EFEK ANTIDEPRESAN KOMBINASI INFUSA BIJI PALA ( Myristica fragrans ) DAN DAUN KEMANGI ( Ocimum basilicum ) PADA MENCIT JANTAN PUTIH ( Mus musculus )
Endang Istriningsih 1 , Khoirunnisa 2 , Devi Ika K.S 3 e-mail : endang.hanggoro@gmail.com S1 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bhakti Mandala Husada Slawi Jl. Cut Nyak Dhien No 16 Kalisapu, Slawi Telp/Fax (0283)6197571/6198450

## Abstrak
Depresi  adalah  keadaan  murung  setiap  orang  yang  mengalami  kekecewaan  hebat  atau kehilangan  pribadi  dengan  sendirinya  menjadi  murung.  Pada  penelitian  telah  terbukti  bahwa  biiji  pala mengandung  senyawa miristin dan  daun kemangi  mengandung  senyawa eugenol yang  mempunyai  efek antidepresan. Tujuan  penelitian ini  yaitu  untuk mengetahui efek  antidepresan  kombinasi  infusa  biji pala dan  daun  kemangi  serta  mengetahui  konsentrasi  kombinasi  yang  paling  baik  pada  mencit  putih  jantan. Biji  pala  dan  daun  kemangi  diekstraksi  dengan  metode  infusa.  Dosis  biji  pala  yang  digunakan 10mg/KgBB dan daun kemangi 1,5g/KgBB dikombinasi dengan konsentrasi (1:1), konsentrasi (1:5) dan konsentrasi  (5:1).  Kontrol  negatif  menggunakan  akuades  dan  kontrol  positif  menggunakan  amitriptilin. Pengujian  antidepresan  pada  mencit  putih  jantan  menggunakan  metode forced  swimming  test yang dilakukan selama 10 hari dengan durasi setiap harinya 8 menit, pada hari ke-11 dilakukan pemberian obat dan  diukur  waktu  imobilitasnya . Data  pengujian  antidepresan  dianalisis  menggunakan  metode kruskal- wallis dan mann-whitney. Hasil  waktu imobilitas  perbandingan infusa  biji  pala  dan  daun kemangi  (1:1) lebih  singkat  dibandingkan  dengan  perbandingan  lainnya.  Semakin  singkat  waktu  imobilitas  maka semakin baik daya antidepresannya. Pada uji kruskal-wallis menunjukan ada perbedaan bermakna dengan nilai signifikan 0,003<0,05 sehingga dilanjutkan uji mann-whitney. Pada uji mann-whitney P3 dengan K- dan K+ dengan P1 menunjukan adanya perbedaan pada setiap kelompoknya.
Kata kunci: Depresi, Biji Pala, Daun Kemangi, Antidepresan.

## 1. Pendahuluan
Depresi  merupakan  salah  satu  masalah kesehatan jiwa di dunia, termasuk
Indonesia. WHO melaporkan terdapat sekitar  35  juta  orang  di  dunia  menderita depresi [1] .  Prevalensi  gangguan  mental emosional  dengan  gejala  –  gejala  depresi dan  kecemasan  untuk  usia  15  tahun  keatas mencapai 14 juta orang atau 6% dari jumlah penduduk  Indonesia [2] .  Kejadian depresi pada  wanita  2  sampai  3  kali  lebih  sering dibandingkan  pria.  Depresi  terjadi  pada setaip umur berkisar umur 25-44 tahun [3] . Dilihat  dari  sisi  biologiknya,  depresi melibatkkan adanya gangguan pada neurotransmitter  norefinefrin,  serotonin  dan dopamin . Neurotransmiter – neurotransmiter  tersebut  yang  menjadi target  antidepresan.  Pada  umumnya  obat antidepresan dibagi menjadi empat
kelompok  besar  seperti selective  serotonin re-uptake inhibitors (SSRIs), serotonin- norepinephrine reuptake inhibitors (SNRIs),
tricyclic  adtidepressants  (TCAs),  mixed serotonergic effects (mixed 5-HT), serotonin and α2adrenergic antagonist dan monoamine oxidase inhibitor (MAOIs)
Obat-obat tersebut  menimbulkan  efek samping  seperti  hipotensi,  kejang,  sedatif, mulut  kering,  mual  dan  muntah [4] Untuk mengindari  efek  samping  tersebut    maka digunakan alternatif bahan alam antidepresan  yaitu  biji  pala  dan  daun kemangi.  Kandungan  senyawa  kimia  biji pala yang dapat memberikan efek antidepresan yaitu miristisin . Miristisin memiliki mekanisme kerja dengan
menghambat  enzim Mono  Amine  Oxidase (MAO).  Pada  daun  kemangi  kandungan eugenol dapat  menghambat  enzim Mono Amine Oksidase A dan B [5] .
2. Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan jenis penelitian  eksperimental  dengan  post  test randomized  controlled  group  design  yaitu
membandingkan  kelompok  uji  dengan kelompok kontrol. Alat-alat yang digunakan pada  penelitian  ini  antara  lain  timbangan analitik,  spuit  sonde  (0,1-1  ml),  kain  flanel, batang pengaduk, beaker glass , objek  glass, tabung  reaksi,  oven,  corong  dan  akuarium silinder dengan tinggi 25 cm dan berdiameter  10  cm.  Bahan  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  biji  pala ( Myristica fragrans )  dan  daun  kemangi (Ocimum  basilicum) .  Bahan  lain  yang digunakan  akuades , etanol  70%, reagen mayer ,  NaOH  dan  HCl.  Hewan  uji  yang digunakan  adalah  mencit  putih  jantan. Masing-masing  kelompok  uji  terdiri  dari  5 ekor mencit putih jantan.
a. Prosedur Penelitian
Determinasi dilakukan di Laboratorium
Biologi  Farmasi  Sekolah  Tinggi  Ilmu Kesehatan  Bhakti  Mandala  Husada Slawi.  Tanaman  segar,  dideterminasi mulai  dari  akar,  batang,  daun,  bunga dan biji.Untuk mengetahui jenis spesies dari tanamannya.
Sampel  simplisia  biji  pala  ( Myristica fragrans )  dan  daun  kemangi  ( Ocimum basilicum )  yang  telah  didapat  dicuci dengan bersih, hal ini bertujuan supaya sampel  bebas  dari  kotoran  yang  masih melekat,  setelah  itu  dirajang  sesuai ukuran yang dikehendaki
dan
dilakukan  pengeringan  menggunakan sinar matahari langsung. [6] .
b. Pembuatan Ekstrak Metode Infusa Serbuk sampel sebanyak 500 gram  dan dimasukkan  dalam  panci  A  ditambah 100 ml air. Tumpuk panci A pada panci B  yang  telah  mendidih.  Pada  panci  B banyaknya  air  secukupnya  hingga sebagian  panci  A  terendam  dengan temperatur  terukur  90 0 C  selama  15
menit
c. Uji Organoleptik
Ekstrak  yang  telah  diperoleh  diamati bentuk, bau, warna, dan rasa [6] .
d. Uji Alkaloid Infusa  0,5  gram  dalam  tabung  reaksi ditambahkan 2 ml etanol 70% kemudian  diaduk,  ditambahkan  5  ml HCl  2  N,  dipanaskan  pada  penangas air.  Setelah  dingin,  campuran  disaring dan  filtrat  ditambahkan  beberapa  tetes reagen Mayer. Sampel kemudian
diamati hingga keruh atau ada endapan yang menunjukkan hasil positif mengandung alkaloid [7] . e. Uji Saponin
Infusa  2  ml  dalam  tabung  reaksi, ditambah  10  ml  akuades  dan  gojog  30 menit.  Jika  terjadi  busa  maka  sampel mengandung saponin [8] . f. Uji Flavonoid Infusa  2  ml  dalam  tabung  reaksi ditambah  beberapa  tetes  NaOH,  jika warnanya menjadi pekat maka
menunjukan  adanya  flavonoid.  Hasil ditambahkan  dengan  HCl  warna  akan kembali seperti semula [9] . g. Uji Minyak Atsiri Infusa  dimasukkan  diuapkan  dalam cawan  penguap,  jika  berbau  aromatik atau  menyenangkan  maka  hal  itu menunjukkan adanya senyawa golongan  minyak  atsiri  miristin  dan eugenol. h. Penentuan Dosis Dosis  daun  kemangi  yang  digunakan dalam penelitian adalah 0,0039 mg/gBB  mencit.  Dosis  daun  pala  yang digunakan  adalah  0,000026mg/gBB mencit.  Dan  dosis  amitriptillin  yang digunakan  adalah  0,000065mg/gBB mencit
i. Pemberian Infusa
Mencit  dibagi  menjadi  5  kelompok secara  acak  (kelompok  kontrol  negatif,
kelompok kontrol positif dan 3 kelompok uji). Membuat mencit depresi dengan metode forced swimming  test dengan  durasi  8  menit selama  10  hari,  pada  hari  ke-11 diperlakuan pada kontrol negatif disuntikkan aquadest secara  oral, kelompok kontrol positif dengan amitriptilin, pada kelompok uji menggunakan  kombinasi  infusa  biji pala dan daun kemangi dengan konsentrasi (1:1), konsentrasi (1:5)  dan konsentrasi (5:1). Setelah mencit mendapatkan perlakuan diamkan
selama  1  jam  dan  masukan  kedalam bejana  yang  berisi  air  dan  dibiarkan berenang  selama  8  menit,  pengukuran waktu  imobilitas  dilakukan  pada  6 menit terakhir [10] .
3. Hasil dan pembahasan Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antidepresan dari kombinasi  infusa  biji  pala  ( Myristica fragrans )  dan  daun  kemangi  ( Ocimum basilicum )  pada  mencit  putih  jantan  galur wistar,  serta  untuk mengetahui  pada konsentrasi  berapa  kombinasi  infusa  biji pala ( Myristica fragrans ) dan daun kemangi ( Ocimum basilicum ) yang paling baik dalam memberikan  efek  antidepresan.  Parameter yang  digunakan  untuk  mengukur  depresi dengan  melihat  waktu  imobilitas,  dimana mencit  bergerak  pasif  pada  kolam  silinder yang  berisi  air.  Waktu  imobilitas  lalu dianalisis  mengunakan  SPSS,  semakin tinggi  waktu  imobilitas  maka  semakin rendah efek antidepresan.
Penggunaan  kombinasi  biji  pala  dan daun  kemangi  karena  mekanisme  kerjanya yang  sama-sama  menghambat  enzim Mono Amin  Oksidasi [11] .  Monoamin  Oksidase merupakan  suatu  sistem  enzim  kompleks yang terdistribusi luas dalam tubuh, berperan dalam dekomposisi amin biogenik, seperti  norepinefrin,  epinefrin,  dopamin, serotonin.
a. Uji Organoleptik Setelah diperoleh infusa biji pala dan daun  kemangi  selanjutnya  dilakukan  uji secara  organoleptik  untuk  mengetahui warna, bau dan rasa.
Tabel 1. Hasil Uji Organoleptik Uji Infusa Biji Infusa Daun Organoleptik Pala Kemnagi Warna Coklat terang Coklat pekat Bau Khas Khas aromatik aromatik pala kemangi Rasa Kelat, agak Kelat, agak sedikit pedas sedikit pahit
b. Skrining Fitokimia Tujuan  skrining  fitokimia  untuk mengetahui  kandungan  apa  saja  yang terdapat  pada  infusa  biji  pala  dan  daun kemangi. Tabel 2. Hasil Uji Skrining Fitokimia Infusa Biji pala dan daun kemangi Skrining Tanaman Fitokimia Biji Pala Daun Kemangi Uji Alkaloid (+) (+) Terbentuknya Terbentuknya
warna putih warna kuning keruh keruh Uji Saponin (+) (+) Terbentuknya Terbentuknya busa busa Uji (+) (+) Flavonoid Warna kembali Warna seperti semula kembali seperti semula Uji Minyak (+) (+) Atsiri Bau aromatik Bau aromatik c. Pengukuran waktu imobilitas Mencit putih jantan diadaptasi selama  2  minggu  dibuat  depresi  dengan metode forced  swimming  test selama  10 hari  dengan  durasi  8  menit  dan  tidak diukur  waktu  imobilitasnya.  Perlakuan ini  bertujuan  untuk  membuat  mencit depresi,  kemudian  pada  hari  ke-11 mencit  diberikan  amitriptilin,  akuades, kombinasi  infusa  biji  pala  dan  infusa daun kemangi konsentrasi (1:1),
konsentrasi  (1:5)  dan  konsentrasi  (5:1), kemudian dilakukan uji forced swimming test selama  8  menit  dan  pengukuran waktu  imobilitas  pada  6  menit  terakhir [10] .
Hasil  penelitian  setiap  hewan  uji mempunyai waktu imobilitas yang berbeda-beda  dalam  satu  kelompok.
Perbedaan  tersebut disebabkan karena tiap  individu  mempunyai  kemampuan yang berbeda dalam menanggapi depresi, sama  halnya  dengan  manusia.  Pada penelitian  ini  hewan  uji  dianggap  telah depresi  pada  saat  hewan  uji  menunjukan perilaku diam mengapung didalam kolam, yang diukur dengan parameternya yang disebut waktu imobilitas Data waktu imobilitas yang
diperoleh  dianalisis  menggunakan SPSS untuk  menentukkan  uji  hipotesis  yang sesuai  dilakukan  terlebih  dahulu  uji normalitas  dan  uji  homogenitas.  Dari hasil uji normalitas data waktu imobilitas tersebut
menunjukkan semua terdistribusi  normal  dilihat  dari  nilai signifikan  0,097-0,942,  nilai  tersebut >0,05.  Dari  hasil  uji  homogenitas  data waktu imobilitas ternyata tidak homogen dilihat dari nilai signifikan 0,013< 0,005.
Oleh  karena  itu  digunakan  uji  hipotesis non parametrik kruskal-wallis. Dari hasil
uji kruskal-wallis didapatkan nilai signifikan  0,003  nilai  tersebut  >0,05.
Oleh  karena  itu  dilanjut  dengan  uji mann-whitney untuk  melihat  perbedaan antar kelompok perlakuan. Hasil pengukuran  waktu  imobilitas  dapat dilihat sebagai berikut : Tabel 3. Rerata dan Standar Devisiasi Waktu Imobilitas Kelompok Mean Median ± Signifikan (biji pala:daun kemangi)) SD (detik) (=P) P1(1:1) 46,4 24,0 ± 4,26 P2(1:5) 75,0 68,0 ± 3,38 P3(5:1) 87,8 93,0 ± 1,24 0,003 K-(kontrol -) 146 140 ± 4,65 K+(kontrol +) 114 114 ± 1,01 Hasil  penelitian  ini  menunjukan terdapat  perbedaan  bermakna  antara kelompok P3 (kombinasi infusa biji pala dan daun kemangi 5:1) dengan kelompok K- (akuades) dan kelompok P1
(kombinasi  infusa  biji  pala  dan  daun kemangi  1:1)  dengan  kelompok  K+ (amitriptillin)  dengan  nilai  signifikan p=0,009 (<0,05). Hasil penelitian tersebut menunjukkan  bahwa  kombinasi  infusa biji  pala  dan  infusa  daun  kemangi memiliki  aktifitas  sebagai  antidepresan dengan  kombinasi  yang  paling  baik  dari urutan  konsentrasi  (1:1),  (1:5)  dan konsentrasi  (5:1)  jika  dibandingkan dengan  hewan  uji  yang  hanya  diberikan akuades.  Namun  pada  kontrol  positif pemberian  amitriptilin  memiliki  waktu imobilitas lebih panjang daripada kelompok perlakuak pemberian kombinasi  infusa  biji  pala  dan  daun kemangi,  hal  ini  dikarenakan  obat antidepresan amitriptilin dapat memberikan  efek  antidepresan  setelah penggunaan 2-3 minggu [12] . Biji pala memiliki aktifitas antidepresan terbesar adalah 10 mg/kgBB dalam penelitian yang berjudul
antidepressant-like  activity  of  n-hexane
extract  of  nutmeg  (myristica  fragrans) seeds in mice [13].
Daun  kemangi  memiliki  aktifitas antidepresan terbesar adalah 1,5 mg/kgBB dalam penelitian yang berjudul antidepressant-like  activities  of  ocimum basilicum  (sweet  basil)  in  the  forced swimming  test  of  rats  exposed  to electromagnetic field (emf) [14] . Perbedaan  dari  penelitian  ini  dengan penelitian  sebelumnya  adalah  penelitian ini  dilakukan  kombinasi  antara  biji  pala dan  daun  kemangi,  serta  pembutannya dengan metode infusa.
Senyawa aktif yang berperan sebagai antidepresan  pada  biji  pala  adalah miristisin . Miristisin memiliki mekanisme  kerja  dengan  menghambat enzim Mono  Amine  Oxidase (MAO) [15] . Kandungan eugenol daun kemangi mempunyai mekanisme  kerja  dengan menghambat  enzim  mitokondrial  yang terdapat  dalam  dua  bentuk  utama  A  dan B. Peran utama MAO adalah mengoksidasi senyawa-senyawa monoamin, termasuk norepinefrin, serotonin  dan  dopamin.  Memblokir enzim degradatif ini, penghilangan transmiter-transmiter tersebut dapat diperlambat [16] .  Kadar  MAO  dihambat oleh miristin dan eugenol , maka oksidasi serotonin akan menurun dan memberikan efek antidepresan.
4. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dari kombinasi  infusa  biji  pala  dan  daun kemangi dapat disimpulkan bahwa Kombinasi    infusa    biji    pala    dan  daun kemangi dapat memberikan efek antidepresan  pada  mencit  putih  jantan  dan kombinasi  infusa  biji  pala  dan  daun kemangi yang paling baik  memberikan  efek antidepresan pada konsentrasi (1:1).

## 5. Daftar Pustaka
[1]  WHO  (2016)  Depression  and  Other Common  Mental  Disorders:  Global Health  Estimates.  Geneva:  the  WHO Document Production Service.
[2]  Riset  Kesehatan  Dasar(Riskesdas).
(2013). Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementerian
RI  tahun  2013.Diakses:  19  Oktober 2014, dari http://www.depkes.go.id/resources/dow nload/general/Hasil%20Riskesdas%20 2013.pdf [3] Ikawati, Z.(2011) Farmakoterapi Penyakit Sistem Syaraf  Pusat. Yogyakarta: Bursa Ilmu
[4]    Dipiro,  et  al.,  (2017)Pharmacotherapy: A  Pathophysiologic  Approach.  Mc Graw Hill Education.
[5] Irie,  Y.(2006)  Effects  of  eugenol  on central  nervous  system:  its  possible application  to  treatment  of  alzheimer’s disease,  depression,  and  parkinson’s disease  current  bioactive  compounds. Bioorganic  and  Medicinal  Chemistry, Vol 2(10), 57-66.
[6] Anonim.  (2000).  Parameter  Standar
Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.  Jakarta: Departemen Kesehatan RI. [7] Mojab,F.,   dkk.   (2003). Phytochemical Screaning  of  Some  Spesies  of  Irania Plants. Iranian of Journal Pharmaceutical  Research,  Vol  2(2), 77-82.
[8]  Anonim.  (1980).  Materia  Medika Indonesia  Jilid  IV.Jakarta:Departemen Kesehatan RI.
[9]  Emmanuel,  dkk.  (2013).  Phytochemical screening,  chemical  composition  and antimicrobial  activity  of  Zingiber officinale  essential  oil  of  Adamaoua region  (Cameroon).  J.  Chem.  Pharm. Res., Vol 5(7):296-301
[10]    Swati, dkk.  (2013).  Evaluation  of Antidepressant Activity of Eclipta Alba Using  Animal  Models.  Asian  J  Pharm
Clin res Vol(6)3, 118-120. [11]  Adelina,  R.  (2013).  Kajian  Tanaman Obat      Indonesia  yang  Berpotensi sebagai Antidepresan. Jurnal Kefarmasian:  Pusat  Biomedis  dan Teknologi  Dasar  Kesehatan,  Badan Litbang Kesehatan, Kementrian Kesehatan RI, Vol 3(1), 9-18. [12]  Anonim.  (2009).  Farmakologi dan Terapi  Edisi 5. Jakarta Departemen Kesehatan RI [13]Dhingra  D.  &  Sharma  A.  (2006).
Antidepresant  Like  Activity  of  n-
Hexane  Seeds  in  Mice.  Journal  Meed
Food, Vol 9(1), 9-89. [14]  Abdoly.,  dkk.  (2012).  Antidepressant- like activities of Ocimumbasilicum (sweet  Basil)  in  the forced swimming test of ratsexposed to electromagnetic  field  (EMF). African Journal of Pharmacy and Pharmacology,Vol 6(3), 211-215. [15] Sanggalli,  B.C. (2000).  Toxicology of  Nutmeg Abuse.  Clinical Toxicology, Vol 38(6), 8-671. [16] Stringer, J.L. (2016).  Konesp Dasar  Farmakologi  Panduan  Untuk Mahasiswa Edisi 3. (Huriawati Hartono,  Jully  Manurang  Penerjemah). Jakarta: EGC.