Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 5 Nomor 1, 2023
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i1.16874

## Formulasi Sabun Mandi Padat Ekstrak Daun Jeruk Bali

## ( Citrus Maxima Merr.) sebagai Antibakteri terhadap Staphyloccous aureus
Noela Riski Riani Sumbung 1 , Vivin Nopiyanti 2 , Siti Aisiyah 3* , Reslely Harjanti 4
1,2,3,4 S1 Farmasi., Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Jl. Letjen Sutoyo, Mojosongo, Kec.Jebres, Surakarta 57127, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: mynanda.ais@gmail.com

## ABSTRAK
Sabun  mandi  padat  merupakan  salah  satu  sediaan  kosmetik  yang  paling  sering  digunakan oleh  masyarakat  untuk  membersihkan  tubuh  dari  kotoran.  Daun  jeruk  bali  mengandung flavonoid  yang  mampu  menjaga  kesehatan  kulit,  dan  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  memformulasi  ekstrak  daun  jeruk  bali  menjadi sabun mandi padat yang mempunyai mutu fisik dan stablilitas yang baik serta mengetahui efek antibakterinya terhadap Staphyloccous aureus . Daun jeruk Bali dimaserasi dengan pelarut etanol  96%  kemudian  ekstrak  yang  diperoleh  diformulasi  menjadi  sediaan  sabun  padat dengan  variasi  ekstrak  yaitu  1;  3  dan  5%.  Selanjutnya  dilakukan  pengujian  mutu  fisik  dan stabilitas serta pengujian aktivitas antibakteri sediaan sabun mandi tersebut terhadap bakteri S. aureus dengan metode difusi agar dengan cara sumuran. Tahapan akhir adalah analisis data secara statistik.Hasil penelitian menunjukkan bahwa sediaan sabun mandi padat ekstrak daun jeruk bali memiliki mutu fisik dan stabilitas yang baik, formulasi sediaan mandi padat dengan konsentrasi ekstrak 1%, 3%, dan 5% memiliki aktivitas antibakteri dengan dengan rata-rata diameter daya zona hambat terhadap bakteri S. aureus berturut turut 5,6 mm, 7 mm dan 10,8 mm  yang  termasuk  dalam  kategori  sedang  hingga  kuat.  Formulasi  sediaan  dengan penambahan  ekstrak  5%  memiliki  aktivitas  antibakteri  paling  efektif  dengan  rata-rata zona daya hambat sebesar 10,8 mm.
Kata Kunci: Ekstrak; Daun Jeruk Bali; Sabun Mandi Padat; Staphyloccous aureus
Diterima: 01-11-2022 Disetujui: 05-01-2023 Online: 10-01-2023

## ABSTRACT
Solid bath soap is one of the most common cosmetic preparations used by the public to clean the body from dirt. Grapefruit leaves contain flavonoids that are able to maintain healthy skin, and can inhibit the growth of bacteria. The purpose of this study was to formulate the leaf extract of grapefruit into a solid bath soap that has good physical and stability qualities and to determine its antibacterial effect against  Staphyloccous  aureus.  Grapefruit  leaves  were  macerated  with  96%  ethanol  solvent  then  the extract obtained was formulated into solid soap preparations with extract variations, namely 1; 3 and 5%.  Furthermore,  physical  quality  and  stability  tests  have  been  carried  out  as  well  as  testing  the antibacterial activity of the bath soap preparations against S. aureus bacteria by agar diffusion method by means of wells. The final stage was statistical data analysis. The results showed that the solid bath soap preparations with grapefruit leaf extract had good physical quality and stability, the formulation of solid bath preparations with extract concentrations of 1%, 3%, and 5% had antibacterial activity with an average diameter of the inhibition zone against S. aureus bacteria were 5.6 mm, 7 mm and 10.8 mm,
respectively, which were included in the moderate to strong category. The formulation with the addition of 5% extract had the most effective antibacterial activity with an average inhibition zone of 10.8 mm.
Copyright © 2023 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Extract; Grapefruit Leaves; Solid Bath Soap; Staphyloccous aureus
Received: 2022 -11-01 Accepted: 2023-01-05 Online: 2023 -01-10

## 1. Pendahuluan
Kulit adalah lapisan yang menutupi seluruh permukaan tubuh yang fungsiya melindungi  tubuh  terutama  terhadap  bakteri  dan  kuman,  kulit  juga  menjadi  tempat penghasil  eksresi  yaitu  keringat.  Keringat  yang  tidak  dibersihkan  lalu  bercampur dengan kotoran dapat menyebabkan infeksi pada kulit [1]. Personal Hygiene misalnya penggunaan sabun untuk membersihkan tubuh memiliki tujuan untuk meningkatkan kesehatan pada individu, dengan kulit sebagai garis tubuh pertama yang melakukan pertahanan melawan infeksi [2],[3].
Perkembangan  kosmetik  mulai  bergerak  ke  arah  produk  alami  [4]  karena kecenderungan ke arah produk alami dan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi. Pengembangan  aditif  alami  yang  aman  bagi  kesehatan  untuk  sabun  padat  sangat diperlukan.  Hal  ini  dilakukan  dengan  maksud  meningkatkan  nilai  tambah  produk akhir  sabun  padat.  Manfaat  lain  ini  termasuk  penampilan  yang  halus  dan  mulus, pelembab kulit, dan ketika digunakan, aktivitas antibakteri.
Memanfaatkan sumber daya alam yang tersedia secara lokal adalah pengganti penggunaan  bahan  sintetis  yang  lebih  sedikit.  Elemen  alami  digunakan  untuk mengurangi efek negatif yang ditimbulkan oleh bahan sintetis. Menurut penelitian yang dilakukan [5] daun jeruk bali mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, dan saponin yang memiliki manfaat sebagai antibakteri. Senyawa saponin dan flavonoid memiliki sifat  antimikroba.  Sementara  saponin  akan  merusak  membran  sitoplasma  dan menghancurkan  sel,  flavonoid  memiliki  mekanisme  yang  mendenaturasi  protein  sel bakteri dan merusak membran sel secara permanen [6].
Staphylococcus  aureus merupakan  golongan  bakteri  Gram  positif  bersifat aerob fakultatif,  menghasilkan  pigmen  kuning,  dan  tumbuh  berpasangan  maupun berkelomp ok  dengan  diameter  0,8  μm  sampai  1,0  μm [7],[8].  Pengujian  antibakteri menggunakan  bakteri  gram  positif S.  aureus karena  bakteri  ini  merupakan  bakteri pathogen  penyebab  penyakit  kulit.  Ekstrak  daun  jeruk  bali  dalam  pembuatan  sabun mandi padat dengan harapan mampu mencegah penyakit kulit dan menjaga kesehatan kulit tubuh. Berdasarkan latar belakang di atas guna memanfaatkan potensi bahan alam yang ada di Indonesia berupa ekstrak dari daun jeruk bali sebagai antibakteri terhadap S.  aureus dalam  sediaan  sabun  mandi  padat  maka  perlu  dilakukan  penelitian  yang bertujuan untuk memformulasi ekstrak daun jeruk bali menjadi sediaan sabun mandi padat  yang  mempunyai  mutu  fisik  dan  stabilitas  yang  baik  serta  berpotensi  sebagai antibakteri terhadap S. aureus.
2.  Metode
Penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental yang dilaksanakan di laboratorium  fitokimia,  teknologi sediaan  farmasi  dan  mikrobiologi  Universitas  Setia Budi.

## Alat dan Bahan
Pelarut  etanol  96%  (Bratachem,  Indonesia),  daun  jeruk  Bali,  NaOH  ( TnT chemical ),  aquadestillata,  VCO,  cocamid  DEA  ( comperlan ),  Asam  stearat,  Gliserin,
sukrosa, indikator PP ( merck ), H 2 SO 4 ( emsure ), asam asetat ( emsure ), natrium karbonat ( ucb ), FeCl 3 ( merck ), serbuk Zn ( merck ), bakteri uji S. aureus , media Nutrien Agar (lab USB), media Mannitol Salt Agar (lab USB) dan media Muller Hinton Agar (lab USB) .

## Ekstraksi
Daun jeruk bali yang sudah dideterminasi, dibuat simplisia kering selanjutnya diserbukkan dan sebanyak 600 gram serbuk daun jeruk bali dimaserasi dengan 6 liter etanol 96% selama 24 jam. Selanjutnya terhadap residu yang dihasilkan diremaserasi dengan  3  liter  etanol  96%  selama  24  jam.  Filtrat  yang  diperoleh  kemudian  diuapkan pelarutnya dengan vacuum rotary evaporator pada suhu ± 55 ° C sampai diperoleh ekstrak kental. Ekstrak selanjutnya diperiksa organoleptis, susut pengeringan, diuji bebas etanol serta dilakukan pemeriksaan kandungan fitokimianya.

## Pembuatan Sabun Mandi Padat dari Ekstrak Daun Jeruk Bali
Sediaan sabun mandi padat dibuat dengan variasi ekstrak yaitu 1%, 3%, 5%, 0% untuk  dievaluasi  pengaruhnya  terhadap  mutu  fisik  dan  stabilitas  serta  uji  aktivitas antibakterinya
Tabel 1. Formula ekstrak daun jeruk Bali Bahan (g) Konsentrasi (%) Formula I Formula II Formula III Formula IV Ekstrak daun jeruk bali 1 3 5 0 Asam stearate 5 5 5 5 VCO 25 25 25 25 NaOH 4,6 4,6 4,6 4,6 Gliserin Cocomid-DEA 7 20 7 20 7 20 7 20 Aquades ad 100 ml 100 ml 100 ml 100 ml Source: Mastur, 2021 (Edited)
Pengujian Mutu Fisik dan Stabilitas Sediaan
Pengujian mutu fisik sediaan sabun mandi padat yang dilakukan antara lain uji organoleptis; uji homogenitas; kadar air; pengujian pH; uji daya busa; uji alkali bebas serta uji stabilitas sediaan.
Identifikasi Bakteri S. aureus.
Identifikasi  yang  dilakukan  terhadap  bakteri S.aureus M eliputi  identifikasi makroskopis; mikroskopis; uji katalase serta uji koagulase.

## Uji Antibakteri Ekstrak Daun Jeruk Bali
Sebanyak 3 cawan petri digunakan untuk masing-masing variasi ekstrak daun jeruk bali dan sediaan sabun mandi padat ekstrak daun jeruk bali lalu mencelupkan lidi kapas  steril  ke  dalam  suspensi  bakteri S.  aureus lalu  suspensi  di  diamkan  sampai suspensi  menyerap  ke  dalam  kapas,  setelah  itu  menggoreskan  kapas  yang  berisi suspensi bakteri ke permukaan media MHA kemudia media diinkubasi selama 15 menit agar suspensi menyerap ke dalam media. Setelah 15 menit mengambil kembali media yang  sudah  diinkubasi  lalu  melubangi  media  menggunakan boor  loop sebanyak  5 sumuran,  lalu  mengisi  larutan  sediaan  sabun  mandi  padat  ekstrak  daun  jeruk  bali kedalam sumuran lalu diinkubasi selama 24 jam. Kemudian setelah 24 jam cawan petri
diambil dan melakukan pengamatan terhadap diameter zona daya hambat pada setiap formula [9].

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Ekstraksi
Ekstrak daun jeruk bali yang diperoleh dari proses maserasi adalah sebanyak 75 gram.  Hasil  ini  memperlihatkan  bahwa  jumlah  senyawa  aktif  yang  tersari  dengan menggunakan  pelarut  etanol  96%  dari  600  gram  serbuk  daun jeruk bali yaitu 12,5%. Pada pemeriksaan organoleptis ekstrak daun jeruk bali berwarna hijau kehitaman lalu untuk  berbentuk  ekstrak  kental  dan  berbau  khas  ekstrak.  Berdasarkan  hasil  yang didapat  penetapan  susut  pengeringan  ekstrak  dengan  rata-rata  ketiga  replikasi  yaitu 8,37% ± 0,05. Hasil rata-rata ekstrak daun jeruk bali telah memenuhi persyaratan kadar air karena kurang dari 10% [10].
Selanjutnya  dilakukan  pemeriksaan  bebas  etanol  untuk  memastikan  bahwa ekstrak  tidak  mengandung  etanol  sehingga  didapat  ekstrak  murni.  Hasil  ini menandakan  bahwa  pelarut  etanol  96%  pada  proses  ekstraksi  telah  menguap seluruhnya  saat  pemekatan  menggunakan rotary  evaporator .  Diketahui  bahwa  etanol memiliki kemampuan sebagai antibakteri maka harus dihilangkan agar hasil aktivitas antibakteri murni dari senyawa kimia di dalamnya.
Pemeriksaan  fitokimia  pada  ekstrak  dilakukan  untuk  mengetahui  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  jeruk  bali.  Metode pemeriksaan menggunakan reaksi warna. Identifikasi senyawa kimia dilakukan pada senyawa flavonoid, saponin,dan  tanin. Uji senyawa tanin negatif karena tidak terjadi perubahan warna, namun menurut literatur terjadi perubahan warna berdasarkan hasil uji  fitokimia  yang  dilakukan  berupa uji  flavonoid,  alkaloid,  dan  saponin.  Pergeseran warna yang terjadi menunjukkan bahwa ekstrak daun jeruk bali memiliki kandungan kimia yang bermanfaat. Kandungan alkaloid yang ditemukan dalam ekstrak daun jeruk dibedakan dengan perbedaan warna coklat pada penambahan reagen Bouchardat dan Mayer. Ion tetraiodomerkurat (II) akan berinteraksi dengan ekstrak ketika ditambahkan pereaksi  Mayer,  membentuk  senyawa  kompleks  yang  akan  mengendap.  Hal  ini disebabkan  ekstrak  dapat  mengendapkan  senyawa  alkaloid  alkali  dan  ion  merkuri hanya  ion  logam  berat  yang  mampu  melakukannya  [11],  kemudian  penambahan ekstrak dengan Bouchardat menciptakan kompleks kalium-alkaloid yang diendapkan dalam  endapan  coklat  sebagai  hasil  dari  koordinasi  kovalen  antara  ion  logam+  dan alkaloid [12]. Adanya kandungan flavonoid dalam ekstrak ditandai dengan perubahan warna dari hijau menjadi kuning. Hal ini karena bahan kimia tersebut direduksi dengan Mg dan HCl sehingga menghasilkan warna merah, kuning, atau jingga [13].

## Pengujian Mutu Fisik dan Stabilitas Sediaan
Sediaan sabun mandi padat yang berhasil dibuat dapat dilihat pada gambar 1 berikut:
Gambar 1. Sediaan sabun mandi padat (a) formula 1; (b) formula 2; (c) formula 3 dan (d) basis tanpa ekstrak
Hasil uji organoleptik yang dilakukan dengan metode cycling test pada formulasi sabun padat menunjukkan tidak ada perbedaan antara sampel yang digunakan sebelum dan sesudah pengujian. Tidak ada perbedaan karakteristik aroma ekstrak sebelum dan sesudah dilakukan uji cyling pada sediaan padat dan sediaan. Warna sabun sebelum dan sesudah dilakukan cycling test pada Formula 1 hijau kehitaman, pada Formula 2 dan Formula  3  hijau  kehitaman  pekat  dan  permukaan  yang  mengkilat,  pada  Formula  4 berwarna putih mengkilat kerena pada formula ini tanpa penambahan ekstrak. Tidak adanya  perubahan  sebelum  dan  sesudah  dilakukan cycling  test menunjukkan  bahwa sediaan  sabun  mandi  padat  ekstrak  daun  jeruk  bali  stabil  selama  penyimpanan.  Uji homogenitas dengan metode cycling test pada sediaan sabun padat menunjukkan tidak ada perbedaan antara sebelum dan setelah pengujian. Tidak adanya perubahan sebelum dan  sesudah  dilakukan cycling  test menunjukkan  bahwa  sediaan  sabun  mandi  padat ekstrak daun jeruk bali stabil selama penyimpanan.
Nilai stabilitas kadar air menunjukkan adanya penurunan setelah dilakukan uji stabilitas  dengan  metode cycling  test .  Terjadinya  penurunan  kadar  air  ini  disebabkan adanya penguapan air karena penyimpanan suhu yang relatif tinggi tetapi hal ini tidak mempengaruhi  mutu  fisik  sediaan  karena  masih  didalam  syarat  standar  mutu  fisik kadar air yaitu tidak lebih dari 15%. Hasil yang diperoleh kemudian dianalisis dengan uji Paired Sample T Test untuk membandingkan sampel tiap formula. Pada hasil analisis tersebut menunjukkan nilai sig >0,05, hasil ini menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang  signifikan  antara  sebelum  dan  sesudah  uji  stabilitas  dengan cycling  test hal  ini menandakan bahwa sediaan sabun mandi padat stabil selama pengujian stabilitas.
Hasil uji stabilitas menunjukkan adanya penurunan nilai pH setelah dilakukan uji  stabilitas dengan metode cycling test . Nilai  pH terjadi  penurunan nilai  pH setelah dilakukan  uji  stabilitas  hal  ini  dikarenakan  sediaan  berinteraksi  dengan  kelembaban udara  yaitu  ketika  gas  CO 2 di  udara  bereaksi  dengan  air  dalam  sediaan  sehingga membentuk asam namun penurunan nilai pH sediaan masih masuk dalam rentang nilai pH sediaan sabun mandi padat yaitu 9-11 dan tidak mempengaruhi nilai mutu fisik pH sediaan sabun. Hasil yang didapat kemudian dianalisis dengan uji Paired Sample T Test untuk membandingkan sampel tiap formula. Pada hasil analisis tersebut menunjukkan nilai sig >0,05 hasil ini menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan antara sebelum  dan  sesudah  uji  stabilitas  dengan cycling  test hal  ini  menandakan  bahwa sediaan sabun mandi padat stabil selama pengujian stablitas.
Penurunan nilai stabilitas daya busa terjadi setelah dilakukan uji dengan metode cycling test. Hasil dari stabilitas daya busa menunjukan bahwa adanya penurunan daya busa pada sediaan karena selama penyimpanan di dalam oven kandungan air menguap dan  mempengaruhi  kadar  kandungan  air  yang  terkandung  didalam  ekstrak  hingga
(a) (b) (c) (d)
membuat daya busa mengalami penurunan. Hasil yang diperoleh kemudian dianalisis Paired  Sample  T  Test untuk  membandingkan  sampel  tiap  formula.  Pada  hasil  analisis tersebut menunjukkan nilai sig >0,05 hasil ini menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang  signifikan  antara  sebelum  dan  sesudah uji  stabilitas  dengan  cycling  test  hal  ini menandakan bahwa sediaan sabun mandi padat stabil selama pengujian stablitas. Hasil uji stabilitas menunjukkan tidak adanya penurunan nilai stabilitas alkali bebas setelah dilakukan  metode cycling  test .  Hal  ini  menandakan  bahwa  sediaan  stabil  selama pengujian stabilitas dengan menggunakan metode cycling test. Hasil evaluasi atau uji mutu fisik sediaan sabun mandi padat dapat dilihat pada tabel 2 berikut ini.
Tabel 2. Hasil uji mutu fisik sediaan Kadar air pH Daya busa Alkali bebas Formula  Sebelum Cycling Test Setelah Cycling Test Sebelum Cycling Test Setelah Cycling Test Sebelum Cycling Test Setelah Cycling Test Sebelum Cycling Test Setelah Cycling Test 1 3,54±0,01  1,90±0,41  9,54±0,1  9,42±0,41  63,63±0,15  62,23±0,66  0,016±0,1  0,016±0,1 2 3,43±0,01  1,26±0,10  9,44±0,1  9,31±0,04  65,25±0,20  63,8±0,45  0,016±0,1  0,016±0,1
3 3,26±0,01  1,11±0,10  9,38±0,1  9,15±0,12  68,33±0,25  65,5±0,30  0,016±0,1  0,016±0,1
4 3,59±0,01  2,48±0,56  9,78±0,1  9,64±0,01  62,23±0,15  60,3±0,25  0,016±0,1  0,016±0,1 Keterangan : Formula 1 : Sabun mandi padat dengan konsetrasi ekstrak 1% Formula 2 : Sabun mandi padat dengan konsetrasi ekstrak 3% Formula 3 : Sabun mandi padat dengan konsetrasi ekstrak 5% Formula 4 :  Sabun mandi padat tanpa penambahan ekstrak
Hasil Identifikasi Bakteri S. aureus
Identifikasi makroskopis. S. aureus akan menghasilkan pigmen lipokrom yang menghasilkan koloni berwarna kuning dan oranye-kuning [14]. Pada media Mannitol Salt  Agar,  S.  aureus membentuk  koloni  berwarna  kuning.  Hal  ini  disebabkan  oleh kemampuan S.  aureus untuk  memfermentasi  manitol  [15].  Sebuah  zona  akan berkembang jika bakteri tidak dapat memfermentasi manitol. S. aureus adalah bakteri uji, menurut perubahan warna. Hasil identifikasi secara makroskopis dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Pengujian makroskopis
Identifikasi  mikroskopis.  Pewarnaan  Gram  digunakan  untuk  memeriksa morfologi tes, dan hasilnya diperiksa di bawah mikroskop 100x. Menurut tes S. aureus adalah bakteri gram positif berbentuk kokus yang mengeluarkan warna ungu. Bakteri yang  mempertahankan  warna  pertama,  kristal  violet,  dalam  pewarnaan  Gram  inilah yang  memberikan  rona  ungu.  Komposisi  dinding  sel  mempengaruhi  perbedaan karakteristik  Gram,  dengan  kandungan  peptidoglikan  Gram  positif  lebih  tebal dibandingkan Gram negatif [16] Pewarnaan safranin tidak dapat masuk ke dalam sel bakteri, dan kompleks kristal violet-Lugol yang terbentuk tidak dapat lepas dari warna ungu. Sel Hasil identifikasi secara pewarnaan gram dapat dilihat pada Gambar 3.

## Gambar 3. Pengujian mikroskopis
Identifikasi  katalase.  Enzim  katalase  membantu  hidrogen  peroksida  terurai menjadi  air  dan  oksigen,  menghasilkan  gelembung  udara  dalam  prosesnya.  Karena menonaktifkan enzim seluler, hidrogen peroksida beracun bagi sel. Karena metabolisme aerobik menghasilkan hidrogen peroksida, zat tersebut harus dipecah oleh bakteri yang dapat bertahan hidup dalam lingkungan aerobik [17]. Hasil identifikasi katalase dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Pengujian katalase
Identifikasi  koagulase.  Enzim  koagulase  dan  faktor  serum  berinteraksi  untuk menciptakan esterase, yang mengaktifkan protrombin dan trombin dan meningkatkan pembekuan. Pembentukan fibrin oleh trombin mempengaruhi  terjadinya pembekuan plasma  [18].  Kemampuan  menggumpalkan  plasma  merupakan  salah  satu  faktor
virulensi yang penting dalam patogenesis S. aureus . Hasil identifikasi koagulase dapat dilihat pada Gambar 5.
Gambar 5. Pengujian koagulase
Kesimpulan hasil  identifikasi  bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  25923  juga dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil identifikasi Staphylococcus aureus ATCC 25923 Identifikasi Pustaka Hasil Kesimpulan Makroskopis Media berubah warna menjadi kuning  (Toelle dan Lenda, 2014). Berubah warna menjadi kuning + Pewarnaan gram Sel berwarna ungu, bulat, menggerombol seperti anggur (Jawetz et al ., 2013) Sel berwarna ungu, bulat, menggerombol seperti anggur + Katalase Menghasilkan gelembung gas O2 (Toelle dan Lenda, 2014). Menghasilkan gelembung gas O2 + Koagulase Terjadi (Radji, 2011) penggumpalan plasma  (SNI, 2015). Terjadi penggumpalan plasma +
Keterangan : + = Positif sesuai pustaka ˗ = Negatif, tidak sesuai pustaka

## Pengujian Antibakteri Sediaan
Pengujian efektivitas antibakteri sediaan sabun mandi padat terhadap S.aureus dengan  metode  difusi  sumuran.  Zona  hambat  ditunjukkan  dengan  adanya  daerah bening di sekitar sumuran dengan adanya zona bening ini menandakan bahwa senyawa kimia dari ekstrak daun jeruk bali efektif sebagai antibakteri. Pengujian ini dilakukan terhadap sediaan sabun mandi padat ekstrak daun jeruk bali dengans variasi ekstrak 1;3;5% lalu digunakan pembanding sabun antibakteri sebagai kontrol positif dan juga formula tanpa ekstrak sebagai kontrol negatif. Hasil pengujian antibakteri dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel 4. Hasil pengujian antibakteri
Formula Diameter Hambat (mm) Rata – Rata ± SD Replikasi 1  Replikasi 2 Replikasi 3 1 5,4 5,9 5,7 5,6±0,21 2 7,4 7,2 6,9 7±0,25 3 11 10,5 10,9 10,8±0,26 Kontrol + (Sabun antibakteri) 20 20,5 20,9 20,4±0,36 Kontrol – (Basis) 0 0 0 0±0 Keterangan : Formula 1 : Sabun mandi padat dengan konsetrasi ekstrak 1% Formula 2 : Sabun mandi padat dengan konsetrasi ekstrak 3% Formula 3 : Sabun mandi padat dengan konsetrasi ekstrak 5% Formula 4 : Sabun mandi padat tanpa penambahan ekstrak
Hasil pengujian aktivitas antibakteri sediaan sabun mandi padat ekstrak daun jeruk bali memiliki diameter hambat pada formula 1, formula 2, dan formula 3 berturut- turut  sebesar  5,6  mm;  7  mm;  dan  10,8  mm.  Formula  1  dan  formula  2  masuk  dalam antibakteri kategori sedang karena diameter hambatnya >5 mm kemudian daya hambat antibakteri tertinggi dihasilkan oleh formula 3 dengan penambahan konsentrasi ekstrak 5% dengan rata-rata zona daya hambat 10,8 mm, formula 3 masuk dalam kategori kuat karena zona daya hambat >10 mm. Hal ini disebabkan oleh penambahan ekstrak yang terbanyak pada formula 3 dengan berat penambahan ekstrak sebanyak 5 g.

## 4.  Kesimpulan
Ekstrak  daun  jeruk  bali  ( Citrus  maxima  Merr )  dapat  diformulasikan  menjadi sediaan sabun mandi padat dengan mutu fisik dan stabilitas yang baik serta memiliki aktivitas antibakteri terhadap S. aureus. Formulasi sediaan sabun mandi padat dengan konsentrasi  ekstrak  5%  memiliki  daya  hambat  antibakteri  paling  efektif  terhadap S. aureus dengan zona daya hambat sebesar 10,8 mm ± 0,26.

## Referensi
[1] Barel  AO,  Paye  M,  Maibach  HI,  editors.  Handbook  of  cosmetic  science  and technology. 3rd ed. New York: Informa Healthcare; 2009. 869 p.
[2] Lavenia  C,  Dyasti  JA.  Studi  Komparatif  Personal  Hygiene  Mahasiswa Universitas Indonesia di Indekos dan Asrama. 2019;1(4).
[3] Anhar  LW.  FAKULTAS  KESEHATAN  MASYARAKAT  UNIVERSITAS SUMATERA UTARA. 2016;
[4] Duraisamy A. Bioprospecting and new cosmetic product development: A brief review on the current status.
[5] Azizah, N., Jayuska, A., Harlia. (2015). Aktivitas Anti Rayap Ekstrak Daun Jeruk Bali  (Citrus  Maxima  (Burm.)  Merr.)  Terhadap  Rayap  Tanah  Coptotermes  sp. Jurnal Kimia Katulistiwa , 4(3): 33-39
[6] Aiello,  S.  E.  (2012).  The  Merck  Etinary  Manual.  USA:  Merck  Sharp  &  Dohme Corp
[7] Mahardika,  Sarwiyono,  Surjowardojo.  (2013). Ekstrak  Metanol  Daun  Kersen (Muntingia calabura L) Sebagai Antimikroba Alami Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Penyebab Mastisis Subklinis Pada Sapi Perah. Ternak Tropika , 15(2)
[8] Jawetz, E. Melnick, J. L dan Adelberg, E.A. (2007). Mikrobiologi Kedokteran Edisi 23. Salemba Medika, Jakarta
[9] Mastur,  L.,  Rifqi,  M.,  Kusumawardani,  I.M.,  Harismah,  K.  (2021).  Pembuatan Sabun Padat Antimikroba dari Ekstrak Daun Steva (Stevia Rebaudiana Bertoni) dan  biji  kopi  in  Prosiding  SNPBS  (Seminar  Nasional  Pendidikan  Biologo  dan Saintek)
[10] Davis,  W.W.,  &  Stout,  T.R.,  (1971).  Disc  Plate  Method  of  Microbiological Antibiotic Assay. Applied Microbiology, 22 (1): 659-665.
[11] Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2008)  Farmakope  Herbal Indonesia, Edisi I, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, Indonesia
[12] Harborne,  J.B.  (1987).  Metode  Fitokimia.  Terjemahan:  Padmawinata,  K.,  dan Soediro, I. Bandung : Institut Teknologi Bandung
[13] Rahmi, U., Yunazar, M., & Adlis, S. (2013). Profil Fitokimia Metabolit Sekunder dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Tanaman  Jeruk  Purut  (Citrus  Histrix  DC)  dan Jeruk Bali (Citrus Maxima (Burm. F.) Merr). Jurnal Kimia Unand, 2 (2): 109-114.
[14] Todar,  K.  (2002).  Todar’s  Online  Textbook  of  Bacteriology:  Streptococcus pyogenes, Universitas of Wisconsin-Madison Departement of Bacteriology
[15] Dewi, A. K. (2013). Isolasi, identifikasi dan uji sensitivitas Staphylococcus aureus terhadap amoxicillin dari sampel susu kambing peranakan ettawa (PE) penderita mastitis  di  wilayah  Girimulyo,  Kulonprogo,  Yogyakarta. Jurnal  Sain Veteriner, 31(2): 138-150.
[16] Lay, B. W. (1994) Analisis Mikroba di Laboratorium. PT Raja Grafindo Persada. Jakarta.
[17] Boerlin,  P.,  Kuhnert,  P.,  Hussy,  D.,  Schaellibaum,  M.  (2003).  Methods  for Identification of Staphylococcus aureus Isolates In Cases of Bovine Mastitis. J. Clin. Microbiol., 41(2): 767-771.
[18] Ote, I., Taminiau, B., Duprez, J.N., Dizier, I. and M a i n i l , J . G . ( 2 0 1 1 ) G e n o  t  y  p  i  c  characterization  by  Polymerase  Chain  Reaction  of  Staphylococcus aureus isolates associated with bovine mastitis. Vet. Microbiol. 153: 285-292.