Copyright (c) 2023 Jurnal Ilmiah Manuntung
Kumalasari E, Septia A, Febrianti DZ, Aisyah N. PPENETAPAN KADAR FLAVONOID TOTAL EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI ETANOL,  FRAKSI  KLOROFORM,  FRAKSI  N-HEKSANA,  FRAKSI  AIR,  FRAKSI  ETIL  ASETAT  DARI  DAUN  BAWANG  DAYAK (Eleutherine palmifolia (L.) Merr.). 2023, Vol 9(2): 167-173.
PENETAPAN KADAR FLAVONOID TOTAL EKSTRAK ETANOL DAN FRAKSI ETANOL, FRAKSI KLOROFORM, FRAKSI N-HEKSANA, FRAKSI AIR, FRAKSI ETIL ASETAT DARI DAUN BAWANG DAYAK ( Eleutherine palmifolia (L.) Merr.)
Submitted : 03 April 2023
Edited : 23 Desember 2023 Accepted : 30 Desember 2023
Eka Kumalasari * , Arini Septia, Dwi Rizki Febrianti, Noor Aisyah
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan ISFI Banjarmasin Email : ekakumalasari260989@gmail.com
ABSTRAK
Bawang dayak ( Eleutherine palmifolia (L.) Merr.) merupakan salah satu tanaman khas Kalimantan Tengah yang turun temurun digunakan oleh masyarakat dayak sebagai obat tradisional. Umumnya hanya bagian umbi bawang dayak yang digunakan sedangkan bagian daun bawang dayak sering dibuang dan jarang dimanfaatkan. Daun bawang dayak memiliki kandungan metabolit sekunder salah satunya yaitu flavonoid. Senyawa flavonoid memiliki banyak manfaat yaitu  sebagai  antioksidan,  antibakteri,  antivirus,  antiradang,  antielergi  dan  antikanker.  Tujuan dari  penelitian  ini  adalah  mengetahui  kadar  flavonoid  total  yang  terkandung  dalam  ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi kloroforom, fraksi etil asetat, fraksi etanol 70% dan fraksi air daun bawang dayak. Ekstraksi daun bawang dayak menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 70%. Setelah ekstraksi dilakukan fraksinasi dengan metode ekstraksi cair - cair dan pelarut yang berbeda kepolarannya. Hasil ekstraksi dan fraksinasi diukur kadarnya menggunakan spektrofotometri UV-Vis. Analisis kuantitatif kadar flavonoid total fraksi daun bawang dayak dari yang tertinggi adalah fraksi kloroform 85,478% ± 0,0019, kemudian fraksi n-heksana 60,171% ± 0,0010, fraksi air 32.671% ± 0,0005, fraksi etil asetat 27,934 % ± 0,0002, ekstrak etanol 70% 15,348% ± 0,0001, dan yang terendah fraksi etanol 70% 10,104% ± 0,0003.
Kata kunci : Bawang Dayak, Fraksinasi, Flavonoid, Spektrofotometri
ABSTRACT
Dayak onion (Eleutherine palmifolia (L.) Merr.) is one of the typical Central Kalimantan plants that has been hereditary used by Dayak people as traditional medicine. Generally, only parts of dayak onion bulbs are used while the onion leaves are often discarded and rarely used. Dayak onion leaves contain secondary metabolites, one of them is flavonoids. Flavonoid compounds have many benefits, namely as an antioxidant, antibacterial, antiviral, anti-inflammatory, anti- allergic and anticancer. The purpose of this study was to determine the total flavonoid content contained in etahanol extraction, n-hexane fraction, chloroforom fraction, ethyl acetate fraction, 70% ethanol fraction and dayak onion leaf water fraction. Extraction of onion dayak leaves using maceration method with 70% ethanol as solvent. After extraction the fraction is carried out with a liquid-liquid extract method and different polarity of solvent. The product of extraction and fractionation were measured using UV-Vis spectrophotometry.The quantitative analysis of total flavonoid content from the highest level of onion dayak fraction chloroform fraction 85,478% ± 0,0019, then n-hexane fraction 60,171% ± 0,0010, water fraction 32,671% ± 0,0005, ethyl acetate  fraction  27,934%  ±  0,  0002,  70%  ethanol  extract  15,348%  ±  0,0001,  and  the  lowest ethanol 70% fraction 10,104% ± 0,0003.
Keywords : Dayak Onion, Fractionation, Flavonoids, Spectrophotometry
Jurnal Ilmiah Manuntung: Sains Farmasi Dan Kesehatan p-ISSN. 2442-115X; e-ISSN. 2477-1821 Vol.9 No.2, Hal. 167-173, 2023

## PENDAHULUAN
Indonesia memiliki banyak jenis tumbuhan berkhasiat sebagai obat, jadi dilakukan berbagai penelitian dan pengujian untuk memastikan bahwa manfaat tumbuhan sebagai obat dapat diterima dan dipercaya masyarakat 1 . Bawang dayak ( Eleutherine palmifolia (L.) Merr) adalah salah satu tanaman khas Kalimantan Tengah. Hanya bagian umbinya yang digunakan sedangkan daun bawang dayak sering dibuang 2 . Berdasarkan hasil penelitian  sebelumnya  kadar  flavonoid ekstrak etanol 70% daun bawang dayak adalah 0,03408 mg/ml ± 0,00075 mg/ml 3 . Tanaman  obat  yang  mengandung  flavanoid dilaporkan  memiliki  aktivitas  antioksidan, antibakteri,  antivirus,  antiradang,  antielergi dan antikanker 4 Penelitian ini dilakukan fraksinasi,
karena fraksi yang dihasilkan lebih murni dibandingkan dengan ekstrak dan fraksinasi juga memiliki kemampuan untuk meningkatkan kandungan senyawa yang diinginkan dengan menghilangkan atau memisahkan senyawa yang tidak diinginkan 5 . Berdasarkan hal di atas, maka dilakukan penelitian  penetapan  kadar  flavonoid  total fraksi ekstrak 70% daun bawang dayak secara spektrofotometri UV-Vis yang sampai saat ini belum pernah diuji. Oleh karena itu, daun bawang dayak dapat digunakan dengan lebih baik sebagai alternatif untuk mengembangkannya menjadi obat herbal unggul.

## METODE
Alat dan bahan Alat yang digunakan adalah mikro pipet, corong buchner , timbangan analitik,
, gelas beker, rotary evaporator , waterbath , erlenmeyer, corong pemisah, pipet ukur, tabung  reaksi,  vortex  kuvet,  labu  ukur, spektrofotometri Uv-Vis .
Bahan yang digunakan adalah daun bawang dayak (Kalimantan Tengah, Palangkaraya), etanol 96%, metanol, n-heksan, etil asetat, kloroform, AlCl 3 , HCl pekat, serbuk Mg, asam asetat, ammonia, aquadest, FeCl 3, quersetin.
EKSTRAKSI Daun bawang Dayak dikeringkan menggunakan  oven  pada  suhu  50 o C dan dihaluskan hingga menjadi serbuk. 500 gram
serbuk direndam dengan pelarut etanol 70%
1,5L selama 3 hari, kemudian disaring. Filtrat dipekatkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 5 0 o C hingga diperoleh ekstrak cair. Pekatkan ekstrak cair di waterbath pada suhu 5 0 o C sampai menjadi ekstrak kental 6 .
FRAKSINASI Ekstrak ditimbang sebanyak 10 gram dilarutkan dengan aquadest 20 mL, kemudian difraksi menggunakan corong pisah dengan pelarut  n-heksana  (1:1),  divortex  hingga terjadi pemisahan, yaitu fase n-heksana berada di atas karena memiliki berat jenis lebih kecil yaitu 0,660 g/ml sedangkan fase air berada dibawah karena memiliki berat jenis lebih besar yaitu 1 g/ml 7 . Kemudian fase bawah difraksinasi dengan pelarut kloroform dan divortex kembali, fase kloroform berada di bawah karena memiliki berat jenis lebih besar dari air yaitu 1,498 g/ml 8 . Fase atas yaitu fase yang tidak larut kloroform di fraksinasi dengan pelarut etil asetat dan di vortex, fase etil asetat berada di fase atas karena memiliki berat jenis lebih kecil dari kloroform yaitu 0,902 g/ml. Selanjutnya fase bawah yang tidak terlarut dalam etil asetat difraksinasi menggunakan pelarut etanol 70% 7 .

## PEMBUATAN LARUTAN STANDAR
KUERSETIN Kuercetin sebanyak 25 mg dilarutkan dalam 25 mL metanol (1000 ppm). Pipet 2,5 mL larutan quersetin 1000 ppm kemudian masukkan ke labu ukur dan tambahkan metanol sebanyak 25 mL (100ppm) 9 .

## PENENTUAN OPERATING TIME
Penentuan operating time ditentukan dengan menggunakan larutan baku dengan konsentrasi 100 ppm diambil dalam 1 mL, kemudian ditambahkan 1 mL AlCl3 10% dan 8 mL asam asetat 5%. Absorbansi diukur setiap 1 menit hingga 30 menit, dan absorbansi yang konstan diperoleh pada panjang gelombang 412 nm.

## PENENTUAN KURVA ABSORBANSI
Panjang gelombang serapan maksimum ditentukan dengan melakukan scanning terhadap konsentrasi 100 ppm yang diambil 1 mL kemudian ditambahkan dengan 1 mL AlCl 3 10% dan 8 mL asam asetat 5%, pada panjang gelombang 400-500 nm diukur menggunakan spektrofotometri visibel.
Jurnal Ilmiah Manuntung: Sains Farmasi Dan Kesehatan p-ISSN. 2442-115X; e-ISSN. 2477-1821 Vol.9 No.2, Hal. 167-173, 2023

## PEMBUATAN KURVA KALIBRASI
Kurva  baku/Kalibrasi  dibuat  seri konsentrasi yaitu 15 ppm, 20 ppm, 25 ppm,
30 ppm, 35 ppm. Larutan standar kuersetin 1000 ppm dan dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL masing-masing 0,15 mL, 0,2
mL, 0,25 mL, dan 0,3 mL, 0,35 mL (15 ppm,
20 ppm, 25 ppm, 30 ppm, 35 ppm) kemudian ditambahkan metanol sampai 25 mL, dimasukkan kedalam labu ukur kemudian pipet 1 mL dari labu ukur tambahkan 1 mL
AlCl 3 10% dan 8 mL asam asetat 5%, pada masing-masing konsentrasi. Selanjutnya diukur absorbansi setiap konsentrasi kemudian digunakan untuk menentukan kurva kalibrasi.

## PENGUKURAN KADAR SAMPEL
Pengukuran kadar sampel dilakukan dengan cara menimbang ekstrak etanol 70%, fraksi n-heksana, fraksi kloroform, fraksi etil asetat, fraksi etanol 70%, dan fraksi air masing – masing 3 kali sebanyak 25 mg kemudian dilarutkan dalam 25 mL metanol sehingga didapatkan 1000 ppm. Dari larutan 1000 ppm dipipet 1 mL dimasukkan kedalam labu ukur larutakan dengan metanol ad 25 mL sehingga didapatkan konsentrasi 100 ppm. Dari 100 ppm dipipet 1 mL masukkan kedalam tabung reaksi ditambah 1 mL AlCl 3 10% dam asam asetat 5% sebanyak 8 mL 10 . Setelah itu di inkubasi selama 10 menit.
Selanjutnya dilakukan pembacaan absorbansi menggunakan spektrofotometri UV-Vis. Nilai absorbansi yang diperoleh digunakan untuk dimasukkan kedalam persamaan regresi  linear  kurva  kalibrasi  dan  dilakukan perhitungan kadar.
HASIL PENELITIAN Proses ekstraksi daun bawang dayak menggunakan metode maserasi. Metode maserasi cocok untuk mendapatkan senyawa flavonoid  dari  daun  bawang  dayak  karena sederhana, mudah, dan tanpa pemanasan, karena ekstraksi menggunakan pemanasan dapat mengurangi kadar flavonoid 11 . Pelarut etanol 70% digunakan karena bersifat polar sehingga dapat menarik senyawa  flavonoid 12 . Selain itu etanol 70% juga  dapat  mendeteksi  senyawa  flavonoid lebih banyak dari pada etanol murni karena polaritas etanol 70% lebih tinggi dari pada etanol murni 13. Ekstrak yang dihasikan sebanyak 64,8 gram dengan organoleptis warna coklat dan berbau khas.

## HASIL FRAKSINASI
Pelarut n-heksana, kloroform, etil asetat, etanol 70%, dan air digunakan untuk memisahkan ekstraksi berdasarkan tingkat kepolaran. Dengan menghilangkan atau memisahkan senyawa yang tidak diinginkan, proses ini bertujuan untuk meningkatkan kandungan senyawa yang diinginkan dengan menghasilkan ekstrak yang lebih murni. Keuntungan menggunakan fraksi dibandingkan dengan ekstrak total adalah lebih mudah digunakan dan lebih murni, sehingga dosis yang dibutuhkan lebih sedikit 5 . Dalam penelitian ini, berbagai pelarut dengan berbagai tingkat kepolaran digunakan untuk fraksinasi. N-heksana pelarut non- polar berfungsi untuk mengeluarkan lemak dan mengekstrak senyawa non-polar seperti asam lemak, sterol, kumarin, dan beberapa terpenoid 7 . Kloroform, pelarut semi-polar, dapat menarik senyawa semi- polar  seperti  lipid,  flavonoid,  steroid,  dan terpenoid 14 . Etil asetat bersifat semi polar digunakan untuk mengekstraksi senyawa dengan polaritas menengah seperti flavonoid, tanin dan beberapa alkaloid. Pemilihan etil asetat sebagai pelarut didasarkan bahwa etil asetat mampu menggabungkan gugus polar dan non-polar sehingga komponen pada ekstrak yang bersifat polar dan non- polar dapat terekstrak 6 . Etanol merupakan pelarut yang bersifat polar sehingga dapat menarik senyawa fenol, flavonoid, tanin, dan saponin. Air bersifat polar digunakan untuk mengekstraksi senyawa yang bersifat polar diantaranya  flavonoid,  glikosida,  tanin  dan alkaloid 7 . Flavonoid  glikosida  cenderung  lebih larut dalam pelarut yang lebih polar seperti air.  Sebaliknya,  senyawa  flavonoid  aglikon seperti  isoflavon,  flavanon,  flavon,  dan flavonol yang termetoksilasi cenderung lebih larut dalam pelarut yang semi polar seperti eter, kloroform, etil asetat, dan n-butanol.
Analisis Kuantitatif Daun Bawang Dayak Flavonoid mengandung sistem aromatik yang terkonjugasi, yang menunjukkan pita serapan yang kuat pada daerah  spektrum  sinar  ultraviolet  dan spektrum sinar tampak, sehingga analisis kuantitatif  flavonoid  dilakukan  dengan menggunakan spektrofotometri UV-Vis 11 . Analisis  kuantitatif  kadar  flavonoid pada daun bawang dayak dalam penelitian
Jurnal Ilmiah Manuntung: Sains Farmasi Dan Kesehatan p-ISSN. 2442-115X; e-ISSN. 2477-1821 Vol.9 No.2, Hal. 167-173, 2023
ini menggunakan kuersetin sebagai larutan pembanding dikarenakan kuersetin merupakan senyawa yang paling luas penyebarannya. Kuersetin umumnya merupakan komponen terbanyak dalam suatu tanaman 15 . Langkah pertama dalam pengujian menggunakan  spektrofotometri  Uv  Vis yaitu Penentuan operating time bertujuan yang untuk menentukan waktu kerja paling baik atau paling stabil, yaitu saat sampel (kuersetin) bereaksi sempurna dengan reagen warna (AlCl 3 ). Waktu kerja ditentukan dengan mengukur hubungan antara waktu pengukuran dengan absorbansi larutan 16 . Didapatkan operating time yang stabil pada menit ke 2 dengan absorbansi 0,404. Selanjutnya Penentuan panjang gelombang maksimal yang bertujuan untuk mengetahui panjang gelombang pada absorbansi maksimal dari sampel atau mengetahui daerah yang memberikan serapan maksimum bagi analit yang akan dianalisis sehingga meningkatkan proses absorpsi larutan terhadap sinar 17 . Penentuan panjang gelombang maksimum ditentukan dengan rentang 400-500 nm, didapatkan hasil yaitu 413 nm sedangkan panjang gelombang teori 412 nm. Perbedaan panjang gelombang maksimum yang didapatkan dari hasil analisis terhadap literatur dikarenakan larutan  baku  standar  flavonoid  yang digunakan berbeda seperti asam galat, rutin dan lainnya dan pelarut yang digunakan juga berbeda yaitu metanol. Panjang gelombang maksimum tersebut kemudian digunakan untuk mengukur serapan kurva kalibrasi dan sampel ekstrak 18 .  Pengukuran  kurva  baku bertujuan untuk mengetahui persamaan garis linier. Tabel 1. Hasil absorbansi larutan baku standar Konsentrasi (ppm) Absorbansi 35 0,273 50 0,403 65 0,517 80 0,603 95 0,743
Setelah mendapatkan nilai absorbansi dari larutan seri kadar quersetin, maka dapat dibuat persamaan garis yang dapat dilihat
pada gambar di bawah ini.

## Gambar 1. Kurva Baku Kuersetin
Berdasarkan gambar, hasil pengukuran absorbansi larutan standar pada berbagai konsentrasi  kurva  kalibrasi,  diperoleh persamaan regresi linier yaitu y = 0,0076 x + 0,0137 dengan nilai koefisien korelasi (r) = 0,9977. Semakin besar konsentrasi, maka akan semakin tinggi juga nilai absorbansi yang didapatkan dan dari hasil tersebut dapat dikatakan bahwa korelasi positif 19 . Fungsi dari penambahan 1 ml AlCl 3
10% untuk memberikan efek batokromik yaitu menggeser ke panjang gelombang yang lebih tinggi, dan penambahan 8 ml asam asetat 5% berfungsi sebagai penstabil agar efek batokromik yang terjadi dapat dipertahankan 20 . Sedangkan perlakuan inkubasi (OT) selama 10 menit bertujuan agar reaksi berjalan sempurna, sehingga memberikan intensitas warna yang maksimal 21 . Selanjutnya, persamaan garis yang  diperoleh  dari  kurva  baku  digunakan untuk  menghitung  kadar  flavonoid  total dalam ekstrak dan fraksi. Ini dilakukan dengan menghitung nilai absorbansi dari spektrofotometri UV-Vis. Dengan rumus sebagai berikut: Keterangan:
C. Reg: Konsentrasi V : Volume ekstrak Fp:Faktor Pengenceran

## Jurnal Ilmiah Manuntung: Sains Farmasi Dan Kesehatan
p-ISSN. 2442-115X; e-ISSN. 2477-1821 Vol.9 No.2, Hal. 167-173, 2023
Tabel 2. Kadar flavonoid didalam ekstrak daun bawang dayak dan didalam di berbagai fraksi Jenis R Nilai absorbansi Kadar (%) Kadar rata-rata (%) ± SD Fraksi N-heksana 100 ppm 1 0,473 60,434 60,171 ± 0,008 2 0,462 58,986 3 0,478 61,092 Fraksi Kloroform 100 ppm 1 0,673 86,75 85,478 ± 0,015 2 0,646 83.197 3 0,671 86.486 Fraksi Etil asetat 100 ppm 1 0,224 27,671 27,934 ± 0,001 2 0,227 28,065 3 0,227 28,065 Fraksi Etanol 70% 500 ppm 1 0,398 10,113 10,104 ± 0,002 2 0,395 10,034 3 0,4 10,165 Fraksi Air 100 ppm 1 0,26 32,407 32,671 ± 0,004 2 0,267 33,328 3 0,259 32,276 Ektrak Etanol 70% 200 ppm 1 0,246 15,282 15,348 ± 0,001 2 0,247 15,348 3 0,248 15,414 Berdasarkan Tabel diatas diketahui fraksi kloroforom mempunyai kadar flavonoid tertinggi kemudian fraksi n-heksana, fraksi air, fraksi etil asetat, ekstrak etanol 70% dan fraksi etanol 70% mempunyai kadar flavonoid terendah. Berdasarkan hasil tersebut diduga bahwa senyawa - senyawa yang berperan dalam tanaman daun bawang dayak adalah flavonoid bersifat non polar karena senyawa flavonoid lebih banyak tertarik / terekstrak ke pelarut non polar. Hasil rendemen tertinggi didapatkan dari fraksi air, tetapi tidak menghasilkan  kadar  flavonoid  yang  besar karena  flavonoid  yang  ada  di  daun  bawang dayak  yang  diteliti  merupakan  flavonoid yang bersifat aglikon, sedangkan air menarik flavonoid  bersifat  glikosida  sehingga  kadar yang dihasilkan lebih kecil. Kadar flavonoid pada ekstrak penelitian ini yaitu 15,348% lebih rendah dari penelitian sebelumnya yaitu 34,08% 3 . Pada penelitian Puspitasari dan Wulandari, fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi air daun kersen didapat kadar  flavonoid  sebesar  3,30%,  76,32%, 14,29%, fraksi n-heksan dan fraksi air pada penelitian ini lebih besar dari penetian fraksi daun kersen sedangkan fraksi etil asetat lebih kecil dari pada penelitian ini 22 . Perbedaan hasil  kadar  flavonoid  diatas  karena  adanya perbedaan perlakuan dari masing-masing penentuan kadar seperti penentuan operating
time , panjang gelombang, kurva baku.
Kloroform adalah pelarut non polar, sedangkan  flavonoid  yang  dapat  bereaksi dengan AlCl 3 yaitu  flavonoid  terhidrolisis yang bersifat semipolar 23 . Jenis substituen dan gugus -OH yang ada pada struktur flavonoid memengaruhi kelarutannya. Jumlah gugus -OH yang lebih banyak meningkatkan kelarutan flavonoid dalam air, tetapi jumlah gugus -OH yang lebih sedikit dan jumlah substituen yang kurang polar, seperti gugus metoksi, menurunkan kelarutan flavonoid 7 . Hasil penelitian menunjukkan fraksi ekstrak daun bawang dayak dapat dijadikan sediaan obat untuk terapi tambahan dan pencegahan suatu penyakit.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian diperoleh kandungan  flavonoid  total  fraksi  daun bawang dayak tertinggi adalah fraksi kloroform 85,478% ± 0,0019. kemudian fraksi n-heksana 60,171% ± 0,0012, fraksi air 32.671% ± 0,0005, fraksi etil asetat 27,934%
± 0,0002, ekstrak etanol 70% 15,348% ± 0,0001 dan yang terendah fraksi etanol 70%
10,104% ± 0,0003 .

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Wahyulianingsih, Handayani S., Malik A.
Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Cengkeh, Jurnal  Fitofarmaka
Indonesia , 2010. 3(2), pp. 188–193.
Jurnal Ilmiah Manuntung: Sains Farmasi Dan Kesehatan p-ISSN. 2442-115X; e-ISSN. 2477-1821 Vol.9 No.2, Hal. 167-173, 2023

## 2.  Ramadhaniyah Al Idrus, Iswahyudi
H,  Wahdaningsih  S.  Uji  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Bawang Mekah ( Eleutherine Americana
Merr. ) Terhadap Gambaran Histopatologi Paru Tikus ( Rattus Norvegicus ) Wistar
Jantan Pasca Paparan Asap Rokok, Jurnal  Fitofarmaka  Indonesia , 2014.
1(2), pp. 51–60.
3.  Kumalasari E, Nazir MA, Putra AMP. Penetapan  Kadar  Flavonoid  Total Ekstrak Etanol 70% Daun Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia L.) d engan Metode Spektrofotometri UV- VIS, Jurnal Insan Farmasi Indonesia, 2018. 1(2) 201-209 4.  Lumbessy M, Abidjulu J, Paendong JJE. Uji Total Flavonoid Pada Beberapa Tanaman Obat Tradisonal Di Desa Waitina Kecamatan Mangoli Timur Kabupaten  Kepulauan  Sula  Provinsi
Maluku Utara, Jurnal Mipa Unsrat Online , 2013. 2(1), pp. 50–55.
5.  Rismana E, Rosidah I, Prasetyawan Y,
Bunga O, Erna Y . ‘Efektivitas  Khasiat Pengobatan Luka Bakar Sediaan Gel
Mengandung Fraksi Ekstrak Pegagan Berdasarkan Analisis Hidroksiprolin dan Histopatologi pada Kulit Kelinci’, Buletin Penelitian Kesehatan , (2013) 41(1), pp. 45–60. 6.  Kumalasari, Eka, Nararia NM, Musiam S. Penetapan Kadar Fenolik Total Ekstrak Etanol 70% Dan Fraksi Etil Asetat Daun Bawang Dayak ( Eleutherine palmifolia (L.) Merr) Dengan Metode Spektrofometri UV-VIS. Jurnal Ilmiah Farmasi Indonesia , 2021. 4(1), 74-84 7. Lukmanto.  Uji  Aktivitas  Antioksidan Dan  Penetapan  Kadar  Flavonoid  Total Ekstrak Dan Fraksi Daun Kenari ( Canarium Indicum L.), Skripsi , Fakultas Farmasi Universitas Jember. 2015. 8.  Mitarlis, Ismono, Tukiran. Pengembangan Metode Sintesis Furfural Berbahan Dasar Campuran Limbah Pertanian Dalam Rangka Mewujudkan Prinsip Green Chemistry, J. Manusia Dan Lingkungan , 2011. 18(3), pp. 191-199. 9.  Lekal, Jecklyn A, Th. Watuguly. Analisis
Kandungan  Flavonoid  Padateh  Benalu (Dendropohtoe pentandra (L.) Miq.).
Biopendix, 2017. Volume 3(2), 54-58
10.  Sari AK, & Ayuchecaria N. Penetapan kadar  fenolik  total  dan  flavonoid  total ekstrak eras hitam (Oryza Sativa L) dari Kalimantan Selatan. Jurnal Ilmiah Ibnu
Sina, (2017). 2(2), 327– 335.
11.  Aminah, Tomayahu N., Abidin Z.
Penetapan  Kadar  Flavonoid  Total Ekstrak Etanol Kulit Buah Alpukat ( Persea americana Mill.)Dengan
Metode Spektrofotometri Uv-Vis, Jurnal Fitofarmaka  Indonesia , 2017. 4(2), pp. 226-230. 12. Nuryanto  A.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mangga Bacang (Mangifera  Foetida  L.) Terhadap Escherichia Coli Secara In Vitro. Skripsi, Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura, Pontianak. 2014.
13.  Tiwari P, Mandeep K, Gurpreet K, Harleem K. A review: Phytochemical screening and extraction , Internationale Pharmaceutica Sciencia , 2011. 1(1), pp. 98–106. 14.  Rahmawati M dan Hidajati N. Isolasi dan  Identifikasi  Senyawa  Metabolit Sekunder Dari Ekstrak Metanol Kulit Batang Tumbuhan Mengkudu ( Morinda citrifolia L.), Journal of Chemistry , 2017. 6(2), pp.113-118.
15.  Koirewoa YA, Fatimawali, Wiyono
WI.  Isolasi  Dan  Identifikasi  Senyawa Flavonoid dalam Daun Beluntas ( Pluchea indica L.), 2012. pp.47-52.
16. Rastuti  U,  dan  Purwati.  Uji  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daunkalba ( Albizia falcataria ) Dengan Metode DPPH ( 1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil ) dan  Identifikasi  Senyawa  Metabolit Sekundernya. Molekul , 2012. 7(1), pp. 33-42.
17.  Mangiwa S, Futwembun A, Awak PM. Kadar Asam Klorogenat (CGA) Dalam
Biji Kopi Arabika ( Coffea  arabica ) Asal Wamena, Papua. Jurnal Ilmiah Pendidikan Kimia , 2015. 3(2), pp. 313- 317. 18.  Azizah DN, Kumolawati E, Faramayuda F.  Penetapan  Kadar  Flavonoid  Metode Alcl3 pada Ekstrak Metanol Kulit Buah Kakao (Theobroma cacao L.). Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi, 2014. 2(2), pp. 45-49.
Jurnal Ilmiah Manuntung: Sains Farmasi Dan Kesehatan p-ISSN. 2442-115X; e-ISSN. 2477-1821 Vol.9 No.2, Hal. 167-173, 2023
19.  Lailiyah A, Adi TK, Hakim A, Yusnawan E. Kapasitas Antioksidan Dan Kandungan Total Senyawa Fenolik Ekstrak Kasar Alga Coklat Sargassum Cristaefolium dari Pantai Sumenep Madura, Alchemy , 2014. 3(1), pp.18-30. 20. Alpiansyah. Penetapan Kadar Flavonoid dari Ekstrak Metanol Daun Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) Dengan Metode Spektrofotometri UV-Visible. Karya Tulis  Ilmiah,  Akademi  Farmasi  Isfi Banjarmasin, Banjarmasin. 2017. 21.  Supriningrum R, Nurhasnawati H, Putri M.  Penetapan  Kadar  Flavonoid  Ekstrak Etanol Umbi Bawang Tiwai (Eleutherine palmifolia (L.) Merr) Berdasarkan Ukuran Serbuk Simplisia, Media sains, 2017. 10(1), pp. 42-46. 22.  Puspitasari AD, Wulandari RL. Aktivitas  antioksidan,  penetapan  kadar fenolik total dan flavonoid total ekstrak daun kersen(Muntingia calabura L.),
Pharmaciana, 2017. 7(2), pp. 147-158. 23.  Manik DF, dan Hertiani D. Analisis Korelasi Antara Kadar Flavonoid dengan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Kersen (Muntingia calabura L.) Terhadap Staphylococcus Aureus, Khazanah , 2014. 6(2), pp. 1-11.