## Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
Yunita Sari 1 , Eman Sutrisna 2 , Hartono 3 1 Jurusan Keperawatan, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto, 2 Jurusan Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto, 3 Jurusan Fisika, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto Email : yunita-tky@umin.ac.jp/sasa.yunita@gmail.com

## Abstrak
Penelitian menyatakan bahwa vibrasi 47 Hz dapat meningkatkan penyembuhan luka diabetes. Namun sampai saat  ini  belum  diketahui  apakah  frekuensi  dibawah  dan  diatas  47  Hz  dapat  meningkatkan  penyembuhan  luka diabetes.  Oleh  karena  itu,  tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efek  frekuensi  vibrasi  yang berbeda  terhadap  penyembuhan  luka  diabetes.  Desain  penelitian  eksperimen  ini  melibatkan  5  kelompok  tikus putih; kelompok yang mendapatkan vibrasi 40 Hz (frekuensi rendah), kelompok 106 Hz (frekuensi menengah), kelompok 200 Hz (frekuensi tinggi), kelompok 300 Hz (frekuensi sangat tinggi), dan kelompok kontrol (tanpa vibrasi).  Induksi  diabetes  dilakukan  dengan  Alloxan  Monohidrat.  Vibrasi  diberikan  selama  10  menit.  Status luka  didasarkan  pada  jaringan  nekrotik,  ukuran  luka,  inflamasi,  dan  reepitelisasi. Analisis  histologi  dilakukan dengan pewarnaan Hematoksilin dan Eosin. Ukuran luka dianalisis dengan uji ANOVA, diikuti oleh tes Tukey. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  jaringan  nekrotik  dan  intensitas  inflamasi  paling  sedikit  pada  kelompok 40  Hz,  dan  paling  banyak  pada  kelompok  300  Hz.  Reepitelisasi  paling  baik  pada  kelompok  40  Hz,  dan paling rusak pada 300 Hz. Ukuran luka di kelompok 40 Hz secara signifikan lebih kecil dibandingkan dengan kelompok lain (p <0.05). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa vibrasi frekuensi rendah dapat mempercepat penyembuhan luka diabetes, sebaliknya, vibrasi frekuensi tinggi dapat merusak atau memperparah jaringan luka.
Kata kunci : Diabetes, penyembuhan, luka, terapi komplementer, vibrasi.

## The Provision of Different Vibration Frequency to Accelerate Diabetic Wound Healing

## Abstract
Studies have revealed that diabetic wound healing can be accelerated using the vibration therapy of 47 Hz. However, no strong evidence compelled the use of different vibration rates. Thus, this experimental study aimed to examine the effect of different vibration frequencies towards diabetic wound healing. Five groups of white rats were injected using Alloxan Monohydrate within ten minutes before the vibration therapy. The dosage was given categorized as 40 Hz (low), 106 Hz (moderate), 200 Hz (high) and 300 Hz (very high). Control group was created without given vibration therapy. Wound status was evaluated using the presence of necrotic tissues, size, inflammation, and reepithelization where Hematoxicilin and Eosin color-based were used to analyse the histological presentation. Using ANOVA and Tukey test, it was found that the necrotic tissues and the intended inflammation have less developed among low vibration group compared to others. Reepithelization and wound size reduction most experienced by the lower group, but the worst damaged occupied by the highest vibration group. It is suggested that lower vibration frequency enabled to accelerate the wound care healing, but a high-frequency rate can disturb or damage the injured tissues.
Keywords: Complementary therapy, diabetes mellitus, wound healing.

## Pendahuluan
Diabetes  Melitus  (DM)  saat  ini  merupakan ancaman yang serius bagi kesehatan manusia di  dunia. International  Diabetic  Federation (IDF) (2015) menyatakan prevalensi DM di dunia  pada  tahun  2014  adalah  sekitar  387 juta,  dan  diperkirakan  akan  menjadi  592 juta pada tahun 2035. Jumlah penderita DM juga  mengalami  peningkatan  yang  drastis di Indonesia, yaitu 8,4 juta jiwa pada tahun 2000, dan menjadi lebih dari 6,9 juta jiwa pada tahun 2016 (Sicree, Shaw, & Zimmet, 2016). Diprediksi pada tahun 2030, Indonesia akan menduduki  peringkat  ke  6  negara  dengan jumlah penderita DM terbesar di dunia, yaitu berjumlah  12  juta  jiwa  (Sicree,  Shaw,  dan Zimmet, 2016).
Salah  satu  komplikasi  yang  paling sering  terjadi  pada  pasien  DM  adalah  luka diabetes.  Luka  diabetes  adalah  penyebab utama  dari  amputasi  ekstremitas  bawah pada  penderita  DM  ( American  Podiatric Medical  Association ,  2016).  Bowker  dan Pfeifer (2008) menyatakan bahwa pasien DM memiliki risiko amputasi sebesar 15-40 kali lipat bila dibandingkan dengan pasien bukan DM. Di Indonesia, 30 % dari penderita DM pernah mengalami amputasi kaki karena luka kaki diabetes (Waspadji, 2006).
Banyak terapi dilakukan untuk meningkatkan  penyembuhan  luka  diabetes, namun  terapi-terapi  ini  sering  gagal, terutama pada luka yang mengalami iskemia. Berdasarkan penelitian terdahulu, kegagalan penyembuhan  luka  kebanyakan  disebabkan karena  aliran  darah  yang  kurang  di  daerah luka.  Aliran  darah  yang  berkurang  akan menyebabkan  penurunan  angiogenesis. Proses  angiogenesis  yang  terganggu  akan menyebabkan gangguan pada fase proliferasi (White,  Haidekker,  Stevens,  &  Frangos, 2004).  Oleh  karena  itu,  luka  diabetes memerlukan terapi yang dapat meningkatkan aliran darah ke area luka.
Beberapa  dekade  terakhir,  vibrasi frekuensi  rendah  telah  terbukti  dapat meningkatkan  aliran  darah,  dan  banyak digunakan untuk tujuan kesehatan.Penelitian Nakagami et al . (2007) menunjukkan bahwa vibrasi 47 Hz dapat menginduksi vasodilatasi dan  meningkatkan  aliran  darah  di  kulit.
Penelitian-penelitian  lain  juga  menyatakan bahwa  vibrasi  dengan  frekuensi  50  Hz dapat meningkatkan aliran darah (Maloney- Hinds,  Petrofsky  &  Zimmtererman,  2008). Penelitian-penelitian terdahulu juga menyatakan  bahwa  vibrasi  dibawah  50  Hz dapat  meningkatkan  aliran  darah  kaki  pada dewasa  muda  dan  wanita  perimenopouse (Kerschan et  al .,  2001;  Lohman,  Petrofsky, Schwab,  & Thrope,  2007;  Lythgo,  Eser,  de Groot,  &  Galea,  2009;  Stewart,  Karman, Montgomery, & McLeod, 2005), peningkatan masa  dan  kekuatan  tulang  (Bosco et  al ., 1999; Wilcock, Whatman, Harris, & Keogh, 2009).  Apabila  diberikan  pada  fruekensi rendah,  vibrasi  dapat  menurunkan  risiko fraktur  tulang,  penurunan  gangguan  otot, peningkatan kekuatan otot, perbaikan aliran cairan kaki, peningkatan proliferasi kondrosit dan  lain-lain  (Gusi,  Raimundo,  &  Leal, 2006;  Kaupp  &  Waldman,  2008;  Roelants, Delecluse, Goris, & Verschueren, 2004). Penelitian  sebelumnya  juga  menyatakan bahwa vibrasi 47 Hz juga dapat mempercepat penyembuhan luka, yaitu pada luka dekubitus stadium I (Arashi et al., 2010), luka dekubitus tipe injuri jaringan dalam (Sari et al ., 2015a), luka dekubitus stadium 2. Lebih lanjut, Sari et al . (2015b) menemukan bahwa vibrasi dapat menurunkan  hipoksia  dan  aktivasi  MMP-2 dan MMP-9 pada luka. Turunnya kadar MMP 2  &  9  dapat  mempercepat  penyembuhan luka karena kadar MMP-2 dan MMP-9 yang berlebihan  dapat  merusak  jaringan  kolagen. Penelitian lain oleh Syabariyah dan Nurahmah (2015) menyatakan bahwa vibrasi frekuensi 47  Hz  dapat  mempercepat  penutupan  luka diabetes  pada  subyek  manusia.  Namun sayangnya penelitian-penelitian diatas hanya menguji efek vibrasi pada frekuensi 47 Hz, dan  tidak  meneliti  efek  vibrasi  dibawah  47 Hz  dan diatas 47 Hz, sehingga sampai saat ini tidak diketahui apakah frekuensi dibawah 47 Hz dan diatas 47 Hz dapat meningkatkan penyembuhan luka diabetes, dan apakah aman untuk diaplikasikan pada luka diabetes. Oleh karena  itu  tujuan  dari  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  rentang  frekuensi  vibrasi yang dapat mempercepat penyembuhan luka diabetes, serta untuk mengetahui efek vibrasi frekuensi  rendah,  menengah  dan  tinggi terhadap penyembuhan luka diabetes.

## Yunita Sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes

## Metode Penelitian
Desain penelitian pada penelitian ini adalah penelitian  eksperimen  dengan  pendekatan post  test  only  with  control  group  design . Hewan  coba,  pada  sampel  yang  digunakan adalah tikus putih Wistar jantan usia sekitar 12 minggu dengan kisaran berat badan 250- 300 gram. Besar sampel ditentukan berdasar rumus  Federer  untuk  subyek  hewan,  yaitu (n-1)(t-1)  ≥  15,  dimana  n  adalah  jumlah sampel, t adalah  jumlah kelompok (Federer, 1991).  Hasil  perhitungan  menunjukkan bahwa jumlah sampel minimal adalah 5 ekor tikus  putih/kelompok.  Penelitian  ini  telah mendapatkan ijin dari komisi etik penelitian untuk subyek hewan dari komisi etik Fakultas Kedokteran  Universitas  Jendral  Soedirman, dengan nomor surat etik adalah 050/KEPK/ III/2015.  Tikus  dikelompokkan  secara  acak menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol (hanya  menerima  perawatan  standar), kelompok vibrasi 40 Hz (perawatan standar dan  vibrasi  40  Hz),  kelompok  vibrasi  106 hz (perawatan standar  dan vibrasi 106 Hz), kelompok vibrasi 200 Hz (perawatan standar dan  vibrasi  200  Hz),  dan  kelompok  vibrasi 300  hz  (perawatan  standar  dan  vibrasi  300 Hz). Induksi  tikus  putih  yang  mengalami diabetes  dilakukan  dengan  cara  tikus putih  diadaptasikan  selama  satu  minggu dengan pemberian makanan standar dan air minum  secara ad  libitum .  Tikus  diinduksi aloksan  dosis  tunggal  120  mg/kg  BB  tikus, intraperitoneal (Sari, Saryono, Purnawan, & Hartono,  2014).  Untuk  mengetahui  apakah tikus  putih  sudah  mengalami  diabetes, kadar glukosa darah tikus percobaan diukur menggunakan alat Blood Glucose Test Meter. Ekor tikus dibersihkan dengan menggunakan alkohol  70%,  kemudian  selanjutnya  ujung ekor  ditusuk  dengan  jarum  kecil  ( syringe 1  cc).  Darah  yang  keluar  kemudian disentuhkan pada strip glukometer. Rata-rata hasil pengukuran glukosa darah 7 hari setelah induksi alloxan monohidrat  adalah 275 mg/ dl. Perlukaan  yang  dilakukan  pada  tikus putih  sebelum  dilakukan  perlukaan,  bulu  di sekitar  punggung  dicukur,  kemudian  tikus putih  diadaptasikan  selama  satu  hari,  baru kemudian  dilukai.  Cara  perlukaan  adalah
berdasarkan atas penelitian sebelumnya yaitu dengan menggunakan gunting sampai lapisan kulit  paniculus  carnosus  (Sari,  Saryono, Purnawan,  &  Hartono,  2014).    Kemudian tikus diberi injeksi ketamile (25–30 mg/kg BB tikus) untuk anestesi. Luka dengan diameter 1 cm dilakukan di daerah perut bagian kanan ( flank region ) dengan menggunakan gunting yang  steril.  Kedalaman  luka  adalah  sampai pada  lapisan  paniculus  carnosus.  Luka kemudian ditutup dengan pembalut luka film transparan.
Terapi  vibrasi  pada  penelitian  ini menggunakan  kasur  vibrasi  diciptakan oleh  peneliti  (Sari,  Sutrisna,  &  Hartono, 2015a).  Tempat  tidur  yang  bisa  bergetar dibuat  dengan  menggunakan  motor  getar. Gambar  dari  kasur  vibrasi  dapat  dilihat  di gambar  1.  Secara  singkat,  kasur  vibrasi dibuat dengan cara meletakan 3 motor getar pada kasur. Frekuensi vibrasi diukur dengan menggunakan vibration  analyzer. Frekuensi vibrasi  dapat  diatur  dengan  merubah kecepatan  dari  motor  getar.  Terapi  vibrasi diberikan  dengan  cara  menidurkan  tikus pada kasur getar. Vibrasi diberikan selama 10 menit.
Gambar 1 Kasur getar  (Sari, Sutrisna, & Hartono., 2015a)

## Pengukuran/Pengumpulan Data
Pewarnaan  jaringan  luka  dilakukan  dengan cara  jaringan  kulit  pada  tikus  diambil  pada hari  ke-8.  Setelah  tikus  dibunuh,  jaringan difiksasi  dengan  10  %  formalin.  Kemudian dilakukan  dehidrasi  pada  jaringan  dengan alkohol  dan xylene ,  kemudian  dibungkus dengan paraffin. Jaringan kulit akan dipotong dengan  mikrotom  dengan  ketebalan  5-μm. Jaringan kemudian dideparafinisasi di xylene,
Yunita Sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
rehidrasi  di  etanol,  dan  dicuci  di  air  steril. Jaringan kemudian diberi pewarnaan dengan hematoksilin  dan  eosin  untuk  menentukan inflamasi  dan  nekrosis.  Setelah  itu,  akan diobservasi  dengan  mikroskop  dengan perbesaran  40  kali  dan  100  kali.  Sebelum diambil  jaringannya,  tikus  akan  dibunuh terlebih  dahulu  dengan  menggunakan overdosis  ketamile.  Sisa  jaringan  akan dikubur.
Proses  inflamasi  ditandai  dengan  adanya sel-sel  peradangan.  Sel-sel  peradangan  ini akan  memberikan  warna  biru  keunguan dengan pewarnaan Hematoksilin dan Eosin. Luas  luka  diukur  dengan  menggunakan software  image  analysis ,  yaitu Image  J . (Schneider et al , 2012). Kecepatan penutupan luka antar kelompok diperbandingkan dalam bentuk rasio luas luka. Rasio luas luka adalah nilai  relatif  yang  diperoleh  dengan  cara membandingkan  luas  luka  pada  hari  ke-n dengan luas luka hari sebelumnya, atau n-1 (rasio luas luka) ( Ueda et al ,  2010). Reepitelisasi  ditandai  dengan  munculnya lapisan  epitel  baru  pada  epidermis. Reepitelisasi  diamati  dengan  menggunakan mikroskop  cahaya.  Hasil  pengamatan dideskripsikan  secara  kualitatif.  Data  luas luka  dianalisis  menggunakan  uji  ANOVA, diikuti oleh tes Tukey. Nilai p < 0,05 dianggap signifikan.

## Hasil Penelitian
Hasil  penelitian  menunjukkan  pada  gambar 2  yaitu  perbedaan  makroskopis  antara kelompok  yang  diberi  vibrasi  40  Hz,  106 Hz,  200  Hz,  dan  300  Hz  serta  kelompok kontrol. Pada hari ke 0, penampakan semua luka  menunjukkan  gambaran  makroskopis yang  sama.  Mulai  hari  kedua,  luka  pada kelompok  vibrasi  300  Hz  mulai  terdapat jaringan  nekrotik  tipis  pada  dasar  luka, sedangkan pada kelompok 40, 106, dan 200 Hz, dasar luka terisi oleh jaringan granulasi yang  merah.  Pada  hari  ketiga,  jaringan nekrotik  semakin  tebal  pada  kelompok vibrasi 300 Hz. Jaringan nekrotik juga mulai terlihat dikelompok 200 Hz pada hari ketiga. Sebaliknya, jaringan nekrotik pada hari ketiga belum  terlihat  pada  kelompok  40  Hz,  106 Hz, dan kontrol. Pada hari kelima, jaringan nekrotik semakin tebal di kelompok 200 Hz dan 300 Hz dibandingkan hari sebelumnya. Pada  hari  kelima,  jaringan  nekrotik  mulai muncul  pada  kelompok  kontrol.  Pada  hari keenam dan ketujuh, jaringan nekrotik masih tebal  pada  kelompok  200  Hz  dan  300  Hz. Jaringan  nekrotik  pada  kelompok  kontrol juga makin menebal. Pada hari ke 0 sampai ke 8, dasar luka pada kelompok 40 Hz dan 106  Hz  terisi  oleh  jaringan  granulasi  dan ukuran luka semakin mengecil. Pada hari ke
Yunita Sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
Gambar  2  Hasil  makroskopis  antara  kelompok  40  Hz,  106  Hz,  200  Hz,  300  Hz,  dan  kontrol. (Ukuran bar adalah 1 cm)
delapan, luka pada kelompok 40 Hz dan 106 Hz  hampir  menutup.  Sebaliknya,  jaringan nekrotik pada kelompok 200 Hz dan 300 Hz dan kontrol masih terlihat tebal. Perbandingan  luas  luka  diantara  lima kelompok dapat dilihat pada gambar 3. Pada hari ke 6, 7, dan 8 luas luka pada kelompok 40  Hz  secara  signifikan  lebih  kecil  bila dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  (p <0,01 pada hari ke 6, p <0,05 pada hari ke 7, dan p <0,01 pada hari ke 8), kelompok 200 Hz (p <0,01 pada hari ke 6, p <0,01 pada hari ke 7, dan p <0,01 pada hari ke 8) ), kelompok 300 Hz (p <0,01 pada hari ke 6, p <0,01 pada hari ke 7, dan p <0,01 pada hari ke 8). Pada hari  ke  6  dan  7,  luas  luka  pada  kelompok 40  Hz  juga  secara  signifikan  lebih  kecil  (p <0,05) daripada kelompok 106 Hz. Gambar  4  adalah  gambaran  mikroskopis pada  epidermis  dengan  menggunakan pewarnaan Hematoksilin dan Eosin. Bagian
atas  adalah  gambaran  mikroskopis  pada kelompok  40  Hz,  106  Hz,  dan  200  Hz, sedangkan  bagian  bawah  adalah  kelompok 300  Hz  dan  kontrol.  Intensitas  inflamasi dapat dilihat melalui gambaran warna ungu pada  pewarnaan  hematoksilin  dan  Eosin. Intensitas  inflamasi  pada  kelompok  40  Hz adalah yang paling sedikit dibanding dengan kelompok-kelompok  lain.  Ketika  intensitas inflamasi pada kelompok kontrol, 200 Hz dan 300 Hz diperbandingkan, intensitas inflamasi pada  kelompok  kontrol  lebih  sedikit  bila dibandingkan kelompok 200 Hz dan 300 Hz. Intensitas  inflamasi  terbesar  terlihat  pada kelompok 300 Hz.
Gambar 5 merupakan gambaran mikroskopis  dari  dermis  antara  kelompok 40  Hz,  40  Hz,  106  Hz,  200  Hz,  300  Hz, dan  kontrol.  Intensitas  inflamasi  terendah adalah  pada  kelompok  40  Hz.  Inflamasi pada  kelompok  kontrol  lebih  sedikit  bila
Yunita Sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
Gambar 3 Perbandingan ukuran  antara kelompok 40 Hz, 106 Hz, 200 Hz, 300 Hz, dan kontrol.(* adalah p < 0,05; ** adalah  p <0,01)
dibandingkan  pada  kelompok  200  Hz. Intensitas  inflamasi  terbesar  terlihat  di kelompok 300 Hz. Gambar    6  menunjukkan  gambaran reepitelisasi  pada  kelompok  40  Hz,  106 Hz,  200  Hz,  300  Hz,  dan  kontrol  dengan menggunakan  pewarnaan  Hematoksilin dan  Eosin  (reepitelisasi  ditandai  dengan adanya jaringan epitel baru pada epidermis). Dari  gambar  6  terlihat  bahwa  reepitelisasi telah  terjadi  pada  semua  kelompok, namun  reepitelisasi  pada  kelompok  40  Hz lebih advance bila  dibandingkan  dengan
kelompok-kelompok  lain.  Pada  kelompok 40 Hz, sel inflamasi juga sangat sedikit pada epidermis yang baru. Gambaran reepitelisasi pada kelompok 106 Hz hampir mirip dengan kelompok  40  Hz,  namun  pada  kelompok 106 Hz masih terdapat banyak sel inflamasi pada  epidermis  yang  baru.  Pada  kelompok 40  Hz  dan  106  Hz,  di  atas  epidermis  yang baru  tidak  terdapat  jaringan  nekrotik. Sebaliknya,  pada  kelompok  200  Hz,  300 Hz dan kontrol, di atas epidermis yang baru terdapat  jaringan  nekrotik  (ditandai  dengan sel  inflamasi  yang  banyak)  yang  menutupi

## Yunita sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
Gambar 4 Perbandingan gambar inflamasi pada epidermis antara 40 Hz, 106 Hz, 200 Hz, 300 Hz, dan kontrol (perbesaran 100X)
Gambar  5  Perbandingan  inflamasi  pada  dermis    antara  40  Hz,  106  Hz,  200  Hz,  300  Hz,  dan kontrol (Perbesaran 100X)
epidermis.  Pada kelompok kontrol, jaringan nekrotik di atas epidermis lebih sedikit bila dibandingkan  pada  kelompok  200  Hz  dan 300 Hz. Ketika kelompok 200  Hz dan 300 Hz  diperbandingkan,  jaringan  nekrotik  di atas epidermis pada kelompok 200 Hz lebih sedikit dibandingkan dengan kelompok 300 Hz.

## Pembahasan
Penelitian ini merupakan penelitian pertama dalam  literatur  yang  meneliti  tentang  efek vibrasi  fruekensi  rendah,  menengah,  dan tinggi  dalam  meningkatkan  penyembuhan luka  diabetes.  Dalam  penelitian  ini,  Kami mendapatkan  hasil  bahwa  vibrasi  frekuensi rendah  dapat  meningkatkan  penyembuhan luka  diabetes  pada  hewan  coba.  Kami  juga memperoleh  hasil  bahwa  vibrasi  fruekensi tinggi tidak dapat mempercepat penyembuhan luka diabetes, bahkan efeknya dapat merusak jaringan luka.
Berdasarkan  atas  penelitian  terdahulu, vibrasi dapat meningkatkan aliran darah pada luka,  sehingga  dapat  mengurangi  hipoksia jaringan (Sari et al , 2015b). Nakagami et al . (2007) dan Ichioka et al . (2011) memberikan aplikasi  vibrasi  sebesar  47  Hz  pada  telinga mencit.  Setelah  pemberian  vibrasi,  terjadi vasodilatasi  pembuluh  darah  yang  diukur
secara real  time dengan  menggunakan intravital  videomicroskope .  Hasil  penelitian dari  Sari et  al .(2015b)  juga  menunjukkan bahwa  setelah  pemberian  vibrasi  dengan frekuensi  47  Hz  selama  7  hari,  tingkat hipoksia jaringan menurun bila dibandingkan dengan jaringan yang tidak mendapat vibrasi. Menurut Nakagami et al. (2007)  vibrasi 47 Hz dapat  mengakibatkan shear  stress sehingga akan mengakibatkan terjadinya peningkatan NO  ( Nitric  oxide )  yang  lebih  lanjut  akan mengakibatkan terjadinya vasodilatasi pembuluh darah. Lebih lanjut, dijelaskan juga bahwa vibrasi dapat menyebabkan stimulasi pelepasan  substansi  P  dan  peptide  terkait gene  kalsitonin  yang  dapat  menyebabkan terjadinya vasodilatasi pembuluh darah.
Dalam  penelitian  ini,  vibrasi  40  Hz (frekuensi  rendah),  dan  vibrasi  106  Hz (frekuensi  sedang)  dapat  meningkatkan penyembuhan luka diabetes, namun gambaran makroskopis dan mikroskopis menunjukkan bahwa vibrasi 40 Hz (frekuensi rendah) lebih dapat  menurunkan  inflamasi  dan  jaringan nekrotik dibanding vibrasi 106 Hz (frekuensi sedang).  Gambaran  lapisan  epidermis  yang baru juga lebih baik pada kelompok vibrasi frekuensi rendah dibanding frekuensi tinggi. Pada penelitian terdahulu, Syabariyah dan Nurahmah (2015) menyatakan bahwa vibrasi 47  Hz  dapat  mempercepat  penyembuhan luka diabetes. Menurut hasil penelitian kami,

## Yunita sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
Gambar  6  Perbandingan  reepitelialisasi  antara  40  Hz,  106  Hz,  200  Hz,  300  Hz,  dan  kontrol (Perbesaran 40X)
ternyata  vibrasi  dibawah  47  Hz  juga  dapat mempercepat  penyembuhan  luka  diabetes. Hasil lain dari penelitian ini yang belum ada dalam  penelitian  terdahulu  adalah  vibrasi frekuensi  tinggi  (200  Hz  keatas)  ternyata dapat  merusak  jaringan  luka  diabetes.  Hal ini  kemungkinan  disebabkan  karena  vibrasi fruekensi di atas 125 Hz dapat mengakibatkan vasokonstriksi  pembuluh  darah  karena adanya peningkatan ROS dan penurunan NO (Hughes et al , 2009). Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  vibrasi  frekuensi  rendah  dapat meningkatkan  proses  reepitelisasi.  Dalam fase penyembuhan luka, proses reepitelisasi akan melibatkan keseimbangan antara enzim pendegradasi kolagen, yaitu MMP dan enzim penghambat degradasi, yaitu Tissue inhibitor of  metalloproteinase .  Pada  luka  diabetes, terdapat  kelebihan  MMP,  sehingga  proses reepitelisasi  terganggu.  Penelitian  terdahulu oleh  peneliti  menemukan  bahwa  vibrasi dapat  menurunkan  aktivasi  MMP-2  dan MMP-9 pada luka dekubitus, sehingga proses reepitelisasi  berjalan  dengan  baik  (Sari et al , 2015b).  Dalam penelitian ini, epidermis terbentuk  dengan  sempurna  pada  hari  ke  8 pada kelompok vibrasi frekuensi rendah, hal ini  kemungkinan  besar  disebabkan  karena vibrasi  frekuensi  rendah  juga  menurunkan aktivasi  MMP-2  dan  MMP-9  pada  luka diabetes.  Pengukuran  aktivasi    MMP-2  dan MMP-9  dengan  zymografi  perlu  dilakukan pada  penelitian  yang  akan  datang  untuk mengkonfirmasi mekanisme ini.
Hasil  dari  penelitian  ini  membawa  ilmu yang baru dalam literatur, yaitu bahwa vibrasi 40  Hz    dapat  mempercepat  reepitelisasi dan  menurunkan  inflamasi,  namun  vibrasi fruekensi  tinggi  (200  Hz  keatas)  dapat meningkatkan  inflamasi  dan  merusak reepitelisasi. Dalam penelitian ini didapatkan data  bahwa  pemberian  vibrasi  fruekensi rendah tidak mengakibatkan terjadinya efek samping.  Seratus  persen  hewan  coba  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  tidak  ada yang  mati  selama  pemberian  terapi  vibrasi. Data  makroskopik  dan  mikroskopik  juga membuktikan bahwa terapi vibrasi  ini dapat menurunkan  inflamasi  dan  jumlah  jaringan nekrotik. Hal ini menunjukkan bahwa terapi vibrasi  dengan  menggunakan  kasur  vibrasi ini memungkinkan untuk diujicobakan pada
luka DM pada manusia di masa depan untuk mengetahui efektifitasnya pada penyembuhan luka diabetes pada manusia.

## Simpulan
Penelitian  ini  adalah  merupakan  penelitian pertama dalam literatur yang meneliti tentang efek vibrasi frekuensi rendah, menengah dan tinggi  terhadap  luka  diabetes.    Berdasarkan hasil penelitian ini, vibrasi 40 Hz (frekuensi rendah)  dan  106  Hz  (frekuensi  menengah) dapat  meningkatkan  penyembuhan  luka diabetes.  Namun  efek  vibrasi  40  Hz    pada penyembuhan  luka  diabetes  lebih  baik  bila dibandingkan efek dari vibrasi 106 Hz. Hasil mikroskopis dan makroskopis menunjukkan bahwa  vibrasi  dengan  frekuensi  40  Hz dapat  menurunkan  inflamasi,  meningkatkan jaringan  granulasi,  dan  mempercepat reepitelisasi.  Sebaliknya,  vibrasi  fruekensi tinggi  dapat  mengakibatkan  kerusakan jaringan.  Kedepannya,  vibrasi  40  Hz  perlu diujicobakan  pada  pasien  dengan  luka diabetes pada subyek manusia.

## Daftar Pustaka
American  Podiatric  Medical  Association. (2016).  What  is  a  Diabetic  Foot  Ulcer?. Retrieved  from  http://www.apma.org/Learn/ FootHealth.cfm?ItemNumber=981.
Arashi, M., Sugama, J., Sanada, H., Konya, C., Okuwa, M., Nakagami, G., ... Tabata K. (2010). Vibration therapy accelerates healing of  stage  I    pressure  ulcers  in  older  adult patients. Advances in skin dan wound care, 23 (7), 321–327.
Bosco  C,  Colli  R,  Introini  E,  Cardinale  M, Tsarpela  O,  Madella  A,  Viru  A.  (1999). Adaptive responses of human skeletal muscle to vibration exposure. Clin Physiol , 19, 183–
7.
Bowker, J. H., & Pfeifer, M. A. (2008). The Diabetic Foot . Philadelphia: Mosby Elsevier.
Federer  W.  (1991). Statistics  and  society: data  collection  and  interpretation. 2nd  ed.
Yunita sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
New York: Marcel Dekker.
Gusi, N., Raimundo, A., & Leal, A. (2006). Low-frequency  vibratory  exercise  reduces the risk of bone fracture more than walking: a  randomized  controlled  trial. BMC Muskuloskeletal Disorder ; 7 , 92.
Hughes, J. M., Wirth, O, Krajnak, K., Miller, R., Flavahan, S., Berkowitz, D. E., ... Flavahan, N.  A.  (2009)  Increased  oxidant  activity mediates  vascular  dysfunction  in  vibration injury. J Pharmacol Exp Ther , 328(1), 223– 30. doi: 10.1124/jpet.108.144618.
Ichioka S, Yokogawa H, Nakagami G, Sekiya N, Sanada H. (2011). In vivo analysis of skin microcirculation and the role of nitric oxide during  vibration. Ostomy  Wound  Manage , 57(9):40-7.
International  Diabetic  Federation.  (2015). International  Working  Group  on  Diabetic Foot.Retrieved  from  http://www.iwgdf.org/ index.php?option=com_content&task=view &id=33&Itemid=48.
Kaupp,  J.  A.,  &  Waldman,  S.  D.  (2008). Mechanical vibrations increase the proliferation  of  articular  chondrocytes  in high-density  culture. Proc.ImechE ,  222(1), 695–703.
. Kerschan-Schindl  K1,  Grampp  S,  Henk C,  Resch  H,  Preisinger  E,  Fialka-Moser  V, Imhof  H.  (2001).  Whole-body    vibration exercise    leads    to    alterations    in    muscle blood  volume. Clin  Physiol , 21, 377-82.
Lohman,  E.  B.,  Petrofsky,  J.  S.,  Maloney- Hinds., Schwab, H. B., & Thrope, D. (2007). The effect of whole body vibration on lower extremity skin blood flow in normal subjects. Med Sci Monit , 13(2).
Lythgo, N., Eser, P., de Groot, P., & Galea, M. (2009). Whole-body  vibration  dosage alters leg blood flow. Clin Physiol Funct Imaging , 29, 53-9.
Maloney-Hinds.,  Petrofsky,  J.  S.,  & Zimmerman, G. (2008). The effect of 30 Hz vs  50  Hz  passive  vibration  and  duration  of
vibration on skin blood flow in the arm. Med Sci Monit , 14(3), 112–116.
Nakagami,  G.,  Sanada,  H.,  Matsui,  N., Kitagawa, A., Yokogawa, H., Sekiya, N., ... Shibata,  M.  (2007).  Effect  of  vibration  on skin blood flow in an in vivo microcirculatory model. BioScience Trends , 1(3), 161–166.
Roelants,  M.,  Delecluse,  C.,  Goris,  M.,  & Verschueren,  S.  (2004).  Effect  of  24  weeks of  whole  body  vibration  training  on  body composition and muscle strength in untrained females. International  Journal  of  Sports Medicine , 25(1).
Sari, Y., Saryono., Purnawan, I., & Hartono. (2014).    Modification  of  breast  pump  as a  negative  pressure  wound  herapy  for accelerating wound healing of diabetic ulcer. Jurnal Ners , 10(1), 104–111.
Sari, Y., Sutrisna, E., & Hartono. (2015a). Low frequency  vibration  attenuate  inflammation and  improve  reepithelialization  of  diabetic ulcer.  5th  International  Nursing  Conference UI. September 16–18. Jakarta, Indonesia.
Sari, Y., Sanada, H., Minematsu, T., Nakagami, G.,  Nagase,  T.,  Huang,  L.,  ...  Sugama,  J. (2015b).  Vibration  inhibits  deterioration  in rat  deep-tissue  injury  through  HIF1-MMP axis. Wound  Repair  Regen ,  23(3),  386–93. doi: 10.1111/wrr.12286.
Schneider  CA,  Rasband  WS,  Eliceiri  KW. (2012).  NIH  Image  to  ImageJ:  25  years  of image analysis. Nat Methods , 9(7):671–5.
Sicree,  R.,  Shaw,  J.,  &  Zimmet,  P.  (2016). The  global  burden  diabetes  and  impaired glucose tolerance: IDF diabetes atlas fourth edition.Retrieved  from  https://www.idf. org/sites/default/files/Diabetes%20and%20 Impaired%20Glucose%20Tolerance_1.pdf., pada 4 April 2016.
Stewart,  J. M., Karman, C., Montgomery,  L. D., & McLeod, K. J. (2005). Plantar  vibration improves  leg  fluid  flow  in  perimenopausal women. Am    J  Physiol  Regul  Integr  Comp Physiol , 288 , 623-9.
Yunita sari :
Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes
Syabariyah,  S,  &  Nurachmah,  E  (2015). Vibration Adjuvant Wound Therapy Enhances The  Healing  of  Diabetic  Foot  Ulcers:  An Interim Analysis of 31 Patient. Jurnal Online STIK  Muhammadiyah  Pontianak .  Doi: journal.stikmuhptk.ac.id/index.php/jokksmp/ article/download/76/3.
Ueda  K, Akase  T,  Nakagami  G,  Nagase  T, Minematsu T,  Huang  L,  Sagara  H,  Ohta Y, Sanada  H.(2010). A  possible  animal  model for  critical  colonisation. J  Wound  Care 19(7):295–300.
Waspadji,  S.  (2006). Komplikasi  kronik
diabetes:  Mekanisme  terjadinya,  diagnosis dan  strategi  pengelolaan  ilmu  penyakit dalam . Fourth edition. Jakarta: FK UI.
White, C. R., Haidekker, M.A., Stevens, H. Y.,  &  Frangos,  J.  A.  (2004).  Extracellular signal-regulated  kinase  activation  and endothelin-1 production in human endothelial cells  exposed  to  vibration. J  Physiol ,  555, 565–572.
Wilcock, I. M., Whatman, C., Harris, N., & Keogh, J. W. (2009). Vibration training: could it  enhance  the  strength,  power,  or  speed  of athletes? J Strength Cond Res , 23, 593–603.
Yunita sari : Pengaruh Frekuensi Vibrasi terhadap Penyembuhan Luka Diabetes