Accredited by Ministry of Research, Technology                                 DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v22i1.37492 and Higher Education No: 28/E/KPT/2019                Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/jis

## Variasi Konsentrasi Asam Borat pada Reaksi Amidasi Asam Sinamat dan Potensinya Sebagai Antikolesterol
Eka Susanti Hanhadyanaputri 1) , Yuliana Purwaningsih 2*) , Erwin Indriyanti 2)
1) Program Studi Diploma Analis Farmasi dan Makanan, Stifar Yayasan Pharmasi Semarang, Semarang, Indonesia
2) Program Studi Sarjana Farmasi, Stifar Yayasan Pharmasi Semarang, Semarang, Indonesia *Corresponding author: y14purwaningsih@gmail.com

## ABSTRAK
Tujuan  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengetahui  reaksi  amidasi  asam  sinamat  dengan  N,  N-dietil amina  menggunakan  katalisator  asam  borat  dan  mengetahui  aktivitas  antikolesterol  dari  produk senyawa  hasil  amidasi.    Reaksi  amidasi  asam  sinamat  dengan  N,  N-dietil  amina  menggunakan variasi konsentrasi (% mol) asam borat sebagai katalis yaitu 5, 10, 15, 20 dan 25%. Hasil  reaksi amidasi  dikarakteristik  menggunakan  FT-IR, 1 H-NMR  dan 13 C-NMR.  Aktivitas  antikolesterol dianalisis  menggunakan  metode  Liebermann-Burchard.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa produk amidasi asam sinamat yaitu 20,47%, 22,99%; 23,37%; 26,77% dan 30,28% untuk variasi mol asam borat secara berturut-turut 5%, 10, 15, 20 dan 25%.  Hasil karakterisasi dengan  FT-IR, 1 H-NMR  dan 13 C-NMR  menunjukkan  bahwa  produk  hasil  amidasi  berupa  senyawa  N,  N-dietil sinamamida. Senyawa hasil amidasi mampu menurunkan kadar kolesterol sebesar 5,24%; 27,18% dan  13,22%  dengan  konsentrasi  senyawa  berturut-turut  sebesar  50,  100,  dan  150  ppm.  Semakin besar  persen  mol  katalisator  asam  borat  yang  digunakan,  semakin  besar  senyawa  hasil  amidasi yang diperoleh. Produk hasil amidasi yang diperoleh yaitu senyawa N, N-dietil sinamamida yang berpotensi sebagai  antikolesterol dengan aktivitas optimum pada konsentrasi 100 ppm.
Kata kunci: Amidasi; antikolesterol; asam borat; asam sinamat; sinamamida
Mole Variation of Concentration Boric Acid in The Amidation Reaction  of Cinnamic Acid and Its Potential as Anticholesterol

## ABSTRACT
The  aims  of  this  study  to  determine  the  amidation  reaction  of  cinnamic  acid  with  N,  N- diethylamine  using  a  boric  acid  catalyst  and  to  determine  the  anticholesterol  activity  of  the amidation  product.  The  amidation  reaction  of  cinnamic  acid  with  N,  N-diethyl  amine  using various  concentration  (%  mole)  of  boric  acid  as  a  catalyst,  namely  5,  10,  15, 20,  and  25%.  The amidation  reaction  results  were  characterized  using  FT-IR, 1 H-NMR,  and 13 C-NMR.  The anticholesterol activity was analyzed using the Liebermann-Burchard method. The results showed that  the  amidation  products  of  cinnamic  acid  were  20.47%,  22.99%;  23.37%;  26.77%,  and 30.28% for variations in moles of boric acid 5%, 10, 15, 20, and 25%, respectively. The results of characterization using FT-IR, 1 H-NMR and 13 C-NMR showed that the amidation product was N, N-diethyl  cinnamamide.  The  compound  resulting  from  the  amidation  was  able  to  reduce cholesterol levels by 5.24%; 27.18%, and 13.22% with compound concentrations of 50, 100, and 150  ppm,  respectively.  The  greater  the  mole  percent  of  boric  acid  catalyst  used,  the  greater  the amidation  product  obtained.  The  amidation  product  formed  is  N,  N-diethyl  cinnamamide  which has the potential as an anticholesterol with optimum activity at a concentration of 100 ppm.
Keywords: Amidation; anticholesterol; boric acid; cinnamic acid; cinnamamide
(Article History:  Received 03-01-2022; Accepted 28-03-2022; Published 09-04-2022)

## PENDAHULUAN
Kolesterol  merupakan  molekul  lipida yang  penting  dalam  membrane  sel  dan lipoprotein.  Kolesterol  merupakan  prekursor
untuk  hormon  steroid,  asam  empedu  dan vitamin  D  (Li et  al. ,  2018).  Kolesterol biasanya diproduksi oleh tubuh dalam jumlah normal,  namun  perubahan  pola  makan  yang
terbentuk  dari  makanan  hewani  dan  lemak tinggi,  menyebabkan  kadar  kolesterol  dalam darah  meningkat.  Peningkatan  kolesterol dalam  plasma  menyebabkan  hiperkoles- terolemia. Hiperkolesterolemia meningkatkan resiko  penyakit  kardiovaskular  (Reshma et al .,  2018).  Menurut  WHO  bahwa  penyakit kardiovaskular  sebagai  penyebab  kematian nomor  1  di  dunia,  yang  diperkirakan menyebabkan  kematian  17,9  juta  jiwa  setiap tahun (World Health Statistic, 2019).
Penurunan kolesterol selama ini dilakukan dengan menggunakan obat golongan stantin. Berdasarkan hasil
penelitian bahwa obat ini dapat menyebabkan banyak  efek  samping  termasuk  kerusakan otot  dan  ginjal  (Hasan et  al .,  2015)  sehingga perlu  dilakukan  pencarian  obat  antikolesterol yang  aman.  Salah  satu  senyawa  kimia  yang dapat  menurunkan  kadar  kolesterol  adalah asam  sinamat  dan  turunannya  (Peperidou et al ., 2017). Senyawa asam sinamat memainkan  peran  penting  dalam  sintesis senyawa-senyawa lain (Sharma, 2011).
Salah  satu  turunan  asam  sinamat adalah  sinamamida.  Senyawa  sinamamida dan  turunannya  memberikan  aktivitas  yang luas  di  beberapa  bidang  seperti  medisinal, farmasi, pertanian, biologi, dan yang lainnya. Sinamamida  dan  turunannya  di  bidang pengobatan  dilaporkan  memberikan  efek yang dapat menekan sistem syaraf, antikonvulsan,  relaksasi  otot,  antialergi, antineoplastik, antitumor, anastetik, analgesik (Borul  &  Agarkar,  2014),  antimikroba,  dan antioksidan  (Saritha et al ., 2018).
Sebanyak  25  %  obat-obatan  yang tersedia  terjadi  karena  reaksi amidasi (Lanigan et  al .,  2013).  Dewasa  ini  banyak dikembangkan metode sintesis amidasi langsung  senyawa  karboksilat  oleh  senyawa amina dengan menggunakan berbagai macam katalis. Reaksi amidasi yang dimediasi boron telah menarik perhatian yang cukup besar dan asam  boronat  telah  terbukti  menjadi  katalis yang  efektif  untuk  pembentukan  amida langsung  dari  asam  karboksilat  dan  amina (Lanigan et al ., 2013).
Asam borat telah mendapatkan perhatian  khusus  sebagai  katalis  dalam sintesis  organik  untuk  sejumlah  transformasi sintetis  dalam  beberapa  tahun  terakhir. Keunggulan  katalis  asam  borat  adalah kelarutan  yang  sangat  baik  dalam  air, penanganan  yang  tidak  rumit,  murah  dan
ramah  lingkungan ( Harichandran et  al. ,
2011),  tersedia  secara  komersial  dan  stabil (Shahrisa et al ., 2012).
Reaksi  amidasi  langsung  dengan  asam borat  biasanya  membutuhkan  energi  yang besar  dan  waktu  yang  lama  untuk  reaksi sehingga  diperlukan  alternatif  penggunaan metode  sonokimia.  Reaksi  organik  dengan bantuan  ultrasonik  telah  muncul  sebagai teknik  inovatif  dalam  beragam  konversi. Penggunaan  iradiasi  ultrasonik  menghasilkan laju  reaksi  yang  dipercepat,  konversi  energi, dan  meminimalkan  limbah  dibandingkan dengan  metode  konvensional  (Sharma et  al ., 2017).
Berdasarkan  sudut  pandang  tersebut, penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui reaksi  amidasi  asam  sinamat  dengan  N,  N- dietil  amina  menggunakan  katalisator  asam borat  dan  mengetahui  aktivitas  antikolesterol dari produk senyawa hasil amidasi.

## METODE PENELITIAN

## a) Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di laboratorium  kimia  farmasi  Stifar  Yayasan Pharmasi  Semarang  dari  bulan  Maret  – Desember 2020. Penelitian yang dilakukan di laboratorium ini meliputi reaksi amidasi asam sinamat, karakteristis fisik, uji FTIR  serta  uji antikholesterol  secara  invitro.  Uji 1 H-NMR dan 13 C-NMR dilkukan di LPPT UGM.

## b) Bahan dan cara kerja
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  asam  sinamat  (Sigma- Aldrich),  N,  N-dietil  amina  (Merck),  asam borat  (H 3 BO 3 )  p.a.,  dietil  eter,  Na 2 SO 4 anhidrat,  kolesterol  p.a.,  kloroform  p.a., anhidrida  asam  asetat  p.a.,  asam  sulfat (H 2 SO 4 ) pekat p.a., n-heksana p.a, etanol p.a, dan metanol p.a.

## Amidasi asam sinamat
Metode  sintesis  ini  mengacu  pada Aghayan et  al. (2016)  yang  dimodifikasi. Sebanyak  10  mmol  asam  sinnamat  ditambah dengan  10  mmol  N,N-dietilamina  dan  asam borat  dengan  variasi  %  mol  (5%, 10%, 15%, 20%  dan  25%).  Campuran  ini  dimasukkan dalam sonikator dengan suhu 50 o C selama 40 menit.  Hasil  sonikator  difraksinasi  dengan eter  (2x20  mL)  dalam  corong  pisah  dan ditambah 10 mL akuades. Fase eter ditambah dengan  Na 2 SO 4 anhidrat  untuk  mengikat
airnya  dan  difiltrasi  untuk  memisahkan  fase eter  yang  mengandung  amida.  Fase  eter  ini dievaporasi  untuk  menghilangkan  pelarut eternya.    Padatan  yang  terbentuk  diuji  titik lelehnya  dan  dikarakterisasi  menggunakan spektrometri  inframerah, 1 H-NMR,  dan 13 C- NMR (Aghayan et al ., 2016) .
Aktivitas antikolesterol
Aktivitas
antikolesterol diuji menggunakan  metode  Liebermann-Burchard berdasarkan  literatur  (Adu et  al .,  2019). Sampel hasil amidasi dibuat deret larutan dari 1000  ppm  yaitu  50,  100  dan  150  ppm. Masing-masing  konsentrasi  ditambah  2  mL reagen  Liebermann-Burchard  dan  5  mL larutan kolesterol 140 ppm. Larutan diinkubasi selama 20 menit sampai terbentuk warna hijau.
Absorbansi
diukur menggunakan  spektrofotometer  Vis  pada panjang  gelombang maksimum (λmaks= 410 nm).

## Analisis Data
Data  hasil  amidasi  dianalisa  secara diskriptif.  Spektrum  hasil  FTIR  digunakan untuk  melihat  gugus  fungsi  dari  senyawa hasil amidasi. Hasil pergeseran kimia dari 1 H dan 13 C-NMR  dianalisa  untuk  menentukan posisi  atom  H  dan  C  dalam  senyawa, sehingga dapat diketahui strukturnya.
Absorbansi  hasil  pengukuran  diolah dengan cara mengurangi absorbansi kolesterol baku oleh sampel hasil sintesis dan dibagi dengan absorbansi baku kolesterol dan dikalikan  100%  sehingga  diperoleh  % penurunan  kadar  kolesterol.  Perhitungan  % penurunan kadar kolesterol dapat dilihat pada persamaan 1.
% 100 kolesterol Penurunan
% x
Ac As Ac   ..( 1)
Keterangan: Ac= Absorbansi kolesterol As= Absorbansi sampel hasil sintesis

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Amidasi asam sinamat
Proses  amidasi  dilakukan  dengan mereaksikan  asam  sinamat,  dietil  amina sebagai  reaktan,  dan  asam  borat  sebagai katalisator.  Perbandingan  asam  sinamat  dan dietil amina adalah 1 : 1 mol (Aghayan et al. ,
2016).  Proses  sonikasi  yang  dilakukan  pada penelitian  ini  ditujukan  untuk  memangkas lama  waktu  reaksi.  Gelombang  ultrasonik terdiri  dari  siklus  kompresi  dan  ekspansi.
Ketika  gelombang  ultrasonik  dilewatkan melalui  cairan,  molekul  ditarik  menjauh  satu sama lain, menghasilkan rongga dalam cairan atau  gelembung.  Gelembung  ini  akan memuai  dan  membesar  mencapai  ukuran yang  tidak  stabil,  dan  kemudian  pecah disertai  pelepasan  energi  (Pokhrel et  al ., 2016).  Energi  inilah  yang  menyebabkan terjadinya  pemutusan  ikatan-ikatan  kimia, sehingga  membantu  mempercepat  proses reaksi amidasi.
Reaksi  amidasi  asam  sinamat  oleh  N, N-dietil  amina  menghasilkan  senyawa  N,  N- dietil  sinamamida  dapat  dilihat  pada  Gambar 1.  Reaksi  yang  terjadi  merupakan  reaksi substitusi  nukleofilik.  N,  N-dietil  amina bertindak sebagai nukleofilik karena memiliki  pasangan  elekron  bebas  pada  atom nitrogennya,  sehingga  menyerang  C  karbonil pada  asam  sinamat  yang  elektropositif  dan akan  menghasilkan  senyawa  amida  yaitu  N, N-dietil  sinamamida.  Nukloefilik  ini  yang akan  menggantikan  gugus  pergi  pada  cincin aromatis (Charville, 2012).
Katalis  yang  digunakan  dalam  reaksi amidasi  asam  sinamat  ini  yaitu  asam  borat. Asam borat digunakan dalam sintesis organik sebagai  katalis  asam  yang  efektif  untuk berbagai tranformasi selektif molekul sederhana  maupun  kompleks.  Katalis  ini digunakan untuk mempercepat reaksi, dimana asam  borat  berperan  untuk  mempercepat jalannya  reaksi  dengan  menurunkan  energi aktivasi reaksi. Reaksi amidasi yang dikatalisis asam borat memerlukan penghilangan  air  dari  reaksi  baik  oleh  agen dehidrasi  atau  dengan  refluks  azeotropik. Reaksi  juga  biasanya  memerlukan  kondisi reaksi  yang relatif encer. Stoikiometri reagen boron  untuk  amidasi  sering  membutuhkan kondisi  anhidrat  dan/atau  kelebihan  asam atau  amina  (Lanigan et  al. ,  2013).  Asam borat  membentuk  kompleks  dengan  asam sinamat  yang  kemudian  bereaksi  dengan dietilamina membentuk garam dietil amonium  sinamat  yang  terhidrolisis  menjadi N, N-dietil sinamamida dan melepaskan asam borat (Aghayan et al ., 2016; Charville, 2012).
26 Jurnal Ilmiah Sains Vol. 22 No. 1, April 2022
Ph OH O Ph N O + HN H 3 BO 3 50 o C, 40' ))) asam sinamat dietil amina N,N-dietil sinamamida Ph O O H 2 N garam dietilamonium sinamat +H 2 O H 3 BO 3 50 o C, 40' )))
Gambar  1. Reaksi  amidasi  asam  sinamat oleh dietil amina (Charville, 2012)
Produk  amidasi  dihasilkan  dengan varian  5%,  10%,  15%,  20%  dan  25%  mol asam  borat  berturut-turut  adalah  20,47%, 22,99%; 23,37%; 26,77% dan 30,28% (Tabel 1).  Semakin  besar  %  mol  asam  borat  yang digunakan,  semakin  besar  %  produk  hasil amidasinya.  Menurut  Tang    bahwa  N,N- disubstitusi  amida  dapat  dihasilkan  sebesar 45-55%  (Tang,  2012).    Dietil  amina merupakan amina sekunder yang memberikan efek sterik yang besar. Hambatan  sterik  yang  signifikan  pada amidasi  asam  sinamat  oleh  dietil  amina menyebabkan  %  hasil  yang  diperoleh  rendah (Leggio et al ., 2017).
Produk  hasil  amidasi  berupa  padatan putih  kekuningan  dengan  aroma  buah  sawo yang  larut  dalam  pelarut  metanol,  etanol, kloroform dan eter, tetapi tidak larut dalam n- heksana dan air. Hal ini menunjukkan bahwa hasil  amidasi  bersifat  semipolar  karena  larut dalam  pelarut  semi  polar  tetapi  tidak  larut dalam pelarut polar dan nonpolar.
Tabel  1. Persen  (%)  hasil  amidasi  dengan variasi mol asam borat Asam Borat N,N- dietilsinamamida (g) Hasil (%) 5% 0,4037 20,47 10% 0,4534 22,99 15% 0,4608 23,37 20% 0,5278 26,77 25% 0,5971 30,28
Titik  leleh  senyawa  hasil  sintesis adalah  114,2  –  117,8 o C  (Tabel  2).  Beberapa literatur  menunjukkan  titik  leleh  senyawa  N, N-dietil sinamamida yang berbeda-beda yaitu 104 o C  (Pathan  &  Agarkar,  2014),  58-60 o C (Leggio et al ., 2017). Perbedaan titik leleh ini disebabkan  produk  sintesis  masih  belum murni.  Hal  ini  juga  ditunjukkan  oleh  warna padatan hasil sintesis yang kurang merata.
Tabel  2. Titik  leleh  senyawa  N,  N-
dietilsinamamida Asam Borat Titik leleh ( o C) 5% 114,5 – 117,7 10% 114,2 – 117,7 15% 114,5 – 117,2 20% 114,7 – 117,8 25% 114,7 – 117,3 Identifikasi hasil sintesis dengan spektroskopi FT-IR pada Gambar 2 menunjukkan  beberapa  serapan  dari  gugus fungsional yang dimiliki oleh senyawa N, N- dietil  sinamamida.    Gugus-gugus  fungsional tersebut adalah C=O amida, C=C terkonjugasi benzena, C-N, C=C terdisubstitusi  trans,  benzena  monosubstitusi dan  gugus  CH 2 CH 3 .  Gugus-gugus  tersebut menyerap pada bilangan gelombang karakteristik  untuk  masing-masing.  Gugus C=O  amida  ditunjukkan  pada  daerah  1670 cm -1 ,  gugus  C=C  yang  terkonjugasi  pada cincin  benzena  pada  daerah  1629  cm -1 .  Hal ini  juga  didukung  oleh  serapan  pada  daerah 977  cm -1 yang  menunjukkan  adanya  C=C tekuk terdisubstitusi trans.
Gambar  2. Spektrum  Inframerah  senyawa N, N-dietil sinamamida
Daerah pada bilangan gelombang 1204 cm -1 menunjukkan  adanya  gugus  C-N  tekuk.
Adanya  gugus  benzena  aromatis  ditunjukan oleh  serapan  pada  1543  cm -1 dan  didukung serapan  pada  768  cm -1 menunjukkan  adanya benzena  monosubstitusi.  Gugus  alkil  - CH 2 CH 3 ditunjukkan  oleh  serapan  pada bilangan  gelombang  1379  cm -1 .  Spektrum dari  inframerah  yang  menunjukkan  serapan lebar  ion  karboksilat  pada  daerah  3300-2500 cm-1  yang  didukung  serapan  pada  daerah 1577  cm -1 menunjukkan  COO - ulur  dan adanya  serapan  NH  pada  3366  cm -1 (Coates, 2006).
Posisi  atom  hidrogen  dalam  senyawa N,  N-dietil  sinamamida  ditunjukkan  oleh spektra  dari 1 H-NMR  dengan  melihat pergeseran  kimia  masing-masing  atom  H (Gambar  3).  Pergeseran  kimia  pada  daerah 1,370-1399  (t,  6H)  menunjukkan  adanya gugus alkil CH 3 (posisi C11 dan 13). δ 3,099 –  3,142  ppm  (m,  4H)  ada  4  puncak  yang muncul  yang  saling  berhimpit  menunjukkan adanya  4  atom  H  pada  CH 2 (posisi  C10  dan 12)  yang  terikat  pada  CH 3 .  Sinyal  ini menggeser kearah downfield karena berikatan dengan  unsur  elektronegatif  yaitu  nitrogen, sehingga  pergeseran  kimia  menjadi  lebih tinggi . Atom H pada pada ikatan C=C alkena yang  terkonjugasi  pada  cincin  aromatik  pada δ  6,473  ppm  (d,  1H)  menunjukkan  posisi  H pada C 2 , sedang pergeseran kimia 6,505 ppm (d,  1H)  menunjukkan  hidrogen  pada  posisi C 3 .
Gambar  3. Spektrum 1 H-NMR  senyawa N, N-dietil sinamamida Pergeseran  kimia  yang  muncul  pada  δ 7,383-7,768 ppm menunjukkan posisi 5 atom H yang ada pada cincin aromatik, yang saling berkorelasi  dan  ekivalen  satu  sama  lain. Pergeseran  kimia  dari  spektra 1 H-NMR  hasil sintesis  ini  memiliki  kemiripan  dengan penelitian  (Leggio et  al .,  2017).  Pergeseran kimia spektra 1 H-NMR pada 8,355 menunjukkan posisi atom H yang terikat pada N  yang  seharusnya  tidak  muncul  untuk senyawa  dietil  sinamamida.  Puncak  yang muncul  pada  δ  8,355  dapat  terjadi  karena adanya  garam  dietilammonium  sinnamat yang terbentuk pada saat proses reaksi antara asam  karboksilat  dan  amina  (Charville, 2012).
Spektra 13 C-NMR (CDCl 3 ) hasil sintesis  pada  Gambar  4  menunjukkan beberapa pergeseran kimia yaitu 11,298 ppm, 29,708  ppm  dan  42,157  ppm  menunjukkan gugus  alkil  yaitu  CH 2 CH 3 pada  posisi  C10- 13.  Pergeseran  kimia  118,707  menunjukkan adanya  gugus  alkena  pada  posisi  C2, sedangkan  pada  posisi  C3,  sedangkan  pada ditunjukkan  pada  pergeseran  kimia  145,805. Gugus aromatis benzena tersubstitusi ditunjukkan  oleh  pergeseran  kimia  dari 128,248; 128,383; 128,901; 129,064; 130,398 dan  134,372  ppm,  sedangkan  gugus  C=O amida  ditunjukkan  oleh  pergeseran  kimia 172,258 ppm.
Gambar  4. Spektrum 13 C-NMR  N,  N-dietil sinamamida
Pergeseran  kimia  dari  produk  hasil amidasi  ini  sesuai  dengan  penelitian  Leggio (Leggio et  al .,  2017).  Berdasarkan  data spektrum  IR, 1 H-NMR,  dan 13 C-NMR  dapat disimpulkan  bahwa  senyawa  hasil  amidasi adalah  senyawa  N,  N-dietil  sinamamida  dan garam N, N-dietil amonium sinamat.
Garam  dietil  amonium  sinamat  ini merupakan  garam  yang  stabil  sebagai intermediet dalam reaksi antara asam sinamat dengan  amina  (Huy  &  Zoller,  2019).  Garam dietil  amonium  sinamat  dapat  terhidrolisis membentuk  amida  (Aghayan et  al .,  2016).
Hidrolisis  yang  tidak  sempurna  pada  garam ini menyebabkan hasil sintesis yang diperoleh berupa  produk  campuran  yaitu  N,  N-dietil sinamamida  dan  N,  N-dietil  ammonium sinamat.
Aktivitas antikolesterol menggunakan Liebermann-Bhurcard
Aktivitas  antikolesterol  hasil  amidasi dilakukan  dengan  uji  Liebermann-Burchard. Produk  sintesis  diuji  pada  konsentrasi  50, 100,  dan  150  ppm.  Senyawa  hasil  amidasi mengikat  kolesterol.  Kolesterol  sisa  bereaksi dengan reagen Libermann-Bhurchard menghasilkan  senyawa  asam  kolestaheksena sulfonate yang berwarna hijau kebiruan  yang dapat  diukur  absorbansinya  menggunakan spektrofotometer visibel pada panjang gelombang 410 nm.
Senyawa  N,  N-dietil  sinamamida mampu menurunkan  kadar  kolesterol  sebesar 5,24%;  27,18%;  13,22%  dengan  konsentrasi senyawa  uji  sebesar  50,  100,  dan  150  ppm secara  berturut-turut.  Hasil  uji  tersebut menunjukkan bertambahnya penurunan kadar
kolesterol  dari  5,24%  ke  27%  pada konsentrasi senyawa uji 50 ppm ke 100 ppm, akan  tetapi  pada  konsentrasi  150  ppm  terjadi penurunan  kadar  kolesterol  menjadi  13,22% (Tabel  4).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa konsentrasi  100  ppm  adalah  konsentrasi optimum  penurunan  kadar  kolesterol  oleh produk amidasi.
Table  4. Persen  (%)  penurunan  kadar kolesterol N,N-dietilsinamamida No Zat absorbansi % penurunan 1 Kolesterol 140 ppm 0,401 - 2 N, N-dietil sinamamida 50 ppm 0,380 5,24 3 N, N-dieti lsinamamida 100 ppm 0,292 27,18 4 N, N-dietil sinamamida 150 ppm 0,348 13,22

## KESIMPULAN
Produk  hasil  amidasi  asam  sinamat dengan  N,  N-dietilamina  menggunakan katalisator asam borat berupa senyawa N, N- dietilsinamamida  yang  berpotensi  sebagai antikolesterol  dengan  konsentrasi  optimum 100 ppm.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Lembaga Penelitian dan Pengabdiam kepada
Masyarakat (LPPM) Stifar Yayasan Pharmasi Semarang  atas  hibah  dana  penelitian  pemula sehingga  penelitian  ini  dapat  terlaksana dengan baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Adu,  J.K.,  Amengor,  C.D.K.,  Kabiri,  N., Orman,  E.,  Abla,  S.,  Patamia,  G.  & Okrah,  B.K.  2019.  Validation  of  a Simple  and  Robust  Liebermann  – Burchard  Colorimetric  Method  for  the Assay  of  Cholesterol  in  Selected  Milk Products in Ghana. International Journal of Food Science , 2019 : 1–7.
Aghayan,  M.M.,  Tavana,  M.M.  &  Rabah,  B. 2016.  Sulfonated  reduced  graphene oxide  as  a  highly  efficient  catalyst  for direct  amidation  of  carboxylic  acids with amines using ultrasonic irradiation. Ultrasonics  Sonochemistry , 29: 371– 379.    https://doi.org/10.1016/j.ultsonch.
2015.10.009.
Borul,  S.B. &  Agarkar,  S.V.  2014.  Synthesis and Characterization of Novel Cinnamamide  Deriverties  and  Their
Antimicrobial  Activities. IOSR  Journal of  Applied  Chemistry , 7 (12): 52–55. https://doi.org/10.9790/5736- 071215255.
Charville,  H.  2012.  Direct  Amide  Formation Between Carboxylic Acids and Amines: Mechanism  and  Development  of  Novel Catalytic Solutions. Durham University.
Coates,  J.  2006.  Encyclopedia  of  Analytical
Chemistry  -Interpretation  of  Infrared
Spectra, A Practical Approach. In R. A.
Meyers (Ed.), Encyclopedia of Analytical  Chemistry .  John  Wiley  & Sons, New York. Harichandran, G., Amalraj, S.D. & Shanmugam,  P.  2011.  Boric  acid Catalyzed Efficient Synthesis of Symmetrical N,N’-Alkylidene Bisamides. Journal  of  the  Iranian
Chemical Society , 8(1): 298–305.
Hasan,  M.K.N.,  Kamarazaman,  I.S.,  Arapoc, D.J.,  Taza,  N.Z.M.,  Amom,  Z.H.,  Ali, R.M.,  Arshad,  M.S.M.,  Shah,  Z.M.  & Kadir,  K.K.A.  2015.  Anticholesterol activity  of  anacardium  occidentale  linn. does  it  involve  in  reverse  cholesterol transport. Sains  Malaysiana , 44(10): 1501–1510. https://doi.org/10.17576/ jsm-2015-4410-16.
Huy,  P.,  &  Zoller,  B.  2019.  Boron  Lewis Acid  Catalysis:  How  to  Synthesize Amides  Atom-Efficiently. Nachrichten Aus  Der  Chemie  (Journal  of  the German  Chemical  Society  GDCh) , 67(5): 51–54.  https://doi.org/10.1002/ nadc.20194087418.
Lanigan, R.M., Starkov, P. & Sheppard, T.D. 2013.  Direct  synthesis  of  amides  from carboxylic  acids  and  amines  using B(OCH2CF3)3. Journal  of  Organic Chemistry , 78(9): 4512–4523.
https://doi.org/10.1021/jo400509n.
Leggio,  A.,  Bagalà,  J.,  Belsito,  E.L., Comandè,  A.,  Greco,  M.  &  Liguori,  A. 2017.  Formation  of  amides:  One-pot condensation  of  carboxylic  acids  and amines  mediated  by  TiCl4. Chemistry
Central Journal , 11(1): 1–12. https://doi.org/10.1186/s13065-017- 0318-9. Li, L., Dutkiewicz, E.P., Huang, Y., Zhou, H.
& Hsu, C. 2018. ScienceDirect Analytical  methods  for  cholesterol quantification. Journal  of  Food  and
Drug Analysis , 27(2): 375–386. https://doi.org/10.1016/j.jfda.2018.09.0 01. Pathan,  R.U.  &  Agarkar,  S.V.  2014.  SiO 2 Supported Synthesis of N,N
Disubstituted  Cinnamamides. Research Journal of Chemical Sciences , 4(5): 56– 58.
Peperidou, A., Pontiki, E., Hdjipavlou-Litina, D.,  Voulgari,  E.    &  Avgoustakis,  K. 2017.  Multifunctional  cinnamic  acid derivatives. Molecules , 22 (8): 1–17.
https://doi.org/10.3390/molecules22081
247.
Pokhrel,  N.,  Vabbina,  P.K.  &  Pala,  N.  2016. Sonochemistry: Science and Engineering. Ultrasonics Sonochemistry , 29: 104–128. https://doi.org/10.1016/j.ultsonch.2015. 07.023. Reshma, B.G., Nadar, M.S.A.M. &
Selvakumar,  P.M.  2018.  A  Review  on Anti-Cholesterol Drugs and their Mechanisms. Journal  of  Medicinal Chemistry and Drug Design , 1(1): 1–6.
Saritha, K., Rajitha, G., Sudheerkumar, K. & Umamaheswari,  A.  2018.  Synthesis  ,
Molecular Docking Studies And Antimicrobial  Activity  Of  Substituted Cinnamides. International  Journal  of Pharmacy  and  Biological  Sciences , 8(3): 770–778.
Shahrisa,  A.,  Esmati,  S.  &  Nazari,  M.G.
2012. Boric acid as a mild and efficient catalyst  for  one-pot  synthesis  of  1- amidoalkyl-2-naphthols  under  solvent- free  conditions. Journal  of  Chemical Sciences , 124(4): 927–931. https://doi.org/10.1007/s12039-012- 0285-6.
30 Jurnal Ilmiah Sains Vol. 22 No. 1, April 2022
Sharma,  N.,  Bhagat,  N.  &  Bhagat,  S.  2017.
Ultrasound-Accelerated Amide Coupling Reactions Directed toward the Synthesis of 1-Acetyl-3-carboxamide- β -carboline  Derivatives  of  Biological Ultrasound-Accelerated Amide Coupling Reactions Directed toward the Synthesis of 1-Acetyl-3-carboxamide- β
-car. Syn Open , 1: 8–10. https://doi.org/ 10.1055/s-0036-1588167.
Sharma,  P.  2011.  Cinnamic  acid  derivatives:
A new
chapter of various
pharmacological  activities. J.  Chem. Pharm. Res. , 3(2): 403–423.
Tang,  P.  2012.  Discussion  Addendum  for: Boric Acid Catalyzed Amide Formation From  Carboxylic  Acids  And  Amines: N-Benzyl-4-Phenylbutyramide. Organic Syntheses , 89: 432–437.  https://doi.org/
10.15227/orgsyn.089.0432.
World  Health  Statistic.  2019.  Monitoring Health  for  the  SDGs.  In World  Health Statistic (Issue  March) .  https://doi.org /10.1007/978-1-349-04787-1_12.