How to cite: Pearlyta  Chrisophras  Situmorang,  Horasdia  Saragih  (2022)  Identifikasi  Senyawa  Bioaktif  Ekstrak  Etanol  dan Metanol Buah Cengkeh (Syzigium Aromaticum) Dengan Teknik Gas Chromatography – Mass Spectroscophy (Gc-Ms), Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia, 7 (4). E-ISSN:
2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia p–ISSN: 2541-0849 e-ISSN: 2548-1398 Vol. 7, No. 4, April 2022

## IDENTIFIKASI SENYAWA BIOAKTIF EKSTRAK ETANOL DAN METANOL
BUAH CENGKEH (Syzigium Aromaticum) DENGAN TEKNIK Gas Chromatography – Mass Spectroscophy (GC-MS)

## Pearlyta Chrisophras Situmorang, Horasdia Saragih
Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Advent  Indonesia, Bandung, Indonesia Email: pearlytasitumorang24@gmail.com, horas@unai.edu

## Abstrak
Senyawa  bioaktif  yang  terkandung  di  dalam  buah  cengkeh  telah  diekstrak  dan diidentifikasi.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut  etanol  dan metanol,  dan  identifikasi  dilakukan  dengan  menggunakan  teknik  Gas Chromatography-Mass  Spectroscophy  (GC-MS).  Dari  hasil  yang  diperoleh menunjukkan bahwa senyawa-senyawa bioaktif hasil ekstrak menggunakan pelarut etanol  adalah:  (1)  eugenol;  (2)  alpha-copaene;  (3)  trans-caryophyllene;  (4)  alpha- humulene;  (5)  alpha-copaene;  (6)  delta-cadinene;  (7)  naphthalene;  (8) caryophyllene oxide; dan (9) 2,3,4-trimethoxyacetophenone. Dan senyawa-senyawa bioaktif hasil ekstrak menggunakan pelarut metanol adalah: (1) eugenol; (2) trans- caryophyllene;  dan  (3)  alpha-humulene.  Kedua  hasil  ekstrak  ini  menunjukkan kandungan  utama  yang  sama  yaitu  senyawa  bioaktif  eugenol.  Ini  menunjukkan bahwa  buah  cengkeh  memiliki  kandungan  utama  senyawa  eugenol.  Karena memiliki  kandungan  utama  eugenol  maka  buah  cengkeh  sangat  berpotensi digunakan dan dikembangkan sebagai salah satu bahan utama pada pembuatan obat alami  antioksidan,  antibakteri,  antifungi,  dan  antivirus  karena  eugenol  dikenal memiliki  sifat-sifat  itu.  Karena  sifatnya  anti  virus,  buah  cengkeh  juga  berpotensi digunakan  sebagai  bahan  obat  alami  untuk  anti  virus  SARS-CoV-2  (Covid-19) yang melanda dunia saat ini.
Kata  kunci :  Senyawa  bioaktif,  ekstrak  etanol,  ekstrak  metanol,  buah  cengkeh,  gas chromatography, mass spectroscophy

## Abstract
Bioactive  compounds  contained  in  cloves  have  been  extracted  and  identified. Extraction is performed using ethanol and methanol solvents, and identification is carried  out  using  the  Gas  Chromatography-Mass  Spectroscophy  (GC-MS) technique. From the results obtained show that bioactive compounds produced by extracts  using  ethanol  solvents  are:  (1)  eugenol;  (2)  alpha-copaene;  (3)  trans- caryophyllene;  (4)  alpha-humulene;  (5)  alpha-copaene;  (6)  delta-cadinene;  (7) naphthalene; (8) caryophyllene oxide; and (9) 2,3,4-trimethoxyacetophenone. And the  bioactive  compounds  produced  by  extracts  using  methanol  solvents  are:  (1) eugenol;  (2)  trans-caryophyllene;  and  (3)  alpha-humulene.  Both  results  of  this extract show the same main content, namely the bioactive compound eugenol. This shows that cloves have the main content of eugenol compounds. Because it has the
main content of eugenol, clove fruit is very potential to be used and developed as one  of  the  main  ingredients  in  the  manufacture  of  natural  antioxidant, antibacterial,  antifungi,  and  antiviral  drugs  because  eugenol  is  known  to  have those properties. Because of its anti-viral nature, cloves also have the potential to be  used  as  a  natural  medicinal  ingredient  for  the  SARS-CoV-2  (Covid-19)  anti- virus virus that is sweeping the world today.
Keywords: Bioactive compounds, ethanol extract, methanol extract, clove fruit, chromatography gas, mass spectroscophy

## Pendahuluan
Cengkeh  ( syzigium  aromaticum )  adalah  salah  satu  jenis  tanaman  yang  banyak tumbuh  di  wilayah  tropis  dan  sub-tropis.  Cengkeh  umumnya  tumbuh  pada  ketinggian sekitar 0 sampai 1.500 meter di atas permukaan laut dengan curah hujan sekitar 1.500 sampai 4.500 mm per tahun dan kelembaban udara sekitar 60% – 80%. Pohon cengkeh tumbuh dalam ukuran yang relatif tinggi dan dicirikan oleh tangkai dan daunnya yang sangat  rapat. Tumbuhan  ini  adalah  tumbuhan  berakar  tunggang.  Bentuk  dan  tampakan pohonnya serta bentuk dan tampakan buahnya ditunjukkan pada gambar 1.
Cengkeh  telah  banyak  dimanfaatkan  masyarakat  untuk  berbagai  keperluan. Buahnya utamanya selama ini digunakan sebagai rempah penyedap rasa dan pengharum makanan. Selain itu, buahnya juga digunakan sebagai salah satu komponen bahan pada pembuatan  rokok  kretek.  Daun  dan  kulit batangnya  dimanfaatkan  untuk menghasilkan minyak,  yang  dikenal  dengan  minyak  cengkeh.  Minyak  ini  digunakan  sebagai  obat tradisional  dan  dipercaya  dapat  menyembuhkan  beragam  jenis  penyakit (Bustaman, 2011) .
Produk  cengkeh  dan  turunannya  dipercaya  dapat  menjaga  kesehatan  sel  agar terhindar  dari  penyakit  kanker.  Selain  itu  dipercaya  juga  dapat  mengobati  kerusakan organ hati. Yang paling umum, masyarakat banyak menggunakan minyak cengkeh, atau memakan  buah  keringnya  secara  langsung,  untuk  mengatasi  penyakit  maag.  Minyak cengkeh atau  buah  kering cengkeh  dipercaya  dapat mencegah  produksi  asam  lambung dan menjaga kesehatan dinding lambung (Tulungen, 2019) .
Dari  sejarah  penggunaannya  seperti  diterangkan  di  atas  dan  manfaat  kesehatan yang  dapat  diperoleh,  cengkeh  memiliki  potensi  untuk  dikembangkan  sebagai  sumber bahan  herbal  dalam  pengembangan  obat-obatan  di  masa  yang  akan  datang.  Manfaat, dimana secara fenomenologis selama ini telah dirasakan dapat menyembuhkan beberapa jenis penyakit dan menjaga kesehatan tubuh, menegaskan potensi tersebut. Oleh karena itu  tanaman  cengkeh  perlu  mendapat  perhatian,  dan  selanjutnya  perlu  dipelajari  lebih lanjut  dan  mendalam  terutama  terhadap  pengetahuan  tentang  kandungan  senyawa- senyawa bioaktifnya dan pengetahuan tentang cara atau teknik atau metode bagaimana senyawa-senyawa bioaktif tersebut dapat diperoleh melalui suatu proses ekstraksi untuk selanjutnya  dapat  digunakan  untuk  pengembangan  atau  peracikan  suatu  obat  tertentu yang  baru  untuk  tujuan  menyembuhkan  suatu  jenis  penyakit  tertentu  ke  depan.
Kandungan ragam jenis senyawa bioaktif yang dimiliki cengkeh adalah menjadi kunci penentu terhadap kasiatnya yang dirasakan selama ini.
Dengan  mengetahui  secara  lebih  diteil  ragam  jenis  senyawa  bioaktif  yang terkandung  dan  yang  dapat  diekstrak  dari  tanaman  cengkeh,  dapat  menerangkan  lebih jelas  mengapa  tanaman  ini  dapat  memberikan  efek  penyembuhan  dan  penjagaan kesehatan  yang  dirasakan  selama  ini.  Selain  itu,  mengetahui  secara  lebih  diteil  jenis kandungan senyawa bioaktif ini dan teknik pengekstrakannya dapat membuka peluang pengembangan  pemanfaatan  baru  tanaman  cengkeh  dan  produk  turunannya. Mengkombinasikannya  dengan  jenis  tanaman  lain  misalnya,  atas  dasar  kandungan senyawa bioakltif yang dimilikinya, juga adalah salah satu bentuk pengembangan yang dapat dilakukan ke depan untuk tujuan penyembuhan suatu jenis penyakit tertentu yang selama ini belum diketahui.
Gambar 1
Bentuk Dan Tampakan Pohon Cengkeh. Sisipan Adalah Bentuk Dan Tampakan Buahnya Yang Siap Dipanen .
Atas  dasar  kepentingan  seperti  diterangkan  tersebut  di  atas,  maka  kami  telah mengekstrak dan mengidentifikasi senyawa-senyawa bioaktif yang terkandung di dalam buah cengkeh. Identifikasi dilakukan dengan menggunakan teknik Gas Chromatography –  Mass  Spectroscopy (GC-MS). Penggunaan  teknik  ini
dilatarbelakangi  oleh  karena  kemampuannya  yang  sangat  baik  dan  secara  sempurna dapat memisahkan senyawa-senyawa bioaktif dan sekaligus mengidentifikasinya secara tepat  dengan  keakuratan  yang  tinggi  berdasarkan  hasil  ukuran  massa  setiap  jenis senyawa  bioaktif  tersebut (Kitson,  Larsen,  &  McEwen,  1996) .  Teknik  ini  telah  teruji secara  baik  dalam  menguji  secara  akurat  berbagai  jenis  senyawa.  Selain  dapat mengidentifikasi  jenis  senyawa  secara  akurat,  teknik  ini  juga  sekaligus  dapat mengkuantisasi  setiap  jenis  senyawa  yang  diukur.  Suatu  senyawa  organik  di  dalam suatu  campuran  senyawa-senyawa  yang  lain  diidentifikasi  dengan  cara  mencocokkan hasil  spektrum  massa  terukurnya  dengan spektrum  massa  yang  telah tersedia  di  dalam basis data (Adams, 2007) .
Pada  penelitian  ini,  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  di  dalam  buah  cengkeh telah diekstrak dengan menggunakan pelarut etanol dan metanol. Penggunaan dua jenis pelarut  ini  dilatarbelakangi  oleh  karena  kemampuannya  yang  sangat  baik  dalam  hal mengekstrak  beragam  jenis  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  di  dalam  suatu  jenis tumbuhan.  Selain  itu  ketersediaanya  yang  sangat  luas  dan  juga  harganya  yang  sangat terjangkau. Kedua jenis pelarut ini dapat saling melengkapi satu dengan yang lain untuk mengekstrak  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  di  dalam  buah  cengkeh  sesuai  dengan kelebihannya  masing-masing.  Ketika  pelarut  yang  satu  tidak  dapat  mengekstrak  suatu senyawa  bioaktif  tertentu,  pelarut  yang  lain  dapat  melakukannya  dan  hasilnya  jumlah jenis senyawa bioaktif yang dihasilkan lebih banyak.
Dengan  demikian  di  dalam  paper  ini  akan  diterangkan  secara  diteil  bagaimana proses senyawa-senyawa bioaktif yang terkandung di dalam buah cengkeh diekstrak dan bagaimana  senyawa-senyawa  bioaktif  tersebut  diidentifikasi  dengan  menggunakan peralatan  GCMS,  serta  merujuk  kepada  hasilnya  diterangkan  pula  secara  singkat potensi-potensi  penggunaan  buah  cengkeh  di  masa  yang  akan  datang  atas  kandungan senyawa bioaktif yang dimilikinya.

## Metode Penelitian

## Penyiapan Sampel Buah Cengkeh
Pada penelitian ini buah cengkeh yang digunakan adalah buah cengkeh yang segar dan tidak cacat dengan bentuk postur seperti ditunjukkan pada sisipan gambar 1. Buah ini  dipetik  dari  pohon  cengkeh  yang  dibudidayakan  oleh  masyarakat  di  daerah Kecamatan Parongpong, Kabupaten Bandung Barat, Jawa Barat dengan umur sekitar 15 tahun yang tampakan pohonnya seperti ditunjukkan pada gambar 1. Tanaman cengkeh ini telah diidentifikasi oleh Badan Penelitian Tanaman Obat dan Sayuran Kementerian Pertanian Republik Indonesia. Buah cengkeh yang digunakan pada penelitian ini dipetik pada bulan Oktober tahun 2021.
Buah segar yang telah dipetik selanjutnya dicuci dengan air bersih mengalir, dan dikeringkan.  Proses  pengeringannya  dilakukan  di  ruang  terbuka  dengan  tidak  terpapar langsung sinar matahari. Buah segar yang awalnya berwarna hijau kekuning-kuningan, setelah  dikeringkan,  berubah  menjadi  berwarna  coklat,  dan  ukuran  tiap  buah  menjadi menyusut  sebagaimana  ditunjukkan  pada  gambar  2(A).  Buah  kering  yang  telah
berwarna  coklat  ini  selanjutnya  dilumatkan  dengan  cara  digiling  sehingga  membentuk serbuk kering seperti ditunjukkan pada gambar 2(B). Pengecilan ukuran menjadi serbuk ini (pelumatan) dilakukan agar luas permukaan buah cengkeh ketika berinteraksi dengan zat  pelarut  pada  saat  diekstrak,  menjadi  lebih  besar  sehingga  kuantitas  senyawa bioaktifnya yang dapat diperoleh menjadi lebih maksimal.

## Gambar 2
Buah cengkeh yang telah dikeringkan (A). Serbuk kering hasil pelumatan (B).

## Ekstraksi Senyawa Bioaktif dari Serbuk Kering Buah Cengkeh
Senyawa  bioaktif  yang  terkandung  di  dalam  serbuk  buah  cengkeh  yang  telah disiapkan  di  atas,  selanjutnya  diekstrak.  Pelarut  yang  digunakan  adalah  etanol (C 2 H 5 OH) ( absolute for analysis ) dengan kemurnian 99,9% dengan molar massa 46,07 g/mol  yang  diproduksi  oleh  Merck  KGaA  Germany  (CAS-No:  64-1745)  dan  metanol (CH 3 OH)  ( for  analysis )  dengan  kemurnian  99,9%  dengan molar  massa 32,04  g/mol yang diproduksi oleh  Merck KGaA Germany (CAS-No: 67-56-1). Ekstraksi dilakukan dengan teknik maserasi. Kedua jenis pelarut sebagaimana diterangkan di atas, langsung digunakan tanpa ada pemurnian tambahan.
Serbuk  kering  buah  cengkeh  sebanyak  100  g  dimasukkan  ke  dalam  suatu  labu kaca.  Selanjutnya  ke  dalam labu  kaca  tersebut  juga  dimasukkan  pelarut etanol  dengan volume  sebesar  250  ml.  Campuran  serbuk  dan  pelarut  yang  ada  di  dalam  labu  kaca diaduk  menggunakan hotplate  magnetic  stirrer dengan  laju  150  rpm  pada  temperatur ruang selama 1 jam. Setelah pengadukan selesai, selanjutnya didiamkan selama 4 jam di dalam ruang tertutup bertemperatur ruang. Siklus pengadukan dan pendiaman seperti ini dilakukan  sebanyak  8  kali,  dan  pada  akhir  siklus,  larutannya  disaring  dengan menggunakan  kertas  filter  ( filter  paper  Whatman  No.1 ),  dan  hasilnya  seperti ditunjukkan pada gambar 3.
(A)
(B)
Gambar 3
Larutan hasil ekstraksi serbuk kering buah cengkeh dengan menggunakan pelarut: (A) Etanol dan (B) Metanol.
Larutan hasil penyaringan ini selanjutnya dievaporasi untuk memisahkan senyawa bioaktif hasil ekstrak dengan pelarutnya dengan menggunakan rotary evaporator yang dioperasikan pada tekanan 0,5 atm dan temperatur 40 o C. Pada saat proses evaporasi ini, pelarut akan menguap dan senyawa bioaktif hasil ekstrak akan tertinggal dalam bentuk konsentrat. Hasil konsentrat ini selanjutnya dimasukkan ke dalam suatu botol kaca dan disimpan  di  dalam  ruang  pendingin  yang  gelap  bertemperatur  -10 o C  sebelum dikarakterisasi.  Proses  ekstraksi  yang  sama  dilakukan  ketika  menggunakan  pelarut metanol.  Dengan  demikian,  setelah  kedua  proses  ekstraksi  ini  selesai  dilakukan  maka diperoleh  dua  jenis  konsentrat  hasil  ekstraksi,  yaitu  konsentrat  hasil  ekstraksi menggunakan  pelarut  etanol  dan  konsentrat  hasil  ekstraksi  menggunakan  pelarut metanol. Selanjutnya kedua konsentrat ini telah siap untuk dikarakterisasi.

## Karakterisasi Konsentrat Hasil Ekstraksi Menggunakan Alat GC-MS
Konsentrat hasil ekstrak di atas selanjutnya dikarakterisasi untuk mengidentifikasi jenis senyawa bioaktif yang terkandung di dalamnya. Untuk tujuan ini karakterisasi GC- MS  dilakukan.  Alat  yang  digunakan  adalah  Shimadzu  GC-MS  QP2010  Ultra  (Japan), yaitu  gabungan  dari  sistim gas  chromatography (GC)  dan  sistim mass  spectroscopy (MS).  Bagian  sistim gas  chromatography -nya  digunakan  untuk  memisahkan  setiap senyawa yang diukur yang wujudnya dalam bentuk uap (gas). Sistim ini diperlengkapi dengan  kolom  kapiler  sepanjang  30  m  yang  bagian  dalamnya  dilapisi  dengan  lapisan silika  setebal  0,25  mm  sebagai  fase  stasioner  ( stationary  phase ).  Uap  sampel  ekstrak
(A) (B)
didorong  dan  sekaligus  dibawa  menggunakan  gas  pembawa  helium  yang  sekaligus menjadi fase gerak ( mobile phase ).
Sebanyak  1  ml  konsentrat  ekstrak  diinjeksi  ke  dalam  kolom  kapiler  dan  gas pembawa  dialirkan.  Ketika  konsentrat  diinjeksi  dan  gas  pembawa  dialirkan,  tekanan pada bagian kepala kolom kapiler dijaga pada 42,3 kP agar dapat menghasilkan laju alir konsentrat  yang  konstan  sebesar  0,74  ml/menit  di  dalam  kolom.  Temperatur  kolom kapiler di awal dijaga pada 80 o C selama 1 menit, kemudian dinaikkan ke 250 o C dengan laju  280 o C/menit,  kemudian  dinaikkan  lagi  ke  300 o C  dengan  laju  270 o C/menit  dan terakhir  dinaikkan  ke  320 o C  dengan  laju  260 o C/menit  dan  ditahan  selama  24  menit. Dengan  perlakukan  seperti  ini  maka  senyawa  yang  terkandung  di  dalam  konsentrat menjadi  menguap  dalam  bentuk  molekul-molekul  dan  mengalir  di  sepanjang  kolom karena dibawa oleh gas pembawa, namun tidak terdekomposisi.
Setiap  jenis  senyawa  yang  terdapat  di  dalam  konsentrat  oleh  karena  itu  akan terpisahkan  satu  dengan  yang  lainnya  dalam  bentuk  molekul-molekul  uap  di  dalam kolom  kapiler.  Molekul-molekul  uap  dari  senyawa-senyawa  ini  ketika  mengalir mengalami  dua  fase,  yaitu  fase  stasioner  ( stationery  phase )  dan  fase  gerak  ( mobile phase ).  Setiap  jenis  molekul  senyawa  bioaktif  memiliki  karakteristik  khas  dalam menjalani  kedua  fase tersebut,  maka  waktu  yang  dibutuhkan  oleh  setiap  jenis  molekul senyawa  untuk  melintasi  sepanjang  kolom  kapiler  menjadi  berbeda-beda  sehingga menghasilkan retensi waktu yang berbeda-beda. Detektor yang terdapat pada sistim gas chromatography akan  mendeteksi  waktu  retensi  ( retention  time )  dan  sekaligus mengukur kuantitas setiap jenis senyawa.
Selanjutnya,  setiap  jenis  senyawa  (terionisasai)  memiliki  massa  masing-masing yang berbeda-beda, dan detektor yang terdapat di dalam sistim mass spectroscopy akan mengukur nilai rasio massa (m) tersebut terhadap muatannya (z) dan menghasilkan nilai m/z.  Dengan  menggunakan  nilai  waktu  retensi  yang  terukur  dan  nilai  rasio  m/z-nya, maka  jenis  senyawa  dapat  diidentifikasi  dengan  cara  mencocokkan  nilai-nilai  tersebut dengan  data  base  yang  terdapat  pada National  Institut  of  Standards  and  Technology Mass Spectral Database (NIST-MS) yang telah terintegrasi pada perangkat lunak sistim peralatan  GCMS.  Dengan  demikian,  kuantitas  senyawa,  nama  senyawa  dan  berat molekul  serta  struktur  senyawa  yang  terkandung  di  dalam  konsentrat  hasil  ekstraksi dapat diukur dan diidentifikasi

## Hasil dan Pembahasan
Setelah kedua konsentrat di atas dikarakterisasi menggunakan alat Shimadzu GC- MS  QP2010  Ultra,  dua  kromatogram  hasil  pengukuran gas  chromatography diperoleh sebagaimana  ditunjukkan  pada  gambar  4  dan  gambar  5.  Gambar  4  menunjukkan  gas kromatogram  konsentrat  hasil  ekstrak  menggunakan  pelarut  etanol,  dan  gambar  5 menunjukkan gas kromatogram konsentrat hasil ekstrak menggunakan pelarut metanol. Terlihat pada gambar 4 dan gambar 5 bahwa ada terbentuk puncak-puncak kelimpahan pada  kromatogram  yang  dihasilkan  dari  pengukuran.  Jumlah  maupun  tinggi,  posisi waktu dan luas masing-masing puncak yang ditunjukkan pada gambar 4 terlihat berbeda
dengan yang ditunjukkan pada gambar 5. Perbedaan ini menunjukkan adanya pengaruh pelarut terhadap hasil yang diperoleh di dalam konsentrat ekstrak. Besaran nilai terkait waktu retensi masing-masing puncak kelimpahan yang ditunjukkan pada gambar 4 dan
gambar  5  ini  dan  juga  tinggi  serta  luas  setiap  puncaknya,  masing-masing  didaftarkan pada tabel 1 dan tabel 2.
Gambar 4
Gas kromatogram ekstrak buah cengkeh menggunakan pelarut etanol.

## Gambar 5

## Gas kromatogram ekstrak buah cengkeh menggunakan pelarut metanol.
Merujuk  pada  kromatogram  yang  ditunjukkan  pada  gambar  4  terlihat  ada sebanyak  10  puncak  kelimpahan  dengan  waktu  retensi  (menit)  yang  berbeda-beda. Puncak-puncak  kelimpahan  ini  terjadi  karena  ada  sejumlah  besar  molekul-molekul senyawa  tertentu  dalam  bentuk  fase  uap  yang  mengalir  dan  lewat  di  dalam  kolom kapiler dan terdeteksi oleh detektor. Satu puncak kelimpahan dihasilkan oleh satu jenis senyawa tertentu. Dengan demikian, ada 10 jenis senyawa yang berbeda yang mengalir di  dalam  kolom  kapiler  yang  terdeteksi  dari  konsentrat  yang  diekstrak  menggunakan pelarut  etanol.  Sementara  dari  gambar  5  terlihat  ada  sebanyak  3  puncak  kelimpahan dengan  waktu  retensi  yang  berbeda,  yang  menyatakan  ada  3  jenis  senyawa  yang
berbeda  yang  terkandung  di  dalam  konsentrat  yang  diekstrak  menggunakan  pelarut metanol.

## Tabel 1
Besaran nilai waktu retensi, tinggi dan luas dari puncak-puncak kelimpahan pada gas kromatogram ekstrak buah cengkeh menggunakan pelarut etanol. Puncak # Waktu Retensi (Menit) Luas Luas (%) Tinggi 1 8,031 64786793 87,48 17135146 2 8,229 153291 0,21 93461 3 8,846 4861118 6,56 2428984 4 9,285 690866 0,93 344925 5 9,523 112182 0,15 39834 6 10,009 661363 0,89 235817 7 10,242 88812 0,12 51568 8 10,559 153239 0,21 64879 9 10,966 144477 0,20 61235 10 12,226 2176269 2,94 609784 Total 74058333 100,00 21188170 Tabel 2
Besaran nilai waktu retensi, tinggi dan luas dari puncak-puncak kelimpahan pada gas kromatogram ekstrak buah cengkeh menggunakan pelarut metanol.
Puncak # Waktu Retensi (Menit) Luas Luas (%) Tinggi 1 7,966 1099092 75.32 323463 2 8,843 302593 20.74 154938 3 9,291 57623 3.95 20042 Total 1459308 100.00 498443
Masing-masing  senyawa  tersebut  di  atas  selanjutnya  dilewatkan  melalui  sistim mass  spectroscopy dari  peralatan  GCMS  yang  digunakan.  Molekul-molekul  senyawa tersebut diioniosasi di dalam sistim mass spectroscopy dan terfragmentasi. Rasio massa (m)  terhadap  muatan  (z)  setiap  molekul  yang  terionisasi  dan  terfragmentasi  tersebut selanjutnya  diukur  dan  menghasilkan  spektrum  massa.  Hasil  spektrum  massa  yang terukur dari masing-masing molekul senyawa tersebut ditunjukkan pada gambar 6 dan gambar 7.
Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 1 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 2 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 3 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 4 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 5 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 6 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 7 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 8 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 9 Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 10
Gambar 6
Spektrum massa dari setiap senyawa yang memiliki puncak-puncak kelimpahan yang ditunjukkan pada gambar 4.
Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 1 Spektrum massa dari senyawa yang
menghasilkan puncak kelimpahan # 2
Spektrum massa dari senyawa yang menghasilkan puncak kelimpahan # 3
Gambar 7
Spektrum massa dari setiap senyawa yang memiliki puncak-puncak kelimpahan yang ditunjukkan pada gambar 5.
Tabel 3
Hasil identifikasi senyawa bioaktif dari ekstrak buah cengkeh menggunakan
pelaraut etanol. Puncak # Waktu Retensi (Menit) Nama Senyawa Rumus Molekul Berat Molekul 1 8,031 Eugenol C 10 H 12 O 2 164 2 8,229 Alpha-Copaene C 15 H 24 204 3 8,846 Trans-Caryophyllene C 15 H 24 204 4 9,285 Alpha-Humulene C 15 H 24 204 5 9,523 Alpha-Copaene C 15 H 24 204 6 10,009 Delta-Cadinene C 15 H 24 204 7 10,242 Naphthalene C 15 H 24 204 8 10,559 Caryophyllene oxide C 15 H 24 O 220 9 10,966 Caryophyllene oxide C 15 H 24 O 220 10 12,226 2,3,4- Trimethoxyacetophenone C 11 H 14 O 4 210
Dengan menggunakan hasil pengukuran waktu retensi dan spektrum massa seperti diuraikan  di  atas,  yaitu:  waktu  retensi  (gambar  4  dan  gambar  5)  dan  spektrum  massa (gambar  6  dan  7),  maka  jenis  atau  nama  setiap  senyawa-senyawa  tersebut  dapat diidentifikasi. Identifikasinya dilakukan dengan cara mencocokkan kedua nilai tersebut
dengan  nilai  yang  relevan  dan  paling  tepat  dengan  nilai  yang  terdapat  pada  data  base National  Institut  of  Standards  and  Technology  Mass  Spectral  Database (NIST-MS). Setelah  dicocokkan,  didapatkan  bahwa  senyawa-senyawa  yang  terdeteksi  tersebut adalah  sebagaimana  diterangkan  pada  tabel  3  dan  tabel  4.  Rumus  molekul  dan  berat molekul dari masing-masing senyawa turut didaftarkan.

## Tabel 4
Hasil identifikasi senyawa bioaktif dari ekstrak buah cengkeh menggunakan
pelaraut metanol. Puncak # Waktu Retensi (Menit) Nama Senyawa Rumus Molekul Berat Molekul 1 7,966 Eugenol C10 H12 O2 164 2 8,843 Trans-Caryophyllene C15 H24 204 3 9,291 Alpha-Humulene C15 H24 204
Merujuk kepada hasil  identifikasi ini, sebagaimana ditunjukkan pada table 3 dan table 4, diperoleh bahwa senyawa-senyawa bioaktif hasil ekstrak buah cengkeh dengan menggunakan  pelarut  etanol  adalah:  (1)  eugenol;  (2)  alpha-copaene;  (3)  trans- caryophyllene;  (4)  alpha-humulene;  (5)  alpha-copaene;  (6)  delta-cadinene;  (7) naphthalene;  (8)  caryophyllene  oxide;  dan  (9)  2,3,4-trimethoxyacetophenone.  Dan senyawa-senyawa  bioaktif  yang  diperoleh  dari  ekstrak  buah  cengkeh  dengan menggunakan  pelarut  metanol  adalah:  (1)  eugenol;  (2)  trans-caryophyllene;  dan  (3) alpha-humulene.
Jika  kita  perhatikan,  senyawa-senyawa  bioaktif  yang  diperoleh  ketika mengekstrak buah cengkeh dengan menggunakan pelarut metanol juga diperoleh ketika buah cengkeh diekstrak dengan menggunakan pelarut etanol. Senyawa-senyawa bioaktif seperti:  eugenol;  trans-caryophyllene;  dan  alpha-humulene  yang  diperoleh  dari  ekstrak menggunakan metanol juga dihasilkan ketika ekstraksi dilakukan  menggunakan pelarut etanol, namun tidak sebaliknya. Ini adalah informasi yang sangat penting terutama jika menginginkan  menghasilkan  hasil  ekstraksi  yang  lebih  selektif.  Penggunaan  pelarut metanol  dapat  lebih  selektif  hanya  menghasilkan  tiga  jenis  senyawa,  sementara menggunakan pelarut etanol, didapatkan lebih dari tiga jenis senyawa. Ini menunjukkan bahwa pelarut etanol dan pelarut methanol dalam hal mengekstrak serbuk buah cengkeh memiliki karakter dan kelebihan masing-masing.
Telah diperoleh ragam jenis senyawa bioaktif dari kandungan buah cengkeh yang diekstrak  menggunakan  pelarut  etanol  dan  metanol.  Sebagaimana  ditunjukkan  pada table 1 dan table 2, kuantitas tinggi dan luas masing-masing kurva puncak kelimpahan juga  diperoleh  dari  hasil  pengukuran.  Nilai  tinggi  kurva  puncak  kelimpahan  ini  dan luasnya  adalah  berbanding  lurus.  Kurva  puncak  yang  menghasilkan  nilai  tinggi  yang besar,  menghasilkan  nilai  luas  yang  besar  pula.  Luas  (%)  setiap  puncak  kelimpahan yang terukur yang dihasilkan oleh setiap senyawa bioaktif yang telah diperoleh tersebut
secara  tidak  langsung  adalah  menunjukkan  besar  persentase  kandungannya  [4,5]. Misalnya: puncak #1 pada table 1 yang adalah puncak kelimpahan yang dihasilkan oleh senyawa  eugenol  menghasilkan  luas  kelimpahan  sebesar  64786793,  yang  adalah 87,48%  dari  seluruh  total  luas  puncak  kelimpahan.  Ini  menyatakan  bahwa  kandungan senyawa  bioaktif  eugenol  dari  seluruh  senyawa  bioaktif  yang  dihasilkan  dari  ekstrak menggunakan  pelarut  etanol  adalah  87,48%.  Dengan  demikian  senyawa  bioaktif eugenol  adalah  senyawa  yang  paling  dominan  (yang  paling  banyak)  yang  diperoleh ketika  mengeskstrak  buah  cengkeh  dengan  menggunakan  pelarut  etanol.  Empat  urutan yang  paling  banyak  berikutnya  masing-masing  adalah  trans-caryophyllene  (6,56%); 2,3,4-trimethoxyacetophenone  (2,94%);  alpha-humulene  (0,93%);  dan  delta-cadinene (0,89).
Hal  yang  sama  dengan  cara  di  atas,  ketika  kita  memperhatikan  luas  masing- masing kurva puncak kelimpahan yang ditunjukkan pada table 2, menunjukkan bahwa senyawa  bioaktif  yang  paling  banyak  diperoleh  dengan  menggunakan  pelarut  metanol adalah eugenol yaitu sebanyak 75%, dan diikuti selanjutnya masing-masing oleh trans- caryophyllene (20,74%) dan alpha-humulene (3,95%). Melihat kedua hasil ekstrak ini, yaitu hasil ekstrak menggunakan pelarut etanol dan hasil ekstrak menggunakan pelarut metanol, kedua-duanya menghasilkan senyawa bioaktif eugenol sebagai senyawa yang paling dominan. Dengan demikian dapatlah kita katakan bahwa kandungan utama (yang paling  banyak)  dari  buah  cengkeh  adalah  eugenol  dan  diikuti  oleh  senyawa-senyawa yang lainnya sebagaimana terurai pada table 1 dan table 2.
Merujuk  kepada  hasil  ini  dimana  eugenol  adalah  kandungan  utama  dari  buah cengkeh  maka  potensi  penggunaan  buah  cengkeh  ke  depan  telah  dapat  dikembangkan merujuk  kepada  kandungan  utamanya  tersebut.  Sebagaimana  telah  diterangkan sebelumnya  pada  bagian  pendahuluan,  bahwa  buah  cengkeh  telah  banyak  digunakan masyarakat  sebagai  obat  tradisional  untuk  menyembuhkan  beragam  jenis  penyakit dan/atau  untuk  menjaga  kesehatan  tubuh.  Secara  fenomenologis  mengkonsumsi  buah cengkeh  dirasakan  dapat  menyembuhkan  beberapa  jenis  penyakit  dan  juga  dapat menjaga  kesehatan  tubuh.  Fenomena ini tentu tidak terlepas  dari  unsur-unsur  senyawa yang  terkandung  di  dalam  buah  cengkeh.  Sebagaimana  telah  kita  peroleh  seperti  telah diterangkan  di  atas,  buah  cengkeh  mengandung  banyak  senyawa  eugenol,  maka kesembuhan  beragam  jenis  penyakit  yang  dirasakan  selama  ini  setelah  mengkonsumsi buah  cengkeh  tersebut  tidak  terlepas  dari  peran  senyawa  eugenol  yang  terkandung  di dalamnya.
(Gülçin,  2011) melaporkan  bahwa  eugenol  memiliki  sifat  antioksidan.  Karena sifat antioksidannya eugenol dapat menjaga membran sel (lipid) terhindar dari bencana peroksidasi yang diakibatkan oleh radikal bebas (oksidan). Radikal bebas dapat merusak membrane  sel  dan  mengakibatkan  terjadinya  distabilitas  dan  perubahan  karakteristik transport  membran.  Bila  peroksidasi  terjadi  pada  membran  sel  dan  tidak  diatasi,  akan berakibat  pada  munculnya  penyakit  seperti:  atherosclerosis,  diabetes,  kanker,  dan ischemia-referfusion  enjury.  Sifat  antioksidan  eugenol  inilah  salah  satu  yang  berperan sehingga  masyarakat  yang  mengkonsumsi  buah  cengkeh  dapat  sembuh  dari  penyakit
seperti disebutkan di atas. Selain sebagai anti oksidan, eugenol juga ditemukan memiliki sifat  antibakteri  dan  antifungi  seperti  yang  dilaporkan  oleh (Marchese  et  al.,  2017) . Dengan  demikian  cengkeh  dapat  pula  dijadikan  bahan  alami  sebagai  antibakteri  dan antifungi (jamur).
Selain  manfaat  seperti  diterangkan  di  atas,  yang  paling  menarik  akhir-akhir  ini adalah  potensi  eugenol  sebagai  anti  virus,  terutama  sebagai  anti  virus  SARS-CoV-2 yang  menyebabkan  penyakit  Covid-19  yang  melanda  dunia  saat  ini.  Beberapa  peneliti telah  menginvestigasi  sifat  anti  virus  eugenol. (Benencia  &  Courreges,  2000) melaporkan  bahwa  eugenol  sangat  efektif  melawan  virus  herpes,  baik  terhadap  virus herpes  tipe-1  maupun  virus  herpes  tipe-2.  Sementara (Lane  et  al.,  2019) melaporkan bahwa  eugenol  juga  memiliki  sifat  anti  virus  yang  sangat  kuat  untuk  melawan  virus ebola.  Merujuk  kepada  hasil-hasil  ini,  maka  gagasan  untuk  menggunakan  senyawa bioaktif eugenol sebagai anti virus, termasuk untuk melawan virus SARS-CoV-2, akhir- akhir ini menjadi mengemuka dan mendapat perhatian.
(Kanyinda,  2020) secara  fenomenologis  telah  menguji  penggunaan  air  hasil rebusan buah cengkeh yang mengandung eugenol sebagai bahan terapi bagi pasien yang menderita  serangan  virus  SARS-CoV-2  (Covid-19).  Buah  cengkeh  direbus menggunakan air murni. Air hasil rebusannya kemudian diuapkan dan dihirupkan pada pasien yang terserang virus Covid-19. Selain diuapkan dan dihirupkan, air hasil rebusan tersebut juga diminumkan pada pasien tersebut. Hasilnya diperoleh bahwa virus SARS- CoV-2  lebih  cepat  hilang  dari  tubuh  pasien,  sebagaimana  dibuktikan  dari  hasil  test covidnya yang negatif. Mekanisme bagaimana eugenol dapat menghambat inveksi virus SARS-CoV-2  ke  dalam  sel,  diterangkan  oleh (Paidi  et  al.,  2021) .  Dari  hasil  temuan mereka diperoleh bahwa molekul eugenol dapat dan berperan mengikat spike dari virus SARS-CoV-2 sehingga virus ini tidak dapat menggapai angiotensin-converting enzyme 2  (ACE2)  dari  sel  dan  menjadi  pasif.  Pada  akhirnya  virus  SARS-CoV-2  gagal menginveksi sel dan mati. Interaksi antara spike virus SARS-CoV-2 dengan ACE2 dari sel secara efektif dapat dihambat dan digagalkan sehingga peluang virus SARS-CoV-2 masuk  ke  dalam  sel  sangat  kecil.  Merujuk  kepada  temuan  ini  maka  ke  depan  buah cengkeh sangat berpotensi digunakan sebagai salah satu obat alami atau sebagai sumber senyawa  eugenol  untuk  mengatasi  permasalah  serangan  inveksi  yang  terjadi  yang diakibatkan oleh virus covid-19.

## Kesimpulan
Dari  hasil  yang  diperoleh  pada  penelitian  ini,  sebagaimana  telah  diterangkan  di atas, senyawa-senyawa bioaktif yang terkandung di dalam buah cengkeh telah diekstrak dengan  menggunakan  pelarut  etanol  dan  pelarut  metanol.  Senyawa-senyawa  bioaktif tersebut  telah  juga  sekaligus  diidentifikasi  dengan  menggunakan  teknik  GC-MS.  Dari hasil pengukuran yang dilakukan diperoleh bahwa ada sebanyak 10 puncak kelimpahan dengan  waktu  retensi  yang  berbeda-beda  yang  terukur  dari  konsentrat  hasil  ekstrak menggunakan pelarut etanol, dan ada 3 puncak kelimpahan dengan waktu retensi yang berbeda-beda yang terukur dari konsentrat hasil ekstrak menggunakan pelarut metanol.
Spektrum  massa  dari  masing-masing  senyawa  bioaktif  yang  menghasilkan  puncak- puncak kelimpahan tersebut pun juga telah diperoleh.
Dengan  menggunakan  hasil  pengukuran  waktu  retensi  tiap-tiap  puncak kelimpahan tersebut dan hasil pengukuran spektrum massa senyawa yang menghasilkan tiap-tiap puncak kelimpahan tersebut, diperoleh bahwa senyawa-senyawa bioaktif yang terdapat  pada  ekstrak etanol  buah cengkeh  adalah:  (1)  eugenol;  (2) alpha-copaene;  (3) trans-caryophyllene;  (4)  alpha-humulene;  (5)  alpha-copaene;  (6)  delta-cadinene;  (7) naphthalene;  (8)  caryophyllene  oxide;  dan  (9)  2,3,4-trimethoxyacetophenone.  Dan senyawa-senyawa bioaktif yang terdapat pada ekstrak metanol adalah: (1) eugenol; (2) trans-caryophyllene;  dan  (3)  alpha-humulene.  Persentasi  kandungan  terbesar  dari masing-masing  hasil  ekstrak  ini  adalah  eugenol.  Ini  menunjukkan  bahwa  kandungan utama buah cengkeh adalah senyawa bioaktif eugenol.
Oleh  karena  kandungan  utamanya  adalah  eugenol  maka  ke  depan  buah  cengkeh berpotensi  digunakan  sebagai  bahan  alam  antioksidan,  antibakteri,  antifungi,  dan  juga antivirus  karena  eugenol,  oleh  para  peneliti  lain,  ditemukan  sebagai  antioksidan, antibakteri,  antifungi,  dan  juga  antivirus.  Terhadap  kasus  yang  dua  tahun  terakhir  ini terjadi di seluruh dunia, yaitu adanya pandemi virus SARS-CoV-2 yang menyebabkan penyakit covid-19, buah cengkeh ini juga sangat berpotensi digunakan sebagai sumber eugenol untuk mengatasi penyebaran dan inveksi dari virus SARS-CoV-2 tersebut

## BIBLIOGRAFI
Adams,  Robert  P.  (2007). Identification  Of  Essential  Oil  Components  By  Gas Chromatography/Mass  Spectrometry (Vol.  456).  Allured  Publishing  Corporation Carol Stream. Google Scholar
Benencia, F., & Courreges, M. C. (2000). In Vitro And In Vivo Activity Of Eugenol On Human Herpesvirus. Phytotherapy Research: An International Journal Devoted To Pharmacological  And  Toxicological  Evaluation  Of  Natural  Product  Derivatives , 14 (7), 495–500. Google Scholar
Bustaman,  Sjahrul.  (2011).  Potensi  Pengembangan  Minyak  Daun  Cengkeh  Sebagai Komoditas  Ekspor  Maluku. Jurnal  Litbang  Pertanian , 30 (4),  132–139. Google Scholar
Gülçin,  İlhami.  (2011).  Antioxidant  Activity  Of  Eugenol:  A  Structure–Activity Relationship Study. Journal Of Medicinal Food , 14 (9), 975–985. Google Scholar
Kanyinda,  Jean  Noël  Mputu.  (2020).  Coronavirus  (Covid-19):  A  Protocol  For Prevention  And  Treatment  (Covalyse®). European  Journal  Of  Medical  And Health Sciences , 2 (3). Google Scholar
Kitson,  Fulton  G.,  Larsen,  Barbara  S.,  &  Mcewen,  Charles  N.  (1996). Gas Chromatography  And  Mass  Spectrometry:  A  Practical  Guide .  Academic  Press. Google Scholar
Lane,  Thomas,  Anantpadma,  Manu,  Freundlich,  Joel  S.,  Davey,  Robert  A.,  Madrid, Peter B., & Ekins, Sean. (2019). The Natural Product Eugenol Is An Inhibitor Of The Ebola Virus In Vitro. Pharmaceutical Research , 36 (7), 1–6. Google Scholar
Marchese,  Anna,  Barbieri,  Ramona,  Coppo,  Erika,  Orhan,  Ilkay  Erdogan,  Daglia, Maria,  Nabavi,  Seyed  Fazel,  Izadi,  Morteza,  Abdollahi,  Mohammad,  Nabavi, Seyed Mohammad, & Ajami, Marjan. (2017). Antimicrobial Activity Of Eugenol And  Essential  Oils  Containing  Eugenol:  A  Mechanistic  Viewpoint. Critical Reviews In Microbiology , 43 (6), 668–689. Google Scholar
Paidi, Ramesh Kumar, Jana, Malabendu, Raha, Sumita, Mckay, Mary, Sheinin, Monica, Mishra,  Rama  K.,  &  Pahan,  Kalipada.  (2021).  Eugenol,  A  Component  Of  Holy Basil  (Tulsi)  And  Common  Spice  Clove,  Inhibits  The  Interaction  Between  Sars- Cov-2  Spike  S1  And  Ace2  To  Induce  Therapeutic  Responses. Journal  Of Neuroimmune Pharmacology , 16 (4), 743–755. Google Scholar
Tulungen, Franky Reintje. (2019). Cengkeh Dan Manfaatnya Bagi Kesehatan Manusia Melalui  Pendekatan  Competitive  Intelligence. Biofarmasetikal  Tropis , 2 (2),  158– 169. Google Scholar

## Copyright holder:

## Pearlyta Chrisophras Situmorang, Horasdia Saragih (2022)

## First publication right:
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: