Jurnal Masker Medika e-ISSN : 2654-8658 p -ISSN :2301-8631
https://doi.org/10.52523/maskermedika.v12i1.613

## STABILITAS POOLED SERA BERDASARKAN LAMA DAN SUHU PENYIMPANAN TERHADAP MUTU PEMERIKSAAN PROTEIN TOTAL
(Stability of Pooled Sera Based on Storage Length And Temperature on Total Protein Examination Quality)
Indah Sari 1*
*Program Studi DIV Teknologi Laboratorium Medis Institut Ilmu Kesehatan dan Teknologi
Muhammadiyah Palembang
Korespodensi Email: iindahsari1917@gmail.com

## ABSTRAK
Pendahuluan :  Pemantapan  mutu  internal  pada  laboratorium  kimia  klinik  dapat dilaksanakan  dengan  cara  melakukan  pemeriksaan  serum  kontrol  yang  bertujuan  untuk menguji  atau  menilai  validitas  hasil  pemeriksaan  laboratorium  dan  hasil  yang  dikeluarkan laboratorium  sesuai  dengan  kriteria  hasil  pemeriksaan.  Penggunaan pooled  sera yang dibuat  dari  sisa  spesimen  pasien  dapat  menjadi  satu  alternatif  untuk  memangkas  biaya kendali mutu pemeriksaan laboratorium. Kadar total protein didalam darah dapat diketahui dengan  pemeriksaan  di  laboratorium  klinik  sebagai  indikator  status  protein  dalam  tubuh. Masalah  umum  di  laboratorium  klinik  yaitu  menjaga  stabilitas  analit  serum  selama penyimpanan  sampel. Tujuan  Penelitian: untuk  mengetahui  stabilitas pooled  sera berdasarkan  lama  dan  suhu  penyimpanan  terhadap  mutu  pemeriksaan  protein  total. Metode: jenis penelitian adalah eksperimen, dengan rancangan penelitian yaitu time series control group design. Sampel pada penelitian ini adalah serum kontrol berupa pooled sera yang  disimpan  dalam freezer yang  diperiksa  protein  total  setiap  hari  selama  4  minggu. Hasil : rata-rata pemeriksaan protein total yaitu 6.35 mg/dL pada kontrol komersial dan 6.61 mg/dL  pada pooled  sera. Diskusi: terdapat  pengaruh  lama  penyimpanan  dalam freezer terhadap stabilitas pemeriksaan protein total.
Kata Kunci: Stabilitas, Pooled Sera, Lama Penyimpanan

## ABSTRACT
Introduction: Internal  quality  stabilization  in  a  clinical  chemistry  laboratory  can  be  carried out  by  conducting  a  serum  control  examination  that  aims  to  test  or  assess  the  validity  of laboratory examination results and the results issued by the laboratory  following the criteria of the examination results. Using pooled sera from the remaining patient specimens can be an alternative to reduce the cost of quality control of laboratory examinations. Total protein levels in the blood can be determined by examination in a clinical laboratory as an indicator of protein status in the body. A common problem in clinical laboratories is maintaining the stability of serum analytes during sample storage. The study aims to determine the stability of  pooled  sera  based  on  the  duration  and  storage  temperature  of  the  quality  of  the  total protein  examination.  Method:  the  type  of  research  is  experimental,  with  the  study  design being a time series control group design. The sample in this study was a control serum in the form of pooled sera stored in a freezer that was examined for total protein every day for four weeks. Results: The mean total protein test was 6.1 mg/dl in commercial control and 6.6  mg/dL  in  pooled  sera.  Discussion:  Long  storage  in  the  freezer  affects  the  stability  of total protein examination.
Keywords: Stability, Pooled Sera, Long Storage

## PENDAHULUAN
Kadar  total  protein  didalam  darah dapat  diketahui  dengan  pemeriksaan  di laboratorium  klinik  (Hastuti  et  al.,  2018) Kadar protein total yang rendah mengindikasikan tubuh kekurangan protein  (Dwifitri  et  al.,  2022).  Kasus tersebut  terjadi  sebagai  manifestasi  dari kelainan fisiologis dalam tubuh (Munabari & Syahputra, 2022).
Salah  satu  aspek  pemantapan  mutu laboratorium  yaitu  penggunaan  bahan kontrol  sebagai pemantauan  kinerja pemeriksaan  (Maulidiyanti  et  al.,  2021). Bahan  kontrol  harus  memenuhi  syarat yaitu  harus  mempunyai  komposisi  sama atau  mirip  dengan  spesimen,  komponen yang  terkandung  didalam  bahan  kontrol harus dalam keadaan stabil  yaitu  selama waktu penyimpanan bahan ini tidak boleh mengalami  perubahan  dan  bahan kontrol harus  disertai  dengan  sertifikat  analisa yang  dikeluarkan  oleh  pabrik  yang bersangkutan  pada  bahan  kontrol  jadi atau bahan komersial  (Maulidiyanti et al., 2021).
Serum buatan sendiri yang diliofilisasi adalah  jenis  serum  buatan  sendiri  yang dapat  digunakan  sebagai  kontrol  serum (Hartani & Handayati, 2023). Penggunaan serum  kontrol  harus  stabil  dan  dapat digunakan  dalam  jangka  waktu  yang cukup  lama.  Suhu  penyimpanan  menjadi salah  satu  faktor  penting  kestabilan bahan  kontrol  (Wulandari  et  al.,  2023). Masalah umum di laboratorium klinik yaitu menjaga  stabilitas  analit  serum  selama penyimpanan  sampel.  Sampel  biasanya disimpan di pintu lemari es (4 - 8°C) untuk jangka  waktu  pendek  atau  di  dalam freezer  (-20°C)  untuk  jangka  waktu  yang lebih lama, kemudian selama
penanganan sampel pasca analisis termasuk  waktu  dan  suhu  penyimpanan (Makwana, 2023).
Biasanya laboratorium
kecil menggunakan  lemari  es  rumah  tangga yang  suhu  freezernya  lebih  tinggi  dari freezer untuk penyimpanan serum. Laboratorium  klinik  harus  menyimpan spesimen menggunakan suhu yang tepat sesegera mungkin dengan
mempertimbangkan  lama  penyimpanan (Tadewos  Hirigo,  2020).  Penggunaan pooled  sera yang  dibuat  dari  sisa spesimen  pasien  dapat  menjadi  satu alternatif untuk memangkas biaya kendali mutu pemeriksaan laboratorium (Maulidiyanti  et  al.,  2021)  (Syamsudin  et al., 2023).
Banyak penelitian yang telah dilakukan  mengenai  alternatif  bahan kontrol  seperti,  penyimpanan  selama  8 minggu  masih  stabil  dan  mempunyai standar  deviasi  dalam  batas  (Wulandari et  al.,  2023).  Serum  kontrol berupa pooled sera yang disimpan dalam freezer dan  refrigerator  yang  setiap  2  minggu selama  3  bulan  atau  selama  12  minggu mendapatkan  hasil  ada  pengaruh  lama penyimpanan  (Maulidiyanti  et  al.,  2021). Pengukuran kadar kolesterol total metode CHOD-PAP dengan menggunakan serum yang disimpan selama 7 hari dalam suhu 2-8°C dikatakan stabil, namun mengalami peningkatan  pada  hari  ke-6.  Pengukuran ALP  memiliki  koefisien  variasi  yang  lebih sempit  pada  serum  buatan  sendiri sehingga  stabil  sebagai  bahan  kontrol dibandingkan dengan yang kontrol komersial  (Prasad  et  al.,  2019).  Serum lyophilized
homemade
setelah rekonstitusi yang disimpan selama 8minggu  pada  suhu  (- 2)  ˚C  sampai dengan  (- 4)  ˚C  dan  (-20)  ˚C  terhadap kadar kreatinin dan BUN dinyatakan tidak stabil (Wibiseno et al., 2022).
Berdasarkan perbedaan
hasil penelitian terkait stabilitas lama penyimpanan pooled  sera maka  penulis m elakukan  penelitian  tentang  “Stabilitas
Pooled  Sera berdasarkan  Lama  dan Suhu Penyimpanan terhadap Mutu
Pemeriksaan Protein Total”.

## BAHAN DAN METODE
Jenis penelitian
adalah eksperimen, dengan rancangan penelitian yaitu time  series  control  group  design. Sampel  pada  penelitian  ini  adalah  serum kontrol berupa pooled sera yang disimpan dalam freezer yang  diperiksa  kadar protein total setiap hari selama 4 minggu. Serum di bagi menjadi 30 vial disimpan di
Jurnal Masker Medika e-ISSN : 2654-8658 p -ISSN :2301-8631
https://doi.org/10.52523/maskermedika.v12i1.613
dalam  freezer  lalu  diperiksa  kadar  protein total.  Metode  pemeriksaan  protein  total yaitu biuret, dibaca dengan alat Midray BS 380  dengan  satuan  mg/dL.  Penelitian dilaksanakan  di  Laboratorium  Patologi Klinik RSUD OKU Timur.

## HASIL
Hasil  Pemeriksaan  Protein  Total  yang disimpan di freezer
Tabel 1 Hasil Pemeriksaan Protein Total Jenis Kontrol Mean  SD CV Kontrol Komersial 6.35 0.23  3.66 Pooled sera 6.61 0.17  2.54
Pada Tabel 1 menjelaskan bahwa hasil perhitungan  rata –  rata  pemeriksaan protein  total  dari  kontrol  komersial  adalah 6.35  mg/dL  sedangkan  rata –  rata pemeriksaan protein total dari pooled sera adalah  6.61  mg/dL.  Standar  deviasi pemeriksaan  protein  total  dari  kontrol komersial  adalah  0.23  sedangkan pooled sera adalah  0.17.  Hasil  CV  (Coeffisient Variation)  pada  pemeriksaan  protein  total kontrol komersial adalah 3.66% sedangkan pooled sera adalah 2.54%.
Rata-Rata  Hasil  Pemeriksaan  Protein Total

## Gambar 1.
Grafik Rata-Rata Hasil Pemeriksaan
Protein Total
Pada  Gambar  1  menjelaskan bahwa  hasil  rata –  rata  pemeriksaan protein  total  baik  dari  kontrol  komersial maupun pooled  sera yang  disimpan  di
freezer  menunjukkan  hasil  yang  stabil selama 4 minggu.

## PEMBAHASAN
Penelitian  menggunakan  sampel yang  berasal  dari  30  sampel  serum normal pemeriksaan protein total, pemeriksaan  protein  total  terdiri  atas  2 kelompok  yaitu  kontrol  komersial  dan pooled  sera dan  diperiksa  menggunakan alat  Midray  BS  380    dengan  metode biuret.
Suatu pemeriksaan yang dikerjakan  harus  menunjukkan  akurasi dan  presisi  yang  baik.  Presisi  biasanya dinyatakan  dalam  nilai  koefisien  variasi (CV)  yang  dihitung  dengan  rumus. Koefisien  variasi  adalah  standar  deviasi yang  dinyatakan  dalam  persen  terhadap nilai  rata-rata  (Wulandari  et  al.,  2023). Semakin kecil nilai CV maka semakin teliti metode  pemeriksaan  yang  digunakan, sedangkan  semakin  besar  nilai  CV  maka semakin  tidak  teliti  metode  pemeriksaan tersebut (Wibiseno et al., 2022).
Hasil  perhitungan  sampel  yang disimpan  dalam freezer selama  4  minggu mendapatkan
standar deviasi pemeriksaan  protein  total  dari  kontrol komersial  adalah  0.23  sedangkan pooled sera adalah  0.17.  Hasil  CV  (Coeffisient Variation)  pada  pemeriksaan  protein  total dari  kontrol  komersial  adalah  3.66% sedangkan pooled  sera adalah  2.54%. Berdasarkan  hasil  tersebut,  nilai  CV yang diperoleh  dari  pemeriksaan  tidak  melebihi batas rentang maksimum CV protein total yaitu  ≤3%  sehingga  dapat  dinyatakan bahwa  pemeriksaan  yang  telah  dilakukan memiliki presisi yang baik (Wibiseno et al., 2022). Hasil tersebut menunjukkan bahwa pooled sera masih stabil selama 4 minggu dalam penyimpanan menggunakan freezer. Hasil  rata –  rata  pemeriksaan protein  total  dari  kontrol  komersial  adalah 6.35  mg/dL  sedangkan  dari pooled  sera adalah  6.61  mg/dL.  Hasil  rata –  rata pemeriksaan protein total dari pooled sera lebih  tinggi  daripada  kontrol  komersial. Hasil  uji  T  Tidak  Berpasangan  diperoleh nilai  p  yaitu  0,000  (p<0,05)  yang  berarti terdapat  pengaruh  lama  penyimpanan
Jurnal Masker Medika e-ISSN : 2654-8658 p -ISSN :2301-8631
https://doi.org/10.52523/maskermedika.v12i1.613
dalam freezer terhadap stabilitas pemeriksaan protein total. Pada saat melakukan aktivitas fisik terjadi  peningkatan  kebutuhan  oksigen sehingga merangsang eritropoetin menghasilkan sel darah merah di sumsum tulang  (Harahap  &  Pahutar,  2018).  Hasil penelitian  ini  mendapatkan  hasil  yang sama  dengan  penelitian  yang  telah dilakukan  oleh  (Wibiseno  et  al.,  2022) dimana hasil serum lyophilized homemade setelah  rekonstitusi  yang disimpan  pada  suhu  (-2) o C  sampai dengan  (-4) o C  dan  (-20)ºC  dinyatakan tidak stabil.
Pengaruh  stabilitas  bukan  hanya dari  lama  penyimpanan  saja  tetapi  juga ada beberapa faktor lain. Beberapa faktor lain  tersebut  bisa  berasal  dari  suhu penyimpanan dan paparan sinar matahari. Suhu  penyimpanan  yang  tidak  stabil  dan tidak  tepat  dapat  mempengaruhi  hasil pemeriksaan.  Sampel  juga  bisa  menjadi salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi hasil  pemeriksaan,  karena  penanganan yang  tidak  tepat  dapat  terkontaminasi bakteri  dan  dapat  menyebabkan  hasil pemeriksaan yang tidak akurat (Wulandari et al., 2023).
Adapun  faktor  lain  secara  teknis bisa  berasal  dari  kebersihan  alat  yang digunakan,  pemipetan  yang  kurang  tepat, keterampilan  petugas,  gelembung  udara pada  alat,  homogenitas  yang  kurang sempurna, waktu dan suhu inkubasi yang kurang sesuai (Wulandari et al., 2023).
Penyimpanan  sampel  pada  suhu tinggi  atau  rendah  dengan  waktu  yang cukup lama dan penanganan sampel yang tidak  tepat  dapat  mempengaruhi  kadar analit sampel (Wibiseno et al., 2022).

## SIMPULAN DAN SARAN simpulan
Pemeriksaan  protein  total  dari kontrol  komersial  mendapatkan  rata-rata yaitu  6.35  mg/dL  sedangkan  dari pooled sera yaitu  6.61  mg/dL.  Standar  deviasi pemeriksaan  protein  total  dari  kontrol komersial  adalah  0.23  sedangkan pooled sera adalah  0.17.  Hasil  CV  (Coeffisient Variation)  pada  pemeriksaan  protein  total dari  kontrol  komersial  adalah  3.66% sedangkan pooled  sera adalah  2.54%.
Berdasarkan hasil yang diperoleh, terdapat  pengaruh  lama  penyimpanan dalam freezer terhadap stabilitas pemeriksaan protein total.

## Saran
Bagi  peneliti  selanjutnya  hasil penelitian  ini  dapat  digunakan  sebagai bahan  perbandingan  dan  referensi  untuk penelitian dengan parameter yang berbeda  seperti  pemeriksaan  kimia  darah lainnya.  Stabilitas pooled  sera dapat menggunakan  suhu  penyimpanan  yang lebih bervariasi.

## FUNDING
Penelitian ini menggunakan dana pribadi dari peneliti.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Tidak  ada  kemungkinan  terjadi konflik  kepentingan  pada  publikasi  artikel ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Laboratorium Patologi  Klinik  RSUD  OKU  Timur,  IKesT Muhammadiyah  Palembang  dan  semua pihak yang telah berperan dalam penelitian.

## KEPUSTAKAAN
Dwifitri,  U.,  Zulkarnain,  M.,  Flora,  R., Purnama,  Y.,  &  Slamet,  S.  (2022). Karakteristik,  Asupan  Protein,  Kadar
Protein Total dan Kejadian Kekurangan  Energi  Kronis  pada  Ibu Hamil: Studi Cross Sectional Characteristic,  Protein  Intake,  Total Protein  Levels  and  the  Incidence  of Chronic Energy Deficiency in Pregnant  Women:  Cross-Sec. Jurnal Kesehatan  Metro  Sai  Wawai , 15 (2),
108 –120. http://dx.doi.org/10.26630/jkm.v15i1.3
497
Harahap,  N.  S.,  &  Pahutar,  U.  P.  (2018).
Pengaruh  Aktifitas  Fisik  Aerobik  Dan Anaerobik Terhadap Jumlah Leukosit Pada  Mahasiswa  Ilmu  Keolahragaan Universitas  Negeri  Medan. Sains
Olahraga : Jurnal Ilmiah Ilmu Keolahragaan , 1 (2), 33. https://doi.org/10.24114/so.v1i2.7785
Jurnal Masker Medika e-ISSN : 2654-8658 p -ISSN :2301-8631
https://doi.org/10.52523/maskermedika.v12i1.613
Hartani,  K.  P.,  &  Handayati,  A.  (2023). Stability  of  Lyophilized  Homemade Control  Serum  After  Reconstitution on SGOT and SGPT Levels Stored in Freezer  at  Temperature  (-2°  to  -4°C) and  -20°C  for  8  Weeks. Indonesian Journal of Medical Laboratory Science  and  Technology , 5 (1),  53 –
67.
https://doi.org/10.33086/ijmlst.v5i1.32 78
Hastuti,  V.  N.,  Murbawani,  E.  A.,  & Wijayanti,  H.  S.  (2018).  Hubungan Asupan  Protein  Total  Dan  Protein Kedelai  Terhadap  Kadar  Asam  Urat Dalam  Darah  Wanita  Menopause. Journal  of  Nutrition  College , 7 (2),
54.https://doi.org/10.14710/jnc.v7i2.2 0823 Makwana,  N.  (2023). TO  DETERMINE THE EFFECT OF STORAGE TEMPERATURE ON THE STABILITY International Pharmaceutical Research of Modern . September .
Maulidiyanti, E. T. S., Purwaningsih, N. V., Widiyastuti,  R.,  Samsudin,  R.  R.,  &
Arimurti,  A.  R.  R.  (2021).  The  Effect of  Storage  Time  for  Pooled  Sera  on Freezers  on  the  Quality  of  Clinical Chemical Examination. Medicra (Journal of Medical Laboratory Science/Technology) , 4 (2),  78 –82.
https://doi.org/10.21070/medicra.v4i2 .1613 Munabari,  F.,  &  Syahputra,  A.  (2022). Pengaruh  Penggunaan  Spesimen Serum  Dan  Plasma  Edta  Terhadap
Kadar  Total  Protein. Jurnal  Pranata
Biomedika , 1 (2), 134 –140.
https://doi.org/10.24167/jpb.v1i2.515 3
Prasad,  P.,  Kumar,  R.,  &  Kumar,  S. (2019).  Effect  of  Storage  on  the Stability  of  Enzyme  Activities  in
Pooled  Serum. International  Journal of  Research  &  Review , 6 (7),  121 –
126.
Syamsudin,  A.  R.,  Solihat,  M.  F.,  & Kurnaeni, N. (2023). Stabilitas
Pooled  Sera  Dengan  Penambahan Propilen  Glikol,  Etilen  Glikol  Dan Natrium Azida Sebagai
Bahan
Kontrol Alternatif. Jurnal Riset Kesehatan Poltekkes Depkes Bandung , 15 (1), 128 –135.
https://doi.org/10.34011/juriskesbdg.v 15i1.2187
Tadewos  Hirigo,  A.  (2020).  Effect  of Storage  Time  and  Temperature  on the  Stability  of  Serum  Analytes.
Health Sci J , 15 (7), 1 –15.
www.imedpub.com
Wibiseno, A. B., Handayati, A., & Arifin, S. (2022).  Stabilitas  Serum  Lyophilized Homemade  Rekonstitusi  Terhadap Kadar  Kreatinin  Dan  Blood  Urea Nitrogen (Bun) Yang Disimpan Dalam Freezer. Jurnal Media Kesehatan , 15 (2), 55 –65. https://doi.org/10.33088/jmk.v15i2.83 7 Wulandari,  N.  N.,  Handayati,  A.,  & Endarini,  L.  H.  (2023).  Stabilitas Serum Kontrol Liofilisat Buatan Sendiri Setelah Rekonstitusi Terhadap  Kadar  Kolesterol  dan Trigliserida  yang  Disimpan  dalam Freezer  Suhu  (-2°C)  sampai  (-4°C) dan (-20°C). Jurnal Penelitian
Kesehatan Suara Forikes , 14 (4), 67 – 72. http://forikes- ejournal.com/index.php/SF