## IDENTIFIKASI BAKTERI Escherichia coli PADA DANGKE
Mardiah 1)
1) Akademi Analis Kesehatan Muhammadiyah Makassar

## Abstrak
Dangke  adalah  makanan  yang  terbuat  dari  susu  kerbau  yang  digumpalkan  dengan menggunakan  air  perasan  getah  pepaya  sebagai  bahan  penggumpalnya.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  adanya  bakteri  Escherichia  coli  pada  dangke  yang diproduksi di Kecamatan  Baraka. Penelitian ini bersifat eksperimen laboratorik dengan pengambilan sampel secara Purposive Sampling dengan kriteria sampel yang di bungkus daun  pisang.  Dari  hasil  penelitian  dari  5  sampel,  Positif  terdapat  bakteri  Escherichia coli  pada  sampel  A,  B  dan  E,  sedangkan  sampel  C  dan  D  tidak  di  temukannya  bakteri Escherichia  coli.  Pertumbuhan  bakteri  pada  Dangke  di  sebabkan  oleh  berbagi  faktor seperti  pada  proses  pemerahan  susu  kerbau,  cetakan  yang  digunakan  atau  tingkat higienis produsen.
Kata kunci : Escherichia coli, Dangke

## PENDAHULUAN
Di  zaman  kolonial  susu  adalah minuman  yang  hanya  dikonsumsi  oleh orang  Belanda.  Sehingga,  ada  anekdot (kejadian)  yang  mengatakan  kalau  mau menjadi  orang  yang  berkuasa,  minumlah susu.  Sementara  di  awal  tahun  1950-an Prof.  Poorwo  Sudarmo  mencetuskan Empat  Sehat  Lima  Sempurna  yang menempatkan  susu  pada  urutan  terakhir. Orang  awam  pun  akhirnya  beranggapan bahwa  susunan  hidangan  kita  menjadi tidak  sempurna  tanpa  kehadiran  susu. Susu  telah  banyak  digunakan  dinegara berkembang termasuk di Indonesia
(Khomsan,  2010).
Adapun  macam-macam  makanan yang  bahan  dasarnya  terbuat  dari  susu baik  yang  sudah  di  olah  secara  moderen maupun  masih  tradisional  antara  lain seperti yoghurt ,  mentega,  keju  dan dangke. Dangke merupakan jenis makanan  yang  bergizi  dan  khas,  yang terdapat  dan  dikenal  di  Kabupaten
Enrekang  Provinsi  Sulawesi  Selatan, makanan  tradisional  ini  terbuat  dari  susu kerbau.  Dalam  pembutan  dangke  pepaya merupakan  salah  satu  bahan  utama  yang di  campur  dengan  susu,  selain  geta pepaya  daun  pisang  juga  merupakan bahan  yang  di  perlukan.  Dimana  daun pisang  di  gunakan  sebagai  pembungkus dari  dangke,  Daun  pisang  merupakan bagian yang mempunyai peluang tercemar
mikroorganisme  paling  banyak  (Hasbi, 2002). Dalam pengolahan bahan makanan perlu diperhatikan syarat kesehatan apalagi    makanan  yang  terbuat  dari  susu, karena  susu  merupakan  bahan    makanan yang cepat  terkontaminasi  oleh mikroba apabila tidak  ditangani dengan baik salah satunya  bakteri Escherichia  coli yang kadang  di  temukan  dalam  usus  manusia dapat menyebabkan diare, baik bagi orang dewasa, maupun anak-anak.
Escherichia  coli suatu  organisme yang  tidak  berbahaya  yang  biasanya  di dalam  saluran  usus  manusia  dan  hewan tingkat  tinggi  lainnya,  namua  apa  bila melewati ambang batas dapat mempengaruhi kesehatan manusia (Bahri, 2008). Pada penelitian sebelumnya mengenai  studi  tingkat  hygiene  pada dangke  yang  di  perjual  belikan  di  Kab. Enrekang  di  dapatkan  hasil  bahwa  tidak menunjukkan adanya
kontaminasi Salmonella  sp. Dari  latar  belakang tersebut  maka  perlu  dilakukan  penelitian mengenai  identifikasi Escherichia  coli pada Dangke.
Berdasarkan  uraian  di  atas  maka peneliti berkeinginan melakukan penelitian identifikasi bakteri Escherichia
coli pada Dangke.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah  tabung reaksi  dan  rak  tabung,  cawan  petri, inkubator,  autoklav,  erlenmeyer,  gelas ukur,  timbangan,  cawan porselin,  bunsen, sendok  tanduk,  hot  plate,  beker  glass, tabung  durham,  kapas,  aluminium  foil, ose, nal, korek api, mikroskop, objek glas, bak  pewarna,  kertas  label.  Bahan  yang digunakan  adalah  dangke,  BHIB  (Brain Heart  Iinfision  Broth),  EMBA,  (TSIA), Triple  Sugar  Iron  Agar,  (SIM)  Sulfur Indol  Motility,  (SCA)Simmon  Citrat Agar,  (MR-VP)  Methyl  Red  Voges Proskauer,  Glukosa,  Laktosa,  Maltosa, Sukrosa, Mannitol, NaCL, Gentian violet, Lugol,  Alkohol  96%,  Karbol  fuchsin, aquades.
Prosdur Penelitian Pembuatan  media  BHIB  (Brain  Heart infission Broth) Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  akan digunakan.  Menimbang  2,7  gr  median BHIB dilarutkan dengan aquades
sebanyak  75  ml.  Memasukkan  kedalam erlenmeyer,  tutup  mulut    Erlenmeyer dengan  aluminium  poil.  Dilarutkan  diatas hot  plate  hingga  media  larut  dengan sempurna.  Memipet  ke  dalam  tabung reaksi  4  ml  BHIB,  tutup  dengan  kapas. Disterilkan  dalam  autoklav  selam  15 menit  pada  suhu  121 0 C.  Dikeluarkan diamkan  sampai  dingin  dan  simpan didalam lemari pendingin.

## Pembuatan Media EMB
Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  akan digunakan.  Menimbang  5,4  gr  media EMBA    dilarutkan  dengan  aquades sebanyak  145  ml.  Memasukkan  kedalam erlenmeyer,  tutup  mulut    Erlenmeyer dengan  aluminium  poil.  Dilarutkan  diatas hot  plate  hingga  media  larut  dengan sempurna.  Disterilkan  dalam  autoklav selama  15  menit  pada  suhu  121 0 C. Dikeluarkan,  dan  dituan  kedalam  cawan petri  secukupnya.  Diamkan  kemudian simpan dalam lemari pendingin.

## Pembuatan TSIA
Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  akan digunakan. Menimbang  media  TSIA  4,8 gr dilarutkan dengan aquades sebanyak 75 ml.  Memasukkan  kedalam  erlenmeyer,
tutup mulut Erlenmeyer dengan aluminium  poil.  Dilarutkan  diatas  hot plate hingga media larut dengan sempurna.  Dipipet  kedalam  tabung  reaksi sebanyak  4  ml  masukkan  kedalam  bker glass  kemudian  bungkus  dengan  koran. Disterilkan  dalam  autoklav  selama  15 menit  pada  suhu  121 0 C.  Dikeluarkan dimiringkan sampai dingin dan masukkan dalam lemari pendingin.

## Pembuatan SIM
Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  akan digunakan. Menimbang media SIM 2.2 gr dilarutkan  dengan  aquades  sebanyak  75 ml.  Memasukkan  kedalam  erlenmeyer, tutup mulut Erlenmeyer dengan aluminium  foil.  Dilarutkan  diatas  hot plate hingga media larut dengan sempurna.  Dipipet  kedalam  tabung  reaksi sebanyak  4  ml  masukkan  kedalam  bker glass  kemudian  bungkus  dengan  Koran. Disterilkan  dalam  autoklav  selama  15 menit  pada  suhu  121 0 C.  Dikeluarkan  dan dinginkan  kemudian  masukkan  dalam lemari pendingin. Pembuatan SCA
Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  akan digunakan. Menimbang media SCA 1,7 gr dilarutkan  dengan  aquades  sebanyak  75 ml.  Memasukkan  kedalam  erlenmeyer,
tutup mulut Erlenmeyer dengan aluminium  poil.  Dilarutkan  diatas  hot plate hingga media larut dengan sempurna.  Dipipet  kedalam  tabung  reaksi sebanyak  4  ml  masukkan  kedalam  bker glass  kemudian  bungkus  dengan  Koran. Disterilkan  dalam  autoklav  selama  15 menit  pada  suhu  121 0 C.  Dikeluarkan dimiringkan sampai dingin dan masukkan dalam lemari pendingin.

## Pembuatan media MR-VP
Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  akan digunakan.  Menimbang  media  MR-VP 2.6 gr dilarutkan dengan aquades sebanyak  155  ml.  Memasukkan  kedalam erlenmeyer,  tutup  mulut    Erlenmeyer dengan  aluminium  poil.  Dilarutkan  diatas hot  plate  hingga  media  larut  dengan sempurna.  Dipipet  kedalam  tabung  reaksi sebanyak  4  ml  masukkan  kedalam  bker glass  kemudian  bungkus  dengan  koran. Disterilkan  dalam  autoklav  selama  15 menit  pada  suhu  121 0 C.  Dikeluarkan  dan
dinginkan  kemudian  masukkan  dalam lemari pendingin Pembuatan media gula-gula Menyiapkan  alat  dan  bahan  yang  akan digunakan. Menimbang  media  gula-gula 8,2 gr dilarutkan dengan aquades
sebanyak  325  ml.  Memasukkan  kedalam bker glass dan di tambahkan dengan water pepton  Dilarutkan  diatas  hot  plate  hingga media  larut  dengan  sempurna.  Dipipet kedalam  tabung  reaksi  sebanyak  4  ml yang  berisi  tabung  durham  masukkan kedalam  bker  glass  kemudian  bungkus dengan Koran. Disterilkan dalam autoklav selama  15  menit  pada  suhu  121 0 C. Dikeluarkan  dan  dinginkan  kemudian masukkan dalam lemari pendingin.

## Inokulasi sampel pada media BHIB
Sampel  diambil  secukupnya  dengan menggunakan  sendok  tanduk  kemudian masukkan kedalam  media  BHIB  inkubasi dengan suhu 37 0 C selam 24 jam.

## Pewarnaan Gram
Setelah  di  inkubasi  dilakukan  pewarnaan Gram.  Membuat  preparat,  kemudian fiksasi  di  atas  api.  Menggenangi  dengan gentian  violet  3  menit,  dicuci  dengan  air. Menggenangi dengan lugol selam 2 menit Menggenangi  dengan  alcohol  96  % hingga  jernih  Mencuci  dengan  air  dan genangi  dengan  fuchsin  salam  1  menit, lalu  cuci  lagi  dengan  air  Mengeringkan dan periksa di mikroskop.

## Inokulasi pada media EMBA
Membakar  ose  sampai  steril  diambil biakan  bakteri      kemudian  digoreskan pada media EMBA dengan menggunakan goresan  T  tanpa  menyentuh  dinding  petri dan  merusak  agarnya,  sterilkan  kembali ose  yang  telah  di  gunakan  dan  media EMBA yang telah digores biakan bakteri, media emba yang telah digores kemudian dikemas dan diinkubasi dengan suhu 37 0 C selama  24  jam.  Setelah  di  inkubasi dilakukan pewarnaan Gram

## Inokulasi media TSIA
Penanaman  bakteri  dengan  menggunakan nal yang telah disterilkan di ambil sedikit koloni  bakteri  pada  media  EMBA, kemudian  ditusuk  kedasar  tabung  media TSIA lalu ditarik kemudian digores-gores pada bagian lereng
Inokulasi  pada  media    SIM,  SCA  MR- VP, dan media gula-gula
Menanaman  bakteri  pada  media  SIM ( Sulfide Indol  Motility) menanam bakteri dengan  menggunakan  nal  yang  telah disterilkan  diambil  sedikit  koloni  bakteri pada  media  TSIA,  kemudian  ditusuk kedasar  tabung  media  SIM  lalu  nal  di tarik keluar.
Menanaman  bakteri  pada  media  SCA Menanam  bakteri  dengan  menggunakan nal yang telah di sterilkan  diambil sedikit koloni bakteri pada media TSIA, kemudian  digoreskan  dari  bawah  keatas tampa menyetuh dinding tabung .
Menanaman  bakteri  pada  media  MR-VP ( Reaksi  Metyl  Red  Voges  Proskauer) menanam bakteri  dengam  menggunakan ose  yang  telah  disterikan  diambil  sedikit koloni bakteri pada media TSIA, kemudian  simasukkan  kedalam  tabung sampai ujung ose tenggelam lalu digoyang-goyangkan jangn sampai menyentuh  dinding  tabung  kemudian tarik. Menanaman bakteri pada media gula-gula (glukosa, laktosa dan maltose) menanaman bakteri dengan menggunakan ose  steril  diambil  sedikit  koloni  baktei pada  media  TSIA,  kemudian  di  celupkan kedasar tabung media sukrosa dan di aduk pelan.
Semua  media  yang  sudah  ditanami dikemas lalu dimasukkan kedalam inkubator.  Inkubasi  dilakukan  selam  24 jm pada suhu 37 0 C. Pembacaan hasil pada media  SCA,SIM  MR-VP  dan  gula-gula setelah inkubasi 24 jam.
Analisa Data Data yang terkumpul dalam penelitian akan dianalisa secara dekstriptif,  kemudian  data  akan  disajikan dalam bentuk tabel presentase. HASIL PENELITIAN Berdasarkan penelitian yang dilakukan  dengan  judul  ‘’  identifikasi Bakteri Escherichia  coli pada  sampel dangke yang telah dilakukan di Laboratorium Akademi Analis Muhammadiyah Makassar pada bulan Juli 2016 maka diperoleh hasil.
Tabel  1.  Hasil  Penelitian  Identifikasi
Bakteri Escherichia coli  Pada Sampel Dangke Kode Sampel Hasil Ket A Positif (+) Ditemukan adanya bakteri Escherichia coli B Positif (+) Ditemukan adanya bakteri Escherichia coli C Negatif (-) Tidak ditemukan adanya bakteri Escherichia coli D Negatif (-) Tidak Tidak ditemukan adanya bakteri Escherichia coli E Positif (+) Ditemukan adanya bakteri Escherichia coli PEMBAHASAN Penelitian  yang  telah  dilakukan merupakan penelitian eksperimen laboratorik yang bertujuan untuk mengetahui  adanya    bakteri Escherichia coli pada  dangke  yang  berada  di  Kec. Baraka  dan  semua  sampel  dianalisis  di laboratorium Bakteriologi Akademi Analis Muhammadiyah Makassar. Escherichia coli merupakan bakteri gram negatif berbentuk batang, bakteri ini dapat  menular  melalui  makanan,  air bahkan  sipenderita  (Thenawijaya,  M 2000).  Berdasarkan  tabel  1  sampel  A,  B dan  E  positif  (+)  terdapat  bakteri Escherichia coli
pada dangke. Terkontaminasinya  suatu  makanan  di sebabkan  oleh  beberapa  faktor.  Faktor pertama  yaitu  kondisi  lingkungan,  di karenaka  suhu  dan  kelembapan  suatu daerah  memungkinkan  bakteri  sanga cepat berkembang biak.
Faktor  kedua  yaitu  air,  pada pencucian  cetakan  tempurung  kelapa hanya  memakai  air  sumur    kemungkinan terkontaminasi Escherichia  coli dimana bakteri  ini  secara  alami  terdapat  di  tanah
dan  air  sehingga  mudah  mengotaminasi makanan  yang  secara  langsung  kontak dengan air dan tanah. Faktor ketiga yaitu Proses pemerahan  pada  kerbau,    memungkinkan terjadinya  kontaminasi  mikroorganisme karena  langsung  terpapar  dengan  tangan pekerja.  Faktor  keempat  yaitu  Cetakan yang  digunakan  (tempurung  kelapa)  di mana tempurung kelapa merupakan bahan organik,  memiliki  struktur  berongga  dan permukaan berpori sehingga memudahkan  bakteri  masuk  kedalam tempurung kelapa. Faktor  kelima  yaitu  Udara,  bakteri
Escherichia  coli yang  ada  di  feses  sapi ternak terbawa melalui angin dan mencemari  susu  sehingga  terkontaminasi bakteri.  Faktor  keenam  daun  pisang  yang di  gunakan  sebagaI  pembungkus  di  mana daun  pisang  merupakan  bagian  yang mempunyai peluang tercemar mikroorganisme pada dangke seperti pada saat  daun  pisang  masih  di  atas  pohon, cemaran dari tanah saat pengambilan atau cemaran  dari  lap  saat  daun  pisang  di bersihkan.  Kemudian  dari  pembuat  itu sendiri,  di  mana  produsen  sering  kali mengabaikan  tentang  kebiasaan  mencuci tangan  sebelum  mengolah  makan  dan berbicara saat pengolahan makanan.
Sedangkan sampel C dan D negatif, tidak  di  temukan  bakteri Escherichia coli di  karenakan  pada  produsen,  tingkat kebersihan  pada  saat  pengolahan  di perhatikan seperti mencuci tanga sebelum pengolahan,  pencucian  cetakan  sebelum digunakan (Suparno  2013).  Adapun dampak  buruk  bakteri Escherichia  coli bagi kesehatan yaitu diare, infeksi saluran kemih, meningitis (Santoso, N 1989). KESIMPULAN
Berdasarkan hasil
penelitian terhadap  identifikasi  bakteri Escherichia coli pada  Dangke,  maka  dapat  ditarik suatu  kesimpulan,  berdasarkan  5  sampel dangke  yang  di  periksa  di  dapatkan adanya  bakteri Escherichia  coli pada sampel  A,  B  dan  E  sedangkan  pada sampel  C  dan  D  tidak  ditemukan  bakteri Escherichia coli .

## SARAN
1. Sebaiknya  pada  proses  pemerahan dan pembuatan dangke lebih diperhatikan sanitasi dan hygiene diri dan lingkungan. 2. Untuk  peneliti  selanjutnya  dapat melanjutkan dengan perhitungan jumlah bakteri Escherichia coli pada dangke  agar  dapat  diketahui  layak tidaknya di konsumsi oleh masyarakat.

## DAFTAR PUSTAKA
Achroni, D 2013. Sapi Perah. Trans Idea Publishing, Jokjakarta. Anonim,  2011  Dangke,  keju  lokal  yang gurih kenyal (http://travel.kompas.com) Anwar,  H  2004. Sanitasi  Makanan  Dan Minuman Pada Institusi Pendidikan  Tenaga  Sanitasi, Dep. Kes RI Pusdinakes, Jakarta Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Pertanian, 2001/2002, Jakarta. Badan  Pengawas  Obat  Dan  Makanan Republik Indonesia, 2009 Peraturan Kepala  Badan  Pengawas  Obat  Dan Makanan Republik Indonesia
NOMOR HK.00.06.1.52.4011
Bahri, S 2008. Beberapa aspek keamanan pangan  asal  ternak  di  Indonesia. Pengembangan inovasi pertanian.
Djide,  M  1998. Pengaruh  Penambahan Getah Pepaya dan Beberapa Macam Pengawet pada Pembuatan Dangke . Laporan Penelitian Universitas Hasanuddin. Dinas Pertanian Daerah Kabupaten Enrekang,    2006. Pengolahan
Dangke, Enrekang.
Firman,  A    2010.  Agrabisnis  Sapi  Perah. Penerbit Widya Padjadjara, Jakarta. Gani,  A  2008,  Metode  Bakteriologi Biagnostik. Balai Besar Laboratorium Kesehatan Hasbi,  I  2002. Pengaruh  Konsentrasi Papain  dan  Suhu  Pemanasan Terhadap kualitas Dangke. (http:// www.google.com). Khomsan, A 2010. Pangan dan gizi untuk kesehatan . PT. Rajagrafindo persada Lampert. Pelczar, M 2007.Dasar Mikrobiolog.Universitas  Indonesia Press.Jakarta. Saleh,  E  2004. Dasar  Pengolahan  Susu Dan Hasil Ternak. (http:// www.google.com). Santosa,  N  1989. Bakteri  Klinik .  Jakarta: Depertemen Kesehatan RI Simatupang, M 2006. Morfologi, Struktur, Fisiologi dan Metabolisme Bakteri . Departemen Mikrobiologi. Universitas Sumatera Utara. Medan. Thenawijaya, M 2000. Dasar-dasar biokimia. Erlangga.