## Potensi Antioksidan Rumput Laut Gracilaria verrucosa Dari Pantai Gunung Kidul, Yogyakarta
Wahyu Febrianto * , Ali Djunaedi, Suryono Suryono, Gunawan Widi Santosa dan Sunaryo Sunaryo
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. H. Soedharto, SH., Tembalang, Semarang, Indonesia 50275 Email: wahyu.febrianto.rf@gmail.com

## Abstract

## Antioxidant Potential of Gracilaria verrucosa Seaweed from Gunung Kidul Beach, Yogyakarta
Gracilaria verrucosa is red algae that has been widely used as an antioxidant. This research was  conducted  to  test  antioxidant  activity,  total  phenolic  content  and  bioactive  compound  of Gracilaria  verrucosa  obtained  from  Pok  Tunggal  Beach  and  Ngandong  Beach,  Gunung  Kidul, Yogyakarta. Research was carried out by descriptive method. Samples were fresh and taken from the beach, then macerated for 3x24 hours in a methanol solvent. Antioxidant test was carried out by electron transfer method with DPPH 0.1 mM and measurement of antioxidant activity using. Total phenolic contents were measured using the Folin-ciocalteau method using gallic acid standard on 725  nm  wavelength.  The  phytochemical  content  observated  by  changing  of  extract  color  by reagent. Pigment contents were measured using spectrophotometric methods at wavelengths 636 and 663 (chlorophyll-a and chlorophyll-b) and 480 nm (carotenoids). The results showed that IC50 value  extract  of  Pok  Tunggal  Beach  and  Ngandong  Beach  were  188,53  ppm  and  168,76  ppm. Phenolic content of each extract were 16,527 and 17,497 mg GAE / g sample weight). Chlorophyll- a levels  were 7,132 and 4,357 mg/g, chlorophyll-b  were 8,335 and 5,401 mg/g, carotenoids were 31,625 and 35,494 µmol/g. Gracilaria verrucosa from Ngandong Beach have  antioxidant activity.
Keywords: Gracilaria verrucosa; antioxidant; DPPH; phytochemical

## Abstrak
Gracilaria  verrucosa merupakan  alga  merah  yang  pemanfaatannya  sudah  banyak dilakukan  sebagai  antioksidan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  potensi  antioksidan, menghitung kadar fenolat total, dan senyawa bioaktif yang terkandung pada Gracilaria verrucosa yang  diperoleh  dari  Pantai  Pok  Tunggal  dan  Pantai  Ngandong,  Gunung  Kidul,  Yogyakarta. Penelitian  ini  dilakukan  dengan  metode  deskriptif.  Sampel  segar  diambil  langsung  dari  pantai, kemudian  dimaserasi  selama  3x24  jam  dalam  pelarut  metanol.  Uji  antioksidan  dilakukan  dengan metode  transfer  elektron  dengan  DPPH  0,1  mM  dan  pengukuran  aktivitas  antioksidan menggunakan  perhitungan  nilai  IC 50 .  Kadar  fenolat  total  diukur  menggunakan  metode  Folin- ciocalteau dengan asam galat sebagai standar pada panjang gelombang 725 nm. Kandungan fitokimia  diuji  menggunakan  pengamatan  perubahan  warna  ekstrak  saat  diberikan  pereaksi. Kadar pigmen diukur menggunakan metode spektrofotometri pada panjang gelombang 636, 663 (klorofil-a  dan  klorofil-b)  dan  480  nm  (karotenoid).  Hasil  menunjukkan  bahwa  nilai  IC 50 ekstrak sampel  dari  Pantai  Pok  Tunggal  dan  Pantai  Ngandong  berturut-turut  adalah  188,53  ppm  dan 168,76  ppm.  Kadar  fenolat  masing-masing  ekstrak  sebesar  16,527  dan  17,497  mg  GAE/g  berat sampel).  Kadar  klorofil-a  sebesar  7,132  dan  4,357  mg/g,  klorofil-b  sebesar  8,335  dan  5,401  mg/g, karotenoid  sebesar  31,625  dam  35,494  µmol/g. Gracilaria  verrucosa dari  Pantai  Ngandong  dan Pantai Pok Tunggal memiliki potensi antioksidan.
Kata kunci : Gracilaria verrucosa ; antioksidan; DPPH; fitokimia

## PENDAHULUAN
Pemanfaatan  rumput  laut  saat  ini beragam  dan  mencakup  ke  dalam  bidang pangan,  industri,  serta  farmasi.  Rumput  laut diketahui  memiliki  senyawa  bioaktif  yang beragam  yang  masing  -  masing  spesies memiliki  keunikannya  tersendiri.  Rumput  laut Gracilaria verrucosa yang termasuk ke dalam golongan  rumput  laut  merah.  Menurut penelitian  yang  dilakukan  Arunkumar et  al. (2014)  kandungan  klorofil  total  dan  pigmen aksesoris  pada Gracilaria  verrucosa lebih besar  dibandingkan  dengan  rumput  laut merah  lainnya.  Pigmen  yang  terkandung pada  rumput  laut  memiliki  potensi  untuk dimanfaatkan sebagai antioksidan (Pumas et al ., 2012).
Senyawa  yang  mampu  mendonorkan satu  elektron  kepada  senyawa  oksidan radikal  sehingga  dapat menghambat  proses oksidasi  dapat  disebut  sebagai  senyawa antioksidan. Senyawa
radikal bebas cenderung  untuk  menyerap  elektron  di sekitarnya  karena  memiliki  elektron  tidak berpasangan.  Antioksidan  dapat  diperoleh dari  alam  dengan  proses  ekstraksi  bahan alam.  Antioksidan  jenis  ini  disebut  sebagai antioksidan  alami  dan  jumlahnya  terbatas (Sayuti dan Yenrina, 2015; Yadav et al., 2016).
Antioksidan  alami  tidak  memiliki  efek samping seperti yang terjadi saat menggunakan antioksidan sintetis (Choe dan Min,  2009).  Antioksidan  sintetis  seperti tert- butylhydroquinone
(TBHQ),
butylated hydroxianisol
(BHA),
dan
butylated hydroxytoluene (BHT)  sering  ditemukan terkandung  dalam  produk  produk  pangan yang beredar di pasaran. Konsumsi antioksidan sintetis secara terus menerus akan menyebabkan kerusakan hati (Fitri, 2013).
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan oleh  Widowati et  al. (2014)  dan  Cyril et  al.
(2017), Gracilaria  verrucosa mengandung metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid, terpenoid  serta  senyawa  bioaktif  lainnya. Alkaloid, flavonoid, dan terpenoid merupakan  senyawa  bioaktif  yang  dapat berfungsi  sebagai  antijamur  dan  antioksidan (Saxena et  al., 2013).  Penelitian  yang dilakukan  oleh  de  Almeida et  al. (2011)
menunjukkan kemampuan Gracilaria verrucosa sebagai  anti-toksik,  anti-inflamasi, antioksidan, dan anti-hipertensi.
Pantai  Pok  Tunggal,  Gunung  Kidul  dan Pantai  Ngandong,  Gunung  Kidul  memiliki karakteristik  berupa  pantai  dengan  susunan karang  mati  di  bibir  pantainya.  Lokasinya yang  berada  di  selatan  Pulau  Jawa  dan menghadap  langsung  ke  Samudera  Hindia, menjadikan  pantai  ini  memiliki  gelombang yang  cukup  besar.  Menurut  Ariani et  al. (2017), pada umumnya rumput laut Gracilaria memiliki  habitat  di  pantai  yang memiliki  substrat  karang  berpasir  dengan kedalaman yang dangkal serta hangat.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengetahui  potensi  antioksidan,  kadar klorofil-a, klorofil-b, karotenoid, dan metabolit sekunder  pada  rumput  laut Gracilaria verrucosa dari Pantai Pok Tunggal dan Pantai Ngandong.

## MATERI DAN METODE
Materi dalam penelitian ini adalah rumput laut  divisi  Rhodophyta  spesies Gracilaria verrucosa yang  diperoleh  dari  Pantai  Pok Tunggal  dan  Pantai  Ngandong,  Gunung Kidul,  Yogyakarta.  Metode  penelitian  yang digunakan  adalah  deskriptif  eksploratif .
Proses
ekstraksi sampel dilakukan berdasarkan  metode  yang  telah  dilakukan oleh Rohimat et al. (2014), yang di modifikasi volume  pelarutnya.  Perhitungan  rendemen berdasarkan Sani et al. (2014).
Pengujian  senyawa  fitokimia,  Uji  alkaloid dan Uji flavonoid dilakukan dengan mengacu  metoda  Suzery  dan  Kusrini  (2004). Aktivitas  antioksidan  dilakukan  berdasarkan penelitian  Shekhar  dan  Anju  (2014)  dan Pramesti et al., (2017).
Pengujian  total  fenolat  dilakukan  denan mengacu  pada  Yangthong et  al. (2009), Sharma et al. (2011) dan Santoso et al. (2012) dengan modifikasi jenis sampelnya. Penentuan kadar klorofil total dan karotenoid mengacu  pada  Lichtenthaler  (1987),  dan Kurniawan et  al. (2010).  Hasil  pegukuran absorbansi kemudian dihitung menggunakan perhitungan oleh Lichtenthaler (1987).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak  sampel  dari  kedua  pantai  memiliki hasil  akhir  berwarna  hijau  pekat  dengan bentuk  seperti  pasta.  Berat  ekstrak  dan rendemen  ekstrak  sampel  yang  berasal  dari pantai  Ngandong  lebih  besar  dibanding ekstrak  sampel  yang  berasal  dari  Pantai  Pok Tunggal.
Hasil  ekstraksi  yang  menunjukkan bahwa  berat  ekstrak  dan  angka  rendemen ekstrak yang diperoleh dari pantai Ngandong lebih  besar  dari  yang  diperoleh  dari  pantai Pok  Tunggal  (Gambar  1).  Lebih  lanjut,  hasil ekstraksi  yang  lebih  besar  diduga  karena Gracilaria  verrucosa memiliki  kandungan senyawa  aktif  yang  lebih  banyak  sehingga mempengaruhi berat rendemen. Pernyataan ini  sesuai  dengan  Sayuti  (2017)  yang menyatakan bahwa berat rendemen dipengaruhi  kandungan  senyawa  aktif  suatu sumber.
Warna  kehijauan  pekat  pada  hasil ekstraksi  mengindikasikan  bahwa  sampel memiliki  banyak  kandungan  klorofil.  Klorofil dapat  keluar  dari  dinding  sel  dikarenakan pemecahan dinding sel saat proses maserasi (Hanapi et  al., 2013).  Aktivitas  antioksidan ekstrak  dilihat  dengan  nilai  IC 50 ( Inhibition Concentration 50%). Nilai IC 50 dapat di hitung berdasarkan  grafik  hubungan  antara  % inhibisi terhadap konsentrasi ekstrak. Persentase  (%)  inhibisi  dari  kedua  ekstrak meningkat  seiringan  dengan  meningkatnya konsentrasi.  Pada   penelitian   ini  konsentrasi
Gambar 1. Rendemen  ekstraksi Gracilaria verrucosa
Gambar 2. Grafik konsentrasi ekstrak Gracilaria verrucosa terhadap % inhibisi.
ekstrak mengacu pada Pramesti et al. (2017). Analisa  korelasi  regresi  untuk  memperoleh nilai  IC 50 .  Persamaan  regresi  linier  hubungan antara  konsentrasi  terhadap  persen  inhibisi DPPH digunakan untuk menghitung nilai IC 50 .
Grafik antara konsentrasi ekstrak Gracilaria  verrucosa terhadap  %  inhibisi (Gambar  2)menunjukkan  bahwa  kedua ekstrak memiliki nilai inhibisi yang berbanding lurus  dengan  konsentrasi  ekstrak.  Hasil pengukuran  aktivitas  antioksidan  pada Gracilaria  verrucosa dari  kedua  pantai didapatkan  nilai  IC 50 sampel  yang  berbeda. Nilai  IC 50 pada  ekstrak Gracilaria  verrucosa dari  pantai  Pok  Tunggal  lebih  besar  dengan nilai  188,53  ppm  dibandingkan  pada  ekstrak dari  Pantai  Ngandong  dengan  nilai  168,76 ppm.  Nilai  IC 50 pada  ekstrak  dari  kedua pantai  lebih  kecil  dibandingkan  dengan penelitian yang dilakukan oleh Lestario et al. (2018)  yang  memperoleh  nilai  IC 50 yang sangat  rendah  yaitu  1680,59  ppm  untuk ekstrak  metanol.  Kemampuan  antioksidan pada  kedua  penelitian  ini  tergolong  rendah berdasarkan  perhitungan  nilai  IC 50 .  Menurut Molyneux (2004)  Semakin kecil nilai IC 50 maka aktivitas antioksidan semakin besar.
Rendahnya kemampuan ekstrak dalam mereduksi DPPH diduga dapat terjadi karena sampel  yang  digunakan  masih  terdapat pengotor  seperti  mineral  garam.  Kepolaran dari  pelarut  metanol  yang  digunakan  untuk ekstraksi  diduga  juga  mempengaruhi  nilai
1 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 Gracilaria verrucosa Ren dem en ( % ) Pok Tunggal Ngandong
y = 0,0743x + 35,992 R² = 0,9824 y = 0,0535x + 40,971 R² = 0,897 0 20 40 60 0 100 200 300 In h ib isi (% ) Konsentrasi (ppm)
Pok Tunggal Ngandong Linear (Pok Tunggal)
Linear (Ngandong)
IC 50 . Aktivitas antioksidan sangat dipengaruhi oleh  metabolisme  sekunder  seperti  senyawa fenolat yang merupakan senyawa semi polar yang  akan  sempurna  terlarut  pada  pelarut yang  semi  polar  (Yanuarti et  al., 2013; Rondonuwu et  al. ,  2017).  Menurut  Heo et  al. (2006), metabolit sekunder  pada rumput laut sangat dipengaruhi oleh parameter lingkungan,  sehingga  sangat  dimungkinkan terdapat  perbedaan  aktivitas  antioksidan pada lokasi yang berbeda (Tabel 1).
Hasil  uji  fitokimia  didasarkan  kepada reaksi  yang  terjadi  terhadap  ekstrak  sampel setelah  diberikan  perekasi  pada  ekstrak sampel.  Pengujian  dilakukan  berdasarkan metode Suzery dan Kusrini (2004).
Hasil  uji  kualitatif  menunjukkan  bahwa kedua  sampel  memiliki  kandungan  senyawa bioaktif  yang  sama.  Senyawa  alkaloid  dan flavonoid merupakan senyawa yang jumlahnya  sangat  besar  dalam  tanaman. Hasil  pengujian  diperkuat  dengan  penelitian yang  telah  dilakukan  oleh  Widowati et  al. (2014)  dan  Cyril et  al. (2017)  yang mengidentifikasi  adanya  alkaloid,  flavonoid, saponin,  fenol,  dan  terpenoid  dalam  sampel Gracilaria  verrucosa. Lebih  lanjut  menurut Yuhernita  dan  Juniarti  (2011)  senyawa flavonoid,  alkaloid,  fenol,  dan  terpenoid merupakan senyawa yang bersifat antioksidan.
Perhitungan kadar total fenolat, klorofil- a,     klorofil-b,    dan     karotenoid    dilakukan
Tabel 1. Keberadaan Metabolit Sekunder dari
Rumput Laut Gracilaria verrucosa Uji Lokasi Pok Tunggal Ngandong Alkaloid + ++ Flavonoid + + Saponin + + Fenol + + Steroid - - Triterpenoid ++ +
Ket.  +  :  terjadi  perubahan  warna/bereaksi; ++: terjadi perubahan warna lebih pekat/bereaksi  lebih  kuat;  -  :  tidak  terjadi reaksi.
menggunakan metode spektrofotometri (Tabel 2).   Asam   galat   digunakan  sebagai standar  dalam  pengukuran  kadar  total fenolat. Hasil pengujian klorofil-a, dan klorofil- b,  menunjukkan  ekstrak  sampel  dari  pantai Pok  Tunggal  memiliki  nilai  berturut  –  turut sebesar  7,132  mg/g,  dan  8,833  mg/g.  Nilai karotenoid  dan  total  fenolat  tertinggi diperoleh  dari  ekstrak  sampel  dari  pantai Ngandong  dengan  nilai  35,494  µmol/g  dan 17,49 mg GAE/mg sampel.
Kandungan fenolat total pada penelitian  ini  lebih  kecil  dibandingkan penelitian  Lestario et  al. (2008)  yang memperoleh  fenolat  total  sebesar  20,01  mg GAE/ g sampel untuk ekstrak metanol namun lebih  besar  dari  penelitian  yang  dilakukan oleh  Widowati et  al .  (2014)  dimana  ekstrak Gracilaria  verrucosa memiliki  kandungan fenolat total sebesar 7,86 mg GAE / g sampel ekstrak metanol.
Kadar  klorofil  pada  ekstrak  dari  Pantai Pok  Tunggal  lebih  besar  dibandingkan dengan  ekstrak  yang  berasal  dari  Pantai Ngandong. Klorofil-a lebih sedikit dibandingkan  dengan  klorofil-b  pada  kedua sampel  dikarenakan  sifat  yang  berbeda antara  klorofil-a  dan  klorofil-b.  Klorofil-b memiliki  sifat  yang  lebih  polar  dibandingkan dengan  klorofil-a  yang  kurang  polar  (Gross, 1991).  Diduga  penggunaan  metanol  yang merupakan  pelarut  polar  akan  melarutkan lebih  banyak  klorofil-b  dibandingkan  klorofil- a.  Lebih  lanjut,  kandungan  zat  hara  pada perairan juga mempengaruhi jumlah klorofil-a yang dimiliki oleh tumbuhan laut (Aryawati et al ., 2014).
Kandungan  klorofil  berbanding  terbalik dengan  kandungan  karotenoid  masing masing sampel. Perbedaan jumlah karotenoid  berhubungan  dengan  intensitas cahaya  yang  diterima  rumput  laut.  Karoten merupakan  aksesoris  permanen  cahaya yang  dapat  melindungi  kerusakan  klorofil oleh  foto-oksidasi  saat  fotosintesis,  selain  itu karotenoid  memiliki  peran  dalam  memanen cahaya (Merdekawati et al , 2017).
Menurut  Gross  (1991)  klorofil  yang berada  pada  tanaman  dapat  berpotensi sebagai  senyawa  antioksidan.  Dalam  proses feofitinisasi  terdapat  logam  Mg + yang
Tabel 2 . Hasil Pengujian Klorofil-a, Klorofil-b, Karotenoid, dan Total Fenolat
Lokasi Klorofil-a (mg/g) Klorofil-b (mg/g) Karotenoid (µmol/g) Fenolat (mg GAE/g) Pok Tunggal 7,132 8,335 31,625 16,527 Ngandong 4,357 5,401 35,494 17,498 terlepas  sehingga  radikal  bebas  yang memiliki elektron berlebih
akan menyumbangkan elektronnya kepada logam Mg + .

## KESIMPULAN
Gracilaria  verrucosa yang  diperoleh dari  Pantai  Pok  Tunggal  dan  Pantai Ngandong memiliki aktivitas antioksidan yang lemah  dengan  nilai  IC 50 untuk  Pantai  Pok Tunggal  sebesar  188,53  ppm  dan  Pantai Ngandong sebesar 168,76 ppm. Pada Pantai Pok  Tunggal  kadar  klorofil-a,  klorofil-b, karotenoid,  dan  kadar  fenolat  adalah sebesar  7,132  mg/g  ,  8,335  mg/g,  31,625 µmol/g,  dan  16,527  mg  GAE/g;  Pada  Pantai Ngandong kadar klorofil-a, klorofil-b, karotenoid,  dan  kadar  fenolat  adalah sebesar  4,357  mg/g,  5,401  mg/g,  35,494 µmol/g,  dan  17,498  mg  GAE/g. Gracilaria verrucosa yang  diperoleh  dari  Pantai  Pok Tunggal  dan  Pantai  Ngandong  memilik senyawa  bioaktif  antara  lain  flavonoid, alkaloid,  saponin,  fenol,  dan  triterpenoid, tetapi tidak ditemukan steroid.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariani,  W.  Nurgayah,  L.O.A.  &  Afu.  2017. Komposisi  dan  Distribusi  Makroalga Berdasarkan  Tipe  Substrat  di  Perairan Desa  Lalowaru  Kecamatan  Moramo Utara. Sapa Laut. 2(1):25-30.
Arunkumar,  K.,  Palanivelu,    A.  &  Darsis,  A.
2014.  Proximate  composition,  nutra- ceutical  constituents  and  fatty  acid profile  on  GCMS  of  seaweeds  collected from  Balk  Bay  (Thondi),  India. Int.  J. Current Sci. 12:57-71.
Aryawati,  R.,  Isnaini,  &  Surbakti,  H.  2014. Hubungan  Konsentrasi  Klorofil-a  dan Kandungan  Hara  di  Perairan  Bangka. Seminar Nasional MIPA Palembang . 1-6.
Choe,  E.,  &  D.  B.  Min.  2009.  Mechanisms  of Antioxidants  in  the  Oxidation  of  Foods.
Comprehen.  Rev.  Food  Sci.  Food  Safety . 8(4):345 – 359.
Cyril,  R.,  Lakshmanan,  R.  &  Thhiyagarajan,  A.
2017. In Vitro Bioactivity and Phytochemical  Analysis  of  Two  Marine Macro-algae. J.  Coast.  Life  Med. 5(10): 427-432.
De  Almeida,  C.L.F.,  Falcão,  D.S.,  Lima,  D.M., Gedson,  R.,  Montenegro,  D.A.,  Lira,  N.S., Athayde-Filho, D., Petrônio, F., Rodrigues, L.C.,  De  Souza,  M.D.F.V.  and  Barbosa- Filho, J.M., 2011. Bioactivities from marine algae of the genus Gracilaria. Int. J. Mol. Sci. , 12(7):4550-4573.
Fitri,  N.  2013.  Butylated  hydroxyanisole sebagai  Bahan  Aditif  Antioksidan    pada Makanan
dilihat dari
Perspektif Kesehatan. J. Kefarmasian Ind. 4(1):41-50. Gross,  J.    1991.    Pigments    in    Vegetables Chlorophylls    and    Carotenoids.    An    Avi Book.  New York
Hanapi,  A.,  Fasya,  G.,  Mardiyah,  U.,  &
Miftahurrahmah. 2013. Uji Aktivitas Antioksidan  Dan  Antibakteri  Ekstrak Metanol Alga Merah Eucheuma spinosum Dari  Perairan  Wongsorejo Banyuwangi. J. Alchemy ,  2(2):126–137.
Kurniawan,  M.,  Munifatul,  I.  &  Yulita,  N.  2010. Kandungan  Klorofil,  Karotenoid,  dan Vitamin  C  pada  Beberapa  Spesies Tumbuhan  Akuatik. Anatomi  Fisiologi . 18(1):28-40.
Lestario,  L.  N.,  Sugiarto,  S.,  &  Timotius,  K.H. 2008.  Aktivitas  Antioksidan  dan  Kadar Fenolik  Total  dari  Ganggang  Merah ( Gracilaria  verrucosa L.). J.  Teknol.  Ind. Pangan ,  19(2):131-139.
Lichtenthaler,  H.K.  1987.  Chlorophylls  And Carotenoids: Pigments  Of Photosynthetic Biomembranes. Methods  in  Enzymology . 148:350-382.
Merdekawati, W., Karwur, F.K. & Susanto, A.B. 2017.  Karotenoid  Pada  Algae:  Kajian Tentang  Biosintesis,  Distribusi  Serta  Fungsi Karotenoid. Bioma 13(1):23-33.
Molyneux, P. 2004. The Use of The Stable Free Radical diphenylpicryl-hydrazyl for
Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J.  Sci.  Technol. 26(2):211-
219.
Pramesti,  R.,  Ridlo,  A.,  Setyati,    W.A., Zainuddin,  M.,  &  Akbar,  M.R.  2017.
Aktivitas Antioksidan Rumput Laut Acanthophora  muscoides (Linnaeus)
Bory  dari  Pantai  Krakal  Gunung  Kidul Yogyakarta. J. Disprotek , 8(1):46-56. Pumas, C., Peerapornpisal, Y., Vacharapiyasophon,  P.,  Leelapornpisid, P., Boonchum, W.,
Ishii,
M. &
Khanongnuch,  C.  2012.  Purification  and characterization  of  a  thermostable phycoerythrin
from
hot spring cyanobacterium  leptolyngbya  sp.  KC45. Int.l J. Agricul. & Biolog. 14:121–125. Rohimat.  R,  Widowati,  I.,  &  Trianto,  A.  2014. Aktifitas  antioksidan  ekstrak  metanol rumput  laut  coklat  ( Turbinaria  conoides dan Sargassum  cristaefolium )  yang dikoleksi  dari  pantai  Rancabuaya  Garut Jawa Barat. J. Mar. Res. 3(3):304-313.
Rondonuwu,  S.D.J.,  Suryanto,  E.,  &  Sudewi,  S. 2017.  Kandungan  Total  Fenolik  dan Aktivitas  Antioksidan  dari  Pelarut  Sagu Baruk  ( Arenga  microcharpa ). Chem. Prog. , 10(1):31-35
Sani, R.N., Nisa, F.C., Andriani, R.D. & Maligan, J.M..  2014.  Analisis  Rendemen  dan Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Mikroalga Laut Tetraselmis  chuii. J.Pangan  Agroind. 2(2):121-126.
Santoso,  J.,  Anwariyah,  S.,  Rumiantin,  R.O., Putri,  A.P.,  Ukhty,  N.  &  Yoshie-Stark,  Y., 2012. Phenol content, antioxidant activity and  fibers  profile  of  four  tropical seagrasses from Indonesia. J. Coast. Dev. 15(2):189-196.
Saxena, M., Saxena, J., Nema, R., Singh, D. &
Gupta,  A.,  2013.  Phytochemistry  of medicinal  plants.
J.    Pharmacog.
Phytochem. 1(6):168-182.
Sayuti,  K.  &  Yenrina,  R.  2015.  Antioksidan, Alami  dan  Sintetik.  Andalas  Universitiy Press, Padang Sayuti,  M.  2017.  Pengaruh  Perbedaan Metode  Ekstraksi,  Bagian  Dan  Jenis Pelarut Terhadap Rendemen Dan
Aktifitas  Antioksidan  Bambu  Laut  ( Isis
Hippuris ). Technol. Sci. Eng. J. 1(3):166-174 Sharma, G.N., Dubey, S.K., Sati, N. & Sanadya, J.,  2011.  Phytochemical  screening  and estimation  of  total  phenolic  content  in Aegle marmelos seeds.
Int. J.
Pharmaceut. Clinic. Res. 3 (2):27-29. Shekhar,  T.C.  &  Anju,  G.,  2014.  Antioxidant activity  by  DPPH  radical  scavenging method  of  Ageratum  conyzoides  Linn. leaves. Am. J. Ethnomed. 1(4):244-249.
Suzery,  M.  &  Kusrini,  D.,  2004.  Buku  Ajar Pemisahan  dan  Analisis  Bahan  Alam. FMIPA, UNDIP, Semarang. 131.
Widowati,  I.,  Lubac,  D.,  Puspita,  M.  & Bourgougnon, N. 2014. Antibacterial and Antioxidant  Properties  of  The  Red  Alga Gracilaria  verrucosa from  The  North Coast of Java, Semarang, Indonesia. Int.
J. Latest Res. Sci. Technol. 3(3):179-185 Yadav,  A.,  Kumari,  R., Yadav,  A., Mishra, J.P., Srivatva,  S.  &  Prabha,  S.,  2016. Antioxidants  and  its  functions  in  human body-A  Review. Res.    Environ.  Life  Sci.
9 (11):1328-1331. Yangthong,  M.,  Hutadilok-Towatana,  N.  & Phromkunthong,  W.  2009.  Antioxidant Activities  of  Four  Edible  Seaweeds  from the  Southern  Coast  of  Thailand. Plant Foods Human Nutrition , 64:218-223
Yuhernita  &  Juniarti.  2011.  Analisis  Senyawa Metabolit  Sekunder  dari  Ekstrak  Metanol Daun  Surian  yang  Berpotensi  Sebagai Antioksidan. Makara, Sains, 15(1):48-52.