## BIOSPECIES
ISSN : 19790902 E-ISSN : 2503-0426 DOI  : 10.22437/biospecies.v16i1.24110

## PENENTUAN KARAKTERISTIK DAN EFEKTIVITAS ECO ENZYME BERBAHAN DASAR LIMBAH ORGANIK YANG BERBEDA SEBAGAI PENGAWET BUAH TOMAT ( Solanum esculentum MILL.)
Determination of The Characteristics And Effectiveness of Eco enzyme Based on Different Organic Waste For The Preservation of Tomato Fruit (Solanum esculentum Mill)
Primasari  Linda  Setiawati 1 ,  Sumardi 2 ,  Bambang  Irawan 3 ,  Endang  Nurcahyani 4 , Rochmah Agustrina 5 1, 2, 3 Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lampung Email Penulis Korespondensi: sumardi_bio@yahoo.co.id
Eco  enzyme  is  a  solution  of  complex  organic  substances  produced  by  the  fermentation  of organic waste, sugar and water. Eco enzyme liquid is dark in color and has a strong sour/fresh aroma  (Hemalitha  and  Visantini,  2013).  Eco  enzyme contains  acid  and  alcohol  compounds which act as antimicrobials. The aim of this research was to determine the characteristics of eco enzyme based on five organic wastes, namely eco enzyme made from banana peels, eco enzyme made from lemon peel, eco enzyme made from pineapple peel, eco enzyme made from pieces of spinach stems and leaves, and eco enzyme made from cassava leaves and to know  the  effectiveness  of  eco  enzyme  in  the  preservation  process  of  tomatoes.  The  study consisted of 2 research phases, namely quantitatively determining the characteristics of eco enzyme  based  on  five  organic  materials  and  determining  the  effectiveness  of  the  eco enzymeter in the preservation process of tomatoes. of 3.42. The highest total acid was found in the P5 treatment of 5.25%, the highest LAB and yeast populations were found in the P4 treatment, namely 2.34 Log CFU/ml and 2.02 Log CFU/ml. The effectiveness of the five eco enzyme products on the best preservation of tomatoes was found in the P4 treatment, which was 70%.
Keywods: Eco Enzyme, Organic Waste, Tomatoes .
Eco enzyme merupakan larutan zat organik kompleks yang dihasilkan oleh fermentasi limbah organik,  gula  dan  air.  Cairan  eco  enzyme  berwarna  gelap  dan memiliki  aroma  asam/segar yang  kuat  (Hemalitha  dan  Visantini,  2013).  Eco  enzyme  mengandung  senyawa  asam  dan alkohol yang sangat berperan sebagai antimikroba. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakteristik eco enzim berbasis lima limbah organik, yaitu eco enzyme berbahan dasar kulit pisang,  eco  enzyme  berbahan  dasar  kulit  jeruk  lemon,  eco  enzyme  berbahan  dasar  kulit nanas,  eco  enzyme  berbahan  dasar  potongan  batang  dan  daun  bayam,  dan  eco  enzyme berbahan  dasar  daun  singkong  serta  mengetahui  efektifitas  eco  enzyme  terhadap  proses pengawetan  buah  tomat.  Penelitian  terdiri  dari  2  tahap  penelitian  yaitu,  penentuan karakteristik eco enzyme yang berbasis lima bahan organik secara kuantitatif dan penentuan efektifias  eco  enzyme  terhadap  proses  pengawetan  buah  tomat.  Hasil  penelitian menunjukkan  karakteristik  eco  enzyme  berbasis  lima  limbah  organik  yaitu  keasaman  (pH) tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  P2  sebesar  3,42.  Total  asam  tertinggi  terdapat  pada perlakuan  P5  sebesar  5,25%,  populasi  BAL  dan  populasi  yeast  tertinggi  terdapat  pada perlakuan  P4  yaitu  2,  34  Log  CFU/ml  dan  2,02  Log  CFU/ml.  Efektifitas  lima  produk  eco enzyme terhadap tingkat keawetan buah tomat terbaik terdapat pada perlakuan P4 yaitu 70 %.
Kata Kunci : Eco Enzyme, Limbah Oranik, Buah Tomat .
Abstract
Abstrak

## PENDAHULUAN
Eco  enzyme merupakan  larutan  zat  organik kompleks yang dihasilkan oleh fermentasi limbah organik,  gula  dan  air.  Cairan Eco  enzyme berwarna  gelap  dan  memiliki  aroma  asam/segar yang  kuat  (Hemalitha  dan  Visantini,  2013). Eco enzyme mengandung senyawa asam dan alkohol yang  sangat  berperan  sebagai  antimikroba (Kumalasari, 2011). Karakteristik pH dan senyawa asam  yang  dihasilkan  oleh  BAL  mengakibatkan pH eco  enzyme menjadi  asam.  Sifat  asam eco enzyme menurut    Sari  (2020),  bermanfa’at sebagai  pengawet bahan pangan yang baik untuk produk  fermentasi  maupun  non  fermentasi, diantaranya untuk pengawetan buah tomat.
Penggunaan eco  enzyme dengan  berbagai tujuan dan fungsi ini terkait  kandungan senyawa organik  yang  di  dalam  bahan  pembuatan eco enzyme seperti  asam  sitrat,  asam  asetat,  asam laktat,  plavonoid,  dan  saponin  pada  daun singkong yang bersifat antioksidan dan antimikroba  (Muninggar,  2020).  Berdasarkan uraian diatas diketahui bahwa eco enzyme dapat digunakan  sebagai  bahan  pengawet  alami  pada bahan  pangan  karena  memiliki  karakteristik  pH asam, mengandung alkohol, senyawa organik dan bakteri asam laktat. Penelitian untuk menentukan karakteristik  dan  efektifitas eco  enzyme untuk pengawetan  bahan  pangan  terutama  jumlah bakteri  dan  fungi  yang  terkandung  dalam  cairan eco  enzyme belum  pernah  dilakukan.  Pada penelitian ini akan dilakukan penentuan karakteristik dan efektifitas produk eco enzyme sebagai  bahan  pengawet  buah  tomat ( Solanum esculentum Mill ).
Tujuan  penelitian  ini  adalah  Mengetahui karakteristik eco  enzyme berbasis  lima  limbah organik,  yaitu eco enzyme berbahan  dasar kulit pisang, eco enzyme berbahan dasar kulit  jeruk  lemon, eco  enzyme berbahan dasar kulit nanas, eco enzyme berbahan dasar potongan batang dan daun bayam, dan eco  enzyme berbahan  dasar  daun singkong dan untuk mengetahui efektifitas eco  enzyme terhadap  proses pengawetan buah tomat.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu Dan Tempat
Penelitian dilaksanakan pada bulan Juni –Agustus 2022.  Penelitian  ini  berlokasi  di  laboratorium mikrobiologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu
Pengetahuan  Alam  Universitas  Lampung  dan laboratorium kimia SMK SMTI Bandar Lampung.

## Bahan Dan Peralatan
Bahan   yang   digunakan   pada   penelitian   ini adalah  limbah  kulit  buah  dan  sisa  sayuran  yang akan  digunakan  untuk  penelitian  ini  sebagai berikut : kulit nanas, kulit jeruk lemon, kulit pisang, potongan bayam, daun singkong, buah tomat, air kran,  gula  aren,  media  biakan  Yeast-Glocose- Pepton  (YGP)  padat,  media  PDA,  antibiotic klhoramphenicol, aquades, NaCL, NaOH 0,1 N.
Alat  yang  digunakan  adalah  indicator fenophtalen, larutan buffer pH 4 dan pH 9, kapas, almunium foil, kain kasa, kertas wrap, kertas label, plastik,  karet,  isolasi  bening  besar,  lem  stik  dan kertas buram.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  dilkakukan dengan  dua  tahap  yaitu penentuan  karakteristik eco  enzyme yang berbasis lima bahan organik secara kuantitatif dan penentuan efektifias e co enzyme terhadap proses pengawetan  buah  tomat.  Pengujian  kuantitatif untuk  menguji  efektifitas eco  enzyme dalam proses pengawetan buah tomat dilakukan dengan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  terdiri  dari  6 perlakuan.  Masing-masing  perlakuan  diulang  4 kali.

## Pembuatan eco enzyme
Pembuatan eco  enzyme dilakukan  dengan metode Rizky (2020). Bahan-bahan kulit buah dan sayuran  disortir,  dicuci  dan  dipotong,  kemudian bahan  ditambahkankan  air,  dan  gula  merah dengan  perbandingan  air  :  bahan  organik  :  gula aren    adalah  10:3:1  ke  dalam  stoples  plastik. Produksi eco enzym dengan mencampur air keran 500 ml, 150 g kulit buah, dan 50 g gula. Sisakan ruang yang cukup pada wadah tersebut untuk gas dan  penambahan  volume  cairan  yang  akan dihasilkan  saat  proses  fermentasi,  campuran diaduk  rata,  kemudian  wadah  ditutuprapat. Campuran  difermentasi  selama  3  bulan.  Untuk melepaskan  gas  yang  menumpuk  dalam  wadah dibuat saluran gas yang dialirkan ke wadah yang berisi  air.  Selama  proses  fermentasi  perlakuan diamati untuk melihat jika ada serangga atau ulat yang  hidup  pada  botol  dan  perlu  dikelurkan. Proses  fermentasi  berlangsung  selama  3  bulan dan cairan eco enzyme akan berwarna kecoklatan,  Cairan eco  enzyme dikeluarkan  dan disaring dari ampas kulit buah dan sayuran (Rizki dkk,  2020). Eco  enzyme siap  panen  ditandai dengan  warna  cairan  coklat  tua,  aroma  asam
segar  dan  menyengat,  terdapat  jamur  pada permukaan cairan eco enzyme .

## Prosedur mengukur pH
Pengujian pH larutan dilakukan mengikuti metode Azizah at  al., (2012),  yaitu  dengan  menggunkan pH  meter  yang  telah  dikalibrasi  dengan  larutan buffer  pH  4  dan  9.  Suhu  sampel  diukur  dengan mengatur  suhu  pH  meter.  pH  meter  dinyalakan dan  dibiarkan  agar  stabil  selama  15-30  menit. Elektroda dibilas dengan aquades dan dikeringkan  dengan  tissu.  Kemudian  elektroda dicelupkan pada sampelsampai diperoleh pembacaan skala pH yang stabil.

## Penentuan Total Asam
Pengukuran total asam eco enzyme dengan cara titrasi  metode  Aristya at  al., (2013).  Sampel ecoenzyme  sebanyak  10  ml  dititrasi  dengan NaOH  0,1N  dan  ditetesi  indikator  phenoftalen hingga  berwarna  pink  (Vama  dan  Cherekar, 2020).  Pengujian  total  asam  dilakukan  dengan cara  sampel  sebanyak  10  ml  dimasukkan  ke dalam  labu  ukur  100  ml,  ditambahkan  aquades sampai  tanda  batas  lalu  dihomogenkan  dan disaring. Filtrat diambil 25 ml dan dimasukkan ke dalam erlenmeyer. Ditambahkan indikator PP 2-3 tetes. Dititrasi dengan larutan NaOH 0,1 Nsampai terbentuk  warna merah  muda,  pembacaan  skala padasaat  warna  merah  muda  terbentuk  yang pertamakali dan bertahan sampai beberapa saat. Kadar  total  asam  diperoleh  dengan  rumus perhitungansebagai berikut:
= Volume NaOH  × N NaOH  × 100/25 × 90
Volume Sampel10 ml × 1000
× 100%

## Keterangan :
Vol NaOH = Vol. NaOH hasil titrasi N NaOH = Normalitas NaOH setelah distandarisasi BE = Berat ekivalen asam sitrat 90 100/25 = 25 ml sampel dalam 100 ml labu takar (pengenceran) Vol sampel = 10 ml sampel yang dititrasi

## Penentuan Total Bakteri Asam Laktat (BAL)
Bakteri dibiakkan pada media GYP padat sebagai berikut : glukosa 1g, yeast 1g, pepton 0,5g, NaCl 5g,  CaCO3  1g,  agar  bacteria  1g  ditimbang menggunakan  neraca  analitik.Aquades  100  ml diukur dengan gelas ukur.Bahan-bahan dicampurkan  ke  dalam  aquades  kemudian dididihkan menggunakan stirer/hot plate kemudian  disterilkan  pada  suhu  121 o C  dengan tekanan 1 atm di autoclave. Sampel eco enzyme dienceran hingga 5 kali pengenceran. Sebanayak1  ml  sampel  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi  yang  berisi  9  ml  NaCL  steril  (10 -1 ) dihomogenkan,  kemudian  1  ml  dari  tabung  10 -1 diambil    dan  dipipet  ke  dalam  tabung  10 -2
dihomogenkan hingga pengenceran 10 -8 . Sampel eco  enzyme pada  3  pengenceran  terakhir diinokulasikan  pada  petridish  sebanyak  1  ml kemudian  dituang  media  YGP  ( pour  plate ), homogenkan  dan  bekukan  kemudian  diinkubasi selama 48 jam.Pengamatan jumlah koloni dicatat dan dikonversi dengan perhitungan bakteri sesuai metode Total  Plate  Count (TPC)  dan  perhitungan dengan  cara Standar  Plate  Count (SPC).  Koloni yang dihitung antara 30 – 300 koloni bakteri.
Jumlah  total    bakteri  (CFU/ml)  =  jumlah koloni/ml x faktor pengenceran

## Penentuan Total Yeast Pada Setiap Variabel Eco enzyme
Media  PDA  dicampurkan  ke  dalam  aquades kemudian  dididihkan  menggunakan  stirrer/  hot plate  kemudian  disterilkan  pada  suhu  121 o C dengan  tekanan  1  atm  di  autoclave.Media  yang sudah steril ditambahkan antibiotik khloramfenikol.  Sampel Eco  enzyme dienceran hingga  6  kali  pengenceran.  Sebanayak1  ml sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi  9  ml  NaCL  steril  (10 -1 )  dihomogenkan, kemudian  1  ml  dari  tabung  10 -1 diambil    dan dipipet  ke  dalam  tabung 10 -2 dan  dihomogenkan hingga  pengenceran  10 -7 .  Sampel eco  enzyme pada 3 pengenceran terakhir diinokulasikan pada petridish sebanyak 1 ml kemudian dituang media PDA  ( pour  plate ),  homogenkan  dan  bekukan kemudian diinkubasi selama 48 jam. Pengamatan jumlah  koloni  dicatat  dan  dikonversi  dengan perhitungan  bakteri  sesuai  metode Total  Plate Count (TPC)  dan  perhitungan  dengan  cara Standar Plate Count (SPC). Koloni yang dihitung antara 30 – 300 koloni bakteri.
Jumlah  total    bakteri  (CFU/ml)  =  jumlah koloni/ml x faktor pengenceran

## Aplikasi Eco Enzyme Dalam Pengawetan Tomat Buah
Aplikasi  pengawetan  terhadap  tomat  buah  ini merupakan  modifikasi  peneliti  Milenia,  (2020). Tomat  buah  denganukuran  yang  hampir  sama, warna  yang  sama,  tingkat  kematangan  yang sama.
Daya  efektifitas eco  enzyme diukur  dengan cara  menguji  larutan eco  enzyme pada  tomat buah.  Kemudian  diamati  setelah  7  hari  dengan melihat  tingkat  kerusakan  dan  keawetan  tomat buah dibandingkan dengan tomat buah yang tidak disemprot  dengan eco  enzyme .  Larutan eco enzyme hasil  fermentasi  kemudian  dimasukkan ke dalam botol spray sebanyak 10 ml untuk setiap
1  tomat . Cairan eco  enzyme disemprotkan  pada buah  tomat  untuk  setiap  variabel,  dan  4  tomat
buah sebagai kontrol tidak disemprot eco enzyme sama sekali. Setelah itu tomat ditaruhpada wadah cawan  dandiletakkan  di  tempat  yang  terbuka, tidak  lembab  dan  tidak  panas.  Kontrol  suhu menggunakan  thermometer  yang disediakan, kemudian  tomat  diamati  setiap  hari  selama  satu minggu,  mencatat  perubahan-perubahan  yang terjadi.
Analisis  pengaruh Eco  enzyme dari  bahan kulit buah dan sisa sayuran terhadap lajupersentase pembusukan buah tomat (Milenia, 2020) modifikasi dengan perhitungan:
% Laju Pembusukan = Jumlah bagian yang busuk Jumlah bagian keseluruhan × 100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Keasaman (pH) Eco enzyme Pada Setiap Variabel
Pengukuran keasaman ph pada eco enzyme dari lima  bahan  organik  yang  berbeda  diukur menggunakan  ph  meter,  disajikan  pada  Gambar 1 .
Gambar 1. Hasil Rata-Rata Keasaman (pH) Eco enzyme Dari Lima bahan Organik yang Berbeda
Keterangan : P1  = Eco ezyme berbahan dasar organik kulit nanas P2  = Eco enzyme berbahan dasar organik kulit jeruk lemon P3  = Eco enzyme berbahan dasar organik kulit pisang P4  = Eco enzyme berbahan dasar organik potongan bayam P5  = Eco  enzyme berbahan  dasar  organik  potongan  daun singkong.
Parameter  rata-rata  pH  merupakan  salah satu parameter dari sifat kimia. Hasil pengukuran keasaman  pH pada kelima eco enzyme terdapat pada Gambar 1, diketahui bahwa pada perlakuan P1  menunjukan  hasil  yang  paling  rendah  yaitu sebesar 3,1 sedangkan pH tertinggi terdapat pada perlakuan P2 sebesar 3,8. Hal ini selaras dengan penelitian  Rasit  (2018)  yang mengatakan  bahwa pada eco  enzyme yang  berasal  dari  kulit  buah yang  telah  difermentasikan  umumnya  bersifat
asam  dengan  pH  berkisar  antara  2,8-3,6. Kemudian  pada  pH  ini  sendiri  tidak  mempunyai sifat  antimikroba  yang  signifikan  terhadap mikroorganisme  patogen  endodontik  (Lund, 2014).  Pada  perlakuan  P1  memiliki  rata-rata  pH yang  rendah,  hasil  tersebut  menunjukan  bahwa pengujian ini sejalan dengan penelitian terdahulu yang menunjukan bahwa kecenderungan larutan eco  enzyme bersifat  asam  dengan  nilai  pH rendah.  Asam  organik  merupakan  kunci  penting dalam  menentukan  keasaman  semakin  tinggi kandungan  asam  organiknya  maka  semakin rendah  nilai  pH.  Berdasarkan  hal  tersebut eco enzyme yang  memiliki  nilai  pH  rendah  dalam penelitian  ini  disebabkan  oleh  kandungan  asam organik yang tinggi seperti asam asetat atau asam sitrat  (Etienne,  2013).  Selain  itu  larutan  enzim dihasilkan oleh bahan organik berupa limbah buah atau limbah padat organik dan molase yang telah ditambahkan  sebagai  substrat  dalam  proses fermentasi  untuk  mendorong  faktor  TDS  yang tinggi pada eco enzyme (Selvakumar, 2015).

## Penentuan Total Asam Pada Setiap Variabel
(%)
Pengukuran  total  asam  dapat  dilihat  pada  Gambar  2. Total  asam  yang  paling  tinggi  dihasilkan  oleh perlakuan P5 ( Eco enzyme berbahan dasar organik potongan  daun  singkong ) sedangkan  nilai  total asam  paling rendah  terdapat  pada  perlakuan  P4 ( Eco  enzyme berbahan  dasar  organik  potongan- potongan bayam).
Gambar 2. Hasil Total Asam Eco enzyme dari Lima bahan Organik yang Berbeda (%)
Keterangan: P1= Eco ezyme berbahan dasar organik kulit nanas P2= Eco enzyme berbahan dasar organik kulit jeruk lemon P3 = Eco enzyme berbahan dasar organik kulit pisang P4= Eco enzyme berbahan dasar organik potongan bayam P5  = Eco  enzyme berbahan  dasar  organik  potongan  daun singkong.
Uji  keasaman  dilakukan  untuk  mengetahui tingkat  keasaman  pada  kelima eco  enzyme
3,3 3,42 3,3 3,2 3,32 0 1 2 3 4 5 P1 P2 P3 P4 P5 1,16 2,4 1,27 1,14 5,25 0 1 2 3 4 5 6 P1 P2 P3 P4 P5 T o ta l A sa m
karena adanya aktivitas mikroba penghasil asam yang  mengubah  karbohidrat  (laktosa)  menjadi asam  laktat,  dapat  dilihat  pada  Gambar  2, diketahui bahwa pada perlakuan P5 memiliki nilai total  asam  yang  paling  tinggi  sebesar    9,  62%. Pada  penelitian  sebelumnya  didapatkan  total asam  pada  eco  enzyme  dari  bahan  kulit  jeruk yang  berbeda  didapatka  kisaran  3,32%  -  5,53% (Audy,2022). Hal tersebut sesuai dengan penelitian Suriasih et al (2012) yang menyatakan bahwa keasaman pada kefir merupakan representasi  dari  akumulasi  asam-asam  organik terutama asam laktat yang dihasilkan dari proses metabolisme laktosa susu oleh bakteri asam laktat yang  tumbuh  dalam  kefir.  Tingginya  total  asam pada  perlakuan  P5  disebabkan  karena  pada konsentrasi  tersebut  jumlah  substrat  tercukupi sehingga  bakteri  asam  laktat  bekerja  dengan optimum untuk membentuk asam laktat. Menurut ide (2008) peningkatan total asam karena adanya aktivitas  BAL  ( L,  acidophilus )  dan yeast ( S. cerevisiae )  yang  saling  menguntungkan.  Selama terjadi proses fermentasi L, acidophilus memnfaatkan  laktosa  menjadi  asam  laktat kemudian  dimanfatkan  oleh S.  cerevisiae untuk menghasilkan etanol, gas CO 2 dan senyawa yang dapat menstimulir pertumbuhan asam laktat.

## Penentuan Bakteri Asam Laktat (BAL)
Terhadap Lima Eco Enzyme Berbahan Dasar Organik yang Berbeda
Penentuan  bakteri  asam  laktat  disajikan  pada Gambar  3  dibawah  ini.  Populasi  bakteri  asam laktat pada media GYP yang tertinggi adalah pada perlakuan P4 sebesar 2,34 Log CFU/ml dan yang paling  sedikit  adalah  perlakuan  P5  sebesar  1,97 Log  CFU/ml.  Hasil  analisis  (Anova)  yang  dilanjut dengan  uji  Duncan  dapat  diketahui  bahwa  pada perlakuan  P4  menunjukan  adanya  perbedaan nyata terhadap setiap, sedangkan pada perlakuan P1,  P2,  P3  dan  P5  menunjukan  tidak  adanya perbedaan  nyata  terhadap  setiap  perlakuan. Rata-rata  bakteri  asam  laktat  terendah  hingga tertinggi  secara  berturut-turut  terdapat  pada perlakuan P1, P5, P3, P2 dan P1.
Gambar 3. Hasil Uji Total Plate Count Bakteri Asam Laktat Pada Kelima Eco enzyme
Keterangan: P1 = Eco ezyme berbahan dasar organik kulit nanas P2 = Eco enzyme berbahan dasar organik kulit jeruk lemon P3 = Eco enzyme berbahan dasar organik kulit pisang P4 = Eco enzyme berbahan dasar organik potongan bayam P5  = Eco  enzyme berbahan  dasar  organik  potongan  daun singkong.
Berdasarkan  analisis  rata-rata  total  koloni bakteri  asam  laktat  terdapat  pada  gambar  3, diketahui bahwa perlakuan P4 yaitu sebesar 2, 34 Log  CFU/ml  yang  berasal  dari  buah  tomat  yang disemprot eco enzyme berbahan potongan bayam dapat  meningkatkan  pertumbuhan  bakteri  asam laktat.  Hal  tersebut  sesuai  dengan  penelitian Koriasih  dan  Jannah,  (2019)  yang  menyatakan bahwa  bakteri  asam  laktat  (BAL)  termasuk mikroorganisme  yang  aman  jika  ditambahkan dalam pangan karena tidak menghasilkan toksin, atau  dikenal  sebagai  mikroorganisme  yang Generally  Recognized  As  Safe (GRAS)  yaitu mikrorganisme  yang  tidak  beresiko  terhadap kesehatan). BAL selain penghasil bakteriosin juga memberikan efek fisiologis bagi kesehatan (Amin et  al., 2011).  Senyawa  penghambat  lain  yang dihasilkan  oleh  bakteri  asam  laktat  seperti hidrogen  peroksida,  diasetil  karbondioksida, reuterin  dan  bakteriosin. Eco  enzyme yang berasal  dari  bayam  menurut  Lingga  (2010) mempunyai kandungan vitamin A, B2, B6, B12, C, K, mangan, magnesium, zat besi, kalsium,kalium, dan  fosfor  sehingga  pada eco  enzyme bayam dapat meningkat bakteri asam laktat. Hal tersebut disebabkan  karena  kemampuan  BAL  dalam metabolisme glukosa dan produk akhir fermentasi yang dihasilkan. BAL dibagi menjadi 2 kelompok yaitu homofermentatif dan heterofermentatif. BAL homofermentatif  akan  menghasilkan  asam  laktat sebagai  produk  utama  atau  satu-satunya  produk hasil  fermentasi  glukosa,  sedangkan  BAL heterofermentatif akan memproduksi asam laktat, CO 2 dan  etanol  dari  metabolisme  heksosa.  BAL homofermentatif banyak digunakan untuk pengawetan  makanan  karena  produksiasam laktat  mampu  menghambat  bakteri  penyebab kebusukanmakanan dan bakteri patogen lainnya. BAL heterofermentatif digunakan untuk pembentukan  flavor  dan  komponen  aroma, seperti asetaldehid dan diasetil (Chen etal ., 2014).
Penentuan Populasi Yeast Pada Lima Eco Enzyme Berbahan Dasar Organik Yang Berbeda
Populasi  yeast  yang  ditumbuhkan  pada  media PDA  disajikan  pada  Gambar  4.  Hasil  analisis
(Anova)  yang  dilanjut  dengan  uji  Duncan  dapat diketahui bahwa pada perlakuan P1 menunjukan adanya perbedaan nyata terhadap perlakuan lain, sedangkan pada perlakuan P1, P2, P3, P4 dan P5 menunjukan  tidak  adanya  perbedaan  nyata terhadap perlakuan lain. Rata-rata yeast terendah hingga  tertinggi  secara  berturut-turut  terdapat pada perlakuan P3, P5, P1, P2 dan P1.
Gambar 4. Hasil Uji Total Plate Count Yeast Pada Kelima Eco enzyme
Keterangan : P1  = Eco ezyme berbahan dasar organik kulit nanas P2  = Eco enzyme berbahan dasar organik kulit jeruk lemon P3  = Eco enzyme berbahan dasar organik kulit pisang P4  = Eco enzyme berbahan dasar organik potongan bayam P5  = Eco  enzyme berbahan  dasar  organik  potongan  daun singkong.
Berdasarkan  hasil Total  Plate  Cound (TPC) pada  kelima eco  enzyme terdapat  pada  Gambar 4, menunjukan hasil yang paling rendah terdapat pada perlakuan P3 ( eco enzyme berbahan dasar organik kulit  pisang)  yaitu  sebesar  1,  22  Log CFU/ml dibandingkan dengan perlakuan P4 yang berasal dari ( eco enzyme berbahan dasar organik potongan bayam) yaitu sebesar 2,02 CFU/ml. eco enzyme berbahan dasar organik potongan bayam lebih  efektif  dibandingkan  dengan eco  enzyme berbahan  dasar  organik kulit  pisang.  Hal  ini dikarenakan eco enzyme yang berasal dari bayam terdapat  flavonoid  yang  berfungsi  sebagai antioksidan,  anti  kanker  dan  anti  bakteri (Parathaman, 2012). Hal tersebut selaras dengan penelitian  Blitz  (2017)  yang  menyatakan  bahwa fermentasi  terjadi  penguraian  senyawa-senyawa organik  yang  menghasilkan  substrat  menjadi produk  baru  oleh  mikroba.  Menurut  penelitian Satife,  (2012)  menyatakan yeast dapat  tumbuh dalam larutan yang pekat, misalnya dalam larutan gula,  garam,  dan  asam  yang  berlebih.  Adanya sifat-sifat  tahan  terhadap  stres  lingkungan  (gula, garam,  dan  asam  berlebih)  menjadikan  yeast dapat bertahan atau bersaing dengan mikroorganisme  lain. Yeast mempunyai  sifat
antimikroba sehingga dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  dan  kapang.  Senyawa antimikroba yeasts telah diketahui  berupa  asam- asam organik (heksanoat, oktanoat, dan dekanoat)  dan  protein.  Beberapa  jenis yeast seperti  diantaranya Sacharomyces  cerevisiae dapat  memproduksi  beberapa  protein  dengan sifat antimikrobial (Roostita, 2011).
Aplikasi  Eco  enzyme  Dalam  Pengawetan  Tomat Buah
Hasil aplikasi eco enzyme dalam pengawetan buah tomat disajikan pada Gambar 5. Pengawetan  buah  tomat  yang  diberi  kelima eco enzyme menunjukan bahwa perlakuan T4 mampu meningkatkan  pengawetan  paling  tinggi  sebesar 70% dibandingkan dengan kontrol (T0) sedangkan  perlakuan  T4  dan  T5  mampu meningkatkan  pengawetan  tatapi  lebih  rendah dibandingkan dengan perlakuan T4, namun lebih baik  apabila  dibandingkan  dengan  kontrol  (T0). Kemudian  hasil  analisis  (Anova)  yang  dilanjut dengan  uji  Duncan  diketahui  bahwa  pada perlakuan  T1,  T2,  T3,  T4  dan  T5  menunjukan adanya  perbedaan  nyata  terhadap  kontrol  (T0). Rata-rata  laju  pembusukan  terendah  hingga tertinggi  secara  berturut-turut  terdapat  pada perlakuan T0, T3, T5, T1 dan T2 dan T4.
Gambar 5. Tingkat Keawetan Buah Tomat
Keterangan : T0 = Buah tomat tanpa pemberian eco enzyme (kontrol) T1 = Buah tomat yang disemprot eco ezyme berbahan kulit nanas T2  =  Buah  tomat  yang  disemprot eco  enzyme berbahan  kulit  jeruk lemon T3 = Buah tomat yang disemprot eco enzyme berbahan kulit pisang T4  =  Buah  tomat  yang  disemprot eco  enzyme berbahan  potongan bayam T5 = Buah tomat yang disemprot eco enzyme berbahan potongan daun singkong
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan pada  kelima eco  enzyme ,  diketahui  bahwa  pada kontrol  memiliki  tingkat  keawetan  buah  tomat yang  sangat  rendah,  hal  tersebut  dikarena  pada kontrol  tidak  disemprot eco  enzyme, sedangkan perlakuan  T4  memiliki  tingkat  keawetan  yang
20 45 60 35 70 35 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 P0 P1 P2 P3 P4 P5 T0    T1 T2    T3    T4    T5 P e rs e n ta s e T in g k a t K e a w e ta n B u a h T o m a t (% )
tertinggi. Hal tersebut disebabkan karena perlakuan  T4  yang  berasal  dari eco  enzyme berbahan  dasar  potongan  bayam,    mampu mempertahankan kesegaran buah tomat dibandingkan  buah  tomat  yang  diberi  perlakuan lainnya.  Hal  ini  selaras  dengan  penelitian Parathaman  (2012)  hasil  penelitiannya  bahwa dalam  bayam  terdapat  sekurang-kurangnya  13 flavonoid yang memiliki fungsi sebagai antibakteri, anti  agen  kanker  dan  antioksidan.  Senyawa fenolik  yang  ada  pada  bayam  yaitu  asam  galat, asam  cafeat,  rutin,  asam  ferulat  dan  quecertin mempunyai struktur yang berperan menassssngkap  radikal  bebas.  Antibakteri  yang terdapat  pada  bayam  yang  mampu  membantu eco  enzyme dalam  mempertahankan  kesegaran tomat  dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya. Menurut  penelitian  Millenia  (2020) eco  enzyme dengan  bahan  dasar  bayam  ini  memang eco enzyme yang  paling  efektif  diproduksi  untuk mengawetkan tomat cherry. Bayam yang mengandung  flavonoid  memiliki  fungsi  sebagai antibakteri  dengan  cara  membentuk  senyawa kompleks  terhadap  protein  extra  seluler  yang mengganggu integritas membran sel bakteri.
Perbedaan  warna  dan  aroma  pada  produk eco  enzyme disebabkan  oleh  proses  fermentasi yang  berbeda  pada  setiap  sampel.  Berdasarkan kajian  literatur  diketahui  bahwa  ketika  proses fermentasi glukosa dirombak untuk menghasilkan asam  piruvat.  Asam  piruvat  dalam  kondisi anaerob akan mengalami penguraian oleh piruvat dekarbosilase  menjadi  asetaldehid,  selanjutnya asetaldehid  diubah  oleh  alkohol  dehydrogenase menjadi  etanol  dan  karbondioksida,  dimana bakteri  Acetobacter  akan  merubah  alkohol menjadi  asetaldehid  dan  air,  yang  selanjutnya asetaldehid  akan  diubah  menjadi  asam  asetat (Atmanegara, 2015). Sedangkan dari segi warna, warna  yang  dihasilkan  oleh  ekoenzim  juga berkaitan dngan proses fermentasi.

## KESIMPULAN
Karakteristik  eco  enzyme  berbasis  lima  limbah organik  yaitu  keasaman  (pH)  tertinggi  terdapat pada  perlakuan  P2  sebesar  3,42.  Total  asam tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  P5  sebesar 5,25%, populasi BAL dan populasi yeast tertinggi terdapat  pada  perlakuan  P4  yaitu  2,  34  Log CFU/ml  dan  2,02  Log  CFU/ml.  Efektifitas  lima produk  eco  enzyme  terhadap  tingkat  keawetan buah  tomat  terbaik  terdapat  pada  perlakuan  P4 yaitu 70 %.

## DAFTAR PUSTAKA
Amin,  H.,  Saida,  Suriyanti,  Suherah,  &  Gani,  M. 2020.  Isolasi  dan  karakterisasi  bakteri probiotik  dari  saluran  pencernaan  ayam kampung  (Gallus  domesticus), Jurnal AGrotekMAS . Vol 1(1): 75-81.
Aristya,  A.L.,  A.M.  Legowo,  dan  A.  N.  Al-Baarri. 2013.  Total  asam,  total  yeast,  dan  profil protein kefir susu kambing dengan penambahan  jenis  dan  konsentrasi  gula yang  berbeda.  Jurnal Pangan  dan  Gizi . 4(7): 39-48..
Audy, 2022. Identifikasi Kadar Asam Asetat Pada Ecoenzyme Dari Bahan Organik Kulit Jeruk Dengan  Metode  Titrasi  Asam  Basa.  UNP.

## Skripsi Biologi
Azizah, N., A. N. Al-Baarri dan S. Mulyani. 2012. Pengaruh  lama  fermentasi  terhadap  kadar alkohol, pH, dan produksi gas pada proses fermentasi  bioetanol  dari  whey  dengan substitusi  kulit  nanas.  Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan. 1(2) : 72-77. Blitz  L.  2017. Tegnologi  Fermentasi .  Yogyakara: Graha Ilmu.
Chen,  P.,  Zhang,  Q.,  Dang,  H.,  Liu,  X.,  Tian,  F., Zhao, J., Chen, Y., Zhang, H.,  dan Chen, W.,  2014.  Screening  for  Potential  New ProbioticBased on Probiotic Properties and α-Glucosidase InhibitoryActivity. Food Control .65-72.
Etienne,  A.,  Genard,  M.,  Lobit,  P.,  Mbeguie Ambeguie, D. dan Bugaud, C. 2013. What Controls  Fleshy  Fruit  Acidity.  Areview  Of Malte  Anda  Citrate  Accumulation  In  Fruit Cells. Journal  of  Experimental  Botany. 64 (6).1451-1469.
Ide,  P.  2008.  Healt  Secet  of  Kefir,  Menguak Keajaiban Susu Asam Untuk Penyembhan Berbagai  Penyakit.  PT.  Elex  Media Kompotindo. Jakarta.
Lingga, L. 2010. Cerdas memilih sayuran, Jakarta:
PT Agromedia Pustaka.
Lund, P. Tramonti, A, Biase, DD. 2015. Mengatsi pH rendah Strategi Molekuler Pada Bakteri Netralofilik. Mikrobiol FEMS.Putaran.
Koriasih,  P.,  dan  Jannah,  S.  N.  2019.  Isolasi bakteri  asam  laktat  dari  tape  ketan  dan potensinya sebagai agen antikapang terhadap  pertumbuhan  Aspergillus  flavus Isolation  of  lactic  acid  bacterial  from fermented  sticky  rice  and  its  potency  as agent  of  anti-fungus  against  Aspergillus flavus  gro, NICHE  Journal  of  Tropical Biology . Vol 2(10): 7 –13. Millenia.  M.  I.,  Andari.  P.A.,  Endang.  T.W.  2020.
Manfaat  Ekoenzim  Dari  Limbah  Organik Rumah  TanggaSebagai  Pengawet  Buah Tomat Cherry. Seminar Nasional Edusainstek.FMIPA  UNIMUS  2020.  ISBN :978-602-5614-35-4.
Muninggar  V.  S.,    Andari  P.  A.,  Endang T.W.Jurusan.  M.  2020.    Perbandingan  Uji
Organoleptik Pada Delapan Variabel Produk Ekoenzim. UNIMUS 2020. Seminar
Nasional Saintik ISBN :978-602-5614-35-4
Parathaman  R,  P.  K.  2012.  GC-MS  Analysis  of
Phytochemicals and Simultaneous Determination of Flavonoids in Amaranthus Caudatus (Sirukeerai) by RP- HPLC.Analitical & Bioanalytical Techniques, 3:5. Roostita L.B. 2001. Deteksi Intra dan Ekstraseluler  Poliol  pada  Pertumbuhan Yeast  Toleran  Debaryomyces  hansenii dalam Asam dan Larutan Garam Konsentrasi Tinggi. Jurnal Vet. Sain . Vol.19(2).
Sari,  R.P.,    Astuti,  A.P.  dan  Maharani,  E.T.W. 2020    Pengaruh  Ecoenzym  Terhadap Tingkat Keawetan Buah Anggur Merah dan Anggur  Hitam,  HIGIEN.    ISSN  (Print)  : 2443-1141ISSN  (Online).    Universitas Muhammadiyah Semarang.
Selvakumar,  P.dan  Sivashanmugam,  P.  2015.
Optimization  of  Lipase  Production  from Organic Soil Waste by Anaerobic Digestion and  Application  in  Biodiesel  Production.
Fuel Processing Tecnology. 1-8. Suriasih,  K.,  W.R.  Aryanta,  G.  Mahardika,  and N.M.  Astawa.  2012.  Microbiological  and Cemical  Properties  of  Kefir  Made  in BalibCattle  Milk.  J.  Food  Sci  and  Quality Management. 6 : 12-22.