BAKTERI ASAM LAKTAT DARI DAGING IKAN PEDA SEBAGAI AGEN PROBIOTIK DAN  ENZIM  KOLESTEROL REDUKTASE
Uswatun Hasanah *)

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  types  and  characteristics  of  lactic  acid  bacteria contained in the Peda Mackerel. The research was conducted in April to June 2013 in the  Microbiology  Laboratory  Biology  Department,  FMIPA  UNIMED.  This  study  used descriptive  design  using  aseptic  sampling  techniques.  Materials  used  are  lactic  acid bacteria  taken  from  the  Peda  Mackerel  and  grown  on  MRS  medium  (de  Man  Rogosa Sharpe).  Based  on  the  research  results  of  the  identification  and  characterization  of lactic  acid  bacteria  in  Peda  Mackerel  using  Test  morphology,  Gram  staining  and Biochemical tests of the obtained 4 types of lactic acid bacteria on the Peda Mackerel. The  genus  of  lactic  acid  bacteria  found  include  Eubacterium,  Lactobacillus, Leuconostoc  and  Staphylococcus.    Characteristics  in  general  is  a  form  of  cocci  and bacilli, Gram positive, catalase negative, non motile, the optimum temperature of 20 0 C- 40 0 C and have type homofermentatif and heterofermentatif fermentation.
Kata Kunci : Bakteri asam laktat, peda ikan kembung, probiotik.
*) Dra. Uswatun Hasanah, M.Si. : Staf Pengajar Jurs. Biologi FMIPA UNIMED

## Pendahuluan
akteri  asam  laktat  adalah  kelompok bakteri  gram  positif,  tidak  berspora, berbentuk bulat atau batang, memproduksi asam  laktat  sebagai  produk  akhir  selama fermentasi  karbohidrat,  katalase  negatif,
mikro aerotoleran dan asidotoleran (Axelsson,  1998).    Secara  ekologis kelompok bakteri ini sangat bervariasi dan anggota  spesiesnya  dapat  mendominasi bermacam-macam makanan, minuman atau habitat  yang  lain  seperti  tanaman,  jerami, rongga  mulut  dan  perut  hewan  (Ray, 1993).
Havenaar dan Hulis (1992) menyatakan  bahwa  bakteri  asam  laktat berpotensi  sebagai  probiotik.Penelitian yang dilakukan oleh Oh, Kim dan Wirobo
(2000)  menemukan  bahwa  bakteri  asam laktat Lactobacillus  acidophilus 305C memproduksi  bahan  yang  berpotensi sebagai  probiotik.    Sedangkan  Frost  dan
Moss  (1987)  menyatakan  bahwa  bakteri asam  laktat  dapat  memproduksi  enzyme selama  proses  fermentasi.    Enzym  yang dihasilkan oleh bakteri asam laktat selama proses fermentasi dapat mereduksi kolesterol  dan  enzim  tersebut  adalah Kolesterol Reduktase (Harmayani, 1993). Irawati  (2011)  menyatakan  bahwa bakteri  asam  laktat  (BAL)  diketahui mempunyai peranan penting dalam menjaga  fisiologis  dan  kesehatan  manusia yaitu  berfungsi  menjaga  sistem  kekebalan tubuh.  Sepanjang  hari  bakteri  ini  akan mengenali  mikroorganisme  patogen  yang berbahaya  dan  bahan-bahan  asing  lainnya yang  ada  dalam tubuh kita. Selama proses ini  sel  kekebalan  dan  antibodi  akan bekerjasama  dalam  aliran  darah  untuk menghentikan  sebaran  virus  dan  bakteri jahat.
Salah satu upaya untuk meningkatkan  sistem  kekebalan  tubuh adalah  dengan  mengkomsumsi  probiotik guna menunjang metabolisme tubuh. Lactobacillus  sp merupakan  bakteri
B
Uswatun Hasanah, Bakteri Asam Laktat Dari Daging Ikan Peda…………, hal. 1 - 8
asam  laktat  yang  mempunyai  potensi sebagai probiotik (Purwandhani dan Rahayu, 2003) dan dapat terjaga kestabilannya selama penyimpanan dengan preparasi  sel  kering  sebagai  bubuk probiotik (Hartati dan Harmayani, 2006). Ada  beberapa  manfaat  probiotik dalam tubuh yaitu berperan dalam penurunan kadar kolesterol, dimana
Bifidobakteria menghasilkan  niasin  yang memberi  konstribusi  terhadap  penurunan kolesterol  tersebut.Bakteri  asam  laktat juga dapat mencegah infeksi saluran urine, mengurangi  risiko  timbulnya  kanker  atau tumor  saluran  pencernaan  dan  organ  lain, menurunkan kadar kolesterol serum darah, mengurangi risiko penyakit jantung koroner,  merangsang  terbentuknya  sistem imun, membantu penderita lactose intolerance  dalam  mengkonsumsi  susu,
dan  memperlancar  buang  air  besar
(Umniyati, 2007).
Peda  adalah  salah  satu  produk fermentasi  yang  tidak  dikeringkan  lebih lanjut,  melainkan  dibiarkan  setengah basah,  sehingga  proses  fermentasi  tetap berlangsung.  Umumnya  proses  fermentasi peda  adalah  fermentasi  secara  spontan, dimana dalam pembuatannya tidak
ditambahkan mikroba dalam bentuk starter , tetapi mikroba yang berperan aktif dalam  proses  fermentasi  berkembang  biak secara spontan karena lingkungan hidupnya  yang  dibuat  sesuai  untuk pertumbuhannya.  Fermentasi  ikan  secara spontan  umumnya  menggunakan  garam dengan konsentrasi tinggi untuk menyeleksi mikroba tertentu dan menghambat  pertumbuhan  mikroba  yang menyebabkan  kebusukan  sehingga  hanya mikroba tahan garam yang hidup (Desniar, 2009). Bakteri asam laktat (BAL) merupakan  salah  satu  mikrobiota  atau bakteri  alami  yang  banyak  dimanfaatkan sebagai agensia fermentasi. Proses fermentasi oleh bakteri asam laktat (BAL)
sangat  bergantung  pada  aktivitas  dan proliferasi  bakteri-bakteri  penghasil  asam laktat  (Ensminger,  1990).  Organisme pembentuk asam laktat terbagi dua spesies, yaitu  :  (1)  spesies  homofermentatif  yang mampu  mengubah  95%  heksosa  mejadi asam laktat, dan(2) spesies heterofermentatif,  merupakan  grup  yang memproduksi  asam  laktat  dalam  jumlah sedikit  dan  produk  yang  dihasilkan  yaitu etil  alkohol,  asam asetat, asam format dan karbondioksida (Salle, 1979).
Mengingat  potensi  bakteri  asam laktat  sebagai  agen  probiotik  dan  dapat menghasilkan enzim selama proses fermentasi maka perlu dilakukan
penelitian  untuk  mengetahui  bakteri  asam laktat  yang  terdapat  dalam  daging  ikan peda  yang  dapat  dikembangkan  sebagai agen  probiotik  dan  sebagai  produsen enzim kolesterol reduktase.

## Metode Penelitian
Alat  dan  Bahan .  Alat  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah sebagai  berikut  :  Alat-alat  gelas  yang terdiri  dari  tabung  reaksi,  cawan  petri, tabung  durham,  erlenmeyer,  gelas  ukur, pipet  ukur  dan  pipet  mikro.Jarum  ose, batang  penyebar,  lampu  Bunsen,  penjepit tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi,  bak pewarnaan, incubator dan autoclave.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  sebagai  berikut  :  Daging  ikan peda  yang  diperoleh  dari  pusat  pasar Medan.Medium  MRS  ( de  Mann  Rogosa Sharpe ) untuk menumbuhkan bakteri asam laktat,  medium  (SMA)  Skim  Milk  Agar untuk  uji  proteolitik  dan  medium  API untuk identifikasi isolat proteolitik.Berbagai bahan kimia untuk uji morfologi,  motilitas,  pewarnaan  gram,
katalase,  dan tipe fermentasi.
Prosedur  Penelitian. Prosedur penelitian  dibagi  atas  tiga  tahap  yaitu Enumerasi  dan  Isolasi  Bakteri  Asam
Laktat, Screening Bakteri  Asam  Laktat Proteolitik dan Pengujian Biokimiawi, dan Identifikasi Genera Isolat BAL Proteolitik Enumerasi dilakukan dengan metoda  pengenceran  dan plating dengan
cara  sebanyak  10  gram  sampel  dicampur dengan  90  ml  larutan  garam  0.86%  dan dihomogenasi  dengan stomacher selama  2 menit.  Selanjutnya  dilakukan  pengenceran sampai dengan  10 -7 dan dilakukan plating dengan  metoda poured  plate pada  media agar  MRS  yang  ditambah  dengan  0.5%
(b/V) CaCO 3, selanjutnya dilakukan inkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  48  jam. Isolasi dilakukan dari cawan yang digunakan  untuk  enumerasi  bakteri  asam laktat.  Dari  setiap  sampel  diambil  5  isolat dari  koloni  yang  memberikan  zona  jernih selanjutnya  dilakukan  pemurnian  dengan metode strike  plate sehingga  diperoleh isolat  murni.Pengujian  bakteri  asam  laktat dilakukan    dengan  pengujian  gram, katalase,  motilitas,  tife  fermentasi,  sifat sel,  produksi  asam  laktat.  Penyimpanan isolat    dilakukan  dengan  cara  menyimpan kultur yang berumur 24 jam pada medium MRS  dan  gliserol  20%  (1:1)  pada  suhu  - 60 0 C.
Pewarnaan Gram. Untuk pewarnaan  gram,  terlebih  dahulu  dibuat apusan  bakteri  pada  kaca  objek  yang kering  dan  bersih.  Kemudian  difiksasi diatas  nyala  api  Bunsen  atau  di  udara barulah  dilakukan  pewarnaan  dengan larutan  kristal  violet  selama  1-1,5  menit. Selanjutnya  dicuci  dengan  air  suling  dan ditetesi  dengan  larutan  garam  iodine, dibiarkan selama 1 menit.Kemudian dicuci dengan  larutan  alkohol  95%  sampai warnanya  terhapus  yang  biasanya  selama 30  detik.Cuci  kembali  dengan  air  dan kemudian  diwarnai  dengan  safranin  atau karbol  fuhsin  selama  5  –  15  menit.Cuci lagi  dengan  air,  kelebihan  air  dibuang dengan  menggunakan  kertas  hisap  tanpa menggosok sediaan.
Selanjutnya
dikeringkan  di  udara  atau  diatas  nyala  api
Bunsen.  Diamati  dibawah  mikroskop dengan pembesaran 100x memakai minyak imersi.
Screening Bakteri  Asam  Laktat Proteolitik. Isolat  yang memberikan ciri- ciri  bakteri  asam  laktat  selanjutnya  diuji aktivitas proteolitiknya menggunakan media  skim  milk  agar  dengan  komposisi 2%  skim  dan  2%    agar.  Inokulasi dilakukan dengan cara menusukkan isolate pada  medium  skim  agar,  selanjutnya diinkubasi  pada  suhu  kamar    selama  24 jam.  Isolat  proteolitik  ditandai  dengan pembentukan  zona  jernih  pada  medium skim  agar  dan  aktivitas  proteolitik  diukur berdasarkan ratio diameter zona jernih/diameter koloni (R). Pengujian Biokimiawi dan Identifikasi Spesies Isolat BAL Proteolitik. Karakterisasi  isolat  bakteri asam  laktat  proteolitik  dilakukan  pada isolat yang mempunyai aktivitas proteolitik relatif tinggi (R≥1.5) selanjutnya diuji karakteristik biokimiawinya dengan pengujian kemampuan  tumbuh  pada  berbagai  suhu, pH dan kadar garam serta uji pembentukan gas  hasil  fermentasi  glukosa.  Untuk keperluan  pengujian  maka  isolat  BAL diinokulasikan pada
MRS broth, selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  37 0 C, selama  24–48  jam  dan  diamati  ada tidaknya  pertumbuhan  BAL  pada  masing- masing  pengujian  pH,  suhu,  kadar  garam. Sedangkan  untuk  pengujian  gas  dilakukan dengan tabung durham.
Identifikasi spesies dilakukan pada  isolat  proteolitik  terpilih  dengan pengujian pola fermentasi karbohidrat dari masing-masing  isolat  dengan    sistem  API
50  CH.  Untuk  keperluan  tersebut  maka kultur murni di”strike” sebanyak-
banyaknya pada MRS, selanjutnya diinkubasi  selama  2  hari  pada  37 0 C.
Semua  kultur  yang  tumbuh  selanjutnya diambil dengan ose steril dan disuspensikan  pada  medium  API  pada
Uswatun Hasanah, Bakteri Asam Laktat Dari Daging Ikan Peda…………, hal. 1 - 8
ampul.  Inokulasi  kultur  pada  masing masing  “karbohidrat  strip”  dengan  pipet steril dan diupayakan tidak ada udara yang masuk, selanjutnya diisikan minyak
mineral pada masing-masing tube. Inkubasi  pada  suhu  36 0 C,  selama  48  jam, selanjutnya  dilakukan  pengamatan  hasil fermentasi  pada  masing-masing  jenis karbohidrat.  Test  positip    (+)  ,  bila  ada perubahan  warna  indikator  bromocresol
purple  menjadi  warna  kuning,    akan berubah menjadi warna hitam.

## Hasil dan Pembahasan

## Hasil Penelitian
Hasil dari isolasi dan karakterisasi bakteri  asam  laktat  dari  daging  ikan  peda dirangkum dalam Tabel 1 di bawah ini.
Tabel 1 . Bakteri Asam Laktat dari Daging Ikan Peda
No Kode Sampel Bentuk Sel Motilitas Gram Katalase Sifat Sel Tipe Fermentasi Produksi Gas 1 Ks 1 Basil N M + - Fk. anaerob homofermentasi - 2 Ks 4 Basil NM + - Fk. anaerob homofermentasi - 3 Ks 5 Basil M + - Fk. anaerob heterofermentasi + 4 Ks 8 Basil N M + - Fk. anaerob homofermentasi - 5 Ks 9 Cocus N M + - Fk. anaerob homofermentasi - 6 Ks 12 Basil M + - Fk. anaerob heterofermentasi + 7 Ks 15 Basil N M + - Fk. anaerob homofermentasi - 8 Ks 16 Basil N M + - Fk. anaerob homofermentasi - 9 Ks 19 Cocus N M + - Fk. anaerob heterofermentasi + 10 Ks20 Cocus N M + - Fk. anaerob heterofermentasi + 11 Ks 22 Cocus N M + - Fk. anaerob homofermentasi - 12 Ks 24 Basil N M + - Fk. anaerob homofermentasi -
Dari  Tabel  1di  atas  dapat  dilihat bahwa  terdapat  12  isolat  bakteri  asam laktat  yang  berhasil  diisolasi  dari  daging ikan  peda.Karakteristik  dari  12  isolat bakteri  asam  laktat  tersebut  adalah semuanya tergolong gram positif,
katalasenegatif, berbentuk batang/basil dan kokus, dengan susunan selnya berantai dan menggerombol.    Sifat  sel  fakultatif anaerob, dua isolate bersifat motil  (isolate Ks  5  dan  Ks  12),  delapan  isolate homofermentatif (isolate Ks 1, 4, 8, 9, 15, 16, 22 dan 24),  hanya empat isolate yang heterofermentatif    (isolate  5,  12,  19  dan 20) yang ditandai dengan terbentuknya gas dalam tabung durham.

## Pembahasan
Pewarnaan  Gram  dilakukan  pada kultur  bakteri  umur  24  jam  yang
ditumbuhkan  pada  medium  MRS  padat. Bakteri  asam  laktat  merupakan  bakteri gram positif, yang akan memberikan warna ungu  ketika  diberi  warna  Gram.    Hal  ini disebabkan  karena  bakteri  menyerap  zat warna  dasar  yaitu  kristal  violet  dan warnanya tidak terhapuskan oleh pencucian alkohol, sehingga sel bakteri ini tidak  menyerap  warna  safranin  yang merupakan  warna  kontras  (Ramona  dkk, 2007).  Warna  violet  (ungu)  ini  timbul karena  bakteri  gram  positif  mempunyai lapisan  peptidoglikan  yang  tebal  dan kandungan  lipidnya  rendah  sehingga  akan mengikat lebih banyak kompleks zat warna sehingga  warnanya  menjadi  violet  (ungu)
(Alcamo, 1996). Dalam  pewarnaan  gram  dilakukan juga  penambahan  iodine  yang  merupakan proses fiksasi warna untuk mempertahankan  struktur  dalam  dan  luar
sel  tetap  pada  posisinya.  Fiksasi  juga berperan untuk menginaktivasi enzim yang mungkin  dapat  mengganggu  bentuk  sel dan menguatkan struktur mikroba.Mikroba umumnya  dibunuh  dan  dilekatkan  kuat pada kaca objek selama fiksasi (Prescott et al, 1993).
Uji  tipe  fermentasi  bakteri  asam laktat dilakukan dengan melihat kemampuan bakteri asam laktat memproduksi  gas.  Pengamatan  dilakukan pada  isolat  bakteri  asam  laktat  yang ditumbuhkan    dalam  medium  MRS  cair pada tabung reaksi yang dilengkapi dengan tabung  durham  terbalik  untuk  menangkap gas  yang  diproduksi  oleh  bakteri  asam laktat selama masa pertumbuhannya.
Hasil pengujian menunjukkan bahwa  dari  12  isolat  yang  diperoleh  pada tahap isolasi, 8 isolat bersifat homofermentatif dan 4 isolat menunjukkan sifat  heterofermentatif.Bakteri  asam  laktat mempunyai  dua  tife  fermentasi,  yaitu homofermentatif  dan  heterofermentatif. Bakteri asam laktat homofermentatif hanya memproduksi  asam  laktat  sebagai  produk utama,  sedangkan  bakteri  asam  laktat heterofermentatif,  selain  asam  laktat  juga memprodukasi  etanol,  asam  asetat  atau asam lainnya dan juga gas CO 2 .
Uji  katalase  dilakukan  dengan meneteskan  2  tetes  H 2 O 2 3%  pada  kultur bakteri  berumur  24  jam.    Reaksi  positif ditunjukkan dengan
terbentuknya gelembung-gelembung  gas  sebagai  hasil pemecahan H 2 O 2 oleh enzim katalase yang diproduksi oleh bakteri tersebut.  Menurut
Stamer  (1979),  bakteri  asam  laktat tergolong bakteri katalase negatif, sehingga hasil uji katalase tidak membentuk  gelembung  udara  yang  berarti bakteri  asam  laktat  tidak  menghasilkan enzim katalase selama masa pertumbuhannya  sehingga  tidak  terbentuk gas  karena  tidak  terjadi  pemecahan  H 2 O 2 . Hasil uji katalase menunjukkan bahwa dari
12  isolat  yang  diperoleh  semuanya menunjukkan katalase negatif.
Identifikasi  genera  bakteri  asam laktat memerlukan karakter-karakter utama dari  bakteri,  yaitu  morfologi  sel  (bentuk sel  dan  susunan  sel),  uji  biokimia dan tife fermentasi.Uji  morfologi  dan  uji  tife fermentasi  sudah  dapat  digunakan  untuk identifikasi ke tingkat genera bakteri asam laktat (Margiono dan Rahayu, 1997).
Dari  data  yang  disajikan  pada Tabel  1  dapat  ditentukan  genera  bakteri asam  laktat  yang  hidup  pada  daging  ikan peda.Genus-genus bakteri asam laktat yang ditemukan pada penelitian ini adalah genus Eubacterium , Lactobacillus , Leuconostoc dan Staphylococcus .

## Genus Eubacterium
Hasil identifikasi dan karakterisasi menunjukkan  bahwa  ciri-ciri  bakteri  asam laktat  yang  ditemukan  pada  daging  ikan peda  adalah gram positif, katalase negatif, bentuk  sel  basil/batang,  heterofermentatif, motil, memproduksi
gas dalam pertumbuhannya, warna koloni putih susu, tepi  koloni  entire,  struktur  dalam  opaque, warna  pigmen  jernih  dan  sifat  selnya adalah fakultatif anaerob.
Menurut  Holt  et  al.,  (1994), bakteri Eubacterium berbentuk  batang, gram  +  dan  ukuran  tidak  menentu, beragam  sekali  antar  spesies  (0,2-2,0  x 0,3-10µm)  dan  bukan  bentuk  filamen. Selnya  tidak  menentu,  sering    gembung atau  ujungnya  lonjong dan kadang-kadang membengkok. Eubacterium biasanya tersusun satu-satu, berpasangan atau dalam rantai,  gram  +  dalam  kultur  muda, motilitas  berubah-ubah  (tidak  tetap),  tidak ada spora, anaerob
sempurna,
membutuhkan  teknik  anaerobik  untuk pertumbuhannya  dan  membutuhkan  media yang  kaya  akan  nutrisi,  koloni  biasanya agak cembung atau flat, kemoorganotrofik,
metabolisme fermentatif, beberapa
memecah  karbohidrat.    Produk  dari
Uswatun Hasanah, Bakteri Asam Laktat Dari Daging Ikan Peda…………, hal. 1 - 8
metabolisme  adalah  glukosa  atau  pepton. Biasanya  campuran  dari  asam  masuk dalam  jumlah  besar  dari    butirat,  asetik atau  formik  dengan  menunjukkan  gas  H 2 , indole  dan  katalase  negatif,  serta  oksidase positif.  Kemungkinan menghasilkan nitrat dan  gelatin  mencair.Ditemukan  dalam rongga  perut  dari  hewan,  feses,  produk tumbuhan  dan  hewan  dan  tanah.Beberapa spesies  sering  bersifat  pathogen  pada hewan  vertebrata.Isolat  yang  tergolong genus  Eubacterium  pada  penelitian  ini adalah Ks 5 dan Ks12.

## Genus Lactobacillus
Hasil identifikasi dan karakterisasi menunjukkan  bahwa  ciri-ciri  bakteri  asam laktat  yang  ditemukan  pada  daging  ikan peda  adalah gram positif, katalase negatif, bentuk  sel  basil/batang,  non  motil, homofermentatif, warna koloni putih susu, tepi koloni entire,  struktur dalam opaque, warna  pigmen  jernih  dan  sifat  selnya fakultatif  anaerob.      Menurut  Holt  et  al., (1994),  bakteri Lactobacillus ini  termasuk
Gram  +,  tidak  berspora,  tidak  motil, fakultatif anaerob, kadang-kadang mikroaerofilik,  sedikit  tumbuh  di  udara tapi bagus pada keadaan di bawah tekanan oksigen rendah dan beberapa anaerob pada isolasi. Manurut Stamer (1979), Lactobacillus ada  yang  homofermentatif dan  heterofermentatif.    Pada  media  agar, koloni  berukuran  2-5  mm,  cembung, entire,  buram  ( opaque )  dan  tanpa  pigmen,
kemoorganotrof,
metabolismenya fermentatif  dan saccharoclastic. Setengah dari  produk  akhir  karbon  adalah  asam laktat,  tidak  menghasilkan  nitrat,  gelatin tidak  mencair,  sitokrom  negatif,  katalase negatif dan oksidase positif.Tumbuh optimum pada suhu 30-40ºC. Lactobacillus tersebar  luas  di  lingkungan  terutama  pada hewan  dan  produk  makanan  dari  sayur- sayuran. Lactobacillus biasanya  mendiami saluran  usus  burung  dan  mammalia,  dan vagina  mammalia  serta  tidak  bersifat
pathogen.  Isolat  yang  tergolong  pada genus Lactobacillus pada  penelitian  ini adalah  Ks1,  Ks  4,  Ks  8,  Ks15,  Ks  16  dan Ks 24 .

## Genus Leuconostoc
Isolat yang tergolong dalam genus Leuconostoc adalah  sampel  dengan  kode Ks 19 dan Ks 20. Ciri dan sifat dari bakteri asam  laktat  yang  teridentifikasi  adalah gram  +,  katalase  negatif,  bentuk  sel cocus/bulat,  heterofermentatif,  non  motil, produksi  gas  negative,  warna  koloni  putih susu,  tepi  koloni  entite,  struktur  dalam opaque,  warna  pigmen  jernih  dan  sifat selnya  fakultatif  anaerob.    Ciri-ciri  yang ditemukan  ini  sesuai  dengan  genus Leuconostoc yang  dikemukakan  oleh Stamer  (1979),  yaitu  berbentuk  bulat  atau cocus berpasangan, menggerombol/berantai,  katalase  negatif, gram +, heterofermentatif, non motil, tidak menghasilkan  spora,  anaerob  fakultatif, koloni kecil, pada kultur tegak pertumbuhan  terjadi  sepanjang  tusukan dan sedikit pada permukaan, suhu optimum  20-30ºC,  nonproteolitik,  tahan terhadap konsentrasi garam tinggi, memulai  fermentasi  secara  cepat  sehingga menghambat  pertumbuhan  bakteri  lain yang  tidak  diinginkan  tumbuh  selama fermentasi.

## Genus Staphylococcus
Isolat  yang  tergolong  pada  genus Staphylococcus adalah  isolat  dengan  kode Ks 9 dan Ks 22 dengan ciri dan sifat yang teridentifikasi  adalah  gram  +,  katalase negatif, bentuk sel
cocus/bulat, homofermentatif,  non  motil,  produksi  gas negatif,  warna  koloni  putih  susu,  tepi koloni  entire,  struktur  dalam  opaque, warna  pigmen  jernih  dan  sifat  selnya fakultatif  anaerob.  Ciri  yang  ditemukan pada  isolat  bakteri  asam  laktat  ini  sesuai dengan genus Staphylococcus yang dikemukakan oleh Holt et al., (1994), yaitu
bakteri Staphylococcus sp  adalah  gram  +, tidak  berspora,  non  motil,  fakultatif anaerob,  kemoorganotrofik  dengan  dua pernafasan  dan  metabolisme  fermentatif. Koloni  biasanya  buram,  biasanya  putih atau  krem  dan  kadang-kadang  kuning keorange-orangean.Bakteri  ini  katalase negatif  dan  oksidase  negatif,  sering mengubah nitrat menjadi nitrit, rentan lisis oleh  lisostafin  tapi  tidak  oleh  lisozim. Biasanya  tumbuh  dengan  kadar  garam 10%  NaCl.    Sebagian  besar  terdapat  pada kulit dan mukosa membran dari vertebrata berdarah panas, akan tetapi sering diisolasi dari  produk  makanan,  debu  dan  air. Beberapa  spesies  ada  yang  patogen  pada manusia dan hewan.

## Simpulan dan Saran

## Simpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dibahas disimpulkan bahwa:
1.  Terdapat  12  isolat  bakteri  asam  laktat yang berhasil diisolasi dari daging ikan peda.
2.  Karakteristik  dari  12  isolat  bakteri asam  laktat  tersebut  adalah  semuanya tergolong gram positif, katalase negatif, berbentuk  batang/basil  dan  kokus, dengan  susunan  selnya  berantai  dan menggerombol.  Sifat  sel  fakultatif anaerob,  dua  isolate  bersifat  motil (isolate  Ks  5  dan  Ks  12),  delapan isolate  homofermentatif  (isolate  Ks  1, 4,  8,  9,  15,  16,  22  dan  24),    hanya empat  isolate  yang    heterofermentatif (isolate 5, 12, 19 dan  20) yang ditandai dengan  terbentuknya  gas  dalam  tabung durham. 3.  Genus-genus  bakteri  asam  laktat  yang ditemukan  pada  penelitian  ini  adalah genus Eubacterium (isolateKs 5 dan Ks 12), Lactobacillus (isolate  Ks1,  Ks  4, Ks  8,  Ks15,  Ks  16  dan  Ks  24), Leuconostoc (isolate Ks 19 dan Ks 20) dan Staphylococcus (isolate  Ks  9  dan Ks 22 ).

## Saran
Dengan ditemukannya BAL dalam daging  ikan  peda  maka  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengetahui aktifitas  probiotik  dan  produksi  enzim kolesterol  reduktase  yang  nantinya  dapat dikembangkan  menjadi  bahan  makanan kesehatan.
Uswatun Hasanah, Bakteri Asam Laktat Dari Daging Ikan Peda…………, hal. 1 - 8

## Daftar Pustaka
Axelsson,  L.T.    (1998).    Lactic  Acid Bacteria Classification and Physicly. In : Lactic Acid Bacteria .
Seppo  Salminen  and  Atte  Vin Wright (Eds).  New York.  Marcel Dekker Inc.
Desniar, Peornomo D, Wijatur W. (2009).
Pengaruh Konsentrasi Garam pada Peda  Ikan  Kembung  ( Rastrelliger sp .)  Dengan  Fermentasi  Spontan. Departemen Teknologi Hasil Perairan  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu Production  Enzyme  by  Fermentasi.  In: Biotechnology Rehm,  M.J  and Reed, G. (Eds). Vol. 7a.Weinheim.Verlag Chemic. Harmayani,  E.    (1993). Reduction  of Cholesterol  Level  in  fat  with Biological System . PhD Dissertation.Colorado State University.    Colorado.    Fort Collins. Hartati,  S  dan  E.  Harmayani.(2006). Preparasi Sel Kering Lactobacillus  sp  DAD  l3  dan Kestabilannya sebagai bubuk Probiotik . J. Mikrobiotogi Indonesia. Vol I I (1) : I -4. Havenaar,  R.  and  J.H.J.  Hulis  in”Veld.
(1992).    Probiotic  :  A  general Viev,  In:  B.J.B.  Wood  (Ed). The Lactic  Acid  Bacteria .    London.
Elsevier Applied Science.
Holt  G.  J.,  Krieg  R.  N,  Sneath  A.  H.  P.,
Staley  T.  J.,  Williams  T.  A., (I994), Bergey’s  Manual  of Determinative Bacteorology Second  Edition, Williams  and Wilkins Awaverly Company, USA. Irawati, E., (2011), Bakteri Homofermentatif ,http://www.blogsp ot./bakteri-homofermentatif-
kamriantiramli.html, (Diakses tanggal 2 januari 2012).
Oh,  S.,  S.H.  Kim.,  R.W.  Wirobo.  (2000). Characterization  and  Purification of  Bacteriocin  Produced  by  a Potential Probiotic Cultur Lactobacillus  achidopllus 305C . J.Dairy Sci. 83 : 2747-2752 Purwandhani,  S.  N.  dan  Rahayu,  E.  S. (2003). Isolasi dan Seleksi Lactobacillus yang Berpotensi sebagai Agensia Probiotik . Agritech 23 (2):67 -74 Ray,  B.    (1993). Cell  off  Lactic  Acid Bacterial as Food Biopreserfatives of Microbial Origin .Ray,  B  and  Daeschel,  M. (Eds).  Germany.  CRC Press.Inc. Ristiati, N P., (2000), Pengantar Mikrobiologi  Umum ,  Dirjen  Dikti, Jakarta. Umniyati,  S.,  (2007), Pengembangan Probiotik Bakteri Asam Laktat dan Enzim  Kolesterol  Reduktase  dari Limbah Kotoran Ayam yang Potensi Menurunkan Kadar Kolesterol  Daging  Ayam  Broiler , Laporan  Hasil  Penelitian,  FMIPA
UNY.