AKTIVITAS ANTIJAMUR EKSTRAK ETANOL DAUN KRATOM ( Mitragyna speciosa )

## TERHADAP JAMUR Microsporum canis
Dhessy Susanto 1 , Diana Natalia 1 , Ari Widiyantoro 2*
1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura, Pontianak 78124
2 Program Studi Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tanjungpura,
Pontianak 78124 Email: ari.widiyantoro@chemistry.untan.ac.id ABSTRAK Kata kunci: Mitragyna speciosa , ekstrak etanol, Microsporum canis Populasi  dunia  yang  mengalami  dermatofitosis  telah  mencapai  20%. Dermatofitosis  merupakan  infeksi  akibat  jamur  dermatofita.  Prevalensinya  di
Asia  mencapai  35,6%.  Salah  satu  jamur  penyebab  dermatofitosis  adalah Microsporum  canis . Microsporum  canis diketahui  telah  resisten  terhadap  obat antijamur.  Kratom  ( Mitragyna  speciosa )  merupakan  tumbuhan  yang  berasal dari Asia Tenggara dan di Indonesia banyak ditemukan di daerah Kapuas Hulu, Kalimantan Barat. Daun kratom banyak dimanfaatkan sebagai obat herbal dan memiliki  senyawa  metabolit  sekunder  yang  berpotensi  digunakan  sebagai antijamur. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antijamur ekstrak etanol daun kratom ( Mitragyna speciosa ) terhadap pertumbuhan Microsporum canis. Skrining  fitokimia  dilakukan  dengan  metode  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT) scanner dan uji semprot untuk mengetahui senyawa metabolit sekunder ekstrak yang diuji. Ekstrak uji dibuat dalam konsentrasi 5%, 10%, 15%, 20%, 25%,  50%,  75%,  dan  90%  (b/v)  dengan  etanol  sebagai  pelarut.  Cakram itrakonazol 8 µg digunakan sebagai kontrol positif dan DMSO 10% digunakan sebagai kontrol negatif. Pengujian aktivitas antijamur dilakukan dengan metode difusi  cakram  dengan  mengukur  zona  hambat  pertumbuhan  jamur.  Ekstrak etanol  daun  kratom  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  alkaloid, terpenoid, steroid, flavonoid dan tannin dengan golongan senyawa alkaloid dan tannin  paling  dominan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  tidak  ada  zona  hambat pertumbuhan Microsporum  canis pada  semua  konsentrasi  ekstrak  yang  diuji. Ekstrak  etanol  daun  kratom  tidak  memiliki  aktivitas  antijamur  terhadap pertumbuhan Microsporum canis.

## ABSTRACT
Keywords: Mitragyna speciosa , ethanol extract, Microsporum canis The  world  population  experiencing  dermatophytosis  has  reached  20%. Dermatophytosis is an infection caused by dermatophyte fungi. The prevalence in  Asia  reaches  35.6%.  One  of  the  fungi  that  causes  dermatophytosis  is Microsporum canis. Microsporum canis is known to be resistant to antifungal drugs. Kratom (Mitragyna speciosa) is a plant originating from Southeast Asia and in Indonesia it is often found in the Kapuas Hulu area, West Kalimantan. Kratom  leaves  are  widely  used  as  herbal  medicine  and  have  secondary metabolite  compounds  that  have  the  potential  to  be  used  as  antifungals.  This study  aims  to  determine  the  antifungal  activity  of  ethanol  extract  of  kratom leaves  (Mitragyna  speciosa)  on  the  growth  of  Microsporum  canis. Phytochemical  screening  was  carried  out  using  the  Thin  Layer

## Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Kratom (Mitragyna Speciosa) Terhadap Jamur Microsporum Canis
Chromatography  (TLC)  scanner  method  and  spray  testing  to  determine  the secondary  metabolite  compounds  of  the  extract  being  tested.  The  test  extract was made in concentrations of 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 50%, 75%, and 90% (w/v) with ethanol as a solvent. 8 µg itraconazole discs were used as a positive control  and  10%  DMSO  was  used  as  a  negative  control.  Antifungal  activity testing was carried out using the disc diffusion method by measuring the fungal growth inhibition zone. The ethanol extract of kratom leaves contains secondary metabolite  compounds,  namely  alkaloids,  terpenoids,  steroids,  flavonoids  and tannins with the most dominant groups of alkaloid and tannin compounds. The results showed that there was no growth inhibition zone for Microsporum canis at all extract concentrations tested. The ethanol extract of kratom leaves does not have antifungal activity against the growth of Microsporum canis.

## PENDAHULUAN
Penyakit  kulit  yang  disebabkan  infeksi  jamur  superfisial  atau  dermatofitosis  merupakan penyakit  yang  sering  ditemukan  di  negara  tropis,  termasuk  Indonesia.  Hal  ini  disebabkan  oleh udara  lembab  yang  mendukung  berkembangnya  penyakit  jamur  kulit.  Selain  itu,  tingkat kebersihan perorangan dan lingkungan yang rendah, status ekonomi yang rendah, serta tingkat pendidikan  yang  rendah  turut  mempengaruhi  angka  kejadian  dermatofitosis.  Tiga  genus penyebab  dermatofitosis  yaitu Microsporum , Trichophyton ,  dan Epidermophyton (Wolf  et  al., 2013; Rahman et al., 2016).
Dermatofitosis  terjadi  di  seluruh  dunia  dengan  prevalensi  yang  berbeda-beda  pada  setiap negara. Hal ini disebabkan karena perbedaan lokasi geografis. Data WHO menyebutkan bahwa 20%  populasi  dunia  mengalami  infeksi  ini  dengan  tipe  terbanyak  adalah  tinea  korporis  diikuti dengan  tinea  kruris,  tinea  pedis  dan  onikomikosis.  Prevalensi  penyakit  dermatofitosis  di  Asia mencapai 35,6% (Lakshmipathy & Kannabiran, 2010; Kumar et al., 2011).
Microsporum  canis merupakan  jamur  penyebab  dermatofitosis  kedua  terbanyak  setelah Tricophyton  rubrum . Microsporum  canis merupakan  jamur  penyebab  pada  20,4%  kasus  dan Tricophyton  rubrum pada 43%  kasus  dermatofitosis.  Terapi  dermatofitosis  biasanya menggunakan antijamur golongan alilamin dan azole seperti terbinafine dan itrakonazol. Namun terbinafine  telah  mengalami  resistensi  terhadap  beberapa  jenis  jamur,  seperti Tricophyton tonsurans dan Microsporum canis (Shalaby et al., 2016; Peres et al., 2010) Kratom ( Mitragynum speciosa ) merupakan tumbuhan yang berasal dari Asia Tenggara dan di  Indonesia  banyak  ditemukan  di  daerah  Kapuas  Hulu,  Kalimantan  Barat.  Kratom  sering dimanfaatkan  daunnya  untuk  dijadikan  obat  herbal,  baik  sebagai  analgesik,  antipretik,  dan antiinflamasi. Berdasarkan penelitian, daun kratom memiliki senyawa metabolit sekunder seperti golongan  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  saponin,  triterpen,  dan  steroid.  Beberapa  senyawa  tersebut telah  dibuktikan  berperan  sebagai  antijamur,  antibakteri,  dan  antiinflamasi  (Gogineni  et  al., 2015; Halpenny, 2017; Rabani et al., 2017; Saxena et al., 2013).

## Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Kratom (Mitragyna Speciosa) Terhadap Jamur Microsporum Canis
Penelitian  mengenai  daun  kratom  ( Mitragynum  speciosa )  masih  sedikit  dan  belum ditemukan  publikasi  penelitian  mengenai  aktivitas  antijamur  daun  kratom  terhadap  agen penyebab  infeksi  jamur  pada  manusia.  Berdasarkan  hal  tersebut  penelitian  ini  akan mengungkapkan  aktivitas  antijamur  ekstrak  etanol  dari  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa ) terhadap  pertumbuhan  jamur Microsporum  canis yang  merupakan  jamur  patogen  penyebab dermatofitosis.

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  murni  secara in  vitro dengan rancangan acak lengkap posttest only control group design.

## Pengambilan Sampel
Sampel  berupa  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa )  yang  diperoleh  dari  Kec.  Bunut,  Kab. Kapuas Hulu, Prov. Kalimantan Barat.

## Pembuatan Simplisia
Daun kratom ( Mitragyna speciosa ) yang telah dideterminasi kemudian disortasi dari bahan- bahan  pengotor.  Selanjutnya  daun  kratom  dicuci  menggunakan  air  mengalir  hingga  bersih  dan dikeringkan dengan cara diangin-anginkan (selama ± 2 minggu). Daun kratom yang sudah  kering disortasi  kembali  lalu  dihaluskan  menggunakan  blender  hingga  berbentuk  serbuk.  Serbuk simplisia  yang  ada  disimpan  dalam  wadah  kering  tertutup  rapat  dalam  ruangan  terlindung  dari cahaya matahari.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Kratom
Serbuk simplisia daun kratom ( Mitragyna speciosa ) sebanyak 500 mg dimaserasi dengan menggunakan  etanol  96%  selama  72  jam  dan  dilakukan  pengadukan ± 12  jam  sekali.  Hasil maserasi disaring menggunakan kapas dan kertas saring. Selanjutnya, residu dimaserasi kembali hingga warna cokelat bening. Filtrat daun yang diperoleh disatukan dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 40 0 -50 0 C hingga diperoleh ekstrak kental.

## Analisis Fitokimia
Sampel  ditotolkan  pada  lempeng  KLT  dengan  fase  diam  berupa  silika  gel  untuk  uji golongan  alkaloid,  tanin,  dan  saponin  serta  selulosa  untuk  uji  flavonoid.  Sampel  kemudian dielusi dengan eluen yang sesuai dan dikeringkan di udara. Setelah itu, sampel dilihat pada sinar UV dengan panjang gelombang 254 nm dan 365 nm dan bercak dideteksi menggunakan pereaksi semprot yang sesuai (Wagner & Bladt, 2009).

## Penyiapan Jamur Uji Peremajaan Jamur
Jamur Microsporum  canis biakan  murni  yang  diperoleh  dari  Fakultas  Kedokteran Universitas  Indonesia  diambil  satu  ose  lalu  ditanam  pada  media  SDA.  Media  SDA  yang  telah ditanam  biakan  jamur  diinkubasi  pada  suhu  37 ℃ selama  18-24  jam  hingga  didapatkan  koloni jamur Microsporum canis (Christoper et al., 2017).

## Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Kratom (Mitragyna Speciosa) Terhadap Jamur Microsporum Canis

## Pembuatan Suspensi Jamur
Pembuatan suspensi jamur dilakukan secara aseptis dengan mensuspensikan jamur uji yang telah  diremajakan  ke  dalam  tabung  berisi  5  mL  akuades  menggunakan  ose.  Kekeruhan  yang diperoleh  kemudian  disetarakan  dengan  Standar  McFarland  0,5  yang  setara  dengan  jumlah pertumbuhan  1,5  x  10 8 CFU/mL  dan  setelah  setara  maka  suspensi  ini  yang  akan  digunakan sebagai jamur uji (Tabassum & Vidyasagar, 2014).

## Kontrol Positif dan Kontrol Negatif
Penelitian  ini  menggunakan  itrakonazol  8  µg /disc sebagai  kontrol  positif  dan  akuades sebagai kontrol negatif.

## Pembuatan Larutan Uji
Ekstrak etanol daun kratom dibuat dalam konsentrasi 5%, 10%, 15%, 20%, dan 25% b/v (g/100 mL). Konsentrasi tersebut dibuat dengan cara menimbang ekstrak masing-masing 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, dan 25 mg, kemudian dilarutkan masing masing dengan akuades hingga volumenya 1 mL.

## Pengujian Aktivitas Antijamur
Pengujian  aktivitas  antijamur  dilakukan  dengan  mengukur  daya  hambat  ekstrak  etanol daun  kratom  terhadap  pertumbuhan Microsporum  canis menggunakan  metose  difusi  kertas cakram berdiameter 5 mm. Pertama, swab kapas steril dicelupkan ke dalam suspensi inokulum selama 15 menit, lalu swab diputar beberapa kali dan ditekankan ke dinding tabung di atas cairan untuk menghilangkan inokulum  yang berlebih pada swab . Setelah itu, jamur uji diinokulasikan pada media SDA dengan melakukan swab pada seluruh permukaan media dengan pola zig-zag sebanyak tiga kali dan diputar sekitar sudut 60 0 untuk memastikan pemerataan inokulum.
Selanjutnya,  kertas  cakram  yang  telah  direndam  selama  15  menit    dengan  ekstrak  etanol daun kratom, kontrol positif, dan kontrol negatif ditempatkan pada permukaan media SDA yang telah  diinokulasikan  jamur  uji  dengan  menggunakan  pinset  steril.  Kemudian,  masing-masing kertas cakram  sebanyak empat buah diletakkan di atas media SDA dengan jarak tiap cakram 4 cm dan dari tepi media sejauh 2 cm.
Media SDA yang telah diinokulasi dan diberi kertas cakram kemudian diinkubasi selama lima hari pada suhu 27 ℃ . Biakan jamur pada media SDA tersebut kemudian diamati dan diukur zona menggunakan jangka sorong untuk mengetahui aktivitas antijamurnya.

## Analisis Data
Data hasil penelitian yang normal dan homogen (setelah diuji dengan uji Shapiro wilk dan uji Leuveune’s )  dilanjutkan  dengan  analisis  varian  satu  arah  ( One  Way  ANOVA )  untuk mengetahui  ada  tidaknya  pengaruh  yang  signifikan  pemberian  ekstrak  etanol  daun  kratom ( Mitragyna speciosa ) terhadap pertumbuhan Microsporum canis . Jika terdapat perbedaan secara bermakna,  maka  dilanjutkan  dengan  analisis Post-Hoc untuk  mengetahui  perbedaan  secara signifikan dari data satu kelompok perlakuan ekstrak etanol daun kratom ( Mitragyna speciosa ) dengan kelompok lainnya.

## Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Kratom (Mitragyna Speciosa) Terhadap Jamur Microsporum Canis

## Etika Penelitian
Penelitian  ini  telah  mendapatkan  surat  keterangan  lulus  kaji  etik  dari  Komite  Etik Penelitian Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura dengan nomor 2978/UN22.9/DL/2019

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi Tumbuhan Kratom (Mitragyna speciosa )
Identifikasi  tumbuhan  kratom  ( Mitragyna  speciosa )  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas  Tanjungpura.  Hasil  identifikasi menunjukkan  bahwa  sampel  penelitian  yang  digunakan  adalah  tumbuhan  kratom (Mitragyna. speciosa ).

## Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa )  dilakukan  dengan metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  yang  disemprot  dengan  reagen  penampak  noda metabolit  sekunder.  Hasil  KLT  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kratom  mengandung golongan alkaloid, terpenoid, steroid, flavonoid dan tannin. Selanjutnya KLT tersebut dilakukan pemeriksaan secara TLC scanner untuk mengetahui presentase masing-masing noda. Persentase masing-masing noda ditampilkan pada Tabel 1. di bawah.
Tabel 1 . Persentase noda KLT ekstrak etanol kratom yang dilakukan TLC scanner No. Noda ke- Persentase (%) Golongan 1. 1 2,11 Terpenoid/Steroid 2. 2 1,65 Terpenoid/Steroid 3. 3 1,21 Flavonoid 4. 4 3,76 Terpenoid/Steroid 5. 5 4,54 Terpenoid/Steroid 6. 6 4,31 Flavonoid 7. 7 5,76 Terpenoid gula 8. 8 9,89 Flavonoid gula 9. 9 15,54 Flavonoid gula 10. 10 51,23 Alkaloid dan Tannin
Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  yang terkandung  dalam  ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa )  sehingga  dapat  diketahui senyawa yang berpotensi sebagai antijamur. Pada skrining fitokimia ini, dilakukan uji golongan alkaloid,  terpenoid,  steroid,  flavonoid  dan  tannin.  Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia  yang  telah dilakukan  didapatkan,  ekstrak  etanol  daun  kratom  terbukti  positif  mengandung  senyawa metabolit sekunder yaitu alkaloid, terpenoid, steroid, flavonoid dan tannin. Berdasarkan tabel 1., terlihat  bahwa  golongan  senyawa  alkaloid  dan  tannin  paling  dominan  sehingga  diprediksi

## Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Kratom (Mitragyna Speciosa) Terhadap Jamur Microsporum Canis
aktivitas biologik ekstrak etanol daun kratom lebih dominan karena pengaruh golongan senyawa alkaloid  dan  tannin.  Alkaloid  merupakan  metabolit  sekunder  yang  mengandung  nitrogen  dan bersifat basa, sedangkan tannin merupakan polifenol yang mengandung banyak gugus hidroksil.

## Karakterisasi Jamur Uji
Jamur uji pada penelitian ini adalah Microsporum canis yang diperoleh dari Laboratorium Parasitologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Indonesia.  Jamur  uji  kemudian  dilakukan peremajaan  dan  dikarakterisasi  secara  mikroskopik  dan  makroskopik  di  Laboratorium Parasitologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Tanjungpura.  Berdasarkan  surat  keterangan  yang diberikan dan hasil karakterisasi diketahui bahwa jamur uji merupakan Microsporum canis . Pada  pemeriksaan  makroskopis  dengan  media  SDA  tampak  koloni  datar,  menyebar, berwarna putih-krem dan permukaannya seperti kapas padat dengan beberapa alur radial. Pada pemeriksaan  mikroskopis,  tampak  makrokonidia  besar  berbentuk  kumparan,  berdinding  tebal dengan  ujung  membentuk terminal  knob serta  terdiri  dari  8-15  sel.  Hasil  karakterisasi  dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Microsporum canis (a) gambaran mikroskopis dengan pewarnaan LPCB (b) gambaran makroskopis dengan media SDA
Jamur  uji  menunjukkan  ciri  dari Microsporum  canis .  Pemeriksaan  makroskopis menunjukkan  koloni  jamur  datar,  menyebar,  berwarna  putih-krem  dan  permukaannya  seperti kapas  padat  dengan  beberapa  alur  radial  pada  SDA.  Pemeriksaan  mikroskopis  menunjukkan makrokonidia jamue besar, berbentuk kumparan dan berdinding tebal dengan ujung membentuk terminal knob.

## Aktivitas Antijamur
Hasil  pengamatan  aktivitas  antijamur  ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna.  speciosa ) terhadap  pertumbuhan Microsporum  canis setelah  inkubasi  selama  lima  hari  pada  suhu  27 o C dapat dilihat pada Tabel 2.
Uji aktivitas antijamur pada penelitian ini menggunakan metode difusi cakram. Penelitian ini terdiri atas lima kelompok perlakuan yaitu ekstrak etanol daun kratom ( Mitragyna speciosa )
(a)                                                      (b)
dengan  konsentrasi  5%,  10%,  15%,  20%,  dan  25%  (b/v)  serta  dua  kelompok  kontrol,  yaitu kontrol  positif  dengan  menggunakan  cakram  itrakonazol  8  µg  dan  kontrol  negatif  dengan menggunakan  cakram  DMSO  10%.  Selama  penelitian  berlangsung,  dilakukan  uji  tambahan untuk  mengamati  aktivitas  antijamur  ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa ) konsentrasi 50%, 75%, dan 90% terhadap pertumbuhan Microsporum canis.
Tabel 2. Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Daun Kratom  ( Mitragyna speciosa ) terhadap
Pertumbuhan Microsporum canis No. Konsentrasi dalam persen (mg/100 mL) Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata (mm) Pengulangan ke- I II III IV 1. 5 0 0 0 0 0 2. 10 0 0 0 0 0 3. 15 0 0 0 0 0 4. 20 0 0 0 0 0 5. 25 0 0 0 0 0 6. 50 0 0 0 0 0 7. 75 0 0 0 0 0 8. 90 0 0 0 0 0 9. Kontrol positif 42,17 40,08 41,79 41,22 41,31 10. Kontrol negatif 0 0 0 0 0
Diameter  zona  hambat  pertumbuhan Microsporum  canis pada  kelompok  kontrol  negatif adalah 0 mm. Hal ini menunjukkan bahwa tidak ada variabel bebas selain ekstrak etanol  daun kratom  ( Mitragyna  speciosa )  yang  mempengaruhi  diameter  zona  hambat  pertumbuhan Microsporum  canis .  Diameter  rata-rata  zona  hambat  pertumbuhan Microsporum  canis pada kelompok  kontrol  positif  adalah  41,31  mm.  Hal  ini  berarti  itrakonazol  sebagai  kontrol  positif masih sensitif sebagai agen antijamur terhadap Microsporum canis . Itrakonazol bekerja dengan cara menginhibisi enzim sitokrom P-450, yaitu lanosterol 14-α-demetilase. Penghambatan kerja enzim  ini  menyebabkan  lanosterol  tidak  dapat  diubah  menjadi  ergosterol  yang  merupakan komponen penyusun membran sel jamur. Akibatnya adalah disrupsi pada sintesis membran sel jamur yang dapat menyebabkan lisis pada sel (Letner & Hope, 2013).
Tidak adanya zona hambat pada konsentrasi uji 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 50%, 75%, dan 90%  mengindikasikan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa )  tidak  memiliki aktivitas  antijamur  terhadap  pertumbuhan Microsporum  canis dan  tidak  efektif  digunakan sebagai pengobatan terhadap infeksi jamur akibat Microsporum canis .
Berdasarkan  hasil  skrining  fitokimia,  diperoleh  bahwa  senyawa  metabolit  sekunder  yang paling dominan pada ekstrak etanol daun kratom ( Mitragyna speciosa ) adalah golongan alkaloid dan  tannin.  Berdasarkan  penelusuran  literatur  terdapat  40  jenis  alkaloid  berbeda  yang diidentifikasi  pada Mitragyna  speciosa dengan  sebagian  besar  alkaloid  berupa  mitraginin  dan turunannya yang eksklusif ditemukan pada tumbuhan tersebut.
Mitraginin  merupakan  alkaloid  indol  dari  golongan corynanthe dengan  monoterpen (irioid)(Hilmas & Fabricants, 2014). Alkaloid indol diketahui bekerja pada sistem saraf pusat dan perifer. Alkaloid indol mitraginin merupakan agonis reseptor opioid μ dan δ yang memberikan efek euforia dan stimulan pada dosis rendah serta efek sedatif dan antinosiseptif pada dosis tinggi (Xu et al., 2014).
Jamur, khususnya Ascomycota , merupakan jamur yang banyak menghasilkan alkaloid indol (Zarembo  et  al.,  1974).  Alkaloid  indol  mitraginin  yang  dihasilkan  oleh  kratom  ( Mitragyna speciosa )  mengalami  biotransformasi  mikrobial  oleh  jamur Helminthosporum  sp .  menjadi  dua metabolit mayor, yaitu mitraginin pseudoindoksil dan hidroksi mitraginin pseudoindoksil. Jamur Helminthosporum  sp .  merupakan  jamur  golongan  askomikota  seperti Microsporum  canis . Namun,  belum  ada  penelitian  yang  membuktikan  bahwa Microsporum  canis dapat membiotransformasikan alkaloid indol mitraginin menjadi bentuk senyawa metabolit lain.
Kratom  ( Mitragyna  speciosa )  merupakan  tumbuhan  yang  menjadi  focus  untuk  penelitian yang  bersifat  sedative.  Saat  ini  belum  ada  publikasi  yang  membahas  mengenai  aktivitas antijamur dari ekstrak daun kratom ( Mitragyna speciosa ) selain penelitian yang dilakukan oleh Rabani  et  al.,  2017,  tentang  penghambatan  pertumbuhan  jamur Schizophyllum  commune Fries oleh  ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa Korth). S.  commune merupakan  jamur pelapuk  kayu  atau  cendawan  dan  bukan  merupakan  jamur  penyebab  dermatofitosis.  Pada penelitian  tersebut,  ditemukan  adanya  aktivitas  antijamur  dari  ekstrak  etanol  daun  kratom ( Mitragyna  speciosa )  namun  tidak  bersifat  mematikan  jamur  (fungisidal).  Mekanisme  ekstrak daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa )  dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur  masih  belum diketahui  secara  pasti.  Bagaimanapun  juga,  setiap  spesies  jamur  memiliki  kerentanan  yang berbeda-beda terhadap senyawa antijamur.
Penelitian  ini  memperlihatkan  bahwa  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang dominan  pada  ekstrak  etanol  daun  kratom  adalah  alkaloid  dan  tannin.  Alkaloid  merupakan senyawa  yang  mengandung  nitrogen  dan  memiliki  berat  molekul  yang  rendah.  Alkaloid cenderung memiliki cincin heterosiklik dengan atom nitrogen sehingga bersifat alkali (Matsuura &  Fett-Neto,  2017).  Mekanisme  antijamur  yang  dimiliki  oleh  alkaloid  adalah  dengan mendisrupsi  membran  sel  jamur.  Alkaloid  dapat  berikatan  dengan  ergosterol  dan  menghambat
biosintesis  ergosterol  yang  merupakan  komponen  utama  pada  membran  sel  jamur  (Freiesleben &Jager, 2014). Sementara itu, tannin merupakan senyawa fenolik dengan struktur beragam yang memiliki kemampuan untuk mengikat dan mempresipitasi protein. Tannin dibedakan menjadi 3 jenis  utama,  yaitu  tannin  yang  dapat  dihidrolisis,  tanin  terkondensasi  atau  proantosianidin,  dan florotanin  (Huang  et  al.,  2018).  Gugus  hidroksil  pada  tannin  dapat  menghambat  sintesis  kitin yang  merupakan  komponen  penting  pada  dinding  sel  jamur  sehingga  dinding  sel  jamur mengalami  kebocoran.  Meskipun  demikian,  keberadaan  senyawa  alkaloid  dan  tannin  pada ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna  speciosa )  tidak  memperlihatkan  adanya  aktivitas antijamur terhadap jamur Microsporum canis .
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Danielli  et  al.,  2017, Microsporum  canis memiliki kemampuan untuk membentuk biofilm. Biofilm yang diamati berupa adanya  struktur tiga  dimensi  miselium  dengan  ekspansi  jaring-jaring  hifa  yang  tumbuh  ke  segala  arah  dan makrokonidia  yang  dibarengi  dengan  adanya  matriks  ekstraselular  polisakarida  yang menghubungkan  hifa  satu  dengan  hifa  lainnya.  Pembentukan  biofilm  pada Microsporum  canis menyebabkan agen antijamur tidak dapat bekerja dengan efektif. Struktur matriks ekstraseluler pada  biofilm menjadi  penghalang  fisik  ( physical  barrier )  yang  mencegah  penetrasi  agen antijamur ke sel jamur (Brilhante et al., 2019). Oleh karena itu, suatu zat harus dapat menembus matriks ekstraseluler dari biofilm jamur tersebut agar dapat bekerja sebagai agen antijamur.
Polisakarida  yang  ada  pada  matriks  ekstraseluler  biofilm  jamur  dapat  didisrupsi  dengan menggunakan enzim tertentu seperti polisakarida liase dan deoksiribonuklease (DNase) (Stewart, 2015). DNase I dan disperin B merupakan enzim utama yang berfungsi sebagai agen antibiofilm potensial (Izano et al., 2008; Roy et al., 2018). DNase I memiliki kemampuan untuk mendigesti DNA  ekstraselular (eDNA)  yang  ada  pada  struktur  biofilm  sementara  Disperin  B  yang merupakan  hidrolase  glikosida  bekerja  dengan  memotong  polimer β  1–6  N-acetylglucosamine (PNAG).  PNAG  merupakan  substansi  polisakarida  ekstraselular  yang  memfasilitasi  agregasi patogen  pada  biofilm  (Roy  et  al.,  2018).  Dengan  demikian,  enzim-enzim  tersebut  berpotensi digunakan  untuk  menembus  matriks  ekstraseluler  dari  biofilm  jamur  sehingga  agen  antijamur dapat bekerja dengan baik.
Selain itu, peptida antifungal (PAF) juga dapat digunakan sebagai agen antibiofilm. PAF dapat  mencegah  pembentukan  biofilm  jamur  dan  mengeradikasi  biofilm  melalui  mekanisme yang  berkaitan  dengan  perturbasi  dinding  sel,  inhibisi  adhesi  sel  jamur  planktonik  pada permukaan, regulasi gen, dan reactive oxygen species (ROS). Contoh PAF yang dapat digunakan adalah  defensin,  katelisidin,  dan  histatin.  PAF  dapat  ditemukan  baik  pada  tumbuhan  maupun mamalia (Oshiro et al., 2019).

## Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Kratom (Mitragyna Speciosa) Terhadap Jamur Microsporum Canis

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan,  disimpulkan  sebagai  berikut.  Kandungan metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak etanol daun kratom ( Mitragyna speciosa ) adalah alkaloid,  terpenoid,  steroid,  flavonoid  dan  tannin.  Ekstrak  etanol  daun  kratom  ( Mitragyna speciosa ) tidak memiliki aktivitas antijamur terhadap pertumbuhan Microsporum canis

## DAFTAR PUSTAKA
Christoper W., Natalia D., & Rahmayanti S. (2017). Uji aktivitas antijamur ekstrak etanol umbi bawang dayak ( Eleutherine americana (Aubl.) Merr. Ex K. Heyne.) terhadap Trichophyton mentagrophytes secara in vitro. JKA . 6 (3):685-9
Brilhante  R.S.N., Aguiar  L., Sales  J.A., Araújo  G.D.S., Pereira  V.S., &  Pereira-Neto  W.A. (2019).  Ex  vivo biofilm-forming  ability  of  dermatophytes  using  dog  and  cat  hair:  an ethically viable approach for an infection model. Biofouling . 35 (4):392-400.
Danielli  L.J.,  &  Lopes  W.,  Vainstein  M.H.,  Fuentefria  A.M.,  Apel  M..A  (2017).  Biofilm formation by Microsporum canis . Clin Microbiol Infect . 23 (12):941-2
Freiesleben, S.H, & Jäger A.K.(2014). Correlation between plant secondary metabolites and their antifungal mechanisms–a review. Med Aromat Plants . 3:154
Gogineni  V.,  Leon  F.,  Avery  B.A.,  McCurdy  C.,  &  Cutler  S.J.  (2015).  Phytochemistry  of Mitragyna speciosa . In: Raffa RB, editor.  Kratom and other mitragynines: the chemistry and pharmacology of opioids from a non-opium source. CRC Press; pp. 77-94.
Halpenny  G.M.  (2017). Mitragyna  speciosa :  Balancing  potential  medical  benefits  and  abuse. ACS Med Chem Lett . 8(9):897-899.
Hilmas C.J., & Fabricant D.S.( 2014). Biomarkers of toxicity for dietary ingredients contained in dietary  supplements.  In:  Gupta  RC,  editor.  Biomarkers  in  toxicology.  USA:  Academic Press; pp. 609-27.
Huang Q., Liu X., Zhao G., Hu T., & Wang Y. (2018). Potential and challenges of tannins as an alternative to in-feed antibiotics for farm animal production. Anim Nutr . 4 (2):137–150. Izano  E.A.,  Amarante  M.A.,  Kher  W.B.,  &  Kaplan  J.B.  (2008).  Differential  roles  of poly-N- acetylglucosamine surface polysaccharide and extracellular DNA in Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis biofilms. Applied Environmental Microbiol . 74 :470-6.
Kumar V., Tilak R., Prakash P., Nigam C., & Gupta R.(2011). Tinea pedis- an update. AJMS . 2:134-138
Lakshmipathy  D.T.,  &    Kannabiran  K.(2010).Review  on  dermatomycosis  pathogenesis  and treatment. Nat Sci. 2(7):726-31.
Lestner J.,& Hope W.W. (2013). Itraconazole: an update on pharmacology and clinical use for treatment  of  invasive  and  allergic  fungal  infections. Expert  Opin  Drug  Metab  Toxicol .  9 (7):911-26
Matsuura  H.N.,  &  Fett-Neto  A.G.  (2017).  Plant  Alkaloids:  Main  Features,  Toxicity,  and Mechanisms of Action. In: Gopalakrishnakone P, Carlini C, Ligabue-Braun R, editor. Plant Toxins. Dordrecht: Springer; pp. 243-261.
Oshiro K.G.N., Rodrigues G., Monges B.E.D., Cardoso M.H., & Franco O.L. (2019). Bioactive peptides against fungal biofilms. Front Microbiol . 10:2169.
Peres  N.T.,  Maranhão  F.C.,  Rossi  A.,  &  Martinez-Rossi  N.M.  (2010).  Dermatophytes:  host- pathogen interaction and antifungal resistance. An Bras Dermatol . 85(5):657-667 Rabani,  Farah  D.,  &  Mulfihati.  (2017).  Penghambatan  pertumbuhan  jamur Schizophyllum commune Fries oleh ekstrak etanol daun kratom ( Mitragyna speciosa Korth). Jurnal Hutan Lestari. 5 (3):831-9
Rahman M.A.A., Jusak, & Sutomo E. (2016). Sistem pakar identifikasi penyakit jamur kulit pada manusia menggunakan metode certainty factor. JSIKA .5(3):1-7
Roy R., Tiwari M., Donelli G., & Tiwari V. (2018). Strategies for combating bacterial biofilms: A focus on anti-biofilm agents and their mechanisms of action. Virulence . 9 (1):522–554 Shalaby  M.F.,  El-Din  A.N.,  &  El-Hamd  M.A.  (2016).  Isolation,  identification,  and  in  vitro antifungal susceptibility testing of dermatophytes from clinical samples at sohag university hospital in Egypt. Electron Physician . 8(6):2557-2567
Saxena,  M.,  Saxena  J.,  Nema  R.,  Singh  D.,  &  Gupta  A.(2013).  Phytochemistry  of  Medical Plants. J Pharmacogn Phytochem . 1(6):168-82
Stewart P.S. (2015). Prospects for anti-biofilm pharmaceuticals. Pharmaceuticals . 8:504-511. Tabassum  N.,  &  Vidyasagar  G.M.  (2014).  Antimicrobial  activity  of  medical  oil  plants  against human pathogens from hyderabad karnataka region. Int J Pharm Sci Rev Res . 26 (2):182-8. Wagner  H.,&  Bladt  S.  (2009).  Plant  drug  analysis:  A  thin  layer  chromatography  atlas.  Edisi kedua. Berlin: Springer Science & Business Media..
Wolf  K.,  Allen  R.,  &  Saavedra  A.P. (2013). Fitzpatrick's  color  atlas  and  synopsis of  clinical dermatology. Edisi ketujuh. New York: McGraw-Hill
Xu W., Gavia D.J., & Tang Y.(2014). Biosynthesis of fungal indole alkaloids. Natural Product Reports . 31 (10):1474-1487.
Zarembo J.E., Douglas B., Valenta J., & Weisbach J.A.(1974). Metabolites of mitragynine. J. Pharm Sci. 63 (9):1407-1415

## This work is licensed under a
Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License