## Diversity: Disease Preventive of Research Integrity
Volume 2, Issue 2, 2022 Page 51-59 doi: 10.24252/diversity.v2i2.26283
Larvicidal Efficacy of Citrus amblycarpa Peel Extract Against the Larvae of Aedes albopictus
Efikasi Larvasida Ekstrak Kulit Limau Kuit pada Jentik Aedes albopictus
Kasman Kasman 1 , Nuning I. Ishak *2 , Elsi S. L. Octaviana 3 , Muhammad R. Ridha 4
1 Bagian Epidemiologi, Universitas Islam Kalimantan Muhammad Arsyad Al Banjari, Banjarmasin
2 Bagian Kesehatan Kerja dan Kesehatan Lingkungan, Universitas Islam Kalimantan Muhammad Arsyad Al Banjari, Banjarmasin
3 Bagian Administrasi dan Kebijakan Kesehatan, Universitas Islam Kalimantan Muhammad Arsyad Al Banjari, Banjarmasin
4 Bagian Entomologi, Balai Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Tanah Bumbu, Batulicin

## Abstract
Various ways to control dengue vector One of them is by using natural insecticides. The purpose of this study was to test the effectiveness of lime peel powder ( Citrus amblycarpa ) as an electric mosquito repellent against the death of Aedes albopictus mosquitoes in the field larvae. This study uses a true experimental design conducted at the Tanah Bumbu Health Research and Development Center. The object of this research was lime peel powder ( Citrus amblycarpa ) which was used as a natural insecticide against the Aedes albopictus mosquito. The larvae used were Aedes aegypti larvae instar III which were hatched at the  Research  and  Development  Center  of  P2B2  Tanah  Bumbu  and  the  results  of  larval  collection  using  ovitrap  in  the Martapura  Health  Center  Area  1.  Susceptibility  test  for  larval  mortality and  data  collection  by  counting  the  number  of  dead Aedes albopictus larvae after being exhibited with skin extract lime for 24 hours at concentrations of 2%, 3%, 4%, and 5%. The LT50 mortality of larvae with lime extract was 2.78 hours (5%), faster than the mortality of larvae in the control group using abate. The results showed the potential of Limau Kuit peel extract as a larvicide in controlling the dengue vector.

## Abstrak
Berbagai cara pengendalian vektor DBD Salah satunya adalah dengan menggunakan insektisida alami. Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji efektifitas serbuk kulit limau kuit ( Citrus amblycarpa ) sebagai anti nyamuk elektrik terhadap kematian nyamuk Aedes albopictus pada jentik lapangan. Penelitian ini menggunakan desain true experiment yang dilakukan di Balai Litbang Kesehatan Tanah Bumbu. Objek penelitian adalah serbuk kulit limau kuit ( Citrus amblycarpa ) yang digunakan sebagai insektisida  alami  terhadap  nyamuk Aedes  albopictus .  Larva  yang  digunakan  adalah  larva  Aedes  aegypti  instar  III  yang ditetaskan di Balai Litbang P2B2 Tanah Bumbu  dan hasil pengumpulan larva menggunakan ovitrap di Wilayah Puskesmas Martapura  1.  Uji  kerentanan  terhadap  kematian  larva  dan  pengumpulan  data  dengan  menghitung  jumlah  larva Aedes albopictus yang mati setelah dipaparkan dengan ekstrak kulit limau kuit selama 24 jam pada konsentrasi 2%, 3%, 4%, dan 5%. LT50  kematian  larva  dengan  ekstrak  limau  kuit  2,78  jam  (5%),  lebih  cepat  dibandingkan  dengan  kematian  larva  pada kelompok kontrol menggunakan abate. Hasil penelitian menunjukkan potensi Ekstrak kulit Limau Kuit sebagai larvasida dalam mengendalikan vektor DBD.

## Graphical Abstract
Keyword
aedes  albopictus;    citrus  amblycarpa; dengue fever; field test; larvicide Artikel History Submited : 06 January 2022 In Reviewed : 20 January 2022 Accepted : 24 January 2022 Published : 25 January 2022

## Correspondence
Address : Alba Residen, Blok II/17, Berangas Timur, Alalak, Barito Kuala. Email     : nuning.fkm@gmail.com
©2022 The Authors This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by -nc-sa/ 4.0/), which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

## PENDAHULUAN
Penyakit  Demam  Berdarah  Dengue  (DBD) merupakan penyakit yang sering menyerang manusia dan  paling  umum  ditemukan  di  daerah  tropis.  DBD telah menjadi masalah global utama dalam kesehatan manusia  beberapa  tahun  terakhir. World  Health Organization (WHO)  memperkirakan  sekitar  2,5-3 miliar  orang  saat  ini  berada  pada  zona  penularan DBD  ( Wang  et  al.,  2020 ).  Penyakit  ini  saat  ini mewabah di lebih dari 100 negara ( Bhatt et al., 2013 ), diantaranya  di  wilayah  Amerika,  Afrika,  Asia Tenggara,  Mediterania  Timur,  serta  Pasifik  Barat. Wilayah  Amerika,  Asia  Tenggara  serta  Pasifik  Barat merupakan yang paling parah terkena dampak ( Ilham et  al.,  2019 ),  dengan  Asia  mewakili  70%  dari  beban penyakit  global  ( World  Health  Organisation  [WHO], 2020 ).  Meningkatnya  urbanisasi,  migrasi,  sanitasi lingkungan  yang  buruk,  investasi  yang  rendah  dalam pencegahan  dan  partisipasi  masyarakat  dan penggunaan  metode  pengendalian  yang  terus- menerus  memiliki  kemanjuran  yang  terbatas  adalah beberapa penyebab utama munculnya dan munculnya kembali  penyakit  yang  ditularkan  melalui  vektor  di negara-negara  berkembang  ( Maciel-de-Freitas  et  al., 2014 ).
Indonesia adalah salah satu negara di wilayah Asia  Tenggara  yang  mempunyai  beban  penanganan besar  dalam  kasus  demam  berdarah  ( Sitepu  et  al., 2018 ).  Indonesia  bahkan  menempati  urutan  teratas, negara  dengan  kasus  (DBD)  tertinggi  se-Asia  yaitu sebanyak 129.435 kasus ( WHO, 2012 ; Adayani et al., 2018 ).  Hal  ini  terjadi  karena  masih  banyak  wilayah yang  berstatus  endemik.  Mayoritas  daerah  endemik DBD  merupakan  sumber  penyebaran  penyakit  ke wilayah  lain.  Kalimantan  Selatan  ialah  salah  satu provinsi  yang  merupakan  daerah  endemis  penyakit DBD  yang  telah  menyebar  luas  ke  seluruh  wilayah provinsi dan terjadi di 13 (tiga belas) Kota/Kabupaten ( Kasman & Ishak, 2018 ), salah satunya di Kabupaten Banjar.  Data  Dinas  Kesehatan  Kabupaten  Banjar pada tahun 2018 data DBD Kabupaten Banjar jumlah 305  kasus  yang  terdapat  di  berbagai  wilayah  kerja Puskesmas  tertinggi  yaitu  Puskesmas  Martapura  1 sebanyak  84  kasus  ( Dinas  Kesehatan  Kabupaten Banjar, 2019 ).
Untuk  menanggulangi  hal  tersebut  maka dilakukan kegiatan pengendalian vektor penyakit DBD ( Grigoraki  et  al.,  2016 ).  Saat  ini,  karena  tidak  ada vaksin  yang  efektif  melawan  demam  berdarah ( Maciel-de-Freitas  et  al.,  2014 ).  Strategi  yang  paling direkomendasikan untuk menghentikan siklus penularan  patogen  bergantung  pada  strategi
pengendalian  yang  berfokus  pada  vektor  nyamuk ( Francine et al., 2016 ). Salah satu cara pengendalian vektor  yang  dapat  dilakukan  adalah  dengan menggunakan  insektisida  sebagai  larvasida  untuk mengurangi  tingkat  kepadatan  larva  nyamuk Aedes aegypti ( Grigoraki et al., 2016 ). Larvasida yang paling banyak  diberdayakan  adalah temephos atau  yang lebih  dikenal  dengan  nama  abate.  Tetapi pemanfaatan  bahan temephos yang  merupakan pestisida  sintetik  dapat  mengakibatkan  keracunan pada  kesehatan  manusia  seperti  pusing,  mual,  dan gangguan  saraf  lain  apabila  dosis  yang  diberikan terlalu tinggi ( Fujiwara et al., 2017 ; Yang et al., 2020 ), polusi  lingkungan  ( Govindarajan  &  Benelli,  2016 ), bahkan  penggunaan temephos yang  terlalu  lama dikhawatirkan  akan  mengakibatkan  kerentanan  pada vektor  penyakit  DBD  ( Ishak  et  al.,  2014 ; Ocampo  et al.,  2011 ).  Hal  ini  dikarenakan  rendahnya biodegradabilitas  insektisida  larvasida  memberikan dampak  jangka  panjang  yang  merugikan  kesehatan manusia ( Yang et al., 2020 ).
Banyaknya  dampak  negatif  dari  penggunaan larvasida  kimia  mendorong  penelitian  mengenai larvasida  alami  untuk  pengendalian  nyamuk  di  masa depan.  Hal  ini  dilakukan  untuk  mendapatkan pengganti  yang  baru  dan  ramah  lingkungan (Maia  et al.,  2019 ).  Pengembangan  pestisida  yang  efektif  dan ramah  lingkungan  untuk  mengendalikan  jentik  vektor nyamuk merupakan tantangan yang krusial pada saat ini ( Mathalaimuthu et al., 2017 ). Resistensi insektisida sedang  meningkat,  oleh  karena  itu  insektisida  nabati dengan  berbagai  jenis  dapat  menjadi  alternatif  yang menjanjikan  dalam  mengendalikan  vektor  nyamuk ( Pavela et al., 2019 ). Banyak penelitian di dunia yang telah  membuktikan  efektivitas  penggunaan  bahan alam  sebagai  larvasida.  Perhatian  kepada  tumbuhan sebagai  larvasida  alami  semakin  meningkat  yang dibuktikan  semakin  banyaknya  penelitian  terkait ( Almadiy, 2020 ; Sarma et al., 2019 ).
Penelitian  menggunakan  Ekstrak  C.  anisata menunjukkan  potensi  dalam  pengendalian  populasi nyamuk,  kematian  50%  larva  Aedes  aegypti  setelah 24  jam  pengukuran  hanya  dengan  konsentrasi  13,90 ppm ( Mukandiwa  et al., 2015 ).  Begitu  juga penelitian lain  dengan  melakukan  pengujian  minyak  atsiri  dari bagian  daun  dan  batang  tanaman  N.  cataria menunjukkan  efek  larvasida  yang  kuat.  Minyak  N. cataria  layak  digunakan  sebagai  larvasida  alami terhadap  larva  Aedes  aegypti  ( Yang  et  al.,  2020 ). Penelitian  lainnya  juga  membuktikan  aktivitas larvasida kombinasi Metil sinamat dan Linalool sangat baik  karena  aktivitas  larvasida  yang  signifikan  dan
toksisitas  yang  rendah  ( Fujiwara  et  al.,  2017 ). Penelitian  larvasida  di  Cina  dengan  menggunakan minyak  atsiri  dari  tanaman  Nepeta  cataria  memiliki aktivitas larvasida yang kuat (LC 50 < 50 mg/mL; LC 90 <86,8  mg/mL)  pada  A.  aegypti  ( Yang  et  al.,  2020 ). Minyak atsiri yang diekstrak dari daun dan kulit jeruk purut  serta  salah  satu  senyawa  penyusun  utamanya citral  terbukti  bisa  menjadi  alternatif  dalam pengendalian  nyamuk  Aedes  aegypti  ( Sarma  et  al., 2019 ).
Di India, penelitian terhadap ekstraksi esensial oil  kuncup  bunga  Syzygium aromaticum  ( Myrtaceae ), buah Illicium verum ( Schisandraceae ) dan Trachyspermum  ammi  ( Apiaceae )  secara  hidro- distilasi dan diujiterhadap larva Aedes aegypti secara individu  maupun  kombinasi  untuk  menemukan interaksi yang sinergis. Hasilnya menunjukkan bahwa kombinasi  Illicium  verum  ( Schisandraceae )  dan Trachyspermum  ammi  ( Apiaceae )  menunjukkan  nilai LC 50 sebesar 23,93 mgL −1 ( Pandiyan et al., 2019 ). Penelitian  larvasida  alami  juga  telah  banyak dilakukan  di  Indonesia.  Yoke  Astriani  dan  Mutiara Widawati  melakukan  penelitian  literatur  review terhadap  potensi  tanaman  di  Indonesia  sebagai larvasida  alami  untuk Aedes  aegypti .  Berdasarkan hasil  penelitiannya  diperoleh  informasi  bahwa  68% dari 25 jenis tanaman yang diamati memiliki efektifitas yang  tinggi  LC 50 <750  ppm.  Melati,  Zodia  dan Tembakau  merupakan  tanaman  dengan  efektifitas yang paling tinggi dibandingkan dengan yang lainnya dengan nilai LC 50 yaitu 0,999 ppm, 1,94 ppm dan 1,94 ppm  ( Astriani  &  Widawati,  2016 ).  Sidik Maulana juga
mencoba  melakukan  penelitian  literatur  review dengan  melihat  hasil  penelitian  efektivitas  larvasida daun  tanaman  terhadap  larva  Aedes  aegypti  rentang 2016-2020.  Hasil  literature  review  didapatkan  daun tanaman yang mempunyai dampak dalam mematikan larva  nyamuk  Aedes  aegypti. Yaitu daun tumih,  sirih, papaya,  binjai,  tembakau,  sirsak,  dan  jeruk  nipis dengan rata-rata konsentrasi larutan kurang dari atau sama dengan 50% (<LC 50 ). Kandungan atau zat yang memiliki  efek  larvasida  pada  daun  tanaman  tersebut diantaranya  adalah  alkaloid,  tanin,  phenolics, saponins,  flavonoid  dan  steroid,  atsiri,  flavonoid, alkaloid,  terpenoid,  fenol,  asam  organik  (asam strearate  dan  asam  palminat),  triterpenoid,  limonoid, dan nikotin ( Maulana, 2021 ).
Pengembangan  penelitian  terkait  larvasida juga  dilakukan  di  Kalimantan  Selatan  dengan memanfaatkan  jeruk  lokal  yakni  Limau  Kuit.  Jeruk Limau Kuit merupakan jeruk khas Kalimantan Selatan memiliki  kandungan  senyawa  golongan  metabolit sekunder  seperti  alkaloid,  steroid,    saponin,  tanin, triterpenoid, dan flavonoid  ( Irwan et al., 2017 ). Limau Kuit  memiliki  kandungan  asam  askorbat  yang berperan  sebagai  antioksidan  juga  memegang  peran penting  dalam  tercapainya  tujuan  terapeutik  suatu pengobatan  dan  memperbaiki  metabolisme  biologis tubuh  ( Nerda,  2015 ).  Senyawa  yang  terkandung dalam limau kuit seperti alkaloid, tanin, flavonoid, dan saponin  diduga  dapat  berperan  sebagai    larvasida ( Kasman  et  al.,  2019 ).  Penelitian  pendahuluan  telah dilakukan untuk melihat efektifitas ekstrak Limau Kuit sebagai larvasida. Hasil penelitian menunjukkan

## Tabel 1
Jumlah Telur Nyamuk Aedes Hasil Rearing Lapangan
No Jumlah Telur Nyamuk Aedes spp. Luar Dalam Jumlah 1 0 0 0 2 0 0 0 3 7 10 17 4 0 0 0 5 25 0 25 6 7 46 53 7 0 0 0 8 0 0 0 9 1 10 11 10 50 67 117 11 0 0 0 12 0 0 0 13 10 0 10 14 41 0 41 15 0 0 0 Jumlah 141 133 274
bahwa  semua  kelompok  perlakuan  dapat  mematikan 100%  larva  setelah  6  jam  pengukuran  ( Ishak,  2019 ). Penelitian  lanjutan  terkait  pemanfaatan  Limau  Kuit terus  dilakukan  dengan melakukan pengujian  ekstrak etanol. Hasilnya bisa mematikan 96% larva setelah 24 jam  pengukuran  ( Kasman,  et  al.,  2021 ).  Hal  tersebut mendorong  perlunya  dilakukan  penelitian  dengan memanfaatkan tanaman Limau Kuit sebagai larvasida yang  banyak  ditemukan  di  daerah  Kalimantan Selatan.  Berdasarkan  uraian  diatas,  penulis  tertarik untuk  menguji  efektivitas  ekstrak  kulit  Limau  Kuit (Citrus amblycarpa) sebagai larvasida alami terhadap kematian  larva Aedes  albopictus sebagai  aplikasi  uji lapangan.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  desain true experiment dengan  rancangan post  test  only  control group. Subjek penelitian dibagi dalam dua kelompok yaitu kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan.  Kelompok
perlakuan, yaitu kelompok yang diberi ekstrak limau kuit. Kelompok  kontrol  positif  menggunakan Temephos dan negatif yaitu kelompok yang tidak diberi ekstrak limau kuit, hanya  menggunakan  aquades.  Larva  yang  digunakan adalah  larva  Aedes  aegypti  Instar  III  hasil  rearing lapangan  di  Daerah  Endemis  DBD  di  Wilayah  Kerja Puskesmas  Martapura  I,  Kabupaten  Banjar,  Kalimantan Selatan.  Pengujian  larvasida  dilakukan  di  Laboratorium Entomologi  Balai  Litbang  Kesehatan  Tanah  Bumbu dengan menggunakan 240 larva instar III dengan jumlah jentik pada tiap kelompok adalah 20 larva.
Pengujian  ekstrak  kulit  limau  kuit  terhadap  larva Aedes aegypti dengan cara larva yang sudah didapatkan langsung dimasukkan ke dalam beaker glass yang sudah berisi 100 ml aquades. Larva kemudian dibiarkan selama 30 menit untuk beradaptasi sebelum memasukkan ekstrak kulit limau kuit dengan konsentrasi 2%, 3%, 4%, dan 5%.
Untuk  kelompok  kontrol  positif  (abate)  dengan pemberian  0,01  gr/100ml  dan  kontrol  negatif menggunakan  aquades  sebanyak  100  ml,  dilakukan selama 24 jam dengan pengulangan 3 kali pada tiap-tiap

## Tabel 2
Tingkat Kematian Larva Aedes albopictus Instar III Pada Semua Kelompok Perlakuan dan Kelompok Kontrol
Jam Ke- % Kematian Larva 2% 3% 4% 5% K+ K- 1 0,0 3,3 3,3 0,0 30,0 0,00 2 0,0 16,7 16,7 23,3 40,0 0,00 3 13,3 40,0 40,0 43,3 50,0 0,00 4 53,3 76,7 83,3 93,3 55,0 0,00 5 63,3 96,7 96,7 96,7 70,0 0,00 6 73,3 96,7 100,0 100,0 75,0 0,00 7 73,3 96,7 100,0 100,0 80,0 0,00 8 80,0 96,7 100,0 100,0 80,0 0,00 9 80,0 96,7 100,0 100,0 80,0 0,00 10 80,0 96,7 100,0 100,0 90,0 0,00 11 83,3 96,7 100,0 100,0 95,0 0,00 12 86,7 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 13 86,7 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 14 90,0 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 15 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 16 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 17 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 18 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 19 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 20 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 21 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 22 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 23 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00 24 93,3 100,0 100,0 100,0 100,0 0,00
konsentrasi. Penghitungan dan pencatatan kematian larva untuk  masing-masing  kelompok  perlakuan  dan  kontrol setiap  1  jam  selama  24  jam.  Data  yang  diperoleh dianalisis secara statistik menggunakan Analisis Univariat untuk  memantau  mortalitas  larva  dalam  setiap  kelompok perlakuan.
Analisis Bivariat dilakukan dengan  menggunakan uji  Kruskal  Wallis.  Untuk  mengetahui  perbedaan  tingkat kecepatan kematian larva antar kelompok maka dilakukan Analisis  Probit  yang  dinyatakan  dalam Lethal  Time (LT) yaitu  LT 50 dan  LT 95 dan Lethal  Concentration LC 50 dan LC 95 untuk  mengetahui  konsentrasi  minimal  yang diperlukan  untuk  membunuh  larva  sebanyak  50%  dan 95%.

## HASIL
Tabel 1 menunjukkan jumlah telur Aedes spp . yang didapat dari hasil pemasangan ovitrap di rumah penduduk  di  Wilayah  Kerja  Puskesmas  Martapura  1, Kab. Banjar. Sebanyak 30 buah ovitrap yang disebar di  15  rumah  penduduk.  Hasil  pemeriksaan  telur didapatkan total 274 telur Aedes spp , masing-masing 141  telur  yang  didapatkan  di  luar  rumah,  dan  133  di dalam  rumah.  Sebanyak  11  ovitrap  yang  terdapat telur  nyamuk  yakni  7  ovitrap  di  luar  rumah,  dan  4 ovitrap di dalam rumah.
Tabel  2  menunjukkan  perbedaan  tingkat kematian  masing-masing  kelompok  perlakuan  dan kelompok kontrol.  Kelompok perlakuan menggunakan ekstrak  kulit  limau  kuit  menunjukkan  kematian  100% lebih  cepat  pada  konsentrasi  4%  dan  5%  pada  jam ke-6  pengukuran.  Pada  kelompok  kontrol  positif dengan  abate  0,01gr/100ml  mengalami  kematian 100%  setelah  12  jam  pengukuran.  Sementara kelompok  kontrol  negatif  dengan  aquades  tidak mengalami kematian.
Tabel  3  menunjukkan  estimasi  waktu  yang dibutuhkan  dalam  mematikan  larva  50%  dan  95%. Untuk  mematikan  50%  larva  dibutuhkan  waktu  4,93 jam pada konsentrasi 2%, 3,05 jam pada konsentrasi
3%,  3,02  jam  pada  konsentrasi  4%,  2,78  jam  pada konsentrasi  5%,  dan  5,7  jam  pada  kelompok  kontrol positif. Untuk mematikan 95% larva dibutuhkan waktu 19,04  jam  pada  konsentrasi  2%,  6,82  jam  pada konsentrasi 3%,  5,05 jam  pada  konsentrasi  4%,  4,94 jam  pada  konsentrasi  5%,  dan  11,84  jam  pada kelompok kontrol positif.
Tabel  4  menunjukkan  estimasi  konsentrasi yang  dibutuhkan  dalam  mematikan  larva  50%  dan 95%  pada  berbagai  lama  pengukuran.  Untuk mematikan  larva  sebanyak  50%  diperlukan konsentrasi  0,73%  (6  jam  pengukuran)  ;  Konsentrasi 0,56%  (12  jam  pengukuran);  konsentrasi  0,29%  (24 jam  pengukuran).  Untuk  mematikan  larva  sebanyak 95%  diperlukan  konsentrasi  1,71%  (6  jam pengukuran);
Konsentrasi 1,21% (12 jam pengukuran); konsentrasi 1,07% (24 jam pengukuran).

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  pada  dasarnya  bertujuan  untuk mengetahui  efektvfitas  larvasida  ekstrak  kulit  limau  kuit pada jentik lapangan dan penggunaan ekstrak limau kuit sebagai larvasida alami dapat dijadikan sebagai alternatif pengganti temephos .  Lokasi  penelitian  dan  pengambilan sampel  telur  nyamuk Aedes  spp dilaksanakan  di Kabupaten  Banjar  tepatnya  di  wilayah  kerja  Puskesmas Martapura  I  yang  merupakan  wilayah  tertinggi  kasus kejadian penyakit DBD sebanyak 84 kasus di tahun 2019. Pengambilan sampel telur nyamuk menggunakan ovitrap sederhana  yang  didalamnya  disematkan  kertas  saring sebagai  tempat  menempelnya  telur  nyamuk Aedes  spp . yang  disebar  masing-masing  15  ovitrap  di  dalam  rumah dan  diluar  rumah  penduduk.  Ovitrap  disimpan  selama  7 hari dengan hasil didapatkan telur nyamuk Aedes  spp di luar rumah sebanyak 141 dan telur nyamuk Aedes spp di dalam rumah sebanyak 133
Penetasan telur nyamuk Aedes spp . dilakukan di Laboratorium Entomologi Balai Litbang Kesehatan Tanah

## Tabel 3
Nilai LT50 dan LT95 Kematian Larva Aedes albopictus Instar III Menggunakan Ekstrak Kulit Limau Kuit
Konsentrasi Nilai LT 50 (jam) Batas Kepercayaan 95% Nilai LT 95 (jam) Batas Kepercayaan 95% Min Maks Min Maks 2% 4,93 3,75 6,15 19,04 15,71 23,67 3% 3,05 2,56 3,47 6,82 6,03 8,02 4% 3,02 2,60 3,35 5,05 4,51 6,05 5% 2,78 1,77 3,39 4,94 4,28 5,88 Kontrol + 5,70 3,38 7,14 11,84 10,11 15,02 Kontrol - - - - - - -
Bumbu.  Sebelum  larva  ditetaskan  terlebih  dahulu dilakukan identifikasi spesies nyamuk Aedes spp. dan setelah  diidentifikasi  didapatkan  sebanyak  187  larva spesies Aedes  albopictus .  Telur Aedes berwarna  hitam, berbentuk  ovoid  yang  meruncing  berukuran  kecil  ±  50 mikron.  Telur Aedes dapat  bertahan  pada  kondisi  kering pada  waktu  dan  intensitas  yang  bervariasi  hingga beberapa  bulan  tetapi  tetap  hidup.  Jika  tergenang  air, beberapa  telur  mungkin  menetas  menjadi  larva  dalam beberapa  menit,  sedangkan  yang  lainnya  mungkin membutuhkan waktu lama tenggelam dalam air, kemudian penetasan berlangsung dalam beberapa hari atau minggu ( Elviani  et  al.,  2019 ).  Penetasan  telur  nyamuk Aedes albopictus berlangsung  ±  5  hari  sampai  menjadi  larva instar  III  yang  memenuhi  syarat  sebagai  sampel  dalam pengujian larvasida ekstrak kulit limau kuit.
Pada  saat  penetasan,  terdapat  87  telur  nyamuk yang  tidak  dapat  menetas  menjadi  larva.  Telur  nyamuk memiliki  lapisan  pelindung  yaitu  korion  dimana  korion  ini berfungsi  untuk  melindungi  embrio  dari  kondisi  eksternal seperti suhu yang tidak mendukung serta zat-zat lain yang yang  dapat  merusak  embrio  sehingga  menghambat penetasan telur (radenintan). Jumlah telur nyamuk Aedes albopictus di  luar  rumah  lebih  banyak  dibandingkan  di dalam  rumah.    Karakteristik    habitat Ae.  albopictus lebih banyak  ditemukan  di  wilayah  peridomestik  (suburban) pada  vegetasi  sekunder  dekat  dengan  pemukiman. Kondisi pedesaan yang masih memiliki vegetasi rindang di sekitar  pemukiman,  memungkinkan  kehadiran Ae. Albopictus . Ae.  albopictus bersifat zoophilik namun memiliki  kecenderungan antropophilik , eksophagi dan eksophilik sehingga lebih sering ditemukan di luar rumah pada  vegetasi  sekunder  dekat  dengan  pemukiman ( Pramadani et al., 2020 ).
Jentik  lapangan Aedes  albopictus yang  telah ditetaskan  kemudian  dipilih  secara  acak  untuk  dijadikan sampel uji larvasida menggunakan ekstrak kulit limau kuit dengan konsentrasi masing-masing 2%. 3%. 4%.dan 5% serta  kontrol  positif  menggunakan  abate  dan  kontrol negatif  menggunakan  aquades.  Pengamatan  dilakukan selama  24  jam  dan  diukur  setiap  jam  untuk  melihat kematian larva.
Hasil pengujian menunjukkan bahwa ekstrak kulit limau  kuit  konsentrasi  2%  dapat  mematikan  93,3%  larva Aedes  albopictus  93,3%.  Konsentrasi  3%,  4%,  5%,  dan Kelompok  kontrol  positif  (abate)  dapat  mematikan  100% larva  setelah  24  jam  pengamatan.  Sedangkan  pada kelompok  kontrol  negatif  tidak  mengalami  kematian. Kematian larva pada kelompok kontrol positif terlihat lebih lambat dibandingkan dengan kematian pada kelompok uji, dimana  kematian  100%  pada  kelompok  kontrol  positif setelah  12  jam  pengamatan.  Sangat  berbeda  dengan  uji larvasida pada jentik lab yang hanya membutuhkan waktu rata-rata  3  jam  untuk  mematikan  100%  jentik.  Hal  ini mengindikasikan  bahwa  jentik  lapangan  mulai  resisten terhadap abate.
Penelitian yang telah dilakukan di Kota Banjarbaru secara in  vitro memaparkan  bahwa  larva  Ae.  aegypti tergolong  kedalam  status  toleran  pada  Larvasida Temephos  (abate).  Pemberantasan  vektor  cara  kimiawi, khususnya pemberantasan serangga yang memanfaatkan insektisida,  baik  diaplikasikan  untuk  mematikan  nyamuk dewasa  ataupun  jentik  akan  merangsang  agar  terjadi seleksi  terhadap  populasi  serangga  yang  menjadi sasaran.  Nyamuk  atau  jentik  yang  rentan  terhadap insektisida  bersangkutan  akan  mati,  sedang  yang  kebal (resisten)  tetap  bertahan  hidup.  Jumlah  yang  hidup (resisten)  lama-lama  bertambah  banyak,  sehingga terjadilah  perkembangan  kekebalan  nyamuk  atau  jentik terhadap  insektisida  yang  bersangkutan  ( Ridha  &  Nisa, 2010 ).
Hasil analisis dengan uji probit menunjukkan nilai LT 50 pada setiap kelompok uji dengan ekstrak kulit limau kuit lebih cepat dibandingkan LT 50 pada kelompok kontrol positif. Hal yang sama juga terlihat pada nilai LT 95 . Rata- rata  waktu  yang  diperlukan  untuk  mematikan  larva  lebih cepat  pada  kelompok  uji  menggunakan  ekstrak  kulit Limau  Kuit  dibandingkan  dengan  kematian  larva  pada kelompok  kontrol.  Ini  menunjukkan  potensi  ekstrak  Kulit Limau  Kuit  memiliki  potensi  yang  baik  untuk dikembangkan sebagai alternatif pengganti abate.
Hasil penelitian sebelumnya dengan menggunakan  jentik  laboratorium  sebagai  sampel  uji, memperlihatkan  bahwa  semua  kelompok  uji  dengan

## Tabel 4
Nilai LC50 dan LC95 Ekstrak Kulit Limau Kuit Dalam Mematikan Larva Aedes albopictus Instar III
Lama Pengukuran Nilai LC 50 (%) Batas Kepercayaan 95% Nilai LC 95 (%) Batas Kepercayaan 95% Min Maks Min Maks 6 jam 0,73 0,29 0,95 1,71 1,36 3,34 12 jam 0,56 - - 1,21 - - 24 jam 0,29 - - 1,07 - -
ekstrak kulit Limau Kuit konsentrasi 2%, 3%, 4%, dan 5% menghasilkan  kematian  100%  pada  larva  Aedes  aegypti ( Ishak, 2019 ). Suatu hasil pengujian insektisida dianggap baik ataupun efektif jika dapat membunuh 100% larva uji. Berdasarkan hal tersebut maka dapat disimpulkan dalam penelitian ini bahwa ekstrak kulit limau kuit terbukti efektif dalam mematikan jentik nyamuk Aedes albopictus. Serta, berdasarkan  data  penelitian  ini  dapat  dilihat  bahwa semakin  tinggi  tingkat  konsentrasi  yang  diberikan (diaplikasikan)  maka  semakin  cepat  kematian  larva nyamuk Aedes albopictus .
Melihat dari banyaknya kasus DBD yang terjadi, program  pencegahan  dan  pengendalian  penyakit  ini  pun terus digalakkan dengan tujuan menekan rantai penularan virus  dengue  tersebut  ( Purnama,  2017 ).  Pengendalian vektor  tetap  menjadi  strategi  kunci  dalam  mengelola penyakit  yang  ditularkan  oleh  nyamuk  pada  manusia. Apalagi  jumlah  populasi  nyamuk  yang  menunjukkan resistensi  sangat  mengkhawatirkan  dan  mengancam keberlanjutan pengendalian nyamuk ( Haddi et al., 2017 ). Kondisi kejadian penyakit DBD yang fluktuatif, mendorong diperlukan  adanya  salah  satu  upaya  pengendalian nyamuk  Aedes  aegypti.  Salah  satu  metode  yang  dapat dilakukan untuk memutuskan siklus dan mematikan larva nyamuk  adalah  dengan  menggunakan  insektisida.  Akan tetapi  program  pengendalian  vektor  nyamuk  masih mengandalkan penggunaan insektisida sintetik penyebab resistensi  pada  spesies  vektor.  Penggunaan  Ekstrak Limau  Kuit  yang  merupakan  jeruk  lokal  Kalimantan Selatan  bisa  dikembangkan  untuk  menjadi  salah  satu alternatif larvasida. Sudah saatnya manusia menggunakan tumbuhan yang telah diciptakan oleh Sang Pencipta  untuk  dimanfaatkan. Sebagaimana  firman  Allah SWT yang terjemahannya :
“(Tuhan)  yang  telah  menjadikan  bumi  sebagai hamparan  bagimu,  dan  menjadikan  jalan-jalan di  atasnya  bagimu,  dan  yang  menurunkan  air (hujan)  dari  langit.  Kemudian  Kami  tumbuhkan dengannya  (air  hujan  itu)  berjenis-jenis  aneka macam tumbuh-tumbuhan .” (QS Thaha/20:53)
Disebutkan  dalam  hadits  shahih  riwayat  Imam Bukhari,  bahwa  Rasulullah  Shallallahu  ‘Alaihi  wa  Sallam bersabda:
“Tidaklah  Allah  menurunkan  penyakit  kecuali Dia  juga  menurunkan  penawarnya.” (HR Bukhari).
Nyamuk Aedes  albopictus sebagai  vektor  DBD merupakan  salah  satu  ciptaan  Allah.  Sebagai  orang beriman,  kita  harus  meyakini  bahwa  Allah  SWT  juga menciptakan  obat  dari  setiap  penyakit.  Tumbuhan mengandung  berbagai  senyawa  yang  terbukti  bisa
dimanfaatkan. Jeruk  Limau  Kuit  merupakan  jeruk  khas Kalimantan  Selatan  memiliki  kandungan  senyawa golongan  metabolit  sekunder  seperti  alkaloid,  saponin, steroid,  triterpenoid,  tanin,  dan  flavonoid  ( Irwan  et  al., 2017 ).  Senyawa  yang  terkandung  dalam  Limau  Kuit seperti tanin, flavonoid, dan saponin ( Kasman et al., 2020 ) diduga dapat berperan sebagai larvasida ( Adayani et al.,
2018 ). Saponin yang diekstrak dari tanaman memiliki efek gangguan  perkembangan  dan  pergantian  kulit  ( molting) . Pada stadium larva Culex quinquefasciatus menunjukkan pigmentasi  yang  parah  dan  kerusakan  bentuk  kepala serta  perut  ( Dita,  2015 ) . Tanin  dapat  mengganggu aktivitas  enzim  dan  penyerapan  makanan,  sedangkan flavonoid menyebabkan gangguan permeabilitas membran sel saluran pencernaan ( Irwan et al., 2017 ).

## KESIMPULAN
Persentase  kematian  larva  Aedes  albopictus menunjukkan  kematian  100%  pada  kelompok  uji  3%, 4%,  dan  5%  ekstrak  kulit  Limau  Kuit.  Nilai  LT50  dan LT95  dari  ekstrak  kulit  Limau  Kuit  lebih  cepat dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  positif. Diperlukan  konsentrasi  0,73%  ekstrak  Kulit  Limau Kuit untuk mematikan 50% jentik dalam waktu 6 jam, dan konsentrasi 0,29% untuk mematikan dalam waktu 25  jam.  Penggunaan  ekstrak  Kulit  Limau  Kuit  bisa digunakan  sebagai  alternatif  pengganti  abate  yang sudah mulai resisten terhadap larva. Sehingga upaya penanggulangan  dan  pencegahan  DBD  bisa  lebih maksimal.  Keterbatasan  penelitian  ini  adalah  pada penggunaan  satu  jenis  ekstrak  yaitu  etanol,  untuk penelitian  selanjutnya  perlu  dilakukan  pengujian dengan  menggunakan  jenis  ekstraksi  yang  lain seperti methanol untuk mengetahui jenis ekstrak yang paling  efektif.  Untuk  peneliti  lainnya  bisa  melakukan penelitian dengan menggunakan kombinasi beberapa tanaman  untuk  melihat  efek  sebagai  larvasida. Kepada  pemerintah  sebaiknya  mulai  mencoba menggunakan  larvasida  alami  untuk  menghindari terjadinya resistensi larva semakin bertambah.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  Universitas Islam  Kalimantan  Muhammad  Arsyad  Al  Banjari Banjarmasin  yang  telah  menyediakan  dana  dalam pelaksanaan  penelitian.  Kepada  Balai  Litbang Kesehatan  Tanah  Bumbu,  Kalimantan  Selatan  yang telah  memfasilitasi  pengujian  larvasida.  Kepada seluruh  tim  yang  telah  berpartisipasi  dalam pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Adayani,  W.  S.,  Subahar,  R.,  Fatmawaty,  &  Slamet.
(2018).  Effect  of  treatment  using  Carica  papaya seed  extract  with  Ag–TiO2  nanocomposite  on  the mortality  of  Aedes  aegypti  larvae. Journal  of Physics: Conference Series , 1–9.
https://doi.org/10.1088/1742-6596/1073/3/032035
Almadiy, A. A. (2020). Chemical composition, insecticidal and  biochemical  effects  of  two  plant  oils  and  their major fractions against Aedes aegypti, the common vector  of  dengue  fever. Heliyon , 6 (9),  1–9. https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2020.e04915 Astriani,  Y.,  & Widawati, M. (2016). Potensi Tanaman Di Indonesia  Sebagai  Larvasida  Alami  Untuk  Aedes aegypti  Potential  Plant  In  Indonesia  As  Natural Larvicides For Aedes aegypti. SPIRAKEL , 8 (2), 37– 46. https://www.researchgate.net/profile/Mutiara- Widawati/publication/
Bhatt,  S.,  Gething,  P.  W.,  Brady,  O.  J.,  Messina,  J.  P., Farlow,  A.  W.,  Moyes,  C.  L.,  …  Hay,  S.  I.  (2013). The  global  distribution  and  burden  of  dengue.
Nature , 496 (7446), 504–507. https://doi.org/10.1038/nature12060
Dinas  Kesehatan  Kabupaten  Banjar.  (2019). Kasus Demam Berdarah Dengue . Martapura.
Dita,  N.  T.  W.  S.  (2015).  Efektivitas  Air  Perasan  Kulit Jeruk  Manis  sebagai  Larvasida  Nyamuk  Aedes aegypti Effectivity of Sweet Orange Peel Juice as a Larvasides  of  Aedes  aegypti  Mosquito. Jurnal Kesehatan  Masyarakat  Nasional , 9 (3),  207–213. http://dx.doi.org/10.21109/kesmas.v9i3.566
Elviani, E., Lucky, H., & Sardjito, E. W. (2019). Larvitrap Tipe Sekat dengan Nyamuk Aedes yang Terjebak. Thesis,  Poltekkes  Kemenkes  Yogyakarta , 53 (9), 1689–1699. http://eprints.poltekkesjogja.ac.id/876/ Francine, T. N., Prosper Cabral, B. N., Constant Anatole, P.,  Bruno,  M.  M.,  Pauline,  N.,  &  Jeanne,  N.  Y. (2016).  Larvicidal  activities  of  hydro-ethanolic extracts  of  three  Cameroonian  medicinal  plants against  Aedes  albopictus. Asian  Pacific  Journal  of Tropical Biomedicine , 6 (11), 931–936. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.apjtb.2016.0 9.004
Fujiwara, G. M., Annies, V., de Oliveira, C. F., Lara, R. A., Gabriel, M. M., Betim, F. C. M., … Zanin, S. M. W. (2017).  Evaluation  of  larvicidal  activity  and ecotoxicity of linalool, methyl cinnamate and methyl cinnamate/linalool  in  combination  against  Aedes aegypti. Ecotoxicology  and  Environmental  Safety , 139 , 238–244.
https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.ecoenv.2017 .01.046
Govindarajan,  M.,  &  Benelli,  G.  (2016).  Eco-friendly larvicides  from  Indian  plants:  Effectiveness  of lavandulyl  acetate  and  bicyclogermacrene  on malaria,  dengue  and  Japanese  encephalitis mosquito vectors. Ecotoxicology and Environmental
Safety , 133 , 395–402. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.ecoenv.2016
.07.035
Grigoraki,  L.,  Balabanidou,  V.,  Meristoudis,  C.,  Miridakis, A.,  Ranson,  H.,  Swevers,  L.,  &  Vontas,  J.  (2016). Functional and immunohistochemical characterization  of  CCEae3a,  a  carboxylesterase associated  with  temephos  resistance  in  the  major arbovirus  vectors  Aedes  aegypti  and  Ae. albopictus. Insect  Biochemistry  and  Molecular
Biology , 74 , 61–67. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.ibmb.2016.0
5.007
Haddi, K., Tomé, H. V. V., Du, Y., Valbon, W. R., Nomura, Y.,  Martins,  G.  F.,  …  Oliveira,  E.  E.  (2017). Detection  of  a  new  pyrethroid  resistance  mutation (V410L) in the sodium channel of Aedes aegypti: A potential  challenge  for  mosquito  control. Scientific
Reports , 7 (October 2016), 1–9. https://doi.org/10.1038/srep46549
Ilham, R., Lelo, A., Harahap, U., Widyawati, T., & Siahaan, L.  (2019).  The  Effectivity  of  Ethanolic  Extract  from Papaya  Leaves  (Carica  papaya  L.)  as  an Alternative  Larvacide  to  Aedes  spp. Open  Access Macedonian  Journal  of  Medical  Sciences , 7 (20), 3395–3399.
https://doi.org/10.3889/oamjms.2019.432
Irwan,  A.,  Mustikasari,  K.,  &  Ariyani,  D.  (2017). Pemeriksaan  Pendahuluan  Kimia  Daun,  Kulit  Dan Buah Limau Kuit: Jeruk Lokal Kalimantan Selatan.
Sains Dan Terapan Kimia , 11 (2), 71–79. Ishak,  A.  R.,  Dom,  N.  C.,  Hussain,  H.,  &  Sabri,  N.  H. (2014).  Biolarvacidal  Potential  of  Ipomoea  Cairica Extracts  Against  Key  Dengue  Vectors. Procedia  - Social  and  Behavioral  Sciences , 153 ,  180–188. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.sbspro.2014. 10.052
Ishak,  N.  I.  (2019).  Efektivitas  Ekstrak  Kulit  Buah  Limau Kuit ( Citrus Amblycarpa ) sebagai Larvasida Aedes Aegypti  Instar  III Jurnal  MKMI , 15 (3),  302–310. https://journal.unhas.ac.id/index.php/mkmi/article/vi ew/6533
Kasman,  &  Ishak,  N.  I.  (2018).  Analisis  Penyebaran Penyakit  Demam  Berdarah  Dengue  di  Kota Banjarmasin  Tahun  2012-2016. Media  Publikasi Promosi  Kesehatan  Indonesia , 1 (2),  32–39. https://doi.org/10.31934/mppki.v1i2.176
Kasman, Ishak, N. I., Hastutiek, P., & Suprihati, E. (2019).
GC-MS  Analysis  Citrus  amblycarpa  Peel  Ethanol Exctract and Potential as a Bioinsecticides against Mosquitoes.  In Kumpulan  Abstrak  Seminar Nasional  2019  “Percepatan  Hilirisasi  Hasil Penelitian  di  Era  Industri  4.0” (p.  104).  Retrieved from https://lppm.ipb.ac.id/publikasi/prosiding- seminar-ppm/?page_id=208&id=21&abstrak=777
Kasman,  K.,  Ishak,  N.  I.,  Hastutiek,  P.,  &  Suprihati,  E. (2021). Potential Extract Ethanol Citrus Amblycarpa as a Bioinsecticide  Against Aedes Aegypti Larvae. Systematic  Reviews  in  Pharmacy , 12 (1),  1614– 1618. https://repository.unair.ac.id/108978/
Kasman,  K.,  Ishak,  N.  I.,  Hastutiek,  P.,  Suprihati,  E.,  &
Mallongi,  A.  (2020).  Identification  of  Active Compounds  of  Ethanol  Extract  of  Citrus amblycarpa  leaves  by  Analysis  of  Thin-layer Chromatography  and  Gas  Chromatography-Mass Spectrometry  as  Bioinsecticide  Candidates  for Mosquitoes. Open  Access  Macedonian  Journal  of Medical Sciences , 8 (T2), 1–6. https://doi.org/10.3889/oamjms.2020.5207
Maciel-de-Freitas,  R.,  Avendanho,  F.  C.,  Santos,  R., Sylvestre, G., Araújo, S. C., Lima, J. B. P., Valle, D. (2014).  Undesirable  consequences  of  insecticide resistance following Aedes aegypti control activities due  to  a  dengue  outbreak. PloS  One , 9 (3),  1–9. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0092424 Maia, J. D., La Corte, R., Martinez, J., Ubbink, J., & Prata, A.  S.  (2019).  Improved  activity  of  thyme  essential oil (Thymus vulgaris) against Aedes aegypti larvae using  a  biodegradable  controlled  release  system. Industrial  Crops  and  Products , 136 ,  110–120. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2019 .03.040
Mathalaimuthu,  B.,  Shanmugam,  D.,  Kovendan,  K., Kadarkarai,  M.,  Jayapal,  G.,  &  Benelli,  G.  (2017). Coleus  aromaticus  leaf  extract  fractions:  A  source of novel ovicides, larvicides and repellents against Anopheles,  Aedes  and  Culex  mosquito  vectors? Process Safety and Environmental Protection , 106 , 23–33. https://doi.org/10.1016/j.psep.2016.12.003 Maulana,  S.  (2021).  Pengaruh  Biolarvasida  Daun Tanaman  Sebagai  Kontrol  Vektor  Nyamuk  Aedes Aegypti  Penyebab  Demam  Berdarah:  A  Literature Review. Jurnal  Medika  Hutama , 2 (03),  978–989. http://jurnalmedikahutama.com/index.php/JMH/artic le/view/201
Mukandiwa, L., Eloff, J. N., & Naidoo, V. (2015). Larvicidal activity  of  leaf  extracts  and  seselin  from  Clausena anisata  (Rutaceae)  against  Aedes  aegypti. South African  Journal  of  Botany , 100 ,  169–173. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.sajb.2015.05
.016
Nerda,  A.  S.  M.  (2015). Analisis  Kuantitatif  Kadar  Asam Askorbat  Pada  Limau  Kuit  (Citrus  hystrix)  Dengan Metode  Spektrofotometri  UV-VIS .  Banjarmasin: Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin.
Ocampo,  C.  B.,  Salazar-Terreros,  M.  J.,  Mina,  N.  J., McAllister,  J.,  &  Brogdon,  W.  (2011).  Insecticide resistance status of Aedes aegypti in 10 localities in Colombia. Acta Tropica , 118 (1),  37–44. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.actatropica.2 011.01.007
Pandiyan,  G.  N.,  Mathew,  N.,  &  Munusamy,  S.  (2019). Larvicidal  activity  of  selected  essential  oil  in synergized  combinations  against  Aedes  aegypti.
Ecotoxicology and Environmental Safety , 174 (March),
549–556.
https://doi.org/10.1016/j.ecoenv.2019.03.019
Pavela, R., Benelli, G., Pavoni, L., Bonacucina, G., Cespi, M.,  Cianfaglione,  K.,  …  Maggi,  F.  (2019). Microemulsions  for  delivery  of  Apiaceae  essential
oils—Towards  highly  effective  and  eco-friendly mosquito larvicides? Industrial Crops and Products ,
129 , 631–640. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2018
.11.073
Pramadani, A. T., Hadi, U. K., & Satrija, F. (2020). Habitat Aedes  aegypti  dan  Aedes  albopictus  sebagai Vektor  Potensial  Demam  Berdarah  Dengue  di Kecamatan  Ranomeeto  Barat,  Provinsi  Sulawesi Tenggara. ASPIRATOR  -  Journal  of  Vector-Borne
Disease Studies , 12 (2), 123–136. https://doi.org/10.22435/asp.v12i2.3269
Purnama,  S.  G.  (2017).  Diktat  Pengendalian  Vektor.  In Prodi IKM FK Universitas Udayana . Bali.
Ridha,  M.  R.,  &  Nisa,  K.  (2010).  Larva  Aedes  aegypti  is Tolerant to Temepos in Banjarbaru. Vektora , III (2),
93–111.
http://ejournal.litbang.kemkes.go.id/index.php/vk/art icle/view/3326
Sarma,  R.,  Adhikari,  K.,  Mahanta,  S.,  &  Khanikor,  B. (2019).  Insecticidal  activities  of  Citrus  aurantifolia essential  oil  against  Aedes  aegypti  (Diptera: Culicidae). Toxicology  Reports , 6 ,  1091–1096. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.toxrep.2019. 10.009
Sitepu,  F.  Y.,  Nasution,  H.,  Supriyadi,  T.,  &  Depari,  E. (2018).  Epidemiological  and  Entomological Investigation  of  Dengue  Fever  Outbreak  in  South Nias  District,  North  Sumatera  Province,  Indonesia,
2016.
OSIR Journal, 11 (3), 8-12.
http://www.osirjournal.net/index.php/osir/article/view /123
Wang,  W.-H.,  Urbina,  A.  N.,  Chang,  M.  R., Assavalapsakul,  W.,  Lu,  P.-L.,  Chen,  Y.-H.,  & Wang,  S.-F.  (2020).  Dengue  hemorrhagic  fever–A systemic  literature  review  of  current  perspectives on pathogenesis, prevention and control. Journal of Microbiology,  Immunology  and  Infection , 53 (6),
963–978. https://doi.org/10.1016/j.jmii.2020.03.007
World  Health  Organization.  (2012).  Global  Alert  an Response  (GAR)  Dengue/Dengue  Haemorrhagic
Fever. Retrieved from
http://www.who.int/csr/disease/dengue/en/
World  Health  Organisation.  (2020).  Dengue  and  severe dengue. Retrieved December 11, 2021, from WHO Fact  Sheet  website: https://www.who.int/news- room/fact-sheets/detail/dengue-and-severe-dengue Yang, S., Bai, M., Yang, J., Yuan, Y., Zhang, Y., Qin, J., Sampietro, D. A. (2020). Chemical composition and larvicidal  activity  of  essential  oils  from  Peganum harmala,  Nepeta  cataria  and  Phellodendron amurense  against  Aedes  aegypti  (Diptera: Culicidae). Saudi  Pharmaceutical  Journal , 28 (5),
560–564. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j.jsps.2020.03 .007