Aktivitas Aspartate Aminotransferase (Ast) Dan Gamma Glutamyltransferase (Ggt) Pada Sapi Pejantan Unggul
(The  Activity  of  Aspartate  Aminotransferase  (AST)  and  Gamma Glutamyltransferase (GGT) on  Bulls)
Ida Zahidah Irfan 1) , Anita Esfandiari 2)
1) Balai Inseminasi Buatan Lembang, Kementerian Pertanian
2) Dep. Klinik, Reproduksi dan Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan, IPB

## Abstrak
Penentuan aktivitas Aspartate Aminotransferase (AST) dan Gamma
Glutamyltransferase (GGT)  dapat  digunakan  sebagai  alat  diagnostik  yang  penting  dalam biokimia  klinis.  Beberapa  faktor  dapat  mempengaruhi  aktivitas  AST  dan  GGT.  Tujuan  dari penelitian  ini  adalah  untuk  memperoleh  profil  aktivitas  AST  dan  GGT  sapi  pejantan  bibit berdasarkan  bangsa,  umur  dan  BCS  ( Body  Condition  Score )  yang  berbeda.  Sampel  darah  dari 160  sapi  pejantan  bibit    telah  dikoleksi.  Kimia  darah  dianalisis  dengan  prinsip  fotometer menggunakan kit komersial. Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa bangsa, umur dan BCS tidak berpengaruh nyata (P>0.05) terhadap aktivitas AST dan GGT.
Kata  kunci:    aktivitas Aspartate  Aminotransferase dan Glutamyltransferase ,  sapi,  bangsa, umur, Body Condition Score

## Abstract
Determination  of  Aspartate  Aminotransferase  (AST)  and  Gamma  Glutamyltransferase (GGT)  activity  can  be  used  as  an  important  diagnostic  tool  in  clinical  biochemistry.  Several factors can affect the activity of AST and GGT. The aim of this study is to obtain activity of AST and  GGTbased  on breed,  age  and  BCS  (body  condition  score).  Blood  samples  from  160 bulls were collected.  Blood chemistry were analyzed by photometer principle using a commercial kit. There weren’t significant (P>0.05) breed, age and BCS variation on AST and GGT activity. Key words: AST and GGT activity, bulls, breed, age, body condition score

## Pendahuluan
Darah  mengandung  berbagai  elemen dan  konstituen  yang  dapat  memberikan berbagai informasi mengenai status fisiologis, metabolisme  dan  homeostasis  yang  sedang berlangsung di dalam tubuh. Beberapa elemen selain  berpengaruh  terhadap  kesehatan,  dapat berpengaruh pula terhadap performa reproduksi  terutama  kualitas  semen  dan produksi  semen  beku.  Melalui  berbagai  jenis analisis,  level  elemen  dan  konstituen  darah tersebut  dapat  diketahui.  Hasil  analisis  dapat digunakan sebagai tolok ukur status metabolik dan  status  kesehatan  sapi  pejantan.  Beberapa gangguan  yang  bersifat  subklinis,  dapat dideteksi  lebih  awal  dengan  analisis  darah. Salah satu panel pemeriksaan profil metabolik adalah  pemeriksaan  fungsi  hati  melalui aktivitas beberapa enzim. Aspartate aminotransferase (AST), Alanine aminotransferase (ALT) dan Gamma Glutamyl Transferase (GGT) sering
digunakan  sebagai  indikator  adanya  penyakit hati  akut  atau  kronis  (Stojevic et  al .  2008). Namun  demikian,  tidak  seperti  AST,  sel  hati pada  ruminansia  tidak  menunjukkan  aktivitas ALT  yang  tinggi,  dan  peningkatan  aktivitas enzim  ini  pada  kerusakan  hati  atau  nekrosis hati  tidak  signifikan  (Stojevic et  al .,  2005). Aspartate aminotransferase merupakan enzim yang  terdapat  di  berbagai  jaringan,  terutama hati,  otot  lurik  dan  otot  jantung.  Peningkatan aktivitas  AST  dapat  menjadi  penanda  yang baik  adanya  kerusakan  jaringan  lunak. Aktivitas  GGT  sering  digunakan  sebagai indikator  adanya  proliferasi  epitel  saluran empedu, gangguan kolestasis. Davoudi (2013) melaporkan  adanya  pengaruh  umur,  bangsa dan  jenis  kelamin  terhadap  aktivitas  enzim hati  pada  kambing.  Kajian  aktivitas  AST  dan GGT  pada  sapi  perah,  sapi  potong,  kambing dan  domba  telah  banyak  dilakukan.  Kajian tersebut  pada  sapi  pejantan  bibit  yang digunakan sebagai bibit penghasil semen beku
di  Indonesia  masih  sangat  terbatas.  Oleh karena  itu  penelitian  ini  bertujuan  untuk mempelajari pengaruh bangsa, umur dan BCS
( Body  Condition  Score )  terhadap  aktivitas AST dan GGT pada sapi pejantan unggul.
Materi dan Metode Tempat penelitian Pengambilan sampel darah sapi pejantan bibit dilaksanakan di Balai Inseminasi Buatan Lembang dan pemeriksaan biokimia serum dilaksanakan di Laboratorium Patologi  Klinik,  Pusat  Studi  Satwa  Primata (PSSP) Institut Pertanian Bogor.
Materi Sebanyak 160 ekor sapi pejantan bibit terdiri  dari  bangsa  Friesian  Holstein  (FH), Limousin,  Simmental,  Ongole  dan  Brahman yang  sehat  secara  klinis,  umur  3-8  tahun digunakan dalam penelitian ini. Sapi dikelompokkan berdasarkan bangsa, umur dan BCS.
Sapi  pejantan  di  pelihara  secara individual,  dengan  komposisi  ransum  perhari seragam  berupa  Hay  rumput  Afrika  ±1  kg, konsentrat ± 4 kg, Feedmix® 15 g, Se 7 g, dan rumput Gajah  ± 50 kg. Air minum disediakan secara ad libitum .

## Metode
Pemeriksaan Kesehatan
Pemeriksaan  klinis  kesehatan  sapi pejantan  dilakukan  oleh  Dokter  Hewan  Balai Inseminasi  Buatan  Lembang.  Sesuai  Form Sistem  Manajemen  Mutu  ISO  9008/2001 Bagian  F-07/BIBL/01/Medik  Veteriner  Log Sheet  Kondisi  Perawatan  Kesehatan  Ternak Harian.
Penentuan Body Condition Score Pengambilan  data  untuk  menentukan nilai  BCS  dilakukan  sesuai  dengan  metode Edmonson et  al .,  (1989).  Evaluasi  dilakukan pada  8  titik  pengamatan,  yaitu  (1)  tonjolan tegak  tulang  belakang  ( processus  spinosus ),
(2)  antara  tonjolan  tegak  dengan  tonjolan datar  tulang  belakang  ( processus  spinosus ke processus  transversus ),  (3)  tonjolan  datar tulang  belakang  ( processus  transversus ),  (4) legok lapar ( flank ), (5) tonjolan tulang pinggul depan  ( tuber  coxae )  dan  belakang  ( tuber ishcii ),  (6)  daerah  antara  tonjolan  tulang pinggul  depan–belakang  ( tuber  coxae-tuber ischii ),  (7)  daerah  antara  tonjolan  tulang pinggul depan kiri dengan depan kanan ( tuber coxae kanan  dan  kiri),  dan  (8)  daerah  antara tulang  ekor  ( vertebrae  coccygea )  dengan
tonjolan  tulang  pinggul  belakang  ( tuber ischii ).  Hasil  pengamatan  berupa  skor  1-5 (skor 1 = sangat kurus, skor 3 = sedang, skor 5 = sangat gemuk).
Koleksi, Preparasi dan Analisis Sampel

## Darah
Sapi  Pejantan  ditempatkan  dalam kandang  jepit  atau bull  crush .  Sampel  darah diambil  dari  vena coccygea menggunakan jarum  nomor  18-G.  Sampel  darah  yang diperoleh segera dimasukkan ke dalam tabung vacutainer tanpa  antikoagulan  yang  sudah diberi  label  kode  sampel.  Sampel  kemudian disimpan pada suhu ruang (25 o C) selama 1-2 jam  supaya  membeku  sempurna.  Serum  yang terbentuk  dipisahkan  dari clot (bekuan  darah) dan  disimpan  dalam  tabung  mikro,  ditutup rapat  dan  diberi  identitas.  Sampel  dikemas sesuai  standar  dan  dikirim  ke  laboratorium untuk dianalisis.
Sampel  darah  dianalisis  terhadap aktivitas  AST  dan  GGT  dengan  prinsip fotometer  (Photometer  5010 ® )  menggunakan kit  komersial.  Prinsip  dasar  fotometri  adalah pengukuran  penyerapan  sinar  akibat  interaksi sinar  yang  mempunyai  panjang  gelombang tertentu  dengan  larutan  atau  zat  warna  yang dilewatinya.Penggunaan fotometer lebih sering digunakan untuk kebutuhan laboratorium klinis (analisa darah).
A nalisis Data
Data  disajikan  dalam  bentuk  rerata dan  standar  deviasinya.  Data  diuji  secara statistik  menggunakan  metode  analisis  model linier  untuk  mengetahui  pengaruh  bangsa, umur  dan  BCS  terhadap  aktivitas  AST  dan GGT.Data  dianalisis  menggunakan software Minitab® versi 16.

## Hasil dan Pembahasan Berdasarkan Bangsa
Hasil  analisis  statistik,  memperlihatkan bahwa  pada  penelitian  ini  bangsa  sapi  tidak berpengaruh  nyata  (P>0.05)  terhadap  rerata aktivitas  AST  maupun  GGT.  Hal  ini  sesuai dengan  hasil  penelitian  Kucera  dan  Chladek (2004)  pada  sapi  potong.  Namun  demikian, hasil  ini  bertolak  belakang  dengan  hasil penelitian  Mapiye et  al. (2010a)  bahwa
bangsa memengaruhi aktivitas enzim
aminotransferase  pada  sapi  lokal  Nguni  dan sapi  persilangan  lokal  ( local  crossbreed )  di Afrika. Sapi persilangan menunjukkan aktivitas AST yang lebih rendah dibandingkan dengan sapi lokal Nguni.
Davoudi  (2013)  melaporkan  adanya pengaruh  umur,  bangsa  dan  jenis  kelamin terhadap  aktivitas  enzim  hati  pada  kambing. Peningkatan  aktivitas  enzim  hati  merupakan indikasi  adanya  penurunan  fungsi  hati, gangguan, penyakit atau kegagalan fungsi hati oleh berbagai sebab (Davoudi 2013). Aktivitas  enzim-enzim  yang  terkait  dengan metabolisme  energi  merupakan  parameter biokimia  yang  penting  untuk  memprediksi derajat  kerusakan  organ-organ  parenkim (Dokovic et  al. 2013).  Peningkatan  aktivitas dan  beban  metabolik  organ-organ  pencernaan dan  kejadian  asidosis  ringan  pada  sapi  yang digemukkan,  dapat  mengakibatkan  kerusakan ringan  sel  parenkhim  hati  (Dokovic et  al. 2010).  Kerusakan  sel  parenkhim  hati  akibat induksi  asidosis  yang  berlangsung  terus menerus  dapat  mengakibatkan  peningkatan aktivitas AST dan GGT dalam sirkulasi darah pada  sapi  yang  digemukkan  (Mori et  al. 2007). Disisi lain, kejadian
lipolisis/ketogenesis  dapat  juga  meningkatkan aktivitas  AST  akibat  rusaknya  hepatosit  oleh hadirnya  badan  keton  (Cincovic et  al .  2012). Dokovic et  al. (2013)  melaporkan  bahwa terdapat  korelasi  positif  antara  aktivitas  AST dengan mobilisasi lemak (konsentrasi NEFA/ Non  esterified  fatty  acid )  pada  sapi perah  dimasa  awal  laktasi.  Peningkatan
aktivitas  AST  bersamaan  dengan  peningkatan konsentrasi NEFA dalam darah juga dilaporkan  oleh  Elitok et  al .  (2006)  dan Cincovic et al. (2012) pada sapi perah periode partus.  Stojevic et  al. (2008)  melaporkan bahwa  aktivitas  AST  pada  sapi  pejantan Simmental  103.68%  lebih  rendah  bila dibandingkan  dengan  referensi  standar  pada sapi perah yang digunakan. Namun demikian, berbagai hal yang mengakibatkan peningkatan aktivitas AST pada sapi perah dan sapi potong sangat mungkin terjadi pada sapi pejantan.
Peningkatan  aktivitas  GGT  dalam sirkulasi  darah  sering  digunakan  sebagai indikator  adanya  proliferasi  epitel  saluran empedu,  gangguan  kolestasis  (Stojevic et  al . 2005;  Davoudi  2013),  sirosis  hati,  hepatopati kronis  dan  toksik  (Krammer  dan  Hoffmann 1997),  fascioliasis  (Molina et  al. 2006), gangguan  metabolik  dan  ketosis  (Rico et  al . 1977).  Aktivitasnya  relatif  tinggi  pada  hati sapi,  kuda,  domba  dan  kambing  (Stojevic et al. 2005). Kebanyakan dari penyakit hepatoseluler dan hepatobilier akan meningkatkan  aktivitas  GGT  dalam  serum dan aktivitasnya akan tetap meningkat selama kerusakan  sel  berlangsung  (Davoudi  2013). Stojevic et  al .  (2005)  melaporkan  bahwa aktivitas GGT mengalami penurunan, sedangkan aktivitas AST mengalami peningkatan  pada  masa  akhir  kebuntingan pada sapi perah. Namun Stojevic et al. (2008) juga  melaporkan  bahwa  aktivitas  GGT  pada sapi  pejantan  Simmental  54.26%  lebih  tinggi bila  dibandingkan  dengan  referensi  standar pada sapi perah yang digunakan.
Tabel 1 Aktivitas AST dan GGT berdasarkan bangsa
Bangsa Parameter AST (U/L) GGT (U/L) FH (n=16) 86.88±20.27 a 18.87± 4.01 a Limousin (n=62) 88.34±21.79 a 17.62± 4.19 a Simmental (n=63) 81.27±15.95 a 18.88± 4.37 a Brahman (n=12) 76.48±17.54 a 18.84± 3.27 a Ongole (n=7) 80.36±25.79 a 19.17± 3.81 a Referensi standar *) 78-132 6.1-17.4
Huruf superscript yang sama pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang tidak nyata (P>0.05);
*) Referensi standar pada sapi potong (Radostits et al. , 2007)

## Tabel 2 Aktivitas AST dan GGT berdasarkan umur
Umur Parameter AST (U/L) GGT (U/L) 3 tahun (n=6) 72.97±12.00 a 18.50±1.88 a 4 tahun (n=60) 82.87±22.11 a 17.97±4.31 a 5 tahun (n=33) 81.82±16.08 a 17.85±4.57 a 6 tahun (n=37) 86.21±18.77 a 18.34±3.85 a 7 tahun (n=18) 90.33±18.49 a 19.54±4.35 a 8 tahun (n=6) 90.28±21.80 a 16.78±4.31 a Referensi standar *) 78-132 6.1-17.4
Huruf superscript yang sama pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang tidak nyata (P>0.05); *) Referensi standar pada sapi potong (Radostits et al. 2007)
Aktivitas  AST  sapi  pejantan  pada penelitian  ini  rata-rata  21.27%  lebih  rendah apabila  dibandingkan  dengan  rerata  referensi standar pada sapi potong (Tabel 1). Yokus dan Cakir  (2006)  dan  Ndlovu et  al .  (2007) melaporkan  bahwa  aktivitas  AST  dapat dipengaruhi oleh musim dan variasi fisiologis. Aktivitas  enzim  pada  sapi  yang  sehat  rendah atau tidak ada (Ndlovu et al . 2007). Aktivitas GGT  sapi  pejantan  pada  penelitian  ini  rata- rata 58.94% lebih tinggi apabila dibandingkan dengan rerata referensi standar yang digunakan  (Tabel  1).  Stojevic et  al. (2008) melaporkan  bahwa  aktivitas  AST  pada  sapi pejantan  Simmental  103.68%  lebih  rendah dan  aktivitas  GGT  54.26%  lebih  tinggi  bila dibandingkan  dengan  referensi  standar  pada sapi  perah  yang  digunakan.  Variasi  tersebut diduga  karena  peruntukan  ternak  yang digunakan  untuk breeding dan  faktor  nutrisi (Stojevic et al. 2008).

## Berdasarkan Umur
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  umur  sapi  tidak berpengaruh nyata (P>0.05) terhadap aktivitas AST dan GGT. Hal ini sesuai dengan laporan Dokovic et  al. (2010)  dan  Mamun et  al. (2013)  bahwa  aktivitas  AST  dan  GGT  pada sapi  potong  tidak  dipengaruhi  oleh  umur. Demikian  pula  pada  kelinci  New  Zealand (Olayemi  dan  Nottidge  2007),  dan  pada  unta (Elrayah et al. 2012). Namun hasil ini bertolak belakang  dengan  laporan  Ottesile  dan  Kasali (1992) yang melaporkan bahwa umur memengaruhi aktivitas AST pada domba, sapi Abeerdeen  Angus  (Pavlik  2009),  sapi  Bali (Kendran et al . 2012), kuda (Mikniene 2014), monyet  ekor  panjang  (Xie et  al .  2013),  dan kalkun (Ibrahim et al. 2012).
Rerata aktivitas AST pada penelitian ini menunjukkan kecenderungan adanya
peningkatan  pada  umur  sapi  yang  lebih  tua. Hasil  ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian  pada sapi potong (Doornenball et al. 1988; Mamun et  al .  2013),      domba  (Ottesile  dan  Kasali 1992),  sapi  Bali  (Kendran et  al. 2012)  dan kalkun  (Ibrahim et  al .  2012).  Apabila dibandingkan  dengan  referensi  standar  yang digunakan,  rerata  aktivitas  AST  berdasarkan umur sapi 19.92% lebih rendah. Stojevic et al. (2008) melaporkan bahwa aktivitas AST pada sapi  pejantan  Simmental  103.68%  lebih rendah  bila  dibandingkan  dengan  referensi standar pada sapi perah yang digunakan.
Rerata  aktivitas  GGT  pada  penelitian ini  54.85%  lebih  tinggi  bila  dibandingkan dengan  referensi  standar  yang  digunakan.
Tidak terdapat peningkatan maupun penurunan aktivitas GGT dengan bertambahnya  umur  sapi.  Stojevic et  al.
(2008)  melaporkan  hasil  penelitiannya  pada sapi pejantan Simmental bahwa aktivitas GGT 54.26% lebih tinggi bila dibandingkan dengan referensi  standar  pada  sapi  perah  yang digunakan.

## Berdasarkan BCS
Hasil  analisis  statistik  menunjukkan bahwa  BCS  sapi  tidak  berpengaruh  nyata (P>0.05)  terhadap  aktivitas  AST  dan  GGT (Tabel  3).  Rerata  aktivitas  AST  pada penelitian  ini  menunjukkan  kecenderungan adanya  penurunan  pada  sapi  dengan  BCS yang  lebih  tinggi.  Apabila  dibandingkan dengan  referensi  standar  yang  digunakan, rerata  aktivitas  AST  pada  penelitian  ini 19.60%  lebih  rendah  sedangkan  rerata aktivitas  GGT  62.10%  lebih  tinggi  dari  nilai tengah  standar.  Rerata  aktivitas  GGT  pada sapi  dengan  BCS  5,  lebih  tinggi  79%  bila dibandingkan  dengan  rerata  referensi  standar yang digunakan (Tabel 3).

## Tabel 3 Aktivitas AST dan GGT berdasarkan BCS
BCS Parameter AST (U/L) GGT (U/L) 3 (n=33) 89.92±22.87 a 18.06±3.96 a 4 (n=118) 82.82±18.62 a 18.00±4.21 a 5 (n=9) 80.84±16.20 a 21.00±3.92 a Referensi standar *) 78-132 6.1-17.4
Huruf superscript yang sama pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang tidak nyata (P>0.05);
*) Referensi standar pada sapi potong (Radostits et al., 2007)
West (1997) melaporkan bahwa pemeriksaan aktivitas GGT memiliki spesifisitas tinggi untuk membantu
menegakkan  diagnosis  adanya  gangguan  hati kronis pada sapi dan sensitif untuk membantu mendiagnosis  adanya  gangguan  hati  akut akibat  fascioliasis  pada  sapi.  Pemeriksaan aktivitas  GGT  juga  lebih  sensitif  untuk membantu  mendiagnosis  adanya fatty  liver dibandingkan  dengan  ketosis  pada  sapi, karena degenerasi lemak pada ketosis memiliki  intensitas  perlemakan  sel  hati  yang yang  lebih  rendah  (Steen  1997).  Menurut Moreira et  al., (2012),  untuk  mendeteksi adanya  lesi  kronis  pada  hati  sapi  yang  sehat secara  klinis,  AST  memiliki  spesifitas  78.8% dan  sensitifitas  22.4%  sedangkan  GGT memiliki  spesifisitas  90.4%  dan  sensitifitas 22.4%.  Adanya  variasi  aktivitas  enzim  hati sapi  pejantan  pada  penelitian  ini  diduga karena  faktor  nutrisi  dan  peruntukan  sapi pejantan  yang  digunakan  sebagai  sumber semen  beku.  Kecenderungan  peningkatan aktifitas GGT pada sapi pejantan dengan BCS lebih  tinggi  dapat  disebabkan  oleh  tingginya metabolisme  lemak  dan  protein  pada  sapi pejantan dengan BCS tinggi
tersebut.Disamping  itu,  ternak  dengan  BCS tinggi  memiliki  resiko  mengalami  stres oksidatif  yang  tinggi.  Ozata et  al .,  (2002), Higdon  dan  Frei  (2003)  dan  Keaney et  al., (2003)  melaporkan  bahwa  terdapat  hubungan yang  erat  antara  stres  oksidatif,  indeks  massa tubuh  dan  kehilangan  berat  badan  pada manusia.  Para  peneliti  menduga  terdapat hubungan erat antara stres oksidatif dan kasus gangguan  metabolik  pada  manusia  (Higdon dan  Frei  2003;  Morrow  2003).  Bernabucci et al., (2005)  jugamelaporkan  bahwa  sapi  perah dengan  BCS  yang  tinggi  lebih  sensitif terhadap  kemungkinan  terjadinya  mobilisasi lemak  dan  stres  oksidatif.Hingga  akhirnya mobilisasi  lemak  dan  stress  oksidatif  tersebut
dapat  meningkatkan  aktivitas  GGT  pada individu  dengan  indeks  massa  tubuh  tinggi.
Diperlukan pemeriksaan lain
yang mendukung  untuk  menegakkan  diagnosa adanya  gangguan  fungsi  hati  pada  terhadap sapi pejantan dengan BCS tinggi.
Kesimpulan Bangsa, umurdan BCS sapi
pejantantidak  berpengaruh  nyata  terhadap rerata  aktivitas  AST  dan  GGT.Aktifitas  GGT pada  sapi  pejantan  bibit  berada  diatas  kisaran referensi standar.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih diberikan kepada Balai  Inseminasi  Buatan  Lembang  yang  telah memberikan bantuan dana penelitian sehingga penelitian ini dapat terlaksana dengan baik.

## Daftar Pustaka
Bernabucci  U,  Ronchi  B,  Lacetera  N, Nardone  A.  2005.  Influence  of  Body Condition  Score  on  Relationships
Between Metabolic Status and Oxidative  Stress  in  Periparturient Dairy  Cows .  J.  Dairy  Sci .  88:2017– 2026 Cincovic R, Branislava B, Biljana R, Hristov
S,  Dokovic  R.  2012.  Influence oflipolysisand ketogenesis to metabolic and hematological parameters indairy cowsduring periparturient period . Acta veterinaria . 62(4): 429-444 doi:10.2298/AVB1204429C Davoudi  SM.  2013.  Study  of  Hepatic
Problems  in  livestock, Euro  J  Zool Res . 2 (4):124-132
Dokovic R, Zoran I, Vladimir K, Vladimir D, Boban  J.  2010.  Blood  biochemical parameters  and  enzyme  activity  in
beef cattle. Acta agriculturae Serbica . 15(29) : 47-54 Dokovic  R,  Kurcubic  V,  Ilic  Z,  Cincovic  M, Petrovic  M,  Fratric  N,  Jasovic  B. 2013. Evaluation of metabolic statu in Simmental  dairy  cows  during  late pregnancy  and  early  lactation. Vet. Akrhiv . 83: 893-602.
Edmonson AJ, Lean IJ, Weaver LD, Farver T, Webster  G.  1989.  A  Body  Condition Scoring  Chart  for  Holstein  Dairy Cows. Journal of Dairy Science. 72(1): 68–78.
Elitok  B,  Kabu  M,  Elitok  OM.  2006. Evaluation  of  liver  function  tests  in cows  during  periparturient  period. FU.  Saglik.  Bil.  Dergisi .  20(3):205- 209.
Elrayah  HA,  Barri  MES,  Abdelrahman  SH. 2012.  Preliminary  Information  of Some  Biochemical  Parameters  in Sudanese Camel (Camelus Dromedarius). Journal  of  Animal Scientist . 1(1): 5-7.
Higdon  JV,  Frei  B.  2003.  Obesity  and oxidative  stress.  A  direct  link  to
CVD? Arterioscler.  Thromb.  Vasc. Biol . 23:365–367
Ibrahim  AA,  Aliyu  J,  Abdu  MI,  Hassan  AM. 2012. Effects of age and sex on serum biochemistry values of turkeys ( Meleagris  gallopavo )  reared  in  the semi-arid  environment  of  Nigeria. World  Appl  Sci  J .  16  (3):  433-436. ISSN 1818-4952.
Keaney  JF,  Larson  MG,    Vasan  RS,  Wilson PWF,  Lipinska  IL,  D.  Corey  D, Massaro  JM,  Sutherland  P,  Vita  JA, Benjamin  EJ.  2003.  Obesity  and systemic  oxidative  stress.  Clinical correlates  of  oxidative  stress  in  the Farmingham  study. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol . 23:434–439.
Kendran  AAS  ,  Damriyasa  IM  ,  Dharmawan NS, Ardana IBK, Anggreni LD. 2012.
Profil  Kimia  Klinik  Darah  Sapi  Bali. Jurnal  Veteriner. 13  (4):  410-415. ISSN : 1411 – 8327. Kucera  J,  Chladek  G.  2004.  The  effect  of year,  season,  breed  and  reproduction cycle  on  some  plasma  parameters  in cows and heifers. Zooticae. 501:149- 155.
Mamun MA, Hassan MM, Shaikat AH, Islam SKMA,  Hoque  MA,  Uddin  M, Hossain  MB.  2013.  Biochemical analysis  of  blood  of  native  cattle  in the hilly area of Bangladesh. Bangl. J. Med. Vet . 11(1):51-56
Mapiye  C,  Chimonyo  M,  Dzama  K,  Marufu
MC.  2010a.  Seasonal  Changes  in Energy-related Blood Metabolites and Mineral  Profiles  of  Nguni  and Crossbred Cattle on Communal Rangelands  in  the  Eastern  Cape, South  Africa. Asian-Australasian  J.
Anim.  Sci. 23(6):  708-718.  Tersedia pada
http://dx.doi.org/10.5713/ajas.2010.90 419 Mikniene  Z,  Maslauskas  K,  Kerziene  S, Kucinskiene  J,  Kucinskas  A,  2014. The effect of age and gender on blood haematological and serum biochemical parameters in Zemaitukai horses.  ISSN  1392-2130. Vet  Med Zoot . 65 (87). Molina  EC,  Lozano  SP,  Barraca  AP.  2006. The Relationship between haematological indices, serum gamma-glutamyl transferase and glutamate dehydrogenase, visual hepatic  damage  and  worm  burden  in cattle infected with Fasciola gigantica . J. Helminthol. 80, 277-279 Moreira  CN,  Souza  SN,  Barini  AC,  Araujo EG,  Fioravanti  MCS.  2012.  Serum  γ- glutamyltransferase  activity  as  an indicator  of  chronic  liver  injury  in cattle  with  no  clinical  signs. Arq. Bras.  Med.  Vet.  Zootec .  64(6):1403- 1410.
Mori A, Urabe S, Asada M, Tanaka Y, Tazaki H,  Yamamoto  I,  Kimura,  Ozawa  T, Morris  ST,  Hickson  R,  Kenyon  P, Blair  H,  Choi  CB,  Arai  T.  2007. Comparison  of  plasma  metabolite concentrations  and  enzyme  activites in  beef  cattle  raised  by  different feeding  systems  in  Korea,  Japan  and New  Zealand. J.  Vet.  Med.  Physiol. Pathol. Clin. Med ., 54 (7) : 342-5.
Morrow  JD.  2003.  Is  oxidant  stress  a connection  between  obesity  and atherosclerosis? Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol . 23:368–370
Ndlovu  T,    Chimonyo    M,  Okoh  AI, Muchenje  V,  Dzama  K,    Raats  JG. 2007.  Assessing  the  nutritional  status of  beef  cattle:  current  practices  and future  prospects. African  Journal  of Biotechnology . 6 (24):2727-2734. ISSN 1684–5315 diakses dari http://www.academicjournals.org/ AJB Olayemi  FO,  Nottidge  HO.  2007.  Effect  of
Age on the Blood Profiles of the New Zealand  Rabbit  in  Nigeria. African Journal of Biomedical Research , Vol. 10; 73 – 76. ISSN 1119 – 5096 Ottesile  EB,  Kasali  OB.  1992.  Effects  of  age and  sex  on  serum  proteins,  urea nitrogen and transaminase concentrations  in  Ethiopian  highland sheep. Bull  of  Anim  Health  and  Prod in Afr . 40 (3): 181-184.
Ozata  M,  Mergen  M,  Oktenly  C,  Aydin  A, Sanisoglu  SY,  Bolu  E,  Yilmaz  MI, Sayal A, Isimer A, Ozdemir IC. 2002.
Increased oxidative stress and hypozincemia  in  male  obesity. Clin. Biochem . 35:627–631. Pavlik  A.  2009.  Changes  of  internal environment  indicators  of  Aberdeen
Angus  heifers  during  rearing. Slovak
J. Anim. Sci . 42 (1): 76-80.
Radostits  OM,  Gay  CC,  Hinchcliff  KW,
Constable  PD.  2007. Veterinary
Medicine:  A  textbook  of  the  diseases
of  cattle,  sheep,  pigs,  goats,  and horses .  Ed  ke  10,  Elsevier  Health Sciences, Philadelphia, PA, USA. Rico AG, Braun JP, Benard P, Thouvenot JP. 1977. Blood and tissue distribution of gamma    glutamyl  transferase  in  the cow. J. Dairy Sci. 60 , 1283-1287.
Stojevic   Z,   Filipovic N,  Bozic P,  Tucek  Z, Daud  J.  2008.  The    metabolic  profile of Simmental service bulls. Vet Arhiv. 78 (2): 123-129.
Stojevic  Z,  Pirsjin  J,  Milinkovic-Tur  S, Zdelar-Tuk  M,  Ljubic  BB.  2005. Activities  of  AST,  ALT  and  GGT  in clinically  healthy  dairy  cows  during lactation  and  in  the  dry  period. Vet Arhiv 75 (1): 67-73
West  HJ.  1997.  Clinical  and  pathological studies  in  cattle  with  hepatic  disease.
Vet. Res. Commun . 21:169-185. Xie L, Xu F, Liu S, Zhou Y, Wu Q, Gong W, Cheng K, Li J, Li L, Fang L, Zhou L, Xie  P.  2013.  Age  and  sex  based hematological and biochemical parameters    for Macaca  fascicularis . Plos One. 8(6). Tersedia di www.plosone.org Yokus  B,  Cakir  UD.  2006.  Seasonal  and physiological  variations  in  serum chemistry  and  mineral  concentrations in  cattle. Biol.  Trace  Elem.  Res .  109: 255-266.