Prevalence Analysis of Hypodermal Infectious and Haematopoetic Necrosis Virus (IHHNV) in Vaname Shrimp ( Litopenaeus vannamei ) in Bengkalis District
Adzra Ariesta Fahmi 1* , Feliatra 1 , Irwan Effendi 1 , Nanang Muhson 2
1 Department of Marine Science, Faculty of Fisheries and Marine, Universitas Riau
2 Sultan Syarif Kasim II Class I Fish Quarantine Station, Pekanbaru Corresponding Author: fadzraariesta@gmail.com
Diterima/Received: 11 August 2022; Disetujui/Accepted: 01 September 2022

## ABSTRACT
The disease is a  limiting factor and causes  economic losses in the cultivation of white  shrimp ( Litopenaeus  vannamei ).  Diseases  in  vaname  shrimp  are  caused  by  viruses,  microbes,  parasites, organisms, and natural conditions. One of these diseases is infectious hypodermal and hematopoietic necrosis (IHHNV).  This  study  was  conducted  from  February  to  April  2022.  This  study  aimed  to analyze the prevalence of IHHNV that attacks white shrimp in the Bengkalis Regency and to observe and observe clinical symptoms in whitewashed shrimp infected with IHHNV in the pond area of the Bengkalis  Regency.  The  research  method  used  in  this  study  is  a  survey  method.  The  primary  data taken  included  water  quality  observations,  morphological  observations,  sampling,  and  detection  of IHHNV using the polymerase chain reaction (PCR) method. The results showed that the prevalence of IHHNV in white shrimp was 0%. PCR testing using a specific primer measuring 392bp showed that white  shrimp  samples  from  three  locations  in  Bengkalis  District,  namely  Bengkalis  District,  Bukit Batu District, and Rupat District, were negative for IHHNV and did not show any clinical symptoms of IHHNV on morphological examination.
Keywords: Disease, IHHNV, white shrimp, the prevalence

## 1. PENDAHULUAN
Udang  vaname  atau  udang  kaki  putih ( Litopenaeus vannamei )  merupakan  komoditas unggulan    yang  banyak  diminati  untuk dibudidayakan  saat  ini  dan  memiliki  nilai ekonomis  yang  tinggi.  Ketahanan  udang vaname  terhadap    penyakit  yang  menyerang udang  pada  umumnya  membuatnya  banyak diminati  oleh  para  pembudidaya  dan  petambak udang  di  Indonesia.  Beberapa  keunggulan udang  vaname  antara  lain  yaitu  kemampuan untuk  merespons  pakan  yang  diberikan  atau nafsu  makan  yang  tinggi,  ketahanan  terhadap serangan  penyakit  dan  lingkungan  yang  tidak menguntungkan (Mahardika et al., 2020).
Pada budidaya vaname, penyakit merupakan  faktor  pembatas  dan  merupakan penyebab  penting  kerugian  ekonomi.  Penyakit pada  udang  vaname  disebabkan  oleh  virus, mikroba,  parasit,  organisme,  dan  kondisi  alam. Salah  satu  penyakit  tersebut  adalah infectious hypodermal  and  hematopoietic  necrosis virus (IHHNV).  IHHNV    adalah  parvovirus  20-22 nm,  icosahedral,  tidak  berselubung  yang
mengandung  genom  DNA  untai  tunggal, panjangnya  sekitar  4,1  kb,  dengan  tiga kerangka  baca  terbuka  (Hernández‐Ruíz et  al., 2020).
Beberapa  tahun  terakhir  total  produksi udang di Indonesia mengalami penurunan, pada tahun  2012  total  produksi  udang  menurun  dari 1.900  ton  menjadi  1.025  ton,  virus  diduga menjadi  patogen  yang  memicu  penyakit  pada udang (Aulia et al., 2019). Keberadaan IHHNV pada  udang  vaname  akan  membawa  dampak yang  besar  pada  penurunan  produksi  budidaya udang vaname. Salah satu tindakan pencegahan penyebaran  virus    adalah  penyebaran  udang bebas  virus.  Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan penelitian atau deteksi dini di area pertambakan Kabupaten  Bengkalis,  agar  diketahui  seberapa besar tingkat serangan IHHNV sehingga upaya- upaya  untuk  pencegahan  terhadap  serangan IHHNV  dapat  dilakukan  dengan  baik  dan maksimal.

## 2. METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  dari  bulan
Februari-April  2022.  Sampel  udang  vaname diambil  dari  Kecamatan  Rupat,  Kecamatan Bengkalis, dan Kecamatan Bukit Batu Kabupaten Bengkalis, Provinsi Riau. Kemudian  pemeriksaan  sampel  dilakukan  di Laboratorium Stasiun Karantina
Ikan Pengendalian  Mutu  dan  Keamanan  Hasil Perikanan (SKIPM) Pekanbaru.

## Metode Penelitian
Metode penelitian yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  metode  survei.  Data  yang dikumpulkan  berupa  data  primer  dan  data sekunder. Data primer tersebut merupakan data dari hasil survei dan observasi langsung selama penelitian.  Data  primer  yang  diambil  meliputi berbagai  hal,  mulai  dari  pengamatan  kualitas perairan,  pengamatan  morfologi,  pengambilan sampel sampai deteksi virus udang yang diteliti dengan  metode Polymerase  Chain  Reaction (PCR).  Sedangkan,  data  sekunder  diperoleh dari  referensi  yang  relevan  seperti,  penelitan- penelitian  terdahulu,  buku,  jurnal,  artikel,  dan laporan instansi terkait.

## Prosedur Penelitian
Pengukuran Parameter Kualitas Air

## Tambak
Parameter kualitas perairan yang diamati pada  penelitian  ini  ada  tiga  parameter  meliputi suhu,  pH,  dan  salinitas.  Waktu  pengambilan dilakukan  bersamaan  saat  pengambilan  sampel udang  vaname  di  permukaan  perairan  dengan sekali  pengambilan  data  pada  masing-masing lokasi pengambilan sampel.

## Penanganan Sampel
Sampel  udang  vaname  dari  masing- masing  lokasi  diukur  panjangnya    kemudian dimasukkan ke dalam botol sampel yang berisi larutan fiksatif, larutan fiksatif yang digunakan adalah  alkohol  70%.  Proses  fiksasi  dilakukan untuk  menghindari  kerusakan  sel  karena kondisi postmortem .  Sampel  udang  vaname dari  lokasi  akan  diuji  di  laboratorium  Stasiun Karantina  Ikan  Pengendalian  Mutu  dan Keamanan Hasil Perikanan Pekanbaru.

## Ekstraksi DNA
Untuk  mengetahui  keberadaan  virus IHHNV  terlebih  dahulu  dilakukan  proses ekstraksi  DNA  menggunakan  metode  ekstraksi DTAB/CTAB. Organ target yang diambil, yaitu insang,  kaki  renang,  hepatopankreas,  dan  ekor. Organ target dikeringkan di tisu, sebanyak 0,02
g  organ  target  dimasukkan  kedalam  mikrotube berisi 600 μL larutan DTAB solution kemudian digerus. Sampel dalam tube yang berisi DTAB solution di inkubasi pada heating block dengan suhu 75 °C selama 5 menit dan dinginkan pada suhu  ruang.  Sebanyak  700  µL  kloroform ditambahkan, vortex 20  detik.  Kemudian sentrifugasi 12.000 rpm selama 5 menit.
Proses  sentrifugasi  dengan  kecepatan tinggi  akan  menghasilkan  endapan  atau  bisa disebut  pellet  (DNA)  dan  menempel  di  dasar microtube .  Larutan  jernih  bagian  atas  diambil sebanyak 200 µL ke dalam tube baru. Sebanyak 100  µL  C tab  solution dan  900  µL DEPC.ddH 2 O  ditambahkan,  kemudian vortex . Sampel  di  inkubasi  pada  suhu  75  °C  selama  5 menit  dan  dinginkan  pada  suhu  ruang. Selanjutnya  sentrifugasi  dengan  kecepatan 12.000  rpm,  selama  10  menit.  Supernatan dibuang  dan  keringkan  ±2  menit.  Setelah  itu, pellet  dilarutkan  dengan  150  µL disolving solution dandiinkubasi  di  suhu  75  °C  selama  5 menit dan didinginkan pada suhu ruang.
Selanjutnya  disentrifugasi  12.000  rpm selama 5 menit. 300 µL ethanol 95% disiapkan dalam tube baru.  Bagian  atas  yang  jernih diambil  sebanyak  100  µL  dan  dimasukkan  ke dalam  300  µL ethanol 95%. Vortex ±20  detik, sentrifugasi  12.000  rpm  selama  5  menit  dan supernatan  dibuang  menyisakan  pellet.  Pellet dikeringkan,  kemudian  ditambahkan  50  µL DEPC.ddH 2 O. Template DNA  yang  dihasilkan disimpan  pada  suhu  -20  ℃  hingga  akan  di amplifikasi.

## Amplifikasi DNA
Tahapan  dalam  melakukan  amplifikasi yaitu,  setelah  diperoleh template dari  ektraksi DNA,  dilakukan  amplifikasi  dengan thermal cycler .  Dipersiapkan master  mix dengan volume  23  µL  per  satu  reaksi.  Reagen single PCR IHHNV terdiri dari; 12,5 µL go taq green ,
8,5 µL nuclease free water , 1 µL primer F, dan 1  µL  primer  R.  Campuran master  mix ditambahkan  2  µL  DNA template sehingga total  reaksi  untuk  satu  sampel  adalah  25  µL. Campuran  reaksi  PCR  yang  terdiri  atas master mix dan template siap  untuk  diamplifikasi. Amplifikasi  DNA  dilakukan  sebanyak  35 siklus,  agar  DNA  target  dapat  terlihat  ketika dilakukan elektroforesis.

## Elektroforesis
Elektroforesis  gel  digunakan  untuk memvisualisasikan produk PCR yang

## Prevalence Analysis of Hypodermal Infectious and Heamatopoetic
dihasilkan,  dan  munculnya  pita  gel  PCR dengan  bp  yang  tepat  menunjukkan  deteksi positif  (Evans  dan  Lamberti,  2018).  Amplikon dielektroforesis pada gel agarose yang direndam dengan larutan TAE buffer. Sebanyak  75  g  agarose  dilarutkan  dengan  50 mL TAE Buffer yang, menggunakan microwave  hingga  mendidih  dan  tidak  ada agarose  yang  mengendap.  Diamkan  selama kurang  lebih  10  menit  hingga  suhunya  kurang lebih  50℃,  5  μL sybro  safe ditambahkan. Agarose  tersebut  dicetak  pada tray agarose yang  telah  dilengkapi  dengan  sisir.  Setelah agarose  dingin  dan  mengeras,  sisir tray pada cetakan agarose tersebut diangkat dan dimasukkan  ke  dalam  elektroforesis  apparratus yang  berisi  TAE  1x.  Pada  sumur  yang  telah terbentuk dimasukkan amplikon secara berurutan,  kontrol  negatif,  sampel,  kontrol positif, dan marker DNA 100bp masing-masing sebanyak  5  μL.  Lalu    gel  agarose  dialiri  arus listrik  dengan  tegangan  100  volt  selama  30 menit

## Visualisasi DNA
Visualisasi  DNA  dilakukan  dengan  cara dokumentasi  sampel  yang telah di PCR. Untuk mengetahui  ada  tidaknya  infeksi  virus  IHHNV terhadap  sampel-sampel  yang  dideteksi  maka gel  hasil  elektroforesis  diamati  menggunakan UV  transiluminator  yang  sekaligus  dilakukan pengambilan gambar. Setelah UV Transluminator dinyalakan,  pita  DNA  akan berpendar.  Hasil  dari  sampel  dapat  dilihat dilayar  monitor  yang  terhubung  dengan  UV Transluminator . Band atau  pita  DNA  yang muncul  pada  sampel  dibandingkan  dengan band yang muncul pada kontrol positif. Sampel yang terinfeksi IHHNV menghasilkan pita pada ukuran 392bp dan sejajar dengan pita DNA dari positif kontrol.

## Parameter yang Diamati
Parameter  utama  yang  diamati  yaitu prevalensi  virus  yang  menyerang  udang vaname,  parameter  pendukung  yaitu  melihat gejala  klinis  udang  vaname  sebelum  dilakukan pemeriksaan.  Sampel  udang  vaname  yang positif  terinfeksi  virus  kemudian  dihitung  dan
dianalisa  berdasarkan  perhitungan  matematik untuk  mengetahui  menilai  prevalensi.  Nilai prevalensi digunakan untuk mengetahui banyaknya  udang  yang  terinfeksi  virus. Prevalensi  dapat  dihitung  menggunakan  rumus menurut Cameron (2002).
Prevalensi (%) = ∑ ∑ 100 %

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh    dari  hasil  deteksi IHHNV  ditampilkan  dalam  bentuk  gambar hasil  visualisasi  DNA  kemudian  disajikan dalam  bentuk  grafik  dimana  grafik  tersebut menggambarkan  tingkat  prevalensi  pada  lokasi penelitian. Kemudian dianalisis secara deskriptif  untuk  menjelaskan  nilai  prevalensi virus yang menginfeksi udang vaname berdasarkan referensi yang relevan.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN Parameter Kualitas Perairan Tambak
Hasil  pengukuran  parameter  lingkungan yang  dilakukan  pada  tambak  udang  vaname  di Kabupaten Bengkalis menunjukkan bahwa nilai salinitas  berada  pada  kisaran  22-24  ppt. Salinitas  terendah  terdapat  pada  di  Kecamatan Bengkalis sedangkan salinitas tertinggi terdapat pada Kecamatan Bukit Batu dan Rupat. Kisaran suhu  terendah  terdapat  pada  Kecamatan Bengkalis dengan nilai sebesar 28ºC sedangkan nilai  tertinggi  pada  kecamatan  Rupat  yaitu sebesar  30℃.  Nilai  pH  yang  didapatkan  pada tiga lokasi sampel yaitu 6 (Tabel 1).
Tabel 1. Data Kualitas Air Selama Penelitian Kecamatan pH pH Suhu ( ºC) Salinitas (ppt) Bengkalis 6 28 22 Bukit Batu 6 29 24 Rupat 6 30 24
Pertumbuhan  yang  baik  bagi  udang vaname  yaitu  berada  pada  kondisi  lingkungan air  yang  optimal  berdasarkan  syarat  standar baku  mutu  air  tambak.  Kisaran  nilai  opimum dari  kualitas  air  yang  baik  untuk  pertumbuhan udang vaname dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2 . Hasil Pengamatan dengan Kelayakan Pustaka Budidaya Udang Vaname
No Parameter Kualitas Air Nilai Optimum Kualitas Air Nilai Hasil Pengamatan 1 Salinitas (ppt) 15-30 (Salsabiela, 2020) 22-24 2 Suhu (℃) 26-30 (Oktavian et al., 2019) 28-30 3 pH 6-9 (Nurhidayati et al., 2021) 6
Budidaya intensif dicirikan dengan padat tebar  tinggi,  penggunaan  pakan  buatan,  sarana prasarana  budidaya  yang  lebih  komplit,  serta manajemen  budidaya  yang  lebih  modern. Keberhasilan produksi budidaya udang intensif, sangat ditentukan oleh faktor lingkungan, inang ( host ),  dan  sebaran  patogen  (Ponce-Palafox et al., 2019).  Faktor  lingkungan  dalam  budidaya adalah  nilai  kapasitas  parameter  fisika,  kimia, dan  biologi  perairan  atau  yang  disebut  juga dengan  parameter  kualitas.  Parameter  kualitas air  dalam  ekosistem  tambak,  memainkan peranan  penting  terhadap  tingkat  produktifitas budidaya (Ariadi et al., 2021).
Pengukuran  Morfologi  Udang  Vaname ( L.vannamei )
Hasil  pengukuran  panjang  pada  udang vaname  didapatkan  hasil  terkecil  pada  kode sampel  I/5B  yang  berasal  dari  Kecamatan Bengkalis  dengan  panjang  6,5  cm  sedangkan ukuran udang vaname terpanjang terdapat pada kode  sampel  I/2R  dan  I/5R  yang  berasal  dari kecamatan Rupat dengan panjang 12 cm (Tabel 3).  Perbedaan  ukuran  udang  yang  signifikan disebabkan  umur  udang  vaname  pada  setiap lokasi  penelitian  berbeda-beda  yaitu,pada kecamatan  bengkalis  berumur  35  hari,  pada kecamatan  Bukit  Batu  berumur  50  hari,  dan pada kecamatan Rupat berumur 55 hari.
Tabel 3 . Identifikasi Morfologi Udang Vaname ( L. vannamei ) No Kode Sampel Panjang (cm) Penampakan Morfologi Udang Vaname Warna Tubuh Bentuk Tubuh 1 I/1B 8 Putih kecoklatan Lurus 2 I/2B 8 Putih kecoklatan Lurus 3 I/3B 7 Putih kecoklatan Lurus 4 I/4B 7,5 Putih kecoklatan Lurus 5 I/5B 6,5 Putih kecoklatan Lurus 6 I/1BB 10,5 Putih kecoklatan Lurus 7 I/2BB 11 Putih kecoklatan Lurus 8 I/3BB 11 Putih kecoklatan Lurus 9 I/4BB 10,5 Putih kecoklatan Lurus 10 I/5BB 9 Putih kecoklatan Lurus 11 I/1R 11, 5 Putih kecoklatan Lurus 12 I/2R 12 Putih kecoklatan Lurus 13 I/3R 11 Putih kecoklatan Lurus 14 I/4R 11,5 Putih kecoklatan Lurus 15 I/5R 12 Putih kecoklatan Lurus
Keterangan :  I =  IHHNV, 1-5 = Nomor sampel,  B = Kecamatan Bengkalis, BB = Kecamatan Bukit
Batu, R = Kecamatan Rupat
Gambar 1. Hasil Deteksi Produk PCR Sampel Kecamatan Bengkalis
Gambar 2. Hasil Deteksi Produk PCR Sampel
Kecamatan Bukit Batu

## Gambar 3. Hasil Deteksi Produk PCR Sampel Kecamatan Rupat
Keterangan : M = DNA marker 100bp, (+) = kontrol positif IHHNV, 1-5 = sampel udang vaname, (-) = kontrol negatif IHHNV
Morfologi  dari  masing-masing  udang vaname  yang  diamati  berdasarkan  gejala IHHNV  yaitu  terdapat  perubahan  warna  kulit atau  karapas  udang,  terdapat  bercak-bercak putih terutama antara segmen eksoskeleton dan karapas, udang yang sekarat umumnya berwarna merah kecoklatan atau pink dan tubuh berbentuk bengkok (Rahmaningsih, 2018).
Hasil pengamatan morfologi berdasarkan warna  dan  bentuk  tubuh  udang  vaname  pada lokasi  penelitian  tidak  menunjukkan  gejala IHHNV. Semua sampel udang vaname berwarna  putih,  tidak  terdapat  bercak  putih antara  segmen  eksoskeleton  dan  karapas,  dan tubuh berbentuk lurus (Tabel 3).

## Hasil Deteksi IHHNV dengan PCR
IHHNV yang diperoleh
tidak
menunjukkan  pada  ukuran  amplikon  392  bp (Huerlimann et  al., 2022).  Ukuran  amplikon 392bp merupakan ukuran positif IHHNV sesuai dengan  protokol Office  International  des Epizooties (OIE).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa tidak  ditemukan  adanya  udang  vaname  yang terdeteksi  positif  IHHNV  pada  semua  sampel (Gambar 1-3).

## Prevalensi Serangan IHHNV
Prevalensi  adalah  persentase  udang vaname di Kabupaten Bengkalis yang terserang virus  IHHNV.  Terdapat  15  sampel  udang vaname  dari  tiga  kecamatan  di  Kabupaten Bengkalis, setelah dilakukan pengujian IHHNV menggunakan metode PCR dengan menggunakan  primer  spesifik  menunjukkan bahwa  sampel  negatif  dari  virus.  Jumlah serangan IHHNV dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4.  Hasil Deteksi IHHNV Lokasi Kode Sampel Hasil Uji Kecamatan Bengkalis I/1B Negatif I/2B Negatif I/3B Negatif I/4B Negatif I/5B Negatif Kecamatan Bukit Batu I/1BB Negatif I/2BB Negatif I/3BB Negatif I/4BB Negatif I/5BB Negatif Kecamatan Rupat I/1R Negatif I/2R Negatif I/3R Negatif I/4R Negatif I/5R Negatif
Pada  penelitian  Aulia et  al. (2019), dilakukan pengujian IHHNV di Balai Karantina Ikan, Pengendalian Mutu, dan Keamanan Hasil Perikanan  Surabaya  sampel  yang  digunakan yaitu  15  post  larva  udang  vaname  yang diperoleh  dari  beberapa  tambak  di  Lamongan dan Tuban hasil penelitian tersebut menyatakan bahwa prevalensi IHHNV yang didapatkan 0%.
Infeksi  penyakit  udang  dipengaruhi  oleh tiga faktor,  yaitu keberadaan pathogen, kondisi udang  dan  lingkungan.  Salah  satu  upaya  untuk menghindari  serangan  penyakit  pada  budidaya udang  vaname  yaitu  dengan  menerapkan biosecurity .  Pemasangan  peralatan biosecurity merupakan  faktor  penting  dalam  keberhasilan budidaya  udang  dan  mencegah  masuknya patogen penyebab penyakit dan virus.
Tambak  udang  vaname  yang  terdapat  di tiga  lokasi  di  Kabupaten  Bengkalis  sudah menerapkan biosecurity .  Salah  satu  langkah
yang  dilakukan  yaitu,  dengan  penggunaan benur  yang  bebas  penyakit  atau specific pathogen  free yaitu  benur  yang  bebas  dari beberapa  jenis  penyakit  tertentu  seperti IHHNV,  WSSV,  IMNV,  dan  TSV.  Kemudian water filtration , bertujuan mencegah masuknya carrier dan predator secara langsung ke tambak udang,  penyaringan  air  menggunakan  saringan atau strimin ukuran 300-1.000 mikron. Penularan  penyakit  juga  dapat  terjadi  melalui perantara  peralatan  tambak  yang  digunakan seperti sampan, jala, water quality checker , dan lain-lainnya. Alat-alat tersebut perlu disterilkan ( equipment  sterilization )    untuk  mencegah penularan penyakit (Supono, 2019).
Patogenisitas IHHNV pada inang berhubungan  erat  dengan  umur/  ukuran  inang. Udang  muda  lebih  rentan  terhadap  infeksi IHHNV  (Yu et  al., 2021)  Udang  lebih  muda lebih sensitif terhadap IHHNV, sistem pertahanan  kekebalannya  terhadap  IHHNV belum  matang.  Jika  membandingkan  reseptor IHHNV  pada  membran  sel  udang  pada  tahap perkembangan  yang  berbeda,  menganalisis perubahan  aktivitas  enzim  terkait  sistem kekebalan dan protein pengikat IHHNV setelah terinfeksi IHHNV, kita akan memiliki informasi yang lebih berharga untuk menjelaskan  perbedaan  patogenisitas  IHHNV
untuk  udang  pada  tahap  perkembangan  yang berbeda.  Ini  dapat  memberikan  perspektif  baru untuk  pengendalian  dan  pencegahan    IHHNV yang  efektif  dan  memberikan  referensi  untuk studi  tentang  berbagai  tahap  kerentanan  virus udang  terhadap infeksi inang.

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  maka  dapat disimpulkan, prevalensi Infectious Hypodermal and  Hematopoietic  Necrosis  Virus (IHHNV) pada udang vaname adalah 0%. Udang vaname dari  tiga  lokasi  di  Kabupaten  Bengkalis  tidak menunjukkan adanya gejala klinis dari IHHNV pada  pemeriksaan  morfologi.  Semua  sampel udang vaname berwarna putih kecoklatan, tidak terdapat  bercak  putih  pada  karapas  dan  tubuh berbentuk lurus.
Deteksi keberadaan
Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus (IHHNV) penyebab sindrom deformitas kekerdilan  menggunakan  teknik Polymerase chain  reaction (PCR)  sangat  bermanfaat  dan akurat  untuk  mendeteksi  keberadaan  virus tersebut.  Oleh  karena  itu,  pengaplikasian metode  ini  sangat  baik  apabila  dilakukan  di semua  usaha  budidaya  udang  vaname  di Kabupaten Bengkalis.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariadi,  H.,  A.  Wafi,  M.  Musa,  &  Supriatna.  (2021).  Keterkaitan  Hubungan  Parameter  Kualitas  Air Pada  Budidaya  Intensif  Udang  Putih  ( Litopenaeus  vannamei ). Samakia:  Jurnal  Ilmu Perikanan , 12(1): 18-28.
Aulia,  A.M.S.,  D.S.  Budi,  A.H.  Fasya,  H.  Kenconojati,  &  M.H.  Azhar.  (2019).  Deteksi  Virus  pada Udang  Vaname  ( Litopenaeus  vanamei )  di  Balai  Karantina  Ikan,  Pengendalian  Mutu,  dan Keamanan  Hasil  Perikanan  Surabaya  I  Virus  Detection  of  Pacific  White  Shrimp  ( Litopenaeus vanamei )  at  Fish  Quarantine  Center,  Quality  Control,  and  Security  of  Fishery. Journal  of Aquaculture , 4(2): 83-90.
Cameron, A. (2002). Survey Toolbox for Aquatic Animal Diseases: A Practical Manual And Software Package. ACIAR Monograph No.94. 375p.
Evans, N.T & G.A. Lamberti. (2018). Freshwater fisheries assessment using environmental DNA: A primer on the method, its potential, and shortcomings as a conservation tool. Fisheries Research , 16: 29–41. https://doi.org/10.1016/j.fishries.2017.09.013
Hernández‐Ruíz, H., H.H. Montaldo, J. Bustos‐Martínez, G.R. Campos‐Montes, & H. Castillo‐Juárez. (2020).  Heritability  and  genetic  correlations  for infectious  hypodermal  and  hematopoietic necrosis  virus load,  body  weight  at  harvest,  and  survival  rate  in  Pacific  white  shrimp ( Litopenaeus vanamei ). Journal of the World Aquaculture Society , 51(1): 312-323.
Huerlimann,  R.,  et  al.  (2022).  Genome  assembly  of  the  Australian  black  tiger  shrimp  ( Penaeus monodon ) reveals a novel fragmented IHHNV EVE sequence. G3 , 12 (4), jkac034.
Mahardika,  A.,  N.  Umar,  N.  Wardhani,  &  I.  Suprianto.  (2020).  Sistem  Pakar  untuk  Mendiagnosa Penyakit  Udang  Vaname  ( Litopenaeus  vannamei )  Menggunakan  Metode  Dempster-
Shafer. Jurnal IT , 11(3): 133-141.
Nurhidayati, M., B. Al Kindhi, & F.I. Adhim. (2021). Implementasi Logika Fuzzy untuk Kontrol pH dan Salinitas Air Tambak. Jurnal Teknik ITS , 10(2): F244-F249.
Oktavian,  M.S.,  A.  Budiyanto,  D.  Farahiyah,  &  H.H.  Triharminto.  (2019).  Rancang  Bangun  Sistem Pengendalian  dan  Monitoring  di  Tambak  Udang. In  Prosiding  Seminar  Nasional  Sains Teknologi Dan Inovasi Indonesia (SENASTINDO), 1(1) :183-194.
Ponce-Palafox, J.T., et al. (2019). Response surface analysis of temperature-salinity interaction effects on water quality, growth, and survival of shrimp Penaeus vannamei post larvae raised in biofloc intensive nursery production . Aquaculture 503: 312-321.
Rahmaningsih,  S.  (2018). Hama  &  Penyakit  Ikan. Dinas  Kelautan  dan  Perikanan  Kabupaten Kebumen. Jawa Tengah : Deepublish.
Salsabiela,  M.  (2020). Pengaruh  Tingkat  Salinitas  Berbeda  terhadap  Pertumbuhan  Udang  Vannamei ( Litopenaeus vannamei ) yang Diablasi. Jurnal Indonesia Sosial Teknologi , 1(5): 405-413
Supono. (2019). Budidaya Udang Vaname Salinitas Rendah, Solusi untuk Budidaya di Lahan Kritis . Yogyakarta : Graha Ilmu.
Yu,  J.  Y.,  Yang,  N.,  Hou,  Z.  H.,  Wang,  J.  J.,  Li,  T.,  Chang,  L.  R.,  &  Yan,  D.  C.  (2021).  Research progress on hosts and carriers, prevalence, virulence of infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus (IHHNV). Journal of Invertebrate Pathology , 183 , 107556.