Biskuit  mocaf–garut  tinggi  zat  besi  meningkatkan  kadar  Fe  darah  dan kadar hemoglobin pada tikus Sprague Dawley
Hesti Permata Sari * , Friska Citra Agustia, Yovita Puri Subardjo, Gumintang Ratna Ramadhan

## ABSTRACT
Background :  One  of  the  most  popular  type  of  snack  is  biscuit,  which  was  favoured  by  all-ages  including  toddler.  At  2016, previous study has found formulation of  biscuit made from mocaf-arrowroot substituted with chicken’s liver and red spinach (Mogatiyam) that has high level of iron for anemic toddlers.
Objectives : This research aimed to measure the bioassay values of Mogatiyam biscuit in anemic rats. Methods : This is a true experimental study using 32 Sprague Dawley male rats aged 3 weeks induced-anemia using zero iron feed for 7 days. The rats were randomly divided into 4 treatment groups, which are ½ serving biscuit (0.2 gram), 1 serving (0.8 gram)  and  2  servings  (0.4  grams).  Statistical  analysis  was  performed  using  ANOVA  to  identify  the  increase  change  in  each group, and LSD to identify the best treatment.
Results : The result reported significant differences in Fe and hemoglobin after biscuit feeding between groups  (p=0.00). The best treatment was found in group P3 (2 servings of biscuit) with Fe and hemoglobin increase were 6.65 ± 0.49 µg/dl and 3.62 ± 0.06 gr/dl respectively.
Conclusion :  Biscuit  made  for  anemic  toddler  from  mocaf-arrowroot  substituted  with  chicken’s  liver  and  red  spinach (mogatiyam) can increase blood Fe and haemoglobin in anemic rat.
Keywords : anemia, biscuits, haemoglobin, iron, rats

## ABSTRAK
Latar  Belakang  : Biskuit  merupakan  bentuk  snack  yang  digemari  semua  usia  terutama  balita.  Pada  tahun  2016,  telah dihasilkan produk biskuit tinggi besi yang berbahan dasar tepung mocaf dan garut dengan penambahan hati ayam dan bayam merah (mogatiyam) yang ditujukan untuk balita anemia.
Tujuan: Melakukan  pengujian  bioassay  biskuit  berbahan  dasar  mocaf-garut  yang  disubtitusi  hati  ayam  dan  bayam  merah (mogatiyam) pada tikus anemia.
Metode : Sebanyak 32 tikus Sprague Dawley jantan berusia 3 minggu dibuat anemia melalui pakan  tanpa zat besi selama 7 hari  dan  dilanjutkan  perlakuan  selama  14  hari,  dibagi  menjadi  4  kelompok  perlakuan,  yaitu  pakan  biasa,  pakan  biasa  dan biskuit ½ takar saji (0,2 gram), pakan biasa dan 1 takar saji (0,8 gram) serta pakan biasa dan 2 takar saji (0,4 gram). Analisis statistik ANOVA untuk menguji perbedaan kenaikan tiap kelompok dan LSD untuk mengetahui perlakuan terbaik.
Hasil  : terdapat  perbedaan  kenaikan  nilai  fe  darah  dan  hemoglobin  yang  bermakna  setelah  pemberian  biskuit  untuk  setiap kelompok (p=0,00). Perlakuan terbaik adalah kelompok P3 dengan kenaikan nilai Fe darah dan hemoglobin tertinggi (6,65 ± 0,49 µg/dl ; 3,62 ± 0,06 gr/dl) Kesimpulan  : Pemberian  biskuit  biskuit  balita  berbahan  dasar  mocaf-garut  yang  disubtitusi  hati  ayam  dan  bayam  merah (mogatiyam) dapat meningkatkan nilai Fe darah dan Hb tikus anemia.
Kata Kunci : anemia, biscuit, hemoglobin, zat besi, tikus

## PENDAHULUAN
Jumlah  balita  anemia  di  Indonesia  masih  cukup tinggi.    Berdasar  Riskesdas  2013,  sebanyak  28,1  % anak usia 12-59 bulan mengalami anemia. Hasil Survey Kesehatan  Rumah  Tangga  (SKRT)  tahun  2012  juga menyebutkan  bahwa  persentase  balita  yang  mengalami anemia  yakni  sebesar  40,5%.  Anemia  adalah  keadaan dengan  kadar  hemoglobin,  hematokrit  dan  sel  darah merah yang lebih rendah dari nilai normal. Berdasarkan  hasil  Riskesdas  2007  salah  satu  faktor utama  penyebab  anemia  pada  balita  adalah  defisiensi asupan  zat  besi  (anemia  mikrositik  hipokromik)  yaitu mencapai  70,1%.  Zat  besi  (Fe)  merupakan  zat  yang
esensial bagi tubuh dan diperlukan dalam hematopoesis (pembentukan darah), yaitu dalam mensintesa hemoglobin. 1 Salah satu solusi potensial yang bisa dikembangkan  untuk  mengatasi  masalah  anemia defisiensi  besi  pada  balita  adalah  dengan  peningkatan konsumsi  sumber  makanan  tinggi  zat  besi.  Biskuit adalah salah satu bentuk cemilan yang digemari semua usia  terutama  balita.  Pada  tahun  2016,  Agustia et  al telah  menghasilkan  produk  biskuit  tinggi    besi  yang berbahan  dasar  tepung  mocaf  dan  garut  dengan penambahan hati ayam dan bayam  merah  (mogatiyam) yang ditujukan untuk balita. 2
Program Studi Ilmu Gizi, Fakultas Ilmu – ilmu Kesehatan, Universitas Jenderal Soedirman. Jl. Dr. Suparno, Karangwangkal, Purwokerto Utara, Banyumas, Jawa Tengah, Indonesia
* Korespondensi: E-mail: permatasari.hesti@gmail.com
Jurnal Gizi Indonesia (The Indonesian Journal of Nutrition) Vol. 7, No. 1, Desember 2018 (49-53) Submitted : 31 Juli 2018, Accepted : 27 Desember 2018 Tersedia Online di https://ejournal.undip.ac.id/index.php/jgi/

## Jurnal Gizi Indonesia
Kandungan  pati  mocaf  yang  tinggi  dapat digunakan  untuk  substitusi  tepung  terigu  dalam pembuatan  biskuit. 3 Pati  garut  memiliki  daya  kembang yang  tinggi,  yaitu  54%  dan  nilai  cerna  pati  84,35% sehingga  menghasilkan  biskuit  yang  lebih  lembut, renyah  dan  mudah  dicerna. 4 Hati  ayam  buras mengandung  zat  besi  24,94  mg/100  g. 5 Kandungan protein  yang  tinggi  pada  hati  (±15  g/100  g)  berperan dalam  meningkatkan  absorbsi  zat  besi  nonheme, pembentuk sel darah merah dan untuk mempertahankan tekanan  osmosis  darah.    Bayam  merah  juga mengandung  vitamin  C  cukup  tinggi  sehingga  sesuai untuk  ditambahkan  pada  biskuit  yang  mengandung  zat besi  tinggi.  Vitamin  C  akan  membantu  penyerapan  zat besi  dalam  tubuh.  Dalam  1  sajian  (22,8  gram)  biskuit tersebut  memiliki  kandungan  zat  besi  sebesar  3,2    mg atau  dapat  memenuhi  35,5%  -  40%  kebutuhan  besi balita. 2
Keunggulan  lain  yang  dimiliki  biskuit  mocaf- garut  selain  dapat  memenuhi  kebutuhan  zat  gizi  balita yaitu  bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  bahan pangan  lokal.  Bahan  lokal  tersebut  setelah  diolah menjadi  biskuit  cenderung  lebih  disukai  balita dibandingkan  dengan  konsumsi  bahan  tersebut  secara langsung  dengan  teknik  pemasakan  biasa  seperti direbus.  Biskuit  mocaf-garut  telah  memenuhi  standar minimal  kandungan  gizi  biskuit  PMT  dan  memiliki keunggulan  dalam  kandungan  zat  besi  yaitu  54,4%. 2 Penelitian  ini  bertujuan  mengkaji  pemanfaatan  biskuit berbahan  dasar    tepung  mocaf  dan  garut  yang disubstitusi bahan makanan tinggi besi yaitu hati ayam dan  bayam  merah  terhadap  pemulihan  status  anemia tikus.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian
ini merupakan penelitian eksperimental  laboratorium  dengan  jenis  pre-post  test randomized  control  group  design.  Metode  yang digunakan  adalah  metode  deplesi-replesi  hemoglobin. Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Mei-Juni  2017  di Laboratorium Pusat Studi Pangan dan Gizi PAU (Pusat Antar Universitas) Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
Sebanyak 32 ekor tikus (Rattus norvegicus galur Sprague  Dawley )  berjenis  kelamin  jantan  berusia  4 minggu  dengan  berat rata-rata  100  gram.  Dikondisikan menjadi anemia dengan cara memberikan pakan standar tanpa  besi  selama  7  hari  sehingga  tikus  mengalami anemia.  Parameter  anemia  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  ketika  kadar  hemoglobin  tikus kurang  dari  10  g/dl  dan  kadar  Fe  darah  kurang  dari  80 µg/dl.
Hewan  coba  dibagi  kedalam  4  kelompok  secara random  sampling.  Dosis  yang  diberikan  pada  tikus dikonversi  dari  manusia  yaitu  22,8  gram 5 dengan memperhitungkan berat badan tikus, sehingga didapatkan dosis seperti pada Tabel 1.
Tabel 1. Dosis Biskuit untuk Sekali Pemberian
Kelompok Perlakuan Takar Saji Dosis Pemberian Perhari (per 200 gram Berat Tikus) K1 0 0 g P1 0,5 0,2 g P2 1 0,4 g P3 2 0,8 g
Pemberian  biskuit  berbahan  dasar  tepung  mocaf dan  garut  yang  disubtitusi  bahan  makanan  tinggi  besi yaitu  hati  ayam  dan  bayam  merah  (mogatiyam) dilakukan  selama  14  hari  dengan  cara  disonde.  Semua kelompok  baik  kelompok  perlakuan  maupun  kontrol diberikan  pakan  standar  yaitu  AIN-93  secara ad- libitum .  Pada  hari  ke-15  masa  perlakuan,  tikus  diambil darahnya  sebanyak  1  ml  melalui  mata  ( medial  canthus sinus orbitalis ) untuk dianalisis kadar Hb dan Fe darah. Pengujian Fe menggunakan metode Nitro-Paps sedangkan kadar Hb diukur dengan metode cyanmethemoglobin.  Hasil  penelitian  dianalisis  dengan ANOVA  dan  LSD.  Protokol  penelitian  ini  telah  di telaah  oleh  tim  komisi  etik  Fakultas  Kedokteran Universitas  Jenderal  Soedirman  dengan  nomor  Ref: 1432/KEPK/IV/2017.

## HASIL
Masa  deplesi  7  hari  dengan  pemberian  pakan standar  tanpa  Fe  telah  mampu  menurunkan  nilai  Fe darah dan Hb tikus anemia. Setelah masa perlakuan 14 hari, terjadi peningkatan nilai Fe darah dan hemoglobin pada  hewan  coba  yang  diberi  tambahan  makanan biskuit  mogatiyam.    Peningkatan  tertinggi  nilai  Fe darah  dan  Hb  ditunjukkan  pada  kelompok  yang  diberi dosis  2  takar  saji  biskuit  tinggi  besi  yang  berbahan dasar tepung mocaf dan garut dengan penambahan hati ayam  dan  bayam  merah  (3,62  ±  0,06  gr/dl  dan  6,65  ± 0,49).  Tidak  terdapat  kenaikan  yang  bermakna  pada kelompok  yang  tidak  diberi  tambahan  biskuit  (Tabel  2 dan 3)
Hasil  analisis  statistik  paired  t-test  menunjukkan bahwa terdapat  perbedaan yang  bermakna  antara  kadar hemoglobin  sebelum  dengan  setelah  intervensi  pada kelompok P1, P2, dan P3 ( p =0,001; p <0,05). Biskuit ini dapat memperbaiki status anemia pada tikus. Kelompok P1,  P2  dan  P3  di  akhir  perlakuan  memiliki  nilai  Fe darah diatas 80 µg/dl dan Hb diatas 10 mg/dl.
Tabel 2. Nilai Fe Darah Hewan Coba Masa Deplesi dan Setelah Diberi Biskuit Tinggi Besi Kelompok Fe (µg/dl) Dependet t-tets One way ANOVA Pre Pos Delta K1 67,90 ± 3,17 69,12 ± 3,02 1,00 ± 0,51 0,180 0,001 P1 71,59 ± 5,49 90,63 ± 5,91 4,29 ± 0,99 0,001 P2 71,91 ± 3,89 104,76 ± 2,70 5,72 ± 0,40 0,001 P3 74 ± 3,21 118,43 ± 6,25 6,65 ± 0,49 0,001
Tabel 3. Nilai Hb Hewan Coba Masa Deplesi dan Setelah Diberi Biskuit Tinggi Besi
Kelompok Hb (gr/dl) Dependet t-tets One way ANOVA Pre Pos Delta K1 9,67 ± 0,17 9,67 ± 0,17 -0,0043 ± 0,07 0,837 0,001 P1 9,50 ± 0,28 10,42 ± 0,22 0,92 ± 0,07 0,001 P2 9,41 ± 0,42 11,67 ± 0,38 2,26 ± 0,06 0,001 P3 9,41 ± 0,27 13,03 ± 0,26 3,62 ± 0,06 0,001 Hasil uji ANOVA menunjukkan bahwa perlakukan  pemberian  biskuit  berbahan  dasar  mocaf- garut  dengan  substitusi  hati  ayam  dan  bayam  merah 5 menghasilkan kenaikan kadar Fe darah dan hemoglobin yang berbeda untuk setiap kelompok ( p =0,00). Hasil uji Post-Hoc DMRT  ( Duncan’s  Multiple  Range  Test ) menunjukkan  kelompok  P3  menempati  subset  keempat dengan  nilai  tertinggi.  Hal  ini  memperlihatkan kelompok P3 merupakan jumlah pemberian yang paling baik  dalam  meningkatkan  kadar  Fe  darah  dan hemoglobin  tikus  anemia,  kemudian  diikuti  kelompok P2, P1, dan terakhir kontrol.

## PEMBAHASAN
Selama  masa  deplesi,  tikus  diberi  pakan  standar yang  telah  dihilangkan  kandungan  besinya  sehingga tikus mengalami anemia. Anemia defisiensi besi terjadi akibat  sedikit  atau  tidak  adanya  asupan  besi  yang mengakibatkan  kosongnya  cadangan  besi  tubuh ( depleted  iron  store )  sehingga  penyediaan  besi  untuk pembentukan hemoglobin menjadi berkurang. Defisiensi  asupan  zat  besi  memberikan  kontribusi paling  besar  terhadap  kejadian  anemia  dibandingkan dengan  defisiensi  asupan  zat  gizi  lainnya  sebesar 65,85%. 7
Masa  replesi  melalui  pemberian  makanan tambahan  berupa  biskuit  berbahan  dasar  tepung  mocaf dan  garut  dengan  penambahan  hati  ayam  dan  bayam merah  yang  ditujukan  untuk  balita  mampu  menaikan kadar Fe darah dan hemoglobin tikus anemia. Semakin tinggi  jumlah  yang  diberikan,  semakin  tinggi  pula peningkatan  kadar  Fe  darah  dan  hemoglobin  yang terjadi.  Peningkatan  ini  berkaitan  dengan  kandungan yang  terdapat  pada  biskuit  ini.  Selain  mengandung kadar zat besi yang tinggi, biskuit ini juga mengandung kadar protein yang cukup tinggi. 5
Kandungan zat besi dalam biskuit berbahan dasar tepung mocaf dan garut dengan penambahan hati ayam dan  bayam  merah  ini  cukup  tinggi,  yaitu  mampu
mencukupi  kebutuhan  besi  balita  sebanyak  35,5%  - 40%  dalam  satu  takar  saji.  Sintesis  hemoglobin memerlukan  ketersediaan  zat  besi  dan  protein  yang cukup didalam tubuh. 8 Zat besi (Fe) merupakan mineral yang  penting  bagi  tubuh  karena  fungsinya  dalam hematopoesis, yaitu dalam mensintesa hemoglobin.  Zat besi  (Fe)  merupakan  mikroelemen  yang  esensial  bagi tubuh. Zat besi terutama diperlukan dalam hematopoesis  (pembentukan  darah),  yaitu  dalam mensintesa hemoglobin. Tubuh tidak dapat memproduksi  zat  besi  sendiri,  pemenuhan  zat  besi dalam tubuh didapatkan dari asupan. Jumlah asupan zat besi  akan  berpengaruh  terhadap  peningkatan  produksi hemoglobin.
Protein  diketahui  berperan  penting  dalam transportasi  zat besi  di dalam  tubuh,  bila tidak  tersedia protein dalam jumlah cukup dalam tubuh maka zat besi yang  diasup  tidak  dapat  didistribusikan  dengan  ke organ.  Protein  yang  berfungsi  untuk  transportasi  zat besi  yaitu  transferrin.  Transferin  adalah  suatu glikoprotein yang disintesis di hati. Protein ini berperan sentral  dalam  metabolisme  besi  tubuh  sebab  transferin mengangkut  besi  dalam  sirkulasi  ke  tempat  –  tempat yang  membutuhkan  besi,  seperti  dari  usus  ke  sumsum tulang untuk membentuk hemoglobin yang baru.
Bahan  subtitusi  yang  memperkaya  biskuit berbahan  dasar  tepung  mocaf  dan  garut  ini  adalah bayam  merah  dan  hati  ayam.  Bahan  makanan merupakan  bahan  makanan  yang  mudah  didapatkan dengan  harga  yang  relatif  terjangkau.  Beberapa penelitian  menunjukkan  subtitusi  biskuit  dengan  bahan tinggi  besi  dapat  meningkatkan  nilai  Hb  hewan  coba. Mahmoed  et  al  (2009)  juga  menyatakan  bahwa  biskuit gandum  yang  disuplementasi  tepung  biji  fenugreek yang  memiliki  kandungan  zat  besi  yang  tinggi  mampu meningkatkan  kadar  hemoglobin  tikus  anemia 9 ,  lebih lanjut  Widjinindyah et  al (2012)  juga  menyatakan bahwa  anemia  defisiensi  besi  dapat  ditangani  dengan pemberian  bahan  makanan  alami  seperti  dalam penelitiannya menggunakan tepung daun kelor. 10
Bayam  merah  sebagai  bahan  subtitusi  biskuit berbahan  dasar  tepung  mocaf  dan  garut  diketahui memiliki  kandungan  zat  besi  tertinggi  dibanding  jenis bayam  yang  lain.  Zat  besi  dalam  bayam  merah termasuk  kedalam  jenis  besi  non  heme  (Fe 3+ ),  yaitu jenis  yang  susah  di  absorbsi.  Zat  Besi  dalam  bayam merah  yang  akan  diserap  harus  direduksi  dari  bentuk feri (Fe 3+ ) ke fero (Fe 2+ ), proses reduksi ini terbantukan oleh  adanya  kandungan  vitamin  C  yang  juga  terdapat dalam bayam merah itu sendiri. Selain mengandung zat besi  yang  tinggi,  bayam  merah  juga  mengandung vitamin  C  yang  cukup  tinggi,  yaitu  730  mg  per  100 gram  daun  bayam. 11 Pandey et  al menyatakan  bahwa pemberian  dosis  ekstrak  bayam  spesies Amaranthus cruentus pada  tikus  anemia  mampu  mengembalikan secara signifikan kadar sel darah merah, sel darah putih, dan  hemoglobin  tikus  percobaan. 12 Hal  inilah  yang membuat biskuit berbahan dasar berbahan dasar tepung mocaf  dan  garut  dengan  penambahan  hati  ayam  dan bayam  merah  meningkatkan  kadar  Fe  darah  dan hemoglobin pada tikus anemia.
Hati  ayam  yang  terkandung  didalam  biskuit  ini juga  mengandung  zat  besi  yang  tergolong  tinggi.  Hati ayam  merupakan  sumber  zat  besi  heme.  Berdasarkan sumbernya, bentuk zat besi dibagi menjadi dua macam, yaitu  besi  heme  yang  diperoleh  dari  makanan  hewani dan  besi  non-heme  yang  berasal  dari  makanan  nabati. Besi-heme  merupakan  bagian  dari  hemoglobin  dan myoglobin  yang  terdapat  didalam  daging  hewan  dan dapat  diserap  dua  kali  lipat  dibandingkan  dengan  besi non-heme.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  biskuit balita berbahan dasar berbahan dasar tepung mocaf dan garut dengan penambahan hati ayam dan bayam merah 5 ini dapat memperbaiki kadar Fe darah dan hemoglobin pada  tikus  anemia  secara  signifikan.    Hal  ini  dapat menjadi  alternatif  baru  cara  penangan  balita  anemia. Dampak  defisiensi  besi  pada  balita  adalah  terjadinya perubahan pada fungsi kognitif, perkembangan motorik dan perkembangan mental dan perilaku. 13 Dibandingkan  dengan  anak  yang  sehat,  anak  dengan defisiensi zat besi lebih mudah lelah, ragu-ragu, kurang aktif,  kurang  memperhatikan  perintah  dan  peragaan, dan  cenderung  menempel  pada  pengasuh. 14,15 Dengan adanya  hasil  penelitian  ini,  diharapkan  para  pemegang kebijakan  dapat  mencoba  alternatif  penangan  masalah anemia pada balita yang selama ini hanya berkutat pada pemberian  suplemen  tablet  besi.  Penelitian  ini  telah mampu membuktikan manfaat biskuit balita mogatiyam dalam mengatasi anemia pada tikus.

## SIMPULAN
Biskuit  balita  berbahan  dasar  berbahan  dasar tepung mocaf dan garut dengan penambahan hati ayam dan bayam merah mampu meningkatkan kadar Fe darah
dan  hemoglobin  pada  tikus  anemia.  Pemberian sebanyak  2  takar  saji  (12  keping  biskuit)  dalam  1  hari menunjukkan  hasil  yang  lebih  baik  daripada  1  takar saji.    Diharapkan  penelitian  selanjutnya  dapat melakukan uji bioassay biskuit ini pada balita.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Gropper  SS,  Smith  JL,  Groff  JL.  Advanced nutrition  and  human  metabolism  5th  ed.  Canada: Wadsworth, Cengange Learning; 2009.
2. Agustia FC, Subardjo YP, Sari HP. Pengembangan biskuit  MOCAF-Garut  dengan  substitusi  hati sebagai  alternatif  biskuit  tinggi  zat  besi  untuk balita.  Jurnal  Gizi  dan  Pangan.  2017;12(2):129- 138.
3. Subagjo  A,  Witono  Y,  Fahmi  F.  2008.  Prosedur Operasi  Standar  (POS)  Produksi  Mocaf  Berbasis Kluster.  Trenggalek:  Kementerian  Negara  Riset dan Teknologi:1-5.
4. Aini  N,  Wirawani  N.  2013.  Kontribusi  MP-Asi biskuit  substitusi  tepung  garut,  kedelai,  dan  ubi jalar  kuning  terhadap  kecukupan  protein,  vitamin A,  kalsium,  dan  Zink  pada  bayi.  Journal  of Nutrition College. 2(4):458-466.
5. Simbolon DOS, Masfria, Sudarmi. 2012. Pemeriksaan  kadar  Fe  dalam  hati  ayam  ras  dan ayam  buras  secara  spektrofotometri  serapan  atom. J Nat Prod Pharma Chemi. 1(1):8-13.
6. Huma  N,  Rehman  SU,  Anjum  FM,  Murtaza  MA. 2007.  Food  fortifcation  strategy:  preventing  iron defciency  anemia  :  A  review.  Crit  Rev  Food  Sci Nutr. 47(3):259-265
7. Wijaya  C.  Hubungan  asupan  zat  gizi  dengan kejadian  anemia  pada  anak  usia  6-23  bulan  di Kabupaten  Aceh  Besar  tahun  2011.  Skripsi, Universitas Indonesia; 2012. unpublished
8. Susilo J, Hamam H. Hubungan asupan zat besi dan inhibitornya  sebagai  prediktor  kadar  hemoglobin ibu  hamil  di  Kabupaten  Bantul  Propinsi  DIY, Berita Kedokteran Masyarakat 18 (1) : 1-8. 2009.
9. Mahmoed.I.  Ibrahium  and  A.I.  Hegazy.  Iron Bioavailability of Wheat  Biscuit Supplemented by Fenugreek  Seed  Flour.  World  Journal  of Agricultural  Sciences  5  (6):  769-776,  ISSN  1817- 3047. 2009
10. Widjindyah  A,  Anwar  S,  Susetyowati  SH. Pemanfaatan  tepung  daun  kelor  (Moringa  oleifera Lamk)  dengan  pretreatment  asam  dan tepung ikan lele  terhadap  pemulihan  anemia  secara  in  vivo. Jurnal Gizi Klinik Indonesia IX(2); 2012 11. Persatuan  Ahli  Gizi  Indonesia  (Persagi).  Tabel Komposisi  Pangan  Indonesia.  Jakarta:  PT.  Elex Media Komputindo, Kompas Gramedia; 2009.
12. Pandey  S, Ganeshpurkar  A, Bansal  D, Dubey  N. Hematopoietic  Effect  of  Amaranthus  cruentus Extract  on  Phenylhydrazine-Induced  Toxicity  in Rats.  J  Diet  Suppl. 2016  Nov;13(6):607-15.  doi: 10.3109/19390211.2016.1155685. 2016.
13. Carter  RC,  Jacobson  JL,  Burden  MJ,  Armony- Sivan  R,  Dodge  NC,  Angelilli  ML,  Lozoff  B, Jacobson  SW.  Iron  deficiency  anemia  and cognitive  function  in  infancy.  Pediatrics.  Volume 126, Number 2; 2010.
14. Schneider  JM,  Fujii  ML,  Lamp  CL,  Lonnerdal  B, Dewey  KG,  Zidenberg-Cherr  S.  Anemia,  iron deficiency,  and  iron  deficiency  anemia  in  12–36- mo-old  children  from  low-income  families.  Am  J Clin Nutr. 82:1269-75; 2005
15. Milman,  N.  Anemia-Still  a  major  health  problem in many parts of the world. Ann Hematol. 90: 369- 377; 2011.