## POTENTIAL ANTIOXIDANT ACTIVITY  ETHANOL EXTRACT OF OLD AND YOUNG LEAVES OF EUPHORBIA HIRTA LINN
Maryati Puspitasari 1,2* , Abun 1 , Ana Rochana 1 , Tuti Widjastuti 3
1 Departemen Produksi Teknologi Nutrisi dan Pakan, Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran, Jl. Raya Bandung Sumedang KM.21, Hegarmanah, Kec. Jatinangor,
Kabupaten Sumedang, Jawa Barat 45363, Indonesia
2 Fakultas Pertanian, Universitas Garut, Jl. Raya Samarang Jl. Hampor No.52A, Rancabango, Kec. Tarogong Kaler, Kabupaten Garut, Jawa Barat 44151, Indonesia 3 Departemen Produksi Peternakan, Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran, Jl. Raya Bandung Sumedang KM.21, Hegarmanah, Kec. Jatinangor, Kabupaten Sumedang, Jawa Barat 45363, Indonesia
*Corresponding author: Maryati Puspitasari ( marpusadad@uniga.ac.id )

## ARTICLE HISTORY
Received: 27 January 2023                             Revised: 22 July 2023                                                      Accepted: 27 July 2023

## Abstract
Euphorbia  hirta  is  a  herbaceous  plant  that  has  active  compounds  with  the  potential  as antioxidants. Information related to the antioxidant activity of Euphorbia Hirta can be a basis for seeing its potential to overcome oxidative stress in poultry. The study aimed to determine the antioxidant activity of the ethanol extract of old and young leaves of Euphorbia hirta. The method used in testing antioxidant activity is to use the DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) method. The results showed that old leaves had higher antioxidant activity than young leaves. The percent inhibition value of old leaves was 68.17% at a concentration of 11 ppm, and that of young leaves was 66.92% at a concentration of 11 ppm. The IC50 value of Euphorbia hirta from old leaves was 7.713 ppm, young leaves were 7.926 ppm, and vitamin C was 2.095 ppm. Judging from the IC50 value, the old and young leaves of Euphorbia hirta are classified as very strong antioxidants, in the same group as Vitamin C. Judging from their antioxidant activity, Euphorbia hirta has the potential to be used to treat oxidative stress in poultry.
Keywords: antioxidant, euphorbia hirta, old leaves, young leaves

## POTENSI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN TUA DAN MUDA EUPHORBIA HIRTA LINN

## Abstrak
Euphorbia  hirta adalah  tanaman  herba  yang  memiliki  senyawa  aktif  berpotensi  sebagai antioksidan.  Informasi  terkait  aktivitas  antioksidan Euphorbia  Hirta dapat menjadi  landasan melihat potensinya untuk mengatasi stress oksidatif pada ternak unggas. Tujuan penelitian adalah untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol daun tua dan muda
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144
Euphorbia hirta . Metode yang digunakan dalam menguji aktivitas antioksidan adalah dengan menggunakan  metode  DPPH  (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl).  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa daun tua memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan daun muda. Nilai persen inhibisi daun tua adalah 68,17% pada konsentrasi 11 ppm dan daun muda adalah 66,92% pada konsentrasi 11 ppm. Nilai IC 50 Euphorbia hirta dari daun tua adalah 7,713 ppm, daun muda 7,926 ppm dan vitamin C 2,095 ppm. Dilihat dari nilai IC50, daun tua dan muda  patikan  kebo  tergolong  antioksidan  sangat  kuat,  berada  dalam  golongan  yang  sama dengan  Vitamin  C.  Dilihat  dari  aktivitas  antioksidannya, Euphorbia  hirta sangat  berpotensi digunakan untuk mengatasi stress oksidatif pada ternak unggas.
Kata kunci: antioksidan,euphorbia hirta, daun muda, daun tua

## Pendahuluan
Dengan  semakin  meningkatnya  jumlah  penduduk,  maka  kebutuhan  terhadap  ternak untuk pemenuhan kebutuhan protein hewani semakin meningkat. Maka peluang bisnis bagi pengembangan  peternakan  terutama  ternak  unggas  semakin  tinggi.  Banyak  perusahaan dibidang ternak unggas didirikan dan dijalankan dengan proses yang intensif. Pemeliharaan unggas dalam jumlah yang besar dan kepadatan yang tinggi dalam kandang, mengakibatkan lingkungan  di  luar  zona  nyaman  bagi  unggas.  Menurut  Mishra 1 kondisi  ini  mengakibatkan stress oksidatif yang mengganggu Kesehatan dan produksi ternak.
Berbagai upaya dilakukan untuk mengatasi stress oksidatif, salah satunya penggunaan obat-obatan  penurun  stress.  Tetapi  penggunaan obat-obatan  dalam  budidaya  ternak  untuk waktu  yang lama,  dapat mengakibatkan terjadi akumulasi bahan kimia dalam tubuh unggas sehingga   membahayakan jika dikonsumsi. Oleh karena itu dicari alternatif lain yang dianggap lebih aman yaitu menggunakan senyawa-senyawa kimia yang terdapat dalam tanaman yang memiliki  aktivitas  oksidasi  yang  tinggi.  Salah  satu  tanaman  yang  dianggap  sebagai  herba berpotensi tinggi sebagai antioksidan adalah tanaman patikan kebo ( Euphorbia hirta Linn). 2 Patikan kebo adalah tanaman herba yang mudah ditemukan di sekitar lingkungan kita. Menurut  Okoli 3 hasil  analisis  terhadap  tanaman  Euphorbia  hirta,  terbukti Euphorbia  hirta mengandung tannins,  saponins,  flavonoids,  cardiac  glycoside ,  alkaloid  dan  steroid.  Bagian daun  patikan  kebo  merupakan  bagian  tanaman  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri  dan antioksidan yang lebih baik dibandingkan dengan bagian yang lain dari tanaman. 4
Oleh karena itu pengukuran aktivitas antioksidan daun dari patikan kebo sangat penting dilakukan sehingga dapat diukur potensi penggunaanya terhadap stress oksidatif pada ternak ungags. Penelitian yang dilakukan terkait dengan patikan kebo yang banyak dilakukan selama ini adalah penggunaan patikan kebo sebagai antibakteri, sebagai antijamur 5 dan sebagai obat, tetapi pengujian  daun patikan kebo dengan memisahkan antara daun tua dan daun muda untuk diukur  aktivitas  antioksidannya    belum  ditemukan.  Menurut  Anwar 6 total  fenolik  pada daun  tua,  dewasa  dan  muda  adalah  berbeda.  Hal  ini  penting  diketahui  mengingat ketersediaan senyawa aktif dalam tanaman adalah tidak sama pada bagian-bagian tanaman. Melihat dari apa yang disoroti terkait patikan kebo, maka penelitian  untuk menguji aktivitas antioksidan dari daun tua dan daun muda patikan kebo sangat penting untuk dilakukan.

## Metode
Penelitian  dilaksanakan  di  laboratorium  lab.  Kimia  Farmasi  Analisis  Fakultas  MIPA Universitas Garut.
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144

## Alat
Alat yang digunakan adalah      seperangkat alat rotary evaporator  ikA RV 10 basic, neraca  analitik  (Fujitsu  fs-AR210)  blender,  labu,  penangas  air.    Pipet,  labu  ukur, spektrofotometer (Thermos Scientific).

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah:  DPPH,  Vitamin  C  dan  daun  patikan  kebo.  Tanaman patikan  kebo  diambil  dari  daerah  Garut.  Daun  patikan  kebo  dibagi  dua  antara  daun  yang diasumsikan sebagai daun tua dan daun muda. Pemisahan daun dapat dilihat pada Gambar 1.

## Gambar 1. Pemisahan patikan kebo

## Prosedur
Simplisia direndam dalam pelarut etanol absolut sebanyak 300 mL selama 2 x 24 jam. Setelah 2 x 24 jam filtrat yang diperoleh disaring dan residunya dimaserasi Kembali selama 1 x 24 jam dengan pelarut etanol. Hasil ekstraksi selanjutnya dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator.

## Identifikasi Senyawa bioaktif daun patikan kebo (Metode DPPH)
Uji aktivitas antioksidan Larutan induk ekstrak daun patikan kebo adalah sebagai berikut: larutan pembanding vitamin C 1000 ppm diencerkan terlebih dahulu menjadi 100 ppm dengan cara    dipipet  1  mL  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu  takar  10  mL.  kemudian  dipipet masing-masing 0,05 mL; 0,075 mL; 0,1 mL; 0,125 mL; dan 0,15 mL kemudian dimasukkan ke dalam  labu  ukur  5  mL,  lalu  ditambahkan  3  mL  larutan  DPPH  40  ppm  lalu  volumenya dicukupkan dengan etanol absolut sampai garis tanda. Kemudian didiamkan selama 30 menit lalu  diukur  absorbansinya  pada  panjang  gelombang  517  nm  dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Sebagai blanko, diukur 3 mL larutan DPPH kemudian dicukupkan volumenya hingga 5 mL dalam labu ukur kemudian diukur absorbansinya.
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144

## Hasil

## Hasil yang diperoleh dari penelitian ini adalah sebagai berikut
Tabel 1. Uji Aktivitas Antioksidan Daun Muda Patikan Kebo
Absorban SD % Inhibisi IC 50 (ppm) Ulangan Ke 1 Ulangan Ke-2 Ulangan Ke-3 Rata- rata Blanko 0,824 0,829 0,829 0,827 0,002 7,926 Konsentrasi Uji 1 0,739 0,74 0,741 0,740 0,001 10,56 3 0,635 0,639 0,639 0,638 0,002 22,93 5 0,556 0,58 0,556 0,564 0,011 31,83 7 0,44 0,448 0,458 0,449 0,007 45,77 9 0,369 0,369 0,379 0,372 0,005 55,00 11 0,252 0,252 0,286 0,263 0,016 68,17
Tabel 2. Uji Aktivitas Antioksidan Daun Tua Patikan Kebo
Absorban SD % Inhibisi IC 50 (ppm) Ulangan ke-1 Ulangan Ke-2 Ulangan Ke-3 Rata- rata Blanko 0,871 0,873 0,871 0,872 0,001 7,713 Konsentrasi Uji 3 0,691 0,654 0,627 0,657 0,026 24,589 5 0,556 0,557 0,556 0,556 0,000 36,176 7 0,487 0,488 0,489 0,488 0,001 44,015 9 0,356 0,357 0,356 0,356 0,000 59,120 11 0,288 0,288 0,289 0,288 0,000 66,922
Tabel 3. Aktivitas Antioksidan Vitamin C
Absorban SD % Inhibisi IC 50 (ppm) Ulangan ke-1 Ulangan Ke-2 Ulangan Ke-3 Rata- rata Blanko 0,653 0,651 0,658 0,654 0,003 2,095 Konsentrasi Uji 1 0,495 0,493 0,493 0,494 0,001 24,516 1,5 0,421 0,421 0,421 0,421 0,000 35,627 2 0,336 0,367 0,341 0,348 0,014 46,789
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144

## Tabel 3. (Lanjutan)
Absorban SD % Inhibisi IC 50 (ppm) Ulangan ke-1 Ulangan Ke-2 Ulangan Ke-3 Rata- rata 2,5 0,258 0,256 0,256 0,257 0,001 60,754 3 0,19 0,188 0,19 0,189 0,001 71,050
Gambar 2. Nilai inhibisi ekstrak etanol daun muda
.
Gambar 3. Persen inhibisi ekstrak etanol daun tua patikan kebo
y = 5,689x + 4,9073 R² = 0,9974 0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 80,00 0 5 10 15 Series1 Linear (Series1) y = 5,3805x + 8,501 R² = 0,9909 0,000 10,000 20,000 30,000 40,000 50,000 60,000 70,000 80,000 0 5 10 15 % I nhi bi si Konsentrasi Uji (ppm) Series1 Linear (Series1)
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144

## Gambar 4. Nilai inhibisi vitamin c

## Pembahasan
Patikan kebo mengandung senyawa metabolit sekunder yang dapat berperan sebagai antioksidan. Menurut Puspitasari 4 senyawa yang terkandung dalam daun patikan kebo yang tua  maupun  yang  muda  adalah  sama  yaitu  fenolik,  tanin,  flavonoid,  saponin,  triterpenoid steroid dan alkaloid. Hasil  ini sesuai dengan pernyataan 7,8 bahwa jenis senyawa aktif yang terdapat  dalam  daun  tua  dan  daun  muda  adalah  sama,  tapi  jumlah  kandungan  dari  tiap senyawa  adalah  berbeda.  Menurut  Prasad 9 kandungan  tanin  dari  patikan  kebo  adalah sebanyak 2586,57±0,39  mg/100 g dan senyawa ke dua adalah fenolik sebesar 336,56 ± 0,39 mg/100  g.  Senyawa  fenolik  yang  banyak  berperan  sebagai  antioksidan  adalah  flavonoid. Patikan kebo juga mengandung sumber antioksidan lainnya yaitu β karoten sebesar 297,44 ± 0,91 mg/100 g dan vitamin C sebesar 91,18 ± 0,49 mg/100 gram.
Gambar 2,3, dan 4 secara umum menggambarkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak  etanol  patikan  kebo  maka  aktivitas  antioksidannya  adalah  semakin  besar.  Hanya terdapat  perbedaan  nilai  antara  aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak  daun  tua,  daun  muda patikan kebo dengan vitamin C. Aktivitas antioksidan pada daun tua (pada konsentrasi 11 ppm mempunyai  persen  inhibitori  sebesar  68,17  %)  adalah  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan aktivitas antioksidan pada daun muda (pada konsentrasi 11 ppm persen inhibitor nya 66,92%). Vitamin C memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi daripada daun tua dan muda patikan kebo yaitu sebesar 71,05% pada konsentrasi yang lebih kecil yaitu 3 ppm.
Daun tua memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi. Tingginya aktivitas antioksidan pada daun  tua  disebabkan  karena  kandungan  flavonoid  yang  tinggi  terdapat  pada  daun  tua, Tingginya kandungan flavonoid pada daun tua dibuktikan dengan penelitian Felicia 10 dimana flavonoid daun tua dari daun alpukat adalah sebesar 54,08 (mg QE/g bk bahan). Nilai ini lebih besar  dibandingkan  yang  terkandung  dalam  daun  muda  yaitu  sebesar  35,54  (mg  QE/g  bk bahan).  Flavonoid ini yang banyak berperan dalam aktivitas antioksidan.
Aktivitas antioksidan yang tinggi dari daun tua patikan kebo, mengakibatkan bahan ini berpotensi digunakan pada ternak unggas. Ternak unggas membutuhkan bahan antioksidan yang tinggi dalam pakannya untuk mengatasi kondisi stress yang menimpanya. Antioksidan sebagai solusi untuk mengatasi stress pada ayam sudah dibuktikan oleh Syahruddin 11 dimana antioksidan yang terdapat dalam buah mengkudu bisa menurunkan stress yang terjadi pada unggas yaitu unggas seperti ayam broiler di daerah tropis.
y = 23,639x + 0,4689 R² = 0,9981 0,000 10,000 20,000 30,000 40,000 50,000 60,000 70,000 80,000 0 1 2 3 4 %I nhi bi si Konsentrasi Uji Standar Vit C Series1 Linear (Series1)
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144

## IC
50 ( Inhibition Concentration 50%) IC 50 adalah  konsentrasi  larutan  sampel  yang  dibutuhkan  untuk  menghambat  50  % radikal  bebas  DPPH.  Semakin  kecil  harga  IC 50 maka  antioksidan  itu  semakin  kuat  dalam menangkal radikal bebas atau dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan yang semakin kuat. IC 50 ekstrak etanol daun muda, daun tua dan vitamin C terdapat pada Gambar 5.
Gambar 5. IC50 dari Ekstrak Daun Tua dan Muda Patikan Kebo
Berdasarkan  pada  Gambar  5,  nampak  daun  tua  memiliki  IC50  yang  lebih  rendah dibandingkan dengan daun muda walaupun nilainya antara daun tua dan muda ini tidak jauh berbeda.  Nilai  IC 50 yang  lebih  rendah  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  yang  lebih  kuat. Tetapi jika dibandingkan dengan vitamin C sebagai kontrol positif dari antioksidan, vitamin C masih lebih baik sebagai sumber antioksidan. Jika dilihat dari nilainya, baik ekstrak daun muda maupun daun tua dari patikan kebo tergolong sebagai antioksidan sangat kuat karena memiliki nilai IC 50 kurang dari 50 ppm. Secara spesifik, suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat jika nilai IC 50 kurang dari 50 ppm, kategori kuat untuk IC 50 bernilai 50-100 ppm, kategori sedang jika IC 50 bernilai 100-150 ppm, dan kategori lemah jika IC50 adalah 151-200 ppm. 9 Hasil  penelitian  serupa  dikemukakan  oleh  [10]  yang  hasil  penelitiannya  kekuatan aktivitas  antioksidan  yang  terkandung  dalam  ekstrak  patikan  kebo  tergolong  antioksidan sangat kuat dengan nilai IC 50 adalah 11,50 ppm.
Uji  aktivitas  antioksidan  patikan  kebo  menggunakan  metode  DPPH  dan  vitamin  C sebagai kontrol positif telah dilakukan oleh beberapa peneliti sebelumnya 11 menguji aktivitas antioksidan patikan kebo dimana hasilnya IC 50 dari Euphorbia hirta Linn adalah 30,02 ppm dan vitamin C adalah 18,33 ppm. Hasil ini agak berbeda dengan hasil penelitian Prasad 9 yang menyatakan  bahwa  ekstrak  patikan  kebo  lebih  baik  aktivitas  antioksidannya  dibandingkan dengan  vitamin  C.  Perbedaan  hasil  yang  telah  disebutkan  di  atas  bisa  disebabkan  karena terdapat perbedaan dari  lokasi  tumbuh patikan  kebo,  bagian  tanaman  yang  diekstrak  serta cara pengeringan dari simplisia patikan kebo.
Dibandingkan  dengan  ekstrak  lain  dari  famili  yang  sama  yaitu    Daun  Katemas (Euphorbia heterophylla, L.), hasil uji aktivitas antioksidan ekstraknya  didapatkan nilai IC50 sebesar 37,56 µg/mL, digolongkan sebagai aktivitas antioksidan yang sangat kuat. 12 Nilai IC 50 ini lebih besar dari nilai IC 50 patikan kebo dalam penelitian ini. Dalam penelitian ini daun tua dan  daun  muda  memiliki  IC 50 berturut  turut  sebesar  7,713  ppm  dan  7,926  ppm.  Nilai  IC tersebut  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  dari  patikan  kebo  adalah  lebih  baik  jika dibandingkan dengan aktivitas antioksidan daun katemas.
Tingginya  aktivitas  antioksidan  dalam  ekstrak  etanol  daun  patikan  kebo,  disebabkan karena daun patikan kebo memiliki kandungan yang tinggi  dari tanin, phenolic, β karotin , dan vitamin C yang merupakan senyawa antioksidan. Daun tua patikan kebo lebih tinggi aktivitas antioksidannya karena kandungan flavonoid sebagai phenolik yang kandungannya tinggi pada daun yang tua. Bagian dari flavonoid yaitu kuersetin memiliki kekuatan tinggi yaitu  4-5 kali
0 2 4 6 8 EKSTAK DAUN TUA EKSTRAK DAUN MUDA VITAMIN C 7,713 7,926 2,095 LC 50 (ppm )
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144
lebih  tinggi  dibandingkan  dengan vitamin  C  dan vitamin  E.  Menurut  Hilma, 12 quersetin  dan beta  karoten  memiliki  atom  H    banyak  yang  dapat  didonorkan  untuk  menetralkan  oksidan sehingga akan memberikan aktivitas antioksidan yang tinggi.
Dilihat  dari  uji  antioksidan  di  atas, patikan  kebo memiliki  potensi  yang  cukup sebagai antioksidan  yang  digunakan  pada  ternak  unggas.  Antioksidan  ini  sangat  diperlukan  untuk mengatasi kondisi stress pada ternak unggas baik pada saat pemeliharaan yang intensif dan juga  pada  saat  pengangkutan.  Menurut  Tiwari 13 Quercetin  dari  flavonoid  patikan  kebo memiliki aktivitas anti stress yang kuat.
Penggunaan  ekstrak  etanol  patikan  dapat  memberikan  peranan  ganda  terhadap Kesehatan  ternak.      Selain  sebagai  antioksidan  bermanfaat  untuk  mengatasi  stress  pada ayam, juga dapat meningkatkan produksi. Hasil penelitian Londok 14 penggunaan antioksidan memperbaiki profil darah sehingga berperan dalam meningkatkan kesehatan unggas seperti ayam pedaging. Penelitian lain  Hahesmi, 15 menunjukkan penggunaan ekstrak patikan kebo dapat meningkatkan nilai hematosyt darah dan meningkatkan efisiensi pakan pada unggas sehingga produksi meningkat. Ekstrak etanol ini dapat diaplikasikan pada unggas berupa feed additive yang penggunaannya bisa ditambahkan dalam pakan atau dalam air minum.

## Kesimpulan
Aktivitas  antioksidan  daun  tua  patikan  kebo  lebih  baik  dibanding  daun  muda  Daun patikan kebo termasuk dalam golongan antioksidan sangat kuat sama satu tingkatan dengan vitamin C. Dilihat dari aktivitas antioksidannya, patikan kebo berpotensi besar digunakan untuk mengatasi masalah stress oksidatif pada ternak unggas.

## Ucapan Terima Kasih
Terima kasih  kepada Pascasarjana Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran dan Lembaga  Pengelola  Dana  Pendidikan    yang  telah  mendukung  penelitian  ini.  Semoga  hasil penelitian bermanfaat bagi banyak pihak.

## Daftar Pustaka
1.   Mishra B, Jha R. Oxidative stress in the poultry gut: potential challenges and interventions.
Front Vet Sci [Internet]. 2019;6:1 –5. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6409315/
2.   Karim K, Jura M, Sabang S. Uji aktivitas antioksidan ekstrak daun patikan kebo (euphorbia hirta l.) . J Akad Kim [Internet].
2015;4(2):56 –63. Available from: https://www.neliti.com/id/publications/224197/uji-aktivitas-antioksidan-ekstrak-daun- patikan-kebo-euphorbia-hirta-l
3.   Okoli RI, Turay AA, Mensah JK, Aigbe AO. Phytochemical and antimicrobial properties of four herbs from Edo State, Nigeria. Rep Opin [Internet]. 2009;1(5):67 –73. Available from: https://www.semanticscholar.org/paper/Phytochemical-and-Antimicrobial-Properties-of- Four-Okoli-Turay/cd38b5a3e5664d44a61ef3fdb1f236123aba0156
4.   Puspitasari M, Abun, Rochana A, Widjastuti T. The potential of young and old Euphorbia hirta leaves  extract  as  antibacterial  against  Escherichia  coli  and  antihelminthic  against Ascaridia  galli  obtained  in  Sentul  chickens.  Biodiversitas  [Internet].  2022;23(6):3243 –50. Available from: https://smujo.id/biodiv/article/view/10868
5.   Zulkarnain Z. Pengaruh ekstrak patikan kebo (Euphorbia hirta L ) terhadap pertumbuhan bakteri  (Staphylococcus  aureus  dan  Escherichia  coli)  dan  jamur  (Candida  albicans) [Internet].  Universitas  Islam  Nusantara  Alauddin  Makassar;  2011.  Available  from: http://repositori.uin-alauddin.ac.id/6408/
6.   Anwar K, Rahmanto B, Triyasmono L, Rizki MI, Halwany W, Lestari F. The influence of leaf age  on  total  phenolic  ,  flavonoids  ,  and  free  radical  scavenging  capacity  of  aquilaria
Vol.14;No.2; Juli 2023 Halaman 136-144
beccariana.  Res  J  Pharm  ,  Biol  Chem  Sci  [Internet].  2017;8(1):129 –33.  Available  from: https://www.rjpbcs.com/pdf/2017_8(1S)/[20].pdf
7.   Prawira-Atmaja MI, Shabri S, Khomaini HS, Maulana H, Harianto S, Rohdiana D. Changes in chlorophyll and polyphenols content in Camellia sinensis var. sinensis at different stage of  leaf  maturity.  In:  IOP  Conference  Series:  Earth  and  Environmental  Science  [Internet]. Indonesia: IOP Conference Series: Earth and Environmental Science; 2018. Available from: https://iopscience.iop.org/article/10.1088/1755-1315/131/1/012010#:~:text=The results showed that total,to decrease with leaf maturity.
8.   Thi  N  Do,  Hwang  ES.  Bioactive  compound  contents  and  antioxidant  activity  in  aronia (Aronia  melanocarpa)  leaves  collected  at  different  growth  stages.  Prev  Nutr  Food  Sci [Internet].
2014;19(3):202 –14. Available from:
https://www.pnfs.or.kr/journal/view.html?spage=204&volume=19&number=3
9.   Prasad  K.  Evaluation  of  antioxidant,  vitamins,  phytochemicals  and  nutritive  values  of euphorbia  hirta  linn.  Res  J  Phytochem  [Internet].  2014;8(2):47 –51.  Available  from: https://scialert.net/abstract/?doi=rjphyto.2014.47.51
10. Felicia  N,  Widarta  IWR,  Yusasrini  NLA.  Pengaruh  ketuaan  daun  dan  metode pengolahan terhadap aktivitas antioksidan dan karakteristik sensoris teh herbal bubuk daun alpukat  (persea  americana  mill.).  Ilmu  dan  Teknol  Pangan  [Internet].  2017;5(2):85 –94. Available from: https://ojs.unud.ac.id/index.php/itepa/article/view/27503
11. Syahruddin E, Abbas H, Purwati E, Heryandi Y. Aplikasi mengkudu sebagai sumber antioksidan  untuk  mengatasi  stress  ayam  broiler  di  daerah  tropis.  J  Peternak  Indones (Indonesian J
Anim Sci [Internet].
2012;14(3):411. Available from:
http://jpi.faterna.unand.ac.id/index.php/jpi/article/view/37
12. Hilma R, Gustina N, Syahri J. Pengukuran total fenolik, flavonoid, aktivitas antioksidan dan  antidiabetes  ekstrak  etil  asetat  daun  katemas  (euphorbia  heterophylla,  l.)  secara  in vitro dan in silico melalui inhibisi enzim α-glukosidase. ALCHEMY J Penelit Kim [Internet]. 2020;16(2):240. Available from: https://jurnal.uns.ac.id/alchemy/article/view/40087
13. Tiwari  N,  Mishra  A,  Bhatt  G,  Chaudhary  A.  Anti-stress  activity  of  a  bioflavanoid: quercetin from euphorbia hirta. Br J Pharm Res [Internet]. 2015;6(2):68 –75. Available from: https://journaljpri.com/index.php/JPRI/article/view/619
14. Londok JJMR, Manalu W, Wiryawan IKG, Sumiati S. Profil hematologi ayam pedaging yang diberi ransum mengandung asam laurat dan pinang yaki sebagai sumber antioksidan alami (haematology profile of broiler fed lauric acid and areca vestiaria giseke as a source of natural antioxidant). J Vet [Internet]. 2018;19(2):222. Available from: https://ojs.unud.ac.id/index.php/jvet/article/view/33394
15. Hashemi  SR,  Zulkifli  I,  Davoodi  H,  Hair  Bejo  M,  Loh  TC.  Intestinal  histomorphology changes and serum biochemistry responses of broiler chickens fed herbal plant (Euphorbia hirta) and mix of acidifier. Iran J Appl Anim Sci [Internet]. 2014;4(1):95 –103. Available from: https://ijas.rasht.iau.ir/article_513723.html