## SYNTHESIS, CHARACTERIZATION AND ANTIOXIDANT ACTIVITY OF KOBALT (II)- HYDRAZONE COMPLEX
Yulyani Nur Azizah 1* , Irma Mulyani 2 , Deana Wahyuningrum 2 , Damar Nurwahyu Bima 3
1 Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, Jl. H.Djuanda No. 95, Tangerang Selatan
2 Institut Teknologi Bandung, Jl. Ganesa No.10, Bandung 3 Universitas Diponegoro, Jl. Prof. Soedarto, Semarang
Email: *yulyani@uinjkt.ac.id
Diterima: 23 April 2020. Disetujui: 13 Juli 2020. Dipublikasikan: 30 Juli 2020 DOI: 10.30870/educhemia.v5i2.7987
Abstract: The potency of the first-row transition metal complexes with Schiff's base ligand as an antioxidant has been widely studied by researchers. In this study, hydrazone-type Schiff base  compounds,  salicylaldehyde-2,4-dinitrophenylhydrazone  (SDPH),  resulted  from  the condensation of salicylaldehyde (1.5 mmol) and 2,4-dinitrophenylhydrazine (1.5 mmol) were synthesized and characterized with 1H-NMR. The synthesized SDPH was used as ligands in the formation of Co(II) metal complexes. The Co(II)-SDPH complexes were synthesized with reflux reaction at 60 o C for 6 hours in molar ratio 1:3. Triethylamine is used to synthesis Co(II)- SDPH, which serves to deprotonate SDPH ligands. ESI-MS analysis showed that the complex is a neutral dimeric complex.The complex has the chemical formula [Co2(SDPH)2[(Et)3N]2(acn)2(OH)2}  ([M+Na]+  =  1061  g/  mol),  shown  on  the  ESI-MS spectrum.  Coordinate  bonds  between  Co  (II)  metal  ions  with  ligands  are  observed  in  the presence of shifting of the C=N wave number, as well as the loss of the vibrating peaks of the O-H groups to the infrared spectra of complexes. The IR spectrum of complexes was suggested that SDPH behave as a bidentate ligand through the azomethine nitrogen atom and phenolic oxygen atom. The ligand and its Co(II) complex have been screened for antioxidant activity against DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazine). Based on the activity test results, the IC50 value of Co(II)-SDPH complex was lower than ligand. These results show that Co(II)-SDPH are potentials as antioxidants .
Keywords: Schiff  base;  hydrazone;  Salicylaldehyde-2,4-dinitrophenylhydrazone  (SDPH); Cobalt complex; antioxidant
Abstrak: Potensi senyawa kompleks logam transisi deret pertama dengan ligan basa Schiff sebagai antioksidan banyak dipelajari oleh peneliti. Pada penelitian ini, senyawa basa Schiff jenis  hidrazon,  salisilaldehid-2,4-dinitrofenilhidrazon  (SDPH),  telah  disintesis  dari  reaksi kondensasi antara salisilaldehid dengan 2,4-dinitrofenilhidrazin dengan perbandingan mol 1:1 dan dikarakterisasi menggunakan 1 H-NMR. Senyawa SDPH yang telah disintesis digunakan sebagai ligan dalam pembentukan senyawa kompleks Co(II)-SDPH yang direfluks pada suhu 60 o C selama 6 jam. Dalam sintesis kompleks Co(II)-SDPH digunakan basa trietilamin, yang berfungsi untuk deprotonasi ligan SDPH. Analisis ESI-MS menunjukkan kompleks tersebut
merupakan kompleks dimerik yang bermuatan netral. Kompleks Co(II)-SDPH yang dihasilkan memiliki  rumus  kimia  {Co 2 (SDPH) 2 [(Et) 3 N] 2 (acn) 2 (OH) 2 }  ([M+Na] + =  1061  g/mol),  yang ditunjukkan pada spektrum ESI-MS. Ikatan koordinasi antara ion logam Co(II) dengan ligan SDPH diamati dengan adanya pergeseran bilangan gelombang gugus C=N, serta hilangnya puncak vibrasi gugus O-H pada spektrum inframerah. Berdasarkan data tersebut, ligan SDPH merupakan ligan bidentat yang mengandung atom donor nitrogen azometin dan atom donor oksigen  fenolik.  Potensi  ligan  dan  kompleks  sebagai  antioksidan  telah  dipelajari  dengan menggunakan  reagen  DPPH  (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).  Berdasarkan  hasil  uji  aktivitas tersebut, nilai IC 50 dari senyawa kompleks Co(II)-SDPH lebih rendah dibanding ligan SDPH. Hasil ini menunjukkan bahwa kompleks Co(II)-SDPH berpotensi sebagai antioksidan.
Kata Kunci: basa Schiff; hidrazon; Salisilaldehid-2,4-dinitrofenilhidrazon (SDPH); kompleks kobalt; antioksidan

## PENDAHULUAN
Kelebihan  radikal  bebas  yang menyerang  biomolekul  dalam  tubuh  dari waktu ke waktu dapat menyebabkan suatu keadaan  yang  dinamakan  stres  oksidatif. Keadaan  tersebut  dapat  menyebabkan terjadinya  kerusakan  pada  membran  sel, lipid,  dan  DNA  sehingga  dapat  memicu timbulnya  berbagai  penyakit  degeneratif seperti kanker, diabetes, katarak, penuaan, parkinson  dan  alzheimer  (Valko  et  al., 2007).  Hal  ini  dapat  terjadi  karena kurangnya  antioksidan  dalam  tubuh, sehingga  tidak  dapat  mengimbangi terbentuknya produk radikal bebas setiap saat.  Maka  dari  itu  antioksidan  sangat diperlukan untuk mencegah, menghentikan dan
memperbaiki kerusakan  sel  akibat  serangan  radikal bebas (Sharma, 2014).
Senyawa  alkaloid  dan  turunannya merupakan  salah  satu  golongan  senyawa antioksidan  yang  mengandung  basa bernitrogen  dengan  struktur  heterosiklik
(Arora,  et  al,  2012).  Basa  bernitrogen yang  sangat  berpotensi  dan  banyak digunakan  sebagai  antioksidan  adalah senyawa  basa  Schiff.  Ligan  basa  Schiff kelompok hidrazon telah menarik banyak perhatian  terkait  potensinya  sebagai antioksidan  (Al-amiery,  et  al,  2012;  El- Gammal,  et  al,  2015;  Harinath,  et  al, 2013).  Penelitian  mengenai  senyawa kompleks  logam  transisi  dengan  ligan basa  Schiff  sebagai  antioksidan  saat  ini sedang  berkembang  (Gull,  et  al,  2017; Jambi, 2017; Piri, et al, 2017; Shabbir, et al,  2017).  Peluang  untuk  menghasilkan senyawa kompleks tersebut sangat besar, karena  jenis  ligan  basa  Schiff  sangat beragam.
Salah  satu  senyawa  turunan  basa Schiff  dengan  gugus  aktif  azometin  (- N=CH-) yaitu salisilaldehid-2,4- dinitrofenilhidrazon  (SDPH).  Senyawa yang  berasal  dari  kondensasi  aldehid dengan  2,4-dinitrofenilhidrazin  ini  telah digunakan sebagai ligan dalam
pembentukan senyawa kompleks antibakteri  dan  antijamur  (El-seidy  & Attia,  2013),  namun  belum  dilaporkan aktivitasnya sebagai suatu antioksidan.
Pada  tubuh  manusia,  kobalt  (II) merupakan  kofaktor  logam  dari  koenzim B 12 dan  vitamin  B 12 (kobalamin)  yang sangat penting untuk kesehatan, menjaga sistem metabolisme, membantu mencerna makanan,  juga  melindungi  tubuh  dari bakteri  dan  virus  (Birch,  et  al,  2009). Beberapa penelitian menunjukkan bahwa umumnya  koordinasi  kompleks  logam transisi  deret  pertama  dengan  ligan  basa schiff  hidrazon  dapat  meningkatkan aktivitas biologis ligan sebagai antioksidan  (Halli  &  Sumathi,  2017; Harinath et al., 2013; Philip et al., 2018; Sathyadevi  et  al.,  2012). Sehingga  pada penelitian  ini  dilakukan  studi  potensi terhadap  senyawa  kompleks  Co(II) dengan  ligan  SDPH  sebagai  suatu antioksidan.

## METODE
Dalam  penelitian  ini  telah  dilakukan sintesis dan karakterisasi ligan
salisilaldehid-2,4-dinitrofenilhidrazon (SDPH). Ligan yang diperoleh digunakan
untuk  sistesis  senyawa  kompleks  Co(II)- SDPH. Kompleks yang terbentuk dikarakterisasi dengan beberapa instrument  untuk  menentukan  rumus kima,  mempelajari  sifat  magnetik  dan
sifat  elektronik  masing-masing  senyawa. Ligan SDPH dan kompleks Co(II)-SDPH kemudian  diuji  aktivitasnya  sebagai antioksidan secara in vitro .

## Material
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  meliputi  salisilaldehid (Merck),
2,4-dinitrofenilhidrazin (Merck), CoCl 2 .6H 2 O (Merck), asetonitril
(Merck), etanol p.a (99% Merck), metanol p.a  (99%  Merck),  aseton  p.a  (99% Merck),  HCl  (37%  Merck),  asam  nitrat (Merck),  trietilamin  (Sigma-Aldrich), natrium  iodida  (Merck),  kalium  nitrat (Merck), 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (Sigma-Aldrich), dimetilsulfoksida (Sigma-Aldrich), kalium
bromida (Merck)  dan L - ascorbic  acid (Sigma- Aldrich).

## Instrument
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  meliputi  peralatan  gelas, spatula, hot plate, magnetic stirrer, vortex , kertas  saring Whatman 42,  desikator, neraca analitik, botol vial 5-10 mL, pipet mikro skala 1-10 μL, 20-200 μL dan 100- 1000  μL.  Beberapa  instrumen  yang digunakan  untuk  karakterisasi  ligan  dan kompleks hasil sintesis yaitu spektrofotometer 1 H-NMR, spektrofotometer FTIR  Prestige  21 , spektrofotometer UV-Visible Shimadzu,
Fischer  Johns  Melting  Point  Apparatus , konduktometer  HANNA Instrument HI 8819W Professional ATC, Magnetic Susceptibility  Balance (MSB), Vernier SpektroVis Plus , dengan perangkat lunak Logger  Lite versi  1.9.2  digunakan  untuk analisis data uji antioksidan.

## Prosedur

## Sintesis Ligan SDPH
Senyawa  SDPH  disintesis  dari campuran salisilaldehida dan 2,4-
dinitrofenilhidrazin (DNPH) dalam pelarut  metanol,  yang  merujuk  pada literatur  sebelumnya  (Ortiz  et  al.,  2016) dengan  struktur  pada  gambar  1. Salisilaldehid  (0,2  mL;  1,51  mmol) ditambahkan  perlahan  ke  dalam  larutan 2,4-dinitrofenilhidrazin  (0,297  g;  1,51 mmol) dan 1 mL asam klorida 32% dalam 50  mL  metanol  panas.  Setelah  2  jam pengadukan  pada  50-55 o C,  endapan jingga  yang  diperoleh  disaring  dan direkristalisasi dalam aseton.
Gambar 1 . Struktur Senyawa SDPH

## Sintesis Kompleks Co(II)-SDPH
Sintesis  senyawa  kompleks  Co(II)- SDPH  disintesis  dari  campuran  garam CoCl 2 .6H 2 O  (Mr=238  g/mol)  dan  ligan SDPH  (El-seidy  &  Attia,  2013)  dengan perbandingan mol 1:3 dan menggunakan pelarut campuran. Pelarut yang digunakan dalam penelitian ini adalah
asetonitril:etanol  (1:1,  v/v).  Larutan tersebut  direfluks  pada  55-60  °C  selama kurang  lebih  5  jam,  kemudian  ditambah beberapa  tetes  trietilamin.  Endapan kompleks yang terbentuk setelah 4-5 hari disaring  dan  dicuci  dengan  etanol kemudian dikeringkan dalam desikator.
Pengukuran Spektrum 1 H-NMR Senyawa

## SDPH
Sebanyak  2  mg  sampel  SDPH dilarutkan  dalam  pelarut  d 6 -DMSO  dan diukur  sinyal  pergeseran  kimianya  pada 500 MHz.

## Pengukuran Spektrum FTIR
Sampel  padatan  ligan  SDPH  dan kompleks Co(II)-SDPH diukur
transmitannya  pada  rentang  bilangan gelombang  400-4000  cm −1 .  Preparasi sampel untuk pengukuran spektrum FTIR sebagai berikut: sampel dan padatan KBr dengan perbandingan 1:10 digerus hingga homogen,  yang  kemudian  dibentuk  pelet transparan  dan  disimpan  dalam  holder sampel IR. Pelet tersebut kemudian diukur transmitannya.
N H N HO NO 2 O 2 N H H H H H H H H 1 2 3 4 5 6 7 8 9 9

## Pengukuran Spektrum Elektronik UV-Vis
Padatan  ligan  SDPH  dan  Co(II)- SDPH  masing-masing  dilarutkan  dengan aseton  dengan  konsentrasi  ~2x10 −4 M.
Pada setiap pengukuran, sampel dimasukkan  ke  dalam  kuvet  yang berukuran  1,25  x  1,25  x  4,5  cm  dengan tebal  1  cm,  lalu  dimasukkan  ke  dalam spektrofotometer  dan  diukur  serapannya pada    panjang  gelombang  200-800  nm dengan blanko aseton p.a.

## Pengukuran Momen Magnet
Penentuan  sifat  magnet  senyawa kompleks
Co(II)-SDPH dilakukan pengukuran  momen  magnet  dengan menggunakan alat Magnetic
Susceptibility  Balance (MSB),  yang bekerja  dengan  prinsip  Gouy.  Berikut tahap-tahap  pengukuran  yang  dilakukan yaitu tabung kosong yang telah bersih dan kering ditimbang dengan teliti menggunakan neraca analitis dan massanya  dinyatakan  sebagai  W o .
Kemudian dilakukan pengukuran kerentanan magnetik tabung kosong, nilai yang  ditunjukkan  dinyatakan  dengan  R o .
Selanjutnya  sejumlah  sampel  yang  telah dihaluskan  dimasukkan  ke  dalam  tabung hingga terisi merata, tinggi sampel 2,5 cm dan  dicatat  sebagai l .  Kemudian  tabung yang  telah  berisi  sampel  diukur kerentanan  magnetnya  dan  nilainya dinyatakan sebagai R 1 . Setelah pengukuran, tabung berisi sampel tersebut
ditimbang  dengan  teliti  menggunakan neraca analitis dan dicatat sebagai W 1 .

## Penentuan Massa Molekul Relatif
Sebanyak  2  mg  kompleks  Co(II)- SDPH  masing-masing  dilarutkan  dengan aseton  dan  asetonitril  hingga  tepat  larut. Kedua  larutan  sampel  tersebut  ditambah dengan garam Natrium (Na + ) sebanyak 1 Mm untuk menghasilkan spektrum ESI+. Sampel  kemudian  diinjeksikan  ke  dalam alat  LCT  Premier  XE  kemudian  diukur pada  rentang  m/z  mulai  dari  0  sampai 1200.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Aktivitas  antioksidan  senyawa  ligan SDPH  dan  kompleks  Co(II)-SDPH ditentukan  menggunakan  metode  DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).  Sebanyak  4 mg DPPH dilarutkan dalam 5 mL etanol p.a  sehingga  diperoleh  larutan  induk DPPH  dengan  konsentrasi  2  mM, sedangkan ligan dan kompleks dilarutkan dalam  DMSO  dengan  konsentrasi  2  mM sebanyak 5 mL. L-asam askorbat (sebagai antioksidan standar) juga diuji aktivitasnya sebagai pembanding.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sintesis  Ligan  SDPH  dan  Kompleks Co(II)-SDPH
Senyawa
salisilaldehid-2,4- dinitrofenilhidrazon  (SDPH)  disintesis dari reaksi
kondensasi antara
salisilaldehid dengan 2,4-
dinitrofenilhidrazin dengan perbandingan mol  1:1  (Monfared,  et  al,  2007).  Reaksi antara  kedua  prekursor  berlangsung melalui  reaksi  adisi  nukleofilik,  dengan atom  N  pada  2,4-dinitrofenilhidrazin berperan  sebagai  nukleofil  yang  akan bereaksi  dengan  atom  C  pada  gugus karbonil  salisilaldehid  yang  bersifat sebagai  elektrofil.  Senyawa  2,4-DNPH
merupakan  nukleofil  lemah  dengan adanya 2 buah gugus nitro sebagai penarik elektron. Sehingga dalam reaksi kondensasi  tersebut  digunakan  HCl sebagai  katalis  untuk  proses  protonasi gugus  karbonil  salisilaldehid.  Senyawa SDPH  lebih  larut  dalam  pelarut  aprotik dengan rendemen sebesar 83-89%. Reaksi antara  2,4-DNPH  dan  salisilaldehid ditunjukkan pada Gambar 2.
Gambar 2 Reaksi pembentukan ligan SDPH
Senyawa SDPH hasil sintesis
digunakan sebagai ligan untuk pembentukan kompleks kobalt(II)-SDPH, Co(II)-SDPH.  Kompleks  Co(II)-SDPH tersebut  disintesis  dari  reaksi  larutan CoCl 2 dan  larutan  SDPH  dengan perbandingan  mol  1:3  dalam  pelarut campuran etanol/asetonitril (1:1). Campuran  tersebut  direfluks  pada  suhu 55-60  °C  selama  5  jam.  Dalam  sintesis kompleks Co(II)-SDPH tersebut digunakan pelarut campuran etanol/asetonitril  untuk  meningkatkan kelarutan  senyawa  SDPH.  Selain  itu,  ke
dalam campuran tesebut juga ditambahkan  trietilamin  (pKa  10,75) untuk  membantu  proses  deprotonasi
senyawa  SDPH.  Penambahan  trietilamin dilakukan setelah semua pereaksi dicampurkan.  Hal  ini  bertujuan  untuk menghindari  kemungkinan  trietilamin terkoordinasi  pada  ion  Co 2+ .  Endapan hasil  reaksi  terbentuk  setelah  larutan reaksi  disimpan  di  lemari  pendingin selama 4-5 hari. Endapan yang diperoleh berwarna hitam dan kristalin, dengan titik leleh >300 o C.
Karakterisasi Ligan SDPH dan Kompleks Co(II)-SDPH
Senyawa SDPH diidentifikasi dengan menggunakan  spektroskopi 1 H-NMR dalam  pelarut  d 6 -DMSO.  Berdasarkan hasil spektrum yang terukur pada Gambar
3, diketahui senyawa SDPH hasil sintesis memiliki  sinyal  singlet  disekitar  geseran kimia  11,72  ppm.  Sinyal  tersebut dihasilkan  oleh  atom  H(1)  yang  terikat pada atom nitrogen gugus amina. Adanya
dua  atom  nitrogen  yang  bersifat elektronegatif  disekitar  atom  H(1) menyebabkan  atom  tersebut  paling deshielding sehingga  geseran  kimianya paling jauh.
Gambar 3 . Spektrum 1 H-NMR Ligan SDPH
Efek deshielding atom elektronegatif juga  terjadi  pada  atom  H(2)  yang  terikat pada atom oksigen gugus fenol sehingga mengalami  pergeseran  kimia  pada  10,22 ppm.  Geseran  kimia  8,96  ppm,  berasal dari  atom  H(3)  yang  terikat  pada  C-sp 3 .
Atom-atom hidrogen tersebut memberikan  sinyal  dengan  multiplisitas singlet  disebabkan  oleh  tidak  adanya kupling  antara  atom  hidrogen  dengan atom  lainnya  yang  juga  aktif  NMR (Caligiani,  et  al,  2007).  Sementara  atom hidrogen  yang  berasal  dari  cincin
aromatik  menunjukan  puncak  doblet, doble  doblet  dan  triplet  pada  geseran kimia 8,87 ppm (H(4), d , J =2,4 Hz), 8,37 ppm (H(5), d , J = 9,7 Hz), 8,04 ppm (H(6), d , J = 9,6 Hz), 7,85 (H(7), d , J = 7,7 Hz), 7,30  ppm  (H(8), t , J =  7,2  Hz)  dan  6,92 ppm  (H(9), dd , J =  1,1,  8,3  Hz).  Hasil analisa  tersebut  sesuai  dengan  penelitian sebelumnya  (Ortiz  et  al.,  2016)  dimana atom-atom hidrogen pada cincin aromatik memberikan  sinyal  dengan  multiplisitas yang  berbeda-beda.  Hal  ini  disebabkan adanya  kupling  antara  atom  hidrogen
1 3  4 5 6 7 8 9 2
dengan  atom  hidrogen  tetangganya  yang juga aktif NMR.
Ikatan  koordinasi  antara  ion  Co 2+ dengan senyawa SDPH dianalisis dengan spektroskopi inframerah. Spektrum
inframerah kompleks Co(II)-SDPH dibandingkan
dengan spektrum
inframerah  senyawa  SDPH,  terutama membandingkan  bilangan  gelombang gugus fungsi imina (-C=N-), amina (-NH- ),  dan  hidroksida  (-OH)  (Gambar  4). Gugus-gugus fungsi tersebut mengandung atom donor yang berpotensi berkoordinasi dengan ion Co 2+ .
Gambar 4 . Spektrum Inframerah Kompleks Co(II)-SDPH dan Ligan SDPH
Berdasarkan spektrum inframerah di atas, gugus  fungsi  O-H,  N-H  dan  C=N  pada kompleks Co(II)-SDPH mengalami perubahan  bilangan  gelombang  yang cukup  signifikan  dibandingkan    gugus fungsi  lainnya.  Perbandingan  bilangan gelombang gugus-gugusfungsi pada kompleks  Co(II)-SDPH  dan  senyawa SDPH ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1 . Pergeseran Bilangan Gelombang
Senyawa Bilangan gelombang, cm -1 O-H N-H C=N M-N SDPH 3365  3273  1621  - Co(II)-SDPH - 3113  1604  465
Hilangnya puncak vibrasi gugus -OH pada  spektrum  kompleks  Co(II)-SDPH disebabkan gugus -OH pada ligan SDPH mengalami deprotonasi oleh basa trietilamin  dan  kemudian  berkoordinasi dengan ion Co 2+ . Selain itu,  serapan yang lebar  diamati  pada  daerah  3400-3600 cm -1 .  Hal  ini  diduga  berasal  dari  ikatan koordinasi  antara  ion  Co 2+ dengan  H 2 O.
Pergeseran  bilangan  gelombang  vibrasi juga  terjadi  pada  gugus  N-H  dan  C=N, yang masing-masing pergeserannya sebesar  160  dan  17  cm -1 .  Pergeseran
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 Co(II)-SDPH Bilangan gelombang ( cm-1 ) SDPH M-N O-H N-H C=N % Tra nsm itan si C-H
tersebut  dapat  dijelaskan  adanya  ikatan koordinasi ion Co 2+ dengan atom N gugus azometin  senyawa  SDPH,  yang  secara tidak langsung melemahkan energi ikatan N-H  imina  dan  C=N  azometin  senyawa SDPH.  Pada  spektrum  inframerah kompleks  Co(II)-SDPH  juga  muncul puncak  vibrasi  baru  pada  bilangan gelombang  465  cm −1 ,  yang  merupakan ikatan antara ion Co 2+ dan atom donor N ligan  SDPH.  Vibrasi  ikatan  atom-atom berat seperti senyawa anorganik umumnya muncul pada daerah inframerah jauh  (<500  cm -1 ).  Berdasarkan  data pergeseran  gugus  fungsi  tersebut,  ikatan koordinasi antara ion Co 2+ dengan SDPH terbentuk  melalui  atom  donor  O  gugus fenol  dan  atom  N  gugus  azometin senyawa SDPH (El-seidy & Attia, 2013).
Selain  dengan  berkoordinasi  dengan ligan  SDPH,  ion  pusat  Co 2+ juga  diduga dapat  mengikat  basa  trietilamin.  Hal tersebut teramati dalam spektrum inframerah  dengan  munculnya  puncak baru  dari  gugus  C-H  alkil  yang  berasal dari  trietilamin  pada  daerah  bilangan gelombang  2600-2700  cm -1 .  Ikatan  C-H pada  trietilamin  bebas  berada  pada  2973 dan 2773 cm −1 . Adanya pergeseran ikatan C-H  pada  daerah  2900-2700  cm −1
mengindikasikan  turut  terkoordinasinya trietilamin pada ion pusat Co 2+ via atom N (Maghami, et al, 2015).
Spektrum elektronik (UV-Vis)
kompleks  Co(II)-SDPH  dibandingkan dengan  garam  CoCl 2 yang  ditunjukkan pada  Gambar  5 . Spektrum  UV-Vis menunjukkan  penurunan  puncak  serapan maksimum  pada  kompleks  Co(II)-SDPH yang  disertai  dengan  munculnya  pita serapan  baru  di  daerah  sinar  tampak. Pergeseran  hipsokromik  pada  Gambar  5 diakibatkan  karena  adanya  perbedaan lingkungan  koordinasi  antara  kompleks Co(II)-SDPH  dan  garam  CoCl 2 . Pada senyawa  CoCl 2 ,  ion  Co 2+ berikatan dengan ligan Cl - yang merupakan ligan π- donor. Sementara pada senyawa kompleks  Co(II)-SDPH,  ion  Co(II) berikatan  dengan  ligan  SDPH  yang memiliki karakter π-akseptor dan bersifat khelat. Koordinasi ion logam dengan ligan kuat  akan  menyebabkan  pembelahan orbital- d (∆ okt )  meningkat  sehingga memerlukan  energi  transisi  yang  lebih besar,  akibatnya  puncak  serapan  akan muncul  pada  daerah  panjang  gelombang yang lebih kecil.
Gambar 5 . Pergeseran spektrum UV-Vis CoCl 2 dengan komples Co(II)-SDPH
400 500 600 700 800 0,0 0,2 0,4 0,6 Absorbans i Panjang gelombang (nm) CoCl 2 .6H 2 O Co(II)-SDPH 407 518
Kompleks  Co(II)-SDPH  memiliki pita  serapan  pada  407  nm  dan  518  nm. Puncak  serapan  407  nm  (24.570  cm −1 ) diduga  berasal  dari  transisi  intraligan sistem  cincin  aromatik  terkonjugasi. Puncak transisi intraligan pada kompleks Co(II)-SDPH terjadi pada daerah panjang gelombang  lebih  tinggi  dibanding  ligan SDPH (386 nm). Kompleks Co(II)-SDPH memiliki  pita  serapan baru pada 518 nm (19.305  cm −1 )  yang  bersesuaian  dengan
transisi 4 T 1g (F)→ 4 T 1g (P) dalam geometri oktahedral (El-seidy & Attia, 2013).
Selanjutnya,  kompleks  Co(II)-SDPH dianalisis  dengan  spektrometri  ESI-MS, yang  spektrumnya  ditunjukkan  pada Gambar 6. Pada preparasi larutan Co(II)- SDPH dalam pelarut asetonitril, ditambahkan larutan natrium iodida yang berperan sebagai pembawa muatan untuk kompleks Co(II)-SDPH yang netral.
Gambar 6 . Spektrum ESI-MS dan prediksi struktur kompleks Co(II)-SDPH dalam pelarut asetonitril
Pada  spektrum  ESI-MS  kompleks Co(II)-SDPH diamati satu puncak dengan intensitas  paling  dominan,  yaitu  puncak 1064  m/z.  Puncak  1064  m/z  diperkiraan bersesuaian  dengan  rumus  molekul kompleks  Co(II)-SDPH  dimer  yaitu, {Co(SDPH)[(C 2 H 5 ) 3 N](CH 3 CN) 2 (OH)} 2
Na + dengan  m/z=  1061.  Hasil  perkiraan struktur  tersebut  mendukung  pernyataan sebelumnya  pada  karakterisasi  spektrum inframerah,  bahwa  basa  trietilamin terkoordinasi  pada  ion  Co 2+ .  Adanya koordinasi  dengan  pelarut  dikarenakan asetonitril  merupakan  senyawa  yang
cukup  basa.  Gugus  alkil  pada  asetonitril bersifat  pendorong  elektron  sehingga atom  N  pada  asetonitril  dapat  bertindak sebagai  ligan.  Kompleks  Co(II)-SDPH dimer  tersebut  merupakan  kompleks netral.
Berdasarkan  hasil  karakterisasi  dan analisa  di  atas,  kompleks  Co(II)-SDPH yang  terbentuk  merupakan  kompleks netral  yang  berkoordinasi  dengan  ligan bidentat  SDPH  yang  bermuatan  −1. Momen  magnet  yang  diperoleh  dari kompleks  Co(II)-SDPH  adalah  sebesar 5,2  BM.  Berdasarkan  data  tersebut  nilai momen  magnet  yang  diperoleh  berada pada  rentang  nilai  momen  magnet  untuk ion Co 2+ dengan konfigurasi d 7 yaitu 4,1- 5,2  BM.  Pada  konfigurasi d 7 terdapat  2 elektron tidak berpasangan pada orbital e g dan  1  elektron  tidak  berpasangan  pada orbital t 2g . Hal tersebut menunjukan ligan SDPH menghasilkan kompleks paramagnetik spin tinggi dengan ion Co 2+ .

## Aktivitas Antioksidan
Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan secara in vitro dengan metoda kolorimetri menggunakan sumber radikal 2,2-difenil- 1-pikrilhidrazil  (DPPH).  Potensi  suatu kompleks  sebagai  antioksidan  dianalisa dari  kemampuan  kompleks  tersebut mereduksi absorbansi serapan maksimum DPPH,  yang  dinyatakan  sebagai  % inhibisi.  Dalam  penelitian  ini  telah
dilakukan  reaksi  DPPH  dengan  ligan SDPH dan kompleks Co(II)-SDPH, yang masing-masing larutan memiliki konsentasi pada rentang 0,00625 mM–0,4
mM. Antioksidan standar yang digunakan sebagai pembanding yaitu asam askorbat.
Dalam  penelitian  Alizadeh  dan  Amraie (2015), SDPH mengalami efek solvatokromik  positif  dalam  pelarut dengan konstanta dielektrik tinggi seperti DMSO. Hal tersebut mengakibatkan akan adanya serapan yang tumpang tindih pada daerah  pengukuran  515  nm,  sehingga perlu  dilakukan  blangko  untuk  setiap konsentrasi  ligan.  Hal  yang  sama  juga dilakukan  terhadap  kompleks  Co(II)- SDPH.  Hasil  uji  bioaktivitas  antioksidan untuk  ligan  SDPH,  kompleks  Co(II)- SDPH ditunjukkan pada Gambar 7.
Gambar 7. Aktivitas Inhibisi Radikal Bebas oleh AsamAskorbat, Ligan SDPH dan Kompleks Co(II)-SDPH pada rentang konsentrasi uji
0,00625 mM-0,4 mM.
Berdasarkan  kurva  tersebut,  pada ligan  SDPH  terjadi  kenaikan  aktivitas antioksidan  yang  cukup  signifikan  di daerah  konsentrasi  0,00625-0,05  mM.
0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0 20 40 60 80 100 % Inhi bi si Konsentrasi (mM) SDPH Co(II)-SDPH Asam Askorbat
Semakin besar konsentrasi ligan, semakin banyak jumlah proton atau elektron yang dapat  didonorkan  untuk  mereduksi  dan menstabilkan  radikal  bebas  DPPH. Kenaikan  nilai  %  inhibisi  masih berlangsung  sampai  ligan  mencapai konsentrasi maksimal pengukuran aktivitas antioksidan dalam penelitian ini yaitu, 0,4 mM. Diperkirakan kenaikan % inhibisi ligan SDPH akan berlanjut hingga mencapai kemampuan reduksi maksimum radikal DPPH yang ditandai dengan kurva mendatar  dengan  nilai  %  inhibisi  yang konsisten.
Pada  senyawa  kompleks  Co(II)- SDPH,  selain  transfer  proton  dari  gugus imina,  radikal  DPPH  juga  terstabilkan dengan  adanya  transfer  elektron  yang berasal  dari  atom  pusat  (Philip  et  al., 2018).  Kenaikan  aktivitas  antioksidan yang cukup signifikan terjadi pada daerah konsentrasi dibawah ~0,1 mM dan mulai menunjukan kurva mendatar setelah ~0,2 mM. Hal tersebut berarti setelah ~0,2 mM, radikal  DPPH  telah  tereduksi  dalam keadaan  optimal  sehingga  tidak  terjadi lagi kenaikan % inhibisi. Hal yang sama terjadi  pada  asam  askorbat  sebagai antioksidan standar. Adanya khelasi pada kompleks  Co(II)-SDPH  diduga  dapat meningkatkan kestabilan kompleks dengan  konjugasi  elektron  pada  seluruh bagian  molekulnya  (Halli  &  Sumathi, 2017).
Nilai IC 50 asam askorbat dan senyawa kompleks  Co(II)-SDPH  secara  berturut- turut  0,042  dan  0,071  mM.  Sementara ligan SDPH memiliki rentang kemampuan  inhibisi  radikal  DPPH dibawah batas 50%, sehingga perhitungan IC 50 tidak dapat dilakukan dan nilai IC 50 antara  ligan  dan  kompleks  tidak  dapat dibandingkan.  Diperkirakan  nilai  IC 50 ligan  SDPH  pada  kondisi  sama  akan berada pada konsentrasi >0,4 mM. Namun berdasarkan Gambar 7, dapat disimpulkan bahwa  dalam  rentang  konsentrasi  sama, senyawa kompleks Co(II)-SDPH memiliki  potensi  sebagai  antioksidan yang  lebih  baik  dibandingkan  ligan SDPH.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  analisis  spektrum 1 H-NMR,  telah  berhasil  disintesis  ligan salisilaldehid-2,4-dinitrofenilhidrazon (SDPH). Ligan tersebut digunakan untuk mensintesis  kompleks  Co(II)-SDPH. Reaksi  pembentukan  kompleks  Co(II)- SDPH  dilakukan  menggunakan  pelarut campuran  etanol/asetonitril  (1:1).  Ikatan koordinasi  antara  ion  Co(II)  dengan SDPH  ditunjukkan  adanya  pergeseran bilangan  gelombang  gugus  fungsi  O-H, N-H  dan  C=N,  yang  masing-masing sebesar 62-82 cm −1 , 54-160 cm −1 dan 17- 18  cm −1 .  Kedua  kompleks  tersebut bersifat  paramagnetik  dan  merupakan
kompleks  netral.  Berdasarkan  analisis ESI-MS, kompleks
Co(II)-SDPH memiliki  puncak  pada  m/z  1064  yang bersesuaian  dengan  rumus  molekul
[Co(SDPH)(N(Et) 3 )(acn)(OH)] 2 Na + (Mr= 1061  g/mol).  Hasil  uji  bioaktivitas
antioksidan  dengan  metoda  DPPH, senyawa kompleks Co(II)-SDPH
memiliki  potensi  sebagai  antioksidan yang lebih baik dibandingkan ligan SDPH dengan  nilai  IC 50 masing-masing  0,071 mM dan >0,4 mM.

## DAFTAR RUJUKAN
Al-amiery,  A.  A.,  Kadhum,  A.  A.  H.,  &
Mohamad,  A.  B.  (2012).  Antifungal and Antioxidant Activities of Pyrrolidone Thiosemicarbazone Complexes, 2012 (L).
https://doi.org/10.1155/2012/795812
Alizadeh,  K.,  &  Amraie,  A.  (2015).
Electronic  Absorption  Spectroscopic Behavior  and  Acidity  Constants  of Some  New  Dinitrophenylhydrazone Derivatives. Spectrochim.  Acta  A ,
147 , 67–72. https://doi.org/10.1016/j.saa.2015.02.
081
Arora,  P.,  Arora,  V.,  Lamba,  H.  S.,  & Wadhwa,  D.  (2012).  Importance  of Heterocyclic  Chemistry:  A  Review. Int J Pharm Res Sci , 3 (9), 2947–2954.
Birch, C. S., Brasch, N. E., Mccaddon, A.,
&  Williams,  J.  H.  H.  (2009).  Free
Radical Biology & Medicine A novel role for vitamin B12: Cobalamins are Intracellular  Antioxidants  In  Vitro. Free  Radic.  Biol.  Med. , 47 (2),  184–
188.
https://doi.org/10.1016/j.freeradbiom ed.2009.04.023
Caligiani,  A.,  Acquotti,  D.,  Palla,  G.,  & Bocchi, V. (2007). Identification and quantification  of  the  main  organic components  of  vinegars  by  high resolution  1H  NMR  spectroscopy. Analytica  Chimica  Acta , 585 ,  110– 119.
https://doi.org/10.1016/j.aca.2006.12.
016
El-Gammal,  O.  A.,  Bekheit,  M.  M.,  &
Tahoon,  M.  (2015).  Synthesis  , Characterization and Biological Activity of 2-Acetylpyridine-a-
Naphthoxyacetylhydrazone  Its  Metal Complexes. Spectrochim.  Acta  A ,
135 ,
597–607.
https://doi.org/10.1016/j.saa.2014.05.
071 El-seidy, A. M. A., & Attia, M. I. (2013). In Situ Synthesis and Characterisation of 2-((2-(2,4-dinitrophenyl)- hydrazono)-methyl)phenol Metal Complexes and their Investigation as

## Antibacterial and Antifungal Agents.
J. Appl. Sci. Res. , 9 (4), 2901–2908.
Gull, P., Babgi, B. A., & Adil, A. (2017).
Microbial  Pathogenesis  Synthesis  of Ni  (  II  ),  Cu  (  II  )  and  Co  (  II  ) complexes  with  new  macrocyclic Schiff-base ligand containing
dihydrazide  moiety :  Spectroscopic  ,
structural , antimicrobial and
antioxidant  properties. Microbial
Pathogenesis , 110 , 444–449. https://doi.org/10.1016/j.micpath.201 7.07.030
Halli,  M.  B.,  &  Sumathi,  R.  B.  (2017).
Synthesis, physico-chemical investigations and biological screening  of  metal  (  II  )  complexes with  Schiff  base  derived  from naphthofuran-2-  carbohydrazide  and citral. Arabian Journal of Chemistry ,
10 ,
S1748–S1759.
https://doi.org/10.1016/j.arabjc.2013.
06.025 Harinath, Y., Kumar, D. H., Kumar, B. N.,
Apparao, C., & Seshaiah, K. (2013).
Spectrochimica Acta Part A : Molecular and Biomolecular Spectroscopy  Synthesis  ,  spectral characterization and antioxidant activity  studies  of  a  bidentate  Schiff base
, 5-methyl thiophene-2-
carboxaldehyde-carbohydrazone  and its Cd ( II ), Cu ( II ), Ni ( II ) and Zn ( II ) complexes. Spectrochimica Acta
Part A: Molecular and Biomolecular
Spectroscopy , 101 , 264–272.
https://doi.org/10.1016/j.saa.2012.09. 085
Jambi,  M.  S.  (2017).  Quantum  , characterization  and  spectroscopic studies on Cu ( II ), Pd ( II ) and Pt ( II  )  complexes  of  1-  (  benzo  [  d  ] thiazol-2-yl  )  -3-phenylthiourea  and its biological application as antimicrobial and antioxidant.
Journal of Molecular Structure , 1143 , 217–228.
https://doi.org/10.1016/j.molstruc.20
17.04.065
Maghami, M., Farzaneh, F., Simpson, J.,
Ghiasi,  M.,  &  Azarkish,  M.  (2015). Synthesis, crystal structure, antibacterial  activity  and  theoretical studies on a novel mononuclear cobalt (II)  complex  based. Journal  of Molecular  Structure , 1093 ,  24–32.
https://doi.org/10.1016/j.molstruc.20 15.03.037
Monfared,  H.  H.,  Pouralimardan,  O.,  &
Janiak,  C.  (2007).  Synthesis  and Spectral Characterization of
Hydrazone  Schiff  Bases  Derived from  2  ,  4-Dinitrophenylhydrazine. Crystal Structure of Salicylaldehyde-
2.4-Dinitrophenylhydrazone. Z.
Naturforsch , 62 (b), 717–720.
Ortiz,  S.,  Nelson,  R.,  Kesternich,  V.,
Pérez-fehrmann,  M.,  Christen,  P.,  &
Marcourt,  L.  (2016).  Synthesis  and Antifungal  Activity  of  Diaryl Hydrazones from 2,4- Dinitrophenylhydrazine. J.  Chil. Chem. Soc. , 61 (3), 3081–3084.
Philip, J. E., Antony,
S. A.,
Eeettinilkunnathil, S. J., Kurup, M. R. P.,  &  Velayudhan,  M.  P.  (2018). Design, Synthesis, Antimicrobial and Antioxidant  Activity  of  3-formyl chromone hydrazone and Their Metal (II)  Complexes. Inorg.  Chim.  Acta ,
469 ,
87–97.
https://doi.org/10.1016/j.ica.2017.09. 006 Piri, Z., Moradi-shoeili, Z., & Assoud, A.
(2017).  New  copper  (  II  )  complex with bioactive 2 – acetylpyridine-4N-
p -chlorophenylthiosemicarbazone
ligand :  Synthesis  ,  X-ray  structure  ,
and  evaluation  of  antioxidant  and antibacterial activity. Inorganic Chemistry Communications , 84 , 122– 126. https://doi.org/10.1016/j.inoche.2017 .08.005
Sathyadevi,  P.,  Krishnamoorthy,  P.,
Jayanthi, E., Butorac, R. R., Cowley, A.  H.,  &  Dharmaraj,  N.  (2012). Inorganica  Chimica  Acta  Studies  on
the effect of metal ions of hydrazone complexes on interaction with nucleic acids  ,  bovine  serum  albumin  and antioxidant  properties. Inorganica
Chimica Acta , 384 , 83–96.
https://doi.org/10.1016/j.ica.2011.11. 033
Shabbir,  M.,  Akhter,  Z.,  Ismail,  H.,  & Mirza, B. (2017). Synthetic bioactive novel  ether  based  Schiff  bases  and their copper ( II ) complexes. Journal of Molecular Structure , 1146 , 57–61. https://doi.org/10.1016/j.molstruc.20 17.05.127
Sharma,  N.  (2014).  Free  Radicals  , Antioxidants and Disease. Biol Med ,
6 (3), 1–6. https://doi.org/10.4172/0974- 8369.1000214
Valko,  M.,  Leibfritz,  D.,  Moncol,  J.,
Cronin,  M.  T.  D.,  Mazur,  M.,  & Telser,  J.  (2007).  Free  radicals  and Antioxidants in Normal Physiological Functions and Human Disease. Int. J. Biochem.  Cell  Biol. , 39 ,  44–84. https://doi.org/10.1016/j.biocel.2006.
07.001