Daya Hambat Larutan Daun Beluntas Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus
Inhibitory Power Solution Against Bacteria Leaf Beluntas Staphylococcus Aureus
Irmanita Wiradona Erni Mardiati
Sulur Joyo Sukendro
Jurusan Keperawatan Gigi Poltekkes Kemenkes Semarang Jl, Tirto agung, Pedalangan, Semarang, Banyumanik, Semarang
E-mail:

## Abstract

## Abstrak
Tujuan penelitian untuk mengetahui efektifitas daya hambat daun beluntas konsentrasi 5%, 10%, dan  20%  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus .  Jenis  penelitian quasi  experiment. Subyek  penelitian adalah bakteri Staphylococcus aureus. Penelitian dilakukan dengan menggunakan 4 Cawan petri yang dibagi menjadi 4 bagian, berisi suspensi bakteri, kemudian masukkan paper disk yang telah dicelupkan dalam larutan daun beluntas   ke dalam 4 cawan petri., kemudian diinkubasi selama 1 x 24 jam. Data dianalisis secara deskriptif dengan tabulasi dan disajikan dalam bentuk grafik. Untuk melihat selisih perbedaan diameter zona hambat setiap konsentrasi  menggunakan uji One Way Anova. Hasil penelitian menunjukkan konsentrasi 5% dan 10% menunjukkan perbedaan rerata 0,92 dengan p value = 0,003 atau ada perbedaan yang signifikan dimana konsentrasi   5% dan 10%. Perbedaan   konsentrasi 5% dan 20% sebesar 3,2 dengan p value = 0,199,  atau ada perbedaan yang signifikan daya hambat antara konsentrasi 5% dan 20%. Perbedaan konsentrasi 10% dan 20% rerata sebesar 0,6 atau ada perbedaan yang signifikan daya hambat antara konsentrasi  10% dan 20%. Sehingga ada pengaruh larutan daun beluntas mampu menghambat  pertumbuhan bakteri staphylococcus aureus.
Kata Kunci: Daun Beluntas (Pluchea indica Less, antibakteri, Staphylococcus aureus

## irmawiradona@yahoo.co.id
The  purpose  of  the  study  is  to  determine  the  effectiveness  of  the  inhibition  of  leaf  beluntas concentration of 5 % , 10 % , and 20 % against Staphylococcus aureus . With Staphylococcus aureus as the subjects, this quasi experimental study was conducted using 4 cup petri divided into 4 sections, then these were incubated for 24 hours. The data were analyzed descriptively and presented in a graphical form to see the difference in inhibition zone diameter of each concentration using One Way Anova test. The results shows a concentration of 5 % and 10 % with mean difference : 0.92 and  p value = 0.003 means that there is a significant difference in this. Concentration differences of 5 % and 20 % of 3.2 with p value = 0.199, means that there is a significant difference between the inhibitory concentration. Concentration differences of 10 % and 20 % average of 0.6 means that there is a significant difference between the inhibitory  concentrations.  In  conclusion,  leaf  beluntas  solution  are  effective  to  inhibit  the  growth  of staphylococcus aureus.
Key Word: Beluntas leaves (Pluchea indica Less), antibacterial, Staphylococcus aureus

## 1. Pendahuluan
Prevalensi penyakit periodontal di Indonesia  menunjukkan  penyakit  yang masih  tinggi,  setidaknya  pada  kelompok usia  8  tahun  yaitu  59,89%  dikota  dan 59,67%  di  desa.  Kelompok  usia  18  tahun sejumlah 72,44% dikota dan 93,44% di desa, dan  pada  kelompok  usia  35-44  tahun sejumlah  88,67%  di  kota.  Penyakit periodontal  adalah  penyakit  gigi  yang disebabkan oleh multifaktorial yaitu faktor sistemik,  malnutrisi,  obat-obatan  dan disebabkan oleh bakteri yang terakumulasi dalam  plak  gigi,  diantaranya  bakteri Staphylococcus aureus (Howley, 2003).
Staphylococcus  aureus merupakan patogen  utama  pada  manusia,  hampir semua  orang  pernah  mengalami  infeksi staphylococcus.  Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri  gram  positif,  yang terdapat  pada  mulut,  selaput  lendir,  dan luka (Jawetz, 1995).
Selain  itu  bahan  alam  yang digunakan  dianggap  lebih  aman,  murah dan  sedikit  efek  samping  dibandingkan dengan obat-obatan yang dibuat dari bahan sintesis.  Salah  satu  tanaman  herbal  yaitu daun  beluntas.    Beluntas  ( Pluchea  indica Less. ) merupakan salah satu tanaman yang sering digunakan sebagai obat tradisional. Daun  beluntas  memiliki  aktivitas antimikroba  terhadap  berbagai  macam bakteri.  Tanaman  ini  sering  digunakan sebagai tanaman pagar di halaman rumah penduduk.  Masyarakat  memanfaatkan daun  beluntas  secara  tradisional  sebagai p e n u r u n   d e m a m   ( a n t i p i r e t i k ) , meningkatkan  nafsu  makan  ( stomakik ) , peluruh keringat ( diaforetik ) , dan penyegar (Dalimartha,  1999).  Daun  beluntas mempunyai  sifat  antimikroba    Purnomo (2001)  dan  Sumitro  (2002).  Khasiat  daun beluntas  diperoleh  dari  beberapa kandungan  kimia  seperti alkaloid ,  minyak atsiri,  dan flavonoid sehingga  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dimana  bakteri tersebut dapat menyebabkan gingivitis dan periodontitis. (Hariana, 2006).
Sedangkan  menurut  Damayanti (2004)  daun  beluntas  diketahui  memiliki sifat  bakterisidal  yang  mampu  membasmi bakteri  selain  mempunyai  kemampuan antiseptik,  antioksida  dan  fungisida. Kandungan  Daun  beluntas  diantaranya adalah minyak atsiri yang mampu melawan beberapa  bakteri  gram  positif  dan  gram negatif.
Q u a s y Experiment (eksperimen semu). Eksperimen menggunakan  Rancangan  Percobaan dengan  4  perlakukan  ulangan.  Masing  – masing  diuji  untuk  melihat  daya  hambat daun  beluntas  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus .  Dengan konsentrasi larutan daun beluntas 5%, 10%, dan 20%.
Yang  di  maksud  konsentrasi larutan  daun  beluntas  adalah  jumlah kandungan  daun  beluntas  dalam  suatu cairan. Daun beluntas yang dipakai adalah air perasan dari daun beluntas yang didapat dengan  cara  daun  beluntas  ditumbuk, diperas  airnya  kemudian  ditambahkan aquades sesuai dengan konsentrasi larutan 5%,  10%,  20%  yang  kemudian  disimpan dalam botol steril.
Bakteri Staphylococcus  aureus adalah Staphylocuccus  aureus yang ditumbuhkan pada suatu media PCA. Cara mengukur  pertumbuhan  bakteri  dengan mengukur daerah bebas bakteri (blank zone ). Uji  ini  dilakukan  pada  permukaan  media padat yaitu suspensi bakteri Staphylococcus aureus sebanyak  1  ml  yang  dicampur dengan media PCA kemudian diberi kertas paper  disc steril  yang  sudah  dicelupkan kedalam  larutan  daun  beluntas  dengan konsentrasi  5  %,  10%  dan  20  %.  Setelah diinkubasi  selama  1  x  24  jam  pada  suhu 0 37 C.  Kemudian    dilihat  diameter  zona panghambatannya yang disebut blank zone sebagai  daerah  bebas  bakteri  pada  cawan petri,  kemudian  diukur  dengan  jangka sorong (mm). Semakin luas diameter maka semakin  bagus  karena  menunjukkan kekuatan  efektif    sebagai  daerah  bebas
2 . Metode
R a n c a n g a n   d e n g a n
bakteri.    Kekuatan  daya  hambat  bakteri dikategorikan  menurut  Davis  dan  Stout (1971)  :  sangat  kuat  (zona  bening  > 20mmm),  kuat  (zona  bening  10  -  20mm), sedang  (zona  bening  5  –  10mm),  lemah (<5mm) (Dewi,2010). prosedur
a. M e n y i a p k a n   s u s p e n s i   b a k t e r i Staphylococcus  aureus dengan  cara mencampur  1  jarum  ose  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  natrium fisiologis.
b. Menyiapkan  larutan  daun  beluntas yang  terbuat  dari  perasan  daun beluntas  dengan  konsentrasi  5%,  10% dan 20%.
c. Menyiapkan  4  cawan  petri  steril, masing-masing cawan petri diberi label A (5%), B(10%) dan C (20%).
d. Cawan  petri  yang  pertama  diisi  1  ml suspensi  bakteri Staphylococcus  aureus lalu dituangkan PCA cair yang sudah dipanaskan terlebih dahulu, kemudian ditunggu  hingga  hangat.  Dalam keadaan hangat PCA dicampur dengan suspensi  bakteri,  diratakan  dengan cara  cawan  petri  sedikit  digoyangkan diputar  di  atas  meja  supaya  merata. K e m u d i a n   d i d i n g i n k a n   h i n g g a memadat.    Lakukan  hal  yang  sama pada cawan petri kedua dan ketiga.
e. Setelah  media  didinginkan  ambil kertas saring dengan pinset, kemudian pada cawan petri yang pertama, ambil kertas  saring    menggunakan  pinset, dicelupkan  larutan  daun  beluntas dengan  konsentrasi  5%  pada  wilayah cawan  petri  bagian  A,  kemudian l a k u k a n   h a l   y a n g   s a m a   p a d a konsentrasi  10%  pada  bagian  B,  dan 20% bagian C.
f. Perlakuan dilakukan secara duplo (2X), yaitu dalam 2 cawan petri.
g. Cawan petri tersebut dibungkus kertas diberi  etiket  kemudian  di  inkubasi selama  1x24  jam.  Teknik  pengukuran dengan  dilihat  dan  diukur  diameter daerah  penghambatannya  yang d i s e b u t b l a n k   z o n e d e n g a n menggunakan jangka sorong  (mm).
Adapun penelitian sbb:
Blank  zone merupakan  area  daya hambat    larutan  daun  beluntas terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus. Perhitungan dilakukan dengan pengukuran radius daerah  bening  (mm)  sehingga diperoleh  4  nilai  dalam  satuan  (mm) hasil  pada  setiap  konsentrasi  larutan daun  beluntas  sehingga  didapatkan rata-rata pada 2 perlakuan.
Efektifitas  Daya  Hambat  Larutan Daun  Beluntas  terhadap  Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 5 %, 10% dan 20% memberikan diameter hambat terbesar pada konsentrasi 20% sebesar 10,23 mm.
Pada konsentrasi 5%, laju hambat pada  pemeriksaan  II  tidak  menunjukkan kenaikan  yang  signifikan  dengan  uji statistic di peroleh selisih rerata = 0,01; t = 0,79; p value = 0,942 dan setelah dilakukan pengulangan  III  dan  IV,  terdapat perbedaan yang signifikan. Demikian juga pada konsentrasi 10%, pada pemeriksaan II tidak  menunjukkan  kenaikan  yang signifikan, selisih rerata = 0,5; t = 3,038; p value  =  0,056.  Lain  halnya  dengan konsentrasi 20%, pada pemeriksaan II telah menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan dengan hasil selisih rerata = 0,41uji statistik t = 3,351; p value = 0,044.
3. Hasil dan Pembahasan
Hasil
konsentrasi  5%  dan  20%  sebesar  3,2 dengan nilai p value = 0,199,   artinya ada perbedaan yang signifikan daya hambatan antara  konsentrasi    5%  dan  20%. Perbedaan  daya  hambat  konsentrasi  10% dan 20% sebesar 0,6 artinya ada perbedaan yang  signifikan  daya  hambat  antara konsentrasi  10% dan 20%. Konsentrasi 5% menunjukkan  selisih  rerata  yang  paling besar yaitu 2,0175.

## Gambar 2. Zona hambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcusaureus setelah ditetesi larutan daun beluntas  dengan konsentrasi 5%, 10%,
20%
Larutan  daun  beluntas  terhadap bakteri staphylococcus  aureus memberikan d i a m e t e r   h a m b a t   t e r b e s a r   p a d a konsentrasi  20%  sebesar  10,23  mm  dan diameter hambat terkecil pada konsentrasi 5%.  Sehingga  semakin  tinggi  konsentrasi daun beluntas maka semakin tinggi zona h a m b a t   y a n g   a d a ,   n a m u n   p a d a pengamatan  yang  dilakukan  larutan  5% mempunyai  selisih  rerata  pengulangan  I d a n   I V   t e r b e s a r   y a i t u   2 , 0 1 7 5 0 , dibandingkan  larutan  20%  (1,7)  dan larutan  10%  (1,1).  Peningkatan  dan penurunan besar zone hambat ini menurut Sinambela  (1985)  disebabkan  karena komponen zat-zat yang terkandung dalam tanaman obat dapat saling memperlemah, memperkuat, memperbaiki atau merubah sama  sekali.  Selain  itu  juga  kualitas  dan kuantitas zat-zat yang ada dalam tanaman obat  ditentukan  oleh  faktor-faktor lingkungan tempat tumbuh seperti iklim,
Pembahasan
tanah,  sinar  matahari  dan  kondisi pertumbuhan  sampai  saat  dipanen. Berdasarkan  penelitian  Komala  dan Ismanto  (2008)  menunjukkan  aktivitas antimikroba  tanaman  obat  pada  bakteri Staphylococcus  aureus memiliki  nilai  zona hambat yang mengalami peningkatan dan penurunan pada berbagai konsentrasi yang ada.
Aktivitas  antibakteri  yang  dimiliki oleh  daun  beluntas  diduga  berasal  dari unsur–unsur yang terkandung didalamnya yaitu antara lain minyak atsiri, fenol, tannin, flavonoid dan saponin fenol  yang  bersifat sebagai bakterisidal,  mampu  menghambat pertumbuhan  dari  bakteri Staphylococcus aureus ( Hariana, 2006).
Flavonoid  dalam  daun  beluntas mempunyai  aktivitas  penghambatan  lebih besar  terhadap  bakteri  gram  positif ( S t a p h y l o c o c c u s   a u r e u s ) .   A k t i v i t a s penghambatan  dari  daun  beluntas  pada bakteri  gram  positif  menyebabkan terganggunya  fungsi  dinding  sel  sebagai pemberi bentuk sel dan melindungi sel dari lisis osmotik. Flavonoid dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan  cara  menggangu  permeabilitas dinding  sel  bakteri,  dengan  terganggunya dinding sel akan menyebabkan lisis pada sel (Dewi, 2010). Sedangkan menurut Ceshnie et  al. (2005)  ada  tiga  mekanisme  yang dimiliki flavonoid dalam memberikan efek a n t i b a k t e r i ,   a n t a r a   l a i n   d e n g a n menghambat  sintesis  asam  nukleat, menghambat fungsi membrane sitoplasma dan menghambat metabolism energy.
Menurut Juliana et al. (2009), senyawa tannin mampu menghambat pertumbuhan bakteri  dengan  cara  mengkoagulasi protoplasma  bakteri.  Tannin  memiliki peran  sebagai  antibakteri  dengan  cara mengikat  protein,  sehingga  pembentukan dinding  sel  akan  terhambat.  Mekanisme penghambatan  tannin  yaitu  dengan  cara dinding  bakteri  yang  telah  lisis  akibat senyawa  saponin  dan  flavonoid,  sehingga menyebabkan  senyawa  tannin  dapat dengan mudah masuk ke dalam sel bakteri dan mengkoagulasi protoplasma sel bakteri
Staphylococcus  aureus akibatnya  sel  tidak dapat  melakukan  aktivitas  hidup  dan pertumbuhannya  terhambat  atau  bahkan mati.
Kemampuan  bakterisidal  daun beluntas  berasal  dari  fenol  dengan mendeturasikan  protein  dan  merusak membran  sitoplasma  sel.  Ketidakstabilan pada dinding sel dan membran sitoplasma bakteri menyebabkan fungsi permebialitas selektif,  fungsi  pengangkutan  aktif, pengendalian  susunan  protein  sel  bakteri terganggu. Pertumbuhan  sel bakteri dapat terganggu  oleh  komponen    fenol  yang terdapat    pada  daun  beluntas.  Fenol m e m i l i k i     k e m a m p u a n     u n t u k mendenaturasikan   protein   dan   merusak membran    sel.    sehingga  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri staphylococcus aureus . (Rahayu, 2000).
Larutan  daun  beluntas  memiliki rata-rata  zona  hambat  pertumbuhan bakteri staphylococcus  aureus yaitu konsentrasi 5% menunjukkan selisih rerata yang paling besar yaitu 2,0175, konsentrasi 20% sebesar 1,7 dan konsentari 10% yaitu sebesar 1,1. Sedang Efektifitas daya hambat larutan  daun  beluntas  termasuk  dalam kategori lemah.
Saran
Masyarakat dapat memanfaatkan daun  beluntas  dalam  kehidupan  sehari- hari  khususnya  dalam  bidang  kesehatan gigi dan mulut, karena daun beluntas dapat membunuh  bakteri  patogen  yang  ada didalam mulut yaitu bakteri staphylococcus aureus .  Serta  Perlu  dilakukan  penelitian dan  pengembangan  lebih  lanjutan mengenai  daya  antibakteri  daun  beluntas dengan konsentrasi yang lebih besar.
terimakasih 4 . Simpulan dan Saran
5 . Ucapan Terimakasih Ucapan disampaikan atas  kesempatan  yang  diberikan  untuk mendapatkan  Dana  Risbinakes  DIPA Poltekkes  Kemenkes  Semarang  sehingga penelitian ini dapat terselesaikan.
6. Daftar Pustaka
Arikunto. S. 2006. Prosedur Penelitian Suatu Pendekatan  Praktek ,  PT.  Rineka Cipta, Jakarta.
Ceshnie  T.,  Lamb  A.J.  2005.  Antimicrobial a c t i v i t y   o f   F l a v o n o i d s . I n t e r n a t i o n a l   J o u r n a l   o f Antimicrobial Agents, 26 : 343 – 356 Dalimartha,  S.  1999. Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia .  Trubus  Agriwidya. Jakarta. hlm 19:170
Dewi,    F.K.  2010.  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Buah  Mengkudu ( Morinda  Citrifolia,  Linnaeus ) Terhadap  Bakteri  Daging  Segar. Skripsi. Universitas Sebelas Maret. Surakarta.
Hariana,  A.    2006. Tumbuhan    Obat    & Khasiatnya seri 1. Jakarta:   Penebar
Swadya. Jakarta. hal 149-150. H o w l e y , L . 2 0 0 3 .
IntisariMikrobiologidanpenyakiti nfeksi. Jakarta: Hipokrates.
Jawetz.  E.,  J.  Melnick,  L.  Adelberg,  E.A. 2005.  Microbiologi  Untuk  Profesi Kesehatan.  Terjemahan  Huriati dan  Hartanto.  Penerbit  Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Juliantina  R.F.,  Citra  M.D.A.,  Nirwani  B., NurmasitohT.,  Bowo  E.T.  2009. Manfaat  sirih  merah  (piper crocatum)  sebagai  agen  anti bacterial  terhadap  bakteri  gram positif  dan  gram  negative.  Jurnal k e d o k t e r a n   d a n   k e s e h a t a n Indonesia
Purnomo,  M.  2001.  Isolasi  Flavonoid  dari Daun Beluntas ( Pluchea indica Less ) y a n g   M e m p u n y a i   A k t i v i t a s Antimikroba  Terhadap  Penyebab Bau  Keringat  Secara  Bioutografi [Thesis].  Universitas  Airlangga.
Surabaya.
Sinambela, J.M. 1985. Fitoterapi, Fitostandar dan  Temulawak  dalam  prosiding Simposium  Nasional  Temulawak UNPAD 17  –  18  September  1985. Bandung. Hlm. 174 –178.
Irmanita Wiradona; Erni Mardiati; Sulur Joyo Sukendro 525
K o m a l a   O . ,   I s m a n t o .   2 0 0 8 .   D a y a Antimikroba  Ekstrak  Beberapa
Tanaman  Obat  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus. Ekologia, Vol. 8 (1) : 29-36
Rahayu,    P.    Winiati.    2000.    Aktivitas
Antimikroba  Bumbu  Masakan Tradisional      Hasil    Olahan Industri Terhadap Bakteri Patogen dan  Perusak.  Vol  11(2).      Buletin Teknologi  dan  Industri Pangan.