Uji Efek Tonikum Ekstrak Etanol Daun Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhadap Mencit dengan Metode

## Natatory Exhaustion
The Tonic Effects Test of Ethanolic Extract of Pandan Wangi Leaf ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) on Mice by Using Natatory Exhaustion Method)
Hanifah Miftah Mafitri 1 , Anom Parmadi 2 1,2 Politeknik Kesehatan Bhakti Mulia aparmadi@yahoo.com
Abstract : The use of chemical medicine as a tonic in the society was increased, so it was necessary to research on the use of natural ingredients which had a small amount of effect. Pandan wangi leaf (Pandanus  amaryllifolius  Roxb)  was  a  herbaceous  plant  that  has  properties  such  as  dyes,  flavour, tonic, and appetite enhancer. The contain of chemicals pandan wangi leaf were alkaloids, flavonoids, polyphenols,  and  tannins.  These  study  aimed  to  examine  the  effects  of  tonics  and  determine  the optimum dose of the extract gave a tonic effect EDPW. The test conducted tonic effect to male mice Swiss  by  using  Natatory  exhaustion  method.  Giving  oral  treatment  were  did  by  divided  into  five treatment groups namely VCO 0,5 ml/g, caffeine 13 mg/kg, with variations EDPW extract dose of 300 mg/kg, 600 mg/kg, and 1200 mg/kg. The results showed that the extract EDPW with variations in dose of 300 mg/kg, 600 mg/kg, and 1200 mg/kg has a tonic effect (35,71 ± 5,05) %, (71,42 ± 5,05) % and (114,28  ±  5,05)  %.  The  resulting  value  was  the  test  statistic  One  way  ANOVA  with  Post  Hoc  Test namely LSD at the highest dose of the extract EDPW 1200 mg/kg caffeine has a significant value of p > 0,05 is 0,155. These means that of extract EDPW dose of 1200 mg/kg was the most optimum dose provides a tonic effect because it had a value nearly equal to caffeine as a comparison. So, the results of  the  study  EDPW  extract  these  study  could  be  developed  to  create  a  stamina  stimulus  because  it potentially had a tonic effect.
Keywords : Pandanus amaryllifolius, Tonic effect, Mice, Natatory exhaustion.
Abstrak : Penggunaan  obat kimia sebagai tonikum di masyarakat semakin meningkat, sehingga hal ini  perlu  adanya  penelitian  terhadap  penggunaan  bahan  alam  dengan  efek  samping  ringan.  Daun pandan  wangi  (Pandanus  amaryllifolius  Roxb)  merupakan  tanaman  perdu  yang  memiliki  khasiat diantaranya  sebagai  pewarna,  pengaroma,  tonikum,  dan  penambah  nafsu  makan.  Kandungan  kimia daun  pandan  wangi  yaitu  alkaloid,  flavonoid,  polifenol,  dan  tanin.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menguji adanya efek tonikum dan menentukan dosis yang paling optimum memberikan efek tonikum dari  ekstrak  EDPW.  Pengujian  efek  tonikum  dilakukan  terhadap  mencit  jantan  galur  Swiss  dengan menggunakan  metode  Natatory  exhaustion.  Pemberian  perlakuan  dilakukan  secara  peroral  dengan dibagi  menjadi  lima  kelompok  perlakuan  yaitu  VCO  0,5  ml/g,  kafein  13  mg/kg  BB,  ekstrak  EDPW dengan  variasi  dosis    300  mg/kg  BB,  600  mg/kg  BB,  dan  1200  mg/kg  BB.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  EDPW  dengan  variasi  dosis  300  mg/kg  BB,  600  mg/kg  BB,  dan  1200 mg/kg  BB  memiliki  efek  tonikum  berturut-turut  yaitu  sebesar  (35,71  ±  5,05)%,  (71,42  ±  5,05)%,  dan (114,28 ± 5,05)%. Nilai hasil statistik uji One way ANOVA dengan Post Hoc Test yaitu LSD pada dosis tertinggi  ekstrak  EDPW  1200  mg/kg  BB  dengan  kafein  memiliki  nilai  signifikansi  p  >  0,05  adalah 0,155.  Hal  ini  berarti  bahwa  ekstrak  EDPW  dosis  1200  mg/kg  BB  merupakan  dosis  yang  paling optimum  memberikan  efek  tonikum  karena  memiliki  nilai  yang  hampir  sama  dengan  kafein  sebagai pembanding. Sehingga hasil dari penelitian ekstrak EDPW ini dapat dikembangkan sebagai obat baru penambah stamina karena berpotensi memiliki efek tonikum.
Kata kunci : Pandanus amaryllifolius, Efek tonikum, Mencit, Natatory exhaustion.

## I. PENDAHULUAN
Seiring  dengan  semakin  meningkatnya penggunaan  obat  penambah  stamina  atau tonikum  di  kalangan  masyarakat  dari  bahan
kimia,  maka  perlu  diimbangi  dengan  upaya pengembangan  obat  penambah  stamina  dari tumbuhan  berkhasiat  obat  yang  relatif  lebih aman salah satunya dari tanaman daun pandan wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.).  Daun
pandan wangi merupakan tanaman perdu  yang memiliki  aroma  khas  berkhasiat  sebagai tonikum,  penambah  nafsu  makan,  penenang, penyedap,  pewangi  dan  pemberi  warna  hijau pada masakan (Dalimartha, 2000). Aroma khas yang  terdapat  pada  daun  pandan  wangi tersebut  diduga  adanya  senyawa  turunan  dari asam  fenil  alanin  yaitu 2-acetyl-1  pyrroline (Faras et  al .,  2014).  Kandungan  kimia  yang terdapat  pada  tanaman  daun  pandan  wangi yaitu  alkaloid,  saponin,  flavonoid,  tanin  dan polifenol (Dirjen POM, 2000).
Pengembangan  potensi  daun  pandan wangi  sebagai  penambah  stamina  ini  sangat penting  dilakukan  penelitian  untuk  mengatasi kelelahan  dan  meningkatkan  stamina  tubuh akibat  dari  padatnya  aktivitas  manusia  di  era modern dalam memenuhi kebutuhan sosial dan ekonomi guna untuk meningkatkan kesejahteraan hidup.
Penggunaan  daun  pandan  wangi  secara empiris telah digunakan di  masyarakat sebagai pengobatan  umumnya  dengan  cara  diseduh dengan  menggunakan  air  panas  dan  diminum secara  rutin.  Kerugian  penggunaan  seduhan dengan  air  panas  tersebut  yaitu  ekstrak  yang dihasilkan  tidak  dapat  bertahan  lama  karena sifat  air  mudah  ditumbuhi  oleh  kapang  dan mikroorganisme.  Zat  aktif  yang  berfungsi sebagai  penambah  stamina  atau  tonikum  lebih banyak larut dalam etanol. Menurut Agustiningsih et  al., (2010)  menyatakan  bahwa hasil  optimasi  cairan  penyari  yang  paling banyak  menarik  senyawa  fenolik  dan  flavonoid pada  pembuatan  ekstrak  daun  pandan  wangi secara  maserasi  adalah  etanol  96%.  Ekstrak etanol  daun  pandan  wangi  mengandung senyawa fenolik, alkaloid, saponin, dan flavonoid (Fatimah, 2007). Kandungan flavonoid yang terdapat pada ekstrak etanol daun pandan wangi  tersebut  diduga  dapat  bekerja  sebagai stimulan jantung.
Tonikum  adalah  obat  atau  campuran bahan  obat  yang  dapat  digunakan  untuk meningkatkan  stamina  dan  menambah  energi tubuh  setelah  melakukan  aktivitas  sehari-hari dalam  waktu  yang  relatif  singkat.  Efek  tonikum adalah efek yang dapat memacu dan memperkuat  sistem  organ  serta  menstimulan terhadap  perbaikan  sel-sel  tonus  otot.  Efek tonikum  dapat  digolongkan  ke  dalam  golongan obat psikostimulansia .  Senyawa  golongan psikostimulansia ini  dapat  digunakan  untuk meningkatkan kemampuan berkonsentrasi pada  kapasitas  yang  bersangkutan  (Mutschler, 1991).  Efek  tonikum  terjadi  karena  efek stimulan  yang  dilakukan  terhadap  sistem  saraf pusat.  Stimulan  yang  dihasilkan  bekerja  pada korteks yang  mengakibatkan euforia ,  tahan
lelah,  dan stimulansia ringan.  Pada  medula menghasilkan  efek  meningkatkan  pernapasan, stimulasi  psikomotor , stimulasi  vagus , euforia , dan  dapat  menunda  timbulnya  sikap  negatif terhadap  kerja  yang  melelahkan  (Nieforth  dan Cohen, 1981).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  untuk menguji  adanya  efek  tonikum  ekstrak  etanol daun  pandan  wangi  (EDPW)  dan  menentukan dosis  yang  paling  optimum  memberikan  efek tonikum terhadap mencit dengan menggunakan metode Natatory exhaustion.

## II. METODE PENELITIAN
Jenis
penelitian adalah penelitian eksperimental dan desain penelitian ini menggunakan True experimental design dengan pendekatan Randomized  post test only control grup design .
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini yaitu  timbangan  analitik  (Sonic),  blender (Airlux), waterbath (NH-4), kain flanel (Lokal), kertas  saring  (Lokal),  oven  (Sonic), needle oral dan  spet  5  ml  (Terumo),  tangki  air  ukuran 50x30x25  cm  (Lion  star),  pembuat  gelombang (Lokal),  kandang  mencit  (Lion  star),  spidol marker  (Snowman),  stopwatch  (Advan),  dan alat-alat gelas (Pyrex).
Bahan uji yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  daun  pandan  wangi  dengan  kriteria yaitu segar,  warna  hijau tua, utuh, panjang ±55 cm, lebar ±3 cm, tidak cacat, dan  diambil pada rumpun  bagian  tengah.  Bahan  kimia  yang digunakan  yaitu  etanol  96%  (Brataco), Virgin coconut  oil (VCO)  (Lokal),  kafein  (Merck), aquadest  (Brataco),  serbuk  Mg  (Merck),  H 2 SO 4 (Brataco), FeCl 3 (Lokal), K 4 Fe(CN) 6 (Lokal), HCl (Brataco), ammonia (Brataco), kloroform (Brataco),  reagen  mayer  (Lokal),  dan  reagen dragendrof (Lokal).
Hewan uji yang digunakan dalam pengambilan  data  penelitian  ini  adalah  mencit jantan  galur  Swiss  sebanyak  25  ekor  dengan kriteria umur 2-3 bulan,  berat badan antara 20- 30  gram,  dan  tidak  cacat  secara  anatomi maupun fisiologi tubuh.
Penyarian  dilakukan  dengan  menimbang serbuk  halus  daun  pandan  wangi  sebanyak 200,00 gram di maserasi dengan pelarut etanol 96%  sebanyak  1400  ml  selama  3x24  jam. Setelah  itu,  disaring  dan  filtrat  yang  didapat kemudian  diuapkan  di  atas waterbath sampai berbentuk  ekstrak  kental.  Ekstrak  kental  dari hasil maserasi tersebut, lalu digunakan untuk uji analisis  fitokimia  secara  kualitatif  terhadap ekstrak  EDPW  yaitu  dengan  cara  mereaksikan filtrat dengan reagen FeCl 3 , H 2 SO 4 , serbuk Mg, ammonia,  kloroform,  HCl,  K 4 Fe(CN) 6 ,  reagen mayer,  dan  reagen  dragendrof  menggunakan
metode  perubahan  warna.  Uji  analisis  fitokimia yang  dilakukan  meliputi  identifikasi  polifenol, flavonoid, alkaloid, dan tanin .
Pengujian efek tonikum dilakukan terhadap mencit  dengan  menggunakan  metode Natatory exhaustion.
Sebelum mencit digunakan diadaptasikan terlebih dahulu dengan lingkungan selama satu minggu dan dipuasakan  selama  delapan  jam.  Perlakuan dibagi  menjadi  lima  kelompok  perlakuan  dan semua  pemberian  perlakuan  dilakukan  secara peroral.  Kelompok  I  diberi  perlakuan  kafein  13 mg/kg  BB  sebagai  kontrol  positif,  kelompok  II diberi  perlakuan  VCO  sebagai  kontrol  negatif serta  kelompok  III  diberi  perlakuan  sediaan  uji dosis  ekstrak  EDPW  300  mg/kg  BB,  kelompok IV  diberi  perlakuan  sediaan  uji  dosis  ekstrak EDPW  600  mg/kg  BB,  dan  kelompok  V  diberi perlakuan  sediaan  uji  dosis  ekstrak  dosis EDPW  1200  mg/kg  BB.  Kemudian  setelah pemberian sediaan uji tersebut, mencit didiamkan  selama  tiga  puluh  menit  dengan tujuan  sebagai  perkiraan  terhadap  waktu absorpsi  sediaan  uji.  Setelah  itu,  mencit direnangkan  hingga  menunjukkan  kondisi  lelah dengan  tanda  yaitu  tidak  ada  reaksi  dari keempat  kaki,  posisi  badan  membungkuk,  dan membiarkan kepalanya dibawah permukaan air selama  tujuh  detik.  Lalu  mencit  diangkat  dari tangki  yang  berisi  air  dan  dicatat  lama  waktu berenang  mencit  yang  kemudian  digunakan untuk  menghitung  persentase  kenaikan  efek tonikum.
Data  hasil  dari  perhitungan  persentase kenaikan  efek  tonikum  diolah  dan  dianalisis dengan  uji  statistik  parametrik  yaitu  uji normalitas  Shapiro  wilk  dan  uji  homogenitas. Setelah  memenuhi syarat  uji parametrik tersebut  maka  dilanjutkan  dengan  uji  Analysis of  variances  yaitu  One  way  ANOVA  kemudian dilanjutkan dengan uji Least significant difference  (LSD).  Namun  jika  tidak  memenuhi syarat  uji  parametrik  maka  akan  dilakukan dengan  uji  non  parametrik  yaitu  uji  Kruskal wallis.

## III. HASIL PENELITIAN
Penyarian  daun  pandan  wangi  secara meserasi  diperoleh  hasil  rendemen  sebesar 7,19%  b/b  yang  berbentuk  ekstrak  kental, warna hijau tua, bau aromatik pandan, dan rasa pahit.  Hasil  terhadap  uji  analisis  fitokimia menunjukkan  bahwa  ekstrak  EDPW  terbukti secara  kualitatif  mengandung  senyawa  bioaktif yaitu  polifenol,  alkaloid,  tanin,  dan  flavonoid. Hasil  dari  uji  efek  tonikum  yaitu  berupa pengamatan  terhadap  lama  waktu  berenang mencit. Hasil pengamatan terhadap lama waktu berenang mencit ditunjukkan pada tabel1.
Tabel  1. Hasil  pengamatan  terhadap  lama waktu berenang mencit.
No Kelompok perlakuan Lama waktu berenang mencit (menit) Jumlah (Mean ± SEM) 1. Virgin  coconut  oil (VCO) 70 14,0 ± 0,7071 2. Ekstrak  EDPW  300 mg/kg BB 95 19,0 ± 0,7071 3. Ekstrak  EDPW  600 mg/kg BB 120 24,0 ± 0,7071 4. Ekstrak EDPW 1200 mg/kg BB 150 30,0 ± 0,7071 5. Kafein  13  mg/kg BB 157 31,4 ± 0,5100 Hasil dari pengamatan lama waktu berenang  mencit  tersebut,  kemudian  dihitung dan  diolah  menjadi  persentase  kenaikan  efek tonikum. Hasil perhitungan persentase kenaikan  efek  tonikum  terhadap  sediaan  uji ditunjukkan pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil perhitungan persentase  kenaikan efek  tonikum  terhadap  sediaan  uji  EPDW  dan Kafein
No Kelompok perlakuan % Kenaikan efek tonikum (% KET) (Mean ± SEM) 1. Ekstrak EDPW 300 mg/kg BB 35,71 ± 5,05 2. Ekstrak EDPW 600 mg/kg BB 71,42 ± 5,05 3. Ekstrak  EDPW  1200 mg/kg BB 114,28 ± 5,05 4. Kafein 13 mg/kg BB 124,28 ± 3,64 Hasil statistik uji normalitas data persentase  kenaikan  efek  tonikum  terhadap sediaan  uji  antar  kelompok  perlakuan  dengan Shapiro  wilk yaitu  kafein  13  mg/kg  BB menunjukkan bahwa data tersebut memiliki nilai signifikansi    p  (0,814)  >  0,05  sedangkan  untuk kelompok  perlakuan  ekstrak  EDPW  dengan variasi dosis 300 mg/kg BB, 600 mg/kg BB, dan 1200  mg/kg  BB  juga  menunjukkan  bahwa semua  data  memiliki  nilai  signifikansi  p  (0,967) >  0,05.  Hasil  uji  statistik Homogeneity  of variances menunjukkan  bahwa  semua  data memiliki nilai signifikansi p (0,887) > 0,05. Hasil uji ANOVA memiliki nilai signifikansi p (0,000) < 0,05.  Hasil  dari  uji  ANOVA  tersebut,  kemudian lebih diperinci lagi untuk mengetahui perbedaan dari masing-masing kelompok perlakuan terhadap  variasi  dosis  sediaan  uji  yang dilakukan  dengan  menggunakan  uji Post  Hoc Tests yaitu  LSD.  Hasil  uji  LSD  menunjukkan bahwa  semua  hasil  antar  kelompok  perlakuan terhadap  sediaan  uji  juga  memiliki  nilai signifikansi  p  (0,000)  <  0,05  kecuali  pada perlakuan    kafein  13  mg/kg  BB  dengan  dosis ekstrak  EDPW  1200  mg/kg  BB  memiliki  yang nilai signifikansi p (0,155) > 0,05.

## IV.  PEMBAHASAN
Uji  efek  tonikum  terhadap  ekstrak  EDPW dilakukan dengan menggunakan metode Natatory exhaustion . Natatory exhaustion merupakan  metode  skrining  farmakologi  yang dilakukan  untuk  mengetahui  efek  obat  yang bekerja pada koordinasi motorik terutama pada kontrol  syaraf  pusat  (Turner,  1965).  Prinsip kerja  yang diterapkan dalam penelitian ini  yaitu pengujian  efek  tonikum  terhadap  penambahan aktivitas  motorik  yang  dapat  dilihat  dengan lama waktu berenang mencit ketika direnangkan dalam air.
Perlakuan dalam pengambilan data penelitian  ini  menggunakan  mencit  galur  Swiss dengan jenis kelamin jantan. Hal ini dikarenakan  kondisi  hormonal  mencit  jantan lebih  stabil  jika  dibandingkan  dengan  mencit betina.  Pada  mencit  betina  sangat  dipengaruhi oleh  perubahan  kondisi  hormonal  dan  stres seperti  pada  saat  mengalami  siklus  ovulasi. Selain  itu,  mencit  yang  digunakan  dalam penelitian ini semua hampir memiliki keseragaman  bobot.  Hal  ini  dilakukan  dengan tujuan  untuk  memperkecil  variasi  biologis  antar perlakuan  mencit  yang  digunakan,  sehingga dapat  memberikan  efek  yang  lebih  seragam terhadap  hasil  dari  pengujian  efek  tonikum tersebut.
Uji  efek  tonikum  yang  dilakukan  dalam penelitian  ini  menggunakan  lima  kelompok perlakuan  yaitu  VCO  0,5  ml/g, kafein 13 mg/kg BB, sediaan uji dosis ekstrak EDPW 300 mg/kg BB,  600  mg/kg  BB,  dan  1200  mg/kg  BB. Sebelum  perlakuan  mencit  dipuasakan  selama delapan jam dengan tetap  diberikan air minum. Hal ini dilakukan dengan tujuan untuk menghindari kemungkinan adanya sisa makanan dalam saluran pencernaan yang akan berpengaruh  terhadap  kandungan  ekstrak EDPW dalam memberikan efek tonikum. Selain itu,  untuk  memudahkan  dalam  pemberian secara  peroral  karena  tanpa  dipuasakan terlebih  dahulu  kemungkinan  sebagian  besar cairan  akan  dikeluarkan  untuk  dimuntahkan melalui  mulut.  Sebagai  control  positif  adalah digunakan  senyawa  cafein. Khasiat  dan penggunaan  kafein  sebagai  stimulan  syaraf pusat dan kardiotonikum (Dirjen POM, 1979).
Hasil dari uji efek tonikum dalam penelitian ini  yaitu  berupa  pengamatan  terhadap  lama waktu  berenang  mencit.  Berikut  ini  merupakan hasil dari pengamatan hubungan terhadap lama waktu  berenang  mencit  dengan  kelompok perlakuan  dosis  yang  ditunjukkan  dengan gambar 1.
Gambar 1. Hubungan lama waktu berenang dengan kelompok perlakuan dosis.
Gambar  1  diatas  menunjukkan  bahwa hubungan antara lama waktu berenang dengan kelompok  perlakuan  dosis  saling  berbanding lurus. Hal ini berarti bahwa semakin tinggi dosis yang  diberikan  maka  lama  waktu  berenang mencit dalam air juga akan semakin meningkat atau semakin lama.
Hasil  yang  diperoleh  dari  pengamatan terhadap lama waktu berenang mencit tersebut, kemudian dihitung dan diolah menjadi persentase  kenaikan  efek  tonikum.  Persentase kenaikan efek tonikum dihitung dengan membandingkan  waktu  perlakuan  sediaan  uji terhadap  waktu  rata-rata  kontrol  negatif.  Hasil perhitungan  persentase  kenaikan  efek  tonikum terhadap  sediaan  uji  ditunjukkan  dengan gambar 2.
Gambar 2. Persentase kenaikan efek tonikum dengan variasi dosis terhadap sediaan uji.
Hasil  persentase  kenaikan  efek  tonikum pada masing-masing kelompok perlakuan dengan  variasi  dosis terhadap sediaan  uji  yaitu ekstrak  EDPW  300  mg/kg  BB,  600  mg/kg  BB, dan  1200  mg/kg  BB,  serta  kafein  13  mg/kg  BB memiliki  persentase  kenaikan  efek  tonikum berturut-turut yaitu sebesar (35,71±5,05)%,(71,42±5,05)%,(114,28±5,05)%, dan (124,28±3,64)%.
Hasil  dari  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  EDPW  dosis  1200  mg/kg  BB memiliki efek tonikum yang lebih kecil dari pada pemberian  kafein  13  mg/kg  BB  sebagai pembanding  kontrol  positif.  Hal  ini  sama  halnya dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Hermayanti,  2013  ;  Lukman  dan  Vivi,  2013  ; Rahmawati  dan  Parmadi,  2014  ;  Wahyuni  dan Kusumawati,  2008  yang  juga  menunjukkan bahwa  pemberian  kafein  masih  lebih  efektif daripada  dosis  ekstrak  sediaan  uji  dalam memberikan efek tonikum guna untuk meningkatkan stamina tubuh.
Hasil statistik uji normalitas data persentase  kenaikan  efek  tonikum  terhadap sediaan  uji  antar  kelompok  perlakuan  dengan Shapiro  wilk yaitu  kafein  13  mg/kg  BB menunjukkan  bahwa  data  yang  diperoleh berdistribusi  normal  karena  memiliki  nilai  p (0,814)  >  0,05  sedangkan  untuk  kelompok perlakuan  ekstrak  EDPW  dengan  variasi  dosis 300 mg/kg BB, 600 mg/kg BB, dan 1200 mg/kg BB juga menunjukkan bahwa semua data yang diperoleh  berdistribusi  normal  karena  semua memiliki nilai   p (0,967) > 0,05. Hasil uji statistik Homogeneity of variances menunjukkan bahwa semua  data  berdistribusi  homogen  karena memiliki nilai p (0,887) > 0,05. Setelah hasil dari data tersebut berdistribusi normal dan homogen maka  dilanjutkan  dengan  uji Analysis  of variance yaitu  uji One-way ANOVA.  Hasil  uji ANOVA  memiliki  nilai    p  (0,000)  <  0,05 sehingga  ada  pengaruh  efek  tonikum  terhadap pemberian  ekstrak  EDPW  pada  mencit.  Hasil tersebut  kemudian  lebih  diperinci  lagi  untuk mengetahui  perbedaan  dari  masing-masing kelompok  perlakuan  terhadap  sediaan  uji  yang dilakukan  dengan  menggunakan  uji Post  Hoc Tests yaitu  uji Least  Significant  Difference (LSD).  Hasil  uji  LSD  menunjukkan  bahwa semua hasil antar kelompok perlakuan terhadap  sediaan  uji  memiliki  nilai  p  (0,000)  < 0,05  kecuali  pada  perlakuan  kafein  13  mg/kg BB  dengan  dosis  ekstrak  EDPW  1200  mg/kg BB  memiliki  nilai  p  (0,155)  >  0,05  maka  berarti bahwa  tidak  ada  perbedaan  antar  perlakuan yang  signifikan.  Sehingga  hal  ini  dapat disimpulkan  bahwa  dosis  ekstrak  EDPW  1200 mg/kg  BB  memiliki  efek  tonikum  yang  setara dengan kafein 13 mg/kg BB.
Berdasarkan hasil pengamatan dan perhitungan pada penelitian yang telah dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak EDPW  terbukti  memiliki  efek  tonikum  terhadap mencit  dengan  menggunakan  metode Natatory exhaustion .  Hal  ini  juga  didukung  dengan penelitian  sebelumnya  dan  yang  ada  dalam literatur bahwa suatu tanaman yang mengandung  senyawa  bioaktif  flavonoid  telah terbukti  aktif  dapat  memberikan  efek  tonikum guna  untuk  meningkatkan  stamina  tubuh. Sehingga  hasil  dari  penelitian  ini  dapat dikembangkan  menjadi  obat  baru  sebagai penambah  stamina  karena  berpotensi  memiliki efek tonikum.
V.  SIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan  dari  uji  efek  tonikum  ekstrak  etanol daun  pandan  wangi  ( Pandanus  amaryllifolius
Roxb.)  (EDPW)  terhadap  mencit  dengan metode Natatory  exhaustion dapat  disimpulkan bahwa :
1.  Ekstrak  EDPW  dosis  300  mg/kg  BB,  600 mg/kg  BB,  dan  1200  mg/kg  BB  positif memiliki  efek  tonikum  terhadap  mencit dengan persentase kenaikan efek tonikum yang diperoleh berturut-turut yaitu sebesar  (35,71  ±    5,05)%,  (71,42  ± 5,05)%, dan (114,28 ± 5,05)%.
2.  Ekstrak  EDPW  dosis  1200  mg/kg  BB merupakan  dosis  yang  paling  optimum memberikan efek tonikum terhadap mencit.  Nilai  signifikansi  uji  statistik  LSD antara  kafein  13  mg/kg  BB  dengan ekstrak  EDPW  dosis  1200  mg/kg  BB memiliki  nilai  p  (0,155)  >  0,05  sehingga ekstrak  EDPW  dosis  1200  mg/kg  BB memiliki efek tonikum  yang hampir setara dengan  kafein  13  mg/kg  BB  sebagai pembanding kontrol positif.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustiningsih, Wildan, A.,  dan  Mindaningsih. 2010.  Optimasi  Cairan  Penyari  pada Pembuatan Ekstrak  Daun  Pandan
Wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.) secara Maserasi terhadap Kadar Fenolik dan Flavonoid Total.
Momentum.
Dalimartha.  2000. Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia  Jilid  I. Ungaran:  Trubus
Agriwidya. Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan.  1979. Farmakope  Indonesia Edisi  III. Jakarta:  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia.
Direktorat  Jenderal  Pengawas  Obat  dan Makanan.  2000. Inventaris  Tanaman Obat  Indonesia  (1)  Jilid  1. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan.
Faras,  A.F.,  Wadkar,  S.S.,  and  Ghosh,  J.S. 2014. Effect of Leaf Extract of Pandanus amaryllifolius Roxb on Growth of Escherichia coli and Micrococcus
(Staphylococcus)  aureus . International Food Research Journal. .
Fatimah, N.D.S. 2007. Pengaruh Ekstrak Etanol
Daun Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhadap
Pertumbuhan  Kelinci  Jantan  serta  Profil Kromatogramnya. Skripsi.
Fakultas Farmasi.  Universitas  Ahmad  Dahlan. Yogyakarta.
Hermayanti.  2013.  Uji  Efek  Tonikum  Ekstrak Daun  Ceguk (Quisqualis  indica  L.) terhadap Hewan Uji Mencit ( Mus musculus L.). Jurnal Bionature .
Lukman, F.H dan Vivi. 2013. Uji Anti Lelah (Anti Fatigue) Kombinasi  Nila  Aren  dan  Air Tebu dengan
Metode
Ketahanan
Berenang (Natatory  exhaustion) Pada Mencit Jantan. Pharmacy .
Mutschler,  Ernst.  1991. Dinamika  Obat  Edisi  V, diterjemahkan  oleh  Widianto,  M.B.,  dan Ranti, A.S . Bandung: Penerbit ITB.
Nielforth, A.K.,  dan  Cohen,  M.L.  1981. Stimulan Sistem  Saraf  Pusat, diterjemahkan  oleh Rosyid, P., Firman, K., Haryant, Suwarno, T.,  Musadad,  A.  Yogyakarta:  Gadjah Mada University Press.
Rahmawati,  R.,  dan  Parmadi,  A.  2014.  Efek
Tonikum Ekstrak Etanolik Rimpang Kencur  ( Kaempferia  galanga L.)  pada
Mencit
Jantan  ( Mus musculus L.). Indonesian Journal on Medical Science .
Turner,  R.A.  1965. Screening  Methods  in Pharmacology .  New  York:  Academic Press, Inc.
Wahyuni,  S.A.,  dan  Kusumawati,  F.  2008.  Efek Tonik  Ekstrak  Air  Biji  Cola  ( Cola  nitida Schott  &  Endl )  pada  Mencit  Jantan. Jurnal Penelitian Sains & Teknologi.