© 2021 Penulis. Dibawah lisensi CC BY-SA 4.0. Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Creative Commons Attribution (CC BY), yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan  reproduksi tanpa  batas  dalam media  apa  pun,  selama  penulis  dan  sumber  aslinya  disebutkan.  Tidak  diperlukan  izin  dari penulis atau penerbit.

## Journal of Experimental and Clinical Pharmacy (JECP)
Doi: 10.52365/jecp.v3i2. 537 http://jurnal.poltekkesgorontalo.ac.id/index.php/JECP/
2023, 3(2), 142-155

## Research Article
Abstrak: Daun  miana  ( Coleus  scutellarioides (L.)  Benth)  mempunyai  banyak  jenis khasiat  yang  difungsikan  menjadi  obat,  penurunan  demam,  batuk,  influenza, penetralisir  racun,  antiseptik  maupun  yang  lainnya.  Bagian  tanaman  yang difungsikan  menjadi  obat  yaitu  bagian  daun.  Tujuan  penelitian  ini  untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri  isolat  fungi  endofit  daun  pada Propionibacterium acne dan Pseudomonas  aeruginosa, jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah eksperimental.  Adapun metode  pengujian  dari  penelitian  yang  dilakukan  dengan berupa  isolasi  dan  pemurnian  fungi  endofit  dari  daun  miana,  identifikasi  fungi daun miana penghasil bakteri, pengujian diameter zona hambat fungi endofit daun miana  terhadap P.  acne dan P.  aeruginosa dengan  metode  difusi  menggunakan teknik  sumuran.  Hasil  penelitian  diperoleh  4  isolat  yang  digunakan Mukor  sp, (putih), Aspergillius  niger (hitam), Aspergillius  fumigatus (hijau), Rhzipus  sp, (abu- abu).  Isolat  fungi  endofit  dari  daun  miana  memiliki  aktivitas  antibakteri  pada pertumbuhan P. acne dan P. aeruginosa
Kata  kunci: Daun  miana; Propionibacterium  acne ; Pseudomonas  aeruginosa ;  fungi endofit
Abstract: Miana leaves (Coleus scutellarioides (L.) Benth) have many types of properties that are used as medicine, including reducing fever, cough, influenza, neutralizing poisons, antiseptics, and others. The part of the plant that is used as medicine is the leaf. The purpose of this study was to determine the antibacterial activity of leaf endophytic fungal isolates on Propionibacterium  acne  and  Pseudomonas  aeruginosa.  The  type  of  research  used  was experimental.  The  testing  methods  of  the  research  were  isolation  and  purification  of endophytic fungi from miana leaves, identification of miana leaf fungi-producing bacteria, and  testing  the  diameter  of  the  inhibition  zone  of  miana  leaf  endophytic  fungi  against  P. acne and P. aeruginosa by diffusion method using the well technique. The results obtained were  four  isolates:  Mukor  sp.  (white),  Aspergillius  niger  (black),  Aspergillius  fumigatus (green),  and  Rhzipus  sp.  (gray).  Endophytic  fungi  isolated  from  miana  leaves  have antibacterial activity against the growth of P. acne and P. aeruginosa.
Keywords :  Miana leaves; Propionibacterium acnes; Pseudomonas aeruginosa;  endophytic fungi

## ABSTRAK
Isolasi dan Aktivitas Antibakteri Fungi Endofit Daun Miana ( Coleus scutellarioides (L.) Benth) terhadap Propionibacterium acne dan Pseudomonas aeruginosa
Novita 1* , Sesilia Rante Pakadang 1 dan Arisanty 1
1 Jurusan Farmasi, Poltekkes Kemenkes Makassar, Makassar

## INFO ARTIKEL
Submit : 17 Okt. 2022 Revisi : 12 Apr. 2023 Diterima : 27 Agu. 2023
*Corresponding Author: Novita, Program Studi Diploma IV Farmasi Poltekkes Makassar, Indonesia, Email: novitanovi420@gmail.com

## PENDAHULUAN
Mikroorganisme  endofit  ialah  mikroorganisme  yang  gampang tumbuh,  bisa  memperoleh  senyawa  bioaktif  pada  kuantitas  besar menggunakan metode fermentasi dengan siklus hidup yang pendek, dan. Kemampuan  mikroorganisme  endofit  dalam  mendapatkan  senyawa bioaktif  adalah  hal  yang  sangat  menjanjikan  sehingga  dapat  difungsikan sebagai tanaman obat herbal (Hasiani, Ahmad, and Rijai 2015).
Sementara  ketersediaan  mikroorganisme  endofit  herbal  di  alam semakin  berkurang  dan  potensinya  sebagai  obat  semakin  meningkat, diperlukan  suatu  cara  untuk  menjaga  ketersediaannya  di  alam  sebagai bahan  obat.  Hubungan  antara  mikroorganisme  endofit  dan  zat  aktif tanaman  memiliki  efek  terapeutik  yang  sama  dengan  metabolit  sekunder yang  dihasilkan  oleh  mikroorganisme.  Mikroorganisme  endofit  bagian tumbuhan  dapat  terdiri  dari  beberapa  spesies,  salah  satunya  yang  paling banyak  diisolasi  adalah  jamur  endofit.  Kapang  endofit  merupakan mikrobiota endofit yang paling banyak ditemukan dan melimpah di alam (Jamilatun and Shufiyani 2019).
Acne vulgaris atau acne adalah masalah inflamasi akut pada kelenjar pilosebasea,  yang  manifestasi  klinisnya  biasanya  polimorfik  dan  meliputi beragam kerusakan epidermis seperti: komedo, papul, pustul, nodul, dan jaringan  parut,  yang  disebabkan  oleh  penyakit  aktif  malnutrisi  dan hipertrofi. Pasien umumnya mengeluh ruam pada wadah predileksi, yaitu wajah, bahu, leher, dada, belakang atas, dan lengan atas (Mauliza, Elmiyati, and Andri 2020).
Di  Indonesia,  studi  dermatologi  kosmetik  melaporkan    pada  tahun 2006  dan  2007  pasien acne masing-masing  60% dan 80%  (Purwaningdyah dan Nelva, 2013). Di negara maju dan berkembang, wanita memiliki lebih banyak jerawat daripada pria, dengan insiden puncak pada usia 15 tahun (Meilina and Hasanah 2018).
Propionibacterium  acnes adalah  mahluk  hidup  utama  yang  dapat menyebabkan  jerawat. P.  acne yaitu  basil  anaerob  gram-positif  yang merupakan floras natural kelenjar pilosebasea. Tumbuhnya penyakit akibat
P.  acnes yaitu  berpecahnya t riasilgliserol  sehingga  terbentuk  asam  lemak bebas,  yang  menyebabkan  kolonisasi P.  acne ,  yang  mengundang peradangan dan menimbulkan jerawat (Yusuf and Mourisa 2020).
Pseudomonas  aeruginosa yaitu  basil  gram  negatif  yang  berkelakuan patogen kepada manusia, akibatnya dapat menimbulkan bermacam infeksi yang  sulit  diobati  karena P.  aeruginosa merupakan  bakteri  yang  telah resisten pada sebagian besar antibiotik. Hal ini karena adanya biofilm pada P.  aeruginosa (Putri,  Nurrohim,  and  Hidayah  2019).  Infeksi  yang
ditimbulkan  oleh P.  aeruginosa sering  dikaitkan  dengan  sistem  kekebalan yang  lemah,  seperti  neutropenia, cystic  fibrosis atau  luka  bakar  (Sanjaya,
Fatmawati, and Hendrayana 2019).
Daun  miana  ( Coleus  scutellarioides (L.)  Benth)  merupakan  tumbuhan yang sangat unik karena mempunyai banyak jenis daun dengan berbagai bentuk varietas yang dimaksud terlihat pada persamaan corak daun yang sangat  banyak.  Corak  pada  daun  ditimbulkan  oleh  pigmen  yang dikandungnya.  Pembentukan  pigmen  pada  daun  ditetapkan  menurut genetik  dan  juga  dipengaruhi  oleh  komponen  yang  ada  disekitar lingkungan  seperti  cahaya  dan  lingkungan.  Daun  miana  dapat  hidup  di dataran  tinggi  dan  rendah  pada  ketinggian  sekitar  1.500  meter.  Sebagai aturan  praktis,  daun  miana  dapat  dipakai  sebagai  obat  luka.  Selain  itu, daun  miana  dapat  digunakan  untuk  mengobati  hepatitis,  batuk  dan  flu. Daunnya  digunakan  sebagai  antiseptik,  insektisida,  pencahar,  bisul  dan gangguan pencernaan (Ramdani, Mulqie, and Maulana 2020).
Manfaat  daun  miana  yang  sudah  terbukti  juga  telah  dibuktikan dalam sebuah analisis manfaat ilmiah lainnya, ialah antihiperkolesterolemia (Iskandar et al. 2018), antimalaria (Lisdawati et al. 2008),  antidiabetes  (Suliati,  Rahmawati,  and  Mukarlina  2017),  antibakteri
Staphylococcus  aureus tahan  pada  methicillin  (Moektiwardoyo  et  al.  2016), antioksidan  (Moektiwardoyo  et  al.  2016)  dan  lipopolisakarida  yang  di induksi  makrofag  penghambatan  implementasi  oksida  nitrat  (Hamidah, Moektiwardoyo, and Abdassah 2019).
Masyarakat  menggunakan  daun  miana  secara  empiris  dengan mengambil  beberapa  pucuk  dan  merebusnya  serta  meminum  air rebusannya.  Masyarakat  tidak  tahu  bahwa  daun  miana  mengandung metabolit  sekunder,  sehingga  dapat  digunakan  sebagai  obat.  Orang biasanya hanya menggunakan tanaman ini sebagai obat yang di dasarkan pada  keturunan  dan  kemudian  dijadikan  kebiasaan.  Kemanjuran antibakteri ekstrak etanol pada daun miana telah ketahui (Salimi 2020).
Sesuai  dengan  berbagai  hal  yang  dimaksudkan  ini  sehingga  perlu pengembangan  potensi  pencarian  fungi  endofit  dari  daun  miana  yang berpotensi  sebagai  antibakteri. P.  acne merupakan  penyebab  terjadinya jerawat  dan P.  aeruginosa merupakan  penyebab  terjadinya  infeksi  pada kulit. Kasus ini cukup banyak ditemukan di masyarakat dan penting untuk mencari solusi pengobatannya.

## MATERIAL DAN METODE

## Material
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  autoklaf,  batang penganduk, cutter ,  cawan  petri, cover  class ,  erlenmeyer,  gelas  kimia,  gelas ukur, gunting, inkubator, jarum ose, label, Laminar Air Flow (LAF), lampu spiritus,  mikroskop,  objek  glass  (kaca  preparat),  oven,  penggaris,  pinset, pipet  tetes,  pisau  scalpel,  rak  tabung,  tabung  reaksi,  dan  timbangan analitik.

## Metode

## Isolasi Fungi Endofit dari Daun Miana
Daun miana dicuci bersih menggunakan air yang dialiri dalam waktu 10  menit,  kemudian  dilaksanakan  sebuah  sterilisasi  permukaan  untuk merendam  secara  berturut-turut  kedalam  alkohol  75%  dalam  waktu  1 menit, natrium hipoklorit (NaOCl) 5% dalam waktu 5 menit, dan alkohol 75%  dalam  waktu  30  detik.  Setelah  itu  daun  kemudian  akan  dilakukan pengeringan yang diletakkan kedalam cawan petri steril yang diberi kertas saring steril. Setelah itu daun dipotong dengan ukuran ± 1 cm di atas objek gelas  steril.  Lalu  potongan  daun  tersebut  diinokulasikan  pada  medium PDA ( Potato Dextrose Agar ) yang telah ditambahkan kloramfenikol 0,005%) dalam cawan petri lalu diinkubasi pada suhu 25°C dalam waktu 5-7 hari. Hasil  isolasi  jamur  endofit  yang  hidup  dalam  medium  PDA,
dimurnikan  dengan  cara  menginokulasi  kembali  koloni  tunggal  pada media PDA dan diinkubasi selama 3 hari pada suhu 25°C. Hasil inkubasi ditemukan beberapa jenis kapang murni berdasarkan pengamatan bentuk dan warna koloni pada medium PDA. Setiap koloni yang berbeda bentuk atau warna dikultur kembali berulang-ulang hingga diperoleh isolat koloni murni fungi endofit.

## Identifikasi Fungi Endofit Penghasil Antibakteri
Hasil  isolat  fungi  endofit  selanjutnya  diidentifikasi  berdasarkan makroskopik dan mikroskopik. Pengamatan makroskopik meliputi bentuk dan  warna  koloni  dan  mikroskopik  meliputi  (bentuk  dan  ukuran  hifa, konidia,  spora  dengan  mikroskop).  Fungi  diidentifikasi  dengan mencocokkan spesifikasi mikroskopik dengan pustaka.
Adapun  cara  mengidentifikasi  fungi  yaitu  medium  SDA  ( Sabouraud Dextrosa Agar ) diambil dari cawan petri dengan jarum ose, potongan agar diletakkan  di  atas  objek  glass  secara  aseptik  menggunakan  jarum  ose, jamur  dari  biakan  murni  diambil  dengan  cara  menggunakan  jarum  ose, pada  bagian  sisi  agar  diinokulasi  dengan  jamur,  setelah  itu  ditutup
menggunakan cover glass , preparat tersebut diletakkan di atas kertas saring yang telah dilembabkan dengan air dan diinkubasi pada suhu 25°C selama 2-3  hari,  morfologi  fungi  (bentuk  dan  ukuran  hifa,  konidia,  spora)  yang terbentuk  dilihat  dengan  cara  menggunakan  mikroskop  dengan pembesaran 400x, jamur yang  ditemukan kemudian diidentifikasi dengan cara mencocokkan dengan pustaka identifikasi fungi.

## Penyiapan Bakteri Uji
Bakteri  Uji  diambil  1  ose  biakan  murni P.  acne dan P.  aeruginosa diinokulasi pada masing-masing medium NA  ( Nutrient Agar ) miring, lalu diinkubasi  selama  1  ×  24  jam  pada  suhu  37°C.  Hasil  peremajaan  biakan bakteri  yang  diperoleh,  diambil  1  ose,  lalu  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi yang berisi 10 ml larutan aquadest steril, dikocok sampai homogen.

## Pengujian  Diameter  Zona  Hambatan  Metabolit  Sekunder  menggunakan Metode Sumuran Agar
Pada  suspensi  jamur  endofit  disiapkan,  diletakkan  sumuran  pada media  NA,  swab  steril  dimasukkan  ke  dalam  suspensi  bakteri  uji  dan diinokulasi  ke  permukaan  media  NA  steril  dengan  metode taburan/sebaran  (bakteri  uji  dioleskan  merata  diatas  permukaan  media menggunakan  swab  steril),  sedian  bahan  uji  suspensi  jamur  endofit  yang sudah disiapkan, dimasukkan ke dalam pencadang secara aseptis dengan menggunakan spoit sebanyak 0,3 ml (pada masing-masing pencadang diisi bahan uji dengan jumlah yang sama banyak), diinkubasi pada suhu 37°C selama 1×24 jam, selanjutnya dilihat dan diukur diameter hambatan yang terjadi.

## HASIL

## Isolasi Fungi Endofit dari Daun Miana
Pada tabel 1 dan 2 akan dijelaskan mengenai karakteristik isolat fungi endofit  daun  miana  secara  makroskopik  dan  mikroskopik,  yang  dimana terdapat 4 empat warna yang berbeda dalama cawan yaitu masing-masing terdapat isolat putih ( Mucor sp ), isolat hitam ( Aspergillus niger ), isolat hijau ( Aspergillus fumigatus ) dan isolat abu-abu ( Rhizopus ).
Tabel 1. Karakteristik Isolasi Fungi Endofit Daun Miana secara Makroskopik Hari ke Makroskopik (dalam cawan) Keterangan
1 Putih (Mucor) Koloni yang mempunyai warna hijau keabu-abuan pada pinggir dengan mempunyai warna putih, koloni bentuknya bulat, bagian bawah koloni mempunyai warna kuning tekstur permukaan koloni dalam tepi koloni sedikit runcing.
2 Isolat Hitam
( Aspergillus niger ) Satu koloni digabungkan dengan yang lain sebagaimana menjadikan cawan petri penuh, dengan tekstur yang kasar menyerupai serbuk , warna bagian bawah hitam dan kuning, warna koloni bagian atas cokelat kehitamaan.
3 Isolat Hijau ( Aspergillus fumigatus ) Dalam awal munculnya pada kumpulan beludru putih dengan berikutnya dilakukan perubahan warna menjadi hijau hingga hijau tua pada pinggiran berwana putih dan permukaan bawah koloni ke kuningan sampai coklat.
4 Isolat Abu-abu ( Rhizopus )
Warna koloni putih dan berubah dengan warna abu-abu dengan pinggirannya mempunyai warna putih, tekstur permukaan tebal seperti kapas dengan bentuknya bulat bawah kuning.
Tabel 2. Karakteristik Isolat Fungi Endofit Daun Miana secara Mikroskopik Hari ke Mikroskopik (dalam cawan) Pembanding (menurut referensi) Keterangan 1 Isolat Putih ( Mucor sp ) a. Kolumela b. Sporangiosfor c. Hifa Ciri-ciri mikroskopik adalah hifa steril, kolom kecil berbentuk hemispherical di bagian atas hifa, dan sporangia halus dan transparan. Sporangia awalnya soliter atau bercabang, columella membulat.
2
Isolat Hijau ( Aspergillus niger ) a. Konidiofor b. Fialid c. Vesikel d. Konidia Ciri-ciri mikroskopis adalah konidiofor transparan, konidia coklat, dan duri pada permukaan konidia. Phialids mengisi seluruh permukaan vesikel dan vesikel bulat besar.
Koloni bercorak besar, dan karakter mikroskopisnya ialah konidia transparan, konidia cokelat, dan duri pada permukaan konidia. Phialids mengisi seluruh permukaan vesikel dan vesikel labu besar.
Bagian bawah koloni bercorak putih kekuningan, koloni bercorak hitam dan koloni bercorak putih kekuningan.
3
Isolat Hijau ( Aspergillus fumigatus ) a. hialin, vesikula b. berbentuk bulat, vialid terbentuk langsung pada vesikula, konidia c. konidia berbentuk bulat Secara mikroskopis, Aspergillus fumigatus dicirikan oleh pembentukan konidia,
konidiofor dengan kepala konidia yang membentuk kolom yang terdiri dari vesikel seperti labu, trikotel, dan konidia rantai panjang, memunculkan danya konidiofor, vesikel dan konidiofor yang berbentuk labu dan bercorak hijau
kebiruan.
4
Isolat Abu-abu ( Rhizopus sp ) 1. Sporangium 2. Hifa Ciri-ciri mikroskopiknya menujukkan  hifanya memiliki sekat dan memperoleh sporangium yang membentuk bulatan di ujung hifanya,
sporagiofor berdiri, standar dan bercorak kecokelatan mempunyai kolumel globose dan bercorak kecokelatan sporangium bercorak hitam dan bentuknya globose
Aktivitas  Isolat  Fungi  Endofit  Daun  Miana  terhadap  Pertumbuhan P. acne dan P. aeruginosa
Pada  tabel  3  akan  dijelaskan  mengenai  hasil  pengukuran  zona hambat pertumbuhan P. acne dan P. aeruginosa dengan menggunakan cara diameter zona hambat 1 x 24 jam pada setiap rerplikasi. Sampel P. acne dan P. aeruginosa dilakukan perlakuan pada masing-masing isolat yang dimana terdapat 3 cawan, sehingga akan di dapatkan total dan hasil nilai rata-rata dari semua isolat sedangkan kontrol negatifnya menggunakan sampel air murni.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Zona Hambat Pertumbuhan P. acne dan P. aeruginosa Sampel Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Inkubasi 1 x 24 Jam pada Setiap Replikasi Total Rata- rata Cawan 1 Cawan 2 Cawan 3 P. acne Putih 10 11 12 33 11 Hitam 12 13,5 15 40,3 13,5 Hijau 11 16 13 40 13,3 Abu-abu 9 13 13 35 11,6 Kontrol Negatif 8 8 8 24 8 P. aeruginosa Putih 14 13 15 42 14 Hitam 20 19 19 58 19,3 Hijau 13 15 14 42 14 Abu-abu 22 19 18 58 19,6 Kontrol Negatif 8 8 8 24 8

## PEMBAHASAN
Pada penelitian ini didapatkan empat isolat murni dengan bahan uji daun miana. Isolat putih diidentifikasi sebagai Mucor sp. (berwarna putih), isolat hitam diidentifikasi sebagai Aspergillus niger (berwarna hitam), isolat hijau diidentifikasi sebagai Aspergillus fumigatus (berwarna hijau) dan isolat abu-abu diidentifikasi sebagai Rhizopus sp. (berwarna abu-abu).
Berdasarkan makroskopiknya, isolat putih diduga sebagai Mucor sp. yang  memiliki  warna  koloni  hijau  keabu-abuan  dengan  tepian  yang bercorak  putih,  dimana  bentuk  koloni  bulat  dan  tekstur  pada  bidang koloni,  tepi  koloni  memuncak,  pada  permukaan  yang  dasar  bercorak kuning. Menurut Samson et al. (2010), Mucor sp. yaitu jamur anggota genus Mucor mempunyai  karakteristik  koloni  yang  bercorak  kuning  keabu- abuan,  koloni  mengunci  cawan  petri  selama  kurang  lebih  seminggu, namun  karakteristik  mikroskopik  sporangiofor  ini  pada  mulanya  sangat sederhana serta mempunyai cabang-cabang kolumela labu atapun runcing.
Secara mikroskopiknya Mucor sp. mempunyai hifa, aseptat, kolumela yang  ditemukan  pada  ujung  hifa  dan  mempunyai  bentuk  semi  labut. Sporangiofor  lembut  dan  bercorak  hialin,  sporangiofor  pada  mulanya standar atau memiliki cabang kolumela labu.
Selanjutnya  berdasarkan  pada  hasil  penggamatan,  isolat  hitam diduga Aspergillus  niger secara  makroskopik  corak  koloni  dibagian  atas cokelat  kehitaman,  sebuah  koloni  menyatu  pada  sebuah  koloni  yang berbeda sehingga dapat mengisi cawan petri hinggah full, karakteristiknya vulgar  hampir  sama  dengan  tepung  corak  pada  bagian  tepi  bawah bercorak  kuning  dan  kehitaman.  Hal  ini  sesuai  dengan  jamur  kelompok spesies Aspergillus  niger berdasarkan  Samson  et  al.  (2010)  ialah  koloni bercorak  kuning,  putih,  hitam,  hitam  kecoklatan,  dan  cokelat.  Konidiofor bercorak  hitam  namun  ada  juga  yang  bercorak  cokelat  dan  konidianya membentuk bulat dan bercorak cokelat dan mempunyai duri dibagian tepi atasnya.
Secara mikroskopik Aspergillus niger mempunyai konidiofor bercorak hialin,  konidia  yang  cokelat  serta  ditemukan  duri  di  bagian  tepi  konidia. Phialid  mengisi  semua  tepi  dengan  vesikel  dan  vesikel  labu  besar. Mempunyai corak koloni hitam dibagian tepi bawah koloni bercorak putih kekuningan.
Selanjutnya  berdasarkan  hasil  pengamatan  isolat  hijau  diduga Aspergillus  fumigatus secara  makroskopik  berubah  warna  menjadi  hijau sampai  hijau  tua  pada  tepian  bercorak  putih  dan  tepian  bawah  koloni bercorak  kekuningan  sampai  cokelat  yang  pada  awalnya  muncul kumpulan  beludru  putih.  Hal  ini  sama  sehingga  yang  diterima  oleh (Fathoni,  Radiastuti,  and  Wijayanti  2007),  bahwa  koloni Aspergillus fumigatus ini mempunyai tepi koloni yang rata, tekstur seperti beludru dan datar serta tumbuh berwarna hijau pekat sampai keabuan Pengamatan  yang  dilakukan  dengan  menggunakan  mikroskopik
Aspergillus  fumigatus ditunjukkan  sebuah  indikator  pembentukan konidiofor  disertai  sebuah  tangkai  konidiofor  menggunakan  kepala konidia  yang  bentuknya  kolom  dengan  tersusun  atas  vesikel  yang  fialid uniserate,  berbentuk  bulat,  dan  rantai  panjang  konidia.  Memperlihatkan adanya  batang  konidiofor,  vesikel,  dan  konidia  (spora)  yang  mempunyai bentuk  labu  yang  bercorak  hijau  biru.  Dalam  sebuah  pengamatan  yang dilakukan  dilakukan  penyesuaian  terhadap  hasil  studi  oleh  Gholib  and Tarmudji  (2005)  dan  Sugui  et  al.  (2015),  mengenai  pemeriksaan mikroskopik Aspergillus  fumigatus menunjukkan  tangkai  konidiofor  yang pendek  berwarna  kehijauan  serta  akan  berbentuk  melonjong  ( columnar ), adanya  vesikel  (kepala  konidia)  berbentuk  bulat  dan  oval  ( clavate )  dan bertambahnya umur koloni. Fialid terlihat mengunci dibagian atas vesikel
dengan setengah bagian saja yang tertutupi. Spora konidia permukaannya bergranul, berwarna kehijauan, serta berbentuk bulat,
Selanjutnya  berdasarkan  hasil  pengamatan  isolat  abu-abu  diduga
Rhizopus sp secara makroskopik warna koloni putih dan berubah menjadi warna  abu-abu  dengan  tepianya  bercorak  putih,  tekstur  pada  tepian  atas tebal seperti kapas, berbentuk labu bercorak pada bagian bawah kuning. Namun  dari  penglihatan  dengan  cara  mikroskopik Rhizopus sp tampak  hifa  bersekat,  dan  memperoleh  sporangium  dengan  berbentuk labu  dibagian  pagkal  hifa,  sporangiofor  lurus,  standar  dan  bercorak kecokelatan,  mempunyai  kolumela  yang  membentuk  globose,  dan bercorak  kecokelatan,  sporangianya  bercorak  hitam  hingga  berbentuk globose.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  Watanabe  (2002)  bahwa  jamur anggota  genus Rhizopus mempunyai  karekteristik  sporangiofor  bercorak kecokelatan  dan  kuning,  lurus,  standar  atau  tangkai  yang  cabang, mempunyai  kolumela  yang  membentuk  globose,  dan  bercorak kecokelatan,  sporangianya  bercorak  hitam  dan  kecokelatan,  hingga membentuk globose.
Hasil  isolat  fungi  endofit  daun  miana  yang  diperoleh  setelah dilakukan pengujian antibakteri terhadap P. acne. Dimana hasil penelitian ini memperlihatkan adanya zona hambat isolat putih, hitam, hijau dan abu- abu  fungi  endofit  daun  miana  terhadap  pertumbuhan P.  acne .  Dimana isolat putih fungi endofit daun miana yang telah diuji pada bakteri uji P. acne yaitu  memiliki  diameter  zona  hambat  dengan  nilai  rata-rata  11  mm. Selanjutnya untuk isolat hitam fungi endofit daun miana yang telah diuji pada P. acne yaitu  memiliki diameter zona hambat dengan nilai rata-rata 13,5  mm.  Selanjutnya  untuk  isolat  hijau  fungi  endofit  daun  miana  yang telah  diuji  pada P.  acne yaitu  mempunyai  ukuran yang mempunyai  zona hambat  dengan  nilai  rata-rata  13,3 mm. Selanjutnya  untuk  isolat  abu-abu fungi endofit daun miana yang telah diuji pada P. acne yaitu mempunyai diameter  zona  hambat  dengan  nilai  rata-rata  11,6  mm.  Data  tersebut menunjukkan bahwa fungi endofit yang tumbuh pada daun miana hanya isolat hitam, hijau, dan abu-abu yang bisa menghentikan perkembangan P. acne sedangkan untuk isolat putih tidak dapat menghentikan pertumbuhan
P. Acne.
Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  isolat  putih,  hitam,  hijau dan abu-abu fungi endofit terhadap pertumbuhan P. acne dianalisis secara SPSS. Uji normalitas untuk P. acne menunjukkan nilai sig 0,780 - 1,000 yang berarti ada data yang berdistribusi normal. Uji homogenitas menunjukkan nilai  sig  0,096>0,05  yang  berarti  data  homogen.  Sehingga  analisis selanjutnya  dilakukan.  Uji  parametrik  Anova  menunjukkan  nilai  sig. 0,18<0,05  yang  berarti  semua  isolat  memberikan  daya  hambat  yang berbeda nyata dalam menghambat pertumbuhan P. acne . Analisis lanjutan

## Isolasi dan Aktivitas Antibakteri Fungi Endofit Daun Miana
dengan Least Significant Different (LSD) . Pengujian LSD dilaksanakan guna mengidentifikasi terdapat maupun tidak sebuah ketidaksamaan pengaruh dalam  memberikan  suatu  larutan  pengujian  pada  efek  anti  mikroba dengan beberapa kelompok perlakuan untuk menentukan pengaruh antar perlakuan.  Pengaruh  antar  perlakuan  menunjukkan  aktivitas  jamur  putih tidak berpengaruh terhadap P.  acne karena fungi endofit isolat putih tidak berbeda  nyata  dengan  kontrol  negatif  berarti  tidak  mempunyai  efek  dan tidak  berpotensi  sebagai  antibakteri  terhadap P.  acne ,  sedangkan  fungi endofit  isolat  hitam,  hijau  dan  abu-abu  masing-masing  antar  perlakuan berbeda nyata dengan kontrol negatif dalam menghambat pertumbuhan P. acne yang  berarti  jamur  hitam,  hijau  dan  abu-abu  mempunyai  efek  dan berpotensi sebagai antibakteri terhadap P. acne.
Hasil  isolat  fungi  endofit  daun  miana  yang  diperoleh  setelah dilakukan pengujian antibakteri terhadap P. aeruginosa . Hasil penelitian ini memperlihatkan  adanya  zona  hambat  isolat  putih,  hitam,  hijau  dan  abu- abu fungi endofit daun miana terhadap pertumbuhan P. aeruginosa . Isolat putih  fungi  endofit  daun  miana  yang  telah  diuji  pada  bakteri  uji P. aeruginnosa yaitu memiliki diameter zona hambat dengan nilai rata-rata 14 mm. Selanjutnya untuk isolat hitam fungi endofit daun miana yang telah diuji pada P. aeruginosa yaitu  memiliki diameter zona hambat dengan nilai rata-rata 19,3 mm. Selanjutnya untuk isolat hijau fungi endofit daun miana yang  telah  diuji  pada P.  aeruginosa yaitu  memiliki  diameter  zona  hambat dengan  nilai  rata-rata  14  mm.  Selanjutnya  untuk  isolat  abu-abu  fungi endofit  daun  miana  yang  telah  diuji  pada P.  aeruginosa yaitu  memiliki diameter  zona  hambat  dengan  nilai  rata-rata  19,6  mm.  Data  tersebut ditunjukkan mengenai fungi endofit yang melakukan pertumbuhan dalam daun  miana  isolat  putih,  hitam,  hijau,  dan  abu-abu  dapat  menghambat pertumbuhan P. aeruginosa .
Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  isolat  putih,  hitam,  hijau dan  abu-abu  fungi  endofit  terhadap  pertumbuhan P.  aeruginosa dianalisis secara  SPSS.  Uji  normalitas  untuk P.  aeruginosa menunjukkan  nilai  sig.
0,463-1,000  maka  data  berdistribusi  normal.  Uji  homogenitas memperlihatkan  nilai  sig  0,134>0,05  yang  berarti  data  homogen.  Analisis selanjutnya  dilakukan  uji  parametrik  Anova  menunjukkan  nilai  sig. 0,00<0,05  yang  berarti  semua  isolat  memberikan  daya  hambat  yang berbeda dalam menghambat pertumbuhan P. aeruginosa. Analisis lanjutan dengan LSD untuk menentukan pengaruh antar perlakuan, pengaruh antar perlakuan  menunjukkan  aktivitas  jamur  putih,  hitam,  hijau  dan  abu-abu masing-masing  antar  perlakuan  berbeda  nyata  dengan  kontrol  negatif dalam menghambat  pertumbuhan P. aeruginosa yang berarti fungi endofit isolat  putih,  hitam,  hijau  dan  abu-abu  mempunyai  efek  dan  berpotensi sebagai antibakteri terhadap P.  aeruginosa.

## KESIMPULAN
Didapatkan  4  hasil  isolat  fungi  endofit  dalam  daun  miana  berupa isolat  putih  diperkirakan Mucor sp,  isolat  hitam  diperkirakan Aspergillus niger ,  isolat  hijau  diperkirakan Aspergillus  fumigatus ,  dan  isolat  abu-abu diperkirakan Rizopus sp.  Fungi  endofit  isolat  hitam,  hijau,  dan  abu-abu mempunyai  efek  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri  terhadap P.  acne sedangkan isolat putih tidak dapat berpotensi sebagai antibakteri terhadap P. acne .

## UCAPAN TERIMAKASIH
Saya  mengucapkan  terima  kasih  kepada  pihak-pihak  yang  telah berperan  dan  mendukung  dalam  pelaksanaan  penelitian  ini  sehingga penelitian dapat diselesaikan dengan baik.

## KONFLIK KEPENTINGAN

## Tidak ada

## KONTRIBUSI PENULIS
Setiap penulis sudah berkontribusi dengan tidak kalah penting satu dan yang lainnya dengan berupa ditunjukkan pada penulis 1 yang sudah berkontribusi  memberikan  ide  maupun  gagasan  dan  bantuan  dana sebagaimana  menjadikan  dalam  penelitian  yang  dilakukan  bisa terselesaikan  berdasarkan  target  dengan  telah  dilakukan  penentuan sebelumnya.  Begitupun  dengan  penulis  2  yang  sudah  memberikan kontribusinya  pada  penyusunan  proposal,  dan  penulis  3  dengan  sudah memberikan  kontribusinya  dalam  penyusunan  dan  melakukan  analisa data.

## PENDANAAN
Dalam  penelitian  yang  dilakukan  tidak  menerima  pendanaan eksternal,  namun  dilakukan  pendanaan  dengan  biaya  mandiri  dari  para peneliti.

## DAFTAR PUSTAKA
Fathoni,  R,  N  Radiastuti,  and  F  Wijayanti.  2007.  “Identifikasi  Jenis Cendawan  pada  Kelelawar  ( Ordo  chiroptra )  di  Kota  Tangerang Selatan.” Jurnal Mikologi Indonesia 1 (1): 28–37.
Gholib,  D,  and  Tarmudji.  2005.  “Kasus  Aspergillosis  Granuloma  pada Paru-Paru  Burung  Emu  ( Dramacius  novaehollandies ).” Jurnal  Mikologi

## Kedokteran Indonesia 6 (1): 38–40.
Hamidah, M., M. Moektiwardoyo, and M. Abdassah. 2019. “ Review Artikel: Senyawa  Aktif  Antiinflamasi  Daun  Jawer  Kotok  ( Plectranthus scutellarioides LR Br.).” Farmaka 17 (1): 93–100.
Hasiani, Vilca Veronica, Islamudin Ahmad, and Laode Rijai. 2015. “Isolasi Jamur  Endofit  dan  Produksi  Metabolit  Sekunder  Antioksidan  dari Daun  Pacar  ( Lawsonia  inermis L.).” Jurnal  Sains  dan  Kesehatan 1  (4):
146–53. https://doi.org/10.25026/jsk.v1i4.32.
Iskandar,  Y,  F  Fadhillah,  S.  A  Sumiwi,  and  M  Moektiwardoyo.  2018. “Antihypercholesterolemic Activity of Water Fraction, Ethyl Acetate Fraction and  n-Hexane Fraction of Jawer Kotok Leaves ( Plectranthus scutellarioides L.) towards Hypercolesterolemic Rats".” Research Journal of Chemistry and Environment , no. 1: 31.
Jamilatun,  M.,  and  S.  Shufiyani.  2019.  “Isolasi  dan  Identifikasi  Kapang Endofit dari Tanaman Alang-Alang ( Imperata cylindrica (L.) Beauv.).” Jurnal Medikes (Media Informasi Kesehatan) 6 (1): 27–36.
Lisdawati,  V,  D  Mutiartikum,  S.  Alegantina,  and  Y.  Astuti.  2008. “Karakteristik  Daun  Miana  ( Plectranthus  scutellarioides (L.)  Bth.)  dan Buah  Sirih  ( Piper  betle L.)  secara  Fisiko  Kimia  dari  Ramuan  Lokal
Antimalaria Daerah Sulawesi Utara.” Media Litbang Kesehatan 18 (4):
213–25.
Mauliza,  Mila,  Elmiyati,  and  Andri.  2020.  “Pengaruh  Penggunaan Kosmetik terhadap Acne vulgaris pada Remaja Putri Kelas I dan Kelas II SMA Negeri 4 Banda Aceh.” Jurnal Ilmu Kedokteran dan Kesehatan 7 (1).
Meilina,  Noer  Erin,  and  Aliya  Nur  Hasanah.  2018.  “Review  Artikel:
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Buah  Manggis  ( Garnicia mangostana L.)  terhadap  Bakteri  Penyebab  Jerawat.” Farmaka 16  (2). https://doi.org/https://doi.org/10.24198/jf.v16i2.17550.g8767.
Moektiwardoyo, M, A Rochjana, Diantini, Ajeng, I Musfiroh, S. A. Sumiwi, Y Iskandar, and Y Susilawati. 2016. “Aktivitas Antioksidan Daun Iler Plectranthus  scutellarioides (  L  .)  R  .Br.” Jurnal  Farmasi  Indonesia 8  (1): 271–276.
Putri, AR, S Nurrohim, and N Hidayah. 2019. “Efektivitas Pemberian Salep Bonggol  Pisang  Ambon  terhadap  Jerawat  pada  Remaja.” Journal  of
Borneo Holistic Health 2 (1): 30–39.
Ramdani, Kiki, Lanny Mulqie, and Indra Topik Maulana. 2020. “Eksplorasi Beberapa  Tanaman  yang  Memiliki  Aktivitas  Antibakteri  terhadap
Staphylococcus  epidermidis Penyebab  Bau  Badan.” Prosiding  Farmasi SPeSIA 6 (2): 798–805.
Salimi, Yuszda K. 2020. “Daun Miana sebagai Antioksidan dan Antibakteri.
Yayasan  Pendidikan  dan  Sosial  Indonesia.” Kota  Serang  Provinsi Banten: Yayasan Pendidikan dan Sosial Indonesia Maju (YPSIM).
Samson,  RA,  J  Houbraken,  JC  Thrane,  Frisvad,  and  F  Andersen.  2010. “Food  and  Indoor  Fungi,  Fungal  Biodiversity  Centre  Utrecht.” Netherlands.
Sanjaya, I G A Ngurah Aswin Panji, Ni Nengah Dwi Fatmawati, and Made Agus  Hendrayana.  2019.  “Prevalensi  Isolat  Klinis  Pseudomonas Aeruginosa  yang  Memiliki  Gen  LasI  dan  LasR  di  Rumah  Sakit Umum Pusat Sanglah Denpasar Tahun 2013 – 2016.” E-Jurnal Medika 8 (6): 1–7.
Sugui,  JA,  KJ  Kwon-Chung,  Juvadi  PR,  Latge  JP,  and  BJ  Steinbach.  2015. “ Aspergillus fumigatus and Related Species.” Perspect Med 5 (10).
Suliati,  Rahmawati,  and  Mukarlina.  2017.  “Jenis-  Jenis  Jamur  Endofit Tanaman  Jeruk  Siam  ( Citrus  nobilis Var.  Microcarpa)  di  Perkebunan
Dungun  Prapakan  Sambas.” Jurnal  Protobiont 6  (3):  173–81. https://doi.org/http://dx.doi.org/10.26418/protobiont.v6i3.22472.
Watanabe, T. 2002. “Pictorial Atlas of Soal AndSeed Fungi, Second Edition.
” United States of America: CRC Press.
Yusuf,  Louse  Chintia,  and  Cut  Mourisa.  2020. “Uji Daya Hambat  Ekstrak Daun  Kembang  Sepatu  ( Hibiscus  rosa-sinensis L.)  terhadap Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium acnes .” Jurnal Ilmiah Maksitek 5 (4): 53–56.