## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL BIJI PINANG YAKI
( Areca vestiaria ) TERHADAP BAKTERI Stapyhlococcus aureus ,
Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa
Caesar H.  Rundengan 1) , Fatimawali 1) ,  Herny Simbala 1) 1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
This study aims to determine the antibacterial activity from ethanol extract of seed of pinang yaki (Areca vestiaria) against the growth inhibition of the bacterium Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Pseudomonas aeruginosa using three concentrations of 30%, 60% and 90%. Extraction was done by maceration method using ethanol 96%. Antibacterial activity test was performing using the paper disk diffusion method (Kirby and Bauer diffusion). The results of antibacterial activity test were analyzed by the method of classification according to the antibacterial degree of strength. Data analysis showed that the extract with the concentration of 30%, 60% and 90% had shown inhibition activity against the growth of test bacteria. At the concentration of 30%, 60%  and 90% against the bacterium Escherichia coli was categorized in the class of strong, while at the concentration of 60% and 90% against the bacterium Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa was categorized in  the  class  of  very  strong  and  extract  with  concentrations  of  30%  was  categorized  in  the  class  of strong against the bacterium Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa. In all three used concentrations,  the  concentration  of  60%  was  the  concentration,  which  have  the  greatest  inhibition activity against the three bacteria.
Keywords : Antibacterial activity, Areca vestiaria, bacterial pathogens, agar diffusion method.

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol biji pinang yaki  ( Areca  vestiaria )  terhadap  daya  hambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli , Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa menggunakan  tiga  konsetrasi  yakni  30%,  60%  dan  90%. Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara  maserasi  menggunakan  etanol  96%.  Pengujian  aktivitas  antibakteri menggunakan  metode  difusi  dengan  cakram  kertas  (difusi  Kirby  dan  Bauer).  Hasil  uji  aktivitas antibakteri dianalisa dengan metode pengelompokkan berdasarkan tingkat kekuatan antibakteri. Dari analisa  data  didapatkan  bahwa  konsentrasi  ekstrak  30%,  60%  dan 90% telah  menunjukkan  aktivitas menghambat  terhadap  pertumbuhan  bakteri  uji.  Pada  konsentrasi  30%,  60%  dan  90%  pada  bakteri Escherichia  coli termasuk  dalam  golongan  kuat  sedangkan  konsetrasi  60%  dan  90%  pada  bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa termasuk  dalam  golongan  sangat  kuat  dan konsentrasi  ekstrak  30%  termasuk  dalam  golongan  kuat  pada Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa .  Pada  ketiga  konsentrasi  yang  digunakan,  konsentrasi  60%  merupakan konsentrasi yang memiliki daya hambat paling besar pada ketiga bakteri.
Kata kunci : aktivitas antibakteri, Areca vestiaria , bakteri pathogen, metode difusi agar.

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  penyakit yang  umum  terjadi  pada  manusia. Keadaan infeksi ialah cedera selular lokal yang  disebabkan  oleh  keadaan  invasi, multiplikasi dan mikroorganisme
(Dorland, 2002). World Health
Organization memperkirakan ada total 10 miliar infeksi baru di seluruh dunia setiap tahun.    JumLah  korban  di  seluruh  dunia akibat infeksi adalah sekitar 13 juta orang per tahun (Cowan, 2012).
Penggunaan  obat  antibakteri  untuk pengobatan penyakit infeksi yang disebabkan  oleh  bakteri  sekarang  sudah cukup  banyak,  namun  masalah  yang dihadapi  sekarang  adalah  terjadinya  efek samping bagi penggunanya, seperti diare, alergi, hingga
bahaya  toksik  lainnya,  serta  konsumsi biaya  perawatan  yang  tinggi  (Brooks, 2013).    Banyaknya  kasus  infeksi  akibat bakteri, timbulnya efek samping penggunaan obat antibakteri, serta konsumsi  biaya  perawatan  yang  tinggi menunjukkan perlu dilakukannya penelitian untuk mengembangkan antibakteri  baru  khususnya  dari  bahan alam.
Salah  satu  tanaman  asli  Indonesia yang  tersebar  dengan  luas  di  beberapa daerah  di  Indonesia  yang  berpotensi untuk  dikembangkan  yaitu  tanaman
Pinang yaki ( Arecca vestiaria ).
Kandungan  kimia  dari  biji  pinang  yaki adalah  gula  50-60%,  lipid  15%,  tanin 15%  dan  0.2-0.5  %  alkaloid  (arekolin, arekaidin,  guvasin  ( tetrahidrinocotinic acid )  dan  guvakolin  (Bruneton,  1995; Eisenbrand  dan  Tang  (1992),  juga golongan  tanin,  sitosterol,  karbohidrat, saponon  dan  karotenoid  (Eisenbrand  dan
Tang 1992).  Oleh Wang dan Lee (1996), disebutkan  ekstrak  buah  pinang  selain mengandung  tanin,  juga  senyawa  flavan, fenolik,  asam  galat,  getah,  lignin  minyak menguap  dan  tidak  menguap  dan  garam. Penelitian  tentang  pinang  yaki  ( Areca vestiaria )  relative  masih  sangat  sedikit, informasi  yang  ada  masih  sebatas morfologi  tanamannya.    Sedangkan Bioekologi  baru  dilakukan  pada  tahun 2005  (Simbala,  2005).    Pada  tahun  2006 penelitian  dilanjutkan  meliputi  aspek Etnobotani.  Selanjutnya pada tahun 2007 dilakukan  pengujiam  Fitokimia. Areca vestiaria oleh  masyarakat  di  kawasan Taman Nasional Bogani Nani Wartabone, selain  digunakan  sebagai  antifertilitas, juga digunakan sebagai  anti diabetes dan antitumor.
Hasil  penelitian  Simbala  2007,  dalam buah Areca vestiaria terkandung berbagai senyawa, diantaranya flavonoid,
triterpen, dan tannin.  Di antara senyawa- senyawa  tersebut,flavonoid  mempunyai bermacam-macam  efek,  yaitu  antitumor, anti  HIV,  imuno  stimulant,  antioksidan, analgetik,  antiradang  (anti  inflamasi), antivirus, antibakteri, antifungal, antidiare,
antihepatotoksik,
antihiperglikermik, dan sebagai vasodilator (de Padua et al., 1999).

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat-alat yang digunakan, yaitu Erlenmeyer  500  mL,  gelas  ukur  500  mL dan  100  mL, aluminium  foil ,  timbangan digital,  3  tabung  reaksi,  9  cawan  petri, hot  plate , laminar  air  flow ,  gelas  piala 500  mL  dan  100  mL,  lampu  Bunsen, jarum  inokulasi  lurus,  autoklaf,  lemari pendingin, mortar dan pestle, rak tabung, korek  api,  kapas,  kertas  label,  gunting, pinset,  pisau,  evaporator,  oven,  cakram
kertas  jenis  Whatman  No  42  dengan diameter  6  mm,  mistar  dan  kain  lap,
kamera,kacamata pengaman, sarung tangan, mikropipet (10-1000 µL).
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu biji Areca  vestiaria yang  diperoleh  dari
Desa
Bilalang,
Kabupaten
Kota
Kotamobagu, biakan murni bakteri Staphylococcus aureus , Escherichia coli ,dan Pseudomonas  aeruginosa yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Farmasi FMIPA UNSRAT, medium Nutrient Agar (NA), NaCl 0.9%, akuades,  etanol  96%  dan  zat  antibiotic (ciprofloxacin).

## PERSIAPAN SAMPEL
Biji  Pinang  yaki  disortasi  basah untuk memisahkan  kotoran  atau  bahan-bahan asing  dari  biji.    Selanjutnya  biji  Pinang yaki  disikat  dibawah  air  yang  mengalir, ditiriskan  kemudian  dirajang  kecil-kecil dengan  menggunakan  pisau,  selanjutnya dikeringkan dengan cara diangin- anginkan  selama  7  hari.    Sampel  kering kemudian dihaluskan menggunakan
blender dan diayak menggunakan ayakan mesh 200 dan didapatkan serbuk simplisia halus. STERILISASI ALAT YANG

## DIGUNAKAN
Untuk mencegah terjadinya
kontaminasi  pada  saat  melakukan  uji difusi  dilakukan  sterilisasi  alat  –  alat gelas  yang  digunakan  terlebih  dahulu. Proses sterilisasi menggunakan autoclave pada  suhu  121 o C  tekanan  2  atm  selama 15 menit.

## PEMBUATAN MEDIA BAKTERI
a. Pembuatan Media Agar Miring Nutrient  Agar (NA)  sebanyak  2.8  g dilarutkan  dalam  100  mL  aquades
menggunakan  erlenmeyer.  Setelah  itu dihomogenkan dengan stirer diatas penangas air sampai mendidih. Sebanyak 5  mL  dituangkan  masing-masing  pada  3 tabung  reaksi  steril  dan  ditutup  dengan aluminium foil . Media tersebut disterilkan dalam outoklaf pada suhu 121 o C selama 15  menit,  kemudian  dibiarkan  pada  suhu ruangan selama ± 30 menit sampai media memadat  pada  kemiringan  30 o .  Media Agar  miring  digunakan  untuk  inokulasi bakteri (Lay, 1994).
b. Pembuatan Media Dasar Media  dasar  dibuat  dengan  cara ditimbang Nutrient  Agar (NA)  sebanyak
5.6  g,  lalu  dilarutkan  dalam  200  mL aquades menggunakan erlenmeyer. Media  dihomogenkan  dengan stirer diatas  penangas  air  sampai  mendidih. Media yang sudah homogen ini disterilkan  dalam autoclave pada  suhu 121 o C  selama  15  menit,  kemudian didinginkan  sampai  suhu  ±  45-50 o C. Media dasar digunakan dalam pembuatan media pengujian.

## PEMBIAKAN BAKTERI
Bakteri  uji  diambil  dengan  jarum  ose steril,  lalu  ditanamkan  pada  media  agar miring dengan cara menggores. Selanjutnya  diinkubasi  dalam  inkubator pada  suhu  37 o C  selama  24  jam. Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada setiap jenis bakteri uji (Siregar, 2009).
PEMBUATAN STANDAR

## KEKERUHAN
LARUTAN (LARUTAN Mc.  Farland )
Larutan  H 2 SO 4 0.36  N  sebanyak  99.5 mL  dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 . 2H 2 O  1,175%  sebanyak  0,5  mL  dalam erlenmeyer.    Kemudian  dikocok  sampai terbentuk  larutan  yang  keruh.  Kekeruhan
ini  dipakai  sebagai  standar  kekeruhan suspensi bakteri uji (Victor, 1980).

## PEMBUATAN  SUSPENSI  BAKTERI UJI
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi diambil  dengan  kawat  ose  steril  lalu disuspensikan  kedalam  tabung  yang berisi 2 mL larutan NaCl 0,9% hingga di peroleh  kekeruhan  yang  sama  dengan standar  kekeruhan  larutan Mc.  Farland . Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada setiap jenis bakteri uji.
PEMBUATAN EKSTRAK BIJI Areca vestiaria DAN

## LARUTAN ANTIBIOTIK
Serbuk  dari  biji Areca  vestiaria ditimbang  sebanyak  402.99  g  kemudian dimasukkan  ke  dalam  wadah  dan dimaserasi  dengan  pelarut  etanol  96% sebanyak  1000  mL  selama  5  hari  sambil sesekali  diaduk  dan  ditutup  dengan aluminium  foil .    Setelah  dimaserasi selama  5  hari,  larutan  tersebut  disaring menggunakan kertas saring yang kemudian  dimasukkan  ke  dalam  gelas Erlenmeyer  untuk  dipisahkan  residu  dari filtrat  dan  dihasilkan  filtrat  1    dan  residu 1  (Frengki  et  al.,  2014),  residu  yang  ada kemudian  ditambahkan  lagi  etanol  96% sebanyak  1000  mL,  ditutup  dengan aluminium  foil ,  dan  dibiarkan  selama  2 hari  sambil  sesekali  diaduk.  Setelah  2 hari,  sampel  disaring  menggunakan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  2  dan residu  2.  Filtrat  1  dan  2  dicampur menjadi satu, kemudian diuapkan dengan menggunakan vacuum  rotary  evaporator pada suhu 40 o C sampai diperoleh ekstrak etanol  yang  pekat.    Ekstrak  etanol  pekat lalu diuapkan di dalam oven dengan suhu 40 o C sampai kering 1 x 24 jam.  Ekstrak kering dari biji Areca vestiaria kemudian
ditimbang  dan  didapat  berat  ekstrak kering  97.8  g,  Setelah  itu  ekstrak  etanol dari Areca  vestiaria dilarutkan  di  dalam 100 mL akuades (Adam, 2014).

## PEMBUATAN LARUTAN KONTROL POSITIF
Kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan obat  tablet  Ciprofloxacin  500  mg. Kemudian serbuk Ciprofloxacin dilarutkan  dalam    larutan  aquades  untuk memperoleh  larutan  Ciprofloxacin  50µg/
50µL.

## PEMBUATAN LARUTAN UJI
Dibuat larutan uji 30%; 60%; dan 90% dengan  cara  ditimbang  0.3  g;  0.6  g;  dan 0.9  g  ekstrak  etanol  biji  pinang  yaki kemudian  masing  –  masing  dilarutkan dalam 1 mL aquades.

## PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  metode  Kirby- Bauer,  yaitu  metode  difusi  dengan cakram  kertas.    Medium  NA  dituang kecawan  petri  sebanyak  10  mL,  masing- masing
Bakteri Pseudomonas aeruginosa , Staphylococcus  aureus ,  dan Escherichia  coli sebagai  biakan  uji, dipipet  dari  medium  larutan  NaCl  0.9% ke  3  cawan  petri  steril  masing-masing sebanyak  200  µl.    cawan  petri  kemudian digoyang  secara  perlahan-lahan  untuk menyebarkan biakan bakteri secara merata  dan  didiamkan  hingga  medium memadat  (Rostinawati,  2009).    Masing- masing dari cakram kertas steril dipindahkan secara aseptik menggunakan pinset  steril  ke  konsentrasi  yakni,  30%, 60%,  dan  90%  serta  larutan  antibiotik (control  positif)  dan  larutan  akuades (control  negatif)  direndam  ±  1  menit
(Tangopa,  2005).    Cakram  kertas  yang telah direndam dengan ekstrak etanol biji Areca  vestiaria ,  larutan  akuades,  serta antibiotik  Ciprofloxacin,  dipindahkan dengan pinset steril ke medium NA berisi
Pseudomonas
aeruginosa ,
Staphylococcus  aureus ,  dan Escherichia coli secara  aseptic,  kemudian  diinkubasi selama  1  x  24  jam  dengan  suhu  37 o C. setelah  diinkubasi,  diamati  zona  bening yang terdapat disekitar kertas cakram dan diukur  diameternya.    Pengujian  daya hambat  antibakteri  ekstrak  etanol  biji Areca  vestiaria terhadap Pseudomonas aeruginosa , Staphylococcus  aureus ,  dan Escherichia  coli dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan untuk setiap konsentrasi yang diuji (Tangapo, 2005).

## ANALISIS DATA
Zona  bening  atau  daya  hambat  dari diameter  ekstrak  etanol  biji Areca
vestiaria disajikan  dalam  tabel  dan gambar. Penggolongan kekuatan antibakteri  dari  daya  hambat  yang diperoleh  ekstrak  etanol  biji Areca vestiaria digolongkan menurut Davis dan Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## EKSTRAKSI BIJI PINANG YAKI
Hasil maserasi  berupa filtrat  berwarna merah  kehitaman  sebanyak  450  mL. kemudian  diuapkan  menggunakan  rotary evaporator  diperoleh  ekstrak  kental, kemudian  ekstrak  kental  dikeringkan  di oven  selama  1x24  jam  didapat  sebanyak 97.8 g.

## UJI  AKTIVITAS  DAYA  HAMBAT ANTIBAKTERI  EKSTRAK  PINANG

## YAKI ( Areca vestiaria )
Pengukuran  diameter  zona  hambat dilakukan untuk menggolongkan antibakteri.    Zona  bening  yang  terdapat disekitar  cakram  kertas  yang  diuji menandakan bahwa terjadi bakteri aktivitas  daya  hambat.    Adanya  zona bening disekitar cakram kertas merupakan daerah difusi dalam mempengaruhi pertumbuhan bakteri.
Kekuatan  antibakteri  dapat  diketahui dengan mengukur besarnya diameter dari zona hambat yang terbentuk oleh ekstrak yang diuji.
Tabel  1.    Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak  Biji Areca  vestiaria Terhadap Escherichia  coli , Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa
Hasil  pengujian  dari  esktrak  etanol  biji
Areca vestiaria terhadap bakteri Escherichia  coli ,  terlihat  memiliki  zona bening di konsentrasi 30%, 60% dan 90% masing-masing sebesar 15.3 mm, 16 mm dan 10.33 mm. Kemampuan menghambat dari  ekstrak  biji  pinang  yaki  tampaknya lebih lemah dibandingkan dengan antibiotika ciprofloxacin yaitu sebesar 36 mm. namun dari hasil penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  biji  pinang yaki  mempunyai  aktivitas  antibakteri terhadap  bakteri Escherichia  coli ,  hal  ini terlihat  dari  zona  bening  yang  terbentuk disekitar  cakram.    Daya  hambat  ekstrak etanol  biji  pinang  yaki  pada  konsentrasi 30%,  60%,  dan  90%  memiliki  kekuatan antibakteri yang kuat.
Hasil  pengujian  ekstrak  etanol  biji Areca vestiaria terhadap bakteri Staphylococcus  aureus ,  terlihat  memiliki zona  bening  di  konsentrasi  30%,  60%, dan  90%  masing-masing  sebesar  12.5 mm;  26.16  mm  dan  25  mm.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  biji  pinang yaki  memiliki  aktivitas  antibakteri  dan mampu menghambat pertumbuhan bakteri S.  aureus .  Daya  hambat  ekstrak etanol  biji  pinang  yaki  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi 30  %  (12.5  mm)  memiliki  kekuatan antibakteri  yang  termasuk  kategori  kuat, sedangkan  pada  konsentrasi  60%  (26.6 mm)  dan    90%  (25  mm)  memiliki kekuatan  antibakteri  kategori sangat  kuat karena  mempunyai  diameter  diatas  20 mm.
Hasil  pengujian  ekstrak  etanol Areca vestiaria terhadap  bakteri Pseudomonas aeruginosa , terlihat memiliki zona bening di  konsentrasi  30%,  60%  dan  90% masing-masing  yaitu  sebesar  17.83  mm; 21.16 mm dan 20.83. Hal ini
menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  biji pinang yaki memiliki aktivitas antibakteri terhadap  bakteri P.  aeruginosa pada konsentrasi  30%  (17.83  mm)  memiliki kekuatan  antibakteri  yang  termasuk kategori kuat, sedangkan pada konsentrasi  60%  (21.16  mm)  dan  90%
(20.83 mm) memiliki kekuatan
antibakteri kategori sangat kuat.
Menurut  Davis  dan  Stout  (1971), dimana kekuatan antibakteri dapat dikelompokkan sebagai berikut :
a. Daerah  hambatan  20  mm  atau  lebih: sangat kuat
b. Daerah hambatan 10-20 mm:  kuat
c. Daerah hambatan 5-10 mm:  sedang
d. Daerah  hambatan  5  mm  atau  kurang: lemah.
Berdasarkan  kriteria  tersebut,  maka daya  antibakeri  esktrak  biji Areca vestiaria pada  bakteri Escherichia  coli dengan  konsentrasi  ekstrak  30%,  60%, dan 90% termasuk kuat.  Daya antibakteri Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi esktrak  30%  termasuk  kuat,  konsentrasi 60%,  dan  90%  termasuk  sangat  kuat.
Sedangkan daya antibakteri Pseudomonas aeruginosa pada konsentrasi 30% termasuk kuat, konsentrasi  60%  dan  90%  termasuk sangat  kuat.    Dengan  demikian  diketahui bahwa ketiga konsentrasi yang digunakan merupakan  konsentrasi  yang  efektif untuk  menghambat  bakteri Escherichia coli , Staphylococcus aureus , dan Pseudomonas  aeruginosa ,  sebab  pada konsentrasi ekstrak tersebut daya antibakterinya dikategorikan kuat bahkan sampai  sangat  kuat  untuk  menimbulkan zona hambatan yang besar.
Hasil pengujian dari ketiga konsentrasi yang  digunakan  didapat  juga  bahwa konsentrasi  60%  merupakan  konsentrasi yang memiliki diameter zona paling besar
dibandingkan  konsentrasi  30%  dan  90%. Pada Escherichia  Coli didapat  diameter sebesar  16  mm,  pada Staphylococcus aureus didapat  diameter  sebesar  26.16 mm  dan  pada Pseudomonas  aeruginosa didapat diameter sebesar 21.16 mm.  Hal ini  mungkin  pada  konsentrasi  60% terdapat  senyawa  aktif  tertentu  yang terkandung  dalam  ekstrak  biji Areca vestiaria yang mampu membunuh biakan uji.
Hasil  penelitian  Simbala  (2007), dalam  biji Areca  vestiaria terkandung senyawa  flavonoid,  saponin,  dan  tannin. Senyawa  flavonoid  memiliki  potensi sebagai  antibakteri  (de  Padua  et  al., 1999).    Hal  inilah  yang  menjadi  dasar adanya  zona  bening  yang  ditunjukkan oleh ekstrak biji Areca vestiaria terhadap bakteri Escherichia  coli , Staphylococcus aureus , dan Pseudomonas aeruginosa .
Flavanoid  merupakan  senyawa  polar yang  umumnya  mudah  larut  dalam pelarut  polar  seperti  etanol,  menthanol, butanol,  dan  aseton  (Markham,  1998). Flavanoid  merupakan  golongan  terbesar dari  senyawa  fenol,  senyawa  fenol mempunyai  sifat  efektif  menghambat pertumbuhan  virus,  bakteri  dan  jamur. Khunaifi  (2010)  menambahkan  bahwa senyawa-senyawa  flavanoid  umumnya bersifat  antioksidan  dan  banyak  yang telah  digunakan  sebagai  salah  satu komponen bahan baku obat-obatan.
Senyawa  flavanoid  dan  turunannya memilki  dua  fungsi  fisiologi  tertentu, yaitu sebagai bahan kimia untuk mengatasi  serangan  penyakit  (sebagai antibakteri)  dan  anti  virus  bagi  tanaman. Para  peneliti  lain  juga  menyatakan pendapat sehubungan dengan mekanisme kerja  dari  flavonoid  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri,  antara  lain  bahwa flavonoid menyebabkan terjadinya
kerusakan  permeabilitas  dinding  sel bakteri  (Sabir,  2008).  Didukung  juga dengan penelitian Mirzoeva et al., (1997) mendapatkan  bahwa  flavonoid  mampu menghambat motilitas bakteri.
Saponin  merupakan  glukosida  yang larut  dalam  air  dan  etanol,  tetapi  tidak larut dalam eter. Saponin bekerja sebagai antibakteri dengan mengganggu stabilitas membran sel bakteri sehingga menyebabkan  sel  bakteri  lisis,  jadi mekanisme kerja saponin termasuk dalam kelompok  antibakteri  yang  mengganggu permeabilitas  membran  sel  bakteri,  yang mengakibatkan  kerusakan  membran  sel dan  menyebabkan  keluarnya  berbagai komponen penting dari  dalam sel  bakteri yaitu protein, asam nukleat dan nukleotida (Ganiswarna, 1995).
Tannin  tersebar  luas  dalam  tumbuhan berpembuluh, dalam angiospermae terdapat  khusus  dalam  jaringan  kayu (Harborne,  1987).    Senyawa  tannin mampu menghambat pertumbuhan bakteri  dengan  cara  mengkoagulasi protoplasma  bakteri  (Pratiwi,  2008).
Menurut Masduki (1996), tannin memiliki peran sebagai antibakteri dengan  cara  mengikat  protein  sehingga pembentukan dinding sel akan terhambat. Tannin  juga  terkandung  didalam  ekstrak biji Pinang yaki(Simbala, 2007).
Mekanisme penghambatan tannin yaitu  dengan  cara  dinding  bakteri  yang telah  lisis  akibat  senyawa  saponin  dan flavonoid, sehingga menyebabkan senyawa  tannin  dapat  dengan  mudah masuk  ke  dalam  sel  bakteri  dan mengkoagulasi protoplasma sel bakteri S. aureus dan E.  coli .  Pada  penelitian Ajizah (2004) yang menggunakan ekstrak daun Psidium guajava L. yang mengandung  tannin  dapat  menekan pertumbuhan bakteri E. coli .
Daya  hambat  dari  ekstrak  etanol  biji pinang  yaki  terhadap  bakteri  Gram negatif ( Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa ) memiliki aktivitas  antibakteri  yang  tergolong  kuat, namun  dari  ketiga  konsentrasi  yang digunakan  ternyata    ekstrak  etanol  biji pinang  yaki  masih  tergolong  lemah dibandingkan  dengan  antibotik  yang digunakan  yaitu  ciprofloxacin.  Hal  ini disebabkan  karena  bakteri  gram  negatif lebih  banyak  mengandung  lipid,  sedikit peptidoglikan,  membran  luar  berupa bilayer  (berfungsi  sebagai  pertahanan selektif  senyawa  -senyawa  yang  keluar atau  masuk  sel  dan  menyebabkan  efek toksik).  Membran  luar  terdiri  dari fosfolipid (lapisan dalam) dan lipoposakarida  (lapisan  luar).  Hal  ini yang  menyebabkan  senyawa  aktif  dalam ekstrak etabol biji pinang  yaki lebih sulit untuk  masuk  kedalam  sel  sehingga aktivitas antibakteri lebih lemah dibandingkan  antibiotik  yang  digunakan yaitu ciprofloxacin.
Daya  hambat  dari  ekstrak  etanol  biji pinang yaki terhadap bakteri Gram positif ( Staphylococcus aureus ) memiliki aktivitas  antibakteri  yang  tergolong sangat  kuat  yakni  pada  konsentrasi  60% dan 90%, dibandingkan dengan antibiotik yang digunakan ekstrak etanol biji pinang yaki  lebih  baik  dalam  menghambat  dan membunuh  bakteri  S.  aureus.  Hal  ini disebabkan  karena  bakteri  Gram  positif memiliki dinding sel dengan lebih banyak peptidoglikan,  sedikit  lipid,  dan  dinding sel  mengandung  polisakarida  (asam teikoat).    Asam  teikoat  merupakan polimer  yang  larut  dalam  air,  yang berfungsi  sebagai  transport  ion  positif untuk  keluar  atau  masuk.    Sifat  larut  air inilah  yang  menunjukkan  bahwa  dinding sel  bakteri    Gram  positif    bersifat  lebih
polar.    Menurut  penelitian  Simbala  2007 Pinang Yaki memiliki kandungan flavonoid  yang  bersifat  polar,  dari  hal inilah sehingga senyawa aktif dari ekstrak lebih mudah menembus lapisan peptidoglikan yang bersifat polar daripada  lapisan  lipid  yang  nonpolar.
Sehingga menyebabkan aktivitas antibakteri yang lebih besar.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Mpila
(2012)  memberikan  hasil  bahwa  ekstrak daun mayana memiliki aktivitas antibakteri  terhadap Escherichia  coli , Staphylococcus aureus , dan
Pseudomonas  aeruginosa .    Menurut penelitian  Sari  (2010)  memberikan  hasil bahwa  ekstrak  infusa  daun  Sirsak memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus .    Menurut  penelitian  Hermawan (2007)  memberikan  hasil  bahwa  ekstrak daun  sirih  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak etanol biji pinang  yaki ( Areca vestiaria )  memiliki  aktivitas  sebagai antibakteri terhadap E. coli , S. aureus , dan P. aeruginosa
2. Konsentrasi  ekstrak  30%,  60%,  dan 90%  merupakan  konsentrasi  yang efektif  untuk  menghambat  bakteri Escherichia  coli karena  termasuk dalam  kategori  kuat.  Konsentrasi ekstrak  60%  dan  90%  merupakan konsentrasi yang efektif untuk menghambat  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa karena termasuk dalam kategori sangat kuat.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk  mengetahui senyawa spesifik  yang berkhasiat  sebagai  antibakteri  pada  biji pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  dan aktivitas  antibakterinya  pada  bakteri pathogen yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Adam A.  A.  2014 .  Aktivitas Antibakteri Esktrak Kasar Tunikata Polycarpa aurata Terhadap Streptococcus  mutans .    [Skripsi]. Manado. Universitas Sam Ratulangi Manado.
Brooks,  G.  F.,  Carroll,  K.,  Butel,  J.S.
Jawetz,  Melnick,  &  Adelberg’s
Medical Microbiology .  Ed ke-26. Philadelphia: McGraw-Hill Company Inc; 2013
Bruneton.    J..    1995.. Pharmacognosy Phytochemistry  Medicinal  Plants.
New  Yotk:  Intercept  Ltd.    705-
706 Cowan, Marjorie Kelly. 2012.
Microbiology : a sistems approach. Thrid Edition. McGraw-Hill International Edition. Americans:New York Davis  dan  Stout,  1971. Disc  Plate Method Of Microbiological Antibiotic  Essay .    Journal  Of
Microbiology.  Vol 22 No 4.
Dorland,  W.    A.,  2002 .    Kamus
Kedokteran  Dorland ,  Edisi  29, Jakarta, Penerbit Buku Kedokteran EGC
de Padua, L.  S.  ,  Bunyapraphatsara, N. and Lemmens, R.  H.  M.  S, Plant Resource  of  South  East  Asia  No 12(1). Medical  and  Poisonous Plants  1 .    Printes  in  Bogor Indonesia  (PROSEA).    Leiden,
the Netherlands, Backhuys Publishers, 1999: 36-48
Eisenbrand  dan  Tang,  1992, Chinese Drugs of Plant Origin , Chemistry,
Pharmacology,and Use in Traditional and Modern Medicine, New  York,  Springer-Verlag,  p. 139-143.
Frengki., Roslizawaty., Pertiwi D.  2014.
Uji  Toksisitas  Ekstrak  Etanol
Sarang Semut Lokal Aceh (Mymercodia sp.) Dengan Metode BSLT  Terhadap  Larva  Udang
Artemia  salina  Leach .    Jurnal Medika  Viterinaria  8(1):  0853-
194
Hermawan,  A.    2007.    Pengaruh  Ekstrak
Daun  Sirih  ( Piper  Betle L.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan
Escherichia  coli  dengan  metode difusi  disk .    Fakultas  Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga
Khunaifi,  M.  2010. Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Binahong  (Anredera  cordifolia (Tenore) steenis) Terhadap Bakteri  Staphylococcus  Aureus
Dan  Pseudomonas  Aeruginosa .
Terdapat pada http://lib.uin-
malang.ac.id/fullchapter/0352002
5 .    pdf.    Diakses  pada  tanggal  13
Maret 2011.
Lay,  B.    W.    1994. Analisis  Mikroba  di Laboratorium .    Edisi  1.    Raja Grafindo Persada, Jakarta
Markham,  K.    R.    1998. Cara Mengidentifikasi Flavonoid . Bandung, Penerbit : ITB
Mirzoeva O.  K., Grishanin R.  N., Calder
P.    C.  1997. Microbiol  Res  : Antimicrobial    action  of  propolis and  some  of  its  components:  the effects  on  growth,  membrane potential, and motility of bacteria . 152: 239 - 46.
Mpila,  Deby.    A.    2012. Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Mayana  (Coleus  Atropurpuneus [L] Benth) Terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Psedumonas aeruginosa . Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT, 95115 Sabir,  A.  2008.    In  Vitro  Antibacterial Activity  Of  Flavonoids  Trigona Sp Propolis Against Streptococcus  Mutans.  Terdapat pada http://www.journal.unair.ac.id/file rPDF/DENTJ-383-08.pdf .
Diakses  pada  tanggal  16  Maret 2011.
Sari,  Yeni.    D.    2010. Uji  Aktivitas
Antibakteri  Infusa  Daun  Sirsak (Annona  muricata  L.)  Secara  in
Vitro  Terhadap  Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia  coli  ATCC  35218 Serta  Profil  Kromatografi  Lapis Tipis . Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta.  ISSN : 1978-6575
Siregar,  S.    F.    2009. Ujia  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  dan
Air  Rebusan  Kulit  Batang  Ingul (Toona  sinensis  M.    Roem)
Terhadap Beberapa Bakteri
[Skripsi],  Fakultas  Farmasi  USU,
Medan
Simbala H E I, Rondonuwu S J, Syamsul A  A,  de  Queljoe  E,  2005. Pemberdayaan  Keanekaragaman Tumbuhan  Obat  di  Sulawesi Utara (Tahap II) tahun 2005.
Simbala H E I.  2007. Uji Toksisitas dan Uji Preklinik Areca vestiaria/Pinang yaki sebagai antifertilitas .
Pratiwi S.U.T. 2008. Mikrobiologi Farmasi . Jakarta. Erlangga
Medical Series
Tangapo  A.    M.    2005. Efektivitas Antibakteri  Ekstrak  Tumbuhan Daun  Sendok  (Plantago  major) Terhadap  Staphylococcus  aureus dan  Pseudomonas  aeruginosa [Skripsi].    Manado .    Universitas Sam Ratulangi
Victor,  L.    1980.    Antibiotics  in Laboratory  Test.    The  Williams and Wilkins Comapany, USA
Wang,  C.L.,  dan  Lee,  W.H.,1996, Separation Caracteristic, and Biological  Activities  of  Phenolics in  Areca  Fruit, J.Agric.Food Chem ., 44, 2014-2019