Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) 2017; 3 (2): 191 – 198 ISSN : 2442-8744 (electronic) http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/Galenika/index DOI : 10.22487/j24428744.2017.v3.i2.8921
Aktivitas  Anti-inflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Beluntas  (Pluchea indica L.) pada Model Inflamasi Terinduksi CFA ( Complete Freund's Adjuvant )
( Anti-inflammatory Activity of Ethanol Extract of Beluntas Leaves(Pluchea indica L.) on Complete Freund's Adjuvant-induced Inflammatory Model)
Reza Setiawan Sudirman, Usmar, Abdul Rahim dan Muhammad Akbar Bahar *

## Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin, Makassar, Indonesia
Article Info: Received: 04 September 2017
in revised form: 22 Seeptember
2017 Accepted: 29 September 2017 Available Online: 01 Oktober 2017

## ABSTRACT
A research about anti-inflammatory  effect of Beluntasleaves extract on CFA (Complete Freund’s Adjuvant) induced inflammatory model has been conducted. The objective of this research was to determine the effect of Beluntasleaves extract in alleviating CFA-induced paw edema  in  mice  ( Mus  musculus ).  The  number  of  mice  used  was  15 and  was  divided  into  5  groups.  Group  I  was  treated  with  NaCMC. Group  II,  III,  and  IV  were  given  suspension  of  Beluntasleaves extract  100  mg/Kg,  300  mg/Kg,  and  500  mg/KgBW,  respectively. Group V was a positive control treatedwith suspension of diclofenac sodium  0.1  ml/10g  orally.  The  determination  of  anti-inflammatory potency  was  based  on  the  average  time  needed  to  amelioratethe edema  volume.  The  shortest    time  period  of  edema  reduction  was produced  by  diclofenacsodium(within  9.33  days),  then  followed  by Beluntasleavesextract  with  the  concentration  of  300  mg/Kg(within 12  days),  500  mg/Kg(within  14.33  days),  and  100  mg/Kg(within 17.67  days),  consecutively.  These  results  are  significantly  different compared to negative control group which did not reduce the edema volume during 18 days of observation.In conclusion, ethanol extract of Beluntasleaves has an effective anti-inflamatory effect.
Keywords : Anti-inflammatory,
Beluntas Leaves,
Pluchea indica , CFA
Corresponding Author: Muhammad Akbar Bahar Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin Makassar, 90245, Indonesia Mobile : +31636432643 Email: akbarbahar@unhas.ac.id
Copyright © 2017 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.

## How to cite (APA 6th Style):
Sudirman  RS.,  Usmar.,  Rahim  A.,  Bahar  MA.  (2017).  Aktivitas  Anti-inflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Beluntas ( Pluchea  indica L.)  pada  Model  Inflamasi  Terinduksi  CFA  ( Complete  Freund's  Adjuvant ). Jurnal  Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy), 3(2), 191-198. doi: 10.22487/j24428744.2017.v3.i2.8921

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  uji  potensi  antiinflamasi  ekstrak  daun  Beluntas ( Pluchea  indica L.)  dengan  model  inflamasi  terinduksi  CFA  ( Complete  Freund's  Adjuvant ). Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  ekstrak  daun  Beluntas  terhadap  penurunan volume  udema  pada  kaki  mencit  ( Mus  musculus )  yang  diinduksi  dengan  CFA  secara intraplantar.  Mencit  yang  digunakan  sebanyak  15  ekor  dan  dibagi  dalam  5  kelompok. Kelompok I diberi perlakuan NaCMC, kelompok II diberi suspensi ekstrak daun Beluntas 100 mg/Kg, kelompok III diberi suspensi ekstrak daun  Beluntas 300 mg/Kg, kelompok IV diberi suspensi  ekstrak  daun  Beluntas  500  mg/Kg,  dan  kelompok  V  diberi  suspensi  natrium diklofenak  dengan  volume  pemberian  secara  oral  0,1  ml/10  g.  Pengamatan  uji  potensi antiinflamasi didasarkan pada rata-rata kecepatan hari penyembuhan udema pada kaki mencit dengan waktu pengamatan selama 18 hari. Rata-rata kecepatan hari penyembuhan udema yang tertinggi terlihat pada kelompok kontrol positif (natrium diklofenak) yaitu 9,33 hari kemudian diikuti ekstrak daun Beluntas dengan konsentrasi 300mg/Kg yaitu 12 hari, setelah itu ekstrak daun  Beluntas  dengan  konsentrasi  500mg/Kgyaitu  14,33  hari  dan  yang  paling  lama  adalah ekstrak daun Beluntas dengan konsentrasi 100mg/Kg yaitu 17,67 hari. Sedangkan, kelompok kontrol  negatif  (NaCMC)  belum  mengalami  penyembuhan  selama  18  hari  pengamatan. Analisis  statistik  (Two  Way  RM  ANOVA)  menunjukkan  efek  yang  berbeda  nyata  antara kelompok  perlakuan  dan  kelompok  kontrol  positif  (natrium  diklofenak)  terhadap  kelompok kontrol  negatif  (NaCMC).  Kesimpulan  penelitian  adalah  ekstrak  etanol  daun  Beluntas memiliki efek antiinflamasi yang baik.
Kata Kunci: Antiinflamasi, daun Beluntas, Pluchea indica , CFA

## PENDAHULUAN
Inflamasi adalah respon sistem kekebalan tubuh terhadap infeksi dan kerusakan jaringan. Inflamasi juga terlibat dalam patogenesis  berbagai  seperti  arthritis,  kanker, stroke,  penyakit-penyakit  neurodegeneratif  dan kardiovaskular.  Tanda-tanda  utama  terjadinya inflamasi  adalah  rubor  (kemerahan),  kalor (panas),  tumor  (pembengkakan),  dan  dolor (nyeri)  (Ricciotti  E  &  FitzGerald  G.A,  2011). Ketika  penyembuhan  selesai,  proses  inflamasi biasanya reda. Namun, aktivasi yang tidak tepat dari  sistem  imun  dapat  menyebabkan  inflamasi menjadi lebih persisten, terutama pada penyakit autoimun  seperti  rheumatoid  arthritis  (RA) (Harvey R.A et al ., 2012).
Inflamasi  mulai  terjadi  ketika  ada stimulus,  seperti  infeksi,  kerusakan  sel  yang disebabkan  oleh faktor  fisik,  atau  faktor  kimia. Kerusakan  ini  dimulai  dengan  aktivasi  faktor transkripsi  yang  mengontrol  ekspresi  banyak mediator inflamasi. Diantara mediator-mediator inflamasi  yang  berperan  penting  adalah eikosanoid,  oksidan  biologis,  dan  sitokin  yang merupakan  target  utama  pengobatan  (Craig C.R. &Stitzel R.E, 2003).
Beluntas( Pluchea  indica L.)  telah digunakan sebagai obat oleh masyarakat di Asia Tenggara seperti Thailand. Daunnya digunakan sebagai  tonik  saraf,  antiinflamasi,  wasir,  anti nyeri,  antipiuretik,  mengeluarkan  keringat, mengobati  scabies,  menghilangkan  bau  badan,
meningkatkan nafsu makan, melancarkan pencernaan  dan  obat  tuberkulosis  (TBC) (Srisook  K et  al .,  2012;  Dalimartha  S,  1999;
Sibarani  VR  dkk.,  2013).  Secara  empiris, penggunaannya dilakukan dengan cara merebus daun  atau  akar  Beluntas sebanyak  10-15  g  lalu diminum (Sibarani VR dkk., 2013).
Model hewan coba yang dapat digunakan  untuk  menguji  efek  antiinflamasi dapat  dibuatdengan  menginduksikan Complete Freund’s  adjuvant (CFA)  pada  hewan  coba seperti mencit. CFA merupakan emulsi minyak dalam  air,  yang  mengandung Mycobacterium tuberculosis kering  yang  telah  di-matikan  atau hanya  berupa  komponen  dari  dinding  selnya ( National  Institutes  of  Health  Intramural , 2015).  Pemberian  CFA  akan  menstimulasi fagositosis,  sekresi  sitokin  oleh  fagositosis mononuklear,  sehingga  berbagai  jenis  sitokin proinflamasi  seperti  TNFα,  IL-1,  IL-6,  IL-8, PGE-2,  NO,  MMP  dan  mediator  lainnya  akan dilepaskan (Fajrin F.A dkk., 2013). Berdasarkan  uraian  diatas,  penelitian  ini bertujuan untuk menguji efek antiinflamasi dari ekstrak daun Beluntas ( P. indica ) menggunakan model  inflamasi  terinduksi  CFA  dengan mengamati laju penurunan volume edema pada kaki belakang mencit ( Mus musculus ).

## METODE PENELITIAN
Alat Alat-alat  yang  digunakan  adalah connecta  tree way ,  statif  dan  klem,  spuit  3  ml,  spuit  insulin (Terumo®),  homogenizer  (Ultra  Turax®  Ika® Werve), mikropipet (Socorex®), neraca analitik
(Sartorius®),  rotary  evaportor  (Buchi®),  dan pengering herba.

## Bahan
Bahan-bahan yang digunakan adalah air suling, Natrium  CMC,  eta-nol  70%,  etanol  96%, ekstrak daun  Beluntas ( Pluchea indica L.), dan Compelete Freund's Adjuvant (CFA) (Sigma®).
Pengambilan dan Pengolahan Sampel Sampel daun Beluntas yang digunakan diperoleh dari Kecamatan Somba Opu, Kabupaten  Gowa,  Sulawesi  Selatan.  Sampel dicuci  bersih  dengan  air  mengalir,  kemudian dikeringkan  dengan  pengering  herba  lalu dipotong kecil-kecil.

## Ekstraksi Sampel
Daun Beluntas yang telah dikeringkan sebanyak  550  g  diekstraksi  secara  maserasi dengan menggunakan 5 liter etanol 70% selama 3  x  24  jam  sambil  sesekali  diaduk  pada temperatur kamar, kemudian dilakukan penyaringan.  Ampasnya  kembali  dimaserasi dengan  metode  dan  pelarut  yang  sama  hingga pelarutnya hampir jernih. Filtrat yang diperoleh kemudian  digabung,  selanjutnya  pelarutnya diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator hingga  diperoleh  ekstrak  kental (Bahar MA et al , 2015; Mufidah M et al , 2015).

## Pembuatan Larutan koloidal Natrium CMC 0,1% b/v
Sebanyak  0,25  g  Natrium  CMC  (Na  CMC) dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer 250 ml, lalu  ditambahkan  air  suling  panas  dengan  suhu 70°C sedikit demi sedikit dan diaduk menggunakan pengaduk elektrik hingga
homogen  hingga  terbentuk  suspensi  yang jernih,  kemudian  dicukupkan  dengan  air  panas hingga volume 250 ml.

## Pembuatan Suspensi Natrium Diklofenak
Ditimbang  20  tablet  dan  dihitung  bobot  rata- ratanya  kemudian  digerus  dan  diambil  bobot setara 2,25 mg/Kg BB kemudian disuspensikan dengan Na CMC.

## Pembuatan Suspensi Ekstrak Beluntas
Ekstrak  daun  Beluntas  disuspensikan  di  dalam Na  CMC  0,1%  dengan  konsentrasi  1,  3,  dan  5 %  untuk  pemberian  pada  hewan  dengan  dosis yang setara dengan 100 mg/Kg BB, 300 mg/Kg BB, 500 mg/Kg BB.

## Pemilihan dan Perlakuan Hewan Uji
Hewan  yang  digunakan  adalah  mencit  ( Mus musculus ) yang berbadan sehat, berumur sekitar 2-3  bulan,  yang  dapat  diamati  dari  perilakunya dengan  bobot  badan  20-30  g.  Mencit  sebanyak 15 ekor dibagi kedalam 5 kelompok perlakuan, tiap  kelompok  terdiri  dari  3  ekor  mencit. Kelompok  I  sebagai  kontrol  negatif,  kelompok II, III, dan IV sebagai kelompok perlakuan, dan kelompok  V  sebagai  kontrol  positif.  Kontrol negatif diberikan Na CMC, kelompok perlakuan  diberikan  ekstrak  Beluntas  dengan konsentrasi berbeda dan kontrol positif diberikan  dengan  natrium  diklofenak  secara peroral dengan dosis 2,25mg/Kg BB. Pengukuran volume udema dilakukan setelah 1 jam perlakuan.

## Pembuatan  Model  Inflamasi  Terinduksi CFA (Complete Freund's Adjuvant)
Mencit  disuntikan  CFA  sebanyak  40  µl  pada bagian  ipsilateral  dan aqua  pro  injection sebanyak 40 µl pada bagian kontralateral secara intraplantar  dan  dilakukan  pengamatan  setiap hari selama 18 hari.

## Penentuan Volume Udema
Dilakukan  pengamatan  laju  penurunan  volume edema kaki mencit menggunakan alat pletismometer  dengan  pengulangan  sebanyak  3 kali kemudian dihitung rata-ratanya.

## Pengumpulan dan Analisis Data
Data yang diperoleh berupa volume udema dari beberapa  perlakuan  dianalisis  secara  statistik dengan  menggunakan  metode  Two  Way  RM ANOVA  diikuti Bonferronni  post  test dengan bantuan  software  Graphpad  prisim  5,03 (Graphpad Software, La Jolla, California).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini  diawali  dengan melakukan  ekstraksi  daun  Beluntas  ( P.  indica L.)  Daun  Beluntas  yang  telah  dikeringkan diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi dengan  pelarut  etanol  70%  selama  3  x  24  jam. Ektraksi dengan metode maserasi dipilih karena untuk  menghindari  kemungkinan  rusaknya senyawa  kimia  yang  diakibatkan  adanya pemanasan.  Hasil  dari  proses  ekstraksi  550  g daun Beluntas diperoleh 93,51 g ekstrak etanol (Rendamen  17,01%).  Ekstrak  yang  telah diperoleh  selanjutnya  suspensikan  menjadi beberapa  konsentrasi  kemudian  diberikan kepada mencit sebagai obat.
Penggunaan  CFA  sebagai  penginduksi dikarenakan  senyawa  ini  akan  menstimulasi fagositosis,  sekresi  sitokin  oleh  fagositosis mononuklear,  sehingga  berbagai  jenis  sitokin seperti  TNFα,  IL-1,  IL-6,  IL-8,  PGE-2,  NO, MMP  dan  mediator  lainnya  akan  dilepaskan (Fajrin FAdkk., 2013).
Penelitian  ini  menggunakan  parameter kecepatan  penyembuhan  udema  sesaat  (akut) dan  18  hari  (subkronis)  setelah  diberikan penginduksi.  Nilai  selisih  hari  penyembuhan volume udema menunjukkan besarnya efektivitas bahan uji. Semakin cepat penurunan volume  udema  yang  didapatkan  maka  semakin besar  efek  antiinflamasi  yang  terdapat  dalam bahan uji dan apabila selisih penurunan volume udema semakin lambat maka bahan uji tersebut memiliki  efek  antiinflamasi  yang  minimal dalam  menghambat  volume  udema.  Salah  satu parameter terjadinya inflamasi adalah terbentuknya  udema.  Jika  penggunaan  suatu obat tradisional atau sintetik dapat menurunkan udema yang diinduksi dengan CFA,  maka obat tersebut  dapat  dikatakan  mempunyai  efek sebagai antiiflamasi. Besarnya efektivitas antiinflamasi  bergantung  pada  besarnya  efek kecepatan  penyembuhan  yang  didasari  dari besarnya  penurunan  volume  udema  yang terlihat.
Penelitian  ini  menggunakan  parameter kecepatan  penyembuhan  udema  sesaat  (akut) dan  18  hari  (subkronis)  setelah  diberikan penginduksi.  Nilai  selisih  hari  penyembuhan volume udema menunjukkan besarnya efektivitas bahan uji. Semakin cepat penurunan
volume  udema  yang  didapatkan  maka  semakin besar  efek  antiinflamasi  yang  terdapat  dalam bahan uji dan apabila selisih penurunan volume udema semakin lambat maka bahan uiji tersebut memiliki  efek  antiinflamasi  yang  minimal dalam menghambat volume udema.
Pada  gambar  1  terlihat  bahwa  terjadi peningkatan  volume  udema  pada  bagian ipsilateral CFA sedangkan pada bagian kontralateral  yang  diinduksi  dengan  API  tidak terdapat  peningkatan  volume  udema  yang sifatnya persisten karena hanya dalam waktu 24 jam  telah  terjadi  penurunan  volume  udema. Selain  itu,  baik  kontrol  positif  maupun perlakuan  belum  memberikan  efek  penurunan volume udema ataupun memberikan penghambatan  pembentukan  udema  secara akut.  Sedangkan  pada  gambar  2  terlihat  bahwa perlakuan  yang  diberikan  selama  18  hari berhasil  menurunkan  volume  udema  pada  kaki mencit  dan  pada  tabel  1  terlihat  bahwa  hari penyembuhan  tercepat  terlihat  pada  kelompok kontrol  positif  kemudian  diikuti  ekstrak  daun Beluntas  dengan  konsentrasi  300mg/Kg  BB, setelah itu konsentrasi 500mg/Kg BB dan yang paling  rendah  adalah  konsentrasi  100mg/Kg BB.  Sedangkan,  kelompok  kontrol  negatif belum  mengalami  penyembuhan  walaupun terjadi penurunan volume udema. Hasil analisis secara  statistik  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan yang sangat signifikan (***P<0,001) antara  kelompok  perlakuan  dan  kontrol  positif terhadap  kontrol  negatif  dalam  menurunkan volume  udema  mencit  yang  telah  diinduksi inflamasi.

## (a) (b)
Gambar 1. (a) Grafik volume udema fase akut kaki kanan (ipsilateral), (b) Grafik volume udema fase akut kaki kiri (kontralateral)
Gambar 2. (a) Grafik volume udema fase subkronis kaki kanan, (b) Grafik volume udema fase subkronis kaki kiri
Tabel 1.Kecepatan hari penyembuhan udema pada kaki kanan mencit. Dosis Replikasi (hari ke-) Rata-rata 1 2 3 100 mg/Kg BB 15 18 20 17,67 300 mg/Kg BB 17 12 7 12,00 500 mg/Kg BB 16 11 16 14,33 Kontrol + 8 8 12 9,33
Berdasarkan hasil tersebut maka dilakukan uji lanjutan menggunakan benferroni test  untuk  melihat  level  signifikansi  antar perlakuan  terhadap  kontrol  positif  dan  kontrol negatif,  juga  untuk  melihat  perbedaan  intra perlakuan  ditiap-tiap  hari  perlakuan.  Diperoleh
hasil  bahwa  untuk  ekstrak  daun  Beluntas  100 mg/Kg  BB  terhadap  kontrol  negatif,  tidak terdapat  perbedaan  yang  signifikan  dalam menurunkan  volume  udema  kecuali  setelah  14 hari  perlakuan.  Hal  ini  menunjukkan  untuk dosis rendah ekstrak daun Beluntas
memerlukan waktu yang lebih lama untuk dapat berefek.  Lain  halnya  dengan  dengan  ektrak daun Beluntas 300 mg/Kg BB terhadap kontrol negatif,  setelah  hari  ke  3  pebedaan  yang signifikan  sudah  mulai  terlihat  dengan  level yang sangat signifikan (*** p<0,001) di hari ke 6  hingga  hari  18.  Namun  ditemukan  hal  yang menarik  dalam  pengamatan  yaitu  pengaruh ekstrak  Beluntas  500  mg/Kg  BB  dibandingkan dengan  kontrol  negatif  dalam  menurunkan volume  udema.  Perbedaan  signifikan  (** p<0,01)  baru  ditemukan  setelah  hari  ke  8 perlakuan.  Berdasarkan  hasil  ini  kami  menarik kesimpulan  bahwa  dosis  maksimal  yang berefek  adalah  300  mg/Kg  BB.  Dosis  yang melebihi  itu  dapat  menyebabkan  efektivitas ekstrak  daun  Beluntas  menjadi  menurun. Meskipun  demikian  diperlukan  uji  lebih  lanjut untuk  menganalisis  mekanisme  ekstak  daun Beluntas  dan  pengaruh  konsentrasi  komponen ekstak  tersebut  dalam  menurunkan  volume udema.  Kemungkinan  hal  ini  dipengaruhi  oleh kandungan  ekstrak  daun  Beluntas,  dimana semakin  tinggi  konsentrasi  eksrak  maka semakin tinggi konsentrasi salah satu komponen  yang  kemungkinan  mempengaruhi mekanisme penurun volume udema.
Analisis  statistika  antara  kelompok perlakuan  terhadap  kelompok  kontrol  positif ditemukan  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan dalam  menurunkan  volume  udema  baik  dosis 100  mg/Kg  BB,  300  mg/Kg  BB    hingga  500 mg/Kg BB. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak daun  Beluntas  memiliki  antiinflamasi  yang baik.
Berdasarkan gambar 2b, terlihat bahwa pemberian ekstrak etanol daun Beluntas sendiri tidak menyebabkan adanya peningkatan volume udema  karena  tidak  adanya  perubahan  volume udema setelah sembuh pada hari ke 3.
Daun  Beluntas  mengandung  alkaloid, flavonoida, tanin, minyak atsiri, asam chlorogenik,  natrium,  kalium,  aluminium, kalsium,  magnesium,  dan  fosfor.  Flavonoid, minyak  atsiri,  dan  tanin  dilaporkan  memiliki aktivitas  anti  inflamasi.  Flavonoid  akan menghambat  kerja  dari  COX-2  sehingga produksi dari prostaglandin menurun (Gautama VG,  2015).  Tanin  akan  menyumbangkan  atom hidrogen  untuk  mengikat  dan  menetralkan radikal  bebas  sehingga  mengendalikan  dan mengurangi  reaksi  autooksidasi  lipid  dengan cara  melindungi  membran  sel  tubuh  dalam mengurangi  inflamasi  (Putri,  BPdkk,  2013). Kandungan  minyak  atsiri  daun  Beluntas  yang diduga  memiliki  efek  antiinflamasi  adalah eugenol (Susanti A., 2007). Eugenol dilaporkan dapat  menghambat  agregasi  platelet  dengan cara  menghambat  pembentukan  tromboksan sehingga juga berperan dalam efek antiinflamasi.  Eugenol  juga  dapat  menghambat aktivitas  PGH  sintase  karena  berkompetisi dengan  asam  arakhidonat  pada  sisi  aktif  PGH sintase sehingga menghambat pembentukan PG (Hidayati  NA  dkk.,  2008).  Sehingga,  Efek antiinflamasi dari Beluntas kemungkinan bekerja  pada  satu  atau  campuran  mekanisme diatas.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian diperoleh kesimpulan bahwa ekstrak etanol daun beluntas dengan  memberikan  efek  antiinflamasi  yang baik.

## DAFTAR PUSTAKA
Bahar,  M.  A.,  Alam,  G.,  Manggau,  M.  A.,
Mufidah,  M.,  &  Suparman,  S.  (2015). Bioassay-guided Fractination Of Antimitotic  Compound  from  Ongkea
Cortex  ( Mezzettia  Parviflora Becc) towards  Sea  Urchin  Eggs. Journal  of Tropical  Pharmacy  and  Chemistry ,
3(1). Craig  C.R.  and  Stitzel  R.E.  (2003). Modern Pharmacology with Clinical Aplications (5 th ed.).  Philadelphia: Walters Kluwer Health;. Hal.424
Dalimartha  S.  (1999).  Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia  Jilid  1.  Jakarta:  Trubus Agriwidya.. Hal.18-21
Fajrin  F.A,  Khotib  J,  &  Susilo  I.  Histologi
Dorsal  Horn  Dari  Spinal  Cord  Mencit yang Mengalami Nyeri Inflamasi Akibat Induksi CFA ( Completed
Freund’s  Adjuvant )  Setelah  Pemberian Gabapentin  dan  Baclofen.  (2013). Bul. Peneliti Kesehatan . Vol. 41, No. 4. Hal. 225 – 236 Harvey R.A, Clark M.A, Finkel R, et.al. (2012). Lippincott’s Illustrated Reviews:Pharmacology (5th ed). Philadelphia:  Walters  Kluwer  Health. Hal. 525 Hidayati,  N.A.,  Ahmad,  S.L.,  &Setyawan,  D. Kandungan Kimia dan Uji Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Lantana camara  L.  pada  Tikus  Putih  ( Rattus norvegicus L.) Jantan. (2008). Bioteknologi .Surakarta:  10-17,  Mei,
ISSN: 0216-6887. Hal. 16
Murdifin, Mufidah, et al. (2015). Antiatherogenic  effect  of Mezzetia parviflora BECC.  extract  in  high cholesterol fed rats. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research . 7.5: 499-505. National Institutes of Health Intramural. Guidelines  for  the  Research Use of Adjuvants . ARAC [serial on the internet].  (2011,  November).  Available from: oacu.od.nih.gov/ARAC/documents/Adj uvants.pdf
Putri,  B.P.,  Aulanni'am,  &  Padaga,  M.C.
(2013).  Terapi  Ekstrak  Air  Buah Kesemek  ( Diospyros  kaki L,f,)  pada Tikus  ( Rattus  novergicus )  Artritis terhadap Enzim Superoksida Dismutase (SOD) dan Gambaran Histologi
Jaringan Sendi. Student Journal Vol. 2, No. 2.
Ricciotti  E  &  FitzGerald  G.A.  (2011).
Prostaglandins and Inflammation.
Arterioscler Thromb Vasc Biol .31: 986- 1000.
Sibarani  V.R,  Wowor  P.M,  &Salem  H.A.
(2013).  Uji  Efek  Analgesik  Ekstrak Daun  Beluntas  (Pluchea  Indica  (L.) Less.)  pada  Mencit  ( Mus  musculus ). Jurnal  e-Biomedik (eBM),  Volume  1, Nomor 1, Hal. 621-628
Srisook K, Buapool D, Boonbai R, Simmasut P,
Charoensuk  Y,  &  Srisook  E.  (2012). Antioxidant  and  Anti-Inflammatory Activities  of  Hot  Water  Extract  from Pluchea  indica  Less. Journal  of Medicinal Plants Research . Vol. 6(23): 4077-4081.
Susanti,  A.  (2007).  Daya  antibakteri  ekstrak etanol  daun  beluntas  ( Pluchea  indica less) terhadap Escherichia coli secara in vitro. Skripsi thesis, Universitas Airlangga. Surabaya.