Pratiwi,  Dianti,  Dila  Qhoirul  Nisa,  Elsya  Martia,  Putri  Wulanbirru,  Syfa  Dwi  Andini  (2021)  Isolasi Senyawa Kumarin Pada Tanaman, Syntax Idea, 3 (7). https:// 10.36418/syntax-idea.v3i7.1375 E-ISSN: 2684-883X Published by: Ridwan Institute
Syntax Idea: p–ISSN: 2684-6853 e-ISSN: 2684-883X Vol. 3, No. 7, Juli 2021

## ISOLASI SENYAWA KUMARIN PADA TANAMAN
Dianti  Pratiwi,  Dila  Qhoirul  Nisa,  Elsya  Martia,  Putri  Wulanbirru,  Syfa  Dwi Andini
Universitas Singaperbangsa Karawang (UNSIKA) Jawa Barat, Indonesia Email: diantipra201@gmail.com, dilaqhoirul@gmail.com, elsyamrt@gmail.com, wulanbirru03@gmail.com, syfadwiandini7@gmail.com

## Abstrak
Indonesia  adalah  negara  yang  kaya  akan  keanekaragaman  hayati.  Dari  beberapa tanaman  yang  dapat  dijadikan  sebagai  obat  alternative  untuk  mengobati  penyakit. Khasiat  tumbuhan  sebagai  pengobatan  dalam  kesehatan  terkait  dengan  tumbuhan memiliki senyawa kimia yang merupakan hasil metabolit sekunder yang terdapat di dalam  tanaman  tersebut.  Salah  satu  golongan  metabolit  sekunder  pada  tumbuhan yaitu  kumarin.  Kumarin  dapat  ditemukan  hampir  di  sebagian  tumbuh-tumbuhan mulai dari akar, batang, daun, bunga dan juga buah. Tujuan penelitian ini dilakukan untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi  senyawa  kumarin  yang  terdapat  di  dalam tanaman tersebut. Pada proses senyawa isolasi kumarin yang dapat dilakukan dengan beberapa metode diantaranya esktraksi, skrining fitokimia, fraksinasi, isolasi kumarin dan  identifikasi  isolat.  Tanaman  yang  mengandung  senyawa  kumarin  yang digunakan  pada  isolasi  kumarin  yang  kami  review  yaitu  kulit  buah  limau  sundai (Citrus nobilis Lour), biji buah rambutan (Nephelium lappaceum L), daun pacar air (Impatiens  Balsemina  Linn),  kulit  batang  kecapi  (Sandoricum  koetjape)  dan Artemisia annua L.
Kata Kunci: tanaman, isolasi kumarin, ekstraksi

## Abstract
Indonesia  is  a  country  rich  in  biodiversity.    Of  several  plants  that  can  be  used  as alternative medicine to treat disease.  The efficacy of plants as medicine in health is related  to  plants  having  chemical  compounds  which  are  the  result  of  secondary metabolites contained in these plants.  One of the secondary metabolites in plants is coumarin.  Coumarins can be found in almost all plants from roots, stems, leaves, flowers  and  fruit.    The  purpose  of this  study  was  to  isolate  and identify  coumarin compounds  contained  in  these  plants.    In  the  process  of  isolating  coumarin compounds  that  can  be  done  by  several  methods  including  extraction, phytochemical screening, fractionation, isolation of coumarins and identification of isolates.  Plants containing coumarin compounds that were used in the isolation of coumarins that we reviewed were sundai lime peel (Citrus nobilis Lour), rambutan fruit  seeds  (Nephelium  lappaceum  L),  water  henna  leaves  (Impatiens  Balsemina Linn), harp bark (Sandoricum koetjape) and Artemisia annua L.
Keywords: plants, coumarin isolation, extraction

## Pendahuluan
Masyarakat  Indonesia  mengenal  dan  memakai  tumbuhan  sebagai  suatu  upaya penanggulangan masalah Kesehatan. Namun hal ini dilakukan berdasarkan pengalaman turun  temurun  bukan  melalui  kajian  yang  sistemis  dan  terencana,  sehingga  komponen kimia yang aktif dari tumbuhan tersebut belum banyak ditemukan (Zainol, Ronasari, & Ninin Khoirunnisa, 2019).
Keanekaragaman  hayati  adalah  sumber  kekayaan  yang  sangat  melimpah  dan  tak ternilai harganya. Keanekaragaam tersebut mempunyai kemmapuan untuk dikembangkan sebagai obat atau bahan baku obat, baik penggunaanya secara tradisional maupun  modern.  Setiap  tumbuhan  menghasilkan  satu  atau  lebih  senyawa  bioaktif dengan  dengan  aktivitas  tertentu,  tumbuhan  mengandung  senyawa  bioaktif  dalam bentuk  metabolit  sekunder  seperti alkaloid,  flavonoid,  steroid,  terpenoid,  tannin dan kumarin. Pada  Keberadaan  senyawa  metabolit  sekunder  ini  lah  yang  menyebabkan tumbuhan telah banyak digunakan sebagai obat, zat pewarna, perasa.
Tumbuhan  merupakan  organisme  kompleks  yang  tersusun  dari  sel,  sekelompok sel  dengan  bentuk  dan  fungsi  yang  sama  membentuk  jaringan,  membentuk  organ, sekelompok  organ  membentuk  sistem  organ  dan  akhirnya  membentuk  organisme (individu). Sekumpulan organisme yang sama akan membentuk populasi, dan populasi akan  membentuk  komunitas  serta  komunitas-komunitas  yang  berbeda  dan  akan berinteraksi dengan lingkungannya dalam suatu ekosistem. Tumbuhan adalah penghasil puluhan  jenis  senyawa  organic  yang  digunakan  untuk  penghasil  senyawa-senyawa berkhasiat (Dhaniaputri, 2016).
Senyawa  kimia  dalam  tumbuhan  adalah  hasil  metabolisme  sekunder  dari tumbuhan  itu  sendiri.  Senyawa  metabolit  sekunder  sangat  bervariasi  jumlah  dan jenisnya  dari  setiap  tumbuhan-tumbuhan.  Beberapa  dari  senyawa  tersebut  telah diisolasi, Sebagian diantaranya memberikan efek fisiologi dan farmakologis yang lebih dikenal  sebagai  senyawa  kimia aktif (Agustina,  2019). Kumarin merupakan  salah satu golongan metabolit sekunder pada tumbuhan (Desi, 2016).
Senyawa organic kumarin diketahui memiliki aktivitas antiinflamasi, antioksidan, antialergi,  antitrombotik,  antivirus  dan  antikanker.  Banyak  studi  eksperimental (Setiawan  &  Rakhmawaty,  2014). Selain  memiliki  banyak  aktifitas  biologis  kumarin dapat  juga  digunakan  sebagai  bahan  dasar  pembuatan  parfum  dan  sebagai  bahan flourisensi  pada  industry  tekstil  dan  kertas  (Murray,  1982).  Kumarin  banyak  terdapat pada  pada  tumbuhan  Angiospermae  dan  tidak  jarang  pada  tumbuhan  Gymnospermae serta tumbuhan tingkat rendah.
Isolasi  yaitu  suatu  teknik  pemisahan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat dalam suatu bahan alam. Isolasi senyawa pada bahan alam terdiri beberapa tahap  yaitu ekstraksi,  fraksinasi  serta  pemurnian  dan  identifikasi.  Ekstraksi  yaitu  suatu  proses pemisahan  senyawa  kimia  yang  terdapat  dalam  sampel  bahan  alam  ke  dalam  pelarut. Prinsip  metode  ekstraksi  didasarkan  pada  distribusi  zat  terlarut  ke  dalam  pelarutnya, hasil ekstraksi ini disebut ekstrak. Fraksinasi yaitu proses pemisahan komponen dalam bentuk ekstrak menjadi fraksi-fraksi, proses ini dapat dilakukan dalam beberapa metode yaitu kromatrografi lapis tipis (KLT), kromatografi kolom, HPLC dan GC.  Pemurnian
dan identifikasi yaitu tahap akhir dalam isolasi teknik yang paling sederhana dan efektif untuk pemurnian senyawa metabolit sekunder yaitu kristalisasi atau rekristalisasi (Ilyas, 2013).
Kumarin  sederhana  yaitu  fenilpropanoid  yang  mengandung  cincin  benzene  C-6 dengan  rantai  alifatik  C-3  dengan  rumus  molekul  C9H5O2.  Senyawa  kumarin  beserta turunannya  mempunyai  banyak  aktifitas  biologis  yaitu  sebagai  antikoagulan  darah, antibiotik  dm,  antimikroba, mempengaruhi  kerja  enzim  sebgai  bahan  dasar  pembuatan parfum serta untuk bahari fluorisensi pada industry tekstil dan kertas. Bentuk kumarin Kristal keping runcing, berbau harum, dapat mencair pada suhu 68°C  - 70°C dan dapat mendidih pada suhu 297°C - 299°C (Zainol et al., 2019).
Turunan  kumarin  sintesis  diperoleh  dengan  memodifikasi  cincin  kumarin  secara kimia melalui reaksi substitusi yang dapat terjadi pada sisi dari 6 sisi yang tersedia pada molekul dasar yang memiliki struktur dan aktifitas yang bervariasi.

## Metode Penelitian
Metode  yang  digunakan  pada  review  ini  merupakan  suatu  tinjauan  literature (literature  review) terhadap  lima  jurnal  dan  berdasarkan  teori-teori  yang  relevan mengenai  isolasi  senyawa  kumarin.  Isolasi  senyawa  kumarin  menggunakan  metode ekstraksi,  fraksinasi,  pemurnian  atau  identifikasi  dengan  pelarut  serta  menggunakan cara yang berbeda-beda.

## Hasil dan Pembahasan
Semua  jurnal  yang  kami  review  pada  isolasi  senyawa  kumarin  menggunakan metode  maserasi  dan  sokletasi.  Menggunakan  tanaman  yang  mengandung  senyawa kumarin  yaitu,  Kulit  buah  Limau  Sundai (Citrus  nobilis  Lour) ,  biji  buah  rambutan (Nephelium  lappaceum  L.) ,  daun  pacar  air (  Impatiens  Balsamina  Linn.) ,  kulit  batang kecapi (Sandoricum  koetjape) ,  dan Artemisia  annua  L .  Tahapan  Isolasi  Senyawa Kumarin
1. Isolasi Senyawa Kumarin Kulit Buah Limau Sundai ( Citrus nobilis Lour )
a. Ekstraksi
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi, serbuk kering kulit buah Limau Sundai  ( Citrus  nobilis  Lour) sebanyak  5kg direndam  ke  dalam  maserator  d menggunakan  metanol lalu diaduk dan dibiarkan selama 5 hari pada suhu kamar. Kemudian  disaring  dan  ditampung  proses  ini  dilakukan  berulang  kali  hingga  uji negatif  terhadap  kumarin.  Hasil  ekstrak  yang  dimaserasi  dikumpulkan  lalu diuapkan pelarutnya dengan rotary evaporator Heidolp WB 2000 dan didapatkan ekstrak pekat.
b. Skrining Fitokimia
Hasil  dari  kromatografi  kolom  ditampung  pada  vial-vial  dan  dilakukan kromatografi  lapis  tipis  dengan  eluen  yang  sesuai  dimana  terbentuk  Kristal,  vial dengan hasil Rf yang sama digabung lalu dikristalisasikan dengan heksan dan etil asetat,  dengan  ditambahkan  etil  asetat  kedalam  padatan  yang  telah  terbentuk, kemudian  diaduk  sampai  larut.  Selanjutnya  ditambahkan  heksan  hingga  keruh
sehingga padatan mengendap kembali kemudian pelarut dipisahkan dari padatan. Cara ini dilakukan secara berulang sampai hasil yang didapatkan menjadi padatan yang  bebas  dari  pengotor.  Kemudian  dilakukan  kromatografi  lapis tipis  kembali, sehingga kromatogram memperlihatkan noda tunggal dengan intesitas fluoresensi biru yang kuat yang artinya isolat mengandung senyawa kumarin.
c. Fraksinasi
Fraksinasi etil asetat dimurnikan menggunakan metode kromatografi kolom, sebelumnya  dimonitor  terlebih  dahulu  dengan  KLT  untuk  menemukan  gradient eluen  yang  sesuai.  Pengelusian  dilakukan  menggunakan  fase  gerak  heksan,  etil asetat dan metanol, hasil dari kromatografi kolom ditampung pada vial-vial serta dilakukan  KLT  lagi  dengan  eluen  yang  sesuai  dimana  terbentuk  Kristal,  vial dengan  Rf  yang  sama  digabung.  Lalu  direkristalisasikan  dengan  heksan  dan  etil asetat  dengan  menambahkan  etil  asetat  pada  padatan  yang  terbentuk  kemudian diaduk  hingga  larut.  Setelah  itu  ditambahkan  heksan  sampai  terjadi  kekeruhan, llau  padatan  mengendap  kembali  kemudian  pelarut  dipisahkan  dari  padatannya. Cara  ini  dilakukan  secara  berulang  kali  sampai  hasil  yang  didapatkan  menjadi padatan yang bebas dari pengotor.
d. Isolasi Kumarin
Senyawa  yang  diisolasi  dari  fraksi  etil  asetat  kulit  buah  limau  sundai merupakan  senyawa  kumarin,  berbentuk  kristal  putih  2,159  g  dengan  titik  leleh 126,2-127,6ﹾC.  Senyawa  isolasi  dikarakterisasi  menggunakan  spektroskopi  UV- Vis,  IR,  C-NMR,  2D-NMR,  (DEPT/HSQC,  COSY,  NOESY,  HMBC).  Dan  dari data-data mendukung bahwa senyawa hasil isolasi adalah kumarin.
e. Identifikasi Isolat
Pengujian  KLT  yang  di  lakukan  dengan  lampu  UV  365  nm,  yang berfluorisensi akan bertambah terang dengan dilakukan penambahan NaOH 10%, hasil  senyawa  isolasi  dari  fraksi  etil  asetat  kulit  buah  Citrus  nobilis  Lour  yaitu senyawa  kumarin,  dari  data-data  analisa  Spektroskopi  UV-Vis,  IR,  C-NMR,  H- NMR,  2D-NMR  (DEPT/HSQC,  COSY,  NOESY,  HMBC),  untuk  hasil  dari senyawa isolasi adalah marmin.
2. Isolasi Senyawa Kumarin dari Biji Buah Rambutan (Nephelium lappaceum L.)
a. Ekstraksi
Ekstraksi  Serbuk  biji  N.  lappaceum  sebanyak  5  kg  dengan  menggunakan teknik  maserasi  menggunakan  metanol.Maka  untuk  dilakukan  Ekstraksi  harus selama 3×24 jam, lalu hasil ekstrak tersebut disaring dan dipisahkan antara filtrat dan  residunya.  Ekstrak  metanol  yang  diperoleh  juga  dipekatkan  dengan  rotary evaporator dan ditimbang untuk memperoleh massa dari ekstrak kental. Kemudian Ekstrak  metanol  kental  dilarutkan  di  dalam  metanol,  kemudian  dipartisi  dengan menggunakan  pelarut  n-heksana  dan  etil  asetat.  Hasil  Ketiga  partisi  dipekatkan menggunakan rotary evaporator sehingga memperoleh fraksi n-heksana, fraksi etil asetat dan fraksi metanol.
b. Skrining Fitokimia
Hasil yang di peroleh dari Fraksi etil asetat dengan  dilakukan uji fitokimia. Untuk  mengidentifikasi  golongan  fenolik  yaitu  dengan  penambahan  FeCl3  maka akan  memberikan  perubahan  warna  menjadi  hijau  kehitaman  dari  warna  kuning. Perubahan  warna  tersebut  disebabkan  karena  senyawa  fenolik  jika  bertemu dengan Fe maka akan membentuk senyawa yang kompleks.
c. Fraksinasi
Fraksi etil asetat dilakukan KVC, proses elusi dimulai dengan menggunakan kombinasi  eluen  berdasarkan  KLT  yang  dimulai  dari  100%  n-heksan,  n- heksan:etil  asetat  (8:2,  6:4,  2:8)  100%  etil  asetat.  Etil  asetat:methanol  (9:1,  8:2) dan  100%  methanol.  Eluat  di  KLT  dengan  eluen  n-heksan:etil  asetat  (4:6). Fraksinasi  yang  diperoleh  dari  hasil  gabungan  KVC  sebanyak  7  fraksi  dengan kode  S 1-7 .Fraksi  S 4 hasil  KVC  dilakukan KKG.  Proses  elusi  dimulai  dari  pelarut yang diperoleh dari KLT yaitu 100% kloroform, kloroform:methanol (99:1, 97:3, 95:5, 90:10, 70:30) dan 100%. Hasil dari KLT, yang mengandung senyawa target dan  cukup murni pada fraksi S 4 N 23 kemudian dilanjutkan uji kemurnian.
d. Isolasi Kumarin
Pada  pengelusian    KVC  dilakukan  secara  bergradien  dan  dilakukan pengulangan  sebanyak  dua  kali,  bertujuan  agar  senyawa  yang  terpisah  semakin baik.  Fraksi  yang  diperoleh  dapat  dilakukan  dengan menggunakan  metode  KLT, fraksi-fraksi  yang  memiliki  noda  dan  RF  yang  relatif  sama  digabungkan.    Dari hasil  penggabungan  51  fraksi  menghasilkan  7  fraksi  gabungan.  Dari  Ketujuh fraksi  yang  dilakukan  dengan  metode    KLT  lalu  kembali  dengan  eluen  n- heksana:etil asetat.
e. Identifikasi Isolat
Analisis  spectrum  MS  menunjukkan  berat  molekul  isolat  S 4 N 23 .  Berat molekul  yang  didapat  sesuai  dengan  rumus  molekul  C 15 H 16 O 8 ,  bila dikombinasikan  dengan  hasil  NMR- 1 H  dan  COSY  didapat  senyawa  5-O-  -L- ramnosa-7-hidroksikumarin.
Hasil  uji  fitokimia  terhadap  fraksi  S 4 N 23 biji  buah N.  lappaceum diketahui bahwa  positif  mengandung  senyawa  fenolik.  Senyawa  dengan  golongan  fenolik salah  satunya  adalah  kumarin,  maka  reaksi  positif  golongan  senyawa  fenolik diduga  dari  senyawa  tersebut.  Berdasarkan  KLT  yang  telah  dilakukan,  diperoleh RF<2  dengan  pelarut  n-heksan:etil  asetat  hal  ini  menunjukkan  senyawa  bersifat polar yang diduga karena adanya gugus gula terikat pada senyawa fenol.
3. Isolasi Senyawa Kumarin dari Daun pacar Air ( Impatiens Balsamina Linn. )
a. Ekstraksi
Daun  pacar  air  dirajang  halus  lalu  dikeringkan  dengan  cara  di  anginkan. Sebanyak  600  gram  sampel  kering  disokletasi  dengan  n-heksa  (5L),  setelah pelarut tidak berwarna lagi maka proses sokletasi dilanjutkan dengan pelarut etil asetat  dan  metanol  berturut  turut  .  Ekstrak  diuapkan  pelarutnya  dengan  rotary evaporator,  maka  akan  didapat  ekstrak  pekat  n-heksana,  ekstrak  pekat  etil  asetat dan methanol.
b. Skrining Fitokimia
larutan ekstrak  ditotolkan  pada  plat  KLT.  Eluen  yang  digunakan  adalah  n- heksan  dan  etil asetat  dengan  perbandingan  3:1.  Ketika  dilihat  pada  UV  366  nm bercak noda tersebut Nampak berwarna biru.
c. Fraksinasi
Fraksi etil asetat dikukan KVC. Proses elusi dimulai dengan menggunakan kombinasi eluen berdasarkan KLT yang dimulai 100% n-heksana, n-heksana : etil asetat (8:2, 6:4, 4:6, 2:8). Eluat yang berada di KLT dengan eluen n-heksana:etil asetat  (4:6).  Fraksi  yang  diperoleh  dari  hasil  gabungan  KCV  sebanyak  7  fraksi. Proses eluesi dimulai dari pelarut yang diperoleh dari KLT yaitu 100% kloroform, kloroform:methanol dan 100% methanol. Eluat yang berada di KLT dengan eluen n-heksana:etil asetat (35:65). Hasil dari gabungan KKG sebanyak 30 fraksi. Hasil dari KLT, yang mengandung senyawa target dan cukup murni pada fraksi S4N23.
d. Isolasi Kumarin
Untuk menentukan senyawa isolasi  maka terlebih dulu  sifat fisikanya yang meliputi uji titik leleh dan kromatografi lapis tipis dengan berbagai eluen. Isolasi dari daun pacar air ini didapati kristal berwarna kuning seberat 7 mg dengan titik leleh 182-183ﹾC. Berdasarkan titik lelehnya, data spektrum UV dan IR, termasuk dalam  senyawa  isolasi  golongan  1,4  naftaquinon  yang  terabsubstitusi  gugus metoksi.
e. Identifikasi Isolat
Fraksi etil asetat dengan metode KLT menggunakan penampak noda NaOH 10%  menunjukkan  satu  noda  berwarna  merah  bata,  berarti  fraksi  etil  asetat  ini positif mengandung senyawa kuinon. Dari Plat KLT yang  disinari dengan lampu UV 365 nm akan memberikan warna fluoresensi kuning hijau, biru, kuning hijau dan  kuning.  Informasi  Dari  data  yang  diperoleh  bahwa  selain    senyawa  kuinon fraksi etil asetat juga mengandung senyawa kumarin dan flavonoid.
4. Isolasi senyawa kumarin dari Kulit Batang Kecapi (Sandoricum koetjape)
a. Ekstraksi
Sebanyak  900  gram  serbuk  kulit  batang  kecapi  direndam  dengan menggunakan  pelarut  heksana,  etil  asetat  dan  metanol  dilakukan  dengan  metode maserasi  berkali-kali  dengan  menggunakan  pelarut  tersebut.  Ekstrak  yang  akan didapatkan  yaitu  dengan  cara  diuapkan  dengan  rotary  evaporator  hingga didapatkan ekstrak pekat. Diperoleh ekstrak pekat heksana 36,75 gram, etil asetat 37,57 gram dan methanol 36,83 gram.
b. Skrining Fitokimia
Uji  kandungan  metabolit  sekunder  (Fitokimia)  yang  telah  dilakukan  pada kulit  batang  bahwa  selain  mengandung  senyawa  triterpenoid  juga  terdapat flavonoid,  fenolik  dan  kumarin.  Senyawa  kumarin  dari  kulit  batang  kecapi dilakukan identifikasi senyawa dengan menggunakan spektroskopi IR.
c. Fraksinasi
Fraksi heksana dilakukan dengan cara rekromatografi kolom dan dilakukan dengan penggabungan fraksi yang berdasarkan pola noda Rf yang sama sehingga didapatkan 4 fraksi. Lalu diperoleh senyawa murni yang ditandai  dengan adanya noda  tunggal  pada  plat  KLT.  Adanya  terlihat  kontaminasi  dari  hasil  sphadex LH20  maka  dimurnikan  kembali  dengan  menggunakan  KLT  preparative. Senyawa  murni  yang  didapatkan  di  KLT  tersebut  menggunakan  berbagai perbandingan eluen.
d. Isolasi Senyawa Kumarin
Hasil  pengujian  dari  titik  leleh  yang  didapatkan  yaitu  titik  leleh  dari senyawa  ini  adalah  194  -  195.  Jaungkauan  nilai  titik  leleh  maka  diindikasikan senyawa hasil isolasi telah murni. Sedangkan untuk titik leleh senyawa dari hasil isolasi  pada  penelitian  sebelumnya  adalah  terdekomposisi  pada  suhu  220. Senyawa  hasil  isolasi  berupa  Kristal  jarum  berwarna  putih  yang  diperoleh  dari ekstrak  etil  asetat  dengan  titik  leleh  194  -  195.  Hasil  pengukuran  spektroskopi inframerah memperlihatkan pita serapan.
e. Identifikasi Isolat
Pada identifikasi senyawa dilakukan dengan spektroskopi IR. Pada spectrum senyawa hasil isolasi yang didapatkan, hasil pengukuran spektroskopi inframerah memperlihatkan  pita  serapan  pada  panjang  gelombang  3339  cm-1,  2946  cm-1, 1702  cm-1,  1509  cm-1,  1446  cm-1  dan 1018  cm-1.  Dari  hasil  data  spektroskopi IR menunjukkan bahwa senyawa ini memiliki gugus fungsi hidroksil.
5. Senyawa Isolasi dari Artemisia annua L
a. Ekstraksi
Sampel diekstraksi menggunakan alat soklet pendingin baik dengan pelarut metanol  dilakukan  sebanyak  2  kali  dalam  sehari  sampai  semua  sari  terekstrak, dihasilkan  larutan  yang  tidak  berwarna  lagi  atau  bening.  Kemudian  ektrak dipekatkan  menggunakan  rotary  evaporator  sampai  ekstrak  mengental,  lalu dikeringkan menggunakan waterbath suhu 40°C - 45°C hingga ektrak kental.
b. Skrining
Fraksi  diklormetan  dan  standar  baku  kumarin  dilakukan  uji  KLT menggunakan fase diam silica gel GF 254 dan fase gerak campuran-heksana: etil asetat  dengan  perbandungan  2:2.  Hasil  KLT  yang  dideteksi  dengan menggunakan  detector  UV  pada  panjang  gelombang  366  nm,  selanjutnya dilakukan  penetapan  kadar  kumarin  dalam  sampel  menggunakan  alat densitometer.
c. Fraksinasi
Ekstrak kental dilarutkan dengan aquadest sampai semua ekstrak larut, lalu dimasukan  kedalam  corong  pisah  500  ml.  Kemudian  ditambahkan  pelarut diklormetan  kedalam  corong  tersebut  sampai  terbentuk  2  lapisan,  setelah terbentuk lalu dipisahkan melalui fraksi diklormetan menghasilkan warna hijau pekat dan fraksi methanol air menghasilkan warna coklat muda.
d. Isolasi senyawa kumarin
Senyawa Kumarin yang terdapat fraksi diklormetan menggunakan hasil uji KLT yang terdeteksi dari lampu UV dengan panjang gelombang 366 nm dengan fraksi diklormetan terdapat Rf dihasilkan bercak bulat flourisensi biru terang dan hasilnya sama seperti pada hasil uji KLT standar kumarin.
e. Identifikasi isolate
Ekstrak artemisia  annua  L diidentifikasi  senyawa  kumarin  dengan menginjeksikan  larutan  yang  mengandung  fraksi  diklorometan  dan  larutan mengandung  methanol-air.  Kemudian  pada  plat  KLT  dilakukan  elusidasi menggunakan  fase  gerak  campuran  n-heksana:  etil  asetat  perbandingan  2:2 menghasilkan nilai Rf bercak serta warna yang didapat dari standar kumarin.
Identifikasi  kumarin  yang  dihasilkan  secara  KLT  dengan  eluen  n-heksan: etil asetat perbandingan 2:2, Rf yang dihasilkan berwarna biru flouriensi dilihat pada  lampu  UV  dengan  panjang  gelombang  366  nm.  Sedangkan  pada  fraksi (tidak  ada  kumarin)  tidak  terjadi  pemisahan  dan  terdapat  bercak  hitam. Sedangkan pada fraksi methanol-air tidak mengandung senyawa kumarin karena pada  fraksi  tersebut  semua  senyawa  kumarin  telah  tertarik  kedalam  fraksi diklormetan.

## Kesimpulan
Kumarin  adalah  senyawa  fenol  yang  berasal  dari  tanaman  tinggi  dan  jarang ditemukan  pada  mikroorganisme.  Senyawa  kumarin  beserta  turunanannya  mempunyai banyak  aktifitas  biologis  yaitu  sebagai  antikoagulan  darah,  antibiotic,  antimikroba, mempengaruhi kerja enzim. Kumarin berbentuk kristal keeping runcing, berbau harum, dapat  mencair  pada  suhu  68°C  -  70°C  dan  dapat  mendidih  pada  suhu  297°C  -  299°C. Dari  jurnal  yang  kami  review,  digunakan  lima  tanaman  tersebut  dilakukan  uji  isolasi senyawa kumarin. Ekstraksi merupakan isolasi senyawa dalam suatu campuran larutan atau  padatan  dengan  menggunakan  pelarut  yang  sesuai,  sedangkan  Fraksinasi merupakan  proses  pemisahan  komponen  senyawa  berdasarkan  tingkat  kepolarannya. Pada  proses  ekstraksi  senyawa  menggunakan  metode  maserasi  dan  sokletasi,  pelarut senyawa  kumarin  yang  digunakan  methanol,  etanol,  N-heksan.  Pada  proses  fraksinasi senyawa menggunakan metode KKG, KLT, dan KVC. Identifikasi Isolat menggunakan spektroskopi  UV-Vis,  Spektroskopi  IR  dan  KLT.  Dari  hasil  tanaman  tersebut  dapat disimpulkan mengandung senyawa kumarin.

## BIBLIOGRAFI
Agustina,  Ratna.  (2019). Efektifitas  Ekstrak  Daun  Jambu  Biji  (Psidium  Guajava  L.) Terhadap  Bakteri  Aeromonas  hydrophila  SECARA  IN  VITRO  (Studi  Eksperimen Sebagai  Sumber  Belajar  Peserta  Didik  Pada  Materi  Sistem  Imun  Pada  Hewan Untuk  Sekolah  Menengah  Atas  Kelas  IX  Semester  II) .  UIN  Raden  Intan Lampung. Google Scholar
Antira.  Nurdin.  Santoni.  (2013).  Uji  Antioksidan  dari  Ekstrak  Daun  Surian.  Makara Sains:2(23):119-123. Google Scholar
Desi,  Karmila.  (2016). Isolasi  Senyawa  Metabolit  Sekunder  dari  Fraksi  Etil  Asetat Tumbuhan  Rumput  Mutiara  (Hedyotis  corymbosa  L.)  dan  Uji  Toksisitas  dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) . Universitas Andalas. Google Scholar
Dhaniaputri,  Risanti.  (2016).  Mata  Kuliah  Struktur  dan  Fisiologi  Tumbuhan  sebagai Pengantar Pemahaman Proses Metabolisme Senyawa Fitokimia. Research Report .
Google Scholar
Fitriyah,  Indatul.  Thahjandarie,  Tjitik.  Saputri,  Ratih.  (2021).  Aktivitas  Kanker Senyawa  Turunan  Kumarin  dari  Melicope  Latifolia.  Jurnal  Sains:15(1):1-7. Universitas Airlangga.
Febria  Elvi,  Susanti.  Mai, Efendi.  (2016).  Isolasi  Senyawa  Kumarin  dari  Kulit  Batang Kecapi. Jurnal Kalisator:1(2):1-8. Universitas Andalas. Google Scholar
Ilyas,  Asriani.  (2013).  Senyawa  Golongan  2-arylbenzofuran  dan  Stilben  dari  Ekstrak Metilen  Klorida  (CH2Cl2)  Daun  Artocarpus  fretessi  hassk. Teknosains:  Media Informasi Sains Dan Teknologi , 7 (1), 1–9. Google Scholar
Katja, Dewa. Sonda, Andre. Huspa, Maryanti. (2015). 7-Hidro-6-Metoksi Kumarin dari Kulit  Batang  Chisocheton  Celebius.  Jurnal  Kimia:9(2):267-270.  Universitas Padjajaran. Google Scholar
Khafidhoh, Zakiyatul. Dewi, Sri. (2015). Efektivitas Infusa Kulit Jeruk Purut terhadap Pertumbuhan  Candida  albicans  Penyebab  Sariawan  secara  in  vitro.  Universitas Muhammadiyah Semarang. Google Scholar
Khasanah,  Sisca.  Imaniah,  Nur.  Saputri,  Ratih.  (2018).  Antioksidan  Kumarin Terisoprenilasi  dan  Alkaloid  indol  dari  Kulit  Batang  Zanthoxylum  Ovalifolium Tutcher. Jurnal Kimia:15(2):79-81. Universitas Airlangga. Google Scholar
Mulia,  Melindra.  Isolasi  Kumarin  dari  Kulit  Buah  Limau  Sundai.  (2017).  Jurnal Eksakta:18(2):138-145. Universitas Negeri Padang. Google Scholar
Setiawan,  Duyeh,  &  Rakhmawaty,  Diana.  (2014).  Sintesis  Dan  Karakterisasi  Senyawa 3, 3’-Benzilidena Bis-4–Hidroksi Kumarin Untuk Sediaan Radioterapi. Chimica et Natura Acta , 2 (3). Google Scholar
Sukmawati,  Siti  Nurhajar.  Harlia.  Rudiyansyah.  (2017).Jurnal  JJK.  Karakterisasi Struktur  Senyawa  Kumarin  Glikosida  Dari  Biji  Buah  Rambutan  (Nephelium lappaceum L.). Pontianak: Program Studi Kimia Universitas Tanjung Pura. 6(3):1- 5.
Wibaldus.  Jayuska,  Afghani.  (2016).  Bioaktivitas  Minyak  Atsiri  Kulit  Jeruk  Nipis terhadap Rayap Tanah. JKK:5(1):44-51. Universitas Tanjung Pura. Google Scholar
Wesly,  Pasaribu.  sammy.  longdong.  (2015).  efektivitas  Estrak  Daun  Pacar  Air  untuk Meningkatkan  Respon  Imun  Non  Spesifik  Ikan  Nila.  jurnal  Budidaya Perairan;3(1):83-92. Manado. Google Scholar
Zainol, Arifin, Ronasari, Mahadji Putri, & Ninin Khoirunnisa, Ninin. (2019). Similarity Jamu Tradisional Ditinjau dari Aspek Ekonomi dan Kesehatan . Google Scholar

## Copyright holder :
Dianti Pratiwi, Dila Qhoirul Nisa, Elsya Martia, Putri Wulanbirru, Syifa Dwi Andini
(2021)
First publication right :

## Syntax Idea
This article is licensed under: