Tersedia online di http://journal.ipb.ac.id/index.php/jhi

## Induksi Poliploid TSS ( True Shallot Seed ) Bawang Merah
Varietas Trisula menggunakan Kolkisin
Polyploid Induction of Trisula Shallot Seed by Colchicine
Yusnita Sari 1 , Sobir 2* , Muhamad Syukur 2 , dan Diny Dinarti 2
Diterima 18 Januari 2018/Disetujui 12 September 2019

## ABSTRACT
Increase of local shallot bulb size with colchicine can increase the productivity and consumer preferences  of  Indonesia  local  shallot.  This  study  aimed  to  obtain  LC 50 values  of  shallot  seeds against  colchicine  and  estimate  some  genetic  parameters  of  agronomic  characteristics  of  putative mutant  populations  of  M1V2  shallot  resulting  from  polyploid  induction  with  colchicine.  This research consisted of two separate experiments. The first experiment was the polyploid induction of TSS with five concentrations of colchicine (0%, 0.25%, 0.5%, 0.75%, and 1%) aimed to obtain LC 50 values  and  putative  mutants  of  shallot.  The  second  experiment  was  the  genetic  parameters estimation  of  several  agronomic  characters  of  Trisula  shallot  putative  mutants  (28  lines)  M1V2 generation resulting from polyploid induction with colchicine to estimate some genetic parameters of  agronomic  characteristics.  he  augmented  design  was  used  in  both  the  first  and  second experiments. LC 50 value of Trisula variety TSS against colchicine was 0.65%. Heritability values of various agronomic characters in putative mutants M1V2 generation ranged from low to high (11.13- 83.39%). Ploidy levels of the all M1V1 population were mixoploid, and grouping of putative mutants in the M1V2 generation by cluster analysis was random. This result indicated the randomized effect of colchicine treatment.
Keywords: colchicine, heritability, LC 50 , mixoploid, polyploidy

## ABSTRAK
Peningkatan  ukuran  umbi  bawang  merah  lokal  dengan  kolkisin  dapat  meningkatkan produktivitas  dan  preferensi  konsumen  terhadap  bawang  merah  lokal  Indonesia.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  memperoleh  nilai  LC 50 benih  bawang  merah  terhadap  kolkisin  serta  menduga beberapa  peubah  genetik  karakter  agronomi  populasi  putatif  mutan  bawang  merah  generasi  M1V2 hasil induksi poliploid dengan kolkisin. Penelitian ini terdiri atas dua percobaan terpisah. Percobaan pertama  yaitu  induksi  poliploid  TSS  bawang  merah  dengan  5  konsentrasi  kolkisin  (0%,  0.25%, 0.5%,  0.75%,  dan  1%)  bertujuan  untuk  memperoleh  nilai  LC 50 dan  mutan  putatif  bawang  merah. Percobaan  kedua  yaitu  pendugaan  peubah  genetik  beberapa  karakter  agronomi  populasi  (28  galur) mutan  putatif  bawang  merah  Trisula  generasi M1V2 hasil  induksi  poliploid  dengan  kolkisin  untuk menduga  berbagai  peubah  genetik.  Rancangan augmented digunakan  baik  pada  penanaman percobaan  pertama  maupun  percobaan  kedua.  Nilai  LC 50 TSS  bawang  merah  varietas  Trisula terhadap kolkisin sebesar 0.65%. Nilai heritabilitas berbagai karakter agronomi pada mutan putatif generasi  M1V2  berkisar  antara  rendah  sampai  tinggi  (11.13-83.39%).  Tingkat  ploidi  seluruh populasi M1V1 bersifat mixoploid dan pengelompokkan pada mutan putatif generasi M1V2 dengan analisis kluster bersifat acak.Hal ini mengindikasikan bahwa induksi poliploid dengan kolkisin pada TSS bawang merah bersifat acak.
Kata kunci: heritabilitas, kolkisin, LC 50 , mixoploid, poliploid
1 Program Studi Pemuliaan dan Bioteknologi Tanaman, Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor Jl. Meranti, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680, Indonesia
2 Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor Jl. Meranti, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680, Indonesia E-mail : ridwansobir@gmail.com (*penulis korespondensi)

## PENDAHULUAN
Produktivitas bawang merah di Indonesia
masih tergolong rendah.
Produktivitas bawang merah di Indonesia pada tahun  2013  sebesar  10.2  ton  ha -1 (Kementan, 2015),  sementara produktivitas  bawang merah di  negara Thailand dan  China dapat  mencapai 13 ton ha -1 (FAO, 2015). Selain meningkatkan produktivitas, tantangan lain komoditas
bawang merah di Indonesia adalah meningkatkan  ukuran  umbi  bawang  merah lokal Indonesia. Preferensi konsumen Indonesia terhadap bawang merah diantaranya adalah bawang yang memiliki umbi padat,ukuran  besar  (diameter  ≥  2.5  cm), bentuk  lonjong,  rasa  pedas,  serta  memiliki aroma  wangi  jika  digoreng  (Sumarni  dan Hidayat,  2005;  Adiyoga  dan  Nurmalinda, 2012).  Bawang  merah  lokal  yang  beredar  di Indonesia  memiliki  keunggulan  rasa  dan aroma  yang  lebih  disukai  konsumen  namun ukuran diameter umbi yang dimiliki lebih kecil dibandingkan bawang merah impor.
Peningkatan ukuran umbi bawang merah lokal diharapkan dapat meningkatkan produktivitas dan preferensi konsumen terhadap  bawang  merah  lokal  Indonesia. Peningkatan ukuran umbi bawang merah dapat dilakukan  melalui  manipulasi  penggandaan kromosom  (poliploid)  dengan  memanfaatkan kolkisin.  Lundqvist etal .  (2012)  menyatakan bahwa  pengaruh  poliploidi  pada  tanaman adalah  peningkatan  ukuran  nukleus,  sehingga dapat  mengakibatkan  penambahan  ukuran  sel dan  jaringan,  organ  dan  tanaman.  Kolkisin telah  banyak  dimanfaatkan  dalam  biologi  dan studi  pemuliaan  untuk  menghasilkan  tanaman poliploid  (Bharathi et  al .,  2006).  Aplikasi kolkisin pada tanaman telah banyak dilakukan, diantaranya  untukmemperbesar  ukuran  buah melon ( Cucumismelo ) (Aggraito, 2004); memperbesar  daun  dan  batang  tanaman  pacar air  ( Impatienbalsamina )  (Wiendra et  al ., 2011);  meningkatkan  ukuran  stomata  dan epidermis  pada  bawang  wakegi  kultivar Sumenep  (Setyowati et  al .,  2013),  dan meningkatkan  kandungan  terpenoid  indol alkaloid Catharanthus  roseus (Xing et  al., 2011). Pemberian 0.05% kolkisin pada planlet bawang  merah  kultivar  Sumenep  mampu menginduksi  tetraploid  bawang  merah  secara in  vitro (Setyowati et  al., 2013).  Namun demikian,  informasi  tentang  induksi  poliploid
tanaman  bawang  merah  dengan  kolkisin khususnya  dengan  bahan  tanam  TSS  belum banyak  diperoleh.  Penelitian  ini  bertujuan untuk memperoleh nilai LC 50 pada benih True Seed  Shallot (TSS)  bawang  merah  terhadap kolkisin  serta  menduga  beberapa  peubah genetik  karakter  agronomi  pada  populasi putatif  mutan  bawang  merah  generasi  M1V2 hasil induksi poliploid dengan kolkisin.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan pada Desember  2014  sampai  dengan  Februari  2016 di Kebun Percobaan PKHT – IPB Pasir Kuda, Ciomas, Bogor dan Laboratorium Mikroteknik, Departemen  Agronomi  dan  Hortikultura, Fakultas  Pertanian,  Institut  Pertanian  Bogor. Penelitian ini terdiri atas dua percobaan, yaitu induksi  poliploid  TSS  bawang  merah  dengan kolkisin  dan  pendugaan  peubah  genetik beberapa  karakter  agronomi  populasi  mutan putatif  bawang  merah  Trisula  generasi  M1V2 hasil induksi poliploid dengan kolkisin.
Percobaan  pertama  terdiri  atas  satu faktor yaitu konsentrasi kolkisin dengan 5 taraf perlakuan  yaitu  0%,  0.25%,  0.5%,  0.75%  dan 1%.  Percobaan  diawali  dengan  perendaman TSS  bawang  merah  varietas  Trisula  dalam aquades  selama  5  menit.  Benih  yang tenggelam kemudian direndam dengan larutan kolkisin  sesuai  dengan  konsentrasi  perlakuan di  dalam  gelas  plastik  selama  24  jam.  Setelah 24 jam, TSS disemai pada media tisu basah di dalam kotak plastik dengan jarak semai 1 cm x 1.5  cm.  Pindah  tanam  bibit  bawang  merah dilakukan  setelah  bibit  berumur  4  minggu setelah  semai  (MSS).  Penanaman  di  lapang dilakukan menggunakan rancangan augmented , dimana pengulangan hanya dilakukan  pada  perlakuan  kontrol  (0%) sebanyak 6 ulangan dengan jarak tanam 20 cm x  15  cm.  Media  tanam  yang  digunakan merupakan campuran tanah : pupuk kandang : arang  sekam  dengan  perbandingan  volume 1:1:1.  Pemupukan  diberikan  1  minggu  sekali setelah  tanaman  berumur  1  minggu  setelah tanam (MST) sampai dengan menjelang panen dengan  pupuk  majemuk  NPK  16-16-16. Pemupukan diberikan dengan cara kocor dengan  konsentrasi  5-10  g  L -1 sesuai  umur tanaman  dan  dosis  250  ml  per  tanaman  setiap minggunya.  Pemberian  fungisida  (bahan  aktif
mankozeb)  dan  bakterisida  (bahan  aktif streptomisin  sulfat  20%)  dilakukan  bersamaan dengan  pemberian  pupuk  NPK  16-16-16 dengan  konsentrasi  1-2  g  L -1 .  Pemanenan dilakukan  setelah  batang  tanaman  agak melunak dan sebagian daun mengering.
Umbi  bawang  merah  hasil  percobaan pertama digunakan pada percobaan pendugaan beberapa  peubah  genetik  karakter  agronomi galurmutan  putatif  M1V2  hasil  induksi poliploidi  dengan  kolkisin ( percobaan  kedua). Percobaan  ini  terdiri  atas  satu  faktor  yaitu  28 galur mutan putatif M1V2 dan varietas Trisula sebagai kontrol. Sebelum penanaman,
dilakukan  pemotongan  sepertiga  bagian  atas umbi  untuk  menginduksi  munculnya  tunas. Penanaman dilakukan
menggunakan rancangan augmented dimana  umbi  bawang merah  varietas  kontrol  ditanam  menggunakan 6 ulangan dan umbi galur mutan putatif M1V2 dilakukan secara acak tanpa ulangan. Pemeliharaan  tanaman  pada  percobaan  kedua sama dengan pada percobaan pertama. Pengamatan  dilakukan  pada  seluruh tanaman,  baik  pada  percobaan  pertama maupun pada percobaan kedua. Karakter yang diamati  pada  percobaan  pertama  terdiri  atas jumlah tanaman hidup (diamati pada 4 minggu setelah  pindah  tanam  (MST),  tinggi  tanaman (diamati  pada  8  MST),  jumlah  daun  (diamati pada 8 MST), diameter batang (diamati pada 8 MST),  bobot  per  umbi  (diamati  setelah  daun tanaman  layu  tanda  akan  panen),  jumlah  dan bobot umbi per tanaman (diamati setelah daun tanaman  layu  tanda  akan  panen).  Karakter yang  diamati  pada  percobaan  kedua  sama dengan  percobaan  pertama,  namun  ditambah dengan  karakter:  warna  daun,  bentuk  daun, bentuk  umbi,  warna  umbi,  diameter  daun (diamati pada 8 MST), jumlah anakan (diamati pada  8  MST),  panjang  umbi  (mm),  diameter umbi  (mm)  dan  kromosom  akar  bawang merah.  Pengamatan  kromosom  akar  bawang merah  mengacu  pada  Syukur  (2013).  Nilai LC 50 pada  percobaan  pertama  dianalisis dengan perangkat lunak Curvit Analysis , sedangkan  nilai  heritabilitas  arti  luas  ( ) pada  percobaan  kedua  dihitung  berdasarkan Kalton et al . (1952).
Keterangan: =  heritabilitas  arti  luas;
= ragam lingkungan; = ragam fenotipe;
=  ragam  genetik;  M1V0  =  Tanaman kontrol  (bawang  merah  trisula);  M1V2  = Tanaman mutan putatif generasi ke-2.
Klasifikasi  nilai  heritabilitas  berdasarkan Zen  dan  Bahar  (1996)  yaitu:    heritabilitas rendah :  0-20%,  heritabilitas  sedang : 20-50% dan  heritabilitas  tinggi:  50-100%.  Selain  itu, juga  dilakukan  analisis  klaster  menggunakan metode Gower dan  analisis  komponen  utama dengan bantuan perangkat lunak STAR.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
LC 50 TSS Bawang Merah Terhadap Kolkisin
Lethal  concentration (LC 50) merupakan konsentrasi  yang  dapat  menyebabkan  kematian 50%  populasi.  Nilai  LC 50 sering  digunakan sebagai konsentrasi untuk peningkatkan keragaman  tanaman  melalui  induksi  mutasi. Konsentrasi  optimum  untuk  menghasilkan tanaman  mutan  umumnya  pada  atau  sedikit  di bawah konsentrasi LC 50 (Sutapa dan Gasmawan,
2016).  Hal  ini  karena  keragaman  terbesar seringkali dihasilkan pada dosis atau konsentrasi LC 50 .  Nilai  LC 50 pada  penelitian  ini  dihitung dengan  menghubungkan  konsentrasi  mutagen dengan  %  benih  tumbuh.  Benih  yang  tumbuh adalah  TSS  yang  dapat  berkecambah  dan tumbuh sampai dengan dapat dipanen umbinya. Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa terjadi penurunan persentase daya tumbuh benih bawang merah setelah perlakuan kolkisin (Tabel 1).  Persentase  benih  tumbuh  pada  konsentrasi 0% mencapai 10.64%, namun menurun mencapai  4.55-5.91%  saja  pada  konsentrasi kolkisin  0.25-0.75%.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  persentase  daya  tumbuh  benih  menurun hingga 50% pada perlakuan 0.25-75%. Terdapat pola  hubungan  yang  linier  (y  =  88.6-59.8x) antara  konsentrasi  kolkisin  dan  persentase  daya tumbuh  benih  bawang  merah  dengan  nilai  LC 50 yang  dihasilkan  sebesar  0.65%  (Tabel  1). Berbeda dengan TSS bawang merah, Mensah et al. (2007)  melaporkan  nilai  LC 50 biji  wijen terhadap  kolkisin  terdapat  pada  konsentrasi 0.047%.  Sementara  itu,  Mahajan et  al. (2015) melaporkan  nilai  LC 50 pada  umbi  bawang  putih terhadap kolkisin dengan perendaman selama 12 jam sebesar 0.058%.
Tabel 1. Persentase daya berkecambah, persentase daya tumbuh, persamaan dan LC 50 benih bawang merah varietas Trisula terhadap kolkisin
Konsentrasi Kolkisin(%) % Benih Berkecambah % Benih Tumbuh Persamaan LC 50 (% Konsentrasi Kolkisin) 0.00 31.4 10.6 y= 88.6 - 59.8x ( Linear fit ) 0.65 0.25 28.6 5.9 0.50 33.6 5.1 0.75 21.4 4.6 1.00 15.1 1.3 Keragaan Tanaman Bawang Merah
Populasi M1V1
Hasil  analisis data  menunjukkan bahwa terdapat  peningkatan  nilai  ragam  pada  semua karakter  tanaman  yang  diamati  setelah perlakuan  kolkisin.  Hal  ini  mengindikasikan bahwa  perlakuan  kolkisin  pada  biji  efektif meningkatkan  keragaman  tanaman  bawang merah. Hasil pengamatan juga memperlihatkan  terdapat  pola  peningkatan nilai  ragam  sampai  konsentrasi  0.75%  lalu menurun  pada  konsentrasi  1%  (Tabel  2).  Hal ini  terjadi  diduga  karena  konsentrasi  0.75% merupakan konsentrasi yang paling mendekati LC 50 biji  bawang  merah  Varietas  Trisula, dimana  LC 50 biji  bawang  merah  terdapat pada konsentrasi  0.65%  (Tabel  1).  Keragaman genetik  tertinggi  seringkali  dihasilkan  pada kisaran  LC 20 sampai  LC 50 ( Nugroho,  2016) atau LD 20 –LD 50 (Maharani et al., 2015).

## Penampilan  Kromosom  Akar  Bawang Merah Populasi M1V1
Hasil
pengamatan kromosom menunjukkan  bahwa  terjadi  peningkatan jumlah  kromosom  akar  bawang  merah  pada semua  konsentrasi  kolkisin  kecuali  kontrol (0%).  Namun  demikian,  tingkat  ploidi  yang dihasilkan  pada  seluruh  populasi  M1V1 bersifat mixoploid dimana pada suatu individu terdapat  sel  dengan  ploidi  yang  berbeda-beda (Gambar  1).  Tingkat  ploidi  yang  mixoploid mengindikasikan  induksi  poliploid  dengan kolkisin  bersifat  acak.  Hal  yang  sama  juga dilaporkan  oleh  Suminah et  al. (2002)  yang melaporkan  bahwa  terdapat  ploidi  yang berbeda-beda antar sel yang diamati (mixoploid)  pada  akar  bawang  merah  yang sama  hasil  perendaman  dengan  larutan kolkisin 0.2 dan 1%.
Tabel 2. Nilai tengah dan ragam bawang merah generasi M1V1
Konsentrasi (%) TT (cm) JD JUP BU (g) DBat (mm) BUP (g) x x x x x x 0.00 30.4 8.4 5.1 4.2 1.8 0.2 8.6 9.0 5.4 3.5 6.0 1.1 0.25 26.5 17.4 5.9 12.8 1.5 0.7 8.9 45.1 5.1 3.5 4.6 1.6 0.50 29.6 49.2 5.3 7.5 1.7 0.2 9.7 38.9 5.0 7.2 5.5 6.5 0.75 34.4 68.8 7.7 11.3 2.4 0.6 18.4 60.2 5.2 7.9 7.3 5.1 1.00 30.8 6.1 3.8 6.8 1.7 0.3 6.9 35.8 5.0 13.0 5.0 3.8
Keterangan:   TT  =  Tinggi  tanaman,  JD  =  Jumlah  daun,  DBat  =  Diameter  batang,  BU  =  Bobot  per  umbi,  JUP  = Jumlah umbi per tanaman, BUP = Bobot umbi per tanaman, x = Rataan, σ 2 = Ragam.
Gambar 1. Kromosom akar bawang merah kontrol dan mutan putatif generasi M1V1. a. Kolkisin 0% (kontrol),  b.  Kolkisin  0.25%,  c.  Kolkisin  0.5%,  d.  Kolkisin  0.75%  dan  e.  Kolkisin  1%. Tanda  panah  menunjukkan  adanya  jumlah  kromosom  yang  lebih  banyak  pada  mutan putatif dibandingkan dengan kontrol (a).
b c a d e
Komponen  Ragam  dan  Heritabilitas  Galur Mutan Putatif M1V2
Hasil  analisis  komponen  ragam  dan heritabilitas, menunjukkan bahwa nilai heritabilitas  berada  pada  kisaran  rendah sampai  tinggi  (11.13-83.39%).  Karakter- karakter  yang  memiliki  nilai  heritabilitas tinggi  merupakan  karakter  yang  berkaitan dengan  ukuran  umbi  dan  ukuran  daun,  yaitu karakter  bobot  umbi  pertanaman,  bobot  per umbi,  diameter  umbi,  panjang  umbi,  dan diameter daun (Tabel 3). Hal ini diduga terjadi karena  adanya  perbesaran  ukuran  sel  tanaman akibat  adanya  peningkatan  jumlah  kromosom. Ajayi et al . (2017) melaporkan bahwa terdapat nilai  heritabilitas  yang  tinggi  pada  karakter panjang  polong  (98%)  dan  bobot  biji  (99%) pada  generasi  M2  dan  M3  tanaman  kacang tunggak  hasil  induksi  mutasi  dengan  kolkisin. Nilai heritabilitas yang tinggi mengindikasikan adanya  keragaman  genetik  yang  tinggi  pada karakter-karakter tersebut.

## Keragaan  Mutan  Putatif  Bawang  Merah Generasi M1V2
Hasil  pengamatan  terhadap  karakter kualitatif  pada  tabel  4  menunjukkan  bahwa
mutan  putatif  yang  diuji  memiliki  2  warna daun,  yaitu  daun  berwarna  hijau  (25  mutan putatif)  dan  daun  berwarna  hijau  keabuan  (3 mutan  putatif).  Hasil  pengamatan  pada  tipe daun  menghasilkan  2  tipe  daun  yaitu  daun rebah (16 mutan putatif) dan daun intermediet (12  mutan  putatif).  Hasil  pengamatan  pada bentuk umbi menghasilkan 3 tipe bentuk umbi yaitu  yaitu  bentuk  membulat  (17  mutan putatif),  bulat  mendatar  (1 mutan putatif),  dan oval  (10  mutan  putatif).  Sementara  itu,  hasil pengamatan  pada  warna  umbi  (IPGRI,  2001) menghasilkan  4  tipe  warna  umbi,  yaitu  warna umbi  cokelat  (6  mutan  putatif),  cokelat  tua  (4 mutan putatif), ungu terang (17 mutan putatif) dan  ungu  tua  (1  mutan  putatif).  Perlakuan kolkisin  0.01%  dan  0.05%  mengakibatkan terjadinya  perubahan  warna  daun  dan  warna luar  buah  tanaman  stroberi  (Susianti et  al .,
2015),  sementara  Rohmah et  al .  (2017) menyatakan  bahwa  tidak  terdapat  perubahan bentuk  stomata  daun  tanaman  zaitun  setelah perlakuan  kolkisin  dengan  konsentrasi  0.25, 0.5, 0.75 dan 1%.
Tabel 3.  Nilai duga komponen ragam dan heritabilitas arti luas galur mutan putatif bawang merah M1V2
Karakter Heritabilitas Nilai Kriteria Tinggi Tanaman 59.85 33.65 26.19 43.77 Sedang Jumlah Daun 88.87 74.64 14.23 16.02 Rendah Jumlah Anakan 3.36 2.76 0.60 17.99 Rendah Bobot Umbi pertanaman 201.14 86.26 114.87 57.11 Tinggi Jumlah Umbi 6.00 3.03 2.97 49.53 Sedang Bobot Umbi 4.94 1.07 3.88 78.36 Tinggi Diameter Batang 3.04 2.70 0.34 11.13 Rendah Diameter Daun 1.31 0.42 0.89 68.08 Tinggi Diameter Umbi 12.59 5.01 7.58 60.19 Tinggi Panjang Umbi 11.86 1.97 9.89 83.39 Tinggi Keterangan : = Ragam fenotipe, = Ragam lingkungan,
= Ragam genetik.

## Tabel 4. Keragaan karakter kualitatif galur bawang merah M1V2
Mutan Putatif Warna Daun Tipe Daun Bentuk Umbi Warna Umbi TR 025-1-1 Hijau Rebah Membulat Ungu terang TR 025-1-2 Hijau Rebah Membulat Ungu terang TR 025-1-3 Hijau Rebah Membulat Cokelat TR 025-11-2 Hijau Rebah Oval Ungu terang TR 025-12-1 Hijau Intermediet Oval Ungu terang TR 025-2-1 Hijau Intermediet Membulat Ungu terang TR 025-6-1 Hijau Rebah Membulat Ungu tua TR 025-7-1 Hijau Intermediet Membulat Cokelat tua TR 05-10-2 Hijau Rebah Membulat Cokelat TR 05-1-3 Hijau Rebah Membulat Ungu terang TR 05-10-4 Hijau Rebah Membulat Cokelat TR 05-10-1 Hijau Rebah Oval Cokelat TR 05-11-1 Hijau Rebah Membulat Ungu terang TR 05-12-2 Hijau Intermediet Membulat Cokelat tua TR 05-5-1 Hijau keabuan Rebah Bulat mendatar Ungu terang TR 05-5-2 Hijau keabuan Rebah Membulat Ungu terang TR 05-5-3 Hijau keabuan Rebah Membulat Cokelat tua TR 05-8-1 Hijau Intermediet Membulat Ungu terang TR 05-8-2 Hijau Intermediet Oval Ungu terang TR 05-8-3 Hijau Intermediet Membulat Ungu terang TR 05-8-5 Hijau Intermediet Oval Ungu terang TR 05-8-4 Hijau Intermediet Oval Cokelat TR 05-9-1 Hijau Rebah Oval Ungu terang TR 075-10-2 Hijau Rebah Membulat Ungu terang TR 075-5-1 Hijau Intermediet Oval Cokelat TR 075-8-2 Hijau Intermediet Oval Ungu terang TR 075-8-1 Hijau Intermediet Oval Ungu terang TR 075-9-2 Hijau Rebah Membulat Cokelat tua TRISULA Hijau Intermediet Membulat Ungu terang Hasil  pengamatan  terhadap  karakter vegetatif  dan  hasil  menunjukkan  bahwa  pada setiap  karakter  yang  diamati  terdapat  mutan putatif  yang  berbeda  nyata  dengan  kontrol. Namun  demikian,  pada  karakter  bobot  per umbi  dan  panjang  umbi  dihasilkan  mutan putatif  paling  banyak  yang  berbeda  nyata dengan kontrol (Tabel 5).
Pada  karakter  bobot  per  umbi  terdapat 22 mutan putatif generasi M1V2 yang berbeda dengan  kontrol,  dimana  sebanyak  11  mutan putatif  memiliki  bobot  per  umbi  yang  nyata lebih  tinggi  dibandingkan  kontrol.  Sementara itu,  pada  karakter  panjang  umbi  terdapat  21 mutan  putatif  yang  berbeda  dengan  kontrol, dimana  sebanyak  14  mutan  putatif  memiliki panjang  umbi  yang  lebih  tinggi  dibandingkan kontrol.  Herman et  al. (2012)  melaporkan bahwa  terdapat  8  galur  kacang  hijau  generasi
M2 hasil induksi mutasi dengan kolkisin yang berbeda dengan varietas kontrolnya.

## Analisis Klaster
Analisis  klaster  dapat  digunakan  untuk memperoleh  informasi  tingkat  kemiripan  dari berbagai  genotipe  yang  diuji.  Hasil  analisis klaster menunjukkan bahwa tingkat ketidakmiripan  dari  galur-galur  pada  populasi M1V2  hasil induksi poliploid dengan kolkisin mencapai  lebih  dari  50%.  Pada  tingkat ketidakmiripan  40%,  galur-galur  bawang merah  pada  populasi  M1V2  mengelompok menjadi  3  kelompok  (Gambar  2)  berdasarkan ukuran umbi dan tidak berdasarkan konsentrasi kolkisin.  Hal ini mengindikasikan bahwa  induksi  poliploid  dengan kolkisin  pada TSS bersifat acak.

## Tabel 5.  Nilai tengah beberapa karakter vegetatif dan hasil mutan putatif  M1V2
Mutan Putatif TT JD JA DB DD BUP JUP BU DU PU TR 025-1-1 41.6 a 32 a 6 a 5.46 5.31 a 26.8 7 a 3.83 b 22.22 a 24.52 a TR 025-1-2 40.0 41 a 8 a 4.80 b 3.57 b 43.6 a 8 a 5.45 20.29 24.36 a TR 025-1-3 39.0 26 5 5.08 b 3.83 25.5 5 5.10 24.11 a 22.02 TR 025-11-2 44.0 a 50 a 9 a 6.32 4.37 49.6 a 13 a 3.82 b 22.68 a 25.39 a TR 025-12-1 27.0 b 15 b 6 a 3.33 b 2.70 b 8.1 b 5 1.62 b 13.10 b 17.91 b TR 025-2-1 28.5 b 30 a 8 a 6.53 2.29 b 33.6 a 9 a 3.73 b 20.46 20.53 b TR 025-6-1 34.3 b 27 6 a 5.00 b 3.43 b 22.0 8 a 2.75 b 17.91 b 22.08 TR 025-7-1 27.5 b 23 5 4.61 b 2.57 b 34.3 a 5 6.86 a 21.25 22.62 TR 05-10-2 35.0 31 a 7 a 6.06 3.68 b 48.8 a 7 a 6.97 a 21.94 24.97 a TR 05-1-3 37.5 20 4 7.22 5.03 a 41.3 a 4 b 10.33 a 21.09 22.17 TR 05-10-4 32.5 b 28 6 a 5.75 2.68 b 33.6 a 5 6.72 a 19.16 21.65 TR 05-10-1 30.0 b 20 4 4.55 b 3.11 b 22.0 4 b 5.50 18.93 19.85 b TR 05-11-1 34.0 b 18 b 4 4.59 b 3.95 18.3 b 6 3.05 b 16.96 b 19.21 b TR 05-12-2 35.1 40 a 7 a 6.90 4.46 51.3 a 7 a 7.33 a 27.22 a 27.73 a TR 05-5-1 50.4 a 18 b 4 6.91 5.07 a 27.4 4 b 6.85 a 24.11 a 27.15 a TR 05-5-2 49.5 a 14 b 3 b 5.46 4.34 15.0 b 3 b 5.00 19.25 26.87 a TR 05-5-3 44.2 a 22 5 5.95 3.26 a 30.4 5 6.08 a 22.06 26.23 a TR 05-8-1 46.5 a 34 a 4 8.53 a 4.19 59.6 a 9 a 6.62 a 25.94 a 28.57 a TR 05-8-2 42.3 a 21 3 b 7.52 a 4.96 a 31.7 4 b 7.93 a 27.51 a 26.37 a TR 05-8-3 41.0 44 a 8 a 7.60 a 3.55 b 11.5 b 3 b 3.83b 17.15 b 25.74 a TR 05-8-5 47.7 a 33 a 5 6.57 3.36 b 43.4 a 6 7.23 a 20.57 20.54 b TR 05-8-4 48.0 a 38 a 6 a 11.18 a 4.21 43.7 a 11 a 3.97 b 18.23 b 19.48 b TR 05-9-1 52.0 a 28 5 8.27 a 5.79 a 25.9 5 5.18 23.44 a 30.73 a TR 075-10-2 27.0 b 15 4 4.06 b 3.28 b 10.2 b 4 b 2.55 b 13.68 b 17.57 b TR 075-5-1 35.2 32 a 8 a 5.03 b 4.13 18.2 b 5 3.64 b 16.34 b 21.41 b TR 075-8-2 49.0 a 23 3 b 9.23 a 6.63 a 30.3 3 b 10.10 a 21.87 27.77 a TR 075-8-1 49.0 a 13 b 2 b 8.41 a 6.66 a 28.1 5 5.62 22.91 a 25.23 a TR 075-9-2 41.0 37 a 8 a 6.82 5.93 a 20.4 b 6 3.4 b 19.24 21.55 b Trisula 37.8 23.8 5 6.43 4.22 27.04 5 5.23 20.52 22.64
Keterangan:   a = Berbeda nyata (positif) dengan varietas pembanding Trisula berdasarkan uji-T pada taraf α 5%, b = Berbeda nyata (negatif) dengan varietas pembanding Trisula berdasarkan uji-T pada taraf α 5%,  TT = Tinggi tanaman, JD = Jumlah daun, JA = Jumlah anakan, DB = Diameter batang, DD = Diameter daun DU  =  Diameter  umbi,  PU  =  Panjang  umbi,  BU  =  Bobot  per  umbi,  JUP  =  Jumlah  umbi  pertanaman, BUP = Bobot umbi pertanaman
Gambar  2.  Pengelompokan  galur-galur  M1V2  berdasarkan  analisis  kluster  dengan  tingkat ketidakmiripan 40%.

## KESIMPULAN
Lethal  concentration (LC 50 )  kolkisin pada  TSS  bawang  merah  varietas  Trisula terhadap  kolkisin  terdapat  pada  konsentrasi 0.65%.  Nilai  heritabilitas  mutan  putatif generasi  M1V2  berada  pada  kisaran  tinggi sampai rendah (11.13-83.39%). Karakter yang memiliki  nilai  heritabilitas  tinggi  yaitu karakter  yang  berhubungan  dengan  ukuran umbi dan ukuran daun.  Tingkat ploidi seluruh populasi  M1V1  yang  bersifat  mixoploid  dan pengelompokkan  yang  tidak  berdasarkan konsentrasi  kolkisin  pada  mutan  putatif generasi M1V2 mengindikasikan bahwa induksi  poliploid  dengan  kolkisin  pada  TSS bawang merah bersifat acak.

## DAFTAR PUSTAKA
Adiyoga,  W.,  Nurmalinda.  2012.  Analisis konjoin  preferensi  konsumen  terhadap atribut  produk  kentang,  bawang  merah, dan  cabai  merah.    J.  Hort.22(3):292- 302.
Ajayi,  A.T.,  A.F.  Ologundudu,  V.O.  Azuh, O.F.  Daramola,  A.R.  Kajogbola.  2017. Colchicine-induced genetic variations in M2  and  M3  generations  of  cowpea
( Vigna  unguiculata L.  Walp).  Jordan J. of Agricultural Sci. 13(2): 293-304.
Anggraito,  Y.U.  2004.  Identifikasi  berat, diameter,  dan  tebal  daging  buah  melon ( Cucumismelo L.)  kultivar  action  434 tetraploid  akibat  perlakuan  kolkisin.
Berk. Penel. Hayati.10: 37-42.
Bharathi,  P.,  D.  Philomina,  S.  Chakkaravarhi. 2006.  Antimitotic  effect  of  colchicine from six different species of gloriosa in onion  roots  ( Alliumcepa ).  J.  Med.  Sci.
6(3): 420-425.
[FAO]  Food  and  Agricultural  Organization.
2015. Statistic crop production.
http://faostat3.fao.org. [13 Juli 2015].
Herman, S., Fitmawati, D.I. Roslim, Faturrahman,
O.  Nuzila.  2012.  Penilaian  dan  seleksi galur  kacang  hijau  ( Phaseolus  radiata ) hasil  kolkisin  M1  dan  M2.  Dinamika Pertanian. 27(3):167-172.
[IPGRI]  International    Plant    Genetic Resources    Institute.  2001. Descriptors for  Allium  (Allium  spp.). Roma  (IT): International  Plant  Genetic  Resources Institute.
Kementerian  Pertanian.  2015.  Basis  data statistik pertanian di Indonesia. http://aplikasi.pertanian.go.id.  [13  Juli
2015].
Kalton,  R.R.,  A.G.  Smit,  R.C.  Leffel.  1952. Parent-inbred  progeny  relationship  of selected  orchardgrass  clones.  Agronomy Journal. 44:481-486.
Lundqvist,  U.,  J.D.  Frankowiak,  B.P.  Forster. 2012.  Mutation  Categories.  In: Plant Mutation  Breeding  and  Biotechnology . Editor  Q.Y.  Shu,    B.P.  Forster  and Nakagawa.  Wallingford  (GB):  CAB International and FAO.
Maharani, S.,  N.  Khumaida,  M. Syukur,  S.W. Ardie.  2015.  Radiosensitivitas  dan keragaman ubi kayu ( Manihot esculenta Crantz)  hasil  iradiasi  sinar  gamma.  J. Agron. Indonesia. 43(2):111-117.
Mahajan, V., A. Devi, A. Khar, K.E. Lawande. 2015.  Studies  on  mutagenesis  in  garlic using  chemical  mutagens  to  determine lethal dose (LD 50 ) and create variability.
Indian J. Hort. 72(2):289-292.
Mensah,  J.K.,  B.O.  Obadoni,  P.A.  Akomeah, B.  Ikhajiagbe,  J.  Ajibolu.  2007.  The effects  of  sodium  azide  and  colchicine treatments  on  morphological  and  yield traits  of  sesame  seed  ( Sesame  indicum L.).  African  Journal  of  Biotechnology. 6(5):534-538.
Nugroho,  C.C.  2016.Radiosensitivitas  pada kalus empat genotipe ubi kayu ( Manihot esculenta Crantz.).  Magrobis  Journal. 16(2):20-27.
Rohmah,  A.,  T.  Rahayu,  A.  Hayati.  2017.
Pengaruh  pemberian  kolkisin  terhadap karakter  stomata  daun  zaitun.  Biosains Tropis. 2(2):10-17.
Setyowati,  M.,  E.  Sulistityaningsih,  A. Purwantoro.  2013.  Induksi  poliploidi dengan  kolkisin  pada  kultur  meristem batang  bawang  wakegi  ( Allium x wakegi araki).  Ilmu  Pertanian.  16(1): 58-73.
Sumarni, A. Hidayat. 2005. Budidaya Bawang Merah. Balai Penelitian Tanaman Sayuran. Bandung.
Suminah,  Sutarno,  A.D.  Setyawan.  2001.
Induksi poliploidi bawang merah ( Allium ascalonicum L.) dengan pemberian  kolkisin.  Biodiversitas  3(1): 174-180.
Susianti,  A.,  G.R.  Aristya,  Sutikno,  R.S.
Kasiamdari. 2015. Karakterisasi
morfologi dan anatomi stroberi ( Fragaria x ananassa D,  cv,  Festival) hasil  induksi  kolkisin.  Biogenesis  3(2): 66-75.
Syukur,  M.  2013.  Panduan  Laboratorium.  p. 281-289. In M. Syukur S. Sastrosumarjo. Sitogenetika Tanaman. IPB Press.
Wiendra,  N.M.S.,  M.  Pharmawati,  N.P.A. Astiti. 2011. Pemberian kolkisin dengan lama perendaman berbeda pada induksi poliploidi tanaman pacar air ( Impatiensbalsamina L.).  J.  Biologi. 17(1): 9-14.
Xing,  S.,  X.  Guo,  Q.  Wang,  Q.  Pan,  Y.  Tian, P.  Liu,  J.  Zhao,  G.  Wang,  X.  Sun,  X. Tang.  2011.  Induction  and  flow cytometry  identification  of  tetraploids from  seed-derived  explants  through colchicine  treatments  in Catharanthus roseus ( L.) G. Don. J. Biomedicine and Biotechnology.  2011: 1-10.
Zen,  S.,  H.  Bahar.    1996.    Penampilan    dan pendugaan  parameter  genetik  tanaman jagung. J. Agric. 3: 1-9.