## Research Article
Effect of Mindi Leaf Powder ( Melia azedarach L ) on Mortality of

## Anopheles aconitus Instar III Larvae
Tajudin Rahmat Surya Atmaja 1 , Kanti Ratnaningrum 2 , Yanuarita Tursinawati 3
1,2,3) Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Semarang

## Abstract
Background: Malaria is a disease caused by Plasmodium parasite infection wwhich is transmitted through bite of an Anopheles mosquito. Efforts to control malaria can be carried out in various ways, starting from treatment, prevention, to breaking the transmission chain through vectors, both mosquitoes and larvae. Mindi tree contains Azadiractin compounds which are larvicides. Study aims to determine effect of mindi leaf powder (Melia azedarach L) on mortality of Anopheles aconitus instar III larvae.
Methods: A true experimental study with a post test only control group design, the object of research was Anopheles aconitus Instar III larvae. The research was conducted at Laboratory of Parasitology, Faculty of Medicine, Universitas Islam Sultan Agung, Semarang. 20 larvae / 100 ml were used. Air temperature and water pH were controlled during observation. Assessment by counting number of mortality larvae and the number of live larvae from each treatment was compared to the control. The data obtained were analyzed by the Kruskal-Wallis statistical test. The LD 50 and LD 90 were analyzed using Probit analysis.
Results: The dose of 0.2 g/100 ml was the minimum dose that killed 100% of larvae of Anopheles aconitus (p = 0.01). In the probit test, LD50 was 0.01 g/100 ml of aquades, while LD90 was 0.06 gram/ 100 ml of aquades.
Conclusion: Dose can served as larvicidal (LD90 )was 0.06 g/100 ml of aquades., while LD50 was 0.01 g/100 ml of aquades.
Keywords: Malaria, Anopheles aconitus, mindi leaf, larvicides.
Correspondence: kantiratna@ymail.com

## PENDAHULUAN
Malaria  merupakan  penyakit  yang  disebabkan infeksi parasit Plasmodium yang ditularkan melalui gigitan  nyamuk  Anopheles.  Empat  jenis Plasmodium  yang  mampu  menginfeksi  manusia yaitu  Plasmodium  falciparum,  Plasmodium  vivax, Plasmodium  malariae,  dan  Plasmodium  ovale.  Malaria merupakan penyakit yang masih menjadi masalah kesehatan  dan  masih  sering  menimbulkan Kejadian Luar Biasa (KLB) di ebberapa wilayah. 1,2
Berbagai upaya menutusan rantai penularan melalui vektor  baik  nyamuk  maupun  larva  sudah  terus dilakukan,  namun  apliaksinya  masih  banyak menemui  kendala.  Penelitian  terdahulu  telah ditemukan  larvasida  sintetik  pembunuh  larva malaria,    tapi  setelah  beberapa  lama  tumbuh kekebalan dalam tubuh larva. Selain itu, larvasida ini masih  terdapat kendala  seperti  harga yang  mahal dan  tidak  dapat  didegradasi  oleh  alam  yang menyebabkan  pencemaran  lingkungan  sehingga
dibutuhkan  larvasida  alami  yang  aman  bagi lingkungan. 3
Pohon  mindi  atau  geringging  atau  biasa  disebut Melia  azedarach  merupakan  jenis  pohon  yang tumbuh di daerah tropis dan sub-tropis, dan dapat tumbuh  pada  berbagai  tipe  tanah.  Di  Indonesia, tanaman ini dapat ditemukan di daerah Sumatera, Jawa, Nusa Tenggara dan Irian Jaya. Daun mindi dikenal  sebagai  pestisida  nabati. 4,5 Pestisida  nabati bersifat  hit  and  run  yaitu  bila  diaplikasikan  akan membunuh  hama  pada  waktu  itu  dan  residunya cepat  menghilang  di  alam.  Senyawa  Azadiractin yang terdapat di dalam daun, buah, dan biji dapat menghambat  pertumbuhan  dan  membunuh serangga  sehingga  dapat  digunakan  sebagai larvasida. 6, 7
Berdasarkan  penelitian  oleh  Sulistiyawati  tahun 2000,  ekstrak  etanol  daun  mindi  meningkatkan mortalitas  larva  Aedes  aegypti,  konsentrasi  0,05% ekstrak  etanol  daun  mindi  dapat  menurunkan pertumbuhan  serta  perkembangan  larva  Aedes aegypti. 7 Penelitian  yang  menganalisa  efek  daun mindi  terhadap  larva  nyamuk  Anopheles  belum pernah  dilakukan,  oleh  karena  itu,  peneliti  ingin melakukan penelitian untuk mengetahui mengetahui efek serbuk daun mindi (Melia azedarach L) terhadap kematian larva Anopheles aconitus instar III.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  yang  dilakukan  menggunakan  jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan post  test  only  control  grup  design.  Populasi  dalam penelitian  ini  adalah  larva  Anopheles  aconitus  yang
didapatkan dari hasil penetasan oleh Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan  Agung  Semarang.  Waktu  pelaksanaan penelitian adalah pada bulan Oktober 2015. Sampel dalam penelitian ini adalah larva Anopheles aconitus instar  III  (umur  6-7  hari).  Penelitian  ini menggunakan larva sebanyak 20 ekor/ 100 ml.
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  mempersiapkan serbuk  daun  mindi  dan  mempersiapkan  larva Anopheles aconitus instar III. Penelitian pendahuluan dilakukan  untuk  menentukan  uji  inti  larvasida. Penelitian pendahuluan daun mindi dimulai dengan dosis 1,4; 1,3; 1,2; 1,1; 1; 0,8; 0,6; 0,4; 0,2 gr/ 100ml diturunkan    hingga  mencapai  dosis  minimum LD 100 .  Masing-masing  dimasukkan  ke  dalam mangkok plastik yang berisi aquades 100 ml. Untuk kontrol,  mangkok  plastik  diisi  aquades  100  ml. Masukkan  larva  sebanyak  20  ekor  pada  masing- masing perlakuan. Suhu udara dan pH air diukur dan  dicatat  selama  percobaan  berlangsung. Pengamatan  larva  dilakukan  setelah  24  jam  dan dihitung  jumlah  yang  mati.  Dosis  minimal  yang dapat  mematikan  seluruh  larva  LD 100 dicari  dan digunakan sebagai patokan dalam uji inti. Setelah mendapatkan  dosis  minimal  LD 100 lakukan penelitian inti larvasida. Berbagai dosis serbuk daun mindi disediakan mulai dari dosis LD 100 sesuai hasil penelitian pendahuluan yang diturunkan dosisnya secara bertahap sampai ditemukan dosis yang tidak dapat  membunuh  larva.  Berbagai  dosis  serbuk daun  mindi  tersebut  dimasukkan  ke  dalam mangkuk plastik masing-masing dan ditambah air sampai  100  ml.  Kelompok  kontrol  berisi  air sebanyak  100  ml  tanpa  pemberian  serbuk  daun
mindi. Pengamatan larva dilakukan setelah 24 jam, kemudian dicatat jumlah larva yang mati, sehingga akan diperoleh data jumlah larva yang mati pada setiap mangkuk dan percobaan diulang sebanyak tiga  kali.  Menentukan  LD 50 dan  LD 90 setelah perlakuan dengan analisis uji probit.
Data yang diperoleh dalam penelitian ini dianalisis menggunakan  uji  statistik  komparatif  rerata variabel numerik untuk lebih dari 2 kelompok tidak berpasangan. Analisis data dilakukan uji normalitas dengan  Shapiro-Wilks  dengan  hasil  data  tidak normal.  Analisis  dilanjutkan  dengan  uji  Kruskal- Wallis dengan signifikansi > 0,05 dan CI 95%. Analisis
Probit  dilakukan  untuk  menganalisis  LD 50 dan LD 90 .

## HASIL PENELITIAN

## Uji Pendahuluan.
Penelitian  pendahuluan  ini  pada  setiap  dosis pengulangan  menggunakan  20  ekor  larva,  pH  7, suhu  25 0 C.  Pada  dosis  0,2gr/100ml  merupakan dosis minimum yang dapat membunuh 100% larva Anopheles aconitus, dimana dari 0,2 gr/100ml akan diturunkan  dosisnya  secara  bertahap  untuk mendapatkan LD50 dan LD90 (tabel 1).
Tabel  1. Uji pendahuluan serbuk daun mindi terhadap Anopheles aconitus setelah 24 jam
jumlah Kematian larva tiap dosis ( gram/100ml ) Kontrol  1,4 1,3 1,2 1,1 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,1 ∑ 0 20 20 20 20 20 20 20 20 20 19 % 0 100  100  100  100  100  100  100  100  100 95 ∑:  Jumlah kematian larva Tabel  2. Uji larvasida serbuk daun mindi terhadap Anopheles aconitus setelah 24 jam Ulangan Kematian larva tiap dosis ( gram/100ml ) Kontrol  0,01  0,02  0,03  0,04  0,05  0,06  0,07  0,08  0,09  0,1 0,2 1 0 14 15 16 17 17 18 19 19 20 20 20 2 0 14 14 15 19 17 18 18 18 19 19 20 3 0 13 15 16 14 18 19 17 19 19 20 20 ∑ 0 41 44 47 50 52 55 54 56 58 59 60 X 0 13.7 14.7  15.7  16.7  17.3  18.3  18  18.7  19.3  19.7  20 s% 0 68.3 73.3  78.3  83.3  86.7  91.7  90 93.3  96.7  98.3  100
∑: jumlah kematian larva, X: rata-rata kematian larva, s%: persentase kematian seluruh pengulangan

## Uji Larvasida.
Uji ini menggunakan 20 ekor larva/100ml, pH 7, suhu 25 0 C, menggunakan dosis serbuk daun mindi
sebesar 0,2 gr; 0,1 gr; 0,09 gr; 0,08 gr; 0,07 gr; 0,06 gr; 0,05 gr; 0,05 gr; 0,04 gr; 0,03 gr; 0,02 gr, 0,01 gr. Tabel  2  menunjukan  bahwa  serbuk  daun  mindi pada dosis 0,2 gr dapat membunuh larva Anopheles aconitus dengan rata-rata jumlah kematian larva 20
ekor dan persentase kematian larva sebesar 100%. Sedangkan  pada  kontrol  tidak  dapat  membunuh larva  Anopheles  aconitus  dengan  rata-rata  jumlah kematian  0  ekor  dan  persentase  kematian  larva sebesar 0%.

## Uji Normalitas.
Hasil  uji  normalitas  menggunakan  Shapiro-wilk menunjukan  bahwa  tidak  semua  kelompok
memiliki nilai p>0,05 sehingga sebaran data tidak normal.  Analisi  dilanjutkan  dengan  uji  Kruskall- Wallis.

## Uji Kruskall-Wallis.
Hasil  uji  Kruskall-Wallis  diperoleh  nilai  p=0.001 (p<0.05), yang dapat diartikan terdapat perbedaan rata-rata  jumlah  kematian  larva  pada  masing- masing kelompok perlakuan (tabel 3).
Tabel 3. Hasil Uji Kruskall-Wallis Dosis serbuk daun mindi (g/100 ml) N Median (min – maks) p Kontrol 3 0 (0 – 0)
0,001 0,01 3
14 (13 – 14) 0,02 3 15 (14 – 15) 0,03 3 16 (15 – 16) 0,04 3 17 (14 – 19) 0,05 3 17 (17 – 18) 0,06 3 18 (18 – 19) 0,07 3 18 (17 – 19) 0,08 3 19 (18 – 19) 0,09 3 19 (19 – 20) 0,10 3 20 (19 – 20) 0,20 3 20 (20 – 20) Tabel 4. Hasil Uji Probit Probabilitas CI 95% Estimasi Terendah Tertinggi 0,50 0,01 0,01 0,02 0,90 0,06 0,05 0,07
Pada  uji  probit  (tabel  4)  diketahui  bahwa  dosis serbuk  daun  mindi  yang  dapat  membunuh  50% larva Anopheles aconitus ( LD 50 ) adalah 0.01 gram/
100  ml  aquades,  sedangkan  dosis  serbuk  daun mindi yang dapat membunuh 90% larva Anopheles aconitus (LD 90 ) adalah 0.06 gram/ 100 ml aquades.

## PEMBAHASAN
Pada penelitian ini, dilakukan uji pendahuluan dan diketahui bahwa pada dosis terendah yaitu 0.2 gram kematian larva mencapai 100%. Untuk kelompok kontrol  tidak  terdapat  kematian  larva  Anopheles aconitus, hal ini membuktikan bahwa kematian larva Anopheles  aconitus  pada  kelompok  perlakuan disebabkan  oleh  serbuk  daun  mindi,  bukan  oleh aquades  atau  variabel  pengganggu.  Setelah  itu dilakukan uji inti dengan pengulangan sebanyak 3 kali dan didapatkan hasil bahwa serbuk daun mindi pada  dosis  terendah  yakni  0.2  gram  dapat membunuh seluruh larva Anopheles aconitus dengan persentase 100%.
Hal ini berbeda dengan penelitian terdahulu yang dilakukan oleh Risky Ika Riani (2006)  mengenai daya larvasida menggunakan serbuk daun mimba terhadap  larva  Anopheles  aconitus  instar  III  yang membuktikan bahwa dosis 0.04 gram sebagai dosis minimum yang mulai dapat membunuh larva dan 1.1  gram  sebagai  dosis  minimum  yang  dapat membunuh  seluruh  larva, 3 sedangkan  pada penelitian  ini  diketahui  bahwa  dosis  yang  dapat membunuh  seluruh  larva  adalah  0,2  gram.  Dari hasil penelitian  ini,  diketahui  bahwa  serbuk  daun mindi dengan konsentrasi yang lbh rendah sudah membunuh  larva  Anopheles  aconitus  instar  III daripada serbuk daun mimba.
Perbedaan  hasil  penelitian  ini    kemungkinan disebabkan  oleh  berbagai  faktor  yaitu  jenis  larva seperti larva aedes aegepty, larva culex, larva psorophora; jenis  sediaan    larvasida  seperti    granul,  ekstrak, larutan;  dan  jenis  tanaman  seperti  bawang  putih, sirsak, srikaya yang dipakai untuk perlakuan, ketiga
hal  ini  merupakan  faktor-faktor  yang  dapat mempengaruhi kekuatan atau daya larvasida. 3

## SIMPULAN
Dosis  serduk  daun  mindi  yang  dapat  berfungsi sebagai larvasida LD 90 adalah 0.06 gram/ 100 ml aquades, sedangkan LD 50 adalah 0.01 gram/ 100 ml aquades.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Zulkoni  A.  Parasitologi.  Yogyakarta:  Nuha Medika. 2011
2. Rahmadiliyani  N,  Noralisa.  Correlation Between  the  application  of  Insecticide  Bed Net  (IBN)  and  Malaria  in  Teluk  Kepayang Village,  Kusan  Hulu  Subdistrict  Tanah Bumbu District in 2013;4(3):128-32.
3. Riani RI. Pengaruh Pemberian Serbuk Daun Mimba terhadap Kematian Larva Anopheles aconitus di Laboratorium. [Skripsi]. Semarang: Fakultas  Kedokteran  Universitas  Sultan Agung; 2007.
4. Utami  P.  Buku  Pintar  Tanaman  Obat  431 Jenis Tanaman Penggempur aneka Penyakit. Jakarta: PT. AgroMedia Pustaka; 2008.
5. Dalimartha  S.  Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia Jilid 3. Jakarta: Trubus Agriwidya; 2007.
6. Hariana  A.  Tanaman  Obat  dan  Khasiatnya. Jakarta: Penebar Swadaya; 2006.
7. Sulistyawati  E.  Pengaruh  Ekstrak  Etanol Daun  Mindi  (M  azedarach)  terhadap Mortalitas,  Petumbuhan  dan  Perkembangan Populasi  Larva  Aedes  aegypti.  [Skripsi].
Semarang:  Fakultas  MIPA  Universitas Diponegoro; 2000.
8. Wardlaw,  G.M.,  &  Hampl,  J.S.  (2007). Perspectives in Nutrition ed. New york: Mc
Graw Hill