## OPTIMASI PROSES EKSTRAKSI MINYAK DAN RESIN NYAMPUNG DENGAN PELARUT BINER MENGGUNAKAN RESPONSE SURFACE METHOD

## OPTIMIZATION OF CALOPHYLLUM OIL AND RESIN EXTRATION PROCESS WITH BINARY SOLVENT USING RESPONSE SURFACE METHOD
Ika Amalia Kartika 1*) , Ikbal Fataya 1) , Muhamad Yunus 1) , Nancy Dewi Yuliana 2)
1) Departemen Teknologi Industri Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor Kampus IPB Dramaga P.O. Box 220, Bogor 16002, Jawa Barat, Indonesia
Email :ikaamalia@apps.ipb.ac.id
2) Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor Kampus IPB Dramaga P.O. Box 220, Bogor 16002, Jawa Barat, Indonesia
Makalah: Diterima 9  Desember 2021; Diperbaiki 7 Februari 2022; Disetujui 22 Februari 2022

## ABSTRACT
Calophyllum seeds are potential to be used as raw material for vegetable oil production due to their high oil content. In addition, Calophyllum seeds contain resin consisting of beneficial phenolic compounds for health. The objective of this research was to optimize the oil and resin extraction from Calophyllum seeds on a pilot scale using binary solvent. The analyses of temperature, extraction time and stirring speed effects on the oil and resin yields were carried out using the central composite design, and the variables were optimized using the response surface  method.  The  result  of oil  yield  optimization  showed  that  the  best  model  was  the  quadratic  model.  The optimum oil yield (59%) was obtained at temperature of 49.4 o C, extraction time of 5.3 h, and stirring speed of 385 rpm. The result of resin yield optimization showed that the best model was the mean model with average value of 15% for all extraction conditions tested. Model validation at this extraction condition resulted actual oil (60%) and resin (13%) yields conformed passably to their prediction. In addition, the oil and resin obtained from this model validation had good characteristics, and matched the predicted results.
Keywords: binary extraction, Calophyllum, oil, optimization, resin, response surface method

## ABSTRAK
Biji  nyamplung  sangat  potensial  untuk  dimanfaatkan  sebagai  bahan  baku  minyak  nabati  karena  kadar minyaknya yang tinggi. Biji nyamplung juga mengandung resin dengan kandungan senyawa-senyawa fenolik yang bermanfaat untuk kesehatan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengoptimasi ekstraksi minyak dan resin dari biji nyamplung pada skala pilot dengan menggunakan pelarut biner. Analisis pengaruh suhu, waktu ekstraksi dan kecepatan pengadukan pada rendemen minyak dan resin dilakukan menggunakan central composite design , dan variabel-variabelnya  dioptimasi  menggunakan response  surface  method .  Hasil  optimasi  rendemen  minyak diperoleh model terbaik yaitu kuadratik. Rendemen minyak optimum (59%) diperoleh pada suhu 49,4 o C, waktu ekstraksi  5,3  jam,  dan  kecepatan  pengadukan  385 rpm.  Hasil  optimasi rendemen resin  diperoleh model  terbaik yaitu mean dengan nilai rata-rata sebesar 15% untuk seluruh kondisi proses ekstraksi yang diuji. Validasi model pada  kondisi  proses  ekstraksi  optimum  menghasilkan  rendemen  minyak  sebesar  60%  dan  resin  sebesar  13% dimana hasil ini cukup sesuai dengan hasil prediksinya. Selain itu, minyak dan resin yang diperoleh dari validasi model ini memiliki karakteristik yang baik, dan cocok dengan hasil prediksinya.
Kata kunci: ekstraksi biner, minyak, nyamplung, optimasi, resin, response surface method

## PENDAHULUAN
Biji  nyamplung  memiliki  kandungan  minyak yang  tinggi  mencapai  75%  (basis  kering)  dan kandungan  resin  mencapai  29%  (basis  kering) (Amalia  Kartika et  al .,  2018).  Minyak  nyamplung dapat  digunakan  sebagai  bahan  baku  dalam pembuatan  biodiesel,  biokerosin,  biobensin,  sabun, minyak  urut,  dan  lain-lain.  Minyak  nyamplung tergolong non edible , sehingga pemanfaatan minyak nyamplung  tidak  bersaing  dengan  kepentingannya untuk pangan.
Resin  yang  berasal  dari nyamplung  memiliki tekstur sangat kental dan berwarna hijau kehitaman. Menurut Liu et al. (2015), resin nyamplung ini dapat digunakan untuk mengobati odontalgia dan pendarahan  gusi.  Resin  nyamplung  mengandung kumarin yang memiliki manfaat sebagai antioksidan, anti  kanker,  anti  bakteri,  analgesik,  dan  dapat berfungsi  untuk  meningkatkan  kekebalan  tubuh (Leksono et  al .,  2014).  Selain  kumarin,  senyawa- senyawa lainnya yang umum ditemukan dalam resin nyamplung adalah kalofiloid, flavonoid, inofilum A- E,  triterpen,  keton,  asam  kalofinat  dan  begonia,
Jurnal Teknologi Industri Pertanian 32 (1): 21-31, April 2022 DOI: https://doi.org/10.24961/j.tek.ind.pert.2022.32.1.21 ISSN: 0216-3160    EISSN: 2252-3901
Terakreditasi Peringkat 2 SK Dirjen Pendidikan Tinggi, Riset, dan Teknologi No. 158/E/KPT/2021 Tersedia online http://journal.ipb.ac.id/index.php/jurnaltin
*Penulis Korespondensi
xanton,  serta  fenol  dan  polifenol  (Dweck  dan Meadows, 2002).
Ekstraksi biji nyamplung yang telah dilakukan adalah  ekstraksi  secara  mekanik  atau  pengempaan mekanik  dan  ekstraksi  menggunakan  pelarut. Ekstraksi  biji  nyamplung  melalui  proses  ekstraksi secara mekanik menggunakan screw press menghasilkan rendemen minyak-resin sebesar 62,5% pada  kadar  air  biji  1,7%,  debit  umpan  5  kg/h, kecepatan  rotasi screw 25  rpm,  dan  suhu  75  C (Indartono et  al .,  2019).  Ekstraksi  biji  nyamplung menggunakan  pengempa  hidrolik  menghasilkan rendemen  minyak-resin  sekitar  58%,  dan  produk yang  dihasilkan  berwarna  hijau  (Widiastuti et  al ., 2019).  Ekstraksi  biji  nyamplung  menggunakan pelarut biner (campuran heksan-metanol) menghasilkan rendemen minyak 62% dan rendemen resin  15%  (Kartika et  al .,  2021).  Minyak  yang diekstraksi  menggunakan  pelarut  biner  ini  memiliki warna  kuning  jernih  karena minyak  yang  dihasilkan telah terpisah dari resin. Proses ekstraksi menggunakan  pelarut  biner  mampu  menghasilkan rendemen minyak yang lebih tinggi. Proses ekstraksi menggunakan  pelarut  biner  juga  menghasilkan minyak nyamplung yang lebih murni, karena minyak yang dihasilkan sudah terpisah dari resin.
Faktor-faktor  yang  mempengaruhi  rendemen dan  mutu  minyak  dan  resin  nyamplung  yang dihasilkan  pada  proses  ekstraksi  menggunakan pelarut  biner  adalah  waktu,  suhu,  kecepatan pengadukan,  dan  rasio  pelarut  terhadap  bahan (Amalia  Kartika et  al .,  2018;  Kartika et  al .,  2017, 2019a, 2021). Peningkatan waktu ekstraksi dan rasio pelarut  terhadap  bahan  berbanding  lurus  dengan peningkatan rendemen hingga kondisi kesetimbangan tercapai.  Peningkatan  suhu  dapat  meningkatkan solubilitas pelarut dan memperbesar pori-pori bahan, sehingga  proses  ekstraksi  berlangsung lebih  optimal (Masud dan Puspitasari, 2017). Kecepatan pengadukan  mempengaruhi  perpindahan  massa komponen-komponen.  Semakin  tinggi  kecepatan pengadukan  maka  turbulensi  cairan  meningkat akibatnya  kontak  antar  bahan  dan  pelarut  semakin intensif dan perpindahan massa komponen- komponen  pun  semakin  tinggi  (Prihandana et  al ., 2012).
Kondisi  proses  ekstraksi  biji  nyamplung dengan  pelarut  biner  yang  menghasilkan  rendemen minyak  nyamplung  tertinggi  adalah  pada  waktu sekitar 5 jam dan kecepatan pengadukan sekitar 400 rpm (Kartika et al ., 2021), dengan suhu sekitar 50 o C (Amalia  Kartika et  al .,  2018;  Kartika et  al .,  2019a). Rasio  pelarut  (campuran  heksan-metanol)  terhadap bahan terbaik  yang menghasilkan rendemen  minyak nyamplung tertinggi adalah 5:2:1 (v/v/b) (Kartika et al .,  2019a).  Pada  penelitian-penelitian  tersebut, pengaruh  waktu  ekstraksi,  suhu,  dan  kecepatan pengadukan secara simultan pada proses ekstraksi biji nyamplung  dengan  pelarut  biner  belum  dianalisis dengan komprehensif, dan variabel-variabel tersebut
belum  dioptimasi.  Optimasi  ketiga  variabel  tersebut perlu  dilakukan  untuk  memaksimalkan  rendemen minyak dan resin, serta untuk mengefisienkan kondisi proses  ekstraksi.  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengoptimasi  suhu,  waktu,  dan kecepatan pengadukan pada proses ekstraksi minyak dan resin  dari  biji nyamplung  dengan menggunakan pelarut  biner. Response  surface  method (RSM) diterapkan  dalam  mengoptimasi  dan  menganalisis pengaruh variabel-variabel tersebut.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah buah nyamplung yang diperoleh dari kawasan sekitar pantai Carita Banten, dan buah nyamplung ini sudah tersimpan dalam gudang selama  1 tahun pada suhu  ruang.  Bahan  kimia  yang  digunakan  adalah heksan  teknis  (kemurnian  98%,  Brataco  Chemical) dan  metanol  teknis  (kemurnian  98%,  Brataco Chemical),  serta  bahan  kimia  lainnya  untuk  analisa sampel dimana bahan kimia dengan analytical grade ini dipasok oleh Sigma-Aldrich, Indonesia. Alat yang digunakan untuk ekstraksi adalah reaktor 10 L yang dilengkapi  pengaduk,  pengatur  suhu,  unit  pendingin yang  terdiri  dari  pendingin  tegak  dan  sirkulator  air pendingin.  Alat-alat  lainnya  yang  digunakan  adalah blender , pompa vakum, corong pisah, rotary vacuum evaporator ,  oven,  serta  berbagai  peralatan  gelas lainnya.

## Metode
Biji nyamplung dipisahkan dari cangkangnya kemudian  dikeringkan  dalam  oven  pengering  pada suhu 50-65 o C selama 48-72 jam hingga kadar airnya <5%.  Selanjutnya  biji  kering  ditimbang  sebanyak  1 kg  dan  dikemas  menggunakan  plastik  polietilen, sampai biji tersebut digunakan.
Ekstraksi  minyak  dan  resin  dari  biji nyamplung  terdiri  dari  pengecilan  ukuran  biji, ekstraksi  minyak menggunakan  pelarut, dan pemisahan minyak dari resin. Pengecilan ukuran biji nyamplung  dilakukan  menggunakan blender .  Biji nyamplung  dicampur  dengan  metanol  1:1  (b/v)  dan dikecilkan  ukurannya  selama  10  menit  untuk mendapatkan  ukuran  partikel  biji  sekitar  20  mesh. Ekstraksi  minyak  menggunakan  pelarut  dilakukan menggunakan reaktor dengan kapasitas 10 L. Metode ekstraksi  yang  digunakan  adalah  maserasi  yang dilengkapi  dengan  sistem  pemanasan,  pengadukan dan refluks pelarut.  Campuran biji dan metanol hasil pengecilan ukuran dimasukkan ke dalam reaktor dan ditambahkan heksan dan metanol (5:1, v/v). Menurut Burke  (1984),  indeks  polaritas  heksan  dan  metanol masing-masing  adalah  sebesar  0,1  dan  5,1. Pencampuran heksan dan metanol dengan perbandingan  5:2  (v/v)  pada  proses  ekstraksi  ini menghasilkan  pelarut  biner  dengan  indeks  polaritas sekitar  1,53.    Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan
variasi  waktu (4,  5  dan  6  jam),  variasi  suhu  (40,  50 dan 60 o C), dan variasi kecepatan pengadukan (200, 400  dan  600  rpm).  Setelah  proses  ekstraksi  selesai, campuran filtrat dan ampas didinginkan hingga suhu ruang.
Filtrat  dan  ampas  dipisahkan  menggunakan vacuum  filter .  Filtrat  terdiri  dari  campuran  fraksi heksan-minyak dan metanol-resin. Kemudian dilakukan  pemisahan  antara  fraksi  heksan-minyak dan  metanol-resin  menggunakan  corong  pemisah. Evaporasi  dilakukan  terhadap  masing-masing  fraksi menggunakan rotary  vacuum  evaporator sehingga diperoleh minyak dan resin. Selanjutnya minyak dan resin  dipanaskan  dalam  oven  dengan  suhu  105 o C selama  1  jam  untuk  menguapkan  sisa  pelarut  yang masih  terdapat  dalam  minyak  dan  resin.  Rendemen minyak  dan  resin  dihitung  menggunakan  rumus: rendemen  (%) =  bobot  minyak atau resin  (g)/bobot biji kering (g)  × 100.
Minyak  nyamplung  yang  diperoleh  dalam penelitian  ini  dikarakterisasi  sifat  fisiko-kimianya dengan menganalisis viskositas mengunakan viskometer  Oswald,  densitas,  kadar  total volatile matter ,  kadar  abu,  bilangan  asam,  bilangan penyabunan,  bilangan  iod,    kadar  bahan  tak tersabunkan,  aktivitas  antioksidan,  dan  analisis kualitatif  senyawa-senyawa  fitokimia  (Harborne, 1996).  Sifat  fisiko-kimia  resin  dianalisis  melalui pengujian kadar total volatile matter , bilangan asam, kadar  total  fenol  (metode Folin-Ciocalteu yang diadaptasi  dari  Agbor et  al. (2014)),  aktivitas antioksidan  (metode  DPPH  yang  diadaptasi  dari Nariya et al. (2013)), dan analisis kualitatif senyawa- senyawa fitokimia (Harborne, 1996).
Rancangan  percobaan  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah central  composite  design dengan tiga  variabel  bebas  yaitu  suhu,  waktu  ekstraksi  dan kecepatan  pengadukan  seperti  pada  Tabel  1, sedangkan variabel tidak bebas atau responnya adalah rendemen  minyak  dan  resin.  Penetapan  nilai  tengah untuk  variabel-variabel  bebas  tersebut  didasarkan atas  rendemen  minyak  terbaik  yang  diperoleh  dari penelitian-penelitian sebelumnya. Menurut Kartika et al .  (2021),  rendemen  minyak  tertinggi  pada  proses ekstraksi  biji  nyamplung  dengan  pelarut  biner diperoleh  pada  waktu  sekitar  5  jam  dan  kecepatan pengadukan  sekitar  400  rpm,  dengan  suhu  sekitar 50 o C  (Amalia  Kartika et  al .,  2018;  Kartika et  al ., 2019a).
Data  yang  diperoleh  selanjutnya  diolah menggunakan software  Design  Expert 11.0 Trial
untuk  mengetahui  pengaruh  linier,  kuadrat  dan interaksi  dari  variabel-variabel  bebas  terhadap respon, serta untuk menganalisis ragamnya (ANOVA). Percobaan ini terdiri dari 17 run dengan 3 ulangan pada titik pusat ( center point ). Pada response surface method (RSM), kondisi proses  optimum  ditentukan  berdasarkan  model terbaik dan analisis ragam (ANOVA). Model terbaik ditentukan berdasarkan nilai SMSS ( sequential model sum  of  squares )  yang  signifikan  atau  terendah  (p- value < 0,05), nilai R 2 dan adjusted -R 2 tertinggi, nilai lack of fit yang tidak signifikan (p- value > 0,05), serta PRESS  ( prediction  residual  error  of  sum  square ) terendah  (Montgomery,  2001).  Setelah  diperoleh kondisi  proses  optimum  berdasarkan  model  terbaik, selanjutkan  dilakukan  validasi  terhadap  kondisi proses optimum tersebut. Validasi ini bertujuan untuk mengukur  tingkat  ketepatan  hasil  validasi  terhadap hasil  prediksinya  dimana  tingkat  ketepatan  hasil validasi yang baik adalah lebih dari 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Biji  nyamplung  melalui  tahap  pengeringan terlebih  dahulu  sebelum  dilakukan  proses  ekstraksi minyak dan resin. Pada penelitian ini, biji nyamplung dikeringkan selama 48-72 jam dengan suhu 50-65 o C. Kadar  air  biji  nyamplung  kering  yang  dihasilkan adalah 2,6%. Berdasarkan hasil penelitian sebelumnya (Kartika et al ., 2021), kandungan minyak dalam biji nyamplung pada kadar air tersebut adalah 67,7%  (basis  kering).    Pengeringan  bertujuan  untuk menghambat  kerusakan  biji  nyamplung  akibat aktivitas  mikroorganisme  dan  memaksimalkan rendemen  minyak  dan  resin.  Menurut  Fadhlullah et al .  (2015),  rendemen  minyak  nyamplung  yang dihasilkan menggunakan biji dengan kadar air rendah mampu  meningkatkan  rendemen  dua  kali  lebih banyak  dibandingkan  menggunakan  biji  dengan kadar  air  tinggi  (  20%).  Adanya  air  yang  bersifat polar dapat menghambat kontak antara pelarut heksan yang  bersifat  non  polar  dengan  minyak.  Selain  itu, kandungan  air  dalam  bahan  yang  minim  dapat memfasilitasi  proses  ekstraksi  karena  pelarut  dapat dengan  mudah  melarutkan  zat  terlarut  dari  bahan dengan  kandungan  air  yang  minim.  Sebaliknya kandungan air dalam bahan yang tinggi mengurangi kemampuan pelarut untuk melarutkan zat terlarut dari bahan  karena  perbedaan  polaritas  antara  air  dan  zat terlarut (Amalia Kartika et al ., 2018).
Tabel 1. Hubungan perlakuan dan kode perlakuan
Perlakuan Satuan Kode Perlakuan -1,68 -1 0 1 1,68 Suhu o C 33,2 40 50 60 66,8 Waktu jam 3,32 4 5 6 6,68 Kecepatan rpm 64 200 400 600 736
Dalam  proses  ekstraksi  minyak  dan  resin nyamplung  menggunakan  pelarut  biner  (Amalia Kartika et  al .,  2018),  sistem  pelarut  dapat meningkatkan fluiditas minyak dan resin, memecahkan  membran  sel  dan  melarutkan  minyak dan  resin  sehingga  minyak  dan  resin  dapat dikeluarkan  dengan  mudah  dari  dalam  sel  tersebut. Rendemen minyak nyamplung yang dihasilkan pada penelitian  ini  sekitar  49-60%  (Tabel  2),  dan  hasil analisis datanya (Tabel 3) menunjukkan bahwa model kuadratik  memiliki  SMSS  dengan  p- value yang signifikan  (<  0,05).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa model kuadratik signifikan terhadap respon rendemen minyak.  Nilai  p- value lack  of  fit model  ini  tidak signifikan (> 0,05), dan ini memastikan bahwa model
kuadratik adalah model yang paling sesuai. Nilai R 2 model  kuadratik  adalah  0,8512,  artinya  85,12% variabel-variabel  bebas  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  mempengaruhi  respon  rendemen minyak sedangkan 14,88% adalah pengaruh variabel lain  yang  tidak  diterapkan  dalam    penelitian    ini seperti    jumlah    pelarut    dan    rasio    pelarut    biner terhadap bahan.
Hasil  penelitian  sebelumnya  (Amalia  Kartika et  al .,  2018;  Kartika et  al .,  2019a)  menunjukkan bahwa rasio pelarut biner (campuran heksan-metanol) terhadap  bahan  berpengaruh  secara  signifikan terhadap  rendemen  minyak  nyamplung  dimana peningkatan  variabel  bebas  ini  akan  meningkatkan rendemen minyak nyamplung.
Tabel 2. Rendemen dan sifat fisiko-kimia minyak yang dihasilkan dari proses ekstraksi biji nyamplung pada berbagai perlakuan
Suhu ( o C) Waktu (jam) Kecepatan pengadukan (rpm) Rendemen minyak (%) Kadar total volatile matter (%) Kada r abu (%) Densitas pada 25 o C (g.cm -3 )
Viskositas pada 40 o C (cSt) Bilangan asam (mg KOH.g -1 ) Bilang an penya bunan
(mg KOH. g -1 ) Bilangan iod (mg iod.g -1 ) 40 4 200 53,83 2,10 0,02 0,87 40,00 27,33 212,9 74,70 40 4 600 55,58 3,28 0,01 0,87 32,84 42,55 194,7 67,96 40 6 200 54,37 4,63 0,01 0,91 21,16 33,35 233,0 73,51 40 6 600 56,26 6,44 0,02 0,90 19,23 24,26 213,5 76,25 50 5 400 58,69 2,59 0,00 0,91 32,90 21,09 194,8 75,39 50 5 400 57,01 3,84 0,03 0,90 33,46 18,22 229,1 76,15 50 5 400 60,37 6,92 0,01 0,91 16,16 39,84 263,4 76,90 60 4 200 55,42 3,03 0,05 0,91 27,61 20,11 258,7 78,62 60 4 600 49,14 1,24 0,01 0,88 36,40 25,05 215,6 79,98 60 6 200 57,34 4,03 0,01 0,90 19,73 20,15 235,4 78,51 60 6 600 53,87 5,52 0,04 0,90 17,39 40,00 221,0 77,58 33,2 5 400 54,67 1,21 0,01 0,88 36,24 29,15 198,4 79,90 66,8 5 400 53,42 3,62 0,01 0,88 36,56 27,27 232,2 80,89 50 3,32 400 50,79 0,47 0,02 0,87 53,12 29,46 225,2 75,97 50 6,68 400 54,32 0,44 0,01 0,88 41,13 29,89 250,2 80,90 50 5 64 52,64 0,49 0,02 0,88 41,83 29,95 225,5 76,68 50 5 736 52,41 0,80 0,01 0,88 38,60 37,43 225,9 69,08
Tabel 3. Nilai parameter-parameter penentuan model terbaik untuk respon rendemen  minyak
Model SMSS (p- value ) R 2 Adjusted R 2 PRESS Lack of fit (p- value ) Keterangan Linier 0,4949 0,1627 -0,0305 154,47 0,2671 2FI 0,3617 0,3833 0,0132 115,46 0,2666 Kuadratik 0,0145 0,8512 0,6598 109,64 0,6033 Cocok Kubik 0,9643 0,8722 0,3185 2234,27 0,2000
Nilai adjusted -R 2 model  kuadratik  memiliki nilai yang paling mendekati nilai R 2 -nya yaitu sebesar 0,6598,  dan  hal  ini  semakin  menegaskan  bahwa model  kuadratik  adalah  model  yang  paling  sesuai. Nilai PRESS model kuadratik adalah yang terendah, artinya  model  kuadratik  memiliki  kemampuan memprediksi respon yang paling baik dengan tingkat error terendah.  Jadi,  model  kuadratik  adalah  model terbaik  untuk  respon  rendemen  minyak  (Y)  dan variabel-variabel bebas suhu (A), waktu ekstraksi (B), kecepatan  pengadukan  (C),  dengan  persamaan sebagai berikut:
Y = –21,93 + 1,19A + 14,62B + 6,6×10 -2 C + 6,8×10 -
2 AB – 8,4×10 -4 AC + 1,8×10 -3 BC – 1,2× 10 -2 A 2
– 1,77B 2 – 4,46×10 -5 C 2
Rendemen  minyak  nyamplung  optimum berdasarkan model kuadratik tersebut adalah 58,7%, yang diperoleh pada suhu 49,4 o C, waktu ekstraksi 5,3 jam,  dan  kecepatan  pengadukan  385  rpm.  Hasil analisis  ragam  (ANOVA)  menunjukkan  variabel- variabel  yang  berpengaruh  signifikan  adalah pengaruh kuadratik suhu (A 2 ), kuadratik waktu (B 2 ), kuadratik  kecepatan  pengadukan  (C 2 ),  dan  interaksi suhu  dan  kecepatan  pengadukan  (AC).  Namun demikian  pengaruh  signifikan  dari  variabel-variabel tersebut  bersifat negatif  terhadap rendemen minyak. Artinya  rendemen  minyak  akan  semakin  rendah apabila  suhu,  waktu,  dan  kecepatan  pengadukan dikuadratkan,  dan  interaksi  suhu  dan  kecepatan pengadukan  ditingkatkan  (Gambar  1).  Phenomena seperti ini juga teramati oleh Kartika et al . (2021). Suhu  dan  kecepatan  pengadukan  yang  tinggi dapat mempengaruhi fasa pelarut (Dewi et al ., 2014). Peningkatan  suhu  dan  kecepatan  pengadukan  selain dapat mempercepat  proses  evaporasi  pelarut, hal  ini juga  dapat  menyebabkan  bentuk  fasa  pelarut  lebih banyak  berbentuk  gas  pada  saat  proses  ekstraksi berlangsung,  akibatnya  kontak  antara  pelarut  dan bahan  tidak  maksimal  dan  menyebabkan  rendemen yang dihasilkan lebih rendah.
Gambar  1.  Respon  permukaan  3D  dan  kontur pengaruh suhu dan kecepatan pengadukan terhadap rendemen minyak nyamplung
Pengaruh  linier  suhu  (A),  waktu  (B),  dan kecepatan  pengadukan  (C)  adalah  positif  terhadap rendemen  minyak.  Semakin  tinggi  waktu  dan kecepatan  pengadukan,  rendemen  minyak  akan meningkat  hingga  tercapai  kondisi  kesetimbangan namun pengaruh kedua variabel ini tidak signifikan, dan  phenomena ini  juga teramati  oleh  Kartika et al . (2021).  Menurut  Geankoplis  (1993)  perpindahan massa akan terjadi jika konsentrasi antara zat terlarut dalam  bahan  dan  pelarut  berbeda,  dan  perpindahan tersebut akan berakhir ketika konsentrasi zat terlarut pada  keduanya  telah  seimbang  walaupun  waktu ekstraksi  diperpanjang  dan  kecepatan  pengadukan ditingkatkan.
Peningkatan kelarutan dan kecepatan transfer massa  minyak  ke  dalam  pelarut,  serta  penurunan viskositas  minyak  dan  tegangan  permukaan  pelarut dapat  terjadi  apabila  suhu  yang  lebih  tinggi diterapkan  dalam  proses  ekstraksi  sehingga  minyak lebih  mudah  terekstraksi  (Amalia  Kartika et  al ., 2018).  Peningkatan  suhu  juga  dapat  meningkatkan pelarutan zat terlarut oleh pelarut di dalam sel dan laju difusi  pelarut  ke  dalam  pori-pori  bahan  padat  atau dinding sel akibat mengembangnya pori-pori padatan (Evon et  al .,  2007).  Lebih  jauh,  peningkatan  suhu dapat  mempercepat  proses  ekstraksi  akibat  adanya percepatan  laju  difusi  (Margaretta et  al .,  2011),  dan meningkatkan  efisiensinya  akibat  energi  kinetiknya meningkat  sehingga  zat  terlarut  yang  terkandung  di dalam sel meningkat solubilitasnya dalam pelarut dan pemisahan  zat  terlarut  yang  terikat  oleh  daya  tarik antar  molekul  menjadi  lebih  mudah  (Ashgari et  al ., 2011).  Namun  demikian  pengaruh  linier  dan  positif suhu  dalam  penelitian  ini  tidak  signifikan  terhadap peningkatan  rendemen  minyak  nyamplung,  seperti yang teramati oleh Amalia Kartika et al . (2018).
Rendemen resin nyamplung yang dihasilkan pada penelitian  ini  sekitar  10-26%  (Tabel  4),  dan  hasil analisis datanya (Tabel 5) menunjukkan bahwa model terbaik  untuk  respon  rendemen  resin  adalah  model mean .    Hal  ini  didasarkan atas nilai  p- value SMSS- nya  yang  paling  rendah  (<  0,0001)  dibandingkan dengan  model-model  lainnya.  Nilai  respon  yang diperoleh adalah 15,0. Hal ini berarti rendemen resin nyamplung  yang  dihasilkan  untuk  setiap  kondisi proses ekstraksi yang diuji adalah sama, yaitu 15,0% (Gambar 2). Variabel-variabel bebas suhu (A), waktu ekstraksi  (B)  dan  kecepatan  pengadukan  (C)  tidak berpengaruh  terhadap  rendemen  resin  nyamplung. Phenomena  ini  bertolak  belakang  dengan  yang teramati  oleh  peneliti-peneliti  sebelumnya  (Amalia Kartika et  al .,  2018;  Kartika et  al .,  2021)  dimana suhu, waktu dan kecepatan pengadukan berpengaruh secara signifikan terhadap rendemen resin nyamplung. Hal ini mungkin dapat disebabkan karena pada seluruh kondisi proses ekstraksi yang diuji pada penelitian  ini  rendemen  resin  sudah  mencapai  nilai optimalnya  sehingga  kondisi  proses  ekstraksi  pada suhu  dan  kecepatan  pengadukan  yang  rendah,  serta
waktu ekstraksi yang pendek sudah dapat mengekstraksi resin secara optimal. Hal ini tentunya akan menguntungkan apabila dilihat dari aspek biaya produksi untuk proses ekstraksi tersebut.
Parameter  mutu  minyak  nyamplung  yang dianalisis  datanya  pada  penelitian  ini  adalah  kadar total volatile  matter , kadar  abu, densitas,  viskositas, bilangan  asam,  bilangan  penyabunan  dan  bilangan iod. Sedangkan untuk resin adalah kadar total volatile matter , bilangan asam, kadar total fenol, dan aktivitas antioksidan.
Kadar total volatile matter minyak nyamplung yang diperoleh pada penelitian ini adalah sekitar 0,4- 7%,  dan  hasil  ini  tidak  jauh  berbeda  dengan  yang diperoleh  dari  penelitian  sebelumnya,  yaitu  1,4-6% (Yunus,  2019).  Kadar  total volatile  matter minyak nyamplung  ditentukan  oleh  proses  penguapan  atau evaporasi pelarut. Semakin baik proses evaporasinya,
maka kadar total volatile matter atau sisa pelarut akan semakin rendah. Pada penelitian ini, proses evaporasi pelarut  berjalan  kurang  efisien,  sehingga  perlu perlakuan lain untuk menurunkan kadar total volatile matter minyak  nyamplung,  contohnya  seperti adsorbsi menggunakan bentonit teraktivasi (Anwar et al ., 2016).
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  suhu, waktu dan kecepatan pengadukan tidak berpengaruh terhadap  kadar  total volatile  matter minyak nyamplung,  artinya  nilainya  konstan  untuk  seluruh kondisi  proses  ekstraksi  yang  diuji  pada  besaran 2,98%. Kondisi proses ekstraksi biji nyamplung yang tidak  mempengaruhi  kadar  total volatile  matter minyak nyamplung yang dihasilkannya juga teramati oleh Yunus (2019).
Tabel 4. Rendemen dan sifat fisiko-kimia resin nyamplung yang dihasilkan dari proses ekstraksi biji nyamplung pada berbagai perlakuan
Suhu ( o C) Waktu (jam) Kecepatan pengadukan (rpm) Rendemen resin (%) Kadar total volatile matter (%) Kadar total fenol (% GAE) Aktivitas antioksidan (mg.g -1 ) Bilangan asam (mg KOH.g -1 ) 40 4 200 12,93 3,22 5,17 2,67 115,03 40 4 600 20,83 2,46 4,57 2,59 108,06 40 6 200 10,17 1,40 7,27 2,54 135,34 40 6 600 10,00 4,39 8,61 2,37 131,16 50 5 400 12,32 2,49 8,02 2,19 95,51 50 5 400 12,31 2,39 6,62 2,63 94,65 50 5 400 12,34 1,88 9,48 2,41 115,27 60 4 200 13,15 2,88 9,03 3,27 104,49 60 4 600 20,87 2,10 4,65 3,16 108,79 60 6 200 11,01 3,58 6,33 3,09 109,92 60 6 600 12,74 2,39 7,80 2,94 137,65 33,2 5 400 15,95 3,93 5,35 3,06 73,00 66,8 5 400 16,83 4,24 4,99 3,03 85,38 50 3,32 400 13,34 3,86 2,94 3,20 109,67 50 6,68 400 26,17 3,26 4,65 3,13 97,83 50 5 64 13,55 3,81 3,08 3,16 118,49 50 5 736 19,72 4,27 5,35 3,14 107,96
Tabel 5. Nilai parameter-parameter penentuan model terbaik untuk respon rendemen resin
Model SMSS (p- value ) R 2 Adjusted R 2 PRESS Lack of fit (p- value ) Keterangan Mean < 0,0001 Cocok Linier 0,4455 0,1797 -0,0096 482,99 <0,0001 2FI 0,7762 0,2617 -0,1813 893,29 <0,0001 Kuadratik 0,7589 0,3692 -0,4417 1546,68 <0,0001 Kubik 0,2574 0,8460 0,1787 10984,73 <0,0001
Gambar  2.  Respon  permukaan  3D  dan  kontur pengaruh  suhu  dan  waktu  terhadap rendemen resin nyamplung
Kadar abu minyak nyamplung yang diperoleh pada penelitian ini adalah sekitar 0-0,05%, dan hasil ini  tidak  jauh  berbeda  dengan  yang  diperoleh  dari penelitian sebelumnya (< 0,05%) (Amalia Kartika et al ., 2018; Kartika et al ., 2021). Dibandingkan dengan minyak  nyamplung  yang  diperoleh  dari  proses ekstraksi secara mekanik (Kartika et al . 2010), kadar abu  minyak  nyamplung  yang  diperoleh  dari  proses ekstraksi  dengan  pelarut  biner  nilainya  jauh  lebih rendah  (<  0,05% versus >  0,2%).  Rendahnya  kadar abu ini menunjukkan rendahnya kadar pengotor pada minyak  nyamplung  tersebut.  Hasil  analisis  ragam menunjukkan  bahwa  hanya  interaksi  antara  waktu dan  kecepatan  pengadukan  saja  yang  berpengaruh signifikan  terhadap  kadar  abu  minyak  nyamplung, artinya  hanya  penurunan  interaksi  waktu  dan kecepatan  pengadukan  saja  yang  dapat  menurunkan kadar abu minyak nyamplung.
Densitas  minyak  nyamplung  yang  diperoleh pada  penelitian  ini  berkisar  antara  0,87-0,91  g.cm -3 pada  suhu  25 o C.  Hasil  ini  sesuai  dengan  yang diperoleh  oleh  peneliti-peneliti  sebelumnya  (Kartika et  al .,  2017,  2021;  Amalia  Kartika et  al .,  2018) dimana densitas minyak nyamplung pada suhu 25 o C berkisar antara 0,86-0,93 g.cm -3 . Densitas dipengaruhi  oleh  komponen  asam  lemak  penyusun minyak  dan  zat-zat  pengotor  seperti  sisa  pelarut, resin,  serta  zat  pengotor  lainnya.  Semakin  tinggi densitas minyak maka semakin rendah mutu minyak dikarenakan semakin banyaknya kandungan pengotor (Kartika et  al .,  2017).  Hasil  analisis  ragam menunjukkan  bahwa  suhu,  waktu  dan  kecepatan pengadukan  tidak  berpengaruh  secara  signifikan terhadap  densitas  minyak  nyamplung.  Artinya densitas minyak nyamplung stabil dengan peningkatan suhu, waktu dan kecepatan pengadukan. Hal ini juga teramati oleh Kartika et al. (2021) dimana kondisi proses ekstraksi tidak mempengaruhi densitas minyak nyamplung.
Viskositas minyak nyamplung yang diperoleh pada penelitian ini adalah sekitar 16-54 cSt pada suhu 40 o C. Viskositas minyak nyamplung yang dihasilkan pada penelitian ini lebih tinggi dibandingkan dengan yang  diperoleh  dari  penelitian  sebelumnya  (Amalia Kartika et al ., 2018; Kartika et al ., 2021) pada suhu pengujian  yang  sama  (20-35  cSt).  Faktor  yang mempengaruhi  viskositas  adalah  suhu,  gaya  tarik antar  molekul,  dan  ukuran  serta  jumlah  molekul terlarut (Lubis, 2018). Penyimpanan buah nyamplung selama  1  tahun  di  dalam  gudang  kemungkinan menyebabkan trigliserida yang terkandung dalam biji nyamplung  teroksidasi,  sehingga  asam-asam  lemak tidah jenuh berubah menjadi asam-asam lemak jenuh. Hal  ini  yang  menyebabkan  viskositas  minyak  yang dihasilkannya pun menjadi lebih tinggi, seperti yang dijelaskan  oleh  Kartika et  al. (2021)  dimana trigliserida  dengan  bilangan  iod  lebih  rendah umumnya mempunyai viskositas lebih tinggi. Hal ini dapat  dibuktikan  dari  bilangan  iod  minyak nyamplung yang diperoleh dalam penelitian ini (68- 81  mg  iod.g -1 )  yang  lebih  rendah  daripada  yang diperoleh  dari  penelitian  sebelumnya,  yaitu  86-138 mg iod.g -1 (Amalia Kartika et al ., 2018; Kartika et al ., 2021).
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa suhu,  waktu  dan  kecepatan  pengadukan  tidak berpengaruh secara signifikan terhadap viskositas dan bilangan  iod  minyak  nyamplung.  Artinya  viskositas dan  bilangan  iod  minyak  nyamplung  stabil  dengan peningkatan suhu, waktu dan kecepatan pengadukan. Hal  ini  juga  teramati  oleh  peneliti  sebelumnya (Kartika et al ., 2021) dimana kondisi proses ekstraksi tidak  mempengaruhi  viskositas  dan  bilangan  iod minyak nyamplung.
Bilangan  penyabunan  minyak  nyamplung yang diperoleh pada penelitian ini adalah sekitar 194- 264  mg  KOH.g -1 ,  dan  hasil  ini  tidak  jauh  berbeda dengan  yang  diperoleh  dari  penelitian  sebelumnya, yaitu  208-263  mg  KOH.g -1 (Kartika et  al .,  2021). Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  suhu, waktu dan kecepatan pengadukan tidak berpengaruh secara  signifikan  terhadap  bilangan  penyabunan minyak  nyamplung.  Artinya  bilangan  penyabunan minyak nyamplung  stabil  dengan  peningkatan  suhu, waktu  dan  kecepatan  pengadukan.  Hal  ini  juga teramati  oleh  peneliti  sebelumnya  (Kartika et  al ., 2021)  dimana  kondisi  proses  ekstraksi  tidak mempengaruhi bilangan penyabunan minyak nyamplung.
Bilangan  asam  minyak  nyamplung  yang diperoleh pada penelitian ini adalah sekitar 18-43 mg KOH.g -1 .  Bilangan  asam  minyak  nyamplung  yang dihasilkan  pada  penelitian  ini  lebih  rendah dibandingkan dengan yang diperoleh oleh Kartika et al. (2021), yaitu sekitar 45-55 mg KOH.g -1 . Namun, nilainya  lebih  tinggi  dibandingkan  hasil  penelitian Kartika et al. (2017) dan Amalia Kartika et al. (2018), yaitu  6-20  mg  KOH.g -1 .  Lama  penyimpanan  buah
nyamplung  dapat  menyebabkan  jumlah  asam  lemak bebas  meningkat  akibat  hidrolisis  minyak  dan aktifitas  enzim.  Buah  nyamplung  yang  digunakan pada  penelitian  ini  telah  tersimpan  dalam  gudang selama  1  tahun  sehingga  kandungan  asam lemak bebasnya meningkat selama penyimpanan.
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa suhu,  waktu  dan  kecepatan  pengadukan  tidak berpengaruh  secara  signifikan  terhadap  bilangan asam  minyak  nyamplung.  Artinya  bilangan  asam minyak nyamplung  stabil  dengan  peningkatan  suhu, waktu  dan  kecepatan  pengadukan.  Hal  ini  juga teramati  oleh  peneliti  sebelumnya  (Kartika et  al ., 2021)  dimana  kondisi  proses  ekstraksi  tidak mempengaruhi bilangan asam minyak nyamplung.
Bilangan  asam  resin  nyamplung  yang diperoleh  pada  penelitian  ini  adalah  sekitar  73-138 mg  KOH.g -1 ,  dan  nilainya  ini  lebih  rendah dibandingkan  dengan  yang  diperoleh  dari  penelitian sebelumnya  (Kartika et  al ., 2017,  2021;  Amalia Kartika et  al ., 2018),  yaitu  sekitar  105-195  mg KOH.g -1 . Bilangan asam resin nyamplung dipengaruhi oleh kandungan asam-asam organik pada resin. Berdasarkan hasil-hasil penelitian sebelumnya, keasaman  resin  yang  sangat  tinggi  karena  resin nyamplung  banyak  mengandung  asam  kalofilat ( calophyllic acid ), asam begonia dan kalofinat, fenol dan  polifenol,  senyawa-senyawa  turunan  asam sinamat  (Liu et  al .,  2015),  serta  asam  benzoat (Prabakaran  dan  Britto,  2012).  Sifat  asam  dan senyawa-senyawa tersebut yang polar dan larut dalam metanol  menyebabkannya  mudah  diekstraksi  oleh metanol. Asam kalofilat ( calophyllic acid ) merupakan  asam  organik  yang  memiliki  aktivitas antibiotik (Dweck dan Meadow, 2002). Hasil analisis ragam  menunjukkan  bahwa  suhu,  waktu  dan kecepatan  pengadukan  tidak  berpengaruh  secara signifikan terhadap bilangan asam resin nyamplung. Artinya bilangan asam resin nyamplung stabil dengan peningkatan suhu, waktu dan kecepatan pengadukan.
Kadar  total volatile  matter resin  nyamplung yang diperoleh pada penelitian ini adalah sekitar 1,4- 4,4%.  Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa waktu,  suhu,  dan  kecepatan  pengadukan  tidak berpengaruh  signifikan  terhadap  kadar  total volatile matter resin  nyamplung.  Seperti  yang  sudah dijelaskan  sebelumnya,  tinggi rendahnya  kadar  total volatile matter dalam bahan sangat dipengaruhi oleh efektivitas  proses  penguapan  pelarutnya.  Dalam penelitian ini, proses penguapan pelarut menggunakan vacuum  evaporator belum  maksimal sehingga kadar total volatile matter resin relatif masih tinggi.
Kadar  total  fenol  resin  nyamplung  yang diperoleh  pada  penelitian  adalah  sekitar  2,9-9,5%, dan  hasil  ini  tidak  jauh  berbeda  dengan  yang diperoleh dari penelitian sebelumnya, yaitu 3,7-5,5%
(Amalia  Kartika et  al ., 2018;  Kartika et  al ., 2021). Kadar  total  fenol  resin  dipengaruhi  oleh  kandungan senyawa-senyawa  fenolik,  seperti  kumarin  yang memiliki khasiat sebagai antioksidan, anti inflamasi, anti kanker,  anti mikroba,  dan  anti  koagulan  (Liu et al .,  2015).  Namun  demikian,  kadar  total  fenol  resin yang  relatif  tinggi  ini  tidak  didukung  oleh  aktivitas antioksidannya  yang  relatif  rendah  (2,19-3,27  mg ekuivalen asam askorbat.g -1 ), dan nilainya jauh lebih rendah dari yang diperoleh oleh Kartika et al. (2021), yaitu  9-14  mg  ekuivalen  asam  askorbat.g -1 .  Hal  ini kemungkinan  disebabkan  oleh  senyawa-senyawa fenolik  tersebut  telah  mengalami  kerusakan  akibat oksidasi  sehingga  aktivitas  antioksidannya  menjadi menurun.
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa suhu,  waktu  dan  kecepatan  pengadukan  tidak berpengaruh  secara  signifikan  terhadap  kadar  total fenol resin nyamplung dan aktivitas antioksidannya. Artinya  kadar  total  fenol  resin  nyamplung  dan aktivitas  antioksidannya  stabil  dengan  peningkatan suhu, waktu dan kecepatan pengadukan. Hal ini juga teramati  oleh  peneliti  sebelumnya  (Kartika et  al ., 2021)  dimana  kondisi  proses  ekstraksi  tidak mempengaruhi  kadar  total  fenol  nyamplung  dan aktivitas antioksidannya.
Menurut  Harborne  (1996),  fenol  adalah senyawa  kimia  alami  yang  mempunyai  cincin aromatik  dengan  satu  atau  dua  gugus  hidroksil. Flavanoid,  tanin,  terpenoid  dan  alkaloid  adalah contoh  senyawa-senyawa  fenol.  Fenol  mudah terdegradasi  oleh  panas  sehingga  penggunaan  suhu yang  tinggi  dapat  menurunkan  kadar  total  fenol (Spigno et al ., 2007), namun pada penelitian ini kadar total  fenol  resin  terjaga  stabil  dengan  peningkatan suhu. Demikian juga dengan aktivitas antioksidannya.  Berdasarkan  hasil-hasil  penelitian sebelumnya  (Madani  dan  Mokrani,  2016;  Zlotek et al .,  2016),  senyawa-senyawa  fenolik  lebih  banyak terekstraksi oleh pelarut dengan polaritas lebih rendah seperti aseton dan metanol dibandingkan air.  Selain itu,  penggunaan  pelarut  biner  (campuran  polar  dan non  polar)  pada  ekstraksi  resin  dari  biji  nyamplung memungkinkan  senyawa-senyawa  fenolik  lebih banyak  terekstraksi  dibandingkan  menggunakan pelarut polar saja karena polaritas pelarut biner lebih rendah daripada pelarut polar (Kartika et al ., 2019b). Rendemen  dan  mutu  minyak  dan  resin nyamplung  yang diperoleh  dari hasil  validasi  model pada  kondisi  proses  ekstraksi  yang  optimum  cukup baik, dan sebagian besar nilainya relatif sama dengan yang  diprediksi  oleh  model  (Tabel  6).  Hal  ini menunjukkan bahwa model optimasi suhu, waktu dan kecepatan pengadukan untuk memaksimalkan proses ekstraksi minyak dan resin nyamplung menggunakan pelarut  biner,  serta  pemisahan  kedua  fraksi  ini berhasil  menemukan  kecocokan  dengan  hasil validasinya.
Tabel 6. Rendemen dan karakteristik minyak dan resin nyamplung yang dihasilkan dari validasi kondisi proses ekstraksi optimum (49,4 o C, 5,3 jam dan 385 rpm) Parameter Nilai Validasi Nilai Prediksi Model MINYAK: Rendemen (%) 59,7 58,7 Kadar total volatile matter (%) 2,88 2,98 Kadar abu (%) 0,02 0,02 Densitas (g.cm -3 ) pada suhu 25 o C 0,85 0,91 Viskositas (cSt) pada suhu 40 o C 27,90 30,58 Bilangan asam (mg KOH.g -1 ) 21,95 29,07 Bilangan penyabunan (mg KOH.g -1 ) 226,9 226,6 Bilangan iod (mg iod.g -1 ) 76,66 76,51 Kadar bahan tak tersabunkan (%) 1,67 na Aktivitas antioksidan (mg ekuivalen asam askorbat.g -1 ) 1,08 na Fitokimia - Flavonoid - Tanin - Saponin Negatif Negatif Negatif na na na RESIN: Rendemen (%) 13,1 15,0 Kadar total volatile matter (%) 6,39 3,09 Bilangan asam (mg KOH.g -1 ) 115,84 108,71 Kadar total fenol (% GAE) 5,94 6,11 Aktivitas antioksidan (mg ekuivalen asam askorbat.g -1 ) 2,57 2,44 Fitokimia - Flavonoid - Alkaloid - Tanin - Saponin - Quinon - Steroid - Triterpenoid Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif Negatif na na na na na na na na: not available
Selain  viskositas dan  bilangan asamnya  yang lebih  rendah,  minyak  yang  dihasilkan  dari  validasi model  ini  mempunyai  kadar  bahan  tak  tersabunkan lebih  besar  daripada  yang  diperoleh  dari  ekstraksi secara mekanik (1,67% versus 0,24%) (Kartika et al ., 2010).  Bahan-bahan  tak  tersabunkan  dapat  berupa senyawa-senyawa  tokoferol,  sterol,  pigmen,  dan vitamin. Bahan-bahan tak tersabunkan tersebut dapat berfungsi  sebagai  antioksidan,  dan  hal  ini  dapat dilihat dari  aktivitas antioksidan minyak nyamplung yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini  (Tabel  6). Meskipun aktivitas antioksidan minyak lebih rendah daripada resin (1,08 versus 2,57 mg ekuivalen asam askorbat.g -1 ),  tetapi  hal  ini  menguntungkan  untuk aplikasi  minyak  sebagai  bahan  bakar  nabati  atau kosmetika.  Kandungan  senyawa-senyawa  fitokimia, seperti  flavonoid,  alkaloid,  tanin,  saponin,  quinon, steroid dan triterpenoid, terdeteksi negatif baik dalam minyak maupun resin nyamplung. Hal ini
menegaskan  bahwa  minyak  dan  resin  nyamplung yang terkandung dalam biji nyamplung kemungkinan sudah  teroksidasi  selama  penyimpanan  sehingga senyawa-senyawa tersebut tidak terdeteksi. Pengujian minyak  dan  resin  nyamplung  menggunakan gas chromatography (GC) atau thin layer chromatography (TLC)  perlu  dilakukan  pada penelitian selanjutnya untuk memastikan kandungan senyawa-senyawa fitokimia tersebut.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Optimasi kondisi proses ekstraksi minyak dan resin  dari  biji  nyamplung  ( Calophyllum  inophyllum L . )  menggunakan  campuran  pelarut  heksan  dan metanol  menghasilkan  rendemen  minyak  59%  dan resin 15% pada suhu 49,4 o C, waktu ekstraksi 5,3 jam, dan  kecepatan  pengadukan  385  rpm.  Suhu,  waktu,
dan  kecepatan  pengadukan  berpengaruh  signifikan terhadap rendemen minyak  tetapi tidak  berpengaruh signifikan terhadap rendemen resin. Suhu, waktu, dan kecepatan  pengadukan  tidak  berpengaruh  signifikan terhadap mutu minyak dan resin. Validasi model pada kondisi  proses  ekstraksi  optimum  menghasilkan rendemen minyak sebesar 60% dan resin sebesar 13% dimana  hasil  ini  cukup  sesuai  dengan  hasil prediksinya.  Minyak  memiliki  karakteristik  yang cukup baik, yaitu densitas 0,85 g.cm -3 , viskositas 27,9 cSt, bilangan asam 21,95 mg KOH.g -1 , bilangan iod 76,8  mg  iod.g -1 ,  bilangan  penyabunan  273,8  mg KOH.g -1 ,  aktivitas  antioksidan  1,08  mg  ekuivalen asam askorbat.g -1 , 2,88% kadar total volatile matter , 0,02%  kadar  abu,  1,67%  kadar  bahan  tak tersabunkan, trace kadar  air  dan  sedimen.  Resin memiliki kadar total fenol sebesar 5,94% GAE ( gallic acid  equivalent ),  aktivitas  antioksidan  2,57  mg ekuivalen  asam  askorbat.g -1 ,  dan  bilangan  asam 115,84 mg KOH.g -1 .

## Saran
Sebelum hasil  penelitian ini  dapat  diterapkan di industri, perlu dilakukan validasi terhadap kondisi optimum  proses  ekstraksi  minyak  dan  resin nyamplung  dengan  pelarut  biner  ini  pada  skala  pra industri,  dan  juga  studi  kelayakannya.  Studi tentang model bisnis aplikasi minyak dan resin nyamplung ini untuk bahan bakar nabati, kosmetika dan farmasi juga perlu dilakukan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Deputi  Bidang  Penguatan  Riset  dan  Pengembangan Kementerian  Riset  dan  Teknologi-Badan  Riset  dan Inovasi  atas  bantuan  dana  (Hibah  Kompetitif Penelitian Terapan) untuk pelaksanaan penelitian ini sesuai  dengan  Perjanjian  Penugasan  Pelaksanaan Penelitian  Tahun  2021  Nomor:  1/E1/KP.PTNBH/ 2021 tanggal 8 Maret 2021.

## DAFTAR PUSTAKA

## Agbor  G,  Vinson  J,  Donnelly  PE.  2014.  Folin-
Ciocalteu  reagent  for  polyphenolic  assay. International  Journal  of  Food  Science, Nutrition and Dietetics 3(8): 147-156. Amalia Kartika I, Cerny M, Vandenbossche V, Rigal L,  Sablayrolles  C,  Vialle  C,  Suparno  O, Ariono D, Evon Ph. 2018. Direct Calophyllum oil  extraction  and  resin  separation  with  a binary  solvent  of n -hexane  and  methanol mixture. Fuel 221: 159-164.
Anwar  RN,  Sunarto  W,  dan  Kusumastuti  E.  2016. Pemanfaatan bentonit teraktivasi asam klorida untuk  pengolahan  minyak  goreng  bekas. Indonesian Journal of Chemical Science 5(3): 190-194.
Ashgari J, Ondruschka B, Mazaheritehrani M. 2011. Extraction  of  bioactive  chemical  compounds
from the medicinal asian plants by microwave irradiation. Journal  of  Medicinal  Plants Research 5(4):495-506. Burke  J.  1984. Solubility  Parameters:  Theory  and Application .  The  American  Institute  for Conservation.
Dewi SR, Izza N, Agustiningrum DA, Indriani DW,
Sugiarto  Y,  Maharani  DM,  Yulianingsih  R. 2014.    Pengaruh  suhu  pemasakan  nira  dan kecepatan  pengadukan  terhadap  kualitas gula merah tebu. Jurnal Teknologi Pertanian 15(3):
149-158.
Dweck  AC  dan  Meadows  T.  2002.  Tamanu ( Calophyllum  inophyllum )  -  The  African, Asian,  Polynesian  and  Pacific  Panacea. International Journal of Cosmetic Science 24:
1-8.
Evon  P,  Vandenbossche  V,  Pontalier  PY,  Rigal  L. 2007. Direct extraction of oil from sunflower seeds by twin-screw extruder according to an aqueous  extraction  process:  Feasibility  study and  influence  of  operating  conditions. Industrial Crops and Products 26: 351-359. Fadhlullah  M,  Widiyanto  SNB,  Elvi  Restiawaty  E.
2015. The potential of nyamplung ( Calophyllum  inophyllum L.)  seed  oil  as biodiesel  feedstock:  Effect  of  seed  moisture content and particle size on oil yield. Energy Procedia 68: 177-185. Harborne  JB.  1996. Metode  Fitokimia:  Penuntun Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan . Cetakan Kedua. Terjemahan. Padmawinata K dan Soediro I. Bandung: Penerbit ITB.
Indartono  YS,  Heriawan  H,  dan  Kartika  IA.  2019.
Innovative and flexible single screw press for the  oil  extraction  of  Calophyllum  seeds. Research  in  Agricultural  Engineering 65(3): 91-97.
Kartika IA, Fathiyah S, Desrial, Purwanto YA. 2010.
Pemurnian minyak nyamplung dan aplikasinya sebagai bahan bakar nabati. Jurnal Teknologi Industri Pertanian 20(2):122-129.
Kartika IA, Sari DDK, Pahan AF, Suparno O, Ariono D.  2017.  Ekstraksi  minyak  dan  resin nyamplung dengan campuran pelarut heksan- etanol. Jurnal  Teknologi  Industri  Pertanian 27(2): 161-171.
Kartika  IA,  Bernia  OTO,  Sailah  I,  Prakoso  T, Purwanto TP. 2019a. A binary solvent for the simultaneous Calophyllum oil-resin extraction and  purification. Research  in  Agricultural Engineering 65(2): 63-69.
Kartika  IA,  Rabbani  RI,  dan  Yuliana  ND.  2019b.
Potensi cangkang buah nyamplung ( Calopyhllum  inophyllum )  sebagai  sumber alami  resin. Jurnal  Teknologi  Industri Pertanian 29(3): 269-277.
Kartika  IA,  Cerny  M,  Vandenbossche  V,  Evon  Ph, Trisunaryanti W, Mukti RR, Hartati, Yuliana ND, Sailah I. 2021. Optimisation
of concurrent Calophyllum oil-resin extraction and  separation. Research  in  Agricultural Engineering 67(2): 84-91.
Leksono  B,  Hendrati  RL,  Windyarini  E,  Hasnah  T. 2014.  Variation  of  biofuel  potential  of  12 Calophyllum  inophyllum populations  in Indonesia. Indonesian  Journal  of  Forestry Research 1(2): 127-138.
Liu  W,  Liu  Y,  Chen  Z,  Chiou  W,  Tsai  Y,  Chen  C.
2015.  Calophyllolide  content  in Calophyllum inophyllum at  different  stage  of  maturity  and its  osteogenic  activity. Molecules 20(7): 12314-12327.
Lubis  NA.  2018.  Pengaruh  kekentalan  cairan terhadap  waktu  jatuh  benda  menggunakan falling  ball  method . Jurnal  Ilmu  Fisika  dan Teknologi 2(2): 26-32.
Madani  K  dan  Mokrani  A.  2016.  Effect  of  solvent, time, temperature on the extraction of phenolic compounds and antioxidant capacity of peach ( Prunus  persica L.)  fruit. Separation  and Purification Technology 162: 68-76.
Margaretta S, Handayani SD, Indraswati N, Hindarso H.  2011.  Ekstraksi  senyawa  phenolik Pandanus amaryllifolius Roxb sebagai antioksidan alami. Widya Teknik 10(1): 21-30.
Masud  F  dan  Puspitasari.  2017.  Studi  pendahuluan ekstraksi  bertingkat  minyak  biji  mangga arumanis  ( Mangifera  indica )  menggunakan pelarut  n-heksan  dan  etanol. Journal  INTEK 4(1):42-48.
Montgomery  DC.  2001. Design  and  Analysis  of Experimental  5 th Edition .  New  York:  John Wiley and Son.
Nariya  PB,  Bhalodia  NR,  Shukla  VJ,  Acharya  R,
Nariya  MB.  2013. In  vitro evaluation  of
antioxidant  activity  of Cordia  dichotoma (Forst f.) bark. AYU 34:124-8.
Prabakaran  K  dan  Britto  SJ.  2012.  Biology, agroforestry and medicinal value of Calophyllum  inophyllum L.  (clusiacea):  A review. International  Journal  of  Natural Product Research 1(2): 24-33. Prihandana RR, Hariansyah, dan Burhanudin S. 2012. Penentuan  koefisien  perpindahan  massa ekstraksi  minyak  biji  nyamplung  dengan menggunakan ekstraktor berpengaduk. Prosiding Seminar Nasional Sains
Matematika  Informatika  dan  Aplikasinya  III .
Lampung, Indonesia. 28-29 Juni 2012.
Spigno G, Tramelli L, Faveri DMD. 2007. Effects of extraction  time  temperature  and  solvent  on concentration and antioxidant activity of grape marc phenolics. Journal of Food Engineering 81: 200-208.
Widiastuti H, Pratiwi M, Neonufa GF, Soerawidjaja TH,  Prakoso  T.  2019.  Comparative  study  of nyamplung (Calophyllum  inophyllum L. ) kernel  oil  obtained  from  mechanical  and chemical  extraction  for  biofuel  production. Jurnal Rekayasa Proses 13(2): 81-87.
Yunus  M.  2019.  Optimasi  proses  ekstraksi  minyak dan  resin  dari  biji  nyamplung  ( Calophyllum inophyllum L.)  [Skripsi].  Bogor:  Institut Pertanian Bogor.
Zlotek U, Mikulska S, Nagajek M, Swieca M. 2016. The effect of different solvents and number of extraction steps on the polyphenol content and antioxidant  capacity  of  basil  leave  ( Ocimum basilicum L.)  extracts. Saudi  Journal  of Biological Science . 23: 628-633.