e- Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan
Volume II No 2 Februari 2014 ISSN: 2302-3600

## EFEK PELARUT YANG BERBEDA TERHADAP TOKSISITAS EKSTRAK AKAR TUBA (Derris elliptica)
Oktarinaldi Irawan *† , Eko Efendi ‡ dan Mahrus Ali ‡

## ABSTRAK
Akar  tuba (Derris  elliptica) digunakan  sebagai  racun  pada  penangkapan  ikan  air tawar. Rotenon sebagai bahan aktif dari akar tuba sangat efektif untuk membunuh ikan tetapi penelitian tentang toksisitasnya masih sangat terbatas. Tujuan penelitian ini  untuk  mengetahui  tingkat  toksisitas  ekstrak  akar  tuba  menggunakan  pelarut etanol,  heksan  dan  akuades  dengan  menggunakan  dua  hewan  uji  yaitu  artemia ( Artemia sp.)  dan  ikan  mas  ( Cyprinus  carpio ).  Penelitian  ini  menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan 5 tingkat konsentrasi yang berbeda. Jumlah rendemen hasil ekstraksi pada pelarut etanol, heksan dan akuades berturut-turut 5; 3,6;  2,5%.  Hasil  penelitian  pada  artemia  menunjukkan  bahwa  tingkat  mortalitas 100% pelarut heksan terjadi pada konsentrasi 63 dan 100 mg/l; etanol 100 mg/l dan akuades  1000  mg/l.    Hasil  analisis  probit  pada  artemia  menunjukkan  nilai  LC 50 (Lethal  Concentration) 24  jam  pada  heksan,  etanol  dan  akuades  berturut-turut 37,03;  46,77;  307,47  mg/l.  Hasil  penelitian  pada  ikan  mas  menunjukkan  bahwa tingkat  mortalitas  100%  pelarut  heksan  terjadi  pada  konsentrasi  3,979;  6,30  dan 9,96 mg/l dan pelarut etanol 9,96 mg/l. Hasil analisis probit pada hewan uji ikan mas menunjukkan nilai LC 50 -96 jam heksan dan etanol berturut-turut 3,83 dan 6,85 mg/l. Penelitian ini diharapkan mampu menjadi data awal untuk penggunaan akar tuba baik untuk meracuni ikan maupun untuk membius ikan.
Kata kunci : rotenon, tuba, ekstraksi, bioassay, probit
Pendahuluan Tuba ( Derris elliptica ) banyak digunakan  oleh  masyarakat  untuk menangkap  ikan,  namun  tanaman  ini tidak  menyebabkan  semua  ikan  mati dengan adanya penelitian yang memilik hasil toksisitas yang berbeda. Starr et al . (2003),  mengungkapkan  akar  tuba mengandung  senyawa  aktif  rotenon yang merupakan senyawa beracun yang dapat  membunuh  ikan  dan  hama tanaman  jika  digunakan  dengan  dosis yang besar (Kardinan, 2000). Beberapa
* Mahasiswa Jurusan Budidaya Perairan Universitas Lampung
† Email : Oktarinaldi_irawan@yahoo.com
‡ Dosen  Jurusan  Budidaya  Perairan  Universitas  Lampung,  Jl.Prof.S.Brodjonegoro  No.1  Gedong Meneng Bandar Lampung 35145
hasil  riset  mengenai  toksisitas  ekstrak akar  tuba  terhadap  ikan  diantaranya pada  nila (Oreochromis  niloticus) ukuran  benih  dengan    nilai  LC 50 ( median lethal concentration) sebesar 5 mg/l (Sumera and Conato, 2006), pada benih  lele (Clarias  gariepinus) sebesar 15x10 6 mg/l  (Olufayo,  2009).  LC 50 ( median  lethal  concentration )  yaitu konsentrasi yang menyebabkan kematian  50%  dari  organisme  uji  yang dapat  dilihat  dalam  grafik  pada  suatu waktu  pengamatan  tertentu,  misalnya
LC 50 -48  jam,  LC 50 -96  jam  sampai waktu  hidup  hewan  uji  (Astuti,  2004  ; Rossiana, 2006).
Berdasarkan  hasil  di  atas,  terdapat perbedaan tingkat toksisitas dari ekstrak akar tuba, hal ini juga karena perbedaan jenis pelarut  yang digunakan, sehingga menyebabkan  senyawa  yang  terlarut akan  berbeda  yang  dapat  berakibat terhadap  perbedaan  tingkat  toksisitas pada ikan. Perlu dilakukan uji toksisitas akar tanaman tuba dengan menggunakan  jenis-jenis  pelarut  yang berbeda  untuk  mengetahui  batas  LC 50 dari  akar  tuba  pada  ikan.  Penelitian tentang  tosisitas  akar  tuba  dengan pelarut yang berbeda dan efeknya pada tingkat  toksisitas  pada  hewan  yang berbeda  belum  banyak  dilakukan sehingga  studi  ini  menarik  untuk dilakukan.  Penelitian  ini  dilakukan dengan  tujuan  untuk  mengetahui  nilai LC 50 -96  jam  ekstrak  akar  tuba  dengan pelarut berbeda terhadap benih ikan mas ( Cyprinus carpio ).

## Bahan dan Metode
Penelitian  dilakukan  di  Laboraturium
Budidaya Perikanan Universitas Lampung. Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah akar tuba yang diambil dari  hutan  didaerah  Tanjung  Bintang Lampung  Selatan,  akuades,  etanol, heksan,  kista  artemia  dan  benih  ikan mas ( Cyprinus carpio ) yang dibeli dari daerah Pagelaran. Metode yang
digunakan  pada  penelitian  ini  adalah rancangan acak lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan konsentrasi yaitu 0,1; 1; 10; 100;  1000  ppm  dan  3  ulangan  untuk setiap  pelarut,  baik  pada  uji  toksisitas dan  BSLT  ( brine  shrimp  lethality  test ) menggunakan ikan masdan Artemia . Uji BSLT  bertujuan  untuk  menentukan pelarut  yang  bersifat  toksik  dan  non
toksik  sedangkan  uji  pada  ikan  mas bertujuan untuk menentukan nilai LC 50 .
Penelitian ini memiliki beberapa tahapan yaitu pembuatan ekstrak senyawa aktif akar tuba dengan pelarut berbeda, uji pendahuluan BSLT menggunakan Artemia dengan penentuan konsentrasi deret logaritmik, uji  utama Artemia dari  hasil  uji pendahuluan,  analisis  probit  pada hewan uji artemia, uji pendahuluan ikan mas dengan penentuan konsentrasi deret logaritmik,  uji  utama  pada  ikan  dari hasil uji pendahuluan dan analisis probit pada hewan uji ikan mas (Yunita dkk., 2009;  Suhirman  dkk.,  2006;  Hendri dkk., 2010). Parameter  yang diuji pada penelitian  ini  adalah  jumlah  rendemen ekstrak masing-masing
pelarut, konsentrasi  pada  uji  utama,  mortalitas dan  LC 50 pada  hewan  uji  artemia  dan ikan  mas.  Perhitungan  analisis  Probit mengacu  pada  Hubert  ,1979  (Hendri dkk.,  2010).  Nilai  LC 50 diperoleh  dari hubungan  nilai  logaritma  konsentrasi bahan  toksik  uji  dan  nilai  Probit  dari persentase mortalitas hewan uji merupakan fungsi linear dengan persamaan :
𝑌 = 𝑎 + 𝑏𝑥 dimana :
Y : Nilai Probit Mortalitas a : konstanta b : slope/ kemiringan X : Logaritma konsentrasi bahan uji
Nilai LC 50 -24 diperoleh dari anti log m, dimana m merupakan logaritma konsentrasi  bahan  toksik  pada  Y  =  5, yaitu  nilai  Probit  50  %  hewan  uji, sehingga persamaan regresi menjadi :
𝑀 = 5 − 𝑎 𝑏
Dengan  nilai  a  dan  b  diperoleh berdasarkan persamaan sebagai  berikut
:
𝑏 = Σ XY – 1 n ( Σ X Σ Y) Σ X 2 – 1 n  ( Σ X) 2 𝑎 = 1 n (ΣY –  b ΣX)
dimana : n : banyaknya perlakuan m : nilai X pada Y = 5

## Hasil dan Pembahasan
Nilai  rendemen  yang  menyatakan bahwa  persentase  tertinggi  berturut- turut  dihasilkan  oleh  pelarut  etanol, heksan  dan  akuades  (Gambar  1.). Pelarut  lebih  cenderung  melarutkan senyawa aktif yang mempunyai golongan  sama,  sedangkan  untuk golongan  semi  polar  dapat  melarutkan sebagian atau seluruh senyawa aktif dari golongan  polar  dan  nonpolar  sehingga jumlah rendemen untuk pelarut ethanol paling  banyak  kerena  etanol  termasuk golongan  semi  polar  (Keenan  dkk., 1990).  Pada  rendemen  yang  diekstrak oleh  pelarut  heksan  terdapat  senyawa aktif  rotenon yang beracun bagi ikan. Hasil uji BSLT diperoleh nilai ambang atas  dan  ambang  bawah  pelarut  etanol dan heksan mempunyai kisaran konsentrasi  10–100  mg/l  dan  pelarut akuades  kisaran  konsentrasi  10-1000 mg/l. Tingkat mortalitas pada uji BSLT tertinggi secara berturut-turut diperoleh dari bahan berpelarut heksan, etanol dan akuades (Gambar 2.; Gambar 3.). Berdasarkan  analisis  data  terdapat perbedaan  nyata  antar  konsentrasi terhadap tingkat mortalias yang digunakan  baik  pada  pelarut  etanol, heksan  dan  akuades.  Pada  pelarut
heksan  hanya  pada  konsentrasi  63  dan 100 mg/l yang tidak berbeda nyata dan pada  pelarut  akuades  hanya  pada konsentrasi  25  dan  63  mg/l  yang  tidak berbeda  nyata.  Mortalitas  100%  pada pelarut  heksan  terjadi  pada  konsentrasi 63  dan  100  mg/l,  pada  pelarut  etanol terjadi  pada  konsentrasi  100  mg/l,  dan pada  pelarut  akuades  pada  konsentrasi 1000 mg/l. Tingginya tingkat mortalitas pada pelarut heksan karena pada pelarut ini  melarutkan  senyawa  aktif  rotenon yang  beracun,  sedangkan  pada  pelarut akuades tidak toksik karena tidak dapat melarutkan  senyawa  rotenon  (WHO, 1992).
LC 50 -24 jam pada (BSLT) berturut-turut adalah  untuk  pelarut  heksan  sebesar 37,03  mg/l,  etanol  sebesar  46,77  mg/l dan  akuades  sebesar  307,47  mg/l. Senyawa  aktif  yang  dilarutkan  dengan pelarut heksan paling toksik karena zat aktif  yang  diekstrak  adalah  rotenon yang termasuk senyawa flavanoid yang sangat  beracun  terhadap  golongan serangga  dan  ikan  (Kardinan,  2000; Maini  and  Rejesus,  1993;  Starr et  al. , 2003) . Senyawa  aktif  yang  dilarutkan dengan  etanol  tidak  terlalu  toksik dibandingkan  dengan  ekstrak  dari pelarut  heksan  karena  senyawa  dari golongan  alkohol  banyak  digunakan sebagai bahan pembius dan juga bahan pembuatan minuman beralkohol. Senyawa  aktif  yang  dilarutkan  dengan akuades  tidak  toksik  karena  pelarut aquades  termasuk  golongan  senyawa polar  tidak  dapat  melarutkan  senyawa rotenon (WHO,  1992).  Berdasarkan hasil  diatas  dapat  diketahui  bahwa senyawa  aktif  ekstrak  akar  tuba  yang dilarutkan  dengan  pelarut  heksan  dan etanol  bersifat  toksik  untuk  ikan sedangkan pelarut akuades tidak toksik untuk ikan.
Gambar  1. Jumlah rendemen hasil ekstraksi akar tuba (Derris elliptica)
Gambar 2. Tingkat mortalitas (%) pada uji BSLT menggunakan pelarut etanol dan heksan.
Gambar 3. Tingkat mortalitas (%) pada uji BSLT menggunakan pelarut akuades. 3,59 ± 0,31 5,04 ± 0,71 2,73 ± 0,36 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 Hexan Ethanol Akuades Juml ah re nde men (% ) Jenis Pelarut 0.64 21.15 29.92 42.09 89.36 0.64 31 49.8 89.36 89.36 0 20 40 60 80 100 120 15.85 25.12 39.82 63.11 100.03 T in g k at m o rtalitas ( %) Konsentrasi (ppm) Etanol heksan a a b b c c d d e d 0,64 ± 0 0,64 ± 0 21,34 ± 2,51 35,25 ± 1,77 89,36 ± 0 0 20 40 60 80 100 120 25.12 63.10 158.50 398.13 1000 T in g k at m o rtalitas ( %) Konsentrasi (ppm) a a b c d
Gambar 4. Hubungan antara log [K] dengan probit mortalitas pada uji BSLT.
Hubungan  antara  Log  [K]  dan  probit mortalitas  yang  paling  tinggi  terdapat pada pelarut akuades dengan R 2 = 0,914 diikuti  dengan  heksan  dan  etanol . Artinya,  setiap  terjadi  perubahan  nilai variabel bebas X (Log [K]), maka akan diikuti  oleh  perubahan  variabel  tak bebas  Y  (probit  mortalitas)  sebesar 8,671 (Gambar 4.).
Uji pada ikan mas hanya menggunakan pelarut  etanol  dan  heksan dikarenakan
pada  pelarut  akuades  tidak  bersifat toksik  dan    saat  uji  pendahuluan  pada ikan  pada  konsentrasi  100  mg/l  ikan masih  dapat  bertahan  hidup.  Suatu senyawa  aktif  dikatakan  toksik  bila LC 50 -nya  dibawah  30  mg/l  (Juniarti dkk.,  2009).  Hasil  uji  pendahuluan untuk  ikan,  bahan  pelarut  etanol  dan heksan  rentang  konsentrasi  sama  yaitu 1–10 mg/l.
Gambar 5. Tingkat mortalitas (%) uji pada ikan mas ( Cyprinus carpio )
Berdasarkan  analisis  data  pada  pelarut etanol hanya pada konsentrasi 9,96 mg/l yang  berbeda  nyata  sedangkan  pada pelarut  heksan  berbeda  nyata  pada konsentrasi  2,51  dengan  3,98  mg/l. Mortalitas  100%  pelarut  heksan  terjadi
y (A) = 5,50x - 8,67
R² = 0,91
y (E) = 9,21x - 10,38 R² = 0,88 y (H) = 10,88x - 12,02 R² = 0,91 -2 0 2 4 6 8 10 12 0 1 2 3 4 P robit morta li tas Log Konsentrasi akuades etanol heksan
0,91 0,91 0,91 0,91 89,09 0,91 091 89,09 89,09 89,09 0 20 40 60 80 100 120 1.59 2.51 3.98 6.30 9.96 T in g k at m o rtalitas ( %) Konsentrasi (ppm) etanol heksan a a a a a a b b b b
pada  konsentrasi  3,98;  6,30  dan  9,96, dan pelarut etanol pada konsentrasi 9,96 ppm.  Tingginya  tingkat  mortalitas pelarut  heksan  dikarenakan  senyawa aktif  yang  diekstrak  adalah  rotenone (Gambar 5.).
Nilai  LC 50 -96  jam  pada pelarut  heksan dan  etanol  sebesar  3,83  dan  6,85  mg/l. Tingginya  tingkat toksisitas pada pelarut  heksan  dikarenakan  zat  aktif yang  diekstrak  adalah  rotenon . WHO (1992), memperoleh hasil  LC 50 -96 jam ekstrak  akar  tuba  yang  dilarutkan
dengan  kloroform adalah  sekitar  0,02- 0.2 mg/l untuk ikan dan manusia sebesar 143  mg/kg.  Pada  penelitian  ini  pelarut etanol  hanya  konsentrasi  paling  tinggi yang  menyebabkan  semua  ikan  mati, namum  pada  konsentrasi  6,30  ppm terlihat  ada  pengaruh  bahan  uji  pada ikan, tapi beberapa saat  kemudian ikan kembali  pulih  dikarenakan  DO  yang tinggi dan adanya aerasi yang mengurangi  tingkat  toksik  bahan  uji (Hinson, 2000).
Gambar  6.  Hubungan  antara  Log  [K]  dan  probit  mortalitas  uji  pada    ikan  mas ( Cyprinus carpio ).
Hubungan  antara  Log  [K]  dan  probit mortalitas  yang  paling  tinggi  terdapat pada pelarut  heksan  dengan R 2 = 0,75. Artinya,  setiap  terjadi  perubahan  nilai variabel bebas X (Log [K]), maka akan diikuti  oleh  perubahan  variabel  tak bebas  Y  (probit  mortalitas)  sebesar 2,615 (Gambar 6.).

## Kesimpulan
Ekstrak  dari  akar  tuba  yang  dilarutkan dengan  pelarut  etanol,  heksan  dan akuades    memiliki  tingkat  toksisitas yang berbeda. Pelarut heksan memiliki tingkat  toksisitas  paling  tinggi  dengan
nilai LC 50 -96 jam sebesar 3,83 mg/l dan nilai  LC 50 -96  jam  pelarut  etanol  6,85 mg/l.  Pelarut  akuades  dinyatakan  tidak toksik  karena  pada  konsentrasi  paling tinggi ikan masih bertahan hidup.

## Daftar Pustaka
Astuti, D. 2004. Uji Toksisitas Limbah Cair MSG ( Mono Sodium Glutamat ) Terhadap Ikan Nila ( Tilapia nilotica ) di Palur Karanganyar. Infokes 8 :   1-
10.
Hendri, M,. Gusti, G dan Jetun, T. 2010 . Konsentrasi  Letal  (LC 50 -48  jam)
y  (E) = 8,72x - 3,49 R² = 0,5 y (H) = 13,07x - 2,62 R² = 0,75 -4 -2 0 2 4 6 8 10 12 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 P robit morta li tas Log Konsentrasi etanol heksan
Logam  Tembaga  (Cu)  dan  Logam Kadmium  (Cd)  Terhadap  Tingkat Mortalitas Juwana Kuda Laut (Hippocampus spp ) . Jurnal Penelitian Sains 13 : 26 - 30. Hinson, D. 2000. Rotenone Characterization  and  Toxicity  in Aquatic System . Principles of Enviromental Toxicology. Idaho. 1 - 13
Juniarti, Delvi, O dan Yuhernita. 2009. Kandungan  Senyawa  Kimia,  Uji Toksisitas  ( Brine  Shrimp  Lethality Test ) dan Antioksidan ( 1,1-diphenyl-
2-pikrilhydrazyl )  dari  Ekstrak  Daun Saga (Abrus precatorius L.) . Makara Sains 13 : 50 - 54. Kardinan.  2000. Pestisida  Nabati: Ramuan  dan  Aplikasi ,  Penebar Swadaya, Jakarta. Hal 3 - 64. Keenan, C. W., Donald, C. K dan Jesse, H. W. 1990. Kimia Untuk Universitas  Jilid  1  Edisi  Keenam .
Penerjemah:  A.  H.  Pudjaatmaka. Erlanggga. Jakarta. Hal 374 - 375 Maini,  P.  N  and  Rejesus,  B.  M.  1993. Moluscicidal  Activity  of Derris eliptica (Fam. Leguminosea). Phillipine  Journal  of  Science,  122  : 61 -75
Olufayo,  M.  2009 . Haematological
Characteristhic of Clarias gariepinus (Burchell  1822)  Juveniles  Exposed to Derris  elliptica Root  Powder.
Department of Fisheries and Wildlife,  Federal  University  of Technology  Akure,  Ondo  State, Nigeria. 9. 3 : 920 – 933 Rossiana,  N.  2006.  Uji  Toksisitas Limbah Cair Tahu Sumedang Terhadap Reproduksi Daphnia carinata King.  Laporan  Penelitian.
Universitas Padjajaran. Hal 7
Starr,  F.,  Kim,  S  and  Llyod,  L.  2003.
Derris elliptica.
United States
Geological Survey--Biological Resources  Division  Haleakala  Field Station, Maui. Hawai'i. 1 - 3 Suhirman,  S.,  Hernani  dan  Cheppy,  S. 2006. Uji Toksisitas Ekstrak Lempuyang Gajah ( Zingiber zerumbet )  terhadap  Larva  Udang
( Artemia  salina Leach).  Bul.  Littro 17 : 30 - 38
Sumera,  F.C  and  Conato  M.T..  2006. Use of Derris trifoliata (Leguminosae)  Root  Extracts  for Fishpond Management. Asian Fisheries Society, Manila, Philippines. Asian Fisheries Science 19 : 75 - 89 World  Health  Organization.  1992.
Rotenone  Health  and  Safety  Guide. IPCS  International  Programme  on Chemical  Safety .  Health  and  Safety Guide No. 73. Geneva. 1 - 10
Yunita,  E.  A.,  Nanik,  H.  S  dan  Jafron, W. H. 2009. Pengaruh Ekstrak Daun Teklan ( Eupatorium riparium ) terhadap Mortalitas dan Perkembangan Larva Aedes aegypti . Bioma 11 : 11-17.