KARAKTERISASI NANOKAPSUL EKSTRAK DAUN SERUNAI ( Chromolaena odorata L.) DENGAN VARIASI KITOSAN-ALGINAT MENGGUNAKAN METODE EMULSI-DIFUSI
Characterization of Nanocapsules of Serunai Leaf Extract (Chromolaena odorata L.) With Chitosan-Alginate Variations Using The Emulsion-Diffusion Method

## Roosma Hatmayana
1*
Noval 1 Dede Mardiyah 1
Rizki Adhie Ramadhani 1
Nurul Auliyani 1
*1 Pharmacy Department, Health Faculty, Sari Mulia University, Banjarmasin City, South Borneo 70238, Indonesia
*email: roosmayn@gmail.com

## Abstrak
Serunai ( Chromolaena odorata L.) merupakan tanaman yang telah banyak digunakan dalam  pengobatan  salah  satunya  sebagai  antidiabetes.  Namun  pengobatan menggunakan  ekstrak  tanaman  memiliki  kelemahan  terhadap  kerlarutan  zat  aktif dan  bioavailabilitasnya  di  dalam  tubuh.  Nanokapsul  merupakan  salah  satu  sistem pada  teknologi  partikel  yang  dapat  mengatasi  masalah  tersebut  dengan memanfaatkan  suatu  polimer  yang  akan  mengenkapsulasi  zat  aktif  dan melepaskannya  secara  perlahan  pada  target  yang  dituju.  Untuk  mencapai  hal tersebut  dalam  pembuatan  nanokapsul  harus  memenuhi  beberapa  persyaratan karakteristik  seperti  ukuran  partikel,  zeta  potensial,  efisiensi  penjerapan,  dan stabilitas  emulsi.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengidentifikasi  karakteristik nanokapsul  ekstrak  daun  Serunai  ( Chromolaena  odorata L.)  dengan  variasi  kitosan- alginat  dan  mengidentifikasi  pengaruh  variasi  kitosan-alginat  terhadap  hasil karakteristik  nanokapsul.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental laboratorium  dengan  rancangan onegroup  posttest  only .  Pembuatan  nanokapsul esktrak daun Serunai menggunakan metode emulsi-difusi yang kemudian dilakukan karakterisasi  meliputi  penetapan  ukuran  partikel,  penetapan  zeta  potensial,  uji efisiensi  penjerapan  (%EE),  dan  uji  stabilitas  emulsi.  Hasil  yang  diperoleh  dari penetapan ukuran partikel Formula I 196,4 nm, Formula II 264,2 nm, dan Formula III 207,4 nm, zeta potensial Formula I -36,1 mV, Formula II -40,1 mV, dan Formula
III  -36,5  mV,  nilai  %EE  Formula  I  99,7%,  Formula  II  99,8%,  dan  Formula  III 99,7%, serta  semua  formula  menunjukkan  tipe  emulsi  m/a.  Dari  ketiga  formula  telah memenuhi  persyaratan  karakteristik  nanokapsul  dan  formula  yang  paling  baik didapatkan  pada  Formula  II  dengan  konsentrasi  kitosan  0,3%  dan  alginat  0,6% sehingga variasi kitosan-alginat memiliki pengaruh terhadap hasil karakteristik. Kata Kunci : Ekstrak serunai Nanokapsul
Kitosan-alginat Emulsi-difusi

## Keywords :
Serunai leaf extract
Nanocapsules Chitosan-alginate
Emulsion-diffusion

## Abstract
Serunai (Chromolaena odorata L.) is a plant that has been widely used in medicine, one of which is as an antidiabetic. But treatment using plant extracts has its drawbacks to the solubility of the active substance and its bioavailability in the body. Nanocapsules are one of  the  systems  in  particle  technology  that  can  solve  this  problem  by  utilizing  a  polymer that will encapsulate the active substance and release it slowly at the intended target. To achieve  this  in  the  manufacture  of  nanocapsules  must  meet  several  characteristic requirements  such  as  particle  size,  potential  zeta,  absorption  efficiency,  and  emulsion stability. This study was conducted to identify the nanocapsules characteristics of Serunai leaf  extract  (Chromolaena  odorata  L.)  with  chitosan-alginate  variations  and  identify  the influence of chitosan-alginate variations on the characteristics of nanocapsules. This study is a laboratory experimental study with a onegroup posttest only design. The manufacture of  Serunai  leaf  extract  nanocapsules  using  the  emulsion-diffusion  method  which  is  then characterized  including  particle  size  determination,  potential  zeta  determination, absorption efficiency test (%EE), and emulsion stability test. The results obtained from the determination  of  the  particle  size  of  Formula  I  196.4  nm,  Formula  II  264.2  nm,  and Formula  III  207.4  nm,  potential  zeta  Formula  I  -36.1  mV,  Formula  II  -40.1  mV,  and Formula  III  -36.5 mV,  formula  I  %EE  values  99.7%,  Formula  II  99.8%,  and  Formula  III 99.7%, as well as all formulas indicating the emulsion type m/a. Three formulas have met the  requirements  of  nanocapsules  characteristics  and  the  formula  is  best  obtained  in Formula  II  with  a  chitosan  concentration  of  0.3%  and  alginate  0.6%  so  that  chitosan- alginate variations have an influence on the characteristic results.
©  year  The  Authors.  Published  by  Institute  for  Research  and  Community  Services  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya.  This  is  Open Access article under  the  CC-BY-SA  License (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/). DOI: https://doi.org/10.33084/jsm.vxix.xxx .

## PENDAHULUAN
Diabetes  Mellitus  (DM)  merupakan  suatu  gangguan yang  biasanya  ditandai  dengan  peningkatan  kadar  gula dalam  darah  sehingga  penyakit  ini  mempengaruhi sekitar  4%  populasi  di  seluruh  dunia  (Kavitha et  al ., 2017)  dan  6,9%  dari  total  penduduk  Indonesia. Penyakit  ini  juga  dilaporkan  menjadi  penyebab kematian  di  Indonesia  sebesar  6%  (KEMENKES  RI, 2016).  Hingga  saat  ini,  penatalaksanaan  penyakit  DM hanya  melakukan  perubahan  gaya  hidup  dan menggunakan  agen  hipoglikemik.  Namun,  penggunaan agen  hipoglikemik  sering  dikaitkan  dengan  timbulnya efek  samping  yang  berhubungan  dengan  sifat farmakokinetik,  hipoglikemia,  gangguan  pencernaan, adanya  reaksi  pada  kulit,  rasa  mual,  gangguan hematologis,  kenaikan  berat  badan,  dan  gangguan enzim pada hati (Kavitha et al ., 2017).
Efek samping yang ditimbulkan dapat menjadi penyebab penurunan kualitas hidup pasien. Sutama et al ., (2017) melaporkan  efek  yang  terjadi  saat  mengonsumi  obat antidiabetes  oral  antara  lain  rasa  mual  (18,25%)  pada metformin dan glimepirid (13,33%), serta hipoglikemia (15,79%)  pada  glibenklamid.  Kebanyakan  obat antidiabetes  oral  memiliki  kelarutan  yang  tinggi  dan waktu  paruh  yang  singkat  sehingga  pasien  harus mengonsumsi obat secara berulang. Hal ini juga  dapat mempengaruhi  kepatuhan  pasien  dalam  minum  obat antidiabetes  oral  (Cahyaningrum,  2019).  Oleh  sebab itu,  masyarakat  banyak  yang  kembali  memanfaatkan obat-obatan  herbal  yang  memiliki  efek  sebagai antidiabetes.
Serunai ( Chromolaena odorata L.) merupakan tumbuhan liar  yang  termausk  ke  dalam  keluarga Astereaceae . Banyak  penelitian  yang  melaporkan  bahwa  Serunai memiliki  beberapa  efek  farmakologis  seperti antiinflamasi,  analgesik,  antipiretik,  antioksidan, antimikobakteri,  penyembuhan  luka,  antibakteri,  dan fungisida. Terutama pada daun Serunai juga dilaporkan memiliki efek sebagai antidiabetes (Nurain, 2014).
Flavonoid  yang  terkandung  dalam  daun  Serunai memiliki  peran  mencegah  terjadinya  kerusakan  dan memperbaiki  sel β -pankreas,  menurunkan  peroksida lipid,  dan  meningkatkan  vaskularisasi  sehingga  dapat mencegah terjadinya kerusakan pada sel  serta mampu meningkatkan  regenerasi  sel.  Penelitian  sebelumnya melaporkan bahwa ekstrak etanol daun Serunai dengan dosis 5, 25, 125, 250/kgBB mampu menurunkan kadar gula  dalam  darah  mencit  (Marianne et  al .,  2014), memulihkan  tingkat  insulin  darah,  dan  meningkatkan fungsi  sel β -pankreas  (Yusuf et  al .,  2020).  Namun, penggunaan  tanaman  herbal  dalam  pengobatan memiliki  kelemahan  yakni  kelarutannya  yang  rendah dan  mudah  terdegradasi  di  saluran  cerna  sehingga mempengaruhi bioavailabilitas di dalam tubuh (Kavitha et al ., 2017).
Nanokapsul  merupakan  sistem  yang  mengenkapsulasi atau  melapisi  suatu  zat  dengan  menggunakan  suatu polimer  dan  dibuat  ke  dalam  ukuran  skala  nanometer (10-1000  nm)  (Armilawati et  al ,  2021).  nanokapsul dapat  meningkatkan  bioavailabilitas  dan  kelarutan  zat aktif,  melindungi  senyawa  dari  degradasi,  dan mengontrol  pelepasan  obat  (Giacomeli et  al .,  2019) serta mampu menjaga kestabilan zat aktif (Santos et al ., 2021).
Kitosan  dan  alginat  sering  digunakan  sebagai  polimer karena sifat keduanya yang biocompatible, biodegradable , dan non toksik. Penggabungan kitosan dan alginat akan membentuk  ikatan  silang  antara  keduanya  karena perbedaan  muatan  yang  dimiliki  (Amelia  &  Noval, 2021).  Alginat  memiliki  muatan  negatif  yang  berasal dari  gugus  karboksil  akan  berikatan  dengan  gugus amino  yang  bermuatan  negatif  pada  kitosan  (Natrajan et al ., 2015).
Pengembangan  sistem  penghantaran  obat  dengan membuat  nanokapsul  dan  karakteristik  nanokapsul ekstrak  daun  Serunai  dapat  menjadi  pertimbangan karena  banyaknya  khasiat  pada  tumbuhan  tersebut. Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka  peneliti  tertarik untuk  melakukan  penelitian  ini  dengan  tujuan
melakukan  karakterisasi  nanokapsul  ekstrak  daun Serunai  dengan  variasi  kitosan-alginat  menggunakan metode emulsi-difusi.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu  timbangan  analitik  (ACIS AD-300), rotary evaporator, magnetic stirer (MS-400), hotplate  stirer  (Thermo  scientific),  Particle  Size Analyzer  (Horiba  SZ-100),  Sentrifugator  (DLAB DM042S),  spektrofotometer  UV-Vis  (Spectroquant® Pharo  300),  sendok  tanduk,  gelas  ukur  (Iwaki  Pyrex), beaker glass (Iwaki Pyrex) kaca arloji, pipet volume. Bahan  yang  digunakan  yaitu  ekstrak  daun  Serunai ( Chromolaena  odorata L.),  etanol  96%,  kitosan  (Sigma Aldrich),  alginat  (Sigma  Aldrich),  tween  80,  sodium tripolofosfat,  asam  asetat  1%,  NaOH,  AlCl 3 10%, kalium asetat 1M.

## Metode Penelitian

## Pembuatan ekstrak daun Serunai
Daun  Serunai  diperoleh  dari  Wilayah  Sungai  Lulut, Banjarmasin,  Kalimantan  Selatan.  Pembuatan  ekstrak daun  Sernai  dilakukan  dengan  menggunakan  metode maserasi  dengan  menimbang  simplisia  daun  Serunai ( Chromolaena  odorata L.)  sebanyak  695  g  kemudian dimasukkan ke dalam wadah dan dimaserasi dengan 13 L  pelarut  etanol  96%  kemudian  ditutup  dan  dibiarkan selama  3-5  hari.  Setelah  itu,  saring  kemudian  diperas dan  dicuci  ampas  dengan  cairan  penyari  secukupnya lalu  dipindahkan  ke  dalam  bejana  tertutup  dan dibiarkan  selama  3  hari  (Hatmayana et  al ,  2021).
Kemudian  di  saring,  hasil  yang  diperoleh  dipekatkan dengan rotary  evaporator sampai  sebagian  besar pelarutnya  menguap  dan  dilanjutkan  dengan  proses penguapan di atas water bath hingga diperoleh ekstrak kental (Haryanti et al ., 2020).

## Pembuatan nanokapsul ekstrak daun Serunai
Pembuatan  nanokapsul  dilakukan  dengan  cara mencampurkan larutan kitosan (b/v) konsentrasi 0,6%, 0,3%, dan 0,3% dengan larutan alginat (b/v) konsentrasi
0,3%,  0,6%,  dan  0,3%  menggunakan  magnetic  stirer hingga homogen. Kemudian ditambahkan 4 ml sodium tripolifosfat  (STPP)  4%  (v/v)  dengan  memantau  pH campuran  tetap  berada  pada  pH  5,5.  Kemudian ditambahkan  aquadest  ad  100  ml  sebagai  fase  air. Sebanyak  1,3  g  esktrak  daun  Serunai  ditimbang  dan dilarutkan  ke  dalam  7,15  ml  etanol  96%  kemudian ditambahkan tween 80 3% sebanyak 10 ml sebagai fase organik.  Selanjutnya  ditambahkan  fase  air  tetes  demi tetes  ke  dalam  fase  organik  dan  dilakukan pencampuran  menggunakan  magnetic  stirer  dengan kecepatan  1000  rpm  selama  2  jam.  Fase  dilusi (aquadest ad 500 ml) dimasukkan tetes demi tetes ke dalam  campuran  fase  organik  dan  fase  air  dengan kecepatan 1000 rpm selama 2 jam.
Karakterisasi nanokapsul ekstrak daun serunai
1. Penetapan  ukuran  partikel  dan  distribusi  ukuran partikel
Penetapan  ukuran  partikel  dilakukan  dengan menggunakan  alat Particle  Size  Analyzer (Horriba SZ-100) dengan persyaratan ukuran partikel berada pada rentang 100-500 nm.
2. Penetapan zeta potensial Zeta  potensial  adalah  ukuran  muatan  permukaan partikel yang diukur menggunakan  alat Particle Size Analyzer (Horriba  SZ-100).  Zeta  potensial menggambarkan  stabilitas  nanokapsul  karena perbedaan muatan antar partikel akan mempengaruhi  gaya  tolak  menolak.  Nanokapsul dikatakan stabil apabila memiliki zeta potensial lebih dari ±25 mV.
3. Uji Efisiensi penjerapan
Nanokapsul  yang  terbentuk  dilakukan  sentrifugasi selama  30  menit  dengan  kecepatan  1200  rpm. Supernatan diambil dan diuji dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang 431 nm.
%EE = 𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑎𝑤𝑎𝑙−𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑠𝑢𝑝𝑒𝑟𝑛𝑎𝑡𝑎𝑛 𝑘𝑜𝑛𝑠𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑠𝑖 𝑎𝑤𝑎𝑙 x 100%
4. Uji Sentrifugasi
Uji  sentrifugasi  dilakukan  dengan  memasukkan emulsi  ke  dalam  sentrifugator  dan  dilakukan pemutaran dengan kecepatan 3800 rpm selama 30 menit.  Hasil  sentrifugasi  dilakukan  pengamatan organoleptis  dan  uji  warna  menggunakan methylen blue .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan  nanokapsul  ekstrak  daun  Serunai (Chromolaena  odorata  L.)  dilakukan  dengan menggunakan 2 jenis polimer yaitu kitosan dan alginat yang  dicampurkan  dengan  variasi  konsentrasi  masing- masing  polimer  berbeda  pada  tiap  formula.  Variasi konsentrasi  yang  digunakan  pada  masing-masing formula  yaitu  konsentrasi  kitosan  0,6%  dan  alginat 0,3%  pada  formulasi  I,  kitosan  0,3%  dan  alginat  0,6% pada  formulasi  II,  dan  pada  formulasi  III  menggunakan kitosan 0,3% dan alginat 0,3%.
Kitosan-alginat  digunakan  sebagai  polimer  karena kitosan-alginat  merupakan  jenis  polimer  yang memenuhi syarat dalam pembuatan nanokapsul. Syarat yang  dimaksud  yaitu  polimer  bersifat  biodegradable, biocompatible,  dan  non  toksik  (Harliantika,  2020). Penggunaan polimer kitosan-alginat yang dikombinasikan  bertujuan  untuk  melengkapi  sifat  yang dimiliki masing-masing polimer di mana gugus karboksil yang  bermuatan  negatif  pada  alginat  dapat  berikatan dengan  gugus  amin  yang  bersifat  positif  pada  kitosan sehingga  membentuk  nanomaterial  yang  lebih  stabil (Noval  &  Harliantika,  2021).  Selain  itu,  penggunaan kitosan  dan  alginat  sebagai  polimer  pada  nanokapsul mampu bekerja secara maksimal dalam melindungi zat aktif  dari  oksidasi,  degradasi  enzimatik,  dan  hidrolisis sehingga memungkinkan pengiriman zat aktif aman dan efektif menuju organ yang diinginkan (Loquercio et al., 2015).  Namun,  karena  kitosan  dan  alginat  sulit bercampur  maka  ditambahkan  tween  80  sebagai emulsifier untuk  menyatukan  kitosan  dan  alginat (Trisnawati & Cahyaningrum, 2014).  Setelah dilakukan pencampuran antara kitosan-alginat kemudian
ditambahkan sebanyak 4% natrium tripolifosfat sebagai agen penaut silang yang dapat berinteraksi secara ionik pada  polimer  yang  digunakan  sehingga  dapat memperkuat  ikatan  polimer  saat  proses  enkapsulasi dan  menstabilkan  nanokapsul  esktrak  daun  Serunai (Chromolaena odorata L.) (Putri et al., 2019).
1. Penetapan  ukuran  partikel  dan  distribusi  ukuran partikel
Tabel I. Penetapan ukuran partikel Replikasi Formula I Formula II Formula III 1 196,4 nm 264,2 nm 208,3 nm 2 190,8 nm 253,6 nm 207,5 nm 3 201,9 nm 274,8 nm 206,5 nm Rata-rata 196,4 nm  264,2 nm 207,4 nm
Penetapan  ukuran  partikel  dan  distribusi  ukuran partikel  merupakan  uji  yang  sangat  penting  dalam karakterisasi  nanokapsul  ekstrak  daun  Serunai (Chromolaena  odorata  L.)  karena  hal  tersebut  juga menentukan  kemampuannya  menembus  ruang-ruang antar  sel,  distribusi  secara  in  vivo,  bioavailabilitas, toksisitas, dan pelepasan dosis pada target yang dituju. Penetapan  ukuran  partikel  juga  dapat  mempengaruhi degradasi  polimer  yang  digunakan  (Kothamasu  et  al., 2012).
Hasil  yang  diperoleh  dari  penetapan  ukuran  partikel antara  lain  formulasi  I  sebesar  196,4  nm,  formulasi  II sebesar 264,2 nm, dan formulasi III sebesar 207,4 nm. Hal tersebut menunjukkan bahwa ukuran partikel dari ketiga  formula  memenuhi  rentang  ukuran  partikel nanokapsul yaitu 100-500 nm. Namun pada formulasi I dengan  konsentrasi  kitosan  sebesar  0,6%  dan  alginat sebesar 0,3% menunjukkan ukuran partikel yang paling kecil  dibandingkan  formula  II  dan  III.  Ukuran  partikel yang  terbentuk  pada  formula  II  dengan  konsentrasi kitosan 0,3%  dan  alginat 0,6% menunjukkan hasil  yang paling  besar  namun  juga  merupakan  hasil  yang  paling baik dari ketiga formula. Hal ini disebabkan karena hasil yang  didapatkan  dari  pengujian  indeks  polidispersitas
juga  menunjukkan  bahwa  formula  II  adalah  formula yang  paling  baik  karena  selain  ukuran  yang  memenuhi rentang,  distribusi  ukuran  partikel  yang  dimiliki  pun homogen. Hasil tersebut juga didukung oleh penelitian yang  dilakukan  Sorasitthiyanukarn  (2018)  dengan ukuran  nanopartikel  kitosan-alginat  sebesar  212-552 nm  dan  penelitiannya  yang  lain  pada  tahun  2022 melaporkan  ukuran  nanopartikel  kitosan-alginat sebesar 264 nm. Hasil yang berbeda pada tiap formula disebabkan  variasi  konsentrasi  polimer  kitosan-alginat yang digunakan pada masing-masing formula.
Tabel II. Nilai indeks polidispersitas (PI) Formulasi Nilai PI F1 0,65 F2 0,39 F3 0,49
Selain  ukuran  partikel,  nilai  indeks  polidispersitas  (PI) merupakan  parameter  yang  menyatakan  distribusi ukuran partikel pada nanokapsul selama 55 isolasi atau pada  proses  analisis.  Nilai  PI  berada  pada  rentang  0 hingga  1.  Nilai  PDI  yang  mendekati  nol  menunjukkan distribusi  ukuran  partikel  nanokapsul  yang  seragam sedangkan  nilai  PDI  yang  melebihi  0,5  menunjukkan distribusi  ukuran  partikel  nanokapsul  yang  tidak seragam  atau  memiliki  heterogenitas  yang  tinggi (Taurina et al., 2017).
Pada  formula  I,  II,  dan  III  menunjukkan  nilai  PI berturut-turut  sebesar  0,65;  0,39;  dan  0,49.  Nilai  PI pada  formula  I  melebihi  0,5  sehingga  menunjukkan distribusi  ukuran  partikel  yang  heterogen  sehingga memiliki  kecenderungan  tidak  stabil  secara  fisik  dan dapat menjadi penyebab terjadinya agregasi (Taurina et al., 2017). Meskipun dari hasil ukuran partikel formula I memiliki  ukuran  yang  paling  kecil  dibanding  formula  II dan III, namun jika nilai PI tidak memenuhi persyaratan maka  distribusi  ukuran  partikel  pada  formula  I  tidak terdistribusi  merata  atau  tidak  homogen.  Sedangkan formula  II  dan  III  telah  memenuhi  persyaratan,  baik berdasarkan  ukuran  partikel  yang  masuk  ke  dalam
rentang  nanometer  maupun  nilai  PI  yang  dihasilkan yaitu  kurang  dari  0,5.  Sehingga  dari  ketiga  formula tersebut,  yang  memiliki  keseragaman  atau  distribusi ukuran partikel yang paling baik terdapat pada formula II  karena  nilai  PI  yang  dihasilkan  sebesar  0,39  atau mendekati nol (Rahmawanty, 2014).
Pengaruh  variasi  konsentrasi  terhadap  ukuran  partikel nanokapsul  dapat  diketahui  dengan  melakukan  analisis statistik  menggunakan  one  way  anova.  Dari  hasil  uji normalitas  didapatkan  hasil  >0,05  pada  ketiga formulasi,  hal  ini  56  menunjukkan  data  penetapan ukuran  partikel  terdistribusi  normal.  Kemudian dilanjutkan uji homogenitas dan didapatkan hasil >0,05, hal ini menunjukkan bahwa data homogen. Selanjutnya dilakukan  uji  one  way  anova  dan  memperoleh  nilai signifikansi
2. Penetapan zeta potensial
Tabel III . Penetapan zeta potensial Replikasi  Formula I Formula II Formula III 1 -37,5 mV -39,6 mV -36,5 mV 2 -36,4 mV -40,5 mV -36,7 mV 3 -34,3 mV -40,2 mV -36,3 mV Rata-rata  -36,1 mV -40,1 mV -36,5 mV
Penetapan zeta potensial dilakukan untuk menggambarkan  stabilitas  nanokapsul  karena  adanya perbedaan  muatan  antar  partikel  dan  akan mempengaruhi  gaya  tolak-menolak  antar  partikel (Napsah,  2014).  Pada  umumnya  suatu  partikel berukuran  nano  yang  memiliki  nilai  lebih  besar  dari +25  mV  atau  kurang  dari  -25  mV  memiliki  derajat stabilitas  yang  tinggi  (Ronson,  2012).  Hasil  penetapan zeta potensial yang diperoleh pada Formulasi I sebesar -36,1  mV,  Formulasi  II  sebesar  -40,1  mV,  dan Formulasi III sebesar -36,5 mV.
Dari  hasil  penetapan  zeta  potensial  ketiga  formula menunjukkan bahwa nilai zeta potensial yang dihasilkan kurang  dari  -25  mV.  Sehingga  berdasarkan  tabel stabilitas  nilai  zeta  potensial  formula  I  dengan
konsentrasi kitosan 0,6% - alginat 0,3% dan formula III dengan  konsentrasi  kitosan-alginat  sama  yaitu  0,3% menunjukkan  tingkat  stabilitas  moderat,  sedangkan formula  II  menunjukkan  tingkat  stabilitas  yang  baik (Honary  &  Zahir,  2016).  Maka  hal  tersebut  berarti nanokapsul  esktrak  daun  Serunai  (Chromolaena odorata  L.)  dengan  konsentrasi  kitosan  0,3%  dan alginat  0,6%  memiliki  stabilitas  yang  tinggi  karena memiliki  nilai  zeta  potensial  -40,1  mV.  Nilai  yang negatif  dari  zeta  potensial  disebabkan  karena  alginat dan  natrium  tripolifosfat  yang  digunakan  memiliki muatan negatif.
Hasil  uji  normalitas  penetapan  zeta  potensial menunjukkan nilai signifikan >0,05, hal ini menunjukkan bahwa  data  terdistribusi  secara  normal.  Kemudian dilanjutkan  dengan  uji  homogenitas,  hasil  yang diperoleh  mendapatkan  nilai  signifikan  >0,05,  hal  ini menunjukkan  bahwa  data  homogen.  Selanjutnya dilakukan analisis statitik menggunakan one way anova dan menghasilkan nilai signifikan 0,004 (<0,05) di mana hal  ini  menunjukkan  adanya  perbedaan  signifikan bermakna  dari  hasil  penetapan  zeta  potensial  tiap formulasi. Berdasarkan data tersebut dapat disimpulkan bahwa variasi konsentrasi polimer kitosan- alginat  memiliki  pengaruh  pada  hasil  penetapan  zeta potensial yang diperoleh.
3. Uji efisiensi penjerapan (%EE)
Tabel IV. Nilai %EE Formulasi Konsentrasi (ppm) I 3,18 ppm II 1,78 ppm III 3,45 ppm
Uji  efisiensi  penjerapan  dilakukan  dengan  mengukur supernatan  ekstrak  daun  Serunai  (Chromolaena odorata  L.)  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis dengan  mencari  panjang  gelombang  maksimum  dari kurva  baku  pada  rentang  400-800  nm,  kemudian didapatkan  hasil  panjang  gelombang  sebesar  431  nm. Uji  efisiensi  penjerapan  ini  dilakukan  bertujuan  untuk
mengetahui gambaran tentang zat aktif (flavonoid) yang berhasil terjerap ke dalam nanokapsul.
Berdasarkan hasil uji efisiensi penjerapan menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  pada  ketiga  formula  yaitu pada  formula  I  sebesar  99,7%,  formula  II  sebesar 99,8%,  dan  formula  III  sebesar  99,7%.  Dari  hasil tersebut menunjukkan bahwa nilai efisiensi penjerapan yang  paling  besar  adalah  pada  formula  II  dengan konsentrasi  kitosan  0,3%  dan  alginat  0,6%.  Menurut Mardiyanto (2015), semakin besar konsentrasi zat aktif yang dijerap maka semakin baik kitosan-alginat sebagai polimer  dalam  mengenkapsulasi  zat  aktif  sehingga dengan  pernyataan  tersebut  kitosan  0,3%  dan  alginat 0,6% berarti mampu menjaga dan melepaskan zat aktif secara  terkontrol  hingga  menuju  target  organ  yang diinginkan (Mardiyanto, 2015).
4. Uji sentrifugasi dan uji tipe emulsi
Tabel V . Pengamatan organoleptis
Formulasi Warna Bau I Hijau bening Bau samar khas ekstrak daun serunai II Hijau bening Bau samar khas ekstrak daun serunai III Hijau bening Bau samar khas ekstrak daun serunai
Uji sentrifugasi didapatkan hasil bahwa sampel akhirnya memisah.  Namun  memisah  yang  dimaksud  bukan pemisahan menjadi 2 fase (air dan minyak),  melainkan pemisahan cairan atas dan bawah yang memiliki warna berbeda,  di  mana  cairan  atas  berwarna  lebih jernih/bening  dibandingkan  dengan  cairan  bawah  (Jafar et al ., 2015).
Tabel VI. Uji tipe emulsi ekstrak daun Serunai
Formulasi Tipe emulsi I M/A
II M/A III M/A
Selain  itu,  untuk  mengetahui  stabilitas  emulsi  juga dilakukan  uji  tipe  emulsi.  Pengujian  tipe  emulsi  yang dilakukan  adalah  dengan  menggunakan  metode  zat warna  methylen  blue  pada  permukaan  emulsi  seperti yang  ditunjukkan  pada  gambar  4.2.10.  Apabila  zat warna  terlarut  dan  berdifusi  homogen  maka  tipe emulsi  yang  dihasilkan  adalam  M/A.  Hasil  yang diperoleh pada Formulasi I, II, dan III adalah zat warna terlarut  dan  berdifusi  homogen,  hal  tersebut menunjukkan bahwa tipe emulsi pada ketiga formulasi adalah tipe emulsi M/A (Yuliyanto et al .,  2019).
Berdasarkan  hasil  keempat  uji  di  atas  maka  diperoleh formula  yang  paling  baik  yaitu  formula  II  jika dibandingkan  dengan  formula  I  dan  III.  Hal  ini dikarenakan  hasil  data  dari  formula  II  menunjukkan hasil  yang  stabil  dan  memenuhi  syarat  masing-masing uji,  baik  dari  hasil  penetapan  ukuran  dan  distribusi ukuran  partikel,  penetapan  nilai  zeta  potensial,  uji efisiensi penjerapan, dan uji stabilitas emulsi.

## KESIMPULAN
Pada  penelitian  ini  juga  memperoleh  formula  yang paling  baik  dalam  menghasilkan  karakteristik nanokapsul  esktrak  daun  Serunai  (Chromolaena odorata  L.)  yaitu  formula  II  dengan  konsentrasi polimer kitosan 0,3% dan konsentrasi alginat 0,6%. Hal itu  ditunjukkan  pada  hasil  penetapan  ukuran  partikel dan  distribusi  ukuran  partikel,  penetapan  nilai  zeta potensial,  uji  efisiensi  penjerapan,  dan  uji  stabilitas emulsi.  Dari  hasil  tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa variasi  konsentrasi  polimer  kitosan-alginat  dengan metode emulsi-difusi dapat mempengaruhi karakteristik nanokapsul yang dihasilkan.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  Direktorat Jendral  Pembelajaran  dan  Kemahasiswaan  (DItjen
Belmawa)  Kementerian  Pendidikan  dan  Kebudayaan, Kementrian  Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan  Tinggi (Kemenristekdikti)  karena  telah  mendanai  Program Kreativitas Mahasiswa 2022.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Kavitha,  K.,  Sujatha,  K.,  &  Manoharan,  S.  (2017). Development,  Characterization  and  Antidiabetic Potentials  of  Nilgirianthusciliatus  Nees  Derived Nanoparticles.  Journal  of  Nanomedicine  & Biotherapeutic Discovery, 07(02). https://doi.org/10.4172/2155-983x.1000152
2. KEMENKES  RI.  2016.  Prevalensi  Diabetes.  In Pencegahan  dan  Pengendalian  Penyakit  Tidak Menular (Vol. 161, Issue 5).
3. Cahyaningrum,  S.  E.  (2019).  Metformine Encapsulated. 1(Snk), 82–84.
4. Nurain, O. I. (2014). Medico-botanical investigation of siam weed (chromolaena odorata) used  among  the  “Ijebu”  people  of  Ogun  state, Nigeria.  International  Research  Journal  of Medicine and Medical Sciences, 5(1). https://doi.org/10.14303/JMMS.2013.128
5. Yusuf,  H.,  Yusni,  Y.,  Meutia,  F.,  &  Fahriani,  M. (2020). Pharmacological Evaluation of Antidiabetic Activity  of  Chromolaena  Odorata  Leaves  Extract in  Streptozotocin-Induced  Rats.  Systematic Reviews  in Pharmacy,  11(10),  772–778. https://doi.org/10.31838/srp.2020.10.115
6. Armilawati,  K.  F.,  Noval,  N.,  &  Zulfadhilah,  M. (2021, October). THE EFFECT OF VARIATIONS
IN THE CONCENTRATION OF THE TRIETHANOLAMINE AND STEARIC ACID ON THE PHYSICAL STABILITY OF THE NANOPARTICLE  CREAM  OF  KAPUL  SEED EXTRACT (Baccaurea macrocarpa). In International  Conference  on  Health  and Science (Vol. 1, No. 1, pp. 511-523).
7. Giacomeli,  R.,  Izoton,  J.  C.,  dos  Santos,  R.  B., Boeira,  S.  P.,  Jesse,  C.  R.,  &  Haas,  S.  E.  (2019). Neuroprotective  effects  of  curcumin  lipid-core nanocapsules  in  a  model  Alzheimer’s  disease induced by β -amyloid 1-42 peptide in aged female mice.
Brain Research, 1721, 146325. https://doi.org/10.1016/J.BRAINRES.2019.146325
8. Santos, R. B. dos, Nakama, K. A., Pacheco, C. O., de Gomes, M. G., de Souza, J. F., de Souza Pinto, A. C., de Oliveira, F. A., da Fonseca, A. L., Varotti, F., Fajardo, A. R., & Haas, S. E. (2021). Curcumin- loaded  nanocapsules:  Influence  of  surface
characteristics  on  technological  parameters  and potential  antimalarial  activity.  Materials  Science and  Engineering  C,  118(April  2020),  111356. https://doi.org/10.1016/j.msec.2020.111356
9. Amelia, N. A., & Noval, N. (2021, October). THE EFFECT  OF  VARIATIONS  IN  CARBOPOL  940
CONCENTRATION  ON  THE  STABILITY  OF

## THE FORMULATION OF SPRAY GEL
NANOPARTICLES  OF  BUNDUNG  PLANT EXTRACT (Actinoscirpus grossus). In International Conference on Health and Science (Vol. 1, No. 1, pp. 573-584).
10. Natrajan,  D.,  Srinivasan,  S.,  Sundar,  K.,  & Ravindran, A. (2015). Formulation of essential oil- loaded  chitosan-alginate  nanocapsules.  Journal  of Food  and  Drug  Analysis,  23(3),  560–568. https://doi.org/10.1016/j.jfda.2015.01.001
11. Haryanti,  S.,  Larasati,  R.D.,  Agusta,  H.  2020. Optimasi Waktu Maserasi dan konsentrasi ekstrak daun sirih hijau (piper betle linn) dalam pembuatan gel  antiseptik  kulit.  Jurnal  konversi.  Jakarta: universitas muhammadiyah jakarta.Volume 9 (2)
12. Harliantika,  Y.  (2020).  Formulasi  dan  evaluasi hidrogel
ekstrak etanol daun
gaharu (aquilariamalacensis  lamk.)  Dengan  kombinasi basis karbopol 940 dan hpmc k4m.
13. Noval,  N.,  &  Harliantika,  Y.  (2021).  Formulation and  Evaluation  Hydrogel  of  Agarwood  Leaf (Aquilaria malacensis Lamk.)  Extract Ethanol with Combination  Carbopol  940  and  HPMC K4M. Journal  of  Pharmaceutical  Care  Anwar  Medika (J-PhAM) , 3 (2), 55-70.
14. Loquercio,  A.,  Elena,  M.,  Gomes,  C.L.,  Moreira, R.G.  2015.  Preparation  of  Chitosan-Alginate
Nanoparticles for
Trans-cinnamaldehyde Entrapment.  A  Publication  of  The  Institute  of Food Technologies.
15. Trisnawati,  A.R.,  Cahyaningrum,  S.E.  2014. Enkapsulasi  Pirazinamid  Menggunakan  Alginat- Kitosan  Dengan  Variasi  Konsentrasi  Penambahan Surfaktan  Tween  80.  UNESA  Journal  of Chemistry. Vol.3., No.3
16. Putri,  D.  A.,  &  Fatmawati,  S.  (2019).  A  New Flavanone  as  a  Potent  Antioxidant  Isolated  from Chromolaena  odorata  L  .  Leaves.  Hindawi, 2019(2017). https://doi.org/10.1155/2019/1453612
17. Kothamasu,  P.,  Kanumur,  H.,  Ravur,  N.,  Maddu, C.,  Parasuramrajam,  R.,  Thangavel,  S.  2012. Nanocapsules:  The  Weapons  For  Novel  Drug
Delivery Systems. BioImpacts 2:71-81. Doi:10.5681/bi.2012.011
18. Sorasitthiyanukarn,  F.N.;  Muangnoi,  C.;  Bhuket, P.R.N.; Rojsitthisak, P.; Rojsitthisak, P. Chitosan/alginate  nanoparticles  as  a  promising approach  for  oral  delivery  of  curcumin  diglutaric acid  for  cancer  treatment.  Mater.  Sci.  Eng.  C 2018, 93, 178–190.
19. Taurina, W., Sari, R., Hafinur, U.C., Isnindar, S.W. 2017. Optimasi Kecepatan Dan Lama Pengadukan Terhadap  Ukuran  Nanopartikel  Kitosan-Ekstrak Etanol 70% Kulit Jeruk Siam (Citrus nobilis L. var Microcarpa).  Traditional  Medicine  Journal,  22(1), 16-20
20. Rahmawanty,  D.,  Effionora,  A.,  Anton,  B.  2014. Formulasi Gel Menggunakan Ikan Haruan (Channa striatus) Sebagai Penyembuh Luka. Media Farmasi. 11(1): 29-40.
21. Napsah,  R.,  Wahyuningsih,  I.  2014.  Preparasi nanopartikel  kitosan-tpp/ekstrak  etanol  daging buah  mahkota  dewa  (Phaleriamacrocarpa  (Scheff) Boerl) Dengan Metode Gelasi Ionik. Vol 11, No.1
DOI: https://doi.org/10.24071/jpsc.0079
22. Ronson.  2012.  Zeta  Potensial  Analysis  of Nanoparticles. San Diego: Nano Composix.
23. Honary, s., Zahir, F. 2013. Effect Of Zeta Potential On  The  Properties  Of  Nano-Drug  Delivery Systems  –  A  Review.  Tropical  Journal  of Pharmaceutical Research. 12 (2); 265-273
24. Mardiyanto,  M.,  Sholihah,  I.  Jaya,  T.  2020.  The Chitosan-Sodium  Alginate  Submicro  Particle Loading  Herbal  of  Ethanolic  Extract  of  Leaves Senna Alata. L for Curing of Bacterial Infection on Skin
25. Jafar,  G.,  Darijanto,  S.T.,  Mauludin,  R.  2015. Formulasi  Solid  Lipid  Nanoparticle  Ceramide. Jurnal Pharmascience, Vol. 2 (2); 80-87
26. Yulianto, A.N., Nugroho, I.D.W., Swandari, M.T.K. 2019.  Formulasi  Emulsi  Minyak  Ikan  Gurami ( Osphronemus  gourami L.)  Sebagai  Suplemen Makanan.  Jurnal  Pharmaqueous.  Cilacap:  STIKES Al-Irsyad Al-Islamiyyah