KAJIAN MUTU KIMIA DAN DAYA HAMBAT MADU LEBAH TRIGONA

## ( Tetragonula clypearis) DARI PETERNAKAN DI KABUPATEN LOMBOK TIMUR TERHADAP Pseudomonas aeruginosa SECARA IN VITRO
[Study On Chemical Quality And Inhibitory Efficacy Of Trigona Bee (Tetragonula Clypearis) Honey From Breeders In East Lombok District Against Pseudomonas Aeruginosa Using In Vitro Analysis]
Solatul Hifzi Ulan Nasri 1) , Sri Widyastuti 2) , Mutia Devi Ariyana 2*)
1) Mahasiswa Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri, Universitas Mataram
2) Staff pengajar fakultasTeknologi Pangan dan Agroindustri, Universitas Mataram *Penulis Korespondensi, Email: mutiadevi0705@unram.ac.id

## ABSTRACT
The chemical properties and antimicrobial activity of honey can be affected by geographic location. The aim of this study was to determine the chemical quality and inhibition activity of trigona honey bee (Tetragonulaclypearis) from Breeders in East Lombok District against Pseudomonas aeruginosa in vitro. This study was conducted using completely randomized design (CRD) with one factor, namely the location of the trigona beekeeping which consisted of 6 (six) locations, namely breeders Dames Damai, Bintang Rinjani, Sukarema, Bebidas, Banjar Sari and Geres.). Data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) at a significance level of 5% using Co-Stat software. Significantly different data  were  tested  with  an  Honestly  Significant  Difference  (HSD).  Data  of  phytochemical  compounds  (tanins  and flavonoids) were analyzed using a descriptive method. The results showed that trigona honey had significantly different pH, water content, and reduced sugar content. The pH of trigona honey obtained from 6 farms in East Lombok Regency is in the general pH range of trigona honey, which ranges from 2.99 to 3.33. Meanwhile, the water content of trigona honey obtained from 6 farms in East Lombok Regency was very high, namely 27.98  - 41.01% (bb) with very low reducing sugar levels, which only ranged from 25.22 - 30.92%. However, the antimicrobial activity of trigona honey from  6  breeders  in  East  Lombok  showed  the  inhibition  activity  to  Pseudomonas  aeruginosa  is  relatively  high  that indicated  by the  formation  of  an inhibition  zone  due  to the  existence  of  flavonoid content in trigona  honey  as  an antimicrobial agent.
Keywords : chemical quality, inhibition activity, Pseudomonas aeruginosa, tetragonulaclypearis, trigona honey

## ABSTRAK
Sifat  kimia  dan  aktivitas  antimikroba  madu  dapat  dipengaruhi  oleh  letak  geografis.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui mutu fisikokimia dan daya hambat madu lebah trigona ( Tetragonula clypearis) dari Peternak di Kabupaten Lombok  Timur  terhadap Pseudomonas  aeruginosa  secara  in  vitro.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan  satu  faktor,  yaitu  lokasi  peternakan  lebah  trigona  yang  terdiri  atas  6  (enam)  lokasi  yaitu peternak Dames Damai, Bintang Rinjani, Sukarema, Bebidas, Banjar Sari dan Geres. Data hasil pengamatan dianalisis dengan analisis keragaman (ANOVA) pada taraf nyata 5% dengan menggunakan software Co-Stat. Data yang berbeda nyata diuji lanjut dengan uji Beda Nyata Jujur (BNJ). Data hasil pengamatan untuk uji senyawa fitokimia (tanin dan flavonoid) dianalisis menggunakan metode deskriptif. Hasil penelitian menunjukan bahwa madu trigona yang diperoleh dari 6 Peternak di Lombok Timur memiliki pH, kadar air dan kadar gula reduksi yang berbeda nyata. pH madu trigona yang diperoleh dari 6 peternakan di Kabupaten Lombok Timur berada pada rentang pH madu trigona pada umunya yaitu  berkisar  antara  2,99  sampai  3,33.  Sedangkan  kadar  air  madu  trigona  yang  diperoleh  dari  6  peternakan  di Kabupaten Lombok Timur sangat tinggi yaitu 27,98 – 41,01% (bb) dengan kadar gula reduksi sangat rendah yaitu hanya berkisar antara 25,22 - 30,92%. Namun pada pengujian aktivitas antimikroba secara in vitro pada madu trigona dari 6 peternak di Lombok Timur menunjukkan penghambatan pertumbuhan Pseudomonas aeruginosa yang cukup tinggi  ditandai  dengan  terbentuknya  zona  hambat  yang  disebabkan  oleh  kandungan  flavonoid  pada  madu  trigona sebagai zat antimikroba.
Kata kunci: daya hambat, madu trigona, mutu kimia, Pseudomonas aeruginosa, Tetragonula clypearis
Copyright © 2022 by Authors, published by Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan)
This is an open access article distributed under the CC BY-SA 4.0 License https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/

## PENDAHULUAN
Lebah Trigona  sp.  merupakan  sekelompok lebah  tanpa  sengat  yang  berukuran  kecil,  hidup  di kawasan tropis sampai lintang yang sedikit lebih tinggi (subtropis)  (Harjanto  dkk,  2020).  Lebah Trigona memiliki lebih dari 600 spesies di seluruh dunia dan di Indonesia tercatat sebanyak 46 spesies (Priawandiputra  dkk,  2020).  Terdapat  tiga  spesies lebah Trigona yang ditemukan di Lombok Timur yaitu Tetragonula  sapiens,  Tetragonula  clypearis  dan Heterotrigona erythrogastra (Wahyunidkk, 2020).
Usaha  budidaya  lebah Trigona  di  Pulau Lombok  semakin  berkembang  pesat  karena  lebah Trigona mampu menghasilkan produk madu, propolis dan  roti  lebah  (Riendriasari  dan  Krisnawati,  2017). Tetragonula  clypearis  merupakan  salah  satu  spesies lebah trigona yang menghasilkan produk madu paling banyak di daerah Lombok Timur. Beberapa tempat di Kabupaten  Lombok  Timur  yang  memproduksi  madu dari  spesies  lebah Tetragonula  clypearis  antara  lain Desa  Bintang  Rinjani,  Desa  Dames  Damai,  Desa Bebidas,  Desa  Sukarema,  Desa  Geres,  dan  Desa Banjar Sari.
Madu  dari  lebah Trigona  sp.  memiliki kandungan  antioksidan  lebih  tinggi  dibanding  madu dari  genus Apis  sehingga  menjadikannya  bernilai ekonomi tinggi (Achyani, 2019). Madu trigona memiliki kandungan  kimia  yang  sangat  kompleks  seperti glukosa,  fruktosa,  mineral,  vitamin  (Kwapong  dkk, 2010)  dan  mengandung  disakarida  trehalosa  yaitu isomer  sukrosa  yang  bermanfaat  bagi  kesehatan karena memiliki indeks glikemik dan indeks insulinemik yang rendah (Mizumoto, 2004 dan Kowalczyk, 2015). Selain  itu,  madu  trigona  diketahui  mengandung senyawa  kimia  yang  bersifat  sebagai  antimikroba, yaitu  senyawa  asam  lemak,  flavanoid  dan  fenol (Harjantodkk,  2020).  Oleh  sebab  itu  madu  trigona dapat  menjadi  solusi  alternatif  sebagai  antimikroba alami  yang  dapat  mencegah  pertumbuhan  mikroba pembusuk dan mikroba patogen (Mundo dkk., 2004).
Bakteri  yang  sering  ditemukan  dalam makanan  yang  menyebabkan  kebusukan  salah satunya  yakni  bakteri  golongan Pseudomonas  sp. Pseudomonas menjadi penyebab kebusukan dikarenakan  kemampuannya  dalam  memproduksi enzim yang dapat memecah komponen lemak, protein maupun karbohidrat dari bahan pangan.
Pseudomonas  aeruginosa  merupakan  salah  satu spesies bakteri yang dapat menyebabkan pembusukan pada daging, ikan, dan telur (Hadiwiyoto, 1993).
Beberapa  penelitian  telah  dilakukan  untuk membuktikan  bahwa  madu  trigona  memiliki kemampuan  dalam  menghambat  pertumbuhan mikroba  patogen  (Hassanain,  2010)  dan  bakteri pembusuk  (Hariyati,  2010)  secara in  vitro. Berdasarkan penelitian Devianti (2015) madu trigona dapat menghambat pertumbuhan mikroba Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeroginosa, dan Candida  albicans  secara  in  vitro,  hal  ini  disebabkan madu  trigona  mengandung  senyawa Heptadecene- (8)-  carbonic  acid  yang  tergolong  senyawa  fenol. Penelitian  Ma’ruf  (2018)  menunjukkan  bahwa penggunaan  madu  trigona  dengan  konsentrasi  100 ml/mg  mampu  menghambat  pertumbuhan  dan membunuh  bakteri Staphylococcus  aureus  resisten sefalosporin secara in vitro pada media Nutrient Agar (NA). Boorn (2009) melaporkan bahwa madu trigona ( T. carbonaria) yang berasal dari Australia mempunyai aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri  gram  positif ( Staphylococcus aureus) dan gram negatif ( Pseudomonas  aeruginosa)  sedangkan  bersifat antifungal  terhadap Candida  albican.  Selain  itu, berdasarkan  penelitian  Nur  (2019),  madu  trigona efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus secara in vitro  dengan  konsentrasi  penghambatan  terbaik adalah 60%-80%.
Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi sifat fisikokimia dan aktivitas antimikroba madu yaitu letak geografis  dan  jenis  tanaman  sebagai  sumber  nektar lebah  madunya  (Nadhilla,  2014).  Wilayah  Lombok Timur  memiliki  kondisi  geografis  yang  bervariasi meliputi  pegunungan  dan  dataran  rendah  (BPS Kabupaten  Lombok  Timur,  2021).  Evahelda  (2017) menyatakan bahwa semakin tinggi suatu daerah maka suhu  lingkungan  semakin  menurun,  sehingga  madu yang akan dihasilkan lebih mudah untuk menyerap air. Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan  penelitian  mengenai kajian  mutu  kimia  dan  daya  hambat  madu  trigona ( Tetragonula clypearis) yang berasal dari Peternak di Kabupaten  Lombok  Timur  terhadap Pseudomonas aeroginosa secara in vitro.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini  antara  lain  Madu Trigona  dari  6  wilayah  di Kabupaten Lombok Timur; isolate murni Pseudomonas aeruginosa  yang  dibiakkan  di  Laboraturium  FATEPA, aquades,  media Nutrient  Agar  (NA),  Nutrient  Broth (NB), NaCl fisiologis 0,9%, standart MC ferland, NaOH 0,1  N,  indikatorPP,  Pb  asetat  5%,  Na3HPO45%,  KI 30%, H2SO4 6N, luff school, Na2S2O3 0,1 N, indicator amilum 1%, FeCl3 5%, butiran Mg dan HCl 2 N.
Adapaun alat-alat yang digunakan pada penelitian ini  adalah  aluminium  foil, Erlenmeyer  (IWAKI, Jepang), cawan petri, corong kaca, cokbor steril, gelas piala,  oven  ( Memmert,  Jerman),  cawan  porselen, mikropipet ( Eppendorf, Jerman), blue tip & yellow tip (Eppendorf, Jerman) , labu ukur, kertas saring, ruber bulb, magnetic stirrer, inkubator (Memmert, Jerman), desikator  ( Normax,  Amerika),  jangka  sorong, timbangan  analitik  ( Kern,  Jerman),  alat  titrasi, waterbath, gelas ukur, lampubunsen, hot plate, pipet tetes,  tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi, Laminar  air flow  (Steamline,  Australia),  dan  vortex  (Heidolph, Jerman).

## Metode
Metode  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  metode  eksperimental  yang  dilakukan  di Laboratorium. Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) menggunakan satu  faktor  dengan  6  perlakuan  yaitu  madu  trigona ( Tetragonula  clypearis)  yang  diperoleh  dari Peternakan Dames Damai, Bintang Rinjani, Sukarema, Bebidas, Banjar Sari dan Geres yang diulang sebanyak 3 kali sehingga diperoleh 18 unit percobaan. Data hasil pengamatan  dianalisis  dengan  analisis  keragaman ( Analysis  of  Variance)  pada  taraf  nyata  5%  dengan software  Co-Stat.  Apabila  terdapat  perbedaan  nyata pada perlakuan, maka dilakukan uji Beda Nyata Jujur (BNJ)  untuk  parameter  kimia  (kadar  air,  keasaman, dan  total  gula  pereduksi)  dan  mikrobiologi  (daya hambat).  Data  hasil  pengamatan  untuk  uji  senyawa fitokimia (tanin dan flavonoid) dianalisis menggunakan metode deskriptif.
Pelaksanaan Penelitian 1. Survey lokasi, wawancara dan Pengambilan sampel
Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan  teknik pengambilan  sampel non-probability  sampling.  Non-
probability  sampling  adalah  teknik  pengambilan sampel  dengan cara sampel diambil tidak secara acak (Fauzy, 2019). Teknik ini didasarkan pada penelitian yang telah dilakukan oleh Zulhawa (2010) dan karena ketersediaan  serta  kemudahan  untuk  mendapatkan sampel. Langkah awal yang dilakukan dalam penelitian ini  adalah  survey  lapangan  serta  melakukan wawancara  kepada  peternak  atau  produsen madu Trigona. Wawancara dilakukan untuk mengetahui  jenis  vegetasi,  cara  pengambilan  madu dan  jumlah  madu  yang  diproduksi.  Sampel  madu Trigona  diambil  dari  6  peternak  lebah  dengan  jenis lebah  yang  sama  yaitu Tetragonula  clypearis  yang berada  di  wilayah  Lombok  Timur,  yakni  Peternakan Dames  Damai,  Peternakan  Bintang  Rinjani, Peternakan Sukarema, Peternakan Bebidas, Peternakan Banjar Sari dan Peternakan Geres.
2. 2. Uji kadar air Uji  kadar  air  dilakukan  dengan  Metode Thermogravimetri (Sudarmadjidkk, 2007).
3. 3. Uji pH Pengujian  kadar  pH  madu  trigona  dilakukan menggunakan pH meter (Sudarmadji dkk, 1989).
4. 4. Uji gula reduksi
Kadar  gula  pereduksi  diuji  dengan  metode lufff schoorl (Sudarmadji dkk, 2010).

## 5. Uji Kualitatif Senyawa Polifenol (Tanin)
Pengujian  kandungan  senyawa  polifenol  (tanin) dilakukan dengan tahapan sebagai berikut (Muntedkk.,  2015),  sampel  madu  sebanyak  3  tetes dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  kemudian ditambahkan  FeCl3  5%  sebanyak  dua  tetes.  Sampel positif mengandung komponen fenolik jika terbentuk warna hijau, hitam kebiruan atau hitam kuat.

## 6. Uji Kualitatif Senyawa Flavonoid
Pengujian  keberadaan  kandungan  senyawa flavonoid  dilakukan  dengan  tahapan  sebagai  berikut (Muntedkk., 2015), yaitu sampel madu sebanyak 1 g dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi,  kemudian ditambahkan butiran Mg dan HCl 2 N. Larutan tersebut disaring  dan  ditambahkan  amil  alkohol.  Perubahan warna  menjadi  merah/jingga  menunjukkan adanya kandungan flavonoid.

## 7. Uji daya hambat
Uji  daya  hambat  madu Trigona  Kabupaten Lombok  Timur  dengan  bakteri  uji Pseudomonas aeruginosa yang telah diremajakan. Uji daya hambat dilakukan  menggunakan  metode  difusi  sumur (Modifikasi  Imam,  2017),  dilakukan  dengan  tahapan yaitu cawan petri steril diisi dengan 1 ml (10 7 ) bakteri uji  dan  24  ml  media  NA  steril  ( pour  plate)  secara aseptik  dan  media  dibiarkan  memadat.  Dibuat  3 sumuran dengan diameter 6 mm pada media cawan menggunakan cokbor steril. Dimasukkan sampel madu trigona  pada  masing  masing  lubang  sumuran sebanyak  0,05  ml.  Dimasukkan  juga  kontrol  positif (dionicol) dan negatif (aquades) pada lubang sumuran sebanyak  0,05  ml.  Media  kemudian  diinkubasi  pada suhu 37 o C selama 24 jam. Dilakukan pengukuran zona bening  menggunakan  jangka  sorong  pada  sisi  yang berbeda sebagai ulangan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kadar Air
Kadar  air  merupakan  salah  satu  parameter yang sangat penting untuk menentukan kualitas madu trigona  yang  memiliki  sifat  cair  (Achyani,  2019). Menurut  Chuttong  (2016),  salah satu  sifat  khas  dari madu  trigona  yakni  mengandung  kadar  air  tinggi . Madu trigona ( Tetragonula clypearis) yang diperoleh dari  6  peternakan  di  Kabupaten  Lombok  Timur mempunyai kadar air yang bervariasi yaitu dari 27,98 – 41,01% (bb). Hasil uji kadar air madu trigona dari 6 Peternakan di Kabupaten Lombok Timur dapat dilihat pada Gambar 1.
Data kadar air pada Gambar 1 menunjukkan bahwa  dari  6  sampel  madu  trigona  yang  memiliki kadar air tertinggi adalah madu trigona dari Peternak Dames   Damai dengan nilai kadar air sebesar 41,01% (bb),  sedangkan  madu  trigona  yang  memiliki  nilai kadar  air  paling  rendah  dihasilkan  oleh  Peternak Bebidas dengan nilai 27,98% (bb). Berdasarkan data ini, madu trigona yang diperoleh dari 6 Peternakan di Kabupaten Lombok Timur yaitu Dames Damai, Bintang Rinjani,  Sukarema,  Bebidas,  Banjar  Sari  dan  Geres belum  memenuhi  syarat  batas  maksimal  kadar  air sesuai  SNI.  Menurut  SNI-8664-2018,  madu  trigona yang  berkualitas  baik  adalah  madu  trigona  yang memiliki  nilai  standar  maksimal  kadar  air  sebesar 27,50% (BSN, 2018). Oleh karena itu, madu trigona yang berasal dari Peternak Bebidas memiliki kualitas
madu terbaik karena memiliki kadar air mendekati nilai SNI-2018 yaitu sebesar 27,98 % (bb). Hasil penelitian ini  sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  Ulfa (2020), bahwa madu trigona yang berasal dari Lombok Timur  memiliki  kadar  air  yang  cukup  tinggi  yaitu sebesar  32,51%  (bb)  serta  belum  memenuhi  syarat nilai SNI.
Gambar 1. Grafik Kadar Air Madu Trigona ( Tetragonula clypearis)  dari  beberapa  Peternak  di Lombok Timur
Kadar air pada madu dipengaruhi oleh faktor cuaca  dan  kelembaban  serta  jenis  nektar  yang dikumpulkan lebah (Gariola dkk, 2013). Secara umum rata-rata  suhu  lingkungan  di  wilayah  Lombok  Timur berkisar antara 26-27 o C dan mempunyai kelembaban yang  cukup  tinggi  yaitu  40-100%  (BPS  Kabupaten Lombok Timur, 2021). Suhu lingkungan yang rendah dan  kelembaban  yang  tinggi  menyebabkan  madu menjadi  lebih  encer  karena  madu  memiliki  sifat higroskopis,  sehingga  kadar  air  pada  madu  menjadi meningkat (Hakim dan Abduh, 2018). Samadi (2004) menyatakan  bahwa  madu  memiliki  sifat  higroskopis, yakni  madu  dapat  menyerap  uap  air  dari lingkungannya.
Secara umum madu trigona dari peternakan di wilayah Lombok Timur memiliki kadar air yang tinggi, terutama  madu  dari  peternak  Dames  Damai  yang memiliki  kadar  air  yang  berbeda  secara  signifikan dengan madu dari peternak lainnya. Jumlah dan jenis vegetasi yang dominan sebagai sumber nektar turut berkontribusi terhadap kadar air madu. Madu trigona dari  Peternakan  Dames  Damai  memiliki  kadar  air paling tinggi disebabkan karena pada lokasi tersebut terdapat  tanaman  kaliandra  yang  menjadi  sumber nektar lebah trigona. Hasil penelitian Chayati (2008),
a b ab b b b 0 10 20 30 40 50 Dames Damai Bintang Rinjani Sukarema Bebidas Banjar Sari Geres K ad ar Ai r (% ) Lokasi Peternakan Madu Trigona ( Tetragonula clypearis )
madu dari nektar tanaman kaliandra mempunyai kadar air  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  madu  dari tanaman  lengkeng,  rambutan  dan  randu.  Hal  ini kemungkinan  terjadi  karena  tanaman  kaliandra berbunga  pada  musim  hujan.  Thohari  (2017) menyatakan bahwa air pada sisiran madu berasal dari nektar yang telah mengalami pematangan oleh lebah.
Selain  itu,  pada  lokasi  Peternakan  Dames Damai tercatat memiliki sumber pakan paling banyak diantara 6 peternakan lebah trigona di Lombok Timur. Berdasarakan data vegetasi yang diperoleh, lebah dari peternakan  Dames  Damai  memiliki  kecendrungan untuk  memperoleh  nektar  dari  tanaman  kaliandra, pisang,  lengkeng  dan  papaya.  Menurut  penelitian Tanjung  (2022)  madu  yang  diperoleh  dari  sumber nektar yang banyak mempunyai kadar air lebih tinggi dibanding madu dari satu jenis sumber nektar.

## Potential of hydrogen (pH)
Keasaman  pada  madu  menjadi  parameter yang sangat penting dalam menentukan kualitas madu karena  dapat  mempengaruhi  aroma  dan  cita  rasa, serta  sebagai  penanda  terjadinya  proses  fermentasi (Korosec,  2017).  Madu  yang  dihasilkan  oleh  lebah trigona secara umum memiliki keasaman lebih tinggi dibandingkan  madu  dari  genus Apis  dengan  kisaran nilai pH yaitu 3,05-4,55 (Sousa, 2006). Pada penelitian ini,  nilai  pH  madu  trigona  yang  diperoleh  dari  6 Peternakan  di  Kabupaten  Lombok  Timur  berkisar antara 2,99 – 3,33 yang dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar  2.  Grafik  pH  Madu  Trigona  ( Tetragonula clypearis  )  dari  beberapa  Peternak  di Lombok Timur
Berdasarkan Gambar 2, diketahui bahwa madu trigona yang mempunyai nilai pH paling tinggi diantara 6 sampel madu trigona tersebut adalah madu trigona yang  diperoleh  dari  Peternakan  Geres  sebesar  3,33;
Sedangkan  madu  trigona  yang  memiliki  pH  paling rendah  adalah  madu  trigona  yang  diperoleh  dari Peternakan Banjar Sari dan Dames Damai dengan nilai pH berturut-turut yaitu 2,99 dan 3,02. Nilai pH yang lebih kecil menunjukkan tingkat keasaman yang tinggi pada  sampel  madu  trigona  tersebut.  Hal  ini  berarti bahwa madu trigona yang diperoleh dari Peternakan Banjar  Sari  dan  Dames  Damai  memiliki  tingkat keasaman  tertinggi  dibandingkan  dengan  sampel madu trigona lainnya. Tingkat keasaman madu trigona dari seluruh sampel memenuhi kisaran nilai pH madu trigona dari Malaysian Standards (2017) yaitu 2,5-3,8. Adapun  standar  dari International  Honey  Commision (2009)  dan  SNI  (2018)  tidak  mensyaratkan  nilai  pH dalam  parameter  standar  madu  kelulut  (madu trigona).
Keasaman  pada  madu  trigona  sangat dipengaruhi  oleh  kadar  air  dan  komposisi  vegetasi tanaman yang menjadi sumber pakan lebah. Chuttong (2016)  menyatakan  bahwa  kadar  air  dan  keasaman yang  tinggi  merupakan  karakteristik  khas  madu trigona.  Keasaman  tertinggi  dihasilkan  oleh Peternakan  Dames  Damai  dan  Banjar  Sari,  hal  ini sesuai dengan nilai kadar air pada madu trigona yang dihasilkan oleh Peternakan Dames Damai dan Banjar Sari yang tergolong tinggi.
Selain kadar air, jenis tanaman yang berpotensi sebagai  sumber  pakan  lebah  trigona  mempunyai pengaruh  yang  sangat  penting  dalam  menentukan tingkat  keasaman  madu  trigona.  Berdasarkan  hasil wawancara pada peternak lebah diketahui bahwa jenis vegetasi  tanaman  pada  setiap  lokasi  budidaya lebah trigona ( Tetragonula clypearis) berbeda dan beragam (Tabel 3). Madu trigona ( Tetragonula clypearis) yang diperoleh dari 6 Peternak yang ada di Lombok Timur termasuk kedalam jenis madu trigona multifloral, jenis madu  ini  dihasilkan  oleh    lebah  trigona  yang menghisap  nectar  dari  sumber  yang  beragam  atau lebih dari satu jenis tanaman. Menurut Sousa (2016) dan  Fatma  (2017),  tingkat  keasaman  madu  sangat erat  kaitannya  dengan  kandungan  asam  organik penyusunnya  yang  mana  hal  ini  bergantung    pada jenis  tumbuhan  yang  menjadi  sumber  pakan  lebah tersebut.

## Kadar Gula Reduksi
Kandungan  gula  reduksi  pada  madu didefinisikan sebagai jumlah total  antara fruktosa dan glukosa  (Crane,  1979).  Kandungan  gula  pada  madu dapat mempengaruhi rasa, aroma dan umur simpan
d b c b d a 2.8 2.9 3 3.1 3.2 3.3 3.4 Dames Damai Bintang Rinjani Sukarema Bebidas Banjar Sari Geres N ila i pH Lokasi Peternakan Madu Trigona (Tetragonula clypearis)
madu  (Evahelda,  2017).  Madu  yang  memiliki  kadar gula tinggi mempunyai tekstur yang lebih kental serta dapat  menghambat  pertumbuhan  mikroba.  Crane (1999)  menyatakan  bahwa  kadar  gula  yang  tinggi pada madu mampu mencegah pertumbuhan mikroba seperti  bakteri,  kapang  dan  khamir  sehingga mencegah  terjadinya  fermentasi  yang  menyebabkan kualitas  madu  menjadi  menurun.  Hasil  penelitian kadar  gula  reduksi  madu  trigona  ( Tetragonula clypearis) dari enam peternak di Lombok Timur dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar  3.  Grafik  Gula  Reduksi  Madu  Trigona ( Tetragonyla  clypearis)  dari  beberapa Peternak di Lombok Timur
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kadar gula  reduksi  antar  sampel  madu  berbeda  nyata, kecuali antara sampel madu dari peternak Sukarema dan Bebidas. Rata-rata kandungan kadar gula reduksi tertinggi terdapat pada madu trigona yang berasal dari Peternakan  Sukarema  yaitu  sebesar  30,98%  diikuti oleh  madu  trigona  dari  Peternakan  Bebidas  sebesar 30,92%. Madu trigona yang memiliki rata-rata kadar gula reduksi paling rendah adalah madu trigona yang diperoleh  dari  Peternakan  Dames  Damai  dan  Banjar Sari  dengan  nilai  25,22%  dan  25,33%.  Berdasarkan hasil  pengujian  kadar  gula  reduksi  tersebut  madu trigona  dari  6  wilayah  di  Kabupaten  Lombok  Timur memiliki  kualitas  madu  yang  belum  sesuai  dengan batas  minimal  SNI-  8664-2018.  Madu  lebah  tanpa sengat  (trigona)  yang  berkualitas  baik  adalah  madu trigona  yang  mengandung  kadar  gula  (glukosa) minimal sebesar 55% (BSN, 2018).
Hasil uji kadar gula reduksi ini menunjukkan adanya  korelasi  dengan  nilai  kadar  air  dan  tingkat keasaman.  Rendahnya  nilai  kadar    gula  reduksi  dari
beberapa  madu  ini    disebabkan  oleh  kandungan  air dan tingkat keasaman yang tinggi pada sampel madu trigona ( Tetragonula clypearis). Hal ini sesuai dengan penelitian  Triwanto  (2021),  bahwa  rendahnya  kadar gula  pada  madu A.  malifera  dari  nektar  randu disebabkan karena tingginya kadar air dan keasaman pada  madu  tersebut.  Terbukti  bahwa  madu  trigona dari Peternakan Dames Damai dan Banjar Sari adalah madu trigona yang memiliki kadar gula reduksi terkecil karena  madu  trigona  dari  Peternakan  Dames  Damai memiliki  kadar  air  tertinggi  dan  madu  trigona  dari Banjar  Sari  memiliki  tingkat  keasaman  yang  paling tinggi.
Menurut  Adityarini  (2020)  kandungan  gula dalam  madu  dipengaruhi  oleh  tingkat  kematangan madu, jenis lebah dan sumber nektar. Sampel madu trigona pada penelitian ini menggunakan sampel madu dari  jenis  lebah  yang  sama  yaitu  lebah  trigona ( Tetragonula clypearis) dan memiliki kandungan gula yang  berbeda.  Berdasarkan  hasil  wawancara  pada peternak  lebah  trigona,  tingkat  kematangan  madu memiliki pengaruh terhadap tingkat kemanisan madu. Madu yang dipanen matang memiliki rasa yang lebih manis  dibandingkan  madu  yang  dipanen  sebelum matang. Madu trigona dari 6 peternak Lombok Timur dipanen  pada  saat  kondisi  matang  yang  ditandai dengan terisinya kantong propolis.
Faktor  lain  yang  dapat  mempengaruhi  kadar gula  dalam  madu  trigona  yaitu  sumber  nektar  yang dikumpulkan  lebah.  Kandungan  gula  pada  nektar tanaman  bervariasi  tergantung  dari  jenis  tanaman dengan kisaran antara 5 - 80% (ICMSF, 2005). Madu dari  lebah  trigona (Tetragonula  clypearis)  yang dihasilkan  dari  6  peternakan  di  Lombok  Timur merupakan  madu  dari  jenis  lebah  trigona  yang tergolong  multifloral  (sumber  nektar  beragam/lebih dari satu jenis tanaman). Berdasarkan data vegetasi diketahui bahwa Peternakan Dames Damai memperoleh  sumber  nektar  dari  tanaman  papaya, pisang,  kaliandra  dan  lengkeng;  Peternakan  Bintang Rinjani  memperoleh  nektar  dari  tanaman  mangga, lengkeng, dan bunga air mata pengantin; Peternakan Sukarema memperoleh nektar dari tanaman bunga air mata  pengantin,  kelapa  dan  kaliandra;  Peternakan Bebidas memperoleh nektar dari tanaman papaya dan kopi; Peternakan Banjar Sari memperoleh nektar dari tanaman  kelapa  dan  pisang;  sedangkan  Peternakan
d b a a d c 0 5 10 15 20 25 30 35 Dames Damai Bintang Rinjani Sukarema Bebidas Banjar Sari Geres G u la R ed u ks i ( % ) Lokasi Peternakan Madu Trigona ( Tertragonula clypearis )
Geres  memperoleh  nektar  dari  tanaman  pisang, kelapa, papaya dan bunga air mata pengantin.
Gula  reduksi  tertinggi  yaitu  sebesar  30,98% dihasilkan  oleh  madu  trigona  yang  diperoleh  dari Peternakan Sukarema. Hasil wawancara menunjukkan bahwa di lokasi peternakan Sukarema terdapat bunga air  mata  pengantin  dan  tanaman  kaliandra  sebagai penghasil nektar terbaik. Nektar dari bunga air mata pengantin adalah jenis nektar yang disukai oleh lebah trigona  sedangkan  nektar  dari  bunga  kaliandra merupakan jenis nektar yang dapat membuat citarasa madu  kelulut  (trigona)  menjadi  lebih  manis berdasarkan pengalaman uji coba peternak (Syaifudin, 2020).

## Senyawa Fitokimia (Tanin dan flavanoid) Polifenol (Tanin)
Pengujian senyawa polifenol (tanin) dilakukan secara  kualitatif  dengan  melarutkan  sampel  madu trigona  dengan  peraksi  besi  (III)  klorida  (FeCl 3 ). Senyawa  tanin  merupakan  turunan  dari  senyawa polifenol  akan  berinteraksi  dengan  ion  Fe 3+ membentuk  kompleks.  Adanya  senyawa  tanin  pada madu  trigona  ditandai  dengan  perubahan  warna larutan  sampel  menjadi  warna  biru  tua,  biru kehitaman,  atau  hijau  kehitaman  (Darmawijaya  dan Yudha,  2013;  Simaremare,  2014).  Berdasarkan  hasil pengujian, madu trigona ( Tetragonula clypearis) dari 6  lokasi  peternakan  yang  berbeda  di  Lombok  Timur dinyatakan tidak mengandung senyawa tanin.
Gambar 4. Hasil Uji Tanin Madu Trigona ( Tetragonyla clypearis) dari beberapa Peternak di Lombok Timur
Hasil  yang  menunjukkan  tidak  adanya kandungan  tanin  ditandai  dengan  terbentuknya kompleks  berwarna  kuning  kehijauan  (Gambar4). Hasil  yang  diperoleh  sama  dengan  penelitian  yang
dilakukan oleh Zahra dkk.,  (2021) yang menyatakan bahwa  ekstrak  madu  dari  spesies Trigona  sp.  asal kabupaten Lombok Utara tidak mengandung senyawa tanin.  Namun  berbeda  dengan  hasil  penelitian  yang dilakukan  oleh  Emmasitah  dkk.  (2020)  yang menunjukkan  bahwa  madu  trigona  asal  Sulawesi Selatan  positif  mengandung  tanin  yang  memiliki potensi sebagai antioksidan. Perbedaan hasil uji dapat disebabkan oleh sumber pakan lebah yang berbeda- beda tergantung pada letak geografisnya. Hal ini dapat mempengaruhi  kandungan  senyawa  yang  terdapat dalam madu (Cahyadin dkk., 2019).

## Flavonoid
Uji  kandungan  senyawa  flavonoid  dilakukan secara kualitatif menggunakan metode Shinoda Test dengan  penambahan  Mg  dan  HCl  sebagai  pereaksi. Penambahan Mg  dan  HCl menyebabkan terjadinya reaksi  reduksi  pada  senyawa  flavonoid  yang  ada  di dalam  sampel.  Kompleks  yang  terbentuk  setelah reaksi ini menghasilkan warna merah atau jingga pada kelompok  senyawa  flavonoid  berupa  flavonol, flavanon,  flavanolol,  dan  zanton (Ikalinusdkk., 2015; Tunny dkk., 2020).
Gambar  5.  Hasil  Uji  Flavonoid  Madu  Trigona ( Tetragonyla  clypearis)  dari  beberapa Peternak di Lombok Timur
Berdasarkan  hasil  penelitian  (gambar  5), madu  trigona  ( Tetragonula  clypearis)  dari  6  lokasi yang  berbeda  di  Lombok  Timur  yaitu  Peternakan Dames  Damai,  Bintang  Rinjani,  Sukarema,  Bebidas, Banjar  Sari  dan  Geres  positif  mengandung  senyawa flavonoid.  Hal  tersebut  ditandai  dengan  perubahan warna  larutan  sampel  menjadi  merah  bata.  Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan Zahra  (2021)  bahwa  ekstrak  madu Trigona  sp.  asal Lombok Utara positif mengandung senyawa flavonoid.

## Daya Hambat
Madu  trigona  memiliki  sifat  antimikroba  lebih kuat dibandingkan madu dari genus Apis sp. karena mengandung  senyawa  bioaktif  seperti  flavonoid  dan alkaloid  (Zahra  dkk.,  2021).  Oleh  karena  itu  madu trigona  diduga  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri  gram  negatif  dan  positif  (Hassanain,  2010). Mekanisme penghambatan pertumbuhan bakteri oleh madu  yaitu  dengan  cara  menghambat  sintesis  asam nukleat,  menghambat  fungsi  membrane  sel  dan menghambat metabolism energi (Hendra, 2011). Daya hambat  madu  trigona  ( Tetragonula  clypearis)  yang diperoleh dari 6 peternakan di Lombok Timur terhadap bakteri uji Pseudomonas aeruginosa dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar  6.  Grafik  Daya  Hambat  Madu  Trigona
( Tetragonulaclypearis) dari Beberapa Peternak di Lombok Timur
Gambar 6 menunjukkan bahwa madu trigona ( Tetragonula  clypearis)  yang  berasal  dari  6  lokasi peternakan lebah di Lombok Timur mempunyai daya hambat terhadap bakteri uji Pseudomonas aeruginosa. Adanya  penghambatan  madu  trigona  terhadap Pseudomonas aeruginosa ditandai dengan terbentuknya  zona  bening  disekitar  sumuran.  Zona hambat  madu  trigona  ( Tetragonula  clypearis)  dari  6 peternakan  di  Lombok  Timur  terhadap  bakteri Pseudomonas aeruginosa secara in vitro dapat dilihat pada Gambar 7. Nilai rata-rata diameter zona hambat madu  trigona  dari  yang  tertinggi  hingga  terendah secara berturut – turut adalah sebagai berikut: madu trigona dari Peternak Bebidas yaitu sebesar 30,59 mm, Dames Damai sebesar 28,61 mm, Sukarema sebesar 26,95  mm,  Banjar  Sari  sebesar  26,87  mm,  Geres sebesar 22,68 mm dan Bintang Rinjani sebesar 20,67 mm.  Nilai  rata-rata  diameter  zona  hambat  madu trigona dari 6 peternakan di Lombok Timur lebih dari 20  mm  dengan  kategori  sangat  kuat.  Hal  ini  berarti
bahwa madu trigona ( Tertagonula clypearis) bersifat bakterisidal  (membunuh)  terhadap  bakteri  uji Pseudomonas aeroginosa.   Hasil   penelitian ini sejalan dengan  penelitian  yang  dilakukan  Shahjahan  (2007) yang menunjukkan bahwa madu trigona ( Trigona Spp) yang  berasal  dari  Malaysia  mempunyai  aktivitas antibakteri terhadap Pseudomonas aeroginosa dengan diameter zona hambat sebesar 23 mm.
Gambar  7.  Diameter  Zona  Hambat  Madu  Trigona ( Tetragonulaclypearis)TerhadapPseudomon as  aeruginosa  (Peternakan  Lebah  Trigona,
A.DamesDamai; B.BintangRinjani; C.Sukarema;  D.Bebidas;  E.Banjar  Sari;
F.Geres)
0 5 10 15 20 25 30 35 Dames Damai Bintang Rinjani Sukarema Bebidas Banjarsari Geres Di amet er zo n a h amb at (mm) Lokasi Peternakan Madu Trigona ( Tetragonula clypearis )
Daya hambat terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa dapat terjadi karena sampel madu trigona ( Tetragonula clypearis) yang berasal dari 6 peternakan di  Lombok  Timur  mempunyai  nilai  pH  rendah  dan positif mengandung senyawa flavanoid. Nilai pH yang rendah menunjukkan bahwa madu trigona mempunyai tingkat keasaman yang tinggi yakni rata-rata nilai pH mencapai  2,99-3,33.  Menurut  Kumar  (2012) Pseudomonas  aeruginosa  merupakan  bakteri  yang tidak tahan terhadap kondisi asam karena bakteri ini mempunyai pH optimum pertumbuhan yaitu 7,4 – 7,6. Oleh  sebab  itu  hasil  uji  daya  hambat  ini  dinyatakan berkorelasi dengan tingkat keasaman yang tinggi dan kandungan senyawa fitokimia flavonoid yang terdapat pada madu lebah trigona ( Tetragonula clypearis). Hal ini  sesuai  dengan  pendapat  Ma’ruf  (2018)  bahwa adanya aktifitas antibakteri pada madu lebah kelulut ( Trigona  spp.)  disebabkan  karena  keasaman  dan kandungan  senyawa  inhibitor  yaitu  flavonoid. Sedangkan  pada  penelitian  Devianti  (2015)  Madu Trigona sp. mengandung senyawa Heptadecene-(8)- carbonic acid yang tergolong senyawa fenol.
Kandungan  senyawa  fitokimia  yang  berfungsi sebagai  antimikroba  pada  madu  trigona  dipengaruhi oleh  jenis  tanaman  sebagai  sumber  nektar  yang dikumpulkan  oleh  lebah.).  Hal  ini  sejalan  dengan penelitian Mahmood dkk. (2021), bahwa sampel madu trigona dengan jenis vegetasi tanaman yang beragam (Multifloral) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  analisis  dan  uraian pembahasan yang terbatas pada lingkup penelitian ini, maka  dapat  ditarik  kesimpulan  yaitu  madu  trigona ( Tetragonula clypearis) yang berasal dari 6 Peternak di Kabupaten Lombok Timur memiliki kadar air, pH dan kadar gula reduksi yang berbeda nyata namun belum memenuhi syarat mutu SNI- 8664-2018. Madu trigona ( Tetragonula clypearis) yang diperoleh dari 6 Peternak di  Lombok  Timur  tidak  mengandung  senyawa  tanin tetapi  positif  mengandung  senyawa  flavonoid.  Daya hambat  madu  trigona  ( Tetragonula  clypearis)  yang diperoleh dari 6 Peternak di Lombok Timur terhadap Pseudomonas aeruginosa tidak berbeda nyata dengan kategori penghambatan sangat kuat secara in vitro.

## DAFTAR PUSTAKA
Achyani dan Wicandra, D., 2019. Kiat Praktis Budidaya Lebah  Trigona  (Heterotrigona  itama).  CV. Laduny Alifatama. Lampung.
Adityarini, D., S.A.W. Suedy, dan S. Darmayanti, 2020. Kualitas  Madu  Lokal  Berdasarkan  Kadar  Air, Gula  Total  dan  Keasaman  dari  Kabupaten Magelang. Jurnal  Anatomoni  dan  Fisiologi. 5(1): 18-24.
Badan  Pusat  Statistik  (BPS),  2020.  Produksi  Madu
Nasional. https://databoks.katadata.co.id.prod uksimadunasional. Diakses pada tanggal
16 September 2021.
Badan Pusat Statistik (BPS), 2021. Kabupaten Lombok Timur  Dalam  Angka  2021.  BPS  Kabupaten Lombok Timur. Selong.
Badan  Standar  Nasional  (BSN),  2018. SNI  01-8664- 2018, Madu. Jakarta.
Boorn, K. L., Y. Y. Khor, E. Sweetman, F. Tan, T. A. Heard dan K. A. Hammer, 2009. Antimicrobial Activity  of  Honey  from  The  Stingless  Bee Trigona  carbonaria  Determined  by  Agar Diffusion,  Agar  Dilution,  Broth  Microdilution and Time-kill Methodology. Journal of Applied Microbiology. 108(2010) : 1534-1543.
Cahyadi, M. A., Sidharta, B. B. R.,  &  To,  N.  2019.
Karakteristik dan EfektivitasSalepMaduKlancengdariLebah Trigo na  sp.  sebagaiAntibakteri    dan    Penyembuh Luka Sayat. Jurnal Biota. 4(3):104–109.
Chayati,  I.,  2008.  Sifat  Fisikokimia  Madu  Monoflora dari  Daerah  Istimewa  Yogyakarta  dan  Jawa Tengah. Jurnal Agritech. 28(1): 9-14.
Chuttong,  B.,  Y.  Chanbang,  K.  Sringarm  dan  M.  D. Burgett,  2016. Physicochemical  Profiles  of Stingless Bee (Apidae: Meliponini) Honey from South  East  Asia  (Thailand).  Journal  of  Food Chemistry. 192: 149-155.
Crane, E. 1979. Honey A Comprehensive Survey. The International Bee Research.
Darmawijaya, I. P., dan N. L. G. A. N. Yudha,  2013. Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun Pancasona  ( Tinosporacoriaceae  Beumee.). 381–385.
Devianti,  R.  P.,  E.  S.  Soetarto,  dan  K.  A.  Hendarto, 2015. Komposisi dan Kandungan Bakteri Pada Madu Trigona  sp.  dan  Aktivitas  Antimikrobia Terhadap  Mikrobia  Patogen. Thesis  S2 Biology. Universitas Gajah Mada. Yogyakarta.
Emmasitah, Raya, I., Usman, A.N., Mauludiyah, I., dan Prihartini,  A.R.,  2020.  Uji  FTIR  Dan  Uji Fitokimia  Dari  Madu  Trigona  Spp.  Untuk Persiapan  Suplemen  Wanita  Prakonsepsi. Jurnal  Keperawatan  Muhammadiyah.  Edisi khusus. 1-6
Evahelda,  E.,  Filli,  P.,  Malahayati,  N.,  &  Santoso,  B. 2017.  Sifat  fisik  dan  kimia  madu  dari  nektar pohon karet  di  Kabupaten  Bangka Tengah, Indonesia. Jurnal Agritech. 37(4): 363–368.
Fatma, I. I., S. Haryanti, dan S. W. A. Suedy, 2017. Uji kualitas  madu  pada  beberapa  wilayah budidaya lebah madu   di   Kabupaten Pati.
Jurnal Biologi. 6(2): 58-65
Fauzy,  A.,  2019.  Metode  Sampling.  Universitas Terbuka. Banten.
Gariola, A., P. Tiwari dan J.K. Tiwari, 2013. Physico- chemical  Properties  Of  Apis  Cerana  Indica Honey From Uttarkashi District Of Uttarakhand.  Jurnal  of  Global  Biosciences.
2(1): 20-25.
Hadiwiyoto,  S.,  1993. Teknologi  Pengolahan  Hasil Perikanan. Penerbit Liberty. Yogyakarta.
Hakim,  S.  S.,  Siswandi,  Wahyuningtyas,  R.S., Rahmanto,  B.,  Halwany  W.,  dan  Lestari,  F.,
2018.  Sifat  Fisikokimia  dan  Kandungan Mikronutrien pada Madu Kelulut ( Heterotrigona  itama)  Dengan  Warna
Berbeda. Jurnal Penelitian Hasil Hutan. 39 (1):
1 – 12.
Hariyati,  L.  F.,  Andriani,  M.,  dan  Utami,  R.,  2010. Aktivitas  Antibakteri  Berbagai  Jenis  Madu Terhadap  Bakteri  Pembusuk  ( Pseodomonas fluorescens  FNCC0071  dan  Pseudomonas putida FNNCC0070). Jurnal Jurusan Teknologi Hasil Pertanian UNS: 1 – 9.
Harjanto, S., Mujianto, M., Arbainsyah dan Ramlan, A.,
2020. Budidaya Lebah Madu Kelulut Sebagai Alternatif  Mata  Pencaharian  Masyarakat.
Yayasan Swaraowa. DI Yogyakarta.
Hassanain, A.T., Alyaa, A. K., dan Karim, A. J., 2010. Antimicrobial  Effect  of  Malaysian  Honey  on Some  Human  Pathogens:  An  In  Vitro  Study. The  International  Medical  Journal  Malaysia. 9(2) : 15 – 18.
Hendra,  R,  S.  Ahmad,  A.  Sukari,  M.Y.  Shukor,  E. Oskoueian,  2011 .  Flavanoid  analyses  and Antimocrobial  Activity  of  Various  Parts  of Phaleria Macrocarpa (Scheff.) Boerl Fruit. Int. J Mol Sci. 12: 3422-3431.
ICMSF  (International  Comission  on  Microbiological Specifications  for  Foods).  2005.  Sugar, Syrups,  and  Honey.  P.  522-543.  In: Microorganisms in Foods 6: Microbial Ecology of  Food  Commodities,  2nd  Edition.  Kluwer Academic. New York.
Ikalinus,  R.,  S.  Widyastuti,  dan  S.  N.  Eka,  2015. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Kulit Batang Kelor  ( Moringa  Oleifera).  Jurnal  Indonesia Medicus Veterinus. 4(1): 71–79.
Imam,  P.N.,  2017.  Pengaruh  Suhu  Fermentasi  Pada Beberapa  Varietas  Bawang  Putih  Terhadap Mutu Black  Garlic.  Skripsi.  Universitas Mataram. Mataram.
International  Honey  Commission,  2009.  Harmonised methods  of    the  International  Honey Commission.  1-63.  Swiss  Bee  Research Centre. Bern.
Korošec, M., R. Vidrih, J. Bertoncelj. 2017. Slovenian Honey and Honey Based Products. Ch. 7. In: R.  M.  S.  Cruz  and  M.  C.  Vieira  (Eds.). Mediterranean  Foods:  Composition  and Processing. CRC Press, Boca Raton, FL.
Kumar,  T.,  D.K.  Tripathi,  K.  Nagori,  S.  Pure,  dan  S. Agrawal,  2011. Isolasion  and  antibacterial susceptibility  testing  of  multi  drug  resistant Pseudomonas  aeroginosa  causing  urinary tract infections. J Chem Pharm Res.
Kwapong, P. K., Aidoo, K., Combey, R., dan Karokari,
A.,  2010.  Stingless Bees:  Importance, Management  and  Utilisation:  A  Training Manualfor Stingless Bee Keeping.Ebook.https://www.researchgate.net
/publication.
Ma’ruf, M., Mawaddah, G. A., Eriana, N. N. A., Swari,
F.  I.,  Aslamiah,  S.,  dan  Lutpiana,  L.,  2018. Madu  Lebah  Kelulut  ( Trigona  Spp.)  Dalam Aktivitas  Terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus  Resisten.  Jurnal  Skala  Kesehatan. Politeknik Kesehatan Banjarmasin. 9(1).
Mahmood, A.L., M. N. Lani, Z. Hassan, S.B.A. Razak, dan  F.T.  Ahmad,  2021. Antioxidant  and Antimicrobial  Properties  of  Indo-  Malayan Stingless  Bee  (Heterotrigona  itama)  Honey From  Different  Seasons  and  Distribution  of Flowers.  Journal  Food  Research.  5(2):  498-
507. Malaysian  Standards  (MS),  2017.  Kelulut  ( stingless bee) honey–specification MS 2683.
Department of  Standards Malaysia.
Mizumoto, K., Sasaki, H., Kume, H. & Yamaguchi, M. Nutritional compositions for controlling blood glucose  levels.  European  Patent  Number EP142407A1 (2004).
Mundo,  M.A.,  Olga  I.  Padilla-Zakour,  and  R.W. Worobo,  2004. Growth  Inhibition  of  Food Pathogens  and  Food  Spoilage  Organisms  by Selected Raw Honeys. International Journal of Microbiology. 97 : 1-8.
Munte,  L.,  Runtuwene,  M.  R.,  &  Citraningtyas,  G.
(2015). Aktivitas antioksidan dari ekstrak daun prasman (Eupatorium  triplinerve  Vahl.). Pharmacon, 4(3), 41–50.
Nadhilla,  N.  F.,  2014.  The Activity  of  Antibacterial Agent  of  Honey  Against  Staphylococcus aureus. Jurnal Majority. 3(7): 94-101.
Nur, A., dan S. Sirajuddin, 2019. Aktivitas Antibakteri Madu Trigona Terhadap Bakteri Gram Positif ( Staphylococcus  Aureus)  dan  Bakteri  Gram Negatif  ( Escherichia  Coli).  Jurnal  Kesehatan. 12(1): 134-140.
Priawandiputra, W., M. G. Azizi, Rismayanti, dan K. M. Djakaria,  A.  Wicaksono,  R.  Raffiudin,  T. Atmowidi  dan  D.  Buchori,  2020. Panduan Budidaya  Lebah  Tanpa  Sengat  (Stingless Bees)  di  Desa  Perbatasan  Hutan  Studi  di Lubuk  Bintialo  dan  Pangkalan  Bulian,
Sumatera Selatan. Ebook ZSL Let’s Work For Wildlife.
Riendriasari,  S.  D.,  dan  Krisnawati,  2017.  Produksi Propolis  Mentah  Lebah  Madu  Trigona  spp  di Pulau Lombok. Jurnal HutanTropik. 1(1): 71-
75.
Samadi, B., 2004. Budidaya Lebah Madu. Aneka Ilmu.
Semarang.
Shahjahan,  M.,  Halim,  and  N.A.B.,  Inzani,  N.Z.N., 2007.  Antimicrobial  Properties  of  'Kelulut' (Trigona  Spp)  Honey.  Malaysian  Journal  of Medical Sciences . 14 (1): 107-108.
Simaremare,  E.S.,  2014.  Skrining  Fitokimia  Ekstrak Etanol  Daun  Gatal  ( Laportea  decumana (ROXB) WEDD). Jurnal Pharmacy. 11(1).
Sousa, J. M., Marques, G., Benassi, M. T., Gullόn, B., Pintado,  M.  M.,  Magnani,  M.  2016. Sugar profile, physicochemical and sensory aspects of  monofloral  honeys  produced  by  different stingless  bee  species  in  Brazilian  semiarid region.  Journal  LWT-Food  Science  and Technology. 65: 645-651.
Souza, B. A., Roubik, D., Barth, O. M., Heard, T., 2006. Composition of Stingless Bee Honey: Setting Quality Standards. Interciencia. 31(12): 867- 875.
Sudarmadji,  S.,  Haryono,  B.,  dan  Suhardi,  1989. Analisa  Bahan  Makanan  dan  Pertanian. Penerbit Liberty. Yogyakarta.
Sudarmadji,  S.  Haryono,  B.,  dan  Suhardi,  2007. Analisis  Bahan  Makanan  dan  Pertanian. Liberty. Yogyakarta.
Sudarmadji,  S.  Haryono,  B.,  dan  Suhardi,  2010. Analisis  Bahan  Makanan  dan  Pertanian. Liberty. Yogyakarta.
Syafrizal, R. R., I. W. Kusuma, S. Egra, K. Shimizu,
M. Kanzaki dan E. T. Arung, 2020. Diversity and honey properties of stingless bees from meliponiculture in east and north Kalimantan, Indonesia . Biodiversitas. 21(10): 4623-4630.
Syaifudin,  S.  M.,  dan  S.  Normagiat,  2020.  Budidaya Pakan Lebah Trigona sp. dengan Agroforestry
System  di  Kelurahan  Mempawah.  Jurnal Ilmiah Pangabdhi. 6(1): 17-24.
Tanjung,  R.A.,  R.  Moulana  dan  S.  Rasnovi,  2022.
Pengaruh Keragaman Sumber Pakan Terhadap  Kualitas  Madu  Lebah  ( Apis  cerana
Fabr,  1798)  di  Balai  Penelitian  dan Pengembangan  Lingkungan  Hidup  dan Kehutanan  (BP2LHK)  Aek  Nauli  Sumatera Utara. Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa  Pertanian. 7(1): 819-832.
Thohari,  I.,  Mustakim,  M.  C.  Padaga,  P.  P.  Rahayu,
2017.  Teknologi  Hasil  Ternak.  UB  Press.
Malang.
Triwanto,  J.,  K.  Herlinda,  dan  T.  Muttaqin,  2021. Kualitas  Fisikokimia  pada  Madu  dari  Nektar Bunga Randu ( Ceiba pentandra) dan Kaliandra ( Calliandra  callothyrsus).  Jurnal  of  Forest Science Avicennia. 4(2) : 102- 113.
Tunny, R., Mahulauw, M. A. H., &Darmanta, K. 2020. Identifikasi  Kandungan  Senyawa  Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Daun  Asam  Jawa  ( Tamarindus  Indica  L.)
Kecamatan Kairatu Kabupaten Seram Bagian Barat. Jurnal2-  TRIK:  Tunas-Tunas  Riset Kesehatan. 10(1): 1–5.
Ulfa,  M.,  2020.  Perbedaan  Kualitas  Madu Lebah Trigona  sp.  dari  Beberapa  Wilayah  di Pulau  Lombok. Thesis  S1.  Universitas Mataram. Mataram.
Wahyuni,  N.,  S.  D.  Riendriasari,  R.  A.  Hasan,  M. Hidayatullah, C. Handoko, L. Anggadhania dan Yamantoko,  2020. Produk  Perlebahan  NTB, Fakta  dan  Strategi  Pengelolaan.  CV.  Nas Media Pustaka. Makasar.
Yuliana, R., Sutariningsih, E., Santoso, H. B., Hendarto K.  A.,  dan  Riendrasari,S.  D.,  2015.  Daya Antimikrobia Sarang Lebah Madu Trigona spp. Terhadap Mikrobia Patogen. Jurnal
Bioedukasi. 8(1): 67 – 72.
Zahra,  N.  N.,  H.  Muliasari,  Y.  Andayani,  dan  I.  M. Sudarma,  2021.  Karakteristik  Fisikokimia Ekstrak  Madu  dan  Propolis  Trigona  sp.  Asal Lombok Utara. Jurnal Agrotek Ummat. 8(1).
Zulhawa, D. J., 2010. Daya Hambat Madu Sumbawa
Terhadap Pertumbuhan Kuman Staphylococcus  aureus  Isolat  Infeksi  Luka
Operasi RS Islam Amal Sehat Sragen. Skripsi.
Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Sebelas Maret. Surakarta.