## Kombinasi Suplementasi Omega 3 dengan Restriksi Kalori Terhadap Penyembuhan Luka Bakar Tikus Sprague Dawley
Kajian Pada VEGF dan Re-Epitelisasi
1 1 2
Doglas Rama Bayu Ardha , Edi Dharmana , Erik Prabowo
Latar  belakang  : Cedera  sel  yang  luas  pada  luka  bakar  melepaskan  banyak  mediator inflamasi.  Respon  tubuh  yang  berlebihan  pada  keadaan  tersebut  akan  memperberat kerusakan sel yang sudah terjadi. Nurtrisi (lemak) yang cukup seperti omega 3 dapat membantu proses penyembuhan luka serta mencegah infeksi pada luka supaya tidak menjadi luka kronis. Maka dari itu peneliti memilih judul penelitian tentang efektifitas kombinasi suplementasi omega 3 dengan restriksi kalori terhadap penyembuhan luka bakar  pada  tikus Sprague  Dawley ,  ditinjau dari  VEGF  dan  Re-epitelisasi. Untuk mengetahui  tingkat  efektifitas  suplementasi Omega 3  dan  retriksi  kalori  pada penyembuhan luka bakar.
Metode  : Peneliti  dalam  melakukan  penelitian  menggunakan  metode  penelitian eksperimental dengan menggunakan 1 kelas kontrol dan 3 kelas perlakuan tikus Sprague Dawley ,  yang  diinduksi  luka  bakar  kemudian  diberi  perlakuan,  dan  diamati  secara berkala.
Hasil : Didapatkan perbedaan yang signifikan antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan yang diuji dengan one way ANOVA mempunyai nilai p = 0,000 ( p <0,05), dan uji Mann-Whitney didapatkan perbedaan yang signifikan antara kelompok perlakuan 1, 2, 3, dan kelompok kontrol p = 0,025; 0,004; 0,004; 0,004; 0,004, nilai p <0,05. Dan uji Games- Howell ditunjukkan pada kolom rerata ± SD jika memuat huruf yang  berbeda berarti ada perbedaan yang bermakna ( p-value <0.05) K1 = 23,3587a ± 0,57556; P1 = 17,1015b ± 2,60108; P2 = 124,1503c ± 15,30168; P3 = 237,5053d ± 0,78263. Simpulan  : Kombinasi  suplementasi  omega  3  dengan  retriksi  kalori  berpengaruh signifikan terhadap penyembuhan luka bakar pada tikus Sprague Dawley .
Kata kunci : Penyembuhan Luka bakar, Sprague Dawley, Omega 3, Retriksi Kalori
1 Program Studi Magister Biomedik, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro
2 KSM Bedah RSUP Dr. Kariadi Semarang Abstrak
Original Article
Med Hosp 2020; vol 7 (2) : 432–438
p-ISSN: 2301-4369 e-ISSN: 2685-7898 https: //doi.org/10.36408/mhjcm.v7i2.517
Diajukan: 26 Februari 2020 Diterima: 08 Juli 2020
Afiliasi Penulis: Program Studi Magister Biomedik, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro
Korespondensi Penulis: Doglas Rama Bayu Ardha Jl. Prof. Soedarto Tembalang, Kec. Tembalang, Kota Semarang, Jawa Tengah 50275
E-mail: doglasramabayuardha@gmail.com
Background : Extensive cell injury to burns releases inflammatory mediators. It's led to excessive body response and cause aggravate cell damage that has already occurred. Adequate nutrients (fat) like omega 3 can help the healing process and prevent infection in wounds to become chronic. Therefore the researchers chose the title of the study of the effectiveness combination omega-3 supplementation with calorie restriction for burns in Sprague Dawley rats, in terms of VEGF and Re-epithelialization. To determine the effectiveness of Omega 3 supplementation and calorie restriction when healing burns.
Methods : The researchers using experimental research methods with 1 control and 3 training classes of Sprague Dawley mice, which were induced by burns were then observed periodically.
Results : The results showed a significant difference between the control group and the treatment group tested by one way ANOVA having a value of p = 0.000 ( p <0.05), and the Mann-Whitney test found a significant difference between the treatment groups 1, 2, 3, and the control group p = 0.025; 0.004; 0.004; 0.004; 0.004, p value <0.05. And the Games-Howell test is shown in the mean column ± SD if it contains different letters it means there is a significant difference ( p -value <0.05) K1 = 23.3587a ± 0.57556; P1 = 17.1015b ± 2.60108; P2 = 124,1503c ± 15.30168; P3 = 237.5053 d ± 0.78263.
Conclusion : The researchers concluded that the combination of omega-3 supplementation with calorie retention had a significant effect on burn healing in Sprague Dawley rats.
Keywords : Burn Healing, Sprague Dawley, Omega 3, Calorie Restriction

## Abstract

## The combination of omega-3 suplementation and calorie restriction in burn wound healing in Sprague Dawley mouse : A study on VEGF and re-ephitalization

## PENDAHULUAN
Cedera sel yang luas pada luka bakar akan melepaskan banyak  mediator  inflamasi.  Respon  tubuh  yang berlebihan  pada  keadaan  tersebut  akan  memperberat kerusakan  sel  yang  sudah  terjadi  dan  dapat
2 menyebabkan  luka  kronis.   Hal  tersebut  tentunya berpengaruh  terhadap  produktiftas  pasien  dan  lama waktu  rawatan  yang  berdampak  pada  meningkatnya
1–3 biaya  pemeliharan  kesehatan.   Data  dari US  Wound Registry di Amerika serikat pada tahun 2012 menunjukan bahwa prevalensi luka kronis pada seluruh populasi di Amerika  Serikat  cukup  rendah  yaitu  2%,  namun anggaran  biaya  yang  dihabiskan  setiap  tahun  untuk perawatan  dan  pengobatan  lebih  tinggi  jika dibandingkan  dengan  penyakit  lainnya.  Sedangkan  di Indonesia  prevalensi  luka  bakar  yang  berujung  pada 4,5,15 kematian terdapat 250 kasus yang dilaporkan. Maka dari itu upaya untuk mencegah suatu luka bakar menjadi
1 luka kronis sangat penting.  Proses penyembuhan luka sendiri dipengaruhi beberapa faktor salah satunya nutrisi atau  sering  disebut  imunonutrisi,  yang  didefinisikan sebagai nutrisi spesifik untuk memodulasi sistem imun
7 pada  saat  terjadi  proses  cedera.   Selain  itu  beberapa penelitian  menyimpulkan  bahwa  pembatasan  asupan kalori  (kalori  restriksi)  juga  mempercepat  proses penyembuhan  luka,  karena  ekpresi  gen  stres  oksidatif dan  stres  amelioratif  tingkat  seluler  saat  terjadi  cedera jaringan  dapat  ditekan  sehingga  meningkatkan 7 kemampuan  regenerasi  sel  pasca  cedera.   Pada  saat mengalami cedera yang serius sumber utama energi yang dipakai  oleh  tubuh  adalah  lemak,  salah  satunya  ialah Omega-3.  Beberapa  penelitian  menunjukan  bahwa
pemberian  Omega-3  dengan  dosis  tinggi  352 mg/kg/hari  dan  Restriksi  kalori  memiliki  pangaruh
7,8 terhadap  proses  penyembuhan  luka.   Perbedaan  hasil penelitian  tersebut  mendorong  peneliti  melakukan penelitian  eksperimental  pada  hewan  coba  tikus  galur Spraguey Dawley untuk menilai efektivitas imunonutrisi omega-3  dan  kalori  restriksi  yang  dilakukan  sesudah perlakuan  luka  bakar  terhadap  proses  penyembuhan luka ditinjau melihat VEGF dan reepitelisasi.
Hipotesis  penelitian  ini  adalah  kombinasi suplementasi  Omega  3  dan  restriksi  kalori  dapat mempercepat  penyembuhan  luka  bakar  pada  tikus Sprague  Dawley di  tinjau  dari  peningkatan  VEGF  dan reepitelisasi.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  suplementasi omega-3  dan  restriksi  kalori  terhadap  penyembuhan luka bakar pada tikus Sprague Dawley ditinjau dari VEGF dan Re-epitelisasi. Dengan harapan dapat menurunkan lama  perawatan  dengan  mempercepat  proses penyembuhan luka.

## METODE PENELITIAN
Peneliti menggunakan metode penelitian eksperimental dengan 1 kelompok kontrol dan 3 kelompok perlakuan. Masing-masing  kelompok  terdiri  dari  6  tikus Sprague Dawley sesuai  dengan  kriteria  besaran  sampel  WHO. Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  harus memenuhi kriteria inklusi : Tikus Sprague Dawley jantan dan  sehat  berusia  rata-rata  12  minggu  dengan  berat badan  200–250  gram.  Sedangkan  tikus  yang  mati  saat perlakuan,  memiliki  abnormalitas  anatomis,  dan menunjukan perubahan perilaku selama masa penelitian
akan dimasukkan dalam kriteria sampel yang dieksklusi. Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Penelitian Hewan  Bagian  Biokimia  Biomolekuler  Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang dan diamati di  Departemen  Patologi  Anatomi,  FK  Universitas Brawijaya  Malang  selama  satu  bulan  sejak  Oktober 2019 – November 2019.
Tikus yang telah memenuhi kriteria inklusi akan diaklimatisasi dan induksi luka bakar, kemudian dibagi ke dalam 4 kelompok secara acak. Kelompok 1 diberikan diet ad libitum selama 14 hari, kelompok 2: diberikan diet restriksi  kalori  selama  14  hari,  kelompok  3:  diberikan suplementasi  omega  3  selama  14  hari,  kelompok  4: diberikan suplementasi omega 3 serta diet restriksi kalori selama 14 hari. Masing-masing kelompok terdiri dari 6 tikus. Kemudian diamati secara makroskopis pada hari ke  5,7,10,  14.  Makroskopis  pada  hari  ke  21  pada  fase poliferasi untuk mengukur proses reepitalisasi luka.
Variabel  pada  penelitian  ini  terdiri  dari  variabel bebas  yaitu  pemberian  suplementasi  omega  3  dan pemberian  restriksi  kalori,  dan  variabel  tergantungnya yaitu  jumlah  VEGF  dan  Reepitelisasi.  Kadar  VEGF dievaluasi  dengan  metode enymed  linked  immunosorbent assay (ELISA).  Reepitelisasi  diketahui  dari  pengukuran ketebalan  epitelisasi  normal  antara  75 – 150  µm  yang diukur pada hari ke 21 setelah luka bakar dimana masih fase  proliferasi  pada  tikus  secara  mikroskopis.  Setelah hasil  dari  pengukuran  kadar  VEGF,  dan  reepitalisasi didapat,  kemudian  dicatat  dan  dianalisis  secara
deskriptif.  Sebelum  dilakukan  uji  hipotesis,  Data  hasil pengukuran VEGF, dan reepitelisasi dalam penelitian ini tidak diukur tingkat kesepakatan antar pengamat (inter- rate  reliability) menggunakan  koefisien  Cohen's  kappa. Hasil  pengukuran  di  uji  hipotesis  menggunakan program SPSS 20. Data deskriptif akan disajikan dalam bentuk tabel dengan menyajikan data rerata dan standar deviasi.  Uji  normalitas  data  dilakukan  dengan  uji Saphiro–Wilk .  Sedangkan  uji  hipotesis  dilakukan  uji hipotesis  untuk  variabel  kategorik  tidak  berpasangan >2 kelompok dan numerik yaitu dengan One Way Anova , dan alternative uji hipotesis Kruskal Wallis . Data dianggap bermakna  apabila  nilai p ≤  0,05.  Interval  kepercayaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah 95%.
Penelitian  ini  menggunakan  hewan  coba  dan menerapkan animal  ethics . Animal  ethics diperoleh  dari pengajuan  kepada  Komisi  Etik  Penelitian  Kesehatan Fakultas  Kedokteran  Universitas  Diponegoro  dengan nomer Ethical  Clearance No.  144/EC/H/KEPK/ FK.UNDIP/XI/2019. Perlakuan pada hewan disesuaikan dengan  standar  pemeliharaan  binatang  dan  pelaporan penelitian disesuaikan dengan NC3R ARRIVE Guidelines for Animal Research .

## HASIL
Dua  puluh  empat  sampel  yang  telah  diberi  perlakuan dan diamati kadar VEGF dan reepitelisasinya kemudian dilakukan  uji  statistik  pada  ke  4  kelompok  perlakuan
Tikus
Spraguey dawley Memenuhi kriteria inklusi n=24 ekor n=6 ekor Memenuhi kriteria inklusi BB Tikus (gram)
TABEL 1
Hasil dan analisa data berat badan tikus

## P1
125 125 – 145 p value 0,466
K1 131,50 105 – 188
P2 P3 125 110 – 150 Median Min – Max 134 128 – 168 Keterangan: Uji Kruskall Wallis berat badan tikus Sprague Dawley , dengan uji ini, tampak bahwa p >0,05 lalu dilakukan Post Hoc dengan uji Mann–Whitney sehingga bisa dinyatakan berat badan tikus tidak berbeda secara signifikan
Gambar 1. Alur penelitian
tikus Spraguey  Dawley :  yaitu  kelompok  tikus  yang diberikan luka bakar dan diberikan pakan normal sesuai kebutuhan  tetapi  tidak  diberikan  omega  3  maupun restriksi  kalori  (K1),  kelompok  tikus  yang  diberikan
restriksi  kalori  (P1),  kelompok  tikus  yang  diberikan suplementasi  omega  3  (P2),  dan  kelompok  tikus  yang diberikan suplementasi omega 3 dan restriksi kalori (P3) didapatkan  penurunan  kadar  VEGF  secara  signifikan
250,00 K1 Kelompok V EG F (p g /m L) 200,00 150,00 100,00 50,00 0,00 P1 P2 P3 Perlakuan TABEL 2 Post Hoc Test Mann-Whitney Perbaikan Luka Bakar
P2
K1
0,025* 0,004* P1 P1 P2 – 0,004* Keterangan : * memiliki perbedaan yang bermakna
0,004*
P3
0,004*
0,262
– –
Gambar 2. Grafik Kadar VEGF dari masing-masing kelompok
200,00 K1 Kelompok Ep it h e l 150,00 100,00 50,00 ,00 P1 P2 P3
Gambar 3. Grafik boxplot perbandingan perbaikan luas luka bakar masing-masing kelompok
pada  kelompok  (P1)  jika  dibandingkan  (K)  sebesar 23,3587  pg/mL  berbanding  17,1015  pg/mL.  Pemberian omega-3  pada  masing-masing  kelompok  luka  bakar dengan  atau  tanpa  restriksi  kalori  menunjukkan pengaruhnya,  dimana  kadar  VEGF  cenderung  naik. Tampak bahwa pemberian omega 3 tanpa restriksi kalori, menaikkan kadar VEGF secara signifikan, dengan nilai 124,1503  pg/mL  berbanding  23,3587  pg/mL.  Sedang pemberian omega 3 dengan restriksi kalori, menaikkan kadar  VEGF  secara  signifikan,  dengan  nilai:  237,5053 pg/mL berbanding 23,3587 pg/mL. Dibuktikan dengan uji One Way ANOVA nilai p =0 , 000 ( p <0 , 05)pada interval kepercayaan  (CI=  95%).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa pemberian  suplementasi  omega-3  berhasil  secara signifikan  menaikkan  kadar  VEGF  plasma  darah  tikus model luka bakar dengan atau tanpa restriksi kalori.
Hasi  uji  statistik  reepitalisasi  luka  bakar didapatkan  nilai p <0,001( p <0,05)  dengan  interval kepercayaan (CI=95%), yang artinya signifikan terdapat perbedaan  perbaikan  luas  luka  bakar  antara  dua kelompok  pada  uji  Kruskal  Wallis.  Kemudian dilanjutkan Post Hoc Test Mann–Whitney tampak bahwa reepitelisasi luka bakar menurun secara signifikan pada kelompok  (P1)  dibandingkan  dengan  kelompok  (K1),
2 2 sebesar 26,9200 µm  berbanding 56,1950 µm . Pemberian omega-3  pada  masing-masing  kelompok  luka  bakar dengan  atau  tanpa  restriksi  kalori  menunjukkan pengaruhnya, dimana reepitelisasi luka bakar cenderung naik. Tampak bahwa pemberian omega-3 tanpa restriksi kalori  (P2)  reepitalisasi  tampak  naik  secara  signifikan,
2 dengan  nilai  118,9800µm   dibandingkan  dengan kelompok K1 dan P1. Sedangkan reepitelisasi luka bakar dengan  pemberian  omega-3  dan  restriksi  kalori  (P3)
2 tampak  naik secara signifikan, dengan nilai 141,0800µm dibandingkan dengan kelompok K1 dan P1, sedangkan antara kelompok P2 dengan P3 tidak ada perbedaan yang bermakna.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  suplementasi omega-3  berhasil  secara  signifikan  meningkatkan reepitelisasi tikus model luka bakar dengan atau tanpa restriksi kalori.

## DISKUSI
Kadar VEGF dan re-epitelisasi luka bakar pada tkus yang mendapatkan  suplementasi  omega  3  dan  atau  retriksi kalori  dibandingkan  dengan  yang  mendapat  diet  ad libitum  berbeda  bermakna  dengan  kontrol  negatif. Menurut  Peng,  dkk  bahwa  pemberian  suplementasi omega  3  pada  tikus  meningkatkan  re-epitelisasi dibandingkan  kelompok  kontrol.  Selain  itu,  pemberian suplementasi omega 3 juga meningkatkan kadar IL-6, IL- 10 dan menurunkan kadar TNF-alfa. Sedangkan menurut Ishak,  dkk  pemberian  suplementasi  omega  3  juga meningkatkan  deposisi  kolagen,    ekspresi  kolagen-1, ekspresi hidroksoprolin, MCP-1, EGF, dan VEGF. VEGF. VEGF berperan penting dalam proses angiogenesis yang
14 akan  mempercepat  penyembuhan  luka.   Sebagai mitogen  spesifik  sel  endotel,  keberadaan  VEGF  akan menginduksi  NO  dan  Cgmp.  Tingginya  kadar  VEGF menandakan  bahwa  proses  angiogenesis  sedang berlangsung dengan baik.
Pengaruh  omega  3  terhadap  penyembuhan  luka bakar  diamati  juga  dengan  menilai  reepitelisasi  luka bakar  pada  jaringan  kulit.  Dari  hasil  pemeriksaan reepitelisasi luka bakar dengan pemberian suplementasi omega  3  pada  masing-masing  kelompok  luka  bakar dengan  atau  tanpa  restriksi  kalori  menunjukkan pengaruhnya,  reepitelisasi  luka  bakar  cenderung meningkat  dan  bernilai  secara  signifikan  jika d i b a n di n g k a n   de n g a n   k e l o m p ok   y a n g   t i da k mendapatkan  suplementasi  omega  3.  Hal  ini dikarenakan omega 3 memiliki komponen biologis aktif untuk  membantu  penyembuhan  luka.  Sintesis  sitokin proinflamatori  dipengaruhi  oleh  konsentrasi  omega  3. Keterlibatan  asam  lemak  pada  kesehatan  epidermal menunjukkan  bahwa  pemberian  omega  3  merupakan terapi yang dapat diberikan untuk memperbaiki respon inflamasi.  Selain  itu,  omega  3  yang  merupakan  asam lemak tak jenuh berantai ganda merupakan sumber dari
13 struktur  dan  fungsi  membran  sel.   Yi-Chi  Peng, et  al melakukan penelitian mengenai pemberian emulsi lipid yang  diperkaya  dengan  omega  3  mempercepat penyembuhan  luka  eksperimental  pada  tikus  dengan kontrol  placebo,  dan  ditemukan  bahwa  peningkatan reepitelisasi,  peningkatan  kadar  IL-6,  IL-10  dan peningkatan  kadar  VEGF  pada  grup  tikus  yang  di
13 berikan omega 3 dibandingkan dengan kontrol.  Sama halnya  dengan  penelitian  ini,  ditemukannya peningkatan kadar VEGF pada kelompok yang diberikan Omega 3 dibandingkan dengan yang tidak diberikan.
Hasil  analisa  data  antara  kelompok  yang diberikan  suplementasi  omega  3  dengan  retriksi  kalori dengan kelompok yang diberikan suplementasi omega 3 tanpa restriksi kalori ditemukan tidak adanya perbedaan yang  bermakna  secara  signifikan.  Hal  ini  dikarenakan peran omega 3 sebagai anti-inflamasi. Omega 3 memiliki efek  menghambat  proses  kemotaksis  saat  inflamasi. Pengaruhnya  dalam  menghambat  kemotaksis  neutrofil dan monosit ke lokasi inflamasi. Omega 3 menghambat kemotaksis  dengan  mengurangi  ekspresi  dan  menjadi
12 antagonis terhadap reseptor kemotraktans.  Sedangkan restriksi  kalori    akan  menekan  pembentukan  radikal bebas  dan  respons  inflamasi,  teori  radikal  bebas berkaitan dengan reactive oxygen species (ROS) yang mana restriksi kalori dapat mengurangi reaktifitas dari lemak viseral  dan  akumulasi  energi  akan  menginduksi
14 inflamasi kronik.  Sehingga kombinasi omega 3 dengan restriksi  kalori  dapat  membantu  dalam  proses penyembuhan luka.
Hasil penelitian antara kelompok yang diberikan restriksi  kalori  saja  dengan  kelompok  kontrol  dan kelompok  yang  mendapatkan  suplementasi  omega  3
Medica Hospitalia | Vol. 7, No. 2, November 2020
ditemukan  adanya  perbedaan  bermakna  dimana ditemukan bahwa kadar VEGF cenderung lebih rendah dibandingkan kelompok lain dan reepitelisasi luka bakar cenderung rendah dibandingkan dengan kelompok lain. Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  Harrison, et  al pada tahun 1991 dan Roth, et al pada tahun 1997 menunjukkan bahwa  restriksi  kalori  memperlambat  penyembuhan 10,11 luka pada tikus. Proses perlambatan ini terjadi pada proses produksi kolagen dan penyembuhan luka secara keseluruhan  pada  tikus  yang  mengalami  restriksi 10 kalori.  Pada penelitian lain juga memiliki hasil bahwa penyembuhan  luka  pada  tikus  yang  mendapatkan restriksi kalori hampir sama hasilnya dengan kelompok kontrol. Menurut Nicole D. Hunt et al yang melakukan penelitian  untuk  menilai  pengaruh  penyembuhan  luka pada tiga kelompok mencit. Kelompok perlakuan terdiri atas  retriksi  kalori,  diet  normal,  dan  retriksi  kalori beberapa saat perlakuan luka yang dilanjutkan dengan diet  biasa.  Percobaan  tersebut  menyimpulkan penyembuhan  luka  yang  paling  cepat  adalah  pada kelompok retriksi kalori yang dilanjut dengan diet biasa disusul dengan kelompok diet normal dan retriksi kalori 8 sepanjang percobaan.  Sehingga perlu di teliti lagi efek dari  kalori  restriksi  dengan  memastikan  kalori  yang mana  yang  harus  di  restriksi,  selain  itu  juga  harus dipastikan berapa jumlah restriksi kalori yang baik untuk penyembuhan luka.
Keterbatasan  penelitian  ini  terdapat  pada higienitas  masing-masing  tikus  yang  tidak  seragam, dimana  hal  tersebut  berpengaruh  dalam  proses penyembuhan  luka,  perbedaan  dalam  pengambilan sampel jaringan luka yang tidak presisi, dan tidak dapat ditentukannya  fase  penyembuhan  luka  sedang  terjadi pada hari ke empat belas pengambilan sampel tersebut karena  proses  penyembuhan  luka  pada  tikus  jenis Sprague  Dawley ini  mungkin  berbeda  dengan  proses penyembukan luka pada manusia.

## SIMPULAN
Kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah  pemberian kombinasi suplementasi omega 3 dengan restriksi kalori dapat meningkatkan kadar VEGF dan reepitelisasi luka bakar yang berpengaruh terhadap proses penyembuhan luka  bakar,  secara  bermakna  dan  signifikan dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  yang  hanya diberi  larutan  fisiologis  dan  makanan  biasa,  dan  tidak ada  perbedaan  secara  signifikan  dibandingkan  dengan kelompok yang hanya diberikan suplementasi omega 3 tanpa restriksi kalori.
Penelitian ini dapat dilanjutkan tidak hanya pada hewan coba tapi pada manusia untuk melihat pengaruh manfaat  suplementasi  omega  3  sebagai  anti  inflamasi pada  tubuh  manusia.  Pada  penelitian  selanjutnya  ada pembuktian  untuk  membuktikan  mengenai  komponen mana  dari  kandungan  omega  3  yang  berperan  besar
terhadap  proses  penyembuhan  luka.  Melihat  beberapa penelitian sebelumnya. Pengaruh retriksi kalori terhadap perbaikan luka yang kurang signifikan maka penelitian selanjutnya lebih menjelaskan jumlah kalori mana yang akan direstriksi dan jumlah restriksi kalori yang terbaik sehingga  dapat  diketahui  komponen  mana  yang berperan  besar  terhadap  proses  penyembuhan  luka. Dilakukan  penelitian  lanjutan  dengan  menggunakan salep topikal antibiotik yang dioleskan pada luka bakar dari masing-masing kelompok untuk melihat dan lebih mengetahui  apakah  efek  penyembuhannya  bisa  lebih cepat dan lebih baik lagi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Bruncardi F C, Anderson DK, Billiar T R , Dunn DL. Schwartz's th Principles of Surgery 10  Edition. New York : McGraw–Hill Education. 2015
2. Herndon  DN.  Total  Burn  Care  [internet].  2012  [diakses  7 September  2019]  https://ia800504.us.archive.org/4/items/ TotalBurnCare4thEd./Total%20Burn%20Care%20%284th%20 Ed.%29.pdf
3. Rose  LF,  Chann  RK.  The  burn  wound  microenvirontment. Advances  in  Wound  Care  [internet].  2016  [diakses  10 September 2019];5: 3:106-118  DOI: 10.1089/wound. 2014.0536
4. Caroline EF, Carter MJ, Walker D, Thomsons B. Wound care outcomes cost among patient wound center : Data From the US Wound  Registry.  Wounds  [internet]  2012  [diakses  12 S e p t e m b e r   2 0 1 9 ] .   2 4 ( 1 ) : 1 0 – 1 7 . http://www.woundsresearch.com/files/wounds/WOUND S_January2012_Fife.pdf
5. Hayati F, Maleki M, Maryam, Sardari K, et al . Influence of short- term, Repeated fasting on the skin wound healing of female mice. Wounds [ Internet ]. 2011. [diakses 12 September 2019] ; 23  (2):  38–43  https://www.researchgate.net/publication/ 265204934
6. BPJS Kesehatan. Info BPJS kesehatan media internal resmi BPJS Kesehatan Edisis VIII [internet]. Jakarta: BPJS Kesehatan. 2014 [ d i a k s e s   2 0   S e p t e m b e r   2 0 1 9 ] .   h t t p s : / / b p j s - kesehatan.go.id/bpjs/
7. Chow  O,  Barbul  A.  Immunonutrition  role  in  wound  healing and tissue regeneration. Advances In Wound Care [internet], Januari  2012  [diakses  12  September    2019];  (3):  1:  46–53. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3900114/
8. Hunt ND , Lii GD, Zhu M, Levette A, Chachich ME et al . Effect of Caloric restriction and Refeeding on Skin wound healing in the rat [internet], September 2011 [diakses 12 September 2019] ; 3 4 : 1 4 5 3 – 1 4 5 8 .     h t t p s : / / w w w . n c b i . n l m . n i h . g o v / pubmed/22037865
9. Seltz O,Schurmann C, Hermes N, M¨uller E, Frank JPS,  Goren I.  Wound  healing  in  mice  with    high  fat  Diet-or-ob  Gene- Induced Diabetes-Obesity Syndromes: A Comparative Study.
Experimental Diabetes Research [internet]. Des 2010 [diakses
1 2 S e p t e m b e r 2 0 1 9 ] : 1 – 1 5 . https://www.hindawi.com/journals/jdr/2010/476969/DOI: 10.1155/2010/476969
10. Rajindar S. Sohal, Michael J. Forster. Caloric restriction and the aging  process:  a  critique.  Free  radical  biology  and  medicine. Elsevier. Volume 73, August 2014, Pages 366–382.
11. Yeon  Ja  Choi.  Shedding  Light  on  the  Effects  of  Calorie Restriction and Its Mimetics on Skin Biology. Nutrients 2020, 12, 1529; doi:10.3390/nu12051529
12. Xia  J,  Wu  X,  Yang  Y,  Zhao  Y,  Fang  M,  Xie  W  et  al.  SIRT1
deacetylates RFX5 and antagonizes repression of collagen type I  (COL1A2)  transcription  in  smooth  muscle  cells. BiochemBiophys Res Commun . 2012;428(2):264–270.
13. Peng Y, Yang F, Subeq Y, Tien C, Chao Y, Lee R. Lipid Emulsion Enriched  in  Omega-3  PUFA  Accelerates  Wound  Healing:  A Placebo-Controlled  Animal  Study. World  J  Surg . 2017;42(6):1714–1720.
14. Ishak W, Katas H, Yuen N, Abdullah M, Zulfakar M. Topical application  of  omega-3-,  omega-6-,  and  omega-9-rich  oil emulsions  for  cutaneous  wound  healing  in  rats. Drug DelivTransl Re . 2018;9(2):418–433.
15. Anonim  2009.  http://www.lukabakar.org.  Pemutakiran Tatalaksana Perawatan Pasien Luka Bakar. Diakses tanggal 1 Oktober 2009.
Medica Hospitalia | Vol. 7, No. 2, November 2020