## SKRINING FITOKIMIA EKSTRAK ETANOL DAUN AVICENNIA MARINA DARI KAWASAN BANDAR BAKAU DUMAI

## PHYTOCHEMICAL SCREENING OF AVICENNIA MARINA LEAF ETHANOL EXTRACT FROM BANDAR BAKAU DUMAI AREA
Nirmala Efri Hasibuan 1 , Aulia Azka 1* , Basri 1 , dan Apri Mujiyanti 2
1 Politeknik Kelautan dan Perikanan Dumai, Jl. Wan Amir, No. 1, Kel. Pangkalan Sesai, Kecamatan Dumai Barat, Kota Dumai, Provinsi Riau, Indonesia
2 Politeknik Sriwijaya, Jl. Srijaya Negara Bukit Besar, Palembang, Sumatera Selatan, Indonesia *Korespondensi : azkaa8586@gmail.com (A Azka) Diterima 20 Mei 2022 – Disetujui 28 Agustus 2022
ABSTRAK. Salah satu hutan mangrove yang masih dilestarikan di kota Dumai adalah kawasan Bandar Bakau. Terdapat berbagai jenis mangrove di kawasan Bandar Bakau, antara lain Avicennia marina . Tumbuhan merupakan sumber senyawa bioaktif alami yang tidak terbatas dan memiliki potensi dalam bidang kesehatan dan industri farmasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder dalam ekstrak etanol daun A.marina . Tahapan penelitian ini terdiri dari tahap preparasi sampel, ekstraksi dan skrining fitokimia. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dengan pelarut etanol. Hasil uji skrining fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol  daun A.marina positif  mengandung  senyawa flavonoid,  terpenoid,  steroid,  saponin dan tanin ,  tetapi menunjukkan hasil negatif untuk kandungan alkaloid .
Kata kunci : Avicennia marina , ekstraksi, mangrove, metabolit sekunder, uji fitokimia.
ABSTRACT. One of the preserved mangrove forests in the city of Dumai is the Bandar Bakau area. There are various types of mangroves in the Bandar Bakau area, including Avicennia marina. Plants were an unlimited source of natural bioactive compounds and have potential in the health and pharmaceutical industries.The purpose of this study  was  to  determine the content  of secondary  metabolites  in  the  ethanolic  extract  of  A.marina  leaves.  The stages of this research consisted of the stages of sample preparation, extraction and phytochemical screening. Extraction  was  carried  out  by  maceration  method  with  ethanol  as  solvent.  The  results  of  the  phytochemical screening test showed that the ethanolic extract of A.marina leaves was positive for flavonoid, terpenoids, steroids, saponins and tannins compounds, but showed negative results for the content of alkaloids.
KEYWORDS: Avicennia marina, extraction, mangrove, secondary metabolites, hytochemical analysis .

## 1. Pendahuluan
Tanaman mangrove merupakan tanaman yang tumbuh subur di kawasan pesisir Indonesia dan memiliki potensi pemanfaatan yang tinggi dalam berbagai bidang disebabkan oleh adanya kandungan senyawa bioaktif. Untuk wilayah kota Dumai terdapat kawasan ekowisata mangrove Bandar Bakau Dumai dengan luas 31 Ha dan yang baru dikelola sekitar 13 Ha di Kawasan Bandar Bakau Dumai (Mulyadi et al ., 2021). Hutan mangrove pada umumnya berperan sebagai pelindung pantai dari bahaya tsunami, penahan erosi dan  perangkap  sedimen,  pendaur  hara,  menjaga  produktivitas  perikanan,  peredam  intrusi  air  laut, penyangga  kesehatan,  menjaga  keanekaragaman  hayati,  dan  menopang  ekosistem  pesisir  lainnya (Alqarni, 2017). Selain itu ekosistem mangrove dikenal sebagai tumbuhan obat, seperti daun mangrove api-api ( A. marina ) telah lama digunakan dalam pengobatan tradisional untuk pengobatan penyakit kulit, rematik, cacar, bisul dan pakan hewan di peternakan (Fitri et al ., 2021).
Penelitian  terkait  kandungan  senyawa  pada  beberapa  jenis  mangrove  telah  banyak  dilakukan, diantaranya penelitian yang dilakukan oleh Akasia et al ., (2021), dengan menggunakan daun spesies mangrove Rhizophora  apiculata dan Rhizophora  mucronata yang  dinyatakan  mengandung  senyawa
AURELIA JOURNAL VOL. 4 (2) OKTOBER 2022 : 137-142
e-mail: aurelia.journal@gmail.com
metabolit sekunder yang berbeda. Hal ini menunjukkan bahwa kandungan senyawa metabolit sekunder berbeda pada setiap jenis spesies mangrove berbeda. Senyawa metabolit sekunder merupakan  bahan alami yang dihasilkan melalui metabolisme sekunder pada tumbuhan. Kondisi lingkungan perairan dapat mempengaruhi  pertumbuhan tanaman mangrove dan proses biosintesis senyawa metabolit sekunder sehingga menyebabkan kandungan senyawa metabolit sekunder yang diperoleh berbeda (Bhattacharya, 2019). Selain berdasarkan jenis spesies, kandungan senyawa bioaktif juga berbeda pada setiap bagian tanaman  mangrove  seperti  akar,  kulit  batang,  buah  dan  daun  mangrove  (Rahmah,  2021).  Senyawa fitokimia dipisahkan melalui proses ekstraksi seperti sokletasi, maserasi, perkolasi dan lainnya. Dalam penelitian ini digunakan ekstraksi dengan metode maserasi dengan pelarut etanol. Pelarut etanol adalah salah satu pelarut yang efektif dan direkomendasikan untuk ekstraksi tanaman (Muhongo et al ., 2021). Tujuan penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi senyawa metabolit sekunder yang terkandung pada ekstrak etanol daun mangrove A. marina dari kawasan bandar bakau Dumai.

## 2. Metode Penelitian

## 2.1 Alat dan Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun Avicennia marina dari bandar bakau Dumai, etanol (p.a merck), H 2 SO 4 (p.a merck), FeCl 3 (p.a merck), Mg (p.a merck), HCl (p.a merck), amil alkohol (p.a  merck),    pereaksi  Meyer,  pereaksi  Bouchardart,  pereaksi  Liebermann-Burchard,  kloroform  (p.a merck),  Salkowsky  dan  akuades.  Alat  yang  digunakan  adalah  alat-alat  gelas  (pyrex),  neraca  analitik (Ohauss),  kertas  saring  whatmann  no.42,  oven  (Memmert),  ayakan  saringan  (20  mesh), rotary evaporator (Heidolph).

## 2.2. Preparasi Ekstrak Daun Mangrove
Daun  mangrove  A.  marina  tua  dan  segar  dipotong  kecil-kecil  dan  dikeringkan  dengan  pengeringan matahari  dan  pengeringan  angin-angin.  Kemudian  digiling  hingga  ukuran  partikel  20  mesh.  Tahap selanjutnya adalah ekstraksi. Ekstraksi menggunakan metode maserasi dengan pelarut polar yaitu etanol 70%.  Perbandingan  bahan  dan  pelarut  yang  digunakan  adalah  1:5  selama  2x24  jam.  Kemudian dilakukan penyaringan, filtrat dievaporasi menggunakan rotary vakum evaporator dengan suhu 40°C dan 60 rpm selama 6 jam (Pratama, 2020). Selanjutnya dihitung rendemen ekstrak etanol daun mangrove dengan rumus:
𝑟𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 (%) = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 (𝑔) 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 (𝑔) × 100% ……………………………………………………… (1)

## 2.3 Pengujian Fitokimia
Analisis  senyawa  aktif  ekstrak  etanol  daun  mangrove A.  marina yang  dilakukan  meliputi alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, triterpenoid , dan steroid sebagai berikut (Endarini, 2016 ) dan (Shaikh & Patil, 2020) :
2.3.1 Uji alkaloid
Sebanyak 0.05 g sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu dilakukan penambahan  H 2 SO 4 lalu dilakukan pengocokan hingga benar-benar tercampur. Kemudian disaring dan dilakukan penambahan pereaksi Meyer akan terbentuk endapan putih kekuningan. Penambahan pereaksi Bouchartdart akan terbentuk endapan cokelat.

## 2.3.2 Uji flavonoid
Sebanyak 0.05 g sampel ditambahkan serbuk Mg sebanyak 0.05 mg, setelah itu ditambahkan 0.2 mL amil alkohol dan 4 mL alkohol. Hasil uji positif bila larutan berwarna merah, kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol. Uji flavonoid dengan penambahan pereaksi  FeCl 3 dilakukan dengan melarutkan ekstrak  dalam  etanol  mendidih  kemudian  ditambah  FeCl 3 .  Sampel  menunjukkan  hasil  positif
mengandung flavonoid , apabila terbentuk warna hijau atau hitam pekat setelah penambahan FeCl 3 . Uji flavonoid dengan penambahan pereaksi H 2 SO 4 dilakukan dengan sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi,  kemudian  ditambahkan  beberapa  tetes  larutan  asam  sulfat  pekat  H 2 SO 4. Diamati  perubahan warna  yang  terjadi,  jika  larutan  berubah  warna  menjadi  merah  tua  atau  kuning  menandakan  adanya senyawa flavonoid.

## 2.3.3 Uji tanin
Pengujian tanin diawali  dengan  penyiapan  sampel  sebanyak  0.05  g.  Sampel kemudian  ditambahkan FeCl 3 dan dihomogenkan. Sampel positif mengandung tannin jika terbentuk warna hijau kehitaman atau biru kehitaman.

## 2.3.4 Uji saponin
Sebanyak 0.05 g sampel diletakan dalam tabung reaksi. Kemudian ditambahkan air panas, dan tabung reaksi dikocok. Diamkan selama 30 menit dan tambahkan HCl 2 N sebanyak 1 tetes. Hasil positif uji saponin ditunjukkan dengan adanya busa yang stabil.

## 2.3.5 Uji steroid dan triterpenoid
Pengujian steroid dengan pereaksi Liebermann-Burchard diawali dengan penyiapan sampel sebanyak 0.05  g.  Sampel  dilarutkan  dalam  2  mL  kloroform  pada  tabung  reaksi  kering.  Larutan  tersebut ditambahkan 10 tetes anhidrat asetat dan 3 tetes asam sulfat pekat. Sampel positif mengandung steroid jika terbentuk warna biru atau jingga. Sampel positif mengandung triterpenoid jika terbentuk warna ungu dan  jingga.  Pengujian steroid dengan  pereaksi  Salkowski  sampel  yang  telah  disiapkan  ditambahkan dengan  1  ml  H 2 SO 4 pekat  melalui  dinding  tabung  reaksi.  Adanya steroid tak  jenuh  ditandai  dengan timbulnya cincin warna merah.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1 Ekstrak Etanol Daun Mangrove A. Marina
Ekstrak  etanol  daun  mangrove A.  marina yang  diperoleh  berupa  pasta  berwarna  coklat  kehitaman dengan  aroma  khas  dari  daun  mangrove.  Rendemen  ekstrak  etanol  didapatkan  berdasarkan perbandingan bobot ekstrak dengan bobot sampel. Ekstrak etanol menghasilkan rendemen sebesar 17.6 %.  Proses  ekstraksi  dalam  penelitian  ini  menggunakan  pelarut  etanol.  Pelarut  etanol  dan  metanol berperan sebagai pelarut dengan potensi ekstraksi tertinggi untuk senyawa fitokimia  (Muhongo et al ., 2021). Nur et al ., (2020) menyatakan bahwa ekstraksi senyawa metabolit sekunder dengan dua pelarut berbeda yaitu pelarut etanol dan etil asetat lebih disarankan menggunakan pelarut etanol yang memiliki tingkat kepolaran lebih tinggi.

## 3.1. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Mangrove A. Marina
Skrining fitokimia penting dilakukan untuk menentukan senyawa aktif  yang terdapat pada tumbuhan dan sebagai dasar untuk menentukan manfaat penggunaan bahan pada bidang yang tepat. Hasil skrining fitokimia  ekstrak  etanol  daun  mangrove A.  Marina dapat  dilihat  pada Tabel  1 .  Hasil  diperoleh  positif terhadap senyawa flavonoid, terpenoid, steroid, tanin, dan saponin . Sedangkan untuk senyawa alkaloid menunjukkan hasil negatif.
Analisis alkaloid ekstrak etanol daun A. marina dengan dua metode yang berbeda menunjukkan hasil negatif. Hasil negatif dinyatakan berdasarkan tidak terbentuknya endapan putih dengan pereaksi Meyer dan tidak terbentuk pula endapan coklat dengan pereaksi bouchardart.   Khafagi et al ., ( 2003) dalam penelitiannya juga mendapatkan hasil negatif, hal ini menunjukkan rendahnya nilai toksisitas dari A. marina.
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Mangrove A. Marina Pereaksi Hasil Alkaloid Bouchardart - Maeyer - Flavonoid FeCl 3 + Mg. HCl
+ H 2 SO 4
+ Terpenoid Liebermann-Burchard + Salkowsky + Steroid Liebermann-Burchard + Salkowsky + Saponin Aquadest + Tanin FeCl 3 +
Keterangan :
(+) = mengandung senyawa metabolit sekunder ( -) = tidak mengandung senyawa metabolit sekunder
Selain  itu,  Darkwah et  al .,  (2018)  menyatakan  kandungan alkaloid dalam  suatu  tanaman  mulai berkurang dan konsentrasinya melemah saat tanaman dewasa. Namun berbeda dengan Jairaman et al , (2019)  bahwa  daun A.  marina yang  berasal  dari Muthukadu  Lake India  menunjukkan  kandungan senyawa fitokimia alkaloid, flavonoid , dan terpenoid dinyatakan positif tetapi senyawa saponin, tanin dan steroid dinyatakan  negatif.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  jenis  tanaman  yang  sama  dapat  memiliki kandungan senyawa berbeda yang disebabkan oleh berbagai faktor. Proses ekstraksi senyawa fitokimia dapat dipengaruhi oleh faktor yang berasal dari sampel dan faktor yang berasal dari proses ekstraksi. Faktor sampel dapat berupa bagian tanaman, asal tanaman, ukuran partikel, metode pengeringan dan kadar  air.  Faktor  ekstraksi  antara  lain  jenis  pelarut,  metode  ekstraksi,  rasio  pelarut,  suhu  dan  lama ekstraksi (Shaikh & Patil, 2020).
Analisis fotokimia terhadap senyawa flavonoid dalam penelitian ini dilakukan dengan tiga pereaksi berbeda dan menunjukkan hasil yang sama yaitu positif. Perubahan warna ekstrak menjadi warna merah, oranye dan hijau tergantung pada struktur flavonoid yang terkandung dalam sampel (Endarini, 2016). Marina et al ., (2015) menyatakan adanya senyawa flavonoid mampu menghambat pertumbuhan bakteri dengan mendenaturasi protein yang menyebabkan aktivitas metabolisme sel bakteri terhenti. Selain itu, kandungan flavonoid dan  senyawa  metabolit  sekunder  lainnya  dalam  suatu  ekstrak  tanaman menunjukkan prospek yang baik terhadap aktivitas antioksidan, hal ini dirujuk berdasarkan penelitian Koomson et al (2018), Kalita et al (2012), dan Darkwah et al (2018).  Lisi et al (2017) juga menyatakan bahwa senyawa yang memiliki kandungan flavonoid memiliki aktivitas antioksidan yang cukup baik. Pengujian ekstrak etanol daun A. marina terhadap senyawa terpenoid dan steroid dengan pereaksi Liebermann-Burchard  dan  Salkowsky  menunjukkan  hasil  positif.  Danata  &  Yamindago  (2014)  dalam penelitiannya terkait ekstrak metanol daun. A.marina menunjukkan hasil yang sama yaitu kandungan terpenoid positif, namun tidak pada semua sampel. Danata & Yamindago (2014) menyatakan kondisi lingkungan antara lain salinitas yang rendah dapat mempengaruhi kandungan senyawa terpenoid pada tanaman.  Kondisi  lingkungan  pesisir  dapat  mempengaruhi  konsentrasi  senyawa  metabolit  sekunder pada  tumbuhan  mangrove  (Hastuti et  al .,  2020).  Ananthavalli  &  Karpagam  (2017)  juga  menemukan hubungan keterkaitan lingkungan terhadap kandungan senyawa metabolit sekunder dari ekstrak daun A.  marina .  Ekstrak  daun A.  marina menunjukkan  hasil  positif  terhadap  senyawa terpenoid,  alkaloid, flavonoid ,  dan tanin .  Sedangkan  senyawa steroid menunjukkan  hasil  negatif.  Daun A.  marina yang berasal  dari  daerah  yang  lingkungannya  tercemar  dan  tidak  tercemar  ternyata  memberikan  aktivitas antibakteri  yang  berbeda.  Kondisi  lingkungan  yang  tercemar  menyebabkan  kandungan  senyawa metabolit sekunder rendah sehingga aktivitas antibakteri menurun.
Berdasarkan  pengujian  senyawa tanin terhadap  ekstrak  etanol  daun A.  marina diperoleh  hasil positif  dengan  menghasilkan  larutan  berwarna  hijau  kehitaman.  Senyawa tanin kondensasi  akan menghasilkan  warna  hijau  kehitaman  dengan  pereaksi  FeCl 3 1%.  Golongan  senyawa tanin bersifat
sebagai anti diabetes (Sangi et al ., 2008). Komposisi fitokimia yang cukup besar dari senyawa metabolit sekunder seperti tanin, fenol, flavonoid, alkaloid dan saponin mampu menangkal radikal bebas atau bersifat antioksidan  (Nwozol & Effiong, 2019). Tanaman yang kaya senyawa fitokimia dapat menjadi sumber senyawa yang mampu mencegah dan melawan berbagai penyakit( Achikanu, et al ., 2021).

## 4. Kesimpulan dan Saran
Skrining fitokimia ekstrak etanol daun A. marina menunjukkan hasil positif terhadap senyawa flavonoid, terpenoid, steroid, saponin dan tanin , tetapi menunjukkan hasil negatif untuk kandungan alkaloid . Penting untuk dilakukan penelitian lanjutan terkait aktivitas antibakteri dan antioksidan ekstrak etanol daun A. marina sehingga menunjang pengaplikasian ekstrak dalam berbagai bidang.

## Daftar Pustaka
Achikanu, C. E., Ani, O. N., & Akpata, E. I. (2021). Phytochemical and Vitamin Composition of Cucumis metuliferus Juice. Asian Journal of Biochemistry, Genetics and Molecular Biology , June , 92 – 98. https://doi.org/10.9734/ajbgmb/2021/v9i430232.
Ananthavalli,  M.,  &  Karpagam,  S.  (2017).  Phytochemical  studies  on  mangrove. Journal  of  Medicinal Plants Studies , 5 (3), 47 – 49.
Danata, R. H., & Yamindago, A. (2014). Analysis of antibacterial activity of Avicennia marina mangrove leave extract from Trenggalek Regency and Pasuruan Regency on the growth of Staphylococcus aureus and Vibrio alginolyticus. Jurnal Kelautan , 7 (1), 12 – 19.
Darkwah,  W.  K.,  Ao,  Y.,  Adinortey,  M.  B.,  Weremfo,  A.,  Abrokwah,  F.  K.,  &  Afriyie,  E.  (2018).  Total Phenolic, Flavonoid and Alkaloid Contents, Oxidative DNA Damage Protective and Antioxidant Properties of Methanol and Aqueous Extracts of Dissotis rotundifolia Whole Plant. Free Radicals and Antioxidants , 8 (2), 82 – 88. https://doi.org/10.5530/fra.2018.2.13. Endarini, L. H. 2016. (2016). Farmakognisi dan Fitokimia . Book, 1 (December), 215.
Jairaman,  C.,  Yacoob,  S.  A.  M.,  &  Venkataraman,  A.  (2019).  Screening  of  Phytochemical  and  Anti- Oxidant Capacity of Avicennia Marina Leaf Extract From Backwaters of. International Journal of Research and Analytical Reviews , 6 (2), 27 – 32.
Kalita, S., Kumar, G., Karthik, L., & Rao, K. V. B. (2012). In vitro antioxidant and DNA damage inhibition activity of aqueous extract of Lantana camara L. (Verbenaceae) leaves. Asian Pacific Journal of Tropical  Biomedicine , 2 (3  SUPPL.),  S1675 – S1679.  https://doi.org/10.1016/S2221- 1691(12)60476-6.
Khafagi,  I.,  Gab-Alla,  A.,  Salama,  W.,  &  Fouda,  M.  (2003).  Biological  activities  and  phytochemical constituents of Avicennia marina (Forssk. Egyptian Journal of Biology , 5 , 62 – 69. Koomson,  D.  A.,  Kwakye,  B.  D.,  Darkwah,  W.  K.,  Odum,  B.,  Asante,  M.,  &  Aidoo,  G.  (2018). Phytochemical constituents, total saponins, alkaloids, flavonoids and vitamin c contents of ethanol extracts  of  five  solanum  torvum  fruits. Pharmacognosy  Journal , 10 (5),  946 – 950. https://doi.org/10.5530/pj.2018.5.160.
Lisi, A. K. F., Runtuwene, M. R. J., & Wewengkang, D. S. (2017). Uji Fitokimia Dan Aktivitas Antioksidan Dari Ekstrak Metanol Bunga Soyogik (Saurauia Bracteosa Dc.). Pharmacon , 6 (1), 53 – 61. Marina, E., Manurung, H., & Nugroho, R. A. (2015). Uji Fitokimia dan Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Balangla (Litsea cubeba ( Lour .) Pers .) terhadap Bakteri Stapylococcus aureus dan Escherichia coli. Prosiding Seminar Sains Dan Teknologi FMIPA Unmu , 1 (1), 1 – 10.
Muhongo, M. N., Kangogo, M., & Bii, C. (2021). Qualitative and quantitative phytochemical profiling of crude fractions of Pechuel-Loeschea leubnitziae leaves. Journal of Medicinal Plants Research , 15 (2), 64 – 72. https://doi.org/10.5897/jmpr2020.7073.
Nur, Y., Cahyotomo, A., & Fistoro, N. (2020). Profil GC-MS Senyawa Metabolit Sekunder dari Jahe Merah
(Zingiber officinale) dengan Metode Ekstraksi Etil Asetat, Etanol dan Destilasi. J. Sains Kes. 2020 , 2 (3), 198 – 205.
Nwozol,  S.  O.,  &  Effiong,  M.  E.  (2019).  Phytochemical  composition,  mineral  content  and  antioxidant activities of the methanol extract of Curcuma longa  and Viscum album. Journal of Food  and Pharmaceutical Sciences , 7 (1), 45 – 54. https://journal.ugm.ac.id/v3/JFPS/article/download/708/231.
Pratama,  D.  A.  (2020). Aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  bakau  hitam  (  Rhizophora  mucronata  L.) sebagai sediaan masker peel off derri alfianto pratama . Skripsi, Institut Pertanian Bogor. Sangi, M., Runtuwene, M. R. J., & Simbala, H. E. I. (2008). Analisa Fitokimia Obat Di Minahasa Utara. Chemistry Progres , 1 (1), 47 – 53.
Shaikh, J. R., & Patil, M. (2020). Qualitative tests for preliminary phytochemical screening: An overview.
International Journal of Chemical Studies , 8 (2), 603 – 608. https://doi.org/10.22271/chemi.2020.v8.i2i.8834.