## PENDAHULUAN
Senyawa  metabolit  sekunder  adalah  sumber  bahan kimia  yang . tidak  pernah  habis,  sebagai  sumber  inovasi dalam  penemuan  dan  pengembangan  obat-obat  baru ataupun  untuk  menunjang  berbagai  kepentingan industri.  Selain  itu,  sebagai  identifikasi  awal  dalam membuat  sediaan  farmasi  dari  senyawa  kimia  bahan alam  yang  memiliki  nilai  tambah  produk  (Noval, Melviani, Novia, Syahrina, 2020).
Senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  dalam tumbuhan  merupakan  zat  bioaktif  yang  berkaitan dengan  kandungan  kimia  dalam  tumbuhan,  sehingga
sebagian tumbuhan dapat digunakan sebagai bahan obat (Kurniawati et al., 2020). . Tanpa adanya suatu senyawa bioaktif  dalam  tumbuhan  secara  umum . tumbuhan tersebut  tidak  dapat  digunakan  sebagai  obat . (Adikara, 2013).
Pada  saat  ini  pohon  buah  Gayam  tersebar  luas diwilayah  Indonesia  yang  meliputi  pulau  Jawa, Kalimantan,  Sumatera,  dan  sebagian  Semenanjung Malaya.  Seiring  dengan  berkembangnya  pembibitan beragam  tanaman  buah-buahan  dengan  berbagai  pola pembiakan  menjadikan.  tanaman  gayam  semakin terpinggirkan.  Pohon  gayam  pelan  namun  pasti tersaingi  oleh  jenis  yang  kebanyakan  masyarakat

## IDENTIFIKASI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER PADA EKSTRAK DAUN GAYAM (Inocarpus Fagifer Fosb) DENGAN MENGGUNAKAN KLT
Identification of Secondary Metabolite Compounds on The Extract of Gayam Leaves (Inocarpus Fagifer Fosb) Using TLC
Rohama 1*
Zainuddin 2
*1,2 Sari Mulia University,
Banjarmasin City, South Borneo 70238, Indonesia
*email: apt.rohama@gmail.com

## Abstrak
Pohon Gayam tersebar luas diwilayah Indonesia, Tumbuhan gayam (Inocarfus Fegifer Fosb)  juga  digunakan  sebagai  obat  BAB  berdarah  pada  masyarakat  dengan  cara merebus batang dan diminum air rebusan nya. Gayam selain berkhasiat sebagai obat juga  digunakan  sebagai  makanan  dimasyarakat  di  daerah  Banjarmasin.  Masyarakat awam  tentunya  banyak  belum  mengetahui  manfaat  gayam  serta  kandungan  nilai gizinya.
Penelitian  mengenai  identifikasi  senyawa  metabolit  sekunder  pada  ekstrak  daun Gayam  (Inocarpus  Fagifer  Fosb)  dengan  menggunakan  KLT  dimana  Daun  Gayam (Inocarpus  Fagifer  Fosb)  di  ekstraksi  dengan  metode  maserasi,  ekstrak  kental  yang diperoleh kemudian dilakukan uji identifikasi senyawa metabolit sekunder dengan uji pereaksi warna dan KLT.  Hasil identifikasi senyawa metabolit daun gayam (Inocarfus Fegifer Fosb) dengan uji pereaksi warna dan KLT menunjukan hasil uji positif adanya senyawa alkaloid, flavonoid, terpenoid, saponin.

## Kata Kunci:
Stroke
Kekuatan Genggaman tangan
Keywords: Stroke Strength Hand grip

## Abstract
The Gayam tree is widespread in the territory of Indonesia, the Gayam plant (Inocarfus Fegifer Fosb) is also used as a medicine for bloody bowel movements in the community by boiling the stems and drinking boiled water. Besides having medicinal properties, Gayam is also  used  as  food  in  the  community  in  the  Banjarmasin  area.  The  common  people certainly do not know the benefits of gayam and its nutritional value. Research on the identification of secondary metabolite compounds in Gayam leaf extract (Inocarpus  Fagifer  Fosb)  using  TLC  where  Gayam  Leaves  (Inocarpus  Fagifer  Fosb)  was extracted  by  maceration  method,  the  thick  extract  obtained  was  then  carried  out  by testing the identification of secondary metabolites with color reagent and TLC. The results of the identification of the compound metabolite of gayam leaves (Inocarfus Fegifer Fosb)
by  color reagent  and  TLC  test  showed  positive  test results  for  alkaloids,  flavonoids, terpenoids, saponins.
©  year  The  Authors.  Published  by  Institute  for  Research  and  Community  Services  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya.  This  is  Open Access article under  the  CC-BY-SA  License (http://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/). DOI: https://doi.org/10.33084/jsm.vxix.xxx .
menganggap  punya  nilai  ekonomi  yang  lebih  bagus. Eksplorasi  senyawa  kimia  dari  bahan  alam  sangat memiliki  dampak  yang  signifikan  terhadap  masyarakat dalam  pengembangan  produk  farmasi  yang  memiliki khasiat farmakologi dan dapat dimanfaatkan secara luas (Noval, et al., 2020).
Gayam  selain  berkhasiat  sebagai  obat  juga  digunakan sebagai  makanan  dimasyarakat  di  daerah  Banjarmasin. Beberapa  hal  tersebut  antara  lain  menjadi  penyebab masyarakat  kurang  berminat  untuk  mengolah  dan memanfaatkan buah gayam. Masyarakat awam tentunya banyak  belum  mengetahui  manfaat  biji  gayam  serta kandungan  nilai  gizinya.  Tumbuhan  gayam  (Inocarfus Fegifer Fosb) juga digunakan sebagai obat BAB berdarah pada  masyarakat  dengan  cara  merebus  batang  dan diminum air rebusan nya.
Ekstrak  etanol  kulit  batang  gayam  mengandung senyawa  flavonoid  serta  mempunyai  aktivitas  sebagai antioksidan  (Anastasia,  2015),  ekstrak  etanol daun gayam memiliki nilai aktivitas antioksidan IC 50 berturut- turut sebesar 5081.2 ug/ml Lestari 2018), ekstrak kulit batang gayam menggandung flavonoid dan fenol (santi, 2015),  berdasarkan  manfaat  gayam  yang  telah diketahui,  maka  tanaman  ini  dapat  digunakan  sebagai bahan dilakukannya penelitian yaitu identifikasi senyawa metabolit  sekunder  daun  gayam  dengan  menggunakan KLT,  dengan  adanya  penelitian  ini  diharapkan  dapat menambah data pemanfaatan tanaman sekaligus wujud pelestarian  tanaman.  Kromatografi  lapis  tipis  adalah salah satu metode identifikasi komponen menggunakan fase diam. berupa plat dengan lapisan bahan adsorben inert,  KLT  merupakan  alat  satu  jenis  kromatografi analitik.  KLT  sering  digunakan  untuk  identifikasi  awal, karena  banyak  keuntungan  menggunakan  KLT, diantaranya adalah sederhana dan murah.

## METODOLOGI

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu  gunting  seperangkat  alat maserasi,  waterbath,  rotary  evaporator,  cawan penguap, corong kaca, batang pengaduk, alat alat gelas, plat KLT, tangas air kertas saring, pipa kapiler, gunting dan pisau. tabung, reaksi, dan lampu ultraviolet.
Bahan  yang  digunakan  adalah  ekstrak  daun  gayam ( Inocarpus  Fagifer  Fosb) ,  aquadest,  etanol  70%,  serbuk magnesium, HCI 5 M, FeCI 3 1% , , n- heksan, kloroform.

## Metode Penelitian
Persiapan Alat dan Bahan Sampel daun gayam ( Inocarpus Fagifer Fosb) didapat dari daerah kota Banjarmasin, Kalimantan Selatan.
Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Gayam Tahapan ekstraksi adalah sebagai berikut:
1. Simplisia daun gayam ( Inocarpus Fagifer Fosb) , dimasukkan ke dalam bejana maserasi.
2. Dimasukkan etanol ke dalam bejana sampai merendam simplisia setinggi 2-3 cm
3. Bejana maserasi ditutup dan biarkan rendaman selama 3 hari sambil sesekali di aduk
4. Cairan hasil ekstraksi dikeluarkan dari bejana dengan disaring
5. Filtrat kemudian diuapkan menggunakan rotary evaporator sampai didapatkan ekstrak kental (Noval et al., 2019).
Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak Daun Gayam dengan Pereaksi Warna
1. Flavonoid  Cara  yang  pertama  uji  shinoda: Ekstrak  daun  gayam  (Inocarfus  fegifer  Fosb) yang  dilarutkan  dalam  2  mL  etanol ditambahkan dan serbuk magnesium dan 5-10 tetes  HCL.  Mengamati  serbuk  perubahan warna  yang  terjadi  (Warna  merah  jingga sampai  merah  menunjukan  adanya  flavanon, flavonol,  flavanolol,  dan  dihidroflavonol) (Harborne,1987).
2. Terpenoid  dengan  pereaksi  Libermann- Buchard: Ekstrak daun gayam (Inocarfus fegifer Fosb)  yang  dilarutkan  dalam  2  mL  etanol ditambahkan  3-5  tetes  pereaksi  liberman-
Burchard  hinga  terbentuknya  warna  hijau hingga biru (Harborne,1987).
3. Alkaloid  dengan  pereaksi  dragendorf:  ekstrak dilarutkan  dalam  2  mL  etanol  masukan  ke dalam  tabung  reaksi  menambahkan  pereaksi dragendorf.  (warna  oranye  mendekati  merah yang  terbentuk  menunjukan  adanya  senyawa alkaloid) (Tiwari,et al., 2017).
4. Saponin: Ekstrak daun gayam (Inocarfus fegifer) yang  dilarutkan  dalam  2  mL  etanol  yang diperiksa  ke  dalam  tabung  tabung  reaksi. Menambahkan  10  ml  air  panas,  kemudian dinginkan.  Kocok  kuat  kuat  10  selama  10 detik. Amati hasil pengujian (Terdapat saponin dengan  ciri  terbentuknya  buih  yang  bertahan selama  10  menit,  setinggi  1  sampai  10  cm) selanjunya  menambahkan  1  tetes  HCL  2N,
buih  tidak  hilang  maka  mengandung  saponin (Tiwari,et al., 2017).
5. Identifikasi  tanin:  Ekstrak  daun  gayam  (Inocafus fegifer Fosb)  yang dilarutkan dalam 2 mL etanol dan  tambahkan  5-10  tetes  larutan  FeCI  3  3% terbentuknya warna hijau biru hingga kehitaman (Noval et al., 2019).
Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak Daun Gayam dengan KLT
Siapkan plat KLT Ekstrak daun gayam (Inocarfus fegifer fosb) yang akan digunakan, Larutan bahan uji dan atau pembanding  yang  sudah  disiapkan  ditotol  kan  pada lempeng  (jarak  antara  totolan  sekitar  1-1,5  cm) dengan  volume  tertentu,  jarak  1,5-2  cm  dari  tepi bawah lempeng, diameter totolan diusahakan sekecil mungkin  dan  dibiarkan  mengering  dan  beri  tanda pada  jarak  rambat  yang  dikehendaki.  Memasukan lempeng  kedalam  bejana  yang  sudah  dijenuhkan dengan  fase  gerak,  dengan  posisi  tegak  dan  bagian tepi bawah tercelup dalam fase gerak, tetapi totolan tidak  sampai  terendam.  Menutup  rapat  bejana,  fase gerak dibiarkan merambat hingga batas jarak rambat,
Mengeluarkan  lempeng  dan  mengeringkan  diudara dan  Perhatikan  bercak  yang  timbul  dengan  sinar tampak  ultraviolet  pada  panjang  gelombang  254  nm dan  366  nm  selanjutnya  diukur  dan  dicatat  jarak rambat setiap bercak yang timbul dan fase gerak dari titik penotolan sehingga diperoleh nilai Rf.
Pereaksi  semprot  Uji  alkaloid  dengan  menyemprot pada plat KLT dengan pereaksi dragendorf yang akan menunjukan  noda  coklat  jingga  berlatar  kuning (Harborne, 1996). Uji triterpenoid dengan menyemprot  pada  plat  KLT  dengan  pereaksi liebermann-buchard  (  anhidrida  asetat:  asam  sulfat pekat  3:1)  yang  akan  menunjukan  warna  hijau/biru pada steroid dan merah/ungu triterpenoid (Harborne, 1996).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tumbuhan gayam (Inocarfus Fegifer Fosb) juga digunakan sebagai  obat  BAB  berdarah  pada  masyarakat  dengan cara  merebus  batang  dan  diminum  air  rebusan  nya. Gayam  selain  berkhasiat  sebagai  obat  juga  digunakan sebagai  makanan  dimasyarakat  di  daerah  Banjarmasin. Masyarakat  awam  tentunya  banyak  belum  mengetahui manfaat gayam serta kandungan nilai gizinya.
Identifikasi senyawa metabolit sekunder ekstrak daun Gayam  (Inocarfus  Fegifer  Fosb)  dilakukan  dengan menggunakan  pereaksi  warna  dan  KLT.  Adapun  hasil identifikasi  senyawa  metabolit  sekunder  daun  gayam dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel I. Hasil Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak  Daun  Gayam  (Inocarfus  Fegifer  Fosb)  dengan Pereaksi Warna
No  Metabolit Sekunder Pereaksi Hasil 1 Alkaloid Dragendorf (+) Warna orange mendekati merah 2 Flavonoid Shinoda (+) Warna merah jingga 3 Terpenoid Liebermann Buchard (+)Warna hijau hingga biru 4 Saponin Buih (+) Buih 2 cm 5 Tanin FeCl3 (-)Warna hijau coklat
Tabel II. Hasil Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak Daun Gayam (Inocarfus Fegifer Fosb) dengan
KLT No Metabolit Sekunder Hasil (UV 366 dan UV 254) 1 Alkaloid (+) 2 Flavonoid (+) 3 Terpenoid (+) 4 Saponin (+) 5 Tanin (-)
Berdasarkan pengujian yang dilakukan, didapatkan data sebagaimana dalam tabel I dan II.
Hasil  dari  pengujian  senyawa  fitokimia  menyatakan bahwa  ekstrak  daun  gayam  mengandung  senyawa alkaloid,  flavonoid,  terpenoid  dan  saponin.  Senyawa flavonoid  yang  teridentifikasi  disebabkan  karena senyawa flavonoid termasuk dalam senyawa fenol yang apabila direaksikan dengan basa  akan terbentuk warna akibat terjadinya sistem konjugasi dari gugus aromatik, senyawa flavonoid selain memiliki kemampuan sebagai antioksidan  juga  dapat  berfungsi  sebagai  antimikroba, anti  alergi,  sitotoksisitas  dan  anti  inflamasi  (Kusnadi, 2017).
Terbentuknya  busa  pada  identifikasi  saponin disebabkan  adanya  glikosida  yang  mampu  membentuk busa didalam air yang terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa  lainnya,  saponin  memiliki  banyak  manfaat seperti  antibakteri,  antifungi,  menurunkan  kolesterol dalam darah dan menghambat pertumbuhan sel tumor (Nugrahani, 2016).
Dari hasil penelitian menunjukan hasil uji positif adanya terpenoid  dalam  sampel.  Senyawa  terpenoid  yang teridentifikasi disebabkan karena terbentuknya senyawa komplek dengan pereksi libermann-buchard.
Senyawa alkaloid yang teridentifikasi disebabkan karena senyawa  alkaloid  mengandung  atom  nitrogen  yang mempunyai  pasangan  electron  bebas  sehingga  dapat digunakan untuk membentuk ikatan kovalen koordinat dengan  ion  logam.  Nitrogen  pada  alkaloid  akan
bereaksi  dengan  ion  logam  k+  dari  kalium tetraiodomerkurat  (II)  membentuk  kompleks  kalium- alkaloid yang mengendap (marliana, 2005).
Pengujian menggunakan KLT  akan diamati pada  lampu UV 254 dan 366, pengamatan pada lampu UV 254 yang terjadi  adalah  lempeng  KLT  akan  berfluorosensi  dan sampel  yang  tampak  akan  menunjukkan  warna  yang gelap. Penampakkan noda yang terjadi pada lampu UV 254  dan  366  terjadi  karena  adanya  interaksi  antara sinar  UV  dengan  indikator  fluorosensi  yang  ada  pada lempeng.  Hasil  yang  didapatkan  adalah  ekstrak  daun gayam positif mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, terpenoid dan saponin.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  ekstrak daun gayam (Inocarfus Fegifer Fosb) dengan uji pereaksi warna dan Kromatografi Lapis Tipis warna menunjukan hasil  uji  positif  adanya  senyawa  alkaloid,  flavonoid, terpenoid, dan saponin

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  keluarga, teman-teman yang telah memberikan dukungan selama pengerjaan penelitian ini.

## REFERENSI
1. Noval,  N.,  Melviani,  M.,  Novia,  N.  and Syahrina,  D.  2020.  Formulasi  Dan  Evaluasi
Sediaan  Obat  Kumur  (Mouthwash)  Dari Ekstrak Etanol Tanaman Bundung (Actinoscirpus  Grossus)  Sebagai  Antiseptik Mulut. Jurnal  Surya  Medika  (JSM).  6,  1  (Aug. 2020), 112-120 . DOI:https://doi.org/10.33084/jsm.v6i1.1626.
2. Kurniawati,  Darini,  Noval  Noval,  and  Kunti Nastiti.  2020.  “POTENSI  ANTISEPTIK
POLIHERBAL  DAUN  SIRIH  (Piper  Betle), KULIT  JERUK  NIPIS  (Citrus  Aurantifolia) DAN TANAMAN BUNDUNG
(Actinuscirpus  Grossus)  PADA  TINDAKAN

## KEPERAWATAN
DAN KEBIDANAN.”
Dinamika  Kesehatan:  Jurnal  Kebidanan  Dan Keperawatan 11(1): 420–31.
3. Adikara,  I  Putu  Arya,  2013  Studi Histopatologi  Hati  Tikus  Putih  (Rattus novergicus)  yang  diberi  Ekstrak  Etanol  Daun Kedondong (Spondias dulcis) Secara Oral.(nama  kota)  Buletin  Veteriner  Udayana. ISSN: 2085-2495. Vol. 5 No. 2.
4. Noval,  N.,  Nastiti,  K.,  Nugraha,  D., Rahmadani,  R.,  &  Alawiyah,  T.  2020  Dec  30. PRODUK  INOVASI  HAND  SANITIZER DARI  AKAR  BAJAKAH  SEBAGAI  UPAYA PENCEGAHAN DI  MASA PANDEMI
COVID-19.  LOGISTA  -  Jurnal  Ilmiah Pengabdian kepada Masyarakat. [Online] 4:2
5. Anastasia,  M.  H.  2015.  Isolasi,  Identifikasi  Dan Uji Aktivitas Antioksidan Senyawa Flavonoid Pada Kulit  Batang  Gayam.  Denpasar:  Bachelor thesis, Universitas Udayana.
6. Harborne,  J.B.  1987.  Metode    Fitokimia Penuntun Cara Modern
Menganalisis
Tumbuhan.Bandung.  Penerbit ITB.
7. Kusnadi,  Devi  Egie  T.  2017.  Isolasi  dan identifikasi  senyawa  flavonoid  pada  ekstrak daun  seledri  (Apium  gaveolens  L.)  dengan metode  refluks.  Pancasakti  Science  Education
Journal. 2(1): 56-57. Tersedia pada: https://www.researchgate.net/publication/318 342858_ISOLASI_DAN_IDENTIFIKASI_SEN YAWA_FLAVONOID_PADA_EKSTRAK_D AUN_SELEDRI_Apium- graveolens_L_DENGAN_METODE_REFLUK S [Diakses 17 Juli 2020]
8. Lestari,  Astuti  (2018).  Isolasi  Dan  Identifikasi Senyawa  Metabolisme  Sekunder  Dari  Fraksi  Etil Asetat  Batang  Benalu  (Dendrophthoe  Falcata (L.F).  Jogyakarta.  Skripsi  Tidak  Diterbitkan. Fakultas  Matematika  dan  IlmuPengetahuan Alam. UNY : Yogyakarta.
9. Marliana,  S.  D.,  Suryanti,  V  dan  Suyono. (2005).  Skrining  Fitokimia  dan  Analisis Kromatografi  Lapis  Tipis  Komponen  Kimia  Buah Labu  Siam  (Sechium  edule  Jacq.  Swartz.)  dalam Ekstrak Etanol. Biofarmasi. 3(1)
10. Noval,  N.,  Yuwindry,  I.  and  Syahrina,  D. (2019) ‘Phytochemical Screening and
Antimicrobial  Activity  of  Bundung  Plants Extract  by  Dilution  Method’,  Jurnal  Surya Medika. doi: 10.33084/jsm.v5i1.954.
11. Nugrahani  R,  Andayani  Y,  Hakim  A.  2016. Skrining  fitokimia  dari  ekstrak  buah  buncis (Phaseolus  vulgaris  L)  dalam  sediaan  serbuk. Jurnal  Penelitian  Pendidikan  IPA.  2(1):  35-42.
Tersedia pada: http://jurnalfkip.unram.ac.id/Index.php/PK/arti cle/download/198/194 [Diakses 17 Juli 2020]
12. Sri  Rahayu  Santi.  2015.  aktivitas  antioksidan total  flavonoid  dan  fenol  kulit  batang  gayam (Inocarfus Fegifer Fosb). Bali. jurnal kimia 9 (2), : 160-168.
13. Tiwari  P,  Kumar  B,  Kaur  G,  Kaur  H.  2011. Phytochemical  Screening  and  Extraction.  A review  International  Pharmaceutica  Sciencia. 1(1).
Tersedia
pada: https://www.semanticscholar.org/paper/ Phytochemical-screening-and-Extraction%3A- A-Review-Tiwari- Kaur/979e9b8ddd64c0251740bd8ff2f65f3c9a1 b3408 [Diakses 3 Maret 2020]