## KOMPONEN BIOAKTIF DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KERANG BALELO ( Conomurex sp.)
Nurhikma 1 , Mirsa 1 , Diah Anggraini Wulandari 2 * 1 Departemen Teknologi Hasil Perairan, Universitas Borneo Tarakan, Kalimantan Utara 2 Pusat Penelitian Bioteknologi – LIPI, Cibinong, Jawa Barat Diterima: 28 Agustus 2020/Disetujui: 28 Desember 2020 *Korespondensi: diahanggrainiw@gmail.com
Cara sitasi : Nurhikma, Mirsa, Wulandari DA. 2021. Komponen bioaktif dan aktivitas antioksidan kerang balelo  ( Conomurex sp.). Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 24(1): 11-19.
Abstrak
Moluska memiliki potensi besar untuk dikembangkan dalam bidang pharmaceutical dan nutraceutical yaitu sebagai sumber antioksidan baru. Penelitian ini bertujuan mengkaji senyawa yang aktif dan aktivitas antioksidan pada daging kerang balelo ( Conomurex sp.) berasal dari perairan Derawan, Kalimantan Timur. Ekstraksi kerang balelo dilakukan dengan tiga jenis pelarut yaitu metanol, etanol, dan etil asetat. Analisis yang dilakukan meliputi analisis rendemen, komposisi kimia, senyawa bioaktif dan aktivitas antioksidan dengan metode DPPH. Kerang balelo  memiliki kadar protein 27,30%, kadar air 56,29% kadar abu 2,00%, kadar lemak 10,30%, dan kadar karbohidrat sebesar 4,11%. Rendemen daging kerang balelo yaitu 34,7%, sedangkan rendemen ekstrak metanol, etanol dan etil asetat yaitu 15,33 %, 15,16 % dan 0,89%. Kerang balelo mengandung senyawa bioaktif alkaloid, tanin, saponin, fenol hidrokuinon dan steroid yang berfungsi sebagai antioksidan dengan nilai IC 50 1055, 8 µg/mL pada ekstrak metanol, 1165,9 µg/mL ekstrak etanol dan ektrak etil asetat 1220,53 µg/mL.Kerang balelo berpotensi sebagai antioksidan dan memiliki  senyawa bioaktif yang dapat dikembangkan dalam bidang pharmaceutical dan nutraceutical .
Kata kunci: antioksidan, komposisi kimia, kerang balelo ( Conomurex sp.), moluska
Bioactive Compound and Antioxidant Activity of Balelo Sea Snail ( Conomurex sp.)

## Abstract
Molluscs have great potential to developed as a new candidate of antioxidant source in the pharmaceutical and nutraceutical field. This study aims to investigate the bioactive compound  and antioxidant activity of balelo sea snail ( Conomurex sp.) from Derawan island, East Kalimantan. Extraction of balelo sea snail was carried out using three types of solvents, such as methanol, ethanol, and ethyl acetate. The analysis consisted of yield, chemical composition, bioactive compounds and antioxidant activity using DPPH. Balelo sea snail had 27.30% of protein content, 2.00% of ash,  10.30%  of lipid, and 4.11% of carbohydrate. The yield of balelo sea snail meat was 34.7%, and the yield of methanol, ethanol and ethyl acetate extract were 15.33%, 15.16% and 0.89%, respectively. Balelo  sea snails contain alkaloid, tannins, saponins, phenol hydroquinone and steroids. The antioxidants  activity of  extract methanol and ethanol of balelo sea snail (IC 50 ) correspondingly were 1055, 8 µg/mL and 1165.9 µg/mL. Balelo sea snail is potential as an antioxidant source and has bioactive compound  that can be develop in the pharmaceutical and nutraceutical field.
Keyword: balelo sea snail, bioactive compound, chemical composition, molluscs
Komponen bioaktif and aktivitas antioksidan, Nurhikma et al.

## PENDAHULUAN
Biota laut merupakan sumber bahan baku penghasil metabolit sekunder potensial sebagai bahan baku obat antara lain antibakteri, antifungi, antitumor, antidiabetes, dan antiinflamasi. Metabolit sekunder pada biota laut memiliki keunikan tersendiri dibandingkan dengan biota terestrial.
Prospek penemuan obat yang diisolasi dari laut diperkirakan 300 kali lebih potensial dibandingkan dari terestrial (Purbasari 2008).
Salah satu  organisme laut yang berpotensi sebagai bahan baku obat yaitu moluska. Moluska memiliki habitat di perairan dangkal dan biasanya hidup dengan cara menyembunyikan diri dalam sedimen atau menempel pada tumbuhan di laut seperti alga dan lamun. Beberapa peneliti menyatakan bahwa moluska mengandung senyawa bioaktif peptida, dispeptida, triterpenoid, alkaloid, prostaglandin, terpena, dan asam lemak esensial  yang bermanfaat bagi kesehatan (Balcázar et al. 2006; Blunt et al. 2006). Selain itu moluska juga mengandung flavonoid, tanin, steroid, dan fenol hidrokuinon (Prabowo 2009). Senyawa bioaktif pada moluska tersebut dimanfaatkan sebagai antioksidan, antikanker, menghambat pertumbuhan virus dan bakteri, antikapang, antitumor, dan menghambat kerja enzim (Tadesse et al . 2008; Defer et al. 2009; Zhou et al. 2011). Salah satu peran penting moluska dalam bidang pharmaceutical dan nutraceutical yaitu sebagai sumber antioksidan. Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat menghambat reaksi oksidasi dengan mengikat radikal bebas dan molekul  reaktif sehingga akan menghambat kerusakan sel. Mekanisme kerja senyawa antioksidan yaitu melindungi sel normal dan menetralisasi radikal bebas (Mollyneux 2004). Beberapa peneliti elah mengkaji mengenai aktivitas  antioksidan pada moluska antara lain kerang pasir ( Semele cardiformis ) memiliki nilai IC 50 453,777 µg/mL (Kalsum et al. 2020),  ekstrak  etanol  kerang  simping ( Amusium pleuronectes ) memiliki  nilai IC 50 1.648,45 µg/mL (Suptijah et al. 2013), ekstrak metanol moluska jenis Meretrix sp. memiliki  nilai  IC 50 84,46 µg/mL (Kalija et al . 2019) , ekstrak metanol keong matah merah ( Cerithidea obtusa ) mempunyai nilai  IC 50
58,19 µg/mL (Purwaningsih 2006), dan ekstrak etil asetat tambelo ( Bactronophorus thoracites ) memiliki  nilai  IC 50 15 µg/mL (Purwaningsih 2012). Berdasarkan kajian-kajian tersebut menunjukkan bahwa moluska berpotensi besar sebagai sumber antioksidan yang berasal dari laut.  Salah satu jenis moluska yang belum banyak dikaji yaitu kerang balelo ( Conomurex sp.). Kerang ini banyak ditemukan di daerah pantai Derawan Kalimantan Timur. Masyarakat di daerah pesisir Kalimantan memanfaatkan kerang balelo sebagai sumber pangan selain ikan, cumi, dan udang karena kandungan proteinnya yang tinggi. Pengkajian mengenai potensi kerang balelo sebagai bahan baku obat dalam bidang pharmaceutical dan nutraceutical belum pernah dilakukan oleh karena itu diperlukan kajian mendasar mengenai karakteristik, komposisi kimia, kandungan senyawa bioaktif dan aktivitas antioksidan sebagai tahap awal dalam pengkajian potensi kerang balelo untuk bahan baku obat sehingga dapat menjadi acuan pada penelitian selanjutnya.

## BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilakukan pada bulan Juni hingga Oktober 2020 di Laboratorium Teknologi Hasil Perikanan (THP), Laboratorium Nutrisi dan Laboratorium Kualitas Air Fakultas Perikanan dan Ilmu kelautan Universitas Borneo Tarakan.
Bahan dan Alat
Bahan baku yang digunakan yaitu daging kerang balelo yang berasal dari Perairan Derawan, Kalimantan Timur. Ekstraksi kerang balelo menggunakan tiga jenis pelarut yakni metanol, etil asetat, dan etanol sedangkan bahan  yang digunakan antara lain kjeltab (Merck), NaOH (Merck), H 3 BO 3 (Merck), bromokresol hijau 0,1% (Merck), metil merah 0,1%, alkohol 96%, HCl 0,02 N (Merck) dan akuades. Bahan untuk uji fitokimia di antaranya serbuk Mg, HCl, amil alkohol, amonia, kloroform, asam sulfat 2 N, pereaksi Meyer, Wagner, Dragendorff, pereksi Lieberman-Burchard, HCl 2 N, FeCl 3 5%. Alat yang digunakan pada penelitian ini antara lain soxhlet, kertas penyaring (whatman 42), kjeldahl, kamera, timbangan
analitik (Sartonius tipe TE15025), shaker orbital (WiseShake), oven (Yamato tipe DV- 41), tanur (Yamato tipe FM 38), autoklaf (Yamato SM52), inkubator (Thermolyne tipe 42 000), rotary evaporator (EYELA N1001T), spektrofotometer UV-Vis.
Metode Penelitian Preparasi dan ekstraksi sampel
Sampel kerang balelo diambil ketika kondisi air laut mulai surut kemudian dipreparasi dengan cara memisahkan bagian cangkang dan dagingnya, kemudian dihitung rendemen cangkang dan dagingnya, selanjutnya dilakukan analisis proksimat terhadap daging kerang balelo. Daging kerang balelo diekstrasi dengan tiga jenis larutan yaitu metanol, etil asetat, dan etanol. Ekstraksi dilakukan dengan cara 100 g sampel ditambah dengan pelarut metanol, etil asetat dan etanol masing-masing sebanyak 200 mL, kemudian dimaserasi selama 1x24 jam. Larutan hasil dari maserasi disaring dengan kertas whatman 42. Kemudian residu direndam kembali dengan 200 mL pelarut selama 1x24 jam dan disaring kembali, lakukan langkah yang sama sebanyak tiga kali. Selanjutnya larutan hasil ekstraksi tersebut dievaporasi dengan rotary evaporator suhu 40 ºC. selanjutnya hasil ekstraksi tersebut dianalisis rendemen, komponen bioaktif, dan aktivitas antioksidannya.

## Analisis sampel
Analisis proksimat mengacu pada metode AOAC (2005) yang meliputi  analisis kadar air, abu, protein, lemak, dan karbohidrat dengan metode by difference. Analisis komponen bioaktif dilakukan secara kualitatif yang mengacu pada Harborne (2006) yang meliputi analisis alkaloid, saponin, steroid/triterpenoid, flavonoid dan fenol hidrokuinon. Analisis antioksidan dilakukan menggunakan metode DPPH yang mengacu pada Mollyneux (2004).

## Uji komponen bioaktif
Uji komponen bioaktif pada kerang balelo meliputi uji alkaloid, steroid/triterpenoid, flavonoid, tanin, saponin, fenol hidrokuinon.
Uji alkaloid Senyawa alkaloid dianalisis dengan
cara sampel  dilarutkan dalam H 2 SO 4 2 N kemudian dilakukan pengujian terhadap senyawa alkaloid menggunakan tiga pereaksi yaitu, pereaksi Dragendorff, pereaksi Meyer, dan pereaksi Wagner. Larutan menunjukkan hasil yang positif bila terbentuknya endapan putih kekuningan pada pereaksi Meyer, endapan cokelat pada pereaksi Wagner dan endapan merah hingga jingga pada pereaksi Dragendorff.

## Uji steroid/triterpenoid
Uji steroid/ triterpenoid dilakukan cara sampel 0,5 g dilarutkan dalam 2 ml kloroform, selanjutnya ditambah10 tetes asetat anhidrat dan 3 tetes asam sulfat pekat. Hasil positif ditunjukan dengan perubahan warna merah menjadi biru dan hijau.

## Uji flavonoid
Uji flavonoid dilakukan dengan cara sampel 0,5 g ditambah dengan serbuk magnesium 0,10 mg dan 0,40 mL amil alkohol dan 4 mL alkohol, kemudian dikocok hingga tercampur sempurna. Hasil positif ditunjukan dengan adanya warna merah, kuning atau jingga  pada lapisan amil alkohol, sedangkan tanin dideteksi dengan cara ekstrak ditambahkan ditambah 3 tetes 10%  FeCl 3 hasil positif ditunjukkan dengan terbentuk warna hitam kehijauan.

## Uji saponin
Uji saponin dilakukan dengan cara sampel ditambahkan HCl 2 N. Busa  stabil yang terbentuk selama 30 menit menunjukkan hasil positif pada senyawa saponin.

## Uji fenol hidrokuinon
Fenol hidrokuinon dianalisis dengan cara 1 g sampel ditambah  20 mL etanol 70%. Larutan tersebut ditambahkan dengan 2 tetes FeCl3 5%. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau atau hijau biru.

## Uji aktivitas antioksidan
Kontrol positif (asam askorbat) dilarutkan dalam metanol p.a dengan konsentrasi 2, 4, 6, dan 8 µg/mL, sedangkan ekstrak kerang balelo dilarutkan dalam metanol dengan konsentrasi 250, 500, 750,
Komponen bioaktif and aktivitas antioksidan, Nurhikma et al.
dan 1.000 µg/mL. Larutan ekstrak dan asam askorbat 4,5 mL direaksikan dengan 500 µL larutan DPPH 1 mM di dalam tabung reaksi, kemudian diinkubasi selama 30 menit dengan suhu 30 ºC, kemudian adsorbansi diukur menggunakan spektrofotometer UV-VIS dengan panjang gelombang 517 nm. Aktivitas antioksidan dinyatakan dalam bentuk persen inhibisi yang dihitung menggunakan rumus sebagai berikut:

## Analisis Data
Analisis data yang digunakan berupa statistik sederhana menggunakan nilai rata- rata dari tiga kali ulangan pada data rendemen, analisis komposisi kimia dan aktivitas antioksidan. Perangkat lunak yang digunakan yaitu Microsoft Excel pada perhitungan persen inhibisi (IC 50 ) aktivitas antioksidan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik Bahan Baku
Kerang balelo berbentuk cangkang kerucut, bagian posterior melebar, cangkang luar memiliki penampakan berwarna putih atau krem disertai bercak cokelat. Panjang cangkang berkisar antara 5-6 cm dengan lebar 3 cm. Bibir luar berbentuk persegi panjang sedangkan bibir dalam memiliki permukaan yang halus dan terdapat garis berwarna coklat kehitaman di  bagian kolumela. Kerang balelo memiliki menara ( spire ) yang kecil dengan rusuk sumbu ( axial ribs )  yang lebar hingga batas bahu, pusaran tubuh ( body whorl )  pada kerang ini bersifat kokoh serta ujung anterior terdapat saluran sifon. Kerang balelo memiliki operkulum berwarna oranye yang berbentuk menjorong ( elliptical ) tajam. Kerang ini banyak ditemukan pada daerah terumbu,
padang  lamun,  serta  substrat  berpasir (Ahmad 2018). Morfologi kerang balelo dapat dilihat pada Figure 1.

## Rendemen Kerang Balelo
Rendemen daging kerang balelo yaitu 34,7%, sedangkan rendemen cangkang 65,3%. Rendemen kerang balelo tidak jauh berbeda dengan kerang lainnya, antara lain  kerang simping memiliki rendemen daging  dan  cangkang  35,89%,  dan  41,15% (Suptijah et al. 2013), kerang tahu memiliki rendemen 14,38% dan 67,44% (Chairunisah 2011), kijing memiliki rendemen 20,71% daging dan 51,93% cangkang (Nurjanah et al. 2010). Rendemen ekstrak etanol kerang balelo yaitu 15,16 %, ekstrak metanol 15,33 % dan ekstrak etil asetat 0,89%. Ekstrak metanol dan etanol kerang balelo memiliki rendemen lebih banyak dibandingkan dengan etil asetat hal ini menunjukkan bahwa senyawa organik yang tertarik pada senyawa polar lebih besar dibandingkan semipolar. Mukhriani (2014) menjelaskan bahwa rendemen menggambarkan keefektifan proses ekstraksi yang dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain pelarut, ukuran partikel bahan, metode, waktu  ekstraksi yang dilakukan, dan juga jenis organisme yang dipergunakan. Rendemen kerang balelo dapat dilihat pada Table 1 .
Komposisi Kimia Kerang Balelo Table 2 menunjukkan kerang balelo memiliki kadar air pada daging 56,29%. Martin et al. (1991) menyatakan bahwa  kadar air dalam tubuh biota laut berkisar antara 50%- 90%. Kadar air pada daging kerang kowoe yaitu 40,04% pada daging kering dan 63,79% pada daging sega (Haslianti et al. 2017). Kandungan protein daging kerang balelo
%inhibisi =                                     x 100% Absorbansi blanko-Absorbansi sampel Absorbansi blanko
sebesar 27,30%. Kandungan protein pada kerang balelo cukup tinggi bila dibandingkan kandungan protein kerang darah 19,48% (Nurjanah et al. 2005), dan kandungan protein kerang simping 13,97% (Suptijah et al. 2013). Tingginya kandungan protein pada kerang balelo dipengaruhi oleh kondisi perairan dan ketersediaan makanan yang melimpah di sekitar perairan Derawan seperti alga, plankton dan zooplankton. Protein digunakan untuk pertumbuhan, pembentukan cangkang, dan proses reproduksi pada moluska.
Kadar lemak pada daging kerang balelo sebesar 10,30%. Kandungan lemak pada lendir kerang balelo tidak jauh berbeda dengan kandungan lemak pada kerang darah (Nurjanah et al. 2005), dan kerang simping (Suptijah et al. 2013). Namun tingginya kadar lemak pada daging kerang balelo dipengaruhi oleh jenis makanan, dan keaktifan gerak pada kerang balelo. Kerang balelo merupakan gastropoda yang bergerak menggunakan tubuhnya sehingga membutuhkan lemak dan energi yang lebih besar sedangkan kerang darah dan kerang simping merupakan bivalvia yang menetap di satu perairan, tubuh dilapisi cangkang dan tidak melalukan mobilisasi di suatu perairan. Pigott dan Tucker (1990) juga
menjelaskan bahwa beberapa hewan moluska mengandung total lemak antara 1%-4% berat basahnya. Kandungan kadar abu pada daging kerang balelo yaitu 2,00%. Hasil tersebut didukung oleh penelitian Nurjanah et al. (2005) yang menyatakan bahwa kerang darah yang memiliki kadar abu 2,24%, kerang simping 0,99% (Suptijah et al. 2013) dan kerang bulu berkisar antara 1,27%-2,08% (Arnanda et al. 2005). Kadar abu pada moluska dipengaruhi kebiasaan makan dengan cara filter feeder sehingga moluska memiliki kemampuan untuk menyimpan dan menyerap mineral dari lingkungannya. Kadar karbohidrat pada  daging  kerang  balelo  yaitu  4,11%. Arnanda et al. (2005) menyatakan bahwa kadar karbohidrat pada moluska berkisar antara 2,3%-4,35%.

## Komponen Bioaktif Kerang Balelo
Hasil pengujian komponen bioaktif ekstrak kerang balelo ( Table 3 ) menggunakan tiga jenis pelarut metanol, etanol, dan etil asetat terhadap senyawa bioaktif alkaloid, tanin, saponin, fenol hidrokuinon, dan steroid secara kualitatif menunjukkan bahwa ekstrak etanol dan metanol mengandung senyawa
Table 1 Yield and extraction of tiger conch ( Conomurex sp) Yield Tiger conch (%) Scallop a (%) Tahu clams b (%) Kijing c (%) Shell 65.30 41.15 67.44 51.93 Meat 34.70 35.89 14.38 27.36 Methanol extract 15.16 - - - Ethanol extract 15.33 - - - Ethyl acetate extract 0.89 - - - Note: a Suptijah et al. (2013), b Chairunisah (2011), c Nurjanah et al. (2010)
Table 2 Chemical composition of fresh tiger conch ( Conomurex sp.) Parameter (%) Meat Anadara clams a Scallop b Water 56.29 74.37 81.21 Protein 27.30 19.48 13.79 Lipid 10.30 2.50 0.2 Ash 2.00 2.24 0.99 Carbohydrate 4.11 1.41 3.63 Note: a Nurjanah et al. (2005), b Suptijah et al. (2013)
Komponen bioaktif and aktivitas antioksidan, Nurhikma et al.
alkaloid, tanin, saponin, fenol hidrokuinon dan steroid, sedangkan ekstrak etil asetat memiliki komponen bioaktif  alkaloid, flavonoid, tanin, fenol hidrokuinon, steroid, dan triterpenoid. Senyawa flavonoid tidak terkandung pada ekstrak etanol dan metanol sedangkan pada ekstrak etil asetat menunjukkan nilai positif. Flavonoid terdiri dari 15 atom karbon, dengan dua cincin benzena pada senyawa tersebut berikatan dengan  rantai propana yang  membentuk  susunan  C6-  C3-C6 (Rahmayani et al. 2013). Flavonoid berfungsi sebagai senyawa antioksidan yang dapat mengurangi risiko penyakit kronis dan degeneratif. Senyawa ini memiliki kemampuan dalam menghambat radikal bebas, anti-inflamasi, dan anti-proliferasi
(Chen dan Blumberg 2007) Semua ekstrak menunjukan hasil positif pada alkaloid, fenol hidrokuinon, steroid, dan tanin. Senyawa alkaloid merupakan senyawa siklik yang mengandung atom nitrogen.
Senyawa alkaloid banyak dimanfaatkan  dalam hal pengobatan yaitu antibakteri, antimalaria, dan antikanker (Hafiluddin 2011).  Senyawa Fenol hidrokuinon mempunyai kromofor dasar pada benzokuinon yang terdiri dari 2 gugus karbonil yang berkonjugasi dengan 2 ikatan rangkap. Beberapa jenis golongan senyawa yang dapat diekstrak oleh pelarut metanol adalah gula, asam amino, senyawa glikosida, senyawa fenolik, flavonoid, antosianin, terpenoid, saponin, tanin, xantoxilin, totarol, quacinoid, lakton, flavon, fenon, dan polifenol yang banyak dimanfaatkan sebagai antioksidan yang kuat
(Yu-Lin et al. 2009; Dehkharghanian et al. 2010; Widyawati et al. 2014).  Tanin merupakan senyawa metabolit sekunder yang berkhasiat sebagai astringen, antidiare, dan menghambat radikal bebas (Malangngi et al. 2012). Wardani et al (2010); Kaihena et al. (2011) menjelaskan bahwa tanin dapat menghambat kerja enzim dan substrat berikatan dengan lipid, sehingga pertumbuhan cangkang lebih cepat. Senyawa steroid digunakan sebagai bahan baku obat dalam bidang pharmaceutical (Mukhriani, 2014). Nurulita et al ( 2008) menyatakan bahwa senyawa steroid fukosterol yang diisolasi dari biota laut bersifat tidak toksik dan berpotensi untuk menurunkan kolesterol, menurunkan gula dalam darah, mengatasi gangguan menstruasi, antibakteri dan antivirus

## Aktivitas Antioksidan Kerang Balelo
Ekstrak metanol, etanol dan etil asetat memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 1.055,80 µg/mL, 1.165,90 µg/mL, 926,58 µg/mL. Aktivitas antioksidan kerang balelo tergolong rendah bila dibandingkan kontrol positif vitamin C (asam askorbat) dengan nilai IC 50 2,80 µg/mL. Meskipun aktivitas antioksidan ekstrak kerang balelo tergolong lemah karena memiliki nilai IC 50 lebih dari 200 µg/mL, namun aktivitas ini lebih tinggi dibandingkan moluska lainnya antara lain ekstrak kerang simping dengan nilai IC 50 1.648,45 µg/mL (Suptijah et al. 2013). Ekstrak etil asetat, metanol dan kloroform kerang pisau berturut-turut memiliki nilai IC 50 1.593,87 µg/mL, 1.391,08 µg/mL dan 2.008,52 µg/mL Aktivitas antioksidan kerang balelo
Table 3 Bioactive compound of tiger conch ( Conomurex sp.) Bioactive compound Ethanol Methanol Ethyl Acetate Alkaloid + + + Flavonoid - - + Tanin + + + Saponin + + - Fenol hidrokuinon + + + Steroid + + + Triterpenoid - - + Note: (-) not detected, (+) detected
dipengaruhi oleh kandungan komponen bioaktifnya yaitu flavonoid, alkaloid, dan fenol hidrokuinon.  Hanani et al. (2005) menyatakan bahwa senyawa metabolit sekunder yang berpotensi sebagai antioksidan berasal dari golongan fenolat, flavonoid dan alkaloid, yang merupakan senyawa-senyawa polar. Pengujian aktivitas antioksidan kerang balelo menggunakan metode DPPH didasarkan pada reduksi dan penghambatan senyawa radikal bebas senyawa DPPH.
Larutan DPPH bereaksi dengan pendonor elektron sehingga senyawa DPPH akan tereduksi, hal ini menyebabkan warna ungu pada larutan DPPH akan memudar dan digantikan warna kuning yang berasal dari gugus pikril (Prayoga 2013). Lemahnya aktivitas antioksidan kerang balelo ini dipengaruhi oleh metode yang digunakan pada pengujian antioksidan, sehingga perlu dilakukan pengujian antioksidan menggunakan metode lain seperti ABTS, Ferrous Ion Chelating (FIC) (reaksi kelat atau melalui pembentukan kompleks), Thiobarbituric acid (TBA), Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) (reaksi reduksi- oksidasi), untuk mengonfirmasi aktivitas tersebut. Aktivitas antioksidan ekstrak kerang balelo menggunakan metode DPPH dapat dilihat pada Table 4.

## KESIMPULAN
Kerang balelo memiliki kadar protein yaitu 27,30%. Ekstrak metanol etanol, etil asetat kerang balelo memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 1.055,8 µg/mL, 1.165,9 µg/mL dan 926,58 µg/mL. Ekstrak Kerang ini berpotensi untuk dikembangkan sebagai bahan baku pharmaceutical dan nutraceutical dengan kandungan senyawa aktif alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, steroid dan fenol hidrokuinon.

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC] Association of Official Analytical Chemist. 2005. Official Method of Analysis of the Association of Official Analytical of Chemist. Virginia (US): The
Association of Analytical Chemist, Inc. Ahmad. 2018. Identifikasi Filum Mollusca
(Gastropoda) Di Perairan Palipi Soreang Kecamatan Banggae Kabupaten Majene [Skripsi]. Makassar (ID): Universitas Islam Negeri Alauddin Arnanda AD, Ambariyanto, Ridlo A. 2005. Fluktuasi kandungan proksimat kerang bulu Anadara inflate Reeve) di Perairan
Pantai Semarang. Jurnal Ilmu kelautan.
10(2): 78-84 Balcáza JL, Blas I, Ruiz-Zarzuela I, Cunningham D, Vendrell D, Múzquiz JL. 2006. The role of probiotics in aquaculture. Veterinary
Microbiology. 114(1): 173-186. Blunt JW, Copp BR, Munro MHG, Northcote
PT, Prinsep, MR. 2006. Marine natural products. Natural Product Reports . 23(1):26–78.
Chairunisah R. 2011. Karakteristik asam amino daging kerang tahu ( Meretrix meretrix ) kerang salju ( Pholas dactylus ), dan keong macan ( Babylonia spirata ). [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.
Chen CYO, Blumberg JB. 2007. Phytochemical composition of nuts. Asia Pacific Journal of Clinical Nutrition. 17(1): 329-332. Defer D, Bourgougnon N, Fleury Y. 2009. Screening for antibacterial and antiviral activities in three bivalve and two gastropod marine molluscs. Journal
Aquaculture. 293(1): 1-7.
Dehkharghanian M, Adenier H, Vijayalakshmi
MA. 2010. Analytical methods study of flavonoids in aqueous spinach extract using positive electrospray ionization
Table 4 Antioxidant activity of tiger conch ( Conomurex sp.) Sample % Inhibition (µg/mL) IC 50 (µg/ mL) 2 4 6 8 250 500 750 1,000 Ascorbic acid 48.80 52.80 55.20  63.20 - - - - 2.80 Methanol extract - - - - 43.50 45.90 47.60 49.40 1,055.80 Ethanol extract - - - - 38.80  43.50 46.50 47.10  1,165.90 Ethyl acetate extract - - - - 38.26  41.74 45.65 52.17   926.58
Komponen bioaktif and aktivitas antioksidan, Nurhikma et al.
tandem quadrupole mass spectrometry. Food Chemistry. 121(1): 863–870. Hafiluddin, Nurjanah, Nurhayati T. 2011.
Kandungan gizi dan karakterisasi senyawa bioaktif lintah laut ( Discodoris sp.). Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 3(1): 1-6. Hafiluddin. 2012. Analisa kandungan gizi dan senyawa bioaktif keong bakau ( Telescopium telescopium ) di sekitar
Perairan Bangkalan. Jurnal Rekayasa . 5(2): 116-122.
Haslianti, Mita GI, Ermayanti I. 2017.
Karakteristik keong kowoe dan aktivitas antioksidannya. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia . 20(1):74-83
Hanani E, Mun’im A, Sekarini R. 2005.
Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. dari Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian . 2(3): 127-133.
Harborne JB. 2006. Metode Fitokimia:
Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Bandung (ID): ITB.
Kaihena M, Vika L, Maria N. 2011. Efektivitas ekstrak etanol daun sirih ( Piper betle L) terhadap mortalitas larva nyamuk
Anopheles sp. dan Culex sp. Jurnal Molluca Medica. 45(1): 88 - 105.
Kaija TA, Warsidah, Prayitno DW. 2020. Komponen bioaktif dan aktivitas antioksidan ektrak kasar kerang alel-ale ( Metetrix sp). Jurnal Laut Khatulistiwa. 3(1): 9-13
Kalsum U, Hafizah I, Aritrina P, Sulastrianah. 2020. Uji aktivitas antioksidan hidrolisat protein kerang pasir ( Semele cordiformis ) dengan metode DPPH. Jurnal Kedokteran Halu Oleo. 7(2): 97-107 Malangngia LP, Meiske S, Sangia , Jessy JE,
Paendong. 2012. Penentuan kandungan tanin dan uji aktivitas antioksidan ekstrak biji buah alpukat ( Persea americana Mill).
Jurnal MIPA Universitas Samratulangi . 1(1): 5-10
Martin DW, Mayes JA, Granner DK, Rodwell YW. 1991. Biokimia (Harper’s Review of Biochemistry). Jakarta (ID): Penerbit Buku Kedokteran Indonesia Molyneux P. 2004. The use of the stable free radical diphenyl picrylhdrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity.
Songklanakarin Journal Science and
Technology. 26(2):211- 21 Mukhriani. 2014. Ekstraksi, pemisahan senyawa, dan identifikasi senyawa aktif. Jurnal Kesehatan. 7(2): 361-367. Nurjanah, Jacoeb AM, Fetrisia RG. 2013. Komposisi kimia kerang pisau ( Solens spp.) dari Pantai Kejawanan, Cirebon,
Jawa Barat. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia . 16(1): 22-32 Nurjanah, Abdullah A, Izzati L. 2010.
Aktivitas antioksidan dan komponen bioaktif kerang pisau ( Solen spp). Jurnal Ilmu Kelautan . 16(3):119-124.
Nurjanah, Zulhamsyah dan Kustiyariyah.
2005. Kandungan mineral dan proksimat kerang darah ( Anadara granosa ) yang diambil dari kabupaten boalemo, gorontalo. Buletin Teknologi Hasil
Perikanan. 8(2): 15-24 Nurulita Y, Haryanto D, Andreanus AS.
2008. Penapisan aktivitas dan senyawa antidiabetes ekstrak air daun dandang gendis ( Clinacanthus nutans ). Jurnal Nature Indonesia. 10(2): 98-103.
Pigott MG, dan Tucker WB. 1990. Seafood : effects Of Technology on Nutrition . New York (NYC) : Marcel dekker inc. Hlm.362.
Prayoga G. Fraksinasi. 2013. Uji Aktivitas
Antioksidan dengan Metode DPPH dan Identifikasi Golongan Senyawa Kimia dari Ekstrak Teraktif Daun Sambang Darah ( Excoecaria cochinchinensis Lour). Fakultas Farmasi Program Studi Sarjana Ekstensi Universitas Indonesia.
Prabowo TT. 2009. Uji aktivitas antioksidan dari keong matah merah ( Cerithidea obtusa ) [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor Purbasari, D. 2008. Produksi dan Karakterisasi Hidrolisat Protein dari Kerang Mas Ngur ( Atactodea striata ). [Tesis]. Bogor (ID):
Institut Pertanian Bogor.
Purwaningsih S. 2012. Aktivitas antioksidan dan komposisi kimia keong matah merah ( Cerithidae obtusa ). Jurnal Ilmu Kelautan. 17(1):39-48. Purwaningsih, S. 2006. Antiproliferation study of Matah Merah ( Cerithidea obtusa ). Proceeding International Seminar and Workshop of Marine biodiversity and
Their Potential for Developing Bio- Pharmaceutical Industry in Indonesia. Jakarta, May 17-18th 2006; Jakarta(ID):
Research Centre for Marine and Fisheries Product Processing and Biotechnology
Hlm. 150-152. Rahmayani U, Pringgenies D, Djunaedi A. 2013.
Uji aktivitas antioksidan ekstrak kasar keong bakau ( Telescopium telescopium ) dengan pelarut yang berbeda terhadap metode DPPH (diphenyl picrilhidrazil). Journal of Marine Research . 2(4): 36-45. Putri MRS, Nurjanah, Tarman K. 2013. Sinergis taurin lintah laut ( Discodoris sp.) dan temulawak ( Curcuma xanthorriza
Roxb.) dalam serbuk minuman fungsional. Jurnal Pengolahan Hasil
Perikanan Indonesia . 16(1):48-57 Suptijah P, Yanuarizki O, Nurjanah. 2013. Aktivitas antioksidan dan komponen bioaktif kerang simping ( Amusium pleuronectes ). Jurnal Pengolahan Hasil
Perikanan Indonesia . 16(3): 242-248 Tadesse M, Gulliksen B, Strim MB, Styrvold OB, Haug T. 2008. Screening for antibacterial and antifungal activities in marine benthic invertebrates from northern Norway. Journal of Invertebrate
Pathology. 99(1): 286-293
Wardani RS, Mifbakhiddin, Yokorinanti K. 2010. Pengaruh konsentrasi daun tembelekan terhadap kematian larva Aedes aegypti. Jurnal Kesehatan Masyarakat Indonesia . 6(2): 30-38. Widyawati PS, Budianta TDW, Kusuma FA, Wijaya EL. 2014. Difference of solvent polarity to phytochemical content and antioxidant activity of Pluchea indica
Less leaves extracts. International Journal of Pharmacology and Phytochemichal Research. 6(4):850- 855.
Yenni, Nurhayati T, Nurjanah. 2012. pengaruh perebusan terhadap kandungan asam lemak dan kolesterol kerang pokea ( Batissa violacea celebensis Marten 1897). Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia . 15(3):193-198 Yu-Lin H, Kuo YH, Lin YL,Chiang W. 2009.
Antioxidative effect and active component from leaves of lotus ( Nelumbo nucifera ). Journal Agricultural and Food Chemistry. 57(15) : 6623-6629. Zhou DY, Zhu BW, Qiao L, Wu HT, Li DM, Yang
JF, Murata Y. 2011. In vitro antioxidant activity of enzymatic hydrolysates prepared from abalone ( Haliotis discus hannai Ino) viscera. Food and Bioproducts Processing. 90(2):148-154