Efek suhu penyeduhan daun tin ( Ficus carica ) segar dan kering terhadap kadar fenolik total
Effect of brewing temperature of fresh and dried fig ( Ficus carica ) leaf on total phenolic content
Oktavina Kartika Putri * , Wahyu Wuryandari
Akademi Farmasi Putra Indonesia Malang Jl. Barito No.5 Malang 65123 Jawa Timur

## ABSTRAK
Manfaat daun tin sebagai antioksidan menarik perhatian karena tanaman tin terkenal sebagai sumber senyawa  fenolik  dengan  kapasitas  antioksidan  yang  tinggi.  Pemanfaatan  daun  tin  seringkali melibatkan proses pemanasan (direbus atau diseduh) sehingga mempengaruhi kandungan senyawa fenolik  karena  sifatnya  tidak  tahan  panas.  Dekomposisi  senyawa  fenolik  meningkat  seiring  dengan meningkatnya  suhu.  Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  efek  suhu  penyeduhan  daun  tin  segar dan kering terhadap kadar fenolik total. Suhu air yang digunakan untuk menyeduh divariasikan yaitu 60 o C, 70 o C,  dan  80 o C.  Penentuan  kadar  fenolik  total  dilakukan  dengan  Metode  Folin-Ciocalteu  dengan larutan  standar  asam  galat.  Kadar  fenolik  total  seduhan  daun  tin  segar  dengan  suhu  penyeduhan 60 o C,  70 o C,  dan  80 o C  secara  berturut-turut  30.089±3.373  μgGAE/g,  199.577±1.636  μgGAE/g,  dan 126.181±6.563 μgGAE/g. Kadar fenolik total seduhan daun tin kering dengan suhu penyeduhan 60 o C, 70 o C,  dan  80 o C  secara  berturut-turut  105.996±8.976  μgGAE/g,  93.588±5.629  μgGAE/g,  dan 84.474±2.615 μgGAE/g. Berdasarkan uji Two Way Anova dapat disimpulkan bahwa suhu penyeduhan dan  penyiapan  simplisia  daun  tin  (segar  dan  kering)  mempengaruhi  kadar  fenolik  total  secara signifikan.  Seduhan  daun  tin  dengan  kadar  fenolik  tertinggi  bernilai  199,577  μgGAE/mg  didapatkan dari penyeduhan daun tin segar dengan suhu 70 o C.
Kata Kunci : suhu, penyeduhan, daun tin segar, daun tin kering, kadar fenolik total.

## ABSTRACT
Fig  leaf  as  an  antioxidant  attracts  attention  because  the  fig  plants  are  well  known  as  a  source  of phenolic compounds  with  a  high  antioxidant  capacity.  The use  of  fig  leaf  often  involves the  heating process (boiled or brewed), so it affects the phenolic content due to the non-heat resistant properties. The  phenolic  decomposition  increases  with  temperature.  This  study  aims  to  determine  the  effect  of brewing temperature of fresh and dried fig leaf on total phenolic content. The temperature of the water used for brewing was varied from 60 o C, 70 o C, and 80 o C. The total phenolic content determination was performed  by  the  Folin-Ciocalteu  method  with  the  standard  gallic  acid  solution.  The  total  phenolic contents  of  fresh  fig  leaf  brew  with  the  brewing  temperatures  of  60 o C,  70 o C,  and  80 o C  are 30.089±3.373 μgGAE/g, 199.577±1.636 μgGAE/g, and 126.181±6.563 μgGAE/g. The total phenolic contents  of  dried  fig  leaf  brew  with  the  brewing  temperatures  of  60 o C,  70 o C,  and  80 o C  are 105.996±8.976  μgGAE/g,  93.588±5.629  μgGAE/g,  and  84.474±2.615  μgGAE/g.  Based  on  the  Two Way Anova test, it can be concluded that the brewing temperature and simplicia preparation of fig leaf (fresh  and  dried)  significantly  affect  the  total  phenolic  content.  The  fig  leaf  brew  with  the  highest phenolic content is 199.577 µgGAE/mg obtained from brewing the fresh fig leaf at 70 o C.
Keywords : temperature, brewing, fresh fig leaf, dried fig leaf, total phenolic content.

## PENDAHULUAN
Tanaman  tin  atau  biasa  disebut dengan  tanaman  ara  ( Ficus  carica )  memiliki beragam  manfaat  bagi  kesehatan  antara  lain sebagai antikanker, antibakteri, dapat mengatasi  hipolipidemik,  dapat  menurunkan tekanan darah tinggi, dan dapat meningkatkan kepadatan tulang (Imran et al ., 2011). Manfaat lain  tanaman  tin  yaitu  sebagai  antipiretik, antijamur, anti-HSV, antispasmodik,
antimutagenik,  anthelmintik,  hepatoprotektor, dan  dapat  mengatasi  hipoglikemia  (Patil  and Patil,  2011).  Antituberkulosis,  antiiritasi, antinematoda, antiplatelet (Mawa et al., 2013), antioksidan  (Ahmad et  al .,  2013),  dan antiinflamasi (Eteraf-Oskouei et al. , 2015) juga termasuk dalam berbagai manfaat tanaman tin. Di  antara  manfaat-manfaat  tersebut,  manfaat sebagai  antioksidan  paling  menarik  perhatian karena  tanaman  tin  terkenal  sebagai  sumber senyawa fenolik dengan kapasitas antioksidan yang  tinggi  sehingga  berpotensi  menangkal beragam penyakit (Solomon et al., 2006 dalam Wahyuni and Hertiani, 2016).
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  oleh  Trifunschi  et  al.,  (2015)  kadar fenolik total ekstrak etanol 70% daun tin lebih tinggi dibandingkan dengan buah tin. Hal inilah yang mendorong semakin maraknya pemanfaatan daun tin di kalangan masyarakat. Beberapa industri juga telah memproduksi dan memasarkan  daun  tin  kering  yang  dikemas dalam bentuk teh celup. Pemanfaatan daun tin yang seringkali melibatkan proses pemanasan (direbus  atau  diseduh)  akan  mempengaruhi kandungan  senyawa  fenolik  karena  senyawa tersebut  tidak  tahan  panas.  Dekomposisi senyawa  fenolik  meningkat  seiring  dengan meningkatnya  suhu  (Cheng  et  al.,  2014). Sayangnya,  hingga  saat  ini  belum  ada penelitian  tentang  efek  suhu  penyeduhan terhadap  kadar  fenolik  total  seduhan  daun  tin yang  juga  pasti  akan  mempengaruhi  aktivitas antioksidannya.
Penelitian  ini  untuk  mengetahui  efek  suhu penyeduhan  daun  tin  segar  dan  kering
terhadap  kadar  fenolik  total.  Suhu  air  yang digunakan  untuk  menyeduh  divariasikan  yaitu 60 o C,  70 o C,  dan  80 o C.  Tujuan  penggunaan daun  tin  segar  dan  kering  adalah  untuk membandingkan kadar fenolik totalnya karena menurut  (Kosińska  and  Andlauer,  2014),  ” The more  processed  the  tea,  the  lower  its antioxidant capacity ”. Sedangkan kadar fenolik total  yang  tinggi  berkontribusi  pada  tingginya kapasitas antioksidan (Leng et al., 2017).

## METODOLOGI Alat dan bahan
Alat  utama  yang  digunakan  untuk penentuan  kadar  fenolik  total  adalah spektrofotometer  UV-Vis  (Hitachi  U-2900). Sampel  daun  tin  diperoleh  dari  Blimbing, Lowokwaru, Malang dan telah diuji keotentikannya  di  Materia  Medica  Batu,  Jawa Timur dengan nomor determinasi 074/253A/102.7/2018.  Bahan-bahan  yang digunakan  antara  lain  reagen  Folin-Ciocalteu, Na 2 CO 3 7,5%,  asam  galat,  metanol,  akuades, serbuk Mg, FeCl 3 10%, kloroform, asam asetat anhidrat, dan H 2 SO 4 pekat.

## Penyiapan daun tin segar dan kering
Daun  tin  segar  dicuci  kemudian dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan. Setelah  itu,  daun  tin  dipotong  dengan  lebar sekitar  2-3  mm.  Masing-masing  sebanyak  ± 6,25  gram  daun  tin  yang  telah  dipotong disiapkan dalam 3 beaker glass untuk diseduh. Masing-masing sebanyak ± 6,25 gram daun tin segar  yang  telah  dipotong  dimasukkan  ke dalam  3  cawan  penguapan.  Ketiganya dikeringkan  dengan  suhu  25-30 o C  dengan oven  hingga  berbobot  tetap  kemudian dipindahkan  ke  dalam  3  gelas  kimia  untuk diseduh.

## Penyeduhan daun tin
Akuades dididihkan, kemudian suhunya  diturunkan  hingga  mencapai  60 o C, 70 o C, dan 80 o C. Setelah mencapai suhu yang diinginkan, akuades digunakan untuk
menyeduh  daun  tin  segar  dan  kering  dalam gelas  kimia  kemudian  ditutup.  Seduhan dibiarkan  tertutup  hingga  mencapai  suhu ruangan  kemudian  disaring.  Volume  akuades yang  digunakan  untuk  menyeduh  masing- masing sebanyak 100 mL.

## Penentuan kadar fenolik total
Penentuan  kadar  fenolik  total dilakukan  dengan  Metode  Folin-Ciocalteu (Baba and Malik, 2015) dengan larutan standar asam galat. Secara singkat, seduhan daun tin ditambah  dengan  0,5  mL  metanol,  2,5  mL akuades, dan 2,5 mL pereaksi Folin-Ciocalteu 50%  kemudian  didiamkan  selama  5  menit. Setelah  itu,  ke  dalamnya  ditambahkan  2  mL larutan Na 2 CO 3 7,5% lalu diinkubasi selama 15 menit  pada  suhu  45 o C.  Setelah  diinkubasi, absorbasinya diukur pada panjang gelombang maksimum 765 nm.

## Analisis data
Data  yang  didapatkan  dianalisis  dengan uji Two Way Anova untuk mengetahui:
a. ada  atau  tidaknya  pengaruh  suhu penyeduhan terhadap kadar fenolik total,
b. ada  atau  tidaknya  pengaruh  penyiapan simplisia  (segar  dan  kering)  terhadap kadar fenolik total,
c. ada  atau  tidaknya  interaksi  keduanya terhadap kadar fenolik total.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Penyiapan daun tin segar dan kering
Berat  lengkap  daun  tin  segar  dan kering  yang  diseduh  terdapat  pada  Tabel  1. Berat daun tin segar yang digunakan adalah ± 6,25  gram  sedangkan  berat  daun  tin  kering adalah  ±  1,52  gram.  Daun  tin  kering  tersebut diperoleh  dari  pengeringan  daun  tin  segar dengan berat yang sama, yaitu ± 6,25 gram. Tabel 1. Berat daun tin sebelum diseduh Suhu penyeduhan Berat (gram) Daun tin segar Daun tin kering 60 o C 6,259 1,523 70 o C 6,254 1,523 80 o C 6,262 1,523

## Penyeduhan daun tin
Pada  penelitian  ini,  penentuan  kadar fenolik total dilakukan terhadap seduhan daun tin  kering  dan  basah  melalui  proses  sekali penyeduhan. Hasil seduhan daun tin segar dan kering terdapat pada Tabel 2.
Tabel 2. Seduhan daun tin
Suhu penyeduhan Seduhan daun tin segar Seduhan daun tin kering
60 o C
70 o C 80 o C

## Penentuan kadar fenolik total
Penentuan  kadar  fenolik  total seduhan  daun  tin  menggunakan  alat  utama spektrofotometer  UV-Vis  dengan  larutan standar  asam  galat.  Kurva  kalibrasi  kadar fenolik total (asam galat ekuivalen) tersaji pada Gambar 1. Absorbansi seduhan daun tin segar dan  kering  diukur  kemudian  diplotkan  pada grafik sehingga diperoleh kadar fenolik total.
Gambar 1. Kurva kalibrasi kadar fenolik total (asam galat ekuivalen)
Kadar  fenolik  total  paling  tinggi didapatkan  dari  penyeduhan  daun  tin  segar dengan  suhu  70 o C  dengan  nilai  sebesar 199,577  μgGAE/g,  sebagaimana  tercantum pada  Gambar  2.  Nilai  tersebut  33  kali  lebih rendah  dibandingkan  dengan  kadar  fenolik total  ekstrak  air  daun  tin  yang  didapatkan melalui  metode  maserasi  dengan  bantuan ultrasonic  bath (Ivanov  et  al.,  2015).  Hal  ini terjadi  karena  proses  kontak  antara  pelarut dengan simplisia pada metode  maserasi  lebih lama  dibandingkan  dengan  penyeduhan. Terlebih  lagi  pada  penelitian  yang  telah disebutkan,  ekstraksi  dilakukan  dengan bantuan ultrasonic  bath yang  dapat memaksimalkan  proses  penarikan  zat  aktif tanaman. Proses maserasi berprinsip melunakkan  dan  menghancurkan  dinding  sel tanaman  sehingga  zat  aktifnya  dapat  terlepas dan terlarut (Azwanida, 2015).

## Gambar 2. Perbandingan kadar fenolik total seduhan daun tin segar
Senyawa  fenolik  yang  disebut  juga dengan  polifenol  terdiri  atas  beberapa  jenis senyawa  antara  lain  flavonoid  sederhana, asam  fenolat,  flavonoid  kompleks,  dan antosianin  berwarna  (Lin  et  al.,  2016).  Telah didapatkan  nilai  pada  uji  kadar  fenolik  total seduhan daun tin segar maupun kering. Hal ini berarti  pada  seduhan  daun  tin  terdapat senyawa fenolik (flavonoid).
Seduhan  daun  tin  segar  yang diperoleh  dari  penyeduhan  dengan  akuades bersuhu  70 o C  memiliki  kadar  fenolik  total tertinggi.  Adanya  penambahan  panas  dapat membantu  meningkatkan  proses  ekstraksi karena suhu merupakan salah satu faktor yang dapat  mempengaruhi  kecepatan  ekstraksi. Suhu yang tinggi dapat meningkatkan desorpsi senyawa aktif dari tanaman karena perusakan sel pada bahan meningkat akibat suhu pelarut yang  tinggi  (Jain  et  al.,  2009).  Tetapi  pada suhu yang lebih tinggi, terjadi penurunan kadar fenolik  total.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian tentang  “Efek  Suhu  Pengeringan  terhadap Kandungan  Fenolik  dan  Kandungan  Katekin Ekstrak  Daun  Kering  Gambir”  yang menyatakan  bahwa  titik  optimum  suhu pengeringan  agar  kadar  total  fenolik  ekstrak bernilai  maksimum  yaitu  79.01 o C  untuk  daun muda,  83,35 o C  untuk  daun  sedang  dan 79,14 o C  untuk  daun  tua.  Jika  suhu pengeringan  melampaui  suhu  tersebut  maka stabilitas  kadar  total  fenolik  di  dalamnya terganggu (Susanti, 2008).
Hasil yang  berbeda ditunjukkan  pada seduhan  daun  tin  kering.  Kadar  total  fenolik tertinggi  didapatkan  dari  hasil  penyeduhan dengan  suhu  60 o C  dan  menurun  setelahnya sebagaimana  tersaji  pada  Figure  3.  Kadar fenolik  total  ekstrak  dengan  pengeringan menggunakan oven lebih rendah dibandingkan dengan  pengeringan  kering  angin  maupun dengan  sinar  matahari.  Senyawa  fenolik memiliki  sifat  mudah  teroksidasi  dan  sensitif terhadap  perlakuan  panas,  sehingga  dengan adanya  proses  pengeringan  dengan  sinar matahari  dapat  menurunkan  kandungan senyawa fenol (Masduqi et al., 2014).

## Gambar 3. Perbandingan kadar fenolik total seduhan daun tin kering

## Analisis Data
Hasil  analisis  data  dengan  Two  Way Anova menunjukkan bahwa:
a. Ada  pengaruh  suhu  penyeduhan terhadap kadar fenolik total,
b. Ada pengaruh penyiapan simplisia (segar dan kering) terhadap kadar fenolik total,
c. Ada  interaksi  keduanya  terhadap  kadar fenolik  total,  yang  ditunjukkan  dengan nilai  sig.  0,000  (sig.  <0,005)  pada  ketiga pengujian di atas.

## KESIMPULAN
Suhu  penyeduhan  dan  penyiapan simplisia  daun  tin  (segar  dan  kering) mempengaruhi  kadar  fenolik  total  secara signifikan  berdasarkan  uji  Two  Way  Anova. Seduhan  daun  tin  dengan  kadar  fenolik tertinggi bernilai 199,577 μgGAE/mg didapatkan  dari  penyeduhan  daun  tin  segar dengan suhu 70 o C.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Peneliti  menyampaikan  terimakasih kepada  Direktorat  Riset  dan  Pengabdian Masyarakat  –  Direktorat  Jenderal  Penguatan Riset dan Pengembangan – Kementrian Riset, Teknologi,  dan  Pendidikan  Tinggi  Republik Indonesia  yang  telah  mendanai  penelitian  ini melalui skema Penelitian Dosen Pemula Tahun 2018.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, J., Khan, I., Khan, S., Iqbal, D., 2013. Evaluation of Antioxidant and Antimicrobial  Activity  of  Ficus  carica Leaves:  an  In  Vitro  Approach.  Journal  of Plant  Pathology  &  Microbiology  4,  157. https://doi.org/10.4172/2157-
7471.1000157
Azwanida,  N.N.,  2015.  A  Review  on  the Extraction  Methods  Use  in  Medicinal Plants, Principle, Strength and Limitation. Medicinal  &  Aromatic  Plants  04. https://doi.org/10.4172/2167- 0412.1000196
Baba, S.A., Malik, S.A., 2015. Determination of total  phenolic  and  flavonoid  content, antimicrobial  and  antioxidant  activity  of  a root  extract  of  Arisaema  jacquemontii Blume.  Journal  of  Taibah  University  for Science 9, 449–454.
Cheng,  Y.,  Xu,  Q.,  Liu,  J.,  Zhao,  C.,  Xue,  F.,
Zhao,  Y.,  2014.  Decomposition  of  Five Phenolic Compounds in High Temperature  Water.  Journal  of  the Brazilian Chemical Society. https://doi.org/10.5935/0103- 5053.20140201 Deephti,  S.P.R.,  Junise,  V.,  Shibin,  P.,
Senthila, S., Rajesh, R.S., 2012. Isolation, identification and antimycobacterial evaluation of piperine from Piper longum. Der Pharmacia Lettre 4, 863–868.
Eteraf-Oskouei,  T.,  Allahyari,  S.,  Akbarzadeh- Atashkhosrow,  A.,  Delazar,  A.,  Pashaii, M.,  Gan,  S.H.,  Najafi,  M.,  2015. Methanolic  Extract  of  Ficus  carica  Linn.
Leaves  Exerts  Antiangiogenesis  Effects Based  on  the  Rat  Air  Pouch  Model  of Inflammation. Evidence-Based Complementary  and  Alternative  Medicine 2015, 1–9. https://doi.org/10.1155/2015/760405 Imran, A., K., J.R., Varnika, S., 2011. A review on traditional, pharmacological, pharmacognostic  properties  of  Ficus carica  (Anjir).  International  Research Journal of Pharmacy 2, 124–127.
Ivanov,  I.,  Dencheva,  N.,  Petkova,  N.,  Denev,
P.,  2015.  Determination  of  Total
Polyphenols  and  Antioxidant  Activity  of Different  Extracts  from  Ficus  carica  L. Leaves. Applied Researches in Technics, Technologies and Education 3, 87–92.
Jain, T., Jain, V., Pandey, R., Vyas, A., Shukla,
S.S., 2009. Microwave assisted extraction for phytoconstituents - an overview. AJRC 2, 19–25.
Kosińska,  A.,  Andlauer,  W.,  2014.  Antioxidant Capacity  of  Tea,  in:  Processing  and Impact  on  Antioxidants  in  Beverages. Elsevier, pp. 109–120. https://doi.org/10.1016/B978-0-12- 404738-9.00012-X
Leng, L., Nadzri, N., Shaari, A., Abdul Razak, N.,  Yee,  K.,  2017.  Antioxidant  Capacity and  Total  Phenolic  Content  of  Fresh, Oven-Dried  and  Stir-Fried  Tamarind Leaves. Current Research in Nutrition and Food  Science  Journal  5,  282–287. https://doi.org/10.12944/CRNFSJ.5.3.13
Masduqi, A.F., Izzati, M., Prihastanti, E., 2014. Efek  Metode  Pengeringan  terhadap Kandungan  Bahan  Kimia  dalam  Rumput Laut Sargassumpolycystum. Buletin Anatomi dan Fisiologi 22, 1–9. Mawa,  S.,  Husain,  K.,  Jantan,  I.,  2013.  Ficus carica  L.  (Moraceae):  Phytochemistry, Traditional  Uses and  Biological  Activities. Evidence-Based  Complementary  and Alternative Medicine 2013, 1–8. https://doi.org/10.1155/2013/974256 Nirwana, A.P., Astirin, O.P., Widiyani, T., 2015. Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun
Benalu  Kersen  (Dendrophtoe  pentandra L. Miq.). EL-VIVO 3, 9–15.
Nirwana,  I.,  Rianti,  D.,  Soekartono,  R.H., Listyorini,  R.D.,  Basuki,  D.P.,  2018. Antibacterial  activity  of  fig  leaf  (Ficus carica Linn.) extract against Enterococcus faecalis  and  its  cytotoxicity  effects  on fibroblast cells. Veterinary World 11, 342– 347. https://doi.org/10.14202/vetworld.2018.34
2-347 Patil, V.V., Patil, V.R., 2011. Ficus carica Linn.- An  Overview.  Research  Journal  of Medicinal Plant 5, 246–253. https://doi.org/10.3923/rjmp.2011.246.253
Suharto,  M.A.P.,  Edy,  H.J.,  Dumanauw,  J.M., 2012.  Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa Saponin  dari  Ekstrak  Metanol  Batang Pisang  Ambon  (Musa  paradisiaca  var. sapientum L.). PHARMACON 1, 86–92.
Susanti,  D.Y.,  2008.  Efek  Suhu  Pengeringan terhadap  Kandungan  Fenolik  dan Kandungan  Katekin  Ekstrak  Daun  Kering Gambir.  Prosiding  Seminar  Nasianal Teknik Pertanian 1–13.
Trifunschi,  S.,  Munteanu,  M.,  Ardelean,  D., Orodan,  M.,  Osser,  G.,  Gligor,  R.,  2015. Flavonoids  and  polyphenols  content  and antioxidant  activity  of  Ficus  carica  L. extracts  from  Romania.  Zbornik  Matice srpske  za  prirodne  nauke  57–65. https://doi.org/10.2298/ZMSPN1528057T
Wahyuni,  O.T.,  Hertiani,  T.,  2016.  DPPH Radical  Scavenging  Activity,  Total Phenolics  and  Flavonoids  of  Water Soluble Extracts Derived from Leaves and Fruit of Ficus carica L. and Ficus parietalis Bl.  Traditional  Medicine  Journal  21,  86– 92.