Chempublish Journal, Volume 3 No 2 (2018), 40-45
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sembung Rambat ( Mikania micrantha Kunth)
Santi Perawati * , Lili Andriani, Putri Pratiwi Stikes Harapan Ibu Jambi, Jl. Tarmizi Kadir No.71 Pakuan Baru, Jambi Program Studi Farmasi, Stikes Harapan Ibu Jambi e-mail: * santiperawati@gmail.com
Diterima: 13 September 2018 / Disetujui: 6 Desember 2018 / Dipublikasi online: 15 Desember 2018 DOI: 10.22437/chp.v3i2.5554

## ABSTRACT
Mikania  micrantha  leaves  are  traditionally  used  as  drugs  wound.  It  is  therefore  suspected that  the  plant  is  potentially  as  antibacterial.  The  purpose  of  this  research  is  to  know  the potential leaves of Mikania micrantha as antibacterial Staphylococcus aureus. Powder leaves of Mikania micrantha in maceration with ethanol 70%, followed by a test of phytochemicals. Then  do  antibacterial  activity  with  disc  method  against  the  bacteria  Staphylococcus  aureus with concentration variations of 5%, 15% and 25%. From maceration, it got rendemen of 9.37% yield. Test positive phytochemicals contain alkaloids, flavonoids, saponins, polyphenols, and steroids.  Testing  of  antibacterial  activity  of  Staphylococcus  aureus  have  strong  inhibitory power  category  at  all  concentrations.  Mikania  micrantha  leaves  extract  has  higher antibacterial activity against Staphylococcus aureus bacteria.
Keywords: Mikania micrantha Kunth; phytochemicals; antibacterial; Staphylococcus aureus

## ABSTRAK
Daun  sembung  rambat  secara  tradisional  digunakan  sebagai  obat  luka.  Oleh  karena  itu diduga tumbuhan tersebut berpotensi sebagai antibakteri. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui  potensi  daun  sembung  rambat  sebagai  antibakteri  Staphylococcus  aureus. Serbuk  daun  sembung  rambat  dimaserasi  dengan  etanol  70%,  dilanjutkan  dengan  uji fitokimia.  Kemudian  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  cakram terhadap  bakteri  Staphylococcus  aureus    variasi  konsentrasi  5%,  15%,  dan  25%.  Dari  hasil maserasi  didapatkan  rendemen  sebesar  9,37%.  Uji  fitokimia  positif  mengandung  alkaloid, flavonoid,  polifenol,  saponin,  dan  steroid.  Uji  aktivitas  antibakteri  Staphylococcus  aureus memiliki  kategori  daya  hambat  kuat  pada  semua  konsentrasi.  Ekstrak  daun  Sembung Rambat memiliki aktivitas antibakteri yang kuat terhadap bakteri Staphylococcus aureus
Kata Kunci: Mikania micrantha Kunth; uji fitokimia; antibakteri; Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Mikania micrantha Kunth atau dikenal dengan nama Sembung Rambat, merupakan salah  satu  spesies  dari  famili  Asteraceae,  dimana  tumbuhan  ini  telah  digunakan  sebagai obat  tradisional,  seperti  mengobati  gigitan  serangga  atau  sengatan  kalajengking,  untuk mengobati  penyait  kulit  seperti  ruam  dan  gatal-gatal  kulit  (Li  et  al,  2013),  juga  dapat mengobati diabetes, stroke, hiperkolesterolemia, dan hipertensi dengan mengkonsumsinya dalam  bentuk  jus  (dibuat  dengan  metode  rebusan).  Selain  itu,  daunnya  dapat  digunakan untuk  mengobati  sakit  perut,  sakit  kuning,  ditempatkan  di  bak  air  hangat  untuk  wanita setelah persalinan, demam, rematik, dan penyakit pernafasan (Chetia, Upadhyaya, & Bora, 2014).  Tumbuhan  ini  juga  memiliki  khasiat  diantaranya  sebagai  antitumor,  sitotoksik, analgesik, antiinflamasi, antiproliferatif, dan phytotoxic (Lallianchhunga et al, 2016).
Daun  sembung  rambat  juga  mengandung  zat  aktif  dalam  bentuk    metabolit sekunder  diantaranya  yaitu  saponin,  flavonoid,  steroid,  tannin,  dan  terpenoid.  Senyawa metabolit  sekunder  yang  berperan  sebagai  antibakteri  yaitu  flavonoid  dan  tannin (Polakitan et  al .,  2017;  Haisya et  al .,  2013).  Selain  itu,  daun  sembung  rambat  memiliki kandungan  volatil  antara  lain  α-pinene,  camphene,  β-pinene,  α-felandrene,  β-ocimene, linalool, geranyl acetate, terpenol, geraniol, dan thymol (Perez-amador et al, 2010).
Penelitian terkait bioaktivitas daun Sembung Rambat sebagai antibakteri masih jarang dilaporkan  (Matawali et al, 2016). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi daun Sembung  Rambat  sebagai  antibakteri.  Selain  itu  juga  untuk  menginvestigasi  metabolit sekunder  yang  ada  pada  sampel  melalui  uji  skrining  fitokimia.  Data  ini  diharapkan nantinya akan bermanfaat untuk penelitian lanjutan terkait identifikasi, dan karakterisasi terhadap metabolit sekunder yang diduga berperan dalam aktivitas antibakteri.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  yaitu  simplisia  daun  sembung  rambat  yang  diambil  dari Kelurahan  Parit  Culum  II  Kecamatan  Muara  Sabak  Barat  Provinsi  Jambi,  etanol  70% (Merck), AlCl 3 5% (Merck), H 2 SO 4 10% (Merck), plat kromatografi KLT, silika gel (silika G 60 kode 1.07734), kromatografi kolom (silika G 60 kode 1.07731), dan preparatif (silika GF254 1.07730),  media nutrient  agar (NA),  media nutrient  broth (NB),  zat  kimia  lain  yang diperlukan untuk skrining.
Alat yang digunakan yaitu maserator, timbangan analitik, seperangkat vacum rotary evaporator, Lampu UV 254 nm dan 366 nm, botol kaca gelap, vial, seperangkat alat KLT, autoklaf,  incubator/oven,  plastik  wrap,  mikropipet,  aluminium  voil  dan  alat-alat  gelas yang umum dipakai.

## Prosedur kerja

## Ekstraksi
Identifikasi  tumbuhan  Sembung  Rambat  dilakukan  di  Laboratorium  Identifikasi dan  Determinasi  Biota,  Sekolah  Ilmu  dan  Teknologi  Hayati  (SITH),  Institut  Teknologi Bandung. Sebanyak  10  kg  daun  Sembung  Rambat  segar  dicuci  dengan  air  dan dikeringanginkan  sampai  beratnya  konstan.  Sampel  yang  sudah  kering    dihaluskan dengan  blender  hingga  menjadi  serbuk  daun  Sembung  Rambat.  Serbuk  daun  sembung rambat  ditimbang  sebanyak  2  kg,  lalu  direndam  dengan  etanol  70%.  Proses  maserasi dilakukan  selama  3x24  jam  hingga  diperoleh  filtrat  bening.  Semua  filtrat  yang  dihasilkan dicampurkan,  kemudian  dipekatkan  dengan  menggunakan vacum  rotary  evaporator pada suhu 50°C sampai didapat ekstrak kental. (Polakitan et al., 2017)

## Penapisan Fitokimia Ekstrak
Penapisan fitokimia ekstrak daun Sembung Rambat meliputi pemeriksaan Alkaloid, Flavonoid,  Polifenol,  Tanin,  Saponin,  Steroid,  Terpenoid,  Monoterpenoid  dan Seskuiterpenoid (Harborne, 1987; Dewi et al, 2013; Dapas et al, 2014; Jannah et al, 2017)

## Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Daun Sembung Rambat
Ekstrak etanol daun sembung rambat dilakukan uji KLT untuk memonitor senyawa yang  terkandung  didalamnya.  Dimana  dalam  proses  ini  diuji  berbagai  campuran pengembang untuk mencari campuran pengembang yang baik.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  cakram  dilakukan  terhadap ekstrak  etanol . Bakteri Staphylococcus  aureus diambil  dari  biakan  di  Laboratorium Mikrobiologi  STIKES  Harapan  Ibu  Jambi.  Adapun  langkah-langkah  uji  aktivitas  tersebut adalah (1) Sterilisasi alat menggunakan oven pada suhu 170°C selama ± 2 jam, sedangkan ose  dan  pinset  disterilkan  dengan  cara  pemijaran  dan  didinginkan  sebelum  digunakan. Media  tumbuh  bakteri  disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu  121°C  selama  15  menit. (Aswarita, 2013); (2) Pembuatan Media Nutrient Agar (NA) dan Nutrient Broth (NB) sebanyak 5  g  kedalam  250  ml  aquadest  dan  disterilkan  menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121°C selama 15 menit. Media untuk peremajaan diletakkan miring pada suhu ruang selama 24 jam. Media cair ( Nutrient Broth ) dibuat sebanyak 0,24 g Nutrient Broth (NB) kedalam 30 mL aquadest sebagai media tumbuh bakteri dan disterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 121°C  selama  15  menit.  (Maharani,  Sukandar,  &  Hermanto,  2016);  (3)  Penyiapan  Kultur Murni:  Biakan  murni  bakteri  diremajakan  pada  media  padat  agar  miring  dengan  cara menggoreskan  jarum  ose  yang  mengandung  bakteri  S.  aureus  secara  aseptis  dan diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37°  C  dalam  inkubator.  (Maharani  et  al.,  2016);  (4) Pembuatan Suspensi Bakteri Uji: Bakteri diambil dengan ose lalu disuspensikan dengan 30 mL media NB ( Nutrient Broth ) yang sudah steril, lalu dihomogenkan dengan menggunakan rotary  shaker.  (Zakiyah  et  al,  2015).  Suspensi  bakteri  selanjutnya  ditentukan konsentrasinya dengan menggunakan spektro dengan panjang gelombang 625 nm, dengan kerapatan  bakteri  sebesar  1-2  x  10 8 CFU/ml  dan  kekeruhan  bakteri  absorbansi  sebesar 0,08  –  0,1.  (Aswarita,  2013;Polakitan  et  al.,  2017);  (5)  Penyiapan  Media  Tumbuh  Bakteri: Media  padat  (NA)  dicairkan  dan  didinginkan  (≤45°C).  Satu  mL  larutan  biakan  aktif dimasukkan  kedalam  cawan  petri  steril.  Selanjutnya  dituangkan  media  yang  masih  cair kedalam cawan petri steril dan dihomogenkan dengan memutar cawan petri mengikuti pola angka  delapan.  Lalu  didiamkan  hingga  memadat.  (Mewari  &  Kumar,  2008);  (6)  Uji  Daya Hambat  Bakteri:  Sampel  uji  yang  sudah  dipekatkan  ditimbang  dan  dilarutkan  dengan menggunakan  pelarut  organik.  Selanjutnya  sampel  diteteskan  kekertas  cakram  steril sebanyak  10  µL  dan  didiamkan  selama  ±15  menit.  Uji  daya  hambat  dilakukan  dengan menggunakan  metode  Kirby-Bauer  atau  metode  difusi  cakram.  Kertas  cakram  yang  telah
Chempublish Journal, Volume 3 No 2 (2018), 40-45
ditetesi  ekstrak  diletakkan  diatas  pemukaan  agar  yang  berisi  bakteri  uji.  Selanjutnya, diinkubasi  pada  suhu  37°  C  selama  24  jam.  Lalu  diukur  zona  hambatnya  dengan menggunakan jangka sorong. (Zakiyah et al., 2015)

## PEMBAHASAN
Identifikasi  tumbuhan  dilakukan  untuk  menentukan  jenis  tumbuhan  yang digunakan.  Hasil  identifikasi  menunjukkan  bahwa  tumbuhan  yang  diperoleh  merupakan Mikania micrantha Kunth yang berasal dari suku Asteraceae. Daun Sembung rambat dicuci bersih  dengan  air  yang  mengalir  guna  menghilangkan  kotoran  yang  melekat  pada  daun. Daun  dikeringanginkan  untuk  mengurangi  kadar  air  yang  ada  pada  daun.  Pengecilan ukuran dengan blender bertujuan untuk memperbesar luas permukaan simplisia, sehingga lebih mudah dalam mengekstrak metabolit sekunder dari dalam daun (Wati et al, 2017).
Pembuatan  ekstrak  dilakukan  dengan  metode  maserasi  atau  perendaman  dengan menggunakan  pelarut  organik  dengan  tujuan  agar  pelarut  yang  digunakan  dalam  proses maserasi  akan  masuk  ke  dalam  sel  tanaman  melewati  dinding  sel  karena  adanya perbedaan  konsentrasi  antara  larutan  di  dalam  dengan  di  luar  sel  melalui  proses  difusi yang menyebabkan terjadinya pemecahan dinding sel dan membran sel sehingga senyawa metabolit sekunder yang terdapat di dalam sel akan terlarut dalam pelarut organik (Rahmi et al., 2016).
Dari  proses  maserasi  simplisia  daun  Sembung  Rambat  didapatkan  rendemen sebesar  25,14%.  Serbuk  simplisia  diekstraksi  dengan  menggunakan  etanol  70%.  Dari penapisan  fitokimia,  metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  Sembung Rambat dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Sembung Rambat
Golongan Senyawa Ekstrak Etanol Alkaloid (Mayer) Alkaloid (Dragendorff) Flavonoid Polifenol Tanin Saponin Steroid Terpenoid Monoterpen dan sesquiterpen
+ + + + - + + - -
Keterangan: (+) : Terdeteksi (-)  : Tidak terdeteksi
Ekstrak simplisia daun sembung rambat dilakukan KLT dengan  pelarut n-heksan: etil  asetat  (1:1).  Pemantauan  pola  bercak  dilakukan  di  bawah  sinar  UV  254  nm  dan  366 nm dengan penampak bercak H 2 SO 4 10% dan AlCl 3 5%. Cairan penampak H 2 SO 4 ini dipilih karena diketahui bahwa larutan ini merupakan penampak bercak yang umum digunakan untuk melihat senyawa metabolit primer ataupun senyawa metabolit sekunder. Sedangkan untuk  penampak  bercak  AlCl 3 5%  digunakan  karena  larutan  ini  merupakan  penampak
Chempublish Journal, Volume 3 No 2 (2018), 40-45
bercak  untuk  melihat  senyawa  metabolit  sekunder  golongan  flavonoid.  Dari  hasil  KLT dilihat  dibawah  sinar  UV  254  nm  diperoleh  3  bercak  dengan  nilai  Rf  sebesar  0.175,  0.4, dan  0.575.  Dilihat  di  bawah  sinar  UV  366  nm  terlihat  4  bercak  dengan  nilai  Rf  sebesar 0.075, 0.2, 0.35, dan 0.575. (Gambar 1).
Gambar 1. Hasil KLT ekstrak daun Sembung Rambat Keterangan
Fase Diam : Silika Gel 60 F 254 Fase Gerak : N-heksan : Etil Asetat (1:1) Deteksi : 1a.Sinar UV 254 nm (Tanpa penampak bercak) 1b. Sinar UV 254 nm (Penampak H 2 SO 4 10%)
1c. Sinar UV 254 nm (Penampak AlCl 3 5%) )
2a. Sinar UV 366 nm (Tanpa penampak bercak) 2b. Sinar UV 366 nm (Penampak  H 2 SO 4 10%) 2c. Sinar UV 366 nm (Penampak AlCl 3 5%)
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  Kirby- bauer  atau  metode  difusi  cakram.  Berdasarkan  hasil  pengukuran  zona  bening  yang terbentuk  pada  uji  daya  hambat,  diketahui  bahwa  ekstrak  daun  sembung  rambat memberikan daya hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus .
Tabel 2.  Kategori kekuatan zat antibakteri berdasarkan diameter zona
hambat (Saridewi et al, 2018) Diameter  Daya Hambat Daya Hambat >20 mm Sangat kuat 11-20 mm Kuat 6-10 mm Sedang <5 mm Lemah
Bakteri Staphylococcus  aureus pada  ekstrak  dengan    konsentrasi  5%  telah memberikan  daya  hambat  yang  kuat  dimana  zona  hambat  yang  terbentuk  dari  ekstrak 5%, 10%, dan 15% secara berurutan memberikan daya hambat sebesar 16.03 mm, 12.082 mm, dan 16.32 mm (Tabel 2).

## KESIMPULAN
Ekstrak  daun  Sembung  Rambat  memiliki  daya  hambat  antibakteri  yang  kuat terhadap bakteri Staphylococcus aureus .

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  diucapkan  kepada  Kementrian  Riset,  Teknologi  dan  Perguruan  Tinggi  atas dana hibah PDP No. kontrak 042/KONTRAK-PENELITIAN/K10/KM/2017.

## DAFTAR PUSTAKA
Aswarita, R. 2013. Interaksi Ekstrak Daun Lidah buaya ( Aloe vera L.) dan Daun Jambu Biji ( Psidium  guajava L.)  Terhadap  Daya  Hambat Escherichia  coli Secara  In  Vitro. EduBio Tropika , 1 (2), 115–120.
Chetia,  J.,  Upadhyaya,  S.,  &  Bora,  D.  K.  2014.  Research  Article  Screening  of Phytochemicals, Antioxidant and Antimicrobial Activity of Some Tea Garden Weeds of Tinsukia, Assam., 26 (33), 193–196.
Dapas, C. C., Koleangan, H. S. J., & Sangi, M. 2014. Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dan  Uji  Toksisitas  Ekstrak  Batang  Bawang  Laut  ( Proiphys  amboinensis (  L  .), 3 (2), 144–148.
Dewi,  Astuti,  &  Warditiani.  2013.  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  95  %  Kulit  Buah Manggis ( Garcinia mangostana L .).
Haisya,  N.  B.  S.,  Latifah,  A.  R.,  Suratno,  R.  P.,  Sa’diah,  S.,  &  Afiff,  U.  2013.  Sembung Rambat  ( Mikania  micrantha H  .  B  .  K  .)  as  Natural  Alternative  Antibacterial  and  Its Study in Cattle Mastitis in Indonesia, 3–5.
Harborne  J.B.  1987. Metode  Fitokimia:  Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan, Penerjemah:Kosasih, P. dan Iwang Soediro . bandung. Jannah, R., Husni, M. A., & Nursanty,  R. 2017. Inhibition  Test of Methanol  Extract From Soursop Leaf ( Annona muricata Linn.) Against Streptococcus mutans BACTERIA, 17 (1), 11–12.
Lallianchhunga, M. ., Ali, M. A., Lalchhandama, C., Lalmuanthanga, C., & Devi, L. I. 2016. Antioxidant Activity of Methanolic Extract of Mikania Micrantha Leaves. World Journal of Pharmaceutical Research , 5 (4), 879–886.
Li, Y., Li, J., Li, Y., Wang, X., & Cao, A. 2013. Antimicrobial Constituents of the Leaves of Mikania, 8 (10). Maharani, T., Sukandar, D., & Hermanto, S. 2016. Karakterisasi Senyawa Hasil Isolasi dari Ekstrak  Etil  Asetat  Daun  Namnam  (Cynometra  Cauliflora  L.)  yang  Memiliki  Aktivitas Antibakteri, 2 (1), 55–62.
Matawali,  A.,  Chin,  L.  P.,  &  Gansau,  J.  A.  2016.  Antibacterial  and  Phytochemical Investigations  of Mikania  micrantha H.B.K.  (Asteraceae)  From  Sabah,  Malaysia, Transactions on Science and Technology . 3(1-2), 244 - 250.
Mewari, N., & Kumar, P. 2008. Antimicrobial activity of extracts of Marchantia polymorpha . Pharmaceutical Biology , 46 (10–11), 819–822.
Perez-amador,  Ocotero,  V.  M.,  Balcazar,  R.  I.,  &  Jimenez,  F.  G.  2010.  Phytochemical  and pharmacological studies on Mikania micrantha H . B . K . ( Asteraceae ), 77–80. Polakitan,  I.  R.,  Leman,  M.  A.,  &  Fatimawali.  2017.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun Sembung  Rambat  ( Mikania  micrantha )  Terhadap  Pertumbuhan  Streptococcus mutans. PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT Vol. 6 No. 1 , 6 (1), 1–8.
Rahmi, Herawati, N., & Dini, I. 2016. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak  Etil  Asetat  Kulit  Batang  Belimbing  Wuluh  ( Averrhoa  bilimbi Linn  ). Jurnal Chemica , 17 (1), 98–107. Saridewi, M. N., Bahar, M., & Anisah. 2018. Uji Efektivitas Antibakteri Perasan Jus Buah Nanas  ( Ananas  comosus )  Terhadap  Pertumbuhan  Isolat  Bakteri  Plak  Gigi  di Puskesmas Kecamatan Tanah Abang Periode April 2017, 5 (2), 104–110.
Wati, M., Erwin, &  Tarigan, D. 2017.  Isolasi dan Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder dari  Fraksi  Etil  Asetat  Pada  Daun  Berwarna  Merah  Pucuk  Merah  ( Syzygium Myrtifilium Walp. ). Kimia FMIPA Unmul Isolasi , 14 (2), 100–107.
Zakiyah,  A.,  Radiastuti,  N.,  &  Sumarlin,  L.  O.  2015.  Aktivitas  Antibakteri  Kapang  Endofit Dari Tanaman Kina ( Cinchona calisaya Wedd .). Jurnal Biologi , 8 , 51–58.