## PROFIL LEMAK DARAH PADA AYAM BROILER YANG DIBERI PAKAN STEP DOWN PROTEIN DENGAN PENAMBAHAN AIR PERASAN JERUK NIPIS SEBAGAI ACIDIFIER
(Blood Lipid Profile of Broiler Chickens Fed a Step Down Protein With Addition of Lime Juice as an Acidifier )
S. Hasanuddin, V. D. Yunianto 1 dan Tristiarti 2
Program Studi Magister Ilmu Peternakan, Program Pascasarjana Fakultas Peternakan dan Pertanian Universitas Diponegoro Sumaiya_nu3c@yahoo.co.id

## ABSTRACT
The aim of this research was to evaluate the effect of lime juice (LJ) and citric acid (CA) as an acidifier in the step down protein feeding system on the blood lipid profiles. The  research  was  conducted  with  192  of  7  days  old  broiler  chickens  which  were arranged in a completely randomized design with 6 treatments and 4 replications, so overall there were 24 experimental units. Each experimental unit consisted of 8 broiler chickens.  Treatments  applied  were P0  (control  diet,  without step  down ), P1  ( step  down diet),  P2  ( step  down diet  +  CA  0.8%),  P3  (step-down  +  LJ  equivalent  to  0,4%  CA  (6,9 ml/100g feed)),  P4 ( step down diet + LJ equivalent to 0,8% CA (13,8 ml/100g feed)) and P5  ( step  down diet  +  LJ  equivalent  to  1,2%  CA  (20,7  ml/100g  feed)).  The  parameters measured  in  this  research  were  cholesterol,  triglycerides, low  density  lipoprotein (LDL) and high density lipoprotein (HDL) in the blood serum. The results showed that the step- down protein feeding with the addition of acidifier such as synthetic citric acid or lime juice  was  not  significant  (P>  0.05)  in  lowering  blood  cholesterol  levels,  triglycerides and LDL and did not result in an increase of serum HDL levels  in broiler chickens.
Keyword : Broiler chicken, blood lipid, Step down Protein, Lime juice, acidifie r

## ABSTRAK
Penelitian  bertujuan  untuk  mengkaji  efek  pemberian  air  perasan  jeruk  nipis (APJN)  maupun  asam  sitrat  (AS)  sebagai acidifier dalam  pakan step  down protein terhadap  profil  lemak  darah  pada  ayam  broiler.  Penelitian  menggunakan  192  ekor ayam  broiler  umur  7  hari  yang  disusun  berdasarkan  pola  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  dengan  6  perlakuan  dan  4  ulangan,  sehingga  terdapat  24  unit  percobaan. Masing-masing unit percobaan terdiri dari 8 ekor ayam broiler. Perlakuan terdiri dari: P 0 (Pakan Kontrol (tanpa Step down )), P 1 (Pakan Step Down) , P 2 (Pakan Step Down + AS 0,8 %), P 3 (Pakan Step Down + APJN setara 0,4 % AS (6,9 ml/100g pakan)), P 4 (Pakan Step Down + APJN setara 0,8 % AS (13,8 ml/100g pakan)), dan P 5 (Pakan Step Down + ml  APJN  setara  1,2  %  AS  (20,7/100g  pakan)).  Parameter  yang  diamati  adalah  kadar kolesterol,  trigliserida,  LDL  dan  HDL  serum  darah.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa pemberian pakan step down protein dengan penambahan acidifier berupa asam
sitrat sintetik maupun air perasan jeruk nipis tidak nyata (P>0.05) menurunkan kadar kolesterol darah, trigliserida dan LDL serta tidak meningkatan kadar HDL darah pada ayam broiler.
Kata kunci : ayam broiler, lemak darah, step down protein, jeruk nipis,

## PENDAHULUAN
Kolesterol dibutuhkan oleh tubuh untuk pembentukan sejumlah steroid penting seperti  asam  folat,  hormon-hormon  adrenal  korteks,  estrogen,  androgen  dan progesterone serta cairan empedu. Kolesterol di dalam tubuh terutama diperoleh dari hasil sintesis di dalam hati. Jumlah yang disintesis tergantung pada kebutuhan tubuh dan  jumlah  yang  diperoleh  dari  makanan  seperti  karbohidrat,  protein  atau  lemak (Almatsier, 2002).
Lemak yang tinggi dalam pakan akan mengakibatkan terjadinya kenaikan kadar Low density lipoprotein (LDL) dalam darah yang merupakan lipoprotein yang kaya akan kolesterol  (Muhajir,  2002),  hal  ini  menyebabkan  peningkatan  kolesterol  dalam  darah. Salah satu upaya yang dapat dilakukan untuk mencegah peningkatan kolesterol dalam darah  yaitu  pengaturan  nutrisi  yang  tepat  melalui  pemberian  pakan  dengan  sistem step  down protein  (penurunan  protein  pakan)  yang  diikuti  dengan  penambahan acidifier .  Penambahan acidifier ke  dalam  pakan step  down protein  dilaporkan  dapat membantu  meningkatkan  kecernaan  nurisi  pakan  dengan  cara  menciptakan  kondisi pH  yang  sesuai  untuk  pencernaan  zat  makanan  yang  masuk  ke  dalam  saluran pencernaan  (Hyden,  2000),  sehingga  kebutuhan  ayam  broiler  untuk  tumbuh  dapat terpenuhi meskipun protein dalam pakan diturunkan.
Acidifier dapat berupa asam sitrat, asam laktat, asam propionat, asam asetat atau campuran  asam  organik  (Natsir,  2005).  Jeruk    nipis  dapat  dijadikan  sebagai  sumber acidifier alami  dengan  kandungan  asam  sitrat  yang  tinggi.  Asam  sitrat  (sintetik maupun  alami)  sebagai  sumber acidifier mampu  menciptakan  kondisi  asam  dalam saluran pencernaan sehingga menurunkan aktifitas dari enzim yang mencerna lemak yang  aktif  pada  pH  netral,  akibatnya  penyerapan  lemak  di  usus  berkurang.  Hal  ini berkibat  pada  rendahnya  sintesis  lemak  baik  trigliserida  maupun  kolesterol  di  darah Hasil  penelitian  Yulianti et  al. (2013)  menunjukkan  bahwa  pemberian  sari  jeruk  nipis sebanyak  3,5  ml  dalam  pakan  berpengaruh  nyata  terhadap  kadar  kolesterol, trigliserida,  HDL  dan  LDL  darah  itik  Magelang.  Pada  penelitian  tersebut,  kadar kolesterol turun dari 164,71 mg/dl menjadi 143,53 mg/dl, kadar trigliserida turun dari 148,67 mg/dl menjadi 117,14 mg/dl dan  kadar LDL turun dari 84,59 mg/dl menjadi 61,02 mg/dl, sedangkan kadar HDL naik dari 50,4 mg/dl menjadi 143,53 mg/dl.
Informasi mengenai penggunaan air perasan jeruk nipis sebagai acidifier untuk mengubah  profil  lemak  pada  ayam  pedaging  masih  kurang  sehingga  dilakukan penelitian yang bertujuan menguji manfaat asam sitrat (AS) dari air perasan jeruk nipis (APJN)  sebagai acidifier dalam  pakan step  down protein  terhadap  profil  lemak  darah ayam broiler.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  di  Kandang  Digesti  Fakultas  Peternakan  dan  Pertanian Universitas Diponegoro, Semarang.  Sebanyak 192 ekor DOC ( Day Old Chick ) umur 1 hari  dipelihara  dalam  kandang brooding hingga  7  hari.  Pada  umur  7  hari,  ayam diseleksi berdasarkan bobot badan untuk mendapatkan bobot awal yang seragam, dan selanjutnya  dibagi  ke  dalam  petak  kandang  panggung  yang  disusun  berdasarkan Rancangan Acal Lengkap (RAL) dengan 6 perlakuan dan 4 ulangan sehingga terdapat 24  unit  percobaan,  dan  tiap  unit  terdiri  atas  8  ekor  ayam.  Perlakuan  pakan  yang diterapkan terdiri dari:
P 0 : Pakan kontrol (tanpa Step down ) P 1 : Pakan Step Down P 2 : Pakan Step Down + AS 0,8% P 3 : Pakan Step Down + APJN setara 0,4% AS (6,9 ml/100g pakan) P 4 : Pakan Step Down + APJN setara 0,8% AS (13,8 ml/100g pakan) P 5 : Pakan Step Down + APJN setara 1,2% AS (20,7/100g pakan)
Pemeliharaan ayam broiler dilaksanakan selama 42 hari. Ayam pada perlakuan tanpa step  down (kontrol),  diberikan  pakan  starter  pada  umur  1  hingga  akhir  periode penelitian  (42  hari).  Pada  perlakuan  pakan  dengan step  down ,  pakan  starter  hanya diberikan pada umur 1 hingga 7 hari, dan selanjutnya pakan step down (finisher) mulai diberikan  pada  umur  7  hingga  42  hari.  Pakan  step down disusun  dengan  komposisi kandungan  protein  sebesar  19%  dan  kandungan  energi  2900  kkal/kg.  Pemberian pakan dan air minum selama pemeliharaan dilakukan secara ad libitum . Pencahayaan diberikan  selama  24  jam  selama  pemeliharaan.  Komposisi  pakan  yang  digunakan selama penelitian dapat dilihat pada Tabel 1.
Acidifier yang  diberikan  berasal  dari  asam  sitrat  dan  air  perasan  jeruk  nipis (APJN).  Asam  sitrat  (AS)  yang  digunakan  adalah  asam  sitrat  sintetis  dalam  bentuk padat. Tiap 1 gram AS dilarutkan dalam 2 ml air, selanjutnya dicampurkan sebanyak 0,8%  ke  dalam  pakan.  Tiap  100  ml  air  perasan  jeruk  nipis  (APJN)  yang  digunakan mengandung asam sitrat 5,8% dan vitamin C 40%.
Selama  pemeliharaan  pemeliharaan  kesehatan  dilakukan  melalui  vaksinasi. Vaksin  ND  B1  diberikan  pada  umur  3  hari  dengan  cara  tetes  mata,  vaksin  gumboro pada  umur  7  hari  melalui  air  minum  dan  vaksin  ND  LS  umur  21  hari  melalui  air minum.
Pengambilan sampel darah dilakukan pada akhir penelitian sebanyak 1 ekor ayam pada  setiap  unit  percobaan.  Sampel  darah  yang  diambil  melalui vena  brachialis, selanjutnya  dianalisis  untuk  mengetahui  kadar  kolesterol,  trigliserida,  HDL  dan  LDL. Kadar  kolesterol  darah  (mg/dl)  ditentukan  dengan  metode  CHOD-PAP  ( cholesterol- oxidase  p-aminophenazone )  enzymatic  colorimetric,  kadar  tigliserida  serum  (mg/dl) ditentukan  dengan  metode  GPO-PAP  ( glyserol  phospate  oxidase-p-aminophenozone )  dan analisis  HDL  dan  LDL  (mg/dl)  ditentukan  menggunakan  metode  “enzymatic colorimetric”  setelah  presipitasi  β-lipoprotein  dengan  asam phosphotungstate dan magnesium  klorida  (MgCl 2 ).  Kadar  LDL  (mg/dl)  diperoleh  dengan  menggunakan rumus Friedewald (1972), yaitu : LDL = Total kolesterol – HDL – 1/5 Trigliserida.
Tabel 1 . Komposisi dan kandungan nutrisi pakan selama penelitian
Uraian Jenis Pakan Starter Finisher ( step down ) Komposisi pakan (%) Jagung 52.5 55 Bekatul 7 12 Minyak Nabati 2 1 Tepung Ikan 6 6 Bungkil Kedelai 23 16 Bungkil Kelapa 8 8 CaCO 3 0,7 1 Tepung Kulit Kerang 0,5 0,5 Premix 0,3 0,3 Lisin 0 0,1 Metionin 0 0,1 Total 100 100 Komposisi Nutrisi Pakan Berdasarkan 100% BK: Energi Metabolis (kkal/kg) Protein Kasar (%) Serat Kasar (%) Lemak Kasar (%) Lisin (%) Metionin (%) Ca (%) P (%) 2975.11 21.88 6.55 6.26 1.24 0.41 0.92 0.50 2870.41 19.15 7.64 5.58 1.14 0.47 1.02 0.54
*Perhitungan  komposisi  pakan  dilakukan  berdasarkan  hasil  analisis  bahan  pakan  di  Laboratorium  Ilmu Makanan Ternak Fakultas Peternakan Universitas Diponegoro.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Nilai  rerata  kadar  kolesterol,  trigliserida,  LDL  dan  HDL  serum  darah  ayam broiler  akibat  pemberian  pakan step  down protein  dengan  penambahan  air  perasan jeruk  nipis  (APJN)  dan  asam  sitrat  sintesis  (AS)  tertera  pada  Tabel  2.  Hasil  analisis ragam  menunjukkan  bahwa  pemberian  pakan step  down dengan  penambahan  APJN maupun  AS  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  penurunan  kadar  kolesterol, trigliserida  dan  LDL  serta  tidak  adanya  peningkatan  kadar  HDL  serum  darah  ayam broiler.  Kadar  HDL  bahkan  mengalami  penurunan  sejalan  dengan  penurunan  kadar kolesterol dan LDL serum darah ayam broiler. Hasil penelitian Dehghani dan Jahanian (2012)  melaporkan  bahwa  kombinasi  pemberian  asam  sitrat  (0,25%)  dan  penurunan level protein dari fase starter (22%), gower (20%) dan finisher (18%) tidak secara nyata mempengaruhi  penurunan  kadar  kolesterol,  trigliserida,  LDL  dan    tidak  adanya peningkatan HDL serum darah pada ayam broiler umur 42 hari.
Pemberian acidifier baik  berupa  APJN  maupun  AS  ke  dalam  pakan step  down protein tidak berpengaruh nyata (P<0,05) terhadap penurunan kadar kolesterol darah. Namun  kolesterol  serum  darah  ayam  broiler  pada  penelitian  ini  masih  lebih  rendah
dibandingkan  hasil  penelitian  Abdel-Fattah  (2008)  yang  menggunakan  asam  sitrat 1,5%  (316,83  mg/dl)    dan    kontrol  (393,33  mg/dl). Acidifier dalam  pakan  unggas mampu  menurunkan  nilai  pH  dari  pakan  dalam  saluran  pencernaan  unggas. Penurunan  pH  dalam  saluran  pencernaan  mampu  meningkatkan  kecernaan  protein pakan,  hal  ini  dikarenakan  kondisi  pH  saluran  pencernaan  yang  asam  mampu mendukung  kinerja  dari  enzim  pencernaan  (Richard et  al., 2005)  khususnya  pepsin yang berperan dalam mencerna protein. Protein memiliki peranan yang penting dalam proses  transportasi  kolesterol  di  darah  melalui  pembentukan  lipoprotein  yang terbentuk  dari  gabungan  protein  dan  lemak.  Menurut  Daniels et al (2009)  lipoprotein berfungsi  untuk  memediasi  transportasi  lipid  dari  hati  ke  jaringan  dan  dari  jaringan kembeli  ke  hati,  sehingga  lipoprotein  memiliki  peranan  yang  sangat  penting  dalam menjaga homeostasis (keseimbangan) kolesterol dalam darah.  Homeostasis kolesterol bertujuan  untuk  mencukupi  kebutuhan  kolesterol  di  dalam  darah  ketika  asupan kolesterol  dalam  pakan  tidak  mencukupi,  maka  Trapani  (2012)  kolesterol  akan disisntesis  dari  jaringan  institinal  maupun  jaringan  ekstrahepatik  untuk  memenuhi kebutuhan kolesterol dalam darah.
Tabel  2 .  Pengaruh  pemberian  pakan step  down protein  dengan  penambahan    air perasan  jeruk  nipis  (APJN)  dan  asam  sitrat  (AS)  terhadap  kadar  kolesterol serum  darah  (mg/dl),  trigliserida  darah  (mg/dl),  LDL  (mg/dl)  dan  HDL (mg/dl).
Parameter Pakan kontrol Pakan Step down Tanpa AS/APJN AS 0,8% APJN setara 0,4% AS APJN setara 0,8% AS APJN setara 1,2% AS Kolesterol darah (mg/dl): 278.85±23.82 250 ±36.89 267.31±71.44 265.38±34.11 215.39±72.16 228.85±40.40 Trigliserida 104.17±8.34 87.50±31.55 108.33±51.82 120.84±20.97 129.17±25.00 127.09±28.36 LDL 232.65±21.73 208.75±28.75 222.21±61.52 225.78±39.50 119.19±72.38 187.05±26.08 HDL 46.20 ±13.68 41.25±11.69 45.10±16.99 39.60±14.70 24.20±12.05 41.80±15.97
Pemberian  pakan step  down protein  dengan  penambahan acidifier tidak berpengaruh nyata (P>0,05) terhadap penurunan kadar trigliserida dalam serum darah ayam broiler. Kadar trigliserida yang hampir sama pada setiap perlakuan disebabkan karena  adanya  fungsi  dari  trigliserida  untuk  memenuhi  kebutuhan  energi  dalam tubuh.  Sjofjan  (2003)  mengemukakan  bahwa  penambahan acidifier ke  dalam  pakan bertujuan untuk meningkatkan kecernaan pakan, sehingga pakan yang tercerna dapat dimanfaatkan  secara  optimal  untuk  pertumbuhan.  Meningkatnya  kecernaan  pakan akan  meningkatkan  kebutuhan  energi  dalam  tubuh  untuk  membantu  proses metabolisme  nutrisi.  Tornheim  dan  Ruderman  (2011)  menyatakan  bahwa  kebutuhan energi dalam tubuh dapat dipenuhi dengan memanfaatkan trigliserida dalam jaringan lemak. Ketika kebutuhan nergi di dalam tubuh meningkat, maka untuk mencukupinya tubuh  akan  mensinstesis  trigliserida  (dalam  bentuk  asam  lemak)  yang  tertimbun dalam jaringan lemak, dimana asam lemak akan kembali mengalami esterifikasi untuk menyediakan bahan bakar bagi seluruh sel dalam tubuh yang memerlukan energi.
Penambahan acidifier ke  dalam  pakan step  down protein  belum  mampu mempengaruhi  penurunan  kadar  LDL  maupun  peningkatan  HDL  serum  darah
(P>0,05)  ayam  broiler.  Hal  ini  dikarenakan  LDL  dan  HDL  merupakan  dua  jenis lipoprotein  yang  berfungsi  mengedarkan  kolesterol  dalam  darah  sehingga kosentrasinya  di  dalam  darah  sangat  dipengaruhi  oleh  jumlah  kolesterol  yang disintesis.  Hasil  penelitian  Musa et  al (2006)  menunjukkan  adanya  korelasi  positif antara kadar  kolesterol dengan LDL dan HDL dalam serum darah. Montgomery et al (2003)  mengemukakan  bahwa  LDL  berperan  dalam  menyediakan  kolesterol  dalam jaringan tubuh karena merupakan karier utama untuk kolesterol dari hati ke jaringan tubuh,  sehingga  kadar  LDL  dalam  darah  dipengaruhi  oleh  konsentrasi  kolesterol. Disisi lain,  HDL merupakan lipoprotein yang menjaga keseimbangan kolesterol agar tidak  menumpuk  di  dalam  sel,  keseimbangan  dikelola  oleh  pengangkatan  sterol  dari membran  pada  tingkat  yang  sama  dengan  jumlah  kolesterol  yang  disintesis    menuju hati  (Diestchy,  2003).  Hubugan  antara  kolesterol  dengan  LDL  dan  HDL  lebih  lanjut dijelaskan oleh hasil analisis regresi korelasi.
Hasil  analisis  regesi  korelasi  antara  kolesterol  dan  LDL  menunjukkan  adanya korelasi  positif  antara  peningkatan  kolesterol  serum  darah  dengan  peningkatan  LDL serum  darah  yang  membentuk  garis  linier  dengan  persamaan  Y  =  22.363  +  1.082  X (P<0.05,  R 2 91.8%).  Artinya  variasi  kadar  kolesterol  serum  darah  dipengaruhi  0,918 oleh kadar LDL serum  darah, dimana setiap peningkatan 1 mg/dl kadar LDL serum darah  menyebabkan  peningkatan  kadar  kolesterol  serum  darah  sebesar  1.082  mg/dl. Hasil analisis regesi korelasi antara kolesterol dan HDL menunjukkan adanya korelasi positif  antara  peningkatan  kolesterol  serum  darah  dengan  peningkatan  HDL  serum darah yang membentuk garis linier dengan persamaan Y = 181.855 + 1.741 X (P<0.05, R 2 26.3%).  Artinya variasi kadar kolesterol serum darah dipengaruhi 0,263 oleh kadar HDL  serum  darah,  dimana  setiap  peningkatan  1  mg/dl  kadar  HDL  serum  darah menyebabkan peningkatan kadar kolesterol serum darah sebesar 1.741 mg/dl.

## KESIMPULAN
Penambahan acidifier ke  dalam  pakan step  down protein  belum  mampu menurunkan baik kolesterol serum darah, trigliserida maupun LDL dan belum adanya peningkatan kadar HDL serum darah pada ayam broiler.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Fattah,  S.A.,  M.  H.  El-Sanhoury,  N.  M.  El-Mednay  and  F.  Abdel-Azeem.  2008. Thyroid activity, some blood constituents, organs morphology and performance of broiler chicks fed supplemental organic acids. Int. J. Poult. Sci., 7 (3): 215-222.
Almatsier, S. 2002. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. PT Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Daniels,  K.  M.  Killinger,  J.  J.  Michal,  R.  W.  Wright  dan  Z.  Jiang.  2009.  Lipoproteins, cholesterol homeostasis and cardiac health. Int. J. Bio. Sci., 5(5):474-488.
Dietschy, J. M. 2003. How cholesterol metabolism and transport present novel targets for lipid treatment.  Adv. Stud. Med., 3(4c):5319-5323.
Friedewald,  W.  T.,  R.  I.  Levy  dan  D.  S.  Fredriscson.  1972.  Estimation  of  the concentration of low-density lipoprotein cholesterol in plasma without use of the preparative ultra-centrifuge. Clin. Chem., 18: 499-502.
Hyden. M. 2000. “Protected”Acid Additives. Feed International. July. 2000.
Montgomery, R., R. L. Dryer, T. W. Conway dan A. A. Spector. 1993. Biochemistry : A Case  –  Oriented  Approach.  Gadjah  Mada  University  Press,  Yogyakarta (Diterjemahkan oleh M. Ismadi).
Muhajir.  2002.  Turunkan  kolesterol  ayam  kampung  dengan  lysin.  Poultry  Indonesia. Ed. September. 68-69.
Musa H. H., G. H Chen, K. H.Wang, B. C. Li, D. M. Mekki, J. T. Shu and H. P. Ju. 2006. Relation  between  serum  cholesterol  level,  lipoprotein  concentration  and carcass characteristics in genetically lean and fat chicken breeds. J. Bio. Sci., 6:616-620.
Natsir, M. H. 2005. Pengaruh penggunaan beberapa jenis enkapsulasi pada asam laktat terenkapsulasi  sebagai  acidifier  terhadap  daya  cerna  protein  dan  energy metabolis ayam pedaging. J. Ternak Tropika, 6(2): 13-17.
Sjofjan,  O.  2003.  Isolasi  dan  Identifikasi  Bacillus  sp  Dari  Usus  Ayam  Petelur  Sebagai Sumber  Probiotik.  Usulan  Penelitian  Hibah  Bersaing  XII.  Fakultas  Peternakan Universitas Padjajaran. Bandung.
Tornheim,  K  dan  N.B.  Ruderman.  2011.  Intermediary  Metabolism  Of  Carbohydrate, Protein  And  Fat.  Dapartement  of  Biochemistry,  Boston  University  School  of Medicine, USA.
Trapani, L., M. Segatto, V. Pallottini. 2012.  Regulation and deregulation of cholesterol homeostasis: The liver as a metabolic “power station”. World  J. Hepatology, 4(6): 184-190.
Yulianti, W., W. Murningsih dan V. D. Y. B. Ismadi. Pengaruh penambahan sari jeruk nipis  (Citrus  aurantifolia).  dalam  ransum  terhadap  profil  lemak  darah  itik magelang jantan. Anim. Agric. J., 2(1):51-58.