Jurnal Pro-Life, Volume 10 Nomor 1, Maret 2023
Uji Aktivitas Antikoagulan pada Sel Darah Manusia dari Ekstrak Bawang Bombai (Allium cepa L.)
Fany Febriani 1* , Junius Hardy 2 , Riskianto 1
1 Program Studi D-III Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Pelita Harapan, Tangerang 2 Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Pelita Harapan, Tangerang * Corresponding author : fany.febriani@uph.edu

## Article History
Received    :   09 January 2023 Approved   :   7 March 2023 Published   :  31 March 2023

## Keywords
Allium cepa L., anticoagulant, blood cell, onion extract

## ABSTRACT
Thromboembolic  disorders  can  cause  various  life-threatening cardiovascular  diseases.  Anticoagulants  are  the  most  common treatment  for  thromboembolic  disorders.  Organosulfur  compounds in  onions,  such  as  allicin  and  flavonoid  compounds,  have anticoagulant  properties.  The  purpose  of  this  study  is  to  test  the anticoagulant  activity  of  onions  extracted  by  maceration  method using  96%  ethanol  as  a  solvent.  The  anticoagulant  test  was performed  on  samples  of  blood  groups  A,  B,  AB,  and  O  using  the Lee-White  method.  Six  tubes  were  filled  with  1  cc  of  each  blood sample  with  treatments  including  control  (without  treatment), negative  control  (96%  ethanol),  positive  control  (EDTA),  and variation of extract concentrations 5; 7.5; 10%.  The results of 96% ethanol  extract  of  Onion  (Allium  cepa  Linnaeus)  using  the maceration  method  contains  secondary  metabolites  including flavonoids,  saponins,  and  phenols.  The  onion  extract  had  a significant  mean  difference  (p  <  0.05)  with  the  EDTA  positive control group and did not produce a significant mean difference (p >  0.05)  with  the  untreated  group,  so  the  onion  extract  with  a concentration  of  5;  7.5;  10%  extracted  with  96%  ethanol  solvent using maceration method had no anticoagulant activity. Blood type
A,  B,  AB,  and  O  did  not  have  a  significant  difference  in  the  mean blood clotting time with a value of P = 0.504 (p > 0.05).

## PENDAHULUAN
Gangguan tromboemboli
mempengaruhi  jutaan  orang  di  seluruh dunia dan menyebabkan morbiditas dan
mortalitas  di  negara-negara  dunia  (Al- Saadi, 2013).

## Prolife

## Jurnal Pendidikan Biologi, Biologi, dan Ilmu Serumpun
https://ejournal.uki.ac.id/index.php/prolife
© 2023 Universitas Kristen Indonesia Under the license CC BY-SA 4.0
Gangguan tromboemboli dapat menyebabkan  berbagai  macam  masalah penyakit  yang  serius  pada  tubuh  dan berpotensi mengancam jiwa, seperti penyakit  kardiovaskular  meliputi  emboli paru  dan  infark  miokard  (Al-Saadi,  2013; Devi et  al. ,  2018;  Octaviani  &  Kurniawan, 2015).  Selain  itu,  gangguan  tromboemboli juga  dapat  menyebabkan  stroke  iskemik (Roveny,  2015).  Pada  stroke  iskemik,  20% penyebabnya  adalah  kardioemboli  yang cenderung  bermanifestasi  lebih  berat, berisiko tinggi untuk berulang, dan memiliki  mortalitas  yang  lebih  tinggi (Roveny,  2015).  Menurut The  Institute  for Health  Metrics  and  Evaluation (IHME)
(2019),  penyebab  kematian  tertinggi  di Indonesia  pada  tahun  2017  adalah  stroke pada  urutan  pertama  dan  diikuti  oleh penyakit  jantung  koroner  pada  urutan kedua.  Penyebab  utama  dari  gangguan tromboemboli  adalah  terjadinya  peristiwa trombosis yang berkaitan dengan terganggunya  mekanisme  pada  pembekuan darah atau koagulasi (Katzung et al., 2018).
Bawang-bawangan telah banyak dimanfaatkan masyarakat Indonesia sebagai bahan makanan dan masakan, serta sebagai obat  atau  jamu  untuk  mengobati  gejala  flu dan  batuk  pada  benua  Amerika  dan  negara Cina. Bawang juga dikonsumsi  masyarakat sebagai  upaya  dalam  pencegahan  dari penyakit  kardiovaskular  karena  bawang memiliki  khasiat  dalam  sirkulasi  darah,
dimana  dapat  memperlancar  sirkulasi  atau peredaran  darah  (Kumar et  al. ,  2010). Bawang-bawangan,  seperti  bawang  merah, bawang  putih,  dan  bawang  bombai, termasuk dalam genus allium yang diketahui  memiliki  senyawa  aktif  biologis yang dapat mempengaruhi proses pembekuan  darah  (Taj et  al. ,  2011). Bawang  bombai  adalah  salah  satu  jenis bawang-bawangan  yang  memiliki  daging yang  tebal  dengan  bentuk  bulat  besar. Bawang bombai di Indonesia masih banyak didapatkan  dari  luar  negeri  atau  impor, Salah  satu  bawang  bombai  yang  banyak beredar di Indonesia adalah bawang bombai dari negara Selandia Baru (Pakekong et al. , 2016).
Antikoagulan adalah pengobatan yang paling umum untuk penyakit tromboemboli,  baik  akut  maupun  kronis (Erlanda & Karani, 2018). Pasien kardiovaskuler  dengan  gangguan  sirkulasi darah  diberikan  antikoagulan,  yaitu  jenis obat  yang  dapat  menurunkan  risiko blood clots atau gumpalan darah dengan menghambat fungsi beberapa faktor pembekuan  darah  (Devi et  al. ,  2018). Heparin, antagonis vitamin K, dan turunannya telah digunakan sebagai antikoagulan selama lebih dari lima dekade dan  digunakan  dalam  pengobatan  klinis (Al-Saadi,  2013).  Terlepas  dari  kenyataan bahwa heparin memiliki sejarah penggunaan yang panjang sebagai
antikoagulan,  penggunaan  heparin  telah terbukti  menghasilkan  perdarahan  sebagai efek  samping  dalam  studi  klinis.  Efek negatif utama dari semua antikoagulan oral, menurut  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  (BPOM)  adalah  perdarahan (BPOM RI, 2015).
Bawang bombai mengandung senyawa metabolit sekunder berupa flavonoid,  saponin,  fenol,  dan  triterpenoid berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Ladeska, et  al. (2020)  terhadap  ekstrak etanol  70%  bawang  bombai.  Selain  itu, bawang  bombai  mengandung  senyawa alisin yang kadarnya lebih rendah dibandingkan  bawang  putih  (Botanical, 2019).  Khasiat  anti  pembekuan  darah  dari bawang  diyakini  terkait  dengan  senyawa organosulfur  dalam  bawang,  khususnya alisin  (Imelda  &  Kurniawan,  2013). Mekanisme  anti  trombotik  dari  senyawa alisin  yaitu  bekerja  sebagai  penghambat agregasi  platelet  pada  darah  dan  memiliki mekanisme  kerja  yang  meyerupai  asam asetilsalisilat  yaitu  sebagai  antikoagulan yang  dapat  mengurangi  pembekuan  darah (Tattelman, 2005).
Molekul alisin dapat mencegah penyakit  jantung  dan  hipertensi.  Aksi antikoagulan  pada  bawang  bombai  juga diketahui  berasal  dari  senyawa  flavonoid selain  dari  komponen  alisin  (Imelda  & Kurniawan, 2013; Patrick et al. , 2018).
Pelarut yang digunakan dalam ekstraksi  adalah  pelarut  dengan  tingkat kepolaran  yang  sama  dengan  kepolaran senyawa  yang  diinginkan.  Pelarut  etanol digunakan untuk menarik senyawa flavonoid, berdasarkan kecenderungan pelarut  dalam  melarutkan  senyawa  dengan tingkat  kepolaran  yang  sama  atau  dikenal dengan  prinsip like  dissolves  like .  Pelarut etanol  digunakan  salam  ekstraksi  senyawa organosulfur  pada  bawang  bombai  dapat menarik  senyawa  alisin  yang  berperan dalam zat antikoagulasi (Imelda & Kurniawan, 2013).
Metode Lee-White merupakan metode  yang  digunakan  untuk  melihat waktu  pembekuan  darah  yang  sederhana dan  dapat  menentukan  waktu  pembekuan darah  dengan  pengamatan  secara  visual berdasarkan masa pembekuan darah normal.  Beberapa  penelitian  mengenai aktivitas antikoagulan yang dilakukan pada beberapa jenis tumbuhan bawang yaitu sari bawang  putih  ( Allium  sativum L.)  tidak menghasilkan gumpalan darah pada metode Lee-White  dan  menghasilkan  profil  sel darah  merah  yang  tidak  saling  berikatan pada  metode  apusan  darah  (Rahmawati et al. ,  2018).  Ekstrak  air  bawang  bombai merah  dapat  menghambat  pembentukan gumpalan  darah  dan  meningkatkan  waktu prothrombin  (Taj et  al., 2011).  Ekstrak etanol  dari  bawang  bombai  putih  yang diujikan  pada  darah  tikus  meningkatkan
waktu  pembekuan  sebesar  dua  hingga  tiga kali  lebih  besar.  Selain  itu,  penelitian  yang dilakukan  oleh  Okeke et  al. ,  (2018), didapatkan  hasil  bahwa  nilai Activated Partial  Thromboplastin  Time (APTT)  dan
Prothrombin  Time (PT)  berbeda  antara variasi  golongan darah dan golongan darah mempengaruhi mekanisme koagulasi instrinsik dan ekstrinsik.
Penelitian  ini  bertujuan  menguji aktivitas  antikoagulan  dari  bawang  bombai yang diekstraksi dengan pelarut etanol 96% dan metode maserasi menggunakan metode Lee-White  yang  diujikan  kepada  variasi golongan  darah  yang  berbeda  yaitu  A,  B, AB, dan O.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini  adalah   bawang bombai yang diimpor  dari  Selandia  Baru  dan  dibeli melalui e-commerce , etanol 96%, magnesium (Mg), EDTA
(Ethylenediaminetetraacetic  Acid),  HCl, amil  alkohol,  HCl  2N,  pereaksi  mayer, pereaksi dragendroff, pereaksi  bourchardat, FeCl 1%, gelatin 10%,  kloroform, pereaksi Liebermann  burchard,  dan  10  cc  sampel darah golongan A, B, AB, dan O.
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  penangas  air  “MEMMERT”, Mikropipet “SOCOREX”, Blender
“FOMAC”, timbangan analitik “OHAOUS”, stopwatch “ALBA”, Vacuum Rotary  Evaporator “HEIDOLPH”, Hot Plate Stirrer “HEIDOLPH”.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  dengan metode  eksperimental  yang  merupakan penelitian true  experimental  laboratories yaitu  penelitian  untuk  menguji  aktivitas antikagulan ekstrak bawang bombai dengan metode  Lee-White.  Metode  Lee-White merupakan  metode  yang  dapat  mengetahui waktu  pembekuan darah ( Clotting Time )  di dalam  tabung  yang  diamati  secara  visual berdasarkan  masa  pembekuan  normal (Rahmawati et  al. ,  2018).  Penelitian  ini terdiri  dari  tiga  tahap  penelitian,  yaitu pembuatan ekstrak bawang bombai, penapisan  fitokimia,  dan  uji  aktivitas antikoagulan ekstrak bawang bombai dengan metode Lee-White.
Pembuatan Simplisia dan Ekstrak
Bawang bombai dipotong-potong kecil  dan  keringkan  pada  suhu  kamar. Irisan  dihancurkan  menjadi  bubuk  halus setelah  benar-benar  kering.  Selama  3×24 jam, serbuk halus bawang bombai dimaserasi  dalam  1L  etanol  96%  dan diaduk-aduk  sesekali,  lalu  disaring  dengan menggunakan kertas saring. Hasil maserasi diuapkan dengan vacuum rotary evaporator pada  kecepatan  putaran  80  rpm  pada  suhu 40°C. Ekstrak dikentalkan dengan
menggunakan  penangas  air  dan  disimpan ke dalam lemari es (Pakekong et al. , 2016).
Penapisan Senyawa Fitokimia
Uji senyawa fitokimia meliputi identifikasi  senyawa  flavonoid,  alkaloid, tanin, fenol, saponin, dan steroid/triterpenoid  menurut  metode  uji Harborne (1987).

## Pembuatan Konsentrasi Ekstrak
Ekstrak bawang bombai dibuat menjadi  larutan  stok  dengan  konsentrasi 10%  dalam  50  ml.  Larutan  stok  digunakan
untuk  membuat  seri  ekstrak  dengan konsentrasi  5%;  7,5%;  10%  dalam  10  ml mengacu  pada  penelitian  Rahmawati et  al.
(2018)  dengan  sedikit  modifikasi  pada konsentrasi yang digunakan.

## Penyiapan Sampel Darah
Sukarelawan  sebanyak  empat  orang yang  telah  mengisi  formulir informed consent diambil  darahnya  melalui  vena kubiti sebanyak 10 ml menggunakan needle wings 23  G  dan spuit  disposable 10  cc. Masing-masing sukarelawan mewakili sampel  golongan  darah  A,  B,  AB,  dan  O.
Uji Antikoagulan Metode Lee-White
6 tabung reaksi disiapkan, lalu tabung diisi dengan kriteria sebagai berikut: Tabung 1 (Darah Kontrol) :  1  ml  darah.
Tabung 2 (Kontrol Negatif)  :  1  ml  darah dan 100 μl etanol 96%. Tabung 3 (Kontrol Positif) :  1  ml  darah  dan  1  mg  EDTA. Jumlah  antikoagulan  yang  dibutuhkan
adalah  mg  1-2  mg/1  ml  darah  (Rahmawati et  al. ,  2018).  Tabung  4  (Uji  Sampel  1)  :  1 ml  darah  dan  100  μl  konsentrasi  ekstrak 5%. Tabung 5 (Uji Sampel 2) :  1  ml  darah dan  100  μl  konsentrasi  ekstrak  7,5%. Tabung 6 (Uji Sampel 3) :  1  ml  darah dan  100  μl  konstrentrasi  ekstrak  10%.
Tabung  diletakkan  pada  waterbath dengan  suhu  37°C  dan stopwatch mulai dijalankan saat tabung dicelupkan ke dalam waterbath .  Tabung  diamati  setiap  30  detik dengan dimiringkan 45°.
Waktu
pembekuan  darah  dimulai  ketika  saat tabung  dimiringkan,  hingga  sampai  darah
tidak  dapat  ditumpahkan  lagi  atau  darah sudah  terbentuk  gumpalan  darah.  Waktu pembekuan  berdasarkan  masa  pembekuan darah  normal  adalah  sekitar  3  sampai  18 menit (Farlex, 2012; Bithell, 1993).

## Analisis Data
Uji  hipotesis  komparatif  dilakukan dengan One-Way  Analysis  of  Variance ( One-Way ANOVA)  dilanjutkan  dengan Student  T-Test jika  data  terdistribusi normal. Jika data tidak terdistribusi normal,
digunakan  uji  Kruskal-Wallis,  dilanjutkan dengan  uji  Mann-Whitney.  Analisis  juga dilakukan  dengan  metode  korelasi  Pearson jika data terdistribusi normal atau menggunakan analisa non-parametrik Spearman  jika  data  tidak  terdistribusi
normal.  Analisis  data  digunakan  pada tingkat signifikansi 0,05 (Dahlan, 2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ektraksi dan Penapisan Senyawa Fitokimia Ekstrak Bawang Bombai
Pembuatan  simplisia  bawang  bombai dari 1500 g bawang bombai segar diperoleh 135,5166  g  simplisia  kering.  100  g simplisia kering bawang bombai diekstraksi dengan  pelarut  etanol  96%  dengan  metode maserasi  menghasilkan  ekstrak  kental sebanyak  48,9628  g  dengan  rendemen sebesar  48,96%  seperti  pada Tabel  1 . Metode  maserasi  dipilih  karena  merupakan metode yang paling sederhana jika dibandingkan  dengan  metode  ekstraksi lainnya.  Pelarut  etanol  digunakan  karena pelarut  etanol  merupakan  pelarut  yang aman berdasarkan rekomendasi Departemen  Kesehatan,  inert  atau  tidak bereaksi  dengan  komponen  lain,  dan memiliki  titik  didih  yang  rendah,  sehingga tidak  memerlukan  pemanasan  yang  tinggi
untuk  menguapkan  pelarut  dalam  ekstrak. Pelarut  etanol  juga  dapat  menarik  senyawa polar  dan  nonpolar  dengan  maksimal karena  etanol  memiliki  gugus  alkil  (CH 3 - CH 2 ) yang bersifat nonpolar dan gugus -OH yang  bersifat  polar  (Shofa,  2020).  Pelarut etanol sendiri dapat menarik senyawa polar dalam umbi bawang bombai yaitu senyawa flavonoid  yang  diketahui  berperan  pada proses  antikoagulan  (Patrick et  al. ,  2018; Weliyani et al. , 2015).
Pelarut  etanol  dan  metode  maserasi cocok  untuk  menarik  senyawa  flavonoid. Senyawa  flavonoid  sendiri  dalam  dunia kedokteran digunakan sebagai zat antikoagulasi.  Mekanisme  dari  flavonoid adalah mencegah terjadinya aglutinasi pada saat terjadinya luka (Weliyani et al. , 2015). Dari  hasil  penapisan  fitokimia  yang  telah dilakukan,  diketahui  bahwa  ekstrak  etanol 96% bawang bombai mengandung senyawa flavonoid  dan  juga  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  lain  meliputi  senyawa saponin,  dan  fenol,  seperti  pada Tabel  2 .
Tabel 1 . Rendemen ekstrak kental bawang bombai
Bawang Bombai Segar (g) Simplisia Serbuk Bawang Bombai (g) Ekstrak Kental bawang Bombai dari 100 g simplisia serbuk (g) Rendemen Ekstrak Kental (%) 1500 135,5166 48,9628 48,96
Tabel 2 . Penapisan senyawa fitokimia ekstrak bawang bombai No Senyawa Kimia Pereaksi Hasil 1 Flavonoid Etanol + Logam Mg + HCl (p) + 2 Alkaloid Mayer - Dragendorff - Bouchardat - 3 Saponin Aquadest panas + Buih + HCl 2N + 4 Tanin FeCl 3 + Gelatin - 5 Fenol FeCl 3 + 6 Steroid/triterpenoid FeCl 3 -
Keterangan:  (+)  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  (-)  tidak  mengandung  senyawa  metabolit sekunder.
Uji  Aktivitas  Antikoagulan  Ekstrak Bawang  Bombai  dengan  Metode  Lee- White
Hasil  pengujian  antikoagulan  pada sampel  darah  A,  B,  AB,  dan  O  terhadap enam  kelompok  perlakuan  dapat  dilihat pada Tabel 3 . Waktu penggumpulan darah terlama  untuk  seluruh  golongan  darah terdapat  pada  tabung  ketiga  yaitu  EDTA selama  lebih  dari  60  menit  atau  tidak terjadi  penggumpulan  darah.  Pada  tabung 1  (tanpa  perlakuan),  tabung  2  (etanol 96%),  tabung  4  (ekstak  5%),  tabung  5 (ekstrak  7,5%),  dan  tabung  6  (ekstrak 10%)  memiliki  waktu  penggumpulan darah  yang  bervariasi  dari  keempat golongan darah. Pada hasil yang diperoleh dapat  dilihat  bahwa  pada  golongan  darah A,  B,  AB,  dan  O  memiliki  waktu penggumpalan  terlama  pada  tabung  ketiga yaitu  EDTA.  Waktu  penggumpalan  darah pada tabung ketiga untuk seluruh golongan darah  yaitu  lebih  dari  60  menit  atau  tidak mengalami penggumpalan darah.
Pada  golongan  darah  A,  waktu penggumpalan  darah  terlama  dilanjutkan pada  tabung  2  yaitu  dengan  perlakuan etanol  96%,  kemudian  tabung  4  yaitu ekstrak  5%,  dilanjutkan  tabung  5  yaitu ekstrak  7,5%,  lalu  tabung  6  yaitu  ekstrak 10%,  dan  terakhir  tabung  1  yaitu  tanpa perlakuan.  Pada  golongan  darah  B,  waktu penggumpalan darah terlama setelah tabung  dengan  EDTA  adalah  tabung  5 yaitu  ekstrak  7,5%,  kemudian  tabung  6 yaitu  ekstrak  10%,  lalu  tabung  2  yaitu perlakuan  etanol  96%,  dilanjutkan  tabung 4  yaitu  ekstrak  5%,  dan  terakhir  tabung  1 yaitu  tanpa  perlakuan.  Pada  golongan darah  AB,  waktu  penggumpalan  darah terlama  setelah  tabung  dengan  EDTA adalah  tabung  6  yaitu  ekstrak  10%, kemudian tabung 2 yaitu dengan perlakuan etanol  96%,  lalu  tabung  4  yaitu  ekstrak etanol  5%,  dilanjutkan  tabung  1  yaitu tanpa  perlakuan,  dan  terakhir  tabung  5 yaitu  ekstrak  7,5%.  Pada  golongan  darah O,  waktu  penggumpalan  darah  terlama
setelah  tabung  dengan  EDTA  adalah tabung  2  yaitu  dengan  perlakuan  etanol 96%,  kemudian  tabung  6  yaitu  ekstrak 10%,  lalu  tabung  4  yaitu  ekstrak  etanol
5%,  dilanjutkan  tabung  5  yaitu  ekstrak 7,5%,  dan  terakhir  tabung  1  yaitu  tanpa perlakuan.
Tabel 3. Waktu koagulasi (menit) dari darah yang diperlakukan dengan variasi ekstrak dan kontrol
Golongan Darah Tabung 1 (tanpa perlakuan) Tabung 2 (etanol 96%) Tabung 3 (EDTA) Tabung 4 (ekstrak 5%) Tabung 5 (ekstrak 7,5%) Tabung 6 (ekstrak 10%) A 9 menit 33 detik 14 menit 04 detik > 60 menit 13 menit 33 detik 13 menit 22 detik 10 menit 51 detik B 6 menit 38 detik 11 menit 06 detik > 60 menit 11 menit 03 detik 12 menit 21 detik 11 menit 13 detik AB 11 menit 47 detik 13 menit 29 detik > 60 menit 12 menit 43 menit 11 menit 8 detik 13 menit 45 detik O 11 menit 9 detik 14 menit 07 detik > 60 menit 11 menit 55 detik 11 menit 29 detik 13 menit 10 detik
Gambar 1. Uji Lee-White pada Golongan Darah A. Keterangan:  (1)  tanpa  perlakuan;  (2)  etanol  96%;  (3)  EDTA;  (4)  ekstrak  5%;  (5)  ekstrak  7,5%;  (6) ekstrak 10%
Uji  hipotesis  komparatif  pada  semua kelompok  perlakuan  tabung  dilakukan dengan  Uji  Kruskal-Wallis,  diperoleh  nilai P  =  0,017  (p  <  0,05)  sehingga  paling  tidak terdapat  dua  kelompok  perlakuan  yang mempunyai perbedaan rerata yang bermakna.  Uji  Mann-Whitney  dilakukan terhadap  kelompok  tabung  1  (tanpa perlakuan)  dengan  kelompok  tabung  2 (etanol  96%)  sebagai  kontrol  negatif menghasilkan  nilai  p  =  0,083  (p  >  0,05), sehingga  tidak  terdapat  perbedaan  rerata
waktu penggumpalan darah yang bermakna antara  kelompok  yang  tidak  diberikan perlakuan dengan kelompok yang diberikan etanol  96%.  Berdasarkan  hasil  tersebut, dikatehui bahwa etanol 96% tidak mempengaruhi  proses  koagulasi  dari  darah dan tidak memiliki aktivitas atau kemampuan  sebagai  antikoagulan  yang dapat  mencegah  penggumpalan  darah. Etanol  96%  merupakan  pelarut  yang  inert atau  tidak  bereaksi  dengan  komponen  lain (Patrick, 2018; Weliyani et al. , 2015).
1
2 3 4 5 6
Uji  Mann-Whitney  semua  kelompok perlakuan  ekstrak  yaitu  tabung  4  (ekstrak 5%), tabung 5 (ekstrak 7,5%), dan tabung 6 (ekstrak  10%)  dengan  kelompok  tabung  3 (EDTA) menghasilkan nilai P = 0,014 (p < 0,05), yaitu terdapat perbedaan rerata waktu penggumpalan darah yang bermakna antara kelompok  yang  diberikan  EDTA  dengan kelompok  yang  diberikan  ekstrak  5%, 7,5%,  dan  10%.  Berdasarkan  hal  tersebut dapat  diketahui  bahwa  kelompok  ekstrak 5%,  7,5%,  dan  10%  tidak  memiliki aktivitas  antikoagulan  yang  sama  maupun seimbang  dengan  EDTA  sebagai  kontrol positif. EDTA merupakan antikogulan yang bekerja  dengan  mengikat  kalsium  untuk mencegah  pembekuan  darah  pada  tabung (Weliyani et  al. ,  2015).  Tidak  adanya aktivitas antikoagulan pada ekstrak bawang bombai  pada  konsentrasi  5%,  7,5%,  dan 10%  dapat  diperkirakan  karena  pada ekstrak bawang bombai yang diujikan tidak mengandung  senyawa  organosulfur  yang berperan  sebagai  antikoagulan.  Selain  itu, senyawa  flavonoid  yang  teridentifikasi dalam ekstrak diperkirakan tidak dapat atau cukup dalam menghasilkan aktivitas antikoagulan  pada  bawang  bombai.  Hal tersebut  dapat  terjadi  karena  faktor-faktor tertentu,  seperti  senyawa  yang  hilang  atau tidak  tertarik  dengan  maksimal  selama proses ekstraksi.
Pada  proses  ekstraksi  penelitian  ini sendiri  digunakan  pelarut  etanol  yang menurut  literatur  dapat  menarik  kedua senyawa baik senyawa organosulfur maupun  senyawa  flavonoid  (Bajac et  al. , 2018;  Shofa,  2020).  Kemudian,  metode maserasi  diketahui  cocok  untuk  menarik senyawa  flavonoid.  Pada  penelitian  yang dilakukan oleh Bajac et al. , (2018), metode ekstraksi  yang  dapat  menarik  senyawa organosulfur dilakukan dengan perendaman bawang  putih  segar  yang  dipotong  kecil- kecil dengan pelarut  etanol  96%  selama 10 hari.  Dalam  penelitian  Bajac et  al. ,  (2018) juga  diperoleh  senyawa  alisin  yang  dari ekstrak  bawang  putih  yang  diekstraksi dengan menggunakan pelarut air menghasilkan  jumlah  10  kali  lebih  besar dibanding dengan pelarut etanol 96% dalam bentuk  ekstrak  terliofilisasi.  Berdasarkan hal  tersebut,  maka  dalam  memaksimalkan penarikan senyawa organosulfur yaitu alisin dalam dipilih dengan pelarut air dibandingkan  pelarut  etanol.  Kemudian, metode  ekstraksi  yang  digunakan  dengan pelarut air tersebut adalah dengan menghancurkan  umbi  bawang  putih  segar dengan  air,  lalu  disaring,  kemudian  di sentrifugasi dan supernatan disaring dengan kertas  saring  menggunakan  pompa  vakum. Sampel  ekstrak  kemudian  diliofilisasi selama 3 hari. Berdasarkan hal tersebut,
maka  rekomendasi  dari  penelitian  ini adalah  dengan  menggunakan  pelarut  air dengan  metode  ekstraksi  dimana  sampel umbi bawang bombai dihancurkan bersama air  menggunakan  blender  dan  ekstrak dibuat dalam bentuk ekstrak terliofilisasi.
Uji Mann-Whitney selanjutnya dilakukan  terhadap  variasi  konsentrasi ekstrak  dengan  kelompok  kontrol  tanpa perlakuan  apapun.  Hal  tersebut  dilakukan untuk  mengetahui  ada  atau  tidaknya perbedaan  rerata  waktu  pembekuan  dari kelompok yang diberikan perlakuan variasi konsentrasi ekstrak dengan kelompok darah normal.  Hasil  yang  diperoleh  dapat  dilihat pada  Tabel  4.5.  Pada  konsentrasi  5% dengan kelompok tanpa perlakuan diperoleh  nilai  p  =  0,083  (p  >  0,05),  maka dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa  tidak terdapat perbedaan rerata waktu penggumpalan darah yang bermakna antara kelompok  yang  tidak  diberikan  perlakuan dengan  kelompok  yang  diberikan  ekstrak 5%. Konsentrasi berikutnya yaitu 7,5% dan 10%  dengan  kelompok  tanpa  perlakuan mendapatkan  nilai  p  =  0,149  (p  >  0,05) maka dapat ditarik kesimpulan bahwa tidak terdapat perbedaan rerata waktu penggumpalan darah yang bermakna antara kelompok  yang  tidak  diberikan  perlakuan dengan  kelompok  yang  diberikan  ekstrak 7,5% dan ekstrak 10%.
Uji One-Way ANOVA  dilakukan terhadap  variasi  konsentrasi  ekstrak  5%,
7,5%,  dan  10% untuk  mengetahui  ada atau tidaknya perbedaan rerata waktu penggumpalan darah antar variasi konsentrasi  ekstrak.  Hasil  yang  diperoleh dari  uji One-Way ANOVA  ialah  nilai  p  = 0,956  (p  >  0,05),  yaitu  tidak  terdapat kelompok data yang mempunyai perbedaan rerata  yang  bermakna  yaitu  dari  ekstrak 5%, 7,5%, dan 10%.
Pada kelompok golongan darah A, B, AB,  dan  O  dilakukan  uji  hipotesis komparatif dan diperoleh nilai P = 0,504 (p > 0,05), yaitu tidak terdapat kelompok data yang  mempunyai  perbedaan  rerata  yang bermakna.  Hasil  yang  diperoleh  dapat dilihat  bahwa  waktu  rerata  penggumpalan darah  antar  variasi  golongan  darah  tidak berbeda secara signifikan, namun golongan darah mungkin dapat mempengaruhi mekanisme  koagulasi  secara  intrinsik maupun ekstrinsik, karena waktu penggumpalan  darah  dari  masing-masing golongan darah di setiap perlakuan bervariasi  (Ebbo et  al. ,  2019).  Golongan darah  A,  B,  AB,  dan  O  diketahui mempengaruhi hemostasis dengan mekanisme  sebagai  penentu  utama  dari vWF  dan  kadar  plasma  Faktor  VIII. Golongan  darah  non-O  diketahui  memiliki kadar  vWF  dan  Faktor  VII  lebih  besar (sekitar 19%) dibandingkan golongan darah O.  Sehingga,  golongan  darah  non-O  lebih cenderung mengalami kejadian
tromboemboli  vena  (VTE)  (Okeke et  al. , 2018).

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol  96%  Bawang  Bombai  ( Allium  cepa Linnaeus)  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  meliputi  flavonoid,  saponin,  dan fenol. Ekstrak etanol 96% Bawang Bombai ( Allium cepa Linnaeus) dengan konsentrasi 5%,  7,5%,  dan  10%  tidak  memiliki aktivitas  antikoagulan  jika  dibandingkan dengan kontrol positif EDTA pada nilai P = 0,014  (p  <  0,05).  Golongan  darah  A,  B, AB, dan O tidak memiliki perbedaan rerata waktu penggumpalan darah yang bermakna dengan nilai P = 0,504 (p > 0,05).

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Saadi, N. H. M. (2013). In vitro study of the  anticoagulant  activity  of  some plant  extracts. Indian  Journal  of Applied  Research , 3 (7),  120–122. https://doi.org/10.15373/2249555X/JU LY2013/32
Bajac,  J.,  Nikolovski,  B.,  Kocić-Tanackov,
S., Tomšik, A., Mandić, A., Gvozdanović-Varga,  J.,  Vlajić,  S.,
Vujanović,  M.,  &  Radojković,  M. (2018). SaBranom (1). IV International Congress “Food Technology, Quality and Safety" , 104–
109.
Bithell.  T.  C.  (1993). The  diagnostic approach  to  the  bleeding  discordes .
Pennsylvania:  Lea  and  Febiger.  Pada jurnal:  Lessy,  A.,  Paransa,  D.,  S.,  & Gerung,  G.  (2013).  Uji  aktivitas
antikoagulan  pada  sel  darah  manusia dari  ekstrak  alga  coklat Turbinaria ornata . Jurnal  Pesisir  dan  Laut Tropis , 2 (1), 168–175. https://doi.org/10.35800/jplt.1.2. 2013.2094 Botanical (2019). Onion properties . Diakses 29 Juni 2020 dari https://www.botanicalonline.com/en/m edicinal-plants/onions-properties
BPOM  RI.  (2015). Antikoagulan  oral . Diakses 29 Juni 2020 dari http://pionas.pom.go.id/ioni/bab2siste m-kardiovaskuler-0/26-antikoagulan- dan-protamin/261-antikoagulan-oral Dahlan,  M.  S.  (2014). Statistik  untuk Kedokteran dan Kesehatan: deskriptif, bivariat,  dan  multivariat,  dilengkapi aplikasi  menggunakan  SPSS .  Edisi  6.
Jakarta: Epidemiologi Indonesia.
Devi, G. A. P. G. L., Aryabiantara, I. W., &
Hartawan, I. U. (2018). Profil Penggunaan Antikoagulan pada Pasien Kardiovaskular yang dirawat di Ruang ICCU  RSUP  Sanglah  periode  Januari 2016  -  Juni  2016. E-Jurnal  Medika , 7 No.10 (10).
Ebbo,  A.  A.,  Bello,  A.,  Ismail,  S.  M., Liman, Y. M., Idris, S. B., Ogah, J. I.,. Yusuf,  S.  A.  (2019).  In  vitro anticoagulant effect of aqueous extract of Allium  cepa (onion)  on  albino  rat blood. Chronicles  of  Pharmaceutical Science , 4 (1), 4–9.
Erlanda,  W.,  &  Karani,  Y.  (2018).
Penggunaan Antikoagulan Pada Penyakit Ginjal Kronik. Jurnal
Kesehatan  Andalas , 7 (Supplement  2), 168–175. https://doi.org/10.25077/jka.v7i0.845.
Farlex,  P.  (2012).  Determination  of coagulation time. International
Biomedical  Journal ,  6,  80-87.  Pada jurnal:  Ebbo,  A.  A.,  Bello,  A.,  Ismail, S.  M.,  Liman,  Y.  M.,  Idris,  S.  B., Ogah, J. I., … Yusuf, S. A. (2019). In vitro  anticoagulant  effect  of  aqueous extract  of Allium  cepa (onion)  on albino  rat  blood. Chronicles  of Pharmaceutical Science , 4 (1), 4–9.
Harborne      J.  B.      (1987). Metode Fitokimia:  Penuntun      cara      modern menganalisa tumbuhan . Terbitan Kedua. Terjemahan Kosasih Padmawinata  dan  Iwang  Soediro.
Bandung: ITB.
IHME.  (2019). Indonesia .  Diakses  29  Juni 2020  dari  http://www.healthdata.org/ indonesia.
Imelda,  M.,  &  Kurniawan,  S.  (2013).
Peranan Garlic ( Bawang Putih ) pada Pengelolaan  Hipertensi. CDK-209 , 40 (10), 746–750. Katzung,  B.  G.  (2018). Basic  &  clinical pharmacology, fourteenth edition . New York: McGraw-Hill Companies.
Kumar, S. V., Kumar, S. P., Rupesh, D., &
Nitin,  K.  (2010).  Journal  of  Chemical and Pharmaceutical Research
preparations. Journal of Chemical and Pharmaceutical  Research , 3 (1),  675– 684.
Ladeska, V., Rindita, Amyra, N., Veranthy,
T. W. (2020). Analisa Fisikokimia dan
Aktivitas  Antioksidan  Umbi  Bawang Bombay  (Allium  cepa  L .).  Jurnal Jamu Indonesia , 5 (2):56–67.
https://doi.org/10.29244/jji.v5i2.170.
Octaviani,  F.,  &  Kurniawan,  A.  (2015).
Emboli Paru. Medicinus , 4 (9).
https://doi.org/10.19166/med.v4i9.119
1
Okeke,  C.  O.,  Okoro,  U.  S.,  &  Babatunde,
A.  (2018).  Variations  in  activated partial thromboplastin time and prothrombin  time  in  individuals  of  A, B,  AB,  and  O  blood  groups. Iraqi Journal  of  Hematology , 7 (2),  85–89. https://doi.org/10.4103/ijh.ijh_11_18 Pakekong,  E.  D.,  Homenta,  H.,  & Mintjelungan,  C.  N.  (2016).  Uji  Daya Hambat  Ekstrak  Bawang  Bombay
( Allium cepa L.) terhadap
Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus aureus secara  In  Vitro. Pharmacon ,
5 (1),
32–38.
https://doi.org/10.35799/pha.5.2016.11
221.
Patrick,  J.,  Gandionco,  Arcenal,  H.  J.  D., Carcel. J. A. L., Entote, H. Y., Lopez, D.  A.  M.,  …  Magalang,  E.  C.  C. (2018).  The  effect  of  100%  ethanolic extract  of  Allium  cepa  (white  onion bulb)  on  the  clotting  time  of  sprague- dawley rats (Tesis/disertasi) . Rahmawati,  Fawwas,  M.,  Razak,  R.,  & Islamiati, U. (2018). Potensi Antikoagulan  Sari  Bawang  Putih (Allium sativum) Menggunakan Metode Lee-White dan Apusan Darah.
Majalah  Farmaseutik , 14 (1),  42–48. https://doi.org/10.22146/farmaseutik.v 14i1.41927
Roveny. (2015). Antikoagulan untuk Stroke Iskemik Kardioemboli, IAI Continuing Professional  Development. CDK-228 , 42 (5), 345–349.
Shofa, S. A. (2020). Skrining Fitokimia dan Identifikasi Metabolit Sekunder Secara Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  pada Nanopartikel Kitosan Ekstrak Bawang
Putih (Allium sativum Liin.), Jeringau (Acorus  calamus  L.),  Temu  Mangga (Curcuma mangga Val.), dan Kombinasinya. Skripsi.  Malang :  UIN Maulana Malik Ibrahim , 1 (1), 1–116. Taj, E. I., Abdalmutalab, M. M., Izzalddeen,  H.  M.,  Abdalkareem,  M. A.,  Aldalraheem  M.  A.,  &  Alhassan, M. B. (2011). Evidence for an in vitro anticoagulant  activity  of  red  onion ( Allium  cepa L.). Sudan  JMS , 6 (2),
85–88. 10.4314/sjms.v6i2.72459.
Tattelman,  E.  (2005).  Health  Effects  of Garlic. American  Family  Physician , 72 (1): 103–106.
Weliyani,  Nugroho,  R.  A.,  &  Syafrizal. (2015).  Uji  Aktivitas  Antikoagulan Ekstrak  Propolis Trigona  laeviceps terhadap Darah Mencit ( Mus musculus L.). Prosiding  Seminar  Sains  Dan Teknologi  FMIPA  Unmul , September , 1–10.