Penulis Korespondensi : Risky Juliansyah Putri Program Studi Farmasi, Universitas Mandala Waluya
Informasi Artikel Submitted : 23 Agustus 2021 Accepted : 2 November 2021 Published : 31 Desember 2021
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, Vol 7.No.2 Desember 2021 Avaiable online at www.jurnal-pharmaconmw.com/jmpi p -ISSN : 2442-6032 e -ISSN :  2598-9979
Uji Aktivitas Antioksidan  dan Anti Hiperurisemia Ekstrak Etanol Daun Maja ( Aegle marmelos L.)
Risky Juliansyah Putri * , Bai Athur Ridwan, Uyun Wardarini, Syamsiah Pawannei Program Studi Farmasi, Universitas Mandala Waluya

## ABSTRAK
Penggunaan  tanaman  dalam  mengatasi  berbagai penyakit  masih  banyak  dimanfaatkan  oleh  masyarakat di  Indonesia  salah  satunya  yaitu  tanaman  maja  ( Aegle marmelos L . ).  Tanaman  ini mengandung  senyawa metabolit yang bersifat sebagai antioksidan  dan   dapat mengurangi  aktivitas  enzim xantin  oksidase sehingga menghambat  terjadinya  stress  oksidatif    dan menurnkan  produksi  asam  urat.    Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  dan antihiperurisemia  ekstrak  etanol  daun    Maja    ( Aegles marmelos L.) . Sampel daun Maja ( Aegle marmelos L.) dilakukan metode ekstraksi  maserasi kemudian ekstrak yang  dihasilkan  dilakukan    uji  skrining  fitokimia senyawa  metabolitnya.  Selanjutnya  dilakukan  uji antioksidan  dengan  menggunakan  metode  FRAP  dan pengukuran  aktivitas  antihiperurisemia  menggunakan spektrofotometri Uv-Vis. Hasil penelitian ini
menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  maja mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  alkaloid, flavonoid,  tannin,  saponin  dan  fenol.  Nilai  aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun maja (Aegle marmelos L.)  adalah    9,518  mgQE/g  ekstrak.  Aktivitas antihiperurisemia  memiliki  perbedaan  signifikan ( ρ <0,05)  antar  kelompok  perlakuan.  Persentase penurunan  kadar  asam  urat  pada  ekstrak  etanol  daun maja  paling  besar  terjadi  pada  dosis  350  mg/KgBB sebesar  44,08%  dibandingkan  dengan  dosis  150 mg/KgBB  dan  250  mg/KgBB  sebesar  22,56%  dan 31,18%  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak etanol  daun  maja  memiliki  aktvitas  antioksidan  dan dapat menurunkan kadar asam urat pada mencit ( Mus musculus ).
Kata kunci : Daun Maja, Antioksidan, antihiperurisemia, Aegle marmelos L.

## ABSTRACT
The  use  of  plants  in  overcoming  various  diseases is still widely used by the community in Indonesia, one  of  which  is  the  maja  plant (Aegle marmelos L. ). This plant  contains  metabolite compounds  that  are  antioxidants  and  can  reduce the activity of the enzyme xantin oxidase to inhibit oxidative stress and reduce uric acid production. This  study  aimto  find  out  the antioxidant  and  antihyperurisemia  activity  of maja leaf ethanol extract (Aegles marmelos L.) . Sample of leaves maja (Aegle marmelos L.) carried out the method of extraction of maceration then the resulting extract is carried out  a  phytochemical  screening  test  of  its metabolite  compounds. Antioxidant  tests  were conducted  using  the  FRAP  method  and measurement  of  antihyperuricemia  by  blood serum  of    mice  ( Mus  Musculus )  activity  using
Uv-Vis  spectrophotometry.  The  results  of  this study  showed  that  ethanol  extract  of  maja  leaves contained  secondary  metabolite  compounds  of alkaloids,  flavonoids,  tannins,  saponins  and phenols. The antioxidant activity value of ethanol extract  of  maja  leaves  ( Aegle  marmelos L.)  is 9,518  mgQE/g  extract. Antihyperurisemia activity had  significant  differences    ( ρ <0.05) between treatment  groups. The  percentage of  decrease  in uric acid levels in ethanol extract of maja leaves is greatest  at  doses  of  350  mg  /  KgBB by 44.08% compared to doses of 150 mg / KgBB and 250 mg / KgBB by 22.56% and 31.18% so it can be concluded that ethanol extract of maja leaves has antioxidant activity and can reduce uric acid levels in mice (Mus musculus).
Keywords : Maja leaves, Antioxidant, Antihyperuricemia, Aegle marmelos L.

## PENDAHULUAN
.    Di  Indonesia  sejak  generasi terdahulu  sampai  saat  ini  telah memanfaatkan  tanaman  sebagai  obat untuk  mengatasi  masalah  kesehatan. Salah satu tanaman yang dimanfaatkan  yaitu  maja  ( Aegle marmelos L.). Tanaman ini termasuk dalam famili  Rutaceae yang  dapat ditemukan  tumbuh  liar  di  hutan kering  dan  dapat  ditemukan  di seluruh  hutan  Himalaya.  Sebagai tanaman  perdu,  kulitnya  berwarna hijau dan keras, sedangkan dagingnya berwarna  putih,  berbau  harum  dan rasanya  juga  manis.  Di  Indonesia, buah  maja  tersebut  dapat  dijumpai terutama  di  dataran  rendah  seperti rawa–  rawa  maupun  di  lahan  kering (M. P. Sari & Susilowati, 2019).
Menurut  Bhar,  Mondal,  & Suresh,  (2019)  menyatakan  bahwa tanaman  maja  mengandung  berbagai golongan  senyawa  seperti  alkaloid, terpenoid,  vitamin,  kumarin,  tanin, karbohidrat,  flavonoid,  asam  lemak, dan  minyak  esensial.    Metabolit sekunder  flavonoid  dan  alkaloid diduga  dapat  menghambat  kerja enzim xanthine  oksidase dan
superoksidase sehingga  mengurangi kadar  asam  urat  di  dalam  darah (Juwita, Saleh, & Sitorus, 2017). Asam urat  adalah  produk  akhir  dari metabolisme purin. Metabolisme purin utamanya terjadi pada hati dan jaringan  lain  pada  tubuh  yang mengandung xanthine oksidase . Tingginya  kadar  asam  urat  atau hiperurisemia  dapat  menyebabkan penyakit gout dan nefrolitiasis. Selain itu  bisa  sebagai  indikator  adanya penyakit  tertentu  seperti  metabolik sindrom,  diabetes  meltus,  penyakit kardiovaskular,  dan  penyakit  ginjal kronis  (George  &  Minter,  2020). Penyakit ini diperkirakan terjadi pada 804  orang  penduduk  dari  setiap 100.000  orang,  dengan  prevalensi penyakit  ini  diderita  pada  usia  30  – 60  tahun  sebesar  36  -  68  % (WHO;2015).
Senyawa  metabolit    seperti flavonoid  juga  memiliki  potensi sebagai  antioksidan  karena  memiliki gugus  hidroksil  yang  terikat  pada karbon  cincin  aromatik  sehingga dapat  menangkap  radikal  bebas  yang dihasilkan  dari  reaksi peroksidasi lemak  (Hamid,  Aiyelaagbe,  Usman,
Ameen, & Lawal, 2010).
Antioksidan bertindak  sebagai  bahan yang  membantu  dalam  melindungi sel-sel  tubuh  dari  efek  buruk radikal bebas.  Senyawa  ini  dapat  terbentuk secara alami di dalam tubuh dan juga dapat  diperoleh  dari  luar  tubuh. Senyawa ini juga  bersifat tidak stabil dan  sangat  reaktif  sehingga  mudah bereaksi  terhadap    molekul  lainnya seperti  protein,    lipid,  karbohidrat, dan DNA untuk mencapai kestabilan. Sifat  kereaktifan  yang  tinggi  dari radikal  bebas  dapat  memulai  sebuah reaksi  berantai    yang  mana  dalam sekali pembentukannya dapat merusak  sel-sel  penting  dalam  tubuh (Liochev,  2013).  Ekstrak  buah  Maja sendiri    mengandung  metabolit sekunder  flavonoid,  tanin,  alkaloid, saponin, dan glikosida yang pengujian aktivitas antioksidannya memperlihatkan  nilai    IC 50 yang diperoleh  sebesar  269,153  µg/mL menggunakan  metode  DPPH  (Fauzi, Santoso, & Riyanta, 2021).
Benzie & Strain, (1996) menyatakan bahwa FRAP merupakan
metode  pengujian  antioksidan  yang digunakan  pada  tumbuh-tumbuhan.
Adapun  kelebihan  dari  metode  ini yaitu  harga  terjangkau,  mudah disiapkan,  sederhana  dan  cepat. Selain  itu,  metode  FRAP  dapat menentukan  kadar  antioksidan  total dari  suatu  sampel  berdasarkan kemampuan  senyawa  antioksidan dalam  mereduksi  Fe 3+ menjadi  Fe 2+ (Halvorsen et al., 2002).
Melihat banyaknya potensi senyawa  metabolit  yang  dikandung oleh tanaman maja khusunya senyawa    antioksidan  yang  memiliki peranan  penting  dalam  proses terjadinya  penyakit degenerative sehingga  perlu  dilakukan  pengujian aktivitas antihiperurisemia dan mengetahui  dosis  optimum  ekstrak etanol  daun  Maja  ( Aegle  marmelos
L.)  yang dapat memberikan aktivitas antihiperurisemia  terhadap  mencit ( Mus  musculus )  yang  diinduksi  jus hati ayam serta menentukan aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol daun Maja  ( Aegle  marmelos L.)  dengan menggunakan  metode  FRAP (Ferric
Reducing antioxidant power) .

## METODE PENELITIAN
A. Alat dan Bahan yang
Digunakan
Alat yang digunakan mikropipet 1000 µL  (Dragon lab), rotary evaporator ( Bucy) , spektrofotometer UV-vis
(Labomed ),  timbangan  analitik, vortex , wadah maserasi.
Bahan yang digunakan meliputi    daun  Maja,  etanol  96%, aquadest,    asam  klorida,  pereaksi dragendroff,  pereaksi  mayer,  asam klorida  pekat,  natrium  hidroksida, besi(III)  klorida,  kloroform,  asam asetat  anhidrat,  monopotasium fosfat, kuersetin, kalium ferrisianida,  trikloroasetat  dan  Jus hati ayam  .
B. Prosedur Kerja
Serbuk  daun  maja  ( Aegle marmelos L.) kering sebanyak 1 kg dimaserasi  menggunakan  pelarut etanol  96%  dan  disimpan  pada suhu  kamar  dalam  waktu  24  jam. Ekstrak  etanol  cair  yang  diperoleh selanjutnya dipisahkan dan Ampas ekstrak    dilakukan  remaserasi sebanyak  3  kali  selama 24  jam.
Maserat    kemudian  dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator .  Proses  selanjutnya yaitu    pemekatan  ekstrak  dengan
menggunakan alat waterbath dengan suhu 50ºC untuk menghilangkan  kadar  pelarut  yang ada (Nurhasanah, 2014).

## C. Skrining Fitokimia
Identifikasi  senyawa  meliputi alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin dan polifenol.
a. Uji alkaloid
Uji Mayer dilakukan dengan sampel dilarutkan
kemudian  ditambahkan    2  tetes pereaksi  Mayer.  Sampel  positif adanya alkaloid akan menunjukkan  adanya  endapan putih. pengujian Wagner dilakukan dengan sampel
ditambahkan  2  tetes  pereaksi Wagner. Sampel positif  alkaloid akan menunjukkan adanya endapan coklat (Jones & Kinghorn, 2006).
b. Uji flavonoid
sampel  sebanyak  2  mL
ditambah dengan serbuk magnesium  dan  2  mL  HCl  2  N. sampel  positif  flavonoid  akan menunjukkan  adanya  warna jingga sampai merah (Harborne, 1987).
c. Uji saponin
sampel ditambahkan akuades, kemudian dikocok kuat-kuat. Sampel positif saponin  akan  menghasilkan busa  pada  permukaan  lapisan dengan  ketinggian  1-10  cm (Harborne, 1987).
d. Uji polifenol dan tanin Sampel ditambahkan dengan    2  tetes  pereaksi  besi
(III)  klorida  1%.  Sampel  positif
tanin dan polifenol akan menunjukkan  perubahan  warna hijau  kehitaman  atau  biru  tua (Harborne, 1987).
D. Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode FRAP
a. Penentuan  panjang  gelombang
maksimal
Pengukuran Panjang gelombang  dilakukan  dengan cara  pengukuran  absorbansi larutan standar pada konsentrasi  50  ppm.  Dari larutan tersebut kemudian
diambil  sebanyak  1  mL  dapar fosfat  0,2  M  pH  6,6  dan  1  mL
kalium  ferrisianida  dipipet  ke dalam labu ukur 5 mL. Inkubasi selama  20  menit  pada  suhu 50°C. Setelah diinkubasi larutan ditambahkan TCA 10% sebanyak 1  mL  selanjutnya  disentrifugasi pada  kecepatan  3000  rpm selama 10 menit, setelah disentrifugasi dipipet sebanyak 1 mL lapisan bagian atas kedalam tabung dicukupkan dengan etanol  p.a  hingga  tanda    batas, didiamkan lagi selama 30 menit. reaksi, kemudian ditambahkan 1 mL  akuades  dan  0,5  mL  FeCl3 0,1  %.  Serapan  diukur  dengan spektrofotometer UV-Vis yang telah diatur panjang gelombangnya dari 400-800 nm (Pratama, Muflihunna,
& Octaviani, 2018).
1) Pembuatan  larutan  kuersetin sebagai pembanding
a) Pembuatan  baku  standar kuersetin Larutan standar kuersetin 100 μg/mL dibuat dengan cara melarutkan 50 mg
kuersetin  ke  dalam  25  mL
metanol  p.a.  kemudian dibuat pada konsentrasi 50 ppm,  75  ppm,  100  ppm, 125 ppm, dan 150 ppm.
b) Penentuan  kurva  baku larutan standar kuersetin
Larutan baku kuersetin  pada  konsentrasi
50 ppm, 75 ppm, 100 ppm, 125  ppm,  dan  150  ppm, masing-masing    dipipet  2
mL  yang  ditambahkan dengan AlCl 3 10% sebanyak  0,1  mL,  natrium asetat  1  M  sebanyak  0,2
mL  dan  aquades  2,9  mL. kemudian diaduk dan dibiarkan selama 30  menit yang  dilanjutkan  dengan pengukuran absorbansi menggunakan alat spektrofotometer uv-vis pada  panjang  gelombang
425 nm (Hanani, 2016).
2) Pengukuran serapan sampel Sebanyak 40 mg sampel ditimbang  dengan  saksama
dan  dilarutkan  dalam  5  ml
etanol    p.a    pada  labu  ukur  5 ml    hingga  mencapai    batas
sehingga diperoleh konsentrasi    10000    ppm. Kemudian  diambil    masing- masing 150 μl, 225 μl, 300 μl, 375 μl dan 450 μl dari larutan stok   ke   dalam    labu ukur   5 ml    hingga    diperoleh konsentrasi 50 ppm, 75 ppm; 100 ppm; 125 ppm; 150 ppm, ditambahkan  masing-masing 1 ml dapar  fosfat  0,2  M (pH 6,6)  dan  1 ml K 3 Fe (CN) 6 1%.
Selanjutnya diinkubasi
selama 20 menit dengan suhu 50°C. Setelah diinkubasi ditambahkan  1  ml  larutan TCA  10%  lalu  disentrifuge dengan kecepatan 3000  rpm selama    10    menit.    Setelah disentrifuge    dipipet    2  ml lapisan bagian  atas  kedalam labu  ukur,  dan ditambahkan 2  ml  air  suling  dan  0,4  ml FeCl 3 0,1%. Larutan didiamkan  selama  10  menit dan diukur serapan maksimumnya dengan spektrofotometri dengan absorbansi 720 nm.
Aktivitas antioksidan dari sampel ditentukan
berdasarkan  persen  inhibisi, yang  dihitung  dengan  cara berikut:
% Inhibisi =
E. Pengujian Aktivitas

## Antihiperurisemia
a. Pembuatan  larutan  pembanding allopurinol
Ditimbang serbuk allopurinol  sebanyak  1,04  mg, digerus, dan disuspensikan dengan  Na-CMC  1  %  hingga homogen, kemudian dicukupkan hingga 10 mL .
b. Pembuatan jus hati ayam
Ditimbang  200  gram  hati ayam kemudian dibersihkan dan dihaluskan  kemudian  diberikan kepada  hewan  uji  secara  oral sebanyak  2  mL/KgBB  selama  6 hari (Fitrya, 2014).
c. Pembuatan  suspensi  ekstrak etanol daun maja Suspensi ekstrak daun maja  150  mg  dibuat  dengan menimbang  ekstrak  daun  maja sebanyak  8,7  mg  kemudian
disuspensikan  dengan  Na.CMC 1%  sebanyak  15  ml,  untuk  250 mg  dibuat  dengan  menimbang ekstrak  daun  maja  sebanyak
14,55 mg kemudian disuspensikan  dengan  Na.CMC 1%  sebanyak  15  ml,  dan  untuk 350  mg    dibuat  dengan menimbang  ekstrak  daun  maja sebanyak  20,4  mg  kemudian disuspensikan  dengan  Na.CMC 1% sebanyak 15 ml.
d. Pengukuran kadar asam urat Hewan  uji  berupa  mencit jantan sebanyak 20 ekor dengan berat  berkisar  antara  20-30 gram  dibagi  menjadi  lima kelompok dan terdiri dari empat hewan  uji  untuk  tiap-tiap kelompok.  Semua  kelompok hewan  uji  kemudian  diinduksi dengan  jus  hati  ayam  selama    6 hari  agar  diperoleh  kondisi hiperurisemia.  Setelah  mencit mengalami  hiperurisemia,  hari ke  13,  14,  dan  15  semua  mencit diberi perlakuan sesuai kelompok.  Adapun  pembagian kelompok pada hewan uji terdiri dari  satu kelompok  kontrol
negatif  diberikan  suspensi  CMC 1%,  satu  kelompok  kontrol
positif diberikan suspensi allopurinol,  dan  tiga  kelompok pemberian  ekstrak  etanol  daun maja  dengan  masing-masing dosis 150 mg/kg BB, 250 mg/kg BB, dan 350 mg/kg BB).
e. Pengambilan darah mencit Darah masing-masing
mencit diambil sebelum perlakuan  hiperurisemia  yaitu pada hari ke-8 setelah aklimatisasi,  setelah  perlakuan
hiperurisemia  yaitu  pada  hari ke-13  dan  hari  ke-15  setelah pemberian sediaan ekstrak etanol  daun  maja.  Pengambilan darah  mencit  diambil  melalui vena  orbitalis sebanyak  kurang lebih 1 ml dengan menggunakan kapiler  mikrohematokrit,  dan pada  hari  ketiga  pemberian larutan  uji  pengambilan  darah mencit  diambil  melalui  jantung. Metode pengukuran kadar asam urat  dalam  darah  menggunakan Photometrics  THBA . Sampel pengukuran ini ialah serum dan plasma
(heparin,
EDTA).
pengukuran  ini  menggunakan reagen  Uric  Acid  FS  TBHBA (2,4,6-tribromo-3-asam hidroksi benzoate)  dari  Diasys  6  mg/dl. Hydrogen peroksida yang dihasilkan dalam reaksi tersebut menjadi quinonimene yang berwarna  biru  yang  dapat memberikan serapan pada panjang  gelombang  546  nm dengan  alat  spektrofometer  uv- vis.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini,  daun  maja ( Aegle  mormales L.)  diekstraksi secara maserasi hingga menghasilkan ekstrak  etanol  yang  dilanjutkan dengan  skrining  metabolit  sekunder. Hasil  pengujian  skrining  fitokimia menunjukkan adanya senyawa metabolit  sekunder  berupa  alkaloid, flavonoid,  tannin,  saponin  dan  fenol dan  tidak  terdapat  triterpenoid seperti terlihat pada tabel 1.
Tabel 1. Kandungan Metabolit
Sekunder ekstrak etanol daun maja Uji metabolit sekunder Keterangan
Uji alkaloid
1. Reagen mayer
2. Reagen wagner
( - ) ( + ) Uji Saponin ( + ) Uji Flavonoid ( + ) Uji Tanin ( + ) Uji fenol ( + ) Uji triterpenoid ( - ) Keterangan:  (-)  :  Tidak  mengandung senyawa uji (+) : Mengandung
senyawa uji
Menurut  Nigam  &  Nambiar, (2015)  menyatakan  bahwa  pada tanaman  maja  ( Aegle  marmelos L . ) Coss)  memiliki  kandungan  senyawa flavonoid  (0,89  %),  tannin  (15,26%), saponin  (2,62%)    serta    kandungan alkaloid  (1,08%)    yang  tinggi. Senyawa flavonoid diketahui memiliki aktivitas antioksidan dengan cara  mendonorkan  ion  hydrogen
sehingga  dapat  menetralisir  efek toksik  dari  radikal  bebas  (Pietta, 2000).  Senyawa  ini  juga  memiliki potensi  tinggi  dalam  penghambatan enzim xantin  oksidase .  Pengurangan aktivitas enzim xantin oksidase dapat menurunkan  produksi  asam  urat berlebih dan dapat mencegah terjadinya  stress  oksidatif  (Özyürek,
Bektaşoğlu, Güçlü, & Apak, 2009). Pengukuran  kadar  asam  urat pada  hewan  uji  dilakukan    dengan menggunakan metode
spektrofotometri yang dilakukan dengan  tiga  kali  pengukuran  yaitu pengukuran kadar asam urat sebelum induksi  atau  kadar  asam  urat  awal, setelah  induksi  jus  hati  ayam  dan setelah  perlakuan  pada  masing- masing  kelompok  hewan  uji.  Hasil pengukuran  kadar  asam  urat  pada hewan  coba  mencit  terdapat  pada tabel 2 berikut.
Tabel 2. Rata-rata kadar asam urat (mg/dL) pada  mencit sebelum dan setelah induksi jus hati ayam
No. Kelompok Perlakuan Kadar asam urat darah mencit (mg/dL) Sebelum diinduksi jus hati ayam (mg/dL) (Hari ke-0) Setelah diinduksi jus hati ayam (mg/dL) (Hari ke-6) 1. NaCMC 0.5515 1.8325
2. Allopurinol 0.6068 1.9612 3. EEDM 150 mg 0.5702 1.9551 4. EEDM 250 mg 0.6005 1.8632 5. EEDM 350 mg 0.6620 1.8631 Pemberian jus hati ayam diberikan  selama  6  hari,  Dengan waktu  pengambilan  darah  pada  hari ke  6  yang  mana  diperlihatkan terjadinya    kenaikan  kadar  seperti terlihat  pada  tabel  2.  Ekstrak  etanol daun maja (Aegle marmelos L.) Coss) dengan  dosis  150  mg/kgBB,  250 mg/kgBB dan 350 mg/kgBB
ditetapkan  kadar  penurunan  asam uratnya dengan menggunakan metode  enzimatik  dengan    reagen Uric  Acid  FS  TBHBA ( 2,4,6- tribromo-3-asam  hidroksi  benzoate ) dari Diasys  6  mg/dl .  Prinsip  dari penetapan  kadar  asam  urat  dengan metode  ini  adalah  reaksi  oksidasi asam urat oleh enzim urikase menjadi allantoin, karbon dioksida (CO 2 ), dan hydrogen peroksida (H 2 O 2 ).
Hydrogen  peroksida  yang  dihasilkan dalam reaksi tersebut menjadi quinonimene yang  berwarna  biru yang dapat memberikan serapan pada panjang gelombang 546 nm (Sutrisna,
2010).
Berdasarkan  analisis  statistik, hasil  uji  normalitas  dan  homogenitas dari  data  kadar  asam  urat  serum darah  mencit  pada  hari  ke  13  setelah diberi  perlakuan  menunjukkan  data terdistribusi  normal  dan  homogen (p>0,05).  Kemudian  dilakukan  uji One  way  Anova dan  menunjukkan nilai  p<0,05  yang  artinya  terdapat perbedaan  penurunan  kadar  asam urat  pada  mencit  antar  kelompok perlakuan.  Hasil  uji  lanjut  ( Post  Hoc LSD ) antara kelompok ekstrak etanol daun  maja  dosis  150  mg/Kg  BB,  250 mg/Kg  BB,  350  mg/Kg  BB  dan kontrol  positif  (allopurinol)  terhadap kontrol negatif (NA-CMC 1%), kontrol positif  terhadap  berbagai  dosis ekstrak  etanol  daun  maja,  dan  antar kelompok  ekstrak  etanol  daun  maja menunjukkan kadar asam urat serum darah  mencit  berbeda  signifikan (p<0,05)  seperti  terdapat  pada  tabel 3.  Kemampuan  ekstrak  etanol  daun maja  ( Aegle  marmelos L.)  dalam manurunkan  kadar  asam  urat  dalam serum  darah  mencit  pada  kelompok
pemberian ekstrak dosis 150
mg/kgBB,  250  mg/kgBB,  dan  350
mg/kgBB menunjukkan
hasil penurunan  kadar  asam  urat  masing- masing  dosis  yaitu  sebesar  22,56  %, 31,18  %,  dan  44,08  %.  Dosis  350 mg/kgBB  merupakan  dosis  yang paling  besar  dalam  menurunkan
kadar  asam  urat  pada  mencit  antar kelompok  ekstrak  etanol  daun  maja dan mendekati persentase penurunan kontrol  positif  (allopurinol)  yaitu sebesar
69,89% sebagaimana ditunjukkan pada tabel 3 dan gambar 1. Tabel 3. Data  penurunan  kadar  asam  urat  (mg/dL)  pada  mencit  setelah perlakuan No. Kelompok perlakuan Rata-rata (X ± SD) dan persentase penurunan (%) kadar asam urat (mg/dL) pada mencit setelah diberi perlakuan sesuai kelompok masing-masing (n=4) Sebelum diinduksi jus hati ayam (mg/dL) Setelah diinduksi jus hati ayam (mg/dL) (X ± SD) Setelah diberi perlakuan (mg/dL) (X ± SD) Persentase penurunan (%) 1. NaCMC 1% 0.5515 1.8325  ± 0,03 1.8042 ± 0,04* 1.63% 2. Allopurinol 0.6068 1.9612 ± 0,02 0.5902 ± 0,05* 69.89% 3. EEDM 150 mg/ KgBB 0.5702 1.9551 ± 0,01  1.5152 ± 0,02* 22.56% 4. EEDM 250 mg/KgBB 0.6005 1.8632 ± 0,07 1.2810 ± 0,11* 31.18% 5. EEDM 350 mg/KgBB 0.6620 1.8631 ± 0,06 1.0405 ± 0,04* 44.08% Keterangan : Kontrol negative   : Kelompok perlakuan yang diberikan suspense  Na CMC 1 % Kontrol Positif : Kelompok Perlakuan yang diberikan allopurinol 100 mg/KgBB EEDM 150 mg : ekstrak  daun  maja 150 mg/KgBB EEDM 250 mg : ekstrak daun maja  250 mg/KgBB EEDM 350 mg : ekstrak daun maja 350 mg/KgBB
*
: berbeda signifikan ( p < 0,05 )
Gambar 1. Grafik persentase penurunan kadar asam urat pada mencit Keterangan  :
KAU SPE : kadar asam urat setelah perlakuan KAU SI : Kadar asam urat setelah induksi KAU Awal   : Kadar asam urat awal % penurunan : persentase penurunan kadar asam urat  mencit Penurunan  kadar  asam  urat disebabkan karena adanya penghambatan enzim xhantin oxidase yang bertindak  sebagai katalis  untuk  asam  urat  dengan memproduksi  radikal  bebas  dalam bentuk anion superoksida dan hidrogen peroksida, yang juga berkontribusi terhadap stres oksidatif kandungan senyawa metabolit sekunder  yang  memiliki  aktivitas untuk  menurunkan  kadar  asam  urat (Cos  et  al.,  1998).  Kemampuan penurunan  kadar  asam  urat  ini karena  aktivitas  senyawa  metabolit sekunder  seperti  flavonoid  yang memiliki  kesamaan  struktur  dengan
senyawa xhantin sehingga memberikan  mekanisme    kompetisi antara  substrat  dengan  inhibitor dalam mengikat sisi aktif enzim (P. S. Sari, Sitorus, & Gunawan, 2018).
Penggunaan  metode  FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) pada uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol  daun  maja  ( Aegle  marmelos
L.) merupakan  salah  satu  metode pengujian aktivitas antioksidan dengan cara mereduksi Fe (III)-TPTZ
menjadi Fe (II)-TPTZ sehingga terjadi perubahan warna dari kuning ke biru.
Adapun  hasil  pengukurannya  dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel  4 .  Hasil  pengukuran  absorbansi  dan  nilai  aktivitas  antioksidan  ekstrak daun maja ( Aegle Marmelos L.)
Konsentrasi (ppm) Absorbansi (720 nm) Aktivitas antioksidan (mgQE/g ekstrak) 50 0.425 9,5104 75 0.405 9,5142 100 0.384 9,5184 125 0.366 9,5218 150 0.345 9,5260 Rata-rata 9,518 Hasil regresi dari konsentrasi (x)
dengan  nilai  absorbansi  (y)  larutan pembanding kuersetin diperoleh persamaan yaitu y = 0,103x + 49,404 dengan  nilai  R 2 =  0,9987  dan  untuk
menghitung nilai aktivitas antioksidan dimasukkan nilai absorbansi sampel kedalam
persamaan  tersebut.  Nilai  FRAP dinyatakan  dalam  mg  ekuivalen kuersetin/g ekstrak (QE).

## Gambar 2. Persamaan regresi linear pembanding kuersetin
Hasil  pengukuran  absorbansi dan nilai aktivitas antioksidan ekstrak etanol  daun  maja  ( Aegle  marmelos
L.) tercantum pada tabel 4 memberikan  nilai  rata-rata  dari sampel  ekstrak  etanol  daun  maja
( Aegle  marmelos L.)  sebesar  9,518 mgQE/g  ekstrak,  yang  artinya  dalam
setiap  gram  ekstrak  setara  dengan 9,518 mg kuersetin. Metode pengujian aktivitas antioksidan FRAP pada  prinsipnya  merupakan  metode yang  dapat  bekerja  dengan  baik tergantung  pada  kemampuan  zat antioksidan untuk mereduksi  Fe (III) serta  Pengaruh  pH  yang  asam  pada
metode  ini  juga  dapat  menurunkan kemampuan  reduksi    dari  senyawa antioksidan  (Maesaroh,  Kurnia,  &  Al Anshori, 2018).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang
telah dilakukan maka dapat
disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol daun  Maja (Aegle  marmelos L. ) memiliki aktivitas antioksidan Ekstrak  etanol  daun  Maja  ( Aegle marmelos L.)    dengan  nilai  sebesar
9,518  mgQE/g  ekstrak.  Aktivitas antihiperurisemia  ekstrak  daun  Maja ( Aegle  marmelos L.)  pada  dosis  350
mg/KgBB  memiliki  perbedaan  yang signifikan  (ρ<0,05)  dengan  kedua kelompok  dosis  ekstrak  dengan persentase  penurunan  kadar  asam urat  paling  tinggi  yaitu  sebesar 44,08%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terimakasih kepada Tim peneliti  dosen  Universitas  Mandala Waluya  kendari,  beserta  staf  dan laboran  Laboratorium  Fakultas  Sains Dan  Teknologi  Universitas  Mandala Waluya serta semua pihak yang telah membantu  terselesainya  penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Benzie, I. F. F., & Strain, J. J. (1996). The  Ferric  Reducing  Ability  of Plasma  (FRAP)  as  A  Measure  of “Antioxidant  Power”:  The  FRAP Assay. Analytical  Biochemistry , 239 (1), 70–76. Bhar,  K.,  Mondal,  S.,  &  Suresh,  P. (2019).  An  Eye-Catching  Review of Aegle  marmelos L.(golden apple). Pharmacognosy Journal , 11 (2).
Cos, P., Ying, L., Calomme, M., Hu, J. P.,  Cimanga,  K.,  Van  Poel,  B.,  & Berghe,  D.  V.  (1998).  Structure Activity
Relationship and Classification  of  Flavonoids  as Inhibitors  of  Xanthine  Oxidase and Superoxide Scavengers. Journal  of  Natural  Products ,
61 (1), 71–76. Fauzi,  M.  N.,  Santoso,  J.,  &  Riyanta, A.  B.  (2021).  Uji  Kualitatif  dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanolik  Buah  Maja  ( Aegle Marmelos (L.)  Correa)  dengan Metode  DPPH. Jurnal  Riset Farmasi . Fitrya,  F.  (2014).  Efek  Hipourisemia Ekstrak  Etanol  Akar  Tumbuhan Tunjuk Langit ( Helminthostachys zaylanica
Linn  Hook)  terhadap  Mencit Jantan  Galur  Swiss. Majalah Obat  Tradisional ,  (Vol  19,  No  1 (2014)),  14–18.  Retrieved  from https://journal.ugm.ac.id/TradM
edJ/article/view/8085 George,  C.,  &  Minter,  D.  A.  (2020). Hyperuricemia.  In StatPearls [Internet] . StatPearls Publishing. Halvorsen, B. L., Holte, K., Myhrstad, M.  C.  W.,  Barikmo,  I.,  Hvattum, E.,  Remberg,  S.  F.,  &  Andersen, L.  F.  (2002).  A  Systematic Screening  of  Total  Antioxidants in Dietary Plants. The Journal of Nutrition , 132 (3), 461–471.
Hamid,  A.  A.,  Aiyelaagbe,  O.  O., Usman,  L.  A.,  Ameen,  O.  M.,  & Lawal,  A.  (2010).  Antioxidants:
Its Medicinal and Pharmacological Applications.
African  Journal  of  Pure  and Applied  Chemistry , 4 (8),  142– 151.
Hanani, E. (2016). Analisis Fitokimia . Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Harborne,  J.  B.  (1987).
Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan . Bandung: ITB . Jones,  W.  P.,  &  Kinghorn,  A.  D. (2006).  Extraction  of  Plant Secondary Metabolites. In
Natural  products  isolation (pp. 323–351). Springer.
Juwita,  R.,  Saleh,  C.,  &  Sitorus,  S.
(2017). Uji
Aktivitas Antihiperurisemia  dari  Daun Hijau  Tanaman  Pucuk  merah ( Syzygium  myrtifolium Walp.) terhadap  mencit  jantan  ( Mus musculus ). Jurnal  Atomik , 2 (1), 162–168. Liochev, S. I. (2013). Reactive Oxygen Species  and  The  Free  Radical Theory  of  Aging. Free  Radical Biology and Medicine , 60 , 1–4. Maesaroh,  K.,  Kurnia,  D.,  &  Al Anshori, J. (2018). Perbandingan Metode Uji Aktivitas Antioksidan
DPPH,  FRAP  dan  FIC  terhadap Asam  Askorbat,  Asam  Galat  dan Kuersetin. Chimica  et  Natura Acta , 6 (2), 93–100. Nigam,  V.,  &  Nambiar,  V.  S.  (2015). Therapeutic  Potential  of Aegle marmelos (L.)  Correa  leaves  as an  Antioxidant  and  Anti-diabetic Agent:  A  review. International Journal of Pharma Sciences and Research , 6 (3), 611–621. Nurhasanah,
H. (2014).
Uji Bioaktivitas  Ekstrak  Daun  Maja ( Crescentia  cujete Linn)  sebagai Anti Rayap. Jurnal Kimia Khatulistiwa , 3 (3), 43–48. Özyürek,  M.,  Bektaşoğlu,  B.,  Güçlü,
K., & Apak, R. (2009). Measurement of Xanthine Oxidase  Inhibition  Activity  of Phenolics  and  Flavonoids  with  A Modified Cupric Reducing
Antioxidant  Capacity  (CUPRAC) Method. Analytica Chimica Acta , 636 (1), 42–50. Pietta,  P.  G.  (2000).  Flavonoids  as Antioxidants. Journal of Natural Products , 63 (7), 1035–1042. https://doi.org/10.1021/np9904 509 Pratama,  M.,  Muflihunna,  A.,  & Octaviani,  N.  (2018).  Analisis Aktivitas  Antioksidan  Sediaan Propolis  yang  Beredar  di  Kota Makassar  dengan  Metode  FRAP (Ferric  Reducing  Antioxidant Power). Jurnal Ilmiah As-Syifaa ,
10 (1), 11–18. Sari, M. P., & Susilowati, R. P. (2019).
Efektivitas  Ekstrak  Daun  Maja ( Aegle  marmelos (L)  Corr) sebagai Larvasida Aedes aegypti . Jurnal  Kedokteran  Yarsi , 27 (1), 1–9.
Sari, P. S., Sitorus, S., & Gunawan, R.
(2018).  Inhibisi  Xantin  Oksidase oleh Fraksi Etil Asetat dari Daun
Jarum Tujuh Bilah ( Pereskia bleo (Kunth) Dc) Sebagai Antihiperurisemia. Jurnal
Atomik , 3 (2), 116–121. Sutrisna,  E.  M.  (2010).  Efek  Infusa Daging  Buah  Mahkota  Dewa ( Phaleria  macrocarpa (Sceff.)
Boerl.) terhadap Penurunan Kadar  Asam  Urat  Darah  Mencit Putih  Jantan  yang  Diinduksi dengan Potassium Oxonate.
Pharmacon:  Jurnal  Farmasi Indonesia , 11 (1), 19–24.