## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KARANG LUNAK Xenia sp.

## YANG DIPEROLEH DARI TELUK MANADO
Maria Novilia Ningsie Kantor 1) , Defny Silvia Wewengkang 1) , Adeanne Caroline Wullur 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) POLTEKKES Manado, 95115

## ABSTRAK
Karang lunak merupakan salah satu komponen biota penyusun terumbu karang yang mempunyai potensi  bioaktif  yang  belum  banyak  dimanfaatkan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan daya  hambat  antibakteri  ekstrak  dan  fraksi  karang  lunak Xenia sp . terhadap  bakteri staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .  Sampel  diekstraksi  secara  maserasi  dan  fraksinasi menggunakan  pelarut  etanol,  fraksi  heksan,  fraksi  kloroform  dan  fraksi  metanol.  Aktivitas antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  agar  (Kirby  and  Bauer).  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa ekstrak Xenia sp., fraksi heksan, fraksi kloroform dan fraksi metanol efektif menghambat bakteri Staphylococcus aureus dan bakteri Escherichia coli . Ekstrak dan fraksi ini dikategorikan  kuat  berdasarkan  kriteria  Davis  dan  Stout.  Fraksi  kloramfenikol  dengan  daya hambat antibakteri paling besar yaitu sebesar 9,66 mm untuk bakteri Staphylococcus aureus dan 9,00  mm  untuk  bakteri Escherichia  coli dan  diduga  mengandung  senyawa  diterpenoid  yang berpotensi sebagai antibakteri didukung oleh data penelitian dari Fattorusso et al (2008). .
Kata kunci. Karang Lunak Xenia sp . , Aktivitas antibakteri, Staphylococcus aureus , Escherichia coli.

## ABSTRACT
Soft  coral  is  a  component  of  a  coral  reef  organisms  that  have  bioactive  potential  has  not  been widely  used.  The  aims  of  this  study  were  to  determine  antibacterial  inhibition  of  extracts  and fractions Xenia sp . soft coral sagainst Staphylococcus aureus and Escherichia coli . Samples was extracted by maceration with and fraction ationusing hexane, chloroform, ethanol and methanol. Antibacterial  activity  performed  by  the  agar  diffusion  method  (Kirby  and  Bauer).  The  result shows  that Xenia sp.  extract,  chloroform  fraction,  and  methanol  fraction  effectively  inhibit  the bacterium Staphylococcus aureus and Escherichia coli . Extracts and fractions categorized strong based on the criteria of Davis and Stout . Chloroform fraction with the greatest antibacterial 9,66 mm Staphylococcus aureus and 9,00 mm Escherichia coli. allegedly contain diterpenoid that are potentially as antibacterial the result Futturusso et al (2008).
Keywords. Xenia sp., soft coral, Antibacterial activity, Staphylococcus aureus , Esherichia coli.

## PENDAHULUAN
Laut  menutupi  71%  dari  permukaan bumi, oleh sebab itu sangat banyak potensi yang bisa  diambil  dari  laut  seperti  sumber  makanan, zat  warna,  kosmetik  bahkan  obat-obatan. Dewasa  ini  pemanfaatan  organisme  laut  banyak digunakan  sebagai  sumber  senyawa  obat  baru. Hal  ini  disebabkan  oleh  kemampuan  organisme laut  seperti  tumbuhan  dan  invertebrata  laut dalam  memproduksi  senyawa  kimia  yang mempunyai  keanekaragaman  hayati  yang  tinggi dengan  struktur  kimia  yang  khas  (El-Sayed, 2001).
Berbagai penelitian menunjukkan bahwa biota  laut  memiliki  potensi  yang  sangat  besar dalam  menghasilkan  senyawa-senyawa  aktif yang dapat digunakan sebagai bahan baku obat. Beberapa  biota  laut  yang  diketahui  dapat menghasilkan  senyawa  aktif  antara  lain  adalah spons,  moluska,  bryozoa,  tunika  dan  lain-lain (Ismet,  2007).  Edrada  (2000)  menyatakan  hal yang  sama  bahwa  organisme  laut  yang mempunyai kandungan kimia terbanyak dihasilkan oleh invertebrata laut disusul kemudian  oleh  tumbuhan  laut.  Kelompok  yang termasuk invertebrata laut antara lain: Spon laut (Filum Porifera) , Hewan lumut (Filum Bryozoa), Karang  lunak (Filum  Cnydaria) dan hewan bermantel (Filum Tunicata).
Indonesia  merupakan  Negera  kepulauan terbesar  di  dunia  yang  mempunyai  panjang pantai  81.000  km  yang  kaya  akan  terumbu karang dan biota laut lainnya (Van Soest, 1989) dan  hampir  seluruh  perairan  yang  berada  di Indonesia  terdapat  karang  lunak  dengan  tingkat keanekaragamannya yang tinggi (Mahaza 2003). Karang lunak (soft coral) merupakan bagian dari ekosistem terumbu karang yang penting (Benayahu  1985)  dan  termasuk  komponen terbesar setelah karang batu (Manuputty 1996).
Karang  lunak  berperan  sebagai  salah satu hewan penyusun ekosistem terumbu karang serta  pemasok  senyawa  pertumbuhan  terbesar bagi  terumbu  karang  yaitu  senyawa  karbonat, hal  ini  dibuktikan  dengan  penemuan  sejumlah besar  spikula  berkapur  di  dalam  jaringan tubuhnya  dan  ini  tidak  ditemukan  pada  hewan- hewan  lain  yang  hidup  sekalipun  diterumbu
karang yang sama (Konishi, 1981). Berdasarkan laporan  pada  dekade  terakhir  ini  ditemukan bahwa ternyata sebanyak 50% senyawa bioaktif yang terdapat pada invetebrata ini bersifat toksik termasuk karang lunak (Radhika, 2006).
Fattorusso, et al (2008) dalam penelitiannya  menyatakan  bahwa  senyawa  aktif yang  terdapat  dalam  karang  lunak Xenia sp. merupakan  senyawa  dari  golongan  diterpenoid dengan nama senyawa xenimanadins.
Umumnya  senyawa  terpenoid  dalam tubuh karang lunak berfungsi sebagai pelengkap kegiatan  fisik,  mengikat  tekstur  tubuhnya  yang lunak  dan  lentur,  senyawa  terpen  ini  berfungsi sebagai  racun  untuk  melawan  predator  yang mengancam  kelangsungan  hidupnya  seperti ikan,  krustasea,  ekhinodermata  dan  lain-lain serta  sebagai  senyawa  untuk  menyelamatkan makanannya  dari  biota  lain  (Bakus,  1981). Karang  lunak  pada  waktu  diambil  dari  laut umumnya  mempunyai  bau  atau  aroma  yang tajam.
Senyawa  terpenoid  merupakan  suatu kelompok senyawa kimia dari golongan hidrokarbon  isometik  yang  mempunyai  rumus molekul  C10H16.  Senyawa  ini  umumnya ditemukan  dalam  minyak  esensial  atau  minyak atsiri  dari  tumbuh-tumbuhan  yang  berdaun harum  misalnya  sebangsa  pinus,  damar,  karet dan  sebagainya  senyawa  ini  berbau  harum  dan wangi  dan  sering  digunakan  dalam  industri farmasi  terutama  dalam  pembuatan  obat-obat meliputi  antibiotik  seperti  anti-bakteri,  anti- jamur dan anti-tumor (Manuputty 1998).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan April - Juli 2015 di Laboratorium Farmakognosi dan  Fitokimia  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Sam Ratulangi.
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  Masker,  gunting,  sarung tangan,  pisau,  shorkel,  fins,  tabung  oksigen, Erlenmeyer,  gelas  ukur,  gelas  kimia,  tabung reaksi,  rak  tabung  reaksi,    pipit  tetes,  micro tubes,  cawan  petri,  timbangan  analitik,  corong pisah,  kertas  saring,  batang  pengaduk, rotary
evaporator ,  ultrasonic  ultra  8060  D-H,  pinset, inkubator incucell, autoklaf, pipet tetes, mikropipet,  Laminar  air  flow N  Biotek ,  mistar berskala, dan kamera.
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu Karang lunak Xenia sp . bakteri uji Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli, aquades,  etanol,  metanol,  kloroform,  n-heksan, kapsul  kloramfenikol, Nutrien  Agar ,  pepton, ekstrak  daging  ( beef  extract ),  natrium  klorida, cakram  ( paper disc )  ukuran  6  mm,  kertas label, tissue dan aluminium foil.

## Pengambilan sampel
Sampel diperoleh dari perairan pantai Malalayang  kota  Manado,  menggunakan  alat bantu  (masker,  shorkel,  fins  dan  tabung oksigen). Sampel dibersihkan dari pengotor, lalu dipotong kecil-kecil kemudian langsung direndam  dengan  cara  maserasi  dengan  etanol dan dibawa ke Laboratorium Farmakognosi dan Fitokimia  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas  Sam  Ratulangi.  Sampel  difoto  lalu diberi lebel serta nomor sampel.

## Pembuatan Ekstrak
Ekstrak karang lunak Xenia sp. sebanyak  135,4  g  dibuat  dengan  cara  maserasi. Sampel  yang  dipotong  kecil-kecil  dimasukkan ke  dalam  Erlenmeyer,  kemudian  direndam dengan  larutan  etanol  96%  sebanyak  200  mL, ditutup dengan aluminium foil selama 1x24 jam. Sampel  yang  direndam  kemudian  disaring menggunakan kertas saring sehingga menghasilkan  filtrat  1  dan  debris  1.  Debris  1 kemudian  ditambah  dengan  larutan  etanol sebanyak  200  mL,  ditutup  dengan  aluminium foil  dan  dibiarkan  selama  1x24  jam,  sampel tersebut  disaring  menggunakan  kertas  saring menghasilkan  filtrat  2  dan  debris  2.  Debris  2 kemudian  ditambah  dengan  larutan  etanol sebanyak  200  mL,  ditutup  dengan  aluminium foil  selama  1x24  jam,  sampel  tersebut  lalu kemudian  disaring  menggunakan  kertas  saring menghasilkan  filtrat  3  dan debris  3.  Filtrat  1,  2, dan 3 dicampur menjadi satu kemudian disaring, lalu dievaporasi menggunakan rotary evaporator ,  sehingga  diperoleh  ekstrak  etanol sampel  sebanyak  4,718  g  sebelum  difraksinasi,
diambil  sebanyak  0,030  g  ekstrak  etanol  untuk dilakukan uji aktivitas antibakteri.

## Pembuatan Fraksinasi
Sebanyak 2,000 g ekstrak etanol karang lunak Xenia sp.  dimasukkan  ke  dalam  corong pisah,  kemudian  dilarutkan  dengan  metanol sebanyak  200  mL  dan  air  sebanyak  50  mL setelah itu ditambahkan pelarut heksan sebanyak 250  mL  kemudian  dikocok  berulangkali  sampai homogen.  Dibiarkan  hingga  terbentuk  2  lapisan yaitu  lapisan  MeOH  dan  lapisan  heksan. Masing-masing lapisan di tampung dalam wadah yang  berbeda.  Lapisan  heksan  selanjutnya dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator hingga kering, lalu ditimbang dan ini dinamakan fraksi  heksan.  Selanjutnya  lapisan  MeOH ditambahkan  dengan  air  sebanyak  125  mL hingga  seperti  volume  awal  yaitu  250  mL kemudian  dipartisi  dengan  pelarut  kloroform sebanyak  500  mL  dalam  corong  pisah,  setelah itu  dikocok  berulangkali  hingga  homogen. Dibiarkan  sampai  terbentuk  dua  lapisan  yaitu lapisan  MeOH  dan  kloroform.  Masing-masing lapisan  ditampung  dalam  wadah  yang  berbeda. Lapisan  kloroform  dalam  wadah  selanjutnya dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator hingga  kering  lalu  ditimbang.  Ini  dinamakan fraksi kloroform. Lapisan MeOH yang ditampung  pada  wadah  yang  lain  kemudian dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator hingga  kering  lalu  ditimbang  berat  sampel.  Ini dinamakan  fraksi  MeOH.  Ketiga  fraksi  tersebut digunakan dalam pengujian antibakteri.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  aktivitas  antibakteri  ini  distrerilkan terlebih  dahulu.  Alat-alat  gelas  disterilkan dengan  autoklaf  pada  suhu  121  ˚C  selama  15 menit, pinset dibakar dengan pembakaran diatas api  langsung  dan  media  disterilkan  diautoklaf pada suhu 121 ˚C selama 15 menit.

## Pembuatan media cair B1
Pepton  0,5  g,  ekstrak  daging  ( meat extract )  0,3  g,  natrium  klorida  0,3  g,  dan aquades  sebanyak  100  mL  diaduk  sampai  rata kemudian dibuat homogen menggunakan magnetic  stirrer lalu  diautoklaf  pada  suhu  121
˚C  selama  15  menit,  ukur  pH  dengan menggunakan  kertas  pH.  Dipipet  1  mL  media cair  B1,  kemudian  masukkan  dalam  tabung reaksi  dan  tutup  dengan  alminium  foil.  Media cair  B1  siap  digunakan  sebagai  media  kultur bakteri (Ortez, 2005).

## Kultur Bakteri
Media  cair  B1  yang  sudah  disiapkan sebelumnya,  ditambahkan  dengan  masing- masing bakteri yang sudah dikultur ( Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli ) sebanyak  100  µL  kedalam  tabung  reaksi  yang berbeda.  Tutup  dengan  aluminium  foil  tiap tabung reaksi dan dimasukkan kedalam inkubator  selama  1x24  jam  pada  suhu  37  ˚C (Ortez, 2005).

## Pembuatan Kontrol Negatif
Kontrol  negatif  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  menggunakan  metanol, dengan  cara  membuat  larutan  stok  metanol dengan  mengambil  sebanyak  0,5  mL  metanol kemudian  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi, tutup  dengan  alminium  foil.  Kontrol  negatif digunakan  sebagai  pembanding  dan  pelarut untuk  pembuatan  larutan  kontrol  positif  dan pembuatan larutan uji.

## Pembuatan Kontrol Positif
Kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan  obat kapsul  kloramfenikol  250  mg.  Satu  kapsul kloramfenikol  dibuka  cangkang  kapsulnya kemudian timbang serbuk dalam kapsul sebanyak  30  mg.  Kemudian  serbuk  dilarutkan dalam  metanol  0,5  mL  untuk  memperoleh larutan stok kloramfenikol 250 µg/50µL.

## Pembuatan Larutan Uji
Pembuatan  larutan  uji  hasil  ekstraksi dan  fraksinasi  karang  lunak Xenia sp.  dengan kosentrasi 250 µg/50 µL  yaitu dengan membuat larutan  stok,  dengan  cara  ditimbang  0,0030  g ekstrak kasar etanol, kemudian dilarutkan dalam 0,5 mL metanol. Perlakuan yang sama dilakukan untuk fraksi heksan, fraksi kloroform dan fraksi metanol.

## Pembuatan Media Agar B1
Pepton  0,5  g,  ekstrak  daging  ( meat extract )  0,3  g,  natrium  klorida  0,3  g, nutrient agar 1,5 g dan aquades sebanyak 100 mL diaduk sampai rata kemudian dibuat homogen menggunakan magnetic  stirrer lalu  diautoklaf pada  suhu  121  ˚C  selama  15  menit.  Lakukan pengujian pH dengan kertas pH. Media agar B1 siap  digunakan  untuk  uji  aktivitas  antibakteri (Ortez, 2005).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  agar (disc diffusion  Kirby  and  Bauer). Pada  pengujian aktivitas  antibakteri  ini,  cakram  ( paper  disc ) yang  digunakan  berukuran  6  mm  dengan  daya serap  50  µL  tiap  cakram.  Sampel  yang  telah ditentukan  kosentrasinya  (250  µg/50  µL) ditotolkan  pada  masing-masing  cakram  dengan menggunakan mikropipet. Untuk media agar B1 yang sudah diautoklaf pada suhu 121 ˚C selama 15  menit,  kemudian  dinginkan  sampai  suhu  40 ˚C.  Tuangkan  media  agar  B1  ke  cawan  petri, Ambil  sebanyak  100  µL  bakteri  yang  telah  di kultur  dalam  tabung  reaksi,  dipipet  dan diinokulasi  pada  media  agar  B1  dan  tunggu sampai  media  agar  B1  mengeras.  Masing- masing  cawan  petri  diberi  label  dan  nomor sampel  yang  sesuai.  Letakkan  kertas  cakram yang  telah  ditotolkan  sampel  uji  karang  lunak Xenia sp.  dengan  pinset  kedalam  cawan  petri lalu diinkubasi selama 1x24 jam (Ortez, 2005).

## Pengamatan dan Pengukuran
Pengamatan  dapat  dilakukan  setelah 1x24 jam massa inkubasi. Daerah pada sekitaran cakram menunjukkan kepekaan bakteri terhadap antibiotik atau bahan antibakteri yang digunakan sebagai  bahan  uji  yang  dinyatakan  dengan diameter  zona  hambat.  Diameter  zona  hambat diukur dalam satuan millimeter (mm) menggunakkan  mistar  berskala  dengan  cara diukur  diameter  total  zona  bening  cakram. Kemudian  diameter  zona  hambat  tersebut dikategorikan  kekuatan  daya  antibakterinya berdasarkan  penggolongan  Davis  dan  Stoud (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi dan Fraksinasi
Ekstraksi  karang  lunak Xenia sp. dimaksudkan  untuk  memisahkan  atau  menyari senyawa  aktif  yang  ada  dalam  bahan.  Hal  ini sesuai  dengan  prinsip  ekstraksi  pelarut  yaitu dengan  memisahkan  dua  komponen  atau  lebih berdasarkan  perbedaan  kelarutan  komponen tersebut (Suryanto, 2012).
Untuk  menentukan  komponen  senyawa aktif  yang  ingin  didapatkan  maka  pemilihan pelarut sendiri menjadi hal sangat penting untuk menentukan  komponen  yang  ingin  didapatkan. Suryanto (2012),  mengatakan bahwa pemilihan pelarut  pada  umumnya  dipengaruhi  oleh beberapa faktor, antara lain selektivitas, kelarutan dan titik didih.
Ekstraksi  sampel  sendiri  digunakan pelarut  etanol  96%  karena  pelarut  etanol menyari hampir keseluruhan kandungan simplisia  baik  non  polar,  semi  polar  maupun polar  (Iswanti,  2009).  Depkes  RI  (1986), menyatakan bahwa etanol mempunyai sifat yang selektif,  dapat  bercampur  dengan  air  dengan segala perbandingan, ekonomis, mampu mengekstrak sebagain besar senyawa kimia yang terkandung  dalam  simplisia  seperti  alkaloida, minyak  atsiri,  glikosida,  kurkumin,  kumarin, antrakinon,  flavonoid,  steroid,  damar  dan klorofil.  Sedangkan  lemak,  malam,  tannin  dan saponin, hanya sedikit.
Pada  penelitian  ini  fraksinasi  dilakukan dengan  metode  FCC  (Fraksinasi  Cair-Cair) dengan pelarut n-heksan, kloroform dan metanol secara berkesinambungan dengan sifat kepolaran pelarut yang berbeda-beda. Fraksinasi dilakukan dengan berbagai pelarut dengan tingkat kepolaran yang berbeda karena tujuan fraksinasi yaitu  untuk  memisahkan  golongan  utama  yang lain,  merupakan  suatu  pemisahan  senyawa berdasarkan  perbedaan  kepolaran.  Pemisahan jumlah  dan  jenisnya  menjadi  fraksi  berbeda. Mula-mula simplisia disari berturut-turut dengan larutan  penyari  yang  berbeda-beda  polaritasnya. Masing-masing  pelarut  secara  selektif  akan memisahkan kelompok kandungan kimia tersebut.  Mula-mula  disari  dengan  pelarut  yang non polar, kemudian disari dengan pelarut yang
kurang  polar  dan  terakhir  dengan  pelarut  polar (Harborne, 1987).
Tabel  1.  Rendemen  ekstrak  dan  fraksi Xenia sp.
No Sampel Rendemen % Warna Sampel 1 EE 3,48% Orang pekat 2 FH 8,13% Hijau kekuningan 3 FK 47,5% Jingga pekat 4 FM 40,9% Kuning
Keterangan :
EE : Ekstrak etanol, FH : Fraksi heksan, FK : Fraksi kloroform, FM : Fraksi metanol.
Untuk uji aktivitas antibakteri digunakan  3  fraksi  yaitu  fraksi  heksan,  fraksi kloroform, dan fraksi metanol-air (MeOH). Agar senyawa  aktif  yang  ada  pada  ekstrak  etanol dapat  dikelompokkan  lebih  spesifik  maka digunakkan  bermacam  pelarut  yang  memiliki tingkat  kepolaran  berbeda.  Oleh  karena  itu pemilihan  pelarut  fraksi  didasarkan  pada bermacam-macam  tingkat  kepolaran,  yaitu pelarut  MeOH  yang  paling  polar,  pelarut kloroform  untuk  semi  polar  dan  pelarut  heksan untuk fraksi non polar.
Hasil  warna  filtrat  untuk  ekstrak  etanol yaitu orange pekat dengan berat 135,4 g dengan rendemen  3,48  %.  Untuk  pengujian  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  diambil  0,030  g  dari 4,718  g.  Ekstrak  etanol  2,000  g  kemudian dipartisi  dengan  pelarut  heksan  dan  metanol-air (MeOH)  menghasilkan  2  lapisan  yaitu  lapisan heksan  dan  lapisan  MeOH.  Partisi  pelarut heksan  menghasilkan  filtrat  berwarna  hijau kekuningan  ekstrak  yang  didapat  0,163  g  dan rendemen  8,13%.  Lapisan  MeOH  kemudian dipartisi  dengan  pelarut  kloroform  sehingga terbentuk  2  lapisan  yaitu  lapisan  kloroform  dan lapisan  MeOH.  Partisi  pelarut  kloroform menghasilkan filtrat berwarna jingga pekat yang didapat  0,950  g  dan  47,5  %  rendemen. Sedangkan  partisi  pelarut  MeOH  menghasilkan filtrat berwarna kuning yang didapat 0,819 g dan 40,9 % rendemen.
Pada  pengujian  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol,  fraksi  MeOH,  fraksi  heksan  dan fraksi  kloroform  karang  lunak  Xenia  sp. terhadap  bakteri  Staphylococcus  aureus  dan Escherichia  coli  menggunakan  metode  difusi agar (difusi Kirby dan Bauer yang dimodifikasi). Metode ini  menjadi  pilihan  karena  untuk  tujuan klinis dengan mempertimbangkan
kesederhanaan teknik, ketelitian, metode serbaguna  bagi  semua  bakteri  patogen  yang tumbuh  cepat  dan  sering  digunakan  dalam  uji kepekaan antibiotik dalam program pengendalian mutu (Mpila, 2012).
Dalam  uji  aktivitas  antibakteri,  hasil diperoleh  melalui  pengamatan  yang  dilakukan selama  1x24  jam  massa  inkubasi  dengan  3  kali pengulangan  untuk  masing-masing  bakteri. Terbentuknya  zona  hambatan  yaitu  ditandai dengan  daerah  bening  disekeliling  cakram menunjukkan  kepekaan  bakteri  terhadap  bahan antibakteri  maupun  antibiotik  yang  digunakan sebagai kontrol postif.
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  dan  hasil pengukuran  diameter  zona  hambat  ekstrak  , fraksi MeOH, fraksi heksan dan fraksi kloroform karang  lunak  Xenia  sp.  terhadap  antibakteri Staphylococcus  aureus  dan  Escherichia  coli dapat dilihat pada gambar 6 dan tabel 3 dan 4.
Gambar 1.Hasil uji aktivitas antibakteri dan hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak etanol, Fraksi MeOH, fraksi heksan dan fraksi kloroform Karang Lunak Xenia sp. terhadap bakteri : (a) Staphylococcus aureus dan (b) Escherichia coli
Keterangan Gambar :Ekstrak etanol, (2) fraksi Heksan, (3) Fraksi Kloroform, (4)Fraksi MeOH, (5) Kontrol Positif, (6) Kontrol negatif
Tabel 2. Hasil rata-rata  pengujian ekstrak etanol dan  fraksi  Karang  Lunak Xenia sp.    terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli .
No.  Sampel
Diameter  zona  hambat  (mm) terhadap bakteri uji Escherichia coli Staphilococus aureus 1 EE 8,66 9,33 2 FH 8,33 8,66 3 FK 9,00 9,66 4 FM 8,66 9,00 5 KP 40,66 38,00 Keterangan : EE : Ekstrak etanol, FH :  Fraksi heksan, FK : Fraksi kloroform, FM : Fraksi
MeOH, KP : Kontrol positif
Berdasarkan kriteria Davis dan Stout (1971) maka ekstrak Xenia sp., fraksi MeOH, fraksi kloroform  dan  fraksi  heksan  merupakan ekstrak  yang  efektif  untuk  menghambat bakteri Stapylococcus aureus karena ekstrak dan  fraksi  ini  memiliki  kategori  yang  kuat untuk  menghambat  bakteri Staphylococcus aureus .  Hal  ini  sesuai  dengan  yang dikatakan  Lathifah  (2008)  yaitu  umumnya kelompok  bakteri  gram  positif  lebih  peka terhadap  senyawa  yang  memiliki  aktivitas antimikroba dibanding dengan gram negatif. Perbedaan  sensitifitas  bakteri  gram  positif dan  bakteri  gram  negatif  dapat  disebabkan oleh  perbedaan  struktur  dinding  sel  yang dimiliki oleh masing-masing bakteri.
Sedangkan  untuk  bakteri Escherichia  coli fraksi  MeOH  dan  fraksi  kloroform  adalah yang paling efektif untuk bakteri Escherichia coli . Ini sesuai dengan penelitian Renhoran (2012) yang menyatakan  bahwa  gram  negatif  cenderung bersifat  sensitif  terhadap  antimikroba  yang bersifat polar.
Hasil  penelitian  untuk  fraksi heksan menunjukkan  bahwa  terbentuk  zona  bening pada  bakteri Escherichia  coli dan  bakteri Staphylococcus  aureus namun  dengan  zona hambat  yang  relatif  rendah  dibandingkan hasil  fraksi  yang  lain.  Data  tersebut menunjukkan  bahwa  pada  fraksi  heksan hanya  memiliki  sedikit  senyawa  spesifik
Gambar a
Gambar b
yang dapat menghambat bakteri Escherichia coli dan pada Staphylococcus aureus .
Didukung  dengan  data  penelitian  dari Fattorusso et  al (2008)  menyatakan  bahwa karang lunak Xenia sp.,  yang diperoleh dari teluk Manado mengandung senyawa diterpenoid dengan nama senyawa xenimanadins.  Maka  diduga  bahwa  fraksi kloroform karang lunak Xenia sp.,mengandung senyawa golongan
diterpenoid yang  mempunyai  aktivitas antibakteri.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan Fraksi karang lunak Xenia sp., maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak,  fraksi  heksan,  fraksi  kloroform  dan fraksi  MeOH  efektif  menghambat  bakteri Escherichia  coli dengan  nilai  zona  hambat sebesar 8,66 mm untuk ekstrak, 8,33 mm untuk fraksi  heksan,  9,00  mm  untuk  fraksi  kloroform dan  8,66  mm  untuk  fraksi  MeOH  sedangkan pada  bakteri Staphylococcus  aureus nilai  zona hambatnya yaitu pada ekstrak sebesar 9,33 mm, fraksi  heksan  sebesar  8,66,  fraksi  kloroform sebesar 9,66 dan fraksi MeOH sebesar 9,00 mm. Hasil  tersebut  menyatakan  bahwa  ekstrak  dan fraksi efektif menghambat bakteri dan dikategorikan  kuat  berdasarkan  kriteria  Davis dan Stoud.
Dari  semua  ekstrak  dan  fraksi,  fraksi kloroform  memiliki  nilai  zona  hambat  terbesar pada  kedua  bakteri  uji  yaitu  sebesar  9,00  mm pada  bakteri Escherichia  coli dan  sebesar  9,66 mm  pada  bakteri Staphylococcus  aureus . Sedangkan nilai zona hambat terendah dibandingkan  fraksi  lain  yaitu  pada  fraksi heksan, 8,33 mm untuk bakteri Escherichia coli dan  8,66  mm  pada  bakteri Staphylococcus aureus .

## Saran
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan Fraksi karang lunak Xenia sp.,  maka  dapat  dikemukakan beberapa saran sebagai berikut :
1. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk  mengetahui  kosentrasi  hambat  minimum maupun  kosentrasi  bunuh  minimum  pada  fraksi kloroform.
2. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk  mengetahui  senyawa  apa  yang  efektif menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus maupun Escherichia  coli yang  ada  pada  fraksi kloroform.

## DaftarPustaka
Bakus,  G.  J.  1981.  Chemical  defense mechanisms  on  the  Great  Barrier Reef.  Australia.  Science,  N.Y.  211: 497-499
Bayer, F. M. 1956. Octocorallia in: Treastie on  invertebrata  paleontology,  Part  F Coeloenterata.  (R.C.  Moore  ed). Geologycal  Society  of  America  and Univ. Kansas Press.
Davis,  W.  W.,  and  T.  R.  Stout.  1971.  Disc plate  method  of  microbiological assay.  Journal  of  microbiology.  22:
659-665. Depkes RI. 1986. Sediaan Galenik.
Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia. Jakarta
Ditjen  POM.  1979.  Farmakope  Indonesia Edisi Ketiga. Departemen Kesehatan RI. Jakarta.
Ditjen  POM.  2000.  Parameter  Standar
Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat. Cetakan Pertama. Jakarta: Depertemen Kesehatan RI. Edrada,  R.  A.,  V.  Wray.,  D.  Handayani.,  P. Schupp.,  M.  Balbin.,  Oliveros.,  and
P.  Proksch.  2000.  Structure-Activity Relationship of Bioactive Metabolites  from  Some  Indo-Pacific Marine  Invertebrates  in  Studies  in
Natural Products Chemistry, Elsevier Sciences. 21: 251-255.
El-Sayed,  K.  A  et  al.  2001.  Hamann.  New Manzamine  Alkaloids  with  Potent Activity Against Infectious Diseases,
J. Am. Chem., Soc., 123: 1804-1808. Fabricius,  K.,  and  P.  Alderslase.  2001.  Soft Coral  and  Sea  Fans.  Australian Institut Of Marine Science.
Australia.
Fattorusso,  E  et  al.  2008.  Xenimanadins  A-
D, a family of xenicane diterpenoids from  the  Indonesia  soft  coral  Xenia sp. Tetrahedron. 64: 3141-3146
Ginting, E. L., Warouw, V., Suleman, R. W.
Aktivitas  Antibakteri  Dari  Ekstrak Kasar  Bakteri  Yang  Berasosiasi Dengan Sponge Acanthostrongylophora  sp.  [skripsi]. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Sam Ratulangi,
Manado.
Ganiswarna,    S.  1995.  Farmakologi  dan Terapi  edisi  4.  Bagian  Farmakologi Fakultas    Kedokteran  Universitas Indonesia. Jakarta.
Hadisahputra,  S.,  dan  U.  Harahap.  1994.
Biokimia Dan Farmakologi Antibiotik. USU Press, Medan Harborne,  J.  B.  1987.  Metode  Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Edisi kedua. Diterjemahkan oleh Kosashi Padmawinata  dan  Iwang  Soedira. ITB Press, Bandung.
Harti, A. S. 2012. Dasar-Dasar Mikrobiologi Kesehatan. Nuha Medika, Surakarta.
Ismet,  M.  S.  2007.  Penapisan  Senyawa Bioaktif  Spons  Spons  Aaptops  dan Petrosia sp. dari lokasi yang berbeda. [skripsi]. Pasca sarjana ITB, Bandung. Iswanti, D.A. 2009. Uji Aktivitas Antibakteri  Fraksi  N-Heksan,  Fraksi Etil  Asetat,  Dan  Fraksi  Etanol  96% Daun Ekor Kucing (Acalypha Hispida  Burm.  F)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923
Secara  Dilusi.  [skripsi].  Fakultas Farmasi  Universitas  Setia  Budi, Surakata.
Jawetz, et al 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Edisi 1. Selamba Medika, Jakarta. Ortez,  J.H.  2005.  Disk  Diffusion  testing  in manual of
antimicrobial susceptibility testing. Marie B. Coyle (Coord.  Ed).  American  society  for Microbiology.
Katzung,  B.  G.  2004.  Farmakologi  Dasar dan  Klinik.  Buku  ke-3  Edisi  ke-8. Penerjemah  dan  editor:  Bagian Farmakologi  FK  UNAIR.  Salemba Medika, Surabaya.
Mahaza,  N.  S.  2003.  Kajian  kerusakan ekosistem  terumbu  karang  akibat penangkapan ikan hias dan pengambilan bunga karang di kelurahan Pulau Panggang Kepulauan  Seribu  [skripsi].  Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  IPB,
Bogor.
Manuputty,  A.  E.  W.  1996.  Zooxanthelae pada  Karang  dan  Hubungannya dengan  Karakteristik  Lingkungan Perairan  di  Terumbu  Karang  Pulau Pari,  Pulau-pulau  Seribu  [tesis]. Program Pascasarjana, IPB, Bogor.
Manuputy.  A.  1998.  Beberapa  Karang Lunak (Alcyonaria) Penghasil
Substansi  Bioaktif.  Seminar  Potensi Farmatik  dan  Bioaktif  Sumberdaya Hayati Terumbu Karang. Manado
Mpila,  D.A.  2012.  Uji  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  daun  mayana  (Coleus atropurpureus benth) terhadap Staphylococcus  aureus,  Echerichia coli  dan  Pseudomonas  aeruginosa secara  invitro.  [skripsi].  Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Sam Ratulangi, Manado. Radhika, P. 2006. Chemical constituens and biological  activities  of  the  soft  coral of  genus  Cladiella:  A  review. Biochemical Systematics and Ecological 34: 781-789.
Renhoran,  W.  2012.  Aktivitas  Antoksidan dan Mikrobiologi Ekstrak Sargassum polycystum.  [skripsi].  Departemen Teknologi  Hasil  Perairan  Fakultas Perikanan  Dan  Ilmu  Kelautan  IPB, Bogor.
Siswandono    dan    Soekardjo.    1995.  Kimia
Medisinal, hlm. 544. Penerbit Universitas Airlangga Press.
Surabaya.
Suryanto,  E.  2012.  Fitokimia  Antioksidan. Penerbit  Putra  Media  Nusantara.
Surabaya.
Todar, K. 2009. Escherichia coli. University of Winconsin – Medison Department of Bacteriology. http//www.textbookofbacteriology.n et/ecoli.html  [Diakses  tanggal  3 agustus]. Todar, K. 2009. Staphylococcus Aureus.University  of  Winconsin  –
Medison DepartmentofBacteriology.http//ww
w.textbookofbacteriology.net/staph. html [Diakses tanggal 3 agustus].
Wattimena,  J.  R.,    Sugiarso,  N.  C., Widianto,  M.  B.,    Sukandar,  E.  Y., Soemardji,  A.  A.,    Setiabudi,  A.  R. 1991.    Farmakologi    dan  Terapi Antibiotik. UGM Press. Yogyakarta.
Warsa,  U.  S.  1994.  Kokus  positif  gram:
dalam mikrobiologi kedokteran.
Binarupa Aksara. Jakarta.
Van  Soest,  R.  W.  1989.  The  Indonesian Sponge  Fauna  :  A  Status  Report. Institute  of  Taxonomic  Zoology, University  of  Amsterdam.Perikanan Dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor.
Settle, F. 1997. Instrumental Techniques for Analytical  Chemistry .  Prentice-Hall,
Inc. Upper Sadle River, New Jersey.
Skoog,  D.  A.,  Holler,  F.  J.,  Nieman,  T.  A. 1998. Principles  Of  Instrumental Analysis,  5th  Edition .  Saunders College Publishing. Philadelphia.
Suryanto,  E.  2012. Fitokimia  Antioksidan .
Penerbit Putra Media Nusantara, Surabaya. Yusman, D.A. 2006. HubunganAntaraAktivitasBakteriKit osandanCiriPermukaanDindingSelBa kteri. [Skripsi] FMIPA IPB.