ISSN 1979-0309 (Online) 2614-7920 (Print)
Jurnal Teknologi Hasil Pertanian . 15(2), 83-95
URL: https://jurnal.uns.ac.id/ilmupangan/article/view/53612 DOI: https://doi.org/10.20961/jthp.v15i2.53612

## PROFIL PROTEIN IKAN LEMURU DENGAN PENGERINGAN OVEN, PENGERING MATAHARI DAN SINAR MATAHARI BERBASIS SDS PAGE

## THE PROTEIN PROFILE OF SARDINELLA LEMURU WITH OVEN, DRYING RACK, AND DIRECT SUN DRIED METHOD BASED ON SDS PAGE
Ni Made Ayu Suardani Singapurwa, I Putu Candra, A.A. Made Semariyani Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Pertanian, Universitas Warmadewa, Denpasar 80234 Bali,
Indonesia email: a.suardani@gmail.com
Diserahkan [22 Juli 2021]; Diterima [1 Agustus 2022]; Dipublikasi [31 Agustus 2022]

## ABSTRACT
Lemuru fish (Sardinella lemuru) contains high nutritional value and is very important for humans as well as  affordable  source  of  protein.  Lemuru  fish  are  very  perishable  and  seasonally  produced,  so  it  needs  to  be preserved. The people of Jembrana Regency, Bali, preserve it into spiced dried fish called Pedetan. The aim of this study was to determine the protein profile of unseasoned and seasoned lemuru fish which were dried in an oven, artificial dryer and sun drying. The research method used is the Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel  Electrophoresis  (SDS-PAGE)  method  to  determine  the  molecular  weight  (BM),  to  see  the  damage  to  the protein in the sample. The results of analysis of the protein profile of lemuru meat based on its molecular weight using SDS-PAGE showed that the molecular weight of the separated protein bands varied from 31 to 524 kDa. Based  on  the  results  of  protein  profile  analysis,  sun  drying  can  cause  protein  denaturation  which  is characterized by a decrease in the number of protein bands. Drying with an artificial drying device can reduce damage, because the protein bands can still be maintained, and drying with an oven causes protein damage that is not as big as drying with the sun drying method. While the addition of seasoning for fresh lemuru does not cause protein damage, it can be seen from the number of protein bands that do not change.
Keywords: Protein Profile; Sardinella lemuru; Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis

## ABSTRAK
Ikan lemuru (Sardinella lemuru) mempunyai nilai gizi yang tinggi dan sangat penting bagi manusia serta merupakan  sumber  protein  yang  harganya  relatif  murah.  Ikan  lemuru  sangat  mudah  busukDAn  produksinya musiman,  sehingga  perlu  dilakukan  pengawetan.  Masyarakat  Kabupaten  Jembrana  Bali  mengawetkan menjadi ikan  kering  berbumbu  yang  disebut  Pedetan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  profil  protein  ikan lemuru tidak berbumbu dan berbumbu yang dikeringkan dengan oven, alat pengering buatan dan sinar matahari. Metode  penelitian  yang  digunakan adalah metode Sodium Dodecyl  Sulfat-Polyacrylamide  Gel Electrophoresis (SDS-  PAGE)  untuk  menentukan  berat  molekul  (BM),  melihat  kerusakan  protein  pada  sampel.  Hasil  analisis profil protein daging ikan lemuru berdasarkan berat molekulnya menggunakan SDS-PAGE menunjukkan bahwa berat  molekul  pita  protein  yang  terseparasi  bervariasi  berkisar  dari  31  –  524  kDa.    Berdasarkan  hasil  analisis profil protein, maka pengeringan dengan matahari dapat menyebabkan denaturasi protein yang ditandai dengan menurunnya  jumlah  pita  protein.    Pengeringan  dengan  alat  penjemur  matahari  dapat  mengurangi  kerusakan, karena  pita  protein  masih  bisa  dipertahankan,  dan  pengeringan  dengan  oven  menyebabkan  kerusakan  protein yang tidak sebesar pengeringan dengan matahari.  Sedangkan pemberian bumbu untuk ikan lemuru segar tidak menyebabkan kerusakan protein, dapat dilihat dari jumlah pita protein yang tidak mengalami perubahan.
Kata Kunci : Profil Protein; Sardinella lemuru ; Sodium Dodecyl Sulfat-Polyacrylamide Gel Electrophoresis Saran sitasi: Singapurwa, N. M. A. S., Candra, I, P., & Semariyani, A. A. M.. 2022.  Profil Protein Ikan Lemuru dengan  Pengeringan  Oven,  Pengering  Matahari  dan  Sinar  Matahari  Berbasis  SDS  Page Jurnal Teknologi Hasil Pertanian, 15(2), 83-95. https://doi.org/10.20961/jthp.v15i1.53612

## PENDAHULUAN
Ikan  lemuru  mempunyai  nilai  gizi  yang tinggi sebagai sumber protein yang harganya relatif  murah,  namun  ikan  lemuru  sangat mudah  busukDAn  produksinya  musiman, sehingga perlu dilakukan pengawetan. Proses pengawetan  biasanya  melibatkan  perlakuan fisik seperti pengasapan, pengeringan, pendinginan  dan  pembekuan.  Pengawetan juga ada yang melibatkan penambahan bahan kimia  seperti  bahan  pengawet,  pelunak, penggaraman  dan  lain-lain  (Hasanah  dan Suyatna, 2015).
Pengawetan dengan pengeringan dapat dilakukan secara tradisional  dengan  alat  pengering  para-para. Pengering ini biasa digunakan oleh masyarakat  nelayan  di  Kabupaten  Jembrana Bali  dalam  mengawetkan  ikan  lemuru menjadi pedetan . Pedetan merupakan produk  pangan  tradisional  yang  dibuat dengan  mengeringkan  ikan  lemuru  yang sudah  diberi  bumbu.  Masyarakat  mengolah ikan  lemuru  menjadi pedetan dimulai  saat penerimaan  bahan  baku  ikan  lemuru, dibersihkan  sisik,  isi  perut  dan  dibuang tulang  belakangnya,  serta  dibelah  menjadi bentuk  kupu-kupu  dan  dicuci.    Ikan  lemuru yang  sudah  bersih  dicampur  dengan  bumbu tradisional  Bali  dan  dijemur  di  bawah  sinar matahari selama 2-3 hari  (Singapurwa et  al ., 2014).    Pengolahan  pedetan  yang  berbeda dari  proses  penerimaan  bahan  baku  sampai proses  distribusi  (Singapurwa et  al .,  2017a; Singapurwa et al ., 2017b) serta penyimpanan pedetan ikan lemuru dengan bahan pengemas yang  berbeda    akan  mempengaruhi  kualitas dan  kuantitas  pedetan  yang  dihasilkan (Singapurwa et al ., 2017c).
Adanya  mikroba  yang  dapat  mencemari pedetan akan  dapat  menurunkan  kualitas produk karena terjadi pembusukan.
Penerapan  kelayakan  dasar  pengolahan pangan dengan Good Manufacturing
Practice (GMP)  dan Sanitation  Standard Operating  Procedures (SSOP)  akan  dapat menurunkan mikroba kontaminan yang dapat mencemari pedetan ikan lemuru (Singapurwa et  al .,  2016;  Singapurwa et  al .,  2017b; Singapurwa et  al .,  2017d).    Total  mikroba pada pedetan ikan  lemuru  sebelum  dan sesudah  menerapkan  GMP  dan  SSOP
masing-masing  sebesar  1.56  x  10 7 CFU/g (Singapurwa et  al .,  2017b)    dan  5.5  x  10 4 CFU/g  (Singapurwa et  al .,  2017d)  ,  dan setelah  dilakukan  pengemasan  sebesar  15.22 x  10 3 CFU/g  (Singapurwa et  al .,  2017c). Kerusakan pedetan terjadi  karena  adanya kapang  pada  permukaan  ikan  dan  kapang yang  sering  mencemari  ikan  kering  adalah kapang Aspergillus sp.(Singapurwa et  al. , 2018).    Bumbu  bawang  putih  dan  kencur dapat  menghambat  pertumbuhan  kapang Aspergillus sp yang mencemari pedetan ikan lemuru (Singapurwa et al ., 2019; Singapurwa et al ., 2021).  Ikan lemuru mengandung nilai gizi  yang  tinggi  dengan  kandungan  protein, asam  amino,  asam  lemak  omega  3  dan omega  6  serta  beberapa  mineral  yang memegang  peranan  dalam  pemeliharaan fungsi tubuh pada tingkat sel, jaringan, organ maupun fungsi tubuh secara keseluruhan.
Pengolahan  ikan  dengan  penggaraman dapat  berpengaruh  terhadap  protein  ikan yaitu  makin  tinggi  kadar  garam  yang ditambahkan  maka  protein  yang  terdapat pada ikan akan terdenaturasi. Proses penggaraman  10%  b/v  pada  daging  ikan merupakan  proses  penggaraman  yang  paling disarankan dibandingkan proses
penggaraman  20,30  dan  40%  b/v  (Suardi et al ., 2019).  Pemberian garam  2% garam dan rempah-rempah  (0,2%  kunyit,  0,2%  cabai, 0,2%  lada)  yang  ditambahkan  sampel  juga memiliki  kelembaban,  aktivitas  air,  kadar garam  yang  lebih  baik  dengan  skor tertinggi untuk  semua  atribut  sensorik  (Nuwanthi et al ., 2016).
Pada  pengeringan  daging  ikan  dengan tiga  metode berbeda, yaitu pengeringan oven Cabinet  dryer , microwave  vacuum  drying , dan freeze drying , metode pengeringan freeze drying menunjukkan kualitas yang lebih baik pada  kadar  air,  indeks  penyerapan  air,  dan indeks kelarutan air, dan memiliki penerimaan evaluasi sensorik terbaik. Freeze drying mengawetkan  protein  dari  degradasi dan  membentuk  struktur  mikro  berpori  yang teratur. Pada uji fraksi nitrogen menunjukkan bahwa protein terdegradasi menjadi Fragmen 40–100  kDa  selama  pengeringan  oven Cabinet  dryer ,  yang  hampir  sama  dengan microwave vacuum drying , dan freeze drying . Secara keseluruhan, freeze drying merupakan
metode yang paling cocok untuk pengeringan daging  ikan,  dilanjutkan  dengan microwave vacuum  drying dan  pengeringan  oven Cabinet dryer (Hu et al ., 2013)
Oleh  karena  itu  diperlukan  pembuatan dan  pendokumentasian  informasi  profil protein  ikan  lemuru  yang  diolah  menjadi pangan tradisional pedetan sebagai salah satu upaya  untuk  mempertahankan  kearifan  lokal yang  menjadi  budaya  masyarakat  setempat. Profil  protein  secara  umum  didefinisikan sebagai  metode  untuk  mengidentifikasi ekspresi protein pada jaringan tertentu, dalam kondisi  dan  waktu  tertentu.  Informasi tersebut  dapat  digunakan  untuk  memahami mekanisme respon individu terhadap perubahan  lingkungan  pada  tingkat  protein. Dengan adanya gambaran profil protein  ikan akan  dapat  memberikan  informasi  penting tentang  taksonomi,  filogeni,  dan  ekologi suatu  spesies  (Dekić et  al .,  2016).  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mendapatkan  ciri molekular  profil  protein  ikan  lemuru  yang yang diolah menjadi produk pangan tradisional pedetan, dengan proses pengeringan yang berbeda, tanpa atau dengan diberi  bumbu.    Dengan  penelitian  ini diharapkan  ikan  lemuru  dapat  dimanfaatkan secara  maksimal  sebagai  salah  satu  bahan pangan  yang  bergizi  untuk  memenuhi kebutuhan  gizi  masyarakat  di  Bali  dengan menentukan  mengetahui  proses  pengeringan terbaik.
Gambar 1 Pedetan ikan lemuru
Gambar 2 Pengeringan dengan oven
Gambar 3 Alat pengeringan sinar matahari
Gambar 4 Pengeringan dengan sinar matahari

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan  yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  ikan  lemuru  segar  yang  diperoleh langsung  dari  nelayan  di  Desa  Perancak Kecamatan  Negara  Kabupaten  Jembran. Ikan lemuru yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  yang  berukurran panjang 13-14 cm.   Bumbu yang terdiri dari bawang putih, ketumbar, kencur, garam, cuka merk  Dixi,  lengkuas,  dan  jahe.  Bahan  kimia untuk  analisis  SDS  PAGE  yaitu  tetrametilen diamina  (TEMED)  dan  inisiator  amonium persulfat (APS) 10%,  sodium dodecyl sulfat
(SDS)  10%,  1,5  M  Tris  pH  8,8  dan  6,8, staining Coomassie Brilliant Blue,
destaining, asam asetat glacial 10%, butanol, alkohol  70%,  running  buffer  1x,  biorad assay, phosphate buffer saline (PBS) pH 7,4, H2O  steril,  sampel  buffer  dan  marker protein.

## Alat
Alat  yang digunakan pada penelitian  ini adalah  pengering  oven  (Memmert  model UM200) ( Gambar 2 ) ,alat pengering  buatan sinar  matahari  ( Gambar  3 ),  para-para pengering  matahari  ( Gambar  4 ),  blender untuk  penghancur  bumbu,  dan  perangkat SDS PAGE. Chamber elektroforesis, mikropipet, yellow  tip , blue  tip,  power supply ,  saringan ,  sentrifuge,  water  bath , cawan  mortar, Beaker  glass 250  ml,  dan Erlenmeyer, bisacrylamid ( elektroforesis grade ).

## Tahapan Penelitian
Pada penelitian ini dilakukan pembuatan pedetan ikan  lemuru  tanpa  bumbu  dan dengan  bumbu.    Bumbu  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  Bawang  Putih (30%),  Ketumbar  (15%),  Kencur  (15%), Garam (15%), Cuka (10%), Lengkuas (10%), Jahe (5%). Perbandingan ikan dengan bumbu yang  digunakan  adalah  10:1.    Ikan  lemuru segar  dibelah  dan  dihilangkan  tulangnya sampai membentuk  kupu-kupu,  setelah dibersihkan,  dan  diberi  bumbu  yang  telah dihancurkan  dengan  cara  membalurkan bumbu pada seluruh bagian ikan. Selanjutnya  dilakukan  proses  pengeringan dengan  pengering  oven  pada  suhu  +  50oC selama  20  jam,  alat  pengering  matahari  dan pengeringan  dengan  sinar  matahari  dengan lama pengeringan selama 3 hari dengan suhu + 50 o C , sampai kadar air berkisar antara 15- 16%. Pengukuran kadar air dilakukan dengan metode Gravimetri .  Masing-masing  proses perlakukan  pengeringan  dilakukan  sebanyak tiga  kali  ulangan.  Produk pedetan ikan lemuru  yang  sudah  kering  selanjutnya dianalisis  profil  proteinnya  untuk  masing- masing sampel.
Analisis profil protein dilakukan dengan metode Sodium Dodecyl Sulfat-
Polyacrylamide  Gel  Electrophoresis (SDS- PAGE).  SDS-PAGE  adalah  metode  yang
dapat  memisahkan  molekul  berdasarkan ukuran  dan  bentuk  molekul.  Molekul  yang berukuran  kecil  akan  bergerak  lebih  cepat dibandingkan  yang  ukurannya  besar  melalui matriks  gel  poliakrilamid  yang  dialirkan muatan  listrik  100  volt.  Gel  poliakrilamid terdiri  dari  2  macam  gel  yaitu  running  gel dan  stacking  gel.  Running  gel  berfungsi untuk memisahkan protein berdasarkan berat molekul  sedangkan  staking  gel  berfungsi sebagai penempatan sampel.
Separating  gel  dibuat,  ditambahkan butanol  untuk  menutupi  permukaan  dan dibiarkan terjadi polimerasi kemudian dibersihkan dengan aquades dan ditambahkan  stacking  gel.  Sisir  dimasukkan dan dibiarkan sampai terjadi polimerasi, sisir diangkat  maka  akan  terbentuk  sumuran ( well ). Dimasukkan sampel ke well , kemudian  ditambahkan  running  buffer  pada alat  dan power  supply dihidupkan.  Ditunggu hingga  proses  running  selesai  yang  ditandai dengan  turunnya Bromophenol  Blue sampai ke dasar separating gel. Gel dikeluarkan dari alat  pencetak  secara  perlahan,  kemudian dimasukkan  dalam  larutan  pewarna  dengan 0,1  %  Commasie  Brilliant  Blue  R-250 selama  30-60  menit  hingga  pita  protein terwarnai. Destaining gel 3-4 kali hingga gel tampak  bersih, kemudian dimasukkan gel ke dalam  larutan  asam  asetat  glasial  10%, kemudian dipress dan dikeringkan ± 1-2 hari di  ruangan  gelap.  Untuk  menentukan  berat molekul  protein,  dihitung  menggunakan  Rf dan  diplotkan  pada  grafik  logaritma  dari  Rf marker  protein  yang  berat  molekulnya  telah diketahui (Darmawati dan Haribi, 2005).
Proses  elektroforesis  dijalankan  pada arus  20  mA  dan  tegangan  50  volt.  Gel kemudian diwarnai dengan commasie brilliant  blue  R25  (Putranto et  al .,  2006). Berat  Molekur  (BM)  protein  ditentukan berdasarkan  protein  standar  yang  telah diketahui  berat  melekulnya  dengan  cara membandingkan  nilai  mobilitas  relatif  (Rf) (Yuanita et al ., 2010). SDS-PAGE menggunakan gel yang disusun oleh akrilamida  dan  N,N’-metilen-bis-akrilamida yang  berpolimerisasi  melalui  mekanisme radikal  bebas  dengan  bantuan  katalisator N,N,N’,N’,-tetrametilen  diamina  (TEMED)
dan  inisiator  amonium  persulfat  (APS) (Putranto et al ., 2006).
Teknik  Pemisahan  Protein  Pemisahan protein  dilakukan  dengan  metode  SDS- PAGE  terdiri  dari  tiga  tahap  yaitu:  ekstraksi protein,  pembuatan  gel,  dan  pemisahan protein  melalui  teknik  elektroforesis  untuk mendeteksi  pita  protein  yang  terbentuk (Orino  et  al.,  2004) . Preparasi  sampel menggunakan  sampel  buffer  yaitu  4  mL dH 2 O; 1 mL larutan 0,5 M Tris– HCl pH 6,8; 0,8  gliserol;  1,6  mL  larutan  SDS  10%;  0,4 mL larutan a-mercaptoetanol; 0,2 mL larutan bromophenol  blue  0,05%.  Sampel  plasma sebanyak  5  µL  dicampur  dengan  30  µL sampel  buffer  dengan  perbandingan  1:6, setelah  plasma  tercampur  sampel  buffer kemudian dipanaskan pada suhu 95 o C selama lima  menit.  Apabila  sampel  sudah  dingin baru  dimasukan  ke  dalam  sumur  yang tersedia  pada  gel  sebanyak  5  µL  (Brunelle dan Green, 2014) . Pembuatan gel pemisah ( running/resolving gel/lapisan
bawah) menggunakan  konsentrasi  7,5%  terdiri  dari 7,28 mL dH 2 O; 3,75 mL larutan 1,5 M Tris- HCl  pH  8,8;  150  µLSDS  10%;  3,75  mL larutan akrilamid 30%; 75 µL APS 10%; 7,5 µL  TEMED  dan  4%  stacking  gel  (lapisan atas) terdiri dari 9 mL dH 2 O; 3,78 mL larutan 0,5  M  Tris-HCl  pH  6,8;  150  µL  SDS  10%; 1,98  mL  larutan akrilamid 30%;  75 µL  APS 10%;  15  µL  TEMED.Untuk  preparasi  gel pengumpul  ( stacking  gel )  dicetak  dengan bantuan sisir ( comb ) untuk membuat sumuran  (Wang  et  al.,  2014).  Proses pemisahan  protein  menggunakan  buffer pemisah (running buffer) terdiri dari M Tris- HCl  9  g;  glisin  43,2  g;  SDS  10%  dan  dH 2 O sebanyak  600  mL.  Buffer  elektroforesis dimasukan dan alat elektroforesis dirangkai.
Sampel  kemudian  dimasukan  ke  dalam sumur  menggunakan  mikropipet  sebanyak  5 µL. Perangkat elektroforesis dijalankan pada suhu 37 o C dengan tegangan 200 volt dan arus 42  mA  hingga  bromophenol  blue  mencapai +0,5  cm  dari  batas  bawah  gel.  Gel  difiksasi dengan  larutan coomassie  brilian  blue R-250 setelah  elektroforesis  selesai  terdiri  dari 0,05% coomassie brilian blue R-250 sebanyak  0,50  g  dilarutkan  dalam  45% metanol  sebanyak  225  mL  dan  10%  asam
asetat  sebanyak  50  mL  dalam  45%  dH 2 O), kemudian  gel  dipucatkan  dengan  larutan destain  yang  terdiri  dari  campuran  50% dH 2 O 250 mL; 10% asam asetat 50 mL; 40% metanol 200 mL sambil digoyang-goyangkan sampai terlihat pola pita protein (Sokolowska et al ., 2012).
Gel  hasil  SDS-PAGE  dianalisis  dengan cara  menghitung  jarak  perpindahan  (Rf) untuk  mengidentifikasi  profil  protein  pada masing-masing sampel (Hermanto dan Meutia,  2009).    Data  hasil  penelitian dianalisis  secara  deskriptif.  Analsis  profil pita  protein  dilakukan  dengan  aplikasi GelAnalyzer versi 19.1.  Dengan aplikasi  ini sudah  bisa  diperoleh  data  Rf  ( Retardation factor )  yaitu  perbandingan  jarak  migrasi protein  dengan  jarak tracking  dye ,  sehingga akhirnya  akan  diperoleh  Berat  Molekul dalam  satuan  kilo  dalton  (kDA).  Perbedaan berat  molekul  menunjukkan  seberapa  besar terjadi  degradasi  protein  dengan  perlakukan proses  pengeringan  dan  pemberin  bumbu pada produk pedetan ikan lemuru.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Metode Elektroforesis Gel (SDS-
PAGE)  bertujuan  untuk  menentukan  berat molekul (BM), dan melihat adanya kerusakan  protein  pada  sampel.    Penelitian penetapan profil protein berbasis SDS-PAGE pada pedetan ikan lemuru berdasarkan variasi proses  pengeringan  serta  tanpa  dan  dengan pemberian  bumbu  menunjukan  bahwa  pada pengeringan  dengan  sinar  matahari  terjadi denaturasi  protein  yang  ditandai  dengan menurunnya  jumlah  pita  protein,  namun pemberian  bumbu  tidak  mempengaruhi terjadinya penurunan pita ( band ) protein. Hal ini dapat dilihat dari perlakuan kontrol (tanpa pengeringan).    Pada  pengeringan  dengan oven,  pemberian  bumbu  dapat  mengurangi kerusakan pita protein, dibandingkan dengan tanpa  pemberian  bumbu.    Perlakukan pengeringan  dengan  Oven  pada  suhu  50 o C selama 20  jam tanpa bumbu diperoleh 3 pita protein,  dan  dengan  bumbu  diperoleh  4  pita protein.    Perlakuan  pengeringan  dengan  alat pengering matahari tanpa bumbu diperoleh 5 pita  protein,  dan  dengan  bumbu  diperoleh  2 pita  protein.  Perlakuan  pengeringan  dengan
matahari  tanpa  bumbu  diperoleh  1  pita protein  dan    dengan  bumbu  diperoleh  3  pita protein,  Perlakuan  tanpa  dan  dengan  bumbu tanpa  pengeringan  diperoleh  masing-masing 10  pita  protein.  Hal  ini  terjadi  karena  proses pengeringan dengan matahari terjadi denaturasi  protein  lebih  besar  dibandingkan dengan  proses  pengeringan  dengan  alat pengering  matahari  dan  dengan  oven,  dapat dibandingkan  kontrol  (tanpa  pengeringan). Sedangkan  perlakukan  tanpa  atau  dengan bumbu  tidak mempengaruhi  denaturasi protein secara signifikan ( Gambar 5 ).
Pada  penelitian  ini  bumbu  terutama garam  digunakan  dalam  jumlah  sedikit, hanya 15% dari  campuran  bumbu atau 1,5% dari  berat  ikan, dan cuka pada  bumbu  hanya 10%  pada  campuran  bumbu  atau  hanya  1% dari  berat  ikan  sehingga  tidak  menyebabkan terjadinya  perubahan  profil  protein.  Kadar garam  dari pedetan ikan  lemuru  berkisar antar  0,70-0,90%  dengan  derajat  keasaman (pH)  sebesar  6,4  –  6,6  (Singapurwa,  2019) Perlakuan  marinasi  ikan  dalam  asam  cuka 5%  selama  5  menit  dapat  menyebabkan perbedaan  profil  proteinnya  lebih  sedikit dibandingkan  dengan  kontrol,  yang  berarti penurunan  kualitas  proteinnya  paling  sedikit dibandingkan  standar  (Rais et  al .,  2017)  . Semakin  tipis  pita  protein,  maka  kandungan protein  yang  terkandung  di  dalamnya  juga semakin  sedikit  (Reddy  dan  Raju,  2000). Proses  penggaraman  dapat  menyebabkan turunnya  kelarutan  protein.  Hal  ini  terjadi karena  terbentuknya  ikatan  silang  dari disulfida  sehingga  menyebabkan  kelarutan protein  menurun  (Triwahyuni  et  al.,  2018). Pengeringan  pada  temperatur  50ºC  dan penggaraman  10%  (b/b)  dapat  dilihat  pita proteinnya  berkurang  dari  26  menjadi  19 pita.  Pada  sampel  yang  dikeringkan  pada temperatur  50°C  menggunakan  oven  selama 1  jam  tanpa  garam  dapat  dilihat  pita proteinnya  berkurang  dari  26  menjadi  21 pita. Sedangkan pada sampel yang dilakukan penggaraman  10%  (b/b)  selama  1  jam  tanpa pengeringan  dapat  dilihat  pita  proteinnya tidak mengalami pengurangan yang signifikan  yakni  dari  26  menjadi  24  pita. Sesuai  hasil  tersebut  dapat  diketahui  bahwa dibandingkan  perlakuan  penggaraman  10% (b/b), perlakuan pengeringan jauh lebih besar
menyebabkan  protein  terdenaturasi,  namun gabungan perlakuan penggaraman 10% (b/b) dengan pengeringan menggunakan oven pada suhu  50°C  memberikan  pengaruh  denaturasi terbesar  (Fahima et  al .,  2018).    Pada konsentrasi penggaraman 10% b/b selama 12 jam pada ikan tenggiri memiliki lebih banyak pita  protein  mayor  dari  pada  ikan  tenggiri yang mendapat perlakuan penggaraman 20%, 30%  b/b  selama  12  jam  dan  10%,  20%,  dan 30%  b/b  selama  24  jam  dan  36  jam sedangkan  pada  penggaraman  30%  b/b selama 36 jam tidak dianjurkan karena semua pita  protein  mayor  tebal  sudah  terdenaturasi menjadi  pita  protein  mayor  tipis  dan  pita protein  minor.  Berat  molekul  penggaraman 10%,  20%  dan  30%  b/b  selama  24  Jam berkisar  antara  13-180  kDa,  dan  berat molekul  penggaraman  10%,  20%  dan  30% b/b  selama  36  Jam  berkisar  antara  12-160 kDa (Wahyudi dan Maharani, 2017)
Pada  penelitian  sampel  ikan  gurami sebelum  penggaraman  menunjukkan  16  pita, sampel  ikan  gurami  dengan  konsentrasi garam  10%  b/v  menujukkan  16  pita,  sampel ikan  gurami  dengan  konsentrasi  garam  20% b/v  menunjukkan  14  pita,  sampel  ikan gurami  dengan  konsentrasi  garam  30%  b/v menunjukkan  10  pita,  sampel  ikan  gurami dengan konsentrasi garam 40% b/v menunjukkan 9 pita. Penggaraman pada ikan dapat  berpengaruh  terhadap  protein  ikan gurami  yaitu  makin tinggi kadar garam  yang ditambahkan  maka  protein  yang  terdapat pada ikan akan terdenaturasi. Proses penggaraman  10%  b/v  pada  daging  ikan gurami merupakan proses penggaraman yang paling disarankan dibandingkan proses penggaraman  20,  30  dan  40%  b/v.  Pita protein  ikan  gurami  sebelum  penggaraman menunjukkan masih banyak atau tebal namun dengan  adanya  perlakuan  penggaraman dengan  variasi  konsentrasi  garam  10,  20,  30 dan  40%  b/v  terlihat  pita  protein  menipis bahkan  ada  yang  menghilang  (Suardi et  al. , 2019)
Profil protein ikan bandeng sebelum dan sesudah  penggaraman,  pada  pita-pita  protein tidak terjadi penurunan atau penipisan secara signifikan  (Feri et  al .,  2017).  Selama  proses penggaraman  berlangsung  terjadi  penetrasi garam  kedalam  daging  dan  keluarnya  cairan
dari  daging  karena  adanya  perbedaan konsentrasi,  kemudian  melarutkan  kristal garam  atau  mengencerkan  larutan  garam. Pada  saat  itulah  terjadi  pengentalan  cairan tubuh  yang  masih  tersisa  dan  penggumpalan protein  (denaturasi)  serta  pengerutan  sel-sel sehingga  sifat  dagingnya  berubah.  Sampel yang  tidak  dilakukan  pengasapan  dan penggaraman  memiliki profil protein dengan 7  pita  mayor  dan  24  pita  minor  sedangkan sampel  setelah  pengasapan  dengan  waktu terlama (6 menit) memiliki 8 pita mayor dan 22  pita  minor.  Untuk  sampel  yang  telah dilakukan penggaraman konsentrasi 10% b/b dan  diasapkan  dengan  waktu  terlama  (6 menit)  memiliki  8  pita  mayor  dan  16  pita minor.  Semakin  lama  waktu  pengasapan maka  semakin  banyak  pita  protein  yang terdenaturasi  dengan  berat  molekul  yang semakin kecil.
Perlakuan  penggaraman  10%  (b/b) selama 1 jam tanpa pengeringan pada sampel ulat  sagu  menghasilkan  pita  protein  yang tidak mengalami pengurangan yang signifikan  yaitu  dari  26  menjadi  24  pita. Perlakuan  penggaraman  10%  (b/b)  dengan pengeringan  jauh  lebih  besar  menyebabkan protein  ulat  sagu  terdenaturasi,  namun gabungan perlakuan penggaraman 10% (b/b) dengan pengeringan menggunakan oven pada suhu  50°C  memberikan  pengaruh  denaturasi terbesar.  Berat  Molekul  total  protein  ulat sagu  kontrol  antara  18  –  180  kDa.  Berat Molekul  total  protein  hasil  pengeringan dengan oven 50 o C selama 1 jam, antara 18 – 109  kDa.  Berat  Molekul  total  protein  hasil penggaraman 10% selama 1 jam, antara 18 – 95  kDa.  Berat  Molekul  total  protein  hasil pengeringan  dengan  oven  50 o C  selama  1 jam,  dengan  penggaraman  10%  antara  18  – 130 kDa (Triwahyuni et al. , 2018).  Pengaruh pengasapan  pada  suhu  tertentu  juga  dapat menyebabkan denaturasi protein dan degradasi  protein  serta  menurunkan  fungsi dan  asam  amino  esensial  (Kabahenda  et  al., 2009).  Pada  penelitian  profil  protein  ikan tongkol,  semakin  lama  waktu  pengasapan maka  jumlah  pita  protein  pada  ikan  tongkol akan berkurang (Esman et al., 2017).
Gambar 5 Hasil SDS PAGE Pedetan Ikan
Lemuru Keterangan : M = Marker
OT =
Pedetan Ikan  lemuru  tanpa  bumbu, pengeringan dengan Oven = 3 band
OB = Pedetan Ikan  lemuru  dengan  bumbu, pengeringan dengan Oven = 4 band
AT = Pedetan Ikan  lemuru  tanpa  bumbu, pengeringan  dengan  Alat  Pengering matahari = 5 band
AB = Pedetan Ikan  lemuru  dengan  bumbu, pengeringan  dengan  Alat  Pengering matahari = 2 band
ST =
Pedetan Ikan  lemuru  tanpa  bumbu,
pengeringan  dengan  Sinar  Matahari  = 1 band
SB =
Pedetan Ikan  lemuru  dengan  bumbu, pengeringan  dengan  Sinar  Matahari  = 3 band
IT =
Pedetan Ikan  lemuru  tanpa  bumbu, tanpa pengeringan  = 10 band
IB = Pedetan Ikan  lemuru  dengan  bumbu, tanpa pengeringan  = 10 band
Gambar 6 Kurva Standar hubungan nilai Rf dengan berat molekul (kDa) Protein Marker (M)
Tabel 1 Profile Protein Marker (Ikan) Band  Rf Raw volume MW (kDa) 1 0.018 891 500 2 0.081 1011 400 3 0.09 817 160 4 0.187 1116 120 5 0.327 1191 100 6 0.4 1195 45 7 0.601 1443 35 8 0.816 1237 22 Tabel  2 Profile  Protein  pada Pedetan Ikan lemuru pengeringan dengan Oven Band Rf Raw volume MW (kDa) Tanpa Bumbu 1 0.05 1226 381 2 0.198  1239 119 3 0.645  1474 38 Dengan Bumbu 1 0.014  1258 524 2 0.198  1676 119 3 0.284  1379 73 4 0.671  1592 38 Tabel  3 Profile  Protein  pada Pedetan Ikan lemuru,  pengeringan  dengan  alat pengering matahari Band  Rf Raw volume MW (kDa) Tanpa Bumbu 1 0.015 1134 518 2 0.162 1162 154 3 0.195 1735 122 4 0.234 1323 96 5 0.654 1350 38 Dengan Bumbu 1 0.18 2023 135 2 0.652 2005 38 Tabel  4 Profile  Protein  pada Pedetan Ikan lemuru, pengeringan dengan matahari Band  Rf Raw volume MW (kDa) Tanpa Bumbu 1 0.153 2971 165 Dengan Bumbu 1 0.1211  1500 110 2 0.284 1606 73 3 0.69 1867 38
Tabel  5 Profile  Protein  pada Pedetan Ikan lemuru, tanpa pengeringan Band  Rf Raw volume MW (kDa) Tanpa Bumbu 1 0.035 1899 406 2 0.203 1838 92 3 0.226 1270 79 4 0.296 1128 54 5 0.386 1869 40 6 0.461 1924 36 7 0.498 1859 35 8 0.561 3318 33 9 0.745 2610 32 10 0.765 2510 31 Dengan Bumbu 1 0.041 2673 386 2 0.16 2299 128 3 0.221 1798 82 4 0.254 2855 66 5 0.331 2239 47 6 0.377 2317 41 7 0.451 2311 36 8 0.481 1933 35 9 0.524 2541 34 10 0.536 2322 33
Pada  penelitian  ini,  berat  molekul protein  berkisar  antara  31  –  524  kDa.    Pada pengeringan  dengan  oven  tanpa  bumbu menghasilkan sebanyak 3 pita protein dengan berat  molekul  berkisar  antara  38  –  381  kDa. Pengeringan oven dengan bumbu menghasilkan sebanyak 4 pita protein dengan berat molekul berkisar antara 38 – 524 kDA,. Pengeringan  dengan  alat  pengering  tanpa bumbu menghasilkan sebanyak 5 pita protein dengan  berat  molekul  berkisar  antara  96  – 518 kDa.  Pengeringan dengan alat pengering dengan bumbu menghasilkan sebanyak 2 pita protein dengan  berat molekul  berkisar antara 38  – 135 kDa. Pengeringan dengan  matahari tanpa  bumbu  menghasilkan  1  pita  protein dengan  berat  molekul  165  kDa,  dan pengeringan  dengan  bumbu  menghasilkan sebanyak 3 pita protein dengan berat molekul berkisar  antara  38  –  110  kDA.  Perlakuan tanpa pengeringan tanpa bumbu
menghasilkan  10  pita  protein  dengan  berat molekul  berkisar  antara  31  –  406  kDa.. Perlakukan tanpa pengeringan dengan bumbu menghasilkan  10  pita  protein  dengan  berat molekul  berkisar  antara  38  –  386  kDa.
Perbedaan berat  molekul menunjukkan adanya  perbedaan  struktur  protein,  yang merupakan  penyusun  utama  protein.    Hasil analsis  profil  pita  protein  dengan  aplikasi GelAnalyzer  versi  19.1.  diperoleh  data  Rf ( Retardation factor ) yaitu perbandingan jarak migrasi  protein  dengan  jarak tracking  dye , sehingga  akhirnya  akan  diperoleh  Berat Molekul  dalam  satuan  kilo  dalton  (kDa) ( Gambar  6,  Tabel  1,  Tabel  2,  Tabel  3, Tabel 4, Tabel 5 ).
Profil  protein  hasil  SDS  PAGE  yang teridentifikasi  pada  tulang  ikan  nila  sebelum dimasak  terdapat  10  fraksi  protein,  dengan berat  molekul  berkisar  antara  8-183  kDa, sedangkan  pada  tulang  ikan  nila  sesudah dimasak  terdapat  8  fraksi  protein  dengan berat  molekul  antara  8  –  183  kDA.  Proses pemanasan menyebabkan terjadinya denaturasi  protein  atau  kerusakan  ikatan sekunder dan tersier protein akibat terpecahnya ikatan hydrogen, interaksi hidrofilik  atau  disulfida.    Fraksi  protein tulang  ikan  sebelum  dimasak  dengan  berat molekul  121  kDA  sedangkan  yang  sudah dimasak 38 kDa (Subagiono, 2019).
Protein  struktural  dengan  berat  molekul 23  kDa  adalah  jenis myosin  light  chain (MLC),  27  kDa  adalah  jenis  protein sarkoplasma  gliseraldehida  –  3  –  fosfat dehidrogenase,  32  kDa  adalah  jenis  rantai ringan  myosin  (MLC),  27  kDa  adalah  jenis protein  sarkoplasma  gliseraldehida-3-fosfat dehidrogenase,  32  kDa  adalah  kelompok enzim  protein  sarkoplasma,  38  kDa  adalah protein  struktural  jenis  tropomiosin,  92  kDa adalah  protein  sarkoplasma,  110  kDa  adalah antibodi  jenis  protein  antibodi  pada  otot miotomal,  sedangkan  48  kDa  dan  71  kDa tidak  diketahui  jenisnya  (Soewarlan,  2016). Analisis  protein  daging  ikan  Kerandang menggunakan  SDS-PAGE  mengandung  27 pita  protein  dengan  kisaran  berat  molekul 10.202 - 134.432 kDa, dengan perkiraan jenis protein  sebagai  berikut:  berat  molekul 105.396-134.432  jenis  -galaktosa,  berat molekul  37.034-95.948  jenis  albumin,  berat molekul  33.002  jenis  karbonik  anhidrase, berat  molekul  28.060-30.301  jenis  inhibitor tripsin,  berat  molekul  17.545-23.756  jenis  - laktalbumin,  dan  berat  molekul  10.202- 15.568  jenis  lisozim  (Aryani et  al .,  2020).
Hasil elektroforegram perlakuan pengendapan amonium sulfat pada konsentrasi  tertentu  menjadikan  pita  protein albumin  lebih  tebal.  Pita  yang  tipis  tersebut menunjukkan  kandungan  albumin  yang jumlahnya  sedikit.    Profil  protein  albumin pada  ikan gabus, toman dan  betutu memiliki bobot  molekul  50-52  kDa  (Nurilmala et  al ., 2020)
Karakter  diagnosis  marker  molekuler dengan  RAPD  pada  semua  jenis  dan  varian plasma  nutfah  ikan  lemuru  dicirikan  oleh  5 pita DNA dengan panjang fragmen: 2000 bp, 1400  bp,  1200  bp,  1000  bp,  dan  900  bp. Diantara fragmen ini diduga ada hubungannya  dengan  konstribusi  terhadap produksi  Asam  Lemak  Omega-3  Ikan Lemuru.  Namun adanya  fragmen  berukuran 350  bp  dalam  urutan  tersebut  diduga bertanggung jawab untuk lebih meningkatkan produksi Asam Lemak Omega-3.  Fragmen  berupa  pasangan  basa yang  lain  (300  bp,  275  bp,  200  bp,  150  bp) diduga  merupakan  variasi  individu  dalam populasi S. lemuru varian yang lain (Mahrus, 2008;  Mahrus et  al .,  2012). Hasil  analisis elektroforegram  pada  ekstrak  ikan  gabus komersial  menunjukkan  pita  yang  sangat tipis  dan  memiliki  berat  molekul  sebesar 51,15  kDa.  Hasil  analisis  profil  protein  ikan Haruan  menunjukkan  bahwa  pita  protein yang  didapatkan  berjumlah  23  buah  untuk ikan Haruan yang berasal dari Nagara dan 27 band  untuk  ikan  Haruan  yan  berasal  dari Gambut.  Berat  molekul  pita  protein  yang terseparasi,  bervariasi  dari  24-  191  kDa. Hasil penelitian menunjukkan adanya keanekaragaman  genetika  yang  dapat  dilihat dari  beragamnya  pita  protein  yang  dapat digunakan  untuk  program  konservasi  dan pemuliaan  haruan  (Mabrur et  al .,  2018). Pada  profil  protein  ikan  lele  dan  ikan  baung diperoleh  empat  belas  pita  protein  dari  ikan baung  memiliki  berat  molekul  masing- masing  25  hingga  123  kDa.  Sebanyak  enam pita protein yang disebut rantai ringan miosin (15-25 kDa), troponin (30 kDa), tropomiosin (35 kDa), aktin (42 kDa), gelsolin (90 kDa), dan Cprotein (140 kDa). Hasil ini memungkinkan  pemahaman  yang  lebih  baik tentang  profil  protein  ikan  lele  dan  ikan baung dan untukDAsar pengembangan
immunoassay  untuk  mendeteksi  otot  ikan (Sasmita et al ., 2018).
Fish  Protein  Hydrilised dari  ikan  Nila memiliki  rentang  berat  molekul  yang  lebih luas (14,4-116 kDa) (Tejpal et al ., 2017)  dan pada fish  protein  hydrolysate kepala  ikan Chlorurus  sordidus berat  molekul  FPH berkisar  antara 18,05 kDa  hingga 75,89 kDa (Prihanto et  al .,  2019).    Gelatin  tulang  ikan patin  yang  diekstrak  dengan  kulit  nanas teridentifikasi  dalam  gel  poliakrilamid  pada kisaran  berat  molekul  ~120  kDa  (jenis  alfa gelatin) (Atma dan Ramdhani, 2017).

## KESIMPULAN
Hasil  analisis  profil  protein  daging  ikan lemuru berdasarkan berat molekulnya menggunakan SDS-PAGE menunjukkan bahwa  berat  molekul  pita  protein  yang terseparasi  bervariasi  berkisar  dari  31  –  524 kDa.    Berdasarkan  hasil  analisis  profil protein,  maka  pengeringan  dengan  matahari dapat  menyebabkan  denaturasi  protein  yang ditandai  dengan  menurunnya  jumlah  pita protein.  Pengeringan  dengan  alat  penjemur matahari dapat mengurangi kerusakan, karena pita protein masih bisa dipertahankan, dan  pengeringan  dengan  oven  menyebabkan kerusakan  protein yang  tidak  sebesar pengeringan  dengan  matahari.    Sedangkan pemberian  bumbu  untuk  ikan  lemuru  segar tidak  menyebabkan  kerusakan  protein,  dapat dilihat  dari  jumlah  pita  protein  yang  tidak mengalami perubahan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terimakasih disampaikan kepada Rektor Universitas Warmadewa dan Lembaga Penelitian Universitas Warmadewa,  Dekan  Fakultas  Pertanian
Universitas Warmadewa,  rekan sejawat serta Laboran  pada  Laboratorium  Universitas Warmadewa  yang  telah  memfasilitasi  dan membantu proses penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Aryani,  Suprayitno,  E.,  Sasmito,  B.  B.,  dan Hardoko.  (2020).  Profile  of  Kerandang Fish  ( Channa  pleurophthalmus Blkr)
Proteins  from  Central  Kalimantan. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science 441 (1).
Atma,  Y.,  dan  Ramdhani,  H.  (2017). Identifikasi  Gelatin  Dari  Tulang  Ikan Patin Hasil . November 1–2.
Brunelle,  J.  L.,  and  Green,  R.  (2014).  One- dimensional  SDS-polyacrylamide  gel electrophoresis  (1D  SDS-PAGE).  In Methods  in  Enzymology (1st  ed.,  Vol.
541). Elsevier Inc 541: 151-159.
Darmawati,  S.,  dan  Haribi,  R.  (2005).
Analisis  Protein  Pilli  Salmonella  Typhi Isoat  Rs.Kariadi  Dengan  Elektroforesis SDS-PAGE. Jurnal Litbang Universitas Muhammadiyah Semarang 2 (3): 1–4.
Dekić,  R.,  Friscic,  J.,  Ivanc,  A.,  dan Kukaviva,  B.  (2016).  Characterization of  Proteins  from  Popovo  Minnow (Delminichthys  ghetaldii  Steindachner, 1882)  Muscle. Turkish  Journal  of Fisheries  and  Aquatic  Sciences 16 (4)  : 953–959.
Esman,  M.  A.,  Mukaromah,  A.  H.,  dan Ethica, S. N. (2017). The Profile Protein of  Tuna  Fish  Based  On  SDS-PAGE Before  And  After  Fumigation  Using Coconut Shell. Universitas
Muhammadiyah Semarang 5 (7) : 21–36.
Fahima, A., Mukaromah, A. H., Ethica, S.N. 2018.  Profil Protein Berbasis SDS- PAGE Pada Ulat Sagu Hasil Pengeringan Dengan Garam dan Tanpa Garam.  Seminar Nasional Edusainstek ISBN : 978-602-5614-35-4 FMIPA UNIMUS. Pp. 15-22
Feri,  Ethica,  S.  N.,  dan  Mukaromah,  A.  H.
(2017).  Profil  Protein  Daging  Ikan
Bandeng ( Chanos chanos ) menggunakan SDS-PAGE Sebelum dan Sesudah Penggaraman. Prosiding Seminar  Nasional  &  Internasional 1(1) : 146–150.
Hasanah,  R.,  dan  Suyatna,  I.  (2015). Karakteristik  Mutu  Produk  Ikan  Baung ( Mystus nemurus ) Asap Industri. Jurnal Akuatika 6(2): 170-176.
Hermanto,  S.,  dan  Meutia,  C.  D.  K.  (2009).
Perbedaan Profil Protein Produk Olahan (Sosis)  Daging  Babi  dan  Sapi  Hasil Analisa  SDS-PAGE. Jurnal  Kimia VALENSI 1(4) : 181–186.
Hu, Y., Que, T., Fang, Z., Liu, W., Chen.,
Liu, D., Ye, X.  2013.  Effect of Different Drying Methods on the Protein and Product Quality of Hairtail Fish Meat Gel. Drying Technology , 31:
1707–1714. DOI:
10.1080/07373937.2013.794831
Kabahenda, M. K., Omony, P., & Hüsken, S. M.  C.  (2009).  Post-harvest  handling  of low-value  fish  products  and  threats  to nutritional quality: a review of practices in  the  Lake  Victoria  region. Regional Programme Fisheries and HIV/AIDS in
Africa: Investing in Sustainable Solutions 15.
Lady  Cindy  Soewarlan.  (2016).  Potensi Alergi  Akibat  Infeksi  Anisakis  Typica Pada  Daging  Ikan  Cakalang. Jurnal Teknologi  Dan  Industri  Pangan 27 (2)  : 200–207.
Mabrur,  Rahmy,  U.  S.  A.,  Sasmita,  R.,  dan Badruzsaufari.  (2018).  Protein  Profiles of  Haruan  Fish  ( Channa  striata )  from South  Kalimantan. Prosiding  Seminar Nasional Lahan Basah 3 (1): 39–45.
Mahrus.  (2008).  Ciri  Molekuler  Plasma Nutfah Ikan Lemuru Yang Mengandung Asam  Lemak  Omega-3  Paling  Tinggi Molecular  Marker  Of  Gen  Pool  Of Sardine  Fish  Containing  The  Highest Omega-3 Faty Acid. J. Pijar MIPA 3 (1)
: 30–34.
Mahrus,  Sumitro,  S.  B.,  dan  Widodo,  N. (2012). The Association between Genetic Variations and Omega-3
Production  on  Sardinella  lemuru  in Lombok  Strait. IOSR  Journal  of Agriculture and Veterinary Science 1(6) : 12–16.
Nurilmala, M., Safithri, M., Pradita, F. T., & Pertiwi,  R.  M.  (2020).  Profil  Protein Ikan  Gabus  ( Channa  striata ),  Toman ( Channa  micropeltes ),  dan  Betutu ( Oxyeleotris marmorata ) Protein Profile of  Striped  Snakehead  ( Channa  striata ),
Giant Snakehead ( Channa micropeltes ), and Marble Goby ( Oxyeleotris marmorata ). JPHPI 23: 548–557.
Nuwanthi,  S.G.L.I.,  S.S.K.  Madage,  I.G.N.
Hewajulige,  R.G.S.  Wijesekera.    2016. Comparative  study  on  organoleptic, microbiological  and  chemical  qualities of  dried  fish,  Goldstripe  Sardinella (S ardinella  gibbosa )  with  low  salt levels  and  spices. Procedia  Food Science . 6: 356 – 361.
Orino,  K.,  Ishiji,  T.,  Yamamoto,  S.,  and Watanabe,  K.  (2004).  Characterization of bovine serum ferritin-binding proteins. Comparative Biochemistry and Physiology - A Molecular and
Integrative  Physiology 137(2)  :  375– 381.
Priatni,  S.,  Ratnaningrum,  D.,  Kosasih,  W.,
Sriendah, E., Srikandace, Y., Rosmalina,  T.,  dan  Pudjiraharti,  S. (2018). Protein and  fatty acid profile of marine  fishes  from  Java  sea,  Indonesia. Biodiversitas , 19 (5) : 1737–1742.
Prihanto, A. A., Nurdiani, R., dan Bagus, A.
D. (2019).
Production and characteristics of fish protein hydrolysate  from  parrotfish  ( Chlorurus sordidus) head. PeerJ (12) :1–16.
Putranto,  W.  S.,  Budiarti,  S.,  Suhartono,  M. T.,  &  Wayan,  I.  T.  (2006).  Pemurnian Ekstraseluler
Hyaluronidase
Streptococcus agalactiae ( Streptokokus Grup  B)  (Extracellular  Hyaluronidase Purification of Streptococcus agalactiae ( Group  of Streptococus) . Jurnal  Ilmu Ternak 6(1) : 16–22.
Rais, A. F., Ethica, S. N., dan Sulistyaningtyas, A. R. (2017). Analisis Profil  Protein  Ikan  Nila  (Oreochromis niloticus) Berbasis Sds-Page Berdasarkan  Variasi  Lama  Marinasi Dan Konsentrasi Asam Cuka . Undergraduate Thesis, Universitas Muhammadiyah Semarang.
Reddy,  P.  R.,  dan  Raju,  N.  (2000). Gel- Electrophoresis  and  Its  Applications .
Intech, China.
Sasmita, R., Mangkurat, U. L., Susilawati, I.
O.,  Mangkurat,  U.  L.,  Mabrur,  M.,  dan Mangkurat, U. L. (2018). Protein Profile from Catfish ( Pangasius hypophthalmus ) and Baung Fish ( Hemibagrus  nemurus )  Muscle  from
South Kalimantan .  Applied Science and
Technology 2 (1) Singapurwa,  N.M.A.S.,  N.  M.  Darmadi, A.A.M. Semariyani. (2014). Characteristics  of  Traditional  Food Pedetan in Jembrana Regency. International  Journal  of  Advanced Science Engineering Information Technology . 4(2): 68-74. Singapurwa,  N.M.A.S.,  A.A.M.  Semariyani, I.P Candra. (2016). Microbial Contamination  in  Traditional  Food Processing  Pedetan. Proceeding  The International  Conference in  Bioscience .
26-27  July  2016.  Denpasar,  Indonesia. 135-140
Singapurwa,  N.M.A.S.,  I  W.  Sudiarta,
A.A.M. Semariyani. M.L. Kant.
(2017a).  The  Type  of  Fish  and  Storage Time  to  The  Characteritics  of  Pedetan in Jembrana Bali. Sustainable Environment  Agricultural  Science 1(1): 12-18.
Singapurwa,  N.M.A.S.,  A.A.M.  Semariyani,
I.P  Candra.  (2017b).  Identification  of the  Implementation  of  GMP  and  SSOP on  the  Processing  of  the  Balinese Traditional  Food  Sardine Pedetan .
International  Research  Journal  of Engineering, IT and Scientific Research 3 (3): 17 - 26. http://dx.doi.org/10.21744/irjeis.v3i3.44 9 Singapurwa,  N.M.A.S.,  I.P  Candra,  A.A.M.
Semariyani.  (2017c).  Characteristics  of Balinese Traditional  Food Pedetan with Plastic  Packaging  in  Storage. J.  Biol. Chem. Research . 34 (1): 256 - 266.
Singapurwa,  N.M.A.S.,  I.P  Candra,  A.A.M. Semariyani.  (2017d).  Application  of GMP and SSOP  in Balinese Traditional Food  Safety  Pedetan  Sardine  Fish (Sardinella lemuru Bleeker). Proceedings of The International
Conference  on  Food  Sovereignty  and
Sustainable  Agriculture .  1-3  Agustus 2017. Jember, Indonesia. 327-333.
Singapurwa,  N.  M.  A.  S.,  Suprapta,  D.  N., Gunam, I. B. W., Wirya, I. G. N. Al. S., dan  Khalimi,  K.  (2018).  Identification of  Contaminant  Fungi  on  Pedetan,  an
Dry Fish Product of Lemuru (S ardinella lemuru ). Journal of Biology, Agriculture  and  Healthcare 8(6)  :  75– 82. Singapurwa, N.M.A.S. 2019.  Pengembangan Komposisi Bumbu Untuk Meningkatkan  ualitas  dan  Keamanan Pangan  Tradisional  ‘ Pedetan’ Ikan Lemuru  ( Sardinella  Lemuru Bleeker).
Disertasi.    Program  Pasca  Sarjana Doktor  Ilmu  Pertanian.    Universitas Udayana.  Denpasar.
Singapurwa  N  M  A  S,  Candra  I  P  and Rudianta  I  N.    (2019).  The  ability  of garlic  extract  and  Kaempferia  galangal inhibit  Aspergillus  sp.  isolated  from Sardine  fish  ‘ Pedetan ’ Journal  of Physics: Conference Series 1402 033055. doi:10.1088/1742- 6596/1402/3/033055
Singapurwa  N  M  A  S,  Candra  I  P.    (2021).
Antimicrobial  activity  of  garlic  and Kaempferia  galanga  on  Aspergillus  sp. growth  isolated  from  sardine  fish
Pedetan . IOP Conf. Ser.: Earth Environ. Sci . 824 012037.
doi:10.1088/1755-1315/824/1/012037
Suardi,  S.,  Mukarromah,  A.  H.,  dan  Ethica,
S. N. (2019). Profil Protein Ikan Gurami ( Osphronemus  Gouramy )  Sebelum  dan Sesudah  Penggaraman  Berbasis  SDS- PAGE. Gorontalo Journal of Public
Subagiono,  A.G.K.  (2019).    Analisis  Profil Protein  Tulang  Ikan  Nila  ( Oreochromis niloticus ) sebelum dan sesudah dimasak
menggunakan Metode SDS-PAGE. Skripsi.    Fakultas  Kedokteran  Gigi. Universitas Jember.
Sokolowska,  I.,  Gawinowicz,  M.  A.,  Wetie, A.  G.  N.,  and  Darie,  C.  C.  (2012). Disulfide  proteomics  for  identification of  extracellular  or  secreted  proteins. Electrophoresis 33(16) : 2527–2536.
Tejpal,  C.  S.,  Vijayagopal,  P.,  Elavarasan, K., Linga Prabu, D., Lekshmi, R. G. K., Asha,  K.  K.,  Anandan,  R.,  Chatterjee,
N. S., & Mathew, S. (2017). Antioxidant,  functional  properties  and amino  acid  composition  of  pepsin-
derived  protein hydrolysates from whole  tilapia  waste  as  influenced  by pre-processing  ice  storage. Journal  of Food  Science  and  Technology 54(13)  :
4257–4267.
Triwahyuni,  A.,  Mukaromah,  A.  H.,  & Ethica,  S.  N.  (2018).  Profil  Protein Berbasis Sds-Page Pada Ulat Sagu Hasil Pengeringan Dengan Garam Dan Tanpa
Garam. Prosiding  Seminar  Nasional  & Internasional ,1(1) : 8–14.
Wahyudi, R., dan Maharani, E. T. W. (2017). Profil Protein Pada Ikan Tenggiri Lama
Penggaraman  Dengan  Menggunakan Metode  Sds-Page. Seminar  Nasional
Pendidikan, Sains Dan Teknologi Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Muhammadiyah Semarang , 34–41. Yuanita,  L.,  Puspita,  A.,  Surodjo,  S.,
Hidayati,  S.,  Amin,  F.  Al,  &  Budiman, A.  (2010).  Isolasi  ,  Pemurnian  dan Karakterisasi Fitase  Bacillus  subtilis dari Holiwood Gresik (Isolation, Purification  and  Characterization  of Bacillus subtilis Phytase from
Holiwood  Gresik). Berk.Penel.  Hayati 15 : 113–119.
Wang,  X.,  Ni,  M.,  Niu,  C.,  Zhu,  X.,  Zhao,  T., Zhu,  Z.,  Xuan,  Y.,  and  Cong,  W.  (2014). Simple  detection  of  phosphoproteins  in SDS-PAGE  by  quercetin. EuPA  Open Proteomics 4 : 156–164.