Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138
Pakan  Mengandung  Ekstrak  Rumput  Laut  Gracilaria  verrucosa  untuk Meningkatkan  Kelangsungan  Hidup  Udang  Vaname  Litopenaeus  vannamei yang Diinfeksi WSSV (White Spot Syndrome Virus)
Aminatul Zahra 1 , Sukenda Sukenda 2 , Dinamella Wahjuningrum 2 , Dendi Hidayatullah 2
1 Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji
2 Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor
INFO NASKAH

## ABSTRAK
Kata Kunci:
Ekstrak Gracilaria verrucosa , Udang Vaname,
WSSV ( White Spot Syndrome Virus ) Salah  satu  penyakit  yang  menyerang  udang  vaname  adalah  penyakit White  Spot
yang  disebabkan  oleh White  Spot  Syndrome  Virus (WSSV) . Dibutuhkan  upaya untuk mencegah penyebaran dari WSSV pada budidaya udang yang efektif, salah satunya  adalah  dengan  pemberian  pakan  mengandung  ekstrak G.  verrucosa. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  pengaruh  pakan  mengandung  ekstrak G. verrucosa dengan  dosis  yang  berbeda  terhadap  kelangsungan  hidup  udang vaname yang diinfeksi WSSV. Penelitian ini terdiri dari enam perlakuan dosis G. verrucosa dan  masing-masing tiga ulangan,  yaitu  KN  (tanpa  ekstrak) , KP  (tanpa ekstrak  +  infeksi  WSSV),  A  (ekstrak  2.000  mg/kg  +  infeksi  WSSV),  B  (dosis 3.000  mg/kg  +  infeksi  WSSV),  C  (dosis  4.000  mg/kg  +  infeksi  WSSV),  dan  D (dosis  5.000  mg/kg  + infeksi  WSSV).  Udang  vaname  dengan bobot 6-10 g/ekor dipelihara dalam akuarium dengan ukuran (60×30×30) cm dengan padat tebar 10 ekor/akuarium.  Udang  diberi  pakan  (protein  32%)  yang  mengandung  ekstrak G.
verrucosa dengan feeding rate 3% dari bobot biomassa sebanyak tiga kali sehari selama  14  hari.  Pada  hari  ke-15  diuji  tantang  dengan  WSSV  dengan  dosis  0,1 mL/ekor  secara  intramuskular.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pakan mengandung  ekstrak G.  verrucosa mampu  meningkatkan  kelangsungan  hidup udang  vaname  secara  signifikan  dibanding  perlakuan  kontrol  positif. Kelangsungan  hidup  terbaik  pasca  uji  tantang  pada  perlakuan  C  (4.000  mg/kg), yaitu  56,67±5.74%.  Disimpulkan  bahwa  dosis  4.000  mg/kg  pakan  memberikan hasil  terbaik  untuk  meningkatkan  kelangsungan  hidup  udang  vaname  yang diinfeksi WSSV.
Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp  :
(0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: ranisepriantiaa@gmail.com,
itakarlina@gmail.com, henkyirawan.umrah@gmail.com
Feed Contains Gracilaria verrucosa Seaweed Extract to improve Survival Rate of Litopenaeus vannamei White Shrimp Infected by WSSV (White Spot Syndrome Virus)
Aminatul Zahra 1 , Sukenda Sukenda 2 , Dinamella Wahjuningrum 2 , Dendi Hidayatullah 2
1 Department of Aquaculture, Faculty of Marine Science and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University
2 Department of Aquaculture, Faculty of Fisheries and Marine Science, Bogor Agriculture University
ARTICLE INFO
ABSTRACT
Keywords Gracilaria verrucosa extract , White Shrimp,
WSSV  ( White  Spot  Syndrome Virus ) One  of  diseases  in  the  white  shrimp  is  white  spot  disease  that  caused  by  White Spot Syndrom Virus (WSSV). Thus, effective effort to prevent WSSV outbreak in shrimp  farming  is  required,  and  one  of  which  is  the  administration  of immunostimulant.  This  study  aims  to  examine  the  effect  of  feed  containing  G. verrucosa extract at different doses on the survival of white shrimp infected with WSSV.  This  study  consisted  of  six  treatments  of  the  dose  of  G.  verrucosa  and each  of  three  replications,  namely  KN  (without  extract),  KP  (without  extract  + WSSV  infection),  A  (extract  of  2,000  mg  /  kg  +  WSSV  infection),  B  (dose  of 3,000 mg / kg + WSSV infection), C (4,000 mg / kg + WSSV infection), and D (5,000 mg / kg + WSSV infection). White shrimp with initial body weight of 6-10 g/shrimp were reared in the (60×30×30) cm with density of 10 shrimps/aquarium. Shrimp were given feed (32% protein) containing G. verrucosa extract with a 3% feeding  rate  of  biomass  weight  three  times  a  day  for  14  days.  On  the  15th  day tested challenged with WSSV at a dose of 0.1 mL / intramuscularly. The  result  showed  that  feed  containing  G.  verrucosa  extract  was  able  to significantly  increase  the  survival  of  white  shrimp  compared  to  the  positive control treatment. The best survival after challenge test on treatment C (4,000 mg / kg), which is 56.67 ± 5.74%. It was concluded that the dosage of 4,000 mg / kg of feed gave the best results to improve the survival of white shrimp infected with WSSV .
Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp  : (0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: ranisepriantiaa@gmail.com, itakarlina@gmail.com, henkyirawan.umrah@gmail.com

## PENDAHULUAN
Salah  satu  penyakit  yang  menyerang  udang  vaname  adalah  penyakit White Spot yang disebabkan oleh White Spot  Syndrome  Virus (WSSV) . Virus ini  dapat mengakibatkan total kematian 100% pada 2 sampai 10 hari penyerangan (Wang et al. 2007).  Di  Indonesia,  WSSV  menyerang  udang  di  Jawa  Barat,  Banten,  Bali,
Lampung, dan Sulawesi Selatan (Rukyani 2000).
Salah  satu  upaya  untuk  mencegah  serangan  WSSV  pada  budidaya  udang yang  tidak  memberikan  dampak  kepada  kesehatan  konsumen  dan  lingkungan adalah  dengan  pemberian  imunostimulan  dari  bahan  alami  yang  ramah lingkungan.  Imunostimulasi  merupakan  cara  untuk  memperbaiki  fungsi  sistem imun  dengan  menggunakan  bahan  yang  menginduksi  sistem  tersebut (Baratawidjaja 2006). Salah satu bahan alami yang dapat dijadikan sebagai bahan imunostimulan  yang  aman  dan  ramah  lingkungan  adalah  rumput  laut Gracilaria verrucosa.
G.verrucosa merupakan rumput laut yang memiliki komponen utama kimia berupa  agar  dan  karagenan  (Angka  dan  Maggy  2000). G.verrucosa dapat digunakan  sebagai  imunostimulan  karena  memiliki  kandungan  senyawa polisakarida  (Anggadiredja et  al. 2006),  yang  biasanya  berisi  galaktosa  maupun galaktan  bersulfat  (Naidu  2000).  Polisakarida  tersebut  memiliki  sifat  antiviral, antikoagulasi,  antitumor  dan  aktifitas  immunomodulatory  pada  mamalia  (Castro et al . 2006).
Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  kasar  rumput  laut G.  verrucosa menunjukkan kandungan  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  dan  steroid  dalam  rumput  laut G.verrucosa (Siregar et  al. 2012).  Senyawa  alkaloid,  flavonoid,  dan  steroid merupakan  senyawa  bioaktif  yang  memiliki  aktifitas  sebagai  antivirus  dan antioksidan (Angka dan Maggy 2000). Alkaloid sebagai antioksidan telah terbukti sangat  ampuh  mencegah  radikal  bebas, singlet  oxygen  species (O2), liped peroxidation ,  sedangkan  flavonoid  memberikan  efek  antioksidan  dengan  cara
menetralisir  radikal  bebas  seperti superoxide dan hydroxyl  radical. Steroid sebagai antivirus mampu mengganggu replikasi virus (Al Jaber et al. 2011) Wongprasert et al. (2013) menyatakan sulfated galactan yang diisolasi dari rumput  laut Gracilaria  fisheri dengan  dosis  100-200  µg/mL  selama  7  hari dapat meningkatkatkan  sistem  imun  dan  aktifitas  antiviral  pada  udang  vaname  yang diinfeksi  dengan  WSSV.  Sirirustananun et  al. (2011)  menyatakan  bahwa penambahan Gracilaria  tenuistipitata pada  pakan  dengan  dosis    0.5  hingga  2.0 g/kg  selama  14  hari  dapat  meningkatkan  sistem  imun  pada  udang  vaname  yang diinfeksi  dengan  WSSV.  Menurut  Jasmanindar  (2009)  penggunaan  ekstrak G. verrucosa dengan  dosis  50  µg/g  bobot  udang  dalam  meningkatkan  sistem ketahanan udang vaname memberikan hasil dapat meningkatkan resistensi  udang vaname  terhadap  infeksi  bakteri Vibrio  harveyi hingga  73.3%  dan  2  kali pemberian  (interval  14  hari)  ekstrak G.  verrucosa selama  30  hari  pemeliharaan mampu memberikan kelangsungan hidup hingga 86.7%.
Pemberian  imunostimulan  harus  memperhatikan  dosis  optimal  yang digunakan  (Hai  2015),  karena  dosis  imunostimulan  yang  tinggi  dapat  menekan respons  imun,  dan  dosis  yang  rendah  bisa  kurang  efektif  atau  tidak  cukup  untuk memberikan  respons  imun.  Sehingga  perlu  dilakukan  penelitian  tentang pemberian  ekstrak  rumput  laut G.  verrucosa sebagai  imunostimulan  pada  pakan udang vaname guna menentukan dosis pemberian pakan yang tepat.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Udang  uji  yang  digunakan  adalah  udang  vaname  ( L.  vannamei )  yang diambil dari lokasi budidaya udang vaname di Bakauheni, Lampung. Bobot udang vaname  yang  digunakan  berukuran  6.07±0.10  g/ekor.  Sebelum  perlakuan  udang diaklimatisasi selama 2 minggu pada suhu 28 °C dalam bak fiber. Setiap akuarium diisi dengan udang sebanyak 10 ekor.
G.  verrucosa yang  telah  berumur  1.5  bulan  dikumpulkan  dari  lokasi budidaya rumput laut di Muara Gembong, Bekasi. G. verrucosa dipilih yang telah berumur  1.5  bulan,  karena  apabila  panen  dilakukan  kurang  dari  umur  tersebut menghasilkan  rumput  laut  berkualitas  rendah,  karena  umur  panen  rumput  laut berpengaruh  terhadap  kekuatan  gel,  viskositas,  kadar  sulfat,  dan  kadar  air  pada rumput laut (Anggadiredja et al. 2006).

## Rancangan Penelitian
Rancangan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL).  Penelitian  untuk  menguji  dosis  yang  tepat  terdiri  dari  enam perlakuan dan masing-masing tiga ulangan, yaitu Kontrol – (KN) : Tanpa ekstrak G. verrucosa Kontrol + (KP)  : Tanpa ekstrak G. verrucosa + infeksi WSSV Perlakuan D2  : Dosis ekstrak G. verrucosa 2 g/kg pakan + infeksi WSSV Perlakuan D3  : Dosis ekstrak G. verrucosa 3 g/kg pakan + infeksi WSSV Perlakuan D4  : Dosis ekstrak G. verrucosa 4 g/kg pakan + infeksi WSSV Perlakuan D5  : Dosis ekstrak G. verrucosa 5 g/kg pakan + infeksi WSSV
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138

## Prosedur Penelitian
Ekstraksi G. verrucosa Rumput  laut G.  verrucosa dicuci  dengan  air  tawar  untuk  menghilangkan garam  dan  mikroorganisme  yang  menempel  pada  rumput  laut.  Alga  yang  telah bersih dikeringkan di udara terbuka (kering udara) tanpa terkena cahaya matahari langsung.  Selanjutnya  sampel  yang  sudah  kering  digiling  halus  dan  diayak menggunakan  saringan  halus  (60 mesh  size ).  Rumput  laut  yang  sudah  halus dicampur  dalam  pelarut  etil  asetat.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  menambahkan pelarut  dengan  perbandingan  1:5  (w/v),  kemudian  dimaserasi  selama  24  jam, diendapkan  dan  kemudian  disaring.  Filtrat  yang  diperoleh  diuapkan  dengan menggunakan vacum rotary evaporator pada suhu 50 o C hingga diperoleh ekstrak kental.

## Pembuatan Pakan Uji
Ekstrak G.verrucosa berdasarkan  dosis  perlakuan  yang  telah  ditentukan dilarutkan  terlebih  dahulu  dalam  98  mL  akuades  steril  yang  sebelumnya  telah ditambahkan  putih  telur  sebanyak  2  g  sebagai  binder.  Larutan  tersebut dicampurkan secara merata ke dalam pakan udang komersial yang telah disiapkan. Pakan dikeringkan menggunakan oven pada suhu 37 °C.

## Pemeliharaan Udang
Udang  diberi  pakan  dengan  feeding  rate  3%  dari  bobot  biomassa  sesuai dengan perlakuan, 3 kali sehari. Udang dipelihara selama 14 hari dan uji tantang dilakukan pada hari ke-15. Setelah uji tantang, pakan yang diberikan adalah pakan komersial biasa (tanpa ekstrak).

## Uji Tantang WSSV
Uji  tantang  WSSV  pada  udang  vaname  dilakukan  secara  injeksi.  Udang yang digunakan untuk menginfeksi adalah udang yang telah terinfeksi oleh WSSV dan  memperlihatkan  gejala  klinis  adanya  bintik  putih  pada  permukaan  karapas udang  yang  sebelumnya  telah  dilakukan  konfirmasi  menggunakan nested PCR ( Polymerase  Chain  Reaction ).  Sebanyak  1  gram  organ  udang  yang  terinfeksi WSSV  digerus  sampai  halus  dan  dilarutkan  dalam  9  mL  PBS  ( Phosfat  Buffer Saline ), kemudian disentrifuse dengan kecepatan  3000 rpm  selama 30 menit dan 8000  rpm  selama  20  menit.  Supernatan  yang  dihasilkan  disaring  dengan  kertas miliphore 0.45 μm menggunakan filter holder dan syringe (Hameed et al . 1998). Uji penularan WSSV dilakukan melalui injeksi secara intramuskular pada segmen ketiga abdomen dengan 0.1 mL larutan virus yang diencerkan sampai 10 -3 dengan PBS. Udang kontrol negatif diinjeksi dengan PBS  (Yao et al. 2015).

## Pengambilan Hemolim
Sebanyak  0.6  mL  hemolim  diambil  dari  pangkal  kaki  renang,  menggunakan syringe 1  mL  berisi  0.4  mL  antikoagulan  Na-sitrat,  kemudian  dihomogenkan dengan  cara  menggerakkan  tangan  membentuk  angka  delapan  selama  5  menit. Pengambilan hemolim untuk pengukuran diferensial hemosit (DHC).
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138

## Parameter yang Diamati
Kelangsungan Hidup
Kelangsungan  hidup  dihitung  sebelum  uji  tantang  dan  9  hari  setelah  uji tantang dengan rumus yang digunakan dalam Daniels et al . (2010):
KH (%) = x 100 Keterangan: KH : Kelangsungan hidup (%) Nt : Jumlah udang hidup pada akhir penelitian (ekor) No : Jumlah udang hidup pada awal penelitian (ekor)
Diferensial Hemosit
Diferensial  Hemosit  dihitung  sesuai  metode  Sung et  al .  1999.  Dihitung dengan cara: hemolim diteteskan pada gelas objek dan dibuat ulasan, dikeringkan dan  difiksasi  dengan  metanol  selama  5  menit.  Kemudian  dikering  anginkan  dan diwarnai dengan larutan giemsa selama 10 menit, dicuci dengan air mengalir dan dibiarkan  kering.  Ulasan  kemudian  diperiksa  di  bawah  mikroskop  dengan pembesaran  100  kali.  Diferensial  hemosit  dihitung  berdasarkan  persentase  jenis sel hemosit.
Persentase jenis sel hemosit = x 100

## Gejala Klinis
Pengamatan gejala klinis diamati secara visual setiap hari setelah uji tantang hingga  akhir  pemeliharaan.  Gejala  klinis  yang  diamati  (semua  perlakuan)  yaitu respons  makan,  kemerahan  pada  tubuh  (perubahan  warna  tubuh),  bintik  putih pada karapas selama pemeliharaan (Wang et al . 1998; Lightner 1996; Hameed et al . 1998).

## HASIL Kelangsungan Hidup
Kelangsungan hidup udang setelah uji tantang paling tinggi pada perlakuan D2,  kemudian  diikuti  perlakuan  D3  dan  D4  yang  berbeda  signifikan  (P<0.05) dengan kelangsungan hidup KP, sedangkan perlakuan D5 tidak berbeda signifikan (P>0.05)  dengan  KP.  Kelangsungan  hidup  pada  sebelum  dan  setelah  uji  tantang disajikan pada Gambar 1.
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138
Gambar 1  Kelangsungan hidup udang ( L. vannamei ) sebelum uji tantang (akhir perlakuan pemberian ekstrak) dan setelah uji tantang. Huruf berbeda di atas setiap bar dan waktu pengamatan yang sama menunjukkan berbeda Signifikan (P<0.05) antar perlakuan. Keterangan: KN: kontrol negatif; KP: kontrol positif; D2: pemberian ekstrak 2 g/kg pakan; D3: pemberian ekstrak 3 g/kg pakan; D4: pemberian ekstrak 4 g/kg pakan;
D5: pemberian ekstrak 5 g/kg pakan.

## Diferensial Hemosit
Diferensial  hemosit  yang  dihitung  pada  penelitian  ini  adalah  sel  hialin  dan granular.  Persentasi  sel  hialin  sebelum  uji  tantang  mengalami  peningkatan  pada semua  perlakuan,  perlakuan  D3  dan  D4  lebih  tinggi  signifikan  (P<0.05) dibandingkan  dengan  kontrol  dan  perlakuan  D5,  sedangkan  perlakuan  D2  tidak berbeda  signifikan  (P>0.05)  dengan  kontrol.  Persentasi  sel  hialin  setelah  uji tantang  pada  perlakuan  D2,  D3,  dan  D4    berbeda  signifikan  (P<0.05)  dengan kontrol. Persentasi sel hialin pada awal, sebelum, dan setelah uji tantang disajikan pada Gambar 2.
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138
Gambar 2  Sel hialin udang ( L. vannamei ) pada awal, sebelum uji tantang (akhir perlakuan pemberian ekstrak), dan setelah uji  tantang. Huruf berbeda di  atas  setiap  bar  dan  waktu  pengamatan  yang  sama  menunjukkan berbeda signifikan (P<0.05) antar perlakuan. Keterangan: KN: kontrol negatif; KP: kontrol positif; D2: pemberian ekstrak 2 g/kg pakan; D3: pemberian ekstrak 3 g/kg pakan; D4: pemberian ekstrak 4 g/kg pakan; D5: pemberian ekstrak 5 g/kg pakan.
Sel  granular  pada  perlakuan  D3  dan  D4  sebelum  uji  tantang  tidak  berbeda signifikan  (P>0.05)  dengan  perlakuan  D2  tetapi  berbeda  signifikan  (P<0.05) dengan kontrol dan perlakuan D5. Setelah uji tantang sel granular pada perlakuan D2,  D3,  dan  D4  berbeda  signifikan  (P<0.05)  dengan  kontrol  dan  perlakuan  D5. Persentasi sel granular pada awal, sebelum, dan setelah uji tantang disajikan pada Gambar 3.
Gambar  3    Sel  granular  udang  ( L.  vannamei )  pada  awal,  sebelum  uji  tantang (akhir  perlakuan  pemberian  ekstrak),  dan  setelah  uji  tantang.  Huruf berbeda  di  atas  setiap  bar  dan  waktu  pengamatan  yang  sama menunjukkan  berbeda  nyata  (P<0.05)  antar  perlakuan.  Keterangan: KN: kontrol negatif; KP: kontrol positif; D2: pemberian ekstrak 2 g/kg pakan; D3: pemberian ekstrak 3 g/kg pakan; D4: pemberian ekstrak 4
g/kg pakan; D5: pemberian ekstrak 5 g/kg pakan.

## Gejala Klinis
Pengamatan  gejala  klinis  pada  penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengamati perubahan  yang  terjadi  akibat  adanya  infeksi  WSSV  terhadap  udang  uji. Perubahan  gejala  klinis  udang  diamati  setiap  hari  setelah  uji  tantang  meliputi perubahan  secara  morfologis  dan  nafsu  makan.  Perubahan  gejala  klinis  secara morfologis  pada  udang  yang  terinfeksi  WSSV  terjadinya  perubahan  warna kemerahan  ( discolouration )  pada  tubuh,  kaki  renang,  dan  ekor  sedangkan  udang normal pada tubuh, kaki renang, dan ekor berwarna putih bersih. Pada udang yang
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138
terinfeksi WSSV usus kosong serta hepatopankreas berwarna kekuningan (pucat) sedangkan  pada  udang  normal  usus  penuh  dan  hepatopankreas  berwarna  hitam kecoklatan.  Penurunan  nafsu  makan  pada  udang  terinfeksi  WSSV  juga  terjadi pada  hari  pertama  setelah  uji  tantang.  Gambaran  gejala  klinis  pada  udang disajikan pada Gambar 4.
Gambar  4    Gejala  klinis  pada  udang  vaname  setelah  uji  tantang  dengan  WSSV. (A) Udang normal dan (B) Udang terinfeksi WSSV.

## PEMBAHASAN
Kelangsungan hidup udang pada penelitian setelah uji tantang paling tinggi pada  perlakuan  D2,  D3,  dan  D4  berbeda  signifikan  (P<0.05)  dengan kelulushidupan  KP.  Lebih  tingginya  kelangsungan  hidup  pada  perlakuan pemberian  ektrak G.  verrucosa (D2,  D3,  dan  D4) jika  dibandingkan  dengan  KP mengindikasikan  pemberian  pakan  yang  mengandung  ektrak G.  verrucosa pada udang mampu mengendalikan penyakit white spot .
Persentasi  sel  hialin  sebelum  uji  tantang  mengalami  peningkatan  pada semua  perlakuan,  perlakuan  D3  dan  D4  lebih  tinggi  signifikan  (P<0.05) dibandingkan  dengan  KP  dan  perlakuan  D5,  sedangkan  perlakuan  D2  tidak berbeda  signifikan  (P>0.05)  dengan  KP.  Persentasi  sel  hialin  setelah  uji  tantang pada perlakuan  D2, D3,  dan D4 berbeda signifikan (P<0.05) dengan kontrol dan perlakuan  D5.  Peningkatan  sel  hialin  sangat  berhubungan  dengan  aktifitas fagositosis.  Sel  hialin  melakukan  fungsi  dalam  imunitas  sebagai  fagositosis (Thornqvist et  al. 1994).  Sel  hialin  juga  terlibat  dalam  proses  koagulasi  dan pembentukan kutikula (Hose et al. 1992)
Sel  granular  mengalami  penurunan  sebelum  dan  setelah  uji  tantang  jika dibandingkan  dengan  awal.  Penelitian  tahap  dua  pada  perlakuan  D3  dan  D4 sebelum uji tantang tidak berbeda signifikan (P>0.05) dengan perlakuan D2 tetapi berbeda signifikan (P<0.05) dengan KP dan perlakuan D5. Setelah uji tantang sel granular pada perlakuan D2, D3, dan D4 berbeda signifikan (P<0.05) dengan KP dan  perlakuan  D5.  Sel  granular  ini  juga  berperan  dalam  fagosistosis,  dimana berkorelasi  dengan  kapasitasnya  dalam intracellular  killing. Sel  ini  berfungsi dalam  menyimpan  dan  melepaskan  sistem  proPO  maupun  sebagai cytoxicity (Johansson dan Söderhäll 1985).
Perubahan  gejala  klinis  secara  morfologis  pada  udang  yang  terinfeksi WSSV terjadinya perubahan warna kemerahan ( discolouration ) pada tubuh, kaki renang,  dan  ekor  sedangkan  udang  normal  pada  tubuh,  kaki  renang,  dan  ekor berwarna putih bersih. Menurut Lightner (2011) udang yang menunjukkan  gejala klinis  WSSV  berupa  perubahan  warna  tubuh  menjadi  coklat  kemerahan  akibat perluasan  kutikula  dan  kromatofor.  Pada  udang  yang  terinfeksi  WSSV  usus kosong serta hepatopankreas berwarna kekuningan (pucat) sedangkan pada udang normal  usus  penuh  dan  hepatopankreas  berwarna  hitam  kecoklatan.  Menurut Soetrisno  (2004),  infeksi  ringan  untuk  WSSV  menunjukkan  gejala  nafsu  makan dari  udang  akan  menurun  terlihat  dari  usus  yang  kosong,  infeksi  ringan  ini  akan diikuti  pola  kematian  yang  terus  meningkat.  Pada  infeksi  selanjutnya  udang banyak  berwarna  merah  dan  bertubuh  lunak  walaupun  beberapa  masih  ada  yang tubuhnya masih keras.
Dosis  ekstrak G.verrucosa 4  g/kg  pakan  memberikan  hasil  terbaik  untuk meningktakan kelangsungan hidup udang vaname yang diinfeksi dengan  WSSV. Optimalisasi  pemberian  ekstrak G.verrucosa dengan  dosis  yang  tepat  dapat memberikan  hasil  yang  terbaik  pada  kelangsungan  hidup  udang  yang  diinfeksi WSSV.  Hai  (2015) menyatakan dosis  pemberian imunostimulan  pada level  yang optimal  harus  dipertimbangkan.  Ekstrak G.verrucosa yang  memiliki  kandungan sulfated  galactan yang  diberikan  dapat  menstimulasi  sistem  imun  dan  memiliki aktifitas  antiviral  pada  udang  vaname  yang  diinfeksi  dengan  WSSV.  Namun, mekanisme sulfated galactan untuk menstimulasi sistem imun pada udang belum diketahui  secara  pasti.  Wongprasert et  al. (2013)  menyatakan sulfated  galactan yang  mampu  menstimulasi  sistem  imun  pada  udang  mungkin  dimediasi  dengan adanya  interaksi  antara sulfated  galactan dengan  reseptor  pada  permukaan hemosit.  Adanya  ikatan  antara sulfated  galactan dengan  reseptor  mengaktivasi pemberikan  sinyal  untuk  meningkatkan  proliferasi  hemosit  dan  menstimulasi aktifitas sistem imun.

## KESIMPULAN
Dosis  4.000  mg/kg  pakan  memberikan  hasil  terbaik  untuk  meningkatkan kelangsungan hidup udang vaname yang diinfeksi WSSV.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Jaber  NA,  Awaad  AS,  Moses  JE.  2011.  Review  on  some  antioxidant  plants growing in Arab world. Journal of Saudi Chemical Society . 15:293 –307.
Anggadiredja  JT,  Achmad  Z,  Heri  P,  Sri  I.  2006. Rumput  Laut .  Jakarta  (ID): Penebar Swadaya.
Angka SL, Maggy TS. 2000. Bioteknologi Hasil Laut. Bogor (ID): PKSPL-IPB. Baratawidjaja  KG,  2006. Imunologi  Dasar .  Jakarta  (ID):  Balai  Penerbit  FKUI.
Hlm 6-7.
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138
Castro R, Piazzon MC, Zarra  I,  Leiro J, Noya  M,  Lamas J. 2006. Stimulation of turbot  phagocytes by Ulva rigida C. Agardh polysaccharides. Aquaculture . 254:9-20.
Daniels  CL,  Merrifield  DL,  Boothroyd  DP,  Davies  SJ,  Factor  JR,  Arnold  KE. 2010.  Effect  of  dietary Bacillus spp.  and  mannan  oligosaccharides  (MOS) on  European  lobster  ( Homarus  gammarus L.)  larvae  growth  performance, gut morphology and gut microbiota. Aquaculture. 304:49-57.
Hai NV. 2015. The use of medicinal plants as immunostimulants in aquaculture:
A review. Aquaculture. 446:88–96.
Hameed  ASS,  Anilkumar  M,  Raj  M.LS,  Jayaraman  K.  1998.  Studies  on  the pathogenicity  of  systemic  ectodermal  mesodermal  baculovirus  and  its detection in shrimp by immunological methods. Aquaculture . 160:31- 45.
Hose JE, Martin GG, Tiu S, McKrell N. 1992. Patterns of haemocyte production and  release  throughout  the  molt  cycle  in  the  penaeid  shrimp Sycionia ingentis . Biol  Bull . 183:185-199.
Jasmanindar  Y.  2009.  Penggunaan  ekstrak Gracilaria  verrucosa untuk meningkatkan  sistem  ketahanan  udang  vaname Litopenaeus  vannamei [tesis]. Bogor (ID): Sekolah Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor.
Johansson MW, Söderhäll K. 1985. Exocytosis of the prophenoloxidase activating system  from  crayﬁsh  haemocytes. Journal  of  Comp  Physiol. 156  B:175– 181 .
Lightner DV.1996. A Handbook of shrimp patology and diagnostic prosedurs for diseases  of  culture  penaeid  shrimp  in  Asia .  Los  Angeles  (US):  World Aquaculture Society. Baton Rounge. 350 p.
Naidu AS. 2000. Natural food antimicrobial system . Washington DC (US): CRC Press. p 417-427.
Rukyani.  2000.  Masalah  penyakit  udang  dan  harapan  solusinya.  Makalah disampaikan  pada  sarasehan  Akuakultur  Nasional,  5-6  Oktober  2000; Jakarta, Indonesia. Pusat Penelitian dan Pengembangan Perikanan.
Siregar  AF,  Sabdono  A,  Pringgenies  D.  2012.  Potensi  Antibakteri  Ekstrak Rumput  Laut  Terhadap  Bakteri  Penyakit  Kulit Pseudomonas  aeruginosa , Staphylococcus  epidermidis ,  dan Micrococcusluteus. Journal  Of  Marine Research . 1(2):152-160
Sirirustananun N, Chen JC, Lin YC, Yeh ST, Liou CH, Chen LL, Sim SS, Chiew SL.  2011.  Dietary  administration  of  a Gracilaria  tenuistipitata extract
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 1. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 128-138
enhances  the  immune  response  and  resistance  against Vibrio  alginolyticus and white spot syndrome virus in  the white shrimp Litopenaeus vannamei . Fish Shelﬁsh Immunol. 31:848-855 .
Soetrisno  CK.  2004.  Mensiasati  Penyakit  WSSV  di  Tambak. Aquaculture Indonesia . 5: 19-31.
Thornqvist  PO,  Johansson  MW,  Soderhall  K.  1994.  Opsonic  activity  of  cell adhesion  proteins  and  b-1,3-glucan-binding  proteins  from  two  crustaceans. Dev Comp Immunol . 18:3-12.
Wang YG, Shariff M, Sudha PM, Rao PSS, Hassan MD, Tan LT. 1998. Managing white spot disease in shrimp, Info fish International . p : 30-3
Wongprasert  K,  Rudtanatip  T,  Praiboon  J.  2013.  Immunostimulatory  activity  of sulfated  galactans  isolated  from  the  red  seaweed Gracilaria  ﬁsheri and development  of  resistance  against white  spot  syndrome  virus (WSSV)  in shrimp. Fish Shellﬁsh Immunol. 36:52-60 .