## AKTIVITAS EKSTRAK DAN FRAKSI DAUN MAHONI ( Swietenia mahagoni (L.) Jacq PADA SEL HELA

## Diah Komala Sari
Akademi Kebidanan Persada, Palembang, Indonesia d_qsari@yahoo.com
Diterima: 26 Juni 2018           Direvisi: 1 Juli 2018          Disetujui:  2 Agustus 2018

## ABSTRAK
Di  antara  jenis  kanker  pada  wanita, Kanker  serviks  atau  leher  rahim  merupakan  penyebab kematian  yang  terbesar  pada  wanita  di  negara-negara  berkembang.  Tanaman  herbal  dijadikan penelitian  sangat  berkembang  luas  untuk  menjadi  alternatif  terapi  yang  dianggap  lebih  efektif dengan efek samping yang minimal. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas ekstrak dan fraksi ( Swietenia  mahagoni (L.) Jacq.) pada sel hela. Penelitian ini menggunakan sel HeLa sebagai objek dan menggunakan beberapa konsentrasi dari ekstrak dan fraksi daun mahoni. Konsentrasi  dari  ekstrak  etanol  dan  fraksi  etil  asetat  memakai  kadar  konsentrasi  320µg/ml;160 µg/ml;80  µg/ml;40  µg/ml;20  µg/ml,  sedangkan  untuk  fraksi  etanol  air  dan  fraksi  n-heksan memakai  kadar  konsentrasi  160  µg/ml;80  µg/ml;40  µg/ml;20  µg/ml,  untuk  cisplatin  memakai kadar dosis 200;100;50;25. Hasil yang didapatkan nilai IC 50 ekstrak ethanol sebesar 236,33 µg/ml; fraksi n-heksan 130,05 µg/ml; fraksi etil asetat 63,5 µg/ml; fraksi ethanol air 164 µg/ml. Sehingga dari hasil IC 50 diketahui  fraksi aktif dari daun  mahoni adalah  fraksi  etil asetat. Setelah penelitian disimpulkan bahwa ekstrak dan fraksi daun mahoni memiliki aktivitas sitotoksik.
Kata kunci : Daun mahoni, sel hela

## ABSTRACT
Among the types of cancer in  woman, cervical cancer is the leading cause of death in  woman in developing countries. Herbal plants made a very wide ranging research to become an alternative therapy that is considered more effective with minimal side effects. The objective of this study was to  assess  the  activity  of  the  extract  and  fraction  of  mahogany  leaves  (Swietenia  mahogany  (L). Jacq) in HeLa cell. This research used HeLa cell as an object and used various concentration of extract  and  fraction.  Concentrations  of  ethanol  extract  and  ethyl  acetate  fraction  using concentrations 320µg/ml;160  µg/ml;80  µg/ml;40  µg/ml;20  µg/ml,  while  for  water  methanol fraction and N-hexan fraction using concentration of 160 µg/ml;80 µg/ml;40 µg/ml;20 µg/ml, and cisplatin used a dose 200;100;50;25. The results showed  IC 50 ethanol extract  236,33 µg/ml;  n- heksan fraction 130,05 µg/ml; etil asetat fraction 63,5 µg/ml; water methanol fraction 164 µg/ml. Based on the values IC 50 , the active fraction of  mahogany leaves is  ethyl acetate fraction.    After testing can be concluded that the extract and fraction of mahogany leaves have cytotoxic activity.
Keywords: Mahogany leaves, Hela cell

## PENDAHULUAN
Penyakit  yang  terbanyak  dan penyebab  kematian  di  Dunia  nomor dua  adalah  kanker.  Berdasarkan  data yang ada  dari keseluruhan wanita di Dunia  yang  berusia  15  tahun  atau lebih  pada  setiap  tahunnya  ada 493.243 wanita didiagnosa menderita kanker.  Sementara  itu,  di  Indonesia setiap  tahunnya  didiagnosa  15.000 penderita  kanker  yang  baru  dan 2.500  diantaranya  meninggal  dunia. Banyaknya  kasus  kematian  akibat penyakit kanker menyebabkan dikembangkannya  obat  yang  dapat menghambat pertumbuhan dan penyebaran sel kanker dalam tubuh. 1
Di  antara  jenis  kanker  pada  wanita, Kanker  serviks  atau  leher  rahim merupakan  penyebab  kematian  yang terbesar  pada  wanita  di  negara- negara  berkembang.  Secara  Global terdapat  600.000  kasus  baru  dan 300.000  kematian  setiap  tahunnya, yang  hampir  80%  terjadi  di  Negara berkembang.    bahkan  tiap  tahunnya sekitar seperempat juta wanita meninggal  karena  penyakit  ini . 2
Jumlah  pengidap  kanker  serviks  di Indonesia  diperkirakan  antara  25-40 orang penderita setiap 100.000 orang per tahun. 3 Kanker serviks merupakan tumor ganas primer yang berasal dari sel  skuamosa.  Penyebab  utama kanker  serviks  adalah  infeksi  virus Human  Papiloma  Virus (HPV) beresiko  tinggi  seperti  HPV16  dan HPV18  yang  memiliki  onkogen  E6 dan  E7.  Protein  E6  dan  E7  terbukti menyebabkan  sifat  immortal  pada kultur  primer  keratinosit  manusia, namun  sel  yang  immortal  ini  tidak bersifat  tumorigenik  hingga  suatu proses  genetik  terjadi.  Jadi,  viral
onkogen tersebut tidak secara langsung  menginduksi  pembentukan tumor, tetapi menginduksi serangkaian proses yang pada akhirnya  dapat  menyebabkan  sifat kanker. 4
Pengembangan obat antikanker sekarang  ini  menjadi  upaya  strategis untuk menggantikan pengobatan kanker  serviks  atau  menjadi  usaha dalam meningkatkan sensitivitas modalitas  terapi  yang  sudah  ada sebelumnya. Tanaman obat dijadikan penelitian  sangat  berkembang  luas untuk  dijadikan    alternatif  terapi yang  dianggap  lebih  efektif  dengan efek samping yang minimal. 9 Sehingga sekarang ini banyak penelitian  yang  dilakukan  untuk mengetahui potensi dari suatu tanaman  apakah  dapat  dijadikan sebagai obat, khususnya obat kanker.
Tanaman  mahoni  ( Swietenia mahagoni )  merupakan  salah  satu jenis  tanaman  obat  dan  banyak ditemukan  di  Sumatera  Selatan. Buah dan daun mahoni adalah bagian dari  tanaman  mahoni  yang  paling sering digunakan untuk pengobatan. 10 Kelompok etnis Amazonian Bolivian telah menggunakan  buah  mahoni  sebagai antibakteri,  obat leishmaniasis dan obat  aborsi,  sedangkan  di  Indonesia tanaman  mahoni  digunakan  untuk menurunkan  tekanan  darah  tinggi (hipertensi), kencing manis (diabetes mellitus), kurang  nafsu  makan, demam,  masuk  angin,  dan  rematik 11 dan  pengobatan  kanker 12 .  Kulit mahoni juga mengandung triterpenoid,  limonoid 13 ,  flavonoid, saponin dan terpenoid 14 , serta alkaloid dan tannin 15 .
Kandungan
senyawa flavonoid  dalam  tanaman  mahoni
mampu  mengkelat  logam  Mg 2+ dan
Zn 2+ sehingga  kedua  ion  logam tersebut  tidak  akan  menempel  dan mengaktifasi enzim DNA polymerase. Tidak aktifnya Berdasarkan  uraian  tersebut
diatas,  maka  peneliti  melakukan pengujian  ekstrak    dan  fraksi  daun mahoni ( Swietenia  mahagoni (L.) Jacq.) pada sel hela.

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat: blender, tabung elemeyer,
corong, kertas saring, rotary evaporator, gelas  ukur,  labu  pisah
1000 mL,  penangas  air,  cawan  petri, tiang  penyangga,  botol,  timbangan analitik,  plat  silica. Inkubator  CO 2 5%  dengan  suhu  37°c,  mikropipet, blue tip, yellow tip, timbangan analitik, conical, micro tube, mikroskop inverted, vortex,  Laminar  air  flow (LAF), ELISA reader, heamocitometer, counter hitung,
tissue culture flask (mikroplate) 96
sumuran,  ELISA reader dengan panjang gelombang 595 nM,
sentrifuge, kamera,  m ikropipet  20µl,
200 µl, 1000 µl, tabung reaksi kecil, rak tabung.
Bahan: simplisia  dari daun mahoni  ( Swietenia  mahagoni (L.) Jacq.) yang  diperoleh  dari  Kampus Biologi UNSRI (Universitas Sriwijaya) Inderalaya, pelarut etanol, n-heksan,  etil  asetat  dan  etanol  air,
sel  HeLa  yang  merupakan  koleksi dari  laboratorium  parasitologi  UGM,
media kultur Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1641 yang mengandung Fetal  Bouvin  Serum (FBS) 10%,  penisilin-streptomisin
1%, dan fungizone 0,5%. Pemanenan sel dari tissue culture disk menggunakan tripsin-EDTA ( Ethylene
diaminetetraacetic  acid )  0,25% dan DMEM/RPMI (Media Kultur) , reagen 3-(4,5-dimetilthiazol-2-il)- 2,5-difeniltetra zolium bromida (MTT).

## Prosedur Kerja
Penentuan Golongan Senyawa Golongan senyawa yang terdapat  dalam  fraksi  aktif  akan ditentukan dengan uji KLT. Prosedur uji KLT adalah sebagai berikut fraksi aktif dengan konsentrasi 1% ditotolkan  pada  plat  silika  gel  F 254 ukuran  lem  x  7cm,  kemudian dikembangkan  dengan  eluen/  fase gerak  yang  sesuai,  biarkan  hingga eluen  sampai  diujung  plat  silika  gel F 2S4 lalu  dikeluarkan  dan  biarkan mengering.  Plat  silika  gel  F 254 disemprotkan  dengan  larutan  H 2 SO 4 1%  lalu  diletakkan  diatas    hot  plate. Diamati bercak warna yang muncul.
Preparasi dan Panen Sel
Sel diambil dari tangki nitrogen  cair,  kemudian  dicairkan dalam  penangas  air  37°c.  Setelah  itu disemprot  dengan  etanol  70%,  sel dalam  cryotube  dimasukkan  ke dalam  LAF  dan  dipindahkan  dengan menggunakan  mikropipet  ke  dalam tabung  conical  yang  berisi  suspensi sel  disentrifugasi  pada  600  rpm selama  5  menit,  lalu  supernatan dibuang.  Selanjutnya  ditambahkan media  yang  baru  ke  dalam  konikel yang  berisi  pelet  dan  disuspensikan hingga homogen. Suspensi sel ditumbuhkan  dalam  tissue  culture dish yang diinkubasi dalam inkubator CO 2 5%  dengan  suhu  37°C.  Kondisi sel  selanjutnya  diamati  di  bawah mikroskop kemudian diinkubasi pada inkubator  CO 2 5%.  Setelah  24  jam dilakukan  penggantian  media  kultur. Sel  ditumbuhkan  sampai  konfulen dan jumlahnya cukup untuk
perlakuan. Setelah konfulen dilakukan  panen  sel  dengan  cara membuang  media  kultur  lalu  dicuci dengan  PBS  2x  untuk  melepas  sel dari  dasar  culture  dish  ditambahkan tripsin-EDTA 0,25% kemudian diinkubasi  selama  3  menit  dalam inkubator C0 2 . Tripsin-EDTA diinaktivasi  dengan  menambahkan media  kultur  kemudian  suspensi  sel diresuspensi lalu suspensi sel dipindahkan  pada  conical  tube. Jumlah sel dihitung dengan menggunakan  hemocytometer  dan cell counter. Cara Perhitungan sel HeLa yaitu: Pembuatan  Larutan  Stok  Bahan  Uji Ekstrak dan Fraksi Sebelum dilakukan uji sitotoksisitas,  terlebih  dahulu  dibuat larutan sampel dengan cara mencampur ekstrak etanol, fraksi etil asetat,  fraksi  n-heksan  dan  fraksi etanol  air  daun  mahoni  (Swietenia mahagoni  (L.)  Jacq.)  dengan  media Dulbecco’s  modification  of  eangle medium  (DMEM).  Larutan  stok dibuat  dengan  cara  menimbang ekstrak  etanol,  fraksi  etil  asetat, fraksi  n-heksan  dan  fraksi  etanol  air dari daun mahoni (Swietenia mahagoni  (L.)  Jacq.)  kemudian ditambah DMSO atau tween sebanyak  30  µl   dan  ditambahkan dengan  media  DMEM  hingga  1000 µl,  sehingga  diperoleh  konsentrasi tertentu.  Dari  konsentrasi  larutan tersebut  kemudian  dibuat  seri  kadar dan  larutan  dalam  berbagai  kadar tersebut  dapat  diujikan  pada  sel HeLa.  Pembuatan  larutan  uji  ini
dilakukan  di  dalam  Laminar  Air Flow Cabinet secara aseptis 20 .
Uji Sitotoksisitas Uji aktivitas sitotoksik dipakai dalam menentukan parameter nilai  IC 50 .  Nilai  IC 50 menunjukkan nilai  konsentrasi  yang  menghasilkan hambatan  proliferasi  sel  50%  dan menunjukkan potensi ketoksikan suatu senyawa terhadap sel. Nilai ini adalah panduan untuk melakukan uji pengamatan  kinetika  sel.  Nilai  IC 50 yang  menunjukkan  potensi  suatu senyawa  sebagai  sitostatik.  Semakin besar  harga  IC 50 maka  senyawa tersebut semakin tidak toksik. Metode  pada  uji  aktivitas sitotoksik di penelitian ini menggunakan  metode  MTT assay.
Keuntungan dari metode MTT assay adalah  waktu  yang  relatif  singkat, lebih objektif, lebih praktis, alat yang dipakai safety karena  tidak  ada penggunaan  unsur  radioaktif,  serta hasilnya langsung menunjukkan relasi  total  sel  aktif  dengan  nilai absorban  sehingga  bisa  menghitung nilai IC 50 nya.
Data  dari  uji  sitotoksisitas digunakan  untuk  menghitung  kadar yang menyebabkan
hambatan proliferasi  sel  50%  (IC 50 )  dengan analisa  probit.  Persentase  kematian sel    setelah  perlakuan  pada  masing- masing kadar dihitung dengan rumus:
Tahapan  selanjutnya  Buat  grafik konsentrasi  vs  %  kematian  sel dengan  memakai  chart  tipe  scatter dilanjutkan  subtrype  compare  pairs of  values  di  excel,  dilanjutkan dengan menampilkan persamaan
regresi  linier  dari  grafik  tersebut dengan  menggunakan  add  trendline- regresi linier, masukkan y=50% pada persamaan  regresi  linier  dan  cari  x nya sehingga diperoleh nilai IC 50.

## Analisis Data
Pada  uji  sitotoksik,  persentase kematian  sel    digunakan  untuk menentukan  nilai  IC 50 merupakan konsentrasi yang dapat menyebabkan penghambatan    pertumbuhan  sel sebanyak  50%  dari  populasi  sel.
Dalam menentukan nilai IC 50
menggunakan  program  excel  2007.
Data viabilitas sel ditampilkan dalam bentuk grafik garis.

## HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL
Ekstraksi  dan  Fraksinasi  Daun Mahoni  ( Swietenia  Mahagoni (L). Jacq) Dalam    penelitian  ini  dari  250 gram simplisia daun mahoni dihasilkan  sebanyak  38  gram  atau 15,2% dari jumlah simplisia. Kandungan  ekstrak  dalam  simplisia berbeda-beda tergantung pada jumlah senyawa organik didalamnya.
Hasil  penelitian  ini  mirip  dengan hasil  ekstrak  kulit  batang  mahoni yaitu  37  gram  (14,8%)  dari  jumlah simplisia.
Sebanyak  13  gram  ekstrak kental daun mahoni dipisahkan untuk dilakukan  uji  aktivitas  antikanker menggunakan    sel  HeLa,  sisanya sebesar  25  gram  dilanjutkan  untuk proses  fraksinasi.  Ekstrak  kental daun  mahoni  difraksinasi  dengan metode fraksi cair-cair (FCC) menggunakan  3  jenis  pelarut  dengan tingkat  kepolaran  yang  berbeda, yaitu n-heksan (non polar), etil asetat (semi  polar)  dan  metanol  air  (polar), dari  fraksinasi  tersebut  didapatkan
berat masing-masing fraksinasi sebagai berikut: Tabel  1.    Hasil  Fraksinasi  daun mahoni  ( Swietenia  Mahagoni (L) Jacq) Pelarut Berat (gram) Persentase (%) Fraksi etil asetat Fraksi n- heksan Fraksi metanol air 10,5 1,8 12,7 42 7,2 50,8 Total 25 100
Dari Tabel 1 Hasil fraksinasi ekstrak daun  mahoni  sebanyak  25  gram, pada  pelarut  urutan  berdasarkan beratnya  adalah  fraksi  metanol  air memiliki berat lebih besar yaitu 12,7 gram  (50,8%)  dibandingkan  berat fraksi  etil  asetat  dan  frak  n-heksan. Perbedaan  berat  fraksi  yang  berbeda diperoleh karena disebabkan kemampuan dari pelaru-pelarut dalam  memisahkan  senyawa  dalam fraksi berdasarkan kepolarannya. Hal ini  disebabkan  pelarut  methanol  air mempunyai
kemampuan
memisahkan  senyawa  berdasarkan kepolarannya.

## Penentuan Golongan Senyawa
Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT) digunakan dalam menentukan golongan  senyawa  yang  ada  di ekstrak  dan  fraksi  daun  mahoni dengan  cara  mengamati  bercak warna  yang  muncul  di  plat  silica  gel F 254 .
Dari hasil bercak warna yang muncul setelah  uji  kromatografi  lapis  tipis (KLT), maka disimpulkan pada tabel 2 di bawah ini:
Tabel  2.  Hasil  Uji  KLT  Ekstrak  dan Fraksi Daun Mahoni
Dari  Hasil  dari  uji  KLT
ekstrak  dan  fraksi  daun  mahoni memperlihatkan
bahwa ekstrak
ethanol mengandung senyawa terpenoid,  flavonoid,  tanin  dilihat dari bercak warna yang muncul yaitu Ungu,  kuning,  coklat..  Fraksi  n- heksan  mengandung  terpenoid  dan flavonoid  terlihat  dari  warna  Ungu, kuning.  Untuk  fraksi  etil  asetat ditandai  dengan  warna  Kuning  yaitu Flavonoid  sedangkan  untuk  fraksi methanol  air  mengandung  senyawa tanin dilihat dari warna coklatnya.

## Uji Sitotoksik
Hasil  untuk  uji  sitotoksitas dari  ekstrak  dan  fraksi  daun  mahoni dapat dilihat di tabel 3. di bawah ini:
Tabel 3. Hasil Uji Sitotoksik Ekstrak dan Fraksi Daun Mahoni
Dilihat dari Gambar 2. di atas, diketahui  persamaan  garis  linier  di setiap  perlakuan  dengan  memakai  5 dan  4  konsentrasi.  Nilai  R  yang dihasilkan
dapat memenuhi
persyaratan  untuk  dipakai  dalam mencari nilai IC 50 .
Dari Tabel 3. hasil uji sitotoksisitas nilai IC 50 yang tertinggi terdapat  pada  ekstrak  etanol  yaitu 236,19 µg/mL. Hasil memperlihatkan bahwa ekstrak etanol daun mahoni memiliki aktivitas  paling  rendah  dimana  sel HeLa  dapat  dihambat  50%  pada kadar  konsentrasi  236,19  µg/mL. Sedangkan  untuk  hasil  uji  sitotoksik terendah  terdapat  pada  fraksi  etil asetat  sebesar  63,01  µg/ml  diartikan fraksi etil asetat mempunyai aktivitas aktif  sebagai  bahan  antikanker  sel HeLa.  Fraksi  etil  asetat  juga  sangat berpotensi  untuk  diteliti  lebih  lanjut sampai ke tahap pemurnian. Sedangkan  untuk  fraksi  n-heksan nilai  uji  sitotoksiknya  130  µg/mL dan  fraksi  methanol  air  yaitu  164,05 µg/mL  yang  berarti  mempunyai aktivitas  antikanker  cukup  aktif. Diduga  berdasarkan  uji  KLT  fraksi
N-heksan mengandung senyawa terpenoid dan tanin, sedangkan untuk fraksi  metanol  air  mengandung senyawa tanin. Penelitian lain menyatakan senyawa tanin berpotensial dalam menghambat invasi dari HT 1080 sel fibrosarkoma.  Sehingga  disimpulkan bahwa  tanin  dapat  menghambat  sel tumor  yang  invasif.  Mekanismenya dengan  cara  menghambat  langsung aktivitas  MMP-2/-9  atau  memblok jalur  ERK-MAP kinase. Sedangkan terpenoid  merupakan  senyawa  kimia yang  memiliki  aktivitas  antikanker dan  antioksidan 18 .  Sedangkan  yang lain  mengatakan  Terpenoid  berperan penting  dalam  tubuh  manusia  untuk menetralisir  radikal  bebas  yang mengakibatkan  penyakit  degeneratif termasuk kanker 22 .

## KESIMPULAN
Daun  mahoni  memiliki  potensi sitotoksik  terhadap  sel  HeLa  yang dinyatakan dengan Nilai IC 50 ekstrak
etanol  daun  mahoni ( Swietenia mahagoni (L.)  Jacq.)  terhadap  sel HeLa adalah 236.33 µg/ml, fraksi etil asetat  sebesar    63.49  µg/ml,  Fraksi Methanol  air  sebesar  164.05  µg/ml, Fraksi  N-Heksan  130.05  µg/ml. Fraksi  yang  mempunyai  aktivitas yang aktif adalah fraksi etil asetat.
Fraksi aktif ekstrak etanol daun mahoni  adalah  fraksi  etil  asetat  dan golongan  senyawa  yang  terdapat pada  fraksi  aktif  etil  asetat  adalah flavonoid.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  ingin  menyampaikan ucapan terima kasih kepada: Direktur Akademi Kebidanan Persada Palembang,  Prof.  Dr.  Supargiyono DTM&H., SU. Ph.D. SpPark sebagai Supervisor Laboratorium bagian
Parasitologi UGM.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Castellsaque,  X.,  De  Sanjose,  S.,
Aquado,  T.,  Louis,  K.S.,  2009. HPV and  cervical  cancer  in  the  world. WHO Information Centre on HPV and Cervical  Cancer  (HPV  Information Centre). p: C1-C230
2. Garcia, Agustin., 2006. Cervical cancer. Diakses dari http://www.medicine.com 3. Boer, A, de, M., A.W. Peter, L., Aziz,
M. F., Siregar, B., Cornain, S., Vrede, M.  A.,  S.  Jordanova,  E.,  Uljee,  S.  K. and  Fleuren,  G.  J.  2004. Human Papiloma Virus type 16 E6, E7 and L1 variant in cervical cancer in Indonesia, Suriname, Netherland. Gynecology Oncol. p: 488-494.
4. Goodwin,  E.,  and  Dimaio,  D.  2000.
Repression  of  human  papillomavirus oncogenes in HeLa cervical carcinoma cells causes the orderly reactivation of dormant  tumor  suppressor  pathway. Biochemistry. P: 12513-12518 5. Prayitno,  A.,  Ruben  D.,  Istar  Y.,  dan Ambar M. 2005. Ekspresi protein p53, Rb,  dan  c-myc  pada  kanker  serviks uteri dengan pengecatan immunohistokimis. Biodiversitas.  P: 157-159.
6. Kumar,  V.,  Ramzi  S.,  and  Stanley  L.
2003.  Robbins  Basic  Pathology.  7 th edition. Elsevier Inc.: New York
7. Borges, HL. Chao C., Xu Y., Linden R and  Wang  JYJ.  2004. Radiation- Induced  Apoptosis  ini  developing mouse  retina  ekhibits  dose  dependent requirement  for  ATM  phosporylation of p53. Cell Death and Differentiation. 8. Falah  S,  Suzuki  T,  Katayama  T.
Chemical  constituent  from  Swietenia macrophylla bark and their antioxidant activity . Pakistan Journal of Biological Sciences. 2013.11:2007-2013.
9. Agarwal,  A  and  Sekhon,  LH.,  2013. The  role  of  antioxidant  therapy  in  the treatment of male and women infertility. J Human Fertility 4. p: 217- 225
10. Mardisadora O., 2010. Identifikasi dan
Potensi  Antioksidan  Flavonoid  Kulit kayu  mahoni  (Swietenia  macrophylla king). Skripsi.  Institusi  Pertanian Bogor
11. Rasyad,  A.,  Mahendra,  P.,  Hamdani,
Y.  2012. Uji  Nefrotoksik  dari  ekstrak etanol Biji Mahoni (Swietenia
mahagoni  Jacq)  terhadap  tikus  putih jantan  Galur  Wistar. Jurnal  Penelitian
Sains Vol 15 No. 2 ©. Hal 79-82
12. Putri  NE.,  2004. Inhibisi  fraksi  aktif biji mahoni pada pertumbuhan Saccharomyces  cerevisiae  sebagai  uji antikanker . Jurnal ilmiah Institut Pertanian Bogor
13. Mooto  BS,  Ali  A,  Motilal  E, et  al. 1999. Limonoids from Swietenia macrophylla  and  S.  aubrevilleana. J Nat Prod 62:1514-1517. 14. Suhesti TS., Kurniawan DW., Nuryanti.  2007. Penjaringan  senyawa antikanker  pada  kulit  batang  kayu mahoni  (Swietenia  mahogany Jacq)
dan  uji  aktivitasnya  terhadap  larva udang  (Artemia  salina  Leach). Jurnal
Ilmiah Kesehatan Keperawatan 3: 155- 162. 15. Ningsih F. 2009. Kandungan Flavonoid  Ekstrak  Kulit  Kayu  Mahoni (Swietenia  macrophylla  king)  dan toksisitas  akutnya  terhadap  mencit.
Bogor:  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Institut  Pertanian
Bogor.
16. Astri,  Dhaniar.,  Sitha,  Arilah  ichsan.,
2011. Pemanfaatan Limbah Kulit Kayu Mahoni  sebagai  Antivirus  Human Papilloma  Virus  Pada  Pengobatan Kanker  serviks. Program  kreativitas mahasiswa. Institut Pertanian Bogor.
17. Setyawati,  Y.  2013. Sitotoksisitas  dan Apoptosis  Ekstrak  Daun  Jeruk  Purut (Citrus  hystrix  D.C.)  Terhadap  Sel HeLa  (Human  Cervical  Cancer  Cell Line). Jurnal
Fakultas
Biologi Universitas Gadjah Mada.
18. Tanimura  S,  Kodomoto  R,  Tanaka.,
2005. Suppression  of  tumor  cell invasiveness  by  Hydrolysable  tannins (plant Polyphenols) Via  The Inhibition
of Matrix
Metalloproteinase-2/-9 Activity. Electrophoresis.
19. Cancer  Chemoprevention  Research Center  (CCRC).,  2009. Sel  HeLa. Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta. http://www.ccrc.farmasi.ugm.ac.id . Diakses  pada  tanggal  06  Desember 2016. 20. Utami  D, Aktivitas  Sitotoksik  Isolat  5 Fraksi Etil Asetat Ekstrak Petroleumeter  Daun  Phaleria  Macro Carva  (Scheff)  boerl.  Pada  Turunan Kanker  Serviks  manusia  (Hela) .  Jurnal
Ilmiah Kefarmasian, 2011. 1(1):17-25.
21. Doyle, A.,Griffiths, J.B.Griffiths. 2000. Cell  and  Tissue  Culture  for Medical  Research .  John  Wiley  and
Sonc. New York.
22. Halliwell, B., J.M.C., Gitteridge. 1999.
Free Raducals in Biology and Medicine. Oxford  University  Press. Oxford.
23. World  Health  Organization: Cancer ; 2009.
24. Worsley SD, Jennings BA, Khalil KH.,
Mole  M.,  Girling  AC. Cyclin  D1 amplification and expression in human breast  carcinoma:  correlation  with histological  prognostic  markers  and oestrogen  receptor  expression. Clin
Mol Pathol 1996;49(1):M46-M50. 25. Surh Y-J. Antitumor promoting potential  of  selected  spice  ingredients with antioxidative and anti-
inflammatory  activities: a  short  review.
Food  Chem  Toxicol  2002;40(8):1091- 1097 26. Ren,  W.,  Qiao,  Z.,  Wang,  H.,  Zhu,  L. 2003. Flavonoids: Promising Anticancer Agents, Medicinal Research Review, p: 519-534.