Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.

## KOMPONEN KIMIA DAN BIOAKTIF AKAR BAHAR GORGONIAN (Genus Rumphella dan Hicksonella ) DARI PULAU RAIJUA- NUSA TENGGARA TIMUR
Chemical Components and Bioactive of Gorgonian Sea Plumes (Genus Rumphella and Hicksonella) from Raijua Islands-East Nusa Tenggara
Yunialdi Hapynes Teffu 1 *, Ruddy Suwandi 2 , Nurjanah 3
1 Program Studi Teknologi Hasil Perikanan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Kristen Artha Wacana Kupang- NTT
2,3 Departemen Teknologi Hasil Perairan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor, Jalan Lingkar Akademik, Kampus IPB, Bogor 16680 Telepon 0251-8622915; Faks. 0251-8622916 *Korespondensi: naldihapynes@gmail.com
Diterima 19 Januari 2015/Disetujui 15 April 2015

## Abstrak
Akar bahar telah lama dikenal oleh masyarakat dan dimanfaatkan sebagai perhiasan dan obat rematik. Penelitian ini bertujuan untuk identifikasi genus akar bahar, metabolit primer, logam berat dan metabolit sekunder yang bermanfaat sebagai bahan obat dalam bidang farmasi. Analisis logam berat menggunakan Atomic  Absorption  Spectrofotometer ,  kandungan  radium  menggunakan  spektrometer  gamma,  ekstraksi bertingkat dengan metode maserasi selama 24 jam dan uji fitokimia kualitatif  berdasarkan warna. Akar bahar  teridentifikasi  sebagai Rumphella sp  dan Hicksonella sp  mengandung  komponen    protein  yang tertinggi, kandungan logam berat Hg, As, Cu, dan Cd berada dalam kisaran maksimum sedangkan logam berat Pb melebihi standar yang ditetapkan BSN dan BPOM.  Akar bahar mengandung radium 0,65 Bq/ kg-0,79 Bq/kg, rendemen terbanyak adalah ekstrak metanol dan mengandung metabolit sekunder alkaloid, flavonoid, fenol hidrokuinon, steroid, triterpenoid, dan saponin.
Kata kunci: Fitokimia, Hicksonella , Radium, Rumphella , Sklerit
Abstract
Sea plumes is mostly used by  people as jewellery and arthritis drug. The aim of this research was to characterize the chemicals and the bioactive compounds of the sea plumes for pharmaceutical ingredients. Characterization of sea plumes was carried out schlerit form identification, proximate analysis, heavy metal analysis using Atomic Absorption Spectrofotometer , radium content using gamma spectrometer, extraction by maceration method for 24 hour and phytochemicals quality testing based on color appearance.  The sea plumes was identified as Rumphella and Hicksonella contains the highest protein components. Heavy metal Pb exceed the standar set to National Standar of Indonesia (SNI) and Medicines and Foods Security Agency. Akar bahar containing radium 0.65-0.79 Becquerel/kilogram, highest yield using methanol and containing secondary metabolite which targeted as bioactive compounds alkaloids, flavonoids, phenols hydroquinone, steroids, triterpenoids and saponins.
Keywords : Hicksonella , secondary metabolite, radium, Rumphella , sklerit

## PENDAHULUAN
Perairan  laut  di  Nusa  tenggara  Timur kaya  akan  berbagai  jenis  gorgonian.    Salah satu  organisme  laut  yang  penting  dan  perlu mendapat perhatian yaitu akar bahar, karena
keberadaannya  melimpah  hampir  di  seluruh perairan  Nusa  Tenggara  Timur.    Penelitian oleh  Tuti  (2014)  pada  perairan  Maumere Kabubapen  Sikka  Nusa  Tenggara  Timur melaporkan keberadaan akar bahar gorgonian
Available online: journal.ipb.ac.id/index.php/jphpi
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
yang  ditemukan  sebanyak  16  marga  ( genus ) gorgonian dari 8 suku ( family ) yang diamati pada 14 stasiun pengamatan.  Gorgonian dari marga Isis atau dikenal sebagai “patah tulang” atau  “bambu  laut”  merupakan  marga  yang paling  banyak  dijumpai  dan  mendominasi perairan Maumere.
Keberadaan  gorgonian  akar  bahar  yang melimpah di perairan Nusa Tenggara Timur merupakan salah satu potensi yang perlu dikaji dan  diteliti.    Penelitian  ini  difokuskan  pada gorgonian akar bahar yang banyak digunakan oleh  masyarakat  pulau  Sabu-Raijua  sebagai gelang  dan  obat  tradisional.    Masyarakat  di Pulau  Sabu-Raijua  Nusa  Tenggara  Timur, menggunakan  akar  bahar  sebagai  obat, dengan cara akar bahar yang telah dikeringkan digerus untuk diambil serbuknya lalu diseduh dengan air panas dan diminum sebagai obat nyeri  pada  sendi.    Isu  yang  berkembang  di masyarakat  perlu  pembuktian  secara  ilmiah bahwa  akar  bahar  mengandung  radium alami  yang  dipercaya  sebagai  zat  yang  dapat berfungsi  untuk  menghilangkan  rasa  nyeri sendi pada tulang.
Penelitian terhadap marga gorgonian akar bahar  yang  dilaporkan  menunjukan  potensi aktivitas biologis yang menjanjikan. Penelitian pada  Gorgonian Rumphella  antiphaties , Carijoa sp.  menunjukan  sifat  potensial biologis  sebagai  antibakteri;  sitotoksisitas sedang  terhadap  sel-T  manusia  leukemia limfoblastik akut (Sung et al. 20071; Sung et al. 20072;  Sung et  al. 2010;  Díaz-Marreroet et al. 2011), sebagai antiprotozoa (Reimão et al. 2008). Octocoral  Dendronephthya  griffin dan Soft  Coral  Scleronephthya  gracillimum berfungsi  sebagai  anti-inflamasi  (Chao et  al. 2008; Fang et al. 2011). Gorgonian Rumphella antipathies menunjukan  penghambatan turunan  anion  superoksida  dan  pelepasan elastase oleh neutrofil manusia (Chung et al. 2013; Chung et al. 2014). Pengetahuan masyarakat tentang khasiat akar  bahar  sebagai  obat  didasarkan  pada pengetahuan  empiris.  Penelitian  ilmiah  di laboratorium dilakukan untuk membuktikan
adanya  komponen  metabolit  primer dan  komponen  metabolit  sekunder  yang terkandung di dalamnya serta manfaat lain dari senyawa  tersebut  dalam  pengembangannya sebagai  bahan  obat  di  bidang  farmasi  yang bermanfaat  bagi  manusia.    Tujuan  dari penelitian  ini  yaitu  mengidentifikasi  akar bahar  yang  digunakan  oleh  masyarakat, komponen  metabolit  primer  dan  metabolit sekunder.

## BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan  utama  dalam  penelitian  adalah akar  bahar  berasal  dari  perairan  di  sekitar Pulau  Raijua,  Nusa  Tenggara  Timur.    Bahan kimia  yang  digunakan  antara  lain  alkohol 70% (Brataco), etanol 70%, (Brataco), pelarut n-heksan  p.a  (Merck  KGaA),  etil  asetat  p.a (Merck KGaA), metanol p.a. (Merck KGaA), kloroform (Merck KGaA).
Alat  yang  digunakan  yaitu  pH  meter, salinometer, flow/current meter,  sechi  disk, Global  Positioning  System (GPS  Garmin etrex), coolbox ,  mikroskop  binokuler Olympus  (U-RFLT  50), Atomic  Absorption
Spectrofotometer (AA700-Shimadzu),  MVU- 1A  (Mercury  Vaporizer  Unit-Shimadzu), HVG-1(Shimadzu),  Spektrometer  Gamma (DETEKTR  HPGe  ORTEG  GMX-25P4), orbital  shaker (wiseshake  SHO-1D), rotary evaporator (Heidolph VV 2000).

## Prosedur Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  dalam  beberapa tahap  meliputi  pengambilan  sampel  dan preparasi,  identifikasi  sampel,  analisis proksimat, pengujian logam berat, pengujian kandungan radium, ekstraksi dan uji fitokimia. Akar bahar diambil dari perairan dengan metode  penyelaman  berkisar  5  sampai  10 meter di bawah permukaan laut oleh nelayan setempat  pada  bulan  Maret  2014.    Sampel dicuci  dengan  air  laut,  kemudian  dijemur dibawah sinar matahari hingga kering (selama enam  hari).    Sampel  kering  dimasukkan dalam  kemasan  plastik  polietilen,  dibawa  ke
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
laboratorium,  dan  disimpan  dalam  wadah yang  tertutup  untuk  selanjutnya  dilakukan tahapan  karakterisasi,  ekstraksi  dan  uji fitokimia.    Sampel  basah  untuk  keperluan identifikasi direndam dalam alkohol 70%.
Identifikasi  Sampel  Gorgonian  (Akar Bahar)
Langka-langkah  yang  dilakukan  untuk mengidentifikasi  sampel  gorgonian  menurut Tuti (2014).  Sampel kira-kira lima belas cm diawetkan  dalam  alkohol  70%.    Identifikasi dilakukan dengan mengamati bentuk koloni, bentuk morfologi jarum sklerit yang terletak di badan maupun di tentakelnya.  Ujung sampel dipotong  satu  cm,  jaringan  dihilangkan dengan  setetes  pemutih,  lalu  sklerit  dicuci dengan  air  bersih.  Untuk  memisahkan aksis  tengah  koloni  dan  kumpulan  sklerit yang  berupa  tepung.    Sklerit  yang  sudah bersih  dilihat  bentuk  morfologinya  dengan mikroskop  mikroskop  binokuler  Olympus (U-RFLT  50)  pembesaran  kuat.  Hasil  foto sklerit  yang  ditemukan  dibandingankan dengan referensi yang ada untuk menentukan bentuk  polip, surface dan subsurface menggunakan buku identifikasi Fabricius dan Alderslade (2001).

## Analisis Kandungan Metabolit Primer dan Logam Berat
Pengujian  proksimat  terhadap  akar bahar  kering  meliputi  uji  kadar  air,  lemak, abu,  karbohidrat,  abu  tak  larut  asam (AOAC  2005);  dan  abu  larut  asam ( by  difference ).    Analisis  logam  berat  Hg, Cd,  Pb,  As  dan  Cu  menggunakan  metode AOAC (2002).
Uji  Kandungan  Radium  (Badan  Tenaga Nuklir Nasional 1998)
Akar bahar dibersihkan dari pengotornya, ditentukan  beratnya  (200  gram  sampai  500 gram).    lalu  dikeringkan  pada  suhu  105 o C. Sampel yang telah kering dimasukkan dalam tanur  dengan  suhu  500 o C  sampai  menjadi abu.  Sampel kemudian dimasukan ke dalam
wadah  (vial  250  mL)  hingga  penuh.  Sampel ditutup  rapat  dan  didiamkan  selama  empat puluh hari pada suhu ruang sebelum diukur dengan spektrometer gamma.

## Ekstraksi
Ekstraksi  dilakukan  secara  bertingkat berdasarkan  Wikanta et  al. (2005) menggunakan  metode  maserasi.  Akar bahar  kering  dipisahkan  antara  kulit  dan aksial  lalu  dihaluskan.  Sampel  ditimbang sebanyak 50 gram kulit dan aksial akar bahar dan  ditambahkan  masing-masing  pelarut n-heksana  p.a  sebanyak  300  mL.  Campuran dikocok  menggunakan shaker selama  24 jam kemudian disaring menggunakan kertas Whatman 42. Filtrat pertama disimpan dalam lemari pendingin.  Ekstraksi dilakukan sampai larutan  menjadi  jernih.    Hasil  penyaringan (filtrat)  masing-masing  bagian  akar  bahar ditampung  dan  digabung  kemudian dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator dengan  suhu  40 o C  sampai  pekat.    Ekstrak pekat kemudian dipindahkan ke dalam botol vial.  Proses  ekstraksi  terhadap  residu  hasil ekstraksi  n-heksana  diulang  menggunakan pelarut etil asetat p.a dan metanol p.a. Hasil ekstrak  kasar  ditimbang  untuk  mengetahui rendemen  berdasarkan  jenis  pelarut menggunakan rumus :

## Uji Kualitatif Fitokimia (Harborne 1987)
Pengujian  fitokimia  secara  kualitatif merupakan tahapan awal dalam mengidentifikasi  kandungan  kimia  yang terdapat dalam simplisia dan ekstrak kasar akar bahar.  Tujuan dilakukan pengujian kualitatif fitokimia  untuk  menentukan  komponen senyawa kimia dan  bioaktif akar bahar, serta memberikan  informasi  tambahan  mengenai keberadaan  suatu  senyawa  tertentu  dalam kelompok  senyawa  yang  sedang  diperiksa dengan  uji  warna.    Uji  kualitatif  fitokimia terdiri  dari  uji  alkaloid,  flavanoid,  steroid/ triterpenoid, saponin, fenol hidrokuinon dan tanin.
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Identifikasi Jenis Akar Bahar Hasil identifikasi berdasarkan pengamatan  polip  dengan  mikroskop ditemukan  bentuk  sklerit  berupa  tonjolan- tonjolan menyerupai gada dan spindle .  Hasil tersebut  dibandingkan  dengan  bentuk  polip pada buku identifikasi soft coral and sea fans menurut  Fabricius  dan  Alderslade  (2001). Hasil  pengamatan  terhadap  bentuk  sklerit dan  wujud  jenis  akar  bahar  disajikan  pada Gambar 1.
Berdasarkan  bentuk  sklerit  tersebut klasifikasi/determinasi akar bahar berdasarkan hasil  penelitian  bersama  dengan  Lembaga
Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), terdapat dua genus akar bahar dengan rincian sebabai berikut: Dunia :  Hewan Filum :  Cnidaria Kelas :  Anthozoa Subkelas  :  Octocorallia Ordo :  Gorgonacea Famili :  Gorgoniidae 1.  Genus  : Rumphella Spesies  : Rumphella sp
2.  Genus  : Hicksonella Spesies  : Hicksonella sp Manuputty  (2008)  menyatakan  bahwa pada beberapa jenis dari kelompok gorgonia, mengandung lapisan koenensim disusun oleh senyawa  kapur  dalam  bentuk  spikula  yaitu partikel  kapur  dengan  bentuk  seperti  jarum yang  bentuknya  berbeda  antara  masing- masing jenis.  Bentuk karakteristik dari spikula ini dipakai sebagai salah satu panduan dalam proses identifikasi sampai ke tingkat jenis. Bahan yang digunakan dalam pengujian metabolit  primer,  metabolit  sekunder, logam berat, radium, ekstraksi dan fitokimia merupakan gabungan sampel akar bahar yang biasa digunakan oleh masyarakat pulau Raijua Nusa  Tenggara  Timur.    Berdasarkan  hasil identifikasi  bahan  yang  digunakan  adalah dua  spesies  yang  berbeda.    Fakta  yang  ada di  lapangan  pada  saat  pengambilan  sampel oleh  masyarakat  yang  biasa  mengambil  dan memanfaatkan akar bahar semua sampel yang diambil  termasuk  dalam  akar  bahar  karena bentuk fisiknya sangat mirip dan sangat sukar untuk  membedakan  jenisnya  di  perairan. Berdasarkan hasil identifikasi di laboratorium yang  dilakukan  sampel  yang  diperoleh  dan digunakan  merupakan  dua  sampel  yang berbeda  jenis.  Proses  identifikasi  yang berlangsung lama bersamaan juga dilakukan proses pengujian yang lain.
Gambar  1  Bentuk sklerit akar  bahar  (a) sklerit Rumphella sp.;  (b) Rumphella sp.;
(c) sklerit Hicksonella sp.; (d) Hicksonella sp. (c) (a) (b) (d)
JPHPI 2015, Volume 18 Nomor 1
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.

## Kandungan Metabolit Primer Akar Bahar
Hasil  pengujian  kandungan  metabolit primer  merupakan  gabungan  (campuran) dua sampel akar bahar genus Rumphella dan Hicksonell a.    Kandungan  metabolit  primer terhadap  kulit  dan  aksial  akar  bahar  dari kedua genus tersebut disajikan pada Tabel 1.
Tabel  1  menunjukkan  kadar  air  pada kulit  akar  bahar  sebesar  2,28%  lebih  kecil dibandingkan  kadar  air  pada  aksial  akar bahar  sebesar  6,53%.    Kadar  air  pada  kulit akar bahar yang relatif rendah diduga akibat saat pengeringan.  Kulit akar bahar langsung kontak  dengan  sinar  matahari  sedangkan bagian  aksial  terlindungi  oleh  kulit  yang membungkusnya, sehingga air yang diuapkan terhalang  oleh  lapisan  kulit.  Akibatnya  air pada kulit akar bahar yang merupakan polip (hewan  karang)  yang  tubuhnya  banyak mengandung air ikut menguap.   Katno (2008) menyatakan pengeringan simplisia bertujuan untuk  mencegah  aktivitas  enzim  perusak kandungan kimia pada bahan.  Bahan setelah di  panen  segera  dikeringkan  sehingga  kadar airnya  rendah  (kurang  dari  10%).  Kadar air  yang  rendah  ini  mencegah  bahan  dari kerusakan oleh jamur dan mikroba pembusuk lainnya. Presentase  kandungan  protein  akar bahar  termasuk  dalam  kategori  kandungan protein  yang  cukup  besar.    Pada  kulit  akar
bahar kandungan protein sebesar 19,14% dan aksial  akar  bahar  sebesar  22,23%.  Tingginya kandungan  protein  pada  aksial  diduga  dari hasil  penimbunan  sisa-sisa  makanan  selama proses metabolisme yang makin lama makin tebal dan keras.  Aziz (1978) menyatakan sisa- sisa makanan akan disimpan di dalam vakuola oleh sel-sel mesoglea dan kelak akan ditimbun ke  arah  sumbu  (axial)  dari  koloni.    Lapisan sebelah  dalam  ini  makin  lama  makin  tebal karena  aktivitas  dari  mesoglea.  Zat-zat  yang ditimbun  oleh  mesoglea  berupa  zat  tanduk atau keratin.  Manuputty (2008) menyebutkan bahwa  kerangka  dalam  (aksial)  terdiri  dari gorgonian yang keras dan padat, sama dengan zat  tanduk  yang  mengandung  substansi kolagen dan senyawa protein. Persentase kadar lemak untuk kulit akar bahar  sebesar  3,11%  dan  presentase  kadar lemak untuk aksial akar bahar sebesar 0,56%. Tingginya  kandungan  lemak  yang  terdapat pada  kulit  akar  bahar  diduga  berasal  dari tubuh hewan karang (polip) yang melakukan proses metabolisme. Lemak yang relatif tinggi dari  bagian  aksial  diduga  berperan  sebagai pelindung  dan  sumber  energi.    Kandungan lemak  yang  relative  rendah  pada  aksial diduga  merupakan  sisa  hasil  penimbunan metabolisme.  Kandungan  lemak  yang terdapat pada akar bahar lebih kecil dari yang dilaporkan Goldberg (1978) pada tiga skeleton
Tabel  1  Kandungan  metabolit  primer  gabungan  sampel  akar  bahar (genus Rumphella dan Hicksonella ) Komposisi akar bahar Gabungan bagian akar bahar (genus Rumphella dan Hicksonella ) Kulit (%) Aksial (%) Kadar air 2,28 ± 0,16 6,53 ± 0,08 Protein 19,14 ± 0,11 22,23 ± 0,14 Lemak 3,11 ± 0.01 0,56 ± 0.00 Karbohidrat 4,54 ± 1,13 5,42 ± 0,79 Kadar abu 14,06 ± 0,34 13,80 ± 0,52 Kadar abu larut asam 11,47 ± 0,03 12,50 ± 0,02 Kadar abu tak larut asam 2,58 ± 0,07 1,27 ± 0,02 Keterangan : sampel diulang 2 kali
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
gorgonian  Muricea  muricata , Swiftia  exserta , Gorgonia ventalina , dan dua Anthiparia yaitu Cirrhipathes lutkeni dan Antipathes rhipidion kandungan lemak 0-8,4%.
Kandungan karbohidrat pada akar bahar relatif  banyak  jika  dibandingkan  dengan penelitian  Goldberg  (1978)  menyebutkan bahwa  kandungan  karbohidrat  sebesar 1,24-3,94%  pada  tiga  skeleton gorgonian
Muricea  muricata ,  Swiftia  exserta, Gorgonia ventalina ,  dan  dua  Anthiparia  yaitu Cirrhipathes lutkeni dan Antipathes rhipidion . Kandungan  karbohidrat  yang  relatif  sama antara  kulit  dan  aksial  akar  bahar  diduga berasal  dari  hubungan  simbiosis  antara polip  dan  alga  uniseluler  zooxanthela yang  menyediakan  makanan  bagi  polip karena  dapat  melakukan  proses  fotosintesa. Winarno  (2008)  menyatakan  bahwa karbohidrat yang terhitung ini diduga berupa glikogen dan serat kasar, hal ini dikarenakan karbohidrat  yang  terdapat  pada  hewan umumnya berbentuk glikogen Kadar  abu  pada  akar  bahar  tergolong besar  antara  kulit  dan  aksialnya  135-14%. sedangkan  prosentase  abu  larut  asam mencapai  12,50%.  Kadar  abu  larut  asam pada bagian kulit dan aksial yang relatif sama diduga berasal dari pasir dan partikel-partikel tempat  akar  bahar  hidup  berupa  komponen garam  dan  mineral-mineral,  terbawa  arus, diserap  dan  terakumulasi  dalam  tubuh akar  bahar.  Bai et  al. (2011)  melaporkan pada black  coral  Antipathes mengandung 13  komponen  organik;  dengan  fosforus  dan kalsium merupakan komponen organik yang paling  besar.  Konishi  (1991)  karang  lunak ( Alcyonaria )  merupakan  hewan  pemasok terbesar  senyawa  karbonat  yang  berguna bagi  pembentukan  terumbu  karang,  hal  ini terbukti  sejak  ditemukannya  sejumlah  besar spikula berkapur di dalam jaringan tubuhnya, yang tidak ditemukan pada hewan lain yang hidup di terumbu karang yang sama.
Kadar abu tak larut asam pada kulit akar bahar  mencapai  2,58%  tergolong  tinggi., jika  dibandingkan  dengan  bagian  aksialnya.
Tingginya kadar abu tak larut asam pada kulit diduga  berasal  dari  perairan  tempat  hidup akar bahar berupa silika, pasir, dan sedimen lainnya yang menempel pada karang.  Kadar abu yang tak larut asam tersebut terakumulasi dalam  tubuh  akar  bahar  dan  tidak  dapat disekresikan  pada  saat  proses  metabolism. Isnawati et al. (2006) menyatakan kadar abu total  dan  abu  tidak  larut  asam  hendaknya menghasilkan  nilai  rendah  karena  uji  ini merupakan indikator adanya cemaran logam yang tidak mudah hilang pada suhu tinggi. Pengujian  kandungan  metabolit  primer terhadap  akar  bahar  penting  dilakukan sebagai  data  penelitian  mengenai  komposisi kimia  yang  terkandung  dalam  akar  bahar. komposisi  kimia  tersebut  berguna  sebagai dasar  pertimbangan  pemilihan  metode ekstraksi  dan  jenis  pelarut  untuk  penelitian selanjutnya pada tahapan metabolit sekunder. Penelitan-penelitian  sebelumnya  tidak  ada yang  melaporkan  data  mengenai  komposisi metabolit  primer,  lebih  banyak  melaporkan senyawa  metabolit  sekunder  dan  pengujian aktivitas biologi senyawa tersebut.

## Logam Berat
Pengujian  logam  berat  terhadap  akar bahar bertujuan untuk memberikan jaminan bahwa  bahan  alami  yang  digunakan  sebagai bahan  obat  atau  ekstrak  tidak  mengandung logam berat tertentu.  Hasil pengujian logam berat tersaji pada Tabel 2.
Tabel  2  menunjukkan  hasil  pengujian logam  berat  merkuri,  arsen,  cadmium  dan nikel pada kulit dan aksial akar bahar masih berada dalam batas standar kandungan logam berat  yang  dipersyaratatkan  dalam  produk perikanan dan cemaran kimia dalam makanan (BSN 2009; BPOM 2009).
Merkuri  merupakan  salah  satu  logam berat  yang  berbahaya  dan  dapat  terjadi secara  alamiah  di  lingkungan  sebagai  hasil perombakan  mineral  di  alam  melalui  proses cuaca/iklim  dari  angin  dan  air.    Umumnya merkuri  ditemukan  di  alam  dalam  bentuk merkuri  metalik,  merkuri  sulfida,  merkuri
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
klorida dan metal merkuri (BSN 2009).
Arsenik diakui sebagai komponen esensial bagi sebagian hewan dan tumbuh-tumbuhan, namun demikian arsenik lebih populer dikenal sabagai raja racun dibandingkan kapasitasnya sebagai komponen esensial.  Arsen anorganik seperti  arsen  pentaoksida  memiliki  sifat mudah  larut  dalam  air,  sedangkan  arsen trioksida  sukar  larut  di  air,  tetapi  lebih mudah  larut  dalam  lemak.  Penyerapan melalui saluran pencernaan dipengaruhi oleh tingkat  kelarutan  dalam  air,  sehingga  arsen pentaoksida  lebih  mudah  diserap  dibanding arsen trioksida (Widaningrum et al. 2007). Kadar  Cd  pada  akar  bahar  masih berada pada ambang batas dan standar yang ditetapkan.    Kandungan  Cd  tersebut  masih lebih rendah dibandingkan dengan kadar Cd yang  dilaporkan  Chan et  al. (2012)  dalam karang  gorgonian Subergorgia  suberosa pada kondisi terkontrol yang diambil dari  perairan laut    Taiwan  bekas  penambangan  dengan kandungan  Cd  sebesar  12,72  mg/L,  hal  ini menunjukkan  lingkungan  yang  berbeda kandungan logam berat  juga berbeda.
Kadar Cd dalam akar bahar diduga berasal dari sedimen pada dasar perairan yang banyak mengandung Cd. Sedimen yang mengandung Cd  terakumulasi  dalam  tubuh  akar  bahar dalam  jangka  waktu  lama.  Cd  merupakan logam  berat  yang  sangat  berbahaya  karena tidak  dapat  dihancurkan  ( non  degradable ) oleh organisme hidup dan dapat terakumulasi ke lingkungan, terutama mengendap di dasar
perairan  membentuk  senyawa  kompleks bersama bahan organik dan anorganik secara adsorbsi  dan  kombinasi  (Rochyatun  dan Rozak 2007; Ayeni et al. 2010).
Kandungan  Cu  berdasarkan  Badan Standarisasi Nasional dan Badan Pengawasan Obat  dan  Makanan  tidak  memasukkan  Cu sebagai salah satu syarat logam dalam produk perikanan  maupun  cemaran  kimia  dalam makanan.  Hasil  penelitian  menunjukkan kandungan  Cu  lebih  tinggi  padahal  sampel diambil  dari  perairan  yang  bukan  bekas daerah  penambangan  dan  jauh  dari  daerah industri.  Berbeda  dengan  penelitian Chan et  al. (2012)  menyatakan  bahwa  pada karang  gorgonian Subergorgia  suberosa pada kondisi terkontrol yang diambil dari  perairan laut  Taiwan bekas penambangan kandungan Cu  sebesar  13,67  mg/L  yang  lebih  kecil kandungannya  dari  kulit  akar  bahar,  tetapi kandungan Cu-nya lebih besar dari aksial akar bahar.  Tingginya kandungan Cu dalam akar bahar diduga berasal dari pengikisan batuan alami  yang  mengandung  mineral  sangat tinggi dan aktivitas manusia di sekitar pesisir pantai.  Rochyatun et al. (2006) menyatakan kemungkinan  besar  Cu  yang  dikandung  di perairan  berasal  dari  buangan  sampah  yang berasal  dari  kegiatan  manusia  di  darat  dan erosi batuan mineral yang terbawa arus pada saat hujan kemudian mengalir ke laut melalui sungai. Logam  Cu  dalam  akar  bahar  diduga dibutuhkan  dalam  proses  metabolisme
Tabel  2  Hasil  pengujian  logam  berat  gabungan  sampel  akar  bahar (genus Rumphella dan Hicksonella ) Parameter Bagian akar bahar (genus Rumphella dan Hicksonella ) BSN (2009) (ppm) BPOM (2009) (ppm) Kulit (ppm) Aksial (ppm) Merkuri (Hg) < 0,002 < 0,002 1,0 1,0 Arsen (As) < 0,002 < 0,002 1,0 1,0 Kadmium (Cd) 0,41±0,12 0,15±0,04 1,0 1,0 Tembaga (Cu) 44,79±1,84 6,42±0,20 - - Timbal (Pb) 4,49±0,58 3,06±1,15 1,5 1,5 Keterangan : sampel diulang 2 kali
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
karena  logam  Cu  bersifat  esensial,  jika dibandingkan  dengan  logam  yang  lain. Hutagalung (1991) menyatakan bahwa karang lunak  membutuhkan logam Cu yang ada di perairan untuk kebutuhan pertumbuhan dan perkembangan  hidupnya  sebagai  kofaktor kerja  enzim  dalam  metabolisme  hewan karang.
Kadar  Pb  berdasarkan  persyaratan  yang ditetapkan  oleh  BSN  (2009)  dan  BPOM (2009)  telah  melebihi  batas  keamanan  yang ditetapkan.  Kadar Pb dalam kulit atau polip ini  lebih  tinggi  jika  dibandingkan  dengan kadar  pb  yang  dilaporkan  oleh  Kadir et  al. (2013)  bahwa  kadar  Pb  dalam  polip  karang lunak Sinularia  polydactyla dari  perairan Pulau  Laelae  sebesar  0,029  ppm,  Pulau Bonebatang  0,084  ppm  dan  Pulau  Badi 0,072 ppm.  Kadar Pb pada aksial (kolenkim) akar  bahar  lebih  rendah  dari  kolenkim (rangka)  karang  lunak Sinularia  polydactyla di perairan Pulau Laelae sebesar 8,382 ppm. Dibandingkan  dengan  kadar  Pb  dalam  akar bahar  Pb  dalam  kolenkim  karang  lunak Sinularia  polydactyla masih  lebih  tinggi  di Pulau  Bonebatang  dan  Pulau  Badi  masing- masing  sebesar 12,378 ppm dan 10,127 ppm. Kadar Pb yang tergolong tinggi dalam akar bahar  diduga  berasal  dari  tumpahan  bensin yang mengandung Pb tinggi  yang digunakan oleh  nelayan  setempat  sebagai  bahan bakar  untuk  perahu  motor  nelayan  dalam menangkap ikan dan sarana transportasi antar pulau.  Rochyatun et  al. (2006)  menyatakan umumnya  bahan  bakar  minyak  mendapat zat tambahan tetraetyl yang mengandung Pb untuk meningkatkan mutu, sehingga limbah dari kapal-kapal tersebut dapat menyebabkan kadar Pb di perairan menjadi tinggi.
Tingginya  Pb  diduga  berasal  dari kejadian  bocornya  minyak  mentah  ke  Laut Timor  akibat  meledak  dan  terbakarnya  unit pengeboran West Atlas milik ladang minyak Montara.  Tumpahan  minyak  tersebut  terjadi pada Agustus 2009.  Kehidupan nelayan dan petani  rumput  laut  serta  kelangsungan  biota perairan  di  tempat  pengambilan  sampel
merasakan  juga  dampak  yang  ditimbulkan dari insiden tersebut karena tumpahan minyak sampai  ke  perairan  pulau  Raijua.  Tumpahan minyak yang diduga mengandung Pb tersebut masuk  dalam  badan  air  dan  mengendap  di dasar perairan dan terakumulasi dalam tubuh biota laut termasuk akar bahar. Timbal  (Pb)  merupakan  logam  yang sangat  beracun  dan  secara  alami  ditemukan pada  tanah.    Timbal  tidak  berbau  dan  tidak berasa. Di dalam tubuh, timbal diperlakukan seperti halnya kalsium.  Timbal dapat masuk ke  dalam  tubuh  melalui  pernapasan  dan makanan.  Konsumsi  timbal  dalam  jumlah banyak  secara  langsung  menyebabkan kerusakan  jaringan  termasuk  kerusakan jaringan mukosal (BSN 2009).

## Radium
Pengujian radium perlu dilakukan untuk menjawab isu yang berkembang di masyarakat tentang kandungan radium dalam akar bahar yang digunakan oleh masyarakat pulau Raijua Nusa  Tenggara  Timur  dalam  hubungannya untuk mengobati sakit nyeri sendi.  Radium yang  diuji  terdiri  dari  radium  226  (226Ra) dan  radium  228  (228Ra).    Hasil  penelitian membuktikan akar bahar mengandung radium alami.    Kandungan  radium  pada  aksial  akar bahar sebesar 0,79 Becquerel/kilogram untuk radium-226  dan  radium-228  sebesar  0,65 Bq/kg. Kandungan radium-226 dan radium-228  pada  kulit  akar  bahar  tidak terdeteksi pada minimum konsentrasi 0,05 Bq/ kg.  Hasil ini menunjukkan kemampuan alat spektrometer  gamma  hanya  bisa  mendeteksi kandungan  radium  pada  konsentrasi minimum  0,05  Bq/kg.    Konsentrasi  lebih kecil  dari  0,05  Bq/kg;  spektometer  gamma yang  digunakan  tidak  mampu  mendeteksi kandungan radium (BATAN 1998).
Keberadaan kandungan radium-226 dan radium-228  pada  aksial  akar  bahar  diduga berasal dari tanah, atau sedimen serta partikel- partikel  seperti  pasir,  karang  mati  dan  silika tempat  hidup  akar  bahar.    Sifat  akar  bahar yang  tumbuh  dan  muncul  dari  dasar  tanah
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
pada karang mati; selama proses metabolisme, terakumulasi  di  dalam  tubuh  akar  bahar. Masyarakat Pulau Sabu-Raijua memanfaatkan aksial  akar  bahar  yang  berwarna  hitam,  dan sifatnya  sangat  keras  sebagai  obat.    Warna hitam  seperti  arang  dan  sifat  keras  inilah yang  diyakini  mengandung  radium  alami. Mahur et  al. (2008)    menyatakan  radium merupakan  unsur  logam  radioaktif  alam yang  hadir  dalam  tanah,  pasir,  batu,  air, tumbuhan  dan  hewan.    Keberadaan  radium dalam berbagai lingkungan dan biota perairan berbeda-beda  tergantung  pada  kondisi alamnya.
Menurut  Sutarman  (2003),  kadar radium  pada  biota  perairan  berbeda-beda. Kadar  Radium-226  dalam  biota  laut  relatif rendah.  Kadar  radium-226  dalam  plankton ( fitoplankton dan zooplankton )  yang  berasal dari lautan di bagian dunia berkisar dari 0,08 sampai  66,6  Bq/kg  basah,  sedangkan  kadar radium-266 dalam alga dan moluska umumnya relatif rendah, yaitu 0,011 - 4,44 Bq/kg untuk alga  dan  0,08  –  0,89  Bq/kg  untuk  moluska. Kadar radium-266 dalam ikan umumnya lebih tinggi dibandingkan kadar  radium-266 dalam alga dam moluska. Kadar radium-266 dalam ikan  berkisar  dari  0,02  sampai  5,15  Bq/kg. Biasanya kadar radium-266 dalam tulang ikan lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  yang  ada di bagian tubuh ikan lainnya, karena radium mempunyai sifat seperti kalsium, yaitu mudah terakumulasi dalam tulang.
Penjelasan  ilmiah  tentang  kandungan radium  yang  dapat  memancarkan  sinar gamma  pada  akar  bahar  sebagai  obat rematik  masih  menjadi  perdebatan  di bidang  kodokteran  sebagai  radioterapi  dan
kemoterapi. Belum adanya bukti ilmiah yang menyatakan  hubungan  tersebut.  Menurut Tjokronagoro  (2004)  bahwa  banyak  obat- obat  kemoterapi  berasal  dari  daun,  batang, dan akar dari pohon-pohon tertentu di alam sekitar kita. Misalnya obat Vincristine, suatu obat  kemoterapi  yang  aktif  pada  saat  sel membelah,  berasal  dari  daun  pohon Vinca
Rosea atau pohon tapak doro. Obat paclitaxel (Taxol) berasal dari daun pohon taxane ( Folia taxane ) yang tumbuh di Amerika Utara.
Ekstraksi  Akar  Bahar  (Genus Rumphella
dan Hicksonella ) Ekstraksi dalam penelitian ini menggunakan  metode  maserasi.    Ekstraksi dilakukan  secara  bertingkat  menggunakan pelarut  yang  memiliki  tingkat  kepolaran yang  berbeda  yaitu  n-heksana  (nonpolar), etil  asetat  (semipolar)  dan  metanol  (polar). Hasil  ekstraksi  kulit  akar  bahar  dan  aksial pada  Tabel  3  menunjukkan  ekstraksi dengan  menggunakan  pelarut  yang  berbeda menghasilkan  rendemen  yang  berbeda  juga. Rendemen  terbanyak  diperoleh  dari  ekstrak metanol, n-heksana dan etil asetat.
Rendemen ekstrak metanol yang banyak diduga  dalam  akar  bahar  terdapat  senyawa- senyawa  yang  sifatnya  lebih  larut  dalam pelarut  polar  dan  sebagian  komponen  yang bersifat  non  polar  dibandingkan  dengan pelarut etil asetat dan n-heksana yang bersifat semi  polar  dan  non  polar.      Astarina et  al. (2013)  menyatakan  metanol  merupakan pelarut  universal  yang  memiliki  gugus  polar (-OH)  dan  gugus  nonpolar  (-CH 3 )  sehingga dapat menarik analit-analit yang bersifat polar dan nonpolar.
Tabel 3  Rendemen ekstrak kulit dan aksial gabungan sampel akar bahar (genus Rumphella dan Hicksonella ) Jenis pelarut Rendemen (%) Kulit akar bahar Aksial akar bahar n-Heksana 0,58 0,57 Etil asetat 0,15 0,74 Metanol 6,99 3,44
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
Rendemen pada n-heksana dan etil asetat yang tertarik pada proses ekstrasi relatif sedikit diduga  komponen  yang  memiliki  kelarutan sesuai  pelarut  yang  digunakan  juga  relatif sedikit  pada  bahan.    Etil  asetat  merupakan pelarut  semipolar  dengan  indeks  polaritas 4,4)  sehingga  berbagai  senyawa  baik  polar maupun  nonpolar  dapat  tertarik  ke  dalam pelarut;  berdasarkan  penggolongan  pelarut n-Heksana dan etil asetat memiliki sifat non polar  (Snyder et  al. 1997;  Artini et  al. 2013; Susanti et al. 2012).
Komponen  Metabolit  Sekunder  Ekstrak Kasar  Akar  Bahar  (Genus Rumphella dan Hicksonella )
Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk memberikan  gambaran  awal  mengenai kandungan  golongan  senyawa  metabolit sekunder  yang  terdapat  dalam  simplisia maupun  ekstrak.  Kandungan  metabolit sekunder  simplisia  dan  ekstrak  akar  bahar disajikan pada Tabel 4.
Komponen  metabolit  sekunder  yang dihasilkan  berbeda-beda  antara  pelarut maupun  pada  kulit  dan  aksial  akar  bahar.
Ekstrak metanol yang bersifat polar terdeteksi memiliki komponen metabolit sekunder yang lebih  banyak  dan  bervariasi  dibandingkan dengan  pelarut  etil  asetat  dan  n-heksana. Harborne  (1987)  menyatakan  pelarut  yang bersifat  polar,  mampu  mengekstrak  senyawa alkaloid  kuartener,  komponen  fenolik, karotenoid,  tanin,  gula,  asam  amino,  dan glikosida.
Komponen  metabolit  sekunder  yang terdeteksi  pada  pelarut  etil  asetat  seperti flavanoid,  triterpenoid,  steroid,  dan  saponin kecendurungan  terdeteksinya  sama    pada pelarut  n-heksana  dibandingkan  pelarut metanol.  Hasil penelitian ini berbeda dengan Chen et al. (2013) yang melaporkan metabolit sekunder  hasil  ekstraksi  menggunakan  etil asetat  dari  karang  lunak  Sinularia  arborea berupa  diterpenoid  dan  steroid.  Metabolit sekunder  yang  terdeteksi  pada  ekstrak n-heksana  pada  kulit  maupun  aksial  akar bahar tergolong dalam senyawa yang bersifat non  polar  sama  seperti  sifat  pelarut  yang digunakan.  N-heksana  adalah  hidrokarbon alkana  rantai  lurus  yang  memiliki  6  atom karbon dengan rumus molekul C 6 H 14 . Isomer
Tabel 4  Hasil  uji  fitokimia  simplisia  dan  ekstrak  kasar  gabungan  sampel  akar  bahar (genus Rumphella dan Hicksonella )
Komponen bioaktif Simplisia akar bahar Jenis ekstrak Kulit Aksial Kulit Aksial Metanol Etil asetat n- Hek- sana Metanol Etil asetat n-Hek- sana Alkaloid - Mayer - - + - - + - + - Dragrendorff - - + - - + - + - Wagner - - + - - + - + Flavonoid + + - + + - + + Fenol hidrokuinon - - + - + + - + Steroid + + + + + + + + Triterpenoid - - - + + + + + Tanin + - - - - - - - Saponin + + + + + + - + Keterangan: (+) terdeteksi;  (-) tidak terdeteksi
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
heksana tidak reaktif dan digunakan sebagai secara luas sebagai pelarut inert dalam reaksi organik karena heksana bersifat sangat tidak polar.  Heksana  digunakan  di  laboratorium untuk  mengekstrak  minyak  dan  lemak (Aziz et al. 2009).
Komponen  metabolit  sekunder  antara
kulit  dan  aksial  akar  bahar  keberadaannya relatif  sama.    Komponen  metabolit  yang ada  pada  kulit  akar  bahar  diduga  berupa spikula  yang  terdapat  pada  lapisan  koenzim sedangkan  bagian  aksial  yang  keras  diduga sebagai  hasil  metabolisme  yang  ditimbun selama proses hidup.  Tubuh akar bahar yang kaya  akan  unsur-unsur  nutrisi  yang  penting seperti  protein,  lemak  dan  dan  karbohidrat merupakan  sumber  makanan  yang  bernilai tinggi bagi predator. Kelangsungan hidup akar bahar menghasilkan senyawa metabolit yang berfungsi untuk  melindungi diri dari serangan predator.  Manuputty  (2008)  menyatakan senyawa  aktif    yang  ada  di  dalam  jaringan tubuh  hewan  oktokoral  digunakan  sebagai pertahanan,  pembentukan  dan  pemekaran koloni  secara  cepat  maupun  dalam  usaha memperebutkan  lahan  tempat  hidup  bagi perluasan  koloni.    Sifat  lain  dari  kehidupan hewan ini yaitu sifat allelopatik yang dipakai sebagai  strategi  untuk  merebut  lahan  dari karang baru. Komponen  metabolit  sekunder  alkaloid yang  terdeteksi  dari  ekstrak  metanol  dan n-heksana  berbeda  dengan  penelitian Gao et  al. (2011)  yang  menemukan lima  senyawa  alkaloid  zoanthoxanthin (1-5)  diisolasi  dari  gorgonian Echinogorgia pseudossapo menggunakan pelarut etanol  dan  klorometanol.  Penelitian tersebut  sesuai  dengan  Sun et  al. (2014) menyatakan  bahwa  dengan  pelarut  yang sama  terdapat  enam  senyawa  baru  alkaloid tetraprenylated,  diisolasi  dari  gorgonian Echinogorgia pseudossapo . Metabolit  sekunder  flavonoid  yang terdeteksi  diduga  berasal  dari  warna koloni  pada  akar  bahar.  Manuputty  (2008) menyatakan  warna  koloni  dipengaruhi  oleh
kandungan  pigmen  dari  alga  uniseluler zooxanthela yang hidup bersimbiosis di dalam jaringan koenensimnya.
Metabolit  sekunder  fenol  hidrokuinon terdeteksi  pada  ekstrak  akar  bahar menggunakan pelarut n-heksana dan pelarut methanol, hal ini menunjukkan senyawa fenol hidrokuinon  larut  dalam  pelarut  polar  dan non  polar  jika  dibandingkan  dengan  pelarut semi polar seperti etil asetat, berbeda dengan penelitian Cheng et al. (2011) pada soft coral Sinularia capillosa mengandung capilloquinol yang diekstraksi menggunakan aseton.
Metabolit  sekunder  steroid  terdeteksi di  semua  bahan  baik  simplisia  maupun ekstrak  akar  bahar  pada  berbagai  pelarut. Hasil  ini  berbeda  dengan  Zhao et  al. (2013) yang    melaporkan    mengisolasi  empat senyawa  pregnane  steroids  dari  gorgonian
Carijoa sp.  dengan  menggunakan  pelarut etanol.    Hasil  penelitian  lainnya  melaporkan senyawa metabolit sekunder steroid juga  dihasilkan  menggunakan  pelarut aseton  dari  berbagai soft  coral antara  lain Sarcophyton sp. (Wang et al. 2013); Nephthea chabrolii (Wang et al. 2012; Wang et al. 2013)
Triterpenoid terdeteksi pada ekstrak etil asetet, n-heksana dan metanol pada kulit dan aksial  ekstrak  akar  bahar.    Penelitian  Chung et  al. (2013;  2014)  menyatakan  bahwa  pada Rumphella antipathies dari campuran pelarut methanol dan diklorometan juga menemukan senyawa triterpenoid dari golongan seskuiterpenoid  yaitu  rumphellclovanes C-E  dari  dan  4,5-seco-caryophyllane  yaitu rumphellaones  B  dan  C.  Colorado et  al. (2013)  juga  melaporkan  mengisolasi  tiga senyawa baru triterpen glikosida dari sponge Ectyoplasia  ferox menggunakan  pelarut methanol dan diklorometana. Saponin  terdeteksi  pada  semua  ekstrak akar  bahar  baik  di  kulit  maupun  pada aksialnya kecuali ekstrak aksial menggunakan pelarut  etil  asetat,  hal  ini  menunjukkan secara  keseluruhan  ekstrak  mengandung saponin.  Van Dyck et al. (2010) melaporkan kandungan  saponin  banyak  terdapat  pada
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
teripang  laut  yang  diekstraksi  menggunakan pelarut etanol-air.
Shi et  al. (2002)  melaporkan  berhasil mengisolasi  metabolit  sekunder  tiga  belas saponin baru yang memiliki pregnenederived aglikon  menggunakan  pelarut  methanol- kloroform dari gorgonian octocoral Euniceapinta . Sangi et al. (2008) menyatakan saponin  adalah  senyawa  aktif  permukaan yang  dapat  menimbulkan  busa  jika  dikocok dalam air, hal tersebut terjadi karena saponin memiliki  gugus  polar  dan  non  polar  yang akan  membentuk  misel.  Misel  terbentuk maka  gugus  polar  akan  menghadap  ke  luar dan gugus nonpolar menghadap ke dalam dan keadaan inilah yang tampak seperti busa.

## KESIMPULAN
Akar  bahar  teridentifikasi  sebagai Rumphella sp. dan Hicksonella sp. mengandung komponen  protein yang tertinggi, kandungan logam  berat  Hg,  As,  Cu,  dan  Cd,  dibawah batas  maksimum  sedangkan  logam  berat  Pb melebihi  standar  yang  ditetapkan  BSN  dan BPOM.    Akar  bahar  mengandung  radium 0,65  Bq/kg-0,79  Bq/kg;  rendemen  terbanyak menggunkan  pelarut  metanol  dan  ekstrak akar  bahar  mengandung  metabolit  sekunder alkaloid, flavonoid, fenol hidrokuinon, steroid, triterpenoid, dan saponin.

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical Chemist.  2005.  Official  Method  of Analysis  of  The  Association  of  Official Analytical of Chemist. Arlington: Virginia (USA): Published by The Association of
Official Analytical Chemist, Inc.
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical
Chemist.  2002.  Official  Method  of Analysis  of  The  Association  of  Official Analytical of Chemist. Arlington: Virginia (USA): Published by The Association of Official Analytical Chemist, Inc
Artini  PEUD,  Astuti  KW,  Warditiani  NK.
2013.  Uji  Fitokimia  Ekstrak  Etil  Asetat Rimpang  Bangle  ( Zingiber  purpureum
Roxb). Jurnal  Farmasi  Udayana 2(4):6-
12. Astarina, NWG, Astuti KW, Warditiani NK . 2013. Skrining Fitokimia Ekstrak Metanol
Rimpang  Bangle  ( Zingiber  purpureum
Roxb.). Jurnal Farmasi Udayana 2(4):26- 31. Ayeni OO, Ndakidemi PA, Snyman RG, and Odendaal  JP.  2010.  Chemical,  biological and  physiological  indicators  of  metal pollution  in  wetlands.  Review. Scientific
Research and Essays 5(15): 1938-1949. Aziz  A.  1978.    Mengenal  kehidupan  akar bahar. Pewarta OSEANA 4(5&6):24-29.
Aziz T, Ratih CKN, Fresca A. 2009. Pengaruh pelarut  heksana  dan  etanol,  volume pelarut,  dan  waktu  ekstraksi  terhadap hasil ekstraksi minyak kopi. Jurnal Teknik
Kimia 1(16):1-8. Bai X, Chen Y, Chen W, Lei H and Shi G. 2011. Volatile constituents, inorganic elements and  primary  screening  of  bioactivity  of black  coral  cigarette  holders. Marine
Drugs 9(5):863-878. [BATAN]  Badan  Tenaga  Nuklir  Nasional. 1998.  Prosedur  Analisis  Sampel Radioaktivitas Lingkungan. Badan tenaga Nuklir  Nasional.  Jakarta:  Badan  tenaga Nuklir Nasional. [BPOM] Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2009.  Penetapan  Batas  Maksimum
Cemaran  Mikroba  dan  Kimia  dalam Makanan.  Peaturan  Kepala  BPOM  RI Nomor HK.00.06.1.52.4011 Tahun 2009. Jakarta:  Badan  Pengawas  Obat  dan
Makanan.
[BSN]  Badan  Standarisasi  Nasional.  2009. Batas Maksimum Cemaran Logam Berat dalam  Bahan  Pangan.  SNI  7387-2009. Jakarta: Badan Standarisasi Nasional.
Chan  I,  Tseng  LC,  Kâ  S,  Chang  CF  and Hwang JS. 2012. An experimental study of  the  response  of  the  gorgonian  coral Subergorgia suberosa to polluted seawater from  a  former  coastal  mining  site  in Taiwan. Zoological Studies 51(1):27-37.
Chao CH, Wen ZH, Su JH, Chen IM, Huang
JPHPI 2015, Volume 18 Nomor 1
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
HC, Dai CF, Sheu JH. 2008. Further study on anti-inflammatory oxygenated steroids from  the  octocoral Dendronephthya griffin . Steroids (73):1353-1358.
Chen  KH,  Dai  CF,  Lu  MC,  Li  JJ,  Chen  JJ,
Chang YC, Su YD, Wang WH, and Sung PJ.  2013.  Secondary  Metabolites  from the Soft Coral Sinularia arborea . Marine
Drugs (11):3372-3380.
Cheng SY, Huang KJ,  Wang SK, Duh CY. 2011. Capilloquinol:  a  novel  farnesyl  quinol from the dongsha atoll soft coral Sinularia capillosa . Marine  Drugs (9):1469-1476. doi:10.3390/md9091469.
Chung HM, Chen YH, Lin RL, Su JH, Wang
WH, and Sung PJ. 2010. Rumphellaone A, a  novel  caryophyllane-related  derivative from  the  gorgonian  coral Rumphella antipathies . Tetrahedron Letters (51):6025-
6027.
Chung HM, Su JH, Wang TL, Li JJ, Chen JJ,
Chen YH, Chang YC, Su YD, Chen YH, Fang LS, Sheu JH, Wang WH, and Sung PJ.  2013.  Rumphellclovanes  C-E,  new clovane-type  sesquiterpenoids  from  the gorgonian  coral Rumphella  antipathies .
Tetrahedron (69):2740-2744.
Chung  HM,  Wang  WH,  Hwang  TL,  Li  JJ,
Fang  LS,  Wu  YC,  and  Sung  PJ.  2014. Rumphellaones B and C, New 4,5-Seco- Caryophyllane  Sesquiterpenoids  from Rumphella antipathies . Molecules (19):12320-12327. Colorado  J,  Muñoz  D,  Marquez  D,  Marquez ME,  Lopez  J,  Thomas  OP  and  Martinez A.  2013.  Ulososides  and  urabosides- triterpenoid saponins from the caribbean marine  sponge Ectyoplasia  ferox . Molecules (18):2598-2610. Díaz-Marrero  AR,  Porras  G,  Aragón  Z,  De la  Rosa  JM,  Dorta  E,  Cueto  M,  D’Croz L, Maté J, Darias J. 2011. Carijodienone from  the  octocoral Carijoa  multiflora .
a  spiropregnane-based  steroid. Journal
Natural Products (74):292–295.
Fabricus K dan Alderslade P. 2001. Soft corals and  sea  fans:  a  comprehensive  guide  to
the thropical shallow-water genera of the central west pacific, the Indian ocean and the  red  sea.  Includex  index.    Australia: Published  by  the  Australian  Intitute  of Marine  Science  PMB,  3  Towsville  MC, Queeseland 4810.
Fang HY, Liaw CC, Chao CH, Wen ZH, Wu YC,  Hsu  CH,  Dai  CF,  Sheu,  JH.  2012. Bioactive  pregnane-type  steroids  from the soft coral Scleronephthya gracillimum . Tetrahedron (68):9694–9700. Gao  CH,  Wang  YF,  Li  S,  Qian  PY,  and  Qi SH.  2011.  Alkaloids  and  sesquiterpenes from  the  South  China  Sea  Gorgonian Echinogorgia  pseudossapo . Marine  Drugs (9):2479-2487. Goldberg  WM.  1978.  Chemical  changes accompanying  maturation  of  the connective tissue skeletons of gorgonian and antipatharian corals. Marine Biology (49):203-210. Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia . Edisi ke- 2. Padmawinata K, Soediro I, penerjemah. Terjemahan dari: Phytochemical Methods.  Bandung:  Institut  Teknologi Bandung. Hutagalung HP. 1991. Pencemaran Laut Oleh Logam  Berat  dalam  Beberapa  Perairan
Indonesia.  Puslitbang.  Oseanologi  LIPI. Jakarta. 45-59.
Isnawati  A,  Raini  M,  Alegantina  S.  2006. Standarisasi simplisia dan ekstrak etanol daun sembung ( Blumea Balsamifera (L) ) dari tiga tempat tumbuh. Media Litbang
Kesehatan 16(2):1-6. Kadir  H,  Samawi  MF  dan  Haris  A.  2013. Akumulasi  logam  berat  pb  pada  rangka dan  polip  karang  lunak Sinularia polydactyla . Torani (Jurnal Ilmu Kelautan dan Perikanan ) 23(1):1-7.
Katno.  2008.  Pengelolaan  Pasca  Panen Tanaman  Obat.  Tawangmangu:Balai Besar  Penelitian  dan  Pengembangan Tanaman  Obat  dan  Obat  Tradisional. Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan. Departemen Kesehatan RI. Konishi  K.  1981.  Alconarian  spiculite:
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
Limestone  of  soft  coral.  Proceedings of  the  fourth  international  coral  reef symphosium I. Manila Filipina (PK ) 643- 649. Kumalasari,  E.  dan  Sulistyani  N.  2011. Aktivitas  Antifungi  Ekstrak  Etanol Batang  Binahong  ( Anredera  cordifolia (Tenore)  Steen.)  Terhadap  Candida albicans serta Skrining Fitokimia. Jurnal
Ilmiah Kefarmasian 1 (2):51–62.
Mahur  AK,  Khan  MS,  Naqvi  AH,  Prasad R,  and  Azam  A.  2008.  Measurement of  effective  radium  content  of  sand samples collected from Chatrapur beach, Orissa, India using track etch technique. Radiation Measurements (43):520-522. Manuputty AEW. 2008. Isis hippuris Linnaeus 1758:  oktokoral  penghasil  anti  virus. Oseana 33(1):19-24. Reimão JQ, Migotto AE, Kossuga MH, Berlinck
RGS, Tempone AG. 2008. Antiprotozoan activity  of  Brazilian  marine  cnidarian extracts  and  of  a  modified  steroid  from the octocoral Carijoa riisei. Parasitol Res (103):1445–1450.
Rochyatun  E,  Kaisupy  MT  dan  Rozak  A. 2006.  Distribusi  logam  berat  dalam  air dan  sedimen  di  perairan  muara  sungai Cisadane. Makara Sains 10(1):35-40. Rochyatun E dan Rozak A. 2007. Pemantauan kadar  logam  berat  dalam  sedimen  di perairan  Teluk  Jakarta. Makara  Sains 11(1):28-36.
Sangi  M,    Runtuwene  MRJ,  Simbala  HEI, Makang  VMA.  2008.  Analisis  fitokimia tumbuhan  obat  di  kabupaten  Minahasa
Utara. Chemical Program 1(1):47-53. Sun ZH, Cai YH, Fan CQ, Tang GH, Luo HB and Yin S. 2014. Six new tetraprenylated alkaloids  from  the  South  China  Sea
Gorgonian Echinogorgia  pseudossapo . Marine Drugs (12):672-681. 1Sung  PJ,  Chuang  LG,  Kuo  J,  Chen  JJ,  Fan TY,  Li  JJ,  Fang  LS,  and  Wang  WH. 2007.  Rhumphellolides  A-F,  six  new caryophyllane-related derivatives from  the  formosan  gorgonian  coral
Rumphella  antiphaties . Chemicals  and Pharmasceutical  Bulletin 55(9):1296- 1301. 2Sung  PJ,  Chuang  LG,  Kuo  J,  Fan  TY,  and Hu WP. 2007. Rhumphellatin A, the first chloride-containing  caryophyllane-type norsesquiterpenoid  from Rumphella antiphaties . Tetrahedron Letters (48):3987-
3989.
Susanti AD, Ardiana D,  Gumelar GP, Bening
YG.  2012.  Polaritas  pelarut  sebagai pertimbangan  dalam  pemilihan  pelarut untuk  ekstraksi  minyak  bekatul  dari bekatul  varietas  ketan  ( Oriza  sativa glatinosa ). Simposium Nasional Rekayasa Aplikasi  Perencanaan  dan  Industri  XI.
Surakarta 8-14.
Sutarman. 2003. Distribusi radium dari dalam kerak bumi ke lingkungan. Buletin Alara 5(1):39– 49. Snyder  CR,  Kirkland  JJ,  Glajach  JL.  1997. Practical  HPLC  Method  Development. second    dition.  New  York  (US):John Wiley dan Sons, Lnc.
Tjokronagoro SM. 2004. Peranan Radioterapi dalam penanggulangan penyakit kanker.
[Pengukuhan  Guru  Besar].  24  April 2004.  Yogyakarta:  Fakultas  Kedokteran
Universitas Gadjah Mada.
Tuti HMIY. 2014. Keberadaan gorgonian (akar bahar) di perairan Maumere, Kabupaten Sikka.    Monitoring  Kesehatan  terumbu karang  dan  ekosistem  terkait.  Perairan Kabupaten Sikka 2013.  Pusat Penelitian Oseanografi  Lembaga  Pengetahuan Indonesia, Jakarta.
Wang SK, Puu SY, Tang H, and Duh CY. 2012. New 19-oxygenated steroids from the soft coral Nephthea  chabrolli . Marine  Drugs
10(6):1288-1296.
Wang SK, Puu SY, Tang H, and Duh CY. 2013.
New steroids from the soft coral Nephthea chabrolli. Marine Drug s (11):571-580.
Wang  Z,  Tang  H,  Wang  P,  Gong  W,  Xue  M, Zhang  H,  Liu  T,  Baoshu  Liu,  Yi  Y  and Zhang W. 2013. Bioactive polyoxygenated steroids  from  the  south  china  sea  soft
JPHPI 2015, Volume 18 Nomor 1
Komponen Kimia dan Bioaktif Akar Bahar Gorgonian, Teffu et al.
coral, Sarcophyton sp. Marine  Drugs (11):775-787.
Widaningrum,  Miskiyah  dan  Suismono. 2007.  Bahaya  kontaminasi  logam  berat dalam sayuran dan alternatif pencegahan cemarannya. Buletin Teknologi Pascapanen Pertanian (3):16-27. Wikanta  T,  Hedi,  Januar  I,  Nursid  M.  2005. Uji  aktivitas  antioksidan,  toksisitas dan  sitotoksisitas  ekstrak  alga  merah Rhodymenia  palmata. Jurnal  Penelitian
Perikanan Indonesia 11(4):41-49. Winarno  FG.  2008. Kimia  Pangan  dan  Gizi . Bogor: M-Brio Press.
Van Dyck S, Gerbaux P, and Flammang P. 2010.
Qualitative  and  quantitative  saponin contents in five sea cucumbers from the
Indian Ocean. Marine Drugs (8):173-189 Zhao  HY,  Shao  CL,    Li  ZY,  Han  L,  Cao  F and Wang CY. 2013. Bioactive pregnane steroids from a south china sea gorgonian Carijoa sp. Molecule (18):3458-3466.