Jurnal Pharmascience, Vol. 06 , No.01, Februari 2019, hal: 106 - 113 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience

## Research Article

## Pengaruh Pemberian Fraksi Etil Asetat Buah Kasturi ( Mangifera casturi Kosterm.)

## Terhadap Gambaran Makroskopis-Mikroskopis Organ Hati Tikus Putih Jantan
*Sutomo 1,2 , Muhammad Rafi 1 , Arnida 1
1 Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat
2 Pusat Studi Obat Berbasis Bahan Alam Universiitas Lambung Mangkurat Email : sutomo01@ulm.ac.id

## ABSTRAK
Kasturi  ( Mangifera  casturi Kosterm)  merupakan  tumbuhan  khas  Kalimantan Selatan  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menentukan  gambaran  makroskopis  (warna  dan  volume)  organ  hati  serta  perubahan histopatologi  sel  hati  (degenerasi  parenkimatosa,  degenerasi  hidropis,  dan  nekrosis) pada tikus setelah diberikan fraksi etil asetat buah M. casturi secara peroral. Penelitian ini  berupa  penelitian  eksperimental  dengan  rancangan post  test  only  control  group design . Hewan dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol (Na-CMC 0,5%) dan kelompok  perlakuan  (5,  50,  300,  dan  2000  mg/kgBB).  Setiap  kelompok  terdiri  dari  5 tikus  putih  jantan  yang  diberikan  perlakuan  1  kali  selama  14  hari,  setelah  itu  tikus dibedah  dan  diambil  organ  hati  untuk  diamati.  Hasil  analisis Kruskal  Wallis menunjukkan  bahwa  pemberian  fraksi  etil  asetat  buah M.  casturi pada  gambaran makroskopis  (volume)  hati  tidak  berbeda  bermakna  antara  kelompok  kontrol  dan perlakuan (p > 0,05). Hasil analisis One-Way ANOVA pada gambaran mikroskopis hati menunjukkan  bahwa  kelompok  kontrol  dan  perlakuan  tidak  terdapat  perbedaan bermakna.
Kata kunci : Mangifera casturi, fraksi etil asetat, toksisitas, degenerasi, nekrosis

## ABSTRACT
Kasturi (Mangifera casturi Kosterm.) is the typical plants of South Kalimantan that contains  antioxidant  activity.  The  aim  of  this  study  was  to  determine  the  macroscopical representative  (color  and  volume)  of  rats  liver  and  the  microscopical  representative  of hepar cells (parenchymatous degeneration, hydropic degeneration, and necrosis) after oral administration of ethyl acetate fraction of M. casturi fruit. This study was an experimental study  with  post-test  only  control  group  design.  Test  animals  were  divided  into  5  groups consisted of a control group (CMC Na 0,5%), and treatment groups (5, 50, 300, and 2000
mg/kg bw). Each group consisted of 5 the male white rats which were treated once for 14 days.  And  then  the  rats  were  dissected,  the  liver  were  taken  out  to  make  preparations  of histopathological examination and observation. The results of Kruskal Wallis showed that ethyl acetate fraction of M. casturi fruit had no difference on macroscopical representation of the liver.
Keywords : Mangifera casturi, ethyl acetate fraction, toxicity, degeneration, necrosis

## I. PENDAHULUAN
Kasturi  ( Mangifera  casturi Kosterm) adalah tumbuhan endemik khas
Kalimantan Selatan yang berpotensi dikembangkan  sebagai  antioksidan  alami.
Penelitian Sutomo et al (2014)
membuktikan bahwa fraksi etil asetat buah
M. casturi mengandung senyawa golongan fenolik  dengan  nilai  IC 50 sebesar  6,0 µg/mL. Kandungan ini juga diperkuat oleh hasil isolasi pada fraksi etil asetat buah M.
casturi ,  yaitu  adanya  senyawa  metil  galat
(Sutomo,  2014).  Senyawa  berkhasiat
antioksidan  dari  fraksi  etil  asetat  buah M.
casturi ini sebelum dikembangkan menjadi obat  tradisional  yang  terstandar  perlu dipastikan  terlebih  dahulu  keamanannya bagi  tubuh  karena  selain  didapatkan  efek farmakologi,  kemungkinan  juga  dapat terjadi efek toksik pada organ-organ tubuh vital  manusia  dan  kadar  toksiknya  pun berbeda  sesuai  konsentrasi  senyawa  yang diberikan (Dewanto, 2007).
Organ  yang  biasanya  menjadi  sasaran akumulasi  toksikan  ini  adalah  hati.  Hati merupakan  organ  terbesar  dan  secara metabolisme paling kompleks dalam tubuh
sehingga  terlibat  dalam  metabolisme  zat makanan dan sebagian besar obat  maupun toksikan  (Lu,  2010).  Beberpa  obat  bahan alam  memiliki  efek  toksik  diantaranya adalah  R-enantiomer  dari   persin,  suatu rantai  panjang,  senyawa  yang  tidak berkapsul  yang  telah  diisolasi  dari  daun alpokat  (Oerlichs  et  al.,  1995).  Pemberian dosis oral dari persin kepada mencit (60  – 100  mg/kg  bb)  menimbulkan  nekrosis kelenjar  susu  dalam  beberapa  jam  saja. Pada dosis yang lebih tinggi (>100 mg/kg) maka  nekrosis  miokardium  akan  muncul. Gejala klinis mastitis terjadi dalam 24 jam setelah diberi daun alpokat.
Uji  toksisitas  akut  merupakan  salah satu prasyarat formal keamanan calon obat herbal terstandar dan fitofarmaka.
Penilaian  toksisitas  akut  ditentukan  dari kematian  hewan  uji  sebagai  parameter akhir. Hewan yang mati selama percobaan dan  yang  masih  hidup  sampai  akhir percobaan  dibedah  untuk  mengevaluasi gejala-gejala  ketoksikan  yang  mungkin ada,  selanjutnya  dilakukan  pemeriksaan organ  tertentu  dari  hewan  uji  tersebut (BPOM  RI,  2014).  Berdasarkan  informasi
tersebut,  maka  perlu  dilakukan  penelitian mengenai  pengaruh  pemberian  fraksi  etil asetat buah M. casturi terhadap organ hati dan ginjal tikus putih jantan

## II. METODE

## A. Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  :  batang pengaduk,  botol  minum  hewan,  blender, corong, hotplate (Stuart), kaca objek, kaca penutup, kandang tikus, mikroskop (Olympus  CX21),  mikrotom  (Microtec), oven  (Thermologic),  pinset,  pipet  tetes, pisau  bedah,  seperangkat  alat-alat  gelas (Pyrex  Iwaki),  sonde  lambung,  spuit, timbangan  analitik  (AND  GF  3000), timbangan  hewan  (AA  Adam),  toples kaca, wadah  bius,  dan waterbath (Smic) .
Bahan-bahan  yang  digunakan  :  buah M.
casturi ,  akuades,  alumunium  foil,    etanol
70%, etanol 80%, etanol 90%, etanol 96%,
etanol  100%  (p.a),  eter,  etil  asetat  (p.a),
kertas saring, larutan buffer formalin 10%,
NaCl,  Na-CMC,  paraffin block ,  pewarna hematoksilin-eosin, dan xylol.

## B. Desain Penelitian
Penelitian ini berupa penelitian
eksperimental  dengan  pendekatan Post
Test Only Control Group Design
menggunakan  tikus  putih  jantan  wistar sebagai hewan uji/objek penelitian.

## Preparasi Sampel (Ekstrak dan Fraksi)
Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan metode  maserasi  menggunakan  pelarut
etanol 96% kemudian difraksinasi bertingkat dengan pelarut n- heksan dan etil asetat  berturut-turut  hingga  didapatkan fraksi etil asetat kental.

## C. Perlakuan Terhadap Hewan Uji
Tikus sebanyak 25 ekor dibagi menjadi 5  kelompok  (masing-masing  5  ekor)  yang terdiri  dari  kelompok  kontrol  (Na-CMC 0,5%)  dan  kelompok  perlakuan  (5,  50,
300, dan 2000 mg/kgBB) (Anonim, 2001).
Pemberian  fraksi  etil  asetat  buah M. casturi dilakukan secara oral dengan single dose menggunakan sonde kemudian diamati  selama  14  hari.  Tikus  dibedah pada hari ke-15 untuk diambil dan diamati organ hatinya.

## D. Evaluasi makroskopis organ hati
Pemeriksaan ini dilakukan dengan:
1. Mengukur  volume  organ  dengan memasukkan  organ  hati  ke  dalam gelas  ukur  yang  berisi  akuades.
Volume  organ  diukur  dari  selisih kenaikan  volume  akuades  pada  gelas ukur (Amalina, 2009).
2. Mengamati  perubahan  warna  organ (Robbins  &  Kumar,  1992;  Indriani,
2016)

## E. Evaluasi  Mikroskopis  Organ  Hati Hewan Uji
Pembuatan preparat histopatologi organ  hati  hewan  uji  dilakukan  secara bertahap sebagai berikut: fiksasi, dehidrasi,  pencetakkan,  pemotongan  dan
pewarnaan Hematoksilin-Eosin (HE). Pengamatan dilakukan dengan
menggunakan  mikroskop  cahaya  pada
perbesaran  400x  sebanyak  5  lapang pandang  tiap  organ.  Penilaian  terhadap perubahan mikroskopis organ hati
dilakukan dengan skoring (nilai)
berdasarkan perubahan terjadi.
Menurut Hapsari (2010), sasaran yang dibaca  pada  organ  hati  adalah  perubahan struktur  sel  hepar.  Setiap  lapang  pandang dihitung 20 sel hepatosit, kemudian dinilai skor tiap sel dan dihitung nilai rerata jenis perubahan  dengan  mengalikan  jumlah  sel sesuai  dengan  kategorinya  dengan  skor yang ada (Tabel I).
Tabel  I. Parameter  skoring  evaluasi histopatologi  hati  tikus  model skoring  Histopathology  Manja Roenigk (Roenigk et al., 1973) Perubahan Skor Normal (tidak ada perubahan) 1 Degenerasi Parenkimatosa 2 Degenerasi Hidropis 3 Nekrosis 4

## F. Analisis Data
Pengamatan  makroskopis  (volume  organ), pengamatan  mikroskopis  organ  hati  (sel hepar), diuji normalitas ( Shapiro-Wilk ) dan uji  homogenitas  ( Levene’s  Test ) . Data yang  diperoleh  diuji  dengan One-Way
ANOVA atau Kruskal-Wallis , dan
dilanjutkan  dengan Post  Hoc atau Mann-
Whitney (Bhara, 2009).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Ekstrak Etanol 96% dan Fraksi Etil

## Asetat Buah M. casturi
Hasil  ekstrak  yang  didapat  dari  1528 gram  serbuk  yaitu  sebesar  510  gram (33,37%)  dan  fraksi  etil  asetat  yang didapat sebanyak 40,6  gram (7,96%).

## B. Pengamatan Organ Hati Tikus

## Makroskopis Hati
Hasil pengamatan secara makroskopis organ hati tikus dapat dilihat pada Tabel 2 dan Gambar 1.
Hasil  yang  didapatkan  adalah  dari kelompok  kontrol,  dosis  5  mg/kgBB,  50 mg/kgBB,  300  mg/kgBB,  dan  2000 mg/kgBB  memiliki  sebaran  data  yang tidak  normal  dan  homogen.  Hasil  analisis volume  organ  hati  menunjukkan  bahwa volume  organ  hati  tikus  pada  kelima kelompok perlakuan tidak berbeda bermakna.  Menurut  Robbins  &  Kumar (1992),  hati  yang  normal  memiliki permukaan  rata  dan  halus  serta  berwarna merah  kecoklatan,  sedangkan  hati  yang abnormal mengalami perubahan warna dan permukaan  berbintik.  Hal  ini  sesuai dengan  hasil  yang  didapatkan  pada pengamatan  warna  dan  permukaan  organ hati  tikus  yaitu  hati  berwarna  merah kecoklatan  dan  memiliki  permukaan  rata dan halus.

## Tabel 2. Hasil Pengamatan Gambaran Makroskopis Hati
Kelompok Tikus Ke- Pengamatan Organ Hati Warna Permukaan Volume (mL) Kontrol 1 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 Na-CMC 0,5% 2 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 3 Merah kecoklatan Rata dan halus 8 4 Merah kecoklatan Rata dan halus 10 5 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 5 mg/kgBB 1 Merah kecoklatan Rata dan halus 11 2 Merah kecoklatan Rata dan halus 13 3 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 4 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 5 Merah sedikit pucat Rata dan halus 9 50 mg/kgBB 1 Merah kecoklatan Rata dan halus 7 2 Merah sedikit pucat Rata dan halus 9 3 Merah kecoklatan Rata dan halus 11 4 Merah kecoklatan Rata dan halus 10 5 Merah sedikit pucat Rata dan halus 9 300 mg/kgBB 1 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 2 Merah kecoklatan Rata dan halus 11 3 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 4 Merah kecoklatan Rata dan halus 10 5 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 2000 mg/kgBB 1 Merah kecoklatan Rata dan halus 11 2 Merah kecoklatan Rata dan halus 11 3 Merah kecoklatan Rata dan halus 9 4 Merah kecoklatan Rata dan halus 10 5 Merah kecoklatan Rata dan halus 9
Gambar 1. Pengamatan Makroskopis Organ Hati Tikus Putih Jantan (A : Kontrol Na-CMC 0,5%  berwarna  merah  kecoklatan;  B  :  Dosis  5  mg/kgBB  berwarna  merah kecoklatan; C : Dosis 50 mg/kgBB berwarna merah sedikit pucat; D : Dosis 300
mg/kgBB berwarna merah kecoklatan;  dan  E : Dosis  2000 mg/kgBB berwarna merah kecoklatan.
C. Mikroskopis hati
Hasil pengamatan mikroskopis organ hati tikus dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Pengamatan Mikroskopis Sel Hepatosit Organ  Hati  Tikus  Putih  Jantan  setelah pemberian  fraksi  etil  asetat  buah M.
casturi .  Sel  normal  (panah  putih)  skor 1,  degenerasi  parenkimatosa  (panah hijau)  skor  2,  degenerasi  hidropis (panah  kuning)  skor  3,  dan  nekrosis (panah merah) skor 4
Hasil  yang  didapatkan  adalah  dari kelompok  kontrol,  dosis  5  mg/kgBB,  50 mg/kgBB,  300  mg/kgBB,  dan  2000 mg/kgBB  memiliki  sebaran  data  yang normal  dan  homogen.  Hasil  analisis mikroskopis  organ  hati  menunjukkan bahwa  gambaran  histopatologi  organ  hati tikus  pada  kelima  kelompok  perlakuan tidak  berbeda  bermakna.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  Meliawati  (2018)  yang menyatakan bahwa gambaran makroskopis dan mikroskopis organ jantung tikus putih jantan  yang  diberikan  fraksi  etil  asetat buah M.  casturi tidak  terdapat  perbedaan
antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan.  Penelitian  Meilawati  (2018) juga  memperkuat  bahwa  fraksi  etil  asetat buah M.  casturi tidak  menimbulkan  efek teratogenik  terhadap  fetus  mencit  dalam pemberian dosis 250, 500, dan 1000 mg.

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan dari penelitian ini yaitu :
1. Gambaran  makroskopis  (warna  dan volume)  organ  hati  tikus  putih  jantan antara  kelompok  kontrol  dengan kelompok  perlakuan  yang  diberikan fraksi  etil  asetat  buah M.  casturi secara peroral tidak terdapat perbedaan.
2. Gambaran  histopatologi  hati  (sel hepar)  tikus  putih  jantan  antara kelompok  kontrol  dengan  kelompok perlakuan  yang  diberikan  fraksi  etil asetat  buah M.  casturi secara  peroral tidak terdapat perbedaan.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terimakasih  kepada  Ristek Dikti  melalui  pendanaan  hibah  PTUPT tahun  2016-2017  serta  semua  rekan-rekan yang berkonstribusi dalam terselesaikannya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Amalina,  N.  2009.  Uji  Toksisitas  Akut Ekstrak Valerian ( Valeriana officinale )  Terhadap  Hepar  Mencit Balb/C. Laporan  Akhir  Penelitian.
Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponegoro, Semarang.
Amaliyah,  F.R.  2015.  Uji  Toksisitas Subkronik Ekstrak Air Daun Katuk ( Sauropus  androgenus (L)  Merr.)
Terhadap Berat Jantung dan Histologi  Jantung  Tikus  Putih
( Rattus novergicus) Betina. Skripsi.
Universitas  Islam  Negeri  Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Anonim.  2001. OECD  Guideline  for Testing  of  Chemicals.  Acute  Oral Toxicity-Acute Toxic Class  Method No.423. OECD, Paris.
Azhari, A.H. 2016. Isolasi dan Identifikasi Senyawa  Antioksidan  dari  Buah
Kasturi ( Mangifera casturi Kosterm.). Skripsi. FMIPA Universitas  Lambung  Mangkurat,
Banjarbaru.
Bhara,  M.  2009.  Pengaruh  Pemberian Kopi  Dosis  Bertingkat  Per-oral  30 Hari Terhadap Gambaran Histologi Hepar  Tikus  Wistar. Tesis. FK Universitas Diponegoro, Semarang. BPOM  RI.  2014. Pedoman  Uji  Toksisitas Nonklinik  Secara  In  Vivo. Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan Republik Indonesia, Jakarta.
Dewanto, H. R. 2007. Pengembangan Obat
Tradisional Indonesia Menjadi Fitofarmaka. Majalah  Kedokteran Indonesia. 7 : 205-211.
Hapsari,  R.  A.  2010.  Pengaruh  Lama
Pemberian  Metanol  50%  Per  Oral Terhadap  Tingkat  Kerusakan  Sel Hepar  pada  Tikus  Wistar .  Tesis.
Program Pendidikan
Sarjana Kedokteran,  Fakultas  Kedokteran,
Universitas Diponegoro. Semarang.
Hidayati,  D.  2008.  Pengaruh  Penambahan Yeast  pada  Pemberian  Lamtoro
Merah  ( Acacia  Villosa )  terhadap
Histopatologi  Ginjal  Tikus  ( Rattus
Rattus ). Skripsi . Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor, Bogor. Indriani,  R.  2016.  Pengaruh  Pemberian
Ekstrak Etanol  Kulit Batang Pakan Banyu  ( Croton  argyratus Blume) Terhadap  Gambaran  Makroskopis dan  Mikroskopis  Ginjal  Tikus. Skripsi. Prodi  Farmasi  Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru. Lu,  F.  C.  2010. Toksikologi  Dasar  (Asas, Organ  Sasaran,  dan  Penilaian Risiko).  Edisi  Kedua. UI  Press, Jakarta.
Meilawati,  D.  2018.  Uji  Teratogenik
Fraksi  Etil  Asetat  Buah  Kasturi (Mangifera casturi Kosterm) Terhadap Fetus Mencit ( Mus muscullus ).
Skripsi . FMIPA Universitas  Lambung  Mangkurat,
Banjarbaru. Meliawati,  G.  2018.  Pengaruh  Pemberian Fraksi  Etil  Asetat  Buah  Kasturi (Mangifera casturi Kosterm) Terhadap Toksisitas Akut, Makroskopis dan Mikroskopis Jantung Tikus Putih Jantan. Skripsi . FMIPA Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru. Nelly.  2013.  Efek  Nefroprotektif  Fraksi Etil Asetat Daun Kesum
( Polygonum  minus Huds.)  pada Tikus  Jantan  Galur  Wistar  ( Rattus norvegicus ) yang Diinduksi
Sisplatin. Skripsi. Universitas Tanjungpura, Pontianak.
Oerlichs  P.  B.,  Jack  C.  Ng.,  Seawright A.A.,  Ward  A.,  Schaffeler  L., Macleod  J.K.,  1995.  Isolation  and identification  of  a  compound  from avocado ( Persea americana ) leaves which causes necrosis of the acinar epithelium of the lactating mammary gland and the myocardium.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pub med/8581318,  diakses  tanggal  28 Februari 2019.
Robbins  &  Kumar .  1992. Buku  Ajar Patologi 1. Edisi 4. EGC, Jakarta.
Roenigk, H.H, JrMaibach H.I., Weinstein G.P. 1973. Methotrexate  Therapy  for Psoriasis: Guideline Revisions. Arch Dermatol. 108 (1)
: 35
Sadis, C., Teske, G., Stokman, G., Kubjak, C.,  Claessen,  N.  2007.  Nicotine
Protects Kidney from Renal Ischemia/Reperfusion Injury through the Colinergic Anti- inflamatory Pathway. Plos One. 5 : 469.
Scheuer, J. S. 1994. Produk Alami Lautan .
IKIP Semarang Press, Semarang. Sutomo.  2014.  Isolasi  dan  Identifikasi Senyawa Penangkap Radikal
DPPH  dan  Immunomodulator  dari
Buah  Kasturi (Mangifera  casturi Kosterm. ) Suku Anacardiaceae.
Disertasi .  Program  Pascasarjana Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Sutomo.,  S.  Wahyuono.,  S.  Rianto.,  E.  P. Setyowati.,  &  A.  Yuswanto.  2014. Antioxidant  Activity  Assay  of Extract  and  Active  Fractions  of Kasturi  Fruit  ( Mangifera  casturi Kosterm.)  Using  1,  1-diphenyl-2- picrylhydrazyl  Method. Journal  of Natural Products. 7 : 124-130.