## UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN ASAM JAWA
( Tamarindus indica Linn.) TERHADAP PENURUNAN KADAR

## KOLESTEROL DARAH TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR
( Rattus norvegicus)
Khalilah K. Assagaf 1) , Widdhi Bodhi 2) , Paulina V. Y. Yamlean 1)
1) Program Studi Farmasi Fakultas MIPA UNSRAT Manado
2) Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran UNSRAT Manado

## ABSTRACT
The  effect  of  Tamarind  leaf  ethanol  extract  to  decrasing  blood  cholesterol  levels  in  white male rats. This research used laboratory experimental with completely randomized design. 15 white  male  rats  which  were  divided  into  5  groups,  consisted  of  3  rats  for  each  group.  The results were obtained from 3 times measurement of the blood cholesterol levels, namely T 0 , T 1 , T 2 . The treatment  starts by  feeding  the rats  by  high-fat  food, which is not  increased the cholesterol  levels.  Measurument  at  day  8  was  used  as  T 0 (normal  cholesterol  condition). Furthermore,  treatment  was  given  to  each  groups,  aquades  (treatment  I),  simvastatin (treatment II), dose I 0,0134g/200g BW (treatment III), dose II 0,0268g/200g BW (treatment IV) and dose III  0,0536g/200g BW (treatment V). T 1 and T 2 measurement was done after 2 and  4  hours.  The  result,  Dose  I  of  Tamarind  leaf  extract  provide  the  greatest  blood cholesterols levels reduction but not as strong as simvastatin.
Key words : Cholesterol, Tamarind leaf.

## ABSTRAK
Pengaruh ekstrak etanol daun Asam jawa ( Tamarindus indica L.)  terhadap penurunan kadar kolesterol  dalam  darah  tikus  putih  jantan.  Desain  penelitian  ini  adalah  eksperimental laboratorium dengan rancangan acak lengkap. 15 ekor tikus putih jantan galur wistar ( Rattus norvegicus ) dibagi dalam 5 kelompok, masing-masing 3 ekor. Hasil penelitian diperoleh dari 3  kali  pengukuran  kadar  kolesterol  darah  yang  disebut  T 0 ,  T 1 ,  T 2 .  Perlakuan  dimulai  dari pemberian pakan tinggi lemak selama 7 hari yang tidak memberikan hasil peningkatan kadar kolesterol.  Pengukuran  hari  ke-8  digunakan  sebagai  T 0 yaitu  keadaan  kolesterol  normal. Selanjutnya  diberi  perlakuan  pada  tiap  kelompok,  yaitu  aquades  (perlakuan  I).  Simvastatin (perlakuan  II).  Dosis  I  :  0,0134g/200g  BB  (perlakuan  III).  Dosis  II  :  0,0268g/200g  BB (perlakuan  IV).  Dosis  III  :  0,0536g/200g  BB  (perlakuan  V).  Pengukuran  T 1 ,  T 2 dilakukan setelah 2 jam dan 4 jam. Hasil dilihat dari perubahan rataan dan presentase antar kelompok perlakuan, dosis I (0,0134g/200g BB) esktrak daun Asam jawa memberikan penurunan kadar kolesterol darah paling baik tetapi tidak sekuat simvatatin.
Kata kunci : Kolesterol, daun Asam jawa,.

## PENDAHULUAN
Indonesia yang beriklim tropis menyebabkan  tanahnya  subur  sehingga banyak  jenis  tumbuhan  yang  dapat tumbuh.  Diantara  berbagai  jenis  tersebut beberapa  jenis  tumbuhan  memiliki  khasiat sebagai  obat.  Salah  satu  tanaman  obat yang  memiliki  berbagai  khasiat  ialah Asam jawa atau yang dikenal dengan nama ilmiah Tamarindus  indica L.  Sebagian masyarakat menggunakan daun Asam jawa sebagai obat tradisional untuk menurunkan kadar  kolesterol  dalam  darah.  Kandungan kimia  daun  Asam  jawa  diantaranya flavonoid,  saponin,  senyawa  fenol,  pektin asam  organik  (Rosmanadewi,  1993)  dan vitamin B (Soesilo, 1995).
Perubahan  gaya  hidup  masyarakat yang  lebih  memilih  makanan  cepat  saji ( fast food) kecepatan pelayanan, enak serta banyak  pilihan.  makanan  ini  sebenarnya tidak  memiliki  kandungan  gizi  yang dibutuhkan  oleh  tubuh.  Kandungan  utama yang  dimilikinya  adalah  kolesterol  yang tinggi (Sandi et al., 2008).
Kolesterol  telah  diketahui  sebagai penyebab  utama  terjadinya  aterosklerosis, yaitu  proses  pengapuran  dan  pengerasan dinding  pembuluh  darah.  Khususnya pembuluh  darah  koroner  menjadi  sempit dan menghalangi aliran darah di dalamnya. Keadaan  ini  akan  meningkatkan  resiko terkena  penyakit  jantung  koroner  (PJK). Pada  usia  produktif,  PJK  sudah  menjadi masalah kesehatan yang serius di Indonesia.  Dari  hasil  survei  Kesehatan Rumah  Tangga  Nasional  (SKRT)  tahun 1992,  penyakit  kardiovaskuler  merupakan penyebab kematian nomor satu  untuk usia diatas 40 tahun (Dalimartha, 2008).
Berdasarkan  latar  belakang  diatas daun  Asam  jawa  digunakan  masyarakat secara tradisional untuk menurunkan kadar kolesterol  dalam  darah.  Daun  Asam  jawa
diduga  memiliki  kandungan  kimia  yang dapat  menurunkan  kadar  kolesterol  dalam darah. Karena alasan tersebut maka penulis tertarik untuk meneliti efek eksktrak etanol daun Asam jawa terhadap penurunan kadar kolesterol darah tikus putih.

## METODOLOGI PENELITIAN
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  daun  Asam  jawa, tikus putih jantan, etanol 96%, Simvastatin 10  mg,  makanan  standar,  Propiltiourasil 100  mg    makanan  tinggi  lemak  (telur puyuh  dan  lemak  hewan).  Alat  yang digunakan dalam penelitian ini adalah Alat yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  gelas  ukur  (Pyrex),  timbangan hewan  uji,  timbangan  analitik,  kandang, gelas  beker  (Pyrex),  disposable  syringe  3 mL  (Terumo),  NGT  ( Naso  Gastric  Tube ) ukuran  5  (Terumo),    lumpang  dan  alu, kertas  saring,  oven, rotary  evaporator , gunting,  alat  ukur  dan  stik  kolesterol (Nesco Multi Check).

## Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan jenis penelitian eksperimen laboratorium.
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL).  Menggunakan sampel  tikus  putih  jantan  galur  wistar. Sampel dibagi dalam 5 kelompok perlakuan  yaitiu  :  Perlakuan  I  (K-), Perlakuan  II  (K+),  Perlakuan  III  (0,0134 g/200  g  BB)  ekstrak  daun  Asam  jawa, Perlakuan IV (0,0268 g/200 g BB) ekstrak daun  Asam  jawa,  Perlakuan  V  (0,0536 g/200  g  BB)  ekstrak  daun  Asam  jawa. Tahap pertama dilakukan aklimatisasi pada setiap  perlakuan  selama  4  minggu,  tahap kedua diberi makanan tinggi lemak selama 7  hari.  Tahap  ketiga  diberi  perlakuan sesuai pembagian perlakuan.

## Pembuatan Ekstrak Daun Asam Jawa
Serbuk  simplisia  daun  Asam  jawa sebanyak  308,9  g  diekstraksi  dengan menggunakan  etanol  96%  sebanyak  1800 mL  selama  5  hari  setiap  hari  diaduk. Maserat  yang  didapat  disaring  dengan kertas  saring  (filtrat  1)  dan  sisanya diekstrak  kembali  dengan  etanol  96% sebanyak  1200  mL  selama  2  hari  lalu disaring  (filtrat  2).  Filtrat  1  dan  filtrat  2 diupakan  menggunakan rotary  evaporator dan dilanjutkan dengan pengeringan sehingga  menghasilkan  masa  kontan  yang disebut ekstrak kental.

## Pembuatan Pakan Tinggi Lemak
Makanan  lemak  tinggi  terdiri  dari lemak sapi dan kuning telur puyuh (1 : 5), 0,1%  propilltiourasil.  Makanan  dibuat dengan  cara  :  panaskan  gajih  sapi, campurkan  dengan  kuning  telur  puyuh, gerus  PTU  dalam  lumpang.  Masukkan PTU  ke  dalam  campuran  lemak  sapi  dan kuning telur puyuh, aduk sampai homogen.  Penginduksi  ini  dibuat  baru setiap hari dan diberikan selama 7 hari.

## Pembuatan Suspensi Simvastatin
Obat  untuk  menurunkan  kadar kolesterol    pada  penelitian  ini  adalah simvastatin. Dosis Simvastatin yang diberikan adalah dosis yang meliputi dosis terapi  pada  manusia  yaitu  10  mg,  maka dosis  Simvastatin  untuk  tikus  adalah (70/50  x  10)  x  (0,018)  =  0,25  mg/200  g BB.  (0,018  merupakan  faktor  konversi dosis manusia ke tikus). Suspensi Simvastatin  diperoleh  dengan  melarutkan zat  aktif  sesuai  berat  badan  ke  1,5  mL aquades.  Suspensi  simvastatin  diberikan dengan menggunakan NGT dan syringe.

## Pengukuran Kadar Kolesterol Darah
Kadar    kolesterol  diukur  sebanyak  4  kali, yaitu :
1. Sesudah aklimatisasi
2. Sesudah  diberi  makanan  tinggi lemak selama 7 hari
3. 2 jam setelah diberi perlakuan
4. 4 jam setelah perlakuan

## Analisis Data
Uji statistik menggunakan program SPSS ver.22 dengan uji-t data berpasangan ( Paried  t-tes) dan  uji  analisis  varians  satu arah ( One way ANOVA) . Taraf kepercayaan 95% atau α = 0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  diperoleh  dari  data hasil tiga kali pengukuran kadar kolesterol darah tikus putih jantan yaitu  T 0 (sesudah pemberian  pakan  tinggi  lemak  yang  tidak memberikan  hasil  peningkatan  kadar kolesterol  darah,  sehingga  dianggap  kadar kolesterol  normal),  T 1 (hasil  pengukuran kadar  kolesterol  2  jam  setelah  perlakuan), T 2 (hasil  pengukuran  kadar  kolesterol  4 jam setelah perlakuan).
Hasil uji-t diperoleh  antara  T 0 dan T 1 diperoleh  nilai  signifikansi  0,510  (p  > 0,05)  yang  menunjukkan  tidak  terdapat perbedaan  (penurunan)  yang  signifikan kadar  kolesterol  darah  Normal  dan  2  jam setelah  pemberian  perlakuan.  Hal  ini menunjukkan  pemberian  perlakuan  belum memberikan  penurunan  yang  signifikan terhadap kadar kolesterol darah.
Namun pada uji-t (Tabel 8)
diperoleh  nilai  signifikansi  0,002  (p  < 0,05) yang menunjukkan terdapat perbedaan  (penurunan)  yang  signifikan terhadap  kadar  kolesterol  darah  Normal dan  4  jam  setelah  pemberian  perlakuan. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pemberian perlakuan  memberikan  penurunan  yang signifikan terhadap kadar kolesterol darah.
Maka data dianalisis lebih lanjut menggunakan Uji  Parametrik  One  Way Anova untuk  mengetahui  ada  tidaknya perbedaan yang bermakna antar perlakuan.
Hasil Uji  Anova  menunjukkan nilai signifikansi  0,078  (p>0,05),  yang  berarti bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang bermakna antar perlakuan.
Karena  tidak  terdapat  perbedaan yang  bermakna  antar  perlakuan  secara  uji statistika,  maka  perbedaan  perlakuan dibandingkan  melalui  nilai  rataan  kadar kolesterol  darah  normal  dan  4  jam  setelah perlakuan.
Gambar 1. Grafik Rataan Persen Penurunan Kadar Kolestterol  Darah (%) 4 Jam  Setelah  Pemberian  Perlakuan  (T 2 ) dibanding  Keadaan  Normal  (T 0 )  masing masing perlakuan.
Penurunan kadar kolesterol berdasarkan  persentase  (%)  menunjukkan hasil  kelompok  perlakuan  kontrol  negatif dan  positif  mengalami  penurunan  kadar kolesterol  yang  berbeda  jauh.  Kontrol Positif mengalami penurunan kadar kolesterol darah sebesar 21,63%.
Sedangkan kontrol negatif hanya
mengalami  penurunan  kadar  kolesterol darah sebesar 4,25%. Pada kelompok D (I) mengalami  penurunan  kadar  kolesterol darah  sebesar  12,11%,  D  (II)  mengalami penurunan  kadar  kolesterol  darah  sebesar 11,54%, dan D (III) mengalami penurunan kadar  kolesterol  darah  sebesar  9,66%. Pada kelompok D (I) mengalami penurunan  kadar  kolesterol  darah  lebih baik jika dibandingkan antara D (II) dan D (III),  diikuti  D  (II)  dan  D  (III).  Semakin kecil  dosis  ekstrak  daun  Asam  jawa  yang digunakan,  memberikan  efek  penurunan kadar kolesterol darah yang lebih baik. Hal ini  menunjukkan  dosis  normal  ekstrak daun  Asam  jawa  yang  diberikan  pada kelompok D (I) memberikan efek penurunan  kadar  kolesterol  darah  lebih baik  jika  dibandingkan  dengan  dosis bertingkat yang digunakan pada kelompok
D (II) dan D (III). Hasil penelitian menunjukkan
ekstrak daun Asam jawa dapat menurunkan  kadar  kolesterol  dalam  darah pada tikus putih jantan. Kemampuan daun Asam  jawa  dalam  menurunkan  kadar kolesterol dalam darah diduga diakibatkan karena  kandungan  flavonoid,  saponin, senyawa  fenol,  pektin  dan  asam  organik (Rosmanadewi, 1993).
Flavonoid  didalam  tubuh  memiliki banyak peran. Sebagai antioksidan, flavonoid  bertindak  sebagai  pereduksi LDL di dalam tubuh (Radhika et al ., 2011 ).  Selain  mereduksi  LDL,  flavonoid  juga menaikkan  densitas  dari  reseptor  LDL  di liver  dan  mengikat  apolipoprotein  B (Baum et  al .,  1998).  Selain  mereduksi LDL,  flavonoid  juga  menaikkan  densitas dari  reseptor  LDL  di  hati  dan  mengikat apolipoprotein  B  (Baum et  al .,  1998). Flavonoid  juga  berperan  sebagai  senyawa yang  dapat  mereduksi  trigliserida  (TGA)
Normal T2 K (+) 100 78.37 K (-) 100 95.75 D (I) 100 87.89 D (II) 100 88.46
D (III) 100 90.34 70 75 80 85 90 95 100 105 110 K ad ar K olest er ol ( %) Persen (%) Penurunan

## Kadar Kolesterol
dan  meningkatkan  HDL.  Selain  itu, menurut  studi  yang  dilakukan  oleh Casaschi et  al .,  2004  dan  Ogawa et  al .,
2005 dalam flavonoid bekerja menurunkan kadar  kolesterol  dari  dalam  darah  dengan menghambat  kerja  enzim  3-hidroksi  3- metilglutaril  koenzim  A  reduktase  (HMG Co-A reduktase) (Sekhon, 2012).
Saponin  dapat  mengurangi  resiko aterosklerosis karena kemampuannya dalam  mengikat  kolesterol  (Arcuri  dalam Sangi et  al., 2008).  Asam  organik menyebabkan  terjadinya  disosiasi  LDL (Girindra,  1993;  Surono,  2002).  Senyawa fenol  mampu  menghambat  modifikasi oksidasi  LDL  yang  dapat  menyebabkan aterosklerosis.  Ketika  HDL  dioksidasi, HDL  akan  kehilangan  asam-asam  lemak tak  jenuh  sehingga  kapasitas  untuk menghilangkan  kolesterol  bebas  dari  sel menurun.  Hal  ini  berhubungan  dengan penurunan  laju  aliran  HDL.  Pektin  dapat menurunkan  kadar  kolesterol  dengan mengikat  asam  empedu  dan  kolesterol  di lumen usus dan mengeksresikannya bersama  feses  sehingga  kadar  kolesterol dalam tubuh menurun.
Sebelum  diberi  perlakuan  terhadap hewan  uji,  dimana  diharapkan  terjadi penurunan  kadar  kolesterol  darah  setelah dilakukan perlakuan. Hewan uji dalam tiap kelompok dibuat agar mengalami peningkatan kadar kolesterol darah dengan induksi  pakan  tinggi  lemak,  namun penginduksian  pakan  tinggi  lemak  tidak membuat  kadar  kolesterol  dalam  darah tikus  meningkat.  Kadar  kolesterol  pada tikus  hanya  berkisar  pada  keadaan kolesterol  normal,  yaitu  120-200  mg/dL. Sehingga  pemberian  perlakuan  untuk menurunkan  kadar  kolesterol  darah  pada tikus dimulai pada kondisi kadar kolesterol darah normal.
Dari  hasil  perubahan  rataan  dan persen  penurunan  kadar  kolesterol  terlihat bahwa  simvastatin  sebagai  kontrol  positif memberikan efek penurunan kadar kolesterol darah tertinggi dibanding kelompok  bahan  uji  lainnya.  Sementara pada  kelompok  ekstrak  daun  Asam  jawa Dosis  I  menunjukkan  efek  penurunan kadar  kolesterol darah  lebih  tinggi dibandingkan Dosis II dan Dosis III. Dapat disimpulkan  bahwa  Dosis  I  yaitu  dosis normal  penggunaan  daun  Asam  jawa bersifat  menurunkan  kadar  kolesterol darah  tetapi  tidak  sekuat  simvastatin,  jika dibandingkan  dengan  dosis  bertingkat yang lain (Dosis  II dan  Dosis  III). Dosis  I merupakan  dosis  ekstrak  daun  Asam  jawa yang  paling  kecil  yang  digunakan. Semakin  besar  dosis  ekstrak  daun  Asam jawa  yang  diberikan  tidak  memberikan efek penurunan yang lebih baik.

## PENUTUP Kesimpulan
1) Ekstrak daun Asam jawa ( Tamarindus indica Linn.)  memiliki  pengaruh terhadap  penurunan  kadar  kolesterol darah  pada  tikus  putih  jantan  galur wistar ( Rattus norvegicus).
2) Tidak  terdapat  hubungan  peningkatan konsentrasi  ekstrak  daun  Asam  jawa ( Tamarindus  indica Linn.)  terhadap penurunan kadar kolesterol darah tikus putih  jantan  ( Rattus  norvegicus) dimana Dosis I, yaitu dosis penggunaan  daun  Asam  jawa  secara normal  yang  merupakan  dosis  paling kecil yang memberikan efek penurunan  kadar  kolesterol  darah paling  baik  tetapi  tidak  sekuat simvastatin. Walaupun berdasarkan uji statistika tidak memberikan perbedaan yang bermakna.
3) Data  empiris  daun  asam  jawa  yang masyarakat gunakan dapat
menurunkan  kadar  kolesterol  dalam darah.

## DAFTAR PUSTAKA
Baum  J  A , Teng  H,  Erdman  J  W,  Weigel R  M,  Klein  B  P,  Persky  V  W,  Freels S,  Surya  P,  Bakhit  R  M,  Ramos  E, Shay  N  F  &  Potter  S  M.  1992.  Long term  intake  of  soy  protein  improves blood  lipid  profile  and  increases mononuclear cell lowdensity lipoprotein  receptor  messenger  RNA in hypercholesterolemic postmenopausal women, Am
JClinNut , 58 ( 1998 ) 545 Dalimartha,  Setiawan.  2008. 36  Resep Tumbuhan  Obat  Untuk  Menurunkan
Kolesterol , Ed.Revisi. Penebar Swadaya, Jakarta.
Radhika, S., K.H. Smila and R. Muthezhilan.  2011.  Antidiabetic  and
Hypolipidemic  Activity  of Punica
granatum Linn  on  Alloxan  Induced Rats. World  Journal  of  Medical Sciences 6 (4): 178-182, 2011. Rosmanadewi,  L.J.,  1993,  Pengaruh  Infus Daun  Asam  ( Tamarindus  indica L.)
Terhadap  Kadar  Kolesterol  Serum Darah Tikus Putih, Skripsi , Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Sandi,  C.,  Saryono,  Rahmawati,  D.  2008.
Perbedaan  Kadar  Kolesterol  Darah
Pada  Pekerja  Kantoran  Dan  Pekerja
Kasar  Di  Desa  Majasari,  Bukateja Kabupaten Purbalingga . Jurnal Keperawatan Soedirman (The Soedirman  Journal  Of  Nursing 3(3) :
131-137
Soesilo,  S.D,  Hargono  dan  S,Nurhayati. 1995. Materia Medika Indonesia . Jilid VI.  Departemen  Kesehatan  Republik
Indonesia. Jakarta. Sekhon S. 2012. Antioxidant, Antiinflammatory  and  Hypolipidemic Properties  of  Apple  Flavonols .  Nova Scotia  Agricultural  College  Truro; Nova Scotia [skripsi]
Girindra,  A.  1993. Biokimia  I. Jakarta  : Gramedia.