Wijaya & Aeny : Pengujian Efikasi Formulasi Kering Trichoderma spp. 315
J.  Agrotek    Tropika.    ISSN  2337-4993 Vol. 1,  No. 3: 315 – 319, September 2013

## PENGUJIAN EFIKASI FORMULASI KERING Trichoderma spp. TERHADAP PENYAKIT BUSUK BUAH KAKAO (Phytophthora palmivora)

## Ahmad Teddy Wijaya P & Titik Nur Aeny
Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung Jl. Soemantri Brodjonegoro No. 1 Bandar Lampung 35145 E-mail:

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk membuat formulasi keringTrichoderma spp. dengan bahan pembawa yang berbeda-beda (talk, kaolin, dan clay) dan mendapatkan formulasi kering yang paling efektif dalam menekan penyakit busuk buah kakao (BBK) yang disebabkan oleh Phytophthora palmivora.  Penyiapan formulasi kering Trichoderma spp. dilakukan di laboratorium dan formulasi kering yang dihasilkan selanjutnya diuji keefektifannya pada buah kakao di laboratorium dan di lapang.  Pengujian laboratorium dilakukan di Laboratorium Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Lampung dan pengujian lapang dilakukan  di  kebun  kakao  petani  di  Dusun  Sidomulyo  Kecamatan  Sumberejo,  Kabupaten  Tanggamus.    Formulasi keringTrichoderma diaplikasikan dengan cara penyemprotan pada buah kako, dan  semua buah yang diberi perlakuan diinokulasi dengan cara menempelkan potongan biakan P. palmivora pada 2 hari setelah perlakuan.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa Trichoderma spp. dalam bentuk formulasi kering dapat  menekan pertumbuhan jamur P. palmivora.  Formulasi kering T.harzianum dan T.viride  dengan  bahan  pembawa  kaolin  memiliki  jumlah  spora  yang  paling  tinggi.  Hasil  percobaan  di  laboratorium menunjukkan bahwa pada 8 hari setelah inokulasi, formulasi kering T.harzianum dengan bahan pembawa kaolin adalah yang paling baik dalam menekan keparahan penyakit(34%), sedangkan di lapang formulasi T.viridae dengan bahan pembawa kaolin yang paling efektif dalam menekan keparahan penyakit BBK (26%).
Kata kunci: formulasi kering, penyakit busuk buah kakao, Trichoderma spp.

## PENDAHULUAN
Kakao merupakan salah satu komoditas ekspor yang  menempati  peringkat  ke  tiga  ekspor  sektor perkebunan dalam menyumbang devisa negara, setelah komoditas  karet  dan  CPO.    Provinsi  Lampung merupakan  salah  satu  sentra  perkebunan  kakao  di Indonesia,  dengan  lokasi  antara  lain  di  Kabupaten Lampung  Selatan,  Pesawaran, Tanggamus,  Lampung Timur,  Lampung  Tengah,  Lampung  Utara,  Lampung Barat,  Pringsewu,  dan  Waykanan  (Bappebti,  2011). Menurut Dirjen Perkebunan (2009) luas areal tanaman kakao di Lampung mencapai 38.865 ha, dengan produksi sebanyak 17.000 ton (2,9%).
Sampai saat ini, usaha pengembangan kakao di Indonesia  masih  menghadapi  banyak  kendala,  salah satunya  adalah  adanya  serangan  hama  dan  penyakit (Darmono et al., 2006). Busuk buah kakao  merupakan penyakit utama tanaman kakao yang ditemukan di banyak negara penghasil buah kakao, termasuk Indonesia (Suara Merdeka, 2004).  Penyakit yang disebabkan oleh jamur Phytophthora  palmivora  (Butl.)  merupakan  penyakit kakao  paling  penting  karena  menyebabkan  kerugian mencapai 10 - 30% di seluruh dunia.
Pada saat ini upaya pengendalian terhadap hama dan  penyakit  tanaman  masih  mengutamakan penggunaan  pestisida  sebagai  upaya  pengendalian utama.  Pada kenyataannya bahwa upaya pengendalian dengan menggunakan senyawa kimia bukan merupakan alternatif  yang  terbaik,  karena  banyak  menimbulkan dampak  negatif.  Selain  itu  dengan  adanya  aplikasi pestisida  sintetik  yang  berlebihan  dapat  memicu timbulnya  patogen  yang  resisten  terhadap  pestisida sistetik yang digunakan. Berdasarkan hal tersebut maka perlu  diambil  alternatif  pengendalian  yang  efektif terhadap  penyebab  penyakit  tanaman  tanpa mengandalkan fungisida sistetik. Pengendalian biologi (hayati) menunjukkan alternatif pengedalian yang dapat dilakukan  tanpa  harus  memberikan  pengaruh  negatif terhadap lingkungan dan sekitarnya, salah satunya adalah dengan pemanfaatan agens hayati seperti virus, jamur atau cendawan, bakteri atau aktiomisetes.
Beberapa  jamur  atau  cendawan  mempunyai potensi  sebagai  agens  hayati  dari  jamur  patogenik diantaranya  adalah Trichoderma  spp.  (Baker  dan Cook,1983 dalam Tindaon, 2008), yang bersifat antagonis terhadap jamur P. palmivora penyebab penyakit busuk buah kakao. Oleh karena itu penggunaan Trichoderma spp. sebagai agen pengendali hayati diharapkan dapat
mengurangi ketergantungan dan dampak  negatif dari penggunaan bahan kimia dalam mengendalikan penyakit busuk buah kakao.
Penelitian ini bertujuan untuk membuat formulasi kering Trichoderma spp. dengan bahan pembawa yang berbeda, dan mendapatkan formulasi kering yang paling efektif dalam menekan penyakit busuk buah kakao.

## METODE  PENELITIAN

## Percobaan untuk pengujian formulasi kering jamur
Trichoderma spp.  disusun  dalam  Rancangan  Acak Lengkap yang terdiri dari 10 perlakuan, yaitu 9 formulasi kering dengan komposisi yang berbeda dan 1 kontrol. Masing-masing  perlakuan  diulang  sebanyak  3  kali sehingga terdapat 30 satuan percobaan.  Satu percobaan terdiri atas 3 buah kakao. Perlakuan terdiri atas:
1. Kontrol berupa buah  kakao yang disemprot dengan air steril (T0C0);
2.  Formulasi  kering T.  harzianum  dengan  bahan pembawa talk (T1C1);
3.  Formulasi  kering T.  harzianum  dengan  bahan pembawa kaolin (T1C2);
4.  Formulasi  kering T.  harzianum  dengan  bahan pembawa clay (T1C3);
5. Formulasi kering T. koningii dengan bahan pembawa talk (T2C1);
6. Formulasi kering T. koningii dengan bahan pembawa kaolin (T2C2);
7. Formulasi kering T. koningii dengan bahan pembawa clay (T2C3);
8. Formulasi kering T. viridee dengan bahan pembawa talk (T3C1);
9. Formulasi kering T. viridee dengan bahan pembawa kaolin (T3C2);
10. Formulasi kering T. viridee dengan bahan pembawa clay (T3C3);
Isolasi dan pemurnian isolat P. palmivora pada tahapan  ini  mengadopsi  langkah-langkah  yang  telah dilakukan  oleh  Umayah et  al., (2006)  yaitu  jamur patogen  diisolasi  secara  langsung  dari  buah  yang menunjukkan  gejala  busuk  buah.  Pada  buah  yang menunjukkan gejala, dibuat potongan jaringan kulit buah pada perbatasan antara yang sakit dan yang sehat (± 5 mm), lalu potongan-potongan tersebut direndam dalam larutan NaOCl 1% selama 5 menit, kemudian direndam dalam larutan alkohol 70% selama 2 menit, dan dibilas dengan aquades sebanyak 2 kali.  Kemudian potongan buah  tersebut  ditanam  pada  cawan  petri  yang  berisi media V8 dan diinkubasi dalam suhu ruang selama 4 hari atau sampai tumbuh koloni. Jamur yang tumbuh pada  V8  selanjutnya  dibiakkan,  dimurnikan,  dan
diperbanyak pada medium yang sama sampai diperoleh biakan murni dalam jumlah yang cukup banyak.
Trichoderma yang digunakan pada percobaan ini terdiri  atas  tiga  spesies    yaitu T.  viride,  T.  koningii, dan T.  harziaum.    Biakan  Trichoderma  yang  sudah murni diperbanyak dalam media perbanyakan berupa menir beras dan diinkubasi dalam inkubator selama 30 hari  untuk  mendapatkan spora/konidia  dalam  jumlah yang cukup banyak.  Perbanyakan biakan untuk starter (pemula) dilakukan sebagai berikut: sebanyak 100 gr menir yang telah dikukus setengah matang dimasukkan ke dalam 10 plastik tahan panas kemudian diikat sampai kedap udara yang lalu disterilkan dalam autoklaf pada suhu  121ºC  (tekanan  1atm)  selama  kurang  lebih  30 menit. Media menir yang telah disterilkan dibiarkan dingin lalu  diinokulasi  dengan  jamur  Trichoderma  spp.  dan diinkubasi selama 2-3 minggu atau  sampai terbentuk spora secara merata pada media menirnya.
Biakan  hasil  perbanyakan  jamur Trichoderma spp. dalam menir beras dikeringanginkan pada suhu 30- 35°C sampai benar-benar kering, kemudian diblender dan disaring untuk memisahkan spora dari ampasnya. Pada tahap berikutnya (tahap pencampuran) spora yang telah halus dicampurkan ke bahan pembawa (carrier) yang  berbeda  yaitu  talk,  kaolin,  dan  clay  untuk mendapatkan  sembilan  formulasi  yang  merupakan kombinasi antara tiga spesies Trichoderma dengan tiga macam bahan pembawa.  Kesembilan formulasi kering tersebut  yang  kemudian  digunakan  dalam  pengujian antagonisme terhadap P. palmivora.
Pengujian formulasi kering jamur Trichoderma spp (T.harzianum, T.koningii, dan T.viride) dilakukan pada buah kakao di dalam laboratorium dan pada buah kakao  di  lapang.  Dosis  yang  digunakan  yaitu  2  g  l -1 (mengacu pada rekomendasi pada label Natural BVR). Pada  percobaan  di  laboratorium  sebanyak  30  buah kakao yang sehat dan segar dipetik dari lapang, Aplikasi perlakuan  dilakukan  dengan  cara  menyemprotkan suspensi formulasi kering Trichoderma secara merata ke permukaan buah kakao.  Setelah 3 hari, buah kakao diinokulasi dengan cara menempelkan potongan cakram (  0,8 cm) biakan jamur P. palmivora berumur 14 hari pada  bagian  tengah  permukaan  buah  kakao. Pengamatan dilakukan setiap hari sampai gejala penyakit muncul dan dilanjutkan sampai gejala terebut memenuhi buah kakao pada kontrol.  Percobaan pada skala lapang, secara  teknis  pelaksanaannya  sama  dengan  yang dilakukan di laboratorium. Hal yang membedakan adalah pada skala lapang buah kakao tetap dibiarkan di pohon.
Pengamatan  dilakukan  setiap  hari  terhadap munculnya gejala pertama dan pengamatan selanjutnya dilakukan  untuk  mengukur  perkembangan  diameter
gejala  penyakit  busuk  buah  kakao  yang  muncul. Pengukuran gejala pada buah dilakukan masing-masing sebanyak dua kali pada diameter vertikal dan horizontal buah kemudian dirata-ratakan.  Selanjutnya, intensitas penyakit  dihitung  berdasarkan diseased  area  yaitu persentase perbandingan antara luas bagian buah yang sakit (bergejala) dengan luasan total permukaan buah.

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Hasil pengamatan di laboratorium menunjukkan bahwa buah kakao yang dipetik dari lapang dan dibawa ke laboratorium untuk diiinokulasi secara buatan dengan inokulum jamur P. palmivora menghasilkan  kemunculan gejala awal dan perkembangan gejala yang bervariasi
satu sama  lain (Tabel 1). Perkembangan  gejala BBK yang berupa perubahan warna di sekitar potongan biakan jamur patogen juga mempunyai kecepatan yang berbeda- beda (ditunjukkan oleh masa inkubasi yang berbeda- beda). Keparahan penyakit BBK pada masing-masing perlakuan  dapat  dilihat  pada  Tabel  2.  Pada  Tabel  2 terlihat bahwa secara umum perlakuan semua formulasi Trichoderma secara nyata dapat menghambat keparahan penyakit BBK yang muncul. Pada hari pengamatan yang terakhir  yaitu  8HSI,  buah  pada  kontrol  sudah menunjukkan keparahan penyakit hampir seratus persen (99,33%)  sedangkan  buah  yang  diberi  perlakuan T. harzianum  dengan  jenis  bahan  pembawa  apapun (T1C2, T1C2, dan T1C3) mempunyai keparahan yang lebih rendah dari kontrol.  Selain itu, formulasi kering
Tabel 1. Masa inkubasi penyakit bubuk buah kakao di laboratorium
Perlakuan Masa inkubasi (hari) Kontrol 2,00 e T1C1 3,33 abcde T1C2 5,00 a T1C3 4,00 abc T2C1 4,33 ab T2C2 3,33 abcde T2C3 4,00 abc T3C1 4,00 abc T3C2 2,00 e T3C3 3,33 e
Keterangan: Nilai dalam kolom yang diikuti huruf yang sama, tidak berbeda nyata menurut uji BNT α = 0,05. (T1=T. harzianum ; T2= T. koningii ; T3= T. viride ; C1= talk ; C2= kaolin ; C3= tanah liat)
Tabel  2. Keparahan penyakit busuk buah kakao di laboratorium
Perlakuan Luas area gejala penyakit busuk buah kakao (%) pada 2 Hsi 3 Hsi 4 Hsi 7 Hsi 8 Hsi Kontrol 25,67 a 36,67 a 50,00 a 94,33 a 99,33 a T1C1 0,00 c 3,33 b 12,33 b 56,33 c 62,67 b T1C2 1,67 c 7,33 b 14,67 b 26,67 bc 34,00 c T1C3 2,00 c 16,00 b 36,67 ab 50,00 bc 60,00 b T2C1 8,33 b 15,00 b 21,67 b 55,00 bc 68,33 ab T2C2 3,33 bc 11,00 b 24,00 b 60,00 bc 68,33 ab T2C3 0,00 c 14,00 b 20,67 b 65,00 bc 71,67 ab T3C1 2,67 bc 8,67 b 18,33 b 48,33 bc 58,67 b T3C2 6,00 bc 9,00 b 17,33 b 71,67 ab 71,00 ab T3C3 3,33 bc 5,67 b 23,33 b 50,67 bc 53,33 b BNT 5.69 13.92 24.57 26.39 31.23
Keterangan : Nilai dalam kolom yang diikuti huruf yang sama, tidak berbeda nyata menurut uji BNT α = 0,05.
T.viride  dengan  bahan  pembawa  talk  dan  clay  juga menunjukkan hasil yang sama.
Pengujian formulasi kering Trichoderma spp. di lapang pada prinsipnya mengunakan metode yang sama pada  pengujian  di  laboratorium,  yang  membedakan adalah jika pada pengujian di lapang, buah kakao tetap dibiarkan di pohon.  Pada pengamatan di lapang, setiap perlakuan  memiliki  perbedaan  pada  masa  inkubasi, dimana  tiap  perlakuan  memiliki  masa  inkubasi  yang berbeda antara satu sama lain (Tabel 3). Selanjutnya dilakukan pengukuran tingkat keparahan penyakit yang dapat  dilihat  pada Tabel  4.  Dari  tabel  tersebut  dapat terlihat bahwa perlakuan tanpa aplikasi formulasi kering Trichoderma  (kontrol)  memiliki  rata-rata  persentase pertumbuhan  gejala  penyakit  yang  lebih  besar
dibandingkan buah kakao yang mendapatkan perlakuan. Dari data tersebut juga dapat terlihat bahwa antara satu perlakuan dengan perlakuan lainnya tidak selalu berbeda nyata dengan kontrol.
Dari  Tabel  1  dapat  diketahui  bahwa  formulasi T2C1  (T.  koningii  dengan  bahan  pembawa  talk) mempunyai masa inkubasi terlama dengan rata-rata 4,33 hari,  sedangkan  kontrol  dan  T3C2  (T.  viride  dengan bahan pembawa kaolin) mempunyai masa inkubasi paling cepat  (0,66  hari).  Hal  ini  mengindikasikan  bahwa formulasi T.  koningii dengan  bahan  pembawa  talk mempunyai  kemampuan  menghambat  perkembangan penyakit  BBK  yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan perlakuan lainnya. Dari hasil pengujian di laboratorium pada 8HSI tampak bahwa perlakuan berupa formulasi
Tabel  3. Masa inkubasi penyakit busuk buah kakao di lapangan
Perlakuan Masa inkubasi (hari) Kontrol 2,00 e T1C1 9,33 ab T1C2 9,67 a T1C3 6,67 abc T2C1 6,00 abcde T2C2 2,00 e T2C3 2,00 e T3C1 2,67 de T3C2 6,33 abcd T3C3 5,00 cde
Keterangan: Nilai dalam kolom yang diikuti huruf yang sama, tidak berbeda nyata menurut uji BNT α = 0,05. (T1=T. harzianum ; T2= T. koningii ; T3= T. viride ; C1= talk ; C2= kaolin ; C3= tanah liat).
Tabel 4. Persentase luasan gejala penyakit busuk buah kakao di lapang
Perlakuan Luas area gejala penyakit busuk buah kakao (%) pada 3 Hsi 5 Hsi 7Hsi 9 Hsi 11 Hsi 13 Hsi Kontrol 17,33 a 26,00 a 27,67 a 52,33 a 88,33 a 95,00 a T1C1 1,67 d 4,33 d 5,00 e 8,33 e 18,33 f 40,00 de T1C2 1,00 d 4,00 d 5,00 e 10,00 e 18,33 f 33,33 e T1C3 1,00 d 4,33 d 7,33 e 18,00 cde 53,33 bcd 87,00 ab T2C1 2,67 d 6,67 d 15,33 de 28,00 cd 46,67 bcde 63,33 abcde T2C2 7,67 bc 15,00 bcd 18,67 abcd 27,00cde 45,00 bcdef 66,00 abcd T2C3 8,67 b 18,67 b 25,00 ab 46,67ab 63,33 ab 95,00 a T3C1 4,67 cd 16,67 bc 20,33 abc 28,33 c 55,00 bc 78,33 abc T3C2 3,33 d 9,33 d 11,00 de 14,33 cde 33,33 cdef 26,67 e T3C3 3,67 cd 9,00 d 11,00 de 20,00 cde 33,33 cdef 39,00 e BNT 3,79 7,18 9,14 16,95 25,91 34,77
Keterangan : Nilai dalam kolom yang diikuti huruf yang sama, tidak berbeda nyata menurut uji BNT α = 0,05.
kering T.harzianum  dengan  bahan  pembawa  kaolin (T1C2)  menunjukkan  hasil  yang  paling  baik  yaitu keparahannya  paling  rendah  (34%).  Hasil ini sejalan dengan  laporan  Sankar  &  Jeyarajan  (1996)  bahwa penambahan kaolin dalam formulasi Trichoderma dapat membuatnya bertahan 3 – 4 bulan.
Pada percobaan di lapang, rata-rata masa inkubasi penyakit  BBK  lebih  singkat  dibandingkan  pada percobaan di laboratorium.  Hal ini diduga disebabkan oleh  beberapa  faktor  lingkungan  yaitu  suhu  dan kelembaban,  serta    keberadaan  inokulum  patogen P.palmivora di lapang.  Pada percobaan di lapang ini, formulasi  dengan  perlakuan  T1C3  (T.  harzianum dengan  bahan  pembawa  tanah  liat)  mempunyai  rata- rata masa inkubasi paling lama, yaitu 6,67 hari. Pada perlakuan T . harzianum dengan bahan pembawa talk (T1C1), T . harzianum dengan bahan pembawa kaolin (T1C2), T.  viride  dengan  bahan  pembawa  kaolin (T3C2),  dan T.  viride  dengan  bahan  pembawa  tanah liat (T3C3) efektif menghambat pertumbuhan jamur P. palmivora pada buah kakao, hal ini terlihat dari kecilnya diameter gejala penyakit busuk buah sampai dengan hari ke-13 setelah inokulasi.  Maka dapat dikatakan bahwa ketiga perlakuan tersebut adalah yang paling baik dalam menghambat perkembangan jamur patogen dilapang.
Data  yang  didapat  secara  keseluruhan  juga menunjukkan bahwa seluruh perlakuan kecuali perlakuan T. koningii dengan bahan pembawa tanah liat (T2C3), memiliki  kemampuan  menghambat  perkembangan penyakit busuk buah, walaupun dalam persentase yang berbeda  antar  perlakuan.  Pada  perlakuan  yang mengandung T.koningii  (T2)  terlihat  kemampuan penghambatan tidak maksimal, bahkan pada perlakuan T2C3 sama sekali tidak menghambat.  Pada perlakuan T2C3, selain karena faktor T.koningii yang diduga tidak maksimal, juga diduga disebabkan adanya faktor bahan pencampur yaitu Clay (C3). Hal  ini dapat terlihat bahwa 2 dari 3 perlakuan yang menggunakan bahan pencampur C3,  hasilnya  kurang  maksimal  dalam  penghambatan penyakit  busuk  buah  kakao.  Clay  dilaporkan  kurang memberikan  efek  yang  positif  terhadap  formulasi Trichoderma.  Sankar & Jeyarajan (1996) melaporkan bahwa  bahan  tambahan  berupa  talk  dan  kaolin  pada formulasi Trichoderma    dapat  bertahan  selama  3  -  4
bulan,  tetapi  viabilitas Trichoderma  dalam  talk  akan menurun 50%  setelah masa penyimpanan selama 120 hari.

## KESIMPULAN
Formulasi  kering T.harzianum dan T.viride dengan bahan pembawa kaolin memiliki jumlah spora yang  paling  tinggi.  Hasil  percobaan  di  laboratorium menunjukkan  bahwa  pada  8  hari  setelah  inokulasi, formulasi kering T.harzianum dengan bahan pembawa kaolin  paling  baik  dalam  menekan  keparahan penyakit(34%), Hasil percobaan di lapang menunjukkan bahwa  formulasi T.viridae  dengan  bahan  pembawa kaolin paling efektif dalam menekan keparahan penyakit BBK (26%).

## DAFTAR  PUSTAKA

## Bappebti.  2011. Analisis  Perkembangan  Harga;
Harga  Kakao  Kembali  Turun.  Badan Pengawas  Perdagangan  Berjangka  Komoditi. Kementrian Perdagangan Republik Indonesia.
Bhattacharyya,  S.  K.  &  Basu,  M,  K.  1982.  Kaolin Powder  as  a  Fungal  Carrier. Applied  and Environment Microbiology. 44 (3)  : 751-753 pp.
Darmono,  T.W.,  Jamil,  I.  &  Santosa,  D.A.  2006 b . Pengembangan  Penanda  Molekuler  Untuk Deteksi Phytophthora  palmivora pada Tanaman  Kakao.
Sankar, P. J. R. 1996.  Biological control of sesamum root rot by seed treatment with Trichoderma spp. and  Bacillus  subtilis. Indian  Journal  of Mycology  and  Plant  Pathology  26:  147-53.
Tindaon,  H.,  2008. Pengaruh  Jamur  Antagonis Trichoderma  harzianum  danPupuk  Organik Untuk  Mengendalikan  Patogen  Tular  Tanah Sclerotium    roflsii  Sacc.  Pada  Tanaman Kedelai (Glycine max L.) di Rumah Kasa. http:/ /repository.usu.ac.id.pdf Akses 10 Februari 2013