua kali sehari dengan salep ekstrak daun pegagan. Pengamatan luka dilakukan setiap hari (hari ke-1 sampai ke- 14). Rerata penyembuhan luka sayat pada kelompok I 9,6 hari, kelompok II 8,6 hari, kelompok III  8,3 hari, kelompok IV 7,6 hari dan kelompok V 11 hari. Hasil analisa statistik dengan metode ANOVA  (α  =  <0,05)  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  antara  setiap kelompok perlakuan..
Kata  kunci :  Daun  pegagan (Centella  asiatica) ( L.)  Urb ,  Waktu  penyembuhan  luka,  Salep.

## PENDAHULUAN
Luka merupakan suatu keadaan dimana terdapat jaringan tubuh yang mengalami  kerusakan  akibat  benda  tajam,  zat kimia, gigitan hewan, sengatan listrik, dan lain sebagainya  (Puspitasari,  2013).  luka  sayat merupakan  suatu  kerusakan  yang  terjadi  pada jaringan  kulit  akibat  trauma  benda  tajam seperti  pisau,  silet,  kampak  tajam,  maupun pedang. Ketika jaringan tubuh mengalami luka maka terdapat beberapa efek yang ditimbulkan seperti  pendarahan  dan  pembekuan  darah, hilangnya  seluruh  atau  sebagian  fungsi  organ, kontaminasi  bakteri,  respon  stres  simpatis, serta kematian sel (Zahriana, 2017).
Luka  adalah  masalah  yang  dianggap ringan  dan  sering  dialami  setiap  orang. Padahal  luka  terbuka  jika  tidak  diobati berpotensi akan mengakibatkan infeksi (Dorland, 2006). Oleh karena itu, penyembuhan  luka  sangat  penting  untuk mencegah resiko terjadinya infeksi yang dapat membuat  luka  menjadi  parah  dan  sulit  untuk disembuhkan.
Inflamasi  merupakan  suatu  dasar respon  fisiologis  tubuh  pada  jaringan  akibat trauma,  infeksi,  luka  ataupun  menghilangkan mikroorganisme patogen yang berbahaya yang merupakan  penyebab  infeksi  pada  luka (Nathan,  2002)  Walaupun  proses  inflamasi dibutuhkan  untuk  penyembuhan  luka,  tetapi inflamasi  dapat  menimbulkan  efek  yang  tidak nyaman pada tubuh diperlukannya
penyembuhan yang cepat untuk menghilangkan  rasa  nyeri  ataupun  sakit  pada luka saat terjadinya fase inflamasi. Pegagan mengandung
beberapa senyawa  saponin,  termasuk  asiaticoside,  asam asiatat,  dan  madecassoside  yang  memacu produksi kolagen I, thankunside, isothankunside, brahmoside, brahmicacid, madasiaticacid, meso-inosetol, centellose, carotenoids,  garam  kalium,  natrium,  kalsium, besi, fosfor,  vellarine, tannin,  mucilago,  resin, pektin,  gula,  vitamin  B,  sedikit  vitamin  C, minyak atsitri, kalsium oksalat, dan amygdalin.  Pegagan  bersifat  sebagai  anti- infeksi, antilepra, antisifilis, dan revitalisasi sel kulit.  Diduga  glikosida  triterpenoida  yang disebut  asiaticoside  merupakan  antilepra  dan penyembuh luka (Winarto dan Surbakti, 2003; Permadi, 2008)
Saponin  merupakan  senyawa  yang dapat  memacu  pembentukan  kolagen,  yaitu
protein  struktur,  yang  berperan  dalam  proses penyembuhan  luka.  Senyawa  saponinpun berperan  sebagai  surfactantagent  yang  kuat seperti  sabun,  karena  dapat  menurunkan tegangan  permukaan  antar  sel.  Saponin  yang diadsorpsi pada permukaan sel akan meningkatkan permeabilitas membran, sehingga bahan-bahan esensial yang dibutuhkan  oleh  bakteri  untuk  hidup  menjadi hilang  dan  dapat  menyebabkan  kematian terhadap sel bakteri (Ayu, 2012).
Penelitian  oleh  (Artawan,  IK  dkk,
2020)  bahwa  ekstrak  gel  daun  pegagan ( Centella  asiatica )  memiliki  aktifitas  dalam penyembuhan  luka  bakar  derajat  II  dangkal pada  tikus  putih  jantan (Rattus  norvegicus) dengan  rata-rata  waktu  penyembuhan  yaitu 12,77  hari.  Selain  itu  penelitian  yang  juga dilakukan oleh I Made Subhawa Harsa (2020) yang  memberikan  langsung  secara  topikal ekstrak etanol daun pegagan ternyata memberikan pengaruh dalam proses penyembuhan  luka  sayat  pada  tikus  putih jantan.
Berdasarkan  penelitian  yang  telah disebutkan bahwa daun pegagan memiliki efek penyembuhan  luka  yang  baik  pada luka  bakar derajat  II,  dan  pemberian  langsung  secara topikal  ekstrak  etanol  daun  pegagan  maka peneliti  melakukan  penelitian  ini  dengan membuat  salep  ekstrak  etanol  daun  pegagan dan  melihat  apabila  ekstrak  daun  pegagan dalam sediaan salep apakah dapat mempercepat penyembuhan luka.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan  pada bulan  Februari  –  Maret  2021  di  Laboratorium Lanjut  Farmasi  Devisi  Farmakologi  Farmasi. Program  Studi  Farmasi  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas  Sam Ratulangi Manado.

## Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  laboratorium.  Tikus  dibagi menjadi  lima  kelompok  perlakuan,  yaitu  K1 (diberi  perlakuan  basis  salep  yaitu  vaselin album dan adepslanae sebagai kontrol negatif), K2  (povidoneiodine  10%  sebagai  kontrol positif),  K3  (ekstrak  daun  pegagan  8%),  K4 (ekstrak daun pegagan 16%), K5 (ekstrak daun
pegagan 24%). Tiap perlakuan terdiri dari tiga ekor tikus putih jantan.

## Alat dan Bahan Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini, antara lain: cutter, gunting, penggaris, perlak/alas,  beaker,  hot  plate,  oven,  blander, kamera,  sarung  tangan,  masker,  kertas  saring, ayakan,  cottonbuds,  jangka  sorong,  pencukur bulu,  timbangan  analitik,  lumpang  dan  alu, wadah salep dan kandang tikus

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini, antara lain: tikus putih jantan 15 ekor, ekstrak daun  pegagan  ( Centella  asiatica ) (L.)  Urb. , vaselin  album,  adepslanae,  etanol  95%,  etanol 70%, betadine 10%, Pangan tikus putih (Rattus novergicus) berupa  pellet  atau  sejenisnya.

## Pengambilan dan penyiapan sampel
Tahap awal dilakukan dengan pengumpulan  bahan  baku  daun  pegagan (Centella  asiatica) (L.)  Urb. yang  diambil  di sekitaran  kota  Bitung.  Daun  tanaman  pegagan dibersihkan  terlebih  dahulu  dari  kotoran  yang menempel,  kemudian  dicuci  dengan  air mengalir sampai bersih lalu kemudian dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan. Setelah  kering  daun  pegagan  selanjutnya diserbukkan, dengan cara diblender dan diayak dengan  ayakan  mesh  hingga  diperoleh  serbuk yang halus dan homogen, kemudian ditimbang beratnya.
Pembuatan ekstrak daun Pegagan (Centella asiatica) (L.) Urb . Serbuk yang telah didapatkan, Kemudian  ditimbang  sampel  sebanyak  300 gram  dimasukkan  dalam  wadah  maserasi, ditambahkan  etanol  95%  sebanyank  1500  ml (simplisia  :  pelarut  =  1  :  5)  sambil  sesekali diaduk.  Wadah  maserasi  ditutup  kemudian dibiarkan  selama  5x24  jam  dengan  sesekali diaduk kemudian disaring dengan menggunakan kertas saring sehingga menghasilkan  filtrat  I  dan  residu  .  Residu diremaserasi  kembali  dengan  900  mL  etanol 95%  selama  3x24  jam.  Kemudian  didapatkan filtrat  II,  maserat  yang  didapatkan  diuapkan dengan oven sehingga diperoleh ekstrak kental
(Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia, 2008).
Pembuatan  salep  ekstrak  daun  Pegagan (Centella asiatica) (L.) Urb.
Pembuatan salep ekstrak daun pegagan  dengan  konsentrasi  perbandingan yang  sesuai  dengan  prosedur  penelitian  dapat dilihat pada tabel 1 dibawah ini.
Tabel  1 .  Formula  salep  ekstrak  daun  pegagan (Centella asiatica) Jenis Bahan (gram) 8%   16% 24% Ekstrak Daun pegagan    0,8 1,6 2,4 Vaselin Album 7,82   7,14   6,46 Adeps Lanae 1,38   1,26 1,14
Pada  penelitian  ini  formula  yang digunakan  dalam  pembuatan  salep  sesuai dengan  formula  standar  salep  menurut Goeswin Agoes (2008) ialah :
R/ Adepslanae 15 g Vaselin album   85 g m.f. salep 100 g
Sediaan salep yang akan dibuat dalam penelitian  ini  memiliki  konsentrasi  ekstrak daun  pegagan  yang  berbeda-beda,  yaitu  8%, 16% dan 24%.
Proses  pembuatan  salep  ekstrak  daun pegagan  menggunakan  basis  adeps  lanae  dan vaselin  album.  Dalam    pembuatan  salep ekstrak  daun  pegagan  hal  pertama  dilakukan menimbang semua bahan yang akan digunakan yaitu basis vaselin album dan adeps lanae  sesuai  dengan  formula.  Vaselin  album sebanyak  7,82  gram  dan  adeps  lanae  1,38 gram untuk ekstrak daun pegagan 8%, vaselin album  sebanyak  7,14  gram  dan  adeps  lanae 1,26  gram  untuk  ekstrak  daun  pegagan  16%, vaselin  album  sebanyak  6,46  gram  dan  adeps lanae  1,14  gram  untuk  ekstrak  daun  pegagan 24%.  Kemudian  menimbang  ekstrak  daun pegagan  0,8  gram  untuk  salep  ekstrak  daun pegagan  8%,  1,6  gram  untuk  salep  ekstrak daun  pegagan  16%  dan  2,4  gram  untuk  salep ekstrak  daun  pegagan  24%.  Selanjutnya mencampurkan  kedua  basis  salep  didalam beakerglas  yang  sudah  dipanaskan  di  atas  hot
plate, dengan tujuan agar tercampur homogen. Lalu  tambahkan  sedikit-sedikit  ekstrak  daun pegagan yang telah ditimbang tadi ditambahkan  pada  masing-masing  basis  salep kemudian  digerus  dalam  mortir  hingga homogen.  Setelah  homogen  masukkan  ke dalam pot salep kemudian beri label.
Sediaan  salep  mempunyai  beberapa jenis  basis  yang  dibedakan  berdasarkan  sifat fisiko-kimia,  salah  satu  kombinasi  basis  yang digunakan  pada  salep  adalah  basis  berlemak yaitu kombinasi basis vaselin album dan adeps lanae. Vaselin album dapat meningkatkan efek hidrasi  pada  kulit  dan  penambahan  adeplanae dapat  meningkatkan  daya  absorpsi  sehingga luka lebih cepat kering dan tidak membusuk.

## Penyiapan Hewan Uji
Penelitian  ini  menggunakan  tikus putih  sebagai  hewan  uji  yang  diaklimatisasi selama  7  hari  dan  terbagi  dalam  5  kelompok dimana masing-masing kelompok terdiri atas 3 ekor  tikus  putih  yang  dipelihara  dalam kandang  yang  terpisah  dimana  satu  kandang berisi tiga ekor tikus dan diberi pangan berupa pellet dan beras milu.

## Pembuatan Luka Sayatan Pada Tikus
Pembuatan  luka  pada  tikus  menurut Asadi  dkk  (2013)  dilakukan  dengan  pertma melakukan anestesi dengan menggunakan eter, selanjutnya  tunggu  5-10  menit  sampai  obat bius  bereaksi,  selanjutnya  menghilangkan rambut pada punggung dengan cara mencukurnya  menggunakan  gunting  dan pencukur,  tujuannya  untuk  mempermudah pada  saat  melukai,  pemberian  perlakuan  dan pengamatan,  memasang  perlak  dan  alasnya dibawah  tubuh  tikus  yang  akan  dilukai, melakukan  disinfeksi  area  kulit  yang  telah dicukur  dengan  alkohol  70%,  selanjutnya melakukan  penyayatan  kulit  menggunakan cutter steril dengan kedalaman 0,2 cm dengan panjang  2  cm  (Rairisti,  Wahdaningsih,  dan Wicaksono, 2014). Setelah dilakukan perlakuan  sayatan  pada  hewan  uji,  ekstrak daun  Pegagan  langsung  dioleskan  secara
merata  pada  permukaan  luka  selama  14  hari pengujian (2 kali/hari).

## Perlakuan Terhadap Hewan Uji
Kelompok  I  adalah  kelompok  kontrol negatif,  yaitu  kelompok  tikus  dengan  luka sayat  yang  diberi  basis  salep  yaitu  Vaseline album  dan  Adeps  Lanae,  kelompok  II  adalah kelompok tikus dengan luka sayat yang diberi perlakuan  salep  povidone  iodine  10%  sebagai kontrol positif, kelompok III adalah kelompok tikus  dengan  luka  sayat  yang  diberi  perlakuan salep ekstrak daun pegagan, dengan dosis 8%, kelompok  IV  adalah  kelompok  tikus  dengan luka  sayat  yang  diberi  salep  ekstrak  daun pegagan  dengan  dosis  16%  dan  kelompok  V adalah  kelompok  tikus  yang  diberi  salep ekstrak daun pegagan dengan dosis 24%.

## Perawatan Luka
Menurut Qomariyah (2014) perawatan luka  dilakukan  dengan  cara,  mencuci  tangan dan  memasang  sarung  tangan,  menempatkan perlak  yang  dilapisi  kain  dibawah  tikus  yang akan  dirawat,  mengatur  posisi tikus  senyaman mungkin  sehingga  memudahkan  tindakan perawatan,  mengecek  keadaan  luka  dengan melihat ada tidaknya eritema, pembekakan dan luka menutup, selanjutnya memberikan pengobatan  pada  masing-masing  kelompok perlakuan.  Pengobatan  dilakukan  2x/hari  dan diberikan sebanyak 0,07 gram.

## Tahap Pengamatan
Pengamatan  pada  luka  dilakukan setiap  hari  selama  14  hari  dengan  mengamati tanda-tanda kesembuhan dengan cara mengukur  panjang  luka  dan  bengkak  luka menggunakan jangka sorong.

## Analisis Data
Untuk  mengetahui  efektifitas  salep ekstrak daun pegagan, pada penyembuhan luka sayat  tikus  putih  jantan  data  dianalisis menggunakan  uji  statistik  Anova  One  Way yang dilanjutan dengan uji Tukey HSD dengan taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dalam  penelitian    ini,  observasi terhadap  penyembuhan  luka  sayat  pada  tikus putih  jantan  dilakukan  secara  makroskopis, dimana  bertujuan  untuk  membandingkan penyembuhan luka sayat antara lima
kelompok  dengan  intervensi  yang  berbeda. Pengamatan  kondisi  luka  sayat  dilakukan sampai  luka  sembuh  yang  dilihat  dari  ada tidaknya  eritema,  pembengkakan  dan  luka menutup.Intervensi  dan  observasi  dilakukan setiap  hari,  pada  pukul  16.00  WITA.  Panjang dan  bengkak  luka  sayat  diukur  dengan
menggunakan  jangka  sorong.  Pengamatan dilakukan  selama  14  hari.  Hasil  observasi dapat dilihat pada tabel dibawah ini.
Tabel 2 . Hasil pengamatan penyembuhan luka pada hari ke-1
Hari ke-1 Kontrol Negatif (basis salep) Kontrol Positif (salep povidone iodine 10%) SDP 8% SDP 16% SDP 24%
Tabel 3 . Hasil pengamatan penyembuhan luka pada hari ke-4 Hari ke-4 Kontrol Negatif (basis salep) Kontrol Positif (salep povidone iodine 10%) SDP 8% SDP 16% SDP 24%
Tabel 4 . Hasil pengamatan penyembuhan luka pada hari ke-7 Hari ke-1 Kontrol Negatif (basis salep)
Kontrol Positif (salep povidone iodine 10%) SDP 8% SDP 16% SDP 24%
Tabel  5 .  Rerata  Waktu  (hari)  Penyembuhan Luka Sayat Pada Tikus Putih Tikus Putih Waktu (Hari) Kel I Kel II Kel III Kel IV Kel V 1 17 10 10 8 10 2
7 8 7 8 11
3 5 8 8 7 12 Rerata 9,6 8,6 8,3 7,6 11
Keterangan:
Kel I : Luka sayat diberi basis salep Kel  II  :  Luka  sayat  diberi  salep  povidone iodine 10%
Kel  III  :  Luka  sayat  diberi  ekstrak  8%  etanol daun pegagan sediaan salep Kel  IV:  Luka  sayat  diberi ekstrak  16%  etanol daun  pegagan sediaan salep
Kel  V :  Luka  sayat  diberi ekstrak  24%  etanol daun pegagan sedian salep
Penyembuhan  luka  adalah  proses penggantian  dan  perbaikan  fungsi  jaringan yang rusak (Boyle, 2008).
Pada  kelompok  I  (basis  salep),  tikus putih  memiliki  rata-rata  waktu  penyembuhan luka  yaitu  9,6  dengan  waktu  penyembuhan tercepat yaitu pada tikus 3 hari ke 5 dan tikus 2 pada hari ke 7, hal ini dikarenakan pada saat pembuatan  luka  tidak  tergores  dengan  baik, selain itu juga basis salep hidrokarbon bersifat menghidrasi  kulit  sehingga  pada  tikus  yang diberikan  luka  sayat  tidak  tergores  dengan baik  luka  cepat  mengering  dan  menutup. Penyembuhan luka paling lambat pada tikus 1 yaitu  pada  hari  ke-17.  Hal  ini  disebabkan karena  tikus  putih  hanya  diberikan  perlakuan pengobatan  dengan  basis  salep.  Hal  ini disebabkan  karena  basis  salep  tidak  memiliki aktivitas  sebagai  penyembuh  luka  sayat, melainkan  sebagai  emolient  atau  pelembab. Sehingga  apabila  diberikan  pada  luka,  luka akan  menjadi  basah  dan  bernanah  dan  akan sulit  untuk  mengering  sehingga  penyembuhan luka  menjadi  lambat.  Walaupun  hanya diberikan  pengobatan  dengan  basis  salep proses penyembuhan luka sayat pada kelompok  I  masih  tetap  berlangsung,  yang ditandai dengan timbulnya gejala klinis reaksi radang  mengecilnya  ukuran  luka  sayat  pada tikus, artinya tubuh sehat memiliki kemampuan  alami  untuk  memulihkan  dirinya sendiri  sesuai  dengan  teori  Sjamsuhidajat (2010).
Basis  salep  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  basis  salep  hidrokarbon (vaselin  album)  dan  basis  salep  absorpsi (adeps lanae). Pemilihan vaselin sebagai salah satu  basis  salep  dalam  penelitian  ini dikarenakan  menurut  (Ansel,  1989)  basis hidrokarbon bersifat melunakkan kulit (emolien) dengan meninggalkan lapisan dipermukaan kulit akibatnya hidrasi kulit akan meningkat  karena  penguapan  air  pada  lapisan kulit dihambat. Efek hidrasi basis hidrokarbon dapat meningkatkan absorpsi obat.
Pada  kelompok  II  (salep  povidone iodine),  luka  sayat  sangat  cepat  mengering namun  keropeng  yang  disebabkan  karena penumpukan  iodin  pada  luka  menyebabkan keropeng  menebal  dan  lama  terkelupas, sehingga  luka  dapat  sembuh  paling  lambat pada  tikus  1  hari  ke-10.  Menurut  Argamula
(2008),  mengatakan  bahwa  proses  luka menutup  setelah  luka  mengalami  proses lepasnya keropeng. Hal ini menandakan sudah terjadi  pertumbuhan  sel-sel  baru  dengan merapatnya tepi luka. Proses keropeng terlepas dimana jaringan dibawahnya sudah kering dan tepi-tepi  luka  mulai  tertarik  ke  tengah.  Rerata waktu  penyembuhan  luka  sayat    yang dibutuhkan  yaitu  8,6  hari  dengan  penutupan luka  paling  lambat  terjadi  pada  tikus  1  yaitu pada  hari  ke-10  tikus  2  pada  hari  ke-8  dan tikus  3  pada  hari  ke-9.  Berdasarkan  hasil observasi  tikus  3  pada  hari  kedua  dan  ketiga memiliki  nilai  pembengkakan  luka  yang paling  besar  dibanding  keempat  kelompok percobaan.  Dengan  ukuran  pembengkakan luka yaitu 0,33 pada hari kedua dan 0,34 pada hari ketiga. Hal ini dikarenakan PVT (Polivinil Pirolidon)  yang  merupakan  bahan  yang ditambahkan  ke  yodium  dan  membentuk kompleks  yang  disebut  povidone  iodine.  PVT berbentuk serbuk amorf bewarna putih hingga kekuning-kuningan,  dapat  menimbulkan  efek samping berupa rasa gatal, nyeri dan bengkak pada daerah luka, Estuningtyas (2007).
Pada  indikator  lamanya  penutupan luka  salep  povidone  iodine  lebih  lama dibanding  kelompok  III  (salep  daun  pegagan 8%)  dan  kelompok  IV  (salep  daun  pegagan 16%)  hal  ini  dikarenakan  povidone  iodine bersifat  toksik  terhadap  fibroblast  sehingga mempengaruhi  pembentukan  kolagen  yang bertanggung  jawab  terhadap  pembentukan jaringan baru.
Berdasarkan  hasil  observasi  pada kelompok  perlakuan  salep  ekstrak  daun pegagan  dibandingkan  dengan  kelompok kontrol  negatif  (basis  salep)  dan  kelompok kontrol  positif  (salep  povidone  iodine) memiliki  rerata  waktu  penutupan  luka  yang berbeda. Hal ini disebabkan karena kandungan bahan aktif yang ada dalam pegagan meliputi: triterpenoid saponin, triterpenoid genin, minyak  esensial,  flavonoid,  dan  bahan  aktif lainnya.  Hal  ini  didukung  oleh  penelitian Gohil  dkk  (2010),  menyatakan  triterpenoid dan  saponin  sebagai  komponen  dasar  dari daun pegagan dapat mendukung penyembuhan luka  karena  meningkatkan  tensilestrenght  dan sintesis kolagen.
Pegagan  mampu  memacu  proliferasi sel  fibroblas  yang  berperan  besar  pada penyembuhan  luka  karena  kemampuannya dalam memproduksi substansi dasar
pembentuk  serat  kolagen  (Redaksi  Trubus, 2010).  Asiatic  acid  mampu  menstimulasi sintesis  kolagen  (tahap  awal  perbaikan jaringan),  sementara  madecassoside  mampu meningkatkan  sekresi  kolagen  tipe  III  dan memiliki  efek  anti-inflamasi  (Zheng  dan  Qin, 2007).
Berdasarkan  grafik  1  dapat  dilihat pada  hari  pertama  panjang  luka  kelima kelompok  belum  menunjukkan  perbedaan. Kelompok 2 (Salep Povidone iodine) pada hari ketiga  menunjukkan  hasil  penurunan  yang lebih  unggul  akan  tetapi  penutupan  luka melambat  pada  hari  kelima  dan  keenam. Selanjutnya pada kelompok perlakuan 4 (salep daun  pegagan  16%)  menunjukan  hasil penutupan  panjang  luka  yang  baik  dibanding keempat  kelompok  yang  lainnya..  Penutupan panjang  luka  yang  paling  lambat  adalah  pada kelompok perlakuan 5.
Selain  penutupan  luka  indikator  lain yang  digunakan  juga  dalam  penelitian  ini adalah  bengkak  luka  (edema)  yang  diukur setiap  hari  dengan  menggunakan  jangka sorong. Eritema (kemerahan) dan
pembengkakan  merupakan  hal  pertama  yang terlihat didaerah yang mengalami perandangan.  Pada  saat  reaksi  peradangan timbul,  terjadi  pelebaran  arteriola  yang mensuplai  darah  ke  daerah  perandangan (Qomariah, 2014). Berdasarkan hasil observasi (grafik  2)  menunjukkan  bahwa  salep  ekstrak dari  daun  pegagan  memiliki  khasiat  lebih cepat  menghilangkan  pembengkakan  jika dibandingkan  dengan  kontrol  negatif  (basis salep)  dan  kontrol  positif  (salep  povidone iodine).  Hal  ini  dikarenakan  daun  pegagan memiliki  senyawa-senyawa  bioaktif  yang terlibat  dalam  fase  penyembuhan  luka, menurut  Belcaro  (2011)  yang  menyatakan TECA  (Titrated  Extract  of  Centella  Asiatica) memiliki  enam  mekanisme  penting  dalam penyembuhan luka. Masing-masing komponen saling  terkait  dan  mempengaruhi  diantarnya: (1)  mengontrol  edema  dan  filtrasi  kapiler,  (2) antioksidan  efektif  sebagai  anti  stress  dan inflamasi  atau  infeksi,  (3)  anti  inflamasi,  (4) memodulasi pembentukan kolagen, (5) memodulasi  growthfactor,  (6)  memodulasi angiogenesis.  Kenam  mekanisme  tersebut berperan penting  pada  tiap  fase  penyembuhan luka (Belcaro dkk, 2011).
Berdasarkan  hasil  observasi  yang  telah dilakukan  dari  kelima  kelompok  perlakuan
penutupan  luka  terlambat  adalah  kelompok  V (Salep  daun  pegagan  24%)  dengan  rerata  hari penutupan luka yaitu 11 hari (tabel 5). Hal ini dikarenakan  pada  tikus  kelompok  V  luka mengalami  infeksi  selain  itu  juga  hewan  uji sering  menggaruk  punggungnya  sehingga membuat luka menganga dan lebar (gambar 8) sehingga penutupan luka menjadi lambat.
Selain  itu  bila  dibandingkan  antara kelompok  perlakuan  salep  ekstrak  daun pegagan  8%  dan  16%  dengan  24%  dimana 24%  memiliki  jumlah  ekstrak  daun  pegagan yang  lebih  banyak,  namun  ekstrak  8%  dan 16%  memiliki  efek  penyembuhan  luka  yang lebih  baik.  Berdasarkan  pengamatan  fisik sediaan  salep  ekstrak  daun  pegagan  8%,  16% dan 24%, sediaan 24% terlihat lebih kental dan pekat.  Menurut  (Gaylene,  2000)  pada  ekstrak yang  lebih  kental  akan  mempermudah terjadinya oksidasi yang menghalangi
hidroksilasiprolin  dan  lisin  sehingga  kolagen tidak dikeluarkan oleh fibroblas.
Pada tabel 2,3 dan 4 hasil pengamatan penyembuhan  luka  pada  hari  ke-1,  adanya perbedaan  bentuk  luka  hal  ini  dikarenakan aktivitas  hewan  uji  yang  sering  menggaruk punggungnya, sehingga membuat luka menganga dan menjadi lebar, sehingga hal ini pun akan mempengaruhi proses penyembuhan luka.
Adanya variasi dalam waktu penyembuhan  luka.  Hal  ini  disebabkan  oleh beberapa  faktor  seperti  daya  tahan  tubuh (kekebalan),  faktor  psikologis  (stres),  dan lingkungan.  Adanya  stres  akibat  luka  bisa meningkatkan  kebutuhan  nutrisi  sehingga asupan  nutrisi  harus  terpenuhi  dengan  baik sehingga  berpengaruh  dalam  penyembuhan luka.  Daya  tahan  tubuh  yang  berbeda-beda memiliki respon berbeda dalam penyembuhan luka (Potter, 2005).
Grafik 1 . Grafik rata-rata hasil pengukuran panjang luka sayat 0 0.5 1 1.5 2 2.5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Rerata panjang luka sayat (14 hari pengamatan) Kelompok 1 Kelompok 2 Kelompok 3 Kelompok 4 Kelompok 5 P a n j a n g L
u k a (cm )
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Grafik 1 . Grafik rata-rata hasil pengukuran bengkak luka sayat

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, hasil uji statistik menunjukkan  bahwa tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  antara  setiap kelompok  pengujian  secara  statistik  namun berdasarkan  hasil  observasi  salep  ekstrak  etanol daun pegagan (Centella asiatica) konsentrasi 16% memiliki efektivitas yang paling baik dengan rata- rata waktu penyembuhan 7,6 hari.

## SARAN
Perlu  dikaji  penelitian  lebih  lanjut  yang diuji  cobakan  pada  hewan  yang  berbeda  dan dilakukan  pula  pengamatan  luka  sayat  secara histopatologis  menggunakan  mikroskop  untuk melihat kondisi seluler pada jaringan yang terluka.

## DAFTAR PUSTAKA
Argamula  G.  2008. Aktivitas  Sediaan  Salep Batang  Pohon  Pisang  Ambon  (Musa paradisiacavarsapientum) Dalam Proses Penyembuhan Luka Pada Mencit
(Mus  musculusalbinus) [Skripsi].  FKH IPB, Bogor.
Artawan,  IK.,  dr.  I  Made  Jawi,  M.Kes.,  Ns.  Luh Gede  Maryati,  S.Kep.  2020. Efek Ekstrak  Gel  Daun  pegagan  (Centella asiatica)  Dalam  Mempercepat  Waktu Penyembuhan  Luka  Pada  Tikus  Putih (Rattus Norvegicus Strain Wistar.
[Skripsi]. Universitas Udayana, Bali
Asadi,  S.  Y.,  Parsaei,  P.,  Karimi,  M.,  Ezzati,  S.,
Zamiri, A.,  Mohammadizadeh, F.,
Rafieian-kopae,  M.  2013. Effect  of greentea  (Camellia  sinensis)  extract  on healing  process  of  surgical  wounds  in rat , Int J Surg.11 (4), 332–337.
Belcaro,  G.,  Maquart,  FX.,  Scoccianti,  M., Dugall,  M.,  Hosoi,  M.,  and  Cesarone, MR., Luzzi, R., Cornelli, U., Ledda, A., and  Feragalli,  B.  2011. TECA  (Titrated Extract  of  Centella  Asiatica):  New Microcirculatory,  Biomolecular,  and Vascular  Application  in  Preventive  and Clinical  Medicine ,  Panminerva  Med. 53(3 Suppl 1):105-118
Boyle,  Mauren.  2008 .  Pemulihan  luka .  Jakarta:
EGC.
Dorland,  W.  2006. Kamus  Kedokteran  Dorland . Jakarta: EGC
Estuningtyas,  Arifa.  2007. Farmakologi  dan Terapi . Balai penerbit FK UI, Jakarta. Gaylene  AB,  Patricia  B,  Valerie  C.  2000. Delmar’s  Fundamental  and  advanced: Nursing Skill , Canada, Thomson Learning.
Gohil,  J.K.,  Patel,  J.A.,  Gajjar,  A.K.  2010.
Pharmacological  Reviewon  Centella Asiatica:  A  Potential  Herbal  Cureall. Indian  Jurnal  Pharmacological  Sci. Vol. 72(5): 546-556 Potter,  Patricia  A.  2005 .  Buku  Ajar  Fundamental Keperawatan :  Konsep,  Proses,  dan
Praktik  edisi  4 .  Alih  bahasa  :  Renata Komalasari. Jakarta : EGC
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 Diame ter b en gka k lu ka say at (c m ) Rerata bengkak luka sayat (14 hari pengamatan)
Kel 1 Kel 2 Kel 3 Kel 4 Kel 5
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Qomariah,  S.  2014. Efektivitas  Salep  Ekatrak Batang Patah Tulang (Euphorbiatirucalli) Pada Penyambuhan  Luka  Sayat  Tikus  Putih (Rattusnorvegicus) .  [Skripsi].  Jurusan Biologi  FMIPA  Universitas  Negeri, Semarang Rairisti,  A.,  Wahdaningsih,  S.,  &  Wicaksono,  A. 2014. Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Biji Pinang  (Arecacatechu  L.)  Terhadap
Penyembuhan  Luka  Sayat  pada  Tikus
Putih  (RattusNorvegicus)  Jantan  Galur
Wistar . [Skripsi]. Program Studi Pendidikan  Dokter  Fakultas  Kedokteran Universitas Tanjungpura. Redaksi Trubus. 2010. Herbal Indonesi Berkhasiat:  Bukti  Ilmiah  dan  Cara
Racik . Halaman 393-396 Sjamsuhidajat  R,  2010. Buku  Ajar  Ilmu  Bedah . Edisi ketiga. Penerbit Buku Kedokteran.
Jakarta : EGC Winarto, W.R dan Maria Surbakti. 2003. Khasiat dan Manfaat Pegagan . Jakarta:Agromedia Pustaka. Zahriana, Nia. 2017. Pengaruh berbagai konsentrasi  Ekstrak  Tanaman  Patikan
Kebo  (Euphorbiahirta  L)  Terhadap Tahapan  Penyembuhan  Luka  Sayat Pada  Tikus  Putih  (Rattus  norvegicus). [Thesis] University  of  Muhammadiyah, Malang. Zheng  CJ,  Qin  LP.  2007. Chemical  Components
of Centella asiatica and their Bioactivities .  J  of  Chinese  Integrative Medicine. 5 (3): 348-351