Perbedaan Lama Istirahat Sebelum Penyembelihan Terhadap Kadar Malondialdehid pada Serum Darah Babi Landrace
Difference in Lairage Time Before Slaughtering on Malondialdehyde (MDA) Levels in Landrace Pig Blood Serum
Putri Jauza Aulia Muhandis 1 , Nusdianto Triakoso 2* , Amung Logam Saputro 2 1 Pendidikan Profesi Dokter Hewan, 2 Departemen Klinik Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, Kampus C Mulyorejo, Surabaya, Jawa Timur, Indonesia 60115.
* Corresponding author : nusdianto-t@fkh.unair.ac.id

## Abstrak
Istirahat  sebelum  penyembelihan  pada  babi  dapat  meminimalkan  stres  yang  diakibatkan  oleh transportasi dari peternakan ke rumah potong hewan. Kondisi stres dapat mengakibatkan ketidakseimbangan antara Reactive Oxygen Species (ROS) dan kemampuan sistem agar mudah mendetoksifikasi. Malondialdehid (MDA) merupakan produk spesifik dari peroksidasi lipid sehingga paling sering digunakan sebagai biomarker dalam penelitian. Sebanyak 18 babi dibagi menjadi dua kelompok, babi dengan lama istirahat 6-8 jam dan lama istirahat  12-24  jam,  pengujian  kadar  MDA  menggunakan  metode  Thiobarbituric  Acid  Reactive  Substance (TBARS)  kemudian  dianalisis.  Terdapat  perbedaan  nyata  (p<0,05)  antara  kelompok  lama  istirahat  6-8  jam (18,10 ± 11,616) dengan lama istirahat 12-24 jam (6,80 ± 4,852), terjadi penurunan tingkat stres dan ditandai dengan penurunan kadar MDA pada babi yang diistirahatkan selama 12-24 jam sebelum disembelih.
Kata kunci: waktu istirahat, babi, malondialdehid

## Abstract
Lairage time before slaughtering a pig can recover the stress caused by transportation from the farm to the abattoir. Stress conditions can overcome the imbalance between Reactive Oxygen Species (ROS) and the ability of the system to be easily detoxified. Malondialdehyde (MDA) is a specific product of lipid peroxidation, it is often used as a biomarker in research. A total of 18 pigs were divided into two groups, pigs with a lairage time  of  6-8  hours  and  a  rest  period  of  12-24  hours,  MDA  levels  were  tested  using  the  Thiobarbituric  Acid Reactive Substance (TBARS) method and then analyzed. There was a significant difference (p<0.05) between the group lairage time length of 6-8 hours (18.10 ± 11.616) with a rest period of 12-24 hours (6,80 ± 4,852), there was a decrease in stress levels and was marked by a decreased in levels of MDA in pigs that were rested for 12-24 hours before being slaughtered.
Keywords: lairage time, pig, malondialdehyde
Received: 7 Agustus 2020 Revised: 10 Juli 2021 Accepted: 22 Desember 2021

## PENDAHULUAN
Aspek  kesejahteraan  hewan  atau animal welfare saat ini menjadi isu penting yang menjadi perhatian dunia. Animal welfare merupakan suatu usaha  kepedulian  yang  dilakukan  oleh  manusia untuk  memberikan  kenyamanan  kehidupan terhadap  hewan.  Konsep animal  welfare terdiri dari  lima  asas  kebebasan  hewan  meliputi,  bebas dari  rasa  lapar  dan  haus,  bebas  dari  rasa  tidak nyaman, bebas dari rasa sakit, luka dan penyakit, bebas dalam mengekspresikan perilakunya, bebas
dari  rasa  takut  dan  stres  (Cussen et  al., 2008). Lima  azas  tersebut  dapat  terabaikan  selama proses  penyembelihan  sehingga  menimbulkan stres  pada  hewan.  Upaya  yang  dapat  dilakukan dalam meminimalkan stres pada hewan yang akan disembelih adalah waktu istirahat.
Pengangkutan  atau  transportasi  ternak sebelum penyembelihan akan menimbulkan stres bahkan kelelahan akibat adanya lingkungan yang tidak  sesuai  dengan  proses  fisiologisnya  selama perjalanan  dan  mengalami  penurunan  selama waktu  istirahat  (Averos et  al., 2007).  Istirahat
sebelum  penyembelihan  pada  babi  dapat meminimalkan  stres  yang  diakibatkan  oleh transportasi  dari  peternakan  ke  rumah  potong hewan  (Purnama  dkk.,  2019).  Pemberian  waktu istirahat sebelum penyembelihan bertujuan untuk mengembalikan  kondisi  fisiologis  tubuh  akibat kelelahan  selama  transportasi  dan  diharapkan menurunkan tingkat stres pada hewan (Faucitano, 2010).
Babi  merupakan  salah  satu  spesies  yang paling  sensitif  terhadap  stres  dan  dapat ditekankan secara fisik maupun fisiologis ( Saco et al., 2003) . Stres  mengakibatkan  peningkatan aktivitas dari tubuh sehingga diperlukan produksi ATP  yang  lebih  besar,  hal  ini  menyebabkan konsumsi  oksigen  oleh  mitokondria  akan mengalami  peningkatan.  Situasi  tersebut  dapat mengarah  pada  peningkatan  produksi  radikal bebas  yang  memicu  ketidakseimbangan  antara Reactive Oxygen Species (ROS) dan kemampuan sistem  agar  mudah  mendetoksifikasi  zat  antara yang  reaktif  dan  memperbaiki  kerusakan  yang dihasilkan  (Lardone et  al., 2006). Radikal  bebas dapat menyebabkan kerusakan pada membran sel, protein,  lipoprotein,  lipid  dan  DNA  serta menyebabkan suatu reaksi yang disebut peroksidasi  lipid  karena  bereaksi  dengan fosfolipid  (Singh et  al., 2010;  Sudiana,  2008). Peroksidasi lipid merupakan suatu reaksi berantai yang terjadi apabila radikal bebas berupa Reactive Oxygen  Species (ROS)  berikatan  dengan polyunsaturated  fatty  acid (PUFA)  yang  berada pada  membran  plasma.  Rangkaian  proses peroksidasi  lipid  tersebut  akan  menghasilkan produk akhir berupa Malondialdehid (MDA). Kadar MDA merupakan produk spesifik dari peroksidasi lipid sehingga paling sering digunakan  sebagai  biomarker  dalam  penelitian dan  memiliki  signifikansi  akurat  dan  stabil dibandingkan  senyawa  lainnya  (Ayala et  al., 2014).  Kadar  MDA  dapat  ditemukan  hampir  di seluruh jaringan tubuh dan cairan biologis, salah satunya melalui serum darah. Kadar MDA dalam serum  darah  dapat  berfungsi  sebagai  penanda kerusakan seluler akibat radikal bebas. Berdasarkan  uraian  latar  belakang  tersebut, penulis melakukan pengukuran kadar Malondialdehid (MDA)  pada  serum  darah  babi
untuk  menentukan  tingkat  stres  oksidatif  yang diakibatkan oleh perbedaan lama waktu  istirahat sebelum penyembelihan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  berupa  rancangan The  Post  Test Only  Group  Design pada  serum  darah  babi Landrace yang  disembelih  di  RPH  Kapuk  DKI Jakarta  sebagai  sampel  penelitian.  Penelitian dilakukan setelah mendapatkan izin etik penelitian. Metode penyembelihan yang dilakukan adalah penyembelihan dengan pemingsanan terlebih dahulu menggunakan head only  electrical  stunning lalu  memotong  arteri carotis  communis .  Jumlah  babi  yang  digunakan sebagai  sampel  yaitu  9  ekor  untuk  setiap kelompok perlakuan, sehingga jumlah babi yang diperlukan untuk dua perlakuan adalah 18 ekor.

## Alat dan Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  larutan  TBARS Assay  Kit untuk pemeriksaan  kadar  MDA.  Peralatan  yang digunakan dalam penelitian ini adalah spuit 5 cc, ice gell pack , coolbox , vacutainer tube plain 5 ml, sentrifus, microtube , micropipette , yellow tip , dan pinset anatomis.

## Pengambilan Sampel
Pengambilan  sampel  berupa  serum  darah babi yang diambil melalui pemancaran dari arteri carotis communis pada saat proses penyembelihan  berlangsung.  Sampel  darah  yang diambil minimal 3 mL kemudian dimasukkan ke dalam vacutainer  tube  plain dan  diberi  label. Darah  didiamkan  selama  kurang  lebih  10  menit hingga  menggumpal  kemudian  disimpan  dalam cool box yang sudah berisi ice gell pack.

## Pemisahan Serum
Serum  didapatkan  dari  sampel  darah  yang disentrifugasi selama 15 menit dengan kecepatan 3.000  rpm  (Hidayatik  dkk.,  2021).  Serum  yang sudah  terpisah  dimasukkan  ke  dalam microtube menggunakan yellow  tip dan micropipet ,
kemudian  disimpan  dalam cool  box yang  sudah berisi ice gell pack .

## Analisis Data
Data  yang  didapatkan  berupa  angka  dan dimasukkan  kedalam  tabel  pada  program Microsoft excel dan kemudian dilakukan analisis menggunakan  program  IBM  SPSS  versi  19 dengan  uji  normalitas  menggunakan Shapiro- Wilk  test  dan selanjutnya  dilakukan  uji  statistik menggunakan Independen sampel t-Test.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Stres  mengakibatkan  peningkatan  aktivitas dari  tubuh  sehingga  diperlukan  produksi  ATP yang lebih besar, hal ini menyebabkan konsumsi oksigen  oleh  mitokondria  akan  mengalami peningkatan.  Situasi  tersebut  dapat  mengarah pada  peningkatan  produksi  radikal  bebas  yang memicu  ketidakseimbangan  antara  ROS  dan kemampuan sistem agar mudah mendetoksifikasi zat  antara  yang  reaktif  dan  memperbaiki kerusakan yang dihasilkan (Lardone et al., 2006). ROS yang berikatan dengan PUFA menyebabkan suatu  reaksi  yang  disebut  peroksidasi  lipid  dan menghasilkan produk akhir berupa MDA (Singh et al., 2010; Sudiana, 2008).
Tabel 1. Kadar MDA pada serum darah babi
Perlakuan  Mean ± SD Lama istirahat 6-8 jam  18,10 a ± 11,616 Lama istirahat 12-24 jam  6,80 b ± 4,852 p-value 0,001*
Hasil  analisis  statistik  penelitian  yang  telah dilakukan  tentang  pengaruh  perbedaan  lama istirahat  sebelum  penyembelihan  terhadap  kadar MDA  pada  serum  darah  babi  menunjukkan bahwa  terdapat  perbedaan  nyata  (p<0,05)  antar kelompok.  Kadar  MDA  pada  serum  darah  babi yang  diistirahatkan  selama  6-8  jam  (18,10 a ± 11,616)  lebih  tinggi  jika  dibandingkan  dengan babi yang diistirahatkan selama 12-24 jam (6,80 b
±  4,852)  (Tabel  1).  Perbedaan  kadar  MDA diakibatkan  oleh  lama  waktu  istirahat  sebelum penyembelihan  yang  diberikan  kepada  setiap kelompok  berbeda  serta  respon  masing-masing
individu terhadap stres tergantung pada kemampuannya  dalam  beradaptasi  melalui mekanisme homeostasis (Mareko, 2005; Soeparno, 2005).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Lemrhamed et al. (2019) pada unta arab menunjukkan bahwa terdapat penurunan kadar MDA pada saat hewan diberikan waktu istirahat selama 20 jam sebelum disembelih. Studi Fisiologis yang dilakukan oleh Benoit et al. (2001) menyatakan bahwa stres dari sumber  apapun  dapat  mempengaruhi  sistem endokrin,  hematopoietik,  dan  kekebalan  tubuh. Ternak dengan kondisi stres sebelum penyembelihan akan berpengaruh kepada ketersediaan  glikogen  dalam  otot  serta  dapat mempengaruhi  tinggi  dan  rendahnya pH postmortem (Kuntoro et al. , 2003).
Kadar  MDA  yang  terbentuk  bergantung pada  stres  oksidatif  yang  terjadi  pada  tubuh  dan kemampuan  antioksidan  dalam  menetralisir. Perubahan  pada  kadar  MDA  di  dalam  tubuh memiliki  efek  negatif  pada  metabolisme  dan fungsi sel, dan dapat menyebabkan kematian sel. Tingkat  kadar  MDA  dapat  digunakan  untuk secara  tidak  langsung  menentukan  sejauh  mana kerusakan tubuh (Zhu et al. , 2014). Kadar MDA kemungkinan  akan  meningkat  pada  kelompok- kelompok  yang  mendapat  waktu  istirahat  lebih pendek  dari  6-8  jam.  Pembentukan  kadar  MDA akan meningkat sesuai stres oksidatif yang terjadi di dalam tubuh (Purnama dkk., 2020). Tingginya radikal  bebas  memicu  MDA  semakin  tinggi (Janero, 1990; Zaetun et al., 2019).

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa  terjadi  penurunan  tingkat  stres  dan ditandai dengan penurunan kadar Malondialdehid (MDA) pada babi yang diistirahatkan selama 12- 24  jam  sebelum  disembelih. Pemberian  waktu istirahat sebelum penyembelihan mengembalikan kondisi fisiologis babi yang akan disembelih.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada RPH Kapuk, DKI Jakarta atas izin dan dukungan
yang  telah  diberikan  kepada  peneliti  untuk melaksanakan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Ayala, A., Muñoz, M. F., & Argüelles, S. (2014). Lipid  peroxidation:  production,metabolism, and signaling
mechanisms of malondialdehyde  and  4-hydroxy-2-nonenal.
Oxid. Medical Cell Longevity , 2014, 1-31.
Averos, X., Herranz, A., Sanchez, R., Comella, J. X.,  &  Gosalvez,  L.  F.  (2007).  Serum  stress parameters  in  pigs  transported  to  slaughter under  commercial  conditions  in  different seasons. Veterinari  Medicina  Praha , 52 (8), p.333.
Cussen,  V.,  &  Garces,  L.  (2008).  Long  distance transport and welfare of farm animals. CAB International. London. Pp: 122.
Benoit,  D.,  Esa,  L.,  &  Ralph,  G.  (2001).  The driving license examination as a stress model effects on blood picture,  serum cortisol and the  production  of  interleukins  in  man. Life Sciences , 68, 1641–1647.
Faucitano,  L.  (2010).  Invited  review:  Effects  of lairage  and  slaughter  conditions  on  animal welfare and pork quality. Canadian journal of animal science , 90 (4), 461-469.
Hidayatik, N., Purnomo, A., Fikri, F., & Purnama, M. T. E. (2021). Amelioration on oxidative stress,  testosterone,  and  cortisol  levels  after administration of Vitamins C and E in albino rats  with chronic variable stress. Veterinary World , 14(1), 137.
Janero,  D.  R.  (1990).  Malondialdehyde  and thiobarbituric  acid-reactivity  as  diagnostic indices of lipid peroxidation and peroxidative  tissue  injury. Free  Radical Biology and Medicine , 9 (6), 515-540.
Kuntoro, B., Maheswari, R. R. A., & Nuraini, H. (2013). Mutu fisik dan mikrobiologi daging
sapi  asal  rumah  potong  hewan  (RPH)  Kota Pekanbaru. Jurnal Peternakan, 10(1),1-8.
Lardone, P. J., Álvarez-Garci ́a, O., Carrillo-Vico,
A., Vega-Naredo, I., Caballero, B., Guerrero,
J.  M.,  &  Coto-Montes,  A.  (2006).  Inverse correlation  between  endogenous  melatonin levels and oxidative damage in some tissues of  SAM  P8  mice. Journal  of  Pineal Research , 40, 153–157.
Lemrhamed,  A.,  Tabite,  R.,  Abbadi,  N.,  El Khasmi, M., & Faye, B. (2019). Evaluation of  slaughter  stress  responses  in  the dromedary  camel. Agriculture  Tropical, 13(1).
Mareko, M. H. D. (2005). Effects of pre-slaughter stress  on  carcass/meat  quality:  implication for Botswana. Journal of Animal Veterinary Advance , 4(9), 761-767.
Purnama, M. T. E., Dewi, W. K., Prayoga, S. F., Triana,  N.  M.,  Aji,  B.  S.  P.,  Fikri,  F.,  & Hamid,  I.  S.  (2019).  Preslaughter  stress  in banyuwangi  cattle  during  transport. Indian Veterinary Journal , 96(12), 50-52.
Purnama, M. T. E., Prayoga, S. F., Triana, N. M., Dewi, W. K., Purnomoaji, B. S., Wardhana, D.  K.,  &  Fikri,  F.  (2020).  Oxidative  stress parameters  in  landrace  pigs  slaughtered  by the  stunning  method. In  IOP  Conference Series:  Earth  and  Environmental  Science , 441(1), 012140.
Saco, Y., Docampo, M. J., Febrera, E., Manteca, X.,  Diestre,  A.,  &  Lampreave,  F.  (2003). Effects  of  transport  stress  on  serum haptoglobin  and  Pig-MAP  in  pigs. Animal Welfare , 12, 403–409.
Singh, R., Dev Lawania, R., Mishra, A., & Gupta,
R.  (2010).  Role  of cordia  dichotoma Seeds Ad Leave Extract In Degenerative Disorders. Department  Of Pharmaconogsy.  Faculty  Of Pharmacy And Babu Banarasi Das National
Instituteof  Technology  And  Management. India. Pp: 45.
Soeparno.  (2005).  Ilmu  dan  Teknologi  Daging. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Hal: 47.
Sudiana,  I.K.  (2008).  Patobiologi  molekuler kanker.  Penerbit  Salemba  Medika.  Jakarta. Hal: 41.
Zaetun, S., Dewi, L. B. K., Wiadnya, I. B. R., &
Gede,  L.  S.  (2019).  Profil  Kadar  Mda
(Malondialdehide) Sebagai Penanda Kerusakan  Seluler  Akibat  Radikal  Bebas
Pada Tikus Yang Diberikan Air Beroksigen.
Jurnal  Analis  Medika  Biosains  (JAMBS) ,
4 (2), 63-68.
Zhu, Z., Chen, Y., Huang, Z., Zhang, Y., Xu, Q., Tong,  Y.,  Zhai,  F.,  Chang,  G.,  &  Chen,  G. (2014).  Effects  of  transport  stress  and  rest before  slaughter  on  blood  parameters  and meat quality of ducks. Canadian Journal of Animal Science , 94 (4), 595-600.
***