## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID DALAM DAUN LAMUN (SYRINGODIUM ISOETIFOLIUM)
Romario Aldi Rompas, Hosea Jaya Edy, Adithya Yudistira Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRAK
Tanaman  lamun  merupakan  kelompok  tumbuhan  berbunga,  berdaun,  berakar  sejati  dan tumbuh pada kedalaman air laut yang dangkal. Tanaman lamun biasanya di gunakan sebagai penangkap  sedimen,  digunakan  sebagai  kompos  dan  sebagai  antioksidan  penggunaan mengenai  tanaman  lamun  khususnya  bagi  manusia  masih  perlu  dilakukan.  Melihat  potensi dan  kandungan  kimia  seperti  yang  terdapat  pada  lamun  seperti  flavonoid.  Maka  sangatlah perlu  dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui  kandungan  jenis  flavonoid  yang  terdapat  pada daun lamun. Untuk itu dilakukan penelitian tentang isolasi dan identifikasi dalam daun lamun (Syringodium  isoetifolium)  menggunakan  Kromatografi  lapis  tipis  dan  Spektrofotometer UV-Vis.  Penelitian  dilakukan  dengan  ekstraksi  maserasi  mengggunakan  pelarut  etanol  96% p.a.  Isolasi  dilakukan  dengan  Kromatografi  Lapis  Tipis  silika  GF  254  dengan  eluen  n- butanol:asam  asetat:air  (BAA)  (4:1:5).  Isolasi  menggunakan  KLT  memperoleh  2  spot,  yang pertama  berwarna  kuning  dengan  Rf  0,4  dan  yang  kedua  berwarna  merah  dengan  Rf  0,8. Identifikasi senyawa flavonoid dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Berdasarkan Hasil penelitian bahwa senyawa flavonoid  yang terdapat pada daun lamun di duga senyawa flavonoid golongan Khalkon.
Kata kunci: Lamun, Flavonoid, Kromatografi Lapis Tipis, Uv-vis

## ABSTRACT
Sea grass is a group of flowering plant, leaved, has its own roots and live in a shallow water. It  usually  used  to  capture  sediment,  compost,  and  as  antioxidant.    The  use  of  sea  grass  on human needs to be conducted. Because of its potency and its component such as flavonoids, a research  to  identify  kind  of  flavonoids  in  sea  grass  must  be  conducted.  The  aims  of  this research  are  to  isolate  and  identify  flavonoids  in  sea  grass  (Syringodium  isoetifolium)  using thin  layer  chromatography  and  spectrophotometer  UV-Vis.  Extraction  was  done  with maceration using ethanol 96% as solvent. Isolation was done by Thin Layer Chromatography GF 6054, and n-butanol : acetic acid : water (BAA) (4:1:5). There are two spot after isolate with TLC, the first is yellow spot with Rf 0,4 and second is red with Rf 0,8. Identification of flavonoids was done using spectrophotometer UV-Vis. Based on results, sea grass consist on flavonoids, suspected chalcon group.
Keywords : sea grass, flavonoids, thin layer chromatography, UV-vis

## PENDAHULUAN
Masa sekarang masyarakat Indonesia mulai menerapkan prinsip hidup kembali ke alam. Banyak upaya
pemeliharaan kesehatan yang dapat diciptakan  melalui  potensi  kekayaan  alam yang  ada  di  Indonesia  khususnya  di Sulawesi Utara yang dikembangkan menjadi obat tradisional untuk
menyembukan penyakit. Pengobatan dengan  menggunakan  tanaman  obat  yang dikembangkan  sekarang  ini  lebih  murah dan  mempunyai  efek  samping  yang  relatif sedikit  dibanding  obat-obat  sintesis  yang beredar  saat  ini  salah  satunya    tanaman lamun yang dimanfaatkan dalam pengobatan tradisional.
Lamun merupakan kelompok tumbuhan  berbunga,  berbuah,  berdaun, berakar  sejati  yang  tumbuh  pada  substrat berlumpur dan berpasir bahkan hidup pada kedalaman  laut  yang  dangkal  yang terdapat  di  wilayah  perairan.  Lamun memiliki kandungan nutrisi seperti protein, karbohidrat,  lemak  dan  serat  pangan  yang merupakan  sumber  makanan.  Lamun merupakan  jenis  tumbuhan  yang  mampu beradaptasi  dengan  lingkungan  dekat pantai  di  sebagian  besar  benua  di  dunia. Akan  tetapi,  ditemukan  beberapa  spesies yang  tidak  dapat  bereproduksi  kecuali muncul  pada  saat  air  surut  atau  pada  saat pemasukan  air  tawar.  Beberapa  jenis lamun  mampu  bertahan  dalam  berbagai kondisi  seperti  air  tawar,  muara,  laut  atau daerah bersalinitas tinggi. Di seluruh dunia diperkirakan  terdapat  52  jenis  lamun,  di Indonesia  ditemukan  sekitar  15  jenis  yang termasuk  ke  dalam  2  famili,  yaitu Hydrocharitaceae  dan  Potamogetonaceae (Short dan Coles, 2006).
Kandungan  kimia  yang  terdapat pada  lamun  seperti  flavonoid  berpotensi menyembuhkan penyakit. Flavonoid adalah  zat  aktif  yang  terdapat  pada tumbuhan yang mempunyai struktur kimia C6-C3-C6 yang tiap bagian C6 merupakan rantai  alifatik  dan  dalam  tanaman  lamun senyawa flavonoid bisa digunakan sebagai antioksidan.
Sejauh  ini  lamun  di  Indonesia  hanya diteliti  mengenai  aktivitas  budidaya  dan eksplorasinya saja dan hanya dimanfaatkan sebagai  pakan  ternak.  Dengan  penelitian yang  dilakakukan  Ukthy  (2011),  yang menguji  kandungan  fitokimia  pada  lamun dengan  jenis  Syringodium  isoetifolium menunjukan  adanya  flavonoid,  fenol, hidrokuinon dan potensi senyawa
flavonoid  yang  bisa  digunakan  sebagai antioksidan.  Maka  penulis  tertarik  untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa flavonoid yang terdapat didalamnya.

## METODELOGI PENELITIAN

## Pelaksanaan penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  september  2012  di  Laboraturium Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas
Samratulangi, Manado.

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  pada  penelitian yaitu  oven,  neraca  analitik,  blender, chamber  KLT,  lampu  UV    366  nm, spektrofotometer  UV-vis,  aluminium  foil, Plat silika gel G60 F254, rotary evaporator, water batch,  kertas saring, dan peralatan gelas.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini yaitu  daun  Lamun  yang  diperoleh  dari Pantai  Molas  dan  Meras  Kecamatan Bunaken,  etanol  96%,  aquades,  n-butanol, asam asetat, metanol. Amoniak,

## Cara Kerja
Sebanyak  150  gram  serbuk  halus  daun lamun  dimasukan  ke  dalam  750  ml  etanol 96  %,  ditutup  dengan  aluminium  foil  dan dibiarkan  selama  5  hari,  sambil  dikocok. Setelah  itu  sampel  di  uapkan  dengan menggunakan    rotary  evaporator  dan mendapat  ekstrak  cair  yang  kemudian  di water batch pada suhu 60º C. Ekstrak yang di isolasi dengan menggunakan kromatografi lapis tipis preparatif menggunakan fase diam G60 F254 dengan ukuran  20  cm  x  20  cm  dan  fase  gerak campuran  n-butanol-asam  asetat-dan  air (BAA)  (4:1:5).  Selanjutnya  isolat  di identifikasi dengan menggunakan spektrofotometer Ultra Violet –Visibel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Tabel 1. Hasil ekstraksi Sampel Ekstrak Basah Kering Halus 1.650 g 155,916 g 150,015 g 2,6 g Hasil Identifikasi Flavonoid Dengan Menggunakan  Spektrofotometer  UV-vis. Pita  1  pada  panjang  gelombang  370 dengan  absorbansi  0,04.  Pita  2  pada
panjang gelombang 289 dengan absorbansi 0,032
Tabel  2  .Perhitungan  Nilai  Rf  dan  warna sinar  tampak  dan  ultraviolet  dengan pereaksi NH 3 pada KLT Preparatif.
Perlakuan Ekstrak Rf ------- Dengan NH 3 Lampu UV tanpa NH 3 Lampu UV dengan NH 3 Lamun 0,4 0,88 Kuning
------- Kuning kecokelatan
------------
Hijau Merah agak pudar Hijau Merah lebih jelas

## Pembahasan
Daun  Lamun  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  diperoleh  dari  Pantai Molas  wilayah  Tuminting.  Tumbuhan  ini merupakan kelompok tumbuhan berbunga, berbuah,  berakar  sejati  dan  tumbuh  pada substrat  yang  berlumpur  dan  berpasir bahkan  hidup  pada  kedalaman  laut  yang dangkal.
Lamun memiliki kandungan nutrisi seperti  protein,  lemak,  dan  serat  pangan yang  merupakan  sumber  makanan  dan mengandung  senyawa  metabolit  sekunder seperti  flavonoid,  fenol  hidroquinon, steroid,  dan  titerpenoid.    Peranan  lamun dalam  lingkungan  perairan  berfungsi sebagai  produsen  primer  tertinggi  bila dibandingkan  dengan  ekosistem  lainya yang  ada  di  laut  yang  dangkal,  sebagai penangkap  sedimen  dan  berfungsi  sebagai antioksidan.
Daun  Lamun  yang  diambil  di Pantai Molas wilayah
Tuminting dimasukkan  kedalam  kotak    putih  yang berisi  Es  untuk  menjaga  daun  tetap  segar sampai  sampel  berada  di  Laboratorium. Daun Lamun kemudian dicuci, dikeringkan,  dan  diangin-anginkan  selama 7  hari  dan  kemudian  di  oven  pada  suhu 40°C  untuk  menghilangkan  kadar  air dalam  Lamun.  Pengeringan  dilakukan sampai  daun  benar-benar  kering  yaitu ketika daun Lamun mudah dipatahkan dan mudah  dihaluskan.  Selanjutnya  daum
lamun  dihaluskan  dengan  menggunakan blender dan dilanjutkan dengan pengayakan  untuk  mengecilkan  ukuran serbuk  dan  mempermudah  pelepasan  zat aktif  pada saat proses Ekstraksi.
Ekstraksi merupakan proses pemisahan suatu senyawa kimia berdasarkan perbedaan kelarutanya terhadap dua  cairan  tidak saling larut dan berbeda.  Metode  ekstraksi  ini  dipilih karena  beberapa  faktor  yang  sangat penting  seperti  sifat  dari  bahan  mentah obat,  daya  penyesuaian  dengan  tiap metode  ekstraksi  dan  untuk  memperoleh ekstrak yang sempurna mendekati sempurna.
Metode  eksraksi  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  metode maserasi  yang  disesuaikan  dengan  sifat fisika dan kimia dari senyawa yang akan di ekstraksi yaitu flavonoid. Senyawa Flavonoid  adalah  golongan  senyawa  yang tidak  tahan  panas  dan  mudah  teroksidasi pada  suhu  tinggi.  Pelarut  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  etanol  96% yang disesuaikan dengan kepolaran senyawa.
Sampel  sebanyak  150  gram  di maserasi dalam 750 ml etanol 96% dengan perbandingan  1:5    selama  5  hari  dan menghasilkan Ekstrak kental sebanyak 2,6 gram.
Setelah di ekstraksi sampel akan di isolasi  dengan  menggunakan  metode Kromatografi  Lapis  Tipis.  Kromatografi
Lapis  Tipis  merupakan  suatu  metode pemisahan  senyawa  kimia  berdasarkan perbedaan  distribusi  dua  fase  yaitu  fasa diam dan fasa gerak.
Eluen  yang  digunakan  n-butanol:  asam asetat:  air  (4:1:5).  Eluen  yang  baik  adalah eluen  yang  bisa  memisakan  senyawa dalam  jumlah  yang  banyak  dan  di  tandai dengan munculnya noda (Harborne, 1987) Hasil  pemisahan  dengan    KLT preparatif  dan  menghasilkan  nilai  Rf  0,4 dengan  warna  kuning  kecokelatan  dan ketika  di  tambahkan  NH 3 kemudian    di baca  pada  lampu  UV  366  menghasilkan nilai Rf 0,4 dan 0,88 dengan warnah merah dan warna hijau. warna merah menunjukan bahwa  senyawa  diduga    mengandung flavonoid. Golongan flavonoid yang terdapat  dalam  daun  lamun  disesuaikan penyebaran  dan  ciri  khas  flavonoid  yang menurut  (Harbone,2009),  bahwa  senyawa dengan  ciri  khas  pereaksi    NH 3 dan memberikan warna merah diduga merupakan  senyawa  flavonoid  golongan khalkon  hal  ini  diperjelas  dengan  warna flavonoid  hasil  pemisahan  pada  plat  KLT oleh  (Harbone,1987).
Setelah  diisolasi  sampel  kemudian diidentifikasi dengan menggunakan spektrofotometer    UV-vis.  Isolat-isolat hasil  KLT  dengan  pereaksi  NH 3 di  kerok dan  dilarutkan  dengan  metanol  dan kemudian  disentrifugasi  untuk  memisakan senyawa  murni  hasil  KLT  kemudian diidentifikasi  dengan      spektrofotometer UV-vis  dengan  menggunakan  metanol sebagai  larutan  baku.  Hasil  identifikasi menunjukan  panjang  gelombang  pada  pita pertama  379  dan  panjang  gelombang    pita kedua 289, maka hasil identifikasi menunjukan golongan flavonoid mengarah pada    khalkon,  auron  dan  flavonol  jika dilihat  pada  panjang  gelombang  pada  pita pertama.  Menurut  (Harbone,  1987)  Ciri spektrum  flavonoid  khalkon  antara  365- 390,  auron  390-430,  flavonol  350-390, maka  dari  ciri  spektrum  di  ketahui  ini bahwa ketiga senyawa tersebut merupakan golongan senyawa hasil identifikasi, namun  jika  disesuaikan  dengan  hasil
pemisahan  dengan  pereaksi  NH 3 lebih mengarah kepada golongan khalkon karena  dari  hasil  pemisahan  perubahan warna  sinar  tampak  menunjukan  senyawa flavonid golongan khalkon.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  dapat  di  simpulkan bahwa  flanonoid  dapat  di  isolasi  dan  di identifikasi  dari  daun  lanun  dengsan metode  kromatografi  lapis  tipis  dan spektrofotometer  uv-vis  dan  flavonoid yang ditemukan adalah golongan khalkon

## Saran
Perlu  adanya  penelitian  lebih  lanjut tentang lamun mengenai kandungan kimia lain  yang  terdapat  dalam  lamun  dan metode  isolasi  dan  identifikasi  yang  lain yang  bisa  digunakan  untuk  isolasi  dan identifikasi senyawa pada daun lamun.

## DAFTAR PUSTAKA
Alam,  Gemini,  dan  Abdul  Rahim.  2007. Penuntun  Praktikum  Fitokimia.  UIN Alauddin : Makassar.
Depkes  RI,  1986.  Sediaan  Galenik.
Jakarta: Departemen Kesehatan
Republik Indnesia. Fessenden,  R.J.  and  R.S.  Fessenden.1986. Organic Chemistry, 3rd Ed. Wadsworth : California.
Harbourne,  J.  B.  1987.  Metode  Fitokimia.
Jilid II. Penerbit ITB : Bandung.
Lulis,  S.  2010.  Isolasi  dan  Identifikasi Senyawa Tanin dari Daun Belimbing wuluh (Avverhoa bilimbi L). Universitas Islam Negeri Malang. Markham,K,R,1988, Techniques Of Flavonoids Identification, diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata,Penerbit ITB,
Bandung.
Mulja,  M.,  Suharman.  1995.  Analisis Instrumental.  Airlangga  University Press : Surabaya.

## Short  FT,  Coles  RG.  2006.  Global
Seagrass  Research  Methods.  USA: Elsivier. Skoog, D.A., 1985. Principles of
Instrumental Analysis. Sauder Collage Publishing : Japan. Stahl,  E.  1985.  Analisis  Obat  Secara Kromatografi dan Makroskopi. Diterjemahkan oleh Kokasih Padmawinata  dan  Iwang  Soediro. Penerbit ITB : Bandung..
Ukthy,N.  2011,  Kandungan  Senyawa
Fitokimia , Total Fenol Dan  Aktifitas Antioksidan  Lamun.  Bogor:  Fakultas Perikanan Dan Ilmu Kelautan. Voight. 1995. Buku Pembelajaran
Teknologi  Farmasi.  Diterjemahkan oleh Dr. rer. nat. Soendani N. S., Apt. Gajah  Mada  University  Press  : Jogjakarta.