MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol.10, No. 2, Des 2021, Hal,13-28 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487

## REVIEW ARTIKEL ANALISIS KANDUNGAN SILDENAFIL SITRAT DALAM SEDIAAN CAIR JAMU KUAT DENGAN METODE KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
Fawandi Fuad Alkindi 1 , Kusuma Hendrajaya 2 , Tariq Hasan Fadhil 3
(1,2,3) Program Studi Sarjana Farmasi Universitas Surabaya Email : 1) alkindifawandi@staff.ubaya.ac.id
2) kusuma_hendrajaya@staff.ubaya.ac.id
3) tahafeas@gmail.com

## ABSTRAK
Sebagian masyarakat Indonesia memilih mengkonsumsi sediaan sildenafil sitrat yang  dijual  dipasaran  untuk  mengatasi  disfungsi  ereksi.  Berkembangnya  obat tradisional,  masyarakat  cenderung  memilih  mengonsumsi  obat  tradisional daripada obat sintetik. Perkembangan minat masyarakat yang besar terhadap produk jamu penambah stamina  sering disalahgunakan produsen jamu yang dalam  menambahkan  bahan  kimia  obat  (BKO)  dimana  dalam  pemakaian jangka  panjang  menyebabkan  toksisitas,  salah  satu  BKO  yang  sering disalahgunakan  adalah  sildenafil  sitrat  yang  penggunaannya  harus  dengan pengawasan  dokter  serta  dalam  dosis  yang  tepat  agar  tidak  menimbulkan toksisitas. Review artikel  ini  bertujuan  untuk  menjawab  permasalahan  pada penerapan  identifikasi  sildenafil  sitrat  pada  sediaan  cair  jamu  kuat  dengan menggunakan  metode  KCKT.  Penerapan  penelitian  menggunakan  metode naratif  dari  hasil  pengelompokan  data-data review artikel  yang  sejenis  sesuai dengan kriteria jurnal yang ditetapkan. Hasil review yang diperoleh sebanyak 8 artikel  yang  ditemukan  yaitu  metode  KCKT  dapat  digunakan  untuk mengidentifikasi  kandungan  bahan  kimia  obat  sildenafil  sitrat  dalam  sediaan cair jamu kuat dengan preparasi sampel menggunakan pelarut metanol, air, dan asetonitril  dan  mengandung  buffer  asam  format  0,1  %  kemudian  dilakukan vortex  dan  ultrasonik  dan  sistem  KCKT  yang  digunakan  yaitu    Fase  gerak  A (Acetonitrile):Fase gerak B (20 mmol/L ammonium acetate, 0.2% formic acid dan 10  mmol/L  triethylamine)  dengan  elusi  secara  gradien  Laju  aliran  di  set  1,0 ml/menit,  volume  injesi  5  μL,  suhu  kolom  diset  30˚C  dan  pada  panjang gelombang 292 nm.
Kata Kunci : Analisis, Sildenafil Sitrat, Obat Herbal, KCKT, Sediaan Cair

## ABSTRACT
Most Indonesian people choose to consume sildenafil citrate to treat erectile dysfunction. Nowadays Indonesian people tend to prefer to consume traditional medicine rather than synthetic  medicine.  The  increasing  of  public  interest in  herbal  aphrodisiacs  products  is often misused by industry which adds medicinal chemicals. This chemicals causes toxicity in  the  long  term  used,  one  of  the  medicinal  chemical that  is  often  misused  is  sildenafil citrate. Sildenafil citrate for its use must be under a doctor's supervision and in the right dosage  so  as  not  to  cause  toxicity.  This  review  article  aims  to  answer  problems  in  the
sildenafil  identification  citrate  in  oral  liquid  herbal  aphrodisiacs  products  using  the HPLC. It’s a narrative method based on the results of grouping data from the review of similar articles which match the criteria. It’s results 8 articles found, namely the HPLC method can be used to identify the chemical content of the drug sildenafil citrate in  oral liquid  herbal  aphrodisiacs  products  preparations  with  sample  preparation  using methanol, water, and acetonitrile solvents and containing 0.1% formic acid buffer then vortexed. and the ultrasonic and HPLC system used were mobile phase A (acetonitrile): mobile  phase  B  (20  mmol  /  L  ammonium  acetate,  0.2%  formic  acid  and  10  mmol  /  L triethylamine)  with  gradient  elution  Flow  rate  set  at  1.0  ml  /  minutes,  the  injection volume is 5 μL, the column temperature is set to 30˚C and at a wavelength of 292 nm.
Key Words : Analysis, Sildenafil Citrate, Herbal, HPLC, Oral Liquid

## PENDAHULUAN
Disfungsi ereksi didefinisikan sebagai ketidakmampuan untuk mencapai atau  mempertahankan  ereksi  yang  cukup  untuk  mencapai  kepuasan  aktivitas seksual. Disfungsi ereksi juga merupakan masalah penting di seluruh dunia yang dialami hampir setengah dari pria diatas usia 40 tahun. Menurut penelitian Asian Journal  of  Andrology prevalensi  disfungsi  ereksi  pada  usia  20-29  tahun  sebesar 15,1%,  usia  30-39  tahun  sebesar  29,6%,  sebesar  40,6%  untuk  usia  40-49  . Sedangkan usia 50-59 tahun sebesar 54,3% dan 70% untuk usia 60-69 tahun (Park, Hwang and Kim, 2011).
Obat  tradisional  atau  yang  lebih  dikenal  sebagai  jamu  yaitu  bahan  alam yang disediakan secara tradisional. Jamu dibuat dalam bentuk serbuk seduhan, pil, dan  cairan  yang  berisi  seluruh  bahan  tanaman  yang  menjadi  penyusun  jamu tersebut  dan  digunakan  secara  tradisional. Jamu  penambah  stamina  pria  atau lebih  dikenal  dengan  istilah  jamu  kuat  pria  merupakan  salah  satu  jamu  yang dikonsumsi  oleh  masyarakat  untuk  mengatasi  disfungsi  ereksi.  Penggunaan jamu secara umum tidak dapat memberikan efek penyembuhan seketika seperti penggunaan  obat  kimia  tetapi  memerlukan  selang  waktu  tertentu  untuk  dapat menimbulkan  efek  yang  diinginkan.  Pengetahuan  ini  sering  tidak  dimengerti oleh  masyarakat  sehingga  banyak  dimanfaatkan  oleh  industri  jamu  yang  tidak bertanggungjawab  dengan  cara  mencampurkan  Bahan  Kimia  Obat  (BKO)  ke dalam jamu kuat pria.
BKO  yang  teridentifikasi  sering  dicampur  dalam  jamu  kuat  pria  yaitu sildenafil  sitrat.  Hal  ini  dibuktikan  dengan  temuan  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  (BPOM)  pada public  warning tahun  2017  ditemukan sebanyak  39  obat tradisional mengandung BKO dan 28 (72%) diantaranya tidak memiliki izin edar dari BPOM. BKO dari obat tradisional tersebut antara lain adalah sildenafil dan turunannya  (BPOM  RI,  2017).    Sildenafil  sitrat  sendiri  merupakan  obat  yang diindikasikan  untuk  disfungsi  ereksi  dan  hipertensi  arteri  pulmonal. Obat  ini umum dikenal dengan nama Viagra dan paling dominan digunakan sebagai obat disfungsi  ereksi  pada  pria.  Sildenafil  dan  turunannya  termasuk  golongan  obat keras yang hanya boleh digunakan sesuai petunjuk dokter. Jika digunakan secara tidak tepat, bahan kimia obat ini dapat menimbulkan efek yang tidak diinginkan, seperti  kehilangan  penglihatan  dan  pendengaran, stroke ,  serangan  jantung, bahkan kematian (BPOM RI, 2015).
Metode  KCKT  banyak  digunakan  untuk  analisis  kandungan  sildenafil dikarenakan  mempunyai  tingkat  selektifitas  dan  ketelitian  yang  tinggi.  Banyak masalah  atau  pertanyaan  yang  timbul  terkait  penerapan  metode  KCKT  untuk identifikasi senyawa sildenafil sitrat pada sediaan cair jamu kuat seperti teknik preparasi  sampel  dan  sistem  KCKT  yang  sesuai  pada  sediaan  cair  jamu  kuat.
Oleh  sebab  itu  agar  masalah  atau  pertanyaan  tersebut  dapat  diidentifikasi  dan dianalisa  serta  dikaji  dengan  baik,  maka  metode  penelitian  yang  digunakan adalah  metode Literature Review atau  review  artikel. Review  artikel  merupakan metodologi penelitian yang dilakukan untuk mengumpulkan dan mengevaluasi penelitian yang terkait pada fokus topik tertentu (Lusiana and M. Suryani, 2014).
Review artikel dilakukan untuk berbagai tujuan, diantaranya digunakan untuk  mengindentifikasi,  mengkaji,  mengevaluasi  dan  menafsirkan  semua penelitian  yang  tersedia  dengan  bidang  topik  fenomena  menarik  dengan pertanyaan penelitian tertentu yang relevan. Selain itu metode penelitian review artikel memiliki banyak keuntungan diantaranya dapat digunakan pada hampir kesemua  topik,  dapat  memberikan  informasi  yang  baik  dalam  mengambarkan sesuatu  lebih  dalam  dengan  mudah  dan  efisien.  Dapat  mengumpulkan  data dalam jumlah besar dan menimalkan biaya (Lusiana and M. Suryani, 2014). Dari latar  belakang  diatas  maka  akan  dilakukan  penelitian  mengunakan  metode
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol.10, No. 2, Des 2021, Hal,13-28 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487
Literature  Review untuk  mengidentifikasi  dan  menjawab  permasalahan  pada penerapan  identifikasi  sildenafil  sitrat  pada  sediaan  cair  jamu  kuat  dengan menggunakan metode KCKT.

## METODE PENELITIAN
Desain  penelitian  ini  adalah  penelitian  kepustakaan  ( literature  review ),  dimana data-data  atau  bahan-bahan  yang  digunakan  untuk  menyelesaikan  penelitian didapatkan dari berbagai informasi kepustakaan baik berupa buku, ensiklopedi, jurnal ilmiah, atau dokumen lain, yang didapatkan dari penelusuran elektronik maupun  secara  manual.  Adapun  jenis literature  review yang  digunakan  adalah narrative  review ( traditional  review ),  yaitu  suatu  kajian  yang  menguraikan memberikan penjelasan, menilai, dan membahas secara kritis serta merangkum literatur  yang  relevan  dengan  topik  yang  diteliti,  namun  cara  pengumpulan faktanya  dan  teknik  sintesisnya  tidak  menggunakan  pendekatan  metodologi ilmiah sebagaimana systematic review atau meta-analysis (Siswanto, 2010) .
Sumber  Data  Penelitian- Sumber  data  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  data  sekunder.  Sumber  data  sekunder  yang  dimaksud  berupa  laporan ilmiah  primer  atau  asli  yang  terdapat  di  dalam  artikel  atau  jurnal  (tercetak dan/atau  non-cetak)  terkait  dengan  analisis  senyawa  sildenafil  sitrat  pada sediaan cair jamu kuat.
Gambar 1. Diagram Alur Searching
Penelusuran artikel melalui Science Direct, Pubmed, dan Google schoolar sesua kata kunci
793 artikel ditemukan sesuai kata kunci
23 artikel dieksklusi karena tidak sesuai dengan kriteria jurnal yang telah ditentukan 762 artikel dieksklusi karena tidak sesuai dengan judul,
abstrak dan kata kunci
8 artikel sesuai kriteria
31 artikel merupakan Research article
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol.10, No. 2, Des 2021, Hal,13-28 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487
Metode  Pengumpulan  Data  Penelitian- Metode  pengumpulan  data  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  dokumentasi.  Metode dokumentasi merupakan metode pengumpulan data dengan cara dokumentasi, yaitu  mempelajari  dokumen  yang  berkaitan  dengan  seluruh  data  yang diperlukan  dalam  penelitian  (Sukardi,  2003).  Metode  dokumentasi  pada penelitian ini diawali dengan pencarian atau penggalian data dari literatur yang terkait  dengan  analisis  senyawa  sildenafil  sitrat  pada  sediaan  cair  jamu  kuat.
Literatur  elektronik  diperoleh  dari  berbagai  sumber  database  yaitu Science Direct,Pubmed,dan  Google  schoolar. Hasil  penelusuran  literatur  kemudian  dicatat dan dikelompokkan dalam sebuah tabel untuk selanjutnya dilakukan analisis.
Prosedur  Penelitian- Mendokumentasikan  dan  mengelompokkan  hasil pencarian data pada sebuah tabel, dimana data dikelompokkan berdasarkan sub topik  penelitian  dan  kata  kunci  seperti  “ HPLC ”,  “ herbal  medicine ”  ,  “ sildenafil ”,
“ Oral  solution ”,  kemudian  melakukan  skrining  dan  analisis  data,  kemudian memisahkan  literatur  yang  tidak  sesuai  dengan  kriteria  penelitian  yang  dapat dilihat pada diagram alur searching kemudian dianalisis menggunakan metode naratif dengan mengelompokkan data-data hasil review yang sejenis sesuai dengan  hasil  yang  digunakan  untuk  menjawab  kebutuhan  metode  yang  akan dipakai pada penelitian.
Tabel 1. Kriteria Jurnal
Kriteria Tema Jurnal Analisis kandungan sildenafil sitrat dalam jamu kuat dengan metode KCKT Bahasa Bahasa Indonesia, Bahasa Inggris Jenis Jurnal Original Article / Research Article Subjek Sampel Jamu ( diutamakan bentuk sediaan jamu cair)
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol.10, No. 2, Des 2021, Hal,13-28 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Penelusuran Sub Topik Preparasi Sampel
Sediaan  cair  jamu  kuat  mengandung  banyak  senyawa  yang  terkandung termasuk senyawa yang dicurigai yaitu sildenafil sitrat, maka dari itu diperlukan preparasi sampel dengan tujuan untuk memisahkan sildenafil sitrat dari matriks sampel  yang  sangat  kompleks,  memekatkan  analit  sehingga  dapat  dianalisis dengan instrumen yaitu Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Berdasarkan 8 artikel yang ditemukan  hanya 6 artikel yang memiliki preparasi sampel jamu kuat dengan bentuk sediaan cair atau larutan oral.

## Tabel 2. Hasil review artikel mengenai preparasi sampel
Referen si Preparasi Sampel Pelarut Vorte x Ultrason ik Sentrifuga si evapora si Sentrifuga si 2 Vorte x 2 Shi shi (2020) metanol - 10 menit - - - - Philippe Lebela (2014) metanol: air: asetonitril (70:20:10) mengandu ng asam format 0,1 %. 2 menit  10 menit - - - 3 menit Feng Shi (2013) asetonitril : air (50:50) 1 menit 15 menit 5000 rpm, 15 menit - - - Maciej J. Bogusz (2006) dikloromet an  : isopropano l (9:1) - - 3000 xg, 5menit Nitroge n 37 ˚C. 16000 xg, 3menit - Qiongli n Liang (2006) methanol: water: TFA (78:22:0.1) - 10 menit 8000 rpm, 10 menit - - - Xiaolan Zhu (2005) metanol - - - - - -
Kelarutan sildenafil sitrat menurut European Pharmacopeia yaitu sedikit larut dalam  air  dan  metanol,  praktis  tidak  larut  dalam  heksana  (European Pharmacopoeia,  2013).  Pelarut  lain  yang  digunakan  selain  metanol  yaitu asetonitril,  asetonitril  merupakan  pelarut  lain  yang  sangat  umum  digunakan
pada KCKT fase terbalik dimana pelarut ini memiliki polaritas sedang, akseptor ikatan  hidrogen  yang  lemah,  dan  kemampuan  donor  yang  sangat  lemah dibandingkan  dengan  metanol,  tetapi  biasanya  bertindak  sebagai  eluen  yang lebih  kuat  dari  metanol  (Serban  C.  Moldoveanu,  2013).  Pada  penelitian  yang dilakukan  Maciej  J.  Bogusz  (2006)  digunakan  pelarut  diklorometan  dan isopropanol  sebagai  preparasi  sampel  hal  ini  dikarenakan  penelitian  yang dilakukan  tidak  hanya  mengektraksi  sildenafil  sitrat  atau  golongan  PDE-5 inhibitor  namun  juga  senyawa-senyawa  obat  lainya  dengan  total  60  senyawa obat,  termasuk  senyawa  yang  sukar  larut  dalam  pelarut  polar  seperti paracetamol,  prednisone,  prednisolone.  Diklorometan  dan  isopropanol merupakan  pelarut  non  polar  dengan  tingkat  polaritas  atau  indeks  polaritas yaitu  3,1  dan  3,9  (Sarker,  latif  dan  Grey,  2006).  Berdasarkan  uraian  diatas penggunaan  pelarut  metanol,  air  dan  asetonitril  lebih  disarankan  untuk preparasi sediaan sampel cair jamu kuat.
Menurut  European  Medicines  Agency    (EMA)  kelarutan  sildenafil  sitrat bergantung  pada  pH,  kelarutan  sildenafil  sitrat  menurun  seiring  dengan meningkatnya  pH  dengan  pH  range  berkisar  antara  3,7  dan  3,8  (European Medicines  Agency,  2009).  Berdasarkan  hal  tersebut  penambahan  buffer  asam format  0,1  %  (pH  2.7)  pada  penelitian  Philippe  Lebela  (2014)  dan  buffer trifluoroacetic  acid (TFA)  0,1  %  (pH    2.0)  pada  penelitian  Qionglin  Liang  (2006) ditujukan untuk membuat pH menjadi lebih asam dan menjaga pH tetap asam juga  digunakan  untuk  meningkatkan  kelarutan  sildenafil  sitrat  dalam  pelarut sehingga akan mudah dipisahkan dari matriks yang lain yang terkadung dalam sampel sediaan cair jamu kuat.
Terdapat  beberapa  teknik  atau  perlakuan  yang  dilakukan  pada  preparasi sampel  yaitu  vortex,  ultrasonik,  sentrifugasi,  dan  evaporasi.  Vortex  mixer berfungsi menghomogenkan sampel-sampel tertentu yang terdiri dari dua cairan atau lebih dalam suatu wadah, tetapi besaran volume yang bisa diproses cukup kecil  jika  dibandingkan  dengan  alat  penghomogen  lainnya  (Alifah  Nur,  2015). Ekstraksi  ultrasonik  atau  sonikasi  merupakan  ektraksi  yang  memanfaatkan gelombang  ultrasonik  20-40  kHz  yang  dihasilkan  oleh  transduser  piezoelektrik digunakan  dengan  tujuan  untuk  mempercepat  laju  ektraksi  dengan  cara
menciptakan getaran-getaran yang menyebabkan terjadinya pemecahan partikel secara  mekanik  (Satinder  Ahuja,  2005).  Teknik  sentrifugasi  dalam  preparasi sampel pada metode KCKT perlu dilakukan meskipun sampel mungkin tampak benar-benar  larut  hal  ini  bertujuan  untuk  menghilangkan  partikel  yang  dapat
merusak injektor atau menyumbat kolom (Slack, G.C, 2008).
Evaporasi merupakan suatu proses penguapan sebagian pelarut . Evaporasi pada sampel kadang-kadang diperlukan untuk meningkatkan konsentrasi analit atau untuk menghilangkan pelarut dari proses ekstraksi, yang mungkin tidak sesuai dengan fase gerak pada KCKT (Satinder Ahuja, 2005).
Dari  beberapa  aspek  yang  telah  disebutkan  terdapat  2  artikel  yang menggunakan pelarut metanol atau asetonitril, menggunakan larutan buffer dan menggunakan  teknik  ektraksi  sampel  seperti  ultrasonik  dan  sentrifugasi untuk preparasi sampel dengan sediaan cair jamu kuat yaitu penelitian yang dilakukan oleh  Philippe  Lebela  (2014)  dan  Qionglin  Liang  (2006).  Namun  pada  artikel penelitian  Qionglin  Liang  (2006)  tidak  dilengkapi  dengan  validasi  metode terutama  dari  perolehan  kembali  ( recovery ).  Perolehan  kembali  merupakan indikator proses ekstraksi yang telah dilakukan karena menggambarkan respon senyawa  dalam  sampel  dengan  setelah  proses  ekstraksi.  Dari  alasan  tersebut dipilih  artikel  yang  dilakukan  oleh  Philippe  Lebela  (2014)  untuk  preparasi sampel sediaan cair jamu kuat.
Hasil  Penelusuran  Sub  Topik  Metode  KCKT- dari  8  artikel  6  artikel menggunakan metode KCKT dengan beragam detektor yaitu UV, UV/PDA, ESI- MS,  dan  ESI-MS/MS.  Dimana  semua  detektor  tersebut  dapat  digunakan  untuk deteksi dan analisis sildenafil sitrat, namun dalam penelitian ini berfokus pada detektor UV karena merupakan detektor yang direkomendasikan menurut USP (2018)  selain  itu  detektor  UV  merupakan  detektor  yang  paling  luas  digunakan karena sensitivitas dan reprodusibelitasnya yang tinggi serta mudah operasinya (Gandjar  &  Rohman,  2010).  Berdasarkan  6  artikel  yang  menggunakan  metode KCKT hanya 3 artikel yang menggunakan detektor UV .
MEDFARM: Jurnal Farmasi dan Kesehatan, Vol.10, No. 2, Des 2021, Hal,13-28 e-ISSN : 2715-9957 p-ISSN: 2354-8487
Tabel 3. Hasil review artikel mengenai spesifikasi KCKT, detektor dan kolom
Referensi Spesifikasi KCKT Detektor-UV Kolom Xiaolan Zhu (2005) Waters Alliance 2695 (Milford,USA) Waters 2487 dual absorbance kolom 5 μm C-18 sillica Eiichi Mikami (2002) shimadzu CLASS-VP (Kyoto, Japan) photo-diode- array kolom wakosil 5C18 ( 5 μm, 4,6 mm x 150 mm) Samuel R. Gratz (2004) Agilent 1100 series (Waldbronn, Germany) UV-visible kolom kromasil C4 (4,6 mm x 25 cm) Tabel 4. Hasil review artikel mengenai sistem KCKT Referen si Sistem KCKT Fase gerak Elusi Laju Alira n Volu me Injek si Suh u Kolo m Panjang Gelomb ang RT Xiaolan Zhu (2005) Fase gerak A (Acetonitrile) Fase gerak B (20 mmol/L ammonium acetate, 0.2% formic acid dan 10 mmol/L triethylamine ) gradi en 1,0 ml/m enit 5 μL 30˚C 292 nm 7,9 Eiichi Mikami (2002) water/methano/acetonitril e/triethylamine (580:250:170:1) dan disesuaikan pH 3.0 dengan asam fosfat isokra tik 1,0 ml/m enit - 40˚C   280 nm  11,5 Samuel R. Gratz (2004) water/acetonitrile/buffer (68:28:4) buffer pH 4.5 dibuat dari 0,5 M KH2PO4 atau 0,01 M diethylamine isokra tik 1.5 ml/m enit - - 230 nm 11,5 7
Tabel 5. Hasil review artikel mengenai validasi metode
Refensi Validasi Metode Linieritas Range LOD LOQ Presisi Akurasi Xiaolan Zhu (2005) r2 = 0,9998 0,8-80 ppm 0,80 3,00 RSD = <2% 94,0% - 106,1% Eiichi Mikami (2002) r2 = >0,999 7,3-145.4 ppm - - RSD = 0,8% - Samuel R. Gratz (2004) r2 = 0,9999 50-125 ppm - - - 96% -103%
Secara umum detektor pada KCKT terbagi menjadi dua yaitu universal yang mampu  mendeteksi  zat  secara  umum,  tidak spesifik  dan  tidak  bersifat  selektfif misalnya detektor indeks bias dan dektektor spektrofotometri massa. Sedangkan
detektor spesifik, hanya mendeteksi analit secara spesifik dan selektif, misalnya detektor  UV-Vis,  elektrokimia  dan  fluorosensi  (Gritter, et.al, 1991).  terdapat  3 spesifikasi  detektor–UV  yang  digunakan  yaitu  UV-Visible  ,Waters  2487  dual absorbance,  dan  Photo-dioda-array  (PDA).  Detektor  UV-VIS  memiliki penyerapan  cahaya  dalam  panjang  gelombang  antara  180-800  nm  (L.C. Passos, 2019).  Detektor  Waters  2487  dual  absorbance  dimana  detektor  ini  dapat membaca  dua  panjang  gelombang  dari  190  hingga  700  nm  (Waters,  2000). Sedangkan  detektor  PDA  merupakan  detektor  UV multiwavelenght dimana detektor  ini  dapat  membaca  panjang  gelombang  dalam  beberapa  titik  secara bersamaan  dari  190  hingga  600  nm  dalam  waktu  sekitar  10  msec  (Zarrin Es’haghi, 2011). Menurut penelitian Eiichi Mikami sildenafil sitrat memiliki dua panjang gelombang maksimum yaitu 224 nm dan 293 nm (Eiichi Mikami, 2002), sedangkan menurut USP panjang gelombang untuk sildenafil sitrat yaitu 290 nm (USP, 2018) Ketiga detektor dapat dipakai untuk analisis sildenafil sitrat karena panjang gelombang maksimal sildenafil sitrat masuk rentang dari ketiga detektor tersebut.
Sedangkan  untuk  pemilihan  kolom  berdasarkan  tabel  4.2    terdapat  2  jenis kolom  yang  digunakan  yaitu  tipe  kolom  C18  dan  C4.  Kolom  C18  merupakan kolom  paling  non  polar  yang  memiliki  gugus  oktadecyl  yang  terikat  pada polimer. Ini dirancang untuk memberikan retensi fase terbalik yang baik, dengan selektivitas yang mirip dengan octadecyl silane. Sedangkan kolom C4 kelompok ini  memiliki  gugus  butil pendek  yang  terikat pada  permukaan polimer.  Kolom C18 dan C4 dapat digunakan pada KCKT fase terbalik (Sigma-Aldrich Co, 2006). Berdasarkan penjelasan tersebut penggunaan kolom C18 lebih disarankan karena memberikan waktu retensi dan selektivitas yang baik dripada kolom C4.
Sistem KCKT yang digunakan meliputi fase gerak, elusi, laju aliran, volume injeksi,  suhu  kolom,  panjang  gelombang  yang  dipakai  dan retension  time (RT).
Sistem KCKT yang dilakukan merupakan fase terbalik  dengan fase gerak  yang mengandung  air,  metanol,  dan  asetonitril.  Secara  umum,  kombinasi  air  / asetonitril  merupakan  kombinasi  yang  sering  digunakan,  terutama  untuk senyawa  yang  mengandung  cincin  aromatik  dan  untuk  kontrol  pH  digunakan kisaran pH 2 - pH 13 (Sigma-Aldrich Co, 2006). Fase gerak yang digunakan yaitu
perbandingan  antara  asetonitril,  air,  metanol  dan  larutan  buffer.  Adapun penambahan  triehylamine  pada  fase  gerak  digunakan  untuk  memperbaiki bentuk puncak ( peak ) dalam analisis KCKT fase terbalik dari senyawa dasar yang dipilih  (Eiichi Mikami, 2002). Hal ini dibutikan pada penelitian yang dilakukan oleh Xiaolan Zhu (2005) dalam penelitianya dilakukan penambahan  5, 10, 15, 25, dan  50  mmol/L  triethylamine  dan  ditemukan  bahwa  ketika  10  mmol/L triethylamine  digunakan,  puncak  dari  sildenafil,  vardenafil  dan  taldalafil meningkat  tajam  dan  relatif  simetris.  Ketika  konsentrasi  triethylamine  lebih tinggi digunakan, bentuk puncak yang dihasilkan tidak meningkat lagi (Xiaolan Zhu, 2005). Triethylamine pada fase gerak untuk identifikasi sildenadil sitrat ini juga digunakan oleh USP 41 dengan konsentrasi 0,7% (USP, 2018).
Terdapat 3 penggunaan larutan buffer yaitu buffer pH 7,0 dari campuran 20 mmol/L amonium acetate dan 0,2% asam format, buffer asam fosfat dengan pH
3,0 dan buffer dengan pH 4,5 dibuat dari  0,5 M KH 2 PO 4 . Jika dilihat dari kontrol pH  menurut  kolom  ketiga  buffer  tersebut  dapat  digunakan  karena  kolom  C18 dan  C4  memiliki  kontrol  pH  2  -  pH  13.  Namun  menurut  penelitian  yang dilakukan  oleh  Ida  Fejos  (2014)  efek  pH  dalam  fase  gerak  senyawa  PDE-5 inhibitor  termasuk  sildenafil  sitrat  dipelajari  dalam  kisaran  2,7  hingga  7,0 menggunakan  campuran  amonium  asetat  dan  asam  asetat  bahwa  peningkatan pH menghasilkan peningkatan bentuk puncak yang tinggi dan tajam (Ida Fejos, 2014).  Sehingga  pemilihan  buffer  ammonium  asetat  dengan  pH  7,0  lebih disarankan untuk senyawa PDE-5 inhibitor termasuk sildenafil sitrat. Suhu yang digunakan yaitu 30 °C dan 40 °C dimana keduanya masih dalam rentang suhu kolom C18 maupun C14 yaitu dari 4 ° C hingga 60 ° C (Sigma-Aldrich Co, 2006). Untuk pemilihan panjang gelombang  berdasarkan tabel 4.2 panjang gelombang yang digunakan yaitu 292 nm, 280 nm dan 230 nm. Ketiga panjang gelombang tersebut  sesuai  dengan  teori  dimana  sildenafil  sitrat  memiliki  dua  daerah panjang gelombang maksimum yaitu 224 nm dan 293 nm (Eiichi Mikami, 2002). sedangkan  menurut  USP  panjang  gelombang  yang  direkomendasikan  untuk identifikasi  sildenafil  sitrat  yaitu  290  nm  (USP,  2018).  Jika  dilihat  berdasarkan Retension Time (RT) panjang gelombang 293 nm memiliki retensi yang lebih cepat
diantara yang lain yaitu sebesar 7,9. Selain itu jika dilihat dari RT elusi gradien lebih baik yaitu sebesar 7,9 daripada elusi isokratik sebesar 11,57 dan 11,5.
Validasi  metode  dilakukan  untuk  menjamin  bahwa  metode  analisis  akurat, spesifik, reprodusibel dan tahan pada kisaran analit yang akan dianalisis, yang meliputi linieritas, range, LOD, LOQ, Presisi dan Akurasi. Berdasarkan tabel 4.4 didapatkan  persamaan  kurva  dari  3  artikel  yaitu  artikel  xiaolan  zhu  (2005) memiliki  r2  sebesar  0,9998,  Eiichi  Mikami  r2  sebesar  0,999,  Samuel  R.  Gratz (2004)  r2  sebesar  0,9999  ketiga  penelitian  memiliki  linieritas  yang  baik  karena persamaan  kurva  yang  didapat  memiliki  koefisien  korelasi  r  >  0.995  atau  r 2 > 0.990 (AOAC, 2013). Untuk rentang  atau jarak antara level terbawah dan teratas dari  metode  analisis  yang  telah  dipakai  beragam  pada  penelitian  Xiaolan  Zhu (2005)    memiliki  rentang  0,8-80  ppm,  pada  penelitian  Eiichi  Mikami  (2002) memiliki rentang 7,3-145,5 ppm, dan penelitian Samuel R. Gratz (2004) memiliki rentang 50-125 ppm. Sedangkan pada parameter LOD dan LOQ hanya penelitian Xiaolan  Zhu  (2005)  yang  terdapat  datanya  yaitu  sebesar  0,80  dan  3,00.  Untuk presisi yang tedapat datanya yaitu pada penelitian Xiaolan Zhu (2005) dan Eiichi Mikami (2002) dimana keduanya memiliki tingkat presisi yang baik yaitu RSD <
2%. Sedangkan untuk akurasi hanya penelitian Xiaolan Zhu (2005) dan Samuel
R.  Gratz  (2004)  yang  memiliki  data  akurasi  dan  keduanya  memiliki  tingkat akurasi yang baik  yaitu berkisar antara 94%-106,1% dan 96%-103%. Dari semua parameter  validasi  metode  penelitian  Xiaolan  Zhu  (2005)  merupakan  penelitan dengan metode validasi yang paling baik.
Berdasarkan  aspek-aspek  yang  telah  dijelaskan  diatas  dari  3  artikel  yang direview  terdapat  1  artikel  yang  sesuai  untuk  digunakan  sebagai  acuan  untuk identifikasi bahan kimia obat sildenafil sitrat dalam sediaan cair jamu kuat pada metode KCKT yaitu penelitian yang dilakukan oleh Xiaolan Zhu (2005).

## SIMPULAN
Dari  hasil review  artikel dengan  8  jurnal  yang  telah  dilakukan  oleh  penulis didapatkan  kesimpulan  yaitu  kondisi  KCKT  yang  optimal  untuk  melakukan analisis kandungan sildenafil sitrat pada sediaan cair jamu kuat adalah dengan Sistem KCKT yang digunakan yaitu  Fase gerak A (Acetonitrile):Fase gerak B (20
mmol/L  ammonium  acetate,  0.2%  formic  acid  dan  10  mmol/L  triethylamine  ) dengan elusi secara gradien pada 10 menit pertama (35:65), 5 menit berikutnya (80:20),  5  menit  lagi  untuk  maintain  (80:20),  dan  5  menit  terakhir  untuk membersihkan kolom (100:0). Laju aliran di set 1,0 ml/menit, volume injesi 5 μL, suhu  kolom  diset  30˚C  dan  pada  panjang  gelombang  292  nm.  Serta  preparasi sampel  yang  sesuai  untuk  identifikasi  bahan  kimia  obat  sildenafil  sitrat  dalam sediaan  cair  jamu  kuat  pada  metode  KCKT  yaitu  sampel  diektraksi menggunakan  pelarut  metanol,  air,  dan  asetonitril  dengan  perbandingan (70:20:10)  dan  mengandung  buffer  asam  format  0,1  %  kemudian  dilakukan vortex  selama  2  menit  diikuti  dengan  ultrasonik  selama  10  menit  setelah  itu divortex kembali selama 3 menit.

## DAFTAR PUSTAKA
Alifah Nur Aisyah, Endang Dian Setioningsih, Lamidi S. (2015). Vortex Mixer Live Rpm Dilengkapi Sensor Pendeteksi Tabung . Politeknik Kesehatan Surabaya.
AOAC (Association of Official Analytical Chemists) (2013). Official Methods Of Analysis,  Appendix  K  :  Guidelines  For  Single  Laboratory  Validation  Of Chemical Methods For Dietary Supplements And Botanical.
BPOM RI. (2005). Peraturan Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia  Nomor  HK  00.05.41.1384  tentang  Kriteria  dan  Tata  Laksana Pendaftaran Obat Tradisional, Obat Herbal Terstandar dan Fitofarmaka . Jakarta: Kepala BPOM RI.
BPOM RI. (2014). Peraturan Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia  Nomor  12  tentang  Persyaratan  Mutu  Obat  Tradisional .  Jakarta: Kepala BPOM RI.
BPOM RI. (2015). Hasil Pengawasan Obat Tradisional dan Suplemen Kesehatan Stamina  Pria  Mengandung  Bahan  Kimia  Obat.  Jakarta:  Biro  Hukum  dan Humas BPOM RI.
BPOM  RI.  (2017). Public  Warning  NO.  B-IN.05.03.1.43.12.17.5966  tentang  Obat Tradisional Mengandung Bahan Kimia Obat. Jakarta: Kepala BPOM RI.
Creswell,  J.W.  (2012). Educational  Research  Planning,  Conducting  and  Evaluating Quantitative  and  Qualitative  Research,  4th  edition.  University  of  Nebraska– Lincoln : Pearson.
Daraghmeh N, Al-Omari M, Badwan AA and Jaber AMY. (2001). Determinaton of sildenafil citrate and related substances in the commercial products and tablet  dosage  form  using  HPLC. Journal  of  Pharmaceutical  and  Biomedical Analysis 25(3–4): 483–492.
Diah  Krisnatuti  dan  Lina  Mardiana.  (2005).  Ramuan  dan  Menu  untuk Meningkatkan Gairah Seksual. Depok : Penebar Swadaya. Hal 8-11, 21.
Eiichi  Mikami,  Ohno,  T.,  &  Matsumoto,  H.  (2002). Simultaneous identification/determination system for phentolamine and sildenafil as adulterants in  soft  drinks  advertising  roborant  nutrition. Forensic  Science  International, 130(2-3),  pages  140–146 . European  Pharmacopoeia  (2013).  European Pharmacopoeia. 8th ed. Strasbourg: Council of Europe;. Sildenafil Citrate p. 3217 .
Feng Shi, et all. (2014). Application of a high resolution benchtop quadrupole-Orbitrap mass  spectrometry  for  the  rapid  screening,  confirmation  and  quantification  of illegal  adulterated  phosphodiesterase-5  inhibitors  in  herbal  medicines  and  dietary supplements. Journal  of  Chromatography  A,  volume  1344.  pages  91– 98. doi:10.1016/j.chroma.2013.12.030
Gandjar,  I.  G.  dan  Rohman,  A.  (2010).  Kimia  Farmasi  Analisis,  Yogyakarta: Pustaka Pelajar, hal 24-25, 366.
Gritter,  R.J.,  Bobbit,  J.M.,  dan  Swharting,  A.E.  (1991).  Pengantar  Kromatografi Edisi Kedua. Bandung: Penerbit ITB.
Harmanto, N. (2008). Herbal Jamu Pengaruh dan Efek Sampingnya. Jakarta: Elex Media Komputindo.
Harmita. (2004). Petunjuk pelaksanaan validasi metode dan cara perhitungannya, Majalah Ilmu Kefarmasian , 1:177–135.
Ida  Fejős,  Neumajer,  G.,  Béni,  S.,  &  Jankovics,  P.  (2014). Qualitative  and quantitative  analysis  of  PDE-5  inhibitors  in  counterfeit  medicines  and  dietary supplements  by  HPLC–UV  using  sildenafil  as  a  sole  reference. Journal  of Pharmaceutical  and  Biomedical  Analysis,  volume  98,  pages  327– 333. doi:10.1016/j.jpba.2014.06.010.
Joint  Formulary  Committee  (2019). British  National  Formulary  (BNF)  78 .  78th edition. Pharmaceutical Press.
L.C.  Passos,  M.,  and  M.F.S.  Saraiva,  M.  L.  (2019). Detection  in  UV-visible spectrophotometry:  Detectors,  detection  systems,  and  detection  strategies. Measurement, Vol 135, pages 896–904.
Lusiana  and  M.  Suryani.  (2014).  Metode  SLR  untuk  Mengidentifikasi  Isu-Isu dalam Software Engineering. SATIN (Sains dan Teknol. Informasi), vol. 3, No. 1.
Maciej  J.  Bogusz,  et  all.  (2006). Application  of  LC–ESI–MS–MS  for  detection  of synthetic  adulterants  in  herbal  remedies. Journal  of  Pharmaceutical  and Biomedical Analysis, volume 41(2), pages 554– 564 . doi:10.1016/j.jpba.2005.12.015.
Park K, Hwang EC and Kim SO. (2011). Prevalence and medical management of erectile dysfunction in Asia. Asian Journal of Andrology 13(4): 543–549.
PERMENKES  RI.  (2012).  Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia Nomor  007  tahun  2012  tentang  Registrasi  Obat  Tradisional.  Jakarta:
Menteri Kesehatan.
Philippe  Lebel.,  Gagnon,  J.,  Furtos,  A.,  &  Waldron,  K.  C.  (2014). A  rapid, quantitative  liquid  chromatography-mass  spectrometry  screening  method  for  71 active  and  11  natural  erectile  dysfunction  ingredients  present  in  potentially adulterated  or  counterfeit  products. Journal  of  Chromatography  A.  volume 1343. pages 143–151. doi:10.1016/j.chroma.2014.03.078
Podder  AK,  Chakrobarty  JK  and  Faroque  ABM.  (2014).  Qualitative  and quantitative  analysis  of  sildenafil  in  traditional  medicines  and  dietary supplements. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research 7. 2: 25–30.
Qionglin  Liang,  Jun  Qu,  Luo,  G.,  &  Wang,  Y.  (2006). Rapid  and  reliable determination of illegal adulterant in herbal medicines and dietary supplements by LC/MS/MS. Journal  of  Pharmaceutical  and  Biomedical  Analysis,  40(2), pages 305–311 .
Rohman, A. (2009). Kromatografi Untuk Analisis Obat, Yogyakarta: Graha Ilmu. Hal 1-2, 5, 45, 53.
Samuel  R.  Gratz,  Flurer,  C.  L.,  &  Wolnik,  K.  A.  (2004). Analysis  of  undeclared synthetic  phosphodiesterase-5  inhibitors  in  dietary  supplements  and  herbal matrices  by  LC–ESI–MS  and  LC–UV. Journal  of  Pharmaceutical  and Biomedical Analysis, 36(3), pages 525–53 3. doi:10.1016/j.jpba.2004.07.004
Sarker, S.D., Latif, Z. and Gray, A. (2006) I. Natural Product Isolation. Methods in Biotechnology. 2nd Edition, Human Press, New Jersey, 202-225.
Satinder Ahuja, Michael W. Dong. (2005). Hand Book of Pharmaceutical Analysis by HPLC. Academic Press.Volume 6. Page 123-144.
Shi, Shi., Wu, Y., Zhou, M., & Cheng, Q. (2020). Simultaneous  analysis  of 31 anti- impotence  compounds  potentially  illegally  added  to  herbal-based  dietary supplements  by  ultra-high-performance  liquid  chromatography  coupled  with quadrupole  time-of-flight  mass  spectrometry. Journal  of  Chromatography  B , 122077 . doi:10.1016/j.jchromb.2020.122077
Sigma-Aldrich  Corporation.  (2006).  apHera™  C18,  C8  and  C4  Polymeric Reversed Phase HPLC Columns.
Siswanto.  (2010).  Systematic  Review  Sebagai  Metode  Penelitian  Untuk Mensintesis  Hasil-Hasil  Penelitian.  Pusat  Penelitian  dan  Pengembangan Sistem dan Kebijakan Kesehatan. Hal 329
Sean  C.  Sweetman.  (2014). Martindale:  The  Complete  Drug  Reference  38th .  38th edition. Pharmaceutical Press.
Serban  C.  Moldoveanu  dan  Victor  David.  (2013) Essensial  in  Modern  HPLC Separation. Elsevier. page 423-424.
Slack,  G.C.,  and  Snow,  N.H.  (2008). HPLC  Sample  Preparation .  Academic  Press. volume 8. Pages 237-268,
Snyder LR and Kirkland JJ. (2010). Introduction to modern liquid chromatography 3 rd . A John Wiley & Sons, Inc
Sugiyono. (2009). Metode Penelitian Kuantitatif Kualitatif dan R & D, Bandung : Alfabeta. hal. 137.
USP  (The  United  States  Pharmacopeial  Convention).  (2018). U.S.  Pharmacopeia National  Formulary  2018:  USP  41  NF  36 .  The United  States  Pharmacopeial Convention.
WATERS  Corporation.  (2000).  Waters  2487  Dual  λ  Absorbance  Detector Operator’s Guide.
Wicaksena LMB, Sukesi BSNASH, Hartini HSASIKS and Khaidi AYICS. (2009). Kajian Potensi Pengembangan Pasar Jamu. Kementrian Perdagangna RI 38(3): 265.
Xiaolan  Zhu,  et  all.  (2005). Simultaneous  determination  of  sildenafil,  vardenafil  and tadalafil as forbidden components in natural dietary supplements for male sexual potency by high-performance liquid chromatography–electrospray ionization mass spectrometry. Journal  of  Chromatography  A,  1066(1-2),  pages  89– 95. doi:10.1016/j.chroma.2005.01.038
Zarrin  Es'haghi.  (2011).  Photodiode  Array  Detection  in  Clinical  Applications; Quantitative  Analyte  Assay  Advantages,  Limitations  and  Disadvantages. 10.5772/18244.