## RESEARCH ARTICLE

## J. Islamic Pharm. Online ISSN: 2527-6123
Volume 7 (2) 2022; p123-128 DOI: 10.18860/jip.v7i2.17698
Profil Senyawa Metabolit Sekunder dalam Minyak Atsiri Tumbuhan Legundi ( Vitex trifolia Linn) yang Tumbuh di Pulau Timor
Angela Nona, Christiani Dewi Q. M. Bulin, Gerardus Diri Tukan, Maximus M. Taek*
Universitas Katolik Widya Mandira, Indonesia
*Corresponding Author. E-mail: maximusmt2012@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui profil senyawa-senyawa metabolit sekunder dalam minyak atsiri daun tumbuhan legundi ( Vitex trifolia Linn) yang tumbuh di Pulau Timor. Minyak atsiri dari sampel daun tumbuhan legundi diekstraksi menggunakan  distilasi  uap  air  dengan  menggunakan  sampel  yang  masih  segar  sedangkan  analisis  senyawa  metabolit sekunder dalam minyak atsiri dilakukan dengan GC-MS. Hasil penelitian yang terdapat dalam sampel minyak atsiri daun legundi asal Pantai Paradiso,  Kelurahan  Oesapa  Barat,  Kota  Kupang  sebanyak  49  senyawa.  Senyawa-senyawa  yang  dominan  ada  12  yakni  trans- Kariopillen 25,43%, 1,2-asam Benzendikarbosilik 14,16%, Sabinen 7,57%, 1,8-Sineol 4,17%, Kariopillen oksida 3,71%, Skareol 3,21%, α-Humulen 3,07%, α-Terpinenil asetat 2,36%, Sitronella 2,30%, 3-Sikloheksanol 1,76%, α-Pinen 1,76%, β-Pinen 1,68%.
Kata Kunci: Legundi, Vitex trifolia Linn, metabolit sekunder, metabolite profilling

## AB STRACT
This research was conducted with the aim of knowing the profile of secondary metabolites in the essential oil of the leaves of the legundi (Vitex trifolia Linn) plant that grows on the island of Timor. Essential oil from legundi plant leaf samples was extracted by steam distillation using fresh samples, while the analysis of secondary metabolites in legundi leaf essential oil used GC-MS. The results of the study contained in the sample of legundi leaf essential oil from Paradiso beach, Oesapa Barat village, Kupang City as many as 49 compounds. The 12 dominant compounds were trans-Karyopillen 25.43%, 1,2-Benzendicarbosic acid 14.16%, Sabinen 7.57%, 1,8-Sineol 4.17%, Karyopillen oxide 3.71%, Skareol 3.21%, α-Humulen 3.07% with a retention time of 9.938 minutes, α-Terpinenyl acetate 2.36%, Citronella 2.30%, 3-Cyclohexanol 1.76%, α-Pinen 1.76%, β-Pinen 1.68%.
Keywords: Legundi (Vitex trifolia Linn), steam-water distillation, essential oil, GC-MS
Submitted: October 3 rd 2022 | Accepted: December 17 th 2022  | Published: December 31 st 2022
Kulit  batang  berwarna  cokelat  muda-tua,  daun  majemuk menjari  berwarna  hijau,  dan  bunga  berwarna  biru  keunguan. Sementara  buahnya  berwarna  cokelat  dan  berbentuk  bulat dengan diameter 2-5 mm yang berisi biji 1-4 butir [7].
Tumbuhan  Legundi  ( Vitex trifolia Linn)  tersebar  di daerah tropis dan subtropis. Tumbuhan ini banyak ditemukan di  Asia  Tenggara,  Mikronesia,  Australia,  dan  Afrika  Timur [6].  Kandungan senyawa aktif dalam tumbuhan legundi telah dilakukan analisis oleh beberapa peneliti. Daun legundi ( Vitex trifolia Linn) mengandung alkaloida, saponin, flavonoida, dan polifenol, serta mengandung minyak atsiri [8]. Syamsuhidayat dan  Hutapea  [7]  dari  penelitiannya  melaporkan  bahwa  daun dan  akar  tumbuhan  legundi  terdapat  senyawa Camphene, L-α-pinene,  silexicarpin,  casticin,  terpenyl  acetate,  luteolin- 7-glucosideflavopurposid ,  vitrisin,  asam  dihidroksibenzoat, dan vitamin A. Pada buah legundi   ditemukan   kandungan diterpen-haliman yang   diberi   nama vitetrifolins   D-G [9].

## Pendahuluan
Sejak peradaban kuno, tanaman obat telah digunakan oleh masyarakat  sebagai  perawatan  kesehatan  yang  penting  [1,2]. Berdasarkan  data  WHO,  65-80%  populasi  dunia  di  negara berkembang  seperti  Indonesia,  pada  dasarnya  menggunakan tanaman obat untuk perawatan kesehatan esensial mereka [3]. Indonesia memiliki lebih dari 300 suku bangsa asli, selain itu memiliki  sumber  daya  tanaman  obat  yang  melimpah  [4,5]. Salah  satu  tanaman  obat  prospektif  untuk  dikembangkan menjadi obat tradisional adalah legundi.
Legundi ( Vitex trifolia Linn) merupakan tumbuhan dari Genus Vitex ( Verbenaceae ). Tumbuhan Genus Vitex memiliki 250  spesies,  yang  salah  satunya  adalah  legundi  [6].  Spesies Vitex trifolia Linn merupakan pohon semak yang merayap, mempunyai tajuk tidak beraturan, dan ketinggian pohon rata- rata 4-8 meter. Tumbuhan ini memiliki batang berkayu bulat.
Pada  biji  legundi  terdapat  senyawa-senyawa  hidrokarbon, asam lemak [10].
Kajian  kandungan  minyak  atsiri  dalam  tumbuhan legundi telah dilakukan oleh peneliti sebelumnya yakni Irekha Parapat [11]. Hasil penelitiannya menunjukkan minyak atsiri dalam sampel daun legundi yang dianalisis dengan GC- MS  mengandung  senyawa  utama  yaitu  1,8  sineol,  sabinen, β-kariofilen,  α-pinen,  β-pinen,  7-okten-4-ol,  dan  α-terpineol. Menurut  Oktavia  Yulianti  [12],  komponen-komponen utama  penyusun  minyak  atsiri  sampel  legundi  adalah  1,8 sineol,  sabinen,  α-pinen,  α-terpineol  asetat,  kariofilen,  dan 3-sikloheksanol.
Tumbuhan  legundi,  di  dalam  wilayah  NTT,  tersebar di  beberapa  tempat  sebagai  tumbuhan  liar.  Masyarakat  telah mengenal tumbuhan ini dan tumbuhan ini telah memiliki nama lokal.  Nama  lokal  dari  tumbuhan  tersebut  oleh  masyarakat NTT  yaitu: Langundi (Sumba  Timur), Kloko (Maumere), Bonsait (Ende), Eku Nde’u (Manggarai), Legundi atau bunga baru  (Larantuka), Kemerung (Lembata).  Masyarakat  NTT telah  mengenal  tumbuhan  tersebut  karena  berkaitan  dengan pengunaannya secara tradisional untuk kesehatan.
Pengunaan  tumbuhan  legundi  sebagai  obat  tradisional oleh  masyarakat  NTT  berbeda-beda  peruntukannya. Masyarakat Ende memanfaatkan sebagai obat luka. Masyarakat Kabupaten  Sikka  memanfaatkannya  sebagai  obat  sakit  perut dan  obat  luka.  Masyarakat  Sumba  Timur  memanfaatkan  air rebusan dari tumbuhan ini untuk memandikan anak bayi dan juga dimanfaatkan untuk orang dewasa untuk menghilangkan rasa  nyeri  pada  otot.  Masyarakat  Manggarai  memanfaatkan air rebusan daun tumbuhan ini sebagai air mandi bagi ibu-ibu setelah  melahirkan.  Masyarakat  Flores  Timur  memanfaatkan daun  tumbuhan  ini  untuk  obat  panu,  kudis,  serta  mengusir serangga. Masyarakat Lembata, memanfaatkan air rebusan dari daun tumbuhan ini sebagai air mandi bagi ibu-ibu pasca partus. Ada juga yang menggunakan daun mentah tumbuhan ini untuk mengusir kutu busuk.
Masyarakat  Pulau  Timor  memanfaatkan  tumbuhan ini  sebagai  obat  tradisional  yang  memiliki  aneka  khasiat. Tumbuhan ini dikenal oleh masyarakat dengan beberapa nama lokal dengan pemanfaatannya yang berbeda-beda. Masyarakat Belu mengenal tumbuhan ini dengan nama Aitasi . Masyarakat Wini-TTU mengenal tumbuhan ini dengan nama Tastasi , dan masyarakat  Kupang  mengenal  tumbuhan  ini  dengan  nama Legundi.  Masyarakat  Belu  memanfaatkan  air  rebusan  dari daun tumbuhan ini sebagai air mandi bagi ibu-ibu pasca partus dan  ada  juga  sebagai  obat  cacar  air.  Masyarakat  Wini-TTU memanfaatkan  aroma  dari  daun  mentah  tumbuhan  ini  untuk mengusir  nyamuk.  Masyarakat  Kupang  memanfaatkan  daun tumbuhan ini sebagai obat luka, panu dan kudis.
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  maka  peneliti  ingin mengkaji  profil  senyawa-senyawa  metabolit  sekunder  yang terdapat  dalam  minyak  atsiri  daun  tumbuhan  legundi  ( Vitex trifolia Linn) yang tumbuh di Pulau Timor.

## Bahan dan Metode
Bahan-bahan yang digunakan adalah daun legundi ( Vitex trifolia Linn),  air,  alkohol  95%,  dan  padatan  natrium  sulfat (Na 2 SO 4 ). Sampel daun legundi yang telah dikumpulkan dicuci di bawah air mengalir. Kemudian sampel ditimbang dan
dimasukkan ke dalam alat distilasi uap-air [13]. Proses distilasi dilakukan sampai mendapatkan destilat berupa air dan minyak. Distilat ditampung dalam erlenmeyer, kemudian dimasukkan ke dalam corong pisah dan didiamkan sampai terjadi pemisahan. Minyak yang diperoleh dari pemisahan dimurnikan dari air yang masih terikat dengan penambahan Na 2 SO 4 . Minyak yang telah dimurnikan diukur volumenya serta dianalisis sifat fisika dan kimia. Kandungan senyawa metabolit sekunder dianalisis menggunakan GC-MS.

## Hasil dan Pembahasan
Penelitian  ini  terbatas  pada  sampel  yang  berasal  di sekitaran pantai Paradiso, Kelurahan Oesapa Barat, Kota Kupang. Sampel yang digunakan pada proses ekstraksi untuk memperoleh minyak atsiri adalah daun legundi yang masih segar. Hal ini dilakukan karena pada saat optimasi menggunakan sampel yang dikering anginkan diperoleh sangat sedikit rendemen minyak atsiri. Perlakuan ini berbeda dengan peneliti  sebelumnya  yaitu  Parapat  [11],  yang  menggunakan sampel kering. Menurut Figueiredo et al [14] dan Dhifi et al [15], perbedaan perolehan rendemen minyak atsiri dipengaruhi oleh  beberapa  faktor  yaitu  asal  geografis,  iklim,  jenis  tanah, genetika dan proses perlakuan sampel atau metode perolehan minyak atsiri [16]. Minyak atsiri daun legundi yang diperoleh dianalisis sifat fisika dan kimia untuk mengetahui mutu atau kualitas  minyak  atsiri  tersebut.  Hasil  analisis  sifat  fisika  dan kimia minyak atsiri daun legundi dapat dilihat pada Tabel 1 . Tabel 1. Hasil distilasi daun legundi ( Vitex trifolia Linn) No. Sifat Fisika Kimia Minyak Atsiri Daun Legundi Hasil 1. Rendemen 0,1557 % 2. Berat Jenis 0,9789 g/ml 3. Indeks Bias 1,4855 4. Kelarutan dalam Alkohol 1 : 2 (Larut) 5. Bau Khas minyak Legundi 6. Warna Hijau
Pada penelitian ini rendemen dihitung untuk mengetahui perbandingan banyaknya minyak daun legundi yang diperoleh dari  hasil  distilasi  uap-air  dengan  banyaknya  sampel  daun legundi  yang  digunakan.  Nilai  rendemen  minyak  atsiri  yang dihasilkan yakni 0,1557%. Nilai yang diperoleh dalam penelitian ini sangat kecil, hal ini dapat disebabkan oleh lamanya waktu penyimpanan sampel. Pada saat penelitian sampel kadang disimpan semalaman sebelum didistilasi. Daun yang tersimpan relatif lama dapat menyebabkan terjadinya penguapan minyak atsiri yang mengakibatkan hilangnya sebagian komponen atau kandungan minyak atsiri pada sampel. Menurut Guenther [17],  penyimpanan  bahan  selama  beberapa  jam  bahkan  di tempat  teduh  dan  terutama  penyimpanan  di  tempat  terbuka dapat mengakibatkan berkurangnya jumlah minyak atsiri yang dihasilkan.
Data berat jenis minyak atsiri dari sampel yang dianalisis, diperoleh  sebesar  0,9789  g/ml.  Berat  jenis  minyak  atsiri umumnya  berkisar  antara  0,800-1,180  g/ml  [18].  Data  hasil penelitian ini menunjukkan informasi bahwa berat jenis minyak atsiri sampel cukup besar tetapi tidak melampaui kisaran berat
jenis minyak atsiri pada umumnya. Hal ini dapat menunjukkan bahwa  minyak  atsiri  sampel  mengandung  fraksi  senyawa- senyawa yang relatif banyak. Menurut Sastrohamidjojo [18], semakin  besar  fraksi  berat  yang  terkandung  dalam  minyak, maka semakin besar pula nilai densitasnya.
Nilai indeks bias minyak atsiri dari sampel yang dianalisis, diperoleh  sebesar  1,4855.  Indeks  bias  dipengaruhi  oleh banyaknya  komponen  yang  bergugus  karbonil  yang  terdapat dalam minyak yang diperoleh. Selain itu juga dipengaruhi oleh banyaknya ikatan rangkap. Menurut Cahyono [19], banyaknya rantai karbon dan ikatan rangkap dapat memperpendek jarak antar medium dari masing-masing komponen sehingga dengan semakin  rapatnya  medium,  cahaya  yang  datang  akan  lebih sukar  untuk  diteruskan  dan  akan  menyebabkan  indeks  bias meningkat.
Perbandingan  kelarutan  minyak  atsiri  sampel  terhadap alkohol yaitu 1:2, dengan perbandingan 1 ml minyak atsiri daun Legundi dan 2 ml alkohol 95%. Hasil ini menunjukkan bahwa minyak atsiri daun legundi larut dengan mudah dan sempurna dalam  alkohol.  Menurut  Julianto  [20],  penentuan  kelarutan merupakan metode cepat dan baik untuk mengevaluasi kualitas minyak atsiri. Suatu sampel minyak atsiri yang larut sempurna dalam alkohol artinya minyak atsiri tersebut memiliki mutu atau kualitas yang baik dan sebaliknya. Minyak atsiri yang banyak mengandung komponen-komponen polar akan mudah larut dalam pelarut polar. Minyak atsiri yang dihasilkan dari daun legundi  dalam  penelitian  ini  berwarna  hijau  karena  klorofil pada daun ikut terdistilasi. Adanya klorofil pada minyak atsiri daun legundi ini disebabkan oleh sampel daun yang memiliki struktur daun tebal. Oleh karena itu, walaupun sudah dibiarkan selama satu hari daun masih mengandung air dan tetap segar. Menurut  Utomo  dan  Mujiburohman  [21],  klorofil  akan  ikut terdistilasi  bersama  minyak  apabila  sampel  daunnya  banyak mengandung air.
Gambar 1. Hasil GC-MS dari sampel minyak atsiri daun legundi ( Vitex trifolia Linn)
Tabel 2. Data  hasil  data  base  sampel  minyak  atsiri  legundi
( Vitex trifolia Linn) No. Nama senyawa Kadar (%) 1 trans-Kariopillen 25.43 2 1,2-asam Benzendikarbosilik 14.16 3 Sabinen 7.57 4 1,8-Sineol 4.17 5 Kariofilen oksida 3.71 6 Sklareol 3.21 7 α-Humulen 3.07 8 α-Terpinenil asetat 2.36 9 Sitronella 2.30 10 3-Sikloheksanol 1.76 11 α-Pinen 1.76 12 β-Pinene 1.68 13 β-Isometil ion 1.42 14 Germacren-D 1.24 15 Germacren -B 1.17 16 Geranil asetat 1.12 17 E-Sitral 0.91 18 Linalol 0.89 19 Sikloheksena 0.85 20 β-Elemen 0.82 21 Sitronelil asetat 0.82 22 p-Cymena 0.82 23 Sklareol 0.79 24 Kariofilen oksida 0.74 25 trans-Kariofilen 0.55 26 Penantren 0.48 27 Δ-Kadinen 0.48 28 Farnesen 0.47 29 z-Sitral 0.46 30 γ -Terpinen 0.46 31 α- Selinen 0.45 32 Neril asetat 0.45 33 α-Dekarvelona 0.44 34 β-Selinena 0.44 35 13-Epimanol 0.40 36 Metil timileter 0.39 37 Sklareol 0.36 38 4-(2,2,6-Trimetil-Bisikloheptil)-Bu - tan-2-on 0.31 39 β- Mirsena 0.31 40 β-Sinensial 0.29 41 2-Pentadekanon 0.23 42 α-Terpineol 0.23 43 Isopimaradien 0.22 44 α-Kardinol 0.21 45 Kariofilen oksida 0.21 46 Endo-1-Bourbonol 0.19 47 α-Terpinen 0.17 48 α-Thujena 0.12 49 Δ.3-Sarene 0.11
Hasil analisis menggunakan alat GC-MS menunjukkan ada  49  senyawa  yang  terkandung  dalam  minyak  atsiri  daun legundi. Dari 49 jenis senyawa tersebut, terdapat 12 senyawa yang paling dominan dalam sampel minyak atsiri daun legundi ( Vitex trifolia Linn) yang dianalisis. Senyawa-senyawa tersebut yakni, trans-Kariofilen 25,43%, 1,2-asam Benzendikarbosilik 14,16%, Sabinen 7,57%, 1,8-Sineol 4,17%, Kariofilen oksida 3,71%, Sklareol 3,21%, α-Humulen 3,07%, α-Terpinenil asetat 2,36%,  Sitronella  2,30%,  3-Sikloheksanol  1,76%,  α-Pinen 1,76%, β-Pinen 1,68%.
Data  hasil  analisis  yang  dilakukan  terhadap  sampel minyak  atsiri  daun  legundi  yang  diambil  di  sekitar  pantai Paradiso, Kelurahan Oesapa Barat, Kota Kupang, memberikan informasi  bahwa  terdapat  perbedaan  komposisi  senyawa
penyusun utama minyak atsiri pada beberapa daerah.  Menurut Figueiredo et al [14] dan Dhifi et al [15], perbedaan komposisi senyawa-senyawa penyusun minyak atsiri tersebut disebabkan oleh faktor internal dan eksternal seperti kematangan tanaman, genetika,  jenis  tanah,  iklim,  asal  geografis,  serta  proses perlakuan  sampel  atau  metode  yang  digunakan  [16].  Data perbandingan  hasil  analisis  senyawa-senyawa  dalam  sampel minyak atsiri dari sampel daun legundi segar menggunakan distilasi uap air pada penelitian ini dengan hasil penelitian lainnya disajikan pada Tabel 3 . Sedangkan data hasil analisis kandungan  senyawa  pada  minyak  atsiri  dari  sampel  daun legundi kering dari peneliti terdahulu secara distilasi uap air disajikan dalam Tabel 4 .
Tabel 3. Data perbandingan hasil senyawa-senyawa minyak atsiri dari sampel daun legundi segar berdasarkan perbedaan tempat tumbuh sampel Senyawa metabolit sekunder yang dominan Kadar (%) Hasil penelitian Parapat, I (2008), Medan Yulianti, O (2011), Jawa Tengah Cahyono, F (2012), Malang Devi dan Singh (2014), India 1,8-Sineol Sabinen α-Pinen Kariofilen oksida β-Kariofilen trans-Kariofilen
α-Terpineol
α-Terpinenil asetat β-Pinen

## Ocimene
7-Oktan-4-ol Kariofilen 3-Sikloheksanol Terpineol-4-ol Limonen (2)- β-Farnesen Sklareol α-Humulen Sitronella Eukaliptol Toluen 3-Sarena 3-Metoksi-5-Metilfenol 1,2-asam Benzendikarboksilik 4,17% 7,57% 1,76 % 3,71% - 25,43% - 2,36% 1,68 % - - - 1,76% - - - 3,21% 3,07% 2,30% - - - - 14,16% 24,35% 19,10% 10,06% - 17,49% - 4,07% - 10,06% - 2,99% - - - - - - - - - - - - - 18,94% 9,20% 10,18% - - - - 7,98% - - - 15,81% 5,33% - - - - - - - - - - - 24,61% 17,32% 9,51% - 8,45% - - 5,88% - - - - - 3,4% 7,7% 5,7% - - - - - - - - - - 4,04% - - - - - - 6,87% - - - - - - - - - 6,13% 1,95% 1,24% 2,18% -
Senyawa-senyawa  metabolit  sekunder  yang  dominan dalam minyak atsiri daun legundi pada data Tabel 3 dan Tabel 4 dilihat dari perbedaan tempat tumbuh sampel dan dari sampel yang digunakan (sampel segar dan kering), sedangkan metode yang digunakan yakni distilasi uap air. Berdasarkan data pada Tabel 2 ,  senyawa  dominan  yang  diperoleh  dari  penelitian ini  adalah  senyawa  trans-Kariofilen  dengan  persentase  area sebesar  25,43%.  Senyawa  ini  tidak  terdapat  pada  penelitian yang  dilakukan  oleh  Devi  dan  Singh  [22],  sedangkan  pada penelitian  yang  dilakukan  Parapat  [11],  Yulianti  [12]  dan Cahyono  [19]  terdapat  senyawa  Kariofilen  dan  β-Kariofilen dengan  persentase  area  yang  lebih  kecil  dari  hasil  penelitian ini.  Senyawa  dominan  yang  kedua  dari  hasil  penelitian  ini adalah 1,2-asam Benzendikarboksilik dengan persentase area sebesar  14,16%.  Senyawa  ini  tidak  terdapat  pada  keempat peneliti  terdahulu  yaitu  Parapat  [11], Yulianti  [12],  Cahyono [19] serta Devi dan Singh [22]. Senyawa dominan yang ketiga dari  hasil  penelitian  adalah  Sabinen  dengan  persentase  area sebesar 7,57%. Senyawa ini tidak terdapat pada penelitian yang dilakukan oleh Devi dan Singh [22], sedangkan pada penelitian yang dilakukan Parapat [11], Yulianti [12] dan Cahyono [19] terdapat senyawa Sabinen dengan persentase area yang lebih besar dari hasil penelitian ini. Senyawa dominan yang keempat yaitu 1,8-Sineol dengan persen area 4,17%. Senyawa ini tidak terdapat pada penelitian yang dilakukan oleh Devi dan Singh [22],  tetapi  senyawa  1,8-Sineol  merupakan  senyawa  yang paling dominan di ketiga penelitian sebelumnya yakni Parapat [11], Yulianti [12] dan Cahyono [19] dengan area persentase diantara  18-24%.  Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Devi dan Singh [22], senyawa yang paling dominan adalah Ocimene. Senyawa ini tidak ditemukan pada keempat peneliti lainnya.
Tabel 4 menunjukkan  data  senyawa-senyawa  minyak atsiri hasil analisis dari sampel daun legundi yang digunakan dalam keadaan kering oleh peneliti-peneliti sebelumnya. Pada penelitian yang dilakukan oleh Arpiwi et al [23] dari Bali, cis- Ocimene merupakan senyawa dominan dengan persentase area sebesar 44,57%. Pada penelitian yang dilakukan oleh Thomas [24]  dari  Kottayam/Kerala  diperoleh  Kariofilen  sebagai senyawa  dominan  dengan  persentase  area  sebesar  38,38%.
Pada penelitian yang dilakukan oleh Chandraserakaran et al [25]  dari  Thanjavur/Tamil  diperoleh  senyawa  dominan Eukaliptol dengan persentase area sebesar 16,35%. Data pada Tabel 3 dan Tabel 4 ini menunjukkan bahwa faktor geografis dan perlakuan sampel mempengaruhi kandungan minyak atsiri yang diperoleh.

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan maka dapat  disimpulkan  bahwa  senyawa-senyawa  yang  terdapat dalam sampel minyak atsiri daun legundi asal pantai Paradiso, Kelurahan Oesapa Barat, Kota Kupang sebanyak 49 senyawa. Senyawa-senyawa yang dominan ada 12 yakni trans-kariofilen 25,43%,  1,2-asam  Benzendikarboksilik  14,16%,  Sabinen 7,57%,  1,8-sineol  4,17%,  Kariofilen  oksida  3,71%,  Sklareol 3,21%, α-Humulen 3,07% dengan waktu retensi 9,938 menit, α-Terpinenil  asetat  2,36%,  sitronella  2,30%,  3-sikloheksanol 1,76%,  α-Pinen  1,76%,  β-Pinen  1,68%.  Tumbuhan  legundi juga hidup di kawasan hutan sehingga disarankan bagi peneliti selanjutnya  agar  melakukan  perbandingan  senyawa-senyawa dalam  minyak  atsiri  daun  legundi  yang  tumbuh  di  kawasan hutan dan pantai yang berada di daratan Pulau Timor.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih diberikan kepada Ibu Eleonora A. M.  Bokilia  atas  bantuannya  selama  penelitian,  serta  Bapak Martinus Edu dan Ibu Hoa Vensia Yulaen Liwu atas dukungan finansial yang telah diberikan.

## Referensi
[1]  Bhagawan  WS,  Suproborini  A,  Putri  DLP,  Nurfatma A,  Putra  RT.  Ethnomedicinal  study,  phytochemical characterization,  and  pharmacological  confirmation of  selected  medicinal  plant  on  the  northern  slope  of Mount Wilis, East Java, Indonesia. Biodiversitas. 2022;23(8):4303–13.
[2]  Bhagawan  WS,  Aziz  YS,  Pamungkas  RPT.  Pendekatan etnofarmasi  Tumbuhan  Obat  Imunomodulator  Suku
Tabel 4. Data perbandingan hasil senyawa-senyawa minyak atsiri sampel dari daun legundi kering berdasarkan perbedaan tempat tumbuh sampel Senyawa metabolit sekunder yang dominan Kadar (%) Arpiwi et al ., (2020), Bali Thomas et al ., (2019), Kottayam/Kerala Chandraserakaran et al ., (2018), Thanjavur/Tamil
α-Pinen
Kariofilen Eukaliptol α-Terpineol asetat Terpinen-4-ol Sabinen β-Pinen α-Thujene cis-Ocimene Siklopentana 6,38% - - -
- - 5,22% 7,85% 44,57% 18,19% 7,85% 38,38% 25,72% 9,60% 4,49% - - - - - -
8,91%
16,35%
- -
9,44%
-
- -
-
Tengger,  Desa  Ngadas,  Kabupaten  Malang,  Indonesia. Journal of Islamic Medicine. 2020;4(2):98–105.
[3]  Bhagawan  WS,  Prajogo  B,  Radjaram  A.  Dissolution enhancement of gendarusin A by poloxamer 188 addition in  Justicia  gendarussa  Burm.  f  ethanolic  extract  granule matrix. J Appl Pharm Sci. 2017;7(6).
[4]  Bhagawan WS, Kusumawati D. Ethnobotanical Medicinal Plant  Study  of  Tengger  tribe  in  Ranu  Pani  Village, Indonesia. SSRN Electronic Journal. 2021;
[5]  Bhagawan  WS,  Barsyaif  UA,  Amrun  M.  Pendekatan etnobotani  tumbuhan  obat  untuk  permasalahan  seksual Suku  Tengger  di  Desa  Argosari,  Lumajang,  Indonesia. Jurnal Tumbuhan Obat Indonesia. 2021;14(2):99–110.
[6]  Bao F, Tang R, Cheng L, Zhang C, Qiu C, Yuan T, et al. Terpenoids from Vitex trifolia and their anti-inflammatory activities. Vol. 72, Journal of Natural Medicines. Springer Tokyo; 2018. p. 570–5.
[7]  Syamsuhidayat SS, Hutapea JR. Inventaris Tanaman Obat Indonesia.  1st  ed.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan  RI, Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan; 1991.
[8]  Hariana  HA.  Tumbuhan  Obat  dan  Khasiatnya.  1st  ed. Jakarta: Penebar Swadaya; 2011.
[9]  Ono  M,  Ito  Y,  Nohara  T.  Four  New  Halimane-Type Diterpenes,  Vitetrifolins  D-G,  from  the  Fruit  of  Vitex trifolia. Vol. 49, Pharm. Bull. 2001.
[10] Sudarsono PN, Gunawan D, Waahyuono S, Donatus IA, Purnomo. Tumbuhan Obat II Hasil Penelitian, Sifat-sifat, dan  Penggunaan.  1st  ed.  Yogyakarta:  Pusat  Studi  Obat Tradisional Universitas Gadjah Mada; 2002.
[11] Parapat IRO. Analisis Komponen Kimia Dan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun Legundi (Vitex trifolia L). [Medan]: Universitas Sumatera Utara; 2014.
[12] Yulianti  O.  Isolasi,  Identifikasi  Dan  Uji  Aktivitas Antibakteri  Minyak  Atsiri  Daun  Legundi  (Vitex  trifolia Linn). [Surakarta]: Universitas Sebelas Maret; 2011.
[13] Clevenger.’  JF.  Apparatus  For  The  Determination  of Volatile Oil. J Am Pharm Assoc. 1928 Apr;17(4):345–9.
[14] Figueiredo  AC,  Barroso  JG,  Pedro  LG,  Scheffer  JJC. Factors  affecting  secondary  metabolite  production  in plants: Volatile components and essential oils. Flavour Fragr J. 2008 Jul;23(4):213–26.
[15] Dhifi W, Bellili S, Jazi S, Bahloul N, Mnif W. Essential Oils’  Chemical  Characterization  and  Investigation  of Some Biological Activities: A Critical Review. Medicines. 2016 Sep 22;3(4):25.
[16] Hussain I, Anwar J, Munawar MA, Asi MR. Variation of levels of aflatoxin M1 in raw milk from different localities in  the  central  areas  of  Punjab,  Pakistan.  Food  Control. 2008 Dec;19(12):1126–9.
[17] Guenther  E.  Minyak Atsiri.  Ketaren  RS,  editor.  Vol.  II. Jakarta: UI-Press; 1990.
[18] Sastrohamidjojo  H.  Kimia  Minyak  Atsiri.  1st  ed. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press; 2004.
[19] Cahyono  F.  Isolasi  dan  Karakterisasi  Penyusun  Minyak Atsiri Hasil Distilasi Uap Daun Legundi (Vitex Trifolia) dengan  Kromatografi  Gas  Spektrometer  Massa  (KG  - SM). Skripsi. [Malang]: Universitas Brawijaya; 2013.
[20] Julianto  TS.  Minyak  Atsiri  Bunga  Indonesia.  1st  ed. Yogyakarta: Deepublish; 2016.
[21] Utomo DBG, Mujiburohman M. Pengaruh Kondisi Daun Dan  Waktu  Penyulingan  Terhadap  Rendemen  Minyak Kayu Putih. Jurnal Teknologi Bahan Alam. 2018;2(2).
[22] Devi  WR,  Singh  CB.  Chemical  composition,  anti- dermatophytic activity, antioxidant and total phenolic content  within  the  leaves  essential  oil  of  Vitex  trifolia. International  Journal  of  Phytocosmetics  and  Natural Ingredients. 2014 Sep 19;1(1):5–5.
[23] Arpiwi NL, Muksin IK, Kriswiyanti E. Essential oils from vitex  trifolia  as  an  effective  repellent  for  aedes  aegypti. Biodiversitas. 2020 Oct 1;21(10):4536–44.
[24] Thomas R. Essential Oils Studies of the Genus Vitex L. (Verbenaceae). Int J Adv Res (Indore) [Internet]. 2019 May 31;7(5):568–74.  Available  from:  http://www.journalijar. com/article/28103/essential-oil-studies-of-the-genus- vitex-l.-(verbenaceae/
[25] Chandrasekaran  T,  Thyagarajan  A,  Santhakumari  PG, Pillai AKB, Krishnan UM. Larvicidal activity of essential oil from Vitex negundo and Vitex trifolia on dengue vector mosquito Aedes aegypti. Rev Soc Bras Med Trop. 2019;52.