## UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN KUMIS KUCING
(ORTHOSIPHON ARISTATUS (BLUME) MIQ.) SEBAGAI

## ANTIBAKTERI TERHADAP PROPIONIBACTERIUM ACNES DENGAN MENGGUNAKAN DUA PELARUT
Varda Arianti 1) ; Fatikhah Fikriyan 2) ; Milda Rianty Lakoan 3) ; Krismayadi 4)
1) varda.11arin@gmail.com , Institut Kesehatan Hermina
2) fatikhahf1001@gmail.com , Institut Kesehatan Hermina
3) mildariantylakoan@gmail.com , Institut Kesehatan Hermina 4) krismayadikrismayadi199@gmail.com , Universitas Binawan

## Abstract
Acne vulgaris is a skin health problem which often experienced by people, can be caused by Propionibacterium acnes  infection.  Previous  supporting  research  has  proven  that  the  ethanol  extract  of  cat's  whisker  leaves (Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.) contains secondary metabolites which have an antibacterial role such as alkaloids, saponins, terpenoids, flavonoids and tannins. The aim of this research is to determine the antibacterial ability  of  cat's  whisker  leaves  extract  against  Propionibacterium  acnes  using  96%  ethanol  and  n-hexane.  The extraction method used was maceration, and used the disc diffusion method which was carried out 3 times to test antibacterial activity with various concentrations, namely 10%, 20%, 40%, 60%, 80%, 0.1% clindamycin positive control, and 0.1% clindamycin positive control.  negative n-hexane and 96% ethanol. This research shows that 96%  ethanol  extract  of  cat's  whisker  leaves  at  concentrations  of  10%,  20%,  40%,  60%,  80%  against Propionibacterium acnes obtained an average of 3.76 mm, 5.88 mm, 10.71 mm, 12.08 mm, 17.36 mm and n-hexane extract with an average of 3.68 mm, 5.30 mm, 7.75 mm, 12.03 mm, 17.21 mm. The conclusion that can be drawn is that 96% ethanol extract and n-hexane of cat's whisker leaves have antibacterial ability to inhibit the growth of Propionibacterium acnes with the best concentration is 80%.
Keywords: Antibacterial, Acne, Disc Diffusion, Orthosiphon aristatus (Blume) Miq., Propionibacterium acnes

## Abstrak
Jerawat ialah masalah kesehatan kulit yang kerap dialami oleh masyarakat, dapat diakibatkan dari adanya infeksi Propionibacterium acnes . Penelitian pendukung terdahulu membuktikan bahwa ekstrak etanol daun kumis kucing ( Orthosiphon  aristatus (Blume)  Miq.)  mengandung  zat  metabolit  sekunder  yang  memiliki  peran  sebagai antibakteri  seperti  alkaloid,  saponin,  terpenoid,  flavonoid,  dan  tanin.  Tujuan  dari  penelitian  ini  yaitu  untuk mengetahui kemampuan antibakteri ekstrak daun kumis kucing terhadap Propionibacterium acnes menggunakan etanol  96%  dan  n-heksana.  Metode  ekstraksi  yang  dipakai  yaitu  maserasi,  serta  menggunakan  metode  difusi cakram yang dilakukan 3 kali pengulangan untuk pengujian aktivitas antibakteri dengan berbagai konsentrasi yaitu 10%,  20%,  40%,  60%,  80%,  kontrol  positif  klindamisin  0,1%,  dan  kontrol  negatif  n-heksana  dan  etanol  96%. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% daun kumis kucing pada konsentrasi 10%, 20%, 40%, 60%, 80% terhadap Propionibacterium acnes memperoleh rata-rata sebesar 3,76 mm, 5,88 mm, 10,71 mm, 12.08 mm, 17,36 mm dan ekstrak n-heksana dengan rata-rata sebesar 3,68 mm, 5,30 mm, 7,75 mm, 12.03 mm, 17,21 mm. Kesimpulan  yang  dapat  diambil  bahwa  ekstrak  etanol  96%  dan  n-heksana  daun  kumis  kucing  memiliki kemampuan  antibakteri  dalam  menghambat  pertumbuhan Propionibacterium  acnes dengan  konsentrasi  terbaik yaitu 80%.
Kata Kunci: Antibakteri, Difusi Cakram, Jerawat, Orthosiphon aristatus (Blume) Miq., Propionibacterium acnes

## PENDAHULUAN
Kesehatan  kulit  dianggap  sangat  penting  bagi  semua  orang,  terutama  bagi  remaja. Jerawat ialah masalah kesehatan kulit yang kerap dialami oleh masyarakat (Lestari et al ., 2020). Acne  vulgaris merupakan  masalah  pada  kulit  yang  diakibatkan  oleh  kelenjar  minyak  yang tersumbat, adanya kulit mati, dan infeksi Propionibacterium acnes (Asbullah et al ., 2021). Propionibacterium acnes adalah bakteri utama penyebab jerawat yang bersifat anaerob fakultatif,  dan  tergolong  bakteri  Gram-positif  (Pariury et  al .,  2021). Mekanisme  timbulnya jerawat diawali ketika bakteri Propionibacterium acnes merusak lapisan kulit bagian stratum korneum dan stratum  basale ,  lalu  mengeluarkan  zat  kimia  yang  membuat  dinding  pori-pori rusak. Inflamasi akan timbul dan meluas ketika jerawat disentuh, sehingga enzim lipase yang
dihasilkan  dapat  membuat  asam  lemak  dan  sebum  yang  tersumbat  akan  mengeras  dan membesar (Hasanah et al ., 2019).
Efek  antibakteri  alami  pada  tanaman  dapat  membunuh  atau  menghambat  timbulnya bakteri Propionibacterium  acnes sehingga  dapat  digunakan  untuk  mengatasi  permasalahan jerawat (Noor Madani et al ., 2021).
Kumis  kucing  ( Orthosiphon  aristatus (Blume)  Miq.) berasal  dari  famili Lamiaceae . sejak lama telah digunakan untuk pengobatan tradisional secara turun temurun oleh masyarakat, dan banyak yang membudidayakannya sebagai tanaman obat keluarga, Khasiat farmakologis yang  terkandung  dalam  tanaman  kumis  kucing  ini  sangat  bervariasi  (Ashraf et  al .,  2018). Senyawa  utama  dengan  kandungan  paling  tinggi  dalam  tanaman  ini  adalah  sinensetin, eupatorin,  danshensu  dan  asam  rosmarinate  (Faramayuda et  al .,  2022).  Daun  kumis  kucing mengandung zat metabolit sekunder yang memiliki peran sebagai antibakteri seperti alkaloid, saponin, terpenoid, flavonoid, dan tanin (Noor Madani et al ., 2021).
Penelitian  pendukung  oleh  (Khalisha et  al .,  2022)  membuktikan  adanya  kemampuan ekstrak  etanol  70%  daun  kumis  kucing  dengan  konsentrasi  1%,  5%,  7,5%,  10%  dalam menghambat bakteri Propionibacterium acnes dengan metode paper disk menghasilkan zona hambat berdiameter sebesar 7,35 mm, 7,49 mm, 7,70 mm, 7,78 mm.
Berdasarkan  uraian  latar  belakang  tersebut,  penelitian  mengenai  efektivitas  ekstrak daun kumis kucing terhadap Propionibacterium acnes dengan menggunakan dua pelarut belum ada  yang  dilaporkan  pada  saat  ini.  Sehingga,  kondisi  tersebut  mendorong  penulis  untuk melakukan  penelitian  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan  antibakteri  dan  besaran konsentrasi  terbaik  ekstrak  n-heksana  dan  etanol  96%  daun  kumis  kucing  yang  terbukti menghambat pertumbuhan Propionibacterium acnes menggunakan dua jenis pelarut yaitu n- heksana  dan  etanol  96%,  karena  pemilihan  pelarut  yang  digunakan  untuk  proses  ekstraksi didasarkan pada sifat kepolaran pelarutnya, dengan berbeda kepolaran maka akan memisahkan jenis senyawa yang berbeda.

## METODE
Penelitian ini dilakukan secara in vitro dan eksperimental dengan melakukan pengujian efektivitas  ekstrak  daun  kumis  kucing  terhadap Propionibacterium  acnes dibubuhkan  7 perlakuan  yaitu  ekstrak  n-heksana  dan  etanol  96%  daun  kumis  kucing  dengan  variasi konsentrasi 10%, 20%, 40%, 60%, 80%, kontrol positif klindamisin 0,1% serta kontrol negatif n-heksana dan etanol 96% untuk menjamin bahwa pelarut yang dipakai tidak mempengaruhi hasil  diameter zona hambat.  Waktu  penelitian ini  berjalan mulai  Oktober  2023  hingga  April 2024 bertempat di Laboratorium Farmakognosi dan Mikrobiologi Institut Kesehatan Hermina.

## Alat
Erlenmeyer 250 mL,  gelas ukur 250 mL, tabung reaksi,  penjepit  tabung reaksi,  pipet tetes, pipet mikro, hotplate , timbangan, pinset, beaker glass 500 mL dan 1000 mL, handscoon , batang  pengaduk,  oven,  blender,  cawan  petri,  inkubator,  jarum  kawat  ose,  autoklaf,  wadah maserasi,  corong, paper  disk  blank ,  lemari  pendingin,  bunsen,  label,  jangka  sorong,  kertas saring, plastic wrap , alumunium foil , pot obat. Bahan
Daun kumis kucing ( Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.), bakteri Propionibacterium acnes ,  klindamisin,  nutrient  agar,  aquadest,  etanol  96%,  n-heksana,  HCl,  pereaksi  Mayer, pereaksi Bouchardat, pereaksi Dragendorf, FeCl 3 1%, H 2 SO 4 , NaOH 10%, BaCl 2 .2H 2 O.

## Prosedur Penelitian Determinasi dan Pembuatan Simplisia
Pengumpulan bahan baku sampel daun kumis kucing ( Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.)  yang  digunakan  ini  diambil  dari  wilayah  Kecamatan  Cilodong,  Kota  Depok  dan
dilakukan determinasi  di Herbarium  Depokensis  (UIDEP), Ruang Koleksi  Biota Universitas Indonesia (RKBUI). Prosedur awal yaitu sortasi basah dengan memisahkan bahan asing tidak diinginkan dari daun kumis kucing. Cuci dengan air bersih mengalir, lalu dilakukan penirisan untuk  menghilangkan  kandungan  air.  Lakukan  perajangan  untuk  mempermudah  kegiatan pengeringan.  Pengeringan  dilakukan  menggunakan  oven  dengan  suhu  45℃  dengan  waktu relatif  sebentar  hingga  daun  kering  sempurna  dan  menghindari  kegosongan.  Ulangi  proses sortasi. Blender hingga menjadi serbuk simplisia. Simpan simplisia di tempat yang aman.

## Pembuatan Ekstrak
Lakukan maserasi dengan 50 g serbuk simplisia yang direndam pelarut yaitu n-heksana maupun  etanol  96%  sebanyak  200  mL.  Simpan  dalam  botol  kaca  gelap  dan  ditutup  rapat. Larutan tersebut disaring. Ampas diremaserasi dengan 200 mL pelarut tiap 24 jam sekali hingga larutan  jernih.  Ekstrak  cair  yang  didapat  kemudian  diuapkan  dengan  oven  pada  suhu  60ºC hingga didapat ekstrak yang kental (Pujiastuti & El’Zeba, 2021).

## Pembuatan Variasi Konsentrasi Ekstrak Kental
Konsentrasi ekstrak n-heksana dan etanol 96% daun kumis kucing yang dipakai adalah 10%, 20%, 40%, 60% dan 80%. Pembuatan dilakukan dengan penimbangan dan pengenceran ekstrak  kental  pekat  dengan  pelarut.  Timbang  stok  sampel  untuk  konsentrasi  paling  besar menggunakan persentase perbandingan % (b/v) (Adigunawan & Bagus, 2018).

## Skrining Fitokimia Uji Alkaloid
Ekstrak ditambah 1 mL  HCl 2 N dan 9 mL aquadest, dipanaskan 2 menit, dinginkan lalu saring. Filtrat ditambah 2 tetes  reagen Mayer menghasilkan kuning  putih  mengendap,  2 tetes reagen Bouchardat menghasilkan coklat hitam mengendap, dan jika ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorf menghasilkan merah bata mengendap (Soemarie et al ., 2018).

## Uji Tanin
Ekstrak  ditambah  10  mL  aquadest,  lalu  diencerkan  filtratnya  hingga  tidak  berwarna. Ambil 2 mL lalu tambah 1-2 tetes pereaksi FeCl 3 1%. Warna hijau kehitaman atau biru positif tanin (Soemarie et al ., 2018). Uji Flavonoid Ekstrak ditambah 3 tetes H 2 SO 4 pekat, menghasilkan cairan kuning tua, merah kebiruan, jingga merah positif adanya senyawa flavonoid. Uji NaOH dengan cara menambahkan ekstrak dengan  2-4  tetes  larutan  NaOH  10%,  perubahan  warna  menjadi  kuning  kecoklatan  (Erwan Kurnianto et al ., 2021).

## Uji Saponin
Ekstrak ditambah 10 mL aquadest panas. Dinginkan lalu kocok kuat selama 10 detik. Busa terbentuk selama > 10 menit setinggi 1-10 cm. Penambahan HCl pekat 1 tetes membuat busa tidak hilang yang artinya positif mengandung saponin (Soemarie et al ., 2018).

## Uji Steroid dan Terpenoid
Ekstrak ditambah 3 tetes HCl pekat dan 1 tetes H 2 SO 4 pekat. Jika cairan warna hijau maka  positif  mengandung  steroid.  Jika  warna  merah  atau  ungu  maka  positif  mengandung terpenoid (Sari et al ., 2021).
Analisis In Vitro

## Pembuatan Media Pertumbuhan Bakteri
Buat nutrient agar dengan melarutkan sebanyak 28 g dalam 1 L aquadest, lalu diaduk dan dipanaskan hingga mendidih. Media disterilisasi dengan autoklaf (Liani, 2017). Tuangkan sebanyak ± 20 mL pada cawan petri. Biarkan dingin dan membeku. (Andayani et al ., 2022)

## Inokulasi Bakteri
Ambil bakteri uji dengan jarum inokulasi yaitu kawat ose lalu tanamkan dengan cara gores pada media agar. Inkubasi selama 24 jam dengan suhu 37°C (Gerung et al ., 2021).

## Pembuatan Larutan Mc.Farland 0,5
Buat  larutan  1%  BaCl 2 .2H 2 O  dengan  melarutkan  0,1  g  dalam  10  mL  aquadest.  Buat larutan  1%  H 2 SO 4 dengan  melarutkan  0,1  mL  dalam  10  mL  aquadest.  Pipet  0,05  mL  1% BaCl 2 .2H 2 O dan 9,95 mL 1% H 2 SO 4 . Homogenkan hingga larutan keruh (Gerung et al ., 2021).

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Ambil  biakan  bakteri  dengan  kawat  ose.  Suspensikan  ke  dalam  10  mL  NaCl  0,9% sampai diperoleh warna kekeruhan setara dengan larutan standar Mc.Farland 0,5, jika sesuai maka suspensi ini dapat digunakan sebagai bakteri uji (Gerung et al ., 2021).

## Uji Aktivitas Antibakteri Metode Paper Disk
Pengujian dilakukan menggunakan paper disk blank berdiameter 6 mm yang direndam 10  menit  ke  dalam  masing-masing  larutan  yaitu  dengan  n-heksana  dan  etanol  96%  (kontrol negatif),  klindamisin  (kontrol  positif),  ekstrak  kental  (kelompok  perlakuan).  Percobaan dilakukan pengulangan sebanyak 3 buah (triplo). Paper disk blank diletakkan pada permukaan media  yang  telah  diinokulasikan  bakteri.  Perlakuan  tersebut  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu  37  C.  Zona  jernih  akan  tampak  dan  diukur  dengan  jangka  sorong  untuk  mengetahui derajat kekuatan hambatan (Karundeng et al ., 2022).

## Pengamatan dan Pengukuran Daya Zona Hambat
Pengukuran dilakukan setelah masa inkubasi pada suhu 37°C 1x24 jam. Diamati zona hambat (zona bening) di sekitar paper disk blank pada  setiap ekstrak yang digunakan. Ukur diameter zona hambat secara vertikal dan horizontal (Soemarie et al ., 2018).

## Analisis Data Statistik
Data  penelitian  berupa  diameter  zona  hambat,  dilakukan  uji  statistik  menggunakan aplikasi software SPSS  untuk  mendapatkan  nilai  perbedaan  bermakna  atau  signifikansi  dari kelompok  rata-rata  yang  diuji.  Jenis  yang  digunakan  untuk  membandingkan  dua  atau  lebih kelompok  rata-rata  yaitu  berupa  metode One  Way  Anova dan Post-Hoc  Least  Significance Different ,  sebelum  melakukan  pengujian  tersebut  maka  harus  dilakukan  uji  normalitas  dan homogenitas (Daud et al ., 2023).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi dan Hasil Simplisia
Hasil determinasi dengan nomor surat 1230/UN2.F3.11/PDP.02.00/2023 membuktikan bahwa sampel yang diteliti adalah benar daun kumis kucing dengan nama latin Orthosiphon aristatus (Blume) Miq. dari Famili Lamiaceae . Jumlah sampel awal daun kumis kucing adalah sebanyak 1 kg. Hasil pembuatan simplisia didapatkan berat sebanyak 100 g.

## Hasil Ekstrak Kental
Simplisia  sebanyak  50  g  yang  dimaserasi  dengan  pelarut  etanol  96%  memperoleh ekstrak kental sejumlah 10,317 g dengan rendemen sebesar 20,63%. Sedangkan, 50 g simplisia yang dimaserasi dengan pelarut n-heksana memperoleh ekstrak kental sejumlah 6,485 g dengan rendemen sebesar 12,97%.

## Skrining Fitokimia
Berikut  adalah  hasil  uji  fitokimia  yang  dapat  ditarik  dari  ekstrak  kental  daun  kumis kucing menggunakan pelarut n-heksana maupun etanol 96%:
Tabel 1. Hasil Identifikasi Fitokimia Ekstrak Kental Etanol 96% dan N-heksana
Senyawa Etanol 96% N-heksana Alkaloid - Uji Mayer: endapan kuning putih. - Uji Bouchardat: endapan coklat hitam. + + + + + +
Senyawa Etanol 96% N-heksana - Uji Dragendorf: endapan merah bata. Tanin Cairan biru atau hijau kehitaman. + - Flavonoid - Uji H 2 SO 4 : kuning tua atau merah kebiruan, jingga merah.
- Uji NaOH 10 %: cairan kuning sampai kuning kecoklatan. + + - + Saponin Busa tidak hilang lebih dari 10 menit setinggi 1-10 cm. + - Terpenoid Cairan warna merah atau ungu. + +

## Sumber: Hasil Olahan Penulis (2024)
Berdasarkan hasil uji fitokimia ekstrak kental etanol 96% daun kumis kucing memiliki senyawa  terpenoid,  flavonoid,  saponin,  tanin,  dan  alkaloid.  Sedangkan,  ekstrak  kental  n- heksana daun kumis kucing mengandung senyawa terpenoid, alkaloid, dan flavonoid. Etanol ialah  pelarut  yang  dapat  menarik  senyawa  yang  larut  dalam  pelarut  polar  hingga  non-polar (Padmasari, P.D., Astuti, K.W., Warditiani, 1998). N-heksana mempunyai sifat non-polar yang dapat melarutkan senyawa non-polar (Renda et al ., 2023).
Uji alkaloid membentuk endapan karena terbentuk ikatan kovalen antara ion logam K+ dengan  alkaloid  sehingga  timbul  kompleks  antara  kalium  dan  alkaloid  yang  mengendap . (Renda et  al .,  2023).  Sistem  kerja  alkaloid  sebagai  antibakteri  adalah  merusak  komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri (Noor Madani et al ., 2021). Tanin bersifat polar karena mempunyai gugus OH (Sulistyarini et al ., 2019). Sistem kerja tanin sebagai antibakteri adalah menyebabkan sel bakteri lisis (Noor Madani et al ., 2021). Senyawa flavonoid akan tereduksi dengan  H 2 SO 4 maupun  NaOH  (Sulistyarini et  al .,  2019).  Flavonoid  bersifat  polar  karena mempunyai gugus OH, namun beberapa jenis flavonoid bebas dapat larut dalam pelarut non- polar (Theodora et al ., 2019). Hal itu yang menyebabkan baik pelarut etanol 96% maupun n- heksana dapat menarik senyawa flavonoid. Sistem kerja flavonoid sebagai antibakteri adalah dengan menghambat metabolisme energi bakteri dan fungsi membran sel (Noor Madani et al ., 2021).  Ikatan  glikosida  pada  saponin  membuat  senyawa  ini  lebih  bersifat  polar,  dapat  juga bersifat  non-polar  karena  memiliki  gugus  hidrofobik.  HCl  membuat  busa  lebih  stabil.  Busa muncul  karena  saponin  memiliki  senyawa  hidrofilik  dan  hidrofobik  sebagai  surfaktan (Sulistyarini et  al .,  2019).  Sistem  kerja  saponin  sebagai  agen  antibakteri  adalah  dengan meningkatkan  permeabilitas  atau  kebocoran  sel  (Noor  Madani et  al .,  2021).  Steroid  dan terpenoid  bersifat  non-polar.  Munculnya  warna  disebabkan  oleh  reaksi  oksidasi  yang menghasilkan  gugus  karbon  tak  jenuh  terkonjugasi  (Sulistyarini et  al .,  2019).  Sistem  kerja terpenoid  sebagai  antibakteri  adalah  merusak  membran  sel  yang  disebabkan  oleh  senyawa lipofilik (Wulansari et al ., 2020).
Uji Aktivitas Antibakteri Metode paper  disk dipilih  karena  proses  pengerjaan  yang  sederhana  dan  mudah dilakukan. Pengukuran dilakukan dengan menggunakan rumus (Magvirah et al ., 2019):
( Diameter vertikal - Diameter cakram ) + (Diameter horizontal - Diameter cakram)
Menurut  (Davis  &  Stout,  1971)  respon  daya  hambat  antibakteri  dibagi  dalam  empat klasifikasi. Diameter zona hambat sebesar < 5 mm tergolong lemah, 5-10 mm tergolong sedang, 10-20 mm tergolong kuat, sedangkan > 20 mm tergolong sangat kuat.
Tabel 2. Hasil Pengamatan Zona Hambat Ekstrak Kental Etanol 96%
Ekstrak Replikasi (mm) Mean±SD %KV Kelas Ket I II III 10% 3,55 3,20 4.55 3,76±0,70 18,61% Lemah K (+): Klindamisin 0,1% K (-): Etanol 96% SD: St. deviasi KV: Koefisien variasi 20% 5,45 6,45 5,75 5,88±0,51 8,67% Sedang 40% 13,55 10,70 7,90 10,71±2,82 26,33% Kuat 60% 12,75 11,00 12,50 12.08±0.94 7,78% Kuat 80% 16,00 18,65 17,45 17,36±1,32 7,60% Kuat K (+) 17,85 22,00 17,10 18,98±2,63 13,85% Kuat K (-) 0 0 0 0 - - Sumber: Hasil Olahan Penulis (2024) Tabel 3. Hasil Pengamatan Zona Hambat Ekstrak Kental N-heksana Ekstrak Replikasi (mm) Mean±SD %KV Kelas Ket I II III 10% 3,00 4,60 3.45 3,68±0,82 22,28% Lemah K (+): Klindamisin 0,1% K (-): N-heksana SD: St. deviasi KV: Koefisien variasi 20% 5,60 4,75 5,55 5,30±0,47 8,86% Sedang 40% 6,50 7,50 9,25 7,75±1,39 17,93%  Sedang 60% 11,25 12,60 12,25 12.03±0.70 5,81% Kuat 80% 18,15 17,40 16,10 17,21±1,03 5.98% Kuat K (+) 21,35 17,50 18,75 19,20±1,96 10,20% Kuat K (-) 0 0 0 0 - -
Sumber: Hasil Olahan Penulis (2024)
Gambar 1. Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri (a) Etanol 96% (b) N-heksana Diameter zona hambat dari ekstrak kental etanol 96% lebih besar daripada n-heksana. Hal ini dapat terjadi karena etanol dapat menarik senyawa metabolit sekunder yang larut dalam pelarut  polar  maupun  non-polar  sehingga  memperoleh  metabolit  sekunder  yang  lebih  kaya dibandingkan  n-heksana  (Padmasari,  P.D.,  Astuti,  K.W.,  Warditiani,  1998).  Etanol  efektif mengekstraksi  agen  antibakteri  dari  tanaman  segar  (Bussaman et  al .,  2015).  N-heksana mempunyai sifat non-polar yang dapat melarutkan senyawa non-polar (Renda et al ., 2023).

## Analisis Data Statistik
Hasil  uji  normalitas  keseluruhan  data  bernilai p-value >  0,05  yang  berarti  data berdistribusi  normal,  sehingga  dapat  dilanjutkan  uji  homogenitas.  Hasil  uji  homogenitas bernilai p-value > 0,05 artinya data memiliki varian yang homogen, sehingga dapat dilakukan uji One Way Anova untuk mengetahui adanya perbedaan yang bermakna. Interpretasi hasil uji One Way Anova memperoleh nilai p-value < 0,05, sehingga terdapat perbedaan yang nyata atau signifikan  antara  hasil  diameter  zona  hambat  pada  pemberian  ekstrak  daun  kumis  kucing ( Orthosiphon aristatus (Blume) Miq . ) terhadap pertumbuhan Propionibacterium acnes .
(a)
(b)
Tabel 4. Hasil Analisis Normalitas, Homogenitas, One Way Anova
Uji Normalitas Ekstrak Sig. p-value (Etanol 96%) Sig. p-value (N-heksana) 10% 0,482 0,527 20% 0,567 0,100 40% 0,990 0,702 60% 0,253 0,482 80% 0,896 0,706 K (+) 0,272 0,619 Uji Homogenitas 0,051 0,064 Uji One Way Anova 0,000 0,000 Sumber: Hasil Olahan Penulis (2024) Analisis  dilanjutkan  dengan  uji Post-Hoc  Least  Significance  Different yang menunjukkan  jika  nilai p-value <  0,05  berarti  data  tersebut  berbeda  bermakna  dengan konsentrasi ekstrak yang lain. Jika p-value ≥ 0,05 maka perolehan data tersebut tidak berbeda bermakna antara satu konsentrasi ekstrak dengan yang lainnya.
Tabel 5. Hasil Analisis Post-Hoc Etanol 96% 10% 20% 40% 60% 80% K+ K- 10% - 0,132 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,013* 20% 0,132 - 0,003* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 40% 0,000* 0,003* - 0,319 0,000* 0,000* 0,000* 60% 0,000* 0,000* 0,319 - 0,001* 0,000* 0,000* 80% 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* - 0,242 0,000* K+ 0,000* 0,000* 0,000* 0,001* 0,242 - 0,000* K- 0,013* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* - N-heksana 10% 20% 40% 60% 80% K+ K- 10% - 0,090 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 20% 0,090 - 0,015* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 40% 0,000* 0,015* - 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 60% 0,000* 0,000* 0,000* - 0,000* 0,000* 0,000* 80% 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* - 0,042* 0,000* K+ 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,042* - 0,000* K- 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* - Keterangan: *: menandakan terdapat perbedaan bermakna ( p-value < 0,05) Sumber: Hasil Olahan Penulis (2024)

## PENUTUP Simpulan
Ekstrak  etanol  96%  dan  n-heksana  daun  kumis  kucing  memiliki  aktivitas  sebagai antibakteri  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan Propionibacterium  acnes .  Konsentrasi terbaik  terletak  pada  konsentrasi  80%  yang  termasuk  ke  dalam  respon  hambat  pertumbuhan kategori kuat dengan perolehan rata-rata hasil diameter zona hambat sebesar 17,36 mm (ekstrak etanol 96%) dan 17,21 mm (ekstrak n-heksana).

## Saran
Pengembangan penelitian lebih lanjut menggunakan metode ekstraksi modern, seperti Supercritical  Fluid  Extraction (SFE), Ultrasonic  Assisted  Extraction (UAE), Microwave Assisted Extraction (MAE).

## DAFTAR PUSTAKA
Adigunawan,  &  Bagus,  I.  W.  (2018).  Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  salam terhadap  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  pyogenes dan Klebsiella  pneumoniae . Politeknik Kesehatan Denpasar.
Andayani, N., Nurhayati, D., & Saing, M. D. (2022). Optimalisasi pertumbuhan bakteri E. coli dan Bacillus  subtilis pada  media  edamame  agar. Jurnal  Pengembangan  Potensi Laboratorium , 1(1), 45–53. https://doi.org/10.25047/plp.v1i1.3095
Asbullah,  A.,  Wulandini,  P.,  &  Febrianita,  Y.  (2021).  Faktor-faktor  yang  mempengaruhi terhadap timbulnya acne vulgaris (jerawat) pada remaja di sman 1 pelangiran kabupaten indragiri  hilir  tahun  2018. Jurnal  Keperawatan  Abdurrab ,  4(2),  79–88. https://doi.org/10.36341/jka.v4i2.1603
Ashraf, K., Sultan, S., &  Adam,  A. (2018). Orthosiphon stamineus Benth. is  an outstanding food  medicine:  review  of  phytochemical  and  pharmacological  activities. Journal  of Pharmacy & Bioallied Sciences , 10(3), 109. https://doi.org/10.4103/jpbs.JPBS Bussaman, P., Rattanasena, P., & Namsena, P. (2015). View of antimicrobial activities of some local plants of thailand against acne-producing bacteria. Food and Applied Bioscience Journal , 3(3), 184–192.
Daud, N. S., Arni, D. P., Idris, S. A., & Saehu, M. S. (2023). Uji aktivitas antibakteri ekstrak batang Meistera chinensis terhadap Escherichia coli atcc 35218. Warta Farmasi , 12(1), 8–18. https://doi.org/10.46356/wfarmasi.v12i1.236
Erwan Kurnianto, Rahman, I. R., & Hairunnisa. (2021). Skrining fitokimia ekstrak etanol daun matoa yang berasal dari pontianak timur dengan variasi konsentrasi pelarut. Suparyanto Dan Rosad, 1(2), 131–138.
Faramayuda, F., Riyanti, S., & Syam, A. K. (2022). Standardization of Orthosiphon aristatus , Blume Miq. International Journal of Applied Pharmaceutics , 14(5), 72–79. Gerung,  W.  H.  P.,  Fatimawali,  &  Irma,  A.  (2021).  Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun belimbing botol ( Averrhoa bilimbi L.) terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes penyebab jerawat. Pharmacon, 10(4), 1087–1093. Hasanah, A. M., Marfu’ah, N., & Ramadhani, C. A. (2019). Uji efektivitas ekstrak etanol daun bidara  ( Ziziphus  spina-  christi L.)  terhadap  pertumbuhan Propionibacterium  acnes . Pharmaceutical Journal of Islamic Pharmacy , 3(1), 31. https://doi.org/10.21111/pharmasipha.v3i1.3296
Herawati, E., & Amelia, T. R. N. (2018). Potensi bahan herbal ekstrak etanol daun mengkudu asal desa wajak lor, tulungagung, jawa timur terhadap bakteri penyebab jerawat. Jurnal Kesehatan (JuKe) , 2(2), 173–178.
Karundeng, E. D. B., Hanizar, E., & Sari, D. N. R. (2022). Potensi ekstrak daun Rhizophora mucronata sebagai  antibakteri  pada Staphylococcus  aureus . Biosapphire:  Jurnal Biologi dan Diversitas , 1(1), 10–18. https://doi.org/10.31537/biosapphire.v1i1.642 Khalisha,  P.  N.,  Widyaningrum,  I.,  Purwanti,  S.,  Khalisha,  P.  N.,  Widyaningrum,  I.,  & Purwanti, S. (2022). Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan fraksi polar daun kumis kucing ( Orthosiphon stamineus ) terhadap Propionibacterium acnes . Jurnal Kedokteran Komunitas (Journal of Community Medicine) , 10(2), 1–9.
Lestari, R. T., Gifanda, L. Z., Kurniasari, E. L., Harwiningrum, R. P., Kelana, A. P. I., Fauziyah, K., Widyasari, S. L., Tiffany, T., Krisimonika, D. I., Salean, D. D. C., & Priyandani, Y.
(2020). Perilaku mahasiswa terkait cara mengatasi jerawat. Jurnal Farmasi Komunitas , 8(1), 15. https://doi.org/10.20473/jfk.v8i1.21922
Liani, V. (2017). Kemampuan tumbuh bakteri termofilik pasca erupsi merapi pada media fosfat organik dan anorganik. Jurnal Prodi Biologi , 6(8), 472–480.
Magvirah, T., Marwati, & Ardhani, F. (2019). Uji daya hambat bakteri Staphylococcus aureus menggunakan  ekstrak  daun  tahongai  ( Kleinhovia  hospita L.).  Jurnal  Peternakan Lingkungan Tropis, 2(2), 41–50.
Noor  Madani,  F.,  Rafi,  M.,  Sakinah,  N.,  Wahyuni,  W.  T.,  Arif,  Z.,  &  Heryanto,  R.  (2021). Aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kumis  kucing  ( Orthosiphon  stamineus )  terhadap bakteri Propionibacterium  acnes . Indonesian  Journal  of  Chemometrics  and Pharmaceutical Analysis , 1(2), 93–101.
Padmasari, P.D., Astuti, K.W., Warditiani, N. . (1998). Skrining fitokimia ekstrak etanol 70% rimpang bangle ( Zingiber purpureum Roxb.). Jurnal Farmasi Udayana , 47(3–4), 234– 234. https://doi.org/10.1007/bf02466588
Pariury, J. A., Juan Paul Christian, Herman, Tiffany Rebecca, Elvina Veronica, & Arijana, I. G.  K.  N.  (2021).  Potensi  kulit  jeruk  bali  ( Citrus  maxima Merr)  sebagai  antibakteri Propionibacterium acne penyebab jerawat. Hang Tuah Medical Journal , 19(1), 119– 131. https://doi.org/10.30649/htmj.v19i1.65
Pujiastuti, E., & El’Zeba, D. (2021). Perbandingan kadar flavonoid total ekstrak etanol 70% dan  96%  kulit  buah  naga  merah  ( Hylocereus  polyrhizus )  dengan  spektrofotometri. Cendekia Journal of Pharmacy , 5(1), 28–43. https://doi.org/10.31596/cjp.v5i1.131 Putri, U. K. D., Hajrah, H., & Ramadhan, A. M. (2021). Uji aktivitas antikoagulan ekstrak daun ciplukan  ( Physalis  angulata L)  secara  in  vitro. Proceeding  of  Mulawarman Pharmaceuticals Conferences , 14, 332–338. https://doi.org/10.25026/mpc.v14i1.590 Renda, Y. K., Pote, L. L., & Nadut, A. (2023). Isolasi dan karakterisasi senyawa alkaloid dari kulit batang tumbuhan halay ( Alstonia spectabilis R. Br) asal desa wee wame kabupaten sumba barat daya. Jurnal Sains Dan Edukasi Sains , 6(1), 44–50. https://doi.org/10.24246/juses.v6i1p44-50
Sari, Y., Yulis, P. A. R., Putri, I. I., Putri, A. M., & Anggraini, S. (2021). Penentuan kandungan metabolit  sekunder  ekstrak  etanol  sabut  kelapa  muda  ( Cocos  nucifera L.)  secara kualitatif. Journal of Research and Education Chemistry , 3(2), 113. https://doi.org/10.25299/jrec.2021.vol3(2).7579
Soemarie,  Y.  B.,  Anita  Apriliana,  Meita  Indriastuti,  Fatimah,  N.,  &  Wijaya,  H.  (2018).  Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  glodokan  tiang  ( Polyalthia  longifolia S.) terhadap bakteri Propionibacterium acnes . Jurnal Farmasi Lampung JFL , 7(1), 15–27. Sulistyarini, I., Sari, D. A., & Wicaksono, T. A. (2019). Skrining fitokimia senyawa metabolit sekunder batang buah naga ( Hylocereus polyrhizus ). Jurnal Ilmiah Cendekia Eksakta , 56–62.
Theodora,  C.  T.,  Gunawan,  I.  W.  G.,  &  Swantara,  I.  M.  D.  (2019).  Isolasi  dan  identifikasi golongan flavonoid pada ekstrak etil asetat daun gedi ( Abelmoschus manihot L.). Jurnal Kimia , 131. https://doi.org/10.24843/jchem.2019.v13.i02.p02
Trisia, A., Philyria, R., & Toemon, A. N. (2018). Antibacterial activity test of ethanol extract from  kalanduyung  leaf  ( Guazuma  ulmifolia Lam.)  on Staphylococcus  aureus growth with diffusion method (kirby-bauer). Anterior Jurnal , 17(2), 136–143.
Wulansari, E. D., Lestari, D., & Khoirunissa, M. A. (2020). Kandungan terpenoid dalam daun ara ( Ficus carica L.) sebagai agen antibakteri terhadap bakteri Methicillin-Resistant S. aureus . Pharmacon , 9(2), 219. https://doi.org/10.35799/pha.9.2020.29274