## PRODUKSI BIOFUNGISIDA BERBAHAN BAKU MIKROBA ANTAGONIS INDIGENOUS UNTUK PENGENDALIAN PENYAKIT HAWAR DAUN TANAMAN KENTANG DI PROVINSI JATENG
Production of biofungiside with raw material of local antagonist Trichoderma  sp. isolate  to control leaf blight desease of potatoes in Central Java
Susiana Purwantisari, Achmadi Priyatmojo and Budi Raharjo

## ABSTRACT
Biological  control  of  plant  pathogens  is  an  attractive  alternative  of  the  strong dependence  of  modern  agriculture  on  chemical  fungicides,  which  cause  environmental pollution  and  development  of  resistant  strains.  Species  of Trichoderma have  long  been known  for  their  capacity  to  reduce  plant  diseases  caused  by  fungal  pathogens  and  some have been tested for biological  control potential in  many field and  greenhouse trials.  Late blight  deseases  is  one  of  the  most  important  deseases  of  Potato  Plant  which  distributes almost  all  over  high  humidity  region  in  Central  Java.  The  aim  of  this  research  was  to produce  mass  fungus  antagonist Trichoderma  sp. isolate  inexpensive  cost. The  exact nature  of  this  relationship  is  still  not  clear,  but  it  appears  that  they  kill  other  fungi  with  a toxin and then consume them using a combination of lytic enzymes. This suggests that they are actually microbial predators. This antagonistic behaviour has led to their use as agents of  biological  control  of  some  fungi  causing  plant  disease.    Agricultural  waste  is  the  best choice  to  packing  biofungicide  formulation  based  on  antagonist  fungus  of  isolate Trichoderma  sp.  isolate. The  study  showed  that  the  biofungicide  production  using  local Trichoderma    sp. isolate  can    be  done  in  simple  procedure  using  local  agriculture  waste. The biofungicide is considered safe and its production process can be socialized to control Lodoh desease presence in potatoes production areas.
Keywords: biological control, Trichoderma sp. biofungicide, local isolate agricultural waste

## Pendahuluan
Kentang  merupakan  salah  satu jenis tanaman hortikultura yang bernilai ekonomis tinggi. Sebagai sumber karbohidrat,  kentang  merupakan  sumber bahan  pangan  yang  dapat  mensubstitusi bahan  pangan  karbohidrat  lain  yang berasal  dari  beras,  jagung  dan  gandum (Samadi,  1997).  Mengacu  pada  program pemerintah  akan  diversifikasi  sumber pangan karbohidrat  non  beras  akhir-akhir ini,  kentang  merupakan    salah  satu alternatif penting untuk keragaman bahan pangan  non  beras.  Sebagai  komoditas pertanian  andalan  di  Propinsi  Jawa
Tengah  yang  bernilai  ekonomi  tinggi, maka  peningkatan  produksi  adalah  satu- satunya pertimbangan utama dalam usaha tani kentang. Usaha peningkatan produksi kentang  mempunyai  faktor  pembatas penting  di  lapangan  antara  lain  adanya serangan  hama  dan  penyakit  tumbuhan (Rukmana, 1997).
Produktivitas  kentang  di  Provinsi Jawa Tengah saat  ini menurun tajam,  hal ini  disebabkan  oleh  lapisan  humus  yang sudah habis, sehingga kontaminasi penyakit  dan  hama  menjadi  tinggi.  Pada musim  hujan  benih  kentang  rentan terhadap  kapang  patogen Phytophthora
infestans, sedangkan di gudang penyimpanan,  benih  rawan  serangan hama ( Agrina , 2007). Phytopthora infestans merupakan  kapang  yang  paling serius  menyerang  tanaman  kentang  di Indonesia. Penurunan produksi kentang di Indonesia  dapat  mencapai  90%  dari  total produksi kentang dalam waktu yang amat singkat.  Sampai  saat  ini  belum  ada varietas  kentang  yang  benar-benar  tahan terhadap  patogen  tersebut  (Utami,  2000  ; Cholil,  1991).  Kondisi  tersebut  sangat merugikan  para  petani  kentang  di  sentra- sentra  pertanaman  kentang  di  Provinsi Jawa Tengah yang kondisi lingkungannya sangat mendukung perkembangan penyakit oleh kapang patogen tersebut.
Penyakit  busuk  daun  dan  umbi tanaman  kentang  oleh  jamur  patogen Phytophthora infestans sejak lama menjadi masalah bagi para petani kentang dan  penyakit  ini  merupakan  penyakit yang paling serius di  antara penyakit dan hama  yang  menyerang  tanaman  kentang di  Indonesia  (Katayama  &  Teramoto, 1997).  Penyakit  ini  tergolong  sangat penting  karena  kemampuannya  yang tinggi merusak jaringan tanaman.
Serangan  patogen  dapat  menurunkan produksi  kentang  hingga  90%  dari  total produksi kentang dalam waktu yang amat singkat.  Sampai  saat  ini  kapang  patogen penyebab  penyakit  busuk  daun  dan  umbi kentang tersebut masih merupakan masalah  krusial  dan  belum  ada  varietas kentang  yang  benar-benar  tahan  terhadap penyakit tersebut (Cholil, 1991). Memasuki pasar global persyaratan produk-produk pertanian ramah lingkungan akan menjadi primadona.  Persyaratan  kualitas  produk pertanian  akan  menjadi  lebih  ketat kaitannya  dengan  pemakaian  pestisida sintetik.  Salah  satu  alternatif  upaya peningkatan kuantitas dan kualitas produk pertanian khususnya kentang dapat dilakukan  dengan  pemanfaatan  agen
hayati  (biopestisida)  sebagai  pengganti pestisida  sintetik  yang  selama  ini  telah diketahui  banyak  berdampak  negatif dalam  mengendalikan  penyakit-penyakit tanaman.  Seperti  terbunuhnya  mikro- organisme bukan sasaran, membahayakan kesehatan  dan  lingkungan  (Samways, 1983).    Berdasarkan  keadaan  ini  maka produksi  biofungisida  berbahan  baku agen hayati lokal spesifik pada keanekaragaman  hayati  yang  kita  punya harus  dilakukan  dalam  rangka  untuk menemukan  sumberdaya  genetik  baru yang  berpotensi  untuk  mengendalikan penyakit  tanaman  kentang  yang  ramah lingkungan.
Trichoderma  harzianum .  adalah jamur  saprofit  tanah    yang  secara  alami merupakan  parasit  yang  menyerang banyak  jenis  jamur  penyebab  penyakit tanaman  (spektrum  pengendalian  luas). Jamur Trichoderma  harzianum dapat menjadi  hiperparasit  pada  beberapa  jenis jamur penyebab penyakit tanaman, pertumbuhannya  sangat  cepat  dan  tidak menjadi  penyakit  untuk  tanaman  tingkat tinggi.    Mekanisme  antagonis  yang dilakukan adalah berupa persaingan hidup, parasitisme,  antibiosis  dan  lisis  (Trianto dan  Gunawan  Sumantri,  2003).  Menurut Rifai,  1969,  jenis  Trichoderma  yang umum  dijumpai  di  Indonesia  adalah: T. piluliferum,  T.  polysporum,  T.  hamatum, T. koningii, T. aureoviride, T. harzianum, T.  longibrachiatum.  T.  psudokoningii, dan  T.  viride. Trichoderma  harzianum . merupakan  jamur  antagonis  yang  sangat penting untuk pengendalian hayati. Mekanisme  pengendalian Trichoderma harzianum .  yang  bersifat  spesifik  target, mengoloni  rhizosfer  dengan  cepat  dan melindungi  akar  dari  serangan  jamur patogen, mempercepat pertumbuhan tanaman dan meningkatkan hasil produksi tanaman, menjadi keunggulan lain sebagai  agen  pengendali  hayati.  Aplikasi dapat  dilakukan  melalui  tanah  secara
langsung, melalui perlakuan benih maupun  melalui  kompos.    Selain  itu Trichoderma  harzianum sebagai  jasad antagonis mudah dibiakkan secara massal, mudah  disimpan  dalam  waktu  lama  dan dapat  diaplikasikan    sebagai seed  furrow dalam  bentuk  tepung  atau  granular /butiran  (Arwiyanto,  2003).  Beberapa keuntungan dan keunggulan Trichoderma harzianum yang  lain  adalah  mudah dimonitor  dan  dapat  berkembang  biak, sehingga  keberadaannya  di  lingkungan dapat  bertahan  lama  serta  aman  bagi lingkungan,  hewan  dan  manusia  lantaran tidak menimbulkan residu kimia berbahaya  yang  persisten  di  dalam  tanah (Anonim, 2002).
Jamur Trichoderma  harzianum
merupakan  agen  hayati  yang  banyak diteliti oleh para ahli tentang kemampuannya  mengendalikan  jamur dan bakteri penyebab penyakit tumbuhan. Produk  komersial  yang  mengandung spora  jamur  ini  banyak  dijumpai  di pasaran. Spesies yang banyak dibicarakan adalah
Trichoderma viridae,
Trichoderma hamatum, dan Trichoderma harzianum. Jamur  ini  merupakan  jamur saprofit  yang  hidup  di  tanah  dan  mudah diproduksi  massal  dengan  media  buatan. Jamur Trichoderma  harzianum. dapat menjadi  hiperparasit  pada  beberapa spesies jamur penyebab penyakit tanaman,  pertumbuhannya  sangat  cepat dan  tidak  menjadi  penyakit  untuk tanaman  tingkat  tinggi.  Agens  antagonis dalam  menekan  populasi  atau  aktifitas pathogen tumbuhan dapat berupa Kompetisi, Hiperparasitisme dan
Antibiosis.  Sedang  jamur Trichoderma harzianum dalam menekan pertumbuhan pathogen  mampu  memproduksi  senyawa racun  (antibiotic)  berupa  trichodermin, trichodermol  dan  chrysophanol  yang dapat  menyebabkan lisis pada hifa jamur lain.
Beberapa hasil penelitian menunjukkan bahwa Trichoderma harzianum . dapat mengendalikan penyakit  yang  disebabkan  oleh  jamur Rhizoctonia  solani .  Hasil  penelitian Susanna,  2000 dalam Trianto  dan Gunawan.  S.,  2003,  menunjukkan  bahwa Trichoderma  harzianum .  isolat  Lampung mampu  menekan  pertumbuhan  jamur Fusarium  oxysporum pada  tanaman pisang.  Nurjannani,  2001 dalam Trianto dan Gunawan. S., 2003, bahwa pemakaian Trichoderma harzianum . dapat mengendalikan penyakit layu bakteri Ralstonia  solanacearum .  Kaji terap yang dilaksanakan pada Laboratorium PHPT Semarang menunjukkan bahwa Trichoderma harzianum . cukup efektif untuk mengendalikan  penyakit Alternaria  sp pada bawang merah.
Penggunaan jamur antagonis sebagai  agen  hayati  harus  dalam  bentuk formulasi  yang  tepat  dengan  bahan  yang mudah  tersedia  (Lewis  dan  Papavizas, 1991).  Menurut  Weller  dan  Cook,  1983 bahwa  untuk  menstabilkan  efektifitas agensia  hayati  harus  diformulasikan. Beberapa laporan menyebutkan bahwa P.
fluorescens,
Gliocladium dan Trichoderma telah  diformulasikan  dalam bentuk cair, tepung dan kompos.
Perkembangbiakan Trichoderma harzianum .  akan  terjadi  bila  hifa  jamur mengadakan kontak dengan bahan organik  seperti  kompos,  bekatul  atau beras  jagung.  Bertha  Hapsari,  2003 menunjukkan
bahwa jamur menguntungkan  tersebut  dapat  bertahan selama  3  bulan  jika  disimpan  dalam kulkas  atau  sebulan  di  suhu  kamar  pada medium beras jagung yang telah difermentasi.  Sedangkan  bahan  yang dapat dibuat sebagai pengemas antara lain talk  dan  kaolin.  (Trianto  dan  Sumantri, 2003).
Mekanisme pengendalian biofungisida  itu  bersifat  spesifik target, sehingga tidak  menimbulkan  hilangnya  organisme nontarget. Kelebihan lain mampu mengoloni  Rhizosfer  (daerah  perakaran tanaman)  dengan  cepat  dan  melindungi tanaman  dari  serangan  jamur  penyakit, mempercepat  pertumbuhan  tanaman,  dan meningkatkan  hasil  produksi  tanaman. Secara ekonomi penggunaan Biofungisida Trichoderma  harzianum lebih  murah dibandingkan dengan fungisida kimiawi.
Proses  produksi  biofungisida  dari jamur  itu  akan  tergantung  pada  bentuk akhir  produknya,  padat  atau  cair.  Secara garis besar alur proses produksinya dibagi menjadi  dua  tahap  proses,  yaitu  tahap produksi konidia-biomassa yang mencakup  kegiatan  peremajaan  isolat, pembuatan starter, perbanyakan biomassa dan  spora  dalam  fermentor.  Tahap berikutnya  pencampuran  hasil  fermentasi dengan  bhan  padat,  penyiapan  bahan padat pencampur, pencampuran bomassa- spora  dengan  bahan  matriks  padat, pengeringan  campuran  dan  pengepakan produk.  Sebagai  pestisida  yang  berbahan aktif  mikroorganisme  dan  berasal  dari alam, biofungisida mempunyai sifat  yang ramah terhadap lingkunganlantaran introduksinya ke tanah tidak menimbulkan pencemaran atau berdampak negative terhadap lingkungan. Sebab, ia bukan bahan beracun, melainkan  justru  dapat  mengembalikan keseimbangan  alamiah  dan  kesuburan tanah. Berdasarkan potensi yang dimiliki Trichoderma harzianum maka pemanfaatan  jamur  tersebut  sebagai  agen hayati untuk  pengendalian jamur patogen Phytophthora  infestans pada  tanaman kentang  yang  berwawasan  lingkungan dan  berkelanjutan  sangatlah  penting  di dalam  menunjang  program  PHT.  Oleh karena itu perlu adanya upaya
pengembangan  ke  depan  yaitu  dengan pembuatan  formulasi  yang  ditujukan untuk  menciptakan  produk  agen  hayati yang efektif untuk mengendalikan penyakit  tanaman.  Pengendalian  hayati dengan agen hayati Trichoderma harzianum .  yang  terseleksi  ini  sangatlah diharapkan dapat
mengurangi ketergantungan  dan  mengatasi  dampak negatif  dari  pemakaian  pestisida  sintetik yang  selama  ini  masih  dipakai  untuk mengendalikan  penyakit  pada  tanaman kentang di Indonesia.

## Metode
Peremajaan Isolat lokal terseleksi jamur antagonis Trichoderma harzianum.
Isolat  lokal  jamur Trichoderma harzianum yang terseleksi dalam pengujian in  vitro di  laboratorium  dan secara in  vivo di  rumah  kaca  pada penelitian sebelumnya  yaitu Trichoderma harzianum diremajakan  pada  medium buatan  pertumbuhan  jamur.    Isolat  lokal spesifik  Kedu Trichoderma harzianum tersebut  diremajakan  pada  medium  PDA. Isolat  jamur  tersebut  akan  ditentukan waktu  generasinya  dan  dibiakkan  secara massal  pada  medium  beras  jagung  pecah dan  sampah  pertanian  yang  nantinya dikembangkan  dalam  suatu  formulasi biofungisida  dengan  alternatif  beberapa medium pembawa dari sampah pertanian.
Penentuan waktu generasi jamur antagonis dan produksi massal Trichoderma  harzianum.  dalam  media in vitro
Untuk  menentukan  waktu  generasi  jamur Trichoderma  harzianum .  terlebih  dahulu menumbuhkan  jamur  tersebut  ke  dalam medium  pertumbuhan  yang  sesuai.  Uji pendahuluan  tentang  media  pertumbuhan jamur  membuktikan  bahwa  media  beras jagung  pecah  yang  telah  disterilkan sangat  cocok  untuk  pertumbuhan  jamur
Trichoderma  harzianum (Bertha  Hapsari,
2003). Konidia jamur Trichoderma harzianum .  ditumbuhkan  pada  medium beras  jagung  yang  telah  disterilkan  (Satu ujung jarum ose inokulum jamur
Trichoderma  harzianum .  cukup  untuk menginkubasi  1  ons  beras  jagung). Medium  yang  telah  diinokulasi  dengan jamur Trichoderma harzianum . kemudian ditutup  rapat,  dikocok  dan  disimpan  di ruangan  tertutup  selama  10-15  hari. Perkembangbiakan miselium jamur ditandai warna hijau dan memadat. Setiap 24  jam  (  1  hari)  populasi  jamur  dihitung dengan  metode  pengenceran  ( dilution method ),  kemudian waktu generasi jamur ditentukan dengan rumus:
G = (T1 – T0) / n
G   :  waktu generasi dalam jam T1 :  waktu pada jam ke 1 T0 :  waktu pada jam ke 0 n  =   (Log M1 – Log M0) /2 M1  :    populasi  (konidia/  ml)  pada jam ke1
M2  :    populasi  (konidia/  ml)  pada jam ke 0
Pengamatan  dilakukan  terhadap biomassa  jamur Trichoderma harzianum . pada media pertumbuhan untuk pembiakan  massal.  Populasi  /  biomassa konidia  jamur Trichoderma  harzianum . ditentukan  dalam  konidia/  ml,  setiap perlakuan diulang dua kali.
Gambar 1. Skema/ Bagan alur produksi massal jamur antagonis spesifik lokasi
Trichoderma harzianum pada media beras jagung pecah
Pembuatan Formulasi Biofungisida media padat berbahan baku Trichoderma harzianum Berdasarkan  hasil  perbanyakan biomassa  konidia  jamur Trichoderma harzianum . pada  medium  beras  jagung pecah  dapat  digunakan  media padat  yang dimodifikasi  dengan  bahan-bahan  yang
komposisinya  sederhana,  murah  dan mudah  ketersediaannya  seperti  sampah- sampah  pertanian  namun  tetap  terjaga kualitas,  viabilitas  dan  daya  simpan  dari produk  biofungisida  tersebut.  Produk biofungisida  berbentuk  padat  misalnya granula dapat diproduksi dengan mencampurkan  biomassa  konidia  jamur
KUKUS DENGAN DANDANG ± 30 MENIT ( ¾ MASAK ) MASUKKAN MEDIA DALAM KANTONG PLASTIK ± 100 gr STERILKAN DENGAN DANDANG 1 – 2 JAM AUTOCLAVE (120 C ;1,5 ATM 20 MENIT)
MEDIA SIAP DI
INOKULASI DINGINKA NNN INOKULUM  ( F1 ) FERMENTOR DINGINKAN NASI BERAS / JAGUNG CUCI BERSIH SIRAM DGN AIR PANAS INKUBASIKAN INOKULUM/ ( F2 ) SIAP DIPAKAI BERAS /
JAGUNG GILING
ISOLAT
jamur Trichoderma  harzianum .  dalam media sekam, serbuk alang-alang,
kompos,  bekatul/  dedak  dan  pupuk kandang sebagai medium pembawa.
Penelitian pendahuluan
menemukan  hasil  bahwa  bahan  organik alang-alang dan jagung merupakan bahan yang  tepat  untuk  meningkatkan  populasi dan daya antagonistik Trichoderma harzianum terhadap Phytopthora  capsici (Wahyuno,  Dono,  dkk,  2003).  Dengan demikian  dalam  penelitian  ini  ingin dicoba  menemukan  suatu  formula  yang ideal  dalam  mengemas  biofungisida dengan  beberapa  media  pembawa  dari sampah pertanian (medium pembawa non pangan) yaitu: (F 1 )   Alang-alang + talk + kaolin  (CaCo 3 +  CMC);  (F 2 )  Jagung  + talk + kaolin (CaCo 3 + CMC); (F 3 ) Dedak + serbuk gergaji + talk + kaolin (CaCo 3 + CMC);  (F 4 )  kompos  +  talk  +  kaolin (CaCo 3 +  CMC);    (F 5 )  pupuk  kandang  + talk + kaolin (CaCo 3 + CMC). Campuran bahan tersebut disterilkan terlebih dahulu dalam autoklaf (121 o C)  dua  kali  selama  masing-masing satu  jam  dengan  selang  waktu  24  jam, untuk  menjaga  keawetan  produk  dari kontaminasi mikroorganisme lain. Biomassa  konidia  jamur Trichoderma harzianum . dengan kerapatan 10 6 konidia/ ml  sebanyak  100  ml/  kg  bahan  dituang sampai tercampur merata. Setelah pencampuran  selesai  dikeringkan  di dalam  inkubator  beraliran  udara  pada suhu  30  –  32 o C,  sampai  produk  sudah cukup  kering  dengan  tingkat  kelembaban <  15 o C.  Setelah  pencampuran  masing- masing formula disimpan dalam kemasan plastik  (P)  dan  aluminium  foil  (A) masing-masing  sebanyak  100  gram  tiap kemasan.  Setelah  proses  pengemasan dilakukan  pencatatan  tanggal  produksi dan  dilakukan  pengamatan  terhadap kualitas  produk  secara  berkala  setiap minggu  sekali  untuk  melihat  kestabilan kualitas  produk  dalam  waktu  yang  sama.
Kriteria  penilaian  meliputi  tampilan produk  akhir  dan  pemantauan  viabilitas sel jamur.
Pembuatan formulasi media padat dari  Jamur Trichoderma  harzianum juga dapat  dilakukan  dengan  beberapa  media pembawa  dari  jenis  sampah  pertanian. Hal tersebut didasarkan pada komposisinya yang minimal mengandung selulosa  sehingga  mampu  digunakan sebagai medium bagi pertumbuhan jamur saprofitik  secara  umum  seperti  jenis Trichoderma harzianum . Sampah pertanian  seperti  alang-alang  (yang  juga menjadi gulma tanaman budidaya) sangat penting  dimanfaatkan  sebagai  medium alternatif  pembawa  konidia  jamur.  Hal tersebut  karena  alang-alang  merupakan gulma  pengganggu  tanaman  budidaya yang  memang  keberadaannya  harus dikendalikan  secara  periodik.  Selain  itu alang-alang  bukan  merupakan  sumber pangan manusia seperti beras dan jagung yang  keberadaannya  dibutuhkan  manusia sebagai sumber pangan yang mengandung karbohidrat (sebagai sumber tenaga/kalori bagi kebutuhan gizi manusia). Selain alang-alang sebagai medium pembawa konidia jamur Trichoderma  harzianum ,  Sekam  padi yaitu  lapisan  keras  yang  membungkus beras dan merupakan limbah penggilingan gabah dapat juga digunakan sebagai  medium  pembawa konidia jamur Trichoderma  harzianum .  Dari  proses penggilingan  gabah  akan  dihasilkan  16,3 –  28%  sekam.  Sekam  padi  mempunyai kadar selulosa yang cukup tinggi sehingga  sangat  cocok  untuk  media pembawa  dan  pertumbuhan  konidia jamur Trichoderma  harzianum .  Medium alternatif pembawa konidia jamur Trichoderma  harzianum yang  lain  juga dapat  digunakan  seperti  kaolin,  kompos, bekatul  atau  dedak  dan  pupuk  kandang. Tahapan  pembuatan  formulasi  untuk
biofungisida berbahanbaku jamur
Trichoderma  harzianum dengan  media pembawa  dari  sampah  pertanian  dengan dua  cara.  Pertama  masing-masing  media yang  telah  diinokulasi T.  harzianum dan sudah  diinkubasi  selama  7  hari  dihitung kerapatan konidianya. Setelah itu masing- masing  media  dicampur  dengan  talk  dan kaolin dengan perbandingan 2:1:1. Selanjutnya pengemasan dilakukan dengan  2  macam  jenis  pengemas  yaitu plastik  dan  alumunium  foil.  Setelah dikemas  masing-masing  kemasan  diberi label.
Pembuatan Formulasi Biofungisida Media Cair Berbahan baku Trichoderma harzianum Pembuatan formulasi biofungisida dengan medium  cair  dengan  medium  cair  juga dapat  dilakukan  dengan  menggunakan Fermentor  sederhana.  Medium  cair  yang digunakan sebagai bahan pembawa dipergunakan adalah dari ekstraksi sampah  pertanian  yaitu  alang-alang, kompos,  pupuk  kandang  dan  sekam. Selain  itu  formulasi  biofungisida  dengan media  cair  juga  dibuat  dengan  ekstrak kentang  dan  jagung.  Bahan,  alat  dan langkah kerja ada pada lampiran.

## Hasil dan Pembahasan
Penelitian  ini  merupakan  salah satu  rangkaian  penelitian  sebelumnya yaitu  tentang  pencarian  biofungisida berbahanbaku  jamur  antagonis  spesifik lokasi yang diharapkan efektif mengendalikan  penyakit  lodoh  tanaman kentang.  Penelitian  sebelumnya  telah didapatkan  isolat  jamur  spesifik  lokasi yang terbaik dalam mengendalikan pertumbuhan jamur patogen Phytophthora infestans penyebab penyakit  lodoh  (busuk  daun  dan  umbi) tanaman kentang pada kondisi di laboratorium  maupun  di  rumah  kaca.
Isolat  jamur  spesifik  lokasi  tersebut adalah Trichoderma  harzianum .  Isolat jamur spesifik lokasi Trichoderma harzianum adalah  isolat  yang  telah terseleksi  paling  efektif  mengendalikan jamur  patogen Phytophthora  infestans diantara isolat-isolat jamur spesifik lokasi yang  lain  dalam  uji  antagonisme  ( dual plating )  di  laboratorium.  Selain  itu  isolat jamur spesifik lokasi Trichoderma harzianum tersebut  juga  telah  dicoba untuk diaplikasikan di rumah kaca dengan cara  mengintroduksikannya  pada  tanah tempat  tanaman kentang ditanam.  Tujuan introduksi  isolat  jamur  spesifik  lokasi Trichoderma  harzianum tersebut  adalah untuk  mencegah  pertumbuhan  jamur patogen Phytophthora infestans penyebab penyakit  busuk  daun  pada  tanaman kentang sehingga tanaman tetap sehat dan bisa berproduksi secara maksimal. Dalam hasil penelitian tersebut, tanaman kentang tetap  tumbuh  sehat tanpa  kendala penyakit lodoh dan pertumbuhannya lebih optimal.
Penelitian  teknologi  pengendalian hama  dan  penyakit  tanaman  harus mempertimbangkan  kesederhanaan  dan kepraktisan  serta  ditunjang  teknologi spesifik  lokasi  ( indigenous  technology ) yang  dapat  diterapkan  para  petani. Demikian  juga  hasil  penelitian  ini  yaitu produksi  biofungisida  berbahan  baku jamur antagonis spesifik lokasi Trichoderma harzianum diharapkan mampu diterapkan dan diaplikasikan oleh para  petani  kentang  khususnya  petani- petani kentang di sentra-sentra penanaman  kentang  di  Provinsi  Jawa Tengah. Produksi biofungisida ini mudah diaplikasikan  pembuatannya  oleh  para petani sendiri, selain itu hanya memerlukan alat-alat  yang sederhana dan mudah  memperolehnya.  Bahan  baku biofungisida  berupa  jamur  antagonis spesifik lokasi dapat diperoleh di laboratorium  pengamatan  hama  dan
penyakit Kedu Temanggung, sedang alat- alat  dan  bahan  pembuatan  biofungisida dapat  disiapkan  sendiri  dan  merupakan alat-alat rumah tangga biasa.
Peremajaan  jamur  antagonis  spesifik lokasi Trichoderma harzianum Proses produksi biofungisida dimualai dengan peremajaan jamur antagonis  spesifik  lokasi Trichoderma harzianum yang  telah  terseleksi  dalam medium pertumbuhan  jamur. Isolat diremajakan  pada  medium  buatan  yang sesuai  untuk  mendukung  pertumbuhan jamur  tersebut  yaitu  medium  PDA (Potato Dekstrose Agar) dan diinkubasikan  pada  suhu  27 o C  selama  7
hari. Peremajaan jamur tersebut dimaksudkan  untuk  membuat  kondisi jamur  tersebut  aktif  kembali  dan  dalam kondisi  sel  yang  optimal.  Di  dalam medium  PDA  isolat  tumbuh  subur  serta berkembang  dengan  pesat  pertumbuhan sporanya  secara  optimal  pada  umur pertumbuhan  7  hari  (7  x  24  jam).  Isolat berwarna hijau tua, tumbuh menyebar ke samping  pada  medium  pertumbuhan  di cawan  petri  (gambar  1).  Pada  umur pertumbuhan  7  hari,  isolat  kemudian sudah  dapat  diperlakukan  lebih  lanjut yaitu  untuk  produksi  massal  isolat  dan formulasi.
Gambar 3. Pertumbuhan jamur Trichoderma  harzianum pada  umur  7 hari masa inkubasi, pada suhu 27 o C. Penentuan  waktu  generasi jamur antagonis spesifik lokasi Trichoderma
harzianum dan produksi massalnya Penentuan  waktu  generasi  isolat jamur Trichoderma harzianum dimaksudkan  untuk  mengetahui  dan menetapkan  keadaan/  kondisi  fisiologis isolat jamur yang optimal untuk diformulasikan.  Produksi  massal  jamur antagonis Trichoderma harzianum dilakukan pada media beras jagung pecah karena  pada  media  ini  pertumbuhan jamur  diketahui  paling  optimal  dan mempunyai  waktu  generasi  paling  tinggi pada masa inkubasi 7 hari. Keadaan isolat dengan  pertumbuhan  yang  optimal  ini yang  juga  disebut  fase  pertumbuhan  log ( log  phase ),  perlu  diketahui  untuk menentukan  bahwa  isolat  telah  dapat dipakai pada tahapan produksi selanjutnya  yaitu  bisa  diformulasikan pada  beberapa  medium  pembawa  yang tepat.
Pada penelitian ini waktu generasi isolat  jamur Trichoderma  harzianum diketahui  dengan  menghitung  jumlah spora/konidiospora per 24 jam pada masa inkubasi isolat pada medium pertumbuhan  beras  jagung  pecah  mulai hari  ke  4.  Dari  perhitungan  jumlah spora/konidiospora  isolat  jamur  per  24 jam  masa  inkubasi  diketahui  bahwa waktu generasi tertinggi (fase log) adalah 3428 yaitu pada umur pertumbuhan isolat pada    hari  7-8.  Dengan  demikian  dapat disimpulkan bahwa untuk memformulasikan dengan beberapa media  pembawa  maka  konidiospora jamur Trichoderma  harzianum dapat diambil  pada  umur  7  hari  pada  masa inkubasi  pada  media  pertumbuhan  beras jagung  pecah  tersebut.  Hal  tersebut didasarkan  pada  data  bahwa  jumlah konidiospora jamur Trichoderma harzianum mempunyai  jumlah  tertinggi. (Penghitungan waktu generasi selengkapnya pada lampiran).
Tabel  1:    Waktu  generasi  isolat  jamur Trichoderma  harzianum pada  media  beras jagung pecah pada umur inkubasi 4-9 hari
Waktu Generasi ( G ) Ulangan ( sampel media beras jagung ) 1 2 3 G1( hari ke 4-5) 83,62 39,87 79,73 G2( hari ke 5-6) 167,83 347,83 126,316 G3( hari ke 6-7) 3200 118,227 12,103 G4( hari ke 7-8) 3428,571 827,586 11,857 G5( hari ke 8-9) 375 140,351 3200 Alternatif  produksi  massal  isolat  jamur
Trichoderma harzianum dapat dilakukan juga  pada  beberapa  media  sampah pertanian dengan tahapan sebagai berikut:
 Ditimbang  alang-alang/  sekam/ kompos/  pupuk  kandang/  serbuk gergaji+dedak  @50 gram.
 Masing-masing  jenis  media  yang telah ditimbang, dicuci dan ditiriskan, kemudian dikukus menggunakan panci dandang
selama ± 10 menit.
 Disterilisasi menggunakan autoclave  selama  15  menit  pada
temperatur 121 ºC dan tekanan 1,5 atm.
 Media  yang  telah  disterilisasi kemudian  didinginkan,  setelah dingin masing-masing bahan media  pembawa  diinokulasikan jamur T.harzianum sebanyak  1 jarum ose, secara aseptis di dalam ruang inkas.
 Diinkubasi selama ± 7 hari.
(a)                                                             (b)
(c)
(d) Gambar 4 : Produksi massal T.harzianum pada media (a) sekam, (b) alang-alang, (c) dedak + serbuk gergaji, dan (d) (e) kompos, setelah inkubasi selama 7 hari.
Formulasi dari biofungisida berbahanbaku jamur Trichoderma harzianum
Berdasarkan  pada  hasil  di  atas yaitu  telah  didapatkan  waktu  generasi untuk  jamur Trichoderma  harzianum tetinggi  yaitu  sebesar  3428  pada  masa inkubasi 7-8 hari pada media pertumbuhan beras jagung pecah.
Selanjutnya untuk formulasi jamur Trichoderma  harzianum dapat  dilakukan dengan  standart  masa  inkubasi  7  hari pada  media  perbanyakan  beras  jagung pecah tersebut. Formulasi jamur antagonis  spesifik  lokasi Trichoderma harzianum pada  penelitian  ini  selain dilakukan  pada  media  talk  dan  kaolin, juga  dilakukan  pada  media  pertumbuhan pada  beberapa  jenis  sampah  pertanian seperti  alang-alang,  kompos,  sekam, pupuk  kandang  yang  dicampur  dengan masing-masing  media  tersebut  dengan talk dan kaolin.
Pembuatan  Formulasi  Media  Padat dari Jamur Trichoderma harzianum Beberapa  jenis  sampah  pertanian dapat  dipakai  sebagai  medium  pembawa isolat jamur Trichoderma harzianum. Hal tersebut  didasarkan  pada  komposisinya
yang  minimal  mengandung  selulosa sehingga  mampu  digunakan  sebagai medium bagi pertumbuhan jamur saprofitik  secara  umum  seperti  jenis Trichoderma harzianum . Sampah pertanian  seperti  alang-alang  (yang  juga menjadi gulma tanaman budidaya) sangat penting  dimanfaatkan  sebagai  medium alternatif  pembawa  konidia  jamur.  Hal tersebut  karena  alang-alang  merupakan gulma  pengganggu  tanaman  budidaya yang  memang  keberadaannya  harus dikendalikan  secara  periodik.  Selain  itu alang-alang  bukan  merupakan  sumber pangan manusia seperti beras dan jagung yang  keberadaannya  dibutuhkan  manusia sebagai sumber pangan yang mengandung karbohidrat (sebagai sumber tenaga/kalori bagi kebutuhan gizi manusia). Selain alang-alang sebagai medium pembawa konidia jamur Trichoderma  harzianum ,  Sekam  padi yaitu  lapisan  keras  yang  membungkus beras dan merupakan limbah penggilingan gabah dapat juga digunakan sebagai  medium  pembawa konidia jamur Trichoderma  harzianum .  Dari  proses penggilingan  gabah  akan  dihasilkan  16,3 –  28%  sekam.  Sekam  padi  mempunyai
kadar selulosa yang cukup tinggi sehingga  sangat  cocok  untuk  media pembawa  dan  pertumbuhan  konidia jamur Trichoderma  harzianum .  Medium
alternatif pembawa konidia jamur Trichoderma  harzianum yang  lain  juga dapat  digunakan  seperti  kaolin,  kompos, bekatul atau dedak dan pupuk kandang.
Hasil pengamatan :
(formulasi media beras jagung) (formulasi media sekam)
(formulasi media dedak + serbuk gergaji)
(formulasi media alang-alang)
(formulasi media kompos) (formulasi media pupuk kandang)
Gambar 5. Tampilan Produk biofungisida media padat berbahanbaku jamur
Trichoderma harzianum dengan bahan pembawa dari beberapa jenis sampah pertanian
3.2. Pembuatan Formulasi Media Cair dari Jamur Trichoderma harzianum Telah diperoleh biofungisida berbahanbaku  Jamur Trichoderma harzianum
Dengan médium pembawa berbahan cair dari ekstrak sampah pertanian.
Gambar 7. Rangkaian Fermentor seder- hana Formulasi cair dari Ekstrak kentang
Gambar 8.  Rangkaian Fermentor seder- hana Formulasi Cair dari Ekstrak Alang- alang
Gambar 9. Rangkaian Fermentor sederhana Formulasi Cair dari  kompos
Gambar 10. Rangkaian Fermentor sederhana Formulasi Cair dari Ekstrak Jagung
Gambar 11. Hasil Fermentasi T. harzianum dalam Media Cair dari Ekstrak kentang, Ekstrak alang-alang, Ekstrak kompos dan Ekstrak jagung (dari kiri ke kanan) setelah masa inkubasi selama 7 hari Dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  isolat jamur spesifik lokasi terseleksi Trichoderma harzianum dapat diperbanyak  secara  massal  pada  medium pembawa  dari  sampah  pertanian  baik dalam media cair maupun padat. Selanjutnya  isolat  jamur  spesifik  lokasi terseleksi Trichoderma  harzianum dapat diproduksi  ke  dalam  bentuk  formulasi biofungisida pada medium  padat  maupun cair  dengan  medium  pembawa  dari beberapa jenis sampah pertanian.
Produk  biofungisida  berbahan baku  jamur  spesifik  lokasi  terseleksi Trichoderma  harzianum direkomendasi- kan  untuk  segera  diaplikasikan  oleh  para petani  kentang  untuk  mengendalikan
penyakit  lodoh  pada  tanaman  kentang khususnya  di  sentra-sentra  pertanaman kentang  di  Provinsi  Jawa  Tengah  yang diketahui  endemik  untuk  penyakit  lodoh tersebut.

## Daftar  Pustaka
Alexander,  M.  1977. Introduction  to  soil microbiology .  John  Wiley  and Sons. New York.
Alexopoulos,C.J., C.W. Mims, M.
Balackwell.  1996. Introductory Mycology .  Fouth    Edition.  John
Willey and Sons Inc. USA. Anonim.  2002. Pedoman  Penerapan Agen Hayati Dalam Pengendalian  OPT    Tanaman Sayuran. Direktorat  Jenderal Bina Produksi Hortikultura. Direktorat Perlindungan Hortikultura. Jakarta. 49 hal. Arwiyanto,  2000. Pengembangan  Agens Hayati untuk Tanaman Hortikultura . Departemen Pertanian Jakarta. Basuki,  T.  1988. Isolasi  Kapang-kapang Khusus: Kapang Selulolitik .
PAU    Bioteknologi  Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Barnes, Ervin H. 1997. Atlas and Manual of  Plant  Pathology .  Apleton- Century-    Crofts.  New  York. Hal.126-130
Barnett,  H.L.  dan  B.B.  Hunter.  1972. Illustrated  Genera  of  Imperfect Fungi .    Burgess  Publ.  Co.
Minneapolis. Benhamou,  N  dan  I.  Chet.  1993.  Hyphal Interactions Between Trichoderma  harzianum and Rhizoctonia solani : Ultrastructure and Gold Cytochemistry of the Mycoparasitic process. Phytopathology 83: 1062- 1071
Bertha  Hapsari,  2003.  Stop  Fusarium dengan  Trichoderma. Trubus
404- XXX .  Hal. (42-43).
Cholil,  A  dan  Latief  Abadi.  1991.
Penyakit-penyakit penting tanaman  pangan .    Pendidikan Program Diploma Satu Pengendalian  Hama  Terpadu. Fakultas  Pertanian  Universitas Brawijaya Malang.
Domsch, K.H, W. Gams., T.H. Anderson. 1980. Compendium  of  Soil Fungi. Volume  1  and  2. Academic  Press.  A  Subsidiary of  Harcourt  Brace  Javanovich Publisher. Djafarudin. 2000. Dasar-dasar Pengendalian Penyakit Tanaman . Bumi Aksara.  Jakarta. Enary,  T.M.  and  M.L.L.  Paavola.  1987. Enzymatiz
hydrolysis of cellulose: Is The  current Theory of  of  The  Mechanisms  of Hydrolysis Valid Critical . Reviews    In  Biotechnology. Issue 1 (5): 67-87.
Gams, W.,H.A. Van der Aa, A.I. Van der Plaats Niterik, R.A. Samson, J.A. Stalpers.  1987. CBS  Course  of Mycology .  Centralbureau  Voor
Schimmelcultures.  Institute  of Royal. Netherlands. Pp.4. Harian  Umum  Suara  Merdeka.  Edisi: Senin, 25 Mret 2002. Trichoderma harzianum Biofungisida yang Ramah Lingkungan.
Katayama,  Katsumi,  dan  Teramoto,
Takeshi.  1997. Seed  Potato Production  and    Control  of
Insect  Pest  and  Diseases  in
Indonesia ,  in  Agrochemicals Japan Journal. Japan-Plant
Protection.
Lewis,  J.A.  and  G.C.  Papavizas.  1983.
Production  of  Clamidospores and Conidia  by Trichoderma sp. In  Liquid  and  Solid  Growth Media. Soil Biology and Biochemistry, 15 (4): 351-357. Malloch,  D.  1997. Moulds  Isolation, Cultivation, Identification, Mycology. Toronto: Departement of Botany, University of Toronto. Novizan.2002. Membuat dan Memanfaatkan  Pestisida  Ramah Lingkungan. Agromedia Pustaka.
Jakarta.94 Hal. Nuryani,  Wakiah,  Hanudin,  I  Djatnika, Evi  Silvia  dan  Muhidin.  2003. Pengendalian Hayati Layu Fusarium  pada  Anyelir  dengan Formulasi Pseudomonas fluorescens,  Gliocladium  sp ., dan Trichoderma  harzianum . Jurnal  Fitopatologi  Indonesia (Vol 7) No. 2: 71-75 pp.
Purbani,  Enny;  Yan  Suhendar;  Imam;
Muhanda.  2007.  Ayo  Garap Bisnis  Benih.    Dalam Agrina Vol. 2- No 47. Hal. 4-7.
Purwantisari,  Susiana.  2004. Uji  Potensi Kapang  Antagonis  Trichoderma lignorum Sebagai Agen Pengendali Hayati Kapang Patogen  Phytopthora  infestans Penyebab Penyakit Utama Tanaman Kentang . Laporan
Penelitian.  FMIPA  Universitas
Diponegoro Semarang.
Rifai, M.A. 1969. A revision of the genus Trichoderma . Mycological Papers 116: 1-56
Rukmana,  Rachmad.  1997. Kentang: Budidaya  dan  Pasca  Panen . Yogyakarta:  Kanisius. Rukmana,  Rachmad  dan  Saputra.  1997.
Penyakit-penyakit tanaman Hortikultura dan Teknik Pengendalian . Yogyakarta: Kanisius. Salma,  S  dan  L.  Gunarto.  1999. Enzim Selulase dari Trichoderma harzianum. Buletin    AgriBio
Vol.  (2)  No.  2.  Balai  Penelitian Bioteknologi  Tanaman  Pangan. Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian Bogor.
Samways, M. J. 1981. Biological Control of  Pest  and  Weeds .  Bangalore.
India:  Mac.Millan.
Schisler, dkk.2004. Formulation of Bacillus  spp.  for  Biological Control  of  Plant  Diseases. The
American
Phytopathological
Society. Vol.94, No.11, 2004. Semangun,  H.  1989. Penyakit-Penyakit Tanaman  Hortikultura .  Gadjah
Mada  Press. Yogyakarta. 808 p.
Srilakhsmi,  P.,  R.P.  Thakur,  K.  Satya Prasad, V.P. Rao. 2001. Identification  of    Trichoderma species  and  their  Antagonistic Potential  Against  Aspergillus flavus in Groundnut . International Arachis Newaletter 21: 40-43.
Sukara,  Endang.  2005. Keanekaragaman Hayati  (Emas  Hijau)  Alternatif
Bagi    Indonesia  Keluar  Dari Krisis Multidimensi . Orasi Pengukuhan Ahli Peneliti
Utama.  Berita  Biologi.  Pusat Penelitian Biologi-  LIPI. Bogor, Indonesia.
Trianto  dan  Gunawan  Sumantri.  2003.
Pengembangan Trichoderma harzianum. Untuk Pengendalian  OPT  Pangan  dan
Hortikultura . Makalah. Lab.
PHPT  Wilayah Semarang. Tri  Mardi,  Yan  Suhendar  dan  Muhanda, 2007. Masih Berpeluang Dikembangkan .    Agrina.  Vol.  2 No 47.
Tsao,  P.H.  1983. Factors  Affecting Isolation  &  Quantitation  of Phytophthora from  soil . In D.C.
Erwin,  S.B.  Garcia  dan  P.H. Tsao.  Phytophthora  its  Biology, Taxonomy  and  Ecology.  The American Phytopatological Society. St. Paul. Hal. 219-236. Utami  K.P.,  2000. Strain  Ganas  Ancam Kentang . Trubus no 372-
November/XXXI. Wahyuno,  Dono,  Dyah  Manohara  dan Karden  Mulya.  2003. Peranan Bahan Organik pada Pertumbuhan dan Daya Antagonisme Trichoderma harzianum  dan  pengaruhnya terhadap  Phytopthora  capsici . Jurnal    Fitopatologi  Indonesia (Vol 7) No. 2: 38-44 pp.
Wibowo, Arif dan Suryanti. 2003 . Isolasi dan  Identifikasi  Jamur-jamur Antagonis    terhadap  Patogen Penyebab  Penyakit  Busuk  Akar dan  Pangkal  Batang    Pepaya . Jurnal  Fitopatologi  Indonesia (Vol 7) No. 2: 38-44 pp.
Yurnaliza.  2002. Senyawa  Khitin  dan Kajian Aktivitas Enzim Mikrobial Pendegradasinya .
Tesis.  Jurusan  Biologi.  FMIPA, USU Medan.

## LAMPIRAN

## Pembuatan biofungisida cair
Bahan: Kentang/ Jagung, Alang-alang dan Kompos masing-masing 150 gram, n Gula pasir 10 gram 4 kantong, Aquadest,  kapas dan Aluminium foil dan larutan   KmNO 4 (3 gram/Liter) dan Alkohol 70 % Alat   : Panci, Erlenmeyer dan Saringan, Fermentor sederhana, Pisau, Glass wool dan Beaker glass, Kompor, Sendok dan Jarum ose
Dibuat  empat  macam  formulasi media  cair  masing-masing  dari  ekstrak kentang,  ekstrak  jagung,  ekstrak  alang- alang  dan  ekstrak  kompos.  Selanjutnya dibuat ekstrak masing-masing dari kentang, jagung, alang-alang dan kompos sebanyak  150  gram  dalam  1000  ml aquadest  direbus  slama  kurang  lebih  10 menit.  Masing-  masing  ekstrak  yang didapat  disaring  dan  ditampung  dalam beaker  glass  bila  perlu  tambahkan aquadest  agar  volume  tetap  1000  ml. Tambahkan  gula  pasir  (Dextrosa)  dan aduk sampai larut.
Larutan  gula  dan  ekstrak  yg didapat  disaring  dan  dimasukkan  ke dalam erlenmeyer.
Kemudian dimasukkan  ke  dalam  autoclave  suhu diatur  121ºC  dengan  tekanan  1,5  atm selama  kurang  lebih  15  menit.  Larutan masing-  masing  formulasi  didinginkan selanjutnya  diinokulasi  isolat  kapang agens  hayati T.harzianum ke  dalam formula  sebanyak  3  jarum  ose,  kocok sampai  homogen.  Dengan  fermentor sederhana  formula  yang  telah  diinokulasi kapang T.harzianum diinkubasikan selama  ±7  hari  dan  biakan  sudah  dapat digunakan.

## Fermentor sederhana pembuatan biofungisida formula cair
Gambar 1.  Skema pengembangan formulasi media cair dengan fermentor sangat sederhana