Hestuning, dkk
EFEK PEMBERIAN SUBKRONIS EKSTRAK ETANOL RIMPANG KUNYIT (Curcuma longa Linn. )

## PADA HATI TIKUS

## SUBCHRONIC EFFECT OF ETHANOLIC EXTRACT OF
TURMERIC RHIZOME ( Curcuma longa Linn.)

## ON RAT LIVER
Hestuning Winda Maharani, Moch. Saiful Bachri Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta Jl. Prof. Dr. Soepomo, SH, Janturan, Warungboto, Umbulharjo, Yogyakarta Email : msaifulbachri@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek toksik ekstrak etanol rimpang kunyit (Curcuma longa Linn. ) terhadap hati tikus jantan galur Wistar jika diberikan jangka panjang (subkronis) dengan melihat aktivitas AST dan ALT. Tikus sejumlah 32 ekor, dibagi menjadi empat kelompok. Kelompok I (kontrol) diberi larutan CMC-Na 0,5%, kelompok  II,  III dan  IV  diberi  ekstrak etanol rimpang kunyit dosis 50, 100 dan 200 mg/kgBB. Perlakuan selama 31 hari, kemudian data hasil uji dianalisis menggunakan Uji Kruskal-Wallis dilanjutkan Uji Mann-Whitney U dengan taraf kepercayaan 95%. Dari hasil penelititan diketahui bahwa aktivitas AST dosis 50, 100 dan 200 mg/kgBB berturut-turut  adalah  18,75±0,03  U/L,  18,75±0,03  U/L,  dan  20,39±0,05  U/L. Evektivitas  ALT  adalah  23,42±0,02  U/L,  23,67±0,03  U/L,  dan  24,45±0,05  U/L. Kontrol AST adalah sebesar 18,69±0,03 U/L dan ALT sebesar 23,49±0,02 U/L. Hasil analisis menunjukkan nilai AST dosis 50 dan 100 mg/kgBB tidak berbeda signifikan dengan AST kontrol, tetapi nilai AST dosis 200 mg/kgBB berbeda signifikan dengan kontrol  namun  masih  dalam  range  normal,  nilai  ALT  ketiga  dosis  tidak  berbeda signifikan  dengan  ALT  kontrol.  Kesimpulannya  adalah  pemberian  ekstrak  etanol kunyit  dosis  50,  100  dan  200  mg/kgBB  selama  31  hari  tidak  menyebabkan  toksik pada hati tikus jantan galur Wistar dilihat dari nilai AST dan ALT yang masih dalam range normal.
Kata Kunci : kunyit (Curcuma longa Linn .), toksisitas subkronis, ALT, AST

## ABSTRACT
This study aim to determine the toxic effects of ethanol extract of turmeric (Curcuma longa  Linn.)  on  the  liver  of  male  Wistar  rats  when  given  long-term  (subchronic)  by looking at the activity of AST and ALT. The number of rats are 32, divided into four groups. Group I (normal) treated with a solution of 0.5% CMC-Na. Group II, III and IV  were  given  ethanol  extract  of  turmeric  dose  of  50,  100  and  200  mg/kg  b.w. Treatment for 31 days, then the test data were analyzed using the Kruskal-Wallis test followed  by  Mann-Whitney  U  level  of  95%.  From  the  results  of  the  activity  of  AST known  dose  of  50,  100  and  200  mg/kg  b.w,  respectively  for  18.75±0.03  U/L, 18.75±0.03  U/L,  and  20.39±0.05  U/L  and  in  ALT  by  23.42±0.02  U/L,  23.67±0.03 U/L, and 24.45±0.05 U/L. AST control was 18.69±0.03 U/L and ALT was 23.49±0.02 U/L.  The  analysis  showed  AST  doses  of  50  and  100  mg/kg  b.w.  did  not  differ significantly with AST control, but AST dose of 200 mg/kg b.w. differed significantly with AST control but still within normal range, the value of ALT three doses did not differ  significantly  with  ALT  control.  The  conclusion  was  the  ethanol  extract  of turmeric  dose  of  50,  100  and  200  mg  /  kg  for  31  days  did  not  cause  toxic  liver  of Wistar male rats views of AST and ALT were still in the normal range.
Keywords: Turmeric (Curcuma longa Linn.), Subchronic toxicity, ALT, AST

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara
yang  memiliki  kekayaan  hayati  yang cukup besar yang dapat dikembangkan terutama untuk obat tradisional (Wasito,  2001).  Dari  sekian  banyak ragam  tanaman  di  Indonesia  yang dapat  dikembangkan  menjadi  obat tradisional, salah satunya adalah tanaman  kunyit (Curcuma  longa
Linn .) (Syukur  dan  Hernani,  2011).
Penggunaan  rimpang  kunyit  sebagai obat  untuk  kepentingan  pencegahan maupun  pengobatan  penyakit  sudah
terbukti  secara  nyata,  efektif,  aman, dan  berkhasiat  (Winarto  dan  Lentera, 2003). Tanaman  kunyit  memiliki senyawa  berkhasiat  sebagai  obat  yang disebut  kurkumin.  Kurkumin  yang terkandung dalam kunyit sebagai salah satu  senyawa  hasil  isolasi  mempunyai aktivitas  yang  sangat  luas  antara  lain sebagai  antioksidan,  antihepatotoksik, antiinflamasi dan antirematik (Rustam, 2007).
Konsumsi kunyit dalam masyarakat sering kali tidak terkontrol penggunaannya  terutama  untuk  kunyit
Efek Pemberian Subkronis Hestuning, dkk
dalam bentuk  sediaan jamu tradisional atau  jamu  gendong  yang  biasanya dikonsumsi  rutin  dan  dalam  jangka waktu yang lama, sehingga tidak dapat dipastikan  penggunaan  kunyit  tersebut aman  atau  toksik  terutama  pada  hati karena terdapat sebanyak 64
kandungan  senyawa  di  dalam  kunyit yang  diduga  bersifat  hepatotoksik (Balaji dan Chempakam,  2010),  selain itu  juga  karena  hati  merupakan  target utama  dari  obat  dan  xenobiotik  (Kim et  al. ,  2013),  sehingga  perlu  adanya pengujian terkait toksisitas pada kunyit.  Uji  yang  dilakukan    untuk mengetahui  toksisitas  suatu  senyawa diantaranya  adalah  uji  toksisitas  akut, uji  toksisitas  subkronis  dan  uji toksisitas  kronis,  dimana  masing- masing  uji  memiliki  rentang  waktu pengamatan yang berbeda. Uji
toksisitas  subkronis  meupakan  uji toksisitas  jangka  panjang  dengan pengamatan selama 1-3 bulan
(Loomis, 1988).
Salah satu parameter yang
digunakan dalam uji ketoksikan subkronis,  adalah  ketoksikan  hati karena  hati  adalah  organ  sentral  pada
metabolisme  dalam  tubuh  (Sacher  dan McPherson,  2004).  Parameter  yang sering  digunakan  dalam  pemeriksaan kerusakan  hati  adalah  pemeriksaan secara  biokimiawi,  yaitu  pemeriksaan aktivitas  ALT  dan  AST  (Sadikin, 2002).  Nilai  aktivitas  normal  AST tikus  adalah  10-45  U/L  dan  nilai normal  ALT  tikus  adalah  10-35  U/L (Anonim, 2003). Apabila hati mengalami  kerusakan  atau  sakit  maka aktivitas  AST  dan  ALT  di  dalam  hati akan  meningkat  hingga  melebihi  nilai normal.
Berdasarkan uraian di  atas maka menjadi  dasar  bagi  penulis  untuk meneliti  efek  subkronis  ekstrak  etanol kunyit  pada  tikus  putih  jantan  galur Wistar selama 31 hari dengan menganalisis  aktivitas  ALT  dan  AST- nya  sehingga  dapat  mengetahui  efek ekstrak  etanol  kunyit  pada  hati  yang digunakan dalam jangka waktu lama.

## METODE PENELITIAN
Jenis Penelitian
Penelitian ini termasuk ke dalam jenis penelitian yang bersifat
eksperimental untuk mengetahui ketoksikan  subkronis  dari  pemberian ekstrak  etanol  kunyit  pada  mencit putih  jantan  galur  Wistar  terhadap aktivitas AST dan ALT Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah timbangan analitik, gelas ukur, pengaduk elektrik, destilator, rotary  evaporator ,  gelas beker,  corong  gelas,  kertas  saring  dan penangas air, timbangan tikus, suntikan oral, timbangan analitik, alat- alat  gelas,  spektrofotometer  UV- 1201V, tabung ependorf, mikropipet.
Hewan  uji  yang  digunakan dalam  percobaan  ini  adalah  tikus jantan galur Wistar yang diperoleh dari Laboratorium  Pangan  dan  Gizi  Pusat Antar  Universitas  (PAU)  Universitas Gadjah  Mada  Yogyakarta.  Tikus dipelihara  di  kandang,  tiap  kandang berisi  4  ekor  tikus,  diberi  makan  dan minum  secukupnya.  Bahan  yang  lain adalah  ekstrak  etanol  rimpang  kunyit yang  dimaserasi  dengan  etanol  96%, CMC  Na  0,5%,  reagen  kit  AST  dan reagen kit ALT.
Jalan Penelitian
Penelitian ini menggunakan hewan  uji  berupa  tikus  jantan  galur Wistar  dengan  bobot  150-200  gram yang  berumur  2  bulan  sebanyak  32 ekor. Tikus terbagi menjadi 4 kelompok  perlakuan.  Kelompok  I sebagai  kontrol  negatif  (hanya  diberi CMC-Na  0,5%),  kelompok  II,  III,  dan IV  masing-masing  diberi  ekstrak etanol rimpang kunyit dengan dosis 50 mg/kgBB,  100  mg/kgBB,  dan  200 mg/kgBB.
Ekstrak  etanol  rimpang  kunyit didapat  dengan  metode  maserasi. Serbuk  rimpang  kunyit  500  gram dimasukkan  ke  dalam  toples  kaca  dan kemudian ditambahkan 1250 ml etanol 96%  hingga  seluruh  sampel  tercelup dalam  etanol  96%.  Setelah  itu, dilakukan pengadukan dengan menggunakan stirrer selama  tiga  jam kemudian  maserat  didiamkan  selama 24  jam.  Setelah  itu,  hasil  maserat disaring  dengan  menggunakan  corong Buchner .  Sisa  etanol  96%  yang  ada dalam  hasil  penyaringan  diuapkan dengan  menggunakan vaccum  rotary
evaporator . Selanjutnya hasil
Efek Pemberian Subkronis Hestuning, dkk
evaporasi  diletakkan  diatas waterbath sampai terbentuk ekstrak kental.
Sedangkan  CMC-Na  0,5%  dibuat dengan cara melarutkan 500 mg CMC- Na dalam 100 ml aquadest.
Pemberian ekstrak
etanol rimpang  kunyit  dilakukan  pada  hari ke-1 sampai hari ke-31 (Tahroui, 2010 cited Hertanto,  2014).  Pada hari ke-32 tikus  diambil  darahnya  dari  sinus orbitalis  kemudian  dianalisis  aktivitas AST  -  ALT.  Kadar  ALT  -  AST
ditetapkan berdasarkan reaksi enzimatis.  Larutan  sampel  sebanyak
100  µl  ditambah  dengan  reagen  kit
1000  µl  yang  selanjutnya  dibaca menggunakan optimized uv-Test according  to  IFCC  (International Federation  of  Clinical  Chemistry) yaitu  pengujian  dengan  menggunakan
spektrofotometer  uv-vis  pada  panjang gelombang 334 nm(Anonim, 2006).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Aktivitas ALT dan AST
Data hasil uji toksisitas terhadap aktivitas ALT dan AST dapat dilihat pada Tabel  I. Data berupa rata- rata  ±  SE  aktivitas  ALT  dan  AST dengan satuanU/L yang masing- masing  dianalisis  dengan  SPSS  16,0. Aktivitas normal AST tikus adalah 10- 45U/L dan aktivitas normal ALT tikus adalah  10-35U/L  (Anonim,  2003). Dilihat  dari  Tabel  I  aktivitas  ALT kontrol dan AST kontrol masuk dalam range normal tersebut.
Tabel I. Hasil pengukuran aktivitas ALT dan AST (rerata ± SE)
Kelompok Dosis (mg/kgBB) Aktivitas ALT (U/L) Aktivitas AST (U/L) Kontrol - 23,49 ± 0,02 18,69 ± 0,03 EERK 50 23,42 ± 0,02 18,75 ± 0,03 100 23,67 ± 0,03 18,75 ± 0,03 200 24,45 ± 0,05 20,39 ± 0,05*
*Data berbeda bermakna dibandingkan dengan kelompok kontrol (p < 0,05)
Berdasarkan  Tabel  I  dan  hasil analisis statistik terhadap kedua parameter maka diperoleh hasil sebagai berikut :
Aktivitas AST
Pada Tabel I dapat dilihat bahwa hasil  analisa  pada  aktivitas  AST menunjukkan tidak terjadinya perubahan bermakna terhadap aktivitas AST  antara  kelompok  kontrol  dan kelompok  dosis  50  mg/kg  BB,  antara kelompok kontrol  dan kelompok dosis 100  mg/kg  BB  serta  antara  kelompok dosis  50  mg/kg  BB  dan  kelompok dosis  100  mg/kg  BB  dimana  nilai P>0,05, tetapi terlihat adanya perubahan  yang  cukup  signifikan antara kelompok kontrol dan kelompok dosis 200 mg/kg BB, antara kelompok  dosis  200  mg/kg  BB  dan kelompok  dosis  50  mg/kg  BB  serta kelompok  dosis  200  mg/kg  BB  dan kelompok  dosis  100  mg/kg  BB  yang ditunjukkan dengan nilai P=0,000.
Terjadinya  perbedaan  bermakna hanya  pada  hasil  analisa  AST  saja dapat  dikarenakan  oleh  beberapa faktor,  diantaranya  kandungan  etanol yang  masih  terdapat  dalam  ekstrak,
jenis pakan yang diberikan serta stress oksidatif.  Pada  faktor  yang  pertama, ekstrak  rimpang  kunyit  memang  telah dibebaskan  dari  etanol  dengan  cara diuapkan, namun terdapat kemungkinan  bahwa  masih  terdapat etanol  di  dalam  ekstrak  walaupun dalam  jumlah  yang  sangat  kecil. Etanol  yang  terkandung  di  dalam ekstrak  rimpang  kunyit  kemudian terakumulasi  sesuai  dengan  dosis pemberian.  Semakin  tinggi  dosis ekstrak  maka  diduga  jumlah  etanol juga akan semakin meningkat, sehingga  kenaikan  enzim  AST  jelas terlihat pada dosis yang tertinggi  yaitu 200  mg/kgBB.  Metabolisme  etanol sebagian  besar  terjadi  di  hepar,  pada penggunaan etanol dalam jumlah yang besar  atau  dalam  jangka  waktu  yang panjang dapat merusak hepar. Metabolisme etanol di dalam sel hepar menyebabkan  peningkatan  produksi radikal bebas dengan berbagai mekanisme  sehingga  terjadi  stres oksidatif  yang  akan  merusak  jaringan hati (Nabila dan Santosa, 2011).
Kurkumin merupakan kandungan  utama  di  dalam  kunyit
Efek Pemberian Subkronis Hestuning, dkk
yang  memiliki  aksi  meningkatkan apoptosis  pada  kerusakan  hepatosit. Hal  ini  mungkin  menjadi  mekanisme proteksi dimana kurkumin akan mengatur  penurunan  efek  inflamasi dan fibrogenesis pada hati (Krup et al ., 2013).  Kurkumin  juga  ditemukan mampu  menurunkan  aktivitas  enzim AST dan ALT (Labban, 2014).
Hati  mengandung  lebih  banyak enzim ALT daripada AST (Sacher dan Mc  Pherson,  2004).  ALT  paling banyak  ditemukan  pada  hati,  sehingga untuk  mendeteksi  penyakit  hati,  ALT dianggap  lebih  spesifik  dibanding AST.  Peningkatan  kadar  AST  dan ALT akan terjadi jika adanya pelepasan  enzim  secara  intraseluler  ke dalam darah yang disebabkan nekrosis sel-sel hati atau adanya kerusakan hati secara akut (Wibowo et al ., 2008).
Selain  itu  kenaikan  AST  bisa bermakna  kelainan  non  hepatik  atau kelainan hati yang didominasi kerusakan  mitokondria.  Hal  ini  terjadi karena  AST  berada  dalam  sitosol  dan mitokondria.  Selain  di  hati,  AST terdapat  juga  di  jantung,  otot  rangka, otak  dan  ginjal.  Faktor  non  hepatik
biasanya  tidak  menaikkan  aktivitas AST dan ALT secara drastis (Giannini et al., 2005). Peningkatan kedua enzim selular  ini  terjadi  akibat  pelepasan  ke dalam serum ketika jaringan mengalami kerusakan. Pada kerusakan hati  yang  disebabkan  oleh  keracunan atau  infeksi,  kenaikan  AST  dan  ALT dapat  mencapai  20-100  kali  harga batas normal tertinggi. Umumnya pada kerusakan  hati  yang  menonjol  ialah kenaikan  aktivitas  ALT  (Sadikin, 2002).
Dalam  kondisi  normal,  sel-sel tubuh memiliki kemampuan regenerasi.  Jika  rusak  sel  tubuh  akan menggantinya  dengan  sel-sel  baru. Kemampuan  regenerasi  inilah  yang akan  mengimbangi  kerusakan  sel.  Hal itulah  yang  tidak  tergambar  dari  hasil uji  aktivitas  AST  dan  ALT.  Bisa  saja terjadi kenaikan AST dan ALT hingga di  atas  normal,  tapi  sebenarnya  hati tidak  dalam  kondisi  sakit,  karena  sel yang telah mati segera diganti oleh sel baru (Giannini et al ., 2005). AST/AST ditemukan  di  hati,  otot  jantung,  otot rangka,  pankreas,  paru,  leukosit,  dan eritrosit  (Longo  dan  Fauci,  2013).
Sebagian kecil juga diproduksi oleh sel otot, jantung, otak dan ginjal  sehingga kondisi  kesehatan  fisik  tikus  juga sangat  berpengaruh  terhadap  nilai aktivitas  AST,  untuk  itu  peningkatan kadar  AST  pada  dosis  200  mg/kg  BB dapat  pula  disebabkan  karena  tikus mengalami stres selama penelitian.
Adanya  akumulasi  metabolit-
metabolit dalam tubuh akan menyebabkan oxidative stress . Oxidative stress adalah kondisi gangguan keseimbangan antara produksi radikal bebas dan antioksidan yang berpotensi menimbulkan
kerusakan sel sehingga terjadi peningkatan  kadar  AST  (Jawi et  al ., 2007).  Produksi  radikal  bebas  yang tidak  seimbang,  akan  menyebabkan kerusakan  makromolekul  termasuk protein,  lipid  dan  DNA  (Atessahin etal ., 2005). Perusakan sel oleh radikal bebas reaktif didahului oleh kerusakan membran  sel  antara  lain  mengubah fluiditas, struktur dan fungsi  membran sel.  Pada  penelitian  ini  ada  beberapa kekurangan yaitu mengacu pada
standar penelitian. Standarisasi penelitian yaitu penggunaan hewan uji
yang telah terstandarisasi secara internasional, penggunaan pakan standar  AIN  93,  penggunaan  kandang metabolik  individual,  dan  suasana lingkungan  yang  tenang  (Vincent et al ., 2001). Kurang terstandarnya penelitian  ini  dikarenakan  pakan  yang diberikan  bukan  AIN  93  melainkan pakan  AD  II,  dimana  kandungan  gizi pada  pakan  AD  II  sangat  jauh  di bawah  pakan  AIN  93  sehingga  dapat mengganggu  validitas  hasil  penelitian walaupun secara faktual hasil penelitian  tidak  terjadi  penyimpangan besar.  Terjadi  peningkatan  aktivitas AST  yang  signifikan  pada  dosis  200 mg/kg  BB,  namun  dapat  dikatakan bahwa pada dosis tersebut tidak terjadi toksisitas  karena  nilai  aktivitas  masih berada dalam range normal.
Aktivitas ALT
Dari  hasil  analisis  data  dapat dilihat bahwa pada aktivitas ALT tidak terjadi  perbedaan  yang  signifikan ketika kelompok kontrol dibandingkan dengan kelompok dosis 50 mg/kg BB, kelompok kontrol dibandingkan dengan  kelompok  dosis  100  mg/kg BB,  kelompok  kontrol  dibandingkan
Hestuning, dkk
dengan  kelompok  dosis  200  mg/kg BB,  kelompok  dosis  50  mg/kg  BB dibandingkan  dengan  kelompok  dosis 100  mg/  kg  BB,  kelompok  dosis  50 mg/kg BB dibandingkan dengan kelompok  dosis  200  mg/kg  BB  dan kelompok  dosis  100  mg/kg  BB dibandingkan  dengan  kelompok  dosis 200  mg/kg  BB.  Hal  ini  dapat ditunjukkan  dari  nilai  signifikansi yaitu  p>0,05.  Serum  transaminase adalah  indikator  yang  peka  pada kerusakan  sel-sel  hati  (Goenarwo et al., 2009 ) sehingga  dengan  hasil aktivitas  ALT  dimana  tidak  berbeda bermakna  dengan  kontrol  atau  tidak terjadi  kenaikan  kadar  serum  ALT setelah  pemberian  ekstrak  etanol kunyit  dapat  berarti  bahwa  ekstrak etanol  kunyit  tidak  menyebabkan kerusakan hepatoseluler aktif.
Hasil  pada  penelitian  ini  sejalan dengan  teori  Shankar et  al. (1980) yang  mengemukakan  bahwa  baik serbuk maupun ekstrak etanol rimpang kunyit  bersifat  tidak  toksik.  Selain  itu didukung  juga  dengan  penelitian  dari Winarsih et  al .  (2012)  bahwa  dosis toksik  ekstrak  rimpang  kunyit  adalah
>15  g/kg  BB  (>15000  mg/kg  BB). Dari  hasil  penelitian  dan  didukung dengan penelitian ilmiah lainnya maka pemberian ekstrak etanol kunyit ( Curcuma  longa Linn.)    dosis  50,  100 dan 200 mg/kg BB selama 31 haritidak bersifat toksik sehingga tidak mempengaruhi atau tidak meningkatkan  aktivitas  ALT  dan  AST tikus jantan galur Wistar dimana kedua enzim  tersebut  merupakan  parameter hepatotoksik,  sehingga  penggunaan kunyit  pada  dosis  200  mg/kgBB  tikus setara dengan 26,18 gr serbuk rimpang kunyit diperkirakan tidak menimbulkan  efek  toksik  pada  hati manusia  jika  digunakan  dalam  jangka waktu yang lama.

## KESIMPULAN
Pemberian  ekstrak  etanol  kunyit selama  31  hari  tidak  menyebabkan toksik  pada  hati  tikus  jantan  galur Wistar  dilihat  dari  aktivitas  AST  dan ALT  yang  masih  berada  dalam  range normal.
Pemberian  ekstrak  etanol  kunyit dengan  variasi  dosis  50,  100  dan  200
mg/kg  BB  tidak  menyebabkan  toksik pada  hati  tikus  jantan  galur  Wistar dilihat  dari  aktivitas  AST  dan  ALT yang  masih  berada  dalam  range normal.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2003, Special Species Clinical Pathology . Pennsylvania: University of Pennsylvania Schools of Veterinary Medicine. Anonim,  2006, GOT  (ASAT)  FS [brocure]. DiaSys. Aslam,  M.,  Tan,  C.K.,  dan  Prayitno, A., 2003. Farmasi Klinis (Chlinical Pharmacy):  Menuju Pengobatan Rasional dan Penghargaan Pilihan. Atessahin  A,  S  Yilmaz,  I  Karahan,  I Pirincci, B Tasdemir., 2005, The Effect of Vitamin E and Selenium on Cypermethrin Induced Oxidative Stress in Rats, Turkey Journal Veteriner Animal
Science Vol. 29 : 385-391.
Balaji,  S.,  Chempakam,  B.,  2010, Toxicity prediction of compounds from turmeric ( Curcuma  longa L.). Elsevier 48 (10):2951-9.
Giannini, E.G., Testa, R., and Savarino, V., 2005, Liver Enzyme  Altrations:  a  guide  for clinicians. Canadian Med Asso J
(CMAJ) 172 (3): 44-53. Goenarwo,  E.,  Chodidjah,  Alimi,    M. S., Primanandika, W., Muttaqien,  A.,  2009,  Pengaruh Air  Perasan  Kunyit  terhadap Kadar Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase (AST),  Serum  Glutamic  Pyruvic Transaminase (ALT), dan Bilirubin  Total  Serum. Sains
Medika . Vol. 1 (1).
Gubta,  R.K.,  Kesari,  A.N.,  Watal,  G.,
Murthy,  P.S.,  Chandra,  R.,  & Tandon,  V.,  2005,  Nutritional and  Hypoglycemic  Effect  of Fruit  Pulp  of Annona  squamosa in  Normal  Healthy  and  Alloxan Induced  Diabetic  Rabbit. Ann Nutr Metab. 49, pp 407-413. Hapsoh,  Rahmawati.,  2008,  Modul Agronomi: Budidaya  Tanaman Obat-obatan.   Fakultas Pertanian .  Universitas  Sumatera Utara.
Hertanto,  AB.,  2014,  Efek  Pemberian Subkronis  Ekstrak  Biji  Pala (Myristica  fragrans  Houtt) pada kadar BUN ( Blood Urea Nitrogen )  dan  Kreatinin  Darah
Tikus  Jantan  Galur  Wistar, Skripsi ,  Yogyakarta:  Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan . Jawi IM, DN Suprapta IWP Sutirtayasa., 2007, Efek Antioksidan  Ekstrak  Umbi  Jalar Ungu  Terhadap  Hati  Setelah Aktivitas Fisik Maksimal Dengan Melihat Kadar ALT dan AST  Pada  Darah  Mencit. Dexa Media No. 3 Vol. 20 (102-106).
Kim  Y.,You  Y.,Yoon  Ho-Geun,  Lee Yoo-Hyun, Kim K., Lee J., Kim M. S., Kim Jong-Choon, Jun W., 2014,  Hepatoprotective  effects of  fermented Curcuma  longa L. on  carbon  tetrachloride-induced
Efek Pemberian Subkronis Hestuning, dkk
oxidative  stress  in  rats. Food
Chemistry 151 , 148–153.
Klaseen,  H.,  2001, Casarett  and Doull’s  Toxicology:  The  Basic Science of Poison 6th   ed.
United  States  of  America  : McGraw-Hill.
Krup V, Prakash LH, Harini A., 2013,
Pharmacological  Activities  of Turmeric ( Curcuma longa Linn): A Review. J Homeop Ayurv Med 2: 133.
Longo,  D.  L.  ,  Fauci,  A.  S,  2013,
Harrison’s Gastroenterology and Hepatology. Alih   Bahasa  :
dr.  Brahm    U.  Pendit.  Jakarta  :
EGC .
Loomis,  T.  A.,  1988, Toksikologi Dasar . Semarang : Ikip Semarang Press. Louay  Labban,  2014,  Medicinal  and pharmacological  properties  of
Turmeric  ( Curcuma  longa ):  A review. Int J Pharm Biomed Sci. 2014; 5 (1):17-23 . Nabila,  N.,  Santosa.,  2011,  Pengaruh Pemberian  Metanol  dan  Etanol Terhadap Tingkat Kerusakan  Sel  Hepar  Tikus Wistar. Skripsi . Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang. Rustam,  E.,  Atmasari  I.,  Yanwirasti., 2007, Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Kunyit ( Curcuma domestica Val.)
pada  Tikus  Putih  Jantan  Galur Wistar. Jurnal Sains dan Teknologi  Farmasi .  Vol. 12 ,  No. 2. Hal. 112-114.
Sadikin,  M.,  2002, Biokimia  Enzim . Jakarta  :  Widya  Medika;  pp. 299-316.
Sacher,  A.  R.,  and  McPherson,  A.  R., 2004, Tinjauan  Klinis  Hasil Pemeriksaan Laboratorium . diterjemahkan  oleh  Pendit,  BU. dan Wulandari, D. Jakarta: EGC.
Schumann, G., Bonara, R., Ceriotti, F.,
Ferard,  G.,  2002,  IFCCprimary reference  procedure  for  the measurement of catalytic activity concentrations  of  enymes,  prt  5, Clin  Chem  Lab  Med. 40 (7):718-
24.
Shankar,  T.N.,  Shanta,  N.V.,  Ramesh,
H.P., Murthy, I.A., Murthy, V.S., 1980, Toxicity studies on turmeric (Curcuma  longa) : acute  toxicity  studies  in  rats, guineapigs  and  monkeys. Indian J Exp Biol 18 : 73-75.
Sumiati,  T.,  Adnyana,  I.K.,  2004,
Kunyit, Si Kuning Kaya Manfaat . Bandung : Departemen Farmasi ITB . Syukur dan Hernani., 2001, Budi Daya Tanaman Obat Komersial . Jakarta: Penerbit Penebar Swadaya, Hal. 76. Vincent,H.K., Powers S,K., Dirks’A.J.,Scarpace,P.J.,  2001, Mechanism  for  Obesity-Induced Increase  In  Myocardial  Lipid
Peroxidation. Int  J  Obes  Relat Metab Disord. 25 (3):378-88.
Wasito,  H.,  2011, Obat  Tradisional Kekayaan Indonesia . Yogyakarta
: Graha Ilmu . Wibowo  AW.,  L  Maslachah  &  R. Bijanti,. 2008, Pengaruh Pemberian Perasan Buah Mengkudu  ( Morinda  citrifolia )
terhadap  Kadar    AST  dan  ALT Tikus Putih ( Rattus norvegicus )  Diet  Tinggi  Lemak,
Jurnal Veterineria Medika Universitas  Airlangga, Vol. 1 :1-
5.)
Winarsih, W., Wientarsih, I.,
Sulistyawati,  N.  P.,  Wahyudina,
I.,  2012,  Uji  Toksisitas  Akut Ekstrak  Rimpang  Kunyit  pada Mencit  :  Kajian  Histopatologis Lambung,  Hati  dan  Ginjal. Jurnal VeterinerFakultas Kedokteran Hewan IPB, Vol. 13 .
4:402-409.
Winarto,  W.P.  dan  Tim  Lentera.,
2003, Khasiat & Manfaat Kunyit .  Jakarta  :  Agromedia
Pustaka, hal. 1-12.