## Studi Pertumbuhan dan Aktivitas Enzim Antioksidan pada Kultur In Vitro Tomat Akibat Cekaman Salinitas
Study of Plant Growth and Antioxidant Response to Salinity Stress in Tomato Cultured In Vitro
Deffi Armita *) dan Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun
Jurusan Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Brawijaya Jl. Veteran, Malang 65145 Jawa Timur, Indonesia
Korespondensi : deffiarmita@gmail.com
Diterima 25 November 2019 / Disetujui 21 Januari 2020

## ABSTRAK
Tanaman  yang  tumbuh  pada  lingkungan  yang  tidak  sesuai  akan  memberikan  respon  berupa perubahan  proses  metabolisme  yang  bervariasi  diantara  spesies  dan  varietas.  Tanaman  tomat  tahan salinitas merupakan langkah alternative untuk pemanfaatan tanah salin pada beberapa area di Indonesia. Penelitian ini bertujuan untuk menyeleksi varietas tomat tahan salinitas yang banyak dibudidayakan secara komersial.  Empat  varietas  tomat  (Servo,  Warani,  Karina,  Optima)  ditumbuhkan  dengan  metode  kultur jaringan pada media MS yang disuplai dengan 0, 20, 40, 60 dan 80 mM NaCl. Hasil menunjukkan bahwa varietas  Servo  yang  paling  toleran  terhadap  salinitas,  dengan  persentase  perkecambahan  yang  paling tinggi hingga 20 hari setelah tanam. Varietas Servo kemudian ditumbuhkan lagi pada media yang sama selama  21  hari.  Hasil  analisis  lanjutan  menunjukkan  bahwa  pertumbuhan  bibit  tomat  varietas  Servo dipengaruhi oleh cekaman salinitas pada level 40 dan 80 mM dengan indikator penurunan panjang tunas dan  panjang  akar  serta  bobot  total  disertai  dengan  kenaikan  aktifitas  enzim  catalase  sebagai  enzim antioksidan.
Kata kunci : cekaman salinitas, tomat, in vitro

## ABSTRACT
Plants that growing under inappropriate environment will respond in the form of changes in metabolic processes which varies between species and varieties. Salinity-resistant tomatoes are an alternative step to utilize saline soil in several areas in Indonesia. This study aims to select salinity-resistant tomato variety that are widely cultivated commercially. Four tomato varieties (Servo, Warrant, Karina, Optima) were grown by  tissue  culture  methods  on  MS  media  which  were  supplied  with  0,  20,  40,  60  and  80  mM  NaCl.  The results  showed  that  Servo  variety  was  the  most  tolerant  to  salinity,  with  the  highest  percentage  of germination up to 20 days after planting. Servo variety was further sub-cultured on the same media for 21 days.  The  results  of  the  follow-up  analysis  showed  that  the  growth  of  Servo  tomato  seedlings  was influenced by salinity stress at levels 40 and 80 mM, by showing decreasing of shoot length and root length and total weight followed by an increase in catalase enzyme activity as an antioxidant enzyme. Keywords : salinity stress, tomato, in vitro
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …

## PENDAHULUAN
Tanah salin merupakan masalah serius dalam  bidang  pertanian  yang  mempengaruhi produktivitas  tanaman.  Hal  ini  berkaitan dengan  fakta  bahwa  salinitas  mempengaruhi banyak  aspek  dalam  fisiologi  tanaman, pertumbuhan  dan  perkembangan.  Diantara banyak  jenis  garam  yang  mempengaruhi salinitas  tanah,  NaCl  merupakan  senyawa yang paling banyak dan paling kuat berkaitan dengan  kemampuannya  untuk  bersaing dengan unsur hara esensial dan menyebabkan terjadinya defisiensi unsur hara dan gejala keracunan tertentu pada tanaman (Neto et al ., 2006).
Kebanyakan  kultivar  tomat  bersifat moderat  sensitif  terhadap  salinitas  pada semua  tahapan  perkembangan  tanaman, termasuk perkecambahan, pertumbuhan vegetatif, dan reproduksi yang menyebabkan penurunan  hasil  ekonomis  tomat  pada cekaman  salinitas.  Kadar  garam  yang  dapat ditoleransi  oleh  tomat  berkisar  antara  1,3 dS/m sampai 6 dS/m. Oleh karena itu, tomat akan  mudah  mengalami  kerusakan  sel  saat hidup  pada  media  dengan  salinitas  tinggi. Meskipun  demikian,  tomat  dapat  bertahan hidup dengan mengurangi hasil ekonomisnya (Cuartero  dan  Fernandez,  1999).  Beberapa studi  menunjukkan  bahwa  irigasi  dengan konsentrasi garam moderat dapat meningkatkan mutu buah tomat. Peningkatan ini  terutama  disebabkan  oleh  meningkatnya konsentrasi bahan kering dan padatan terlarut total. Peningkatan padatan terlarut total terjadi melalui osmoregulasi atau pengaturan potensial  osmotik  sel  terhadap  cekaman salinitas.  Selain  itu,  salinitas  juga  dilaporkan dapat  meningkatkan  kandungan  antioksidan dalam  buah  (Gautier et  al .,  2010).  Kajian mutakhir tentang tomat menunjukkan adanya keterlibatan  enzim  yang  bersifat  antioksidatif dalam mekanisme toleransi terhadap cekaman salinitas yang disebabkan oleh NaCl (Mittova et al ., 2000).
Respon  tanaman  terhadap  cekaman salinitas bervariasi antar species dan varietas. Hasil  penelitian  Srinieng et  al .  (2015) menunjukkan bahwa cekaman salinitas dapat menghambat perkecambahan dan pertumbuhan  enam  kultivar  tomat  pada berbagai level. Hasil penelitian juga menunjukkan bahwa secara berurutan konsentrasi  NaCl  rendah,  medium  dan  tinggi dapat meningkatkan, menurunkan dan meningkatkan kembali aktivitas enzim antioksidan.  Pengaruh  lain  dari  salinitas menunjukkan  bahwa  konsentrasi  50mM  dan 75mM  NaCl  mampu  meningkatkan  padatan terlarut  total  sebesar  3,92%  dan  4,03%, sedangkan control hanya mampu meningkatkan  padatan  terlarut  total  sebesar 2,29% (Lu et al ., 2010).
Disisi  lain,  tanaman  yang  berada  pada kondisi  salinitas  tinggi  akan  memproduksi Reactive  Oxygen  Species  (ROS)  seperti superoxide  (O2-),  hydrogen  peroxide (H2O2) dan  hydroxyl  radicals  (OH-).  Peningkatan jumlah  ROS  akan  menyebabkan  terjadinya oksidasi pada komposisi lipid pada membran sel,  denaturasi  protein  dan  kerusakan  asam nukleat (Mittler, 2002). Secara alami, beberapa  tanaman  dapat  mengembangkan beberapa mekanisme perlindungan yang bisa secara efektif mengeliminasi atau mengurangi produksi ROS pada beberapa taraf cekaman. Sebagai  upaya  untuk  mengurangi  dampak kerusakan sel akibat cekaman oksidatif maka tanaman membentuk enzim antioksidan yang dapat mengkatalisis reaksi untuk mengurangi tingkat  detoksifikasi  ROS  secara  langsung maupun tidak langsung di dalam sel tanaman (Pritchard et  al .,  2000).  Enzim  antioksidan yang  dibentuk  oleh  tanaman  diantaranya adalah Glutation Peroksidase (GPX), Glutation Reduktase (GR), Superoxida Dismutase  (SOD),  Ascorbat  Peroksidase (APOD), Katalase, Peroxidase,
Dehydroascorbate  Reduktase  (DAR)  dan Monodehydroascorbate  Reductase  (MDAR)
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
(Pritchard et al ., 2000). Sistem antioksidan di dalam sel tanaman menyediakan perlindungan  melawan  pengaruh  racun  dari ROS. Komponen penting dari sistem perlindungan  itu  adalah  pertahanan  secara enzimatis,  seperti  SOD  dan  katalase  yang dapat  menghindari  O2-  dan  H2O2  selain metabolit  seperti  askorbat,  glutation  dan tokoperol  yang  berfungsi  untuk  mengatur tingkat  keaktifan  oksigen  pada  jaringan tanaman (Bosch dan Alegre, 2002).
Salah  satu  mekanisme  perlindungan terhadap  radikal  bebas  adalah  pembentukan enzim antioksidan diantaranya enzim catalase yang mengeliminasi H 2 O 2 dengan merubahnya menjadi molekul air. Peningkatan taraf  cekaman  pada  tanaman  biasanya  akan diikuti peningkatan enzim antioksidan sehingga  analisis  toleransi  suatu  tanaman terhadap  cekaman  dapat  dilihat  dari  jumlah produksi enzim tersebut.
Penelitian  tentang  pengaruh  salinitas terhadap  pertumbuhan  tomat  telah  banyak dilakukan, namun informasi tentang mekanisme  pertahanan  terhadap  cekaman salinitas secara fisiologis masih terbatas. Oleh karena  itu,  kajian  mengenai  aktivitas  enzim antioksidan  pada  tomat  akibat  cekaman salinitas menarik untuk dikaji. Melalui penelitian ini, juga akan didapatkan informasi mengenai  varietas  tomat  yang  memiliki kemampuan toleran terhadap cekaman salinitas melalui seleksi kultur in vitro.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya pada bulan Juni hingga November 2019. Penelitian terbagi menjadi dua tahapan yaitu  uji  perkecambahan  untuk  seleksi varietas  dan  uji  lanjutan  untuk  analisis aktivitas antioksidan.
Uji  perkecambahan  disusun  dalam Rancangan  Acak  Lengkap  yang  disusun secara faktorial. Faktor pertama adalah kadar NaCl dalam media, yaitu: N0 = 0 mM; N1 = 20
mM; N2 = 40 mM; N3 = 60 mM; N4 = 80 mM. Faktor kedua yaitu varietas tomat yang terdiri dari:  V1  =  Servo;  V2  =  Warani;  V3 =  Karina; V4  =  Optima.  Masing-masing  kombinasi perlakuan  diulang  sebanyak  3  kali  sehingga didapatkan total sebanyak 60 kombinasi.
Untuk  uji  lanjutan  analisis  aktivitas antioksidan  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap dengan perlakuan perbedaan kadar salinitas media seperti pada uji perkecambahan  menggunakan  satu  varietas terpilih.

## Penentuan Kecepatan Perkecambahan Biji
Biji dari empat varietas tomat disterilisasi menggunakan  95%  ethanol  dan  15%  larutan chlorox  masing-masing  selama  10  menit dilanjutkan  dengan  pencucian  menggunakan air  aquades.  Kemudian  biji  ditanam  pada media MS (pH 5,7) yang ditambahkan dengan NaCl  0-80mM  pada  lingkungan  aseptic  25 o C dengan  penyinaran  16  jam/hari  selama  20 hari. Jumlah biji yang tumbuh diamati pada 5, 10, 15 dan 20 hst dan dihitung persentasenya. Varietas  yang  menunjukkan  persentase perkecambahan  paling  tinggi  akan  diseleksi dan  digunakan  untuk  uji  lanjutan  dalam pengukuran aktivitas enzim antioksidan.

## Penentuan Aktivitas Enzim Antioksidan
Biji  yang  berkecambah  dari  varietas terseleksi  selanjutnya  ditumbuhkan  di  media yang sama sesuai perlakuan selama 21 hari. Pengamatan  pertumbuhan  meliputi  panjang batang, panjang akar, bobot batang dan juga bobot  akar  diamati  pada  7,  14  dan  21  hari setelah inkubasi. Sedangkan untuk pengamatan  fisiologis  dilakukan  pengukuran enzim SOD, CAT dan kadar klorofil.

## Analisis Enzim Catalase (CAT)
Penentuan  aktivitas  enzim  katalase didasarkan  pada  metode  Beers  dan  Sizer (1952),  dalam  hal  ini  prinsip  pengukuran adalah  pengukuran  penguraian  H 2 O 2 .  Untuk ekstraksi enzim, sebanyak 0.5 g sampel segar dihaluskan  menggunakan  5  ml  extraction
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
buffer  terdiri  dari  50mM  phosphate  buffered potassium  (PBP,  pH  7.0),  0,4%  polyvinylpoly pyrrolidone (PVP) dan mortar lalu ditempatkan pada  es.  Sebanyak  1,5  ml  campuran  reaksi terdiri  dari  950µl  air  destilasi,  500µl  5,29mM H 2 O 2 dan  50µl  ekstraksi  enzim  disiapkan. Aktivitas  enzim  CAT  dilakukan  dengan mengukur  absorbansi  campuran  reaksi  pada 240nm. Satu unit enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim yang dibutuhkan untuk menghidrolisis  1  mmol  substrat  per  menit pada 25 o C.

## Analisis Klorofil
Pengukuran  Kandungan  klorofil  pada daun  tomat  dilakukan  dengan  menggunakan spektofotometer  (Harborne,  1987).  Sampel daun tanaman tomat dihaluskan dan ditimbang  beratnya  hingga  mencapai  1  g. Hasil ekstraksi daun dicampur dengan aseton 80%  hingga  mencapai  10  ml,  kemudian larutan dihomogenkan sampai klorofil terlarut. Ekstrak  tersebut  disaring  dan  filtrat  yang didapat  ditempatkan  dalam  cuvet  untuk selanjutnya  diukur  kandungan  klorofil  total menggunakan spektofotometer pada panjang gelombang  646  nm,  dan  663  nm.  Setelah didapat  nilai  absorbansi,  kandungan  klorofil dengan  menggunakan  Konsentrasi  klorofil dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut: Klorofil total (mg/100ml) = (17,3 x D646)+ (7,18 x D663)
A646 = Absorbansi pada panjang gelombang 646 nm A663 = Absorbansi pada panjang gelombang 663 nm

## Analisis Data
Data  dianalisis  dengan  menggunakan uji  varian  (ANOVA)  dengan  tingkat  uji  F  5% dan  apabila  terdapat  pengaruh  nyata,  maka dilanjutkan dengan uji DMRT pada tingkat F 5 %.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis  Perkecambahan  Empat  Varietas Tomat
Biji dari empat varietas tomat diuji daya perkecambahannya  dalam  media  dengan beberapa tingkat salinitas dan hasil ditampilkan pada Gambar 1. Pada grafik dapat dilihat  bahwa  biji  dari  Varietas  Servo  yang paling  awal  berkecambah  (5  hari  setelah tanam).  Laju  perkecambahan  pada  varieatas Servo kemudian meningkat secara cepat pada 10  hst  dengan  persentase  perkecambahan mencapai 80-90% pada semua level salinitas dan  mencapai  rata-rata  persentase  100% pada  20  hst.    Perkecambahan  biji  varietas Warani  muncul  mulai  pada  umur  10  hst  dan persentase perkecambahan meningkat secara  bertahap  pada  umur  15  dan  20  hst dengan  persentase  perkecambahan  tertinggi pada  media  dengan  tingkat  salinitas  40  mM. Pola  perkecambahan  yang  sama  didapatkan pada  varietas  Optima,  namun  pada  level salinitas 80 ppm, dengan persentase perkecambahan  yang  hanya  mencapai  60% pada 20 hst. Sedangkan persentase perkecambahan varietas Optima paling tinggi didapatkan pada kontrol (0 mM) dan salinitas 20  mM.  Varietas  Karina  memiliki  laju perkecambahan yang lebih lambat dibandingkan  ketiga  varietas  tomat  yang  lain karena  biji  baru  mulai  berkecambah  setelah 10 hst. Namun pada tingkat salinitas 80 mM, varietas  Karina  dapat  berkecambah  hingga 80% pada 20 hst.
Berdasarkan  hasil  uji  perkecambahan, maka  dapat  disimpulkan  bahwa  varietas Servo  merupakan  varietas  tomat  yang  tahan salinitas  dan  digunakan  untuk  uji  lanjutan. Secara umum, salinitas dapat memperlambat laju perkecambahan karena garam konsentrasi tinggi menurunkan osmotik normal dan berpotensi menyebabkan berkurangnya penyerapan air dan nutrisi yang dibutuhkan untuk perkecambahan. Selain itu, garam atau ion juga bisa menjadi racun bagi
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
embrio  dan  memengaruhi  perkecambahan biji. Hasil percobaan sesuai dengan penelitian Rahman et  al .  (2008)  dan  Srinieng et  al .
(2015) yaitu tingkat keterlambatan
perkecambahan  terkait  langsung  dengan
konsentrasi garam dari medium yang digunakan  atau  dengan  kata  lain,  tingkat keterlambatan terkait langsung dengan jumlah air yang tersedia dan diserap oleh biji.
Gambar 1. Laju perkecambahan empat varietas tomat pada salinitas 0, 20, 40, 60, 80 ppm saat
5, 10, 15 dan 20 hst Disamping konsentrasi garam,
kemampuan toleransi salinitas suatu tanaman dapat  bervariasi  sesuai  dengan  jenis  garam yang  ada  dan  potensi  osmotik  medium (Kayani & Rahman, 1988). Dengan demikian, studi  lebih  lanjut  diperlukan  untuk  mencapai informasi inklusif dari varietas toleransi garam.

## Analisis Pertumbuhan Bibit Tomat
Varietas  tomat  dengan  kemampuan  toleran terhadap  salinitas  seharusnya  tidak  hanya memiliki tingkat perkecambahan biji yang baik di salinitas tinggi, tetapi pertumbuhan bibitnya harus bisa bertahan  dalam kondisi seperti itu juga.
0 50 100 5 10 15 20 % Pe rke cam b ah an Waktu (Hari) Warani 0 20 40 60 80 0 50 100 5 10 15 20 % Pe rke cam b ah an Waktu (Hari) Karina 0 20 40 60 80 0 50 100 5 10 15 20 % Pe rke cam b ah an Waktu (Hari) Optima 0 20 40
60 80
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
Gambar 2. Pengaruh cekaman salinitas pada panjang tunas (a) dan panjang akar (b) perkecambahan varietas Servo pada 7, 14 dan 21 hst
Gambar 3. Pengaruh cekaman salinitas pada bobot total kecambah varietas Servo pada 7, 14 dan 21 hst
Pada  Gambar  2  dapat  dilihat  bahwa cekaman salinitas berpengaruh pada panjang tunas  saat  umur  21  hst.  Tunas  pada perlakuan  80mM  NaCl  secara  nyata  lebih pendek dibandingkan dengan kontrol, namun tidak  berbeda  nyata  dengan  panjang  tunas pada  perlakuan  40mM  NaCl.  Pertumbuhan akar juga dipengaruhi oleh cekaman salinitas pada umur kecambah 7 dan 14 hst (Gambar 2).  Pada  umur  7  hst,  panjang  akar  pada tingkat  salinitas  60  mM  dan  80  mM  secara nyata  lebih  pendek  dibandingkan  kontrol  (0 mM), namun pada 14 hst panjang akar pada 14 hst secara nyata lebih pendek dibandingkan  pada  salinitas  20  mM.  Pada umur  21  hst,  cekaman  salinitas  juga berpengaruh  pada  bobot  total  bibit.  Pada Gambar  3  dapat  dilihat  bahwa  bobot  bibit secara  signifikan  turun  pada  level  NaCl  40
dan  80  mM  dibandingkan  dengan  kontrol. Tunas  dan  akar  yang  lebih  pendek  adalah respon  umum  dari  salinitas  yang  juga menyebabkan  penurunan  bobot  total  bibit. Pertumbuhan  menurun  secara  signifikan dengan  peningkatan  level  NaCl  disebabkan oleh  stress  osmotik,  toksisitas  ion  dan ketidakseimbangan nutrisi (Bernstein, 1964). Pertumbuhan  kecambah  varietas  Servo terdapat pada Gambar 4.

## Analisis Kandungan Klorofil
Kandungan  klorofil  pada  daun  tomat dianalisis sebagai indikator perubahan fisiologis tanaman terhadap cekaman salinitas.  Data  analisis  klorofil  menunjukkan bahwa secara signifikan, penurunan kandungan klorofil paling banyak terjadi pada perlakuan     NaCl      40   mM     (Gambar 6).
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
Servo 7hst
14 hst
21 hst
(a) (b) (c) (d) (e)
Gambar 4. Karakteristik pertumbuhan perkecambahan tomat varietas Servo pada konsentrasi NaCl: (a) 0 mM, (b) 20 mM, (c) 40 mM, (d) 60 mM, (e) 80 mM saat umur 7, 14 dan
21 hst
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
(a) (b) (c) (d) (e)
Gambar 5. Karakteristik daun pada perkecambahan varietas Servo pada media MS dengan berbagai konsentrasi NaCl pada umur 21 hst. Konsentrasi NaCl: (a) 0 mM, (b) 20 mM, (c) 40
mM, (d) 60 mM, (e) 80 mM
Gambar 6. Pengaruh cekaman salinitas pada kandungan klorofil daun varietas Servo pada 7, 14 dan 21 hst
Gambar 7. Pengaruh cekaman salinitas terhadap aktivitas enzim Catalase pada daun varietas Servo pada 7, 14 dan 21 hst
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
Penurunan kandungan klorofil ini disebabkan oleh  penghambatan  penyerapan  nutrisi karena faktor salinitas. Selanjutnya perubahan  warna  pada  daun  terlihat  pada umur  21  hst  (Gambar  5).  Pada  gambar  5 defisiensi  nitrogen  nampak  pada  semua perlakuan  pemberian  NaCl  dengan  gejala daun kekuningan (klorosis). Bahkan menurut Cha-Um  dan  Kirdmanee  (2009),  salinitas menurunkan  konsentrasi  total  klorofil  dua varietas  jagung.  Berkurangnya  konsentrasi klorofil  mungkin  disebabkan  oleh  efek penghambatan akumulasi ion (Ali, 2004).

## Aktivitas Enzim Antioksidan
Catalase  merupakan enzim yang terlibat  pada  degradasi  hidrogen  peroksida menjadi  air  dan  oksigen  dan  merupakan enzim  antioksidan  yang  paling  efektif  dalam pencegahan kerusakan oksidatif. Hasil analisis  aktifitas  enzim  catalase  pada  daun tomat akibat cekaman salinitas pada Gambar 7 menunjukkan tren kenaikan aktifitas enzim seiring  dengan  peningkatan  kadar  salinitas. Peningkatan  aktivitas  catalase  dengan  pola yang  sama  juga  ditemukan  pada  penelitian Srinieng et al . (2015), yaitu meningkat hingga pada cekaman salinitas 100 mM. Perubahan aktifitas  enzim  catalase  bergantung  pada spesies, tahap perkembangan dan metabolisme tanaman, sesuai dengan durasi dan intensitas (Chaparzadeh et al ., 2004).

## KESIMPULAN
1.  Cekaman salinitas (NaCl) dapat menghambat  perkecambahan  biji  dan pertumbuhan  bibit  pada  empat  varietas tomat tetapi pada level yang berbeda.
2.   Varietas Servo menunjukkan pertumbuhan  yang  baik  pada  cekaman salinitas  20  dan  60  mM,  ditunjukkan dengan respon aktivitas enzim antioksidan yang tinggi.
3.  Servo  terbukti  sebagai  varietas  yang tahan  terhadap  cekaman  salinitas  dan
dapat  dijadikan  varietas  rekomendasi untuk pengembangan tanaman tomat di daerah salin.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terimakasih  kepada  Fakultas Pertanian  Universitas  Brawijaya  yang  telah memberikan  pendanaan  penelitian  melalui dana PNBP.

## DAFTAR PUSTAKA
Ali,  Y.,  Z.  Aslam,  M.  Y.  Ashraf,  and  G.  R.
Tahir.  2004.  Effect  of  salinity  on chlorophyll  concentration,  leaf  area, yield  and  yields  components  of  rice genotypes grown under saline environment. Environmen.Sci. Technol . 1(3) : 221-226
Beers,  R.F.  and  I.W.  Sizer.  1952.  A spectrophotometric method for measuring the breakdown of hydrogen peroxide  by  catalase.  J.  Biol.  Chem 195: 133-140
Bernstein,  L.  1964.  Effects  of  salinity  on mineral  composition  and  growth  of plants. Plant Anal. Fert. Probl. olloq., 4: 25-45.
Bosch M and L. Alegre. 2002. The function of tocopherols  and  tocotrienols  in  plants. Crit. Rev. In Plant Sci . 21(1): 31-57 Chaparzadeh, N., M.L. Amico, R.K. Nejad, R.
Izzo and F.N. Izzo. 2004. Antioxidative responses  of Calendula  officinalis under salinity conditions. Plant Physiol.
Biochem. 42 (9): 695-701.
Gautier  H.,  F.L  Lauri,  C.  Masscot,  R.
Murshed,  I.  Marty,  D.  Grassely,  C. Keller,  H.  Sallanon  and  M.  Genard. 2010. Impact of ripening and salinity on tomato  fruit  ascorbate  content  and enzymatic activities related to ascorbate  recycling.  Functional  Plant Sci. and Biotech . 4 (1): 66-75
Deffi Armita & Nur Alfiyana Wardhani Alawiyatun, Studi Pertumbuhan dan …
Mittler R. 2002. Oxidative stress, antioxidants and stress tolerance. Trends Plant Sci. 7 (9): 405-410.
Mittova  V,  M.  Volokita,  M  Guy  and  M  Tal. 2000. Activities of SOD and ascorbate- glutathione cycle enzymes in
subcellular compartments in leaves and roots  of  the  cultivated  tomato  and  its wild  salt-tolerant  relative Lycopersicon pennellii . Physiol. Plant. 110 (1): 42-51 Kayani,  S.A.  and  M.  Rahman.  1988.  Salt tolerance in Corn ( Zea mays L.) at the germination  stage.  Pak.  J.  Bot.,  19:  9-
15.
Lu,  S.,  T.  Li  and  J.Jiang.  2010.  Effects  of salinity  on  sucrose  metabolism  during tomato  fruit  development.  African  J.  of Biotech. 9(6): 842-849.
Neto, A.D.A, J. T. Prisco, J.E. Filho, C.E.B de
Abreu  and  E.G.  Filho.  2006.  Effect  of salt  stress  on  antioxidative  enzymes and  lipid  peroxidation  in  leaves  and roots  of  salt-tolerant  and  salt-sensitive maize  genotypes.  Environ.  Exper.  Bot . 56(1): 87-94.
Pritchard,  S.G,  Z.  Ju,  E.V.  Santen,  J.  Qiu, D.B. Weaver, S.A. Prior and H. Roger. 2000. The influence of elevated CO 2 on the  activities  of  antioxidative  enzymes in  two  soybean  genotypes.  Aust.  J. Plant Physio.l 27(11): 1061-1068. Rahman,  M.U.,  U.A.  Soomro,  M.  Zahoor-ul- Haq and S. Gul. 2008. Effects of NaCl salinity on wheat (T riticum aestivum L.) cultivars. World J. Agri. Sci. 4 (3): 398- 403.
Srinieng, K., T. Saisavoey and A. Karnchanatat.  2015.  Effect  of  salinity
stress on antioxidative enzyme activities  in  tomato  cultured  in  vitro. Pak. J. Bot. 47(1): 1-10.