How to cite: Diar  Herawati,  A.A  Hidayat,  Amir  Musadad  (2022)  Uji  In  Siliico  Senyawa  EDCs  (Endocrine  Disrupting Chemicals) dan Phloroglucinol Terhadap Reseptor Estrogen, Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia, 7 (6). E-ISSN: 2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia p–ISSN: 2541-0849 e-ISSN: 2548-1398 Vol. 7, No. 6, Juni 2022

## UJI  IN  SILIICO  SENYAWA  EDCS  (ENDOCRINE  DISRUPTING  CHEMICALS) DAN PHLOROGLUCINOL TERHADAP RESEPTOR ESTROGEN

## Diar Herawati, A.A Hidayat, Amir Musadad
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Bandung, Indonesia Email: diar.herawati.e@unisba.ac.id, anggahidayat.278@gmail.com diarmunawar@gmail.com

## Abstrak
Bisphenol-A merupakan  salah  satu  dari Endocrine  Disrupting  Chemicals (EDCs) yang  terdapat  pada  bahan  baku  plastik  salah  satunya polycarbonate (PC).  BPA lepas  dari  polimer  akibat  proses  pemanasan  pada  kemasan,  sehingga  residu terakumulasi dalam tubuh dan menginvasi sel-sel payudara dengan cara menguasai estrogen  receptor (ER)  dan  menyebabkan  kanker  payudara. Phloroglucinol berpotensi  melawan  pertumbuhan  sel  kanker  payudara.  Penelitian  ini  dilakukan perbandingan  afinitas  ERβ  tehadap  BPA  dan phloroglucinol dengan  metode In silico . Makromolekul ERβ diunduh dari Protein Data Bank (PDB) (www.rcsb.org) dengan  kode  (PDB  ID  :  3OLS).  Struktur  2D  BPA  dan phloroglucinol digambar menggunakan program ChemBioDraw 2D 15.0 dan dioptimasi menjadi struktur 3D menggunakan program ChemBioDraw 3D 15.0. Senyawa BPA dan phloroglucinol di- docking terhadap ERβ menggunakan program MGL Tools 1.5.6 yang dilengkapi Autodock  Tools 4.2.6.  Hasil docking menunjukkan  nilai  energi  bebas  ikatan  (∆G) phloroglucinol terhadap  ERβ  -4,67  Kkal/mol  dan  BPA  terhadap  ERβ-7,70
Kkal/mol.  Nilai  ∆G  terbesar  adalah phloroglucinol ,  sehingga  ikatan  senyawa dengan  reseptor  lemah  dan  mudah  terurai  oleh  tubuh.  Pengujian  toksisitas  antara BPA dan phloroglucinol dilakukan menggunakan program Toxtree 3.1.0. Hasil uji toksisitas  menunjukan phloroglucinol kategori Low  (Class  I) dan  BPA  kategori High  (Class  III) yang  artinya phloroglucinol aman  sebagai  alternatif  bahan  baku plastik.
Kata Kunci : endocrine disrupting chemicals ; phloroglucinol; estrogen beta; in silico

## Abstract
Bisphenol-A is one of the Endocrine Disrupting Chemicals (EDCs) found in plastic raw  materials,  one  of  which  is  polycarbonate  (PC).  BPA  is  released  from  the polymer  due  to  the  heating  process  on  the  packaging,  so  that  the  residue accumulates  in  the  body  and  invades  breast  cells  by  controlling  the  estrogen receptor (ER) and causing breast cancer. Phloroglucinol has the potential to fight the growth of breast cancer cells. This study was conducted to compare the affinity of ERβ to BPA and phloroglucinol using themethod In silico. ERβ macromolecules downloaded  from  Protein  Data  Bank  (PDB)  (www.rcsb.org)  with  code  (PDB  ID: 3OLS).  2D  structures  of  BPA  and  phloroglucinol  were  drawn  using  the  program. ChemBioDraw  2D  15.0  and  optimized  into  a  3D  structure  using  the  program
ChemBioDraw 3D 15.0. BPA and phloroglucinol bedocking to ERβ using program MGLTools 1.5.6 incorporates AutodockTools 4.2.6. The results docking showed the value  of  the  free  energy  (∆G)  of  phloroglucinol  against  ERβ  -4.67  Kcal/mol  and BPA against ERβ -7.70 Kcal/mol. The largest ∆G value is phloroglucinol, so that the compound bonds with the receptors are weak and are easily broken down by the body.  Toxicity  testing  between BPA  and phloroglucinol  was  carried  out  using the program  Toxtree  3.1.0.  Result  Toxicity  test  shows  phloroglucinol  in  the  category Low  (Class  I)  and  the  category  BPA  High  (Class  III),  which  means  that phloroglucinol  is  safe  as  an  alternative  to  plastic  raw  materials.  Abstracts  are made  in  two  languages,  English  and  Bahasa  Indonesia.  Abstract  more  about background, purpose, up to, the results of  research, and manai research. Abstract contains  up  to  250  words,  single  write  spaces  with  italics  (Italics)  for  English abstracts. Below the abstract are listed keywords consisting of six words, where the first word is again the forward. Abstract in Indonesian can be a translation of an English translation. Tif editor for abstract syning for reasons of abstract content.

## Keywords: bisphenol-a; phloroglucinol; beta estrogen; in silico; plastic raw materials

## Pendahuluan
Plastik  banyak  digunakan  sebagai  tempat  untuk  mengolah,  menyimpan  atau mengemas  makanan.  Dalam  kehidupan  masyarakat  sehari-hari  penggunaan  plastik semakin  meningkat  karena  fleksibel,  tidak  mudah  pecah,  bentuk  laminasi,  transparan, harganya  relatif  lebih  murah,  praktis,  dan  lebih  tahan  lama.  Namun  plastik  juga memiliki  kelemahan,  yaitu  tidak  tahan  panas  dan  dapat  mencemari  produk  karena adanya migrasi komponen monomer yang berakibat buruk terhadap kesehatan terutama bagi kaum wanita yang dimana dapat menyebabkan kanker payudara.
Kanker  payudara  adalah  kanker  dengan  persentase  kasus  baru  tertinggi  hingga 43,3%    dan  persentase  kematian  tertinggi  hingga  12,9%  pada  wanita  di  dunia berdasarkan research Globocan, International Agency for Research on Cancer (IARC) tahun 2012. Penyebab utama kanker payudara yaitu adanya reseptor estrogen (ER) yang merupakan salah satu marker klinis penting dalam kanker payudara. Salah satu senyawa yang  dapat  menyebabkan  kanker  payudara  adalah bisphenol-A (BPA)  yang  dimana sebagai bahan baku plastik.
Senyawa bisphenol-A (BPA)  atau 2,2-bis(4-hydroxyphenyl)  propane ,  merupakan salah  satu  dari endocrine  disrupting  chemicals (EDCs)  yang  dapat  terakumulasi  oleh tubuh akibat residu dari polimer yang terdapat pada pengemas makanan dan minuman (Le, Carlson, Chua, & Belcher, 2008).
Phloroglucinol merupakan oligomer penyusun phlorotannin yang dapat dihasilkan dari  alga  coklat Sargassum  Duplicatum di  mana  senyawa  tersebut  memiliki  potensi sebagai  efek  inhibisi  melawan  pertumbuhan  sel  kanker  payudara  MCF-7  melalui induksi  apoptosis  (Lazennec,  Bresson,  Lucas,  Chauveau, &  Vignon,  2001).  Salah  satu pemanfaatan  alga  coklat  yang  sering  dilakukan  adalah  pembuatan  plastik biodegradable.
Plastik biodegradable adalah  plastik  yang  dapat  diuraikan  kembali  oleh mikroorganisme secara alami menjadi senyawa yang ramah lingkungan. Salah satu cara untuk mengetahui manfaat alga coklat adalah menggunakan metode in silico .
Pada  penelitian  sebelumnya  telah  dilakukan  oleh  (Dwipratama  &  Effendi,  2017) dengan  menggunakan  software ArgusLab ® .  Hasil docking penelitian  tersebut menunjukkan bahwa nilai energi bebas ikatan (ΔG) Phloroglucinol dengan ER -6,91549 kkal/mol  dan  BPA  dengan  ER  -8,41162  kkal/mol  yang  dimana  menjelaskan  bahwa Phloroglucinol sangat  berpotensi  untuk  dijadikan  obat  antikanker  payudara,  sehingga dalam  penelitian  ini  perlu  dilakukannya  pengujian  toksisitas  menggunakan software Toxtree dan metode docking lain menggunakan software Autodock .
Pada  penelitian  (Maryawan,  Effendi,  &  Fakih,  2020),  didapatkan  bahwa penggunaan software  Autodock dan Toxtree dapat  menggambarkan  tingkat  keamanan dalam senyawa sehingga metode tersebut akan digunakan dalam penelitian ini.
Berdasarkan  uraian  di  atas  dapat  dirumuskan  masalah  dalam  penelitian  ini  yaitu apakah phloroglucinol dari  alga  coklat  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  bahan  baku plastik yang lebih aman dibandingkan bisphenol-A bagi kesehatan khususnya bagi kaum wanita?
Tujuan dilakukannya penelitian ini guna memaksimalkan pemanfaatan alga coklat dalam  bidang  farmasi,  terutama  sebagai  alternatif  bahan  baku  plastik  yang  aman  bagi kesehatan juga ramah lingkungan, mengetahui afinitas dan toksisitas phloroglucinol dari alga  coklat  terhadap  reseptor  estrogen  (ER)  yang  dibandingkan  dengan  afinitas  dan toksisitas bisphenol-A terhadap reseptor estrogen (ER) menggunakan metode in silico .

## Metode Penelitian
Penelitian ini dilakukan untuk membandingkan interaksi antara senyawa bisphenol- A terhadap  reseptor  estrogen  (ER)  dengan phloroglucinol terhadap  reseptor  estrogen (ER).  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  metode in  silico dengan tahapan  penggambaran  struktur  senyawa  uji,  optimasi  geometri,  pencarian  struktur reseptor  estrogen  (ER),  penambatan  molekul,  dan  uji  toksisitas  senyawa.  Adapun rincian tahap penelitian sebagaimana berikut ini:
1) Menentukan  jenis  reseptor  estrogen  mana  yang  berikatan  dengan bisphenol-A . Penyebab  kanker  payudara  secara  spesifik  disebabkan  oleh  adanya  pengikatan bisphenol-A dengan reseptor estrogen jenis beta (ERβ), pada jalur pensinyalan non- genomik Estrogen Related Receptor jenis gamma (ERRγ).
2) Penggambaran  struktur  dua  dimensi  (2D)  dan  struktur  tiga  dimensi  (3D)  dari senyawa bisphenol-A dan phloroglucinol menggunakan software  ChemBioDraw versi 15.0.
3) Pencarian  dan  pengunduhan  struktur  tiga  dimensi  (3D)  dari  reseptor  estrogen  beta (Erβ) yang diunduh pada website rcsb.org (Protein Data Bank) dengan kode 3OLS.
4) Selanjutanya dilakukan metode docking pertama penghapusan molekul air, kemudian dipisahkan  reseptor  estrogen  dengan  ligan  alami.  Kemudian  dilakukan  preparasi
meliputi  penambahan  atom  hidrogen,  penambahan  muatan  parsial Gasteiger  charge lalu disimpan dalam bentuk file pdb.
5) Setelah struktur reseptor telah diunduh, kemudian dilakukan validasi metode docking dengan  menggunakan software  MGL  Tools versi  1.5.6  yang  dilengkapi  dengan Autodock  Tools versi  4.2.6,  Kemudian  dilakukan  simulasi docking antara  reseptor estrogen  beta  (Erβ)  dengan bisphenol-A dan  reseptor  estrogen  beta  (Erβ)  dengan phloroglucinol menggunakan software  MGL  Tools versi  1.5.6  yang  dilengkapi dengan Autodock Tools versi 4.2.6.
6) Hasil docking pada  sisi binding  site yang  didapat  dianalisis  dengan  menggunakan software  BIOVIA  Discovery  Studio  Visualizer 2016.  Penambatan  molekul  antara bisphenol-A terhadap  reseptor  estrogen  beta  (Erβ)  dengan phloroglucinol terhadap reseptor  estrogen  (Erβ)  (nilai  energi  ikatan  dan  konstanta  inhibisi)  menggunakan software BIOVIA Discovery Studio Visualizer 2016.
7) Uji  toksisitas  senyawa bisphenol-A dan phloroglucinol hasil  optimasi  geometri menggunakan software  Toxtree versi  3.1.0  untuk  mengetahui  potensi  toksisitas senyawa dengan menggunakan parameter prediksi parameter Cramer Rules, Benigni dan Bossa rulebase dan Kroes TTC decision tree .
Adapun bahan yang dibutuhkan dalam penelitian terdiri atas:
➢ Struktur 2D Senyawa Bisphenol-A
Gambar 1 Struktur 2D Senyawa Bisphenol-A ➢ Struktur 2D Senyawa Phlorogucinol
Gambar 2 Struktur 2D Senyawa Phloroglucinol

## ➢ Struktur 3D Reseptor Estrogen Beta (Er )

## Gambar 3 Struktur 3D Makromolekul Reseptor Estrogen
Begitu  pun  dengan  alat  penunjang  penelitian  terdiri  atas  dua  bagian,  yaitu perangkat keras dan perangkat lunak. Perangkat keras yang digunakan yaitu laptop dengan  spesifikasi  RAM  (Random  Access  Memory)  empat gigabyte (4GB);
Processor ( Intel  Core i3-6006U  CPU  @  2.00GHz  (4  CPUs),  ~@2.0Ghz;  dan sistem operasi Microsoft Windows 10. Sedangkan perangkat lunak yang digunakan adalah BIOVIA  Discovery  Studio 2016; ChemBioDraw 2D  versi  15.0;
ChemBioDraw 3D  versi  15.0; MGL  Tools versi  1.5.6- AutoDockTools versi  4.2.6 dan Toxtree versi 3.1.0.

## Hasil dan Pembahasan

## a) Preparasi Ligan dan Reseptor
Tahap  pertama  dalam  penelitian  ini  yaitu  dilakukannya  preparasi  struktur molekul,  dimana  reseptor  estrogen  beta  (ERβ)  diunduh  pada website rscb.org (Protein Data Bank) dengan kode 3OLS. Kemudian dilakukan penghapusan molekul air  agar  tidak  mengganggu  proses  validasi  dan docking ,  kemudian  dipisahkan reseptor  estrogen  beta  (ERβ)  dengan  ligan  alaminya  agar  mempermudah  proses docking .
Tabel 1 Hasil Preparasi Makromolekul Reseptor Kode Struktur 3 Dimensi Reseptor Estrogen  Beta (ERβ) 3OLS
Selanjutnya  yaitu  preparasi  ligan  yang  dimana  senyawa  uji  yaitu  bisphenol-A dan  phloroglucinol  dilakukan  optimasi  geometri  agar  mendapatkan  konformasi
molekul  yang  stabil  dan  memiliki  energi  potensial  yang  rendah.  Struktur  molekul masing-masing senyawa diperbaiki muatannya dengan menambahkan muatan persial sebelum dilakukan docking. Optimasi ini dilakukan menggunakan software Chem3D Pro 15.0.
Tabel 2 Hasil Optimasi Molekul Senyawa Struktur 2 Dimensi Struktur 3 Dimensi Bisphenol-A
4,4’- (propane-2,2-diyl) diphenol

## Phloroglucinol
b) Validasi Metode Docking
Pada  proses  validasi  ini  dilakukan  dengan  cara  kalkulasi Rate  Mean  Square Deviation (RMSD).    Proses  ini  bertujuan  untuk  memperoleh  metode  yang  cocok untuk  simulasi docking senyawa  uji.  Di  mana  reseptor  estrogen  beta  (ERβ)  akan dipilih sebagai senyawa alaminya untuk dilakukan proses docking . Nilai RMSD yang dapat  diterima  adalah  kurang  dari  2  Angstroms  (<  2Å),  sehingga  memperlihatkan bahwa  metode docking yang  dipakai  dapat  menghasilkan  simpangan  yang  tidak terlalu  besar    Adapun  parameter  validasi  metode docking yaitu  ukuran grid  box , jumlah run , dan maximum number of evals ( short, medium, atau long ).
c) Ukuran Grid Box
Ukuran grid  box yang  digunakan  pada  proses  validasi  metode docking harus dapat menutupi seluruh bagian senyawa ligan alami dan ligan uji agar diperoleh hasil yang  baik.  Dilakukan autogrid dengan  ukuran grid  box (40x40x40)  menggunakan software  MGL  Tools versi  1.5.6  dengan  dilengkapi Autodock  Tools versi  4.2.6 sehingga didapat hasil sebagai berikut:

## Tabel 3 Ukuran Grid Box, Grid Center dan Spasing (Angstrom)
Berdasarkan  Tabel  3.  ukuran grid  box (40x40x40)  didapat  ukuran grid  center yaitu  pada  koordinat  (x,y,z)  26.647;  -23.692;  -10.814  dan spasing 0.375  Å.
Koordinat  tersebut nantinya akan digunakan dalam simulasi docking senyawa uji.
d) Simulasi Hasil Docking
Tahap  selanjutnya  yaitu  dilakukan  simulasi  hasil docking antara  senyawa bisphenol-A dan phloroglucinol terhadap reseptor estrogen beta (ERβ) dengan ukuran grid  box dan  koordinat  yang  sama  pada  saat  melakukan  validasi  metode docking .
Simulasi docking ini  dilakukan  guna  melihat  konformasi  interaksi  senyawa bisphenol-A dan phloroglucinol serta  afinitas  pada  sisi  aktif  reseptor  estrogen  beta (ERβ).
Simulasi docking dilakukan menggunakan software MGL Tools versi 1.5.6 yang dilengkapi dengan Autodock Tools versi 4.2.6 didapat hasil sebagai berikut:

## Tabel 4 Simulasi Hasil Docking
Sementara  interaksi  antara  ligan  dan  reseptor  hasil docking senyawa pembanding  dan  senyawa  uji  terbaik  dalam  bentuk  dua  dimensi  (2D)  dan  tiga dimensi (3D) sebagai berikut:
estrogen beta (ERβ).
Simulasi docking dilakukan menggunakan software MGL Tools versi 1.5.6 yang dilengkapi dengan Autodock Tools versi 4.2.6 didapat hasil sebagai berikut:
Gambar 4

## Interaksi Senyawa Bisphenol-A Dan Phloroglucinol
Terhadap Reseptor Estrogen Beta (Erβ)

## e) Analisis Hasil Docking
Berdasarkan hasil dari simulasi docking yang tertera pada Tabel 4., energi bebas ikatan  (∆G)  yang  didapat  dari  senyawa bisphenol-A sebesar  -7,70  Kcal/mol  dan senyawa phloroglucinol sebesar  -4,67  Kcal/mol.  Dalam  hal  ini  menunjukan  bahwa senyawa bisphenol-A memiliki  ikatan  yang  kuat terhadap  reseptornya  dibandingkan phloroglucinol .  Semakin  kecil  nilai  energi  bebas  ikatan  (∆G)  suatu  senyawa,  maka energi  interaksi  semakin  rendah  dan  ikatan  terhadap  reseptor  akan  semakin  kuat, sehingga dalam kasus ini senyawa tersebut dinyatakan toksik dan sulit terurai dalam tubuh.  Sementara  jika  nilai  energi  bebas  ikatan  (∆G)  suatu  senyawa  tersebut  lebih tinggi maka energi interaksi akan semakin tinggi juga sehingga ikatan antar senyawa dengan  reseptor  akan  sulit  terbentuk  dan  akan  mudah  untuk  terurai  oleh  tubuh. Berdasarkan  uraian  di  atas,  dapat  dipastikan  bahwa bisphenol-A lebih  toksik  dari pada phloroglucinol .
Interaksi kontak residu yang berikatan antara ligan dengan reseptor berdasarkan Gambar  4.  dengan  uraian  masing-masing  residu  yaitu  interaksi  antara  senyawa bisphenol-A berikatan dengan asam amino 305 GLU, 346 ARG, 343 LEU, 356 PHE, 339  LEU,  298  LEU,  302  ALA,  340  MET,  336  MET,  476  LEU  (10  residu)  dan senyawa phloroglucinol berikatan  dengan  asam  amino  298  LEU,  343  LEU,  301 LEU, 339 LEU, 305 GLU, 356 PHE, 302 ALA (7 residu). Analisis ikatan hidrogen dari  hasil  visualisasi  antara  ligan  dengan  reseptor  estrogen  beta  (Erβ),  dapat  dilihat bahwa kedua senyawa memiliki dua interaksi ikatan hidrogen yang ditandai dengan garis putus-putus berwarna hijau. Hal tersebut menunjukan bahwa kedua senyawa uji yaitu bisphenol-A dan phloroglucinol memiliki  aktivitas  yang  baik  dalam  mengikat hidrogen.  Dengan  demikian,  dalam menentukan  afinitas  suatu  senyawa  berdasarkan nilai  terendah  energi  bebas  ikatan  (ΔG)  lebih  diutamakan  daripada  jumlah  ikatan hidrogen.

## f) Parameter Toksisitas

## Tabel 5 Parameter Toksisitas
Penelitian  selanjutnya  dilakukan analisis  toksisitas  senyawa  phloroglucinol  dan bisphenol-A  menggunakan  software  Toxtree  versi  3.1.0.  Pada  analisis  toksisitas  ini menggunakan  3  parameter  yaitu,  cramer  rules,  kroes  TTC  decision  Tree,  dan begigni/bossa  rulerbase.  Cramer  rules    adalah  tingkatan  toksisitas  yang  dinilai  dari gugus fungsi senyawa. Pada parameter ini, senyawa phloroglucinol masuk ke dalam kategori  Low  (Class  I)  yang  dimana  senyawa  Phloroglucinol  diprediksi  memiliki toksisitas  yang  sangat  rendah  (aman),  sedangkan  pada  senyawa  bisphenol-A  masuk ke  dalam  kategori High ( Class III)  yang  di  mana  artinya  senyawa bisphenol-A memiliki potensi toksisitas yang tinggi.
Kroes TTC decision tree adalah parameter  yang  memperkirakan  ambang  batas paparan      dari      senyawa   uji     terhadap     manusia.   Jika      dilihat   dari    hasil    pada Tabel  V.5,  senyawa phloroglucinol dan bisphenol-A masih  berada  di  ambang  batas paparan akan tetapi dengan resiko paparan yang masih rendah.
Selanjutnya  parameter begigni/bossa  rulerbase adalah  parameter  yang memperlihatkan  apakah  senyawa  uji  dapat  menyebabkan  karsinogenik  dan mutagenisitas.  Berdasarkan  hasil  yang  dapat  dilihat  pada  Tabel  5.,  senyawa phloroglucinol dan bisphenol-A menunjukan  hasil  negatif  dan  tidak  dapat menyebabkan karsinogenik dan mutagenisitas.

## Kesimpulan
Penelitian  ini  telah  berhasil  dilakukan  uji in  silico guna  melihat  afinitas  dari senyawa phloroglucinol dan bisphenol-A terhadap  reseptor  estrogen  beta  (ERβ). Berdasarkan  hasil  simulasi docking menunjukan  bahwa  nilai energi  bebas  ikatan  (∆G) phloroglucinol terhadap  reseptor  estrogen  beta  (ERβ)  sebesar  -4,67  Kcal/mol  dan bisphenol-A terhadap  reseptor  estrogen  beta  (ERβ)  sebesar  -7,70  Kcal/mol.  Hasil tersebut menunjukkan bahwa senyawa phloroglucinol memiliki afinitas yang lebih kecil dari pada bisphenol-A terhadap reseptor estrogen beta (ERβ), juga hasil dari parameter cramer  rules yang  menunjukkan  bahwa  senyawa phloroglucinol masuk  ke  dalam kategori Low ( Class I) dibandingkan dengan bisphenol-A yang masuk ke dalam kategori High ( Class III).

## 5.5. Parameter Toksisitas
Begign / Bossa Rulerbase carsinogenecity Negative for genotoxic and non-genotoxic concern Negative for genotoxic and non-genotoxic
Berdasarkan  hasil  dari  dua  pengujian  tersebut,  dapat  disimpulkan  bahwa  senyawa phloroglucinol memiliki tingkat keamanan yang lebih tinggi dibandingkan bisphenol-A , sehingga  senyawa phloroglucinol dapat  dilakukan  pengujian  toksisitas in  vivo di laboratorium  guna  mendapatkan  hasil  yang  lebih  akurat  sebagai  alternatif  bahan  baku plastik yang aman bagi kesehatan khususnya terhadap kaum wanita.

## BIBLIOGRAFI
Dwipratama,  Gisantya  Nuansa,  &  Effendi,  Diar  Herawati.  (2017).  Perbandingan  Uji Afinitas  Reseptor  Estrogen  terhadap  Bisphenol-A  dan  Phloroglucinol  dari Sargassum duplicatum dengan Metode In silico. Prosiding Farmasi , 53–60.
Foloppe,  Nicolas,  &  Chen,  I.  Jen.  (2009).  Conformational  sampling  and  energetics  of drug-like molecules. Current Medicinal Chemistry , 16 (26), 3381–3413.
Kesuma,  Dini,  Purwanto,  Bambang  Tri,  &  Hardjono,  Suko.  (2018).  Uji  in  silico aktivitas  sitotoksik  dan  toksisitas  senyawa  Turunan  N-(Benzoil)-N’-feniltiourea sebagai  calon  obat  antikanker. Journal  of  Pharmaceutical  Science  and  Clinical Research , 3 (1), 1–11.
Kim, Se Kwon. (2014). Handbook of anticancer drugs from marine origin . Springer.
Lazennec,  Gwendal,  Bresson,  Damien,  Lucas,  Annick,  Chauveau,  Corine,  &  Vignon, Françoise.  (2001).  ERβ  inhibits  proliferation  and  invasion  of  breast  cancer  cells. Endocrinology , 142 (9), 4120–4130.
Le, Hoa H., Carlson, Emily M., Chua, Jason P., & Belcher, Scott M. (2008). Bisphenol A  is  released  from  polycarbonate  drinking  bottles  and  mimics  the  neurotoxic actions  of  estrogen  in  developing  cerebellar  neurons. Toxicology  Letters , 176 (2), 149–156.
Maryawan, Irman, Effendi, Diar Herawati, & Fakih, Taufik Muhammad. (2020). Uji In Silico  Reaktivitas  Reseptor  NMDA  (N-Metil-D-Aspartat)  Ensefalitis  terhadap Hidroksiprolin. Prosiding Farmasi , 6 (2), 872–878.
Motiejunas,  D.,  &  Wade,  R.  C.  (2007). Structural,  energetic,  and  dynamic  aspects  of ligand–receptor interactions .
Mulyani,  Nina  Siti.  (2013).  Menopause  akhir  siklus  menstruasi  pada  wanita  di  usia pertengahan. Yogyakarta: Nuha Medika , 10 .
Samee,  Haider,  Li,  Zhen  xing,  Lin,  Hong,  Khalid,  Jamil,  &  Guo,  Yong  chao.  (2009). Anti-allergic effects of ethanol extracts from brown seaweeds. Journal of Zhejiang University Science B , 10 (2), 147–153.
Schneider, Gisbert, & Baringhaus, Karl Heinz. (2008). Molecular design: concepts and applications .
Stiger-Pouvreau,  Valérie,  Jegou,  Camille,  Cerantola,  Stéphane,  Guérard,  Fabienne,  & Le  Lann,  Klervi.  (2014).  Phlorotannins  in  Sargassaceae  species  from  Brittany (France): Interesting molecules for ecophysiological and valorisation purposes. In Advances in botanical research (Vol. 71, pp. 379–411). Elsevier.

## Copyright holder:
Diar Herawati, A.A Hidayat, Amir Musadad (2022)
First publication right: Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: