## DAYA IRITASI DAN SIFAT FISIK SEDIAAN SALEP MINYAK ATSIRI BUNGA CENGKEH
( Syzigium aromaticum ) PADA BASIS HIDROKARBON

## IRRITATION TEST AND PHYSICAL PROPERTIES OF
UNGUENTUM VOLATILE OIL OF Syzygium  aromaticum IN HYDROCARBON BASE
Neneng Rachmalia Izzatul Mukhlishah 1 , Nining Sugihartini 2 , Tedjo Yuwono 2 1 Mahasiswa Program Pascasarjana Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta, Indonesia 2 Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta, Indonesia Email : nining.sugihartini@pharm.uad.ac.id

## ABSTRAK
Minyak  atsiri  bunga  cengkeh  ( Syzygium    aromaticum )  dengan  senyawa aktif eugenol telah banyak diteliti dan diketahui berkhasiat sebagai antiinflamasi, dan  penelitian  lanjutan  terkait  formulasinya  terus  dilakukan.  Formula  yang dikembangkan  pada  penelitian  ini  adalah  bentuk  sediaan  topikal  salep  dengan menggunakan  basis  hidrokarbon  (Vaselin  album  dan  Paraffin  liquidum). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui sifat fisik dan daya iritasi dari sediaan salep  minyak  atsiri  bunga  cengkeh  (MABC)  jika  digunakan  basis  hidrokarbon. Salep dibuat dengan metode peleburan dengan konsentrasi MABC 5% (F1), 10% (FII)  dan  15%  (FIII).  Salep  dari  ketiga  formula  ini  kemudian  dievaluasi  sifat fisiknya, meliputi daya sebar, daya lekat dan pH. Selain itu dievaluasi juga sifat iritatifnya  pada  kulit  dengan  menggunakan  hewan  uji  marmut  jantan  dengan metode Draize test .  Data percobaan  yang diperoleh kemudian  dianalisis secara statistik  dengan  taraf  kepercayaan  95%.  Hasil  uji  statistik  dengan  uji  LSD menunjukkan terdapat perbedaan yang signifikan antar formula. Semakin  tinggi konsentrasi  MABC,  menyebabkan  makin  besar  daya  sebar  (p<0,05)  dan  daya lekat  (p<0,05  antara  F1  dan  FIII).  Namun  pada  uji  pH  setelah  dilakukan  uji Kruskal  Wallis untuk  masing-masing  formula  ternyata  tidak  memberikan perbedaan  yang  signifikan  (p>0,05).  Hasil  uji  iritasi Draize  test menunjukkan pula  bahwa  salep  basis  hidrokarbon  dengan  konsentrasi  MABC    5%,  10%  dan 15% tidak menimbulkan efek iritasi. Kata  kunci  : Syzygium  aromaticum ,  eugenol,  basis  salep  hidrokarbon, antiinflamasi.

## ABSTRACT
Essential  oil  of  clove  (Syzygium  aromaticum)  with  the  active  compound eugenol  has  been  widely  studied  and  well  known  efficacious  as antiinflammatory, and advanced research  related to the formulation continues. Formula  in  this  study  was  the  topical  dosage  form  an  ointment  using  a hydrocarbon base (Vaseline album and Paraffin liquidum). Aim of this study was to  know  the  physical  properties  and  the  power  of  irritation  from  ointment  of clove essential  oil  (MABC)    hydrocarbon  base.  The ointment  was  made by  the melting method with concentration of MABC 5% (F1), 10% (FII) and 15% (FIII). Then  the  ointment  of  the  third  formula  was  evaluated  its  physical  properties (spreadibility,  adhesivity  and  pH).  It  was  also  evaluated  the  irritation’s properties on the skin by using a male guinea pigs test animals by the method of  Draize  test.  The  data  were  analyzed  statistically  with  a  confidence  level  of 95%. The statistical shows that were method significant differences between the formula.  The  increasing  concentration  of  MABC,  causes  the  greater  of spreadibility  (p<0,05)  and  adhesivity  (p  <0.05  between  F  1  and  FIII). On  the
other  hand,  the  Kruskal  Wallis  test  of    pH  shows  there  was  no  significant difference  (p>  0.05).  The  results  of    irritation  Draize  test  shows  that  an ointment base MABC hydrocarbon with concentration of 5%, 10% and 15% does not cause irritation.
Keywords  :Syzygium  aromaticum  L.,  eugenol,  hydrocarbon  base  ointment, antiinflammatory.

## PENDAHULUAN
Minyak  cengkeh  terutama  dari  bagian bunga cengkeh, mengandung eugenol sebesar 70- 80% (Alma dkk., 2007; Nurdjanah, 2004). Minyak atsiri  bunga  cengkeh  ( Syzygium  aromaticum ) memiliki  kandungan  eugenol  yang  telah  terbukti memiliki  aktivitas  anti-inflamasi  (Kamatou  dkk., 2012; Murakami dkk., 2003 dan Da Silveirae dkk., 2014), analgesik dan juga antiseptik (Rapp, 2007). Dari manfaat yang sudah diketahui tersebut, maka banyak  dikembangkan  produk  yang  berasal  dari MABC dalam bentuk sediaan yang farmasetis dan lebih praktis. Formulasi terhadap MABC perlu
dilakukan agar khasiatnya bisa dimanfaatkan oleh masyarakat  luas.  Salah  satu  bentuk  sediaan  yang bisa digunakan adalah bentuk sediaan salep basis hidrokarbon.  Pemilihan  salep  basis  hidrokarbon pada penelitian ini dikarenakan basis hidrokarbon memiliki  waktu  kontak  dengan  kulit  yang  lebih lama,  sehingga  diharapkan  penetrasi  bahan  aktif ke dalam lapisan kulit lebih maksimal.
Evaluasi  terhadap  sifat  fisik  dan  sifat iritatif  pada  sediaan  topikal  perlu  dilakukan.  Hal ini untuk menjamin bahwa sediaan memiliki efek farmakologis yang baik dan tidak mengiritasi kulit ketika digunakan. Sifat fisik sediaan mempengaruhi  tercapainya  efek  farmakologis sesuai yang diharapkan. Parameter pengujian sifat fisik  salep  antara  lain  uji  daya  sebar,  daya  lekat, dan  pH  (Naibaho  dkk.,  2013).  Selain  itu  juga dievaluasi  terhadap  daya  iritasi  salep.  Ada beberapa  faktor  yang  mempengaruhi  daya  iritasi salep  antara  lain  keadaan  permukaan  kulit, lamanya  bahan  bersentuhan  dengan  kulit,  dan konsentrasi dari bahan (Amirudin, 2003).

## METODE PENELITIAN
Bahan dan Alat Penelitian Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah  minyak  atsiri  bunga  cengkeh  (MABC) diperoleh dari Pusat Studi Minyak Atsiri / Center of Essential  Oils  Studies (CEOS)  Universitas  Islam Indonesia,  Sleman,  Yogyakarta,  basis  salep  yaitu vaselin  album  dan  paraffin  liquidum  dengan derajat farmasetis, marmut jantan dengan rata-rata berat badan 500-600 g. Peralatan yang digunakan adalah  pengaduk,  seperangkat  alat  gelas,  cawan porselen,  mortir,  stamper, waterbath ,  timbangan analitik,  viskostester  (VT-RION),  alat  uji  daya sebar, alat uji daya lekat, piknometer, pemanas air, batang pengaduk dan gelas ukur.

## Jalannya Penelitian
1. Formulasi  Salep  Basis  Hidrokarbon  Minyak Atsiri Bunga Cengkeh Formulasi  MABC  disajikan  pada  tabel  I.
Pada  masing-masing  formula  tersebut  divariasi konsentrasi  minyak  atsiri  bunga  cengkeh  sebesar 5%, 10% dan 15%.
Pembuatan  salep  dilakukan  dengan  memanaskan vaselin  album  kemudian  ditambahkan  paraffin liquidum  sambil  diaduk  sampai  terbentuk  massa yang  kental  dan  homogen.  Minyak  atsiri ditambahkan  kemudian  dicampur  dalam  keadaan dingin hingga homogen (Naibaho dkk., 2013).
2. Evaluasi  Sifat  Fisik  Salep  Basis  Hidrokarbon Minyak Atsiri Bunga Cengkeh
Uji Daya Sebar
Salep yang sudah ditimbang sebesar 0,5 gr diletakkan  diatas  kaca  bulat  yang  berdiameter  15 cm,  lalu  kaca  lainnya  diletakkan  di  atasnya  dan dibiarkan  selama  1  menit.  Diameter  penyebaran salep  diukur.  Setelahnya,  ditambahkan  100  g beban  tambahan  dan  didiamkan  selama  1  menit lalu diukur diameter yang konstan (Naibaho dkk., 2013).
Uji Daya Lekat Salep yang sudah ditimbang sebesar 0,25 g diletakkan  di  atas  gelas  obyek  yang  telah ditentukan  luasnya,  lalu  diletakkan  gelas  obyek yang lain di atas salep tersebut dan ditekan dengan beban 1 kg selama 5 menit. Selanjutnya dipasang gelas  obyek  pada  alat  tes.  Dilepas  beban  seberat 80 gram,dan dicatat waktunya hingga kedua gelas obyek tersebut terlepas (Naibaho dkk., 2013).
Uji pH Salep yang  sudah  ditimbang  sebesar  0,5  g dilarutkan dengan 5 mL aquades, kemudian di cek pH larutannya (Naibaho dkk., 2013).
Tabel  I.  Formulasi  Salep  Minyak  Atsiri  Bunga  Cengkeh dalam  Basis  Hidrokarbon  dengan  Konsentrasi  5%(FI),
10%(FII), dan 15%(FIII) Bahan (F1) FII) (FIII) Konsentrasi minyak cengkeh 5 10 15 Vaselin album 85,5 81 76,5 Paraffin liquidum 9,5 9 8,5
3. Evaluasi Daya Iritasi Salep Basis Hidrokarbon Minyak Atsiri Bunga Cengkeh
Uji iritasi  sediaan  selep  basis  hidrokarbon dilakukan menggunakan hewan uji marmut jantan dengan  metode Draize  test (1959).  Penelitian  ini menggunakan 6 ekor marmut jantan dengan rata- rata usia 2 bulan. Rambut pada bagian punggung marmut dicukur sampai bersih. Punggung marmut lalu dibagi menjadi 6 bagian yang berbentuk bujur sangkar,  yang  akan  diberikan  perlakuan  sediaan salep  dengan  konsentrasi  5%,  10%,  15%,  basis, kontrol sakit dan kontrol sehat.
Masing-masing sampel iritan sebanyak 0,5 g  dioleskan  pada  bagian  punggung  marmut  yang telah  dicukur,  lalu  ditutup  dengan  kasa  steril kemudian  direkatkan  dengan  plester.  Setelah  24 jam,  plester  dan  perban  dibuka  dan  dibiarkan selama 1 jam, lalu diamati. Setelah diamati, bagian tersebut  ditutup  kembali  dengan  plester  yang sama  dan  dilakukan  pengamatan  kembali  setelah 72 jam (Irsan dkk, 2013). Selanjutnya untuk setiap keadaan kulit diberi nilai  sebagai berikut (Draize,
1959): Kondisi Kulit Nilai Tidak ada eritema 0 Eritema sangat ringan 1 Eritema ringan 2 Eritema sedang 3 Eritema berat 4 Tidak ada edema 0 Edema sangat ringan 1 Edema ringan 2 Edema sedang 3 Edema berat 4
Indeks  iritasi  dihitung  dengan  cara menjumlahkan nilai dari setiap marmut percobaan setelah  24  jam  dan  72  jam  pemberiaan  sampel iritan,  kemudian  dibagi  4.  Penilaian  iritasinya sebagai berikut: 0,00 = Tidak mengiritasi 0,04 - 0,99 = Sedikit mengiritasi 1,00 - 2,99 = Iritasi ringan 3,00 - 5,99 = Iritasi sedang 6,00-8,00 = Iritasi berat.

## HASIL dan PEMBAHASAN
Uji daya sebar pada salep dilakukan untuk melihat kemampuan sediaan menyebar pada kulit, dimana suatu basis salep sebaiknya memiliki daya sebar yang baik untuk menjamin pemberian bahan obat  yang  baik    (Naibaho  dkk.,  2013).  Hasil  uji daya  sebar  disajikan  pada  Gambar  1.  Hasil  uji menunjukkan  bahwa  peningkatan  konsentrasi MABC  dalam  sediaan  salep  menurunkan konsistensi  dari  salep,  sehingga  luas  area
penyebaran  salep  meningkat.  Namun  demikian daya  sebar  salep  basis  hidrokarbon  belum memenuhi syarat daya sebar untuk sediaan topikal yaitu sekitar 5-7 cm (Ulaen dkk.,  2012). Hasil uji ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian  Sari  dkk  (2015) yang menunjukkan bahwa peningkatan konsentrasi  minyak  atsiri  bunga  cengkeh  dalam basis  emulgel  menyebabkan  peningkatan  daya sebar.
Hasil  uji  daya  sebar  ini  lalu  dianalisa menggunakan uji anova dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil uji statistik menunjukkan data uji daya sebar terdistribusi normal dan homogen (p>0,05). Setelah  itu  dilakukan  uji  LSD  untuk  melihat perbedaan  antara  kelompok  konsentrasi  minyak atsiri.  Hasil  uji  LSD  menunjukkan  tidak  ada perbedaan  signifikan  antara  konsentrasi  5%  dan 10% (p>0,05), sedangkan antara konsentrasi 5%, 10%,  dan  15%  menunjukkan  perbedaan  yang signifikan (p<0,05).
Uji daya lekat  pada salep dilakukan untuk melihat  kemampuan  salep  melekat  pada  kulit, dimana  hal ini dapat  mempengaruhi  kemampuan penetrasi salep ke dalam kulit untuk menimbulkan efek.  Hasil uji daya lekat disajikan pada Gambar 2.  Hasil  uji  daya  lekat  menunjukkan  bahwa peningkatan  konsentrasi  MABC  dalam  sediaan salep  meningkatkan  kemampuan  melekat  dari
Gambar  1.  Diagram  Daya  Sebar  Salep  Minyak  Atsiri Bunga  Cengkeh  pada  Basis  Hidrokarbon dengan  Konsentrasi  5%  (FI),  10%  (FII),  dan 15% (FIII)
Gambar  2.  Diagram  Daya  Lekat  Salep  Minyak  Atsiri Bunga  Cengkeh  pada  Basis  Hidrokarbon dengan  Konsentrasi  5%  (FI),  10%  (FII),  dan 15% (FIII)
salep, sehingga waktu daya lekat salep meningkat, berkisar  antara  6-14  menit.  Hal  ini  dipengaruhi oleh  basis  salep  yang  bersifat  lemak,  sehingga ikatan  dengan  minyak  atsiri  bunga cengkeh kuat, yang memungkinkan untuk waktu kontak sediaan dengan  kulit  lebih  lama,  sehingga  penetrasi  salep dapat  menghasilkan  efek  yang  lebih  baik.  Syarat untuk daya lekat pada sediaan topikal adalah tidak kurang  dari  4  detik  (Ulaen  dkk.,  2012).  Hal  ini menunjukkan  sediaan  salep  basis  hidrokarbon dengan  berbagai  konsentrasi  minyak  atsiri memenuhi persyaratan daya lekat.
Hasil  uji  daya  lekat  ini  lalu  dianalisis menggunakan  anova  dengan  taraf  kepercayaan 95%.  Hasil uji  statistik  menunjukkan  bahwa  data uji  daya  lekat  terdistribusi  normal  dan  homogen (p>0,05).  Setelah  itu  dilakukan  uji  LSD  untuk melihat  perbedaan  antara  kelompok  konsentrasi minyak  atsiri.  Hasil  uji  LSD  menunjukkan  tidak ada  perbedaan  signifikan  antara  konsentrasi  5% dan  10%  (p>0,05)  serta  konsentrasi  10%  dan 15%,  tetapi    antara  konsentrasi  5%  dengan  15% menunjukkan perbedaan yang signifikan (p<0,05).
Pengujian  sifat  fisik  selanjutnya    adalah pengujian  pH.  Pengujian  pH  dilakukan  untuk melihat pH salep apakah berada pada rentang pH normal  kulit  yaitu  4,5  –  7.  Jika  pH  terlalu  basa dapat mengakibatkan kulit kering, sedangkan jika pH  kulit  terlalu  asam  dapat  memicu  terjadinya iritasi  kulit  (Mappa  dkk.,2013;  Swastika  dkk., 2013).  Hasil  pengujian  menunjukkan  pH  sediaan salep  basis  hidrokarbon  minyak  atsiri  bunga cengkeh  berada  di  antara  pH  5-6.  Hal  ini  sudah masuk dalam rentang pH yang disyaratkan untuk sediaan  topikal.  Hasil  uji  pH  ini  lalu  dianalisis menggunakan  anova  dengan  taraf  kepercayaan 95%.  Hasil uji  statistik  menunjukkan  bahwa  data uji pH terdistribusi normal (p>0,05) namun tidak homogen  (p<0,05),  lalu  dilanjutkan  dengan  uji Kruskal  Wallis untuk  melihat  perbedaan  antara kelompok  konsentrasi  minyak  atsiri.  Hasil  uji Kruskal  Wallis menunjukkan  bahwa  tidak  ada perbedaan signifikan antara tiap  konsentrasi 5%, 10%  dan  15%  (p>0,05)  yang  menunjukkan  tiap
konsentrasi  memiliki  nilai  pH  yang  aman  bagi tubuh  karena  berada  pada  kisaran  pH  kulit normal.
Pengamatan  daya  iritasi  salep  basis hidrokarbon  dilakukan untuk  mengetahui  apakah bahan-bahan yang digunakan pada formulasi salep memiliki sifat mengiritasi pada kulit. Pengamatan ini  dilakukan  menggunakan  hewan  uji  marmut, terhadap 3 macam konsentrasi sediaan salep basis hidrokarbon    yaitu  5%, 10%  dan  15%,  selain itu juga menggunakan kontrol basis, dan kontrol sakit yang  menggunakan croton  oil .  Pengamatan dilakukan  dengan  menggunakan  metode Draize dan  diamati  adanya  eritema  dan  udema  yang terjadi pada kulit marmut. Setelah dihitung skoring eritema  dan  udema  yang  terjadi,  kemudian dihitung indeks iritasi yang terjadi.
Hasil  indeks  iritasi  dari  kontrol  sehat, kontrol basis, dan sediaan salep basis hidrokarbon minyak atsiri bunga cengkeh pada konsentrasi 5% (FI),  10%  (FII),  dan  15%  (FIII)  adalah  tidak mengiritasi,  sedangkan  pada  kontrol  sakit  terjadi iritasi ringan dapat dilihat pada tabel II.

## KESIMPULAN
Peningkatan  konsentrasi  minyak  atsiri bunga  cengkeh  dalam  sedian  salep  menyebabkan peningkatan  daya  sebar(p<0,05)  dan  daya  lekat (p<0,05  antara  konsentrasi  5%  (FI)  dan  15% (FIII))  serta  pada  pH  terjadi  peningkatan walaupun  tidak  signifikan  (p>0,05).  Hasil percobaan  menunjukkan  bahwa  salep  basis hidrokarbon konsentrasi 5% (FI), 10% (FII) dan 15%(FIII)  tidak  menimbulkan  iritasi  pada  kulit marmut.

## DAFTAR PUSTAKA
Alma,  M.H.,  M.  Ertas,  S.  Nitz,  H. Kollmannsberger,. 2007. Chemical Composition and Content of Essential Oil from The Bud of Cultivated Turkish Clove ( Syzygium  aromaticum ,  L.). J.  Bio  Resources. 2(2): 265-269.
Amiruddin, M.D,. 2003. Ilmu Penyakit Kulit. Bagian Ilmu Penyakit Kulit dan Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin. Gambar  3.  Diagram  pH  Salep  Minyak  Atsiri  Bunga Cengkeh  pada  Basis  Hidrokarbon  dengan Konsentrasi  5%  (FI),  10%  (FII),  dan  15% (FIII)
Tabel II. Hasil Perhitungan Indeks Iritasi Kelompok Uji Indeks Iritasi Tanpa Pemberian 0 Croton Oil 2,05 Basis 0 Konsentrasi 5% (FI) 0 Konsentrasi10% (FII) 0 Konsentrasi15% FIII) 0
Lembaga Penerbitan UNHAS. Makassar:133-149. Da  Silveira e  Sá,  R.,  Andrade,  L.N.,  de  Oliveira, R.R.B.,  and  de  Sousa,  D.P,.  2014.  A
Review  on  Anti-Inflammatory  Activity  of Phenylpropanoids Found in Essential Oils. Molecules. 19:1459-1480. Draize,  J.H.  1959. Dermal  Toxicity .  The Association of Food and Drug Officials of the  United  States.  Bureau  of  Food  and Drugs, Austin, TX. pp 46-49. Available as PDF file.
Irsan,  M.A,  Manggav,  E.,  Pakki.,  Usmar,.  2013. Uji  Iritasi  Krim  Antioksidan  Ekstrak  Biji Lengkeng  ( Euphoria  longana Stend)  pada Kulit Kelinci ( Oryctolagus cuniculus ). Majalah Farmasi dan Farmakologi. 17(2):55–60.
Kamatou,  G.K.,  Vermaak,  I.,  and  Viljoen,  A.M,.
2012 Eugenol—From the Remote Maluku Islands  to  the  International Market  Place: A  Review  of  a  Remarkable  and  Versatile Molecule. Molecules. 17: 6953-6981. Mappa,  T.,  Edi,  J,  H  &  Kojong,  M,.  2013, Formulasi  Gel  Ekstrak  Daun  Sasaladahan (Pperomia pellucida L.)  dan Uji
Efektivitasnya  terhadap  Luka  Bakar  pada Kelinci. Jurnal Ilmiah Farmasi. 2(20), 49-56.
Murakami,  Y.,  Shoji,  M.,  Hanazawa,  S.,  Tanaka,
S.,  and  Fujisawa,  S,.  2003.  Preventive effect  of    bis-eugenol,   a   eugenol    ortho dimer,  on  lipopoly saccharide-stimulated
nuclear    factor  kappa  B    activation    and inflammatory    cytokine    expression    in macrophages. Biochem.  Pharmacol .  66: 1061–1066.
Naibaho,  D.H.,  Yamkan,  V,Y.,  Weni,  Wiyono,. 2013.  Pengaruh  Basis  Salep  Terhadap Formulasi  Sediaan  Salep  Ekstrak  Daun Kemangi (Ocinum sanchum L.) pada Kulit Punggung  Kelinci  yang  dibuat  Infeksi Staphylococcus  aureus. Jurnal  ilmiah
Farmasi – UNSRAT . 2(2).
Nurdjannah,  N,.  2004.  Diversifikasi  Tanaman Cengkeh. J. Perspektif. Desember. 3(2): 61- 70.
Rapp,  C,.  2007.  Clove  oil  as  effective  as  topical anesthetic. Herbal Gram. hal 26.
Sari,  D.K.,  Sugihartini,  N.,  Yuwono,T.,  2015,
Evaluasi  Uji  Iritasi  dan  Uji  Sifat  Fisik Sediaan  Emulgel  Minyak  Atsiri  Bunga Cengkeh (Syziqium aromaticum) , Pharmaqiana , 5(2) : 115-120.
Swastika, A, Mufrod & Purwanto,. 2013. Aktivitas Antioksidan  Krim  Ekstrak  Sari  Tomat ( Solanum  lycopersicum  L.).  Trad  Med  Journal . 18(3): 132-140.
Ulaen, Selfie P.J., Banne, Yos Suatan & Ririn A,. 2012.  Pembuatan  Salep  Anti  Jerawat  dari
Ekstrak  Rimpang  Temulawak (Curcuma xanthorrhiza  Roxb.).  Jurnal  Ilmiah  Farmasi.
3(2): 45-49.