## PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN CARICA PUBESCENS Lenne & K. koch TERHADAP KETEBALAN EPITEL GINGIVA MENCIT BETINA YANG DIPAPAR ASAP ROKOK
Risma Aprinda Kristanti 1
1 Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran dan Imu-ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang
E-mail: risma.aprinda@yahoo.com

## ABSTRAK
Rangsangan asap rokok yang lama, dapat menyebabkan kerusakan pada bagian mukosa mulut yang terpapar,  penebalan  menyeluruh  bagian  epitel  mulut  termasuk  epitel  gingiva,  hingga  dapat  menimbulkan bercak putih keratotik yang menandai leukoplakia dan kanker mulut . Beberapa komponen dalam tanaman C. pubescens terbukti memiliki aktivitas antioksidan, diantaranya adalah minyak atsiri, polifenol, dan flavanoid. Kandungan  antioksidan  utama dalam C.pubescens adalah  vitamin  C.  Selain  itu,  kandungan  flavonoid  dalam C.pubescens berfungsi  melindungi  struktur  sel  dan  memiliki  hubungan  sinergis  dengan  vitamin  C. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak buah C. pubescens terhadap ketebalan epitel gingiva mencit betina yang dipapar asap rokok. Sebanyak 25 ekor mencit betina Mus musculus dibagi menjadi lima kelompok dan dipapar asap rokok selama 21 hari. Pada kelompok K1 sebagai kelompok kontrol negatif diberikan paparan asap rokok dan cmc, pada kelompok K2 sebagai kontrol positif diberikan paparan asap  rokok  dan  vitamin  C,  kelompok  K3  diberikan  paparan  asap  rokok  dan  ekstrak  daun C.  pubescens sebanyak  0,5  gram/kgBB,  kelompok  K4  diberikan  paparan  asap  rokok  dan  ekstrak  daun C.  pubescens sebanyak 1 gram/kgBB, dan pada kelompok K5 diberikan paparan asap rokok dan ekstrak daun C. pubescens sebanyak 2 gram/kgBB. Pada hari ke-22 seluruh tikus dikorbankan dan diambil jaringan gingiva. Selanjutnya pada jaringan gingiva dilakukan pengecatan menggunakan Hematoxylin Eosin (HE) untuk melihat ketebalan epitel gingiva secara histologis. Hasil penelitian menunjukkan antara keempat kelompok penelitian terdapat perbedaan  yang  signifikan  untuk  ketebalan  epitel  gingiva  mencit  betina Mus  musculus ,  dan rerata epitel gingiva paling tebal pada kelompok K2
Kata kunci : epitel, gingiva, ekstrak, C.pubescens

## ABSTRACT
The exposure from cigarette smoke in long term can destroy oral mucous, thickening of the epithel gingival  tissue,  and  keratotic  white  spot  that  sign  leukoplakia  and  oral  cancer.  Several  components  in  the C.pubescens leaf for example atsiri oil, polifenol, and flavonoid are kown has antioxidant acivity. The major component in C.pubescens leaf that have antioxidant activity is vitamin C. The aim of this study is to examine the effect of C. pubescens leaf extract to the thickness of gingival tissue from female mices that got cigarette smoke exposure. Twenty five adult female mices were devided into five group and they exposed by cigarette smoke for twenty one day. K1 group as negative control were given by cmc, K2 group as positive control were given by 0,2 mg vitamin C, K3 group were given by 0,5 g/KgBW C. pubescens extract, K4 group were given by 1 g/KgBW C. pubescens extract, and K5 group were given by 2 g/KgBW C. pubescens extract. At the end of 22 nd day, the mices were sacrificed and the gingival mucosa were collected for histologist preparations. The result of this study shows that K2 group has the thickest gingival epithel layers while there is significant different among five group for the thikness gingival epithel layers.
Kata kunci : epitel, gingiva, ekstrak, C.pubescens

## PENDAHULUAN
Merokok  merupakan  salah  satu  kebiasaan  yang  dapat  menyebabkan  peningkatan  stres oksidatif  dalam  tubuh.  Asap  rokok  merupakan  salah  satu  polutan  yang  dapat  meningkatkan oksidan  dalam  tubuh  dan  merupakan  polutan  penyumbang  radikal  bebas  terbesar  diantara polutan lainnya. Lingkungan asap rokok dapat menyebabkan timbulnya berbagai jenis gangguan kesehatan pada perokok aktif maupun pasif [1].
Sebagian besar perokok berasal dari negara berkembang dan dari golongan sosial ekonomi rendah. Prevalensi perokok di Indonesia adalah 69% pria dan 4% wanita. Merokok diestimasikan 90%  menyebabkan  kanker  paru – paru  pada  pria,  dan  sekitar  70%  pada wanita.  Di  negara – negara  industri,  sekitar  56% - 80%  merokok  menyebabkan penyakit  pernafasan  kronis  dan sekitar  22%  penyakit  kardiovaskular.  Dari  seluruh perokok  yang  ada  70%  yang  menderita penyakit  akibat  merokok  adalah Negara berkembang.  Indonesia  menduduki  peringkat  ke-4 jumlah  perokok  terbanyak  di  dunia dengan  jumlah  sekitar  141  juta  orang,  dengan  kenaikan konsumsi  rokok  tertinggi  di dunia  (44%).  Konsumsi  rokok  Indonesia  setiap  tahun  diperkirakan mencapai  199 miliar batang  rokok.  Akibatnya  adalah kematian  sebanyak  5  juta  orang  per tahunnya. Bila  hal  ini  tidak  dapat  dicegah,  maka  jumlah  kematian  akan  meningkat  dua  kali mendekati 10 juta orang pertahun pada tahun 2020. Tahun 2005, biaya  yang harus dikeluarkan akibat penyakit terkait tembakau mencapai18,1 milyar US Dolar [2].
Merokok tidak hanya menimbulkan efek secara sistemik, tetapi juga dapat menyebabkan timbulnya kondisi patologis di rongga mulut. Tar, nikotin, dan karbonmonoksida merupakan tiga macam  bahan kimia  yang  paling  berbahaya  dalam  asap  rokok.  Berbagai  penelitian  terdahulu membuktikan adanya pengaruh rokok terhadap kesehatan gigi dan rongga mulut [3]; [4]. Telah banyak  penelitian  yang  menunjukkan  adanya  hubungan  antara  merokok  dan  penyakit periodontal.  Penelitian  membuktikan  bahwa  pada  perokok  lebih  banyak  terjadi  penyakit periodontal  yang  parah  dan  penyakit  radang  gingiva  dibandingkan  pada  bukan  perokok. Penelitian-penelitian  terbaru  menunjukkan  bahwa  pada  perokok  pasif  memiliki  resiko  lebih tinggi sampai 1,5 kali lebih besar terkena penyakit gingiva [5].
Munculnya  berbagai  kondisi  patologis  sistemik  maupun  lokal  dalam  rongga mulut, disebabkan karena terjadinya penurunan fungsi molekul, termasuk saliva. Kerusakan komponen antioksidan  saliva,  diikuti  dengan  penurunan  fungsinya,  ditemukan pada  beberapa  kelainan  di rongga  mulut. Rongga  mulut  adalah  bagian  yang  sangat  mudah  terpapar  efek  rokok,  karena merupakan  tempat  terjadinya  penyerapan  zat  hasil  pembakaran rokok  yang  utama [6]. Komponen toksik dalam rokok dapat mengiritasi jaringan lunak rongga mulut, dan menyebabkan terjadinya  infeksi  mukosa, dry  socket,  memperlambat  penyembuhan  luka, memperlemah kemampuan  fagositosis,  menekan  proliferasi  osteoblas,  serta  dapat mengurangi  asupan  aliran darah  ke  gingiva [6]. Penyakit  periodontal  termasuk  akumulasi  plak  dan  kalkulus,  saku periodontal, inflamasi gingiva, resesi gingiva, serta kehilangan tulang alveolar [7].
Rangsangan asap rokok  yang lama, dapat menyebabkan kerusakan pada  bagian mukosa mulut  yang  terpapar,  penebalan menyeluruh  bagian  epitel  mulut,  hingga  dapat  menimbulkan bercak  putih  keratotik  yang menandai  leukoplakia  dan  kanker  mulut [7]. Iritasi  kronis  bahan karsinogen tar menyebabkan perubahan awal struktur dasar epitel mukosa mulut, salah satunya
adalah keratosis atau  penebalan  epitel,  bahkan dapat  menyebabkan  displasia  epitel  yang mengalami keganasan.
Keseimbangan antara SOR dan antioksidan sangat diperlukan untuk mencegah terjadinya stres  oksidatif [8].  Berbagai  jenis  antioksidan  seperti  glutation  (GSH),  melatonin,  vitamin  C, vitamin E, β -karoten, koenzim Q10, likopen, flavonoid, isoflavon antosianin, asam lipoat/alpha lipoic  acid (ALA)  serta  substansi  lainnya  dapat  diperoleh  dari  makanan  maupun  suplemen [9]; [10]. Kerusakan  oksidatif  dapat  dihalangi  oleh  senyawa  antioksidan  yang terdapat  dalam tumbuhan,  melalui  reduksi  dengan  radikal  bebas,  membentuk  kelat dengan  senyawa  logam katalitik, dan menangkap oksigen [11].
Salah  satu usaha  pencarian senyawa  antioksidan  dapat  dilakukan dengan  eksplorasi senyawa  aktif  dari  tanaman  ataupun  hewan  ciptaan  Allah  SWT.  Allah  SWT  berfirman  dalam surat Al A n’am ayat 99 : ﺨﻨﻟا ﻦﻣو ﺎﺒﻛاﺮﺘﻣ ﺎﺒﺣ ﮫﻨﻣ جﺮﺨﻧ اﺮﻀﺧ ﮫﻨﻣ ﺎﻨﺟﺮﺧﺄﻓ ءﻲﺷ ﻞﻛ تﺎﺒﻧ ﮫﺑ ﺎﻨﺟﺮﺧﺄﻓ ءﺎﻣ ءﺎﻤﺴﻟا ﻦﻣ لﺰﻧأ يﺬﻟا ﻮھو ﻦﻣ ﻞ ذ ﻲﻓ نإ ﮫﻌﻨﯾو ﺮﻤﺛأ اذإ هﺮﻤﺛ ﻰﻟإ اوﺮﻈﻧا ﮫﺑﺎﺸﺘﻣ ﺮﯿﻏو ﺎﮭﺒﺘﺸﻣ نﺎﻣﺮﻟاو نﻮﺘﯾﺰﻟاو بﺎﻨﻋأ ﻦﻣ تﺎﻨﺟو ﺔﯿﻧاد ناﻮﻨﻗ ﺎﮭﻌﻠط تﺎﯾﻵ ﻢﻜﻟ
نﻮﻨﻣﺆﯾ مﻮﻘﻟ
Artinya:  “Dan  Dialah  yang menurunkan  air  hujan  dari  langit,  lalu  kami  tumbuhkan dengan air itu segala macam tumbuh-tumbuhan, maka Kami keluarkan dari tumbuh-tumbuhan itu  tanaman  yang  menghijau,  Kami  keluarkan  dari  tanaman  yang  menghijau  itu  butir  yang banyak;  dan  dari  mayang  kurma mengurai  tangkai-tangkai  yang  menjulai,  dan  kebun-kebun anggur,  dan  (Kami  keluarkan  pula)  zaitun  dan  delima  yang  serupa  dan  yang  tidak  serupa. Perhatikanlah buahnya di waktu pohonnya berbuah, dan (perhatikan pulalah) kematangannya. Sesungguhnya  pada  yang demikian  itu  ada  tanda-tanda  (kekuasaan  Allah)  bagi  orang-orang yang berimam [12].
Carica pubescens Lenne & K. Koch (C. Pubescens) merupakan pohon kecil atau perdu yang tidak berkayu, mirip dengan Carica papaya tetapi mempunyai cabang yang lebih banyak dan  ukuran  semua  bagian  tanaman  lebih  kecil [13]. Karakter  morfologi,  kapasitas  antioksidan, dan analisis pola pita protein terhadap C. pubescens telah dilakukan [14], akan tetapi lebih lanjut mengenai  pemanfaatan  senyawa  aktif  untuk  bahan  makanan  atau  suplemen  antioksidan  belum banyak diteliti.
Beberapa  komponen  dalam tanaman C.  pubescens terbukti  memiliki  aktivitas antioksidan, diantaranya  adalah minyak atsiri, polifenol, dan flavanoid. Kandungan antioksidan utama dalam C.pubescens adalah vitamin C. Selain itu, kandungan flavonoid dalam C.pubescens berfungsi melindungi struktur sel, memiliki hubungan sinergis dengan vitamin C (meningkatkan efektivitas vitamin C), mencegah keropos tulang, antibiotik, dan sebagai antiinflamasi [15]; [16].
Vitamin C merupakan laktosa dengan enam rantai karbon yang disintesis dari glukosa di dalam  hati  oleh  sebagian  mamalia selain  manusia,  karena  manusia tidak  memiliki  enzim gulonolactone  oxidase yang  penting  untuk  sintesis  asam askorbat.  Vitamin  C  mampu memberikan elektron  dan  mereduksi  agen  karena  bentuk  fisiologi  dan  biokimianya.  Vitamin  C menyumbangkan  dua  elektronnya  dari  rantai  ganda  antara  dua  dan  tiga  molekul  karbon  dari enam molekul karbon [17]. Dijelaskan pula bahwa, vitamin C disebut sebagai antioksidan karena dengan elektron  yang  didonorkan  itu  dapat  mencegah  terbentuknya  senyawa  lain  dari  proses oksidasi  dengan  melepaskan  satu  rantai karbon.  Namun,  setelah  memberikan elektron pada radikal  bebas,  vitamin  C  akan  teroksidasi  menjadi semidehydroascorbut  acid atau  radikal ascorbyl  yang  relatif  stabil.  Sifat  inilah  yang  mungkin  menjadikannya  sebagai  antioksidan  atau dengan kata lain bahwa asam askorbat dapat bereaksi dengan radikal bebas, reaksi tersebut dapat
mereduksi  radikal  bebas  yang  reaktif  menjadi  tidak  reaktif.  Radikal  bebas  yang  mengalami reduksi  dari  yang  reaktif  menjadi  tidak  reaktif  disebut scavenger atau  squencsing.  Oleh  karena itu asam askorbat baik untuk radikal bebas scavenger karena sifat kimianya.
Berdasarkan  uraian  di  atas  peneliti  beranggapan  bahwa penebalan  epitel  akibat  paparan asap rokok dapat dicegah dengan pemberian ektsrak C. pubescens yang merupakan sumber dari vitamin C dimana vitamin C ini erat kaitannya dengan aktivitas antioksidan. Antioksidan vitamin C yang terkandung di dalam ekstrak C.pubescens diharapkan dapat meminimalisir radikal bebas asap rokok yang memapar mukosa rongga mulut sehingga radang mukosa rongga dapat dicegah dengan ditandai berkurangnya ketebalan epitel gingiva.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  tergolong  penelitian  eksperimental  laboratoris,  dengan  menggunakan rancangan penelitian post test only control group design. Penelitian dilakukan di Laboratorium Biosistem  Jurusan  Biologi  UIN  Maulana  Malik  Ibrahim  Malang  untuk  pemeliharaan  dan perlakuan  hewan  coba,  Laboratorium  Fisiologi  Hewan  Jurusan  Biologi  UIN  Maulana  Malik Ibrahim  Malang  untuk  pengamatan  histologi,  dan  Laboratorium  Patologi  Anatomi  RS  Syaiful Anwar Malang untuk pembuatan preparat histologi.

## Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  mencit  betina Mus  musculus sebanyak  25  ekor,  berusia  8-10 minggu  dengan  berat  20-25 gram,  dalam  keadaan  sehat  dan belum pernah digunakan untuk penelitian.
Subyek penelitian dibagi dalam lima kelompok secara random, kelompok I (K1) sebagai kontrol negatif adalah kelompok yang diberi paparan asap rokok dan mendapat CMC, kelompok II (K2)  sebagai  kontrol  positif adalah  kelompok  yang  diberi  paparan  asap  rokok  dan mendapat terapi vitamin C, kelompok III (K3), kelompok IV (K4), dan kelompok V (K5) adalah kelompok yang  diberi  paparan  asap  rokok  dan  mendapat ekstrak  daun C.  pubescens dengan sebesar  0,5 gram/kgBB, 1 gram/kgBB, dan 2 gram/kgBB.

## Paparan Asap Rokok
Paparan  asap  rokok  diberikan  sebanyak  1  batang  rokok  setiap  kandang,  pada  satu kandang  ditempatkan  5  mencit  pada  saat  perlakuan  paparan  asap  rokok.  Pada  saat  perlakuan, kandang ditutup dengan plastik tebal dan diberi 2 lubang, 1 lubang untuk memasukkan rokok ke dalam kandang, dan lubang lainnya untuk aliran udara. Pangkal rokok dihubungkan dengan spuit melalui  selang yang memiliki diameter  sama  dengan  diameter  rokok,  dan  asap  rokok dihembuskan melalui dorongan dari spuit. Paparan asap rokok diberikan selama 21 hari.

## Pemberian Ekstrak C. Pubescens
Ekstrak daun C.  pubescens diberikan  per  sonde pada  mencit  betina  kelompok  K3,  K4, dan K5, dengan dosis tunggal yaitu 1 kali pemberian sebanyak 0,5 gram/kgBB untuk kelompok K3, 1 gram/kgBB untuk kelompok K4, dan 2 gram/kgBB untuk kelompok K5 setiap hari selama 21 hari. Selama  penelitian,  mencit  diperlakukan  sebaik-baiknya,  diusahakan  agar  bebas  stres, leluasa bergerak, serta diberikan makanan dan minuman setiap hari secara ad libitum.

## Pengambilan Data
Pada hari ke-22, semua mencit dikorbankan dan diambil jaringan mukosa gingiva untuk dibuat  sediaan  histologis.  Setelah  sediaan  histologis  selesai  dibuat,  dilakukan  pengukuran ketebalan  epitel  gingiva  menggunakan micrometer  grid.  Data yang  didapat diuji  normalitas dengan Kolmogorov-Smirnov. Untuk  melihat  perbedaan  ketebalan  epitel  antar  kelompok dilakukan Uji Games-Howell.

## HASIL PENELITIAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan,  diperoleh  hasil  rata-rata  ketebalan  epitel gingiva mencit pada masing-masing kelompok sebagai berikut:
Tabel 1. Nilai  rerata (mean)  dan  simpang  baku (SD) ketebalan  epitel  gingiva  mencit pada kelompok K1, K2, K3, K4 dan K5
Kelompok N Mean dan SD K1 K2 K3 K4 K5
4 4 4 4 4 27,35 ± 7,73 30,13 ± 5,64 17,46 ± 1,95 18,89 ± 5,80 22,18 ± 2,29 Total 20 23,20 ± 6,79
K(1) K(2)
Gambar 1. Epitel  Gingiva  dengan  pewarnaan  HE. Epitel  gingiva dilihat  dengan  perbesaran  100x  menggunakan mikroskop  mikrofoto  olympus perbesaran  100x serta software pengolahan  gambar Image  Raster3. K(1) paparan rokok+CMC, K(2) paparan rokok+vitamin C 0,2  mg,  K(3) paparan rokok+ekstrak C.pubescens 0,5 g/KgBB, K(4) paparan rokok+ekstrak C.pubescens 1g/KgBB, dan K(5) paparan rokok+ekstrak C.pubescens 2g/KgBB.
Data  terlebih  dahulu  diuji  normalitas menggunakan Kolmogorov-smirnov dan menunjukkan (p>0,05) sehingga dapat disimpulkan bahwa data berdistribusi normal, selanjutnya dilakukan  uji  homogenitas  menggunakan  uji Levene  test, setelah data diuji  menunjukkan (p>0,05) yang  berarti  data homogen,  selanjutnya untuk  mengetahui  beda  variabel  tebal  epitel gingiva  antar  kelompok  dilakukan ANOVA Test.  Dari  hasil ANOVA  Test didapatkan  bahwa ketebalan epitel antar kelompok berbeda secara bermakna dengan p = 0,015 (<0,05)
Untuk mengetahui antar kelompok mana yang berbeda, dengan data berdistribusi normal dan variasi antar kelompok homogen, dilanjutkan dengan Uji LSD. Hasil uji dapat dilihat pada Tabel 2 berikut:
K(5) K(4) K(3)
Tabel 2. Hasil uji beda LSD ketebalan epitel gingiva pada kelompok K1, K2, K3, K4 dan K5
Kelompok P Keterangan K1 dan K2 K1 dan K3 K1 dan K4 K1 dan K5 K2 dan K3 K2 dan K4 K2 dan K5 K3 dan K4 K3 dan K5 K4 dan K5 0,460 0,016 0,035 0,178 0,004 0,008 0,046 0,702 0,217 0,383 Tidak signifikan Signifikan Signifikan Tidak signifikan
Signifikan
Signifikan Signifikan Tidak signifikan Tidak signifikan Tidak signifikan
Tabel di atas menunjukkan bahwa untuk kelompok K1-K3, K1-K4, K2-K3, K2-K4, K2- K5  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  untuk  ketebalan  epitel  gingiva  antar  kelompok, sedangkan  untuk  kelompok  K1-K2,  K1-K5,  K3-K4,  K3-K5,  K4-K5  tidak  terdapat  perbedaan yang signifikan.

## DISKUSI
Carica pubescens Lenne & K. Koch (C.pubescens) merupakan salah satu tanaman khas dataran tinggi di Indonesia dengan kandungan Vitamin C tinggi  yang berpotensi sebagai bahan alami antioksidan. Di  Indonesia, C. pubescens dapat dijumpai  di  Dataran  Tinggi  Dieng,  Jawa Tengah dan  di  Cangar,  Batu. Carica pubescens Lenne  &  K.  Koch  merupakan  spesies  yang beradaptasi di  tempat  dengan  ketinggian 1.400 – 2.400  meter  di  atas  permukaan  laut  (dpl), temperatur rendah, dan curah hujan tinggi.
Carica  pubescens Lenne  &  K.  Koch mempunyai  banyak  manfaat  dalam  kehidupan sehari-hari. Hasil penelitian [18] menunjukkan teridentifikasinya 19 senyawa fenol pada buah C. pubescens yang tumbuh di Chili. Buah C. pubescens mengandung zat antioksidan yang mampu menangkal bahaya  radikal  bebas  dan  mengandung  enzim  pencernaan  yang  meningkatkan  kerja alat  pencernaan,  absorbsi  nutrien,  mengurangi stress pencernaan,  menjaga  pH,  menjaga kesehatan usus serta menyeimbangkan enzim-enzim alami tubuh [19]. C. pubescens merupakan sumber kalsium, gula, vitamin A dan C [20] dalam [21]. Vitamin C berperan dalam memperkuat dinding  pembuluh  darah,  membantu  penyembuhan  luka,  menurunkan  tingkat  stress,  serta meningkatkan  daya  tahan  tubuh  dalam    melawan  infeksi.  Oksidasi  vitamin  C  dengan  kofaktor Fe 2+ menyebabkan  dikeluarkannya  sejumlah  anion  radikal  oksigen  superoksida  (O 2- ) [22]. Adanya  senyawa-senyawa  tersebut  dapat  memungkinkan C.pubescens dapat  digunakan  sebagai obat herbal yang dapat meningkatkan kecepatan regenerasi epitel.
Penelitian  ini  bertujuan  mengkaji  lebih  dalam  tentang  pengaruh  pemberian  ekstrak C.pubescens yang  berasal  dari  daerah  Cangar  terhadap ketebalan  epitel  gingiva pada mencit betina (Mus musculus) yang dipapar asap rokok.
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  laboratoris  yang  memenuhi  kriteria sebagai  penelitian  eksperimen murni  (true  experiment).  Perlakuan  terhadap  sampel  penelitian dilakukan  pada  ruangan  yang  telah  tersedia  dan  pemeriksaan  terhadap  variabel  yang  diukur dilakukan di laboratorium [23].
Rancangan penelitian yang digunakan adalah post test only control group design karena hewan coba dibagi menjadi 5 kelompok menggunakan teknik alokasi random dan data variabel tergantung untuk masing-masing sampel diperoleh hanya setelah perlakuan atau tidak dilakukan pengambilan data variabel tergantung sebelum perlakuan [23].
Hasil  analisa  deskriptif  menunjukkan  bahwa  rerata  ketebalan  epitel  gingiva  untuk kelompok yang diberi paparan asap rokok adalah 27,35 µm, untuk kelompok yang diberi paparan asap  rokok  dan  terapi  vitamin  C  adalah  30,13  µ m,  untuk  kelompok  yang  diberi  paparan  asap rokok dan ekstrak C.pubescens 0,5 gram adalah 17,46 µm, untuk kelompok yang diberi paparan asap rokok dan ekstrak C.pubescens 1 gram adalah 18,89 µm, dan untuk kelompok yang diberi paparan  asap  rokok  dan  ekstrak C.pubescens 2  gram  adalah  22,18  µm.  Hal  ini  menunjukkan bahwa epitel gingiva yang paling tebal ada pada kelompok yang diberi paparan asap rokok dan terapi  vitamin  C,  sedangkan  rata-rata  epitel  gingiva  yang  paling  tipis  ada  pada  kelompok  yang diberi  paparan  asap  rokok  dan  terapi  ekstrak  C.  pubescens  0,5  gram.  Penelitian [24] menyebutkan  bahwa  bila  vitamin C  bekerja  sendiri  kurang  mampu  memberikan perbedaan, supaya  vitamin  C  bisa  berperan secara  optimal  dalam  menangkal  radikal bebas,  sebaiknya vitamin C bekerja sama dengan vitamin E. Hal ini dikarenakan vitamin C bekerja secara sinergis dengan vitamin  E sebagai  antioksidan dengan  menangkap  radikal bebas, vitamin  E meyumbangkan  satu  elektronnya kepada  radikal  yang  kemudian  berubah menjadi  vitamin  E radikal  dan  selanjutnya akan  distabilkan  oleh  vitamin  C.  Vitamin  C yang  bersifat  radikal selanjutnya  akan  berubah menjadi  stabil  kembali  oleh  enzim  antioksidan.  Sedangkan  ekstrak daun C.pubescens dosis  0,5  gram ternyata  paling  efektif  dalam  mengurangi  penebalan  epitel gingiva  yang  disebabkan  oleh  keradangan  akibat  paparan  asap  rokok.  Hal  ini  serupa  dengan penelitian [25] dimana ekstrak yang lebih tinggi dosisnya memberikan hasil yang kurang efektif, disebabkan  karena  kandungan  antioksidan  yang  banyak  pada  esktrak C.  pubescens berubah menjadi  prooksidan  karena  hasil  interaksinya  dengan  oksidan  yang  berasal  dari  paparan  asap rokok.
Sedangkan  dari  hasil Uji  ANOVA  diperoleh  hasil ada  perbedaan  bermakna ketebalan epitel gingiva  antar  kelompok.  Antara  kelompok  yang  dipapar  asap  rokok  dengan  kelompok yang  dipapar asap  rokok  dan  mendapat  terapi  vitamin  C  tidak  terdapat  perbedaan  yang signifikan,  hal  ini  bisa  disebabkan  karena bila  vitamin C  bekerja  sendiri  kurang  mampu memberikan perbedaan, supaya vitamin C bisa berperan secara optimal dalam menangkal radikal bebas,  sebaiknya  vitamin  C  bekerja sama  dengan  vitamin  E.  Hal  ini  dikarenakan vitamin  C bekerja secara sinergis dengan vitamin E sebagai antioksidan dengan menangkap radikal bebas, vitamin  E  meyumbangkan  satu  elektronnya kepada  radikal  yang  kemudian  berubah menjadi vitamin  E  radikal  dan  selanjutnya akan  distabilkan  oleh  vitamin  C.  Vitamin  C yang  bersifat radikal  selanjutnya  akan  berubah menjadi  stabil  kembali  oleh  enzim  antioksidan.  Antara kelompok  yang  dipapar  asap  rokok  dengan  kelompok  yang  dipapar  asap  rokok dan  diterapi ekstrak C.pubescens dosis 2 gram juga memberikan hasil tidak signifikan yang dapat disebabkan
karena kandungan antioksidan yang banyak  atau di atas dosis optimal pada esktrak C.pubescens berubah menjadi prooksidan karena hasil interaksinya dengan oksidan yang berasal dari paparan asap rokok. Sedangkan hasil yang tidak signifikan antara kelompok yang dipapar asap rokok dan diterapi  dengan  ekstrak C.pubescens 0,5  gram  dengan  kelompok  yang  diterapi  ekstrak  1  gram menunjukkan bahwa ekstrak C.pubescens dapat memberikan hasil optimal dengan rentang dosis antara  0,5  sampai  1  gram. C.  pubescens mengandung  zat  antioksidan  yang  mampu  menangkal bahaya  radikal  bebas  dan  mengandung  enzim  pencernaan  yang  meningkatkan  kerja  alat pencernaan,  absorbsi  nutrien, mengurangi stress pencernaan,  menjaga  pH,  menjaga  kesehatan usus  serta  menyeimbangkan  enzim-enzim  alami  tubuh  [19]. Vitamin  C  berperan  dalam memperkuat dinding pembuluh darah, membantu penyembuhan luka, menurunkan tingkat stress, serta  meningkatkan  daya  tahan  tubuh  dalam    melawan  infeksi.  Oksidasi  vitamin  C  dengan kofaktor  Fe 2+ menyebabkan  dikeluarkannya  sejumlah  anion  radikal  oksigen  superoksida  (O 2- ) [22].

## KESIMPULAN
Pada penelitian ini, pemberian ekstrak daun C. pubescens dengan dosis bervariasi dapat mempengaruhi  ketebalan  epitel  gingiva pada  mencit  betina Mus  musculus yang  dipapar  asap rokok

## DAFTAR PUSTAKA
[1]. Ahsan A, Wiyono, Soerojo W, Wibisana W. 2009. Dampak Tembakau dan Pengendaliannya di Indonesia. Jakarta: Lembaga Demografi FEUI. Hal 4-80
[2]. Gondodiputro S. 2007. Bahaya Tembakau Dan Bentuk-Bentuk Sediaan Tembakau. Bagian Ilmu Kesehatan Masyarakat Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran. Bandung.
[3]. Warnakulasuriya S., Dietrich T., Bornstein M., Peidró E., Preshaw P., Walter C., Wennström J., and Bergström J. 2010. Oral Health Risks Of Tobacco Use And Effects Of Cessation. International Dental Journal. Vol.60:7-30.
[4].   Mullally, BH. 2004. The  Influence of Tobacco Smoking on the Onset of Periodontitis in Young Persons. Tob Induc Dis. 2 (1) 6.
[5]. Ruslan G. Efek Merokok Terhadap Rongga Mulut. Available at: File://G:/Cermin%20 Dunia%20 Kedokteran.htm. Accessed March 28, 2006
[6]. Aditama TY. Rokok dan Kesehatan. Jakarta: UI Press, 1997: 17-25.
[7]. Sham  A.,  Cheung  L.,  Jin  L.,  and  Corbet  E.  2003.  The  Effects  Of  Tobacco  Use  On  Oral Health. Hong Kong Med J. Vol.9 : 271-7
[8]. Gupta,  S.,  Choi,  A.,  Yu,  H.Y.,  Czerniak,  S.M.,  Holick,  E.A.,  Paolella,  L.J.,  Agarwal,  A., Combelles,  C.M.H.  2011.  Fluctuations  in  Total  Antioxidant  Capacity,  Catalase  Activity, and  Hydrogen  Peroxide  Levels  of  Follicular  Fluid  During  Bovine  Folliculogenesis. Reproduction, Fertility and Development. 23(5): 673-680.
[9]. Winarsi,  H.  2007. Antioksidan  Alami  dan  Radikal  Bebas:  Potensi  dan  Aplikasinya  dalam Kesehatan. Yogyakarta: Penerbit Kanisius.
[10]. Hamid  AA,  Aiyelaagbe  OO,  Usman  LA,  Ameen  OM,  and  Lawal  A.  Antioxidants:  It’s Medicinal  And  Pharmacological  Applications. African Journal  of  Pure  and  Applied Chemistry Vol.4(8): 142-151,
[11]. Purboyo  A.  2009. Efek  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun  Jambu Psidium  guava L.  Pada Kelinci Yang Dibebani Glukosa. Dissertation.Surakarta
[12]. QS. Al An’am:99
[13]. Verheij,  E.W.M  dan  R.E.  Coronel.  1997.  Prosea  Sumber  Daya  Nabati  Asia  Tenggara & Buah-Buahan Yang Dapat Dimakan. Terjemahan S.Somaatdja. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
[14]. Laily, AN. 2011. Karakterisasi Carica pubescens Lenne & K.koch berdasarkan Morfologi, Kapasitas Antioksidan, dan Pola Pita Protein di  Dataran Tinggi Dieng. Tesis Universitas Sebelas Maret Surakarta
[15]. Ahkam,  MS, 2008.  Obat Alternatif:  Sarang  Semut  Penakluk  Penyakit  Maut. www.sarangsemut.50webs.com
[16]. Hidayat, S. 2001. Prospek Pepaya Gunung (Carica Pubescens) dari Sikunang, Pegunungan Dieng,  Wonosobo. Prosiding  Seminar  Sehari:  Menggali  Potensi  dan  Meningkatkan Prospek Tanaman Hortikultura Menuju Ketahanan Pangan. Pusat Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Bogor-LIPI, Bogor.
[17]. Padayatty  SJ,  Katz  A,  Wang  Y,  Eck  P,  Kwon  O,  Lee  JH,  et  al.  2003.  Vitamin  C  as  an antioxidant:  Evaluation  of  its  role  in  disease  prevention. Journal  of  American  College  of Nutrition, Maryland. 22:p.18-35.
[18]. Simirgiotis, MJ. 2009. Identification of phenolic compound from the fruits of the mountain Papaya  Vasconcellea  pubscensa.  Dc.  Grown  In  Chile  by  Liquid  Chromatography-uv- Detection-Mass Spectrometry.Journal Food Chemistry.Vol 115 (2).
[19]. Rock W, Red. 2009. Product Review-Wild Mountain Papaya Extract http://www.associatedcontent.com/article/1987516product_review_wild_mountain_papa ya.html (Diakses 15 Agustus 2016)
[20]. Hidayat, S. 2001. Prospek Pepaya Gunung (Carica Pubescens) dari Sikunang, Pegunungan Dieng,  Wonosobo. Prosiding  Seminar  Sehari:  Menggali  Potensi  dan  Meningkatkan Prospek Tanaman Hortikultura Menuju Ketahanan Pangan. Pusat Konservasi Tumbuhan Kebun Raya Bogor-LIPI, Bogor.
[21]. Wikipedia. 2011. Pepaya Gunung. http://id.wikipedia.org/wiki/index [10 Februari 2011].
[22]. Kusyati,  E.  2010. Pengaruh  Suplementasi  Vitamin  C  Terhadap  Jumlah  Sel  Fibroblas  Di Sekitar  Luka  Insisi  Pada  Tikus Usia  Tua.  Tesis  Program  Pascasarjana  Universitas Diponegoro Semarang
[23]. Zainuddin, M. 2000. Metodologi Penelitian. Surabaya: Pasca Sarjana Unair
[24]. Christijanti  W,  Utami  NR,  dan  Iswara  A.  2010.  Efek  Pemberian  Antioksidan  Vitamin  C dan E Terhadap Kualitas Spermatozoa Tikus Putih Terpapar Allethrin. Biosaintifika. Vol. 2 No.1
[25]. Suryani N, Endang T, Aulanni'am. 2013. Pengaruh Ekstrak Metanol Biji Mahoni terhadap Peningkatan Kadar Insulin, Penurunan Ekspresi TNF- α dan Perbaikan Jaringan Pankreas Tikus Diabetes. Jurnal Kedokteran Brawijaya. Vol. 27 No. 3