Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN
PENGARUH PEMBERIAN VITAMIN E TERHADAP JUMLAH SEL SPERMA MENCIT ( Mus musculus, L. )

## YANG DIPAPARI TUAK
Meriani Herlina Prodi D-III Keperawatan, STIKes Imelda, Jalan Bilal Nomor 52 Medan E-mail: siahaan29mei@gmail.com

## ABSTRAK
Vitamin E berperan sebagai antioksidan dan dapat melindungi aksi kerusakan membran biologis akibat radikal bebas. Radikal bebas adalah suatu atom dan molekul yang tidak  mempunyai pasangan elektron dan dapat merusak molekul-molekul penting bagi fungsi seluler. Pemberian asupan antioksidan berupa vitamin  E  diusulkan  dapat  menurunkan  efek  radikal  bebas  dalam  tubuh.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui tentang pengaruh pemberian vitamin E terhadap jumlah sperma pada testis mencit yang di papari  tuak.  Pada  penelitian  ini  menggunakan  mencit  jantan  (Mus  musculus,  L)  strain  DD  Webster dewasa  sehat  dan  fertil  yang  berumur  8-11  minggu  dengan  berat  20-35  g  sebanyak  30  ekor  dibagi dengan  6  kelompok  perlakuan.  Kelompok  (K0)  =  kelompok  kontrol  pertama  terdiri  dari  5  ekor  mencit dewasa jantan tanpa perlakuan selama 30 hari. Kelompok 2 (P1) = Kelompok perlakuan pertama terdiri dari 5 ekor mencit dewasa jantan yang diberi tuak (alkohol 20%) 0,5 ml/hari/ekor secara oral setiap hari selama  15  hari  pertama  dan  15  hari  berikutnya  pemberian  tuak  dihentikan  dan  diganti  dengan pemberian aquadest 0,5 ml. Kelompok 3 (P2) = Kelompok perlakuan kedua terdiri 5 ekor mencit dewasa yang  diberi  tuak  (alkohol  20%)  0,5  ml/hari/ekor  secara  oral  selama  30  hari.  Kelompok  4  (P3)  = Kelompok  perlakuan  ketiga  terdiri  5  ekor  mencit  dewasa    yang  diberi  tuak  (alkohol  20%)  0,5  ml /hari/ekor  selama  15  hari  pertama  dan  15  hari  berikutnya  pemberian  tuak  dihentikan  diganti  dengan pemberian  vitamin  E  0,25  mg/hari/ekor/mencit  secara  oral.  Kelompok  5  (P4)  =  Kelompok  perlakuan keempat  terdiri  5  ekor  mencit  dewasa  yang  diberi  tuak  (alkohol  20%)  0,5  ml/hari/ekor  selama  15  hari pertama dan 15 hari berikutnya pemberian tuak dengan pemberian vitamin E 0,25 mg/ekor/hari secara oral. Kelompok 6 (P5) = Kelompok perlakuan kelima terdiri dari 5 ekor mencit dewasa yang diberi tuak (alkohol 20%) 0,5 ml/hari/ekor dan pemberian vitamin E 0,25 mg/ekor/hari  selama 30 hari secara oral. Mencit ditempatkan ke dalam kelompok secara random. Penelitian ini telah mendapat persetujuan dari komite etik penelitian USU. Hasil yang didapat pemberian vitamin E 0,25 mg/hari/mencit sejalan dengan pemaparan tuak selama 30 hari cenderung mempengaruhi peningkatan jumlah spermatozoa mencit.
Kata kunci: Vitamin E; Histologis Testis; Sperma;  Mencit Jantan; Tuak.

## ABSTRACT
Vitamin  E  is  one  of  the  fat-soluble  vitamins.  Vitamin  E  acts  as  an  antioxidant  and  can  protect  the biological action of membrane damage by free radicals. A free radicals is an atom or a molecule without a pair of electrons that can damage the molecules essential for cellular function. Giving antioxidants in the  form  of  vitamin  E  is  proposed  to  reduce  the  effects  of  free  radicals  in  thebody.  This  study  aims  to determine  the  effect  of  vitamin  E  on  testicular  sperm  count  in  mice  given  palm  wine.  In  this  study  30 healty and fertile adult male mice (Mus musculus, L.) strain DD Webster. The 8-11 week old mice (20-35 g) were divided in to 6 treatment groups. The first group (K0) = consisted of 5 mice without treatment for 30 days. The first treatment group (P1) consisted of 5 mice that were each given palm wine (20% alcohol) orally  at  0.5  ml/day  for  15  days.  After  15  the  palm  wine  was  repleaced  with  water  0,5  ml.  The  second treatment group (P2) consisted of 5 mice that were each given palm wine (20% alcohol) orally 0.5 ml/day for  30  days.  The  third  treatment  group  (P3)  consisted  of  5  mice  that  were  each  given  palm  wine  (20% alcohol) orally 0.5 ml/day for 15 days. After 15 days  the palm wine was replaced with 0.25 mg of vitamin E/day  administered  orally.  The  fourth  treatment  group  (P4)  consisted  of  5  mice  that  were  each  given palm wine (20% alcohol) orally 0.5 ml/day for 30 days. After 15 days in addition to the palm wine with 0.25 mg of vitamin E/day was administered orally. The fifth treatment group (P5) consisted of 5 mice that were each given palm wine (20% alcohol) 0.5 ml/day and vitamin E 0.25 mg/day orally. The mice were placed into groups randomly. This study was approved by the USU research ethics committee. The results of this study suggest concurrent administration of vitamin E (0.25 mg/day) reduces the negative affect of palm wine. An increased number of an increased number spermatozoa were observed in treatment group P5 as compared to the other treatment groups.
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN
Keywords: Vitamin E; Histological Testes; Sperm; Male Mice; Palm Wine.

## PENDAHULUAN
Alkohol  jika  dikonsumsi  mempunyai efek  toksik  pada  tubuh  baik  secara  langsung maupun  tidak  langsung  (Panjaitan,  2003). Penelitian  yang  dilakukan  (Foa et  al .,  2006) menyebutkan bahwa etanol berpengaruh pada beberapa  metabolisme  organ  dan  jaringan tubuh, termasuk organ reproduksi pria berupa keterlambatan pubertas, atrofi testis, disfungsi  ereksi,  ginekomastia,  gangguan proses spermatogenesis hingga infertilitas.
Pemberian alkohol pada hewan percobaan  diketahui  dapat  menurunkan konsentrasi  hormon  steroid,  menghambat ovulasi  dan  mengganggu  transportasi  sel sperma sampai ke tuba falopi. Penelitian pada tikus  jantan  yang  diberi  alkohol  10%  secara oral  sebanyak  1  ml/hari  selama  60  hari menyebabkan penurunan proses pembentukan  spermatozoa  sekitar  24%  dari yang  normal  (Ilyas,  2004).  Penelitian Nugroho  (2007)  menyatakan  pemberian minuman  beralkohol  dengan  kadar  40% selama 30 hari dengan dosis 0,1 ml/hari/ekor, 0,2  ml/hari/ekor,  0,3  ml/hari/ekor  dapat menyebabkan  penurunan  jumlah  lapisan  sel spermatogenik  dan  penurunan  berat  vesikula seminalis pada mencit. Hal ini diperkuat oleh (Foa et  al .,  2006)  yang  melaporkan  bahwa penelitiannya  pada  tikus  putih  jantan  dengan umur 40-60 hari (umur dewasa) sebanyak 35 ekor  yang  diberikan  etanol  peroral  dengan dosis    10%,  1g/kgBB/hr,  10%,  3g/kg/BB/hr, 30%,  1g/kgBB/hr,  30%,  3g/kgBB/hr  selama 45  hari  menunjukkan  bahwa  etanol  dapat menurunkan  jumlah  sel  spermatosit  primer, sel spermatogonium dan sel Leydig.
Secara umum tuak dikenal oleh masyarakat di Indonesia adalah jenis minuman yang disebut arak. Bagi masyarakat Batak Toba tuak merupakan minuman sehari- hari  (Ikegami,  1997).  Tuak  merupakan minuman  beralkohol  yang  bahan  dasarnya nira  aren  ( Arenga  pinnata )  mengandung alkohol  dengan  kadar  4%  (Sunanto,  1993). Menurut  Keputusan  Menteri  Kesehatan No.151/A/SK/V/81  bahwa  minuman  atau obat  tradisional  yang  tergolong  dalam minuman  keras  mengandung  alkohol  >1%. Pengolahan  nira  aren  menjadi  etanol  sudah umum  dilakukan  petani  aren,  antara  lain  di daerah  Minahasa  Sulawesi  Utara,  dengan
cara  menampung  nira  hasil  sadapan  dalam tangki  selama  2-3  hari  tanpa  menggunakan stater  atau  ragi,  nira  hasil  fermentasi kemudian  disuling  dengan  alat  penyulingan sederhana,  akan  menghasilkan  bioetanol berkadar  25-35%  etanol  (Lay et  al .,  2004). Pemberian tuak dengan dosis 0,21 ml/ekor/hari/mencit  jantan  dengan  lama pemberian  60  hari  cenderung  lebih  menekan jumlah  anak  mencit  dibandingkan  dengan dosis  air  tuak  0,05  ml/ekor/hari/mencit jantan,  0,09  ml/ekor/hari/mencit  jantan,  0,13 ml//ekor/hari/mencit jantan, 0,17
ml/ekor/hari/ mencit jantan (Ilyas, 2004).
Vitamin E merupakan antioksidan pemecah  rantai  utama  dan  terdapat  pada cairan ekstrasel. Vitamin E dapat menetralisir  hidroksil,  superoksida,  dan radikal  hidrogen  peroksida  dan  mencegah aglutinasi  sperma  (Agarwal et  al .,  2005). Pemberian  vitamin  E    dosis  4,4  IU/kg  tidak menimbulkan  efek  pada  sel  Sertoli  dan jumlah sperma, tetapi jika pemberian vitamin E  ditingkatkan  menjadi  220  IU/kg  dapat menurunkan  konsentrasi  prostaglandin  pada prostat dan kematangan vesikel seminal gland pada  babi  hutan  (Guzman,  2000).  Pemberian vitamin E dengan dosis 100 mg/kg/hari tidak hanya  kompensasi  efek  toksik  pada  para- nonylphenol  (p-NP)  dalam  berat  testis, jumlah  sperma,  motilitas  sperma,  dan produksi  estrogen,  tetapi  juga  meningkatkan kelangsungan  hidup  dan  perkembangan sperma tikus (Momeni et al ., 2009)
Berdasarkan    yang  sudah  dipaparkan  di atas  terlihat  akan  pengaruh  pemberian alkohol  terhadap  penurunan  jumlah  sel Leydig,  testis  dan  produksi  sekresi  hormon testosteron,  sedangkan  vitamin  E  dapat menetralisir  hidroksil,  superoksida,  dan radikal  hidrogen  peroksida  dan  mencegah aglutinasi  sperma.  Penelitian  ini  bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian vitamin  E  terhadap  jumlah  sel  sperma  pada mencit yang di papari tuak.
Alkohol  dapat  merusak  sel  Leydig sehingga  menurunkan  kadar  testosteron intratestikular.  Testosteron  berfungsi  dalam proses pematangan sperma pada spermatogenesis, selain itu alkohol dapat juga menurunkan Luteinizing  Hormon (LH)  dan Follicle
Stimulating Hormon (FSH)
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
(Emanuele dan Nicholas, 1998). LH
berfungsi  menstimulasi  sel  Leydig  untuk menghasilkan  testosteron  sedangkan  FSH dapat  mempengaruhi  sel  Sertoli  untuk
membentuk  androgen  binding  protein  (ABP) yang  berfungsi  untuk  mengikat  testosteron intratestikular  yang  dihasilkan  sel  Leydig (Foa et al ., 2006).
Gambar 1: Kerangka Konsep Pengaruh Pemberian Vitamin E Terhadap  Gambaran Histologis Testis, Jumlah Sel Leydig  dan Jumlah Sel Spermatozoa Pada Mencit yang Dipapari Tuak.

## METODE Waktu dan Tempat
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Biokimia/Kimia  Bahan  Makanan      (KBM) Universitas Sumatera Utara dan Laboratorium  Biologi  FMIPA  Universitas Sumatera  Utara  Medan.  Penelitian  dilakukan selama 4 (empat) bulan Juni-September 2015.

## Rancangan Penelitian
Penelitian ini dilakukan dengan
rancangan    experimental  dengan  desain Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Mencit jantan ( Mus musculus L.) strain DD Webster dewasa, sebanyak 30 ekor, dengan menggunakan    rumus  perhitungan  yaitu:  (t- 1)(n-1)  ≥  15  (Federer,  1963).  Di  mana  t
adalah jumlah perlakuan (dalam penelitian ini ada  6  kelompok  perlakuan)  dan  n  adalah jumlah ulangan perkelompok, maka jumlah n yang  diharapkan  secara  teoritis  adalah  5, maka  jumlah  keseluruhan  hewan  coba  yang diperlukan  dalam  penelitian  ini  adalah  30 ekor  mencit  jantan  yang  dipilih  dari  hasil perbanyakan  untuk  keperluan  penelitian. Mencit  ditempatkan  ke  dalam  kelompok secara random.

## Alat Penelitian dan Bahan Penelitian Alat-alat
Alat  utama  yang  digunakan  dalam penelitian  antara  lain  :  jarum  oval  (gavage), spuit  1  ml,  bak  bedah  dan  dissecting  set, gelas  arloji,  cawan  petri,  batang  pengaduk,
radikal bebas (stres oksidatif) Peroksidasi lipid Hipotalamus Hipofisis FSH LH Fungsi Sel Sertoli Testosteron Fungsi Sel Leydig ABP Jumlah Sperma Radikal Bebas (Stres Oksidatif ) Peroksidasi lipid Hipotalamus Hipofisis FSH LH Fungsi Sel Sertoli Fungsi Sel Leydig ABP Testosteron Jumlah Sperma Vitamin E 0,25mg/hari/ekor Secara oral
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
kamar  hitung  Neubauer,  mikroskop  cahaya, objek glass, mikrotom, oven

## Bahan Penelitian
Hewan coba yang akan digunakan dalam penelitian  ini  adalah    mencit  jantan  ( Mus musculus L.) strain DD Webster dewasa sehat dan fertil yang berumur 8-11 minggu dengan berat  20-35  g.  Mencit  jantan  dewasa merupakan  hasil  pengembangan  hewan  yang diperoleh  dari  FMIPA  Biologi  Universitas Sumatera  Utara  Medan,  sebanyak  30  ekor mencit  jantan  dipilih  dari  hasil  perbanyakan untuk keperluan penelitian.

## Bahan Kimia
Larutan  fiksatif,  bouin,  parafin,  vitamin E  murni  (merck),  hematoxylin          Erlich  – Eosin (H-E).

## Air tuak atau nira aren
Air  tuak  didapat  dari  daerah  Pancurbatu dengan  cara  mengambil  air  nira  dari  pohon aren.  Ada  4  sampel  air  tuak  yang  diambil untuk  menentukan  kadar  alkoholnya  yaitu: nira  aren  asli,  nira  ditambah  raru  ( Rapistrum rugosum L.),  tuak  asli,  tuak  yang  siap dipasarkan,  masing–masing  2  liter  dan  air tuak  belum  bermalam.  Kemudian  dibawa  ke laboratorium  Biokimia/KBM  FMIPA  USU untuk ditentukan kadar alkohol yang dikandungnya.  Pada  penelitian  ini  yang digunakan  adalah  air  tuak  yang  siap  di pasarkan dengan kadar alkohol 20%.

## Variabel Penelitian
Variabel Independen 1.     Tuak (alkohol 20%) 2.    Vitamin E (Merck)

## Variabel Dependen
Jumlah sel sperma.

## Pelaksanaan Penelitian dan Pengamatan Pemeliharaan Hewan Percobaan
Mencit  ditempatkan  di  dalam  kandang yang  terbuat  dari  bahan  plastik  (ukuran 30x20x10  cm)  yang  ditutup  dengan  kawat kasa.  Dasar  kandang  dilapisi  dengan  sekam padi setebal 0,5-1 cm dan diganti setiap  tiga hari. Cahaya ruangan dikontrol persis 12 jam terang  (pukul  06.00  sampai  dengan  pukul
18.00) dan 12 jam gelap (pukul 18.00 sampai dengan pukul 06.00). Pakan (pelet komersial) dan  minuman  air  leiding  /aquadest  disuplai setiap hari.

## Etika Penggunaan
Pengunaan  dan  penanganan  hewan  di laboratorium  penelitian  dilakukan  dengan aturan  etika  penelitian  hewan.  Penelitian hewan  yang  diatur  dalam  Deklarasi  Helsinki untuk  memperoleh  ” ethical  clearance ”  dari komite  etika  dan  komite  ilmiah  penelitian FMIPA  Biologi  Universitas  Sumatera  Utara Medan.

## Pemberian Perlakuan
Penelitian  ini  terdiri  atas  6  kelompok perlakuan yaitu:
1 Kelompok  1  (K0)  =  kelompok  kontrol pertama  terdiri  dari  5  ekor  mencit dewasa  jantan            tanpa  perlakuan selama 30 hari.
2.    Kelompok 2 (P1) = Kelompok perlakuan pertama  terdiri  dari  5  ekor    mencit dewasa jantan    yang    diberi    tuak
(alkohol  20%)    0,5  ml/hari/ekor    secara oral    setiap        hari  selama    15  hari pertama    dan  15    hari    berikutnya pemberian  tuak  dihentikan   dan diganti dengan pemberian aquadest 0,5 ml.
3. Kelompok 3 (P2) = Kelompok perlakuan kedua  terdiri  5  ekor    mencit    dewasa yang  diberi  tuak  (alkohol  20%)  0,5 ml/hari/ekor secara oral selama 30 hari.
4. Kelompok 4 (P3) = Kelompok perlakuan    ketiga  terdiri  5  ekor  mencit dewasa  yang diberi tuak (alkohol 20%)  0,5 ml /hari/ekor   selama 15  hari  pertama  dan 15 hari berikutnya pemberian    tuak    dihentikan    diganti dengan    pemberian    vitamin  E  0,25 mg/hari/ekor/mencit secara oral. 5. Kelompok 5 (P4) = Kelompok
perlakuan    keempat    terdiri    5    ekor mencit      dewasa  yang    diberi  tuak (alkohol  20%)  0,5  ml/hari/ekor  selama 15  hari  pertama  dan  15  hari  berikutnya pemberian    tuak  dengan    pemberian vitamin E 0,25 mg/ekor/hari  secara oral.
6. Kelompok 6 (P5) = Kelompok perlakuan kelima terdiri dari 5 ekor mencit dewasa yang  diberi  tuak  (alkohol  20%)  0,5
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
ml/hari/ekor  dan  pemberian  vitamin  E 0,25 mg/ekor/hari  selama 30 hari secara oral.  Mencit  ditempatkan  ke  dalam kelompok secara random.
Tabel 1: Desain Perlakuan (Bagan Penelitian) K0 Tanpa perlakuan Tanpa perlakuan P1 Tuak (alkohol 20%) 0,5m Aquadest 0,5 ml P2 Tuak (alkohol 20%) 0,5ml Tuak  (alkohol  20%) 0,5 ml P3 Tuak (alkohol 20%) 0,5ml Vitamin E 0,25mg P4 Tuak (alkohol 20%) 0,5ml Tuak  (alkohol  20%) 0,5  ml  +  Vitamin  E 0,25mg P5 Tuak (alkohol 20%)  0,5  ml  + Vitamin E 0,25 mg Tuak  (alkohol  20%) 0,5 ml       + Vitamin E 0,25 mg 0 15 30 (hari) Keseluruhan  kegiatan  penelitian  dari persiapan sampai pada penulisan hasil adalah lebih kurang 3 bulan. Urutan kegiatan jadwal pelaksanaan secara lengkap dapat dilihat pada tabel berikut ini:
Tabel 3: Jadwal Penelitian
N o Kegiatan Bulan Juni Ju li Agustus Septemb er 1 Persiapan
2 Pelaksanaan
3 Analisa Data
4 Penulisan Hasil

## Prosedur Pemeriksaan dan Pengamatan
Setelah  perlakuan  selama  30  hari, masing-masing hewan percobaan
dikorbankan  dengan  cara  dislokasi  leher, selanjutnya  dibedah  dan  isolasi  testis. Kemudian  dilakukan  pengamatan  sebagai berikut:

## Pengamatan Jumlah Sperma
Pengamatan  jumlah  sperma  dilakukan menurut  Soehadi  dan  Arsad  (1983).  Setelah 30  hari  perlakuan,  masing-masing  hewan percobaan dikorbankan dengan cara dislokasi leher  dan  selanjutnya  dibedah.  Kemudian organ testis beserta epididimis sebelah kanan dan  kiri  diambil  dan  diletakkan  ke  dalam cawan petri yang berisi NaCl 0,9%. Suspensi sperma  yang  telah  diperoleh  terlebih  dahulu
dihomogenkan.
Selanjutnya diambil sebanyak 10µl, sampel dimasukkan ke dalam kotak-kotak hemositometer Improved Neubauer serta ditutup dengan kaca penutup. Dilihat  di  bawah  mikroskop  cahaya  dengan pembesaran 400 kali, hemositometer diletakkan  dan  dihitung  jumlah  sperma  pada kotak/bidang  A,  B,  C,  D  dan  E.  Hasil perhitungan jumlah sperma kemudian dimasukkan  ke  dalam  rumus  penentuan jumlah  sperma/mL  suspensi  sekresi  cauda epididimis sebagai berikut:
Jumlah sperma = N/2 x 10 5 spermatozoa/ml suspensi
N : jumlah sperma yang dihitung dalam kotak
Gambar  2: Kamar  Hitung  Improved Neubauer (Zanevald et al., 1986).

## Analisis Data dan Pengujian Hipotesis
Semua  data  dipresentasikan  dalam bentuk rata-rata ± simpangan baku (   ± SD). Dilakukan  uji  normalitas  dan  homogenitas, dari  hasil  penelitian  didapatkan  data  dengan distribusi  normal  dan  variansi  datanya  tidak homogen,  sehingga  dilakukan  uji  Kruskal Wallis.  Bila  terdapat  perbedaan  maka dilakukan  uji  lanjut  Mann  Witney  untuk melihat  perbedaan  masing–masing kelompok perlakuan yang ada.

## HASIL
Berdasarkan hasil penelitian dan kumpulan  data  yang  telah  dilakukan  selama penelitian,  maka  dapat  dibuat  beberapa gambar  grafik  histogram  dengan  parameter hasil pengukuran sebagai berikut:
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
Jumlah spermatozoa mencit (Mus musculus L.) Hasil pengukuran data jumlah spermatozoa  setiap  mencit  ditampilkan  pada lampiran  3.  Hasil  perhitungan  analisis  dari rata-rata  jumlah  spermatozoa  mencit  untuk semua  kelompok  perlakuan  dan  kontrol disajikan pada Tabel 2.
Tabel  2. Jumlah  Spermatozoa  (x10 6 )  Mencit ( Mus musculus L.)
Kelompok N Jumlah spermatozoa (     ± SD) (juta/mL) K 5 69,27±24,40 P1 5 2,87±3,90 P2 5 2,97±6,63 P3 5 4,20±5,35 P4 5 3,00±5,69 P5 5 19,30±17,20
Dari  hasil  tersebut  dapat  dibuat  grafik histogram  seperti  yang  tertera  pada  Gambar
3. Pada pengujian distribusi dan homogenitas data,  ternyata  data  tidak  normal  dan/atau homogen, sehingga harus dilakukan transformasi data. Data hasil uji transformasi diuji  kembali  distribusi  dan  homogenitas datanya,  tetapi  tetap  saja  datanya  tidak normal  dan/atau  tidak  homogen.  Maka  data tersebut  dianalisis  dengan  analisis  non- parametrik Kruskal-Wallis. Hasilnya,
perbedaan  jumlah  spermatozoa  mencit  pada kelompok yang berbeda adalah berbeda nyata (p<0,05) sehingga dilakukan uji lanjut Mann- Whitney.
Gambar  3. Grafik  Histogram  Jumlah Spermatozoa  (jt/mL)  Mencit  ( Mus  musculus L.)  setelah  diberikan  perlakuan  tuak  dan vitamin  E.  Keterangan;  Grafik  histogram pada  perlakuan  berbeda  yang  diikuti  oleh huruf  kecil  yang  sama,  berbeda  tidak  nyata
pada  taraf  uji  5%.  K=  Kontrol,  P1=  15  hari Tuak  &  15  hari  Aquades, P2=  30  hari  Tuak , P3= 15 hari Tuak & 15-30 hari Vit.E , P4= 30 hari  Tuak  &  15-30-  hari  Vit.E,  dan  P5=  30 hari  Tuak  &  30  hari  Vit.E.  ┬ = standar deviasi (SD).
Rerata jumlah spermatozoa paling tinggi pada  kelompok  kontrol  (K)  dan  kemudian menurun  pada  kelompok  perlakuan  (P1-  P4) berbeda tidak nyata dengan P5.
K P2 P3 P4 P5 P1 Spermatozoa Mencit ( Mus musculus L.)
Gambaran  Jumlah  Sel  Sperma  Mencit  ( Mus musculus L.) setelah diberikan perlakuan tuak dan vitamin E. Keterangan; K= Kontrol, P1= 15 hari Tuak & 15 hari Aquades, P2= 30 hari Tuak,  P3=  15  hari  Tuak  &  15-30  hari  Vit.E, P4=  30  hari  Tuak  &  15-30-  hari  Vit.E,  dan P5= 30 hari Tuak & 30 hari Vit.E.  ▬ = 40 μm.

## PEMBAHASAN
Jumlah spermatozoa mencit (Mus
musculus L.)
Adanya  pengaruh  (p<0,05)  pemberian tuak  baik  sendiri  atau  bersama  dengan vitamin E pada mencit selama 15 dan 30 hari dapat terlihat pada Gambar 8 di atas. Jumlah spermatozoa mencit yang tertinggi
didapatkan  pada  K  (69,27±24,4  juta/mL) yang  berbeda  nyata  dengan  P1,  (2,87±3,9 juta/mL),  P2  (2,97±6,63  juta/mL),  P3
(4,20±5,35 juta/mL), P4 (3,00±5,69 juta/mL), dan  P5  (19,30±17,2  juta/mL).  Hal  ini kemungkinan  karena  tidak  adanya  pengaruh tuak  atau  alkohol  pada  mencit  jantan, sehingga spermatogenesis berkembang secara normal  melalui  regulasi  poros  hipotalamus, hipofisis  dan  testis.  Hipotalamus  melepas Gonadotropin  Hormone  Releasing  Hormone (GnHRH)  dan  menstimulasi  hipofisis  untuk melepaskan hormon gonadotropin Luteinizing Hormone (LH)  dan Follicle  Stimulating Hormone (FSH). LH menginduksi sel Leydig
x
a b b b  b b x
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
untuk  menghasilkan  testosteron,  sedangkan FSH menginduksi sel Sertoli untuk menghasilkan Androgen  Binding  Protein (ABP) yang berguna untuk mengikat testosteron  intratestikular  yang  diperlukan untuk  spermatogenesis  (proses  pembentukan spermatozoa).  Bremner et  al., (1981)  telah didemonstrasikan  bahwa  LH  terikat  secara khusus  pada  sel  Leydig,  dimana  dia menstimulasi  akumulasi  siklik Adenosin Mono  Phospat (AMP)  dan  mengkonversi kolesterol  menjadi  pregnenolon,  kemudian akhirnya meningkatkan kandungan testosteron  yang  merupakan  produk  steroid mayor di testis. Kemudian Dym et al., (1979) menyatakan bahwa, FSH mengikat sel Sertoli dan spermatogonia dalam tubulus seminiferus.  Pengikatan  FSH  terhadap  sel Sertoli  diikuti  oleh  akumulasi  siklik  AMP, aktivasi protein kinase, dan produksi Androgen  Binding  Protein (ABP).  Bowen (1998),  hormon  hipotalamus  disebut  sebagai hormon  pelepas  ( releasing  hormone )  dan hormon  penghambat  ( inhibiting  hormone ), yang  refleksinya  terlihat  pada  pengaruhnya terhadap hormon hipofisis anterior. Selain itu kemungkinan karena adanya pengaruh vitamin E sebagai antioksidan bekerja dengan cara  mencegah  terjadinya  kerusakan  akibat radikal  bebas  dari  tuak.  Antioksidan  pada semen  dapat  mengendalikan  radikal  bebas, hal ini tentunya dapat melindungi sperma dari kerusakan akibat stress oksidatif (Agarwal et al , 2005).
Jumlah spermatozoa yang paling rendah didapatkan pada P1 (2,87±3,9 juta/mL), tidak berbeda nyata dengan P2 (2,97±6,63
juta/mL),  P3  (4,20±5,35  juta/mL),  P4 (3,00±5,69  juta/mL),  dan  P5  (19,30±17,2 juta/mL  tetapi  berbeda  nyata  dengan  K (69,27±24,4  juta/mL).  Hal  ini  kemungkinan karena  kandungan  alkohol  pada  tuak  yang diberikan pada mencit menyebabkan kegagalan  hipotalamus  dan  hipofisis  untuk mensekresikan  GnRH  dan  FSH,  (Wright,
1991; Rees, 2005) sehingga dapat menurunkan kadar LH pada testis,
menyebabkan sel Leydig mengurangi produksi testosterone intratestikularnya. Akibatnya  spermatogenesis  tertekan  dan akhirnya  mengurangi  hasil  spermatozoa  (Foa et  al .,  2006).  Seperti  pernyataan Maneesh et
al., (2005)  bahwa,  penyalahgunaan  alkohol dapat  merusak  fungsi  reproduksi  seperti menyebabkan  kelainan  kesuburan  antara  lain jumlah sperma rendah dan gangguan motilitas  sperma.  Menurut  Canteros et  al., (1995)  alkohol  menekan  reproduksi  mencit dengan  cara  mengahambat  LH.  Prinsip  aksi alkohol tersebut melalui penekanan pelepasan LHRH,  baik in  vivo dan in  vitro .  Sehingga LHRH  menekan  hipofisis  untuk  mengurangi hasil LH nya.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan penelitian  tentang  pemberian  vitamin  E  0,25 mg/hari  pada  mencit  yang  dipapari  tuak, dapat  disimpulkan  beberapa  hal  seperti  yang tercantum  di  bawah  ini  Vitamin  E  0,25 mg/hari/mencit  sejalan  dengan  pemaparan tuak selama 30 hari dapat melindungi sperma dari  kerusakan  akibat  stress  oksidatif  pada mencit.

## SARAN
Untuk  dapat  lebih  menjelaskan  hal-hal lain  yang  mendukung  dan  guna  aplikasi lanjut nantinya, maka disarankan:
a. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut tentang pengaruh vitamin E pada mencit yang   dipapari  tuak  terhadap  kandungan hormon  mencit  misalnya  FSH,  LH, ataupun testosteron.
b. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut akibat  tuak  dan  khasiat  vitamin  E  pada organ  yang  lain  serta  mekanisme proteksi vitamin E secara molekuler.

## DAFTAR PUSTAKA
Acharya,  U;  Mishra,  M;  Tripathy,  R.  dan Mishra, I. (2006). Testicular Dysfunction And  Antioxidative  Defense  System  Of Swiss Mice After Chromic Acid Exposure . Reprod Toxicol , 22: 87-91. Adler,  R.A.  (1992). Clinically  Important Effectsof  Alcohol  On    Endocrine Function . Journal of Clinical
Endrocrinology  and  Metabolism , 74: 957-960.
Agarwal,  A;  Prabakaran,  A;  Said,  T.M.
(2005). Oxidative Stress And Antioxidants  In  Male  Infertility  A
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
Difficult  Balance ,  Iranian  Journal  of Reproductive Medicine, 3(1): 1-8. Agarwal,  A;  Prabakaran,  A;  Said,  T.M.
(2005). Prevention  Of  Oxidative  Stress Injury  To  Sperm ,  Journal  of  Andrology, 26: 654-600.
Almaster, S. (2004). Prinsip Dasar Ilmu Gizi . Jakarta:  Gramedia  Pustaka  Utama.  Hal: 173-179.
Bowen,
R. (1998).
Overview of Hypothalamic  and  Pituitary  Hormones . http://www.vivo.colostate.edu/hbooks/pa thphys/endocrine/hypopit/overview.html . diakses tanggal 18 Desember 2010. Bremner, Wj; Alvin M; Matsumoto; Allen M. Sussman,  and  C.  Alvin  Paulsen.  (1981).
Follicle-Stimulating Hormone And Human Spermatogenesis , The Journal of Clinical Investigation, 68: 1044-1052.
Canteros,  G;  Valeria,  R;  Ana,  F;  Ana,  G;
Elisa,  C;  Alicia,  F;  Martha,  G;  And Samuel,  M.  M.  (1995). Ethanol  Inhibits Luteinizing Hormone-Releasing Hormone (LHRH) Secretion By Blocking The  Response  Of  Lhrh  Neuronal
Terminals  To  Nitric  Oxid . Proc.  Natl. Acad. Sci , 92: 3416-3420.
Chandrasoma,  P  dan  Taylor,  C.  R.  (2005).
Ringkasan  Patologi  Anatomi ,  EGC. Jakarta. Chen,  H;  June,  L , Lindi,  L;  Mirza,  U.  Baig; Jong-Min  Kim  and  Barry  R.  Zirkin. (2005). Vitamin  E,  Aging  And  Leydig Cell Steroidogenesis , 40: 728-736. Dym,  M;  H.G.  Madhwa  Raj;  Y.C.  Lin;  H.E.
Chemes;  N.J.  Kotite;  S.N.  Nayfeh,  and F.S. French. (1979). Is Fsh Required For Maintenance  Of  Spermatogenesis  In Adult  Rats . J.  Reprod.  Fert .  Suppl.  26:
175-181. Emanuele,  M.A  and  Emanuele,  N.V.  (1998).
Alcohol’s Effects On Male Reproduction , Alcohol  Health  and Research World. 22(3): 195-197. Fabio,  P.F;  Lucon,  A.M;  Sobreiro,  B.P; Pasqualotto,  E.B;  Arap,  S.  (2004). Effects  Of  Medical  Therapy,  Alcohol, Smoking,  And  Endrocine  Disruptors  On Male  Infertility . Rev.Hosp.  Clin.Fac. Med. S. Paulo , 59(6): 375-382.
Federer,  W.Y.  (1963). Experimental  design, theory and application, New York, Mac. Millan, p. 544. Fiore,  M.S.H.  (1986). Atlas  of    Human Histology . Edisi V. Jakarta: EGC. Fleming,  M;  S.J.  Mihic  dan  R.A.  Harris.
(2007). Etanol  Dasar  Farmakologi Terapi . Jakarta: EGC.
Foa,  A;  Ibo,  O;  Ilambra;  Ngadji,  C.  (2006).
Pengaruh  Pemberian  Etanol  Peroral Terhadap Gambaran Histologik Sel - Sel Spermatogenik  Dan  Sel  Leydig  Pada Testis Tikus Putih . Airlangga University. Ganong,  W.F.  (2008). Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran, Edisi  22.  Jakarta:  EGC. Hal: 441-449.
Gunawan,  S.G.  (2007). Farmakologi  dan Terapi , Edisi 5. Jakarta: FKUI. Hal: 786- 787.
Guzman-Marin, J; D.C. Mahan and J.L. Pate. (2000). Effect  Of  Dietary  Selenium  And Vitamin
E On Spermatogenic
Development  In  Boars .  Journal  of Animal Science, 78: 1537-1543. Halim,  A;  Eka,  A.  (2008). Pembuatan Bioethanol  Dari  Nira  Siwalan  Secara Fermentasi  Fese  Cair  Menggunakan Fermipan .  Jurusan  Teknik  Kimia,  Fak. Teknik, Universitas Diponegoro.
Huang,  H;  Appel,  L.J;  Crot,  K.D;  Miller, E.R;  Mori,  T.A.  and  Puddley,  I.B. (2002). Effects  Of  Vitamin  C  And  E  On In  Vivo  Lipid  Peroxidation:  Results  Of Randomized Controlled Trial . Am J Clin Nutr, 76: 549-555. Ikegami,  S.  (1997). Tuak  In  The  Batak Sosiety:  A  Preliminary  Report  On  The Socio-Cultur  Aspect  Of  Palm  Wine Consumption .  Annual  Report  of  the University  of  Shizuoka,  Hamamatsu College, 11-3.
Ilyas,  S.  (2004). The  Effect  Tuak  Water  To Histogical  Of  Several  Genitals  Aspects And  Non  Genitals  Aspects  Of  Male Mouse  (Mus  Musculus    L. Strain  DDW) And  Then  Condition  Of  Their  Fertility After Be Copulated , Fakultas
Metematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam- Sumatera Utara Medan.
Jensen,  T.K;  Hjollund,  H.I;  Henriksen,  T.B;
Scheike,  T;  Kolstad,  H;  Glwercman,  A;
Ernst,  E;  Bonde,  J.P;  Skakkebaek,  N.E;
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
Olsen, J. (1998). Does moderate alcohol Consumption  Affect  Fertility?  Follow Up Study Among Couples Planning First Pregnancy. BMJ , 317: 505-510. Junqueira, L.C. (2007). Histologi Dasar, Teks dan  Atlas ,  edisi  10,  EGC,  Jakarta.  Hal: 416-417.
Lay,  A;  Hutapea,  R.T.P;  Tuyuwale,  J;
Sondakh,  J.O;  Polakitan,  A.L.  (2004).
Pengembangan  Komoditas  Aren  Di Daerah  Minahasa  Sulawesi  Utara . Prosiding Seminar Nasional Pengembangan Tanaman Aren. Tondano. Lloyd,  C.W  dan  Williams,  R.H.  (1948).
Endocrine  Changes  Associated  With Laennec’s  Cirrhosis .  Annals  of  the American  Journal  of  Medicine , 4:  315- 330.
Maneesh,  M;  Jayalekshmi,  H;  Dutta,  S;
Chakrabarti, A; Vasudevan, D.M. (2005). Effect  Of  Chronic  Ethanol Administration On Testicular Antioxidant  System  And  Steroidogenic Enzyme Activity In Rats. Ind J Exp Bio, 43: 445-9. Masters,  S.B.  (2002). Alkohol .  Di  dalam Katzung,  B.G,  Editor: Farmakologi Dasar  dan  Klinik ,  Edisi  8.  Salemba Medika. Jakarta. Hal: 57-63. Mather,  J.P  ;  J.M.  Saez;  F,  Dray  and  F, Haour.  (1983). Vitamin  E  Prolongs Survival  And  Function  Of  Porcine Leydig Cells In Culture . Acta
Endocrinologica , 102(3): 470-475. Momeni;  Hamid,  R;    Mehranjan;    Malek,  S; Abnosi,  M.  H;  Mahmoodi;  Monireh. (2009). Effects  Of  Vitamin  E  On  Sperm Parameters and Reproductive Hormones in  Developing  Rats  Treated  With  Para-
Nonylphenol . Iranian Journal of
Reproductive Medicine , 7(3): 111-116. Nugroho,  C.A.  (2007). Pengaruh  Minuman Beralkohol  terhadap  Jumlah  Lapisan Sel . Panjaitan,  R.G.P.  (2003). Bahaya  Gagal Hamil  Yang  Diakibatkan  Minuman Beralkohol . Program Pasca Sarjana (S3),
Institut Pertanian Bogor. Rees,  T.J.  (1993). The  Toxicology  Of  Male
Reproduction.  Literature  Review  In
Applied Toxicology , MS Thesis
Portsmouth University.
Rugh, R. (1967 ). The Mouse  its Repoduction and Development. Minneapolis , Burgess Publishing Company, 1-23.
Sakr,  S.A;  Okdah,  Y.A;  El-Adly,  E.K. (2009). Effect  of  Ginger  (Zingiber Officinale) on Mancozeb   Fungicide Induced  Testicular.  Damage  in  Albino Rats. Australian  Journal  of  Basic  and Applied Sciences , 3(2): 1328-1333. Sheerwood,  L.  (2004). The  Reproductive System  in  Human  Phsiology  From  Cell To  System,  Fifth  Edition ,  California, Tomson Brook/cole, 757. Siregar,  J.H.  (2009). Pengaruh  Pemberian Vitamin  C  terhadap  Jumlah  Sel  Leydig dan  Jumlah  Sperma  Mencit  Jantan Dewasa  (Mus  Musculus,  L.)  yang
Dipapari
Monosodium Glutamate (MSG) ,  Program  Studi  Ilmu  Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan. Soehadi,  K;  Arsyad,  K.M.  (1983). Analisis Sperma, Airlangga  University  Press. Surabaya. Spermatogenik  dan  Berat Vesikula  Seminalis  Mencit ,  Program Studi  Biologi  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Widya Mandala Madiun.
Sudjadi  dan  Rohman,  A.  (2008). Analisis Kuantitatif  Obat .  Yogyakarta:  Gadjah Mada Universitas Press. Hal: 191-193. Sunanto.  (1993). Aren.    Budidaya  dan Multigunanya . Kanisius, Hal: 5-53. Suntoro,  S.H.  (1983). Metode  Pewarnaan (Histologi  dan  Histokimia) .  Jakarta: Bharatara Karya Aksara.
Van  Thiel,  D.H;  Gavaler,  J.S;  Cobb,  C.F; Santucci,  L;  Graham,  T.O.  (1983). Ethanol,  A  Leydig  Cell  Toxin:  Evidence Obtained  in  Vivo  and  in  Vitro. Pharmacol  Biochem  Behav. ;18  Suppl  1:
317-23.
Van  Thiel,  D.H;  Lester,  R;  dan  Sherins,  R.J. (1974). Hypogonadism  In  Alcoholic Liver  Disease:  Evidence  For  A  Double Defect , 67: 1188-1199.
Van Thiel, D.H; Lester, R; dan Vaitukaitis, J.
(1978). Evidence  For  A  Defect  In
Pituitary Secretion Of Luteinzing Hormon  In  Chroniuc  Alcoholic  Men .
Jurnal Ilmiah Keperawatan Imelda                                                             Vol. 3, No. 1, Maret 2017 http://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALKEPERAWATAN e-ISSN 2597-7172, p-ISSN 2442-8108
Journal  of  Clinical  Endocrinology  and Metabolism , 47: 499-507.
Wright,  H.I;  Gavelar,  J.S  dan  Van  Thiel,  D. (1991). Effects Of Alcohol On The Male Reproductive System . Yousef, M.I; Abdallah, G.A dan Kamel, K.I.
(2003). Effect  Of  Ascorbic  Acid  And
Vitamin  E  Supplementation  On  Semen Quality And Biochemical Parameters Of
Male Rabbits . Anim Reprod Sci , 76: 99- 111. Zaneveld,  P.  (1977). Technicques  Of  Human Andrology :  160.  Dalam:  Zaneveld  LJD, Fulgham, D.L. 1986. Short cource: Male reproduction/Andrology and non- hormonal  contraception. Chicago,  IL, 19.