## POTENSI JAMUR ENDOFIT TANAMAN KARET DALAM MENGHAMBAT
PERTUMBUHAN JAMUR AKAR PUTIH ( Rigidoporus microporus )

## SECARA IN VITRO

## Widya Lestari dan Aini Qomariah Manurung
Program Studi Agroteknologi Sekolah Tinggi Ilmu Pertanian Labuhan Batu Jln. SM. Raja No 126 A Aek Tapa Labuhanbatu Sumatera Utara e-mail : widya.chubby@yahoo.co.id

## ABSTRACT
One  of  the  environmentally  friendly  control  alternatives  that  can  be  done,  namely  by  utilizing biological agents in the form of endophytic fungi that are antagonistic. This study aims to study and obtain information about the potential of endophytic fungi in inhibiting white root fungi  in vitro. Endophytic fungi isolation is carried out by sterilizing the surface of the stem of the rubber plant  and  culture  it  on  agar  nutrient  media.  Five  endophytic  bacterial  isolates  were  obtained from the roots of rubber plants, respectively: JEB01, JEB02, JEB03, JEB04 and JEB05. Fungal isolates  were  tested  antagonistically  in  vitro  against  Rigidoporus  microporus.  Two  fungal isolates,  JEB01  and  JEB02  showed  the  best  antagonist  in  inhibiting  the  growth  of  pathogenic fungi Rigidoporus microporus in vitro.
Keywords: endophytic fungi, in vitro, Rigidoporus microporus, rubber plants (Hevea brasilliensis

## PENDAHULUAN
Jamur akar putih ( Rigidoporus microporus ) merupakan jamur patogen yang menyebabkan  kerusakan  pada  karet.  Jamur ini  menyerang  bagian  akar  tanaman  karet. Serangan jamur patogen tersebut mengakibatkan  kerugian  yang  sangat  besar bagi para petani. Untuk itu diperlukan suatu penanggulangan  yang  efektif.  Selama  ini telah  banyak  dilakukan  pengendalian  fungi patogen pada tanaman secara kimiawi, akan tetapi  menimbulkan  efek  negatif  terhadap lingkungan.  Untuk  itu  perlu  diupayakan suatu  alternatif  pengendalian  secara  biologi dengan  menggunakan  mikroba  antagonis atau  menggunakan  metabolit  antimikroba yang dihasilkan.
Usaha penanggulangan penyakit tanaman secara biologis mempunyai peluang yang cukup besar karena organismenya telah tersedia  di  alam  dan  aktivitasnya  dapat distimulasi dengan memodifikasi
lingkungan maupun tanaman inang. Keuntungan dalam menggunakan mikroorganisme antagonis sebagai pengendalian  biologis  antara  lain:  aman terhadap  lingkungan,  tidak  ada  efek  residu, aplikasinya  bersifat  berkelanjutan  karena yang digunakan organisme hidup yang dapat memperbanyak diri sehingga dapat mengurangi  aplikasi  yang  berulang-ulang (Cook dan Baker, 1989).
Hampir  di  setiap  bagian  tanaman ditemukan  adanya  jamur  endofit,  baik  pada daun,  akar  maupun  batang.  Dalam  beberapa tahun  terakhir,  pengaplikasian  mikroba  endofit sebagai  pengendali  biologis  telah  menjadi alternatif  untuk  menggantikan  peran  pengendali kimia  seperti  pestisida.  Penggunaan  agen biologis ini secara alami mampu mengendalikan populasi hama, meningkatkan produksi tanaman dan merupakan pilihan yang baik bagi resistensi penyakit  dan  juga  ramah  lingkungan  (Procopio et al ., 2009).
Tanaman tingkat tinggi mengandung beberapa mikroba endofit yang menghasilkan  metabolit  sekunder  sebagai bentuk pertahanan terhadap mikroba patogen  (Radji,  2005).    Tanaman  karet memiliki  bakteri  endofit,  karet  merupakan pohon  yang  tumbuh  tinggi  dan  memiliki batang  yang  cukup  besar.  Tinggi  pohon dewasa  dapat  mencapai  15-25  m.  Batang karet  tumbuh  lurus  ke  atas  dan  cenderung miring  ke  arah  utara.  Bagian  batang  inilah yang  mengandung  getah  atau  lateks. Penelitian  ini  diperlukan  untuk  mengetahui potensi  jamur  endofit  yang  ada  pada  akar tanaman  karet  sebagai  agen  pengendalian hayati.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilakukan  dari  bulan  Juni 2018  sampai  November  2018. Pengambilan sampel  dilakukan  di  Perkebunan  Rakyat Marbau  Selatan.  Penelitian  dilakukan  di Laboratorium  Mikrobiologi,  Departemen Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sumatera Utara, Medan.

## Teknik Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel tanaman dilakukan  di  kebun  rakyat  Marbau  Selatan, sampel  batang  yang  diambil  dari  bagian tanaman  sehat.  Sampel  batang  dibawa  ke Laboratorium untuk diisolasi jamur endofitnya. Isolasi jamur endofit dari batang dilakukan dengan metode sterilisasi permukaan  menurut  metode  Radu  and Kqueen (2002).
Sampel  yang  diambil  dari  lokasi dimasukkan  ke  dalam  plastik  diletakkan  di dalam termos  yang berisi es batu, kemudian sampel dibawa ke laboratorium mikrobiologi  untuk  isolasi  bakteri  endofit. Tahap  awal  yang  dilakukan  adalah  mencuci batang dengan air mengalir selama 20 menit. Sterilisasi bagian permukaan akar dilakukan dengan  cara  merendamnya  di  dalam  larutan secara  berturut-  turut:  etanol  75%  selama  2 menit,  larutan  sodium  hipoklorit  5,3% selama  5  menit  dan  etanol  75%  selama  30 detik.
Selanjutnya  akar  dibilas  dengan aquadest  steril,  setelah  kering  bagian  ujung kiri  dan  kanan  batang  dipotong  1  cm, kemudian  masing-masing  batang  dipotong membujur  dan  diletakkan  di  permukaan media  PDA  dengan  posisi  bekas  potongan ke  arah  media,  kemudian  diinkubasi  pada suhu  ruang  selama  5  hari.  Koloni  yang muncul  disubkultur  ke  media  PDA  yang baru untuk dimurnikan.

## Uji  in  vitro  Jamur  Endofit  Terhadap Rigidoporus microporus
Uji  potensi  dilakukan  untuk  melihat kemampuan jamur endofit dalam menghambat pertumbuhan Rigidoporus microporus .  Biakan  kultur  JAP  yang  sudah
diremajakan diambil dengan cork borer , lalu diinokulasikan  pada  bagian  tengah  media PDA  dengan  jarak  3,5  cm  dari  cakram tempat  inokulum  isolat  bakteri  lalu  biakan tersebut diinkubasi selama 72 jam pada suhu
ruang.  Metode  pengukuran  zona  hambat jamur endofit terhadap koloni jamur patogen berdasarkan  (Suryanto  dan  Munir,  2006) (Gambar 1).
Gambar 1. A. koloni jamur patogen, B. zona hambat jamur endofit terhadap koloni fungi   patogen, C. titik tengah jamur  endofit  diletakkan,  D.  koloni  jamur  endofit,  X.  diameter  koloni  jamur R.  microporus yang  terhambat pertumbuhannya, Y. Diameter koloni jamur R. microporus normal
Persentase penghambatan (%) didapat dengan rumus:
Karakterisasi  dan  Identifikasi  Isolat Jamur Endofit
Hasil  seleksi  isolat  jamur  endofit diperoleh  5  isolat  yang  memiliki  potensi daya  hambat  terhadap  jamur  akar  putih. Selanjutnya  ke-5  isolat  tersebut  diamati karakteristik  morfologinya  baik  secara mikroskopis maupun makroskopis.
Identifikasi dilakukan dengan metode biakan slide ( slide culture ) untuk mengetahui genus masing-masing isolat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolat  jamur  endofit  yang  telah diperoleh  dari  sampel  batang,  kemudian dimurnikan. Selanjutnya dilakukan pengujian  secara in  vitro untuk  mengetahui daya hambat (antagonisme) terhadap
Rigidoporus  microporus .  Hasil  pengamatan daya  hambat  isolat  jamur  terhadap  patogen Rigidoporus microporus menunjukkan bahwa setiap isolat mempunyai kemampuan daya  hambat  yang  berbeda-beda.  Isolat jamur  yang  memiliki  daya  hambat  tinggi merupakan isolat antagonis yang pertumbuhan koloninya lebih cepat dibandingkan  koloni  patogen  dan  tampak perkembangan koloni antagonis dapat menutupi  dan  menekan  perkembangan koloni  patogen.  Cook  dan  Baker  (1989) menjelaskan  bahwa  salah  satu  syarat  suatu organisme  disebut  sebagai  agens  hayati adalah  apabila  mempunyai  kemampuan antagonisme  atau  kemampuan  menghambat perkembangan  dan  pertumbuhan  organisme lainnya.  Mekanisme  biokontrol  adalah
melemahkan atau membunuh patogen
tanaman dengan perlawanan yaitu memparasit patogen secara langsung, memproduksi antibiotik (toksin), dan kemampuannnya dalam kompetisi ruang dan nutrisi.  Jamur  Endofit  memproduksi  enzim untuk  melawan  komponen  sel  jamur patogen,  menginduksi  respon  ketahanan tanaman, dan produksi metabolisme tanaman
dalam menstimulasi perkecambahan spora patogen (Tabel 1).
Tabel 1. Daya hambat isolat jamur endofit tanaman karet Terhadap Rigidoporus  microporus NO  Kode Isolat Daya Hambat (%) 1 JEB01 65,2 2 JEB02 75,4 3 JEB03 63,3 4 JEB04 60,5 5 JEB05 20,3
Menurut  Bakri  (2009),  isolat  jamur tersebut  memiliki  kemampuan  antagonistik yang ditandai dengan adanya penghambatan miselium  jamur  patogen  tanaman  dan  pada akhirnya pertumbuhan hifa menipis, mengering  dan  mengalami  abnormalitas. Kecepatan  pertumbuhan  jamur  endofit merupakan  indikator  mekanisme  kompetisi ruang dan nutrisi dengan jamur Rigidoporus microporus .  Semakin  cepat  pertumbuhan jamur endofit maka semakin efektif menekan  pertumbuhan  jamur  patogen. Kecepatan pertumbuhan koloni jamur merupakan  salah  satu  faktor  penting  dalam menentukan potensinya sebagai agens hayati terhadap  patogen.  Elbert et  al .  (2007) menyatakan  bahwa  pertumbuhan  koloni jamur  yang  dihasilkan  memiliki  peranan penting dalam proses siklus hidupnya karena spora/konidia  merupakan  alat  reproduksi
aseksual,  penyebaran,  dan  pertahanan  hidup jamur pada lingkungannya.
Mekanisme Penghambatan Jamur Endofit terhadap Rigidoporus microporus Hasil pengamatan secara mikroskopis terhadap mekanisme
penghambatan  jamur  antagonis  terhadap patogen R.  microporus terlihat  dalam pengamatan  hifa  jamur R.  microporus Semua  jamur  antagonis  yang  dievaluasi mempunyai  satu  atau  lebih  mekanisme penghambatan,  yaitu  kompetisi,  antibiosis, dan parasitisme.
Gambar 2. Uji antagonis jamur endofit dengan jamur patogen Rigidoporus microporus
Tabel  2.  Deskripsi  gejala  antagonis  yang  terjadi antara isolat jamur endofit dari batang tanaman karet dengan Rigidoporus microporus
Kode Isolat

## Gejala Antagonis
JEB01  Pertumbuhan jamur patogen terhambat,
hifa lisis
JEB02  Pertumbuhan jamur patogen terhambat, hifa bengkok JEB03  Pertumbuhan jamur patogen terhambat, hifa menggulung JEB04  Pertumbuhan jamur patogen terhambat, hifa mengecil JEB05  Pertumbuhan jamur patogen terhambat, hifa menggulung
Gambar  3.  Respon  hifa Rigidoporus  microporus setelah  uji  antagonis  dengan  jamur  endofit  yang  diisolasi  dari batang tanaman karet (A) Hifa Lisis, (B). Hifa Bengkok, (C). Hifa Menggulung, (D). Hifa Mengecil
Jamur  endofit  dari  jenis Trichoderma yang mempunyai  mekanisme  kompetisi  dan parasitisme,  umumnya  memiliki  spektrum penghambatan  yang  lebih  luas  dan  lebih kuat  sehingga  menyebabkan  patogen  tidak dapat  tumbuh.  Aktivitas  parasitisme  dari jamur antagonis jenis
Trichoderma
menghasilkan  senyawa  kimia  yang  bersifat toksik dan enzim yang mampu mendegradasi sel patogen. Antibiosis adalah mekanisme antagonism  yang melibatkan hasil metabolit penyebab  lisis,  enzim,  senyawa  folatil  dan non-folatil  atau  toksin  yang  dihasilkan  oleh suatu mikroorganisme. Meskipun
mikoparasitisme
dianggap sebagai
mekanisme  antagonism  yang  utama,  tetapi penelitian  lebih  lanjut  mengungkapkan bahwa  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan Trichoderma spp.  juga  berperan  penting dalam  aktifitas  antijamurnya  (Chet et  al ., 2005).
Purwantisari  dan  Hastuti  (2009),
melaporkan
bahwa semakin cepat pertumbuhan jamur antagonis, maka pertumbuhan  jamur  patogen  akan  semakin terdesak  karena  kehabisan  ruang  tumbuh. Mikroba endofit dapat melindungi tumbuhan inang dari serangan patogen dengan senyawa  yang  dikeluarkan.  Senyawa  yang dikeluarkan mikroba endofit berupa
senyawa metabolit sekunder yang merupakan  senyawa  bioaktif  dan  dapat berfungsi untuk membunuh patogen (Prihatiningtias dan Wahyuningsih, 2014).

## KESIMPULAN
Diperoleh 5 isolat jamur endofit yang diisolasi  dari  batang  tanaman  karet:  JEB01, JEB02,  JEB03,  JEB04  dan  JEB05.  Isolat JEB01  dan  JEB02  menunjukkan  daya antagonis terbaik dalam menghambat pertumbuhan  jamur  patogen Rigidoporus microporus secara in vitro.

## DAFTAR PUSTAKA
Bakri, M. 2009. Isolasi dan Uji Kemampuan Antifungal Fungi Endofit dari
Tanaman  Andaliman  ( Zanthoxylum acanthopodium DC.) Terhadap Fungi Perusak  Makanan. Skripsi .  USU. Medan
Chet  I,  N.  Benhamou,  S.  Haran.  2005. Mycoparasitism  and  Lytic  Enzymes.
In Harman,  G.E.  and  C.  P.  Kubicek (Eds), Trichoderma and Gliocladium enzymes  biologica  l  control  and commercial  applications  Volume  2. Taylor and Francis. London.
A B C
D
Cook  RJ,  Baker  KF.  1989.  The  Nature  of Practice  of  Biological  Control  of Plant  Pathogens.  The  APS  Press,  St. Paul, Minnesota. 53 p.
Elbert  W,  Taylor  PE,  Andreae,  MO,  Pöschl U.  2007.  Contribution  of  Fungi  to
Primary  Biogenic  Aerosols  in  The Atmosphere: Wet and Dry Discharged  Spores,  Carbohydrates and  Inorganic  Ions. Atmos.  Chem.
Phys. 7(4569–4588).
Prihatiningtias  W,  M.S.H.  Wahyuningsih. 2014.  Prospek  Mikroba  Endofit sebagai  Sumber  Senyawa  Bioaktif. Fakultas Farmasi UGM. Yogyakarta.
Procopio  REL,  Araujo  W,  Maccheroni  Jr,
Azevedo  JL.  2009.  Characterization
of an Endophytic Bacterial Community Associated with Eucalyptus spp. Genet Mol Res 8 (4): 1408-1422.
Purwantisari  S,  R.B.  Hastuti.  2009.  Uji
Antagonisme Jamur Patogen Phytophthora  infestans  Penyebab Penyakit  Busuk  Daun  dan  Umbi Tanaman Kentang dengan Menggunakan Trichoderma spp.
Isolat Lokal. Bioma. 11(1): 24-32.
Radu  S,  Kqueen  CY.  2002.  Preliminary Screening of Endophytic Fungi From
Medicinal  Plants  in  Malaysia  for Antimicrobial and Antitumor Activity. Malaysian  Journal  of Medical Science. 9(2): 23-33.
Radji,  M.  2005.  Peranan  bioteknologi  dan mikroba endofit dalam
pengembangan  obat  herbal. Majalah Ilmu Kefarmasian . 2: 118-121.
Suryanto  D,  Munir  E.  2006.  Potensi  Isolat
Bakteri  Kitinolitik  Lokal  untuk Pengendalian Hayati Jamur. Prosiding Seminar Hasil-hasil Penelitian USU 2006.