DOI : http://doi.org/10.29244/jhi.13.1.35-42 Tersedia online di http://journal.ipb.ac.id/index.php?jhi
p-ISSN 2087-4855 e-ISSN 2614-2872 Terakreditasi Sinta 2 No. 200/M/KPT/2020
1 Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Sudarto, Tembalang, Semarang 50275, Indonesia E-mail: nintyasetiari@yahoo.co.uk (*Penulis korepondensi)

## J. Hort. Indonesia, April 2022, 13(1): 35-42
Pertumbuhan Anggrek Cymbidium ensifolium (L.) Sw. dengan Pemberian Pupuk Hayati Mikoriza Growth of Cymbidium ensifolium (L.) Sw. with the Application of Mycorrhizal Fertilizers
Sofatun Misrofah 1 , Nintya Setiari 1* , Yulita Nurchayati 1 , Sri Widodo Agung Suedy 1
Diterima 4 Maret 2022/Disetujui 10 April 2022

## ABSTRACT
Cymbidium ensifolium is a terrestrial orchid listed on CITES 2020 as an endangered or vulnerable species that requires ex situ conservation. One of the supporting factors for orchid cultivation is the application of fertilizer. Mycorrhizal biofertilizers are eco-friendly and can reduce the negative impact of inorganic fertilizers. This study aims to examine the effect of various doses of mycorrhizal biofertilizers on the growth of C. ensifolium. This study was arranged using a one-factor Completely Random- ized Design, namely mycorrhizal biofertilizers (0; 5; 10; 15 g plant -1 ) with 6 replications. Data were analyzed in the Analysis of Variance with a 95% confidence level. The experiment was conducted from October 2021 – February 2022 in Tembalang, Sema - rang. Parameters observed were time of shoot emergence, number of shoots, time of leaf emergence, number of leaves, and the percentage of mycorrhizal infections. The results showed that the treatment of mycorrhizal biofertilizers had a significant effect on the time of emergence of shoots and leaves, the number of leaves, and the percentage of mycorrhizal infections. Mycorrhizal biofertilizer at 5 g plant -1 is the optimal treatment to increase the time of emergence of shoots and leaves, and the optimal concen- tration of 15 g plant -1 increases the number of leaves and the percentage of mycorrhizal infections. The effect of this mycorrhizal biofertilizer can be developed for the preservation of other types of orchids.
Keywords: orchid species, Cymbidium, biofertilizer, mycorrhiza

## ABSTRAK
Anggrek Cymbidium ensifolium adalah anggrek terestrial yang terdaftar di CITES 2020 sebagai spesies hampir terancam punah atau rentan sehingga perlu upaya pelestarian secara ex situ. Salah satu faktor pendukung budidaya anggrek adalah pembe- rian pupuk. Pupuk hayati mikoriza bersifat ramah lingkungan dan dapat mengurangi dampak negatif pupuk anorganik. Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh pupuk hayati mikoriza berbagai dosis terhadap pertumbuhan anggrek C. ensifolium. Pe- nelitian ini disusun menggunakan Rancangan Acak Lengkap satu faktor, yaitu pupuk hayati mikoriza (0; 5; 10; 15 g tanaman -1 ) dengan 6 ulangan. Data dianalisis pada Analysis of Variance dengan taraf kepercayaan 95%. Percobaan dilakukan bulan Oktober 2021 – Februari 2022 di Tembalang, Semarang. Parameter yang diamati berupa waktu muncul tunas, jumlah tunas, waktu muncul daun, jumlah daun, dan persentase infeksi mikoriza. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan pupuk hayati mikoriza ber- pengaruh signifikan terhadap waktu muncul tunas dan daun, jumlah daun, dan persentase infeksi mikoriza. Pupuk hayati mikoriza sebesar 5 g tanaman -1 merupakan perlakuan optimal untuk meningkatkan waktu muncul tunas dan daun, serta konsentrasi 15 g tanaman -1 optimal meningkatkan jumlah daun dan persentase infeksi mikoriza. Pengaruh pupuk hayati mikoriza ini dapat dikem- bangkan untuk pelestarian anggrek jenis lain.
Kata kunci: anggrek spesies, Cymbidium, biofertilizer, mikoriza

## PENDAHULUAN
Anggrek termasuk dalam famili Orchidaceae yang merupakan kelompok tanaman terbesar dan paling beragam dari Angiospermae (Zhang et al ., 2018). Salah satu spesies anggrek yang ada di Indonesia yakni Cymbidium ensifolium
dengan nama lokal anggrek empat musim (Jiang et al. , 2019). Anggrek dalam genus Cymbidium bernilai ekonomi tinggi di Cina, Jepang, Korea, dan Asia Tenggara karena bunganya yang indah, harum, dan berbunga lebih dari dua kali dalam se- tahun (Wei et al ., 2020; Li et al. , 2013). Anggrek Cymbidium menarik karena tidak hanya dimanfaatkan sebagai tanaman
hias dan bunga potong, namun juga sebagai sumber daya ge- netik untuk hibridisasi anggrek (De dan Rakesh, 2018).
Permasalahan muncul karena populasi alami C. ensi- folium telah berkurang secara drastis akibat hilangnya habitat alami dan pengambilan yang berlebihan yang mengancam ke- lestariannya. Anggrek C. ensifolium di Cina terdaftar sebagai spesies yang terancam punah (Kasutjianingati dan Firgiyanto, 2018; Jiang et al ., 2019). Menurut CITES (2020), status kon- servasi anggrek C. ensifolium termasuk dalam kategori ham- pir terancam ( near threatened ) atau rentan ( vulnerable ). Oleh sebab itu, perlu adanya upaya pelestarian untuk tanaman ini.
Upaya yang dapat dilakukan untuk melestarikan ang- grek adalah dengan cara dibudidayakan. Salah satu cara untuk memperoleh hasil yang optimal dalam budidaya anggrek yaitu dengan pemupukan (Milla et al ., 2017). Pupuk hayati telah menunjukkan potensi besar sebagai sumber nutrisi tanaman yang terbarukan dan ramah lingkungan (Bhattacharjee dan Dey, 2014). Pupuk ini membantu untuk memperbaiki dampak buruk dari pupuk anorganik karena tidak meninggalkan bahan berbahaya dan beracun (Shina, 2018). Pupuk hayati yang di- gunakan dalam penelitian ini adalah mikoriza.
Mikoriza merupakan bentuk simbiosis mutualisme jamur dengan akar tanaman. Jamur mikoriza akan masuk ke dalam sel korteks akar dan membentuk arbuskula (kumparan hifa) yang bertindak sebagai mediator pertukaran metabo- lit antara jamur dan sitoplasma akar inang.  Manfaat jamur pada tanaman yaitu dapat meningkatkan perolehan air den- gan meningkatkan luas permukaan akar inang. Mikoriza dapat meningkatkan ketersediaan dan suplai ion seperti fosfat ke ta- naman. Selain itu, mikoriza juga dapat menyediakan nutrisi makro dan mikro lainnya seperti N, K, Mg, Cu dan Zn (Saleh dan Atmaja, 2017; Bhat et al ., 2017). Sementara itu, tanaman akan memberikan karbon hasil fotoasimilat pada jamur sim- bionnya. Jumlah karbon fotoasimilat yang diberikan ke jamur diperkirakan mencapai 4-23%. Umumnya, mikoriza pada ta- naman anggrek termasuk dalam kelompok Sebacina, Tulas- nella, dan Ceratobasidium (Santiago et al. , 2022, Sugiyarto et al. , 2016). Penggunaan pupuk hayati dari mikoriza pada ta- naman telah dilakukan sebelumnya. Dosis mikoriza seban- yak 10 g tanaman -1 merupakan dosis terbaik pada anggrek Dendrobium sp. yang dapat meningkatkan jumlah akar se- besar 30.78% dan infeksi mikoriza meningkat 480% diban- dingkan kontrol (Herliana et al. , 2018). Dosis tersebut juga dapat meningkatkan pertumbuhan kacang hijau pada parame- ter tinggi tanaman, bobot basah tajuk, bobot basah akar, serta bobot polong dan biji dibandingkan kontrol. Upaya pelesta- rian Cymbidium belum banyak dilaporkan. Salah satu upaya yang dapat dilakukan adalah dengan menggunakan pupuk ha- yati mikoriza. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pe- ngaruh pupuk hayati mikoriza terhadap pertumbuhan tanaman anggrek C. ensifolium dan dosis pupuk hayati mikoriza yang optimal dalam meningkatkan pertumbuhan tanaman anggrek C. ensifolium .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilakukan selama empat bulan dimulai pada bulan November 2021 -  Maret 2022. Lokasi penelitian ber- ada di Kebun Percobaan, Tembalang, Kota Semarang. De- sain penelitian yang digunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) satu faktor yaitu empat dosis pupuk hayati mikoriza yang berbeda. Dosis yang digunakan sebagai perlakuan ada- lah 0 g tanaman -1 (kontrol), 5 g tanaman -1 , 10 g tanaman -1 , 15 tanaman -1 . Masing-masing perlakuan terdapat 6 ulangan. Tanaman anggrek Cymbidium ensifolium dewasa diperoleh dari penjual anggrek di Trenggalek. Penelitian ini diawali den- gan aklimatisasi anggrek selama 1 bulan dengan cara tanaman ditumbuhkan di lingkungan penelitian dan diberi pupuk NPK dengan merk dagang Growmore seminggu sekali.
Setelah aklimatisasi, dilakukan pemberian pupuk ha- yati mikoriza dalam bentuk granul dengan merk dagang Mycogrow pada dosis 0, 5, 10, dan 15 g tanaman -1 . Pupuk Mycogrow mengandung 5 spesies endospora dengan jumlah spora 33 g -1 . Cara pengaplikasianya yaitu dengan menaburkan pupuk hayati mikoriza di sekitar akar. Selanjutnya perakaran anggrek ditutup dengan media tanam. Tanaman anggrek di- siram dua hari sekali. Pemberian vitamin B1 dilakukan dua minggu sekali. Setelah diberi perlakuan pupuk hayati miko- riza, pemberian pupuk NPK dihentikan. Penyiangan gulma dilakukan secara manual dengan mencabut dari area tanaman.
Pengamatan infeksi mikoriza dilakukan di akhir peneli- tian. Pengamatan ini dilakukan pada preparat semi permanen yang telah dibuat. Cara membuat preparat menurut Brundrett et al .  (1984)  yang  dimodifikasi  dalam  Sulfiah  (2021)  yaitu akar dibersihkan dari tanah yang menempel dan dipotong ± 1cm sebanyak 5 potongan. Akar dimasukkan KOH 10% dan didiamkan selama ± 24 jam hingga akar menjadi putih atau pucat dan dibilas menggunakan aquades 5 kali. Selanjutnya dilakukan pewarnaan dengan merendam dalam tinta-cuka 5% (1 ml tinta dan 19 ml cuka 5%) selama ± 12 jam. Akar diren- dam kembali dengan cuka 5% selama ± 30 menit agar akar tidak overstaining. Tingkat infeksi akar dihitung berdasar- kan rumus Schenck (1982). Infeksi mikoriza ditandai dengan adanya vesikel, arbuskula, atau hifa pada akar tanaman.
Parameter pertumbuhan tunas (waktu muncul dan jum- lah tunas) serta pertumbuhan daun (waktu muncul dan jumlah daun) diamati empat hari sekali selama 3 bulan. Data yang diperoleh dari hasil pengamatan dianalisis menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% dan jika terdapat perbedaan data yang significant dilan - jutkan dengan uji Duncan’s Multiple Range Test (DMRT).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kondisi Umum
Penelitian dilakukan di Tembalang, Kota Semarang pada ketinggian sekitar 200 m dpl. Kondisi iklim di lingkun-
gan penelitian yaitu memiliki suhu 22–30 °C, kelembaban berkisar 80%, dan curah hujan 181–284 mm. Gulma yang tumbuh yaitu rumput kerbau ( Brachiaria mutica ) yang dapat dikendalikan dengan mencabut akarnya.

## Hasil Analisis Sidik Ragam
Berdasarkan uji Anova menunjukkan bahwa pemberian pupuk hayati mikoriza berpengaruh nyata terhadap persen- tase infeksi mikoriza, waktu muncul tunas, waktu muncul daun dan jumlah daun dengan nilai signifikasi 0.05 dan tidak berpengaruh nyata pada jumlah tunas anggrek C. ensifolium (Tabel 1).

## Persentase Infeksi Mikoriza
Hasil uji lanjut Duncan terhadap perlakuan pupuk hayati mikoriza dosis 15 g tanaman -1 memperlihatkan infeksi miko- riza tertinggi (Gambar 1). Persentase infeksi mikoriza pada penelitian cukup tinggi diduga disebabkan karena kurangnya kesuburan media tanam sehingga mikoriza perlu mengubah unsur hara yang tidak tersedia menjadi tersedia bagi tanaman. Menurut Brundrett (2009) tingkat infeksi akar oleh mikoriza sangat dipengaruhi oleh tingkat kesuburan tanah. Infeksi yang tinggi akan terjadi ketika tanah di sekitar akar tidak subur.
Hasil penelitian ini meyakinkan bahwa anggrek C. ensifolium bersimbiosis dengan mikoriza yang ditunjukkan dengan adanya hifa dan vesikula (Gambar 2). Sasmita et al. (2019) mengatakan bahwa persentase infeksi akar menunjuk- kan bahwa mikoriza dapat bersimbiosis dengan akar tanaman dan dibuktikan dengan adanya hifa, vesikula, atau arbuskula. Semakin tinggi dosis pupuk hayati mikoriza yang diberikan, semakin tinggi pula persentase infeksi mikoriza pada akar. Hal ini diduga penambahan pupuk hayati mikoriza dapat mening- katkan auksin dan peningkatan auksin tersebut menyebabkan kolonisasi mikoriza pun meningkat. Hal ini sesuai dengan Bhat et al. (2017) bahwa ketika konsentrasi auksin meningkat maka perkecambahan spora, pertumbuhan hifa, laju infeksi, dan persentase kolonisasi mikoriza turut meningkat.
Jamur   dalam asosiasi mikoriza akan mendapatkan kar- bon yang jumlahnya hingga seperlima dari hasil fotosintesis tanaman inang dan sebagai imbalannya jamur akan mening-
Tabel 1. Hasil Analisis Sidik Ragam Perlakuan Uji Anova Persentase infeksi mikoriza * Waktu muncul tunas * Jumlah tunas tn Waktu muncul daun * Jumlah daun * Keterangan : *= nyata, tn= tidak nyata
25.00
75.00 70.00 91.67 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00 0 5 10 15 Pers en ta se I nf ek si M ik ori za Konsentrasi Mikoriza (g/tanaman)
Gambar 1.  Persentase Infeksi Mikoriza pada akar Anggrek Cymbidium ensifolium dengan perlakuan mikoriza selama 92 hari.
katkan kemampuan tanaman untuk mengambil air dan min- eral yang akan berpengaruh pada peningkatan pertumbuhan dan reproduksi tanaman (Goh et al. , 2019; Yeh, 2019). Unsur karbon yang diperoleh jamur dari tanaman digunakan untuk mempertahankan dan memperbesar extraradical mycelium (ERM), metabolisme sel, dan pengembangan spora (Bucking et al. , 2012).

## Pertumbuhan Tunas
Berdasarkan hasil pengamatan, penggunaan pupuk hayati mikoriza berpengaruh secara signifikan terhadap waktu mun - cul tunas baru (Gambar 3) dan meningkatkan waktu muncul 15-50 hari dibandingkan perlakuan kontrol. Meskipun persen- tase infeksi mikoriza paling banyak pada perlakuan mikori- za 15 g tanaman -1 , namun perlakuan mikoriza 5 g tanaman -1 dapat memunculkan tunas paling cepat. Sementara itu, waktu muncul tunas terlama pada perlakuan tanpa pemberian pupuk hayati mikoriza.  Hal ini disebabkan karena penggunaan pu- puk hayati mikoriza diduga dapat meningkatkan sitokinin da- lam tanaman sehingga mempercepat pembelahan sel. Hal ini didukung oleh Goh et al. (2019) bahwa kandungan sitokinin pada tanaman yang diberi mikoriza lebih banyak dibanding tanaman tanpa mikoriza. Sitokinin tersebut berperan dalam mempercepat pembelahan sel yaitu dalam menginduksi protein cyclin-dependent protein kinase (CDKs) dan mereduksi phospat sehingga dapat mempercepat fase G2 pembelahan sel (Lipavska et al. , 2011). Akibat pembelahan sel yang cepat dapat berpengaruh pada kemunculan tunas yang lebih cepat pula. Pupuk hayati mikoriza juga diduga dapat meningkat- kan mikronutrien dan makronutrien seperti N, P, K, Mg, Cu dan Zn yang berperan penting pada fase mitosis. Widiastoety (2014) mengemukakan bahwa sitokinin dan nutrisi lainnya berguna untuk mensintesis senyawa essensial seperti protein, karbohidrat, lemak dan senyawa essensial lain yang akan ber-
tukan tunas. Menurut Ludwig-Muller (2010), simbiosis antara ta- naman Arabidopsis thaliana dengan jamur P. indica menun- jukkan bahwa P. indica dapat mensintesis sitokinin dalam jumlah yang tinggi. Ludwig-Muller berasumsi bahwa sitoki- nin mungkin berperan selama fase awal kolonisasi.
Meskipun pemberian mikoriza 5 g tanaman -1 merupakan perlakuan tercepat pada parameter waktu muncul tunas, hal ini belum mempengaruhi hasil pada parameter jumlah tunas. Hasil ANOVA menunjukkan bahwa pemberian pupuk hayati
peran dalam pembelahan sel/mitosis.
Waktu muncul dan jumlah tunas pada perlakuan miko- riza 10 g tanaman -1 dan 15 g tanaman -1 lebih lambat diban- dingkan mikoriza 5 g tanaman -1 diduga disebabkan karena do- sis kandungan sitokinin pada dosis tersebut telah mengalami penurunan. Konsentrasi sitokinin diduga meningkat pada fase awal pemberian mikoriza. Gambar 3 menunjukkan bahwa waktu muncul tunas pada perlakuan M10 dan M15 selama 45.6 hari dan 40.6 hari sehingga diduga kandungan sitokinin telah mengalami penurunan yang dapat menghambat pemben-
1.33  1.20 a 1.20 a 1.33 a 1.10 1.15 1.20 1.25 1.30 1.35 0 5 10 15 Jum la h Tuna s ( tu na s) Dosis Mikoriza (g tanaman -1 ) 68 b 11.2 a 45.6  ab 40.6 ab 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 0 5 10 15 W ak tu M unc ul T una s ( ha ri ) Dosis Mikoriza (g tanaman -1 )
Gambar 3. Waktu Muncul dan Jumlah Tunas Anggrek C. ensifolium dengan perlakuan mikoriza selama 92 hari Keterangan: Data yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata menurut uji DMRT pada taraf 5%
Gambar 2. Penampakan mikroskopis mikoriza pada akar anggrek C. ensifolium dengan perlakuan mikoriza A. 0 g tanaman -1 ; B. 5 g tanaman -1 ; C. 10 g tanaman -1 ; D. 15 g tanaman -1 (Perbesaran 10x10) A Vesikula Hifa Hifa Hifa Hifa D C A B
mikoriza tidak berpengaruh pada parameter jumlah tunas (Gambar 3). Hal ini diduga karena pupuk hayati mikoriza meningkatkan konsentrasi auksin pada akar. Hal ini disebut- kan oleh Pons et al . (2020) yang menyatakan bahwa pada akar tomat, kolonisasi mikoriza telah terbukti meningkatkan kon- sentrasi auksin. Ketika konsentrasi auksin melebihi sitokinin akan menghambat pertumbuhan tunas. Inisiasi dan pemben- tukan tunas dikontrol oleh interaksi zat pengatur tumbuh auk- sin dan sitokinin. Perbandingan konsentrasi yang tepat akan meningkatkan pembelahan dan diferensiasi sel. Konsentrasi auksin yang lebih tinggi dibanding sitokinin memiliki efek yang berlawanan terhadap pertumbuhan tunas. Sementara itu, ketika konsentrasi sitokinin yang lebih tinggi akan mempe- ngaruhi sel untuk melakukan pembelahan secara cepat hingga berkembang menjadi tunas, batang, dan daun (Pamungkas et al ., 2009; Septiana, 2014). Aplikasi  mikoriza tidak berpengaruh terhadap varia- bel pertumbuhan tunas, hal ini diduga akibat dari konsentrasi auksin yang sudah lebih tinggi dan digunakan untuk pertum- buhan batang. Menurut Ludwig-Muller (2010), konsentrasi auksin akan meningkat seiring perkembangan mikoriza. Hor- mon auksin dalam inisiasi tunas dibutuhkan dalam konsen- trasi rendah sekitar 10 -10 ̶ 10 -8 M. Ketika konsentrasi auksin sudah lebih tinggi (10 -8 ̶ 10 -5 M) maka akan menginisiasi pem- bentukkan batang (Kolachevskaya et al. , 2019).
Hasil penelitian tentang jumlah tunas yang tidak ber- pengaruh dengan pemberian pupuk hayati mikoriza didukung oleh Herliana (2018), bahwa penambahan pupuk hayati miko- riza pada Dendrobium sp.  tidak berpengaruh terhadap jumlah tunas. Peningkatan jumlah tunas dipengaruhi oleh jenis media. Rerata jumlah tunas pada tanaman non mikoriza (1.17), miko- riza 10 g tanaman -1 (1.33), dan mikoriza 20 g tanaman -1 (1.35).
Gambar 4. Pertumbuhan tunas anggrek C. ensifolium (dalam lingkaran) pada umur A. 1 hari, B. 4 hari, C. 20 hari; d. 36 hari (Bar: 1 cm)
A B C D

## Pertumbuhan Daun
Hasil uji Anova menunjukkan bahwa pemberian miko- riza berpengaruh signifikan terhadap waktu muncul daun dan jumlah daun baru. Gambar 4 menunjukkan bahwa pemberi- an pupuk hayati mikoriza dapat meningkatkan waktu muncul daun 25 - 35 hari lebih cepat.  Daun C. ensifolium tumbuh  ber- asal dari tunas. Berdasarkan hasil pada Gambar 3, tunas yang tumbuh tercepat pada perlakuan mikoriza 5 g tanaman -1 . Hal ini menyebabkan waktu muncul daun pada perlakuan yang sama turut lebih cepat. Munculnya daun baru ditandai dengan membukanya helai daun pertama yang berasal dari primordia daun (Gambar 4).
Sementara itu pada parameter jumlah daun, pemberi- an pupuk hayati mikoriza dapat meningkatkan jumlah daun sebesar 50-150%. Meskipun waktu muncul daun perlakuan mikoriza 15 g tanaman -1 lebih lambat dibanding mikoriza 5 g tanaman -1 (Gambar 5), namun jumlah daun yang dihasil- kan lebih banyak. Berdasarkan hasil pengamatan, daun pada perlakuan mikoriza 5 g tanaman -1 walaupun muncul lebih cepat, hingga 92 hari perlakuan hanya berjumlah 1-4 helai dalam satu polybag (Gambar 6). Sementara itu, perlakuan mikoriza 15 g tanaman -1 relatif muncul lebih lama namun jumlah daun sebanyak 2-7 helai dalam satu polybag. Hasil ini diduga karena akar yang bersimbiosis dengan mikoriza dapat menyerap unsur nitrogen lebih banyak dibandingkan akar non mikoriza. Perlakuan pemberian mikoriza memiliki persentase infeksi yang tinggi dan berbeda dengan perlakuan kontrol (Gambar 1) sehingga berpengaruh pada serapan hara N. Hal ini sesuai dengan pendapat Yeh et al. (2019) bahwa simbiosis mikoriza penting untuk pertumbuhan dan kelangsungan hidup banyak spesies tanaman dan bertanggung jawab hingga 80%
1.67 c
2.60 b 3.00 b 4.33 a 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 0 5 10 15 Ju ml ah D au n Konsentrasi Mikoriza (g tanaman -1 ) 65.33 c 30.00 a 36.33 b 40.00 b 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 0 5 10 15 W ak tu M unc ul D aun (h ar i) Konsentrasi Mikoriza (g tanaman -1 )
Gambar 5. Waktu Muncul dan Jumlah Daun Anggrek C. ensifolium dengan perlakuan mikoriza selama 92 hari Keterangan: Data yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata menurut uji DMRT pada taraf 5%
pada penyerapan nitrogen dan fosfor oleh tanaman. Unsur nitrogen yang telah diserap akan mempengaruhi proses pem- bentukan daun pada tanaman. Menurut Sauwubi et al. (2012), nitrogen pada tembakau yang diserap tanaman lebih banyak dimanfaatkan untuk membentuk asam amino untuk pening- katan ukuran sel pada daun muda. Unsur N digunakan sebagai unsur utama pembentukan klorofil dalam fotosintesis. Hasil dari fotosintesis akan beperan banyak dalam pertumbuhan daun.
Pemberian mikoriza diduga juga dapat meningkatkan konsentrasi sitokinin dalam tanaman sehingga memperce- pat pembentukan daun. Menurut Bhat et al. (2017), adanya mikoriza menyebabkan konsentrasi sitokinin meningkat. Wu et al. (2021) menyatakan bahwa sitokinin mengatur laju pem- belahan sel, waktu transisi sel daun dari pembelahan sel ke pembesaran sel, dan ukuran pembesaran sel sehingga mem- pengaruhi jumlah dan ukuran sel yang kemudian berpengaruh pada ukuran daun.
Penelitian Rivana et al. (2016) sejalan dengan hasil penelitian ini bahwa pemberian mikoriza berpengaruh nyata pada parameter jumlah daun tanaman sorghum. Rerata jum- lah daun pada dosis 10 g tanaman -1 (13.67 helai) lebih banyak dibandingkan rerata jumlah daun pada dosis 0 g tanaman -1 (10.92 helai).

## KESIMPULAN
Perlakuan pupuk hayati mikoriza meningkatkan pertum- buhan anggrek Cymbidium ensifolium pada parameter waktu muncul tunas, jumlah daun, waktu muncul daun. Perlakuan pupuk hayati mikoriza juga berpengaruh terhadap persentase infeksi mikoriza. Pupuk hayati mikoriza sebesar 5 g tanaman -1 merupakan perlakuan optimal untuk meningkatkan waktu muncul tunas dan waktu muncul daun. Pupuk hayati mikoriza sebesar 15 g tanaman -1 merupakan perlakuan optimal untuk meningkatkan jumlah daun.
Gambar 6. Pertumbuhan daun anggrek C. ensifolium yang diberi perlakuan mikoriza A. 0 g tanaman -1 , B.5 g tanaman -1 , C. 10 g tanaman -1 , D. 15 g tanaman -1 pada umur 92 hari.
Keterangan: Bar menunjukkan skala 5 cm
A B
C D

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Hibah Penelitian Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro dengan sumber dana selain APBN dengan nomor 1261E/UN7.5.8/PP/2022.

## DAFTAR PUSTAKA
Bhat, R.A., M.A. Devash, M.A. Mehmood, B.M. Skinder, A. Rashid, J.I.A. Bhat, D.V. Singh, R. Lone. 2017. Mycorrhizae: a sustainable industry for plant and soil environment. Mycorrhiza-Nutrient Uptake, Bio- control, Ecorestoration: 473-502. Doi: https://doi. org/10.1007/978-3-319-68867-125
Bhattacharjee, R., U. Dey. 2014. Biofertilizer, a way to- wards organic agriculture: a review. Afr. J. Microbiol. Res. 8(24): 2332-2342. Doi: https://doi.org/10.5897/ AJMR2013.6374
Brundrett, M. 2009. Mychorrhizal association and other means of nutrition of vascular plants: understanding the global diversity of host plants by resolving con- flicting information and developing reliable means of diagnosis. Plant Soil. 320: 33-77.
Brundrett, M.C., Y. Piche, R.L. Peterson. 1984. A new method for observing the morphology of vesicular arbuscular mycorrhizae. Can. J. Bot. 62: 2128-2134.
Bucking, H, E. Liepold, P. Ambilwade. 2012. The role of the mycorrhizal symbiosis in nutrient uptake of plants and the regulatory mechanism underlying these transport process. Plant Science. Intech Open. Doi: https://doi. org/10.5772/52570.
CITES. 2020. Convention on international trade in endan- gered species of wild fauna and flora. https://cites.org/ sites/default/files/eng/com/pc/25/Inf/E-PC25-Inf-04. pdf. [14 Mei 2022].
De, L.C., R. Singh. 2018. Organic production of Cymbidium orchids . Acta Sci. Agric. 2(4): 30-35.
Goh, D. M., M. Cosme, A. B. Kisiala, S. Mulholland, Z. M. F. Said, L. Spichal, R. J. N. Emery, S. Declerk, F. C. Guinel. 2019. A stimulatory role for cytokinin in the arbuskular mycorrhizal symbiosis of pea. Front.
Plant Sci. 10: 1-18. Doi: https://doi.org/10.3389/ fpls.2019.00262
Herliana, O., E. Rokhminarsi, S. Mardini, M. Jannah. 2018. Pengaruh jenis media tanam dan aplikasi pupuk hayati
mikoriza terhadap pertumbuhan, pembungaan, dan in- feksi mikoriza pada tanaman anggrek Dendrobium sp. J. Kultivasi. 17(1): 550-557.
Jiang, Y.T., R.Q. Lin, B. Liu, Q.M. Zeng, Z.J. Liu, S.P. Chen.
2019. Complete chloroplast genome of Cymbidium ensifolium (Orchidaceae). Mitochondrial DNA B: Re- sour. 4(2): 2236-2237. Doi: https://doi.org/10.1080/23 802359.2019.1624637
Kasutjianingati, K., R. Firgiyanto. 2018. Characterization of morphology from orchid Vanda sp. as a genetic in- formation source for preservation and agribusiness of orchids in indonesia. IOP Conf. Ser.: Earth En- viron. Sci. 207. Doi: https://doi.org/10.1088/1755- 1315/207/1/012006
Kolachevskaya, O.O., S.N. Lomin, D.V. Arkhipov, G.A. Ro- manov. 2019. Auxins in potato: molecular aspects and emerging roles in tuber formation and stress resis- tance. Plant Cell Rep. 36(6): 681-698. Doi: https://doi. org/10.1007/s00299-019-02395-0
Li, X., J. Luo, T. Yan, L. Xiang, F. Jin, D. Qin. 2013. Deep sequencing-based analysis of the Cymbidium ensifoli- um floral transcriptome. PLoS One. 8(12). Doi: https:// doi.org/10.1371/journal.pone.0085480
Lipavska, H., P. Maskova, P. Vojvodova. 2011. Regulatory desphosphorylation of CDK at G2/M in plant: yeast mitotic phosphatase cdc25 induces cytokinin-like ef- fect in transgenic tobacco morphogenesis. Ann. Bot. 107: 1071-1086. Doi: https://doi.org/10.1093/aob/ mcr016
Ludwig-Muller, J. 2010. Hormonal Responses in Host Plants Triggered by Arbuscular Mycorrhizal Fungi. Arbuscu- lar Mycorrhizas: Physiology and Function pp 169-190. Doi: https://doi.org/10.1007/978-90-481-9489-6_8.
Milla, Y. N., I.K. Widnyana, N.P. Pandawani. 2017. Pengaruh waktu pemberian pupuk mikoriza terhadap pertumbu- han dan hasil tanaman paprika ( Capsicum annum var grossum L.). Agrimeta. Hal. 66-76.
Pamungkas, F.T., S. Darmanti, B. Raharjo. 2009. Pengaruh konsentrasi dan lama perendaman dalam supernatan kultur Bacillus sp.2 DUCC-BR-K1.3 terhadap pertum- buhan stek horisontal batang jarak pagar. J. Sains & Matematika 17(3): 131-140.
Pons, S., S. Fournier, C. Chervin, G. Becard, S. Rochange, N. F. D. Frey, V. P. 2020. Phytohormone production by the arbuscular mycorrhizal fungus Rhizophagus irregu-
laris. PLoS One. 15(10). Doi: https://doi.org/10.1371/ journal.pone.0240886
Rivana, E., N.P. Indriani, L. Khairani. 2016. Pengaruh pemu- pukan fosfor dan inokulasi fungi mikoriza arbuskula (FMA) terhadap pertumbuhan dan produksi tanaman sorghum ( Sorghum bicolor L.). J. Ilmu Ternak. 16(1):
46-53.
Saleh, Ismail, I.S.W. Atmaja. 2017. Efektivitas inokulasi cendawan mikoriza arbuskula (CMA) terhadap pro- duksi bawang merah dengan teknik pengairan berbeda. J. Hort. Indonesia. 8(2): 120-127.
Santiago, I.A.S., M.M. Trujillo, J.J.V. Alarcon, M.E.P. Santos, G. Santoyo, M.J. Pozo, A.T.C. Barcenas. 2022. An up- take review on the modulation of carbon patitioni and allocation in arbuscular mycorrhizal plants. Microor- ganism. 10(75): 1-20. Doi: https://doi.org/10.3390/mi- croorganisms10010075
Sasmita, M.W.S., S. Nurhatika, A. Muhibuddin. 2019. Pen- garuh dosis mikoriza arbuskular pada media AMB- P0K terhadap pertumbuhan tanaman tembakau ( Nico- tiana tabacum var. Somporis). J. Sains dan Seni ITS. 8(2): 2337-3520
Sauwubi, D.A., M. Muryono, F. Hendrayana. 2012. Pengaruh pupuk nitrogen terhadap pertumbuhan dan produktivi- tas tembakau ( Nicotiana tabacum L.) varietas prancak pada kepadatan populasi 45.000/Ha di Kabupaten Pa- mekasan, Jawa Timur. Biologi Institut Teknologi Sep- uluh Nopember Surabaya.
Septiana, A. A. 2014. Pengaruh hormon IAA dan BAP terha- daap perbanyakan tanaman kentang ( Solanum tubero- sum L.) secara in Vitro . J. UNEJ. 1 (1): 1-7
Sugiyarto, L., S. Umniyatie, V. Henuhili. 2016. Keaneka- ragaman anggrek alam dan keberadaan mikoriza an- ggrek di Dusun Turgo Pakem, Sleman Yogyakarta. J. Sains Dasar. 5(2): 71-80
Shina, S. 2018. Biofertilizer: usage, potential dan prospect as alternative to chemical fertilizer in nigeria. Doi: https:// doi.org/10.13140/RG.2.2.26232.49927
Schenck, N.C. 1982. Methods and principles of mycorrhi- zal research. American Phytopathological Society St. Paul, MN.
Sulfiah, S., N. Sukarno, A.W. Gunawan. 2021. Pembersihan isi sel akar dan jenis warna tinta untuk deteksi cendawan mikoriza arbuskula. J. Sumberdaya HAYATI. 7(1): 36- 40.
Wei, Y., J. Jin, X. Yao, C. Lu, G. Zhu, and F. Yang. 2020. Tran- scriptome  analysis  reveals  clue  into  leaf-like  flower mutant in chinese orchid Cymbidium ensifolium . Plant Divers. 42: 92-101. Doi: https://doi.org/10.1016/j. pld.2019.12.001
Widiastoety, D. 2014. Pengaruh auksin dan sitokinin terhadap pertumbuhan planlet anggrek mokara. J. Hort. 24 (3): 230-238.
Widiati, B.R., N. Haerani, M. Mulkilkram. 2018. Pertumbu- han dan produksi kacang hijau dengan pemanfaatan mikoriza vesikular arbuskular. Agro Plantae. 7(1). Doi: https://doi/org/10.51978/agro.v7i1.29
Wu, W., K. Du, X. Kang, H. Wei. 2021. The diverse role of cytokinins in regulating leaf development. Hortic. Res. 8(18): 1-13. Doi: https://doi.org/10.1038/s41438-021- 00558-3
Yeh, C.M., K. Chung, C.K. Liang, W.C. Tsai. 2019. New in- sight into the symbiotic relationship between orchids and fungi. Appl. Sci. 9(3): 1-14. Doi: https://doi. org/10.3390/app9030585
Zhang, S., Y. Yang, J. Li, J. Qin, W. Zhang, W. Huang, and H. Hu. 2018. Physiological diversity of orchids. Plant Divers. 40: 196-208. Doi: https://doi.org/10.1016/j. pld.2018.06.003