Submitted : 27 Oktober 2020 Revised : 20 November 2020 Accepted : 11 Desember 2020

## PEMILIHAN JENIS PELARUT PADA EKSTRAKSI TANIN DARI DAUN AVERRHOA BILIMBI DENGAN METODE SOXHLETASI
Helda Niawanti * , Novy Pralisa Putri Program Studi Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Mulawarman Jl. Sambaliung, Kampus Gunung Kelua, Samarinda, 7511, Indonesia
* Email: niawanti@ft.unmul.ac.id

## Abstrak
Salah satu komponen dalam proses produksi yang harus diperhatikan dalam proses aplikasi kimia hijau di industri adalah zat warna. Pewarna yang lebih banyak digunakan selama ini adalah jenis pewarna sintetis karena harganya yang lebih murah. Namun, pewarna sintetis ini memiliki kekurangan yaitu berbahaya bagi lingkungan dan dapat menimbulkan reaksi alergi pada tubuh manusia jika digunakan sebagai bahan baku kosmetik. Zat warna alami merupakan solusi dari permasalahan tersebut, salah satu pewarna alami adalah tanin yang dapat diekstraksi dari daun Averrhoa bilimbi. Ekstraksi dilakukan dengan metode ekstraksi soxhlet padat-cair. Pelarut merupakan salah satu faktor yang berpengaruh pada hasil ekstraksi. Penelitian ini mempelajari efek dari jenis pelarut yaitu etanol, etanol/air dengan komposisi 90/10 (v/v) dan etanol/air dengan komposisi 80/20 (v/v). Ekstraksi dengan ketiga pelarut dilakukan pada waktu 30, 60, 120, 240, dan 480 menit. Pelarut etanol/air dengan komposisi 90/10 (v/v) memberikan waktu ekstraksi lebih singkat yaitu 60 menit dengan kadar tanin sebesar 5,509% ± 0,125. Sedangkan pelarut etanol mencapai kadar tanin 5,489% ± 0,073 dengan waktu ekstraksi yang lebih panjang yaitu 480 menit. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa jenis pelarut berpengaruh pada ekstraksi  tanin dikarenakan kelarutan senyawa tanin menjadi lebih cepat ketika ditambahkan air sebagai pelarut.
Kata Kunci : Averrhoa bilimbi , Ekstraksi, Pelarut, Soxhlet, Tanin,

## Abstract
The dye must be considered in the application process of green chemistry in the industry. The dyes that are mostly used are synthetic because of their lower  price. However,  the synthetic dye is dangerous for the environment and trigger allergic reactions when used as a cosmetic raw material. Natural dyes are the solution to these problems; one of the natural dyes is tannins which can be extracted from the Averrhoa bilimbi leaves. The extraction was carried out by the solid-liquid extraction method using soxhlet equipment. The solvent is one of the factors that influence the extraction yield. This study studied the effects of the solvent type, namely ethanol, ethanol/water  90/10 (v/v) and ethanol/water  80/20  (v/v).  Extraction  was  carried  out  at  30,  60,  120,  240,  and  480  minutes.  The  ethanol/water solvent 90/10 (v/v) gave a shorter extraction  time, namely 60 minutes with a  tannin content of 5.509% ± 0.125. Meanwhile,  the  ethanol  solvent  achieved  tannin  content  of  5.489%  ±  0.073  with  a  longer  extraction  time  of  480 minutes. The results of this study indicate that the solvent type affects the extraction of the tannin due to the tannin solubility becomes faster when water is added as a solvent.
Keywords : Averrhoa bilimbi, Tannin, Extraction, Soxhlet, solvent

## JURNAL INTEGRASI PROSES
Website: http://jurnal.untirta.ac.id/index.php/jip
1. PENDAHULUAN
Kimia  hijau merupakan  isu  yang  kini  menjadi perhatian  oleh  pelaku  industri  yang  melibatkan senyawa  kimia  dalam  proses  produksi.  Kimia  hijau berfokus  pada  desain  produk  dan  proses  dengan meminimalkan  atau  menghilangkan  penggunaan  dan pembentukan  zat  berbahaya.  Kesadaran  pelaku industri  untuk  menerapkan  konsep  kimia  hijau semakin  meningkat  seiring  dengan  meningkatnya permintaan  konsumen  akan  hal  tersebut.  Sebagai contoh pada industri kosmetik penerapan kimia hijau telah mencapai perubahan  yang sangat  besar  ditinjau dari  perubahan  dalam pembuatan  dan  desain produk kimia, dengan perkembangan proses yang lebih bersih dan ramah lingkungan (Villa, 2018).
Salah satu komponen dalam proses produksi yang harus  diperhatikan  dalam  proses  aplikasi  kimia hijau adalah  zat  warna.  Zat  warna  merupakan  bahan  yang sering digunakan  pada  berbagai  jenis  industri seperti tekstil,  kosmetik,  makanan,  dan  farmasi.  Pewarna ditambahkan  untuk  meningkatkan  persepsi  dan  daya terima konsumen terhadap produk (Mohd-Nasir et al., 2018).  Jenis  zat  pewarna  sintetis  lebih  banyak digunakan daripada zat warna alami dikarenakan lebih ekonomis  dan  memiliki  pilihan  warna  yang  lebih variatif,  akan  tetapi  zat  warna  sintetis  berdampak buruk bagi lingkungan karena sulit terurai (Putri et al., 2015).  Pewarna  sintetis  juga  dapat  menimbulkan reaksi  alergi  dan  intoleransi  pada  tubuh  manusia (Khayyat et al., 2017). Selain itu, pewarna sintetis dan pigmen  yang  digunakan  pada  industri  tekstil  diolah dari  bahan  petrokimia  tak  terbarukan yang ketersediannya  terbatas.  Subtitusi  pewarna  sintetis dengan  pewarna  organik  alami  yang  diolah  dari sumber  daya  terbarukan  seperti  tumbuhan  dapat menjadi  solusi  bagi  ketersediaan  bahan  petrokimia yang terbatas dan untuk menjaga kualitas lingkungan (Ali  et  al.,  2010).  Pewarna  alami  juga  memiliki kelebihan  lainnya  karena  terbukti  tidak  bersifat karsinogenik,  tidak  beracun  dan  dapat  terdegradasi secara  biologi  (Mirjalili  dan  Karimi,  2013).  Dampak positif  dari  subtitusi  zat  warna  sintetis  dengan  zat warna  alami  mendorong  para  peneliti  untuk mengembangkan  zat  warna  dari  berbagai  sumber tanaman.
Zat  warna  alami  dapat  dibagi  menjadi  delapan kelas  berdasarkan  struktur  kimia  penyusunnya  yaitu indigo,  piridina,  karotenoid,  kuinonoid,  flavanoid, dihydropyran, betalain,  dan  tanin.  Indigo  adalah sumber pewarna biru dan piridin memberikan warna kuning  cerah.  Karotenoid memberikan  warna  kuning, oranye, dan merah, sedangkan kuinonoid memberikan warna  dengan range antara  kuning  hingga  merah. Flavanoid memberikan warna kuning pucat (isoflavon),  kuning  pekat  (flavon,  auron),  oranye (auron),  serta  merah  dan  biru  (antosianin). Dihydropyran memberikan  warna  yang  mendekati warna  yang  diberikan  oleh  flavon.  Betalain
memberikan warna kuning dan violet. Sedangkan tanin memberikan  warna  cokelat  karena  struktur  polifenol yang dimiliki (Sharma et al., 2018; Vargas dan Lopez, 2002; Yusuf et al., 2017)
Tanin  merupakan  zat  warna  alami  yang terkandung di dalam tumbuhan, salah satunya adalah daun Averrhoa  bilimbi .  Daun  dari Averrhoa  bilimbi belum  termanfaatkan  secara  optimal  sehingga berpotensi sebagai sumber bahan baku pewarna alami. Isolasi  tanin  dari  daun Averrhoa  bilimbi dapat dilakukan dengan metode ekstraksi padat-cair. Metode ini  adalah  yang  paling  sederhana  dan  telah  banyak digunakan  untuk  ekstraksi  tanin.  Metode  ini dipengaruhi oleh kontak antara pelarut dan zat padat dengan  cara  pelarut  menembus  ke  dalam  dinding  sel bahan baku yang mengandung tanin. Jika pelarut yang digunakan adalah jenis organik dan larutan encernya, ekstraksi umumnya dilakukan dengan alat soxhlet (de Hoyos-Martínez et al., 2019).
Ekstraksi tanin dari bahan alam dipengaruhi oleh jenis pelarut yang digunakan untuk memisahkan fraksi larut  dari  padatan  permeabel.  Pilihan  pelarut  yang tepat  akan  sangat  mempengaruhi  proses  transfer massa  zat  terlarut  yang  diinginkan.  Penelitian sebelumnya  yaitu  ekstraksi  tanin  dari  tanaman  putri malu menggunakan etanol sebagai pelarut (Putri  et  al.,  2015)  serta  pemodelan  transfer  massa tanin  dari  daun Averrhoa  bilimbi juga  menggunakan etanol sebagai pelarut (Putri et al., 2019). Penelitian ini menggunakan  variasi  pelarut  dengan  penambahan akuades  untuk  melihat  pengaruhnya  pada  hasil ekstraksi tanin dari daun Averrhoa bilimbi.

## 2. METODE PENELITIAN
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah daun  segar  dari  belimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi ) yang diambil dari daerah di Kota Samarinda, Indonesia. Sebelum  digunakan,  daun  dicuci  terlebih  dahulu kemudian  dipotong  kecil  untuk  memperluas permukaan  sampel.  Bahan  kimia  yaitu  Kalium Permanganat  dari  SAP  Chemical,  etanol  96%  sebagai pelarut  dari  Smart  Lab,  dan  asam  sulfat  dari Mallinckrodt.  Sedangkan  untuk  indikator  digunakan Indigo  carmine  dan  asam  oksalat  dari  Merck.  Indigo carmine sebelum digunakan terlebih dahulu dilarutkan sebanyak 6 gram ke dalam 500 mL aquades pada suhu 70°C,  kemudian  didinginkan  dan ditambahkan  50  mL asam sulfat. Larutan ini kemudian diencerkan menjadi 1 L dengan akuades dan disaring dalam kondisi vakum.
2.1 Ekstraksi Tanin dari Daun Averrhoa bilimbi Daun Averrhoa  bilimbi yang  telah  dipotong  kecil dimasukkan ke dalam kertas saring sebanyak 25 gram, kemudian diletakkan dalam soxhlet seperti Gambar 1. Pelarut  yang  digunakan  adalah  etanol,  campuran etanol-air sebesar 90/10 (v/v), dan campuran etanol- air sebesar 80/20 (v/v). Pelarut tersebut dimasukkan ke  dalam round  bottom  flask dengan  rasio  padat/cair
sebesar 1/30 (w/v). Temperatur ekstraksi diatur pada suhu  80-90°C.  Ekstraksi  dengan  metode  soxhletasi dilakukan secara kontinyu dan pada waktu 30, 60, 120, 240,  dan  480  menit  diambil  20  mL  ekstrak  untuk analisis kadar tanin. Ekstrak sebanyak 20 mL tersebut diambil  melalui  outlet valve dari  ekstraktor.  Setiap pengambilan  ekstrak  untuk  analisis  dilakukan  juga penambahan  fresh  solvent  sebanyak  20  mL  untuk menjaga  pelarut  tetap  konstan.  Ekstrak  kemudian dipisahkan dari pelarut dengan alat destilasi sederhana pada suhu 70-80°C. Tahapan ini diulangi dengan variasi rasio  padat/cair  sebesar  1/20,  1/30,  1/40,  1/50,  dan 1/60 (w/v) dengan waktu ekstraksi dan pelarut yang menghasilkan  persentase  tanin  terbesar  pada  tahap ekstraksi sebelumnya.
Gambar 1. Rangkaian alat ekstraktor

## 2.2 Analisis Tanin
Konsentrasi  tanin  dianalisis  dengan  metode titrimetri  menggunakan  kalium  permanganat  sebagai titran dan indigo carmine sebagai indikatornya. Metode analisis merujuk pada penelitian yang telah dilakukan oleh  Atanassova  dan  Christova  (2009),  metode tersebut memodifikasi metode analisis  tanin dari The International Pharmacopoeia dan AOAC. Sebanyak 750 mL akuades dan 25 mL indigo carmine ditambahkan ke dalam  ekstrak  yang  telah  melalui  proses  distilasi menghasilkan  terbentuknya  larutan  berwarna  biru. Kemudian  25  mL  larutan  diambil  untuk  proses titrimetri.  Kalium  Permanganat  0,1  N  digunakan sebagai  titran  yang  sudah  distandarisasi  terlebih dahulu  dengan  asam  oksalat.  Penambahan  Kalium Permanganat  0,1  N  merubah  warna  biru  larutan menjadi warna hijau dan penambahan beberapa tetes dilanjutkan  sampai  larutan  berubah  menjadi  kuning keemasan.  Titrasi  larutan  blanko  juga  dilakukan dengan menggunakan campuran 750 mL aquades dan
25  mL  indigo  carmine.  Tanin  dihitung  dengan persamaan sebagai berikut:
%Tanin = (𝑉−𝑉 0 )𝑥 0,004157 𝑥 500 25 𝑥 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 (𝑔) 𝑥 100 (1) dimana  V  adalah  volume  Kalium  Permanganat  0,1  N sebagai  titran  dalam  titrasi  sampel  (mL),  V 0 adalah volume Kalium Permanganat 0,1 N sebagai titran pada titrasi  blanko  (mL),  0,004157  setara  dengan  tanin dalam  1  mL  0,1  N  Kalium  Permanganat,  500  adalah volume dari volumetric flask yang digunakan (mL) dan 100 adalah persen (%).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemilihan  pelarut  sangat  penting  dalam  proses ekstraksi  dan  merupakan  salah  satu  parameter  yang mempengaruhi transfer massa zat terlarut dari bahan alam  ke  dalam  pelarut.  Pelarut  yang  digunakan  pada ekstraksi  tanin  dari  daun Averrhoa  bilimbi memiliki perbedaan indeks polaritas yaitu etanol dan air sebesar 5,2  dan  9,  sedangkan  polaritas  campuran  etanol/air dihitung  dengan  menggunakan  persamaan  berikut (Snyder et al., 2012):
P’ = Φa Pa + Φb Pb (2) Hasil perhitungan didapatkan untuk etanol/air 90/10 (v/v) dan 80/20 (v/v) adalah masing-masing 5,58 dan 5,96.  Semakin  besar  nilai  indeks  polaritas  dari  suatu pelarut menunjukkan bahwa karakteristiknya semakin polar.  Penambahan  air  pada  etanol  sebagai  pilihan pelarut menunjukkan menambah nilai indeks polaritas dari etanol. Berdasarkan hasil penelitian ketiga pelarut berhasil melarutkan senyawa bioaktif tanin dari daun segar Averrhoa bilmbi . Hasil  analisis  kandungan  tanin  dengan  metode permanganometri  pada  ketiga  pelarut  ditunjukkan pada  Gambar  2.  Gambar  2  menunjukkan  bahwa persentase  tanin  terbesar  pada  pelarut  etanol didapatkan  pada  waktu  ekstraksi  480  menit  yaitu sebesar 5,489% ± 0,073. Pelarut etanol menunjukkan pola  bahwa  semakin  lama  waktu  ekstraksi  maka semakin  besar  kandungan  tanin  yang  berhasil terekstraksi. Fenomena ini terjadi karena waktu kontak juga  merupakan  salah  satu  faktor  yang  berpengaruh dalam  ekstraksi  dengan  metode  soxhletasi  .  Menurut (Markom  et  al.,  2007)  polaritas  pelarut, rasio  solven- padatan,  dan  waktu  kontak  secara  signifikan mempengaruhi  hasil  ekstraksi  tanin.  Fenomena  pada pelarut  etanol  menunjukkan  bahwa  semakin  lama waktu kontak antara pelarut dan daun Averrhoa bilimbi semakin banyak tanin yang terlarut.
Persentasi tanin terbesar pada etanol/air sebesar 90/10 (v/v) didapatkan pada waktu ekstraksi 60 menit yaitu  sebesar  5,509%  ±  0,125.  Persentase  tanin  pada waktu  60  menit  mendekati  nilai  tanin  pada  ekstraksi dengan  pelarut  etanol  yang  memerlukan  waktu  lebih panjang yaitu 480 menit. Kehadiran air dalam pelarut terbukti  meningkatkan  kelarutan  tanin  ditunjukkan dengan  waktu  kontak  yang  lebih  singkat  untuk mencapai persentase tanin >5%. Hasil ini menunjukkan bahwa  sebagian  besar  komponen  dari  tanin  dalam daun Averrhoa  bilimbi bersifat  hidrofilik  yang  larut dalam  air.  Hasil  ini  sesuai  dengan  penelitian sebelumnya  tentang  ekstraksi  tanin  dari Phyllanthus niruri  Linn yang  juga  menunjukkan  bahwa penambahan  air  dalam  pelarut  menunjukkan peningkatan  yield  ekstraksi  (Markom  et  al.,  2007). Selain  itu  juga  karena  adanya  peningkatan  kelarutan gugus methoxylated dengan  adanya  penambahan  air (Muhamad et al., 2014), penambahan air juga terbukti meningkatkan  transfer  massa  pada  pemodelan ekstraksi  tanin  dari  daun Averrhoa  bilimbi (Putri  et  al.,  2019).  Sedangkan  pada  aplikasi  pelarut etanol/air  sebesar  80/20  (v/v)  persentase  tanin terbesar  ditemukan  pada  waktu  ekstraksi  30  menit yaitu sebesar 3,419% ± 0,05. Pelarut dengan campuran etanol-air  memberikan  dampak  positif  yaitu  waktu
ekstraksi  yang  lebih  singkat,  namun  jika  dilihat  pada Gambar  1,  semakin  lama  waktu  ekstraksi  maka konsentrasi  tanin  yang  bisa  diekstrak  semakin  turun. Fenomena  ini  terjadi  karena  massa  tanin  dari  daun sudah banyak berpindah dari sampel ke dalam pelarut pada waktu ekstraksi 30 dan 60 menit. Sebagian dari tanin  yang  terlarut  pada  ekstraksi  30  dan  60  menit terpisah  dari  proses  ekstraksi  selanjutnya  dengan waktu 120-480 menit dikarenakan pemisahan ekstrak untuk  proses  analisis.  Ekstrak  untuk  analisis  tanin diambil  pada  setiap  variasi  waktu  ekstraksi  dan ditambahkan  pula  solven  segar  untuk  menjaga  rasio padat/cair konstan.  Kondisi  ini  dapat  mengakibatkan jumlah tanin dari daun tersisa lebih sedikit pada waktu ekstraksi 120-480 menit. Penurunan persentase tanin juga  dapat  dikarenakan  kandungan  air  pada  pelarut yang  mengakibatkan  terjadinya  degradasi  tanin  saat waktu  ekstraksi  yang  lama sekitar  2-5  jam  (Cork  dan Krockenberger,  1991).  Hasil  perbandigan  ketiga pelarut  menunjukkan  bahwa  persentase  tanin  pada ekstrak terbesar dengan waktu ekstraksi yang singkat yaitu  60  menit  dicapai  dengan  menggunakan  pelarut campuran etanol/air sebesar 90/10 (v/v).
Selain  jenis  pelarut  dan  waktu  ekstraksi,  rasio padatan terhadap pelarut juga turut berpengaruh pada hasil  ekstraksi.  Gambar  3  menunjukkan  bahwa
Gambar 2. Pengaruh jenis pelarut dan waktu ekstraksi terhadap persentase tanin pada rasio padat/cair
1/30 (w/v) 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 K an du n gan Tanin ( %) Waktu Ekstraksi (Menit) Pelarut Etanol Etanol-Air 90/10 (v/v) Etanol-Air 80/20 (v/v)
Gambar 3. Pengaruh rasio padat/cair terhadap persentase tanin pada waktu ekstraksi 60 menit
0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 1/20 1/30 1/40 1/50
1/60
K an du n gan Tanin ( % ) Rasio Padat/Cair (w/v) Pelarut Etanol-Air 90/10 (v/v)
persentase  tanin  terbesar  didapatkan  pada  rasio padat/cair 1/30  (w/v)  sebesar  5,509%  ±  0,125. Persentase  tanin  yang  berhasil  diekstrak  meningkat secara signifikan pada penambahan rasio pelarut dari 1/20 (w/v) yang hanya berhasil mengekstrak sebesar 4,209%  ±  0,000  tanin.  Peningkatan  rasio  pelarut terhadap padatan dapat memperbesar gaya penggerak pada  proses  transfer  massa,  Gaya  penggerak  adalah gradien  konsentrasi  diantara  padatan  dan  sebagian besar  cairan  (Elboughdiri,  2018). Akan  tetapi, persentase tanin justru menurun setelah penambahan rasio  menjadi  1/40  (w/v),  data  menunjukkan  bahwa persentase  tanin  terendah  didapatkan  pada  rasio padat/cair  1/40  (w/v)  sebesar  2,507  ±  0,044. Penambahan  padat/cair  rasio  menjadi  1/50  (w/v) menunjukkan  peningkatan  persentase  tanin,  namun peningkatan ini tidak terlalu besar serta turun kembali pada penambahan volume pelarut dengan perbandingan  1/60  (w/v).  Kondisi  ini  menunjukkan bahwa  rasio  padat/cair  sebesar  1/30  (w/v)  adalah kondisi  terbaik  pada  penelitian  ini  untuk  ekstraksi tanin dari daun Averrhoa bilimbi .

## 4. KESIMPULAN
Polaritas  pelarut  berpengaruh  pada  proses ekstraksi  tanin  dari  daun Averrhoa  bilimbi. Pelarut etanol  mampu  mengekstraksi  tanin  hingga  5,489%  ± 0,073 dengan waktu ekstraksi 480 menit. Penambahan air ke dalam pelarut sebesar 10% memberikan waktu ekstraksi  yang  lebih  singkat  yaitu  60  menit  dengan kadar tanin 5,509% ± 0,125. Akan tetapi, peningkatan waktu  ekstraksi  pada  pelarut  dengan  campuran  air menunjukkan penurunan kadar tanin yang terekstraksi, dikarenakan tanin yang terdegradasi oleh kehadiran  air  pada  waktu  kontak  >1  jam.  Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan optimasi dan pemodelan  untuk  menentukan  kondisi  operasi  yang optimal.

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  terlaksana  dengan  dukungan finansial berupa hibah dana penelitian dari The Islamic Development Bank Grant No. `137/UN17.11/PL2019.
6. NOTASI
P’   : Polaritas campuran Pa  : Polaritas Pelarut a Pb  : Polaritas Pelarut b Φa : Fraksi volume Pelarut a Φb : Fraksi volume Pelarut b

## 7. DAFTAR PUSTAKA
Ali, A., Ali, S., Saleem, H. & Hussain, T. (2010). Effect of Tannic  Acid  and Metallic  Mordants  on  The  Dyeing Properties  of  Natural  Dye  Extracted  from  Acacia Nilotica  Bark.  Asian  Journal  of  Chemistry,  22(9), 7065 – 7069.
Atanassova,  M.  &  Christova-Bagdassarian,  V.  (2009).
Determination  of  Tannins  Content  by  Titrimetric Method  for  Comparison  of  Different  Plant  Species. Journal  of  the  University  of  Chemical  Technology and Metallurgy, 44(4), 413 – 415.
Cork, S. J. & Krockenberger, A. K. (1991). Methods and Pitfalls of Extracting Condensed Tannins and Other Phenolics from Plants : Insights from Investigations on Eucalyptus Leaves. Journal of Chemical Ecology, 17(1), 123 – 133. de Hoyos-Martínez, P. L., Merle, J., Labidi, J. & Charrier – El Bouhtoury, F. (2019). Tannins extraction: A Key Point for Their Valorization and Cleaner Production. Journal  of  Cleaner  Production,  206,  1138 – 1155. https://doi.org/10.1016/j.jclepro.2018.09.243 Elboughdiri,  N.  (2018).  Effect  of  Time,  Solvent-Solid Ratio,  Ethanol  Concentration  and  Temperature  on Extraction Yield of Phenolic Compounds from Olive Leaves.  Engineering,  Technology  and  Applied Science Research, 8(2), 2805 – 2808. Khayyat,  L.,  Essawy,  A.,  Sorour,  J.  &  Soffar,  A.  (2017). Tartrazine  Induces  Structural  and  Functional Aberrations  And  Genotoxic  Effects  In  Vivo.  PeerJ, 2017(2),  1 – 14.  https://doi.org/10.7717/peerj. 3041
Markom,  M.,  Hasan,  M.,  Daud,  W.  R.  W.,  Singh,  H.  & Jahim,  J.  M.  (2007).  Extraction  of  Hydrolysable Tannins  from  Phyllanthus  niruri  Linn.:  Effects  of Solvents  and  Extraction  Methods.  Separation  and Purification Technology, 52(3), 487 – 496. https://doi.org/10.1016/j.seppur.2006.06.003
Mirjalili,  M.  &  Karimi,  L.  (2013).  Extraction  and Characterization of Natural Dye from Green Walnut Shells  and  Its  Use  in  Dyeing  Polyamide:  Focus  on Antibacterial  Properties.  Journal  of  Chemistry, 2013. https://doi.org/10.1155/2013/375352 Mohd-Nasir,  H.,  Abd-Talib,  N.,  Mohd-Setapar,  S.  H., Wong,  L.  P.,  Idham,  Z.,  Casillas,  A.  C.  &  Ahmad,  A.
(2018). Natural Colorants from Plants for Wellness Industry.  International  Journal  of  Pharmaceutical Sciences and Research, 9(3), 836 – 843. https://doi.org/10.13040/IJPSR.09758232.9(3).83
6-43
Muhamad, N., Yusoff, M. & Gimbun, J. (2014). Influence of Solvent Polarity and Conditions on Extraction of Antioxidant, Flavonoids and Phenolic Content from Averrhoa  bilimbi.  Journal  of  Food  Science  and Engineering, 4, 255-260, https://doi.org/10.17265/21595828/2014.05.006 Putri,  N.  P.,  Jurin,  A.  P.  S.  &  Ganna,  S.  A.  (2015). Pemodelan  Transfer  Massa  Tannin  pada  Tanaman
Putri Malu. Jurnal Integrasi Proses, 5(3), 115 – 119. Putri,  N.  P.,  Niawanti,  H.,  Rifaldiannur,  M.  &  Desy,  K. (2019).  Modeling  of  Tannin  Mass  Transfer on The Averrhoa bilimbi Leaf Extraction. Ekoloji, 28(108),
2755 – 2760.
Sharma,  S.,  Saxena,  V.,  Baranwal,  A.,  Chandra,  P.  & Mohan,  L.  (2018).  Engineered  Nanoporous Materials  Mediated  Heterogeneous  Catalysts  and
Their  Implications  in  Biodiesel  Production. Materials  Science  for  Energy  Technologies,  1(1), 11 – 21. https://doi.org/10.1016/j.mset.2018. 05.002 Snyder,  L.  R.,  Kirkland,  J.  J.  &  Glajch,  J.  L.  (2012). Appendix  II:  Properties  of Solvents  Used  in  HPLC. Practical  HPLC  Method  Development,  3,  721 – 728. https://doi.org/10.1002/9781118592014.app2
Vargas, F. D. & Lopez, O. P. (2002). Natural Colorants for Food and Nutraceutical Uses. CRC Press.
Villa,  C.  (2018).  Green  Cosmetic  Ingredients  and
Processes.  Analysis  of  Cosmetic  Products:  Second Edition (Second Edi). Elsevier B.V. https://doi.org/10.1016/B978-0-444-635082.
00013-8
Yusuf, M., Shabbir, M. & Mohammad, F. (2017). Natural Colorants:  Historical,  Processing  and  Sustainable Prospects.  Natural  Products  and  Bioprospecting,
7(1),  123 – 145.  https://doi.org/10.1007/s1365 9-017-0119-9