Uji Kapasitas Antiokisdan pada Ekstrak Daun Peppermint (Mentha piperita L.) dengan Metode DPPH, FRAP, ABTS
Andrea Bianca Castafiore Kusuma 1 , David Limanan 2 , Eny Yulianti 3 , Frans Ferdinal 4
Universitas Tarumanagara, Jakarta, Indonesia Email: andrea.405210063@stu.untar.ac.id, davidl@fk.untar.ac.id

## ABSTRAK
Kata Kunci:
Paparan  terhadap  konsentrasi  oksigen  tinggi  bisa  merugikan  organ tubuh mulai dari sistem kardiovaskular, gastrointestinal, pernapasan dan saraf. Melalui reaksinya dengan elektron, oksigen dapat berubah menjadi reactive oxygen species (ROS). ROS merupakan by-product yang  berasal  dari  metabolisme  sel  terutama  mitokondria.  Ketika ROS diproduksi melebihi kapasitas antioksidan sel, terjadilah stres oksidatif  dimana  keadaan  ini dapat  merusak  makromolekul  seperti lipid,  protein  dan  DNA  sebagai  inisiasi  perkembangan  suatu penyakit. Salah satu mekanisme pertahanan untuk melindungi tubuh dari efek berbahaya ROS adalah dengan antioksidan, yaitu senyawa yang  mampu  mencegah  atau  memperlambat  proses  oksidasi. Tentunya  antioksidan  sudah  terkandung  dalam  sel  tubuh,  tetapi antioksidan  juga  bisa  diperoleh  dari  luar,  salah  satunya  daun peppermint (Mentha piperita L.). Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah untuk menguji metabolit sekunder, aktivitas antioksidan, dan toksisitas  dari  ekstrak  daun  mint.  Desain  penelitian  ini  merupakan eksperimental  yang  bersifat  in  vitro.  Daun  peppermint  diekstrak dengan  metode  maserasi  menggunakan  metanol  sebagai  pelarut. Ekstrak yang diperoleh dilakukan pengujian yang uji kapasitas total antioksidan  menggunakan  tiga  metode  yakni,  DPPH,  FRAP  dan ABTS  dengan  pembanding  trolox.  Dari  uji  kapasitas  total antioksidan,   didapatkan  nilai  IC50  terhadap  DPPH  92,994,  FRAP 23,899,  dan  ABTS  27,180.  Dapat  dikatakan  ekstrak  daun  mint tergolong  kategori  antioksidan  kuat  hingga  sangat  kuat  dengan kapasitas  antioksidan  lebih  kecil  dibandingkan  trolox.  Hal  ini membuktikan  ekstrak  daun  mint  memiliki  potensi  sebagai antioksidan.

## ABSTRACT
Exposure  to  high  oxygen  concentrations  can  harm  body organs  ranging  from  the  cardiovascular,  gastrointestinal, respiratory  and  nervous  systems.  Through  its  reaction  with electrons, oxygen can turn into reactive oxygen species (ROS). ROS  is  a  by-product  originating  from  cell  metabolism, especially in the mitochondria. When an excessive amount of ROS  is  produced  more  than  the  cell's  antioxidant  capacity, oxidative  stress  occurs,  which  can  damage  macromolecules such as lipids, proteins and DNA, initiating the development of a disease. One defense mechanism to protect the body from the  harmful  effects  of  ROS  is  with  antioxidants,  which  are compounds  that  can  prevent  or  slow  down  the  oxidation process.  Antioxidants  are  contained  in  body  cells,  but antioxidants can also be obtained externally, one of which is peppermint  leaves  (Mentha  piperita  L.).  The  aim  of  this
Mentha piperita L., antioksidan;  DPPH;  FRAP; BSLT;  Fenolik;  Skrining Fitokimia

## Keywords:
Mentha piperita L., antioksidan; DPPH; FRAP; BSLT; phenolic; phytochemical screening
research was to investigate antioxidant capacity of mint leaf extract.  This  research  is  conducted  with  an  in  vitro experimental  study  design.  Peppermint  leaves  are  extracted using the maceration method using methanol as a solvent. The extract obtained was analyzed for a total antioxidant capacity test  using  the  following  methods:  DPPH,  FRAP,  and  ABTS, with  Trolox  as  a  comparison.  From  the  total  antioxidant capacity  test,  the  IC 50 value  for  DPPH  was  92.994,  FRAP
23.899, and ABTS 27.180. It can be concluded that mint leaf extract has strong to powerful antioxidant capacity with less antioxidant  capacity  than  trolox.  This  proves  that  mint  leaf extract has potential as an antioxidant

## Coresponden Author: Andrea Bianca Castafiore Kusuma
Email: andrea.405210063@stu.untar.ac.id Artikel dengan akses terbuka dibawah lisensi

## Pendahuluan
Oksigen ditemukan oleh seorang ilmuwan bernama Carl Wilhelm Scheele yang berasal dari Swedia. Penemuan mengenai oksigen dituliskan di tahun 1777 pada tesis yang berjudul “ Luft und dem Feuer ” yang artinya udara dan api. Awalnya oksigen dianggap sebagai molekul baik yang tidak merugikan. Setelah dipelajari lebih lanjut, paparan konsentrasi oksigen tinggi dapat menjadi racun yang menyebabkan kerusakan pada organ tubuh seperti sistem pernapasan, kardiovaskular, saraf, dan gastrointestinal (Halliwell & Poulsen, 2007; Phillips dkk., 2003) . Setelah bereaksi dengan  elektron,  oksigen  dapat  berubah  menjadi  salah  satu  dari  radikal  bebas  yaitu reactive oxygen  species (ROS)  (Brieger  dkk.,  2012;  Elsayed Azab  dkk.,  2019).  ROS  merupakan by- product dari  metabolisme  sel  terutama  di  mitokondria.  Stres  oksidatif  terjadi  ketika  ROS diproduksi  melebihi  kapasitas  antioksidan  sel.  Hal  ini  menyebabkan  kerusakan  pada makromolekul  seperti  lipid,  protein,  dan  DNA.  Untuk  melindungi  tubuh  dari  efek  berbahaya ROS, konsentrasi ROS harus dikendalikan oleh beberapa mekanissme pertahanan, salah satunya dengan antioksidan. Antioksidan merupakan senyawa yang memiliki kemampuan mencegah atau memperlambat  proses  oksidasi  makromolekul.  Selain  dari  sel  tubuh,  antioksidan  juga  bisa diperoleh dari tanaman (Irianti dkk., 2022; Kasote dkk., 2015). Salah satu tanaman yang memiliki mekanisme pertahanan dengan antioksidan adalah tanaman mint (Trevisan dkk., 2017). Daun peppermint atau  mint,  dalam  bahasa  latin  dikenal  dengan Mentha  piperita L. Merupakan tanaman hibrida antara spearmint ( Mentha spicata L.) dan mint air ( Mentha aquatica L.) Tanaman ini banyak digunakan sebagai pengobatan tradisional untuk gangguan pencernaan, sistem  saraf,  mengurangi  kram,  mual,  diare,  dan  sebagainya.  Sebagai  tambahan,  daun  mint termasuk  sumber  tanaman  yang  kaya  akan  senyawa  polifenol  sehingga  memiliki  aktivitas antioksidan yang kuat (Aparna L dkk., 2017). Sifat antioksidan yang dikandung dalam minyak atsiri daun mint telah banyak dimanfaatkan untuk makanan, kosmetik, dan industri farmasi karena berpotensi  sebagai  pengganti  bahan  tambahan  sintetik (Singh  dkk.,  2015).  Meskipun  begitu, beberapa penelitian mengatakan bahwa sifat antioksidan daun mint perlu diinvestigasi lebih lanjut untuk  memastikan  keamanannya  untuk  konsumsi  manusia  (AN,  2022;  Pramila,  2012).
Berdasarkan  data  tersebut,  penulis  bermaksud  melakukan  penelitian  untuk  menguji  kapasitas antioksidan dari ekstrak daun mint.

## Metode Penelitian
Desain penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang bersifat in vitro . Uji in vitro yang dilakukan adalah uji kapasitas antioksidan pada ekstrak daun mint ( Mentha piperita L.)  dengan  tiga  metode  meliputi 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH),
2,2’azinobis ( 3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic  acid )  (ABTS),  dan Ferric  Reducing / Antioxidant  Power (FRAP).  Uji  statistik  dalam  penelitian  ini  menggunakan  aplikasi GraphPad  prism  v.9.0  La  Jolla,  CA,  USA.  Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Departemen  Biokimia  dan  Biologi  Molekuler  Fakultas  Kedokteran  Universitas Tarumanagara, Jakarta Barat.

## Pembuatan Ekstrak Daun Mint
Sejumlah  daun  mint  ditimbang  lalu  dikeringkan  dengan  disebarkan  secara  merata  pada wadah terbuka lalu diangin-anginkan tanpa terkena sinar matahari selama 2 hari hingga tekstur daun  menjadi  kering.  Setelah  menjadi  kering,  daun  mint  dihaluskan  dengan  blender  sampai terbentuk  simplisia.  Simplisia  yang  terbentuk  ditimbang  kembali  lalu  dicatat.  Simplisia  akan diekstrak dengan metode perkolasi menggunakan metanol. Proses ekstrak diawali dengan proses maserasi dengan cara mencampurkan sampel dan pelarut metanol. Simplisia didiamkan selama 1 jam  tidak  terkena  sinar  matahari  sebelum  dilanjutkan  perkolasi.  Perkolasi  dimulai  dengan melapisi  dasar  bagian  dalam  perkolator  dengan  kapas  yang  diberi  sedikit  metanol  agar  kapas menempel  pada  dinding  perkolator.  Simplisia  dimasukkan  dan  bagian  atas  simplisia  ditutup dengan  kertas  saring  dilanjutkan  dengan  menuang  pelarut  ke  dalam  perkolator  hingga  tinggi pelarut  sekitar  1-2  cm  di  atas  kertas  saring.  Simplisia  direndam  selama  24  jam.  Setelah  itu, simplisia  terendam  diekstrak  dengan  dibiarkan  menetes  dari  perkolator  dengan  kecepatan  1-2 mL/menit  hingga  diperoleh  perkolat  yang  ditambung  pada  gelas  ukur.  Sebagian perkolat  akan dievaporasi menggunakan mesin rotary evaporator hingga konsistensi kental.

## Pembuatan Larutan DPPH, ABTS, FRAP
Larutan DPPH dibuat dengan melarutkan 1,97 mg bubuk DPPH yang kemudian dilarutkan dengan  pelarut  metanol  hingga  mencapai  100  mL  dalam  tabung  volume  metrik  lalu dihomogenkan. Larutan ditutup untuk mencegah oksidasi dari udara sekaligus dilapisi alumunium foil untuk mencegah terjadi oksidasi dari cahaya.
Larutan ABTS dibuat dengan menyiapkan serbuk ABTS 28,4 mg dan kalium persulfat 14 mg.  Pada  tempat  berbeda,  masing-masing  dilarutkan  dengan  20  mL  pelarut  etanol.  Larutan dihomogenkan, lalu diinkubasi selama 12 jam dalam ruangan gelap. Setelah 12 jam, kedua larutan dicampur kemudian ditambahkan etanol hingga volume larutan total mencapai garis 100 mL.
Pembuatan  larutan  FRAP  diawali  dengan  menimbang  natrium  asetat  trihidrat,  TPTZ, danFeCl 3 .6H 2 O ditimbang dengan berat berurutan sebanyak 187 mg, 150 mg, dan 270 mg. Pada labu ukur 250 mL, natrium asetat trihidrat ditambahkan asam asetat 16 mL lalu dilarutkan dengan aquadest hingga mencapai garis 250 mL. Pada labu ukur 50 mL, serbuk TPTZ dilarutkan dengan HCl 40 mM hingga mencapai garis 50 mL. Pada labu ukur 100 mL, FeCl 3 .6H 2 O dilarutkan dengan aquadest hingga mencapai garis 100 mL. Setelah itu, diambil labu ukur 100 mL untuk mencampur ketiga larutan tersebut dengan kadar natrium asetat trihidrat 25 mL, larutan TPTZ 2,5 mL, dan
larutan  FeCl 3 .6H 2 O  2,5  mL.  Campuran  tersebut  ditambahkan aquadest hingga  mencapai  garis 100 mL.

## Pembuatan Trolox
Dibuat larutan Trolox yang akan digunakan sebagai standar pembanding. Larutan Trolox dibuat  dengan  mencampurkan  0,01  g  trolox  yang  dilarutkan  dengan  pelarut metanol  sebanyak 100 mL sehingga diperoleh konsentrasi 100 µg/mL sebagai kapasitas antioksidan pembanding.

## Pengukuran Kapasitas Antioksidan metode DPPH
Pengukuran kapaistas antioksidan ekstrak daun mint dengan metode DPPH diawali dengan  mengambil  ekstrak  daun  mint  sebanyak  0,01  g  dilarutkan  dengan  metanol sebanyak 10 mL dalam gelas ukur lalu diaduk hingga merata. Hasil larutan sampel daun mint  dimasukkan  ke  dalam  lima  tabung  berbeda  dengan  masing-masing  larutan diencerkan  menjadi  50  µg/mL,  100  µg/mL,  150  µg/mL,  200  µg/mL,  dan  250  µg/mL (Tabel 1). Pada lima tabung reaksi baru, larutan sampel dan larutan DPPH dipipet dari masing  –  masing  konsentrasi  diambil  0,5  mL  larutan  sampel  dan  ditambahkan  larutan DPPH  sebanyak  3,5  mL  pada  setiap  tabung.  Sediaan  larutan  trolox  dibuat  dengan konsentrasi 10 µg/mL, 20 µg/mL, 30 µg/mL, 40 µg/mL dan 50 µg/mL. Trolox sebagai standar  pembanding  mendapat  perlakuan  yang  sama  dengan  larutan  sampel,  sehingga masing – masing konsentrasi trolox dicampur dengan DPPH. Proses ini diulang sebanyak dua  kali  (duplo).  Setelah  itu,  larutan  dihomogenkan  dan  diinkubasi  selama  30  menit dalam ruangan gelap. Serapan larutan lalu dibaca dengan spektrofotometer genesys 30- Vis pada panjang gelombang 517 nm.

## Tabel 1 Kapasitas Antioksidan Daun Mint dengan Metode DPPH
Konsentrasi (µg/mL) Rata – rata Absorbansi (µg/mL) %Inhibisi IC 50 (µg/mL) 50 0,316 42,125 92,994 100 0,272 50,183 150 0,2 63,370 200 0,166 69,597 250 0,069 87,363

## Pengukuran Kapasitas Antioksidan metode ABTS
Pengukuran  kapasitas  antioksidan  dengan  metode  ABTS  dilakukan  dengan mengambil ekstrak daun mint sebanyak 0,02 g dilarutkan dengan etanol sebanyak 10 mL lalu diaduk hingga merata. Hasil larutan sampel daun mint diencerkan hingga konsentrasi menjadi 10 µg/mL, 20 µg/mL, 30 µg/mL, 40 µg/mL, dan 50 µg/mL (Tabel 2) . Disiapkan larutan trolox sebagai standar pembanding dan konsentrasi dibuat 10 µg/mL, 20 µg/mL, 30 µg/mL, 40 µg/mL, dan 50 µg/mL. Larutan sampel dan larutan ABTS dicampurkan. Perbandingan takaran antara kedua larutan adalah 1:1, sehingga diambil larutan sampel sebanyak 1 mL dan larutan ABTS sebanyak 1 mL. Trolox sebagai kontrol positif diberi
perlakuan  yang  sama  seperti    sampel.  Proses  ini  dilakukan  sebanyak  tiga  kali  (triplo). Setelah  itu,  larutan  dibaca  dengan  spektrofotometer genesys 30-Vis  pada  panjang gelombang 734 nm dan dibuat kurva standar.

## Tabel 2 Kapasitas Antioksidan Daun Mint dengan Metode ABTS
Konsentrasi (µg/mL) Rata – rata Absorbansi (µg/mL) %Inhibisi IC 50 (µg/mL) 10 0,052 31,579 27,180 20 0,043 43,421 30 0,036 52,632 40 0,027 64,474 50 0,021 72,368

## Pengukuran Kapasitas Antioksidan metode FRAP
Pengukuran  kapasitas  antioksidan  dengan  metode  FRAP  dikerjakan  dengan menyiapkan ekstrak daun mint sebanyak 0,02 g dilarutkan dengan aquadest sebanyak 10 mL  lalu  diaduk  hingga  merata.  Hasil  larutan  sampel  daun  mint  diencerkan  hingga konsentrasi menjadi 5 µg/mL, 10 µg/mL, 15 µg/mL, 20 µg/mL, dan 25 µg/mL (Tabel 3). Larutan  sampel  dicampurkan  dengan  larutan  FRAP  dengan  perbandingan  takaran  1:3, maka  sebanyak  1  mL  larutan  sampel  dan  3  mL  larutan  FRAP  dari  masing-masing konsentrasi  dipipet  ke  lima  tabung  baru.  Larutan  trolox  yang  akan  digunakan  sebagai standar  pembanding  dipersiapkan  dengan  masing-masing  konsentrasi  10  µg/mL,  15 µg/mL,  20  µg/mL,  25  µg/mL,  dan  30  µg/mL.  Trolox  mendapat  perlakuan  yang  sama dengan sampel. Proses ini dilakukan sebanyak tiga kali (triplo). Larutan dihomogenkan, lalu didiamkan selama 10 menit pada suhu 37 o C. Setelah 10 menit, larutan dibaca pada spektrofotometer genesys 30-Vis dengan panjang gelombang 594 nm lalu dibuat kurva standar.

## Tabel 3 Hasil Uji Kapasitas Antioksidan Ekstrak Daun Mint dengan Metode FRAP
Konsentrasi (µg/mL) Rata – rata Absorbansi (µg/mL) %Inhibisi IC 50 (µg/mL) 5 0,119 24,37 23,899 10 0,129 30,23 15 0,152 40,78 20 0,169 46,74 25 0,177 49,15

## Hasil Dan Pembahasan Uji Kapasitas Antioksidan Ekstrak Daun Mint dengan Metode DPPH
Gambar 1 Kurva Persentase Inhibisi DPPH Ekstrak Daun Mint
Gambar 2 Kurva Persentase Inhibisi Standar Trolox dengan Metode DPPH
Nilai IC 50 pada ekstrak daun mint diperoleh sebesar 92,994 µg/mL (Gambar 1) dan trolox  sebesar  27,86  µg/mL (Gambar  2) .  Menurut  penelitian  Rosmalena  dkk.  (2022), nilai  IC 50 ekstrak  daun  mint  adalah  126,695  µg/mL  yang  tergolong  memiliki  aktivitas antioksidan  sedang.  Berbedanya  nilai  IC50  dikarenakan  penelitian  Rosmalena  dkk. (2022)  menggunakan  pelarut  etanol  sedangkan  penelitian  ini  menggunakan  pelarut metanol dimana jenis pelarut yang digunakan berpengaruh terhadap kapasitas anitoksidan (IC 50 ). Menurut Lung dan Destiani (2017), antioksidan sedang apabila nilai IC 50 100 – 250  µg/mL  sedangkan  antioksidan  kuat  apabila  nilai  IC50  50  –  100  µg/mL.  Dapat dikatakan ekstrak daun mint pada penelitian ini tergolong kuat. Jika dibandingkan trolox, nilai  IC50  ekstrak  daun  mint  lebih  rendah  dikarenakan  trolox  merupakan  senyawa antioksidan murni turunan vitamin E. Maka aktivitas antioksidan pada trolox lebih efektif untuk menghambat radikal bebas. Meskipun begitu, peran biologis daun mint tidak hanya sebagai  antioksidan,  tetapi  juga  sebagai  antibakteri,  antiinflamasi,  antialergenik, antimikroba, antifungal, dan antivirus.

## Uji Kapasitas Antioksidan Ekstrak Daun Mint dengan Metode ABTS
Gambar 3 Kurva Persentase Inhibisi ABTS Ekstrak Daun Mint
Gambar 4 Kurva Persentase Inhibisi Standar Trolox dengan Metode ABTS
Kapasitas antioksidan ekstrak daun mint dengan metode ABTS diperoleh nilai IC 50 27,180  µg/mL (Gambar  3) dan  trolox  sebesar  16,461  µg/mL (Gambar  4). Aktivitas antioksidan  pada  penelitian  ini  didukung  penelitian  sebelumnya  oleh  Mapeka  dkk. (2022)yang menunjukkan nilai  IC 50 = 17,67 µg/mL yang tergolong antioksidan sangat kuat. Penelitian sebelumnya oleh Luță dkk. (2022) juga menunjukkan ekstrak daun mint tergolong antioksidan sangat kuat dengan nilai IC 50 = 37 µg/mL pada penelitiannya. Maka ekstrak  daun  mint  pada  penelitian  ini  dapat  dikatakan  memiliki  kapasitas  antioksidan yang tergolong sangat kuat. Apabila dibandingkan dengan trolox, nilai IC 50 pada ekstrak daun mint tidak menunjukkan perbedaan cukup jauh dan sama – sama memiliki nilai IC 50 kurang dari 50 µg/mL. Dari pengujian kapasitas antioksidan dengan metode ABTS pada penelitian ini, keduanya termasuk antioksidan sangat kuat dan efektif dalam menangkal radikal bebas.

## Uji Kapasitas Antioksidan Ekstrak Daun Mint dengan Metode FRAP
Gambar 5 Kurva Persentase Inhibisi FRAP Ekstrak Daun Mint
Gambar 6 Kurva Persentase Inhibisi Standar Trolox dengan Metode FRAP
Nilai IC 50 diperoleh dari ekstrak daun mint dengan metode FRAP sebesar 23,899 µg/mL (Gambar 5) dan trolox 14,17 µg/mL (Gambar 6). Menurut Mapeka dkk. (2022), nilai IC 50 pada ekstrak daun mint adalah 53,4 µg/mL yang tergolong antioksidan kuat. Bila dibandingkan dengan penelitian ini, nilai IC 50 dari penelitian oleh Mapeka dkk.tidak menunjukkan  perbedaan  cukup  jauh,  hanya  saja  pada  penelitian  ini  ekstrak  daun  mint tergolong antioksidan sangat kuat. Perbandingan ekstrak daun mint dan trolox tidak jauh berbeda  dan  keduanya  menunjukkan  nilai  IC 50 kurang  dari  50  µg/mL.  Hal  ini  dapat diartikan baik ekstrak daun mint dan trolox terbilang memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.

## Kesimpulan
Ekstrak  daun  mint  ( Mentha  piperita L.)  dengan  metode  DPPH  didapatkan  kapasitas antioksidan dalam IC 50 sebesar 92,994 µg/mL tergolong antioksidan kuat. 1) Ekstrak daun mint ( Mentha piperita L.) dengan metode ABTS didapatkan kapasitas antioksidan dalam IC 50 sebesar 27,180  µg/mL  tergolong  antioksidan  sangat  kuat.  2)  Ekstrak  daun  mint  ( Mentha  piperita L.) dengan  metode  FRAP  didapatkan  kapasitas  antioksidan  dalam  IC 50 sebesar  23,899  µg/mL tergolong antioksidan sangat kuat.

## Daftar Pustaka
AN, M. T. (2022). Buku Ajar Obat Tradisional . CV Mitra Edukasi Negeri.
Aparna L, M., S, A., I, S., & D, R. (2017). Assessment of Sputum Quality and Its Importance in the Rapid Diagnosis of Pulmonary Tuberculosis. Archives of Clinical Microbiology , 08 (04). https://doi.org/10.4172/1989-8436.100053
Brieger, K., Schiavone, S., Miller, Jr., & Krause, K. (2012). Reactive oxygen species: from health to disease. Swiss Medical Weekly . https://doi.org/10.4414/smw.2012.13659
Elsayed Azab, A., A Adwas, A., Ibrahim Elsayed, A. S., A Adwas, A., Ibrahim Elsayed, A. S., &
Quwaydir,  F.  A.  (2019).  Oxidative  stress  and  antioxidant  mechanisms  in  human  body.
Journal of Applied Biotechnology & Bioengineering , 6 (1), 43–47.
https://doi.org/10.15406/jabb.2019.06.00173
Halliwell, B. B., & Poulsen, H. E. (2007). Cigarette Smoke and Oxidative Stress . Springer Berlin Heidelberg. https://doi.org/10.1007/3-540-32232-9
Irianti, T. T., Pramono, S., & Sugiyanto, S. (2022). Penuaan Dan Pencegahannya: Proses Faali Biokimiawi dan Molekuler . Gadjah Mada University Press.
Kasote,  D.  M.,  Katyare,  S.  S.,  Hegde,  M.  V.,  &  Bae,  H.  (2015).  Significance  of  Antioxidant Potential of Plants and its Relevance to Therapeutic Applications. International Journal of Biological Sciences , 11 (8), 982–991. https://doi.org/10.7150/ijbs.12096
Lung,  J.  K.  S.,  &  Destiani,  D.  P.  (2017).  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Vitamin  A,  C,  E  dengan metode DPPH. Farmaka , 15 (1), 53–62.
Luță,  E.  A.,  Biță,  A.,  Moroșan,  A.,  Mihaiescu,  D.  E.,  Ghica,  M.,  Mihai,  D.  P.,  Olaru,  O.  T.,
Deculescu-Ioniță, T., Duțu, L. E., Popescu, M. L., Costea, L., Nitulescu, G. M., Lupuliasa, D., Boscencu, R., & Gîrd, C. E. (2022). The Influence of Phytosociological Cultivation and Fertilization on Polyphenolic Content of Menthae and Melissae folium and Evaluation of Antioxidant  Properties  through  In  Vitro  and  In  Silico  Methods. Plants , 11 (18),  2398. https://doi.org/10.3390/plants11182398
Mapeka,  T.  M.,  Sandasi,  M.,  Viljoen,  A.  M.,  &  van  Vuuren,  S.  F.  (2022).  Optimization  of Antioxidant  Synergy  in  a  Polyherbal  Combination  by  Experimental  Design. Molecules , 27 (13), 4196. https://doi.org/10.3390/molecules27134196
Phillips, M., Cataneo, R. N., Greenberg, J., Grodman, R., Gunawardena, R., & Naidu, A. (2003).
Effect  of  oxygen  on  breath  markers  of  oxidative  stress. European  Respiratory  Journal , 21 (1), 48–51. https://doi.org/10.1183/09031936.02.00053402
Pramila,  D.  M.  (2012).  Phytochemical  analysis  and  antimicrobial  potential  of  methanolic  leaf extract of peppermint (Mentha piperita: Lamiaceae). Journal of Medicinal Plants Research ,
6 (3). https://doi.org/10.5897/JMPR11.1232
Rosmalena,  R.,  Putri,  N.,  Yazid,  F.,  Ambarwati,  N.  S.,  Omar,  H.,  &  Ahmad,  I.  (2022).
Phytochemical,  in  vitro  radical  scavenging  and  in  vivo  oxidative  stress  analysis  of peppermint  (Mentha  piperita  L.)  leaves  extract. Journal  of  Advanced  Pharmaceutical Technology & Research , 13 (2), 133–137. https://doi.org/10.4103/japtr.japtr_16_22 Singh, R., Shushni, M. A. M., & Belkheir, A. (2015). Antibacterial and antioxidant activities of
Mentha piperita L. Arabian Journal of Chemistry , 8 (3), 322–328. https://doi.org/10.1016/j.arabjc.2011.01.019
Trevisan, S. C. C., Menezes, A. P. P., Barbalho, S. M., & Guiguer, É. L. (2017).  Properties of Mentha Piperita: A Brief Review. World Journal of Pharmaceutical and Medical Research , 3 (1), 309–313.