## LUTJANUS
p-ISSN: 0853 - 7658 e-ISSN: 2721-3757
Uji Daya Hambat Ekstrak Alga Coklat (Sargassum sp) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Vibrio harveyi Secara In-vitro
Inhibitory Test of Brown Algae Extract (Sargassum sp) on Growth Vibrio harveyi Bacteria In-vitro
Agus Suryatman 1 dan Nurilmi Achmad 1
1) Budidaya Perairan, Universitas Cokroaminito Makassar
Article history: Received Mei 8, 2022 Accepted Juni 15, 2022
Keyword: sargassum sp, Vibrio harveyi
. *Corresponding Author: suryahmanagus@gmail.com
Abstrak: Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  daya  hambat ekstrak alga coklat sargassum sp terhadap pertumbuhan Vibrio harveyi . Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret sampai dengan bulan Mey 2014. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Hama dan Penyakit Politeknik Pertanian Negeri Pangkep. Hasil penelitian ini menunjukan bahwa  rata-rata  diameter  zona  hambat  tertinggi  di  peroleh  dari perlakuan 3 (dosis 10 mg) dengan rata-rata diameter 8 mm, kemudian perlakuan 2 (dosis 7,5 mg) dengan rata-rata diameter zona hambat 7,77 mm, dan dosis terendah pada  perlakuan 1(dosis 5 mg) dengan rata-rata diameter zona hambat 7,5 mm. Sebagai Hasil analisis ragam.
Abstract: This study aimed to determine the inhibitory power of brown algae  extract  sargassum  sp  on  the  growth  of  Vibrio  harveyi.  This research  was  conducted  from  March  to  May  2014. This  research  was conducted  at  the  Pest  and  Disease  Laboratory  of  the  Pangkep  State Agricultural  Polytechnic.The  results  of  this  study  showed  that  the highest  average  diameter  of  the  inhibition  zone  was  obtained  from treatment  3  (dose of  10  mg)  with  an  average  diameter of  8  mm,  then treatment 2 (dose of 7.5 mg) with an average diameter of 7.77. mm, and the  lowest  dose  was  in  treatment  1  (5  mg  dose)  with  an  average inhibition zone diameter of 7.5 mm. As a result of analysis of variance.

## PENDAHULUAN
Pemanfaatan  dan  pengolahan sumberdaya hayati  yang  ada  di  laut  lebih  banyak  di fokuskan  pada  sumber  ikan,  padahal  Indonesia  mengandung  berbagai  potensi  sumber  daya hayati yang sangat potensial untuk di kembangkan bagi kesejahteraan manusia yang ekonomis penting misalnya, Alga (Seaweed) (Kapael dalam Katmona, 2008).
Izzati (2007), mengemukakan bahwa alga laut merupakan salah satu dari berbagai sumber hayati  laut  yang  bernilai  ekonomis  penting  dan  memiliki  tingkat  kegunaan  tinggi  karena komoditas  alga  laut  dapat  bermanfaat  baik  bagi  manusia  maupun  lingkungan  perairan  di sekitarnya,  manfaat  alga  laut  bagi  mausia  antara  lain  bisa  dijadikan  sebagi  bahan  makanan, bahan dasar kosmetik maupun bahan dasar pembuatan obat.
Penelitian yang dilakukan oleh Putra (2006) menyatakan bahwa alga coklat merupakan sumber  potensial  senyawa  bioaktif  yang  sangat  bermanfaat  bagi  pengembangan  industri farmasi seperti sebagai senyawa antibakteri, anti tumor dan anti kanker.
Kemampuan alga untuk memproduksi metabolit sekunder yang bersifat sebagai senyawa bioaktif dimungkinkan terjadi karena kondisi lingkungan hidup alga yang ekstrim seperti salinitas yang tinggi atau digunakan untuk mempertahankan diri dari ancaman predator.
Dalam dekade terakhir ini bebagai variasi senyawa yang unik dari isolat alga telah berhasil di isolasi. Namun pemanfaatan sumber bahan bioaktif dari alga belum banyak dilakukan. Dewasa ini sudah mulai tampak lebih diperhatikan untuk lebih diteliti dan dimanfaatkan sebagai sumber koloid berupa alginat (iodiun) (Atmadja, 1996). Senyawa bioaktif yang terkandung dalam alga coklat ( sargassum sp) dapat berperan sebagai senyawa anti bakteri yang memungkinkan dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen  pada  ikan  dan  udang  seperti  bakteri vibrio sp, Bakteri vibrio harvey i adalah bakteri gram negatif tidak tahan asam, penyakit ini dapat dibawa oleh  banyak  hewan  laut  yang  hidup,  seperti  udang-udangan  dan  penyakit  ini  telah  banyak menyebabkan  kematian  massal  pada  budidaya  ikan  dan  udang,  Penyakit  ini  telah  menyebar hampir diseluruh indonesia (Rukyani et al. ,1992). namun pengobatan penyikit ini belum ada yang efektif untuk menghambat pertumbuhan penyakit ini. tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui  daya  hambat  ekstrak  alga  coklat sargassum  sp terhadap  pertumbuhan  bakteri Vibrio harveyi .  Dari hasil penelitian diharapkan dapat memberikan informasi yang bermanfaat bagi  pengembangan  ilmu  pengetahuan  dan  tekhnologi  dibidang  budidaya  perikanan  juga diharapkan dapat menjadi refrensi praktis bagi komunikasi budidaya perikanan.

## METODE
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret sampai Mei 2014 di Laboratorium Hama dan Penyakit Politeknik Pertanian negeri Pangkep.
Adapun alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian ini di tunjukan pada Tabel 1 dan 2.
Tabel 1. Alat-alat yang digunakan dalam penelitian No Bahan Kegunaan 1 Timbangan Menimbang ekstrak rumput laut 2 Opendorf Menyimpan rumput laut yang sudah ditimbang 3 Erlemeyer Tempat larutan yang akan dipakai 4 Vortex Mmengaduk bahan 5 Cawan petric Media kultur bakteri 6 Pipet ukur Mengambil larutan 7 Pingset Mengambil bahan 8 Autoklaf Inkubasi 9 Bunsen Sterilisasi 10 Mistar Mengukur zona hambat
Tabel 2. Bahan yang digunakan dalam penelitian No Bahan Kegunaan 1 Ekstrak rumput laut (sodium alginat) Sebagai bahan uji 2 Larutan PBS Sebagai bahan campuran sodium alginat/bahan pelarut 3 Kertas cakram Sebagai pengukur zona hambat

## Tahap persiapan penelitian
a. Persiapan Alat
Sebelum  alat  digunakan  terlebih  dahulu  disterilkan  seperti  alat  opendorf,  cawan petric/disch, pipet ukur, erlemeyer  dan pingset. Alat –alat tersebut disterilkan dengan mencuci  dengan  sabun  dan  dikeringkan  setelah  kering  ada  beberapa  alat  yang dibungkus  dengan  aluminium  foil  diantaranya  erlemeyer,  cawan  petric/disch kemudian dimasukan kedalam oven sterilisasi selama 24 jam,sedangkan pipet ukur dan opendorf dimasukan kedalam lemari sterilisasi.
b. Persiapan bahan
1. Persiapan tepung sodium alginat Tepung sodium  alginat di peroleh dari  BPPBAP Jakarta, sebelum   tepung odium alginat digunakan terlebih dahulu ditimbang dengan konsentrasi, 1; 2,5; 5; 5,7; 7,5; 10 dan 15.
2. Persiapan kertas cakram
Kertas cakram yang digunakan yaitu kertas cakram yang berdiameter 6 mm yang sudah disterilkan.
3. Persiapan larutan PBS Sebelum larutan PBS digunakan terlebih dahulu di homogenkan.
4.  Persiapan pembuatan media kultur bakteri
- Media pembenihan NA dibuat dengan cara melarutkan 20 gram NA ke dalam 1 L aquades kemudian dipanaskan hingga larut.
- Media disterilkan terlebih dahulu sebelum digunakan.
5. Penyiapan bakteri uji
- Bakteri vibrio harveyi di peroleh dari BPPBAP Maros.
- Bakteri  uji vibrio  harveyi ditanam  di  atas  permukaan  yang  telah  memadat dalam cawan petri dan diinkubasikan selama 18-24 jam pada suhu 37 0 C. Biakan vibrio harveyi yang telah tumbuh selanjutnya disubkultur pada media NA dan diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 8-12 jam.
- .Sebanyak 200 µl suspensi bakteri dimasukkan ke dalam cawan petri steril.
- Dinginkan  media  NA  steril  hingga  suhu  sekitar  40 0 C  setelah  itu  dituang  pada cawan petri yang telah berisi biakan bakteri.
- Cawan digoyang-goyangkan dengan gerakan memutar membentuk angka 8 agar bakteri dan media tercampur dengan homogen selanjutnya dibiarkan memadat.
c. Tahap pelaksanaan Uji Daya Hambat Bakteri
1. Uji  daya  hambat  dilakukan  dengan  terlebih  dahulu  menyiapkan  larutan  sodium alginat dari tepung sodium alginat yang telah di timbang dengan konsentrasi 1; 2,5; 5; 7,5; 10 dan 15 mg, dimasukan kedalam opendorf serta ditambahkan larutan PBS dengan menggunakan pipet ukur otomatis sebanyak 1 ml lalu di vortex
2. Setelah  larutan  PBS  dan  larutan  sodium  alginat  tercampur  kemudian      dituang kedalam disch yang telah disterilsasi
3. Kertas  cakram  (Whatman  antibiotic  assay  paper)  berdiameter  6    mm  dimasukan kedalam  masing-masing  konsentrasi  larutan  sodium  alginat  yang  sudah  dituang kedalam disch selama 5 menit
4. Sambil menunggu perendaman kertas cakram selama 5 menit, maka  dibuat media (media NA) yang mengandung bakteri dengan menggunakan cawan petric.
5.  Setelah cukup 5 menit kertas cakram diambil dengan menggunakan pingset dan di tempatkan pada permukaan  media agar yang mengandung bakteri dan diinkubasi pada suhu kamar selama 24 jam, setelah di inkubasi selama 24 jam pada suhu kamar maka dapat dilihat zona bening yang terbentuk di sekitar kertas cakram  dan diukur dalam  mm,  dosis  sodium  alginat  yang  menghasilkan    zona    bening  menunjukan kemampuan  menghambat  bakteri.dosis  sodium  yang  menghasilkan  zona  bening itulah yang dipakai   sebagai penghambat bakteri.

## Peubah yang diamati
Untuk mengetahui Diameter Zona D Hambat Estrak Alga Coklat ( Sargassum. sp ) Terhadap Bakteri Vibrio  harvey i secara in-vitro (diameter zona hamba  (mm)).

## Rancangan penelitian
penelitian  ini  didesain  dengan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Rancangan Acak Lengkap yang digunakan terdiri atas 3 perlakuan, perlakuan yang akan diuji adalah  bagaimana  pemberian  dosis  ekstrak  alga  coklat  (Sargassum  sp)  yang  berbeda  untuk menghambat  pertumbuhan  bakteri  vibrio  harveyi.  Untuk  menentukan  dosis  perlakuan dilakukan uji pendahuluan dari dosis 1; 2,5; 5; 7,5; 10 dan 15 mg dari uji pendahuluan telah terpilih tiga (3) dosis perlakuan yang bisa digunakan sebagai penghambat pertumbuhan bakteri vibrio harveyi dengan tiga kali ulangan, perlakuan tersebut yaitu : Perlakuan A = Dosis ekstrak alga coklat 5 mg Perlakuan B = Dosis ekstrak alga coklat 7,5 mg Perlakuan C = Dosis ekstrak alga coklat 10 mg

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil uji daya hambat pada perlakuan dapat dilihat pada gambar grafik berikut ini
Gambar 1. grafik  Daya Hambat Ekstrak Sargassum. Sp terhadap Pertumbuhan Bakteri Vibrio Harveyi
7,2 7,4 7,6 7,8 8 8,2 Perlakuan D ay a h amb at ( ϴ = mm ) Diameter Zona Hambat 5 mg 7,5 mg 10 mg Dosis
Grafik pada gambar 1. menunjukan bahwa rata-rata diameter zona hambat tertinggi di peroleh dari perlakuan 3 (dosis 10 mg) dengan rata-rata diameter 8 mm, kemudian perlakuan 2 (dosis 7,5 mg) dengan rata-rata diameter zona hambat 7,77 mm, dan dosis terendah pada  perlakuan 1(dosis 5 mg) dengan rata-rata diameter zona hambat 7,5 mm.)  Sebagai Hasil analisis ragam (lampiran 1) menunjukan bahwa dosis  ekstrak rumput laut Sargassum sp tidak berpengaruh terhadap diameter zona hambat.
Berdasarkan hasil penelitian uji daya hambat ekstrak sargassum sp terhadap pertumbuhan bakteri vibrio harvey , yang menjadi tolak ukur adalah zona hambat . Proses pembentukan zona hambat  ini  dipengaruhi  karena  adanya  kelarutan  suspensi  bakteri  pada  kertas  cakram  yang mengandung  ekstrak  rumput  laut  yang  diketahui  konsenterasinya  sehingga  menimbulkan daerah  jernih  disekitar  kertas  cakram  inilah  yang  disebut    zona  hambat,  hal  ini  menunjukan sensivitas bakteri terhadap zat antibakteri (ekstrak rumput laut), dan dikatakan bahwa semakin lebar zona hambat yang terbentuk itu berarti bakteri tersebut semakin sensitif. Sedangkan zat antibakteri  (ekstrak  rumput  laut)  yang  tidak  bisa  menghambat  pertumbuhan  bakteri dikarenakan zat antibakeri (ekstrak rumput laut) yang digunakan tidak spesifik terhadap bakteri yang ditanam dalam media.
Ekstrak  rumput  laut Sargassum sp  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  hal  itu dikarenakan  adanya  kandungan  bioaktif  yang  terdapat  dalam  ekstrak  rumput Sargassum sp (alga coklat). Kandungan bioktif itu adalah flavonoid, steroid dan florotanin.
a. Flavonoid  adalah  senyawa  pereduksi  yang  baik,  menghambat  banyak  pereaksi  oksidasi, baik  secara  enzim  maupun  non  enzim.  Flavonoid  merupakan  golongan  terbesar  senyawa fenol, flavonoid berfungsi sebagai anti bakteri dengan cara pembentuk senyawa kompeleks terhadap  protein  extraseluler  yang  mengganggu  kebutuhan  membran  sel,  Kandungan flavonoid  ini  memiliki  kemampuan  mengrhambat  pertumbuhan  bakteri  dengan  beberapa mekanisme  yang  berbeda,  flavonoid  menyebabkan  terjadinya  kerusakan  permebilitas dinding bakteri, mikrosom dan lisosom sebagai hasil interaksi antara flavoid dengan DNA bakteri,  dan  struktur  senyawa  flavoid  menyebabkan  perubahan  kompenen  organik  dan transpor nutrisi yang akhirnya akan menyebabkan efek toksik terhadap senyawa saponim yang  akan  merusak  membran  sitoplasma  dan  membunuh  sel  senyawa  bakteri  serta mendenaturasi  protein  sel  bakteri  dan  merusak  membran  sel  tampa  dapat  di  perbaiki lagi.(Juliantina 2008).
b. Steroid  merupakan  fraksi  lipid  dari  tanaman  yang  berfungsi  untuk  mengatur  aktifitas biologis dalam organisme hidup, steroid pada tumbuhan di bentuk oleh senyawa sterol dan banyak  erdapat  dalam  jaringan  tumbuhan  sehingga  sering  dikenal  dengan  fitosterol, senyawa  Steroid  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan    mekanisme  penghambatan terhadap  sintesis  protein  karena  terakumulasi  dan  menyebabkan  perubahan  kompenen- kompenen  penyusun  sel  bakteri  itu  sendiri.  Senyawa  ini  dapat  juga  menghambat pertumbuhan bakteri baik melalui membran sitoplasma maupun mengganggu pertumbuhan dan perkembangan bakteri.
Steroid dapat bereaksi dengan membran fosfilipid sel yang bersifat   impermeabel terhadap senyawa-senyawa  lipofelik  sehingga  menyebabkan  integritas  membran  menurun, morfologi  memberan  sel  berubah  dan  akhirnya  dapat  menyebabkan  memberan  sel  rapuh dan  lisis  serta  kematian  pada  dinding  sel  dan  membran  sitoplasma  bakteri  menyebabkan fungsi permebealitas selektif, fungsi jadi terganggu berakibat pada lolosnya makromolekul
dan  ion  dari  sel  dengan  demikian  sel  bakteri  menjdi  kehilangan  bentuk    sehingga pertumbuhan bakteri menjadi terhambat (Morin dan garman 1995).
c. senyawa frotanin mempunyai sifat-sifat senyawa alkaloid yang disebabkan karena adanya gugus basa yang mengandung nitrogen, adanya gugus  basa ini apabila mengalami kontok dengan  bakteri  akan  bereaksi  dengan  senyawa-senyawa  asam  amino  yang  menyusun dinding sel bakteri dan juga DNA bakteri  yang merupakan penyusun utama inti sel yang merupakan pusat pengaturan segala kegiatan sel.( Assani, 1994).
Reaksi ini terjadi karena secara kimia suatu senyawa yang bersifat basa akan bereaksi dengan senyawa asam dalam hal ini adalah senyawa asam amino telah beraksi dengan gugus basa dari  senyawa  alkaloid.  Perubahan  susunan  asam  amino  ini  jelas  akan  merubah keseimbangan  genetik  pada  asam  DNA  sehingga  asam  DNA  bakteri  akan  mengalami kerusakan. Kerusakan DNA pada inti bakteri akan mendorong terjadinya lisis pada inti sel, sehingga  akan  terjadi  kerusakan  sel.  Kerusakan  sel  mengakibatkan  sel-sel  bakteri  tidak mampu melakukan metabolisme sehingga akan mengalami lisis (hancur) (Sabir, 2005)

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian maka kesimpulan yang dapat diambil dari penelitian ini adalah : Dari  7  perlakuan  dan  7  dosis  (1;  2,5;  5;  7;  7,5;  10  dan  15)  yang  digunakan  sebagai penghambat bakteri vibrio harveyi namun  hanya  ada tiga dosis  (5; 7,5 dan 10) yang terlihat bisa  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dari  ketiga  dosis  yang  terpilih  ternyata  yang menimbulkan zona hambat yang paling luas  terdapat pada dosis 10 mg, dengan zona hambat 8, kemudian dosis  7,5 mg dengan diameter 7,77 mm dan terendah 7,5 mg dengan diameter 7,5 mm. sedangkan dari hasil uji ANOVA data yang diperoleh tidak terdapat pengaruh nyata antara diameter zona hambat dan dosis ekstrak rumput laut.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggaradiredja,T.J.,  A.  Zatnika,  h.,  Purwonto,  dan  S.  Istini.  2006. Rumput  Laut .  Swadaya. Jakarta.
Anonymous. 2007. Manfaat Ganggang Coklat . http://www. Wikipedia. Org. Diakses tanggal 5 Mey 2014.
Arifin.1986.  Koleksi  Bibit  Alga  Coklat  ( Padina  australis )  dengan  Metode  Rentangan  Net. Ambon. Balai Budidaya Laut Ambon.
Atmadja,W,S.1996. Pengenalan  Jenis-Jenis  Rumput  Laut  Indonesia .  Pusat  Penelitian  dan Pengembangan Oseneologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia. Jakarta.
Assani.1994. Aplikasi Bakteri Simbion Gastropoda sebagai Anti Bakteri dalam Bentuk Sedian Gel antiseptik ( Skripsi). Fakultas Perikanan dan Kelautan UNDIP. Semarang Bauman., Fumis., Lee. 1984. Skenning Potensi Anti Bakteri Pada Beberapa Spesies Rumput Laut  Terhadap  Bakteri  Pahtogen  pada  Udang  Windu.  Laboratorium  Struktur  dan Fungsi Tumbuhan.
Bosse. 1928. Khasiat dan Manfaat Rumput Laut . http://www.kir-31 blogspot.com. Diakses 21 Maret 2014.
Fatmona.  2008. Penelusuran  Efektifitas  Beberapa  Bahan  Alam  Sebagai  Anti  Bakteri  untuk Mengatasi  Penyakit  Vibrio  Udang  windu .  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan. Universitas Pajajaran Jatinogoro.
Holt. 1979. Inhibitory Activity of Probiotic Bacillus subtilis UTM 126 Against Vibrio Species Confers  Protection  Against  Vibriosis  in  Juvenile  Shrimp (Litopenaeus  vannamei ). Faculty of Aquaculture, Technical University of Machala, Machala, Ecuador. Indriani,  H.  dan  Sumarshi,  S.,  1997. Budidaya,  Pengolahan,  dan  Pemasaran  Rumput  Laut . Penebar Swadaya. Jakarta.
Iskandar.  2005. Ekstraksi  dan  Analisis  Sifat  Fisika  Kimia  dari  Ekstrak  Rumput  Laut Sargassum.sp . Skripsi. Fakultas Teknologi Pertanian, institut Pertanian Bogor, Bogor. Istiqomah.2004.Pengaruh  Probiotik  Bacillus  Pada  Dosis  BerbedaTerhadap  Kualitas  Air, Bakteri Vibrio  harveyi ,  Sintasan  dan  total  Haemocyte  Post  larva  Udang  vannamei (Litopenaeusvannamei) . Program Pascasarjana UNHAS. Makassar Izzati.  2007 .  Penelitian  Budidaya  Rumput  Laut    (Algae  Makro/Seawed)  di  Indonesia .  Orasi Pengukuhan Ahli Peneliti Utama Bidang Akuakultur. LIPI Jakarta.
Kordi.2009.  Bakteri  Vibriosis.  Makalah  Stadium  General  Technologi.  Fakultas  Perikanan.
Bogor
Levie.1997. Studi Aktifitas Antioksidan dan Antibakteri Pada10 Merk Teh  Hijau yang eredar Di  Pasaran  Kota  Malang ,  Skripsi Mahasiswa  Jurusan  Teknologi,Universitas Brawijaya. Malang.
Maharani dan Widayayanti.  2010. Budidaya Rumput Laut dan Cara Pengelolaannya . Bathara. Jakarta.
Pelczar  dan  Chan.1988.  Diktat  Parasit  dan  Penyakit  Ikan.  Fakultas  Perikanan.Univesitas Brawijaya
Poermono.A.1978. Water Quality Management and Aeration in Sdrimp Farming. Fisheries and allied Aquacultures Departement Series No.2. Alabama Agramiculture Experiment
Boyd,C.E. 1992. Shrimp Pond Bottom Soil and Sediment Management. In Wyban, J.(Ed) Ramellow. 2000. Kandungan Alga sebagai penunjang Makalah Ilmiah , Universitas Lampung, bandang Lampung
Sabir. 2005. Rumput Laut Sebagai Anti Bakteri . Departemen Perikanan dan Kelautan. Jakarta. Schalagel  dan  Schmid.,2009.  Amlifikasi  gen  penyandi  hemolisin  dari  bakteri  vibrio harveyidengan tekhnik PCR ( p olimerase chain reaction ) 201. (Skripsi). Departemen Budidaya Perairan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Bogor
.Rukyani,  A.,  Taufik.,  Taukhid.1992.  Ekstrak  Daun  Mangrove  Sebagai  Antibakteri  Vibrio Harveyi. Universitas diPonegoro Wikipedia. 2007. Laporan Mikrobiologi Uji Daya Hambat Mikroba http://wikipedia.org.wiki.Diakses  20 Mey 2014