## Uji Potensi Antibakteri dan Antibiofilm Minyak Atsiri Umbi Teki ( Cyperus rotundus L.) terhadap Staphylococcus aureus ATCC 6538
Ni Made Uthari a* , Lisa Soegianto a , Liliek S. Hermanu a a Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya
Penyakit  infeksi  merupakan  suatu  penyakit  yang  disebabkan  karena  adanya  invasi  mikroorganisme  patogen  di dalam  tubuh.  Biofilm  adalah  sekelompok  mikroorganisme  yang  mampu  berdiferensiasi  dan  berkembang  biak secara  kompleks  dan  dapat  melakukan komunikasi  antar  sel  melalui  matriks  polisakarida.  Pada  infeksi kronis, biofilm berperan dalam mempertahankan bakteri dan menyebabkan resistensi terhadap antibiotik. Rumput teki ( Cyperus rotundus L.) merupakan salah satu tanaman yang memiliki banyak khasiat untuk berbagai pengobatan. Penelitian ini dilakukan untuk menentukan aktivitas antibakteri dan aktivitas penghambatan biofilm dari minyak atsiri umbi teki ( Cyperus rotundus L.) terhadap Staphylococcus aureus. Minyak atsiri umbi teki diperoleh dengan cara  destilasi  menggunakan  alat  Stahl  dengan  perolehan  rendemen  sebesar  0,22%.  Penentuan  aktivitas antibakteri dan aktivitas antibiofilm dilakukan dengan metode mikrodilusi menggunakan microplate U-bottom PVC 96  wells dengan  bakteri  uji Staphylococcus  aureus yang  setara  dengan  larutan  standar  ½ Mc  Farland  I .  Hasil pengujian  aktivitas  antibakteri  menunjukkan  nilai  KHM  (Konsentrasi  Hambat  Minimum)  dan  KBM  (Konsentrasi Bunuh  Minimum)  yaitu  pada  konsentrasi  0,05%  (v/v)  dan  12,5%  (v/v).  Hasil  pengujian  aktivitas  antibiofilm menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  umbi  teki  ( Cyperus  rotundus L.)  dapat  menghambat  89,01%  pembentukan biofilm Staphylococcus aureus pada konsentrasi 0,09% (v/v).
Kata kunci : Cyperus rotundus L., Staphylococcus aureus, minyak atsiri, antibakteri, antibiofilm.

## Antibacterial and Antibiofilm Potential of Essentials Oils of

## Cyperus rotundus L. Tubers against Staphylococcus aureus ATCC 6538
Infectious disease is a disease that is caused by an invasion of pathogenic microorganisms in the body. Biofilm is a group of microorganisms that are able to differentiate and proliferate in the complex way as well as being able to communicate  between  cells  through  a  matrix  of  polysaccharides.  In  chronic  infection,  biofilm  has  an  important role to maintain the bacteria which can cause resistance to antibiotics. Teki ( Cyperus rotundus L.) is one of the plants  that  has  many  benefits  for  different  treatment.  The  aim  of  this  study  was  to  determine  the  antibacterial activity  and  inhibition  of  biofilm  activity  of  essential  oil  of Cyperus  rotundus L.  tubers  against Staphylococcus aureus . Essential oil was extracted by distillation using Stahl with water as the solvent and the yield of essential oil obtained  was  0.22%.  Determination  of  antibacterial  activity  and  antibiofilm  activity  were  carried  out  by  micro- dilution method using microplate 96 U-PVC bottom wells against Staphylococcus aureus which is equivalent to the solution  standard  of  ½ Mc  Farland  I .  The  results  of  antibacterial  activity  tests  showed  that  MIC  (Minimum Inhibitory  Concentration)  and  MBC  (Minimum  Bactericidal  Concentration)  values  were  0.05%  (v/v)  and  12.5% (v/v). Antibiofilm activity test showed that the essential oil of Cyperus rotundus L. tubers is able to inhibit 89.01% of the biofilm formation of Staphylococcus aureus on the concentration of 0.09% (v/v).
Keywords: Cyperus rotundus L., Staphylococcus aureus, essential oil, antibacterial, antibiofilm.
*Corresponding  author:  Fakultas  Farmasi Universitas  Katolik  Widya  Mandala  Surabaya , Jl.  Raya  Kalisari Selatan No. 1 Surabaya, e-mail: nimadeuthari@gmail.com

## PENDAHULUAN
Penyakit infeksi merupakan suatu penyakit yang  disebabkan  karena  adanya  proses  invasi mikroorganisme  patogen  didalam  tubuh  (Potter dan Perry, 2005). Biofilm merupakan sekelompok mikroorganisme yang mampu berdiferensiasi dan berkembang  biak  dengan  cara  kompleks  dalam membentuk  morfologi  baru  yang  tumbuh  pada suatu  permukaan  (O’toole et  al., 2000).  Biofilm adalah  sekelompok  mikroorganisme  dimana  sel- selnya  saling  terikat  satu  sama  lain  dan  dapat melakukan  komunikasi  antar  sel  melalui  matriks polisakarida.  Struktur  alami  biofilm  dapat melindungi sel-selnya terhadap agen antimikroba dan  mampu  mempertahankan  sel host -nya, sehingga  menyebabkan  resistensi  terhadap antibiotik yang diberikan (Paraje, 2011).
Indonesia  adalah  negara  tropis  yang memiliki  kekayaan  alam  melimpah  terutama keanekaragaman tumbuhan yang dapat dikembangkan  menjadi  sumber  obat  tradisional. Salah  satu  tanaman  yang  banyak  dimanfaatkan masyarakat  Indonesia  adalah  teki  ( Cyperus rotundus L.) (Gunawan dkk., 1996).  Rumput teki mempunyai  khasiat  yang  berbeda-beda  pada beberapa  bagian  tanamannya,  seperti  daun,  biji dan umbinya. Daun yang segar dan bijinya sering digunakan  untuk  meningkatkan  nafsu  makan, menghilangkan  nyeri  lambung  dan  sebagai ekspektoran.  Umbi  teki  dapat  digunakan  sebagai obat  demam,  arthritis,  diuretik,  diare,  disentri, leprosi, bronkhitis dan kelainan darah, analgesik, sedatif,  anstispasmodik  dan  antipiretik  (Nima et al. ,  2007).  Kegunaan  umbi  teki  lainnya  adalah sebagai  obat  busung  lapar,  keputihan,  kolera, melunakkan faeces ,  mempercepat  pembekuan darah, dan kuku bernanah (Achyad dan Rasyidah, 2000).
Strategi  yang  dapat  dilakukan  untuk mengatasi  permasalahan  biofilm  adalah  dengan pengobatan  menggunakan  antimikroba  disertai dengan  menggunakan  zat  kimia  yang  mampu menghambat  atau  merusak  lapisan  biofilm tersebut,  sehingga  antimikroba  dapat  mencapai target  dan  membunuh  bakteri  (Cortés et  al., 2011).  Pada  penelitian  ini,  minyak  atsiri  yang terkandung  dalam  umbi  teki  diharapkan  mampu mengatasi  permasalahan  biofilm.  Minyak  atsiri merupakan  salah  satu  hasil  proses  metabolisme dalam tanaman yang disintesis dalam sel kelenjar pada  jaringan  tanaman  dan  ada  juga  yang terbentuk dalam pembuluh resin misalnya minyak terpentin dalam pinus (DepKes RI, 1985).
Penelitian  tentang  aktivitas  antibiofilm minyak  atsiri  umbi  teki  ( Cyperus  rotundus L.) belum  banyak  dilakukan.  Oleh  sebab  itu, penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui potensi  aktivitas  antibakteri  dan  antibiofilm minyak  atsiri  umbi  teki  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus.

## METODE PENELITIAN
Bahan Penelitian
Umbi  teki  yang  diperoleh  pada  bulan  Juli 2016  di  daerah  Surabaya  Timur,  Jawa  Timur; Staphylococcus aureus ATCC 6538 diperoleh dari Laboratorium  Mikrobiologi  Farmasi  UKWMS; media Mueller  Hinton  Agar (MHA) , Trypticase Soya Broth (TSB) , Mueller Hinton Broth (MHB), etil asetat p.a, toluen p.a, DMSO, penampak noda vanilin  sulfat,  tween  80,  pengering  Na 2 SO 4 , akuades  steril,  kristal  violet  1%,  glukosa  2%, larutan ½ McFarland I.

## Alat Penelitian
Alat  yang  digunakan  untuk  penelitian  ini antara  lain:  seperangkat  alat  destilasi  Stahl, microplate, microplate reader, timbangan analitik,  lemari  es,  oven,  autoklaf,  inkubator, Laminar Air Flow (LAF), lampu UV 254 dan 366, spiritus  brander,  kawat  ose,  jangka  sorong, lempeng  silika  gel  60  F 254 ,  bejana  KLT,  pipa kapiler,  gelas  beaker,  Erlenmeyer,  cawan  petri, kertas  saring,  tabung  reaksi,  alumunium  foil, kapas, mikropipet, pipet tetes.

## Tahapan Penelitian

## Destilasi Minyak Atsiri Umbi Teki
Umbi  teki  yang  telah  dipanen  dilakukan sortasi  basah,  kemudian  dicuci  bersih  dengan  air kran  yang  mengalir.  Umbi  teki  dirajang  secara horisontal  untuk  memperluas  permukaan  yang bertujuan  agar  kelenjar  minyak  dapat  terbuka sebanyak  mungkin,  sehingga  memudahkan penguapan  minyak  atsiri  dalam  simplisia  saat destilasi berlangsung. Sebanyak ± 300 g umbi teki yang  telah  dirajang  dimasukkan  ke  dalam  labu Stahl,  ditambahkan  air  hingga  seluruh  sampel terendam  atau  hingga  2/3  dari  volume  labu. Destilasi  dilakukan  selama  6  jam.  Minyak  atsiri yang telah tertampung kemudian dipisahkan dari air dengan menambahkan Na 2 SO 4 untuk menarik air (Astuti, 2006).
Profil  Kromatogram  Minyak  Atsiri  Umbi  Teki menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Pengamatan  profil  kromatogram  minyak atsiri  umbi  teki  dilakukan  menggunakan  fase diam  lempeng  silika  gel  F 254 dan  dieluasi  dengan fase  gerak  toluen  :  etil  asetat  (93  :  7,v/v). Konsentrasi  larutan  minyak  atsiri  umbi  teki  dan pembanding  eugenol  adalah  20.000  µg/ml  (2%) dengan volume penotolan masing-masing sebanyak  10  μl.  Penampak  noda  yang  digunakan adalah vanilin asam sulfat (Astuti, 2006).
Pengujian
Aktivitas Antibakteri untuk menentukan  Kadar  Hambat  Minimum  (KHM) dan  Kadar  Bunuh  Minimum  (KBM)  (Yosephine, dkk., 2013)
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan dengan  metode  mikrodilusi  (uji  pengenceran berderet)  menggunakan microplate  U-bottom PVC 96-well . Digunakan minyak atsiri konsentrasi  25%  sebanyak  100  μl,  suspensi bakteri Staphylococcus  aureus yang  sudah disetarakan  dengan  larutan  Standar  ½ Mc
Farland I  (1,5  x  10 5 cfu/mL)  sebanyak  20  μl  dan media Mueller  Hinton  Broth (MHB)  100  μl. Sebagai  kontrol  sampel  yaitu  media  MHB  100  μl dan  minyak  atsiri  100  μl , sedangkan kontrol positif  yaitu  media  MHB  180  μl  dan  suspensi bakteri  20  μl.  Sebagai  kontrol  negatif  digunakan media  MHB  200  μl,  sedangkan  kontrol  uji  yaitu Tetrasiklin  HCl  100  μl  dan  media  MHB  100  μl. Microplate ditutup  dan  diinkubasi  pada  suhu 37°C selama 24 jam. Microplate digoyang selama 30 detik dan densitas optik diukur menggunakan microplate  reader pada  595  nm.  Rumus  yang digunakan untuk menghitung aktivitas antibakteri berupa  KHM  dan  KBM  dari  hasil  pembacaan Densitas Optik (DO) adalah sebagai berikut :

## =
Keterangan : KHM  =    Kadar  Hambat  Minimum,  menghambat pertumbuhan bakteri hingga tersisa ≤ 10,0% dari koloni bakteri KBM  =    Kadar  Bunuh  Minimum,  membunuh bakteri hingga tersisa ≤ 0,1% dari koloni bakteri Sampel  MA  =  rata-rata  DO  sampel  minyak  atsiri umbi  teki  dengan  suspensi  bakteri  sebanyak  3 replikasi Kontrol  MA  =  rata-rata  DO  sampel  minyak  atsiri tanpa  penambahan  suspensi  bakteri  sebanyak  3 replikasi Kontrol  (+)  =    rata-rata  blanko  positif pertumbuhan  bakteri  (Suspensi  bakteri  +  media MHB)
Kontrol  (-)  =    rata-rata  blanko  negatif pertumbuhan bakteri (Media MHB)
Pengujian  Aktivitas  Antibiofilm  Minyak  Atsiri Umbi  Teki  dengan  Metode  Mikrodilusi  (Al Fattah, 2015)
Pengujian  dilakukan  dengan  metode mikrodilusi (uji pengenceran berderet)
menggunakan microplate U-bottom PVC 96-well . Digunakan  minyak  atsiri  konsentrasi  50% sebanyak 100 μl, suspensi bakteri Staphylococcus aureus yang setara dengan larutan Standar ½ Mc Farland I  sebanyak  20  μl  dan  media Trypticase Soy  Broth (TSB)  yang  mengandung  glukosa  2% 100 μl. Kontrol sampel yaitu media TSB+ glukosa 2%  100  μl  dan  sampel  minyak  atsiri  100  μl . Kontrol positif yaitu media TSB+ glukosa 2% 180 μl  dan  suspensi  bakteri  20  μl.  Kontrol  negatif yaitu  media  TSB  +  glukosa  2%  sebanyak  200  μl. Microplate ditutup  dan  diinkubasi  pada  suhu 37°C  selama  48  jam.  Isi microplate dikeluarkan dan  dibilas  3  kali  dengan  air  mengalir, dikeringkan  dalam  inkubator  37°C  selama  15 menit. Microplate diberi  200  μL  larutan  kristal violet  1%  dan  didiamkan  selama  15  menit  pada suhu  ruang. Microplate dicuci  dengan  air mengalir  sebanyak  2  kali.  Setiap  sumuran dimasukkan  tween  80  2%  sebanyak  200  μL  dan diinkubasi  suhu  ruang  selama  15  menit.
Microplate digoyang selama 30 detik dan densitas optic  diukur  menggunakan microplate  reader pada  595  nm.  Rumus  yang  digunakan  untuk menghitung  aktivitas  penghambatan  biofilm adalah sebagai berikut :
%Penghambatan biofilm = {(1-DO sampel MA-DO kontrol  sampel  MA)/(DO  kontrol  positif  –  DO kontrol negatif)} x 100%
Keterangan : Sampel  MA  :  Sampel  minyak  atsiri  +  media pertumbuhan + suspensi bakteri Kontrol  sampel  MA  :  Sampel  minyak  atsiri  + media pertumbuhan Kontrol positif   : Media pertumbuhan + suspensi bakteri Kontrol negatif  : Media pertumbuhan

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini rumput teki dideterminasi  terlebih  dahulu  sebelum  diambil bagian  umbinya  dengan  menggunakan  buku panduan  van  Steenis  (2008)  untuk  memastikan bahwa tanaman yang diambil sudah sesuai. Umbi teki yang telah diperoleh selanjutnya dicuci bersih dan  disortasi  basah  dari  pengotornya.  Umbi  teki diamati  secara  makroskopis  dan  mikroskopis dengan tujuan untuk mempelajari morfologi umbi teki.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  makroskopis dan  mikroskopis,  sampel  menunjukkan  ciri-ciri yang  sama  dengan  makroskopis  dan  mikroskopis umbi  teki  dalam  pustaka  Materia  Medika Indonesia  Jilid  IV  (DepKes  RI,  1980).  Umbi  teki dirajang  untuk  memperluas  permukaan  yang bertujuan  agar  kelenjar  minyak  dapat  terbuka sebanyak  mungkin.  Minyak  atsiri  yang  diperoleh dari  hasil  destilasi  Stahl  dengan  dua  kali pengulangan berupa  cairan berwarna  kuning  dan berbau khas teki dengan kadar minyak atsiri rata- rata  sebesar  0,22%.  Hasil  minyak  atsiri  yang didapat  lebih  kecil  daripada  pustaka  yaitu  0,3  – 1%  (Achyad  dan  Rasyidah,  2000)  dapat disebabkan karena kandungan minyak atsiri suatu tanaman  berbeda-beda  tergantung  dari  umur tanaman,  kandungan  mineral  tempat  hidupnya, penanganan  bahan  sebelum  disuling,  variasi musim  dan  variasi  alat  yang  digunakan  untuk mengisolasi minyak atsiri.
Karakterisasi  minyak  atsiri  yang  dilakukan yaitu pengamatan organoleptis, penetapan indeks bias  dan  profil  kromatogram  menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Secara organoleptis  minyak  atsiri  umbi  teki  berwarna kuning muda dan berbau aromatis. Hasil ini telah sesuai  dengan  penelitian  sebelumnya  yaitu berwarna  kuning  muda  dan  berbau  aromatis (Astuti, 2006). Penetapan indeks bias dengan tiga kali  replikasi  diperoleh  hasil  rata-rata  sebesar 1,512.  Hasil  ini  sesuai  dengan  penelitian sebelumnya yaitu 1,513 (Atal and Kapur, 1982).
Pada penetapan profil kromatogram menggunakan  KLT  dengan  penampak  noda
= % KHM
& KBM
DO sampel MA – DO kontrol MA   x 100%
DO kontrol (+) – DO kontrol (-)
vanilin  sulfat  dihasilkan  6  noda  yang  diamati secara  visibel  dengan  nilai Rf 0,32,  0,41,  0,60, 0,72,  0,84,  0,94  berturut-turut  berwarna  merah, merah  oranye,  merah  oranye,  merah  keunguan, merah dan merah oranye. Pada pengamatan KLT di  bawah  sinar  UV  254  nm  sebelum  disemprot penampak noda dihasilkan 5 noda dengan nilai Rf 0,41, 0,50, 0,60, 0,72, 0,84, dan setelah disemprot penampak  noda  vanilin  sulfat  dihasilkan  6  noda dengan nilai Rf 0,41, 0,50, 0,60, 0,72, 0,84, 0,94. Pada pengamatan KLT di bawah sinar UV 366 nm sebelum disemprot penampak noda tidak diamati adanya  pemisahan  noda.  Namun  setelah disemprot  penampak  noda  tampak  pemisahan  6 noda dengan nilai Rf 0,32, 0,41, 0,50, 0,60, 0,84, 0,94 (Gambar 1.) . Hasil pengujian aktivitas antibakteri ditunjukkan  pada  Tabel  1.  dan  Gambar  2.  Hasil pengujian aktivitas antibakteri minyak atsiri umbi teki terhadap
Staphylococcus aureus
menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  umbi  teki mampu menghambat pertumbuhan dan membunuh Staphylococcus aureus . Kadar hambat  minimum  (KHM)  suatu  senyawa ditentukan  dari  konsentrasi  terendah  senyawa tersebut  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri  ≥  90,0%  dari  koloni  bakteri,  sedangkan kadar  bunuh  minimum  (KBM)  ditentukan  dari konsentrasi  terendah  senyawa  yang  mampu membunuh  bakteri  sebesar  ≥  99,9%  dari  koloni bakteri  (Forbes,  Sahm  and  Weissfeld,  2007). Berdasarkan  hasil  penelitian  ini,  minyak  atsiri umbi  teki  memberikan  Kadar  Hambat  Minimum (KHM) pada konsentrasi 0,05% dengan penghambatan sebesar 90,68% dan Kadar Bunuh Minimum  (KBM)  yaitu  konsentrasi  12,5%  yang membunuh sebesar 99,95% dari koloni bakteri.
Tabel  1. Persentase  reduksi  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  6538  dari pengujian  antibakteri  minyak  atsiri  umbi  teki ( Cyperus rotundus L.) No. Konsentrasi Minyak Atsiri Umbi Teki (%) % Reduksi 1. 25 99,86 2. 12,5 99,95 3. 6,25 99,88 4. 3,12 99,77 5. 1,56 99,76 6. 0,78 99,76 7. 0,39 99,70 8. 0,19 99,59 9. 0,09 96,58 10. 0,05 90,68 Keterangan :              = KBM; = KHM
Mekanisme  antibakteri  dari  komponen minyak  atsiri  umbi  teki  belum  diketahui  secara pasti. Penelitian yang dilakukan oleh Kilani et al .
(2004)  menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  umbi teki  lebih  efektif  sebagai  antibakteri  terhadap bakteri Gram-positif khususnya terhadap Staphylococcus  aureus daripada  bakteri  Gram- negatif.  Senyawa  spatulenol,  patkulanol  dan siperol yang terkandung dalam minyak atsiri umbi teki  tergolong  turunan  senyawa  fenol.  Senyawa fenol  diketahui  mempunyai  efek  antiseptik  dan bekerja dengan merusak membran sel (Siswandono  dan  Soekardjo,  2008).  Mekanisme antibakteri  diduga  karena  pengikatan  senyawa fenol  dengan  sel  bakteri,  yang  akan  mengganggu permeabilitas  membran  dan  proses  transportasi. Hal  ini  mengakibatkan  hilangnya  kation  dan makromolekul dari sel sehingga pertumbuhan sel akan  terganggu  atau  mati.  Pada  konsentrasi rendah  senyawa  fenol  akan  menyebabkan denaturasi  protein  dan  pada  konsentrasi  tinggi akan menyebabkan koagulasi protein sehingga sel akan mati (Siswandono dan Soekardjo, 2008).
Tabel  2. Persentase  penghambatan  biofilm minyak atsiri umbi teki ( Cyperus rotundus L.)
No. Konsentrasi Minyak Atsiri Umbi Teki (%) % Penghambatan Biofilm 1. 50 97,04 2. 25 96,38 3. 12,5 93,68 4. 6,25 93,48 5. 3,12 93,20 6. 1,56 93,15 7. 0,78 92,87 8. 0,39 92,45 9. 0,19 91,15 10. 0,09 89,01
Hasil  pengujian  aktivitas  antibiofilm ditunjukkan  pada  Tabel  2.  dan  Gambar  3. Berdasarkan  hasil  uji  aktivitas  antibiofilm tersebut, minyak atsiri umbi teki pada konsentrasi yang  mendekati  dengan  KHM  yaitu  0,09% mampu  menghambat  pembentukan  biofilm sebesar  89,01%.  Lawal  dan  Adebola  (2009) melaporkan hasil analisis menggunakan Kromatografi  Gas  dengan  detektor  FID  bahwa komponen  seskuiterpen  yang  terkandung  dalam minyak  atsiri  umbi  teki  didominasi  oleh  senyawa α-siperon,  karyopilen  oksida  dan  β-selinen,  serta terdapat pula kandungan senyawa monoterpenoid yaitu  mirtenol,  β-pinen  dan trans -pinocarveol. Golongan  seskuiterpen  dan  monoterpenoid merupakan  turunan  terpenoid  yang  diketahui memiliki  potensi  sebagai  antibakteri  (Perumal  & Mahmud, 2013). Terpenoid dapat mempengaruhi pelepasan  sel  planktonik  dari  biofilm  dan meningkatkan  komposisi  asam  lemak  pada membran  sel  biofilm,  sehingga  sel  menjadi  lebih hidrofobik yang selanjutnya akan menghancurkan biofilm  tersebut  (Perumal  dan  Mahmud,  2013). Penelitian lain melaporkan bahwa senyawa terpen berperan  aktif  dalam  membunuh  bakteri (Mastelic et  al. ,  2005).  Mekanisme  kerja  dari
senyawa  terpen  diduga  dengan  melibatkan gangguan membran oleh senyawa lipofiliknya dan dengan  demikian  menghambat  proses  respirasi dan  transportasi  ion  dalam  sel  bakteri  (Cowan, 1999).  De  Carvalho  dan  Da  Fonseca (2007)
membuktikan  bahwa  senyawa  alami  seperti terpen dapat digunakan untuk mencegah agregasi sel dan pembentukan formasi biofilm.
Gambar 1. Profil kromatogram minyak atsiri umbi teki menggunakan KLT dengan penampak noda vanilin asam sulfat.
Keterangan: (a) secara visibel, (b) pada UV 254 nm, (c) pada UV 366 nm; 1. minyak atsiri umbi teki, 2. pembanding eugenol.
Gambar 2. Grafik konsentrasi minyak atsiri umbi teki ( Cyperus rotundus L.) vs % reduksi pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dari pengujian antibakteri minyak atsiri umbi teki.
Gambar 3. Grafik konsentrasi minyak atsiri umbi teki ( Cyperus rotundus L.) vs % penghambatan pembentukan biofilm Staphylococcus aureus 1         2 1          2 1          2 (a) (b) (c)

## KESIMPULAN
Minyak  atsiri  umbi  teki  ( Cyperus  rotundus L.) memberikan  Kadar  Hambat  Minimum  (KHM) yaitu  konsentrasi  0,05%  (v/v)  menghambat pertumbuhan bakteri sebesar 90,68% dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) yaitu konsentrasi 12,5%
membunuh  bakteri  sebesar  99,95%  dari  koloni bakteri.  Minyak  atsiri  umbi  teki  ( Cyperus rotundus L.)  memberikan  %  penghambatan biofilm  sebesar  89,01%  pada  konsentrasi  0,09% (v/v).

## DAFTAR PUSTAKA
Achyad, D. E. dan Rasyidah, R., 2000. Teki Cyperus rotundus L . , PT. Asiamaya Dotcom Indonesia, Jakarta.
Al Fattah, M., 2015. ‘Uji Aktivitas Antibiofilm In Vitro Minyak Atsiri  Herba  Kemangi  terhadap  Bakteri Escherichia  coli, Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus ’ , Skripsi Sarjana  Farmasi ,  Universitas  Islam  Negeri  (UIN)  Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Astuti, M.S., 2006. ‘Isolasi dan Identifikasi Komponen Minyak Atsiri  Umbi  Teki (Cyperus  Rotundus  L.)’ , Skripsi  Sarjana Sains , Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Atal,  C.K.  dan  Kapur,  B.M.,  1982. Cultivation  and  Utilization of  Medicinal  Plants ,  Jammu-Tawi  :  Regional  Research Laboratory, Council of Scientific & Industrial Research.
Cortés,  M.E.M,  Bonilla,  J.C.,  and  Sinisterra,  R.D.,  2011. ‘Biofilm  Fomation,  Control  and  Novel  Strategis  for Eradication’, Science against microbial pathogens: communicating current research and technological advances (Proceeding), A. Mendez-Vilas(Ed.), Formatex, Argentina, pp. 896-905.
Cowan,    M.M.,  1999.  Plant  products  as  antimicrobial  agents, Clinical Microbiololgy Reviews, 12: 564–582.
De  Carvalho,  C.C.  and  Da  Fonseca,  M.M.,  2007.  Preventing biofilm  formation:  promoting  cell  separation  with  terpenes, FEMS Microbiol Ecology , 61:406–413.
Departemen  Kesehatan  RI,  1980. Materi  Medika  Indonesia . Jilid  IV.  Cetakan  I.  Jakarta:  Direktorat  Jenderal  Pengawasan Obat dan Makanan, hal. 52.
Departeman  Kesehatan  Republik  Indonesia,  1985. Cara Pembuatan Simplisia . Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, hal. 6, 25.
Forbes,  B.A.,  Sahm,  D.F.,  and  Weissfeld,  A.S.,  2007. ‘Laboratory  Methods  and  Strategies  for  Antimicrobial Susceptibility  Testing’  in: Bailey  &  Scott's  Diagnostic Microbiology , 12 th ed., Mosby, St. Louis, p. 187-214.
Kilani, S., Abdelwahed, A., Ammar, R.B., Hayder, N., Ghedira, K., and Chraief, I., 2004. Chemical Composition Antibacterial and  Antimutagenic  Activities  of  Essential  Oil  from Cyperus rotundus, Journal of Essential Oil Research, 17: 695-700.
Lawal,  O.A.  and  Adebola,  O.,  2009.  Chemical  Composition  of The  Essential  Oils  of Cyperus  rotundus L.  from  South  Africa, Journal Molecules, 14:2909-2917.
Mastelic,  J.,  Politeo,  O.,  Jerkovic,  I.  and  Radosevic,  N.,  2005. Composition  and  antimicrobial  activity  of Helichrysum italicum esential  oil  and  its  terpene  and  terpenoid  fractions, Chemistry of Natural Compounds, 41:35–40.
Nima,  Z.M.,  Jabier,  M.S.,  Wagi,  R.I.  and  Hussain,  H.A.A., 2007.  Extraction,  Identification  and  Antibacterial  activity  of Cyperus  oil  from  Iraqi Cyperus  rotundus,  Engineering  & Technology , 26(10):1156-1163.
O’Toole,  G.,  Kaplan,  H.B.  and  Kolter,  R.,  2000.  Biofilm formation  as  microbial  development ,  Annual  Review  of Microbiology , 54:49-79.
Paraje,  M.G.,  2011.  ‘Antimicrobial  resistance  in  biofilms’ . Science against microbial pathogens: communicating current research  and  technological  advances  (Proceeding), A. Mendez-Vilas(Ed.), Formatex, Argentina, p. 736-744.
Perumal,  S.  and  Mahmud,  R.,  2013.  Chemical  analysis, inhibition  of  biofilm  formation  and  biofilm  eradication potential  of Euphorbia  hirta L.  against  clinical  isolates  and standard  strain, BMC  Complementary  and  Alternative Medicine , 13:346.
Potter,  P.A.  dan  Perry,  A.G.,  2005. Buku  Ajar  Fundamental Keperawatan : Konsep, Proses,  dan Praktik . Edisi 4. Volume 1. Alih Bahasa : Yasmin Asih, dkk., PT. EGC, Jakarta.
Siswandono  dan  Soekardjo,  B.,  2008. Kimia  Medisinal ,  Edisi 2, Airlangga Unversity Press, Surabaya.
Gunawan,  D.,  Sudarsono,  Wahyuono,  S.,  Donatus,  L.A.,  dan Purnomo,  2001. Tumbuhan  Obat  2:  Hasil  Penelitian,  Sifat- sifat dan Penggunaan , Yogyakarta: PPOT UGM.
Van Steenis, C.G.G.J., 2008, Flora , Diterjemahkan dari Bahasa Belanda  oleh  Moeso  Surjowinoto,  PT  Pradnya  Paramita, Jakarta.
Yosephine, A.D., Wulanjati, M.P., Saifullah, T.N. dan Astuti, P., 2013. Mouthwash Formulation of Basil Oil ( Ocimum Basilicum L.)  and  In  Vitro  Antibacterial  and  Antibiofilm  Activities Against Streptococcus Mutans , Traditional Medicine Journal , 18(2):95-102.