## PRODUKSI ENZIM LIPASE DARI Aspergillus niger ISOLAT KAPANG KOPRA DENGAN MENGGUNAKAN MEDIUM KELAPA PARUT
[Lipase Production from Aspergillus niger of Copra Mold Isolates Using Grated Coconut Medium]
Indah 1* , Mappiratu 1 , Musafira 2
1) Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
2) Universitas Sulawesi Barat Jln. Prof. Dr. Baharuddin Lopa, SH, Talumung, Majene, Sulawesi Barat, Telp/Fax: (0422) 22559
*)Coresponding author: indaherlan09@gmail.com (hp: 082293580306)
Diterima  20 Juli 2017, Disetujui 10 Oktober 2017

## ABSTRACT
The investigation about the lipase enzyme production from Aspergillus niger using grated coconut as a medium has been done. The aim of the study is to determine the best incubation time, pH and water content  which  produced  lipase  enzyme  with  high  activity.  Randomized  Block  Design  (RBD)  with  2 factorial  pattern  (incubation  time  and  pH  of  the  medium)  was  used  in  this  research.  Each  factor consists of three levels and it was done in triplo. The level of incubation time and of pH were 48, 60, 72 hours and pH 5, 6, and 7, respectively. The observed parameter was the obtained lipase enzyme activity. The result showed that the  highest activity  was achieved at pH 7 for 48 hours of incubation time with 45% of water content. The amount of lipase enzyme activity was 1.70 µmol/ml.minutes.
Keywords: mold coconut, Aspergillus niger , lipase

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  produksi  enzim  lipase  dari Aspergillus  niger isolat  kapang  kopra dengan  menggunakan  medium  kelapa  parut.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan  waktu inkubasi  terbaik,  pH  medium  terbaik  dan  kadar  air  medium  terbaik  yang  menghasilkan  enzim  lipase dengan aktivitas tertinggi. Penelitian dirancang menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) pola faktorial  yang  terdiri  atas  1  faktor kelompok  yaitu  waktu inkubasi  terdiri  atas  3  taraf  (48  jam,  60  jam dan  72  jam)  dan  2  faktor  yaitu  pH  medium  terdiri  atas  3  taraf  (pH  5,  pH  6  dan  pH  7)  dan  kadar  air medium  terdiri  atas  3  taraf  yaitu  (25%,  35%  dan  45%)  yang  masing-masing  dilakukan  secara  triplo. Parameter yang diamati adalah aktivitas enzim lipase yang dihasilkan. Hasil penelitian menunjukkan waktu inkubasi terbaik adalah 48 jam, pH medium terbaik adalah pH 7 dan kadar air medium terbaik adalah kadar 45% dalam produksi enzim lipase dengan aktivitas tertinggi yang diperoleh adalah 1,70 µmol/ml.menit.
Kata Kunci : Kelapa berjamur, Aspergillus niger , lipase

## LATAR BELAKANG
Pemanfaatan  enzim  dalam  bidang bioteknologi dan industri semakin meningkat,  oleh  karena  itu  pengkajian enzim perlu dilakukan untuk dapat digunakan  dalam  bidang  tersebut.  Sifat enzim  yang  sangat  spesifik  dibandingkan dengan  katalis  anorganik  menyebabkan enzim  banyak  digunakan  dalam  berbagai proses  industri  pangan  maupun  non pangan.  Selain  itu,  lebih  dari  70%  industri kimia menggunakan enzim sebagai katalis. Hal  tersebut  dikarenakan  penggunaan enzim  mempunyai  beberapa  keuntungan, yaitu  mempunyai  aktivitas  yang  selektif, aman,  mudah  dikontrol,  dapat  didegradasi secara  biologis,  memiliki  daya  katalitik yang  tinggi.  Selain  itu,  reaksi  enzimatik yang  terjadi  tidak  menghasilkan  produk samping  dan  enzim  dapat  aktif  pada  suhu dan  pH  tertentu,  sehingga  enzim  sangat potensial  untuk  menggantikan  katalis kimiawi  dalam  bidang  industri  (Lin et al .,1998).
Enzim  yang  cukup  banyak  dikaji adalah  enzim  lipase.  Enzim  ini  dibutuhkan oleh  beberapa  industri,  karena  dapat menghasilkan asam lemak yang digunakan sebagai bahan baku pembuatan  deterjen,  pembuatan  polimer dan  zat  pengemulsi  pada  industri  farmasi. Gliserol  selain  digunakan  untuk  bahan peledak,  banyak  juga  digunakan  dalam bidang kosmetik dan obat-obatan (Crueger &  Crueger,  1984).  Indonesia  yang  kaya akan  keanekaragaman  hayati  memiliki peluan  besar  untuk  mengembangkan
produksi  enzim  lipase  dari  mikroba  lokal. Adapun  produksi  lipase  dapat  dilakukan melalui  teknik  fermentasi  secara  substrat padat dengan menggunakan mikroorganisme khususnya kapang.
Kapang  merupakan  jenis  mikroba  yang memenuhi  80%  kebutuhan  substratnya dari makromolekul berantai karbon (Putranto et  al .,  2006).  Pemanfaatan
kapang pada proses fermentasi memungkinkan terjadinya perombakan komponen  bahan  yang  sulit  dicerna menjadi lebih tersedia, sehingga dimungkinkan nilai nutrisinya juga meningkat.  Kualitas  produk  fermentasi tergantung  pada  jenis    mikroba  serta medium  padat  yang  digunakan.  Kadar protein  produk  fermentasi  menggunakan Aspergillus  niger lebih  baik  dibandingkan dengan Rhizopus  oligosporus (Kompiang et al., 1994).
Medium padat yang dapat digunakan pada  penumbuhan Aspergillus  niger ialah kelapa.  Kelapa  yang  diolah  menjadi  kopra dimanfaatkan  sebagai  bahan  baku  pada industri pembuatan minyak nabati. Pembuatan  kopra  dapat  dilakukan  secara tradisional dalam beberap tahapan, meliputi  pengupasan  tempurung  kelapa, penjemuran sampai kering, dan pengasapan.  Pada  proses  pengolahan tersebut,  seringkali  dijumpai  kopra  yang rusak  atau  berjamur.  Sekitar  1-5%  kelapa yang diolah menjadi kopra dapat berjamur, sehingga  biasanya  hanya  menjadi  limbah. Kopra  yang  berjamur  tersebut  dapat digunakan sebagai sumber mikroba
penghasil  enzim,  seperti  lipase.  Kadar  air yang  masih  tinggi  pada  kopra  merupakan media  yang  baik  untuk  pertumbuhan mikroba  utamanya  jenis  kapang.  Jenis kapang yang biasanya tumbuh pada kopra dan  telah  teridentifikasi  adalah Aspergillus niger dan genus Penicillium (Dali & Pirman 2005).
Penggunaan Aspegillus niger sebagai sumber lipase ekstraseluler sangat potensial karena memiliki keunggulan  dalam  menghasilkan  enzim ekstraselular  dengan  aktivitas  tinggi  dan pemeliharaannya  yang  mudah.  Selain  itu, secara  ekonomi  mudah  didapat  dengan harga  yang  murah  dan  berkembang  pada media yang relatif lebih murah.
Murni et  al .  (2011)  telah  melakukan peneltian  tentang  produksi,  karakterisasi, dan  isolasi  lipase  dari Aspergillus  niger dengan  menggunakan  induser  minyak goreng  sawit  dan  melaporkan  bahwa aktivitas enzim lipase tertinggi (1,5 µmol/ml.menit) dicapai pada waktu 12 jam, pH 7, dan suhu 30°C.
Mengacu  dari  penelitian  sebelumnya dan melihat banyaknya manfaat dari enzim lipase  maupun Aspergillus  niger ,  maka dalam  penelitian  ini  akan  dilakukan produksi  enzim  lipase  dari Aspergillus niger isolat kapang kopra dengan menggunakan medium kelapa parut.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  kopra  berjamur,
daging  buah  kelapa  parut  kering,  bahan lain terdiri atas bahan medium pertumbuhan  mikroba  untuk  isolasi  dan bahan  kimia  untuk  analisis  aktivitas  enzim yang  terdiri  atas: medium  Potato  Dextrosa Agar  (PDA),  medium  Nutrien  Agar  (NA), kalsium  klorida,  asam  tartrat,  alkohol, aseton,  minyak  zaitun,  natrium  klorida, indikator metil merah, indikator Phenopthalien,  buffer  posfat  (pH  5,  6  dan 7),  inokulum  kapang Aspergillus  niger, minyak kelapa, aseton-etanol (1:1 v/v) dan natrium hidroksida.
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  mencakup:  labu  ukur,  corong bukhner,  penangas  air,  buret,  statif,  klem, pipet,  mesin  kocok,  neraca  analitik,  lemari pendingin, mikroskop, sterilisator, inkubator  dan  alat-alat  gelas  lain  yang umum  digunakan  dalam  Laboratorium Mikrobiologi Dan Laboratorium Kimia.

## Prosedur Penelitian
Isolasi  mikroba  penghasil  enzim  lipase pada kopra berjamur (Mappiratu, 1997).
Kopra yang digunakan sebagai sampel  adalah  kopra  berjamur.  Isolasi kapang  dilakukan  menggunakan  metode tuang. Kopra berjamur dihancurkan, kemudian  ditimbang  sebanyak  1  gram, selanjutnya  disuspensikan  dengan  air destilata  steril  sebanyak  10  ml.  Suspensi yang  telah  diperoleh  diencerkan  dengan pengenceran  sampai  10 -4 .  Larutan  hasil pengenceran  masing-masing  diambil    0,1 ml,  kemudian  dituangkan  dalam  agar cawan  PDA  yang  mengandung  asam
tartrat  10%  dengan  kandungan  3  g/100  g PDA.  Medium  ini  adalah  medium  selektif untuk  kapang.  Medium  agar  cawan  PDA yang  telah  diinokulasi  diinkubasi  pada suhu  37 0 C  selama  3  hari.  Kapang  yang tumbuh dipindah tumbuhkan pada medium NA yang mengandung minyak zaitun 1 %, indikator  metil  merah  9,93  %.  Medium yang  telah  diinokulasi  tersebut  diinkubasi pada  suhu  37 0 C  selama  3  hari.  Koloni yang  tumbuh  yang  mempunyai  areal merah mudah disekelilingnya,  dipindahkan pada  agar  miring  PDA,  diinkubasi  pada suhu  37 0 C  selama  3  hari.  Kultur  yang diperoleh  diidentifikasi  dan  digunakan sebagai kultur untuk produksi lipase.

## Produksi enzim lipase (Mappiratu, 1997)
Produksi lipase dilakukan pada medium padat, yakni pada medium kelapa parut  kering dengan cara sebagai berikut : 50  g  kelapa  parut  kering  dimasukkan dalam  Erlenmeyer  500  ml  kemudian ditambahkan  larutan  buffer  posfat  dengan pH  sesuai  perlakuan  (pH  5,  pH  6,  pH  7). Penambahan  buffer  dilakukan  sesuai perlakuan (25%, 35% dan 45%) atas dasar berat  kelapa  parut  kering.  Campuran diaduk hingga homogen, kemudian ditambahkan  inokulum  kapang Aspergillus niger konsentrasi  1%  atas  dasar  berat kelapa  parut  kering.  Campuram  diinkubasi dengan  inkubator  bergoyang  pada  suhu ruang  dengan  waktu  inkubasi  sesuai perlakuan  (48,  60  dan  72  jam).  Lipase yang ada dalam medium diekstrak menggunakan  larutan kalsium  klorida  0,01
M  dengan  rasio  2:1.  Campuran  dikocok selama  1  jam  diatas  mesin  kocok, selanjutnya  disaring  filtratnya  ditampung sebagai  larutan  enzim  lipase  dan  diuji aktivitasnya.
Penetuan aktivitas enzim (Linfield et al., 1984)
Minyak  kelapa  sebanyak 2  g, dimasukkan  kedalam  erlenmeyer  bertutup 500  ml,  kemudian  ditambahkan  4  ml larutan buffer 0,01 M (pH 6,0), 1 ml larutan kalsium  klorida  1  M  dan  1  ml  filtrate (larutan  enzim).  Campuran  selanjutnya diinkubasi pada inkubator bergoyang agitasi 300 rpm pada suhu ruang selama 1 jam.  Setelah  waktu  inkubasi  tercapai segera  substrat  enzim  diinaktifkan  dengan penambahan campuran aseton-etanol (1:1 v/v) sebanyak 10 ml. Lalu campuran dibuat homogen  dengan  pengocokan,  kemudian ditambahkan  3  tetes  indikator  pp  dan dititrasi  dengan  larutan  natrium  hidroksida standar sampai campuran berwarna merah jambu.  Untuk  blanko  dilakukan  dengan cara  yang  sama  akan  tetapi  setelah ditambahkan enzim langsung ditambahkan dengan  campuran  aseton-etanol  1:1  (v/v). Aktivitas  lipase  yang  dinyatakan  dalam satuan      µmol  FFA  perml  enzim  permenit dihitung menggunakan persamaan :
Aktivitas lipase = (    )
Keterangan : A = volume NaOH sampel (mL) B = volume  NaOH blanko (mL) N NaOH  =   0,05 N 1000 =  nilai konversi dari mmol ke µmol V = volume enzim (mL) t =   waktu inkubasi

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolat  kapang  kopra  Aspergillus  niger penghasil enzim lipase
Isolasi kapang penghasil lipase yang tumbuh pada kopra dilakukan menggunakan  medium  Potato  Dextrosa Agar (PDA) selektif kapang yang dilanjutkan  dengan  medium  Nutrien  Agar (NA)  yang  mengandung  minyak  dan indikator metil merah (medium Morinaga et all., 1986).  Medium  nutrien  agar  ini merupakan medium selektif kapang
penghasil lipase. Kapang yang memproduksi  lipase  akan  menghidrolisis minyak  menghasilkan  warna  merah  muda dengan  indikator  metil  merah  sehingga kapang penghasil lipase akan menampakkan areal merah muda disekeliling  koloni  karena  adanya  indikator metil merah.
Gambar 1.  Kapang
Aspergillus
niger
dengan  areal  merah  muda disekeliling koloni
Hasil pengamatan menunjukkan terdapat  beberapa  jenis  kapang  penghasil lipase  yang  tumbuh  pada  kopra.  Hal  ini ditandai dari adanya beberapa koloni yang menghasilkan areal merah muda disekeliling  koloni.  Kemudian  dengan pemisahan lanjut untuk menghasilkan satu koloni  ditemukan  koloni  yang  berwarna hitam,  hijau  terang  dan  kuning  kehijauan
yang  merupakan  koloni  penghasil  lipase. Hal  yang  sama  ditemukan  oleh  Mappiratu (1997),  yang  telah  mengidentifikasi  setiap koloni  berdasarkan  morfologisnya  dengan menunjukkan  bahwa  morfologi  koloni berwarna  hitam  merupakan  morfologi kapang Aspergillus  niger ,  koloni  berwarna hijau  terang  sama  dengan  morfologi Aspergillus  flavus dan  koloni  berwarna kuning  kehijauan  sama  dengan  morfologi kapang Rhizopus sp .

## Aktivitas  Enzim  Lipase  Aspergillus niger Isolat Kapang Kopra.
Produksi  enzim  lipase  oleh  kapang termasuk  kapang Aspergillus  niger dalam proses  fermentasi  dengan  aktivitas  enzim tertinggi  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor antara  lain,  faktor  lama  inkubasi,  pH medium  dan  kadar  air  media  (August, 2000).
Hasil yang diperoleh
memperlihatkan  aktivitas  enzim  lipase yang terdapat pada Tabel 1.
Tabel  1  Aktivitas  enzim  lipase Aspergillus niger isolate kapang kopra
Gambar 2.  Pengaruh  pH  medium  dan kadar  air  medium  terhadap aktivitas  enzim  lipase  pada waktu 48 jam.
Gambar 3. Pengaruh  pH  medium  dan kadar  air  medium  terhadap aktivitas  enzim  lipase  pada waktu 60 jam.
Gambar 4. Pengaruh  pH  medium  dan kadar  air  medium  terhadap aktivitas  enzim  lipase  pada waktu 72  jam.

## Waktu inkubasi enzim lipase
Berdasarkan  ketiga  gambar  diatas (Gambar  2,  3  dan  4)  menunjukkan  bahwa aktivitas  enzim  lipase  meningkat  seiring dengan  bertambahnya  waktu  fermentasi
sampai pada hari ke dua, setelah itu terjadi penurunan  aktivitas  enzim  lipase.  Hal  ini disebabkan  karena  pada  hari  pertama hingga  hari  ke  dua  (48  jam)  pertumbuhan mikroba  memasuki  fase  eksponensial. Namun  setelah  hari  ke  dua  jumlah mikroorganisme menurun, berarti pertumbuhan telah memasuki fasa stationer dan fasa kematian karena nutrien di  dalam  medium  dan  energi  cadangan  di dalam  sel  sudah  habis  sehingga  aktivitas enzim menurun dengan drastis.
Menurut  Maryanty et  al., (2010)
dalam produksi crude lipase dari aspergillus  niger pada  substrat  ongok menggunakan  metode  fermentasi  fasa padat  didapatkan  hasil  bahwa  pada  jam ke-36 sampai 60 jamur mengalami pertumbuhan terus menerus. Pada fase ini mikroba  membelah  dengan  cepat  dan konstan  mengikuti  kurva  logaritmik.  Pada waktu  ke-72  sampai  108  merupakan  fase stationer.
pH maksimum enzim lipase
Aktivitas  enzim  lipase  dilakukan dengan  variasi  pH  yaitu  pH  5,  6  dan  7. Hasil  pengamatan  aktivitas  enzim  lipase maksimum  yang  dicapai  pada  pH  7 (netral).  Menurut  Christakopoulus  (1992) dimana  pada  pH  tinggi  atau  rendah memungkinkan  terjadinya  denaturasi  dan ini akan mengakibatkan menurunnya aktivitas  enzim.  Karena  enzim  merupakan protein, perubahan pH akan menyebabkan ionisasi  pada  molekul  protein  berubah pula.  Perubahan  ini  akan  mengakibatkan struktur tiga dimensinya berubah sehingga
fungsi  katalitiknya  terganggu.  Hal  tersebut dapat  dilihat  dari  grafik  diatas,  pada aktivitas enzim pada pH 6 masih menunjukkan aktivitas lebih rendah dibanding  pada  pH  7.  Selain  itu,  terlihat pada  ketiga  gambar  diatas,  terdapat rentang  pH  yang  dapat  menyebabkan aktivitas  lipase  tertinggi,  dan  pH  inilah yang  dinamakan  dengan  pH  optimum. Besarnya  pH  optimum  yang  sama,  yaitu pH = 7 (netral), dilaporkan untuk lipase dari Calvatia gigantean (Christakopoulos, 1992). Selain itu, menurut penelitian Murni et    al., (2011),  dimana  aktivitas  enzim lipase optimum dari Apergilus niger berada pada  pH  7  dengan  aktivitas  sebesar  1,5 µmol/ml.menit.

## Kadar air enzim lipase
Tingkat  keasaman  (pH)  larutan  atau jumlah air pada medium sering diatur pada saat  dilakukan  inkubasi.  Kadang-kadang jumlah  air  medium  diatur  saat  dilakukan penambahan  larutan  asam  maupun  basa (bahan).  Tingkat  keasaman  medium  perlu diatur  pada  pH  yang  cocok  untuk pertumbuhan  mikroba  karena  kebanyakan mikroba  hanya  tumbuh  pada  daerah  pH tertentu.  Pengaturan  tersebut  biasanya dengan  penambahan  buffer  yang  cocok.
Buffer  adalah  suatu  larutan  bahan  kimia yang  digunakan  untuk  mempertahankan pH  suatu  larutan.  Salah  satu  buffer  yang biasa  dipakai  adalah  buffer  fosfat.  Pada penelitian  ini  digunakan  buffer  fosfat dengan  berbagai  kadar  air  yakni  25%, 35%, dan 45%.
Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan kadar  air  45%  merupakan  aktivitas  lipase tertinggi.  Hal  ini  disebabkan  karena kebanyakan  jamur  dapat  tumbuh  pada kisaran pH yang luas yaitu pH 2-8,5 tetapi biasanya  pertumbuhannya  akan  lebih  baik pada  kondisi  asam  atau  pH  netral (Srikandi.F, 1989). Selain itu kadar air dari bahan  juga  sangat  mempengaruhi  laju reaksi  enzimatik,  kadar  air  yang  rendah menghambat  kerja  enzim  atau  substrat, akibatnya  hidrolisis  hanya  terjadi  pada bagian substrat yang langsung berhubungan dengan enzim.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dilakukan, didapatkan waktu inkubasi kapang Aspergillus  niger pada  medium kelapa  parut  yang    menghasilkan    enzim lipase  dengan  aktivitas  tertinggi  adalah pada  waktu  inkubasi  48  jam.  pH  medium yang  menghasilkan  enzim  lipase  dengan aktivitas  tertinggi  adalah  pH  7,  sedangkan kadar  air  medium  kelapa  parut  yang menghasilkan enzim lipase dengan aktivitas  tertinggi  adalah  kadar  air  45%, dengan aktivitas tertinggi 1,70
µmol/ml.menit.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Secara khusus
peneliti menyampaikan ucapan terima kasih kepada  Laboran  Jurusan  Kimia  dan Himpunan  Mahasiswa  Kimia  (HIMAKIM) FMIPA UNTAD.

## DAFTAR PUSTAKA
August,  E.  G.  2000. Kajian  lipase  amobil dari Aspergillus niger pada pembuatan    MAG  yang  bersifat antibakteri dati minyak kelapa . ( Tesis ). Bogor: Program Pasca Sarjana. Institut Pertanian Bogor.
Christakopoulos,  P.,  Constantina  Tzia, Dimitris Kekos, Basil J. Macris. 1992, Production  and  characterization  of extracellular  lipase  from  Calvatia gigantean. Journal  Appl  Microbiol
Biotecnol . l32:194-197.
Crueger W., Crueger A. 1984. Biotechnology: A Textbook of Industrial Microbiology . Science Tech Inc. USA.
Dali  S.,  Pirman.  2005.  Eksplorasi  dan Isolasi  Enzim  Lipase  dari  Fungi Inperfekti ( genus Aspergillus dan Penicillium indigenus) . Laporan Penelitian. Makassar: UNHAS.
Kompiang,  I  P.,  J.  Darma,  T.  Purwadaria, A.  Sinurat,  Supriyati.  1994.  Laporan Hasil  Penelitian  Protein Enrichment : Studi  Cassava Enrichmen t  melalui
Proses  Biologi  bekerjasama  dengan
Proyek  Pengembangan  Penelitian Pertanian  Nasional  Badan  Litbang
Pertanian.
Lin,  L.  L.,  Chyau,  C.  C.,  Hsu, W.  H.  1998. Production  and  Properties  of a  Raw-
Starch  Degrading  Amylase  from
Thermophilic and Alkaliphilic Bacillus sp. TS-23. Biotechnology and Applied Biochemistry . 28 (4) : 61 –68.
Linfield,  W.M.,  D.J.  O’Brien,  S.  Serota,
R.A. Barauskas. 1984.  Lipid-  lipase interactions.    I.    Fat    splitting    with lipase    from  Candida    rugosa. J.
Am.    Oil  Chem  Soc .  61  (1)  :  1067- 1071.
Mappiratu. 1997. Isolasi Mikroba Penghasil
Enzim Protease, Amilase dan Lipase serta Pengujian Potensi Produksinya .  ( Tesis) .  Palu:  Fakultas Pertanian Universitas Tadulako.
Maryanty  Yanty,  Hesti  Pristianti,  Paulina Ruliawati.  2010.  Produksi  Crude
Lipase  Dari Aspergillus  niger Pada
Substrat Ongok Menggunakan Metode  Fermentasi  Fasa  Padat. Jurnal Pengembangan Teknologi Kimia. 4 (2) : 59-64.
Morinaga,  T,  S.  Kanda,  R.  Naomi.  1986.
Lipase Production Of a New Thermophilic Fungus Humicols lanuginosa Var. Catenulata. International Journal Ferment Technol . 64 (5) : 451-453.
Murni  Sri  Wahyu,  Siti  Diyar  Kholisoh, Renaldo  A.  N.,  Nurul  Arifin  S.  S. 2011.  Produksi  Enzim  Lipase  dari Aspergillus  niger dengan  Induser
Minyak Goreng Sawit. Jurnal
Pengembangan  Teknologi  Kimia. 21 (7) : 88-94. Putranto, A.R., Santoso, D., Tri-
Panji,Suharyanto,  Budiani  A.  2006. Karakterisasi  Gen  Penyandi  Lipase dari  Kapang Rhizopus  oryzae dan
Absidia
corymbifera . Menara
Perkebunan. 74(1):23-32.
Srikandi  F.1989. Mikrobiologi  Pangan . Bogor: Pusat antar Universitas
Pangan dan Gizi.