## POTENSI AGEN IMUNOSTIMULAN RUMPUT LAUT DALAM MODULASI HEMOSIT UDANG VANAME (Litopenaeus vannamei)
Potential Seaweed Immunostimulant Agent in Modulating the Hemocytes of Vaname Shrimp (Litopenaeus vannamei)
Lili Suharli 1* , Mardiana Hamjah 1 , Adi Suriyadin 1 , Milis 2
1 Fakultas Ilmu dan Teknologi Hayati, Universitas Teknologi Sumbawa
2 Balai Karantina Ikan Pengendalian Mutu dan Keamanan Hasil Perikanan Mataram
* Corresponding author : lili.suharli@uts.ac.id

## ABSTRAK
Pertahanan pertama terhadap penyakit pada udang vaname dilakukan oleh hemosit . Hemosit  merupakan  salah  satu  sel  imun  utama  pada  udang.  Salah  satu  upaya  dalam penanggulangan  dan  pencegahan  penyakit  udang  adalah  melalui  peningkatan  sistem pertahanan  tubuh  udang,  yaitu  dengan  menggunakan  imunostimulan.  Rumput  laut Sargasum sp., Eucheuma sp.  dan Ulva sp.  merupakan  sumberdaya  laut  yang  potensial sebagai  sumber  fitokimia  yang  mempunyai  aktifitas  biologi  yang  bermanfaat  bagi kesehatan. Rumput laut ini memiliki kandungan seperti tannin, flavonoid, dan polisakarida sulfat  yang  mampu  meningkatkan  jumlah  hemosit  dan  pertahanan  tubuh  pada  udang. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  modulasi  hemosit  dan  pertumbuan udang  vaname.  Rancangan  percobaan  yang  digunakan  yaitu  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 3 ulangan. Dosis masing-masing perlakuan yaitu 0,5 gram, 1  gram,  2  gram  dan  kontrol.  Parameter  pengamatan  terdiri  dari Total  Haemocite  Count (THC), Differensial Haemosite Count (DHC) dan Pertumbuhan pada udang vaname. Hasil penelitian menunjukkan bahwa THC dan DHC tertinggi didapat pada perlakuan pemberian ekstrak Euchema sp. dosis 2 gram dengan nilai THC sebesar 12.75x10 4 cell/ml dan DHC sebesar  0.51%,  serta  pertumbuhan  udang  vaname  dengan  bobot  29.87  gram  dan  panjang 19.66 cm. Sehingga dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak rumput laut memberikan pengaruh  dalam  sistem  pertahanan  udang  melalui  parameter  THC  dan  DHC  serta peningkatan  pertumbuhan  panjang  dan  berat  udang.  Penggunaan  ekstrak  rumput  laut Sargasum sp., Eucheuma sp. dan Ulva sp. sebagai immunostimulan dengan konsentrasi 2 gram  memberikan  pengaruh  positif  dalam  modulasi  hemosi  serta  pertumbuhan  udang vaname .
Kata Kunci: Immunostimulants, Hemocytes, Seaweed, Litopenaeus vannamei

## ABSTRACT
The  first  defense  against  disease  in  white  shrimp  is  carried  out  by  hemocytes. Hemocytes are one of the main immune cells in shrimp. One of the efforts to overcome and prevent shrimp diseases is by increasing the shrimp's body defense system, namely by using immunostimulants. Seaweed Sargasum sp., Eucheuma sp. and Ulva sp. is a marine resource that  has  potential  as  a  source  of  phytochemicals  that  have  biological  activities  that  are beneficial  for  health.  This  seaweed  contains  ingredients  such  as  tannins,  flavonoids  and sulfate polysaccharides which can increase the number of hemocytes and body defenses in shrimp. This study aims to determine the effectiveness of hemocyte modulation and growth of  vaname  shrimp.  The  experimental  design  used  was  a  Completely  Randomized  Design
(CRD) with 4 treatments and 3 replications. The doses for each treatment were 0.5 grams, 1 gram, 2 grams and control. The observation parameters consist of Total Haemocite Count (THC), Differential Haemosite Count (DHC) and Growth in vaname shrimp. The research results showed that the highest THC and DHC were obtained in the treatment of Euchema sp extract. a dose of 2 grams with a THC value of 12.75x10 4 cells/ml and a DHC of 0.51%, as well as the growth of vaname shrimp with a weight of 29.87 grams and a length of 19.66 cm. So it can be concluded that the administration of seaweed extract has an influence on the shrimp defense system through the parameters THC and DHC as well as increasing the growth in length and weight of shrimp. Use of seaweed extract Sargasum sp., Eucheuma sp. and  Ulva  sp.  as  an  immunostimulant  with  a  concentration  of  2  grams,  it  has  a  positive influence in modulating hemorrhage and growth of vaname shrimp.

## Keywords: Imunostimulant, Hemosit, Rumput laut, Litopenaeus vannamei

## PENDAHULUAN
Menurut  data  statistik  perikanan budidaya  Kementrian  Kelautan  dan Perikanan  tahun  2018,  menunjukan bahwa  perkembangan  produksi  udang vaname  tahun  2017  sebesar  757.793  ton dan  tahun  2018  sebesar  717.094  ton. Penurunan  produksi  udang  terjadi  pada tahun 2018 sehingga membuat pemerintah menargetkan  produksi  udang  di  tahun 2020  menjadi  934.922  ton.  Produksi udang vaname yang tinggi harus didukung dengan  ketersediaan  jumlah  benur  yang terpenuhi  dan  pemeliharaan  kesehatan yang  baik.  Namun,  wabah  penyakit menjadi  kendala  di  budidaya  udang, karena  dapat  menyebabkan  kematian massal (Siswati 2021).
Pertahanan pertama terhadap penyakit  pada  udang  vaname  dilakukan oleh  hemosit . Hemosit  merupakan  salah satu  sel  imun  utama  pada  udang,  yang berperan penting dalam imunitas humoral maupun  seluler.  Hemosit  berpartisipasi dalam  proses  imunitas  humoral  dengan mensintesis  dan  melepaskan  molekul imun  seperti  peptida  antibakteri,  lektin, dan  crustin.  Hemosit  juga  terlibat  dalam proses imunitas seluler melalui fagositosis,  enkapsulasi,  dan  nodulasi.
Berdasarkan sifat pewarnaan dan morfologinya, hemosit pada udang vaname  umumnya  dibagi  menjadi  tiga yaitu  granulosit,  semigranulosit,  dan hialinosit (Battistella et al., 1996).
Sistem  imunitas  pada  udang sangat bergantung tehadap proses pertahanan nonspesifik sebagai pertahanan  pertama  terhadap  serangan penyakit  (lee et  al, 2004).  Salah  satu upaya dalam penanggulangan dan pencegahan penyakit udang adalah melalui  peningkatan  sistem  pertahanan tubuh udang, yaitu dengan menggunakan imunostimulan (Putri et al., 2013).
Rumput laut merupakan sumberdaya  laut  yang  potensial  sebagai sumber  fitokimia  yang  memiliki aktifitas biologi  dan  bermanfaat  bagi  kesehatan, seperti carotenoids,  phycobilins,  fatty acids,  polysaccharides,  vitamins,  sterols, tocopherol dan phycocyanins dan  juga peptida  bioaktif  dengan  fungsi  biologis seperti  antihypertension,  antithrombotic, antioxidant,  anticancer  dan  antimicrobial activities (Subagyo dan Fatichah, 2015).
Berdasarkan uraian diatas senyawa  bioaktif  yang  terdapat  dalam rumput  laut  berperan  penting  dalam menstimulus  sistem  imun  dan  bekerja sebagai antibakteri, antifungi serta antioksidan.  Oleh  karena  itu,  penting untuk  dilakukannya  penelitian  tentang potensi  agen  imunostimulan  rumput  laut dalam  modulasi  hemosit  udang  vaname ( Litopenaeus vannamei ).

## METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dila l ksa l na l ka l n  pa l da l bula l n Februa l ri - A l pril tahun 2023, dengan pengamatan  serta  pengambilan  data dilakukan di La l bora l torium Ba l la l i Ka l ra l ntina l Ika l n  Penga l nda l lia l n  Mutu  da l n Kea l ma l na l n Ha l sil Perika l na l n Ma l ta l ra l m.
Alat dan Bahan Penelitian ini menggunakan beberapa alat dan bahan diantaranya yaitu a l qua l rium,  pisa l u,  gunting,  pla l stik  hita l m, timba l nga l n a l na l litik, spuit insulin, mikroskop,  pinset,  ca l wa l n  petri,  objet gla l ss, ha l emocytometer ,  tisu,  a l era l tor, rota l ry  eva l pora l tor.  Sedangkan  bahan ba l ha l n  ya l ng  diguna l ka l n  yaitu  uda l ng va l na l me  ( Litopenaeus  vannamei ),  rumput la l ut  ( Ulva l sp., Sa l rga l ssum sp.,  da l n Euchema l sp.), a l ir, eta l nol, la l ruta l n giemsa l ,
meta l nol,  a l qua l des  dan a l ntikoa l gula l n (EDTA l ).

## Rancangan Penelitian
Ra l nca l nga l n A l ca l k Kelompok (RA l K)  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  4  perlakuan  dengan  3  ulangan. Ekstrak rumput laut yang digunakan yaitu Ulva l sp., Sa l rga l ssum sp., da l n Euchema l sp. yang disimbolkan dengan masing-masing perlakuan  UP,  SP  dan  EP.  Pemberian ekstrak  perlakuan  rumput  laut  dibuat menjadi beberapa dosis diantaranya yaitu perlakuan  satu  dengan  dosis  0,5  g, perla l kua l n  dua  dosis  1  g,  dan    perla l kua l n tiga dosis 2 g. Sedangkan kontrol nega l tif ta l npa l pena l mba l ha l n  ekstra l k  rumput  la l ut. Berikut  adalah  tabel  perlakukan  pada penelitian:
Tabel  1 .  Perlakuan  Pemberian  Ekstrak  Rumput  Laut  Pada  Udang  Vaname  dengan  dosis yang berbeda Perlakuan Ekstrak Rumput Laut Perlakuan Dosis Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3 UP 0,5 g 1 g 2 g SP 0,5 g 1 g 2 g EP 0,5 g 1 g 2 g K (-) 0 g 0 g 0 g Ketera l nga l n: UP : Pemberian ekstrak Ulva l sp.
EP : Pemberian ekstrak Euchema l sp. SP : Pemberian ekstrak Sa l rga l ssum sp.  K (-) : Tanpa pemberian ekstrak rumput laut

## Prosedur Penelitian

## Sampel Udang Vaname
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  udang  vaname ( Litopenaeus  vannamei )  yang  masih hidup dan segar.  Udang yang digunakan adalah  udang  yang  berumur  2  bulan dengan  berat  rata-rata  10-12  gram  dan panjang 4.30 cm.
Koleksi Sampel Rumput La l ut Rumput  la l ut  ya l ng  diguna l ka l n da l la l m  penelitia l n  ini  ya l itu Ulva l sp., Sa l rga l ssum sp.  da l n Euchema l sp.  Rumput la l ut  ya l ng  dia l mbil  dima l sukka l n  ke  da l la l m pla l stik hita l m, kemudia l n disimpa l n dila l bora l torium  untuk  dila l kuka l n  proses pencucia l n.  Proses  pencucia l n  dila l kuka l n
tiga l ka l li  ya l ng  perta l ma l mencuci  rumput la l ut  denga l n  a l ir  la l ut,  ya l ng  kedua l denga l n a l ir ta l wa l r, da l n ya l ng ketiga l denga l n a l qua l des steril.  Setela l h  dicuci,  sa l mpel  ditiriska l n da l n dikeringka l n di tempa l t ya l ng terlindung da l ri  sina l r  ma l ta l ha l ri  la l ngsung  sela l ma l 3-5 ha l ri.  Rumput  la l ut  ya l ng  suda l h  kering kemudia l n  di  potong  kecil-kecil  da l n diha l luska l n  denga l n  blender.  Rumput  la l ut ya l ng tela l h diha l luska l n kemudia l n disimpa l n di tempa l t ya l ng bersih.

## Ekstraksi Sampel Rumput Laut
Ketiga l jenis rumput la l ut ( Ulva l sp., Sa l rga l ssum sp.,  da l n Euchema l sp.)  ya l ng suda l h  dikoleksi  kemudia l n  diekstra l ksi. Ekstra l ksi mengguna l ka l n metode perenda l ma l n  (maserasi)  dima l na l setia l p
sa l mpel  rumput  la l ut  ya l ng  tela l h  ha l lus dima l sukka l n ke da l la l m ta l bung Erlenmeyer, dita l mba l hka l n  eta l nol    96%  denga l n perba l ndinga l n 1:10 da l n disha l ker sela l ma l 6 ja l m. Sela l njutnya l rumput la l ut itu disa l ring denga l n  mengguna l ka l n  kerta l s  sa l ring  a l ga l r diperoleh  supra l na l ta l n  ya l ng  bena l r-bena l r terpisa l h  da l ri  residunya l .  Sela l njutnya l la l ruta l n ya l ng dida l pa l t di rota l ry eva l pora l tor pa l da l suhu 50ºC sela l ma l 2 ha l ri. Kemudia l n ha l sil  da l ri  ekstra l k  ma l sing  ma l sing  rumput la l ut Ulva l sp. 500 ml, Sa l rga l ssum sp. 500 ml, da l n Euchema l sp. 500 ml disimpa l n di tempa l t ya l ng bersuhu dingin sa l mpa l i wa l ktu ya l ng a l ka l n diguna l ka l n.

## Aplikasi Ekstrak Rumput laut
Ekstrak rumput laut yang diperoleh  ditambahkan  ke  dalam  pakan udang  komersial  pakan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  berupa  pellet.
Pertama-tama pellet dihancurkan, selanjutnya  ditambahkan  ke  ekstrak rumput laut dengan masing-masing dosis 0.5%,  1%,  dan  2%  dicampur  sampai homogen.  Frekuensi  pemberian  ekstrak rumput laut  dilakukan 4 kali sehari yaitu jam 07.00, 11.30, 15.00 dan 21.00.
Analisis THC (Tota l l Ha l emosite Count) Pa l da l perhitunga l n hemosit dila l kuka l n denga l n ca l ra l meneteska l n hemolymph ke da l la l m ha l emositometer da l n dihitung  jumla l h  selnya l per  ml  diba l wa l h mikroskop  denga l n  pembesa l ra l n  40  ka l li. Penga l mbila l n hemolymph uda l ng dila l kuka l n  pa l da l ba l gia l n  pa l ngka l l pleopod pa l da l segmen  a l bdomina l l  deka l t  luba l ng genita l l denga l n mengguna l ka l n syringe 1 ml ya l ng  tela l h  diba l sa l hi  la l ruta l n  a l ntikoa l gula l n (EDTA l ).
Galmbar 1 . Haemositometer (alat untuk menghitung sel)
Sela l njutnya l dihitung denga l n mengguna l ka l n rumus menurut Ba l xha l ll dan Da l ishley (1973) ya l itu:
Total Hemosit = ∑ 𝐓𝐢𝐚𝐩 𝐒𝐞𝐥 ∑ 𝐓𝐨𝐭𝐚𝐥 x Jenis Sel x 𝟏𝟎 𝟒

## Analisis DHC
Diferensia l si hemosit a l ta l u diferensia l l  ha l emosite  count (DHC) dila l kuka l n denga l n ca l ra l hemolin diteteska l n pa l da l gla l ss  objek  da l n  dibua l t  ula l sa l n, kemudia l n dikeringka l n diuda l ra l . Sela l njutnya l prepa l ra l t  difiksa l si  denga l n metha l nol  sela l ma l 5-10  menit.  Kemudia l n dikeringka l n di uda l ra l kemba l li. Setela l h itu prepa l ra l t  direnda l m  da l la l m  la l ruta l n  giemsa l sela l ma l 5-10 menit, la l lu dicuci denga l n a l ir
menga l lir da l n dibia l rka l n kering. Sela l njutnya l dihitung denga l n mengelompokka l n sel hemosit ke da l la l m 3 tipe  sel  (gra l nula l r,  semigra l nula l r,  da l n hia l lin)  di  ba l wa l h  mikroskop  denga l n pembesa l ra l n  100  ka l li.  Tota l l  tipe  sel hemosit ya l ng dihitung a l da l la l h 100 sel, la l lu presenta l se  tia l p  jenis  sel  dan  dihitung denga l n mengguna l ka l n rumus Ba l xha l ll dan Da l ishley (1973) seba l ga l i berikut:
% Jenis Sel Hemosit = ∑ 𝐉𝐞𝐧𝐢𝐬 𝐒𝐞𝐥 𝐇𝐞𝐦𝐨𝐬𝐢𝐭
𝐓𝐨𝐭𝐚𝐥 𝐇𝐞𝐦𝐨𝐬𝐢𝐭 x 𝟏𝟎𝟎

## Perhitungan Panjang dan Bobot
Pengukuran  panjang  dan  berat udang  dilakukan  sebelum  diberi  ekstrak rumput  laut  dan  sesudah  diberi  ekstrak
rumput laut. Untuk pertambahan panjang udang diukur dari mulai antennula sampai keujung  telson.  Sementara  pertambahan berat udang dilakukan dengan menimbang bobot  udang.    Pengukuran  pertumbuhan berat udang menggunakan rumus Effendie (2003):
W m = W t -W o Keterangan : W m  : Pertumbuhan berat mutlak (g) W t : Berat akhir W o : Berat awal
Pengukuran  pertumbuhan  panjang  udang rumus Effendie (2003):
L m = L t –L a Keterangan : L m  : Pertumbuhan panjang mutlak (cm) L t : Panjang akhir L a : Panjang awal

## HASIL DAN PEMBAHASAN THC dan DHC
Hemosit  berperan  penting  dalam sistem  pertahanan  tubuh  pada  udang (Battistella et al., 1996). Jumlah total dan diferensiasi  hemosit  akan  menentukan kondisi  kesehatan  pada  udang  vaname (Jasmine et  al., 2018).  Berdasarkan  hasil THC  pada  tabel  2  diketahui  bahwa hemosit dengan jumlah tertinggi terdapat pada perlakukan EP3. Pemberian perlakuan ekstrak rumput laut Eucheuma sp. dengan konsentrasi 2% (EP3) mampu memberikan  pengaruh  total  hemosit tertinggi  yaitu  sebesar  12.75x10 4 cell/ml sedangkan  jumlah  total  hemosit  terendah pada  perlakuan  kontrol  sebesar  5.25x10 4 cell/ml.  Hasil  THC  udang  vaname penelitian  ini  dapat  dilihat  pada  tabel  2 sebagai berikut:
Ta l bel 2. Jumla l h THC pa l da l uda l ng va l na l me ( Litopena l eus va l nna l mei )
Perla l kua l n Ra l ta l -Ra l ta l THC K(-) 5.25 x 10 4 cell/ml UP1 7.18 x 10 4 cell/ml UP2 7.55 x 10 4 cell/ml UP3 8.25 x 10 4 cell/ml SP1 7.45  x 10 4 cell/ml SP2 8.25 x 10 4 cell/ml SP3 9.15 x 10 4 cell/ml EP1 9.35 x 10 4 cell/ml EP2 9.75 x 10 4 cell/ml EP3 12.75 x 10 4 cell/ml
Ketera l nga l n: UP : Pemberian ekstrak Ulva l sp.
1,2,3 : Dosis ekstrak rumput laut SP : Pemberian ekstrak Sa l rga l ssum sp. K (-) : Kontrol negatif EP : Pemberian ekstrak Euchema l sp.
Jumlah total hemosit yang berbeda menunjukkan  perbedaan  respon  dari pemberian ekstrak rumput laut pada udang vaname. Konsentrasi masing-masing ekstrak  rumput  laut  yang  tinggi  selaras dengan  tingginya  jumlah  total  hemosit udang  vaname  dibandingkan  dengan hemosit  udang  yang  tidak  diberikan ekstrak  rumput  laut  (Kontrol)  sehingga ekstrak  rumput  laut  berperan  sebagai imunuostimulan  bagi  udang  vaname. Penelitian  ini  sejalan  dengan  hasil
penelitian  dari  Kilawati et  al., (2021) bahwa  pemberian  ekstrak Eucheuma cottonii dan Gracillaria  verrucossa memberikan pengaruh terbaik pada sistem imun non spesifik udang vaname melalui parameter THC, DHC, Enzim superoksida dismutase dan RB ( Respiratory Brust ). Peningkatan  jumlah  total  hemosit sebagai repson dari meningkatnya kekebalan udang ketika ada patogen yang masuk  dan  ekstrak  rumput  laut  berperan sebagai imunostimulan bagi udang
vaname  untuk  menghambat  patogen penyebab  penyakit  pada  udang  (Kilawati e t  al., 2021;  Kreckhoff et  al., 2019). Peningkatan  ini  diduga  sebab  terdapat senyawa  bioaktif  serta  makro  dan mikronutrien  dalam  rumput  laut  seperti protein,  peptide,  polifenol,  asam  lemak, pigmen  dan  mineral  (Chojnacka,  2015; Silva et al., 2020).
Senyawa  bioaktif  yang  terdapat dalam rumput laut berperan penting dalam menstimulus  sistem  imun  dan  bekerja sebagai antibakteri, antifungi serta antioksidan  (Biris-Dorhoi et  al., 2020). Pemanfaatan kandungan senyawa bioaktif seperti  astaxanthin  yang  bersumber  dari rumput laut dalam bentuk pakan meningkatkan  respon  imun,  antibakteri dan  antioksidan  yang  sangat  kuat  pada udang  vaname  (Mansour et  al., 2022). Selain itu, penelitian oleh Kreckhoff et al.,
(2019)  menyebutkan  bahwa K.alvarezii mengandung polifenol yang tinggi sehingga dapat digunakan sebagai imunostimulan untuk meningkatkan
sistem  imun  termasuk  pada  ikan. Keberadaan imunostimulan terbukti mampu menghambat infeksi dari berbagai penyakit  pada  udang  seperti infectious myonecrosis (IMN), White spot syndrome virus (WSSV),  and Vibrio  harveyi bacteria (Muahiddah et al., 2022).
Pengaruh  imunostimulan  ekstrak rumput  laut  pada  udang  vaname  dapat diketahui  juga  melalui  diferensiasi  sel Perkembangan  sel  hemosit  diketahui melaui  perhitungan  DHC.  Terdapat  tiga jenis  diferensiasi  sel  hemosit  yaitu  sel hialian, semigranular dan granular (Battistella et  al., 1996;  Ching,  2019). Hemosit  Distribusi  ketiga  subpopulasi hemosit  berbeda  antar  spesies  krustasea. Subpopulasi  hemosit  yang  berbeda  pada berbagai krustasea menunjukkan berbagai aktivitas kekebalan tubuh yang bervariasi (Liu e t al., 2021). Diferensiasi sel hemosit pada  udang  va l na l me  yang  diberikan ekstrak rumput laut ( Litopena l eus va l nna l mei )  dapat  dilihat  pada  tabel  3 sebagai berikut:
Ta l bel 3. Persenta l se DHC pa l da l uda l ng va l na l me ( Litopena l eus va l nna l mei ) Perlakuan Jenis Hemosit Hialin Semi Granular Granular K(-) 0.37% 0.32% 0.31% UP1 0.38% 0.35% 0.27% UP2 0.39% 0.34% 0.27% UP3 0.40% 0.38% 0.22% SP1 0.41% 0.35% 0.22% SP2 0.43% 0.35% 0.22% SP3 0.44% 0.35% 0.21% EP1 0.46% 0.33% 0.21% EP2 0.48% 0.31% 0.21% EP3 0.51% 0.26% 0.23% Ketera l nga l n: UP : Pemberian ekstrak Ulva l sp.
1,2,3
: Dosis ekstrak Rumput laut SP
: Pemberian ekstrak Sa l rga l ssum sp. K (-) : Kontrol negative
EP
: Pemberian ekstrak Euchema l sp.
Berdasarkan  tabel  3  diketahui bahwa masing-masing perlakuan
ekstrak  rumput  laut  menunjukkan perbedaan  jumlah  diferensiasi  ketiga jenis  sel  hemosit.  Sel  hialin  ditemukan paling  banyak  pada  perlakuan  EP
sebesar  0.51%  sedangkan  sel  granular dan  semigranular  pada  perlakuan  UP dengan  jumlah  0.38%  dan  0.27% berurutan. Hal ini menunjukkan bahwa pada ekstrak rumput laut Eucheuma sp. berperan  dalam  pembentukan  lebih
banyak  sel  hialin  sedangkan  ekstrak rumput  laut Ulva sp.  berperan  lebih banyak  pada  pembentukan  sel  granular dan semigranular.
Eucheuma sp.  dan Ulva sp. merupakan  makroalga  yang  memiliki kandungan  berbagai  jenis  senyawa bioaktif  untuk  meningkatkan  sistem kekebalan  tubuh  udang. Eucheuma sp. termasuk  alga  merah  ( Rhodophyta ) yang  mengandung  40-50%  agar  dan karagenan ( Iota-carrageenan dan kappa carrageenan) dengen  efek  farmakologi sebagai  antioksidan  (Carpena et  al.,
2022; Menaa et al., 2021).
Ulva sp.  termasuk  alga  hijau ( chlorophyta ) memiliki kandungan protein 9–26% lebih banyak dibandingkan alga coklat (Biris-Dorhoi
et  al., 2020)  serta  polisakarida  (ulvan) yang  bersifat  sebagai  antioksidan  (El- Beltagi et  al., 2022).  Kedua  jenis makroalga  ini  memiliki  kandungan senyawa  bioaktif  sebagai  antioksidan yang  diduga  menjadi  imunostimulan dalam  pembentukan  diferensiasi  sel hemosit udang.
Diferensiasi  sel  hemosit  pada udang  yang  diberikan  imunostimulan
ekstrak rumput laut (tabel 3)
menunjukkan  bahwa  sel  hialin  lebih banyak dari sel granular dan semigranular.  Hal  ini  serupa  dengan penelitian  oleh  Chen et  al., (2015) bahwa  udang  vanamei  yang  direndam dalam air laut yang mengandung ekstrak Gracilaria  tenuistipitata dan  diberikan stres ammonia menunjukkan pemulihan lebih  awal  berdasarkan  parameter kekebalan  dan  jumlah  sel  hialian  lebih banyak  dibandingkan  sel  granular  dan semigranular.  Pembentukan  sel  hialin dan  granular  berperan  penting  pada sistem kekebalan tubuh udang melawan bakteri  gram  negative  seperti  bakteri Vibrio (Jian-An Xian et al., 2017).

## Pertumbuhan Udang Vanamei
Pengaruh  ekstrak  rumput  laut terhadap pertumbuhan  udang  dapat diamati  dan  diukur  melalui  pengukuran penambahan  panjang  dan  bobot  udang. Panjang dan bobot udang diukur sebelum dan sesudah diberikannya ekstrak rumput laut Eucheuma sp., Ulva sp. dan Sargasum sp. yang dapat dilihat pada gambar 2 dan 3 sebagai berikut:
Gambar 2. Bobot udang vaname sebelum dan sesudah diberikan ekstrak rumput laut
Berdasarkan hasil perhitungan bobot udang diketahui bahwa bobot udang tertinggi pada  perlakuan  EP3.  Pemberian  ekstrak  rumput  laut Eucheuma sp.  sebanyak  2% memberikan pengaruh pada pertumbuhan dan peningkatan bobot udang hingga mencapai 18.3 gr.
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 K UP1 UP2 UP3 SP1 SP2 SP3 EP1 EP2 EP3 B er at ( gr ) BERAT AWAL BERAT AKHIR
Gambar 3. Pertumbuhan panjang badan udang vaname sebelum dan sesudah diberikan ekstrak rumput laut. Panjang udang setelah pemberian ekstrak rumput laut tertinggi pada  perlakuan  EP3  mencapai  9,2  cm. berdasarkan  hasil  pengukuran  panjang dan  bobot  udang  maka  pemberian ekstrak Eucheuma sp.  sebanyak  2% memberikan pengaruh peningkatan pertumbuhan  terbaik  pada  udang.  Hal ini menunjukkan bahwa adanya pengaruh positif pada pemberian ekstrak  rumput  laut Eucheuma sp. terhadap  pertumbuhan  udang  vaname. Sejalan dengan penelitian (Sasmaya dan Ridlo,  2013)  menunjukkan  bahwa suplementasi G.verrucosa sebanyak 2% pada pakan udang meningkatkan panjang  udang  131,43%  dan  32,50% berat udang.
Berdasarkan  gambar  2  dan  3 diketahui pula bahwa perlakuan dengan pemberian  ekstrak  ketiga    rumput  laut Sargasum sp., Eucheuma sp.  dan Ulva sp. memberikan
peningkatan pertumbuhan  panjang  dan  berat  udang dibandingkan dengan
kontrol.
Penelitian  oleh  (Suantika et  al., 2018) membuktikan  bahwa  kandungan  dalam diet  rumput  laut  mengandung  energi sebanyak  137  kkal/g  (lebih  tinggi dibandingkan kontrol), kandungan lipid 1,5% (lebih tinggi dibandingkan
kontrol)  sehingga  mampu  menyuplai energi sebanyak 9 kkal/g serta kandungan  protein  0,5%  lebih  tinggi dibandingkan kontrol.
Selain  itu,  kandungan  bioaktif dalam  ekstrak  rumput  laut  seperti pigmen  xantopil  dan  karotenoid,  Asam lemak  tak  jenuh  ganda  (PUFA), kandungan  fenolik,  tannin,  peptida, lipid,  enzim,  vitamin,  carbohydrates, dan terpenoid (Biris-Dorhoi et al., 2020; Menaa et al., 2021) diketahui memiliki kemampuan  dalam  meningkatkan  laju pertumbuhan, mengurangi stres
oksidatif dan amonia,
serta meningkatkan  kekebalan  udang  (Zhao et al., 2022).

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian maka dapat  disimpulkan  bahwa  pemberian ekstrak  rumput  laut Sargasum sp.,
Eucheuma sp.  dan Ulva sp.  memberikan pengaruh dalam sistem pertahanan udang melalui  parameter Total  Haemocyte Count (THC) dan Differential Haemocyte
Count (DHC) serta peningkatan pertumbuhan  panjang  dan  berat  udang. Penggunaan  ekstrak  rumput  laut  sebagai immunostimulan  dengan  konsentrasi  2% memberikan  pengaruh  positif  dalam modulasi  hemosi  serta  pertumbuhan udang vaname.

## SARAN
Perlu  adanya  penelitian  lanjutan atau uji coba skala lapangan yaitu aplikasi ekstrak rumput laut pada budidaya udang vaname sistem intensif dalam meningkatkan  sistem  imun  dan  bobot
0 2 4 6 8 10 K UP1 UP2 UP3 SP1 SP2 SP3 EP1 EP2 EP3 P an jan g (c m ) PANJANG AWAL PANJANG AKHIR
udang  vaname  yang  berdasarkan  pada dosis ekstrak rumput laut pada penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti mengucapkan terima kasih  kepada  Balai  Karantina  Ikan Pengendalian  Mutu  dan  Keamanan  Hasil
Perikanan  Mataram,  Fakultas  Ilmu  dan Teknologi  Hayati  Universitas  Teknologi Sumbawa  dan  semua  pihak  yang  telah banyak  membantu  baik  dalam  bentuk dukungan  maupun  kritik  dan  saran  yang membangun sehingga penelitian ini dapat terselaesaikan dengan baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Battistella, S., Bonivento, P., & Amirante, G.A (1996) Hemocytes and Immunological Reactions in Crustaceans. Italian  Journal  of
Zoology . 63 (4),  337–343.  https://do i.org/10.1080/11250009609356156.
Biris-Dorhoi, E.S., Michiu, D., Pop, C.R.,
Rotar, A.M., Tofana, M., Pop, O.L., Socaci,  S.A.,  &  Farcas,  A.C  (2020)
Macroalgae  -  A  Sustainable  Source of Chemical Compounds with
Biological Activities. Nutrients . 12 (10), 1–23. https://doi. org/10.3390/nu12103085.
Blaxhall,  P.C  &  Dalishley  (1973)  The Haemothological  Assessment  of The  Health  of  Fresh  Water  Fish.  A Review  of  Selected  Literature.
Journal of Fish Biology . 4 : 593-604.
Carpena,  M.,  Garcia-Perez,  P.,  Garcia- Oliveira, P., Chamorro, F., Otero, P., Lourenço-Lopes, C., Cao, H., Simal- Gandara,  J.,  &  Prieto,  M.A.  2022.
Biological  Properties  and  Potential of  Compounds  Extracted  from  Red Seaweeds. In Phytochemistry Reviews (Vol. 0123456789). https://doi.org/10.100 7/s11101-022- 09826-z.
Chen,  Y.Y.,  Chen,  J.C.,  Lin,  Y.C.,  Yeh,
S.T.,  &  Huang,  C.L  (2015)  White Shrimp Litopenaeus  vannamei that have Received Gracilaria tenuistipitata Extract  show  Early Recovery  of  Immune  Parameters
after  Ammonia  Stressing . Marine Drugs , 13 (6),  3606–3624.  https://do i.org/10.3390/md13063606.
Ching, C.A (2019) Understanding Shrimp Hemocytes. Global  Aquaculture
Advocate . January 28 , 1–9.
Chojnacka.,    Izabela,  M.,  Katarzyna (2015)  Algae  as  Production  System of Bioactive
Compounds.
Engineering  in  Life  Sciences .  https:
//doi.org/10.1002/elsc.201400191.
Effendie,  H  (2003)  Telaah  Kualitas  Air: bagi  Pengelolaan  Sumber  Daya  dan Lingkungan  Perairan.  Gramedia. Jakarta. 258 hal.
El-Beltagi, H.S., Mohamed, A.A.,
Mohamed,  H.I.,  Ramadan,  K.M.A., Barqawi,  A.A.,  &  Mansour,  A.T (2022)  Phytochemical  and  Potential Properties  of  Seaweeds  and  Their Recent  Applications:  A  Review. Marine Drugs . 20 (6). https://doi.org /10.3390/md20060342.
Jasmine, B.J., Parimala, M.S., & Innocent, X.B (2018) Identification and
Classification of Hemocytes from the
Fresh  Water  Prawn,  Cari  dina Weberi. International  Journal  of Research  and  Analytical  Reviews .
5 (4), 406–410. www.ijrar.org
Jian-An Xian, Xiu-Xia Zhang, Dong-Mei Wang,  Jun-Tao  Li,  Pei-Hua  Zheng, Y.P.L  (2017)  Various  Cellular Responses  of  Different  Shrimp
Haemocyte Subpopulations to Lipopolysaccharide Stimulation. Fish  &  Shellfish  Immunology. https://doi.org/https://doi.org/10.101 6/j.fsi.2017.08.025. Kilawati,  Y.,  Arsad,  S.,  Islamy,  R.,  & Solekah, S.J (2021) Immunostimulant from Marine Algae  to  Increase  Performance  of Vanamei Shrimp ( Littopenaeus vannamei ). Journal  of  Aquatic Biology  &  Fisheries , 5 (6),  1–10. https://doi.org/10.36648/2581804X. 5.6.26.
Kreckhoff, R.L., Ngangi, E.L.A., Undap,
S.L.,  &  Kusen,  D.J  (2019)  Crude
Extracts  of Kappaphycus  alvarezii Algae Cultivated in Several Seaweed Production Centers in North Sulawesi, Indonesia as Immunostimulant. AACL  Bioflux , 12 (2), 678–686.
Lee, M.H. & Shiau, S.Y (2004) Vitamin E Requirements  of  Juvenil  Grass Shirmp, P.  monodon and Effects  on Nonspecific  Immune  Responses. Fish and Shellf.
Liu, M., Jun., Liu, S., & Liu, H.P (2021) Recent  Insights  Into  Hematopoiesis in  Crustaceans. Fish  and  Shellfish Immunology  Reports , 2 ,  100040. https://doi.org/10.1016/j.fsirep.2021. 100040.
Mansour, A.T., Ashour, M., Abbas, E.M., Alsaqufi,  A.S.,  Kelany,  M.S.,  El-
Sawy, M.A., & Sharawy, Z.Z (2022) Growth Performance, Immune-
Related  and  Antioxidant  Genes
Expression, and Gut Bacterial Abundance  of  Pacific  White  Leg Shrimp, Litopenaeus vannamei, Dietary  Supplemented  With  Natural Astaxanthin. Frontiers in Physiology . 13 (June), 1–12.
https://doi.org/10.3389/fphys.2022.8
74172.
Menaa, F., Wijesinghe, U.,
Thiripuranathar, G., Althobaiti,
N.A., Albalawi, A.E., Khan, B.A., &
Menaa,  B  (2021)  Marine  Algae- Derived  Bioactive  Compounds:  A New  wave  of  Nanodrugs. Marine Drugs . 19 (9),  1–36.  https://doi.org/ 10.3390/md19090484.
Muahiddah, N., Affandi, R.I., &
Diamahesa,  W.A  (2022)  The  Effect of  Immunostimulants  from  Natural Ingredients  on  Vanamei  Shrimp ( Litopenaeus Vannamei ) in Increasing  Non-Specific  Immunity
To  Fight  Disease. Journal  of  Fish Health . 2 (2),  90–96.  https://doi.org/ 10.29303/jfh.v2i2.1462.
Putri,  F.M.,  Sarjito,  &  Suminto  (2013) Pengaruh Penambahan Spirulina sp. dalam Pakan Buatan terhadap Jumlah Total Hemosit dan Aktivitas Fagositosis Udang Vaname ( Litopenaeus vannamei ). Jurnal Manajemen  dan  Teknologi  Akua- kultur . 2(1):102-112.
Sasmaya  E.S.,  &  Ridlo,  A  (2013)  Studi Pemanfaatan  Ekstrak  Rumput  Laut Gracilaria Verrucosa Sebagai Suplemen Pakan untuk Meningkatkan  Pertumbuhan  Udang Putih  ( Litopenaeus  Vannamei )  dan
Mengendalikan  Populasi  Bakteri
Vibrio. Pengaruh Konsentrasi
NaOH  Yang  Berbeda  Terhadaap Mutu  Agar  Rumput  Laut  Gracilaria Verrucosa , 2 (1), 120–126.
Silva,  A.,  Silva,  S.A.,  Carpena,  M., Garcia-Oliveira,  P.,  Gullón,  P., Barroso,  M.F.,  Prieto,  M.A.,  &
Simal-Gandara, J (2020) Macroalgae as a Source of Valuable Antimicrobial Compounds:
Extraction and Applications . Antibiotics , 9 (10),  1–41.  https://doi. org/10.3390/antibiotics9100642.
Siswati  (2021)  Kinerja  Imunostimulan Rumput  Laut Codium  Hubbsii pada
Dosis  yang  Berbeda  Terhadap
Peningkatan Respon Kekebalan
Tubuh  Udang  Windu  ( Penaeus monodon Fabricus, 1978) yang Diuji
Tantang  dengan  Bakteri Vibrio harveyi . Thesis. Universitas
Hasanudin.
Suantika, G., Situmorang, M.L., Khakim, A.,  Wibowo,  I.,  Aditiawati,  P., Suryanarayan, S., Nori, S.S., Kumar, S.,  &  Putri,  F  (2018)  Effect  of  Red Seaweed Kappaphycus  alvarezii on Growth,  Survival,  and  Disease Resistance  of  Pacific  White  Shrimp
Litopenaeus vannamei Against
Vibrio harveyi in the Nursery Phase.
Journal  of  Aquaculture  Research  & Development . 09 (02).  https://doi.org
/10.4172/2155-9546.1000523.
Subagiyo., & Fatichah, D.I (2015) Potensi Hot  Water  Extract  Rumput  Laut Caulerpa sp. dan Sargassum sebagai
Komponen Immunonutrisi pada Budidaya Udang Vannamei ( Litopenaeus vanamei ). Jurnal Kelautan Tropis . 18(3):154–159.
Zhao,  X.,  Wang,  G.,  Liu,  X.,  Guo,  D., Chen, X., Liu, S., Bi, S., Lai, H., Zhu, J., Ye, D., Wang, H., & Li, G (2022) Dietary Supplementation of Astaxanthin Increased Growth, Colouration, the Capacity of Hypoxia and Ammonia Tolerance of Pacific  White  Shrimp (Litopenaeus vannamei) .  Aquaculture  Reports. https://doi.org/10.1016/j.aqrep.2022. 101093 .