Jurnal : Jurnal Kesehatan Prima Volume
: 11, No.2, Agustus 2017, Halaman : 158-170
ISSN Print
: 1978 – 1334, ISSN Online : 2460 – 8661

## ___________________________________________________________________________
Yunan Jiwintarum, Urip, Anas Fadli Wijaya, dan Maruni Wiwin Diarti : Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Mataram, Jl. Prabu Rangkasari Dasan Cermen Sandubaya Mataram

## MEDIA ALAMI UNTUK PERTUMBUHAN JAMUR CANDIDA ALBICANS   PENYEBAB KANDIDIASIS DARI TEPUNG BIJI KLUWIH (ARTOCARPUS COMMUNIS)
Yunan Jiwintarum, Urip, Anas Fadli Wijaya, Maruni Wiwin Diarti
Abstrak : Candida  albicans memerlukan  sumber  nutrisi  terutama  karbohidrat  yang  cukup  untuk pertumbuhannya.  Media  semi  sintesis  merupakan  media  yang  paling  umum  untuk  menumbuhkan Candida albicans. Media semi sintesistersusun atas bahan alami dan bahan sintesis.Melimpahnya sumber hayati di alam dengan kandungan karbohidrat yang lebih tinggi  dari bahan alami pada media semi sintesis mendorong untuk menemukan  bahan  media  alternatif  dari  sumber  karbohidrat  yang  berbeda  terutama  biji-bijian  salah  satunya adalah biji kluwih. Tujuan dari penelitian ini adalah  untuk  mengetahui potensi tepung biji kluwih ( Artocarpus communis )  sebagai  bahan  media  alternatif  untuk  pertumbuhan  jamur Candida  albicans penyebab  kandidiasis. Penelitian  ini  bersifat true  eksperiment dengan  menggunakan  6  replikasi  dan  4  perlakuan  yaitu  media  PDA sebagai  kontrol,  media  tepung  biji  kluwih  dengan  konsentrasi  10%,  20%,  dan  30%.  Hasil  data  pertumbuhan Candida  albicans kemudian  dilakukan  uji  statistik  menggunakan One  Way  Anova dengan  tingkat  kepercayaan 95%  atau  α  =  0,05.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwalaboratoriumrerata  jumlah  pertumbuhan Candida albicans pada  media  PDA  sebanyak  13,7  koloni,  pada  media  alternatif  tepung  biji  kluwih  dengan  konsentrasi 10%  rerata  13,5  koloni,pada  konsentrasi  20%  rerata  16,3  koloni  dan  pada  konsentrasi  30%  rerata  24  koloni. Kesimpulan bahwa tepung biji kluwih dapat digunakan sebagai bahan media alami alternatif pertumbuhan jamur Candida albicans .
Kata Kunci: Candida Albicans; Tepung Biji Kluwih; Media Pertumbuhan.

## NATURAL MEDIA FOR THE GROWTH OF CANDIDA ALBICANS CAUSES OF CANDIDIASIS BY ARTOCARPUS COMMUNIS
Abstract: a  candida  albicans  requires  a  source  of  nutrients  especially  carbohydrates  that  are  sufficient  for  its growth.  Semi-synthesis  media  is  the  most  common  medium  for  growing  Candida  albicans.  Semi-synthesized media  composes  of  natural  and  synthesis  materials.  An  abundance  of  biological  sources  in  nature  with  higher carbohydrate  content  than  natural  ingredients  on  semi-synthesized  media  encourage  to  find  the  materials  of alternative  media  from  different  carbohydrate  sources,  particularly  grains,  one  of  them  is  breadnut  seed.  This study aimed to find out a potential of Artocarpus communis as an alternative media for the growth of Candida albicans causes of candidiasis. This study was true experiment, used 6 replications and 4 treatments with PDA as  control  media,  the  media  of  Artocarpus  communis  with  concentration  of  10%,  20%,  and  30%. The  data  of Candida albicans growth was tested statistically used One Way Anova with 95% confidence level or α = 0.05. The result indicated that a number of Candida albicans growth on PDA media was 13.7 colonies, on alternative media  of  Artocarpus  communis  with  the  concentration  of  10%  was  an  average  of  13.5  colonies,  the concentration  of  20%  was  an  average  of  16.3  colonies  and  the  concentration  of  30%  was  an  average  of  24 colonies. The conclusion: the Artocarpus communis can be employed as an alternative natural media of Candida albicans growth.
Keywords: Candida Albicans; Artocarpus Communis; Growth Media.

## LATAR BELAKANG
Indonesia merupakan negara beriklim tropis yang memiliki kelembaban tinggi sehingga memungkinkan untuk tumbuhnya berbagai mikroorganisme dengan baik. Salah satu mikroorganisme  yang  dapat  tumbuh  dengan  baik  di Indonesia  adalah  jamur  (Arifin,  2006).  Jamur  dapat mengakibatkan berbagai penyakit infeksi, diantaranya disebabkan oleh jamur Candida albicans (Getas,  2013).  Penyakit  yang  disebabkan  oleh Candida  albicans dikenal  dengan  kandidiasis.
Kandidiasis  adalah  suatu  penyakit  jamur  yang bersifat  akut  dan  sub  akut  yang  disebabkan  oleh spesies Candida  sp .  yang  dapat  menyerang  mulut, vagina,  kuku,  kulit,  bronki,  atau  paru-paru.  Penyakit ini ditemukan di seluruh dunia dan dapat menyerang semua  umur  baik  laki-laki  maupun  perempuan.  Di Indonesia  sendiri  tercatat  dari  berbagai  kasus kandidiasis, 84% diantaranya adalah pasien penderita AIDS  dan  beberapa  diantaranya  merupakan  pasien dengan diabetes  mellitus (Getas,  2013).  Diagnosis laboratorium  penyakit  kandidiasis  dapat  dilakukan dengan  cara  melakukan  pemeriksaan  mikroskopis, identifikasi  molekuler, uji serologi dan sistem kultur terhadap  spesimen  (Jawetz,  2010).  Sistem  kultur bertujuan untuk mengidentifikasi dan memperbanyak jenis jamur pada spesimen sekaligus mengkonfirmasi hasil pemeriksaan secara mikroskopis. Dalam sistem kultur  penyakit  kandidiasis  dilakukan  dengan mengisolasi  jamur Candida  albicans dari  sampel pasien pada media. Media merupakan suatu substansi yang  terdiri  dari  campuran  zat-zat  makanan  (nutrisi) yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangbiakan jamur (Sutarma, 1999).
Pertumbuhan  serta  perkembangan  jamur Candida albicans sangat  dipengaruhi  oleh  sejumlah  faktor diantaranya  ialah  suhu,  cahaya,  udara,  pH  serta nutrisi  seperti  karbon  dan  nitrogen  (Barnett  dan Hunter,  1998),  dan  karbohidrat  sederhana  (Kelley, 1977).  Pada  saat  ini  kultur  jamur Candida  albicans biasanya  menggunakan  media  semi  sintesik.  Media semi sintetik tersusun atas bahan alami (kentang) dan bahan  sintesis  (dextrose  dan  agar).  Bahan  alami (kentang)  yang  terdapat  pada  media  semi  sintetik merupakan sumber karbon (karbohidrat), vitamin dan energi,  dextrose  sebagai  sumber  gula  dan  energi, selain itu komponen agar berfungsi untuk memadatkan  media.  Masing-masing  dari  ketiga komponen tersebut sangat diperlukan bagi pertumbuhan  dan  perkembangbiakkan Candida albicans (Rahmawati,  2016).    Melimpahnya  sumber hayati  di  alam  dengan  kandungan  nutrisi  yang  lebih tinggi    dari  bahan  alami  pada  media  semi  sintesis mendorong  untuk  menemukan  media  alternatif  baru untuk  pertumbuhan  jamur.  Jamur Candida  albicans dapat  tumbuh  baik  pada  media  yang  mengandung nutrisi  yang  dapat  memenuhi  syarat  sebagai  media pertumbuhan  salah  satunya  dari  sumber  karbohidrat pada  biji-bijian  (Atlas,  2004).  Karbohidrat  dan derivatnya merupakan substrat utama untuk metabolisme  karbon pada jamur. Karbon  merupakan unsur  yang  paling  penting  karena  50%  berat  jamur adalah  karbon  (Hidayat,  2006).  Kluwih  ( Artocarpus communis ) merupakan salah satu tanaman khas yang banyak  ditemukan  di  Indonesia.  Tanaman  kluwih umumnya  digunakan  masyarakat  pada  bagian buahnya  sebagai  sayuran.  Selain  bagian  buahnya terdapat  satu  bagian  dari  kluwih  yang  selama  ini
belum dimanfaatkan secara optimal  yaitu bagian biji (Murdopo, 2014). Padahal jika dilihat dari
kandungan kimianya biji kluwih memiliki keseimbangan  nutrisi  yang  meliputi  karbohidrat, lemak  dan  protein  yang  jauh  lebih  tinggi  dari  pada bahan alami kentang  yang terdapat pada media semi sintetik.  Biji  kluwih  mengandung  karbohidrat  52,7 gr,  lemak  5,9  gr,  protein  9,8  gr  (Pitojo,  2005). Sedangkan  kentang  hanya  memiliki  kandungan karbohidrat  19,10  gr,  lemak  0,10  gr, dan  protein  2,0 gr.  (Direktorat  Gizi,  Depkes,  2009).  Melihat kandungan  nutrisi  biji  kluwih  yang  jauh  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  bahan  alami  kentang  yang terdapat pada media semi sintetik maka dimungkinkan  biji  tersebut  dijadikan  sebagai  media alternatif  untuk  menumbuhkan  jamur Candida albicans .

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini bersifat true eksperiment yaitu penelitian  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  suatu gejala atau pengaruh yang timbul sebagai akibat dari adanya  perlakuan  (Notoatmodjo,  2012).  Rancangan penelitian  yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak Lengkap , dengan menggunakan 4 perlakuan yaitu : T0  =  Media PDA sebagai kontrol positif pertumbuhan
T1  =   Penambahan  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis )  dengan  konsentrasi  10%  dalam komposisi media alternatif
T2  =   Penambahan  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis )  dengan  konsentrasi  20%  dalam komposisi media alternatif
T3  =   Penambahan  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis )  dengan  konsentrasi  30%  dalam komposisi media alternatif
Besar unit eksperimen dalam penelitian ini adalah   = 24 unit percobaan.
Teknik Pengambilan Sampel : Teknik pengambilan sampel  dilakukan  dengan  cara Simple  Random Sampling yaitu  pengambilan  sampel  secara  acak bahwa  setiap  anggota  atau  unit  dari  populasi mempunyai  kesempatan  yang  sama  untuk  diseleksi sebagai sampel.
Variabel  Penelitian  : Variabel  bebas  ( Independent variable )  :  Media  alternatif  tepung  biji  kluwih ( Artocarpus communis ) dengan konsentrasi komposisi  yang  berbeda-beda  dan    Variabel  terikat ( Dependent  variable )  :  Hasil  pertumbuhan  koloni jamur Candida albians .
Definisi Operasional :
1. Tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus  communis ) adalah  biji  kluwih  segar  yang  sudah  matang  di pohon  kemudian  dibersihkan  kulit  luarnya,  lalu dipotong  kecil-kecil,  dikeringkan  di  bawah  sinar matahari  sampai  kering  dan  ditumbuk  sampai halus  selanjutnya  di  ayak  hingga  didapatkan serbuk halus dan kering.
2. Media  alternatif  adalah  media  yang  sengaja dibuat  sebagai  alternatif  dari  media  yang  sudah ada,  misalnya  dengan  cara  mengganti  salah  satu komposisi  dari  media  yang  sudah  ada  dengan bahan lain yang mudah didapat.
3. Media  alternatif  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis ) adalah media yang dibuat dari tepung biji  kluwih  yang  dilarutkan  dalam  aquadest  dan ditambahkan  agar.  Prinsip  yang  digunakan  pada
media  alternatif  ini  adalah  dengan  mengganti bahan  sari  kentang  pada  media  PDA  dengan tepung biji kluwih ( Artocarpus communis ).
4. Pertumbuhan  jamur  adalah  pertambahan  jumlah jamur  yang  dibaca  sebagai  koloni  pada  media pertumbuhan.
5. Isolat Candida albicans adalah biakan murni dari jamur Candida  albicans yang  ditumbuhkan  pada media tertentu.
6. Suspensi Candida  albicans adalah  satu  koloni Candida  albicans yang  diambil  dari  isolat  murni kemudian  dilarutkan  dalam  aquadest  steril dengan pengenceran tertentu.

## Jenis dan Skala Data
1. Data  dari  variabel  independet  yaitu  media alternatif tepung biji kluwih ( Artocarpus communis ) dalam kategori perlakuan :
a. Penambahan  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis )  dengan  konsentrasi  10%  dalam komposisi media alternatif
b. Penambahan  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis )  dengan  konsentrasi  20%  dalam komposisi media alternatif
c. Penambahan  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis )  dengan  konsentrasi  30%  dalam komposisi media alternatif Maka  skala  data  yang  digunakan  adalah interval
2. Data  dari  variabel  dependent  berupa  hasil pertumbuhan  koloni  jamur Candida  albicans ,
maka skala datanya adalah berupa rasio.
Instrumentasi  dan  Bahan  penelitian  : Pisau,
Tumbukan,  Sulung,  Ayakan,  Panci  Kertas  kasa, Tabung  reaksi,  Rak  tabung  reaksi,  Neraca  analitik,
Spatula,  Erlenmeyer, Beaker  glass,  Petri  dish, Hotplate  Magnetic  stirrer, Drigalski  Autoklaf, Inkubator,  Spiritus,  Korek  api,  Ose  Kertas  Koran Kapas,  Karet, Laminar  Air  Flow, Alkohol  70%, Tepung biji kluwih ( Artocarpus communis ), Aquadest,  NaCl  0,85%  H 2 S0 4 1%,  BaCl 2 1%, Ciprofloxacin,  Dextrose,  Agar,  Media  PDA,  Isolat jamur Candida albicans .
Cara Pengumpulan Data :
1. Tahap Persiapan
a. Sterilisasi Alat
Alat-alat yang akan digunakan dalam penelitian  harus  disterilisasi  agar  alat-alat tersebut  terbebas  dari  mikroorganisme  yang dapat  menghambat  penelitian.  Berikut  cara sterilisasi  alat-alat  laboratorium  yang  akan digunakan  dalam  penelitian  (Dwidjoseputro, 2005)  :
1) Tabung reaksi, erlenmeyer, dan gelas ukur a) Disemprotkan alkohol 70% ke permukaan  dalam  dan  luar  alat, kemudian  dikeringkan  menggunakan tisu.
b) Disumbat leher erlenmeyer dan lubang tabung reaksi serta gelas ukur menggunakan  kapas  sedemikian  rupa sehingga kapas tidak  mudah lepas dari tabung reaksi yang disterilkan.
c) Dimasukkan ke dalam plastik tebal dan diikat dengan karet untuk menghindari meresapnya  air  dari  autoklaf  ke  dalam alat yang disterilkan.
d) Dilakukan pengecekan air pada autoklaf dan memasukksan alat-alat ke
dalam  autoklaf  selama  ±  15  menit dalam suhu 121 0 C dan tekanan 1 atm.
2) Petri dish
a) Dibungkus petri  dish menggunakan kertas koran.
b) Dimasukkan  petri  dish  tersebut  ke dalam  plastik  tebal  dan  diikat  dengan karet  untuk  menghindari  meresapnya air  dari  autoklaf  ke  dalam  alat  yang disterilkan.
c) Dimasukkan ke dalam autoklaf.
2. Pembuatan  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis )
a. Dibersihkan  biji  kluwih  yang  telah  matang dengan air bersih
b. Dibuang kulit luar biji kluwih dan dibersihkan kembali dengan air mengalir
c. Dipotong kecil-kecil biji kluwih
d. Dijemur  potongan  biji  kluwih  di  bawah  sinar matahari sampai kering
e. Ditumbuk  biji  kluwih  yang  telah  kering sampai halus.
3. Pembuatan Media
a. Media  PDA  sebagai  kontrol  (Safitri  dan Novel, 2010)
1) Dibuat media PDA sebanyak 250 ml.
2) Ditimbang  media  PDA  (39  gr/l)  sebanyak 9,75 gr, dengan rumus :

## (Safitri dan Novel, 2010)
3) Dimasukkan  hasil  timbangan  PDA  instan ke  dalam  erlenmeyer  dengan  aquades steril 250 ml.
4) Dilarutkan  kemudian  dipanaskan  media menggunakan  hot  plate  magnetic  stirrer hingga mendidih dan larutan homogen.
b. Media  alternatif  biji  kluwih  ( Artocarpus communis ) (Amadi dan Moneke, 2010)
1) Dibuat  media  alternatif  biji  kluwih sebanyak 250 ml
2) Ditimbang tepung biji kluwih sebanyak 25 gr
3) Ditimbang agar sebanyak 5,0 gr
4) Ditimbang dextrose sebanyak 5,0 gr
5) Ditimbang Ciprofloxacin sebanyak 0,1 gr
6) Direbus  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis ) dengan 250 ml aquades di atas hot  plate  magnetic  stirrer  pada  suhu  90 0 C sampai 100 0 C selama 30 menit.
7) Disaring  hasil  rebusan  tepung  biji  kluwih ( Artocarpus communis ) menggunakan kain  kasa  dan  dimasukkan  ke  dalam erlenmeyer.  Ditambahkan  aquades  hingga konsentrasi  awal  (250  ml)  kemudian dipanaskan  kembali  dengan  hot  plate magnetic strirrer.
8) Ditambahkan  agar  dan  dextrose  sedikit demi  sedikit  ke  dalam  erlenmeyer  hingga mendidih  sambil  terus  diaduk  agar homogen.
9) Diulangi  semua  langkah  sampai  selesai dengan  komposisi  tepung  biji  kluwih ( Artocarpus communis ) 50 gr dan 75 gr.
4. Sterilisasi Media
Media  yang  dibuat  harus  disterilkan  terlebih dahulu dengan cara sebagai berikut :
a. Ditutup  erlenmeyer  yang  sudah  berisi  media menggunakan kapas yang dibentuk sedemikian rupa.
b. Dilakukan  pengecekan  air  pada  autoklaf  dan memasukkan  erlenmeyer  ke  dalam  autoklaf. Eratkan  penutup  autoklaf,  diatur  suhunya 121 0 C tekanan 1 atm selama ± 15 menit.
c. Ditunggu  sampai  tekanan  pada  autoklaf menjadi  0  atm  dan  dikeluarkan  media  dari autoklaf. Tunggu hingga hangat kuku
kemudian  tambahkan  0,1  gr Ciprofloxacin,
homogenkan.  Kemudian  dituangkan  pada petri  dish  steril di  dalam Laminar  Air  Flow dan  diamkan  selama  ±  20  menit  sampai memadat.
d. Media bisa langsung digunakan atau disimpan dalam  pendingin  untuk  digunakan  pada  lain waktu.
e. Dilakukan  hal  yang  sama  pada  perlakuan media yang lain.
5. Pembuatan standar kekeruhan 1 unit Mc Farland (Soemarno, 2000)
a. Disiapkan 1 tabung reaksi steril
b. Dipipet larutan BaCl 2 1% sebanyak 0,1 ml ke dalam tabung
c. Ditambahkan  larutan  H 2 S0 4 1%  sebanyak  9,9 ml, homogenkan
6. Pembuatan  suspensi Candida  albicans 1  unit Mc
Farland (Kepadatan  jamur    1  x  10 7 CFU/ml) (Ingroff, 2007) (Santoso, 2014)
a. Diambil  koloni Candida  albicans dengan menggunakan ose tumpul yang telah
dipijarkan terlebih dahulu
b. Disuspensikan ke dalam NaCl 0,85% steril (5 ml),  kemudian  dibandingkan  dengan  standar kekeruhan 1 Mc Farland apabila terlalu keruh tambahkan  dengan  NaCl  0,85%  sampai tingkat kekeruhan sama
c. Dengan pipet steril dipipet suspensi jamur  1 x 10 7 sebanyak  1  ml,  kemudian  dimasukkan  ke dalam  tabung  yang  berisi  9  ml  NaCl  0,85% steril (pengenceran 10x), sehingga didapatkan kepadatan jamur 1 x 10 6
d. Dengan pipet steril dipipet suspensi jamur  1 x 10 6 sebanyak  1  ml,  kemudian  dimasukkan  ke dalam  tabung  yang  berisi  9  ml  NaCl  0,85% steril (pengenceran 10x), sehingga didapatkan kepadatan jamur 1 x 10 5
e. Dilakukan  pengenceran  sampai  didapatkan kepadatan jamur 10 3
7. Penanaman  kepadatan  jamur Candida  albicans
10 3 Mc  Farland pada  media  PDA  dan  media alternatif tepung biji kluwih
a. Ditanam  suspensi Candida  albicans pada media  alternatif  biji  kluwih  dan  media  PDA dengan metode tebaran ( Spread Plate Methods ) sebanyak 0,1 ml diratakan menggunakan drigalski..
b. Diinkubasi  selama  48  jam  pada  suhu  37 0 C dalam inkubator.
8. Perhitungan Koloni Candida albicans
a. Diambil biakan agar plate dari inkubator.
b. Dihitung koloni Candida albicans .
c. Dimasukkan  data  jumlah  total  koloni  pada tabel pengamatan.
Analisis  Data untuk  mengetahui  adanya  pengaruh perlakuan terhadap masing-masing variabel
dilakukan  uji One  Way  Annova .  Uji  ini  dilakukan untuk  menentukan  apakah  data  yang  diperoleh berdistribusi  normal  dan  homogenitas  sampel    pada tingkat  kepercayaan  95%  atau  α  =  0,05  dengan bantuan komputer program SPSS.

## HASIL PENELITIAN
Hasil penelitian pertumbuhan jamur Candida  albicans pada  media  tepung  biji  kluwih dengan  metode spread  plate  test pada  setiap perlakuan didapatkan hasil seperti terlihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Pertumbuhan koloni Candida albicans setelah  inkubasi 2 x 24 jam Replikasi Perlakuan T0 T1 T2 T3 1 12 13 17 20 2 14 12 16 29 3 15 15 18 25 4 13 11 15 22 5 16 14 16 24 6 12 16 16 24 Jumlah Total Koloni 82 81 98 144 Rata-Rata  Jumlah Total Koloni 13,7 13,5 16,3 24
Keterangan : T0   = Media PDA sebagai kontrol positif pertumbuhan T1   = Penambahan tepung biji kluwih ( Artocarpus communis ) dengan konsentrasi 10% dalam komposisi media alternatif T2   = Penambahan tepung biji kluwih ( Artocarpus communis ) dengan konsentrasi 20% dalam komposisi media alternatif T3   = Penambahan tepung biji kluwih ( Artocarpus communis ) dengan konsentrasi 30% dalam komposisi media alternatif
Tabel  1.  menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  jumlah pertumbuhan  koloni Candida  albicans pada  masing- masing  media  dengan  konsentrasi  yang  berbeda- beda.  Jumlah  pertumbuhan Candida  albicans pada media PDA sebagai kontrol menunjukkan rerata 13,7 koloni, untuk jumlah pertumbuhan Candida albicans pada  media  alternatif  tepung  biji  kluwih  dengan konsentrasi  10%  menunjukkan  rerata  13,5  koloni, jumlah  pertumbuhan Candida  albicans pada  media alternatif tepung biji kluwih dengan konsentrasi 20% menunjukkan  rerata  16,3  koloni  dan  jumlah pertumbuhan Candida albicans pada media alternatif tepung  biji  kluwih  dengan  konsentrasi  30% menunjukkan  rerata  24  koloni.  Adapun  gambar
tepung  biji  kluwih,  hasil  pertumbuhan  koloni Candida  albicans dan  hasil  morfologi Candida albicans dari media  tepung biji kluwih dapat dilihat pada gambar 1,2,3,4,5,6,dan 7.
Gambar 1. Penimbangan Tepung Biji Kluwih
Gambar 2.  Koloni C. Albicans Pada Media PDA
Gambar 5.  Koloni C. Albicans Pada Media Kluwih 30%
Gambar 3.   Koloni C. Albicans Pada Media Kluwih 10% Gambar 6.  Morfologi C. albicans dari media kluwih
Gambar 7. Morfologi C. Albicans Dari PDA Gambar 4. Koloni C. Albicans Pada Media Kluwih 20%
Hasil Uji Statistik :

## Tabel 2. Nilai Uji One Way Annova
Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups Within Groups Total 436,458 82,167 518,625 3 20 23 145,486 4.108 35.412 .000
*Sig. Apabila <0,05
Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  media  alternatif tepung  biji  kluwih  dapat  digunakan  sebagai  media pertumbuhan jamur Candida albicans, ini dinyatakan dengan  nilai  signifikan  p  <  0,05  yaitu  0,000. Berdasarkan  uji  statistik  tersebut  dapat  diketahui bahwa  tepung  biji  kluwih  dapat  digunakan  sebagai bahan  media  untuk  pertumbuhan  jamur Candida albicans, hal  ini  dikarenakan  tepung  biji  kluwih memiliki  kandungan  nutrisi  yang  tinggi  yang  dapat mendukung pertumbuhan jamur Candida albicans

## PEMBAHASAN
Kandidiasis  merupakan  suatu  penyakit jamur  yang  bersifat  akut  dan  sub  akut  yang disebabkan  oleh  spesies Candida  sp .  Jamur  ini memiliki  lebih  dari  20  jenis.  Meski  demikian,  jenis Candida yang  paling  sering  menyebabkan  infeksi adalah Candida  albicans .  Diagnosis  laboratorium penyakit  kandidiasis  dapat  dilakukan  dengan  cara melakukan  pemeriksaan  mikroskopis,  identifikasi molekuler,  uji  serologi  dan  sistem  kultur  terhadap spesimen  (Jawetz,  2010).  Dalam  sistem  kultur penyakit  kandidiasis  dilakukan  dengan  mengisolasi jamur Candida  albicans dari  sampel  pasien  pada media. Media atau medium adalah suatu bahan yang terdiri  atas  campuran  nutrisi  yang  dipakai  untuk menumbuhkan mikroorganisme baik dalam mengkultur  bakteri,  jamur,  dan  mikroorganisme lainnya. Media berfungsi untuk mengisolasi,
menumbuhkan mikroorganisme, memperbanyak jumlah, menguji sifat-sifat fisiologi, dan menghitung jumlah  mikroba  (Safitri  dan  Novel,  2010).  Syarat nutrisi  media  pertumbuhan  jamur  antara  lain  harus mengandung  karbohidrat,  kalsium,  fosfor,  zat  besi, dan lain-lain. Karbohidrat dan derivatnya merupakan substrat utama untuk metabolisme karbon pada jamur (Gandjar, 2006). Salah satu media semi sintetik yang digunakan  untuk  pertumbuhan  jamur Candida albicans adalah media PDA ( Potato Dextrose Agar ).
Komposisi  media  PDA  terdiri  dari potatos  infusion 200,0  gr,  agar  15,0  gr  dan  dextrose  20,0  gr  (Safitri dan  Novel,  2010).  Sumber  karbohidrat  pada  media PDA  adalah  kentang.  Kentang  termasuk  lima  besar makanan pokok dunia. Kentang  merupakan tanaman dari  suku Solanaceae yang  memiliki  umbi  batang yang  dapat  dimakan.  Umbi  kentang  merupakan sumber  karbohidrat  yang  mengandung  vitamin  dan mineral  yang  cukup  tinggi  (Laily,  2010).  Kluwih ( Artocarpus  communis )  merupakan  salah  satu tanaman  khas  yang  banyak  ditemukan  di  Indonesia. Tanaman  kluwih  umumnya  digunakan  masyarakat pada bagian buahnya sebagai sayuran. Selain bagian buahnya  terdapat  satu  bagian  dari  kluwih  yang selama  ini  belum  dimanfaatkan  secara  optimal  yaitu bagian biji (Murdopo, 2014). Padahal jika dilihat dari kandungan kimianya biji kluwih memiliki keseimbangan  nutrisi  yang  meliputi  karbohidrat, lemak  dan  protein  yang  jauh  lebih  tinggi  dari  pada
bahan alami kentang  yang terdapat pada media semi sintetik.  Melihat  kandungan  nutrisi  biji  kluwih  yang jauh  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  bahan  alami kentang yang terdapat pada media semi sintetik maka dimungkinkan  biji  tersebut  dijadikan  sebagai  media alternatif  untuk  pertumbuhkan  jamur Candida albicans .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui potensi  tepung  biji  kluwih  sebagai  bahan  media alternatif  pertumbuhan  jamur Candida  albicans . Kontrol  pertumbuhan yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  media  PDA  sedangkan  media alternatif  dari  tepung  biji  kluwih  dibuat  perlakuan menjadi  3  konsentrasi  yaitu  10%,  20%,  dan  30%. Dari  penelitian  yang  dilakukan  pada  kelompok kontrol  dan  masing-masing  perlakuan  sebanyak  6 kali replikasi didapatkan hasil pertumbuhan populasi koloni Candida albicans setelah inkubasi 2 x 24 jam dengan  rerata  pada  kelompok  kontrol  sebanyak  13,7 koloni,  sedangkan  rerata  hasil  pertumbuhan  pada konsentrasi  10%  sebanyak  13,5  koloni,  rerata  hasil pertumbuhan  pada  konsentrasi  20%  sebanyak  16,3 koloni dan rerata hasil pertumbuhan pada konsentrasi 30% sebanyak 24 koloni. Hal ini menegaskan bahwa tepung  biji  kluwih  dapat  dijadikan  sebagai  media alternatif pertumbuhan jamur Candida albicans. Dari masing-masing perlakuan terdapat perbedaan jumlah populasi  koloni Candida  albicans. Media  alternatif tepung biji kluwih dengan konsentrasi 30% memiliki pertumbuhan Candida albicans terbanyak, kemudian disusul  dengan  konsentrasi  20%,  kontrol  (media PDA),  dan  terakhir  konsentrasi  10%.  Hal  ini  sangat berkaitan  dengan  jumlah  nutrisi  yang  terkandung dalam  masing-masing  perlakuan  terutama  kadar karbohidrat,  karena  karbohidrat  dan  derivatnya
merupakan substrat utama untuk metabolisme karbon pada  jamur  (Gandjar,  2006).  Pada  media  PDA sumber  karbohidrat  utamanya  adalah  kentang, kentang  dalam  100  gr  memiliki  kandungan karbohidrat  sebanyak    19,10  gr  (Direktorat  Gizi, Depkes,  2009)  sedangkan  pada  media  alternatif sumber  karbohidratnya  berasal  dari  tepung  biji kluwih,  dalam  100  gr  biji  kluwih  terkandung karbohidrat  sebanyak  52,7  gr    (Direktorat  Gizi, Depkes,  2009).  Pembuatan  rentang  konsentrasi media  alternatif  tepung  biji  kluwih  didasarkan  pada penelitian  terdahulu,  kandungan  karbohidrat  dan jumlah  komposisi  kentang  dalam  media  PDA. Komposisi kentang dalam media PDA adalah 200 gr dalam  1  liter  aquadest  (Safitri  dan  Novel,  2010). Konsentrasi  media  alternatif  10%  (100  gr/  1  lt aquadest)  didasarkan  pada  kandungan  karbohidrat yang  disetarakan  dengan  kandungan    karbohidrat pada  kentang,  sehingga  hasil  pertumbuhan  populasi koloni Candida  albicans pada  konsentrasi  10% hampir  menyamai  populasi  koloni  pada  media  PDA yaitu  13,5  dan  13,7  koloni  pada  media  PDA.  Untuk konsentrasi  20%  (200  gr/  1  lt  aquadest)  didasarkan pada  jumlah  komposisi  bahan  kentang  yang dipergunakan  pada  media  PDA,  sehingga  hasil pertumbuhan populasi koloni Candida albicans pada konsentrasi 20% lebih banyak dibandingkan populasi koloni  pada  media  PDA  yaitu  16,3  koloni  dan  13,7 koloni  pada  media  PDA.  Hal  ini  sangat  berkaitan dengan  jumlah  karbohidrat  yang  lebih  banyak  pada media alternatif. Dan untuk konsentrasi 30% (300 gr/ 1  lt  aquadest)  didasarkan  pada  penelitian-penelitian terdahulu  dalam  pembuatan  media  alternatif  dengan sumber  karbohidrat  berbeda.  Jumlah  kandungan
karbohidrat  pada  konsentrasi  ini  hampir  3  kali  lipat jumlah karbohidrat pada media PDA,  sehingga hasil pertumbuhan populasi koloni Candida albicans pada konsentrasi  30%  sangat  signifikan  lebih  banyak dibandingkan populasi koloni pada media PDA yaitu 24  koloni  dan  13,7  koloni  pada  media  PDA.  Pada pengamatan  morfologi,  kecepatan  pertumbuhan  dan jumlah pertumbuhan koloni Candida albicans setelah inkubasi  1  x  24  jam  dan  2  x  24  jam  terdapat perbedaan  pada  media  PDA  dan  media  alternatif tepung biji kluwih. Pada inkubasi 1 x 24 jam, koloni pada  media  PDA  berbentuk  bulat,  sedikit  cembung, permukaan  halus,  berwarna  putih    kekuningan, dengan  ukuran  diameter  0,1  mm.  Sedangkan  pada media  alternatif  tepung  biji  kluwih  untuk  semua perlakuan  konsentrasi  koloni  yang  tumbuh  sama dengan  koloni  pada  media  PDA  hanya  saja  dengan ukuran  diameter  yang  lebih  kecil  yakni  0,05  mm. Pada  pengamatan  2  x  24  jam,  pada  media  PDA jumlah koloni cenderung tidak mengalami pertambahan, hanya mengalami pertambahan ukuran diameter  sebelumnya  dari  0,1  mm  menjadi  0,4  mm dan  disertai  dengan  adanya  aroma  khas  aroma  ragi. Sedangkan  pada  media  alternatif  tepung  biji  kluwih jumlah  koloni  cenderung  bertambah  dan  disertai pertambahan ukuran diameter yang sebelumnya 0,05 mm  menjadi  0,2  mm  dan  disertai  dengan  adanya aroma  khas  ragi.  Setelah  inkubasi  2  x  24  jam dilakukan  uji  mikroskopis  pada  koloni  yang  tumbuh pada  media  PDA  dan  media  alternatif  tepung  biji kluwih  untuk lebih  memastikan  koloni  yang tumbuh adalah Candida albicans. Setelah dibuat sediaan dan dilakukan  pewarnaan  gram,  sediaan  diperiksa  di bawah  mikroskop  dengan  perbesaran  lensa  obyektif
100  kali,  morfologi  yang  terlihat  memiliki  bentuk oval  atau  bulat  lonjong.  Hasil  tersebut  yang  didapat sesuai  dengan  teori  pada  Jawet  (2013)  yang menyatakan bahwa spesies Candida albicans tumbuh dengan  morfologi  oval  dan  pada  media  agar  yang diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C atau suhu kamar,  spesies Candida  albicans menghasilkan koloni  yang  halus,  berwarna  putih  kekuningan (krem)  dengan  bau  khas  ragi  (Jawetz,  2013). Berdasarkan  jumlah  populasi  koloni  yang  tumbuh, media  yang  terbaik  adalah  media  alternatif  tepung biji kluwih dengan konsentrasi 30%. Akan tetapi jika berdasarkan  kecepatan  pertumbuhan  dan  ukuran koloni,  media  yang  terbaik  adalah  media  PDA.  Hal ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  yang dilakukan  oleh  Aini  (2015)  mengenai  media alternatif  pertumbuhan  jamur Candida  albicans dengan bahan umbi ganyong, umbi gembili dan umbi garut menghasilkan jumlah koloni yang lebih banyak dibandingkan  dengan  media  PDA  akan  tetapi memiliki  koloni  dengan  ukuran  diameter  yang  lebih kecil dibandingkan media PDA (Aini, 2015). Hal ini dikarenakan media PDA merupakan salah satu media kultur  yang  paling  umum  digunakan  karena formulasinya  yang  sederhana  dan  merupakan  media terbaik  karena  kemampuannya  dalam  mendukung pertumbuhan  berbagai  jenis  jamur  (Saha,  2008), sedangkan  media  alternatif  memiliki  nutrisi  yang lebih  kompleks  sehingga  pertumbuhan  jamur  belum seoptimal  media  PDA.  Kandungan  kompleks  dalam media  menyebabkan  jamur  uji  membutuhkan  waktu yang  lebih  lama  untuk  menguraikan  menjadi komponen-komponen  sederhana  yang  dapat  diserap oleh sel yang digunakan untuk sintesis sel dan energi
(Gandjar,  2006).  Media  alternatif  dari  tepung  biji kluwih  mampu  mendukung pertumbuhan jamur. Hal tersebut dikarenakan biji kluwih memiliki kandungan karbohidrat  yang  tinggi.  Pada  media  pertumbuhan yang mengandung karbohidrat, jamur akan mengekskresikan  enzim  α-amilase  untuk  mengubah amilum  menjadi  glukosa,  senyawa  glukosa  tersebut kemudian  diserap  oleh  jamur.  Nutrien-nutrien tersebut  baru  dapat  dimanfaatkan  sesudah  jamur mengekskresikan  enzim-enzim  ekstraseluler  yang dapat  mengurai  senyawa  kompleks  dari  substrat menjadi  senyawa-senyawa  yang  lebih  sederhana (Gandjar, 2006). Karbohidrat dan derivatnya merupakan  substrat  utama  metabolisme  karbon  pada jamur. Berdasarkan berat mikroba, sekitar 50% berat mikroba  adalah  karbon.  Oleh  karena  itu,  karbon merupakan  bahan  paling  besar  pada  medium  kultur (Hidayat,  2006).  Hal  ini  dipertegas  oleh  Madigan (2002)  yang  menyatakan  bahwa  senyawa  karbon organik  mulai  dari  gula  sederhana,  asam  organik, polimer rantai pendek dan rantai panjang mengandung  karbon  hingga  senyawa  kompleks seperti  karbohidrat,  protein,  lipid,  asam  nukleat dimanfaatkan  jamur  untuk  membentuk  materi  sel baru. Candida  albicans mengalami  pertumbuhan pada media alternatif tepung biji kluwih pada semua perlakuan.  Sehingga  dapat  dikatakan  bahwa  tepung biji  kluwih  dapat  dipergunakan  sebagai  media pertumbuhan  jamur Candida  albicans. Pertumbuhan jamur Candida  albicans yang  paling  baik  adalah pada konsentrasi tepung biji kluwih 30%.

## KESIMPULAN
Hasil pertumbuhan jamur Candida albicans rerata  pada  kelompok  kontrol  sebanyak  13,7  koloni. Hasil  pertumbuhan  jamur Candida  albicans rerata pada  tiap  kelompok  perlakuan  yaitu:  Rerata pertumbuhan  pada  media  alternatif  tepung  biji kluwih (Artocarpus  communis) dengan  konsentrasi 10% sebanyak 13,5 koloni. Rerata pertumbuhan pada media  alternatif  tepung  biji  kluwih (Artocarpus communis) dengan  konsentrasi  20%  sebanyak  16,3 koloni.  Rerata  pertumbuhan  pada  media  alternatif tepung  biji  kluwih (Artocarpus  communis) dengan konsentrasi  30%  sebanyak  24  koloni.  Terdapat potensi  pada  tepung  biji  kluwih  ( Artocarpus communis) sebagai bahan media alternatif pertumbuhan jamur Candida albicans .

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  pengaruh  lama  penyimpanan  tepung  biji kluwih (Artocarpus  communis) yang  digunakan sebagai  bahan  media  alternatif  pertumbuhan  jamur Candida  albicans terhadap  hasil  pertumbuhan. Media  dari  bahan  tepung  biji  kluwih (Artocarpus communis) dapat  diaplikasikan  sebagai  media alternatif pengganti PDA dalam penelitian laboratorium terutama mikrobiologi.

## DAFTAR PUSTAKA
Aini, N. 2015. Media Alternatif Untuk Pertumbuhan Bakteri  Menggunakan  Sumber  Karbohidrat Yang  berbeda. Jurnal  Pendidikan  Biologi FKIP UNS .
Arifin, Z. 2006. Kajian Mikoriza Vesikula Arbuskula (MVA)  dalam  Menekan  Perkembangan Penyakit  Bercak  Ungu  (Alternaria  Porri) pada Bawang Putih. Disertasi Fakultas Ilmu
Pertanian Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Atlas,  R.M.  2004. Handbook  of  Microbiological Media  Fourth  Edition  Volume  1 .  RCR Press. United States of America.
Direktorat  Gizi  Departemen  Kesehatan  Indonesia.
2009. Kandungan  Nutrisi  Biji  Kluwih . Departemen Kesehatan Indonesia. Jakarta.
Direktorat  Gizi  Departemen  Kesehatan  Indonesia. 2009. Kandungan  Nutrisi  Biji  Nangka . Departemen Kesehatan Indonesia. Jakarta.
Dwidjoseputro.  2005. Dasar-Dasar  Mikrobiologi . Djambatan. Yogjakarta.
Gandjar,  Indrawati.  2006. Mikologi  Dasar  dan Terapan . Yayasan Obor Indonesia. Jakarta.
Getas,  W.  Wiadnya,  B.R.  dan  Waguriani,  A.  2013. Pengaruh  Penambahan  Glukosa  Dan  Waktu Inkubasi  Pada  Media  SDA  (Sabaroud Dextrose  Agar)  Terhadap  Pertumbuhan Jamur  Candida  Albicans. Media  Bina Ilmiah .
Hidayat,  N.  Padaga,  M.C.  dan  Suhartini,  S.  2006.
Mikrobiologi Industri . ANDI. Yogjakarta.
Jawetz,  Melnick,  dan  Adelberg.  2010. Medical Micobiology Ed. 25 . McGraw-Hill. USA.
Jawetz,  Melnick,  dan  Adelberg.  2013. Medical Micobiology Ed. 26 . McGraw-Hill. USA.
Kelley,  W.D.  1977.  Interactions  of  Phytophthora cinnamomi and Trichoderma spp. in relation to  propagule  production  in  soil  cultures  at 26 degrees C1. Can J Microbiology .
Laily,  R.  2010. Olahan  Dari  Kentang .  Kanisius. Yogyakarta.
Murdopo.  2014.  Kadar  Serat  Pangan  Dan  Sifat Organoleptik  Cookies  Dengan  Penambahan Tepung Biji Kluwih ( Antocarpus communis ) dan  Angkak  Sebagai  Pewarna  Alami. Skripsi Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu Pendidikan  Universitas  Muhammadiyah, Surakarta.
Notoadmodjo,  S.  2012. Metodologi  Penelitian Kesehatan . Rineka Cipta. Jakarta
Pitojo,  S.  2005. Budi  Daya  Keluwih .  Kanisius. Yogyakarta.
Price,  S.A.  dan  Wilson,  L.M.  2006. Patofisiologi Konsep  Klinis  Proses  Penyakit .  EGC.
Jakarta
Rahmawati,  R.  2016.  Pertumbuhan  Jamur  A.  Niger Pada  Media  Biji  Kluwih  Dan  Biji  Nangka Sebagai  Substitusi  Media  Pda. Skripsi Universitas Muhammadiyah, Surakarta.
Safitri,  R.  dan  Novel,  S.S.  2010. Medium  Analisis Mikroorganisme . Trans Info Media. Jakarta. Saha,  A.,  Mandal,  P.,  Dasgupta,  S.,  Saha,  D.  2008.
Influence of Culture Media and Environmental  Factors  on  Mycelia  Growth and Sporulation of Lasiopdiplodia theobromae  (Pat.)  Griffon  and  Maubl. Journal of Enviromental Biology .
Sutarma.  2000.  Kultur  Media  Bakteri. Temu  Teknis Fungsional non Peneliti .