## UJI AKTIVITAS ANTI KANKER PAYUDARA EKSTRAK DAUN
SESEWANUA ( Clerodendron squmatum Vahl.) TERHADAP SEL KANKER

## PAYUDARA T47D
Adithya Yudistira 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
This  study  aims  to  find  out  how  the  value  of  IC 50 from  plant  extract  to  breast  cancer  cells T47D. This research is experimental laboratory using maseration extraction technique and activity test to breast  cancer  cell  from  sesewanua  leaf  extract.  The  results  obtained  are:  sesewanua  leaf  extract  has  a result  as  a  moderate  anticancer  because  it  only  has  a  result  of  359.44  μg  /  mL,  which  for  strong anticancer should have an IC 50 value below 200 μg / mL.

## Keywords : sesewanua leaf, anti-cancer plant, breast cancer cell T47D

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan mengetahui berapa nilai IC 50 dari ekstrak tumbuhan tersebut terhadap sel kanker  payudara  T47D.  Penelitian  ini  bersifat  eksperimental  laboratorium  dengan  menggunakan  teknik ekstraksi maserasi dan uji aktivitas terhadap sel kanker payudara dari ekstrak daun sesewanua. Hasil yang diperoleh  yaitu  :  ekstrak  daun  sesewanua  memiliki  hasil  sebagai  antikanker  sedang  karena  hanya mempunyai hasil 359,44 µg/mL, dimana untuk antikanker kuat harusnya mempunyai nilai IC 50 dibawah 200 µg/mL.
Kata kunci : Daun sesewanua, tumbuhan anti kanker, sel kanker payudara T47D.

## PENDAHULUAN
Penggunaan terapi herbal telah setua peradaban manusia dan berkembang bersama  dengan  peradaban  itu  sendiri. Sebagian  besar  manusia  di  muka  bumi  ini masih  mengandalkan  pengobatannya  pada sistem  adat  mereka  dan  menggunakan  obat- obatan herbal untuk pemelirahaan kesehatannya.  Penduduk  dunia  akan  lebih dari  7,5  miliar  dalam  10  sampai  15  tahun mendatang,  peningkatan  populasi  ini  akan terjadi  terutama  dibelahan  bumi  selatan, dimana 80% dari populasi masih bergantung pada  sistem  tradisional  dalam  perawatan kesehatan  yang  berbasis  obat-obat  herbal (Syukur, 2013).
Penemuan  obat  dari  tumbuhan  terus berlanjut dan memberikan arahan baru yang penting terhadap berbagai target farmakologi  termasuk  penyakit  kanker, malaria, penyakit metabolik, penyakit kardiovaskular  serta  gangguan  neurologic (Syukur,  2013).Kanker atau  tumor  ganas merupakan salah satu penyakit  yang sampai saat  ini  masih  belum  dapat  ditangani  secara tuntas meskipun berbagai metode
pengobatannya  telah  dikembangkan  oleh pakar  ilmu  kedokteran.  Kurang  lebih  120 jenis kanker sudah diketahui dan dikelompokkan  dalam  12  bagian  besar berdasarkan  organ  atau  jaringan  tubuh manusia  yang  diserang  (Nurrani  dkk. 2014). Kanker  termasuk  penyakit  yang sangat ditakuti karena sulit disembuhkan,bahkan
tidak jarang menyebabkan  kematian.  Secara  sederhana, kanker  berarti  pertumbuhan  sel-sel  tubuh yang tidak terkendali atau abnormal (Miranti dkk, 2014).
Penanganan  pasien  kanker  dapat dilakukan  dengan  operasi,  kemoterapiatau radiasi.  Kemoterapi  dilakukan  dengan  cara memberikan  obat  antikanker  ( cytotoxic ) untuk  menghancurkan  sel-sel  penyebab kanker. Namun adanya mekanisme multidrug  resistance (MDR)  mengakibatkan berkurangnya  kemanjuran  obat  kemoterapi. Beberapa  penelitian  mulai  diarahkan  pada pengujian  potensi  bahan  alam  sebagai  agen kemopreventif yang berpotensi sebagai  agen pendamping  kemoterapi.  Tujuannya  adalah untuk  meningkatkan  sensitifitas  sel  kanker serta  mengurangi  efek  yang  ditimbulkan oleh  agen  kemoterapi.  Agen  kemopreventif merupakan  agen  yang  dapat  mencegah  dan menghambat  proses  perkembangan  sel kanker serta membantu memulihkan kondisi kesehatan penderita kanker. Agen kemopreventif  umumnya  memiliki  aktivitas menghambat  pertumbuhan  tumor  melalui mekanisme cell cycle arrest atau menghentikan  siklus  sel,  pemacuan  proses bunuh  diri  sel  atau  apoptosis  ataupun menghambat ekspresi protein yang berperan dalam Multi  Drug  Resistance (Miranti  dkk, 2014).
Hal tersebut
mendorong dilakukannya  berbagai  penelitian  untuk menemukan bahan aktif baru yang alami dan lebih aman (efek samping minimum). Salah satunya  adalah  melalui  penelusuran  bahan aktif  yang  berasal  dari  bagian  tumbuhan. Perbedaan  tipe  ekosistem    dan  karakteristik suku  dan  budaya  berdampak  terhadap  jenis pemanfaatan  tumbuhan  obat  di  Indonesia. Oleh karena itu perlu diketahui pemanfaatan tumbuhan obat yang dilakukan oleh masyarakat,  salah  satunya  dari  daerah Manado  sebagai  bagian  dari  kekayaan
budaya  dan  kearifan  lokal  masyarakat Indonesia.
Berdasarkan  hal  tersebut  di  atas, dilakukan penelitian terhadap daun sesewanua  yang  secara  empiris  dikalangan masyarakat Manado
menggunakannya sebagai obat kanker payudara.

## METODE PENELITIAN

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimental  laboratorium  yang  bertujuan untuk mengetahui potensi aktivitas antikanker  dari  tumbuhan  obat  sesewanua yang ada di kota Manado.
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  mulai bulan Nopember 2016 sampai dengan bulan Desember  2016  bertempat  di  Laboratorium Farmakognosi  dan  Fitokimia  Program  Studi Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan
Alam Universitas Sam Ratulangi  Manado  kemudian  dilanjutkan  di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.

## Alat dan Bahan Yang Digunakan
Alat-alat  yang  digunakan  adalah rotary  evaporator  (Buchi),  gelas  piala (Pyrex) frezz dryer (Scanvac), LAF (Benchmark),  mikro  plate  (Nesco),  lemari inkubasi  (Benchmark),  mikroskop  inverted (Pyramid)  mikro  pipet  (Pyramid),  tabung evendorf (Nesco), elisa reader (Benchmark), dan toples kaca.
Bahan-Bahan yang digunakan adalah tumbuh-tumbuhan  obat  dari  Kota  Manado, etanol  70%  (Farenheit),  Media  RPMI (Merck),  Dimethyl  Sulfoxide  (Merck),
Sodium  Dodesil  Sulfat  (Merck),  MTT (Merck),  Doxorubisin  (Merck),  kultur  sel kanker payudara T47D.

## Prosedur kerja Penyiapan Sampel
Sampel  tumbuhan  obat  seswanua dari  Kota  Manado  diambil  dan  dibersihkan terlebih dahulu dengan air bersih, dikeringkan lalu dirajam sebelum dimaserasi.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  gelas  dibungkus  dengan kertas dan disterilkan dalam oven pada suhu 180 ° C selama 2 jam.

## Ekstraksi Tumbuhan
Tumbuhan obat sesewanua diekstraksi  dengan  cara  maserasi  dengan cara  direndam  menggunakan  pelarut  etanol 70%, setelah didapat ekstrak kental diproses dengan  frezz  dryer  untuk  mendapatkan ekstrak dalam bentuk kering Uji Aktivitas Pada Sel Kanker
Ekstrak  kering  yang  didapat  di  uji nilai  IC 50 pada  sel  kanker  payudara  dengan cara  masing-masing  ekstrak  ditimbang  10 mg  dalam  tabung  evendorf  kemudian dilarutkan dalam 100 µl Dimethyl Sulfoxide lalu  divorteks  selama  3  menit.  Kemudian diambil  100  µL  dan  dimasukkan  ke  dalam mikro  plate  yang  telah  berisi  sel  kanker T47D dalam media RPMI dengan pengenceran 500 ; 250 ; 125 ; 62,5 ; 31,25 ; 15,625  dan  dilakukan  dengan  tiga  kali pengulangan  ditambah  dengan  Doxorubisin sebagai  kontrol  pembanding.  Kemudian diinkubasi selama 24 jam setelah diinkubasi dimasukkan  MTT  sebanyak  100  µL  setelah itu  ditambahkan  dengan  Sodium  Didusil Sulfat  sebanyak  100  µL  dan  diinkubasi  24
jam.  Setelah  itu  dibaca  serapannya  dengan Elisa Reader dan dihitung nilai IC 50

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil pengujian IC 50 ekstrak daun sesewanua
Nilai IC 50 : 359,44 µg/mL
Gambar 2. Grafik nilai pengujian IC 50 ekstrak Daun Sesewanua
Gambar  3.  Foto  pengamatan  sel  kanker  payudara  T47D  terhadap  ekstrak  daun sesewanua
y = -0,1832x + 115,85 R² = 0,7719 0,00 50,00 100,00 150,00 0 100 200 300 400 500 600 viab ili ta s konsentrasi ekstrak daun sesewanua
Ekstrak  daun  sesewanua  memiliki hasil  sebagai  antikanker  sedang  karena hanya  mempunyai  hasil  359,44  µg/mL, dimana  untuk  antikanker  kuat  harusnya mempunyai  nilai  IC 50 dibawah  200  µg/mL. Hal  ini  disebabkan  karena  daun  sesewanua yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah bentuk ekstrak belum dalam bentuk senyawa murni.
Hasil  ini  menurut  saya  bahwa  daun sesewanua hanya sebagai anti kanker sedang karna  daya  membunuh  sel  kanker  payudara T47D  hanya  sedikit.  Menurut  teori  sebagai anti  kanker  kuat  harus  memiliki  daya membunuh sel kanker dibawah 200 µg/mL.
Saya  menilai  hal  ini  terjadi  karena saya  belum  memurnikan  senyawa  spesifik dari  ekstrak  daun  sesewanua  ini,  mungkin jika  saya  telah  memisahkan  kebentuk senyawa  murni  kemungkinan  hasilnya  akan lebih kuat lagi dalam membunuh sel kanker payudara T47D.

## KESIMPULAN
Ekstrak  daun  sesewanua  dari  Kota Manado  termasuk  dalam  antikanker  sedang karena hanya  mempunyai  hasil  nilai  IC 50 sebesar 359,44 µg/mL

## SARAN
Disarankan untuk memisahkan
ekstrak  daun  sesewanua  kedalam  bentuk senyawa murni.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina  Setiawati,  Florentinus  Octa  Dika
Riswanto, Sri Hartati Yuliani, Enade
Perdana Istyastono.
(2014).
Anticancer  Activity  Of  Mangosteen Pericarp Dry Extrac Againts MCF-7 Breast  Cancer  Cell  Line  Through
Estrogen Repector –α . Hal 5.
Bingjun  Guo,  Xin  Jiang,  Xiaoqiao  Hu,  Fan Li,
Xiaopin Chen. (2015). Association  between  vitamin  D receptor  gene  polymorphisms  and breast cancer in a Chinese population . Hal 7.
Cancer  Chemoprevention  Research  Center.
(2012). Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Hal 2-3.
David  Z.  Kochan,  Olga  Kovalchuk .  (2015 ). Circadian  disruption  and  breast cancer: An epigenetic link . Hal 1.
Farman  Ullah,  Taimoor  Khan,  Nawab  Ali, Faraz  Arshad  Malik,  Mahmood
Akhtar  Kayani,  Syed  Tahir  Abbas Shah,  Muhammad  Saeed.  (2015). Promoter Methylation Status
Modulate  the  Expression  of  Tumor Suppressor  (RbL2/p130)  Gene  in
Breast Cancer . Hal 7.
Hai  Chen,  Xiaodong  Qi,  Ping  Qiu,  Jiali Zhao.  (2015). Correlation  between
LSP1 polymorphisms and the susceptibility to breast cancer . Hal 3. International Union Against Cancer
(UICC).2009. Cancer  In  The  World.
( http://www.depkes.go.id).
Jie  Chen,  Qiwen  Deng,  Yuqin  Pan, Bangshun He, Houqun Ying, Huiling
Sun  ,  Xian  Liu,  Shukui  Wang. (2015). Prognostic value of neutrophil-to-lymphocyte  ratio  in breast cancer . Hal 3
Kallirroi  Voudouri,  Aikaterini  Berdiaki, Maria Tzardi, George N. Tzanakakis, dan  Dragana  Nikitovic.  (2015).
Insulin-Like  Growth  Factor  and Epidermal  Growth  Factor  Signaling in  Breast  Cancer  Cell  Growth: Focus on Endocrine Resistant
Disease . Hal 3. Kementerian Kesehatan. (2010). Jika tidakdikendalikan  26  Juta  orang  di dunia menderitakanker.
( http://www.depkes.go.id).
Lis  Nurrani,  Julianus  Kinho,  Supratman Tabba.  (2014). Active  Ingredients and Their  Toxicity of Several  Forest Plant Species Indigenous from North Sulawesi  Potential  as  Efficacious Medicine . Hal. 1 – 2
Luoqiang  Lin,  Dan  Liu,  Hongyan  Liang,  Li Xue,  Changlei  Su,  Ming,  Liu.
(2015). MiR-1228  promotes  breast cancer  cell  growth  and  metastasis through  targeting  SCAI  protein .  Hal
5.
Madan R , R. Benson, D.N. Sharma, P.K. Julka, G.K. Rath. (2015). Radiation induced heart disease: Pathogenesis, management and review literature .
Hal 2.
Maria  Eleftheriou,  Ana  Jimenez  Pascual, Lee  M.  Wheldon,  Christina  Perry,
Abdulkadir  Abakir,  Arvind  Arora, Andrew  D.  Johnson,  Dorothee  T. Auer,  Ian  O.  Ellis,  Srinivasan Madhusudan  dan  Alexey  Ruzov. (2015). 5  -  Carboxylcytosine  levels are  elevated  in  human  breast cancers and gliomas . Hal 5
Miranti,  Laili  Fitri  Yeni,  Asriah  Nurdini. (2014). Uji  Potensi  Anti  Kanker
Ekstrak  Biji  Pinang  Merah  dan Implementasinya dalam Pembelajaran Mitosis. Hal. 1 – 2.
Muhammad  Da’i,  Anis  Fiveri,  dan  Edy Meiyanto.  (2007). Efek  Sitotoksik Ekstrak  Tanaman  Keladi  Tikus Terhadap Sel He La. Hal. 1
Rahmawati Syukur. (2013). Aktivitas Imunostimulan Sediaan “Sirup Kasumba Turate (Carhamus tintorius Linn.)” Secara In Vitro dan In Vivo . Hal. 1
Sri  Handayani,  Chandra  Risdian,  Edy Meiyanto, Zalinar Udin, Rina Andriyani1,
Marissa Angelina. (2012).
Selaginella  Active  Fractions  Induce Apoptosis  On  T47D  Breast  Cancer
Cell. Hal 7.
Tarek  M.A.  Abdel-Fatah,  Arvind  Arora, Paul  M.  Moseley,  Christina  Perry, Emad  A.  Rakha,  Andrew  R.  Green, Stephen  Y.T.  Chan,  Ian  O.  Ellis,
Srinivasan Madhusudan . (2015). DNA repair prognostic index
modelling  reveals  an  essential  role for base excision repair in
influencing  clinical  outcomes  in  ER negative  and  triple  negative  breast cancers . Hal 7.
Pandiangan,  D;  Esyanti,  R;  de  Queljoe,  E.
Aktivitas Antikanker Katarantin pada  Sel Mouse  Mammary  Cancer
MmT06054 .  Jurnal  Ilmiah  Sains.
2008
Lakhiafa  Yunietha.  (2012). Toksisitas  Akut
Dengan  BSLT  (  Brine  Shrimp
Letality Test ) . Hal 1 – 3.
Zampieri, L, Bianci, P., Ruff, P., Arbuthnot, P.,  (2002), Differential  modulation by  estradiol  of  P-glycoprotein  drug resistance  protein  expression  in cultured  MCF7  and  T47D  breast cancer cel l. Hal 22.