Identifikasi Isolat Streptomyces hygroscopicus INA CC A497 sebagai Anti Malaria : Uji Pendahulu 115
Identifikasi Isolat Streptomyces hygroscopicus INACC A497 sebagai Anti Malaria : Uji Pendahulu
Rosa Salsabila Reza 1* , Endah Setyaningrum 1 , Nismah Nukmal 1 , Achmad Arifiyanto 1
1 Program Studi Magister Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
* corresponding author  : rosasalsabila24@gmail.com
Diterima: 26-06-2021 –   Disetujui: Disetujui : 15-11-2021    –    Dipublikasi: 29-11-2021
© 2021 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Halu Oleo Kendari

## Abstract
Streptomyces sp  is  known  as  a  bacterium  that  is  able  to  produce  secondary  metabolites  that  act  as antiparasitic,  antitumor,  anti-oxidant,  plant  growth,  herbicide,  pesticide,  and  many  others  so  that  it  is often  used  as  an  antibiotic  in  the  form  of  drugs.  This  study  aims  to  identify  the  bacteria InaCC A497 Streptomyces  hygrocipcus subsp  Jinggangensis  collection  from  the  Indonesian  Culture  Collection (InaCC)  Lipi  Cibinong  which  will  be  used  as  an  antimalarial.  The  tests  carried  out  were  biochemical tests (sugar test, indole test, and motile test), and observation of growth curves for 6 consecutive days using  a  UV-VIS  Spectrophotometer.  The  results  showed  that  the  bacteria InaCC A497  Streptomyces hygrocipcus subsp Jinggangensis has the potential as an anti-malarial.
Keywords : Streptomyces  hygroscopicus ,  Anti-malaria,  UV-VIS  Spectrophotometer,  Secondary metabolites, Bacteria

## ABSTRAK
Streptomyces sp.  dikenal  sebagai  bakteri  yang  mampu  menghasilkan  metabolit  sekunder  yang berperan  sebagai  antiparasit,  antitumor,  antioksidan,  pertumbuhan  tanaman,  herbisida,  pestisida,  dan lain-lain sehingga sering digunakan sebagai antibiotik dalam bentuk obat. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi bakteri InaCC A497 Streptomyces hygrocipcus sub sp. Jinggangensis koleksi. Koleksi Kultur  Indonesia  (InaCC)  LIPI  Cibinong  yang  akan  digunakan  sebagai  antimalaria.  Pengujian  yang dilakukan  adalah  uji  biokimia  (uji  gula,  uji  indol,  dan  uji  motil),  dan  pengamatan  kurva  pertumbuhan selama  6  hari  berturut-turut  menggunakan  Spektrofotometer  UV-VIS.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  bakteri  InaCC  A497 Streptomyces  hygrocipcus sub  sp.  Jinggangensis  berpotensi  sebagai antimalaria.
Kata  kunci : Streptomyces  hygroscopicus,  Antimalaria,  Spektrofotometer  UV-VIS,  Metabolit  sekunder, Bakteri

## PENDAHULUAN
Malaria merupakan penyakit menular yang masih menjadi masalah di Indonesia, karena  Indonesia  memiliki  iklim  tropis. Penularan malaria disebabkan oleh
protozoa genus Plasmodium melalui gigitan  nyamuk Anopheles sp.  betina kemudian  bereproduksi  dalam  sel  darah manusia.  Parasit  Plasmodium  memiliki  ciri siklus  hidup  terjadi  dalam  dua  tahap  yaitu aseksual dan seksual. Berdasarkan jenisnya, malaria dikelompokkan menjadi 5 parasit  yaitu P.  falciparum,  P.  vivax,  P. malariae,  P.  ovale,  dan  P.  Knowlesi
(Febriani et  al., 2019).  Spesies  yang membahayakan  bagi  manusia  yaitu P. falciparum karena  dapat  menyebabkan infeksi  akut  pada  ginjal,  hati,  dan  otak sehingga  berdampak  kematian.  Selain  itu dapat  juga  ditemukan  gejala  lain  seperti nyeri  kepala,  mual,  muntah,  diare,  pegal  - pegal,  dan  nyeri  otot.  (Prabowo et  al. , 2019).
Kasus malaria sepanjang tahun 2019 di  Indonesia  tercatat  sebanyak  250.644 kasus.  Berdasarkan  data  trend  kasus positif  malaria  API  ( Annual  Parasite Incidence ), masih banyak ditemukan
Reza, R.S., Setyaningrum, E., Nukmal, N., & Arifiyanto, A. BioWallacea : Jurnal Penelitian Biologi (Journal of Biological Research), Vol. 8 (2),  Hal. : 115-122, November 2021
daerah  endemis  malaria,  di  Indonesia, diantaranya  Kawasan  Timur  Indonesia, seperti  Papua,  Papua  Barat,  dan  Provinsi Nusa tenggara Timur, dan Provinsi
Kalimantan  Timur.  Namun,  kasus  tertinggi yaitu sekitar  86%  terjadi di Provinsi Papua sebanyak  216.380  kasus.  Selanjutnya, disusul oleh Provinsi Nusa tenggara Timur sebanyak  12.909  kasus  dan  Provinsi Papua  Barat  sebanyak  7.079  kasus (Kemenkes RI, 2019).
Peningkatan  kasus  malaria  yang terus bertambah setiap tahunnya membuat peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang pemanfaatan mikroorganisme sebagai  antimalaria.  Sebelumnya  telah dilakukan  penelitian  tentang  pemanfaatan mikroorganisme sebagai antimalaria, salah satunya adalah kelompok bakteri
Streptomyces sp. Genus
Streptomyces termasuk dalam  golongan  ordo  Actinomycetes  dan famili  Streptomycetaceae  yaitu  bakteri dengan  struktur  khas  karena  memiliki kemampuan pembentukan hifa atau filamen,  sehingga  sekilas  tampak  seperti jamur.  Akan  tetapi,  genus  Streptomyces bersifat  selayaknya  prokariota  lainnya karena  tidak  memiliki  membran  pada  inti selnya (Kawuri, 2016).
Penelitian sebelumnya telah dilakukan mengenai penghambatan pertumbuhan P.falciparum oleh  metabolit sekunder Streptomyces sp. karena terdapat  kandungan  senyawa  kimia  aktif yang  berperan  sebagai  inhibitor  protease pada  tripsin,  kimotripsin,  dan  proteinase. Genus Streptomyces memiliki kemampuan untuk  menghasilkan  metabolit  sekunder termasuk. Metabolit sekunder yang dihasilkan  oleh S.  hygroscopicus terdapat kandungan eponemycin sebagai  aktivitas anti  tumor  dengan  cara  menghambat fungsi proteasom dan selanjutnya
mengganggu kerja sistem ubiquitin- proteasome  (Fitri et  al., 2019).  Sehingga diharapkan  hasil  penelitian  ini  dapat diketahui  kandungan  ekstrak  metabolit
sekunder S.  hygroscopicus strain  INA  CC A47  yang  dapat  dikembangkan  sebagai antimalaria terhadap P. falciparum .

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Mikrobiologi  FMIPA,  Universitas  Lampung pada bulan Mei-Juli 2020.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  magnetic  stirrer,  hot plate,  rotary  evaporator  ( Buchii  Rotary Evaporator ), peralatan kromatografi kolom, spektrofotometer (Uv-Vis 1800), LAF ( Laminar air flow Forma Scientific ), inkubator  (Heraeus).  Mikroskop  binokular ( Axioskop,  Zeiss ),  kaca  objek,  pipet  mikro dan peralatan gelas laboratorium. Identifikasi senyawa menggunakan spektrofotometer UV-Vis.
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  Tripton,  ekstrak  ragi, agar,  H2O,  pepton,  ferri  sitrat  amoniakal, natrium  tiosulfat,  K2HPO4,  (NH4)2SO4, MgSO4,  substrat  gula  (Laktosa,  manitol, galaktosa, dan sukrosa), pelarut etil asetat, DMSO (Dimetil Sulfokida).

## Metode Penelitian Tes Karakterisasi
Bakteri S.  hygroscopicus INACC  A497 diremajakan  pada  media  yang  telah disiapkan  (ISP  1,  ISP  4,  ISP6,  ISP9,  ISP 9+Mannitol, ISP 9+Galaktosa, ISP 9+Laktosa,  ISP  9+Sukrosa,  SCA,  dan Strepto). Seluruh media disterilisasi dengan menggunakan autoklaf suhu 121 o C dengan  tekanan  15  Psi  selama  15  menit. Sebanyak  15  mL  media  dituangkan  ke dalam cawan petri dan dibiarkan memadat. Pengamatan  dilakukan  selama  3  hari berturut-turut (Yasjudani, 2017).

## Uji Biokimia
Mengambil  1  ose  isolat  bakteri  kemudian diinokulasikan ke dalam media NB
( Nutrient  Broth )  yang  ditambahkan  gula sukrosa  1%,  laktosa,  fruktosa,  galaktosa, glukosa dalam tabung reaksi. Sebelumnya, media  telah  diberi  indikator  bromothymol blue sebagai indikator fermentasi.
Kemudian
tabung dihomogenkan kemudian  diinkubasi  selama  72  jam  pada suhu  25-28 o C.  Hasil  positif  ditunjukkan ketika  terjadi  perubahan  warna  dan  juga terdapat  gelembung  gas  (Hayati et  al., 2019).
Pengujian  indol  dilakukan  dengan mengambil  satu  koloni  isolat  bakteri kemudian  diinokulasikan  ke  dalam  media SIM  dan  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu  37ºC.  Pengamatan  hasil  uji  indol dilakukan  dengan  menambahkan  10-12 tetes pereaksi Kovac. Uji motilitas dilakukan  dengan  mengambil  satu  koloni isolat  bakteri  ke  dalam  media  SIM kemudian  diinkubasi  selama  48  jam  pada suhu  37 o C.  Pertumbuhan  bakteri  di  sekitar tusukan  menunjukkan  hasil  tes  negatif (Datta et al ., 2019).

## Kurva Pertumbuhan
Pengujian spektrofotometer dilakukan dengan  mengambil  suspensi  bakteri  yang telah diseimbangkan dengan standar kekeruhan  McFarland  1  sebanyak  0,5  ml
dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi kemudian  diukur  nilai  absorbansi  awal dengan  panjang  gelombang  600  hingga mencapai OD = 0,5 menggunakan spektrofotometer
UV-Vis. Penelitian dilakukan selama 6 hari berturut-turut pada jam  yang  telah  ditentukan  yaitu  pukul 09:00,  12:00,  15:00  perlakuan  diulang sebanyak 3 kali.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Karakterisasi
Pengamatan uji karakterisasi ditunjukkan  dengan  warna  miselium  dan pertumbuhan
isolat Streptomyces hygroscopicus INACC A497 pada berbagai media  tumbuh  yang  sudah  dibuat  serta melihat  ada  atau  tidaknya  pigmen  terlarut pada  berbagai  media  tumbuh.  Hasil pengamatan makroskopik meliputi pertumbuhan,  bentuk,  warna,  margin,  dan elevasi  koloni  bakteri.  Permukaan  koloni dapat  dilihat  dari  samping,  dan  tepi  koloni dapat dilihat dari atas cawan. Uji karakterisasi  dilakukan  pada  10  media yaitu  Strepto,  SCA,  ISP  1,  ISP  4,  ISP  6, ISP 9, ISP 9+ manitol, ISP 9+ sukrosa, ISP 9+ laktosa, ISP 9+ galaktosa. Pengamatan dilakukan selama 3 hari. Hasil pengamatan koloni bakteri disajikan pada Tabel 1.
Table 1. Uji karakterisasi S. hygroscopicus InaCC A497 Hari ke Media Growth Arial Mycelium  Substrate mycelium Pigmen
1 Strepto Tidak terjadi perubahan SCA ISP 1
ISP 4 ISP 6 ISP 9 ISP 9+Manitol
ISP 9+Sukrosa ISP 9+Laktosa ISP 9+ Galaktosa 2 Strepto Poor White to yellow Dark yellow White SCA Poor White White White to yellow
ISP 1 Good White White to yellow Brown ISP 4 Poor White Not fully developed Moderate olive ISP 6 Poor White White Black ISP 9 Moderate  Immature white White Moderate yellow ISP 9+Manitol Poor White Moderate yellow White ISP 9+Sukrosa Poor White Moderate yellow White ISP 9+Laktosa Good White Moderate yellow Yellow ISP 9+ Galaktosa Less White Not fully developed Yellow 3 Strepto Poor White to yellow Dark yellow White SCA Poor White White White to yellow ISP 1 Very Good White White to yellow Brown ISP 4 Less White Not fully developed Moderate olive ISP 6 Less White White Black ISP 9 Good Immature white White Yellow ISP 9+Manitol Poor White to yellow Yellow Moderate yellow ISP 9+Sukrosa Less White Moderate yellow White to yellow ISP 9+Laktosa Very Good White Moderate yellow White to yellow ISP 9+ Galaktosa Good White Moderate yellow White to yellow Berdasarkan hasil pengamatan yang dilakukan selama 3 hari didapatkan isolate S. hygroscopicus INA CC A497  pada hari pertama  belum  mengalami  pertumbuhan pada seluruh media. Pengamatan hari ke-2 mulai  terlihat  pertumbuhan  pada  media ISP1  dan  ISP9+  Lactosa  yang  tumbuh sangat baik, terlihat dari jumlah koloni yang hidup lebih banyak. Kemudian pada media ISP9  dan  ISP9+  galaktosa  memiliki pertumbuhan  yang  baik.  Sedangkan  pada media  ISP4,  ISP6,  ISP  9+  sukrosa pertumbuhannya  relative  rendah  karena pertumbuhannya  hanya  sedikit.  Terakhir
pada media yang tidak mengalami pertumbuhan  sama  sekali  yaitu  pada media  SCA,  dan  ISP9+  strepto  hal  ini terlihat  karena  tidak  ada  koloni  bakteri yang tumbuh. Selain dilihat dari pertumbuhannya juga diamati warna koloni,  dari  hasil  diperoleh  warna  putih terdapat  pada  media  SCA,  ISP1,  ISP4, ISP6,  ISP9+  Sukrosa,  ISP9+  Laktosa,  dan ISP9+ Galaktosa. Media lainnya menghasilkan  warna  putih  sampai  kuning yaitu  Strepto  dan  ISP9+  Mannitol,  dan warna  Immature  White  dihasilkan  dari media  ISP  9.  Perbedaan  warna  pada
media disebabkan karena adanya perbedaan  kemampuan  dalam  mencerna komponen-komponen  media,  Selain  itu disebabkan  adanya  kandungan  pigmen pada sel dan rantai spora pada Strepromyces hygroscopicus INACC A497, hifa  akan  berubah  menjadi  warna  tertentu apabila terjadi pembentukan spora, sehingga  diperoleh  warna  yang  berbeda (Sari et  al., 2019).  Salah  satu  ciri  khas genus  Streptomyces  yaitu  permukaan koloni  tidak  licin,  ukuran  diameter  koloni antara  1-10  mm,  memiliki  miselium  aerial yang  mengarah  dari  permukaan  koloni  ke udara.  Miselium  pada  awalnya  berwarna putih  sampai  coklat  ,  namun  seiring berjalannya waktu berubah menjadi berwarna  tertentu.  Miselium  aerial  bakteri Streptomyces sp.  memiliki  warna  yang berbeda-beda seperti putih, abu-abu, kuning,  oranye,  lavender,  biru,  hijau, sampai hitam (Lestari et al., 2019).

## Uji Biokimia
Uji  biokimia  pada  penelitian  ini  meliputi  uji gula-gula, Indol, dan Motil. Pengujian gula- gula  dilakukan  bertujuan  mengidentifikasi apakah bakteri Streptomyces hygroscopicus INA  CC  A497  mampu memfermentasi karbohidrat. Pengujian positif ditandai dengan terjadinya perubahan warna dari warna ungu menjadi warna  kuning  dan  adanya  pembentukan gelembung  gas  pada  tabung  Durham. Perubahan warna yang terjadi menandakan bahwa bakteri ini membentuk asam dari fermentasi glukosa dan fermentasi sukrosa (Panjaitan et al., 2020). Uji  motilitas  bertujuan  untuk  melihat pergerakan bakteri di dalam media tumbuh.  Hasil  pengamatan  uji  Biokimia disajikan pada Tabel 2 dan disajikan dalam bentuk Gambar 1.
Tabel 2. Uji Biokimia
No Uji Hasil Keterangan 1 Sukrosa + Ada sedimen 2 Laktosa + Ada endapan, warnanya lebih keruh 3 Fruktosa + Ada sedimen 4 Galaktosa - Tidak ada perubahan 5 Glukosa + Ada sedimen 6 Indol - Warna hijau, tidak ada cincin 7 Motil + Bentuk rizoid/bercabang
(a)                    (b)
(c) (d)
(e) (f) (g)
Gambar 1. Uji Biokimia strain INA CC A497
Keterangan : (a) Uji Lactosa, (b) Uji Galaktosa, (c) Uji Sukrosa, (d) Uji Fruktosa (e) Uji Glukosa , (f) Uji Motil, (g) Uji Indol
Hasil  pengujian  gula-gula  diketahui  bahwa hanya  gula  laktosa,  sukrosa,  fruktosa  dan glukosa menunjukan hasil positif, sementara  gula  galaktosa  menunjukan hasuil  negatif.  Energi  yang  dihasilkan  dari fermentasi gula oleh bakteri akan membentuk asam piruvat dan asam asetat, disertai  oleh  gelembung  gas  CO2  dalam media  (Putri  dan  kurnia,  2019).Uji  indol menujukan  hasil  negatif  karena  tikdak mengalami  perubahan  warna  dan  tidak terbentuk  cincin  dikarenakan  bakteri  tidak melakukan pergerakan yang ditandai dengan tidak muncul penyebaran pertumbuhan bakteri sepanjang permukaan
tusukan pada media SIM.apabila  bakteri  positif  indol  maka bakteri tersebut memiliki kandungan enzim triptofanase  yang  merupakan  katalis  untuk menguraikan  gugus  indol  yang  terdapat pada  asam  amino  triptofan  (Mogea et  al., 2019). Karakterisasi kimia bakteri kelompok Actinomycetes khususnya genus Streptomyces sp.  memiliki  spora  non-motil dan  menghasilkan  enzim  katalase,  tidak menghasilkan gas, H2S dan indol (Barka et al., 2016).

## KURVA PERTUMBUHAN
Pembuatan  kurva  pertumbuhan  isolat diperlukan  untuk  menentukan  umur  starter terbaik  yang  dibutuhkan  untuk  produksi etanol.  Ada  beberapa  tahapan  dalam pertumbuhan  bakteri,  yaitu:  fase  lag,  fase log (pertumbuhan dipercepat), fase stasioner  (laju  pertumbuhan  tetap)  dan fase  kematian  (pertumbuhan  lebih  lambat dan beberapa sel mati). Metabolit sekunder dihasilkan mikroorganisme pada akhir fase pertumbuhan  yakni fase  stasioner,  dimana sel  yang  tumbuh  jumlahnya  sama  dengan sel  yang  mati.  Sintesis  metabolit  sekunder akan  dihasilkan  saat  nutrient  pada  media pertumbuhan  mikroorganisme  telah  habis, keterbatasan jumlah nutrient media pertumbuhan menyebabkan terakumulasinya  induser  enzim  metabolit sekunder  dan  terlepasnya  gen-gen  untuk sintesis  metabolit  sekunder(Wahyuningsih dan  Zulaika,  2019).  Hasil  pengamatan selama 6 hari terlihat isolat mengalami fase pertumbuhan  yang  semakin  hari  semakin baik.  Pengamatan  kurva  pertumbuhan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis ditunjukkan  pada  grafik  di  bawah  ini
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 9 :0 0 1 2 :0 0 1 5 :0 0 9 :0 0 1 2 :0 0 1 5 :0 0 9 :0 0 1 2 :0 0 1 5 :0 0 9 :0 0 1 2 :0 0 1 5 :0 0 9 :0 0 1 2 :0 0 1 5 :0 0 9 :0 0 1 2 :0 0 1 5 :0 0

## KURVA PERTUMBUHAN
Hasil
Gambar 2. Kurva Pertumbuhan Streptomyces hygroscopicus INA CC A497
Hasil  pengamatan  kurva  pertumbuhan ditunjukkan pada grafik yang menunjukkan bahwa  pada  hari  ke-6  Ina  CCA497 mengalami  pertumbuhan  yang  optimal. Sedangkan  nilai  absorbansi  mengalami penurunan yang besar pada hari berikutnya  dimungkinkan  karena  regangan tidak  lagi  tumbuh  pada  media  cair.Salah satu  faktor  yang  harus  dimaksimalksan agar  mendapatkan  metabolit  sekunder yang  baik  yaitu  waktu  fermentasi  (Zhang dan  Liu,  2016).  Laju  pertumbuhan  bakteri sangat  bervariasi  menurut  jenis  bakteri serta kondisi lingkungannya.Laju pertumbuhan  ditentukan  dengan  cara membuat kurva pertumbuhan antara waktu inkubasi  dengan  absorban  yangdihasilkan Berdasarkan penelitian ini dapat
disimpulkan bahwa waktu efektif pengujian aktivitas  antibakteri  adalah  pada  hari  ke-6, karena strain masih mengalami pertumbuhan  yang  baik.  Ada  beberapa faktor  yang  mempengaruhi  pertumbuhan bakteri  yang  tidak  stabil  antara  lain  pH lingkungan, komponen benih bakteri, stabilitas  zat  aktif,  ukuran  inokulum,  waktu inkubasi dan aktivitas metabolisme bakteri.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada Kepala  Laboratorium  Mikrobiologi  dan
Kepala  Laboratorium  Botani  Universitas Lampung atas dukungannya dalam menyediakan tempat penelitian serta bimbingan dalam melaksanakan pekerjaan dan  bimbingannya  sehingga  penelitian  ini dapat terlaksana dengan lancar.

## DAFTAR PUSTAKA
Barka, E, A. Vatsa, P. Sanchez, L. Vaillant,
N,  G.  Jacquard,  C.  Klenk,  H,  P. Clément,  C,  2016,  Taxonomy, Physiology, and Natural Products of Actinobacteria, Microbiology  and Molecular  Biology  Review , Vol.  80 No.1 .
Datta,  F,  U.  Anggela,  D,N.  Imanuel,  B. Anytha,  I,  R.  Detha . Nancy,  D,    F, K.  Nemay  A.  Ndaong.  2019.  Uji Aktivitas  Antimikroba  Bakteri  Asam Laktat  Cairan  Rumen  Terhadap
Pertumbuhan Salmonella Enteritidis, Bacillus Cereus, Escherichia Coli Dan Staphylococcus Aureus Menggunakan Metode Difusi Sumur Agar.  Prosiding  Seminar  Nasional VII  FKH  Undana  Swiss  Bel-inn Kristal  Kupang.  ISBN:  978-602- 6906-55-7. Universitas Nusa Cendana. Febriani,  I,  D.  Muhimmah,  I.  Lusiyana,  N. 2020. Identifikasi Stadium Plasmodium Vivax untuk
Penegakan Diagnosis Penyakit Malaria  dengan  Sistem Berbantuan Komputer. Universitas Islam Indonesia. Fitri,  L,  E.  Alkarimah,  A.  Cahyono,  A,  W. Lady, W, N. Endharti, A, T. Rivo, Y. 2019. Effect of Metabolite Extract of Streptomyces Hygroscopicus Subsp. Hygroscopicus on Plasmodium  Falciparum  3D7  In vitro. Iranian Journal of Parasitology . Hayati, L, N. Wiwiek, T. Ratih, N, P. Sri, C. Maya,  N,  Y.  Prima,  A,  P.  2019. Isolasi dan Identifikasi Staphylococcus  aureus pada  Susu Kambing Peranakan Etawah Penderita  Mastitis  Subklinis  di Kelurahan  Kalipuro,  Banyuwangi. Jurnal Medik Veteriner DOI: 10.20473/jmv.vol2.iss2.2019.76-82.
Vol.2  No.2  :  76-82 .  Universitas Airlangga.
Kawuri,  R.  2016.  Isolasi  Dan  Identifikasi
Streptomyces Sp.  Pada  Rhizosfer Tanaman Pisang ( Musa paradiasica )  Di  Desa  Pendem Jembrana Bali. Jurnal Metamorfosa Vol  III No 2:  140-148 . ISSN: 2302-
5697.Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi F-MIPA Universitas Udayana.
Kemenkes  RI.  2019.  Profil  Kesehatan Indonesia  2018.  Dinas  Kesehatan
Republik Indonesia. Lestari,  S.  Mukarluna.  Rikhsan,  R.  2019. Identifikasi  dan  Deteksi  Aktivitas Daya Hambat Bakteri Actinomycetes  yang  diisolasi  dari Tanah  Gambut  di  Desa  Tajok Kayong  Kalimantan  Barat. Jurnal Protobiont Vol.  8  (1)  :  13 –  19 . Universitas Tunjung Pura.
Mogea,  R,  A.  Waode,  I,  C,  L,  H,  P. Hermawaty, A. 2020. Isolasi Bakteri Penghasil  Indole  Acetic  Acid  pada Tanaman Hortikultura di Perkebunan Prafi SP 1, Manokwari. Jurnal  Ilmu  Pertanian  Indonesia
(JIPI) . Vol.  27  (1)  1 :  6  ISSN  0853- 4217 EISSN 2443-3462
Panjaitan,  F,  J.  Taufiq,  B.  Irsyana,  A. Onesimus,  K,  L.  Whaersima,  I.
2020. Karakterisasi  Mikroskopis Dan  Uji  Biokimia  Bakteri  Pelarut Fosfat (Bpf) Dari Rhizosfer
Tanaman  Jagung  Fase  Vegetatif. Ciwal  Jurnal  Ilmu  Pertanian  dan Lingkungan. Vol  1,  No  1. Unika
Santu Paulus Ruteng. NTT.
Prabowo, A, Y. Hotman, S. Fajar, Y. 2019.
Profil Penyakit Malaria Pada Rumah  Sakit  Tk.IV  TNI  AD  Bandar Lampung. Volume 3 No 1 . Universitas Lampung.
Putri,  A,  M.  Kurnia,  P.  2018.  Identifikasi
Keberadaan  Bakteri  Coliform  Dan Total  Mikroba  Dalam  Es  Dung- Dung Di Sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Surakarta. Media  Gizi  Indonesia , 13(1).
Sari,  F,  A.  Ali,  A.  Junda,  M.  2019.  Isolasi
Dan  Karakterisasi  Actinomycetes Dari  Beberapa  Sentra  Perkebunan Bawang Antagonis Fusarium Oxysporum  F .Sp  Cepae  Dan  Uji Kemampuan Perkecambahan
Tanaman  Bawang  Merah  ( Allium ascalonium  L .)  Varietas  Tuktuk Super.  Jurusan  Biologi.  FMIPA. Universitas Negeri Semarang. Wahyuningsih,  N.  Zulaika,  E.  2019.
Perbandingan Pertumbuhan Bakteri Selulolitik  pada  Media  Nutrient Broth dan Carboxy Methyl Cellulose. Jurnal  seni  da  sains. Insititut Teknologi Sepuluh November . Yusjadani.  2017.  Uji  Aktivitas  Antimikroba Fraksi Ekstrak Daun Mahoni ( Swietenia  mahagoni  L .)  Terhadap Beberapa Mikroba Patogen. Univeristas  Islam  Negeri  Alaudin. Makassar
Zhang,  Q.Liu,  Y.  2016.  The  Strategies  for Increasing  Cordycepin  Production of  Cordyceps  Militaris  by  Liquid Fermentation. Fungal  Genomics  & Biology , 6(1) . http://doi.org/10.4172/2165- 8056.1000134