Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia, 5 (1) (2023) 15-23
Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia
Website: https://journal.ubb.ac.id/index.php/stannum doi: 10.33019/jstk.v5i1.3845 Research paper
Liquid Soap with Active Ingredients of Methanol Extract of Sambang Darah Leaves ( Excoecaria cochinchinensis L.): Formulation, Characterization, and Antibacterial Activity
Sabun Cair Berbahan Aktif Ekstrak Metanol Daun Sambang Darah ( Excoecaria cochinchinensis L.): Formulasi, Karakterisasi, dan Aktivitas Antibakteri
Fatkhurrachman 1 , Avidlyandi 1 , Devi Nurhasana 2 , Dina Erliana 2 , Munifilia Eka Sari 2 , Charles Banon 1 , Risky Hadi Wibowo 3 , & Morina Adfa 1, 4*
1) Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Bengkulu Jalan WR. Supratman, Kandang Limun, Kota Bengkulu 38371
2) Magister Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Bengkulu
3) Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Bengkulu
4) Pusat Riset Produk Bahan Alam dan Material Fungsional, Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat (LPPM) Universitas Bengkulu
* Corresponding author: morina@unib.ac.id
Received: February 8, 2023,  Accepted: April 28, 2023  Published: April 30, 2023

## ABSTRACT
The  methanol  extract  of  sambang  darah  leaves  ( Excoecaria  cochinchinensis L.)  contains  flavonoids, saponins, tannins and triterpenoids which have the potential as antibacterial compounds.  The goal of this research is to produce liquid soap that preparations with four formulas by varying the methanol extract  of  sambang  darah  leaves  as  the  active  ingredient,  characterizing,  and  understanding  its antibacterial  activity.  Organoleptic  tests,  foam  stability,  pH,  specific  gravity,  and  viscosity  were  all used to characterize liquid soap. The best results were obtained with liquid soap formulation 3 (3 g extract), which had foam stability of 84.10%, a pH of 9.62, specific gravity of 1.03 g/mL, and viscosity of  492.933 cP. The organoleptic test revealed that the liquid soap was a homogeneous viscous liquid with  a  blackish-brown  color  and  a characteristic extract odor. The inhibition zone  for  antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Escherichia coli was 9.15 mm and 13.72 mm, respectively. In antiseptic tests, all soap formulas reduced bacteria on the thumb. Keywords : Antibacterial, Liquid soap, Excoecaria cochinchinensis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Sabun cair merupakan sediaan yang banyak diproduksi  karena  bentuknya  yang  lebih menarik  serta  penggunaannya  yang  lebih praktis  dibandingkan  dengan  sabun  padat. Sediaan  sabun  cair  dapat  dibuat  untuk membersihkan  kulit  dari  kuman-kuman  yang menempel  pada  tubuh  dan  juga  dapat
digunakan  untuk  mengobati  penyakit  kulit yang  disebabkan  bakteri  dan  jamur.  Zat  aktif untuk  pembuatan    sabun    cair  relative  dapat memanfaatkan  sumber  daya  alam  yang  ada disekitar dan dapat dijangkau oleh masyarakat pada umumnya (Anggraini et al ., 2012). Pemanfaatan  ekstrak  tumbuhan  sebagai bahan tambahan dalam pembuatan sabun cair
dapat  meningkatkan  kemampuan  sabun  cair dalam  membunuh  bakteri  dan  jamur.  Salah satu  tanaman  yang  dapat  dikembangkan sebagai  bahan  sediaan  sabun  cair  adalah sambang darah ( Excoecaria cochinchinensis L.). Sambang darah ( E. cochinchinensis ) merupakan jenis  tanaman  perdu  yang  berasal  dari Indocina.  Daun  sambang  darah  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  antara  lain flavonoid,  saponin,  tanin  dan  triterpenoid. Pemanfaatan  secara  tradisional  daun  sambang darah dapat menghilangkan gatal-gatal, menghentikan  pendarahan,  mengobati  disentri, dan  muntah  darah    (Nizar  &  Monika,  2015; Hutuba et al ., 2023).
Fraksi  etil  asetat  ekstrak  etanol  daun sambaing  darah  pada  konsentrasi  0,78%  b/v sampai  50%  b/v  menunjukkan  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri E.  coli dengan diameter  hambat  terkecil    7,1  mm  dan diameter hambat terbesar 12,25 mm. Fraksi air dengan  konsentrasi  6,25%  b/v  sampai  50% b/v  memberikan  diameter  daya  hambat  7,15 sampai  10,25  mm  (Nizar  &  Monika,  2015). Ekstrak etanol daun sambang darah juga telah diteliti  manfaatnya  sebagai  pewarna  alam dalam  pembuatan  serbuk  perona  pipi (Syarifuddin  &  Lubis,  2022),  juga  dapat mengurangi waktu pendarahan luka sayat pada tikus percobaan ( Rattus norvegicus ) (Hijriani et al ., 2023) Lenelusuran  literatur  belum  ada  laporan pemanfaatan  ekstrak  metanol  daun  sambang darah dalam pembuatan sabun cair anti septik. Pada  penelitian  ini  akan  dikaji  formulasi  dan karakterisasi sabun cair berbahan aktif ekstrak metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis )  serta  menguji  aktivitas antibakterinya  terhadap  bakteri S.  aureus dan E. coli .

## METODOLOGI
Bahan
Bahan-  bahan  yang  digunakan  meliputi ekstrak  metanol  daun  sambang  darah  ( E. cochinchinensis ),  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli ,  minyak  kelapa  kemasan (Barco),  minyak  kelapa  sawit  kemasan (SunCo),  kalium  hidroksida  (KOH)  (Merck), Natrium  Karboksil  Metil  Selulosa  (Na-CMC), gliserin  (Merck),  asam  stearate  (Smart-Lab), akuades, cocamide diethanolamine ( foambooster )  (teknis),  metil paraben  (teknis), etanol  70%, Nutrient  Agar (Merck), Nutrient Broth (Merck),  sabun  pasaran  (kontrol  +),
aseton  (Merck),  aluminium  foil,  kertas  cakram (Whatman No 3), kertas label, dan kapas.

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini meliputi cawan petri, gelas piala, gelas ukur, Erlenmeyer, kaca arloji, pipet ukur, bola hisap, piknometer,  pipet  tetes,  tabung  reaksi,  rak tabung,  viskometer  oswald,  statif  dan  klem, termometer ,  hand  mixer ,  neraca  analitik, autoklaf, hot plate , laminar air flow (Telstar AV- 100), oven, inkubator, lampu spritus, pH meter, magnetic  stirrer ,  jangka  sorong  digital,  batang pengaduk,  botol  kaca,  botol  pump  plastik, jarum ose, spuit,  dan pinset.
Pembuatan  Sabun  Cair  Berbahan  Aktif Ekstrak  Metanol  Daun  Sambang  Darah ( Excoecaria cochinchinensis L.) Pembuatan  sediaan  sabun  cair  ekstrak metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis )  mengacu  pada  penelitian  yang dilakukan oleh Yamlean & Bodhi (2017), dengan formula  yang  telah  dimodifikasi  yang  dapat dilihat  pada  Tabel  1.  Berdasarkan  hasil  uji pendahuluan  yang    telah  dilakukan,  pembuatan sabun  cair  menggunakan  minyak  kelapa  sawit menghasilkan  busa  sabun  yang  sedikit  serta sabun  yang  didapatkan  agak  keras  sehingga perlu  ditambahkan  minyak  kelapa  agar  busa sabun yang dihasilkan lebih banyak serta sabun yang  didapatkan  lebih  bagus.  Sebanyak  21  gr minyak  kelapa  dan  9  gr  minyak  kelapa  sawit dimasukan ke dalam gelas kimia dan dipanaskan di  atas hot  plate pada  suhu  60-70 ° C  selama  20 menit. Kemudian ditambahkan 6,9 gr KOH  yang sudah dilarutkan menggunakan 13,8 mL akuades dan  diaduk  dengan    menggunakan handmixer sampai mendapatkan pasta sabun (±10 menit).
Tabel 1 . Formulasi sediaan basis sabun dan sabun cair ekstrak metanol daun sambang sarah  ( E. cochinchinensis L . )
Bahan F0 (g) F1 (g) F2 (g) F3 (g) Ekstrak 0 0,75 1 3 Minyak Kelapa 21 21 21 21 Minyak Kelapa Sawit 9 9 9 9 KOH 6,9 6,9 6,9 6,9 Gliserin 5 5 5 5 Na-CMC 1 1 1 1 Asam Stearat 0,5 0,5  0,5 0,5 Cocamide diethanolamine 2 2 2 2 Metil Paraben 0,01  0,01 0,01  0,01 Akuades ditambahkankan hingga 100 mL untuk setiap formula
Setelah  didapatkan  pasta  sabun,  lalu ditambahkan  gliserin,  Na-CMC,  asam  stearat,
cocamide diethanolamine dengan tetap dilakukan  pengadukan  sampai  semua  bahan tercampur  dengan  sempurna  (±  25  menit). Setelah  itu,  ditambahkan  ekstrak  metanol  daun sambaing darah dan diaduk perlahan, kemudian ditambahkan  akuades  hingga  100  mL  ke  dalam sabun  yang  dihasilkan  dengan  dilakukan pengadukan  sampai  mendapatkan  sabun  cair. Setelah sabun cair terbentuk, ditambahkan metil paraben  dan  diaduk  hingga  homogen.  Sediaan basis  sabun  dan  sabun  cair  berbahan  aktif ekstrak metanol daun sambang darah ( Excoecaria  cochinchinensis L . )  untuk  setiap formula dibuat sebanyak 3 kali pengulangan.

## Evaluasi Mutu Sediaan Sabun Cair
Uji Organoleptik
Uji  organoleptik  sabun  cair  berbahan  aktif ekstrak  metanol  daun  sambang  darah  ( E. cochinchinensis )  dan  basis  sabun  dilakukan secara  kualitatif  yang  meliputi  bentuk,  bau  dan warna. Pengamatan dilakukan secara visual oleh 12 orang responden, data dari hasil pengamatan responden dikumpulkan dan dicatat (Yamlean & Bodhi, 2017).

## Uji Stabilitas Busa
Sampel  dipipet  sebanyak  0,4  mL  dan dimasukan  kedalam  tabung  reaksi,  kemudian ditambahkan akuades sebanyak 4 mL, dikocok selama  20  detik  dan  diukur  tinggi  busa  yang terbentuk. Tabung reaksi kemudian didiamkan selama  5  menit  dan  ukur  kembali  tinggi  busa yang  masih  terbentuk,  dilakukan  3  kali ulangan.  Persentase  stabilitas  busa  dapat dihitung  dengan  menggunakan  rumus  berikut (Agustina et al . 2017):
Penentuan Berat Jenis, pH, dan Viskositas Penentuan  berat  jenis  sabun  cair menggunakan  piknometer,  penentuan  pH menggunakan  pH  meter,  dan  penentuan viskositas  menggunakan  viskometer  Ostwald. Semua  pengujian  dilakukan  dengan  3  kali ulangan.

## Uji Antiseptik
Pengujian  antiseptik  sabun  cair  F0,  F1,  F2, dan F3 mengacu pada penelitian yang dilakukan
oleh  Wijetunge  &  Perera  (2016).  Responden pada  uji  antiseptik  merupakan  mahasiswa Jurusan  Kimia  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Bengkulu. Ibu jari tangan  yang  terpapar  lingkungan  ditempelkan pada media NA ( Nutrient Agar ) padat yang steril didalam  cawan  petri.  Setelah  itu  5  orang responden  diminta  untuk  mencuci  tangan dengan menggunakan sabun cair F0, F1, F2, dan F3  sebanyak  0,5  mL  selama  60  detik,  kemudian dikeringkan  dengan  cara  dikibaskan  selama  75 detik.  Ibu  jari  yang  sudah  dicuci  dengan  sabun diletakan pada media NA steril pada cawan petri terpisah,  selanjutnya  cawan  Petri  diinkubasi pada  suhu  37 °C  selama  24  jam.  Diamati pertumbuhan  koloni  bakteri  yang  tumbuh  pada media  yang  sudah  ditempel  ibuk  jari  sebelum dan  sesudah  mencuci  tangan  menggunakan sabun cair semua formula.

## Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Cair
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  sebanyak tiga  kali  pengulangan  untuk  masing-masing formula sabun cair yang telah dibuat. Pengujian dilakukan  dengan  menggunakan  metode  difusi cakram.  Kertas  cakram  berdiameter  6  mm dicelupkan  merata  pada  0,03  g  sampel  sabun cair  F0,  F1,  F2,  F3,  akuades  (kontrol  negatif), dan sabun cair pasaran (kontrol positif). Media NA yang telah disterilkan  dituangkan sebanyak 15 mL ke dalam cawan petri, ditambahkan 1 mL suspensi  bakteri  uji    ( S.  aureus atau E.  coli ) sesuai  kekeruhan  Mc.  Farlan  0,5,  lalu  cawan petri diputar membentuk angka delapan supaya suspensi  bakteri  bercampur  dengan  media  NA, setelah itu didinginkan dan dibiarkan memadat. Diatas  media  NA  padat  yang  sudah  tercampur bakteri  uji  diletakkan  kertas  cakram  yang sebelumnya  telah  dicelupkan  ke  dalam  sabun cair,  kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu 37 ° C. Zona hambat yang terbentuk diukur menggunakan  jangka  sorong  dari  5  sisi  dan dirata-ratakan (Mulyadi et al ., 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan  Sabun  Cair  Berbahan  Aktif Ekstrak  Metanol  Daun  Sambang  Darah ( Excoecaria cochinchinensis L.) Sabun cair yang dihasilkan pada penelitian ini  sebanyak  4  jenis  (F0,  F1,  F3,  F4)  dengan masing-masing  3  kali  ulangan  sehingga dihasilkan  12  botol  sabun  dengan  volume masing-masing 100 mL. Dari 4 jenis sabun cair yang  dihasilkan  ini,  perbedaan  formulanya
terdapat  pada  massa  ekstrak  metanol  daun sambaing darah yang ditambahkan. F0 adalah basis  sabun  berfungsi  sebagai  kontrol  negatif karena  tidak  ada  penambahan  ekstrak, sedangkan  F1,  F2,  dan  F3  dilakukan  variasi penambahan  ekstrak  sebanyak  0,75,  1,  dan  3 g.  Pada Gambar 1 terlihat sampel sabun cair setiap formula.

## F0                         F1
F2                                  F3 Gambar 1. Basis sabun (F0) dan sabun cair berbahan aktif ekstrak metanol daun sambang darah ( Excoecaria cochinchinensis L.) (F1, F2, F3)

## Evaluasi Mutu Sediaan Sabun Cair Uji organoleptik
Uji  organoleptik  sediaan  sabun  cair berbahan aktif ekstrak metanol daun sambang darah  ( E.  cochinchinensis )  dan  basis  sabun dilakukan secara kualitatif menggunakan indra penciuman  dan  penglihatan  yang  meliputi bentuk,  bau  dan  warna  oleh  12  orang responden.  Uji  organoleptik  sabun  cair  dapat dilihat pada Tabel 2 .
Berdasarkan  Tabel  2.  dapat  diketahui bentuk,  bau  dan  warna  sabun  cair  dari  4 formula.  Semua  jenis  sabun  cair  berbentuk cairan  kental  homogen,  dimana tidak terdapat gumpalan-gumpalan  pada  sabun  cair.  Hasil  uji juga  menunjukkan  bahwa  basis  sabun  (F0) yang  dihasilkan  mempunyai  bau  khas  minyak kelapa  dan  berwarna  krem,  sedangkan  sabun cair  F1,  F2,  F3  memiliki  bau  khas  ekstrak metanol daun sambang darah ( E.
cochinchinensis )  dan  sabun  cair  F1  berwarna
cokelat, sabun cair F2 dan F3 berwarna  coklat tua  dan  coklat  kehitaman.  Perbedaan  warna pada masing-masing sediaan sabun disebabkan oleh  tingkat  kandungan  ekstrak  yang  berbeda pada setiap formulanya. Ekstrak metanol daun sambang  darah  ( E.  cochinchinensis )  yang digunakan  berbentuk  solid  berwarna  coklat kehitaman  serta  memiliki  bau  khas  ekstrak.
Berdasarkan hasil uji tersebut sifat organoleptik  sabun  cair  berbahan  dasar ekstrak metanol daun sambang darah meliputi bentuk,  bau,  dan  warna  telah  memenuhi standar  yang  ditetapkan  SNI  06-4085-1996 yaitu  bentuk  cairan  homogen,  berbau  dan warna khas.
Tabel 2 . Hasil uji organoleptik sabun cair Sampel  Bentuk  Bau Warna F0 Cairan kental homogen Khas Minyak kelapa Krem F1 Cairan kental homogen Khas Ekstrak E. cochinchinensis Coklat F2 Cairan kental homogen Khas Ekstrak E. cochinchinensis Coklat Tua F3 Cairan kental homogen Khas Ekstrak E. cochinchinensis Coklat Kehitaman

## Uji stabilitas busa
Hasil    uji    kestabilan    busa    rata-rata sabun  cair  ekstak  metanol  daun  sambang darah  ( E.  cochinchinensis )  dapat  dilihat  pada Gambar 2.
Gambar 2 . Grafik rata-rata hasil uji stabilitas busa sediaan sabun cair
Berdasarkan  hasil  pengukuran  kestabilan busa, sabun cair basis (F0) memiliki kestabilan busa 91,76 ± 0,74 %, F1 90,5 ± 1,09 %, F2 87,4
±  1,46  %,  dan  F3  84,11  ±  0,46  %,  sedangkan sabun  cair  pasaran  (kontrol  +)  memiliki stabilitas busa yang lebih rendah yaitu sebesar 80,19  ±  2,03  %.  Dapat  dilihat  stabilitas  busa sabun  cair  semakin  menurun  seiring  dengan semakin  banyaknya  ekstrak  metanol  daun sambaing  darah  yang  ditambahkan,  namun kestabilan  busa  ke-4  jenis  sabun  cair  yang dibuat  lebih  tinggi  dari  sabun  cair  pasaran. Menurut  Korompis et  al .,  (2020)  semakin banyak ekstrak yang ditambahkan pada sabun cair  maka  semakin  sedikit  busa  yang dihasilkan,  dimana  ekstrak  yang  ditambahkan diduga  berperan  sebagai antifoaming  agent yang  dapat  menurunkan  stabilitas  busa  yang terbentuk.

## Penentuan Berat Jenis
Berdasarkan  SNI  06  4085-1996,  standar berat  jenis  pada  sabun  cair  yaitu  1,01-1,1 g/mL.    Berat    jenis    yang    didapatkan    dari masing-masing  formula  sediaan  sabun  cair pada  penelitian  ini  dapat  dilihat  pada  Gambar 3.
Gambar 3 . Grafik rata-rata berat jenis sediaan sabun cair
Berdasarkan  Gambar  3,  dapat  dilihat  berat jenis  sabun  cair  F0  sebesar  1,021  ±  0.001 g/mL, F1 0,995 ± 0,018 g/mL, F2 dan F3 adalah 1,019  ±  0,003  g/mL  dan  1,034  ±  0,009  g/mL, sedangkan  berat  jenis  sabun  cair  pasaran sebesar  1,010  ±  0,005  g/mL.  Berat  jenis  dari masing-masing  formulasi  hampir sama,  hal  ini menunjukkan  bahwa  sifat  fisik  basis  sabun tidak  terlalu  berbeda  dengan  sabun  cair berbahan    aktif    ekstrak    methanol    daun sambaing  darah.  Berat  jenis  sabun  cair  F0,  F2 dan  F3  yang  dibuat  telah  sesuai  standar  yang ditetapkan oleh SNI 06 4085-1996.

## Uji pH
Derajat keasaman atau pH merupakan salah satu syarat mutu sabun cair untuk mengetahui sabun  cair  yang  dihasilkan  bersifat  asam  atau basa.  pH  merupakan  parameter  yang  penting karena  nilai  pH  dapat  mempengaruhi    daya absorpsi  kulit  (Widyasanti et  al .,  2017). Berdasarkan standar yang ditetapkan oleh SNI 2588:2017, pH sabun cair yang diperbolehkan berkisar antara 4-10. Berikut hasil uji pH rata- rata basis sabun dan sabun cair ekstak metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis )  pada Gambar 4.
Gambar 4. Grafik rata-rata hasil uji pH sediaan sabun cair
Pada  Gambar  4,  dapat  dilihat  bahwa  pH sediaan  sabun  cair  yang  dibuat  telah memenuhi standar SNI, rentang pH 9,39 - 9,62. Berdasarkan  hasil  pengukuran,  sabun  cair  F0 memiliki pH sebesar 9,48 ± 0,111 nilai tersebut sama dengan sabun cair berbahan aktif ekstrak metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis )  Formula  1,  dan  hampir  sama dengan  nilai  pH  F2  dan  F3  dari  yaitu  sebesar 9,39 ±  0,152 dan 9,62 ± 0,178. Sabun pasaran (kontrol  +) memiliki  pH  yang  lebih  rendah yaitu sebesar 8,06 ± 0, 015. Dari Gambar 4 juga terlihat  bahwa  penambahan  ekstrak  metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis ) tidak mmemberikan  pengaruh  besar  terhadap  nilai pH sabun cair.
Uji Viskositas Uji  viskositas  dilakukan  untuk  mengetahui kekentalan  sediaan  sabun  cair  dengan menggunakan alat viskometer oswald. Viskositas  yang  didapatkan  dari  masing- masing  sediaan  sabun  cair  dapat  dilihat  pada Gambar  5.  Dari  pengukuran  viskositas
diperoleh  viskositas sabun  cair  berbahan aktif ekstrak  metanol  daun  sambang  darah  ( E. cochinchinensis )  lebih  besar  dibandingkan dengan  basis  sabun  (F0)  dan  sabun  pasaran (2,329  ±  0,161  cP.  Viskositas  F0  sebesar 372,155  ±  17,09  cP,  sedangkan  viskositas  F1, F2,  dan  F3  sebesar  383,644  ±  28,572  cP, 469,183 ± 11,489 cP dan 492,933 ± 23,771 cP. Naiknya nilai viskositas seiring dengan naiknya massa  ekstrak  yang  ditambahkan,  yang mengakibatkan  kandungan  air  semakin menurun (Cahyaningsih et al ., 2019).
Gambar 5. Grafik rata-rata hasil uji viskositas sediaan sabun cair
Uji Antiseptik Uji  antiseptik  bertujuan  untuk  mengetahui keefektifan  sabun  cair  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  terdapat  pada  ibu jari  dengan  pengamatan  secara  visual. Pengujian  dilakukan  dengan  membandingkan koloni bakteri yang dihasilkan cap ibu jari pada media  NA  sebelum  dan  sesudah  mencuci tangan  dengan  basis  sabun  dan  sabun  cair berbahan aktif ekstrak metanol daun sambang darah  ( E.  cochinchinensis ).  Setelah  pengujian dilakukan,  maka  dapat  dilihat  perbandingan yang signifikan pada bakteri yang tumbuh pada media  sebelum  dan  sesudah  mencuci  tangan seperti pada Gambar 6.
Berdasarkan hasil pengamatan yang ditunjukan  pada  Gambar  6,  menunjukkan jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada media NA  sebelum  dan  sesudah  mencuci  tangan dengan  sabun  cair  berbahan  aktif  ekstrak metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis )  mengalami  perubahan  yang signifikan. Bakteri sangat banyak tumbuh pada media  NA  ketika  ibu  jari  ditempel  dalam keadaan  tangan  sebelum  dicuci,  sedangkan ketika  tangan  dicuci  menggunakan  sabun  cair
terlihat  adanya  penurunan  jumlah  koloni bakteri  yang  tumbuh.  Dapat  dilihat,  semakin banyak  formula  ekstrak  yang  ditambahkan maka  semakin  tinggi  efektivitas  sabun  cair berbahan aktif ekstrak metanol daun sambang darah  ( E.  cochinchinensis ).  Hal  ini  dibuktikan dimana pada formulasi F3 bakteri yang tumbuh lebih sedikit dibandingkan dengan bakteri yang tumbuh  pada  F0,  F1dan  F2  setelah  mencuci tangan.
(a)
(b)
Gambar  6 .  Bakteri  yang  tumbuh  pada  media NA  setelah  ditempelkan  ibu  jari sebelum  dan  sesudah  mencuci tangan  dengan  sabun  F0.  F1,  F2, sdan  F3  (a)  sebelum  mencuci tangan (b) setelah mencuci tangan
Uji Aktivitas Antibakteri Sabun Cair Uji  aktivitas  antibakteri  pada  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan  dari sabun  cair  berbahan  aktif  ekstrak  metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis ) dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram positif S.  aureus dan  bakteri  gram  negatif E. coli .  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  dari  sabun cair dapat dilihat pada Gambar 7.
Gambar  7 .  Grafik  rata-rata  diameter  zona hambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli setelah  diberi perlakuan  dengan  sabun  F0,  F1, F2,  F3,  sabun  pasaran  (kontrol positif),  dan  akuades  (kontrol negatif)
Berdasarkan Gambar 7, menunjukkan setiap formula  sabun  cair  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri S.  aureus dan E.  coli . Kontrol  positif  (sabun  antiseptik  komersil) memberikan diameter zona hambat yang lebih besar  daripada  sabun  cair  setiap  formula  dan kontrol  negatif.  Pada  penelitian  ini  akuades digunakan  sebagai  kontrol  negatif  untuk membuktikan  bahwa  akuades  tidak  berperan dalam  membentuk  zona  hambat  sehingga kontrol  negatif  tidak  berpengaruh  dalam pembentukan  zona  hambat  bakteri S.  aureus dan E.  coli .  Dapat  dilihat  bahwa  sabun  cair  F0 (basis sabun) menghasilkan diameter rata-rata zona hambat terhadap bakteri S. aureus dan E. coli masing masing sebesar 6,98 ± 0,96 mm dan
8,02  ±  0,91  mm.  Diameter  yang  diperoleh menunjukkan kategori sedang dalam menghambat  bakteri  (Ponce  et  al.,  2003). Sedangkan  kontrol  positif  (sabun  antiseptik komersil) memberikan diameter rata-rata zona hambat  terhadap  bakteri S.  aureus dan E.  coli dengan  masing-masing  sebesar  20,84  ±  0,41 mm  dan  23,43  ±  2,90  mm.  Diameter  yang diperoleh  menunjukkan  kategori  sangat  kuat dalam  menghambat  bakteri  (Ponce et  al., 2003).  Sabun  antiseptik  umumnya  telah ditambahkan beberapa bahan kimia obat yang efektif  membasmi  kuman,  seperti triclosan , trilocarban , povidone  iodine , benzalconium chloride , benzethonium chloride , dan chloroxylenol .  Triclosan  merupakan  senyawa
aktif  yang  umumnya terdapat  pada sabun  cair antiseptik.
Sediaan  sabun  cair  F1,  F2,  dan  F3 memberikan diameter zona hambat yang lebih besar  dari  F0,  ini  membuktikan  bahwa penambahan  ekstrak  dapat  meningkatkan kemampuan  sabun  cair  untuk  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Dari  Gambar  7  juga dapat  dilihat  bahwa  aktivitas  antibakteri  F3 lebih  tinggi  dari  F2  dan  F1,  hasil  ini menegaskan  bahwa  semakin  besar  massa ekstrak  metanol  daun  sambang  darah  yang ditambahkan  pada  formula  maka  semakin meningkat juga aktivitas antibakterinya. Sabun F1  memberikan  daya  hambat  terhadap S. aureus dan E. coli sebesar 7,86 ±  0,95 mm dan 7,54 ± 0,91 mm dengan respon hambat bakteri tergolong  lemah.  Sabun  cair  F2  menghasilkan diameter zona hambat rata-rata untuk masing- masing  bakteri  sebesar  8,58  ±  0,30  mm  dan 10,38  ±  0,74  mm  dengan  kategori  respon hambat  tergolong  sedang.  Pada  sabun  cair  F3 menghasilkan diameter  zona  hambat  rata-rata untuk  masing-masing  bakteri  sebesar  9,15  ± 0,97 mm dan 13,72 ± 2,53 mm dengan kategori respon hambat bakteri tergolong sedang.
Penggunaan ekstrak metanol daun sambang darah  ( E.  cochinchinensis )  pada  sediaan  sabun cair  mampu  membunuh  atau  menghambat pertumbuhan  bakteri S.  aureus dan E.  coli karena  adanya  senyawa  metabolit  sekunder yang  diduga  aktif  dalam  mengahambat pertumbuhan  bakteri  uji  seperti  flavonoid, saponin,  tanin  dan  triterpenoid  (Nizar  & Monika, 2015; Ye-ling et al. , 2014) Daya  hambat  sabun  cair  berbahan  aktif ekstrak  metanol  daun  sambang  darah  ( E. cochinchinensis )  terhadap  2  jenis  mikroba  uji memperlihatkan efek yang berbeda. Hal ini dapat disebabkan  oleh  kemampuan  pertahanan mikroba uji terhadap sabun cair dengan berbagai formula. Visualisasi zona hambat yang dihasilkan setiap formula dapat dilihat pada Gambar 8.
Berdasarkan  data  diameter  zona  hambat pertumbuhan bakteri yang diperoleh menunjukkan  bahwa  sediaan  sabun  cair  F0-F3 lebih  sensitif  terhadap  bakteri E.  coli dibandingkan  bakteri S.  aureus .  Perbedaan aktivitas antibakteri tersebut mungkin dipengaruhi  oleh  perbedaan  struktur  dinding sel ke-dua bakteri uji. Pada bakteri gram positif memiliki  dinding  sel  yang  lebih  tebal  daripada bakteri  gram  negatif.  Dinding  sel  pada  bakteri gram positif tersusun dari lapisan peptidoglikan
sehingga  lapisan  ini  dapat  mempertahankan keutuhan  sel.  Sedangkan  pada  bakteri  gram negatif  mengandung  lipid  dan  substansi  lemak dalam  persentase  yang  lebih  tinggi  daripada bakteri  gram  positif.  Adanya  kandungan triterpenoid  pada  ekstrak  metanol  daun sambang darah ( E.
cochinchinensis ) menyebabkan  sediaan  sabun  cair  lebih  lifofilik. Terpenoid memiliki aktivitas antibakteri dengan merusak  membran  sel  bakteri  melalui  gugus lipofiliknya  (Nazzaro et  al. ,  2013).  Sehingga sabun  cair  lebih  efektif  dalam  menghambat bakteri E. coli dibandingkan bakteri S. aureus.
(a) (b)
Gambar  8. Aktivitas  antibakteri  sabun  cair berbahan  aktif  ekstrak  metanol daun sambang darah ( E. cochinchinensis L.)  setiap  formula terhadap  bakteri  uji  (a) S.  aureus
(b) E. coli

## KESIMPULAN
Sediaan  sabun  cair  berbahan  aktif  ekstrak metanol daun sambang darah ( E.
cochinchinensis )  dengan  penambahan  0  g  (F0) 0,75 g (F1), 1,5 g (F2) dan 3 g (F3) telah memiliki mutu  dan  sifat  fisik  yang  baik  berdasarkan hasil uji organoleptik, uji pH, uji stabilitas busa, uji  berat  jenis  dan  uji  viskositas.  Sabun  cair berbahan aktif ekstrak metanol daun sambang darah  ( E.  cochinchinensis )  yang  dihasilkan
efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri S.  aureus dan E.  coli yang  ditunjukan dengan terbentuknya zona hambat disekeliling kertas  cakram.  Formula  3  memberikan  daya hambat  pertumbuhan  bakteri  uji  terbesar diantara  3  formula  lainnya.  Semua  formula sabun  yang  dibuat  dapat  mereduksi  bakteri pada tangan yang diperkuat pada uji antiseptik.

## REFERENSI
Anggraini,  D.,  Sri  Rahmides,  W.,  &  Malik,  M. (2012). Formulasi Sabun Cair dari ekstrak Batang Nanas ( Ananas cosmosus . L) untuk Mengatasi  Jamur Candida  albicans . Jurnal
Penelitian Farmasi Indonesia , 1 (1), 30 – 33. Aminah, S., & Lubis, R. U. Br. (2022). Formulasi Sediaan Serbuk Perona Pipi Ekstrak Daun Sambang Darah ( Excoecaria cochinchinensis )  Sebagai  Pewarna  Alami.
Jurnal Farmasi , 5 (1), 26 – 30.
Cahyaningsih,  D.,  Ariesta,  N.,  &  Amelia,  R.
(2019).  Pengujian  Parameter  Fisik  Sabun Mandi Cair Dari Surfaktan Sodium Laureth Sulfate (Sles). Jurnal  Sains  Natural , 6 (1),
10. https://doi.org/10.31938/jsn.v6i1.250 Hijriani,  B.  I.,  Zaetun,  S.,  &  Wiadnya,  I.  B.  R. (2023). The Effect of Sambang Darah Leaf Filtrate  ( Excoecaria  cochinchinensis L.)  to Reduce  The  Bleeding  Time  in  Skin Wounds of White Rats ( Rattus Norvegicus ). Jurnal  Analis  Medika  Biosans
(JAMBS) , 10 (1), 31 – 36. https://doi.org/10.32807/jambs.v10i1.298 Hutuba, A. H., Mustapa, M. A.. & Suryadi, A. M. A. (2023).  Analisis  Kandungan  Flavanoid Daun Sambang Darah ( Excoecaria cochinchinensis L.). Journal  Syifa  Sciences and  Clinical  Research , 5 (1),  164 – 171. https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i1.7157
Korompis, F. C. ., Yamlean, P. V. Y., & Lolo, W. A.
(2020).  Formulasi  Dan  Uji  Efektifitas Antibakteri  Sediaan  Sabun  Cair  Ekstrak Etanol  Daun  Kersen  ( Muntingia  Calabura
L.)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus epidermidis . Pharmacon , 9 (1), 30. https://doi.org/10.35799/pha.9.2020.27 407 Mulyadi,  M.,  Wuryanti,  W.,  &  Sarjono,  P.  R. (2017).  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) Kadar Sampel Alang-Alang ( Imperata  cylindrica )  dalam  Etanol Melalui  Metode  Difusi  Cakram. Jurnal Kimia Sains Dan Aplikasi , 20 (3), 130 – 135. https://doi.org/10.14710/jksa.20.3.130-
135
Nazzaro,  F.,  Fratianni,  F.,  De  Martino,  L., Coppola, R., & De Feo, V. (2013). Effect of
Essential  Oils  on  Pathogenic  Bacteria. Pharmaceuticals , 6 (12), 1451 – 1474. https://doi.org/10.3390/ph6121451 Nizar,  M.,  &  Monika,  A.  F.  (2015).  Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Sambang Darah ( Excocaria cochinchinensis Lour) Fraksi N- Heksan,  Fraksi  Etil  Asetat  dan  Fraksi  Air Terhadap  Bakteri Escherichia  coli . Jurnal Kesehatan  Poltekes  Palembang , 11 (2),
216 – 223. Ponce, A. G., Fritz, R., Del Valle, C., & Roura, S. I. (2003). Antimicrobial Activity of Essential Oils  on  The  Native  Microflora  of  Organic Swiss  Chard. Lebensm.-Wiss.  u.-Technol. ,
36 (7),
679 – 684.
https://doi.org/10.1016/S0023-
6438(03)00088-4
Wijetunge,  W.  M.  A.  N.  K.,  &  Perera,  B.  G.  K. (2016).  Preparation  of  Medicinal  Soap Products Using the Leaf Extracts of Punica
Granatum (Pomegranate). International Journal  of  Pharmacy  and  Biological Sciences , 6 (2), 7 – 16.
Yamlean, P. V. Y., & Bodhi, W. (2017). Formulasi dan  Uji  Antibakteri  Sediaan  Sabun  Cair Ekstrak Daun Kemangi ( Ocymum basilicum L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus . Pharmacon , 6 (1), 76 – 86.
Ye-ling, W., Ping, L., Kai-jing, G., Li-yu, C., & Qin,
T.  (2014).  Isolation  and  Identification  of Chemical  Constituents  of  Excoecaria cochinchinensis  Lour. Natural  Product Research and Development , 26 (1), 47 – 49.