## EFEKTIVITAS KITOSAN MIKROKRISTALIN SEBAGAI ALTERNATIF ANTIBAKTERI ALAMI DALAM MOUTHWASH

## The Effectiveness of Microcrystalline Chitosan as a Natural Antibacterial
Agent in Mouthwash

## Bustami Ibrahim*, Pipih Suptijah, Ahmad Zahid
Departemen Teknologi Hasil Perairan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan,

## Institut Pertanian Bogor
Diterima 7 Mei 2010/Disetujui 16 Juli 2012
Abstract
Microcrystalline chitosan is a chitosan that has been modified by minimizing its particle size. Chitosan posses antibacterial property. The use of microcrystalline chitosan as an antibacterial in the mouthwash has not been revealed yet. This study was done to compare the degree effectiveness of mouthwash that contain microcrystalline chitosan as an antibacterial and commercial mouthwash. The parameters measured in this study were proximate analysis, yield, deacetylation (Fourier Transform Infrared), particle size (Scanning Electron Microscopy), and total plate count. Microcrystalline chitosan contained moisture, ash, nitrogen and yield were 3.92% dry weight basis (db); 4% db, 1.4% db; and 50% respectively. Detection results of FTIR and SEM showed the size of microcrystalline chitosan was 0.6-6μm and degree of deacetylation was 88.66%. Mouthwash that contained 0.5%, 1% and 1.5% microcrystalline chitosan could reduce TPC bacteria up to 97.57%, 99.05% and 99.46% respectively, while commercial mouthwash reduced TPC bacteria up to 89.70%.
Keywords: antibacterial, microcrystalline chitosan, mouthwash.

## Abstrak
Kitosan  mikrokristalin  merupakan  hasil  modifikasi  kitosan  dengan  cara  memperkecil  ukuran partikelnya.  Kitosan  ini  dapat  berfungsi  sebagai  antibakteri.  Penggunaan  kitosan  mikrokristalin  sebagai antibakteri dalam mouthwash belum pernah dilakukan, oleh karena itu penelitian ini dilakukan dengan tujuan  untuk  menentukan  efektivitas  antibakteri  terbaik  kitosan  mikrokristalin  dalam mouthwash serta membandingkan kemampuan antibakteri mouthwash berbahan kitosan mikrokristalin dengan mouthwash komersial.  Parameter  yang  diukur  dalam  penelitian  ini  adalah  analisis  proksimat,  rendemen,  derajat deasetilasi (FTIR), ukuran pertikel (SEM), dan TPC. Hasil pengukuran rendemen dan analisis proksimat kitosan mikrokristalin yang meliputi kadar air, abu dan nitrogen masing-masing memiliki nilai berturut- turut  50%;  3,92%  bk;  4%  bk;  dan  1,4%  bk.  Hasil  deteksi  FTIR  dan  SEM  menunjukkan  bahwa  kitosan mikrokristalin  memiliki  ukuran  0,6-6  μm  dan  derajat  deasetilasi  sebesar  88,66%. Mouthwash dengan kandungan kitosan mikrokristalin 0,5%; 1%; dan 1,5% masing-masing dapat menurunkan jumlah TPC bakteri sebesar 97,57%; 99,05% dan 99,46%, sedangkan mouthwash komersial hanya dapat menurunkan jumlah TPC bakteri sebesar 89,70%.
Kata kunci: antibakteri, kitosan mikrokristalin, mouthwash .
*Korespondensi:  Jln.  Lingkar  Akademik,  Kampus  IPB Dramaga.  Telp.  +622518622915  Fax.  +622518622916 e-mail: bustamibr@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Hasil  Survei  Kesehatan  Rumah  Tangga (SKRT)  yang  dilakukan  Departemen Kesehatan  RI  menyebutkan  bahwa  penyakit
mulut  dan  gigi  menduduki  urutan  pertama dengan  jumlah  60  persen  dari  10  penyakit terbanyak  yang  diderita  masyarakat.  Angka permasalahan  yang  tinggi  tersebut  tidak dapat  dianggap  remeh.  Menjaga  kesehatan mulut dan gigi berarti juga menjaga seluruh kesehatan tubuh, karena gigi yang tidak sehat
Efektivitas kitosan mikrokristalin, Ibrahim, B. et al.
atau pada umumnya berlubang sangat mudah terjangkit kuman dan bakteri yang kemudian apabila menembus ke pembuluh darah dapat menggumpal di jantung (Loesche et al. 1998;
Malik 2008; Pedersen et al . 2005).
Permasalahan  cukup  serius  yang  timbul akibat  dari  penyakit  mulut  dan  gigi  perlu diimbangi pula dengan kesadaran yang tinggi dari masyarakat dalam menjaga kesehatan dan kebersihan mulut dan gigi. Salah satu aktivitas dalam  menjaga  kesehatan  serta  kebersihan mulut  dan  gigi  yang  sering  dilakukan masyarakat adalah dengan cara menyikat gigi atau cara pembersihan mekanis. Menyikat gigi ternyata kurang efektif dalam membersihkan kondisi gigi, karena menyikat gigi tidak dapat dilakukan secara sempurna pada tiap individu karena adanya beberapa faktor misalnya letak gigi yang berjejal.
Salah  satu  cara  pemeliharaan  kebersihan gigi  dan  mulut  yang  efektif  ialah  dengan cara  berkumur  menggunakan  obat  kumur ( mouthwash ).  Penggunaan  obat  kumur  sangat efektif  karena  kemampuannya  menjangkau tempat  yang  sulit  dibersihkan  dengan  sikat gigi  dan  dapat  merusak  pembentukan  plak. Penggunaan  antiseptik  dalam  obat  kumur dewasa  ini  diduga  dapat  berefek  karsinogenik terhadap penggunanya. Fakta tersebut didukung dari  hasil  penelitian  McCullough  dan  Farah (2008)  yang  menyatakan  bahwa  pemakaian mouthwash dengan  kandungan  antiseptik berupa alkohol dapat memicu terjadinya kanker mulut.  Melihat  dari  permasalahan  tersebut salah  satu  terobosan  yang  dilakukan  dalam penelitian  ini  adalah  menggunakan  kitosan mikrokristalin sebagai antiseptik dan antibakteri yang  alami  serta  aman  bagi  penggunanya. Tujuan  dilakukannya  penelitian  ini  adalah menentukan  efektivitas  antibakteri  terbaik kitosan mikrokristalin dalam mouthwash serta membandingkan dengan mouthwash komersial.

## MATERIAL DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  kitosan  mikrokristalin.
Bahan yang digunakan untuk produksi kitosan mikrokristalin  adalah  kitosan  komersial larut asam, CH 3 COOH, NaOH dan akuades. Bahan-bahan untuk analisis proksimat antara lain  akuades,  kjeltab  jenis  selenium,  larutan H 2 SO 4 pekat, NaOH, H 3 BO 3 , HCl 0,1 N, HgO, H 2 O 2 dan  AgNO 3 ,  akuades,  K 2 SO4,  HgO, H 2 SO 4 .  Bahan-bahan  untuk  analisis  derajat deasetilasi  adalah  ZrOCl 2 .8H 2 O  p.a.  Bahan- bahan untuk analisis ukuran partikel dengan Scanning  Electron  Microscopy (SEM)adalah aseton, pasta perak ( Dotite ), fine coat , nitrogen cair.  Bahan  yang  digunakan  untuk  uji  total plate count (TPC) antara lain garam fisiologis dan media NA. Alat-alat yang digunakan untuk produksi kitosan  mikrokristalin  antara  lain magnetic stirrer, kompor listrik, gelas ukur, gelas piala, dan spray dry . Alat-alat yang digunakan untuk analisis proksimat meliputi timbangan digital, pisau,  sudip,  cawan  porselen,  aluminium foil,  gegep,  desikator,  oven,  kompor  listrik, tanur  pengabuan,  labu  Kjeldahl,  destilator, labu Erlenmeyer, buret dan pipet volumetrik. Alat  yang  digunakan  untuk  analisis  derajat deasetilasi adalah Fourier Transform Infrared (SHIMADZU,  FTIR-8400).  Alat  yang digunakan untuk menentukan ukuran partikel SEM-EDX  5310LV  (JEOL).  Alat-alat  yang digunakan  untuk  analisis  TPC  diantaranya cawan  petri,  vortex,  sudip,  inkubator,  dan colony counter .

## Metode Penelitian
Penelitian  diawali  dengan  penelitian pendahuluan  berupa  analisis  mutu  kitosan komersil  meliputi  analisis  kadar  air, mineral,  protein,  dan  derajat  deasetilasi. Penelitian  utama  terdiri  atas  (1)  produksi dan  karakterisasi  kitosan  mikrokristalin;  (2) produksi mouthwash dan pengujian efektivitas antibakteri mouthwash kitosan mikrokristalin terhadap bakteri gigi dan mulut. Produksi  kitosan  mikrokristalin  diawali dengan  pelarutan  kitosan  komersil  dengan larutan  CH 3 COOH  2%.  Larutan  kitosan tersebut  selanjutnya  dihomogenisasi  agar
memperoleh ukuran partikel yang jauh lebih kecil  menggunakan magnetic  stierrer pada kecepatan  5000-10.000  rpm  selama  1  jam. Tahap selanjutnya berupa penambahan secara perlahan  NaOH  10%  hingga  terjadi  proses presipitasi atau pengendapan partikel terlarut.
Partikel  terlarut  yang  telah  mengendap,
selanjutnya dicuci hingga mencapai kondisi  pH  partikel  netral.  Tahap  terakhir proses  produksi  kitosan  mikrokristalin berupa  proses  pengeringan  partikel  kitosan mikro  menggunakan spray  dryer sehingga memperoleh  bubuk  kitosan  mikrokristalin. Kitosan  mikrokristalin  yang  telah  diproduksi kemudian  dianalisis  mutunya  berupa  analisis kadar  air,  kadar  mineral,  dan  kadar  nitrogen (AOAC  2005),  selanjutnya  dihitung  nilai derajat deasetilasi (DD) (Domszy dan Robert 1985)  menggunakan  alat  FTIR.  Penentuan ukuran pertikel dilakukan menggunakan SEM (Lin et al . 2002).
Tahap  produksi mouthwash dengan  zat antibakteri  kitosan  mikrokristalin  diawali dengan proses pelarutan kitosan mikrokristalin dengan  konsentrasi  masing-masing  sebesar 0,5%,  1%,  dan  1,5%.  Larutan mouthwash kitosan mikrokristalin kemudian ditambahkan zat  rasa  seperti  sodium  sakarin  dan mint ke  dalam  masing-masing  larutan  kitosan mikrokristalin  tersebut. Mouthwash yang dihasilkan diuji efektivitas antibakteri dengan dikumurkan oleh dua orang probandus yang memiliki  karakter  gigi  berlubang  dan  tidak berlubang.  Pengambilan  sampel  dilakukan pada  selang  waktu  sebelum  berkumur, dan  setelah  berkumur  pada  jam  ke-0,  jam ke-4  dan  jam  ke-8.  Pengamatan  efektivitas antibakteri  dilakukan  dengan  perhitungan
TPC.  Percobaan  ini  dilakukan  sebanyak  dua kali  ulangan.  Data  hasil  perhitungan  TPC kemudian  diuji  secara  statistik.  Data  yang diperoleh kemudian dianalisis menggunakan rancangan  acak  kelompok intime dengan uji lanjut Duncan (p<0,05) (Steel dan Torrie 1993).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Penelitian Pendahuluan
Hasil  analisis  proksimat  yang  meliputi kadar air, abu dan nitrogen kitosan komersial memiliki  nilai  berturut-turut  4%  bk;  0,21% bk; dan 1,33% bk. Kitosan tersebut memiliki derajat deasetilasi sebesar 80% (Tabel 1). Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa kitosan komersial memiliki kadar air sebesar 4%  bk.  Kadar  air  kitosan  tersebut  telah memenuhi  standar  mutu  yang  ditetapkan Protan Laboratories (1987) maksimal sebesar 10%  bk.  Kadar  air  kitosan  dipengaruhi oleh  lama  penyimpanan  bahan  baku  dan lingkungan.  Lingkungan  yang  lembab memberikan pengaruh besar terhadap kadar air dalam kitosan. Kumar (2000) menyatakan bahwa  kitosan  memiliki  sifat  yang  mudah menyerap  air  (hidrofilik),  sehingga  apabila kitosan  disimpan  terlalu  lama  dan  berada pada  kondisi  lingkungan  yang  lembab  maka kadar air kitosan semakin meningkat.
Kadar  abu  dalam  kitosan  larut  asam sebesar  0,21%  bk.  Nilai  tersebut  telah memenuhi standar mutu Protan Laboratories (1987)  yang  menstandarkan  kadar  mineral kitosan kurang dari 2%. Kadar mineral kitosan dipengaruhi oleh kualitas air yang digunakan ketika proses penetralan serta efektivitas proses demineralisasi yang dilakukan.

## Tabel 1 Hasil analisis proksimat kitosan
Spesifikasi Hasil Uji Protan Laboratories (1987) Ibrahim et al. (2009) Penampakan Serpihan Serpihan Kadar air 4,00% ≤ 10% 8,98% Kadar abu 0,21% ≤2% 1,04% Kadar N 1,33% <5% 4,87% Derajat deasetilasi 80,00% 70% 82,0%
Efektivitas kitosan mikrokristalin, Ibrahim, B. et al.
Hasil pengujian juga menunjukkan bahwa kitosan  larut  asam  memiliki  kadar  nitrogen dan derajat deasetilasi masing-masing sebesar 1,33% bk dan 80%. Kadar nitrogen dan derajat deasetilasi  ini  sesuai  dengan  standar  mutu yang telah ditetapkan Protan Laboratories.

## Penelitian Utama
Karakterisasi kitosan mikrokristalin Kitosan komersial yang telah dianalisis  mutunya  kemudian  dimodifikasi menjadi  kitosan  mikrokristalin  dengan memperkecil  ukuran  partikelnya.  Mutu kitosan  mikrokristalin  yang  telah  dihasilkan ditentukan  dengan  pengukuran  rendemen, analisis  proksimat,  analisis  FTIR,  analisis SEM, dan uji TPC rongga mulut dan gigi.
Hasil pengukuran rendemen dan analisis proksimat  kitosan  mikrokristalin  yang meliputi kadar air, abu, dan nitrogen masing- masing  memiliki  nilai  berturut-turut  50%; 3,92% bk; 4% bk; dan 1,4% bk. Suptijah et al. (1992)  menyatakan  bahwa  standar  kadar  air kitosan kurang dari 10% bk, nitrogen kurang dari 5% bk dan abu kurang dari 2% bk. Spektrum  inframerah  digunakan  untuk menentukan  derajat  deasetilasi  kitosan mikrokristalin,  gugus  fungsi  kitosan  yang terdiri  atas  gugus  OH,  CH,  NH,  amida  dan karbonil  pada  bilangan  gelombang  3414 cm -1 ,  2480  cm -1 ,  1639  cm -1 ,  1384  cm -1 dan 1075 cm -1 (Tabel 3). Derajat deasetilasi (DD) kitosan  mikrokristalin  yang  dihasilkan sebesar  88,66%  (Gambar  1).  Nilai  DD  di
Tabel 3 Karakteristik gugus fungsi  dari kitosan Standar Bilangan gelombang (cm -1 ) Gugus Fungsional Hasil Penelitian Bilangan Gelombang (cm -1 ) 3450 2400 1650 1550 1070 OH CH NH amida C=O 3392 2342 1575 1412 1076

## Tabel 3 Karakteristik gugus fungsi  dari kitosan
Standar Bilangan gelombang (cm -1 )  Gugus Fungsional Hasil Penelitian Bilangan Gelombang (cm -1 ) 3450 2400 1650 1550 1070 OH CH NH amida C=O 3392 2342 1575 1412 1076
Gambar 1 Spektrum FTIR kitosan mikrokristalin D (1) 4000.0 3000 2000
1500
1000 450.0
-2.0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22.0 cm-1 %T Laboratory Test Result J (2) 3901.52 3854.88 3839.58 3818.17 3803.28 3751.96 3735.87 3690.79 3672.48 3392.84 2342.47 1575.13 1412.31 1152.06 1076.14 651.62 Gambar 1 Spektrum FTIR kitosan mikrokristalin.
atas  70%  menandakan  bahwa  modifikasi kitosan menjadi kitosan mikrokristalin tidak mengubah  sifat  fungsional  kitosan  tersebut. Muzarelli  dan  Peter  (1997)  menyatakan bahwa  kitin  dengan  derajat  deasetilasi  lebih dari  70%  dapat  dikatakan  sebagai  kitosan. Hasil  pendeteksian  FTIR  menunjukkan bahwa  hasil  yang  diperoleh  tidak  berbeda signifikan  terhadap  gugus  fungsinya,  hal  ini menunjukkan bahwa proses modifikasi sudah dapat  menghasilkan  kitosan  dengan  gugus fungsi  yang cukup identik dengan standar.
Nilai  karakteristik  fisik  berupa  ukuran partikel  diukur  menggunakan  SEM.  Ukuran partikel  dapat  ditentukan  dengan  mengukur diameter  partikel  tersebut.  Perbesaran  yang digunakan  yaitu  mulai  dari  1000  hingga 20.000  kali.  Hasil  pengukuran  diameter menggunakan  foto  SEM  didapatkan  ukuran partikel  kitosan  mikrokristalin  berkisar  0,6- 6 μm (Gambar 2). Proses modifikasi kitosan menjadi kitosan mikrokristalin dengan teknik presipitasi telah berhasil mendapatkan ukuran partikel  mikro  bahkan  mencapai  ukuran nano. Mohanraj dan Chen (2006) menyatakan bahwa partikel yang berbentuk padat dengan ukuran  sekitar  10-1000  nm  dapat  dikatakan sebagai nano partikel. Nano partikel dari bahan polimer biodegradable dan biocompatible merupakan perkembangan yang baik karena diduga mampu terserap secara utuh di dalam sistem  pencernaan  setelah  masuk  ke  dalam
tubuh (Wu et al . 2005).
Pengujian Efektivitas Mouthwash Kitosan
Mikrokristalin Mouthwash kitosan mikrokristalin berbagai  konsentrasi  diaplikasikan  secara in vivo dengan  cara  berkumur  pada  dua  orang probandus usia 21 tahun dengan karakterisasi gigi berlubang dan tidak berlubang.
Hasil analisis ragam terhadap kandungan nilai  TPC  berdasarkan  karakter  jenis  gigi probandus 1 (tidak berlubang) dan probandus 2 (gigi berlubang) (Gambar 3) menunjukkan bahwa perbedaan jenis gigi tidak memberikan pengaruh  nyata  dengan  selang  kepercayaan 95%  terhadap  nilai  TPC  pada  setiap  taraf waktu  pengambilan  sampel  dan  konsentrasi kitosan  mikrokristalin.  Perbedaan  jenis  gigi tidak  memberikan  pengaruh  yang  berbeda nyata  terhadap  nilai  TPC  kedua  probandus dapat  disebabkan  faktor oral  hygiene yang diterapkan pada probandus 2 (gigi berlubang) masih  tergolong  baik.  Pintauli  dan  Hamada (2008)  menyatakan  bahwa  peningkatan bakteri  pada  individu  dengan oral  hygiene buruk  dapat  meningkatkan  bakteri  pada permukaan gigi sebanyak 2-10 kali lipat. Pada setiap taraf konsentrasi mouthwash kitosan  mikrokristalin  dengan  selang  waktu pengambilan sampel sebelum berkumur, dan setelah  berkumur  pada  jam  ke-0,  jam  ke- 4,  dan  jam  ke-8  (Gambar  4)  menunjukkan
Gambar 2 Hasil Scanning elektron microscopy dari kitosan mikrokristalin
Gambar 2 Hasil SEM dari kitosan mikrokristalin.
Efektivitas kitosan mikrokristalin, Ibrahim, B. et al.
bahwa interaksi antara konsentrasi dan waktu pengambilan  sampel  memberikan  pengaruh berbeda  nyata  (p<0,05)  terhadap  nilai  TPC rongga  gigi  dan  mulut  yang  dihasilkan.  Uji lanjut  Duncan  menunjukkan  hambatan bakteri  yang  terjadi  dari  sebelum  berkumur hingga  setelah  berkumur  (jam  ke-0) membuktikan  bahwa  perbedaan  konsentrasi kitosan  mikrokristalin  dalam mouthwash memberikan pengaruh yang nyata. Hambatan bakteri  terbaik  hingga  jam  ke-0  dihasilkan dari  hasil  berkumur  dengan mouthwash kitosan mikrokristalin 0,5, 1, dan 1,5% yang mampu  mengurangi  jumlah  bakteri  secara berturut-turut  sebesar  97,57,  99,05,  dan 99,46%,  sedangkan mouthwash komersial (kontrol positif) hanya mampu menurunkan bakteri sebesar 89,70%. Uji lanjut Duncan untuk hambatan bakteri dari jam ke-0 hingga jam ke-4 menunjukkan bahwa mouthwash dengan konsentrasi kitosan mikrokristalin  0,5,  1,  dan  1,5%  memiliki pengaruh nyata dibandingkan dengan kontrol positif ( mouthwash pembanding) dan kontrol negatif.  Uji  lanjut  Duncan  menunjukkan hambatan  terbaik  dihasilkan  dari  hasil berkumur  dengan mouthwash kitosan mikrokristalin  konsentrasi  1,5%  sebesar
83,72% atau mampu menghambat bakteri dari 4,93  x  10 6 hingga  3,41  x  10 5 koloni  bakteri. Mouthwash dengan  konsentrasi  kitosan mikrokristalin 1% hanya mampu menghambat bakteri sebesar 77,86% dan untuk konsentrasi 0,5% nilai hambatan bakteri yang dihasilkan pada jam ke-4 sudah melebihi jumlah bakteri saat  sebelum  berkumur,  akan  tetapi  masih jauh lebih kecil dibandingkan dengan kontrol negatif.
Hasil  yang  didapatkan  dari  semua perlakuan mouthwash jam ke-8  telah melebihi jumlah  bakteri  pada  saat  awal  atau  sebelum berkumur.  Uji  lanjut  Duncan  menunjukkan mouthwash kitosan mikrokristalin konsentrasi 1 dan 1,5% memiliki hambatan yang berbeda nyata  dibandingkan  dengan  perlakuan mouthwash lainnya.  Perbedaan  daya  hambat bakteri yang terjadi pada setiap taraf konsentrasi mouthwash kitosan mikrokristalin mendukung dari pernyataan Liu (2003) yang menjelaskan bahwa  aktivitas  antibakteri  tergantung  pada konsentrasi  kitosan  dalam  larutan.  Aktivitas antibakteri  dari  kitosan  dalam  medium  akan meningkat jika konsentrasi kitosan meningkat.
Mekanisme aktivitas antibakteri kitosan  terjadi  melalui  interaksi  gugus  NH 3 glukosamin  dengan  permukaaan  sel  yang
Keterangan: Huruf (a) menunjukkan perbedaan jenis gigi tidak memberikan pengaruh berbeda nyata (p<0,05) terhadap kandungan nilai TPC pada setiap perlakuan dan waktu.
Gambar 3 Nilai TPC probandus 1 (gigi tidak berlubang) dan probandus 2 (gigi berlubang) pada setiap waktu pengambilan sampel dan konsentrasi penggunaan mouthwash kitosan mikrokristalin ( mouthwash kitosan mikrokristalin 0,5%, mouthwash kitosan mikrokristalin 1%, mouthwash kitosan mikrokristalin 1,5%, kontrol positif,     kontrol negatif ) Lo g TP C Lo g TP C Analisis TPC Rongga Gigi dan Mulut Probandus 2 a
Gambar 3 Nilai TPC probandus 1 (gigi tidak berlubang) [a] dan probandus 2 (gigi berlubang) [b] pada setiap waktu pengambilan sampel dan  konsentrasi penggunaan mouthwash kitosan mikrokristalin ( ◆ mouthwash kitosan mikrokristalin 0,5%,  ■ mouthwash kitosan  mikrokristalin 1%, • mouthwash kitosan mikrokristalin 1,5%, ∆ kontrol positif, × kontrol negatif ). a b sebelum berkumur
sebelum berkumur jam ke-0 jam ke-4 jam ke-8 jam ke-0 jam ke-4 jam ke-8
bermuatan negatif (Eldin et al . 2008). Adanya daya  tarik  secara  struktural  antara  dinding sel  bakteri  dan  kitosan  disebabkan  dinding sel  bakteri  mengandung  peptidoglikan  yang struktur  dasar  rantai  utamanya  terdiri  atas N-asetilglukosamin dan β-glikan (Qujeq dan Mossavi 2004). Rafaat et al . (2008) menyatakan bahwa  interaksi  awal  antara  polikationik kitosan  dan  polimer  dinding  sel  yang bermuatan negatif dipengaruhi oleh interaksi elektrostatis  dan  asam  teikoat,  akibatnya, pengikatan kitosan pada polimer dinding sel memicu  terjadinya  efek  seluler  kedua,  yaitu destabilisasi  dan  perusakan  fungsi  membran bakteri  sehingga  mengganggu  fungsi membran  sebagai  pelindung.  Permeabilitas membran  terganggu  dan  mengakibatkan pergerakan substansi bakteri terhambat.

## KESIMPULAN
Hasil modifikasi kitosan menjadi kitosan mikrokristalin  dengan  metode  presipitasi menghasilkan kitosan dengan ukuran partikel berkisar  dari  0,6-6µm.  Karakteristik  mutu kitosan  mikrokristalin  yang  dihasilkan  tidak memiliki  perbedaan  yang  cukup  signifikan dengan  standar  yang  ditetapkan  Protan Laboratories  (1987). Mouthwash kitosan
mikrokristalin  memiliki  nilai  efektivitas penurunan nilai TPC lebih baik dibandingkan dari  hasil  berkumur  dengan mouthwash komersial.

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical Chemist.  2005.  Official  Method  of Analysis  of  the  Association  of  Official Analytical  of  Chemist.  Arlington:
The  Association  of  Official  Analytical
Chemist, Inc.
Ibrahim  B,  Suptijah  P,  Prantommy.  2009.
Pemanfaatan  kitosan  pada  pengolahan limbah  cair  industri  perikanan. Jurnal Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia 12(2): 154-166. Domszy  JG,  Robert  GAF.  1985.  Evaluation of  infrared  spectroscopic  techniques for analyzing chitosan. Journal Macromoleculer  Chemistry  and  Physics 186(8): 1671-1677. Eldin MSM, Soliman EA, AI Hashem, Tamer TM.  2008.  Antibacterial  activity  of chitosan  chemically  modified  with  new technique. Journal  Trends  Biomaterial
Artificial Organs 22(3): 121-133.
Kumar  MNR.  2000.  A  review  of  chitin  and
Keterangan: Angka-angka pada diagram batang yang diikuti huruf yang berbeda (a,b,c,d) menunjukan interaksi pada setiap taraf konsentrasi dan waktu  memberikan pengaruh nyata (p<0,05) terhadap nilai TPC rongga gigi dan mulut
Gambar 4  Nilai rata-rata TPC pada setiap taraf interaksi konsentrasi dan waktu pengambilan sampel
(     kontrol negatif,     kontrol positif,     0,5%
1%,     1,5%) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Sebelum Berkumur Jam ke-0 Jam ke-4 Jam ke-8 Log TP C
Gambar 4  Nilai rata-rata TPC pada setiap taraf interaksi konsentrasi dan waktu pengambilan sampel ( kontrol negatif,     kontrol positif,    0,5%,   1%,      1,5%).
JPHPI 2012, Volume 15 Nomor 2
Efektivitas kitosan mikrokristalin, Ibrahim, B. et al.
chitosan application. Journal Reactive and Functional Polymers 46: 1-27.
Lin  S,  Huff  HF,  Hsieh  F.  2002.  Extraction process parameter, sensory characteristics and  structural  properties  of  a  high moisture soy protein meat analog. Journal of  Food  Science  and  Technology 67(3): 1066-1072.
Liu J. 2003. Preparation and Characteritation of  chitosan  Cu  II  affinity  membrane for  area  adsorption. Journal  of  Applied Polymer Science 90(4): 1508-1112. Loesche  WJ,  Schork  A,  Terpenning  MS,
Chen  Y,  Dominguez  BL,  Grossman  N.
1998. Assessing the relationship between dental disease and coronary heart disease in  elderly  U.S.  veterans. Journal  of  The
American Dental Association 129(3):301- 311. Malik.  2008.  Sakit-Gigi  Bisa  Picu  Penyakit Kronis. http://www.dechacare.com/ S a k it - Gi g i - Bi s a - Pi c u - Pe ny a k it - Kronis-I231.html  [30 September 2010]. McCullough  MJ,  Farah  CS.  2008.  The  role of  alcohol  in  oral  carsinogenesis  with particular reference to alcohol-containing mouthwashes. Australian  Dental  Journal 53(4): 302-305.
Mohanraj UJ, Chen Y. 2006. Nanoparticles - A Review. Tropical Journal of Pharmaceutical Research 5(1): 561-573.
Muzzarelli  RAA,  Peter  MG.  1997. Chitosan Handbook. European Chitin Society. Pedersen  PH,  Avlund  K,  Douglas  E.  Morse,
Stoltze K, Katz RV, Viitanen M, Winblad B. 2005. Dental caries, periodontal disease,
and cardiac arrhythmias in community- dwelling older persons aged 80 and older: Is there a link?. Journal of the American Geriatrics Society 53(3): 430-437. Pintauli  S,  Hamada  T.  2008. Menuju  Gigi dan  Mulut  Sehat,  Pencegahan  dan Pemeliharaan  Karies  Gigi .  Medan:  USU
Press.
Protan  Laboratories.  1987. Cation  Polymer for  Recovery  Valuable  by  Products  from Processing  Waste. Protan  Laboratories Inc.  1725  Ocean  Avenue,  Raymond, Washington USA.
Qujeq  D,  Mossavi  SE.  2004.  Antibacterial activity  of  chitosan  against Escherichia coli . Journal  Babol  Medical    Science 7: 1-12.
Rafaat  D,  Kristine  Von  K,  Albert  H,  Hans
George  S.  2008.  Insight  into  the  mode of  action  of  chitosan  as  an  antibacterial compound. Applied  and  Environmental Microbiology 74(5): 3764-3773.
Steel  RGD,  Torrie  JH.  1993. Prinsip  dan Prosedur  Statistika:  Suatu  Pendekatan Biometrik. Terjemahan:  Bambang Sumantri, Jakarta: PT. Gramedia Utama.
Suptijah  P,  Salamah  E,  Sumaryanto  H, Purwaningsih  S,  Santoso  J.    1992. Pengaruh  Berbagai  Isolasi  Khitin  Kulit Udang  Terhadap  Mutunya.  Laporan Penelitian.  Jurusan  Teknologi  Hasil Perikanan,  Fakultas  Perikanan  IPB. Bogor.
Wu  Y,  Yang  W,  Wang  C,  Hu  J,  Fu  S.  2005. Chitosan nanoparticles as a novel delivery system  for  ammonium  glycyrrhizinate. International  Journal  of  Pharmaceutics 295: 235-245.