## JNTTIP
Jurnal Nutrisi Ternak Tropis dan Ilmu Pakan
Jurnal Nutrisi Ternak Tropis dan Ilmu Pakan Tersedia online di : jurnal.unpad.ac.id/jnttip 3(1):10-19, Maret 2021
PENGARUH PROTEKSI PROTEIN BUNGKIL KEDELAI DENGAN CAIRAN BATANG PISANG TERHADAP KONSENTRASI AMONIA DAN UNDEGRADED DIETARY PROTEIN (UDP) PADA RUMEN

## DOMBA ( IN VITRO )
Effect of Protein Protection of Soybean Meal with Banana Stem Liquid  on Ammonia Concentration (NH 3 ) and Undegraded Dietary Protein (UDP) in Sheep Rumen
Muhamad Faroja Sa’dan 1 , Rahmat Hidayat 1 , Ujang Hidayat Tanuwiria 1
1 Laboratorium Nutrisi Ternak Ruminansia dan Kimia makanan Ternak, Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran, Jl. Raya Bandung Sumedang Km 21 Jatinangor Sumedang 45363

## ABSTRAK
Penelitian  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  proteksi protein  bungkil  kedelai  oleh  tanin  asal  cairan  batang  pisang (CBP)  terhadap  konsentrasi  amonia  dan undegraded  dietary protein (UDP)  ( in  vitro) .  Cairan  batang  pisang  mengandung 4,96  mg/ml  Tanin.  Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Nutrisi  Ternak  Ruminansia  dan  Kimia  Makanan  Fakultas Peternakan  Universitas  Padjadjaran.  Rancangan  penelitian yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  dengan empat perlakuan dan lima ulangan. Perlakuan terdiri atas 0% 0,5%, 1% dan 1,5% tanin. Perlakuan pada penelitian ini adalah sebagai berikut: T0 (11,4 g bungkil kedelai + 0 ml CBP); T1 (11,4  g  bungkil  kedelai  +  20,1  ml  CBP;  T2  (11,4  g  bungkil kedelai + 40,2 ml CBP); T3 (11,4 g bungkil kedelai + 60,3 ml CBP). Data yang diperoleh dianalisis dengan Sidik Ragam dan dilanjutkan dengan uji Polinomial Ortogonal dan uji Duncan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa proteksi tanin CBP pada bungkil  kedelai  menurunkan  konsentrasi  amonia    mengikuti persamaan  y=6,267-11,27x+16 x 2 -6,2 x 3 (R 2 =0,803)  dan meningkatkan UDP  mengikuti persamaan y=29,224+17,025 x (R 2 =0,955). Konsentrasi amonia terendah dihasilkan oleh T1 (bungkil kedelai + 0,5% tanin) dan kandungan UDP tertinggi dihasilkan oleh T3 (bungkil kedelai + 1,5% tanin).
Kata  Kunci:  Bungkil  kedelai,  tanin,  amonia, undegraded dietary protein , proteksi protein, cairan batang  pisang, in vitro

## Ujang Hidayat Tanuwiria
Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran, Bandung, Kampus Jatinangor, Jl. Raya Bandung-Sumedang KM.21, Jatinangor-Sumedang, Jawa Barat 45363
email : uhtanuwir@yahoo.co.id

## KORESPONDENSI

## ABSTRACT
This research goal is to determine the protein protection of soybean meal with tannin of banana  stem  liquid  on  ammonia  concentration  and  undegraded  dietary  protein  in  sheep rumen  (in  vitro).  The  research  was  held  at  Ruminant  Nutrition  and  Feed  Chemistry Laboratory  of  Animal  Husbandry  Faculty,  Universitas  Padjadjaran.  The  reseacrh    used experimental method with  Completely Randomized Design (CRD) with four treatments and each  treatment  was  repeated    five  times.  The  treatments  were  arranged  as  follows:  T0 (soybean meal + tannin 0%); T1 (soybean meal + tannin 0.5%); T2 (soybean meal + tannin 1%),  and  T3  (soybean  meal  +  tannin  1.5%).  The  data    were  analyzed  by  Polynomial Orthogonal and Duncan test. The result of the research showed that  protein protection of soybean meal with tannin of banana stem liquid decreased ammonia concentration (P<0,05) significanly  with  equation  y=6.267-11,27x+16x2-6.2x3  (R2  =0.803)  and  increased undegraded dietary protein (P<0,05) with equation y=29.224+17.025x (R2=0.955). Lowest concentration  ammonia  was  resulted  by  T1  (soybean  meal  +  tannin  0.5%)  and  Highest concentration  Undegraded  Dietary  Protein  was  resulted  by  T3  (soybean  meal  +  tannin 1.5%).
Keywords: Soybean meal, tannin, ammonia, undegraded dietary protein, protein protection, banana stem fluid, in vitro

## PENDAHULUAN
Domba  membutuhkan  asupan  pakan untuk  memenuhi  nutrisi  setiap  harinya. Pemberian  pakan  pada  domba  selain jumlahnya harus memenuhi kebutuhan, juga harus  mengandung  zat  makanan  yang lengkap agar produktivitasnya sesuai potensi genetiknya. Sumber protein untuk mendukung produktivitas yang tinggi berasal dari protein mikrobial rumen dan protein asal pakan.  Pemberian  pakan  sumber  protein berkualitas  tinggi  sering  dilematis,  terutama jika  pakan  tersebut  mudah  didegradasi  oleh mikroba  rumen.  Sehingga  perlu  upaya menyelamatkan asam amino pakan terhadap degradasi mikroba rumen.
Sebagian  besar  protein  pakan  akan terdegradasi  menjadi  amonia  (NH 3 )  oleh mikroba    rumen,  amonia    dimanfaatkan sebagai sumber N utama bagi mikroba untuk sintesis  protein  mikrobial  rumen.  Tingginya konsentrasi  amonia  menandakan  proses degradasi  protein  pakan  lebih  cepat dibanding  proses  pembentukan  protein mikroba  sehingga  terjadi  akumulasi  amonia (NH 3 ) dalam rumen (Jenny dkk., 2012). Salah
satu  bahan  pakan  yang  memiliki  protein tinggi  adalah  bungkil  kedelai.  Bungkil kedelai merupakan hasil samping pengolahan biji kedelai menjadi minyak kedelai.
Agar  asam  amino  bungkil  kedelai dapat  dimanfaatkan  semaksimal  mungkin oleh induk semang, maka sebelum diberikan kepada  ternak  perlu  dilakukan  manipulasi berupa  perlindungan  protein  terhadap aktivitas  mikroba  rumen.  Manipulasi  bahan pakan  dapat  dilakukan  dengan  cara menambahkan  tanin  ke  dalam  bungkil kedelai.
Tanin  merupakan  senyawa  yang dapat  digunakan  untuk  melindungi  protein dari degradasi mikroba rumen, karena tanin- protein  melalui  kondensasi,  tidak  dapat dihidrolisis  atau  tidak  terhidrolisis  di  dalam rumen  sehingga  tidak  akan  terdegradasi dalam  rumen  (Rahmat  dkk,  2012).  Tanin akan  memproteksi  asam  amino  esensial, sehingga  lolos  dari  degradasi  rumen (Rochman dkk., 2012).
Batang  pisang  merupakan  salah  satu sumber  tanin.  Batang  pisang  sesungguhnya dilindungi  oleh  pelepah  pisang  atau  batang pisang  semu.  Batang  pisang  mengandung
lebih  dari  80%  air,  selulosa,  glukosa,  dan tanin.  Batang  pisang  memiliki  kandungan anti nutrisi seperti tanin dan lignin yang dapat mempengaruhi  kecernaan  bahan  kering  dan bahan  organik  (Tidi  dkk.,  2011).  Penelitian yang    telah    dilakukan menyatakan   bahwa ekstrak      batang      pisang  mengandung beberapa  jenis  senyawa  fitokimia  yaitu saponin,    tanin,    dan    flavonoid    (Wijaya, 2010).  Kandungan  saponin  pada  batang pisang  dapat  mengakibatkan  defaunasi mikroba  dalam  rumen  (Wina  dkk,  2005). Tanin  di  dalam  cairan  batang  pisang  segar adalah  0,01  –  4,96  mg/ml.    Setiap  satu  kg batang  pisang  segar  mengandung  930  ml cairan, maka kandungan tanin terkondensasi dalam  batang  pisang  segar  berdasarkan perhitungan adalah 4,6 gram (Wina, 2001).
Indikator bahwa suatu pakan sumber protein  mudah  terdegradasi  atau  tidak  di dalam  rumen  dapat  dilihat  dari  kehadiran NH 3 .  Bagian  protein  yang  tidak  dirombak oleh  mikroba  rumen  dikenal  sebagai undegraded  dietary  protein (UDP).  Pakan seperti  bungkil  kedelai  yang  tinggi  kadar asam amino jika terdegradasi di rumen akan menghasilkan  NH 3 yang  tinggi.  (Puastuti dkk., 2012).

## METODE PENELITIAN

## Materi Penelitian
1. Bungkil Kedelai
Bungkil  kedelai  yang  digunakan berasal dari toko Missouri di Jalan Malabar, Bandung.  Bungkil  kedelai  lalu  disaring menggunakan sieve  mesh ukuran  30  untuk menghomogenkan ukuran.

## 2. Batang Pisang
Batang pisang yang digunakan adalah batang pisang sesungguhnya dilindungi oleh pelepah  pisang  atau  batang  pisang  semu. Batang  pisang  diperoleh  dari  pohon  pisang Kepok  yang  berlokasi  di  Tanjungsari  dan digunakan  tidak  lebih  dari  24  jam  setelah diambil batangnya.

## 3. Cairan Rumen
Cairan  rumen  digunakan  sebagai sumber  mikroba  rumen  untuk  proses fermentasi  dalam  proses  degradasi  pakan. Cairan  rumen  domba  ini  diambil  di  Tempat Pemotongan Hewan (TPH) pribadi Pak Bandi yang  berada  di  Babakan  Caringin,  Desa Sayang,  Kecamatan  Jatinangor,  Kabupaten Sumedang.

## 4. Saliva Buatan
Saliva  buatan  ini  dibuat  berdasarkan formula  McDougall  (1949)  yang  dikutip Tilley  dan  Terry  (1963).  Saliva  buatan  ini berfungsi  sebagai  buffer.    Formula  saliva buatan ini dibuat dari beberapa bahan kimia dan  dicampurkan  dengan  cara  tertentu  agar menyerupai kandungan saliva domba.

## 5. CO 2
CO 2 digunakan  untuk  menjaga kondisi larutan dan ruang fermentasi sampel dalam  keadaan  anaerob.  Gas  CO 2 dalam tabung  disalurkan  melalui  selang  dan dimasukkan  ke  dalam  cairan  rumen  dan tabung  fermentor  yang  telah  berisi  pakan terproteksi dan cairan rumen sebelum di uji in vitro .

## Prosedur  Pengambilan  Cairan  Batang Pisang
Pengambilan  batang  pisang  berasal dari  pohon  pisang  yang  dipanen  pada  umur 12-13  bulan,  Secara  bertahap  proses pengambilan  cairan  batang  pisang  adalah sebagai berikut (1) memotong antara 25 cm dari  ujung  atas  sampai  25  cm  dari  atas bongkol,  (2)  memisahkan  dari  pelepah pisang,  (3)  hasilnya    diparut  menggunakan mesin parut, (4) hasil parutan dimasukkan ke dalam kain muslin dan diperas sampai cairan batang  pisang  tidak  menetes  lagi,  (5)  hasil perasan lalu disaring menggunakan saringan agar tersisa cairan batang pisang saja.

## Prosedur Proteksi Bungkil Kedelai
Proteksi  bungkil  kedelai  dilakukan dengan  (1)  menyaring  bungkil  kedelai menggunakan  saringan sieve  mesh dengan
ukuran  mesh    30,  (2)  menuangkan  cairan batang pisang dengan dosis tanin 0%, 0,5%, 1%,1,5%  v/w  (dengan  perhitungan  BK bungkil  kedelai  88%  dan  kandungan  tanin pada  cairan  batang  pisang  2,49  mg/ml  )  ke dalam ember yang telah diisi bungkil kedelai sesuai timbangannya, diaduk sampai homogen. Perhitungan:
(Berat bungkil kedelai dalam BK x % dosis tanin )/(Kandungan tanin cairan batang pisang g/ml) = cairan batang pisang (ml)
1. ((11,4 x 88%) x 0%) / (0,00249g/ml) = 0 ml
2. ((11,4x88% )x 0,5%) / (0,00249g/ml) = 20,1 ml
3. ((11,4x88%)  x  1%)  /  (0,00249g/ml)  = 40,2ml
(3)  mendiamkan  selama  kurang  lebih  1  jam dalam ember, (4) Menyimpan bungkil kedelai bersama cairan batang pisang pada nampan, (5) mengeringkan menggunakan oven bahan tersebut hingga kadar air cairan batang pisang mencapai 0%.

## Tahap Pengambilan Cairan Rumen
Pengambilan  cairan  rumen  domba lokal  jantan  dilakukan  dengan  beberapa tahap:
(1) Mempersiapkan
tempat penampungan  rumen  terlebih  dahulu  yaitu dengan mengisi air dengan suhu 39-40 0 C ke dalam termos, (2) cairan rumen diambil dan disaring  dengan  menggunakan  kain  muslin, (3) cairan rumen yang diperoleh dimasukkan ke  dalam  termos  menggunakan  corong, sebelumnya air yang berada di dalam termos dibuang  terlebih  dahulu,  (5)  termos  diisi cairan  rumen  hingga  penuh  agar  terjaga kondisi anaerob. Kemudian tutup rapat agar tidak ada udara masuk.

## Tahap Pembuatan Saliva Buatan
Saliva buatan dibuat dengan mengacu pada  pentunjuk  McDougall  (1948)  yang dikutip  Tilley  dan  Terry  (1963).  Tahap  (1) larutan saliva buatan dibuat sebanyak 2 liter, (2)  saliva  buatan  dibuat  dengan  2  liter  air destilasi dan dimasukkan ke dalam labu takar yang  bervolume  2  liter  dan  dicampurkan dengan  19,6  gram  NaHCO 3 ,  9,25  gram
Na 2 HPO 4 .7H2O, 1,14 gram KCl, 0,94 gram NaCl,  0,24  gram  MgSO 4 .7H 2 O,  dan  0,11 gram CaCl 2 , (3) CaCL 2 ditambahkan terakhir setelah  bahan  lain  melarut  sempurna, kemudian  aquadest  ditambahkan  hingga campuran menjadi 2 liter.

## Metodologi Penelitian
Percobaan  menggunakan  tiga  level tanin  yang  bersumber  dari  cairan  batang pisang  dan  tanpa  tanin.  Percobaan  didesain menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) dengan lima ulangan. Perlakuan yang diberikan adalah sebagai berikut:
P 0 = Bungkil kedelai tanpa ditambah tanin. P 1 = Bungkil kedelai + 0,5% w/w tanin P 2 = Bungkil kedelai + 1% w/w tanin P 3 = Bungkil kedelai + 1,5% w/w tanin Indikator kinerja tanin  diukur secara in  vitro dengan  menganalisis  parameter berikut:
1. Kadar  produksi  amonia  (NH 3 )  dengan metoda mikrodifusi Conway.
2. Kadar undegraded  dietary  protein (UDP) dengan menghitung kadar protein sebelumnya  fermentasi in  vitro dan sesudah  fermentasi  dengan  metoda Kjeldahl.
3. Data  yang  diperoleh  dianalisis  secara statistic  menggunakan  uji  Polynomial Orthogonal dan uji Duncan.

## Pemeriksaan Fermentabilitas in vitro
Penentuan  fermentabilitas  rumen secara in  vitro mengikuti  prosedur  Tilley  & Terry (1967), yaitu satu gram tepung daging bungkil kedelai dari masing-masing perlakuan dimasukkan ke tabung fermentor, yang telah ditambahkan 10 ml cairan rumen dan  40  ml  larutan  McDougall.  Sampel  dan larutan  yang  telah  bercampur,  selanjutnya dikocok  menggunakan  gas  CO 2 selama  30 detik  agar  kondisi  dalam  tabung  menjadi anaerob. Karet berventilasi digunakan untuk menutup mulut tabung, kemudian difermentasi  pada  suhu  39 o C  di  dalam waterbath ,  selama  tiga  jam.  Selanjutnya, tutup  tabung  fermentor  dilepas,  segera ditetesi  HgCl 2 jenuh,  kemudian  disentrifuge
pada  kecepatan  3000  rpm  selama  20  menit. Supernatan  digunakan  untuk  menentukan kadar  NH 3 dan UDP ( undegraded  dietary protein ).
Analisis Kadar N-NH 3 Cairan Rumen
Teknik Mikrodifusi Conway digunakan untuk menentukan konsentrasi N-
NH 3 . Satu ml supernatan dan larutan Na 2 CO 3 masing-masing ditempatkan di kiri dan kanan sekat cawan. Asam borat berindikator merah metil diisikan ke dalam cawan kecil di tengah serta  ditambah  1  mL  brom  kresol  hijau. Cawan  Conway  setelah  diolesi  vaselin ditutup  rapat,  kemudian  digoyang  perlahan agar  supernatan  dengan  Na 2 CO 3 menjadi homogen.  Larutan  disimpan  dalam  suhu kamar selama 24 jam. Dititrasi dengan H 2 SO 4 0,005  N  sampai  warna  berubah  kemerahan untuk  mengukur  amonia  yang  terikat  oleh boric acid . Kadar NH 3 ditentukan: NH 3 = (ml titrasi x N H 2 SO 4 x 1000) mM.

## Penentuan kadar protein
Teknik  dalam  penentuan  kadar protein  menggunakan  metode  Kjeldahl, metode  Kjeldahl  terdiri  atas  3  tahap  yaitu: tahap  destruksi,  tahap  destilasi  dan  tahap titrasi.
1. Tahap  Destruksi  Ditimbang  1  gram sampel  yang  telah  diblender.  Sampel dimasukkan ke dalam labu Kjehdahl 100 ml, kemudian ditambahkan dengan pipet 10  mL  asam  sulfat  pekat.  Ditambahkan katalisator  (campuran  selenium)  untuk mempercepat  destruksi.  Kemudian  labu Kjehdahl  tersebut  dipanaskan  dimulai dengan  api  yang  kecil  setelah  beberapa saat  sedikit  demi  sedikit  api  dibesarkan sehingga  suhu  menjadi  naik.  Destruksi dapat  dihentikan  pada  saat  didapatkan larutan berwarna jernih kehijauan.
2. Tahap  destilasi.  Hasil  destruksi  yang didapatkan kemudian didinginkan, setelah  itu  diencerkan  dengan  aquadest sampai  100  ml.  Setelah  homogen  dan dingin dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan  ke  dalam  labu  destilasi, kemudian  ditambahkan  10  ml  larutan
natrium hidroksida 30% melalui dinding dalam  labu  destilasi  hingga  terbentuk lapisan  dibawah  larutan  asam.  Labu destilat  dipasang  dan  dihubungkan dengan kondensor, lalu ujung kondensor dibenamkan  dalam  cairan  penampung. Uap  dari  cairan  yang  mendidih  akan mengalir  melalui  kondensor  menuju erlemeyer penampung. Erlenmeyer penampung  diisi  dengan  10  ml  larutan asam  klorida  0,1  N  yang  telah  ditetesi indikator  metil  merah.  Hasil  destilasi dicek  dengan  kertas  lakmus  hingga diperoleh hasil sudah tidak bersifat basa lagi, kemudian penyulingan dihentikan.
3. Tahap  titrasi.  Hasil  destilasi  yang ditampung dalam erlemeyer berisi asam klorida  0,1  N  ditetesi  indikator  metil merah sebanyak 5 tetes langsung dititrasi dengan  menggunakan  larutan  natrium hidroksida  0,1  N.  Titik  akhir  titrasi ditandai  dengan  warna  merah  muda menjadi kuning. Perlakuan ini dilakukan sebanyak 3 kali untuk tiap sampel.
Dari dua pengukuran protein tersebut maka  diperoleh  nilai undergraded  dietary protein (UDP) sebagaimana rumus berikut.
UDP(%) = !"#$%&' )%*&+, (.) !"#$%&' 0123%4 (.) x 100% Keterangan: Protein  residu:  Bobot  protein  yang  telah mengalami proses
fermentasi  dan  pengujian kadar NH 3 .
Protein sampel: Bobot protein dalam sampel yang  berasal  dari  bungkil kedelai  dan  cairan  batang pisang.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh Perlakuan terhadap

## Konsentrasi Amonia
Konsentrasi  amonia  menunjukkan protein  pakan  yang  terdegradasi  oleh mikroorganisme rumen. Konsentrasi amonia
pada  perlakuan  proteksi  bungkil  kedelai dengan berbagai level tanin asal tanin cairan
batang pisang disajikan pada Tabel 1 berikut ini.
Tabel 1.  Konsentrasi Amonia Bungkil Kedelai yang Diproteksi Berbagai Level  Tanin Asal Cairan Batang Pisang
Ulangan Perlakuan P0 P1 P2 P3 -----------------------------------------------mM---------------------------------------------- 1 6,60 4,40 5,45 4,65 2 5,75 4,05 4,10 4,3 3 6,90 3,45 5,40 4,65 4 6,35 4,15 5,80 4,85 5 6,80 4,30 4,30 4,8 Rata-Rata 6,48 4,07 5,01 4,65 Standar Deviasi 0.459 14,703 0,758 0,215 Keterangan: P0 = Bungkil Kedelai + Tanin 0%
P1 = Bungkil Kedelai + Tanin 0,5% P2 = Bungkil Kedelai + Tanin 1% P3 = Bungkil Kedelai + Tanin 1,5%
Berdasarkan  Tabel  1,  rata-rata konsentrasi  amonia  hasil  degradasi  bungkil kedelai  yang  diproteksi  oleh  berbagai  level tanin asal cairan batang pisang berkisar antara 4,07  –  5,01  mM.  Nilai  konsentrasi  amonia
yang paling tinggi yaitu 6,48 mM dihasilkan pada perlakuan P0 (tanpa penambahan tanin), sedangkan  nilai  konsentrasi  amonia  yang paling  rendah  dihasilkan  pada  perlakuan  P1 yaitu sebesar 4,07 mM
Grafik 1. Grafik Analisis Polinomial Orthogonal Pengaruh Perlakuan terhadap Konsentrasi Amonia
Data tersebut kemudian diuji statistik untuk mengetahui hubungan  antar perlakuan terhadap  rata-rata    konsentrasi  amonia dengan Polinomial Orthogonal persamaan    y = 6,267 – 11,27x + 16x 2 -6,2x 3 (R 2 = 0,803). Hasil  analisis  koefisien  determinasi  (R 2 ) menunjukkan  bahwa  persentase  sumbangan variable  bebas  (level  pengunaan  tanin  dari
cairan  batang  pisang)  terhadap  variable terikat (NH 3 ) adalah 80,3%. Pada persamaan menunjukkan bahwa terjadi  penurunan  kadar  amonia  tetapi  tidak seiring dengan penambahan tanin. Penurunan kadar  amonia  terjadi  karena  tanin  dapat mengikat  protein  dalam  bungkil  kedelai sehingga protein dalam bungkil kedelai tidak seluruhnya  terdegradasi  oleh  mikroba  di
0 1 2 3 4 5 6 7 0,0% 0,5% 1,0% 1,5% 2,0% Pemberian Level Tanin NH 3 y = 6,267 – 11,27x + 16x 2 -
R 2 = 0,803
dalam  rumen  yang  pada  akhirnya  akan menurunkan konsentrasi amonia (Jenny dkk., 2012).
Hal ini menunjukkan bahwa penambahan level tanin lebih dari 0,5% tidak memberikan hasil yang lebih baik dibanding level  0,5%.  Berbeda  dengan  pendapat  M. Zamsari dkk. (2012) yang menyatakan bahwa semakin tinggi penambahan level tanin yang digunakan untuk memproteksi protein maka akan menurunkan konsentrasi amonia.
Kandungan  tanin  di  dalam  cairan batang pisang segar adalah 0,01 – 4,96 mg/ml (Wina,  2001).  tanin  terkondensasi  dalam cairan  batang  pisang  mampu  membentuk
ikatan kompleks dengan protein pada kondisi pH  netral  dan  menjadikan    senyawa  tanin- protein  tersebut  tidak  terdegradasi  oleh mikrobial rumen sehingga bahan pakan yang terproteksi  tanin  di  dalam  rumen  akan menghasilkan konsentrasi amonia yang lebih rendah  dibandingkan  dengan  pakan  yang tidak  terproteksi  tanin.  Menurut  Wiseman dan  Cole  (1990)  penggunaan  saponin  yang ditambahkan  ke  dalam  ransum  dapat menurunkan populasi protozoa rumen secara parsial  atau  keseluruhan.  Sehingga  dapat menyebabkan proses degradasi protein lebih lambat.
Tabel 2.  Hasil Uji Duncan Pengaruh Perlakuan terhadap Amonia (NH 3 )
Keterangan : Huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata.
Hasil  uji  Duncan  pada  Tabel  2 menunjukkan bahwa penambahan tanin 0,5% pada  bungkil  kacang  kedele  menghasilkan amonia (NH 3 ) terendah dibandingkan dengan perlakuan P 0 , P 2 dan P 3 .
Hasil  ini  berbeda  dengan  pendapat Cahyani dkk. (2012), bahwa bahwa semakin tinggi level tanin dalam memproteksi protein, maka  semakin  banyak  protein  yang terproteksi  sehingga  berdampak  pada menurunnya konsentrasi NH 3 di dalam cairan rumen.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa penggunaan  tanin  P 1 (0,5%)  sudah  mampu memproteksi protein bungkil kedelai dengan baik  yang  tercermin  dari  kadar  NH 3 cairan rumen yang dihasilkan.
Menurut Akiyama  dkk. (2001) tanin dapat  menjadi  bahan  antibakteri  aerob dengan  tanin  membentuk  ikatan  kompleks ion logam, karena bakteri yang tumbuh dalam kondisi  aerob  memerlukan  zat  besi  untuk berbagai  fungsi,  termasuk  reduksi  dari prekursor ribonukleotid DNA. Adanya ikatan
antara  tanin  dan  besi  akan  menyebabkan terganggunya  berbagai  fungsi  bakteri. Menurut  Samaranayake  (2012)  bakteri fakultatif  anaerob  yang  dapat  hidup  dalam kondisi aerob dapat terganggu pertumbuhannya  dengan  adanya  senyawa tanin.  Menurut  Fakhrurrazi  dkk.  (2013) Mekanisme  kerja  senyawa  tanin  dalam menghambat  sel  bakteri,  yaitu  dengan  cara mendenaturasi protein sel bakteri, menghambat fungsi selaput sel (transport zat dari  sel  satu  ke  sel  yang  lainnya)  dan menghambat sinstesis asam nukleat sehingga pertumbuhan bakteri dapat terhambat.
Pengaruh Perlakuan terhadap
Undegraded Dietary Protein (UDP) Undegraded  Dietary  Protein  (UDP) menunjukkan  protein  pakan  yang  tidak terdegradasi oleh mikroba rumen. UDP pada perlakuan  proteksi  bungkil  kedelai  dengan berbagai level tanin asal cairan batang pisang disajikan pada tabel 3 berikut ini.
Perlakuan Rataan Signifikansi P0 6,48 a P2 5,01 b P3 4,65 bc P1 4,07 c
Tabel 3. Undegraded Dietary Protein (UDP) Bungkil Kedelai yang Diproteksi Berbagai Level Tanin Cairan Batang Pisang
Ulangan Perlakuan P0 P1 P2 P3 ------------------%----------------- 1 29,95 37,93 42,56 51,43 2 29,40 35,9 43,5 52,46 3 29,93 36,43 49,33 56,6 4 30,72 37,00 49,35 58,17 5 29,16 37,19 45,84 57,00 Rata-Rata 29,83 36,89 46,12 55,13 Standar Devisasi 0,602 0,770 3,176 2,988 Keterangan:
P0 = Bungkil Kedelai + Tanin 0%; P1 = Bungkil Kedelai + Tanin 0,5%; P2 = Bungkil Kedelai + Tanin 1%; P3 = Bungkil Kedelai + Tanin 1,5%
Berdasarkan  Tabel  3,  rata-rata  UDP bungkil  kedelai  yang  diproteksi  berbagai level tanin asal cairan batang pisang berkisar antara  29,83-55,13%.  Nilai  UDP  paling
tinggi  yaitu  55,13%  dihasilkan  pada perlakuan  P 3 ,  sedangkan  nilai  UDP  yang paling  rendah  dihasilkan  pada  P 0 yaitu sebesar 29,83.
Grafik 2. Grafik Analisis Polinomial Orthogonal Pengaruh Perlakuan terhadap Undergraded Dietaru Protein (UDP)
Berdasarkan  hasil  uji  Polinomial Orthogonal,  pemberian  tanin  dalam  bungkil kedelai berpengaruh pada kadar UDP, grafik membentuk respon linier dengan persamaan y  =  29,224  +  17,025x  (R 2 =  0,955).  Hal  ini menunjukkan bahwa semakin tinggi pemberian tanin, makan semakin tinggi pula kandungan  UDP  yang  dihasilkan.  Hal  ini sesuai  dengan  pernyataan  Rochman  dkk. (2012),  yang  menyatakan  presentase UDP akan  semakin  meningkat  seiring  dengan penambahan  aras  tanin,  mengindikasikan
bahwa  proteksi  tanin  pada  bahan  pakan mampu melindungi protein dari degradasi di dalam rumen.
Faktor  penambahan  tanin  dapat meningkatkan UDP karena tanin membentuk ikatan kompleks dengan protein yang mampu membentuk  resistensi  terhadap  degradasi mikrobial  rumen,  pH  yang  sesuai  dengan kondisi  di  dalam  rumen  membuat  ikatan tanin-protein  stabil  (Jenny  dkk.,  2012). Menurut  Makkar  (2003)  tanin  merupakan senyawa  polifenolik  yang  mampu  mengikat
0 10 20 30 40 50 60 0,0% 0,5% 1,0% 1,5% 2,0% Pemberian Level Tanin (U D P ) y = 29,224 + 17,025x
R 2 = 0,955
protein.  Ikatan  tanin  dan  protein  tersebut membuat  protein  tidak  terdegradasi  oleh mikrobia  rumen,  tetapi  setelah  sampai abomasum  yang  mempunyai  pH  2,5  –  3,5
terjadi  pemisahan  senyawa  kompleks, sehingga protein dapat terlepas dari tanin dan dapat diserap oleh hewan inangnya.
Tabel 4.  Hasil Uji Duncan Kandungan Undergraded Dietary Protein (UDP) Perlakuan Rataan Signifikansi P0 29,83 a P1 36,89 b P2 46,12 c P3 55,13 d
Berdasarkan  hasil  uji  Duncan menunjukkan  bahwa  kadar  UDP  meningkat seiring peningkatan dosis tanin. Kadar UDP terendah dihasikan oleh P0 kemudian diikuti perlakuan P1, P2 dan P3.
Dilihat  dari  urutan  rata-  rata,  dapat diketahui bahwa protein bungkil kedelai yang diproteksi cairan batang pisang menghasilkan UDP  terkecil  pada  P0  sedangkan  yang menghasilkan UDP tertinggi adalah P3. Hal ini  sesuai  dengan  pendapat  Rahmadi  dkk (2010)  yang  menyatakan  bahwa  tingginya produksi protein total dapat dipengaruhi oleh konsentrasi  protein yang lolos dari degradasi rumen.  Produksi  protein  total  semakin meningkat
dengan seiring dengan
penambahan cairan batang pisang, dilaporkan oleh Wina (2001)  bahwa dalam cairan batang pisang  terdapat  kandungan  tanin  yang termasuk
dalam kelompok tanin terkondensasi.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa tanin  cairan  batang  pisang  terbukti  dapat memproteksi protein terbukti oleh meningkatnya produksi UDP.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan,  dapat disimpulkan sebagai berikut:
1. Proteksi Protein Bungkil Kedelai dengan sumber  tanin  cairan  batang  pisang berpengaruh  menurunkan  konsentrasi amonia  dan  meningkatkan  kadar
undegraded  dietary  protein (UDP) secara in vitro.
2. Berdasarkan  hasil  ini  pemberian  level tanin  yang  terbaik  adalah  1,5%  karena menghasilkan  kadar  UDP  tertinggi, menunjukkan  bahwa  proses  proteksi protein  dengan  tanin  cairan  batang pisang berhasil.

## DAFTAR PUSTAKA
Akiyama H, K Fuji, O Yamasaki, O Ono, T.
Iwatsuki. 2001.  Antibacterial Action of Several Tannins Against Staphylococcus  aureus .  J  Antimicrob Chemother. 48:  487 – 491.
Cahyani  R.  D.,  L.  K.  Nuswantara  dan  A. Subrata.  2012.  Pengaruh  Proteksi Protein Tepung Kedelai dengan Tanin Daun Bakau terhadap   Konsentrasi Amonia, Undegraded  Protein dan Protein Total Secara in  vitro .  Fakultas Peternakan  dan  Pertanian  Universitas Diponegoro, Semarang. Animal Agricultural Journal. Fakhrurrazi, Herrialfian, Nita Yulida Ramadani, Roslizawaty. 2013. Aktivitas  Antibakterial  Ekstrak  Etanol dan Rebusan Sarang Semut ( Myrmecodia  Sp .)  terhadap  Bakteri Escherichia  coli .  Jurnal  Medika Vetenaria.
Jenny,  Surono  dan  M.  Christiyanto.  2012. Produksi Amonia, Undegraded Protein
dan  Protein  Total  Secara  in  vitro Bungkil  Biji  Kapuk  Yang  Diproteksi Dengan Tanin Alami. Animal Agricultural Journal, Vol. 1 (1): 277 – 284. Kariuki,  I.W.  and  B.W.  Norton.  2008.  The Digestion of  Dietary Protein Bound By Condensed Tannin in The
Gastrointestinal  Tract  of  Sheep. Animal  Feed  Sci.  Technol.  142:197- 209.
Makkar,  H.  P.  S.  2003.  Effect  and  Fate  of Tannins  In  Ruminant  Animals, Adaptation   To Tannins, and Strategies To  Overcome  Detrimental  Effect  of Feeding  Tannin  –  Rich  Feeds.  Small Ruminant Research 49:241-256
Puastuti,  W.,  D.  Yulistiani,  dan  I.  W. Mathius.  2012.  Respon  Fermentasi Rumen   dan  Retensi  Nitrogen  Dari Domba  yang  Diberi  Protein  Tahan
Degradasi dalam  Rumen.  JITV Vol 17 (1): 67-72. Samaranayake L. 2012. Essential Microbiology  Fordenistry  4th  Ed.
Churchil  Livingstone  Elsevier  :  279- 281 Rochman, A., Surono, dan A. Subrata. 2012. Pemanfaatan  Tanin  Ampas  Teh dalam  Proteksi  Protein  Bungkil Kedelai Biji Jarak terhadap Konsentrasi Amonia, Undegraded Dietary Protein (UDP),  dan  Protein  Total  Secara  in Vitro.  Animal  Agricultural  Journal. Vol 1 (1) : 257 - 264.
Rahmadi,  D,  Sunarso,  J.  Achmadi,  E.
Pangestu, A. Muktiani, M.
Christiyanto, Surono, dan Surahmanto. 2010.  Ruminologi  Dasar.  Jurusan
Nutrisi  dan  Makanan  Ternak  Fakultas Peternakan  Universitas  Diponegoro.
Semarang. Rahmat  Hidayat,  N.D.  Kartika  dan  U.  H. Tanuwiria, 2012. Pengaruh
Tingkat  Pemberian  Tepung  Ampas Teh  ( Camellia  sinensis )  terhadap Kecernaan Bahan Kering (Kcbk) Dan Kecernaan  Bahan  Organik  (Kcbo) Ransum Sapi   Potong  (In  Vitro).
Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran, Sumedang. Jurnal
Unpad.
Tidi,  D.,  A.  Budiman,  B.  Ayuningsih  dan Mansyur.  2011.  Nilai  nutrisi  batang pisang  dari  bioproses  (Ensilase) sebagai  ransum  lengkap.  Jurnal  Ilmu Ternak Vol. 11(1): 17- 23.
Tilley,  J.M.A.  and  Terry,  R.A.  1967.A  two stage  technique  for  in  the  in  vitro  d ingestionof forage crops. J. Grassland Soc. 18 : 104
Wina,
E. 2001. Tanaman pisang sebagaipakan ternak ruminansia. Wartazoa 11: 20-27.
Wina,  E.,  S.  Muetzel  and  K.  Becker.  2005.
The  Impact  of  Saponin-Containing Plant Materials on Ruminant
Production-A review: 1-13.
Wiseman,  J.  and  W.  J.  A.  Cole.  1990.
Feedstuff  Evaluation.  Butterworth, London.
Zamsari,  M,  Sunarso,  dan  Sutrisno.  2012.
Pemanfaatan  Tanin  Alami  dalam Memproteksi  Protein  Bungkil  Kelapa Ditinjau  dari  Fermentabilitas  Protein Secara  In  Vitro.  Animal  Agricultural Journal. Vol 1 (1): 405-416.