## Journal of Agromedicine and Medical Sciences . 2023. 9(2): 70-74

## JOURNAL OF AGROMEDICINE AND MEDICAL SCIENCES
(AMS) ISSN: 2460-9048 (Print), ISSN: 2714-5654 (Electronic)
Available online at http://jurnal.unej.ac.id/index.php/JAMS
Determinasi Dosis Letal Efek Larvasida Ekstrak Kulit Jeruk Siam ( Citrus suhuinensis ) terhadap Larva Nyamuk Aedes Aegypti
Lethal Dose Determination of Larvacide Effect of Citrus suhuinensis Peel Extract on Aedes Aegypti Larvae
Wahyu Eko Prabowo 1 , Erma Sulistyaningsih 2* ), Dwita Aryadina Rachmawati 3 .
1 Faculty of Medicine, University of Jember, Jember, Indonesia
2 Department of Parasitology, University of Jember, Jember, Indonesia
3 Department of Public Health, University of Jember, Jember, Indonesia

## Article Info
Article History: Received: January 04, 2023
Accepted: April 18, 2023 Published: June 30, 2023
*) Corresponding author:
E-mail: sulistyaningsih.fk@unej.ac.id
How to cite this article:
Prabowo W.E., Sulistyaningsih E.,
Rachmawati  D.A.,  2022.  Determinasi Dosis  Letal  Efek  Larvasida  Ekstrak  Kulit Jeruk  Siam  terhadap  Larva  Nyamuk Aedes  aegypti. Journal  of  Agromedicine and Medical Sciences . 2023. 9(2): 70-
https://doi.org/10.19184/ams.v9i2.3309 8

## Abstrak
Demam  berdarah dengue (DBD)  adalah  penyakit  infeksi  yang  endemis  di  Indonesia. Penyakit  ini  disebabkan  oleh  virus  dengue  dan  ditularkan  oleh  vektor  nyamuk Aedes aegypti . Pengendalian vektor merupakan  upaya  penting dalam mengontrol DBD. Kulit jeruk siam ( Citrus suhuinensis ) mempunyai kandungan zat aktif yang mampu berpotensi membunuh  larva  nyamuk  seperti  zat  saponin,  tanin,  flavonoid,  serta  D-limonen. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan efektifitas dan dosis letal ekstrak kulit jeruk siam  sebagai  larvasida  nyamuk Ae  aegypti. Desain  penelitian  eksperimental  dengan randomized  control-group  posttest  design dilakukan  menggunakan  larva  nyamuk Ae aegypti instar III dan IV yang terbagi menjadi 10 kelompok yaitu: kontrol positif (abate), kontrol negatif, kelompok perlakuan dengan dosis bertingkat 0,01, 0,02, 0,04, 0,06, 0,25, 0,50, 0,75 dan  1 %. Setiap kelompok terdiri dari 25 larva. Pengamatan kematian larva dilakukan setelah 24 dan 48 jam perlakuan. Hasil penelitian menunjukan bahwa ekstrak kulit  jeruk  siam  mempunyai  sifat  larvasida  sesuai  dengan  dosis  letalnya,  yaitu  LD50 sebesar  5,77  %,  LD95  sebesar  9,34  %  dan  LD99  sebesar  11,39  %.  Dapat  disimpulkan bahwa ekstrak kulit jeruk siam berpotensi  sebagai larvasida Ae aegypti .
Kata kunci : Aedes aegypti , Citrus suhuinensis , Demam berdarah, Dosis letal

## Abstract
Dengue  hemorrhagic  fever  (DHF)  is  an  endemic  infectious  disease  in  Indonesia.  This disease is caused by dengue virus and transmitted by Aedes aegypti as a vector. Vector control  is  an  important  approach  to  control  DHF.  Citrus  suhuinensis  contains  active compounds such as saponins, tannins, flavonoids, and D-limonene that can kill Ae aegypti larvae. This study aimed to determine the effectivity and lethal dose of C. suhuinensis peel extract  against  Ae  aegypti  larva.  This  was  an  experimental  study  using  randomized control-group posttest design on Ae aegypti instar III and IV larvae which were divided into 10 groups, i.e., positive control, negative control, 8 treatment groups of serial doses of 0.01,  0.02, 0.04, 0.06,  0.25, 0.50, 0.75 and 1  %. Each group consisted of 25 larvae. Observations  on  the  larvae  were  conducted  after  24  and  48  hours  of  treatment.  The results showed that C. suhuinensis peel extract has larvicide effect as shown by the Lethal Dose  value,  i.e.,  LD50,  LD95  and  LD99  were  5.77,  9.34  and  11.39%,  respectively.  In conclusion, the C. suhuinensis peel extract has potential as an Ae aegypti larvacide.
Keywords : Aedes aegypti, Citrus suhuinensis, Dengue fever, Lethal Dose

## Pendahuluan
Demam  Berdarah Dengue (DBD)  atau Dengue  Haemorrhagic Fever )  adalah  penyakit  infeksi  yang  ditularkan  oleh  gigitan nyamuk  dan  umumnya  ditemukan  di  daerah  tropis  dan subtropis, terutama di daerah perkotaan. Indonesia sejak 2013 telah memasukkan demam berdarah sebagai salah satu penyakit menular  yang  mematikan  (Dania,  2016).  Selama  lima  puluh tahun  terakhir,  infeksi  DBD  terus  meningkat  30  kali  lipat (Sholihah  et  al.,  2020).  Pada  2019,  jumlah  infeksi  DBD  di Indonesia  mencapai  112.954  kasus  (Arisanti  &  Suryaningtyas, 2021)
DBD  disebabkan  oleh  virus  dengue  yang  terbagi  menjadi  4 serotipe, yaitu Den-1, Den-2, Den-3 dan Den-4, semua serotipe ada di Indonesia, Den-3 merupakan serotipe terbanyak (Fajarani et al., 2020). DBD memiliki masa inkubasi 3-14 hari dalam tubuh manusia (Trovancia et al., 2016).
Nyamuk Ae  aegypti merupakan  vektor  utama  penularan  virus dengue, berkembang biak di lingkungan padat penduduk yang memiliki  genangan  air  bersih  seperti  pada  kaleng  bekas,  bak mandi, ember (Syamsir et al., 2020).  Nyamuk Ae . aegypti saat bertelur, nyamuk betina mampu menghasilkan hingga 100 butir telur, sehingga dapat berkembang biak dengan cepat (Kusuma & Sukendra,  2016).  Pengendalian  vektor  dengan  cara  tradisional menimbun,  mengeringkan  dan  menutup  masih  belum sepenuhnya  efektif,  sementara  menggunakan  bahan  kimia seperti  semprotan  pengusir  nyamuk  dan  penggunaan  abate terkadang  menimbulkan  efek  samping.  Oleh  karena  itu, dibutuhkan lebih banyak bahan alami seperti kulit jeruk.
Indonesia merupakan produsen jeruk siam ( Citrus Suhuinensis ) yang  melimpah,  pada  penelitian  sebelumnya  diketahui  bahwa kulit  jeruk  mengandung  beberapa  zat  aktif  yang  dapat membunuh  jentik  nyamuk  seperti  saphonin,  tanin,  flavonoid, dan D-limonene (Nirma et al., 2017).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek larvasida ekstrak kulit  jeruk  siam  terhadap  larva  nyamuk Ae  aegypti dan menentukan dosis letalnya.

## Metode

## Desain Penelitian
Penelitian  ini  adalah  studi  eksperimental  dengan  desain randomized  control-group  posttest  design .  Sampel  penelitian berupa larva nyamuk Ae aegypti instar III dan IV, dipilih karena merupakan  bentuk  larva  yang  paling  lengkap  dan  sempurna organnya  sehingga  paling  cocok  untuk  penelitian  larvasida. Sampel  dipilih  berdasarkan  metode simple  random  sampling , dengan  menggunakan  kriteria  inklusi,  yaitu  larva  yang  sehat dan aktif bergerak .

## Ekstrak Kulit Jeruk Siam
Pembuatan ekstrak diawali dengan pemilihan kulit buah jeruk dari jeruk yang berukuran sedang dengan berat total sekitar 5 kg.  Kulit  jeruk  dipotong-potong  dan  dicuci,  kemudian dikeringkan selama 3 hari dan dioven pada suhu 45  C untuk mengurangi  kadar  airnya.  Kulit  jeruk  dihaluskan  dengan blender, diayak untuk memisahkan serbuk halus dengan yang kasar. Dari pengayakan tersebut didapatkan 500 g serbuk halus.
Proses ekstraksi menggunakan metode maserasi. Sebanyak 100 g  serbuk  simplisia  dimasukkan  kedalam  botol  kaca  yang
berfungsi  sebagai  maserator  dicampurkan  dengan  1000  ml etanol 95 % dengan skala perbandingan 1/10, diaduk setiap 8 jam,  serta  didiamkan  selama  3  hari,  total  ada  5  botol  yang dibuat oleh peneliti. Setelah itu ekstrak disaring dengan kertas saring  untuk  selanjutnya  dilakukan  evaporasi  menggunakan waterbath untuk  mengurangi  kadar  etanolnya.  Dari  1000  ml ekstrak  pada  setiap  botol  mendapatkan  sekitar  10  g  ekstrak kental, sehingga total didapatkan 50 g ekstrak.

## Perlakuan
Penelitian dilakukan dengan membagi kelompok perlakuan dan kelompok  kontrol.  Kelompok  perlakuan  terdiri  atas  dosis ekstrak kulit jeruk 0,01 %, 0,02 %, 0,03 %, 0,04 %, 0,25 %, 0,50 %,  0,75  %,  dan  1  %.  Sedangkan  kelompok  kontrol  positif menggunakan  abate  dan  kontrol  negatif  menggunakan aquades.  Setiap  kelompok  eksperimen  terdiri  dari  25  larva sesuai  dengan  standar  WHO  untuk  penelitian  larvasida  serta volume cairan maksimal 100 ml.
Penelitan  ini  menggunakan  data  primer.  Data  dikumpulkan dengan menghitung dan mengamati larva uji yang mati pada setiap  kelompok  setelah  24  jam  dan  48  jam  perlakuan.  Data antara  kelompok  uji  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol positif dan negatif untuk melihat tingkat efektifitas serta dosis letalnya.

## Analisis Data
Analisis data dilakukan menggunakan software SPSS versi 24.0. Data  diuji  normalitasnya  dengan Shapiro  Wilk  test dan homogenitas  menggunakan Levene  test. Penentuan  dosis  letal LD50, LD95 dan LD99 diuji dengan analisis probit.

## Persetujuan etik
Penelitian ini sudah mendapat persetujuan etik dari Komisi Etik  Penelitian  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Jember dengan nomor 1.570/H25.1.11/KE/2021.

## Hasil
Hasil  penghitungan  kematian Ae  aegypti setelah  pemberian ekstrak kulit jeruk siam pada dosis 0,01 - 0,06 % selama 24 jam dan 48 jam serta dosis  0,25 - 1 % selama 24 jam dapat dilihat pada Tabel 1.
Hasil  uji  normalitas  menggunakan  uji Shapiro  Wilk dan  uji homogenitas dengan Levene test dapat dilihat pada Tabel 2. Dari data tersebut menunjukkan karakteristik data tidak normal dan tidak homogen.
Hasil  analisis  probit  untuk  melihat  hasil  LD50,  LD95,  dan  LD99 dapat dilihat pada Tabel 3. Data yang digunakan untuk analisis probit adalah data dosis 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,25, 0,50, 0,75, dan 1 % pada 24 jam awal, sebagai penilaian dalam uji toksisitas akut  (BPOM,  2022).  Tabel  3  menunjukkan  nilai  LD50  (dosis ekstrak kulit jeruk siam yang mampu membunuh 50 % dari larva uji nyamuk Ae aegypti setelah uji 24 jam) adalah 5,77 %, dengan range  dosis  5,35  -  6,2  %.  Sedangkan  LD95  (dosis  yang  mampu membunuh 95 % larva uji) adalah 9,34 %, dengan range dosis 8,2 - 11,6 %. Nilai LD99 (dosis yang mampu membunuh 99 % larva uji) menunjukkan angka 11.39 %, dengan range dosis 9,6 - 15.3 %.
Tabel 1 Jumlah kematian larva Ae aegypti pada berbagai dosis ekstrak kulit jeruk siam setelah 24 dan 48 jam
Dosis(%) Rata-rata Kematian Larva 24 jam 48 jam 0,01 0,00 0,25 0,02 0,50 1,75 0,04 0,00 3,75 0,06 0,75 4,00 0,25 11,5 - 0,50 14,5 - 0,75 19,00 - 1 20,00 - Kontrol + 19,00 - Kontrol - 0,00 0,00
Tabel 2. Hasil uji normalitas dan homogenitas
Dosis (%) Uji Normalitas (sig) Uji Homogenitas (sig) 0,01-0,06/24 jam 0,025 0,007 0,01-0,06/48 jam 0,001 0,177 0,01-1%/24 jam 0,024 0,001
Tabel 3 Hasil analisis probit LD 50, LD95 dan LD99 Confidence Limits Probability 95% Confidence Limits for Dosis 95% Confidence Limits for log(Dosis) Estimate Lower Bound Upper Bound Estimate Lower Bound Upper Bound .50 5.77 5.35 6.22 .76 .73 .79 .95 9.34 8.23 11.62 .97 .92 1.06 .99 11.39 9.64 15.38 1.06 .98 1.19

## Pembahasan
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  kulit  jeruk  siam mempunyai  sifat  larvasida  sehingga  dapat  digunakan  sebagai pendekatan  alternatif  untuk  menekan  jumlah  vektor  demam berdarah.  Kulit  jeruk  siam  memiliki  beberapa  kandungan  zat aktif  seperti saphonin,  flavonoid,  D-limonen dan tannin .  Zat tersebut  bersifat  racun  pada  larva  dan  secara  alami  ada  pada tumbuhan,  akan  tetapi  cenderung  lebih  aman  bagi  mamalia (Adrianto et al., 2014).
Saponin  juga  mempunyai  efek  larvasida  yaitu  memiliki kemampuan untuk menembus lapisan membran sel (Yuliana et al.,  2021).  Sifat  zat  ini  membentuk  ikatan  dengan  lipid  pada membran sel larva, hingga mampu mengubah struktur kimianya. Perubahan  struktur  kimia  pada  membran  sel  ini  dapat menyebabkan  terserapnya  air  kedalam  sel  (osmosis),  hingga dapat  menyebabkan  sel  tersebut  lisis  (Ramayanti  &  Febriani, 2016).
Flavonoid  bekerja  dengan  cara  melumpuhkan  sistem  saraf pernapasan  pada  serangga/larvanya.  Turunan  dari  senyawa
flavonoid  adalah  rotelon  yang  dapat  menghambat  enzim pernapasan  sehingga  membuat  kegagalan  sistem  pernapasan (Nurhaifah & Sukesi, 2015).
D-limonen  merupakan  suatu  senyawa  aktif  yang  terkandung pada ekstrak kulit jeruk, mempunyai aroma yang khas sehingga tidak  disukai  oleh  nyamuk.  Selain  itu  juga  mempunyai  sifat larvasida dengan cara mengganggu sistem saraf sensoris perifer pada larva, sehingga membuat larva kurang menyadari sesuatu yang terjadi, larva yang terkena efek dari zat ini akan membuat larva  mempunyai  gerak  yang  lambat  dalam  merespon  suatu ancaman, hal tersebut karena zat aktif ini merusak sistem saraf sensoris  pada  larva,  sehingga  larva  sulit  untuk  mencerna informasi  yang  diterima  (membutakan  larva).  Kematian  akibat zat ini akan membuat larva mengkerut karena efek kontraksi dari rusaknya saraf (Saleh et al., 2017).
Tanin  adalah  zat  aktif  antioksidan  yang  termasuk  dalam golongan polifenol yang mudah teroksidasi menjadi asam tanat. Tanin merupakan zat yang bermanfaat bagi manusia karena zat ini  dapat  berkontribusi  untuk  mencegah  kerusakan  yang  di timbulkan  oleh  efek  negatif  yang  di  sebabkan  oleh  berbagai
macam radikal bebas, seperti kerusakan sel dan jaringan. Pada tanaman  dan  buah-buahan  tanin  berkontribusi  dalam memberikan rasa pahit. Tanin mempunyai efek larvasida yaitu dapat  menganggu  proses  pencernaan  pada  larva  (Yuliasih  & Widawati, 2017). Menghalangi larva untuk menyerap nutrisi dari makanan  yang  di  peroleh.  Mengakibatkan  pertumbuhan  larva terganggu,  dan  larva  tidak  bisa  melakukan  molting  (berganti kulit),  hingga  akhirnya  mati  akibat  kekurangan  nutrisi (Purnamasari et al., 2017).
Larva yang mati pada penelitian ini tampak mengembang, pucat dan terdapat luka pada kulitnya.  Hal tersebut disebabkan oleh zat saponin yang terdapat pada kandungan ekstrak kulit jeruk. Saponin merusak membran sel pada kulit larva hingga membuat air  yang  ada  di  sekitar  berpindah  ke  ruang  intrasel  hingga akhirnya  lisis.  Hal  tersebut  dapat  ditandai  dengan  melihat struktur  kulit  larva  yang  rusak  dan  berlubang-lubang  dan berwarna  pucat  serta  membengkak  yang  diakibatkan  air  dari lingkungan  sekitar  yang  masuk  kedalam  tubuh  larva  melalui proses  osmosis  karena  hilangnya  tekanan  interseluler  karena kerusakan membran sel pada tubuh larva. Selain itu juga dapat diamati dari keadaan larva yang telah mati banyak diantaranya tenggelam  serta  tidak  memendek,  hal  tersebut  menunjukkan efek  flavonoid  pada  kandungan  ekstrak  kurang  memberikan pengaruh.
Kandungan  tannin  pada  ekstrak  juga  menunjukkan  efek  pada larva. Hal ini ditunjukkan dengan kondisi larva pada dosis yang lebih tinggi yaitu 0,06 % lebih sedikit yang mengalami molting (pergantian kulit) daripada larva pada dosis 0,01 %. Larva pada dosis  0,06  %  mengalami  gangguan  tumbuh  kembang  yang disebabkan oleh terganggunya sistem pencernaan.
Dosis  letal  ekstrak  kulit  jeruk  siam  pada  penelitian  ini  adalah LD50 bernilai 5,77 %, untuk LD95 berada di angka 9,34 % serta LD99  sebesar  11,39  %.  LD50  menjadi  dosis  yang  paling  tepat pada uji toksisitas akut karena hanya menyebabkan kematian 50 % populasi sampel dan angkanya cenderung lebih stabil (Assagaf et al., 2013)

## Kesimpulan
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  kandungan  yang  terdapat dalam  kulit  jeruk  siam  ( Citrus  suhuinensis) mempunyai  efek larvasida terhadap Ae aegypti sesuai dengan penghitungan dosis letalnya, dimana LD50 sebesar 5,77 %, LD95 sebesar 9,34 % serta LD99 sebesar 11,39 %.

## Konflik Kepentingan
Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan dalam penelitian ini

## Ucapan Terima Kasih
Penulis  berterima  kasih  kepada  Laboratorium  Farmakologi Universitas  Jember  dan  Laboratorium  Entomologi Institute  of Tropical  Disease UNAIR  yang  telah  memberikan  kesempatan, tempat  dan  fasilitas  kepada  peneliti  untuk  melakukan penelitian.

## Kontribusi Penulis
WEP berkontribusi dalam melakukan penelitian, mengumpulkan  dan  menganalisis  data,  menyusun  draft naskah.    ES  berkontribusi  dalam  memberikan  ide  penelitian, menyusun kerangka konsep, metode  penelitian, menganalisis data  dan  memfinalisasi  naskah.  DAR  berkontribusi  dalam metode penelitian dan memfinalisasi naskah.

## Referensi
Adrianto,  H.,  Yotopranoto,  S.,  &  Hamidah.  (2014).  Efektivitas ekstrak  daun  jeruk  purut. Aspirator , 6 (1),  1 – 6. https://ejournal2.litbang.kemkes.go.id/index.php/aspirat or/article/view/4535
Arisanti,  M.,  &  Suryaningtyas,  N.  H.  (2021).  Kejadian  Demam Berdarah  Dengue  (Dbd)  Di  Indonesia  Tahun  2010-2019.
Spirakel , 13 (1), 34 – 41.
https://doi.org/10.22435/spirakel.v13i1.5439
Assagaf, F., Wullur, A., & Yudistira, A. (2013). Uji toksisitas akut (lethal  dose  50)  ekstrak  etanol  daun  gedi  merah (Abelmoschus  manihot  L.)  terhadap  tikus  putih  jantan galur  Wistar  (Rattus  norvegicus  L  .). Pharmacon  Jurnal Ilmiah Farmasi Unsrat , 2 (01), 23 – 28.
BPOM. (2022). BPOM NO.10 Tahun 2022 Uji Toksisitas Praklinik secara in vivo . 490 .
https://peraturan.bpk.go.id/Home/Details/223969/perat uran-bpom-no-10-tahun-2022
Dania,  I.  A.  (2016).  Gambaran  Penyakit  dan  Vektor  Demam Berdarah  Dengue  (DBD)  Perguruan  tinggi  di  Medan,
Sumatera Utara. Jurnal Warta , 48 (1), 1 – 15. https://media.neliti.com/media/publications/290766- gambaran-penyakit-dan-vektor-demam-berda- ded3625d.pdf
Fajarani,  R.,  Martini,  &  Adi,  M.  S.  (2020).  Gambaran  Variasi Serotipe Virus Dengue Pada Pasien Infeksi Dengue Di Kota Semarang  Tahun  2019. Jurnal  Kesehatan  Masyarakat , 8 (1), 169 – 176. https://doi.org/10.14710/jkm.v8i1.26065
Kusuma,  A.  P.,  &  Sukendra,  D.  M.  (2016).  Analisis  Spasial Kejadian  Demam  Berdarah  Dengue Berdasarkan Kepadatan Penduduk. Unnes Journal of Public Health , 5 (1),
48. https://doi.org/10.15294/ujph.v5i1.9703
Nirma,  Susilawaty,  A.,  Ibrahim,  H.,  &  Amansyah,  M.  (2017).
Efektivitas Larvasida Ekstrak Kulit Buah Jeruk Nipis ( Citrus aurantifolia ) Dalam Membunuh Jentik Nyamuk Aedes sp (Studi di Daerah Epidemi DBD di Wilayah Kerja Puskesmas Antang Kecamatan Manggala). HIGIENE: Jurnal Kesehatan Lingkungan , 3 (2), 87 – 96. https://journal.uin- alauddin.ac.id/index.php/higiene/article/view/3700
Nurhaifah, D., & Sukesi, T. W. (2015). Efektivitas Air Perasan Kulit Jeruk  Manis  sebagai  Larvasida  Nyamuk  Aedes  aegypti. Kesmas:  National  Public  Health  Journal , 9 (3),  207. https://doi.org/10.21109/kesmas.v9i3.566
Purnamasari,  M.  R.,  Sudarmaja, I.  M.,  &  Swastika,  I.  K.  (2017). Potensi  Ekstrak  Etanol  Daun  Pandan  Wangi  (  Pandanus amaryllifolius  roxb.)  sebagai  Larvasida  Alami  bagi  Aedes
aegypti. E-Jurnal Medika , 6 (3), 1 – 8. http.//ojs.unud.ac.id/indexphp/eum
Ramayanti,  I.,  &  Febriani,  R.  (2016).  Uji  Efektivitas  Larvasida Ekstrak Daun Pepaya (Carica papaya Linn) terhadap Larva Aedes  aegypti. Syifa’  MEDIKA:  Jurnal  Kedokteran  Dan
Kesehatan , 6 (2), 79.
https://doi.org/10.32502/sm.v6i2.1383
Saleh, M., Susilawaty, A., Syarfaini, S., & Musdalifah, M. (2017). Uji  Efektivitas  Ekstrak  Kulit  Buah  Jeruk  Nipis  (Citrus aurantifolia) Sebagai Insektisida Hayati Terhadap Nyamuk Aedes aegypti. Jurnal Kesehatan Lingkungan , 3 (1), 30 – 36. https://journal.uin- alauddin.ac.id/index.php/higiene/article/view/2761
Sholihah,  N.  A.,  Weraman,  P.,  &  Ratu,  J.  M.  (2020).  Analisis Spasial  dan  Pemodelan  Faktor  Risiko  Kejadian  Demam Berdarah Dengue Tahun 2016-2018 di Kota Kupang. Jurnal Kesehatan Masyarakat Indonesia , 15 (1), 52. https://doi.org/10.26714/jkmi.15.1.2020.52-61
Syamsir, S., Daramusseng, A., & Rudiman, R. (2020). Autokorelasi Spasial Demam Berdarah Dengue di Kecamatan Samarinda
Utara,  Kota  Samarinda. Jurnal  Kesehatan  Lingkungan
Indonesia , 19 (2), 119 – 126. https://doi.org/10.14710/jkli.19.2.119-126
Trovancia, G., Sorisi, A., & Tuda, J. S. B. (2016). Deteksi transmisi virus  dengue  pada  nyamuk  wild  Aedes  Aegypti  betina  di Kota Manado. Jurnal E-Biomedik , 4 (2). https://doi.org/10.35790/ebm.4.2.2016.14661
Yuliana,  A.,  Rinaldi,  R.  A.,  Rahayuningsih,  N.,  &  Gustaman,  F. (2021).  Efektivitas  Larvasida  Granul  Ekstrak  Etanol  Daun Pisang  Nangka  (Musa  x  paradisiaca  L.)  terhadap  Larva Nyamuk  Aedes  aegypti. ASPIRATOR  -  Journal  of  Vector- Borne Disease Studies , 13 (1), 69 – 78. https://doi.org/10.22435/asp.v13i1.4042
Yuliasih, Y., & Widawati, M. (2017). Aktivitas Larvasida Berbagai Pelarut  pada  Ekstrak  Biji  Kayu  Besi  Pantai  (Pongamia pinnata)  terhadap  Mortalitas  Larva  Aedes  spp. Balaba: Jurnal Litbang Pengendalian Penyakit Bersumber Binatang Banjarnegara , 13 (2), 125 – 132. https://doi.org/10.22435/blb.v13i2.5807.125-132