http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index

## Senyawa Antiinflamasi dari Fraksi Etil Asetat Akar Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) Terhadap Udema Kaki Mencit Terinduksi Karagenan
Diva Feraldy 1 , Endah Sayekti 1 , Ari Widiyantoro 1*
1 Program Studi Kimia, FMIPA Universitas Tanjungpura, Pontianak, Indonesia
Article info Abstrak History Submission : 21-09-2022
Review : 24-01-2023 Accepted : 14-02-2023
* Email: ari.widiyantoro@chemistry.untan.ac.id
DOI: 10.33096/jffi.v10i1.885
Kata Kunci: Pandanus amaryllifolius Roxb. ; edema; carrageenan;
pandamarilactone Inflamasi  dapat  terjadi  karena  gigitan  serangga,  toksin,  terbakar  dan pukulan  keras.  Inflamasi  dapat  disembuhkan  menggunakan  Obat Antiinflamasi  Non-Steroid  (OAINS).  Akar  pandan  wangi  diduga memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi  karena mengandung senyawa golongan  alkaloid  dan  flavonoid.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  dan  karakteristik  senyawa  antiinflamasi  dari fraksi etil asetat akar pandan wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhadap  udema  kaki  mencit  terinduksi  karagenan.  Proses  isolasi senyawa    dari  akar  pandan  wangi  meliputi  tahapan  maserasi,  partisi dan  kromatografi.  Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  metanol memiliki aktivitas yang baik pada dosis 200 mg/kg BB (51,7%), fraksi metanol  memiliki  aktivitas  yang  baik  pada  dosis  200  mg/kg  BB (38,2%), fraksi etil asetat memiliki aktivitas yang baik pada dosis 200 mg/kg BB (56.9%), fraksi diklorometana memiliki aktivitas yang baik pada  dosis  200  mg/kg  BB  (59,2%)  dan  fraksi n -heksana  memiliki aktivitas  yang  baik  pada  dosis  200  mg/kg  BB  (37,1%%)  dan  isolat memiliki aktivitas yang baik pada dosis 50 mg/kg BB (35,6%). Isolat K2  dari  fraksi  etil  asetat  dikarakterisasi  menggunakan 1 H-NMR dengan  pelarut  DMSO  (500  MHz)  dan 13 C-NMR  dengan  pelarut DMSO (125 MHz).  Isolat K2 dari fraksi etil asetat memiliki kemiripan dengan senyawa Pandamarilakton.
Abstract
Keywords: Pandanus amaryllifolius Roxb. ; udema; karagenan; pandamarilakton
Inflammation can occur due to insect bites, toxins, burns, and blows.
Inflammation  can  be  cured  using  Non-Steroid  Anti-Inflammatory Drugs  (NSAID).  Root  of  fragrant  pandan  is  thought  to  have  anti- inflammatory  activity  because  it  contains  alkaloids  and  flavonoid compounds.  This  study  aims  to  determine  the  activity  and characteristics  of  anti-inflammatory  compound  from  ethyl  acetate fraction of  root of fragrant  pandan (Pandanus amaryllifolius Roxb.) against  foot  edema  of  mice  carrageenan-induced.  The  process  of isolation  of  compound from root  of fragrant  pandan includes stages such as maceration, partitioning, and chromatography. The results of the study of the methanol extract had good activity at a dose of 200 mg/kg BB (51.7%); the methanol fraction had good activity at a dose of 200 mg/kg BB (38.2%); the ethyl acetate fraction had good activity at a dose of 200 mg/kg BB (56.9%); the dichloromethane fraction had good  activity  at  a  dose  of  200  mg/kg  BB  (59.2%);  the  n-Hexane fraction had good activity at  a dose  of  200 mg/kg BB (37.1%); and isolates had good activity at a dose of 50 mg/kg BB (35.6%). K2 isolate from the ethyl acetate fraction was characterized using 1 H-NMR with DMSO (500 MHz) and 13 C-NMR with DMSO (125 MHz). K2 isolate from the ethyl acetate fraction had similarities to Pandamarilactone.

## I. Pendahuluan
Inflamasi merupakan infeksi pada jaringan rusak yang disebabkan oleh gigitan s erangga, toksin, terbakar,  atau  pukulan  keras.  Inflamasi  dapat bersifat  akut  atau  inflamasi  kronik.  Tanda-tanda yang terjadi pada inflamasi yaitu panas, kemerahan, bengkak,  nyeri,  atau  kehilangan  fungsi.  Inflamasi adalah suatu respon sistem imunitas tubuh terhadap rangsangan berbahaya seperti patogen, sel-sel yang rusak,  senyawa  beracun,  atau  iradiasi.  Proses inflamasi  yang  terjadi  merupakan  mekanisme pertahanan  yang  utama  bagi  kesehatan  dengan membentuk  sitokin-sitokin  maupun  mediator  yang bertanggung  jawab  dalam  inflamasi  (Bare et  al ., 2019).  Inflamasi  berupa  peradangan  yang disebabkan bukan karena aktivitas mikroorganisme (noninfeksi) dapat diobati dengan obat antiinflamasi (Tinesya et al ., 2019).
Obat  Antiinflamasi  Nonsteroid  (OAINS) seperti  aspirin,  ibuprofen,  dan  natrium  diklofenak dapat  mengatasi  rasa  nyeri  akibat  peradangan. OAINS  sering  digunakan  karena  efektivitasnya yang  baik  sebagai  analgetik,  antiinflamasi,  dan antipiretik.  Efektivitas  kerja  OAINS  diperoleh  dari kemampuannya menghambat sintesis prostaglandin melalui penghambatan kerja enzim siklooksigenase. OAINS  memiliki  efek  samping  yaitu  ulkus peptikum  sehingga  telah  dikembangkan  OAINS yang selektif menghambat enzim siklooksigenase-2 dan  diyakini  lebih  aman  untuk  lambung.  Namun berbagai penelitian menunjukkan adanya peningkatan  risiko  penyakit  kardiovaksular  pada penggunaan  OAINS  sehingga  penggunaan  OAINS saat ini menjadi perhatian terutama bagi pasien yang sejak awal sudah memiliki penyakit kardiovaskular (Zahra  &  Carolia,  2017).    Selain  menggunakan OAINS,  masyarakat  pada  umumnya  menggunakan rempah-rempah seperti kunyit, jahe dan kayu manis sebagai obat herbal antiinflamasi. Menurut penelitian Meilina & Mukhtar (2019), ekstrak etanol rimpang  kunyit  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  seperti  alkaloid,  flavonoid,  antrakinon, saponin, tannin dan steroid/triterpenoid dan minyak atsiri yang memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi.
Tanaman  lainnya  yang  digunakan  sebagai obat  herbal  antiinflamasi  yaitu  pandan  wangi. Menurut  penelitian  Sentat  (2016),  ekstrak  etanol daun  pandan  wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.)  memiliki  aktivitas  antiinflamasi  karena mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  alkaloid dan flavonoid yang berperan aktif sebagai senyawa antiinflamasi. Senyawa alkaloid dan flavonoid juga terdapat  pada  bagian  akar  pandan  wangi.  Oleh karena  itu  akar  pandan  wangi  berpotensi  memiliki aktivitas antiinflamasi (Mustofa et al ., 2019).
Berdasarkan
penelusuran literatur
penelitian  tentang  akar  pandan  wangi  telah dilakukan baik isolasi senyawa maupun aktivitasnya.  Isolasi  senyawa  yang  diperoleh  dari ekstrak  metanol  akar  pandan  wangi  yaitu  senyawa
alkaloid  lakton  dan  senyawa  tersebut  memiliki aktivitas antimalaria (Dila et al ., 2020), oleh sebab itu senyawa alkaloid yang terkandung di dalam akar pandan  wangi  diduga  juga  dapat  berpotensi memiliki aktivitas biologis lainnya seperti antiinflamasi.
Selama  ini  bagian  pandan  wangi  yang sering  digunakan  untuk  obat  antiinflamasi  hanya bagian  daunnya,  sedangkan  pada  bagian  akarnya belum  digunakan  oleh  masyarakat.  Akar  pandan wangi  diduga  dapat  digunakan  sebagai  obat antiinflamasi karena kaya akan kandungan senyawa alkaloid  yang  dapat  menghambat  pembentukaan prostaglandin.  Saat  ini  belum  ditemukan  publikasi penelitian mengenai sifat antiinflamasi dari fraksi etil asetat a kar pandan wangi, sehingga pada penelitian ini akan dilakukan isolasi senyawa dari fraksi etil asetat akar  pandan  wangi.  Etil  asetat  merupakan  pelarut semipolar sehingga dapat menarik senyawa bersifat polar  maupun  nonpolar  pada  senyawa  organik. Senyawa  yang  ditemukan  akan  diuji  aktivitas antiinflamasi terhadap udema kaki mencit terinduksi karagenan  dan  uji  karakterisasi  menggunakan Nuclear Magnetic Resonance (NMR).
II. Metode Penelitian
II.1 Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  beker  gelas,  blender,  corong  pisah, evaporator,  kaca  petri,  labu  ukur,  plat  KLT, plestimometer, pipet tetes, pipet volume, spatula dan timbangan.  Bahan-bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  akar  pandan  wangi,  akuades, diklorometana,  etil  asetat,  metanol, n -heksana, pereaksi  besi  (III)  klorida,  pereaksi Dragendorff , pereaksi Lieberman-Burchard, pereaksi serium (IV) sulfat, plat silika gel 60 F 254 , dan silika gel 60 (70- 230 mesh dan 230-400 mesh).

## II.2 Preparasi Sampel
Akar  pandan  wangi  diperoleh  dari Kecamatan  Punggur,  Kabupaten  Kubu  Raya, Provinsi  Kalimantan  Barat  kemudian  dibersihkan dengan  menggunakan  air  bersih,  dikeringanginkan sehingga  kadar  airnya  mencapai  <10%  lalu diblender sampai menjadi serbuk halus dan diayak (Dila et al ., 2020).

## II.3 Ekstraksi dan Partisi
Sampel  akar  pandan  wangi  dimaserasi dengan  metanol  pada  suhu  kamar.  Kemudian ekstrak disaring dan filtratnya dikumpulkan. Residu dimaserasi  kembali  dengan  cara  menambahkan metanol (sampai jernih). Seluruh filtrat dikumpulkan  lalu  dipekatkan  dengan  evaporator, setelah itu ditimbang untuk memperoleh rendemennya (Dila et al. , 2020).
Ekstrak kasar metanol kemudian difraksinasi dengan pelarut n -heksana, diklorometana, dan etil asetat. Masing-masing fraksi dipekatkan dengan evaporator, setelah itu digunakan
untuk uji antiinflamasi terhadap udema kaki mencit yang terinduksi karagenan ( Dila et al ., 2020).

## II.4 Pemisahan dan Pemurnian
Pemisahan  diawali  dengan  kromatografi lapis tipis (KLT) untuk mencari eluen terbaik yang digunakan  untuk  pemisahan  secara  kromatografi vakum  cair  (KVC).  Fraksi  etil  asetat  diimpregnasi dengan  silika  gel,  dielusi  dengan  fase  gerak bergradien  secara  berturut-turut n -heksana,  etil asetat, diklorometana dan metanol. Masing-masing fraksi  hasil  KVC  di  KLT  kembali  untuk menggabungkan  fraksi  yang  mempunyai  pola pemisahan  yang  sama.  Fraksi  gabungan  yang diperoleh  kemudian  dipilih  yang  secara  kuantitas banyak  dan  pola  pemisahannya  bagus  untuk dilanjutkan dengan pemisahan secara kromatografi kolom gravitasi (KKG) untuk memperoleh senyawa yang murni.

## II.5 Uji Aktivitas Antiinflamasi
Uji  aktivitas  anttiinflamasi  dilakukan terhadap  mencit  ( Mus  musculus )  yang  diinduksi karagenan.  Mencit  diberikan  makan  dan  minum sebelum melakukan percobaan. Hewan coba dibagi dalam  delapan  kelompok,  yaitu  kelompok  kontrol (CMC  0,5  %),  kelompok  bahan  uji  (ekstrak  dan fraksi hasil partisi akar pandan wangi dengan dosis 100, 150 dan 200 mg/kg BB serta isolat K2 dengan 50 mg/kg BB), dan kelompok pembanding (natrium diklofenak dengan dosis 150 mg/kg BB) (Meilina & Mukhtar, 2019).
Pada  sendi  kaki  kiri  diberi  tanda  sebagai batas  pengukuran  volume  kaki  mencit  dan  diukur volumenya  sebagai  volume  awal  (Vo),  kemudian pada  masing-masing  telapak  kaki  mencit  disuntik secara  intraplantar  dengan  larutan  indikator karagenan 1% dengan volume 0,04 mL (Meilina & Mukhtar, 2019) . Pada  masing-masing  mencit  diberikan larutan  sesuai  dengan  kelompoknya.  Selanjutnya, volume  masing-masing  kaki  mencit  diukur. Pengukuran  dilakukan  setiap  selang  waktu. Pengukuran  dilakukan  dengan  cara  mencelupkan kaki  mencit  kedalam  alat  plestimometer  air  raksa sampai batas tanda. Perubahan yang terjadi pada air raksa dicatat sebagai udema kaki mencit (Meilina & Mukhtar, 2019).
II.6 Karakterisasi Menggunakan
Spektrofotometer  Nuclear  Magnetic  Resonance (NMR)
Karakterisasi  isolat  dari  fraksi  etil  asetat menggunakan  spektrometer  NMR  yaitu 1 H-NMR dan 13 C-NMR untuk mengetahui posisi hidrogen dan karbon pada struktur isolat tersebut.

## III. Hasil Dan Pembahasan III.1 Preparasi Sampel
Sampel akar pandan wangi sebanyak 16 kg diperoleh  dari  Kecamatan  Punggur,  Kabupaten
Kubu  Raya,  Provinsi  Kalimantan  Barat.  Sampel dicuci menggunakan air bersih sampai akar tersebut tidak ada kotoran. Setelah itu sampel dikeringanginkan  pada  ruangan  tertutup.  Fungsi pengeringan bertujuan untuk mengurangi  kadar air sehingga  menghambat  pertumbuhan  jamur  dan mikroorganisme,  menghentikan  reaksi  enzimatis dan mencegah terjadinya perubahan kimiawi (Vania et al ., 2019). Sampel yang sudah kering ditimbang dan diperoleh hasil sebesar 2,4 kg. Sampel tersebut dipotong  kecil-kecil  menggunakan  gunting  dan diblender  sampai  halus.  Hal  ini  bertujuan  untuk memperbesar  luas  permukaan  sampel  agar mempermudah  interaksi  pelarut  kedalam  sel tumbuhan (Hainil et al ., 2015).

## III.2 Ekstraksi dan Partisi
Sampel akar pandan wangi sebanyak 2,4 kg dimaserasi menggunakan metanol pada suhu ruang. Pada maserasi akan terjadi proses plasmolisis yaitu pecahnya  dinding  sel  pada  suatu  tanaman  akibat tekanan  dalam  dan  luar  sel  sehingga  senyawa metabolit sekunder pada tanaman akan lebih mudah dilarutkan oleh pelarut berupa metanol (Surahmaida &  Umarudin,  2019).  Selain  itu,  pelarut  metanol diprediksi  lebih  reaktif  dibanding  etanol  untuk mengekstraksi kandungan metabolit sekunder dalam tumbuhan.  Adanya  gugus  metil  memberikan dorongan elektron lebih kecil dibandingan gugus etil sehingga membuat metanol lebih reaktif (Saputra et al., 2018).
Maserat  yang  diperoleh  disaring  untuk memisahkan filtrat dan residu. Filtrat yang diperoleh disimpan dan residu dimaserasi kembali dengan cara menambahkan  metanol  (sampai  jernih).  Seluruh filtrat  dikumpulkan  lalu  dipekatkan  dengan evaporator  dan  diperoleh  ekstrak  metanol  akar pandan  wangi  sebesar  115,8056  g.  Ekstrak  kental metanol  kemudian  difraksinasi  dengan  pelarut n - heksana,  diklorometana,  dan  etil  asetat.  Ekstrak metanol  diambil 75% sebesar 86,0031 g dilarutkan dengan pelarut metanol. Ekstrak metanol dimasukan kedalam labu corong pisah dan difraksinasi dengan pelarut n -heksana dengan perbandingan metanol : n - heksana (1:1). Setelah itu, dikocok hingga terbentuk campuran 2 fase. Larutan bagian atas merupakan n - heksana  dan  bagian  bawah  metanol.  Larutan tersebut  dipisahkan  dan  ditampung  pada  setiap fraksi.  Fraksi n -heksana  dipekatkan  menggunakan evaporator  lalu  ditimbang  dan  diperoleh  sebesar 4,8737  g.  Fraksinasi  menggunakan  pelarut n - heksana  untuk  mengambil  senyawa  nonpolar  dan senyawa  polar  akan  tetap  pada  pelarut  metanol (Laksono et al., 2014).
Fraksi  metanol  difraksinasi  lagi  dengan pelarut diklorometana dengan perbandingan metanol : diklorometana (1:1). Setelah itu, dikocok hingga  terbentuk  campuran  2  fase.  Larutan  bagian atas  merupakan  metanol  dan  bagian  bawah diklorometana.  Larutan  tersebut  dipisahkan  dan
ditampung pada setiap fraksi. Fraksi diklorometana dipekatkan  menggunakan  evaporator,  setelah  itu fraksi  kental  ditimbang  dan  diperoleh  sebesar 15,8242  g.  Penggunakan  diklorometana  untuk memperoleh  senyawa  nonpolar  yang  tidak  larut dalam pelarut n -heksana (Syahbanu et al ., 2019).
Fraksi metanol difraksinasi dengan etil asetat  dengan  perbandingan  metanol  :  etil  asetat (1:1).  Setelah  itu,  dikocok  hingga  terbentuk campuran  2  fase.  Larutan  bagian  atas  merupakan metanol  dan  bagian  bawah  berupa  etil  asetat. Larutan  tersebut  dipisahkan  dan  ditampung.  Fraksi etil  asetat  dipekatkan  menggunakan  evaporator kemudian  fraksi  kental  ditimbang  dan  diperoleh sebesar 7,3996 g.
Fraksi metanol sisa dipekatkan menggunakan  evaporator  kemudian  fraksi  kental ditimbang  dan  diperoleh  sebesar  4,1662  g. Penggunaan etil asetat untuk memisahkan senyawa polar  yang  tingkat  kepolaranya  lebih  rendah  dari senyawa  yang  larut  di  pelarut  metanol.  Senyawa dengan  tingkat  kepolaran  yang  tinggi  akan  tetap terikat pada pelarut metanol (Prasetyo et al ., 2016).

## III.3 Uji Metabolit Sekunder
Senyawa metabolit sekunder yang
umumnya  terdapat  pada  tanaman  berupa  golongan alkaloid,  flavanoid,  steroid,  saponin,  terpenoid  dan fenolik.  Untuk  mengetahui  kandungan  metabolit
sekunder  pada  tumbuhan  akar  pandan  wangi  dapat diuji  menggunakan  kromatografi  lapis  lapis  tipis (KLT) dan dideteksi menggunakan reagen Dragendroff, Liberman Burchard, serium sulfat dan FeCl 3 .  Reagen  Dragendroff  untuk  menentukan golongan  alkaloid,  reagen  Lieberman  Burchard untuk  menentukan  golongan  steroid  dan  terpenoid, reagen  serium  sulfat  untuk  menentukan  golongan flavonoid,  reagen FeCl 3 untuk menentukan golongan fenolik, dan pada uji saponin menggunakan aquades (Muthmainnah, 2017).
Uji  metabolit  sekunder diawali dengan uji kromatografi  lapis  tipis  menggunakan  plat  KLT untuk  mencari  eluen  terbaik  pada  ekstrak  metanol, fraksi n- heksana,  fraksi  diklorometana,  fraksi  etil asetat,  dan  fraksi  metanol.  Berikut  eluen  terbaik hasil uji KLT ditunjukkan pada Tabel 1.
Setelah diperoleh eluen terbaik dilanjutkan uji metabolit sekunder untuk mengetahui kandungan senyawa metabolit sekunder pada ekstrak dan fraksi. Pada uji alkaloid plat KLT ekstrak kental metanol, fraksi n -heksana,  fraksi  diklorometana,  fraksi  etil asetat,  dan  fraksi  metanol  disemprotkan  dengan menggunakan  reagen  Dragendroff  dan  dipanaskan pada hotplate untuk diamati perubahan yang terjadi.
Berikut hasil yang diperoleh pada uji alkaloid pada Gambar 1.
Tabel 1 . Hasil uji kromatografi lapis tipis (KLT) akar pandan wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) Sampel Eluen Terbaik Ekstrak kental metanol diklorometana : etil asetat (9,5:0,5) Fraksi metanol metanol : diklorometana (6,5:3,5) Fraksi diklorometana diklorometana : etil asetat (7:3) Fraksi etil asetat etil asetat : diklorometana (1:1) Fraksi n -heksana
n -heksana : diklorometana (5:5)
(a)       (b)       (c)       (d)       (e) Gambar 1. Uji alkaloid pada (a) Ekstrak metanol (b) fraksi metanol (c) fraksi etil asetat (d) fraksi diklorometana dan (e) fraksi n -Heksana
Berdasarkan  Gambar  1  menunjukkan bahwa ekstrak kental metanol, fraksi metanol, fraksi etil  asetat,  fraksi  diklorometana  dan n -heksana menunjukkan positif mengandung senyawa golongan alkaloid karena menurut Wagner & Bladt,
(1996) noda yang ditandai  bercak berwarna jingga sampai  coklat  mengandung  senyawa  golongan alkaloid. Pada uji flavonoid plat KLT ekstrak kental metanol,  fraksi n -heksana,  fraksi  diklorometana, fraksi  etil  asetat,  dan  fraksi  metanol  disemprotkan dengan  menggunakan  reagen  serium  sulfat  dan dipanaskan  pada hotplate kemudian  diamati perubahan yang terjadi. Berikut hasil yang diperoleh pada uji flavonoid di Gambar 2.
Berdasarkan  Gambar  2  menunjukkan bahwa ekstrak kental metanol, fraksi metanol, fraksi etil asetat, fraksi diklorometana dan fraksi n -heksana menunjukkan positif mengandung senyawa flavonoid karena menurut Ningsih et al , (2013) noda yang  ditandai  bercak  berwarna  coklat  tua mengandung  senyawa  flavonoid.  Pada  uji  steroid dan terpenoid plat KLT ektrak kental metanol, fraksi n -heksana,  fraksi  diklorometana,  fraksi  etil  asetat, dan fraksi metanol disemprotkan dengan menggunakan  reagen  Lieberman  Burchard  dan dipanaskan  pada hotplate lalu  diamati  perubahan
yang terjadi. Berikut hasil yang diperoleh untuk uji steroiddan terpenoid pada Gambar 3.
(a)       (b)       (c)       (d)       (e)
Gambar 2. Uji Flavonoid pada senyawa (a)
Ekstrak metanol (b) fraksi metanol (c) fraksi etil asetat (d) fraksi diklorometana dan (e) fraksi n - Heksana
(a)       (b)       (c)       (d)       (e)
Gambar 3. Uji steroid dan terpenoid pada (a) ekstrak metanol (b) fraksi metanol (c) fraksi etil asetat (d) fraksi diklorometana dan (e) fraksi n - heksana
Berdasarkan  Gambar  3  menunjukkan bahwa ekstrak kental metanol, fraksi metanol, fraksi diklorometana  dan  fraksi n -heksana  menunjukan positif mengandung senyawa steroid dan terpenoid. Noda  yang  ditandai  bercak  berwarna  hijau-biru untuk senyawa steroid dan warna merah kecoklatan untuk  senyawa  terpenoid  (Suhaenah  &  Nuryanti, 2017).  Pada  uji  fenolik  plat  KLT  ektrak  kental metanol,  fraksi n -heksana,  fraksi  diklorometana, fraksi  etil  asetat,  dan  fraksi  metanol  disemprotkan dengan menggunakan reagen FeCl 3 dan dipanaskan pada hotplate sehingga  diamati  perubahan  yang terjadi. Berikut hasil yang didapat  uji fenolik pada Gambar 4.
(a)       (b)       (c)       (d)       (e) Gambar 4. Uji fenolik pada (a) ekstrak metanol (b) fraksi metanol (c) fraksi etil asetat (d) fraksi diklorometana dan (e) fraksi n -heksana
Berdasarkan  Gambar  4  menunjukkan bahwa ekstrak kental metanol, fraksi metanol, fraksi diklorometana  dan  fraksi n -heksana  menunjukan positif  mengandung  senyawa  fenolik.  Noda  yang ditandai bercak hijau, merah ungu, biru, atau hitam yang  kuat  mengandung  senyawa  fenolik.  Pada  uji saponin  ektrak  kental  metanol,  fraksi n -heksana, fraksi  diklorometana,  fraksi  etil  asetat,  dan  fraksi metanol dilarutkan menggunakan aquades, dikocok dan  diamati  perubahan  yang  ter  jadi.  Berikut  hasil yang diperoleh untuk uji saponin pada Gambar 5.
(a)       (b)       (c)       (d)       (e) Gambar 5. Uji saponin pada (a) ekstrak metanol (b) fraksi metanol (c) fraksi etil asetat (d) fraksi diklorometana dan (e) fraksi n -heksana
Berdasarkan Gambar 5 menunjukan bahwa ekstrak  kental  metanol,  fraksi  metanol,  dan  fraksi diklorometana  menunjukan  positif  mengandung senyawa  saponin.  Menurut  Novitasari  &  Putri (2016),  larutan  yang  ditandai  adanya  busa  stabil selama 10 detik maka larutan tersebut mengandung senyawa saponin. Pada fraksi etil asetat dan fraksi n - heksana diperoleh hasil negatif karena tidak terdapat busa pada saat pengocokan.

## III.4 Pemisahan dan Permurnian
Kromatografi Vakum Cair (KVC)
merupakan  suatu  metode  untuk  memisahkan  suatu senyawa  menggunakan  metode  kromatografi disertai  vakum  untuk  membantu  pergerakan  fase
gerak berupa pelarut/eluen (Syahbanu et al ., 2019).
Sampel  fraksi  etil  asetat  dilarutkan  menggunakan pelarut  etil  asetat,  setelah  itu  sampel  diimpregnasi untuk  proses  penjenuhan  zat  secara  total menggunakan  silika  gel  (Zamhari et  al .,  2021).
Sampel yang sudah diimpregnasi diletakan di dalam desikator selama 24 jam untuk menjaga sampel tetap kering  dan  tidak  terkontaminasi  oleh  bahan  lain (Oko  &  Feri,  2019).  Kolom  vakum  dibersihkan menggunakan  pelarut  metanol  sambil  disedot menggunakan  vakum.  Kolom  vakum  cair  yang sudah  bersih  dimasukan  silika,  kertas  saring  dan sampel  yang  sudah  diimpregnasi.  Kolom  disedot dengan  pompa  vakum  sampai  padat,  lalu  dialirkan dengan  eluen  yang  pertama  pelarut n -heksana, kedua  pelarut  diklorometana,  ketiga  pelarut  etil asetat  :  diklorometana  (5:5),  keempat  pelarut  etil asetat,  dan  kelima  pelarut  metanol.  Alasan digunakan  pelarut  nonpolar terlebih  dahulu  karena senyawa nonpolar akan lebih mudah dielusi dengan kromatografi  fasa  normal  (fasa  diamnya  berupa silika  yang  bersifat  polar)  (Mariana et  al .,  2013). Setiap eluen ditampung ke dalam botol metro yang sudah  diukur  30  mL.  Semua  botol  berisi  sampel dikeringkan  dan  ditimbang.  Sampel  yang  sudah kering  diuji  KLT  dengan  urutan  ganjil  untuk memudahkan  melihat  pola  noda  yang  sama  dan menghemat  penggunaan  plat  KLT.  Profil  noda ditunjukan pada Gambar 6.
Gambar 6. Profil noda hasil elusi KVC dibawah Sinar UV panjang gelombang 366
Berdasarkan  hasil  analisis  KLT  pada Gambar 6 dihasilkan 7 fraksi gabungan dengan urutan F1 (1 dan 2), F2 (3), F3 (4, 5, 6, dan 7), F4 (8, 9, dan 10), F5 (11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, dan 19), F6 (20, 21, 22, 23, 24, dan 25), F7 (26, 27, 28, dan 29), dan F8 (30, 31, dan 32). Fraksi  yang  telah  digabungkan  kemudian ditimbang untuk mengetahui berat massa. Berat masing-masing  fraksi  gabungan menjadi dasar pemilihan  fraksi  yang  akan  dilanjutkan  untuk pencarian  senyawa  murninya.  Berat  fraksi gabungan KVC yang diperoleh disajikan pada Tabel 2.
Tabel  2. Berat  fraksi  gabungan  hasil kromatografi  vakum  cair  (KVC)  akar  pandan wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) No. Berat F1 117,4 mg F2 3,8 mg F3 3,8 mg F4 289,1 mg F5 1019,5 mg F6 333,1 mg F7 79,9 mg F8 5348,6 mg
Sampel  F4  dipilih  untuk  dilanjutkan  pada uji  kromatografi  kolom  gravitasi  (KKG),  karena sampel  F4  memiliki  berat  sebesar  289,1  mg  dan memiliki spot lebih sedikit daripada fraksi yang lain sehingga  lebih  mudah  dipisahkan.  Sampel  F4 dilanjutkan dengan pemisahan kromatografi kolom gravitasi  (KKG)  proses  pemisahan  menggunakan kolom  yang  dialirkan  fase  gerak  berupa  pelarut menggunakan gaya tarik gravitasi (Mamonto et al ., 2015).  Sampel  diimpregnasi  dengan  silika  gel  dan dibiarkan  selama  24  jam  disimpan  ke  dalam desikator. Sebelum menggunakan kolom kromatografi  kolom  gravitasi  dibersihkan  dengan pelarut  metanol.  Kolom  kromatografi  gravitasi dimasukan kapas dan silika gel kemudian direndam selama  24  jam  dengan  eluen  terbaik  yang  telah diperoleh  pada  uji  metabolit  sekunder  dengan perbandingan  etil  asetat  :  diklorometana  (4:6). Setelah  itu,  sampel  yang  sudah  diimpregnasi dimasukkan  kedalam  kolom  yang  sudah  direndam dengan  perbandingan  etil  asetat  :  diklorometana (4:6)  dan  dialirkan  eluen  tersebut.  Setiap  eluen ditampung kedalam botol vial yang sudah diukur 5 mL.  Semua  botol  berisi  sampel  dikeringkan  dan ditimbang.  Sampel  yang  sudah  kering  dilanjutkan dengan uji KLT dengan urutan ganjil dan dilihat spot yang sama. Hasil elusi ditunjukan pada Gambar 7.
Berdasarkan  hasil  analisis  KLT  pada Gambar  7 dihasilkan  7  fraksi  gabungan  dengan urutan  K1  (1  dan  2),  K2 (3),  K3  (4  dan  5),  K4  (6 sampai 82), K5 (83 dan 84), K6 (85, 86, 87, 88, 89, dan 90), dan K7 (91, 91, 93, 94, 95, 96, 97, 98, dan 99).  Berat  fraksi  gabungan  KKG  yang  diperoleh disajikan pada Tabel 3.
Tabel  3. Berat  fraksi  gabungan  hasil  kromatografi kolom  gravitasi  (KKG)  akar  pandan  wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) No. Berat K1 14,6 mg K2 167,4 mg K3 119,3 mg K4 14,6 mg K5 30,8 mg K6 4,3 mg K7 4,8 mg
Gambar 7. Hasil KLT fraksi-fraksi KKG dibawah Sinar UV panjang gelombang 366
Sampel fraksi K2 dilanjutkan uji permurnian karena fraksi K2 memiliki berat sebesar 167,4 mg dan memiliki spot tunggal yang berwarna biru  pada  saat  dilihat  di  bawah  lampu  UV  pada panjang gelombang 366 nm maka fraksi K2 disebut sebagai isolate K2. Isolat K2 diuji kromatografi lapis tipis  (KLT)  untuk  mencari  eluen  terbaik  pada  1 dimensi.  Berdasarkan  pencarian  eluen  diperoleh eluen  terbaik  etil  asetat  : n -heksana  (1:1)  dan  etil asetat : n -heksana (7:3). Hasil yang diperoleh pada 1 dimensi dilanjutkan untuk 2 dimensi menggunakan plat KLT 5x5 cm dengan menggunakan eluen ke-1 dengan  perbandingan  etil  asetat  : n -heksana  (1:1) dan  eluen  ke-2  menggunakan  perbandingan  etil asetat : n -heksana (7:3). Hasil yang diperoleh pada 2 dimensi memiliki spot yang tunggal.
(a) (b)
Gambar 8. Hasil uji KLT 2 dimensi dengan eluen etil asetat : n -heksana (1:1) (a) λ=366 nm dan (b) λ= 254 nm
(a)                                   (b)
Gambar 9. Hasil uji KLT 2 dimensi dengan eluen etil asetat : n -heksana (7:3) (a) λ= 366 nm dan (b) λ= 254 nm

## III.5 Pengujian Antiinflamasi
Tahap selanjutnya ekstrak dan fraksi  hasil partisi  serta  isolat  K2  dilakukan  uji  antiinflamasi terhadap  mencit  terinduksi  karagenan.    Karagenan sebagai  senyawa  iritan  menginduksi  terjadinya cedera  sel  melalui  pelepasan  mediator  yang mengawali  proses  terjadinya  inflamasi.  Pada  saat terjadi  pelepasan  mediantor  inflamasi  terjadi  udem maksimal bertahan 6 jam. Inflamasi yang diinduksi oleh  karagenan  ditandai  dengan  peningkatan  rasa sakit pada pembengkakan (Lallo et al ., 2020). Hasil pengujian disajikan pada Tabel 4.
1     3     5      7      9       11  13   15    17    19       21    23     25    27   29     31   33    35    37     39 81  83    85     87    89     91  93    95     97    99 41   43     45     47  49      51   53    55    57   59     61  63    65    67     69     71   73   75     77    79
Tabel 4. Hasil Penurunan Volume Radang Akibat Ekstrak, Fraksi dan Isolat No. Sampel Dosis (mg/kg BB) Penurunan Volume Radang (%) t1 t2 t3 1. Kontrol Negatif (Natrium CMC) - 2,3 2,3 2,3 2. Kontrol Positif (Natrium diklofenak) 150 55,8 68,1 78,2 3. Ekstrak Metanol 100 28,4 29,6 30,8 150 31,4 35,8 42,8 200 41,4 47,5 51,7 4. Fraksi Metanol 100 22,6 26,9 28,8 150 27,8 29,8 33,3 200 31,5 35,2 38,2 5. Fraksi Etil Asetat 100 29,2 36,3 39,5 150 31,4 38,8 43,9 200 37,8 46,7 56,9 6. Fraksi Diklorometana 100 29,8 37,4 41,3 150 34,2 39,9 45,2 200 39,9 47,9 59,2 7. Fraksi n -Heksana 100 24,2 27,3 29,4 150 27,1 30,3 34,7 200 28,6 35,1 37,1 8. Isolat K2 50 22,2 29,8 35,6
Pada  Tabel  4,  terlihat  ekstrak  metanol, fraksi  metanol,  fraksi  diklorometana,  fraksi  etil asetat,  fraksi n -heksana  dan  isolat  K2  mampu melakukan  penurunan  volume  radang  (%)  kaki mencit  dengan  pembanding  kontrol  negatif  berupa CMC  dan  pembanding  kontrol  positif  berupa natrium diklofenak. Natrium diklofenak merupakan obat  analgesik  dan  antiinflamasi  yang  banyak digunakan secara oral oleh masyarakat. Namun efek samping  natrium  diklofenak  dapat  menyebabkan iritasi  lambung,  mual,  muntah  sehingga  sediaan yang  beredar  dibuat  dalam  bentuk  salut  enterik. Formulasi  salut  enterik  yang  selama  ini menggunakan  basis  pelarut  organik  yang  beresiko terhadap  toksisitas  dan  mudah  terbakar  (Yunarto, 2014).  Pada  ekstrak  metanol  diperoleh  penurunan volume radang dosis 200 mg/kg BB pada waktu (t1), (t2)  dan  (t3)  diperoleh  41,4%;  47,5%;  dan  51,7%. Fraksi metanol diperoleh penurunan volume radang dosis 200 mg/kg BB pada waktu (t1), (t2), dan (t3) diperoleh  31,5%;  35,2%;  dan  38,2%.  Fraksi  etil asetat diperoleh penurunan volume radang dosis 200 mg/kg BB pada waktu (t1), (t2), dan (t3) diperoleh 37,8%;  46,7%;  dan  56,9%.  Fraksi  diklorometana diperoleh  penurunan  volume  radang  dosis  200
mg/kg BB pada waktu (t1), (t2), dan (t3) diperoleh 39,9%;  47,9%;  dan  59,2%.  Fraksi n -heksana diperoleh  penurunan  volume  radang  dosis  200 mg/kg BB pada waktu (t1), (t2), dan (t3) diperoleh 28,6%; 35,1%; dan 37,1%. Pada Isolat K2 diperoleh penurunan volume radang dosis 50 mg/kg BB pada waktu  (t1), (t2),  dan  (t3)  diperoleh  22,2%;  29,8%; dan 35,6%.
III.6  Karakterisasi  Menggunakan 1 H-NMR  dan 13 C-NMR Isolat K2 Spektrum Nuclear  Magnetic  Resonance (NMR) menjelaskan gambaran tentang jenis atom, jumlah  atom  dan  lingkungan  atom  hidrogen  ( 1 H NMR)  maupun  atom  karbon  ( 13 C  NMR). Spektrometer  NMR  didasarkan  pada  penyerapan gelombang  radio  oleh  inti  tertentu  dalam  molekul organik,  ketika  molekul  tersebut  terkena  medan magnet  yang  kuat  (Paramita et  al .,  2020).  Dalam penelitian ini sampel K2 dikarakterisasi menggunakan  spektrometer 1 H-NMR  dengan pelarut  DMSO-d6  (500  MHz)  dan 13 C-NMR dengan  pelarut  DMSO-d6  (125  MHz).  Spektrum ditunjukan pada Gambar 10 dan 11.
Gambar 10. Spektrum 1 H-NMR Isolat K2 (DMSO, 500 MHz)
Gambar 11. Spektrum 13 C-NMR Isolat K2 (DMSO, 125 MHz)
Pada  spektrum  Gambar  10  dan  11, menunjukkan spektrum 1 H-NMR senyawa isolat K2 memiliki struktur siklik pada pergeseran kimia 6-8 ppm yang menunjukkan kemiripan dengan senyawa Pandamarilakton  dan  turunannya  yang  termasuk golongan alkaloid. Isolat K2 diprediksi belum murni karena  pada  pergeseran  yang  sama  mempunyai
jumlah  proton  yang  banyak.  Hal  ini  terjadi  karena isolat berupa campuran dengan struktur yang hampir sama  yang  diprediksi  berupa  pandamarilakton  dan turunannya.  Pada  spektrum 13 C-NMR  terlihat memiliki  minimal  13  atom  karbon.  Berikut  data hasil  perbandingan  senyawa  Isolat  K2  dan Pandamarilakton pada Tabel 5 dan 6.
Tabel 5. Perbandingan pergeseran kimia 1 H-NMR Isoat K2 dan Pandamarilakton
Isolat K2
(DMSO, 500 MHz) Pandamarilakton (400MHz, CDCl 3 ) (Cheng et al., 2015; Nonato et al., 1993) Pergeseran Kimia (ppm) Multiplisitas Pergeseran Kimia (ppm) Multiplisitas 7,71 dd 6,98 ddd 7,69 dd 6,68 dd 6,65 dd 5,04 ddd 2,51 dd 2.79 ddd 1,63 dd 2.45 dd 1,62 dd 2.31 ddd 1,61 br s 2.00 br s 1,59 br s 1,86 br s
1,45 m 1,72 m 1,45 m 1.72 m 1,45 m 1.72 m
Tabel 6. Perbandingan pergeseran kimia 13 C-NMR isolat K2 dan Pandamarilakton
Isolat K2 (DMSO, 125 MHz) Pandamarilakton (100 MHz, CDCl 3 ) (Cheng et al., 2015; Nonato et al., 1993) Pergeseran Kimia (ppm) Pergeseran Kimia (ppm) 166,9 173,0 166,9 171,0 131.7 149,7 131,5 148,6 131,5 137,6 131,5 131,5 128,6 129,2 128,6 113,7 128,6 101,7 67,3 50,7 67,3 47,2 38,0 36,2 23,4 25,1
Berdasarkan  hasil  pada  Tabel  5  dan  6 spektrum 1 H-NMR  isolat  K2  dari  fraksi  etil  asetat akar pandan wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) mempunyai  kemiripan  pada  pergeseran  kimia, integrasi  dan  multiplisitas  pada    senyawa pandamarilakton  ( 1 H-NMR  dan 13 C-NMR).  Pada spektrum 13 C-NMR  isolat  K2  juga  memiliki kemiripan  pada  senyawa  pandamarilakton  yaitu memiliki minimal 13 atom karbon. Beberapa sinyal mempunyai  peregseran  kimia  yang  sama.  Hal  ini terjadi karena isolat belum murni.

## IV. Kesimpulan
Berdasarkan  pada  hasil  penelitian  yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat  mempunyai  aktivitas  antiinflamasi  terbaik dibandingkan  fraksi  lainnya  hasil  partisi.  Isolat  K2 merupakan  metabolit  sekunder  yang  terkandung pada  fraksi  etil  asetat  akar  pandan  wangi  dan memiliki aktivitas antiinflamasi menurunkan peradangan sebesar 35,6% . Analisis 1 H-NMR dan 13 C-NMR  isolat  K2  memiliki  kemiripan  dengan senyawa Pandamarilakton yang termasuk golongan alkaloid.

## Daftar Pustaka
Bare, Y., Kuki, A. D., Rophi, A. H., Krisnamurti, G.
C., Lorenza, M. R. W. G.,  and Sari, D. R. T.  (2019).  Prediksi  Asam  Kuinat  sebagai Antiinflamasi  terhadap  COX-2  secara Virtual. Biota:  Jurnal  Ilmiah  Ilmu-Ilmu Hayati , 4(3), 124-129. https://doi.org/10.24002/biota.v4i3.2516 Cheng, Y. Bin, Tsai, Y. H., Lo, I. W., Haung, C. C.,
Tsai,  Y.  C.,  Beerhues,  L.,  El-Shazly,  M., Hou, M. F., Yuan, S. S., Wu, C. C., Chang,
F. R., & Wu, Y. C. (2015). Pandalisines A and  B,  Novel  Indolizidine  Alkaloids  from the Leaves of Pandanus utilis . Bioorganic and  Medicinal  Chemistry  Letters ,  25(19),
4333–4336.
https://doi.org/10.1016/j.bmcl.2015.07 .041
Dila, G., Kahtan I, M., & Widiyantoro, A . (2020).
Efektivitas  Ekstrak  Metanol  Akar  Pandan wangi  ( Pandanus  amaryllifolius roxb.) sebagai  Antimalaria  terhadap  Jumlah Parasitemia  dan  Monosit  dalam  Darah Mencit  ( Mus  musculus )  yang  Diinfeksi Plasmodium  berghei . Biomedika , 12 (1). https:// 10.23917/biomedika.v12i1.9237 Hainil, S., Arbain, D., & Putra, D. P. (2015). Kajian Kimia dari Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Kayu Pahit ( Picrasma javanica Bl.). Jurnal Sains  Farmasi  &  Klinis , 2 (1),  1. https://doi.org/10.29208/jsfk.2015.2.1.41
Laksono, F. B., Fachriyah, E., & Kusrini, D. (2014).
Isolasi  dan  Uji  Antibakteri  Senyawa Terpenoid  Ekstrak n -Heksana  Rimpang Lengkuas  Merah  ( Alpinia  purpurata ). Jurnal  Kimia  Sains  Dan  Aplikasi , 17 (2),
37–42.
https://doi.org/10.14710/jksa.17.2.37-42
Lallo,  S.,  Hardianti,  B.,  Umar,  H.,  Trisurani,  W., Wahyuni,  A.,  &  Latifah,  M.  (2020). Aktivitas Anti Inflamasi dan Penyembuhan Luka  dari  Ekstrak  Kulit  Batang  Murbei ( Morus alba L.). Jurnal Farmasi Galenika (Galenika  Journal  of  Pharmacy)  (e-
Journal) , 6 (1), 26–36.
https://doi.org/10.22487/j24428744.2020.v 6.i1.14661
Mamonto,  D.,  Ramadhan,  K.,  &  Rijai,  L.  (2015). Profil  Kromatografi  Lapis  Tipis  Metabolit Sekunder  Ekstrak Fraksi  Etil  Asetat  Daun Alpukat  ( Persea  americana Mill)  Hasil Pemisahan Kromatografi Kolom Gravitasi. Prosiding Seminar Nasional Kefarmasian ,
5–6.
Mariana, L., Andayani, Y., & Gunawan, R. (2013). Analisis Senyawa Flavonoid Hasil Fraksinasi  Ekstrak  Diklorometana  Daun
Keluwih. Chemistry Progress , 6 (2), 50–55. https://doi.org/10.35799/cp.6.2.2013.3494 Meilina,  R.,  &  Mukhtar,  R.  (2019).  Efek Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Rimpang
Kunyit  ( Curcuma  domestica Val.)  pada Tikus  Putih  yang  Diinduksi  Karagenan. Journal  of  Healthcare  Technology  and
Medicine , 4 (1), 111. https://doi.org/10.33143/jhtm.v4i1.173
Mustofa, D., Kahtan, M. I., Natalia, D., Zakiah, M.,
&  Widiyantoro,  A.  (2019).  Efektivitas Ekstrak  Metanol  Akar  Pandan  Wangi ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.)  sebagai Antimalaria  terhadap  Jumlah  Limfosit dalam Darah Mencit ( Mus musculus ) yang
Diinfeksi Plasmodium  berghei. Intisari Sains Medis , 10 (2).
https://doi.org/10.15562/ism.v10i2.366
Muthmainnah. (2017). Skrining Fitokimia Senyawa Metabolit  Sekunder  dari  Ekstrak  Etanol
Buah Delima ( Punica granatum l.) dengan Metode  Uji  Warna. Media  Farmasi , 549 (2), 40–42.
Ningsih,  V.,  Nugraheni,  E.  R.,  &  Astirin,  O.  P. (2013). Uji Toksisitas Fraksi Aktif Ekstrak Etanol  Daun  Ginje  ( Thevetia  peruviana ) dengan  Metode Brine  Shrimp  Test dan Profil  Kandungan  Kimia  Fraksi  Teraktif.
Biofarmasi  Journal  of  Natural  Product Biochemistry , 11 (2), 48–57. https:// 10.13057/biofar/f110204
Nonato,  M.G.,  Garson,  M.J.,  Truscott,  R.J.W.  &
Caver, J.A. (1993). Structural Characterization  of  Piperidine  Alkaloids from Pandanus  amaryllifolius by  Inverse- Detected 2D NMR Techniques, Phytochemistry , 34 (4) : 1159-1163
Novitasari, A. E., & Putri, D. Z. (2016). Isolasi dan
Identifikasi  Saponin  pada  Ekstrak  Daun Mahkta  Dewa  dengan  Ekstraksi  Maserasi.
Jurnal Sains , 6 (12), 10–14.
Oko, S., & Feri, M. (2019). Pengembangan Katalis
CaO  dari  Cangkang  Telur  Ayam  dengan
Impregnasi KOH dan Aplikasinya Terhadap Pembuatan Biodiesel dari Minyak Jarak. Jurnal Teknologi Universitas Muhammadiyah Jakarta , 11 (2), 103–110.
https://doi.org/10.24853/jurtek.11.2.103- 110
Paramita,  S.,  Permata  S.,  M.,  Vaulina  Y.D.,  E., Nasrokhah,  N.,  &  Iswanto,  P.  (2020).
Pemilihan  Metode  Perhitungan  Kimia Komputasi Semi-empiris untuk Pengembangan  1,3,4-Thiadiazole. Indo.  J. Chem. Res. , 8 (1), 51–56. https://doi.org/10.30598/10.30598//ijcr.20 20.8-pon
Prasetyo,  Y.  E.,  Sangi,  M.  S.,  &  Wuntu,  A.  D.
(2016).  Penentuan  Total  Fenolik  dan Aktivitas  Antioksidan  Fraksi  Etil  Asetat dari  Tepung  Pelepah  Aren  ( Arenga pinnata ). Jurnal Ilmiah Sains , 16 (2), 68-72. https://doi.org/10.35799/jis.16.2.2016.140 67
Saputra, T. R., Ngatin, A., & Sarungu, Y. T. (2018).
Penggunaan  Metode  Ekstraksi  Maserasi dan  Partisi  pada  Tumbuhan  Cocor  Bebek ( Kalanchoe  pinnata )  dengan  Kepolaran Berbeda. Fullerene  Journal  of  Chemistry ,
3 (1),
5-8. https://doi.org/10.37033/fjc.v3i1.26
Sentat,  T.  (2016).  Uji  Aktivitas  Anti  Inflamasi Ekstrak  Etanol  Daun  Pandan  Wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb  .)  pada Mencit Putih Jantan ( Mus musculus ). 1– 11. Prosiding  Seminar  Nasional  Akademi
Farmasi Samarinda
Suhaenah,  A.,  &  Nuryanti,  S.  (2017).  Skrining
Fitokimia Ekstrak Jamur Kancing
( Agaricus  bisporus ). Jurnal  Fitofarmaka Indonesia , 4 (1), 199–204. https://doi.org/10.33096/jffi.v4i1.228
Surahmaida dan Umarudin. (2019). Studi Fitokimia Ekstrak  Daun  Kemangi  dan  Daun  Kumis Menggunakan Pelarut Metanol. Indonesian
Chemsitry  and  Aplication  Journal  (ICAJ) ,
3 (1), 1–6. https://doi.org/10.26740/icaj.v3n1.p1-6
Syahbanu, I., Anugraeni, A. & Melati, H. A. (2018).
Kinetika  Degradasi  Selulosa  Asetat  dari Sabut  Pinang. Indo.  J.  Pure  App.  Chem ,
1 (1),
23–29.
http://dx.doi.org/10.26418/indonesian.v1i1 .26040
Tinesya,  D.,  Andhita,  N.,  &  Vidmar,  R.  (2019).
Eksplorasi  Potensi  Ekstrak  Biji  Alpukat ( Persea americana ) sebagai Agen
Antiinflamasi. LENSA  (Lentera  Sains): Jurnal  Pendidikan  IPA , 9 (2),  52–56. https://doi.org/10.24929/lensa.v9i2.66
Vania  I,  Nofianti T,  &  R.  N.  (2019).  Uji  Aktivitas
Ekstrak  Etanol  Daun  Pandan  Wangi ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.)  Sebagai Hair  Tonic  Pada  Kelinci  Jantan  Galur Lokal. Pharmacoscript,  2(1), 55-76 . . https://doi.org/10.36423/pharmacoscript.v 2i1.148
Wagner, H. & Bladt, S. 1996. Plant Drug Analysis a Thin  Layer  Chromatography  Atlas,  2 nd Edition.
Springer-Verlag,
Berlin,
Hiedelberg, New York Yunarto, N. (2014). Optimasi Formula Tablet Salut Enterik Natrium Diklofenak dengan Bahan Penyalut Kollicoat 30 D. Jurnal
Kefarmaasian Indonesia , 4 (2), 65–74. Zahra,  A.  P.,  &  Carolia,  N.  (2017).  Obat  Anti-
inflamasi Non-steroid (OAINS): Gastroprotektif  vs  Kardiotoksik  Non- steroidal Anti-inflammatory Drugs ( NSAIDs ): Gastroprotective vs Cardiotoxic. Medical Journal  of Lampung University , 6 (3) , 153–158.
Zamhari, M., Junaidi, R., Rachmatika, N., Oktarina, A., Srijaya, J., Bukit, N., Palembang, B., & Selatan,  S.  (2021).  Pembuatan  Katalis Berbasis  Karbon  Aktif  dari  Tempurung Kelapa  ( Cocos  nucifera )  Diimpregnasi
KOH pada Reaksi Transesterifikasi
Sintesis  Biodiesel. Jurnal  Kinetika , 12 (1), 23–31.