## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK BUAH Rivina humilis L.TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN Escherichia coli
Mariyam 1 , P. Santoso 1 , Chairunnisa 1
1 Program Studi Kimia, Jurusan Sains, Institut Teknologi Sumatera, Jalan Terusan Ryacudu, Lampung Selatan, 35365, Indonesia
E-mail: mariyam@ki.itera.ac.id

## Abstract
Rivina humilis L. is herbaceous bushy perennial plant found in shrubs. The fruit extract of Rivina humilis  L.  had  experienced  antibacterial  activity  against  K.  pneumoniae  and  E.  coli  using  agar diffusion  method.  The  crude  extract  of  nonpolar  fraction  (n-hexane)  of  Rivina  humilis  L.  showed negative antibacterial  activity  against  K.  pneumoniae  and  E.  coli   whereas  the  methanolic  extract has antibacterial activity with 12 mm of inhibition zone for K. pneumoniae and 10 mm for E.coli  in 1  mg/ml  concentration.  Determination  of  MIC  (Minimum  Inhibitory  Concentration)  was  conducted with  variation of  concentration  (mg/ml)  1;  0.8;  0.6;  0.2;  0  (methanol  96%  as  negative control),  and chloramphenicol (positive control). The result of MIC determination against K. pneumoniae showed that the width and the inhibition zone index in the minimum concentration (0.2 mg/ml) were 7 mm and 1.36 respectively. While against E.coli, MIC determination exhibited positive result at 0.6 mg/ml with the width and the inhibition zone index were 8 mm and 1.78 respectively.
Keyword:  Rivina humilis L., K. pneumoniae, E.coli,  antibacterial

## 1. Pendahuluan
Tanaman  obat  merupakan  sumber  utama  obat  baru  yang  dapat  dijadikan  sebagai  alternatif  dari  obat- obatan  sintetis  [1].  Dalam  beberapa  tahun  terakhir  telah  terjadi  peningkatan  yang  signifikan  dalam penemuan  senyawa  antibakteri  baru,  karena  tingginya  tingkat  infeksi  terhadap  mikroorganisme  resisten antibiotik  [2].  Salah  satu  pendekatan  yang  digunakan  dalam  penemuan  senyawa  aktif  pada  tanaman adalah  skrining  sistematis  pada  mikroorganisme  atau  tanaman  yang  telah  diyakini  sebagai  sumber terapeutik yang bermanfaat [3].
Rivina  humilis  L.  merupakan  tanaman  perdu  liar yang  termasuk  dalam family  Phytolaccaceae.  Tanaman ini tumbuh secara berkoloni pada berbagai jenis tanah hitam [4]. Buah dari Rivina humilis L. atau disebut juga dengan Pigeon Berry dilaporkan memiliki kandungan betalain yang cukup tinggi dan memiliki aktivitas sebagai antioksidan dan antikanker ([5]. Selain itu, bagian-bagian lain dari tanaman tersebut seperti  daun, batang,  akar,  dan  kulit  dari  tanaman  Rivina  humilis  L.  juga  memiliki  sifat  antibakteri,  antioksidan  dan antipestisida [6], [7].
K.  pneumoniae    termasuk  dalam  family  Enterobacteriaceae  dan  merupakan  bakteri  gram  negatif  yang bersifat  patogen.Bakteri  ini  berbentuk  basil  (batang)  dan  merupakan  bakteri  yang  non-motil  (tidak bergerak).K.  pneumoniae    hidup  secara  berkoloni,  mampu  menginfeksi  saluran  kencing,  intra-abdomen, paru-paru  dan  kulit  [8]–[10].  Selain  itu,  bakteri  ini  dapat  memproduksi  enzim  ESBL  (Extended  Spektrum Beta Lactamase) yang berfungsi melumpuhkan kerja berbagai jenis antibiotik[11].
Sama  halnya  dengan  K.  pneumoniae,E.  coli  juga  merupakan  bakteri  patogen,  berbentuk  basil  (batang). Secara garis besar, E. coli dapat dikategorikan berdasarkan  serogroup, mekanisme patogenisitas, gejala klinis, atau faktor virulensi [12]. E. coli memiliki sifat yang unik karena dapat menginfeksi primer pada usus menyebabkan  diare,  peritonitis,  infeksi  saluran  kemih,  meningitis,  septikemia  (blood  poisoning)  dan pneumonia. Keberadaan bakteri ini dalam air merupakan suatu indikator pencemaran air[13].
Keterlambatan  atau  ketidaksesuaian  pemberian  antibiotik  telah  dikaitkan  dengan  tingginya  angka kematian  kepada  pasien  dengan  infeksi  berat  [14]  karena  penggunaan  antibiotik  secara  terus  menerus kepada  pasien  dapat  mengakibatkan  terjadinya  multidrug ‐ resistant  (MDR)  [15].    Hal  ini  sejalan  dengan penelitian  lain  yang  menemukan  bahwa  isolat  klinis  K.  pneumoniae    dari  beberapa  klinik  kesehatan menunjukkan resistensi terhadap ampisilin, karbenisilin dan colistin [16].
Tanaman  herbal  memiliki  sejarah  panjang  dalam  penggunaannya  sebagai  obat-obatan,  makanan  dan aneka  kebutuhan  sehari-hari.Beberapa  studi  epidemiologi  menunjukkan  bahwa  peningkatan  konsumsi beberapa tanaman obat yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan dapat digunakan sebagai bahan untuk treatment pada kerusakan DNA dan karsinogenesis. Selain itu, tanaman herbal juga sering menunjukkan berbagai aktivitas farmakologis seperti sifat antiflammatory, anti bakteri, dan anti jamur [17].
Tanaman  Rivina  humilisLsebagai  tanaman  obat  belum  banyak  dieksplor  manfaatnya  di  Indonesia.  Oleh sebab  itu,  penelitian  mengenai  khasiat  tanaman  Rivina  humilis  L.  sebagai  tanaman  herbal  dalam fungsinya  sebagai  antibakteri  terhadap  K.  pneumoniae    danE.  coli  menjadi  sangat  penting  untuk dilakukan.

## 2. Metode

## 2.1 Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu:  peralatan  gelas  (erlenmeyer,  gelas  kimia,  corong,  batang  pengaduk), timbangan  digital,  inkubator,  autoklaf,  rotary  evaporator,  cawan  petri,  cawan  porselin,  ose,  mikropipet jangka  sorong  dan  oven.Bahan  yang  digunakan  yaitu:  Buah  tanaman  Rivina  humilis  L.,  n-heksana (teknis),  metanol  96%  (teknis),  aseton  (p.a),  akuades,  media  Nutrient  Agar  (NA),  biakan  K.pneumoniae dan  E.  coli  (ATCC  25933)  dengan  umur  bakteri  masing-masing  2  minggu  pasca  peremajaan,kertas Wathman no. 1 dan kertas saring.

## 2.2 Ekstraksi
Buah  Rivina  humilis  L.  yang  digunakan  dalam  penelitian  diambil  di  daerah  Bandar  Lampung.Buah dibersihkan  dan  dikeringkan  menggunakan  oven  pada  suhu  30 o C.Sampel  yang  telah  kering  kemudian dihaluskan  hingga  berbentuk  serbuk  halus.Serbuk  kering  buah  Rivina  humilis  L.  (130,599  gram) diekstraksi secara bertingkat menggunakan 2 pelarut yang berbeda polaritasnya, dimulai dengan fraksi n- heksana.  Serbuk  dimaserasi  dengan  500  ml  dengan  n-heksana  selama  24  jam,  kemudian  disaring  dan dikeringkan.  Maserasi  dilakukan  selama  3  kali  berturut turut.Filtrat  ditampung  dan  ampasnya  dikeringkan diudara  terbuka  sampai  terbebas  dari  bau  n-heksana.Selanjutnya  maserasi  dilakukan  dengan menggunakan  pelarut  metanol  sebanyak  3  kali  perulangan.Filtrat  diuapkan  dengan  rotary  evaporator hingga diperoleh ekstrak kasar.

## 2.3 Uji Aktivitas Antibakteri
Ekstrak  n-heksana  dan  metanol  dari  buah  Rivina  humilis  L.  diuji  aktivitas  antibakterinya  terhadap  K. pneumoniae danE. Colimenggunakanuji difusi cakram menurut Kirby-Bauer (1966). Pada masing-masing media yang terpisah, diinokulasikan satu ose bakteri K. pneumoniae dan E. coli kemudian kertas cakram yang  telah  mengandung  ekstrak  Rivina  humilis  L.  diletakkan  pada  media.Aktivitas  antibakteri  dihitung dengan  mengukur  zona  hambat  di  sekitar  kertas  cakram  yang  terlihat jernih  setelah inkubasi  pada  suhu 27 0 C selama 18-24 jam.Pengukuran besar zona hambat menggunakan jangka sorong.
Variasi  konsentrasi  ekstrak  buah  Rivina  humilis  L.  yang  digunakan  pada  penentuan  KHTM  (Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum) adalah (mg/ml) 1; 0,8; 0,6; 0,2 dan 0 (kontrol negatif menggunakan metanol). Konsentrasi  ekstrak  dibuat  dengan  menambahkan  metanol  sebagai  pelarutnya.Kontrol  negatif  yang digunakan adalah metanol dan kontrol positif adalah chloramphenicol.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Sebelum  dimaserasi,  sampel  buah  Rivina  humilis  L.  dihaluskan  hingga  berbentuk  serbuk.Tujuannya adalah  agar  terjadi  kerusakan  dinding  sel  pada  sampel  dan  menyebabkan  pelarut  lebih  mudah  menarik senyawa  yang  terkandung  di  dalam  sel  tersebut  sehingga  jumlah  ekstrak  yang  diperoleh  optimal.Serbuk selanjutnya dilakukan ekstraksi secara maserasi[18].
Teknik  ekstraksi  yang  digunakan  adalah  maserasi.  Maserasi  merupakan  proses  perendaman  sampel menggunakan pelarut. Proses ini sangat menguntungkan dalam isolasi senyawa bahan alam, karena tidak terjadi  pemanasan  pada  proses  ini  sehingga  senyawa-senyawa  metabolit  sekunder  yang  mudah teroksidasi  pada  suhu  tinggi  (seperti  flavonoid)  tidak  akan  rusak  selama  ekstraksi.  Selain  itu,  terjadi peristiwa  plasmolisis  selama  maserasi  yang  menyebabkan  terjadi  pemecahan  pada  dinding  sel  akibat perbedaan tekanan di dalam dan luar sel, sehingga senyawa yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dan
proses  ekstraksi  senyawa  akan  sempurna  karena  lamanya  perendaman  dapat  diatur.  Pemilihan  pelarut yang tepat untuk proses maserasi akan memberikan efektivitas yang tinggi. Pelarut yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  n-heksana  sebagai fraksi  nonpolar  dan metanol  sebagai  fraksi  polar.Masing-masing ekstrak dievaporasi menggunakan rotary evaporator hingga di dapatkan ekstrak kasar yang kental.
Hasil  ekstraksi  (maserasi)  buah  Rivina  humilis  L.  dengan  menggunakan  pelarut  n-heksana  (teknis) diperoleh  ekstrak  cair  berwarna  kuning  dan  ekstraksi  dengan  methanol  (teknis)  diperoleh  ekstrak  cair berwarna  kuning  lebih  pekat.Setelah  dievaporasi  dengan  menggunakan  rotary  evaporator  diperoleh larutan ekstrak berwarna kuning bening untuk fraksi n-heksana dan warna coklat untuk ekstrak methanol. Hasil ekstraksi dengan pelarut n-heksana diperoleh ekstrak kasar sebesar 5,67 gram dan dengan pelarut metanol sebesar 25,7 gram.
Tabel 1.Rendemen hasil ekstraksi buah Rivina humilis L.
(A)                               (B)
Gambar 1.Hasil Ekstraksi buah Rivina humilis L. Ket. : (A. Fraksi n-heksana, B. Fraksi metanol
3.1  Uji  Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak  buah  Rivina  humilis  L.  terhadap  Klebsiella  pneumonieae danE. coli.
Aktivitas  antibakteri  dihitung  dengan  mengukur  zona  hambat  di  sekitar  kertas  cakram  yang  terlihat jernih.Berdasarkan  pengujian  yang  telah  dilakukan,  terdapat  perbedaan  zona  hambat  dari  ekstrak  n- heksana  dan  metanol  buah  Rivina  humilis  L.  terhadap  pertumbuhan  K.  pneumoniae    danE.  coli.Aktivitas antibakteri  terbesar  pada  kedua  bakteri  terdapat  pada  ekstrak  metanol.Besar  zona  hambat  yang dihasilkan dari fraksi metanol pada konsentrasi ekstrak 1 mg/ml, untuk bakteri K. pneumoniae  danE. coli masih  berada  dibawah  chloramphenicol  sebagai  kontrol  positif.  Ekstrak  methanol  buah  Rivina  humilis  L. memiliki  potensi  antibakteri  lebih  besar  pada  Klebsiella  pneumonie    dibandingkan  E.  coli,  yaitu  masing- masing  sebesar  12  mm  dan  10  mm.  Sedangkan  untuk  ekstrak  fraksi  n-heksana,  tidak  terlihat  adanya aktivitas  antibakteri  terhadap  Klebsiella  pneumonie,  tetapi  terlihat  adanya  zona  bening  terhadap  E. colisebesar 8 mm. Besar zona hambat yang terbentuk dipengaruhi oleh konsentrasi dan kecepatan difusi senyawa  aktif  yang  terdapat  dalam  ekstrak  buah  Rivina  humilis  L.  yang  memiliki  potensi  sebagai antibakteri. Selain itu, faktor lain yang juga mempengaruhi lebar zona hambat adalah waktu inkubasi, umur bakteri,  suhu,  serta  pembuatan  simplisia.Sebagaimana  yang  telah  dipaparkan  oleh  Hadioetomo  (1993) bahwa  waktu  inkubasi,  umur  dan  jumlah  sel  bakteridapat  mempengaruhi  pengujian  dayahambat  suatu bahan sebagai antibakteri.
3.2 Penentuan Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum (KHTM)
Penentuan  KHTM  dilakukan  dengan  menguji  sederetan  konsentrasi  sampel  yang  dibuat  dengan  cara pengenceran.  Konsentrasi  ekstrak  metanol  buah  Rivina  humilis  L.  yang  digunakan  dalam  penentuan KHTM  adalah  (mg/ml)  1;  0,8;  0,6;  0,2  dan  0  (kontrol  negatif).  Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah chloramphenicol.
Fraksi Ekstrak Warna Bentuk Berat (gram) % Randemen (b/b) N-heksana Kuning Cair 5,67 4,34% Metanol Coklat Pasta 25,7 19,68%
Berdasarkan  hasil  penelitian  (seperti  yang  disajikan  pada  grafik  1)  menunjukkan  bahwa  aktivitas antibakteri  ekstrak  metanol  buah  Rivina  humilis  L.  menurun  seiring  dengan  menurunnya konsentrasi.Semakin  tinggi  konsentrasi  suatu  bahan  antibakteri,  maka  aktivitas  antibakterinya  semakin besar  pula.  Ekstrak  methanol  buah  Rivina  humilis  L.  dengan  konsentrasi  0,2  mg/ml  dapat  menghambat pertumbuhan  K.  pneumoniae      dengan  zona  hambat  sebesar  7  mm.  Semakin  kecil  konsentrasi  hambat minimum ekstrak menandakan semakin potensial ekstrak tersebut sebagai antibakteri.
Pada  penelitian  ini,  ekstrak  methanol  buah  Rivina  humilis  L.  masih  memiliki  aktivitas  antibakteri  pada konsentrasi  dibawah  0,2  mg/ml.  Kontrol  positif  (chloramphenicol)  1  mg/ml  dapat  menghambat  bakteri  K. pneumoniae    dengan  zona  hambat  sebesar  25  mm  dengan  indeks  zona  bening  sebesar 17,36.Penggunaan chloramphenicol sebagai kontrol positif dikarenakan senyawa ini merupakan antibiotik dengan  spectrum  luas  dengan  mekanisme  kerja  yaitu  menghambat  sintesis  protein  pada  ribosom  dari bakteri  tersebut.Mekanisme  hambat  ini  bersifat  bakteriostatik.Kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah pelarut metanol dan n-heksana.Hal ini dilakukan untuk membuktikan bahwa pelarut yang digunakan tidak berpengaruh dalam uji antibakteri.
Hasil yang berbeda terhadap bakteri E. coli. Sifat antibakteri ekstrak buah  Rivina humilis L. terdapat pada fraksi n-heksana dan metanol. Pada n-heksana, KHTM terdapat pada konsentrasi 0,8 mg/ml dengan lebar zona bening sebesar 7 mm. Pada metanol, KHTM terdapat pada konsentrasi 0,6 mg/ml dengan lebar zona bening sebesar 8 mm. K. pneumoniae  danE. coli merupakan bakteri gram negatif yang memiliki dinding sel  yang  tersusun  atas  lapisan  peptidoglikogen.  Adanya  perbedaan  struktur  lapisan  ini  dapat mempengaruhi  kerja  ekstrak  buah  Rivina  humilis  L.  sebagai  senyawa  antibakteri  sehingga  terjadi perbedaan  lebar  zona  hambat  pada  masing  –  masing  bakteri.Diameter  zona  hambat  dapat  menentukan kekuatan  daya  hambat  mikroba  suatu  bahan/senyawa  yang  dikelompokkan  menjadi  4  bagian  yaitu:  a) zona hambat ≤ 5 mm tergolong lemah; b) zona hambat 5-10 mm tergolong sedang; c) zona hambat 10-20 mm tergolong kuat; dan d) zona hambat ≥ 20 mm tergolong sangat kuat [19].
Ekstrak (mg/ml) Diameter Kertas Cakram (d b ) mm Diameter Zona Bening (d z ) mm Indeks Zona Bening (I) Daya Antibakteri K. pneumonia S 1 (fraksi n- heksana) (-) 6 - - - 0,2 6 - - - 0,6 6 - - - 0,8 6 - - - 1 6 - - - (+) 6 19 10,02 Kuat S 2 (fraksi metanol) (-) 6 - - - 0,2 6 7 1,36 Sedang 0,6 6 7,5 1,56 Sedang 0,8 6 8 1,78 Sedang 1 6 12 4 Kuat (+) 6 25 17,36 Sangat kuat E. coli S 1 (fraksi n- heksana) (-) 6 - - - 0,2 6 - - - 0,6 6 - - - 0,8 6 7 1,36 Sedang 1 6 8 1,78 Sedang (+) 6 14 5,4 Kuat S 2 (fraksi metanol) (-) 6 - - - 0,2 6 - - - 0,6 6 8 1,78 Sedang 0,8 6 9 2,25 Sedang 1 6 10 2,77 Sedang (+) 6 26 18,78 Sangat kuat
Tabel 2. Aktivitas antibakteri ekstrak buah Rivina humilis L. fraksi n-heksana (S 1 ) dan fraksi metanol (S 2 ) terhadap bakteri K. pneumoniae dan E. coli
Dari hasil uji KHTM ekstrak buah Rivina humilis L. didapatkan bahwa pada K. pneumoniae , KHTM ekstrak fraksi metanol berada di konsentrasi kurang dari 0,2 mg/ml dengan diameter zona bening sebesar 7 mm dan  indeks  zona  bening  1,36.  Sedangkan  pada  ekstrak  metanol  buah  Rivina  humilis  L.  terhadap  E. coliberada  di  konsentrasi  0,2  mg/ml.  Pada  konsentrasi  0,6  mg/ml  dapat    menghambat  pertumbuhan  E. colisebesar 8 mm dengan indeks zona bening sebesar 1,78. Berdasarkan penelitian ini, ekstrak methanol buah Rivina humilis L. memiliki aktivitas antibakteri pada kisaran konsentrasi 0,2-0,6 mg/ml.
Gambar 2. Hasil Uji antibakteri (S 2 ) K.pneumoniae (1 mg/ml)
Menurut  Khan  et.  al.,  (2012)  bahwa  buah  Rivina  humilis  L.  mengandung  pigmen  betasianin  yang merupakan  penyumbang  warna  merah-violet  memiliki  fungsi  sebagai  antioksidan.  Sementara  itu,  buah Rivina  humilis  L.  juga  mengandung  senyawa  fenol  (  ̶OH).  Fenol  dengan  kadar  yang  terkandung  dalam ekstrak  buah  Rivina  humilis  L.  dapat  berinteraksi  dengan  protein  membentuk  sebuah  kompleks  protein- fenol.  Ikatan yang terjadi  antara protein  dengan fenol adalah  ikatan yang  lemah  dan akan segera  terurai dalam  larutan.  Fenol  dalam  keadan  bebas  (tidak  terikat  dengan  kompleks  protein),  akan  berpenetrasi kedalam  sel,  yang  menyebabkan  presipitasi  dan  denaturasi  protein.  Sedangkan  pada  kadar  yang  tinggi, fenol dapat menyebabkan koagulasi protein sehingga akan melisiskan membran sel [20].
Hal ini  berkaitan  dengan  uji  aktivitas  antibakteri  terhadap Klebsiella  pneumonia  danE.  coli  dimana kedua bakteri tersebut adalah bakteri gram negatif yang memiliki membran sel. Salah satu penyebab munculnya zona bening adalah adanya senyawa aktif antibakteri pada buah Rivina humilis L. yang mampu melisiskan membran sel yang ada pada bakteri tersebut.
Grafik 1.KHTM dari ekstrak metanol buah Rivina humilis L. terhadap K. pneumoniae Grafik 2. KHTMdari ekstrak metanol buah Rivina humilis L. terhadap Escherichia coli Sampel (1mg/ml
0 5 10 15 20 25 30 Zo na hambat (mm ) Konsentrasi (mg/ml) Fraksi metanol Fraksi n-heksana 0 5 10 15 20 25 Zo na hambat (mm ) Konsentrasi (mg/ml) Fraksi metanol Fraksi n-heksana

## 4. Kesimpulan
Buah tanaman Rivina humilis L. memiliki potensi sebagai antibakteri terhadap bakteri gram negatif yaitu E. colidanK.  pneumoniae  .  Ekstrak  n-heksana  tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  K.  pneumoniae tetapi memiliki hasil yang positif terhadap E. coli, terlihat dari adanya zona hambat sebesar 8 mm dengan indeks  zona  bening1,78  pada  konsentrasi  1  mg/ml.  Besar  zona  hambat  ekstrak  metanol  buah  Rivina humilis  L.  terhadap  K.  pneumoniae      pada  konsentrasi  1  mg/ml  adalah  sebesar  12  mm  dengan  indeks zona  bening  4,  sedangkan  pada  E.  coli,  lebar  zona  hambatnya  sebesar  10  mm  dengan  indeks  zona bening  2,77.  Konsentrasi  Hambat  Tumbuh  Minimum  (KHTM)  berada  pada  kisaran  konsentrasi  0  -  0,2 mg/ml terhadap K. pneumoniae  dan 0,2 – 0,6 mg/ml terhadap E. coli.Perlu dilakukan identifikasi senyawa metabolit  sekunder  sebagai  uji  awal  untuk  mengetahui  senyawa  yang  terkandung  dalam  buah  Rivina humilis  L.  Selain  itu,  perlu  juga  dilakukan  penelitian  lanjutan  dengan  menggunakan  bakteri  uji  selain  K. pneumoniae  dan E. coli.

## 5. Penghargaan
Ucapan terimakasih disampaikan kepada Institut Teknologi Sumatera yang telah membiayai penelitian ini melalui  skema  penelitian  Hibah  Mandiri  tahun  2017,  kepada  Universitas  Lampung  atas  fasilitas laboratorium  dan kepada semua pihak yang telah membantu dalam pelaksanaan penelitian ini.

## 6. Daftar Pustaka
[1] B. Tepe, D. Daferera, M. Sökmen, M. Polissiou, and A. Sökmen, “In vitro antimicrobial and antioxidant activities of the essential oils and various extracts of Thymus eigii M. Zohary et P.H. Davis.,” J. Agric. Food Chem., vol. 52, no. 5, pp. 1132–7, 2004.
[2] B. P. Marasini et al., “Evaluation of antibacterial activity of some traditionally used medicinal plants against human pathogenic bacteria,” Biomed Res. Int., vol. 2015, pp. 1–6, 2015.
[3] Salvat, Antonnacci, Fortunato, Suarez, and Godoy, “Screening of some plants from Northern Argentina for their antimicrobial activity,” Lett. Appl. Microbiol., vol. 32, no. 5, pp. 293–297, 2001.
[4] C. K. Islands, “The Status of Exotic Plants on the Cocos ( Keeling ) Islands , Indian Ocean .,” no. July, 2002.
[5] M. I. Khan, P. S. C. Sri Harsha, P. Giridhar, and G. A. Ravishankar, “Pigment identification, nutritional composition, bioactivity, and in vitro cancer cell cytotoxicity of Rivina humilis L. berries, potential source of betalains,” LWT - Food Sci. Technol., vol. 47, no. 2, pp. 315–323, 2012.
[6] M. Ajaib, “Rivina humilis L : A Potential Antimicrobial and Antioxidant Source,” no. October, 2013.
[7] E. Arumugam, B. Muthusamy, K. Dhamodaran, M. Thangarasu, and K. Kaliyamoorthy, “Pesticidal activity of Rivina humilis L. (Phytolaccaceae) against important agricultural polyphagous field pest, Spodoptera litura (Fab.) (Lepidoptera: Noctuidae),” J. Coast. Life Med., vol. 3, no. 5, pp. 389–394, 2015.
[8] J. D. D. Pitout, P. Nordmann, and L. Poirel, “Carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae, a key pathogen set for global nosocomial dominance,” Antimicrob. Agents Chemother., vol. 59, no. 10, pp. 5873–5884, 2015.
[9] B. Melot, J. Colot, and G. Guerrier, “Bacteremic community-acquired infections due to Klebsiella pneumoniae: Clinical and microbiological presentation in New Caledonia, 2008-2013,” Int. J. Infect. Dis., vol. 41, no. June 2016, pp. 29–31, 2015.
[10] C. A. Broberg, M. Palacios, and V. L. Miller, “Klebsiella: a long way to go towards understanding this enigmatic jet-setter,” F1000Prime Rep., vol. 6, no. August, 2014.
[11] J. D. Pitout and K. B. Laupland, “Extended-spectrum ??-lactamase-producing Enterobacteriaceae: an emerging public-health concern,” Lancet Infect. Dis., vol. 8, no. 3, pp. 159–166, 2008.
[12] J. P. Nataro and J. B. Kaper, “Diarrheagenic Escherichia coli.,” Clin. Microbiol. Rev., vol. 11, no. 1, pp. 142–201, 1998.
[13] J. Y. Lim, J. Yoon, and C. J. Hovde, “A brief overview of Escherichia coli O157:H7 and its plasmid O157.,” J. Microbiol. Biotechnol., vol. 20, no. 1, pp. 5–14, 2010.
[14] S. Harbarth, J. Garbino, J. Pugin, J. A. Romand, D. Lew, and D. Pittet, “Inappropriate initial antimicrobial therapy and its effect on survival in a clinical trial of immunomodulating therapy for severe sepsis,” Am. J. Med., vol. 115, no. 7, pp. 529–535, 2003.
[15] I. Martin-Loeches et al., “Resistance patterns and outcomes in intensive care unit (ICU)-acquired pneumonia. Validation of European Centre for Disease Prevention and Control (ECDC) and the Centers for Disease Control and Prevention (CDC) classification of multidrug resistant organi,” J.
Infect., vol. 70, no. 3, pp. 213–22, 2015.
[16] T. J. Kidd et al., “A Klebsiella pneumoniae antibiotic resistance mechanism that subdues host defences and promotes virulence,” EMBO Mol. Med., vol. 9, no. 4, pp. 430–447, 2017.
[17] G. K. Rasineni, D. Siddavattam, and A. R. Reddy, “Free radical quenching activity and polyphenols in three species of Coleus Free radical quenching activity and polyphenols in three species of Coleus,” J. Med. Plants Res., vol. 2, no. 10, pp. 285–291, 2008.
[18] I. Fitri and D. I. Widiyawati, “EFEKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK HERBA MENIRAN ( Phylanthus niruni ) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Salmonella sp . dan Propionibacterium acnes,” vol. 6, no. 2, 2017.
[19] Davis, W.W dan T.R. Stout, Disc Plate Method of Microbiological Antibiotic Assay, J. Applied Microbiology, vol.22, no.4, pp. 659-665, 1971.
[20] F. Juliantina, D. A. Citra, B. Nirwani, T. Nurmasitoh, E. T. Bowo, and Gnhjk, “MANFAAT SIRIH MERAH ( P i p e r c r o c a t u m ) SEBAGAI AGEN ANTI BAKTERIAL TERHADAP BAKTERI GRAM POSITIF DAN GRAM NEGATIF,” Jkki, vol. 10, p. 10, 2008.