JFFI. 2019; 6(1) 340-346 www.jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindonesia
ISOLASI SENYAWA ANTIOKSIDAN EKSTRAK METANOL KULIT BUAH NAGA MERAH (Hylocereus polyrhizus)
Dwi Indah Pratiwi, Rezki Amriati Syarif, Risda Waris, Faradiba *
Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia, Makassar
* faradiba.faradiba@umi.ac.id
Submission Date: 25-01-2019; Review Completed: 05-02-2019; Accepted Date:10-02-2019

## ABSTRAK
Senyawa  antioksidan  alami  dapat  ditemukan  dalam  buah-buahan.  Salah  satu  contoh  tanaman  yang merupakan  sumber  antioksidan  alami  yaitu  tanaman  buah  naga  (Dragon  fruit).  Kulit  buah  naga ( Hylocereus polyrhizus ) merupakan limbah hasil pertanian yang selama ini belum dimanfaatkan. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi  senyawa  antioksidan  yang  terdapat  dalam  ekstrak  metanol  kulit  buah  naga  merah  yang  aktif  sebagai antioksidan. Ekstrak kulit buah naga merah diperoleh melalui simplisia kulit segar buah naga merah dengan pelarut metanol.  Ekstrak  metanol  yang  diperoleh  di  partisi  dengan  metode  cair-cair  menggunakan  pelarut n-heksan ,  etil asetat, dan air. Hasil partisi  yaitu fraksi n-heksan kemudian dilakukan rekristalisasi  selanjutnya dilakukan isolasi menggunakan kromatografi lapis tipis (KLTP). Berdasarkan hasil KLTP fraksi n-heksan diperoleh 8 pita tetapi hanya pita 6 (isolat I) dan 8 (isolat II) yang aktif sebagai antioksidan setelah penyemprotan DPPH. Hasil spektroskopi UV- Vis isolat II diduga merupakan senyawa flavonoid. Uji aktivitas antioksidan diketahui bahwa ekstrak metanol, fraksi n-heksan , fraksi etil asetat dari kulit buah naga merah (Hylocereus polyrhizus) memiliki potensi aktivitas antioksidan yang kurang aktif, sedangkan fraksi air tidak aktif sebagai antioksidan.
Keywords: Antioksidan, isolasi, kulit buah, buah naga merah ( Hylocereus polyrhizus ), DPPH

## I. PENDAHULUAN
Salah satu pemicu utama penyakit degeneratif  adalah  radikal  bebas.  Tubuh  kita membutuhkan suatu senyawa yang dapat membantu menangkal  radikal  bebas  atau  sering  disebut antioksidan. Antioksidan adalah senyawa kimia yang dapat  menyumbangkan  satu  atau  lebih  elektron kepada  radikal  bebas,  sehingga  reaksi  radikal  bebas tersebut dapat terhambat dan  mecegah terbentuknya radikal bebas baru (Winarsih, 2007).
Berdasarkan  sumbernya,  antioksidan  dapat dibedakan  menjadi  antioksidan  sintetik  dan  alami. Seiring dengan semakin meningkatnya kekhawatiran masyarakat  terhadap  efek  samping  antioksidan sintetik  seperti  Butil  Hidroksi  Anisol  (BHA)  dan Butil  Hidroksil  Toluen  (BHT)  yang  bersifat karsinogen, mengakibatkan
terjadinya kecenderungan peningkatan penggunaan antioksidan alami (Hermani dan Rahardja, 2005).
Senyawa antioksidan alami dapat ditemukan dalam buah-buahan. Salah satu contoh tanaman yang merupakan sumber antioksidan alami yaitu tanaman buah naga ( Dragon fruit ). (Cahyono, 2009).  Tingkat pemanfaatan  dan  konsumsi  buah  naga  semakin meningkat,  namun  umumnya  masih  sebatas  pada pengolahan  daging  buahnya  saja,  padahal  masih banyak  potensi  besar  yang  dimiliki  bagian  lainnya,
salah satunya adalah kulit buah (Budilaksono, 2014). Kuit  buah  naga  merupakan  limbah  hasil  pertanian yang selama ini belum dimanfaatkan. Kulit buah naga mengandung  vitamin  C,  vitamin  E,  vitamin  A, alkaloid,  terpenoid,  flavonoid,  tiamin,  niasin, piridoksin, kobalamin, fenolik, karoten, dan fitoalbumin (Jaafar et al., 2009). Menurut penelitian Wu et  al., (2006)  keunggulan  dari  kulit  buah  naga yaitu  kaya  polifenol  dan  merupakan  sumber antioksidan.
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  kulit  buah naga  juga  telah  diuji  dengan  beberapa  pelarut  yang berbeda  tingkat  kepolarannya.  Penelitian  yang dilakukan  Mitasari  (2012)  menyatakan  bahwa ekstrak  kloroform  kulit  buah  naga  merah  memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 sebesar 43,836 μg/mL.  Kemudian  penelitian  yang  dilakukan  Putra (2012)  menyatakan  bahwa  ekstrak  n-heksana  kulit buah  naga  merah  memiliki  aktivitas  antioksidan dengan  nilai  IC 50 sebesar  853,543  μg/mL.  Dengan adanya  potensi  yang  dimiliki  oleh  kulit  buah  naga (Hylocereus  polyrhizus) memberikan  peluang  untuk diuji lebih lanjut.
Berdasarkan  data  diatas,  maka  dilakukan penelitian  mengenai  isolasi  senyawa  antioksidan ekstrak metanol kulit  buah  naga  merah ( Hylocereus
polyrhizus )  yang  diperoleh  dari  kota  Soppeng, Sulawesi Selatan .

## II. METODE PENELITIAN
A. Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  alat-alat gelas  ( Pyrex ),  alat  kromatografi  kolom,  botol penyemprot  penampak  bercak,  cawan  porselin, chamber  ( Camag ),  corong  pisah,  eksikator,  lampu UV 254 nm  dan  lampu  UV 366 nm  ( Philips ),  neraca analitik ( Sartorius ), pipa kapiler, sentrifuge (Centurion),  spektrofotometer  UV-Vis  ( Shimatzu ), vacuum rotary evaporator. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah aluminium foil, aseton, aquadest, dichloromethane, DPPH, etil asetat, kuersetin, kulit buah naga merah (Hylocereus polyrhizus) , metanol, n-heksan, lempeng KLT, lempeng KLTP, dan silika gel.

## B. Pengambilan dan Pengolahan Sampel
Pengambilan  sampel  penelitian  kulit  dari tanaman  buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) yang  diperoleh  dari  Kabupaten  Soppeng,  Sulawesi Selatan.  Pengolahan  bahan  penelitian  berupa  kulit dari  buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) .
Selanjutnya  sampel  dibersihkan  menggunakan  air mengalir,  setelah  itu  sampel  dikupas  untuk memisahkan  daging  buah  dengan  kulitnya.  Kulit buah naga dipotong kecil-kecil.

## C. Pembuatan Ekstrak Sampel
Sebanyak  7,7  kg  sampel  kulit  buah  naga segar diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut metanol. Kulit buah naga merah dimasukkan kedalam  wadah  maserasi  dan  diekstraksi  dengan metanol  hingga  sampel  terendam  sempurna,  lalu disimpan selama 1x24 jam dalam wadah tertutup dan terlindungi  dari  cahaya  matahari  langsung,  sampel diaduk  pada  jam  keenam  setelah  penyimpanan. Sampel disaring menggunakan kertas saring sehingga diperoleh  filtrat. Residu dimaserasi kembali dengan cairan  penyari  metanol  yang  baru.  Dilakukan remaserasi  sebanyak  2  kali.  Filtrat  yang  diperoleh, dikumpulkan dan diuapkan dengan rotary evaporator hingga didapatkan ekstrak kental.

## D. Partisi Sampel
Sebanyak  70  gram  ekstrak  metanol  kulit buah naga merah dilarutkan dalam aquasest sebanyak 150  mL.  Selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  corong pisah  lalu ditambahkan 200  mL  n-heksana, dikocok secara  perlahan-lahan  selama  5  menit,  setelah  itu didiamkan hingga terjadi pemisahan antara ektrak n- heksana  dan  air.  Ekstrak  n-heksana  dipisahkan dengan  lapisan  air,  kemudian  ekstrak  air  dipartisi
kembali  dengan  n-heksana  hingga  6  kali  sampai larutan  berwarna  bening.  Selanjutnya  ekstrak  air  di partisi  kembali  menggunakan  etil  asetat  dengan proses  yang  sama  dengan  n-heksana.  Ekstrak  n- heksana  cair,  ekstrak  etil  asetat  cair  dan  ekstrak  air diupkan sehingga diperoleh ekstrak kental.

## E. Uji Kualitatif
Fraksi  n-heksan,  fraksi  air  dan  fraksi  etil asetat kulit buah naga merah (Hylocereus polyrhizus) ditotolkan  pada  lempeng  KLT  gel  60  F 254 yang berukuran  7  x  1  cm  dengan  menggunakan  pipa kapiler, kemudian dimasukan kedalam chamber  yag berisi  eluen  n-heksan  :  etil  asetat  dengan perbandingan  85:15  sebanyak  5  mL.  Selanjutnya profil  kromatogram  diamati  pada  sinar  tampak,  UV 254  nm  dan  UV  366  nm.  Setelah  itu  disemprot dengan  DPPH  (Budilaksono,  Wahdaningsih,  & Fahrurroji 2014, h. 4).

## F. Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom
Kolom  kromatografi  dibersihkan  dengan metanol  kemudian  bagian  bawah  kolom  disumbat dengan  kapas  agar  silika  gel  tidak  mencemari tampungan fraksi. Sebanyak 100 g adsorben silika gel G  60  (0,2-0,5  mm),  kemudian  dimasukan  kedalam kolom  dan  dimampatkan  dengan  menggunakan perbandingan eluen pertama.
Fraksi  n-heksan  kulit  buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) ditimbang  sebanyak  1  g. Kemudian  diletakkan  diatas  permukaan  adsorben yang  sebelumnya  telah  dimasukkan  dalam  kolom, dibawah  ekstrak  tersebut  diletakkan  kertas  saring. Kemudian  fase  gerak  menggunakan  eluen  yang berbeda  yaitu  dichloromethane  :  metanol  dengan perbandingan 100:0 dalam 100 mL, 95:5 dalam 200 mL, 90:10 dalam 200 mL dan 85:15 dalam 300 mL.

## G. Pemurnian Senyawa secara Rekristalisasi
Fraksi  n-heksan  yang  membentuk  Kristal dilakukan  rekristalisasi  dengan  cara  fraksi  n-heksan dilarutkan menggunakan campuran pelarut n-heksan dan  metanol  kemudian  di  panaskan.  Selanjutnya dimasukkan  ke  dalam  lemari  pendingin  hingga terbentuk kristal.
H. Pemurnian Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis Preparatif (KLTP)
Fraksi  n-heksan  yang diperoleh selanjutnya dipreparatif.  Eluen  yang  digunakan  n-heksan  :  etil asetat  (85:15).  Pita  hasil  KLT-P  dikerok  dan dilarutkan  dalam  pelarut  metanol,  kemudian  di sentrifuge  untuk  mengendapkan  silikanya  sehingga diperoleh supernatant lalu dikeringkan (isolat).
I. Pemastian  Kemurnian  Isolat  dengan  KLT  2 Dimensi
Isolat  aktif  yang  diperoleh  ditotol  pada lempeng  KLT  dengan  ukuran  5  x  5  cm,  kemudian dielusi  dengan  menggunakan  fase  gerak  n-heksan  : etil asetat (85:15) untuk arah pertama dan n-heksan : etil asetat (85:15) untuk arah kedua.

## J. Identifikasi  Isolat  dengan  Spektrofotometer UV-Vis
Isolat  yang  diperoleh  diidentifikasi  dengan spektroskopi UV-Visible. Senyawa dilarutkan dalam metanol  p.a  kemudian  cuplikan  ditempatkan  antara monokromator  dan  detektor.  Spektrum  yang dihasilkan direkam pada alat pencatat.

## K. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Menggunakan Spektrofotometer UV-Vis
Uji  aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak metanol  dan  masing-masing  fraksi  kulit  buah  naga merah (Hylocereus  polyrhizus) berdasarkan  pada prosedur Brand-Williams, et al (1997) dan Ahmad, et al (2012)  dengan  beberapa  modifikasi.  Pengujian dilakukan  dengan  memipet  0,5  mL  larutan  sampel dari berbagai konsentrasi. Kemudian masing-masing ditambahkan 3,5 mL DPPH. Divortex dan diinkubasi selama  1  jam  pada  ruangan  gelap.  Diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum.
Data hasil pengukuran absorbansi dianalisa presentase  aktivitas  antioksidannya  menggunakan perhitungan nilai IC 50 .
Persentase inhibisi radikal DPPH dihitung dengan rumus:
Persen Inhibisi =
A B - A x 100%
Dimana  A  adalah  serapan  blangko  dan  B adalah  serapan  sampel.  Nilai  lC 50 dihitung  dengan menggunakan  persamaan  regresi  persentase  inhibisi (Ahmad et al, 2012).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini  digunakan  kulit  buah naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) yang  diambil pada  bulan  september  2018  di  kabupaten  soppeng, provinsi  sulawesi  selatan.  Buah  naga  merah  yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 30 kg. Dari jumlah  tersebut  diperoleh  bobot  kulit  buah  naga merah sebanyak 7.700 gr atau sebesar 25,66 % dari bobot buah keseluruhan.
Tabel 1. Hasil rendamen ekstrak metanol kulit buah naga merah (Hylocereus polyrhizus)
Berat simplisia (g) Jumlah pelarut metanol (mL) Berat ekstrak (g) 1. Rendemen ekstrak (%) 7.700 20.000 2. 152,498 0,019
Untuk  mendapatkan  senyawa  kimia  yang diinginkan  digunakan  metode  ekstraksi  yang merupakan metode penyarian zat berkhasiat atau zat aktif  dari  bagian  tanaman  dengan  menggunakan pelarut yang sesuai (Yuliani & Satuhu, 2012). Salah satu  metode  ekstraksi  adalah  maserasi,  metode maserasi  dipilih  karena  prosesnya  mudah  dan  tidak menggunakan suhu tinggi yang memungkinkan dapat merusak  senyawa-senyawa  kimia  yang  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  terdapat  dalam  sampel (Pratiwi et al., 2013). Proses ekstraksi yang dilakukan menggunakan  pelarut  metanol.  Dimana  pelarut  ini dipilih  karena  memilki  kemampuan  untuk  menarik senyawa  polar  dan  beberapa  senyawa  nonpolar. Penguapan  ekstrak  diperoleh  ekstrak  metanol sebanyak  152,498  gram  dari  berat  simplisia  7.700 gram dengan persentase rendamen 0,019%. Persentase  rendamen  menunjukkan  seberapa  besar jumlah  kandungan  yang  dapat  terekstraksi  oleh pelarut dalam persen (%).
Ekstrak  metanol  kulit  buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) yang  diperoleh  setelah  itu dilakukan  partisi,  dimana  jenis  partisi  yang digunakan yaitu metode partisi cair-cair dikarenakan ekstrak metanol kulit  buah  naga  merah (Hylocereus polyrhizus) larut dalam air.
Tabel  2. Hasil  fraksi  n-heksan  dan  etil  asetat  kulit buah naga merah (Hylocereus polyrhizus)
Jumlah ekstrak kental (g) Jenis pelarut Jumlah pelarut (mL) Berat fraksi (g) 70 Air 150  3. 57,2793 n-heksan 1.200 4. 3,3420 Etil asetat 1.500 5. 3,7997
Fraksinasi  pada  ekstrak  metanol  bertujuan untuk memisahkan senyawa berdasarkan kelarutannya  terhadap  pelarut  dengan  tingkat kepolaran  yang  berbeda.  Prinsip  pemisahan  pada proses  fraksinasi  adalah  didasarkan  pada  perbedaan tingkat  kepolaran  dan  perbedaan  bobot  jenis  antara dua  fraksi,  yakni  fraksi  yang  memiliki  bobot  jenis lebih besar akan berada pada fase bawah, sedangkan fraksi  yang  memiliki  bobot  jenis  yang  lebih  kecil berada pada fase bawah.
Hasil  dari  partisi  selanjutnya  diidentifikasi senyawa  pada  fraksi  air,  fraksi  n-heksan,  dan  fraksi etil  asetat  kulit  buah  naga  merah (Hylocereus polyrhizus) yang diperoleh dilakukan dengan metode KLT. Tujuannya adalah untuk mengetahui pemisahan  senyawa.  Metode  KLT  dipilih  karena beberapa kelebihan yang dimiliki, seperti keserbagunaan, kecepatan, dan kepekaannya (Harborne,  1987).  Eluen  yang  digunakan  yaitu  n- heksan  :  etil  asetat  dengan  perbandingan  99:1,  95:5 85:15  dan  7:3  adapun  diambilnya  perbandingan tersebut  karena  telah  dilakukan  uji  kualitatif  yang mana terjadi pemisahan noda yang baik pada tingkat kepolaran yang digunakan. Setelah itu dilakukan uji kualitatif  antioksidan  dengan  menyemprot  larutan DPPH. Senyawa yang mempunyai aktivitas antioksidan  akan  bereaksi  dengan  DPPH  yang berwarna  ungu  dan  berubah  menjadi  senyawa  yang lebih  stabil  menjadi  warna  kuning  (Sarker, et  al, 2006).  Prinsip  DPPH  berdasarkan  reaksi  antara antioksidan  dengan  DPPH  radikal  melalui  donasi proton.  Dengan  demikian  antioksidan  yang  bekerja dengan menangkap radikal ( radical scavenger ) dapat dideteksi  dengan  metode  ini.  Prinsip  penentuan aktivitas  antioksidan  metode  ini  berdasarkan perubahan  warna  menjadi  kuning  dari  hasil  reaksi antara DPPH dengan senyawa antioksidan, sehingga DPPH akan berubah menjadi diphenilpycrilhydrazine yang  bersifat  non-radikal  yang  tidak  berbahaya. Meningkatnya  jumlah diphenilpycrilhydrazine akan ditandai dengan perubahan warna ungu pada bercak menjadi warna kuning (Sarker, et al., 2006).
Tabel 3. Hasil Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan Ekstrak Uji Kualitatif DPPH Hasil Pengamatan Pustaka Fraksi air Ungu - Perubahan warna dari ungu ke kuning (Molyneux, 2004) Fraksi n- heksan Kuning + Fraksi etil asetat Kuning +
Pada  hasil  partisi  yaitu  fraksi  n-heksan teridentifikasi  adanya  kristal.  Kemudian  kristal tersebut  dilakukan  rekristalisasi  untuk  melakukan pemurnian  dengan  pelarut  n-heksan  dan  metanol. Dari  hasil  rekristalisasi  yang  diperoleh  dilanjutkan dengan  proses  isolasi  menggunakan  kromatografi lapis tipis preparatif. Proses isolasi kromatografi lapis tipis  preparatif  terjadi  berdasarkan  perbedaan  daya serap dan daya partisi serta kelarutan dari komponen- komponen  kimia  yang  akan  bergerak  mengikuti kepolaran  eluen,  oleh  karena  daya  serap  adsorben
terhadap  komponen  kimia  tidak  sama,  maka komponen bergerak dengan kecepatan yang berbeda sehingga  hal  inilah  yang  menyebabkan  pemisahan (Munson, 2010). Proses elusi kromatografi lapis tipis preparatif eluen yang digunakan yaitu n-heksan : etil asetat (85:15) dalam 100 mL.
Tabel 4. Hasil KLTP dari fraksi n-heksan kulit buah naga merah (Hylocereus polyrhizus) yang disemprot dengan DPPH
Pita ke Penyem protan DPPH Hasil pengamatan Pustaka 1 Ungu - Perubahan warna dari ungu ke kuning (Molyneux, 2004) 2 Ungu - 3 Ungu - 4 Ungu - 5 Ungu - 6 Kuning + 7 Ungu - 8 Kuning +
Pada  kromatografi  lapis  tipis  preparatif adsorpsi  dan  partisi  berdasarkan  pada  jumlah  dan cara  penotolan  cuplikan  yang  berkesinambungan yang memberikan hasil elusi berupa pita. Berdasarkan hasil KLTP didapatkan hasil dari pita 6 dan  8  yang  menunjukkan  aktivitas  antioksidan dengan  penyemprotan  DPPH.  Pita-pita  yang dihasilkan  kemudian  dikerok  dan  dilarutkan  dalam pelarut  metanol.  Kemudian  disentrifuge  untuk memisahkan  silika  gel  dan  supernatant  yang didapatkan sehingga diperoleh isolat.
Tabel  5. Hasil  kristal  isolat  kulit  buah  naga  merah (Hylocereus polyrhizus)
No. Isolat Berat (g) 1 I 0,1398 2 II 0,0373
Isolat  yang  diperoleh  selanjutnya  diuji kemurniannya  dengan  metode  KLT  dua  dimensi. Pada  uji  KLT-dua  dimensi  menggunakan  eluen  n- heksan  :  etil  asetat  (85:15)  untuk  arah  pertama  dan arah kedua. Hasil elusi nampak pada UV 366 nm dan diperoleh satu bercak tunggal.
Gambar 1. Data hasil spektrum isolat fraksi n- heksan kulit buah naga merah (Hylocereus polyrhizus) Selanjutnya  dilakukan  pengujian  dengan alat  spektrofotometri  UV-Vis  untuk  mengetahui puncak  serapan  yang  dimiliki  oleh  isolat  kulit  buah naga merah (Hylocereus polyrhizus) , yang didapatkan  hasil  puncak  serapan  ada  dua  puncak
yang  menandakan  fraksi  n-heksan  kulit  buah  naga merah (Hylocereus  polyrhizus) adalah  golongan senyawa flavonoid.
Pada  penelitian  ini  juga  dilakukan  uji kuantitatif  aktivitas  antioksidan  dilakukan  dengan menggunakan  peredaman  radikal  DPPH  ( 1,1 Diphenyl-2-picrylhidrazyl ). Metode ini dipilih karena Metode  DPPH  merupakan  metode  yang  sederhana, cepat, dan mudah untuk skrening aktivitas penangkap radikal  beberapa  senyawa  (Koleva et  al .,  2001 ), selain  itu  metode  ini  terbukti  akurat,  reliabel  dan praktis.  Metode  DPPH  memberikan  informasi reaktivitas  senyawa  yang diuji dengan  suatu radikal stabil. DPPH memberikan serapan kuat pada panjang gelombang  517  nm  dengan  warna  violet  gelap. Penangkap  radikal  bebas  menyebabkan  elektron menjadi  berpasangan  yang  kemudian  menyebabkan penghilangan warna  yang sebanding dengan  jumlah elektron yang diambil (Sunarni, 2005).
Tabel 6. Pengukuran absorbansi, persen inhibisi, dan nilai IC 50 dari ekstrak metanol, fraksi n-heksan, fraksi etil asetat, dan fraksi air kulit buah naga (Hylocereus polyrhizus)
Sampel Konsentrasi (ppm) Absorbansi blanko Absorbansi sampel Persen inhibisi (%) IC 50 (μg/mL) Metanol 20 0,837 0,725 13,381 445,255 40 0,837 0,712 14,934 60 0,837 0,693 17,204 80 0,837 0,680 18,757 100 0,837 0,669 20,071 n-heksan 20 0,837 0,717 14,336 198,065 40 0,837 0,688 17,801 60 0,837 0,658 21,385 80 0,837 0,624 25,448 100 0,837 0,579 30,824 Etil asetat 20 0,796 0,643 19,221 199,527 40 0,796 0,623 21,733 60 0,796 0,587 26,256 80 0,796 0,567 28,768 100 0,796 0,533 33,040 Air 20 0,816 0,722 11,519 2749,07 40 0,816 0,720 11,764 60 0,816 0,717 12,132 80 0,816 0,715 12,377 100 0,816 0,712 12,622
Tabel 7. Pengukuran absorbansi, presentase pengikatan DPPH, dan nilai IC 50 dari pembanding kuarsetin Sampel Konsentrasi (ppm) Absorbansi blanko Absorbansi sampel Persen inhibisi (%) IC 50 (μg/mL) Kuersetin 2 0,863
0,621 28,041 8,382 4 0,863 0,551 36,152 6 0,863 0,494 42,757 8 0,863 0,450 47,856 10 0,863 0,384 55,504
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 A nm 1.dsp 2.dsp 3.dsp Kuercetin 1234.dsp
Menurut  Phongpaichit  et  al  (2007),  suatu senyawa  dikatakan  sebagai  antiradikal  bebas  sangat kuat apabila nilai IC 50 < 10 μg/mL, kuat apabila nilai IC 50 antara 50-100 μg/mL, sedang apabila nilai IC 50 berkisar  antara  100-150  μg/mL,  lemah  apabila  nilai IC 50 berkisar  antara  150-200  μg/mL  dan  tidak  aktif apabila IC 50 diatas 250 μg/mL.
Semakin kecil nilai IC 50 , maka semakin aktif sampel tersebut sebagai antioksidan. Pada penelitian ini diperoleh nilai IC 50 dari sampel ekstrak metanol, fraksi  n-heksan, fraksi etil asetat  dan fraksi air kulit buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) dengan nilai IC 50 untuk ekstrak metanol IC 50 445,255 μg/mL, fraksi  n-heksan  IC 50 198,065  μg/mL,  dan  fraksi  etil asetat  IC 50 199,527  μg/mL.  Nilai  ini  menyatakan bahwa ekstrak metanol, fraksi n-heksan dan fraksi etil kulit  buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  kurang  aktif, namun  tetap  memiliki  potensi  antioksidan  karena memiliki  nilai  IC 50 yang  berkisar  antara  200-1000 μg/mL (Molyneux, 2004). Untuk fraksi air memiliki nilai  IC 50 2749,078  μg/mL  ini  menyatakan  bahwa fraksi air yang tidak aktif.
Sedangkan kuersetin yang diperoleh sebesar
8,382  μg/mL,  ini  menunjukkan  bahwa  kuersetin memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat karena memiliki nilai IC 50 < 50 μg/mL.
Perhitungan persen inhibisi adalah kemampuan suatu bahan untuk menghambat aktivitas radikal bebas yang berhubungan dengan konsentrasi suatu bahan. Nilai IC 50 sendiri merupakan salah satu parameter yang biasa digunakan untuk menginterpretasikan hasil dari pengujian DPPH.

## IV. KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
1. Isolat  fraksi  n-heksan  kulit  buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) memiliki  aktivitas antioksidan.
2. Isolat  fraksi  n-heksan  kulit  buah  naga  merah (Hylocereus polyrhizus) adalah golongan senyawa flavonoid
3. Uji  aktivitas  antioksidan  kulit  buah  naga  merah (Hylocereus  polyrhizus) dengan  nilai  IC 50 untuk ekstrak  metanol  IC 50 445,255  μg/mL,  fraksi  n- heksan IC 50 198,065 μg/mL, dan fraksi etil asetat IC 50 199,527  μg/mL memiliki aktivitas antioksidan  yang  kurang  aktif,  namun  tetap memiliki  potensi  antioksidan.  Untuk  fraksi  air memiliki  nilai  IC 50 2749,078  μg/mL  ini menyatakan  bahwa  fraksi  air  yang  tidak  aktif sebagai  antioksidan.  Sedangkan  kuersetin  yang diperoleh  sebesar  8,382  μg/mL  menunjukkan bahwa  kuersetin  memiliki  aktivitas  antioksidan yang sangat kuat.

## DAFTAR PUSTAKA
Agoes,  Goeswin,  2007, Teknologi  Bahan  Alam, Penerbit ITB, Bandung.
Ahmad,  A,  R,  A,  A,  Kosman,  R,  2014, ‘Standarization of Simplisia and Methanolic Extract  of  Cemba  ( Acacia  rugata (Lam.) Fawc Rendle ) Leaves Endemic Plant From Massenrenpulu  Regency  of  Enrekang’, World Journal of Pharmaceutical Sciences, vol . 2, no. 12, pp. 1808-1812. Auterhoff, H, & Kovar, K.A, 2002, Identifikasi Obat , Edisi V, trans. N.C. Sugiarso, Penerbit ITB, Bandung.
Bendra, A 2012, ‘Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Premna  oblongata Miq.’,  S.Farm Skripsi ,  Program  Studi  Ekstensi  Farmasi, Universitas Indonesia.
Budilaksono,  W.,  Wahdaningsih,  S.,  Fahrurroji,  A., 2014, ‘Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi N- heksana Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus  lemarei Britton  and  Rose )
Menggunakan Metode DPPH (1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazil)’,
Universitas
Tanjungpura. Cahyono,  B.,  2009, Buku  Terlengkap  Sukses Bertanam  Buah  Naga, Pustaka  Mina, Jakarta.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia,  2000,
Parameter Standar Umum Ekstrak
Tumbuhan  Obat ,  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Direktorat  Jenderal  Pengawas  Obat  dan  Makanan,
2014, Farmakope  Indonesia ,  Edisi  V, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Gunasena,  HPM,  &  Pushpakumara,  DKNG  2006 , ‘ Dragon  Fruit- Hylocereus  undatus (Haw.) Britton and Rose Fruit For The Future’, Sri Lanka  Council  For  Agricultural  Policy , Wijerama Mawatha, Colombo 7, Sri Lanka,
p. 114. Harmita, 2006, Buku Ajar Kromatografi ,
Departemen  Farmasi  Fakultas  Matematika &  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas Indonesia, Jakarta.
Harmita, 2009, Analisis Fisikokimia: Kromatografi , vol.  2,  Penerbit  Buku  Kedokteran  EGC, Jakarta.
Heftmann,  E.,  2003, Steroids  Dalam  Kromatografi , Fundamentals and Aplication, Amsterdam.
Hernani,  &  Rahardja,  2005,  Tanaman  Berkhasiat Antioksidan, Jakarta: Penebar Swadaya, pp. 13; 79-80.
Integreds  Taxonomi  Information  System,  2016, Hylocereus  polyrhizus  &  Hylocereus
undatus , diakses tanggal 20 november 2016, (http://www.itis.gov). Khaira, K, 2010, Menangkal  Radikal Bebas dengan Antioksidan, Vol. 2. No. 2 pp. 183-186.
Kosasih,  EN,  Setiabudhi,  T,  Heryanto,  H  2004, Peranan  Antioksidan  Pada  Lanjut  Usia ,
Pusat Kajian Nasional Masalah Lanjut Usia, Jakarta.
Kristanto,  D,  2008, Buah  Naga  Pembudidayaan  di
Pot  dan  di  Kebun,  Penebar  Swadaya , Bogor, pp.14-16. Leba,  M,  A,  2017, Buku  Ajar  :  Ekstraksi  dan  Real Kromatografi, Deepublish : Yogyakarta. Mitasari, A., 2012, ‘Uji Aktivitas Ekstra Kloroform Kulit  Buah  Naga  Merah ( Hylocereus polyrhizus Britton  &  Rose)  Menggunakan Metode DPPH (1,1-Defenil-2-Pikril
Hidrazil)’, Skripsi, Program  Studi  Farmasi, Universitas Tanjungpura, pp. 37-38.
Molyneux,  P  2004,  ‘The  Use  Of  The  Stable  Free Radical  Diphenyl  Picrylhydrazyl  (DPPH) For  Estimating  Antioxidant  Activity’
Songklanakarin Journal Science
Technology , vol 26, no.2, pp. 211-219.
Munson, 2010, ‘Plant Resources of South East Asia, Edible Fruits and Nuts’, Prosea Foundation , Bogor.
Nasution, 2010, Pharmacochemical Investigation on Raw  Materialsof  Passiflora  Edulis  Forma Flavicarpa,: Planta Med.
Nisa,  GK,  Nugroho,  WA,  &  Hendrawan,  Y  2014. ‘Ekstraksi  Daun  Sirih  Merah  ( Piper crocatum )  dengan  metode  microwave assisted extraction (MAE)’, Jurnal Biopress Komoditas Tropis , vol. 2, no. 1, pp. 72-78. Nuari, S., Anam, S., & Khumaidi, A., 2017, ‘Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Ekstrak Etanol  Buah  Naga  Merah (Hylocereus polyrhizus (F.A.C. Weber) Briton & Rose )’ ,
Jurnal  Farmasi  Galenika:  Galenika  Jurnal of Pharmacy , 3(2), pp. 118-125.
Nurliyana, R., Zahir, I. S., Suleiman, K. M., Aisyah, M. R., & Rahim, K. K., 2010, ‘Antioxidant Study of Pulps and Peels of Dragon Fruits: a comparative  study’, International  Food Research Journal, pp. 17: 367-365.
Oxtoby,  D,  W,  Gilis,  H,  P,  &  Campion,  A,  2011, Principles  of  modern  chemistry ,  7 th edn, Brooks Cole Cengage Learning, USA. Pranata,  R.,  Wahdaningsih,  S.,  &  Fahrurroji,  A., 2014,  ‘Uji  Aktivitas  Antioksidan  Fraksi Kloroform  Buah  Naga  Merah (Hylocereus lemairei Britton  dan  Rose)  Menggunakan Metode DPPH (1,1-Difenil-2-
Pikrilhidrazil)’ , Jurnal Mahasiswa Farmasi Fakultas Kedokteran UNTAN.
Rohman,  A,  2009, Kromatografi  Untuk  Analisa Obat , Graha Ilmu, Yogyakarta.
Rusli,  R  2009,  ‘Penetapan  Kadar  Boraks  Pada  Mie Basah  Yang  Beredar  Dipasar  Ciputat Dengan  Metode  Spektrofotometer  UV-VIS Menggunakan  Pereaksi  Kurkumin’,  S.Ked Skripsi ,  Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah. Saifuddin,  A,  2014, Senyawa  Alam  Metabolit Sekunder,  Teori,  Konsep  dan  Teknik Pemurnian , Yogyakarta. Sayuti, K, Yenrina, R, 2015, Antioksidan Alami dan Sintetik . Andalas University Press, Padang, pp. 7, 32-38 & 75-77.
Sudjadi.,  2007,  Kimia  Farmasi  Analisis,  Pustaka Pelajar, Yogyakarta. Thomas A.N.S., 1992. Tanaman  obat  tradisional  2,  Kanisius: Yogyakarta.
Tobo,  F.,  2001, Buku  Pegangan  Laboratorium Fitokimia I , Universitas Hasanuddin, Makassar.
Warisno,  Dahana,  K  2010, Buku  Pintar  Bertanam Buah  Naga,  Gramedia  Pustaka  Utama , Jakarta, p. 11.
Widyastuti, Fratama, I. Rizqi, & Seprialdi, A, 2015, ‘Pengujian Aktivitas Antioksidan dan Tabir Surya  EKstrak  Etanol  Kulit  Buah  Naga Super  Merah (Hylocereus  costaricensis (F.A.C.  Weber)  Britton  &  Rose) ’,  Vol.  5, No. 2, pp. 70-71.
Winarsih,  2007, Mengenal  dan  Membudidayakan Buah Naga, Semarang. Winarsih, H., 2007, Antioksidan  Alami  dan Radikal Bebas, Yogyakarta: Kanisius, pp:13; 79-80. Wulandari, Lestyo, 2011, Kromatografi Lapis Tipis, Taman Kampus Presindo, Jember.
Wu, L. C., Hsu, H. W., Chen, Y., Chiu, C.C., and Ho,
Y. I., 2006, ‘Antioxidant and Antiproliferative  Activities  of  Red  Pitaya’ , Food Chemistry Volume, 95: 319-327.