Potensi Antibakteri Ekstrak Etanol Herba Meniran Hijau ( Phyllanthus niruri Linn.) dalam Menghambat Pertumbuhan Staphylococcus aureus
Vector Stephen Dewangga 1) , Muhammad Taufiq Qurrohman 2) 1,2 Program Studi D-IV Teknologi Laboratorium Medis Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional Jl. Raya Solo - Baki Kwarasan, Grogol, Sukoharjo, 57552 vector.stephen@stikesnas.ac.id m.taufiqqurrohman@stikesnas.ac.id

## ABSTRAK
Penggunaan  bahan  alam  semakin  meningkat  dan  masih  menjadi  andalan  di  beberapa  negara berkembang.  Penelitian  kali  ini  menggunakan  ekstrak  etanol  dari  herba Phyllanthus  niruri Linn.  Dalam usaha menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus . S. aureus merupakan salah satu mikroflora normal di wajah yang berperan dalam infeksi jerawat.
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  dengan  7 perlakuan dan 5  ulangan. Perlakuan yang digunakan  adalah pemberian ekstrak etanol herba P. niruri Linn. untuk  konsentrasi  5%;  25%;  50%;  75%;  100%,  pengenceran  menggunakan  pelarut  DMSO  10%.  Kontrol positif  menggunakan  ciprofloxacin,  sedangkan  kontrol  negatif  menggunakan  DMSO  10%.  Zona  hambat yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  uji  Kolmogorov–Smirnov  dan  uji  homogenitas  Levene.  Apabila variansi data homogen, maka dilanjutkan analisis dengan Anova yang dilanjutkan dengan uji Post Hoc . Dari  perhitungan  kontrol  negatif,  variasi  konsentrasi  (5%,  25%, 50%,  75%, 100%)  dan  kontrol  positif diperoleh  rata-rata  zona  radikal  berturut  sebesar  6  mm;  7,46  mm;  7,52  mm;  7,6  mm;  8,52  mm;  8,98  mm; 31,08 mm. Semua variasi konsentrasi ekstrak etanol herba P. niruri Linn. mampu menghasilkan zona hambat radikal  dengan  zona  hambat  terbesar  tetap  dijumpai  pada  kontrol  positif.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa konsentrasi  ekstrak  etanol  herba P.  niruri Linn.  yang  semakin  besar  akan  berbanding  lurus  dengan peningkatan aktivitas penghambatan, namun belum seoptimum kontrol positif.
Kata Kunci: Phyllanthus niruri Linn., Staphylococcus aureus , aktivitas penghambatan

## ABSTRACT
The  use  of  natural  materials  is  increasing  and  is  still  a  mainstay  in  several  developing  countries.  This research  was  used  ethanol  extract  from  herb Phyllanthus  niruri Linn.  in  an  effort  to  inhibit  the  growth  of Staphylococcus aureus . S. aureus is one of the normal microflora on the face that helps infection.
This research is an experimental study  used a completely randomized design with 7 preparations and 5 replications. The treatment used ethanol extract of P. niruri Linn herb. for a concentration of 5%; 25%; 50%; 75%;  100%,  the  dilution  used  10%  DMSO  solvent.  Positive  controls  used  ciprofloxacin,  while  negative controls  used DMSO 10%. The inhibition zone obtained was analyzed using the Kolmogorov-Smirnov test and the Levene homogeneity test.  If  the data variance  is  homogeneous, then  the analysis  is  continued with ANOVA followed by the Post Hoc test.
From  the  calculation  of  negative  controls,  various  concentration  (5%,  25%,  50%,  75%,  100%)  and positive  controls  obtained  an  average  radical  zone  of  6  mm;  7.46  mm;  7.52  mm;  7.6  mm;  8.52  mm;  8.98 mm; 31.08 mm. All variations in the concentration of ethanol extract of P. niruri Linn. herbs able to produce a radical inhibition zone with the largest inhibition zone still found in positive controls. This showed that the greater concentration of ethanol extract of P. niruri Linn. herb. will be directly proportional to the increase in inhibition activity, but not optimal as much as positive control.
Keywords : Inhibition activity, Phyllanthus niruri Linn. ,Staphylococcus aureus

## 1. PENDAHULUAN
Jerawat  merupakan  salah  satu  penyakit  kulit karena  abnormalitas  produksi  sebum  pada kelenjar  sebasea  yang  biasa  muncul  pada  masa remaja  dan  dapat  sembuh  dengan  sendirinya secara  spontan  (Ghodsi et  al .,  2009).  Insiden jerawat 80-100 % terjadi pada usia dewasa muda, yaitu  umur  14-17  tahun  pada  wanita,  dan  16-19 tahun  pada  pria  (Andy,  2009). Staphylococcus aureus merupakan  bakteri  patogen  yang  dapat menyebabkan infeksi pada manusia, salah satunya adalah  menjadi  penyebab  jerawat  dan  abses  pada luka  (Razak  dkk.,  2013).  Penelitian  di  beberapa negara  ditemukan  bahwa S.  aureus resisten terhadap  obat  golongan  penisilin  dan  juga turunannya  seperti  methicillin  (Michael,  2012).
Pencegahan resistensi
adalah dengan
memanfaatkan kembali bahan alami bagi kesehatan, terutama obat-obatan yang berasal dari tumbuhan,  karena  pengobatan  tradisional  dengan menggunakan bahan alam harganya lebih terjangkau, mudah didapat dan efek samping yang rendah.  (Aryadi,  2014).  Penggunaan  bahan  alam semakin meningkat dan masih menjadi andalan di beberapa negara berkembang (Upton et al. , 2015).
Peningkatan  produk  obat  herbal  yang  beredar  di masyarakat  karena  bahan  alam  mudah  diperoleh, harganya relatif lebih murah dan efek sampingnya juga  kecil,  kemungkinan  terjadinya  interaksi  dan ketergantungan  juga  kecil  dibandingkan  obat sintetis (Lynch and Berry,2007).
Salah  satu  tumbuhan  yang  dimanfaatkan dalam  pengobatan  tradisional  adalah  meniran ( Phyllanthus  niruri Linn.).  Genus Phyllanthus merupakan  kelompok  tanaman  yang  sebagian besar  anggotanya  telah  digunakan  sebagai  obat herbal.  Berdasarkan  penelitian,  anggota  genus Phyllanthus memiliki senyawa aktif yang berperan sebagai anti viral (Liu et al., 2001; Yang et  al., 2012),  anti  kanker  (Huang et  al., 2004), hepatoprotektif (Sharma and Rameshbabu , 2012), antioksidan  (Chularojmontri et  al., 2005;  Karuna et  al., 2009). Phyllanthus  niruri Linn.  dapat digunakan  sebagai  ramuan  untuk  mengobati  sakit kuning,  malaria,  ayan,  demam,  batuk,  haid berlebihan,  disentri,  luka  bakar,  luka  koreng, radang  ginjal,  susah  berkemih,  infeksi  dan  batu saluran  kemih,  serta  jerawat  (Mustarichie,  2011). Selain  dikonsumsi  sebagai  obat, P.  niruri Linn. juga  digunakan  pada  pemakaian  luar.  Kandungan senyawa  aktif  dalam P.niruri Linn.,  antara  lain filantin, hipofilantin, filtetralin, alkaloid, terpenoid, tanin, dan glikosida flavanon (Gunawan, 2006).

## 2. PELAKSANAAN
a. Tempat Penelitian
Pengambilan  sampel  herba P.  niruri Linn. dilakukan  di  Kelurahan  Bentakan,  Kecamatan Baki.  Tempat  pembuatan  ekstrak  etanol dilakukan  di  Laboratorium  Farmasi  STIKES Nasional.  Tempat  pemeriksaan  dilakukan  di Laboratorium  Bakteriologi  Sekolah  Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional.
b. Waktu Penelitian
Penelitian  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak etanol  herba P.  niruri Linn.  terhadap pertumbuhan S.  aureus dilakukan  pada  bulan September 2017 sampai dengan bulan Desember 2017.

## 3. METODE PENELITIAN
Pengumpulan  Sampel  Herba. P.  niruri Linn.  diambil  seluruh  bagian  termasuk  akarnya. Dikumpulkan  dengan  jumlah  kurang  lebih  3  kg dalam  keadaan  segar.  Dilakukan  pencucian  dan dikeringkan  menggunakan  panas  matahari  dan ditutup  dengan  kain  hitam.  Setelah  kering, P. niruri Linn.  dipotong-potong  dan  digerus  dengan lumpang serta alu.
Pembuatan Ekstrak. Simplisia herba P.niruri Linn  sebanyak  300  gram  dimasukkan  ke dalam  wadah  dan  dimaserasi  menggunakan pelarut  etanol  96%  sebanyak  2  kali.  Maserasi  I menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  2,25 liter, direndam selama 5 hari sambil diaduk setiap hari.  Residu  yang  didapat  tersebut  diekstraksi kembali menggunakan 750 ml pelarut etanol 96% selama  2  hari,  lalu  disaring.  Filtrat  hasil  maserasi yang  diperoleh  dipekatkan  dari  sisa  pelarutnya dengan rotary  evaporator dengan  suhu  50˚C. Ekstrak  kental  yang  didapat  diuapkan  kembali diatas waterbath dan  disimpan  di  lemari pendingin.
Pembuatan Variasi Konsentrasi. Pembuatan konsentrasi ekstrak sebagai berikut:
1. Konsentrasi  100%  =  20  gram  ekstrak dilarutkan dalam 20 ml DMSO 10%
2. Konsentrasi  75%  =  7,5 ml  ekstrak  konsentrasi 100% ditambahkan 2,5 ml DMSO 10%
3. Konsentrasi  50%  =  5  ml  ekstrak  konsentrasi 100% ditambahkan 5 ml DMSO 10%
4. Konsentrasi  25%  =  2,5 ml  ekstrak  konsentrasi 100% ditambahkan 7,5 ml DMSO 10%,
5. Konsentrasi  5%  =  0,5  ml  ekstrak  konsentrasi 100% ditambahkan 9,5 ml DMSO 10%,
Perlakuan  Uji  Antimikroba  Metode  Difusi Uji  Kirby-Bauer. Uji  antimikrobia  dilakukan tahapan antara lain :
1.  Pembuatan  suspensi  bakteri  uji S.  aureus dari biakan    pada  media  caso  diambil  di  bagian lereng kurang lebih 2 ohse dan dibuat suspensi dalam  tabung  yang  berisi  media  NaCl  0,9% yang kekeruhannya disesuaikan dengan kekeruhan  standar  Mc  Farland  No.  0,5  (1,5  x 10 8 CFU/ml) dan dihomogenkan.
2.  Suspensi  bakteri  diokulasikan  secara  perataan pada  media  NA plate dengan  menggunakan kapas lidi steril secara aseptis.
3.  Suspensi  bakteri  diinkubasi  pada  suhu  ruang selama 15 menit
4. Blank  disc antimikroba  steril  direndam  pada masing-masing  variasi  konsentrasi  ekstrak P.niruri Linn.  selama  5  menit.  Disk  antibiotik ciprofloxacin  5  µg  dipakai  sebagai  kontrol positif  dan  DMSO  10%  sebagai  kontrol negatif.
5. Masing-masing perlakuan diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam.
6.  Pengulangan  dilakukan  sebanyak  5  kali  dari masing-masing konsentrasi.
7. Hasil dibaca secara visual menggunakan jangka sorong  berdasarkan  diameter  zona  hambat yang terbentuk (zona radikal).
Analisis  Data. Hasil  dianalisis  dengan  uji One  Way  Anova kemudian  dilanjutkan  dengan Post Hoc Test dengan metode DMRT.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  (Tabel  1.  dan  Gambar  1.) menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  herba P. niruri Linn . mampu menghambat pertumbuhan S. aureus, ditandai dengan terbentuk  zona  radikal di sekitar disc  diffusion pada  semua  variasi konsentrasi.
Penelitian  ini  mendukung  Lai et  al. (2008) bahwa terdapat senyawa anti bakteri pada herba P. niruri Linn.Selvamohan et al. (2012) menyatakan bahwa ekstrak etanol herba P. niruri Linn. mampu menghambat
pertumbuhan
bakteri Pseudomonas sp. , Klebsiella sp., Staphylococcus sp. dan Escherichia  coli. Kanthimathi  dan  Soranam (2013)  telah  meneliti  rebusan  air  herba P.  Niruri Linn mampu secara efektif menghambat pertumbuhan  bakteri  Gram  positif  ( Lactobacillus sp.),  namun  tidak  mampu  menghambat  bakteri Gram negatif( Pseudomonas sp. dan Proteus sp.).
Tabel 1. Diameter Zona Hambat Radikal Ekstrak Etanol Herba P. niruri Linn. terhadap
Pertumbuhan Staphylococcus aureus
Ulangan K (-) (mm) Zona Hambat (Radikal) Tiap Variasi Konsentrasi (mm) K (+) (mm) 5% 25% 50% 75% 100% 1 6 7.2 7.2 7 8.3 9.5 31.9 2 6 8 8 8.3 7.5 8.5 27.3 3 6 7.5 8.1 8 9.2 9.5 37
4 6 7.9 8.3 7.9 8.7 9.2 31.9 5 6 6.7 6 6.8 8.9 8.2 27.3 Rata-rata 6 7.46 7.52 7.6 8.52 8.98 31.08
Gambar 1. Grafik hasil uji daya hambat ekstrak etanol herba Phyllanthus niruri Linn. terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus

## Tabel 2. Hasil Uji ANOVA
Tabel 3. Hasil Uji Post-Hoc Daya Hambat Ekstrak Etanol Daun Phyllanthus niruri Linn.Terhadap Staphylococcus aureus Konsentrasi Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) Kontrol (-) 6 a 5% 7,46 ab 25% 7,52 ab 50% 7,60 ab 75% 8,52 b 100% 8,98 b Kontrol (+) 31,08 c
0 5 10 15 20 25 30 35 ANOVA Perlakuan Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 121.000 18 6.722 5.661 .001 Within Groups 19.000 16 1.188 Total 140.000 34
Keterangan :  Huruf  yang  berbeda  di  belakang  angka  menunjukkan beda signifikan berdasarkan uji post-hoc metode DMRT dengan  p< 0,05
Aktivitas  antibakteri  dapat  dipengaruhi  oleh beberapa  faktor  yaitu  konsentrasi ekstrak, kandungan  senyawa  antibakteri,  daya  difusi ekstrak  dan  jenis  bakteri.  Adanya  penambahan konsentrasi maka kandungan senyawa antibakterinya  akan  semakin  besar  sehingga semakin  banyak  pula  senyawa  antibakteri  yang berdifusi ke dalam sel bakteri dengan mekanismenya  masing-masing  dan  zona  hambat juga semakin besar (Yunizar dkk., 2014).
Aktivitas  penghambatan S.  aureus oleh ekstrak  etanol  daun P.  niruri Linn.disebabkan oleh  adanya  pengaruh  senyawa  zat  aktif  yang terdapat  dalam  ekstrak  tersebut.  Beberapa senyawa  zat  aktif  yang  terkandung  dalam  ekstrak etanol  daun P.  niruri Linn  antara  lain  senyawa turunan  alkaloid,  flavonoid,  tanin  dan  steroid (Putra, 2010).
Flavonoid termasuk dalam golongan senyawa  phenolik  dengan  struktur  kimia  C6-C3- C6.  Flavonoid  merupakan  salah  satu  kelompok senyawa  metabolit  sekunder  yang  paling  banyak ditemukan di dalam jaringan tanaman (Redha,2010).  Flavonoid  merupakan  golongan terbesar  dari  senyawa  fenol  yang  memiliki senyawa efektif menghambat pertumbuhan bakteri, jamur dan virus (Rahayu, 2013).Mekanisme kerja flavonoid sebagai antibakteri  dapat  dibagi  menjadi  3  yaitu menghambat  sintesis  asam  nukleat,  menghambat metabolisme  energi  bakteri  dan  mengganggu sintesis dinding bakteri sehingga terjadi kebocoran  plasma  yang  diakhiri  dengan  lisisnya bakteri (Dewi, 2013). Hal ini sama halnya dengan yang  dikatakan  Retnowati  dkk  (2011)  bahwa flavonoid  juga  memiliki  ion  H + yang  mampu menyerang  gugus  polar  (gugus  fosfat)  sehingga molekul  fosfolipida  akan  terurai  menjadi  gliserol, asam karboksilat dan asam fosfat yang mengakibatkan fosfolipida tidak mampu mempertahankan bentuk membran sitoplasma dan bakteri  akan  mengalami  hambatan  pertumbuhan bahkan  kematian.  Ikatan  hidrogen  pada  flavonoid juga  berperan  dalam  mengganggu  sintesis  DNA pada bakteri dan mengganggu metabolisme energi bakteri (Ngajow dkk., 2013).
Tanin  adalah  kelompok  polifenol  yang  larut dalam air denganberat molekul antara 500  -  3000 gr/mol.  Tanin  atau  lebih  dikenal  dengan  asam tanat,  biasanya  mengandung  10%  H 2 O  (Fajriati, 2005).  Tanin  memiliki  mekanisme  antimikroba yang  berhubungan  dengan  kemampuan  tanin
dalam  menginaktivasi  adhesin  sel  mikroba  yang terdapat  pada  permukaan  sel  (Sari,  2011).  Tanin juga  memiliki  aktivitas  antibakteri  dengan mempresipitatkan  atau mendenaturasi protein dan destruksi  atau  inaktivasi  materi  genetik  yang berada  pada  sel  bakteri  (Fitriani,  2014).  Tanin memiliki  ion  H + berikatan  dengan  protein  yang mengakibatkan pH menjadi asam sehingga protein terdenaturasi dan kondisi asam dapat menginaktifkan  enzim  pada  bakteri,  hal  tersebut menyebabkan metabolisme terganggu dan bahkan berakibat kematian sel bakteri (Dewi dkk., 2014). Menurut  Rijayanti  (2014)  tanin  mempunyai  daya antibakteri  dengan  menginaktifkan  enzim  dan mengganggu transport protein pada lapisan dalam sel  serta  mengganggu  polipeptida  dinding  sel sehingga  pembentukan  dinding  sel  kurang sempurna,  hal  ini  menyebabkan  sel  bakteri menjadi  lisis  karena  tekanan  osmotik  maupun fisik.
Saponin adalah jenis glikosida dari sapogenin dan memiliki  karakteristik berupa  busa bila  dikocok  dalam  air.  Saponin  mudah  larut dalam air dan alkohol tetapi tidak larut dalam eter. Mempunyai  rasa  pahit  dan  dapat  menyebabkan iritasi  (Liemdkk.,  2013).  Saponin  bekerja  sebagai antibakteri  dengan  cara  membentuk  senyawa kompleks  dengan  membran  sel  melalui  ikatan hidrogen,  sehingga  dapat  menghancurkan  sifat permeabilitas dinding sel yang akhirnya menimbulkan  kematian  sel  (Rinawati,  2010). Rijayanti  (2014)  menyatakan  bahwa  saponin sebagai  antibakteri  yang  dapat  menyebabkan kebocoran  protein  dan  enzim  dari  dalam  sel dengan  cara  saponin  berdifusi  melalui  membran luar  dan  dinding  sel  yang  rentan  kemudian mengikat membran sitoplasma sehingga mengganggu dan mengurangi kestabilan membran sel.  Akibat  dari  gangguan  ini,  sitoplasma  bocor keluar  dari  sel  yang  mengakibatkan  kematian  sel. Agen  antibakteri  yang  mengganggu  membran sitoplasma memiliki sifat bakterisida.
Senyawa  alkaloid  umumnya  mencakup senyawa  yang  bersifat  basa  yang  mengandung satu  atau  lebih  atom  nitrogen  (Nuraini,  2007). Golongan  senyawa  ini  biasanya  memiliki  rasa pahit  serta  memiliki  aktivitas  farmakologis  pada manusia dan  hewan (Forestrania, 2012).  Senyawa alkaloid  terdapat  gugus  basa  yang  mengandung nitrogen  yang  dapat  bereaksi  dengan  senyawa asam  amino  yang  menyusun  dinding  sel  bakteri dan DNA bakteri. Reaksi tersebut akan mengakibatkan  terjadinya  perubahan  struktur  dan susunan asam amino, sehingga akan menimbulkan perubahan  keseimbangan  genetik  pada  rantai
DNA  sehingga  akan  mengalami  kerusakan  dan mendorong  terjadinya  lisis  sel  bakteri  yang  akan menyebabkan  kematian  sel  bakteri  (Rinawati, 2010).  Selain  itu  menurut  Rijayanti  (2014) alkaloid  bekerja  sebagai  antibakteri  dengan  cara menghambat enzim topoisomerase sel bakteri. Penelitian  ini  menggunakan  kontrol  negatif DMSO  yang  tidak  memiliki  senyawa  antibakteri, sehingga  tidak  membentuk  zona  hambat  radikal. Kontrol  positif  menggunakan ciprofloxacin 5  µg yang  mampu  membentuk  zona  radikal  dengan rata-rata  diameter  sebesar  24,67  mm  pada pertumbuhan S.  aureus, menurut  standar  CLSI (2014) dapat dikategorikan sensitif. Ciprofloxacin merupakan  antibiotik  golongan  kuinolon  baru dengan  atom  fluor  pada  cincin  kuinolon. Fluorokinolon  mempunyai  daya  antibakteri  yang lebih  besar  dan  toksisitas  yang  lebih  rendah. Ciprofloxacin akan menghambat enzim topoimerase  II  (DNA  girase)  dan  enzim topoimerase  VI  pada  bakteri.  Enzim  topoimerase II  berfungsi  menimbulkan  relaksasi  dan  DNA yang mengalami positive supercoiling pada waktu transkrip  dalam  proses  replikasi  DNA.  enzim topoimerase VI berfungsi dalam pemisahan  DNA baru yang terbentuk setelah proses replikasi DNA bakteri terbentuk (Dima dkk., 2016)
5. SIMPULAN DAN SARAN a. Simpulan Ekstrak etanol herba meniran hijau ( Phyllanthus  niruri Linn.)  mampu  menghambat pertumbuhan Staphylococcus  aureus ,  namun belum dijumpai konsentrasi optimal pada perlakuan  ekstrak  etanol  herba P.  niruri Linn.yangmampu menyamai kontrol positif ( ciprofloxacin )  dalam  menghambat  pertumbuhan S. aureus . b. Saran Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  dengan konsentrasi ekstrak satuan ppm (µg/ml) . Selain itu juga perlu dilakukan fraksinasi dan isolasi ekstrak etanol  daun P.  niruri  Linn. untuk  mengetahui fraksi  mana  yang  berperan  dalam  menghambat pertumbuhan S. aureus .

## 6. UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih kepada LPPM STIKES Nasional  yang  telah  mendanai  penelitian  dan segenap  pihak  yang  telah  berkontribusi  dalam kelancaran pelaksanaan penelitian ini

## 7. REFERENSI
Andy.  2009.  Pengetahuan  dan  Sikap  Remaja SMA  Santo  Thomas  1  Medan  Terhadap
Jerawat. Karya  Tulis  Ilmiah .  Universitas Sumatera Utara, Medan.
Aryadi,  I.  G.  A.  I.  P.  2014.  Pengaruh  Ekstrak Daun  Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)
Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus Sebagai  Penyebab  Abses  Periodontal Secara In Vitro. Skripsi. Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Mahasaraswati, Denpasar. Chularojmontri,  L.,  Wattanapitayakul,  S.K.,
Herunsalee,  A.,  Charuchongkolwongse,  S., Niumsakul, S., Srichairat, S. 2005.
Antioxidative  and cardioprotective effects of Phyllanthus  urinaria L.  on  doxorubicin- induced  cardiotoxicity. Biol  Pharm  Bull. 28
(7) : 1165-71
Dewi,  A.K.  2013.  Isolasi,  Identifikasi  dan  Uji Sensitivitas Staphylococcus  aureus terhadap Amoxicillin  dari  Sampel  Susu  Kambing Peranakan Ettawa (PE) Penderita Mastitis di Wilayah Girimulyo, Kulonprogo, Yogyakarta. Jurnal  Sain  Veteriner 31(2): 138-150
Dewi , M.K., Ratnasari, E., Trimulyono, G. 2014.
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Majapahit  ( Crescentia  cujete )  terhadap
Pertumbuhan Ralstonia solanacearum Penyebab Penyakit Layu. Jurnal Lentera Bio 3(1): 51-57
Dima, L.L.R.H,.Fatimawati,. Lolo, W.A. 2016. Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Kelor ( Moringa  olelfera L.)  terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus . Jurnal Ilmiah Farmasi 5(2): 282-289
Fajriati,  I.  2005.  Optimasi  Metode  Penentuan
Tanin (Analisis Tanin secara Spektrofotometri denganPereaksi Orto- Fenantrolin). Jurnal Kaunia 2(2): 108-120 Fitriani,  E.  2014.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Etanol DaunSirsak ( Annona muricata L.) Terhadap Shigella flexneri Secara In  Vitro . Naskah  Publikasi.
Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura, Pontianak
Forestrania,  R.C.  2012.  Isolasi,  Karakterisasi  dan
Uji Aktivitas Antioksidan Senyawa Alkaloid dari  Kulit  Batang Phoebe  declinata Nees. Skripsi. Fakultas MIPA Universitas
Indonesia
Ghodsi S. Z., Helmut O. and Christos C. Z. 2009. Prevalence,  Severity,  and  Severity  Risk
Factors  of  Acne  in  High  School  Pupils:  A Community-Based Study. Journal of investigative Dermatology (129): 2136-2141. Gunawan.  2011.  Pengaruh  infusa  meniran ( Phyllanthus niruri Linn.) konsentrasi

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada – Juli 2019
bertingkat terhadap produksi ookista Eimeria tenella pada  tinja  ayam. Skripsi .  Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Huang,  S.  T.,  Yang,  R.  C,  Pang,  J.  H.  2004.
Aqueous  extract  of Phyllanthus  urinaria induces  apoptosis  in  human  cancer  cells. Am J Chin Med. 32(2):175-83.
Kanthimathi,  M  and  Soranam,  R.  2013. Antibacterial  effects  of Emblica  officinalis and Phyllanthus  niruri crude  extractsagainst bacterial pathogens. International Journal of Pharmaceutical  and  Clinical  Science 3  (3): 20-23
Karuna,  R.,  Sreenivasa,  R.  S.,  Baskar,  R.  and
Saralakumari, D. 2009. Antioxidant potential of aqueous extract of Phyllanthus amarus in rats. Indian J Pharmacol 41 (2): 64 - 67
Lai, H. T., Hou, J. H., Su, C.I., Chen, C. L. 2008.
Effects  of  chloramphenicol,  florfenicol,  and thiamphenicol  on  growth  of  algae  Chlorella pyrenoidosa, Isochrysis galbana, and Tetraselmis chui. Ecotoxicol Environ Saf. 72
(2) :329-34
Liem,  L.F.,  Holle,  E.,  Gemnafle,  I.Y.,  dan Wakum,  S.  2013.  Isolasi  Senyawa  Saponin dari Mangrove Tanjang ( Bruguiera gymnorrhiza )  dan  Pemanfaatannya  sebagai Pestisida Nabati pada Larva Nyamuk. Jurnal Biologi Papua . Vol.5(1): 29-36
Liu,  J.,  Lin,  H.,  McIntosh,  H.  2001.  Genus Phyllanthus for  chronic  hepatitis  B  virus infection: a systematic review. J Viral Hepat. 8 (5) : 358-66
Lynch,  N  and  Berry,  D.  2007.  Differences  in perceived  risks  and  benefits  of  herbal,  over- the-counter  conventional,  and  prescribed conventional, medicines, and the implications of this for the safe and effective use  of  herbal  products. Complement  Ther Med. 15 : 84–91
Michael.  2012.  Efek  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun  Teh  Hijau  ( Camellia  sinensis )  yang Diperoleh dengan Metode Soxhletasi
terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli Secara In  Vitro . Skripsi . Universitas Sumatera Utara, Medan. Mustarichie,  R.  2011. Penelitian  Kimia  Tanaman Obat . Widya Padjajaran, Bandung.
Ngajow,  M.,  Jemmy.  A.,  Kamu,  V.S.  2013.
Pengaruh  Antibakteri  Ekstrak  Kulit  batang Matoa  ( Pometia  pinnata )  terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus secara  In  Vitro. FMIPA  Unsrat  Manado. Jurnal  MIPA UNSRAT Online 2(2): 128-132
Nuraini, A.D.  2007.  Ekstraksi  Komponen
Antibakteri dan Antioksidan dari Biji Teratai ( Nymphaca pubescens Willd). Skripsi . Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian, Bogor Putra, Dhanang P. 2010. Isolasi Senyawa Filantin dari  Daun  Meniran  ( Phyllanthus  niruri L.). Skripsi . Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta. Rahayu.  2006.  Uji  Daya  Inhibisi  Ekstrak  Kasar Flavonoid Sambiloto ( Andrographis paniculata [Burm.  F]  Ness)  dan  Temu  Putih ( Curcuma zedoaria Roscoe) Terhadap Aktivitas  Tirosin  Kinase  secara In  Vitro . Skripsi .  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam  Institut  Pertanian  Bogor, Bogor.
Razak,  A.,  Djamal,  A.,  dan  Revilla,  G.  2013.  Uji Daya  Hambat  Air  Perasan  Buah  Jeruk  Nipis ( Citrus aurantifolia S . ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Secara In  Vitro . Artikel  Penelitian .  Fakultas Kedokteran Universitas Andalas, Padang. Redha, A. 2010. Flavonoid: Struktur Antioksidatif dan  Peranannya  dalam  Sistem  Biologis. Jurnal Belian 9(2):196-202
Rijayanti,  R.P.  2014.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun  Mangga  Bacang ( Mangifera foetida L.)
Terhadap
Staphylococcus  aureus Secara  In  Vitro. Skripsi .  Fakultas  Kedokteran  Universitas
Tanjungpura, Pontianak. Rinawati, N.D. 2010. Daya Antibakteri Tumbuhan  Majapahit (Crescentia  cujete L.) terhadap Vibrio alginolyticus. Jurnal Biologi. Fakultas  MIPA  Institut  Teknologi  Sepuluh November, Surabaya
Sari,  F.P,  dan.  Sari,  F.M.  2011.  Ekstraksi  Zat Aktif  Antimikroba  Dari  Tanaman  Yodium ( Jatropha  Multifida  Liin )  Sebagai  Bahan Baku  Alternatif  Antibiotik  Alami. Artikel
Ilmiah . Fakultas Teknik Universitas Diponegoro, Semarang.
Selvamohan,  T.,  Ramadas,  V.  and  Shibila,  S.K. (2012).  Antimicrobial  activity  of  selected medicinal plants against some selectedhuman pathogenic  bacteria. Advances  in  Applied Science Research 3 (5):3374-3381
Sharma,  M  and  Rameshbabu,  C.  S.  2012. Collateral  Pathways  in  Portal  Hypertension.
J Clin Exp Hepatol. 2 (4) : 338–352 Upton,  R., Graff, A., Jolliffe, Longer,Williamson. 2011. American Herbal Pharmacopoeia Botanical Pharmacognosy, Microscopic
Characterization  of  Botanical  Medicines . CRC Press, New York.
Yang  SG,  Cao  B,  Liang  LR,  Li  XL,  Xiao  YH,
Cao ZX, Jia HY, Yu HJ, Xu Z, Gu  L, Yang YD,  Chen  Y,  Du  WB,  Yan  XX,  Liang  ZA, Zhang  W,  Zhang  CL,  Chen  W,  Guo  CP, Jiang XL, Yang M, Deng GM, Yu KJ, Hu K, Zou  Q,  Li  LJ,  Wang  C.  2012.  Antiviral
therapy  and  outcomes  of  patients  with pneumonia  caused  by  influenza  A  pandemic (H1N1) virus. PLoS One. 7 (1) : 29652 Yunizar,  M.  F.,  S.  Larnani,  dan  A.  Nuryanti. 2014.  Pengaruh  Konsentrasi  Minyak  Atsiri Kayu  Manis  ( Cinnamomum  burmannii )
Terhadap Daya Hambat Pertumbuhan Enterococcus  faecalis.  BIMKGI (2)1:  1-11