UJI EFEK EKSTRAK DAUN JAMBU BIJI (Psidium guajava L.) TERHADAP BAKTERI Salmonella pullorum  SECARA IN VITRO
A. Ika H. A. Imran A. B. * , Abdul Wahid Jamaluddin, Sitti Arifah Program Studi Kedokteran Hewan, Universitas Hasanuddin
Email: ikaimranbaraniah@gmail.com

## ABSTRAK
Salmonella pullorum merupakan bakteri yang mempunyai hospes spesifik dan infeksius terhadap unggas, terutama pada anak ayam dan anak kalkun. Salah satu gejala klinis dari penyakit yang disebabkan oleh bakteri ini adalah diare. Untuk menangani masalah bakteri ini umumnya digunakan antibiotik, namun penggunaan yang  berlebihan  akan  menyebabkan  residu  dan  resistensi  antibiotik.  Untuk menghindari hal tersebut dibutuhkan alternatif pengobatan. Daun jambu biji dikenal sebagai  obat  tradisional  diare.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek ekstrak  daun  jambu  biji  terhadap  bakteri Salmonella  pullorum secara in  vitro . Penelitian  ini  menggunakan  6  perlakuan  dengan  3  pengulangan  diantaranya menggunakan disk tetrasiklin sebagai kontrol positif, DMSO 10% sebagai kontrol negatif, dan variasi konsentrasi ekstrak daun jambu biji 10%, 20%, 30% dan 40%. Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya  efek  ekstrak  daun  jambu  biji  untuk menghambat  bakteri Salmonella  pullorum, dimana  konsentrasi  tertinggi  (40%) memiliki efek yang paling baik.
Kata kunci: antibakteri, ekstrak daun jambu biji, in vitro, Salmonella pullorum

## ABSTRACT
Salmonella pullorum is a bacterium that has a specific host and infectious to  poultry, especially in  chicks and turkeys. One  of  the clinical symptoms of  this disease is diarrhea. To handle this bacterial problem in general using antibiotics, but  it  can  cause  residual  and  antibiotic  resistence.  To  avoid  that  case,  new alternative  treatments  are  required.  Guava  leaves  are  known  as  traditional medicine for diarrhea treatments. This study aims to determine the effect of guava leaf  extract  on Salmonella  pullorum growth  in  vitro.  This  research  uses  6 treatments with 3 repeat times among using disc tetrasiklin as a positive control, 10% DMSO as a negative control, and variation concentration of guava leaf extract 10%, 20%, 30% and 40%. The results showed the effect of guava leaf extract to inhibit the Salmonella pullorum bacteria, where the highest concentration (40%) had the best effect in inhibiting bacteria.
Keywords: antibacterial, guava leaf extract, in vitro, Salmonella pullorum

## PENDAHULUAN
Ayam  merupakan  salah  satu jenis ternak unggas yang memberikan nilai  ekonomis  dalam  bentuk  barang (daging dan telur) dan jasa (pendapatan) (Yuwanta, 2004).
Penyakit yang cukup sering
menyerang unggas yaitu Salmonellosis atau  Pullorum  yang disebabkan  oleh  bakteri Salmonella pullorum. Ciri khas  dari penyakit ini adalah  adanya  diare. Salmonella pullorum bersifat  non  motil,  non kromogenik,  non  sporagenik  dan fakultatif anaerob. Penyakit pullorum dapat  ditemukan  pada  ayam  dan kalkun  muda.  Penyakit  ini  telah tersebar di berbagai peternakan ayam di  Indonesia  walaupun  frekuensi kejadiannya  masih  tergolong  rendah (Tabbu, 2000).
Penyakit  yang disebabkan oleh bakteri pada dasarnya dapat ditangani langsung dengan pemberian
antibiotik.  Antibiotik  yang  banyak digunakan  di  peternakan  ayam  yaitu antibiotik tetrasiklin. Obat ini berguna  untuk  pencegahan  ataupun pengobatan  terhadap  infeksi  saluran pernafasan, infeksi saluran pencernaan dan lain-lainnya
(Nurhidayah  dkk. , 2015).  Namun, pemberian antibiotik yang berlebihan dapat menyebabkan resistensi bakteri dan residu antibiotik terhadap produk ternak.  Resistensi  bakteri  terhadap antibiotik dapat mengakibatkan penyakit  sulit  diobati  karena  bakteri menjadi kebal, sehingga harus menggunakan antibiotik dengan dosis lebih  tinggi,  sebagai  konsekuensinya harga menjadi lebih tinggi (Warbung dkk., 2013).
Alternatif  lain  yang  dapat digunakan selain pemakaian antibiotik  pada  ayam  yang  terkena pullorum  yaitu  dengan  penggunaan obat  herbal.  Daun  jambu  biji  dapat dimanfaatkan  sebagai  obat  herbal dalam menangani pertumbuhan bakteri  (Jamaluddin  dkk.,  2018). Penelitian Ajizah (2004) membuktikan adanya kepekaan
kuman Salmonella typhimurium pada penggunaan  ekstrak  daun Psidium guajava secara in  vitro ,  sehingga daun  jambu  biji  dapat  dicoba  untuk diujikan pada penyakit pullorum yang menunjukkan  gejala  diare.  Adapun kandungan  dari  daun  jambu  biji diantaranya  yaitu  psiditanin,  minyak atsiri  ( eugenol ),  damar,  flavonoid,
tanin,  dan  alkaloid  (Frawiti,  2015). Tujuan dari penelitian yang dilakukan adalah untuk mengetahui efek ekstrak daun jambu biji ( Psidium guajava L . ) dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Salmonella pullorum.

## METODE PENELITIAN

## A. Alat dan Bahan
Alat penelitian yang digunakan antara  lain: Herbs  dryer ,  pisau,
blender,  timbangan,  toples  kaca, sonikator, Rotary Evaporator,
Lempeng KLT, bunsen, korek api, rak tabung,  autoklaf,  label,  inkubator, mikroskop,  pinset,  jangka  sorong, cawan  petri,  Erlenmeyer,  tabung reaksi, gelas ukur, pipet tetes, batang pengaduk kaca, object glass , ose.
Bahan penelitian yang digunakan antara lain: bakteri Salmonella pullorum, daun jambu biji dari tangkai ke 3–7, Media Salmonella  Shigella  Agar (SSA), Media Sulfide  Indol  Motility  Agar
(SIM),  Media Muller  Hilton  Agar (MHA), Reagen Dragendorf , Reagen kovach,  FeCl 3 ,  Sitroborat,  Etanol  70
%, DMSO ( Dimetil Sulfoxide ) 10 %, blank  disc ,  disk  tetrasiklin  30  µg, aluminium  foil, silica  gel ,  Etanol  96
%, crystal  violet ,  lugol,  safranin, spidol, dan akuadest.
B. Prosedur Penelitian
1. Pembuatan ekstrak dan pengujian fitokimia Pembuatan ekstrak daun jambu biji  menggunakan  metode  sonikasi dengan pelarut 70%. Variasi
konsentrasi  ekstrak  daun  jambu  biji yaitu  10%,  20%,  30%,  dan  40% dengan  kontrol  negatif  DMSO  10% dan  kontrol  positif  yaitu  disk Tetrasiklin. Hasil ekstrak daun jambu biji  akan  diuji  fitokimia  dengan  uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) atau Tabung.
2. Pengujian bakteri
Penggunaan bakteri pada penelitian  merupakan  bakteri stock kultur  dari  laboratorium.  Bakteri  ini juga dilakukan pengkulturan menggunakan media SSA, pewarnaan gram dan pengujian biokimia khususnya  uji Sulfide  Indol  Motility
(SIM).
3. Uji daya hambat ektrak terhadap bakteri
Uji daya hambat ekstrak dengan menggunakan  media Muller  Hilton Agar yang  telah  diswab  dengan bakteri Salmonella  pullorum yang telah  distandarkan  dengan  0,5  Mc
Farland, dengan pengulangan
sebanyak  3  kali  (triplo).    Kemudian semua cawan petri diinkubasi selama 18 – 24 jam pada suhu 37ºC. Setelah diinkubasi,  dilakukan  pengukuran diameter  zona  menggunakan  jangka sorong.
4. Analisis Data
Data pada penelitian ini dikumpulkan  dan  dianalisis  secara deksriptif .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil  Uji  Organoleptik  dari Ekstrak  Daun Jambu  Biji  dan Uji Fitokimia
1. Hasil  uji  organoleptik  dari ekstrak daun jambu biji
Tabel 1 . Hasil uji organoleptik dari ekstrak daun jambu biji Analisis Ekstrak Hasil Bentuk Ekstrak Kental Warna Coklat kehitaman Bau Berbau Khas

## 2. Hasil uji fitokimia
Tabel 2 . Hasil uji Fitokimia Ekstrak Uji Fitokimia Hasil Alkaloid Negatif (-) Flavanoid Positif (+) Tanin Positif (+) Saponin Positif (+)
3. Pengujian Bakteri
Hasil pengkulturan bakteri dengan  menggunakan  media  SSA yang merupakan media selektif yaitu terbentuknya  koloni  terpisah  dengan bintik  hitam  pada  tengah  setiap koloni.
Gambar 1. Biakan Salmonella pullorum
Hasil pewarnaan gram
didapatkan  hasil  yang  berwarna merah  yang  menandakan  bakteri tersebut  merupakan  bakteri  Gram Negatif.
Gambar 2. Pewarnaan gram
Hasil pengujian biokimia terkhusus  uji  SIM  didapatkan  hasil pada  media  SIM  yaitu:  Non  Motil ,
Indol Negatif , H 2 S Positif.
Gambar 3. Uji Sulfide Indol Motility (SIM)
4. Uji  daya  hambat  ekstrak terhadap bakteri
Gambar 4. Hasil uji efek ekstrak
Proses  pembuaan  ekstrak  pada penelitian  ini  menggunakan  pelarut etanol 70% dikarenakan masih mengandung  air  yang  cukup  banyak (30%) yang membantu proses ekstraksi sehingga sebagian senyawa ada  yang  dapat  tertarik  dalam  etanol dan  ada  pula  yang  tertarik  dalam  air (Sani  dkk ., 2014).  Ekstrak  daun jambu biji ini memiliki efek terhadap bakteri Salmonella  pullorum seperti yang  telah  ditunjukkan  pada  gambar
4. Kandungan daun jambu biji setelah
melakukan uji fitokimia yang didapatkan yaitu flavonoid, tanin, dan saponin. Mekanisme dari senyawa flavonoid  sebagai  antibakteri  yaitu dengan membuat kerusakan
permeabilitas  dinding  sel  bakteri
(Kurniawan & Aryana, 2015).
Mekanisme tanin berhubungan dengan kemampuannya untuk
menginaktifkan  adesi  sel  mikroba juga  menginaktifkan  enzim,  dan menggangu  transport  protein  pada pada  lapisan  dalam  sel.  Tanin  juga mempunyai  target  pada  polipeptida dinding  sel  sehingga  pembentukan dinding sel menjadi kurang sempurna.  Hal  ini  menyebabkan  sel bakteri  menjadi  lisis  karena  tekanan osmotik  maupun  fisik  sehingga  sel bakteri  akan  mati  (Ngajow,  2013). Mekanisme kerja untuk saponin yaitu mengganggu  permeabilitas  membran sel  bakteri,  yang  mengakibatkan kerusakan membran sel dan menyebabkan  keluarnya  berbagai komponen  penting  dari  dalam  sel bakteri  yaitu  protein,  asam  nukleat dan  nukleotida.  Hal  ini  akhirnya mengakibatkan sel bakteri mengalami lisis (Kurniawan & Aryana, 2015).
Maritsa dkk. (2017)
menyatakan media SSA mengandung sodium  thiosulphate  yang  dirombak oleh mikroorganisme enteric tertentu menjadi sulfit dan gas H 2 S menggunakan enzim reduktif tiosulfat reduktase. Produksi gas H 2 S dideteksi  sebagai  endapan  hitam ferrous  sulfide yang  tidak  larut,
terbentuk pada reaksi H 2 S dengan ion
ferric atau ferric citrate ,  yang ditunjukkan di tengah koloni. Pewarnaan  gram  yang  dinyatakan positif  bakteri Salmonella  pullorum merupakan  bakteri  fram  negatif  dan berbentuk  basil.  Pengujian  motilitas pada  bakteri Salmonella  pullorum yang memiliki sifat non motil (Tabbu, 2000).
Tabel 3 . Hasil uji efek ekstrak daun jambu biji Pengulangan Kontrol (mm) Diameter Zona Hambat (mm) - + 10% 20% 30% 40% 1 0 25 14 16 18 20 2 14 16 18 19 3 13 15 16 18 Rata – rata 13,6 15,6 17,3 19
Keterangan: Kontrol (-) = DMSO 10%; Kontrol (+) = disk tetrasiklin 30 µg
Hasil pengukuran uji efek pada tabel 3 menunjukkan konsentrasi 10% memiliki  diameter  13,6  mm,  pada konsentrasi  20%  memiliki  diameter 15,6  mm,  pada  konsentrasi  30% memiliki diameter 17,6 mm, dan pada konsentrasi  40%  memiliki  diameter
19 mm.
Tampedje
(2016),
menyatakan  jika  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  lebih  besar atau  sama  dengan  6  mm,  maka ekstrak dikategorikan memiliki aktivitas antibakteri dan bila diameter zona  hambat  yang  terbentuk  lebih kecil dari 6 mm atau tidak terbentuk,
maka  dikategorikan  ekstrak  tersebut tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri. Berdasarkan  hal  tersebut,  ekstrak daun  jambu  biji  pada  penelitian  ini dengan  konsentrasi  10%,  20%,  30% dan  40%  dapat  dinyatakan  efektif menghambat bakteri Salmonella pullorum .
Penggolongan  lainnya  untuk antibiotik  atau  antibakteri  menurut Muharni (2017)
dikatakan mempunyai aktivitas terhadap bakteri dengan kekuatan sebagai berikut: bila zona  hambat  berukuran  6  –  10  mm dikategorikan lemah, bila 11 – 20 mm
dikategorikan aktif, dan 21 – 30 mm atau lebih dikategorikan sangat aktif. Berdasarkan kategori tersebut ekstrak pada  penelitian  ini  masuk  dalam kategori  aktif  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella
pullorum .
Penelitian  ini  menunjukkan semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak daun jambu biji maka semakin besar diameter  zona  hambat  terhadap pertumbuhan bakteri. Hal ini
disebabkan semakin tingginya konsentrasi  maka  semakin  banyak
ekstrak  yang  terkandung  sehingga senyawa-senyawa yang dimiliki ekstrak semakin banyak. Konsentrasi ekstrak  menurut    Putri  dkk ., (2017)
mempengaruhi  kecepatan  difusi  zat aktif, makin besar konsentrasi ekstrak maka  makin  cepat  difusi  akibatnya makin  besar  daya  antibakteri  dan makin  luas  diameter  zona  hambatan yang terbentuk.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian ini
menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun jambu  biji  ( Psidium  guajava L.) memiliki  efek  antibakteri  terhadap Salmonella pullorum dimana
konsentrasi  tertinggi  40%  memiliki efek yang lebih baik dari konsentrasi lainnya untuk menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella pullorum .

## REFERENSI
Ajizah,  Aulia.    2004.    Sensitivitas Salmonella Typhimurium Terhadap Ekstrak Daun Psidium Guajava L . Bioscientiae  Volume  1,  Nomor 1, Januari 2004 . Hal 31-38
Jamaluddin,  AW.,  Muslimin,  LW.,
Djide  Natsir,  2018.    Ekstrak Daun  Jambu  Biji  (Psidium
Guajava  L.)  Sebagai  Inhibitor Pertumbuhan  Bakteri  Zoonosis Proteus Mirabilis Yang Diisolasi  Dari  Daging  Ayam. Jurnal  As-Syifaa  Vol  10  (01)  : Hal. 30-36, Juli 2018 Kurniawan  ,  Betta  dan  Wayan  Ferly Aryana. 2015. Binahong
( Cassia  Alata  L )  As  Inhibitor Of Escherichiacoli  Growth. J
Majority  Volume  4  Nomor  4 . Universitas Lampung: Lampung Maritsa,    Hasnaul.,   Fitratul   Aini., Desri    Santi    Nurhakim., Greace    Meisinta Sihombing., Ardiansyah Saputra. 2017. Isolasi dan Identifikasi Cemaran  Bakteri Salmonella
Sp.  Pada  Daging  Ayam  dan Ikan  Mentah.  Jambi  : Bio-site . Vol. 3 No. 2,  47-70
Muharni,  Fitrya,  dan  Sofa  Farida. 2017. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Etanol  Tanaman  Obat
Suku  Musi  di  Kabupaten  Musi Banyuasin,  Sumatera  Selatan.
Jurnal  Kefarmasian  Indonesia.
Vol  7.  No.2-  Agustus  2017  ; 127-135 .  Universitas  Sriwijaya
: Sumatera Selatan
Ngajow,          Mercy.,      Jemmy Abidjulu,      dan    Vanda    S.
Kamu.      2013.    Pengaruh antibakteri  ekstrak kulit  batang Matoa (Pometia pinnata) terhadap bakteri staphylococcus aureus secara in vitro. Jurnal  Mipa  Unsrat Online 2 (2) 128-132. UNSTRAT : Manado.
Nurhidayah,    Nina    Tri    Yulianti,
Maria  Fatima  Palupi,  Novida Ariyani,    Unang  Patriana,  Sri
Werdiningsih,  Eli  Nugraha, Rosana Anita Sari, Ambarwati, Dyah  Widyarimbi,  dan  Emi Rusmiati.  2015.  Pengkajian
Residu  Beberapa  Golongan Antibiotika  Pada  Telur  Ayam Di Beberapa Provinsi Di
Indonesia. Buletin  Pengujian
Mutu Obat Hewan No.23 Tahun
2015 .  Balai  Besar  Pengujian Mutu  dan  Sertifikasi  Obat
Hewan,  Gunung  Sindur  :
Bogor.
Putri, Andryana Vera Anindya Astri; Noor Hafida Dan Vera Megawati. 2017. Pengaruh Daya Antibakteri Ekstrak Daun Stevia ( Stevia Rebaudiana Bertoni )  Pada  Konsentrasi  5%, 10%,  20%,  40%  Dan  80% Terhadap Streptococcus Mutans ( In  Vitro ). Jurnal  Ilmu Kedokteran  Gigi. Universitas
Muhammadiyah  Surakarta  : Surakarta
Sani,      Robby        Nasrul,  Fithri Choirun  Nisa,  Ria      Dewi
Andriani,  Jaya Mahar Maligan. 2014.  Analisis  Rendemen  Dan Skrining  Fitokimia  Ekstrak Etanol Mikroalga Laut Tetraselmis Chuii. Jurnal Pangan Dan Agroindustri Vol.2 No.2  P.121-126 .    Universitas
Brawijaya : Malang
Tabbu,  Prof.,  drh.  Charles  Rangga., Msc.,  Ph.D.  2000. Penyakit Ayam dan Penanggulangannya Vol. 1 . PT. Kaninus ; Yogyakarta
Tampedje,   Ayu  A.  D,  Josef  S.  B
Tuda,  Michael,    A.    Leman. 2016.  Uji      Efek  Antibakteri Ekstrak  Daun  Jambu  Biji (Psidium Guajava Linn.) Terhadap  Pertumbuhan  Koloni Streptococcus Mutans. Pharmacon jurnal Ilmiah Farmasi – Unsrat Vol. 5 No. 3 Agustus 2016 Issn 2302 – 2493 . Unsrat : Manado.
Warbung,  Yanti  Y.,  Vonny  N.S. Wowor  dan  Jimmy  Posangi. 2013 . Daya  Hambat  Ekstrak Spons  Laut  Callyspongia  sp terhadap  Pertubuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus. Portal Garuda. Universitas Sam Ratulangi : Manado Yuwanta, Prof. Dr. Ir. Tri S.U, DEA. Dasar Ternak Unggas . Kanisius: Yogyakarta