Jurnal Lahan Suboptimal ISSN: 2252-6188 (Print), ISSN: 2302-3015 (Online) Vol. 1, No.2: 123-129, Oktober 2012

## Aplikasi Isolat Bakteri Hidrokarbonoklastik asal Rizosfer Mangrove pada Tanah Tercemar Minyak Bumi
Application of Hydrocarbonoclastic Bacteria Isolates from Mangrove Rhizosphereon Petroleum Polluted Soil
Nuni Gofar 1,2*)
1 Jurusan Tanah Fakultas Pertanian Universitas Sriwijaya Indralaya
2 Pusat Unggulan Riset Pengembangan Lahan Suboptimal (PUR-PLSO) Unsri
*) Penulis untuk korespondensi: Tel./Faks. +62711352879, email: nigofar@yahoo.co.id

## ABSTRACT
This  research  was  aimed  at  studying  the  ability  of  hydrocarbonoclastic  bacteria  to reduce  total  petroleum  hydrocarbon  of  petroleum  polluted  soil.  The  hydrocarbonoclastic bacteria  were  isolated  from  rhizosphere  of  mangrove  grown  on  petroleum  contaminated soil  in  Sungsang,  Sumatra  Selatan.  The  samples  were  taken  using  a  defined  sampling method from the oil contaminated areas. Soil samples around the roots of mangrove plants were randomly taken in the contaminated    area.  Isolates obtained from the isolation and selection of bacteria from mangrove forests were overhauled at the laboratory-scale using oil-enriched  medium  following    a  completely  randomized  design.  Nine  isolates  of hydrocarbonoclastic bacteria were found to be  capable of growing on petroleum contained medium  in  vitro.  Two  best  isolates  in  degrading  petroleum  hydrocarbon  compound  were Pseudomonas alcaligenes (I 5 ) and Alcaligenes facealis (I 8 ). P. alcaligenes and A. facealis were able to decrease TPH up to 63% and 70% respectively. The ability of these isolates in degrading hydrocarbon compound was 6.5-7.0 times higher than the control.
Key words: hydrocarbonoclastic bacteria, hydrocarbon compounds, mangrove

## ABSTRAK
Penelitian  bertujuan  untuk  mempelajari  kemampuan  bakteri  hidrokarbonoklastik asal  rizisfer  mangrove  dalam  menurunkan  kadar  TPH  pada  tanah  tercemar minyak  bumi. Bakteri  hidrokarbonoklastik  diisolasi  dari  rizosfer  mangrove  yang  tumbuh  pada  tanah terkontaminasi minyak bumi di daerah Sungsang Sumatera Selatan.  Contoh tanah sumber bakteri  hidrokarbonoklastik  diambil  dari  rizosfer  mangrove  secara  acak  pada  area  yang terkontaminasi  minyak  bumi.    Isolasi  dan  seleksi  bakteri  hidrokarbonoklastik  dilakukan pada skala laboratorium menggunakan media yang diperkaya dengan minyak bumi.  Isolat- isolat berkemampuan tumbuh pada medium mengandung minyak bumi diaplikasikan pada tanah  tercemar  minyak  bumi  dengan  rancangan  acak  lengkap.  Ditemukan  9  isolat bakteri hidrokarbonoklastik yang mampu tumbuh pada medium mengandung minyak bumi secara in vitro. Dua isolat terbaik dalam mendegradasi senyawa hidrokarbon minyak bumi adalah Pseudomonas  alcaligens  (I 5 )  dan Alcaligens  facealis (I 8 ). P.  alcaligens dan A.  faecalis mampu  menurunkan  TPH  berturut-turut  sebesar  63  dan  70%.    Kemampuan  kedua  isolat dalam mendegradasi senyawa hidrokarbon 6,5-7,0 kali lebih tinggi dibandingkan kontrol.
Kata kunci: Bakteri hidrokarbonoklastik, senyawa hidrokarbon, mangrove
Gofar :  Aplikasi bakteri hidrokarbonoklastik asal rizosfer mangrove

## PENDAHULUAN
Ekosistem mangrove merupakan daerah peralihan antara darat dan laut yang terdapat di sepanjang pantai yang terlindung  dan  muara  sungai.    Selain mengalami penurunan luas, hutan mangrove  juga  mengalami  penurunan kualitas  lingkungan  akibat  pencemaran, salah  satunya  pencemaran  minyak  akibat eksplorasi minyak bumi. Untuk menanggulangi masalah pencemaran minyak  bumi  di  kawasan  mangrove, teknologi  yang  direkomendasikan  adalah teknik  bioremediasi  yang  memanfaatkan bakteri hidrokarbonoklastik
(Mangkoedihardjo, 2005).  Bakteri tersebut mampu  menggunakan  PAH  ( policyclic aromatic hydrocarbon ) sebagai satu- satunya  sumber  karbon  dan  energi  selama proses bioremediasi tanah tercemar minyak bumi  dan  mendegradasinya  secara  lengkap hingga terbentuk senyawa akhir yang stabil dan  tidak  beracun  (Zam,  2006)  serta karbondioksida dan air (Ling, 2006).
Kelompok  bakteri  merupakan  agens bioremediasi yang banyak digunakan terutama karena bakteri memiliki kecepatan reproduksi yang tinggi dan bakteri merupakan kelompok mirkoba yang mudah beradaptasi  dengan  lingkungan,  sehingga memungkinkan  dapat  menggunakan  residu minyak  bumi  sebagai  sumber  karbon  dan energi (Koswara, 2003; Foght, 2008).
Menurut  Desai  dan  Vyas  (2006), mikroba  pendegradasi  hidrokarbon  secara alami  terdapat  dimana-mana  dan  relatif lebih tinggi jumlahnya pada tanah tercemar minyak  bumi  dibandingkan  pada  tanah tidak tercemar. Hasil penelitian Gofar et al . (2011)  telah  menemukan  3  isolat  kapang hidrokarbonoklastik  indigen  asal  hutan mangrove Sumatera Selatan tercemar minyak  bumi yang  terbukti  mampu mendegradasi minyak bumi secara in vitro. Ketiga  isolat  tersebut  diidentifikasi  sebagai Aspergillus  fumigatus,  A.  Parasiticus ,  dan Chrysonilia  sitophila .    Selain  kapang, eksplorasi  bakteri  hidrokarbonoklastik  asal rizozfer  tanaman  mangrove  Sumatera
Selatan yang tercemar minyak bumi penting juga  dilakukan  untuk  mengetahui  potensi bakteri  indigen  dalam  merombak  minyak bumi.  Oleh  karena  itu,  penelitian  yang bertujuan  untuk  mempelajari  kemampuan bakteri  hidrokarbonoklastik  asal  rizofer mangrove  dalam  menurunkan  kadar  TPH pada  tanah  tercemar  minyak  bumi  perlu dilakukan.  Dari  isolasi  dan  pengujian kemampuan  bakteri  hidrokarbonoklastik dalam  merombak  minyak  bumi  yang mencemari tanah diharapkan akan diperoleh isolat-isolat  bakteri  yang  berkemampuan tinggi merombak hidrokarbon minyak bumi dan  memperkaya  keanekaragaman  hayati yang  bermanfaat  untuk  menanggulangi pencemaran lingkungan.

## BAHAN DAN METODE
Contoh  tanah  sumber  isolat  bakteri hidrokarbonoklastik  diambil  dari  rizozfer tumbuhan mangrove asal areal pasang surut Kabupaten  Banyuasin  pada  bulan  Januari 2010.  Sampel  tanah  sumber  isolat  diambil dengan  metode purposive  sampling dari rizosfer  tumbuhan  mangrove  yang  tumbuh di  daerah  tercemar  minyak  bumi.  Contoh tanah tercemar minyak bumi untuk pengujian kemampuan isolat bakteri hidrokarbonoklastik diambil di desa Talang Jimar,  Prabumulih  pada  kedalaman  0-20 cm. Aplikasi isolat bakteri hidrokarbonoklastik  terpilih  pada  tanah tercemar minyak bumi berkadar 7,2% TPH ( total  petroleum  hydrocarbon )  dilakukan dalam percobaan pot menggunakan rancangan acak lengkap.
Sampel  tanah  asal  rizosfer  tanaman mangrove  Sumatera  Selatan  ditimbang sebanyak 4,5 g dan disuspensikan dalam 45 mL  medium Bushnell  Haas  Mineral Salt (BHMS)  cair,  lalu  diinkubasi  selama  5 hari pada suhu 30 o C dengan laju pengocokan  100  rpm.  Terhadap  contoh tanah  yang  telah  mengalami  pengayaan  ini dilakukan pengenceran sampai tingkat 10 -6 . Dari    pengenceran  10 -4 ,  10 -5 ,  10 -6 diambil sebanyak  1  mL,  dicampur  dengan  medium Bushnell  Haas  Mineral  Salt (BHMS)  padat
dengan  metode pour  plate ,  kemudian diinkubasi  pada  suhu  30 o C  selama  5  hari. Setiap  koloni  bakteri  yang  tumbuh  dan mempunyai ciri  yang berbeda, dipindahkan pada  medium  nutrien  agar  (NA)  padat dalam cawan petri menggunakan jarum ose dengan  cara  goresan  ( streak  plate )  dan diinkubasi  kembali  pada  suhu  30 o C  selama 5  hari.  Selanjutnya  koloni  yang  sudah murni  diinokulasikan  ke  dalam  medium Zobell miring untuk penyimpanan.
Isolat bakteri yang diperoleh diseleksi berdasarkan kemampuan mendegradasi residu minyak bumi dalam dua tahap, yaitu: Seleksi  tahap  I:  Isolat-isolat  bakteri  yang telah  murni  diinokulasikan  pada  medium Zobell  padat  dalam  cawan  Petri,  kemudian kertas  saring  yang  telah  diolesi  residu minyak  bumi  diletakkan  di atas  permukaan medium,  kultur  diinkubasi  pada  suhu  30 o C selama5  hari.  Tumbuhnya  koloni  isolat bakteri  pada  permukaan  medium  Zobell yang diolesi residu minyak bumi menunjukkan isolat tersebut mampu bertahan hidup dan tumbuh pada lingkungan yang mengandung residu minyak  bumi.    Seleksi  tahap  II:  Isolat bakteri  yang  mampu  tumbuh  pada  seleksi tahap  I  diinokulasikan  pada  medium Soeminarti  cair  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan residu minyak bumi sebanyak 0,3  mL,  lalu  diinkubasi  pada shaker incubator (100  rpm)  pada  suhu  30 o C selama  5  hari.  Terbentuknya  lapisan berwarna  putih  diantara  fase  media  (cair) dan fase residu menunjukkan isolat tersebut tumbuh dan mempunyai kemampuan menggunakan  residu  minyak  bumi  sebagai sumber  karbon  dan  energi.  Selanjutnya, isolat  bakteri  yang  sudah  diketahui  mampu mendegradasi  residu  disebut  sebagai  isolat terpilih dan dibuat kultur persediaan dengan medium NA.
Kegiatan selanjutnya adalah pengujian kemampuan isolat bakteri hidrokarbonoklastik hasil isolasi pada tanah tercemar  minyak  bumi.  Satu  ose  isolat bakteri hidrokarbonaklastik terpilih diinokulasi  ke  10  mL  medium  NB, diinkubasi selama 48 jam pada suhu ruang.
Contoh  tanah  tercemar  minyak  bumi  untuk pengujian  ini  disterilisasi  dengan  autoklaf pada suhu 121 0 C, tekanan 1 atm selama 15 menit.    Pencemaran  tanah  dengan  minyak bumi  steril  dilakukan  dengan  konsentrasi 10%  w/w  tanah,  yaitu  30  g  minyak  bumi dicampur  dengan  270  g  tanah  dan  diaduk rata. Bakteri pada media MB diinokulasikan  masing-masing  0,5%  v/v tanah  yang  telah  dicemari  tersebut,  lalu diinkubasikan selama 1 bulan.
Peubah  yang  diamati  dari  percobaan ini  adalah  kadar  TPH,  persen  biodegradasi senyawa  minyak  bumi,  kadar  CO 2 yang dilepas yang diamati pada 7, 14, 21 dan 28 hari  inkubasi.  Data  dianalisis  dengan  sidik ragam rancangan acak lengkap dan dilanjutkan dengan uji BNT 0,05 .

## HASIL
Diperoleh
30 isolat bakteri hidrokarbonoklastik  asal  rizosfer  mangrove tercemar  minyak  bumi  yang  mampu  hidup pada  medium  mengandung  minyak  bumi. Dari  hasil  seleksi  dalam  2  tahap  seperti yang dijelaskan dalam bahan dan metode,diperoleh  sebanyak  9  isolat  yang mampu mendegradasi minyak bumi (selanjutnya  diberi  kode  I 1 sampai  I 9 ),  lalu yang dilanjutkan dengan pengujian kemampuan  mendegradasi  minyak  bumi pada tanah tercemar minyak bumi.
Hasil analisis keragaman menunjukkan bahwa inokulasi isolat bakteri hidrokarbon  pada  tanah  tercemar  minyak bumi berpengaruh nyata terhadap pelepasan CO 2 . Pengaruh aplikasi bakteri hidrokarbonoklastik  pada  tanah  tercemar minyak  bumi  terhadap  rata-rata  pelepasan CO 2 mingguandisajikan  dalam  Tabel  1. Adapun total produksi CO 2 yang dihasilkan pada 1, 2, 3, dan 4 minggu setelah inkubasi disajikan pada Gambar 1.Tabel 1 menunjukkan  bahwa  terjadi  peningkatan pelepasan  CO 2 berkisar  6,5  sampai  7  kali akibat inokulasi berbagai bakteri hidrokarbonoklastik  dibandingkan  dengan kontrol.  Selain  itu,  peningkatan  produksi CO 2 terlihat jelas pada minggu ke-2 dan ke-
3,  terutama  akibat  inokulasi  isolat  8  dan  9. Pada  minggu  ke-4  inkubasi,  evolusi  CO 2 mengalami  penurunan  yang  disebabkan aktivitas  bakteri  dalam  merombak  minyak bumi mulai menurun.Peningkatan pelepasan  CO 2 mengindikasikan  aktivitas bakteri hidrokarbonoklastik
dalam merombak minyak bumi. Hasil analisis keragaman menunjukkan  bahwa  inokulasi  bakteri hidrokarbon  berpengaruh  nyata  terhadap kadar  TPH  (Total  Petroleum  Hidokarbon). Rata-rata TPH  pada tanah tercemar minyak bumi  pada  2  dan  4  MSI  (Minggu  setelah inkubasi)  disajikan  pada  Tabel  2.    Pada pengukuran  TPH  minggu  kedua  terlihat
bahwa  ke  sembilan  isolat  menyebabkan penurunan  TPH  yang  berbeda  nyata terhadap kontrol. Kadar TPH paling rendah pada  pengamatan  minggu  ke  empat dijumpai pada tanah yang diaplikasi dengan isolat  I 5 dan  I 8 .    Pengaruh  inokulasi  isolat bakteri  hidrokarbonoklatik  pada  tanah tercemar  minyak  bumi  terhadap  rata-rata persentase penurunan TPHmingguan jugadisajikan  dalam  Tabel  2.  Terlihat  pada Tabel  2  bahwa  persentase  penurunan  TPH pada tanah tercemar yang diinokulasi isolat bakteri  hidrokarbonoklastik  jauh  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  kontrol  (tanpa inokulasi).
Gambar 1.  Produksi CO 2 akibat inokulasi berbagai isolat
Tabel 1.     Pengaruh berbagai isolat bakteri hidrokarbonoklastik terhadap pelepasan CO 2 setiap minggu
Kode Isolat Rata-rata minggu 1 Rata-rata minggu 2 Rata-rata minggu 3 Rata-rata minggu 4 …………............……mg CO 2 kg -1 minggu -1 ………..........................…… I 1 8,80  bc 17,62 b 40,16 bc 20,02 b I 2 8,03  b 17,20 b 41,30 c 20,32 b I 3 9,08  bc 16,80 b 43,68 d 20,16 b I 4 10,80 cd 17,06 b 41,14 b 19,67 b I 5 10,78 cd 17,06 b 39,20 b 22,56 cd I 6 9,75 bcd 17,20 b 44,01 d 20,65 bc I 7 11,88d 19,88 c 44,17 d 23,85 de I 8 8,80 bc 21,21 c 44,50 d 25,13 e I 9 10.80 cd 21,21 c 44,96 d 21,44 bc K 3,87 a 3,99 a 5,90  a 3,99 a Uji BNT 0.5 2,7 1,6 1,5 2,1
Keterangan:  Angka  yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama  menunjukkan  perbedaan yang tidak nyata pada taraf uji 5%. 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00 Isolat 1 Isolat 2 Isolat 3 Isolat 4 Isolat 5 Isolat 6 Isolat 7 Isolat 8 Isolat 9 Kontrol Isolat CO 2 ( mg g -1 Minggu -1 ) Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4
Tabel 2. Rata-rata kadar TPH (%) tanah  tercemar minyak bumi pada 2 dan 4 MSI
Kode isolat TPH (%) pada Biodegradasi TPH (%) 2 MSI 4 MSI 2 MSI 4 MSI I 1 4,25 a 3,85 ab 41,0 46,5 I 2 3,75 a 3,16 ab 48,0 56,1 I 3 4,50 a 4,23 b 37,5 41,2 I 4 4,43 a 3,83 ab 38,5 46,8 I 5 3,60 a 2,68 ab 50,0 63,0 I 6 3,71 a 3,16 ab 48,5 56,1 I 7 4,04 a 3,16 ab 43,9 56,1 I 8 3,81 a 2,18 a 47,1 70,0 I 9 4,32 a 4,15 ab 40,0 42,4 K 6,78 b 6,50 c 5,8 9,7 BNT 0,05 1,31 2,08
Keterangan:  Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama   menunjukkan   perbedaan yang tidak nyata pada uji BNT 0,05 .

## PEMBAHASAN
Produksi  CO 2 pada  tanah  tercemar minyak  bumi  akibat  inokulasi  berbagai isolat  bakteri  hidrokarbonoklastik  lebih tinggi  dan  berbeda  nyata  dengan  kontrol pada  setiap  minggu.  Gas  CO 2 yang  diukur merupakan  hasil  perombakan  senyawa minyak bumi oleh bakteri hidrokarbonoklastik.  Menurut  Leahy  dan Colwell  (1990),  hasil  proses  biodegradasi senyawa  hidrokarbon  kompleks  umumnya berupa  CO 2 dan  metana  yang  kurang berbahaya  dibandingkan  minyak  pada konsentrasi  yang  sama  serta  senyawa sederhana lainnya. Proses pemecahan rantai hidrokarbon oleh bakteri dapat berlangsung karena  adanya  reaksi  enzimatik.    Menurut Fritsche dan Hofritchter (2009),
kebanyakan  bakteri  memproduksi  enzim oksigenase  sehingga  dapat  mendegradasi hidrokarbon. Hal ini disebabkan kemampuan bakteri mengoksidasi hidrokarbon  dan  menjadikan  hidrokarbon sebagai donor elektronnya untuk selanjutnya mendegradasi hidrokarbon menjadi H 2 O dan CO 2 .
Peningkatan  CO 2 tertinggi  terjadi pada  minggu  ketiga  dan  setelah  minggu keempat  pelepasan  CO 2 menurun  kembali (Gambar  1).    Menurut  Noegroho  (1999), penurunan  produksi  CO 2 sejalan  dengan lamanya waktu inkubasi, akibat
menurunnya  kadar  minyak  bumi  sumber karbon.
Laju  penurunan  TPH  tinggi  pada  2 minggu  pertama  setelah  inkubasi  dan selanjutnya menurun pada 4 minggu setelah inkubasi  (Tabel  2).  Menurut  Walker  dan Colwell  (1974) dalam Nugroho  (2006), keanekaragaman dan kelimpahan mikroorganisme  pendegradasi  hidrokarbon yang  terdapat  di  alam  memiliki  hubungan yang  linear  dengan  peningkatan  kadar polusi hidrokarbon. Isolat bakteri hidrokarbon  dapat  memanfaatkan  minyak bumi sedemikian rupa sehingga kelimpahannya semakin meningkat. Dengan demikian, proses degradasi hidrokarbon  berlangsung  efektif  yang dibuktikan  dengan  semakin  tingginya persentase degradasi. Senyawa hidrokarbon yang  tertumpah  di  alam  mengalami degradasi  secara  alamiah  karena  faktor- faktor lingkungan, meskipun laju degradasinya  berlangsung  lambat.    Pada penelitian ini,  tanah  tercemar minyak  bumi yang  tidak  diinokulasi  dengan  bakteri hidrokarbonoklastik masih mengalami proses  degradasi,  namun  laju  degradasinya lebih  lambat  dibandingkan  jika  diinokulasi dengan bakteri hidrokarbonoklastik. Setelah 4  minggu  masa  inkubasi,  persentase penurunan  TPH  pada  kontrol  rata-rata hanya  9,72%  sedangkan  penurunan  TPH pada  4  minggu  masa  inkubasi  berkisar antara 41-70%.
Minyak  bumi  mengandung  ratusan komponen  senyawa  karbon  tergantung daerah  asalnya,  baik  berupa  rantai  alifatik, aromatik,  dan  senyawa  non  hidrokarbon seperti  naftenat,  fenol,  tiol  dan  senyawa sulfur  (Lestari,  2003).    Perubahan  senyawa karbon  rantai  panjang  tersebut  menjadi senyawa  rantai  pendek  dan  pelepasan  CO 2 disebabkan aktivitas bakteri yang diinokulasikan.
Sebelum  inokulasi  isolat  bakteri hidrokarbon,  kandungan  TPH  awal  tanah tercemar minyak bumi adalah 7,2%. Setelah 2 dan 4 MSI,  terjadi penurunan kadar TPH pada  semua  perlakuan,  termasuk  kontrol. Penurunan  TPH  disebabkan  karena  bakteri hidrokarbon  memerlukan  minyak  bumi sumber karbon sebagai sumber energi untuk aktivitasnya.  Pada  2  dan  4  MSI,  semua isolat  mampu  menurunkan  kadar  TPH secara nyata dibanding kontrol.  Dari Tabel 1 dan Tabel 2, isolat bakteri hidrokarbonoklastik terbaik dalam menurunkan  TPH  adalah  I 5 dan  I 8 mampu mendegradasi  minyak  bumi  6,5  kali  (65%) untuk isolat I 5 dan 7 kali (70%) untuk isolat I 8 dibandingkan dengan kontrol.
Terhadap isolat bakteri I 5 dan I 8 yang terbukti  berkemampuan  tinggi  menurunkan kadar  TPH  dilakukan  karakterisasi  dan identifikasi.    I 5 teridentifikasi  sebagai Pseudomonas  alcaligenes dengan  ciri morfologi  sel  berbentuk  batang,  gram negatif, tidak menghasilkan spora, dan tidak motil.  Dari hasil uji biokimia, terjadi reaksi positif  pada  hidrolisis  pati,  memproduksi katalase,  bereaksi  positif  pada  uji  TSI, simmon’s  sitrat  dan  reduksi  nitrat.  I 8 teridentifikasi  sebagai Alcaligens  faecalis dengan  ciri  morfologi  mikroskopis  sel berbentuk  bulat,  gram  negatif,  dan  tidak menghasilkan  spora  serta  bersifat  motil. Hasil  uji  biokimia  menunjukkan  bakteri ini mampu  menghidrolisis  kasein,  bereaksi positif  terhadap  uji  metil  merah  dan  uji Simmon’s  sitrat.  Kedua  bakteri  tergolong bakteri  aerobik.    Menurut  Foght  (2008), bakteri  aerobik  berpotensi  lebih  baik dibandingkan  bakteri  anaerobik  dalam mendegradasi senyawa hidrokarbon.
Penelitian  ini  juga  sejalan  dengan  hasil penelitian Ramsay et al. (2000), Ibrahim et al .  (2008)  dan  Widjajanti  (2012)  yang menemukan  isolat  bakteri  yang  mampu mendegradasi  hidrokarbon  minyak  bumi dari  kawasan  mangrove  yang  berasal  dari genus Pseudomonas, Alcaligenes,
Klebsiella,  Bacillus dan Enterobacter.
Widjajanti et al . (2010) berhasil mengisolasi 16 spesies bakteri pendegradasi minyak bumi  yang berpotensi sebagai agen bioremediasi,  yaitu Alcaligens  eutropus, Bacillus  cereus,  B.  firmus,  B.licheniformis, B.  polymyxa,  Enterobacter  agglomerans, Flavobacterium thalpophilum, Pseudomonas  alcaligenes,  P.  aureofaciens, P.  epacia,  P.  diminuta,  P.  mendocina,  P. pseudomallei,  P.  saccharophila dan P. syringae .    Fritsche  dan  Hofritchter  (2009) mengungkapkan bahwa bakteri yang dominan  dalam  biodegradasi  hidrokarbon alifatik,  hidrokarbon  aromatik,  hidrokarbon polisiklik aromatik, dan senyawa terklorinasi  lainnya  adalah  dari  genus Pseudomonas, Alcaligenes dan Bacillus.

## KESIMPULAN
Ditemukan 9 isolat bakteri hidrokarbonoklastik  yang  mampu  tumbuh pada  medium  mengandung  minyak  bumi secara  in  vitro.  Dua  isolat  terbaik  dalam mendegradasi senyawa hidrokarbon minyak bumi  adalah Pseudomonas  alcaligens (I 5 ) dan Alcaligens  facealis (I 8 ). P.  alcaligens dan A.  faecalis mampu  menurunkan  TPH berturut-turut sebesar 63 dan 70%. Kemampuan kedua isolat dalam mendegradasi senyawa hidrokarbon 6,5-7,0 kali lebih tinggi dibandingkan kontrol.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih penulis sampaikan  kepada  Nasrul  Harahap  sebagai mahasiswa yang membantu dalam pengumpulan  data  untuk  penelitian  dan penulisan artikel ini.
DAFTAR PUSTAKA
Desai  A,    Vyas  P.    2006.    Applied
Microbiology: Petroleum and hydrocarbon  microbiology.  Dept.  of Microbiology,  M.S.  Univ.  of  Baroda,
Vadodara.
Foght  J.  2008.    Anaerobic  biodegradation of aromatic hydrocarbon: Pathways and prospects. J. Mol. Mocrobiol. Biotechnol . 15: 93-120.
Fritsche  W,  Hofritchter  M.    2009.    An aerobic degradation by microorganisms.    Http://www.wiley- vch.de/books/biotech/pdf/v11b_aero.pd f. 02/05/2009.
Gofar N. 2011. Characterization of petroleum  hydrocarbon  decomposing fungi isolated from mangrove rhizosphere. J.  of.  Tropical  Soils . 16(1): 39-45.
Ibrahim  ML,  UJJ  Ijah,  SB  Manga,  AB
Rabah.    2008.    Occurrence  of hydrocarbon  utilizing  bacteris  in  the rhizosphere of Eucalyptus camaldulensis , Lablab  purpureus and Moringa  oleifera . Int.  J.  of  Pure  and Appl. Sci . 2(3): 21-26.
Koswara  A.  2003.  Kemampuan  isolat bakteri  dari  tanah  tercemar  pelumas dalam  Mendegradasi  pelumas  bekas. Tesis pada Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati  (SITH)  ITB,  Bandung  (tidak dipublikasikan).
Leahy  JG,  Colwell  RR.  1990.  Microbial Degradation  of  Hydrocarbons  in  the Environment. Microbiological  Rev : 305-315.
Lestari  Y.  2003.    Bioremediasi  lahan terkontaminasi  senyawa  hidrokarbon.
Prosiding  seminar  Bioremediasi  dan REhabilitasi Lahan Skitar Perminyakan dan Pertambangan . Forum Bioremediasi IPB, Bogor.
Ling GC. 2006.  Biodegradation ability and community  structure  of  bacteria  in mangrove  sediment  contaminated  by
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs). Doctor of Phylosophy Dissertation. City Univ. of Hongkong. Mangkoedihardjo S. 2005. Seleksi Teknologi  Pemulihan  untuk  Ekosistem Laut Tercemar Minyak. Seminar Nasional Teori dan Aplikasi Teknologi
Kelautan ITS, Surabaya. p. 1-9.
Noegroho  H.  1999.  Pengaruh  aerasi  pada bioproses limbah kilang minyak.
Lembaran Publiksi Lemigas, Jakarta.
Nugroho  A.  2006.  Biodegradasi sludge minyak bumi dalam skala mikrokosmos . Makara Teknologi . 10(2): 82-89.
Ramsay MA, RPJ Swannells, WA Shipton,
NC Duke and RT Hill. 2000.  Effect of bioremediation on the microbial community in oiled mangrove sediments.  Marine Pollution Bull.  41: 413-419.
Widjajanti  H,  I  Anas,  N  Gofar  and  MR
Ridho.    2010.    Screening  of  petroleum hydrocarbons  degrading  bacteria  as  a bioremediating  agents  from  mangrove areas. Proceeding  of  International Seminar,  workshop  on  integrated lowland development and management . ISBN  no.  978-979-25-8652-7.    March 18-20, 2010.
Widjajanti H.  2012.  Bioremediasi minyak bumi menggunakan bakteri dan kapang hidrokarbonoklastik dari kawasan mangrove  tercemar  minyak  bumi. [Disertasi] Program Doktor Ilmu Pertanian  PPs  Universitas  Sriwijaya
(tidak dipublikasikan). Zam  SI.  2006.  Bioremediasi  Limbah Pengilangan
Minyak Bumi
PERTAMINA  UP  II  Sungai  Pakning dengan  Menggunakan  Bakteri  Indigen. [Tesis].  Program  Studi  Bioteknologi Institut  Teknologi  Bandung,  Bandung (tidak dipublikasikan).