EFEKTIVITAS DAUN MIMBA ( Azadirachta indica A. Juss) SEBAGAI DESINFEKTAN ALAMI

## TERHADAP DAYA HAMBAT BAKTERI TOTAL
DI RUANG PENAMPUNGAN SUSU
Efectiveness of Azadirachta indica A. Juss (Neem)
Leaves As a Natural Desinfectant on Inhibition Potential Total of Bacteria in Milk Room
Eulis Diah Sri Rahayu 1 )* , Ellin Harlia 1) , Eulis Tanti Marlina 1)
1) Program studi Ilmu Peternakan, Fakultas Peternakan, Universitas

## Padjadjaran
DOI: http://dx.doi.org/10.21111/agrotech.v3i1.1380 Terima 12 Desember 2017 Revisi 06 Juni 2018 Terbit 08 Juni 2018
Abstrak: Daun  mimba  dapat  dimanfaatkan  sebagai  desinfektan alami  karena  memiliki  senyawa  antibakteri.  Tujuan  penelitian  ini adalah untuk mengetahui pengaruh daun mimba sebagai desinfektan alami  terhadap  zona hambat  bakteri  total  di  ruang  penampungan susu,  serta  mengetahui  pengaruh  larutan  daun  mimba  sebagai desinfektan alami terhadap penurunan jumlah bakteri total di ruang penampungan  susu.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  tanggal  03 April hingga 17 April 2017 yang bertempat di Koperasi Peternak Susu
* Korespondensi email: elisdiahsrirahayu@gmail.com Alamat : Jl. Raya Bandung-Sumedang KM. 21 Jatinangor 45363
Gontor AGROTECH Science Journal Vol. 4 No. 1, Juni 2018 http://ejournal.unida.gontor.ac.id/index.php/agrotech
Eka  Putra  Jaya  dan  Laboratorium  Mikrobiologi  dan  Penanganan Limbah  Fakultas  Peternakan  Universitas  Padjadjaran.  Penelitian ini dilakukan secara eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap  (RAL)  dengan  tiga  perlakuan  yaitu  P1  (larutan  daun mimba dengan pelarut aquabides), P2 (larutan daun mimba dengan + 1% alkohol 70%) dan P3 (larutan daun mimba + 1% alkohol 70% + 0,2% detergen) dan lima ulangan. Peubah yang diamati adalah daya hambat  dan  penurunan  jumlah  bakteri  total  ruang  penampungan susu.  Larutan  daun  mimba  dengan  penambahan  1%  alkohol  70% merupakan  perlakuan  paling  efektif  untuk  daya  hambat  dengan rataan zona hambat sebesar 5,11 mm dan untuk penurunan jumlah bakteri  dengan  rataan  persentase  sebesar  61,00%  pada  meja  dan 66,34% pada lantai.
Kata Kunci : daun mimba, desinfektan alami, daya hambat, penu- runan jumlah bakteri
Abstract: Azadirachta indica A. Juss (neem) leaves can be used as a natural  disinfectant  because  it  has  antibacterial  compounds.  The purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of  neem  leaves as  a  natural  desinfectant  against  inhibition  of  total  bacteria  in milk room, and to determine the effect of neem leaves as a natural disinfectant against decline in the number of total bacteria in milk room. The research was conducted on April 03 rd until April 17 th 2017 which in Koperasi Peternak Susu Eka Putra Jaya and Microbiology Laboratory and Waste Management Faculty of Animal Husbandry, Universitas Padjadjaran. This study was conducted in experimental use  completely  randomized  design  (CRD)  with  three  treatments, T1  (neem  leaves  with  aquabidest),  T2  (neem  leaves  solution  +  1% alcohol 70%) and T3 (neem leaves solution + 1% alcohol 70% + 0.2%
and a decline in the number of total bacteria milk room. Neem leaves solution + 1% alcohol 70% is the most effective treatment with the average inhibition potential of about 5.11 mm and the most effective
treatment  to  decrease  the  amount  of  bacteria  with  the  average
Keywords : neem  leaves,  natural  desinfectant,  inhibition  potential, reduction number of bacteria

## 1. Pendahuluan
Desinfektan  adalah  suatu  bahan  yang  digunakan  dalam proses desinfeksi. Desinfektan yang biasa digunakan pada umumnya berasal  dari  bahan  kimia  sintetis.  Bahan  kimia  sintetis  memiliki kelebihan  yaitu  dapat  mereduksi  bakteri  dengan  cepat,  namun juga memiliki kekurangan yaitu dapat menyisakan residu dan sulit untuk terurai (Winarno, 2011). Oleh karena itu penggunaan bahan kimia sintetis perlu dikurangi dan digantikan dengan bahan alami. Salah  satu  bahan  alami  yang  dapat  dijadikan  desinfektan  adalah daun mimba.
Tanaman  mimba  dikenal  sebagai  pestisida  nabati,  selain mampu  bekerja  sebagai  insektisida  juga  mampu  bekerja  sebagai fungisida,  nematisida,  bakterisida,  akarisida  dan  antivirus.  Ekstrak daun mimba mampu menghambat Bacillus cereus, Enterococcus faecalis, Eschericihia  coli,  Kleibsiella pneumoniae,  Neisseria  gonohorreae,  Proteus mirabilis dan Staphylococcus aureus (Pritima dan Pandian, 2008).
Ekstrak  daun  mimba  fraksi  alkohol  90%  dapat  menekan diameter  koloni  dan  menghambat  jumlah  spora Colletotrichum capcsici (Ningsih,  2013).  Uji  efek  antibakteri  ekstrak  daun  mimba dalam etanol 70% mempunyai potensi menghambat pertumbuhan semua  mikroba  uji  dari Staphylococcus  aureus , Escherichia  coli dan Streptococcus epidermidis (Syarmalina dan Dian, 2005).
Evaluasi  secara  mikrobiologis  pada  peralatan  dan permukaan-permukaan  yang  kontak  dengan  pangan  merupakan
kegiatan  penting  untuk  mengetahui  efektivitas  pembersihan  dan desinfeksi yang diterapkan, termasuk tingkat cemaran pada proses tersebut. Pengambilan contoh (sampel) pada permukaan peralatan, pakaian,  tangan  pekerja  atau  kemasan  dapat  dilakukan  dengan metode RODAC ( Replicate Organism Direct Agar Contact ) atau swab (usapan  kapas).  Metode  RODAC  merupakan  metode  yang  sering digunakan  pada  sanitasi  meja  dan  lantai.  Metode  RODAC  hanya dapat digunakan pada permukaan yang rata. Pengujian dilakukan dengan membuka tutup cawan petri, menempelkan dan menekan permukaan agar di atas permukaan yang akan diuji, kemudian agar diinkubasi dan selanjutnya koloni yang tumbuh dihitung (Lukman dan Soejoedono, 2009).
Evaluasi yang dilakukan ialah pada permukaan yang kontak langsung dengan proses penampungan susu yaitu meja dan lantai ruang  penampungan  susu.  Efektivitas  daun  mimba  dapat  terlihat dari penurunan jumlah bakteri total dan ukuran zona hambat yang terbentuk pada media difusi agar.

## 2. Bahan dan Metode

## 2.1  Bahan
Bahan penelitian adalah daun mimba yang sudah siap panen sebanyak  500  gram, Nutrient  Agar , Lactose  Broth ,  aquades,  sabun cream dan alkohol.

## 2.2  Metode

## Persiapan Larutan Daun Mimba
Daun  mimba  dicuci  dan  ditimbang  dalam  keadaan  kering sebanyak  500  gram  dan  diblender  sampai  halus.  Kemudian ditambah dengan aquabides sebanyak 1500 ml. Menyaring larutan
daun mimba menggunakan kertas saring, kemudian diperas, maka diperoleh  larutan  uji  (larutan  A).  Larutan  uji  ini  kemudian  dibagi menjadi  3  bagian  untuk  3  jenis  perlakuan,  masing-masing  500  ml yaitu P 1 = 500 ml larutan A, P 2 = 500 ml larutan A + 5 ml alkohol 70% dan P 3 = larutan A + 5 ml alkohol 70% + 1 gram detergen.
Perhitungan  Total  Bakteri  Sampel  pada  Permukaan  Meja  dan

## Lantai Ruang Penampungan Susu
Metode  yang  digunakan  yaitu  metode  RODAC  ( Replicate Organism  Direct  Agar  Contact ).  Pengambilan  sampel  bakteri dilakukan  dengan  cara  menempelkan  media  agar  setebal  ±  5  mm pada  meja  dan  lantai  kemudian  dioleskan  larutan  daun  mimba, media agar dimasukkan ke dalam cawan petri steril dan diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam. Pengamatan adanya pertumbuhan mikroba, dihitung dan dinyatakan jumlah koloni per 100 cm 2 .
Perhitungan Zona Hambat yang Dihasilkan oleh Bakteri Per muka- an Meja dan Lantai Ruang Penampungan Susu
Perhitungan zona hambat dilakukan dengan cara mengukur zona bening yang terbentuk di sekitar kertas saring dengan meng- gunakan jangka sorong.

## Rancangan Percobaan dan Analisis Statistika
Rancangan  percobaan  yang  digunakan  adalah  Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 3 perlakuan (P 1 = larutan daun mimba dengan pelarut aquabides, P 2 = larutan daun mimba + 1% alkohol 70% dan P 3 = larutan daun mimba + 1% alkohol 70% + 0,2% detergen) dan 5 ulangan. Pengujian pengaruh perlakuan menggunakan Uji t Berpasangan,  Analisis  Sidik  Ragam  dan  dilanjutkan  dengan  Uji Tukey untuk melihat selisih rata-rata perlakuan.

## 3. Hasil dan Pembahasan
3.1  Daya Hambat Bakteri di Ruang Penampungan Susu
Daya  hambat  bakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi agar  sehingg   membentuk  zona  bening.  Ukuran  zona  bening  yang terlihat  pada  metode  difusi  agar  menunjukkan  besarnya  kemam- puan daun mimba sebagai desinfektan alami terhadap daya hambat bakteri  ruang  penampungan  susu.  Rata-rata  zona  hambat  pada uji  daya  hambat  bakteri  total  ruang  penampungan  susu  dengan berbagai  perlakuan  larutan  daun  mimba  dapat  dilihat  pada ilustrasi  dibawah  ini.  Hasil  penelitian  menunjukkan  desinfektan daun mimba menghasilkan zona hambat yang berbeda pada setiap perlakuan, yaitu P1 menghasilkan rata-rata zona hambat 2,93±0,86 mm,  P2  menghasilkan  rata-rata  zona  hambat  5,11±1,44  mm  dan P3  menghasilkan  rata-rata  zona  hambat  4,10±1,08  mm  (Gambar 1).  Zona  hambat  daun  mimba  yang  dihasilkan  termasuk  kategori lemah sampai sedang yakni berkisar antara 2,93-5,11 mm.
Keterangan  P1 = larutan daun mimba dengan pelarut aquabides P2 = larutan daun mimba + 1% alkohol 70% P3 = larutan daun mimba + 1% alkohol 70% + 0,2% detergen
Gambar 1. Rata-rata Zona Hambat pada Uji Daya Hambat Bakteri Total Ruang Penampungan Susu dengan Berbagai Perlakuan Larutan Daun
Mimba
Sejalan dengan pendapat Davis dan Stout (1971) menyatakan bahwa  apabila  zona  hambat  yang  terbentuk  pada  uji  difusi  agar ber ukuran  kurang  dari  5  mm,  maka  aktivitas  penghambatannya dikate gorikan  lemah.  Apabila  zona  hambat  berukuran  5-10  mm dikate gorikan sedang.
Larutan daun mimba dengan penambahan 1% alkohol 70% (P2) mampu memperbaiki aktivitas desinfektan. Hal ini disebabkan karena alkohol bersifat sebagai pelarut polar, sehingga dapat efektif dalam melarutkan senyawa yang terkandung dalam daun mimba. Zat antibakteri dalam daun mimba tidak digunakan secara murni, melainkan  dicampur  dengan  bahan  pelarut  yaitu  aquabides  dan alkohol  70%.  Alkohol  yang  umum  dipakai  sebagai  antiseptik  dan desinfektan  adalah  alkohol  70%  karena  efektif  memecah  protein yang  ada  dalam  mikroorganisme  (Margono,  dkk.,  1993).  Daun mimba  dan  alkohol  70%  memiliki  kekhasan  dalam  senyawa  yang dimiliki  dan  dapat  berbeda  satu  sama  lain.  Senyawa-senyawa tersebut berpotensi sebagai antibakteri dan bila dicampurkan akan

## 3.2  Penurunan  Jumlah  Bakteri  Total  di  Ruang  Penampungan Susu
Sanitasi  lingkungan  di  sekitar  ruang  penampungan  susu meliputi sanitasi udara, lantai, meja, dinding dan langit-langit (Jenie dan  Fardiaz,  1989).  Uji  t  Berpasangan  dilakukan  pada  masing- masing perlakuan untuk mengetahui ada atau tidaknya perbedaan antara sebelum dan sesudah perlakuan terhadap penurunan jumlah bakteri  di meja  dan lantai. Hasil uji tersebut  menunjukkan  bahwa P1, P2 dan P3 berbeda nyata (P < 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa antar  perlakuan  terdapat  perbedaan  antara  sebelum  dan  sesudah
perlakuan  sehingga  setiap  perlakuan  berpengaruh  menurunkan jumlah bakteri pada meja dan lantai ruang penampungan susu.
Tabel 1.   Rata-rata Persentase Penurunan Jumlah Bakteri di Ruang Penampungan Susu
P1 P2 P3 ------------------(%)------------------ Meja 45,10±4,91 b 61,00±12,65 a 55,62±6,40 a Lantai 52,29±6,65 a 66,34±4,92 a 59,87±12,58 a * * *
Huruf kecil yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata
Keterangan  P 1 = larutan daun mimba dengan pelarut aquabides P 2 = larutan daun mimba + 1% alkohol 70% P 3 = larutan daun mimba + 1% alkohol 70% + 0,2% detergen
Hasil penelitian menunjukkan desinfektan daun mimba meng- hasilkan rata-rata penurunan jumlah bakteri total yang ber beda pada setiap perlakuan. Efektivitas daun mimba sebagai des infek tan alami di lantai ruang penampungan susu lebih baik di ban dingkan dengan di  meja  ruang  penampungan  susu.  Hal  ini  diduga  karena  pada meja  terdapat  banyak  debu  yang  merupakan  sum ber  kontaminan pada  meja.  Keadaan  yang  mempengaruhi  anti mikroba  menurut Pelzcar dan Chan (1988) salah satunya ialah jumlah mikroorganisme. Jumlah  awal mikroorganisme yang tinggi di  meja dan  lantai  ruang penampungan  susu  dapat  mempengaruhi  kemampuan  bahan  aktif dalam  desinfektan.  Semakin  tinggi  jumlah  awal  mikroorganisme, maka akan semakin menurunkan kerja dari desinfektan.
Menurut  Soekarto  (1990)  sanitasi  merupakan  persyaratan yang ber sifat mutlak dalam industri pangan. Meja ruang penam pu- ngan susu di KPS Eka Putra Jaya dibersihkan menggunakan alkohol
70% sedangkan lantai ruang penampungan susu dibersihkan dengan menggunakan air hangat 60 0 C dan klor. Meskipun seluruh peralatan yang digunakan telah dibersihkan dengan baik, namun kebersihan lantai dan meja kurang diperhatikan. Sejalan dengan pendapat Jenie dan Fardiaz (1989) bahwa upaya penurunan densitas bakteri pada ruang penampungan susu yang meliputi lantai, dinding dan udara dengan menggunakan desinfektan tidak dapat membunuh bakteri. Hal  ini  tercermin  dari  densitas  bakteri  yang  relatif  masih  tinggi setelah proses pembersihan.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa larutan daun mimba da- pat digunakan sebagai desinfektan pada ruang penampungan susu. Senyawa antibakteri yang terdapat dalam daun mimba me nurut Biu
ponin, tanin, steroid dan triterpenoid. Adapun kandu ngan yang lain yaitu azadirachtin, salanin, meliantriol, nimbin dan nimbidin.

## 4. Kesimpulan
Daun mimba  dapat  menghambat bakteri  total  di  ruang pe- nampungan  susu  dengan  rata-rata  zona  hambat  sebesar  5,11  mm. Selain  itu,  daun  mimba  dapat  menurunkan  jumlah  bakteri  total di  ruang  penampungan  susu  dengan  rata-rata  presentase  sebesar 61,00% pada meja dan 66,34% pada lantai.

## 5. Ucapan Terimakasih
Terimakasih  penulis  sampaikan  kepada  staf  Laboratorium Mikro  biologi  dan  Penanganan  Limbah  Fakultas  Peternakan  atas bimbingan dan masukan yang diberikan kepada penulis dan juga kepada  pihak-pihak  yang  telah  membantu  penulis  untuk  menye- lesaikan penelitian ini.

## 6. Referensi
Agus dan Rahayu. 2014. Mimba dan Manfaatnya . World Agroforestry Centre.
Biu, A.A., S.D. Yusufu, and J.S. Rabo. 2009. Phytochemical Screening of  Azadirachta  indica  (Neem)  (Meliaceae)  in  Maiduguri,  Nigeri .
Bioscience Research Communications, 21, 6. Collins,  C.H.  dan  P.M.  Lyne.  1976. Microbiological  Methods  4 th Ed .
Butterworths & Co. Publisher Ltd. Control . 41 (2): 43-45.
Essay. Journal of Microbiology . Vol 22 No 4. Jenie, Betty S.L dan Srikandi Fardiaz. 1989. Uji Sanitasi dalam Industri Pangan . Departemen Pendidikan dan Kebudayaan Direktorat
Jenderal Pendidikan Tinggi Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Lukman D. W dan R. R Soejoedono. 2009. Uji Sanitasi Dengan Metode RODAC  Penuntun  Praktikum  Higiene  Pangan  Asal  Ternak . Bagian  Kesehatan  Masyarakat  Veteriner.  Departemen Ilmu  Penyakit  Hewan  dan  Kesmavet.  Fakultas  Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Margono, T., Suryati, D. dan Hartinah, S. 1993. Buku Panduan Teknologi Pangan . Pusat Informasi Wanita dalam Pembangunan PDII- LIPI Bekerjasama dengan Swiss Developmnet Cooperation. Ningsih,  Y.  2013. Pengaruh  Fraksi  Ekstrak  Daun  Mimba  (Azadirachta indica A.) dan Daun Jarak (Jatropha curcas L.) terhadap Diameter dan  Jumlah  Spora  Jamur  Colletotrichum  capsici  Penyakit Antraknosa  pada  Cabai  (Capsicum  annum  L.) .  Universitas Lampung. Bandar Lampung. Pelczar,  M  J  &  Chan,  E  C  S.  1986. Dasar-dasar  Mikrobiologi .  Jilid  I. Hadioetomo,  R.S,  Tjitrosomo,  S.S,  Angka,  S.L  &  Imas  T. (Penerjemah). Penerbit Universitas Indonesia Press. Jakarta.
Pratiwi,  S.  2008. Mikrobiologi  Farmasi .  Penerbit  Erlangga.  Jakarta.  Hal. 17-18.
Pritima,  R.A.  and  R.S.  Pandian,  2008, Antibacterial  Potency  of  Crude Extract  of  Azadirachta  indica  A.  Juss  (Leaf)  Against  Mirobes Causing Reproductive Tract Infections Among Women . Current Biotica. 2, 2.
Soekarto,  S.  1990. Dasar-dasar  Pengawasan  dan  Standarisasi  Mutu Pangan . Institut Pertanian Bogor Press. Bogor.
Syarmalina  dan  Dian  R.  Laksmitawati.  2005. Uji  Efek  Antibakteri Ekstrak  Daun  Mimba ( Azadirachta  indica A  Juss) Terhadap Bakteri . Fakultas Farmasi Universitas Pancasila. Jakarta. Winarno, F.G. 2011 . Good Manufacturing Practices Pengolahan Pangan yang Baik . M-Brio Press. Bogor hal 9, 25.