DOI: http://dx.doi.org/10.29244/jhi.9.2.73-83

## Studi Akumulasi Pigmen β-Cryptoxanthin untuk Membentuk Warna Jingga Buah Jeruk di Daerah Tropika
Study on the Accumulation of β-Cryptoxanthin Pigment to Induce Orange Color on Citrus Fruits in the Tropic
Inanpi Hidayati Sumiasih 1,3* , Taruna Shafa Arzam 1 , Roedhy Poerwanto 2 , Darda Efendi 2,4 , Andria Agusta 5 , dan Sri Yuliani 6
Diterima 25 Oktober 2017/Disetujui 14 Maret 2018

## ABSTRACT
Degreening is  a transformation process on peel which enables it to change color from green to orange on citrus fruits. The orange color of the peel comes from the mixture of carotenoid pigments, such as β-cryptoxanthin and β-citraurin. The pigments contributed in the formation of β-citraurin are β-cryptoxanthin and zeaxanthin. The objectives of this study were (1) to obtain proper degreening temperature in the orange color formation of several citrus varieties, and (2) to identify and determine pigments of β-cryptoxanthin pigment and total chlorophyll content in citrus peel after degreening. This study was conducted at PKHT IPB and LIPI Cibinong from July 2013 to December 2013, and from February 2016 to May 2017. About 100 ppm of ethylene gas was injected into a citrus-containing box using 5 ml syringe, then the box was placed in cool storage at 15 0 C, 20 0 C and room temperature, for 72 hours. The results showed that the best colors of Keprok Selayar and Keprok Tejakula were obtained by the degreening  at  15 0 C,  in  Siam  Kintamani  it  was  obtained  by degreening  at  20 0 C. Degreening  significantly  reduced  the  total  chlorophyll  content,  and  increased  β-cryptoxanthin content.  The  content  of  β-cryptoxanthin  after  degreening  was  3  folds  higher  on  highland  Citrus reticulata than lowland citrus.
Keywords: citrus color index, chlorophill, degreening, ethylene, tropical citrus

## ABSTRAK
Degreening adalah    proses  perombakan  warna  hijau  pada  kulit  jeruk  diikuti  dengan  proses pembentukan  warna  jingga.  Warna  jingga  adalah  campuran  antara β-cryptoxanthin dengan β- citraurin .  Pigmen  yang  berkontribusi  dalam  pembentukan β-citraurin adalah β-cryptoxanthin dan zeaxanthin .  Tujuan  penelitian  ini  ialah  (1)  Mendapatkan  suhu degreening yang  tepat  dalam pembentukan warna jingga pada beberapa varietas jeruk, (2) Identifikasi dan penentuan kadar pigmen β-cryptoxanthin dan  kandungan  total klorofil pada  kulit  jeruk  setelah degreening .  Penelitian  ini dilakukan di PKHT IPB dan LIPI Cibinong pada bulan Juli 2013 sampai Desember 2013, dan bulan Februari 2016 sampai Mei 2017. Degreening dilakukan dengan menginjeksikan gas etilen konsentrasi 100 ppm ke dalam wadah tertutup yang berisi jeruk menggunakan syringe 5 ml, kemudian disimpan pada suhu 15 0 C, 20 0 C dan suhu ruang, selama 72 jam. Hasil penelitian menunjukkan bahwa warna terbaik  jeruk  Keprok  Selayar  dan  Tejakula  diperoleh  dengan degreening pada  suhu  15 0 C,  Siam Kintamani diperoleh dengan degreening pada suhu 20 0 C. Degreening dapat menurunkan kandungan total klorofil secara tajam, dan terbukti meningkatkan kandungan pigmen β-cryptoxanthin . Kandungan pigmen β-cryptoxanthin setelah degreening 3  kali  lebih  tinggi  pada  jeruk  keprok  dataran  tinggi dibandingkan dengan dataran rendah.
Kata kunci: citrus color index , degreening, etilen, jeruk tropika, klorofil
1 Mahasiswa Program Studi Agronomi dan Hortikultura, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor Jl. Meranti Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680 dan
2 Departemen Agronomi dan Hortikultura, Institut Pertanian Bogor, Jl. Meranti Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680
3 Universitas Trilogi, d/h STEKPI Jl. TMP Kalibata No. 1, Jakarta 12760
4 Pusat Kajian Hortikultura Tropika, Institut Pertanian Bogor, Jl. Raya Pajajaran, Kampus IPB Baranangsiang, Bogor 16144
5 Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Cibinong Science Center, Jl. Raya Jakarta-Bogor Km.46 Cibinong - Bogor 16911
6 Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pascapanen Pertanian (BBP) Jl. Tentara Pelajar No. 12 Kampus Penelitian Pertanian Cimanggu Bogor 16111 E-mail: inanpihs@trilogi.ac.id (*Penulis korespondensi)

## PENDAHULUAN
Jeruk  merupakan  produk  hortikultura yang mempunyai potensi pengembangan yang besar  di  Indonesia.  Buah  jeruk  mengandung karotenoid yang paling kompleks karena kaya akan pigmen seperti lycopene, β-cryptoxanthin , β-citraurin, dan zeaxanthin. Jeruk  juga mengandung  potassium,  bioflavonoid,  asam folat,  vitamin  C  dan  fitonutrient  lain  yang bermanfaat  untuk  kesehatan  manusia  (Kato et al ., 2006). Permintaan buah jeruk semakin meningkat, seiring dengan meningkatnya kesadaran masyarakat terhadap nilai gizi. Peningkatan ini menyebabkan  Indonesia  mengimpor  jeruk segar  dalam  jumlah  yang  besar.  Peningkatan permintaan  konsumen  buah  jeruk  impor diantaranya  disebabkan  karena  ketertarikan konsumen  terhadap  penampilan  dan  cita  rasa buah jeruk yang berwarna jingga. Di sisi lain, ketersediaan  jeruk  keprok  Indonesia  yang berwarna  kuning-jingga  sedikit  dan  tidak kontinyu,  ikut  menyebabkan  tingginya  impor buah  jeruk  (Arzam et  al., 2015).  Berdasarkan Deptan  (2015),  Indonesia  mengimpor  jeruk sebesar 24 937 ton di tahun 2010 dan melonjak mencapai 147 255 ton  pada tahun 2014. Penelitian  Shanti  (2007)  dan  Nafisah (2013)  menunjukkan  bahwa  sebanyak  85 persen  responden  di  Bogor  memilih  untuk membeli  jeruk  impor,  sedangkan  15  persen responden memilih untuk membeli jeruk lokal. Hal tersebut disebabkan penampilan buah jeruk lokal  kurang  menarik  dibandingkan  dengan buah  jeruk  impor.  Jeruk  lokal  indonesia  perlu dikembangkan  untuk  meningkatkan  kualitas warna buah jeruk menjadi lebih menarik.
Peningkatan kuantitas dan kualitas buah jeruk perlu dilakukan guna memenuhi permintaan  pasar.  Salah  satu  cara  untuk memenuhi permintaan konsumen sesuai selera yaitu dengan  pembentukan  warna  jingga pada buah jeruk, sehingga perlu dilakukan perlakuan degreening dengan etilen segera setelah panen. Etilen  terbukti  berperan  dalam  mengurangi kandungan  klorofil  dalam  kulit  buah  hingga menyebabkan terjadinya perubahan warna pada kulit  jeruk  dari  hijau  ke  jingga.  Perlakuan pemberian  etilen  pada  pascapanen  buah  jeruk merupakan perlakuan degreening untuk menurunkan  kandungan  klorofil  pada  kulit buah (Karthik et al., 2010). Durasi pemaparan etilen  yang  dianjurkan  untuk  menghindari
munculnya  perubahan  internal  buah  adalah tidak  melebihi  72-96  jam  (Martinez-Javega et al., 2008) Degreening adalah    proses  perombakan warna  hijau  pada  kulit  jeruk  diikuti  dengan proses pembentukan warna jingga. Degreening yang  dilakukan  di  Indonesia  selama  ini  tidak berhasil  membentuk  warna  jingga,  tetapi kuning.  Jeruk  berwarna  kuning  tidak  disukai konsumen  karena  dianggap  sudah  hampir busuk. Warna kuning pada kulit jeruk terbentuk oleh β-cryptoxanthin (Kato et  al .,  2006; Fanciullino et  al .,  2008;  Zhou et  al .,  2010), warna  jingga  adalah  campuran  antara β- cryptoxanthin dengan β-citraurin pada karotenoid, sedangkan pigmen yang berkontribusi  dalam  pembentukan β-citraurin adalah β-cryptoxanthin dan zeaxanthin (Ma et al ., 2013; Rodrigo et al., 2013).
Penelitian tentang pembentukan pigmen pada  kulit  jeruk  di  Indonesia  belum  pernah dilakukan. Namun berdasarkan literatur di atas, kegagalan degreening di  daerah  tropika membentuk  warna  jingga  karena β-citraurin hanya terbentuk pada suhu rendah. Oleh karena itu  dikembangkan  teknologi degreening yang mampu  menjadikan  jeruk  tropika  berwarna jingga,  dan  mengidentifikasi β-cryptoxanthin pada  karotenoid  sebagai  pembentuk  warna jingga.  Tujuan  penelitian  ini  ialah  (1) Mendapatkan  suhu degreening yang  tepat dalam  pembentukan  warna  jingga  pada beberapa  varietas  jeruk  dengan  elevasi  lahan yang  berbeda,  dan  (2)  Identifikasi  pigmen β- cryptoxanthin dan  kandungan  total klorofil pada kulit jeruk setelah degreening .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilakukan  di  PKHT  IPB dan  Pusat  Penelitian  Biologi-LIPI  Cibinong. Penelitian  berlangsung  pada  bulan  Juli  2013 sampai  Desember  2013,  dan  pada  bulan Februari 2016 sampai Mei 2017.
Rancangan  percobaan  yang  digunakan ialah  Rancangan  Acak  Kelompok  Faktorial. Perlakuan  terdiri  atas  2  faktor  yaitu  varietas jeruk  dan  suhu degreening .  Faktor  varietas jeruk  terdiri  atas  Keprok  Selayar,  Keprok Tejakula, dan Siam Kintamani. Faktor suhu terdiri atas 15 0 C, 20 0 C dan suhu ruang (± 30 0 C). Total kombinasi perlakuan adalah 9 dan diulang tiga kali, sehingga terdapat 27 satuan percobaan.
Bahan  yang  digunakan  ialah  jeruk dataran rendah pada ketinggian 50 meter di atas permukaan laut (m dpl) (Keprok Tejakula) yang dipanen  dari  Kabupaten  Singaraja  dan  jeruk dataran  tinggi  pada  ketinggian  ±  1200  m  dpl (Keprok  Selayar  dan  Siem  Kintamani)  yang dari  Kabupaten  Bangli,  gas  etilen  konsentrasi 100 ppm, suhu 15 0 C, 20 0 C dan ± 30 0 C. Peubah yang diamati antara lain: Padatan terlarut total (PTT). Jus buah dari buah sampel diambil  dari  setiap perlakuan dan diukur PTT dengan  menggunakan hand  refraktometer . Pengukuran dilakukan dengan cara memberikan setetes  cairan  buah  pada  lensa  pembaca hand refraktometer .  Setiap  melakukan  pengukuran, lensanya  dibersihkan  dahulu  dengan  akuades
dan  tisu.  Angka  yang  muncul  pada  layar merupakan PTT dalam buah jeruk.
Total Asam Tertitrasi. Kandungan asam diukur  dengan  menghitung  persen  asam tertitrasi.  Jus  buah  ditimbang  sebanyak  25  g dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  serta ditambahkan aquades hingga 100 ml, kemudian dimasukkan ke dalam erlenmeyer sebanyak 25 ml  untuk  dua  kali  ulangan.  Setelah  itu,  filtrat disaring  menggunakan  saringan  glasswol. Filtrat  buah  sebanyak  25  ml  dititrasi  dengan metode  titrasi  basa  dengan  NaOH  0,1  N  dan indikator  phenolptialin  (tiga  tetes).  Titrasi dilakukan sampai filtrat berwarna merah muda stabil.  Kandungan  asam  tertitrasi  dihitung menggunakan rumus:
Asam ( mg 100 gram ) = (mL NaOH x N NaOH x fp x 64) bobot bahan (mg) x 100%
Keterangan:  ml NaOH = Volume NaOH  yang terpakai pada titrasi; N  NaOH  =  Volume NaOH  yang terpakai pada titrasi; Fp = faktor pengencer (100/25); 64 = faktor asam dominan; mg sampel = 25.000 mg.
Nilai hue dan Citrus Color Indeks (CCI). Perubahan  kualitas  warna  kulit  buah  jeruk diukur dengan Minolta Color Reader tipe 310. Alat ini mempunyai sistem notasi warna hunter (sistem  warna  L,  a,  dan  b).  Hasil  pengukuran dinyatakan dalam Citrus Color Index (CCI) dan derajat hue. Sistem  notasi  warna  Hunter dicirikan  dengan  3  parameter  warna,  yaitu notasi  L  menyatakan  parameter  kecerahan ( lightness ),  notasi  a  menyatakan  warna kromatik  campuran  merah-hijau,  sedangkan notasi b menyatakan warna kromatik campuran biru-kuning  (Andarwulan et  al .,  2011).  Hasil pengukuran  nilai  a  dan  b  dikonversikan  ke dalam satuan kromatik derajat hue ( o hue ). Nilai o hue mendeskripsikan  warna  murni  yang menunjukkan warna dominan dalam campuran beberapa  warna.  Berdasarkan  Manera et  al. (2012), nilai o hue digunakan persamaan sebagai
berikut: °ℎ𝑢𝑒 = tan −1 ( b a )
Nilai Citrus  Color  Indeks (CCI) merupakan formula yang banyak dipergunakan untuk melihat kualitas warna kulit buah jeruk.
Menurut  Jimenez-Cueata et  al. (1981)  bahwa nilai  CCI  digunakan  persamaan  sebagai berikut: CCI = 1000.a L.b . Indeks  warna  jeruk (CCI)  digunakan  kisaran  sebagai  berikut: CCI<=  -5  (hijau  gelap),  -5<CCI<=0  (hijau), 0<CCI<=3  (hijau  kekuningan),  3<CCI<=6 (kuning kehijauan), 6<CCI<=8 (jingga kekuningan), 8<CCI<=10 (jingga), dan CCI>10 (jingga gelap).
Kandungan total klorofil diukur menggunakan  metode  spektrofotometri.  Kulit jeruk ditimbang sebesar 0.5 gram untuk digerus dan diekstraksi dengan acetris sebanyak 2 mL, kemudian  dimasukkan  ke microtube dan disentrifuge  selama  10  detik.  Filtrat  hasil sentrifuge  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi sebanyak 1 mL, ditambahkan 3 mL acetris, lalu ditempatkan  dalam  cuvet  untuk  diukur menggunakan  alat  spektrofotometer  pada panjang  gelombang  537,  647,  dan  663  nm. Menurut  Sims  dan  Gamon  (2002),  setelah memperoleh nilai  absorbansi,  kandungan  total klorofil dapat dihitung dengan rumus:
𝑪𝒉𝒍 𝒂 = 𝟎. 𝟎𝟏𝟑𝟕𝟑 ∗ 𝑨 𝟔𝟔𝟑 − 𝟎. 𝟎𝟎𝟎𝟖𝟗𝟕 ∗ 𝑨 𝟓𝟑𝟕 −   𝟎. 𝟎𝟎𝟑𝟎𝟒𝟔 ∗ 𝑨 𝟔𝟒𝟕 𝑪𝒉𝒍 𝒃 = 𝟎. 𝟎𝟐𝟒𝟎𝟓 ∗ 𝑨 𝟔𝟒𝟕 − 𝟎. 𝟎𝟎𝟒𝟑𝟎𝟓 ∗ 𝑨 𝟓𝟑𝟕 −   𝟎. 𝟎𝟎𝟓𝟓𝟎𝟕 ∗ 𝑨 𝟔𝟔𝟑
Total Klorofil = 𝐶ℎ𝑙 𝑎 + 𝐶ℎ𝑙 𝑏

## Gambar 1. Gambar kurva standar pigmen β-cryptoxanthin
Ekstraksi  karotenoid  dilakukan  dengan memisahkan  kulit  buah  jeruk  dari  bagian daging  buah  jeruk,  kemudian  didinginkan dengan cairan nitrogen di dalam tabung dewar sampai  digunakan.  Identifikasi  karotenoid dilakukan dengan metode yang dijelaskan oleh Kato et  al .  (2004).  Pigmen  diekstrak  dari sampel dengan larutan heksana; aseton: ethanol (2:1:1, v/v) yang mengandung 0.1% (w/v) 2.6 di  tert  butyl  4  methylphenol  dan  10%  (w/v) magnesium  karbonat.  Setelah  pelarut  organik menguap  secara  keseluruhan,  ekstrak  yang mengandung karotenoid yang diesterifikasi ke asam  lemak,  disaforifikasi  dengan  20%  (w/v) methanolic KOH. Ekstrak yang larut dalam air dihilangkan  dengan  NaCl  jenuh.  Pigmen dipartisi  pada  fase  dhietyl  ether  dan  diuapkan menjadi kering.
Analisis β-cryptoxanthin dan zeaxanthin diukur  dengan  melarutkan  kembali  residu karotenoid  ke  dalam  larutan  methyl  tert  butyl ether: methanol (4:6, v/v). Sebuah aliquot (30 µL)  dipisahkan  dengan  system  fase  terbalik HPLC, pada tingkat aliran 1 mL min -1 . Standar dari β-cryptoxanthin disiapkan  berdasarkan metode yang dideskripsikan dengan berat segar (fresh weight) mikrogram per gram (menyiapkan kalibrasi dari standar).
Kuantifikasi β-cryptoxanthin,  zeaxanthin dan β-carotene dilakukan dalam 3 ulangan. Standar pigmen (Gambar 1), dan persamaan linear y = 41433x + 101291, R² = 0.9997. Data hasil pengamatan diuji dengan sidik ragam pada taraf α= 5% menggunakan program SAS  ( Statistical  Analysis  System ),  yang diuji lanjut  dengan Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT) pada taraf α= 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh Suhu Degreening terhadap Beberapa  Varietas  Jeruk  pada  Nilai  Citrus Color Indeks (CCI)
Peningkatan  nilai  CCI  menunjukkan bahwa  terjadi  perubahan  warna  dari  hijau menjadi jingga. Suhu degreening berpengaruh terhadap nilai CCI pada jeruk Keprok Selayar, Keprok Tejakula  dan Siam Kintamani ditunjukkan  pada  Tabel  1.  Hasil  pengukuran nilai CCI jeruk Keprok Selayar yang diberikan perlakuan degreening pada suhu 15 0 C dan 20
0 C  masing-masing  sebesar  CCI  sebesar  7.44 dan  6.18  pada  hari  ke-4.  Hal  tersebut memperlihatkan  bahwa  jeruk  Keprok  Selayar telah berubah warna menjadi jingga kekuningan, dan berubah menjadi jingga cerah hari  ke-8  dengan  nilai  8.31  pada  suhu degreening 15 0 C. Degreening pada suhu ruang memperlihatkan  pembusukan  sejak  hari  ke-4 (Gambar 2).
Nilai  CCI  pada  jeruk  Keprok  Tejakula dengan degreening pada suhu 15 0 C dan 20 0 C masing-masing  membentuk  warna  jingga kekuningan  pada  hari  ke-12,  dan  suhu  ruang pada  hari  ke-8.  Tingkat  pembusukan  buah menjadi tinggi dengan degreening suhu 20 0 C dan ruang.
Degreening dengan  suhu  20 0 C  pada Siam  Kintamani  menunjukkan  perubahan warna  kulit  menjadi  jingga  kekuningan  pada hari ke-12 dengan nilai CCI 6.90. Degreening pada suhu 30 0 C menunjukkan warna kulit yang kecoklatan dan membusuk.
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 min 0 5 10 15 20 25 30 mV Detector A:450nm 6 .8 3 3 /5 9 0 8 0 5 1 0 .7 7 8 /8 9 8 5 7 1 9 .1 5 7 /9 7 0 6 1 β-cryptoxanthin
Tabel 1. Perubahan nilai Citrus Color Index (CCI) berbagai jenis jeruk pada beberapa suhu degreening Jenis Jeruk Suhu Panen 0 HSP Nilai CCI pada hari setelah perlakuan (HSP) ke- 1 4 8 12 Keprok Selayar Suhu 15 0 C 2.14 5.33 7.44 a 8.31 a 9.24 a Suhu 20 0 C 2.00 4.23 6.18 ab 6.98 b 8.88 a Suhu Ruang (± 30 0 C) 2.57 4.37 - - - Keprok Tejakula Suhu 15 0 C -0.72 2.20 4.22 b 5.73 b 6.57 b Suhu 20 0 C 0.12 2.57 5.03 b 5.79 b 6.22 b Suhu Ruang (± 30 0 C) -0.77 3.22 5.00 b 7.68 a 7.98 a Siam Kintamani Suhu 15 0 C -0.52 2.95 4.82 b 5.52 b 6.22 b Suhu 20 0 C -0.40 2.96 5.19 b 6.57 b 6.90 b Suhu Ruang (± 30 0 C) -0.46 - - - -
Keterangan: Angka rataan yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan Uji lanjut Duncan pada taraf α= 5%. (-) adalah buah busuk. CCI= 1000.a/L.b.
Gambar 2. Perubahan warna kulit buah jeruk Keprok Selayar, Keprok Tejakula dan Siam Kintamani pada 0 HSP (hari setelah perlakuan) sampai dengan 12 HSP.

## Pengaruh Degreening terhadap Nilai Hue
Kulit  buah  jeruk  berwarna  jingga ditunjukkan dengan nilai hue ≤ 71.5. hue ( o hue ) merupakan hasil konversi dari nilai a dan b dan menjadi  parameter  penting  dalam  metode pengukuran  jeruk.  Jeruk  Keprok  Selayar dengan degreening suhu  15 0 C  menunjukkan penurunan nilai hue paling tajam, dengan nilai 69.24  pada  hari  ke-4.  Pada  jeruk  Siam Kintamani yang diberikan perlakuan degreening suhu  15 0 C  dan  20 0 C  dapat membentuk warna jingga kekuningan pada hari
ke-16  (69.34)  dan  hari  ke-12  (71.55) ditunjukkan pada Gambar 3.
Jeruk Keprok Selayar dari dataran tinggi yang diberikan perlakuan degreening membentuk  warna  jingga  lebih  cepat.  Hal tersebut  sejalan  dengan  pernyataan  Iglesias et al .  (2007)  menyatakan  bahwa  suhu  dingin berperan penting dalam proses perubahan kulit buah jeruk menjadi jingga. Menurut Jomori et al . (2010) dan Sdiri et al . (2010) suhu selama pertumbuhan  buah  sangat  mempengaruhi perubahan warna kulit buah jeruk.
0 HSP 1 HSP 4 HSP 8 HSP 12 HSP 15 0 C 20 0 C 30 0 C Keprok Selayar Keprok Tejakula Siam Kintamani 15 0 C 20 0 C 30 0 C 15 0 C 20 0 C 30 0 C
Gambar 3. Perubahan nilai hue (a) Keprok Selayar, (b) Keprok Tejakula, dan (c) Siam Kintamani pada beberapa suhu degreening
Analisis HPLC β-cryptoxanthin dan Penentuan Kadar Klorofil
Jeruk  Keprok  Selayar  dan  Keprok Tejakula memiliki kandungan β-cryptoxanthin yang berbeda,  hal  tersebut  disebabkan  karena kedua  varietas  jeruk  tersebut  ditanam  pada daerah dengan  ketinggian  yang  berbeda. Pada Gambar  4  menunjukkan  bahwa  kandungan β- cryptoxanthin pada  semua  varietas  dengan perlakuan degreening lebih besar dibandingkan dengan  tanpa degreening .  Jeruk  Keprok Selayar dataran tinggi menunjukkan kandungan β-cryptoxanthin lebih  tinggi  dibandingkan dengan Keprok Tejakula dan Siam Kintamani. Perbedaan  ketinggian  elevasi  jeruk selama pertumbuhan juga mempengaruhi kadar β-cryptoxanthin. Pada  jeruk  dataran  tinggi dengan  perlakuan degreening menunjukkan kadar β-cryptoxanthin tiga kali lipat lebih tinggi dibandingkan  jeruk  yang  ditanam  di  dataran rendah.  Hal  tersebut  karena  di  dataran  tinggi suhu  selama  pertumbuhan  buah  lebih  rendah dibandingkan  di  dataran  rendah.  Suhu  rendah dapat mengaktifkan gen yang dapat mengakumulasi pigmen β-citraurin.  β- Citraurin pada  tingkat  lebih  rendah  yaitu  β- apo-8'-carotenal,  menjadi  pigmen  utama  pada jeruk  yang  memberikan  warna  kemerahan cerah  serta  memberikan  kontribusi  signifikan dalam  karakteristik  warna  jingga  cerah  pada jeruk  (Oberhoslter et  al .,  2001;  Rios et  al .,
2010; Carmona et al ., 2012).
Nilai  kandungan β-cryptoxanthin pada kulit  jeruk  Keprok  Selayar  hari  ke-8  HSP sebesar 37.70 ug g BS -1 (BS = bobot segar), dan dengan perlakuan degreening pada suhu 15 0 C sebesar  93.07  ug  g  BS -1 .  Nilai  kandungan β- cryptoxanthin pada kulit jeruk Keprok Tejakula tanpa degreening sebesar 17.48 ug g BS -1 , dan degreening suhu 15 0 C menunjukkan nilai lebih tinggi  yaitu  sebesar  34.40  ug  g  BS -1 .  Hal tersebut  terjadi  karena  peningkatan  akumulasi β-cryptoxanthin, dengan  peningkatan  akumulasi β-cryptoxanthin diduga β-citraurin juga mengalami  peningkatan  karena β-cryptoxanthin adalah salah satu pembentuk β-citraurin.
Kandungan  total  klorofil  pada  semua jeruk dengan degreening mengalami penurunan yang  tajam,  dan  kandungan β-cryptoxanthin lebih tinggi pada semua varietas jeruk dengan degreening dibandingkan  tanpa degreening (Gambar 5) .
Pigmen  dominan  pada  kulit  buah  yang belum  masak  ataupun  telah  matang  yang berwarna  hijau  ialah  klorofil  (Rodrigo et  al ., 2013). Degreening menggunakan etilen digunakan  untuk  mempercepat  perubahan warna  pada  buah  jeruk  dari  hijau  menjadi jingga (Peng et al., 2013). Nilai kandungan total klorofil  terendah  pada  jeruk  selayar  pada perlakuan degreening pada  suhu  15 0 C, sedangkan  jeruk  Keprok  Tejakula  dan  Siam Kintamani pada suhu 20 0 C.
(a) (b) (c) Suhu 15 0 C
Suhu Ruang
Suhu 20 0 C Suhu 15 0 C Suhu Ruang Suhu 20 0 C Suhu 15 0 C
Suhu Ruang Suhu 20 0 C
Gambar  4.  Analisis  HPLC,  identifikasi  pigmen β-cryptoxanthin, pada  kulit  jeruk  Keprok  Selayar: tanpa degreenin g (8 HSP) (a), Keprok Selayar dengan degreening (8 HSP) (b), Keprok Tejakula: tanpa degreening (12 HSP) (c), Keprok Tejakula dengan degreening (12 HSP) (d),  Siam  Kintamani;  tanpa degreening (12  HSP)  (e),  dan  Siam  Kintamani  dengan degreening (12 HSP) (f)
(a) 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 min 0 25 50 75 100 125 150 175 200 225 250 mV Detector A:450nm 7 .5 0 4 /1 9 5 0 6 1 1 1 0 .8 7 9 /1 2 8 3 9 4 0 1 8 .6 0 1 /8 1 8 9 5 3 (b) 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 min 0 100 200 300 400 500 600 mV Detector A:450nm 6 .1 2 2 /1 0 2 3 5 5 3 1 9 .9 0 5 /7 1 1 7 2 3 1 1 6 .6 4 6 /1 4 0 3 3 7 1 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 min 0 50 100 150 200 250 300 350 mV Detector A:450nm 5 .9 4 7 /3 4 0 0 6 4 9 9 .8 7 7 /8 2 7 6 4 2 1 6 .4 8 7 /2 2 2 1 4 5 2 (c) (d) 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 min 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 mV Detector A:450nm 5 .6 6 1 /2 1 6 5 9 0 0 9 .7 2 2 /1 2 5 8 6 9 1 1 5 .4 0 9 /2 8 1 5 5 1 β-cryptoxanthin β-cryptoxanthin β-cryptoxanthin β-cryptoxanthin Waktu retensi (menit) Waktu retensi (menit) In te n si ta s (m V ) In te n si ta s (m V ) 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 min 0 25 50 75 100 125 150 175 200 225 mV Detector A:450nm 6 .5 3 7 /1 1 8 3 1 2 4 1 0 .2 7 7 /5 5 8 9 2 0 1 8 .1 9 5 /2 2 5 9 4 1 In te n si ta s (m V ) 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 min 0 100 200 300 400 500 mV Detector A:450nm 6 .1 1 3 /3 1 9 4 8 9 1 9 .8 1 1 /5 7 3 2 8 1 1 5 .5 7 2 /4 0 6 6 2 4 β-cryptoxanthin β-cryptoxanthin (e) (f)
Gambar 5. Perubahan total klorofil (a) Keprok Selayar, (b) Keprok Tejakula, (c) Siam Kintamani, dan kandungan β-cryptoxanthin 15 0 C (d) pada beberapa suhu degreening.
Pengaruh  Degreening  terhadap  Padatan Terlarut  Total  (PTT)  dan  Total  Asam Tertitrasi (TAT)
Ukuran untuk mengetahui tingkat kemanisan  buah  jeruk  dinyatakan  dalam kandungan  padatan  terlarut  total  (PTT). Berdasarkan  jenis  jeruk  dan  perlakuan  suhu degreening saat  pengamatan  akhir tidak berpengaruh pada PTT dan total asam tertitrasi (Tabel 2).
Pada  akhir  penyimpanan  yaitu  hari  ke- 12,  jeruk  keprok  tejakula  menunjukkan  nilai PTT yaitu 8.51 dan pada jeruk keprok selayar yaitu 9.72. Hal tersebut didukung oleh pernyataan Ladaniya  (2008),  standar  kematangan  untuk jeruk  tropis  yang  memiliki  warna  hijau  saat panen  dengan  kriteria  masak  fisiologis memiliki nilai PTT berkisar antara 9-10.
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa degreening tidak  merubah  kualitas  internal
buah jeruk, perbedaan PTT tersebut disebabkan karena berbeda-beda varietas jeruk yang dipakai untuk  penelitian,  sedangkan  suhu degreening tidak  menyebabkan  perbedaan  nyata.  Jeruk termasuk kedalam buah non klimakterik, tingkat kematangannya  tidak  dapat  dipacu  sehingga cara pemanenan buah jeruk harus dalam kondisi matang fisiologis. Hal tersebut sejalan dengan penelitian Hasimi et al. (2016) bahwa degreening tidak  memberikan  pengaruh  nyata  terhadap kualitas internal buah jeruk siam Banyuwangi. Menurut  Ladaniya  (2008)  bahwa  sifat  jeruk yang  non-klimakterik  tidak  memungkinkan terjadi peningkatan pada rasa buah jeruk setelah dipetik  dari  pohonnya.  Hal  ini  juga  didukung oleh  penelitian  Mayuoni et  al .  (2011),  bahwa degreening dengan etilen tidak mempengaruhi padatan  terlarut  total  (PTT),  vitamin  C  dan flavonoid total pada buah jeruk sehingga tidak menurunkan kualitas internal buah.
(a) (b) 0 20 40 60 80 100 120 Keprok selayar Keprok
Tejakula Siam Kintamani K an dun ga n β- C ry ptoxanthin β-Cryptoxanthin tanpa degreening Degreening (d) 0 20 40 60 80 100 120 Panen (0 HSP) suhu 15 oC (12
HSP) suhu 20 oC (12 HSP) suhu ruang K an dun ga n T o ta l kl o ro fi l
(ug g B S -1 ) Siam Kintamani (c) Panen     suhu       suhu (0 HSP)  15 0 C     20 0 C (8 HSP) (8 HSP) Panen       suhu         suhu     suhu ruang (0 HSP)    15 0 C        20 0 C      (8 HSP) (12 HSP)  (12 HSP) Panen       suhu       suhu (0 HSP)    15 0 C     20 0 C (12 HSP) (12 HSP)
Tabel 2. Pengaruh suhu degreening dan varietas jeruk terhadap padatan terlarut total (PTT), total asam tertitrasi (TAT) dan kekerasan buah
Perlakuan PTT ( o brix) TAT (mg/100 g) 8 HSP 12 HSP 8 HSP 12 HSP Jenis jeruk Keprok Selayar 10.55 a 9.72 a 0.53 b 0.56 a Keprok Tejakula 9.19 b 8.51 b 0.64 a 0.63 a Siam Kintamani 9.60 b 8.54 b 0.68 a 0.50 a Suhu degreening 15 0 C 10.07 a 9.32 a 0.67 a 0.54 a 20 0 C 9.82 a 8.97 a 0.63 ab 0.57 a Ruang 9.42 a 8.46 a 0.55 b 0.59 a Interaksi tn tn tn tn
Keterangan: Angka rerata yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata berdasarkan uji lanjut Duncan pada taraf α= 5%.

## KESIMPULAN
Warna terbaik jeruk Keprok Selayar dan Tejakula  diperoleh  dengan degreening pada suhu 15 0 C, Siam Kintamani diperoleh dengan degreening pada suhu 20 0 C. D egreening dapat menurunkan  kandungan  total  klorofil  secara tajam,  dan  terbukti  meningkatkan  kandungan pigmen β-cryptoxanthin dalam  mempercepat pembentukan warna kulit jeruk keprok menjadi jingga.  Kandungan  pigmen β-cryptoxanthin setelah degreening, 3  kali  lebih  tinggi  pada jeruk  keprok  dataran  tinggi  dibandingkan dengan dataran rendah.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terimakasih disampaikan kepada PKHT  IPB  dan  LIPI  Cibinong  yang  telah memfasilitasi  penelitian  ini  dan  kementerian riset, teknologi, dan pendidikan tinggi melalui hibah  PDD  dengan  nomor  kontrak  0432/ K3/KM/2017 dengan judul studi pembentukan pigmen β-citraurine dan β-cryptoxanthin pada buah jeruk dengan degreenin g dan Kementerian  Pertanian  RI  dengan  nomor kontrak  714/LB.620/1.1/2/2013  diketuai  oleh Prof.  Dr.  Ir.  Roedhy  Poerwanto,  MSc.  yang telah membantu mendanai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Andarwulan,  N.,  F.  Kusnandar,  D.  Herawati. 2011.  Analisis  Pangan.  Dian  Rakyat. Jakarta.
Arzam,  T.S.,  I.H.  Sumiasih,  R.  Poerwanto,
Y.A.  Purwanto.  2015. Precooling dan konsentrasi  etilen  dalam degreening untuk  membentuk  warna  orange  kulit buah jeruk siam. J. Hort. 25(3): 257-265.
Carmona, L., L. Zacarías, M.J. Rodrigo. 2012. Stimulation of coloration and carotenoid biosynthesis  during  postharvest  storage of  ‘Navelina’  orange  fruit  at  12 0 C. Postharvest Biology and Technology. 74: 108-117.
[Deptan] Departemen Pertanian. 2015. Outlook Jeruk.  Pusat Data dan  Sistem  Informasi Pertanian Kementerian Pertanian.
Fanciullino,  A.L.,  M.  Cercos,  C.D. Mayer,  Y. Froelicher,  M.  Talon.  P.  Ollitrault,  R. Morillon.  2008.  Changes  in  carotenoid content  and  biosintesis  gene  expression in  juice  sacs  of  four  orange  varities ( Citrus sinensis ) differing  fruit  color.  J. Agricultural  of  Food  Chemistry.  54: 4397-4406.
Hasimi,  N.R.,  R.  Poerwanto,  K.  Suketi.  2016. Degreening  buah  jeruk  siam  ( Citrus nobilis )  pada  beberapa  konsentrasi  dan durasi  pemaparan  etilen.  J.  Hort. Indonesia. 7(2): 111-120.
Iglesias,  J.D.,  M.  Cercós,  J.M.  Colmenero- Flores,  M.A.  Naranjo,  G.  Ríos,  E. Carrera,  O.  Ruiz-Rivero,  I.  Liso,  R. Morillon,  F.R.  Tadeo,  M.  Talón.  2007. Physiology  of  citrus  fruiting.  Brazilian Journal of Plant Physiology. 19: 333-362.
Jiménez-Cuesta,  M.J.,  J.  Cuquerella,  J.M.
Martínez-Jávega.  1981.  Determination of  a  color  index  for  citrus  fruit degreening. In Proc. of the International Society of Citriculture. 2: 750-753.
Jomori,  M.L.  L.,  Sestari,  F.A.M.  Terra,  D.G. Chiou,  R.A.  Klauge.  2010.  Degreening of  ‘Murcott’  tangor  with  ethapon treatments. Proc. IV International Postharvest Symposium. Acta Hort. 877.
Ladaniya,  M.S.  2008.  Citrus  Fruit:  Biology, Technology  and  Evaluation.  San  Diego CA. Elsevier Academic Press.
Kato,  M.,  Y.  Ikoma,  H.  Matsumoto,  M. Sugiura,  H.  Hyodo,  M.  Yano.  2004. Accumulation of carotenoids and expression  of  carotenoid  biosynthetic genes  during  maturation  in  citrus  fruit. Plant Physiol. 134(2): 824-37.
Kato,  M.,  H.  Matsumoto,  Y.  Ikoma,  Y.H. Okuda,  M.  Yano.  2006.  The  role  of carotenoid  cleavage  dioxygenase  in  the regulation  of  carotenoid  profiles  during maturation  in  citrus  fruit.  J.  Exp.  Bot.
Japan. 57(10): 2153-2164.
Karthik, J. Joseph, Karrupiah, J.K. Burns. 2010. Differential  ethylene  sensitivity  during abscission  and  degreening  in  citrus. University of Florida.
Ma, G., L. Zhang, A. Matsuta, K. Matsutani, K. Yamawaki, M. Yahata, A. Wahyudi, R. Motohashi,  M.  Kato.  2013.  Enzymatic formation  of  β-citraurin  from  β- cryptoxanthin and zeaxanthin by carotenoid cleavage dioxygenase4 in the flavedo of citrus fruit. American Society of Plant Biologists. 682-695.
Manera, J., J.M. Brotons, A. Conesa, I. Porras.
2012. Relationship between air temperature  and  degreening  of  lemon ( Citrus  lemon L.  Burm.  F)  peel  color during maturation. Australian Journal of Crop Science. 6(6): 1051-1058.
Martinez-Javega,  J.M.,  A.  Monterde,  P. Navarro, A. Salvador. 2008. Respons of
new clementines to degreening treatment. Proc. Int. Soc. Citriculture. 11: 1342-1346.
Nafisah,  S.N.  2013.  Sikap  dan  persepsi konsumen terhadap jeruk lokal dan jeruk impor  di  pasar  modern  Kota  Bogor. Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
70 Hal.
Oberholster, R., K. Cowan, P. Molnar, G. Toth. 2001.  Biochemical  basis  of  color  as  an aesthetic  quality  in Citrus  sinensis .  J.
Agric. Food Chem. 49: 303-307.
Peng, G., X.L. Xie, Q. Jiang, S. Song, C.J. Xu. 2013.  Chlorophyll  a/b  binding  protein plays a key role in natural and ethylene- induced  degreening  of  ponkan  ( Citrus reticulate Blanco ). J. Sci. Hortic. 160: 37-43.
Ríos, G., M.A. Naranjo, M. Rodrigo, E. Alós,
L. Zacarías, M. Cercós, M. Talón. 2010. Identification of a GCC transcription factor responding to fruit colour change events in citrus through the transcriptomic analyses  of  two  mutants.  BMC  Plant Biology. 10: 276.
Rodrigo,  M.J.,  M.  Alquezar,  E.  Alos,  V. Medina, L. Carmona, M. Bruno. 2013. A Novel  carotenoid  cleavatage  in  the biosynthesis  of  citrus  fuit  specific apocarotenoid  pigments.  Experimental Botany. 64: 4461-4478.
Sdiri, S., P. Navarro, A. Monterde, J. Benabda, A.  Salvador.  2012.  New  degreening treatments  to  improve  the  quality  of citrus  fruit  combining  different  periods with  and  without  ethylene  exposure.  J Postharvest Biol and Technol. 63: 25-32.
Shanti,  S.I.  2007.  Analisis  keputusan  konsumen dalam  mengkonsumsi  jeruk  lokal  dan jeruk  impor  di  ritel  modern  (kasus konsumen  Giant Botani  Square  Bogor).
Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Bogor
Sims,  D.A.,  J.A.  Gamon.  2002.  Relationship between  leaf  pigment  content  and spectral reflectance across a wide range of species, leaf structures and development  stages.  J.  Remote  Sensing Envir. 81: 337-354.
Zhou, Y.J., C.D. Sun, L.L. Zhang, X. Dai, C.J.
Xu,  K.S.  Chen.  2010.  Preferential accumulation of orange-colored carotenoids in Ponkan ( Citrus reticulata ) fruit peel following postharvest application  of  ethylene  or  ethephon.  J. Scientia Horticulturae. 126: 229-235.