Rizofiltrasi Logam Pb (Plumbum) pada beberapa Jenis Tumbuhan Air

## Elly Proklamasiningsih dan Hernayanti

## Fakultas Biologi UNSOED Purwokerto

## Abstract
The   research   about   rhizofiltration   of   Pb   in   several   species   of   aquatic   plant   had   been conducted in a greenhouse of Biology Faculty, Jenderal Soedirman University. The aims of this research were to evaluate the aquatic plant species which has Pb accumulative characteristic and to determine Pb concentration tolerated by those plants. This research was used experimental method with split plot design. The main plot was kind of aquatic plant of Hydrilla verticillata (L.f ), Pistia stratiotes L, and Salvinia molesta D.S.Mitchell. The Pb (NO3) 2 concentrations of 0, 5, 10, 15 mg/l were as sub plot.   Each treatment was replicated for 3 times. The parameter observed were biomass (raw weight and dry weight), the Pb absorbed whether in root and shoot, and chlorophyll content. Data collected were analyzed using F test continued by LSD. The result of this research showed that both Pistia and Salvinia planted in 10 mg/l media were able to accumulate high Pb concentration. However, Pistia were able to accumulate Pb concentration mostly in root and only part be translocated in shoot. Whereas Salvinia was able to translocate Pb concentration in shoot higher than those in of Pistia .  The implications of these results for rhizofiltration are discussed.
Key words : Rhizofiltration, Hydrilla verticillata, Pistia stratiotes , Salvinia molesta , Pb (NO3) 2

## Pendahuluan
Proses untuk menghilangkan, memindahkan, dan atau menghancurkan kontaminan dalam tanah, perairan, dan air bawah tanah  yang menggunakan jenis-jenis tumbuhan tertentu atau mikroorganisme disebut dengan bioremediasi. Proses bioremediasi dengan menggunakan   tumbuhan   disebut   fitoremediasi   (Kambhampati   and   William,   2001). Berdasarkan   mekanisme   detoksifikasinya,   fitoremediasi   dapat   dibedakan   menjadi fitoekstraksi,   rizofiltrasi,   fitostabilisasi,   rizodegradasi   serta   bioremediasi   lainnya   dengan menggunakan tumbuhan (Gareth and Furlong, 2003). Kontaminan logam berat dan unsur radioaktif dapat dibersihkan oleh tumbuhan melalui proses-proses tersebut. Dalam proses rizofiltrasi, akar tumbuhan menyerap kontaminan bersamaan dengan penyerapan nutrient dan air. Metode ini digunakan terutama untuk menyerap limbah yang mengandung logam berat dalam media cair (Kvesitadze et al ., 2006).
Rizofiltrasi   dapat   dikatakan   sebagai   pemanfaatan   kemampuan   tumbuhan   dalam menyerap   dan   mengakumulasi   senyawa   pencemar.   Efektifitasnya   dipengaruhi   oleh kemampuan tumbuhan untuk mentoleransi  dan mengakumulasi  logam dari lingkungan (Stearns et al., 2007). Tumbuhan merupakan agen ideal untuk remediasi tanah dan air karena mempunyai mekanisme biokimiawi, fisiologis dan genetik yang unik (Memon et al., 2001).   Beberapa penelitian mebuktikan bahwa untuk membersihkan polutan logam berat seperti Pb (Plumbum), Cd (Cadmium) atau Cr (Chromium) dapat dilakukan dengan tumbuhan air.
Pb   merupakan   logam   tertua   yang   telah   digunakan   manusia  sejak   2500   th   S.M. Logam tersebut banyak digunakan dalam industri baterai, aki, percetakan, alat lapis listrik, pelapis logam, industri kimia, pestisida, mainan anak, dan cat. Komponen Pb yang paling banyak   digunakan   dalam   cat   adalah   timbal   putih   yang   mempunyai   rumus   kimia Pb(OH)2.2PbCO3.Timbal   merah   atau   Pb3O4   berupa   bubuk   berwarna   merah   cerah sebagai   pewarna  cat  tahan  karat.  Cat  berwarna  kuning  dibuat   dengan  menambahkan kuning   krom   atau   PbCrO4.   Pada   pabrik   keramik,   Pb   dalam   bentuk   PbO   digunakan sebagai   campuran   dengan   silika   dalam   pembuatan   keramik   yang   disebut glaze yang berwarna mengkilat. Pb juga digunakan sebagai bahan aditif pada  bensin dalam bentuk
Tetra   Ethyl   Lead (TEL)   dan Tetra   Methyl   Lead (TML)   (Darmono,   1995;  Subbid Pemantauan, 2009).
Berdasarkan  klasifikasinya  Pb  termasuk   logam  berat   golongan   IV-A,   mempunyai nomor atom 82, berat atom 207,2 dengan titik lebur 327,5. Pb termasuk logam berat kelas B yang bersifat toksik, terutama dalam bentuk Pb organik, seperti tetra ethyl lead (TEL) yang terdapat pada bensin. TEL merupakan Pb yang paling toksik karena  mudah masuk lewat inhalasi, larut dalam lemak, dan mudah terakumulasi dalam  jaringan lunak maupun keras (Palar,1995; Kaim and Schwedeski,  1994).
Umumnya, polusi Pb di udara atau atmosfer berasal dari asap kendaraan bermotor. Pb ditambahkan ke dalam bensin untuk meningkatkan bilangan oktan agar pembakaran motor  dapat   lebih   baik.   Pb  tersebut   akan  keluar  bersama  gas   buang   dan  mencemari udara. Adanya pencemaran Pb di lingkungan telah banyak diteliti antara lain oleh Jong (1996),   yang   menemukan   tanaman   cabai   merah   pada   jarak   10   m   dari   jalan   raya Yogyakarta-Solo Km 19, mengandung Pb sebesar 0,859 μg/g (jumlah kendaraan yang lewat ± 2385/jam), di jalan Imogiri tanaman cabai mengandung Pb sebesar 0,399 μg/g (jumlah kendaraan yang lewat ± 531/jam).Nilai ambang batas kadar Pb udara di daerah bebas   polusi   adalah   <0,006   μg/m 3 .   Kadar   Pb   di   udara   sebesar   1   μg/m 3 dapat menyebabkan darah manusia mengandung Pb sebesar 2,5-5,3 μg/dl.
Rangkuti   (2005)   menemukan   adanya   Pb   pada   daun   beberapa   tanaman   yang ditanam di pinggir jalan tol Jagorawi.   Pada   tanaman Gmelina ditemukan Pb sebesar 5,89 ppm, tanaman Akasia mengandung  Pb sebesar  9,47 ppm, tanaman  Kayu manis 12,29 ppm, tanaman Tanjung 7,31 ppm, tanaman Kesumba 7,09 ppm, tanaman Sawo 7,62 ppm dan tanaman Angsana 9,41 ppm. Hasil uji baku mutu emisi dari 10.880 unit kendaraan bermotor yang lewat di daerah tersebut   ternyata terdapat sebanyak 45,7 % kendaraan yang tidak memenuhi standard baku mutu emisi.Tidak terpenuhinya baku mutu emisi menyebabkan  daerah tersebut tercemar Pb. Hal ini didukung penemuan.
Mengingat   banyaknya   limbah   buangan   dari   industri-industri   yang   menyebabkan pencemaran lingkungan, maka rizofiltrasi pada beberapa jenis tumbuhan air perlu diteliti untuk   mengetahui   kemampuan   tumbuhan   air   dalam   mengakumulasi   kontaminan. Efektivitas rizofiltrasi dapat ditingkatkan dengan memperbaiki faktor internal yaitu potensi genetik dan fisiologis tanaman atau faktor eksternal termasuk manageman   pengolahan tanah, air, dan atau budidaya tanaman. Meningkatkan efisiensi rizofiltrasi dalam fungsinya sebagai   hiperakumulator   pada   dasarnya   adalah     meningkatkan   potensi   akumulasi kontaminan yang tinggi dalam tajuknya dan potensi produksi biomassa.
Penelitian fisiologis termasuk mekanisme penyerapan unsur dan transportasinya dalam   tumbuhan   untuk   meningkatkan   penyerapan   unsur   melalui   berkas   pengangkut (Memon et   al .,   2001)   dapat   menyumbang   pengetahuan   untuk   memperbaiki   efisiensi rizofiltrasi   atau   fitoekstraksi.   Beberapa   jenis   tumbuhan   air   dapat   digunakan   sebagai hiperakumulator (Fitter and Hay, 1987; Zayed et al., 1999). Beberapa jenis diantaranya adalah: Pistia stratiotes, telah terbukti dapat berperan sebagai fitoremediator, yaitu dapat menurunkan kadar Cu dan Zn pada air yang tercemar (Hernayanti and Proklamasiningsih, 2005); Salvinia molesta dapat menurunkan logam berat Cr pada industri pelapisan logam (Hernayanti,   2002).   Beberapa  jenis  tumbuhan  air  seperti Eichornia   crassipes,  Salvinia molesta, Spiridella sp .,Elodera dan Pistia stratiotes dapat digunakan untuk meningkatkan kualitas air limbah dengan cara menanamnya pada kolam pengolah air limbah (Pane and Hasanudin 2001; Hidayati, 2005).
Tujuan   penelitian   adalah   untuk   mempelajari   jenis   tumbuhan   air   yang   dapat digunakan sebagai fitoremediator melalui proses rizofiltrasi  serta konsentrasi  Pb (NO 3 ) 2 yang dapat ditoleransi.Penelitian ini diharapkan dapat dijadikan sebagai informasi untuk mengevaluasi   jenis   tumbuhan   air  yang  dapat   mengurangi   pencemaran  suatu   perairan yang disebabkan oleh polutan Pb.

## Materi dan Metode
Materi yang digunakan adalah tumbuhan air: Hydrilla verticillata, (L.F) Royce, Pistia stratiotes L dan Salvinia molesta D.S. Mitchell. Media tumbuh yang digunakan adalah formula Hoagland yang sudah dimodifikasi (Tabel 1).
Tabel 1. Formula Hoagland (Taiz and Zeiger, 1998) Table 1. Hoagland formula
Senyawa Konsentrasi Stok (gr/l) Makronutrien KNO 3
Ca(NO 3 ) 2 .4H 2 O NH 4 H 2 PO 4 MgSO 4 .7H 2 O
Mikronutrien KCL H 3 BO 3
MnSO 4 .H 2 O ZnSO 4 .7H 2 O CuSO 4 .5H 2 O H 2 MoO 4 (85% MoO 3 ) 101,10 236,16 115,08 246,49 1,864 0,773 0,169 0,288 0,062 0,040
Sebagai   perlakuan   adalah   Pb(NO 3 ) 2 dengan   berbagai   konsentrasi.   Bahan-bahan lain adalah bahan-bahan untuk analisis Pb dalam jaringan tanaman dan bahan-bahan untuk analisis klorofil.
Rancangan  yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak Lengkap (RAL) pola  petak terpisah ( Split Plot Design ) sebagai petak utama adalah jenis tanaman air, yaitu Hydrilla verticillata , (L.F) Royce, Pistia stratiotes L dan Salvinia molesta D.S. Mitchell, sebagai anak   petak   adalah   konsentrasi   Pb(NO 3 ) 2 yaitu   0   mg/liter,  5   mg/   liter;   10   mg/liter;   15 mg/liter. Masing- masing konsentrasi perlakuan diulang 3 kali.
Tumbuhan   yang   akan   digunakan   dicuci   bersih,   dipelihara   di   dalam   rumah   kaca selama 2 bulan. Percobaan menggunakan wadah plastik (bak plastik) yang mempunyai kapasitas isi 8 liter. Wadah plastik untuk percobaan diisi media yang mengandung formula Hoagland dan Pb(NO 3 ) 2 sesuai perlakuan sebanyak 5 liter untuk masing- masing wadah. Tumbuhan air yang sudah disiapkan ditimbang seberat 50 gram kemudian ditempatkan pada masing- masing media dalam wadah percobaan. Media tumbuh selalu dikondisikan pada pH 7 (apabila kurang dari 7 maka ditambahkan NaOH, sedangkan apabila lebih dari 7, maka ditambahkan HCl) .
Pengamatan dilakukan pada umur 4 minggu setelah pemaparan Pb(NO 3 ) 2 , dengan mengukur biomassa segar dan biomassa kering; analisis kandungan Pb dalam akar dan tajuk;   serta   analisis   klorofil.   Data-data   yang   diperoleh   dianalisis     dengan   uji   F   dan dilanjutkan dengan Uji LSD.
Parameter yang diamati meliputi: 1) Biomassa tumbuhan. Pengamatan biomassa tumbuhan   dilakukan   dengan   mengukur   berat   segar   dan   berat   kering   tumbuhan;   2) Analisis kandungan Pb. Sempel dikeringkan dalam oven dengan suhu 80 0 C selama 12 jam. Sempel sebanyak 1 gram dilarutkan larutan HNO 3 pekat selama 24 jam. Selamjutnya ditambahkan larutan HClO 4 sebanyak 2 mililiter, dipanaskan sampai menguap. Disaring menggunakan   kertas   Whatman   nomer   42   sehingga   diperoleh   filtrat.   Filtrat   diencerkan sampai   volume   50   mililiter.  Ekstrak   jernuh   yang   dihasilkan   diukur   menggunakan  AAS ( Atomic Absorption Spectrophotometer ). Serapan Pb merupakan hasil perkalian antara konsentrasi   Pb   dalam   jaringan   tumbuhan   dengan   berat   keringnya;   3)  Analisis   klorofil. Jaringan   segar   sebanyak   0,1   gram   dilumatkan   dalam   mortar.   Ditambahkan   Aseton sebanyak 10 mililiter, disaring dengan kertas Whatman nomer 42. Pengukuran dilakukan dengan Spectrophotometer pada panjang gelombang 660 nm untuk klorofil a, dan 642,5 nm untuk klorofil b.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil analisis pengaruh Pb dengan konsentrasi berbeda terhadap biomassa segar, biomassa kering, kandungan Pb dalam akar, kandungan Pb dalam tajuk dan kandungan klorofil   pada   3   jenis   tumbuhan   air   yang   digunakan,   yaitu Hydrlla,   Pistia, dan Salvinia disajikan pada Tabel 2.
Tabel   2.   Pengaruh   Pb   dengan   konsentrasi   berbeda   terhadap   biomassa   segar   (BS), biomassa kering (BK), kandungan klorofil total (KK), pada Hydrilla , Pistia dan Salvinia.
Table 2. Effect of different Pb concentrantion on fresh biomass (BS), dry biomass (BK), total chlorophyll content (KK) of Hydrilla , Pistia , and Salvinia Perlakuan (mg/l) BS (g) BK (g) KK (mg/g) Hydrilla (0) Pistia (0) Salvinia (0) Hydrilla (5) Pistia (5) Salvinia (5) Hydrilla (10) Pistia (10) Salvinia (10) Hydrilla (15) Pistia (15) Salvinia (15) 28,33 cd 44,00 bc 17,00 e 43,67 bc 47,67 abc 41,67 bcd 40,00 cd 61,00 a 28,17 de 24,00 e 55,00 ab 23,83 e 2,01 a 1,58 a 0,85 a 3,10 a 1,71 a 2,08 a 2,84 a 2,19 a 1,40 a 1,70 a 1,97 a 1,19 a 137,94 a 44,41 c 34,81 c 145,33 a 37,69 c 41,07 c 121,76 a 46,02 c 50,87 c 87,00 b 38,81 c
51,51 c
Keterangan : angka yang diikuti huruf berbeda pada kolom yang sama, menunjukkan beda nyata
Pertumbuhan Pistia pada   media   yang   diberikan   pemaparan   Pb   dengan   semua konsentrasi  yang  dicobakan  lebih  baik,  namun  tidak  diikuti   dengan  kandungan  klorofil yang tinggi. Kandungan klorofil yang tinggi justru terdapat pada Hydrilla .  Klorofil  adalah pigmen yang terdapat dalam kloroplas dan memanfaatkan cahaya yang diserap sebagai energi   untuk   reaksi-reaksi   cahaya   dalam   proses   fotosintesis.   Dalam   reaksi   ini,   sinar matahari diserap oleh klorofil dan kemudian diubah menjadi tenaga kimia dalam bentuk ATP serta senyawa pereduksi berupa NADPH + H + (Taiz and Zeiger. 1998). Pada gambar 1, nampak jelas bahwa  kandungan klorofil cenderung tinggi pada Hydrilla, namun tidak berpengaruh   terhadap   pertumbuhan.   Dari   3   jenis   tumbuhan   yang   digunakan,   hanya Hydrilla yang mempunyai perilaku berbeda, yaitu seluruh tubuhnya terendam dalam air. Perilaku yang berbeda ini dimungkinkan berpengaruh terhadap kandungan klorofil.
Gambar 1. Pengaruh Pb dengan konsentrasi berbeda terhadap kandungan klorofil dalam Hydrlla, Pistia dan Salvinia
Figure 1.  Effect of different Pb concentration on chlorophyll content of Hydrlla, Pistia, dan Salvinia
Untuk   mengetahui   translokasi   Pb   dengan   konsentrasi   berbeda   pada   3   jenis tumbuhan sebagai percobaan, dapat dilihat pada data serapan yang tersaji pada Tabel 3. Serapan Pb dalam akar, paling tinggi terdapat pada tumbuhan Salvinia yang ditumbuhkan pada media dengan pemaparan semua konsentrasi Pb. Sedangkan serapan Pb dalam tajuk   tertinggi   terdapat   pada   tumbuhan Salvinia .   Namun   demikian,   kemampuan mengakumulasi lebih baik untuk tumbuhan Pistia yang ditumbuhkan pada media dengan pemaparan Pb 10 mg/l, karena pada media dengan pemaparan lebih tinggi semua jenis tumbuhan sudah menurun pertumbuhannya.
Tabel 3. Pengaruh   Pb   dengan   konsentrasi   berbeda   terhadap   serapan   Pb   dalam akar(SPA),   serapan   Pb   dalam   tajuk   (SPT),   serapan   Pb   dalam   tumbuhan (SPTot), pada Hydrilla , Pistia dan Salvinia.
Table 3.  Effect of different Pb concentration on Pb absorption in root, shoot, and plant on Hydrilla , Pistia, and Salvinia.
Perlakuan (mg/l) SPA (mg) SPT (mg) SPTot (mg) Hydrilla (0) Pistia (0) Salvinia (0) Hydrilla (5) Pistia (5) Salvinia (5) Hydrilla (10) Pistia (10) Salvinia (10) Hydrilla (15) Pistia (15) Salvinia (15) 0,000 e 0,269 e 0,000 e 0,914 e 13,745 c 3,480 d 0,835 e 18,634 b 5,090 d 0,000 e 27,458 a 6,180 d 0,008 d 0,045 d 0,057 d 3,984 c 0,469 d 3,740 c 4,997 b 2,662 c 5,247 b 0,246 d 3,204 c 7,447 a 0,008 g 0,314 g 0,057 g 4,898 f 14,214 c 7,220 e 5,832 f 21.296 b 10,337 d 0,246 g 30,662 a
13,627 c
Keterangan : angka yang diikuti huruf berbeda pada kolom yang sama, menunjukkan beda nyata
Serapan   Pb   dalam   akar   tertinggi   terdapat   pada   tumbuhan Pistia ,   sedangkan serapan   Pb   dalam   tajuk   tertinggi   terdapat   pada   tumbuhan Salvinia, tetapi   kandungan klorofil tertinggi terdapat pada tumbuhan Hydrilla. Apabila dilihat dari morfologi tubuhnya, maka Pistia mempunyai perakaran panjang dan lebat, sedangkan Salvinia perakarannya sangat pendek dan tipis, Dengan demikian sistem perakaran juga berpengaruh terhadap proses penyerapan. Pada Hydrilla , pertumbuhan akarnya sangat jarang, sebagian besar tubuhnya didominasi oleh tajuk.
a b
Gambar 2.  Pengaruh   Pb   dengan   konsentrasi   berbeda   terhadap Hydrilla , Pistia ,  dan Salvinia . (a) biomassa segar. (b) serapan Pb total dalam tumbuhan Figure 2.  Effect of different Pb concentration on Hydrilla, Pistia, and Salvinia. (a) fresh biomass, (b) total Pb absorption in plant
Adanya   batas   konsentrasi   polutan   yang   dapat   ditolerir   oleh   tumbuhan, menyebabkan teknik rizofiltrasi biasanya menggunakan jenis-jenis tumbuhan yang toleran terhadap   polutan   tertentu   (Chaney et   al .,   1997;   Kambhampati   and   William,   2001). Konsentrasi   polutan   yang   melebihi   batas   toleran   menyebabkan   tumbuhan   mengalami stres  dan   akhirnya   mati   (Espinosa-quinones et   al .,   2005;  Akinola   and  Adedeji,   2007). Tumbuhan yang toleran terhadap senyawa polutan tertentu ditandai dengan serapan yang tinggi dan pertumbuhannya baik (Baker et al., 1994; Brown et al., 1995 a; Brown et al., 1995 b). Pada Gambar 2 (a) dan (b) dapat diketahui  pengaruh pemaparan Pb dengan konsentrasi berbeda terhadap Hydrilla, Pistia dan Salvinia terhadap biomassa segar dan serapan   Pb   total   dalam   tumbuhan.   Jenis   tumbuhan   yang   ideal   untuk   remediasi kontaminan logam berat adalah mempunyai pertumbuhan cepat, biomassa tinggi dengan sistem   perakaran   yang   ekstensif   serta   mempunyai   toleransi   tinggi   dan   juga   mampu mengakumulasi  kontaminan dalam  jumlah tinggi  dalam tubuhnya  (Volesky, 1994;  Salt, 2000;   Vangronsveld,2000 ) .  Hasil   pengamatan   yang   dilakukan   4   minggu   setelah pemaparan Pb, maka dari semua data yang telah tersaji dalam tabel dan gambar dapat disimpulkan   bahwa     diantara   3   jenis   tumbuhan   yang   dicobakan   ternyata Pistia dapat digunakan   sebagai   fitoremediator   melalui   proses   rizofiltrasi.   Lama   waktu   pemaparan berpengaruh terhadap kemampuan tumbuhan untuk bertahan hidup (Odjegba and Fasidi, 2004; Rosa et al ., 2004).

## Kesimpulan
Jenis tumbuhan air yang dapat  digunakan  sebagai  fitoremediator melalui  proses rizofiltrasi adalah Pistia stratiotes L dalam media tumbuh yang diberikan pemaparan Pb (NO 3 ) 2 dengan konsentrasi paling tinggi adalah 10 mg/l.
Daftar Pustaka
Akinola, M.O. and Adedeji,  O.A.,  2007. Assessment of Lead Consentration in Panicum maximum Growing   Along   The   Lagos-Ibadan   Expressway,  Nigeria.  AJST.Science and Enginering Series. 8: 97-102.
Baker,  A.J.M.,   Reeves,   R.D.,   and   Hajar,  A.S.M.,1994.   Heavy   Metal  Accumulation   and Tolerance   in   British   Population   of   the   Metalophyte     Thalspicaerulescens.   New Phytol. 127: 61-68.
Brown,  S.L.,   Chaney,  R.L.,  Angel,  J.S.,   and   Baker,  J.M.,  1995a.   Zink   and   Cadmium uptake by hyperaccumulator Thalspi caerulescens grown in nutrient solution. Soil Sci Soc Am J:59: 125-133.
Brown,  S.L.,   Chaney,  R.L.,  Angle,  J.S.,   and   Baker,  J.M.,  1995b.   Zink   and   Cadmium uptake by hyperaccumulator Thalspi caerulescens and Silene vulgaris grown on sludge-amended soils in relation to total soil metals and soil pH. Environ Sci Technol 29: 1581-1585.
Chaney, R.L., Brown, S.L., and Angle, J.S., 1997. Phytoremediation of Soil Metals . Curr Opini  Biotechnol 8: 279-284
Darmono, 1995. Logam Dalam Sistem Biologi Makhluk Hidup. UI Press, Jakarta.
Espinoza-quinones,   F.R.,   Zacarkim,   C.E.,  Palacio,  S.M.,   Obregon,  C.L.,   Zenatti,  D.C.,
Galante, R.M., Rossi, N., Pereira, I.R.A., and Welter, R.A., 2005 Removal of Heavy Metal from Polluted River Water Using Aquatic Macrophytes Salvinia sp. Brazilian Journal of Physics 35: 744-746.
Fitter, A.H. and Hay, R.K.M., 1987. Environmental Physiology of Plants. Academic Press Inc., San Diego.
Gareth,   M.E.   and   Furlong,  J.C.,  2003.   Environmental   Biotechnologi,   Theory   and Application. John Wiley and Sons, England.
Hernayanti, 2002. Efektivitas Tumbuhan Air ( Salvinia sp. ) dalam Menyerap Chrom pada Limbah Cair  Industri Elektroplating. Tesis . Pasca Sarjana Ilmu Lingkungan UGM, Yogyakarta.
Hernayanti   dan   Proklamasiningsih,  E.,  2005.   Fitoremediasi   Limbah   Cair     Batik Menggunakan  Tumbuhan Air. Laporan Penelitian. Fakultas Biologi UNSOED.
Hidayati, N., 2005. Fitoremediasi dan Potensi Tumbuhan Hiperakumulator. Hayati .12(1):
35-40.
Jong, L.K., 1996. Akumulasi Pb dalam tanah dan cabai merah besar ( Capsicum annum, L.)  di   beberapa   lokasi   jalan   raya   DIY.  Skripsi . Fakultas   Biologi   Universitas   Duta Wacana, Yogyakarta.
Kaim, W. and Schwedesdeski, B.,  1994. Bioinorganic Chemistry : Inorganic Elements in the Chemistry of life. John Wiley and Sons, England.
Kambhampati, L.S. and Williams, L., 2001. Phytoremediation of Lead-Contaminated Soil Using Mirabilis   jalapa   L .   Phytoremediation,   Wetlands,   and   Sediments.   The   sixth International In situ and On-site Bioremedistion Symposium. 145-150.
Kvesitadze, G.,  Khtisashvili,  G.,  Sadunishvili,  T.,  and Ramsden,  J.J.,  2006. Biochemical Mechanisms of Detoxification in Higher Plant (Basis of Phytoremediation). Springer- Verlag, Berlin, Heidelberg.
Memon,   A.R.,   Aktoprakligil,  D.,   Ozdemir,   A.,  and   Vertii,  A.,  2001.   Heavy   Metal Accumulation and Detoxification Mechanism in Plant. Turk. J. Bot. 25: 111-121.
Odjegba,V.J. and Fasidi, I.O., 2004. Accumulation of Trace Elements by Pistia stratiotes : Implications for phytoremediaton. Ecotoxicology, 13: 637-646
Pane, H. dan Hasanudin, A., 2001. Gulma Invasive  Jajagron ( Echinochloa crusgali L) dan Enceng   gondok   ( Eichornia   crassipes )   di   lahan   bawah   Irigasi . Makalah   pada “Seminar Peringatan Hari Keanekaragaman Hayati 2001”
Palar, H., 1995. Pencemaran dan toksikologi logamberat. Penerbit Rineka Cipta. Jakarta.i jalan   tol   Jagorawi:   Analisis   struktur   anatomi   dan   histokimia.   Jurnal   analisis lingkungan. 2 (1): 117 -127
Rangkuti, 2005. Kemampuan menyerap Timbal (Pb) beberapa jenis tanaman penghijauan di   Jalan   Tol   Jagorawi:   Analisis   Struktur   Anatomi   dan   Histokimia.   Jurnal   Analisis Lingkungan. 2 (1): 117 -127.
Rosa, G., Gardea-Torresdey,  J.L., Peralta-Videa,  J.R.,  and Aldrich  ,M.,  2004. Effect of EDTA on Pb(II) Uptake and Translocation by Tumbleweed ( Salsola kali ) : Agar ang Hydroponices   Studies.   Symposia   Papers   Presented   before   the   Division   of Environmental Chemistry American Chemical Society. March 28 - April 1  2004.
Salt,  D.E.,  2000.   Phytoextraction:   Present   Applications   and   Future   Promise.
Bioremediation of Contaminated Soils. Marcek Dekler Inc., New York. pp 729-743.
Stearns, J. C., Shah, S., and Glick, B.R., 2007. Increasing Plant Tolerance to Metal in the Environment. From: Methods in Biotechnology, vol. 23: Phytoremediation: Methods and Reviews, Edited by: N. Willey. Humana Press Inc., Totowa, NJ.
Subbid   Pemantauan,   2009.   Sumber   pencemar   Timbal   (Pb)   da   Alur   Pajanan. http://www.bplhdjabar.go.id/index.php/bidang-pengendalian/subid-pemantauan- pencemaran/168-pencemaran-pb-timbal?start=1. (diakses 31 Desember 2009).
Taiz, L. and Zeiger, E., 1998. Plant Physiology, second ed. Sinauer Ass. Inc. Publishers, Sunderland, Massachusetts.
Vangronsveld,  J.,  2000. Insitu Inactivation and Phytoremediation of Metal and Metalloid Contaminated soils: Field Experimennt di dalam Wise OL., Trontolo DJ., Cichan EJ., Inyang HI., Stottmeiser U (ed). Bioremediation of Contaminated Soils  New York: Marcek Dekker Inc: 859-884.
Volesky, B., 1994. Advances in Biosorption of Metals: Selection of Biomassa Types, FEMS Microbiology Review 14, hal. 291-301.
Zayed, A., Gowthaman,  S.,  and Terry,  N.,  1999. Phytoaccumulation of  trace  element by wetland: I Duckweed . Journal of Environmental Quality 27: 715-721.