Hubungan antara Trypsin Inhibitor dan Alfa-Amylasa Inhibitor 101
Hubungan antara Trypsin Inhibitor dan Alfa-Amylase Inhibitor Pohon Sengon terhadap Perkembangan Larva Boktor dalam Artificial Diet
Correlation of Enzyme Inhibitor Activity in Sengon with Boktor Larval Growth on

## Artificial Diet
Ulfah Juniarti Siregar 1 , Noor Farikhah Haneda 1 dan Laura Flowrensia 1
1 Departemen Silvikultur, Fakultas Kehutanan IPB

## ABSTRACT
Sengon (Paraserianthes  falcataria ( L ) Nielsen ) is  widely  planted  for  reforestation  programs,  especially  in establishment of community forest as its timber is utilized for constrction, package box, lighter as well as raw material of pulp and paper. However, there is main problem in sengon plantation, which is boktor (Xystrocera festiva Pascoe ) pest attact. In the midgut of boktor larvae it was detected trypsin and α-amylase enzymes activity. Whereas on sengon tree it was  reported  contains  inhibitory  substance  against  trypsin  and  α-amylase  enzymes  of  boktor  larvae.  The  inhibitory activity was assumed as defense mechanism of sengon tree against the pest attack. In order to clarify the assumption an investigation  on  the correlation  between  trypsin  and  α-amylase  inhibitor  of sengon  with  larval  growth  on  an  artificial diet  is  necessary.  The  experiments  aimed  at  obtaining  correlations  between  the  activities  of  trypsin  and  α-amylase inhibitors of sengon tree with the growth of boktor larvae, with small (±1,5 cm) and big sizes (±3 cm) on an artificial diet containing respective sengon tree materials.
Key words : Trypsin, alfa-amylase, inhibitor, artificial diet

## PENDAHULUAN
Tanaman  sengon  ( Paraserianthes  falcataria (L) Nielsen) merupakan jenis kayu  yang banyak  digunakan sebagai  bahan  baku  industri  pulp,  kertas  dan  kayu pertukangan,  serta  peti  kas.  Jenis  tanaman  ini  banyak dikembangkan  dalam  pembangunan  Hutan  Tanaman Industri (HTI) maupun Hutan Rakyat.
Salah  satu  masalah  terbesar  dalam  pengusahaan hutan sengon adalah adanya seragan boktor ( Xystrocera festiva Pascoe,  Cerambycidae,  Coleoptera).  Hama  ini menyerang  batang  sengon  sejak  tegakan  berumur  3-4 tahun. Larva boktor ( X. festiva ) yang baru menetas akan segera memakan kulit bagian dalam dan bagian luar dari kayu gubal.
Prasetya  (2007),  menyebutkan  bahwa  dalam pencernaan  boktor  terdapat  enzim trypsin dan α- amylase .  Selain  itu  dalam  pohon  sengon  juga  terdapat senyawa  yang  bersifat  inhibitor  terhadap  enzim trypsin dan α-amylase yang  terdapat  pada  penceranaan  boktor (Winarni 2003).
Dalam  upaya  pengembangan  sengon  resisten terhadap  boktor  perlu  dilakukan  penelitian  tentang hubungan trypsin inhibitor  dan α-amylase inhibitor sengon  terhadap  perkembangan  larva  boktor.  Pengaruh inhibitor  terhadap  kesukaan  larva  boktor  perlu  diuji langsung  terhadap  larva.  Pengujian  dilakukan  dengan artificial diet ,  karena  kesulitan melakukannya  langsung di  lapang  Informasi  ini  dapat  membantu  dalam mendapatkan  bibit  sengon  unggulan.  Diharapkan kandungan  inhibitor  tinggi  akan  berpengaruh  negatif
terhadap    perkembangan  hama  boktor.  Informasi  ini sangat berguna dalam kegiatan pemuliaan pohon sengon yang resisten terhadap serangan hama boktor.
Tujuan dari penelitian ini adalah : 1. Mengetahui  hubungan  aktivitas trypsin inhibitor sengon dengan berat, diameter kepala,  panjang dan konsumsi artificial  diet larva  boktor  ukuran  kecil dan besar.
2. Mengetahui hubungan aktivitas α-amylase inhibitor sengon dengan berat, diameter kepala,  panjang dan konsumsi artificial  diet larva  boktor  ukuran  kecil dan besar.

## BAHAN DAN METODE
Waktu  dan  Tempat. Penelitian Artificial  Diet dilaksanakan  di  laboratorium  Entomologi  Hutan, Departemen Silvikultur, Fakultas Kehutanan mulai  dari Agustus - Desember 2009.
Bahan  dan  Alat. Bahan  yang  digunakan  dalam pengamatan  a rtificial  diet yaitu  serbuk  kayu  sengon yang  terdiri  dari  provenan  Solomon  kondisi  sehat, provenan  Solomon  kondisi  sakit,  provenan  Kediri kondisi  sehat,  provenan  Kediri  kondisi  sakit  (masing- masing    telah  diproses freeze  dry ), yeast  extract , streptomycin , ascorbic  acid (vitamin  C),  natrium benzoat, agar, sukrosa, aquades, larva boktor berukuran kecil  (1-2,5  cm)  dan  larva  boktor  berukuran  besar (>2,5-5  cm).  Sedangkan  data  rekapitulasi  aktivitas enzim trypsin inhibitor  dan alfa-amylase inhibitor didapatkan  berupa  data  sekunder  dari  penelitian sebelumnya.

## JURNAL SILVIKULTUR TROPIKA
Vol. 03 No. 01 Agustus 2011, Hal. 101 – 108 ISSN: 2086-8227
Ulfah Juniarti Siregar et al.
102
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu timbangan digital, kompor listrik, kaliper digital, tabung reaksi, gelas ukur, refrigerato r, oven, sendok pengaduk, sudip,  cawan  petri,  toples,  pinset,  gunting,  kain  kasa, tissue, label, karet, piring, alat tulis dan kamera digital.

## Metode Penelitian
1.   Persiapan dan Pembuatan Artificial Diet
Persiapan penelitian meliputi :
1. Pengambilan  serbuk  kulit  dan  batang  sengon  yang telah diproses secara freeze dry.
2. Persiapan  bahan-bahan  kimia  penyusun artificial diet .
3. Persiapan alat-alat yang digunakan.
4. Pembuatan  desain  tabung  sebagai  tempat  ransum dengan  tabung  reaksi  yang  kemudian  ditutup  kain kasa
5. Pencarian larva X. festiva , dengan asumsi kumpulan larva berasal dari 1 induk.
Komposisi artificial  diet yaitu  bahan  I  yaitu  : aquades 50 ml, sukrosa 5 g, streptomycin 0,5 g, benzoat 0,5 g, yeast extract 0,75 g, ascorbic acid (vitamin C) 0,5 g serta serbuk sengon batang dan kulit masing masing 5 g.  Sementara  itu  bahan  II  adalah  aquades  50  ml  dan serbuk agar 1,75 g.
Pembuatan artificial diet meliputi :
1. Bahan I dibuat dengan cara memasukan aquades dan sukrosa  kedalam  gelas  kimia  lalu  diaduk  sampai larut.  Kemudian  masukan yeast  extract sambil diaduk  masukkan  lagi streptomycin , benzoat dan ascorbic  acid lalu  diaduk  sampai  larut  semuanya. Selanjutnya,  masukan  serbuk  batang  dan  kulit sengon sesuai  dengan provenan, bagian dan kondisi lalu diaduk lagi sampai tercampur semua.
2. Bahan  II  dibuat  dengan  cara  menuangkan  aquades ke dalam gelas kimia dan melarutkan serbuk agar ke dalamnya lalu diaduk dan dipanaskan di atas kompor listrik.
3. Setelah  kedua  bahan  siap,  larutan  agar  (bahan  II) dicampurkan  ke  dalam  campuran  serbuk  kulit  atau batang serta bahan kimia lainnya (bahan I).

## 2.  Percobaan dan Parameter Artificial Diet
Percobaan  dilakukan  dengan  memasukan  larva X. festiva satu  persatu  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah berisi  makanan  buatan  ( artificial  diet ),  kemudian ditutup  dengan  kain  kasa  lalu  diikat  dengan  karet gelang.  Tabung-tabung  percobaan  ini  disimpan  di  rak dengan suhu kamar dan memperoleh udara yang cukup. Parameter  yang  diamati  selama  penelitian  yaitu  berat larva,  diameter  kepala  larva,  panjang  larva  dan konsumsi  pakan  larva.  Pengukuran  dan  penggantian makanan  dilakukan  setiap  dua  minggu  sekali  selama  6 kali pengamatan.
Analisis  Data. Hubungan  dan  pengaruh  antara aktivitas trypsin inhibitor  dan alfa-amylase inhibitor dengan  berat,  diameter  kepala,  panjang  dan  konsumsi artificial  diet larva  boktor  pada  serbuk  kayu  sengon Solomon  kondisi  sehat  dan  sakit  serta  Kediri  kondisi sehat  dan  sakit  dianalisis  menggunakan  korelasi
Pearson.  Software  yang  digunakan  Microsoft  Excel 2007.
Sampel yang digunakan yaitu : BSH = Batang Solomon Sehat KSH = Kulit Solomon Sehat BSK = Batang Solomon Sakit KSK = Kulit Solomon Sakit
BKH = Batang Kediri Sehat  KKH = Kulit Kediri Sehat BKK = Batang Kediri Sakit  KKK = Kulit Kediri Sakit
Pada  penelitin artificial  diet setiap  sampel  pohon diulang  sebanyak  3  kali,  dan  untuk  penggunaan  larva boktor  dibagi  menjadi  dua  ukuran  yaitu  :  kecil  dan besar.
Analisis  korelasi  Pearson  digunakan  dengan hipotesis:
H 0 : r ≥ 0 (X dan Y tidak ada hubungan) H 1 : r < 0 (X dan Y ada hubungan)
Dimana :   X   =    TUI  (Trypsin  Unit  Inhibited)  dan AUI (Alfa amylase Unit Inhibited) Y   =   berat,  diameter  kepala, panjang, dan konsumsi pakan
Hasil penelitian ini, diharapkan setiap korelasi antara inhibitor  dengan  semua  parameter  perkembangan  larva pada artificial diet selalu negatif. Korelasi  Antara  Aktivitas Trypsin Inhibitor Dengan Perkembangan Larva Boktor  Ukuran Kecil Dalam Artificial Diet (Tabel 1).
Tabel 1.  Korelasi  TUI  dengan  parameter  perkem- bangan larva kecil dalam artificial diet
Bagian Kondisi TUI bs Berat TUI vs Dia TUI vs Panjang TUI vs Konsumsi Batang Sehat - + - + Sakit - - + + Kulit Sehat - + - - Sakit + + + -
Berdasarkan  Tabel  1  dilihat  dari  bagian  pohon, bagian  batang  dan  kulit  memiliki  jumlah  korelasi negatif  dan  positif  yang  sebanding/sama.  Jika  dilihat dari kondisi pohon, pada sengon kondisi sehat memiliki jumlah  korelasi  negatif  lebih  banyak  dibandingkan dengan kondisi sakit. Data ini membuktikan bahwa pada sengon  sehat,  bagian  batang  dan  kulit  sama-sama memiliki  TUI  yang  tinggi  yang  menyebabkan  larva boktor  kecil  tidak  menyukai  pohon  sengon  sehat tersebut.
Hubungan antara Trypsin Inhibitor dan Alfa-Amylasa Inhibitor 103
Gambar 1.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva kecil pada batang sehat.
Pada  batang  sengon  sehat  (Gambar  1)  terdapat  2 perbandingan  korelasi  yang  memperlihatkan  hubungan negatif,  yaitu  pada  korelasi  antara  TUI  dengan  berat  (- 0,150)  dan  TUI  dengan  panjang  (-0,219).  Sedangkan pada  2  parameter  perkembangan  larva  lainnya berkorelasi  positif,  yaitu  korelasi  pada  TUI  dengan diameter kepala dan TUI dengan konsumsi pakan larva. Walaupun  perbandingan  kedua  historgam  parameter sama,  namun  pada  parameter  yang  berkorelasi  negatif memiliki  nilai  yang  lebih  besar  sehingga  parameter  ini dapat dikatakan konsisten.
Gambar 2.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva kecil pada batang sakit.
Bagian batang sakit yang diperlihatkan pada Gambar 2,  juga  terjadi  hal  yang  sama  seperti  histogram  pada batang  sehat.  Namun  perbandingan  korelasi  negatifnya berlaku  pada  berat  larva  (-0,123)  dan  dengan  diameter kepala larva TUI (0,213) dan korelasi positifnya berlaku pada  parameter  panjang  (-0,023)  dan  konsumsi  pakan larva (0,218).
Gambar 3.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva kecil pada kulit sehat.
Pada  Gambar  3,  korelasi  TUI  dengan  3  parameter perkembangan  larva  (berat  sebesar  -0,127,  panjang sebesar  -0,201  dan  konsumsi  pakan  larva  sebesar -0,270)  menunjukkan  TUI  berkorelasi  negatif  pada perkembangan  larva  kecil.  Sedangkan  pada  parameter diameter  kepala  larva  histogramnya  menunjukkan korelasi  positif  sebesar  (0,257).  Korelasi  negatif  yang dimaksudkan adalah semakin tingginya aktivitas trypsin inhibitor  pada  kulit  sehat  akan  berbanding  terbalik dengan 3 parameter perkembangan larva.
Pada  Gambar  4  memiliki  bentuk  histrogram  yang sangat  berbeda  dari histogram  sebelumnya,  yaitu  ada  3 parameter  yang  memperlihatkan  korelasi  positif  dan  1 parameter berkorelasi negatif.
Gambar 4.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva kecil pada kulit sakit.
Korelasi  positif  diperlihatkan  pada  parameter  berat larva (0,632), diameter kepala larva (0,842) dan panjang larva  (0,517),  sedangkan  pada  konsumsi  pakan  larva nilai  korelasinya  negatif  sebesar  -0,438.  Histogram  ini membuktikan  tidak  ada  hubungan  yang  jelas  antara trypsin inhibitor  perkembangan  larva  kecil  pada  kulit sehat.
Dengan hasil  ini, kulit sengon sehat  dapat dijadikan indikator  tingginya  aktivitas trypsin inhibitor  pada pohon  sengon.  Aktivitas trypsin inhibitor  tertinggi adalah  kulit,  sementara  aktivitas trypsin inhibitor  pada bagian batang sangat rendah (Djati 2009).
Korelasi  Antara  Aktivitas Trypsin Inhibitor Dengan Perkembangan Larva Boktor Ukuran Besar Dalam Artificial  Diet. Korelasi  antara  TUI  dengan parameter  perkembangan  larva  besar  banyak  yang menunjukkan  nilai  negatif  pada  bagian  kulit  yaitu sebanyak  6  korelasi  sedangkan  pada  bagian  batang hanya memiliki 2 korelasi negatif.
Tabel   2.  Korelasi TUI dengan parameter perkembangan  larva  besar  dalam artificial diet Bagian Kondisi TUI vs Berat TUI vs Dia TUI vs Panjang TUI vs Konsumsi Batang Sehat + + - + Sakit + + - + Kulit Sehat + - - + Sakit - - - -
Ulfah Juniarti Siregar et al.
104
Hasil ini membuktikan bahwa pengukuran perkembagan  larva  besar  dengan  aktivitas trypsin inhibitor lebih signifikan pada bagian kulit. Tabel 2 juga menunjukkan  bahwa  pohon  sengon  sakit  lebih  banyak yang  berkorelasi  negatif  daripada  pohon  sehat.  Seperti yang  dikutip  dari  Djati  (2009),  kandungan trypsin inhibitor  yang  lebih  besar  pada  kulit  mengindikasikan bahwa  kulit  adalah  perlindungan  utama  pada  sengon dari  serangan  boktor.  Tingginya  aktivitas trypsin inhibitor pada kulit dikarenakan kulit banyak mengandung  sel-sel  hidup  yang  memiliki  mitokondria yang  mengandung  anti  protein  enzim trypsin yang bekerja pada pencernaan boktor.
Gambar 5.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva besar pada batang sehat.
Gambar  5  memperlihatkan  korelasi  antara  TUI dengan  parameter  perkembangan  larva  kecil  lebih banyak  berpengaruh/korelasi  positif,  baik  pada  berat berat  larva  sebesar  0,122,  diameter  kepala  larva  0,218 dan konsumsi pakan larva sebesar 0,256.
Gambar 6.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva besar pada batang sakit.
Sama halnya dengan batang sehat, yang memperlihatkan korelasi antara TUI dengan perkembagan larva  besar pada  batang sakit (Gambar 6) juga  banyak  yang  berkorelasi  positif.  Parameter  yang memperlihatkan korelasi negatif hanya  ditemukan pada panjang larva yaitu sebesar -0,009. Hal ini membuktikan  bahwa  aktivitas trypsin inhibitor  pada bagian    batang  tidak  memberikan  pengaruh  pada perkembangan larva besar. Hasil tersebut sesuai dengan Prasetya  (2007)  rendahnya  enzim trypsin pada  larva ukuran  besar  disebabkan  karena  dalam  masa  transisi antara  stadium  larva  dan  stadium  pupa  sehingga makanan yang dimakan sedikit.
Gambar 7.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva besar pada kulit sehat.
Pengamatan  pada  bagian  kulit  memiliki  lebih banyak  korelasi  negatif  antara  TUI  dengan  parameter perkembangan  larva  besar.  Pada  kulit  sehat  terdapat  2 pengamatan  yang  berkorelasi  negatif,  yaitu  diameter sebesar  -0,034  dan  panjang  sebesar  -0,106  seperti histogram pada Gambar 7.
Sedangkan Gambar 8 yang memperlihatkan korelasi pada bagian kulit sakit, keempat parameter perkembangan  larva  besar  bernilai  negatif,  yaitu  pada parameter  berat  larva  sebesar  -0,123,  diameter  kepala larva  sebesar  -0,266,  panjang  larva  sebesar  -0,168  dan konsumsi  pakan  larva  sebesar  -0,299.  Hasil  ini membuktikan  bahwa  pada  bagian  kulit  banyak mengandung trypsin inhibitor  yang  menyebabkan pengaruh negatif terhadap perkembangan larva seperti : menurunnya  berat,  ukuran  diameter  kepala,  panjang larva dan jumlah konsumsi larva tersebut.
Gambar 8.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas Trypsin inhibitor  dengan  parameter  perkembangan larva besar pada kulit sakit.
Parameter  yang  paling  konsisten  digunakan  dalam menguji  korelasi trypsin inhibitor  pada  larva  besar adalah  panjang  larva,  karena  baik  dari  batang  maupun kulit, panjang larva berkorelasi negatif.
Hubungan antara Trypsin Inhibitor dan Alfa-Amylasa Inhibitor 105
Korelasi  Antara  Aktivitas α-amylase Inhibitor Dengan Perkembangan Larva Boktor  Ukuran Kecil Dalam Artificial Diet (Tabel 3).
Tabel 3.  Tabel  korelasi  AUI  dengan  parameter perkembangan  larva  kecil  dalam artificial diet
Bagian Kondisi AUI bs Berat AUI vs Dia AUI vs Panjang AUI vs Konsumsi Btg Sehat - - - + Sakit - + - - Klt Sehat + - + + Sakit - - - +
Berdasarkan  Tabel  3  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor  dengan  perkembangan  larva  boktor kecil,  bagian  batang  lebih  banyak  memperlihatkan korelasi negatif dibandingkan dengan bagian kulit yaitu sebanyak 6 korelasi. Parameter yang kuat memperlihatkan  korelasi  ini  adalah  berat  larva  dan panjang,  yang  selalu  bernilai  negatif  pada  batang  sehat dan  batang  sakit.  Sedangkan  pada  bagian  kulit,  hanya pada  diameter  larva  yang  memperlihatkan  tingginya aktivitas α-amylase inhibitor  berpengaruh  buruk  pada perkembangan larva kecil.
Dilihat  dari  kondisi  pohon,  parameter  yang berkorelasi negatif terhadap α-amylase inhibitor paling banyak  ditemukan  pada  kondisi  sakit  yaitu  sebanyak  6 korelasi. Pada  sengon kondisi  sehat hanya  ditemukan 4 korelasi  negatif,  yang  berarti  aktivitas α-amylase inhibitor  tinggi  pada  pohon  sakit  kurang  disukai  larva kecil.
Gambar 9.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor dengan parameter perkembangan  larva  kecil  pada  batang sehat.
Pada  batang  sehat  (Gambar  9)  menunjukkan  3 parameter perkembangan larva  kecil berkorelasi negatif terhadap  AUI.  Parameter  tersebut  adalah  berat  larva  (- 0,184),  diameter  kepala  larva  (-0,075),  dan  panjang larva  (-0,287)  sedangkan  pada  konsumsi  larva berkorelasi  positif  sebesar  (0,096).  Histogram  ini membuktikan  menurunnya  perkembangan  larva  kecil pada  batang  sengon  sehat,  hal  ini  disebabkan  oleh tingginya kandungan α-amylase inhibitor pada batang.
Gambar 10.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor  dengan  parameter  per- kembangan larva kecil pada batang sakit.
Korelasi  antara  aktvitas α-amylase inhibitor  dengan perkembangan  larva  kecil  yang  ditampilkan    Gambar 10,  memperlihatkan  3  parameter  perkembangan  larva berkorelasi  negatif.  Bedasarkan  histogram  di  atas, semakin  tinggi  kandungan α-amylase inhibitor  pada batang  sakit  akan  mengurangi  berat  sebanyak  -0,043, panjang  sebanyak  -0,041  dan  jumlah  konsumsi  larva kecil sebanyak -0,065.
Gambar 11.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor  dengan  parameter  per- kembangan larva kecil pada kulit sehat.
Berbeda  dengan  bagian  batang,  pada  bagian  kulit (Gambar 11) umumya histogram menunjukkan hubungan  negatif  antara  AUI  dengan  perkembangan larva  kecil.  Pada  kulit  sehat  hanya  ditemukan  satu parameter  yang  berkorelasi  negatif  dengan  AUI,  yaitu diameter  kepala  larva  sebesar  -0,746.  Sedangkan parameter perkembangan larva kecil lainnya berkorelasi negatif.  Dari  data  ini,  kandungan α-amylase inhibitor pada  kulit  sehat  tidak  berpengaruh  pada  perkembangan larva kecil.
Gambar 12.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor  dengan  parameter  per- kembangan larva kecil pada kulit sakit.
Ulfah Juniarti Siregar et al.
Pada kulit sakit (Gambar 12) ditemukan 3 parameter yang  berkorelasi  negatif  terhadap  aktivitas α-amylase inhibitor  yaitu  berat  (-0,026),  diameter  kepala  (-0,326) dan  panjang  larva  (0,096).  Pada  larva  ukuran  kecil aktivitas enzim α-amylase relatif rendah, dalam kondisi tersebut  larva  sedang  tidak  banyak  memakan  atau mencerna  pati  yang  terdapat  pada  tanaman  sengon (Prasetya, 2007).
Rendahnya  rata-rata  memakan  dan  tidak  adanya kelaparan  dapat  menyebabkan  rendahnya  aktivitas enzim.  Pada  bagian  pohon,  yang  memberi  respon negatif paling banyak ditemukan pada bagian batang.
Korelasi  Antara  Aktivitas α-amylase Inhibitor Dengan Perkembangan Larva Boktor Ukuran Besar Dalam Artificial Diet (Tabel 4).
Tabel 4.  Tabel  korelasi  AUI  dengan  parameter perkembangan  larva  besar  dalam artificial diet Bagian Kondisi AUI vs Berat AUI vs Dia AUI vs Panjang AUI vs Konsumsi Batang Sehat + + + + Batang Sakit + - + + Kulit Sehat - - + + Kulit Sakit + + + +
Hubungan  perkembangan  larva  besar  dengan α- amylase inhibitor  pada  bagian  pohon  umumnya berkorelasi  positif  sebanyak  13  korelasi,  yang  dapat dilihat  pada  Tabel  4.  Pada  batang  dan  kulit  korelasi negatif  antara  AUI  dengan  perkembangan  larva  hanya ditemukan    pada  parameter  berat  dan  diameter  larva. Hal ini juga ditemukan pada kondisi pohon, pohon sehat maupun pohon sakit hubungan AUI dengan perkembangan  larva  besar  sama-sama  didominasi  oleh korelasi positif. Berdasarkan data ini dapat disimpulkan antara α-amylase inhibitor  dengan  perkembangan  larva besar  ditemukan  berkorelasi  negatif  hanya  pada  bagian kulit  dan  pada  kondisi  sehat.  Namun  karena  jumlah korelasi  lebih  sedikit  dibandingkan  dengan  korelasi positif,  maka  larva  besar  tidak  dapat  dijadikan  sebagai indikator  dalam  mengetahui  pengaruh α-amylase inhibitor terhadap perkembangan larva.
Berdasarkan  histogram  korelasi  pada  batang  sehat (Gambar  13),  keseluruhan  parameter  perkembangan larva  besar  berkorelasi  positif  yaitu  pada  berat  (0,036), diameter  kepala  (0,057),  panjang  (0,211)  dan  paling besar pada konsumsi oleh larva (0,493).
Gambar 13.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor dengan parameter perkembangan  larva  besar  pada  batang sehat.
Tingginya  kandungan α-amylase inhibitor  pada batang  sehat  akan  mendorong  perkembangan  larva boktor,  terutama  nafsu  makan  larva  tersebut  seperti yang  digambarkan  histogram  konsumsi  pada  Gambar 13.  Hal  ini  berlawanan  dengan  Prasetya  (2007)  pada larva  ukuran  kecil  aktivitas  enzim α-amylase relatif rendah,  dalam  kondisi  larva  sedang  tidak  banyak memakan  atau  mencerna  pati  yang  terdapat  pada tanaman sengon.
Gambar 14.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor dengan parameter perkembangan  larva  besar  pada  batang sakit.
Pada  batang  sakit  (Gambar  14),  korelasi  antara aktivitas α-amylase inhibitor dengan parameter perkembangan larva  besar umumnya  berkorelasi positif yang  dapat  dilihat  pada  perameter  berat,  panjang  dan konsumsi larva. Masing–masing korelasi postif parameter  perkembangan  larva  besar  tersebut  bernilai 0,261,  0,487  dan  0,247.  Sedangkan  pada  diameter kepala  larva  menunjukkan  korelasi  negatif  sebesar -0,285.
Gambar 15.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor dengan parameter perkembangan larva besar pada kulit sehat.
Hubungan antara Trypsin Inhibitor dan Alfa-Amylasa Inhibitor 107
Pada  kulit  sehat  (Gambar  15),  terdapat  2  korelasi negatif    antara  aktivitas α-amylase inhibitor  dengan parameter  perkembangan  larva  besar  yaitu  pada  berat dengan  nilai  -0,382  dan  diameter  kepala  -0,381. Walaupun jumlah korelasi positif dan negatif seimbang, jika  dilihat  dari  nilai  korelasinya,  kulit  sehat  dapat dijadikan  indikator  perkembangan  larva  besar.  Hal  ini berlawanan  dengan  hubungan  yang  terjadi  pada  kulit sakit.
Gambar 16.  Histogram  korelasi  antara  aktivitas α- amylase inhibitor dengan parameter perkembangan larva besar pada kulit sakit.
Keempat  parameter  perkembangan  larva  besar  pada kulit  sakit  (Gambar  16)  selalu  bernilai  positif,  yang berarti  kandungan α-amylase inhibitor  pada  kulit  sakit tidak mempengaruhi perkembangan dan konsumsi larva tersebut. Hal ini  dikarenakan larva  boktor ukuran besar banyak  mencerna  karbohidrat  dan  sedikit  mencerna protein  (Marta,  2005)  sedangkan  karbohidrat  banyak ditemukan pada batang pohon.
Rekapitulasi  Korelasi  antara  Aktivitas  Inhibitor dengan Arificial  Diet . Hasil  pengamatan menunjukkan bahwa  tidak  semua  korelasi  antara  aktivitas  inhibitor dengan  perkembangan  larva  mempunyai  nilai  negatif, baik untuk ukuran larva, bagian dan kondisi pohon. Hal ini  menyulitkan  dalam  menentukan  inhibitor  yang berpengaruh terhadap perkembangan hama boktor. Oleh karena  itu  hasil  korelasi  aktivitas trypsin inhibitor  dan α-amylase inhibitor  pada  perkembangan  larva  ukuran tertentu  perlu  direkapitulasi.  Hal  ini  bertujuan  agar mempermudah dalam analisis selanjutnya.
Gambar 17.  Rekapitulasi korelasi trypsin inhibitor pada perkembangan larva kecil.
Berdasarkan Gambar 17, untuk mengetahui aktivitas trypsin inhibitor  dengan  menggunakan  larva  kecil sebaiknya  diujikan pada bagian kulit sengon sehat. Hal ini  ditunjukkan  oleh  parameter  perkembangan  larva yang berkorelasi negatif dengan trypsin inhibitor paling banyak ditemukan pada bagian kulit sehat. Larva boktor
kecil mempunyai kandungan enzim trypsin yang tinggi. Enzim  ini  sangat  penting  untuk  mencerna  protein menjadi  bahan yang lebih sederhana  yang akan diserap oleh tubuh larva (Prasetya 2007).
Larva  yang  berukuran  kecil  merupakan  tahap  aktif dalam memakan kulit. Trypsin inhibitor adalah senyawa yang  mempunyai  kemampuan  untuk  menghambat aktivitas  enzim trypsin .  Sedangkan  aktivitas trypsin inhibitor tertinggi terdapat pada bagian kulit, sementara aktivitas trypsin inhibitor  pada  bagian  batang  sangat rendah (Djati 2009).
Gambar 18.  Rekapitulasi korelasi trypsin inhibitor pada perkembangan larva besar.
Gambar  18  menunjukkan  seluruh  parameter perkembangan larva berkorelasi negatif dengan aktivitas trypsin inhibitor pada  kulit  sengon  sakit.  Hal  ini  sesuai dengan  Djati  (2009),  yang  menyatakan  bahwa  kulit adalah  pelindung  utama  pohon  sengon  dari  serangan hama  boktor,  karena  mempunyai  kandungan  trypsin inhibitor yang lebih tinggi dibandingkan dengan batang.
Gambar 19.  Rekapitulasi  korelasi α-amylase inhibitor pada perkembangan larva kecil.
Pengamatan  aktivitas α-amylase inhibitor  pada perkembangan  larva  kecil  (Gambar  19),  memper- lihatkan  korelasi  negatif  yang  signifikan  adalah  bagian kulit  sehat.  Tetapi  korelasi  negatif  pada  kulit  sehat hanya  berlaku  pada  diameter  kepala  larva  kecil  jika dilihat pada keseluruhan parameter, perkembangan larva kecil juga dapat diamati pada batang sengon sehat.
Bagian  batang  mengandung  banyak  karbohidrat sehingga  larva  boktor mensintesa  enzim amylase untuk mencerna  karbohidrat  tersebut.  dengan  dihambatnya pemecahan pati oleh α-amylase inhibitor maka serangga tidak  mendapatkan  kebutuhan  karbohidratnya,  hal  ini
Ulfah Juniarti Siregar et al.
108
berakibat  fatal  bagi  serangga  tersebut  (Bahagiawati, 2005).  Semakin  tinggi  aktivitas α-amylase inhibitor menunjukkan  kulit  sehat  memiliki  kemampuan  untuk menghambat serangan hama boktor yang lebih besar.
Hubungan  aktivitas α-amylase inhibitor  terhadap perkembangan larva pada artificial diet yang menggunakan larva besar dapat dilihat pada Gambar 20. Korelasi negatif terjadi pada kondisi sehat.
Gambar 20.  Rekapitulasi  korelasi α-amylase inhibitor pada perkembangan larva besar.
Pada  pengamatan α-amylase inhibitor  tidak  dapat ditetapkan parameter yang signifikan untuk perkembangan  parameter  larva,  baik  ukuran  besar maupun  ukuran  kecil.  Larva  mempunyai  perilaku memakan  yang  berbeda  dan  juga  harus  melakukan proses  asimilasi,  pencernaan  dan  pergantian  kulit (Prasetya, 2007). α-amylase inhibitor akan menghambat proses  degradasi  pati  (karbohidrat)  dalam  pencernaan larva  boktor  sehingga  larva  besar  tidak  dapat mengubahnya menjadi energi.
Aktivitas  enzim α-amylase tertinggi  terdapat  pada larva  berukuran  3,5  cm.  Pada  saat  inilah  larva  sedang dalam kondisi banyak mencerna pati yang terdapat pada batang pohon sengon.  Namun aktivitas α-amylase akan mengalami penurunan pada panjang larva 4 cm hingga 5 cm,  karena  larva  tidak  melakukan  aktivitas  memakan kayu secara kontinyu (Prasetya, 2007).
Namun  hasil  pengamatan  ini  kurang  representatif, karena jika dilihat dari total korelasi keseluruhan hanya sedikit yang berkorelasi negatif.
Hasil  pengamatan  yang  tidak  reprisentatif  ini  juga disebabkan  oleh  berbagai  faktor,  diantaranya  :  ukuran boktor  yang  tidak  tepat,    jumlah  sampel  yang  tidak seimbang  dan  resep arificial  diet yang  belum  tepat. Menurut  Singh  (1977)  ada  empat  prinsip  yang  harus diperhatikan  untuk  mendapatkan artificial  diet yang sempurna,  yaitu  :  faktor  fisik  (tekstur,  kekerasan, kandungan  air  dan  ukuran  artificial  diet),  faktor  kimia (nutrisi  dan  kandungan  bahan  organik),  keseimbangan nutrisi  (peran  masing-masing  nutrisi  harus  ada)  dan tidak ada kontaminasi mikroba.
Keseluruhan  pengamatan  korelasi  pada  kedua ukuran larva, parameter panjang adalah parameter yang
paling konsisten dalam menguji  aktivitas inhibitor pada pohon sengon.

## KESIMPULAN
Kesimpulan yang dapat diperoleh dari penelitian ini adalah :
1. Pada  kondisi  pohon  sehat  mempunyai  aktivitas trypsin inhibitor tinggi sehingga tidak diminati larva boktor ukuran kecil dan berlaku hal yang sebaliknya pada kondisi pohon sakit.
2. Pada  kondisi  pohon  sehat  mempunyai  aktivitas α– amylase inhibitor  tinggi  sehingga  tidak  diminati larva  boktor  ukuran  besar  dan  berlaku  hal  yang sebaliknya pada kondisi pohon sakit.
3. Korelasi  negatif  antara  aktivitas trypsin inhibitor dengan  perkembangan  larva  boktor  lebih  baik diamati  dengan    menggunakan  larva  ukuran  kecil, sedangkan  aktivitas α–amylase inhibitor  lebih  baik diamati dengan menggunakan larva ukuran besar. 4. Panjang  larva  adalah  parameter  paling  konsisten diantara  empat  parameter  perkembangan  larva  pada artificial diet .

## DAFTAR PUSTAKA
Bahagiawati. 2005. Isolasi dan Purifikasi α-amilase dari Biji Kacang Phaseolus vulgaris.  Agrobiogen 1(1):7- 12. http://www.indobiogen.or.id/terbitan/ pdf/abgobiogen_1_1_2010_06-07. pdf [1 Juli 2010].
Djati  FDH.    2009.  Studi  trypsin  inhibitor  dan  alfa- amylase inhibitor pada pohon sengon ( Paraserianthes  falcataria (L)  Nielsen)  provenan Banjarnegara  dan Subang [skripsi]. Bogor:  Fakultas Kehutanan. Institut Pertanian Bogor.
Marta A.K. 2005. Pengaruh berbagai Jenis Serbuk Kayu Sengon  ( Paraserianthes  falcataria )  pada  makanan buatan  ( Artificial  diet )  terhadap  pertumbuhan  larva boktor ( Xystrocera festiva Pascoe ) [Skripsi]. Bogor
: Fakultas Kehutnan Institut Pertanian Bogor.
Prasetya  A.    2007.  Studi  tentang  enzim trypsin dan α- amylase pada  hama  boktor  ( Xystrocera  festiva Pascoe)  serta  inhibitor trypsin pada  pohon  sengon [skripsi].  Bogor:  Fakultas  Kehutanan.  Institut Pertanian Bogor.
Singh  P.  1977. Artificial  Diet  for  Insect,  Mites,  dan Spiders .  New York:Plenum dara Company.
Winarni I. 2003. Studi  keragaman trypsin inhibitor dan keragaman  genetik  isoenzim  pohon  plus  sengon ( Paraserianthes  falcataria (L.)  Nielsen)  pada  hutan rakyat  di  Jawa  Barat  (Tesis).  Bogor  :  Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
Hubungan antara Trypsin Inhibitor dan Alfa-Amylasa Inhibitor 109