DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
EKSPLORASI CENDAWAN ENDOFIT ASAL DAUN TANAMAN KARET ( Hevea brasiliensis Muell. Arg.) SERTA POTENSI

## ANTAGONISMENYA TERHADAP PENYAKIT GUGUR DAUN
Colletotrichum gloeosporioides
(The Exploration of Endophytic Fungus from Leaves Rubber Plants and Their Potential Antagonism Againts Colletotrichum gloeosporioides Leaf Fall Diseas e)
Rani Adha Nisaq 1 , Syamsul Bahri 1* , Yenni Marnita 1 , Alchemi Putri Juliantika Kusdiana 2
1 Program Studi Agroteknologi Fakultas Pertanian, Universitas Samudra Jalan. Prof. Dr. Syarief Thayeb, Meurandeh Langsa Lama, Kota Langsa, Aceh
2 Peneliti Unit Riset Sungei Putih, Pusat Penelitian Karet Jalan. Sei Putih Rispa, Kp. Klp. Satu, Kec. Galang, Kab. Deli Serdang, Sumatera Utara, 20585 *Corresponding author, Email: syamsulbahrimp@unsam.ac.id

## ABSTRACT
This study aims to explore endophytic fungi found on the leaves of healthy rubber plants and determine their antagonistic potential against Colletotrichum gloeosporioides leaf fall disease in vitro using Potato Dextrose Agar media with the Dual Culture method. Almost all parts of the  rubber  plant  can  be  infected  with  a  number  of  plant  diseases,  one  of  which  attacks  the leaves. Leaf fall disease can be detrimental because fallen leaves can cause plant growth to be inhibited, and sap or latex production will decrease and can even result in death of the plant. An alternative to controlling diseases that have attacked widely is to use biological control by exploration. Exploration is carried out to obtain beneficial biological control materials and is the  first  step  in  the  implementation  of  biological  control  techniques.  The  research  was conducted  using  a  Non-Factorial  Completely  Randomized  Design  (CRD),  namely  by  using PDA (Potato Dextrose Agar) solid media consisting of 4 replicates, as the treatment was an isolate  of  endophytic  fungi  from  exploration  and  the  isolate  tested  for  antagonism  was  the Colletotrichum  gloeosporioides  fungus.  The  results  of  the  percentage  of  inhibition  on endophytic fungus isolates that are able to inhibit or suppress the growth of the mycelium of the C.  gloeosporioides fungus  with  values  ranging  from  40%  are  only  found  in  endophytic fungus  isolate  C  ( Arthobotrys Corda)  in  the  P3  treatment  with  an  average  percentage inhibition of 40.94% which is included in the criteria for a medium percentage of inhibition.
Keywords: Hevea brasiliensis , endophytic fungi, Colletotrichum gloeosporioides

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengeksplorasi  cendawan  endofit  yang  terdapat  pada  daun tanaman  karet  sehat  dan  mengetahui  potensi  antagonismenya  terhadap  penyakit  gugur  daun Colletotrichum  gloeosporioides secara in  vitro menggunakan  media Potato  Dextrose  Agar dengan  metode Dual  Culture .  Hampir  seluruh  bagian  tanaman  karet  dapat  terinfeksi sejumlah penyakit pada tanaman, salah satunya menyerang pada bagian daun. Penyakit gugur daun dapat merugikan karena daun yang gugur mampu mengakibatkan pertumbuhan tanaman terhambat,  serta  produksi  getah  atau  lateks  akan  menurun  bahkan  dapat  mengakibatkan kematian pada tanaman. Alternatif untuk mengendalikan penyakit yang telah menyerang luas yaitu menggunakan pengendalian hayati dengan cara eksplorasi. Eksplorasi dilakukan untuk mendapatkan bahan pengendalian hayati yang menguntungkan dan merupakan langkah awal
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
dari  pelaksanaan  teknik-teknik  pengendalian  hayati.  Penelitian  dilakukan  dengan menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  Non  Faktorial,  yaitu  dengan  menggunakan media  padat  PDA  ( Potato  Dextrose Agar)  terdiri  dari  4  ulangan,  sebagai  perlakuan  adalah isolat  cendawan  endofit  hasil  eksplorasi  dan  isolat  yang  diuji  antagonismenya  adalah Cendawan Colletotrichum gloeosporioides . Hasil persentase hambatan pada isolat cendawan endofit  yang  mampu  menghambat  atau  menekan  pertumbuhan  miselium  cendawan C. gloeosporioides dengan  nilai  berkisar  antara  40%  hanya  terdapat  pada  isolat  cendawan endofit  C  ( Arthobotrys Corda)  pada  perlakuan  P3  dengan  rerata  persentase  daya  hambat sebesar 40,94% yang termasuk kedalam kriteria persentase daya hambat sedang.
Kata Kunci : Hevea brasiliensis Muell. Arg, Cendawan Endofit, Cendawan Colletotrichum gloeosporioides

## PENDAHULUAN
Tanaman karet di Indonesia mempunyai nilai ekonomi tinggi dan bernilai strategis  dalam  meningkatkan  pendapatan petani  karet  serta  menunjang  perekonomian negara  (Juliansyah  dkk,  2018).  Indonesia memiliki  luas  areal  perkebunan  karet terbesar  di  dunia  yakni  mencapai  3,6  juta hektar.  Namun,  tidak  didukung  dengan tingkat  hasil  produktivitas  tanaman  karet  di Indonesia  yang  tergolong  rendah  jika dibandingkan dengan Thailand (Badan Pusat Statistik, 2017).
Hampir seluruh bagian tanaman karet dapat  terinfeksi  sejumlah  penyakit  pada tanaman,  salah  satunya  menyerang  pada bagian  daun.  Penyakit  gugur  daun  utama yang  ada  pada  tanaman  karet  yaitu disebabkan  oleh  cendawan Colletotrichum gloeosporioides , Oidium heveae, Corynespora  cassiicola dan Pestalotiopsis microspora. Penyakit ini merupakan penyakit  penting  karena  dapat  menyerang tanaman  di  pembibitan,  tanaman  muda  dan tanaman menghasilkan. Penyakit gugur daun dapat  merugikan  karena  daun  yang  gugur mampu mengakibatkan pertumbuhan tanaman terhambat, serta produksi getah atau lateks akan menurun bahkan dapat mengakibatkan  kematian  pada  tanaman
(Daslin, 2013).
Menurut  Rokhmah  (2017),  penyakit gugur daun Colletotrichum mampu menyerang  tanaman  karet  mulai  pada pembibitan,  tanaman  belum  menghasilkan, sampai tanaman dewasa yang telah menghasilkan.  Gugur  daun  karet  akibat  dari serangan Colletotrichum  gloeosporioides menyebabkan  gejala  berupa  munculnya bercak-bercak  berwarna  coklat  kehitaman pada  daun  muda  di  bagian  tengah  yang berturut-turut  kemudian  diikuti  dengan mengeriputnya  lembaran  daun.  Berikutnya akan  timbul  busuk  kebasahan  pada  bagian terinfeksi  dan  akhirnya  akan  mengalami gugur  daun.  Gejala  yang  terlihat  pada  daun tua  berupa  bercak  daun  berwarna  coklat kekuningan,  tepi  dan  ujung  daun  keriput, serta  permukaan  daun  menjadi  kasar.  Pada klon  yang  rentan  serangan  berat  dapat menurunkan  produktivitas  lateks  sebesar 40%  atau  lebih.  Kelembapan  merupakan faktor utama penyebab perkembangan penyakit gugur daun terutama dengan adanya hujan.  Pada  saat  pembentukan  daun  baru setelah masa gugur daun akan diikuti dengan serangan Colletotrichum yang  lebih  berat karena  disertai  adanya  hujan.  Dengan kelembapan udara sekitar 95% dan berkembang  optimum  pada  suhu  25-28  °C,
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
maka  spora C.  gloeosporioides dapat berkecambah.
Penyakit  gugur  daun  sebelumnya dianggap  penyakit  minor  oleh  petani  karet, sehingga  rekomendasi  cara  serta  bahan pengendalian  belum  tersedia.  Dikarenakan perkembangan dari penyakit ini cukup cepat, sehingga dikhawatirkan mampu menyebabkan kerugian  yang besar bagi para petani  karet,  maka  dari  itu  petani  mulai melakukan  pemupukan  sebagai  penguatan tanaman,  serta  melakukan  pengendalian dengan  menggunakan  fungisida  dengan  alat fogger atau power  sprayer pada  malam  hari atau  pada  waktu  subuh.  Tetapi,  teknik tersebut  membutuhkan  dana  yang  cukup besar  dan  mampu  mencemari  lingkungan sekitar (Alimin, 2018).
Alternatif untuk mengendalikan penyakit  yang  telah  menyerang  luas  yaitu menggunakan  pengendalian  hayati  dengan cara  eksplorasi.  Eksplorasi  dilakukan  untuk mendapatkan  bahan  pengendalian  hayati yang menguntungkan dan merupakan langkah  awal  dari  pelaksanaan  teknik-teknik pengendalian  hayati.  Oleh  karena  itu,  perlu pelestarian  dengan  mengeksplorasi  musuh alami  tersebut  agar  mampu  dikembangkan, diperbanyak serta dimanfaatkan untuk pengendalian.  Dalam  kegiatan  eksplorasi dilakukan  dengan  mencari  spesimen  di lapangan, yaitu berupa serangga yang diduga terinfeksi cendawan entamopatogen, serangga yang tidak terinfeksi cendawan atau sehat, serta pada bagian tanaman (daun, akar, batang)  dan  tanah  di  sekeliling  tanaman (Darmawan, 2016).
Keunggulan  agens  hayati  untuk mengendalikan penyakit tanaman di antaranya adalah dengan menghambat inokulum dan kolonisasi patogen (menghasilkan antibiotik atau sebagai
mikoparasit),  menginduksi  ketahanan  pada tanaman  dan  memicu  pertumbuhan  dari tanaman  (Kumar  &  Khurana,  2021).  Agens hayati  efektif  untuk  waktu  yang  cukup  lama sehingga  tidak  perlu  aplikasi  secara  terus- menerus (Raguchander dkk, 2011).
Agens  hayati  yang  sudah  dilaporkan sebagai  pengendalian  penyakit  gugur  daun diantaranya adalah cendawan endofit (Gazis, 2012).  Lebih  dari  20  tahun  yang  lalu,  telah dilakukan penelitian tentang mikroba endofit.  Hampir  setiap  bagian  tanaman ditemukan  adanya  cendawan  endofit,  baik pada  daun,  akar,  ataupun  batang.  Dalam beberapa  tahun  terakhir,  mikroba  endofit digunakan  sebagai  agens  pengendali  biologi yang  menjadi  alternatif  untuk  menggantikan pengendalian  kimiawi  seperti  penggunaan pestisida.  Penggunaan  agens  biologis  secara alami  dapat  mengendalikan  populasi  hama, serta mampu meningkatkan produksi tanaman,  hal  itu  merupakan  pilihan  yang baik  bagi  resistensi  penyakit  tidak  mudah patah, dan ramah lingkungan (Procopio  dkk, 2009).
Cendawan endofit yang efekif mengendalikan Colletotrichum sp., diantaranya yaitu isolat endofit Trichoderma . Syamsafitri  &  Hasanudin  (2013)  telah meneliti cendawan endofit dari berbagai klon karet  dan  mendapatkan  sebanyak  13  isolat endofit dari genus Trichoderma , Aspergillus , Penicillium , Gliocladium, dan Pestalotia . Cendawan endofit tersebut mampu menghambat pertumbuhan dari C. gloesporioides .  Selain  itu,  Villarraga  dkk, (2017)  telah  menggunakan  beberapa  strain endofit Streptomyces strain  5.1 untuk mengendalikan C.  gloesporioides pada tanaman karet yang ada di Kolombia.
Adanya  kejadian  dari  penyakit  gugur daun Colletotrichum menyebabkan
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
menurunnya  produksi  lateks  lebih  dari  40%. Selama  ini,  pengendalian  penyakit  ini menggunakan metode pengendalian penyakit secara  kimia,  budidaya  dan  sanitasi.  Oleh karena itu, dibutuhkan alternatif pengendalian  penyakit  yang  lebih  ramah lingkungan dan efektif yaitu dengan pengendalian  secara  biologi  menggunakan agens hayati cendawan endofit. Penelitian ini diperlukan untuk mengetahui potensi antagonisme cendawan endofit yang terdapat didalam  jaringan  daun  tanaman  karet terhadap penyakit gugur daun Colletotrichum .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan  September  sampai  November  2022, bertempat  di  Unit  Riset  Sungei  Putih,  Pusat Penelitian Karet, Kecamatan Galang, Kabupaten  Deli  Serdang,  Sumatera  Utara. Tempat  pengambilan  sampel  dilakukan  di kebun  persilangan  buatan  dengan  ketinggian 80 m dpl. Kegiatan penelitian dilakukan pada skala  laboratorium.  Bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  sampel  daun tanaman karet yang sehat, isolat Colletotrichum
gloeosporiodes , streptomycin ,  20  gram  agar-agar,  20  gram dextrose,  250  gram  kentang,  aquades,  dan clorox 1%,  alkohol  70%,  alkohol  96%, NaOCl 1%, spirtus, metilen blue, benih sawi, tanah  steril.  Sedangkan  alat  yang  akan digunakan  yaitu  cawan  petri  ukuran  9  cm dan  cawan  petri  ukuran  15  cm,  erlenmeyer, beaker  glass, object  glass , cover  glass , bunsen, gelas ukur, gunting, panci serbaguna,  kompor,  saringan  teh,  kapas, aluminium  foil , plastic  wrap ,  tisu  steril, kantung  plastik,  pisau, hot  plate ,  jarum  ose, autoclave ,  mikroskop,  timbangan  elektrik, cork  borer ,  oven,  LAFC  ( Laminar  Air  Flow Cabinet) , alat tulis serta kamera.
Data  pengaruh  antara  cendawan endofit  terhadap  variabel  penyakit  gugur daun Colletotrichum  gloeosporioides diolah secara  statistik  dan  deskriptif.  Penelitian dilakukan  dengan  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  Non  Faktorial,  yaitu dengan  menggunakan  media  padat  PDA ( Potato  Dextrose Agar)  terdiri  dari  5 perlakuan dengan 4 ulangan. Perlakuan yang diuji  terdiri  dari:  P 0 =  Kontrol  (Cendawan Colletotrichum  gloeosporioides );  P 1 =  Isolat Cendawan Endofit A vs Cendawan Colletotrichum  gloeosporioides; P 2 =  Isolat Cendawan Endofit B vs Cendawan Colletotrichum  gloeosporioides; P 3 =  Isolat Cendawan Endofit C vs Cendawan Colletotrichum  gloeosporioides; P 4 =  Isolat Cendawan Endofit D vs Cendawan Colletotrichum gloeosporioides .
Data  dari  parameter  pengamatan metode dual  culture dianalisis  dengan menggunakan  sidik  ragam  (ANOVA)  pada taraf  5%  dan  1%,  jika  pada  hasil  analisis berpengaruh  nyata  maka  akan  dilanjutkan dengan  menggunakan  uji  BNT  pada  taraf 5%.
Tahap  pelaksanaan  penelitian  adalah sebagai berikut:

## 1. Sterilisasi Alat
Sebelum  dilakukan  penelitian,  alat- alat  yang  akan  dipakai  terlebih  dahulu disterilisasi dari patogen yang tidak diinginkan,  alat-alat  tersebut  dicuci  hingga bersih  lalu  direndam  menggunakan  alkohol 70%  dan clorox 1%,  kemudian  dimasukkan kedalam autoclave pada  suhu 120  C dengan tekanan 1 atm selama 20 menit.

## 2.  Pembuatan  Media  Potato  Dextrose Agar (PDA)
Bahan  pembuatan  media  PDA  terdiri dari 250 gram kentang, 20 gram dextrose , 20 gram  agar,  dan  1000  ml  aquades.  Untuk
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
menghitung  berat  dari dextrose dan  agar digunakan  timbangan  elektrik.  Kentang dikupas  dan  dicuci bersih,  kemudian dipotong  kecil-kecil  dengan  ukuran  (1  x  1  x 1  cm).  Kentang  yang  telah  dipotong dimasukkan  ke  dalam  panci  serbaguna  yang telah  diisi  aquades,  dan  dimasak  selama  20 menit.  Selanjutnya,  kentang  disaring  dengan menggunakan saringan dan diambil ekstraknya  sebanyak  500  ml,  setelah  itu dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer  kemudian diaduk  sampai  homogen  menggunakan  hot plate selama 1 menit. Selanjutnya erlenmeyer disumbat  dengan  menggunakan  kapas  dan ditutup  kertas aluminium  foil ,  kemudian media PDA dimasukkan ke dalam autoclave pada  suhu 121°C  dengan  tekanan  1  atm selama  15  menit.  Berikutnya  penuangan cairan  PDA  yang  dilakukan  di  LAFC ( Laminar Air Flow Cabinet ), sebelum cairan PDA  di  tuangkan  ke  dalam  cawan  petri cairan  tersebut  harus  dicampur streptomycin sebanyak  25  mg  agar  bakteri  pada  daun tanaman karet yang akan di isolasi tidak ikut tumbuh pada saat pengisolasian daun, hal ini berguna agar pada media PDA hanya tumbuh cendawan  yang  akan  digunakan  pada penelitian.  Pada  saat  penuangan  cairan  PDA dilakukan  di  dekat  bunsen  supaya  cairan tidak  mudah  membeku.  Setelah  selesai penuangan media PDA maka media diletakkan  di  dalam  oven  agar  tetap  steril atau  tidak  mengalami  kontaminasi  dari cendawan ataupun bakteri sekitar.
3. Isolat Cendawan Patogen Colletotrichum gloeosporioides Isolasi Cendawan Colletotrichum gloeosporioides
Isolasi cendawan Colletotrichum gloeosporioides berasal  dari  daun  karet bergejala  sakit  pada  klon  IRR  118.  Daun karet  yang  digunakan  terdapat  di  kebun
okulasi  atau  kebun  entres  Unit  Riset  Sungei Putih.  Isolasi  daun  dilakukan  dengan  cara memotong daun sepanjang ± 1 cm, kemudian dilakukan  sterilisasi  permukaan  dengan merendam  potongan  sampel  daun  dengan cairan clorox 1% selama 3 menit, setelah itu direndam menggunakan alkohol 70% selama 15  detik  dan  direndam  dengan  aquades selama  2  menit,  lalu  potongan  sampel dikering-anginkan di atas tisu steril.
Setelah potongan sampel daun kering,  daun  diletakkan  di  atas  media  PDA yang  sudah  beku  dalam  cawan  petri.  Lalu ditunggu  2  sampai  3  hari  setelah  inkubasi untuk melihat pertumbuhan cendawan Colletotrichum  gloeosporioides pada  media PDA .
Identifikasi Colletotrichum gloeosporioides Identifikasi cendawan C. gloeosporioides
dilakukan dengan meletakkan  sedikit  hifa  pada object  glass dengan menggunakan jarum ose lalu di taruh sebentar  di  atas  api  bunsen  agar  hifa menempel dan dikering-anginkan, selanjutnya  hifa  diteteskan  dengan  aquades setelah itu ditutup menggunakan cover glass , berikutnya dilakukan pengamatan mikroskopis menggunakan mikroskop compound pada perbesaran obyektif 60x dan jarak spesimen 0,29 mm. Cendawan Colletotrichum  gloeosporioides yang  sudah teridentifikasi  kemudian  dibiakkan  pada media PDA yang baru dan diinkubasi selama 5  hari  untuk  mendapatkan  isolat  murni. Pemurnian  isolat  dilakukan  dengan  cara memindahkan  bagian  dari  cendawan C. gloeosporioides dengan menggunakan jarum ose ke media PDA yang baru.
4.  Eksplorasi  Cendawan  Endofit  Asal Daun Tanaman Karet
Pengambilan Sampel Daun
Pengambilan sampel cendawan
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
endofit  pada  daun  yang  digunakan  dalam eksplorasi  yaitu  pada  tanaman  karet  yang sehat dan tidak menunjukkan gejala serangan penyakit tanaman. Dalam penelitian ini, daun yang  akan  digunakan  akan  diambil  dari beberapa  klon  pada  kebun  persilangan buatan  yang  ada  di  Unit  Riset  Sungei  Putih, Pusat  Penelitian  Karet.  Daun  dicuci  dengan air  mengalir  untuk  menghilangkan  kotoran yang ada dan di kering-anginkan. Selanjutnya,  daun  yang  sudah  bersih  dan kering di masukkan ke dalam kantung plastik yang steril dan dibawa ke laboratorium.

## Isolasi Cendawan Endofit
Isolasi  cendawan  endofit  dilakukan pada  bagian  permukaan  daun  tanaman  karet hasil  eksplorasi  sebelumnya  dengan  cara mencuci  menggunakan  alkohol  96%  selama 30  detik,  lalu  dibilas  dengan  menggunakan aquades  selama  15  detik  agar  daun  menjadi steril  dari  cendawan  patogen,  sehingga cendawan  yang  tumbuh  diharapkan  berasal dari  dalam  jaringan  daun  tanaman  karet. Kemudian  sampel  daun  dipotong  sepanjang ±  1  cm,  potongan  sampel  selanjutnya disterilkan  dengan  cara  direndam  ke  dalam larutan  NaOCl  1%  selama  1  menit,  lalu direndam  dengan  alkohol  70%  selama  1 menit,  dan  dibilas  dengan  aquades  sebanyak 3  kali,  lalu  potongan  sampel  di  kering- anginkan di atas tisu steril. Setelah potongan sampel  daun  kering,  daun  diletakkan  di  atas media PDA yang sudah beku di dalam cawan petri.  Bilasan  terakhir  yaitu  menggunakan aquades sebanyak 1 ml dan dituang ke dalam media  PDA  yang  baru  untuk  digunakan sebagai  kontrol,  jika  pada  media  kontrol tumbuh cendawan maka sampel isolasi daun pada  media  bukan  merupakan  cendawan endofit  (Tirtana,  2013).  Hasil  isolasi  atau pertumbuhan  cendawan  akan  terlihat  2 sampai 3 hsi.

## Pemurnian Cendawan Endofit
Pemurnian  dilakukan  pada  seluruh koloni cendawan yang tumbuh dan dianggap berbeda  berdasarkan  morfologi  makroskopis yang meliputi warna dan bentuk koloni. Pada masing-masing  cendawan  diambil  serta dipisahkan  ke  dalam  media  PDA  baru dengan  menggunakan  jarum  ose.  Jika cendawan yang telah tumbuh masih bercampur  dengan  cendawan  lain  maka harus dimurnikan kembali.

## Identifikasi Cendawan Endofit
Identifikasi cendawan endofit dilakukan  dengan  meletakkan  sedikit  hifa pada object  glass dengan  menggunakan jarum  ose  lalu  di  taruh  sebentar  di  atas  api bunsen  agar  hifa  menempel  dan  dikering- anginkan,  lalu  ditetesi  dengan  hifa  dengan pewarna metilen blue biarkan selama 1 menit setelah  itu  bilas  dengan  aquades  dan  ditutup menggunakan cover glass , berikutnya dilakukan pengamatan mikroskopis menggunakan  mikroskop  compound  pada perbesaran  obyektif  40x  dan  jarak  spesimen cendawan  endofit  (A,  B,  C,  D)  sebesar  0,53 mm.
5.  Uji  Antagonisme in  vitro Cendawan Endofit
terhadap
Cendawan
Colletotrichum gloeosporioides dengan Metode Dual Culture
Uji aktivitas antagonis antara cendawan  endofit  dan  cendawan  patogen Colletotrichum  gloeosporioides dilakukan dengan  metode  biakan  ganda  atau dual culture yaitu menempatkan potongan miselium cendawan endofit dan cendawan C. gloeosporioides dengan diameter 5 mm pada media  PDA  dalam  satu  cawan  petri  yang sama  pada  cawan  petri  berukuran  9  cm. Potongan  miselium  cendawan  diperoleh dengan  menggunakan cork  borer berukuran 5  mm.  Posisi  masing-masing  cendawan
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
diatur  saling  berhadapan  dengan  jarak  3  cm dari  tepi  media.  Media  yang  diinokulasikan isolat  cendawan C.  gloeosporioides tanpa cendawan  endofit  berperan  sebagai  kontrol. Pada  saat  melakukan  metode dual  culture cawan  petri  harus  disekitar  api  bunsen  agar terhindar  dari  bakteri  ataupun  cendawan yang menyebabkan media akan terkontaminasi setelah
inokulasi berlangsung.
6.  Uji  Potensi  Patogenesitas  Cendawan
Endofit  terhadap  Kecambah  Sawi  pada Tanah Steril
Pengujian potensi patogenesitas cendawan  dilakukan  terhadap  kecambah sawi  pada  tanah  steril,  pengujian  dilakukan untuk  melihat  persentase  infeksi  dari cendawan  endofit  sebagai  patogenik  atau nonpatogenik.  Untuk  menghasilkan  tanah steril  yaitu  dengan  menggunakan autoclave pada  suhu  120  C  dengan  tekanan  1  atm selama  20  menit.  Isolat  cendawan  endofit yang  digunakan  adalah  isolat  cendawan endofit  yang  sudah  diinkubasikan  selama  7 hari  pada  media  PDA.  Isolat  tersebut kemudian digerus dan diberi 500 ml aquades. Selanjutnya,  tanah  steril  dimasukkan  ke dalam  cawan  petri  berukuran  15  cm  dan benih  sawi  ditanam  sebanyak  10  lubang tanam  yang  berisi  2  benih  sawi  pada  setiap lubang  tanam.  Larutan  cendawan  endofit kemudian  disiramkan  pada  sekitar  benih sawi  sampai  tanah  menjadi  lembap.  Sebagai kontrol diuji menggunakan cendawan Colletotrichum  gloeosporioides ,  dilakukan untuk melihat insidensi infeksi dari cendawan patogen terhadap kecambah sawi.
Adapun parameter yang diamati yaitu sebagai berikut :
1. Karakterisasi Cendawan Colletotrichum gloeosporioides
Pengamatan  dilakukan  untuk  melihat ciri  khas  dari  Cendawan Colletotrichum gloeosporioides yang digunakan pada penelitian  ini  berupa  morfologi  cendawan dan bentuk konidia. Identifikasi karakteristik spora cendawan C. gloeosporioides berdasarkan  buku  penyakit  tanaman  kebun Semangun (1990).

## 2. Karakterisasi Cendawan Endofit
Karakterisasi secara makroskopis meliputi bentuk koloni, warna, pola penyebaran, tekstur koloni cendawan. Secara mikroskopis  karakterisasi  cendawan  endofit meliputi hifa, konidiofor dan bentuk konidia. Identifikasi  karakteristik  cendawan  endofit berdasarkan  buku  kunci  spesies  cendawan oleh Watanabe (2002).
3. Persentase Daya Hambat secara in vitro Cendawan  Endofit  terhadap  Cendawan Colletotrichum gloeosporioides dengan Metode Dual Culture
Biakan  diinkubasi  pada  suhu  ruang selama 7 hari disertai pengukuran pengamatan metode dual culture yang mulai dilakukan  pada  hari  ke-2  setelah  inokulasi. Untuk  pengamatan  metode dual  culture dilakukan mengukur pertumbuhan cendawan patogen C. gloeosporioides ke arah cendawan endofit dan pertumbuhan cendawan  patogen C.  gloeosporioides yang tumbuh berlawanan dengan cendawan endofit, pengukuran dilakukan dengan menggunakan penggaris lurus serta persentase penghambatan dihitung mulai dari 2  hari  setelah  inkubasi  hingga  7  hari  setelah inkubasi.
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
Gambar 1 . Uji antagonis metode dual culture Persentase
penghambatan pertumbuhan  ( percentage  growth  inhibition
–PGI) ditentukan berdasarkan persamaan:
P (%) = × 100% Keterangan : P :  Persentase Penghambatan
R1 :    Jari-jari  Koloni  Colletotrichum  yang tumbuh  berlawanan  dengan  mikroorganisme endofit R2 :  Jari-jari  koloni  Colletotrichum  yang tumbuh  kearah  mikroorganisme  endofit  (Seema dan Devaki, 2012)
Berdasarkan  pernyataan  Amaria  dkk (2013), ada tiga kriteria persentase hambatan pertumbuhan  (%)  yaitu  persentase  hambat tinggi:  70-100%;  persentase  hambat  sedang: 40-69%; persentase hambat rendah: 0-39%. 4.  Persentase  Infeksi  Cendawan  Endofit Terhadap Kecambah Sawi pada   Tanah Steril
Pengamatan dilakukan setelah 10 hari inkubasi  terhadap  daya  tumbuh  kecambah dengan melihat gejala nekrotik dan mengukur panjang kecambah. Apabila tanaman  tumbuh  maka  cendawan  yang diinokulasi  bukan  kelompok  patogen  atau merupakan  cendawan  endofit,  sebaliknya jika tanaman mati maka cendawan
menyebabkan patogen atau bukan
merupakan cendawan endofit. Pengamatan dilakukan terhadap persentase infeksi dengan rumus:
Persentase Infeksi = × 100% Keterangan: A  : Jumlah benih tidak berkecambah
B  : Jumlah kecambah nekrosis atau mati
C  :  Jumlah  benih  yang  diinkubasi  (Harahap dkk , 2015).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik  Cendawan Colletotrichum gloeosporioides
Hasil dari karakteristik secara makroskopis  menunjukkan  bahwa  cendawan Colletotrichum gloeosporioides yang berasal dari daun bergejala sakit pada klon IRR 118 yang  terdapat  di  kebun  entres  Unit  Riset Sungei Putih, dalam media PDA menghasilkan  banyak  miselium,  koloni berwarna  putih  abu-abu,  di  bagian  bawah koloni berwarna cokelat kehitaman, pertumbuhannya cepat, dan pada kultur yang sudah  tua  (lebih  dari  15  hari)  muncul  noda- noda hitam pada permukaan koloni (Semangun, 1990).
Gambar 2 . (A) Koloni Cendawan Colletotrichum gloeosporioides pada 7 HSI; (B) Bagian bawah koloni Cendawan C. gloeosporioides ;  (C) Koloni Cendawan C. gloeosporioides lebih dari 15 HSI (Foto Langsung) A B C
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
Pengamatan ciri mikroskopik cendawan  seperti  bentuk  konidia,  bentuk spora dan warna dari spora pada media PDA diamati di bawah mikroskop compound pada perbesaran  obyektif  60x  dengan  jarak spesimen 0,29 mm. Cendawan C. gloeosporioides ini  memiliki  bentuk  konidia silindris,  spora  tidak  bersepta  dengan  warna hialin.
Berdasarkan  laporan  dari  Smith  dan Black (1990), bahwa morfologi dan karakteristik  dari  cendawan Colletotrichum yang  diisolasi  dari  tanaman    strawberry menunjukkan  respon  yang  berbeda  saat diinokulasikan  pada  media  PDA,  seperti
jamur C.  fragariae memiliki  bentuk  spora gelondong,  warna  koloni  hitam  abu-abu; C. gloeosporioides memiliki  bentuk  spora silindris,  warna  koloni  abu-abu  dan C. acutatum bentuk  spora  silindris,  warna koloni putih abu-abu sampai coklat kehitaman.
Ciri-ciri  umum  cendawan  dari  genus Colletotrichum yaitu  memiliki  hifa  bersekat dan  bercabang  serta  menghasilkan  konidia yang  transparan,  memanjang  dengan  ujung membulat  atau  meruncing  dengan  panjang antara  10-16  µm  dan  lebarnya  5-7  µm,  dan massa  konidia  berwarna  hitam  (Dickman, 1993).
Gambar 3 . Konidia Colletotrichum gloeosporiodes (Foto langsung)

## Karakteristik Cendawan Endofit
Dari hasil eksplorasi cendawan endofit,  diperoleh  4  isolat  cendawan  endofit berasal  dari  daun  tanaman  karet  yang  sehat diambil  dari  klon  yang  berbeda  pada  kebun enteres  Unit  Riset  Sungei  Putih.  Keterangan isolat  cendawan  endofit  hasil  eksplorasi (dapat dilihat pada tabel 1). Ada beberapa hal yang  mampu  mempengaruhi  keragaman endofit pada suatu tanaman diantaranya yaitu faktor-faktor  lingkungan,  tipe  vegetasi,  pola
spatiotemporal  mikroskosmos  (akar),  serta interaksinya dengan berbagai mikrob (Sieber & Grünig, 2006).
Hasil  karakterisasi  dari  4  isolat cendawan  endofit  yang  telah  diisolasi  dari daun  tanaman  karet  sangat  bervariasi  antara satu  isolat  dengan  isolat  lain  dilihat  dari  ciri morfologinya,  menunjukkan  kemungkinan bahwa isolat cendawan endofit yang diisolasi merupakan  spesies  yang  berbeda,  berikut adalah  kenanampakan  dari  isolat  cendawan
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
endofit.
Tabel 1 . Keterangan isolat cendawan endofit hasil eksplorasi Isolat Asal Isolat Asal Inang Tanaman Kode Perlakuan Cendawan Endofit A Klon PB 260 Daun Sehat Karet P1 Cendawan Endofit B Klon IRR 32 Daun Sehat Karet P2 Cendawan Endofit C Klon RRIC 131 Daun Sehat Karet P3 Cendawan Endofit D Klon PB 217 Daun Sehat Karet P4
Isolat  cendawan  endofit  berasal  dari hasil  eksplorasi  daun  sehat  tanaman  karet  di kebun  entres  milik  Unit  Riset  Sungei  Putih. Secara makroskopis dan mikroskopis beserta identifikasi  berdasarkan  buku  kunci  spesies cendawan  oleh  Watanabe  (2002)    adalah sebagai berikut:
a.    Pada  kode  isolat  cendawan  endofit  A,
karakteristik  secara  makroskopis  yaitu koloni berwarna hijau, berbentuk seperti bunga,  memiliki  bau,  pola  penyebaran aerial,  tekstur  koloni  beludru  (velvety), memiliki batas koloni yang halus, organ pembentuk  berupa  stroma.  Karakteristik secara  mikroskopis  yaitu  hifa  bersekat, konidiofor  bercabang,  dan  konidia berbentuk  silindris.  Isolat  cendawan endofit  A  termasuk  ke  dalam  divisi Basidiomycotina dengan genus
Coprinus Pers.  yang  sesuai  dengan identifikasi dari buku Watanabe (2002).
b.    Pada  kode  isolat  cendawan  endofit  B, karakteristik  secara  makroskopis  yaitu koloni  berwarna  hijau  kecokelatan, berbentuk  seperti  bunga,  memiliki  bau, pola  penyebaran  aerial,  tekstur  koloni beludru (velvety), memiliki batas koloni yang  halus,  organ  pembentuk  berupa stroma. Karakteristik secara mikroskopis yaitu hifa bersekat, konidiofor
bercabang, terlihat buram. Isolat cendawan  endofit  B  termasuk  ke  dalam divisi Ascomycotina dengan  genus Monosporacus Pollack  &  Uecker.  yang sesuai dengan identifikasi buku Watanabe (2002).
c.    Pada  kode  isolat  cendawan  endofit  C, karakteristik  secara  makroskopis  yaitu koloni  berwarna  abu-abu  kehitaman, tidak  berbau,  pola  penyebaran  aerial, tekstur  koloni  seperti  kapas,  memiliki batas  koloni  yang  halus.  Karakteristik secara  mikroskopis  yaitu  hifa  tidak bersekat,  konidiofor  tegak,  dan  konidia berbentuk  bulat  telur.  Isolat  cendawan endofit  C  termasuk  ke  dalam  divisi Deuteromycotina dengan genus Arthrobotrys Corda. yang sesuai dengan identifikasi buku Watanabe (2002).
d.    Pada  kode  isolat  cendawan  endofit  D, karakteristik  secara  makroskopis  yaitu koloni berwarna hijau kehitaman, berbentuk  seperti  bunga,  memiliki  bau, pola  penyebaran  aerial,  tekstur  koloni beludru (velvety), memiliki batas koloni yang  halus,  organ  pembentuk  berupa stroma. Karakteristik secara mikroskopis yaitu hifa bersekat, konidiofor bercabang,  konidia  berbentuk  bulat. Isolat  cendawan  endofit  D  termasuk  ke dalam  divisi Ascomycotina dengan genus Chaetomium  funicola Cooke. yang  sesuai  dengan  identifikasi  buku Watanabe (2002).
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
(A)
(B) (C)
Gambar 4.
(A)  Empat  isolat  cendawan  endofit  pada  media  PDA;  (B)  Morfologi miselium  pada  perbesaran  obyektif  40x,  jarak  spesimen  0,53  mm;  (C)
Identifikasi  berdasarkan  buku  kunci  morfologi  cendawan  Watanabe,
2002 (Foto Langsung) Potensi  Antagonisme In  Vitro Cendawan Endofit
terhadap
Cendawan
Colletotrichum gloeosporioides dengan Metode Dual Culture
Persentase  Daya  Hambat  Cendawan Endofit  terhadap  Cendawan Colletotrichum gloeosporioides . Berdasarkan hasil uji ANOVA pada taraf 5% dan 1% dari data uji antagonisme  cendawan  endofit  terhadap pertumbuhan miselium cendawan C.
gloeosporioides secara in vitro menunjukkan bahwa pada 2 HSI hingga 7 HSI semua isolat cendawan  endofit  berpengaruh  nyata  dalam menghambat  pertumbuhan  cendawan C. gloeosporioides sehingga  dilakukan  uji  lajut dengan  menggunakan  uji  BNT  pada  taraf 5%.
Pengamatan untuk mengetahui persentase penghambatan pertumbuhan dilakukan 1 hari setelah inokulasi yaitu pada
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
2  HSI  hingga  7  HSI.  Pengamatan  metode dual  culture dilakukan  dengan  mengukur pertumbuhan cendawan patogen C . gloeosporioides ke  arah  cendawan  endofit dan  pertumbuhan  cendawan  patogen C. gloeosporioides yang  tumbuh  berlawanan
dengan cendawan endofit, kemudian dilakukan perhitungan persentase penghambatannya. Hasil dari analisis potensi antagonisme  cendawan  endofit  terhadap  C. gloeosporioides (dapat dilihat pada Tabel 2).
Tabel 2 . Persentase daya hambat misellium cendawan c. gloeosporioides oleh cendawan endofit pada 2-7 hsi di transformasi Arcsin Sinc -1  P Perlakuan Daya Hambat Cendawan Endofit (%) pada hari ke- setelah inokulasi 2 3 4 5 6 7 P0/Kontrol 2,86 a 2,86 a 2,86 a 2,86 a
2,86 a 2,86 a P1 43,05 c 54,27 c 47,67 b 46,91 bc 33,49 b 27,20 b P2 28,59 b 46,27 bc 47,51 b 50,33 c 43,07 c 32,57 bc P3 35,81 bc 45,43 bc 54,29 c 48,02 bc 41,43 bc 40,94 c P4 40,63 c 44,32 b 46,85 b 44,07 b 34,77 b 28,89 b BNT 0,05 9,71 9,80 5,92 8,14 10,50 10,48
Keterangan: Angka yang diikuti huruf-huruf yang sama pada kolom yang sama, menunjukkan berbeda tidak nyata berdasarkan uji BNT taraf 5%
Dari  data  yang  diperoleh  pada  tabel 2,  rerata  persentase  penghambatan  dapat dilihat  pada  2  HSI  daya  hambat  terbesar dijumpai  pada  perlakuan  P1  dan  P4  berbeda nyata  terhadap  perlakuan  P0  dan  P2,  namun berbeda  tidak  nyata  terhadap  perlakuan  P3. Pada  3  HSI  daya  hambat  terbesar  dijumpai pada  perlakuan  P1  berbeda  nyata  terhadap perlakuan  P0  dan  P4,  namun  berbeda  tidak nyata  terhadap  perlakuan  P2  dan P3. Pada  4 HSI  daya  hambat  terbesar  dijumpai  pada perlakuan  P3  berbeda  nyata  terhadap perlakuan  P0,  P1,  P2  dan  P4.  Pada  5  HSI daya hambat terbesar dijumpai pada perlakuan  P2  berbeda  nyata  terhadap perlakuan  P0  dan  P4,  namun  berbeda  tidak nyata  terhadap  perlakuan  P1  dan P3. Pada  6 HSI  daya  hambat  terbesar  dijumpai  pada perlakuan  P2  berbeda  nyata  terhadap perlakuan  P0,  P1  dan  P4,  namun  berbeda tidak  nyata  terhadap  perlakuan  P3.  Pada  7 HSI  daya  hambat  terbesar  dijumpai  pada perlakuan  P3  berbeda  nyata  terhadap
perlakuan  P0  dan  P1,  namun  berbeda  tidak nyata terhadap P2 dan P4.
Berdasarkan hasil pengamatan pada 7 HSI  diperoleh  persentase  hambatan  pada isolat  cendawan  endofit  yang  mampu menghambat pertumbuhan misellium cendawan C.  gloeosporioides dengan  nilai berkisar  diantara  40%  yaitu  persentase  daya hambat  sedang,  hanya  terdapat  pada  isolat cendawan  endofit  C  pada  perlakuan  P3 dengan  rerata  persentase  daya  hambat sebesar  40,94%  (tabel  2).  Untuk  isolat cendawan  endofit  lainnya  berpengaruh  tidak nyata pada setiap perlakuan, karena pada hari ke-7  setelah  inokulasi  cendawan  endofit mengalami  kemunduran  dalam  pertumbuhan pada  masa  penghambatan.  Tetapi  untuk perkembangan C.  gloeosporioides malah semakin meningkat, hal inilah yang menjadikan  cendawan  endofit  tidak  mampu menghambat pertumbuhan dari C.
gloeosporioides . Tinggi
rendahnya persentase  hambatan  dilihat  dari  besarnya
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
zona yang dihasilkan oleh cendawan endofit. Masing-masing dari cendawan endofit mempunyai daya hambat yang berbeda-beda. Perbedaan  dari  setiap  kemampuan  daya antagonis cendawan dapat ditentukan berdasarkan aktivitas cendawan dalam mengendalikan  patogen  seperti  kompetisi terhadap  tempat  tumbuh  serta  nutrisi, antibiosis  dan  mikoparasitisme  (Pelczar  dan Chan, 1998).
No.  Perlakuan Ulangan I II
III IV 1. P0 2. P1 3. P2 4. P3 5. P4
Gambar 5. Pengamatan  7  HSI  uji  antagonisme  cendawan  endofit  terhadap
Cendawan C.  gloeosporioides dengan  menggunakan  metode dual culture (CL  :  Cendawan Colletotrichum gloeosporioides ,  CE  : Cendawan Endofit) (Foto Langsung)
Keuntungan  yang  didapat  dengan menggunakan  cendawan  endofit  isolat  CE.C yang  merupakan  genus  dari  cendawan Arhtrobotrys Corda  pada  perlakuan  P3  yang memiliki potensi sebagai agens hayati adalah pertumbuhannya  lebih  cepat  dibandingkan dengan  cendawan  endofit  lainnya  dan pembiakannya  mudah  untuk  dilakukan. Kandungan  dari  spesies  cendawan  ini  yaitu memiliki  enzim  protease  yang  memegang peran penting selama infeksi dan merupakan salah  satu  faktor  virulensi  terpenting  pada
jamur  tersebut  (Yang  dkk.,  2010)  yang mampu  menghambat  pertumbuhan  dari cendawan C.  gloeosporioides .  Cendawan endofit  isolat  CE.C  ini  menggunakan apresorium  atau  zat  penekan  pertumbuhan lawannya  dengan  cara  mengeluarkan  enzim protease  dan  kitinase  untuk    menembus dinding  sel  cendawan  patogen  (Yang  dkk., 2010).
Berdasarkan hasil pengamatan pada 7 HSI  pertumbuhan  cendawan  endofit  pada perlakuan  P3  terlihat  nyata  lebih  besar
dibandingkan pertumbuhan cendawan
endofit  pada  perlakuan  lainnya.  Hal  ini disebabkan  karena  kompetisi  ruang  tumbuh dan nutrisi cendawan endofit C ( Arthrobotrys Corda)  mampu  menyebabkan pertumbuhan cendawan patogen C. gloeosporioides terdesak  ke  bagian  atas dalam  media  tumbuh.  Sesuai  dengan pernyataan  Purwantisari  dan  Hastuti  (2009), bahwa  kompetisi  ruang  dan  nutrisi  yang terjadi  di  antara  cendawan  endofit  dan cendawan  patogen  mampu  menyebabkan pertumbuhan  miselium  cendawan  patogen menjadi  terdesak,  hal  ini  menjadikan pertumbuhan miseliumnya mengarah ke atas bukan mengarah ke samping. Pada perlakuan P1,  P2  dan  P4  cendawan  endofit  tidak mampu menahan laju pertumbuhan cendawan patogen C. gloeosporioides , sedangkan uji daya hambat cendawan endofit terhadap cendawan patogen
C.
gloeosporioides pada  perlakuan  P3  mampu menghambat pertumbuhan cendawan
patogen C. gloeosporioides.
Menurut
Octriana (2011),
pertumbuhan  dari  patogen  akan  terhambat jika  terjadi  kompetisi  antara  agens  hayati dengan  patogen  yang  menyebabkan  patogen tidak memiliki ruang untuk tempat hidupnya. Tetapi  yang terjadi pada penelitian ini justru tiga  dari  empat  isolat  patogen  mampu menghambat  pertumbuhan  dari  agens  hayati sehingga  patogen  memiliki  ruang  untuk tempat  hidupnya.  Sesuai  dengan  pendapat dari  Trigiano  dkk.  (2008),  antibiosis  yaitu terbentuknya zona kosong diantara cendawan patogen dengan cendawan antagonis terdapat perubahan  bentuk  hifa  pada  patogen,  dan dihasilkan  pigmen  di  permukaan  bawah koloni  cendawan  antagonis.  Pada  perlakuan cendawan  endofit Cuninghamella Matr. cendawan  endofit  tidak  mampu  tumbuh
menyebar pada media uji antagonis.
Penyakit  gugur  daun Colletotrichum yang  disebabkan  oleh C.  gloeosporioides sebagian utama melakukan kolonisasi subkutikular  intramural  untuk  menginfeksi jaringan inang. Seperti  yang dilaporkan oleh Perfect dkk. (1999), spora C. Capsici atau C. gloeosporioides bergerminasi  membentuk apresoria  menembus  dinding  kutikula  inang, kemudian  hifa  cendawan  menyebar  secara subkutikular  di  antara  dinding  sel  epidermis hingga  mesofil  sel.  Penyebaran  hifa  tersebut yang menyebabkan sel-sel di sekitar patogen mati.

## Potensi  Patogenesitas  Cendawan  Endofit terhadap  Kecambah  Sawi  pada  Tanah Steril
Uji  patogenesitas  dilakukan  pada  4 isolat  cendawan  endofit  yang  berasal  dari daun  tanaman  karet  sehat,  diambil  dari  klon yang  berbeda  pada  kebun  enteres  Unit  Riset Sungei Putih, serta cendawan Colletotrichum gloeosporioides sebagai kontrol. Hasil pengujian  menunjukkan  bahwa  cendawan yang  ditemukan  lebih  didominasi  oleh cendawan potensial patogenik.
Cendawan  potensial  patogenik  masih menyebabkan benih sawi berkecambah tetapi pertumbuhannya tidak normal atau mengalami nekrotik. Cendawan yang diklasifikasikan  sebagai  patogenik  atau potensial  patogenik  dapat  dilihat  dari pengaruhnya  terhadap  viabilitas  dan  vigor benih,  dimana  cendawan  patogenik  akan menyebabkan benih tidak mampu berkecambah,  sedangkan  pada  cendawan potensial  patogenik  benih  masih  dapat berkecambah  tetapi  pertumbuhannya  tidak normal  (abnormal)  (Irawati  dkk,  2017). Kartika (2013), mengatakan bahwa kecambah  dengan  pertumbuhan  normal merupakan kecambah dengan perkembangan
sistem akar, hipokotil, plumula, dan kotiledon yang sempurna atau tanpa kerusakan  bahkan  kelainan  pada  jaringan- jaringannya.
Pada  uji  patogenesitas  cendawan patogen C.  gloeosporioides dan  cendawan endofit  terhadap  kecambah  sawi  pada  tanah steril  hasil  dari  tinggi  perkecambahan  benih sawi  pada  kontrol  (cendawan  patogen C. gloeosporioides ) dan isolat cendawan endofit C  di  dapatkan  tinggi  perkecambahan  yang sama  yaitu  6  cm,  hal  ini  disebabkan  oleh kemampuan cendawan endofit dalam meningkatkan pertumbuhan tanaman bergantung pada sejumlah metabolit pemacu pertumbuhan  yang  dihasilkan.  Berdasarkan laporan  dari  beberapa  penelitian  ditemukan zat  pemacu  pertumbuhan  yang  diproduksi cendawan  endofit  seperti  giberelin,  auksin,
dan sitokinin (Khan dkk, 2012).
Gejala yang diamati pada uji patogenesitas  menggambarkan  bahwa  tidak ada benih  yang berkecambah lalu mati, pada penelitian  ini  memperoleh  banyak  benih berkecambah dengan sehat. Persentase infeksi tertinggi terjadi pada kontrol cendawan  ( C.  gloeosporioides )  mencapai 90%, cendawan endofit isolat CE.A mencapai  60%,  cendawan  endofit  isolat CE.D  mencapai  45%.  Sedangkan  persentase infeksi  terendah  terjadi  pada  cendawan endofit  isolat  CE.B  sebesar  20%,  cendawan endofit  isolat  CE.C  hanya  mencapai  15% (dapat dilihat pada tabel  4). Hasil persentase infeksi ini menyatakan bahwa benar cendawan C. gloeosporioides mampu menyebabkan  penyakit  hingga  kematian pada benih sawi.
Tabel 3. Uji Patogenesitas cendawan endofit pada benih sawi
Perlakuan Jumlah Benih Uji (Biji) Tinggi Perkeca- mbahan (cm) Jumlah Benih Dengan Kondisi Gejala Penyakit Insidensi Infeksi Penyakit (%) BS TB BN BM Kontrol ( C. Gloeosporioides ) 20 6 2 18 0 0 90 Cendawan Endofit A 20 4,5 8 0 12 0 60 Cendawan Endofit B 20 4,5 16 4 0 0 20 Cendawan Endofit C 20 6 17 0 3 0 15 Cendawan Endofit D 20 5 11 0 9 0 45
Keterangan: BS: Benih berkecambah sehat; TB: Benih mati tidak berkecambah; BN: Benih berkecambah dan mengalami nekrosis; BM: Benih berkecambah lalu mati .
Sesuai dengan pernyataan Park (2005),  lebih  dari  90%  antraknosa  mampu menginfeksi  cabai  di  daerah  dataran  tinggi disebabkan  oleh C.  gloeosporioides dan spesies  ini  juga  dilaporkan  paling  virulen diantara  spesies Colletotrichum lainnya. Sama hal nya seperti hasil penelitian ini pada kontrol  yang  merupakan  cendawan C. gloeosporioides menginfeksi  benih  sawi
dengan  insidensi  infeksi  penyakit  mencapai 90%,  sehingga  hanya  menghasilkan  2  benih sawi yang berkecambah sehat.
Gejala infeksi pada benih sawi paling banyak yaitu berupa benih berkecambah lalu mengalami  nekrosis  dan  benih  mati  tidak berkecambah  (Tabel  3).  Benih  yang  tumbuh menjadi kecambah dapat mengalami nekrosis akibat  dari  serangan  cendawan  sehingga
hipokotil kecambah sawi mengalami kerusakan  pada  jaringan  pertumbuhannya. Gejala  nekrosis  lanjut  dapat  menyebabkan kecambah menjadi mati.
Wilia dkk. (2012), menyatakan bahwa  cendawan  endofit  bukan  merupakan cendawan patogen dan kehidupannya bergantung  pada  inang,  sehingga  tanaman yang diinfeksinya tidak sakit secara menyeluruh.  Cendawan  endofit  menginfeksi dan  menyelesaikan  hampir  dari  seluruh hidupnya  di  dalam  jaringan  tanaman  sehat serta berasosiasi dengan tanaman sehat tanpa menimbulkan gejala penyakit.
Cendawan  yang  memiliki  potensi sebagai patogen mampu menyebabkan benih menjadi  busuk  tidak  berkecambah,  nekrosis pada  kecambah,  memberi  hambatan  pada pertumbuhan  kecambah,  atau  sampai  pada kematian  kecambah.  Menurut  Ora  dkk. (2011), hal tersebut diduga karena terjadinya infeksi  cendawan  pada  benih  sehingga menghasilkan  metabolit  sekunder  yang bersifat toksik bagi benih maupun kecambah, sehingga  menyebabkan  pembusukan  benih dan kematian kecambah. Berikut merupakan gambar dari hasil uji patogenesitas cendawan endofit  terhadap  kecambah  sawi  pada  tanah steril.
(A) (B) (A) (B)
Gambar 6. (A)  Infeksi  penyakit  tertinggi  terjadi  pada  kontrol  cendawan ( C.gloeosporioides ),  isolat  cendawan  endofit  A  dan  isolat  cendawan endofit  D;  (B)  Infeksi  penyakit  terendah  terjadi  pada  isolat  cendawan endofit B dan isolat cendawan endofit C. (Foto Langsung)
Walaupun  pada  tanaman  yang  sehat relatif  banyak  ditemukan  mikroba  yang sebenarnya bersifat patogenik, namun kenyataannya  hanya  sedikit  yang  dapat menyebabkan  tanaman  yang  bersangkutan terkena  gejala  sakit.  Hal  ini  dikarenakan
beberapa hal yang diantaranya memang tidak ada  kesesuaian  antara  patogen  dan  inang, baik  kesesuaian  nutrisi  ataupun  pengenalan terhadap  patogen.  Meskipun  demikian, secara  alami  tanaman  dapat  meningkatkan pertahanan  dirinya,  baik  secara  langsung
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
maupun  tidak  langsung  terhadap  patogen. Tak  hanya  itu,  hal  tersebut  bisa  juga disebabkan  karena  adanya  efek  tidak langsung  dari  interaksi  berbagai  mikroba patogenik tersebut dengan mikroba nonpatogenik yang ada (Irawati dkk, 2017).

## KESIMPULAN
Dari hasil eksplorasi cendawan endofit,  diperoleh  4  isolat  cendawan  endofit berasal  dari  daun  tanaman  karet  yang  sehat diambil  dari  klon  yang  berbeda  pada  kebun enteres  Unit  Riset  Sungei  Putih.  Hasil  dari identifikasi  cendawan  endofit  menggunakan buku kunci spesies cendawan oleh Watanabe (2002), diperoleh divisi serta genus cendawan  endofit  yaitu:  (a)  Isolat  CE.A termasuk  kedalam  divisi Basidiomycotina dengan  genus Coprinus Pers.;  (b)  Isolat CE.B termasuk kedalam divisi Ascomycotina dengan  genus Monosporacus Pollack  & Ueker.;  (c)  Isolat  CE.C  termasuk  kedalam divisi Deuteromycotina dengan genus Arthrobotrys Corda.;  (d)  Isolat  CE.D termasuk  kedalam  divisi Ascomycotina dengan  genus Chaetomium  funicola Cooke.
Potensi  antagonisme  cendawan  endofit terhadap penyakit gugur daun
Colletotrichum gloeosporioides. Hasil persentase  hambatan  pada  isolat  cendawan endofit  yang  mampu  menghambat  atau menekan  pertumbuhan  misellium  cendawan C.  gloeosporioides dengan  nilai  berkisar diantara  40%  hanya  terdapat  pada  isolat cendawan  endofit  C  ( Arthrobotrys  superba Corda)  pada  perlakuan  P3  dengan  rerata persentase daya hambat sebesar 40,94% yang termasuk  kedalam  kriteria  persentase  daya hambat sedang. Gejala yang diamati pada uji patogenesitas  menggambarkan  bahwa  tidak ada benih  yang berkecambah lalu mati, pada penelitian  ini  memperoleh  banyak  benih
berkecambah dengan sehat. Persentase infeksi tertinggi terjadi pada kontrol cendawan ( C.gloeosporioides ) mencapai 90%, cendawan endofit isolat CE.A mencapai  60%,  cendawan  endofit  isolat CE.D  mencapai  45%.  Sedangkan  persentase infeksi  terendah  terjadi  pada  cendawan endofit  isolat  CE.B  sebesar  20%,  cendawan endofit  isolat  CE.C  hanya  mencapai  15%. Hasil  persentase  infeksi  ini  menyatakan bahwa  benar  cendawan C.  gloeosporioides mampu menyebabkan penyakit hingga kematian pada benih sawi.

## SARAN
Untuk  memperoleh  hasil  eksplorasi isolat  cendawan  endofit  yang  bermanfaat dalam pertumbuhan tanaman perlu dilakukan pengujian secara in  vivo yang lebih  aplikatif dan  sesuai  peruntukan,  karena  isolat  yang paling  baik  dalam  memicu  pertumbuhan tanaman  belum  tentu  baik  pula  dalam responsnya  menghadapi  berbagai  cekaman lingkungan.

## DAFTAR PUSTAKA
Alimin.  (2018).  Tanaman  karet  meranggas akibat penyakit gugur daun. Retrieved from http://perlindungan.ditjenbun.pertania n.go.id/web/page/title/312961/tanama n-karet-meranggas-akibat-penyakit- gugur-daun.
Amaria,  W.,  Taufiq,  E.,  dan  Harni,  R. (2013). Seleksi dan identifikasi jamur antagonis sebagai agens hayati jamur akar  putih  ( Rigidoporus  microporus ) pada  tanaman  karet. Buletin  RISTRI 4(1), 55-64. Retrieved from https://media.neliti.com/media/public ations/133158-ID-seleksi-dan- identifikasi-jamur-antagonis.pdf [BPS] Badan Pusat Statistik. (2017). Statistik Karet  Alam  Indonesia. Jakarta  (ID):
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
Badan Pusat Statistik. https://www.bps.go.id Darmawan,  E.  (2016).  Eksplorasi  Jamur Entomopatogen  Beauveria  bassiana, Metarrhizium  anisopliae,  dan  Jamur Antagonis  Trichoderma  sp.  Pada
Beberapa  Sampel  Tanah  Pertanaman Tembakau. Skripsi. Digital Repository Universitas Jember. Retrieved from https://repository.unej.ac.id/handle/12 3456789/78142
Daslin,  A.  (2013).  Ketahanan  genetik berbagai klon karet introduksi terhadap penyakit gugur daun. Jurnal
Penelitian Karet 31(2), 79-87. doi:10.22302/jpk.v31i2.135
Dickman, M. W. (1993). The Fungi . Academic Press, New York.
Gazis, R.O. (2012). Evaluating The Endophytic  Community  In  Planted And  Wild  Rubber  Trees  ( Hevea
brasiliensis ). University of Maryland, College Park. Retrieved from https://drum.lib.umd.edu/bitstream/ha ndle/1903/12661/Gazis_umd_0117E _13047.pdf;sequence=1
Harahap,  A.  S.,  Yuliani,  T.  S.  dan  Widodo.
(2015).  Deteksi  dan  identifikasi cendawan terbawa benih brassicaceae. J urnal Fitopatologi Indonesia, 11(3), 97-103.
doi:https://doi.org/10.14692/jfi.11.3.9
7
Irawati, A. F. C., Mutaqin, K. H., Suhartono, M.  T.,  Sastro,  Y.,  Sulastri.,  dan Widodo.  (2017).  Eksplorasi  dan pengaruh  cendawan  endofit  yang berasal  dari  akar  tanaman  cabai terhadap  pertumbuhan  benih  cabai merah. Jurnal  Hortikultura 27(1),
105-112.
doi:https://dx.doi.org/10.21082/jhort. v27n1.2017.p105-112
Juliansyah,  H  dan  Riyono,  A.  (2018).
Pengaruh  produksi,  luas  lahan  dan tingkat pendidikan
terhadap pendapatan petani karet di desa Bukit
Hagu Kecamatan Lhoksukon Kabupaten Aceh Utara. Jurnal Ekonomi  Pertanian  Unimal 1(2),  65-
72. doi:https://doi.org/10.29103/jepu.v1i 2.522 Kartika,  T.  (2013). ‘Viabilitas,  parameter, dan  tolok  ukur  viabilitas  benih’ , dalam  Widajati,  E.,  Murniati,  E., Palupi,  E.R.,  Kartika,  T.,  Suhartanto, M.R.,  dan  Qadir,  A.  (eds.)  1, Dasar ilmu  dan  teknologi  benih ,  IPB  Press, Bogor.
Khan, S.A., Hamayun, M., Khan, A.L., Lee I Jung, Shinwari, Z.K., dan Kim J Guk. (2012).  Isolation  of  plant  growth promoting  endophytic  fungi  from dicots  inhabiting  coastal  sand  dunes of  Korea. Pakistan  J  Bot .  44(4),
1453–1460. Retrieved from https://www.researchgate.net/publicat ion/230844968
Kumar,  N.,  dan  Khurana,  S.M.P.  (2021).
Trichoderma-plant-pathogen interactions  for  benefit  of  agriculture and  environment.  I n  Biocontrol Agents  and  Secondary  Metabolites ,41–63. Retrieved from https://doi.org/10.1016/b978-0-12- 822919-4.00003-x.
Octriana,  L.  (2011).  Potensi  Agen  Hayati dalam  Menghambat  Pertumbuhan Phytium  sp.  secara  In  vitro. Buletin Plasma Nutfah , 17(2), 138-142. doi:10.21082/blpn.v17n2.2011.p138- 142
Ora,  N.,  Faruq,  A.N.,  Islam,  M.T.,  Akhtar, N.,  dan  Rahman,  M.M.  (2011). Detection  and  identification  of  seed borne pathogen from some cultivated hybrid  rice  varieties  in  Bangladesh. Mid  J  Sci  Res. 10(4),  482–488. Retrieved from https://www.researchgate.net/publicat ion/266005377
Park,  S.K.  (2005).  Differential  Interaction
Between  Pepper  Genotypes  And Colletotrichum Isolates Causing
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
Anthracnose.  Thesis.  S eoul  Nat. Univ., Seoul, Korea. 48 p. Perfect, S.E., Hughes, H.B., O’Connell, R.J.,
dan Green, J.R. (1999). Colletotrichum :  A  Model  Genus  for Studies  on  Pathology  and  Fungal- Plant  Interactions. Fungal  Genetics and Biology 27(2-3), 186-198.
Retrieved from
https://doi.org/10.1006/fgbi.1999.114 3 Persulessy, E, R., Lembang, F.K., Djidin, H. (2016).  Penilaian  cara  mengajar menggunakan rancangan acak lengkap (studi kasus: jurusan matematika FMIPA UNPATTI).
Jurnal Ilmu Matematika dan Terapan
10(1), 9-16. doi:10.30598/barekengvol10iss1pp9- 16 Procopio,  R.E.L.,  Araujo,  W.,  Maccheroni, Jr.,  dan  Azevedo,  J.L.  (2009). Characterization  of  an  endophytic bacterial  community  associated  with eucalyptus  spp. Genet  Mol  Res 8(4), 1408-1422. doi:10.4238/vol8- 4gmr691
Purwantisari,  S.,  dan  Hastuti,  R.B.  (2009). Uji  antagonisme  jamur  patogen phytophthora infestans penyebab penyakit  busuk  daun  dan  umbi tanaman kentang dengan menggunakan trichoderma spp. isolat lokal. BIOMA 11(1), 24-32.
Retrieved from
http://eprints.undip.ac.id/2000/1/Bio ma_Susiana_Juni_2009_.pdf Raguchander, T., Senthil, R., Shanmugapackiam, S., dan Ramjegathesh, R. (2011). Formulation and Delivery Systems of Pseudomonas  Fluorescens .  Dalam
Samiyappan, R., Jonathan R.,
Chandrasekar  E.I.,  Raguchander  G.,
Mohankumar  T.,    Nakkeeran  S., Karthikeyan  S.,  Saravanakumar  G., Rajendran D., Ramjegathesh  L. (Ed.) International
Workshop on
Production of Biocontrol Agents, 18- 22 July 2011 (Issue July, pp. 53–74). Retrieved from https://www.researchgate.net/publicat ion/344803485
Seema,  M.,  dan  Devaki,  N.  S.  (2012).  In
Vitro Evaluation of Biological Control  Agent  Against Rhizoctonia solani . Journal of Agricultural Technology, 8(1), 233-240. Retrieved from http://www.ijat- aatsea.com/pdf/v8_n1_12_January/21 _IJAT_2012_8_1__N.S.pdf Semangun,  H.  (1990). Penyakit  Tanaman Kebun  di  Indonesia .  Gajah  Mada University Press. Jogyakarta.
Sieber,  T.  N.  dan  Grünig,  C.  R.  (2006).
Biodiversity of Fungal Root- Endophyte Communities and Populations, in Particular of the Dark Septate  Endophyte Phialocephala fortinii s.  I.  Soil  Biology. Microbial Root Endophytes 9, 134-7. doi:10.1007/3-540-33526-9_7 Syamsafitri,  S.  dan  Hasanuddin,  H.  (2013).
Isolation  and  exploration  of  rubber endophytic fungi ( Hevea brasilliensis Muell.Arg ).  In Proceedings  of  the National  Seminar  and  Deans  Annual Meeting  of  the  Agricultural  Sciences of  the  Western  Region  BKS-BTN .
Pontianak.
Tirtana, Z.Y.G., Sulistyowati, L., dan Cholil,
A.  (2013).  Eksplorasi  jamur  endofit pada  tanaman  kentang  ( solanum tuberosum
l) serta potensi antagonismenya terhadap
phytophthora  infestans (mont.)  de barry  penyebab  penyakit  hawar  daun secara in  vitro. Jurnal HPT 1(3), 91- 101. Retrieved from
https://jurnalhpt.ub.ac.id/index.php/jh pt/article/view/75
Trigiano,  R.N.,  Windham,  M.T.,  dan Windham, A.S. (2008). Plant pathology:  Concepts  and  Laboratory Exercises (p.  558). Second  Edition .
DOI: https://doi.org/10.32663/ja.v%vi%i.3623
CRC Press . New York.
Villarraga,  D.M.V.,  Tibambre,  M.E.M.,
Romero, I.B.A., Suarez-Moreno, Z.M.,  dan  Moreno-Sarmiento,  N.M. (2017).  Evaluation  of  biocontrol properties  of Streptomyces spp.
isolates against phytopathogenic fungi Colletotrichum gloeosporioides and Microcyclus ulei . African Journal of  Microbiology  Research,  11(5)  : 141–154.
DOI:https://doi.org/10.5897/ajmr201
6. 8270 Watanabe,  T.  (2002). Pictorial  Atlas  of  Soil and  Seed  Fungi:  Morphologies  of
Cultured  Fungi  and  Key  to  Species . Ed  ke-2.  Florida  (US):  CRC  Press LLC.
Wilia,  W.,  Hayati,  I.,  dan  Ristiyadi,  D.
(2012).  Eksplorasi  cendawan  endofit dari  tanaman  padi  sebagai  agens pemacu pertumbuhan tanaman.
BIOPLANTAE 1(4), 299-304.
Retrieved from https://online- journal.unja.ac.id/bioplante/article/vi ew/1731
Yang, L., Li, G.Q., Long, Y.Q., Hong, G.P., Jiang, D.H., dan Huang, H.C. (2010). Effects  of  soil  temperature  and moisture on survival of coniothyrium minitans conidia  in  central  china. Biol. Control 55(1), 27-33. Retrieved from http://dx.doi.org/10.1016/j.biocontrol. 2010.06.010