## Uji Cemaran Mikroba Udara Pada Beberapa Ruang Produksi Non Betalaktam Lafiau Sesuai Dengan Standar CPOB Tahun 2018
Asep Edi Sukmayadi 1 , Yusrin Hayati 2 , Azka Nurkhairiyah Rahmah 3
1 Politeknik Kesehatan TNI AU Ciumbuleuit Bandung, a.ediapt@gmail.com
2 Politeknik Kesehatan TNI AU Ciumbuleuit Bandung, yusrinhayati07@gmail.com
3 Politeknik Kesehatan TNI AU Ciumbuleuit Bandung, azkanurkhairiyahrahmah@gmail.com

## ABSTRAK
Salah  satu  penunjang  kritis  industri  farmasi  adalah  Sistem  tata  udara  yang  meliputi  Pengendalian  udara berkelanjutan terhadap kebersihan dan kualitas udara yang diperlukan untuk memenuhi kondisi ruangan yang dipersyaratkan  oleh CPOB.  Batas  mikroba  merupakan  parameter  syarat  kelas  kebersihan  ruangan  farmasi. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui apakah kualitas mikroba udara dalam ruangan memenuhi syarat kualitas udara yang baik berdasarkan jumlah  koloni yang didapat serta karakteristik bakteri yang terdapat pada ruang  Produksi  Non  Betalaktam  LAFIAU.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental-deskriptif, menggunakan  kombinasi  metode  kualitatif  dan  kuantitatif  dengan  menghitung  jumlah  mikroba  dan mengidentifikasi  jenis  mikroba  sehingga  dapat  digunakan  sebagai  bahan  evaluasi  kualitas  udara  di  ruang tersebut.  Hasil  dari  penelitian  menunjukkan  bahwa  jumlah  mikroba  udara  pada  beberapa  ruang  produksi memenuhi persyaratan yang sudah ditentukan menurut PerBPOM No 34 Tahun 2018 yakni  < 200 CFU/m 3 . Identifikasi menunjukan bahwa jenis mikroba yang ditemukan adalah bakteri genus staphylococcus Sp dengan karakteristik gram positif dan uji katalase positif, jamur genus aspergillus Sp , serta cemaran. Kesimpulan pada penelitian ini bahwa ruang produksi yang dipilih sebagai lokasi penelitian telah memenuhi persyaratan. Peneliti menyarankan  kepada  pihak  LAFIAU  agar  selalu  melakukan hygiene dan  sanitasi  secara  berkala  dan monitoring kebersihan ruangannya.
Kata Kunci : Sistem tata udara, unit produksi, jumlah mikroba, CPOB

## ABSTRACK
One of the critical supports of the pharmaceutical industry is the air system which includes continuous air control of the cleanliness and air quality needed to meet the room conditions required by CPOB. Microbial limit  is  a  parameter  of  pharmaceutical  room  cleanliness  class  requirements.  This  study  was  conducted  to determine whether the microbial quality of indoor air meets the requirements of good air quality based on the number of colonies obtained and the characteristics of bacteria found in the mixing room and weighing room of the LAFIAU Non Betalactam Production Unit. This research is an experimental-descriptive research, using a combination of qualitative and quantitative methods by counting the number of microbes and identifying the types of microbes so that it can be used as an evaluation of air quality in the place. The results of the study showed  that  the  number  of  air  microbes  in  the  mixing  room  and  weighing  room  met  the  requirements determined according to PerBPOM Number 34 of 2018 which is < 200 CFU/m3. Identification shows that the types of microbes found are bacteria of the genus staphylococcus Sp with gram-positive characteristics and positive catalase tests, fungi of the genus aspergillus Sp, and contamination. The conclusion of this study is that  the  mixing  room  and  weighing  room  chosen  as  the  research  location  have  met  the  requirements. Researchers  suggest to the  LAFIAU  to  always  carry out  hygiene  and  sanitation  regularly  and  monitor  the cleanliness of the room.
Keywords: Air system, air quality, production unit, microbial count, CPOB

## PENDAHULUAN
Pencemaran  udara  adalah  suatu kondisi  dimana  kualitas  udara  menjadi rusak  terkontaminasi  oleh  zat-zat,  baik yang  tidak  berbahaya  maupun  yang membahayakan.  (Kusnoputranto,  2002). Banyak  faktor  yang  dapat  menyebabkan pencemaran  udara,  salah  satu  faktornya dapat berasal dari kegiatan produksi yang ada di industri.
Industri farmasi adalah badan usaha yang memiliki izin dari Menteri Kesehatan untuk melakukan kegiatan pembuatan obat atau  bahan  obat.  Tujuan  utama  industri farmasi  adalah  untuk  menghasilkan  obat yang  aman  dan  efektif  untuk  digunakan dalam terapi (efficacy, safety, toxicity) dan untuk  kepentingan  ekonomi  suatu  negara (Menkes  ,  2010).  Salah  satu  sarana penunjang  kritis  industri  farmasi  adalah udara.
Adanya sistem tata udara yang baik mampu  memperkecil  adanya  cemaran mikroba  udara  dalam  suatu  industri. Sistem  HVAC  merupakan  suatu  sistem yang  terdiri  dari  tiga  komponen  saling bekerja  sama  untuk  memindahkan  panas dari  tempat  yang  diinginkan  (dalam ruangan) ke tempat yang tidak diinginkan (luar ruangan) (Sugarman, 2007).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan  oleh  Rudi  dan  Abdunnaser
(2018),  mengenai  Perancangan  instalasi tata udara ruang bersih area penimbangan pada  industri  farmasi  kelas  E  bahwa perhitungan jumlah partikel pada ruangan penimbangan  bahan  baku  menurut  ISO
14644-1  pada  ukuran  partikel  0,5  μm jumlahnya sebesar
446.771,3769
partikel/m3 pada standar kelas E (100.000) partikel  dibatasi  pada  jumlah  3,520,000 partikel/m3,  sedangkan  pada  ukuran partikel  5  μm  jumlahnya  sebesar 47.760,7813  partikel/m3  pada  standar dibatasi  pada  jumlah  29,300  partikel/m3. Penelitian  tentang  ruang  bersih  telah dilakukan  berbagai  simulasi  dengan berbagai  kelas  ruang  bersih.  Hal  yang perlu  diperhatikan  juga  adalah  bahwa ruang  bersih  harus  memenuhi  standar CPOB  yang  didalamnya  memuat  ISO 14644-1. Hal ini penting dilakukan sebagai tanggung  jawab  industri  farmasi  terhadap aturan pemerintah tentang CPOB (Amalia,
2018). Peneliti beranggapan bahwa dalam suatu  ruang  industri  adanya  cemaran mikroba  kemungkinan  dapat  terjadi. Sehingga  perlu  adanya  pengujian  untuk memastikan  ada  atau  tidaknya  cemaran mikroba.
Analisis mikrobiologi adalah  salah satu  uji  dan  studi  analisis yang  dilakukan untuk menentukan kesehatan suatu produk. Uji mikrobiologi adalah salah satu pengujian  yang  menggunakan  perubahan sifat mikroba terhadap lingkungan sebagai tolak ukurnya. Dalam fasilitas pembuatan obat, terutama di ruangan produksi farmasi diwajibkan  adanya  uji  mikroba  atau sampling  udara.  Uji  mikroba  pada  udara ini  wajib  secara  CPOB  2018,  uji  ini dilakukan  untuk  memastikan  ruangan produksi  bebas  atau  terkontrol  mikroba yang  sangat  beresiko  kontaminasi  pada produk  sediaan  obat.  Batas  mikroba  ini merupakan  salah  satu  parameter  syarat kelas kebersihan ruangan farmasi.
Adapun  tujuan  dari  penelitian  ini adalah untuk mengetahui jumlah mikroba, mengidentifikasi  jenis  mikroba,  serta mengetahui  kualitas  udara  di  beberapa ruang produksi Non Betalaktam LAFIAU sesuai standar CPOB 2018.

## KAJIAN LITERATUR
Udara merupakan media penyebaran bagi mikroorganisme. Mereka terdapat  dalam  jumlah  yang  relatif  kecil bila  dibandingkan  dengan  di  air  atau  di tanah. Udara tidak mengandung komponen nutrisi yang penting untuk bakteri, adanya bakteri  di  udara  kemungkinan  terbawa oleh  debu,  tetesan  uap  air kering  ataupun terhembus  oleh  tiupan  angin.  Kelompok mikroorganisme  yang  tersebar  luas  di udara adalah bakteri : bacillus, staphylococcus,  streptococcus, jamur  : aspergillus, rhizopus, penicillium
(termasuk  ragi)  dan  juga  mikroalga (Waluyo,  2016).  Kandungan  udara  di dalam  dan  di  luar  ruangan  akan  berbeda. Taraf  pencemaran  di  dalam  ruangan  oleh mikroba  dipengaruhi  oleh  faktor-faktor seperti laju ventilasi, padatnya orang, sifat, dan tingkat aktivitas orang yang menempati ruangan tersebut.
Uji  cemaran  mikroba  adalah
menentukan  cemaran  mikrobiologi  yang terkandung tidak melebihi batas yang telah ditetapkan  sehingga  dapat  diketahui kualitas  dan  keamanan  dari  bahan  baku yang  akan  dijadikan  sediaan.  Dalam fasilitas  pembuatan  obat,  terutama  di ruangan  produksi  farmasi  diwajibkan adanya  uji  mikroba  atau  sampling  udara. Batas  mikroba  ini  merupakan  salah  satu syarat  kelas  kebersihan  ruangan  farmasi. Uji  cemaran  mikroba  pada  udara  ini merupakan  hal  yang  sangat  utama  dalam proses  pembuatan  produk  steril  yang dilakukan di ruang kelas kebersihan steril (A,B,C,D). Ini dilakukan untuk
memastikan  ruangan  produksi  bebas  atau terkontrol  mikroba  yang  sangat  berisiko kontaminasi  pada  produk  steril.  Batas mikroba yang disarankan untuk pemantauan  area  bersih  pada  ruang produksi  kelas  D  selama  kegiatan berlangsung  sesuai  CPOB  Tahun  2018 adalah  kurang  dari  200  CFU/m 3 .  Untuk kelas  E  dapat  ditentukan  sendiri  oleh industri farmasi berdasarkan kajian risiko. Kelas  kebersihan  F  dan  G  tidak  perlu dilakukan  pemantauan  mikroba,  kecuali dinyatakan lain.

## METODE PENELITIAN
Kerangka Konsep Penelitian Cemaran mikroba dapat digunakan  sebagai  indikator  kualitas udara. Adanya cemaran mikroba menunjukkan  tingkat  kebersihan  udara  di dalam ruangan tersebut. Ruangan industri farmasi harus memiliki kualitas udara yang baik  yang  memenuhi  standar  yang  telah ditetapkan.  Kualitas  udara  di  dalam ruangan  dipengaruhi  oleh  banyaknya aktivitas  di  dalam  ruangan  dan  adanya mikroorganisme  di  udara.  Penelitian  ini bersifat eksperimental-deskriptif, menggunakan kombinasi metode kualitatif dan kuantitatif, menghitung jumlah mikrobanya  dan  mengidentifikasi  jenis mikroba sehingga dapat digunakan sebagai bahan  evaluasi  kualitas  udara  di  tempat tersebut.

## Desain Penelitian
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  kualitas  udara  berdasarkan jumlah  mikroba  yang ada di  dalam ruang mixing  dan  ruang  timbang  bagian  unit produksi  Non  BetaLaktam  LAFIAU. Penelitian meliputi beberapa tahapan kerja yaitu, tahap persiapan dan tahap pelaksanaan.  Tahap  persiapan  meliputi penetapan  judul,  survey  tempat  untuk pengambilan  sampel  dan  penyusunan proposal  penelitian.  Tahap  pelaksanaan meliputi  penyiapan  alat  dan  bahan, pembuatan  media Plate  Counter  Agar , pengambilan  sampel,  perhitungan  jumlah koloni  bakteri,  dan  identifikasi  jenis bakteri.

## Populasi dan Sampel
Populasi  dalam  penelitian  ini adalah  Unit  Produksi  Non  Betalaktam LAFIAU.  Sampel  penelitian  ini  adalah mikroba  udara  yang  terdapat  di  ruang mixing, ruang timbang, ruang koridor, dan rung filing kapsul pada Unit Produksi Non Betalaktam LAFIAU.

## Instrumen Penelitian Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah Nutrient  Agar (Himedia), Mannitol  Salt  Agar (Oxoid), Alkohol 70%, Alkohol 96%, Asam Sulfat p.a (Merck), Barium Chlorida p.a (Merck), Hidrogen  Peroksida  Teknis  (Merck), Kristal Violet (Merck), Safranin (Merck), Iodine  (Megasetia),  Kalium  Iodine  (JT Baker),  Natrium  Hidroksida  p.a  (Merck), Asam  Klorida  p.a  (Merck),  Aquadest, NaCl fisiologis.

## Alat
Neraca  Analitik  Mettler  Toledo ME204E, Autoclave All American Model No 75X, Colony Counter Health, Ika Oven 125 Basic Dry, Spektrofotometer UV-Vis Shimadzu  Seri  UV  19001,  pH  Meter, Inkubator  Lab  Companion,  Mikroskop, Laminar  Air  Flow,  Hot  Plate  Maspion, Mikro  pipet  Pipette,  dan  alat  –  alat  yang umum digunakan di laboratorium mikrobiologi

## Teknik Pengumpulan dan Analisis Data Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Alat  disterilkan  terlebih  dahulu, ditimbang media agar pada neraca analitik
sesuai  perhitungan.  Lalu Nutrient  Agar (NA)  dilarutkan  dalam beaker  glass , tambahkan  aquades  sesuai  kebutuhan. Pelarutan  dilakukan  di  atas hot  plate sambil diaduk. Media yang sudah terlarut dipindahkan  ke  dalam  erlenmeyer. Media Nutrient  Agar disterilkan  menggunakan autoclave selama 15 menit pada suhu 121⁰ C. Laminar  Air  Flow disterilkan  dengan alkohol  70%,  kemudian  nyalakan  api bunsen. Media Nutrient Agar dimasukkan ke dalam Laminar Air Flow . Selanjutnya, tanam media dalam cawan petri sebanyak 20 ml. Ditunggu sampai media membeku. Media Diinkubasi selama 1 X 24 jam.

## Pengambilan Sampel
Cawan petri berisi media Nutrient
Agar (NA) yang telah diinkubasi diletakkan  dan  dibuka  selama  4  jam  di dalam ruang produksi dengan titik di ruang mixing  dan  ruang  timbang.  Dalam  ruang mixing  di  simpan  4  cawan  petri  dan  di ruang  timbang  disimpan  4  cawan  petri yang  berisi  media  NA  ( Nutrient  Agar ).
Setelah  itu  cawan  petri  ditutup  dan diinkubasi  dalam  keadaan  terbalik  pada suhu 37°C selama 3-5 hari.
Perhitungan Koloni Bakteri Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC)
Koloni  yang  tumbuh  setelah diinkubasi selama 3-5 hari pada suhu 37°C dihitung pada media dengan menggunakan colony  counter dengan  satuan  CFU/m 3 . Koloni  yang  tumbuh  setelah  diinkubasi dapat dihitung dengan persyaratan sebagai berikut :
1. Dua atau lebih koloni yang bergabung menjadi  satu  merupakan  kumpulan koloni  yang  besar  dapat  dihitung sebagai  satu  koloni  (jumlah  koloni diragukan).
2. Suatu deretan atau rantai yang terlihat dalam  satu  garis  tebal  dihitung sebagai satu koloni.
3. Dua  koloni  yang  berhimpitan  dan masih  dapat  dibedakan  dihitung  Dua koloni.
4. Koloni  lebih  besar  dari  setengah cawan petri tidak dihitung.
5. Koloni bakteri dapat dihitung manual dengan  memberi  tanda  titik  pada koloni yang sudah dihitung.
Dilakukan  perhitungan  mikroba  rata-rata dengan rumus sebagai berikut :
Jumlah mikroba rata-rata = 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 𝑑𝑎𝑙𝑎𝑚 𝑠𝑒𝑚𝑢𝑎 𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛 𝑝𝑒𝑡𝑟𝑖 𝑏𝑎𝑛𝑦𝑎𝑘𝑛𝑦𝑎 𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛 𝑝𝑒𝑡𝑟𝑖
CFU Hasil  koloni  yang  didapat  kemudian dikonversikan  ke  dalam  satuan  CFU/m 3 menggunakan Metode Koch sedimentation method yang  mengacu  pada  Polish Standard PN 89/Z-04008/08 dengan rumus sebagai berikut :
CFU/m 3 = 𝑛 𝑥 10.000

## 𝑆 𝑥 𝑘
Keterangan : n = jumlah koloni pada cawan petri (CFU) S  =  luas  permukaan  cawan  petri  yang digunakan  (untuk  9  cm,  S  =  3,14  x  R 2 =
63,5 cm 2 ) k = koefisien waktu paparan dalam menit (k = 1 untuk 5 menit; k = 2 untuk 10 menit; k = 3 untuk 15 menit, dst.)
Metode Pembuatan Media MSA
(Manitol Salt Agar)
Alat  disterilkan  dengan  oven selama 2 jam pada suhu 180 0 C. Ditimbang media mannitol  salt  agar sebanyak  27,75 gram. Media mannitol salt agar dilarutkan dengan aquadest sebanyak 250 mL diatas kompor.  Setelah  larut,  dinginkan  media sampai suam  – suam kuku. Media diukur pHnya  ±  7,2  –  7,4.  Jika  pH  terlalu  asam tambahkan NaOH 0,1 N. Jika terlalu basa tambahkan  HCl  0,1  N  sampai  pH  yang telah ditentukan. Media yang sudah sesuai pHnya dipindahkan ke dalam Erlenmeyer. Media Mannitol  Salt  Agar disterilkan menggunakan  autoclave  selama  15  menit pada  suhu  121⁰  C. Laminar  Air  Flow disterilkan dengan alkohol 70%, kemudian nyalakan api bunsen. Media mannitol salt agar yang telah steril dimasukkan ke dalam Laminar  Air  Flow .  Selanjutnya,  tanam media dalam cawan petri sebanyak 20 ml. Tunggulah  sampai  media  membeku. Media Diinkubasi selama 1 X 24 jam.

## Purifikasi Bakteri Pada Media MSA
Disiapkan cawan petri yang berisi media  MSA.  Ambilah  satu  ose  biakan bakteri pada  media nutrient agar ,
kemudian  diinokulasikan  secara  higienis pada  permukaan  media  MSA  dengan goresan streak  T ,  selanjutnya  diinkubasi pada  suhu  ±37 0 C  selama  2  X  24  jam. Amati perubahan warna yang terjadi pada media.

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Disiapkan  sembilan  tabung  untuk pembuatan  suspensi  bakteri.  Tabung  diisi dengan  10  ml  NaCl  fisiologis.  1-2  ose bakteri  diambil  dan  disuspensikan  ke dalam tabung yang berisi NaCl fisiologis. Kocok hingga homogen.

## Perhitungan  Jumlah  Mikroba  Metode Turbidimetri
Alat  disterilkan  terlebih  dahulu kemudian  disiapkan  11  tabung  reaksi.  11 tabung di isi dengan BaCl 2 1% dan H 2 SO 4 1%  sesuai  dengan  standar  McFarland mulai  dari  skala  0,5  sampai  10.  Suspensi bakteri  diamati  kekeruhannya  dengan standar  McFarland  sampai  kekeruhannya setara  dengan  salah  satu  konsentrasinya.
Kemudian
diukur absorbansinya menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis dengan  panjang  gelombang  625  nm.  Dari hasil  absorbansi  dibuat  kurva  standar bakteri.

## Pewarnaan Bakteri
Alat  disterilkan  terlebih  dahulu. Kemudian  Bunsen  dinyalakan. object glass diambil menggunakan penjepit kayu. Sterilkan Object  glass di  atas  bunsen. Sterilkan  jarum  ose  dengan  cara  di panaskan di atas api bunsen sampai terlihat merah  menyala.  Setetes  aquades  diambil menggunakan jarum ose kemudian diletakkan  pada object  glass. Sterilkan biakan  bakteri  dengan  cara  di  gilirkan  di atas  bunsen.  Biakan    bakteri  diambil dengan  jarum  ose,  kemudian  diletakan pada object  glass dengan  cara  melingkar, usahakan  tidak  menumpuk  dan  terlihat merata.  O bject  glass dikeringkan  pada bunsen  sampai  benar-benar  mengering. Tahap  pertama  pewarnaan  dengan  kristal
violet. Kristal violet diambil menggunakan pipet  tetes,  kemudian  tetesi  2  –  3  tetes kristal  violet,  tunggu  selama  satu  menit. Setelah  satu  menit  dibilas  menggunakan aquades.  Tahap  kedua  pewarnaan  dengan iodine. Iodine diambil menggunakan pipet tetes,  kemudian  tetesi  2  –  3  tetes  iodine, tunggu  selama  satu  menit.  Setelah  satu menit  dibilas  menggunakan  aquades. Selanjutnya  lanjutkan  dengan  dialiri alkohol  95%  selama  5  detik,  lalu  dibilas menggunakan  aquades.  Tahap  akhir pewarnaan  dengan  safranin.  Saffranin diambil menggunakan pipet tetes, kemudian tetesi 2 – 3 tetes safranin, tunggu selama  satu  menit.  Setelah  satu  menit dibilas menggunakan aquades. Area object glass di  lap  dengan  tissu,  perhatikan jangan  sampai  terkena  cetakan.  Cetakan dikeringkan  dengan  di  gulir  di  atas Bunsen.  Setelah  kering  amati  preparat dibawah mikroskop.

## Uji Katalase
Disiapkan object  glass yang bersih, selanjutnya diambil satu ose biakan bakteri  yang  berasal  dari  kultur  media MSA dan dioleskan pada object glass . Di teteskan  Hidrogen  Peroksida  (H2O2)  3% pada  biakan  bakteri  di  atas object  glass . Diamati gelembung gas yang terbentuk.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Jumlah Angka Mikroba Rata - rata Metode Total Plate Count (TPC)
Hasil  perhitungan  jumlah  angka mikroba  udara  pada  ruang  mixing  dan ruang  timbang  Unit  Produksi  Non Betalaktam  LAFIAU  data  yang  diperoleh terdiri dari hasil jumlah rata  – rata koloni yang  berasal  dari  perhitungan  dengan Metode total  plate  count (TPC)  yang  di konversikan ke dalam Koch sedimentation method mengacu pada Polish Standard PN 89/Z-04008/08.  Data  hasil  perhitungan koloni  dan  konversi  berdasarkan Koch sedimentation  method adalah  sebagai berikut :
Tabel 4 .1 Hasil Perhitungan Koloni dan Konversi berdasarkan Koch Sedimentation Method
Titik No Cawan Petri Jumlah Koloni Bakteri Udara Jumlah Rata – rata Mikroba Ket. Standar <200 CFU/m 3 CFU CFU/m 3 Ruang Mixing M1 Jamur : 5 koloni Bakteri : 12 koloni 15,5 50,85 MS M2 Jamur : 9 koloni Bakteri : 14 koloni M3 Jamur : 1 koloni Bakteri : 4 koloni M4 Jamur : 2 koloni Bakteri : 15 koloni Ruang Timbang T1 Jamur : 2 koloni Bakteri : 5 koloni 10,25 33,62 MS T2 Jamur : 2 koloni Bakteri : 10 koloni T3 Jamur : 2 koloni Bakteri : 5 koloni T5 Jamur : 4 koloni Bakteri : 11 koloni Ruang Filling Kapsul F1 Jamur : 7 koloni Bakteri : 7 koloni 47,25 155,01 MS F2 Jamur : 2 koloni Bakteri : 156 koloni F3 Jamur : Tidak ada Bakteri : 3 koloni F4 Jamur : 1 koloni Bakteri : 13 koloni Ruang Koridor K1 Jamur : 1 koloni Bakteri : 2 koloni
26,6 87,27 MS K2 Jamur : 2 koloni Bakteri : 97 koloni K3 Jamur : Tidak ada Bakteri : 11 koloni K4 Jamur : 2 koloni Bakteri : 13 koloni K5 Jamur : 2 koloni Bakteri : 3 koloni Keterangan: MS = Memenuhi Syarat
TMS = Tidak Memenuhi Syarat
Berdasarkan tabel 4.1 hasil perhitungan  koloni  dan  konversi Koch sedimentation method di ruang mixing dan ruang  timbang  Unit  Produksi  Non Betalaktam  LAFIAU  menunjukkan  hasil bahwa  jumlah  angka  mikroba  udara memenuhi  persyaratan  batas  maksimum mikroba pada ruang kelas D sesuai dengan Peraturan  Badan  Pengawas  Obat  dan
Makanan  Nomor  34  Tahun  2018 Tentang Pedoman Cara Pembuatan Obat Yang Baik yakni  angka  bakteri  kurang  dari  200 CFU/m 3 .

## Metode Turbidimetri
Metode Turbidimetri adalah cara cepat untuk  menghitung  jumlah  bakteri  dalam
suatu  larutan  dimana  jumlah  bakteri dihitung dengan membandingkan kekeruhan  suspensi  bakteri  menggunakan larutan  standar  McFarland.  Hasil  yang didapatkan  dalam  perhitungan  mikroba udara  menggunakan  metode  turbidimetri dapat dilihat pada tabel 4.2 sebagai berikut
Tabel 4 .2 Hasil Perhitungan Metode Turbidimetri
Kurva  standar  bakteri  merupakan suatu kurva untuk menghitung jumlah sel bakteri secara tidak langsung, dengan cara meregresikan nilai absorbansi dan konsentrasi  ke  dalam  persamaan  garis kurva  standar  y  =  ax  +  b,  dimana  y  =
jumlah  koloni,  dan  x  =  besarnya  nilai absorbansi.  Data  data  tabel  4.2  di  atas
dibuat kurva standar yaitu grafik hubungan antara  Absorban  pada  sumbu  x  dengan konsentrasi  pada  sumbu  y.  Pada  gambar 4.1 didapatkan garis persamaan linear y = 5,1714x  –  0,0015.  Pada  gambar  4.2 didapatkan  garis  persamaan  linear  y  = 54075x  –  0,0319.    Kurva  standar  bakteri dapat dilihat sebagai berikut  :
Gambar 4 .1 Kurva Standar Bakteri Ruang
Mixing Titik No Cawan Petri Jumlah  Sel Bakteri (CFU/ml) Log Jumlah  Sel (CFU/ml) Absorbansi Konsentrasi Ruang Mixing M1 30 x 10 8 9,5 0,142 0,734 M2 21 x 10 8 9,3 0,111 0,575 M3 9,0 x 10 8 9 0,109 0,561 M4 21 x 10 8 9,4 0,127 0,653 Ruang Timbang T1 9,0 x 10 8 9 0,084 0,422 T2 30 x 10 8 9,5 0,137 0,708 T3 21 x 10 8 9,3 0,117 0,601 T4 27 x 10 8 9,4 0,125 0,645 Ruang Filling Kapsul F1 2,4 x 10 9 9,4 0,122 0,122 F2 9,0 x 10 8 9 0,113 0,113 F3 3,0 x 10 9 9,5 0,132 0,132 F4 9,0 x 10 8 9 0,114 0,114 Ruang Koridor K1 3,0 x 10⁹ 9,5 0,135 0,135 K2 6,0 x 10⁸ 8,8 0,104 0,104 K3 2,4 x 10⁹ 9,4 0,125 0,125 K4 3,0 x 10⁹ 9,5 0,148 0,148 K5 3,0 x 10⁹ 9,5 0,137 0,137
y = 5,1714x - 0,0015 R² = 0,9993 0 0,2 0,4 0,6 0,8 0 0,05 0,1 0,15 Kon se n tra si Absorbansi Ruang Mixing
Gambar 4. 2 Kurva Standar  Bakteri Ruang
Timbang Gambar 4.3 Kurva Standar Bakteri Ruang Filling Gambar 4.4 Kurva Standar Bakteri Ruang Koridor Karakteristik Jenis Bakteri Udara Menurut hafsan, dkk 2014
karakteristik  ialah  ciri  yang  dimiliki  oleh satu  bakteri  yang  dilihat  dari  bentuk, ukuran,  permukaan,  warna,  elevasi  dan margin.  Pada  pengamatan  karakteristik dapat  dilakukan  dengan  dua  cara  yaitu pengamatan makroskopis dan pengamatan mikroskopis. Hasil penelitian pada pengamatan morfologi secara mikroskopis dapat  dilihat  dari  beberapa  bentuknya seperti Coccus, Diplococcus, Staphylococcus,  Streptococcus,  Tetrads, Sarcina,  Cocco  basil,  Basil,  Streptobasil, dan Helical .
Uji katalase menggunakan hidrogen  peroksida  (H2O2)  3%  yang bertujuan untuk mengetahui adanya enzim katalase pada bakteri. Warna merupakan
salah satu pembeda yang lebih tampak dari suatu  bakteri.  Pewarnaan  Gram  adalah suatu  proses  untuk  mengetahui  bakteri yang  didapatkan  termasuk  bakteri  Gram negatif atau Gram positif. Diantara macam - macam bakteri yang diwarnai, ada yang menahan zat warna ungu dalam tubuhnya meskipun  telah  di  dekolorisasi  dengan alkohol.  Bakteri  yang  memberikan  reaksi semacam  ini  dinamakan  bakteri  Gram positif.  Sebaliknya,  bakteri  yang  tidak dapat menahan zat warna setelah dekolorisasi dengan alkohol akan kembali menjadi tidak berwarna dan bila dibiarkan pengecatan  dengan  warna  kontras,  akan berwarna sesuai dengan zat warna kontras. Bakteri  ini  dinamakan  bakteri  Gram negatif. Hasil penelitian karakteristik jenis bakteri  udara  bisa  dilihat  pada  tabel  4.3 sebagai berikut :
Tabel 4 .3 Karakteristik Jenis Bakteri Udara
Ttik No Cawan Petri Uji Katalase Pewarnaan Gram Positif Warna Bentuk Ruang Mixing M1 + Ungu Coccus Bergerombol M2 + Ungu Coccus Bergerombol y = 0,2028x - 0,0056 R² = 0,9997 0,11 0,12 0,13 0,14 0,55 0,6 0,65 0,7 Ab so rb an si Konsentrasi Ruang Filling Kapsul y = 5,4075x - 0,0319 R² = 1 0 0,2 0,4 0,6 0,8 0 0,05 0,1 0,15 K on se n tras i Absorbansi Ruang Timbang y = 0,1957x - 0,0011 R² = 0,9995 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0 0,5 1 Ab so rb an si Konsentrasi Ruang Koridor
Berdasarkan  hasil  penelitian  pada tabel 4.3 menunjukkan bahwa karakteristik sampel isolat bakteri dari pewarnaan gram merupakan jenis bakteri gram positif yang ditunjukkan dengan koloni berwarna ungu dan  bentuk Coccus (bulat)  bergerombol. Hasil  uji  katalase  terhadap  sampel penelitian  ini  didapatkan,  bahwa  semua isolat bakteri menunjukkan reaksi positif.

## Pembahasan
Uji cemaran mikroba udara dilakukan  untuk mengetahui berapa jumlah mikroba yang terdapat pada ruang mixing,  ruang  timbang,  ruang  filling  dan ruang koridor unit produksi non betalaktam  LAFIAU.  Ruang  mixing, ruang  timbang,  ruang  koridor,  dan  ruang filling  kapsul  ialah  ruangan  yang  dipilih untuk  mengetahui  kualitas  udara  dalam ruangan  tersebut  ditinjau  dari  aspek mikrobiologis.  Ruang  timbang  adalah ruang  dimana  bahan  baku  pertama  kali masuk sebelum dilakukan proses selanjutnya.  Ruang  mixing  adalah  ruang dimana  terdapat  proses  pencampuran bahan  baku.  Ruang  koridor  merupakan ruang  dimana  terdapat  aktivitas  berlalu- lalang  para  pelaku  produksi  untuk berpindah  dari  satu  tempat  ke  tempat lainnya.  Sedangkan  ruang  filling  kapsul merupakan ruang dimana terdapat aktivitas pengisian  obat  ke  dalam  kapsul  setelah bahan  baku  diolah.  Ruang  tersebut termasuk ke dalam klasifikasi ruang kelas D di industri farmasi.
Hasil  penelitian  koloni  yang tumbuh  setelah  diinkubasi  selama  3  –  5 hari pada suhu 37 ℃ dihitung menggunakan colony  counter dengan satuan  CFU/m 3 .  Pada  penelitian  ini, peneliti  menggunakan  media  Nutrient Agar  sebagai  media  pengambilan  sampel dengan paparan selama 4 jam yang di sebar di  beberapa  titik  masing-masing  ruangan. Berdasarkan tabel 4.1 menunjukkan bahwa jumlah mikroba udara pada ruang mixing sebesar  50,85  CFU/m 3 ,  ruang  timbang sebesar  33,62  CFU/m 3 ,  ruang  koridor sebesar  87,27  CFU/m 3 ,  dan  ruang  filling kapsul  sebesar  155,01  CFU/m 3 .  Angka mikroba  udara  tersebut  masih  sesuai dengan  persyaratan  batas  maksimum mikroba  udara  berdasarkan  Peraturan Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan Nomor  34  Tahun  2018   untuk  kelas  D jumlah  mikroba  udara  kurang  dari    200 CFU/m 3 .  Hal  ini  menunjukkan  bahwa sistem  tata  udara  di  Unit  produksi  Non Betalaktam  LAFIAU  telah  sesuai  dengan standar  CPOB.  Meskipun  jumlah  angka mikroba  masih  memenuhi  persyaratan, adanya  koloni  menunjukkan  pencemaran udara  yang  dapat  menjadi  resiko  adanya kontaminasi.
Tinggi  atau  rendahnya  jumlah angka  mikroba  udara  diduga  dipengaruhi oleh  kondisi  ruangan  saat  pengamatan. Saat  dilakukan  penelitian  keadaan  ruang sedang tidak ada produksi. Sehingga, tidak banyak  lalu  lalang  para  pekerja  serta frekuensi  terbukanya  pintu  sangat  minim dimana  partikel  maupun  mikroba  dari
M3 + Ungu Coccus Bergerombol M4 + Ungu Coccus Bergerombol Ruang Timbang T1 + Ungu Coccus Bergerombol T2 + Ungu Coccus Bergerombol T3 + Ungu Coccus Bergerombol T4 + Ungu Coccus Bergerombol Ruang Filling Kapsul F1 + Ungu Coccus Bergerombol F2 + Ungu Coccus Bergerombol F3 + Ungu Coccus Bergerombol F4 + Ungu Coccus Bergerombol Ruang Koridor K1 + Ungu Coccus Bergerombol K2 + Ungu Coccus Bergerombol K3 + Ungu Coccus Bergerombol K4 + Ungu Coccus Bergerombol K5 + Ungu Coccus Bergerombol
koridor  tidak  terlalu  banyak  terbawa  ke dalam  ruangan.  Ditinjau  dari  pernyataan Dai  et  al.  (2015)  tingginya  aktivitas manusia di suatu ruangan dapat meningkatkan  jumlah  mikroba  udara hingga  132%.  Sehingga  industri  farmasi harus lebih memperhatikan kondisi sistem tata udaranya.
Selain  itu,  beberapa  faktor  yang mempengaruhi  perbedaan  jumlah  bakteri di  ruangan  adalah    proses  pembersihan ruangan  yang  dilakukan  harus  sesuai dengan standar maka akan mempengaruhi jumlah  koloni  bakteri  yang  ada  pada ruangan tersebut, kondisi pintu tidak dalam keadaan tertutup yang dapat menyebabkan kontaminasi  dari  luar  ruangan  dan kontaminasi mikroorganisme dalam ruangan  juga  dapat  dipengaruhi  oleh beberapa  faktor  seperti  luas  ventilasi, kepadatan hunian, tingkat aktivitas individu yang berada dalam ruangan, luas ruangan yang ditempati .
Setelah  dilakukan  perhitungan jumlah  mikroba  dengan  Metode  TPC, perhitungan  dilanjutkan  dengan  metode turbidimetri. Berdasarkan hasil penelitian, perhitungan  diawali  dengan  membuat larutan  standar  McFarland  mulai  dari konsentrasi  0,5  sampai  10.  Selanjutnya, dilakukan  pengujian  terhadap  semua sampel yang mana pengujian ini mengamati kekeruhan  dari  suspensi bakteri  dan  menyetarakan  dengan  standar McFarland  yang  sudah  ada  sampai kekeruhannya sama.  Setelah  didapat  hasil jumlah sel dan log jumlah sel bakteri, maka dilanjutkan dengan
perhitungan
menggunakan metode
turbidimetri,
dimana  metode  ini  mengukur  nilai Absorbansinya
menggunakan alat spektrofotometer  UV  –  Vis  pada  Panjang gelombang  625  nm.  Rentang  absorbansi yang  baik  pada  suspensi  bakteri  adalah pada  rentang  0,08  –  0,1.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  absorbansi  yang dihasilkan  memenuhi  persyaratan  dengan nilai  absorbansi  paling  kecil  0,084  dan yang paling tinggi 0,0148. Larutan standar yang  digunakan  adalah  larutan  standar McFarland  konsentrasi  0,5.  Dimana  hasil absorbansi dari larutan standar nya adalah 0,097.
Selanjutnya, peneliti membuat kurva  standar  antara  absorbansi  dengan konsentrasinya.  Didapatkan  hasil  garis persamaan  regresi  linear  y  =  5,1714x  – 0,0015 dengan nilai R 2 0,9993 untuk ruang mixing;  ruang  timbang  didapatkan  garis persamaan  linear  y  =  54075x  –  0,0319 dengan  nilai  R 2 1;  ruang  koridor didapatkan  garis  persamaan  linier  y  = 0,1957x – 0,0011 dengan nilai R 2 0,9995; ; ruang  filling  kapsul  didapatkan  garis persamaan  linier  y  =  0,2028x  –  0,0056 dengan nilai R 2 0,9997 Nilai R2 mendekati satu  menunjukkan  bahwa  kurva  tersebut linier. Hal ini sesuai dengan  teori Hukum Lambert-Beer  yang  menyatakan  bahwa semakin besar konsentrasi larutan standar semakin besar absorbansinya.
Setelah dilakukan perhitungan jumlah angka mikroba dilanjutkan dengan identifikasi  karakteristik  jenis  mikroba yang terdapat pada sampel. Pada pengamatan  karakteristik  jenis  mikroba dapat  dilakukan  dengan  dua  cara  yaitu pengamatan makroskopis dan pengamatan mikroskopis.  Mikroba  di  udara  bersifat sementara  dan  beragam  diantaranya termasuk bakteri, kapang, maupun khamir. Kehadiran  jasad  hidup  tersebut  di  udara, ada  yang  dalam  bentuk  vegetatif  (tubuh jasad) maupun dalam generatif (umumnya spora).  Mikroba  yang  paling  banyak ditemukan  adalah  jenis  bakteri  seperti Staphylococcus  sp,  Streptococcus  sp . Beberapa  jenis  lain  yang  terdeteksi mencemari udara antara lain: Pseudomonas  sp,  Klebsiella  sp,  Proteus sp,  Bacillus  sp,  dan jamur Aspergillus. Berdasarkan hasil pengamatan makroskopis  menunjukkan  bahwa  jenis mikroba  yang  terdapat  pada  media  NA ditemukan  beberapa  jenis  mikroba  terdiri dari genus bakteri yang diduga Staphylococcus ,  spesies  jamur  genus Aspergillus serta  adanya  spesies  jamur berkembangbiak dengan membentuk spora kecil yang dapat dengan mudah tumbuh di udara.  Tubuh Aspergillus  Sp biasanya cepat  tumbuh  berwarna  putih,  kuning, kuning  coklat,  coklat,  sampai  hitam  atau hijau. Untuk memperoleh identifikasi yang sempurna  maka  selanjutnya  dilakukan pengamatan  secara  mikroskopis  dan  uji biokimia  dimana  sebelum  dilakukan
pengujian,  spesies  bakteri  yang  terdapat pada  sampel  media  NA  dilakukan purifikasi ke dalam media MSA cemaran. Dimana  purifikasi  ini  bertujuan  untuk memisahkan  koloni  bakteri  agar  hanya didapatkan  bakteri  murni  (Austin,  n.d.)
Berdasarkan hasil purifikasi bakteri diketahui  bahwa  ditemukan  bakteri  udara genus Staphylococcus pada semua sampel. Bakteri  genus Staphylococcus dapat dibedakan  terutama  berdasarkan  warna dan  bentuk  koloni  pada  media  msa. Penelitian  ini  berkaitan  dengan  penelitian yang  dilakukan  oleh  rahmawati  dan kurniatuhadi  (2017)  yakni  koloni  bakteri spesies Staphylococcus aureus pada media msa  membentuk  koloni  yang  berwarna kuning  keemasan  sedangkan  bakteri spesies
Staphylococcus epidermidis berwarna putih atau merah muda. Adanya perbedaan  warna  disebabkan  karena bakteri  spesies Staphylococcus  aureus dapat  memfermentasi  mannitol  menjadi asam yang kemudian merubah warna dari merah  menjadi  kuning  sedangkan  bakteri genus Staphylococcus yang  lain  tidak dapat memfermentasi mannitol (Rahmi et al., 2015).
Selanjutnya dilakukan pengamatan karakteristik secara mikroskopik  dengan  cara  pengecatan gram.  Pengecatan  Gram  merupakan pengecatan  diferensial  yang  digunakan secara luas dalam bakteriologi. Pengecatan Gram dibagi menjadi dua kelompok yaitu Gram  negatif  dan  Gram  positif.  Larutan yang  digunakan  dalam  pengecatan  Gram adalah  larutan  kristal  violet,  lugol  iodin, alkohol, dan safranin. Larutan kristal violet berperan sebagai cat utama yang mewarnai sel  bakteri  menjadi  ungu.  Larutan  Lugol iodin  berfungsi  sebagai  mordan  yang meningkatkan  interaksi  antar  sel  bakteri dan cat utama. Larutan Alkohol berfungsi sebagai decoloriser yang  akan  mencuci kristal  violet.  Gram  positif  akan  tetap mempertahankan  kompleks  kristal  violet iodin,  sedangkan  Gram  negatif  akan menjadi tidak berwarna. Larutan Safranin berperan  sebagai counterstain yang  akan memberikan warna merah pada sel bakteri (Harly  &  L,  2002)  Dalam  identifikasi morfologi  secara  mikroskopik  dilakukan dengan
menggunakan mikroskop.
Pengamatan  ini  dilakukan  untuk  melihat bentuk dan warna sel di bawah mikroskop dengan  perbesaran  10  x  1,25.  Perbedaan warna  antara  bakteri  Gram  positif  dan bakteri  Gram  negatif  disebabkan  oleh adanya  perbedaan  struktur  pada  dinding selnya (Sylvia, 2008).
Berdasarkan  hasil    penelitian didapatkan hasil sesuai bahwa dari seluruh sampel  bakteri  berwarna  ungu  dan berbentuk Coccus bergerombol.  Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  sampel merupakan jenis bakteri gram positif. Hal ini  sejalan  dengan  pernyataan  bahwa Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram  positif  dan  berbentuk  kokus  yang menghasilkan warna ungu pada pewarnaan Gram.  Warna  ungu  disebabkan  karena bakteri  mempertahankan  warna  pertama, yaitu  kristal  violet.  Perbedaan  sifat  Gram dipengaruhi oleh kandungan pada dinding sel, yaitu bakteri Gram positif kandungan peptidoglikan  lebih  tebal  jika  dibanding dengan  Gram  negatif  (Fardiaz,  1993). Pewarnaan Gram bertujuan untuk mengamati  morfologi  sel  bakteri  dan mengetahui kemurnian sel bakteri (Fardiaz, 1993)
Selanjutnya  dilakukan  pengujian biokimia dengan uji katalase. Uji Katalase bertujuan  untuk  menentukan  kemampuan bakteri  dengan  menghasilkan  enzim katalase. Dilakukan dengan larutan hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 ).  Hasil  uji katalase  terhadap  delapan  sampel  yang tumbuh  pada  media  MSA  didapatkan, bahwa semua isolat (bakteri) menunjukkan reaksi  positif  sesuai  tabel  4.3  yang ditunjukkan  dengan  adanya  gelembung udara  yang  terbentuk  setelah  diberi  2  –  3 tetes larutan hidrogen peroksida. Fungsi uji katalase  pada  bakteri  berbentuk  kokus adalah untuk membedakan antara staphylococcus dan streptococcus, dimana kelompok staphylococcus bersifat katalase positif.  Katalase  merupakan  enzim  yang mengkatalisa penguraian hidrogen peroksida  menjadi  H 2 O  dan  O 2 .  Menurut
Schliefer 1986 Semua
galur staphylococcus adalah  katalase  positif.
Sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  hasil uji  katalase  ini  merupakan  bakteri  genus staphylococcus.
Penunjang  kritis  industri  farmasi adalah udara. Sistem tata udara yang baik di industri farmasi adalah  adanya HVAC.
Dimana dalam HVAC terdapat salah satu komponen  penting  yaitu High  Efficiency Particulate Air (HEPA). HEPA
merupakan  sebuah  filter  khusus  yang dirancang  dapat  menyaring  udara  sampai dengan  partikel  debu  ukuran  mikron. Berdasarkan  hasil  penelitian,  kualitas udara  di  ruang  mixing,  ruang  timbang, ruang  koridor,  dan  ruang  filling  kapsul Unit  produksi  LAFIAU  dapat  dikatakan baik. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian yang  menunjukkan  bahwa  jumlah  angka mikroba  rata  –  rata  dibawah  batas maksimum  yakni  <  200  CFU/m 3 .      Dari hasil  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  ruang mixing  dan  ruang  timbang  memiliki ventilasi  yang  baik  dengan  filter  HEPA
sebagai pengendali udara untuk menghindari  kontaminasi  pencemaran baik  langsung  ataupun  silang.  Meskipun jumlah  angka  mikroba  masih  memenuhi persyaratan,  adanya  koloni  menunjukkan pencemaran  udara  yang  dapat  menjadi resiko adanya kontaminasi. Sehingga suatu industri harus lebih memperhatikan sistem tata  udaranya.    Selain  itu,  menerapkan sistem hygiene dan  sanitasi  yang  baik mampu    menunjang  mutu    dan    kualitas produk    yang    diproduksi.  Higienitas  dan sanitasi mampu menghilangkan pencemaran    silang    baik    dari  faktor manusia  maupun  lingkungan  produksi.
Menurut (Adawiyah, 2017) juga menyatakan pandangan yang sama bahwa semakin tinggi hygiene dan sanitasi  suatu proses    produksi  maka  akan  menurunkan jumlah mikroba produk tersebut.
Penutup Berdasarkan hasil penelitian mengenai  Uji  Cemaran  Mikroba  Udara Pada  Beberapa  Ruang  Produksi  Non Betalaktam  LAFIAU  Sesuai  Dengan
Standar  CPOB  Tahun  2018,  dapat disimpulkan bahwa :
1. Jumlah  angka  mikroba  udara  pada ruang timbang sebesar 33,62 CFU/m 3 , ruang mixing sebesar 50,85 CFU/m 3 , ruang  koridor  sebesar  87,27  CFU/m 3 dan  ruang  filling  kapsul  sebesar 155,01 CFU/m 3 sehingga telah sesuai dengan  Peraturan  Badan  Pengawas Obat dan Makanan Nomor 34 Tahun 2018 Tentang Pedoman Cara
Pembuatan Obat Yang Baik (CPOB).
2. Jenis  mikroba  yang  terdapat  pada ruang  timbang,  ruang  mixing,  ruang koridor,  ruang  filling  kapsul  adalah bakteri  genus Staphylococcus  Sp , jamur  genus Aspergillus  Sp, serta
mikroba lain yang belum teridentifikasi.
3. Jumlah mikrobiologi udara pada pada koridor dan ruang filling kapsul Unit Produksi  Non  Betalaktam  LAFIAU tidak  lebih  dari  200  CFU/m3  hal  ini berarti sistem tata udara HVAC yang terdapat pada ruang tersebut berfungsi dengan baik sehingga kualitas udaranya memenuhi persyaratan sesuai  Peraturan  Badan  Pengawas Obat dan Makanan Nomor 34 Tahun 2018 Tentang Pedoman Cara Pembuatan Obat Yang Baik (CPOB).
Disarankan  bagi  Akademik,  diharapkan kepada  mahasiswa  yang  ingin  melakukan penelitian dapat melanjutkan penelitian ini di unit produksi yang berbeda dan metode pengukuran  yang  berbeda,  dan  bagi LAFIAU  Kepada  LAFIAU  diharapkan untuk  selalu  melakukan hygiene dan sanitasi secara berkala dan selalu memonitoring kebersihan ruangan.

## REFERENSI
Adawiyah,  R.,  2017.  Hubungan  hygiene
sanitasi  produksi  dengan  jumlah mikroba pada petis hasil olahan desa Sungonlegowo  kecamatan  Bungah kabupaten  Gresik  (thesis).  In:
Malang:Universitas Muhammadiyah Malang. Amalia,  T.  (2018).  Tanggung  Jawab Industri Farmasi Terhadap Penerapan  Aturan  Pemerintah
Tentang  Cpob. Jurnal  Inkofar ,
1 (1).
Austin,  T.  X.,  n.d. Manitol  Salt  Agar.  In:
s.l.:Austin Community College District.
BPOM, 2018. Cara Pembuatan Obat yang Baik. Jakarta: s.n.
Fardiaz,  S.,  1993.  Analisis  Mikrobiologi Pangan.  In:  Jakarta:  PT  Prasindo Persada.
Harly, J. P. & L, M. P., 2002. Laaboratory exercises  in  microbiology  5  th  ed..
In:  New  York:  The  mcGrAw-hill
Componies, p. 466.
Kusnoputranto, 2002. Kesehatan Lingkungan Pemukiman dan Perkotaan. s.l.:FKM UI.
Menkes  ,  R.,  2010. Peraturan  Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 1799 MENKES/PER/XII/2010 tentang Industri Farmasi. s.l.:s.n. Menkes, n.d. Peraturan Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia  No.
48 tahun 2016 Standar Keselamatan dan  Kesehatan  Kerja  Kantor. Jakarta: s.n . Sugarman, S. C., 2007. HVAC Fundamentals 2 Edition. The Fairmont Press.
Waluyo,  L.,  2016. Mikrobiologi  Umum. Malang: Universitas Muhmmadiyah Malang Press.