## Sasambo Journal of Pharmacy
https://jffk.unram.ac.id/index.php/sjp
___________ Email: xxxx@xxx.xxx (*Corresponding Author)
Copyright © 2022, The Author(s).
This article is distributed under a Lisensi Creative Commons Atribusi 4.0 Internasional .
Kajian  pustaka  toksisitas  tanaman  nanas  ( Ananas  comosus [L.] Merr)
Qurratul Aeni 1* , Siti Rahmatul Aini 1 , Iman Surya Pratama 1
1 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Mataram, Mataram, Indonesia.

## DOI: https://doi.org/10.29303/sjp.v6i1.264
Article Info
Abstract: Pineapple  plants  are  used  ethnomedicinally  in  various  countries,  especially  in Indonesia. Several studies have shown that pineapple plants have pharmacological effects both in vitro and in vivo on various diseases. Ananas Plant has the potential to be cultivated as medicine products. The toxicity of Ananas comosus (L) Merr important to acknowledge. This  literature  review  aims  to  provide  comprehensive  information  through  a  literature review regarding the toxicity of pineapple ( Ananas comosus [L.] Merr). The literature review was collected in the period 2010 to 2021 which was obtained from the Google Scholar and Pubmed databases with a total of 9544 and a study was carried out on 10 works of literature. Based on the results of 10 literatures that have met the inclusion criteria, it shows that the in vitro toxicity test on pineapple ( Ananas comosus [L.] Merr) has an LC 50 of 403.83 to 9000 ppm which belongs to the category of practically non-toxic to moderately toxic. In vivo toxicity test  showed  that  LD50  >  5000  mg/kgBW  showed  no  deaths  which  were  classified  as practically non-toxic. From the results of literature research, it can be said that toxic plants ( Ananas comosus [L.] Merr) have a toxicity category of practically non-toxic to moderately toxic in vitro studies. The results of the in vivo test showed that there were no deaths in the test animals which were in the category of practically non-toxic to mildly toxic. Received : 2022-03-29 Revised : 2022-04-23 Accepted : 2022-04-27
Keywords: Pineapple ( Ananas comosus [L.] Merr), toxicity.
Citation: Aeni, Q., Aini, S. R., & Pratama, I. S. (2022). Kajian pustaka toksisitas tanaman nanas ( Ananas comosus [L.] Merr). Sasambo Journal of Pharmacy , 3 (1), 49-62. https://doi.org/10.29303/sjp.v3i1.164

## Pendahuluan
Ananas comosus (L.) Merr atau yang lebih dikenal dengan  nanas  merupakan  tanaman  yang  berasal  dari Amerika  Selatan  dan  Paraguay  (Debnath  dkk,  2012). Indonesia  merupakan  salah  satu  lokasi  konservasi tumbuhan  nanas.  Menurut  Dalimartha  (2000),  Redaksi AgroMedia  (2008),  dan  Hidayat  dkk  (2015)    nama daerah nanas di Indonesia yaitu anes (Aceh); anes, nas, kanas, konas (Sumatera); aneh dan naneh (Minangkabau);  hanas  (Batak);  nanas  (Melayu);  kanas, kanyas, nas, dan nyanyas (Lampung); ganas dan danas (Sunda); nanas (Jawa); lanas dan nanas (Madura);manas (Bali);  pedang  dan  nanas  (Nusa  Tenggara);  anana  dan pedang  (Flores);  nanati  (Gorontalo);  tuis  mangandow
(Makassar);  nanasi  (Toraja);  arnasiun,  kaluasi,  dan manasi (Maluku).
Berdasarkan Food  and  Agricultural  Organization beberapa  negara  di  dunia  memproduksi  nanas diantaranya  Philipina,  Thailand,  Costa  Rica,  Malaysia, Chili,  Brazil,  India,  Nigeria,  Meksiko,  Vietnam, Colombia, dan Indonesia (Debnath, dkk, 2012). Daerah penghasil  nanas  di  Indonesia  yaitu  Sumatera  Utara, Riau,  Sumatera  Selatan,  Jawa  Barat,  dan  Jawa  Timur (Ardiansyah,  2019).  Nusa  Tenggara  Barat  termasuk dalam  daerah  produksi  nanas  dengan  Kabupaten Lombok  Timur  merupakan  penghasil  nanas  terbesar setelah Kabupaten Lombok Barat (Badan Pusat Statistik NTB, 2015).
Tanaman  nanas  termasuk  dalam  Filum Tracheophyta,  Kelas  Liliopsida,  Ordo  Bromeliales, Famili Bromeliaceae, genus Ananas dan spesies Ananas comosus (L.) Merril (Debnath dkk, 2021). Menurut Lubis (2020)  nanas  memiliki  beragam  varietas  yaitu  Queen, Cayene, Spanyol, Spanish dan Abacaxi dengan varietas Cayene dan Queen lebih banyak ditanam di Indonesia. Tanaman nanas diilustrasikan pada Gambar 1 .
Nanas memiliki akar serabut dengan batang tebal berbentuk gada  dan  beruas-ruas  pendek  (Lubis,  2020). Daun nanas berurat sejajar dengan tepi yang ditumbuhi duri ke arah ujung daun. Buah nanas merupakan buah majemuk  yang  disebut  sinkarpik  dengan  bentuk silinder.  Bagian  atas  buah  tumbuh  daun-daun  pendek yang  tersusun  seperti  pilin  yang  disebut  mahkota (Sunarjono, 2008).
Gambar 1. Morfologi tanaman nanas (Hassan dan Othman, 2011).
Kandungan  metabolit  primer  dan  sekunder tanaman  nanas  di  setiap  bagian  berbeda.  Bagian  akar mengandung  saponin  dan  tanin  (Megawati,  2020). Bagian batang  mengandung  karbohidrat,  asam  amino, protein,  saponin,  flavonoid,  dan  alkaloid  (Helen  dkk, 2019).  Bagian  daun  mengandung  karbohidrat,  protein, asam  amino,  vitamin  C,  alkaloid,  tanin,  flavonoid, terpenoid,  fenolik,  dan  bromelain  (Helen  dkk,  2019; Akram dkk, 2013). Bagian kulit mengandung flavonoid, alkaloid,  tanin,  saponin,  dan  bromelain.  Bagian  buah mengandung asam amino, peptida, protein, karbohidrat,  lipid,  terpenoid,  flavonoid,  alkaloid,  dan fenolik (Helen dkk, 2019; Jovanoic dkk, 2018).
Masyarakat  Indonesia  telah  memanfaatkan tumbuhan  nanas  sebagai  pengobatan  tradisional  pada penyakit  beri-beri  dan  cacingan  (Dalimartha,  2007). Menurut  Redaksi  AgroMedia  (2008),  bagian  buah  dan daun  berkhasiat  sebagai  obat  sembelit,  radang tenggorokan,  bengkak,  dan  rasa  penuh  di  lambung. Berdasarkan  laporan  anekdot  dan  cerita  rakyat  dari beberapa  studi  menyatakan  bahwa  kulit  nanas  secara
tunggal atau dikombinasikan dengan tanaman obat lain berkhasiat  sebagai  pengobatan  malaria,  radang  sendi, infeksi tifoid, dan keluhan gastrointestinal. Kulit nanas juga berfungsi sebagai penyedap ramuan herbal (Ajayi dkk, 2021).
Berdasarkan  studi  Asase  (2010),  Yetein  (2013), Iyamah (2015), Kadir (2012), Debnath (2021), Olorunniyi dan Morekenji (2013), beberapa negara di Benua Afrika telah  memanfaatkan  nanas  dalam  penggunaan etnomedisin  diantaranya  buah  nanas  untuk  demam kuning,  obesitas,  pencegah  kanker,  mencegah  kadar vitamin  C,  dan  keluhan  gastrointestinal.  Daun  nanas untuk  batuk  dan  penyakit  kuning  (Kamerun);  buah nanas  sebagai  obat  malaria,  penyakit  kuning,  dan kelelahan  (Benin);  daun  dan  buah  nanas  sebagai  obat malaria (Nigeria).
Tanaman nanas telah diuji baik secara in vitro dan in vivo dan terbukti memiliki efek farmakologi. Secara in vitro jus  kulit  nanas  konsentrasi  25%  b/v  efektif membunuh Paramphistomum  sp. dengan  indeks ketahanan  hidup  38,9%  dan  motilitas  34,1  yang sebanding dengan Albendazol 10% b/v dengan p <0,05 (Damiyati dkk, 2021). Ekstrak air buah nanas memiliki aktivitas  antimikroba  terhadap Pseudomonas  aeruginosa multidrug  resisten dengan  konsentrasi  bunuh  minimal (KBM) 0,75 g/mL (Zharfran dkk, 2017). Fraksi etil asetat buah  nanas  konsentrasi  1000  µg/mL  mampu menghambat  pertumbuhan  sel  kanker  SP-C1  sebesar 41,62%  dan  43,45%  dengan  waktu  inkubasi  berturut- turut yaitu 24 jam dan 48 jam (Martina dkk, 2011).
Secara in  vivo jus  kulit  nanas  dosis  1008  mg/kg efektif menurunkan 98% jumlah telur Ascaridia galli dan Heterakis gallinarum pada ayam setelah 14 hari uji yang secara  signifikan  lebih  baik  dibandingkan  pemberian plasebo  pada  ayam  dengan  p  <0,05  (Cormanes  dkk, 2016). Pemberian kombinasi bromelain dosis 25 mg/kg secara  oral  dan  Cisplatin  dosis  1  mg/kg  secara intraperitoneal  pada  mencit  betina  BALB/c  selama  28 hari  menunjukkan  penurunan  47%  berat  kanker payudara  4TI  yang  berbeda  signifikan  diantara  semua kelompok uji dengan p <0,05 (Mohamad dkk, 2019).
Tanaman  obat  tradisional  digunakan  secara empiris  oleh  masyarakat  dalam  menanggulangi masalah  kesehatan  baik  dengan  pemeliharaan, pengobatan,  maupun  pemulihan  kesehatan  (BPOM, 2005).  Akan  tetapi  beberapa  penelitian  menunjukkan bahwa  tanaman  obat  tradisional  memiliki  efek  toksik apabila dikonsumsi secara terus menerus dengan dosis tertentu  (Asif,  2012).  Berdasarkan  hal  tersebut, Organisasi  Kesehatan  Dunia  (WHO)  menyatakan bahwa  untuk  memenuhi  beberapa  persyaratan  terkait kualitas, keamanan, dan khasiat, obat tradisional harus melalui  uji  praklinik  yang  salah  satunya  dengan pengujian toksisitas.
Berdasarkan  studi  literatur,  nanas  ditinjau  dari aktivitas  farmakologi  dapat  dikembangkan  menjadi sediaan farmasi sehingga perlu ditelaah mengenai aspek toksisitas  dan  keamanan  (Rahman  dkk,  2020;  Debnath dkk,  2021).  Terkait  peningkatan  jumlah  penelitian  di bidang  fitoterapi  dan  pasar  obat  fitoterapi,  kebutuhan untuk  mengeksplorasi  tumbuhan  nanas  juga  perlu dipertimbangkan  (Paixao,  2019).  Selain  itu  kajian literatur  periode  tahun  2010  hingga  2021  oleh  Hassan, dkk (2011) dan Paixao, dkk (2021), aspek toksisitas dan keamanan  masih  terbatas.  Oleh  karena  itu,  studi  ini bertujuan  untuk  menyediakan  informasi  yang komprehensif  melalui  kajian  literatur  terkait  toksisitas tanaman nanas ( Ananas comosus [L.] Merr).

## Metode
Penyusunan kajian literatur terdiri dari beberapa tahapan meliputi pertanyaan penelitian, pencarian data, skrinning  data,  penilaian  kualitas  data,  ekstraksi  data, pemetaan dan merangkum hasil. Pertanyaan penelitian disusun  berdasarkan framework  Population  Intervention, Comparison, Outcome (PICO) yang dilihat pada Tabel 1 .
Tabel 1. Kerangka Berpikir Population, Intervention,
Outcome (PIO) Kriteria Cakupan Population Nanas Intervention Uji Toksisitas Comparison Tidak ada kontrol Outcome Parameter toksisitas
Sumber  pencarian  literatur  diperoleh  melalui database  Google  Scholar dan  PubMed  yang  disesuaikan dengan  judul  penelitian,  abstrak  dan  kata  kunci.  Kata kunci yang digunakan dapat dilihat pada Tabel 2 .
Tabel 2. Kata Kunci Pencarian Literatur
Pencarian Literatur Kata Kunci Google Scholar PubMed Toksisitas DAN Nanas toxicity AND Ananas AND comosus LC 50 AND Ananas AND comosus LD 50 AND Ananas AND comosus
Penapisan data dilakukan berdasarkan judul/abstrak dan kata kunci. Data lengkap yaitu data yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Algoritma penentuan literatur yang digunakan dapat dilihat pada Gambar  2 .  Kriteria  inklusi  berupa  literatur  yang menjelaskan terkait parameter toksisitas tanaman nanas ( Ananas  comosus [L.]  Merr)  yang  dipilih  secara in  vitro dan in vivo , studi eksperimental, berbahasa Inggris atau
Indonesia,  dan  dipublikasikan  dari  tahun  2010  hingga 2021.
Kriteria  eksklusi  berupa  literatur  yang  tidak dapat  diakses  secara  penuh,  literatur  berjenis article review , dan parameter toksisitas dari suatu produk dan enzim  bromelain  nanas  ( Ananas  comosus [L.]  Merr). Ekstraksi data dilakukan pada literatur yang memenuhi syarat dan kriteria lalu dilakukan analisis lebih lanjut.
Proses  ekstraksi  data  terkait  175  total  literatur yang  diperoleh  dari  kesesuaian  judul  dan  abstrak dengan  kata  kunci  dilakukan  oleh  anggota  tim  satu. Setelah  dilakukan  skrining  terkait  kriteria  inklusi  dan eksklusi,  anggota  tim  2  dan  anggota  tim  3  melalui diskusi lalu meninjau kembali dan menyetujui literatur yang  digunakan.  Ke-10  jurnal  dinilai  menggunakan critical appraisal checklist JBI.

## Gambar 2. Algoritma pengumpulan literatur

## Hasil dan Pembahasan
Uji  toksisitas  merupakan  uji  yang  bertujuan untuk  mendeteksi  efek  toksik  suatu  zat  pada  sistem biologi untuk memperoleh data dosis respon yang khas dari  sediaan  uji.  Toksisitas  suatu  senyawa  dapat dilakukan secara in vitro dan in vivo . Uji toksisitas in vitro adalah  suatu  pengujian  yang  dilakukan  di  luar  tubuh makhluk  hidup,  seperti  pada  sel,  bakteri,  organ terisolasi.  Uji  toksisitas in  vivo adalah  suatu  pengujian
Google Scholar
(n = 9522) PubMed (n = 22) Total literatur yang diperoleh (n =175) Kriteria Inklusi:  Parameter toksisitas toksisitas  tanaman  nanas ( Ananas comosus [L.] Merr) secara in vitro dan in vivo .
 Studi eksperimental
 Pada  tahun  2010  hingga 2021
 Bahasa  Indonesia  atau Inggris
 Lulus quality apparaisal
Kriteria Eksklusi:
 Artikel yang tidak lengkap
 Parameter toksisitas produk dan enzim bromelain nanas. Hasil skrining (n =10) Total literatur yang diperoleh (n = 9544)
Kesesuaian judul dan abstrak (n = 175) Total literatur yang digunakan
(n =10)
yang dilakukan di dalam tubuh makhluk hidup, seperti hewan uji (Badan Pengawas Obat dan Makanan, 2014).
Uji  toksisitas  secara in  vivo diklasifikasikan menjadi  dua  meliputi  uji  toksisitas  umum  dan  uji toksisitas khusus. Uji toksisitas umum bertujuan untuk mengevaluasi  keseluruhan  efek  toksik  meliputi  akut, subkronis dan kronis. Uji toksisitas khusus merupakan uji  lanjutan  untuk  menentukan  efek  yang  belum ditemukan  pada  uji  toksisitas  umum  khusus  (Badan Pengawas Obat dan Makanan, 2014).
Secara umum, parameter toksisitas yaitu LC 50 dan LD 50 . LC 50 adalah konsentrasi sediaan uji dalam air yang membunuh  50%  hewan  uji  dalam  periode  paparan tertentu  (OECD,  2019).  Sedangkan  LD 50 adalah  dosis tunggal sediaan uji yang menyebabkan kematian hewan uji sebanyak 50% akibat pemberian secara oral (Badan Pengawas Obat dan Makanan, 2014).
Uji toksisitas tanaman nanas secara in vitro Berdasarkan Tabel 3 , uji toksisitas akut secara in vitro dilakukan  pada  bagian  kulit,  runjung,  dan  pulpa nanas  menggunakan  metode  BSLT  ( Brine  Shrimp Lethality Test ) yang diuji pada Artemia salina Leach. Jenis pelarut  yang  digunakan  pada  ekstrak  yaitu hidroalkohol 95% dengan air garam sebagai kelompok kontrol.  Hasil  telaah  literatur  menunjukkan  bahwa kategori  toksisitas  dari  terendah  hingga  tertinggi berturut-turut  ditunjukkan  pada  ekstrak  hidroalkohol 95%  runjung  nanas  yang  dinyatakan  praktis  tidak toksik,  ekstrak  hidroalkohol  95%  kulit  nanas  dengan kategori  sedikit  toksik,  dan  hidroalkohol  95%  pulpa nanas  yang  dinyatakan  toksik  sedang. Artemia  salina Leach  pada  ekstrak  hidroalkohol  95%  runjung  nanas memiliki pergerakan berenang lebih lambat dibandingkan  ekstrak  hidroalkohol  95%  kulit  dan runjung karena kandungan gula yang tinggi pada pulpa secara  langsung  mempengaruhi  proses  adaptasi microcrustacean dengan lingkungan (Paixao et al., 2019). Menurut Paixao (2019) ekstrak etanol dan penggunaan air  dan  garam  laut  untuk  mensimulasi  lingkungan Artemia  salina Leach  adalah  poin  utama  yang mendukung kematian spesies.
Berdasarkan  uji  hemolisis  sel  darah  merah domba, ekstrak mentah runjung, kulit, dan pulpa nanas memiliki  persentase  hemolisis  berturut-turut  sebesar 7,19% yang dinyatakan toksik sedang, 1,66% dan 0,83% pada konsentrasi 1000 µg/mL yang dinyatakan praktis tidak toksik. Hasil yang diperoleh dalam penelitian ini menunjukkan bahwa ketiga ekstrak tidak menunjukkan toksisitas terhadap darah (Paixao et al., 2019).
Terdapat  sebuah  studi yang  menyatakan bahwa toksisitas jus kulit nanas Palembang, Pemalang, Subang, dan Sunpride dengan  pelarut  air  dikategorikan  toksik rendah dengan nilai LC 50 berturut-turut 755,21; 775,92; 403,83;  dan  616,23  µg/mL  namun  metode  pada  studi
tidak disebutkan (Cornelia dan Kristyanti, 2021). Studi yang  dilakukan  oleh  Aeni  (2022)  menggunakan pedoman  OECD  nomor  203  tahun  2019  menunjukkan bahwa ekstrak air kulit nanas pada ikan mas ( Cyprinus carpio ) memiliki nilai LC 50 >100 mg/L dengan kategori praktis  tidak  toksik.  Namun  studi  tersebut  masih memiliki  keterbatasan  pada  parameter  pH  yang  tidak sesuai dengan prasyarat OECD.
Uji toksisitas tanaman nanas secara in vivo Pada Tabel  4 menunjukkan  bahwa  uji  toksisitas secara in  vivo dilakukan  pada  bagian  buah,  kulit,  dan daun nanas menggunakan empat jenis pedoman OECD yaitu OECD 420, 423, dan 425 pada uji toksisitas akut, dan  OECD  407  pada  uji  toksisitas  sub  akut.  Pedoman OECD  420  digunakan  pada  uji  toksisitas  ekstrak  air daun  nanas  dan  ekstrak  hidroalkohol  buah  nanas. Pedoman  OECD  423  digunakan  pada  uji  toksisitas ekstrak metanol kulit nanas dan ekstrak metanol daun nanas.  Pedoman  OECD  425  dan  407  berturut-turut digunakan pada ekstrak etanol kulit nanas dan ekstrak air daun nanas.
OECD  420  bertujuan  untuk  menentukan  dosis terendah  yang  menyebabkan  gejala  toksisitas.  OECD 423 bertujuan untuk mementukan dosis terendah yang menyebabkan kematian. OECD 425 dapat memberikan perkiraan  nilai  LD 50 dengan  interval  kepercayaan  dan hasilnya dapat diklasifikasikan pada Sistem Harmonisasi  Global  (GHS)  (Erkekoglu  dkk,  2011). Sedangkan  OECD  407  pada  uji  toksisitas  sub  akut bertujuan  untuk  memberikan  informasi  tentang kemungkinan  bahaya  yang  timbul  dari  paparan berulang selama periode waktu yang relatif terbatas.
Berikut  hasil  uji  toksisitas in  vivo pada  masing- masing bagian buah nanas sebagai berikut:
a. Uji Toksisitas Buah Nanas
Hasil  telaah  review  pada  uji  toksisitas  buah nanas  menyatakan  bahwa  ekstrak  hidroalkohol buah  nanas  dengan  dosis  2000  mg/kg  BB  hingga dosis  4000  mg/kg  BB  menunjukkan  tidak  ada kematian (Malik et al., 2014; Saxena dan Panjwani, 2014; Mallik et al., 2019).
b. Uji Toksisitas Kulit Nanas
Pada  ekstrak  metanol  kulit  nanas  dosis  2000 mg/kg  BB    tidak  menunjukkan  kematian  pada tikus  jantan  (Kargutkar  &  Brijesh,  2017).  Pada ekstrak  metanol  kulit  nanas  dengan  dosis  5000 mg/kg  BB  juga  tidak  menunjukkan  gejala toksisitas,  kematian,  perubahan  berat  badan,  dan berat organ pada tikus jantan dan betina selama 14 hari pengamatan (Ajayi et al., 2021).
Pada uji batas yang dilakukan oleh Oktafia et al. (2019), ekstrak etanol kulit nanas dengan dosis 2000 dan 5000 mg/kg BB menunjukkan tidak ada kematian  dan  gejala  toksisitas,  selama  14  hari
pengamatan  dengan  LD 50 >  5000  mg/kg  BB. Pemberian  ekstrak  juga  tidak  berpengaruh terhadap  pertumbuhan  dan  perkembangan  bobot badan  tikus.  Hari  ke  15,  pengujian  dilanjutkan dengan melakukan pembedahan  hewan uji untuk melihat indeks organ tikus  seperti  jantung, paru- paru,  limpa,  hati,  dan  ginjal.  Hasil  analisis  bobot badan  dan  indeks  organ  menggunakan  SPSS menunjukkan  bahwa  p  >0,05  pada  uji  normalitas, homogenitas dan signifikansi sehingga H 0 diterima sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa  data  bobot badan dan indeks organ organ terdistribusi normal, homogen  dan  tidak  berbeda  signifikan  dengan kontrol negatif.
c. Uji Toksisitas Daun Nanas
Ekstrak  metanol  daun  nanas  dengan  dosis tunggal  2000  mg/kg  BB  tidak  menunjukkan kematian  dan  gejala  toksisitas  pada  tikus  jantan (Kargutkar  &  Brijesh,  2018;  Faisal  et  al.,  2014). Ekstrak air daun nanas dosis sebesar 5000 mg/kg BB  tetap  tidak  menunjukkan  kematian,  gejala toksisitas,  dan  perubahan  berat  badan  pada  tikus selama 14 hari pengamatan. Uji toksisitas sub akut ekstrak  air  daun  nanas  tidak  menunjukkan kematian, gejala toksisitas, perubahan berat badan, perubahan konsumsi makanan dan air pada hewan yang diberi ekstrak dan kelompok kontrol hingga dosis  1000  mg/kg BB  selama  28  hari  pengamatan (Dutta & Bhattacharyya, 2013).
Pada uji toksisitas sub akut, analisis biokimia dilakukan  dengan  mengumpulkan  darah  tikus untuk  mengamati  perubahan  kadar  enzim  serum seperti  AST,  ALT,  ALP,  urea  dan  kreatinin.  Hasil pengukuran  menunjukkan  bahwa  kadar  enzim tidak  mengalami  perubahan  yang  signifikan dibandingkan dengan kelompok kontrol (Dutta & Bhattacharyya, 2013).
Perbedaan  hasil  di  masing-masing  uji disebabkan  penggunaan  bagian  tumbuhan  yang berbeda (bagian pulpa, kulit, dan runjung pada uji in  vitro ,  bagian  buah,  kulit,  dan  daun  pada  uji in vivo )  dan  pelarut  yang  digunakan  (secara  umum pelarut metanol memiliki toksisitas ringan, adapun etanol  atau  hidroalkohol  tidak  toksik  pada  uji in vivo ).

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  telaah  beberapa  penelitian  uji toksisitas akut, nilai LC 50 tumbuhan nanas pada ekstrak buah,  kulit,  dan  daun  secara in  vitro menunjukkan bahwa  tumbuhan  nanas  memiliki  kategori  toksisitas praktis tidak toksik hingga toksik sedang. Secara in vivo , tumbuhan  nanas  dikategorikan  praktis  tidak  toksik hingga toksik ringan.

## Daftar Pustaka
Aeni,  Q.  (2022).  Penentuan  Derajat  Ketoksikan  Jus Limbah  Kulit  Nanas  ( Ananas  comosus [L.]  Merr) pada  Ikan  Mas  ( Cyprinus  carpio )  [Unpublished master’s thesis]. Universitas Mataram.
Ajayi, A. M., Coker, A. I., Oyebanjo, O. T., Adebanjo, I.
M., & Ademowo, O. G. (2022). Ananas comosus (L) Merrill (pineapple) fruit peel extract demonstrates antimalarial, anti-nociceptive and anti- inflammatory  activities  in  experimental  models. Journal  of  Ethnopharmacology , 282 ,  114576. https://doi.org/10.1016/j.jep.2021.114576
Akram, M., Hamid, A., Ahmed, K., Ghaffa, A., Naveed, T., & Ahmed, S. (2013). Hypocholestrolemic activity of plants: a review. International Journal of Agronomy and  Plant  Production , 4 (11),  2906-11.  http:// www.ijappjournal.com
Asase,  A.,  Akwetey,  G.  A.,  &  Achel,  D.  G.  (2010). Ethnopharmacological  use  of  herbal  remedies  for the  treatment  of  malaria  in  the  Dangme  West District  of  Ghana. Journal  of  ethnopharmacology , 129 (3),
367-376.
https://doi.org/10.1016/j.jep.2010.04.001
Asif,  M.  (2012).  A  brief  study  of  toxic  effects  of  some medicinal  herbs  on  kidney. Advanced  biomedical research , 1 .
Badan  Pengawas  Obat dan  Makanan. (2014). Pedoman Uji  Toksisitas  Nonklinik  secara  In  Vivo. Badan Pengawas Obat dan Makanan RI. https://jdih.pom.go.id/download/product/701/
13/2014
Badan Pengawas Obat dan Makanan (2005). Standarisasi Ekstrak  Tumbuhan  Obat  Indonesia,  Salah  Satu Tahapan  Penting  Dalam  Pengembangan  Obat Indonesia. Badan Pengawas Obat Dan Makanan RI.
Badan Pusat Statistik. (2015). https://www.bps.go.id/indicator/55/62/1/prod uksi-tanaman-buah-buahan.html
Cormanes, J. M. Y., Portugaliza, H. P., & Quilicot, A. M. M. (2016). In vivo anthelmintic activity of pineapple ( Ananas comosus Merr.) fruit peeling juice in semi- scavenging Philippine native chicken naturally co- infected  with  Ascaridia  galli  and  Heterakis gallinarum. Livest.  Res.  Rural  Dev , 28 (5),  82. http://www.lrrd.org/lrrd28/5/corm28082.html
Cornelia,  M.,  &  Kristyanti,  T.  (2021).  Utilization  of Pineapple’s ( Ananas comosus L. Merr) Peel Waste as Raw Material in Cider Making. https://www.scitepress.org/Papers/2018/100414
/100414.pdf .
Dalimartha, S. (2000). Atlas tumbuhan obat Indonesia Jilid II . Trubus Agriwidya.
Dalimartha, S. (2007). Atlas Tumbuhan Indonesia. Pustaka Bunda.
Damiyati, S. Y., Pratama, I. S., & Tresnani, G. (2021). In vitro  anthelmintic  activity  of  pineapple  peel  juice
( Ananas comosus (L.) Merr.) against Paramphistomum sp. Communications in Science and Technology , 6 (1), 49-54. https://doi.org/10.21924/cst.6.1.2021.394
Debnath, P., Dey, P., Chanda, A., & Bhakta, T. (2012). A Survey  on  Pineapple  and  its  medicinal  value. Scholars Academic Journal of Pharmacy , 1 (1), 24-29.
Debnath,  B.,  Singh,  W.  S.,  &  Manna,  K.  (2021).  A phytopharmacological  review  on Ananas  comosus . Advances in
Traditional Medicine , 1-8.
https://link.springer.com/article/10.1007/s13596- 021-00563-w
Dutta,  S.,  &  Bhattacharyya,  D.  (2013).  Enzymatic, antimicrobial  and  toxicity  studies  of  the  aqueous extract  of Ananas  comosus (pineapple)  crown  leaf. Journal  of  Ethnopharmacology , 150 (2),  451-457. https://doi.org/10.1016/j.jep.2013.08.024
Erkekoglu,  P.,  Giray,  B.  K.,  &  Basaran,  N.  (2011).  3R principle  and  alternative  toxicity  testing  methods.
Fabad
J Pharm Sci , 36 (1), 101-17.
http://dergi.fabad.org.tr/pdf/volum36/issue2/1 01-117.pdf .
Faisal, M. M., Hossa, F. M. M., Rahman, S., Bashar, A. B. M. A., Hossan, S., & Rahmatullah, M. (2014). Effect of methanolic extract of Ananas comosus Leaves on glucose  tolerance  and  acetic  acid  induced  pain  in Swiss albino mice. World J. Pharm. Res , 3 (8), 24-34. https://www.academia.edu/download/34967142 /ANANAS_COMOSUS.pdf .
Fitriyasti,  B.,  &  Salmi,  S. (2021). Efek  toksisitas  ekstrak bromelin  buah  nanas  ( Ananas  comosus L.)  dengan metode  Brine  Shrimp  Lethality  Test  (BSLT). EKOTONIA: Jurnal Penelitian Biologi, Botani, Zoologi
Dan Mikrobiologi , 6 (1),
12-16. https://doi.org/10.33019/ekotonia.v6i1.2571
Hassan,  A.,  Othman,  Z.,  &  Siriphanich,  J.  (2011). Pineapple ( Ananas comosus L. Merr.). In Postharvest biology and technology of tropical and subtropical fruits (pp. 194-218e). Woodhead Publishing.
Helen,  P.  M.,  Teena,  D.  S.,  Jacob,  J.  G.,  James,  J.  J.,  & Anitha,  C.  (2019).  Preliminary  Phytochemical Screening  and  Antioxidant  Activity  of  Leaf,  Stem and Fruit Ananas comosus . World J. Pharm. Res , 8 (5), 1407-1416. https://wjpr.s3.ap-south
1.amazonaws.com/ article_issue/ 1554362945.pdf .
Hidayat,  R.S.,  dan  Napitupulu,  R.  (Ed.).  (2015). Kitab Tumbuhan Obat.
Iyamah, P. C., & Idu, M. (2015). Ethnomedicinal survey of  plants  used  in  the  treatment  of  malaria  in Southern Nigeria. Journal of ethnopharmacology , 173 , 287-302. https://doi.org/10.1016/j.jep.2015.07.008
Jovanović, M., Milutinović, M., Kostić, M., Miladinović,
B.,  Kitić,  N.,  Branković,  S.,  &  Kitić,  D.  (2018). Antioxidant capacity of pineapple ( Ananas comosus (L.) Merr.) extracts and juice. Lekovite sirovine , (38), 27-30. http://dx.doi.org/10.5937/leksir1838027J
Kadir, M. F., Sayeed, M. S. B., & Mia, M. M. K. (2012). Ethnopharmacological  survey  of  medicinal  plants used by indigenous and tribal people in Rangamati, Bangladesh. Journal  of  ethnopharmacology , 144 (3),
627-637. https://doi.org/10.1016/j.jep.2012.10.003
Kargutkar,  S.,  &  Brijesh,  S.  (2016).  Anti-rheumatic activity  of Ananas  comosus fruit  peel  extract  in  a complete Freund’s adjuvant rat model. Pharmaceutical biology , 54 (11), 2616-2622.
https://doi.org/10.3109/13880209.2016.1173066
Kargutkar,  S.,  &  Brijesh,  S.  (2018).  Anti-inflammatory evaluation  and  characterization  of  leaf  extract  of Ananas  comosus . Inflammopharmacology , 26 (2),  469- 477.
https://link.springer.com/article/10.1007/s10787- 017-0379-3
Lubis, E. R. (2020). Hujan Rezeki Budi Daya Nanas. Bhuana Ilmu Populer.
Mallik,  D.,  Bhattacharjee,  C.,  &  Gouda,  T.  S.  (2014). Pharmacological  intervention  of  the  fruit  of  plant Ananas comosus acting as hepatoprotective activity in  animal  models. Indian  Journal  of  Research  in Pharmacy
and Biotechnology , 2 (3), 1167. https://www.researchgate.net/profile/Chiranjib Bhattacharjee/publication
Mallik,  D.,  Deb,  L.,  Gandhare,  B.,  &  Bhattacharjee,  C.
(2019).  Evaluation  of Ananas  comosus Fruit  for Antiulcer  Potentials  on  Experimental  Animals. J. Harmon. Res. Appl. Sci , 7 , 89.
Martina,  M.,  Oewen,  R.  R.,  Riyanti,  E.,  Syawqie,  A.,  & Supriatno,  S.  (2011).  The  effects  of  ethyl  acetate fraction  of Ananas  comosus (L.)  Merr.  of  tongue cancer  cell  growth  inhibition  Supri’s  Clone-1, invitro. Padjadjaran  Journal  of  Dentistry , 23 (2). http://jurnal.unpad.ac.id/pjd/article/view/1401 7 .
Medicinal  benefits  of  pineapple  plant. Healthscope:  The Official  Research  Book  of  Faculty  of  Health  Sciences, UiTM , 3 (2), 54-59.
Megawati,  M.  (2020).  Phytochemical  Screening, Secondary Metabolites and Biological Activities of Southeast  Sulawesi  Plants. Jurnal  Akta  Kimia Indonesia (Indonesia Chimica Acta) .
https://doi.org/10.20956/ica.v13i2.11138
Mohamad, N., Ramli, N., Abd-Aziz, S., & Ibrahim, M. F. (2019).  Comparison  of  hydro-distillation,  hydro- distillation with enzyme-assisted and supercritical fluid  for  the  extraction  of  essential  oil  from pineapple peels.
3
Biotech , 9 (6), 1-9.
https://link.springer.com/article/10.1007/s13205- 019-1767-8
OECD  (2002)  Guidelines  for  the  Testing  of  Chemicals No.  420.  Acute  Oral  Toxicity  -  Fixed  Dose Procedure https://doi.org/10.1787/9789264070943-en .
OECD  (2002)  Guidelines  for  the  Testing  of  Chemicals No.  423:  Acute  Oral  toxicity  -  Acute  Toxic  Class Method. https://doi.org/10.1787/9789264071001- en
OECD  (2002)  Guidelines  for  the  Testing  of  Chemicals No.  425  Acute  Oral  Toxicity:  Up-and-Down Procedure. https://doi.org/10.1787/9789264071049-en
OECD  (2008)  Guidelines  for  the  Testing  of  Chemicals No. 4 Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents https://doi.org/10.1787/9789264070684- en
Ogose, N., Hirochi, M., Ebata, T., & Katsumata, Y. (2009). Reproduction  study  in  rats  treated  orally  with yacon  extracts. Yakuri  to  Chiryo , 37 (6),  511-519.
https://link.springer.com/article/10.1007/s13205- 019-1767-8
Oktafia,  N.,  Susanti,  R.,  &  Purwanti,  N.  U  (2019).  Uji Toksisitas  Akut  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah  Nanas ( Ananas  comosus L.)  Terhadap  Tikus  Putih  Betina (Rattus  norvegicus  L.)  Galur  Wistar. Jurnal Mahasiswa Farmasi Fakultas Kedokteran UNTAN , 4 (1). https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jmfarmasi/ article/view/45667 .
Olorunniyi, O. F., & Morenikeji, O. A. (2013). The extent of use of herbal medicine in malaria management in Ido/Osi  local  government  area  of  Ekiti  state, Nigeria. Journal  of  Medicinal  Plants  Research , 7 (42), 3171-3178.
https://doi.org/10.5897/JMPR2013.5101
Paixão, J., de Araújo Neto, J. F., Oliveira do Nascimento, B., Mota da Costa, D., Neves Brandão, H., Duarte Souza,  F.  V.,  ...  &  de  Lima  David,  J.  P.  (2021). Pharmacological  Actions  of Ananas  comosus L. Merril: Revision of the Works Published from 1966 to 2020. Pharmacognosy
Reviews , 15 (29). https://www.phcogrev.com/sites/default/files/ PharmacognRev-15-29-57.pdf .
Rahmayanti, V., & Ardiansyah, S. (2019). Kinerja Fungsi Ginjal  pada  Kelinci  (Lepus  nigricollins)  Diabetes yang diberi Ekstrak Bonggol Buah Nanas (Ananas comusus  L.). Medicra  (Journal  of  Medical  Laboratory Science/Technology) , 2 (2), 63-67. https://medicra.umsida.ac.id/index.php/medicra /article/view/1606 .
Rahman, I. A., Mohamed, E., Camalxaman, S. N., Haron, N.,  &  Rambely,  A.  S.  (2020). Ananas  comosus (L.) Merr.: A mini review of its therapeutic properties. Healthscope:  The  Official  Research  Book  of  Faculty  of Health Sciences, 3(2). http://www.healthscopefsk.com/index.php/rese arch/article/view/146
Redaksi  AgroMedia  (2008). Buku  Pintar  Tanaman  Obat . PT. AgroMedia Pustaka.
Saxena,  P.,  &  Panjwani,  D.  (2014).  Cardioprotective potential of hydro-alcoholic fruit extract of Ananas comosus against  isoproterenol  induced  myocardial infraction  in  Wistar  Albino  rats. Journal  of  Acute Disease , 3 (3), 228-234.
https://doi.org/10.1016/S2221-6189(14)60051-2
Sunarjono,  H.  (2008). Berkebun  21  Jenis  Tanaman  Buah. Penebar Swadaya.
Yetein, M. H., Houessou, L. G., Lougbégnon, T. O., Teka, O.,  &  Tente,  B.  (2013).  Ethnobotanical  study  of medicinal plants used for the treatment of malaria in plateau of Allada, Benin (West Africa). Journal of ethnopharmacology , 146 (1), 154-163. https://doi.org/10.1016/j.jep.2012.12.022
Zharfan,  R.  S.,  Purwono,  P.  B.,  &  Mustika,  A.  (2017). Antimicrobial activity of pineapple ( Ananas comosus L.  Merr)  extract  against  multidrug-resistant  of Pseudomonas  aeruginosa:  An in  vitro study. Indonesian  Journal  of  Tropical  and  Infectious  Disease , 6 (5), 118-123. https://e- journal.unair.ac.id/index.php/IJTID/article/view File/4159/4049
Tabel 3. Uji Toksisitas secara in vitro
Tabel 4. Uji Toksisitas secara in vivo Bagian Nanas Model Uji Toksisitas Rute Administrasi Ekstrak Dosis Hasil Review Guidline Kekurangan Referensi Pustaka Daun Nanas Tikus (Sprague Dawley) Akut Oral Air 5, 50, 300, 2000, dan 5000 mg/kg. a. Tidak  ada  kematian  pada  dosis 5000  mg/kg    sehingga  termasuk dalam  kategori  praktis  tidak toksik.
b. Tidak menunjukkan gejala toksisitas seperti perubahan warna  kulit,  berat  badan,  dan OECD guideline 420 a. Tidak    dicantumkan  sifat fisik,  kemurnian,  sifat fisikomia, dan data identifikasi ekstrak.
b. Rincian  kualitas  makanan dan air tidak dijelaskan.
(Dutta & Bhattacharyy a, 2013) Bagian Nanas Model/ Tipe Sel Senyawa/ Ekstrak/ Fraksi/ Sediaan Konsentrasi Hasil Review Saran Kementar Referensi Pustaka Kulit Artemia salina Leach Hidroalkohol 95% v/v 1000, 750, 500, 250, 100, dan 50 µg/mL. Uji  toksisitas  akut  secara in  vitro menyatakan sedikit toksik dengan nilai LC 50 770 μg/mL dan memiliki pergerakan berenang yang lambat. - - (Paixao  et  al., 2019) Runjung Artemia salina Leach Hidroalkohol 95% v/v 1000, 750, 500, 250, 100, dan 50 µg/mL. Uji  toksisitas  akut  secara in  vitro menyatakan praktis  tidak  toksik  dengan  nilai  LC 50 994 μg/mL. - - (Paixao  et  al., 2019) Pulpa Artemia salina Leach Hidroalkohol 95% v/v 1000, 750, 500, 250, 100, dan 50 µg/mL. Uji  toksisitas  akut  secara in  vitro menyatakan toksik sedang dengan nilai LC 50 622 μg/mL dan memiliki pergerakan berenang yang signifikan lebih lambat. - - (Paixao  et  al., 2019) Kulit, runjung, dan pulpa Sel Darah Merah Domba Dilarutkan dengan 0,9% larutan garam fisiologi 1000, 750, 500, 250, 100, dan 50 µg/mL. Uji  hemolisis  sel  darah  merah  menyatakan bahwa runjung, kulit, dan pulpa nanas memiliki persentase hemolisis berturut turut 7,19% yang dinyatakan toksik sedang, dan 1,66%; dan 0,83% pada konsentrasi 1000  µg/mL  yang dinyatakan praktis tidak toksik. - - (Paixao  et  al., 2019)
aktivitas  somatomotorik  selama 14 hari pengamatan. c. Tidak  melakukan  proses nekropsi dan histopatalogi. Daun Nanas Tikus (Sprauge Dawley) Sub Akut Oral Air 250,  500, dan  1000 mg/kg. a. Tidak  menunjukkan  kematian pada  dosis  250  mg/kg,  500 mg/kg, dan 1000 mg/kg sehingga termasuk  dalam  kategori  toksik ringan.
b. Tidak menunjukkan gejala toksisitas perubahan berat badan, konsumsi makanan dan konsumsi air  pada  hewan  yang  diuji  dan kontrol  negatif    selama  28  hari pengamatan..
c. Kadar  biomarker  serum  seperti AST,  ALT,  ALP,  urea,  dan kreatinin  pada  tikus  yang  diberi ekstrak tidak menunjukkan perubahan yang signifikan dibandingkan  dengan  kelompok kontrol. OECD guideline 407 a. Tidak    dicantumkan  sifat fisik,  kemurnian,  sifat fisikomia, dan data identifikasi ekstrak.
b. Rincian  kualitas  makanan dan air tidak dijelaskan.
c. Tidak dicantumkan jumlah hewan  yang  digunakan kurang.
d. Tidak  dijelaskan  alasan pemilihan dosis awal.
d. Tidak  melakukan  proses nekropsi dan histopatalogi.
e. Tidak  dijelaskan  hasil  uji hematologi.
(Dutta & Bhattacharyy a, 2013) Kulit Nanas Tikus (Wistar) Akut Oral Metanol Dosis tunggal 2000 mg/kg pada toksisitas akut. a. Tidak  ada  kematian  pada  dosis 2000  mg/kg  sehingga  termasuk dalam kategori toksik ringan.
b. Tidak  menunjukkan    gejala toksisitas  seperti  warna  mata, tekstur dan warna bulu,
pernapasan  (palpitasi),  gerakan mata,  efek  menggeliat,  muntah, diare,  serta  gerakan  tubuh  yang tidak normal. OECD guideline 423 a. Tidak    dicantumkan  sifat fisik,  kemurnian,  sifat fisikomia, dan data identifikasi ekstrak.
b. Tidak  dicantumkan  usia dan jumlah hewan.
c. Tidak  dijelaskan  alasan pemilihan hewan jantan.
d. Kondisi tempat pemeliharaan hewan terkait kelembapan,
suhunya  melebihi  suhu yang ditetapkan OECD.
e. Tidak dijelaskan pemilihan dosis awal.
(Kargutkar & Brijesh, 2017)
f. Tidak dilakukan pengukuran dan pengamatan berat badan. g. Tidak melakukan nekropsi dan histopatologi. Kulit Nanas Tikus Betina (Wistar) Akut Oral Etanol 96% Dosis 2000  dan 5000 mg/kg a. Tidak  ada  kematian  pada  hingga dosis  5000  mg/kg  sehingga termasuk  dalam  kategori  praktis tidak toksik.
b. Tidak ada gejala toksisitas seperti refleks  kornea,  refleks  pineal,
hafner,  fleksi,  sikap  tubuh, menggalantung, retablismen, sistem pernapasan, ptosis, lakrimasi,  katalepsi,  mortalitas, salivasi, vokalisasi, tremor, kejang,  dan writhing setelah  14 hari pengamatan. c. Ekstrak tidak berpengaruh terhadap pertumbuhan dan perkembangan bobot badan tikus. d. Hasil  pembedahan    di  hari  ke  15 menunjukkan  bahwa  ekstrak tidak mempengaruhi pembesaran organ  jantung,  paru-paru,  limpa,
hati, dan ginjal. OECD guideline 425 a. Tidak dicantumkan kondisi tempat pemeliharaan hewan
terkait  kelembapan,  suhu dan siklus cahaya.
b. Tidak dicantumkan rincian kualitas makanan dan air.
c. Tidak  dijelaskan mengapa dilakukan uji batas.
d. Tidak melakukan histopatologi. (Oktafia dkk, 2019) Kulit Nanas Tikus (BALB/c ) Akut Oral Metanol 80% Dosis tunggal 5000 mg/kg a. Dosis  5000  mg/kg  BB  tidak menunjukkan  gejala  morbiditas dan mortalitas sehingga termasuk dalam  kategori  praktis  tidak toksik.
b. Tidak menunjukkan gejala toksisitas seperti perubahan tingkah  laku  selama  14  hari pengamatan. c. Tidak  menunjukkan  perubahan berat badan dan berat organ. OECD guideline 423 a. Tidak  dicantumkan  sifat fisik,  kemurnian,  sifat fisikokimia ekstrak.
b. Tidak  dicantumkan  usia hewan uji.
c. Tempat pemeliharaan hewan terkait kelembapan tidak  dicamtukan  dan suhu  yang  digunakan melebihi suhu yang ditetapkan. (Ajayi  dkk, 2021)
d. Tidak  dijelaskan  alasan menggunakan  dua  jenis kelamin hewan uji.
e. Tidak  menjelaskan  alasan pemilihan dosis awal.
f. Tidak melakukan histopatologi. Daun Nanas Tikus (Wistar) Akut Oral Metanol Dosis tunggal 2000 mg/kg a. Hasil  uji  menunjukkan  tidak  ada kematian pada dosis 2000 mg/kg sehingga termasuk dalam kategori toksik ringan.
b. Tidak menunjukkan gejala toksisitas  seperti  menggeliat, muntah,  diare,  gerakan  tubuh tidak  normal selama  14  hari pengamatan. OECD guideline 423 a. Tidak  dicantumkan  sifat fisik, kemurnian, dan fisikokimia ekstrak.
b. Tidak  dicantumkan  usia dan jumlah hewan.
c. Tempat pemeliharaan hewan terkait kelembapan tidak  dicamtukan  dan suhu  yang  digunakan melebihi suhu yang ditetapkan. d. Tidak  dijelaskan  alasan menggunakan hewan jantan sebagai hewan uji.
e. Tidak  dijelaskan  alasan pemilihan dosis awal.
f. Tidak melakukan penimbangan dan pengukuran berat badan. g. Tidak melakukan nekropsi dan histopatologi.
(Kargutkar & Brijesh, 2018) Daun Nanas Tikus (Swis albino) Akut Oral Metanol 100,  200, 300,  600, 800, 1000, 2000  dan 3000 mg/kg Tidak ada kematian pada dosis 2000 mg/kg  selama  14  hari  pengamatan sehingga  termasuk  dalam  kategori toksik ringan. - a. Tidak mencantumkan pedoman guidline.
b. Tidak  dicantumkan  sifat fisik, kemurnian, dan fisikokimia ekstrak.
c. Tidak  dicantumkan  usia, jumlah  dan  jenis  kelamin hewan yang digunakan.
d. Tidak dicantumkan rincian kualitas makanan dan air.
(Faisal  dkk, 2014)
e. Tidak  dijelaskan  alasan pemilihan dosis awal.
f. Tidak melakukan penimbangan dan pengukuran berat badan. g. Tidak  dijelaskan  hasil pengamatan gejala toksisitas. h. Tidak melakukan nekropsi dan histopatologi. Buah Nanas Tikus (Albino) Akut Oral Hidroalk ohol Dosis tunggal 2000 mg/kg pada toksisitas akut. Tidak ada kematian pada dosis 2000 mg/kgBB selama 14 hari pengamatan  sehingga  termasuk dalam kategori toksik ringan. OECD guideline 420 a. Tidak  dicantumkan  sifat fisik, kemurnian, dan fisikokimia ekstrak.
b. Tidak  menjelaskan  alasan menggunakan hewan pada dua jenis kelamin.
c. Tidak ada informasi terkait rincian  kualitas  makanan dan air.
d. Tidak  dijelaskan  alasan pemilihan dosis awal.
e. Tidak melakukan penimbangan dan pengukuran berat badan. f. Tidak  menjelaskan  hasil pengamatan gejala toksisitas. g. Tidak melakukan nekropsi dan histopatologi. (Malik  dkk, 2014) Buah nanas Tikus (Albino Wistar) Akut Oral Hidroalk ohol (70% etanol) Dosis 200, 400 hingga 4000 mg/kg untuk toksisitas akut. Tidak  ada  perubahan  tingkah  laku hingga 2 jam dan tidak ada kematian hingga 24 jam pada dosis maksimum 4000 mg/kg. - a. Tidak dicantumkan guidline yang digunakan.
b. Tidak  dicantumkan  sifat fisik,
kemurnian, fisikokimia, dan data identifikasi ekstrak.
c. Tidak  dicantumkan  alasan menggunakan hewan pada dua jenis kelamin.
(Saxena dan Panjwani, 2014)
d. Tidak dicantumkan jumlah dan usia hewan.
e. Tidak  dijelaskan  alasan pemilihan dosis awal.
f. Tidak melakukan penimbangan dan pengukuran berat badan. g. Gejala toksisitas yang diamati hanya 4 jam.
h. Tidak melakukan nekropsi dan histopatologi. Buah Nanas Tikus (Albino) Akut Oral Hidroalk ohol Dosis hingga 2000 mg/kg Tidak  ada  kematian  pada  ekstrak etanol dan air buah nanas dosis 2000 mg/kg  sehingga  termasuk  dalam kategori toksik ringan. OECD guideline 420 a. Tidak dicantumkan sifat fisik, kemurnian, dan sifat fisikokimia ekstrak.
b. Tidak dicantumkan jumlah dan usia hewan.
c. Tidak  dicantumkan  alasan menggunakan hewan pada dua jenis kelamin.
d. Tidak dicantumkan rincian kualitas makanan dan air.
e. Tidak melakukan penimbangan dan pengukuran berat badan. f. Gejala  toksisitas  tidak diamati.
Tidak melakukan nekropsi dan histopatologi.
(Mallik dkk, 2019)