UJI DAYA HAMBAT DAUN SALAM KOJA ( Murraya koenigii (L.) Spreng)
TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli DAN
Staphylococcus aureus DENGAN METODE KIRBY BAUER
Eny Purwanitiningsih 1 , Nurbaiti 2 , Arum Lintang D.L 3*
1,2 Prodi D-III Anafarma Universitas MH Thamrin
3 Mahasiswa Pascasarjana MIPA Unindra
* Corresponding author: bintangkejora120982@gmail.com

## Abstract
Salam Koja (Murraya koenigii) is a species belonging Rutaceae that contains active antibacterial compounds. These leaves can be used to kill or inhibit the growth of pathogenic bacteria in humans, namely Escherichia coli and Staphylococcus aureus. This study aims to determine the ability of koja bay leaves to inhibit the growth of Escherichia  coli  and  Staphylococcus  aureus  bacteria,  and  to  determine  the  concentration  of  koja  bay  leaves which  is  the  most  effective  in  inhibiting  the  growth  of  E.  coli  and  S.aureus.  This  study  used  the  Kirby  Bauer diffusion method with 5 treatments and 5 replications. The concentrations tested were 0%, 25%, 50%, 75%, and 100%. Data analysis used one-way ANOVA test. Koja bay leaves (Murraya koenigii) can inhibit the growth of Escherichia coli and Staphylococcus aureus which is characterized by the formation of a clear zone. The 25% concentration of Salam Koja leaves (M. koenigii) has been effective in inhibiting the growth of Escherichia coli and  Staphylococcus  aureus  bacteria.  This  proves  that  koja  bay  leaves  contain  active  compounds  that  are antibacterial, such as alkaloids, flavonoids, tannins, saponins, terpenoids, steroids, and essential oils.
Keywords : Salam Koja (Murraya koenigii), inhibition,  Escherichia coli, Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Infeksi merupakan keadaan masuknya mikroorganisme ke dalam tubuh, kemudian berkembang biak dan menimbulkan penyakit.  Mikroorganisme  yang  dimaksud yaitu  bakteri,  jamur  dan  virus.  Salah  satu mikroorganisme  yang  dapat  menyebabkan infeksi yaitu  bakteri.  Bakteri  dapat menyebabkan  infeksi  secara  lokal  maupun sistemik.  Secara  umum  penyakit  infeksi dapat  disembuhkan  dengan  menggunakan antibiotik.  Penggunaan  antibiotik  untuk infeksi  lokal  telah  dikurangi  karena kecenderungan dapat menimbulkan hipersensitivitas  secara  lokal  pada  kulit atau  membran  mukosa.  Penyakit  infeksi merupakan  salah  satu  masalah  kesehatan
masyarakat  yang  penting,  khususnya  di negara  berkembang.  Salah  satu  cara  untuk mengatasi masalah tersebut adalah antimikroba antara lain antibakteri/antibiotik,  antijamur,  antivirus, dan  antiprotozoa.  Antibiotik  merupakan obat  yang  digunakan  pada  infeksi  yang disebabkan  oleh  bakteri  (Bussmann et  al. , 2010).
Penyakit  saluran  pencernaan,  infeksi kulit  dan  diare  adalah  beberapa  penyakit yang dapat ditimbulkan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus (Sudarmi et  al .,  2017).    Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus adalah  flora  normal  yang  secara alamiah  ada  pada  manusia . Bakteri  ini
dapat  berubah  menjadi  patogen  jika jumlahnya  melebihi  batas  normal.  Dari banyaknya  dampak  yang  disebabkan  oleh bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus membuat kita harus semakin  waspada  untuk  mencegah  atau mengendalikan  pertumbuhannya,  salah satunya  adalah  dengan  cara  menghambat pertumbuhan bakteri tersebut.
Indonesia  merupakan  negara  yang memiliki iklim tropis dengan keanekaragaman  hayati  terbesar  kedua  di dunia  setelah  Brazil,  Indonesia  memiliki sekitar  25.000-30.000  spesies  tanaman yang merupakan 80% dari jenis tanaman di dunia  dan  90%  dari  jenis  tanaman  di  Asia yang banyak digunakan  dalam pengobatan tradisional.  Dalam  dekade  belakangan  ini di  tengah  banyaknya  jenis  obat  modern  di pasaran dan munculnya berbagai jenis obat modern yang baru, terdapat kecenderungan global  untuk  kembali  ke  alam  ( back  to nature ),  oleh  karena  itu  obat  bahan  alam menjadi semakin populer dan penggunaannya meningkat (Dewoto, 2007).
Salah  satu  tanaman  yang  berkhasiat adalah  Daun  Salam  Koja  ( Murraya koenigii  L )  dari  Famili Rutaceae  (Dheeraj,
2014).  Salam  Koja  ( Murraya  koenigii ) merupakan  salah  satu  tanaman yang banyak  ditemukan  di  Indonesia  dan termasuk  daun  aromatik  yang  sering dimanfaatkan sebagai rempah-rempah terutama  sebagai  bumbu  masakan  yang
memberikan  aroma  yang  sedap  dan  rasa yang nikmat dan memiliki peran serbaguna dalam  pengobatan  tradisional  (Rastina et al. ,  2015).  Bagian  tanaman  salam  yang mengandung antibakteri adalah pada bagian dalam daunnya. Senyawa antibakteri yang terkandung di dalam daun salam  yaitu  alkaloid,  saponin,  tanin, polifenol, kuinon, dan triterpenoid (Ismarani,  2012).  Daun  ini  digunakan masyarakat  untuk  perawatan  berbagai penyakit pada sistem pengobatan tradisional (Handayani, Rini 2016).
Sejumlah  khasiat  farmakologi  daun  Salam Koja, yaitu sebagai antioksidatif, antimikroba,  antibakteri,  obat  penurun panas,  antijamur,  dan  untuk  anti-inflamasi (Dheeraj, 2014).
Beberapa  studi  menyatakan  bahwa karbazol  alkaloid  dalam  daun  Salam  Koja memiliki aktivitas biologis sebagai antikanker dan antimikroba terhadap bakteri gram positif dan gram negatif serta jamur  (Rastina et  al .,  2015).  Menurut Handral et  al. (2012),  daun  Salam  Koja memiliki  kandungan  fitokimia  alkaloid, tanin,  saponin  dan  flavonoid  sehingga bersifat  antimikroba  dan  antioksidan  yang berguna  bagi  kehidupan  manusia.  Daun Salam  Koja  memiliki  khasiat  sebagai antidiabetes, antioksidan, antimikroba, antiinflamasi, dan obat hipertensi (Azwarni et al., 2016).
Eny Purwanitiningsih et al. : Uji Daya Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii (L.) Spreng) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan Metode Kirby Bauer
Daun  Salam  Koja  juga  mempunyai komponen  alkaloid  dan  minyak  atsiri (Parthasarathy, et  al., 2008)  yang  berguna untuk  mencegah  atau  memelihara  rongga mulut  dan  saluran  pernafasan  sebagai antiseptik,  analgesik,  anti  jamur,  pelega tenggorokan, dan antibakteri. Minyak daun Salam  Koja  mengandung  58  komposisi kimia  yang  sebagian  besar  terdiri  atas caryophlen  oxide (16,6%)  yang  berfungsi untuk  pengobatan diare,  demam,  muntah dan  penyakit  pencernaan  lainnya  (Rastina, et al ., 2015).
Pada penelitian uji aktivitas antibakteri ini menggunakan metode difusi cara  Kirby  Bauer  dengan  risiko  kegagalan yang  lebih  kecil  dibanding  cara  lainnya karena  pada  saat  media  yang  telah dilakukan  penggoresan,  media  tersebut ditempatkan secara terbalik untuk mencegah tetesan uap air yang timbul jatuh ke atas media  yang telah ditanami bakteri, tetesan ini dapat mempengaruhi hasil akhir dari  inkubasi.  Disamping  itu,  dengan  cara ini  lebih  efisien  terhadap  waktu  yang digunakan dalam penelitian (Putra I. Made , 2015).
Metode  Kirby  Bauer  (disc  diffusi) yaitu  metode  difusi  yang  menggunakan paper  disk  yang  berisi  zat  antibakteri  dan diletakkan  pada  media  agar  yang  telah ditanami  bakteri  uji.  Pengukuran  dan pengamatan  diameter  zona  hambat  berupa zona bening yang terbentuk disekitar paper
disk  dilakukan  setelah  media  didiamkan selama 18-24 jam dan diukur menggunakan jangka sorong.
Tujuan penelitian ini mengetahui zona hambat  daun  Salam  Koja  dengan  metode kirby  bauer terhadap  bakteri Escherichia coli dan Staphyococcus  aureus pada konsentrasi  0%,  25%,  50%,  75%,  dan 100%.  Pemilihan  konsentrasi  tersebut didasarkan pada penelitian  yang dilakukan sebelumnya  oleh  Putra  Rahmadea  Utami pada  tahun  2015  dengan  menggunakan konsentrasi  25%,50%  dan  75%  yang memberikan  efek  antibakteri.  Diharapkan dengan memodifikasi pengujian menggunakan  sediaan  yang  berbeda  dapat memberikan efek antibakteri secara maksimal.  Oleh  karena  itu,  peneliti  ingin mencoba  pada  konsentrasi  yang  lebih tinggi  yaitu  100%  sehingga  lebih  cepat memberikan efek kesembuhan dan keberhasilan pengobatan.

## METODE PENELITIAN
Metode  penelitian  dalam  penelitian ini  adalah  deskriptif  kuantitatif.  Penelitian ini  menggunakan  metode kirby  bauer dengan  membedakan  konsentrasi  daun Salam  Koja  ( Murraya  koenigii )  yaitu  0%, 25%,  50%,  75%,  dan  100%  terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphyococcus aureus . Pengujian
dilakukan  5  (lima)  pengulangan  dengan
menggunakan rumus dari Federer: (n-1) (t- 1)   15.
Daun  Salam  Koja  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  diperoleh  dari  Jl. Kirey  I  RT  05  RW  10  Kelurahan  Tengah, Kecamatan  Kramat  Jati,  Jakarta  Timur. Bagian  tumbuhan  yang  digunakan  adalah daun  Salam  Koja  segar  yang  berwarna hijau tua. Ranting yang dipilih dan diambil untuk  sampel  adalah  ranting  ke  tiga  dari bawah sampai ranting ke  tujuh dari pucuk (Purwaningsih, S.N, 2017). Bagian tanaman salam yang mengandung antibakteri  yaitu  di  dalam  daunnya. Senyawa  antibakteri  yang  terkandung  di dalam  daun  salam  yaitu  alkaloid,  saponin, tanin,  polifenol,  kuinon,  dan  triterpenoid (Ismarani, 2012).
Data  penelitian  diperoleh  dengan  cara pengukuran  zona  bening  yang  terbentuk disekitar paper  disk. Diameter  zona hambat diukur secara langsung menggunakan  jangka  sorong  dalam  satuan milimeter  (mm)  (Rastina et  al. ,  2015) .
Pertama-tama  disiapkan  daun  Salam  Koja dengan  berbagai  konsenttrasi  (0%,  25%, 50%,  75%,  dan  100%).  Suspensi  bakteri Staphylococcus aureus dinokulasikan sebanyak  0,1  mL  pada  permukaan  media MSA dan suspensi bakteri Escherichia coli sebanyak  0,1  mL  pada  permukaan  media MCA  kemudian  diratakan  dengan  cara digores menggunakan kapas lidi yang steril. Selanjutnya  daun  Salam  Koja  dengan
berbagai  konsentrasi  diteteskan  sebanyak 20 µL pada setiap paper disk , sebelumnya diletakkan  diatas media yang  telah dinokulasikan bakteri. Hal tersebut dilakukan dengan pengulangan sebanyak 5 kali. Bakteri  yang  akan  di  digunakan sebelumnya  diambil  dari  biakan  media dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  yang berisi  10  mL  larutan  NaCl  0,9%,  dikocok hingga  homogen,  kemudian  disamakan dengan  standar  Mc  Farland  0,5.,  bila sudaah  sama  dapat  digunakan  untuk pemeriksaan.
Mikroba yang digunakan diperoleh dengan cara  membeli  di  pabrik  farmasi  yaitu bakteri golongan ke 3.
Media yang digunakan untuk menumbuhkan mikroba berbeda-beda berdasarkan  jenis  bakterinya.  Media  MSA digunakan  untuk  menumbuhkan  bakteri Staphylococcus  aureus dan  media  MCA untuk  menumbuhkan  bakteri Escherichia coli .  Pada  penelitian  tidak  menggunakan control baik positif maupun negatif.

## Teknik pengumpulan dan analisis data
Pengolahan  data  dilakukan  dengan cara  menghitung  rata-rata  diameter  zona hambat  dari    daun  Salam  Koja  terhadap pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus ,  zona  hambat diukur  sebanyak  4  kali.  Hari  keberapa dilakukan  pengukuran  zona  hambatnya? Data  yang telah dikumpulkan kemudian di analisis  menggunakan  metode  anova  (satu
Eny Purwanitiningsih et al. : Uji Daya Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii (L.) Spreng) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan Metode Kirby Bauer
arah).  Terdapat  lima  konsentrasi  daun Salam  Koja  yaitu  0%,  25%,  50%,  75%, dan  100%.  Pembuatan  eksttrak  Daun Salam  Koja  dengan  cara  menimbang sebanyak 100 gram, kemudian  dibersihkan dan  dipotong  kecil-kecil.  Selanjutnya ditambahkan  aquadest  steril  sebanyak  100 mL  dengan  perbandingan  1:1,  sehingga didapat  konsentrasi  100%.  Ektrak  daun Salam  Koja  yang  diperoleh  dilakukan pengnceran
untuk
mendapatkan
konsentrasi yang diinginkan.
Hasil zona hambat di setiap konsentrasi kemudian dibandingkan.
Sehingga dapat diketahui konsentrasi daun Salam  Koja  yang  paling  efektif  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .
Data  yang  dikumpulkan  dianalisis secara  statistik  menggunakan  metode anova  (satu  arah).  Pengolahan  data dilakukan  dengan  cara  menghitung  rata- rata  diameter  zona  hambat  dari    daun
Salam  Koja  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus ,  zona  hambat  diukur  sebanyak  4 kali.  Zona  hambat  berupa  zona  bening yang terdapat di sekitar paper disk dimana bakteri  terhambat  pertumbuhannya  akibat adanya antibakteri. Dari pengukuran tersebut  didapat  data,  kemudian  data  itu yang  akan  dihitung  menggunakan  Anova satu arah.

## HASIL DAN  PEMBAHASAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  menunjukkan  bahwa  ekstrak daun  Salam  Koja  ( Murraya  koenigii ) menunjukkan  adanya  aktivitas  antibakteri yang  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus ,  yang  ditandai dengan terbentuknya zona bening di sekitar paper  disk.  Diameter  daya  hambat  ekstrak daun  Salam  Koja  ( Murraya  koenigii ) terhadap  bakteri Escherichia  coli dapat dilihat pada Gambar 1 .
0 2 4 6 8 10 12 14 16 0% 25% 50% 75%
100%
Gambar  1. Diagram  batang  hubungan  antara  konsentrasi  daun  Salam  Koja (Murraya  koenigii) dengan rata-rata zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli
0 2 4 6 8 10 12 0% 25% 50% 75%
100%
Gambar 2 . Diagram batang hubungan antara konsentrasi daun Salam Koja (Murraya koenigii) dengan rata-rata zona hambat terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus
Berdasarkan Gambar  2 dapat  dilihat bahwa  daya  hambat  daun  Salam  Koja (Murraya  koenigii) terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi  0%  sampai  konsentrasi  75% mengalami kenaikan, namun pada konsentrasi  100%  mengalami  penurunan. Berdasarkan Tabel 1 dapat dilihat bahwa F hitung  lebih  besar  dari  F  tabel,  ini  berarti terdapat  perbedaan  yang  sangat  nyata antara  daya  hambat  daun  Salam  Koja terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli.
Berdasarkan Tabel  2 dapat  dilihat bahwa uji Batas Nilai Terkecil (BNT) daun Salam  Koja  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli pada  konsentrasi    0% terdapat  perbedaan  yang  sangat  nyata dengan  konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan 100%. Konsentrasi 50% dan 75% mengalami  kenaikan  zona  hambat,  akan tetapi  tidak  terdapat  perbedaan  yang  nyata terhadap  konsentrasi  25%  sedangkan
konsentrasi  100%  memiliki  zona  hambat yang lebih kecil daripada konsentrasi 75%, sehingga  konsentrasi  100%    mengalami penurunan  dan  terdapat  perbedaan  yang nyata pada penurunan tersebut.
Berdasarkan Tabel  3 dapat  dilihat bahwa F hitung lebih besar dari F tabel, ini berarti  terdapat  perbedaan  yang  sangat nyata antara daya hambat daun Salam Koja terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus. Berdasarkan Tabel 4 dapat  dilihat  bahwa  uji  Batas  Nilai Terkecil (BNT) daun Salam Koja terhadap pertumbuhan  bakteri S.  aureus pada konsentrasi    0%  terdapat  perbedaan  yang nyata  dengan  konsentrasi  25%,  50%,  75% dan 100% .
Konsentrasi  50%  dan  75%  mengalami kenaikan  zona  hambat,  akan  tetapi  tidak terdapat  perbedaan  yang  nyata  terhadap konsentrasi  25%.  Sedangkan  konsentrasi 100%  memiliki  zona  hambat  yang  lebih kecil  daripada  konsentrasi  75%,    sehingga
Eny Purwanitiningsih et al. : Uji Daya Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii (L.) Spreng) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan Metode Kirby Bauer
konsentrasi  100%    mengalami  penurunan dan  tidak  terdapat  perbedaan  yang  nyata
pada penurunan tersebut.
Tabel 1. Anova Satu Arah Hasil Analisis Zona Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii ) pada Bakteri
Escherichia coli Sumber Varians Derajat Kebebasan DK Jumlah Kuadrat (JK) Rata-rata JK RJK F-Hit F Tabel 5% 1% Perlakuan 4 629,61 157,4 10,82 2,87 4,43 Galat 20 290,96 14,55 Total 24 920,57
Tabel 2. Uji Batas Nilai Terkecil (BNT) Hasil Analisis Zona Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii ) pada Bakteri Escherichia coli
Perlakuan Rata- rata Beda Harga Rata-rata 0% 25% 50% 75% 100% 0% 0 - - - - - 25% 11,17 11,17** - - - - 50% 12,34 12,34** 1,17 - - - 75% 14,44 14,44** 3,27 2,1 - - 100% 8,81 8,81** -2,36 -3,53 -5,63** - BNT 5% 4,16 BNT 1% 6,09
Tabel 3. Anova Satu Arah Hasil Analisis Zona Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii ) pada Bakteri
Staphylococcus aureus Sumber Varians Derajat Kebebasan DK Jumlah Kuadrat JK Rata-rata JK RJK F-Hit F Tabel 5% 1% Perlakuan 4 406,87 101,72 34,84** 2,87 4,43 Galat 20 58,49 2,92 Total 24 465,36
Tabel 4. Tabel Uji Batas Nilai Terkecil (BNT) Hasil Analisis Zona Hamba Daun Salam Koja ( Murraya koenigii ) pada Bakteri S. aureus
Perlakuan Rata- rata Beda Harga Rata-rata 0% 25% 50% 75% 100% 0% 0 - - - - - 25% 9,2 9,2** - - - - 50% 9,7 9,7** 0,5 - - - 75% 11,06 11,06** 1,86 1,36 - - 100% 9,92 9,92** 0,72 0,22 -1,14 - BNT 5% 1,86 BNT 1% 2,73
Berdasarkan  penelitian,  hasil  uji  daya hambat  daun  Salam  Koja  ( Murraya koenigii )  menunjukkan  adanya    aktivitas antibakteri  yang  mampu  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus, yang  ditandai dengan terbentuknya zona bening di sekitar paper  disk . Hal  ini  disebabkan  karena adanya  kandungan  antibakteri  dalam  daun Salam Koja yaitu alkaloid, flavonoid, tanin, saponin,  terpenoid,  steroid,  dan  minyak atsiri.
Daya  hambat  daun  Salam  Koja ( Murraya  koenigii )  terhadap  pertumbuhan
bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi 0% tidak menghasilkan zona hambat. Pada konsentrasi  25%,  50%  dan  75%  diameter zona hambat yang terbentuk semakin besar. Namun,  konsentrasi  50%  dan  75%  tidak berbeda  nyata  terhadap  konsentrasi  25%. Sehingga  memberikan  efek  yang  sama dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus , meskipun konsentrasinya meningkat.  Akan  tetapi,  pada  konsentrasi 100% diameter zona hambat yang terbentuk menurun.
Pada  penelitian  Rastina et  al dengan menggunakan  daun  Salam  Koja  ( Murraya koenigii )  menunjukkan  konsentrasi  12,5%, 25%  dan  50%  memiliki  diameter  zona hambat  semakin  besar,  ini  membuktikan bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak
daun  Salam  Koja  ( M.  koenigii )  yang diberikan,  maka  semakin  besar  pula kemampuannya untuk menghambat pertumbuhan  bakteri.  Pada  penelitian  ini, dilanjutkan  dengan  konsentrasi  75%  dan 100%.  Konsentrasi  75%  menunjukkan kenaikan  diameter  zona  hambat.  Akan tetapi,  pada  konsentrasi  100%  mengalami penurunan. Hal ini kemungkinan disebabkan karena konsentrasi  100% tidak meresap  secara  sempurna  kedalam paper disk dan  sulit  berdifusi  dalam  media sehingga daya hambat yang terbentuk lebih kecil daripada konsentrasi 75%.
Kekuatan  antibakteri  ditentukan  oleh besarnya  zona  hambat  yang  terbentuk. Kekuatan  antibakteri  digolongkan  menjadi empat  kategori  yaitu  kategori  lemah, sedang,  kuat,  dan  sangat  kuat.  Diameter zona hambat 5 mm atau kurang dikategorikan  lemah,  zona  hambat  5-  10 mm  dikategorikan  sedang,  zona  hambat 10-20  mm  dikategorikan  kuat  dan  zona hambat  20  mm  atau  lebih  dikategorikan sangat kuat (2) .
Berdasarkan  penggolongan  kekuatan antibakteri  tersebut,  maka  daya  hambat daun  Salam Koja ( Murraya koenigii ) pada bakteri E.  coli dengan  konsentrasi  25%
(11,17 mm), 50% (12,34 mm), 75% (14,44 mm) termasuk kategori kuat, dan konsentrasi  100%  (8,81  mm)  termasuk kategori  sedang.  Sedangkan  daya  hambat daun  Salam  Koja  ( M.  koenigii )  pada
Eny Purwanitiningsih et al. : Uji Daya Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii (L.) Spreng) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan Metode Kirby Bauer
bakteri S.  aureus dengan  konsentrasi  25%
(9,82    mm)  termasuk  kategori  sedang, konsentrasi  50%  (10,04  mm),  75%  (11,68 mm)  dan  100%  (10,51  mm)  termasuk kategori  kuat.    Dengan  demikian  dapat diketahui  konsentrasi  25%  sudah  efektif dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri E. coli karena antibakterinya dikategorikan kuat dan menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus karena antibakterinya
dikategorikan sedang.
Mekanisme  kerja  antibakteri  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  yaitu dengan  menghambat  sintesis  dinding  sel, menghambat  sintesis  metabolisme  sel, mengganggu  keutuhan  membran  sel, menghambat  sintesis  protein  sel,  dan menghambat  sintesis  asam  nukleat (10) . Kandungan  antibakteri  yang  terdapat dalam  daun  Salam  Koja  ( M.  koenigii ) dapat menghambat pertumbuhan bakteri E. coli dan S.  aureus dengan  menghambat sintesis  dinding  sel  dan  memblokir  tahap sintesis    peptidoglikan  yang  akan  merusak dinding  sel  bakteri  dan  sel  menjadi  lisis.
Terjadinya lisis menyebabkan bakteri tidak dapat bekerja (26) .
Daya  hambat  daun  Salam  Koja  ( M. koenigii )    pada  bakteri Escherichia  coli mempunyai  zona  hambat  yang  lebih  besar daripada  bakteri Staphylococcus  aureus , hal  ini  kemungkinan  disebabkan  karena lapisan  peptidoglikan  yang  menyusun dinding  sel  bakteri S.  aureus terdiri  dari
struktur  yang  tebal  dan  kaku,  sedangkan lapisan  peptidoglikan  yang  menyusun dinding  sel  bakteri E.  coli tipis  sehingga dinding  selnya  mudah  rusak.  Karena sedikit  dan  tipisnya  lapisan  peptidoglikan yang menyusun dinding  sel  bakteri E. coli yang  menyebabkan  dinding  selnya  lebih rentan mengalami kerusakan ketika diberikan antibakteri (Rastina, dkk, 2015).

## SIMPULAN
Berdasarkan  pembahasan  di  atas, maka  simpulan  dalam  artikel  ini  adalah hasil  uji  daun  Salam  Koja  ( Murraya koenigii )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan  metode Kirby  Bauer membuktikan  bahwa  daun  Salam  Koja ( Murraya  koenigii )    bersifat  antibakteri. Konsentrasi  daun  Salam  Koja  ( Murraya koenigii ) 25% sudah efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

## DAFTAR PUSTAKA
Anshar  JM. 2017.  Daya  Hambat  Ekstrak Etanol Daun Bayam Duri (Amaranthus spinosus) Terhadap Pertumbuhan  Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis. Thesis . Universitas Muhammadiyah Semarang.
Arisman  A.  2009. Buku  Ajar  Ilmu  Gizi Keracunan Makanan , Jakarta: EGC Aziz  T,  S  Febrizky,  &  AD  Mario.  2014.
Pengaruh  Jenis  Pelarut  Terhadap Persen  Yield  Alkaloid  dari  Daun
Salam  India  (Murraya  koenigii).
Jurnal Teknik Kimia , Fakultas Teknik, Universitas Sriwijaya,
Palembang. Azwarni  E.  Sulistiany,  2016.  Efektifitas Pemberian Ekstrak Daun Kari (Murraya koenigii) Terhadap Penurunan  Tekanan  Darah  Pada Penderita Hipertensi. Jurnal,
Keperawatan, Poltekes  Kemenkes Aceh, Aceh
Beauchamp  CS  &  Sofos  JN.  2010. Diarrheagenic  Escherichia  coli .  In:
Juneja,  V.K.  and  Sofos,  J.N.  Eds. Pathogens  and  Toxins  in  Foods . Washington DC: ASM Press.
Bussmann  RW,  Glenn  A,  &  Sharon  D.
2010. Antibacterial activity of medicinal  plants  of  Northern  Peru  - Can  traditional  applications  provide leads  for  modern  science Indian  J Tradit Knowl. 9(4):742–53.
Dewato  HR.  2007,  Pengembangan  Obat Tradisional  Indonesia  Fitofarmaka.
Maj Kedokt Indon , 57 (7).
Dheeraj et  al .  2014,  Murraya  Koenigii buah  Etnobotani,  Fitokimia  Dan
Farmakologi Ulasan.
Jurnal Farmakognosi Dan Fitokimia , 3 (3) : 109-119.
Dwidjoseputro  D.  2010. Dasar-  dasar Mikrobiologi . Jakarta: Djambatan.
Elfidasari D, Saraswati AM, Nufadianti G,
Samiah  R,  &  Setiowati  V.  2011.
Perbandingan Kualitas Es di Lingkungan  Universitas  Al  Azhar Indonesia dengan Restoran Fast Food di  Daerah  Senayan  dengan  Indikator Jumlah  Escherichia  coli  Terlarut. Jurnal Al-Azhar Indonesia Seri Sains dan Teknologi .
Handayani R. 2016. Uji Aktivitas Hipoglikemik  Nano  partikel  Daun Temuru  dan  Ekstrak  Etanol  Daun Temuru (Murraya koenigii (L)
Spreng)  Terhadap  Tikus  Putih  yang Diinduksi  Aloksan  Serta  Aktivitas Antioksidannya. Thesis .  Universitas Sumatera Utara, Medan.
Handral KH, A Pandith, & Shruti. 2012. A
Review On Murraya koenigii:
Multipotential Medicinal Plant. Asian J. Of Pharma And Clinic, Department  of  Solid  State  Crystal
Unit  SSCU  .  Indian  Institute  of Science, Bangalore, Karnataka, India. Hutagoal AM. 2015. Karakterisasi
Simplisia  dan  Isolasi  Minyak  Atsiri dari  Daun  Salam  Koja  (Murraya koenigii L. Spreng) Segar dan Kering serta  Analisis  Komponennya  Secara GC-MS. Thesis. Universitas Sumatera Utara, Medan.
Iskandar  Y,  Rusmiati  D,  &  Rusma  RD. 2010.    Uji  efektivitas  antibakteri ekstrak  etanol  rumput  laut  terhadap bakteri  Escherichia  coli  dan  Bacillus aureus. Skripsi .  Fakultas  MIPA Universitas Padjajaran, Bandung.
Ismarani  I.  Potensi  senyawa  tannin  dalam menunjang
produksi ramah
lingkungan.  2012. Agribisnis  dan Pengemb Wil. 3(2): 46–55.
Jawetz  E,  Melnick  JL,  &  Adelberg  FA. 2012. Mikrobiologi Kedokteran . Alih Bahasa  Aryandhito  Widhi  Nugroho et  al .,  Editor  edisi  Bahasa  Indonesia Adisti  Adityaputri  Edisi  25,  Jakarta:
EGC.
Parthasarathy  VA.,  Chempakam  B.,  & Zachariah  TJ.  2008. Chemistry  of Spices, Oxfordshire: CABI.
Pelczar,  Michael  J,  &  Chan  ECS.  2008.
Dasar-dasar  Mikrobiologi  Jilid  I , Jakarta: UI Press.
Pratiwi,  S.T.  2008. Mikrobiologi  Farmasi , Jakarta: Erlangga
Public  Health  Agency  of  Canada.  2011.
Escherichia coli infection . A
Perinatal Health Surveillance Report, Ottawa. Purwaningsih SN. 2017. Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Kari (Murraya koenigii) terhadap Mikrobiologi Daging Kambing Kacang. Jurnal .  Program  Studi
Peternakan. Fakultas Peternakan, Universitas Jambi.
Eny Purwanitiningsih et al. : Uji Daya Hambat Daun Salam Koja ( Murraya koenigii (L.) Spreng) terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan Metode Kirby Bauer
Radji MDR. 2010. Buku Ajar Mikrobiologi
Panduan  Mahasiswa  &  Kedokteran ,
Jakarta: EGC.
Rahmawati S. 2016. Pengaruh Kadar PVP K30  Terhadap  Mutu  Fisik  Tablet Hisap  Ekstrak  Daun  Salam  Koja Berbasis  Sukrosa  Secara  Granulasi Basah.  Other  thesis, University  of Muhammadiyah Malang.
Rastina  R,  Mirnawati  S,  Letje  W.  2015.
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol
Daun Kari (Murraya koenigii)
terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia  coli,  dan  Pseudomonas sp. Jurnal Kedokteran Hewan , Universitas  Syiah  Kuala,  Banda Aceh, Aceh.
Sudarmi  K,  Darmayasa  IBG,  Muksin  IK. 2017.  Uji  Fitokimia  dan      Daya Hambat Ekstrak Daun Juwet (Syzygium cumini) terhadap Pertumbuhan  Escherichia  coli  dan Staphylococcus aureus ATCC. Jurnal
Simbiosis, Jurusan  Biologi  FMIPA, Universitas Udayana.
Suhaerah  L.  2014. Statistika  Dasar . Bandung: Prisma Press. Suriaman E, Permana ASH, & Warman M. 2016.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Buah  Mentimun  (Cucumis sativus  Linn)  Terhadap  Salmonella typhi  dan  Bacillus  cereus  Secara  In Vitro. Journal  of  Science ,  Analis kesehatan, Akademi Analis Kesehatan, Malang.
Talaro  K.P.,  Vhess  B.  2008. Foundations in  microbiology ,  8 th ed, The  gram positive  and  gram  negative  cocci  of medical  importance .  Chapter  18, New York: McGraw-Hill.
Tortora  Gj,  Funke  BR,  Case  CL.  2010.
Microbiology  an  introduction .  10 th ed,      Pearson  Edition,  Inc.,  San Francisco:  Publishing  as  Pearson Bejamins Cummings.
Wibowo  MS.  2012. Pertumbuhan  dan kontrol  bakteri .  Jurnal  Pertumbuhan Bakteri, PDF.