Penyarian Konstituen Organik Daging Buah Gaharu ( Aquilaria malaccensis Lamk.) dengan Metode Maserasi Berbantu Microwave dan Uji Aktivitas Sebagai Antioksidan
[Organic Constituent Extraction of Gaharu Fruit ( Aquilaria malaccensis Lamk.) Using Microwave Assisted Maseration Method and Activity Test as Antioxidant]
Imran 1* , Nurlian 1 , L.A. Kadir 1 , La Agusu 2 , Ruslan 3
1) Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,Universitas Halu Oleo
2) Jurusan Fisika, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Halu Oleo
3) Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Tadulako
Abstract. This study was conducted to determine the organic constituents and to test the antioxidant activity and toxicity of gaharu fruit pulp extract ( Aquilaria malaccensis Lamk.). Gaharu fruit pulp extract was obtained through Microwave Assisted Extraction (MAE) method and then extracted with a solvent with different polarity, namely ethyl acetate  and  n-hexane.  The  obtained  yield  of  ethyl  acetate  extract  of  the  gaharu  fruit  pulp  was  40.827%  w/v, whereas 0% w/v in n-hexane extract, therefore, no further test for n-hexane extract, so that the n-hexane extract was not tested for the next stage. The results of the organic constituents of the ethyl acetate extract of gaharu fruit pulp  showed  flavonoids,  saponins,  glycosides,  phenols  and  tannins.  Antioxidant  activity  testing  was  carried  out using the DPPH method with vitamin C as a positive control. The results of the antioxidant activity test showed that IC 50 of  ethyl  acetate  extract of  gaharu  fruit  pulp and  vitamin  C  were  143.789ppm  and  13.797ppm,  respectively. Extracts from microwave-assisted maceration that were partitioned with ethyl acetate solvent were categorized into moderate antioxidants because the IC 50 value was between 101-150ppm, while vitamin C was categorized as a strong antioxidant because the IC 50 value was between 0-100ppm. Toxicity testing was also carried out on ethyl acetate  extract  of  gaharu  fruit  pulp  using  the  BSLT  method.  The  results  of  the  toxicity  test  of  the  ethyl  acetate extract of gaharu fruit pulp showed activity with an LC 50 value of 11.282ppm. Based on this research, the ethyl acetate extract of gaharu fruit pulp is considered to have an anticancer potential.
Keywords: Gaharu fruit, MAE, antioxidant, toxicity
Abstrak. Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  konstituen  organik  dan  menguji  aktivitas  antioksidan  serta toksisitas ekstrak daging buah gaharu ( Aquilaria malaccensis Lamk.). Ekstrak daging buah gaharu diperoleh melalui metode  maserasi  berbantu  microwave  atau Microwave  Assited  Extraction (MAE),  kemudian  diekstraksi  dengan pelarut yang berbeda kepolarannya yaitu pelarut etil asetat dan n-heksan. Hasil ekstrak etil asetat daging buah gaharu diperoleh rendamen sebesar 40,827% b/v, sedangkan pada n-heksana tidak ada rendamen ekstrak yang terkandung (0%  b/v),  sehingga  pada  ekstrak  n-heksan  tidak  dilakukan  pengujian  tahap  berikutnya.  Hasil  konstituen  organik terhadap ekstrak etil asetat daging buah gaharu menunjukkan adanya flavonoid, saponin, glikosida, fenol dan tanin. Aktivitas antioksidan ditentukan dengan metode DPPH dan menggunakan vitamin C sebagai kontrol positif. Hasil uji aktivitas  antioksidan  menunjukkan  nilai  IC 50 ekstrak  etil  asetat  daging  buah  gaharu  dan  vitamin  C  berturut-turut 143,789 dan 13,797ppm. Ekstrak dari hasil maserasi berbantu microwave yang dipartisi dengan pelarut etil asetat dikategorikan ke dalam antioksidan sedang karena nilai IC 50 berada diantara 101-150ppm, sedangkan kontrol positif vitamin C dikategorikan ke dalam antioksidan kuat karena nilai IC 50 berada diantara 0-100ppm. Pengujian toksisitas juga  dilakukan  terhadap  ekstrak  etil  asetat  daging  buah  gaharu  menggunakan  metode  BSLT.  Hasil  uji  toksisitas ekstrak etil asetat daging buah gaharu menunjukkan aktivitas dengan nilai LC 50 11,282ppm. Berdasarkan penelitian ini, ekstrak etil asetat daging buah gaharu diduga memiliki potensi antikanker.
Kata kunci: Buah gaharu, MAE, antioksidan, toksisitas
Diterima:  15 Maret 2021, Disetujui: 9 April 2021 Sitasi:   Imran.,  Nurlian.,  Kadir,  L.A.,  Agusu,  L.,  &  Ruslan.  (2021).  Penyarian  Konstituen  Organik  Daging  Buah  Gaharu  ( Aquilaria malaccensis Lamk.)  dengan Metode  Maserasi  Berbantu Microwave dan  Uji Aktivitas  Sebagai Antioksidan. KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 7(1): 42-50.
https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/kovalen
*  Corresponding author E-mail : Imran.gaffar@yahoo.com
Imran et al.

## LATAR BELAKANG
Antioksidan merupakan senyawa penangkal radikal bebas dengan cara menstabilkan  radikal  bebas  sehingga  dapat mencegah kerusakan sel. Sumber antioksidan dapat  berasal  dari  alam  dan  memiliki kandungan kelompok senyawa polifenol (misalnya flavonoid), seperti pada tanaman teh, sayur-sayuran,  dan  buah-buahan  (Handayani et al. , 2014).
Aprilia et  al. (2015)  melaporkan  bahwa senyawa-senyawa  metabolit  sekunder,  seperti flavonoid,  senyawa  fenolik,  dan  terpenoid memiliki  aktivitas  antioksidan.  Seluruh  bagian tumbuhan  dapat  menjadi  sumber  antioksidan alami  mulai  dari  akar,  kayu,  kulit  kayu,  daun, bunga, buah, hingga biji (Nugraha et al. , 2015).
Salah  satu  jenis  tanaman  yang  dapat digunakan  sebagai  obat  tradisional  ialah tanaman Gaharu ( Aquilaria malacensis Lamk.), khususnya pada bagian buah.
Gaharu  termasuk  dalam  hasil  hutan Indonesia  yang  berpotensi  memiliki  senyawa yang  berkhasiat  sebagai  obat.  Masyarakat  di Kalimantan  Timur,  banyak  memanfaatkan tanaman  Gaharu  sebagai  obat  luka  bakar. Bagian  daun  dari  tanaman  gaharu  diduga memiliki kandungan metabolit sekunder golongan  flavonoid  yang  berfungsi  sebagai antioksidan.  Jumiarni  &  Komalasari  (2017) melaporkan  bahwa  daun  tua  gaharu  yang diekstrak  dengan  pelarut  metanol  memiliki aktivitas antioksidan, sedangkan yang diekstrak  dengan  pelarut  kloroform  memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Escerichia coli dan Staphylococcus  aureus .  Penelitian lainnya  menjelaskan  bahwa  bagian  daun  dari tanaman gaharu mengandung senyawa flavonoid,  terpenoid,  alkaloid,  glikosida,  dan tanin (Aprilia et al ., 2015). Selain potensi daun
Gaharu yang sangat besar sebagai antioksidan,  bagian  buahnya  juga  dapat memiliki manfaat yang sama.
Buah gaharu memiliki banyak kandungan metabolit  sekunder.  Buah  gaharu  terdeteksi memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder, meliputi kelompok minyak atsiri yang terdiri  atas  eudesmana,  valencana,  dan sequiterpenoid;
senyawa
furanoid sesquiterpen, seperti α-agarofuran, β- agarofuran,  dan  agarospirol;  dan  polifenol (Zulfa,  2019).  Buah  gaharu  secara  tradisional banyak  dimanfaatkan  sebagai  obat  stroke, tumor, dan kanker karena memiliki kandungan polifenol.
Daging  buah  gaharu  dapat  diekstraksi dengan  menggunakan  metode  maserasi  dan microwave . MAE ( Microwave Assited Extraction ) digunakan untuk mengekstraksi zat aktif di dalam bagian tanaman dengan bantuan energi  gelombang  mikro.  Teknologi  MAE sangat  tepat  digunakan  untuk  mengekstrak senyawa  yang  tidak  tahan  suhu  tinggi  atau thermolabile karena memiliki kontrol temperatur yang  baik  (Chan et  al. ,  2015).  Kelebihan  lain dari  teknik  MAE,  yaitu  waktu  yang  dibutuhkan untuk mengekstraksi lebih singkat, penggunaan  pelarut yang lebih  sedikit, rendemen yang tinggi, akurasi dan presisi yang tinggi,  transfer massa  tinggi  karena dilengkapi dengan pengadukan, dan perangkat peralatan yang  modern  dengan  menggabungkan  fitur sokletasi dan microwave (Chen et al. , 2012).
Penggunaan obat tradisional memerlukan kajian ilmiah mengenai khasiat dan keamanannya sehingga dapat dipertanggungjawabkan  secara  medik  (Fitri et al. ,  2018).  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan penelitian  uji  aktivitas  antioksidan  dan  uji
Imran et al.
toksisitas  dalam  ekstrak  daging  buah  gaharu ( Aquilaria malaccensis Lamk.).

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan  dan  peralatan/instrumen  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah,  n- heksana teknis (C 6 H 14 ), etil asetat
(CH 3 CH 2 OC(O)CH 3 ),  plat  KLT,  asam  klorida (HCl) 5%, asam askorbat (C 6 H 8 O 6 ), 2,2-difenil- 1-pikrilhidrazil (DPPH) 0,4%, pereaksi
Dragendroff, pereaksi Mayer, dan larva udang Artemia  salina . Peralatan yang  digunakan meliputi microwave ( Panasonic  NN-ST342M ), spektrofotrometer UV-Vis ( Jasco  V-360 ), blender ( Panasonic ), dan peralatan gelas.

## Prosedur Penelitian

## Preparasi sampel
Sampel  daging  buah  Gaharu  dirajang dan  dikeringkan  dengan  cara  penjemuran, dibawah  sinar  matahari  selama  2-3  minggu kemudian  daging  buah  gaharu  dihaluskan dengan  blender,  sehingga  didapatkan  serbuk simplisia kering.

## Microwave-Assisted Extraction (MAE)
Rangkaian  alat  (Gambar  1)  terdiri  atas microwave  dengan  daya  maksimal  800W, wadah sampel pompa air, kondensor, statif dan klem.  Microwave  yang  digunakan  adalah. Ukuran ruang oven 315mm (W) × 227mm (H) × 349mm  (D),  sedangkan  ukuran  luar  485mm (W) × 287mm (H) × 400mm (D).
Gambar 1 . Rangkaian alat ekstraksi microwave

## Metode maserasi
Serbuk  simplisia  kering  daging  buah
gaharu ( Aquilaria malaccensis Lamk.) ditimbang  200  gram  dan  dimaserasi  dengan aquades  sebanyak  3800  mL  selama  7  hari. Selanjutnya  hasil  maserasi  disaring  hingga diperoleh maserat cair (belum kental) (Imran et al. , 2021)

## Penggunaan microwave
Maserat  cair  daging  buah  gaharu dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer  sebanyak 300  mL  dan  selanjutnya  dimasukkan  dalam microwave  untuk  didekstruksi  pada  daya  600
watt  selama  100  menit.  Maserat  yang dihasilkan  kemudian  disimpan  di  toples  pada suhu ruang. Prosedur diulangi hingga maserat cair hasil maserasi habis. Selanjutnya masing- masing hasil maserat yang diperoleh dimurnikan dengan metode destilasi menggunakan  microwave  hingga  diperoleh maserat kental (Vieira et al. , 2017)

## Ekstraksi maserat air daging buah gaharu
Ekstraksi  maserat  air  daging  buah gaharu dilakukan dengan menggunakan corong pisah. Maserat air daging buah gaharu masing-masing  sebanyak  50  mL  ditambahkan
Gambar 15. 1 2 3 4 5 6 Keterangan:
1.  Kondensor 2. Microwave 3.  Wadah sampel 4.  Pompa air 5.  Klem 6.  Statif

## Imran et al.
50  mL  pelarut  dengan  kepolaran  berbeda. Campuran  dikocok  hingga  terbentuk  dua lapisan  dan  dipisahkan.  Sisa  fase  maserat  air daging  buah  gaharu  ditambahkan  50  mL pelarut  dan  dikocok  hingga  kembali  terjadi pemisahan. Cara yang sama dilakukan hingga fase  dari  pelarut  (n-heksan  atau  etil  asetat) yang  ditambahkan  jernih.  Pelarut  diuapkan dengan rotary evaporator . Ekstrak daging buah gaharu ditimbang bobot keringnya dan dihitung rendemennya.
Analisis  kualitatif  (ekstrak  daging  buah gaharu) dengan metode KLT
Analisis  kualitatif  ekstrak  daging  buah gaharu  dilakukan  dengan  kromatografi  lapis tipis (KLT), dimana fase diam berupa plat KLT dan  fase  gerak  berupa  n-Heksan:  etil  asetat untuk  mendapatkan  komposisi  cairan  eluen yang  optimum  cairan  eluen  dijenuhkan  dalam chamber.  Diambil  sebagian  sampel  dari masing-masing pengenceran sampel kemudian ditotolkan pada plat KLT. Hasil elusi dibiarkan  mengering  dan  pola  pemisahan diamati  di  bawah  sinar  UV  pada  panjang gelombang 254 dan 366nm (Alen et al. , 2017).

## Skrining fitokimia
Skrining  fitokimia  terhadap  ekstrak ekstrak daging buah gaharu meliputi pemeriksaan alkaloid, polifenol, steroid, triterpenoid,  flavonoid,  saponin,  glikosida  dan tanin.

## Uji antioksidan
Pengujian  diawali  dengan  inkubasi larutan  uji  +  DPPH,  larutan  asam  askorbat  + DPPH, dan larutan DPPH sebagai blanko pada suhu  37 o C  selama  30  menit.  Serapan  setiap larutan dianalisis dengan spektrofotometer UV- Vis pada panjang gelombang 517nm (Imran et al. , 2021)

## Uji toksisitas dengan metode  Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)
Metode  BSLT  digunakan  untuk  menguji toksisitas  ekstrak  yang  diperoleh.  Sampel dalam  tabung  ependorf  dilarutkan  dengan DMSO  dan  diencerkan  dengan  quabides hingga konsentrasi sampel menjadi 1000 g/mL, kemudian  dibuat  variasi  konsentrasi  didalam microplate.  Benur  udang A.  salina yang berumur 48 jam dan terdiri dari benur 7-15 ekor, dimasukkan pada  tiap  lubang microplate  yang berisi  sampel  dan  selanjutnya  diinkubasi selama 24 jam. Jumlah benur udang yang mati dan  yang  masih  hidup  dihitung.  Data  tersebut selanjutnya digunakan untuk menentukan nilai LC 50 (Imran et al. , 2021)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstrak Sampel
Maserat yang diperoleh memiliki rendemen 5,725 % (174 g berat ekstrak kental dari 200 g simplisia). Hasil ekstraksi bertingkat cair-cair  yang  diperoleh  terdiri  dari  dua komponen ekstrak (Tabel 1).
Tabel 1 .  Rendemen  ekstrak  n-heksana  dan etil asetat. No. Nama Fraksi Rendemen (% b/v) 1. n-heksana 0 2. Etil asetat 40,827
Hasil  ekstraksi  terhadap  ekstrak  daging buah  gaharu  yang  paling  banyak  adalah ekstrak  etil  asetat  (40,827  %  b/v)  sedangkan pada  n-heksana  tidak  ada  ekstrak  yang terkandung (0 % b/v) (Tabel 1), sehingga pada ekstrak  n-heksan  tidak  dilakukan  pengujian pada  tahap  berikutnya.  Berdasarkan  hasil tersebut,  diasumsikan  bahwa  senyawa  aktif yang  terdapat  dalam  ekstrak  daging  buah gaharu lebih bersifat polar.

## Imran et al.

## Hasil Analisis Kualitatif dengan KLT
Penggunaan  KLT  dimaksudkan  untuk menentukan  golongan  senyawa  aktif  yang terdapat  dalam  ekstrak.  Penggunaan  KLT dimaksudkan  untuk  memisahkan  kelompok senyawa  kimia  berdasarkan  prinsip  adsorbsi dan  partisi  dengan  menggunakan  fase  diam (adsorben) dan fase gerak (eluen). Komponen kimia  akan  bergerak  dengan  jarak  yang berbeda-beda  karena  adanya  perbedaan tingkat kepolarannya, sehingga terjadi pemisahan. Penggunaan KLT dilakukan beberapa kali untuk mendapatkan pelarut yang memberikan pemisahan yang baik (Alen et al., 2017).
Perbandingan  fase  gerak  etil  asetat:n- heksan  yang  digunakan  untuk  mengelusi menggunakan adalah 7:3. Hasil pengamatan di bawah  sinar  UV  254nm  menunjukkan  adanya dua noda dengan nilai Rf 0,1 dan 0,46 (Gambar 2).  Sebagiamana  halnya  penggunaan  UV  245 nm,  pengamatan  di  bawah  sinar  UV  365nm juga memperlihatkan dua noda dengan nilai Rf yang  sama.  Penggunaan  panjang  gelombang UV 254nm menunjukkan senyawa yang diamati memiliki minimal dua ikatan rangkap
terkonjugasi, sedangkan UV 365nm menunjukkan  senyawa  yang  diamati  memiliki ikatan rangkap terkonjugasi panjang (kromofor) dan  pada  struturnya  mempunyai  gugus auksokrom.
Gambar 2 . Profil KLT ekstrak etil asetat daging buah gaharu ( Aquilaria malaccensis )  di  bawah  sinar  UV 254nm (A) dan 365nm (B)

## Hasil Skrining Fitokimia
Uji  fitokimia  digunakan  untuk  mendeteksi senyawa tumbuhan secara kualitatif berdasarkan  golongannya.  Informasi  yang diperoleh  dimanfaatkan  untuk  mengetahui golongan  senyawa  kimia  yang  mempunyai aktivitas biologi dari suatu tanaman.
Tabel 2. Hasil skrining fitokimia daging buah gaharu ( Aquilaria malaccensis Lamk.) Metabolit sekunder Hasil positif menurut pustaka Hasil Alkaloid Terbentuk endapan jingga (Pereaksi Dragendorff) - Terbentuk endapan putih (Pereaksi Mayer) Terbentuk endapan kuning (Pereaksi Wagner) Flavonoid Terjadi perubahan warna dari tabung kontrol ++ Saponin Ada busa yang bertahan ± 10 menit setinggi 10 cm - Terpenoid Cincin kecoklatan atau violet + Tanin Terbentuk warna biru tua atau hitam kehijauan ++ Glikosida Terbentuk warna biru tua atau hijau + Polifenol Terbentuk warna biru tua atau hitam kehijauan ++ Steroid Terbentuknya cincin biru kehijauan -
Keterangan:  ++  : terkandung senyawa lebih banyak/warna pekat
+   : terkandung senyawa/warna muda -   : tidak terkandung senyawa/tidak terbentuk warna A B

## Imran et al.
Hasil penapisan fitokimia yang dilakukan pada ekstrak daging buah gaharu menunjukkan adanya kandungan senyawa metabolit sekunder,  meliputi  flavonoid,  saponin,  fenol, tanin,  dan  glikosida  (Tabel  2).  Data  tersebut menunjukkan  bahwa  metabolit  sekunder  yang diperoleh  pada  umumnya  bersifat  polar sehingga terekstrak pula di dalam pelarut polar.
Hasil  uji  kualitatif  melalui  skrining fitokimia  yang dilakukan oleh  Yanti  & Swastini (2013)  ekstrak  methanol  daun  gaharu  yang diperoleh dengan metode maserasi mengandung  senyawa  metabolit  sekunder berupa  polifenol,  flavonoid,  tannin,  glikosida dan  terpenoid.  Penelitian  yang  dilakukan (Parwata,  2015)  seduhan  daun  gaharu  dan kombucha  daun  gaharu    memiliki  komponen senyawa metabolit sekunder, seperti flavonoid, fenolik,  dan  tanin.  Sementara  pada  penelitian (Kamaluddin et al ., 2017) ekstrak daun gaharu yang diperoleh dengan cara sokletasi menggunakan  pelarut  metanol  mengandung seyawa  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid,  feno, steroid  dan  saponin.  Hal  ini  membuktikan bahwa secara garis besar ekstrak daging buah gaharu  dan  daun  gaharu  memilki  kemiripin senyawa yang dikandungnya.

## Aktivitas Antioksidan
Pengujian  aktivitas  antioksidan  ekstrak daging buah gaharu dan larutan standar Vit. C
dilakukan  pada  berbagai  seri  konsentrasi dengan  Metode  DPPH.  Aktivitas  antioksidan diuji  menggunakan  Spektrofotometer  UV-Vis pada panjang gelombang 517nm. DPPH dalam metanol p.a digunakan sebagai larutan kontrol. Radikal  DPPH  sisa  yang  terbaca  merupakan selisih  antara  absorbansi  sampel  tereduksi DPPH  dengan  absorbansi  kontrol.  Aktivitas antioksidan  yang  semakin  tinggi  ditunjukkan dengan selisih yang semakin besar.
Gambar 3 . Hubungan  konsentrasi  terhadap persentase  inhibisi  oleh  larutan asam askorbat
Konsentrasi larutan asam askorbat yang semakin  tinggi  akan  meningkatkan  aktivitas antioksidannya (Gambar 3). Konsentrasi asam askorbat  yang  tinggi  menyebabkan  atom hidrogen  dari  dua  gugus  hidroksi  akan  lebih banyak  didonorkan  ke  DPPH  sehingga  terjadi reduksi menjadi DPPH-H. Berdasarkan persamaan regresi linier y = 0,4691x + 43,528, diperoleh nilai IC 50 untuk larutan asam askorbat sebesar 13,797 ppm (Tabel 3).
Tabel 3 . Aktivitas antioksidan asam askorbat Konsentrasi (ppm) Absorbansi rata-rata Inhibisi (%) IC 50 ppm 20 40 60 80 100 Blanko 0,336 0,288 0,209 0,132 0,071 0,731 54,042 60,657 71,396 82,003 90,283 13,797
y = 0.4691x + 43.528 R² = 0.9944 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 120 In hi bi s i (% )
Konsentrasi (ppm)

## Imran et al.
Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak daging buah gaharu yang dapat dilihat pada Gambar 4. Konsentrasi ekstrak 100 ppm menunjukkan  aktivitas  antioksidan  tertinggi, sedangkan aktivitas terendah pada konsentrasi ekstrak 20 ppm. Ekstrak buah gaharu memiliki kandungan  metabolit  sekunder  yang  beragam dan  tersusun  atas  senyawa  polihidroksi, sehingga  jika  konsentrasi  ekstrak  tinggi  akan menyebabkan  lebih  banyak  atom  H  yang didonorkan  pada  radikal  DPPH  dan  akhirnya terbentuk  senyawa  DPPH-H  stabil.  Jumlah senyawa  DPPH  terstabilkan  yang  semakin tinggi  akan  menurunkan  intensitas  warna, sehingga  aktivitas  antioksidan  semakin  tinggi.
Nilai  IC 50 ekstrak  daging  buah  gaharu  yang diperoleh berdasarkan persamaan regresi linier y = 0.2985x + 7.0788 adalah143,789 ppm atau memliki aktivitas sedang (Tabel 4).
Gambar 4 . Hubungan konsentrasi dan persentase  inhibisi oleh  ekstrak etil asetat daging buah gaharu Tabel 4. Aktivitas antioksidan ekstrak daging buah gaharu Konsentrasi (ppm) Absorbansi rata-rata Inhibisi (%) IC 50 ppm 20 40 60 80 100 Blanko 0,637 0,592 0,551 0,49 0,47 0,731 12,819 18,944 24,576 32,936 35,675 143,789

## Toksisitas Ekstrak Daging Buah Gaharu
Nilai LC 50 pada tingkat kepercayaan 95% ditentukan  berdasarkan  data  mortalitas  larva yang  diperoleh.  Data  penelitian  menunjukkan bahwa  perbedaan  konsentrasi  ekstrak  dapat mempengaruhi  tingkat  kematian  larva  uji.  Hal ini  terlihat  pada  konsentrasi  konsentrasi  500- 62,5  µg/mL  tingkat  kematian  larva  uji  paling banyak  dibandingkan  konsentrasi  lainnya (Tabel  5).  Dalam  BSLT,  tingkat  toksistas  dari suatu  sampel  ditentukan  berdasarkan  nilai LC 50 ,  yaitu  konsentrasi  senyawa  yang  dapat menyebabkan  mortalitas  sebesar  50%.  Suatu senyawa  dikatakan  aktif  jika  menghasilkan mortalitas yang tinggi. Semakin kecil nilai LC 50 semakin besar mortalitasnya. Ekstrak terhadap larva udang A. salina Leach dinyatakan toksik
jika nilai LC 50 ≤ 1000 µg/mL dan tidak toksik jika LC 50 ≥ 1000 µg/mL. Sedangkan untuk ekstrak dikatakan  toksik  jika  nilai  LC 50 ≥  200  µg  /  mL dan  sangat  toksik  jika  nilai  LC 50 ≤ 30 µg / mL (Imran et al ., 2021).
Uji  toksisitas  yang  dilakukan  terhadap ekstrak daging buah gaharu menunjukkan nilai LC 50 11,282 ppm. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak  daging  buah  gaharu  memiliki  potensi toksisitas akut, sehingga  dapat dikembangkan sebagai  antikanker.  Potensi  toksisitas  akut yang  dimiliki  ekstrak  daging  buah  gaharu dipengaruhi oleh kandungan metabolit sekunder  yang  dimiliki  ekstrak  tersebut. Senyawa flavonoid dalam ekstrak daging buah gaharu  memiliki  gugus  OH - yang  mampu berikatan  dengan  protein  integral pada
y = 0.2985x + 7.0788 R² = 0.9842 0 10 20 30 40 0 20 40 60 80 100 120 In hi bi s (% )
Konsentrasi (ppm)
Imran et al.
membran  sel,  sehingga  dapat  mengehentikan transport  aktif  Na + -  K + .  Akibat  fenomena tersebut,  ion  Na + masuk  ke  dalam  sel  secara
tidak  terkendali  dan  akhirnya  membran  sel pecah.
Tabel 5 . Toksisitas ekstrak buah Gaharu Konsentrasi (ppm) Log C Banyaknya Larva Hidup (Awal) Total Larva Mati Persen Kematian Larva (%) LC 50 X 1 2 3 0 (kontrol) 7,8125 15,625 31,25 62,5 125 250 500 0,89 1,19 1,49 1,8 2,1 2,4 2,7 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 0 2 15 29 30 30 30 30 6,67 50 96,7 100 100 100 100 11,282 ppm (<500 ppm atau toksik)

## KESIMPULAN
Ekstrak  daging  buah  gaharu  memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder diantaranya  fenol,  flavonoid,  tanin,  saponin, dan  glikosida.  Hasil  uji  antioksidan  dengan metode  DPPH  menunjukkan  bahwa  ekstrak dari  hasil  maserasi  berbantu  microwave  yang dipartisi  dengan  pelarut  etil  asetat  dan  kontrol positif vitamin C diperoleh masing-masing nilai IC 50 sebesar  143,789  ppm  dan  13,797  ppm.
Pengujian toksisitas akut dengan metode BSLT menunjukkan bahwa ekstrak dari hasil maserasi  berbantu  microwave  yang  dipartisi dengan pelarut etil asetat daging buah gaharu ( Aquilaria malaccensis Lamk) memiliki aktivitas toksik  (LC  <1000  ppm)  dengan  LC 50 11,232
ppm.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  diucapkan  kepada  semua pihak  yang  telah  membantu  penyelesaian penelitian  ini,  terutama  Laboran  Laboratorium Kimia  dan  Biologi  FMIPA  Universitas  Halu Oleo.

## DAFTAR PUSTAKA
Alen,  Y.,  Agresa,  FL.,  &  Yuliandra,  Y.  (2017). Analisis  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT) dan  Aktivitas  Antihiperurisemia  Ekstrak Rebung  Schizostachyum  brachycladum Kurz  (Kurz)  pada  Mencit  Putih  Jantan.
Jurnal  Sains Farmasi &  Klinis, 3(2):  146- 152.
Aprilia, A., Putri, S., & Hidajati, D. N. (2015). Uji Aktivitas  Antioksidan  Senyawa  Fenolik Ekstrak  Metanol  Kulit  Batang  Tumbuhan Nyiri  Batu  (Xylocarpus  Moluccensis)
Activity  Antioxidant  Test  Of  Phenolic Compound  Methanol  Extract  From  Stem Bark Nyiri Batu (Xylocarpus moluccensis). In UNESA Journal of Chemistry (Vol. 4).
Chan, C. H., Lim, J. J., Yusoff, R., & Ngoh, G. C.  (2015).  A  generalized  energy-based kinetic  model  for  microwave-assisted extraction  of  bioactive  compounds  from plants. Separation and Purification Technology , 143 , 152 –160. https://doi.org/10.1016/j.seppur.2015.01. 041 Chen,  Y.,  Zhao,  L.,  Liu,  B.,  &  Zuo,  S.  (2012). Application of Response Surface Methodology  to  Optimize  Microwave- assisted  Extraction  of  Polysaccharide from  Tremella. Physics  Procedia , 24 , 429 –433. https://doi.org/10.1016/j.phpro.2012.02.0 63
Fitri,  R.,  Oktiarni,  D.,  &  Arso,  D.  D.  (2018).
Eksplorasi Pengetahuan Obat Tradisional dalam Prespektif Hukum Kekayaan
Imran et al.
Intelektual di Bengkulu. Mimbar Hukum - Fakultas  Hukum  Universitas  Gadjah Mada , 30 (2), 304.
https://doi.org/10.22146/jmh.31021
Handayani,  V.,  Ahmad,  A.  R.,  &  Sudir,  M.
(2014).  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Metanol  Bunga  dan  Daun  Patikala
(Etlingera elatior (Jack) R.M.Sm) Menggunakan Metode DPPH. Pharmaceutical  Sciences  and  Research , 1 (2),
86 –93.
https://doi.org/10.7454/psr.v1i2.3321
Imran, I., Noor, A., Soekamto, N. H., Megawati,
M.,  &  Kadir,  L.  A.  (2021).  Bioaktivitas
Metabolit Sekunder Batang Kayu Paliasa (Kleinhovia hospital Linn) dengan Uji BST (Brine  Shrimp  Lethality  Test)  dan  Daya Hambatnya  Pada  Sel  Leukimia  P-388. BioWallacea :  Jurnal  Penelitian  Biologi (Journal  of  Biological  Research) , 7 (2),
1134 –1140. https://doi.org/10.33772/BIOWALLACEA. V7I2.14883
Jumiarni,  W.  O.,  &  Komalasari,  O.  (2017). Eksplorasi Jenis Dan Pemanfaatan
Tumbuhan  Obat  Pada  Masyarakat  Suku Muna  Di  Permukiman  Kota  Wuna. Traditional  Medicine  Journal , 22 (1),  45 –
56.
Kamaluddin,  M.  T.,  Yuliarni,  Y.,  Agustin,  Y., Parisa,  N.,  Hidayat,  R.,  Wahyuni,  T.,  … Perryanis,  P.  (2017).  Efek  Sedativa  dan Kebugaran  Teh  Celup  Daun  Gaharu (Aquilaria  malaccensis  L). Jurnal  Jamu Indonesia , 2 (3), 114 –119. https://doi.org/10.29244/jji.v2i3.40
Nugraha, R., Batubara, R., & Ginting, H. (2015). Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Gaharu  (Aquilaria  malaccensis Lamk) Berdasarkan Umur Pohon  Activity Testing  of  Ethanol  Extract  Antioxidant  of Agarwood  Leafs  (Aquilaria  malaccenceis Lamk) Based On The Age of The Tree. In Peronema Forestry Science Journal (Vol. 4).
Parwata, I. (2015). Karakteristik dan kapasitas antioksidan  daun  Gaharu  (Gyrinops versteegii). Jurnal Kimia
FMIPA Universitas Udayana , 1 –13.
Vieira, V., Prieto, M. A., Barros, L., Coutinho, J. A. P., Ferreira, O.,  & Ferreira, I. C. F. R.
(2017).  Optimization  and  comparison  of maceration  and  microwave  extraction systems  for  the  production  of  phenolic compounds from Juglans regia L. for the valorization  of  walnut  leaves. Industrial Crops  and  Products , 107 ,  341 –352.
https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2017.06. 012.
Yanti,  Swastini  D.A,  K.  I.  .  (2013).  Skrinning fitokimia  ekstrak  metanol  daun  Gaharu (Gyrinops  versteegii). Jurnal  Farmasi FMIPA Universitas Udayana , 2 (4), 37 –40. Zulfa, H. I. (2019). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Dan Kulit Buah Tiga Spesies Pohon Penghasil Gaharu. Skripsi . IPB, Bogor.