Abstrak —Pada  penelitian  ini  telah  dilakukan  proses pemindaian dari jamur kontaminan ampas tebu. Penelitian ini bertujuanuntuk  mendapatkan  jamur  penghasil  enzim  selulase dan  mengetahui  pengaruh  pH  terhadap  produktivitas  enzim selulase  dari  jamur  hasil  pemindaiankontaminan  ampas  tebu yang  didapatkan.  Hasil  pemindaian  diperoleh  2  jamur  yang dapat  menghasilkan  enzim  selulase.  Aktivitas  enzim  selulase dapat  diketahui  dengan  mengukur  gula  pereduksi  dari  hasil hidrolisis  substrat  selulosa  (CMC) dengan  menggunakan metode DNS. Produksi enzim selulase Jamur Galur 1 optimum pada  hari  ke-8  dan  Jamur  Galur  2  optimum  pada  hari  ke-7 dengan  nilai  rasio  perbandingan  konsentrasi  glukosa  dan biomassa  sebesar  8096,65 dan  9672,49  untuk  masing-masing Jamur. Derajat keasaman (pH) berpengaruh terhadap produksi enzim  selulase  dimana  untuk  kedua  jamuroptimum  pada  pH 6.0  dengan  nilai  rasio  perbandingan  konsentrasi  glukosa dengan biomassa sebesar 6147,73 dan 8725,10.
Kata  Kunci:pemindaian,  jamur,  ampas  tebu,  aktivitas selulase, DNS
I. PENDAHULUAN mpas  tebu  (bagasse)  adalah  sisa  batang  tebu (Saccharum  oficinarum)  setelah  dihancurkan  dan diekstraksi  untuk  diambil  niranya.  Ampas  tebu merupakan  limbah  tebu  yang  melimpah  dan  dapat  mencapai 30-35%  dari  berat  tebu  sehingga  terjadi  kelebihan  ampas  di beberapa  pabrik  gula  [1].  Ampas  tebu  mempunyai  ukuran panjang  serat  antara  1,7  sampai  2  mm  dengan  diameternya sekitar  20  mikro.  Ampas  tebu  memiliki  kandungan  air  48- 52%, gula rata-rata 3,3%, dan serat rata-rata 47,7%. Serat pada ampas  tebu  tidak  dapat  larut  dalam  air  dan  sebagian  besar terdiri  dari  selulosa,  pentosan,  dan  lignin  [2].  Selulosa merupakan  sumber  glukosa  yang  digunakan  sebagai  sumber karbon pada industri fermentasi yang melibatkan mikroorganisme.
Perubahan  selulosa  menjadi  glukosa  dapat  terjadi  baik secara kimia, maupun secara enzimatis. Jika dilakukan dengan cara  kimia  dapat  menimbulkan  limbah  dari  zat  kimia  yang digunakan,  sedangkan  bila  dilakukan  secara  enzimatis  tidak menimbulkan  pencemaran  karena  enzim  yang  digunakan mudah terdegradasi. Menurut Taherzadeh dan Karimi (2007), reaksi enzimatis memiliki beberapa keuntungan dibandingkan hidrolisis  asam,  antara  lain:  tidak  terjadi  degradasi  gula  hasil hidrolisis, dapat dilakukan pada temperatur ruang dan tekanan
atmosfer, berpotensi memberikan hasil yang tinggi, dan biaya pemeliharaan  peralatan  relatif  rendah  karena  tidak  ada  bahan yang  korosif,  selain  itu  hidrolisis  enzimatis  ini  tidak menggunakan asam sehingga ramah lingkungan.
Enzim  yang  digunakan  untuk  mengubah  selulosa  menjadi glukosa  adalah  enzim  selulase.  Enzim  ini  dapat  diproduksi oleh  mikroorganisme  berupa  bakteri  ataupun  jamur.  Untuk mendapatkan  jamur  penghasil  enzim  selulase,  dilakukan pemindaian  dari  jamur-jamur  yang dapat  tumbuh pada  media yang mengandung selulosa seperti kayu dan ampas tebu yang terkontaminasi.
Salah satu jenis tebu yang ampasnya sering ditumbuhi oleh jamur  kontaminan  adalah  tebu  yang  ukuran  batangnya  besar yang sari tebunya dikonsumsi sebagai  minuman  segar.Jamur- jamur  kontaminan  ampas  tebu  yang  dapat  bertahan  lama tumbuh  mengindikasikan dapat  menghasilkan enzim  selulase. Hal  ini  dikarenakan  enzim  selulase  dapat  menghidrolisa selulosa  yang  ada  pada  ampas  tebu  untuk  menghasilkan glukosa  sebagai  nutrisi  sumber  karbon  dari  pertumbuhan jamur.
Pertumbuhan  jamur  tentu  dipengaruhi  beberapa  faktor seperti substrat, temperatur, dan pH media pertumbuhan yang digunakan. Jamur akan tumbuh dengan baik apabila ia berada di lingkungan yang mendukung.
Sebelumnya,  Yuniar  [3],  telah  melakukan  pemindaian jamur selulolitik dari tandan kosong kelapa sawit di Bandung yang  menunjukkan  aktivitas  selulase  dengan  substrat  CMC. Selain  itu,  Hardianty  [4] juga  melakukan  isolasi  dan  seleksi jamur selulolitik dari Hutan Arboretum Universitas Riau yang menunjukkan  aktivitas  selulase  dengan  adanya  zona  bening pada  media pertumbuhan.  Begitu juga  dengan  Roza  [5] yang melakukan  isolasi  dan  seleksi  jamur  seluloliik  dari  tanah gambut di perkebunan karet desa Rimbo Panjang, Riau.
Telah  banyak  dilakukan  penelitian  mengenai  pemindaian jamur  penghasil  enzim  selulase.  Pada  penelitian  ini,  akan dilakukan pemindaian jamur dari kontaminan ampas tebu yang kemudian diuji untuk menetahui aktivitas selulasenya.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan jamur penghasil  enzim  selulase  dan  mengetahui  pengaruh  pH terhadap  produktivitas  enzim  selulase  dari  jamur  hasil pemindaian  kontaminan  ampas  tebu  yang  diuji  pada  hari optimum yang telah didapatkan dari perlakuan sebelumnya.

## Pemindaian Jamur Kontaminan Ampas Tebu untuk Produksi Enzim Selulase
Ismi Zahriadan Refdinal Nawfa
Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia
e-mail : refnawfa@chem.its.ac.id
A

## II. URAIAN PENELITIAN

## A. Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  antara  lain:  stirer,  cawan  petri, parafilm,  botol  semprot  dan  peralatan  gelas  seperti  gelas beker,  pipet  volume,  pipet  ukur,  pipet  tetes,  labu  ukur, pengaduk  kaca,  kaca  arloji  serta  corong  pisah.  Sedangkan instrumen  yang digunakan adalah hot plate dengan pengaduk magnetik,  neraca  analitik,  digital  pH  meter, laminary  flow , inkubator,  sentrifuse,  spektrofotometer  UV-Vis. Bahan-bahan yang  digunakan  antara  lain:kontaminan  ampas  tebu,  Potato Dextrose Agar (PDA), Potato Dextrose Broth (PDB), glukosa, aquades,  kloramfenikol, Carboxymethylcellulose (CMC), etanol,  natrium  hidroksida  (NaOH),  asam  3,5-dinitrosalisilat (reagen DNS), dan natrium kalium tartarat (garam Rochelle).

## B. Prosedur Kerja

## Pemindaian Jamur Kontaminan Ampas Tebu
Pertama,  ampas  tebu  dibiarkan  beberapa  hari  sampai ditumbuhi  jamur.  Kemudian,  permukaan  ampas  tebu  yang ditumbuhi  jamur  dipindahkan  dengan  menggunakan  penjepit. Kemudian dicelupkan dalam air steril. Suspensi ini kemudian diambil  kurang  lebih  2  mL  dan  dilakukan  pengenceran pada 10 -1 ,  10 -2 dan  10 -3 .  Suspensi  hasil  pengenceran  ini  diambil  2 mL  dan  diinokulasikan  ke  dalam  media  pertumbuhan  PDA yang telah  mengandung  khloramfenikol 2%  supaya  tidak  ada mikroorganisme  lain  yang  tumbuh  selain  jamur.  Biakan diinkubasi  selama  3-7  hari  dalam  temperatur  ruang.  Koloni yang  tumbuh  diamati  perbedaannya,  masing-masing  koloni yang berbeda dipindahkan ke dalam media pertumbuhan yang lain. Biakan-biakan baru ini kemudian diinkubasi lagi selama 3-7  hari.  Kemudian  diamati  pertumbuhannya.  Apabila  koloni yang  terbentuk  masih  bercampur  dengan  koloni  lain,  maka dilakukan  pemisahan  lagi.  Kemudiaan  diinkubasi  selama  7 hari.  Demikian  seterusnya  sampai  diperoleh  biakan  yang terdiri  dari  satu  macam  koloni  (kultur  murni).  Selanjutnya terhadap  kultur  murni  yang  diperoleh,  dipindahkan  dan ditumbuhkan ke dalam media cair PDB.
Koloni  jamur  penghasil  enzim  selulase  diperoleh  dengan menumbuhkan  koloni  tunggal  terpilih  dalam  media  yang mengandung  selulosa  (CMC)  yang  kemudian  diuji menggunakan metode DNS dan menghasilkan nilai absorbansi tertentu.
Kemudian diidentifikasi jamur yang telah didapatkan untuk mengetahui  jenis  jamur  dan  dilakukan  pertumbuhan  untuk mengetahui kemampuan tumbuh masing-masing jamur dalam media  yang  mengandung  glukosa  dan  selulosa  (CMC)  dan produksi enzim selulasenya.

## Uji Aktivitas Enzim Selulase dari Jamur 1 dan 2
Setelah  didapatkan  jamur  hasil  pemindaian  kontaminan ampas tebu, dilakukan uji aktivitas selulase untuk mengetahui adanya  enzim  selulase  dengan  cara  menginokulasikan suspensi  spora  pada  media  cair  PDB  yang  mengandung  2% CMC.  Pada  hari  ke-4,  dilakukan  pemanenan  dari  masing- masing  jamur  dan  diuji  aktivitas  selulasenya  dengan  metode DNS.

## Uji Aktivitas Enzim Selulase
Sebelum  dilakukan  uji  aktivitas  selulase,  dibuat  kurva standar  glukosa  untuk  mengetahui  hubungan  antara konsentrasi  dengan  absorbansi  yang  akan  didapatkan  dari penelitian  ini.  Dibuat  larutan  glukosa  standar  dengan konsentrasi masing-masing 0, 100, 200, 300, 400, 500 dan 600 ppm. Masing-maisng larutan diambil 1 mL, lalu ditambahkan 3  mL  pereaksi  DNS.  Kemudian,  masing-maisng  larutan divorteks dan dipanaskan dalam air mendidih selama 5 menit. Setelah  dingin,  masing-masing  larutan  diencerkan  2  kali  dan divorteks kembali. Diukur absorbannya dengan spektofotometer  pada  panjang  gelombang  540  nm,  kemudian buat  persamaan  linearnya  sebagai  kurva  standar.  Untuk mengetahui  aktivitas  enzim  selulase  dilakukan  pengukuran kadar  gula  pereduksi  pada  sampel  dengan  cara  mengambil  1 mL sampel kemudian ditanbahkan 3 mL pereaksi DNS. Proses selanjutnya  sama  seperti  pada  larutan  glukosa  standar, kemudian  nilai  absorbansi  pengukuran  yang  diperoleh  diplot pada kurva standar.

## Penentuan  Waktu  Produksi  Enzim  Selulase  Jamur Kontaminan
1  mL  suspensi  sporauntuk  setiap  jamur  yang  didapatkan, ditumbuhkan  pada 14  erlenmeyer  100  mL  yang  berisi20  mL media  cair  PDB  yang  mengandung  2%  CMC.  Kemudian diinkubasi  selama  14  hari  dengan  penyamplingan  setiap  hari dengan  cara  diambil  1  erlenmeyer  setiap  hari.  Selanjutnya dipanen  dan  disentrifus  selama  15  menit  dengan 3000rpm.Setelah  itu,  dilakukan  uji  aktivitas  selulase  dengan mengukur kandungan glukosa yang dihasilkan dengan metode DNS, dan ditimbang biomassa yang didapatkan menggunakan neraca analitik.

## Pengaruh pH terhadap Produksi Enzim Selulase
Setelah didapatkan hari optimum jamur kontaminan ampas tebu  untuk  memproduksi  enzim  selulase,  dilakukan  uji  untuk mendapatkan  pH  optimum. pH  optimum  ditentukan  dengan cara sebagai berikut: disiapkan media PDB yang mengandung 2%CMC dengan pH  berbeda yaitu  5.0;  5.5;  6.0;  6.5;  7.0  dan 7.5  sebanyak  20  mL  untuk  setiap  erlenmeyer.  Kemudian diinokulasikan  spora  jamur  dan  diinkubasi  pada  suhu  kamar selama  waktu  optimum  untuk  masing-masing  jamur  yang didapatkan.  Selanjutnya  dipanen  dan  disentrifus  selama  15 menit  dengan  3000rpm.  Dilakukan  uji  kandungan  enzim selulasenya  pada  supernatan  yang  didapatkan  dengan  uji kandungan kadar gula pereduksi metode DNS, dan ditimbang biomassa yang didapatkan menggunakan neraca analitik. Dari  hasil  ini  diperoleh  jamur-jamur  yang  tumbuh  pada  pH tertentu dan waktu produksi enzim selulase tertentu.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A.  Hasil Pemindaian Jamur
Biakan jamur diperoleh dengan mensuspensikan ampas tebu yang ditumbuhi jamur ke dalam air steril dengan pengenceran sampai  10 -3 ,  yang  dibiakkan  dalam  medium  agar  PDA  yang mengandung  klorafenikol  dalam  cawan  petri  yang  ditutup dengan parafilm. Klorafenikol digunakan sebagai anti-bakteri, agar  pertumbuhan  jamur  tidak  terganggu  dan  terkontaminasi dengan adanya bakteri.
Setelah biakan diinkubasi selama 2-7 hari, terlihat bahwa koloni pada biakan 10 -1 dan 10 -2 kali pengenceran masih terlalu rapat sehingga terlalu sulit untuk dilakukan isolasi. Sedangkan koloni yang tumbuh pada biakan yang berasal dari suspensi dengan pengenceran 10 -3 kali tidak terlalu rapat sehingga lebih mudah dibedakan dan isolasi dapat dengan mudah dilakukan.
Dari  isolasi  ini  diperoleh  dua  macam  jamur  yang  berbeda yang  berhasil  diisolasi  dalam  bentuk  kultur  murni.  Jamur- jamur  yang  berhasil  diisolasi  ini  diberi  kode  Jamur  Galur  1 dan 2 yang data dilihat pada Gambar 3.1.

## Gambar 1 Hasil  Pemindaian  Jamur  Kontaminan  Ampas  Tebu (a) Jamur 1, (b) Jamur 2

## B. Hasil Uji Aktivitas Enzim Selulase Jamur 1 dan 2
Setelah  didapatkan  2  jamur  hasil  pemindaian  kontaminan ampas tebu, dilakukan uji aktivitas enzim selulase Jamur 1 dan Jamur  2.  Suspensi  spora  diinokulasikan  selama  4  hari, kemudian  Jamur  1  dan  Jamur  2  dipanen  dan  diuji  aktivitas selulasenya  dengan  metode  reagen  DNS  menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Dari hasil pengujian ini didapatkan nilai absorbansi tertentu yang kemudian dimasukkan ke dalam persamaan  garis  standar  glukosa y = 0,0002x + 0,0019 . Hasil ini  mengindikasikan bahwa Jamur 1 dan Jamur 2 dapat menghasilkan enzim selulase yang ditunjukkan pada Tabel 31.
Tabel 1 Hasil Uji  Aktivitas Enzim  Selulase Jamur 1 dan  Jamur 2 pada Hari ke-4 A C (ppm) Biomassa (gram) Jamur Galur 1 0,0355 168 0,0260 Jamur Galur 2 0,0465 223 0,0299

## C. Penentuan Waktu Produksi Enzim Selulase
Menurut  Galbe  &  Zalcchi  [6],  Proses  degradasi  selulosa (hidrolisis  selulosa)  dapat  dilakukan  secara  kimiawi (menggunakan  asam  atau  basa)  atau  secara  biologis menggunakan  mikroorganisme  selulotik  yang  berasal  dari bakteri  ataupun  jamur.  Hidrolisis  sempurna  selulosa  akan menghasilkan  monomer selulosa  yaitu glukosa, dan  hidrolisis tak sempurna akan menghasilkan disakarida dari selulosa yang disebut selobiosa.
Dari Gambar 3.2. dapat diketahui nilai aktivitas selulase masing-masing jamur. Kurva diatas menunjukkan konsentrasi gula pereduksi yang dihasilkan dari hidrolisis selulosa (CMC) menjadi glukosa naik mulai hari pertama sampai hari tertentu untuk setiap jamurnya. Pada Jamur Galur 1, konsentrasi glukosa naik sampai hari ke-9 dengan nilai 425.5 ppm, yang kemudian mulai menurun setelah hari ke-10 sampai hari ke- 14. Pada Jamur Galur 2, puncak maksimal kandungan glukosa
didapatkan juga pada hari ke-9. Kurva yang memiliki model parabola, menunjukkan yang sesuai dengan teori. Menurut Crueger [7], kurva pertumbuhan jamur memiliki 4 fase, yaitu: fase lag, fase log, fase stasioner, dan fase kematian dengan bentuk parabola.
Gambar 2
Kurva Waktu Produksi Enzim Selulase Jamur 1 dan 2
Tabel 2 Rasio  Perbandingan  Konsentrasi  Glukosa  dengan Biomassa Hari ke- Rasio Jamur Galur 1 Rasio Jamur Galur 2 0 0 0 1 4405,59 4869,11 2 3721,97 3955,48 3 4744,09 4831,08 4 6461,54 7458,19 5 7794,12 6819,37 6 7831,05 7072,89 7 7560,00 9672,49 8 8096,65 9158,51 9 7115,36 7239,35 10 6103,05 7123,89 11 4630,12 7066,42 12 3923,71 5930,45 13 3364,96 5403,23 14 2377,68 4665,99
Tabel 3.2. menunjukkan rasio hasil bagi konsentrasi glukosa dengan  biomassa  yang  dihasilkan.  Aktivitas  selulase  untuk Jamur  Galur  1  optimum  pada  hari  ke-8  yang  ditunjukkan dengan nilai rasio sebesar 8096,65 yang memiliki nilai paling tinggi  diantara  hari  lainnya,  dimana  pada  hari  sebelum  dan sesudah hari ke-8 nilai aktivitas selulase berada dibawah hari ke-8.  Begitu  juga  dengan  Jamur  Galur 2  yang  memiliki aktivitas  selulase  optimum  pada  hari  ke-7  dengan  nilai  rasio sebesar  9672,49.Nilai  optimum  aktivitas  selulase  didapatkan dari  rasio  perbandingan  konsentrasi  glukosa  yang  dihasilkan dengan biomassa yang menunjukkan  nilai kemampuan enzim selulase menghidrolisis selulosa menjadi glukosa.
Dari  kurva  dapat  diketahui  bahwa  jamur  langsung  tumbuh terlihat  setelah  dilakukan  inokulasi  spora.  Hal  ini menunjukkan  media  pertumbuhan  cocok  sehingga  tidak membutuhkan  fase  lag  atau  penyesuaian  untuk  kedua  jamur yang langsung ke fase pertumbuhan di percepat. Pada hari ke-
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0 200 400 600 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314 Bi om as sa (g ra m ) Ko ns en tr as i g lu ko sa (p pm ) Waktu (hari)
Jamur Galur 1
Jamur Galur 2
Biomassa Jamur Galur 1 Biomassa Jamur Galur 2 a b
4  sampai  hari  ke-11  terjadi  fase  pertumbuhan  eksponensial untuk  Jamur  Galur  1,  dan  pada  hari  ke-4  sampai  hari  ke-9 untuk  Jamur  Galur  2.  Penurunan  kandungan  glukosa  terjadi pada  hari  ke-10  sampai  hari  ke-14  akibat  laju  pembentukan glukosa  tidak  sebanding  dengan  biomassa  yang  tumbuh, dimana semakin banyak biomassa yang tumbuh, maka ia akan membutuhkan  lebih  banyak  glukosa.  Fase-fase  pertumbuhan tersebut  sangat  berpengaruh  terhadap  enzim  yang  dihasilkan oleh mikroorganisme untuk membantu pencernaan makanannya. Jamur  Galur  1  memiliki  biomassa  paling  besar pada hari ke-11 dengan massa 0,0757 gram dan pada hari ke-9 dengan massa 0,0681 gram untuk Jamur Galur 2.

## E.  Hasil Pengaruh pH terhadap Produksi Enzim Selulase
Proses selanjutnya uji dengan variasi pH pada media untuk mengetahui pengaruh pH terhadap produksi enzim selulase. Pada penelitian ini diberikan variasi pH dengan nilai pH 5.0; 5.5; 6.0; 6.5; 7.0 dan 7.5.Variasi pH dilakukan dengan menambahkan beberapa tetes NaOH dan HCl yang kemudian diukur pH media menggunakan pH meter pada media cair PDB yang mengandung CMC.
Efek pH terhadap  pertumbuhan adalah jamur  yang tumbuh pada  media  dengan  pH  optimum  akan  tumbuh  dengan  baik, dimana  jamur  ini  nanti  yang  akan  menghasilkan  enzim selulase.  Enzim  merupakan  suatu  protein  yang  memiliki aktifitas  biokimiawi  sebagai  katalis  suatu  reaksi sehingga enzim ini sangat rentan terhadap kondisi lingkungan.  Adanya perubahan  konsenrasi  subtrat  atau  pH  lingkungan  akan mengakibatkan  aktivitas  enzim  ikut  mengalami  perubahan meskipun  masih  banyak  juga  hal  lain  yang  dapat mempengaruhi  aktivitas  enzime  seperti  temperatur  atau komposisi  media.  Setiap  enzim  yang  mempunyai  pH  dan temperatur  tertentu  yang  menyebabkan  aktifitasnya  mencapai nilai  optimum.  Kondisi  pH  dan  temperatur  yang  optimum akan mendukung enzim dalam melakukan katalisa suatu reaksi dengan  baik.  Sedangkan  temperatur  dan  pH  yang  kurang sesuai  akan  mengakibatkan  kerusakan  atau  tidak  aktifnya protein dalam suatu enzim sehingga menyebabkan fungsi dan aktifitas dari enzim tersebut berkurang. Hasil uji pengaruh pH terhadap aktivitas enzim selulase, terlihat pada Gambar 3.3.
Setelah  1  mL  suspensi  spora  diinokulasikan  ke  dalam  20 mL  media  cair  PDB  yang  telah  mengandung  CMC  dengan variasi pH, diinkubasi Jamur Galur 1 dan Jamur Galur 2 pada hari  optimum  masing-masing  jamur.  Seharusnya,  jamur dipanen  pada  hari  optimum  yang didapatkan;  yaitu  pada  hari ke  8  untuk  Jamur  Galur  1  dan  pada  hari  ke  7  untuk  Jamur Galur 2, tetapi pada penelitian ini dipanen pada hari ke 5 dan pada  hari  ke  7  untuk  masing-masing  jamur.  Hal  ini dikarenakan  hasil  perhitungan  awal  didapatkan  hari  ke  5  dan hari  ke  7,  tetapi  setelah  dikaji  kembali,  didapatkan  hari  ke  8 dan  hari  ke  7 untuk  masing-masing  jamur  sehingga  data variasi  pH  yang  didapatkan  tidak  pada  hari  optimum pertumbuhan  jamur. Hasil uji  pengaruh pH terhadap  aktivitas enzim selulase, terlihat pada Gambar 3.3.
Gambar  3 Kurva  Pengaruh Variasi  pH  terhadap  Produksi  Enzim Selulase
Jamur  yang  telah  tumbuhdipanen,  disentrifus  dan  diuji aktivitas  dengan  menggunakan  reagen  DNS.Nilai  aktivitas selulase  merupakan  nilai  kemampuan  enzim  selulase mendegradasi  selulosa  menjadi  glukosa  dalam  satuan  jam. Nilai aktivitas  selulase  adalah  kemampuan  enzim  selulase untuk menghidrolisis substrat selulosa menjadi gula pereduksi, glukosa. Tabel 3 menunjukkan rasio perbandingan konsentrasi glukosa  yang  didapatkan  dengan  biomassa  untuk  mengetahui pH optimum untuk masing-masing jamur.
Tabel 3 Pengaruh  pH  terhadap  Rasio  Perbandingan Konsentrasi Glukosa dengan Biomassa
pH Rasio Jamur Galur 1 Rasio Jamur Galur 2 5 6142,56 6656,12 5,5 6045,05 7589,47 6 6147,73 8725,10 6,5 5281,03 7424,24 7 4385,34 6572,40 7,5 1516,39 5841,35
Dari Gambar 3.3.,  diketahui  aktivitas selulase  kedua jamur optimum  pada  pH  6.0  dengan  nilai  rasio  perbandingan konsentrasi  glukosa  dengan  biomassa  sebesar  6147,73  dan 8725,10.Hasil  ini  sejalan  dengan  penelitian  selulase sebelumnya. Catriona [8] melaporkan bahwa aktivitas selulase yang dihasilkan dari beberapa Bacillus optimum pada rentang pH 5.0– 7.0. Immanuel [9] melaporkan bahwa enzim selulase dari Cellulomonas , Bacillus ,  and Micrococcus spp., menghidrolisis  substrat  pada  rentang  pH  4.0  – 9.0,  dengan aktivitas maksimum pada pH 7,0. Selain itu, Gupta [10], juga menuliskan pH optimum untuk jamur hasil isolasi dari sampel tanah di India, menunjukkan aktivitas selulase pada pH media 4.0 – 6.0.
Biomassa  yang  didapatkan  dari  produksi  enzim  selulase dengan  pengaruh  pH  diketahui  tinggi  pada  pH  optimum masing-masing Jamur, yaitu; pada pH 5.5 untuk Jamur Galur 1 dengan  massa  0,0555  gram  dan  pada  pH  6.0  untuk  Jamur Galur  2  dengan  massa  0,0502  gram.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  pertumbuhan  miselium  dapat  mempengaruhi  aktivitas selulase.  Miselium  yang  lebih  banyak  akan  menghasilkan
0 0.02 0.04 0.06 0 100 200 300 400 500 5 5.5 6 6.5 7 7.5 Bi om as sa (g ra m ) Ko ns en tr as i g lu ko sa (p pm ) pH Jamur Galur 1 Jamur Galur 2 Biomassa Jamur Galur 1
Biomassa Jamur Galur 2
enzim  selulase  yang  lebih  banyak  pula,  sehingga  aktivitas selulase semakin tinggi.

## IV. KESIMPULAN
Didapatkan hasil pemindaian jamur kontaminan ampas tebu yang  diberi  kode  Jamur Galur 1  dan  Jamur  Galur  2.Nilai aktivitas  selulaseJamur  Galur  1  optimum  pada  hari  ke-8  dan Jamur  Galur  2  optimum  pada  hari  ke-7  dengan  nilai  rasio perbandingan  konsentrasi  glukosa  dan  biomassa  sebesar 8096,65 dan  9672,49  untuk  masing-masing  Jamur. pH optimum  untuk  kedua  jamur  pada  pH  6.0  dengan  nilai  rasio perbandingan  konsentrasi  glukosa  dengan  biomassa  sebesar 6147,73 dan 8725,10.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Drs.  Refdinal Nawfa,  M.Si  selaku  dosen  pembimbing  sekaligus  dosen  wali yang telah berkenan  membimbing,  memberikan  pengetahuan, saran  dan  nasihat, rekan-rekan  di  kelompok  riset mikroorganisme serta  semua  pihak  yang  telah  berperan  baik secara langsung maupun tidak langsung dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Christiyanto M. dan  Subrataa. 2005.  Perlakuan Fisik dan Biologis  pada  Limbah  Industri  Pertanian  terhadap Komposisi Serat. Semarang: Universitas Diponegoro.
[2] Husin,  A.  A.  2007.  Pemanfaatan  Limbah  untuk  Bahan Bangunan.
[3] Yuniar,  D.  2013.  Skrining  dan  identifikasi  Kapang Selulolitik pada Proses Vermikomposting Tandan Kosong Kelapa Sawit (TKKS). Jember: Universitas Jember.
[4] Hardianty,  D.  I.,  Roza,  R.  M.,  dan  Martina,  A.  2013. Isolasi  dan  Seleksi  Jamur  Selulolitik  dari  Hutan Arboretum  Universitas  Riau.  Pekanbaru:  Kampus Binawidya.
[5] Roza,  R.  M.,  Martina,  A.,  Fibrianti,  B.  L.,  Zul  D.,  dan Ramadhan N. 2013. Isolasi dan Seleksi Jamur Selulolitik dari  Tanah  Gambut  di  Perkebunan  Karet  Desa  Rimbo Panjang Kabupaten Kampar Riau. Pekanbaru: Universitas Riau.
[6] Galbe,  M.,  Zacchi,  G.,  dan  Sassner,  P.  2007.  Techno- economic  Evaluation  of  Bioethanol  Production  from Three  Different  Lignocellulosic  Materials.  Journal Biomass & Energy, Vol. 32, p. 422-430.
[7] Crueger, A. W. dan Crueger.1984. In: T. D. Brock. (ed.), Biotechnology:  A  Textbook  of  Industrial  Microbiology, Minuaer Associates, Sunderland, p. 12-50.
[8] Catriona  A. W.,  Sheila I.  M.,  dan Thomas, M.  W.  1994. Characterization  of  a  β-D-Glucosidase  from  the Anaerobic  Rumen  Fungus  Neocallimastix  frontalis  with Particular Reference to Attack on Cello-Oligosaccharides. J. Biotechnol. 37: 217-227.
[9] Immanuel,  S.  2006.  Latar  Belakang  Pengembangan Biodiesel, sinarharapan.co.id
[10] Gupta, C., Jain, P., Kumar, D., A. K. Dixit dan R. K. Jain .  2015.  Production  of  Cellulase  Enzyme  from  Isolated Fungus and Its  Application  as Efficient  Refining  Aid for
Production  of  Security  Paper.  Central  Pulp  and  Paper Research Institute, India,  p. 11-19.