## Journal of Agromedicine and Medical Sciences
. 2024. 10(1): 41-47
JOURNAL OF AGROMEDICINE AND MEDICAL SCIENCES (AMS) ISSN: 2460-9048 (Print), ISSN: 2714-5654 (Electronic)
Available online at http://jurnal.unej.ac.id/index.php/JAMS
PENGARUH EKSTRAK BUAH ANDALIMAN ( Zanthoxylum acanthopodium DC.) TERHADAP HATI TIKUS ( Rattus norvegicus L.) YANG DIINDUKSI TARTRAZIN
EFFECT OF ANDALIMAN FRUIT EXTRACT ( Zanthoxylum acanthopodium DC.) ON THE LIVER OF TARTRAZINE INDUCED RAT ( Rattus norvegicus L.)
Juandi Al Gani Sika *) , Husnarika Febriani, Syukriah
Biology Study Program, Faculty of Science And Technology, State Islamic University of North Sumatra, Deli Serdang, Indonesia

## Article Info
Article History: Received: August 05, 2023
Accepted: February 12, 2024 Published: February 19, 2024
*) Corresponding author:
E-mail: juandialganisika18@gmail.com

## How to cite this article:
Sika, J.A.G., Febriani, H., Syukriah, 2024. Effect  of  Andaliman  Fruit  Extract ( Zanthoxylum  acanthopodium DC.)  on The  Liver  of  Tartrazine  Induced  Rat ( Rattus  norvegicus L.). Journal  of Agromedicine  and  Medical  Sciences. 2024. 10(1): 41-47
https://doi.org/10.19184/ams.v10i1.394 15

## Abstrak
Pengaruh tartrazin sebagai pewarna makanan sintetik yang dikonsumsi berkepanjangan memberikan  efek  racun  oleh  radikal  bebas  dalam  jumlah  yang  besar  membuat ketidakseimbangan  didalam  tubuh  dan  memicu  gangguan  fungsi  hati.  Radikal  bebas dapat  diminimalisir  dengan  antioksidan  sehingga  mampu  menguragi  radikal  bebas didalam tubuh. Antioksidan dapat diperoleh salah satunya pada buah andaliman. Tujuan penelitian untuk mengetahui pengaruh ekstrak etanol buah andaliman terhadap kadar SGOT dan SGPT serta histologi tikus putih yang diinduksi tartrazin. Rancangan penelitian ini  menggunakan  25  tikus  putih  dengan  5  perlakuan  dan  5  ulangan  selama  30  hari. Kelompok kontrol negatif diinduksi CMC 1%, kontrol positif diinduksi tartrazin 15 mg/kg BB, pada kelompok perlakuan 1, 2, dan 3 diinduksi  dengan tartrazin 15 mg/kg BB dan ekstrak  etanol  buah  andaliman,  150  mg/kg  BB,  300  mg/kg  BB,  dan  450  mg/kg  BB. Tahapan  pada  penelitian  ini  adalah  skrining  fitokimia,  flavonoid  total  dan  aktivitas antioksidan  serta  pengukuran  kadar  SGOT  dan  SGPT , dan  pengamatan  histologi  hati. Data  dianalisis  menggunakan  Anova  one-way  dan  uji  lanjut  Duncan.  Hasil  penelitian menunjukkan  skrining  fitokimia  ekstrak  buah  andaliman  mengandung  flavonoid, terpenoid, steroid, dan tanin. Kadar flavonoid total pada ekstrak adalah 7,8163 mgQE/g ekstrak. Kadar aktivitas antioksidan pada ekstrak memiliki nilai IC 50 sebesar 102,35 ppm. Hasil  penelitian  ini  juga  menunjukkan  adanya  pengaruh  ekstrak  terhadap  penurunan kadar  SGOT  dan  SGPT  serta  dapat  meminimalisir  kerusakan  histologi  hati  setelah diinduksi tartrazin.
Kata Kunci : Andaliman, tartrazin, SGOT-SGPT, histologi hati

## Abstract
Tartrazine, as a synthetic food coloring consumed for a long time, has a toxic effect by free  radicals  in  large  quantities,  creating  an  imbalance  in  the  body  and  triggering disturbances, namely liver function. Free radicals can be minimized with antioxidants to reduce free radicals in the body. Antioxidants can be found in fruits, including Andaliman fruit. This study aimed to determine the effect of ethanol extract from Andaliman fruit on SGOT-SGPT  levels  and  histology  of  tartrazine-induced  white  rats.  The  research  design used 25 white rats with 5 treatments and 5 replications for 30 days. The negative control group  was  induced  by  1%  CMC,  positive  control  induced  by  tartrazine  15  mg/kg  BW, treatment  groups  1,  2,  3  induced  by  tartrazine  15  mg/kg  BW  and  ethanol  extract andaliman fruit 150 mg/kg BW, 300 mg/kg BW, and 450 mg/kg BW. The stages in this study  were  screened  for  phytochemicals,  total  flavonoids  and  antioxidant  activity, measurement  of  SGOT-SGPT  levels,  and  observation  of  liver  histology.  Data  were

## Pendahuluan
Tartrazin  merupakan  pewarna  makanan  sintetis  yang  biasa digunakan  pada  produk  makanan  yang  hampir  setiap  hari dikonsumsi.  Tartrazin  adalah  pewarna  makanan  sintesis berwarna  kuning  lemon  yang  mudah  larut  dalam  air.  Batas penggunaan  tartrazin  di  Indonesia  dalam  peraturan  Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan  Nomor  11  Tahun  2019  Tentang Bahan Tambahan Pangan, menurut ADI ( Acceptable Daily Intake ) sebesar 0-10 mg/kg berat badan (BPOM, 2019). Adapun produk makanan yang menggunakan tartrazin sebagai bahan tambahan pangan  sebagai  tambahan  pewarna  yaitu  makanan  dan minuman  ringan  seperti  keripik  rasa,  sereal,  kue  kering,  jeli, campuran  minuman  bubuk,  mustard,  es  krim,  permen  karet, yoguart,  biskuit,  maupun  mie  instan.  Selain  itu  juga  terdapat pada  produk  non  pangan  yaitu  pada  sabun,  kosmetik,  sampo, maupun obat-obatan (Barhoma et al. , 2019).
Penggunaan jangka panjang tartrazin dapat menunjukkan efek racun pada fungsi hati dan ginjal (Ali et al. , 2016). Berdasarkan penelitian  Amin., et  al (2010) menyatakan  bahwa  efek  zat pewarna  tartrazin  dengan  dosis  15  dan  100  mg/kg  BB  yang diinduksi pada tikus selama 30 hari secara oral memperlihatkan perubahan  pada  fungsi  hati  yakni  meningkatnya  kadar  enzim pada  hati  dan  juga  pada  ginjal  yaitu  peningkatan  kadar  serum kreatinin yang menandakan kerusakan pada hati dan ginjal juga terdapat perubahan secara histopatologi yaitu deposisi pada sel kupffer hati dan adanya perdarahan pada bagian hati dan ginjal. Menurut  Sianturi  (2021)  bahwa  pemberian  tartrazin  yang berkepanjangan  dapat  menyebabkan  struktur  histologi  hati mengalami  kerusakan  seperti  degenerasi,  kongesti  vena centralis,  hingga  nekrosis  pada  hepatosit.  Selain  itu  menurut Batubara et  a.l (2017)  menyatakan  bahwa  peningkatan  kadar tartrazin  dalam  darah  pada  anak  yang  Defisit  Perhatian  dan Gangguan  Hiperaktivitas  memberikan  efek  peningkatan  yang sangat  signifikan  pada  hasil  pengukuran  tingkat  hiperaktivitas dari anak yaitu 95%.
Hati  adalah  organ  vital  yang  memiliki  berat  sekitar  1200-1500 gram  dan  sebagai  organ  kelenjar  terbesar  dalam  tubuh.  Hati terletak pada abdomen/perut kuadran kanan atas yang menyatu pada saluran bilier dan kantung empedu. Hati berperan penting dalam  tubuh  yakni  dalam  metabolisme  glukosa  dan  lipid, mengabsorbsi  lemak  dan  vitamin,  membantu  dalam  proses pencernaan,  juga  membantu  dalam  mendetoksifikasi  tubuh terhadap  xenobiotik  atau  zat  asing  yang  ada  dalam  tubuh (Rosida, 2016). Pemeriksaan dalam menentukan suatu kelainan pada organ hati dapat dilakukan berupa pemeriksaan fungsi hati yaitu  SGOT  dan  SGPT  serta  pemeriksaan  histologi  hati.  SGOT
( Serum  Glutamic  Oxaloacetic  Transaminase )  dan  SGPT  ( Serum Glutamic  Pyruvic  Transaminase )  merupakan  enzim  yang terdapat salah satunya pada organ hati yang akan keluar pada sel  hati  jika  terjadinya  kerusakan  dan  akan  mengalami peningkatan  kadar  dalam  serum  darah.  Meningkatnya  kadar SGOT dan SGPT disebabkan terjadinya perubahan permiabilitas atau  kerusakan  dinding  sel  hati  yang  menandakan  terjadinya gangguan  pada  organ  hati.  Secara  pengamatan  histologi, kerusakan jaringan hati dapat  ditandai dengan tingginya  kadar SGOT dan SGPT sehingga dibutuhkan senyawa antioksidan yang berperan  dalam  menurunkan  radikal  bebas  dan  berpengaruh terhadap fungsi hati yaitu salah satunya buah andaliman (Rosida, 2016).
Andaliman  ( Zanthoxylum  acanthopodium DC.)  adalah  jenis tumbuhan  rempah  khas  yang  ditemukan  di  Sumatera  Utara. Buah  pada  tumbuhan  ini  sering  digunakan  sebagai  bumbu masakan  tradisional  suku  Batak.  Buah  andaliman  menyimpan kandungan  senyawa  flavonoid  yang  berperan  sebagai antioksidan yang mampu meningkatkan proliferasi limfosit dan dapat  menurunkan  radikal  bebas  (Worotikan et  al. ,  2017). Berdasarkan  penelitian  Simanullang et  al. (2021)  yang  telah dilakukan  mengenai  kanker  dari  induksi benzopyrene dan perberian  ekstrak  andaliman  bahwa  pemberian  ekstrak andaliman  sebagai  antioksidan  dapat  memperbaiki  kerusakan hati  berupa  nekrosis.  Menurut  Wira et  al ,  (2021)  berdasarkan penelitiannya  bahwa  ekstrak  buah  andaliman  memiliki efektifitas  sebagai  analgesik  (penghilang  rasa  sakit)  terhadap mencit  yang  diinduksi  oleh  asam  asetat.  Selain  itu  juga  ekstak buah  andaliman  mampu  memperbaiki  kerusakan  sel  serviks yang disebabkan oleh benzopyrene dikarenakan andaliman disini sebagai antioksidan yang mampu untuk memperbaiki kerusakan tersebut (Simanullang et al. , 2021). Dengan demikian kandungan flavonoid pada buah andaliman dengan dosis 150 dan 300 mg/kg BB mampu menurunkan radikan bebas dan dapat meningkatkan proliferasi  sel  juga  meningkatkan  regenerasi  sel  yang  rusak sehingga  sel  dapat  mengalami  perbaikan  ( Worotikan  et  al ., 2017).
Tujuan  dalam  penelitian  ini  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian  ekstrak  etanol  buah  andaliman  ( Zanthoxylum acanthopodium DC.)  terhadap  SGOT  SGPT  dan  histologi  hati tikus putih ( Rattus norvegicus L.) yang diinduksi tartrazin.

## Metode

## Desain Penelitian
Penelitian yang dilakukan merupakan penelitian eksperimental  dan  menggunakan  metode  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL).  Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan  5
analyzed  using  one-way  Anova  and  Duncan's  further  test.  Results  showed  that phytochemical  screening  of  Andaliman  fruit  extract  contained  flavonoids,  terpenoids, steroids  and  tannins.  The  total  flavonoid  content  in  the  extract  was  7.8163  mgQE/g extract.  The  extract's  antioxidant  activity  level  has  an  IC50  value  of  102.35  ppm.  This study also showed that the extract affected decreasing levels of SGOT-SGPT and could minimize liver histological damage after being induced by tartrazine .
Keywords : Andaliman, tartrazine, SGOT-SGPT, liver histology
macam  kelompok  perlakuan  dengan  5  kali  pengulangan yaitu kelompok kontrol positif dan negatif, serta kelompok perlakuan 1, 2, dan 3.

## Subyek Penelitian
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah sebagai berikut. (1) Kandang tikus, (2) Kain hitam, (3) Spuit 3 ml, (4) Saringan, (5) Needle  sonde  tikus,  (6)  Corong  buchner  atau  corong  kaca,  (7) Wadah makan hewan (8) Bak parafin, (9) Botol minum hewan, (10) Seperangkat alat bedah, (11) Timbangan digital, (12) Rotary evaporator, (13) Erlenmeyer 1000 ml, (14) Mikrotom dan pisau mikrotom, (15) Gelas takar 2000 ml, (16) Tissue processing, (17) Spatula,  (18)  Tissue  cassatte,  (19)  Gelas  arloji,  (20)  Mikroskop, (21)  Plastik  wrap,  (22)Cover  glass,  (23)  Alumunium  foil,  (24) Object  glass,  (25)Tabung  vacutainer  phlebotomi  tutup  merah, (26)  Centrifuge,  (27)  Pipet  mikrohematokrit,  (28)Klinipet,  (29) Blender,  (30)  Tip  kuning  dan  biru,  (31)  Toples  kaca  3L, (32)Tabung reaksi, (33) Rak tabung reaksi, (34) Spektofotometri UV, (35)Inkubator, (36) Labu ukur.
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  sebagai berikut.
(1)Tikus putih jantan ( Rattus norvegicus L.) berumur 2-3 bulan dengan berat sekitar 150-180 gram, (2) Alkohol bertingkat (70%, 80%, 90%), (3) Pakan tikus, (4) Larutan entellan, (5) Sekam kayu, (6)  Natrium  nitrit  hidroksida  10%,  (7)  Buah  andaliman (Zanthoxylum  acanthopodium  DC.),  (8)  Eter,  (9)Tartrazin, (10)H 2 SO 4 (p), (11) Air, (12)Asam asetat anhidrat, (13)Aquades, (14)Asam klorida 2 N, (15)Etanol 96%, (16)Pereaksi (Bouchardat, Mayer,  maupun  Dragendroff  dan  Wagner),  (17)CMC  1%, (18)Larutan  HCl  2  N,  (19)Hematoxylin-eosin  (HE),  (20)Larutan FeCl 3 10%,  (21)  Neutral  buffered  formalin  (NBF),  (22)Pereaksi FeCl 3 5%, (23)Larutan xylene, (24)Parafin preparat, (25) Larutan xylol, (26) Reagen SGOT : Tris pH 7.8, L-Aspartate, LDH, MDH, 2- Oxoglutarete,  dan  NADH,  (27)  Reagen  SGPT  :  Tris  pH  7.5,  L- Alanine,  LDH,  2-Oxoglutarate,  dan  NADH,  (28)  NaCl  fisiologis 0,9%.

## Penentuan Sampel Penelitian
- Pembuatan ekstrak etanol buah andaliman
Buah  andaliman  ( Zanthoxylum  acanthopodium DC.)  yang  akan digunakan dalam penelitian ini sebanyak 10 Kg yang didapat dari Desa  Raya  Huluan  Kabupaten  Simalungun  Sumatera  Utara. Sampel  tumbuhan  kemudian  dicuci  bersih  lalu  dikering anginkan. Selanjutnya sampel buah andaliman yang telah dicuci bersih dan dikering anginkan, kemudian sampel dikeringkan di bawah  sinar  matahari  selama  lebih  kurang  1-3  hari  dan  yang tutupi menggunakan kain penutup berwarna hitam.
Selanjutnya  sampel  yang  telah  kering  kemudian  dihaluskan menggunakan blender hingga menjadi serbuk, lalu diayak/disaring  untuk  memperoleh  serbuk  simplisia  sebanyak 2000 gram. Serbuk simplisia kemudian diekstraksi dengan cara dimaserasi menggunakan pelarut etanol 96% sebanyak 20 liter dengan perbandingan 1 : 10. Selanjutnya serbuk simplisia buah andaliman  tersebut  direndam  menggunakan  etanol  selama  24 jam. Lalu sampel hasil rendaman disaring menggunakan kertas saring untuk memisahkan filtrat dari ampasnya. Kemudian filtrat hasil  maserasi  dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator untuk mendapatkan hasil ekstrak yang kental/ekstrak pekat. - Persiapan hewan coba
Penelitian ini menggunakan tikus putih jantan ( Rattus norvegicus L.) dengan keadaan yang sehat dan tidak dalam keadaan cacat
yang  berumur  sekitar  2-3  bulan  dengan  berat  badan  150-180 gram sebanyak 25 ekor. Penelitian ini juga menggunakan kadang sebagai tempat hewan coba sebanyak 5 kandang.
Sebelumnya  tikus  aklimatisasi/diadaptasi  terhadap  lingkungan baru  selama  1  minggu  dan  pengukuran  berat  badan  dihari pertama perlakuan yang dilakukan untuk penetapan dosis. - Pengambilan Darah
Pengambilan darah dilakukan untuk melihat fungsi hati berupa SGOT  dan  SGPT.  Metode  pengambilan  darah  melalui  sinus orbital  terletak  dibelakang  mata.  Metode  ini  dapat  dilakukan melalui  anestesi  umum  maupun  anestesi  lokal  (Handajani., 2021). Pengambilan sampel darah dilakukan melalui sinus orbital mata  menggunakan  pipet  mikrohematokrit  sebanyak  kurang lebih  2  ml  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung  vacutainer phlebotomi tutup merah.
- Pembedahan
Pembedahan  dilakukan  setelah  dilakukan  perlakuan  terhadap hewan  coba  dengan  melakukan  dislokasi  maupun  anestesi terlebih  dahulu.  Selanjutnya  dilakukan  pengambilan  sampel organ  hati  untuk  dilakukan  tahapan  berikutnya  yakni  histologi hati.

## Perlakuan
-
Penginduksian Tartrazin
Penginduksian tartrazin sebagai zat toksik dilakukan secara oral menggunakan needle sonde pda tikus putih sebanyak 1 x sehari pada  pagi  hari  yang  sebelumnya  tikus  putih  telah  dipuasakan selama  1  jam  sebelum  penginduksian  selama  30  hari  dengan dosis 15 mg/kg berat badan.
- Penginduksian Ekstrak Etanol Buah Andaliman Penginduksian ekstrak dilakukan secara oral menggunakan dosis bertingkat  (150, 300, 450 mg/kg BB) sebanyak 1 x sehari pada sore hari yang sebelumnya tikus putih telah dipuasakan selama 1 jam sebelum penginduksian selama 30 hari.

## Pengukuran
-
Pengukuran Kadar SGOT – SGPT Pengukuran  kadar  SGOT – SGPT  dilakukan  untuk  melihat  ada atau  tidak  adanya  pengaruh  yang  diberikan  setelah  dilakukan perlakuan  terhadap  hati  tikus  putih  setelah  diinduksi  tartrazin dan  ekstrak  etanol  buah  andaliman.  Pengukuran  SGOT  SGPT dilakukan  menggunakan  serum  darah  tikus  putih,  pipet mikrohematokrit  dan  tabung  phlebotomi  melalui  sinus  orbital sebanyak 2 ml. Prinsip pemeriksaan melalui metode penetapan aktivitas  ASAT  ( asparate  aminotransferase )  menggunakan metode pengujian secara kinetik ‘IFCC’ ( international federation of clinical chemistry ). - Pengamatan Histopatologi
Pengamatan  histopatologi  dilakuakan  setelah  perlakuan  dan pembedahan kemudian dilanjutkan dengan pembuatan preparat histopatologi  pada  organ  hati  untuk  dilakukan  pengamatan histopatologi  dengan  5  lapang  pandang  pada  mikroskop  yakni keempat sudut dan pada bagian tengah dengan perbesaran 100x dan didasari oleh skor nilai berikut (Insani, 2015).

## Analisis Laboratorium
- Pengujian Metabolit Sekunder Buah Andaliman Pengujian  metabolit  sekunder  meliputi  skrining  fitokimia  dan aktivitas antioksidan terhadap ekstrak buah andaliman. Skrining fitokimia  dilakukan  guna  mengetahui  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  ekstrak  tersebut. Sedangkan pengujian kadar aktivitas antioksidan bertujuan untuk mengetahui apakah ada tidaknya senyawa yang bersifat aktif
pada ekstrak tersebut sehingga mampu untuk menangkal radikal bebas.
-
Pengujian  Ekstrak  Terhadap  Kadar  SGOT – SGPT  Hati Tikus Putih yang Diinduksi Tartrazin Pengujian bertujuan untuk mengetahui kadar SGOT – SGPT hati tikus putih terhadap ekstrak buah andaliman setelah dipaparkan oleh tartrazin
- Pengujian  Ekstrak  Terhadap  Histologi  Hati  Tikus  Putih yang Diinduksi Tartrazin
Pengujian  tersebut  dilakukan  untuk  mengetahui  secara histopatologi terhadap ekstrak buah andaliman pada hati tikus putih setelah diinduksi oleh tartrazin

## Analisis Statistik
Hasil  pengamatan  SGOT – SGPT  dan  hasil  pengamatan perhitungan  histologi  yang  diperoleh  akan  dianalisis menggunakan  uji  ANOVA one  way untuk  mengetahui  ada tidaknya  pengaruh  ekstrak  etanol  buah  andaliman  terhadap
fungsi hati dan histologi hati yang diinduksi oleh tartrazin.

## Persetujuan Etik
No.0662/KEPH-FMIPA/2022 Persetujuan  etik  dalam  penggunaan  hewan  coba  digunakan sebagai  protokol  penelitian  sebagai  subjek  penelitian  yang dapat  dipertimbangkan  relevansinya  terhadap  kesehatan manusia  yang  berpedoman  pada  prinsip – prinsip  penelitian hewan  coba  secara  etis  untuk  penelitian  kesehatan  yang menggunakan hewan coba.

## Hasil
Hasil  pengujian  metabolit  sekunder  dan  pengujian  kadar aktivitas antioksidan ekstrak buah andaliman terdapat di Tabel 2 dan  Tabel  3.  Hasil  pengamatan  pengaruh  ekstrak  buah andaliman  terhadap  kadar  SGOT – SGPT  hati  tikus  putih  yang diinduksi oleh tartrazin menunjukkan adanya perbedaan rata – rata  pada  kadar  SGOT – SGPT  disetiap  kelompok  perlakuan (Tabel 4).
Tabel 1. Skor Pengamatan Histopatologi Hati
No. Integritas Gambaran Hati Skor 1 Normal, tidak ada perubahan patologis 1 2 Perdarahan (Hemoragi)/Degenerasi Parenkimatosa 2 3 Degenerasi Melemak/Degenerasi Hidropik 3 4 Nekrosis 4 Tabel 2. Hasil skrining fitokimia ekstrak buah andaliman Golongan Senyawa Metabolit Pereaksi Hasil Alkaloid Bouchardart - Maeyer - Flavonoid FeCl 3 +
Mg.HCl + H 2 SO 4
+ Terpenoid Liebermann-Bouchard + Salkowsky + Steroid Liebermann-Bouchard + Salkowsky + Saponin Aquadest - Tanin FeCl 3 +
Keterangan : (+) = Terdapat senyawa
(-) = Tidak terdapat senyawa
Tabel 3. Hasil pengujian kadar total aktioksidan ekstrak buah andaliman No. Sampel Konsentrasi (ppm) / IC 50 1. Ekstrak Buah Andaliman ( Zanthoxylum acanthopodium DC.) 102,35 Keterangan : 1. Sangat Kuat = <50 (ppm) 2. Kuat = 50-100 (ppm) 3. Sedang = 101-150 (ppm) 4. Lemah = 151-200 (ppm)
Tabel 4. Hasil pengamatan kadar SGOT – SGPT Kelompok Kadar SGOT (U/L) Kadar SGPT (U/L) P=Value Kontrol Negatif 61,0 ± 12,6 a 25,8 ± 7,01 a 0,000
Kontrol Positif 368,6 ± 24,2 e
362,0 ± 17,3 e Perlakuan 1 242,4 ± 25,7 d 233,2 ± 16,4 d Perlakuan 2 176,0 ± 40,5 c 187,6 ± 7,19 c Perlakuan 3 105,6 ± 16,9 b 58,4 ± 125,0 b
Keterangan : SD : Standar Deviasi, K- (CMC 1%), K+ (tartrazin 15 mg), P1 (tartrazin 15 mg/kg BB + ekstrak 150 mg/kg BB), P2 (tartrazin 15 mg/kg BB + ekstrak 300 mg/kg BB), P3 (tartrazin 15 mg/kg BB  +  ekstrak  450  mg/kg  BB). abcde angka  yang  diikuti  huruf  berbeda  pada  satu  kolom  yang menunjukkan beda nyata (P<0,05).
Tabel 5. Hasil pengamatan skrining histologi hati tikus putih Kelompok Skoring Histologi P=value Kontrol Negatif 22,6 ± 5,50 a 0,000 Kontrol Positif 70,8 ± 4,86 e Perlakuan 1 59,2 ± 3,03 d Perlakuan 2 52,2 ± 5,76 c Perlakuan 3 37,0 ± 3,53 b
Keterangan : SD : Standar Deviasi, K- (CMC 1%), K+ (tartrazin 15 mg), P1 (tartrazin 15 mg/kg BB + ekstrak 150 mg/kg BB), P2 (tartrazin 15 mg/kg BB + ekstrak 300 mg/kg BB), P3 (tartrazin 15 mg/kg BB  +  ekstrak  450  mg/kg  BB). abcde angka  yang  diikuti  huruf  berbeda  pada  satu  kolom  yang menunjukkan beda nyata (P<0,05).
Gambar 1. Histologi Hati Tikus Putih Setelah Penginduksian Tartrazin dan Ekstrak Etanol Buah Andaliman ( Zanthoxylum acanthopodium DC.). K+ (tartrazin 15 mg), P1 (tartrazin 15 mg/kg BB + ekstrak 150 mg/kg BB), P2 (tartrazin 15 mg/kg BB + ekstrak 300 mg/kg BB), P3 (tartrazin 15 mg/kg BB + ekstrak 450 mg/kg BB). Keterangan : (a) hepatosit normal, (b) degenerasi hidropik, (c) degenerasi melemak, (d) hemoragi, (e) nekrosis.
Pengujian  terhadap  histologi  hati  tikus  putih  menunjukkan adanya  perbedaan  rata – rata  histologi  hati  tikus  putih  pada masing – masing  kelompok  perlakuan,  baik  pada  kelompok kontrol  maupun  kelompok  perlakuan  setelah  penginduksian tartrazin dan ekstrak  etanol buah andaliman (Tabel 5,  Gambar 1).

## Pembahasan
Pengujian Ekstrak Terhadap Kadar SGOT – SGPT Hati Tikus Putih yang Diinduksi Tartrazin
Hasil uji ANOVA one way pada pengamatan kadar SGOT – SGPT
didapatkan  nilai  signifikan  sebesar  p=0,000  yang  menunjukkan bahwa  adanya  pengaruh  pemberian  ekstrak  buah  andaliman terhadap  kadar  SGOT – SGPT  yang  diinduksi  tartrazin  dengan nilai  rata – rata  (368,6 ± 24,2)  dan  setelah  penginduksian tartrazin dan ekstrak etanol buah andaliman dengan nilai rata – rata  (105,6 ± 16,9)  setelah  30  hari.  Berdasarkan  hasil pengamatan  kadar  SGOT – SGPT  mengalami  peningkatan  dari kadar normal yaitu SGOT (61,0 ± 12,6) dan SGPT (25,8 ± 7,01) pada kelompok kontrol negatif setelah diinduksi tartrazin selama 30  hari.  Peningkatan  enzim  SGPT  dan  SGOT  disebabkan perubahan  permiabilitas  atau  kerusakan  dinding  sel  hati sehingga jumlah SGOT dan SGPT akan  meningkat  dalam darah dan hal tersebut dapat mengindikasikan bahwa fungsi organ hati mengalami gangguan atau kerusakan (Rosida, 2016).
Berdasarkan hasil analisis statistik kadar SGOT dan SGPT (Tabel 3.)  pada  penelitian  ini  mengalami  penurunan  yang  signifikan yang  hampir  mendekati  kadar  normal  pada  setiap  kelompok perlakuan. Sehingga dapat dikatakan bahwa adanya perbedaan yang  sangat  nyata  antara  kelompok  kontrol  negatif  dengan setiap kelompok perlakuan 1, 2 dan 3. Hal tersebut menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  dosis  yang  diberikan,  maka  membuat kadar  SGOT  dan  SGPT  mengalami  penurunan.  Data  ini menunjukkan  ekstrak  etanol  buah  andaliman  sebagai hepatoprotektor  mampu  mengurangi  kerusakan  sel  hati  yang disebabkan  oleh  penginduksian  tartrazin  sehingga  membuat kadar enzim SGOT dan SGPT mengalami penurunan ( Wahyudi et al., 2018).  Pengaruh  ekstrak  etanol  buah  andaliman  sebagai hepatoprotektor  disebabkan  oleh  adanya  antioksidan  yang terkandung  didalamnya.  Radikal  bebas  adalah  atom  yang memiliki satu bahkan lebih dari elektron yang tidak berpasangan (Rahmi, 2017). Antioksidan berperan dalam menetralkan radikal bebas  dengan  cara  mendonorkan  satu  bahkan  lebih  dari elektronya  dan  menghambat  oksidasi  serta  bereaksi  dengan radikal bebas reaktif yang tidak stabil agar membentuk  radikal bebas  tidak  reaktif  dan  relatif  stabil  sehingga  mampu menurunkan kerusakan sel yang disebabkan oleh radikal bebas ( Khaira , 2010).
Pengujian  Ekstrak  Terhadap  Histologi  Hati  Tikus  Putih  yang Diinduksi Tartrazin
Hasil uji Anova one way pada pengamatan skoring histologi hati menyatakan  nilai  signifikan  sebesar  p=0,000  yang  berarti menunjukkan  bahwa  pengaruh  penginduksian  ekstrak  etanol buah andaliman ( Zanthoxylum acanthopodium DC.) berpengaruh nyata terhadap skoring histologi hati yakni (p<0,05) dengan  nilai  rata-rata  sebesar  (70,8 ± 4,86)  setelah penginduksian tartrazin dan dengan nilai rata-rata sebesar (37,0 ± 3,53)  setelah  30  hari  penginduksian  ekstrak  etanol  bua andaliman.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  bahwa  terdapat  perbedaan sangat nyata antara kelompok kontrol positif dengan kelompok perlakuan 1, 2, dan 3 yaitu nilai kelompok perlakuan 1, 2, dan 3 lebih  rendah  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  positif. Dapat  dikatakan  bahwa  pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol buah  andaliman  dengan  dosis  bertingkat  (150  mg/kg  BB,  300 mg/kg  BB,  dan  450  mg/kg  BB)  memberikan  pengaruh  yakni tingkat  kerusakan  pada  setiap  perlakuan  yang  mengalami penurunan  dengan  hasil  pada  kelompok  perlakuan  3  dengan hasil yang hampir mendekati  kelompok  kontrol negatif. Hal ini dapat disimpulkan bahwa perlakuan 3 dengan dosis 450 mg/kg BB  dapat  mengurangi  kerusakan  berupa  (degenerasi  hidropik, degenerasi  melemak,  nekrosis  hingga  hemoragi)  yang diakibatkan oleh pengaruh penginduksian tartrazin dengan dosis 15 mg/kg BB. Sedangkan pada perlakuan 1 dan 2 berpengaruh dalam  menuruhkan  kadar  SGOT  SGPT  namun  kurang  dalam mengurangi keruskan yang disebabkan penginduksian tartrazin.Pada  penelitian  ini  dilakukan  dengan  menginduksi tartrazin  dengan  dosis  15  mg/kg  BB  dan  ekstrak  etanol  buah andaliman dengan dosis bertingkat (150, 300, dan 450 mg/kg BB) yang  dilakukan  selama  30  hari  yang  menyebabkan  terjadinya kerusakan  secara  histologi  berupa  degenerasi  hidropik, degenerasi  melemak,  hemoragi,  dan  nekrosis  pada  organ  hati tikus putih yang disebabkan oleh pengaruh dari paparan induksi tartrazin secara akumulatif dengan dosis 15 mg/kg BB sehingga
menyebabkan  meningkatnya  radikal  bebas  dalam  tubuh  yang akan  menyebabkan  gangguan  dalam  tubuh.  Menurut  Khaira (2010)  menyatakan  bahwa  meningkatnya  radikal  bebas  dalam tubuh akan menyebabkan ketidakseimbangan dalam tubuh yang disebut  dengan  stres  oksidatif.  Hasil  reaksi  tersebut  akan menghasilkan radikal bebas lain yang akan menyerang molekul lain  seperti  membran  sel,  protein,  dan  DNA  yang  akan membentuk reaksi berantai yang berbahaya.
Kerusakan  sel  hati  dapat  diminimalisir  dengan  ekstrak  etanol buah  andaliman  yang  berperan  sebagai hepatoprotektor (pelindung  hati)  dengan  mengurangi  kerusakan  sel  hati  yang disebabkan  oleh  penginduksian  tartrazin.  Hal  tersebut  sesuai dengan  hasil  analisis  statistik  skoring  histologi  hati  yang mengalami  penurunan  nilai  pada  kelompok  perlakuan  dari kelompok  kontrol  positif.  Pengaruh  ekstrak  etanol  buah andaliman  sebagai  hepatoprotektor  disebabkan  oleh  adanya antioksidan yang terkandung didalamnya. Radikal bebas adalah atom yang memiliki satu bahkan lebih dari elektron yang tidak berpasangan  (Rahmi,  2017).  Sehingga  antioksidan  berperan dalam  menetralkan  radikal  bebas  dengan  cara  mendonorkan satu bahkan lebih dai elektronya dan menghambat oksidasi serta bereaksi  dengan  radikal  bebas  reaktif  yang  tidak  stabil  agar membentuk radikal bebas tidak reaktif dan relatif stabil sehingga mampu menurunkan kerusakan sel yang disebabkan oleh radikal bebas (Khaira, 2010).

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil pada penelitian mengenai ekstrak etanol buah andaliman  ( Zanthoxylum  acanthopodium DC.)  terhadap  hati tikus putih ( Rattus norvegicus L.) yang diinduksi dengan tartrazin dapat ditarik kesimpulan bahwa :
1. Pemberian  ekstrak  etanol  buah  andaliman  ( Zanthoxylum acanthopodium DC.)  dengan  dosis  bertingkat  (150  mg/kg BB, 300 mg/kg BB, dan 450 mg/kg BB) berpengaruh dalam menurunkan  kadar  SGOT  dan  SGPT.  Dosis  ekstrak  etanol buah  andaliman  yang  paling  optimal  menurunkan  kadar SGOT  dan  SGPT  hati  setelah  induksi  tartrazin  adalah  450 mg/kg  BB  dengan  nilai  rata-rata  SGOT  (105,6)  dan  SGPT (58,4).
2. Pemberian  ekstrak  etanol  buah  andaliman  ( Zanthoxylum acanthopodium DC.) dengan dosis bertingkat berpengaruh dalam  mengurangi  kerusakan  histologi  hati  berupa degenerasi  hidropik,  degenerasi  melemak,  nekrosis  dan hemoragi. Dosis ekstrak etanol buah andaliman yang paling optimal dalam mengurangi kerusakan histologi hati setelah induksi tartrazin adalah 450 mg/kg BB dengan nilai rata-rata (37,0).

## Konflik Kepentingan
Penulis menyatakan tidak terdapat konflik kepentingan dalam penelitian ini.

## Ucapan Terima Kasih
Saya ucapkan terima kasih kepada Tuhan yang maha esa Allah SWT  atas  semua  rahmat,  karunia  serta  hidayahnya.  Saya ucapkan terima kasih juga kepada ibu Husnarika Febriani, ibu Syukriah,  ibu  Rahmadina  dan  ibu  Zahratul  Idami  yang  telah
membimbing saya dalam menyelesaikan penelitian saya. Selain itu saya ucapkan terima kasih juga kepada kedua orang tua saya dan abang dan adik saya serta teman – teman saya yang telah memberikan  dorongan  berupa  motivasi  dan  semangat  dalam menyelesaikan penelitian saya.

## Kontribusi Penulis
Adapun peran ataupun kontribusi penulis adalah JAGS, HF dan S  merancang  konsep  penelitian,  berkontribusi  dalam penelitian,  dan  menyetujui  naskah  akhir.  Serta  JAGS  dan  S berkontribusi dalam menulis dan mengedit artikel.

## References
Amin, K.A., Hameid, A., and Elsttar, A. 2010. Effect Of Food Azo Dyes  Tartrazine  and  Carmoisine  On  Biochemical Parameters  Related  To  Renal,  Hepatic  Function  And Oxidative  Stress  Biomarkers  In  Young  Male  Rats. Food And Chemical Toxicology .
Barhoma, R. A., Elshamy, A. M., and Amer, Alaa I. 2019. Study of the Protective Effect of Nigella  Sativa  Oil on  Tartrazine- Induced Hematological Disorders In Rats. Med. J . Vol. 87
(7) : 4661-4670.
Batubara,  M.  S.,  Siregar,  Y.,  Rusmarilin,  H.,  Soviani,  S.,  dan
Febriani, Husnarika. 2017. Hubungan Kadar Tartrazin Dan Seng  (Zn)  Dalam  Darah  Pada  Anak  Penderita  Defisit Perhatian Dan Gangguan Hiperaktivitas (ADHD). BioLink . Vol. 4 (1) : 1-10.
BPOM.  2019.  Peraturan  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan Tentang  Bahan  Tambahan  Pangan. Badan  Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia.
F. Alaa Ali., S.A. Sherein. A., S. Osama. El-Tawil., M. Adel, B. 2016. Toxicological  And  Hispathological  Studies  On  The  Effect Of Tartrazine In Male Albino Rats. International Journal Of Biological,  Biomolecular,  Agricultural,  Food  And Biotechnological Engineering . Vol. 10 (8) : 469-474. Handajani, Fitri. 2021. Metode Pemilihan dan Pembuatan Hewan Model Beberapa Penyakit Pada Penelitian Eksperimental . Sidoarjo : zifatama Jawara.
Insani,  Aulia.,  Samsuri.,  dan  Berata,  I  Ketut.  2015.  Gambaran
Histopatologi  Hati  Tikus  Putih  yang  Diberikan Deksametason  dan  Vitamin  E. Indonesia  Medicus Veterinus . Vol. 4 (3) : 228-237.
Khaira,  Kuntum.  2010.  Menangkal  Radikal  Bebas  Dengan Antioksidan. Jurnal Sainstek . Vol. 2 (2) : 183-187.
Rahmi,  Hayatul.  2017.  Aktivitas  Antioksidan  dari  Berbagai Sumber  Buah-buahan  di  Indonesia. Jurnal  Agrotek Indonesia . Vol. 2 (1) : 34-38.
Rosida,  Azma.  2016.  Pemeriksaan  Laboratorium  Penyakit  Hati. Berkala Kedokteran. Vol. 12 (1) : 123-131.
Sianturi, Sister. 2021. Gambaran Histologi Organ Hepar Mencit Betina Bunting ( Mus musculus L.) Setelah Pemberian Air Rebusan Mi Instan. Jurnal Farmasi Etam . Vol. 1 (1) : 39- 49.
Simanullang,  R.  H.,  Ilyas,  Syafruddin.,  Hutahaean,  Salomo., Rosidah.,  Manurung,  R.  D.,  and  Situmorang,  P.  C.  2021. Effect of Andaliman Fruit Extract on Cervical Cancer Rat’s Histology. International Conference on Health, Instrumentation & Measurement, and Natural Sciences . Simanullang, R. H., Ilyas, Syafruddin., Hutahaean, Salomo., and Rosidah.  2021.  Effect  Of  Andaliman  ( Zanthoxylum acanthopodium DC.)  Methanol  Extract  on  Rat’s  Kidney and  Liver  Histology  Induced  by  Benzopyrene. Pakistan Journal of Biological Sciences . Vol. 24 (2) : 274-281. Wahyudi,  Agung.,  Bahar,  Yenni.,  dan  Septianawati,  Paramita.
2018.  Pengaruh  Ekstrak  Etanol  Daun  Kemangi  ( Ocimum basilicum L) Terhadap Kadar SGOT dan SGPT Tikus Putih ( Rattus  norvegicus  strain  wistar )  yang  Diinduksi  MSG. Herb-Medicine Journal . Vol. 1 (1).
Wira,  M.  R.,  Gaol,  P.  L.,  dan  Simbolon,  B.  M.  2021.  Uji  Efek Analgesik  Ekstrak  Buah  Andaliman  ( Zanthoxylum acanthopodium )  Terhadap  Nyeri  Pada  Mencit  ( Mus musculus )  yang  Diinduksi  Asam  Asetat. Jurnal  Ilmiah Rekam Medis dan Informatika Kesehatan . Vol. 11 (2) : 40- 45.
Worotikan,  R.  V.,  Tuju,  E.  A.,  dan  Kawuwung,  Femmy.  2017.
Analisis  efektivitas  antidiabetes  ekstrak  etanol  buah andaliman  ( Zanthoxylum  acanthopodium DC)  pada histopatology  ginjal  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus L.) yang  diinduksi  alloksan. Jurnal  Sains,  Matematika,  & Edukasi . Vol. 5 (1) : 29-37.