## KAPASITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK BUAH RUKAM (Flacourtia rukam)
MENGGUNAKAN METODE MICROWAVE ASSISTED EXTRACTION (MAE)
Antioxidant Capacity of Rukam Fruit Extract (Flacourtia rukam) Using Microwave Assisted Extraction (Mae) Method
Inas Fadiyah, Iin Lestari, Robby Gus Mahardika *
Department of Chemistry, Faculty of Engineering, Universitas Bangka Belitung Gg. IV No. 1, balunijuk, Merawang, Kabupaten Bangka, Kepulauan Bangka Belitung
*Corresponding author, e-mail: robbygusmahardika@gmail.com
Received: August. 2019 Published: Jan. 2020

## ABSTRACT
Rukam fruit ( Flacourtia rukam ) is one of the species spread in Indonesia, specifically Bangka Island. Rukam has a  higher  phenolic ratio  than  guava  ( Psidium  guajava ).  Phenolic  compounds  have  a  major  role  as  antioxidants, while  antioxidants  have  the  ability  to  fight  free  radicals.  Therefore  a  study  was  conducted  to  examine  the application  of  secondary  metabolites  and  antioxidant  bioactivity  of  the Flacourtia  rukam species  using  the Microwave  Assisted  Extraction  method.  Rukam  fruit  extract  is  obtained  by  using  the  Microwave  Assisted Extraction (MAE) method. While for the antioxidant test using the DPPH method. The test results of antioxidant activity of rukam fruit extract with ethanol solvent were obtained with IC 50 value 47.7022 ppm and in rukam fruit extract with acetone solvent IC 50 33.1702 ppm obtained using this antioxidant antioxidant powder was very strong.
Keywords: Flacourtia rukam, DPPH, antioxidant activity, Microwave Assisted Extraction.

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  agraris  yang beriklim  tropis  sehingga  Indonesia  memiliki keanekaragaman  hayati  yang  sangat  melimpah salah satunya adalah tanaman rukam ( Flacourtia rukam ) yang merupakan tanaman asal Indonesia. Berdasarkan hasil penelitian sebelumnya menyatakan  bahwa  buah  rukam  memiliki kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  fenolik lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  jambu  batu ( Psidium  guajava )  (Julio  dkk.,  2018).  Senyawa fenolik  diketahui  sangat  berperan  pada  aktivitas antioksidan,  semakin  besar  kandungan  senyawa golongan  fenolnya  maka  semakin  besar  juga aktivitas antioksidannya (Shahwar dkk., 2010).
Flacourtia  rukam merupakan  salah  satu spesies  dari  famili Flacourtiaceae yang  banyak tersebar  di  Indonesia  khususnya  daerah  Sumatra seperti pulau Bangka dan cukup mudah ditemui di daerah  yang  masih  alami  ditumbuhi  hutan. Spesies Flacourtia  rukam merupakan  salah  satu spesies tumbuhan famili Flacourtiaceae memiliki keunikan,  yaitu  pohonnya  berduri  dengan  tinggi tanaman  7  m,  diameter  batang  17  cm.  Bentuk buah  dari  spesies Flacourtia  rukam bulat  kecil
berwarna  hijau  saat  muda  dan  merah  saat  tua. Belum  banyak  dilakukan  penelitian  mengenai Flacourtia rukam, tetapi spesies ini sudah banyak digunakan  untuk  membuat  kue  dan  selai,  daun diaplikasikan  untuk  mengobati  kelopak  mata yang  meradang,  buah  digunakan  sebagai  obat diare dan disentri untuk anak-anak sampai remaja. Sedangkan  rebusan  akar  digunakan  oleh  wanita setelahnya persalinan (Rana dkk., 2018).
Penelitian tentang kajian metabolit sekunder terhadap Flacourtia  rukam belum  banyak dilakukan.  Penelitian  ini  melaporkan    isolasi kandungan  diacylglycerols  monogalactosyl  (1), β-sitosteryl  3β-glucopyranoside-6β-  HAI-  ester asam  lemak  (2),  betasitosterol  (3),  triasilgliserol (4),  dan  klorofil  (5)  dari Flacourtia  rukam (Gambar  1) (Ragasa  dkk.,  2016) . Senyawa  1 adalah  non-fosfor  lipid  paling  banyak  di  alam. Senyawa  ini  dilaporkan  menunjukkan  sejumlah sifat  biologis,  seperti  antitumor,  anti-virus, algicidal, dan anti-inflamasi (Ragasa dkk., 2015). Senyawa  2  merupakan  ester  asam  lemak mempunyai  aktivitas  sitotoksisitas  terhadap Bowes  (melanoma)  dan  sel  kanker  MCF7 (payudara). Beta-sitosterol memiliki penghambatan  pertumbuhan  efek  pada  payudara
1
manusia  (MCF7)  dan  sel  adenokarsinoma. triasilgliserol  memiliki  aktivitas  antimikroba terhadap S. aureus, P. aeruginosa, B. subtilis, C. albicans,  dan  T.  Mentagrophytes .  klorofil  dan berbagai  turunannya  sering  digunakan  dalam pengobatan tradisional dan untuk tujuan terapeutik.  Selain  itu Kandungan  fenolik
berkorelasi terhadap aktivitas antioksidan (Ragasa dan Jesus, 2014)
Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  buah rukam  dapat  dimanfaatkan  sebagai  sumber antioksidan  untuk  penangkal  radikal  bebas penyebab berbagai penyakit. Selain itu Flacourtia rukam mengandung metabolit sekunder  lainnya  yang  sangat  berguna  untuk tujuan  pengobatan  seperti  saponin,  flavonoid, polifenol, dan tanin (Barcelo, 2015). Hal ini yang menyebabkan  buah  rukam  dapat  digunakan sebagai antioksidan.
Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat menghambat aktivitas radikal bebas dengan cara  kerja    menyerahkan  satu  atau  lebih elektronnya  kepada  radikal  bebas  sehingga
menjadi  bentuk  molekul  yang  normal  kembali serta  menghentikan  berbagai  kerusakan  yang dapat  ditimbulkan  (Mahardika  dan  Roanisca, 2018).  Sekarang  ini  antioksidan  menjadi  topik penting dalam berbagai disiplin ilmu (Julio dkk., 2018). Hal ini didasari karena semakin diketahui bahwa  sebagian  besar  penyakit  diawali  oleh
reaksi oksidasi yang berlebihan di dalam tubuh.
Banyak metode yang dapat digunakan untuk mengekstraksi senyawa aktif tumbuhan, biasanya digunakan  metode  maserasi  yang  membutuhkan banyak  waktu  dan  tidak  efektif  (Safdar  dkk., 2017). Oleh sebab itu diperlukan pengembangan mengenai  metode  ekstraksi  yang  lebih  efektif khususnya  dari  efisiensi  waktu  dan  hasil rendemen yang dihasilkan.
Salah  satu  pengembangan  metode  ekstraksi saat  ini  adalah  menggunakan  microwave  atau yang  dikenal  dengan  istilah Microwave-Assisted Extraction (MAE).  Metode  ini  menggunakan energi  yang  ditimbulkan  oleh  gelombang  mikro dengan  frekuensi  0,30-300  GHz  dalam  bentuk
1 2 3 4 5
Gambar 1. Kandungan Senyawa pada Flacourtia rukam
radiasi non-ionisasi elektromagnetik. Keuntungan MAE adalah laju ekstraksi lebih tinggi, konsumsi pelarutnya  rendah,  dan  penggunaan  waktu ekstraksi  yang  lebih  signifikan  dibandingkan dengan metode maserasi (Hemwimon dkk. 2007). Tetapi tidak semua ekstraksi menggunakan MAE pada  setiap  tumbuhan  menghasilkan  antioksidan yang tinggi juga. Senyawa yang termolabil (tidak tahan  panas)  akan  rusak  jika  diekstraksi menggunakan MAE dengan power dan suhu yang tinggi  (Kaufmann  dan  Christen,  2002).  Oleh sebab itu, perlu kajian khusus mengenai ekstraksi senyawa  antioksidan  dari  rukam  ( Flacourtia rukam ) menggunakan MAE.

## METODOLOGI

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  blender, Microwave  Assisted  Extraction (MAE)  (Gambar 1), rotary  evaporator, corong,  botol  sampel, hotplate, tabung reaksi, gelas kimia, pipet volum, labu ukur, inkubator, spektrofotometer UV-Vis.

## Bahan
Buah  rukam  yang  diperoleh  dari  desa  Air Duren,  Kecamatan  Mendo  Barat,  Kabupaten Bangka ( LS  -2,085716, BT  106,021224) . Bahan kimia  yang  digunakan  adalah  metanol,  etanol,
aseton,
akuadestilat,
2,2-diphenil-1-
picrylhydarzyl (DPPH).

## Prosedur Kerja Preparasi Sampel
Sampel  yang  digunakan  dapat  berupa  buah yang  basah  dan  kering.  Selanjutnya  sampel tersebut  dijemur  dibawah  sinar  matahari  sampai kering.  Sampel  yang  telah  kering  diblender hingga  menjadi  serbuk.  Kemudian  sampel tersebut  diayak  dengan  ayakan  mesh  60  untuk mendapatkan  bubuk  halus.  Lalu  disimpan  ke dalam wadah kedap udara.
Ekstraksi Dengan Mikrowave Assited Extraction (MAE)
Serbuk  kering  buah  rukam  ( Flacourtia rukam )  diambil  sebanyak  kurang  lebih  0,1  g dimaskkan  10  ml  pelarut  dalam  tabung mikrowave.  Pelarut  yang  digunakan  adalah aseton.  Masing-masing  pelarut  (etanol  dan aseton) digunakan 10 tabung mikrowave. Tabung selanjutnya dimasukkan  dalam Microwave Accelarated  Reaction  System (MARS  6) pada suhu 60 o C (1200W, 2450 MHz) selama 10 menit
(Enggiwanto  dkk.,  2018).  Setelah  itu  dipisahkan antara filtrat dengan residu menggunakan corong. Filtrat yang diperoleh dievaporasi dengan rotary vacuum  evaporator hingga  diperoleh  ekstrak buah rukam yang pekat.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan metode DPPH yang pengukurannya  menggunakan  spektrofotometer. Dengan  cara  Sebanyak  1  mL  larutan  sampel dengan  konsentrasi  10;  30;  40;  dan  80  ppm dicampurkan  dengan  2  mL  larutan  DPPH  0,15 mM. Selanjutnya larutan tersebut dihomogenkan dan didiamkan selama 15 menit pada suhu ruang (sekitar  25 o C).  Kemudian  absorbansinya  diukur pada  λ  maks  515  nm  dengan  spektrofotometer UV-Vis  (Pangestu,  2017).  Kemudian  masing- masing  blanko  dan  kontrol  negatif  yang digunakan adalah 2 mL pereaksi DPPH 0,15 mM. Lalu ditambahkan 1 mL masing-masing pelarutnya kemudian diukur dengan spektrofotometer UV-Vis.

## Analisis Data
Aktivitas  antioksidan  pada  buah  rukam ( Flacourtia rukam ) dianalisis berdasarkan kekuatan  inhibisinya.  Kekuatan  inhibisinya dihitung menggunakan rumus:
% Inhibisi = {Abs kontrol – ( 𝐴𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴𝑏𝑠𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 ) x100%}
Aktivitas peredaman radikal bebas biasanya dinyatakan  sebagai  presentase  peredaman  dari DPPH  dan  dapat  juga  dinyatakan  dengan  IC 50 . Persamaan  garis  yang  diperoleh  kemudian digunakan  untuk  mencari  nilai  IC 50 (konsentrasi yang diperlukan untuk menginhibisi 50% radikal bebas (Kusbandari dan Prasetyo, 2018).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstrak Buah Rukam
Ekstraksi  buah  rukam  dilakukan  dengan menggunakan metode Microwave Assisted Extraction (MAE) dan maserasi. Microwave yang digunakan adalah MARS 6 dari CEM Corporation (Gambar  2) . Pada  ekstraksi  buah rukam  dengan  metode  MAE  diperlakukan sebanyak  1  gram  serbuk  halus  buah  rukam ditambahkan  10  ml  pelarut  pada  tabung microwave  dengan  perbandingan  sampel    1:  10. Pelarut yang digunakan adalah etanol dan aseton. Tabung selanjutnya dimasukkan dalam
1
Mikrowave  Assisted  Extraction (MARS  6) pada suhu 60 o C dan power sebesar 1200W selama 10 menit.  Hasil  yang  diperoleh  disaring  dan dievaporasi.  Rendemen  ekstraksi  buah  rukam disajikan pada Tabel 1.
Gambar 2. MARS 6 dari CEM Corporation
Berdasarkan  hasil  penelitian  pada  Tabel  1 dapat  dilihat  bahwa  perbedaan  penggunaan pelarut  yang  digunakan  dapat  mempengaruhi kelarutan  senyawa  aktif  yang  akan  diekstraksi. Pelarut  etanol  memilki  rendemen  hasil  ekstraksi yang lebih banyak dibandingkan aseton.
Kepolaran  senyawa  yang  terkandung  pada  buah rukam  mempunyai  kepolaran  yang  mendekati kepolaran  etanol  daripada  pelarut  aseton, sehingga  dapat  terekstrak  lebih  tinggi  dengan pelarut etanol (Riza dan Susanti, 2013). Merujuk hasil fitokimia yang telah dilaporkan dari spesies ini,  kemungkinan  senyawa polar  tersebut  berupa senyawa  alkaloid,  fenol  hidrokuinon,  dan flavonoid (Fadiyah dkk., 2019).
Tabel 1. Hasil Ekstraksi Buah Rukam
menggunakan MAE Pelarut Suhu ( o C) Waktu (menit) Rendemen Hasil Ekstrak Etanol 60 10 12,5 % Aseton 60 10 7,5 % Jika dibandingkan dengan metode maserasi.
Ekstrak etanol buah rukam menggunakan  metode  maserasi  selama  3  hari (pada  suhu  ruang)  didapatkan  rendemen  sebesar 28,6%,  sedangkan  jika  maserasi  menggunakan pelarut  aseton  didapatkan  rendemen  sebesar 19,1%  (Fadiyah  dkk.,  2019).  Hasil  ini  memang 2,3  kali  lebih  banyak  jika  dibandingkan  hasil
ekstraksi  menggunakan  MAE  dengan  pelarut yang sama. Tetapi waktu ekstraksi menggunakan maserasi  lebih  lama  432  kali  jika  dibandingkan menggunakan  MAE.  Begitupun  juga  hasil ekstraksi  menggunakan  pelarut  aseton.  Pada metode maserasi selama 3 hari memang memiliki rendemen  2,5  lebih  banyak  jika  dibandingkan menggunakan MAE. Tetapi waktu yang digunakan juga lebih lama. Melihat hasil tersebut, rendemen  ekstraksi  yang  dihasilkan  tidak sebanding waktu yang diperlukan untuk ekstraksi.
MAE menunjukkan lebih efisien dari segi waktu jika dibandingkan maserasi.
Hal  ini  diperkuat  juga  dengan  penelitian Hemwimon  dkk  (2007),  ekstraksi  antrakuinon dari Morinda citrifolia pada suhu 60 o C dan waktu yang  sama  rendemen  esktraksi  yang  dihasilkan jika menggunakan MAE lebih besar dibandingkan
menggunakan maserasi
(Hemwimon  dkk.,  2007).  Begitupun  juga  pada ekstraksi  senyawa  fenolik  pada Tristaniopsis merguensis ,    ekstraksi  menggunakan  MAE dengan  pelarut  aseton,  etanol,  dan  metanol memiliki  kandungan  total  fenolik  yang  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  metode  maserasi (Mahardika dan Roanisca, 2019).

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan metode DPPH. Aktivitas antioksidan  diamati  dari  perubahan  warna  pada larutan  DPPH.  Sampel  yang  telah  bercampur dengan  pelarut  dari  warna  ungu  kehitaman berubah  menjadi  sedikit  lebih  terang  dari  warna awalnya (Gambar 3).
Gambar 3. Uji Aktivitas Antioksidan Metode DPPH
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  dengan metode  DPPH  kemudian  diukur  menggunakan spektrofotometer pada panjang  gelombang maksimum  515  nm.  Hasil  pengukuran  dengan spektroskopi  diperoleh  nilai  absorbansi  yang kemudian digunakan untuk memperoleh persentase inhibisi ekstrak buah rukam.
1
Gambar 4. Nilai Inhibisi Ekstrak Aseton Buah

## Rukam
Berdasarkan  Gambar  4  tersebut  diperoleh persamaan  regresi  linear  y  =  0,8605x  +  21,457 dan nilai R 2 adalah 0,9115 untuk sampel ekstrak aseton  buah  rukam.  Jika  nilai  y  =  50  maka didapatkan  nila  IC 50 untuk  ekstrak  aseton  adalah 33,1702  ppm.  Nilai  inhibisi  dan  IC 50 ekstrak aseton  berbeda  dengan  etanol.  Nilai  inhibisi ekstrak etanol disajikan pada Gambar 5.
Gambar 5. Nilai Inhibisi Ekstrak Etanol Buah Rukam
Pada Gambar 4 tersebut diperoleh persamaan regresi linear y = 0,9033x + 6,9106 dan nilai R 2 = 0,9033. Dari persamaan ini maka didapatkan nilai IC 50 ekstrak  etanol  adalah  47,7022  ppm. Aktivitas  peredaman  radikal  bebas  biasanya dinyatakan  sebagai  presentase  peredaman  dari DPPH  dinyatakan  dengan  IC 50 .  Semakin  kecil nilai IC 50 maka semakin  baik aktivitas antioksidannya. Hasil pengujian aktivitas antioksidan  disajikan  pada  tabel  2.  Kategori aktivitas  antioksidan dinyatakan sangat kuat jika memiliki  nilai  IC 50 <  50  μg/ml,  kuat  untuk  IC 50 bernilai  50-100  μg/ml,  aktivitas  antioksidan sedang  jika  IC 50 bernilai  100-500  μg/ml,  dan bersifat  lemah  jika  nilai  IC 50 >  500  μg/ml  (Putri dan Hidajati., 2015).
Berdasarkan  hasil  Tabel  2  dapat  dilihat bahwa ekstrak buah rukam dengan pelarut aseton memiliki  nilai  antioksidan  yang  lebih  kuat  dari ekstrak  buah  rukam  dengan  pelarut  etanol. Aktivitas  antioksidan  ini  terjadi  dikarenakan adanya  reaksi  antara    molekul  difenil  pikri hidrazil  (DPPH)  dengan  atom  hidrogen  dari antioksidan yang terkandung dalam ekstrak buah rukam (Kusbandari dan Prasetyo, 2018). Menurut Putri  dan  Hidayati  (2015)  senyawa  antioksidan bereaksi dengan senyawa DPPH yang menyebabkan perubahan ungu menjadi kuning.
Tabel 2. Hasil aktivitas antioksidan ekstrak buah rukam
Sebelumnya telah dilakukan  uji antioksidan pada  tanaman  yang  satu  genus  dengan  rukam yaitu  pada F.  Jangomas,  F.  Indica,  F.  Inemris (Tabel  2).  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  aseton dan etanol buah rukam ( F. rukam ) pada penelitian ini lebih baik dibandingkan aktivitas antioksidan ekstrak  etil  asetat  dan  metanol  pada  spesies F. inermis .  Serta  lebih  baik  juga  jika  dibandingan ekstrak  kloroform,  metanol,  dan  petroleum  eter pada  spesies F.  jangomas. Tetapi  aktivitas antioksidan  pada  penelitian  ini  tidak  lebih  baik jika  dibandingkan  ekstrak  metanol  dan  aquades pada  spesies F.  indica (Rahman  dkk.,  2012) (College  dan  Pradesh,  2010) (Alakolanga  dkk., 2015) . Hal  ini  diduga    pada F.  indica banyak mengandung  senyawa  polar  yang  bersifat antioksidan
y = 0,8605x + 21,457 R² = 0,9115 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 In h ibi si ( % ) Konsentrasi Ekstrak (ppm) y = 0,9033x + 6,9106 R² = 0,9388 0 20 40 60 80 100 120 0 50 100 In h ibi si ( % )
Konsentrasi (ppm)
No. Sumber
Sampel Pelarut IC 50 (ppm) 1 Flacourtia rukam Etanol 47,7022 Aseton 33, 1702 2 Flacourtia jangomas (Rahman dkk., 2012) Kloroform 523,15 Metanol 1623,87 Pet. eter 5811,35 3 Flacourtia indica Merr (College dan Pradesh, 2010) Metanol Aquades 18 26 4 Flacourtia inermis (Alakolanga dkk., 2015) Etil asetat Metanol 66,20 212,95

## KESIMPULAN
Pada  penelitian  ini  diperoleh  persentasi rendemen  hasil  ekstrak  buah  rukam  dengan pelarut  etanol  adalah  12,%  dan  ekstrak  buah rukam dengan pelarut aseton adalah 7,5%. Hasil pengujian  aktivitas  antioksidan  menggunakan metode DPPH dengan pengukuran menggunakan spektrofotometer  UV-Vis    pada  ekstrak  buah rukam  dengan  pelarut  aseton  diperoleh  IC 50 33,17025  ppm  sedangkan  dengan  pelarut  etanol di[peroleh IC 50 47,7022 ppm yang menunjukkan bahwa  sifat  antioksidan    buah  rukam  ini  sangat kuat.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti berterima kasih kepada Kementrian Riset,  Teknologi,  dan  Pendidikan  Tinggi Direktorat Jenderal
Pembelajaran dan Kemahasiswaan yang telah memberikan bantuan dana penelitian berdasarkan SK No. 1020/B3.1/KM/2018

## DAFTAR PUSTAKA
Alakolanga,  A.  G.  A.  W.,  Kumar,  N.  S.,
Jayasinghe, L., Fujimoto, Y., 2015, Antioxidant  Property  And  Α-Glucosidase  , Α-Amylase and Lipase Inhibiting Activities of Flacourtia Inermis Fruits :
characterization of malic acid as an inhibitor of  the  enzymes J.  Food  Science  and Technology , 52, 8383–8388.
College, S. R. N. S., Pradesh, M., 2010, In vitro Antioxidant  Activity  of  Methanolic  and Aqueous  Extract  of  Flacourtia  indica  Merr Vedica  College  of  Pharmacy,  Bhopal, Madhya Pradesh, India, American-Eurasian J. Scientific Res. , 5(3), 201–206. Enggiwanto,  S.,  Istiqomah,  F.,  Daniati,  K.,
Roanisca,  O.,  Mahardika,  R.  G.,  2018, Ekstraksi  Daun  Pelawan  (Tristaniopsis merguensis) Sebagai Antioksidan Menggunakan Microwave Assisted Extraction  (MAE), Indones.  J.  Pure  and Applied Chem. , 1(2), 50–55.
Fadiyah, I., Lestari, I., Victory, S., Mahardika, R.
G., 2019, Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Buah Rukam ( Flacourtia rukam) menggunakan  metode  maserasi. Seminar Nasional  Penelitian  Dan  Pengabdian  Pada Masyarakat , 64–68.
Hemwimon, S., Pavasant, P., Shotipruk, A., 2007, Microwave-assisted
extraction of
antioxidative  anthraquinones  from  roots  of Morinda citrifolia. Separation and
Purification Technology , 54(1), 44–50.
Julio,  C.,  Camarena-tello,  Mart,  E.,  Garnica- romo,  M.  G.,  Saavedra-molina,  A.,  2018, Quantification  of  Phenolic  Compounds  and In  Vitro  Radical  Scavenging  Abilities  with Leaf Extracts from Two Varieties of Psidium guajava L . Antioxidants , 7(3), 1–12.
Kaufmann,  B.,  Christen,  P.,  2002,  Recent Extraction Techniques for Natural Products :
Microwave-assisted Extraction and Pressurised Solvent Extraction, Phytochemcal Analysis , 113(2), 105–113.
Kusbandari,  A.,  Prasetyo,  D.  Y.,  2018,
Determination of total phenolic content and antioxidant  activity  of  kawa  coffee  leaves ethanolic  extract  with  dpph  method. Media Farmasi , 15(2), 72–80.
Mahardika,  R.  G.,  Roanisca,  O.,  2018,
Antioxidant  activity  and  phytochemical  of extract  ethyl  acetat  pucuk  idat  (Cratoxylum glaucum  ). Indo.  J.  Chem.  Res ,  5(2),  481– 486.
Mahardika,  R.  G.,  Roanisca,  O.,  2019,
Microwave-Assisted Extraction of
Polyphenol  Content  from  Leaves  of Tristaniopsis  merguensis, ASEAN  J.  of Chemical Engineering , 19(2), 110–119.
Pangestu, N. S., 2017, Aktivitas Antioksidan Dan
Antibakteri Ekstrak Daun Jatropha gossypifolia L Abstrak Prosedur Penelitian . 1(1), 15–19.
Ragasa, C. Y., Jesus, J. De., 2014, Porphyrins and Polyprenol from Macaranga tanarius. Esearch  Journal  of  Pharmaceutical  , Biological  and  Chemical  Sciences , 5 (3),
701–708.
Ragasa, C. Y., Madeleine, J., Reyes, A., Tabin, T. J., S, M. C., Chiong, I. D., Urban, S., 2016, Chemical  Constituents  of  Flacourtia  rukam Zoli & Moritzi Fruit. Inter. J. Pharmaceutical  and  Clinical  Research , 8(12), 1625–1628.
Ragasa,  C.  Y.,  Ng,  V.  A.  S.,  Lazaro-llanos,  N., Carmen,  M.,  Tan,  S.,  Brklja,  R.,  Urban,  S., 2015,  Monogalactosyl  diacylglycerol  from Caulerpara  racemosa (Forsskal)  J.  Agardh,
Der Pharma Chemica , 7(7), 194–198.
Rahman,  M.  M.,  Habib,  M.  R.,  Hasan,  M.  R., Islam,  A.  M.  T.,  Khan,  I.  N.,  2012, Comparative Antioxidant Potential of Different  Extracts  of  Flacourtia  Jangomas Lour Fruits, Asian J. of Pharmaceutical and
Clinical Res. , 5 (1), 2011–2013.
Rana, Ghina, S. E., Lestario, L. N., Martono, Y., 2018, Effect of Various Concentration Sugar Addition  on  the  Color  Stability  of  Rukem Fruit Anthocyanin Extract (Flacourtia rukam Zoll. & Mor.), J. Aplikasi Teknologi Pangan , 7(4), 173–179.
Riza,  A.,  Susanti,  H.,  2013,  Penetapan  Kadar Fenolik  Total  Ekstrak  Metanol  Kelopak
Bunga  Rosella  Merah  ( Hibiscus  Sabdariffa
Linn)  Dengan  Variasi  Tempat  Tumbuh
Secara Spektrofotometri, J. Ilmiah Kefarmasian , 33 (3), 324–333.
Safdar, M. N., Kausar, T., Jabbar, S., Mumtaz, A., Ahad, K., Saddozai, A. A. (2017). Extraction and  Quantification  of  Polyphenols  from Kinnow  (Citrus  reticulate  l  .)  Peel  Using Ultrasound  and  Maceration  Techniques. J. Food and Drug Anal. , 25(3), 488–500.
Shahwar, D., Ahmad, N., Ullah, S., Raza, M. A., 2010, Antioxidant Activities of The Selected Plants  from  The  Family  Euphorbiaceae, Lauraceae,  Malvaceae  and  Balsaminaceae, African  Journal  of  Biotechnology ,  9(7), 1086–1096.