## Pencegahan  Infeksi  Bakteri
Vibrio  alginolyticus  Pada  Ikan  Kerapu  Cantang ( Epinephelus  fuscoguttatus  x  lanceolatus)  Dengan  Menggunakan  Kombinasi Madu Dan Air Rebusan Patikan Kerbau ( Euphorbia hirta)
Kanisius Ogy Syaputra Bere 1* , Yuliana Salosso 2 , Wesly Pasaribu 3
1 ,  2,  3) Program  Studi  Budidaya  Perairan,  Fakultas  Peternakan  Kelautan  dan  Perikanan,  Universitas  Nusa Cendana. Jln. Adisucipto Penfui, Kota Kupang. Kode Pos 85228. *Email Korespondensi : ogybere@gmail.com Abstrak. Kegiatan  budidaya  ikan  kerapu  cantang  ( Epinephelus  fuscoguttatus  x  lanceolatus )    seringkali  terkendala akibat  serangan  penyakit  yang  disebabkan    oleh  bakteri Vibrio  alginolyticus. Tujuan  dilakukannya  penelitian  ini adalah untuk mengetahui apakah penggunaan kombinasi madu dan patikan kerbau dapat mencegah ikan kerapu cantang dari serangan bakteri V. alginolyticus. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan tiga perlakuan yang masing-masing diulangi sebanyak tiga kali yakni 2 : 1, 1,5 : 1,5 dan 1 : 2. Penelitian dilaksanakan selama  satu    bulan  di    Jalan  Fatudela  1  Liliba  sedangkan  pemeriksaan  hematologi  dilakukan  di  UPT Laboratorium  Kesehatan  Provinsi  Nusa  Tenggara  Timur.  Parameter  yang  diamati  meliputi  jumlah  eritrosit, jumlah  leukosit,  pertumbuhan,  kelangsungan  hidup,  morfologi  dan  gejala  klinis.  Hasil  menunjukkan  bahwa pemberian kombinasi madu dan patikan kerbau tidak berpengaruh terhadap hematologi dan pertumbuhan ikan kerapu  cantang  (P>0,05),  namun  berpengaruh  nyata  terhadap  kelangsungan  hidup  ikan  kerapu  cantang (P<0,05) dengan kelangsungan hidup tertinggi pada perlakuan 1:2. Hasil uji lanjut BNT menunjukkan bahwa perlakuan 1:2 berbeda dengan perlakuan 2 : 1 dan 1,5 : 1,5, begitu pula perlakuan 1,5 : 1,5 juga berbeda dengan perlakuan 2 : 1. Sedangkan hasil gejala klinis menunjukkan bahwa perlakuan 1 : 2 memiliki gejala klinis yang lebih ringan jika dibandingkan dengan perlakuan lainnya.
Kata kunci : Kerapu Cantang, Vibrio alginolyticus , Hematologi, Madu, Euphorbia hirta

## Pendahuluan
Ikan  Kerapu  Cantang  ( Epinephelus  fuscoguttatus  x  lanceolatus )  merupakan  salah  satu  dari  sekian  banyak spesies kerapu yang memiliki nilai ekonomis tinggi (Rahmaningsih & Ari, 2013). Ikan kerapu cantang dihasilkan melalui  persilangan  antara  induk  betina  ikan  kerapu  macan  ( Epinephelus  fuscoguttatus )  dan  induk  jantan  ikan kerapu  kertang  ( Epinephelus  lanceolatus )  (Firdausi  &  Mubarak,  2021;  Ismi,  2017;  Rahmaningsih  &  Ari,  2013). Sutarmat  &  Yudha,  (2013)  melaporkan  bahwa  ikan  kerapu  cantang  ( E.  fuscoguttatus  x  lanceolatus )  memiliki keunggulan dimana pertumbuhannya relatif cepat dibandingkan dengan jenis kerapu lainnya.
Dalam  pengembangan  budidaya  ikan  kerapu  cantang  ( Epinephelus  fuscoguttatus  x  lanceolatus )  sering terkendala oleh serangan penyakit akibat bakteri (Dahlia et al., 2017). Vibrio alginolyticus adalah golongan bakteri yang  sering  menginfeksi  hampir  semua  spesies  air  laut  (Ren et  al., 2022;  Yu et  al., 2022;  Zhang et  al., 2023). Dilaporkan  bahwa Vibrio  alginolyticus menyebabkan  mortalitas  pada  ikan  kerapu  cantang  sebesar  60% (Mali et al., 2023)  hingga  mencapai  63,3%  (Qomariyah et  al., 2017).  Penanganan  yang  sering  dilakukan  dalam  hal mengatasi serangan bakteri yaitu dengan penggunaan antibiotik (Harikrishnan et al., 2011). Namun penggunaan antibiotik dapat berdampak buruk terhadap biota seperti resistensi antibiotik (Defoirdt et al., 2011). Oleh karena itu  penanganan  bakteri  pada  ikan  dapat  menggunakan  bahan  herbal  sebagai  antibiotik  alami  (Hamzah et  al., 2021).
Bahan herbal yang telah terbukti ampuh mengatasi serangan bakteri pada ikan adalah madu hutan kefa yang dapat mengobati ikan kerapu cantang dari serangan bakteri V. alginolyticus (Ollin et al., 2021). Selain madu tanaman  patikan  kerbau  ( Euphorbia  hirta )  juga  telah  terbukti  dapat  mencegah  serangan  bakteri Aeromonas hydrophilla pada ikan nila (Dawan et al., 2021).
Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji apakah kombinasi antara madu dan patikan kerbau ( E. hirta ) efektif dalam pencegahan serangan bakteri V. alginolyticus pada ikan kerapu cantang ( E. fuscoguttatus x lanceolatus ) dengan meninjau perubahan hematologi, pertumbuhan, gejala klinis serta sintasan ikan kerapu cantang dan pada perbandingan berapakah yang dapat memberikan efek terbaik.

## Bahan dan Metode
Penelitian ini menggunakan madu hutan kefa yang diencerkan menggunakan akuades hingga mencapai konsentrasi 50%, air rebusan patikan kerbau dengan konsentrasi 3% dan ikan kerapu cantang ( E. fuscoguttatus x lanceolatus )  sebanyak  54  ekor  dengan  padat  penebaran  tiap  akuarium  adalah  6  ekor.  Pelaksanaan  penelitian dilakukan  pada  bulan  Oktober  sampai  November  2022,  pemeliharaan  ikan  dilakukan  di  Jalan  Fatudela  1 Kelurahan  Liliba  Kota  Kupang  dan  pemeriksaan  hematologi  ikan  dilakukan  di  UPTD.  Dinas  Kesehatan Provinsi NTT. Pemeriksaan hematologi berupa eritrosit dan leukosit dilakukan sebanyak tiga kali yakni sebelum ikan diberi perlakuan, sesudah 26 hari perlakuan dan sesudah 5 hari dilakukan infeksi bakteri Vibrio alginolyticus . Desain  penelitian  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  dengan  tiga  perlakuan  yang  diulang sebanyak tiga kali sehingga diperoleh 9 unit percobaan yakni
Perlakuan A (2:1) = 1000 ml madu dan 500 ml patikan kerbau Perlakuan B (1,5:1,5)
= 750 ml madu dan 750 ml patikan kerbau dan Perlakuan C (1:2) = 500 ml madu dan 1000 ml patikan kerbau.
Sebelum  diberi  perlakuan,  ikan  terlebih  dahulu  dilakukan  aklimatisasi  dalam  wadah  penelitian  selama tiga  hari  bertujuan  agar  ikan  dapat  menyesuaikan  diri  dengan  lingkungan  barunya.  Selanjutnya  dilakukan pengambilan  darah  ikan  sebelum  perlakuan.  Dilanjutkan  dengan  perlakuan  perendaman  selama  26  hari  yang dilakukan  selama  1  sampai  2  menit  pada  sore  hari.  Saat  perendaman  ikan  tetap  diberi  aerasi  agar  tidak kekurangan oksigen. Pada hari ke-27 dilakukan pengambilan darah sesudah perlakuan di hari yang sama pula dilakukan infeksi bakteri Vibrio alginolyticus dengan kepadatan bakteri 10 6 sel/ml diinfeksi ke setiap ikan dengan konsentrasi 0,1 ml/individu dengan cara di injeksi. Pengamatan gejala klinis dilakukan selama 5 hari setelah ikan diinfeksi bakteri.
Parameter  utama  yang  diamati  berupa  nilai  sel  darah  merah  (eritrosit),  sel  darah  putih  (leukosit), kelangsungan hidup dan gejala klinis serta parameter penunjang berupa pertumbuhan ikan kerapu cantang.
Perhitungan  eritrosit  maupun  leukosit  menggunakan  hematology  analyzer  (Quintus  5  part)  dimana segala  proses  pemeriksaan  akan  terjadi  secara  otomatis  dimulai  dari  proses  dilusi,  hemolyzing,  perhitungan jumlah sel, display serta print out.
Kelangsungan  hidup  ikan  kerapu  cantang  selama  penelitian  dihitung  menggunakan  rumus  Effendie (1997). Rumus yang digunakan adalah sebagai berikut :
𝑺𝑹 = 𝑵𝒕 𝑵𝟎 𝑿 𝟏𝟎𝟎%
Keterangan : SR : Kelangsungan hidup (%) Nt : Jumlah ikan yang hidup pada akhir penelitian (ekor) N0 : Jumlah ikan pada awal penelitian (ekor)
Pertumbuhan berat mutlak ikan kerapu cantang selama penelitian dihitung menggunakan rumus Effendie (1997). Rumus yang digunakan adalah sebagai berikut :

## Wm = Wt – Wo
Keterangan : Wm : Pertumbuhan berat mutlak (gram) Wt : Berat biomassa pada akhir penelitian (gram) Wo : Berat biomassa pada awal penelitian (gram)

## Hasil dan Pembahasan Sel Darah Merah (Eritrosit)
Rata-rata sel darah merah (eritrosit) ikan kerapu cantang ( Epinephelus fuscoguttatus x lanceolatus )  mulai dari sebelum diberi perlakuan, sesudah diberi perlakuan selama 26 hari dan sesudah infeksi selama 5 hari disajikan sebagaimana dalam gambar 1.
Gambar 1. Rata-rata Eritrosit Ikan Kerapu Cantang Selama Penelitian
Gambar  1  menunjukkan  rata-rata  sel  darah  merah  (eritrosit)  ikan  kerapu  cantang  sebelum  diberi perlakuan berjumlah 1,65x10 6 sel/µl. Nilai ini masih tergolong eritrosit normal namun dalam kategori rendah dimana rata-rata eritrosit normal pada ikan berkisar antara 1,05 – 3 x10 6 sel/mm 3 (Sjafei et al., 1989). Rendahnya eritrosit  ikan  sebelum  perlakuan  diduga  karena  ikan  dalam  kondisi  stres.  Hal  ini  sejalan  dengan  pernyataan Bangsa et al., (2015) bahwa kondisi stress mampu mempengaruhi kinerja dan kesehatan ikan berupa gangguan fungsi sel  darah.  Selain  itu, kurangnya  suplai  nutrisi  ke sel  jaringan  dan  organ sehingga  dapat  mempengaruhi total eritrosit.
Eritrosit  ikan  kerapu  cantang  setelah  diberi  perlakuan  menunjukkan  adanya  peningkatan  yakni  pada perlakuan A (2:1) = 1,7x10 6 sel/µl, perlakuan B (1,5:1,5) = 1,8x10 6 sel/µl dan pada perlakuan C (1:2) = 1,96x10 6 sel/µl  (Gambar  1).  Akan  tetapi  nilai  tersebut  tidak  menunjukkan  adanya  perbedaan  (P>0,05).  Meningkatnya eritrosit  ikan  kerapu  cantang  setelah  diberi  perlakuan  dipicu  oleh  adanya  kandungan  senyawa  aktif  yang terkandung dalam madu dan patikan kerbau ( E. hirta ). Dimana madu mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, tanin  dan  saponin  (Zahra et  al., 2021),  sedangkan  patikan  kerbau  ( E.  hirta )  mengandung  senyawa flavonoid,  tannin  dan  steroid  (Yuda et  al., 2017).  Sejalan  dengan  hal  diatas  Zissalwa et  al., (2020)  menyatakan bahwa  senyawa  flavonoid  dan  saponin  mampu  meningkatkan  jumlah  eritrosit  dimana  flavonoid  bermanfaat dalam  melindungi  sel,  antiinflamasi  dan  dapat  bekerja  sebagai  antibiotik  sedangkan  senyawa  saponin  dapat memacu pembentukan protein (Chandra et al., 2018).
Rata-rata eritrosit ikan kerapu cantang mengalami penurunan setelah diinfeksi bakteri Vibrio alginolyticus selama  lima  hari  yakni  pada  perlakuan  A  (2:1)  =  1,33x10 6 sel/µl,  perlakuan  B  (1,5:1,5)  =  1,4x10 6 sel/µl sedangkan pada perlakuan C (1:2) = 1,77x10 6 sel/µl (Gambar 1). Akan tetapi nilai tersebut tidak menunjukkan adanya perbedaan (P>0,05). Menurunnya jumlah eritrosit setelah infeksi bakteri V. alginolyticus diakibatkan oleh bakteri  yang  masuk  kedalam  saluran  darah  menghasilkan  enzim  hemolisin  sebagai  suatu  eksotoksin  yang memiliki kemampuan dalam melisiskan sel darah merah sehingga sel darah merah pada pembuluh darah akan berkurang  (Kamaludin,  2011).  Selain  itu  bakteri  yang  masuk  kedalam  tubuh  ikan  akan  mengganggu  organ hematopoietik seperti ginjal dan limpa terganggu dalam memproduksi sel eritrosit yang disebabkan oleh adanya infeksi bakteri (Kabata,  1985).  Walaupun  mengalami penurunan namun masih  dalam  kisaran  eritrosit  normal ikan.
1.65± 0,09 a 1.7 ± 0,1 a
1.33 ± 0,2 a 1.65 ± 0,09 a
1.8 ± 0,1 a 1.4± 0,2 a 1.65± 0,09 a 1.96± 0,1 a 1.77 ± 0,1 a 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 Sebelum Perlakuan Sesudah Perlakuan Sesudah Infeksi R at a- ra ta Erit rosi t sel am a Pe nel it ian (1 0 6 sel /µ l) Perlakuan A (2:1)
Perlakuan B (1,5:1,5)
Perlakuan C (1:2)

## Sel Darah Putih (Leukosit)
Rata-rata sel darah putih (leukosit) ikan kerapu cantang ( Epinephelus fuscoguttatus x lanceolatus )  mulai dari sebelum diberi perlakuan, sesudah diberi perlakuan selama 26 hari dan sesudah infeksi selama 5 hari disajikan sebagaimana dalam gambar 2.
Gambar 2. Rata-rata Leukosit Ikan Kerapu Cantang Selama Penelitian.
Gambar 2 menunjukkan bahwa rata-rata sel darah putih (leukosit) ikan kerapu cantang sebelum diberi perlakuan  berjumlah  10x10 4 sel/µl. Hal  ini menunjukkan  bahwa  leukosit  ikan  kerapu  cantang sebelum  diberi perlakuan  masih  tergolong  leukosit  normal  pada  ikan.  Sejalan  dengan  hal  tersebut  Moyle  &  Cech  (1988) melaporkan bahwa rata-rata sel darah putih lebih rendah dibandingkan dengan sel darah merah pada ikan yakni berkisar antara 20.000 sel/mm 3 – 150.000 sel/mm 3 .
Leukosit ikan kerapu cantang setelah diberi perlakuan menunjukkan adanya peningkatan dimana pada perlakuan A (2:1) = 12,76x10 4 sel/µl, perlakuan B (1,5:1,5) = 13,06x10 4 sel/µl sedangkan pada perlakuan C (1:2) =  13,87x10 4 sel/µl  (Gambar  2).  Akan  tetapi  nilai  tersebut  tidak  menunjukkan  adanya  perbedaan  (P>0,05). Peningkatan  nilai  leukosit  setelah  perlakuan  mengindikasikan  bahwa  telah  terjadi  pembentukan  antibodi  yang dipicu  oleh  adanya  kandungan  senyawa  aktif  pada  madu  dan  patikan  kerbau  ( E.  hirta )  dimana  madu  madu mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, tanin dan saponin (Zahra et al., 2021), sedangkan patikan kerbau ( E. hirta ) mengandung senyawa flavonoid, tannin dan steroid (Yuda et al., 2017). Sejalan dengan hal diatas Hodar et al., (2021)  menyatakan  bahwa  senyawa  aktif  seperti    flavonoid,  steroid,  fenol  dan  tanin  dapat  bekerja  dalam mengaktifkan sel pertahanan seluler dengan cara meningkatkan sel yang berperan dalam sistem imun dalam hal ini adalah sel darah putih.
Rata-rata  leukosit  ikan  kerapu  cantang  setelah  diinfeksikan  bakteri Vibrio  alginolyticus mengalami peningkatan dimana pada perlakuan A (2:1) = 16x10 4 sel/µl, perlakuan B (1,5:1,5) = 15x10 4 sel/µl sedangkan perlakuan  C  (1:2)  =  14,4x10 4 sel/µl  (Gambar  2).  Namun  nilai  tersebut  juga  tidak  menunjukkan  adanya perbedaan (P>0,05). Peningkatan nilai leukosit setelah infeksi dapat terjadi karena  bakteri yang masuk kedalam tubuh ikan akan diidentifikasi sebagai antigen (Hazzuli et al., 2015) sehingga ketika terjadi infeksi maka leukosit akan  membentuk  antibodi  untuk  merangsang  dan  mengidentifikasi  benda  asing  (antigen)  yang  masuk  oleh karena  itu  semakin  banyak  rangsangan  antigen  maka  antibodi  yang  dihasilkan  juga  akan  semakin  banyak (Kurniawan et al., 2020).

## Kelangsungan Hidup
Kelangsungan  hidup  ikan  kerapu  cantang  dari  awal  penelitian  hingga  5  hari  dilakukan  infeksi  bakteri Vibrio alginolyticus disajikan sebagaimana dalam gambar 4.
10 ± 0,92 a 12.76 ± 0,32 a 16± 2,2 a 10± 0,92 a 13.06± 1,79 a 15± 0,4 a 10± 0,92 a 13.87± 0,4 a 14.4± 0,7 a 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Sebelum Perlakuan Sesudah Perlakuan Sesudah Infeksi Rata -ra ta L euk osit Ik an K era pu C an ta ng S el ama P ene lit ian ( x10 4 se l/µ l) Perlakuan A (2:1)
Perlakuan B (1,5:1,5)
Perlakuan C (1:2)

## Gambar 3. Kelangsungan Hidup Ikan Kerapu Cantang Selama Penelitian
Gambar 3 menunjukkan kelangsungan ikan kerapu cantang selama penelitian dimana pada perlakuan A (2:1)  memiliki  nilai  sintasan  44,4%,  perlakuan  B  (1,5:1,5)  sebesar  72,2%  sedangkan  pada  perlakuan  C  (1:2) sebesar  100%.  Hasil  uji  ANOVA  menunjukkan  bahwa  penggunaan  kombinasi  madu  dan  patikan  kerbau berpengaruh  nyata  terhadap  kelangsungan  hidup  ikan  kerapu  cantang  (P<0,05),  dengan  kelangsungan  hidup tertinggi pada perlakuan C (1:2) selanjutnya diikuti perlakuan (1,5:1,5) sedangkan kelangsungan hidup terendah pada perlakuan (2:1). Uji lanjut BNT menunjukkan bahwa perlakuan C berbeda dengan perlakuan A maupun B, begitu pula perlakuan B berbeda dengan perlakuan A.
Mortalitas  terjadi  akibat  ikan  uji  mengalami  stress  setelah  terinfeksi  bakteri V.  alginolyticus .  Bakteri masuk  menyebar  ke  seluruh  tubuh  ikan  sehingga  pertahanan  tubuh  ikan  lemah  dan  menyebabkan  kematian. Mangunwardoyo et  al., (2010)  menyatakan  bahwa  upaya  untuk  melindungi  tubuh,  ikan  mengeluarkan  banyak lendir  sehingga  metabolisme  meningkat  dan  banyak  menggunakan  energi  dalam  tubuh,  akibatnya  ikan  lemah dan  stress  sehingga  kondisi  ini  mempermudah  bakteri  untuk  menginfeksi.  Faktor  yang  mempengaruhi kelangsungan  hidup  ikan  kerapu  cantang  diduga  adalah  kandungan  patikan  kerbau  dalam  perlakuan.  Dimana semakin  tinggi  konsentrasi  patikan  kerbau  dalam  perlakuan  menghasilkan  tingkat  kelangsungan  hidup  yang tinggi  pula.  Sejalan  dengan  hal  tersebut  Dawan et  al., (2021)  melaporkan  bahwa  pemberian  patikan  kerbau melalui pencegahan dapat meningkatkan ketahanan tubuh ikan.

## Gejala Klinis
Gejala klinis diamati selama 5 hari setelah ikan kerapu cantang diinfeksi bakteri V. alginolyticus . Gejala klinis pasca infeksi disajikan sebagaimana dalam table 1.
Tabel 1. Gejala Klinis Ikan Kerapu Cantang Pasca Infeksi
Perlakuan Gejala Klinis Yang Tampak Pada Hari Ke- 1 2 3 4 5 A A (2:1) + ++ ++ + + B B (1,5:1,5) + ++ ++ + + C C (1:2) + + - - - Keterangan: - = Respon terhadap pakan normal, ikan bergerak aktif
+ = Respon terhadap pakan kurang, ikan berenang normal tapi tidak terlalu aktif, warna tubuh menjadi pudar ++
= Respon  terhadap  pakan  kurang,  ikan  berenang  tidak  seimbang  terjadi  kerusakan  pada  tubuh (borok, luka pada bekas suntikan, sisk mengelupas)
Tabel 1 menunjukkan bahwa  pengamatan gejala klinis hari  ke-1 menggambarkan hampir semua ikan perlakuan  menunjukkan  gejala  klinis  awal  yang  sama  yakni  warna  tubuh  menjadi  pudar,  gerakan  lambat  dan
44.4 ± 9,6 a 72.2 ±19.2 b 100 c 0,0 10,0 20,0 30,0 40,0 50,0 60,0 70,0 80,0 90,0 100,0 A (2:1) B (1,5:1,5) C (1:2) K el an gs un gan h id up ( % ) Perlakuan
nafsu  makan  menurun.  Pada  hari  ke  2,  gerakan  ikan  mulai  kembali  normal  namun  pada  perlakuan  2:1  dan perlakuan 1,5:1,5 beberapa ikan mengalami luka pada bekas suntikan dan sisik mengelupas selain itu ikan belum terlalu  merespon  pakan  yang  diberikan.  hari  ke  3,  ikan  pada  perlakuan  1:2  sudah  kembali  merespon  pakan sedangkan pada perlakuan 2:1 dan 1,5:1,5 masih belum merespon bahkan menunjukkan gejala tambahan seperti pada perlakuaan 2:1 terjadi borok pada operculum. Selanjutnya di hari ke 4, pada perlakuan 1:2 menunjukkan gejala sembuh yakni nafsu makan mulai normal dan  sedangkan pada pada perlakuan 2:1 dan 1,5:1,5 ikan baru mulai  merespon  pakan sedangkan  luka  di  bagian  tubuh  dan  operculum  tidak  kunjung  membaik.  Pengamatan pada hari ke 5, masih menunjukkan kondisi yang sama seperti pada hari ke 4.
Nitimulyo et  al., (2005)  melaporkan  bahwa  ikan  kerapu  yang  terserang  vibriosis  akan  menimbulkan gejala seperti bergerak lambat, keseimbangan terganggu dan selalu berenang di permukaan. Sementara itu Seuk et al., (2021) melaporkan bahwa ikan kerapu cantang setelah diinfeksi bakteri V. alginolyticus menunjukkan gejala klinis  seperti  sisik  terkelupas,  muncul  benjolan  dan  borok  disertai  pendarahan  pada  sirip  punggung  dan  sirip ekor,  muncul  benjolan  pada  bekas  suntikan  serta  terjadi  pendarahan,  insang  mengalami  pendarahan,  muncul borok  pada  permukaan  tubuh  ikan,  respon  ikan  terhadap  pakan  kurang  serta  ikan  sering    menabrak  dinding akuarium  dan  sering  muncul  ke  permukaan.  Gejala  klinis  yang  muncul  diinfeksi  bakteri V.  alginolyticus tidak begitu parah jika dibandingkan dengan yang dilaporkan oleh Nitimulyo et al. , (2005); Seuk et al., (2021). Hal ini menandakan bahwa penggunaan kombinasi madu dan patikan kerbau cukup efektif dalam menekan timbulnya gejala klinis akibat infeksi bakteri V. alginolyticus .

## Pertumbuhan Berat
Pertumbuhan  berat  mutlak  ikan  kerapu  cantang  mulai  dari  awal  penelitian  hingga  26  hari  dilakukan perlakuan perendaman disajikan sebagaimana dalam gambar 3.

## Gambar 4. Pertumbuhan Berat Mutlak Ikan Kerapu Cantang selama 26 Hari Perlakuan
Gambar  4  menunjukkan  bahwa  setelah  dilakukan  perlakuan  perendaman  selama  26  hari  terjadi penambahan  berat  mutlak  ikan  kerapu  cantang  yakni  pada  perlakuan  A  (2:1)  sebesar  47,5  g,  perlakuan  B (1,5:1,5)  sebesar  46,5  g  sedangkan  pada  perlakuan  C  (1:2)  sebesar  45,1  g.  akan  tetapi  nilai  tersebut  tidak menunjukkan adanya perbedaan (P>0,05).
Pada awal penelitian diduga ikan mengalami stres dilihat dari kurangnya respon terhadap pakan namun setelah  diberi  perendaman  selama  beberapa  hari  menunjukkan  nafsu  makan  yang  semakin  membaik  dimana ikan  kembali  merespon  pakan  yang  diberikan.  Hal  ini  dapat  terjadi  karena  kandungan  madu  yang  ada  dalam perlakuan.  Sejalan  dengan  penelitian  Arifin &  Rumondang  (2017)  dimana madu  yang  dicampur  dalam pakan akan  meningkatkan  nafsu  makan  ikan.  Islamiyah et  al., (2018)  menyatakan  bahwa  selain  dapat  meningkatkan nafsu  makan  dan  berfungsi  dalam  ketahanan  tubuh,  madu  juga  mengandung  sejumlah  mineral  yang  dapat berfungsi dalam pembentukan sel.
47.5  ± 1,63 a 46.5± 3,94 a 45.1 ± 2,5 a 0,0 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 35,0 40,0 45,0 50,0 A (2:1) B (1,5:1,5) C (1:2) P ertum buhan B erat M utl ak ( g) Perlakuan

## Kesimpulan
Penggunaan kombinasi madu dan air rebusan patikan kerbau tidak memberikan berpengaruh terhadap eritrosit, leukosit dan pertumbuhan ikan kerapu cantang akan tetapi berpengaruh terhadap kelangsungan hidup ikan  kerapu  cantang.  Kelangsungan  hidup  tertinggi  dihasilkan  pada  perlakuan  C  (1:2)  yang  berbeda  dengan perlakuan lainnya, selanjutnya diikuti perlakuan B (1,5:1,5) dan nilai sintasan terendah pada perlakuan A (2:1). Hasil  gejala  klinis  menunjukkan  bahwa  perlakuan  C  (1:2)  memiliki  gejala  klinis  yang  ringan  dibandingkan perlakuan lainnya.
Ucapan Terimakasih Ucapan  terimakasih  penulis  berikan  kepada  Kepala  dan  seluruh  staf  UPT  Dinas  Kesehatan  Provinsi Nusa Tenggara Timur dan Stasiun Karantina Ikan Pengendalian Mutu dan Keamanan Hasil Perikanan Kupang.

## Daftar Pustaka
Arifin,  Z.,  &  Rumondang,  2017.  Pengaruh  Pemberian  Suplemen  Madu  Pada  Pakan  Terhadap  Pertumbuhan Dan FCR Ikan Lele Dumbo ( Clarias gariepinus ). Fisherina , 1 (1), 1-11.
Bangsa, P., Sugioto, Zuhrawati, Daud, R., Asmilia, N., & Azhar, 2015. Pengaruh Peningkatan Suhu terhadap Jumlah Eritrosit Ikan Nila ( Oreochromis niloticus ). Medika Veteriner , 9(1), 9-11.
Chandra,  Syawal,  H.,  &  Lukistyowati,  I.,  2018.  Diferensiasi  Leukosit  Ikan  Jambal  Siam  Pangasius hypophthalmus  yang  Terinfeksi  Aeromonas  hydrophila  dan  Diobati  Dengan  Ekstrak  Daun Rhizophora sp. Journal of Materials Processing Technology , 1 (1), 1-8.
Dahlia, Suprapto, H., & Kusdarwati, R., 2017. Isolasi Dan Identifikasi Bakteri Pada Benih Ikan Kerapu Cantang ( Epinephelus sp.) Dari Kolam Pendederan Balai Perikanan Budidaya Air Payau ( BPBAP) Situbondo, Jawa Timur. Journal of Aquaculture and Fish Health , 6 (2), 57-66.
Dawan,  G.,  Salosso,  Y.,  &  Jasmanindar,  Y.,  2021.  Pengaruh  penggunaan  ekstrak  daun  patikan  kerbau (Euphorbia  hirta)  dalam  pencegahan  dan  pengobatan  bakteri  Aeromonas  hydrophilla  pada  ikan  nila ( Oreocromis niloticus ). Jurnal Akuatik , 42-52.
Defoirdt, T., Sorgeloos, P., & Bossier, P., 2011. Alternatives to antibiotics for the control of bacterial disease in aquaculture. Current Opinion in Microbiology , 14 (3), 251-258.
Effendie, I., 1997. Biologi Perikanan. In Yayasan Pustaka Nusantara. Yogyakarta .
Firdausi,  S.  L.  Y.,  &  Mubarak,  A.  S.,  2021.  Manajemen  Pendederan  Ikan  Kerapu  Cantang  (Epinephelus fuscoguttatus-lanceolatus) pada Bak Beton di Balai Perikanan Budidaya Air Payau (BPBAP) Kabupaten Situbondo Propinsi Jawa Timur. Journal of Marine and Coastal Science , 10 (3), 129-137.
Hamzah, Herawaty, & Hasmawati, 2021. Inhibitory Test of Honey, Onion and Ginger Against Several Types of Bacteria Vibrio sp . Siganus: Journal of Fisheries and Marine Science , 2 (2), 118-125.
Harikrishnan,  R.,  Balasundaram,  C.,  &  Heo,  M.  S.,  2011.  Impact  of  plant  products  on  innate  and  adaptive immune system of cultured finfish and shellfish. Aquaculture , 317 (1-4), 1-15.
Hazzuli,  N.  J.,  Setyawan,  A.,  &  Harpeni,  E.,  2015.  Imunogenitas  Kombinasi  Vaksin  Inaktif  Whole  Cell Aeromonas salmonicida dan Vitamin C pada Ikan Mas ( Cyprinus carpio ). E-Jurnal Rekayasa Dan Teknologi Budidaya Perairan , 3 (2), 359-365.
Hodar,  A.  R.,  Vasava, R., Mahavadiya,  D.,  Joshi,  N., Nandaniya,  V.,  &  Solanki, H.,  2021. Herbs  and  Herbal Medicines : a Prominent Source for sustainable aquaculture. J. Exp. Zool. India , 24 (1), 719-732.
Islamiyah,  D.,  Rachmawati,  D.,  &  Susilowati,  T.,  2018.  Pengaruh  Penambahan  Madu  Dengan  Dosis  Yang Berbeda Terhadap Performa Laju seperti kalium, kalsium, magnesium dan Mineral-mineral di tambak tradisional  Dusun  Roban  Timur  penelitian  ini  adalah  ikan  bandeng  (C.  stadia  nener  dengan  bobot. Jurnal Pena Akuatika , 17 (2), 19-33.
Ismi, S., 2017. Produksi Telur Ikan Kerapu Hibrida Untuk Menunjang Usaha Pembenihan. Ilmu Dan Teknologi Kelautan Tropis , 9 (2), 783-794.
Kabata, Z., 1985. Parasites and Diseases of Fish Cultured in the Tropics. Institute of Marine Research , 170-172.
Kamaludin,  I.,  2011.  Efektivitas  Ekstrak  Lidah  Buaya  Aloe  Vera  Untuk  Pengobatan  Infeksi  Aeromonas Hydrophila Pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp. melalui Pakan. Skripsi. Institut Pertanian Bogor , 33.
Kurniawan, R., Syawal, H., & Effendi, I., 2020. Pengaruh Penambahan Suplemen Herbal Pada Pakan Terhadap Diferensiasi Leukosit Ikan Dan Sintasan Ikan Patin ( Pangasionodon hypopthalmu s). Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia , 8 (2), 150-163.
Mangunwardoyo,  W.  Ismayasari,  &  Riani,  E.,  2010.  Uji  Patogenitas  dan  Virulensi  Aeromonas  hydrophila Stanier  pada  Ikan  Nila  (Oreochromis  niloticus  Lin.)  Melalui  Postulat  Koch. Ristek  Akuakultur , 5 (2),
245 – 255.
Moyle, P. B., & Cech, J. J. J., 1988. Fishes An Introduction to Icthyology. Prentice Hall, Inc. USA. , 559.
Nitimulyo,  K.,  Isnanstyo  A.,  Triyanto,  Istiqomah,  I.,  &  Murdjani,  M.,  2005.  Isolasi,  Identifikasi,  dan Karakterisasi  Vibrio  spp.  Patogen  Penyebab  Vibriosis  pada  Kerapu  di  Balai  Budidaya  Air  Payau. Perikanan , 6 (2), 80-94.
Ollin, N. S., Salosso, Y., & Jasmanindar, Y., 2021. Pengobatan Ikan Kerapu Cantang Yang Terinfeksi Bakteri Vibrio alginolyticus Menggunakan Madu Dengan Frekuensi Yang Berbeda. Jurnal Akuatik , 4 (2), 38-45.
Qomariyah, N., Suprapto, H., & Sudarno, 2017. Administration Of Vaccine Formalin Killed Cell (FKC) Vibrio alginolyticus  To  Increase  Survival  Rate  (SR),  Antibody  Titre,  And  Phagocytic  Leukocytes  Cantang Grouper (Epinephelus sp.) Against Bacteria Vibrio alginolitycus. Jurnal Ilmiah Perikanan Dan Kelautan , 9(1), 15-24.
Rahmaningsih,  S.,  &  Ari,  A.  I.,  2013.  Pakan  dan  pertumbuhan  IKan  Kerapu  Cantang  (Epinephelus fuscoguttatus-lanceolatus). Jurnal Ekologia , 13 (2), 25-30.
Ren, Y., Wang, L., Chen, R., Li, X., Li, S., Li, J., Li, Q., Wang, Z., & Xu, Y., 2022. Isolation and characterization of a novel phage vB ValP VA-RY-3 infecting Vibrio alginolyticus. Virus Research .
Seuk,  M.  H.,  Salosso,  Y.,  &  Jasmanindar,  Y.,  2021.  Pengobatan  Ikan  Kerapu  Cantang  (Epinephelus fuscoguttatus-lanceolatus)  Yang  Terinfeksi  Bakteri  Vibrio  alginolyticus  Menggunakan  Ekstrak  Air Daun Ketapang (Terminalia catappa). Jurnal Akuatik , 4 (2), 8-16.
Sjafei,  D.  S.,  Raharjo,  M.  F.,  Affandi,  R.,  &  Sulisyiono,  1989. Iktiologi.  Jurusan  Manajemen  Sumberdaya  Perairan. Fakultas Perikaanan. Pertanian Bogor. Bogor .
Sutarmat, T., & Yudha, H. T., 2013. Performance analysis of seed grouper hybrid of cross breeding between tiger  grouper  Epinephelus fuscoguttatus  with  giant  grouper  Epinephelus  lanceolatus  and  camouflage grouper (Epinephelus mic rodon). Jurnal Riset Akuakultur , 8 (3), 363.
Yu, Y., Li, H., Wang, Y., Zhang, Z., Liao, M., Rong, X., & Li, B., 2022. Antibiotic Resistance, Virulance and Characteristics of Vibrio alginolyticus Isolates form aquatic Enviroment in Costal Mariculture Areas in China. Marine Pollution Bulletin , 185 (12).
Yuda,  P.  E.  S.  K.,  Cahyaningsih,  E.,  &  Winariyanthi,  N.  P.  Y.,  2017.  Skrining  Fitokimia  Dan  Analisis Kromatografi  Lapis  Tipis  Ekstrak  Tanaman  Patikan  Kebo  (Euphorbia  hirta  L.). Jurnal  Ilmiah Medicamento , 3 (2), 61-70.
Zahra, N. N., Muliasari, H., Andayani, Y., & Sudarma, I. M., 2021. Karakteristik Fisikokimia Ekstrak Madu Dan Propolis Trigona Sp. Asal Lombok Utara. Jurnal Agrotek Ummat , 8 (1), 7.
Zhang, Y., Wu, X., Cai, J., Chen, M., Zhang, J., & Shao, S., 2023. Transposon Insertion Sequencing Analysis Unveils  Novel  Genes  Involved  in  LuxR  Expression  and  Qurum  Sensing  Regulation  in  Vibrio alginolyticus. Microbiological Research , 267 .
Zissalwa, F., Syawal, H., & Lukistyowati, I., 2020. Profil eritrosit ikan jambal siam (Pangasius hypophthalmus) yang diberi pakan mengandung ekstrak daun mangrove (Rhizophora apiculata) dan di pelihara dalam keramba. Jurnal Perikanan Dan Kelautan , 25 (1), 70-78.