Jurnal Pharmascience, Vol 05, No. 02, Oktober 2018, hal: 134-142 ISSN-Print. 2355-5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article
Perbandingan Kadar Kolagen Cangkang Kerang Darah ( Anadara granosa ) dengan Cangkang Kerang Hijau (Mytilus viridis) di Bandengan, Kendal, Jawa Tengah
Ariyanti Ariyanti 1) , Melani Dewi 1) , Alfenila Prasista Hapsari 2) , Syukron Mashadi 2)
1) Dosen Program Studi Farmasi, STIKES Kendal Email : riri99.cettaazzahra@gmail.com
2) Mahasiswa Program Studi Farmasi, STIKES Kendal Email : alfenila@gmail.com

## ABSTRAK
Kolagen merupakan komponen struktural utama jaringan ikat putih (white connective tissue) yang meliputi hampir 30% total protein pada organ tubuh vertebrata dan invertebrate. Kolagen adalah protein bermolekul besar, merupakan komponen utama penyusun kulit. Lebih dari 71% protein kulit adalah kolagen. Salah satu sumber kolagen yang dapat digunakan dan belum  termanfaatkan  adalah  cangkang  kerang  darah  dan  cangkang  kerang  hijau.  Adanya pendayagunaan  kolagen  yang  berasal  dari  hewan  yang  hidup  di  air  ini  dapat  menjadi alternatif yang menjanjikan, mengingat kolagen komersial biasanya diperoleh dari kulit sapi, kulit babi, atau kulit ayam.
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  cangkang  kerang  darah  (Anadara  granosa)dan cangkang  kerang  hijau  (Mytilus  varidis)  yang  diambil  dari  tempat  pelelangan  ikan  di Bandengan,  Kendal.  Sampel  akan  diberi  perlakuan  yang  berbeda  pada  konsentrasi  cairan penyari  asam  asetat  dan  waktu  ekstraksi  yang  mana  akan  berpengaruh  terhadap  rendemen kolagen yang dihasilkan.
Rancangan penelitian yang dipakai adalah pra eksperimen berupa post only design/one shot case study yaitu perlakuan/intervensi telah dilakukan kemudian pengukuran. Penelitian dianalisa  secara  komparatif  yaitu  efektifitas  asam  asetat  dan  waktu  perendaman  dalam mempengaruhi  hasil  rendemen  kolagen  dari  cangkang  kerang  darah  dan  cangkang  kerang hijau. Data diolah dan dianalisa menggunakan spss dengan uji t-test.
Kata Kunci :Anadara granosa, Mytilus varidis, kolagen

## ABSTRACT
Collagen is a major component of white connective tissue (white connective tissue) that covers  nearly  30%  of  total  protein  in  vertebrate  organs  and  invertebrates.  Collagen  is  a large  molecular  protein,  a  major  component  of  the  skin. More  than  71%  of  skin  protein  is collagen. One source of collagen that can be used and not yet utilized is the shells of shells and shells of clam green. The use of collagen derived from animals that live in the air can be
a promising alternative, given the usual commercial collagen of cowhide, pig skin, or chicken skin.
The  population  in  this  study  is  the  shell  of  blood  clams  (Anadaragranosa)  and  the shells of clam green (Mytilusvaridis) taken from the fish auction site in Bandengan, Kendal. Samples  will  be  treated differently  to  the  concentration  of  acetic  acid  dancer  fluid  and  the extraction time which will affect the yield of collagen produced.
The  research  design  used  was  pre  experiment.  Only  one  case  design/case  study  is treated/ intervened. The study was analyzed comparatively ie the effectiveness of acetic acid and the immersion time in yield of collagen yield from the shells and shells of clam greens. Data is processed and analyzed using spss with t-test.
Keywords :Anadara granosa,Mytilus varidis, collagen

## I. PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  salah  satu negara  kepulauan  terbesar  di  dunia, dimana  2/3  dari  wilayah  Indonesia  terdiri dari  laut.  Sebagai  salah  satu  dari  wilayah kepulauan  Indonesia,  Propinsi  Jawa Tengah  memiliki  total  pantai  sepanjang 656,1  km 2 (0,81%  dari  keseluruhan panjang  pantai  Indonesia)  yang  terbagi dalam  wilayah  utara  dan  wilayah  selatan. Perikanan  di  wilayah  utara  Jawa  Tengah didukung  oleh  beberapa  daerah  salah satunya  kota  Kendal  yang  memiliki sumber  daya  ikan  melimpah  dan  banyak diminati  masyarakat  Kendal.  Selain  ikan, potensi lain dari perairan pantai di Kendal adalah  kerang.  Jenis  kerang  yang  sering menjadi  konsumsi  masyarakat  yaitu kerang  hijau (Mytilus  viridis) ,  kerang darah (Anadara granosa) dan kerang bulu
(Anadara antiquata) . Kerang yang digunakan  sebagai  obyek  penelitian  ini adalah  kerang  darah.  Daerah  penyebaran kerang  ini  hampir  di  seluruh  pantai
Indonesia, hidup  di dasar, di daerah pasir berlumpur pada kedalaman sampai 4 meter dan  perairan  yang  relatif  tenang  (Hapsari,
2017).
Dari potensi kerang yang dihasilkan,
kebanyakan masyarakat hanya memanfaatkan daging kerang saja sedangkan cangkang kerang belum dimanfaatkan  secara  optimal,  tercatat hanya  20%  dari  limbah  cangkang  kerang yang  diproduksi  sebagai  pakan,  kerajinan dan  produk  lain  (Anwar, et  al., 2011).
Cangkang  kerang  darah  merupakan  salah satu  sumber  alternatif  dalam  pembuatan kolagen
yang belum dimanfaatkan.Menurut  Nasution  (2015), kandungan  kimia  cangkang  kerang  dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Kandungan Kimia Cangkang
Kerang
Komponen Komposisi (%) Ca + C Mg Na P K Lain – lain 98,77 0,0476 0,9192 0,0183 0,0398 0,1981 Pendayagunaan kolagen
yang berasal dari hewan yang hidup di air dapat menjadi  alternatif  yang  menjanjikan, mengingat  kolagen  komersial  biasanya diperoleh  dari  kulit  sapi,  kulit  babi,  atau kulit ayam (Setyowati dan Setyani, 2015). Kolagen  merupakan  komponen  struktural utama jaringan ikat putih ( white connective tissue )  yang  meliputi  hampir  30%  total protein  pada  organ  tubuh  vertebrata  dan invertebrata  (Setiawati,  2009).  Kolagen  di pasaran  digunakan  sebagai  bahan  baku dalam industri makanan, kosmetik, pembuatan  film,  biomaterial  dan  farmasi. Pada  industri  farmasi  kolagen  digunakan sebagai drug carrier yaitu mini-pellet dan tablet  untuk  penghantar  protein,  formulasi gel pada kombinasi dengan liposom untuk sistem  penghantar  terkontrol,  bahan pengkontrol
untuk penghantaran transdermal  dan  nanopartikel  untuk penghantaran gen (Nurhayati et al., 2013).
Kolagen dapat diperoleh melalui ekstraksi bahan-bahan  sumber  kolagen  dengan menggunakan asam-asam organik ataupun asam  anorganik.  Faktor  penting  yang mempengaruhi  hasil  akhir  kolagen  adalah
konsentrasi  dan  waktu  perendaman  dalam larutan  asam  asetat.  Konsentrasi  asam asetat dapat mengubah pH yang mengatur kerapatan muatan protein yang memodifikasi  interaksi  elektrostatik  dan struktur protein. Proses ekstraksi dipengaruhi juga oleh waktu karena waktu sangat  menentukan  perpindahan  molekul zat  selama  proses  difusi  (Djailani,  2016). Menurut  Minah et  al., (2016),  tahapan perendaman  harus  dilakukan  dengan  tepat (waktu  dan  konsentrasinya),  agar  tidak terjadi  kelarutan  kolagen  dalam  larutan dan  menyebabkan  penurunan  rendemen yang  dihasilkan.  Oleh  sebab  itu,  untuk mengoptimalkan pemanfaatan limbah padat  kerang  sebagai  kolagen  akan dilakukan  penelitian  mengenai  pengaruh konsentrasi  asam  asetat  dan  waktu perendaman  terhadap  kadar  kolagen cangkang kerang darah yang dihasilkan.

## II. METODE PENELITIAN Bahan dan Alat
Bahan  baku  utama  penelitian  yaitu cangkang  kerang  darah  dan  cangkang kerang  hijau  yang  diambil  dari  tempat pelelangan ikan di daerah Bandengan, kota Kendal.  Bahan  –  bahan  kimia  yang digunakan adalah NaOH, NaCl,
CH 3 COOH, aquades.
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini  antara  lain  beaker  glass,  oven,  batang pengaduk, corong kaca, gelas ukur, kertas
saring,  sentrifius,  timbangan  analitik, cawan  petri,  indikator  pH,  dropel  plate, pipet tetes.

## Penyiapan Sampel
Cangkang kerang dibersihkan dan diserbukkan.  Sampel  kemudian  ditimbang dengan  perbandingan  1:20  (b/v)  lalu direndam  dalam  larutan  NaOH  0,1  M selama  24  jam.  Sampel  disaring  memakai kertas  saring,  lalu  dicuci  dengan  aquadest hingga  pH  sampel  mendekati  atau mencapai pH 7.

## Proses Ekstraksi Kolagen
Ekstraksi  kolagen  dilakukan  dengan perendaman  dalam  asam  asetat  mengacu pada  Muyonga et  al .,  (2004)  yang dimodifikasi.  Cangkang  kerang  darah  dan cangkang  kerang  hijau  ditimbang  dengan perbandingan  bobot  sampel  dan  volume larutan  1:10  (b/v),  kemudian  diberi  kode perlakuan A dan perlakuan B. Perlakuan A dimaserasi dalam asam asetat 0,25; 0,5 dan 0,75  M  dengan  waktu  ekstraksi  3  hari. Perlakuan B dimaserasi dalam asam asetat 0,75 M dengan waktu ekstraksi 1, 2 dan 3 hari.  Hasil  ekstraksi  perlakuan  A  dan perlakuan  B  disaring  kemudian  di presipitasi  secara  salting  out  dengan  cara menambahkan  NaCl  0,9  M.  Selanjutnya disentrifugasi  selama  10  menit  dengan kecepatan 10.000 rpm untuk mengendapkan  serat-serat  residu  kolagen
basah. Hasil pemisahan kemudian disaring dan dioven dengan suhu 60°C selama satu hari  untuk  mendapatkan  kolagen  kering. Kolagen  kering  tersebut  lalu  ditimbang untuk  menghitung  jumlah  rendemen  yang didapat.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  kolagen  dari  cangkang kerang  darah  (Anadara  granosa)dan cangkang kerang hijau (Mytilus varidis)menggunakan  metode  maserasi. Metode  maserasi  merupakan  salah  satu metode  ekstraksi  dingin.  Penggunaan metode  ini  cukup  efektif  dikarenakan kontak  antara  simplisia  dan  pelarut membutuhkan waktu yang lama, selain itu kolagen  sendiri  tidak  tahan  panas  maka dengan  metode  ini  kolagen  akan  lebih tersari dengan sempurna.
Pada  tahap  pengerjaan  awal, cangkang  kerang  darah  melewati  proses pencucian lalu diserbukkan untuk memperluas permukaannya. Serbuk kemudian  direndam  dengan  NaOH  0,1  M selama  24  jam  yang  bertujuan  untuk menghilangkan  komponen  non-kolagen yang  ditandai  dengan  larutan  hasil perendaman  berwarna putih  keruh,  karena komponen non-kolagen keluar dan bersatu bersama  pelarut.  Perendaman  dengan
NaOH  mengakibatkan  struktur  kolagen mengembang  akibat  adanya  air  yang berpenetrasi.  Hal  tersebut  mengakibatkan komponen-komponen  non-kolagen  yang pada  awalnya  terperangkap  di  dalam matrik  kolagen  dapat  dengan  mudah terlepas.  Sampel  hasil  perlakuan  NaOH dibagi menjadi 2 perlakuan.
Perlakuan A direndam dalam asam asetat  dengan  variasi  konsentrasi  0,25  M;
0,5 M dan 0,75 M selama 3 hari. Perlakuan B direndam dalam asam asetat konsentrasi
0,75 M dengan variasi waktu perendaman
1  hari,  2  hari  dan  3  hari.  Adapun  proses ekstraksi memakai pelarut asam dan bukan basa karena asam mampu mengubah serat kolagen  triple  heliks  menjadi  rantai tunggal, sedangkan larutan perendam basa hanya  mampu menghasilkan  rantai  ganda. Hal  ini  menyebabkan  kolagen  yang dihidrolisis oleh larutan asam lebih banyak daripada  larutan  basa.  Larutan  basa membutuhkan  waktu  yang  lebih  lama untuk  menghidrolisis  kolagen  (Kasim, 2013). Asam asetat banyak dipilih sebagai pelarut  dalam  ekstraksi  kolagen  karena dapat  mengekstrak  lebih  baik  dibanding pelarut  yang  lain  (Astiana  et  al.,  2016). Kasim  (2013)  menyatakan  bahwa  jumlah kolagen  yang  terekstrak  menggunakan asam  asetat  lebih  tinggi  dibandingkan menggunakan  asam  sitrat  dan  asam klorida.  Asam  asetat  mampu  melarutkan kolagen  yang  tidak  berikatan  silang.
Menurut Astina et al., (2016), perendaman dalam asam akan menyebabkan pengembangan  kulit  karena  masuknya  air dalam  serat  kolagen.  Masuknya  air  ke dalam serat kolagen disebabkan terjadinya gaya elektrostatik antara gugus polar pada serat  kolagen  dengan  H+  dari  asam  aatu terbentuknya ikatan hidrogen antara gugus non  polar  pada  serat  kolagen  dengan  H+ dari  asam.  Pengembangan  kulit  ini  akan merusak  struktur  serat  kolagen  karena terganggunya ikatan non kovalen sehingga akan  melarutkan  kolagen  pada  larutan asam setat.
Hasil  penyaringan  masing-masing perlakuan  selanjutnya  dipresipitasi  atau diendapkan  kolagennya  dengan  cara salting  out  memakai  larutan  NaCl  0,9  M. Penambahan  garam  dengan  konsentrasi tinggi  akan  menyebabkan  salting  out dimana garam mengikat air dan menyebabkan  agregasi  pada  protein sehingga molekul protein akan mengalami presipitasi.  Hasil  tersebut  disebabkan kekuatan  ionik  garam  lebih  tinggi dibandingkan  protein  sehingga  mudah mengikat air. Jumlah air yang terikat pada protein  menurun  sehingga  menyebabkan gaya tarik menarik antara molekul protein dan  air  sehingga  terjadi  pengendapan protein  (Astina,  et  al.,2016)  Selanjutnya hasil  presipitat  disentrifugasi  selama  10 menit dengan kecepatan 30.000 rpm untuk mengendapkan  serat-serat  residu  kolagen
basah. Hasil pemisahan kemudian disaring dan dioven dengan suhu 60°C selama satu hari  untuk  mendapatkan  kolagen  kering.
Kolagen  kering  tersebut  lalu  ditimbang untuk  menghitung  jumlah  rendemen  yang didapat. Tabel 2. Persentase Rendemen Perlakuan A Pada Perendaman 3 Hari Kadar Konsentrasi (M) Kadar Rendemen Kolagen (%) Cangkang kerang darah Cangkang kerang hijau As. asetat 0,25 0,55 0,71 0,97 1,04 0,22 1,12 As. asetat 0,5 0,94 1,34 1,03 1,51 1,08 1,85 As. asetat 0,75 1,61 1,68 1,49 1,71 2,03 1,96 Dari  tabel  2,  dapat  dilihat  bahwa proses  ekstraksi  sampel  cangkang  kerang darah  dan  cangkang  kerang  hijau  yang menggunakan konsentrasi 0,75 M
menghasilkan persentase
rendemen kolagen  tertinggi  (2,03%)  dan  (1,96%) artinya  semakin  tinggi  konsentrasi  asam asetat  yang  digunakan,  semakin  banyak kolagen yang dihasilkan.
Konsentrasi  larutan  asam  asetat yang  lebih  tinggi  dapat  menyebabkan penurunan  kadar  protein  karena  asam asetat  akan  menghidrolisis  ikatan  peptida
lebih kuat sehingga akan terjadi kehilangan  protein  (Tridhar,  2016). Menurut  Ulfah  (2011),  rendemen  kolagen tertinggi  dihasilkan  oleh  ceker  ayam  yang direndam  didalam  larutan  asam  asetat,
dimana  semakin  tinggi  konsentrasi  asam asetat  maka  struktur  kolagen  akan  lebih terbuka.
Menurut  Naro  (2013),  proses ekstraksi sampel kulit ikan nila hitam yang menggunakan konsentrasi asam asetat 0,75 M  menghasilkan  persentase  rendemen kolagen yang lebih besar (5,96%). Hal ini menunjukkan  bahwa  faktor  konsentrasi larutan  asam  asetat  memberikan  pengaruh terhadap ekstraksi protein kolagen.
Tabel 3. Hasil Perhitungan Indepedent Samples Test Rendemen Perlakuan A
Kadar rendemen kolagen Levene's Test for Equality of Variances t-test for Equality of Means F sig t Sig Equal variances assumed 0,239 0,631 -1,455 0,165 Equal variances not assumed -1,455 0,166 Berdasarkan hasil perhitungan independent samples  test  pada  tabel  3,  nilai  signifikan dari  uji  T  menunjukkan  angka  0,166  atau p  >0,05;  maka  H0  diterima  dan  H1
ditolakatau bisa disimpulkan bahwa kedua rata-rata  kadar  rendemen  kolagen  antara cangkang  kerang  darah  dan  cangkang kerang hijau adalah sama.

## Tabel 4. Persentase Rendemen Perlakuan B Pada Perendaman Asam Asetat 0,75 M
Waktu ekstraksi Kadar Rendemen Kolagen (%) Cangkang kerang darah Cangkang keranghijau Waktu ekstraksi 1hr 1,07 0,71 1,06 1,12 1,12 1,04 Waktu ekstraksi 2hr 1,08 1,34 1,74 1,85 1,14 1,51 Waktu ekstraksi 3 hr 1,00 1,68 0,91 1,96 0,98 1,71 Dari  tabel  4,  dapat  dilihat  bahwa  proses ekstraksi sampel cangkang kerang darahdari  hari  pertama  menuju  hari  kedua mengalami  kenaikan  sementara  pada  hari ketiga  mengalami  penurunan.Menurut Minah  et  al.,  (2016),  proses  hidrolisis kolagen dengan perendaman dalam larutan asam  membutuhkan  waktu  yang  lebih singkat  dibandingkan  dengan  perendaman dalam  larutan  basa  karena  asam  mampu mengubah  serat  kolagen  triple  heliks menjadi rantai
tunggal.
Tahapan
perendaman  harus  dilakukan  dengan  tepat
(waktu  dan  konsentrasinya),  agar  tidak terjadi  kelarutan  kolagen  dalam  larutan dan  menyebabkan  penurunan  rendemen yang dihasilkan.
Tabel 5. Hasil Perhitungan Indepedent Samples Test Rendemen Perlakuan B Levene's Test
t-test for Equality
Kadar rendemen kolagen for Equality of Variances of Means F sig t sig Equal variances assumed 4,562 0,048 -1,955 0,068 Equal variances not assumed -1,955 0,073
Berdasarkan  hasil  perhitungan kruskal-wallis pada tabel 5, nilai signifikan menunjukkan  angka  0,068  atau    p>0,05; maka H0 diterima dan H1 ditolak atau bisa
disimpulkan  bahwakedua  rata-rata  kadar rendemen  kitosan  antara  limbah  cangkang kerang bulu dan limbah duri ikan bandeng adalah  sama.

## IV. KESIMPULAN
1. Tidak  ada  perbedaan  rata-rata  kadar kolagen  cangkang  kerang  darah  dan cangkang kerang hijau
2. Perlakuan  asam  asetat  0,75  M menghasilkan  rendemen  yang  tertinggi 2,03%  untuk  cangkang  kerang  darah
dan  1,96%  untuk  cangkang  kerang hijau.
3. Perlakuan  waktu  ekstraksi  2  hari menghasilkan  rendemen  yang  tertinggi 1,74%  untuk  cangkang  kerang  darah dan 1,85% untuk cangkang kerang hijau

## DAFTAR PUSTAKA
Anwar,  K.,  Rinaldi,  R.,  Nisa,  H.,  Sitepu, S.F., 2011, Pasta Gigi Cakradent, Pasta  Gigi  Cangkang  Kerang Sehat  Tanpa  Flouride  dan  SLS, Proposal  Program  Kreativitas
Mahasiswa  Universitas  Negeri Medan , Medan. Astiana, I., Nurjanah., Tati N., Karakteristik Kolagen Larut Asam  Dari  Kulit  Ikan  Ekor Kuning, Jurnal  IPB ,  Fakultas
Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB, Bogor.
Hapsari, Alfenila  P.,  2017,  Pengaruh
Konsentrasi  Asam  Asetat  dan Waktu  Ekstraksi  terhadap  Kadar KolagenCangkang Kerang Darah( Anadara Granosa )
di
Daerah  Bandengan, Karya  Tulis Ilmiah ,  Program  Studi  D-III Farmasi STIKES Kendal, Kendal Kasim,  S.,  2013,  Pengaruh  variasi  Jenis
Pelarut  Asam  Pada  Ekstraksi Kolagen Dari Ikan Pari (Himantura  gerrardi) dan  Ikan Tuna (Thunnus sp),Majalah Farmasi dan Farmakologi ,
Fakultas  Farmasi  Universitas Hasanuddin, Makassar.
Marjoni,  Mhd.  Riza,  2006, Dasar-Dasar Fitokimia  Untuk  Diploma  III Farmasi, Cetakan  I,  20,  Trans Info Media, Jakarta.
Minah, Faidliyah N., Siga, Wea Drira M.,
S., Catur Pratiwi, 2016, Ekstraksi
Gelatindari  Hidrolisa  Kolagen Limbah Tulang Ikan Tuna dengan Variasi  Jenis  Asam  dan  Waktu Ekstraksi, Seminar Nasional
Inovasi dan Aplikasi Teknologi di Industri , Institut Teknologi Nasional Malang, Malang. Naro, AB., 2013, Ekstraksi dan Karakterisasi  Kolagen  dari  Kulit Ikan  Nila  Hitam (Oreochoromis niloticus),Skipsi , Fakultas pertanian  Universitas  Gadjah Mada, Yogyakarta. Nasution, Jeffry Haryadi, 2015, Pembuatan Adsorben Dari Cangkang  Kerang  Bulu  Yang Daktivasi  Secara  Termal  Sebagai Pengadsorbsi Fenol, Skripsi, Fakultas Teknik Universitas Sumatera Utara, Sumatera. Nurhayati,  Tazwir,  Murniyati,  2013, Ekstraksi dan Karakterisasi Kolagen  Larut  Asam  Dari  Kulit Ikan Nila (Oreochromis niloticus).JPB kelautan dan Perikanan, Balai Besar Penelitian dan  Pengembangan  Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, Jakarta. Nurjanah,  Zulhamsyah,  Kustiyariyah., 2005,  Kandungan  Mineral  dan Proksimat Kerang Darah (Anadara granosa) Yang Diambil Dari Kabupaten Boalemo, Gorontalo. Buletin  Teknologi Hasil Perikanan, Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Setiawati,  I.  H.,  2009,  Karakterisasi  Mutu Fisika  Kimia  Gelatin  Kulit  Ikan Kakap Merah ( Lutjanus Sp.) Hasil Proses  Perlakuan  Asam, Skripsi,
Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor,
Bogor.
Setyowati,  H.,  dan  Wahyuning  S.,  2015, Potensi  Nanokolagen  Limbah Sisik Ikan Sebagai Cosmeceutical,  Jurnal  Farmasi Sains  dan  Komunitas, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Tridhar, Noorman A., 2016, Perbandingan Produksi  Kolagen  dari  Sisik  dan Tulang Ikan Gurami (Osphronemus  gouramy) Secara Kimia  dan  Enzimatis, Skripsi ,
Fakultas Teknik Universitas Pasundan, Bandung. Ulfah,  M.,  2011,  Pengaruh  Konsentrasi Larutan  Asam  Asetat  dan  Lama Waktu Perendaman terhadap Sifat-Sifat  Gelatin  Ceker  Ayam, AGRITECH ,  Fakultas  Teknologi Pertanian, Yogyakarta.
Astiana, I., Nurjanah., Tati N., Karakteristik Kolagen Larut
Asam  Dari  Kulit  Ikan  Ekor Kuning, Jurnal  IPB ,  Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB, Bogor.