Karakteristik reproduksi ikan sidat
Anguilla bicolor McClelland, 1844 yang diinduksi GNRH-analog
[Reproductive characteristic of Anguilla bicolor McCleland , 1844 which  inducted by administration of GnRh   Analog]
Farida Nur Rachmawati 1 , Untung Susilo 1 , Muslih 2
1 Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman
2 Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Jenderal Soedirman Jln dr. Soeparno No. 63 Purwokerto 53122
Diterima: 5 Oktober 2016; Disetujui: 4 April 2017

## Abstrak
Ikan sidat Anguilla bicolor McClelland sulit matang gonad dalam kondisi budi daya, karena rendahnya kadar gonado- tropin pituitari. Oleh karena itu untuk memacu pematangan gonad ikan sidat dalam kondisi budi daya perlu ditambah- kan gonadotropin secara eksogen. Tujuan penelitian ini adalah mengkaji pengaruh induksi GnRH-analog terhadap pe- matangan  gonad  ikan  sidat  berdasarkan  perubahan  nilai  indeks  mata,  indeks  kematangan  gonad    (IKG),  dan  kadar estradiol. Penelitian dilakukan secara eksperimental menggunakan rancangan acak lengkap dengan tiga perlakuan dan delapan ulangan. Perlakuan percobaan terdiri atas induksi hormon GnRH-analog dengan dosis 0,0; 0,5 dan 1,0 ml kg -1 bobot badan . Ikan sidat dengan rata-rata ukuran panjang 67 cm dan rata-rata bobot 500 g sebanyak 18 ekor yang telah diinduksi dengan berbagai dosis GnRH analog (0, 0,5 dan 1 ml kg -1 bobot badan) dipelihara dalam akuarium fiberglass selama dua bulan. Pakan berupa ikan rucah diberikan satu kali sehari pada pukul 16.00 secara ad libitum . Variabel yang diamati  adalah  indeks  mata,  IKG,  dan  kadar  estradiol.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  induksi  hormon  GnRH- analog  tidak  berpengaruh  terhadap  peningkatan  nilai  indeks  mata,  nilai  IKG  (p>0,05), dan kadar  estradiol  ikan  sidat (p<0,05). Induksi hormon GnRH-analog dengan dosis 0,5 dan 1 ml kg -1 bobot badan tidak efektif memacu pematangan gonad ikan sidat.
Kata penting: estradiol, GnRH-analog, indeks kematangan gonad, indeks mata, sidat

## Abstract
Eel, Anguilla bicolor McClelland was hard to mature in captivity, due to low levels of pituitary gonadotropin. In order to stimulate gonadal maturation in captivity, exogenous gonadotropin is needed. The purpose of this study was to assess the effect of GnRH-analog induction on gonadal maturation of tropical eel base on  the value of the eye index, gonado- somatic  index,  and  estradiol  levels. The  study  was  carried  out  experimentally  with  a  completely  randomized  design with  three  treatments  and  eight  replications.    The  treatments were  the  induction  of  hormone  GnRH-analogues  with doses of 0.0; 0.5 and 1.0 ml kg -1 body weight. Eel with an average total length of 67 cm and an average weight of 500 g were  injected  with  different  doses of  GnRH-analog  (0.0; 0.5  and  1.0 ml  kg -1 body  weight),  kept  in  the  fiberglass aquarium for two months. The eels were fed with discard fish daily in ad libitum at 16.00 pm.  The observed variables were eye index, Gonadosomatic Index (GSI), and estradiol levels. The results showed that injection  of three different doses of GnRH-analog did not affect on the increasing of GSI, eye index (P> 0.05), and estradiol (P <0.05). Induction of GnRH-analog of 0.0; 0.5 and 1.0 ml kg -1 body weight can not stimulate the gonadal maturity of tropical eel.
Keyword : GnRH-analog, estradiol, eye index, gonadosomatic index, eel, Anguilla bicolor .

## Pendahuluan
Ikan  sidat  merupakan  ikan  katadrom. Pada fase pertumbuhan ( yellow eel ) ikan hidup di per- airan  tawar. Setelah mencapai  pubertas  ( silver eel ) ikan sidat akan beruaya ke perairan laut un- tuk memijah (Geffroy et al . 2012, Nowosad et al .
2014).  Fase pubertas  pada  masing-masing jenis
kelamin  berbeda  antara  individu  jantan  dan  be- tina. Ikan jantan mencapai pubertas pada ukuran panjang tubuh  > 43,7 cm, sedangkan ikan betina mencapai  pubertas  pada  ukuran  panjang  tubuh >  57,5  cm  (Sudo et  al .  2013).  Setelah  memijah ikan  sidat  akan  mati  karena  ikan  sidat  termasuk kedalam kelompok hewan smelparous (Moyes & Schulte 2008).
_____________________________ Penulis korespondensi
Alamat surel: farida.rachmawati@unsoed.ac.id
Sampai  saat  ini  budi  daya  ikan  sidat Anguilla bicolor McClelland masih terfokus pada usaha  pembesaran,  sehingga  kebutuhan  benih selalu  dipasok  dari  alam.  Pada  umumnya  ikan sidat  yang  dibudidayakan  berukuran  panjang tubuh  mulai  dari  ukuran  20  cm  hingga  50  cm. Menurut  Kasimoglu  (2014),  umur  3  tahun  ikan sidat  berukuran  panjang  ±23  cm,  umur  4  tahun panjang ±27 cm, umur 5 tahun panjang ±35 cm, umur 6 tahun panjang ±45 cm, dan pada umur 7 tahun panjang mencapai 50 cm.
Ikan sidat sulit matang gonad dalam kondisi budi daya sehingga pemijahan secara buatan sulit dilakukan  (Denusta et al . 2014). Berbagai pene- litian telah dilakukan dalam  upaya untuk  mema- cu  pematangan  gonad  ikan  sidat  dengan  cara memanipulasi faktor lingkungan yang berupa sa- linitas,  temperatur,  dan  induksi  hormon,  namun demikian  kematangan  gonad  tahap  akhir  sangat bergantung pada  kadar  hormon steroid (Sabet et al . 2009, Nowosad et al . 2014). Hormon steroid mempunyai  peran  yang  sangat  penting  pada proses fisiologi vertebrata, khususnya reproduksi (Zohar et al . 2001).
Penelitian  yang  dilakukan  pada  ikan  sidat subtropis A. japonica dan A. anguilla menunjuk- kan bahwa pemberian gonadotropin berpengaruh terhadap  perkembangan  gonad  (Jung  Kim et  al . 2007, Palstra et al . 2005). Induksi hormon ekso- gen  menjadi  faktor  yang  sangat  penting  untuk memacu  pematangan  gonad  ikan  sidat.  Induksi hormon  bertujuan  untuk  meningkatkan  kadar hormon  endogen  sehingga  akan  memengaruhi aktivitas  gonad.  Beberapa  hormon  yang  telah digunakan  pada  studi  terdahulu  pada  ikan  sidat sub  tropis  antara  lain, Salmon  Pituitary  Extract, -dyhidroxi-4-pregnen-3-one  pada A.  japoni- ca ( Kagawa et al . 2005), A. australis (Palstra et al . 2005, Burgerhout et al . 2011), HCG ( Human Chorionic Gonadotropin ) pada A. japonica (Ohta
&  Tanaka  1997), A.  anguilla (Gallego et  al . 2012), ekstrak pituitari ikan mas  (Rovara 2008),
PMSG, antidopamin dan estradiol-
(Toma-
soa et al . 2015) pada A. bicolor .
Peningkatan  kematangan  gonad  ikan  sidat dapat diamati dari  perubahan nilai indeks kema- tangan  gonad  (IKG),  indeks  mata,  indeks  sirip, kadar  hormon  steroid  (Nowosad et  al .  2014), diameter  telur,  fekunditas  dan  kualitas  sperma- tozoa.  Nilai  IKG A.  bicolor yang  diinduksi ekstrak hipofisis dengan dosis 0,5 yang diberikan setiap  minggu selama 10  minggu  sebesar 3,37% (Rovara et al . 2008). Nilai IKG ikan sidat betina yang  belum  matang  gonad  sebelum  beruaya berkisar antara 1-4%, sedangkan pada umumnya nilai  IKG  ikan  sidat  matang  gonad  yang  sudah beruaya mencapai 40% (Tsukamoto et al. 2011).
Keberhasilan  induksi  hormon  sangat  ber- gantung kepada respons hormonal dan kinerja re- produksi  ikan,  yang bervariasi  bergantung kepa- da titer hormon endogen. Kinerja reproduksi ikan sangat  dipengaruhi  oleh  aktivitas  kelenjar  endo- krin  yang  mensintesis  dan  mensekresi  hormon. Kelenjar  pensekresi  hormon  yang  terlibat  dalam reproduksi meliputi hipotalamus (otak), pituitari, dan gonad. Stimulus dari faktor lingkungan akan memicu hipotalamus mensintesis dan mensekresi hormon  pelepas  gonadotropin  (GnRH)  (Kagawa et  al .  2005).  GnRH  selanjutnya  memengaruhi pituitari  untuk  mensintesis  dan  melepas  hormon gonadotropin  yang  diperlukan  untuk  steroidoge- nesis  dan  perkembangan  gonad  (Yamaguchi et al .  2006).  Gonad  pada  akhirnya  akan  memberi- kan umpan balik kepada pituitari untuk mengon- trol sintesis dan pelepasan hormon gonadotropin (Yaron et  al .  2003).  Diantara  steroid  yang  dise- kresi gonad yang terlibat dalam umpan balik po- sitif  dan  negatif  pada  pituitari  adalah  estradiol-
-ketotestoterone
(11-KT) (Yamaguchi et al . 2006).
Gonadotropin  hormone  (GtH),  yaitu folicle stimulating  hormone (FSH)  dan luteinizing  hor- mone (LH)  mempunyai  peran  yang  sangat  pen- ting dalam mengatur proses reproduksi pada Ver- tebrata melalui aksi poros otak - pituitari  gonad (Yamaguchi et  al. 2006,  Oliveira et  al .  2014,
Rousseau et  al .  2014).  Pada  Teleostei,  hipotala- mus mengatur sekresi GtH melalui berbagai neu- romediator seperti Gonadotropin Releasing Hor- mone (GnRH)  dan  neurotransmitter  (dopamin, norepinephrin,  dan  serotonin).  Pada  ikan,  GtH bekerja  pada  gonad  untuk  merangsang  produksi hormon-hormon  steroid,  yang  selanjutnya  akan mengatur sintesis vitelogenin, perkembangan go- nad, kematangan gonad tahap akhir dan aktivitas reproduksi lainnya ( Levavi-Sivan et al . 2010).
GnRH-analog  merupakan  hormon  steroid yang  mengandung ekstrak  hipofisis  ikan  salmon dan antidopamin. Ekstrak salmon pituitari meru- pakan  hormon  yang  digunakan  untuk  memacu pematangan  gonad  betina,  sedangkan Human Chorionic  Gonadotropin (HCG)  digunakan  un- tuk ikan jantan ( (Kazeto et al . 2011). Pengguna- an GnRH-analog untuk induksi  ikan  sidat A. bi- color belum pernah dilakukan, dengan demikian menarik untuk dikaji bagaimana pengaruh induk- si GnRH-analog terhadap kinerja reproduksinya.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji  pe- ngaruh  induksi  GnRH-analog  terhadap  pema- tangan  gonad  ikan  sidat  dilihat  dari  perubahan nilai indeks mata, IKG, dan kadar estradiol.

## Bahan dan metode
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Juli hingga  Oktober  2014.  Obyek  penelitian  adalah ikan  sidat Anguilla  bicolor McClelland dengan ukuran panjang tubuh rata-rata 67 cm (fase silver eel ).  Ikan  uji  diperoleh  dari  nelayan  pengepul ikan  sidat  di  sekitar  Sungai  Serayu,  Kabupaten Cilacap,  Provinsi  Jawa  Tengah.  Bahan  yang
digunakan meliputi pakan ikan (ikan rucah),  hor- mon GnRH-Analog ( Syndal,  Vancouver  Cana-
da
-es-
tradiol (REF 30 330 - BioMarieux, Inc. Perancis).
Alat  yang  digunakan  yaitu  mikrosentrifuga,  ta- bung sentrifuga, akuarium fiber, freezer , alat be- dah, timbangan teknikal, dan timbangan analitik.
Percobaan  dilakukan  dalam  skala  laborato- rium, menggunakan rancangan acak lengkap  de- ngan tiga perlakuan dosis hormon GnRH-Analog
(0,  0,5, dan 1 ml kg -1 bobot badan (bb), masing- masing perlakuan diulang sebanyak delapan kali. Ikan sidat terlebih dahulu diaklimasi selama satu minggu  pada  bak  fiber  berdiameter  125  cm  dan tinggi 70 cm serta diisi air sebanyak 300 liter. Se- lama aklimasi ikan sidat diberi pakan ikan rucah secara ad libitum .
Setelah  aklimasi  ikan  ditempatkan  dalam akuarium  fiber  berukuran  100  x  100  x  130  cm 3 sesuai dengan perlakuan yang dicobakan dengan padat  penebaran  8  ekor.  Ikan  diberi  pakan  ikan rucah  satu  kali  sehari  yaitu  pada  pukul  16.00 sebanyak  3%  dari  biomassa  ikan  dan  dipelihara selama delapan minggu. Penyuntikan hormon di- lakukan secara  intraperitonial pada bagian abdo- men  ikan  dengan  menggunakan  hormon GnRH- Analog (0,  0,5  dan  1  ml  kg -1 bb)  setiap  minggu sekali selama delapan minggu. Variabel yang di- amati  adalah    indeks  mata,    indeks  kematangan gonad (IKG), dan kadar estradiol.
Preparasi  sampel  darah  untuk  analisis  hor- mon dilakukan di  Laboratorium Fisiologi Hewan Fakultas Biologi Unsoed, Purwokerto. Pengukur- an kadar estradiol dengan metode ELISA dilaku- kan di Laboratorium Medico, Purwokerto.
Pengukuran  indeks  mata  dilakukan  meng- gunakan  penggaris  dengan  mengukur  diameter orbital secara horisontal dan vertikal. Rumus per- hitungan indeks mata mengacu pada Yokouchi et al . (2009):
Indeks mata : {(A + B)/4} 2
Keterangan: A= diameter orbital  horisontal (mm), B= diameter  orbital  vertikal  (mm),  TL=  panjang  tubuh total (mm)
Sebelum dilakukan pengambilan sampel da- rah, ikan sidat dibius terlebih dahulu mengguna- kan eugenol dengan dosis 50 ppm selama 30 me- nit  (Rachmawati  &  Susilo  2009).  Setelah  ping- san,  ditimbang  bobotnya  dan  diukur  panjangnya lalu  diambil  darahnya  melalui  pembuluh  darah kaudal  dengan  menggunakan  siring  berukuran  1 ml.  Darah  yang  diperoleh  dimasukkan  kedalam tabung mikro sentrifuga, kemudian darah dibiar- kan membeku pada suhu ruang selama 30 menit. Selanjutnya darah disimpan selama ±12 jam pada suhu  4°C,  setelah  itu  disentrifugasi  selama  15 menit dengan kecepatan 3500 rpm untuk menda- patkan  serum.  Serum  darah  yang  dihasilkan  di- masukkan ke dalam tabung mikro sentrifuga dan disimpan  pada  suhu  20°C,  selanjutnya  diguna- kan untuk analisis kadar hormon etradiol dengan metode ELISA.
Ikan  sidat  yang  telah  diambil  darahnya  lalu dibedah  untuk  diisolasi  gonadnya.  Gonad  ditim- bang bobotnya untuk  menghitung nilai  IKG (In- deks Kematangan Gonad) (Kagawa 2005):
IKG = (bobot gonad / bobot tubuh) x 100 Data hasil penelitian yang berupa indeks ma- ta, IKG, dan kadar estradiol diuji dengan analisis ragam ( Anova ) , dengan tingkat kepercayaan 95%
(Steel & Torrie 1981).

## Hasil
Berdasarkan  hasil  penelitian  terhadap  ikan sidat yang diinduksi GnRH-analog dengan dosis
0,  0,5  dan  1  ml  kg -1 bb,  diperoleh  nilai  indeks mata  rata-rata  ikan  masing-masing  8,7;  7,5;  dan 7,4  (Gambar  1),  nilai  IKG    rata-rata  masing- masing  perlakuan  adalah  1,78%,  1,23%,  dan 1,26% (Gambar 2), dan kadar estradiol berturut- turut adalah 0,67 ng ml -1 , 0,25 ng ml -1 , dan 0,22 ng ml -1 (Gambar 3).
Gambar 1 Rata-rata nilai indeks mata Anguilla bicolor McClelland yang diinduksi dengan GnRH-Analog dosis  0,  0,5  dan  1  ml  kg -1 bb.  Huruf  yang  sama  di  atas  kolom  menunjukkan  hasil  yang  tidak berbeda nyata (P>0,05)
0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 0 0.5 1 In de ks m at a Dosis GnRH-Analog (ml kg -1 bb) a a a
Gambar  2  Rata-rata  nilai  indeks  kematangan  gonad Anguilla  bicolor McClelland  yang  diinduksi  dengan GnRH-Analog dosis 0, 0,5 dan 1 ml kg -1 bb. Huruf yang sama di atas kolom menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata (P>0,05)
Gambar  3    Rata-rata  kadar  estradiol Anguilla  bicolor McClelland  yang  diinduksi  dengan  GnRH-Analog dosis  0,  0,5  dan  1  ml  kg -1 bb    Huruf  yang  berbeda  di  atas  kolom  menunjukkan  hasil  yang berbeda nyata (P<0,05)
Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa perlakuan  induksi  GnRH-analog  berpengaruh tidak  nyata  terhadap  indeks  mata  dan  IKG  (P  > 0,05)  dan  berpengaruh  sangat  nyata  terhadap penurunan  kadar  estradiol  (P<  0,05).  Induksi GnRH-analog dengan dosis 0,5 dan 1 ml kg -1 bb belum  efektif  memacu  kematangan  gonad  ikan.
Hal  ini  dapat  dilihat  dari  nilai  indeks  mata  dan IKG  yang  relatif  sama  pada  setiap  perlakuan (Gambar  1  dan  2).  Sementara  kadar  estradiol pada  perlakuan  yang  diinduksi  GnRH-analog dengan  dosis  0,5  dan  1ml  kg -1 bb  lebih  rendah dibanding  perlakuan  kontrol  (0  ml  kg -1 bb) (Gambar 3).
0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 0 0.5 1 In de ks k em at an ga n go na d Dosis GnRH-Analog (ml kg -1 bb) a a a b b a

## Pembahasan
Ikan  sidat  yang  digunakan  pada  penelitian ini berada pada fase pubertas ( silver eel ). Namun, tidak  seperti pada  ikan  umumnya,  meskipun  su- dah memasuki fase pubertas, ikan sidat belum si- ap memijah karena untuk memijah ikan tersebut harus  beruaya  ke  perairan  laut.  Selama  beruaya, gonad  ikan  sidat  akan  mengalami  pematangan sampai  tercapai  kematangan  gonad  tahap  akhir dan siap untuk memijah (Van den Thillart & Du- four  2009).  Dengan  demikian  induksi  hormonal yang  dilakukan  pada  ikan  sidat  hanya  bertujuan memacu  kematangan  gonad  tahap  awal,  karena secara alami di alam sidat butuh waktu yang cu- kup  lama  untuk  mencapai  kematangan  gonad tahap awal bila tanpa manipulasi faktor lingkung- an maupun hormonal (Nowosad et al . 2014)
Nilai  indeks  mata  akan  meningkat  sejalan dengan  peningkatan  kematangan  gonad,  selain itu pada saat ikan  sidat  beruaya  ke perairan laut indeks mata juga akan meningkat. Nilai rata-rata indeks mata pada masing-masing perlakuan ada- lah 8,87 (kontrol), 7,52  (induksi   GnRH-analog 0,5 ml kg -1 bb), dan 7,43 (induksi GnRH-analog 1 ml kg -1 bb). Nilai indek mata yang berkisar an- tara  7,52-8,87  menunjukkan  bahwa  ikan  sidat yang digunakan dalam penelitian ini berada pada fase pubertas ( silver eel ). Menurut Beullens et al . (1997),  nilai  indeks  mata  >6,7  sudah  mencapai fase pubertas. Meskipun pada penelitian ini ikan sidat  sudah  mencapai  fase  pubertas,  namun  be- lum mencapai matang gonad. Pematangan gonad akan berlangsung seiring dengan proses ruaya ke perairan laut  (Van den Thillart & Dufour 2009). Nilai  indeks  mata  pada A.  anguilla yang  sudah matang  gonad  sebesar  15,75  (Mordenti et  al . 2012).
Nilai  IKG  ikan  sidat  pada  masing-masing perlakuan  relatif  sama  tidak  berbeda  nyata (p>0,05)  masih  di  bawah  2%,  sedangkan  ikan
sidat  fase  silver  di  alam  mempunyai  nilai  IKG 2,88% (Rachmawati & Susilo 2012). Hasil pene- litian  Rovara et  al .  (2008)  yang  menggunakan ekstrak  hipofisis  ikan  mas  dengan  dosis  ½,  ber- hasil  memacu  kematangan  gonad  yang  tecermin pada  peningkatan  nilai  IKG  hingga  mencapai 3,37%.
Nilai  indeks  mata  dan  IKG  antar  perlakuan tidak  berbeda  nyata  menunjukkan  bahwa  dosis GnRH-analog  yang diberikan belum mampu me- macu  peningkatan  kematangan  gonad.  Diduga dosis hormon yang diberikan  tidak tepat melam- paui batas optimum, karena pada umumnya pem- berian  GnRH-analog  untuk  ikan  adalah  0,3  ml kg -1 bb. Penelitian yang dilakukan pada ikan lele dumbo, induksi GnRH-analog   dengan dosis 0,3 ml kg -1 bb memberikan hasil yang lebih baik ter- hadap  lama  waktu  pemijahan,  daya  tetas  telur dan  sintasan  larva  dibanding  dengan  dosis  0,6 dan 0,93 ml kg -1 bb (Sinjal 2014).
Induksi  hormon  eksogen  yang  tinggi  akan menjadi umpan balik negatif bagi sekresi GnRH endogen, sehingga sekresi hormon eksogen men- jadi  terhambat  (Moyes  &  Schulte  2008).  Ke- mampuan  kelenjar  hipofisis  anterior  untuk  bere- aksi terhadap pemberian hormon GnRH tidak se- lalu sama. Dosis yang tinggi  akan menyebabkan terhentinya produksi  gonadotropin, setelah terle- bih  dahulu  mengalami  periode  perangsangan awal  ( initial  stimulation/flare-up  effect )  (Supar- man & Suparman 2016).
Pada ikan sidat betina, nilai IKG berkorelasi positip dengan titer hormon estradiol. Pada pene- litian  ini  dapat  dipastikan  bahwa  jenis  kelamin ikan sidat  yang digunakan  merupakan ikan beti- na. Jenis kelamin ikan betina mudah dikenali dari bentuk  morfologi  gonad  berupa  lamela,  sedang- kan ikan sidat jantan mempunyai struktur gonad berupa lobulus.
Hasil  pengukuran  kadar  estradiol  rata-rata pada  masing-masing  perlakuan  berturut-turut yaitu 0,67 ng ml -1 , (kontrol), 0,25 ng ml -1 (induk- si GnRH-analog 0,5ml kg -1 bb) dan 0,22 ng ml -1
(induksi  GnRH-analog  1  ml  kg -1 bb).  Kadar  es- tradiol akan meningkat seiring dengan peningkat- an  kematangan  gonad  yang  tercermin  pada  nilai IKG (Rachmawati & Susilo 2011). Estradiol ber- peran  pada  kematangan  gonad  dan  merangsang sintesis vitelogenin di hati, sebagai prekusor yolk untuk menyokong pertumbuhan oosit (Kagawa et al . 1981, Matsubara et al . 2005, Levavi-Sivan et
al . 2010, Kazeto et al . 2011).
Perlakuan  induksi  memberikan  kadar  estra- diol yang lebih rendah dibanding perlakuan kon- trol . Diduga  frekuensi  induksi  setiap  minggu sekali  memacu  kondisi  stres  bagi  ikan  sehingga berpengaruh terhadap kinerja reproduksinya. Hal ini  dikarenakan  pada  penelitian  ini  tidak  dilaku- kan  pembiusan  pada  saat  induksi,  sehingga  ber- dampak stress bagi ikan.
Dugaan  adanya  stres  pada  ikan  sidat  tecer- min dari rendahnya kadar estradiol pada peneliti- an ini yaitu masing-masing 0,25 ng ml -1 (induksi GnRH-analog  0,5ml  kg -1 bb) dan  0,22  ng  ml -1
(induksi  GnRH-analog  1  ml  kg -1 bb)  dibanding dengan  kadar  estradiol  ikan  sidat  yang  tidak  di- beri perlakuan induksi sebesar 0,67 ng ml -1 . Stres pada ikan dapat dipicu oleh aktivitas transportasi, penanganan  ikan  pada  kondisi  budi  daya,  dan faktor-faktor  lingkungan.  Perlakuan  induksi  me- rupakan  salah  satu  faktor  yang  dapat  memicu stres bagi ikan apabila tidak diikuti dengan pem- biusan.
Induksi  GnRH-analog  dengan  dosis  0,  0,5 dan  1  ml  kg -1 bb  terhadap  ikan  sidat  fase  silver pada  penelitian  ini  tidak  berpengaruh  terhadap peningkatan  kematangan  gonad.  Hal  ini  diduga karena  tingginya  dosis  hormon  yang  diberikan sehingga  menjadi  umpan  balik  negatif    bagi  se-
kresi hormone endogen (Moyes & Schulte 2008). Selain  itu,  perlakuan  induksi  yang  tidak  diikuti dengan pembiusan memicu stres pada ikan sidat.
Stres  ikan  pada  perlakuan  induksi  dapat  di- kurangi dengan pemberian obat bius (Tomasoa et al. 2015, Zahri et al . 2015). Obat bius atau anes- tesi mampu menghambat kerja kortikosteroid se- hingga sekresi kortisol sebagai respon stres  pada hewan dihambat (Husen & Sarma 2014). Berda- sarkan hasil penelitian ini maka disarankan untuk membius ikan sebelum diinduksi.

## Simpulan
Induksi GnRH-Analog dengan dosis 0,5 dan 1 ml kg -1 bb tidak berpengaruh terhadap  pening- katan  kematangan  gonad  ikan  sidat Anguilla bicolor McClelland yang  tercermin  pada  nilai indeks  mata,  indeks  kematangan  gonad,  dan  ka- dar estradiol yang masih rendah.

## Persantunan
Penulis mengucapkan terima kasih yang tak terhingga  kepada  Kementerian  Riset,  Teknologi, dan Pendidikan Tinggi yang mendanai penelitian ini  dalam  skim  penelitian  Hibah  Bersaing  tahun Anggaran 2014/2015.

## Daftar pustaka
Beullens K, Eding EH, Gilson P, Ollevier F, Ko- men  J  &  Richter  CJJ.  1997.  Gonadal  diffe- rentiation,  intersexuality  and  sex  ratios  of European  eel  ( Anguilla  anguill L)  main- tained  in  captivity. Aquaculture, 153(1-2):
135-150.
Burgerhout E, Brittijn SA,  Kurwie T, Decker P, Dirks  RP,  Palstra  AP,  Spaink  HP,  Van  den Thillart GEEJM. 2011. First artificial hybrid of  the  eel  species Anguilla  australis and Anguilla anguilla . BioMed Central  Develo- pmental Biology , 11(16): 1-9.
Gallego  V,  Mazzeo  I,  Vilchez  MC,  Penaranda DS,  Carneiro  PCF,  Perez  L,    Asturiano  JF. 2012. Study of the effects of thermal regime and  alternative  hormonal  treatments  on  the reproductive  performance  of  European  eel
males  ( Anguilla  anguilla )  during  induced sexual  maturation. Aquaculture ,  354(1):  7- 16.
Geffroy B, Fostier A, Guiguen Y,   Bardonnet  A. 2012.  Unusual  cases  of  adult  intersexuality in the European eel Anguilla Anguilla. Sexu- al Development , 6(6): 316-319.
Denusta  PJT,  de  Jesus-Ayson  EGT,  Laron  MA, Garcia LMB. 2014. Effects of human chori- onic  gonadotropin  (HCG)  and  handling stress  on  spermiation  of  silver  perch Leio- potherapon plumbeus (Kner, 1864). Journal of Applied Ichthyology , 30(3): 448-453.
Husen MdA, Sharma S. 2014.  Efficacy of anes- thetics  for  reducing  stress  in  fish  during aquaculture practices - A Review. Journal of Science,  Engineering  and  Technology, 10(1): 104-123
Jung  Kim  D,  Young  Bae  J,  Oh  Kim  E.  2007. Changes  in  sex  steroid  hormones  and  ova- rian development during artificial maturation of female eel, Anguilla japonica. Integrative Biosciences , 11(2): 117-124.
Kagawa H, Takano K, Nagahama Y. 1981. Cor- relation of plasma estradiol-17  and proges- terone  levels  with  ultrastructureand  histo- chemistry  of  ovarian  follicles  in  the  white- spotted  char, Salvelinus  leucomaenis.  Cell and Tissue Research, 218(2): 315-329.
Kagawa  H,  Tanaka  H,  Ohta  H,  Unuma  T,    No- mura K. 2005. The first success of glass eel production  in  the  world:  Basic  biology  on fish  reproduction  advances  new  applied technology  in  aquaculture. Fish  Physiology and  Biochemistry , 31(2-3): 193-199.
Kasimoglu  C.  2014.    The  Effect  of  Fish  Size, Age and condition  factor on the contents of seven essential elements in Anguilla anguilla from  Tersakan  Stream  Mugla  (Turkey). Journal of Pollution Effects & Control, 2(2): 123-129.
Kazeto Y, Tosaka R, Matsubara H, Ijiri S, Ada- chi S. 2011. Ovarian steroidogenesis and the role  of  sex  steroid  hormones  on  ovarian growth  and  maturation  of  the  Japanese  eel. Journal  of  Steroid  Biochemistry  and  Mole- cular Biology, 127(3-5): 149-154.
Levavi-Sivan B, Bogord J, Monanos EL, Gomes A,  Laroyne  JJ.  2010.  Perspectives  on  fish gonadotropins  and  their  receptors. General and  Comparative  Endocrinology , 165(3):
412-437.
Matsubara H, Lokman PM, Kazeto Y, Adachi S, Yamauchi K. 2005. Serum steroid profiles in artificially  maturing  female  Japanese  eel,
Anguilla  japonica . Aquaculture ,  243(1-4):
392-402.
Mordenti  O,  Di  Biase  A,  Sirri  R,  Modugno  S, Tasselli  A.  2012.  Induction  of  sexual  ma- turation  in  wild  female  European  eels  ( An- guilla  anguilla )  in  darkness  and  light. The Israeli Journal of Aquaculture , 64(1): 1-9.
Moyes CD, Schulte PM. 2008. Principles of Ani- mal  Physiology ,  second  edition.  Pearson, Benjamin  Cummings,  San  Francisco,  Bos- ton, New York. 754 p
Nowosad  J,  Kucharczyk  D,  Czarkowski  TK, Kwasek  K.  2014.  Changes  in  body  weight and  eye  size  in  European  eel  kept  in  fresh and  salt  water. Italian  Journal  of  Animal Science , 13(2): 382-386.
Ohta  H,  Tanaka  H.  1997.  Relationship  between serum levels of human chorionic gonadotro- pin  (hCG)  and  11-ketotestosterone  after  a single injection of hCG and induced maturi- ty  in  the  male  Japanese  eel, Anguilla  japo- nica. Aquaculture , 153(1-2): 123-134.
Oliveira AD, Levavi-Sivan B, Aizin J, Gonzalves J, Fernandez-Duran  B, Coimbra J. 2014. Pi- tuitary  Follicle-stimulating  hormone  (FSH) and luteinizing hormone (LH) levels in  ma- turing female flounder Platichthys flesus un- der  hydrostatic  pressure  simulating  vertical migrations. Marine Biology Research , 10(1):
85-92.
Palstra AP, Cohen EGH, Niemantsverdriet PRW, van  Ginneken  VJT,  van  den  Thillart GEEJM. 2005. Artificial  maturation and re- production of Europian silver eel : Develop- ment  of  oocytes  during  final  maturation.
Aquaculture , 249(1-4): 533-547.
Rachmawati FN, Susilo U. 2009. Perkembangan gonad  ikan  sidat, Anguilla  bicolor ditinjau dari titer hormon gonadotropin. Sains Akua- tik 10(2): 148-154.
Rachmawati  FN,  Susilo  U.  2011. Profil  hormon dan  kinerja  reproduksi  ikan  sidat, Anguilla bicolor McCleland. Biota , 16(2): 221-226.
Rachmawati FN, Susilo U.2012. Kajian histologi ovarium ikan sidat Anguilla bicolor McClel- land yang tertangkap di Segara Anakan Cila- cap. Berkala  Penelitian  Hayati ,  18(1):  47- 49.
Rousseau  K,  Lafont  AG,  Pasquier  J,  Mauger  G, Jolly  C, Sebert  ME,  Aroua  S, Pasqualini C, Dufour  S.  2014.  Advances  in  eel  reproduc- tive physiology and endocrinology. In : Tris- chitta F, TakeiY, Sebert P (Editor). Eel Phy- siology. CRC  Press.  Taylor  &  Francis Group, New York. pp. 1-42.
Rovara O,  Affandi  R,  Zairin  Yunior M,  Agung- priyono S, Toelihere MR. 2008. Pematangan gonad  ikan  sidat  betina  ( Anguilla  bicolor bicolor) melalui  penyuntikan  ekstrak  hipo- fisasi . Jurnal  Ilmu-ilmu  Perairan  dan  Peri- kanan Indonesia , 15(1): 69-76.
Sabet S, Imanpoor S, Mohammad, Reza, Fatideh A,  Bagher,  Gorgin,  Saeed.  2009.  Study  on sexual  maturity  and  levels  of  gonad  steroid hormones in  female kutum Rutilus frisii ku- tum (Kamenskii,  1901)  during  spawning season  from  river  Sefid-Rood  of  the  south- ern Caspian Sea. Journal of Cell and Animal Biology , 3(11): 208-215.
Sinjal  H.  2014.  Efektifitas  ovaprim  terhadap  la- ma  waktu  pemijahan,  daya  tetas  telur  dan sintasan  larva  ikan  lele  dumbo, Clarias  ga- riepinus. Budidaya Perairan , 2(1): 14-21
Steel RGD, Torrie JH. 1981. Principles and Pro- cedures of Statistic a Biometrical Approach , 2 nd edition.  Mc  Graw  Hill  Book  Company, Singapore. 672 p
Sudo  R,  Fukuda  N,  Aoyama  J,  Tsukamoto  K. 2013.  Age  and  body  size  Of  Japanese  eels,
Anguilla  japonica ,  at  the  silver-stage  in  the Hamana  Lake  system,  Japan. Coastal  Ma- rine Science , 36(1): 13-18.
Suparman  E,  Suparman  E.  2016 . Peran  GnRH agonis . Jurnal Biomedik, 8(1): 1-7
Tomasoa  AM,  Sudrajat  AO,    Zairin  Yunior  M. 2015.  Induksi  pemetangan  gonad  ikan  sidat menggunakan  PMSG,  antidopamin,  dan  es- tradiol- Jurnal  Akuakultur  Indonesia ,
14(2): 112-121.
Tsukamoto  K,  Chow  S,  Otake  T,  Kurogi  H, Mochioka  N,  Miller  M,  Aoyama  J,  Kimura S,  Watanabe  S,  Yoshinaga  T,  Shinoda  A, Kuroki  M,    Oya  M,  Watanabe  T,  Hata  K, Ijiri S,  Kazeto Y, Nomura K, Tanaka & H. 2011.  Oceanic  spawning  ecology  of  fresh- water eels in the western North Pacific. Na- ture Communications , 2(179): 1-9.
Van den Thillart G, Dufour S. 2009. How to esti- mate  the  reproductive  succes  of  European silver eels. In : Van den Thillart G, Rankin J, Dufour  S  (editor). Spawning  Migration    of the European Eel . Springer, Netherland. pp. 3-9
Yamaguchi  S,  Gen  K,  Okuzawa  K,  Matsuyama M, Kagawa H. 2006. Influence of estradiol- -ketotestosterone on  testicular  development,  serum  steroid hormone and gonadotropin secretion in male red  sea  bream Pagrus  major.  Fisheries Science , 72(4): 835-845.
Yaron Z,  Gur G,  Melamed  P, Rosenfeld  H, Eli- zur A, Levavi-Sivan B. 2003. Regulation of fish  gonadotropins. International  Review  of Cytology , 225(1): 131-185.
Yokouchi K, Sudo  R, Kaifu  K, Aoyama J, Tsu- kamoto  K.  2009.  Biological  characteristics of silver-phase Japanese eels, Anguilla japo- nica ,  Collected  from  Hamana  Lake,  Japan. Coastal Marine Science . 33 (1): 1-10.
Zahri  A,  Sudrajat  AO,  Zairin  Yunior  M.  2015. Pertumbuhan  gonad  sidat Anguilla  bicolor bicolor yang  diinduksi  kombinasi  hormone HCG,  MT,  E2  dan  antidopamin. Jurnal Akuakultur Indonesia , 14(1): 69-78.
Zohar Y, Mylonas CC. 2001. Endocrine manipu- lations  of  spawning  in  cultured  fish:  from hormone  to  genes. Aquaculture , 197(1-4):
99-136.