## POTENSI TUMBUHAN BANGKAL (Nauclea Orientalis) UNTUK PENGENDALIAN BAKTERI Aeromonas Hydrophila

## POTENTIAL PLANT BANGKAL (Nauclea orientalis) FOR CONTROL Aeromonas Hydrophila
1) Siti Aisiah
1) Jurusan Budidaya Perairan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Lambung Mangkurat Banjarbaru
E-Mail : siahbams@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah didapatkan metode pengendalian penyakit yang disebabkan  oleh  bakteri Aeromonas  hydrophila pada  budi  daya  ikan  yang  ramah lingkungan.  Dalam  penelitian  ini  dilakukan  uji  sensitivitas  terhadap  bakteri A. hydrophila, uji minimal konsentrasi menghambat  bakteri A. hydrophila (uji MIC) dan uji  toksisitas  terhadap  ikan  nila.  Rancangan    yang  digunakan  untuk    uji  toksisitas adalah rancangan acak lengkap (RAL), dengan 4 perlakuan yaitu A  = Ikan disuntik dengan ekstrak bangkal konsentrasi 20%, B  = Ikan disuntik dengan ekstrak bangkal konsentrasi 40%,  C  = Ikan disuntik dengan ekstrak bangkal konsentrasi 80%, dan D =  Kontrol  (ikan  tidak  disuntik),  diulang  sebanyak  3  kali.  Perlakuan  ini  didapat  dari hasil  uji  sensitivitas  antibakteri  bangkal  yang  mempunyai  daya  hambat  dan  daya bunuh  paling  besar  terhadap  bakteri A.  hydrophila yaitu  ekstrak  daun  bangkal dengan  pelarut  akuades.  Pengujian  MIC  menunjukkan  bahwa  ekstrak  bangkal- akuades  memiliki  daya  hambat  minimal    20  %  terhadap  aktivitas  bakteri A. hydrophila . Hasil uji toksisitas yang dilakukan terhadap ikan nila dengan konsentrasi 20%,  40%  dan  80%    mortalitas  ikan  nila  dibawah  50  %.  Pengamatan  hematologis yaitu eretrosit, leokosit, plasma darah, hematokrit dan leokokrit pada masing-masing perlakuan  sebagian  besar  masih  berada  dalam  kisaran  yang  normal.  Parameter kualitas  air  yaitu, kadar  oksigen  terlarut,    pH,  amoniak,  CO 2 dan  suhu  masih dapat mendukung kehidupan normal ikan nila.
Kata kunci : Nauclea sp, A. hydrophila, Tilapia , MIC

## ABSTRACT
The  purpose  of  this  study  was  obtained  method  of  controlling  diseases caused  by Aeromonas  hydrophila in  fish  farming  is  environmentally  friendly.  In  this study the sensitivity of the test A. hydrophila , a minimum test konsentari inhibiting A. hydrophila (MIC test) and toxicity test on  tilapia. The design used for toxicity tests is completely  randomized  design  with  4  treatments  it  A  =  Fish  injected  with  extracts bangkal concentration of 20 %,  B = Fish injected with extracts bangkal concentration
Siti Aisiah : Potensi Tumbuhan Bangkal.....
of  40  %,  C  =  Fish  injected  with  extracts  of  80  %  concentration  bangkal,  and  D  = Control ( fish not injected ), repeated 3 times. This treatment was obtained from the results of the sensitivity test antibacterial bangkal inhibition and has the power to kill most of the bacteria against A. hydrophila is bangkal leaf extract with distilled water solvent. MIC testing showed that the extract bangkal - distilled water has a minimum of  20  %  inhibition  of  the  bacterial  activity A.  hydrophila .  Results  of  toxicity  tests conducted on tilapia with a concentration of 20 %, 40 % and 80 % mortality of tilapia under  50  %.  Haematological  observation  that  eretrosit,  leokosit,  blood  plasm, hematocrit  and  leokokrit  in  each  treatment  is  still  in  the  normal  range.  The  water quality  parameters,  dissolved  oxygen,  pH, ammonia,  CO 2 and  temperature  can  still support the normal life of tilapia.
Key word : Nauclea sp, A. hydrophila, Tilapia, MIC

## PENDAHULUAN
Salah satu jenis penyakit infektif  yang  merupakan  masalah serius  dalam  budi  daya  ikan  nila  di kolam dan keramba jaring apung serta panti  benih  di    Kalimantan  Selatan adalah penyakit yang disebabkan oleh bakteri
Aeromonas hydrophila. Erawati dan Marsoedi (2004)
menyatakan  bahwa  serangan  bakteri ini bersifat patogenik, menyebar secara  cepat  pada  padat  penebaran tinggi dan dapat mengakibatkan kematian  benih  sampai  90  %.  Cara yang umum dilakukan untuk pengendalian  penyakit  ini  biasanya dengan  menggunakan  bahan  kimia maupun  antibiotik,  tetapi  hasilnya kurang efektif karena tingkat keberhasilannya  masih  sangat  rendah
serta  dapat  menimbulkan  resistensi bakteri terhadap obat-obatan tersebut. Untuk itu perlu dicari metode lain yang lebih    aman,  dan  efektif  serta berwawasan lingkungan untuk
pengendalian  populasi Aeromonas hydrophila sampai  batas  aman. Salah satu upaya
pengendalian  yang  dapat  dilakukan untuk  menanggulangi A.  hydrophila dengan  aman  dan  ramah  lingkungan adalah  pengendalian  secara  kimiawi dengan memanfaatkan tumbuhan yang  mengandung  bahan  aktif  alami. Tumbuhan  Bangkal Nauclea  orientalis merupakan  salah  satu  tanaman  yang potensial dikembangkan untuk
menekan perkembangan bakteri patogen. Dimana bangkal pada umumnya menghasilkan senyawa metabolit  sekunder  seperti  tannin  dan senyawa  alkaloid,  yang  berfungsi
sebagai antibiotik alami ramah lingkungan.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Metode
Penelitian  ini  dilaksanakan  di Laboratorium Hama dan Penyakit Ikan Fakultas Perikanan Universitas
Lambung  Mangkurat  selama  3  bulan, bahan  yang  digunakan  antara  lain isolat  bakteri A.  hydrophila berasal dari  koleksi  Laboratorium  Hama  dan Penyakit  Ikan  Fakultas  Perikanan
Universitas Lambung Mangkurat. Media  kultur  yang  digunakan  adalah media selektif Aeromonas-
Pseudomonas (GSP  Agar),  medium stock  culture dan  uji  sensitivitas A. hydrophila yaitu  TSA  ( Tryptone  Soya Agar ),    medium  untuk  kultur  cair bakteri A.  hydrophila yaitu  TSB
( Tryptone  Soya  Broth ),  medium  agar murni    ( Bacto    Agar )  dan  akuades.
Sebelum percobaan dimulai dilaksanakan persiapan alat dan bahan.    Peralatan  yang  digunakan dicuci  hingga  bersih  dan  kemudian dilakukan  sterilisasi  terhadap  alat  dan media  kultur  bakteri  yang  digunakan, ekstraksi    tanaman  bangkal,  kultur isolat bakteri dan aklimatisasi ikan
Uji Sensitivitas Aeromonas hydrophila terhadap Tumbuhan Bangkal
Medium  Bacto  Agar  disiapkan sebagai  lapisan  bawah  untuk  uji sensitivitas. Suspensi bakteri A. hydrophila dengan  kepadatan 10 8 cfu dari  medium  TSB    dikultur  ke  dalam medium  TSA  semi  solid  (70%)  pada suhu  ±  40  -  50 o C  lalu  divortek. Medium  yang  mengandung  suspensi bakteri    ini  dituangkan  ke  dalam medium Bacto Agar, sehingga terdapat dua lapisan pada cawan petri dan medium dibiarkan hingga membeku.
Kertas  cakram    ditetesi  20  µl supernatan, hasil  dari ekstraksi daun, batang,  dan  kulit  bangkal  dengan menggunakan pelarut metanol maupun  akuades.  Selain  itu,  kontrol terdiri dari kontrol positif
(oxytetracyclin) ditempelkan pada medium  dan  diinkubasi  pada  suhu kamar  selama  18-24  jam.  Zona penghambat bakteri (bakteristatik)
yang  berwarna  keruh  dan  zona pembunuh (bakterisidal) yang berwarna  bening   diukur  diameternya. Selanjutnya, bagian tumbuhan bangkal yang memiliki zona
penghambat  dan  zona  pembunuh paling  besar    digunakan  dalam penelitian selanjutnya.
hal. 166-177
Uji  Minimal Inhibitor Concentration

## (MIC)
Uji MIC dilakukan untuk mengetahui  konsentrasi  minimal  dari ekstrak  daun  bangkal-akuades  yang dapat  menghambat  atau  membunuh bakteri sebanyak-banyaknya.   Uji  MIC dilakukan dengan metode difusi cakram,  kertas  cakram  ditetesi  20  µl ekstrak daun bangkal dengan konsentrasi  5,  10,  20,  30,  40,  50,  60, 70,  80  dan  90%.  Sedangkan  untuk kontrol positif ditetesi 20 µl oxytetracyclin dan
akuades.
Selanjutnya  kertas  cakram  yang  telah ditetesi  dibiarkan  sebentar  supaya ekstraknya  meresap  kedalam  kertas cakram.  Kertas  cakram  perlakuan tersebut selanjutnya ditempelkan pada medium  TSA  semi  solid  (70  %)  yang telah  diinokulasi  bakteri  sebanyak  10 8 cfu.  Kemudian  diinkubasi  selama  18- 24  jam.  Setelah  itu,    zona  hambat yang  ditimbulkan  oleh  pengaruh  dari ekstrak  daun  bangkal  di  amati  dan diukur setiap 3 jam.

## Uji  Toksisitas
Uji  toksisitas  dilakukan  untuk mengetahui  dampak    keracunan  yang tidak  disengaja  dari    ekstrak  bangkal pada  ikan  nila.  Ikan  nila  yang  telah diaklimatisasi  disuntik  dengan  dosis sebanyak 0,1 ml supernatan
mengkudu dari hasil uji MIC.
Sedangkan  untuk  kontrol  negatif  ikan nila tidak disuntik (Lu, 1995). Kemudian ikan nila tersebut dipelihara dalam  bak  plastik  selama  2  minggu pengaruh  penyuntikan  diamati  pada ikan  nila.  Apabila  ada  ikan  yang terluka  dan  mati,  maka  dilakukan pengamatan    gejala  eksternal  yang ditimbulkannya  dan  jumlah  ikan  yang mati. Uji toksisitas  dilakukan  dengan 4 perlakuan 3 ulangan, yaitu:
A    =  Ikan  disuntik  dengan  ekstrak daun bangkal dosis 20 %
B    =  Ikan  disuntik  dengan  ekstrak daun bangkal dosis 40%
C    =  Ikan  disuntik  dengan  ekstrak daun bangkal dosis 80 %
D     =   Kontrol (ikan tidak disuntik)

## Pengamatan
Pengamatan dilakukan
terhadap  zona  penghambat  dan  zona pembunuh dalam uji sensitivitas bakteri A.  hydrophila terhadap  bagian tumbuhan bangkal (daun, batang, kulit dan  buah)  yang  diamati  dengan metode deskriptif (Nazir, 1985).
Ditemukan  bahwa  bagian  daun  yang memiliki daya hambat terbesar.
Konsentrasi  ekstrak  daun  bangkal yang mampu
menghambat
pertumbuhan  bakteri  dalam  uji  MIC diamati  dengan  metode  deskriptif.  Uji toksisitas dengan melakukan pengamatan  terhadap  jumlah  ikan
Siti Aisiah : Potensi Tumbuhan Bangkal.....
yang  mati  melebihi  50%  (Lu,  1995). Gejala  yang  ditimbulkan  ikan  nila akibat  uji  toksisitas  ekstrak  daun bangkal diamati dengan metode deskriptif (Nazir,1985).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji Sensitivitas bakteri A. hydrophila terhadap tumbuhan bangkal yang dilakukan untuk mengetahui  daya  hambat  aktivitas antibakteri dapat dilihat pada Tabel 1 . Tabel 1. Hasil  Uji  Sensitivitas  Pada  Ekstrak  Daun,  Batang,  Buah  dan  Biji
Bangkal  ( N.  orientalis )  Dalam  Metanol  dan  Akuades  Terhadap
Pertumbuhan Bakteri A. hydrophila . No Sampel Waktu Zona Hambat (mm) Bakterisidal Bakteristatik 1 Daun bangkal-akuades 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - 4 4 5 6 6 12 12 - - - - - - - - 2 Daun bangkal-metanol 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - 2 2 4 4 6 8 10 - - - - - - - - 3 Kulit bangkal-akuades 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - 2 2 4 4 4 6 6 - - - - - - - -
4 Kulit bangkal-metanol 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - 2 2 4 4 4 6 6 - - - - - - - - 5. Batang bangkal- akuades 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - - 1 1 2 2 2,5 2,5 - 3 3 4 4 5 5 5 6. Batang bangkal- metanol 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - - - - 0, 0,5 1 1 - - 3 4 4 5 5 5 7. Kontrol Positif (Oxytetracyclin) 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - - 2 4
4 6 8 10
- 6 6 6 6 6 6 6 8. Kontrol Negatif (Kertas cakram kosong) 3 jam 6 jam 9 jam 12 jam 15 jam 18 jam 21 jam 24 jam - - - - - - - - - - - - - - - -
Keterangan : (-) tidak ada pertumbuhan
Kertas  cakram  yang  telah dibasahi ekstrak daun bangkal- akuades  mempunyai  daya  hambat
lebih  besar  terhadap  pertumbuhan bakteri  setelah  24  jam  pengamatan yaitu  bakterisidal  12 mm, disusul oleh
daun  bangkal-metanol  bakterisidal 10 mm,  kulit    bangkal-akuades  dan    kulit bangkal-mehanol masing-masing bakterisidal 6 mm dan batang bangkal- akuades  bakterisidal  2,5  mm  dan bakteristatik 5 mm dan batang bangkal-metanol  bakterisidal  1  mm dan bakteristatik 5 mm. Dalam penelitian  utama  hanya  digunakan ekstrak  daun  bangkal-akuades  yang terbukti  mempunyai  daya  bunuh  dan menghambat  lebih  tinggi  terhadap A. hydrophila. Ekstrak  daun  bangkal diduga  mengandung  bahan  aktif  yang mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri A.  hydrophila karena  akuades dapat  melarutkan  bahan  aktif  yang terkandung  di  dalam  daun  bangkal tersebut.
Pengujian MIC ( Minimal Inhibitor Concentration ) antibakteri dengan metode difusi cakram menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun bangkal-akuades memiliki daya hambat terhadap bakteri A. hydrophila .
Hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi  ekstrak  daun  bangkal- akuades minimal yang mampu menghambat  aktivitas  bakteri  adalah 20  %.  Konsentrasi  40%,  80%,  dan kontrol positif (oxytetracyclin) diketahui juga  mempunyai  kemampuan  sebagai bakterisidal  terhadap  bakteri A. hydrophila yang lebih besar
dibandingkan konsentrasi 20 %.
Kemampuan  suatu  bahan antimikroba dalam meniadakan kemampuan hidup mikroorganisme tergantung pada konsentrasi  bahan  antimikroba  itu (Schlegel,  1994 di  dalam Ajizah, 1998). Artinya jumlah bahan
antimikroba  dalam  suatu  lingkungan mikroorganisme  sangat  menentukan kehidupan  dari A.  Hydrophila yang terpapar  antimikroba  dari  ektrak  daun bangkal.
Ekstrak  daun  bangkal-akuades
memiliki kemampuan sebagai bakterisidal  artinya  dapat  mematikan atau menghentikan pertumbuhan bakteri A.  hydrophila .  Semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  daun  bangkal semakin  sedikit  jumlah  bakteri  yang mampu bertahan hidup. Ini menunjukkan bahwa dengan meningkatnya  konsentrasi  semakin besar kadar bahan aktif yang berfungsi  sebagai  antibakteri  pada ekstrak daun bangkal tersebut.
Uji toksisitas bangkal pada ikan nila  dapat diketahui  berdasarkan jumlah  ikan  yang  mati  melebihi  50% dalam uji kesehatan ikan. Berdasarkan hasil  uji  toksisitas  yang  dilakukan terhadap ikan nila dengan menggunakan  ekstrak  daun  bangkal dengan  konsentrasi  20%,  40%  dan 80%  menunjukkan  tingkat  kematian

## hal. 166-177
masih  di  bawah  50%    setelah dilakukan penyuntikan. Mortalitas yang terjadi  berkisar  9  –  21  %,  berarti kandungan bahan alami pada bangkal tidak toksik terhadap ikan nila.
Menurut  Soemirat,  2003  Toksisitas terhadap organisme tertentu
dinyatakan  dalam  nilai Lethal  Dose (LD 50 ), yaitu menunjukkan dosis racun yang  dapat  mematikan  50%  dari populasi hewan percobaan.
Penyuntikkan dengan konsentrasi    ekstrak  daun  bangkal- akuades  konsentrasi  sebanyak  80%, 40%    dan  20%  tidak  menunjukkan gejala  eksternal  yang  berarti  pada ikan  uji.  Hasil  ini  lebih  baik  dari  yang didapatkan  pada  penelitian  dengan ekstrak  daun  mengkudu,  dimana ditemukan gejala klinis yang
ditimbulkan akibat penyuntikkan ekstrak mengkudu-akuades dapat mempengaruhi  kesehatan  ikan,  yakni
ikan  berenang  lemah,  insang  pucat, dan  ada  bekas  suntikan  berwarna hitam  pada  bagian  intramuskular (Aisiah,  2012).  Bangkal  mengandung bahan aktif memiliki metabolit sekunder  seperti  steroid,  karoten, substansi biokatif anti bakteri/jamur/virus/kanker (Anonim, 2012). Pengamatan hematologis dilakukan  berdasarkan  modifikasi  dari metoda  Klontz  (1994).    Peubah  yang diamati adalah pola gambaran hematologis  yang  meliputi  :  nilai hematokrit,  leukokrit,  eritrosit,  plasma darah dan leukosit. Pengamatan hematologis  ikan  dilakukan  dengan pengambilan darah ikan uji.
Pengamatan  hematologis  ikan  nila sebelum  perlakuan    adalah  leukosit  1 mm 3 ,  eritrosit  22  mm 3 ,  plasma  darah 45  mm 3 ,  hematokrit  32,35%  dan leukokrit  1,47 %.
Tabel 2.   Jumlah  Leukosit,  Eritrosit,  Plasma  Darah,  Hematokrit  dan  Leukokrit Setelah Diberi Perlakuan
Perlakuan Ulangan Jumlah Leukosit (mm 3 ) Jumlah Eritrosit (mm 3 ) Jumlah Plasma Darah (mm 3 ) Total Darah (mm 3 ) Jumlah Hematokrit (%) Jumlah Leukokrit (%) A 1 1,5 26 41 69,5 2 1 28 39 69 3 2 27 40 69 Rata-rata 1,5 27 40 69,16 39,09 2,16 B 1 1,5 27,5 38,5 67,5
2 1 27 38 66 3 1 26,5 38 66 Rata-rata 1.16 27 38,16 66,83 40,40 1,74 C 1 1 31 36 68 2 1,5 29 38 68,5 3 2 30,5 36 68,5 Rata-rata 1,5 30,16 37,33 68,33 44,13 2,19 D 1 1 25 43 69 2 2 24 41,5 67,5 3 1,5 26 42 69,5 Rata-rata 1,5 25 42,16 68,66 36,41 2,18
Keterangan:
A= Disuntik dengan menggunakan ekstrak daun bangkal- akuades dengan konsentrasi 20% B= Disuntik dengan menggunakan ekstrak daun bangkal- akuades dengan konsentrasi 40% C= Disuntik dengan menggunakan ekstrak daun bangkal- akuades dengan konsentrasi  80% D= Ikan tanpa penyuntikan
Hematokrit juga disebut
sebagai Packed  Cell  Volume (PCV).
Nilai  PCV  adalah  volume  yang  diisi oleh  eritrosit,  dinyatakan  sebagai persen  terhadap  volume  total  darah. Nilai hematokrit adalah volume sel-sel darah yang didapat setelah sentrifugasi dan dikeluarkannya plasma  darah.  Parameter  hematokrit berpengaruh  terhadap  pengukuran eritrosit  dan  merupakan  perbandingan dengan volume eritrosit (Schalm, Jain, and Carroll., 1975).
Persentase darah merah (hematokrit)  dalam  darah  ikan  dapat menggambarkan kesehatan ikan. Ikan yang  mengalami  anemia  mempunyai presentase  serendah-rendahnya  10% (Anderson  dan  Siwicki,  1994).  Rata- rata  jumlah  hematokrit  ikan  uji  pada
penelitian ini  berkisar antara 36,41% - 44,13  %,  hematokrit  pada  sejumlah ikan  teleostei  berkisar  antara  20  – 40%  (  Fange,  1992).  Rendahnya hematokrit  juga  dapat  menunjukkan terjadinya kontaminasi, ikan kekurangan makan, kandungan protein pakan yang rendah,
kekurangan vitamin atau terjadi infeksi.  Hematokrit  yang  tinggi  juga dapat menunjukkan adanya kontaminan, adanya
masalah osmolaritas  dan  stres  (Anderson  dan Siwicki,  1994),  pada  penelitian  ini terdapat  kadar  hematokrit  diatas  40% yaitu  pada  perlakuan  C  44,13%    ini diduga  karena  dosis  yang  diberikan terlalu  besar  sehingga  menyebabkan ikan  menjadi  stress  sehingga  kadar hematokritnya meningkat.
Rerata jumlah leukokrit ikan uji pada penelitian ini berkisar antara 1,74 –  2,19%.  Menurut  Anderson  dan Siwicki (1994), persentase darah putih (leukokrit)  dapat  menunjukkan  status kesehatan ikan. Leukokrit pada rainbow  trout  normal  berkisar  1-2%
(Anderson dan Siwicki, 1994), selanjutnya dijelaskan bahwa leukokrit yang  rendah  disebabkan  oleh  infeksi kronis,  kualitas  nutrisi  yang  rendah, kekurangan vitamin dan adanya kontaminan infeksi awal dan stres.
Rerata  jumlah  plasma  darah ikan  uji  pada  penelitian  ini  berkisar antara        37,33  –  42,16%.  Warna plasma  darah  pada  perlakuan  C konsentrasi  80%  terlihat  kemerah- merahan,  ini  menunjukkan  terjadinya hemolisis pada eretrosit yang disebabkan oleh kerapuhan sel (Anderson  dan  Siwicki,1994).  Diduga kandungan  bahan  anti  bakteri  dalam bangkal  dengan  konsentrasi  yang tinggi  (80%)  dapat  menyebabkan hemolisis  pada eretrosit.  Plasma darah  pada  ikan  sehat  berwarna bening  dan  agak  sedikit  kekuningan (Anderson, 1974).
Pengukuran
kualitas air dilakukan dengan
mengambilan sampel  air  kolam  pada  saat  awal  dan akhir  uji  toksisitas.    Rerata  oksigen terlarut  pada penelitian  ini adalah 5,6- 5,7  ppm,  karbondioksida  1,1-5,15
ppm,  pH  6,5-7,63,  kadar  amoniak 0,05-0,8 ppm dan suhu pada penelitian ini berkisar 29,5-30 0 C.
Secara keseluruhan kualitas air selama penelitian masih dalam kisaran yang  baik  untuk  kehidupan  normal ikan nila (Zonneveld, 1991).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Simpulan  dari  hasil  penelitian ini  adalah  sensitivitas  bakteri A. hydrophila terhadap tanaman bangkal ( Nauclea sp)  menunjukkan  bahwa ekstrak daun bangkal-akuades memiliki aktivitas lebih besar
dibandingkan dengan yang lain. Berdasarkan  uji    MIC  ekstrak  daun bangkal-akuades menunjukkan bahwa kosentrasi  hambat  minimal  20  % terhadap bakteri A. hydrophila . Hasil uji toksisitas dengan dosis 20, 40 dan  80%  ekstrak  daun  bangkal menunjukkan  tidak  toksik  terhadap ikan  nila.  Pengamatan  hematologis yaitu  eritrosit, leukosit, plasma darah, hematokrit, dan leukokrit pada masing- masing  perlakuan  menunjukkan  hasil kisaran  normal  pada  ikan  nila.  Ini menunjukkan  bahwa  ektrak  daun bangkal-akuades  dapat  dipergunakan untuk  pengobatan  pada  ikan  nila.
Parameter kualitas air selama penelitian masih berada dalam kisaran yang  cukup  layak  untuk  kehidupan normal ikan nila.

## Saran
Saran dari penelitian ini adalah perlu dilakukan penelitian untuk
Mencari  isolat  murni  senyawa  bioaktif
Nauclea orientalis yang bersifat antibakteri yang dapat dijadikan bakterisida  alami  dalam  pengendalian penyakit A.  hydropilla pada  budi  daya ikan nila.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah, A., 1998.   Sensitivitas    Enteropathogenic Escherichia  coli terhadap Daun Psidium  guajava L.  Secara  in  vitro.  FKIP  Unlam  Banjarmasin.
(http://bioscientiae.tripod.com/v1n1/v1_n1_ajizah)      ( Diakses    tanggal      16 November 2006 ).
Aisiah,  S  2012.  Efikasi  Ekstrak  Mengkudu (Morinda  citrifolia) terhadap  Bakteri Aeromonas  hidrophila Dan  Toksisitasnya  Pada  Ikan  Nila    ( Oreochromis niloticus ), Jurnal Ilmiah Sains Akuatik , Volume 14 Nomor 1, Mei 2012 UMP, Purwokerto : 55- 63.
Anderson, D.P. 1974. Fish Immunology.T.F.H Publication Inc. Ltd. U.S.A. P: 66-73.
Anderson,  D.  P    dan  A.  K.  Siwicki.,  1994.  Simplited  Assay  For  Measuring Nonspescific Depense Mechanism In Fish. Rough Draft For Presentation  at The  Fish  Healt  Section / American   Fisheries  Society  Meetings,  Seatle Woshington. 239 pp.
Anonim 2012, (http:///E:/Bangkal.html).  Dikutip tanggal 12 Nopember 2012.
Efendie,  M.I.,  1992.  Metodologi  Biologi  Perikanan.  Fakultas  Perikanan  IPB.  Bogor.
75 Halaman.
Erawati, C.I dan Marsoedi. 2004. Pengaruh pemberian Perasan Kasar Daun pepaya ( Carica  papaya )  dengan  Dosis  Yang  Berbeda  terhadap  Ikan  mas  ( Cyprinus carpio )  yang  Terinfeksi  Bakteri Aeromonas  hydrophila .  Jurnal  Penelitian Perikanan Volume 7 nomor 2. Universitas Brawijaya, Malang.
Fange,  R.,  1992.  Fish  Blood  Cells. In :  Fish  Physiology.  Volume  XII,  Part  B.  The cardiovascular system. W.S. Hoar, D.J. Randall. A. P. Farrell (Eds). Academic Press, Inc. San Diego. 1-54 pages.
Klontz,  G. W.,  1994.      Fish Hematology.    Stolen et al . (Eds.). Techniques in Fish Immunology-3.   Sos   Publications,    Fair Haven,    NJ 07704-3303. In USA. p.121-131
Lu, F. C., 1995. Toksikologi Dasar. Asas, Organ Sasaran, dan Penilaian Resiko Edisi Kedua. UI- Press. Jakarta. 428 halaman.
Nazir, M., 1985. Metode Penelitian. Ghalia Indonesia. Jakarta. 597 halaman.
Schalm,   O.W.,  N.C. Jain,    and        E.J. Carroll.  1975. Veterinary Hematology. 3 rd Edition. Lea & Fehiger. Philadelphia. 807 pp.
Soemirat,  Juli.  2003.  Toksikologi  Lingkungan.  Gadjah  Mada  University  Press. Yogyakarta. 220 halaman.
Zonneveld,  N.,  Huisman,  E.A  dan  Boon,  J.H.  1991.  Prinsip-Prinsip  Budidaya  Ikan. Penerbit PT. Gramedia Pustaka utama.  Jakarta.