## PENGARUH AIR PERASAN BROKOLI
TERHADAP DAYA ANALGETIK PARASETAMOL
PADA MENCIT JANTAN BALB/c
1 Maya Arfania
2 Lukman Hakim
3 Arief Rahman Hakim
1 Prodi Farmasi Fakultas Tekhnik dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( maya.arfania@ubpkarawang.ac.id )
2 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta ( lukman48@yahoo.com )
3 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakart ( ar_hakim2000@yahoo.com ) Jl. HS.Ronggo Waluyo, Telukjambe Timur, Karawang, Jawa Barat 41361

## ABSTRAK
Brokoli  mengandung  senyawa  indol  yang  dapat  menginduksi  enzim pemetabolisme  obat-obat  dengan  rasio  hepatik  rendah  (<  0,4)  seperti  kinidin, tolbutamide,  dan  parasetamol.  Konsumsi  bersama  dengan  brokoli  diduga  dapat menurunkan  efek  farmakologi  obat-obat  tersebut.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui pengaruh air perasan brokoli terhadap daya analgetik parasetamol.
Penelitian  dilakukan  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  pola  searah menggunakan hewan uji mencit jantan BALB/C. Sekelompok mencit dibagi secara acak menjadi kelompok kontrol dan perlakuan. Efek yang diamati adalah jumlah geliat dalam 1  jam.  Analisa  hasil  dilakukan  dengan  membandingkan  jumlah  geliat  rata-rata  setelah perlakuan  dengan  parasetamol,  baik  dengan  dan  tanpa  pemberian  air  perasan  brokoli. Jumlah geliat rata-rata yang timbul akibat pemberian asam asetat dan parasetamol, baik dengan  dan  tanpa  pemberian  air  perasan  brokoli  dibandingkan  secara  statistik menggunakan uji Student’s-t tak berpasangan dengan taraf kepercayaan 95%.
Hasil  penelitian  menunjukkan  air  perasan  brokoli  dapat  meningkatkan  daya analgetik  parasetamol  pada  mencit  (dari  54,74%  menjadi  71,58%)  dengan  perbedaan tidak bermakna ( p > 0,05).
Kata kunci: Brokoli, parasetamol, analgetik

## ABSTRACT
Broccoli  contains  indole  compounds  that  can  induce  metabolic  enzymes  of drugs  with  low  hepatic  extraction  ratio  (<  0,4)  such  as  quinidine,  tolbutamide,  and paracetamol. Consumption with broccoli was suspected to decrease the pharmacological effect  of  these  drugs.  The  objective  of  the  present  study  is  to  determine  the  effect  of broccoli juice to the analgesic of paracetamol.
The study was conducted in male BALB/C mice using a randomized completely block  design. A  group  of  mice  were  randomly  divided  into  control  and  treatment groups. The observed effect is the cummulative number of stretching in an 1 hour. The results  were  analyzed  by  comparing  the  average  number  of  stretching  after  treatment with  paracetamol,  both  with  and  without  the  broccoli  juice  pretreatment.  The  average number  of  stretching  with  and  without  broccoli  juice  administration  were  compared statistically using an independent Student’s t Test with 95% confidence level.
The  results  show  that  broccoli  juice  can  increase  the  analgesic  effect  of paracetamol in the mice (from 54,74% to 71,58%) without significantly difference (p > 0,05).

## Keywords: Broccoli, paracetamol, analgesic

## PENDAHULUAN
Sayur-sayuran  dari  familia Brassicaceae yang  lazim  dikonsumsi  ternyata  dapat mempengaruhi  profil  farmakokinetika  obat  dan  pada  gilirannya  mempengaruhi farmakodinamika obat. Hasil penelitian yang telah dilakukan sebelumnya menunjukkan bahwa  praperlakuan  brokoli  pada  kelinci  menyebabkan  perubahan  parameter farmakokinetik  kinidin,  antara  lain  penurunan  kadar  puncak  dan  luas  area  di  bawah kurva kinidin, terjadi kenaikan pada volume distribusi dan kliren hepatik kinidin secara bermakna.  Perubahan  farmakokinetik  kinidin  secara  bermakna  akibat  praperlakuan brokoli  juga  dijumpai  pada  pemberian  kinidin  per  oral  (Sari,  1999).  Dari  penelitian tersebut  disimpulkan  bahwa  brokoli  mampu  mempengaruhi  sistem  enzim biotransformasi  kinidin  yaitu  sitokrom  P-450  3A4.  Penelitian  lain  mengenai  pengaruh perasan  brokoli  terhadap  farmakokinetik  tolbutamid  pada  tikus  normal  menunjukkan
bahwa  terjadi  kenaikan  kliren  hepatik  dan  volume  distribusi  tolbutamid  secara bermakna.  Perubahan  kedua  parameter  tersebut  menurunkan  jumlah  tolbutamid  dalam sirkulasi sistemik (Nugroho, 2000).  Gejala ini mengindikasikan bahwa brokoli mampu menginduksi  sistem  enzim  biotransformasi  tolbutamid,  yaitu  enzim  sitokrom  P-450 2C8, 2C9 dan 2C19.
Menurut Rowland  dan Tozer (1995), kinidin, tolbutamid, salisilat, parasetamol, dan  fenobarbital  adalah  obat-obat  yang  memiliki  rasio  ekstraksi  hepatik  rendah,  yaitu kurang  dari  0,4.  Pada  obat-obat  ini,  nilai  kliren  hepatik  (CLh)  dan  kliren  total  (CL) dapat  dipengaruhi  oleh  induksi  enzim  metabolismenya.  Di  lain  pihak  Bradfield  dan Bjeldanes (1991) menyatakan bahwa senyawa indol yang terkandung pada Brassica sp dapat  mempengaruhi  kerja  enzim-enzim  sitokrom  P-450  tergantung  monoksigenase, glutation  S-transferase  atau  epoksi  hidrolase.  Pustaka  lain  menyebutkan  bahwa  kubis dan  brokoli  mengandung  senyawa  indol  yang  mampu  menginduksi  dealkilasi-  O- fenasetin, dealkilasi-O-7-etoksikumarin, hidroksilasi dari benzo[ a ]piren dan heksobarbital  dealkilasi-O  dari  fenasetin  dan  7-etoksikumarin  pada  tikus  serta  dapat memperlihatkan  induksi  biotransformasi  antipirin  dan  fenasetin,  glukuronidasi parasetamol  dan  aktivitas  glutation  transferase  pada  manusia  (Pantuck  dkk,1976; Beecher, 1994; Cashman dkk, 1999; Gibson dan Skett, 1986).
Parasetamol  merupakan  senyawa  turunan  para-aminofenol  yang  berfungsi sebagai  analgetik-antipiretik.  Obat  ini  adalah  penghambat  pembentukan  prostaglandin yang lemah pada jaringan perifer dan tidak memiliki efek antiinflamasi yang  bermakna. Daya  kerjanya  sebagai  analgetik  sama  kuatnya  dengan  aspirin  namun  lama  kerjanya sedikit  lebih  singkat  (Tjay  dan  Rahardja,  2002).  Parasetamol  dimetabolisme  utamanya di hati, sebagian besar diubah menjadi bentuk tidak aktif oleh konjugasi dengan sulfat dan  glukuronida,  yang  kemudian  diekskresi  melalui  ginjal.  Hanya  sebagian  kecil parasetamol yang dimetabolisme melalui sistem enzim sitokrom P450 hepatik terutama CYP 2E1 (Zimmerman dan Maddrey, 1995). Parasetamol merupakan obat dengan rasio ekstraksi  hepatik  rendah  (Rowland  dan  Tozer,  1995),  sehingga  obat  ini  mudah mengalami  induksi  enzim.  Konsumsi  brokoli  bersama  dengan  obat  dengan  rasio ekstraksi  hepatik  rendah  (misalnya  parasetamol),  diduga  dapat  mengurangi  efek farmakologi  parasetamol  sehingga  dapat  menyebabkan  tidak  tercapainya  efek  terapi yang diinginkan.
Dengan  mengacu  pada  penelitian-penelitian  sebelumnya yang  telah membuktikan  adanya  interaksi  antara  sayuran  dari  familia Brassicaceae dengan  obat- obatan  rasio  ekstraksi  hepatik  rendah,  maka  perlu  dilakukan  penelitian  untuk mengetahui apakah brokoli dapat mempengaruhi efek farmakologi parasetamol,. Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  air  perasan  brokoli  terhadap  daya analgetik parasetamol pada mencit jantan BALB/c.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Parasetamol  berkualitas  farmasetis,  asam  asetat  glasial  pro  analisa,  brokoli, akuabides, mencit  jantan  galur  BALB/c  berat  20-30  gram  umur  2-3  bulan.  Air  perasan  brokoli diperoleh dengan memeras brokoli menggunakan blender , tanpa pengenceran air.

## Alat
Timbangan mencit, jarum per oral (5 ml), jarum suntik intraperitoneal (1 ml), pipet tetes dan  pipet  Ependorf,  labu  takar  10,  50,  100  ml,  labu  Erlenmeyer,  dan beaker  glass , mortar, dan stamper.
Perlakuan hewan uji
Tanpa pra-perlakuan air perasan brokoli
Kelompok asam asetat:
Lima  ekor  mencit  disuntik  larutan  asam  asetat  (100  mg/kg;  ip),  kemudian  dihitung jumlah geliat yang muncul.
Kelompok parasetamol:
Enam ekor mencit disuntik larutan asam asetat (100 mg.kg; ip), dan 15 menit kemudian diberi larutan parasetamol (91 mg/kg; po), dan dihitung jumlah geliat yang terjadi. Dengan pra-perlakuan air perasan brokoli
Kelompok parasetamol:
Lima ekor mencit diberi air perasan brokoli (50 ml/kg; po) dengan 7-kali pemberian (3- kali sehari). Lima jam setelah pemberian brokoli yang terakhir,  mencit disuntik larutan asam  asetat  (100  mg/kg;  ip),  dan  15  menit  kemudian  diberi  larutan  parasetamol  (91 mg/kg; po). Dihitung jumlah geliat yang terjadi.

## Analisa dan uji statisitik
Daya analgetik ditentukan dengan persamaan berikut:
Uji statistik:
Jumlah geliat rata-rata yang timbul akibat pemberian asam asetat dan parasetamol, baik dengan  dan  tanpa  pemberian  air  perasan  brokoli  dibandingkan  secara  statistik menggunakan uji Student’s-t tak berpasangan dengan taraf kepercayaam 95%.

## PEMBAHASAN
Uji analgetik dalam penelitian ini menggunakan metode rangsang kimia berupa tumbulnya rasa nyeri karena pemberian asam asetat secara intraperitoneal. Manifestasi timbulnya  rasa  nyeri  yaitu  berupa  geliat.    Karakteristik  geliat  yang  digunakan  sebagai patokan  adalah  geliat  dengan  bentuk  minimum  1-2  geliat,  yaitu  kedua  pasang  kaki depan  ditarik  ke  depan  dan  kedua  kaki  belakang  ditarik  ke  belakang  sehingga  perut menekan  alas  kandang  dalam  waktu  5  menit  setelah  pemberian  asam  asetat  (Vogel, 2002).
Dosis  asam  asetat  yang  digunakan  adalah  100  mg/kg.  Pengamatan  geliat dilakukan  selama  1  jam  dan  didapatkan  geliat  rata-rata  (M  ±  SEM)  sebesar  95  ±  10, dengan kisaran geliat sebesar 70-124, seperti disajikan pada tabel.
Tabel . Persentase daya analgetik parasetamol  dengan dan tanpa pra perlakuan brokoli
pada mencit jantan BALB/c Perlakuan Jumlah geliat kumultaif (M ± SEM) % Daya Analgetik Asam asetat 95 ± 10 0 Parasetamol 43 ±11 54,74 Parasetamol + brokoli 27 ± 7 71,58
Untuk  menguji  daya  analgetik  parasetamol,  mencit  jantan  BALB/c  yang  telah diberi asam asetat (100 mg/kg; ip) dan 15 menit kemudian diberi parasetamol dosis 91 mg/kg per oral. Ternyata jumlah geliat setelah pemberian parasetamol berkurang secara bermakna  bila  dibandingkan  dengan  pemberian  asam  asetat  saja  (95  ±  10)  dan
Daya Analgetik =
∑ geliat rata-rata (asam asetat – parasetamol)
∑ geliat rata-rata asam asetat
x 100%
didapatkan rata-rata geliat 43 ± 11, atau berkisar antara 3-63 dengan % daya analgetik sebesar 54, 74% ( p < 0,05). Hal ini dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1. Jumlah geliat rata-rata pada tiap-tiap interval waktu pengukuran setelah pemberian asam asetat (100 mg/kg; ip) dan larutan parasetamol (91 mg/kg per oral) pada mencit jantan BALB/c
Untuk menguji daya analgetik parasetamol setelah pemberian brokoli, dilakukan setelah  mencit  jantan  diberi  air  perasan  brokoli  (50  mg/kg  per  oral).  Pemberian  air perasan  brokoli  dilakukan  selama  3  hari berturut-turut  dengan  waktu  pemberian  3  kali sehari  selama  2  hari  dan  1  kali  pada  hari  ketiga.  Lima  jam  setelah  pemberian  terakhir brokoli, mencit disuntik asam asetat (100 mg/kg; ip) dan 15 menit kemudian diberikan parasetamol (91 mg/kg; po). Setelah pemberian parasetamol diamati jumlah geliat yang muncul selama 1 jam dan didapatkan jumlah geliat rata-rata (M ± SEM) adalah 22 ± 7 geliat  (berkisar  12-43  geliat).  Dengan  kata  lain,  pemberian air  perasan  brokoli  mampu meningkatkan daya analgetik parasetamol sebesar 71,58% (tabel).
Jika  dibandingkan  antara  perlakuan  dengan  dan  tanpa  air  perasan  brokoli, ternyata jumlah geliat parasetamol berkurang, dari 43 ± 11,3 (tanpa brokoli) menjadi 27 ±  7  (dengan  brokoli),  seperti  nampak  pada  gambar  2.  Dari  temuan  ini  ternyata  terjadi peningkatan % daya analgetik parasetamol dari 54,74% (tanpa brokoli) menjadi 71,58% (dengan brokoli), meskipun perbedaan tersebut tidak bermakna ( p > 0,05).
0 2 4 6 8 10 12 14 16 0-5 5-10 10-15 15-20 20-25 25-30 30-35 35-40 40-45 45-50 50-55 55-60 Waktu (menit) P u rata Jum lah G eli at As asetat Paraset
Gambar 2. Persen daya analgetik parasetamol (91 mg/kg BB; per oral) dengan dan tanpa pra perlakuan air perasan brokoli (50 ml/kg BB; per oral; 7x pemberian) pada mencit jantan BALB/C
Dalam penelitian ini, daya analgetik parasetamol tidak terpengaruh oleh adanya senyawa kimia dalam brokoli. Hal ini mungkin disebabkan karena parasetamol sebagian kecil (5-10%) mengalami biotransformasi melalui isozim P450 2E1, dan sebagian besar melalui  fase  II  (konjugasi;  60  –  90  %;  Zimmerman  dan  Maddrey,  1995).  Sedangkan brokoli  lebih  berperan  mempengaruhi  enzim  sitokrom  P450  3A.  Alasan  ini  diperkuat oleh  Ritschel  (1992),  bahwa  biotransformasi  parasetamol  melalui  fase  II,  yaitu konjugasi  dengan  sulfat  dan  asam  glukuronat.  Jadi  dari  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  zat  aktif  brokoli  tidak  mampu  menginduksi  enzim  metabolisme parasetamol baik pada fase I maupun fase II pada mencit jantan BALB/c.

## PENUTUP

## Kesimpulan
Hasil  penelitian  menunjukkan  air  perasan  brokoli  dapat  meningkatkan  daya  analgetik parasetamol  pada  mencit  (dari  54,74%  menjadi  71,58%)  dengan  perbedaan  yang  tidak bermakna ( p > 0,05).

## Saran
1. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  tentang  kemungkinan  interaksi  senyawa- senyawa yang terdapat di dalam brokoli pada proses distribusi atau ikatannya dengan reseptor yang bertanggung jawab terhadap efek parasetamol.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut pada obat lain, khususnya yang memiliki rasio ekstraksi hepatik rendah, misalnya teofilin, digoksin, kloramfenikol, klordiazepoksid, sehingga  didapatkan  informasi  yang  lebih  lengkap  mengenai  adanya  pengaruh
konsumsi  sayur-sayuran  dari Brassicaceae terhadap  obat-obatan  yang  lazim digunakan dalam terapi.
3. Dosis dan lama pemberian air perasan brokoli perlu ditingkatkan untuk membuktikan adanya pengaruh pada metabolisme (khususnya fase II) dari parasetamol.

## DAFTAR PUSTAKA
Beecher,  C.W.W.  1994,  Cancer  Prevention  Properties  of  Varieties  on Brassica oleraceae : A Review. Am. J. Clin. Nutr , 59 (suppl) : 1165S-1170S.
Bradfield,  C.A  &  Bjeldanes,  L.F.  1991,  Modification  of  carcinogen  metabolism  by indolylic autolysis product of Brassica oleracea, Adv. Exp. Med. Biol . 289: 153-163. Cashman,  J.R.,  Xiong,  Y.,  Lin,  J.,  Verhagen,  H.,  van  Poppel,  G.,  van  Bladeren  ,  P.J., Larsen-Su, s., and Williams, D.S. 1999, In Vitro and In Vivo Inhibition of Human Flavin-Containing  Monooxygenase  Form  3  (FMO3)  in  The  Present  of  Dietary Indoles, Biochem. Pharmacol ., 58 : 1047-1055.
Gibson,  G.G & Skett, P.  1986, Introduction to Drug Metabolism , 1-42, Chapman and Hall, London.
Nugroho, A.E. 2000, Pengaruh Praperlakuan Brokoli ( Brassica oleraceae L.) Terhadap Farmakokinetika  Tolbutamid  pada  Tikus  Putih  Jantan, Laporan  Penelitian , Lembaga Penelitian UGM, Yogyakarta.
Pantuck,  E.J.,  Hsio,  K.C.,  Loub,  W.D.,  Wattenberg,  L.W.,  Kuntzman,  R.  and  Conney, A.H. 1976, Stimulatory Effect of Vegetales on Intestinal Drug Metabolism in The Rat, J.Pharmacol. Exp. Ther ., 198 : 278-283.
Ritschel,  W.A.  1992, Handbook  of  Basic  Pharmacokinetics ,  4 th ed.,  Drug  Intelligence Publications, Inc., Hamilton.
Rowland,  M  &  Tozer,  T.N.1995, Clinical  Pharmacokinetics  :  Concepts  and Applications ,  3 rd ed.,  Lippincott  Williams  &  Wilkins,  A  Wolters  Kluwer  Co., Philadelphia.
Sari,  I.P.  1999,  Antaraksi  Farmakokinetika  Brokoli  ( Brassica  oleraceae L. vabrotrytis L.)-Kinidin.  Kajian  Terhadap  Akibat  dan  Perantara  Antaraksi,  Fakultas  Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Tjay, H.T dan Rahardja, K. 2002, Obat-Obat Penting , Edisi Kelima, Ditjen Pengawasan Obat dan Makanan, Departemen Kesehatan Repulik Indnesia, Jakarta.
Vogel,  H.G.  2002, Drug  discovery  and  evaluation-Pharmacologigal  assays ,  Springer: 716.
Zimmerman, H.J & Maddrey, W.C, 1995, Acetaminophen (paracetamol) hepatotoxicity with  regular  intake  of  alcohol:  analysis  of  instances  of  therapeutic  misadventure.
Hepatology 22 (3): 767-773.