## Biofarmasetikal Tropis
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Dari Tanaman P. Piloselloides Pada Citrus Microcarpa Dengan Menggunakan Metode DPPH 2,2- Diphenyl-1- Picryhydrazil
Alvina M. Dengen 1 , Wilmar Maarisit 1* , Joke L. Tombuku 2 , Ferdy A. Karauwan 2 , Randy Tampa’I 1 , Adolfina Sumangando 2 , Margaretha S. Ginting 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
*Penulis Korespondensi; wmaarisit@yahoo.com Diterima: 4 April 2024 ; Disetujui : 25 April 2024

## ABSTRAK
Pyrrosia piloselloides, juga dikenal sebagai tanaman skala naga, telah digunakan dalam pengobatan tradisional untuk daunnya, yang mungkin memiliki efek antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi  potensi  antioksidan  dari  ekstrak  etanol    daun  Pyrrosia  piloselloides  yang  sering dikenal  dengan  sisik  naga.  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  dari  P.  Tanaman  piloselloides diukur  menggunakan  uji  2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl  (DPPH)  pada  dosis  2,5ppm,  5ppm, 7,5ppm,  10ppm,  dan  12,5ppm.  Analisis  fitokimia  digunakan  untuk  mengidentifikasi  senyawa bioaktif yang ada di P. jaringan daun piloselloides. Metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid, tanin,  triterpenoid,  saponin,  dan  fenolik  diukur  dalam  P.  daun  piloselloides.  Nilai  IC 50 untuk aktivitas antioksidan ekstrak etanol mentah P. Piloselloides Dragon Scale Leaves adalah 3,30 ppm.
Kata kunci: Antioksidan; Radikal bebas; Pyrrosia piloselloides; Skrining Fitokimia, IC 50 .

## ABSTRACT
Pyrrosia  piloselloides,  also  known  as  dragon's  scale  plant,  has been  used  in  traditional  medicine for  its  leaves,  which  may  have  antioxidant  effects.  This  study  aims  to  evaluate  the  antioxidant potential of an ethanol extract of Pyrrosia piloselloides leaves, often known as dragon scales. The antioxidant  activity  of  ethanol  extracts  from  P.  piloselloides  plants  was  measured  using  the  2,2- Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay at doses of 2.5ppm, 5ppm, 7.5ppm, 10ppm, and 12.5ppm. Phytochemical  analysis  was  used  to  identify  the  bioactive  compounds  present  in  P.  piloselloides leaf  tissue.  Secondary  metabolites  such  as  alkaloids,  flavonoids,  tannins,  triterpenoids,  saponins, and phenolics were quantified in P. piloselloides leaves. The IC50 value for the antioxidant activity of the crude ethanol extract of P. piloselloides dragon scale leaves is 3.30 ppm.
Keywords: Antioxidants; free radicals; Pyrrosia piloselloides; Phytochemical Screening, IC 50 .

## 1. PENDAHULUAN
Istilah  "antioksidan"  dan  "radikal  bebas" sering  digunakan  dalam  komunitas  medis  dan ilmiah.  Antioksidan  telah  menjadi  kata  kunci dalam  beberapa  tahun  terakhir,  mendapatkan minat  dari  orang-orang  yang  sadar  kesehatan yang  mencoba  membuat  pilihan  yang  baik setiap hari. Antioksidan, seperti yang ditunjukkan  oleh 1 ,  memainkan  peran  penting dalam  mencegah  kerusakan  radikal  bebas  pada
sel.  Antioksidan  juga  dapat  melindungi  tubuh dari ROS dan menjaga oksidasi di teluk (ROS).
Berbagai  penyakit  dan  kondisi  yang dikenal  sebagai  penuaan  yang  dipercepat disebabkan  oleh  efek  kumulatif  radikal  bebas yang  masuk  ke  dalam  tubuh  dan  merusak  sel- sel sehat 2 . Selain mempercepat proses penuaan, radikal  bebas  telah  dikaitkan dengan kerusakan oksidatif  yang  mendasari  penyakit  termasuk aterosklerosis  dan  kanker 3 .  Tanaman  Skala Naga  herba  (Pyrrosia  piloselloides  (L.)  M.G.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2024, 7(1), 7-12
Price) adalah epifit yang tumbuh di kulit pohon. Berbeda dengan parasit, epifit dapat berkembang  hanya  pada  nutrisi  yang  mereka dapatkan  dari  tanaman  lain  dan  tanah,  yang bertindak  sebagai  penyangga.  Air  bisa  jatuh sebagai  hujan  atau  embun  atau  bahkan  ada dalam  bentuk  uap.  Debu  dan  sisa-sisa  batang yang  membusuk  dan  bagian  tanaman  lainnya adalah  sumber  nutrisi  mineral.  Bahkan  ketika epifit  tidak  benar-benar  memakan  tanaman yang  melekat  padanya,  mereka  mungkin akhirnya  bersaing  untuk  mendapatkan  cahaya. Ketika  akar  epifit  menyerang  ruang  di  sekitar dan  melalui  kulit  batang  pohon,  mereka  dapat membuang  ekosistem  internal  pohon.  Sisik naga  dapat  hidup  sebagai  epifit  pada  berbagai macam tanaman, termasuk teh, kopi, jambu biji, palem,  dan    jeruk  kasturi 4 .  Praktisi  pengobatan tradisional  di Kabupaten Minahasa,  khususnya di  Kecamatan  Kawangkoan,    telah  lama menggunakan daun sisik naga untuk menyembuhkan  berbagai  macam  penyakit, termasuk  asma,  alergi,  dan  bahkan  kanker. Daun  sisik  naga  pada  pohon  inang  jambu  biji telah  terbukti  mengandung  sterol/triterpenoid, fenol, flavonoid, dan tanin, di antara komponen kimia lainnya 4 .
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas, maka peneliti tertarik untuk melakukan penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengetahui aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  dari tanaman P. piloselloides pada Citrus microcarpa  dengan  menggunakan  metode DPPH 2,2- Diphenyl-1- Picryhydrazil.

## 2. METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah  glass  beker, measuring  flask,  filter  paper,  stirring  rod, glass jar, distillation flask 1000 ml, analytical scales, test  tube,  rotary  vaccum  evaporator  (IKA  RV 10  basic),  aluminium  foil,  split  funnel,  kapas, buret,  botol  botol,  gelas  ukur,  mikropipet, penggaris, gunting, pulpen, label, kuvet, corong kaca,  spatula,  erlenmeyer,  pipet  tetes,  cawan petri,  spektrofotometer  UV-Vis  (Shimadzu 1800),  kamera dan kalkulator.
Bahan-bahannya  antara  lain  ekstrak Pyrrosia  piloselloides,    air  steril,  alkohol  95%, aquadest,  etil  asetat,  FeCl 3 1%  dan  5%, magnesium klorida, asam klorida pekat, larutan kloroform, larutan dragendorff, larutan wagner,
larutan mayer,  larutan DPPH, etanol 70%, dan vitamin C.

## Pembuatan Ekstraksi
Sampel P. piloselloides dimaserasi dalam etanol  95%  dan  beratnya  1.000  gram.  Setelah direndam  selama  sehari  dalam  etanol  dan pencampuran  secara  berkala,  sampel  disaring melalui  kertas  saring  tiga  kali.  Setelah penyaringan,  itu  akan  menghasilkan  filtrat pertama,  kedua,  dan  ketiga,  yang  semuanya akan  mengalami  penguapan  vakum  putar sampai ekstrak pekat diperoleh.

## Analisis data
Pengujian  antioksidan  diukur  dengan mengamati  pergeseran  warna  setiap  sampel setelah inkubasi DPPH menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Sampel ekstrak akan berubah  dari  ungu  tua  menjadi  kuning cemerlang jika semua elektron DPPH berpasangan  dengan  elektron  dalam  sampel. Radikal  bebas  yang  dibuat  ketika  molekul DPPH  bergabung  dengan  atom  hidrogen  dan kemudian  dilepaskan  oleh  molekul  kimia sampel adalah apa yang menyebabkan pergeseran  warna  ungu.  Spektrofotometer  UV- Vis  kemudian  digunakan  untuk  mengukur absorbansi larutan pada panjang gelombang 517 nm.  Persamaan  regresi  linier  dalam  Microsoft Excel  digunakan  untuk  menganalisis  data antioksidan  dan  menemukan  korelasi  antara perubahan konsentrasi dan persen penghambatan.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  menyimpulkan  bahwa  sampel yang digunakan terdiri dari daun sisik naga dari Desa  Kinali,  Kawangkoan.  Akhirnya,  sampel dimaserasi  dalam  pelarut  etanol  96  persen sampai  benar-benar  terendam,  setelah  itu dibersihkan  dengan  air  yang  sangat  bersih, ditimbang,  dan  disajikan  dalam  potongan- potongan  kecil  (total  1.000  gram) 5,6 .  Setelah tiga  hari  melakukan  ini  sekali  sehari,  kertas saring digunakan untuk menghilangkan kotoran.  Setelah  disaring,  menghasilkan  filtrat pertama, kedua, dan ketiga. Setelah menguapkan  filtrat  pada  suhu  400  derajat Celcius,  kami  mendapatkan  ekstrak  tingkat penelitian 14,34 gram.
Skrining  fitokimia  ekstrak  dilakukan dengan  mereaksikan  sampel  dengan  larutan reagen  spesifik  untuk  mengukur  konsentrasi

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2024, 7(1), 7-12
metabolit  sekunder  dalam  uji  tabung  reaksi. Hasil dari tes fitokimia tercantum pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Kasar Daun Sisik Naga P. piloselloides
Golongan Senyawa (1) Pereaksi (2) Hasil (3) Perubahan Warna (4) Alkaloid Kloroform dan H2SO4 pekat Dragendorff + + Terbentuk dua lapisan Terbentuk endapan warna jingga Wagner + Tenbentuk endapan cokelat merah Mayer + Terbentuk endapan putih Flavonoid HCl pekat dan Mg + Terbentuk warna jingga Tanin Etanol dan FeC + Terbentuk warna hitam dan hijau Saponin Aquades + Terbentuk gelembung/buih Steroid Etil asetat dan H2SO4 pekat - Tidak terbentuk warna Triterpenoid Etil asetat dan H2SO4 pekat + Menghasilkan warna merah Fenolik FeC 5% dan H2SO4 pekat + Terbentuk warna hitam
Keterangan  :  Tanda  (+)  menunjukkan  adanya  senyawa  yang  diuji,  sementara  tanda  (-) menunjukkan  senyawa  yang  diuji  tidak  ada  pada  ekstrak  daun  sisik  naga P. Piloselloides
Kesimpulan dari kelas kimia berdasarkan data  dari  ekstrak  daun  sisik  naga  Alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin,  triterpenoid,  dan fenolik  adalah  contoh  metabolit  sekunder  yang dapat ditemukan pada P. piloselloides. Alkaloid,  seperti  yang  didefinisikan  oleh penelitian  sebelumnya 7 ,  tidak  berwarna  jika mereka  tidak  memiliki  struktur  aromatik  dan mengandung  satu  atau  lebih  atom  nitrogen. Keluarga  metabolit  sekunder  yang  dikenal sebagai  alkaloid  adalah  yang  paling  banyak pada  tanaman.  Cabang,  daun,  biji,  dan  kulit kayu  hanyalah  sebagian  bagian  tanaman  yang mungkin  mengandung  alkaloid 8 .  Dua  dari  tiga reagen  yang  digunakan  membentuk  endapan, menunjukkan  hasil  positif  untuk  alkaloid. Penggunaan  pereaksi  yang  mengandung  ion  K +  menyebabkan  endapan  terbentuk  selama produksi senyawa alkaloid.
Struktur  dasar  flavonoid  terdiri  dari  dua cincin  aromatik  yang  dihubungkan  oleh  tiga atom  C,  seringkali  oleh  ikatan  oksigen
heterosiklik,  dan  mereka  adalah  molekul metabolit  sekunder.  Karena  memiliki  dua  atau lebih  gugus  hidroksil  dan  agak  asam,  ia  dapat dilarutkan dalam basa, menjadikannya senyawa polifenol. Ternyata, flavonoid lebih larut dalam pelarut  polar  seperti  metanol,  etanol,  butanol, dan etil asetat setelah mereka terhubung ke gula untuk membentuk glikosida 9 .
Fitokimia  flavonoid  digunakan  dalam pengobatan,  yaitu  sebagai  antikoagulan,  seperti yang  dilaporkan  oleh 10 .  (mencegah  pembekuan darah).  Ketika  cedera  pembuluh  darah  terjadi, senyawa  flavonoid  bekerja  dengan  mencegah aglutinasi  (pengumpulan  trombosit).  Bahan kimia flavonoid sering disebut pengencer darah karena kecenderungan mereka untuk menghambat  pengumpulan  darah.  Setelah menambahkan  bubuk  Mg  dan  HCl,  sampel menjadi  oranye,  menunjukkan  hasil  yang menguntungkan  dalam  pengujian  flavonoid 11 . Inti  benzopiron  dalam  struktur  flavonoid  dapat dikurangi  dengan  bubuk  Mg  dan  HCl,  yang

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2024, 7(1), 7-12
mengarah  ke  produksi    garam  flavilium  merah atau oranye  .
Tanin  adalah  sejenis  bahan  kimia  yang ditemukan  pada  tanaman  dan  diproduksi sebagai metabolit sekunder. Ada dua kelompok tanin  yang  berbeda,  yang  mudah  dihidrolisis dan  yang  lebih  sulit  dipecah.  Cathecin  dan gallocathecin  adalah    dua  contoh  tanin terkondensasi,  sedangkan  polimer  galat  dan asam  ellagic  adalah  contoh  tanin  yang  mudah dihidrolisis  yang  terdiri  dari  polimer  senyawa flavonoid  dengan  hubungan  karbon-karbon yang  mengikat  ester  ke  molekul  gula 12 . Penambahan larutan FeC 1 persen menyebabkan  pergeseran  warna  yang  berbeda, rona  hijau  kehitaman,  yang  menunjukkan adanya tanin dalam sampel yang diuji. Menurut penelitian,  penambahan  FeC  pada  salah  satu gugus  hidroksil  molekul  tanin  menyebabkan pergeseran  warna 13 .  Setelah  menambahkan FeC, warna hijau gelap berkembang, menunjukkan adanya tanin kental.,l-3.,l-3.
Sampel  ditemukan  mengandung  saponin, yang  dapat diidentifikasi  oleh ketidakmampuan mereka  untuk  larut  setelah  dikocok  selama  10 menit.  Produksi  busa  dalam  air  yang  terurai menjadi  molekul  glukosa  dan  aglikon  terlihat dalam penelitiannya 14 .
Terpenoid  yang  memiliki  kerangka karbon  enam  unit  isoprena  (methylbuta-1,3- diene)  dikenal  sebagai  triterpenoid.  Bahan kimia  ini  adalah  metabolit  sekunder,  dan kerangka  karbonnya  sering  terbentuk  dari hidrokarbon  C-30  asilik  dan  termasuk  alkohol, aldehida, atau asam karboksilat. Efek farmakologis yang substansial ditunjukkan pada senyawa  yang  termasuk  dalam  kelompok triterpenoid.  Molekul-molekul  ini  mengurangi pembentukan  kolesterol,  melawan  peradangan, dan  membunuh  sel-sel  kanker,  antara  lain.
Tanaman  dengan  bahan  kimia  triterpenoid memiliki  nilai  ekologis  karena  molekul  ini memiliki sifat antijamur, insektisida, antipredator,  antibakteri,  dan  antivirus.  Hasil positif  ditunjukkan  oleh  senyawa  triterpenoid yang  menjadi  oranye  dengan  penambahan asetat  anhidrida  dan  asam  sulfat  pekat, sedangkan  hasil  negatif  ditunjukkan  oleh senyawa  steroid  yang  tidak  menampilkan perubahan warna tersebut. Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa molekul terpenoid / steroid mengalami perubahan warna ketika  asam  asetat  atau  sulfat  ditambahkan padanya 15 .
Dari segi struktur, senyawa fenolik dapat bervariasi  dari  molekul  sederhana  hingga polimer kompleks, dan mereka adalah metabolit sekunder  bioaktif  pada  tanaman  yang  biasanya dihasilkan  melalui  jalur  asam  sikadat,    pentosa fosfat, dan fenilpropanoid 16 .
Saat menguji senyawa fenolik, perubahan warna  biru-ke-hitam  merupakan  indikasi  hasil positif.  Pembentukan  warna  pada  pengujian  ini dikaitkan  dengan  interaksi  FeC  dengan  bahan dan  ion  yang  melewati  hibridisasi 7 .  ,l-3.,Fe-3+. Spektrofotometer  UV-Vis  digunakan  untuk menentukan  tingkat  penghambatan.  Panjang gelombang terpanjang yang terdeteksi dalam uji absorbansi kosong DPPH adalah 517 nm. Nilai absorbansi  yang  diperoleh  dapat  digunakan untuk  mengetahui  proporsi  inhibisi  radikal DPPH (% inhibisi). Nilai persen penghambatan untuk ekstrak kasar yang efektif diberikan pada disukai.  Suatu  bahan  kimia  memiliki  aktivitas antioksidan yang sangat  Tabel 2, 3, dan 4. Saat mengukur  kekuatan  antioksidan,  nilai  IC50 yang  lebih  rendah  lebih  tinggi  apabila  nilai  IC- 50-nya  kurang  dari  atau  sama  dengan  ambang batas tertentu.
Tabel 2. % Inhibisi Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kasar Sisik Naga P. piloselloides
Konsentrasi (ppm) (1) Ulangan Rata-rata Absorbansi (3) % Inhibisi (4) IC50µg/mL (5) U1 U2 (2) U3 2.5 0.482 0.499 0.485 0.4887 44.28 3.30 5 0.367 0.366 0.374 0.3690 57.92 7.5 0.255 0.291 0.263 0.2697 69.25 10 0.217 0.222 0.219 0.2193 74.99 12.5 0.153 0.143 0.143 0.1463 83.31 Kontrol DPPH 0.874 0.876 0.881 0.8770

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2024, 7(1), 7-12
Tabel 3. % Inhibisi Aktivitas Antioksidan Vitamin C sebagai pembanding
Konsentrasi (ppm) (1) Ulangan Rata-rata Absorbansi (3) % Inhibisi (4) (ppm) (5) U1 U2 (2) U3 0.25 0.358 0.355 0.353 0.355 59.52 0.03 0.50 0.301 0.319 0.312 0.311 64.54 0.75 0.251 0.254 0.253 0.253 71.15 1 0.126 0.127 0.121 0.125 85.75 1.25 0.098 0.092 0.096 0.095 89.16 Kontrol DPPH 0.874 0.876 0.881 0.877
Tabel 4. Karakteristik Antioksidan berdasarkan nilai
Nilai Karakteristik Antioksidan 200-150ppm Lemah 150-100 ppm Sedang 100-50 ppm Kuat <50ppm Sangat kuat
Persamaan  regresi  untuk  ekstrak  kasar adalah  y  =  3,8052x  +  37,411  dan  R  =  0,9751, sedangkan untuk vitamin C adalah y = 3,22x + 49,882  dan  R  =  0,9598.  Persamaan  ini digunakan untuk menentukan nilai ekstrak daun sisik naga dan vitamin C, masing-masing.
Konsentrasi  ekstrak  kasar  dan  vitamin  C yang  dibutuhkan  untuk  mengurangi  radikal DPPH  diwakili  oleh  koefisien  x  dalam persamaan ini, sedangkan koefisien y diberikan oleh  as.  Nilai  R  mendekati  1  adalah  positif; nilai  R  memiliki  nilai  maksimum  1  dan  tidak pernah melebihi 1, menunjukkan bahwa dengan meningkatnya  konsentrasi  ekstrak  kasar  dan vitamin  C,  semakin besar  aktivitas  antioksidan, seperti  yang  ditunjukkan  oleh  kurva  hubungan antara  konsentrasi  ekstrak  kasar  dan  vitamin  C terhadap  persen  penghambatan  pada  angka, IC 50 . 1 dan 2.
Pengujian
aktivitas antioksidan komponen  terisolasi  dan  identifikasi  bahan kimia  murni  dari  daun  Pyrrosia  piloselloides (L.)  M.G.Price.  adalah  area  yang  perlu diselidiki lebih lanjut.

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh,  maka  dapat  disimpulkan  bahwa Ekstrak  daun  sisik  naga P.  piloselloides yang kandungan    senyawa  metabolit  sekunder  jenis alkaloid,  flavonoid,  tanin,  triterpenoid,  saponin
dan  fenolik,  memiliki  Aktivitas  antioksidan sangat kuat dengan nilai IC 50 3.30 ppm.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
1  Omodairo  OD,  Ikekamma  OC.  In  Vitro Study of
Antioxidant and Anticoagulant  Activities  of  Ethanol Extract of Pdananus Tectorius Leaves. Internasional  Blood  Research  and Reviews. 2016;5(1):1–11.
2  Liochey SI. Reactive oxygen species and the free  radical  theory  of  aging.  Vol.  60. Free  radical  biology  and  medicine; 2013. 1–4 p.
3  Miryanti  YA,  Sapei  L,  Budiono  K,  Indra  S. Ekstraksi  antioksidan  dari  kulit  buah manggis  (Garcinia  mangostana  L.). Vol.  2.  Research  Report-Engineering Science; 2011.
4  Eugenius  Y,  Wirawan.  Uji  Antioksidan  dan Penetapan  kadar  karakteristik  ekstrak Pyrrosia  pilloselloides  Pada  Inang Pohon Jambu Dengan Metode DPPH. 1st  ed.  Rotty  V,  Tumbelaka  S, Pratasik S, editors. Universitas Sanata Dharma; 2016.
5  Jimene-Moreno  N,  Volve  F,  Esparza  JA, Azpilicueta  Ancin  C.  Impact  of Extraction Conditions on the Phenolic
Composition and Antioxidant

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2024, 7(1), 7-12
Capacity  of  Grape  Stem  Extracts. Antioxidants. 12th ed. 2019;8(12):597. 6   Chen  H,  Xiao  H,  Pang  J.  Parameter Optimization and Potential Bioactivity  Evaluation  of  a  Betulin Extract  from  White  Birch  Bark. Plants. 2020;9(3):392. 7  Marliana  SD,  Suryanti  V,  Suyono.  Skrining Fitokimia  dan  Analisis  Kromatografi Lapis  Tipis  Komponen  Kimia  Buah Labu Siam (Sechium edule Jacq.Swartz.)  dalam  Ekstrak  Etanol. Biofarmasi. 2005;3(1):26–21.
8   Simbala  HE.  Analisis  senyawa  alkaloid beberapa jenis tumbuhan obat sebagai bahan aktif fitofarmaka. Pacific Journal. 2009;1(4):489–94.
9   Hanani E. Analisis Fitokimia. Buku Kedokteran EGC; 2016.
10  Armiyanti, Darus S, Paransa, Gerung G. Uji Aktivitas  Antikoagulan  Pada  Sel
Darah  Manusia  Dari  Ekstrak  Alga Coklat  Turbinaria  ornota.  Jurnal Pesisir dan Laut Tropis. 2013;2(1):21–7. 11  Khotimah  SN,  Muhtadi  A.  Beberapa Tumbuhan Yang Mengandung Senyawa Aktif Antiinflamasi. Farmaka  Suplemen.  2016;14(2):28– 40. 12  Jayanegara A, Sofyan A. Penentuan aktivitas biologis tanin beberapa hijauan secara in vitro menggunakan’Hohenheim gas test’dengan  polietilen  glikol  sebagai determinan. Media Peternakan Fakultas  Peternakan  Institut  Pertanian Bogor. 2008;31(1). 13  Sangi  M,  Runtuwene  MRJ,  Simbala  HEI, Makang VMA. Jurnal Analisis Fitokimia Tumbuhan Obat di Kabupaten Minahasa Utara. Chemistry Progress. 2008;1(1):47–53.
14  Setyowati  WAE,  Ariani  SRD,  Ashadi,
Mulyani  B,  Rahmawati  CP.  Skrining Fitokimia Dan Identifikasi Komponen Utama  Ekstrak  Metanol  Kulit  Durian (Durio  zibethinus  Murr.)  Varietas Petruk.  In:  Seminar  Nasional  Kimia dan Pendidikan Kimia. Padang: Akademia Permata; 2014. p. 271–80. 15  Minhatun N. Antioxidant Test And Identification  Of  Active  Compounds From Chloroform Extract Of Beluntas (Pluchea  indica  L.)  Leaf.  UNESA Journal  of  Chemistry.  2017;6(2):17– 20.
16  Haminiuk  C,  Maciel  G,  Plato-Oviedo  M, Peralta  R.  Phenolic  compounds  in fruits  -  An  overview.  Int  J  Food  Sci Technol. 2012;47(10):2023–44.