Anggraini et al.: Patogenisitas Empat Isolat Jamur Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. 105
J.  Agrotek    Tropika.    ISSN  2337-4993 Vol. 6,  No. 2: 105 – 109,  Mei 2018
PATOGENISITAS  EMPAT  ISOLAT  JAMUR Beauveria  bassiana (Bals.) Vuill.
TERHADAP ULAT API ( Setothosea spp.) DI LABORATORIUM
Windari Anggraini, Yuyun Fitriana, Agus M. Hariri & Purnomo
Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung Jl. Prof. Soemantri Brojonegoro, No. 1 Bandar Lampung 35145 Email:  windarianggraini42@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakter empat isolat jamur B . bassiana (Bbyf 22, Bbyf 24, Bbyf, dan BbTa) dalam pertambahan diameter koloni, kerapatan spora, dan  perkecambahan sporasertakemampuan tiga isolat jamur B . bassiana dalam menimbulkan mortalitas terhadap ulat api ( Setothosea spp.).Penelitian inidilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung, dari bulan Juli 2016 sampai Januari 2017.  Penelitian ini terdiri dari dua set percobaan, yaitu percobaan pertama untuk mengetahui pertambahan diameter koloni, kerapatan spora, dan perkecambahan sporasecara in vitro dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan diulang lima kali.  Percoban kedua uji patogenisitas jamur B . bassiana terhadap ulat api ( Setothosea spp.) dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan diulang tiga kali dengan konsentrasi 10 6 , 10 7 , dan 10 8 .  Pengamatan dilakukan terhadap diameter koloni, kerapatan spora, perkecambahan spora, dan mortalitas. Data diuji dengan analisis ragam dan nilai tengah perlakuan diuji dengan uji Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf 5%.Keempat isolat jamur B. bassiana memiliki pertambahan koloni, kerapatan spora dan daya berkecambah (viabilitas) yang berbeda-beda, dari keempat jamur tersebut isolat Bbyf 24 yang memiliki pertambahan koloni, kerapatan spora dan daya berkecambah (viabilitas) yang paling baik dibandingkan B. bassiana asal Tanggamus.Tiga isolat B. bassiana dari tiga tingkat pengenceran mampu menimbulkan mortalitas pada ulat api, namun isolat yang mampu menimbulkan mortalitas ulat api dengan baik yaitu isolat Bbyf danBbyf24 mencapai 33% dengan tingkat pengenceran 10 8 .
Kata kunci: Beauveria bassiana , Setothosea spp., kerapatan spora, viabilitas, mortalitas

## PENDAHULUAN
Kelapa  sawit  ( Elaeis  guineensis Jacq.) merupakan  salah  satu  tanaman  perkebunan  yang menduduki  posisi  penting  di  Indonesia.    Hal  ini dikarenakan  kelapa  sawit  mampu  menciptakan kesempatan kerja yang mengarah pada kesejahteraan masyarakat  serta  memegang  peranan  penting  dan menjadi devisa terbesar bagi Negara dari sektor non migas selain karet dan kopi (Sastrosayono, 2003).
Direktorat  Jenderal  Perkebunan  (2015) menjelaskan  bahwa  pada  statistik  perkebunan  tahun 2015-2017  produksikelapa  sawit  di  Indonesia  setiap tahunnya  meningkat.    Pada  tahun  2015  mencapai produksi kelapa sawit mencapai 26.051.518 ton, tahun 2016 memperoleh hasil produksi sebesar 33.229.381 ton, dan  tahun  2017  produksi  kelapa  sawit  mencapai 35.359.384 ton.
Permasalahan  utama  dalam  budidaya  tanaman kelapa sawit adalah organisme pengganggu tanaman, salah  satunya  ulat  pemakan  daun  yaitu  ulat  api ( Setothosea asigna ).  Ulat api memakan daun hingga berlubang atau habis sama sekali hingga menyisakan
tulang daun.  Dalam kondisi yang parah tanaman akan kehilangan  daun  sekitar  90%  (Satriawan,  2011). Prawirosukarto (2002) mengatakan bahwa kerusakan daun yang terjadi pada tanaman kelapa sawit berumur 8 tahun, diperkirakan penurunan produksi mencapai 30- 40% pada 2 tahun setelah terjadi kehilangan daun akibat serangan ulat pemakan daun kelapa sawit (UPDKS). Kerusakan daun yang terjadi pada tanaman kelapa sawit yang lebih muda, dapat menyebabkan kehilangan hasil yang kecil.  Kehilangan daun sebesar 50% pada tanaman kelapa sawit yang berumur 1-2  tahun, masing-masing akan mengakibatkan penurunan produksi sebesar 12- 24% dan < 4% pada dua tahun pasca serangan.
Ulat  api  merupakan salah  satu  hama  pemakan daun  pada  tanaman  kelapa  sawit.    Menurut Prawirosukarto dkk. (2003), ambang ekonomi kedua ulat api  ( Setothosea  asigna dan Setora  nitens )  pada tanaman kelapa sawit rata-rata 5-10 ekor perpelepah untuk  tanaman  yang  berumur  7  tahun  ke  atas  dan  5 ekor larva untuk tanaman yang lebih muda.
Pengendalian  ulat  api  dapat  dilakukan  dengan cara mekanis, biologi maupun kimia tergantung pada intensitas  serangannya.    Untuk  intensitas  ringan,
serangan ulat api dapat diatasi dengan mengambil ulat api yang ada pada tanaman kelapa sawit yang terserang secara  manual  ( hand  picking ).    Untuk  pengendalian secara  hayati  dapat  dilakukan  dengan  menggunakan musuh  alami  seperti  predator,  patogen  hama/ entomopatogen atau parasitoid (Prawirosukarto dkk., 1997).
Beberapa agensia hayati telah banyak digunakan untuk  mengendalikan  ulat  api,  antara  lain Bacillus thuringiensis , Cordyceps  militaris dan Multi-Nucleo Polyhydro  Virus (MNPV),  dan Beauveria bassiana . Beauveria  bassiana (Bals.)  Vuill.  adalah salah satu jamur entomopatogenik yang berpotensi untuk dikembangkan  sebagaiagensia  pengendali  hayati. Beauveria  bassiana telah  dilaporkan  efektif  dalam menekan perkembangan larva Lepidoptera antara lain ulat api Darna catenata (Saranga & Daud, 1993), ulat jengkal Ectropis bhurmitra (Widayat & Rayati, 1993), ulat polong Helicoverpa armigera (Suharto dkk., 1998; Soetopo,  2004),  ulat  kantung Metisa  plana (Badan Penelitian  dan  Pengembangan  Pertanian,  2013),  ulat grayak Spodoptera litura (Arsyiogi, 2014).  Selain itu, B. bassiana juga efektif  untuk mengendalikan Aphis craccivora (Purnama dkk., 2003), Cylas formicarius (Noya,  2009), Helopeltis spp.  (Pratiwi,  2016),  dan Thrips tabaci (Fitriana dkk., 2015). Tarigan dkk. (2013) melaporkan  jamur B . bassiana mampu  menekan intensitas  serangan  ulat  api  di  laboratorium  sebesar 4,17%. B.  bassiana juga  dimanfaatkan  untuk mengendalikan serangan ulat pemakan tajuk tanaman kelapa  sawit, Darna  catenata di  Sulawesi  Selatan dengan  mortalitas  ulat  rata-rata  46-93%  (Saranga  & Daud, 1993).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kemampuan empat isolat jamur B . bassiana (Bbyf 22, Bbyf 24, Bbyf, dan BbTa) dalam pertambahan diameter koloni, kerapatan spora, dan  perkecambahan spora dan mengetahui kemampuan tiga isolat jamur B . bassiana
(Bbyf,  Bbyf  24,  dan  BbTa)  dalam  menimbulkan mortalitas terhadap ulat api ( Setothosea spp.).

## BAHAN  DAN  METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Bioteknologi Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung, dari bulan Juli 2016 sampai Januari 2017. Penelitian  ini  terdiri  dari  dua  set  percobaan,  yaitu percobaan  pertama  untuk  mengetahui  pertambahan diameter koloni, kerapatan spora, dan  perkecambahan sporasecara in vitro menggunakan empat isolat jamur B . bassiana (Bbyf 22, Bbyf 24, Bbyf, dan BbTa) yang diulang  sebanyak  5  kalidengan  Rancangan  Acak Lengkap (RAL) dan diulang lima kali.  Percoban kedua uji patogenisitas jamur B . bassiana terhadap ulat api ( Setothosea spp.)  menggunakan  9  perlakuan  yang diulang sebanyak 3 kali dengan konsentrasi 10 6 , 10 7 , dan 10 8 . Dalam 1 ulangan menggunakan 10 ekor serangga dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Pengamatan dilakukan terhadap diameter koloni, kerapatan spora, perkecambahan spora, dan mortalitas.  Data diuji dengan analisis ragam dan nilai tengah perlakuan diuji dengan uji Duncan Multiple Range Test (DMRT)  pada taraf 5%.

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Hasil  analisis  pertambahan diameter  koloni B. bassiana mulai dari 3 hingga 15 hari setelah inokulasi (hsi) dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1 menunjukkan bahwa pada 3 hsi, diameter koloni B. bassiana isolat Bbyf secara statistika tidak berbeda nyata dengan Bbyf 24.    Isolat  Bbyf  22  memiliki  nilai  diameter  terkecil dibanding BbTa.  Hasil analisis ragam diameter koloni keempat  isolat B.  bassiana pada  7  hsi  tidak  nyata. Sedangkan pada 11 hsi, isolat Bbyf 24 memiliki diameter koloni sebesar 4,39 cm namun tidak beda nyata dengan
Tabel 1.  Diameter koloni empat isolat B. bassiana pada media PSA
Keterangan : * = nyata, tn = tidak berbeda nyata pada taraf 5%
Isolat B. bassiana Diameter koloni B.bassiana (cm) HSI 3 7 11 15 Bbyf 1,38 c 2,60 4,15 b 5,33 b Bbyf 22 1,18 a 2,65 4,29 c 5,32 b Bbyf 24 1,34 bc 2,53 4,39 c 5,51 b BbTa 1,28 b 2,38 3,36 a 4,54 a F hitung 14,76 * 3,24 tn 217,05 * 19,67 *
Anggraini et al.: Patogenisitas Empat Isolat Jamur Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. 107
isolat Bbyf 22, dan beda nyata dengan isolat Bbyf dan BbTa.  Pada hari terakhir pengamatan (15 hsi), isolat Bbyf tidak beda nyata dengan Bbyf 22 dan Bbyf 24 dan beda  nyata  lebih  kecil  dengan  BbTa.  Isolat  BbTa mempunyai  diameter  terkecil  dari  7-15  hsi.  Hasil pengamatan kerapatan spora B. bassiana dapat dilihat pada Tabel 2. Secara statistika, kerapatan spora isolat Bbyf 24 berbeda nyata lebih besar dibanding 3 isolat B. bassiana lainnya yaitu 20,80 x 10 8 spora/ml.  Sedangkan 3  isolat  Bbyf,  Bbyf  22,  dan  BbTa  secara  statistika mempunyai kerapatan spora yang sama yaitu masing- masing 8,20 x 10 8 ; 7,00 x 10 8 dan 7,90 x 10 8 spora/ml.
Hasil  analisis  statistika  perkecambahan  spora jamur B. bassiana dapat dilihat pada Tabel 3. Spora B. bassiana yang memiliki daya berkecambah paling baik yaitu isolat Bbyf24 mencapai 75,40% dan berbeda nyata dengan isolat Bbyf, Bbyf 22, dan BbTa. Sedangkan 3 isolat Bbyf, Bbyf 22, dan BbTa secara statistika sama yaitu masing-masing sebesar 71,2%; 71,4% dan 69,0%.
Mortalitas ulat api ( Setothosea spp.) pada 7 hsa yang  diaplikasi  dengan  3  isolat B . bassiana dengan tingkat pengenceran 10 6 , 10 7 , dan 10 8 dapat dilihat pada Tabel  4.  Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa mortalitas  ulat  api  pada  7  hsa  dengan  3  tingkat
Tabel 4.  Mortalitas ulat api ( Setothosea spp.) dengan tingkat pengenceran 10 6 , 10 7 dan 10 8 spora jamur Beauveria  bassiana pada  7  hsa Perlakuan Mortalitas Ulat Api ( Setothosea spp.) (%) 10 6 10 7 10 8 Kontrol 0,00 0,00 0,00 Bbyf 26,67 30,00 33,33 Bbyf 24 26,67 33,33 33,33 BbTa 23,33 26,67 30,00 F hitung 2,21 tn 2,61 tn 2,70 tn
Keterangan: * = nyata, tn = tidak berbeda nyata pada taraf 5%
Keterangan: huruf yang tidak sama menunjukkan berbeda nyata menurut uji DMRT pada taraf 5%
Isolat B. bassiana Spora B. bassiana berkecambah (%) Bbyf 71,20 a Bbyf 22 71,40 a Bbyf 24 75, 40 b BbTa 69,00 a F hitung 3,91 *
Tabel 3. Daya berkecambah spora B. bassiana yang telah diinkubasi selama 16 jam pada media PSA
Tabel 2.  Kerapatan spora empat isolat B. bassiana pada media PSA
Keterangan: huruf yang tidak sama menunjukkan berbeda nyata menurut uji DMRT pada taraf 5%
Isolat B. bassiana Kerapatan spora  (x 10 8 /ml) Bbyf 8,20 a Bbyf 22 7,00 a Bbyf 24 20,80 b BbTa 7,90 a F hitung 473,01 *
konsentrasi tidak berbeda nyata pada taraf 5%. Hasil penelitian mortalitas ulat api dapat dilihat pada Gambar 1. Gambar 1 menunjukkan bahwa tingkat pengenceran yang efektif dalam menginfeksi ulat api adalah tingkat pengenceran 10 8 . Pada tingkat pengenceran 10 8 masing- masing jamur mampu menginfeksi ulat api sebesar 33% (Bbyf), 33% (Bbyf 24), dan 30% (BbTa).
Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat Bbyf 24 lebih tinggi dibandingkan isolat Bbyf dan Bbyf 22, maupun pada isolat BbTa. Hal ini dapat terlihat dari kemampuan isolat Bbyf 24 dalam pertambahan koloni, kerapatan  spora, daya berkecambah (viabilitas) serta kemampuannya dalam menginfeksi ulat api.Isolat Bbyf 24 memiliki jumlah spora berkecambah lebih banyak
dibandingkan  dengan  isolat  lainnya  sehingga  untuk menginfeksi ulat api memiliki peluang yang lebih besar.
Berdasarkan  grafik  mortalitas  (Gambar  1), kerapatan  spora  10 8 /ml  mampu  menyebabkan persentase mortalitas yang palingbesar.  Semakin tinggi kerapatan spora, maka semakin tinggi peluang ulat api terinfeksi.  Noya (2009) melaporkan bahwa jamur B. bassiana pada  kerapatan  spora  10 8 /ml  mampu menyebabkan mortalitas imago Cylas formicarius lebih dari 50%.  Penggunaan kerapatan spora 10 8 /ml pada penelitian Rosfiansyah (2009) mampu menekan luas serangan hingga 25,40% dan intensitas serangan hingga 13,79%.
Tingkat kerapatan spora yang diaplikasikan untuk mengendalikan  serangga  juga  berpengaruh  untuk menunjukkan tingkat kematian yang berbeda. Tingkat kerapatan jamur B. bassiana yang diaplikasikan pada larva Spodoptera litura instar 3 yaitu 10 5 , 10 6 , 10 7 dan 10 8 spora/ml menunjukkan bahwa kerapatan 10 8 spora/ ml mortalitasnya lebih tinggi dibandingkan kerapatan 10 5 , 10 6 , 10 7 spora/ml.  Persentase kematian pada kerapatan 10 8 spora/ml adalah 75%, sedangkan pada kerapatan 10 5 , 10 6 , 10 7 spora/ml adalah 40%, 48% dan 60% (Arsyiogi, 2014).    Hasil  penelitian  Bell  dan  Hamale  (1970) menyebutkan bahwa dengan menggunakan konsentrasi spora  1,8  x  10 9 /ml  mampu  membunuh  100%  larva Chalcodermus aeneus dalam waktu 6-7 hari.
Pada pengamatan mortalitas ulat api secara visual, kriteria yang terlihat bahwa ulat api sudah terinfeksi jamur B.  bassiana adalah  penurunan  nafsu  makan,  adanya miselia jamur berwarna putih pada permukaan tubuh ulat api.    Gejala awal, kondisi  ulat  api masih  lunak, kemudian ulat api menjadi kaku dan mumifikasi saat jamur berkembang di dalam tubuh ulat api.
Hasil  pengamatan  (Gambar 2A)  menunjukkan bahwa  ulat  api  yang  terinfeksi  jamur B.  bassiana tampak mengalami mumifikasi oleh miselia B. bassiana , namun tidak tampak menyeluruh permukaan tubuh ulat api.   Ada  beberapa  ulat  api  yang  tidak  mengalami kematian menjadi pupa dan ngengat.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian dapat diambil kesimpulan bahwa  keempat  isolat  jamur B.  bassiana memiliki pertambahan  koloni,  kerapatan  spora  dan  daya berkecambah  (viabilitas)  yang  berbeda-beda,  dari keempat jamur tersebut isolat Bbyf 24 yang memiliki pertambahan  koloni,  kerapatan  spora  dan  daya berkecambah (viabilitas) yang paling baik dibandingkan B.  bassiana asal  Tanggamus.  Tiga  isolat B. bassiana dari  tiga  tingkat  pengenceran  mampu
Gambar 1. Mortalitas ulat api menggunakan 3 isolat pada tingkat pengenceran10 6 , 10 7 , dan 10 8
Gambar 2. Mortalitas  ulat  api. A.Tubuh  ulat  api ( Setothosea spp.)  yang  terinfeksi  jamur B.bassiana (Bbyf 24) dengan perbesaran 400x; B. Pupa ulat api ( Setothosea spp.);
C. Ngengat ulat api ( Setothosea spp.)
Anggraini et al.: Patogenisitas Empat Isolat Jamur Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. 109
menimbulkan mortalitas pada ulat api, namun isolat yang mampu menimbulkan mortalitas ulat api dengan baik yaitu isolat Bbyf dan Bbyf 24 mencapai 33% dengan tingkat pengenceran 10 8 .

## DAFTAR  PUSTAKA
Arsyiogi, B.  2014.  Mortalitas Aphis craccivora Koch. pada Beberapa Konsentrasi Beauveria bassiana Balsamo  pada  Tanaman  Kacang  Panjang. Skripsi . Universitas Bengkulu.  Bengkulu.  2 hlm.
Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian.  2013.
Ulat Kantung (Lepidoptera : Psychidae) sebagai Hama  Potensial  Jambu  Mete  dan  Upaya Pengendaliannya. Warta  Penelitian  dan Pengembangan  Perkebunan .  Vol.19(2):1-4.
Bell, V.J. dan R. Hamale.  1970.  Three Fungi Tested for Curculio, Chalodermus aeneus. Journal of Invert. Pathol . (15): 447-450.
Direktorat  Jenderal  Perkebunan.  2015. Statistik Perkebunan  Indonesia .  Jakarta.
Fitriana,Y., S. Shinobu, S. Katsuya, N. Issay, dan  S. Tsutomu.  2015.  Benomyl-resistant Beauveria bassiana (Hypocreales: Clavicipitaceae) mutants induced by ion beams Applied Entomology and Zoology . Vol.50: 123-129.
Noya, S.H. 2009. Pathogenicity of Beauveria bassiana Isolates  (Bals)  Vuill  on Cylas  formicarius F. (Coleoptera:  Curculionidae). J.  Budidaya Pertanian. Vol.5: 81–83.
Pratiwi, D.2016. Patogenisitas Empat Isolat Cendawan Beauveria bassiana terhadap  Hama Helopeltis spp.  dan Riptortus  linearis di  Laboratorium. Skripsi. Universitas Lampung. Lampung.
Prawirosukarto,  S.  2002. Pengenalan  dan Pengendalian  Hama  Ulat  pada  Tanaman Kelapa  Sawit .  Pusat  Penelitian  Kelapa  Sawit. Medan. 4 hlm.
Prawirosukarto, S., A. Djamin, dan Dj. Pardede.  1997. Pengendalian  Oryctes  rhinoceros  dan  Ulat Pemakan  Daun  Kelapa  Sawit  Secara Terpadu . Pusat Penelitian Kelapa Sawit. Medan.
Prawirosukarto,  S.,  R.Y.  Purba,  C.  Utomo,  dan A. Susanto.  2003. Pengenalan dan Pengendalian Hama  dan  Penyakit  Tanaman  Kelapa  Sawit . Medan.
Purnama, P.C., S.R. Nastiti dan J. Situmorang.  2003. Uji  Patogenitas  Jamur Beauveria  bassiana (Bals.) Vuill.  Isolat  Magelang  terhadap Aphis craccivora Koch. BioSmart . Vol.5(2): 81-88.
Rosfiansyah.  2009.  Pengaruh Aplikasi Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin dan
Heterorhabditis sp.  terhadap  Serangan  Hama Ubi jalar Cylas formicarius (Fabr.) (Coleoptera: Brentidae). Tesis .    Sekolah  Pasca-sarjana. Institut Pertanian Bogor.  Bogor.
Saranga,  A.P.  dan  I.D.  Daud.  1993. Prospek Pemanfaatan  Patogen  Serangga  untuk Pengendalian  Serangga  Hama  di  Sulawesi Selatan. Prosiding  Simposium  Patologi Serangga I. Yogyakarta. 9 hlm.
Sastrosayono,  S.  2003. Budidaya  Kelapa  Sawit .
Agromedia Pustaka. Jakarta.
Satriawan,  R.  2011.  Kelimpahan  Populasi  Ulat Api (Lepidoptera: Limacodidae) dan Ulat Kantung (Lepidoptera:  Psychidae)  serta  Predator  pada Perkebunan  Kelapa  Sawit  ( Elaeisguineensis Jacq.)  Cikidang  Plantation  Estate,  Sukabumi. Skripsi . Institut Pertanian Bogor.  Bogor.
Soetopo,  D.  2004.    Efficacy  of  Selected Beauveria bassiana (Bals.) Vuill, Isolates in Combination with  a  Resistant  Cotton  Variety  (PSB-Ct  9) againts  the  Cotton  Bollworm, Helicoverpa armigera (Hubner)  (Lepidoptera:  Noctuidae). Disertasi .  Philippines:  University  of  The Philippines Los Banos.
Suharto, E.B., Trisusilowati, dan H. Purnomo. 1998. Kajian Aspek Fisiologik Beauveria bassiana dan Virulensinya  terhadap Helicoverpa  armigera . Jurnal  Perlindungan  Tanaman  Indonesia. Vol.4(2): 112-119.
Tarigan,  B.,  Syahrial,  dan  M.U.  Tarigan.  2013.  Uji Efektifitas Beauveria  basianna dan Bacillus thuringiensis terhadap  Ulat Api  ( Setothosea asigna Eeck, Lepidoptera , Limacodidae )  di Laboratorium. Jurnal Agroteknologi. Vol.1(4):
139-146.
Widayat, W. dan D.J. Rayati.  1993. Pengaruh Frekuensi Penyemprotan Jamur Entomopatogenik terhadap Ulat Jengkal ( Ectropis bhurmitra ) di Perkebunan Teh. Prosiding  Simposium  Patologi  Serangga
I. Yogyakarta.  13 hlm.