Jurnal Pharmascience, Vol. 05 , No.01, Februari 2018, hal: 63 - 70 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article

## Efek Imunomodulator Infusa Umbi Bawang Dayak
( Eleutherina palmifolia L. Merr) Dengan Metode Bersihan Karbon
*Rahmi Muthia, Karunita Ika Astuti
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Borneo Lestari, Banjarbaru, Kalimantan Selatan. Email : rahmi.muth@gmail.com

## ABSTRAK
Perkembangan  pengetahuan  banyak  mengangkat  penggunaan  bahan  alam untuk  alternatif  pilihan  sebagai  imunomodulator.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  efek  imunomodulator  dari  infusa  umbi  Bawang  Dayak  ( Eleutherina palmifolia L. Merr) dengan metode bersihan karbon pada mencit putih jantan. Skrining fitokimia yang diujikan pada umbi Bawang Dayak yaitu uji flavonoid, alkaloid, steroid, kuinon,  tanin  dan  saponin.  25  mencit  galur  Balb/C  dibagi  menjadi  5  kelompok  yang terdiri  dari  kelompok  P1  sebagai  kontrol  positif  yang  diberikan  stimuno  dosis  0,78 mg/20 gram BB; kelompok P2 yang diberikan aquadest, kelompok P3, P4 dan P5 yang diberikan Infusa umbi Bawang Dayak dengan dosis berturut-turut yaitu 13 mg/20 gBB, 26 mg/20 gBB, dan 52 mg/20 gBB. Perlakuan pemberian diberikan secara oral selama 7 hari.  Pada  hari  ke-8  dilakukan  uji  imunomodulator  dengan  metode  bersihan  karbon. Hasil skrining fitokimia menunjukkan adanya senyawa saponin, flavonoid dan alkaloid. Hasil  Uji  imunomodulator  menunjukkan  adanya  infusa  umbi  Bawang  Dayak  dosis  52 mg/20  gBB  menunjukkan  efek  imunomodulator  terbesar.  Infusa  umbi  Bawang  Dayak memiliki aktivitas imunmodulator.
Kata Kunci : Imunomodulator, Infusa, Umbi Bawang Dayak, Eleutherina palmifolia

## ABSTRACT
The  development  of  knowledge  raised  the  use  of  natural  materials  as  an alternative  choice  as  an  immunomodulator.  The  aim  of  this  study  was  to  know  the imunomodulatory effect of Bawang Dayak Bulb (Eleutherina palmifolia L. Merr) by using carbon  clearance  method  on  male  mice.    The  phytochemical  screening  were  tested  to flavonoids,  alkaloids,  steroids,  quinones,  tanins,  and  saponins.  25  male  Balb/C  mice divided into 5 groups consisting of P1 groups as positive control given stimuno 0,78 mg/20 gBB; P2 groups as negative control given aquadest, P3, P4 and P5 groups given Bawang Dayak Bulb Infusion with doses respectively 13 mg/20 gBB, 26 mg/20 gBB, and 52 mg/20 gBB.  Each  groups  were  adminstered  orally  one  a  day  for  seven  days.  On  the  eighth  day, imunomodulatory  test  were  performed  by  using  carbon  clearence  method.  The
phytochemical  screening  revealed  the  presence  of  flavonoids,  alkaloids,  and  saponins. Results  of  imunommodulatory  test  showed  Bawang  Dayak  Bulb  infusion  doses  52  mg/20 gBB  has  the  highest  immunomodulatory  effect.  Bawang  Dayak  Bulb  Infusion  showed imunomodulatory effect.
Keywords : Imunomodulator, Infusion, Bawang Dayak Bulb, Eleutherina Palmifolia

## I. PENDAHULUAN
Salah  satu  sistem  terpenting  dalam tubuh  yang  terus  menerus  melakukan kegiatan adalah sistem imun. Sistem imun adalah  semua  mekanisme  yang  digunakan badan  untuk  mempertahankan  keutuhan tubuh  sebagai  perlindungan  terhadap bahaya  yang  dapat  ditimbulkan  berbagai bahan dalam lingkungan hidup (Baratawidjaja, 2000). Sistem imun bekerja  untuk  melindungi  tubuh  dari infeksi  oleh  mikroorganisme,  membantu proses  penyembuhan  dalam  tubuh,  dan membuang  atau  memperbaiki  sel  yang rusak  apabila  terjadi  infeksi  atau  cedera (Corwin,  2009).  Sebagian  besar  infeksi berlangsung  dalam  jangka  waktu  terbatas dan menyebabkan sedikit sekali kerusakan permanen  karena  sistem  imun  melawan agen  infeksi  dengan  mengendalikan  atau menghancurkannya  (Wahab  dan  Julia, 2002). Sedangkan immunomodulator adalah  substansi  yang  digunakan  untuk mempengaruhi sistem imun dan mempunyai kemampuan untuk meningkatkan respon imun atau perlindungan terhadap patogen atau tumor. Secara umum ada dua kategori
imunomodulator berdasarkan efeknya yaitu  immunosuppressan  (menekan)  dan immunostimulator (meningkatkan)
(Djauzi,  2003).  Bertolak  dari  hal  tersebut maka sebagai salah satu upaya penanggulangan masalah kesehatan dengan  adanya  peranan  tanaman    obat berkhasiat  perlu  ditingkatkan.  Beberapa upaya yang perlu adalah dengan melakukan  pengenalan,  pengujian  dan pengembangan  khasiat  suatu  tanaman obat.  Perkembangan  pengetahuan  banyak mengangkat  penggunaan  bahan  alam sebagai alternatif pilihan sebagai imunomodulator. Beberapa tanaman  yang sudah  terbukti  memiliki  aktivitas  sebagai imunomodulator adalah achinaceae
( Echinacea purpurea), meniran ( Phyllanthus niruri L. ) , mengkudu ( Morinda citrifolia) , dan Sambiloto ( Andrographis  paniculata) (Suhirman  dan
Winarti,  2007).  Selain  itu  juga  Daun Ketepeng  Cina  ( Cassia  alata L.)  secara farmakologi dapat meningkatkan sel fagositosis  magrofag  pada  pengujian imunomodulator  (Kusmardi  dkk ., 2007). Serta  merangsang  sel-sel  fagosit  untuk melakukan respon fagositosis pada
aktivitas
imunomodulator herba
Terminalia  chebula, Terminalia  bellerica,
dan Emblica  officinalis yang  positif mengandung  flavonoid, tanin,  saponin glikosida  dan  senyawa  fenolik  (Rinki  dan Mishra, 2011).
Tanaman Bawang Dayak
( Eleutherina  palmifolia L.  Merr . )  secara empiris  digunakan  sebagai  obat  sembelit dan  disuria  (Kasahara  dan  Hemmi,  1995), Selain itu rebusan air umbi Bawang Dayak digunakan  untuk  mengobati  penyakit kencing manis (diabetes melitus) menurunkan  kolesterol,  dan  kanker  usus (Galingging, 2007). Ekstrak etanol Bawang  Dayak  juga  diketahui  memiliki aktivitas antibakteri (Firdaus, 2014).
Penelitian Efendi dkk. (2015)
menunjukkan  bahwa  ekstrak  etil  asetat Bawang Dayak memiliki efek menghambat  pertumbuhan  sel  (mitosis) pada uji anti kanker. Berdasarkan kemampuannya  sebagai  antibakteri  dan menghambat pertumbuhan sel pada uji anti kanker,  maka  akan  dilakukan  penelitian sebagai imunomodulator terhadap tanaman Bawang  Dayak  ( Eleutherina  palmifolia L.
Merr.)  untuk  menambah  manfaat  bagi masyarakat.

## II. METODE PENELITIAN
A. Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  yaitu mencit  putih  ( mus  musculus L.)  galur
Balb/C  jantan,  umur  3  bulan,  berat  badan rata-rata 20 – 35 gram.

## B. Bahan
Simplisia  umbi  Bawang  Dayak, aquadest, asam asetat 1%, etanol, kloroform, suspensi karbon, dan stimuno.

## C. Determinasi Tanaman  Bawang Dayak
Tanaman
Bawang Dayak
diperoleh  dari  daerah  Palangka  Raya, Kalimantan Tengah dan akan dideterminasi  di  Laboratorium  Dasar,
Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam  (FMIPA)  Universitas Lambung Mangkurat (ULM).
D. Pengumpulan dan Pengolahan Simplisia Bawang Dayak
Tanaman  Bawang  Dayak  yang diambil  dari  lokasi  berupa  umbi.  Umbi Bawang  Dayak  kemudian  disortir  basah untuk memisahkan benda-benda asing dan dicuci  dengan  air  mengalir.  Selanjutnya dirajang dengan ukuran kecil dan dikeringkan dengan cara diangin- anginkan.  Rajangan  kecil  kering  sampel yang disebut pula dengan haksel.

## E. Pembuatan  Infusa  Umbi  Bawang
Dayak
Simplisia  Bawang  Dayak  yang sudah  kering  ditimbang  sesuai  dosis  yang diperlukan  kemudian  panaskan  dengan
menggunakan  akuades  selama  15  menit terhitung saat suhu airnya mencapai 90 o C, didinginkan  sehingga  infusa  Bawang Dayak yang siap diberikan pada hewan uji.

## F. Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  yang  dilakukan antara  lain  uji  alkaloid,  uji  flavonoid, steroid,  kuinon,  tanin  dan  saponin  sesuai dengan  beberapa  metode  (Seniwati  dkk., 2009;  Aiyegoro  &  Okoh,  2010;  Kumar dkk.,  2013;  Sihombing  dkk.,  2015; Zannah,  2017)  yang  mengalami  sedikit modifikasi.
G. Pengujian Efek Imunomodulator Dengan Cara Bersihan Karbon
Mencit dikelompokkan secara acak dan  dibagi  menjadi  5  kelompok  dengan tiap  kelompok  terdiri  dari  5  ekor  mencit. Pembagian  kelompok  perlakuan  sebagai berikut:
Tabel 1. Kelompok Perlakuan
Kelompok Perlakuan Kontrol  Negatif (KKN) Aquadest 0,5 mL/20 gBB Kontrol Positif (KKP) Stimuno  dosis  0,78  mg/20 gBB Uji 1 (KU1) Infusa dosis 13 mg/20 gBB Uji 2 (KU2) Infusa dosis 26 mg/20 gBB Uji 3 (KU3) Infusa dosis 52 mg/20 gBB
Setiap  kelompok  diberikan  perlakuan secara  oral    sekali  sehari  selama  7  hari. Pada hari ke-8, dilakukan uji
imunomodulator  dengan  cara  bersihan karbon.  Sebanyak  0,1mL/  20  gramB mencit  disuntikkan  tinta  cina  secara intravena melalui pembuluh darah di ekor. Pada menit ke-0 dan menit    ke-15 setelah penyuntikan karbon dilakukan pengambilan  darah  sebanyak              20  µL melalui  vena  orbital  dan  dimasukkan  ke dalam kuvet  yang telah diisi dengan 2 mL asam asetat 1%, kemudian diukur serapannya dengan menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 635 nm.

## H. Analisis Data
Semua  data  pengamatan  hasil  uji imunomodulator  dengan  metode  bersihan karbon  berupa  data  density  optik  dari setiap  sampel  kemudian  digunakan  untuk menghitung  nilai  indeks  fagositosis  (K) yang  menunjukkan  efek  imunomodulator. Nilai  indeks  fagositosis  (K)  dihitung menggunakan rumus :
K = (ln 𝑂𝐷1−ln 𝑂𝐷2) 𝑡2−𝑡1
Keterangan :
OD1  dan  OD2  adalah  Density  optik  pada waktu t1 dan t2.
(Dashputre dan Naikwade, 2010).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil skrining fitokimia menunjukkan senyawa yang terkandung di dalam  infusa  umbi  Bawang  Dayak.  Hasil
skrining  fitokimia  dapat  dilihat  pada  tabel 2.
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia
Golongan Senyawa Hasil Flavonoid + Alkaloid + Steroid - Kuinon - Tanin - Saponin + Keterangan : + : memiliki senyawa
- : tidak memiliki senyawa
Pada  penelitian  ini  digunakan metode bersihan karbon ( Carbon clearance ) yaitu pengukuran secara spektrofotometer  laju  eliminasi  partikel karbon  dari  darah  hewan.  Ini  merupakan ukuran  aktivitas  fagositosis.  Uji  ini merupakan  respon  nonspesifik  untuk mengetahui aktivitas fagositosis sel makrofag  terhadap  karbon  sebagai  benda asing.  Uji  bersihan  karbon  menggunakan tinta  cina  sebagai  benda  asing/antigen yang  diberikan  secara  intravena.  Nilai density  optik  karbon  dalam  darah  yang dilihat  dengan  spektrofotometer  pada panjang  gelombang  635  nm  menunjukkan hasil  menurun  seiring  waktu  karena eliminasi. Karbon akan berkurang jumlahnya  dalam  darah  seiring  dengan pertambahan waktu, karena adanya
peristiwa  fagositosis  oleh  sel-sel  leukosit terutama neutrofil, monosit, makrofag dan eusinofil (Aldi, 2016).
Tabel 3. Nilai Indeks Fagositosis
Kelompok Rata-rata Density Optik Indeks Fagositosis 0 menit 15 menit KKN 0,2064 ± 0,086 0,1684 ± 0,086 0,0135 ± 0,0055 KKP 0,4096 ± 0,092 0,1548 ± 0,098 0,0649 ± 0,0301 KU1 0,4028 ± 0,153 0,2984 ± 0,122 0,0200 ± 0,0013 KU2 0,6006 ± 0,041 0,3916 ± 0,058 0,0285 ± 0,0083 KU3 0,6564 ± 0,0223 0,2684 ± 0,018 0,0596 ± 0,0040
Berdasarkan  nilai  rata-rata  density optik  karbon  dalam  darah  yang  dilihat dengan  spektrofotometer  pada  panjang gelombang  635  nm,  terlihat  penurunan nilai  density  optik  terbesar  terjadi  pada kelompok uji 3 (KU3) dengan konsentrasi 52  mg/20  gBB.  Berdasarkan  hasil  nilai density  optik  panjang  gelombang  karbon dalam  darah  setiap  konsentrasi  dapat memberikan efek imunomodulator. Adanya  kelompok  KKN  dan  KKP  pada penelitian  ini  dilakukan  untuk  melihat adanya perbedaan antara kelompok perlakuan dengan  kelompok kontrol.
Untuk melihat efek imunomodulator, dapat dilihat  melalui  indeks  fagositosisnya. Indeks  fagositosis  dapat  dihitung  melalui nilai density optik. Penurunan nilai density optik  yang  terbesar  terjadi  pada  KKP, KU3,  KU2,  dan  KU1.  Semakin  rendah nilai  density  optik  berarti  konsentrasi karbon  yang  tinggal  dalam  darah  mencit semakin  sedikit.  Hal  ini  memperlihatkan bahwa terjadi peningkatan aktivitas fagositosis pada masing-masing kelompok variasi  dosis.  Hasil  perhitungan  indeks fagositosis dapat dilihat pada Tabel 3.
Peningkatan indeks fagositosis mencerminkan peningkatan fungsi fagositosis  dari  makrofag  mononuklear dan  sistem  imun  non  spesifik  (Dashputre dan  Naikwade,  2010).  Untuk    mengetahui dan    menganalisis  apakah  ada  perbedaan yang  nyata  maka  dilakukan  uji one  way ANOVA  ( Analysis  of  varians ).  Hasil  dari pengujian  ANOVA  dapat  dilihat  pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil Analisis Anova
indeks_fagositosis Sum of Squares  df Mean Square F Sig. Between Groups .012 4 .003  3.068  .040 Within Groups .019  20 .001 Total .031  24
Hasil  analisis  Anova  diketahui terdapat perbedaan indeks fagositosis yang bermakna  diantara  kelompok  perlakuan ditunjukkan  dari  nilai  p<0,05.  Dengan demikian,  ada  efek  imunomodulator  dari infusa  umbi  Bawang  Dayak  ( Eleutherina palmifolia L. Merr) pada mencit. Berdasarkan hasil analisis Anova kemudian  digunakan  uji  lanjut  yaitu menggunakan  Duncan  untuk  melihat  ada dosis  infusa  umbi  Bawang  Dayak  yang memiliki  efek  imunomodulator  yang sebanding  dengan  kontrol  positif.  Hasil analisis  Duncan  dapat  dilihat  pada  tabel dibawah ini.
Tabel 5. Hasil Analisis Duncan
kelompok
N Subset for alpha = 0.05 1 2 kelompok negatif 5 .015511 dosis 1 5 .022213 dosis 2 5 .029006 dosis 3 5 .061726 kelompok positif 5 .075298 Sig. .242 .215
Pada  uji  duncan,  nilai  indeks fagositosis    antara  kontrol  negatif,  KU1 dan  KU2  menunjukkan  nilai  p=0,242 (p<0,05).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kontrol  negatif,  KU1  dan  KU2  tidak
menunjukkan  perbedaan  yang  yang  nyata.
Pada kontrol positif dan KU3 menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  yang signifakan  antara  keduanya,  ditunjukkan dari  nilai  p>0,05  yaitu  sebesar  0,215.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  KU3  memiliki efek  imunomodulator  yang  setara  dengan kelompok kontrol positif.

## IV. KESIMPULAN
Hasil  uji  efek  imunomodulator infusa  umbi  Bawang  Dayak  menunjukkan KU3  memberikan  efek  imunomodulator yang  terbesar  diantar  kelompok  uji lainnya.  Peningkatan  dosis  infusa  umbi Bawang  Dayak  menunjukkan  adanya peningkatan efek imunomodulator.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  didukung  dan  didanai  oleh Kementerian Riset Teknologi dan Pendidikan  Tinggi  Indonesia  melalui Hibah Penelitian Dosen Pemula.

## DAFTAR PUSTAKA
Aiyegoro  OA,  Okoh  AI.  Preliminary Phytochemical  Screening  and  In
Vitro  Antioxidant  Activities  of  The Aqueous  Extract  of  Helichrysum longifolium DC. BMC Complementary and Alternative
Medicine. 2010; 10(21), 1-8.
Aldi,  Y.,  Dewi,  O.N.,  Uthia,  R.  Uji
Imunomodulator  dan  Jumlah  Sel Leukosit dari Ekstrak daun Kemangi
( Ocimum  basilicum L.)  pada  Mencit
Putih  Jantan.  Scientia,  2016;  6(2), 139-147.
Baratawidjaja,  K.G.,  2000, Imunologi Dasar, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta. Corwin, E.J., 2009, Buku Saku Patofisiologi , Terjemahan Egi
Komara,  Esty  Wahyuningsuh,  Devi
Yulianti,  dan  Pamilih  Eko  Karyuni, Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Dashputre,  N.L.,  Naikwade,  N.S.,  2010. Imunomodulatory Activity of Abutilon  Indicum linn  on  Albino mice. International Journal of Pharma  Sciences  and  Research (IJPSR), 1(3) : 178-184.
Djauzi,  S.,  2003, Simposium  Peranan Echinacea  sebagai  Imunomodulator dalam Infeksi  Virus  dan  Bakteri.
Jurnal  Sains  Teknologi  Farmasi,
Vol. 8 (1), 14.
Efendi,  A.,,  Islamudin  A.,  dan  Arsyik  I.,
2015, Efek Antititosis Ekstrak Bawang Dayak (Eleutherona americana  L.Merr)  Terhadap  Sel Telur Bulu Babi (Tropneustes gratilla  Linn. ),  Jurnal  Sains  dan Kesehatan, Vol. 1(3), 99-104.
Firdaus,T.,  2014., Efektivitas  Ekstrak Bawang Dayak
(Eleutherine palmifolia) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus, Skripsi, Program studi pendidikan dokter Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan, Universitas  Islam  Negeri  Syarif Hidayatullah, Jakarta. Galingging,  R.Y.,  2009, Bawang  Dayak (Eleutherina palmifolia ) sebagai Tanaman  Obat  Multifungsi. Warta Penelitian dan Pengembangan Badan
Penelitian dan Pengembanagn
Pertanian, Vol. 15 (3), 10-16.
Kasahara,  S.,  dan  Hemmi,  S.,  1995.
Medical Herb Index in Indonesia 2 nd Edition . PT. Eisai Indonesia, Jakarta. Kumar  RS,  Venkateshwar  C,  Samuel  G, Rao SG. Phytochemical Screening of some  compounds  from  plant  leaf extracts  of  Holoptelea  integrifolia
(Planch.)  and  Celestrus  emarginata (Grah.)    used  by  Gondu  tribes  at Adilabad  District,  Andhrapradesh,
India. International Journal of
Engineering Science Invention. 2013; Vol 3, No.8, 65-70.
Kusmardi, Shirly  K., dan Enif E.T., 2007,
Efek  Imunomodulator  Ekstrak  Daun Ketepeng  Cina  (Cassia  alata  L.) Terhaap  Aktivitas  dan  Kapasitas Fagositosis Makrofag . Makara Kesehatan. Vol. 11(2), 50-53. Rinki,  S.  dan  Mishra,  R.N.,  2011, Imunomodulatory Activity of Triphala Megaext , International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical
Sciences, Vol 2(2), 579-582.
Seniwati, Raihanah, Nugraheni IK, Umaningrum  D.  Skrining  Fitokimia dari Alang-Alang (Imperata
cylindrica L. Beauv) dan  Lidah Ular
(Hedyotis  corymbosa  L.  Lamk). Sains  dan  Terapan  Kimia.  2009; Vol.3(2), 124-133.
Sihombing  JR,  Dharma  A,  Chaidir  Z,
Almahdy,  Fachrial  E,  Munaf  E. Phytochemical screening and antioxidant activities of 31 fruit peel extract  from  Sumatera,  Indonesia. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research. 2015; 7(11), 190-196.
Wahab,  A.S.,  dan  Julia,  M.,  2002. Sistem Imun, Imunisasi, dan Penyakit Imun . Widya Medika, Jakarta.
Zannah F., Amin M, Suwono H, Lukiati B. Phytochemical
screening of
Diplazium  esculentum  as  medicinal plant  from  Central  Kalimantan,
Indonesia.  American  Institute  of
Physics Cenference Proceeding.
2017; 1844.