Optimasi Pembentukan Gula Cair Dari Limbah Kulit  Singkong (Manihot utilisima Pohl) Oleh Bacillus Licheniformis dalam Usaha Menumbuhkan Jiwa Kewirausahaan .
The Optimal Concentration of Bacillus licheniformis Required in the Formation of Liquid Sugar from Cassava (Manihot utilisima Pohl) Waste to Nurture Entrepreneurial Skills
Retni S. Budiarti 1) , Harlis 2) , Hari kapli 3)
Program Studi Pendidikan Biologi FKIP Universitas Jambi Email: 1) rsb_nugraha@yahoo.co.id, 2) harlisbahar@gmail.com , 3) harikapli9@gmail.com
Abstract, This  study  aims  to  determine  the  optimal  concentration  of Bacillus  licheniformis required  in  the  formation  of  liquid  sugar  from  cassava  waste,  the  value  of  sugar  and  value starch contained in degraded cassava skin waste. The design used in this study was Completely Randomized  Design  (RAL)  with  4  treatment  concentration  of  cassava  leaf  extract  (Manihot utilissima  Pohl.),  Ie  0  concentration,  1.5  ml  concentration,  2.5  ml  concentration  and  3.5  ml  of concentration B.  licheneformis .  Data  were  analyzed  using  analisis  (ANOVA)  followed  by Duncan's range test (DMRT) with a 5% confidence level. The results of the study showed that all treatments  had  a  significant  effect  on  the  administration  of  B.  licheniformis  concentrations. Treatment  using  1.5  ml  B.  licheniformis  concentration  on  cassava  skin  substrate  weighing  1 gram  after  Duncan's  test  range  (DMRT)  with  5%  confidence  level  resulted  Reduction  sugar value of 6.07%.
Keywords : Bacillus licheniformis , liquid sugar, cassava waste, sugar content, starch
Abstrak, Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi Bacillus licheniformis optimal yang dibutuhkan dalam penbentukan gula cair dari limbah singkong, nilai kadar gula serta  nilai amilum  yang  terkandung  dalam  limbah  kulit  singkong  yang  terdegradasi.  Rancangan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan konsentrasi  ekstrak  daun  singkong  ( Manihot  utilissima Pohl . ),  yaitu  0  konsentrasi,  1,5  ml konsentrasi, 2,5 ml konsentrasi dan 3,5 ml konsentrasi B. Licheneformis . Data dianalisis dengan menggunakan  analisis  (ANOVA)  yang    dilanjutkan  dengan  uji  duncan’s  range  test  (DMRT) dengan  taraf  kepercayaan  5%.  Hasil  Penelitian  memperlihatkan  bahwa  seluruh  perlakuan pengaruh nyata terhadap pemberian konsentrasi B.licheniformis . Perlakuan dengan menggunakan konsentrasi  1,5  ml B.  licheniformis pada  substrak  kulit  singkong  seberat  1  gram  setelah  uji Duncan’s  range  test  (DMRT)  dengan  taraf  kepercayaan  5%  menghasilkan  nilai  gula  reduksi sebesar 6.07 %  .
Kata kunci : Bacillus licheniformis, gula cair, limbah singkong, kadar gula, amilum
Biospecies Vol. 11 No. 2, Juli 2018. Hal 108  - 114

## PENDAHULUAN
Paradigma bahwa lulusan program studi pendidikan  biologi  hanya  dapat  bekerja sebagai pendidik saatnya kini harus dirubah, karena    tidak  sesuai    dengan  profil  lulusan yang  diharapkan    pada  Visi  dan  Misi Kurikulum  KKNI  yang  dipakai  pada Program  Studi  Pendidikan  Biologi  FKIP UNJA . Selain sebagai pendidik, mahasiswa diharapkan menjadi calon pengelola pendidikan  yang  handal,  calon  peneliti pendidikan  dan  keilmuan  biologi  serta menjadi    lulusan  yang  mampu  menciptakan lapangan    kerja  dimasyarakat    sebagai wirausahawan  yang  kompeten    dalam menerapkan keilmuan yang telah didapatkan semasa kuliah (Anonim, 2016)
Sejalan dengan hal tersebut dipandang perlu menumbuhkan jiwa kewirausahaan  pada  mahasiswa  di  prodi Pendidikan  biologi.  Diantaranya  dengan mengeksplore  kegiatan  pembelajaran    pada berbagai  mata  kuliah  program  studi    yang dapat  dijadikan    sarana  latihan  atau      uji coba pembuktian teori . Pentingnya pembuktian  teori  saat  perkuliahan  ditujukan agar  mahasiwa  memiliki  kemampuan  untuk menghasilkan    produk  baru    yang  bernilai tinggi  karena  sudah  melalui  pengujian secara  ilmiah    yang  berkelanjutan  yang berdampak pada nilai jual yang tinggi .
Satu  dari  beberapa  mata  kuliah pilihan  yang  dapat  menumbuhkan  jiwa kewirausahan  adalah Mikrobiologi  Terapan. Mikrobiologi  Terapan    merupakan  cabang ilmu  mikrobiologi    yang  menggunakan mikroorganisme mencakup bermacam- macam  kelompok  organisme  mikroskopik baik    sel  tunggal  maupun  kelompok  sel, termasukkajian  virus  yang  dapat  diterapkan demi  kelangsungan  hajat  hidup  manusia (Pelzar,  2012).    Beberapa  mikroorganisme yang  dipelajari  pada  Mikrobiologi  terapan dapat dimanfaatkan untuk berbagai kepentingan  manusia  dalam  mengubah
bahan  tidak  terpakai  atau  sisa  dari  kegiatan manusia  (Limbah)  menjadi  produk  yang bermanfaat  dan  memiliki  nilai  ekonomis yang  tinggi.  Satu  diantaranya  adalah Bacillus  licheniformis. Bakteri  ini  memiliki kemampuan  mengubah  senyawa  amilum menjadi senyawa yang lebih sederhana yaitu glukosa. B. liceniformis merupakan mikroorganisme  yang    sangat  berpotensi menghasilkan  enzim.  Bakteri  ini  bersifat termofilik yang dapat hidup pada suhu tinggi 50-65°C(Soeka, dkk.2011:90). Kemampuannya  untuk  menghasilkan  enzim pendegradasi  senyawa  ini  dapat  dikaitkan dengan  pengubahan  bahan-bahan  terbuang menjadi bahan yang dapat dimanfaatkan.
Limbah  merupakan  satu  kata  yang kini menjadi kekawatiran baik tingkat local, nasional  dan  internasional.Dengan  semakin kompleksnya  kebutuhan  dan  teknologi manusia  dapat  dibayangkan  seandai  limbah yang  terbuang  tersebut  tidak  dimanfatkan tentunya dapat mengganggu lingkungan baik dari  segi  estetika  maupun  segi  kesehatan. Salah  satu  produksi  masyarakat  Jambi  yang meninggalkan  limbah  adalah produksi singkong.  Berdasarkan  sumber  informasi bahwa Provinsi Jambi merupakan salah satu pusat produksi singkong terbesar di Indonesia  setelah  provinsi  Jawa.  Dua kabupaten yang merupakan sentra perkebunan singkong yaitu Kabupaten Musi Bayuasin  telapu  h  mam  berproduksi  seluas 10.000  Ha,  dikabupaten    Muaro  Jambi seluas  10.000  Ha,  dan  kini  ada  rencana untuk  membuka  dikabupaten  yang  lainnya yaitu kabupaten Tebo, Damasraya, dan lain- lain .
Menurut  data  terakhir  Badan  Pusat Statistik  (2016:1)  produksi  singkong  di Provinsi  Jambi  pada  tahun  2015  mencapai 43.433  ton.  Artinya  limbah  yang  dihasilkan juga  cukup  banyak.  Mastuti,  dkk  (2013:5) mengatakan bahwa persentase jumlah limbah  kulit  singkong  bagian  luar  sebesar 0,5-2%  dari  berat  total  singkong  segar  dan
limbah  kulit  bagian  dalam  sebesar  8-15%. Oleh  karena  itu,  untuk  meminimalisir besarnya  limbah  kulit  singkong  di  Provinsi Jambi,  perlu  dilakukan  pemanfaatan  dalam bentuk lain, salah satunya adalah memanfaatkan  menjadi  gula  cair  dengan bantuan jasa bakteri.
Pemanfaatan  kulit  singkong  menjadi gula  cair  didasarkan  dari  penemua  n Arrahman,  Galih  Nugraha,  Putri  Vionita dam  Abdul  Aziz  kelompok    mahasiswa fakultas  pertanian  dari  kampus  IPB  (Institut Pertanian Bogor) yang menginovasikan kulit singkong  menjadi  gula  dalam  bentuk  cair yang  disebut  dengan  GUCAKUSI  (Gula Cair  Kulit  Singkong)  dengan  menggunakan enzim  amilase.  Studi  lanjut  telah  dilakukan pula  pada    praktikum  mikrobiologi  terapan di  program  studi  pendidikan  biologi  FKIP UNJA  semester  ganjil  2016-2017  yang memperlihatkan  kemampuan  terbentuknya gula  cair  dengan  menggunakan  bakteri B. licheniformis .    Hasil  tersebut  merupakan landasan  perlunya    dilakukan  penilitian dengan  judul Optimasi  Pembentukan Gula  Cair  Dari  Limbah  Kulit  Singkong (Manihot  utilisima  Pohl.)  Oleh  Bacillus licheniformis
Dalam
Usaha Menumbuhkan Jiwa Kewirausahaan.

## METODE
Rancangan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan konsentrasi ekstrak daun singkong ( Manihot utilissima Pohl . ), yaitu:
P0  =  1  g  limbah  singkong  +  0  konsentrasi B. licheneformis (kontrol)
P1  =  1  g  limbah  singkong  +  1,5  ml konsentrasi B. licheneformis P2  =  1  g  limbah  singkong  +  2,5  ml konsentrasi B. licheneformis P3  =  1  g  limbah  singkong  +  3,5    ml konsentrasi B. licheneformis
Setiap perlakuan diulang sebanyak 6 kali,  sehingga  didapatkan  unit  satuan percobaan sebanyak 24 unit satuan percobaan.
Setiap perlakuan diulang sebanyak 6 kali, sehingga di dapat 6 x 4 = 24 satuan unit percobaan. Menurut Mattjik dan
Sumertajaya  (2002:64),  model  linier  dari percobaan tersebut adalah:
Y ij = µ + T i + Ɛ ij
Keterangan :
Y ij : Pengamatan pada perlakuan ke-I dan ulangan ke-j µ : Rataan umum T i : Pengaruh perlakuan ke-i
Ɛ ij : Pengaruh acak pada perlakuan ke-i ulangan ke-j
Alat  yang  digunakan  antara  lain autoclave, sentrifugasi, vortex, rotary shaker,  evaporator,  oven,  spektofotometer, kalorimeter, timbangan analitik, erlenmeyer, gelas  beker,  tabung  reaksi,  cawan  petri, pipet  tetes,  tabung  ukur,  bunsen  api,  batang pengaduk, jarum ose, ember, baskom/wadah,  blender,  pisau/cutter,  botol kaca, saringan, thermometer, lemari pendingin, inkubator, incase, kompor listrik, kalorimeter, mikroskop dan kaca objek.
Bahan  yang digunakan antara lain pati kulit singkong ( Manihot utilisima Pohl.), air bersih,  isolat B.licheniformis ,  NA  ( Natrium Agar ), kristal violet , air kapur , H 2 SO 4 , NaCl 0,85  %,  pereaksi  seliwanof,  pereaksi benedict,  larutan  glukosa,  fruktosa,  sukrosa dan  laktosa,  sarung  tangan,  masker,  kapas kesehatan,  aluminium  foil,  kertas  label,  dan aquades.
Alat  dan  bahan  yang  akan  digunakan harus  disterilkan  terlebih  dahulu  untuk meminimalisir  kontaminasi  oleh  mikroba yang tidak diinginkan. Alat dan bahan  yang disterilisasi  dengan  menggunakan  autoclave adalah  erlenmeyer,  tabung  reaksi,  kapas kesehatan,  gelas  beker  ,  pipet  tetes,  alat
Biospecies Vol. 11 No. 2, Juli 2018. Hal 108  - 114
pengaduk dan jarum ose. Sterilisasi  dengan autoclave menggunakan suhu 121°C dengan tekanan 15 lbs atau 1 atm. Sementara untuk baskom/wadah,  pisau/cutter,  botol  kaca, saringan,  dan  sendok  pengaduk  disterilkan dengan  cara Boilling ,  yaitu  perebusan  atau pemanasan  pada  suhu  100°C  selama  10-15 menit (Hajoeningtijas, 2012:112).

## Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Pembuatan media NA dengan cara melarutkan 10 g NA sintetis ke dalam 500 ml akuades kemudian   dipanaskan dan diaduk hingga homogen lalu disterilkan dalam autoklaf  pada suhu 121 o C tekanan 15 lbs selama 15 menit.
Pembuatan Kurva Pertumbuhan B. licheniformis

## Pembuatan kurva pertumbuhan
Pembuatan  kurva  pertumbuhan B. licheniformis diawali  dengan  pembuatan suspensi bakteri B.licheniformis . Pembuatan suspensi  dilakukan  dengan  menyiapkan NaCl 0,85 % sebanyak 9 ml dan dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi.  Kemudian  diambil sampel  bakteri B.licheniformis yang  telah dibiakkan  dengan  menggunakan  jarum  ose. Setelah itu dihomogenkan dengan menggunakan  vortex  atau  dapat  dilakukan dengan  cara  manual  menggunakan  pipet tetes..  Diambil  1  ml  dari  tabung  1  dan dimasukkan  ke  tabung  2,  dan  seterusnya sampai tabung ke-7 pengenceran dihentikan. Diambil  1  ml  suspensi  bakteri  dari  tabung ke-7  dan  dimasukkan    dalam  cawan  petri dan  disebarkan  di  atas  media  NA    sampai merata  dengan  cara  di streak .  Media  NA diinkubasi  dalam inkubator pada suhu 37°C selama  24  jam.  Kemudian  diamati  jumlah koloni  yang  tampak  pada  cawan  petri. Selanjutnya dapat dibuat kurva pertumbuhan bakteri B.  licheniformis. Pembuatan  kurva pertumbuhan B. Licheniformis bertujuan untuk mengetahui tahap pertumbuhan beserta  waktu  yang  dibutuhkan  bakteri
B.licheniformis dalam mencapai fase stasioner.  Fase  stasioner  merupakan  fase maksimal  bakteri  mengalami  pertumbuhan (Cappuccino dan Sherman, 2013:135).

## Pengamatan Morfologi B. licheniformis
Morfologi  bakteri B.licheniformis dapat dilihat melalui pengamatan menggunakan  mikroskop. B.licheniformis merupakan bakteri jenis gram positif.Sehingga  dalam  pembuatan  apusan digunakan zat pewarna kristal violet . Bakteri gram  positif  dapat  mempertahankan  warna kristal  violet karena  lapisan  peptidoglikan dan dinding selnya lebih tebal dibandingkan bakteri gram negatif.
Pembuatan apusan bakteri B.licheniformis dilakukan dengan menyiapkan olesan tipis bakteri menggunakan jarum ose. Kemudian dilakukan  fiksasi.  Setelah  itu  objek  ditetesi dengan kristal  violet dan  dibiarkan  selama 60  detik.  Kemudian  dibilas  dengan  aquades secara  perlahan  dan  diamati  dimikroskop dengan beberapa perbesaran.

## Pembuatan Ekstrak Pati Kulit Singkong
Membersihkan Kulit singkong bagian  mesokarp  sebanyak    500  gram dengan  air  mengalir,  kemudian  direndam selama  ±  3  hari.  Perendaman  dilakukan dengan  ditambahkan  air  kapur  1  gr  untuk mencegah  kerusakan  pada  kulit  singkong. Selanjutnya  dengan  perbandingan  1:1  kulit singkong  ditambahkan  dengan  air  diblender sampai  halus  yang  dinamakan  bubur  pati  . Kemudian  bubur  pati  disaring  dan  sisanya diperas kemudian dimasukkan dalam wadah dan  diendapkan  hingga  pati  berada  didasar wadah.  Endapan  pati  yang  terbentuk dipisahkan  dan  ditambahkan  air  bersih secukupnya,  lalu  diendapkan  kembali.  Hal ini bertujuan untuk membilas pati agar lebih bersih.  Menurut  Arnata,  dkk  (2011:3)  pati
yang  sudah  mengendap  dipisahkan  pada wadah lainnya lalu dikeringkan menggunakan  oven  pada  suhu  50°C  agar kandungan  airnya  berkurang.  Kemudian dipindahkan  kedalam    erlenmeyer,  ditutup dengan kapas kesehatan dan aluminium foil.
Fermentasi  Pati  Kulit  Singkong  oleh Bakteri B. licheniformis
Fermentasi pati kulit singkong dilakukan  dengan  mencampurkan  pati  kulit singkong  dengan  aquades  dan  ditambahkan biakan  bakteri B.licheniformis .  Banyaknya biakan yang dimasukkan adalah 1 % dengan perbandingan  antara  pati  dan  aquades sebesar  1:2  Sebelum  ditambahkan  biakan, dilakukan  pengukuran  kadar  glukosa  pati sebanyak  1  gr  dengan  aquades  sebanyak  2 ml  (1:2)  untuk  mengetahui  kadar  glukosa sebelum  difermentasi  oleh B.licheniformis . Setelah itu dimasukkan biakan dan difermentasi  selama  72  jam  (3  hari)  dengan suhu 37°C (Widyatmoko, 2015:15).
Hasil hidrolisis kemudian disentrifuse  dengan  kecepatan  3000  rpm selama  30  menit.  Pada  tahap  ini,  zat  sisa atau  senyawa  yang  tidak  digunakan  akan terpisah  dan  mengendap  dibagian  bawah. Sementara  bagian  supernatant  nya  berada dibagian  atas  dan  inilah  yang  dikatakan sebagai gula cair. Sentrifugasi ini merupakan pemurnian yang bertujuan untuk memisahkan  enzim  dari  sel  bakteri  dan senyawa lainnya (Yandri dan Ibadurrahman, 2011:61).
Pemanasan Gula Cair Kulit

## Singkong
Supernatan  yang  dihasilkan  dari proses sentrifuse merupakan larutan glukosa yang  siap  untuk  dipanaskan  menjadi  gula cair.  Sebelumnya  dilakukan  pemucatan dengan arang aktif sebanyak 2 % dari bobot pati.  Menurut  Mashuri  (2012:1)  arang  aktif merupakan karbon yang diproses
sedemikian rupa sehingga memiliki kemampuan  adsorbsi  atau  daya  serap  yang tinggi  terhadap  bahan  larutan  atau  uap. Arang  aktif  ini  dapat  menyerap  senyawa berbahaya  dan  menjernihkan  gula  cair. Pemucatan  dilakukan  selama  ±1  jam  atau sampai  gula  cair  berubah  menjadi  lebih jernih.  Setelah  itu  disaring  menggunakan saringan dan dipindahkan kedalam erlenmeyer  lainnya.  Kemudian  larutan glukosa  dipanaskan  (gelatinisasi)  pada  suhu 90°C selama ±30 menit.

## Parameter Pengamatan Pengukuran Kadar Glukosa
Pengukuran  kadar  gula  dilakukan dengan menggunakan metode Fenol. Sampel sebanyak  1  ml  ditambahkan  dengan  fenol 5%  sebanyak  0,5  ml  dan  kemudian  H 2 SO 4 sebanyak  2,5  ml.  setelah  itu  dihomogenkan menggunakan  vortex  dengan  kecepatan 1800  rpm.  Kemudian  didiamkan  selama  10 menit.  Setelah  itu  ditambahkan  aquades hingga volume nya 10 ml. divortex kembali dan  kemudian  dimasukkan  kedalam  water bath dengan suhu 25 ° C atau bisa dimasukkan  kedalam  lemari  pendingin. Setelah itu diukur menggunkan spektrofotometer  pada  490  nm.  Tahap selanjutnya  adalah  perhitungan  adsosbansi dan pembuatan kurva standar  (Apriyantono, dkk,1989:50).

## Uji Biokimia
Uji biokimia dilakukan untuk mengidentifikasi  kandungan  karbohidrat pada gula cair kulit singkong. Uji karbohidrat dilakukan dengan dua cara yaitu melalui  tesseliwanof  dan  tes  benedict. Disamping  itu  juga  dilakukan  uji  jenis karbohidrat  pada  sampel  gula  cair  kulit singkong. Hal ini dilakukan dengan menggunakan  larutan  pereaksi  glukosa, fruktosa, laktosa dan sukrosa.
Biospecies Vol. 11 No. 2, Juli 2018. Hal 108  - 114
Analisis Data
Untuk menganalisis data hasil penelitian,  diperlukan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  yang  dianalisa  dengan analisis  varian  (ANOVA).  Jika  terdapat perbedaan  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan’s
Range Test (DMRT) dengan taraf kepercayaan  5%,  untuk  membandingkan hasil yang diperoleh dari tiap-tiap perlakuan.

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Biologi  FKIP,  Laboratorium Kimia Analitik dan Laboratorium Dasar dan Terpadu  Universitas  Jambi  pada  sampai dengan Oktober 2017.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Uji glukosa
Setelah  dilakukan  analisis  data  hasil uji  glukosa  menggunakan  gula  pereduksi terhadap  24  sampel  uji  didapatkan  hasil bahwa  terdapat  pengaruh  nyata  perlakuan terhadap  kontrol.  Kemudian  dilanjutkan dengan  uji  lanjut Duncan pada  table  2 didapatkan hasil bahwa semua perlakuan P1 (1  g  limbah  singkong  +  1,5  ml  konsentrasi B.  licheneformis ) , P2  (1  g  limbah  singkong +  2,5  ml  konsentrasi B.  licheneformis )dan P3  (1  g  limbah  singkong  +  3,5  ml konsentrasi B.  licheneformis )  berbeda  nyata perlakauan  P0  (1  g  limbah  singkong  +  0 konsentrasi B. licheneformis (kontrol).
Tabel 2 hasil uji analisis statistik menggunakan  rancangan  acak  lengkap (RAL) yang dianalisa dengan analisis varian (ANOVA)  dan  dilanjutkan  dengan  uji duncan’s  range  test  (DMRT)  dengan  taraf kepercayaan 5%
Perlakuan Ulangan R 1 2 3 4 5 6 P0 0.15 0.17 0.19 0.14 0.16 0.15 0.16a
P1 6,38 7,77 7,42 5,34 5,80 3,69 6.07c
P2 6,89 5,87 6,18 3,37 4,48 4,82 5.27c P3 3,01 1,91 3,55 2,57 2,56 2,77 2.73b
J
Ket : P ; Perlakuan, R&N : rata-rata dan notasi, J ; Jumlah.
Uji  gula  reduksi  dilakukan  pada  24 isolat  yang  menunjukkan  bahwa  semua isolat  terdapat  perubahan  warna.Hal  ini karena  semua  isolat  tersebut  memiliki kemampuan mereduksi amilum yang tinggi.Gula  reduksi  diamati  secara  kualitatif ditandai dengan adanya endapan merah bata (Lampiran  1),  Semakin  merah  warna  yang dihasilkan  maka  diharapkan  semakin  besar kemampuan  mereduksi  gula.  Hasil  terbaik didaptkan  pada  perlakuan  P1  dengan  nilai rata-rata gula reduksi yang dihasilkan adalah 6.07  %  meningkat  sekitar  60%  dari  kadar gula  kontrol,  dimana  pada  perlakuan  P1 ditambahkan 1,5 ml konsentrasi B. licheneformis. Penambahan 1,5 ml konsentrasi
B. licheneformis untuk fermentasi  adalah  tahap  sebelum  dilakukan prosedur penelitian mulai dari sterilisasi alat dan bahan, pembuatan media NA, pembuatan kurva pertumbuhan B. licheniformis ,  pengamatan  morfologi B. licheniformis ,  dan  pembuatan  ekstrak  pati kulit  singkong.    Pada  tahapan  fermentasi kulit dengan ditambahkan 2,5 ml konsentrasi B.  licheneformis pada  perlakuan  P1  yang memiliki  persentase  gula  pereduksi  paling tinggi  terjadi  perombakan  senyawa  pada kulit  singkong  yaitu  amilum  menjadi senyawa yang lebih sederhana yaitu glukosa. Hal  ini  dkarenakan  pada  perlakuan  P1 berhasil dilakukan fermentasi dengan sempurna oleh B. licheneformis
mengguakan  enzim  pendegradasi  amilum yaitu  amylase.  Berdasarkan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Reddy, et  al (2013) mendaptkan hasil bahwa Bacillus licheniformis memiliki  kemampuan  untuk menghasilkan enzim amylase.Bakteri menghasilkan  enzim  ekstraseluler  di  dalam
sel  dan  menggunakannya  di  luar  sel,  yaitu untuk menghidrolisis sumber makanan yang mengandung  amilum  yang  terdapat  di lingkungannya.Molekul  amilum  tidak  dapat masuk  ke  dalam  sel  bakteri  karena ukurannya  sangat  besar,  karena  itu  molekul amilum  dihidrolisis  terlebih  dahulu  oleh enzim amilase ekstraselular menjadi molekul  karbohidrat  yang  lebih  sederhana dan kecil ukuran molekulnya. Molekul hasil hidrolisis  amilum  oleh  enzim  amilase tersebut selanjutnya akan diangkut masuk ke dalam  sel  bakteri  dan  digunakan  sebagai sumber  karbon  bagi  aktivitas  pertumbuhan dan kehidupannya (Benson, 1994).
Kemudian konsentrasi bakteri terbaik  yaitu  terdapat  pada  konsentrasi  1,5 ml hingga 2,5 ml pada perlakuan P1 dan P2 hal  ini  dimungkinkan  karena  dengan konsentrasi  telah  memiliki  jumlah  bakteri optimal  untuk  memfermentasi  amilum, sedangkanpada  konsentrasi  lebih  tinggi terlau  tinggi  jumlah  populasi  bakteri  yang mengakibatkan ketidaksesuaian dengan nutrisi  (substrat)  untuk  difermentasi.  Proses bakteri pertumbuhan sangat komplek, mencakup  pemasukan  nutrien  dasar  dari lingkungan  ke  dalam  sel,  konversi  bahan- bahan  nutrien  menjadi  energi  dan  berbagai konstituen  vital  sel  serta  perkembangbiakan (Moat,  1979  dalam  Judoamidjoyo,  1989). Jumlah  sel  bakteri  dapat  diamati  dengan pola  pertumbuhan  sehingga  didapatkan  fase lag,  fase  log,  fase  stasioner  dan  fase kematian.  Pola  pertumbuhan  bakteri B. licheniformis pada  konsentrasi  1,5  ml,  2,5 ml,  3  ml,  serta  control  (tidak  ada  bakteri) berbeda. Hal ini dikarenakan di dalam setiap konsentrasi  memiliki  kandungan  nutrisi yang  berbeda-beda.Kandungan  nutrisi  pada media  mola  sel  ini  menentukan  viabilitas (jumlah  sel)  dari  bakteri B.  licheniformis . Jumlah  sel  bakteri  yang  paling  tinggi terdapat  pada  fase  log  akhir.  Pada  fase  ini, sel mulai aktif membelah serta perkembangbiakan meningkat sehingga
didapatkan jumlah sel terbanyak. Perkembangbiakan berhenti disebabkan karena    nutrisi  di  dalam  molase  telah berkurang.  Kematian  bakteri  disebabkan karena  zat  makanan  yang  diperlukan berkurang  (Dwijoseputro,  2003).  Untuk mengetahui fase log akhir dan fase kematian bakteri B.  licheniformis ,  maka  dibuat  pola pertumbuhan  dari  data  jumlah  sel  pada media molase serta media NB (kontrol) yang didapatkan dari metode hitungan cawan.
Kemudian  tingginya  jumlah  enzim yang dihasilkan pada konsentrasi 1.5 ml dan 2.5  mengakibatkan  hasil  terbaik  untuk fermentasi amilum menjadi glukosa. Tingginya konsentrasi enzim yang digunakan akan berpengaruh terhadap kecepatan reaksinya. Peningkatan kecepatan reaksi  ditandai  dengan  semakin  banyaknya produk yang terbentuk dan ju ml ah substrat yang  terus  berkurang    (Budiyanto  et  al. 2006). Terbentuknya produk tersebut ditandai dengan terbentuknya gula cair.Gula cair  tersebut  mengandung  gula  pereduksi yang selanjutnya dilakukan pengukuran nilai absorbansi.Nilai  absorbansi  yang  semakin tinggi  menunjukkan  kandungan  glukosa pada  gula  cair  yang  semakin  besar  (Argo dan  Yulianingsih  2013).  Sedangkan  pada konsentrasi  3,5  ml  karena  jumlah  mikroba yang  dihasilkan  tidak  sebanding  dengan substrat sehingga dimunkinkan banya terjadi kematian  bakteri  yang  berdampat  pada rendahnya  enzim  yang  dihasilkan  sehingga rendahnya  nilai  gula  pereduksi.  Kemudian pada  control  tidak  terjadi  proses  fermentasi dkarenakan  karena  tidak  terdapat  bakteri yang  berfermetnasi  sehingga  tidak  terjadi perombakan  amilum  menjadi  gula.  Hal  ini ditunjukkan  oleh  nilai  gula  pereduksi  yang hanya 0.16 %.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitan  didapatkan kesimpulan  bahwa  limbah  kulit  singkong dapat  dimanfaatkan  dalam  pembuatan  gula
Biospecies Vol. 11 No. 2, Juli 2018. Hal 108  - 114
cair  dengan  memanfaatkan  bakteri Bacillus licheneformis dan  konsentrasi  terbaik  pada pemaanfaatan bakteri B. licheniformis dengan  konsentrasi  1,5  ml  yang  diharapkan akan  dapat  dilanjutkan  dengan  penelitian peningkatan kemampuan menghasilkan enzim amylase oleh bakteri B. licheniformis.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim,2016,Laporan Penyusunan KurikulumProgram Studi Pendidikan Biologi FKIP Revitalisasi LPTK Argo BD, Yulianingsih R. 2013. Pemanfaatan  enzim  selulase  dari Trichoderma  Reseei  dan  Aspergillus
Niger  sebagai  katalisator  hidrolisis enzimatik jerami padi dengan pretreatment microwave. J Bioproses
Komodititas Tropis. 1(1):36-43.
Badan  Pusat  Statistik.2016.  Produksi  Ubi
Kayu  Menurut  Provinsi  (ton)  1993- 2015 diakses tanggal 18 Mei 2016 https ://www.bps.go.id /linkTableDinami/view/i /880
Gentara.  L. Diakses tanggal 06 Maret 2017. Cara  Mengolah  Kulit  Singkong Menjadi Sayur atau Keripik, 12 April 2013. http://www.gen22.net/2013/04/cara- mengolah-kulit-singkong- menjadi produk.html
Prabawati,S.,Nur.R.dan  Suismono.  2011.
Inovasi Pengolahan singkong eningkatkan pendapatan dan
diversifikasi  pangan.  Edisi  4-10  Mei
2011  No.3404  Tahun  XLI ,  Bogor  : Badan litbang pertanian.
Prihandana,  R.,  Noerwijan,  K.,  Adinursni, P.G.,  Setyaningsih,  D.,  Setiadi,  S. dan Hendroko  R.  2007.  Bioetanol  Ubi Kayu  Bahan  Bakar  Masa  Depan. Jakarta: Agromedia
Richana,N.2012. Ubi  Kayu  dan  Ubi  Jalar . Bandung : Penerbit Nuansa
Rukmana,  R.  1997.  Ubi  Kayu  Budi  Daya dan Pasca Panen. Yogyakarta: Kanisius Suprapti,L.2015. Teknologi Pengolahan Pangan  Tepung  Tapioka  Pembuatan
& Pemanfaatannya. Kanisius  :

## Yogyakarta
Sunarto,2002. Membuat  kerupuk  singkong dan  keripik  kedelai .  Kanisius  : Yogyakarta
Suherman,C.2009.Ubi dan Singkong.
Talenta  Pustaka  Indonesia  :  Banten