## PENGARUH TIMBAL ASETAT (Pb(CH
3 COO) 2 ) TERHADAP PERTUMBUHAN MIKROALGA LAUT Porphyridium cruentum
(Effect Of Lead Acetate (Pb(Ch 3 coo) 2 ) On The Growth Of Marine Microalgae Porphyridium cruentum)
Jacqlien V. Sanep 1 , Kurniati Kemer 1 , Desy M.H. Mantiri 1 , James J. H Paulus 1 , Jane M. Mamuaja 1 , John Tombokan 2
1 Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi, Manado 95115 Sulawesi Utara, Indonesia
2 Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Sam Ratulangi, Jl. Kampus Unsrat Bahu. Manado 95115 Sulawesi Utara. Indonesia
*Corresponding author: kurnikemer@unsrat.ac.id

## Abstract
Microalgae are a group of phytoplankton that live in waters and in damp places; Microscopic in size and can only be seen with a microscope. The stages of microalgae growth are started with the lag phase, the exponential phase, the growth rate decreasing phase, the stationary phase, and the death phase. Porphyridium cruentum is a single-celled microalgae, belonging to the class Rhodophyceae, free-living or in colonies bound in mucilago.
The  purpose  of  this  study  was  to  observe  the  growth  of  the  marine  microalgae Porphyridium cruentum in culture media treated with lead acetate at different concentrations, namely 30 ppm, 50 ppm, 80 ppm, and control. Observation of cell growth was carried out by counting the number of cells every day, at the same time until Porphyridum cruentum entered the death phase. The cell density of Porphyridium cruentum marine microalgae showed a good growth pattern where until day 11 the average number of microalgae cells was 9.8 x104. Furthermore, the culture media was treated with lead acetate in different concentrations. Cell density with lead acetate treatment can affect the growth of Porphyridium cruentum.
Keywords : Microalgae; Porphyridium cruentum ; Lead Acetate

## Abstrak
Mikroalga  adalah  kelompok  fitoplankton  yang  hidup  di  perairan  dan  di  tempat  yang  lembab; berukuran mikroskopis dan hanya bisa dilihat menggunakan mikroskop. Tahapan pertumbuhan mikroalga  adalah  dimulai  dari  fase  lag,  fase  eksponensial,  fase  penurunan  laju  pertumbuhan, fase stasioner dan fase kematian. Porphyridium cruentu m merupakan mikroalga bersel tunggal, termasuk kelas Rhodophyceae, hidup bebas atau berkoloni yang terikat dalam mucilago. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  mengamati  pertumbuhan  dari  mikroalga  laut Porphyridium cruentum pada media kultur dengan perlakuan timbal asetat pada konsentrasi berbeda yaitu 30 ppm, 50 ppm, 80 ppm dan kontrol. Pengamatan pertumbuhan sel dilakukan dengan menghitung jumlah  sel  setiap  hari,  pada  waktu  yang  sama  sampai Porphyridum  cruentum memasuki  fase kematian. Kepadatan sel mikroalga laut Porphyridium cruentum menunjukkan pola pertumbuhan yang baik dimana sampai hari ke 11 jumlah rata-rata sel mikroalga 9,8 x10 4 . Selanjutnya media kultur  diberi  perlakuan  timbal  asetat  dengan  konsentrasi  berbeda.  Kepadatan  sel  dengan perlakuan timbal asetat dapat mempengaruhi pertumbuhan Porphyridium cruentum .
Kata kunci: Mikroalga; Porphyridium cruentum ; Timbal Asetat

## PENDAHULUAN
Mikroalga
adalah kelompok fitoplankton  yang  bisa  ditemukan  di perairan  air  tawar  dan  air  laut,  juga  di tempat  yang  lembab  dalam  kondisi tertentu.  (Winahyu  et  al.,  2013;  Sánchez-
Bayo  et  al.,  2020).  Mikroalga  adalah  alga yang  berukuran  mikroskopis  yang  hanya bisa  dilihat  menggunakan  mikroskop; bermanfaat  bagi  makhluk  hidup  terutama pada  manusia,  yakni  sebagai  sumber makanan  dan  pembuatan  obat-obatan,
serta  sebagai  bahan  baku  biodiesel. (Sheehan, 1998).
Mikroalga  disebut  sebagai  produsen primer  di  perairan,  waktu  pertumbuhan sekitar 14 hari dengan melakukan fotosintesis  (Sani,  2014).  Mikroalga  dapat hidup  dan  bertumbuh  walaupun  diberikan perlakuan  senyawa  toksik  dengan  unsur merkuri  ataupun  timbal.  Salah  satu  jenis logam  berat  yang  bisa  ditemukan  di perairan adalah timbal (Pb). Dampak timbal terhadap  organisme  di  perairan  yang masuk  ke  dalam  tubuh  organisme  melalui rantai makanan, insang, atau difusi melalui permukaan  kulit  dan  jika  dikonsumsi  oleh manusia  maka  akan  berpengaruh  dan membahayakan nyawa manusia. (Sorensen,  1994).  Dampak  dari  timbal asetat  adalah  memicu  reactive  oxygen species  atau  radikal  bebas  (Ariati,  2020) pada  mikroalga  laut  dapat  menghambat pertumbuhan  dan  kandungan  pigmen klorofil  (Tamalonggehe,  2020).  Adapun penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui pertumbuhan  sel  mikroalga Porphyridium cruentum ,  melalui  perhitungan  kepadatan sel yang diberikan perlakuan timbal asetat.

## METODE PENELITIAN
Sampel  mikroalga  laut Porphyridium cruentum berasal dari Balai Besar Perikanan Budidaya Jepara yang kemudian dikultur untuk diamati pertumbuhan melalui perhitungan
kepadatan  selnya.  Air  untuk  media  kultur mikroalga Porphyridium  cruentum yang diambil dari perairan pantai Teluk Manado (dekat  tugu  boboca)  Malalayang  Manado yakni  perairan  yang  jauh  dari  pemukiman masyarakat.  Kemudian  air  laut  dibawa  ke laboratorium Biologi
Molekuler dan
Farmasitika, disaring
dengan menggunakan  alat  bantu  vakum,  kertas saring,  dan  labu  buchner  atau  corong buchner.  Selanjutnya  air  laut  dimasukkan ke 4 wadah Erlenmeyer berukuran 1000 ml untuk dilakukan sterilisasi dengan autoclave kering pada suhu 121 0 C selama 15-20 menit.
Pada  4  wadah  erlenmeyer  1000  ml  berisi air laut, masing-masing diberi 1000 µl bibit mikroalga Porphyridium  cruentum dan
1000  µl  media  walne  kemudian  wadah ditutup  menggunakan  aluminium  foil. Proses  kultur  dilakukan  selama  11  hari dengan  pencahayaan  lampu  48  watt. Dilakukan perhitungan jumlah sel, menggunakan haemocytometer serta mikroskop  cahaya  dengan  pembesaran 1000x.  Setelah  mikroalga Porphyridium cruentum berada  pada  fase  eksponensial, diberikan  perlakuan  timbal  asetat  dengan konsentrasi 30 ppm, 50 ppm, 80 ppm dan dimasukkan  kembali  ke  lemari  kultur  dan akan dilakukan pengamatan hingga hari ke 24  dengan  5x  pengulangan  diwaktu  yang sama.

## Analisis Data
Menghitung kepadatan sel mikroalga menurut  Mudjiman  (1984)  adalah  sebagai berikut:
Bila kepadatan sel Mikroalga Rendah : Jumlah Kepadatan Sel Mikroalga  = Jumlah sel x 10 4
Keterangan :
10 4 = Konstanta Haemacytometer=
= 1000 = 10 4
Bila kepadatan planktonnya tinggi : Jumlah kepadatan sel Mikroalga = rata – rata  jumlah sel x 25 x 10 4
Keterangan : 25 = Banyak kotak pada haemacytometer 10 4 = Kostanta haemacytometer=
= 1000 =10 4
Data yang diperoleh setelah pengamatan jumlah sel mikroalga terbanyak  dalam  1  kotak  sedang  dengan 16 kotak kecil, data tersebut dihitung dalam rumus  dan  diolah  dengan  microsoft  excel agar  mengetahui  jumlah  rata-rata  dan grafik diperoleh.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan awal kultur
Berdasarkan hasil pengamatan, pertumbuhan  kepadatan  sel  mikroalga Porphyridium cruentum pada fase eksponensial
sebelum pemberian perlakuan  timbal  asetat  adalah  pada pengamatan hari ke 11.
Berdasarkan hasil pengamatan pada grafik  di  atas,  rata-rata  kepadatan  sel Porphyridium  cruentum mulai  dari  hari pertama  sampai  hari  ke  11  bertumbuh, mikroalga  tersebut  menggunakan  nutrient
dari pupuk walne yang diberikan ke dalam wadah  kultur.  Pertumbuhan  sel  semakin bertambah sampai pada fase eksponensial, hari ke 11.  Pada penelitian Tewal  (2021),  fase  eksponensial  terjadi pada hari ke 9 pada wadah kontrol. Selain dari pengamatan menghitung sel, pertumbuhan  sel Porphyridium  cruentun dapat  dilihat  dari  perubahan  warna  dalam media  kultur.  Pada  penelitian  Bawias (2018) mengatakan bahwa fase eksponensial  terjadi  pada  hari  ke  5  pada wadah  kontrol  dengan  jumlah  kepadatan sel melimpah.
Gambar 1. Kepadatan sel Porphyridium cruentum

## Pemberian senyawa timbal asetat
Kultur mikroalga
Porphyridium
cruentum dilanjutkan dengan pemberian  3 perlakuan (yaitu 30 ppm, 50 ppm, 80 ppm ) dan  kontrol.  Pengamatan  saat  setelah diberi perlakuan dilakukan selama 13 hari.
Hasil pengamatan pertumbuhan mikroalga Porphyridium cruentum (gambar
2) menunjukkan  pertumbuhan  yang  pada umumnya terjadi pada mikroalga laut. Hasil penelitian  ini  memperlihatkan  bahwa  sel mikroalga Porphyridium  cruentum pada awal  pengamatan  di  hari  pertama  sampai hari  ke  4  menunjukkan  pertumbuhan  sel yang  masih  beradaptasi  dengan  media kultur  yakni  fase  lag.  Fase  lag  terjadi kurang  dari  24  jam  setelah  penambahan inokulan ke dalam media kultur dan ukuran sel mengalami peningkatan. (Isnansetyo & Kurniastuti, 1995).
Data  yang  diperoleh,  pada  hari  ke  5 sampai  hari  ke  8,  pertumbuhan  sel  relatif baik  hingga  pada  fase  eksponensial  pada
hari  ke  11  dimana  jumlah  kepadatan  sel mikroalga  relatif  tinggi.  Hasil  penelitian yang  didapat  yang  ditujukan  pada  grafik diatas  memperoleh  hasil  yang  beragam ditiap  wadah  kultur,  jumlah  sel  makin menurun  selain  disebabkan  oleh  nutrisi yang mulai berkurang juga disebabkan oleh faktor  lain  yaitu  terjadi  pemadaman  listrik yang mengakibatkan tidak ada cahaya dari lampu dan suhu naik di laboratorium. Pada penelitian Tewal (2021) menunjukkan juga pada awal pengamatan sebelum pemberian  perlakuan  timbal  asetat  pada hari  pertama  sampai  hari  ke  4  mengalami fase lag dan pada hari ke 5 sampai hari ke 8  penambahan  jumlah  sel  stabil  hingga pada fase eksponensial di hari ke 9. Dalam penelitian  Jeheskiel  (2022)  menunjukkan pengamatan  pada  hari  pertama  sampai pada  fase  eksponensial  mengalami  fase lag  pada  hari  ke  3,  kemudian  mengalami penambahan  jumlah  sel  menjadi  stabil
hingga  pada  fase  eksponensial  pada  hari ke 10.
Pada  fase  eksponensial  dari  wadah kontrol bersamaan dengan awal pengamatan  yang  diberi  perlakuan  timbal asetat yaitu pada hari pertama pengamatan,  kemudian  sel  mikroalga Porphyridium  cruentum mengalami  fase penurunan  laju  pertumbuhan  dikarenakan nutrien  yang  semakin  berkurang,  suhu, cahaya. Sel mikroalga yang yang bertumbuh pada wadah ini mengalami fase stasioner  hingga  fase  kematian  yang  bisa dilihat warna pada wadah mulai memudar, fase  kematian  tidak  semua  sel  mikroalga habis hingga pada hari terakhir pengamatan  dikarenakan  masih  ada  sisa nutrien di dalam wadah.
Pada  wadah  kedua  yang  diberi perlakuan timbal asetat dengan konsentrasi  30  ppm  menunjukkan  bahwa pemberian  perlakuan  mempengaruhi  laju pertumbuhan dan kepadatan sel mikroalga Porphyridium  cruentum mulai  dari  hari pertama  dan  hari  kedua  jumlah  sel  yang diamati menurun kemudian stabil pada hari ke 3 sampai hari ke 7, namun pada hari ke 8  hingga  hari  ke  13  laju  pertumbuhan  sel mikroalga  mengalami  fase  penurunan  laju pertumbuhan dan fase stasioner kemudian fase kematian dikarenakan sifak toksik dari timbal asetat. Pengamatan tidak dilakukan hingga sel mikroalga Porphyridium cruentum mati.
Gambar 2. Grafik Pertumbuhan sel Porphyridium cruentum setelah pemberian perlakuan
Pada  wadah  ketiga  diberi  perlakuan timbal  asetat  dengan  konsentrasi  50  ppm menunjukkan bahwa pemberian perlakuan mempengaruhi  laju  pertumbuhan  dan kepadatan  sel  mikroalga Porphyridium cruentum mulai dari hari pertama dan hari ke 5 pertumbuhan sel mikroalga cukup baik atau  stabil,  pada  hari  ke  6  sampai  hari  ke 13  sel  mikroalga  yang  diamati  mengalami fase penurunan laju pertumbuhan dan fase stasioner kemudian fase kematian dikarenakan sifak toksik dari timbal asetat. Pengamatan  tidak  dilakukan  hingga  sel mikroalga Porphyridium  cruentum habis atau mati.
Pada wadah yang diberikan perlakuan
timbal asetat dengan konsentrasi  paling  tinggi  yaitu  80  ppm menunjukkan  penurunan  jumlah  sel  yang
lebih banyak dibandingkan dengan pemberian  perlakuan  dengan  konsentrasi 30  ppm  dan  50  ppm.  Dari  data  yang diperoleh,  pertumbuhan  dan  kepadatan jumlah  sel  yang  diamati  kurang  stabil dimana  dari  hari  pertama  pengamatan dilakukan jumlah sel mikroalga Porphyridium  cruentum semakin  menurun hingga hari ke 13. Pada akhir pengamatan, warna  pada  wadah  ini  cenderung  bening atau  tidak  berwarna.  Hal  ini  membuktikan bahwa  pengaruh  timbal  asetat  dengan konsentrasi  tinggi  dapat  mematikan  sel mikroalga  laut Porphyridium  cruentum dengan perlahan.
Kontrol Hasil pengamatan pada wadah kontrol  menunjukkan  pertumbuhan  dari
mikroalga Porphyridium  cruentum sama seperti  pertumbuhan  mikroalga  laut  pada umumnya,  dimulai  dari  mengalami  laju pertumbuhan yang cukup besar dikarenakan sel dapat bereproduksi dengan cepat serta pertumbuhan kepadatan  sel  yang  relatif  sampai  akhir pengamatan dikarenakan nutrisi dari walne yang  diberikan  tersedia  dalam  wadah kultur.
Setelah diberi perlakuan timbal asetat pada sel mikroalga Porphyridium cruentum , kepadatan  sel  mikroalga  menunjukkan jumlah  kepadatan  sel  yang  baik  dari  hari pertama  sampai  hari  ke  4,  pada  hari  ke  5 sampai hari ke 13 menunjukkan penurunan jumlah sel.

## Timbal Asetat 30 ppm
Pengamatan  yang  dilakukan  pada pemberian perlakuan timbal asetat dengan konsentrasi 30 ppm menunjukkan pertumbuhan  kepadatan  sel  mikroalga cukup  bagus  karena  jumlah  sel  dari  hari pertama  sampai  hari  ke  3  sel  masih beradaptasi  kemudian  pada  hari  ke  4 sampai  hari  ke  13  jumlah  sel  mikroalga mikroalga menurun.

## Timbal Asetat 50 ppm
Pemberian
timbal dengan konsentrasi  50  ppm  pada  wadah  sel mikroalga yang ketiga menunjukkan jumlah sel  yang  masih  stabil  sampai  hari  ke  5, pada  hari  ke  6  jumlah  yang  diamati menurun sampai hari ke 8, pada hari ke 9 jumlah sel yang diamati naik hingga jumlah terbanyak yang diamati adalah pada hari ke 9, pada hari ke 10 sampai hari ke 13 jumlah sel terus menurun.

## Timbal Asetat 80 ppm
Pada  wadah  sel  mikroalga  yang terakhir diberi perlakuan timbal asetat yang paling tinggi yaitu 80 ppm. Hasil pengamatan  yang  didapat  adalah  laju pertumbuhan  sel  hampir  sama  dengan pemberian perlakuan timbal asetat 50 ppm yaitu  pada  hari  pertama  sampai  hari  ke  6 jumlah sel yang diamati stabil, pada hari ke 7 dan hari ke 9 jumlah sel naik, dan pada hari  ke  10  sampai  hari  ke  13  jumlah  sel
menurun  atau  memasuki  fase  penurunan laju pertumbuhan.

## KESIMPULAN
Pertumbuhan mikroalga laut Porphyridium  cruentum sampai  hari  ke-11 menunjukkan  pertumbuhan  yang  baik sampai  pada  puncak  pertumbuhan  fase eksponensial.
Kepadatan sel mikroalga laut Porphyridium cruentum yang  diberi  perlakuan  timbal asetat  diperoleh  jumlah  kepadatan  sel mikroalga dengan konsentrasi timbal asetat dapat  mempengaruhi  pertumbuhan  sel mikroalga Porphyridium cruentum , 30 ppm jumlah  rata-rata  sel  mikroalga  1,6  x10 4 sel/ml,  50  ppm  jumlah  rata-rata  sel mikroalga  1,4  x10 4 sel/ml,  80  ppm  jumlah rata-rata sel mikroalga 2 x10 4 sel/ml.

## DAFTAR PUSTAKA
Abd  El-Baky,  H.H.  2009.  Enhancing antioxidant  availability  in  grains  of wheat plants grown under seawaterstress in response to microalgae extracts treatments.
African Journal of Biochemistry
Research. 3(4) : hal 77-83. Bawias, M., K. Kemer., D. M. H. Mantiri., D. R.  Kumampung.,  D.  S.  Paransa.,  R. Mantiri. 2018. Isolasi Pigmen Karatenoid Pada Mikroalga Nannochloropsis sp. Dengan
Menggunakan  Beda  Pelarut..  Jurnal Pesisir dan Laut Tropis. 1(2) : hal 1-8
Jeheskiel,  A.  V.,  K.  Kemer.,  D.  M.  H.
Mantiri., J. Paulus., R. M. Rompas dan R. Khreekhoff. 2022. Pengaruh Timbal Asetat (Pb(CH 3 COO) 2 Terhadap Pertumbuhan Mikroalga Laut Chlorella vulgaris (Beijerink, 1890). Jurnal Platax. 10(2)
: hal 363-370.
Mudjiman,  A.  1984.  Makanan  Ikan. Swadaya. Jakarta.
Sani,  R.N.,  F.C  Nisa.,  R.D  Andriani.  dan J.M. Maligan. 2014. Analisis Rendemen dan Penyaringan Fitokimia Ekstrak Etanol Mikroalga Laut
Tetraselmis  chuii . Jurnal  Pangan  dan Agroindustri. 2(2) : hal 121-126. Sheehan,  D.V.,  Y.  Lecrubier  dan  K.
Harnett-Sheehan.  1998.  The  Mini International Neuropsychiatric Interview (M.I.N.I.): The Development and validation of a structured diagnostic  psychiatric  interview  for DSM-IV  and  ICD-10.  Journal  of Clinical Psychiatry. hal 22-23.
Tamalonggehe,  J.,  K.  Kemer.,  D.S.A.
Paransa.,  D.M. Mantiri., N.J.  Kawung dan  S.L  Undap.  2020. Efek  Senyawa Timbal Asetat Terhadap Pertumbuhan Dan  Kandungan  Pigmen  Klorofil Mikroalga Dunaliella sp. Jurnal Pesisir Dan Laut Tropis. 8(2) : hal 1-10.
Tewal,  F.,  K.  Kemer.,  J.R.  Rimper.,  D.M.
Mantiri., W.E. Pelle dan J.D. Mudeng. 2021. Laju Pertumbuhan Dan Kepadatan Mikroalga Dunaliella sp. Pada  Pemberian  Timbal  Asetat Dengan Konsentrasi Yang Berbeda. Jurnal  Pesisir  Dan  Laut Tropis. 9(1) : hal 30-37. Winahyu, D.A., Y. Anggraini., E. Rustiati., J.
Master  dan  A.  Setiawan.  2013.  Studi Pendahuluan Mengenai
Keanekaragaman  Mikroalga  di  Pusat Konservasi  Gajah,  Taman  Nasional
Way  Kambas.  Prosiding  Semirata FMIPA  Universitas  Lampung.  1(1)  : hal 93 –98.