Respon Pemberian Virgin Coconut Oil dan Olive Oil Terhadap Mikroanatomi Testis Tikus Putih Jantan ( Rattus norvegicus )
Response Microanatomy Testis Male Rats ( Rattus norvegicus ) to Provision of Virgin Coconut Oil and Olive Oil
Sella Widya Astuti 1 *, Enny Yusuf  Wachidah Yuniwarti 2 , Muhammad Anwar Djaelani 2 1 Program Studi Biologi, Departemen  Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro
2 Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH Tembalang Semarang
*Email : sellawidyaastuti@gmail.com
Diterima 26 Juli 2016/Disetujui 17 Februari 2017

## ABSTRAK
Virgin  Coconut  Oil memiliki  kandungan  vitamin  E  dan  polifenol  yang  mampu  meningkatkan  enzim-enzim antioksidan dan menurunkan kandungan peroksida, sedangkan olive oil berperan sebagai antioksidan karena adanya oleocanthal dan oleuropein yang serupa dengan vitamin E. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui manfaat VCO dan olive oil terhadap spermatogenesis. Penelitian ini menggunakan 25 ekor tikus jantan yang terdiri  atas  5  perlakuan  dan  5  ulangan.  Perlakuan  yang  digunakan  yaitu  P0:  kontrol,  P1:  pakan  dengan penambahan  VCO  5  ml/kg  pakan,  P2:  pakan  dengan  penambahan  VCO  10  ml/kg  pakan,  P3:  pakan  dengan penambahan olive oil 5 ml/kg pakan, dan P4: pakan dengan penambahan olive oil 10 ml/kg pakan. Penelitian ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Variabel  yang  diamati  adalah  jumlah  spermatogonia, jumlah  spermatosit  primer,  dan  bobot testis.  Data  yang  diperoleh  kemudian  dianalisis  dengan  menggunakan uji ANOVA pada taraf signifikansi 5% dan uji lanjut Duncan. Hasil analisis data menunjukkan tidak terdapat perbedaan  yang  nyata  pada  pemberian  VCO  dan olive  oil terhadap  jumlah  spermatogonia  dan  bobot  testis, serta berbeda nyata terhadap jumlah spermatosit primer. Simpulan dari penelitian ini VCO dan olive oil dapat meningkatkan jumlah spermatosit primer pada tubulus seminiferus.
Kata kunci : Virgin Coconut Oil, olive oil, testis

## ABSTRACT
Virgin  Coconut  Oil  contains  vitamin  E  and  polyphenols  that  can  increased  antioxidant  enzymes  and  reduce peroxides, however olive oil serves as antioxidant because oleocanthal and oleuropein were similar to vitamin E. This research aimed to study the benefit of VCO and olive oil for spermatogenesis. This research used 25 male  rats  which  consists  of  5  treatments  and  5  replicates.  The  main  experiment  used  P0:  control,  P1:  food added with 5 ml/kg of VCO, P2: food added with 10 ml/kg of VCO, P3: food added with 5 ml/kg of olive oil, and P4: food added with 10 ml/kg olive oil. This research used CRD method (complete randomized design). The observed variables was the number of spermatogonia, primary spermatocytes, and testes weight, which at last the observation data would be experimented with ANOVA method on 5 % significance and also further experimented with Duncan method. The analysis result showed that there was not significant between giving VCO and olive oil to spermatogonia and testes weight. The analysis data also showed that was VCO and olive oil affected the number of primary spermatocytes. The resume of this research was to study that both of VCO and olive oil can increased the number of primary spermatocytes on tubulus seminiferus.
Keywords : Virgin coconut Oil, olive oil, testes

## PENDAHULUAN
Infertilitas  merupakan  masalah  yang  dialami pria  dan  wanita  diseluruh  dunia.  Kasus  infertilitas
baik  pria  maupun  wanita  di  negara-negara  maju seperti  Amerika  dan  Jepang  ditemukan  sekitar  80% dari  400  juta  pasangan.  Para  ahli  memastikan  angka
infertil meningkat mencapai 15%-20% dari sekitar 50 juta  pasangan  di  Indonesia  (Wahyuni,  2012).  Faktor infertilitas  pria  memegang  peranan  50%  dari keseluruhan  kasus,  antara  lain  disebabkan  karena proses spermatogenesis kurang optimal (Agarwal and Prabakaran, 2005).
Spermatogenesis  adalah  proses  terbentuknya spermatozoa  dari  spermatogonium,  melalui  proses perkembangan yang kompleks dan teratur. Spermatogenesis terjadi di dalam tubulus seminiferus testis  (Widotama,  2008).  Testis  sangat  rentan terhadap  proses  oksidasi  oleh  radikal  bebas. Membran  sel  spermatogonia  mengandung  sejumlah besar  asam  lemak  tak  jenuh  rantai  ganda.  Radikal bebas    yang  terbentuk  jika  bertemu  dengan  asam lemak  tak  jenuh  ganda  dalam  membran  sel,  akan terjadi  reaksi  peroksidasi  lipid  (Sukmaningsih  dkk., 2011).  Peroksidasi  lipid  pada  membran  sel spermatogenik menghasilkan senyawa malondialdehyde (MDA) (Permatasari dkk., 2011).
Hewan  tingkat  tinggi  yang  hidup  secara aerobik  akan  menghasilkan  radikal  bebas  sebagai produk  samping  dari  metabolisme  tubuh,  terutama yang  berasal  dari  fosforilasi  oksidatif  dalam mitokondria  (Widayati,  2012).  Tubuh  membutuhkan asupan  antioksidan  untuk  menetralisir  radikal  bebas (Quratul’ainy,  2006).  Antioksidan  dapat  berupa antioksidan  endogen  dan  antioksidan  eksogen. Antioksidan endogen yaitu antioksidan yang diproduksi  di  dalam  tubuh  seperti glutation peroksidase , superoksida  dismutase ,  dan  katalase. Antioksidan  eksogen  berasal  dari  makanan,  seperti vitamin  E,  vitamin  C,  beta  karoten,  zinc,  dan selenium (Silvani, 2015).
Virgin Coconut Oil (VCO)  mengandung asam lemak  jenuh  yang  tinggi  sehingga  menyebabkan VCO  tahan  terhadap  proses  ketengikan  akibat oksidasi. VCO juga mengandung tokoferol. Tokoferol  mengandung  komponen  aktif  biologis sebagai  aktivitas  vitamin  E  yang  berperan  dalam menjaga  kekebalan  tubuh  manusia  (Alamsyah, 2005).
Penelitian  yang  dilakukan  Jasda  dkk.  (2014), menunjukkan  rerata  jumlah  spermatozoa  pada  tikus yang  diberi  diet  lemak  yang  tinggi  dan  penambahan VCO  sebesar  1  ml;  1,2  ml;  dan  2  ml,  mampu meningkatkan jumlah spermatozoa dibanding dengan tikus  yang  diberi  diet  lemak  yang  tinggi  tanpa
penambahan  VCO.  VCO  diketahui  juga  dapat meningkatkan  daya  tahan  tubuh  hewan  melalui peningkatan  aktivitas  fagositosis  makrofag  pada ayam  yang  diberi  VCO  10  ml/kg  pakan  (Yuniwarti, 2013).
Sumber  antioksidan  juga  terdapat  pada olive oil.  Olive  oil mengandung  senyawa  seperti  fenol, tokoferol, sterol, dan squalene yang berperan penting untuk kesehatan. Salah satu komponen penting olive oil adalah tokoferol yaitu vitamin E, yang terdiri atas tokoferol  alfa,  beta,  gamma,  dan  delta. Olive  oil sangat ideal sebagai antioksidan (Anggraeni, 2011).
Vitamin  E  diperlukan  untuk  menormalkan epitel  pada  tubulus  seminiferus,  dan  memperlambat reaksi peroksidasi karena mampu menangkap radikal bebas dan memutus rantai proses peroksidasi lipid di dalam  membran,  sehingga  terbentuk  radikal  vitamin E yang stabil dan tidak merusak (Astuti dkk., 2008). Berdasarkan  latar  belakang  tesebut,  maka  perlu diteliti  lebih  lanjut  mengenai  respon  pemberian Virgin  Coconut  Oil dan olive  oil terhadap mikroanatomi  testis  tikus  putih  jantan (Rattus norvegicus).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Biologi  Struktur  dan  Fungsi  Hewan,  Departemen Biologi,  Fakultas  Sains  dan  Matematika  Universitas Diponegoro,  pada  bulan  Januari  sampai  bulan  Mei 2015.  Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  tikus  putih jantan strain wistar sebanyak 25 ekor. Kandang tikus yang  digunakan  berupa  wadah  plastik  berbentuk kotak  berukuran  25  cm  x  35  cm.  Kandang  dibuat sebanyak  25  buah  dan  masing-masing  kandang ditempatkan  satu  ekor  tikus.  Kandang  dilengkapi dengan tempat makan dan minum tikus.
Penempatan  kandang  tikus  dilakukan  secara acak dengan cara membuat undian dari kertas. Tikus diaklimasi  dalam  kandang  individu  yang  diberi sekam  dan  tempat  makan  selama  7  hari.  Penelitian ini  menggunakan  5  perlakuan,  yang  terdiri  dari  P0: kontrol  dengan  pakan  standart,  P1:  pakan  dengan penambahan VCO 5 ml/kg pakan, P2: pakan dengan penambahan VCO 10 ml/kg pakan, P3: pakan dengan penambahan olive  oil 5  ml/kg  pakan,  dan  P4:  pakan dengan penambahan olive oil 10 ml/kg pakan. Setiap perlakuan  diulang  sebanyak  5  kali  ulangan.
Respon Pemberian Virgin Coconut Oil dan Olive Oil Terhadap Mikroanatomi Testis Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus)
Perlakuan diberikan selama 4 minggu kemudian tikus dibedah  untuk  diambil  organ  testisnya,  setelah sebelumnya  dimatikan  dengan  pemberian  anestesi. Testis ditimbang dengan timbangan analitik kemudian  dibuat  preparat  histologis  untuk  diamati jumlah  spermatogonia  dan  jumlah  spermatosit primer.
Pembuatan  preparat  dengan  menggunakan metode  paraffin  dengan  pewarnaan  Hematoxylin Eosin.  Pengamatan  jumlah  spermatogonia  dan spermatosit  primer  dilakukan  dengan  menggunakan fotomikrograf pada perbesaran 400x. Masing-masing preparat diambil 5 tubulus seminiferus yang memiliki bentuk  sama  dan  kemudian  dihitung  jumlah spermatogonia  dan  jumlah  spermatosit  primer dengan menggunakan hand counter. Data berat testis, jumlah  spermatogonia,  dan  jumlah  spermatosit primer  dianalisis  dengan  menggunakan  uji  ANOVA dan uji lanjut Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil analisis rata-rata dari jumlah spermatogonia, jumlah spermatosit primer, dan berat testis  tikus  dari  penelitian  dengan  pemberian Virgin
Coconut Oil dan olive oil pada pakan disajikan pada Tabel 1.
Hasil  analisis  penambahan  VCO  dan olive  oil pada  pakan  terhadap  jumlah  spermatogonia  dengan Analysis  of  Variance (ANOVA)  menunjukkan  hasil yang  tidak  berbeda  nyata  (P>0.05).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  VCO  dan olive  oil tidak mempengaruhi  jumlah  spermatogonia  pada  tubulus seminiferus  tikus.  Antioksidan  pada  VCO  dan olive oil tidak berpengaruh terhadap jumlah spermatogonia diduga  karena  sel  spermatogonia  merupakan  sel induk  dimana  proses  spermatogenesis  baru  akan dimulai.  Proses  spermatogenesis  dimulai  dengan  sel benih  primitif,  yaitu  spermatogonia  mengalami mitosis dan menghasilkan generasi sel-sel yang baru. Sel-sel  ini  dapat  terus  membelah  sebagai  sel  induk, yang  disebut  spermatogonium  tipe  A  atau  dapat berdeferensiasi  selama  siklus  mitosis  yang  progresif menjadi spermatogonium B. Spermatogonium tipe B berasal dari tipe A yang membelah dan meninggalkan  kemampuannya  untuk  membelah secara  mitosis,  untuk  kemudian  menyelesaikan proses spermatogenesis (Akbar, 2010).
Tabel 1. Hasil analisis rata-rata jumlah spermatogonia, jumlah spermatosit primer, dan berat testis tikus.
Variabel Perlakuan P0 P1 P2 P3 P4 Jumlah Spermatogonia (sel) 44,60 a ±4,28 50,20 a ±2,95 49,20 a ±2,49 47,00 a ±2,92 48,40 a ±4,34 Jumlah Spermatosit primer (sel) 47,80 b ±3,11 54,60 a ±2,30 53,40 a ±2,51 51,60 a ±3,13 52,20 a ±2,77 Berat testis (g) 1,278 a ±0,24 1,336 a ±0,07 1,336 a ±0,06 1,294 a ±0,06 1,260 a ±0,06
Keterangan : Angka yang ditunjukkan dengan superskrip yang sama pada baris yang sama menunjukkan perbedaan tidak  nyata  (P>0,05).P0:  Pakan  dengan  perlakuan  kontrol,  P1:  Pakan  dengan  penambahan  VCO  5 ml/kg pakan, P2: Pakan dengan penambahan VCO 10 ml/kg pakan, P3: Pakan dengan penambahan olive oil 5 ml/kg pakan, dan P4: Pakan dengan penambahan olive oil 10 ml/kg pakan.
Hasil  analisis  penambahan  VCO  dan olive  oil pada  pakan  terhadap  jumlah  spermatosit  primer dengan Analysis of Variance (ANOVA) menunjukkan  hasil  yang  berbeda  nyata  (P<0.05). Hasil  uji  lanjut  dengan  uji  Duncan  menunjukkan terdapat  perbedaan  nyata  antara  P0  dengan  P1,  P0 dengan  P2,  P0  dengan  P3,  dan  P0  dengan  P4, sedangkan  P1  dengan  P2,  P3,  dan  P4  menunjukkan
tidak berbeda nyata. Hal ini menunjukkan penambahan  VCO  dan olive  oil pada  pakan  dapat meningkatkan  jumlah  spermatosit  primer  pada tubulus seminiferus . Peningkatan jumlah spermatosit primer  tersebut  diduga  karena  VCO  mengandung asam  laurat  yang  mampu  menjadi  sumber  energi. Energi ini digunakan untuk meningkatkan metabolisme, sehingga dapat membantu
berlangsungnya  proses  spermatogenesis  (Jasda  dkk., 2011).  Sifat  antioksidan  yang  terdapat  pada  VCO mampu  untuk  menurunkan  stres  oksidatif  dan mencegah  kerusakan  jaringan  pada  testis  serta melindungi  jalur  metabolisme  testosteron  terhadap peroksidasi (Dosumo et al., 2010).
Testosteron  dihasilkan  oleh  sel  interstitial leydig  jika  testis  dirangsang  LH  dari  kelenjar hipofisis  dan jumlah  testosteron  yang  disekresi  kira- kira  sebanding  dengan  jumlah  LH  yang  tersedia. Perubahan spermatogonia menjadi spermatosit dalam tubulus  seminiferus  dirangsang  oleh  FSH  dari kelenjar    hipofisis  anterior.  LH  dan  FSH  disekresi oleh  kelenjar  hipofisis  anterior  akibat  aktivitas  saraf pada hipotalamus (Nandari, 2006).
Penelitian  Yuniwarti  (2015)  menyebutkan bahwa kandungan vitamin E dan polifenol pada VCO mampu  meningkatkan  enzim-enzim  antioksidan  dan menurunkan  kandungan  peroksida,  sedangkan olive oil berperan  sebagai  antioksidan  karena  adanya oleocanthal  dan  oleuropein  yang  serupa  dengan vitamin  E. Olive  oil juga  mengandung  komponen fenol  yang  mempunyai  efek  positif  terhadap kerusakan  oksidatif.  Senyawa  polifenol  meliputi flavonol,  isoflavon,  flavanon,  antosianidin,  katekin, dan  biflavan.  Polifenol  bersifat  sebagai  antioksidan karena kemampuannya melawan pembentukan radikal bebas dalam tubuh (Putri dkk., 2014).
Jasda  dkk.  (2011)  dalam  penelitiannya menyebutkan  VCO  memiliki  kandungan  polifenol dan  asam  lemak  dengan  nilai  tertinggi  adalah  asam laurat.  Polifenol  memiliki  efek  sebagai  antioksidan dan  prooksidan.  Kandungan  polifenol  pada  VCO, jika  diberikan  pada  dosis  tinggi  dapat  meningkatkan stress oksidatif  karena  tingginya  antioksidan  bersifat prooksidan  sehingga  dapat  menyebabkan  kerusakan membran karena lipid peroksidasi.
Peningkatan jumlah spermatosit primer setelah pemberian olive oil diduga karena olive oil memiliki peran  penting  dalam  perbaikan  kerusakan  testis dengan  mengurangi  stres  oksidatif  dan  melindungi kerusakan  organ  reproduksi  selama  toksisitas  (Al- Ani,  2013).  Vitamin  E  mampu  mempengaruhi kualitas  spermatozoa.  Vitamin  E  merupakan  agen pendorong  atau  pemacu  fertilitas,  yaitu  untuk menormalkan  epitel  pada  tubulus  seminiferus. Degenerasi epitel tubulus seminiferus akibat defisiensi  vitamin  E  pada  tikus  jantan  menyebabkan
penghambatan spermatogenesis, menghentikan produksi  sperma,  dan  degenerasi  sel  benih  (Astuti dkk., 2008).
Antioksidan  mampu  meningkatkan  produksi testosteron,  hormon  penting  yang  terlibat  dalam produksi  dan  pematangan  spermatozoa  di  tubulus seminiferus  dari  testis.  Hal  ini  mampu  menghambat kerusakan  pada  membran  sel  akibat  radikal  bebas, sehingga  ikatan  antara  hormon  yang  berperan  dalam proses  spermatogenesis  dengan  reseptor  hormon tidak  terganggu  dan  proses  spermatogenesis  lebih optimal (Umar dkk., 2015).
Hasil  analisis  penambahan  VCO  dan olive  oil pada  pakan  terhadap  berat  testis  dengan Analysis  of Variance (ANOVA)  menunjukkan  hasil  yang  tidak berbeda nyata (P>0.05). Hal ini menunjukkan bahwa VCO  dan olive  oil tidak  mempengaruhi  berat  testis tikus.  Berat  testis  ditentukan  oleh  perkembangan epitelium  seminiferi,  karena  tubulus  seminiferus menempati  sebagian  besar  volume  testis.  Jaringan interstisial menempati 6% dari volume testikuler dan sel  leydig  2%,  sehingga  jaringan  interstisial  dan  sel leydig juga menentukan berat testis (Iryani, 2003).
Tubulus  seminiferus  merupakan  bagian  utama dari massa testis yang merupakan tempat berlangsungnya  spermatogenesis.  Sel-sel  endokrin yang  mengeluarkan  testosteron  yaitu  sel  leydig terletak  dijaringan  ikat  antara  tubulus-tubulus seminiferus.  Sel  leydig  mengandung  enzim-enzim dengan  konsentrasi  tinggi  yang  diperlukan  untuk sintesis  testosteron.  Testosteron  masuk  ke  lumen tubulus seminiferus setelah disekresikan untuk proses spermatogenesis  (Wahyuni,  2012).  Variabel  berat organ  merupakan  indikator  yang  baik  untuk menunjukkan aktivitas pertumbuhan sel dan aktivitas sekresi endokrin. Testis merupakan tempat pembentukan spermatozoa dari sel-sel germinativum primitif  dan  terdapat  sel-sel    leydig  yang mensekresikan testosteron ke dalam darah (Nugraheni dkk., 2003).

## KESIMPULAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa penambahan  VCO  dan olive  oil pada  tikus  putih jantan (Rattus  norvegicus) mampu  meningkatkan jumlah spermatosit primer dalam tubulus seminiferus,  sehingga  dapat  disimpulkan  pemberian
VCO  dan olive  oil mampu  menginduksi  proses pembelahan spermatogonia.

## DAFTAR PUSTAKA
Agarwal,  A.  and  S.  A.  Prabakaran.  2005.  Oxidative Stress  and  Antioxidants  in  Male  Infertility:  a Difficult Balance. Iranian Journal of Reproductive Medicine. Vol. 3 (1) : 1-8.
Akbar,  B.  2010. Tumbuhan  dengan  Kandungan Senyawa Aktif yang Berpotensi Sebagai Bahan Antifertilitas . Penerbit Adabia Press, Jakarta.
Alamsyah,  A.N.  2005. Virgin  Coconut  Oil  Minyak Penakluk  Aneka  Penyakit .  Penerbit  Agro Media Pustaka, Jakarta.
Al-Ani,  N.K.H.  2013.  Protective  Influence  of  Olive Oil  on  Reproductive  Parameters  in  Male  Rat Treated with Cadmium. Global Journal of Bio- Science  and  Biotechnology  (G.J.B.B). Vol.2 (4): 500-505.
Anggraeni,  D.  2011.  Manfaat  Minyak  Zaitun (Olive Oil) terhadap  Kadar Low  Density  Lipoprotein (LDL) dalam Darah Tikus Wistar Jantan yang Diberi  Diet  Hiperlipidemia .  Skripsi .  Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember, Jember.
Astuti  S.,  D.  Muchtadi.,  M.  Astawan.,  B.
Purwantara., dan T. Wresdiyati. 2008. Pengaruh  Pemberian  Tepung  Kedelai  Kaya Isoflavon,  Seng  ( Zn )  dan  Vitamin  E  terhadap Kadar Hormon Testosteron Serum dan Jumlah Sel  Spermatogenik  pada  Tubuli  Seminiferi Testis  Tikus  Jantan. JITV .  Vol.  13  (4):  288- 293.
Dosumo,  O.O.,  F.I.O.  Duru,  A.A.  Osinubi,  A.A. Oremosu,  and  C.C.  Noronha.  2010.  Influence of  Virgin  Coconut  Oil  (VCNO)  on  Oxidative Stress,  Serum  Testosterone  and  Gonadotropic Hormones  (FSH,  LH)  in  Chronic  Ethanol Ingestion. Agriculture  and  Biology  Journal  of North America . Vol.1 (6): 1126-1132.
Iryani,  D.  2003.  Kadar  Testosteron  Darah  dan Gambaran  Histologis  Sel-Sel  Leydig  Tikus Putih  ( Rattus  norvegicus )  Jantan  Dewasa Setelah  Pemberian  Monosodium  Glutamat Peroral. Majalah  Kedokteran  Andalas .  Vol.27 (2): 50-59.
Jasda,  A.,  Winarto,  dan  T.N.  Kristina.  2014.
Pemberian Virgin Coconut Oil untuk Meningkatkan Jumlah dan Motilitas
Spermatozoa: Studi pada Tikus Wistar dengan Diet Tinggi Lemak. Jurnal Penel Gizi Makan . Vol. 37 (2): 161-167.
Nandari,  R.  2006.  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak Belimbing  Wuluh (Averrhoa  bilimbi L.)
Terhadap Kadar Testosteron Bebas dan Libido Tikus  Jantan  Galur  Wistar. Tesis. Program Pascasarjana
Universitas Diponegoro, Semarang.
Nugraheni,  T.,  O.P.  Astirin,  dan  T.  Widiyani.  2003. Pengaruh  Vitamin  C  terhadap  Perbaikan Spermatogenesis  dan  Kualitas  Spermatozoa Mencit  ( Mus  musculus L.)  Setelah  Pemberian Ekstrak  Tembakau  ( Nicotiana  tabacum L.). Jurnal Biofarmasi. Vol.1 (1): 13-19.
Permatasari,  H.K.,  N.  Permatasari,  dan  Subandi.
2011. Pengaruh Ekstrak Jintan Hitam terhadap MDA  dan  Sel  Spermatogonium  Tikus  yang Dipapar  Asap  Rokok  Kretek  Subakut. Jurnal Kedokteran Brawijaya . Vol.26 (3): 161-165.
Putri, B.E., H. Soetjipto, dan S. Hartini. 2014. Kadar Polifenol dan Efek Antioksidan Ekstrak Etanol Buah  Sosis  ( Kigelia  Africana (Linn.)  Benth.)
Serta  Aplikasinya  dalam  Sabun  Transparan. Seminar  Nasional  Kimia  dan  Pendidikan Kimia VI . 326-331.
Quratul’ainy, S. 2006. Pengaruh Pemberian Vitamin
E  terhadap Jumlah  SpermatozoaMencit Jantan Strain  Balb/C  yang  Dipaparkan  Asap  Rokok. Skrips i.  Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponogoro, Semarang.
Silvani, L. 2015. Melatonin Menghambat Penurunan Aktivitas  Superoksida  Dismutase  Tikus  Putih Jantan (Rattus  norvegicus) Galur  Wistar dengan  Aktivitas  Fisik  Berlebih. Tesis . Program  Studi  Ilmu  Biomedik  Pasca  Sarjana Universitas Udayana, Denpasar.
Sukmaningsih, A.A.Sg.A., I.G.A.M. Ermayanti., N.I.
Wiratmini., dan N.W. Sudatri. 2011. Gangguan Spermatogenesis Setelah Pemberian Monosodium  Glutamat  pada  Mencit (Mus musculus L.). Jurnal Biologi. Vol. 15 (2) : 49– 52.
Umar,  S.H.,  E.D.  Queljoe,  dan  L.  Tendean.  2015.
Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Kulit  Buah Manggis  ( Garcinia  mangostana L.)  Terhadap Kualitas  Spermatozoa  Wistar  Jantan    ( Rattus norvegicus )  yang  Diberi  Paparan  Suhu  Panas. Jurnal e-Biomedik (eBm) . Vol. 3 (2) : 670-675.
Wahyuni,    R.S.  2012.  Pengaruh  Isoflavon  Kedelai Terhadap  Kadar  Hormon  Testosteron  Berat Testis  Diameter  Tubulus  Seminiferus  dan Spermatogenesis  Tikus  Putih  Jantan (Rattus norvegicus).  Tesis. Program  Studi  Ilmu Biomedik Universitas Andalas, Padang.
Widayati,  E.  2012.  Oxidasi  Biologi,  Radikal  Bebas, dan  Antioxidant. Artikel  Ilmiah .  Bagian Kimia-Biokimia FK Unissula, Semarang.
Widotama,  I.G.B.G.  2008.  Pengaruh  Isolat  Herba Vernonia  cinerea terhadap  Spermatogenesis Tikus Putih. Jurnal Kimia . Vol.2 (2). 117-124.
Yuniwarti,  E.Y.W.  2013. Virgin  Coconut  Oil Meningkatkan  Aktivitas  Fagositosis Makrofag Ayam  Pedaging  Pascavaksinasi  Flu  Burung.
Jurnal Veteriner. Vol.14 (2): 190-196.