## Pengaruh Penambahan Minyak Zaitun Terhadap Karakteristik dan Reologi Edible Film Berbahan Dasar Gluten
[The Effect of Addition of Olive Oil on The Properties and Rheology of Gluten- Based Edible Films]
Nancy Siti Djenar, Joko Suryadi  , Nisa Siti Nursaadah, Erina Putri
Program studi D-III Analis Kimia, Jurusan Teknik Kimia, Politeknik Negeri Bandung Jl. Gegerkalong Hilir, Ciwaruga, Kec. Parongpong, Kabupaten Bandung Barat, Jawa Barat
Abstract. Gluten vegetable protein can be used as an alternative source of biopolymer as the basic material for edible film other than polysaccharides. Gluten-based edible films have a poor water vapor barrier and high cohesive and viscoelastic properties, therefore the addition of lipids and plasticizers is required. In this study, olive oil was added to reduce its permeability to water vapor, while glycerin was added to produce a more flexible edible film. The results showed that the addition of 1% olive oil could reduce the lowest water vapor transmission rate of 9.14 g/m 2 /24 hours with a thickness of 0.248 mm, tensile strength of 16.64 mPa, and elongation of 419.5%. The four characteristics are in accordance with the Japanese Industrial Standard. The antimicrobial testing on edible films showed that the addition of 0-2% olive oil could inhibit the growth of E. coli , while A. niger and R. oryzae 0-2% olive oil could not inhibit the growth of the two fungi. The measurement of optical properties showed that the transparency of the edible film was highest at the addition of 0% olive oil at 55%. The highest opacity value was with the addition of 1% olive oil , which is 2.96 . The Fourier Transform Infrared (FTIR) identification showed that the edible film added with 1% olive oil had three characteristic absorption bands from gluten , olive oil , and an absorption band from glycerin. These bands indicate that olive  oil,  glycerin  and  gluten  do  not  react  but  only  physically  interact.  The  measurement  using  Scanning  Electron Microscopy (SEM) and Energy Dispersive Spectrometer (EDS) showed that the microstructure of gluten-based edible film produces a varied structure where the gluten structure network can be clearly observed and contains elements of C, O, N where the intensity of C and O elements of 160-400 cps and 30-100 cps, respectively.
Keywords: Edible film, gluten, olive oil
Abstrak. Sumber  alternatif  biopolimer  sebagai  bahan  dasar edible  film selain  polisakarida,  dapat  digunakan protein nabati gluten. E dible film berbahan dasar gluten memiliki sifat water vapour barrier yang buruk serta sifat kohesif  dan  viskoelastik  yang tinggi sehingga  diperlukan penambahan  lipid  dan plasticizer .  Dalam  penelitian ini ditambahkan minyak zaitun untuk menurunkan permeabilitasnya terhadap uap air sedangkan penambahan gliserin untuk menghasilkan edible film yang lebih fleksibel. Hasil penelitian menunjukkan bahwa penambahan 1% minyak zaitun dapat menurunkan laju transmisi uap air terendah sebesar 9,14 g/m 2 /24 jam dengan ketebalan 0,248 mm, kuat  tarik  16,64  mPa,  pemanjangan  419,5%.    Ke  empat  karakteristik  tersebut  telah  sesuai  dengan Japanese Industrial Standard . Hasil pengujian antimikroba terhadap edible film menunjukkan bahwa penambahan minyak zaitun  0-2%  dapat  menghambat  pertumbuhan E.  coli ,  sedangkan  hasil  pengujian  pada A.  niger  dan  R.  oryzae menunjukkan  bahwa  minyak  zaitun  0-2%      tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan  kedua  jamur  tersebut.  Hasil pengukuran sifat optik menunjukkan bahwa transparansi edible film tertinggi pada penambahan 0% minyak zaitun sebesar 55%. Nilai opasitas tertinggi pada penambahan   1% minyak zaitun sebesar 2,96. Hasil identifikasi Fourier Transform Infrared (FTIR) menunjukkan bahwa edible film yang ditambahkan dengan 1% minyak zaitun memiliki tiga pita serapan karakteristik masing masing berasal dari gluten dan minyak zaitun serta pita serapan dari gliserin. Pita  pita  ini  menunjukkan  bahwa  antara  minyak  zaitun,  gliserin  dengan  gluten  tidak  bereaksi  tetapi  hanya bercampur  secara  fisik.  Hasil  pengukuran  menggunakan Scanning  Electron  Microscopy  (SEM) dan Energy Dispersive  Spectrometer  (EDS) menunjukkan  bahwa  mikrostruktur edible  film berbahan  dasar gluten menghasilkan  struktur  yang  bervariasi  dimana  jaringan  struktur  gluten  dapat  diamati  dengan  jelas  serta mengandung unsur C, O, N dimana intensitas unsur C dan O masing masing 160-400 cps dan 30-100 cps.
Kata kunci : Edible film, gluten, minyak zaitun
Diterima:  29 Juni 2022, Disetujui: 14 Juli 2022
Sitasi:   Djenar, NS., Suryadi, J., Nursaadah, NS., dan Putri, E. (2022). Pengaruh Penambahan Minyak Zaitun Terhadap Karakteristik dan Reologi Edible Film Berbahan Dasar Gluten. KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 8(2): 127-141.
 Corresponding author E-mail: joko.suryadi@polban.ac.id
https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/kovalen

## Djenar dkk.

## LATAR BELAKANG
Edible  film berbahan  dasar  agroindustri semakin  banyak  dikembangkan  terutama polisakarida  seperti  pektin,  turunan  selulosa dan pati (Mellinas et al., 2016) . Sifat fungsional dari edible  film seperti  permeabilitas  terhadap uap air dan oksigen, plastis dan ringan sangat bervariasi  sesuai  dengan  biopolimer  yang digunakan sebagai bahan baku ( Andrade et al .,
2016).
Sumber  alternatif  biopolimer  lain  sebagai bahan  dasar edible  film dapat  digunakan protein  nabati  gluten.  Gluten  merupakan protein  yang  secara  alami  ditemukan  pada berbagai  biji-bijian  seperti  gandum,  jelai  dan gandum  hitam.  Di  Indonesia  gluten  terdapat dalam tepung terigu dan banyak dimanfaatkan sebagai  sumber  protein  untuk  komunitas vegan/vegetarian  sebagai  pengganti  protein hewani  (Djenar et  al .,  2021).  Gluten  memiliki sifat  kohesif  (mudah  merekat),  viskoelastik (kenyal)  dan  tidak  larut  dalam  air  (Day  L., 2011).  Sifat-sifat  tersebut  menjadikan  gluten dapat  dimanfaatkan  sebagai  bahan  dasar pembuatan edible film.
Sifat  permeabilitas  terhadap  oksigen  dan uap air merupakan karakter paling penting dari edible  film. Fenomena  ini  dikaitkan  dengan adanya  ikatan  hidrogen  dan  sifat  hidrofilik (polar) dari gluten, sehingga menghasilkan nilai permeabilitas  yang  tinggi  terhadap  uap  air tetapi rendah terhadap oksigen (Thawien, 2012 dan Gennadios et al ., 1993).
Penambahan  bahan  kimia  yang  bersifat nonpolar  dan  mengandung  gugus  hidroksil seperti  lipid  diperlukan  untuk  menurunkan permeabilitas terhadap uap air tersebut. Salah satu  jenis  lipid  yang  dapat  digunakan  adalah minyak  zaitun  yang  juga  mengandung  bioaktif sebagai  antimikroba. Edible  film berbahan
dasar  gluten  ini  dapat  menjadi  penahan  air yang  baik  serta  meningkatkan shelf  life dari bahan pangan/pangan.
Berdasarkan  sifat  reologinya  gluten  hasil ekstraksi  dari  tepung  terigu  mempunyai  nilai kuat  tarik  yang  cukup  tinggi  dan  persen pemanjangan masing-masing 66,809 MPa dan 12,41%  (Djenar et  al .,  2021).  Penambahan plasticizer seperti  gliserin  diperlukan  untuk meningkatkan  fleksibilitas edible  film .  Gliserin akan  menurunkan  nilai  kuat  tarik (tensile strength ) dan meningkatkan persen pemanjangan ( percent elongation ) dan melembutkan ( soften) (Mellinas C. dkk., 2016).
Pada  pembuatan  berbahan  dasar  pati  seperti sereal  digitalia  exilis  dan  tepung  biji  durian penambahan gliserin mempengaruhi transparansi edible  film yang  diperoleh    (Alimi et al ., 2021 dan Wahidin dkk., 2021).
Sifat  optik  dari edible  film merupakan  hal yang cukup penting sebagai  penentu persepsi visual  dan  keterterimaan (acceptibilty )  dari konsumen karena dapat mengekspos tampilan dari  pangan  tersebut  (Alimi et  al .,  2021;  P . S. Tanada-Palmu  &  Grosso,  2005 ). Gluten  yang telah ditambahkan dengan plasticizer dan lipid akan  menghasilkan  edible film yang  buram
(opaque  edible  film). Sifat  buram  ini  sangat bermanfaat  untuk  beberapa  produk  pangan yang  peka  terhadap  cahaya  seperti  coklat, lemak  dan  pangan  berpigmen  (Alimi et  al ., 2021).
Berdasarkan  sifat  fungsional edible  film ,
ada beberapa pengujian yang penting dilakukan yaitu water vapour transmission rate
(WVTR)  untuk  mengukur  kemampuan  dalam menahan keluar masuknya uap air dari dan ke dalam  suatu edible  film. Tensile  strength dan percent elongation untuk mengukur fleksibilitas/
plastis edible film . Untuk mengukur ketebalan,
Djenar dkk.
transparansi  dan  opasitas edible  film masing masing  menggunakan  mikrometer  sekrup  dan spektrofotometer UV-VIS, sedangkan FTIR dan SEM  masing-masing  untuk  mengidentifikasi gugus  fungsi  dan  pori/luas  permukaan  dari edible film ( Andrade et al ., 2016, Matche et al .,
2021 dan Bangar et al ., 2021).
Permasalahan dalam penelitian ini adalah edible film berbahan dasar gluten memiliki sifat water  vapour  barrier yang  buruk  sehingga diperlukan  penambahan  lipid  (minyak  zaitun) yang bersifat hidrofobik yang dapat menurunkan  permeabilitasnya  terhadap  uap air. P enambahan plasticizer (gliserin) ditujukan untuk  melihat  pengaruhnya  terhadap  sifat kohesif dan viskoelastik dari gluten. Tujuan dari penelitian  yang  dilakukan  adalah  menentukan pengaruh  penambahan  minyak  zaitun  dan gliserin  terhadap  sifat  dan  reologi edible  film
berbahan dasar gluten.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Gluten  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  diperoleh  dengan  cara  mengekstraksi tepung  terigu  yang  telah  dilarutkan  kedalam NaCl  3%  (b/v).  Semua  bahan  kimia  yang digunakan seluruhnya dalam pro analys grade (Merck),  diantaranya  NaCl  3%,  etanol  95%, gliserin 3,5% (v/v) dan NH 4 OH 6N. Sedangkan minyak  zaitun  0%,  1%,  1,5%,  dan  2%  yang digunakan  adalah extra  virgin  olive  oil merek Borges. Cast /cetakan yang digunakan berbahan  dasar  akrilik  dengan  ukuran  200  x 100  x  0,25  mm.  Peralatan  yang  digunakan adalah FTIR (Bruker FTIR Alpha Spectrometer), Spektrofotometer UV-Vis
(Evolution TM 201/220), Tensile strength meter Autograph,  Shimadzu  dan Scanning  Electron Microscopy (SEM) Zeiss Evo 10, Shimadzu.

## Prosedur Penelitian

## Ekstraksi gluten menggunakan NaCl 3%
Sebanyak  50  mL  larutan  NaCl  3%  (b/v) dimasukkan  kedalam  100  gram  tepung  terigu protein tinggi, selanjutnya didiamkan pada suhu ruang  selama  ±10  menit  hingga  membentuk adonan (dough), selanjutnya      didiamkan
( resting )  di  udara  terbuka  selama  60  menit.
Untuk  memisahkan  gluten  dari  adonannya dilakukan  pencucian  dengan  air  mengalir hingga warna bilasannya bening (Djenar et al ., 2021). Gluten yang diperoleh dikeringkan pada suhu  60 o C  selama  1,5  jam  dan  ditentukan kadar airnya hingga < 7,5% (Gennadios et al .,
1993).

## Pembuatan edible film dari gluten
1.  Formulasi larutan edible film
Sebanyak  10  g  gluten  dicampurkan dengan 50 ml etanol 95% dan dihangatkan hingga  suhunya  mencapai  sekitar  50 o C. Kedalam  campuran  tersebut  ditambahkan dengan  3,2  ml  gliserin  3,5%  dan minyak zaitun berturut turut 0%; 1%; 1,5% dan 2%, dan didiamkan selama 10 menit. Selanjutnya  32  ml  aquadest  dan  8  ml NH 4 OH  6N  ditambahkan  secara  perlahan dan  bersamaan.  Campuran  diaduk  selama 60 menit hingga mencapai suhu akhir yaitu 75 o C.  (Gennadios et  al .,  1993;  Liu et  al .,
2006; Sharma et al ., 2007)
2. Casting
Ketika  masih  hangat  larutan  di  atas dituangkan kedalam cast / cetakan.
Permukaan  larutan  yang  telah  dituangkan tersebut harus rata dan tidak ada gelembung,  selanjutnya cast didiamkan pada  suhu  ruang  selama  24  jam  dan dilanjutkan
dengan pemanasan
menggunakan oven  (t  =  3  jam;  T  =  60 O C)
Djenar dkk.
(Gennadios et  al .,  1993;  Nuriyah  dkk.,
2018).
Karakterisasi  edible  film  berbahan  dasar gluten
1.  Laju transmisi uap air
Laju  transmisi  uap  air  (WVTR) ditentukan secara gravimetri berdasarkan ASTM  E96-01,  1997  (Dewi  dkk.,  2021). Silika  gel  sebanyak  3  g  dimasukkan  ke dalam  cawan  petri  yang  berdiameter  60 mm dan tinggi 30 mm.  Sampel edible film
dipotong sesuai dengan ukuran permukaan cawan. Selanjutnya edible film ditutupkan  pada  cawan  hingga  menutupi seluruh  permukaan  cawan  dan  pinggiran cawan  diolesi  menggunakan  vaselin. Cawan  beserta  isinya  ditimbang  dan dicatat beratnya sebagai W 0 dan dikondisikan  pada  suhu  ruang  selama  24 jam.  Uap  air  yang  melewati edible  film akan diserap oleh silika gel sehingga akan meningkatkan  berat  cawan.    Setelah  24 jam, cawan ditimbang kembali dan dicatat beratnya  sebagai  W  (Dewi  dkk.,  2021). Nilai laju transmisi uap air dapat ditentukan dengan rumus berikut (ASTM, 1997 dalam Dewi dkk., 2021):
WVTR= ( W-Wo ) ( t×A ) …….(1)
Dimana:
WVTR = Laju transmisi uap air (g/m 2 .24 jam) W 0 = Berat awal (g) W = Berat akhir (g) t = waktu (jam) A = luas film (m 2 )
2.  Ketebalan ( Thickness )
Pengukuran  ketebalan mengacu  pada metode  yang  digunakan  Aleman et  al .
(2016)  dalam  Togas  (2018)  yang  telah dimodifikasi.  Peralatan  yang  digunakan adalah  micrometer  sekrup  (Model  MDC-
25M, Mitutoyo, MFG, Japan). Alat ini dapat memperbesar  dan  memperpendek  jarak untuk dapat diukur secara langsung menjadi putaran  sekrup  lain  dan  dapat  dilihat skalanya. Sampel edible film dengan ukuran 100  x  15  mm  diletakkan  menempel  pada poros  tetap.  Bagian thimble dikondisikan dengan  cara  diputar  sampai  objek  terjepit antara  kedua  poros.  Hasil  pengukuran dapat terbaca pada skala  utama dan skala nonius (Soeyono, 2015).
3.  Kekuatan tarik dan persen pemanjangan
Pengukuran  kekuatan  tarik  ( tensile strength ) dan persen pemanjangan ( percent  elongation  at  break )  edible film menggunakan alat merk Autograph, Shimadzu. Edible  film dipotong  pada ukuran  40  mm  x  10  mm.  Sampel  dijepit pada  kedua  sisi  panjangnya  dan  ditarik hingga putus. Beban maksimum diperoleh tepat  ketika  sampel  tersebut  putus.  Nilai kekuatan  tarik  dibaca  setelah  sampel ditarik.  Kekuatan  tarik  dihitung  dengan persamaan berikut.
δ= Fmaks A .......(2) Keterangan: 𝛿 = kuat tarik (N/m 2 ) F maks = gaya tarik maksimum (N) A = luas penampang (m 2 )
Persen  pemanjangan  dihitung  dengan persamaan berikut (Nuriyah dkk., 2018).
ε= ∆L L0 x100 …....(3)
Keterangan: 𝜀 = elongasi (%) ∆𝐿 = (L-L 0 ) = pertambahan panjang (mm) L 0 = panjang mula-mula (mm)
4.  Uji aktivitas antimikroba Pengujian aktivitas antimikroba edible film bertujuan untuk mengetahui konsentrasi  minyak  zaitun yang  mampu menghambat pertumbuhan mikroba,
Djenar dkk.
dalam  hal  ini Escherichia  coli, Rhyzopus oryzae dan Aspergillus niger. Metode yang digunakan  yaitu  difusi  agar  (Handayani dkk., 2018). Sebanyak 0,1 ml kultur E. coli disebar  di  atas  cawan  petri  yang  berisi media  natrium  agar  (NA),  sedangkan untuk kultur R. oryzae dan A. niger disebar di atas media Potato Dextrose Agar (PDA).
Edible  film berdiameter  1  cm  yang  telah disterilkan di bawah lampu UV diletakkan di atas kedua media tersebut. Cawan petri diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam
(Khashayary et  al .,  2021).  Aktivitas antimikroba dihitung
berdasarkan pengukuran  zona  hambat  ( clean  zone) pada  media  setelah  melewati  masa inkubasi mikroba (Handayani dkk., 2018).
5.  Pengukuran a w ( water activity )
Pengukuran  aktivitas  air  (dilakukan dengan  a w meter  merek  AquaLab  Pawkit.
Sebelum  dilakukan  pengukuran  pada
edible
film , a w meter
dikalibrasi menggunakan  larutan  NaCl  6  mol/kg (0,760a w ) dan LiCl 13,41 mol/kg (0,250a w ). Nilai aktivitas air pada alat akan diperbarui setiap  30  detik.  Nilai  akhir  aktivitas  air ditandai dengan bunyi bip 5 kali pada alat setelah  5  menit  pengukuran  (Pawkit,
2018.)
6.  Sifat optis (transparansi dan opasitas)
Pengujian  transparansi  dan  opasitas dilakukan dengan metode Spektrofotometri  UV-VIS  menggunakan rumus sebagai berikut ( Alimi dkk., 2021):
T f = 100 x [ Tw T0 ] ……..(4)
T f ,  T w dan  T 0 masing-masing  adalah transparansi edible film, transmisi cahaya yang  melewati edible  film dan  transmisi cahaya tanpa melewati edible film . Dalam
tahapan  ini edible  film dipotong  dengan luas  sekitar  80x35  mm 2 .  Sampel  tersebut dimasukkan  kedalam  kuvet  dan  diukur dengan  spektrofotometer  pada λ maks 560 nm  dengan  udara  sebagai  standar.  Nilai transparansi didapatkan melalui pengukuran dengan menggunakan spektrofometer pada  560 nm.
Berdasarkan  standar  (ASTM-D1746-03, 2003),  transparansi edible  film dapat diukur  pada  panjang  gelombang  540-560 nm. Opasitas edible film diukur menggunakan  metode  Spektrofotometri pada λ maks 560  nm.  Rumus  yang digunakan  sebagai  berikut  (Tran  dkk., 2020).
Opasitas= Abs 560 h ……….(5)
Abs 560 adalah  nilai absorbansi  edible  film pada  560  nm  dan  h  adalah  tebal  (mm) edible film.
7.  Analisis spektrum inframerah
Analisis menggunakan FTIR (Fourier Transform
Infrared
Spectroscopy )
dilakukan  pada  senyawa  gluten,  minyak zaitun,  gliserin  dan edible  film pada bilangan gelombang tertentu.
8. Scanning  Electron  Microscopy (SEM)/ Energy  Dispersive  X-Ray  Spectroscopy
(EDS)
Morfologi permukaan khususnya porositas  dari edible  film berbahan  dasar gluten dapat
diamati
dengan menggunakan  alat Scanning  Electron Microscopy (SEM)  dengan  perbesaran 2000x.  Spesimen  uji edible  film dipotong kecil dan dilapisi dengan emas setebal 10 nm (Wahyuningtyas dkk., 2017).
Spesimen  diletakkan  di  atas specimen stage dan dimasukkan ke dalam alat SEM.

## Djenar dkk.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik Edible Film Menurut Japanese Industrial Standard (JIS)
Karakterisasi  suatu edible  film menurut Japanese  Industrial  Standard (JIS)  dilakukan berdasarkan  sifat  sifat  fungsionalnya  yaitu ketebalan,  kuat  tarik  ( tensile  strength )  dan pemanjangan (percent  elongation  at  break) .
Untuk  mempelajari  sifat  penahan  ( barrier properties )  terhadap  uap  air  karakterisasinya adalah  mengukur  laju  transmisi  uap  air  atau WVTR (Permata, 2020). Dari hasil penelitian ini diperoleh  karakteristik edible  film berbahan dasar  gluten  seperti  yang  ditunjukkan  pada Tabel 1.
Tabel 1 .  Karakteristik edible film  berbahan  dasar  gluten  yang  ditambahkan  minyak  zaitun  dengan konsentrasi bervariasi Edible film % minyak zaitun A 0% B 1% C 1,5% D 2% Syarat (JIS) Ketebalan (mm) 0,241 0,248 0,252 0,256 ≤0,250 mm Elongasi (%) 465,3 419,5 358,2 348,6 min. 70 % Tensile strength (mPa) 11,07 16,64 21,26 24,95 min. 0,3 MPa WVTR (g/m 2 /24jam) 17,16 9,14 13,5 12,8 ≤10 g/m 2 /24jam
Sifat  permeabilitas  terhadap  uap  air/ WVTR merupakan karakter paling penting dari edible film karena berpengaruh pada mutu dan keamanan  dan  waktu  simpan  ( shelf  life ) pangan (Mellinas et al ., 2016).
Menurut L. Yang dan Poulson (2000) serta Shen et  al .  (2021),  secara  umum  WVTR  film komposit terdiri dari biopolimer dan lipid sangat bergantung  pada  jenis,  struktur  dan  jumlah lipid. Untuk edible film yang mengandung asam lemak  atau  alkohol  lemak,  WVTR  menurun dengan peningkatan panjang rantai dan derajat kejenuhan lipid.
Edible  film berbahan  dasar  protein  yang telah  ditambahkan  lipid  akan  menurunkan WVTR  karena  adanya  interaksi  antara  zat hidrofobik dan emulsifikasi antara lipid dengan protein  di  dalam  emulsi edible  film tersebut seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1, terlihat bahwa  penambahan  1%  minyak  zaitun  dapat menurunkan nilai WVTR.
Pada  penambahan  1,5%  dan  2%  minyak zaitun      lapisan edible  film lebih  basah  dan berminyak (oily), diperkirakan  minyak  zaitun
tidak  bercampur  dengan  baik  dengan edible film . Dalam kondisi ini terbentuk dua fasa yaitu fasa  padat edible  film dan  fasa  cair  minyak zaitun,  sehingga  terjadi  peningkatan  nilai WVTR. Sedangkan menurut Taqil et al . (2011) selain mengandung polifenol flavonoid, minyak zaitun juga mengandung asam lemak tak jenuh tunggal  ( monounsaturated  fatty  acids )  yang tinggi.  Kemampuan  minyak  zaitun  sebagai penghalang  kelembaban (moisture  barrier ability) akan  menurun  dengan  meningkatnya ketidakjenuhan  ikatannya.    Berdasarkan  JIS, edible film yang telah ditambahkan dengan 1% minyak  zaitun  adalah  yang  terbaik  karena menghasilkan WVTR yang paling rendah yaitu 9,14 g/m 2 /24jam.
Ketebalan ( thickness ) edible film dipengaruhi  oleh  konsentrasi  dan  jenis  bahan penyusunnya  serta  banyaknya  total  padatan dalam  larutan,  luas  dan  volume  larutan  dalam cetakan  yang  digunakan  (Indarti  dkk.,  2020). Penambahan  zat  hidrofobik  seperti  seperti minyak dan lilin akan meningkatkan ketebalan edible  film .  Hal  tersebut  berhubungan  dengan

## Djenar dkk.
kandungan  air  yang  ada  dalam edible  film, dimana  pada  kondisi  yang  sama,  jumlah  air yang  diuapkan  dari edible yang  telah ditambahkan  lipid  lebih  sedikit  dibandingkan dengan  yang  diuapkan  dari  film  yang  dibuat tanpa lipid (Liu et al ., 2006). Hasil penelitian Liu et al .  (2006)  menyebutkan  bahwa  pektin  yang telah ditambahkan 2,5% dan 5% minyak zaitun menghasilkan edible  film dengan  ketebalan maing masing 0,52 dan 0,51% mm. Pada Tabel 1  ditunjukkan  bahwa  gluten  yang  telah ditambahkan  1%  minyak  zaitun  menghasilkan edible  film terbaik  karena  ketebalannya  telah sesuai  dengan  JIS  yaitu  0,248mm  (<  0,250 mm).
Kekuatan tarik ( tensile strength ) merupakan  sifat  fisik  yang  berhubungan dengan kekuatan jaringan  struktur, khususnya sifat  mekanik  dari  bahan  dasar  suatu edible film .  Sifat  mekanik  gluten  seperti  kohesiv  dan elastis menyebabkan gluten mempunyai kekuatan  tarik  yang  cukup  tinggi  yaitu  66,809 Mpa (Djenar et al ., 2021).
Pada  penelitian  ini  nilai  kuat  tarik edible film berbahan  dasar  gluten  lebih  rendah  dari glutennya yaitu antara 11,07-24,95 MPa (Tabel
1). Gluten yang telah bercampur dengan bahan lain penyusun edible film seperti minyak zaitun dan  gliserin  akan  menurunkan  kekuatan  pada jaringan  strukturnya.    Namun,  pada  kondisi tertentu,  keberadaan β-sheet,  -helix,  and  β- turns pada  struktur  sekunder  gluten  akan kembali  menguatkan  jaringan  sruktur  dari edible film (Dhaka & Khatkar, 2016 & Djenar et al .,  2021),  sehingga  peningkatan  konsentrasi minyak zaitun yang ditambahkan menyebabkan terjadinya peningkatan kekuatan tarik edible film . Nilai kekuatan tarik edible film berbahan  dasar  gluten  jauh  lebih  tinggi dibandingkan  dengan edible  film non-gluten.
Nilai  kuat  tarik  edible  film  berbahan  dasar pektin dengan penambahan 2,5%- 5% minyak zaitun  berkisar  antara  1,96-1,82  Mpa  (Liu  & Han,  2005),  sedangkan edible  film berbahan dasar karagenan dengan penambahan minyak atsiri  bawang  putih  memiliki  nilai  kuat  tarik antara 14,70-26,00 MPa (Qotimah dkk., 2020). Nilai  ini  hampir  sama  dengan  nilai  kuat  tarik pada edible film berbahan dasar gluten.  Hal ini disebabkan,  gluten  dan  karagenan  keduanya merupakan biopolimer yang jaringan strukturnya  mempunyai  kemiripan  (Kassab et
al ., 2018). Persentase pemanjangan ( percent elongation  at  break) adalah  representasi kuantitatif  kemampuan edible  film untuk meregang ( stretching ). Karakter ini sangat erat kaitannya dengan derajat plastisisasi dari suatu edible film . Pada Tabel 1 terlihat bahwa setelah ditambahkan  minyak  zaitun  maka edible  film berbahan  dasar  gluten  mempunyai  nilai pemanjangan yang cukup tinggi berkisar 348,6- 465,3  %,  dimana  semula  nilai  pemanjangan gluten  hanya  sekitar  6,32-47,80  %  (Djenar et al ., 2021 & Kaushik et al ., 2014). Menurut Li Liu et  al .  (2006)  penambahan  lipid  cair  (minyak zaitun)  ke  dalam  bahan edible film akan meningkatkan  sifat  pemanjangannya  karena lipid  berperan  sebagai  pelumas  dan  akan mengurangi  sifat  mekanik  lainnya,  sehingga edible  film berbahan  dasar  gluten  ini  menjadi cukup  plastis.  Pada  penambahan  minyak zaitun  yang  konsentrasinya  dinaikkan  terjadi penurunan  nilai  pemanjangannya  (Tabel  1). Fenomena  ini  sama  dengan  nilai  kuat  tarik edible film yang dihasilkan, dimana antara kuat tarik dengan persentase pemanjangan memiliki hubungan  yang  berbanding  terbalik  ( inversely proportional  relationship )  (Hazirah et  al .,  2018 dan Aquasky Plus, 2021). Secara keseluruhan
Djenar dkk.
nilai  persen  pemanjangan  pada edible  film ini telah sesuai dengan JIS yaitu lebih dari 70%.
Pengujian  sifat  antimikroba  pada edible film bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan
minyak
zaitun dalam
menghambat
pertumbuhan  mikroba  antara  lain E.  coli,  A.
niger dan R.  oryzae .  Sebelum  melakukan pengujian  antimikroba, water  activity (a w )  dari masing-masing edible film diukur dan diperoleh besarnya  antara  0,52-0,62.  Hasil  pengujian antimikroba ini ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Pengujian antimikroba terhadap edible film berbahan dasar gluten
Edible film % Minyak zaitun A 0% B 1% C 1,5% D 2% Water activity (a w ) 0,62 0,57 0,52 0,52 Antimikroba ( E.coli ) Zona hambat 2,0 cm Zona hambat 2,2 cm Zona hambat 2,1 cm Zona hambat 2,0 cm Antimikroba ( R.oryzae ) Tidak ada zona hambat Tidak ada zona hambat Tidak ada zona hambat Tidak ada zona hambat Antimikroba ( A. niger ) Tidak ada zona hambat Tidak ada zona hambat Tidak ada zona hambat Tidak ada zona hambat
Tabel  2  menunjukkan  hasil  pengujian terhadap E.  coli ,  penambahan  minyak  zaitun dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri. Kandungan polifenol di dalam semua konsentrasi  minyak  zaitun  telah  menghambat pertumbuhan E.  coli dengan  cara  merusak membran sitoplasma secara total dan mengendapkan  protein  sel  (Nazzaro et  al ., 2019).  Hal  ini  ditunjukkan  dengan  munculnya zona  hambat  ( clean zone )  pada  media  uji.
Pengaruh  a w terhadap  pertumbuhan  bakteri terlihat  pada edible  film tanpa  penambahan minyak zaitun  yang sama sama menghasilkan zona  hambat.  Pada  umumnya  bakteri  tidak dapat  tumbuh  bila  lingkungannya  mempunyai a w ≤ 0,80, E.  coli dapat  tumbuh  pada  a w 0,95-
1,00 (Tapia et al ., 2008).
Pada  pengujian  antimikroba  terhadap kapang A. niger dan R. oryzae tidak dihasilkan zona hambat karena minyak zaitun tidak dapat menghentikan pertumbuhan kapang, dimana A. niger dan R. oryzae tetap tumbuh pada semua edible  film. Hal  ini  disebabkan  a w 0,52-0,62 merupakan kondisi yang baik untuk pertumbuhan  kapang.  Selain  itu, Aspergillus
sp. dan Rhizopus sp . merupakan mikroba yang mempunyai  enzim  protease  dan  lipase  yang mampu  memecah  protein  (gluten)  dan  lipid (minyak  zaitun)  yang  terkandung  pada edible film (Sabrini et al ., 2021).
Transparansi merupakan ukuran transmisi cahaya melalui film dan tingkat kejernihan dari edible  film (Alimi et  al .,  2021)  Mustapa  dkk.,
2017).  Menurut  (Vebiani et  al .,  2019) transparansi  merupakan  salah  satu  aspek penting dalam edible film dalam meningkatkan penerimaan  dan  ketertarikan  konsumen  untuk digunakan sebagai bahan  kemasan makanan. Pengaruh  konsentrasi  minyak  zaitun  terhadap transparansi edible film gluten dapat ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel  3. Pengaruh  konsentrasi  minyak  zaitun terhadap transparansi  dan  opasitas edible film berbahan dasar gluten
Edible film % minyak zaitun A 0% B 1% C 1,5% D 2% Transparansi (%) 51,55  18,43  20,20  27,80 Opasitas 1,19 2,96 2,76 2,17

## Djenar dkk.
Pada  Tabel  3  terlihat  bahwa  nilai transparansi edible  film terbaik  berada  pada penambahan  0%  minyak  zaitun  yaitu  51,55% selanjutnya dengan meningkatnya konsentrasi minyak  zaitun,  mengalami  penurunan  yang fluktuatif.  Penurunan  transparansi  ini  dapat disebabkan  permukaan edible  film yang  tidak rata serta terpisahnya sebagian minyak zaitun dari fasa edible film sehingga muncul dua fasa.
Selain itu minyak zaitun yang berwarna kuning akan  menyebabkan  penurunan  transparansi pada edible  film (Warkoyo  dkk., 2014). Opasitas  adalah  kebalikan  dari  transparansi (Alimi et al ., 2021) dimana penambahan minyak zaitun dapat meningkatkan nilai opasitas. Nilai opasitas paling tinggi terdapat pada penambahan  minyak  zaitun  1%  yaitu  2,96, sedangkan  pada  konsentrasi  1,5%  dan  2% terjadi penurunan yang fluktuatif. Nilai transparansi edible film berbahan dasar gluten relatif  rendah  yaitu  27,80-51,55%,  sedangkan edible  film berbahan  dasar  lain  seperti  pati,
kitosan dan limbah tulang ikan masing masing sekitar  89,19-97,08%;  71,06-88,55%  dan  65- 155%  (Shittu et  al .,  2014  dalam  Alimi et  al. , 2021  &  Vebiani et  al .,  2019).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  jaringan  struktur  kimia dari bahan dasar untuk pembuatan edible film selain  mempengaruhi  sifat  mekaniknya  juga terhadap  sifat  optiknya.  Berdasarkan  sifat opasitasnya  maka edible  film berbahan  dasar gluten  dapat  dimanfaatkan  untuk  beberapa produk  pangan  yang  peka  terhadap  cahaya seperti  lemak,  minyak,  vitamin  dan  pangan berpigmen  (Alimi et  al .,  2021  &  Kwon et  al ., 2018).
Spektra  FTIR  yang  terdiri  atas  gluten, edible  film blanko  (tanpa  minyak  zaitun  dan gliserin), edible  film yang  mengandung  1%
minyak  zaitun,  gliserin  dan  minyak  zaitun bertujuan untuk mengidentifikasi interaksi yang terjadi  dalam  matriks edible  film ,  seperti  yang ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1 . Spektrum FTIR edible film dan bahan bahan penyusunnya

## Djenar dkk.
Gambar  1 menunjukkan  bahwa  spektrum antara edible  film blanko  dengan edible  film yang ditambahkan 1% minyak zaitun menunjukkan  pola  transmitansi  inframerah yang  mirip.  Selanjutnya  pita-pita  serapan tersebut  dibandingkan  dengan  pita  serapan dari  bahan  bahan  penyusunnya  yaitu  gluten, minyak zaitun dan gliserin.
Tabel  4  menunjukkan  bahwa  gluten mempunyai  pita  serapan  yang  karakteristik yaitu  Amida  I  yang  terdiri  dari α-helix, β-sheet dan β-turns ,  amida  II  dan  Amida  III (Djenar et al .,  2021;  Dhaka  &  Khatkar,  2016).  Namun setelah  membentuk edible  film ,  gugus  fungsi yang muncul pada spectra FTIR adalah α-helix
(1660,71-  1658,78  cm -1 ),  amida  II  (1533,41 – 1544,98  cm -1 )      dan  amida  III  (12338,30-
1240,23 cm -1 ). Penambahan etanol 95% dalam formulasi edible film menyebabkan perubahan struktur kimia dari gluten yaitu tidak munculnya β-sheet  dan  β-turns  baik  pada edible  film blanko  maupun  pada edible  film 1%  minyak zaitun. Berdasarkan transmitansinya edible film yang ditambahkan 1% minyak zaitun menghasilkan  pita  pita  serapan  yang  rendah pada 1238,30 dan 1544,98 cm -1 yaitu amida III dan  amida  II.  Minyak  zaitun  yang  bersifat hidrofobik  dapat  mengurangi  kekuatan  ikatan internal  pada  matriks  gluten.  Pada  pita  pita serapan edible  film yang  ditambahkan  1% minyak  zaitun,  terdapat  pita  serapan  minyak zaitun  yaitu  puncak  C=O,  CH 3 dan  CH 2 pada bilangan gelombang 1745,58 cm -1 , 2854,65 cm - 1 dan 2926,01 cm -1 (Laachari et al ., 2015).
Tabel 4. Pembandingan spektrum FTIR antara edible film dengan bahan bahan penyusunnya
Keterangan Bilangan Gelombang (cm -1 ) C-H (b) C-C (v) C-C & C- O-C (v) C=O (v) C=C (b)
CH 3 (v) CH 2 (v) Amida II Amida III Amida I NH bending dan CN stretching NH bending dan CN stretching α- heliks β- sheet β- turns Gluten (Qodri & Sihotang, 2021) - - - - - - - 1500- 1550 1238- 1240,23 1658 1632 1665 Minyak zaitun (Laachari et al. , 2015) - - - 1746 1640 2855 2926 - - - - - Gliserin (Kachel- Jakubowska , 2017) 1453 993 1103 - - - - - - - - - Edible film blanko - - - - - - 2927,94 1533,41 1240,23 1660,71 - - Edible film 1% minyak zaitun 1462,04 993,34 1111 1740 - 2854,65 2926,01 1544,98 1238,3 1658,78 - -
Terdapat  pula  pita  serapan  gliserin  yaitu puncak  C-H,  C-C,  C-C  dan  C-O-C  pada bilangan gelombang 1462,04 cm -1 ; 993,34 cm -1 dan  1111,  00  cm -1 .  Keberadaan  pita  pita  ini menunjukkan  bahwa  antara  minyak  zaitun, gliserin  dengan  gluten  tidak  bereaksi  tetapi hanya bercampur secara fisik, sehingga minyak zaitun  1%  dan  gliserin  3,5%  dapat  berperan
dalam  meningkatkan  kualitas edible  film berbahan dasar gluten.
Hasil pengujian menggunakan SEM menunjukkan  bahwa  pada  perbesaran  2000x dapat  menghasilkan  gambar  topografi  dan morfologi  yang  jelas,  seperti  yang  ditunjukkan pada Gambar 2 dan 3.
Djenar dkk.
Gambar 2 . Mikrostruktur edible film blanko Gambar 3. Mikrostruktur edible film yang ditambahkan 1% minyak zaitun
Gambar  2  dan  3  menunjukkan  bahwa mikrostruktur edible film berbahan dasar gluten menghasilkan  struktur  yang  bervariasi  dari yang  tidak  homogen  hingga  lebih  homogen, tidak  halus  hingga  halus,  permukaan  yang merata  hingga  adanya  retakan.  Pada  kedua edible  film jaringan  struktur  gluten  dapat diamati dengan jelas.  Gambar 2 menunjukkan jaringan  struktur  gluten  cukup  jelas  dan komponen penyusun filmnya terdispersi cukup merata serta permukaannya yang cukup halus, homogen,  rapat  dan  tidak  berpori.  Hal  ini berhubungan  linier  dengan  gluten  yang memiliki  sifat  viskoelastik  dan  sangat  kohesif (Kaushik et  al., 2014  &  Djenar et  al .,  2021).
Gambar 3 menunjukkan jaringan struktur gluten mulai  berkurang  dan  terlihat  jelas  permukaan edible film yang tidak homogen, tidak rata dan ada  retakan.  Hal  ini  disebabkan  dalam edible film gluten  tidak  terdispersi  secara  merata, fenomena  ini  ditunjukkan  dengan  adanya jaringan gluten di satu sisi sedangkan pada sisi yang lain tidak tampak. Selain itu penggunaan gliserin  sebagai plasticizer dengan  jumlah berlebih  dapat  menutupi  permukaan  dan menyebabkan munculnya retakan pada edible film (Fahrullah et al ., 2020).
Gambar 4 . EDS image Edible film blanko
Gambar 5 .  EDS image edible film yang ditambahkan 1% minyak zaitun
Metode EDS digunakan untuk mengetahui jumlah unsur-unsur kimia yang terdapat dalam edible  film .  Gambar  4  dan  5  menunjukkan kedua edible film mengandung unsur C (warna merah)  dan  O  (warna  hijau).  Pada  Gambar  4 dan 5, unsur N tidak terlihat karena jumlahnya kecil,  tetapi  terlihat  jelas  dari  spektrumnya

## Djenar dkk.
seperti yang ditunjukkan pada Gambar 6 dan 7 (warna  biru).    Unsur-unsur  tersebut  terdapat pada  bahan  penyusun edible  film ,  juga  dapat membuktikan bahwa tidak terdeteksinya
kontaminan  pada edible  film .  Pada  kedua gambar  tersebut,  menunjukkan  bahwa  unsur yang mendominasi adalah karbon (C).
Gambar 6. Spektrum EDS edible film blanko
Gambar 7. Spektrum EDS edible film yang ditambahkan 1% minyak zaitun
Tabel 5 .  Komposisi kimia edible film berbahan dasar  gluten  menggunakan  metode
EDS
Jenis unsur Cps ( count per second ) Edible film blanko Edible film yang ditambahkan 1% minyak zaitun C 44-224 160-400 O 0-100 30-100 N 0-48 0-40
Tabel  5  menunjukkan  bahwa  intensitas unsur N pada edible film blanko lebih tinggi dari edible  film yang  ditambahkan  1%  minyak zaitun.  Unsur  N  dalam  matriks  gluten  pada edible film blanko tidak berikatan dengan gugus lain  dari  bahan  penyusun edible  film . Sementara itu pada edible film yang ditambahkan  1%  minyak  zaitun,  intensitasnya menurun.  Hal  ini  dapat  disebabkan  unsur  N pada  gluten  membentuk  ikatan  hidrogen
dengan  unsur  lain  yaitu  O  atau  H  dari minyak zaitun atau gliserin. Edible film yang ditambahkan  1%  minyak  zaitun  memiliki intensitas  unsur  C  dan  O  yang  tinggi.  Unsur unsur  tersebut  dapat  berasal  dari  matriks minyak  zaitun atau  penambahan  gliserin  yang berlebih.

## KESIMPULAN
Edible  film berbahan  dasar  gluten  yang telah  ditambahkan  dengan  1%  minyak  zaitun mempunyai  karakteristik  yang  telah  sesuai dengan JIS dan dapat menghambat pertumbuhan E.  coli tetapi  tidak  dapat menghambat  A .  niger dan R.  oryzae.
Berdasarkan sifat optiknya, edible film berbahan  dasar  gluten  mempunyai  sifat transparansi yang rendah tetapi opasitas yang cukup tinggi.

## Djenar dkk.
Analisis spektrum IR menunjukkan bahwa antara  minyak  zaitun,  gliserin  dengan  gluten tidak  bereaksi  tetapi  hanya  bercampur  secara fisik. Berdasarkan hasil pengukuran menggunakan  SEM  dan  EDS  menunjukkan bahwa  mikrostruktur edible  film menghasilkan struktur  yang  bervariasi  dengan  jaringan struktur gluten yang dapat diamati dengan jelas serta  mengandung  unsur  C,  O  dan  N  dimana intensitas unsur C dan O cukup tinggi.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  didanai  oleh  Politeknik Negeri  Bandung  melalui  Pusat  Penelitian  dan
Pengabdian Kepada Masyarakat (P3M) dengan
nomor kontrak: Nomor: B/66.26/PL1.R7/PG.00.03/2022

## DAFTAR PUSTAKA
Alimi,  B.  A.,  Workneh,  T.  S.,  &  Femi,  F.  A.
(2021). Fabrication and characterization of edible films from acha ( Digitalia exilis ) and iburu  ( Digitalia  iburua )  starches . CYTA  - Journal of Food , 19 (1): 493 –500. https://doi.org/10.1080/19476337.2021.19 17667
Andrade,  RMS.,  Ferreira,  MSL.,  Goncalves, ECBA. (2016). Development and Characterization of Edible Films Based on Fruit  and  Vegetable  Residues . Journal  of
Food Science, 81(2): E412-8. doi: 10.1111/1750-3841.13192
Aquasky. (2021).
Rubber Diaphragm
Elongation . https://aquaskyplus.com/news detail.php?sid=64&page=1.  Diakses  23 Juni 2022
Bangar,  SP.,  Singh,  A.,  Trif,  M.,  Kumar,  M., Kumar, P., Kaur, R., and Kaur, N. (2021). Process  Parameter  Optimization  and Characterization  for  an  Edible  Film: Flaxseed Concern. Coatings, 11(9), 1106 , https://doi.org/10.3390/coatings11091106
Day,  L.  (2011). Wheat  gluten:  production, properties,  and  application . In  Handbook of food proteins (pp. 267-288). Woodhead Publishing.
Dhaka, V and Khatkar, BS. (2016).
Microstructural, thermal
and
IR
spectroscopy characterization of wheatgluten  and  its sub fractions. J Food Sci  Technol  August, 53(8):  3356 –3363. DOI 10.1007/s13197-016-2314-9
Dewi  Rozanna,  Rahmi,  &  Nasrun.  (2021).
Perbaikan Sifat Mekanik dan Laju Transmisi  Uap  Air  Edible  Film  Bioplastik Menggunakan Minyak Sawit dan
Plasticizer  Gliserol  Berbasis  Pati  Sagu .
Jurnal Teknologi KImia Unimal , 10(1): 61 – 77.
Djenar  N.S.,  Jayanti,  R.D.,  Suryadi  J.  (2021). The Effect of Sodium Chloride with Varying Concentration  on  Characteristics  and Rheology of Extracted Gluten from Wheat Flour. Advances in Engineering Research Proceedings  of  the  2nd  International
Seminar of Science and Applied Technology (ISSAT 2021)
https://doi.org/10.2991/aer.k.211106.004
Fahrullah,  F.,  Radiati,  L.  E.,  Purwadi,  P.,  & Rosyidi, D. (2020). The Effect of Different Plasticizers on the Characteristics of Whey Composite  Edible  Film. Jurnal  Ilmu  Dan Teknologi  Hasil  Ternak, 15(1):  31 –37. https://doi.org/10.21776/ub.jitek.2020.015
.01.4 Gennadios,  R.  F.  Testin  (1993).  Property Modification  of  Edible  Wheat,  Gluten- Based Films. Biological Systems Engineering:  Papers  and  Publications. American Society of Agricultural
Engineers 0001-2351 / 93 / 3602-0465
Handayani,  R.,  &  Nurzanah,  H.  (2018). Karakteristik  edible  film  pati  talas  dengan penambahan  antimikroba  dari  minyak atsiri lengkuas. Jurnal Kompetensi Teknik 10(1).
Hazirah, N., Wan, B. C., Nafchi, A. M., & Huda, N. (2018). Tensile Strength, Elongation at Breaking  Point  and  Surface  Color  of  a Biodegradable Film Based on a Duck Feet Gelatin  and Polyvinyl  Alcohol  Blend . Asia Pacific  Journal  of  Sustainable  Agriculture
Food and Energy , 6 (2): 16 –21. http://journal.bakrie.ac.id/index.php/APJS AFE
Indarti, Eti; Sri Marlita A., dan Zaidiyah. (2020). Sifat Transparansi Dan Permeabilitas Film Bionanokomposit  Polylactic  Acid  Dan Polycaprolactone  Dengan  Penambahan Nanocrystalline
Cellulose Sebagai Pengisi. Jurnal  Teknologi  dan  Industri Hasil Pertanian, 25(2): 81-89. http://dx.doi.org/10.23960/jtihp.v25i2.81- 89

## Djenar dkk.
Kassab,  Z.,  Aziz,  F.,  Hannache,  H.,  Ben Youcef,  H.,  &  El  Achaby,  M.  (2019). Improved  mechanical  properties  of  k- carrageenan-based  nanocomposite  films reinforced  with  cellulose  nanocrystals.
International Journal of Biological Macromolecules , 123 : 1248 –1256.
https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2018.12.
030
Kaushik, R.,  Kumar, N.,  Sihag, MK., and Ray,
A.  (2014).  Isolation,  characterization  of wheat gluten and its regeneration properties. J  Food  SciTechnol., 52(9): 5930 –5937.  doi:  10.1007/s13197-014- 1690-2.
Kachel-Jakubowska,  M.,  Matwijczuk,  A.,  and Gagoś,  M.  (2017).  Analysis  of  the physicochemical properties of post- manufacturing waste derived
fromproduction  of  methyl  esters  from rapeseed  oil. Int.  Agrophys. ,  31:  1-8,  doi: 10.1515/intag-2016-0042.
Khashayary  S,  &  Aarabi  A.  (2021).  Evaluation of  Physico-mechanical  and  Antifungal Properties of Gluten-based Film Incorporated  with  Vanillin,  Salicylic  Acid, and  Montmorillonite  (Cloisite  15A). Food and Bioprocess Technology , 14 : 665 –678.
Kwon Seongyoung, Aungkana, O., Nattinee, B., ChanSuk, Y., Choi, J., & Ko, S. (2018 ). A
Short Review of Light Barrier Materials for Food  and  Beverage  Packaging. Korean
Journal  of  Packaging  Science  and
Technology , 24 (3): 141 –148.
https://doi.org/10.20909/kopast.2018.24.3 .141
Laachari,  F.,  Maâtaoui,  H.,  Bergadi,  F.  El, Boukir,  A.,  Saad,  &  Ibnsouda,  K.  (2015).
Improvement  of  a  lipolytic  activity  assay protocol  to  increase  the  efficiency  of  the lipases activity measurement and validation by infrared spectroscopy. Journal, African Biotechnology , 14.
Liu,  Z.,  &  Han,  J.  H.  (2005).  Film-forming characteristics  of  starches. Journal  of Food
Science,
70(1). https://doi.org/10.1111/j.1365- 2621.2005.tb09034.x
Liu, L., Kerry, J. F., & Kerry, J. P. (2006). Effect of food  ingredients  and  selected  lipids  on the  physical properties of extruded edible films/casings. International  Journal  of Food  Science  and  Technology ,  41(3):
295 –302.  https://doi.org/10.1111/j.1365- 2621.2005.01063.x
L.  Yang  and  A.T.  Paulson.  (2000).  Effects  of lipids  on mechanical  and  moisture barrier properties  of  edible  gellan  film. Food Research International, 33: 571 –578.
Matche  S  Rajeshwar,  Chandrababu  Anokhi (2021).  Development  and  Application  of Edible  Film  with  Bioactive  Compound.
International  Journal  of  Food  Science, Nutrition  and  Dietetics  (IJFS ),  10(2):524- 531. ISSN 2326-3350
Mellinas.C,  Arantzazu  Valdes,  Marina  Ramos,
Nuria Burgos,  Maria del Carmen, Alfonso Jimenez  (2016).    Active  edible  films: Current state and future trends. Journal of Applied Polymer Science , 133, 42631 DOI: 10.1002/APP.42631
Mustapa, R., Restuhadi, F., & Efendi, R. (2017). Pemanfaatan  Kitosan  Sebagai  Bahan Dasar  Pembuatan  Edible  Film  Dari  Pati Ubi  Jalar  Kuning. Electronic  Publishing , 26(3): 1 –5.
Nazzaro,  F.,  Fratianni,  F.,  Cozzolino,  R., Martignetti, A., Malorni, L., Feo, VD., Cruz, AG., and d'Acierno, A. (2019). Antibacterial Activity of Three Extra Virgin Olive Oils of the  Campania  Region,  Southern  Italy, Related  to  Their  Polyphenol  Content  and Composition. Journal  of  Microorganisms, 7(9): 321. doi:
10.3390/microorganisms7090321
Nuriyah, L., Saroja, G., Ghufron, M., Razanata, A., Rosid, N. F., Fisika, J., Matematika, F., Ilmu,  D.,  &  Alam,  P.  (2018). Karakteristik Kuat  Tarik  dan  Elongasi  Bioplastik Berbahan  Pati  Ubi  Jalar  Cilembu  dengan Variasi  Jenis  Pemlastis . NATURAL  B,
4(4).
Pawkit.  (2018). Pawkit  Water  Activity  Meter
Standard  Operating  Procedure .  Decagon Devices, Inc. (diunduh dari http://www.keydiagnostics.com.au/images /new2018/28%20HACCP%20tools/AquaL ab%20Paw%20Kit/Pawkit%20-
%20Basic%20Standard%20Operating%2 0Procedure%20KD%2009-17.pdf)
Permata,  M.  M.  (2020).  Tinjauan  sistematis: pengaruh  jenis  pati  dan  plasticizer terhadap karakteristik edible film . [ Skripsi ],
Institut Pertanian Bogor, Bogor. hlm.1 –60. Qodri, M. M., & Sihotang, Y. B. (2021 ). Isolasi Dan  Karakterisasi  Gluten  Dari  Tepung Terigu  Protein  Tinggi .  Politeknik  Negeri Bandung, Bandung.
Djenar dkk.
Qotimah, K., Nurcahya Dewi, E., & Purnamayati, L. (2020). Karakteristik Mutu Edible Film Karagenean Dengan Penambahan Minyak Atsiri Bawang Putih (Allium Sativum) Pada Produk Pasta Ikan. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 23 (1): 1 –9.
Sabrini, Z., Rukmi, I., Rejeki, D., & Ferniah, S. (2021).  Enzymatic  Activity  of  Aspergillus Section  Nigri  Fungi  Culture  DUCC (Diponegoro University Culture Collection) and  Molecular  Identification  of  Potential Isolates. Bioma, 23 (1): 1-5. DOI: https://doi.org/10.14710/bioma.23.1.1-5
Sharma,  N.,  Khatkar,  B.S.,  Kaushik,  R., Sharma,  P.,  and  Sharma,  R.  (2017 ). Isolation and development of wheat-based gluten edible film and its physicochemical properties. International  Food  Research Journal 24(1): 94-101.
Shen, G., Xuoxian Y., Wu Hejun, Li Shanshan, Hou  Xiaoyan,  Li  Meiliang,  Li  Qingye,  Liu Xingyan,  Zhou  Man,  Chen  Anjun  dan Zhang  Zhiqing.  (2021 ). Incorporation  of
Lipids  into  Wheat  Bran  Cellulose/Wheat
Gluten Composite Film Improves Its Water
Resistance
Properties. Membranes ,
12(1):18.
doi:
10.3390/membranes12010018.
Soeyono. (2015). Jurnal Fisika Umum Mikrometer Sekrup.
Diunduh dari https://www.scribd.com/document/388989 842/Soeyono-Jurnal-Fiska-Umum- Mikrometer-Sekrup .
Tanada-Palmu,  P.  S.,  &  Grosso,  C.  R.  F.
(2005).  Effect  of  edible  wheat  gluten- based  films  and  coatings  on  refrigerated strawberry  ( Fragaria  ananassa )  quality. Postharvest  Biology  and  Technology , 36 (2): 199 –208.
https://doi.org/10.1016/j.postharvbio.2004 .12.003
Tapia,  M.  S.,  Alzamora,  S.  M.,  &  Chirife,  J. (2008). Effects  of  Water  Activity  (aw)  on Microbial  Stability:  As  a  Hurdle  in  Food Preservation, Chapter 10 . Water Activity in Foods:  Fundamentals  and  Applications, 239 –271. https://doi.org/10.1002/9780470376454.c h10
Thawien Wittaya. (2012). Protein-Based Edible Films: Characteristics and Improvement of Properties. INTECH open science
Taqi, A., Askar, KA., Nagy, K., Mutihac, L., and Stamatin,  I.  (2011).  Effect  of  different concentrations of olive oil and oleic acid on
the mechanical properties of albumen (egg white)  edible  films. African  Journal  of Biotechnology , 10(60): 12963-12972.
Togas,  C.,  Berhimpon,  S.,  Montolalu,  R.  I., Dien, H. A., & Mentang, F. (2018). Physical Characteristics  of  Edible  Film  made  from Carrageenan  and  Beeswax  Composites through  Nanoemulsion  Process. Jurnal
Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia , 20(3):
468-477. https://doi.org/10.17844/jphpi.v20i3.19767
Tran,  T.  T.  B.,  Roach,  P.,  Nguyen,  M.  H.,
Pristijono, P., & Vuong, Q. V. (2020). Food Hydrocolloids Development of biodegradable  fi  lms  based  on  seaweed polysaccharides and Gac pulp ( Momordica  cochinchinensis ),  the  waste generated  from  Gac  oil  production. Food Hydrocolloids, 99, 105322. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2019.10
5322
Vebiani, L., Rostini, I., Hamdani, H., & Pratama, R. I. (2019). Potential Of Lates Calcarifer’s Bone  Waste  As  A  Source  Of  Main Ingredient for Edible Films. GSJ, 7(9): 891- 898.
Wahidin,  M.,  Srimarlita,  A.,  Sulaiman,  I.,  & Indarti,  E.  (2021).  Transparency  and thickness  of  jackfruit  and  durian  seed starch edible film. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 667(1). https://doi.org/10.1088/1755- 1315/667/1/012030
Wahyuningtyas,  N.,  &  Suryanto,  H.  (2017). Analysis  of  Biodegradation  of  Bioplastics Made  of  Cassava  Starch. Journal  of Mechanical  Engineering  Science  and
Technology , 1 (1), 24 –31.
https://doi.org/10.17977/um016v1i12017p 024
Warkoyo,  Rahardjo,  B.,  Marseno,  D.  W.,  &
Karyadi,  J.  N.  W.  (2014).  Sifat  Fisik, Mekanik Dan Barrier Edible Film Berbasis Pati Umbi Kimpul ( Xanthosoma sagittifolium )  Yang  Diinkorporasi  Dengan Kalium Sorbat. Agritech , 34 (1): 72 –81.