Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019)
Pujiyati, Prabang Setyono, Wiryanto. (2019). Risiko Pemanfaatan Air Baku Pokmair Watumalang melalui Tinjauan Cemaran Koliform. Journal Bioeksperimen. Vol. 5 (2) Pp. 77-86. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i2.2795

## RISIKO PEMANFAATAN AIR BAKU POKMAIR WATUMALANG MELALUI TINJAUAN CEMARAN KOLIFORM
Pujiyati * , Prabang Setyono, Wiryanto
Magister Ilmu Lingkungan Universitas Sebelas Maret Surakarta *Email korespondensi : 1 pujiyati.zara@gmail.com Paper diterima : 5 Juni 2017 Paper terbit : September 2019
Abstract- Watumalang, Wonosobo, is a district with substantial spring utilization (60.66%). Limited management in quality of water utilization is considered a risk to health, especially from coliform contamination. The purpose of this study is to assess the risk of using raw water of POKMAIR group (spring users), specifically from the coliform aspect. The study was conducted primarily by water sampling and respondent questionnaires. Data analysis was performed descriptively and correlatively. The result shows that 71% of water samples did not meet the requirements as clean water from the coliform aspect. Utilization risk assessment shows that 37.5% of high-risk villages. Further analysis shows that the closest relationship to coliform was the ownership of sanitation facilities (r -0,381).
Keywords: water quality, coliform, utilization, Watumalang

## Pendahuluan
Air bersih merupakan sumber daya dengan keterbatasan pada kuantitas dan kualitas, memiliki tren terus menurun akibat pertumbuhan populasi, urbanisasi dan perubahan iklim (Mohsin et al., 2013). Avigliano dan Schenone (2015) menjelaskan bahwa faktor pembatas pemanfaatan air adalah oleh pencemaran antropogenik. Risiko pencemaran lebih tinggi pada air permukaan atau air yang ditempatkan pada permukaan. Hal ini menjadikan pengelolaan air menjadi permasalahan lingkungan global terkait dengan keberlanjutan, pengelolaan dan konservasi (Avans et al. , 2012 dalam Soeprobowati et al. , 2016).
Saat ini, WHO melaporkan bahwa lebih dari 80% temuan penyakit pada masyarakat merupakan waterborne disease . Sebagian besar terjadi di negara berkembang. Total koliform secara umum tidak menyebabkan penyakit, melainkan sebagai indikator. Beberapa strain dari Eschericia coli (sebagai bagian umum kelompok koliform) diketahui mampu
menimbulkan penyakit pada manusia, seperti E.coli 0157:H7. Keberadaan koliform seperti E.coli mengindikasikan adanya patogen penyebab penyakit pada air seperti bakteri, virus dan parasit (Pal, 2014).
Megha et al. (2015) mendeskripsikan dua mekanisme utama pencemaran air yaitu ketidaksempurnaan distribusi dan rendahnya kesadaran individu memenuhi syarat higienis. Aspek pencemaran ditinjau salah satunya dari cemaran koliform. Kelompok ini merupakan indikator cemaran tinja karena habitat idealnya adalah pada intestinal hewan berdarah panas, meski dapat pula ditemukan secara alami (Campbell et al. , 2011). Cemaran fekal koliform adalah indikasi ancaman nyata kesehatan masyarakat dengan potensi menimbulkan beragam wabah penyakit dari penggunaan air sesuai dengan kesimpulan penelitian Butt and Ghaffar (2015). Eksistensinya dapat pula dipengaruhi oleh faktor musim dengan kecenderungan memiliki daya tahan yang tinggi terhadap perubahan lingkungan (Conclasure et al. , 2015).
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019) ISSN 2460-1365
Penelitian sebelumnya oleh Pujiyati et al. (2016) menunjukkan pemanfaatan mata air sebagai air baku masyarakat POKMAIR di Watumalang memiliki risiko tinggi pada cemaran koliform. Hampir keseluruhan sampel air uji tidak memenuhi syarat terutama sebagai air minum. Salah satu penyebabnya adalah risiko pencemaran sarana yang tinggi pada beberapa desa. Mempertimbangkan tingginya rasio pemanfaatan sumber air tersebut (60,66%) di Watumalang, maka kondisi ini memprihatinkan dan berisiko pada kesehatan masyarakat. Terjadinya kejadian luar biasa (KLB) pada beberapa desa di tahun sebelumnya dapat menjadi indikasi dampak kesehatan tersebut. Tujuan penelitian ini adalah menilai dan mengkaji risiko pemanfaatan mata air sebagai sumber air baku masyarakat POKMAIR di Kecamatan Watumalang, terutama ditinjau dari cemaran koliform dan aspek aspek yang dianggap berkorelasi dengan peningkatan nilainya.

## Metode Penelitian
1.  Lokasi dan Waktu Penelitian
Lokasi penelitian adalah Kecamatan Watumalang, Wonosobo yang terbagi menjadi 16 desa dengan masing masing direpresentasikan dalam penelitian ini. Waktu penelitian adalah bulan November 2016 - Januari 2017. Uji MPN dilaksanakan di Laboratorium Dinas Kesehatan Kabupaten Wonosobo.
Gambar 1. Lokasi penelitian, Kecamatan Watumalang

## 2.  Alat dan bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah set sampling bakteriologis, ice pack , botol flakon steril, set analisis MPN, alat tulis, lembar kuisioner dan laptop/komputer dilengkapi dengan Microsoft Office dan SPSS 20. Bahan yang dimanfaatkan dalam penelitian ini adalah sampel air (untuk keperluan uji MPN), set kemikalia uji MPN, hasil kuisioner dan data sekunder pemerintah.

## 3.  Koleksi data
Sampel air diambil dan masing-masing mewakili setiap desa di Kecamatan Watumalang (51 sampel). Kuisioner diambil dari responden yang berdomisili di Kecamatan Watumalang (mewakili setiap desa) dan merupakan anggota masyarakat POKMAIR. Jumlah total responden kuisioner adalah 205 responden. Data sekunder digunakan sebagai pendukung pembahasan penelitian ini dikumpulkan dari dokumen resmi pemerintah terkait dengan bahasan dalam penelitian ini.

## 4.  Analisis data
Variabel utama dalam penelitian ini adalah cemaran koliform (y) hasil analisis MPN dari sampel air Kecamatan Watumalang. Variabel tersebut dikelompokkan secara nominal (Tabel 1).
Tabel 1. Penentuan kategori dan nilai nominal cemaran koliform Nilai MPN Kategori Nominal 0-49 A 5 50-99 B 4 100-1000 C 3 1000-2400 D 2 >2400 E 1
Nilai nominal berfungsi dalam menentukan rata-rata nilai setiap desa. Variabel lainnya adalah hasil dari kuisioner terhadap masyarakat POKMAIR terkait persepsi lingkungan (x 1 ) dan kepemilikan sanitasi (x 2 ) serta penilaian terhadap risiko pencemaran sarana (x 3 ). Kuisioner tentang persepsi lingkungan dan
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019)
kepemilikan sarana sanitasi terlebih dahulu diuji melalui validitas dan relaiabilitas dengan SPSS 20 dan menghasilkan nilai koefisien Cronbach Alpha  0,960 ( reliabel ). Berikut adalah kategori penilaian untuk kuisioner persepsi lingkungan dan kepemilikan sarana sanitasi. Penilaian terhadap risiko pencemaran sarana dilakukan menggunakan kuisioner baku dari Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. Penilaian terhadap risiko pemanfaatan mata air sebagai air baku masyarakat POKMAIR dilakukan dengan skoring terhadap variabel- variabel di atas (cemaran koliform, persepsi lingkungan, kepemilikan sarana sanitasi dan resiko pencemaran sarana) ditambah dengan rasio pemanfaatan setiap desa. Rasio pemanfaat berisiko pada potensi terjadinya KLB waterborne disease akibat tidak terkendalinya kualitas air baku. Berikut adalah model skoring dalam penelitian ini.
Tabel 2. Kategori penilaian kuisioner persepsi lingkungan dan kepemilikan sarana sanitasi Persepsi Lingkungan Kepemilikan Sarana Sanitasi Skor  total No m Stat Skor  Total No m Stat 96-102 A Sangat baik 8-9 A Baik 89-95 B Baik 6-7 B Cukup 82-88 C Sedang 4-5 C Kurang 74-81 D Buruk <3 D Sangat Buruk <74 E Sangat Buruk Tabel 3. Skoring penilaian risiko pemanfaatan air baku pada masing-masing variabel
Skor Rentang Nilai Pada Kategori Penilaian Cemaran  kolifor m Persepsi  lingkungan K epemilikan sarana Risiko  pencemaran  (%) R asio pemanfaatan (%) 1 4,6-5 96–102 8–9 0–19 0–19 2 3,6-4,5 89–95 6–7 20–39 20–39 3 2,6-3,5 82–88 4–5 40–59 40–59 4 1,6-2,5 74–81 2–3 60–79 60–79 5 1-1,5 < 73 1 80–100 80–100
Analisis dilakukan secara deskriptif kuantitatif dan kualitatif. Analisis kuantitatif melalui skoring hasil penelitian dan statistik korelasi Pearson untuk menilai hubungan antara variabel cemaran koliform dengan persepsi lingkungan, kepemilikan sarana sanitasi dan risiko pencemaran sarana. Analisis korelasi akan menunjukkan variabel yang berhubungan erat dengan cemaran koliform pada air baku POKMAIR di Kecamatan Watumalang. Untuk penilaian risiko pemanfaatan air baku POKMAIR setiap desa menggunakan ketentuan sebagai berikut :
Tabel 4. Kategori risiko pemanfaatan setiap desa Nilai Total (per desa) Keterangan 5-7 Risiko Sangat Rendah 7-9 Risiko Rendah 10-14 Risiko Sedang 15-19 Risiko Tinggi 20-25 Risiko Sangat Tinggi

## Hasil dan Pembahasan
Watumalang adalah salah satu kecamatan di Wonosobo dengan penciri agraris non- sawah. Data penggunaan lahan menunjukkan luas lahan sawah di Watumalang mencapai 511,485 Ha (7,49%) dan non sawah 6311,427 Ha (92,50%). Jumlah penduduk Kecamatan Watumalang berdasarkan survey penduduk BPSD Wonosobo pada tahun 2015 adalah 49266 jiwa. Pada tahun yang sama, rasio kepadatan penduduk Watumalang adalah 722 jiwa/km 2 . Dokumen Data dan Informasi Lingkungan Hidup Jawa Tengah (2015) mendeskripsikan hanya 15,09% sampah domestik terangkut hingga tempat pembuangan akhir (TPA). Sebagian sampah domestik dikelola mandiri dengan pembakaran ( open burning ) atau dikubur (36,23%). Ironisnya, 21,51% sampah dibiarkan menumpuk ( open dumping ) atau dibuang di badan air (sungai, saluran irigasi dan selokan).
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019)
Gambar 2. Jumlah dan kepadatan penduduk Watumalang (sumber : Data BPS (2016) diolah)
Sebesar 66,04% penduduk desa di Wonosobo mengandalkan mata air sebagai air baku dan sisanya memanfaatkan air ledeng dari Perusahaan Air Minum (PAM) maupun air kemasan (BPSP Jawa Tengah, 2016). BPSP Jawa Tengah (2015) mengindikasikan terdapat 25% warga yang tidak memiliki jamban mandiri dan lebih dari 80% masyarakat memiliki tipe penampungan tinja non septic tank . Kepemilikan sistem pengolahan air limbah (SPAL) domestik juga menjadi fasilitas langka (17%). Angka kepemilikan jamban, septic tank dan SPAL masyarakat Wonosobo adalah terendah di Provinsi Jawa Tengah Kabupaten Wonosobo menduduki peringkat ke 34 dari 35 kabupaten di Jawa Tengah untuk cakupan jamban sehat dengan persentase 50,16% (Dinas Kesehatan Kabupaten Wonosobo, 2013). Data Sanitasi Total Berbasis Masyarakat (2016) menunjukkan akses jamban di Kecamatan Watumalang adalah 64,78%. Dari keseluruhan 14.878 KK, hanya 4864 KK yang telah memiliki jamban permanen. Sejumlah 4639 KK (31,18%) tidak terakses jamban atau tidak memiliki sarana sanitasi baik secara pribadi maupun bersama.
Sisanya memiliki jamban semi permanen dan menggunakan jamban bersama.

## 1.  Deskripsi hasil penelitian
Data kesehatan lingkungan dan sanitasi tersebut mengindikasikan potensi permasalahan pada kualitas air akibat minimnya kualitas sarana sanitasi, termasuk di Watumalang. Kekurangan dalam pola dan sarana akan berdampak pada risiko cemaran terutama oleh koliform. Berikut adalah hasil evaluasi cemaran koliform di Watumalang. Watumalang memiliki pengguna mata air lebih dari separuh penduduknya (60,66%). Gambar 3 menunjukkan hanya 2 desa (Gondang dan Limbangan) yang dianggap mampu memenuhi kualitas sebagai air bersih atau setara 29% (sesuai Permenkes 416 Tahun 1990). Angka yang ironis karena pada kedua desa tersebut rasio pemanfaatan mata air rendah (< 20%). Adapun beberapa desa memiliki cemara koliform tinggi dengan rasio pemanfaatan juga tinggi seperti Wonosroyo dan Watumalang (> 70%). Hal ini menggambarkan tingginya resiko terjadinya waterborne disease pada lokasi tersebut.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795
UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)*
1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019)
Gambar 3. Perbandingan cemaran koliform dan rasio pemanfaatan setiap desa di Watumalang (sumber : data primer diolah, 2016)
Dendrogram pada gambar 3 menggambarkan tingginya resiko terjadinya waterborne disease pada lokasi tersebut. Adanya perbedaan signifikan antara garis menunjukkan rasio pemanfaatan dan cemaran koliform, terutama ketika cemaran koliform jauh melampaui rasio pemanfaatan, menunjukkan ketimpangan antara kebutuhan pemanfaatan dengan kemampuan untuk mengelola kualitas air, khususnya pada variabel cemaran koliform. Laporan dari Dinas Kesehatan pada periode pemantauan 2015-2016 menunjukkan diare bukan penyakit dominan. Meski demikian ancaman penyakit diare berpotensi terjadi dengan pertimbangan eksistensi koliform yang tinggi (Butt and Ghaffar, 2015). Selain itu, angka penurunan peristiwa diare pada periode tersebut tidak signifikan (sig 0,316) menggambarkan rendahnya upaya mitigasi peristiwa ini. Berkombinasi dengan permasalahan kesehatan lingkungan lain, termasuk cemaran koliform pada air baku, maka KLB diare bisa saja terjadi ketika kesadaran dan mitigasi pihak terkait lemah.
Persepsi lingkungan, kepemilikan sarana sanitasi dan risiko pencemaran sarana merupakan tiga variabel lain yang dianggap memiliki hubungan dengan terjadinya cemarann koliform pada air baku POKMAIR Watumalang. Dua variabel awal merupakan gambaran persepsi dan perilaku masyarakat pada penyediaan air baku.
Variabel terakhir berkaitan dengan kualitas sarana air bersih seperti perlindungan mata air dan reservoir yang memenuhi standar atau mempunyai faktor risiko cemaran  yang rendah Persepsi lingkungan merupakan aspek yang dianggap telah merata dalam kondisi yang baik di Watumalang. Hal ini salah satu imbas upaya penyuluhan oleh instansi terkait hingga kemudahan aksesibilitas informasi melalui beragam media. Namun, persepsi yang telah baik tersebut nampaknya belum sepenuhnya muncul dalam perilaku masyarakat untuk mengelola kesehatan lingkungan. Kondisi ini digambarkan oleh kepemilikan sarana sanitasi yang tergolong terbatas, merata pada kategori penilaian kurang-cukup.
Nilai kurang pada kepemilikan sarana sanitasi mayoritas dikontribusikan pada instrumen kuisioner nomor 7 dan 8. Instrumen 7 terkait dengan kondisi tempat sampah (terbuka/ tertutup) dan instrumen 8 terkait jarak kandang dengan lokasi tampungan air. Keduanya menunjukkan keterbatasan masyarakat untuk melaksanakan tindakan sesuai persepsinya dengan salah satu pemnbatasnya adalah perekonomian. Hasil kuisioner sesuai dengan data BPSP Jawa Tengah mengenai permasalahan sampah secara umum di Kabupaten Wonosobo. Sarana sanitasi tersebut tersedia sebatas pemenuhan kuantitas namun belum memenuhi standar kualitas kelayakan.
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019) ISSN 2460-1365
(a) (b)

## (c)
Gambar 4. Evaluasi kuisioner kepemilikan sarana sanitasi (a); persepsi lingkungan (b); dan risiko pencemaran sarana (c)
Situasi yang nyaris serupa tampak pada risiko pencemaran. Sarana yang dipantau seperti reservoir telah tersedia namun belum memenuhi persyaratan kualitas dan kelayakan kesehatan sehingga beberapa diantaranya dipandang berisiko tinggi pada pencemaran. Hasil pemantauan menunjukkan hanya 25%
sarana yang dianggap rendah terhadap risiko pencemaran. Tingginya risiko pencemaran akan memudahkan kontaminasi beragam kontaminan (biologi, fisika dan kimia) pada air baku.

## 2.  Hubungan antar variabel penelitian
Analisis dengan aplikasi korelasi Pearson menggunakan software SPSS 20 memperoleh hasil sebagai berikut :
Tabel 4. Hasil uji korelasi Pearson untuk hubungan antar variabel Var Korelasi Pearson (R) Y x 1 x 2 x 3 Y 1 -0,381 -0,202 0,186 x 1 -0,381 1 0,173 -0,279 x 2 -0,202 0,173 1 -0,211 x 3 0,186 -0,279 -0,211 1
Sumber : pengolahan data primer (2016); Keterangan : y adalah kualitas air baku (koliform) komposit, x 1 adalah kepemilikan sarana sanitasi, x 2 adalah persepsi kesehatan lingkungan dan x 3 adalah resiko pencemaran
Hasil pada Tabel 4 menunjukkan hubungan paling erat terhadap variabel y (cemaran koliform) adalah kepemilikan sarana sanitasi (r -0,381). Semakin tinggi kepemilikan sarana sanitasi, kecenderungannya akan mampu menurunkan cemaran koliform pada air baku. Hasil ini sesuai dengan penelitian Tong et al ., (2016) bahwa perbedaan kontaminasi koliform pada air baku disebabkan oleh perbedaan akses sanitasi sehat masyarakat. Aplikasi sanitasi sehat secara total diprediksi akan mengurangi 70% keseluruhan koliform fekal dalam air dan secara khusus akan menurunkan hingga 34% koliform fekal yang dirilis oleh manusia. Hasil menarik adalah korelasi yang sangat lemah antara persepsi dan kepemilikan sarana sanitasi (0,173). Kondisi ini menunjukkan adanya batasan yang mengakibatkan persepsi lingkungan tidak terwujud dalam perilaku pada kasus Kecamatan Watumalang. Hal ini dapat diakibatkan oleh perekonomian, prioritas pembiayaan dan pendidikan masyarakat di
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com

## Abstrak
Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019)
Watumalang. Ekonomi pada skala rendah membuat aspek perbaikan kondisi kesehatan lingkungan menjadi prioritas akhir dibelakang pemenuhan kebutuhan primer sehari-hari. Meski demikian, persepsi lingkungan memiliki korelasi yang lebih kuat dengan cemaran koliform (r -0,202) dan risiko pencemaran (-0,211). Artinya, keterbatasan lebih mengarah pada perilaku yang berhubungan dengan pembangunan fasilitas sanitasi yang layak, nilai persepsi masih lebih baik pada perilaku berupa sikap sehari-hari untuk mengelola kesehatan lingkungan.

## 3.  Penilaian risiko pemanfaatan air baku POKMAIR di Watumalang
Penilaian terhadap risiko pemanfaatan air baku yang bersumber dari mata air oleh masyarakat POKMAIR Kecamatan Watumalang dinilai dengan metode skoring berdasarkan hasil penelitian primer. Variabel yang dinilai meliputi cemaran koliform, kepemilikan sarana sanitasi, persepsi lingkungan, risiko pencemaran dan rasio pemanfaatan. Total skor diperoleh akan menggambarkan risiko pemanfaatan air baku tersebut pada masing-masing desa.
Tabel 5. Penilaian risiko pemanfaatan air baku POKMAIR di Watumalang
Desa Cemaran  kolifor m K epemilikan Sarana
Persepsi  lingkungan R esiko pencemaran R asio pemanfaatan Total S kor Status risiko pemanfaatan Bumiroso 3 3 1 2 3 12 Sedang Gondang 2 3 1 4 1 11 Sedang Limbangan 1 2 1 2 2 8 Rendah Kuripan 4 2 1 2 3 12 Sedang Lumajang 2 2 2 2 4 12 Sedang Wonoroto 4 2 1 2 3 12 Sedang Wonokampir 3 2 2 2 4 13 Sedang Krinjing 3 3 1 5 4 16 Tinggi Mutisari 2 3 1 4 5 15 Tinggi Binangun 3 2 1 3 3 12 Sedang Kalidesel 4 2 2 1 5 14 Sedang Banyukembar 2 2 1 4 4 13 Sedang Pasuruhan 3 2 3 5 4 18 Tinggi Gmw. Kidul 3 2 4 5 4 18 Tinggi Wonosroyo 5 2 1 3 4 15 Tinggi Watumalang 5 2 2 5 4 18 Tinggi Sumber : data primer diolah (2016)
Hasil penilaian menunjukkan hanya satu desa dengan risiko rendah (Limbangan). Risiko rendah berarti pemanfaatan air dari sumber mata air dapat dilakukan berkelanjutan dengan dukungan dari sistem pemantauan dan evaluasi berkala. Hal ini bermakna bahwa pemanfaatan pada desa tersebut telah terkelola dengan baik didukung ketersediaan prasarana dan pola perilaku yang baik dari masyarakat sehingga
pemanfaatan tersebut tidak mengkhawatirkan ditinjau dari aspek kesehatan, khususnya pada cemaran koliform.
Hasil pada tabel 5 menunjukkan adanya 6 desa dengan risiko tinggi terhadap pemanfaatan mata air karena koliform, dengan 3 diantaranya dipandang kritis yaitu Pasuruhan, Gumawang Kidul dan Watumalang. Hal ini telah terbukti dengan terjadinya KLB diare di Desa Pasuruhan
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018). Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019) ISSN 2460-1365
pada 2015. Peristiwa tersebut dimungkinkan sebagai dampak resiko pemanfaatan air baku dari sumber mata air yang tidak terkelola baik kualitasnya. Risiko semakin tinggi mempertimbangkan rasio pemanfaatan yang tinggi pada ketiga desa tersebut. Kehadiran koliform dalam air baku setidaknya diwaspadai sebagai ancaman atau indikasi penurunan kualitas mikrobiologis pada air. Sampel koliform positif pada air yang semestinya bebas bisa mengindikasikan ketidakefektifan perlakuan, keterbatasan penggunaan desinfektan, intrusi dari air tercemar ke dalam air baku, terjadinya permasalahan pada sistem distribusi yang kesemuanya tidak dapat ditoleransi. Penelitian-penelitian terdahulu mengindikasikan adanya hubungan kuat antara kejadian ledakan waterborne disease dengan pengelolaan koliform pada air (Pal, 2014; Divya and Solomon, 2016).
Indikasi pencemaran koliform berdasarkan penelitian dapat berasal dari limbah domestik terkait berkaitan dengan cemaran feses dan kotoran hewan. Karakteristik wilayah dan perilaku masyarakat di Watumalang menguatkan indikasi tersebut. Watumalang didominasi oleh pemukiman dengan kualitas sanitasi kurang memadai dan rentan risiko pencemaran pada sarana air bersih.
Hasil kuisioner kepemilikan sarana menggambarkan kekurangan lain pada jarak yang tidak ideal antara kandang ternak dengan tampungan air rumah serta kurangnya tempat sampah memadai. Keduanya memudahkan vektor penyakit seperti lalat hinggap dan kemudian memindahkannya pada air tampungan. Bahkan, jarak yang dekat dengan sumber kontaminasi besar akan memungkinkan cemaran langsung dari sumber kontaminan tersebut.
Justifikasi dari rentannya cemaran ternak muncul pada hasil pantauan aspek abiotik yang memunculkan nilai klorida sebagai salah satu parameter yang signifikan pada seluruh sampel air POKMAIR. Cemaran klorida merupakan dapat bersumber dari bahan organik pada aktivitas industri dan peternakan (Venkateshraju, 2010). Keterbatasan industri pada wilayah
Watumalang menjadikan sumber peternakan sebagai kontributor utama cemaran ini.  Kondisi ini menunjukkan kerentanan tampungan air pada masyarakat POKMAIR terhadap cemaran limbah peternakan, kemungkinan juga feses ternak. Penelitian yang sama dari Venkateshraju (2010) menghasilkan korelasi positif yang amat kuat antara peningkatan kadar klorida dengan koliform (r 0,85).
Hasil yang terjadi di Watumalang sesuai penelitian dari Windusari dan Sari (2015) tentang cemaran koliform di Sungai Musi yang diakibatkan terutama oleh padatnya pemukiman dengan sanitasi buruk. Nilai koliform akan cenderung meningkat pada lokasi dengan karakter tersebut akibat cemaran kotoran hewan dan manusia. Penelitian cemaran koliform Shariq et al (2016) menyatakan kondisi selaras bahwa adanya pemukiman yang dihuni secara konsisten memiliki kerentanan lebih tinggi pada tercemarnya air oleh koliform akibat sanitasi yang tidak memadai, kurangnya perawatan fasilitasi sanitasi, kurangnya supervisi sumber air dan intensitas rendah pada pemantauan kualitas air baku secara rutin. Resiko akan turut meningkat seiring meningkatnya populasi hunian.
Hasil tersebut dapat menjadi masukan atau rekomendasi bagi pemerintah untuk program peningkatan kualitas air baku POKMAIR di masa mendatang. Hasil-hasil di atas menggambarkan bahwa permasalahan terletak pada ketidakmampuan masyarakat secara mandiri mengelola kualitas airnya. Pemerintah dapat membantu menurunkan pembatas antara persepsi dan perilaku dengan memberikan bantuan bagi pembangunan sarana sanitasi baru yang lebih layak. Hasil penilaian risiko pemanfaatan pada setiap desa menunjukkan lokasi-lokasi yang semestinya memperoleh prioritas dalam perbaikan kualitas air bakunya, khususnya yang bersumber dari mata air.

## Simpulan
Mata air menjadi sumber air baku utama Kecamatan Watumalang (60,66% penduduk), khususnya POKMAIR. Hasil kajian
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019)
menunjukkan bahwa sebanyak 37,5% dari total desa di Kecamatan Watumalang menunjukkan pemanfaatan air yang tergolong berisiko tinggi yaitu berdasarkan aspek cemaran koliform, kepemilikan sarana sanitasi, persepsi lingkungan, risiko pencemaran sarana dan rasio pemanfaatan setiap desa. Evaluasi terhadap cemaran koliform menghasilkan data hanya 29% air baku POKMAIR yang memenuhi persyaratan air
bersih. Kajian berdasarkan variabel penelitian menunjukkan bahwa hubungan paling erat terhadap cemaran koliform adalah kepemilikan sarana sanitasi (r -0,381). Adapun pada Kecamatan Watumalang terjadi kecenderungan bahwa persepsi lingkungan yang baik tidak serta merta mempengaruhi perilaku masyarakat terutama dalam pembangunan sanitasi yang layak dan berkualitas (r 0,173).

## Daftar Referensi
Avigliano, E. and Schehone, N.F. 2015. Human Health Risk Assesment and Environmental Distribution of Trace Elements, Glyphosate, Fecal Coliform and Total Coliform in Atlantic Rainforest Mountain Rivers. Microchemical Journal 122 (2015) : 149-158. elsevier.com/ locate/microc (akses 3 Oktober 2016)
Badan Pusat Statistik Kabupaten Wonosobo. 2016. Kecamatan Watumalang dalam Angka 2016 .
Butt, I and Ghaffar, A. 2012. Groundwater Quality Assesment Near Mehmood Boti Landfill, Lahore, Pakistan. Asian Journal of Social Sciences and Humanities 1 (2) pp : 13-24
Campbell, J.W., Watson, A., Watson, C., Ball, H., and R. Pirkle. 2011. Eschericia coli, Other Coliform and Environmental Che oheterothropic Bacteria in Isolated Water Pools from Six Caves in Northern Alabama and Northwester Georgia. Journal of Caves and Karst Studies 73 (2) pp : 75-82. DOI : 10.4311/jcks2009mb1031
Colclasure, V.J., Soderquist, T.J., Lynch, T., Schubert, N., McCormick, D.S., Urrutia, E., Knickerbocker, C., McCord, D., and J.H. Kavouras. 2015. Coliform Bacteria, Fabrics and The Environment. American Journal of Infection Control 43 (2015) pp : 154-158. DOI : 10.1016/j.ajic.2014.11.001
Dinas Kesehatan Kabupaten Wonosobo. 2013. Laporan Tahunan Dinas Kesehatn Kabupaten Wonosobo tahun 2013 , Bidang PMK  Dinas Kesehatan Kabupaten Wonosobo
Divya, A.H and Solomon, P.A. 2016. Effects of Some Water Quality Parameters Especially Total Coliform and Fecal Coliform in Surface Water of Chalakudy River. Procedia Technology 24 (2016) pp : 631-638. DOI : 10.1016/j.protcy.2016.05.151
Megha, P.U., Kavya, P., Murugan, S., and P.S. Harikumar. 2015. Sanitation Mapping on Groundwater Contamination in a Rural Village of India. Journal of Environmetal Protection 2015 (6) pp : 34-44. dx.doi.org/10.4236/jep.2015.61005
Mohsin, M., Safdar, S., Ashgar, F. And F. Jamal. 2013. Assesment of Drinking Water Quality and its Impact on Residents Health in Bahawalpur City. International Journal of Humanities and Social Science Vol 3 (15) : 114-128 August 2013. ijhssnet.com (akses 4 Oktober 2016)
Pal, P. 2014. Detection of coliform in drinking water and its effect on human health – A Review. International Letters of Natural Sciences 17 (2014) : 122-131
Peraturan Menteri Kesehatan Nomor 416/Menkes/Per/IX/1990 tentang Syarat-Syarat dan Pengawasan Kualitas Air
Pujiyati, Setyono, P. dan Wiryanto. 2016. The Provision of Clean Water Contamination Risk and Environment Perception of Water User Groups (POKMAIR) in Watumalang District,
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 5 No. 2 (September 2019) ISSN 2460-1365
Wonosobo Regency, Central Java. Proceedings . The 3 rd International Conference on Health Science 2016. Yogyakarta. Poltekkes Kemenkes
Sanitasi Total Berbasis Masyarakat (STBM). 2016. Monitoring Data. Laporan Kemajuan Akses Sanitasi Kabupaten Wonosobo . stbm-indonesia.org/monev/ (diakses 10 Oktober 2015).
Shariq, M., Singh, S., Farooq, U., Dhariyal, K.K., Singh, K., and Kaur, N. 2016. Presumptive Coliform Count in Water Sample Collected From Different Sites of A University, Moradabad, Uttar Pradesh, India. International Journal of Scientific Study 3 (12) : 91-96
Soeprobowati, T.R., Tandjung, S.D., Sutikno, Hadisusanto, S., Gell, P., Hadiyanto, and S.W.A. Suedy. 2016. The Water Quality Parameters Controlling Diatoms Assemblage in Rawapening Lake, Indonesia. Biodiversitas 17 (2) : 657-664. DOI : 10.13057/biodiv/d170239
Tong, Y., Yao, R., He, W., Zhou, F., Chen, C., Liu, X., Lu, Y., Zhang, W., Lin, Y., and M. Zhou. 2016. Impacts of Sanitation Upgrading to The Decrease of Fecal Coliform Entering Into The Environmental in China. Environmetal Research 149 (2016) pp : 57-65. DOI : 10.1016/j. envres.2016.05.009
Venkateshraju, K., Ravikumar, P., Somashekar, P., and Prakash, K.L. 2010. Physico-Chemical and Bacteriological Investigation on The River Cauvery of Kollegal Stretch in Karnataka. Kathmandu University Journal of Science Engineering and Technology 6 (1) : 50-59
Windusari, Y dan Sari, N.P. 2015. Kualitas Perairan Sungai Musi di Kota Palembang Sumatera Selatan. Bioeksperimen 1 (1) : 1-5