## MOUTHWASH  JUS  BUAH  NANAS  ( Ananas  comosus L.  Merr)

## TERHADAP BAKTERI Streptococcus mutans
1| Sri Wahyuningsih, 2| Nielma Auliah, 3| Salwi Email : sriwahyuningsih1004@gmail.com
ABSTRACT

## ARTICLE INFO

## Pendahuluan
Kesehatan mulut dan gigi terutama rongga mulut termasuk salah satu hal penting bagi manusia [1]. Masalah kesehatan gigi dan mulut seperti bau mulut (halitosis), karies gigi dan radang gusi, hampir menjadi masalah bagi semua manusia. Hal ini disebabkan karena tempat pertumbuhan mikroorganisme sebagai  penyebab infeksi adalah rongga mulut sehingga  akan mempengaruhi keadaan  kesehatan  (2).  Dalam  rongga  mulut,  beragam  mikroorganisme  dapat  ditemukan  dan hidup, salah satu yang sering ditemukan adalah bakteri [3].
Streptococcus  mutans merupakan  salah  satu  bakteri yang ditemukan  dan  hidup dalam  rongga mulut [1] . Salah satu penyakit infeksi akibat adanya proses penghilangan mineral akibat bakteri di  permukaan  gigi  disebut  dengan  karies  [4].  Bakteri Streptococcus  mutans ini  dapat memfermentasi karbohidrat menjadi asam sehingga pH permukaan gigi menjadi turun sehingga terjadi  karies.  Pencegahan  karies  bisa  dilakukan  dengan  beberapa  hal,  salah  satunya penggunaan mouthwash [5].
Mouthwash termasuk  sediaan  cair  yang  digunakan  sebagai  pembersih  untuk  meningkatkan estetika,  kesehatan  rongga  mulut,  dan  keseragaman  nafas  [6]. Mouthwash lebih  efektif dibandingkan  sikat  gigi,  hal  ini  mampu  menjangkau  tempat  yang  sulit  dibersihkan  dan  dapat mencegah  pembentukan  plak  pada  gigi  [5]. Mouthwash ini  terdiri  dari  zat  berkhasiat antibakteri  digunakan  sebagai  pembilas  rongga  mulut  sehingga  mampu  mengurangi  jumlah mikroorganisme dalam mulut [7]. Pada umumnya telah banyak ditemukan sediaan mouthwash komersial  tetapi  mengandung  kadar  alkohol  yang  cukup  tinggi,  sehingga  hal  ini  dapat meningkatkan sekitar 50% risiko timbulnya kanker faring, mulut dan tenggorokan [8].
Alternatif  lain  yang  dijadikan  sebagai  antiseptik  mulut  adalah  buah  nanas.  Pada  buah  nanas terdapat salah satunya enzim bromelin yang  berperan penting untuk mengatasi masalah yang terjadi  pada  mulut.  Enzim  bromelin  memiliki  mekanisme  kerja  mengurai  protein  dan  juga bersifat  antimikrobial  [9].  Selain  itu  buah  nanas  juga  mengandung  fenol,  iodium,  fenol  dan flavonoid.  Hal  ini  dibuktikan  dari  hasil  penelitian  Rakhmanda  [10]  menunjukkan  bahwa konsentrasi  minimal  jus  nanas  yaitu  25%  masih  dapat  menghambat  bakteri Streptococcus mutans ,  sedangkan  konsentrasi  100%  jus  nanas  mempunyai  efek  bakterisidal.  Penelitian  lain juga telah menguji efektivitas kandungan antibakteri buah nanas ( Ananas comosus L.Merr) yang diperoleh hasil konsentrasi 50% dengan zona hambat 10 mm yang termasuk kategori sedang dalam menghambat aktivitas bakteri [9].
Dari  uraian  di  atas,  dimana  penggunaan mouthwash komersil  dengan  kandungan  alkohol sebesar  25%  atau  lebih  dapat  meningkatkan  risiko  timbulnya  kanker  mulut  maka  dicari alternatif lain dalam pembuatan sediaan mouthwash. Berdasarkan penelitian diatas terkait buah
This research aimed to determine the formulation of pineapple juice into mouthwash and to  investigate  antibacterial  activity  against  Streptococcus  mutans.  This  was  an experimental design method, it started by formulating pineapple juice (Ananas comosus L.Merr)  into  mouthwash  and  testing  the  activity  of  bacteria  using  the  agar  diffusion method to determine the inhibition zone. The research result showed that pineapple juice (Ananas comosus L.Merr) can be formulated into mouthwash with a concentration of 5%; 10%;  and  15%  and  there  was  no  significant  difference  after  the  stability  test.  The mouthwash  also  has  antibacterial  activity  against  Streptococcus  mutans  with  a  zone  of inhibition for a concentration of 5%; 10% and 15%, respectively 8.6 mm; 9.4 mm; and 9.7 mm.  Antibacterial  activity  of  pineapple  juice  mouthwash  against  Streptococcus  mutans showed a moderate inhibition zone category.
Keywords: Pineapple juice; Mouthwash; Streptococcus mutans
DOI:
10.24252/kesehatan.v13i2.16423
Sri  Wahyuningsih,  Nielma  Auliah,  Salwi:  Mouthwash  jus  buah  nanas  (Ananas  comosus  L.  Merr)  terhadap  bakteri  Streptococcus mutans. Jurnal Kesehatan. Vol 13 (2) 2020
nanas yang dapat menghambat bakteri Streptococcus mutans maka permasalahan yang timbul yaitu  apakah  jus  buah  nanas  dapat  diformulasikan  sebagai  sediaan mouthwash dan  aktivitas terhadap  bakteri Streptococcus  mutans .  Sehingga  hal  ini  bisa  dijadikan  alternatif  baru  dalam pembuatan sediaan mouthwash yang aman digunakan sehari-hari.

## Metode Penelitian

## Desain, tempat dan waktu
Penelitian  ini  merupakan  jenis  penelitian  eksperimental  dimulai  dengan    pembuatan  sediaan mouthwash dan  pengujian  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans. Penelitian  dilaksanakan  di Laboratorium  Teknologi  Farmasi  dan  Mikrobiologi  Farmasi  Universitas  Megarezky  selama Agustus - September 2020.

## Bahan dan alat
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  air  suling,  alumunium  foil,  biakan  murni bakteri Sterptococcus  mutans, gliserin,  kapas,  kertas  whatman,  ,  medium  NA,  menthol,methyl paraben,  Nacl 0,9%, paper disk, buah nanas ( Ananas comosus L.Merr).
Alat  yang  digunakan  antara  lain  :  autoklaf  (Gea ® ),    batang  pengaduk,  cawan  petri  (Pyrex ® ), erlenmeyer  (Pyrex ® ),  gelas  kimia  (Pyrex ® ),  gelas  ukur  (Pyrex ® ),  inkubator  (Eyela  SLI-400 ® ), jangka  sorong  (Tricle  brand ® ),  LAF,  lampu  spritus,  mortir,  tabung  reaksi  (Pyrex ® ),  ose,  oven (She Lab ®) , pencadang baja, pipet tetes, timbangan analitik (Ohaus ® ).

## Pengolahan sampel
Pembuatan jus buah nanas dilakukan dengan cara buah nanas ( Ananas comosus L.Merr) segar, dikupas,  di  cuci  dan  dipisahkan  dari  biji  dan  bonggolnya.  Kemudian  dipotong  kecil-kecil  lalu diblender, selanjutnya disaring unrtuk mendapatkan jus buah yang murni [7]. Setelah itu dibuat rancangan  formula  sediaan mouthwash berdasarkan  variasi  konsentrasi  jus  buah  nanas    5% (F1), 10% (F2), dan 15% (F3).
Formulasi sediaan mouthwash
Tabel 1. Rancangan formulasi mouthwash Konsentrasi % Bahan Fungsi F0 F1 F2 F3 Jus buah nanas Zat berkhasiat 0 5 10 15 Sodium lauryl sulfat  Surfaktan 0,1 0,1 0,1 0,1 Natrium benzoat Pengawet 0,2 0,2 0,2 0,2 Gliserin Humektan 15 15 15 15 Menthol Penyegar 0,2 0,2 0,2 0,2 Air suling Pelarut Ad 100 Ad 100 Ad 100   Ad 100 Ket:
F0 : Mouthwash tanpa jus buah nanas F1 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 5% F2 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 10% F3 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 15%
Mouthwash dibuat  dengan  cara  sodium  lauryl  sulfat  digerus  dengan  air  suling  secukupnya sampai  homogen,  kemudian  ditambahkan  natrium  benzoat,  gliserin  dan  jus  buah  nanas. Menthol dilarutkan terlebih dahulu dengan etanol 70% hingga homogen lalu dimasukkan pada campuran pertama kemudian dicukupkan volumenya dengan air suling. Disaring hasil larutan menggunakan  kertas  whattman  untuk  mendapatkan  hasil  yang  jernih.  Ditambahkan  pipper mint  oil  dan  FDC yellow no.6  secukupnya  untuk  memberi  aroma  dan  warna  yang  menarik sebelum akhirnya dikemas dalam wadah.
Evaluasi mouthwash

## Uji kestabilan fisik sediaan
Uji  stabilitas  fisik  sediaan  dilakukan  dengan  cara Cycling  test. Sediaan  larutan mouthwash disimpan pada suhu 4 0 C ± 2 0 C selama 24 jam lalu keluarkan dan tempatkan pada suhu 40 0 C ± 2 0 C selama 24 jam. Perlakuan ini adalah satu kali siklus. Percobaan diulang sebanyak 6 siklus [11].

## Pengamatan Organoleptis
Uji organoleptis meliputi pengamatan kejernihan, warna dan bau. Mouthwash yang stabil harus menunjukkan  karakter  yang  sama  berupa  kejernihan,  warna  dan  bau  yang  sama  setelah penyimpanan dipercepat [12].

## Bobot Jenis
Uji bobot jenis dilakukan guna mengetahui kemurnian suatu sediaan dengan menghitung berat jenisnya,  jika  berat  jenisnya  mendekati  nilai  yang  telah  ditentukan  maka  dapat  dikatakan sediaan  memiliki  kemurnian  yang  tinggi.  Hal  ini  dilakukan  dengan  cara  bersihkan  dan keringkan pikno kemudian timbang pikno kosong lalu timbang pikno lain berisi air dengan suhu 25 o C. Dilakukan perhitungan bobot air setelah itu buang air dalam pikno dan bersihkan dengan etanol kemudian keringkan. Dilakukan perhitungan bobot pikno berisi zat cair uji [12].

## Pemeriksaan pH
Sediaan  yang  sudah  jadi,  sebelum  dan  sesudah  kondisi  penyimpanan  dipercepat,  diukur  pH sediaan dengan menggunakan kertas pH universal, dimana ujungnya dicelup pada mouthwash kemudian  dilihat  hasil  pengukurannyadengan  menyesuaikan  ketentuan  yang  tertera  pada wadah kertas pH [12].

## Uji Aktivitas Antibakteri
a. Sterilisasi alat
Alat-alat yang akan digunakan terlebih dahulu dicuci dengan detergen kemudian dibilas dengan air suling. Alat-alat yang terbuat dari gelas dibungkus dengan kertas hvs putih dan disterilkan dengan  menggunakan  oven  dengan  suhu  180 o C  selama  2  jam.  Alat-alat  logam  disterilkan dengan menggunakan lampu spiritus selama 30 detik. Alat-alat karet dan plastik (tidak tahan pemanasan suhu tinggi) disterilkan dengan autoclaf pada suhu 121 o C selama 15 menit [12].

## b. Penyiapan Medium Nutrient Agar
Sebanyak  2,8  gram nutrient  agar dilarutkan  dengan  air  suling  hingga  100  ml  dalam  labu erlenmeyer  kemudian  dipanaskan  hingga  larut.  Setelah  itu  disterilkan  selama  15  menit  pada suhu 121 o C dalam autoclaf [12].

## c. Peremajaan Kultur Murni Bakteri Streptococcus mutans
Biakan murni bakteri Streptococcus mutans diambil dan diinokulasi dengan cara menggoreskan pada agar miring  pada  medium nutrient  agar secara  aseptis,  kemudian  diinkubasi  selama  24 jam pada suhu 37 o C [12].
d. Uji Aktivitas Antibakteri Mouthwash Jus Buah Nanas ( Ananas comosus L.Merr)
Pada  cawan  petri  dimasukkan  sebanyak  10  ml  medium nutriet  agar kemudian  didinginkan hingga  suhu  40 o -45 o C  hingga  memadat.  Biakan  bakteri  yang  telah  diremajakan  kemudian diambil menggunakan lidi kapas steril dan digoreskan pada  permukaan medium nutrient agar yang telah memadat secara zigzag dan merata. Pengujian dilakukan dengan menggunakan paper disk yang  telah  dicelupkan  ke dalam  sediaan mouthwash kemudian  diletakkan  diatas  medium pada cawan petri secara aseptis. Tiap paper disk dicelupkan dengan mouthwash jus buah nanas ( Ananas  comosus L.  Merr)  dengan  konsentrasi  5%;  10%;  dan  15%  dan  dibandingkan  dengan kontrol  negatif  ( mouthwash tanpa  ekstrak)  dan  kontrol  positif  ( mouthwash komersial).
Kemudian  masing-masing  cawan  petri  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37 o C.  Pengujian dilakukan  sebanyak  3  kali  replikasi.  Setelah  itu  diukur  rata-rata  diameter  zona  hambat  yang dihasilkan menggunakan jangka sorong [12].

## Hasil Penelitian
Tabel 2. Hasil pemeriksaan bobot jenis No. Sediaan Bobot Jenis (g/ml) 1 2 3 F1 F2 F3 1,081 1,078 1,076 Ket:
F1 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 5% F2 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 10% F3 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 15%
Tabel 3. Hasil evaluasi sediaan sebelum cycling test
Ket: F0 : Mouthwash tanpa jus buah nanas F1 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 5% F2 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 10% F3 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 15% KP : Mouthwash komersil dengan merk 'X'
Tabel 3. Hasil evaluasi sediaan setelah cycling test
Ket: F0 : Mouthwash tanpa jus buah nanas F1 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 5% F2 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 10% F3 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 15% KP : Mouthwash komersil dengan merk 'X'
No  Evaluasi Sebelum cycling test F0 F1 F2 F3 KP 1 Bentuk larutan larutan larutan larutan larutan 2 Warna kuning kuning kuning kuning kuning 3 Bau khas menthol khas menthol khas menthol khas menthol  khas menthol 4 Kejernihan jernih jernih jernih jernih jernih 5 pH 5, 4 4,9 6,0 6,3 5,2 No  Evaluasi Setelah cycling test F0 F1 F2 F3 KP 1 Bentuk larutan larutan larutan larutan larutan 2 Warna kuning kuning kuning kuning kuning 3 Bau khas menthol khas menthol khas menthol khas menthol  khas menthol 4 Kejernihan jernih jernih jernih jernih jernih 5 pH 5, 6 4,7 6,2 6,4 5,3
Gambar 1. Diagram zona hambat
Ket:
F0 : Mouthwash tanpa jus buah nanas F1 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 5% F2 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 10% F3 : Mouthwash dengan jus buah nanas konsentrasi 15% KP : Mouthwash komersil dengan merk 'X'
Gambar 2. Uji aktivitas antibakteri formulasi mouthwash Gambar 3. Uji aktivitas antibakteri kontrol mouthwash

## Diskusi
Penelitian ini dimulai dengan pembuatan jus buah nanas dengan cara buah nanas dikupas dan dipisahkan antara daging dengan biji dan bonggolnya. Setelah itu, daging kemudian dipotong- potong  kecil  untuk  memudahkan  saat  dihaluskan.  Proses  ini  dilakukan  agar  jus  buah  yang diperoleh  lebih  banyak.  Setelah  proses  penghalusan  selesai,  kemudian disaring  menggunakan kain  kasa  untuk  memisahkan  filtrat  dan  residu.  Jus  buah  yang  dihasilkan  kemudian  disaring
0 3 6 9 12 15 F0 F1 F2 F3 KP R at a -r at a d ia m e te r zo n a h am b at ( m m ) Sediaan mouthwash
Sri  Wahyuningsih,  Nielma  Auliah,  Salwi:  Mouthwash  jus  buah  nanas  (Ananas  comosus  L.  Merr)  terhadap  bakteri  Streptococcus mutans. Jurnal Kesehatan. Vol 13 (2) 2020
kembali menggunakan kertas whattman sehingga menghasilkan jus buah sebagai zat berkhasiat dalam pembuatan mouthwash .
Mouthwash mengandung zat berkhasiat antibakteri untuk mengurangi jumlah mikroorganisme sehingga  disebut  juga  larutan  antiseptik  mulut.  Zat  berkhasiat  antibakteri  pada mouthwash dapat  berupa  sintetis  atau    berasal  dari  bahan  alam  [7].  Pada  penelitian  ini  formulasi mouthwash terdiri dari sodium lauryl sulfat, natrium benzoat, menthol, gliserin, dan pipper mint oil serta air suling untuk melarutkan bahan dan mencukupkan volume yang diinginkan. Natrium benzoat  dimaksudkan  sebagai  pengawet  untuk  mencegah  kerusakan  dan  pertumbuhan mikroorganisme  pada  sediaan.  Penambahan  menthol  yang  berbau  khas  permen  dapat memberikan  sensasi  dingin  atau  menyegarkan sehingga  digunakan  sebagai penyegar.  Gliserin sendiri dimaksudkan untuk menjaga zat aktif agar tidak menguap dengan cara mengikat bahan aktif  dan  sekaligus  mempertahankan  air  yang  ada  pada  sediaan  sehingga  dapat  memperbaiki stabilitas bahan dalam jangka panjang. Selain itu gliserin juga dijadikan sebagai pemanis, hal ini disebabkan karena gliserin 0,6 kali lebih manis dibanding sukrosa [13].
Setelah  formulasi mouthwash, kemudian  dilanjutkan  dengan  evaluasi  sediaan  salah  satunya mengetahui  bobot  jenis.  Hal  ini  berguna  untuk  mengetahui  kemurnian  suatu  sediaan  dengan menghitung  berat  jenisnya,  jika  berat  jenisnya  mendekati  nilai  yang  telah  ditentukan  maka dapat  dikatakan  sediaan  memiliki  kemurnian  yang  tinggi  (12).  Selain  itu  pengujian  bobot jenispun dilakukan untuk mengetahui kemurnian suatu sediaan, jika bobot jenisnya mendekati nilai  bobot  jenis  air  yaitu  1,00g/ml  maka  sediaaan  dapat  dikategorikan  memiliki  kemurnian yang tinggi, seperti terlihat pada tabel 1. Hasilnya pada pemeriksaan bobot jenis menunjukkan bahwa ketiga formula memiliki bobot jenis yang mendekati bobot jenis air.
Evaluasi sediaan dilanjutkan dengan uji stabilitas sediaan mouthwash pada penyimpanan suhu tinggi  dalam  hal  40°  C  dan  suhu  rendah  yaitu  4°  C.  Uji  stabilitas  obat  atau  sediaan  perlu dilakukan  untuk  mengetahui  kemampuan  produk  obat  dalam  mempertahankan  sifat  dan karakteristiknya agar sama setelah dibuat dan sepanjang periode penyimpanan [14]. Pada hasil uji  stabilitas  sediaan  menunjukkan  bahwa  tidak  terjadi  perubahan  signifikan  pengamatan evaluasi sediaan pada saat sebelum dan sesudah cycling test. Hasil uji stabilitas evaluasi sediaan sebelum dan sesudah cycling test dapat dilihat pada tabel 2 dan 3.
Penelitian  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  aktivitas antibakteri sediaan mouthwash jus  buah nanas  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans .  Pengujian  dilakukan  dengan  cara  paper  disk dicelupkan  kedalam  masing-masing  sediaan  bebeda  konsentrasi  (5%,  10%  dan  15%)  dan sediaan tanpa zat berkhasiat serta sediaan komersial kemudian diletakkan diatas medium agar seperti gambar 2 dan 3. Hasil pengujian aktivitas antibakteri sediaan mouthwash dapat terlihat seperti pada gambar 1. Hasil penelitian terlihat pada gambar 1 bahwa F1 (8,6 mm), F2 (9,4 mm) dan  F3  (9,7  mm)  termasuk  memiliki  kategori  memiliki  zona  hambat  sedang  sedangkan mouthwash komersial  (12,6  mm)  termasuk  kategori  zona  hambat  kuat.  Hal  ini  sesuai  dengn kategori  zona  hambat  yang  menunjukkan  bahwa  rata-rata  diameter  6-10  mm  menunjukkan kategori penghambatan sedang sedangkan rata-rata diameter 11-20 mm menunjukkan kategori penghambatan kuat [6].
Kandungan  buah  nanas  antara  lain  air,  besi,  iodium,  fenol,  fosfor,  kalium,  karbohidrat,  klor, lemak,  magnesium,  natrium,  protein,  serat,  vitamin  A  dan  C.  Klor,  iodium  dan  fenol  menurut penelitian  terdahulu  mempunyai  efek  sebagai  antiseptik.  Klor  dan  iodium  mempunyai  sifat bakterisidal.  Mekanisme kerja  klor  dengan  air yaitu  membentuk  hipoklorit  sedangkan  iodium dipercaya  dapat  menggumpalkan  protein  sehingga  bekerja  dengan  cepat  dan  hampir  semua bakteri  pathogen  dapat  dibunuh.  Fenol  juga  merupakan  salah  satu  antiseptik  tertua  yang memiliki sifat bakterisidal [10]. Selain itu, buah nanas juga memiliki kandungan enzim bromelin dengan  mekanisme  kerja  mampu  menginaktifkan  adesin  sel  mikroba  juga  enzim  dan mengganggu  transpor  protein  pada  lapisan  dalam  sel  sehingga  memiliki  aktivitas  antibakteri. Enzim  bromelin  diketahui  juga  memiliki  target  pada  polipeptida  dinding  sel,  hal  ini
menyebabkan  pembentukan    dinding  sel  menjadi  kurang  sempurna  sehingga  sel  bakteri menjadi lisis akibat tekanan osmotic maupun fisik [9].

## Kesimpulan
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  formula mouthwash jus  buah  nanas  ( Ananas  comous L.Merr) dengan perbandingan konsentrasi 5; 10%; dan 15% menunjukkan bahwa tidak terjadi perubahan  baik  setelah  uji  kestabilan  secara  bentuk,  warna,  bau,  kejernihan  dan  pH.  Uji aktivitas mouthwash terhadap  bakteri Streptococcus  mutans menunjukkan  rata-rata  diameter zona  hambat  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans pada  konsentrasi  5%;  10%;  dan  15% masing-masing  sebesar  8,6  mm;  9,4  mm;  dan  9,7  mm  yang  termasuk  katergori  zona  hambat sedang.

## Daftar Pustaka
1. Elmitra, Ramadhani N. Formulasi Obat Kumur Dari Daun Asam Jawa ( Tamarindus indica L.) Dengan Metode Infundasi. Borneo Journal of Pharmascientech. 2017;1(2).
2. Andayani  NP,  Artawa  IMB.  Pengaruh  Penyakit  Gigi  dan  Mulut  Terhadap  Halitosis.  Jurnal Kesehatan Gigi. 2016;4(1):24–48.
3. Andayani R, Chismirina S, Kumalajus I. Pengaruh Ekstrak Buah Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi )  Terhadap  Interaksi Streptococcus  sanguinis dan Streptococcus  mutans Secara In Vitro .  Cakradonya Dent Journal. 2014;6(2): 678–744.
4. Mustika  MD,  Carabelly  AN,  Cholil.  Insidensi  Karies  Gigi  Pada  Anak  Usia  Prasekolah  di  TK Merah  Mandiangin  Martapura  Periode  2012-2013.  Dentino  Jurnal  Ked.  Gigi.  2014;  2(2): 200-204.
5. Sakinah N, Dwyana Z, Tambaru E, Rante H. Uji Aktivitas Sediaan Obat Kumur Ekstrak Daun Miana Coleus  scuttelariodes (L.)  Benth  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus mutans . Jurusan Biologi Universitas Hasanuddin. 2015.
6. Handayani  F,  Warnida  H,  Nur  SJ.  Formulasi  dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Streptococcus mutans Dari Sediaan Mouthwash Ekstrak Daun Salam ( Syzygium polyanthum (Wight) Walp.) Media Sains. 2016;9(1): 74-84.
7. Ririn, Tandjung AI, Wagola S. Formulasi Sediaan Mouthwash Dari Jus Buah Sirih ( Piper betle L.) Varietas Siriboah. As-Syifaa. 2013;5(2):153-161.
8. Gurning D, Nathaniel D, Mella O, Sagala Z. Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Obat Kumur Dari Ekstrak  Etanol  70%  Batang  Sambung  Nyawa( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.)  Terhadap Bakteri Streptococcus mutans . Pharmacon: Jurnal Farmasi Indonesia. 2018;15(2): 58-64.
9. Bahtiyar AY, Efriyadi O, Fitriah E. Efektivitas Kandungan Anti-Bakteri Buah Nanas ( Ananas comosus L.Merr) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Streptococcus mutans . Prosiding Semnas Sains & Entrepreneurship IV. 2017:634-640.
10. Rakhmanda  AP.  Perbandingan  Efek  Antibakteri  Jus  Nanas  ( Ananas  comosus L.Merr)  pada Berbagai  Konsentrasi  Terhadap Streptococcus  mutans .  Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponegoro. 2008.
11. Nofita  H,  Mugiyanto  E,  Agustiningrum  W.  Uji  Antibakteri  Formulas  Sediaan Mouthwash Ekstrak  Kulit  Buah  Nanas  ( Ananas  comosus L.  Merr)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus . Journal of Current Pharmcautical Sciences. 2018;2(1):97-103.
12. Simbolon  PM,  Hartina  ST.  Formulasi  dan  Uji  Aktivitas  Sediaan  Mouthwash  Ekstrak  Etanol Bawang Dayak ( Eleutherine palmifolia (L.) Merr) Sebagai Antibakteri terhadap Streptococcus mutans . Program Studi Farmasi STIKes Mega Rezky Makassar. 2017.
13. Rowe CR, Sheskey PJ, Quinn ME. Handbook of Pharmaceutical Excipient. Sixth Edition. UK: Pharmaceutical Press; 2009.
14. Nurhadi G. Pengaruh Konsentrasi Tween 80  Terhadap Stabilitas Fisik Obat Kumur Minyak Atsiri Herba Kemangi ( Ocimum americanum L.). Program Studi Farmasi. Jakarta : UIN Syarif Hidayatullah. 2015.
15. Kono  SR,  Yamlean  PVY,  Sudewi  S.  Formulasi  Sediaan  Obat  Kumur  Herba  Patikan  Kebo ( Euphorbia  hirta )  dan  Uji  Antibakteri Prophyromonas  gingivalis .  Pharmacon  Jurnal  Ilmiah Farmasi-UNSRAT. 2018;7(1):37-46.