(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 122-127
Uji Efektivitas Diuretik Ekstrak Daun Afrika Vernonia amygdalina pada Tikus Putih Jantan Rattus norvegicus
Venly Y.D. Warouw 1* , Douglas N. Pareta 1 , Jeane Mongie 1 , Vlagia Paat 1
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
* Penulis Korespondensi yohanes021197@gmail.com DIterima : 12 Desember 2019  Disetujui : 20 Januari 2020

## ABSTRAK
Diuretik  adalah  obat  yang  dapat  meningkatkan  volume  urin  baik  pembentukan  maupun  volumenya. Salah satu tanaman yang memiliki potensi sebagai diuretik yaitu daun afrika ( Vernonia amygdalina ). Tujuan penelitian ini untuk mengetahui efek diuretik ekstrak etanol daun afrika pada tikus putih jantan. Hewan  uji  sebanyak  15  ekor  tikus  putih  jantan  yang  dibagi  menjadi  4  kelompok  perlakuan  yang dipuasakan selama 24 jam, kelompok I kontrol  negatif diberi suspense Na CMC 0.5%, kelompok II kontrol  positif  diberi  suspense  furosemid  1,139  mg/226gBB,  kelompok  III  diberi  suspensi  ekstrak dosis 20 mg/kgBB, kelompok IV diberi suspensi esktrak dosis 40 mg/kgBB dan kelompok V diberi suspensi ekstrak dosis 80 mg/kgBB. Sebelum diberikan perlakuan hewan diinduksi air hangat dengan suhu 20-30˚C setelah itu diberikan ekstrak. Hewan uji diletakan didalam metabolic cage . Data yang didapatkan diuji ANOVA dengan tingkat kepercayaan 95% apabila terdapat perbedaan yang bermakna dilanjutkan pada uji Tukey. Analisis data menunjukan adanya perbedaan yang signifikan dengan (p < 0,05) antara setiap perlakuan. Berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun afrika memiliki efek diuretik pada tikus putih jantan.
Kata kunci : diuretik, daun afrika, ekstrak, tikus putih.

## ABSTRACT
Diuretics are drugs that can increase urine volume both in formation and volume. One of the plants that have potency as a diuretic  is  African leaves ( Vernonia amygdalina ). The purpose  of this study  was to determine  the  diuretic  effect  of  ethanol  extracts  of  African  leaves  in  male  white  rats. Test  animals  as many as 15 male white rats were divided into 4 treatment groups which were fasted for 24 hours, group I was given  negative control CMC Na 0.5%, positive  control group II  was given suspense furosemide 1,139 mg / 226gBB, group III was given a suspension extract of dose 20 mg / kg body weight, group IV was given an extract suspension of 40 mg / kg body weight and group V was given an extract suspension dose of 80 mg / kg body weight. Before being given the treatment of animals induced warm water with a temperature of 20-30˚C after which the extract was given. Test animals are placed in a metabolic cage. The  data  obtained  were  tested  for  ANOVA  with  a  confidence  level  of  95%  if  there  were  significant differences  followed  by  the  Tukey  test.  Data  analysis  showed  a  significant  difference  with  (p  <0.05) between  each treatment. Based on these results it can be concluded that the  ethanol  extract of African leaves has a diuretic effect on male white rats.
Keywords : diuretic, african leaves, extract, white rats.

## PENDAHULUAN
Diuretik adalah obat yang dapat meningkatkan  volume  urin  baik  pembentukan maupun  volumenya.  Diuretik  memiliki  fungsi untuk memobilisasi cairan edema yaitu
mengubah  keseimbangan  cairan  ektrasel kembali  normal  [1].  Penggunaan  diuretik mampu  mengatasi  penyakit  gagal  jantung kongesti,  sindrom  nefritis,  sirosis,  gagal ginjal,  hipertensi  [2]  edema,  diabetes insipidus, batu ginjal, dan hiperkalsemia [3].

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 122-127
Organisasi  Kesehatan  Dunia  (WHO) memperkirakan  bahwa  80%  dari  orang-orang di  negara-negara  berkembang  di  dunia mengandalkan obat-obatan
tradisional (Wardani and Adrianta , 2013). Beberapa alasan penggunaan  obat  tradisional  dikarenakan banyaknya efek samping dari penggunaan obat sintetik,  obat-obat  diuretik  sintetik  seperti furosemid  memiliki  efek  samping  anatara  lain hipokalemia
(Kekurangan
ion K + ), hiperurisemia  (peningkatan  kadar  asam  urat), hiperkalsemia  (peningkatan  kadar  kalsium dalam serum), gangguan toleransi glukosa dan diabetes [1].
Salah satu tanaman yang memiliki potensi sebagai  diuretik  yaitu  daun  afrika  ( Vernonia amygdalina ).  Daun  afrika  adalah  salah  satu tanaman  yang  digunakan  sebagai  obat  di indonesia  khususnya  didaerah  sulawesi  dan papua  penggunaannya  dengan  cara  diambil daun yang tidak terlalu  muda dan tidak terlalu tua  lalu  direbus,  setelah  itu  air  rebusan  daun afrika tersebut diminum.
Penelitian  terdahulu  yang  dilakukan  oleh
[4]  bahwa  daun  dari Vernonia  amygdalina mengandung  senyawa  bioaktif  yaitu  saponin, alkaloid,  terpen,  steroid,  coumarin,  alkaloid, flavonoid,  asamfenolik,  lignans,  xanthone, antrakuino, dan tanin. Senyawa yang memiliki manfaat sebagai diuretik adalah flavonoid  dan alkaloid.

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini di lakukakan di Laboratorium  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Kristen
Indonesia Tomohon, yang  di  laksanakan pada bulan Oktober sampai dengan November 2019.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  kandang  diuretik,  aluminium  foil, timbangan kolegram, timbangan analitik, gelas ukur,  tissue,  label,  pipet,  batang  pengaduk, spatula,  vial,  toples  kaca,  sonde  oral,  sarung tagan,  masker,  kertas  saring,  kadang  tikus,
mortar,  stampler,  dan vaccum  rotary evaporatory.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah simplisia daun afrika yang berasal dari  daerah  kota  tomohon,  etanol  70%, furosemid  40  mg,  aquadest,  CMC  Na ( natrium carboxymethyl cellulose ) 0,5%, dan hewan uji yang digunakan pada penelitian ini adalah  tikus  putih  jantan  sebanyak  15  ekor, dengan berat rata-rata 200 gr.

## Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental dengan rancangan acak lengkap  (RAL)  dimana  semua  aspek  harus homogen  kecuali  perlakuan.  Hewan  uji sebanyak 15 ekor tikus jantan dibagi menjadi 5  kelompok  perlakuan  dengan  3  kali pengulangan.
1. Perlakuan 1 : kontrol negatif, diberi suspensi Na CMC.
2. Perlakuan 2 : kontrol positif, diberi furosemid
3. Perlakuan 3 : diberi dosis ekstrak daun afrika 20 mg/kgBB
4. Perlakuan 4 : diberi dosis ekstrak daun afrika 40 mg/kgBB
5. Perlakuan  5 :  diberi  dosis  ekstrak  daun afrika 80 mg/kgBB

## Prosedur Penelitian
1. Persiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  tikus  putih  jantan berumur 3 bulan yang sudah diaklimatisasi selama 1 minggu
sebanyak  15  ekor,  dan  dikelompokan menjadi  5  kelompok  percobaan  setiap kelompok terdiri dari 3 ekor tikus.
2. Pembuatan Ekstrak Daun Afrika
Maserasi  dilakukan  selama  3  ×  24  jam sambil sesekali diaduk pada hari ketiga maserat disaring menggunakan kertas saring  sehingga  mendapatkan  filtrat  I. Maserat yang telah disaring dimaserasi lagi selama 3 × 24 jam pada hari keenam maserat disaring sehingga mendapatkan

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 122-127
filtrat II. Selanjutnya dilakukan pemekatan  menggunakan rotary  vacuum evaporator pada  suhu  40-50˚C  untuk mendapatkan ekstrak kental.
3. Pembuatan Larutan Na CMC 1 %
Larutan  Na  CMC  dibuat  dengan  cara melarutkan  1  gr  Na  CMC  dalam  10  ml aquades  panas  lalu  diaduk  sampai homogen, kemudian ditambahkan aquades sampai 100 ml.
4. Pembuatan Larutan Uji Furosemid. Larutan  furosemid  dibuat  dengan  cara menimbang  17,085  mg  paracetamol  dan dilarutkan  dengan  larutan  Na  CMC  1  % sampai  10  ml.  Dosis  furosemid  untuk manusia : 40 mg, rata-rata berat badan orang indonesia : 50 kg, konversi manusia (70 kg) ke tikus (200 gr) : 0,018. Perhitungan dosis untuk tikus dengan BB
Perlakuan 2 (positif) : 1,139 mg/2 ml Perlakuan 3 : volume dosis 0,4 ml Perlakuan 4 : volume dosis 0,9 ml Perlakuan 5 : volume dosis 1,8 ml
8.  Perlakuan Hewan Uji Pengujian  diuretik  dilakukan  dengan cara  hewan  uji  diinduksi  air  hangat dengan suhu sekitar 20-30˚C setelah 30 menit  diberikan  perlakuan  ekstrak dengan dosis 20 mg/kgBB, 40 mg/kgBB, 80 mg/kgBB kemudian tikus dimasukan  kedalam  kandang  diuretik atau metabolic cage dan diamati selama
12 jam.

## Analisis Data
Persen diuretik dihitung dengan cara : % Analgesik = AUCp−AUCk x 100 % AUCk 226 yaitu :
= 40 mg x (70/50) x 0,018
= 1,008 mg/200 gr tikus
=228/200 x 1,008 mg
= 1,13 x 1,008 mg
= 1,139 mg/228 gr tikus
5. Pembuatan  Larutan  Uji  Ekstrak  Daun Afrika 1 %
Larutan uji ekstrak dengan konsentrasi 1% dibuat  dengan  cara  melarutkan  1  gr ekstrak  dengan  Na  CMC  1%  sampai  100 ml.
6. Dosis Ekstrak Daun Afrika 20 mg/kgBB = 4 mg
40 mg/kgBB = 8 mg
80 mg/kgBB = 16 mg
Dosis  dibuat  dengan  rumus  Thompson
(1985) dalam Susanty et al ., (2014) : 𝑫 𝒙 𝑩𝑩 𝑽 =
𝑪 Ket : V  = volume (ml)
D  = Dosis (mg/kgBB) BB = Berat tikus (kg) C  = konsentrasi (mg/ml)
7. Pemberian Zat Uji
Perlakuan 1 (negatif) : Na CMC 2 ml
Ket : AUCp = AUC tiap konsentrasi AUCk = AUC control negatif
Untuk  melihat  adanya  perbedaan  efek diuretik  setiap  perlakuan,  data  dianalisis menggunakan  ANOVA  dengan  tingkat kepercayaan 95 %.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini,  sampel  daun  afrika diambil  sebanyak  500  kg  dibersihkan  lalu dimaserasi  dan  disaring.  Hasil  maserasi kemudian  dievaporasi  dan  mendapatkan ekstrak kental sebanyak 45 gram.
Larutan  uji  ekstrak  dibuat  dengan  cara melarutkan 1 gr ekstrak ke  dalam Na CMC 1 %  sampai  100  ml.  Larutan  uji  furosemid dibuat  dengan  cara  melarutkan  paracetamol 17,085 mg dalam larutan Na CMC sampai 10 ml.  Dari  hasil  pengamatan  terlihat  larutan ekstrak daun afrika berwarna hijau kehitaman sedangkan  larutan  uji  furosemid  berwarna putih keruh dan Na CMC berwarna bening.

## Hasil Uji Diuretik
Hasil  uji  efek  diuretik  menggunakan  5 perlakuan, setelah dilakukan pengujian maka

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 122-127
didapatkan  data  yang  dapat  dilihat  pada  tabel berikut :
Tabel  1.  Data  urin  kumulatif  tiap  waktu pengamatan  (ml)  pada  masing- masing kelompok perlakuan.
Data  hasil  pengamatan  volume  urin kumulatif  selama  12  jam  mengambarkan kenaikan  volume  urin  secara  keseluruhan selama  waktu  pengamatan  pada  setiap perlakuan.  Berdasarkan  hasil  pengamatan pemberian  ekstrak  daun  afrika  dan  furosemid dapat  meningkatan  volume  urin  pada  tikus putih  jantan  dapat  dilihat  pada  Tabel.  1, dijelaskan bahwa pemberian sedian uji berupa ekstrak  daun  afrika  dan  furosemid  dapat meningkatkan  volume  urin  dengan  rata-rata 8,60  ml  sedangkan  kelompok  yang  diberi perlakun  yaitu  ekstrak  20  mg/kgBB  memiliki rata-rata  peningkatan  volume  urin  5,23  ml, kelompok  perlakuan  40  mg/kgBB  memiliki rata-rata peningkatan volume urin 6,77 ml dan kelompok  perlakuan  80  mg/kgBB  memiliki rata-rata peningkatan volume urin 6,03 ml.
Gambar 1. Kurva hubungan waktu pengamatan  (t)  terhadap  volume  urin kumulatif (ml) setelah perlakuan. Untuk melihat perbedaan efek diuretik pada masing-masing perlakuan pada jam 1 sampai 6, 6 sampai 12 dan 1 sampai 12
dapat  dilihat  pada  Tabel  2.  rata-rata  volume urin.
Tabel  2.  Rata-rata  volume  urin  dari  jam  1 sampai  6,  6  sampai  12  dan  1 sampai  12  pada  setiap  kelompok perlakuan.
Dari  tabel  rata-rata  urin  diatas  dapat  dilihat bahwa  pada  jam  ke  1  sampai  6  terjadi peningkatan  volume  urin  pada  setiap perlakuan  dengan  kelompok  kontrol  positif yang  memiliki  efek  diuretik  paling  tinggi diikuti  dengan  dosis  ekstrak  daun  afrika  20 mg/kgBB,  40  mg/kgBB  dan  80  mg/kgBB. Sedangkan  pada  jam  ke  6  sampai  12  dapat dilihat terjadi penurun efek diuretik dikarenakan  pada  jam  6  sampai  12 kemungkinan  kontrol  positif  (furosemid) maupun ekstrak daun afrika telah terekskresi. Pada jam ke 1 sampai 12 merupakan jumlah rata-rata urin keseluruhan  dimana dapat

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 122-127
dilihat  terjadi  peningkatan  volume  urin  yang signifikan pada 1 sampai 12.
Tabel 2. Hasil perhitungan persen diuretik
Kelompok Perlakuan

## Diuretik
Dari  data  tabel  diatas  dapat  dilihat  bahwa kontrol  positif  memiliki  presentase  diuretik paling  tinggi  yaitu  mencapai  95,45  % dibandingkan  dengan  perlakuan  dosis  ekstrak daun  afrika  20  mg/kgBB  lebih  rendah  yaitu 18,86 %, dosis ekstrak 40 mg/kgBB yaitu 53,86 %  dan dosis 80 mg/kgBB yaitu 37,04 %.

## Hasil Uji Diuretik
Data  hasil  pengukuran  volume  urin kumulatif  selanjut  dilakukan  analisis  stastik untuk perbedaan dari setiap perlakuan. Hasil uji Shapiro-Wilk untuk  melihat  normalitas  data dengan  nilai  signifikan  p  >  0,05  menunjukan data  terdistribusi  normal.  Uji Levene untuk melihat  homogenitas  data  dengan  nilai signifikan  p  >  0,05  menunjukan  bahwa  data homogen, sehingga dilakukan dapat dilakukan uji  ANOVA  untuk  melihat  adanya  perbedaan yang signifikan pada antara kelompok perlakuan.
Tabel 3.  Uji  ANOVA
Dari  tabel  3,  data  yang  dimasukkan  pada Berdasarkan hasil uji  ANOVA  dengan tingkat kepercayaan  95%  dapat  dilihat  nilai  F hitung = 11,793  >  F tabel 5% (4, 10) =  3,48  dan  dari  nilai signifikannya  nilai  sig  =  0,001  <  0,05, berdasarkan  hasil  uji  ANOVA  menunjukan bahwa  perlakuan  memiliki  perbedaan  yang signifikan karena setiap perlakuan memiliki
perbedaan  yang  signifikan  maka  data  yang didapatkan akan diuji lebih lanjut menggunakan  uji  Tukey  HSD  ( Honest Significance  Difference )  untuk  mengetahui kelompok perlakuan yang memiliki pengaruh sama  atau  berbeda  antara  satu  dengan  yang lainnya (Kusriningrum, 2010).
Tabel 4. Uji Tukey (HSD)
Dari  tabel  hasil  uji  Tukey  diatas  dapat dilihat  terdapat  beberapa  perlakuan  yang tidak  memilik  perbedaan  yang  terlalu bermakna  tetapi  ada  juga  perlakuan  yang memiliki  perbedaan  bermakna.  Perlakuan yang  tidak  memilik  perbedaan  bermakna yaitu  perlakuan  kelompok  kontrol  negatif (Na CMC),  dosis  20  mg/kgBB  dan  dosis  80 mg/kgBB dan juga kelompok perlakuan dosis 20 mg/kgBB, dosis 80 mg/kgBB dan dosis 40 mg/kgBB dapat dilihat pada tabel keempatnya  berada  dalam  satu  subset  yaitu subset  1  dan  2.  Perbedaan  yang  signifikan atau  bermakna  terdapat  pada  perlakuan kontrol negatif (Na CMC) dengan kelompok perlakuan  ekstrak  dosis  40  mg/kgBB, kelompok  perlakuan  dosis  20  mg/kgBB dengan kontrol positif (furosemid), kelompok  perlakuan  dosis  80  mg/kgBB dengan kontrol positif (furosemid), kelompok dosis 40 mg/kgBB dengan kontrol positif  (furosemid)  dan  juga  kontrol  negatif (Na CMC) dengan kontrol positif
(furosemid)  dapat  dilihat  setiap  perlakuan terdapat  pada  subset  yang  berbeda  yaitu subset 1 2 dan 3.
Berdasarkan perbedaan yang dihasilkan oleh setiap perlakuan dapat menggambarkan bahwa  daun  afrika  memilik  efek  diuretik walaupun  beberapa  perlakuan  tidak  terlalu
(%) Kontrol Positif furosemid 95,45 % Ekstrak 20 mg/kg BB 18,86 % Ekstrak 40 mg/kg BB 53,86 % Ekstrak 80 mg/kg BB 37,04 %

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 122-127
memberikan efek yang signifikan, efek diuretik yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  daun  afrika dikarenakan  adanya  senyawa  flavonoid  dan alkaloid. Flavonoid memiliki mekanisme kerja sebagai  diuretik  dengan  cara  menghambat  ko- transpor  dan  menurunkan  reabsorbsi  ion  Na + , K + ,  dan  Cl - terjadi  penigkatan  elektrolit ditubulus sehingga terjadi diuresis [5]
Sedangkan alkaloid memiliki mekanisme kerja dengan  bekerja  langsung  pada  tubulus  dengan cara  meningkatkan  ekskresi  Na + dan  Cl - , dengan  meningkatnya  sekresi  Na + juga meningkatkan  ekskresi  air  dan  menyebabkan volume urin bertambah [6].

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  afrika ( Vernonia  amygdalina )  dengan  dosis  yang diberikan  20  mg/kgBB,  40  mg/kgBB  dan  80 mg/kgBB memiliki efektivitas sebagai diuretik pada  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  dengan ekstrak  yang  memilik  efek  diuretik  paling mendekati  kontrol  positif  adalah  dosis  40 mg/kgBB  dibandingkan  dengan  dosis  lainnya yaitu 20 mg/kgBB dan 80 mg/kgBB.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Juliana M., Lestari F., Hazar F., 2015. Uji Efek Diuretik Infusa Kulit Akar dan Da,un Senggugu ( Rotheca Serrate (L.) R. Steane dan  Mabb)  serta  Kombinasi  Keduanya Terhadap  Tikus  Wistar  Jantan.  Prosising Penelitian  SPeSIA  Unisba  2015.  2460- 6472.
[2] Angunu A, Abdurahman EM, Andrew GO, Muhammed  Z.  2005. Diuretic  Activity  of the  Stem-Bark  Extracts  of  Steganotaenia araliaceahoehst. Journal of
Ethnopharmacol, 96: 471-5
[3] Ceppy S. 2002. Budi Daya Tanaman Obat Komersial . Jakarta: Penebar Swadaya.
[4] Lecia,  J.  G.,  Jetaime  R.,  and  Ernest  B.  I.. 2008. Vernonia  amygdalina: Anticancer Activity,
Authentication,
and
Adulteration  Detection. International Journal of Environmental Research and Public Health. 5(5) 342-348.
[5] Mokoagow, M., Mongi, J., Maarisit, W., Palandi.,  R.R.,  Tulandi,  S.S.  2019.  Uji Efektivitas Daun Eceng Gondok ( eichhornia  crassipes (Mart.)  Solms)
pada  Tikus  Putih  ( Rattus  norvegicus ) Sebagai Diuretik. Journal Biofarmasetikal Tropis. (2)2, 55-60
[6] Nessa.  2013.  Efek  Diuretik  dan  Daya Larut  Batu  Ginjal  dari  Ekstrak  Etanol
Rambut Jagung (Zea mays L.). Fakultas
Farmasi, Universitas Andalas. Padang.