## PENGARUH DOSIS IRRADIASI GAMMA 60 COBLAT TERHADAP STABILITAS ANTIOKSIDATIF EKSTRAK METANOLIK BIJI DUWET
(Syzygium cumini Linn.)
(Effect of 60 Coblat Gamma irradiation doses onAntioxidant Stability of Metanolic Extract of Duwet Seeds (Syzygium cumini Linn.))
Khilda Noor Itsnaini 1 , Rohadi 2 , Sugili Putra 3
1 Mahasiswa Teknologi Hasil Pertanian Universitas Semarang
2 Staff Pengajar Teknologi Hasil Pertanian Universitas Semarang
3 Staff Pengajar Sekolah Tinggi Teknologi Nuklir-BATAN, Yogyakarta khilda125@gmail.com

## ABSTRAK
Ekstrak metanolik biji duwet ( Syzygium  cumini Linn.) banyak mengandung senyawa antioksidan  seperti jambosine ,  korilagin,  kuersetin,  asam  galat,  asam  elagat,  1- galloylglucose ,  3- galloylglucose , 3,6-hexahydroxy  diphenoylglucose , 4,6hexahydroxy diphenoylglucose dan ß-sitosterol . Proses irradiasi dengan gamma 60 Coblat  dengan dosis (0 kGy-12,5 kGy) mampu meningkatkan senyawa fenolik dan tanin total pada ekstrak daun teh hijau. Tujuan penelitian ini adalah menganalisis pengaruh iradiasi gamma pada dosis 0 kGy, 2,5  kGy,  5  kGy,  7,5  kGy,  10  kGy,  dan  12,5  kGy  terhadap  stabilitas  antioksidatif  ekstrak metanolik  biji  duwet  ( Syzygium  cumini Linn . )  Ekstrak  metanolik  biji  duwet  dipekatkan dengan Vaccum  Evaporator kemudian  dikeringbekukan  menggunakan Freeze  Dryer kemudian di Irradiasi gamma dengan 60 Coblat pada dosis 0 kGy, 2,5 kGy, 5 kGy, 7,5 kGy, 10  kGy,  dan  12,5  kGy  dan  dilakukan  pengujian  meliputi:  uji  kualitatif  fenol,  flavonoid, tanin,  uji  flavonoid,  uji  total  fenolik,  uji  total  tanin,  uji  penangkapan  radikal  bebas  DPPH RSA-DPPH konsentrasi (25-400 ppm), dan uji reduksi ion ferri (FRAP) konsentrasi (25-400 ppm).  Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya  perbedaan  nyata  antar  perlakuan  ( p <0,05) terhadap uji flavonoid,  fenolik, tanin, RSA-DPPH, dan FRAP.   Sifat antioksidatif terhadap total fenolik, flavonoid dan total tanin stabil pada dosis irradiasi gamma 7,5 kGy-12,5 kGy dan  beragam  dosis  irradiasi  gamma  menyebabkan  total  fenolik  tidak  stabil,  flavonoid mengalami peningkatan, tanin tidak stabil, FRAP menggalami penurunan dan meningkatkan nilai IC 50 ekstrak metanolik biji duwet.
Kata Kunci : Ekstrak metanolik biji duwet; dosis irradiasi gamma; stabilitas antioksidatif

## ABSTRACT
Metanolic  extract  of  duwet  seeds ( Syzygium    cumini Linn.) seeds  has  antioxidant potential  rich  in  jambosine , korilagin,  quercetin,  gallic  acid,  egelic  acid ,  1- galloylglucose , 3- galloylglucose , 3,6-hexahydroxy diphenoylglucose , 4,6hexahydroxy diphenoylglucose dan ß-sitosterol . Irradiation  process  with  gamma 60 Coblat  with  doses  (0  kGy-12,5  kGy) can increase  levels  of  phenolic  compound  and  tannin  of  green  tea  leaf  extract . The  purpose  of this study was to analyze effect of gamma irradiation with dose 0 kGy, 2,5 kGy, 5 kGy, 7,5 kGy, 10 kGy, and 12,5 k Gy on the antioxidant stability of metanolic extract of duwet seeds ( Syzygium  cumini linn . ). Metanolic  extract  of  duwet  seeds  was  concentrated  with  Vaccum Evaporator then dried using Freeze Dryer then irradiation with 6 0 Coblat with dose 0 kGy, 2,5kGy, 5 kGy, 7,5 kGy, 10 kGy, and 12,5 kGy and test include qualitative flavonoid, phenol, tannin, quantitative flavonoid, phenol, tannin, the radical scavenging activity ( RSA-DPPH) concentration  test  (25-400  ppm),  and  ferric  reductionantioxidant  power  (FRAP) concentration  test  (25-400  ppm).  The  results  showed  a  real  difference  between  treatments (p<0.05) for flavonoid, tanin, phenolic, RSA-DPPH, and FRAP. Antioxidantive properties to total phenolic, flavonoid and total tannin are stable at irradiation doses, 7,5 kGy-12,5 kGy and  various  doses  of  gamma  irradiation  cause  total  phenolic  be  unstable,  flavonoidsto increase, tannin unstable, FRAP to decrease and increase IC50 metanolic extract of duwet seed.

## Keywords: Metanolic extract of duwet seeds , antioxidant stability

## PENDAHULUAN
Biji  Duwet  merupakan  limbah  pertanian  padat  yang  masih  dapat  dimanfaatkan ( underutilized ) antara lain sebagai sumber antioksidan alami.(Saha et al.,2013) menyebutkan biji  duwet  lebih  kaya  akan  senyawa  fenolik  dan  flavonoid  dibanding  bagian  buahnya.  Biji duwet  banyak  mengandung  tanin  (19%),  asam  galat  (1-2%)  dan  asam  elagat.  Swami  et  al. (2012)  menyebutkan  senyawa  kimia  yang  terdapat  pada  biji  duwet  antara  lain;  jambosine, korilagin,  kuersetin,  asam  galat,  asam  elagat,  1 galloylglucose ,  3- galloylglucose , 3,6 hexahydroxy  diphenoylglucose, 4,6 hexahydroxy  diphenoylglucose dan  ßsitosterol. Persenyawaan  tersebut  tidak  lain  adalah  polifenolik  yang  memiliki  kapasitas  antioksidan (Frankel, 1998; Brewer, 2011; Saha et al ., 2013; Rohadi et   al 2017 a ; Rohadi et   al 2017 b ) Menurut Rohadi et al .,  (2017) bahwa  buah  duwet  ( Syzygium   cumini Linn.) varietas “ Genthong ”, ekstraksi  biji       buah      duwet       dengan      pelarut metanol  50%(v/v) paling sesuai,  untuk ekstraksi senyawa fenolik biji buah duwet dengan yield ekstrak tertinggi 16,29 %  (b/b)  dengan  komposisi  fenolik  total  45,99  ±0,25%  (gGAE/100g),  2,28±0,07%  (g- QE/100g)  flavonoid  total  dan  26,9±0,07%  (gTAE/100g)  tanin  total,  aktivitas  antioksidan (10-200  ppm)  terhadap  penangkapan  radikal  bebas  DPPH  (2,2 diphenyl -2- picrylhydrazyl ) 92,87% (200 ppm), aktivitas  pereduksi ion  feri ( 50-800 ppm) sebesar OD =3,11±0,01(600 ppm),  penghambatan  peroksidasi  lipid  dalam  sistem  asam  lemak  linoleat  pada  konsentrasi 25-800 ppm (inkubasi 96 jam), 50,13% (100 ppm).
Stabilitas senyawa fenolik dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain suhu dan lama waktu pemanasan, pH dan lama penyimpanan (Horvathova et  al., 2007; Teppakorn, 2016). teknik  irradiasi  gamma  dapat  menguraikan  senyawa-senyawa  organik  sederhana  (Sugita  et al., 2000),. Prinsip teknik irradiasi gamma adalah interaksi radiasi dengan molekul air yang dikenal  radiolisis  (Miyata,  1995;  Sugita  et  al.,  2000).  Pada  proses  radiolisis  air  akan dihasilkan spesies aktif yaitu elektron terhidrat (e-aq), radikal hidrogen (•H•) sebagai spesies pereduksi  serta  radikal  hidroksida  (•OH)  dan  hidrogen  peroksida  sebagai  spesies pengoksidasi  (Miyata,  1995;  Sugita  et  al.,  2000).  Jika  di  dalam  air  terdapat  oksigen  maka akan  dihasilkan  radikal  perhidroksil  (H2O2•).  Radikal-radikal  tersebut  dapat  bereaksi dengan bermacam-macam senyawa organik seperti fenol, tanin, fosfatorganik, dan lain-lain (Tokunaga,  1995;  Sugita  et  al.  2000).  Tujuan  penelitian  ini  adalah  menganalisis  pengaruh iradiasi  gamma 60 Coblat  terhadap  stabilitas  antioksidatif  ekstrak  metanolik  biji  duwet ( Syzygium  cumini Linn).

## METODE PENELITIAN

## WAKTU DAN TEMPAT
Penelitian dilaksanakan April – Mei 2019 yang dilakukan di Laboratorium Kimia dan Biokimia  Fakultas  Teknologi  Pertanian  Universitas  Semarang  ,  Laboratorium  Rekayasa Pangan  Fakultas  Teknologi  Pertanian  Universitas  Semarang,  Laboratorium  Kimia  Radiasi Sekolah  Tinggi  Teknologi  Yogyakarta,  Laboratorium  Rekayasa  Proses  Fakultas  Teknologi Pertanian,  Universitas  Gadjah  Mada,  Laboratorium  Kimia  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu, UGM.

## BAHAN
Bahan  penelitian  dipakai  yaitu  bubuk  biji  duwet  ( S.  cumini L.( Skeels ),  kadar  air  < 12,00±0,5%, ukuran = 60 mesh. Bahan kimia dipakai meliputi metanol, ( Merck Darmstadt, Germany ),  asam  galat  hidrat,  (Sigma  Chemical  Co.  St.  Louis  USA),  butylated hydroxyanisole –BHA (Sigma Chemical Co.), NaCO 3 , asam hidroklorida (HCl), fero klorida (FeCl 2 ),  feri  khlorida  (FeCl 3 ),  amonium  tiosianat,  K 3 Fe(CN) 6 ,  trychloroacetic  acid  (TCA), asam  tungsto-fosforik,  2,2- diphenyl -1 picrylhydracyl radical  (DPPH)  (Aldrich  Chemical Co.), kertas saring Whatman No.4 ( Whatman International, Ltd. England ), Folin Ciocalteu reagent  dan  buffer  phosphate pH  7.    Reagen  kimia  dan  standar  yang  digunakan  dalam penelitian kategori pro analisis kemurnian 95-98% dan sumber iradiasi gamma 60Coblat.

## ALAT
Pengering  tipe  kabinet  ( cabinet  dryer ),  timbangan  analitik  Shimadzu  AUW  120 ( Shimadzu, Kyoto Japan ), penggiling ( cutting mill ) serealia, ayakan Tyler 60 mesh, a rotary vacuum  evaporator (IKA-RV  10  Basic), freeze  drying (Virtis  SP Scientific  Sentry 2.0), vortex  (Velp  Scientifica  Europe), water-bath  shaker (Julabo  SW  22), UV- Visiblespectrophotometer (UV-1601 Shimadzu, Japan), chromatography GC-2010 Shimadzu (Shimadzu,  Kyoto  Japan)  dan  alat  Iradiator  Ob-Servo  Ignis  di  Sekolah  Tinggi  Teknologi Nuklir Yogyakarta.

## RANCANGAN PERCOBAAN
Rancangan  percobaan  yang  digunakan  adalah  RAK  (Rancangan  Acak  Kelompok) dengan  satu  faktor  dan  6  perlakuan,  masing–masing  perlakuan  diulang  3  kali  sehingga didapatkan 18 unit perlakuan. Perlakuan dosis irradiasi yang diberikan yaitu :
P0  :  0     kGy P1  :  2,5  kGy
P3  :  5     kGy
P4  :  7,5  kGy P5  : 10    kGy P6  : 12,5 kGy

## PROSEDUR PENELITIAN
Penelitian  biji  duwet  ini  dimulai  dari  menyiapkan  biji  duwet  segar  yang  telah diperoleh  dari  pohonnya,  hal  selanjutnya  yaitu  biji  duwet  dibersihkan  dengan  air  bersih untuk memisahkan dari buahnya, setelah itu biji duwet yang telah bersih ditimbang, setelah itu biji duwet dikeringkan dengan suhu 50-55 o C selama 12 jam menggunakan cabinet dryer, setelah itu biji duwet yang telah kering digiling menggunakan grinder, lalu disaring dengan ayakan  60  mesh  dan  selanjutnya  dilakukan  proses  uji  proximat  (kadar  air,  protein,  lemak, abu,  karbohidart  dan  serat  kasar),  kemudian  dilakukan  proses  ekstraksi  maserasi  pada  biji duwet bubuk dengan pelarut metanol 50%, dengan perbandigan air : methanol : bubuk biji duwet,  1:1:10  dengan  suhu  40 o C  menggunakan  waterbath  shaker,  selama  6  jam  kemudian difiltrasi menggunakan kertas saring whatman, ampas dari filtrasi dimaserasi lagi sebanyak 2 kali, filtrat yang dihasilkan dipekatkan menggunakan rotaryvakum evaporator selama 3 jam dengan suhu 50 o C kemudian ekstrak biji duwet tersebut dikeringbekukan ( freeze drying) pada suhu -18-(-20 o C) , setelah itu didapatkan serbuk ekstrak metanolik biji duwet yang kemudian dilakukan pengujian kualitatif fenolik, flavonoid, tanin menurut cara Rathinavel et al. 2018). Selanjutnya dilakukan pemanasan sesuai dengan perlakuan yaitu pada dosis 0 kGy, 2,5 kGy, 5  kGy,  7,5  kGy,  10  kGy  menggunakan  Iradiator  Ob-Servo  Ignis  dengan  dilekan  di almunium foil yang sudah ditutup rapat. Kemudian dilakukan uji stabilitas sifat oksidatifnya meliputi  uji  kuantitatif  total  fenolik,  total  flavonoid,  total  tanin,  uji  penangkapan  radikal bebas (RSA-DPPH), dan uji reduksi ion ferri (FRAP) dengan cara Vasi dan Austin (2009). Data  yang  diperoleh  dianalisis  secara  statistik  dengan  menggunakan  analisis  ragam (ANOVA).  Jika  Fhitung  lebih  besar  atau  sama  dengan  Ftabel  maka  dilanjutkan  dengan  uji beda nyata Duncan’s Multiple Range Test (DMRT) pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Kadar  Proksimat  Bubuk  Biji  Duwet  Bubuk  biji  duwet  yang  didapatkan  kemudian dilakukan  analisis  proksimat.  Hasil  analisa  proksimat  yang  diperoleh  yaitu  kadar  air sebesar  9,09±  0,07  %,  kadar  abu  sebesar  1,07  ±  0,01%,  kadar  lemak  sebesar  0,22  ± 0,00%,  kadar  protein  sebesar  3,89  ±  0,02%,  kadar  serat  kasar  sebesar  2,14  ±  0,07%, karbohidrat by diff sebesar 85,73 ± 0,08% dan kalori 332,08±0,28 (kal/100g)
B. Yield  Ekstak  Metanolik  Biji  duwet  Hasil  rata-rata  dari  yield  (%  db)  dari  ekstrak metanolik  buah  duwet  sebesar  12,84±  0,88  lebih  kecil  dibandingkan  dengan yield yang dihasilkan  pada  penelitian  Rohadi  (2017)  yang  menyatakan  bahwa yield ekstrak metanolik biji duwet sebesar 16,29 %. Hal ini dikarenakan ukuran bubuk biji duwet dan suhu yang digunakan berbeda dengan penelitian yang dilakukan oleh Rohadi (2017) yang menggunakan  suhu  ruang  untuk  ekstraksi  dan  ukuran  bubuk  biji  duwet  yang  digunakan adalah  80  mess.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Brewer  (2011)  yang  menyatakan bahwa kesesuaian polaritas pelarut dengan senyawa target, frekuensi dan suhu ekstraksi, rasio bahan : pelarut dan ukuran partikel bahan berpengaruh terhadap yield .
C. Uji  Kualitatif  Ekstrak  Metanolik  Biji  Duwet  Ekstrak  metanolik  biji  duwet  positif mengandung  fenol,  flavonoid  dan  tanin.  Perubahan  warna  pada  ekstrak  metanolik  biji duwet  menjadi  kuning  menandakan  adanya  senyawa  flavonoid.  Keberadaan  fenol ditunjukkan  dengan  perubahan  warna  hitam  kebiruan.  Sedangkan  keberadaan  tanin ditunjukkan dengan perubahan warna hijau kecoklatan atau biru kehitaman (Rathinavel et al. ,  2018).  (Rohadi , 2017)  juga  menyatakan  bahwa  ekstrak  metanolik  biji  duwet  atau yang  selanjutnya  disingkat  EMBD  kaya  senyawa  antioksidan  fenolik  seperti  kuersetin, (+)- katekhin, (+)epikatekhin, rutin, asam galat, asam elagat, dan kaemferol.
D. Total Fenolik Ekstrak Metanolik Biji Duwet Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan sidik  ragam  menunjukkan  adanya  perbedaan  nyata  antar  perlakuan  ( p <0,05)  diikuti dengan superscript yang berbeda. Nilai total fenolik cenderung tidak stabil karena terjadi penurunan  pada  dosis  2,5  kGy,  5  kGy,  10  kGy  dan  mengalami  kenaikan  total  fenolik pada dosis 7,5 kGy dan 12,5 kGy. Hal ini sesuai dengan penelitian yang pernah dilakukan sebelumnya  oleh  Bonita  (2017)  yang  menyatakan  bahwa  total  fenolik  menggalami penurunan pada dosis 2,5 kGy, 10 kGy dan peningkatan pada dosis 5 kGy, 7,5 kGy, dan 12,5 kGy. Hasil pengujian total fenolik dapat dilihat pada Tabel 1

## Tabel 1. Hasil Pengujian Total Fenolik Ekstrak Metanolik Biji Duwet
Perlakuan Total Fenolik (gGAE/100 g-ekstrak) P0 35,95±0,10 d P1 33,76±0,078 c P2 28,59±0,078 a P3 29,70±0,35 b P4 29,36±0,67 b P5 29,69±0,42 b
Keterangan : rerata yang diikuti dengan superscript yang berbeda antar kolom  yang sama menunjukkan adanya beda nyata ( p <0,05) antar perlakuan (n = 3).
Penurunan total fenolik menurut Adamo et al ., (2004) bahwa bahwa proses oksidasi yang  merusak  dan  irradiasi  gamma  mampu  memecahkan  ikatan  kimia  polifenol  dan dengan  demikian  melepaskan  larut  fenol  dari  bobot  molekul  rendah  dan  peningkatan kandungan  total  fenolik  ini  dapat  dikaitkan  dengan  degradasi  tanin  yang  ada  dalam ekstrak  bubuk  biji  duwet  yang  memiliki  berat  molekul  lebih  tinggi  ke  dalam  pelepasan senyawa  phe-nolic  sederhana  seperti  asam  galat,  asam  tanat.  Irradiasi  dapat  merusak kompleks  ini  untuk  memfasilitasi  pelepasan  bahan  aktif,  yang  berkontribusi  untuk meningkatkan total konten fenolik Kumari et a l.,(2009).
E. Total  Flavonoid  Ekstrak  Metanolik  Biji  Duwet  Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  sidik  ragam  menunjukkan  adanya  perbedaan  nyata  antar  perlakuan  ( p <0,05) diikuti  dengan  superscript  yang  berbeda.  Hasil  pengujian  total  flavonoid  dapat  dilihat pada tabel 2.

## Tabel 2. Hasil Total flavonoid Ekstrak Metanolik Biji Duwet
Perlakuan Total Fenolik (gGAE/100 g-ekstrak) P0 8,01±0,17 b P1 7,33±0,21 a P2 7,96±0,16 b P3 9,17±0,16 c P4 9,95±0,22 d P5 10,43±1,20 e
Keterangan: rerata yang diikuti dengan superscript yang berbeda antar kolom  yang sama menunjukkan adanya beda nyata ( p <0,05) antar perlakuan (n = 3).
Nilai  total  flavonoid  semakin  meningkat  dengan  bertambahnya  dosis  irradiasi gamma.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  sebelumnya  oleh  Bonoita,  (2017)  kadar flavonoid cenderung meningkat sampai pada dosis 7,5 kGy. Menurut Bonita, (2017) dosis irradiasi  yang  lebih  tinggi  dapat  memutuskan  ikatan  glikon  dari  aglion  flavonoid, putusnya ikatan tersebut membuat berat molekul flavonoid lebih kecil dan mengakibatkan peningkatan  pada  total  flavonoid.  Senyawa  aglikon,  biasanya  ditemukan  di  alam  dalam bentuk  glikosida  dan  terikat  oleh  satu  atau  lebih  gugus  gula  maupun  berikatan  dengan gugus alkoksil ataupun ester (Sutisna, 2016).
F. Total  Tanin  Ekstrak  Metanolik  Biji  Duwet.  Hasil  analisa  total  tanin  dilakukan  dengan standar  ekuivalensi  asam  tanat  (tannic  acid)  dengan  kurva  standar  y  =  0,83928x  + 0,03119,  R=.0,9961.  Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  sidik  ragam menunjukkan  adanya  perbedaan  nyata  antar  perlakuan  ( p <0,05)  diikuti  dengan superscript yang berbeda. Hasil pengujian total tanin dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil Total Tanin Ekstrak Metanolik Biji Duwet Perlakuan Total Fenolik (gGAE/100 g-ekstrak) P0 29,81±0,21 a P1 23,45±0,49 b P2 21,06±0,50 a P3 9,17±0,16 c P4 30,00±0,14 e P5 28,66±0,92 c
Keterangan:  rerata  yang  diikuti  dengan  superscript  yang  berbeda  antar  kolom    yang  sama menunjukkan adanya beda nyata ( p <0,05) antar perlakuan (n = 3).
Nilai total fenolik cenderung tidak stabil karena terjadinya penurunan pada dosis 2,5 kGy,  5  kGy  dan  12,5  kGy  dan  menggalami  kenaikan  pada  dosis  7,5  kGy  dan  10  kGy. Hasil penelitian ini berbanding terbalik dengan penelitian sebelumnya yang menunjukan semakin besar dosis  radiasi  maka jumlah radikal bebas yang terbentuk  semakin  banyak, sehingga dimungkinan untuk berikatan dengan senyawa organik semakin besar sehingga total  tanin  meningkat  (Yohan et  al .,  2005)  sedangkan  penurunan  tanin  diakibatkan degradasi tanin yang ada dalam bubuk ekstrak yang memiliki berat molekul lebih tinggi ke  dalam  pelepasan  senyawa  fenolik  sederhana  seperti  asam  galat,  asam  tanat,  dll. Iradiasi dapat merusak kompleks ini Kumari et al ., (2009).
G. Uji  RSA-DPPH  Ekstrak  Metanolik  Bubuk  Biji  Duwet  Stabilitas  antioksidan  dianalisis menggunakan metode RSA-DPPH dengan ppm yang digunakan adalah 25 ppm, 50 ppm, 100  ppm,  200  ppm,  dan  400  ppm.  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  analisis  sidik  ragam RSA-DPPH menunjukan adanya perbedaan nyata antar perlakuan ( p <0,05) diikuti dengan superscript  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama.  Hasil  sidik  ragam  menunjukan berpengaruh nyata terhadap kemampuan penangkapan radikal bebas DPPH (RSA-DPPH) disajikapan pada tabel 4.
Tabel 4. Hasil Analisa Kuantitatif Metode RSA-DPPH Dosis 25 ppm 50 ppm 100 ppm 200 ppm 400 ppm P0 3,66±0,12 a 21,44±0,06 a 36,15±0,19 a 63,10±0,26 a 71,11±14,01 a P1 10,93±0,08 b 21,49±0,08 a 45,69±0,78 b 81,19±0,78 b 89,82±0,07 b P2 18,39±0,07 c 24,04±0,07 b 46,54±0,07 c 83,64±0,07 c 90,67±0,07 b P3 21,91±0,07 d 26,28±0,07 c 46,89±0,13 c 85,66±0,07 d 90,99±0,07 b P4 21,91±0,07 d 30,44±0,08 d 55,17±0,07 d 87,16±0,08 e 91,21±0,08 b P5 23,08±0,07 e 33,16±0,15 e 57,09±0,07 e 87,69±0,08 f 91,42±0,08 b
Keterangan: rerata yang diikuti dengan superscript yang berbeda antar kolom  yang sama menunjukkan adanya beda nyata ( p <0,05) antar perlakuan (n = 3).
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan menunjukan bahwa dosis irradiasi gamma  dapat  meningkatkan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanolik  biji  duwet.  Hasil pengujian  aktivitas  antioksidan  dapat  diketahui  dengan  mencari  nilai  IC 50 .  Aktivitas antioksidan  menunjukkan  semakin  kecil  nilai  konsentrasi  IC 50 ,  maka  semakin  kuat aktivitas antioksidan dalam suatu sampel (Jun et al ., 2003). Perhitungan IC 50 dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel 5. Perhitungan Inhibitor Concentration 50 % (IC 50) Dosis Persamaan Garis Nilai R 2 Nilai y (RSA-DPPH 50%) IC 50 (ppm) P0 y = 0,1672x+ 13,176 0,678 50 220,24 P1 y = 0,199x + 21,817 0,596 50 141,62 P2 y = 0,2094x+ 17,369 0,695 50 155,83 P3 y = 0,1931x + 24,412 0,514 50 132,51 P4 y = 0,1848x + 28,527 0,349 50 116,19 P5 y = 0,1798x + 30,617 0,251 50 107,80
Hasil  penelitian  didapatkan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanolik  biji  duwet menunjukkan  semakin  menurun  sehingga  didapatkan  dosis  irradiasi  terbaik  pada  dosis 12,5 kGy dengan i nhibitor concentration 50 % (IC 50 ) sebesar 107,80 ppm sesuai dengan pernyataan (Jun et al ., 2003) menurunnya kosentrasi i nhibitorConcentration 50 % (IC 50 ) maka  semakin  kuat  aktivitas  antioksidan  dalam  suatu  sampel.  Peningkatan  kapasitas antioksidan  setelah  irradiasi  disebabkan  oleh  peningkatan  aktivitas  enzim  (misalnya aktivitas  fenilalanin  ammonia-lyase  dan  peroksidase)  atau  pada  peningkatan  ekstraksi jaringan yang dapat diekstraksi dengan depolimerisasi dan pelarutan dinding sel polisak- charides oleh irradiasi (Alothman et al., 2009). Peningkatan kapasitas antioksidan setelah irradiasi  disebabkan  oleh  peningkatan  aktivitas  enzim  (misalnya  aktivitas  fenilalanin ammonia-lyase  dan  peroksidase)  atau  pada  peningkatan  ekstraksi  jaringan  yang  dapat diekstraksi  dengan  depolimerisasi  dan  pelarutan  dinding  sel  polisak-charides  oleh irradiasi (Alothman et al ., 2009). H. Uji FRAP Ekstrak Metanolik Biji Duwet
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  analisis  sidik  ragam  FRAP  menunjukan  adanya perbedaan nyata antar perlakuan ( p <0,05) diikuti dengan superscript yang berbeda pada baris  yang  sama.    Hasil  pengujian  reduksi  ion  ferri  dapat  dilihat  pada  Tabel  6.  Hasil analisis  FRAP  ekstrak  metanolik  biji  duwet  pada  menunjukan  semakin  meningkatnya ppm  menunjukan adanya peningkatan ODλ= 700 nm.   Kemampuan mereduksi ion  Feri (Fe 3+ ) menjadi Fero (Fe 2+ ) oleh senyawa organik korelatif dengan kapasitas antioksidannya (Jayaprakasha et al. 2001).
Tabel 6. Hasil analisis FRAP Ekstrak Metanolik Biji Duwet Perlakuan 25 ppm 50 ppm 100 ppm 200 ppm 500 ppm P0 0,18±0,00 a 0,45±0,00 c 0,66±0,00 d 1,18±0,00 b 2,26±0,00 d P1 0,21±0,00 b 0,32±0,00 a 0,51±0,00 a 1,14±0,00 a 1,93±0,00 a P2 0,21±0,00 b 0,32±0,00 a 0,54±0,00 b 1,14±0,00 a 1,99±0,00 b P3 0,22±0,00 c 0,32±0,00 a 0,63±0,00 c 1,31±0,02 c 2,13±0,00c P4 0,22±0,00 c 0,32±0,00 a 0,70±0,00 e 1,31±0,00 c 2,45±000e P5 0,28±0,00 0,33±0,00 b 0,77±0,00 f 1,38±0,00 d 2,48±0,00f
Keterangan : Rerata yang diikuti dengan superscrip t yang berbeda pada baris yang

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian pengaruh dosis irradiasi gamma 60 Coblat terhadap stabilitas sifat antioksidatif ekstrak metanolik biji duwet dapat disimpulkan sebagai berikut :
1. Berdasarkan  hasil  analisis  sidik  ragam  ANOVA  menunjukkan  bahwa  beragam  dosis irradiasi  gamma  berngaruh  nyata  terhadap  total  fenolik,  total  flavonoid,  total  tanin, kemampuan penangkapan radikal bebas dan reduksi ion feri.
2. Sifat antioksidatif terbaik terhadap total fenolik, flavonoid dan total tanin stabil pada dosis irradiasi gamma 12,5 kGy.
3. Beragam  dosis  irradiasi    gamma  menyebabkan  total  fenolik  tidak  stabil,  menyebabkan flavonoid  mengalami  peningkatan,  menyebabkan  total  tanin  tidak  stabil,  menyebabkan FRAP menggalami penurunan dan meningkatkan nilai IC 50 ekstrak metanolik biji duwet.

## SARAN
1. Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan untuk  mengetahui  penyebab  peningkatan  dan  penurunan  nilai  total  tanin,  fenol  dan flevonoid pada ekstrak metanolik biji duwet.
2. Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  perlu  dilakukan  irradiasi  gamma dengan dosis diatas 12 kGy.
3. Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan perlu dilakukan pengaplikasian ekstrak metanolik biji duwet pada produk pangan.

## DAFTAR PUSTAKA
Adamo,  M.  Capi  tani,  D.  Mannina,  L.  Cristinzio,  M.  Ragni,  P.  Tata,  A.  2004.  Ruffles Decontamination Treatment by Ionizing Radiation. Radiation Physics and Chemistry, 71, 2004, pp. 165–167.
Bonita. 2017. Pengaruh Iradiasi Gamma Pada Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia Sinensis L ) Terhadap  Kadar  Senyawa  Fenolik  dan  Tanin  Total.  Universitas  Pakuan. Bogor.Brewer, M.S. 2011. Natural Antioxidant: Source Compounds
Mechanisms  of  Action  and  Potential  Application. Comprehensive  Reviews.  Food  Science and Food Safety 10: 221-247. Frankel,  E.N.  1998. Antioxidants  in  lipid  foods  and  their  impact  on  food  quality .  Food Chemistry, 57(1):51-55.
Horvathova, J., Suhaj,  M. dan Šimko, P. 2007. Effect of thermal treatment and storage on antioxidant  activity  of  some  spices. Journal  of  Food  and  Nutrition  Research , 46(1):20-27.
Jayaprakasha, G.K., Singh, R.P. dan Sakariah, K.K. 2001. Antioxidant activity of grape seed (Vitis  vinifera)  extracts  on  peroxidation  models  in  vitro. Food  Chemistry, 73:  285- 290.
Jun  M,  Fu  HY,  Hong  J,  Wan  X,  Yang  CS,  Ho  CT.  2003.  Comparison  of  antioxidant activities  of  isoflavones  from  kudzu  root  (Pueraria  lobata  Ohwi) . Journal  Food Science. 68(6): 2117–2122.
N. Kumari, P. Kumar, D. Mitra, B. Prasad, B. N. Tiwary and L. Varshney. 2009. “Effects of Ionizing  Radiation  on  Mi-crobial  Decontamination,  Phenolic  Contents,  and  Anti- oxidant Properties of Triphala,” Journal of Food Science74 : 109-1113.
M.  Alothman,  R.  Bhat  and  A.  A.  Karim.  2009.  “Effects  of  Ra-diation  Processing  on Phytochemicals  and  Antioxidants  in  Plant  Produce,”  Trends  in  Food  Science  and Technol-ogy, 20(2) : 201-212.
Miyata, T. 1995. Radiation Chemistry of Water System Aplication of radiations Processinf for Decontamination of Liquid Wastes . Takasaki Radiation Chemistry Research Establishment , UNDP/IAEA/RCA. Regional Training Course, Tokyo. Rathinavel,  T.,  Ammashi,  S.  dan  Govindarajan,  P.  2018. In  Vitro  Antioxidant  Activity  of Bioactive  Flavonoids  identified  from  Crateva  adansonii  DC  Bark  Extracts. International Journal of Current Science, Engineering & Technology , 6–17. Rohadi,  Raharjo,  S.,  Falah,  I.I.  dan  Santoso,  U.  2016.  Aktivitas  Antioksidan  Esktrak  Biji Duwet  (Syzygium  cumini  Linn.)  Pada  Peroksidasi  Lipida  Secara  in  Vitro .Agritech, 36(1): 30-37.
Rohadi. 2017. Biji Duwet (Syzygium Cumini L. (Skeel) Sebagai Sumber Antioksidan Alami Dan Potensi Aplikasinya Di Bidang Pangan. Disertasi . Universitas Gadjah Mada;
Yogyakarta.
Rohadi,  Santoso,  U.,  Raharjo,  S.,  Falah,  I.I.  2017a.  Determination  of  Antioxidant  Activity and  Phenolic  Compounds  of  Methanolic  Extract  of  Java  Plum  (Syzygium  cumini Linn. (Skeel) Seed. Indonesian Food and Nutrition Progress , 13(1): 9-20.
Rohadi,  Raharjo,  S.,  Falah,  I.I.,  dan  Santoso,  U.  2017b.  Methanolic  extract  of  Java  Plum Syzygium cumini Linn) Seed as natural antioxidant on lipid oxidation of oil-in water emulsions. International Food Research Journal (IFRJ) , 24(4):1636-1643. Saha,  R.K.,  Zaman,  N.M.,  dan  Roy,  P.  2013.  Comparative  evaluation  of  the  medicinal activities of methanolic extract of seed, fruit pulp and fresh juice of Syzygium cumini in vitro. Journal of coastal Medicine , 1(4): 288-296.
Sugita P, Ermin KW, Lia A. 2000. Pengaruh Iradiasi Gamma terhadap Degradasi Zat Warna Direct Orange 34 dalam Air. Jurnal Teknologi Lingkungan. 1(2) : 114120.
Sutisna,  N.  2016.  Pengaruh  pH  Larutan  Penyeduh  Dan  Lama  Penyeduhan  Terhadap Kapasitas Antioksidan Ekstrak Teh Daun Sirsak (Annona muricata Linn).
Institut  Pertanian  Bogor  Teppakorn,  T.  2016.  Stability  and  chemical  changes  of  phenolic compounds  during  Oolong  tea  processing. International  Food  Research  Journal , 23(2):564-574.
Yohan, Rifaid  MN, lilik H, ES. Siradj.  2005. Sintesis Bahan Membran  Sel  Bahan Bakar : Kopolimerisasi  Stirena  pada  Film  ETFE  dengan  Teknik  Iradiasi  Awal.  Makara, Teknologi : 9(2), 72-77.