Profil Pelepasan Andrografolid Granul Kombinasi Ekstrak Terpurifikasi Herba Pegagan ( Centeella Asiatica ) Dan Sambiloto (A ndrographis Paniculata )
Lina Widiyastuti 1* & Akhmad Kharis Nugroho 2 1 Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta
2 Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta
*Corresponding author: lina.widiy1979@gmail.com

## Abstract
Background:  Andrografolid  is  a  water-soluble  compound,  the  determination  of  the  amount  and  profile  of  the andrographolide  release  of  the  dosage  form  is  necessary.  Objective:  This  research  is  aimed  to  determine  the amount  and  profile  of  andrographolide  release  of  granules  combination  purified  extract  of  pegagan  and sambiloto herbs. This study was conducted to ensure that excipient does not bind the active ingredient. Methods: The  release  test  was  conducted  through  a  dissolution  test  using  acetat  buffer  pH  4,5  media.  The  dissolution result of granule was determined using TLC- Densitometry. Results: The dissolution effisiency (DE 60 ) result was 75,00%  ±  1,33.  The  dissolution  profiles  were  determined  by  nonlinear  regression  approach  zero  order,  first order,  Higuchi,  Hixon  Crowell,  and  KorsmeyerPeppas.  The  mechanism  determining  the  dissolution  profile  of andrographolide release  was seen visually from the suitability of  the result of solver prediction  (Q prediction ) and experiment (Q observation ) with identity line. The curve of a model which closer to identity line  was the description of andrographolide release mechanism which was formed with the approach. The curve with Korsmeyer Peppas approach  was  closer  to  the  identity  line  than  the  other  four  approach  model.  Based  on  nonlinear  regression calculation,  the  release  of  andrographolide  was  controlled  by  a  matrix  diffusion  mechanism,  it  means  that andrographolide release of granules  was occured because of the erosion of the outer layers  which was caused by the quickly hydrated Avicel PH 101. By using Kormeyer Peppas equation, mechanism of drug release follows the  Fick  diffusion  law  with  the  value    n  =  0.320    (<  0,45).  Conclusions:  The  amount  and  profile  of andrographolide released from granule are the research finding that can be applied as a reference to determine the amount of extract used in a formulation.
Keywords : andrographolide, realease profile, krosmeyer-peppas

## Abstrak
Pendahuluan:  Andrografolid  merupakan  senyawa  yang  sukar  larut  dalam  air,  penentuan  jumlah  dan  profil pelepasan andrografolid dari bentuk sediaan perlu dilakukan. Tujuan: Penelitian ini dilakukan untuk menentukan jumlah  dan  profil  andrografolid  yang  dilepaskan  dari  formula  granul  kombinasi  ekstrak  terpurifikasi  herba pegagan  dan  herba  sambiloto.  Hal  tersebut  untuk  memastikan  eksipien  tidak  mengikat  zat  aktif.  Metode:  Uji pelepasan  dilakukan  dengan  melakukan  uji  disolusi  menggunakan  media  dapar  asetat  pH  4,5.  Hasil  disolusi granul  kombinasi  ekstrak  terpurifikasi  herba  pegagan  dan  herba  sambiloto  ditentukan  menggunakan  KLT- densitometri. Hasil: Hasil perhitungan efisiensi disolusi (ED 60 ) sebesar 75,00% ± 1,33. Profil disolusi ditentukan dengan regresi  nonlinear dengan pendekatan orde nol, orde 1, Higuchi, Hixon Crowell dan Korsmeyer Peppas. Mekanisme  penentuan  profil  disolusi  dari  pelepasanan  andrografolid  dilihat  secara  visual  dari  kesesuaian  hasil prediksi solver  (Q Prediksi ) dan  hasil  percobaan (Q observasi ) dengan  melihat  garis  identitas. Kurva dari suatu model yang mendekati garis identitas merupakan gambaran mekanisme pelepasan andrografolid yang dibentuk dengan pendekatan tersebut. Kurva dengan pendekatan Korsmeyer Peppas terlihat lebih dekat dengan garis identitas bila dibandingkan  dengan  4  model  pendekatan  yang  lain.  Berdasarkan  perhitungan  regresi  nonlinear,  pelepasan andrografolid  dikontrol  dengan  mekanisme  difusi  matriks,  yang  berarti  pelepasan  andrografolid  dari  granul terjadi  karena  adanya  pengikisan  lapisan  terluar  karena  Avicel  PH  101  terhidrasi  dengan  cepat.  Dengan menggunakan persamaan  Korsmeyer-Peppas  mekanisme pelepasan andrografolid  mengikuti hukum  difusi  Fick dengan nilai n = 0,320 (< 0,45). Kesimpulan: Jumlah dan profil pelepasan andrografolid dari granul adalah hasil penelitian yang dapat dijadikan suatu referensi untuk menentukan jumlah ekstrak yang dipakai dalam formulasi.
Kata kunci: andrografolid , profil pelepasan , korsmeyer-peppas

## PENDAHULUAN
Pelepasan zat aktif memberikan gambaran zat aktif lepas  meninggalkan  bentuk  sediaan  dan  selanjutnya akan  mengalami  absorbsi,  distribusi,  metabolisme  dan eksresi.  Hal  ini  merupakan  suatu  keniscayaan  untuk
suatu  zat  aktif  dapat  memberikan  efek  farmakologis yang  diharapkan.  Pemilihan  eksipien  yang  tepat merupakan  kunci  dari  problem  pelepasan.  Eksipien hanya  akan  mengantarkan  zat  aktif  sampai  tempat terjadinya pelepasan zat aktif, tanpa harus
mempengaruhi  zat  aktif  sehingga  dapat  terlepas optimal (Anwar, 2012).
Kelarutan zat aktif  merupakan  faktor penting agar obat  dapat  diabsorpsi.  Selanjutnya  zat  aktif  akan  larut dalam  medium  sebagai  fungsi  waktu.  Jumlah  zat  aktif yang  terlarut  dapat  disampaikan  dengan  beberapa metode  diantaranya  metode  klasik  (C 20 atau  T 20 ) maupundisolusi  efisiensi  (DE).  Metode  DE  digunakan untuk  menyampaikan  hasil  pengamatan  kecepatan disolusi  obat  karena  lebih  bisa  menggambarkan keseluruhan proses disolusi (Fudholi, 2013).
Metode  nonlinier  atau  linierisasi  kurva  dapat  juga digunakan untuk mengungkapkan  hasil dissolusi.  Pada metode ini dapat digunakan pendekatan  model Higuci, Krosmeyer-Peppas,  Hixon-Crowell,  Weibull, First order dan Zero order .

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah andrografolid  p.a  (sigma),  kloroform  p.a  (Merck), etanol p.a (Merck), metanol p.a (Merck), n -butanol p.a (Merck),  asam  asetat  p.a  (Merck),  lempeng  silika  gel 60  F 254 ,  natrium  lauril  sulfat  (Merck),  etil  asetat (Merck),  kertas  saring,  dan  pereaksi  Lieberman- Burchard.

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah KLT  dengan  fase  diam  lempeng  silika  gel  60  F 254 , Densitometer  (Camag  TLC  Scanner  3),  Dissolution tester (Erweka DT 720).

## Metode
Ditimbang  granul  seberat  738  mg  dimasukkan dalam  medium  disolusi  yaitu  500,0  mL  larutan  dapar asetat    pH  4,5  yang  ditambah  dengan  larutan Sodium Lauryl  Sulphate (SLS)  0,1  M  sebanyak  5  mL. Keranjang diputar dengan kecepatan 50 rpm dan  jarak antara ujung keranjang dengan dasar labu 2,0 ± 0,2 cm. Diambil  sampel  medium  pada  waktu  0,  5,  10,  15,  30 dan  60  menit  sebanyak  5,0  mL.  Dimasukkan  medium sebanyak  5,0  mL  untuk  mengganti  volume  sampel dengan suhu yang sama yaitu 37 ± 0,5 o C. 5 mL sampel dimasukkan dalam labu takar 10 mL, ditambah dengan 5  mL  etil  asetat,  divortek  3  menit,  didiamkan  hingga memisah  2  fraksi,  diambil  fraksi  etil  asetat  diuapkan pada  suhu  50 0 C  sampai  kering  kemudian  dilarutkan kembali  dengan  etil  asetat  1  mL  untuk  penotolan. Filtrat yang diperoleh ditotolkan sebanyak 30 µL  pada silika  gel  60F 254 dan  dielusi  menggunakan  fase  gerak CHCL 3 :  MeOH (9:1) (Kementerian Kesehatan, 2009). Dilakukan perhitungan jumlah zat aktif yang terlepas.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Granul  kombinasi  ekstrak  terpurifikasi  herba pegagan  dan  sambiloto  mengandung  asiatikosida  dan andrografolid sebagai senyawa aktifnya. Uji pelepasan zat  aktif  granul  lebih  difokuskan  pada  kandungan andrografolid  yang  terdapat  dalam  granul  karena andrografolid  merupakan  zat  yang  kelarutannya  kecil dalam  air.  Disolusi  merupakan  tahapan  penting  yang menentukan bioavailabilitas, maka uji disolusi
andrografolid pada granul kombinasi ekstrak terpurifikasi  herba  pegagan  dan  herba  sambiloto merupakan  parameter  yang  tepat.  Uji  disolusi memberikan  informasi  tentang  kecepatan  disolusi, jumlah  obat  yang  terlepas  tiap-tiap  waktu  dan  disolusi efisiensi  (DE)  serta  mekanisme  pelepasan  obat  dari sediaan.
Hasil disolusi granul kombinasi ekstrak terpurifikasi herba pegagan dan sambiloto terlihat pada hasil  kromatografi  lapis  tipis.  Sampel  memberikan hasil  yang  sama  dengan  R f andrografolid  standar (Gambar 1).
Gambar 1. Profil KLT uji kualitatif dalam media disolusi, berurutan kiri ke kanan (1), (2), (3), (4), (5) standar andrografolid konsentrasi 0,063; 0,125; 0,250; 0,500 dan 1 mg/mL, (6), (7), (8), (9), (10), (11) sampel pada waktu ke-0, 5, 10, 15, 30 dan 60 menit, dengan fase gerak kloroform:metanol = 9:1, fase diam silika gel 60 F 254 , jarak elusi 8 cm, penampak bercak sinar UV 254.
Andrografolid  standar  dibuat  seri  baku  standar dengan  konsentrasi  1;  0,5;  0,25;  0,125  dan 0,0625 mg/ mL dengan penotolan sebanyak 5 µL. Hasil penetapan kurva baku dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Kurva baku konsentrasi vs luas area andrografolid
Tabel 1. Bobot kumulatif andrografolid (mg) sebagai fungsi waktu (menit) Waktu (menit) Bobot kumulatif andrografolid (mg) 0 0,00 5 4,21 10 4,60 15 5,68 30 7,33 60 8,75
Persamaan  kurva  baku  yang  diperoleh,  digunakan untuk menetapkan jumlah andrografolid dalam sampel. Diperoleh hasil yang disajikan pada Tabel 1. Data yang tersaji  pada  Tabel  1  digunakan  untuk  menghitung disolusion  effisiensi ( DE )  andrografolid. Disolusion effisiensi didefinisikan  sebagai area  under  the dissolution  curve (AUC)  terhadap  waktu,  dihitung sebagai  persentase  area  terhadap  100%  disolusi  pada waktu  yang  sama  (Gambar  3).  Hasil  perhitungan  data yang disajikan Tabel 1 diperoleh DE 60 sebesar 75,00% ±1,33,  yang  berarti  bahwa  selama  60  menit  75% andrografolid terlepas .
Mekanisme  pelepasan  andrografolid  dari  sediaan granul  dapat  diketahui  dengan  perhitungan  regresi linear  hubungan  bobot  kumulatif  andrografolid  yang terlepas  terhadap  waktu  (Gambar  3)  dan  perhitungan regresi  nonlinear  dengan  pendekatan  orde  nol,  orde  1, Higuchi, Hixon Crowell dan Korsmeyer Peppas (Costa & Lobo, 2001).
Gambar 3. Kurva hubungan bobot kumulatif andrografolid vs waktu
Profil  disolusi  dengan  regresi  linear  tidak memperlihatkan  linearitas  sehingga  tidak  dapat ditentukan  mekanisme  pelepasan  dengan  tepat,  maka dilakukan  cara  kedua  yaitu  perhitungan  regresi nonlinear dengan pendekatan orde nol, orde 1, Higuchi, Hixon Crowell dan Korsmeyer Peppas.
Penentuan  mekanisme  dilihat  secara  visual kesesuaian bobot kumulatif andrografolid yang terlepas hasil  prediksi solver (Q prediksi )  dan  hasil  percobaan (Q observasi )  dengan  garis  identitas.  Kurva  dari  suatu model  yang  mendekati  garis  identitas  merupakan gambaran  mekanisme  pelepasan  andrografolid  yang
dibentuk  dengan  pendekatan  tersebut.  Kurva  dengan pendekatan  Korsmeyer  Peppas  terlihat  dekat  dengan garis  identitas  bila  dibandingkan  dengan  4  model pendekatan yang lain (Gambar 4).
Gambar  5  merupakan curve  fitting hasil  disolusi yang  menjelaskan  lebih  lanjut  mekanisme  pelepasan andrografolid  dengan  Q observasi sesuai  dengan  kurva prediksi  (Q prediksi )  yang  dibangun  model  Korsmeyer Peppas.
Gambar 4. Kurva goodness of fit
Gambar 5. Kurva fitting pendekatan Korsmeyer Peppas

## KESIMPULAN
Pelepasan andrografolid dikontrol dengan mekanisme  difusi  matriks  berdasarkan  perhitungan regresi  nonlinear,  artinya  pelepasan  andrografolid  dari granul terjadi karena adanya pengikisan  lapisan terluar karena Avicel PH 101 terhidrasi dengan cepat. Dengan menggunakan persamaan Krosmeyer-Peppas mekanisme  pelepasan  obat  ditentukan  dengan  nilai  n.
Jika nilai  n = < 0,45 pelepasan obat  mengikuti  hukum difusi  Fick  dan  jika  nilai  n  =  0,45  –  0,89  maka mekanisme  pelepasan  obat  tidak  mengikuti  hukum Fick,  apabila    nilai  n  lebih  besar  dari  0,89  maka mekanisme pelepasan mengikuti kinetika orde 0 (Dash dkk.,  2010).  Granul  kombinasi  ekstrak  terpurifikasi herba pegagan dan sambiloto dengan nilai n  =  0,320  (<  0,45)  mengindikasikan  mekanisme pelepasannya  mengikuti  hukum  difusi  Fick  (Shoaib dkk., 2006). Menurut  Fick  laju disolusi senyawa padat ditentukan  oleh  laju  disolusi  suatu  lapisan  tipis  dari larutan  yang  terbentuk  disekeliling  zat  padat.  Obat yang  terlarut  dalam  larutan  jenuh  berdifusi  kedalam pelarut dari daerah konsentrasi tinggi ke daerah dengan konsentrasi obat rendah.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  penulis  ucapkan  kepada  semua pihak  yang  telah  memberikan  kontribusi  selama pelaksanaan  penelitian  dan  sampai  publikasi  ini. Terimakasih  kepada  laboran  laboratorium  Kimia Farmasi  Universitas  Ahmad  Dahlan    Yogyakarta yang telah membantu teknis penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Anwar,  E.  (2012).  Eksipien  Dalam  Sediaan  Farmasi.
Jakarta: Dian Rakyat.
Costa,  P.  &  Lobo,  J.M.S.  (2001).  Modeling  and Comparation  of  Dissolution  Profiles. European Journal  of  Pharmaceutical  Sciences ; 13 ;  123- 133.
Dash,  S.,  Chowdhury,  P.,  Murthy,  P.N.  &  Nath,  L.
(2010). Kinetic Modeling on Drug Release from Controlled Drug Delivery System . Acta Poloniae  Pharmaceutican  Drug  Research ;
67 (3) ; 217-223.
Fudholi,  A.  (2013).  Disolusi  dan  Pelepasan  Obat  in Vitro.Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Kementerian  Kesehatan.  (2009).  Farmakope  Herbal Indonesia.  Jakarta:  Kementerian  Kesehatan Republik Indonesia.
Shoaib,  M.H.,  Tazeen,  J.  &  Merchant,  H.A.  (2006). Evaluation  of  Drug  Release  Kinetic  from Ibuprofen  Matrix  Tablets  Using  HPMC . Pakistan  Pharmaceutical  Journal  Sciences ; 19 (2); 119-124.