KUALITAS LINGKUNGAN DAN AKTIVITAS ENZIM PENCERNAAN UDANG VANNAMEI (Litopenaeus vannamei) PADA BERBAGAI KONSENTRASI PROBIOTIK BIOREMEDIASI-Bacillus sp.

## THE ENVIRONMENTAL QUALITY AND ENZYME ACTIVITIES OF DIGESTIVE VANNAMEI SHRIMP (Litopenaeus vannamei) ON VARIOUS CONCENTRATIONS OF BIOREMEDIATION-Bacillus sp. PROBIOTICS
Siti Aslamyah 1)
1) Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Hasanuddin, Jalan Perintis Kemerdekaan Km 10, Makassar 90245 Telp./faks. 0411-586025 HP. 081342765705, e-mail: siti_aslamyah_uh@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Probiotik  Bioremediasi- Bacillus sp.  dengan  komposisi  bakteri  yang menguntungkan, serta  bekerja secara sinergis pada  lingkungan budidaya  dan pada saluran  cerna  inang.  Selain,  dapat  memperbaiki  kualitas  lingkungan  juga  dapat meningkatkan  aktivitas  enzim  pencernaan  udang.  Pada  akhirnya  menyebabkan peningkatan pertumbuhan dan memperkecil resiko timbulnya penyakit  pada udang. Tujuan  dari  penelitian  ini  menentukan  konsentrasi  optimum  aplikasi  probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.    dalam  media  budidaya  udang  vannamei.    Penelitian didesain  dalam  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan  konsentrasi probiotik  Bioremediasi- Bacillus sp.  yaitu  kontrol  (tanpa  probiotik);  0,5;  1,0;  1,5  ppm per  minggu,  masing-masing  dengan  3  ulangan.    Selama  penelitian,  udang  uji dipelihara dalam  akuarium kaca berkapasitas  30 L dengan  kepadatan 4 ekor/L  dan diberi  pakan berbentuk  powder dengan  kadar protein 52% sebanyak  70-100% total biomassa.    Media  air  yang  digunakan  bersalinitas  ±  30  ppt  sebanyak  25  L.    Hasil penelitian  menunjukkan  terjadi  perbaikan  kualitas  lingkungan  budidaya  pada perlakuan  aplikasi  probiotik,  terutama  kadar  amoniak  lebih  rendah  dibandingkan kontrol.  Kadar enzim pencernaan  -amilase dan protease juga meningkat signifikan dibandingkan  kontrol.    Keadaan  inilah  yang  menyebabkan  sintasan  dan pertumbuhan  udang vannamei  yang  mendapat perlakuan pemberian  probiotik  lebih tinggi  dibandingkan  kontrol,  sedangkan  berbagai  konsentrasi  probiotik  tidak menghasilkan respon perbedaan. Dapat disimpulkan aplikasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.  dengan  konsentrasi  0,5  ppm  per  minggu  dalam  media  budidaya  dapat memperbaiki  kualitas  lingkungan  budidaya  dan  aktivitas  enzim  pencernaan - amilase  dan  protease,  sehingga  dapat  meningkatkan  sintasan  dan  pertumbuhan udang vannamei.
Kata kunci: Bioremediasi, Bacillus sp. enzim, probiotik, udang vannamei

## ABSTRACT
Bioremediation-Bacillus  sp.  probiotics  with  the  composition  of  the  beneficial bacteria,  as  well  as  working  synergistically  on  aquaculture  and  environment  in  the host  gastrointestinal  tract.  In  addition,  it  can  improve the  quality  of  the  environment can  also  increase  the  activity  of  digestive  enzymes  shrimp.  Ultimately  lead  to increased  growth  and  minimize  the  risk  of  disease  of  shrimp.  The  purpose  of  this study to determine the optimum concentration of applications Bioremediation-Bacillus sp.  probiotics  vannamei  shrimp  culture  in  the  media.  The  study  was  designed  in  a Completely  Randomized  Design  (CRD)  with  4  treatment  concentration  of bioremediation-Bacillus sp. probiotics the control (without probiotic), 0.5; 1.0, 1.5 ppm per  week,  with  three  replications each. During  the study,  the test  shrimp  rearing   in glass aquaria with a capacity of 30 L with a density of 4 fish / L and fed the form of powder  with  52%  protein  content  as  much  as  70-100%  of  total  biomass.  Water medium used ± 30 ppt salinity  as much as 25 L. The results showed improvement of environmental  quality  cultivation  occurs  in  the  probiotic  treatment  applications, particularly  ammonia  levels  lower  than  controls.  Digestive  enzyme  levels  of - amylase  and  protease  also  increased  significantly  compared  to  controls.  This condition  which  cause  the  vannamei  shrimp  survival  and  growth  were  receiving higher  than  controls of  probiotic  treatment,  while various  concentrations of probiotic did  not  produce  differences  in  response.  Application  of  Bioremediation-Bacillus  sp. probiotics  can  be  concluded  with  a  concentration  of  0.5  ppm  per  week  in  culture media  can  improve  the  quality  of  the  environment  cultivation  and  the  activity  of digestive enzymes  -amylase and protease, thus increasing the survival and growth of vannamei shrimp . Key words : Bioremediation, Bacillus sp. enzyme, probiotic, vannamei shrimp

## PENDAHULUAN
Udang  vannamei  ( Litopenaeus vannamei )  merupakan  jenis  udang yang  dapat  dibudidayakan  di  tambak selain udang windu ( Penaeus monodon Fab.).    Udang  vannamei memiliki keunggulan, yaitu dapat hidup pada rentang salinitas lebar ( euryhaline )  dari  5  hingga  30  ppt, mampu beradaptasi terhadap kepadatan  tinggi,  serta  tumbuh  baik dengan  pakan  berprotein rendah (Haliman dan Adijaya, 2005). Demikian  juga,  perubahan  salinitas
khususnya pada salinitas tinggi.
Disamping  itu,  udang  vannamei  juga mempunyai  laju  pertumbuhan  yang relatif  cepat  (Rahardjo et  al .,  2003).
Dengan  demikian,  udang  vannamei potensial untuk dikembangkan mendampingi udang windu. Budidaya udang vannamei tidak saja dapat menghasilkan produksi  yang  lebih  tinggi,  tetapi  juga mampu membangkitkan usaha pertambakan nasional. Namun demikian, kejayaan budidaya
vannamei  juga  menimbulkan  masalah
hal. 161-178
baru,  yaitu  munculnya  jenis  penyakit TSV  ( Taura  Syndrom  Virus )  yang sudah  menyerang  udang  vannamei sejak  tahun  2003  dan  juga  rentan pada  infeksi WSSV ( White  Spot
Syndrome  Virus )  (Suprapto,  2005). Meskipun demikian, dengan menerapkan sistem pentokolan
diharapkan  serangan  penyakit,  serta kematian tinggi dapat dikendalikan.
Seiring  dengan  meningkatnya ukuran  udang,  pemberian  pakan  juga semakin  tinggi.    Apabila  pakan  yang diberikan  tidak  termakan  seluruhnya oleh  udang,  dapat menyebabkan penumpukan  sisa  pakan  yang  tidak termakan.    Penumpukan  sisa  pakan, kotoran  udang,  dan  jasad  plankton yang mati dapat memperburuk kondisi kualitas  lingkungan  budidaya  udang vannamei. Salah satu alternatif pemecahan masalah ini adalah melalui  aplikasi  probiotik  pada  media pemeliharaan.  Probiotik  berasal  dari kata  Pro  yang  berarti  pendukung  dan Bios  berarti  kehidupan,  Jadi  probiotik adalah  untuk  kehidupan.  Tannock (1997) mengemukakan
bahwa probiotik adalah sel-sel mikrobial hidup yang  diberikan  sebagai  suplemen dengan tujuan meningkatkan kesehatan dan keseimbangan mikroorganisme inang.
Irianto dan  austin  (2002), serta Irianto  (2003)  mengemukakan  untuk mencegah memburuknya kualitas lingkungan,  dapat  dilakukan  dengan pemberian  probiotik  sejak  awal,  yang bertujuan  untuk  menguraikan  bahan- bahan  organik  yang  ada  dalam tambak. Dengan demikian, kualitas air tidak  menurun  dan  tetap  terjaga kualitasnya. Bakteri probiotik pengurai, berupa bakteri nitrifikasi dan denitrifikasi, bakteri fotosintetik
anoksigenik,  serta  bakteri  heterotropik dapat  meningkatkan  kualitas  air  dan sedimen  yang  kandungan  amoniak, nitrit,  nitrat,  dan  H 2 S  berada  diluar ambang  batas  yang  diperbolehkan untuk  budidaya  udang  (Widiyanto, 2006). Bakteri lain yang sering digunakan  sebagai  probiotik  adalah Bacillus sp. Peran Bacillus sp. sebagai probiotik untuk mengoptimalkan pertumbuhan,  efisiensi  pakan,  dan ketahanan  udang  windu  terhadap bakteri  patogen  telah  dilakukan  oleh Rengpipat et al . (2000) dan Gatesoupe (1999). Bakteri ini mempunyai keunggulan bahwa
sporanya  dapat  dibuat  dalam  bentuk kering  sehingga  mudah  ditambahkan ke  dalam  pakan  buatan  (Gatesoupe, 1999; Rengpipat et al ., 1998 ; Moriaty,
1998).  Penggunaan  probiotik  pada
Siti Aslamsyah:  Kualitas Lingkungan dan Aktifitas Enzim  ......
akuakultur bertujuan untuk
mengendalikan  mikrob  dalam  air, dalam  saluran  pencernaan  inang, serta  untuk  memperbaiki  kualitas lingkungan  perairan  ( Bioaugmentasi ) melalui  proses  biodegradasi  (Anonim, 2008).    Fuller  (1992)  mengemukakan probiotik  berperan  dalam    beberapa mekanisme  yaitu  1)  menghambat reaksi-reaksi yang menghasilkan
toksin;  2)  merangsang  reaksi-reaksi enzimatis  yang  terlibat  dalam  proses detoksifikasi
bahan-bahan yang
potensial  sebagai  toksin  baik  yang
berasal  dari  luar  maupun  dari  dalam tubuh;  3)  merangsang  enzim  inang yang
terlibat dalam
proses
pencernaan atau menggantikan enzim yang  tidak  ada;  dan  (4)  sintesis vitamin  atau  zat  makanan  essensial yang kurang tersedia dalam pakan
Salah  satu  produk  probiotik
yang direkomendasikan adalah Bioremediasi- Bacillus sp. dengan komposisi bakteri yang menguntungkan,  serta  bekerja  secara sinergis  pada  lingkungan  budidaya dan  pada  saluran  cerna  inang.  Selain dapat
memperbaiki kualitas lingkungan,  sehingga  keseimbangan optimum  ekologi  tambak  udang  dapat tercipta,  juga  dapat  meningkatkan
aktivitas  enzim  pencernaan  udang budidaya.
Pada akhirnya
menyebabkan
peningkatan
pertumbuhan  udang  dan  memperkecil resiko  timbulnya  penyakit.  Informasi yang  penting  dikaji  adalah  aplikasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dengan  konsentrasi  yang  tepat  dalam media budidaya, sehingga menghasilkan kualitas lingkungan yang  optimal  dan  aktivitas  enzim pencernaan yang tinggi untuk mendukung pertumbuhan dan sintasan  pada pentokolan udang vannamei.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilaksanakan pada  bulan  Februari  sampai  Maret
2008,                                    di  Laboratorium Basah, Balai Riset Perikanan Budidaya Air Payau (BRPBAP), Dusun Manrimisi, Desa Mattirotasi, Kabupaten Maros, Sulawesi Selatan.

## Materi Penelitian
Hewan  Uji  yang  digunakan adalah udang vannamei yang berukuran  PL  12  dengan  bobot  rata- rata  0,001  g.  Benih  udang  tersebut diperoleh  dari  panti  pembenihan  di Kabupaten Barru.
Bahan  uji  yang  digunakan adalah  probiotik  komersial  dengan
kandungan  bakteri  campuran  antara bakteri  bioremediasi    ( Nitrosomonas sp., Pseudomonas sp., Aerobacter sp., dan Nitrobacter sp.)  dan Bacillus sp., dengan total populasi 6,82 x 10 10 CFU ( Colony Forming Unit ) per mL.
Pakan  yang  digunakan  adalah pakan komersil bentuk powder produksi Seaster  Mini  Grain dengan komposisi protein 52%, lemak 3%, abu 15% dan serat kasar 3%.

## Wadah Pemeliharaan
Wadah  pemeliharaan  berupa akuarium  kaca  bervolume  30  L berjumlah  12  buah  yang  ditutup dengan  waring.  Pada  bagian  dasar wadah diberi shelter yang  terbuat dari nilon, yang berfungsi untuk meminimalisir  kanibalisme.  Agar  tidak mengapung, shelter diberi  pemberat batu kerikil. Sebelum digunakan semua  peralatan  tersebut  terlebih dahulu disucihamakan dan dikeringkan.

## Rancangan Percobaan
Penelitian didesain dalam Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan  4  perlakuan  dan  setiap
perlakuan  masing-masing  mempunyai
3 ulangan. Dengan demikian,
penelitian ini terdiri atas 12 unit satuan
percobaan. Penempatan unit-unit percobaan  dilakukan  secara  acak sesuai  petunjuk  Gasperz    (1991).
Perlakuan  yang  diujikan  pemberian berbagai konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dalam media budidaya, yaitu :
A.  Tanpa probiotik (Kontrol)
B.   Probiotik  Bioremediasi- Bacillus sp. dengan  konsentrasi  0,5  ppm  per minggu
C.  Probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dengan  konsentrasi  1  ppm  per minggu
D.  Probiotik  Bioremediasi- Bacillus sp. dengan  konsentrasi  1,5  ppm  per minggu

## Prosedur Penelitian
Prosedur  penelitian  meliputi
tahap persiapan, penebaran, pemeliharaan,  pengamatan  sampel,
dan pengukuran peubah. Tahap persiapan  meliputi  penyediaan  alat dan  bahan.  Wadah pemeliharaan  diisi air  media  dengan  salinitas  ±  30  ppt sebanyak  25  L  dan  setiap  wadah diberi  aerasi.  Sebelum  wadah  diisi udang  uji,  terlebih  dahulu  dilakukan pengukuran  kadar  amoniak    awal, suhu,  salinitas,  pH,  dan  oksigen terlarut.  Selanjutnya,  setiap  wadah
diisi  benur  dengan  kepadatan  4  ekor /L atau 100 ekor/wadah.
Sebelum udang ditebar
dilakukan  penimbangan  bobot  awal dan  aklimatisasi  terhadap  suhu  dan salinitas. Hal ini  dilakukan  agar udang tidak  mengalami  stres  yang  berakibat pada  kematian.  Aklimatisasi  suhu dilakukan  dengan  cara  meletakkan plastik pengemas yang berisi udang uji ke dalam media pemeliharaan.
Tindakan  tersebut  dilakukan  hingga suhu  air  dalam  kemasan  plastik mendekati  suhu  air  media,  yang dicirikan  dengan  munculnya  embun dalam plastik kemasan. Setelah aklimatisasi  suhu  selesai  dilanjutkan dengan aklimatisasi salinitas. Aklimatisasi salinitas dilakukan
dengan  cara  memasukkan  air  yang ada  dalam  wadah  sebanyak  1-2  L  ke dalam  kemasan  plastik  udang  uji.  Hal ini dilakukan hingga salinitas air dalam kemasan  plastik  mendekati  salinitas dalam  akuarium.  Setelah  udang  uji ditebar,  dilakukan pemberian probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dengan cara
menebar  langsung  ke  dalam  media pemeliharaan sesuai dengan konsentrasi  perlakuan.    Pemberian probiotik diulangi setiap minggu sampai  akhir  pengamatan.  Percobaan dilakukan selama sebulan. Persentase pakan yang diberikan adalah 70-100%
dari  total  biomassa  dengan  frekuensi pemberian  3  kali  sehari,  yaitu  pada pukul 07.00, 12.00, dan 16.00 wita.

## Peubah yang diamati

## 1. Parameter Kualitas Air
Parameter  kualitas  air  yang diamati selama
penelitian berlangsung,  meliputi    suhu,  oksigen terlarut,  pH,  salinitas,  dan  amoniak. Suhu  dan  oksigen  terlarut  diukur dengan  menggunakan  DO  Meter  (YSI 58, Yellow  Springs  Instrumen co.  Inc. USA), salinitas dengan hand
refractometer  (Atago  S/Mill  –  E  – Japan), pH dengan kertas lakmus, dan amoniak dengan spektrofometer.
Pengukuran  dilakukan  setiap  2  kali sehari  sekali pada   pagi dan sore hari sekitar jam 06.30 dan 17.00 wita untuk parameter  suhu,  oksigen  terlarut, salinitas, dan  pH, sedangkan amoniak diukur setiap minggu.
2.    Aktivitas  Enzim  Pencernaan  ( - amilase dan Protease)
Analisis aktivitas enzim pencernaan  protease  dan -amilase
pada  udang  uji  dilakukan  pada  akhir percobaan.    Prosedur  memperoleh ekstrak enzim dikerjakan  pada suhu  0 sampai  4 o C  dengan    tujuan  enzim dalam  kondisi  tidak  aktif.    Sampel saluran  pencernaan  dengan  akuades
hal. 161-178
dan dikeringkan dengan kertas pengisap.  Sampel   diambil   sebanyak 1 g    dan   dihancurkan dengan  mortal sampai  halus  dan  dihomogenkan dengan    10  mL  akuades  yang  dingin,
kemudian
disentrifius dengan kecepatan  15.000  rpm  selama  20 menit  pada  suhu  4 o C,  supernatannya diambil  sebagai  ekstrak  enzim  kasar dan  digunakan  sebagai  sampel  untuk pengujian  aktivitas  enzim.    Aktivitas enzim protease dan -amilase dianalisis  dengan  mengikuti  prosedur Bergmeyer dan Grassi (1983). Metode analisis aktivitas enzim protease    menggunakan  campuran buffer  borat  0,01  M  pH  8,0  (1,0  mL), substrat  kasein  20  mg/mL pH  8,0  dan HCl  0,05  mg/mL  ditambahkan  ekstrak enzim  dalam  CaCl 2 10  mmol/L  (1,0 mL).  Blanko  adalah  campuran  buffer borat 0,01 M pH 8,0 (1,0 mL), substrat kasein 20 mg/mL pH 8,0 dan HCl 0,05 mg/mL  ditambah  akuades  (1,0  mL). Standar adalah campuran buffer borat 0,01  M  pH  8,0  (1,0  mL),  substrat kasein 20 mg/mL pH 8,0 dan HCl 0,05 mg/mL  ditambah  tirosin  standar  5 mmol/L).  Campuran  diinkubasi  dalam shaker  water  bath selama  10  menit pada  suhu  37 0 C.      Reaksi  dihentikan dengan  menambah  3,0  mL  TCA ( Trichloroasetat  Acid ).    Kemudian
larutan  sampel  ditambah  0,2  mL akuades, blanko dan standar ditambah 0,2    ekstrak  enzim  dalam  CaCl 2 10 mmol/L.    Diamkan  pada    suhu  37 o C selama 10 menit, selanjutnya disentrifius  dengan  kecepatan  3500 rpm  selama  10  menit.  Semua  larutan ditambah fitrat (1,5 mL), Na 2 CO 3 0,4 M (5,0 mL), dan folin ciocalteau (1,0 mL). Diamkan  pada    suhu  37 o C  selama 20 menit, kemudian absorbansinya diukur pada  panjang  gelombang  578  nm. Metode  analisis  aktivitas  enzim - amilase  menggunakan      substrat soluble  starch  dalam  buffer  sitrat  pH 5,7  (1,0  mL)  ditambahkan  ekstrak enzim  (1,0  mL).  Blanko adalah campuran  soluble  starch  dalam  buffer sitrat  pH  5,7  (1,0  mL)  dan  akuades (1,0  mL).  Campuran diinkubasi dalam shaker  water  bath selama  30  menit pada  suhu  32 0 C.    Reaksi  dihentikan dengan  menambah  3,0  mL  DNS ( Dinitrosalicylic  acid )  dan  dipanaskan pada  suhu  100 o C  selama  10  menit.
Sampel  diencerkan  dengan  akuades sampai  volume  tertentu  tergantung kepekatan warna dan didiamkan selama  beberapa  menit  pada  suhu ruang, kemudian absorbansinya diukur pada  panjang  gelombang  578  nm. Kurva  standar  yang  digunakan  adalah
campuran  maltosa  dan  soluble  starch dalam buffer sitrat pH 5,7 (1,0 mL).

## 3. Sintasan
Sintasan  udang  uji  dihitung awal  dan  akhir  percobaan  dengan menggunakan  rumus  Effendie  (1997), sebagai berikut :
Dimana :   S  =  Sintasan  (%) N t =  Jumlah  udang  yang hidup pada  akhir penelitian (ekor)
N o =  Jumlah  udang  pada awal penelitian (ekor) 4. Pertumbuhan Bobot Mutlak
Pengukuran  bobot  udang  uji
dilakukan pada awal dan akhir penelitian, dengan menggunakan timbangan elektrik. Pertambahan bobot mutlak dihitung dengan menggunakan  rumus  Effendie  (1997) sebagai berikut:
Dimana :
W =  Pertumbuhan  bobot  mutlak
(g)
W t =  Rata-rata  bobot  udang  uji pada akhir penelitian (g) W o =  Rata-rata  bobot  udang  uji pada awal penelitian  (g)

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis dengan  menggunakan  analisis  ragam (ANOVA).  Hasil  yang  memperlihatkan pengaruh  nyata,  untuk  menentukan perlakuan  yang  terbaik  dilakukan  uji lanjut  W- Tuckey (Gasperz,  1991).
Peubah  kualitas  air  dianalisis  secara deskriptif berdasarkan tingkat kelayakan kehidupan udang
vannamei.    Sebagai  alat  bantu  uji statistik  digunakan  paket  program SPSS versi 15,0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Parameter  Kualitas Air
Hasil  pengukuran  parameter kualitas air media pemeliharaan udang vannamei yang diberi berbagai konsentrasi  Bioremediasi- Bacillus sp. selama  penelitian  meliputi    suhu, oksigen  terlarut,  derajat  keasaman, salinitas,  dan  amoniak  disajikan  pada pada Tabel 1.
Tabel  1.   Kisaran  parameter    kualitas    air    pada  berbagai  konsentrasi  probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. selama akhir penelitian Konsentrasi Probiotik (ppm) Suhu Air ( o C) Oksigen Terlarut (ppm) Salinitas pH Amoniak Awal Kontrol 25,7 – 27,6 5,8 – 7,3 30 – 34 7,4 – 8,0 0,5 25,7 – 27,7 5,6 – 6,9 30 – 34 7,5 – 7,7 1 25,7 – 27,8 5,7 – 7,4 30 – 34 7,5 – 7,7 1,5 25,7 – 27,7 5,2 – 7,1 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0324 Minggu I Kontrol 25,7 – 27,6 5,8 – 7,3 30 – 34 7,4 – 8,0 0,1053 0,5 25,7 – 27,7 5,6 – 6,9 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0142 1 25,7 – 27,8 5,7 – 7,4 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0185 1,5 25,7 – 27,7 5,2 – 7,1 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0124 Minggu II Kontrol 25,7 – 27,6 5,8 – 7,3 30 – 34 7,4 – 8,0 0,1239 0,5 25,7 – 27,7 5,6 – 6,9 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0161 1 25,7 – 27,8 5,7 – 7,4 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0147 1,5 25,7 – 27,7 5,2 – 7,1 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0157 Minggu III Kontrol 25,7 – 27,6 5,8 – 7,3 30 – 34 7,4 – 8,0 0,1324 0,5 25,7 – 27,7 5,6 – 6,9 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0167 1 25,7 – 27,8 5,7 – 7,4 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0174 1,5 25,7 – 27,7 5,2 – 7,1 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0157 Minggu IV Kontrol 25,7 – 27,6 5,8 – 7,3 30 – 34 7,4 – 8,0 0,1368 0,5 25,7 – 27,7 5,6 – 6,9 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0395 1 25,7 – 27,8 5,7 – 7,4 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0299 1,5 25,7 – 27,7 5,2 – 7,1 30 – 34 7,5 – 7,7 0,0116 Aktivitas Enzim Pencernaan ( -Amilase dan Protease) Hasil  analisis  aktivitas  enzim pencernaan,  meliputi -amilase  dan
protease  pada  berbagai  konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. pada  akhir  percobaan  disajikan  pada Tabel 2. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa pemberian berbagai konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.  pada  media budidaya  berpengaruh  sangat  nyata
(p<0,05)  terhadap  aktivitas  enzim  - amilase dan protease udang vannamei. Uji lanjut W-Tuckey menunjukkan bahwa aktivitas enzim  - amilase dan protease udang vannamei yang  mendapat  aplikasi    probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dalam media dengan  konsentrasi  0,5;  1,0;  dan  1,5 ppm  sama  pada  setiap  perlakuan, namun nyata lebih tinggi dibandingkan dengan  aktivitas  enzim  -amilase  dan protease  udang  vannamei  yang  tidak mendapatkan aplikasi
probiotik
hal. 160-176
Siti Aslamsyah:  Kualitas Lingkungan dan Aktifitas Enzim  ......
Fish Scientiae, Volume 1 No. 2, Desember 2011,
Bioremediasi- Bacillus sp. dalam media (kontrol).
Tabel 2.  Aktivitas  enzim  pencernaan -amilase  dan  protease  pada  berbagai konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. pada akhir penelitian Konsentrasi Probiotik (ppm) Aktivitas Enzim (IU/g/menit) Kontrol 0,5 1,0 1,5 -amilase 60,3 ± 3,8 b 82,7 ± 2,7 a 85,6 ± 2,5 a 85,8 ± 3,7 a Protease 65 ± 3,1 b 86 ± 3,1 a 87,08 ± 2,1 a 89,11 ± 3,2 a
Keterangan :   Huruf yang berbeda pada pada baris yang sama menunjukkan adanya perbedaan antar perlakuan (P<0,05)
Tabel 3.  Rata-rata sintasan udang vannamei pada berbagai konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. pada akhir penelitian Sintasan Rata-rata  sintasan  pentokolan udang vannamei pada berbagai
konsentrasi  probiotik  Bioremediasi-
Bacillus sp.selama  percobaan  dapat dilihat pada Tabel 3.
Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa pemberian berbagai konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.  pada  media
pemeliharaan tidak berpengaruh nyata (p>0,05)  terhadap  sintasan  udang vannamei. Dengan demikian, pemberian probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.  pada  media pemeliharaan baik  pada konsentrasi 0,5;  1,0; maupun  1,5  menghasilkan  sintasan udang  vannamei  yang  sama  dengan kontrol.

## Pertumbuhan
Rata-rata  pertumbuhan  bobot mutlak udang vannamei pada berbagai konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. selama percobaan dapat dilihat pada Tabel 4. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa pemberian berbagai konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. berpengaruh sangat nyata (p<0,05) terhadap pertumbuhan  bobot  mutlak  udang vannamei. Uji lanjut W-Tuckey menunjukkan bahwa pertumbuhan Konsentrasi Probiotik (ppm) Sintasan  (%) 0 (Kontrol) 86,33   ±   4,163 a 0,5 92,33    ±  2,886 a 1,0 94,33    ±  1,527 a 1,5 94,33    ±  4,041 a
bobot  mutlak  udang  vannamei  pada konsentrasi  Bioremediasi- Bacillus sp. 0,5;  1,0;  dan  1,5  ppm  sama  pada setiap  perlakuan,  namun  nyata  lebih tinggi dibandingkan
dengan pertumbuhan  bobot  mutlak  udang vannamei  yang  tidak  mendapatkan aplikasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dalam media (kontrol).
Tabel 4. Rata-rata pertumbuhan bobot mutlak  (g)    udang  vannamei pada  berbagai  konsentrasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. pada akhir penelitian Keterangan :   Huruf  yang  berbeda  pada kolom yang sama menunjukkan  perbedaan yang nyata antar perlakuan  pada  taraf  5% (p<0,05)

## Pembahasan
Respon  parameter  kualitas  air, meliputi suhu, oksigen terlarut, derajat keasaman,  dan  salinitas  terhadap probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. sama  pada  setiap  konsentrasi  yang diberikan.    Kecuali  kadar  amoniak pada  media  kontrol  lebih  tinggi dibandingkan  yang  mendapat  aplikasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.
Kisaran  suhu  yang  diperoleh  selama penelitian  berkisar  antara  25  dan
27 o C. Kisaran suhu tersebut merupakan  kisaran  yang  optimal  bagi pertumbuhan udang vannamei. Haliman dan Adijaya (2005) mengemukakan  bahwa  suhu  yang optimal  untuk  pertumbuhan  udang vannamei  berkisar dari  25–32 o C. Selanjutnya  menurut  Cholik  (1988) udang  vannamei  memiliki  toleransi suhu yang tinggi, yaitu  dari 16–32 o C.
Kadar  oksigen  terlarut  yang diperoleh  selama  penelitian  pada perlakuan kontrol berkisar dari 5,8–7,3 ppm,  perlakuan  aplikasi  probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.    dengan konsentrasi  0,5  berkisar  dari  5,6–6,9 ppm,  konsentrasi  1,0  berkisar  dari 5,7–7,4  ppm,  dan  konsentrasi  1,5 berkisar  dari  5,2–7,1  ppm.  Kisaran kadar  oksigen  terlarut  layak  untuk
kehidupan udang. Boyd (1990) mengemukakan  konsentrasi  oksigen terlarut  yang  baik    adalah  >  3  ppm.
Standar  kualitas  air  budidaya  udang vannamei untuk oksigen terlarut
(Anonim,  2004)  adalah  dengan  nilai optimal  4  ppm  dengan  batas  toleransi 0,8  ppm.  Menurut  Haliman  dan
Adijaya (2005) bahwa udang vannamei membutuhkan oksigen terlarut tidak kurang dari 3 mg/L air. Konsentrasi Probiotik (ppm) Bobot  (%) 0 (Kontrol) 2,047 ±  0,007 b 0,5 5,384 ±  0,112 a 1,0 5,413  ±  0,028 a 1,5 5,514  ±  0,084 a
Siti Aslamsyah:  Kualitas Lingkungan dan Aktifitas Enzim  ......
Nilai pH yang diperoleh selama penelitian    untuk  perlakuan  kontrol berkisar antara 7,4 dan 8,0;  perlakuan aplikasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.  dengan  konsentrasi  0,5  berkisar antara  7,5  dan  7,7;  konsentrasi  1,0 berkisar  antara  7,5  dan  7,7;  dan konsentrasi  1,5  berkisar  antara  7,5 dan  7,7.  Nilai  pH  semua  perlakuan dengan  penambahan  probiotik  dalam media  air  pemeliharaan  cenderung stabil.  Hal  ini  diduga  sebagai  akibat dari  kinerja    probiotik  Bioremediasi- Bacillus sp. khususnya bakteri Bacillus sp.  dan Pseudomonas sp.  yang mengurai  bahan  organik,  sehingga menghasilkan senyawa  sederhana seperti  nitrogen.  Hasil  pembentukan nitrogen  dimanfaatkan  oleh  bakteri untuk  perkembangbiakannya.  Hal  ini sesuai pendapat Dwidjoseputro (1994) menyatakan  bahwa  N  adalah  salah satu  unsur  yang  dibutuhkan  bakteri sebagai sumber nutrien untuk
pembentukan  protoplasma.  Namun demikian  nilai  pH  untuk  perlakuan kontrol  masih  layak  untuk  kehidupan dan  pertumbuhan  udang  vannamei.
Haliman dan Adijaya (2005) mengemukakan  bahwa  pH  yang  ideal untuk  udang  vannamei  berkisar  dari 7,5 dan 8,5.
Kadar  amoniak  yang  diperoleh selama  penelitian  untuk  perlakuan
kontrol  berkisar  dari  0,1053–0,1364 ppm,  perlakuan  aplikasi  probiotik Bioremediasi- Bacillus sp.    dengan konsentrasi  0,5  berkisar  dari  0,0142– 0,0395  ppm,  konsentrasi  0,1  berkisar dari  0,0147  –  0,0299  ppm,  dan konsentrasi  1,5  berkisar  dari  0,0116– 0,0157  ppm.  Menurut  Boyd  (1990) kandungan  amoniak  yang  aman  bagi kehidupan  udang  adalah  dibawah  0,1 ppm. Kisaran  tersebut  masih  layak untuk budidaya udang vannamei, serta belum  bersifat  racun  bagi  udang karena didukung oleh pH yang berada dalam  kisaran  optimum. Buwono (1993)  mengemukakan    bahwa  kadar amoniak  akan  bersifat  racun  apabila pH air tinggi. Ahmad (1991) menyatakan bahwa konsentrasi
ammonium  dan  amoniak  dalam  air membentuk  suatu  keseimbangan  dan dipengaruhi  oleh  pH.  Pada  pH  tinggi akan  terjadi  pembentukan  NH 3 dan sebaliknya  pada  pH  rendah  terjadi pembentukan  NH 4 + .  Akumulasi  NH 4 + tidak  membahayakan  karena  NH 4 + tidak  mampu  menembus  dinding  sel insang  udang.  Konsentrasi  amoniak yang  optimal  udang  vannamei  adalah 0,03–0,25  ppm  (Adiwijaya et  al ., 2003).  Kisaran  nilai  amoniak  untuk perlakuan kontrol lebih tinggi dibanding perlakuan lainnya. Kandungan amoniak yang tinggi
dalam  air  dapat  menjadi  penyebab udang mengalami stress sampai terjadi kematian,  kalau konsentrasinya terlalu  ekstrim.  Amoniak  terbentuk akibat  adanya  proses  perombakan sisa pakan yang tidak termakan, feces udang,  dan  bahan  organik  lainnya dalam air. Boyd (1990) mengemukakan  bahwa  amoniak  akan
diubah  menjadi  nitrit  oleh  adanya aktivitas bakteri Nitrosomonas sp.  dan selanjutnya  nitrit  akan  segera  diubah menjadi  nitrat  oleh  adanya  aktivitas bakteri Nitrobacter sp.  Kondisi  optimal untuk  kedua  proses  tersebut  adalah apabila  jumlah  oksigen  mencukupi, kapasitas  buffer  baik,  pH  netral,  dan suhu air rendah.
Cukup tingginya kadar amoniak pada  perlakukan  kontrol  dibandingkan pada perlakuan aplikasi probiotik yang diduga menyebabkan perbedaan sintasan  pada  udang  uji.    Walaupun perbedaan  tersebut  tidak  signifikan. Hal  ini  terjadi  karena  kadar  amoniak pada  perlakuan  kontrol  masih  berada pada kisaran yang dapat ditolerer oleh udang vannamei, disamping ketersediaan  pakan  yang  cukup  dan daya  dukung  parameter  air  media lainnya.  Dengan  demikian,  udang tetap survive untuk  mempertahankan sintasannya.      Fenomena  yang  sama
diperoleh  oleh  Heriyanti  (2004)  yang melakukan penelitian penggunaan probiotik  bakteri Pseudomonas sp. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa perlakuan tidak memberikan pengaruh yang  nyata  pada  sintasan  udang windu. Namun dalam hal yang berbeda,  hasil  penelitian  Widyapuri (2000) menunjukkan bahwa penggunaan probiotik epicin
memberikan  pengaruh  yang  nyata pada  sintasan  pasca  larva  udang windu.  Hal  yang  sama  diperoleh Nurhidayah et  al .  (2006)  dengan menggunakan  probiotik  YL1,  BL  542, BT  950,  MY  1112,  dan  BN  2067 memberikan  pengaruh  yang  nyata pada  sintasan  udang  windu.  Adanya perbedaan tersebut diduga perbedaan kandungan probiotik yang digunakan.
Penambahan probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dengan
kandungan  bakteri Nitrosomonas sp., Pseudomonas sp., Aerobacter sp., dan Nitrobacter sp.  dan Bacillus sp. dalam media budidaya dapat meningkatkan aktivitas enzim -
amilase  dan  protease.    Peningkatan aktivitas  enzim  pencernaan  yang berasal  dari  kontribusi  mikrob  pada saluran pencernaan ikan juga dilaporkan  oleh  beberapa  peneliti (Gatesoupe,  1999;  Handayani et  al .,
Siti Aslamsyah:  Kualitas Lingkungan dan Aktifitas Enzim  ......
2000;  Robertson et  al .,  2000;  Murni, 2004;  dan  Aslamyah,  2006).    Namun demikian,  penambahan  konsentrasi probiotik  yang  lebih  tinggi  tidak memberikan perbedaan. Hal ini diduga bakteri  probiotik    tersebut  sudah menghasilkan  enzim  sebelum  keluar bersama  feses.      Disamping  itu, menurut Lesel (1990)  jumlah populasi bakteri  dalam  saluran  pencernaan sangat  dipengaruhi  oleh  lingkungan, terutama  suhu.    Ikan  merupakan hewan poikilothermal, sehingga populasi  bakteri  probiotik  tersebut pada  kondisi  terjadi  perubahan  suhu, hanya  sebagian  yang  dapat  berperan secara aktif dalam saluran pencernaan ikan.    Selain  itu  Atlas  dan  Richard (1993)  menyatakan  bahwa  kepadatan bakteri yang tinggi akan menyebabkan adanya persaingan dalam pengambilan  substrat  atau  terjadi akumulasi  metabolit  yang  dihasilkan tinggi sehingga aktivitas bakteri menjadi terhambat.  Dengan demikian, populasi bakteri yang masuk ke dalam saluran  pencernaan  akan  mengalami penyesuaian agar tercipta keseimbangan kepadatan bakteri dalam saluran pencernaan. Bakteri probiotik yang ditambahkan  melalui media disamping dapat menyeimbangkan ekologi media.  Bakteri yang masuk ke saluran pencernaan udang dapat meningkatkan  keseimbangan  mikrob dalam  usus  dan  juga  berperan  dalam memproduksi enzim pencernaan eksogen protease, amilase dan lipase. Dengan  demikian  probiotik  berperan sebagai growth promotor bagi pertumbuhan udang vannamei. Moriaty  (1998)  mengatakan  bahwa terjadinya  peningkatan  sintasan  dan pertumbuhan pada udang yang
ditambahkan Bacillus sp.  disebabkan adanya  enzim  dan  antimikroba  yang dihasilkan oleh bakteri tersebut. Gatesoupe (1999) melaporkan
aktivitas  bakteri  dalam  pencernaan akan  berubah  dengan  cepat  ketika ada  mikrob  yang  masuk  melalui  air dan  pakan.    Hal  ini  menyebabkan pada saluran pencernaan terjadi keseimbangan  antara  bakteri  yang sudah  ada  dalam  saluran pencernaan dengan bakteri yang
masuk Handayani et  al .  (2000),  menyatakan bahwa  pemanfaatan  bakteri  pengurai, seperti  bakteri  nitrifikasi  dan Bacillus sp.  pada  pemeliharaan  larva  udang windu
membuktikan dapat
memberikan  pengaruh  positif  bagi pertumbuhan  udang.    Enzim  yang dihasilkan  oleh  bakteri  pengurai  yang ikut  termakan  akan  membantu  proses pencernaan di dalam saluran pencernaan  udang.    Hal  ini  demikian
hal. 161-178
karena bakteri tersebut dapat memproduksi enzim protease,
amilase, dan lipase.  Namun demikian, nilai  aktivitas  enzim  yang  dihasilkan tidak  dipengaruhi  oleh  dosis  probiotik dari 10 sampai 30 mL/kg pakan.
Peningkatan  aktivitas  enzim dalam  saluran  pencernaan  udang  uji menyebabkan peningkatan daya cerna dan konsumsi pakan. Dengan demikian, nutrien lebih banyak diserap dan ketersediaan energi untuk pertumbuhan  terpenuhi.  Hal  inilah yang menyebabkan tingkat pertumbuhan  udang  vannamei  yang mendapat aplikasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. dalam media lebih  tinggi  dibandingkan  kontrol. Wang et  al .  (1999)  mengemukakan bahwa fungsi penting dalam penggunaan probiotik pada akuakultur adalah  mempertahankan  kestabilan parameter kualitas air dengan menurunkan  kadar amoniak,  gas hidrogen sulfida, dan gas-gas beracun lainnya. Secara tidak langsung, probiotik berfungsi meningkatkan kesehatan  inang  melalui  kemampuan pemanfaatan  mikroorganisme  dalam memecah atau mengurai rantai panjang  karbohidrat,  protein,  dan lemak  dengan enzim  yang dimilikinya.
Pemecahan menjadi
molekul
sederhana akan mempermudah organisme  mencerna  serta  menyerap sari  pakan  (Devaraja et  al .,  2002).
Dengan demikian, proses metabolisme  dalam  tubuh  organisme akan berlangsung secara cepat sehingga  memicu  ketersediaan  energi yang dapat menunjang pertumbuhan. Rendahnya pertumbuhan
udang  vannamei  pada  perlakuan kontrol,  disamping  aktivitas  enzim pencernaannya lebih rendah dibandingkan  udang  vannamei  yang mendapat aplikasi probiotik Bioremediasi- Bacillus sp. juga
disebabkan  sisa-sisa  pakan  dan  hasil eskresi  dari  larva  udang  vannamei. Hal  ini  ditandai  dengan  meningkatnya kandungan  amoniak  mencapai  nilai 0,1053–0,1364 ppm.
Dengan demikian,  terjadi  penggunaan  energi yang  tinggi  untuk  beradaptasi  dengan lingkungan  hidupnya  sehingga  porsi energi  untuk  pertumbuhan  rendah.
Chen dan Chen (1998) mengemukakan  bahwa  peningkatan kadar  amoniak  dapat  menyebabkan kerusakan  pada  organ-organ  tubuh yang  ada  kaitannya  dengan  transpor oksigen  pada  insang,  sel-sel  eritrosit, dan  jaringan  penghasil  eritrosit  yang menurunkan  kemampuan  darah  untuk mengangkut oksigen. Selanjutnya,
meningkatnya  kadar  amoniak  dalam darah  akan  mempengaruhi  pH  darah, sehingga  menghambat  reaksi  katalisis enzimatik  dan  stabilitas  membran yang akhirnya akan berpengaruh pada pertumbuhan udang (Boyd, 1990).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Aplikasi probiotik Bioremediasi-
Bacillus sp.  dengan  konsentrasi  0,5 ppm per minggu dalam media budidaya  dapat  memperbaiki  kualitas lingkungan  budidaya  dan  aktivitas enzim  pencernaan -amilase  dan protease, sehingga dapat meningkatkan sintasan dan pertumbuhan udang vannamei.

## DAFTAR  PUSTAKA
Adiwijaya  D.,  P.  R.  Sapto,  E.  Sutikno,  Sugeng,  dan  Subiyanto,  2003.  Budidaya Udang  Vannamei  ( Litopenaeus  vannamei )  Sistim  Tertutup    yang  Ramah Lingkungan.  Depertemen  Kelautan  dan  Perikanan,  Dirjen  Perikanan Budidaya, Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Payau, Jepara.
Ahmad T. 1991. Pengelolaan Peubah Mutu Air yang  Penting Dalam Tambak Udang Intensif. Balai Penelitian Perikanan Budidaya  Pantai, Maros.
Anonim.    2004.  Pentingnya  Probiotik  Bagi  Tambak  Udang.  Majalah  CP  Shrimp News. Edisi 6 juni 2004, Surabaya.
Anonim.  2008.  Pengelolaan  Lingkungan  dan  Kesehatan  Ikan. www.  Google.com. Diakses pada tanggal 18 April 2008 .
Aslamyah  S. 2006. Peningkatan Peran Mikroba Saluran Pencernaan Untuk Memacu Pertumbuhan  Ikan  Bandeng  (desertasi).  Program  Pascasarjana,  Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Atlas  M.R.  dan  B.  Richard  .  1993.    Microbial  Ecology  Fundamental  and  Aplication.
Third Edition.  The Berjami Cumming Public Company Inc.
Bergmeyer H.U. dan  M.  Grassi .  1983.  Methods of Enzymatic Analysis. Volume ke- 2. Verlag Chemie, Weinheim.
Boyd  C.  E.  1990.  Water  Quality  in  Ponds  for  Aquaculture.  Brimingham  Publishing Co., Alabama, USA.
Buwono  I.D.  1993.    Tambak  Udang  Windu  Sistem  Pengelolaan  Intensif.  Kanisius. Yogyakarta.
Chen J. C. dan J.S. Chen.  1998.  Acid-Base Balance, Ammonia and Lactate Levels in the Hemolymph of Peneaeus japonicus During Aerial Exposure. Comp. Biochem. Physiol , 121A : 257-262.
Cholik  F.  1988.  Pembagunan  Tambak  Moderen.  Direktorat  Jenderal  Perikanan, Lembaga Penelitian Perikanan Darat, Bogor.
Devaraja  T.N.,  F.M.  Yusoff,  dan  M.  Syarif.  2002.  Changes  in  Bacterial  Populations and  Shrimp  Production  in  Pons  Treated  With  Commercial  Microbial Products. Aquaculture , 206 : 245-256.
Dwidjoseputro D. 1994. Dasar-dasar Mikrobiologi. Penerbit Djambatan, Jakarta.
Effendie M. I. 1997. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusatama, Yogyakarta. Fuller  R.  1992.  History  and  Development  of  Probiotics.    In  Probiotics  the  Scientific Basis.  Chapman and Hall.
Gasperz V. 1991. Metode Perancangan Percobaan. CV Armico, Bandung. Gatesoupe  F.J.  1999.  The  Use  of  Probiotics  in  Aqaculture. Aquaculture ,  180;  147- 165.
Haliman  R,W.  dan  S.D.  Adijaya.  2005.  Udang  Vannamei  (Pembudidayaan  dan Prospek  Pasar  Udang  Putih  yang  Tahan  Penyakit).  Penebar  Swadaya, Jakarta.
Handayani  R.,  C.  Kokarkin,  S.M.  Astuti.    2000.    Pemanfaatan  Enzym  Bakteri Remedian pada Pemeliharaan Larva Udang windu. Laporan BBAP, Jepara.
Heriyanti. 2004.  Pengaruh  Bakteri  Probiotik  ( Pseudomonas sp.)  Terhadap  Sintasan Pasca  Larva  Udang  Windu  ( Penaeus  monodo n)  yang  Dipaparkan Vibrio harveyi .  Skripsi.  Program  Studi  Budidaya  Perairan,  Fakultas  Ilmu  Kelautan dan Perikanan, Universitas Hasanuddin, Makassar.
Irianto A. 2003. Probiotik Akuakultur. Gajah Mada University Press, Yogyakarta.
Irianto A. dan   B. Austin. 2002. Probiotics in  Aquaculture . J. of Fish  Diseases , 25  : 633-642.
Lesel R. 1990.  Thermal Effects on Bacterial in the Gut of Rainbow trout and African catfish. Dalam R.  Lele  (Ed.), Microbiology  in  poelithrens .    Elsevier. Amsterdam.  Hlm 33-38.
Moriarty  D.J.W. 1998.  Control  of  Luminuous Vibrio Species  in  Penaeid  Aquaculture Ponds. Aquaculture , 164 : 351–358.
Murni.    2004.    Pengaruh  penambahan  bakteri  probiotik Bacillus sp.  dalam  pakan buatan terhadap pencernaan, efisiensi pemanfaatan pakan dan pertumbuhan ikan  gurame  ( Osphronemus  gouramy Lacepede)  (tesis).    Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Nurhidayah,  Muliani,  dan  Nurbaya.  2006.  Penggunaan  Bakteri  Probiotik  yang diisolasi dari Laut, Daun Mangrove dan Tambak pada Pemeliharaan Udang Windu  (Penaeus  monodon)  dalam  Skala  Laboratorium.  Laporan  Hasil Penelitian. Balai Riset Perikanan Budidaya Air Payau, Maros.
Siti Aslamsyah:  Kualitas Lingkungan dan Aktifitas Enzim  ......
Fish Scientiae, Volume 1 No. 2, Desember 2011,
Rahardjo S. P., Sutikno, Subiyanto, dan Adiwijaya. 2003. Petunjuk Teknis Budidaya Udang  Vannamei  ( Litopenaeus  vannamei )  Sistem  Sirkulasi  Tertutup.
Direktorat  Jenderal  Perikanan  Budidaya,  Departemen  Kelautan  dan Perikanan, Jakarta.
Rengpipat S., W. Phianphak, S. Piyatratitivorakul, dan P. Menasveta.  1998.  Effects of Probiotic Bacterium on Black Tiger Shrim Penaeus monodon Survival and Growth. Aquaculture , 167; 301-313.
Rengpipat  S.,  W.  Phianphak,  S.  Piyatratitivorakul,  dan  P.  Menasveta.      2000. Immunity and Hand Sement in Black Tiger Shrimp ( Penaeus monodon ) by a Probion Bacterium ( Bacillus S11). Aquaculture p. 271-288.
Robertson P.A.W., C.O. Dowd, C. Burrells, P. Williams, dan B. Austin.  2000.  Use of Carnobacterium sp.  as  a  probiotic  for  Atlantic  salmon  ( Salmo  salar L.)  and rainbow trout ( Oncorhynchus mykiss, Walbaum). Aquaculture 185:235-243.
Tannock G.W.  1999.  Probiotics: A critical review . England:  Horizon Scientific Pr.
Suprapto. 2005. Petunjuk Teknis Budidaya Udang Vannamei ( Litopenaus vannamei ). CV. Biotirta, Bandar Lampung.
Wang  Y.G.,  O.L.  Tan,  K.L.  Lee,  M.D.  Hassan,  dan  M.  Shariff.  1999.  Health Management  of  Shrimp  During  Grow-Out. News  From  Around  the  World. Infofish International , 4 : 30–35.
Widiyanto, 2006. Bioremediasi yang Menghidupkan Lagi Tambak Udang. Republika, 31 oktober 2006. http://www. Republika.com. Diakses 12 April 2008.
Widyapuri W. 2000. Pengaruh Pemberian Epicin Terhadap Kandungan Amoniak dan Sintasan Pasca Larva  Udang Windu ( Penaeus monodon ). Skripsi. Program Studi  Budidaya  Perairan,  Jurusan  Perikanan,  Fakultas  Ilmu  Kelautan  dan Perikanan, Universitas Hasanuddin, Makassar.
hal. 161-178