## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ESCHERICHIA COLI PADA AIR WUDHU DI MASJID YANG BERADA DI KOTA TANGERANG
*Jamilatun M, * Aminah

## Abstrak
Air  sebagai  salah  satu  kebutuhan  utama  dalam  menunjang  kehidupan manusia beresiko membawa penyakit bawaan air ( water borne disease ) jika tidak  memenuhi  syarat  kesehatan.  Salah  satu  pemanfaatan  air  adalah digunakan  sebagai  air  wudhu.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui keberadaan Escherichia  coli pada air  wudhu di  Masjid  yang berada di Kota Tangerang.  Desain  penelitian  yang  digunakan  adalah  penelitian  deskriptif dengan  uji  laboratorium  dengan  jumlah  sampel  15.  Pengambilan  sampel dilakukan  pada  masjid  yang  telah  ditentukan,  selanjutnya  dilakukan pemeriksaan  laboratorium  yang  meliputi  nilai  MPN coliform untuk mengetahui kualitas air, dilanjutkan isolasi dan identifikasi Escherichia coli pada media EMBA ( Eosin Methylin Blue Agar) serta uji produksi hemolisin pada  media  agar  darah.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  Terdapat keberadaan bakteri Escherichia coli pada air wudhu di Masjid yang berada di Kota Tangerang. Dari hasil identifikasi Escherichia coli, dapat diketahui dari 15  sampel  yang  diteliti  terdapat  6  sampel  air  wudhu  yang  teridentifikasi E.coli ,  dua  diantaranya  bersifat  hemolisis.  Oleh  karena  itu  penjaga  masjid untuk  senantiasa  menjaga  kebersihan  air  bak  penampungan  dengan  teratur serta kebersihan lingkungan di sekitar masjid.
Keywords: Isolasi, Identifikasi, Escherichia coli, air wudhu. *Poltekkes Kemenkes Banten

## PENDAHULUAN
Air  bersih  adalah  air  yang digunakan  untuk  keperluan  sehari- hari  yang  kualitasnya  memenuhi syarat  kesehatan  dan  dapat  diminum apabila  telah  dimasak  (Permenkes No.416  Tahun  1990).  Dampak  yang ditimbulkan  dari  kualitas  air  yang tidak memenuhi baku mutu air bersih adalah  terjadinya  berbagai  penyakit dengan  cara  mengkonsumsi  air
secara langsung maupun pendayagunaan air yang tidak
memenuhi standar air bersih
(Soemirat,  2003).  Data  dari  WHO
(1998)  menyebutkan  bahwa  separuh dari  populasi dunia  mengalami
penyakit  yang  berhubungan  dengan
kekurangan air dan air
terkontaminasi  yang  berisiko  pada timbulnya  penyakit  bawaan  air
seperti diare yang
banyak mengakibatkan kematian.
Masjid merupakan tempat ibadah  umat  Islam,  salah  satunya untuk  sholat.  Sebelum  melakukan
sholat selalu didahului dengan berwudhu  yang  dalam  rangkaiannya terdiri  dari  berkumur,  membasuh muka,  tangan,  dan  kaki.  Saat
berkumur, air wudhu dimasukkan ke dalam  mulut,  sehingga  terdapat sebagian  air  yang  tersisa  di  dalam mulut. Jika air wudhu dari
penampungan tidak memenuhi syarat, diantaranya secara mikrobiologis maka dapat menimbulkan penyakit karena terdapat mikroorganisme di dalamnya. Mikroorganisme dalam air
dapat diketahui keberadaannya melalui bakteri-bakteri  yang menjadi indikator  keberadaannya.  Indikator yang umum diketahui adalah
Escherichia  coli . E.  coli merupakan bakteri  yang berbentuk  batang,  gram negatif,  yang  merupakan  penghuni normal  dalam  saluran  pencernaan manusia dan hewan. Namun demikian E.  coli merupakan  salah satu bakteri penyebab diare.
Penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Alikhani, et.al . (2013), menyebutkan bahwa E.coli merupakan agen penyebab  diare. E.coli merupakan bakteri penyebab diare dengan
prosentase  tertinggi  (Osman et  al .,
2012).  Terdapat  beberapa  serotipe dari E.coli yang  menyebabkan  diare (Bonyadian et.al . (2010); Sahar et.al .
(2013)).  Berdasarkan  latar  belakang tersebut,  maka  dalam  penelitian  ini dilakukan  pemeriksaan Escherichia
coli sebagai indikator kualitas mikrobiologis  pada  air  wudhu  di Masjid yang berada di Kota
Tangerang.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  September  -  Oktober  2015. Desain  digunakan  adalah  penelitian deskriptif  dengan  uji  laboratorium.
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah seluruh  air  dari  Masjid  yang  berada di  Kota  Tangerang.  Sampel  diambil secara purposive sampling .

## Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel dilakukan
dengan  cara  air  dimasukkan  ke dalam  botol  steril  sebanyak  100  ml secara  aseptis.  Kemudian  sampel
ditempatkan  dalam  wadah  botol  dan dibawa ke Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Banten.
Isolasi dan Identifikasi Escherichia coli
Sebelum dilakukan isolasi dan
identifikasi E.coli ,  dilakukan  uji
MPN. Pemeriksaan MPN menggunakan  ragam  3-3-3  terdiri
dari  3  uji  yaitu  uji  penduga  yang menggunakan  media  LB  ( Lactosa Broth ),  uji  penegasan  menggunakan media BGLB ( Brilliant Green Lactose Bile Broth) , dan uji
pelengkap dengan menggunakan EMBA  ( Eosin  Methylin  Blue Agar) untuk identifikasi Escherichia coli .

## Uji Produksi Hemolisin
Produksi hemolisin ditentukan
berdasarkan  adanya  zona  hemolisis yang  dibentuk  oleh  isolat E.  coli .
Isolat  ditanam  pada blood  agar  base dengan  penambahan  darah  domba 5%,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C selama 18-24 jam. Terlihatnya zona bening di  sekitar koloni setelah 18  jam  inkubasi  pada  suhu  37 0 C dianggap sebagai hasil positif produksi  hemolisin  (Suardana,  2014 dan Hendrayana et.al .,  2012).

## Analisis Data
Data hasil penelitian disajikan secara
deskriptif dalam bentuk tabel ataupun  gambar  (Steel  dan  Torrie,
1995). Data hasil pengamatan
coliform dianalisa menggunakan
metode Most  Probable Number
(MPN)  ragam  3-3-3.  Data  hasil identifikasi Escherichia  coli
disajikan
dalam bentuk gambar.

## HASIL
Tabel 1.
Hasil Pengamatan Tabung Positif pada Air Wudhu dari Uji Penduga ( Presumtive test ) pada Media LBDS ( Lactose Broth Double Strength )
dan LBSS ( Lactose Broth Single Strength ) No Sampel LBDS (10ml) LBSS (1ml) LBSS (0.1ml) Kombinasi Tabung Positif 3 3 3 1 Sampel 1 +  + + + + + + + + 3-3-3 2 Sampel 2 +  + + + + + + + + 3-3-3 3 Sampel 3 +  + + + + + + + + 3-3-3 4 Sampel 4 +  + + + + + - - + 3-3-1 5 Sampel 5 +  + + + + + - + - 3-3-1 6 Sampel 6 +  + + + + + + + + 3-3-3 7 Sampel 7 -  - + - - + - - - 1-1-0 8 Sampel 8 +  + + + + + - - - 3-3-0 9 Sampel 9 +  + + + + + - - - 3-3-0 10 Sampel 10 +  + + + + + + + + 3-3-3 11 Sampel 11 +  + + + + + - - - 3-3-0 12 Sampel 12 +  + + + + + - - - 3-3-0 13 Sampel 13 -  - - - - - - - - 0-0-0 14 Sampel 14 +  + + + + + + + + 3-3-3 15 Sampel 15 +  + + + + + + + + 3-3-3
Keterangan:
 = Tidak Tumbuh + = Tumbuh Membentuk Gas dan Media menjadi Keruh
Tabel 2.
Hasil Uji MPN Coliform pada Air Wudhu dari Uji Penegasan ( Confirmative Test ) pada Media BGLB ( Brilliant Green Lactose Bile Broth )  dan
Kesesuaian dengan persyaratan PERMENKES
416/MEN.KES/PER/IX/1990 (Kadar Maksimum MPN Coliform yang diperbolehkan 50 per 100 ml) No Sampel Kombinasi Tabung positif MPN Coliform per 100 ml Keterangan 1 Sampel 1 3-2-2 210 Tidak memenuhi syarat 2 Sampel 2 2-0-0 9 Memenuhi syarat 3 Sampel 3 3-3-0 240 Tidak memenuhi syarat 4 Sampel 4 3-0-0 23 Memenuhi syarat 5 Sampel 5 3-0-0 23 Memenuhi syarat 6 Sampel 6 2-2-2 28 Memenuhi syarat 7 Sampel 7 1-1-0 7 Memenuhi syarat 8 Sampel 8 3-3-0 240 Tidak memenuhi syarat 9 Sampel 9 1-0-0 4 Memenuhi syarat 10 Sampel 10 3-1-0 48 Memenuhi syarat 11 Sampel 11 3-3-0 240 Tidak memenuhi syarat 12 Sampel 12 2-2-0 21 Memenuhi syarat 13 Sampel 13 0-0-0 0 Memenuhi syarat 14 Sampel 14 3-3-3 1100 Tidak memenuhi syarat 15 Sampel 15 3-1-0 48 Memenuhi syarat Tabel 3. Hasil Pengamatan Koloni Escherichia coli pada Media EMBA ( Eosin
Methylen Blue Agar ) dan Uji Hemolisis pada Agar Darah No Sampel E.coli (+/-) Hemolisis (+/-) 1 Sampel 1 - - 2 Sampel 2 + + 3 Sampel 3 - - 4 Sampel 4 - - 5 Sampel 5 + + 6 Sampel 6 + - 7 Sampel 7 - - 8 Sampel 8 - - 9 Sampel 9 - - 10 Sampel 10 - - 11 Sampel 11 - - 12 Sampel 12 + - 13 Sampel 13 - - 14 Sampel 14 + - 15 Sampel 15 + -
Gambar 1. (a) Media EMBA yang ditumbuhi bakteri E.coli , (b) Media EMBA yang  tidak  ditumbuhi  bakteri E.coli ,  (c)  Media  Agar  Darah  yang hemolisis.

## PEMBAHASAN
Hasil pemeriksaan MPN coliform dapat dilihat  pada  Tabel  2.    Pada  tabel
tersebut , dapat diketahui dari 15 sampel
yang  diteliti  terdapat  5  sampel  air wudhu  yang  tidak  memenuhi  kualitas standar yang telah ditetapkan PERMENKES 416/MEN.KES/PER/IX/1990 (kadar
maksimum MPN coliform yang diperbolehkan  50  per  100  ml),  yaitu pada  sampel  1,  sampel  3,  sampel  8, sampel  11,  dan  sampel  14.  Nilai  MPN
yang  melebihi  standar  ini  menunjukkan bahwa  air  wudhu  telah  tercemar  oleh bakteri coliform .  Menurut  penelitian yang  telah  dilakukan  oleh  Hope et  al .
(2014),  salah  satu  sumber  hadirnya bakteri coliform adalah  dari  bak penampungan air, sampah di lingkungan  sekitar,  udara  terbuka,  air tanah  yang  terkontaminasi  air  cucian dan  air  hujan,  serta  limbah  rumah tangga  dan  limbah  domestik.  Dan ditambahkan  oleh  Mashiatullah et  al .
(2010),  bakteri coliform bisa  masuk  ke
a
b c
dalam  tampungan  air  melalui  kotoran hewan,  burung,  sisa  sampah  dan  sisa pertanian  yang  terbawa  oleh  angin. Selain  itu,  juga  kondisi  septitank  saat musim  hujan  yang  mengakibatkan kotoran  manusia  tercampur  ke  dalam aliran air dekat tampungan.
Adanya  bakteri coliform dalam  badan air  menunjukkan  kemungkinan  adanya bakteri  patogen  yang  berbahaya  bagi kesehatan.  Sehingga  penggunaan  air wudhu yang tercemar ini bisa
menyebabkan penyakit dikarenakan bakteri coliform bisa  masuk  melalui
mulut,  hidung,  telinga  dan  kulit.
Sebagaimana dinyatakan oleh
Nwachukwu  and  Ume  (2013)  dan  Aziz et  al .,  (2013),  air  yang  tercemar  dapat beresiko  bagi  kesehatan  karena  bisa menjadi  perantara  penularan  penyakit seperti  disentri,  kolera,  diare,  tipes, shigellosis, salmonellosis.
Menurut Ramadan (2015) bakteri
coliform merupakan golongan mikroorganisme  yang  lazim  digunakan sebagai  indikator,  karena  densitasnya berbanding lurus dengan tingkat pencemaran  air.  Bakteri  ini  dapat mendeteksi patogen pada air. Selain itu, bakteri  ini  juga  memiliki  daya  tahan yang lebih tinggi daripada patogen serta lebih  mudah  diisolasi  dan  ditumbuhkan (Doyle,  2006).  Sehingga  bakteri  ini dapat menjadi sinyal untuk menentukan
suatu  sumber  air  telah  terkontaminasi oleh  patogen  atau  tidak  (Pracoyo, 2006). Bakteri coliform dapat
memfermentasi laktosa untuk
menghasilkan  asam  dan  gas  pada  suhu
35°C-37°C.  Contoh  bakteri  coliform
antara lain Escherichia coli .
Hasil  identifikasi Escherichia  coli pada penelitian ini dilihat pada Tabel 3.  Pada tabel  tersebut , dapat  diketahui  dari  15 sampel  yang  diteliti  terdapat  6  sampel air  wudhu  yang  teridentifikasi  koloni E.coli ,  yaitu  pada  sampel  2,  sampel  5, sampel  6,  sampel  12,  sampel  14  dan sampel 15. Dan dua diantaranya bersifat hemolisis  yaitu  pada  sampel  2  dan sampel  5.  Berdasarkan  penelitian  yang telah  dilakukan  oleh  Huwaida  (2014), faktor  yang  mempengaruhi  adanya bakteri E.coli adalah kedalaman sumber air, jarak  antara jamban  dengan sumber air bersih, jarak antara septitank dengan sumber air.
Bakteri Escherichia  coli merupakan organisme  penghuni  utama  di  usus besar,  hidupnya  komensal  dalam  kolon manusia dan merupakan mikroorganisme  normal  yang  terdapat dalam  kotoran  manusia,  baik  sehat maupun  sakit.  Oleh  karena  itu,  dikenal juga  dengan  istilah  koli  tinja.  Dalam satu  gram  kotoran  manusia  terdapat sekitar  seratus  juta  bakteri Escherichia coli. (Jawert,  dkk,  2005).  Sehingga
Escherichia coli dapat digunakan sebagai  indikator  adanya  kontaminasi feses  atau  indikasi  adanya  pencemaran tinja  manusia  yang  dapat  menyebabkan masalah  kesehatan  seperti  diare,  serta
indikator adanya mikroorganisme enterik  patogen  lainnya  yang  bisa menjadi agen penularan penyakit
(Tortora et  al .,  (2004)  dan  Hope et  al .,
(2014).
Hasil  Identifikasi E.coli pada  media
EMBA dapat  dilihat  pada  gambar  3.
Hasil  pertumbuhan E.coli pada EMBA
memperlihatkan  koloni  berwarna  hijau metalik, diameter 2 - 3 mm dengan titik hitam di bagian tengah koloni
(Suardana  dkk.,  2014). EMBA adalah
media  selektif  dan  media  diferensial.
Media  ini  mengandung  eosin  dan
metilen biru, yang menghambat pertumbuhan  bakteri  Gram  positif,
maka  media  ini  dipilih  untuk  bakteri Gram  negatif. EMBA juga  mengandung
karbohidrat  laktosa,  dengan  adanya karbohidrat laktosa bakteri Gram negatif  terdiferensiasi  berdasarkan  pada kemampuan mereka
untuk
memfermentasi  laktosa.  Warna  media sebelum  pemupukan  bakteri  berwarna merah  keunguan.  Perubahan  warna hijau metalik pada media EMBA karena
Escherichia  coli dapat  memfermentasi
laktosa
yang
mengakibatkan
peningkatan  kadar  asam  dalam  media.
Kadar asam yang tinggi dapat mengendapkan  methylen  blue  dalam media EMBA.
Dari hasil penelitian ini dapat diketahui, beberapa sampel menunjukkan coliform yang tinggi, namun tidak semua jumlah coliform yang  tinggi  menunjukkan adanya  bakteri E.coli .  Menurut  Archer
(1984)  dalam  Mashiatullah et  al .
(2010),  jika  yang  diketahui  hanya jumlah  coliformnya  saja  yang  tinggi, maka  kemungkinan  besar  disebabkan oleh  lingkungan,  yang  menjadi  indikasi adanya  pencemaran,  yang  secara  tidak langsung  dapat  menjadi  agen  bagi patogen lainnya.

## Simpulan
Terdapat keberadaan bakteri
Escherichia  coli pada  air  wudhu  di Masjid yang berada di Kota Tangerang. Dari  hasil  identifikasi Escherichia  coli,
dapat  diketahui  dari  15  sampel  yang diteliti  terdapat  6  sampel  air  wudhu yang  teridentifikasi  koloni E.coli .  Dan dua  diantaranya  bersifat  hemolisis. Hasil pertumbuhan E. coli pada EMBA memperlihatkan  koloni  berwarna  hijau metalik.

## Saran
Disarankan kepada para  penjaga masjid untuk senantiasa menjaga kebersihan air bak  penampungan  dengan  teratur  serta kebersihan lingkungan di sekitar masjid.

## DAFTAR PUSTAKA
Alikhani, et.al .  2013.Prevalence  and antibiotic  resistance  patterns  of diarrheagenic Escherichia coli
isolated from adolescents and adults in  Hamedan,  Western  Iran.  Iranian Journal  of  Microbiology. Volume  5
Number 1:  42-47.
Aziz Ahmed, Tarique Mahmood
Noonari, Habibullah Magsi, Amanullah  Mahar.  2013.  Risk Assessment  of  Total  and  Faecal
Coliform  Bacteria  From  Drinking Water  Supply  of  Badin  City, Pakistan. Journal  of  Environmental Professionals  Sri  Lanka,  2013:Vol. 2 – No. 1, 52-64
Bonyadian, et.al. 2010. Identification & characterization  of  Shiga  toxin- producing Escherichia coli isolates from patients with diarrhoea in Iran.
Indian  J  Med  Res  132,  September 2010, pp 328-331
Doyle,  M.P.,  Erickson,  M.C.  2006.
Closing  The  Door  On  The  Fecal Coliform  Assay .  Microbe  1,  hal. 162-163.
Hendrayana, M.A., et.al.,  2012. Deteksi Bakteri Escherichia  Coli Serotipe O157  Pada  Daging  Babi  Dari
Pedagang  Daging  Babi  Di  Kota
Denpasar. MEDICINA, 43:3-8.
Hope C. Okereke1, Eze S. Ogbonnaya2, Sunday O. Eze. 2014. Bacteriological and
Physicochemical  Qualities  of  Some
Borehole  Waters  in  Aba  South Metropolis,  Abia  State  Nigeria. Asian Journal of Natural & Applied Sciences Vol. 3(3) September 2014
Huwaida,  RN.  2014.  Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Jumlah Escherichia  coli Air  Bersih  pada Penderita Diare di Kelurahan
Pakujaya Kecamatan Serpong Utara Kota  Tangerang  Selatan  Tahun 2014.  Skripsi.  FKIK  UIN  Syarif hidayatullah. Jakarta.
Jawert, Melnick, Adelberg, 2005, Mikrobiologi  Kedokteran  (Medical Microbiology),  Salemba  Medika, Jakarta
Mashiatullah,  R.  M.  Qureshi,  T.  Javed, M.  S.  Khan,  M.  Z.  Chaudhary  And F.  Khalid.  2010.    Bacteriological (Fecal  And  Total  Coliform)  Quality Of  Pakistani  Coastal  Water.  The Nucleus  47,  No.  2  (2010)  173-180. Issn 0029-5698.
Menteri Kesehatan R.I., 1990. Peraturan
Menteri Kesehatan R.I, No. 416/Menkes/Per/IX/1990 tentang syarat-syarat dan pengawasan kualitas air , Jakarta.
Menteri kesehatan RI . 2002.  Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 1405/menkes/sk/xi/2002 tentang Persyaratan  Kesehatan  Lingkungan Kerja  Perkantoran  dan  industry . Departemen kesehatan RI.
Michael  JP  Jr.,  E.C.S.  Chan.  2012. Dasar-dasar mikrobiologi . Jakarta:
Universitas Indonesia
Nwachukwu, E.,  & Ume, C. A. (2013).
Bacteriological and
physicochemical qualities of
drinking  water  sources  in  local  area of  Eastern  Nigeria. J.  Environ.  Sci.
Water Res., 2 (9), 336 – 341.
Osman, et  al .  2012.  Bacterial  etiology of  diarrhoeal  diseases  in  children under  5  years  old  in  Ombadda Hospital  –  Sudan. Sudanese  Journal
Of Public Health - July 2012, VOL.
7 No 3 Pracoyo, N.E. 2006. Penelitian
Bakteriologik  Air  Minum  Isi  Ulang di Daerah Jabotabek . Cermin Dunia Kedokteran 152, hal. 37-40.
Ramadan, M. Usama Mohammed Abdul-Raouf  and  Elsayed  Khalaf Bakhiet. 2015. Microbial Evaluation of Some Groundwater Resources for Human  Domestic  Consumption  in the  Western  Area  of  the  River  Nile Basin of Assuit Governorate, Egypt.
J. Eco. Heal. Env. Vol. 3 , No. 1, 15- 25 (2015).
Sahar et.al .  2013.  Prevalence  and characterization  of  Shiga  toxin O157 and non-O157 enterohemorrhagic  Escherichia  coli isolated  from  different  sources  in Ismailia, Egypt.  Academic Journals.
Vol. 7(21), pp. 2637-2645
Soemirat,
J. 2003. Toksikologi lingkungan. Yogyakarta. Gadja Mada University
Steel,  R.G.D.,  and  J.H.  Torrie.  1995.
Prinsip dan Prosedur  Statistika. PT.
Gramedia Pustaka, Jakarta.
Suardana,  I.W. et  al ., 2014.  Identifikasi Escherichia  Coli O157:H7  Dari Feses Ayam Dan Uji Profil Hemolisisnya  Pada  Media  Agar Darah.  Jurnal  Kedokteran  Hewan. Vol. 8 No. 1
Tortora,  GJ  B.R.  Funke,  C.L.  Case. Microbiology:  An  Introduction,  8th Ed. The Benjamin Cummings Publishing  Co.  Inc,  USA,  2004,
p.717. WHO.  1998,  ‘Treatment  Critical  to Curbing
Waterborne Disease’,
Questia:  Journal  of Environmental
Health , vol. 60.