## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK BIJI ALPUKAT ( Persea Americana Mill )

## Wittri Djasmasari
Program Studi Penjaminan Mutu Industri Pangan, Politeknik AKA Bogor Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
Email: wittridjasmasari@kemenperin.go.id
(Received : 1 Juni 2020; Accepted: 30 Juni 2020; Published: 1 Juli 2020)

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan mengetahui potensi aktivitas antioksidan dari  senyawa bioaktif yang terkandung dalam ekstrak biji alpukat.  Sampel biji alpukat diekstraksi dengan cara maserasi dengan pelarut metanol, selanjutnya hasil ekstrak dipekatkan untuk digunakan sebagai contoh uji. Uji antioksidan dilakukan dengan metode DPPH (- 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil).  Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak biji alpukat memiliki aktivitas antioksidan yang tergolong lemah dengan nilai IC50 sebesar  289,3 ppm.
Kata kunci : ekstrak biji alpukat; aktivitas antioksidan; metode DPPH

## Abstract
This research aims to determine the potential antioxidant activity of bioactive compounds contained in avocado seed extract. Avocado seed samples were extracted by maceration with methanol solvent, then the extract was concentrated to be used as a test sample. Antioxidant test was carried out by the DPPH method (-1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl).  The  results  of  this  research  indicate  that  avocado  seed  extract  has  a  relatively  weak antioxidant activity with an IC50 value of 289.3 ppm.
Keywords : extract of avocado seeds; antioxidant activity; DPPH method

## PENDAHULUAN
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang  mampu menunda  atau  menghambat  proses  oksidasi  suatu radikal bebas. Antioksidan terlibat dalam  mekanisme pertahanan  organisme  terhadap  patologi  terkait dengan  serangan  radikal  bebas.  Prinsip  mekanisme aksinya  melalui  penghambatan  pembentukan  radikal dengan  cara  menstabilkan  dan  mencegah  reaktivitas radikal  bebas  (Molyneux,  2004).    Sumber-sumber antioksidan    alami  yang  berasal  dari  alam  banyak dijumpai pada tanaman yang mengandung karotenoid,  senyawa  fenolat,  turunan  asam  benzoat, flavonoid,  proantosianidin,  stilben,  kumarin,  lignan, dan  lignin  (Lindsay  &  Astley,  2006).  Senyawa flavonoid berupa senyawa fenolat memiliki kemampuan  untuk  menghilangkan  dan  secara  efektif mengurangi  spesies  pengoksidasi  yang  merusak (Heinrich et al ., 2010).
Biji  buah  alpukat  memiliki  kandungan  kimia, yaitu  alkaloid,  triterpenoid,  tanin,  flavonoid,  dan saponin.  Senyawa-senyawa  kimia  tersebut  diketahui memiliki  efek  sebagai  antibakteri,  antioksidan,  dan antikanker  yang  kuat  (Arukwe et  al .,  2012  dan Marlinda et  al .,  2012).    Berdasarkan  hal  tersebut, maka  dilakukan  uji  aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak biji alpukat.

## BAHAN DAN METODE
Bahan  yang  digunakan  adalah  bahan  uji  dan bahan  kimia.    Bahan  uji  yang  digunakan  adalah  biji dari buah alpukat yang diperoleh dari pasar swalayan di kota Bogor.   Bahan kimia yang digunakan adalah DPPH,  DMSO,  metanol  p.a,  etanol  96%,    larutan natrium karbonat 0,2 M dan akuades.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah:  spektrofotometer  Hitachi  U-2000,  timbangan analitik, vacum  rotary  evaporator ,  pemanas  listrik, oven,  penangas  air, vortex ,    pipet  mohr,  pipet  mikro dan  tipnya,  tabung  reaksi,  labu  erlenmeyer  dan  alat- alat gelas lainnya.
Penelitian  dilakukan  dalam  2  (dua)  tahap  : pembuatan  sampel  ekstrak  kasar  biji  alpukat  dan pengujian  sampel.  Senyawa  bioaktif  diekstraksi dengan  cara  maserasi  dengan  pelarut  etanol, selanjutnya hasil ekstrak dipekatkan untuk digunakan sebagai  contoh  uji.    Uji  aktivitas  antioksidan dilakukan    dengan  metode  DPPH  (-1,1-difenil-2- pikrilhidrazil).

## Pembuatan Ekstrak Kasar Biji Alpukat
Biji  alpukat  dicuci  dengan  air  sampai  bersih, diris  kecil  dan  tipis,  ditiriskan,  dikeringkan  di  udara terbuka  (diangin-anginkan)  terhindar  dari  pengaruh
cahaya  matahari  langsung,  kemudian  dikeringkan dalam  lemari  pengering  pada  temperatur  ±  400  °C kemudian diserbuk.
Sebanyak  500  g  serbuk  sampel    dimaserasi dengan  pelarut  etanol  selama  24  jam,  kemudian dipisahkan,  sisa  serbuk  (residu)  dimaserasi  kembali dengan  pelarut  etanol  sampai  jernih.  Ekstrak    yang diperoleh  diuapkan  dengan  alat  rotary  evaporator pada  temperatur  tidak  lebih  dari  400  °C  hingga diperoleh ekstrak kental (Samuelsson, 1999).

## Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Larutan  induk  sampel  1000  ppm  dibuat dengan  menimbang  5  mg  sampel  yang  dilarutkan dengan  5  mL  metanol  atau  air.  Kemudian  untuk membuat larutan sampel dengan konsentrasi 1, 5, 10, 25,  dan  50  ppm,  dipipet    sebanyak  2,5  μL,  12,5  μL, 25 μL, 67,5 μL, dan 125 μL larutan induk, kemudian dimasukkan  ke  empat  tabung  reaksi.  Selanjutnya masing-masing  tabung  ditambahkan  1  mL  larutan DPPH 1 mM dan diencerkan dengan metanol sampai 5  mL.  Setelah  homogen,  tabung  yang  berisi  larutan tersebut diinkubasi dalam penangas air 37 °C selama 30 menit. Untuk blanko dipipet 1,0 mL larutan DPPH ke  dalam  tabung  reaksi  kemudian  ditambahkan metanol  (p.a)  hingga  volume  5  mL.  Serapan  diukur dengan  spektrofotometer  pada  panjang  gelombang maksimun yaitu λ 515 nm. Setelah itu dihitung persen inhibisi  tiap  konsentrasi  dan  dihitung  persamaan linier antara konsentrasi contoh (sumbu x) dan persen inhibisi (sumbu y).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bji Alpukat dengan Metode DPPH
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  biji alpukat  dengan  metode  DPPH  dapat  dilihat  pada Gambar  1.  Secara  kualitatif,  semakin  tinggi konsentrasi ekstrak  maka  semakin pudar  warna  ungu larutan  uji  yang  ditambahkan  DPPH.  Perubahan warna  tersebut  menunjukkan  bahwa  sampel  ekstrak biji  alpukat  memiliki  aktivitas  antioksidan  terhadap radikal DPPH.
Gambar 1. Hubungan Konsentrasi dengan Inhibisi pada Uji Aktivitas Antioksidan
Ekstrak Biji Alpukat
Hubungan konsentrasi dengan persen inhibisi  pada  uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  biji alpukat menghasilkan persamaan regresi y = 0,173x – 0.045.  Berdasarkan  persamaan  regresi  tersebut, diperoleh nilai IC50 sebesar 289,3 ppm. Nilai tersebut menunjukkan konsentrasi sampel yang dapat meredam  radikal  DPPH  sebanyak  50%  konsentrasi awal.  Nilai  IC50  sebesar  289,3  ppm  menunjukkan bahwa ekstrak biji alpukat  memiliki sifat antioksidan yang tergolong lemah.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak biji alpukat       memiliki aktivitas  antioksidan  yang  tergolong  lemah  dengan nilai IC50 sebesar  289,3 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Arukwe,
Amadi, Duru . ( 2012). Chemical Composition  of  Persea  americana  Leaf,  Fruit, and Seed .  URRASS 11:346-349.
Heinrich,  M.,  Barnes  J.,  Gibbons,  S.,  Williamson, E.M.  (2010). Farmakognosi  dan  Fitoterapi. Diterjemahkan oleh Syarief, W. R dkk.  Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.
Lindsay  D.  G.,  Astley,  S.  B.  (2006). European Research on The Functional Effects
Marlinda,  M.,  Sangi,  M.S.,  Audy.  (2012). Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dan Uji
Toksisitas  Ekstrak  Etanol  Biji  Buah  Alpukat (Persea  Americana  Mill) .  FMIPA  Universitas Sam Ratulangi.  Manado. Molyneux,  P.  (2004). The  Use  of  The  Stable  Free Radical  Diphenylpicryl-hydrazyl  (DPPH)  for Estimating Antioxidant Activity . Songklanakarin J. Sci. Technol., 26(2):11-21. Samuelsson,  G.  (1999). Drugs  Natural  Origin .Fourth Revised Edition . Swedish Pharmaceutical Press. Swedia