## Tingkat Respon Superovulasi dan Produksi Embrio In Vivo dengan Sinkronisasi CIDR (Controlled Internal Drug Releasing) Pada Sapi Donor Simmental
Superovulation Rate and In Vivo Embryo Production Based on CIDR (Controlled Internal Drug Release) Syncronization in Simental Cattle
S. Jodiansyah 1) , M. Imron 2) , & C. Sumantri 1)
1) Departemen Ilmu Produksi dan Teknologi Peternakan, Fakultas Peternakan IPB Jl. Agatis Kampus IPB Darmaga Bogor
2) BalaiEmbrioTernak, DirjenPeternakan, KementrianPertanian

## ABSTRACT
The improvement and increasing of beef cattle population through the application of superovulation and embryo transfer technology is very useful for the development of breeding and industrial feedlot. The purpose of this research to improve the effectiveness of the CIDR on estrus synchronization, superovulation response  and  the  quantityand  quality  ofin  vivoembryosinSimmentalcattle.  Totally  20  Simmentalcows wereused as donorswith agedbetween2.5 - 4years, 10 cowsascontrolwithnaturalestrustreatment(P1) and10 cows for synchronizationwith CIDRtreatment(P2).  Parameters observediesuperovulationresponse rate,the number ofcorpusluteum(CL), number of ova,embryos,and RecoveryRate (RR). All data were analizedbyChi- square test.The results showed that the treatment ofsuperovulationCIDRbasedon synchronizationhad noa significant effecton number of corpusluteum(CL), ovum,and,  number of  transferableembryoes.
Keywords: CIDR, superovulation, embryotransfer, transferable embryos.

## PENDAHULUAN
Pe ngembangan  peternakan  di  Indonesia  khususnya ternak ruminansia besar masih dihadapkan pada permasalahan kualitas  ternak    yang  masih  kurang  baik.  Upaya  yang dilakukan  salah  satunya  dengan  penyediaan  bibit  unggul lokal  maupun  import.  Faktor  yang  menjadi  penghambat dalam  proses  produksi  embrio  pada  sapi  donor  saat  ini antara lain: fluktuasinya respon donor terhadap perlakuan superovulasi (SOV) dan rendahnya perolehan embrio setiap kali pemanenan (kuantitas).  Disamping itu masalah tingkat kerusakan  embrio (degeneratif) serta  ovum  yang  tidak terbuahi (unfertilized) pada proses produksi embrio masih menjadi masalah yang perlu dicari pemecahannya (kualitas). Salah  satu  upaya  yang  dapat  dilakukan    adalah    dengan pengembangan metode superovulasi yang dikombinasikan dengan  penggunaan  CIDR (Controlled  Internal  Drug Releasing) .  Penggunaan  CIDR  dilakukan  dengan  tujuan untuk  sinkronisasi  perkembangan  gelombang  folikel  pada sapi  yang  akan  dilakukan  superovulasi.    Preparat  hormon progesteron  yang  terkandung  di  dalam  CIDR  diharapkan dapat  memberikan  peningkatan  kadar  progesteron  pada saat  perlakuan  superovulasi  dan  waktu  untuk  perlakuan superovulasi  dapat  ditentukan  (pertengahan  fase luteal). Kadar  progesteron  yang  tinggi  pada  pertengahan  fase luteal  diharapkan  dapat  membantu  dalam  peningkatan sensitifitas  folikel-  folikel  primer  yang  ada  terhadap perlakuan superovulasi dengan menggunakan FSH (Follicle Stimulating Hormone). Semakin meningkatnya sensitifitas gelombang folikel terhadap hormon FSH diharapkan akan meningkatkan  jumlah  folikel  yang  akan  berkembang  dan mengalami  pematangan.    Semakin  banyak  folikel  yang matang dan mengalami ovulasi  maka akan semakin banyak
kemungkinan  sel  telur  (oosit)  yang  dihasilkan  sehingga Corpus Luteum (CL) yang terbentuk akan semakin banyak pula.  Beberapa  negara  telah  mencoba  mengembangkan suatu metode baru untuk penentuan waktu superovulasi pada pelaksanaan  produksi  embrio  yaitu  dengan  menggunakan preparat  progesteron  yang  dimasukkan  intra  vagina  atau sering  disebut Controlled  Internal  Drug  Release (CIDR) (Bo et al., 2002). Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh  penggunaan  CIDR  terhadap  terhadap  tingkat respon superovulasi dan peningkatan produksi embrio baik kuantitas maupun kualitas secara in vivo terhadap tingkat respon superovulasi dan peningkatan produksi embrio baik kuantitas maupun kualitas secara in vivo.

## MATERI DAN METODE Sapi Donor
Sapi donor yang diberi perlakuan superovulasi dilakukan pada sapi Simmental murni (pure breed) sebanyak 20 ekor yang berumur antara 2,5 -4 tahun, dengan rataan berat badan 498 kg ,telah beranak satu kali,  nilai kondisi tubuh (NKT) berkisar 3,0 – 3,5 (skala penilaian 5), mempunyai kesehatan dan siklus reproduksi yang baik. Pemberian pakan dengan hijauan King grass seberat 40 kg/ekor/hari. Pakan konsentrat berasal dari pakan komersil dengan kandungan protein 16% -18%  yang  diberikan  sebanyak  5  kg/ekor/hari,  dipelihara dalam kandang  dengan sistem free stall sehingga sapi bebas bergerak untuk makan dan  minum.
Alat dan bahan superovulasi Alat  dan  bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini antara  lain  CIDR  yang  mengandung progesteron 1,9 g
Jurnal Ilmu Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan
ISSN 2303-2227

## produk dari EAZI BREED CIDR
® , Phzer Animal Health, Austalia.  Untuk  implan  ke  vagina  mengunakan  aplikator CIDR.  Preparat  hormon  FSH  20NIH  (ovine  FSH;  OPTI STIM ® ,  Jurox  Pty  Ltd,  Rutherford  NSW  2320 Australia) yang  dilarutkan  dalam  20  ml,  PGF 2 α  5  mg  (etiproston; Prostavet C ® , VIRBAC S.A., Carros, Prancis). Inseminasi buatan menggunakan semen beku import dari bangsa sapi Simmental dan alat untuk inseminasi buatan  (Gun IB).

## Produksi embrio in vivo
Penelitian ini menggunakan prosedur dengan dua perlakuan yaitu perlakuan superovulasi berdasarkan berahi alami dan perlakuan superovulasi berdasarkan sinkronisasi CIDR (Controlled  Internal  Drug  Releasing). Program superovulasi  dari  masing-masing  perlakuan  menggunakan preparat  FSH (Follicle  Stimulating  Hormone) yang sama  yaitu  ovine  FSH;  OPTI  STIM ® ,  Jurox  Pty  Ltd, Rutherford NSW 2320 Australia dengan dosis yang sama yaitu 18mg/20 ml. Perlakuan dilakukan pada 20 ekor sapi bangsa Simmental yang terdiri dari 10 ekor untuk perlakuan superovulasi  berdasarkan  berahi  alami  dan  10  ekor  untuk perlakuan  superovulasi  berdasarkan  sinkronisasi  CIDR, dengan umur2,5 -4 tahun, rataan berat badan 498 kg, sama- sama baru mengalami beranak satu kali, nilai kondisi tubuh (NKT)  berkisar  3,0  –  3,5  (skala  penilaian  5),  dipelihara dalam kandang  dengan sistem free stall sehingga sapi bebas bergerak untuk makan dan  minum.

## Prosedur  Perlakuan
Perlakuan P1 (Perlakuan Superovulasi Berdasarkan Berahi Alami)
Urutan kegiatan superovulasi berdasarkan berahi alami dapat  dilihat  pada  Tabel  1.  Urutan  kegiatan  superovulasi berdasarkan sinkronisasi CIDR dapat dilihat pada Tabel 2.

## Tahap Pemanenan Embrio
Teknik pemanenan embrio dilakukan dengan metode non surgical via servik menggunakan media pembilas cairan ringer laktat yang dicampur dengan Calf Serum 5-10 ml + penisilin 100.000 iu + streptomisin 0,1 g.Pemanenan embrio dilakukan pada hari ke 7 setelah IB pertama dilakukan.
Media  pembilas  sebanyak  1000  ml  disiapkan  untuk
!  !" # $%
Gambar 1.  Prosedur Perlakuan Superovulasi Berdasarkan Berahi Alami !
Perlakuan P2 (Perlakuan Superovulasi Berdasarkan Sinkronisasi
Gambar 2.  Prosedur Perlakuan Superovulasi Berdasarkan Sinkronisasi CIDR satu donor yang disimpan di water bath dengan suhu hangat 37 0 C,  botol  media  dihubungkan  dengan  menggunakan selang  masuk  ke  foley  kateter  sedangkan  selang  keluar dari foley kateter dihubungkan menggunakan Y konektor. Anastesi  dilakukan  dengan  menyuntikan  4  ml Xylocaine dipangkal ekor antara sacrum dan coccygeal pertama tulang belakang.
Panen Embrio Panen embrio dilakukan dengan cara metode pembilasan pada uterus, pembilasan uterus dilakukan dengan membuka klem  pemasukan  dan  menutup  klem  pengeluaran.    Media pembilas  dibiarkan  mengalir  sebanyak  20-50  ml.  Untuk pembilasan pertama hanya 20-30 ml, dalam keadaan klem pemasukan  tertutup  dilakukan  pemijatan  dan  manipulasi uterus  dimana kornua  uteri diluruskan  beberapa  menit untuk  menghindari  adanya  embrio  yang  tersekap  dalam apeks uteri yang melengkung, kemudian klem pengeluaran dibuka untuk mengeluarkan media pembilas.
Cara pembilasan ini diulang lagi 8 – 10 kali, sehingga untuk  satu  kornua  uteri  dibutuhkan  400  -  500  ml  media pembilas.  Setelah  pembilasan  pada  satu  kornua  selesai
Hari ke : Perlakuan Superovulasi 0 Estrus 7 Pemeriksaan  CL (Palpasi per  rectum) 9 Pagi : Penyuntikan FSH 4 ml (intra muscular) Sore : Penyuntikan FSH 4 ml 10 Pagi : Penyuntikan FSH 3 ml
Sore : Penyuntikan FSH 3 ml
11 Pagi : Penyuntikan FSH 2 ml  + PGF2α 5 mg  (intra muscular)
Sore : Penyuntikan FSH 2 ml + PGF2α 5 mg
12 Pagi : Penyuntikan FSH 1 ml Sore : Penyuntikan FSH 1 ml
13 Pagi : IB (Tergantung kondisi estrus)
Sore : IB
14 Pagi : IB  (Jika gejala estrus masih terlihat)
20
Pagi :Cek CL dengan palpasi rektal (Respon Superovulasi), Panen  Embrio dan Evaluasi Embrio T abel 1. Prosedur Perlakuan 1 (P1) yaitu  Produksi  Embrio In Vivo Berdasarkan  Pengamatan Estrus Alami (Standar Prosedur Superovulasi di BET).
kemudian  dilanjutkan  dengan  kornua  yang  lainnya. Pemindahan  kateter  dilakukan  dengan  pengempesan balon  terlebih dahulu.  Setelah pembilasan selesai uterus dibersihkan  dengan  cairan  iodine  povidone  2%  sebanyak 50 ml yang dimasukan secara intra vagina untuk mencegah infeksi.    Setelah  itu  sapi  disuntik  dengan  PGF2α,  untuk mencegah  terjadinya  kebuntingan  dan  mempercepat  masa pemulihan reproduksi.

## Evaluasi Embrio
Media  hasil  pembilasan  disaring  menggunaan penyaring  embrio  70  µm  untuk  mendapatkan  embrio  dan dievaluasi.Embrio  ditempatkan  dalam  cawan  petri  besar (berisi  medium  pembilas  diambil  dengan  mikro  pipet dengan  bantuan  mikroskop  stereokospik  dan  pembesaran (10 – 20 kali).Embrio yang didapat kemudian dipindahkan ke  dalam  cawan  petri  kecil  (berisi  media  penyimpan). Pembesaran  mikroskop  diperbesar  hingga  50  -  100  kali untuk  mengevaluasi  embrio    lebih  cermat.Berdasarkan morfologi  evaluasi  embrio  dilakukan  untuk  mengetahui embrio  yang  normal  dan  embrio  yang  abnormal.
Parameter  embrio yang diamati 1. Response Rate, yaitu perbandingan jumlah ternak donor yang respon terhadap jumlah donor yang disuperovulasi. Sapi  dianggap  memberikan  respon  apabila  memiliki jumlah  CL  lebih  dari  atau  sama  dengan  3    (CL  ≥  3).
(Silva et al., 2009).
2. Jumlah Corpus Luteum (CL), merupakan tingkat respon superovulasi  yaitujumlah  CL  yang  terdapat  pada ovarium kiri dan kanan, berdasarkan perhitungan secara palpasi rektal.
3.  Jumlah ovum yang terkoleksi dan embrio yaitu jumlah embrio kualitas A, B, C, DG dan UF yang terkoleksi
!"#
5.  Jumlah  embrio  layak  transfer,  yaitu    jumlah  embrio layak transfer (kualitas A, B dan C)  .
6.  Proporsi  embrio  layak  transfer,  adalah  perbandingan jumlah embrio layak transfer yang mempunyai  grade A, B dan C terhadap jumlah seluruh embrio (grade A, B, C, DG dan UF) yang terkoleksi.

## !"#

## Analisis Data
Hasil  penelitian  berupa  data    jumlah  corpus  luteum, jumlah  embrio  dan  ovum  yang  terkoleksi,  jumlah  embrio layak  transfer  pada  masing-masing  perlakuan  dianalisis menggunakan metode statistik  uji Khi-kuadrat (Chi-square test). Model rancangan dari uji  Khi-kuadrat menggunakan formula menurut Gaspersz (1991) yaitu :
Keterangan : Bi = total frekuensi pengamatan pada baris k Kj = total frekuensi pengamatan pada kolom ke-j T = total seluruh frekuensi pengamatan
Keterangan :
X 2 = nilai Khi-kuadrat Oij   = frekuensi pengamatan (observasi) Eij   = frekuensi yang diharapkan mengikuti hipotesis yang dirumuskan

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jumlah Corpus Luteum (CL) sebagai Tingkat Respon Superovulasi Respon  sapi  donor  terhadap  perlakuan  superovulasi dapat  diketahui  dari  banyaknya Corpus  Luteum (CL) yang  terbentuk  setelah  pemberian  hormon  gonadotropin Folikel  Stimulating  Hormon (FSH).  Banyaknya corpus Luteum (CL) yang berkembang di dalam ovarium sesudah pemberian hormon gonadotropin menunjukkan  gambaran tentang  keberhasilan  superovulasi,  data  hasil  penelitian dapat dilihat pada Tabel 3.
Pada  data  P1  superovulasi  berdasarkan  berahi  alami dari jumlah 10 ekor memberikan respon 7 ekor (70%)  dan tidak respon 3 ekor (30%), sedangkan pada P2 superovulasi dengan sinkronisasi CIDR dari jumlah 10 ekor memberikan respon  terhadap  perlakuan  superovuasi  10  ekor  (100%). Hal ini diakibatkan karena pada perlakuan P1 mempunyai kelemahan kurang tepatnya dalam penentuan kondisi CL di
Hari ke : Perlakuan Superovulasi 1 Implant CIDR (intra vagina) 9 Pagi : Penyuntikan FSH 4 ml (intra muscular) Sore : Penyuntikan FSH 4 ml 10 Pagi : Penyuntikan FSH 3 ml Sore : Penyuntikan FSH 3 ml
11 Pagi : Penyuntikan FSH 2 ml  + PGF2α 5 mg  (intra muscular) Sore : Penyuntikan FSH 2 ml + PGF2α 5 mg
12 Pagi : Penyuntikan FSH 1 ml + cabut CIDR
Sore : Penyuntikan FSH 1 ml
13 Pagi : IB (Tergantung kondisi estrus) Sore : IB 14
Pagi : IB  (Jika gejala estrus masih terlihat)
20 Pagi  :  Cek  CL  dengan  palpasi  rektal  (Respon Superovulasi), Panen  Embrio dan Evaluasi Embrio Tabel 2. Prosedur Perlakuan 2 (P2) Produksi Embrio In Vivo dengan Pemasangan CIDR
(kuantitas).
4. Recovery  Rate (RR),  adalah  perbandingan  jumlah embrio  dan  ovum  yang  terkoleksi  dibagi  jumlah  CL yang terbentuk karena ovulasi yang terjadi.
hari ke-7 pada saat akan dilakukan perlakuan superovulasi (penyuntikan  FSH).  Selama  ini  teknik  penentuan  kondisi CL untuk perlakuan superovulasi di Balai Embrio Ternak/ BET  masih  menggunakan  cara  palpasi  rektal  dan  cara ini  mempunyai  kelemahan  terhadap  penentuan  kondisi CL  yang  potensial    baik  secara  ukuran  maupun  kadar progesteron yang dihasilkan, sehingga akan mempengaruhi tingkat respon dari perlakuan superovulasi, karena apabila superovulasi dilakukan pada saat sensitifitas folikel terhadap preparat FSH rendah maka folikel yang terstimulasi untuk berkembang akan menjadi sedikit.
Pada Perlakuan P2 yaitu perlakuan superovulasi dengan prosedur  pemasangan  CIDR  tingkat  keberhasilan  respon superovulasi mencapai 100% diakibatkan ketepatan  waktu dalam pemberian FSH. Tingkat keberhasilan superovulasi ditentukan  oleh  ketepatan  waktu  pemberian  hormon gonadotrophin yang dapat merangsang pertumbuhan folikel (preparat  FSH)  yang  dimulai  pada  hari  ke-9.  Pemberian FSH secara eksogenus  pada perlakuan superovulasi akan memberikan sensitifitas tinggi apabila dilakukan pada fase luteal yaitu hari ke-9 dari awal siklus birahi dengan panjang siklus  birahi  21-23  hari,  dimana  pada  saat  itu  munculnya gelombang  folikel.        Setiadi et  al. (2005),  menyatakan bahwa  aplikasi  hormon  gonadotrophin  pada  saat  muncul gelombang folikel dapat meningkatkan respon superovulasi jika dilakukan pada waktu gelombang folikel terjadi tanpa keberadaan folikel dominan.
Tujuan    dari    pemasangan    CIDR    pada    proses superovulasi  adalah  untuk  dapat  meningkatkan kadar  progesteron  dalam  darah  yang  berfungsi  untuk mempersiapkan  terjadinya  gelombang  folikel  pada fase luteal sehingga  folikel-folikel  tersebut  akan  memiliki sensitifitas  yang  tinggi  terhadap  hormon  FSH  yang  akan diberikan  pada  proses  superovulasi.  Sistem  kerja  dari CIDR  adalah  membantu  meningkatkan  kadar  progesteron dalam darah, peningkatan kadar progesteron dimulai sejak CIDR  disisipkan  dalam  vagina  dimana  kadar  konsentrasi progesteron  dalam  darah  akan  meningkat  menjadi  5 sampai 7 ng/ml dalam waktu 24 jam.  Peningkatan kadar ini  mengakibatkan  kondisi  siklus  reproduksi  berada  pada pertengahan fase luteal (Mapletoft et al. , 2003). Dari  segi  efisiensi  waktu  pelaksanaan  superovulasi sampai panen embrio, perlakuan superovulasi berdasarkan sinkronisasi CIDR lebih singkat yaitu membutuhkan waktu 20 hari karena pemasangan CIDR itu sendiri bisa dilakukan pada  semua  fase  yaitu  fase  luteal  maupun  fase  folikuler, sedangkan  berdasarkan  pengamatan  berahi  pelaksanaan superovulasi  membutuhkan  waktu  41±2,16  hari  dengan syarat dilakukan pada fase luteal dan dengan siklus berahi yang  normal  yaitu  18  sampai  24  hari  (dalam  satu  siklus) karena  menurut  Hafez  dan  Hafez    (2000)  menyatakan bahwa lama waktu timbulnya estrus pada berbagai ternak berbeda. Pada ternak sapi siklus estrus  berkisar antara 18
sampai 24 hari (Rata-rata 21 hari), dengan lama estrus 18 sampai 19 jam.
Rataan  jumlah  CL  pada  perlakuan  P1  sebanyak 8.4±8.24,  sedangkan  P2  sebanyak  7,7±3,53.  Banyaknya CL  yang  terbentuk  pada  penelitian  ini,  yaitu  perlakuan superovulasi  berdasarkan  berahi  alami  (P1)  maupun perlakuan  superovulasi  dengan  penggunaan  CIDR  (P2) memberikan total rataan sebayak 8,05 CL per sapi donor. Banyaknya CL yang terbentuk dari masing-masing perlakuan tidak memberikan perbedaan yang nyata meskipun jumlah rataan  dari  masing-masing  perlakuan  tersebut  memiliki perbedaan jumlah CL yaitu P1 sebanyak 8,4  lebih tinggi dari pada P2 sebanyak  7,7. Perbedaan tersebut bisa diakibatkan kurangnya  konsentrasi  progesteron  pada  perlakuan superovulasi  berdasarkan  penggunaan  CIDR  (P2)  karena apabila pemasangan CIDR pada fase folikuler  konsentrasi progesteron akan kembali menurun menjadi 2 sampai 3 ng/ml setelah 2 sampai 3 hari dan akan tetap bertahan sampai hari ke-12 (Mapletoft et al. , 2003).  Hal tersebut menyebabkan penyuntikkan  hormon  FSH  untuk  superovulasi  menjadi kurang maksimal merangsang perkembangan folikel karena kadar progesteron pada saat penyuntikan tidak berada pada titik yang cukup tinggi. Kadar progesteron yang  ideal untuk penyuntikan FSH berkisar antara 4 -6 ng/ml dan pada saat ini diketahui dengan keberadaan CL yang potensial (Pineda, 2003).  Menurut  Silva  (2009),    faktor  yang  menyebabkan perbedaan  tingkat  respon  superovulasi  terbagi  menjadi  2 faktor  yaitu  faktor  internal  dan  faktor  eksternal.    Faktor internal  meliputi  genetik  ternak  ( breed dan  sensitifitas individu ternak terhadap hormon), karakter fisiologis (umur, kondisi ovari, ada tidaknya folikel dominan), nutrisi ( Body Condition Score dan kecukupan nutrisi) dan kesehatan organ reproduksi.  Faktor eksternal meliputi penggunaan preparat FSH (imbangan FSH dengan LH), dosis FSH yang digunakan, musim dan manajemen pelaksanaan di lapangan. Pengaruh perlakuan superovulasi terhadap jumlah corpus luteum yang terbentuk  diperlihatkan    pada  Tabel  4.Hasil  sinkronisasi PGF2α  memberikan  tingkat  respon  100%    dengan  rataan CL  yang  terbentuk  sebanyak  9,0±4,68,  sedangkan  hasil perlakuan  superovulasi  berdasarkan  sinkronisasi  CIDR yang memberikan tingkat respon 100% dan rataan CL yang terbentuk sebanyak 7,7±3,53. Hal ini menunjukkan bahwa efektifitas  pelaksanaan  superovulasi  dari  masing-masing perlakuan  terhadap  tingkat  superovulasi  sudah  tercapai, karena  dari masing-masing perlakuan baik itu sinkronisasi CIDR maupun sinkronisasi PGF2α bertujuan untuk   untuk mempersiapkan terjadinya gelombang folikel pada fase luteal sehingga folikel-folikel tersebut akan memiliki sensitifitas yang tinggi terhadap FSH yang akan diberikan pada proses superovulasi. Ketepatan waktu dari pemberian hormon FSH akan  memberikan  hasil  yang  maksimal,  efisiensi  dalam waktu, efisiensi tenaga, biaya dan penggunaan donor (Silva et al ., 2009).
Perlakuan Sapi (ekor) Hari Corpus Luteum Jumlah Response Rate (%) Jumlah Rataan Berahi alami (P1) 10 7 (70) 41±2,16 84 8,4±8,24 Implan CIDR (P2) 10 10 (100) 20 77 7,7±3,53
Tabel 3.  Pengaruh Perlakuan  terhadap Tingkat Respon Superovulasi (Response Rate) dan Jumlah Corpus Luteum (CL)
Rataan Cl dari masing-masing perlakuan menunjukan bahwa  perlakuan  superovulasi  berdasarkan  sinkronisasi PGF2α menghasilkan rataan CL  lebih tinggi yaitu sebanyak 9,0  dibandingkan  sinkronisasi  CIDR  sebanyak  7,7  CL yang terbentuk.  Hal ini disebabkan karena pada perlakuan superovulasi berdasarkan sinkronisasi PGF2α menggunakan bangsa sapi donor dan preparat FSH yang berbeda dengan sinkronisasi CIDR.  Hal ini sesuai dengan pendapat Gordon (2005)  yang  menyatakan  bahwa  perbedaan  variasi  respon tiap individu ternak dapat disebabkan oleh adanya perbedaan genetik  ternak,    jenis  preparat  FSH  yang  digunakan  dan kualitas dan kemurnian preparat FSH yang digunakan.
Berdasarkan efisiensi waktu, pelaksanaan superovulasi dengan  penggunaan  CIDR  lebih  efektif  dibandingkan dengan PGF2α karena perlakuan superovulasi berdasarkan sinkronisasi  CIDR  hanya  membutuhkan  waktu  20  hari sampai  pelaksanaan  panen  embrio,  sedangkan  perlakuan superovulasi berdasarkan sinkronisasi PGF2α membutuhkan waktu  34  hari  dengan  syarat  dalam  kondisi  fase  luteal (terdapat  CL  pada  hari  ke-12  setelah  penyuntikan  PGF2α ke-2).
Produksi Embrio, Ovum yang Terkoleksi dan Nilai Recovery Rate Perolehan  ovum  yang  terkoleksi  dan  embrio  hasil superovulasi dan nilai perolehan kembali embrio atau ovum setelah  ovulasi  terjadi  ( recovery  rate )  dapat  dilihat  pada Tabel 5  di bawah ini.
Perbedaan angka rata-rata perolehan embrio dan ovum sangat ditentukan oleh berhasil tidaknya proses superovulasi oleh FSH terhadap folikel-folikel target dari superovulasi. Target  FSH  dilakukan  pada  fase  luteal  dimana  pada  fase tersebut terjadi munculnya gelombang folikel  dan pada fase tersebut ditandai dengan keberadaan CL yang mensekresikan progesteron  pada  kadar  tertentu.  Perlakuan  superovulasi berdasarkan sinkronisasi CIDR kadar progesteronnya tidak setinggi  kadar progesteron dari corpus luteum (CL) pada perlakuan  superovulasi  berdasarkan  berahi  alami.  Kadar progesteron yang  ideal untuk   penyuntikan FSH berkisar antara  4  -6  ng/ml  dan  pada  saat  ini  diketahui  dengan keberadaan  CL  yang  potensial  sedangkan  berdasarkan penggunaan  CIDR  pada  fase  folikuler    konsentrasi progesteron sebanyak 2 - 3 ng/ml (Mapletoft et al ., 2003). Pada  penelitian  ini    keberhasilan  superovulasi  dapat
Vol. 01 No. 3
Perlakuan Sapi (ekor) Jumlah Corpus Luteum Jumlah Response Rate (%) Rataan *Sinkronisasi PGF2α 4 10 (100) 36 9,0±4,68 Sinkronisasi CIDR 10 10 (100) 77 7,7±3,53
Tabel 4. Pengaruh Perlakuan  Superovulasi berdasarkan Sinkronisasi PGF2α dan   Sinkronisasi CIDR terhadap Tingkat Respon Superovulasi (Response Rate) dan Jumlah Corpus Luteum (CL)
diprediksi lebih awal melalui palpasi rektal pada ovarium untuk  mengetahui  keberadaan  CL  yang  terbentuk  setelah perlakuan  superovulasi,  jika  jumlah  CL  yang  terbentuk banyak  maka  diperkirakan  jumlah  embrio    akan  banyak pula.  Berdasarkan  Tabel  5  nilai recovery  rate (RR)  yaitu perbandingan  jumlah  embrio  dan  ovum  yang  terkoleksi dengan  jumlah  CL  yang  terbentuk  dari  masing-masing perlakuan yaitu P1 (84,52%) dan P2 (87,01%). Nilai recovery rate pada perlakuan superovulasi berdasarkan sinkronisasi CIDR  (P2)  lebih  tinggi  dari  perlakuan  superovulasi berdasarlan berahi alami (P1).
Tinggi rendahnya perolehan embrio dan ovum sangat ditentukan  oleh  berhasil  tidaknya  proses  superovulasi oleh  hormon  FSH  terhadap  folikel-folikel  pada  ovarium yang  merupakan  target  dari  superovulasi.  Perbedaan  nilai recovery rate juga bisa diakibatkan kurang tepatnya waktu proses pemberian FSH terhadap perkembangan gelombang folikel sehingga terjadinya kegagalan dalam proses stimulasi terhadap folikel-folikel target preparat FSH yang diberikan. Perlakuan berdasarkan berahi alami tidak bisa menentukan secara tepat terhadap kapan dimulainya gelombang folikel sebagai target superovulasi, karena acuan dari gelombang folikel  berdasarkan  pada  keberadaan  CL  yang  terbentuk setelah  terlihatnya  gejala  berahi.  Valencia et  al. (2004), menyatakan  bahwa  kisaran  rata-rata  untuk  nilai  RR  pada sapi dengan metode pemanenan embrio non surgical adalah 68,2% sampai 74%.  Perlakuan P1 dan P2 telah melebihi kisaran  prosentase  tersebut,    sehingga  keberhasilan
Perlakuan Corpus Luteum Embrio dan Ovum Recovery Jumlah Rataan CV Jumlah Rataan Rate (%) Berahi alami (P1) 84 8,4±8,24 98,04 71 7,1±7,36 84,52 Implan CIDR (P2) 77 7,7±3,53                    45,83 67 6,7±3,06 87,01
Tabel 5. Pengaruh Perlakuan terhadap Jumlah Embrio dan Ovum Terkoleksi dan Nilai Recovery Rate.
superovulasi  dan  pemanenan  embrio  tanpa  pembedahan telah memenuhi syarat.
Tinggi  rendahnya  nilai  RR  bisa  diakibatkan  masalah teknis  yaitu  perhitungan  jumlah  CL  dengan  cara  palpasi rektal karena tidak dapat memberikan hasil yang meyakinkan dibandingkan perhitungan menggunakan alat USG.

## Persentase  Embrio Layak Transfer dan Embrio Tidak Layak Transfer
Hal terpenting dari keberhasilan perlakuan superovulasi adalah  persentase  yang  tinggi  dari  kualitas  embrio  layak transfer.  Pengaruh  perlakuan  superovulasi  berdasarkan berahi  alami  dan  sinkronisasi  CIDR    terhadap  jumlah embrio layak transfer dan tidak layak transfer dapat dilihat pada Tabel 6.
Embrio layak transfer adalah embrio yang mempunyai
bentuk  morfologi  sesuai  tahap  perkembangan  embrio  dan mempunyai  kualitas  dengan  klasifikasi  grade A,  B  dan  C sedangkan embrio yang tidak layak transfer adalah embrio yang  perkembangannya  tidak  sesuai  dengan  tahapan perkembangan  yang  telah  dilalui  atau  tidak  berkembang degeneratif (DG)  atau  oosit  yang  tidak  terbuahi  atau unfertilized (UF).    Tahapan  perkembangan  embrio  yang ideal  digunakan  untuk  kegiatan  transfer  embrio  adalah tahapan mulai compact morulla sampai blastocyst . Berdasarkan perhitungan  statistik uji Khi-kuadrat dari data pada Tabel 6, dapat diketahui bahwa tiap-tiap perlakuan tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  embrio  layak transfer.  Pada penelitian ini nilai angka persentase embrio layak transfer masing-masing perlakuan tidak berbeda jauh yaitu 38,03%  (P1) dan 34,33 % (P2).
Faktor  yang  dapat  mempengaruhi  tinggi  dan rendahnya  embrio  yang  layak  transfer  adalah  faktor fisiologis  pada  saat  pemanenan  embrio  dilakukan.    Pada saat pemanenan sapi donor berada pada fase luteal dengan keberadaan  banyak  CL  yang  terbentuk    tanpa  keberadaan folikel  yang  belum  terovulasi  (folikel  domonan)    pada permukaan ovarium.  Keberadaan CL ini akan menghasilkan progesteron  dalam  konsentrasi  tinggi  untuk  mendukung kehidupan embrio.  Kadar progesteron yang dominan dengan eksistensi CL fungsional akan menjamin kehidupan embrio dan  mengurangi  kematian  embrio  dini  (Rocha,  2005). Hal  ini  terjadi  pada  perlakuan  superovulasi  berdasarkan pengamatan  birahi  alami  (P1)  dimana  persentase  embrio layak transfernya lebih tinggi (38,03%), dibanding perlakuan superovulasi  berdasarkan    CIDR  (P2)  yang  mempunyai persentase embrio layak transfer sedikit lebih rendah (34,33 %).  Hal  ini disebabkan karena fungsi CL yang rendah pada perlakuan  superovulasi  menggunakan  CIDR  (P2)  dalam mensintesa  dan  sekresi  progesteron.  Kadar  progesteron yang  rendah  dapat  menjadi  penyebab  kegagalan  dalam perkembangan embrio dan ketidakmampuan uterus dalam mendukung  perkembangan  embrio  dini  (Amaridis et  al ., 2006). Perbedaan  jumlah    embrio  pada  berbagai  kualitas kemungkinan  disebabkan  oleh  tingkat  kematangan  oosit yang  tidak  seragam  pada  saat  sapi  donor  disuperovulasi. Hal ini sesuai dengan pendapat Merton et al . (2003) yang menyatakan  bahwa  melalui  superovulasi  akan  diperoleh banyak oosit dengan berbagai tingkat kematangan. Kondisi tersebut menyebabkan kualitas embrio yang dihasilkan akan beragam  (A,  B,  C,  DG,  UF).  Perkembangan  folikel  yang dipercepat  dengan  perlakuan  superovulasi  menyebabkan oosit  kurang  bisa  berdiferensiasi  sehingga  mengurangi kemempuan  oosit  untuk  berkembang  menjadi  sel  telur yang  matang.  Keragaman  tingkat  kematangan  oosit  pada perlakuan superovulasi menyebabkan kualitas embrio yang dihasilkan oleh sapi donor kurang optimal jika dibandingkan dengan  kondisi  normal.  Jika  sel  telur  belum  matang
saat  fertilisasi  terjadi  menyebabkan  embrio  tidak  akan terbentuk  ( unfertilized )  atau  embrio  mengalami  kematian ( degeneratif ). Hal ini dapat dilihat dari tingginya persentase embrio yang tidak layak transfer (DG, UF).
Manajemen pemberian pakan sangat berperan penting dalam produksi embrio karena, sapi dengan asupan energi berkurang memiliki folikel dominan lebih kecil dan siklus lebih dari tiga gelombang, dibandingkan dengan sapi  pada asupan pakan yang lebih tinggi, sehingga  pengaruh nutrisi terhadap efisiensi reproduksi adalah pada tingkat produksi embrio (Boland et al ., 2001). Menurut Siddiqui et al , (2002) bahwa  sapi  dengan  BCS  2,5-3  cenderung  merespon  lebih baik terhadap perlakuan superovulasi dibandingkan dengan BCS 4-5, karena sapi dengan BCS tinggi kemungkinan besar mendapatkan kista ovari yang menyebabkan gagal ovulasi.
Hal lain yang mempengaruhi persentase embrio layak transfer adalah adanya kegagalan ovulasi dari folikel yang telah matang sehingga menimbulkan tingginya kadar estrogen dalam  darah.    Kegagalan  ovulasi  dapat  disebabkan  oleh kekurangan  konsentrasi  hormon  LH  yang  mengakibatkan tidak terjadinya proses ovulasi.  Keberadaan estrogen yang cukup  tinggi  dari  folikel de  Graaf yang  tidak  mengalami ovulasi  pada  masa  perkembangan  embrio  akan  memberi efek menurunkan kualitas embrio.  Jainudeen et al . (2000) menyatakan  bahwa  variasi  tahap  perkembangan  embrio dalam satu lingkungan yang sama dapat mempengaruhi daya hidup embrio.  Lebih lanjut dinyatakan embrio yang mati (degeneratif)  atau  oosit  yang  tidak  terbuahi  (unfertilized) dapat menyebabkan penurunan kualitas embrio lain.
Perbedaan  hasil  tersebut  mungkin  juga  disebabkan faktor  genetik  (sensitivitas  respon  variasi  antara  individu terhadap pemberian gonadotropin), karakteristik fisiologis (umur,  kondisi  ovarium,  dan  populasi  folikel  pada  saat superovulasi), nutrisi, kesehatan organ reproduksi (ovarium, uterus dan oviduct) dan jenis FSH komersial yang digunakan (Silva et al ., 2009).

## KESIMPULAN
Penggunaan  CIDR  dalam  sinkronisasi  estrus  dan superovulasi memberikan Response Rate, Recovery Rate, lebih  tinggi    dan  efektifitas  waktu  dan  manajemen  yang lebih baik bila  dibandingkan dengan perlakuan superovulasi berdasarkan berahi alami, tetapi tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah Corpus Luteum (CL) , jumlah oosit  terkoleksi,  jumlah  embrio  dan  jumlah  embrio  layak transfer.

## DAFTAR PUSTAKA
Adriani,  Depison,  B.  Rosadi,  Y.  Supriondo  &  Isroli. 2007. Pengaruh   superovulasi terhadap jumlah corpus luteum. J.Indon. Trop.Anim. Agric. 3:32.
Tabel 6. Pengaruh Perlakuan terhadap Jumlah Embrio Layak Transfer dan Embrio Tidak Layak  Transfer
Perlakuan Embrio layak transfer Embrio Tidak Layak Transfer (DG dan UF) (A, B dan C) Jumlah Rataan % DG UF Rataan % Berahi alami (P1) 27 2,7±5,81 38,03 29 15 4,4±4,74 61,97 Implan CIDR (P2) 23 2,3±3,30 34,33 23 21 4,4±3,69 65,67
Amaridis, G.S., T. Tsiligianni & E. Vainas. 2006. Follicle ablation improves the ovarian response and the number of collected embryos in superovulated cow during the early  stages  lactation.  Reprod.  Dom.  Anim.  5:402- 407.
Boland.  M.  P.,  P.  Lonergan  &  D.  O’Callaghan. 2001. Effect  of  nutrition  on  endocrine  parameters,  ovarian physiology  and  oocyte  and  embryo  development. Theriogenology 55 : 1323–1340 Bó,  G.  A.,  P.S.  Baruselli,  D.  Moreno,  L.  Cutaia,  M. Caccia, R. Trıbulo, H. E. Tribulo & R. J. Mapletoft . 2002. The control of follicular wave development for self-appointed  embryo  transfer  programs  in  cattle. Theriogenology 57:53–72.
Gaspersz,  V. 1991.  Teknik  Analisis  dalam  Penelitian Percobaan. Tarsito. Bandung.
Gordon.  I. 2005.  Reprtoductive  Technologies  in  Farm Animals. CABI Publishing, USA. Hafez, B., Hafez &  E.S.E. 2000.  Reproduction in Farm Animal.  7th    ed.  Lippincott  Williams  &  Wilkins, Philadelpia. USA.
Jainudeen,  M.R.,  H.  Wahid  &  E.S.E.  Hafez .  2000. Ovulation  induction,  embrio  productian  and  transfer. In :  Hafez, E.S.E an B. Hafez (Ed.). Reproduction in Farm Animal. 7th ed. Lippincott Williams and Wilkins. USA.
Mapletoft,  R.J.,  M.F.  Martinez,  M.G.  Colazo  &  J.P. Kastelic. 2003.  The  use  of  controlled  internal drug  release  devices  for  the  regulation  of  bovine reproduction. J. Anim. Sci. 81:28-36.
Merton JS, APW. de Ros., E. Mullart., L. de Ruigh., L. Kaal.,  PLAM.  Vos  &  S.J  Dieleman. 2003.  Factors affecting  oocyte  quality  and  quantity  in  commercial application  of  embryo    technologies  in  the  cattle breeding industry. Theriogenology 59 :   651-674.
Pineda,  M.H. 2003.  Female  reproductive  system.  In  : Pineda,  M.H  and  M.P.  Dooley.  (Ed.).  McDonald’s Veterinary  Endocrinology  and  Reproduction.  5th ed.  Blackwell  Pub.  Co.,  Iowa  State,  USA.  283-340. Rocha HER. 2005. Analysis of record of embryo production in red brahman cows. Thesis. Texas A&M University. Setiadi, P.L. I. Supriatna & A. Boediono. 2005. Follicel development  after  gonadotrophin  treatment  in  garut sheep for laparoscopic ovum pick up. J. Agri Rur Dev in the tropic and subtropics 83: 153-158.
Siddiqui,  M.A.,  M.  Shamsuddin,  M.  M.  Bhuiyan,  A. Akbar    &    K.  M.  Kamaruddin, 2002.  Effect  of feeding and body condition score on multiple ovulation and embryo production in zebu cows. In Reproduction in Domestic Animals, vol. 37, no.1, p. 37-41.
Silva,  J.C.C.,  R.H.  Alvarez,  C.A.  Zanenga  &  G.T. Pereira. 2009.  Factors  affecting  embryo  production in superovulated Nelore catlle. Anim. Reprod. 6: 440- 445.
Valencia, J., M.  Flores, A.S. Aldana & E. Anta. 2004. Effect of PGF2 administration before uterine flushing on  embryo  recovery  rate  in  superovulated  cows  and heifers. Revista Cientifica. 14:74-78.