Aktivitas Anti Mycobacterium tuberculosis Strain H37Rv  dan  MDR  ( Multi Drug Resistant ) dari Ekstrak Rimpang Curcuma mangga Val.
(Anti Mycobacterium  tuberculosis Activity  Strain  H37Rv  and  MDR  ( Multi  Drug Resistant ) from Curcuma mangga Val. Rhizome Extract)
Ritha Pratiwi 1* , Gemini Alam 2 , Herlina Rante 2 , Nasrum Massi 3
1 * Jurusan Farmasi,Fakultas Matemaika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Tadulako, Palu, Indonesia.
2 Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin, Makassar, Indonesia.
4 Jurusan Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Hasanuddin, Makassar, Indonesia. E-mail: rithapratiwi1286@gmail.com
Article Info:
Received: 10 Juli 2019
in revised form: 09 November 2019 Accepted: 20 Februari 2020 Available Online: 02 Maret 2020

## ABSTRACT
Tuberculosis  is  an  infectious  disease  caused  by  the  bacterium Mycobacterium  tuberculosis .  Empirically  the  plants  that  have  long  been used  in  medicine  are Curcuma  mangga rhizome,  which  shows pharmacological  activity  as  an  anti M.  tuberculosis drug .  The  objective  of the research is to determine the ability of n-hexane and methanol extracts of C.  mangga in  inhibiting  the  growth  of M.  tuberculosis Strain  H37Rv  and MDR . The  extraction  of C.  mangga rhizome  wasconducted  by  maceration methode using n- hexane and methanol as the solvents, respectively.  Both of extracts  were  made  in  1  mg/ml  and0,5  mg/mlconcentration,  then  tested  for anti M.  tuberculosis activity  usingMODS( Microscopic  Observation  Drug Suspectibility )  method.  Determination  of  anti M.  tuberculosis activity  was based  on  microscopic  observation  on M.  tuberculosis colony  in  cord formation. The results showed that n-hexane extract at a concentration of 1 mg/ml  and  0.5  mg/ml  had  inhibitory  activity  on  the  growth  of M. tuberculosis strain  H37Rv  and  MDR.  Whereas  methanol  extract  at  both concentrations did not have inhibitory activity against M. tuberculosis Strain H37Rv  and  MDR.  In  conclusion,  n-hexane  extract  of C.  mangga have  the ability to inhibit the growth of M. tuberculosis Strain H37Rv dan MDR.
Keywords : Curcuma mangga Mycobacterium tuberculosis MODS
Corresponding Author: Ritha Pratiwi Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam
Universitas Tadulako
Palu 90245 Indonesia email: rithapratiwi1286@gmail.com
Copyright © 2019 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Pratiwi,  R.,  Alam,  G.,  Rante,  H.,  Massi,  N.  (2020).  Aktivitas  Anti Mycobacterium tuberculosis Strain  H37Rv  dan  MDR ( Multi  Drug  Resistant )  dari  Ekstrak  Rimpang Curcuma  mangga Val. Jurnal  Farmasi  Galenika  :Galenika  Journal  of Pharmacy (e-Journal), 6 (1), 70-76. doi:10.22487/j24428744.2020.v6.i1.13102
Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) (e-Journal) 2020; 6 (1): 70 – 76 ISSN : 2442-8744 (electronic); 2442-7284 (printed) Journal Homepage: https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/Galenika DOI: 10.22487/j24428744.2020.v6.i1.13102

## ABSTRAK
Tuberculosis  adalah  penyakit  menular  yang  disebabkan  oleh  bakteri Mycobacterium  tuberculosis. Secara  empiris  tanaman  yangtelah  lama  digunakan  dalam  pengobatan  adalah  rimpang Curcuma mangga yang  menunjukkan aktivitas farmakologi yakni sebagai obat anti M. tuberculosis . Penelitian ini  bertujuan  untuk  menentukan  kemampuan  ekstrak  n-heksan  dan  metanol  dari  rimpang C.mangga terhadap aktivitas anti M. tuberculosis strain H37Rv dan MDR dengan metode MODS yang dimodifikasi.  Ekstraksi  rimpang C.  mangga dilakukan  dengan  metode  maserasi  dengan  pelarut  n- heksan  dan  metanol  secara  berturut-turut.  Kedua  ekstrak  dibuat  dalam  konsentrasi  1  mg/ml  dan  0,5 mg/ml,  lalu  diuji  aktivitas  anti M.  tuberculosis dengan  menggunakan  metode  MODS  ( Microscopic Observation  Drug  Susceptibility ).  Penentuan  aktivitas  anti M.  tuberculosis berdasarkan  pengamatan mikroskopik koloni M. tuberculosis dalam bentuk formasi cord. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak n-heksan pada konsentrasi 1 mg/ml dan 0,5 mg/ml memiliki aktivitas penghambatan terhadap pertumbuhan M.  tuberculosis Strain  H37Rv  dan  MDR.  Sedangkan  ekstrak  metanol  pada  kedua konsentrasi  tidak  memiliki  aktivitas  penghambatan  terhadap M.  tuberculosis Strain  H37Rv  dan MDR . Sebagai  kesimpulan  bahwa  ekstrak  n-heksan C.  mangga memiliki  aktivitas  penghambatan terhadap pertumbuhan M. tuberculosis Strain H37Rv dan MDR
Kata kunci : Curcuma  mangga , Mycobacterium tuberculosis, MODS

## PENDAHULUAN
Penyakit Tuberculosis (TBC)  merupakan  masalah  yang  serius  bagi dunia,  karena  menjadi  penyebab kematian  terbanyak  dibanding  dengan penyakit  infeksi  lain.  (Depkes  RI,  2008).  TBC  merupakan penyakit menular langsung yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) yang sebagian  besar  (80%)  menyerang  paru-paru. M.  tuberculosis termasuk  basil  gram  positif,  berbentuk batang, dinding selnya mengandung kompleks lipida glikolipida serta lilin (wax) yang sulit ditembus oleh zat kimia (Depkes RI, 2005).
Peningkatan prevalensi infeksi Mycobacterium tuberculosis resistan terhadap obat merupakan keadaan darurat kesehatan masyarakat global. Pada waktu tertentu, sekitar 630.000 orang di dunia diperkirakan membawa strain M. tuberculosis yang menunjukkan resistensi terhadap dua obat yang saat ini paling efektif  melawan  tuberkulosis  (TB)  yaitu:  isoniazid  dan  rifampicin  (WHO,  2012).  Oleh  kerena  itu, dibutuhkan senyawa aktif anti TBC baru yang lebih efektif  dan mudah diperoleh.
Tanaman  yang  secara  tradisional  sering  digunakan  untuk  tujuan  pengobatan  adalah  dari  genus Curcuma.Curcumabanyak  dimanfaatkan  sebagai  antimikroba  karena  kandungan  senyawa  aktifnya mampu  mencegah  pertumbuhan  mikroba  (Adila et  al., 2013).  Rimpang Curcuma  mangga menunjukkan berbagai aktivitas farmakologi seperti : antioksidan, aktivitas penangkapan ( scavanging ) radikal  dan  aktivitas  kemopreventif  (pencegah  kanker).  Selain  itu,  ekstrak  etanol  dan  senyawa  aktif yang telah berhasil diisolasi dari C. mangga adalah labdane diterpen glikosida, menunjukan aktivitas sitotoksis terhadap beberapa sel line kanker, seperti MCF7, Hep G2 dan T47D (Yuandani, 2011).
Penelitian yang dilakukan oleh Raihan (2013), tentang skrining aktivitas  antibakteri ekstrak rimpang C.  mangga terhadap M.  tuberculosis dengan  medium  LJ  ( Lowenstein-Jensen )  yang  menunjukkan bahwa  ekstrak  heksan  dan  etanol  70%  dari  rimpang C.  mangga pada  konsentrasi  0,2%  bersifat bakteriostatik terhadap pertumbuhan M. tuberculosis. Singh et al (2010), melakukan penelitian tentang isolasi  senyawa  aktif  dari  ekstrak  kloroform  rimpang C.  mangga dan  berhasil  mengisolasi  satu senyawa  aktifyaitu  Labdan  diterpen  dialdehyde.  Dari  hasil  uji  BATEC-460  dengan  menggunakan medium  LJ  ( Lowenstein-Jensen )  menunjukkan  aktivitas  anti  TBC  dengan  nilai  MIC  500  µg/ml terhadap M. tubercolosis Strain H37Rv.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Abbas  (2005),  diketahui  bahwa C.  mangga mempunyai  11  senyawa yaitu campuran stigmaterol dan β sitoserol, demetoksikurkumin, bismetoksikurkumin, zerumin B, 1,17 bis(4 hidroksifenil) 1,4,6 heptatrien 3 on, 7 hidroksi metoksikaumarin, kurkumin, curcumang-gosida, Labda 8(17),12 diene,15,16-dial, asam-4 hidroksisinamik, dan calcalatarin A.
Dari  uraian  latar  belakang  diatas  maka  penulis  bertujuan  melakukan  penelitian    untuk  menentukan kemampuan  ekstrak  n-heksan  dan  metanol  dari  rimpang C.  mangga terhadap  aktivitas  anti M. tuberculosis strain H37Rv dan MDR dengan metode MODS yang dimodifikasi.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang  digunakan  adalah  seperangkat  alat  maserasi,  batang  pengaduk,  alat-alat  gelas (pyrex®),  oven  (Fisher®), biosafety  cabinet  II (Thermo®) , mikropipet  (Socorex®),  pinset,  spoit (OneMed®), incubator (Memmert®), magnetik stirrer, lampu UV 254 dan 366 nm, rotary evaporator, timbangan analitik (Sartorius®), pipet tetes dan  spatula.
Bahan yang  digunakan  adalah  rimpang C.  mangga , plat KLT  silika  gel  G60  F254  (Merk®),  kertas saring, DMSO, medium Middlebrook 7H9 Broth (Bactec®), PANTA® (Bactec®), OADC Enrichment (Bactec®),  metanol,  n-heksan,  etil  asetat,  aquadest,  pereaksi  H2S04,  dan  Koloni Mycobacterium tuberculosis Strain H37Rv dan MDR .

## Metode
Sampel rimpang C. mangga diperoleh dari kota padang, Sumatera Utara. Ekstrak C. mangga diperoleh dengan  mengekstraksi C. mangga menggunakan  pelarut  n-heksan  dan  metanol  secara  berturut- turut.Ekstrak kental yang diperoleh kemudian dilarutkan kedalam DMSO kemudian diuji aktivitas anti M.tuberculosis dengan metode MODS ( Microscopic Observation Drug Susceptibility ).
M.tuberculosis Strain  H37Rv  dan  MDR  diperoleh  dari  koleksi  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran  Universitas  Hasanuddin.  Semua  kultur  ditumbuhkan  pada  media  cair  Middlebrook  7H9 dengan kompleks asam oleat-bovine serum albumin dextrose catalase (OADC) pada suhu 37°C, dan diagitasi  kuat  sekali  sehari  selama  2  minggu.  Untuk  inokulum  dibuat  suspensi M.tuberculosis dalam larutan PBS ( Phosphate Buffer Solution ) pada turbiditas Standar No. 0.5 McFarland.
Pengujian aktivitas anti M.tuberculosis dilakukan dengan  metode MODS ( Microscopic Observation Drug Susceptibility ) sesuai metode Anita et al., (2014), yang dimodifikasi. Media MODS dipersiapkan dalam well  plate dengan  24  sumur.  Tiap  sumur  mengandung  950  µl    inokulum M.tuberculosis, Middlebrook  7H9,  kompleks  asam  oleat-bovine  serum  albumin  dextrose  catalase  (OADC),  dan antibiotik  PANTA  (kompleks  polymyxin,  amphotericin  B,  nalidixic  acid,  trimethoprim,  and azlocillin). Setiap 50 µl stok dari masing-masing ekstrak (ekstrak n-heksan dan metanol) ditambahkan ke  dalam  sumur  untuk  mendapatkan  konsentrasi  akhir  ekstrak  sebesar  1mg/ml  dan  0,5  mg/ml  dan sebagai kontrol negatif digunakan DMSO. Sumur yang tidak terisi sampel digunakan sebagai  kontrol pertumbuhan  (kultur)  yang  hanya  berisi  media  dan  bakteri.  Pengamatan  dilakukan  dengan mengunakan inverted light microscope pada pembesaran 10x setiap hari dari hari ke-7 sampai ke-14. Pertumbuhan M.tuberculosis diidentifikasi berdasarkan bentuk penampakan formasi cord (Gambar 1).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  menggunakan  sampel  rimpang Curcuma  mangga yang  terlebih  dahulu  diolah  menjadi simplisia  untuk  memudahkan  proses  penyarian  senyawa  kimia  yang  mempunyai  aktivitas  anti Mycobacterium tuberculosis .
Ekstraksi  sampel  rimpang C.  mangga dilakukan  secara  maserasi.  Dimana  maserasi  merupakan metode  ekstraksi  yang  sederhana  dengan  cara  merendam  simplisia  kedalam  pelarut  organik  yang sesuai  dan  merupakan  metode  ekstraksi  dingin  yang  relatif  aman  untuk  senyawa  kimia  yang  tidak stabil  pada  pemanasan.  Rimpang C.  mangga dimaserasi  bertingkat  dengan  cairan  penyari  berturut- turut n-heksan dan metanol.Cairan penyari n-heksan ditujukan untuk menyari senyawa-senyawa yang bersifat nonpolar sedangkan metanol ditujukan untuk senyawa-senyawa yang lebih polar.Ampas dari sisa  maserasi  n-heksan  kemudian  dilarutkan  kembali  dengan  pelarut  metanol  kemudian  disaring  dan uapkan dengan rotary evaporator sampai diperoleh ekstrak kental metanol.Bobot ekstrak kental dan % rendamen dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.Hasil Maserasi Rimpang C. mangga
Ekstrak Bobot (g) Rendamen (%) n-heksan 258,78 6,46 Methanol 56,93 1,42
Hasil  pengujian  aktivitas  anti M.tuberculosis diperoleh  bahwa  ekstrak  n-heksan  pada  konsentrasi  1 mg/ml  dan  0,5  mg/ml  dapat  menghambat  pertumbuhan M.  tuberculosis Strain  H37Rv  dan  MDR, sedangkan  ekstrak  metanol  pada  kedua  konsentrasi  tersebut  tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan dari M. tuberculosis strain H37Rv dan MDR. Hasil pengujian aktivitas anti M.tuberculosis dari ekstrak rimpang C.mangga dapat dilihat pada Tabel 2.
Pada  penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa  ekstrak  n-heksan  kulit  batang  cempaka  kuning memiliki  aktivitas  antituberculosis  pada  konsentrasi  10  dan  100  mg/ml  (Yanti,  2013).  Ekstrak  kulit batang Spondias  pinnata juga  menunjukkan  aktivitas  terhadap  M.  tuberculosis  strain  MDR  pada konsentrasi 100 mg/ml (Anggreni, 2013). Sedangkan pada penelitian yang dilakukan oleh Hiremath & Kaliwal  (2013),  dimana  aktivitas  rimpang Curcuma  pseudomontana J.  Graham  menunjukkan  bahwa ekstrak  n-heksan  dan  metanol  dapat  menghambat  aktivitas M.  tuberculosis strain  H37Rvpada konsentrasi  50  mg/ml.  Penelitian  yang  dilakukan  Yusran et  al., (2016)  melaporkan  bahwa  daun pegagan  mampu  mengambat  pertumbuhan  bakteri mycobacterium  tuberculosis dan  penghambatan optimum  ekstrak  metanol  daun  pegagan  terjadi  pada  konsentrasi  80%  dan  100%  b/v.  Dari  beberapa hasil  penelitian,  ada  beberapa  faktor  yang  bisa  menyebabkan  ekstrak  metanol  rimpang C.  mangga tidak  menunjukkan  adanya  aktivitas  antituberculosis  yakni  konsentrasi  ekstrak  yang  kecil  dan mengakibatkan jumlah kadar senyawa  tidak optimal dalam  menghambat M. tuberculosis .
Pengujian  aktivitas  anti M.  tuberculosis dari  ekstrak  n-heksan  dan  metanol  1  mg/ml  dan  0,5  mg/ml dengan  menggunakan  metode  MODS  ( mycobacterial  observation  drug  susceptibility )  dimulai  pada hari  ke-7  untuk  menentukan  ekstrak  yang  paling  aktif.  Pada  sebuah  artikel  penelitian  menerangkan bahwa  kultur  mycobacterial  observation  drug  susceptibility  (MODS)  adalah  modifikasi  medium  cair yang  menggabungkan  teknik  identifikasi  bakteri M.  tuberculosis dengan  drug  susceptibility  testing (DST).  MODS  memiliki  sensitivitas  lebih  tinggi  dibanding  dengan  medium  solid,  mencapai  65% dengan spesifisitas 98–100% dan membutuhkan waktu yang cenderung lebih singkat sekitar 6 hari – 4 minggu untuk memberikan hasil.
Tabel 2. Hasil uji aktivitas anti M.tuberculosis ekstrak rimpang C. mangga dengan metode MODS
Sampel Ekstrak (mg/ml) Replikasi Mycobacterim tuberculosis H37Rv a MDR b n-Heksan 1 1 - - 2 - - 3 - - 0,5 1 - - 2 - - 3 - - Metanol 1 1 + - 2 + - 3 - - 0,5 1 - + 2 - - 3 + - Kontrol negatif (DMSO) 1 + + 2 + + 3 + - Kontrol positif ( M. tuberculosis) 1 + + 2 + + 3 + +
Keterangan : + = Ada pertumbuhan M.tuberculosis
-  = Tidak ada pertumbuhan M.tuberculosis a =  Pengamatan pada hari ke-10 b = Pengamatan pada hari ke-14
Pengamatan  pada  hari  ke-7,  semua  perlakuan  tidak  memperlihatkan pertumbuhan M.tuberculosis kecuali  kultur . Pengamatan  hari  ke-10  memperlihatkan  pertumbuhan M.  tuberculosis pada  kontrol negatif (DMSO) dan pada ekstrak metanol konsentrasi 0,5 mg/ml. Begitu pula pada pengamatan hari ke-14  memperlihatkan  pertumbuhan M.  tuberculosis pada  ekstrak  metanol  konsentrasi  0,5  mg/ml. Hasil  pengujian  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  n-heksan  adalah  ekstrak  yang  aktif  dalam menghambat pertumbuhan M. tuberculosis Strain H37Rv.
Dari hasil skrining fitokimia yang dilakukan oleh Habibi (2017) bahwa ekstrak n-heksan kortex batang salam positif mengandung  steroid, terpenoid dan triterpenoid. Dari fraksi n-heksan umbi bidara upas juga  dilaporkan  positif  mengandung  senyawa  terpenoid  (Setyara,  2016).  Riyanto et  al., (2013) menyatakan  bahwa  senyawa  triterpenoid  yang  dijumpai  pada  tumbuhan  berfungsi  sebagai  pelindung untuk menolak serangga dan serangan mikroba. Hasil review jurnal Cantrell et al., (2001) melaporkan bahwa terpenoid merupakan senyawa yang memiliki aktivitas anti M. tuberculosis . Berbagai senyawa terpenoid  tanaman  dari  berbagai  kelas  telah  dievaluasi  untuk  aktivitas  antimikobakterinya  secara  in vitro.
Hasil  pengujian  aktivitas  anti M.tuberculosis strain  H37Rv  dan  MDR  memperlihatkan  waktu pertumbuhan  yang  berbeda.Pertumbuhan  pada M. tuberculosis H37Rv  lebih  cepat  jika  dibandingkan dengan MDR. Salah satu faktor yang menyebabkan hal tersebut adalah M.tuberculosis strain H37Rv
merupakan bakteri kultur sehingga memiliki adaptasi yang baik pada media jika dibandingkan MDR yang merupakan isolat yang didapatkan dari sputum pasien TB.
Gambar1. Bentuk formasi cord M.tuberculosis pada pembesaran 10x menggunakan inverted light microscope

## KESIMPULAN
Ekstrak  n-heksan  rimpang Curcuma  mangga Val  pada  konsentrasi  0,5  mg/ml  memiliki  aktivitas penghambatan terhadap pertumbuhan M. tuberculosis Strain H37Rv dan MDR.

## DAFTAR PUSTAKA
Abbas, F. (2005). Phytochemical  and Biologycal Activity Studies of Cosmos Caudatus and Curcuma Mangga  and  the  Online  Caracterization  of  Bioactive  Fractions  from  Melicope  Ptelefolia . (Disertation). University Putra Malaysia, Malaysia.
Adila, R., Nurmita., & Anthoni, A. (2013). Uji Antimikroba Curcuma spp terhadap pertumbuhan C. albicans , S. aureus dan E. coli . Jurnal Biologi Universitas Andalas, 2 (1).
Anggreni, M., Ariantari, N. P., Dwija, I. B. N. P. (2013). Aktivitas Antituberculosis Ekstrak n-Heksan Kulit Batang Spondias pinnata terhadap isolate Mycobacterium tuberculosis Strain Multi Drug Resistant. Jurnal Farmasi Udayana, 2 (3), 28.
Anita.,  Tangke,  S.  S.,  Ladju,  R.  B.,  &  Massi,  N.  (2014).  Evaluation  of  the  Microscopic  observation Drug  Susceptibility  Assay  Drugs  Concentration  for  Detection  of  Multidrug-Resistant Tuberculosis. Journal  International  Journal  of  Medical,  Health,  Pharmaceutical  and Biomedical Engineering, 8 (5), 257-260.
Cantrell,  C.  L.,  Franzblau, S.  G.,  Fischer,  N.  H.  (2001).  Antimycobacterial  Plant Terpenoids. Planta medica, 67 . 685-94. 10.1055/s-2001-18365.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2005). Pharmaceutical  Care  Untuk  Penyakit Tuberkulosis . Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (2008). Pedoman Nasional Penanggulangan Tuberkulosis Edisi 2 . Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Habibi,  A.  I.  (2017). Skrining  Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-Heksan Korteks Batang Salam  (Syzygium  polyanthum) (Unpublished  undergraduate  Thesis),  Universitas  Islam  Negeri Walisongo. Indonesia.
Habibi,  A.  I.  (2017). Skrining  Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-Heksan Korteks Batang Salam  (Syzygium  polyanthum) .  (Unpublished  undergraduate  thesis),  Universitas  Islam  Negeri Walisongo, Indonesia.
Hiremath,  G.  B.,  Kaliwal,  B.  B.,  (2013).  Anti-tubercular  activity  of  the  rhizome  of Curcuma pseudomentana J.  Graham. International  Journal  of  Pharmaceuticals  and  Health  Care Research, 1 (04). 178.
Raihan, M. (2013). Skrining Aktivitas Antibakteri Ekstrak Rimpang Temu Mangga (Curcuma mangga Val.)  terhadap  Mycobacterium  tubercolosis (Unpublished  undergraduate  thesis) , Universitas Hasanuddin, Indonesia.
Riyanto,  E.  I.,  Widowati,  I.,  &  Sabdono,  A.  (2013).  Skrining  aktivitas  antibakteri  pada  ekstrak Sargasum polycystum terhadap bakteri Vibrio harveyi dan Micrococcus luteus di Pulau Panjang Jepara. Journal of Marine Research, 1 (1):115- 121.
Setyara,  M.  (2016) Uji  Sitotoksik  Ekstrak  Etanol  dan  Fraksi  N-Heksana  Umbi  Bidara  Upas (Merremia  mammosa  (Lour.)  Haller  f.)  Terhadap  Sel  Kanker  Payudara  T47D. (Unpublished undergraduate thesis), Universitas Setia Budi Surakarta, Indonesia.
Singh, S., Kumar, J. K., Saikia, D., Shanker, K., Thakur, J. P., Negi, A. S., & Banerjee, S. (2010). A bioactive  labdane  diterpenoid  from  Curcuma  amada  and  its  semisynthetic  analogues  as antitubercular agents. European journal of medicinal chemistry , 45 (9), 4379-4382.
World Health Organization. (2012). Global tuberculosis control . Geneva
Yanti, P. E. W, Ariantari, N. P., Dwija, I. B. N. P (2013). Aktivitas Antituberculosis Ekstrak n-Heksan Kulit  Batang  Cempaka  Kuning  terhadap Mycobacterium  tuberculosis Strain  Multi  Drug Resistant. Jurnal Farmasi Udayana, 2 (3), 77.
Yuandani.  (2011).  Uji  Aktivitas  Antikanker  (Preventif  dan  Kuratif)  Ekstrak  Etanol  Temu  Mangga ( Curcuma  Mangga Val.)  Pada  Mencit  yang  Diinduksi  Siklofosfamid. Majalah  Kesehatan Pharma Medika , 3(2), 1.
Yusran, Ilyas, A., Saleh, H. A. (2016). Bioaktivitas Ekstrak Metanol Daun Pegagan ( Centella Asiatica L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Mycobacterium Tuberculosis . Jurnal Al-Kimia. 4 (1), 60.