## PENGEMBANGAN DAN  VALIDASI METODE PENETAPAN KADAR DIFOSFORUS PENTOKSIDA TOTAL DALAM PUPUK ORGANIK SECARA SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK DI PT MITRA AGRO SERVINDO
Henny Rochaeny 1 , Candra Irawan 1 , Silvia Rachmy 2 , Amelia Apriani 1 , Akmal Rakhmadi 3
1 Program Studi Analisis Kimia, Politeknik AKA Bogor
Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
2 Program Studi Pengolahan Limbah Industri, Politeknik AKA Bogor
Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
3 PT  Mitra Agro Servindo, Jalan Tomang Raya No.49, DKI Jakarta 11440
Email: silvia@kemenperin.go.id
(Received : 1 November 2019; Accepted: 30 November 2019; Published: 1 Desember 2019)

## Abstrak
Pengembangan  metode  penetapan  kadar  difosforus  Pentaoksida  (P 2 O 5 )  total  dalam  pupuk  organik  secara spektrofotometri sinar tampak mengacu pada Handbook of Reference Materials for Soil Testing telah dilakukan. Validasi      dilakukan  karena  pada    metode  pengembangan  menggunakan  objek  pupuk  organik  sedangkan  pada metode baku digunakan tanah. Dari hasil penelitian, diperoleh  nilai koefisien korelasi (r) sebesar 0,9995;  limit deteksi metode sebesar 0,0276 dan limit kuantitasi sebesar 0,2761; presisi ripitabilitas dengan nilai % simpangan baku relative (% SBR) sebesar 1,81%;  presisi antara dengan nilai %SBR sebesar 1,83% dan 1,81%;  nilai persen perolehan kembali sebesar (100,98-109,71)%; serta uji ketangguhan memberikan uji F dan uji t antar analis yang tidak  berbeda  nyata  dengan  diperoleh  nilai  f hitung (1,00)  <  f tabel (3,18)  dan  t hitung (1,96)  <  t tabel (2,10). Pengembangan  metode  penetapan  kadar  difosforus  Pentaoksidatotal  dengan  objek  pupuk  organik  secara spektrofotometri sinar tampak,menghasilkan data yang valid.
Kata kunci: Difosforus pentaoksida,  pupuk organik, % SBR.

## Abstract
The development of a method for determining total Diphosphorus pentaoxide (P 2 O 5 ) levels in organic fertilizer by visible spectrophotometry refers to the Handbook of Reference Materials for Soil Testing. Validation needs to be  done  because  the  development  method  uses  the  object  of  organic  fertilizer  while  the  standard  method  uses soil.  From  the  results  of  the  study,  obtained  correlation  coefficient  (r)  of  0.9995;  method  detection  limit  of 0.0276 and quantitation limit of 0.2761; repeatability precision with a value of% relative standard deviation (% SBR)  of  1.81%;  precision  between  the%  SBR  values  of  1.83%  and  1.81%;  the  value  of  percent  recovery  is (100.98-109.71)%; and the toughness test gives an F test and a t test between analysts that are not significantly different from the values obtained fcount (1.00) <ftabel (3.18) and tcount (1.96) <ttable (2.10). Development of a  method  for  determining  the  total  Diphosphorus  levels  of  total  Pentaoxide  with  organic  fertilizer  objects  by visible spectrophotometry, produces valid data.
Keywords: Diphosphorus pentaoxide, organic fertilizer, %SBR.

## PENDAHULUAN
Pupuk adalah suatu bahan yang mengandung satu  atau  lebih  hara  tanaman  dan  dapat  digunakan untuk  memperbaiki  kesuburan  tanah.  Sedangkan pupuk organik adalah pupuk yang sebagian besar atau seluruhnya  terdiri  atas  bahan  organik  yang  berasal dari  tanaman  dan/atau  hewan  yang  telah  melalui proses rekayasa, dapat berbentuk padat     atau    cair yang    digunakan     untuk menyuplai bahan organik untuk  memperbaiki  sifat  fisik,  kimia,  dan  biologi tanah  (Peraturan  Menteri  Pertanian,  2006).    Pupuk organik  dapat  berperan  sebagai  “pengikat”  butiran primer menjadi butiran sekunder dalam pembentukan agregat  yang  mantap.    Keadaan  ini  berpengaruh terhadap  porositas,  penyimpanan  dan  penyediaan  air, aerasi  tanah,  dan  suhu  tanah.    Pupuk  organik memiliki  fungsi  kimia  yang  penting,  seperti  : penyediaan  hara  makro  (N,P,K,Ca,  Mg,  dan  S)  dan mikro  seperti  Zn,  Cu,  Mo,  Co,  B,  Mn,  dan  Fe, meskipun  jumlahnya  relatif  sedikit;    meningkatkan kapasitas  tukar  kation  (KTK)  tanah;    dan  dapat membentuk  senyawa  kompleks  dari  ion  logam  yang mencemari  tanaman,  seperti  Al,  Fe,  dan  Mn (Suriadikarta    &  Simanungkalit,  2006).  Proses pemupukan  dilakukan  untuk  penambahan  bahan  zat hara tanaman ke dalam tanah (Hardjowigeno, 2007).
Sumber fosfor (P) total didalam tanah cukup banyak  tetapi  tanaman  masih  bisa  mengalami kekurangan  fosfor  karena  sebagian  besar  fosfor terikat secara kimia oleh unsur lain sehingga menjadi senyawa  yang  sukar  larut  (Isnaeni,  2015).    fosfor pada  tanah  dapat  diperoleh  melalui  pemupukan, kotoran  hewan,  residu  tanaman,  limbah  industri  dan domestik,  disamping  senyawa  fosfor  alami  baik organik  maupun  anorganik  yang  memang  telah tersedia  dalam  tanah  (Krishnaveni,  2010).  Pengaruh pupuk  organik  terhadap  ketersediaan  fosfor  dalam tanah  dapat  secara  langsung melalui  proses mineralisasi  atau  membantu  pelepasan  fosfor  yang terfiksasi (Atmojo, 2003).
Difosforus Pentaoksida (P 2 O 5 ) total umumnya  terdapat  ditanah  dalam  bentuk  fosfat  yaitu H 2 PO 4- , HPO 4 2- , dan PO 4 3- . Fosfat umumnya diserap oleh  tanaman  dalam  bentuk  ion  ortofosfat  primer (H 2 PO 4- ) atau ortofosfat sekunder (HPO 4 2- ) sedangkan PO 4 3- lebih  sulit  diserap  oleh  tanaman  (Engelstad, 1997).    Oleh  karena  itu,  proses  mineralisasi  bahan organik    adalah  pelepasan  fosfor  mineral  (PO 4 3- ) karena  lebih  sulit  diserap  tanaman.    Pada  pH  lebih rendah,  tanaman  lebih  banyak  menyerap  ion ortofosfat  primer,  dan  pada  pH  yang  lebih  tinggi  ion ortofosfat  sekunder  yang  lebih  banyak  diserap  oleh tanaman (Hanafiah, 2005).
Penetapan  kadar    P 2 O 5 total  dalam  pupuk organik  mengunakan   metode   spektrofotometri sinar tampak pada panjang gelombang 420 nm. Spektrofotometri  sinar  tampak  adalah  suatu  metode pengukuran  interaksi  antara  materi  dengan  radiasi yang  dilakukan  pada  panjang  gelombang  sinar
tampak, yaitu dari 400-780 nm.  Sampel yang diukur dengan  metode  ini  haruslah  sampel  yang  berwarna atau yang dapat dibuat berwarna.  Pewarnaan sampel yang tak berwarna dapat dilakukan dengan mereaksikan  sampel  dengan  pereaksi  yang  spesifik hingga  terbentuk  suatu  kompleks  warna  yang  stabil (Day  &  Underwood,  2002).  Prinsip  kerja  dari spektrofotometer  adalah  sumber  cahaya  yang  datang merupakan  sinar  polikromatis  dilewatkan  melalui monokromator sehingga menjadi sinar monokromatis yang  kemudian  diteruskan  melalui  sel  yang  berisi contoh.  Sebagian  sinar  akan  diserap  oleh  sel  dan sebagian  lagi  akan  diteruskan  ke  foto  sel  yang berfungsi  untuk  mengubah  energi  cahaya  menjadi energi listrik.  Energi listrik yang dihasilkan oleh foto sel  memberikan  sinyal  pada  detektor  yang  kemudian akan  diubah  menjadi  nilai  serapan  (absorbansi)  dari zat yang dianalisis (Khopkar, 1990).
Penetapan  kadar    P 2 O 5 total  dalam  pupuk organik  perlu    divalidasi  karena  merupakan  metode yang  dikembangkan  dari  sumber  referensi Handbook of  Reference  Materials  for  Soil  Testing .    Validasi metode  adalah  konfirmasi  melalui  bukti-bukti pemerikasaan  dan  telah  sesuai  dengan  tujuan pengujian sehingga laboratorium harus merekam hasil yang  diperoleh,  prosedur  yang  digunakan  untuk validasi, dan pernyataan bahwa metode tersebut tepat untuk  penggunaan  yang  dimaksud  (Riyanto,  2014). Validasi  adalah  salah  satu  metode  pengujian  untuk menetapkan  metode  yang  tidak  baku  agar  masuk  ke dalam  ruang  lingkup.  Penelitian    bertujuan  untuk memastikan  bahwa  metode  penetapan  kadar  P 2 O 5 total  dalam  pupuk  organik  secara  spektrofotometri sinar tampak valid dan dapat dipertanggung jawabkan dilihat  dari    ketelitian,  keakuratan,  dan  ketangguhan metode.

## BAHAN DAN METODE Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  percobaan  ini adalah Spektrofotometer Sinar Tampak merek Perkin Elmer  Lambda  25 ,  tabung  destruksi  ( digestion )  dan digestion  block merek Gerhardt ,  neraca  analitik  4 desimal  merek Ohaus  CP214 , vortex  mixer merek Wisd VM-10 , mesin grinder , hotplate and stirrer dan magnetic  stirrer ,  pipet  mohr  10  mL  dan  5  mL,  buret Schellbach 50  mL,  labu  takar  100  mL,  gelas  piala 1000  mL,  tabung  reaksi  dan  rak  tabung, weighing boat , spatula, botol semprot, dan bulb .
Bahan  yang  digunakan  dalam  percobaan  ini terbagi menjadi dua bagian yaitu bahan uji dan bahan kimia.  Bahan uji yang digunakan merupakan sampel pupuk  organik  yang  telah  dihomogenkan.    Bahan kimia  yang  digunakan  adalah  larutan  standar  induk PO 4 1000 mg/L, larutan campuran HNO 3 : HClO 4 (5 : 1), larutan amonium heptamolibdat, larutan amonium monovanadat, dan akuabides.

## Metode Kerja
Percobaan   ini   dilakukan  dalam  tiga
tahap  yaitu  persiapan,  pengujian,  dan  pengolahan data.    Pada  tahap  persiapan  dilakukan  preparasi contoh  uji  pupuk  organik,  pembuatan  larutan pembangkit  warna,  pembuatan  larutan  standar  fosfor 0  mg/L  dan  deret  standar  fosfor  (20,  40,  60,  80  dan 100)  mg/L  untuk  uji  linieritas,  pembuatan  blangko pereaksi  untuk  uji  limit  deteksi  metode  dan  limit kuantisasi,  pembuatan  larutan  contoh  uji  pupuk organik  untuk  uji  presisi  ripitabilitas,  pembuatan larutan  contoh  uji  pupuk  organik  untuk  uji  presisi antara, pembuatan larutan standar fosfor (20, 40, dan 60) mg/L untuk uji akurasi (perolehan kembali), serta pembuatan larutan contoh uji pupuk organik untuk uji ketangguhan metode ( ruggedness ). Tahap selanjutnya dilakukan  pengujian  menggunakan  spektrofotometer sinar  tampak  pada  panjang  gelombang  420  nm terhadap  deret  standar  fosfor  dan  contoh  uji  pupuk organik  dengan  parameter  linieritas,  limit  deteksi metode  dan  limit  kuantitasi,  presisi  ripitabilitas, presisi  antara,  akurasi  (perolehan  kembali),  dan ketangguhan  metode  ( ruggedness )  dengan  mengukur absorbansi larutan sampel yang membentuk kompleks berwarna  kuning.    Tahap  pengolahan  data  dari  hasil pengujian setiap parameter diolah secara statistika.

## Linieritas
Deret standar fosfor (20, 40, 60, 80, dan 100) mg/L  dipipet  1  mL  dengan  mikropipet  lalu ditambahkan  2,5  mL  larutan  amonium  heptamolibat dan  2,5  mL  amonium  monovanadat.  Larutan dihomogenkan,  ditunggu  30  menit  agar  bereaksi sempurna.      Larutan  sampel  yang  membentuk kompleks  berwarna  kuning  diukur  absorbansi menggunakan  spektrofotometer  sinar  tampak  pada panjang gelombang 420 nm.

## Limit Deteksi Metode dan Limit Kuantitasi
Larutan  blanko  yang  telah  dibuat  dipipet  1 mL  dengan  mikropipet  dan  dilakukan  pengenceran dengan  faktor  pengenceran  sebanyak  dua  kali, dihomogenkan  lalu  dipipet  kembali  sebanyak  1  mL dengan  mikropipet,    serta  ditambahkan  2,5  mL larutan  amonium  heptamolibat  dan  2,5  mL  amonium monovanadat.   Larutan dihomogenkan dan  ditunggu 30  menit  agar  bereaksi  dengan  sempurna.    Larutan sampel  yang  membentuk  kompleks  berwarna  kuning diukur  absorbansi  menggunakan  spektrofotometer sinar tampak pada panjang gelombang 420 nm.

## Presisi Ripitabilitas
Sampel pupuk organik yang telah dipreparasi  dipipet  1  mL  dengan  mikropipet  dan dilakukan  pengenceran  dengan  faktor  pengenceran sebanyak  dua  kali,  dihomogenkan  lalu  dipipet kembali  sebanyak  1  mL  dengan  mikropipet  lalu ditambahkan  2,5  mL  larutan  amonium  heptamolibat dan  2,5  mL  amonium  monovanadat.  Larutan dihomogenkan  dan    ditunggu  30  menit  agar  bereaksi dengan  sempurna.    Larutan  sampel  yang  membentuk kompleks  berwarna  kuning  diukur  absorbansi
menggunakan  spektrofotometer  sinar  tampak  pada panjang gelombang 420 nm.

## Presisi Antara
Cara  kerja  pengujian  presisi  antara  sama seperti presisi ripitabilitas, tetapi dilakukan pengulangan  pengukuran  oleh  analis  yang  berbeda dan pada waktu yang berbeda.

## Akurasi (Perolehan Kembali)
Cara  kerja  pengujian  akurasi  dengan perolehan  kembali  sama  seperti  presisi  ripitabilitas, hanya  saja  sampel  pupuk  organik  yang  telah dipreparasi  dilakukan  sembilan  kali  pengulangan yang terdiri dari tiga sampel untuk perolehan kembali 25%  (konsentrasi  rendah),  tiga  sampel  untuk perolehan kembali 50% (konsentrasi sedang), dan tiga sampel  untuk  perolehan  kembali  75%  (konsentrasi tinggi).    Tiga  sampel  untuk  akurasi  25%    dipipet  1 mL  dengan  mikropipet,  ditambahkan  5  mL  larutan standar  fosfor  20  mg/L  dan  dilakukan  pengenceran dengan  faktor  pengenceran  sebanyak  dua  kali, dihomogenkan  lalu  dipipet  kembali  sebanyak  1  mL dengan  mikropipet,    ditambahkan  2,5  mL  larutan amonium  heptamolibat  dan  2,5  mL  amonium monovanadat.   Larutan dihomogenkan dan  ditunggu 30  menit  agar  bereaksi  dengan  sempurna.    Larutan sampel  yang  membentuk  kompleks  berwarna  kuning diukur  absorbansi  menggunakan  spektrofotometer sinar tampak pada panjang gelombang 420 nm.
Cara  yang  sama  dilakukan  untuk  akurasi konsentrasi  sedang  dengan  menambahkan  5  mL larutan  standar  fosfor  40  mg/L,  dan  untuk  akurasi konsentrasi  tinggi  dengan  menambahkan  5  mL larutan standar fosfor 60 mg/L.
Ketangguhan Metode ( Ruggedness )
Cara  kerja  pengujian  ketangguhan  metode sama  seperti  presisi  antara,  yang  berbeda  adalah  saat pengolahan  data  dilakukan  uji  beda  nyata  yaitu  uji  F dan uji T.

## Tahap Pengolahan Data
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  pengujian setiap  parameter  selanjutnya  diolah  secara  statistika menggunakan  program Microsoft  Excel dengan rumus sebagai berikut:

## Linieritas
Kurva kalibrasi dibuat dengan memplot data konsentrasi  deret  standar  terhadap  absorbansi sehingga akan diperoleh persamaan regresi linear y = a  +  bx.  Nilai  intersep  (a),  slope  (b),  dan  koefisien korelasi  (r)  dapat  dihitung  dengan  rumus  sebagai berikut:
Keterangan :
a = intersep (abs) b = slope (abs/ mg/L ) r
= koefisien korelasi
x i = konsentrasi ke-i (mg/L) y i = absorbansi ke-I (abs) i
= 1, 2, 3, …, n n = banyak ulangan

## Limit Deteksi Metode dan Limit Kuantitasi
Data  konsentrasi  sampel  pengujian  limit deteksi  metode  dan  limit  kuantitasi  yang  diperoleh dari  sepuluh  kali  ulangan  kemudian  dihitung  nilai rata-rata  absorbansi,  limit  deteksi  metode,  dan  limit kuantitasinya dengan rumus sebagai berikut:
Keterangan:
=  rata-rata  absorbansi  dari  sepuluh  kali
pengulangan (abs) C = konsentrasi sampel (mg/L)
LDM   = limit deteksi metode (%b/b)
LK = limit kuantitasi (%b/b)
142 = bobot molekul P 2 O 5 (g/mol)
190
= bobot molekul PO 4 dikalikan dua (g/mol)

## Presisi Antara
Perhitungan  kadar  sampel  presisi  antara sama  seperti  perhitungan  presisi  ripitabilitas,  tetapi dilakukan  perbandingan  antara  dua  analis  yang berbeda.

## Akurasi (Perolehan Kembali)
Data  kadar  sampel  akurasi  yang  diperoleh  dari sembilan  kali  ulangan  kemudian  dihitung  nilai perolehan kembalinya dengan rumus sebagai berikut:
Keterangan :
C 1 = konsentrasi P 2 O 5 dalam sampel (mg/L) C 2
=  konsentrasi spike yang  ditambahkan
(mg/L) C 3
=  konsentrasi  P 2 O 5 dalam  sampel  + spike (mg/L)
Ketangguhan Metode ( Ruggedness ) Uji  F  digunakan  untuk  membandingkan ragam  (simpangan  baku)  dua  populasi  sebagai evaluasi  presisi  (ketelitian).  Ragam  kadar  sampel ketegaran metode yang diperoleh dari populasi 1 dan populasi  2  kemudian  diuji  beda  nyata  menggunakan uji F dengan rumus sebagai berikut:
a. Hipotesis Ho:  σ 1 2 =  σ 2 2 (ragam  populasi  1  tidak berbeda nyata dengan ragam populasi 2) Hi  :  σ 1 2 ≠  σ 2 2 (ragam  populasi  1  berbeda nyata dengan ragam populasi 2)
b. Statistik Hitung F hitung = ; SB 1 2 >SB 2 2 F tabel = α, db 1 , db 2 α = 5% (0,05) db 1 = n 1 - 1 db 2 = n 2 - 1
c. Kesimpulan Jika  F hitung <  F tabel maka  terima  Ho,  artinya ragam  populasi  1  tidak  berbeda  nyata  dengan ragam populasi 2.
Jika  F hitung ≥  F tabel maka  tolak  Ho,  artinya ragam  populasi  1  berbeda  nyata  dengan  ragam populasi 2.
Keterangan: SB 1
=simpangan baku populasi 1(%b/b)
SB 2
=simpangan baku populasi 2 (%b/b)
α = taraf nyata db 1 = derajat bebas populasi 1 db 2 = derajat bebas populasi 2 n 1 = jumlah data populasi 1
n 2 = jumlah data populasi 2
Uji  t  digunakan  untuk  membandingkan rataan  dua  populasi  sebagai  evaluasi  akurasi (ketepatan).  Rataan  kadar  sampel  ketangguhan metode yang diperoleh dari populasi 1 dan populasi 2 kemudian  diuji  beda  nyata  menggunakan  uji  t  saling berpasanganformula  1  (apabila  ragam  populasi  1 tidak berbeda nyata dengan ragam populasi 2) dengan rumus sebagai berikut:
a. Hipotesis  Ho:  μ 1 =  μ 2 (rataan  populasi  1  tidak berbeda nyata dengan rataan populasi 2) b. Hi  :  μ 1 ≠  μ 2 (rataan  populasi  1  berbeda  nyata dengan rataan populasi 2) c. Statistik Hitung
t tabel = α, db α = 5% (0,05) db = n 1 + n 2 – 2 d. Kesimpulan Jika  t hitung <  t tabel maka  terima  Ho,  artinya  rataan populasi 1 tidak berbeda nyata dengan rataan populasi 2.  Jika  t hitung ≥  t tabel maka  tolak  Ho,  artinya  rataan populasi 1 berbeda nyata dengan rataan populasi 2. Keterangan: s = simpangan baku gabungan (%b/b)
SB 1 = simpangan baku populasi 1(%b/b) SB 2
= simpangan baku populasi 2 (%b/b)
x̅ 1
= rata-rata kadar populasi 1 (%b/b)
x̅ 2 = rata-rata kadar populasi 2 (%b/b) n 1 = jumlah data populasi 1 n 2
= jumlah data populasi 2
α
= taraf nyata db = derajat bebas

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Syarat  keberterimaan  dan    hasil  pengujian validasi  metode  penetapan  kadar  P 2 O 5 dalam  pupuk organik  secara  spektrofotometri  sinar  tampak  untuk parameter  linieritas,  limit  deteksi  metode  dan  limit kuantisasi,  presisi  ripitabilitas,  presisi  antara,  akurasi (perolehan  kembali) , dan  ketangguhan  metode ( ruggedness ) dapat dilihat pada Tabel 1.
Berdasarkan data pada Tabel 1, dapat dilihat bahwa  seluruh  parameter  pengujian  telah  memenuhi syarat keberterimaan dan pembahasan setiap parameter akan diuraikan sebagai berikut:

## Linieritas
Pengujian  linieritas  bertujuan  mengetahui kemampuan  metode  analisis  dalam  memberikan respon yang proporsional (sebanding) antara konsentrasi  analit  dalam  sampel  dengan  perubahan respon  alat  (absorbansi)  pada  rentang  konsentrasi tertentu  yang  ditunjukkan  melalui  nilai  koefisien korelasi  (r).    Pengujian  dilakukan  dengan  mengukur deret  standar  dari  konsentrasi  rendah  hingga  tinggi yang  masih  memberikan  respon  linear,    (Riyanto, 2014).    Kurva  kalibrasi  standar  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 1. Kurva Kalibrasi Standar Fosfor
Berdasarkan  Gambar  1,  dapat  dilihat  bahwa persamaan  regresi  linier  yang  diperoleh  dari pengujian  liniearitas  fosfor  adalah  y  =  0,0029x  + 0,0009  dengan  koefisien  korelasi  (r)  sebesar  0,9995. Nilai intersep (a) sebesar 0,0009 menunjukkan bahwa ketika  konsentrasi  fosfor  0  mg/L  maka  nilai absorbansinya sebesar 0,0009. Nilai slope (b) sebesar 0,0029 menunjukkan bahwa ketika konsentrasi fosfor naik satu satuan konsentrasi maka nilai absorbansinya naik sebesar 0,0029 kali. Nilai r yang mendekati satu menunjukkan  bahwa  terdapat  hubungan  kuat  dan linear antara konsentrasi dan absorbansi pada rentang konsentrasi  20  mg/L,  40  mg/L,  60  mg/L,  80  mg/L, dan  100  mg/L.  Nilai  r  yang  positif  (ditandai  dengan kurva  yang  miring  ke  kanan)  menunjukkan  bahwa hubungan  konsentrasi  dan  absorbansi  berbanding lurus, artinya ketika konsentrasi naik maka absorbansinya  juga  akan  naik.  Nilai  r  tersebut  telah memenuhi  syarat  keberterimaan,  yaitu  r  ≥  0,9950 sehingga rentang konsentrasi tersebut dapat digunakan  untuk  validasi  metode  penetapan  kadar P 2 O 5 total dalam pupuk organik secara spektrofotometri sinar tampak pada panjang gelombang 420 nm.

## Limit Deteksi Metode dan Limit Kuantitasi
Pengujian  limit  deteksi  metode  (LDM)  dan limit  kuantitasi  (LK)  bertujuan  untuk  mengetahui nilai  LDM  dan  LK  dari  suatu  metode.  Pengujian dilakukan  dengan  mengukur  blangko  metode/pelarut sebanyak  sepuluh  kali  ulangan. Hasil pengujian limit deteksi metode dan limit kuantitasi dapat dilihat pada Tabel 2.
Berdasarkan  data  pada  Tabel  2,  nilai  limit deteksi  metode  sebesar  0,0276  b/b%.    Nilai  tersebut menunjukkan  bahwa  kadar  analit  paling  terendah yang  masih  dapat  ditetapkan  dengan  suatu  metode dan  masih  dapat  dipertanggungjawabkan,  serta  hasil ukur  sampel  yang  berada  dibawah  nilai  tersebut dianggap  sudah  tidak  akurat  lagi  dan  merupakan noise sehingga  tidak  dapat  dipercaya  sebagai  respon dari  analit.    Nilai  limit  deteksi  metode  (LDM) didapat  melalui  konfirmasi  nilai slope dari  kurva kalibrasi  pengujian  akurasi  dengan  cara  pengukuran blangko metode sebanyak sepuluh kali. Nilai tersebut didapatkan  dengan  cara  mengalikan  sepuluh  ke  nilai LDM.
Tabel 1. Hasil Validasi Penetapan Kadar P 2 O 5 Total dalam Pupuk Organik Parameter Hasil Pengujian Syarat Keberterimaan Keterangan Linieritas 0,9995 r ≥ 0,9950 Memenuhi Limit Deteksi Metode 0,0276 %b/b - - Limit Kuantitasi 0,2761 %b/b - - Presisi Ripitabilitas (%SBR) 1,81 %b/b < 2,82 %b/b %SBR < 2/3 KV Horwitz Memenuhi Presisi Antara (%SBR) 1,83 %b/b < 2,82 %b/b dan 1,81 %b/b < 2,82 %b/b %SBR < 2/3 KV Horwitz Memenuhi Akurasi (% Perolehan kembali) (100,98 – 109,71) % Perolehan kembali (90-110)% Memenuhi Ketangguhan Metode ( Ruggedness ) 1,00 < 3,18 1,96 < 2,10 Uji F: F hitung < F tabel
Uji T:   T hitung < T tabel Memenuhi Memenuhi Tabel 2. Hasil Pengujian Limit Deteksi Metode dan Limit Kuantitasi No Sampel Abs Konsentrasi (mg/L) Kadar (%b/b) 1 0,0081 2,7609 0,0413 2 0,0095 3,2496 0,0486 3 0,0118 4,0524 0,0606 4 0,0083 2,8307 0,0423 5 -0,0011 -0,4505 -0,0067 6 0,0007 0,1779 0,0027 7 0,0064 2,1675 0,0324 8 0,0047 1,5741 0,0235 9 0,0012 0,3524 0,0053 10 0,0052 1,7486 0,0261 LDM 0,0055 1,8463 0,0276 LK 0,2761 Limit kuantitasi (LK) adalah batas kepercayaan  atau  konsentrasi  analit  terendah  yang dapat  diukur  dengan  metode  uji  tersebut  dan  dapat dipertanggungjawabkan  secara  akurat  dan  teliti (Harmita,  2004).    Nilai  LK  adalah  sebesar  0,2761 %b/b,    nilai  ini  menunjukkan  kadar  analit  terendah yang  masih  bisa  terbaca  jelas  dengan  tingkat  presisi dan akurasi yang dapat diterima , artinya pengukuran di dibawah nilai tersebut tidak dapat dipertanggungjawabkan.  Oleh karena itu, disarankan pengukuran  sampel  berada  di  atas  nilai  limit kuantitasi.

## Presisi Ripitabilitas
Pengujian  presisi  ripitabilitas  bertujuan mengetahui  kedekatan  nilai  ulangan  yang  diperoleh dari  serangkaian  pengukuran  menggunakan  sampel, metode,  analis,  peralatan,  dan  laboratorium  yang sama  dalam  interval  waktu  yang  singkat  yang ditunjukkan  melalui  nilai    persen  Simpangan  Baku Relatif  (%SBR).    Nilai  %SBR  ini  dibandingkan dengan  2/3  KV Horwitz .  Hasil  pengujian  presisi ripitabilitas dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Pengujian Presisi Ripitabilitas
No Konsentrasi (mg/L) Kadar (%b/b) 1 41,8542 0,67 2 42,8717 0,68 3 42,1700 0,67 4 42,5910 0,68 5 41,6788 0,67 6 43,1875 0,69 7 43,7489 0,70 8 43,7839 0,70 9 43,4331 0,69 10 43,9594 0,70 Rata-rata 0,69 SB 0,01 %SBR 1,81 KV Horwitz 4,23 2/3 KV Horwitz 2,82 Hasil 1,81 %b/b  < 2,82
Syarat Keberterimaan : %SBR < 2/3 KV Horwitz
Berdasarkan hasil yang tertera pada Tabel 3, didapatkan  hasil  simpangan  baku  (SB)  sebesar  0,01 %b/b  dan    nilai  persen  Simpangan  Baku  Relatif (%SBR)  sebesar    1,81  %b/b.    Nilai  %SBR  yang didapat  berada  dibawah  nilai  2/3  KV Horwitz yaitu 2,82  artinya  syarat  keberterimaan  untuk  presisi ripitabilitas  terpenuhi  dan  menunjukkan  bahwa  data yang  dihasilkan  memiliki  ketelitian  tinggi.    Menurut Sumardi  (2002),  nilai  %SBR  dengan  rentang  1%  < SBR < 2% menunjukkan bahwa pengujian menghasilkan data dengan tingkat ketelitian tinggi.
Perbedaan nilai dari setiap ulangan menujukkan  adanya  kesalahan  acak  yaitu    sumber kesalahan  tidak  tertelusur,  tidak  dapat  dikendalikan, dan  berulang,  seperti    ketidakstabilan  neraca  saat penimbangan  serta  variasi  suhu,  kelembaban,  dan tekanan  udara  pada  saat  preparasi  larutan  sampel. Kesalahan acak pada pengujian ini tidak memberikan pengaruh besar terhadap hasil dan dibuktikan dengan hasil  pengujian  yang  masih  memenuhi  syarat keberterimaan.
Tabel 4. Hasil Pengujian Presisi Antara
No Analis A Analis B Konsentras i (mg/L) Kadar (%b/b) Konsentrasi (mg/L) Kadar (%b/b) 1 41,1876 0,66 41,8542 0,67 2 40,7665 0,65 42,8717 0,68 3 41,4683 0,66 42,1700 0,67 4 43,1524 0,69 42,5910 0,68 5 42,7664 0,68 41,6788 0,67 6 42,6612 0,68 43,1875 0,69 7 42,2402 0,68 43,7489 0,70 8 42,0998 0,67 43,7839 0,70 9 43,2226 0,69 43,4331 0,69 10 42,4507 0,68 43,9594 0,70 Rata-rata 0,68 0,69 SB 0,01 0,01 %SBR 1,83 1,81 KV Horwitz 4,24 4,23 2/3 KV Horwitz 2,82 2,82 Hasil 1,83% < 2,82 1,81% < 2,82 Syarat Keberterimaan : %SBR < 2/3 KV Horwitz Tabel 5. Hasil Pengujian Akurasi (Perolehan Kembali) Spike (%) Konsentrasi P 2 O 5 dalam sampel (mg/L) (C 1 ) Konsentrasi P 2 O 5 dalam sampel +
spike (mg/L) (C 3 ) FP Konsentrasi Spike yang ditambahkan (mg/L) (C 2 ) Konsentrasi Spike sesungguhnya (mg/L) Perolehan Kembali (%) 25 42,5647
52,9601
2 20 20,79 103,95 52,7224 20,32 101,58 52,6884 20,25 101,24 50 63,4874 40 41,85 104,61 63,9289 42,73 106,82 64,5062 43,88 109,71 75 72,5885 60 60,05 100,98 73,1318 61,13 101,89 73,0300 60,93 101,55 Rata-rata 103,49 % Perolehan Kembali Maksimum 109,71 % Perolehan Kembali Minimum 100,98
Syarat Keberterimaan :                                                                                           (90-110)%
Tabel 6. Hasil Pengujian Ketangguhan Metode ( Ruggedness ) Uji F Uji t Banyaknya data 10 s gabungan 0,01 F hitung 1,00 t hitung 1,96 F tabel 3,18 t tabel 2,10 Kesimpulan : 1,00 < 3,18 Kesimpulan : 1,96 < 2,10 Syarat Keberterimaan : F hitung < F tabel
Syarat Keberterimaan : t hitung < t tabel

## Presisi Antara
Presisi  suatu  analisis  adalah  kedekatan  satu hasil  dengan  yang  lainnya  pada  serangkaian pengujian.    Pada  pengujian  ini,  presisi  ditetapkan berdasarkan  uji  antara  yaitu  dengan  menguji  sampel yang sama dalam kondisi dan hari yang berbeda serta dengan  analis  yang  berbeda  pula.    Hasil  pengujian presisi antara dapat dilihat pada Tabel 4.
Berdasarkan hasil yang tertera pada Tabel 4, simpangan  baku  (SB)  yang  didapat  untuk  analis  A adalah  0,01  dan  analis  B  adalah  0,01.    Untuk  nilai simpangan baku relatif (%SBR)  analis A adalah 1,83 %b/b dan untuk analis B adalah 1,81 %b/b.  Nilai dari kedua analis ini berada dibawah nilai 2/3 KV Horwitz yaitu  2,82  maka  presisi  antara  terpenuhi  dan menunjukkan  bahwa  data  yang  dihasilkan  memiliki ketelitian  tinggi.    Hasil  ini  juga  menujukkan  metode penetapan  kadar  P 2 O 5 total  dalam  pupuk  organik secara spektrofotometri sinar tampak dapat digunakan oleh analis yang berbeda dan hari yang berbeda.

## Akurasi (Perolehan Kembali)
Pengujian  akurasi  bertujuan  mengetahui derajat  kedekatan  antara  kadar  hasil  analisis  sampel sebelum  ditambahkan spike dengan  kadar  hasil analisis  yang  telah  ditambahkan spike .    Pengujian dilakukan dengan mengukur sampel berdasarkan hasil uji  presisi  antara  yang  telah  ditambahkan spike larutan  standar  dengan  tiga  level  konsentrasi  (20 mg/L  untuk  konsentrasi  rendah,  40  mg/L  untuk konsentrasi  sedang,  dan  60  mg/L  untuk  konsentrasi tinggi)  masing-masing  sebanyak  tiga  kali  ulangan. Hasil pengujian akurasi dapat dilihat pada Tabel 5.
Berdasarkan  data  pada  Tabel  5,  nilai  persen perolehan  kembali  terletak  pada      rentang  (100,98  – 109,71)%.    Hasil  yang  didapatkan  telah  memenuhi syarat  keberterimaan,  yaitu  nilai  perolehan  kembali (90  –  110)%  .  Hal  ini  menginformasikan    bahwa kadar  P 2 O 5 dalam  pupuk  organik  memberikan  hasil yang akurat.
Nilai perolehan kembali P 2 O 5 yang cenderung  lebih  dari  100%  menujukkan  adanya kesalahan sistematis yaitu sumber kesalahan tertelusur, dapat dikendalikan, dan berulang pada  hal yang  sama  dan  berasal  dari  adanya  kontaminan (pengotor)  yang  berasal  dari  pelarut  maupun  zat  lain yang ikut terukur karena memiliki kesamaan karakter dengan  analit.    Kesalahan  sistematis  pada  pengujian ini  tidak  memberikan  pengaruh  besar  terhadap  hasil. Hal ini dibuktikan dengan hasil pengujian yang masih memenuhi syarat keberterimaan.
Ketangguhan Metode ( Ruggedness ) Ketangguhan metode adalah derajat ketertiruan  hasil  uji  yang  diperoleh  dari  analisis sampel yang sama dalam berbagai kondisi uji normal, seperti  laboratorium,  analis,  instrumen,  bahan pereaksi, suhu, dan hari yang berbeda.  Ketangguhan biasanya  dinyatakan  sebagai  tidak  adanya  pengaruh perbedaan  operasi  atau  lingkungan  kerja  pada  hasil uji  (Riyanto,  2014).    Pengujian  ketangguhan  metode
dilakukan  sebanyak  sepuluh  kali  ulangan  untuk masing-masing  analis.    Kadar  yang  didapat  dari masing-masing analis dibandingkan ragamnya dengan uji F dan rataannya dengan uji t.
Berdasarkan data pada Tabel 6, dapat dilihat bahwa  hasil  uji  F  dan  uji  t  pada  pengujian ketangguhan  metode  diperoleh  nilai  F hitung <  F tabel dan t hitung <  t tabel dengan  nilai  F hitung (1,00)  <  F tabel (3,18) dan  t hitung (1,96)  <  t tabel (2,10)  sehingga  ragam  dan rataan  hasil  analisis  antara  analis  1  tidak  berbeda nyata dengan ragam dan rataan hasil analisis analis 2. Kedua  hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  metode penetapan  kadar  P 2 O 5 dalam  pupuk  organik memberikan  hasil  ketertiruan  antar  analis  yang seksama dibawah kondisi normal karena memberikan hasil yang optimal.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  pengujian  yang  telah dilakukan,  didapatkan  hasil  parameter  linieritas dengan  nilai  koefisien  korelasi  sebesar  0,9995,  limit deteksi  metode  sebesar  0,0276  %b/b  dan  limit kuantitasi  sebesar  0,2761  %b/b,  presisi  ripitabilitas dengan nilai %SBR sebesar 1,81 %b/b, presisi antara dengan  nilai  %SBR  sebesar  1,83  %b/b  dan  1,81 %b/b, nilai persen perolehan kembali sebesar (100,98 - 109,71) %, serta uji ketangguhan memberikan uji F dan uji t antar analis yang tidak berbeda nyata dengan diperoleh  nilai  F  hitung  (1,00)  <  F  tabel  (3,18)  dan  t hitung (1,96) < t  tabel (2,10), sehingga  hasil  validasi metode  penetapan  kadar  P 2 O 5 dalam  pupuk  organik memenuhi syarat keberterimaan yang ditetapkan.

## DAFTAR PUSTAKA
Atmojo, S.  W.  (2003). Peran C-Organik Terhadap Kesuburan Tanah Dan Upaya Pengelolaannya. Usm-Press.  Surakarta. Day,  R.A.,  Underwood,  A.L.  (2002). Analisis  Kimia Kuantitatif. Edisi  Keenam.  Diterjemahkan Oleh  Dr.  Ir.  Iis  Sopyan,  M.Eng.  Erlangga. Jakarta.
Engelstad, O.  P.  (1997). Teknologi Dan Pengunaan Pupuk .  Edisi Ketiga.  Gadjah Mada University Press.Yogyakarta.
Hanafiah, K.  A.  (2005). Dasar-Dasar Ilmu Tanah.
Raja Grafindo.  Jakarta.
Hardjowigeno,  S.    (2007). Ilmu  Tanah. Edisi Keenam . Akademika
Pressindo.
Jakarta. Harmita.    (2004). Petunjuk  Pelaksanaan  Validasi Metode  Dan  Cara  Perhitungannya.    Majalah Ilmu  Kefarmasian. Departemen  Farmasi FMIPA UI.  1:117-135.
Huber, L.  (2010). Validation of Analytical Methods. Agilent Technologies.  Germany. Isnaeni,  D.  (2015). Penentuan  Kadar  P 2 o 5 Dalam
Pupuk Npk Phonska
I Dengan
Membandingkan  Dua  Metode  Uji  Pada Spektrofotometer  UV-Vis .    Laporan  Praktik
Kerja  Lapang  (Pkl).    Universitas  Negeri Semarang.  Semarang. Isnaini,  M.    (2006). Pertanian  Organik. Cetakan Pertama.  Kreasi Warna.  Yogyakarta. Khopkar,  S.    M.  (1990). Konsep  Dasar  Kimia
Analitik . Diterjemahkan
Oleh A. Saptorahardjo.  UI Press.  Jakarta. Krishnaveni,  M.    S.    (2010). Studies  On  Phosphate Solubilizing  Bacteria(Psb)In  Rhizosphere  And Non-Rhizosphere  Soils  In  Different  Varieties Of  Foxtails  Millet  (Setaria  Italica.) .    Intl  J Agric Food Sci Tech.  1:23-29. Peraturan  Menteri  Pertanian.    (2006). Peraturan Menteri Pertanian Nomor : 02/Pert/Hk.060/2/2006 Tentang Pupuk
Organik Dan Pembenah Tanah. Departemen Pertanian.  Bogor. Riyanto. (2014). Validasi Dan Verifikasi Metode Uji: Sesuai  Dengan  ISO/IEC  17025  Laboratorium Pengujian  Dan  Kalibrasi .    Edisi  Keenam. Deepublish. Yogyakarta. Sumardi.  (2002). Validasi  Metode  Pengujian .    Pusat Standardisasi Dan Akreditasi Jenderal
Departemen Pertanian.  Jakarta. Suriadiakarta,  D.A.,  Simanungkalit,  R.D.  M.  (2006). Pupuk  Organik  Dan  Pupuk  Hayati .  Balai Besar  Litbang  Sumberdaya  Lahan  Pertanian, Badan Penelitian Dan Pengembangan Pertanian.  Bogor.