Aktivitas Antimalaria Ekstrak Daun Macaranga gigantea
Antimalaria Activity of Macaranga gigantea Leaves Extracts
Muhaimin 1,2 , Yusnaidar 1,2 dan Hilda Amanda 2
1 Program Studi Pendidikan Kimia Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Jambi 2 Program Studi Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Jambi

## A B S T R A K
Penggunaan  tanaman  obat  tradisional  untuk  mengobati  penyakit  malaria yang  disebabkan  oleh Plasmodium , saat ini makin meningkat, seiring dengan resistensi obat dan meningkatnya harga obat serta efek  samping  penggunaan  obat  modern.  Tumbuhan Macaranga gigantea memiliki  fungsi  ekologi  yang unik  antara  lain  sebagai  tumbuhan  pelopor dengan  kemampuan  adaptasi  morfologi  dan  fisiologis  yang baik terhadap kondisi ekstrim dalam menangani stres alami karena hama, suhu dan sinar UV. Sehingga spesies  tanaman Macaranga  gigantea pada  hutan  memiliki  sistem  biokimia  yang  unik  dan  beragam senyawa bioaktif  alami  baru  diproduksi  dengan  berbagai  aktivitas  seperti  antimikroba,  antioksidan  dan antivirus.  Hasil  pengujian  terdahulu  terhadap  bioaktivitas  ekstrak  metanol  daun  tumbuhan  Merkubung ( Macaranga  gigantea )  menunjukkan  adanya  aktivitas  antimalaria.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mendapatkan  fraksi  aktif  antimalaria  dari  daun  Merkubung  ( Macaranga gigantea ).  Untuk  itu  pada penelitian  ini  dilakukan  fraksinasi  ekstrak  metanol  daun  Merkubung ( Macaranga  gigantea )  dengan menggunakan pelarut organik yang berbeda kepolarannya, dilanjutkan dengan uji bioaktivitas antimalaria menggunakan Plasmodium  berghei .  Hasil  penelitian  menunjukkan  fraksi  etanol  daun  Merkubung ( Macaranga gigantea ) memiliki aktivitas antimalaria yang lebih baik dari fraksi lain. Berdasarkan hasil penelitian daun Merkubung ( Macaranga gigantea ) sebagai kandidat baru sumber obat antimalaria.

## A B S T R A C T
The  utilization  of traditional  medicinal  plants  to  medicate  malaria  caused by  Plasmodium  is  currently more increased along with drug resistance and rising drug prices, and the side effects of using modern medicine. Additionally, Macaranga gigantea plant species have a unique ecological function such as a pioneer plant with good morphological and physiological adaptability to extreme conditions in dealing with natural stress due to pests, temperatures, and UV rays. Therefore, they have a unique biochemical system  and  a  variety  of  new  natural  bioactive  compounds  produced  with  various  activities  such  as antimicrobial,  antioxidant  and  antiviral  in  the  forest.  As  the  results  of  previous  study,  antimalarial activity was shown on the bioactivity of methanol leaves extract of Merkubung (Macaranga gigantea). In short,  this  study  aimed  to  obtain  an  active  antimalarial  fraction  of  Merkubung  leaf  (Macaranga gigantea). In this case, fractionation of methanol extract of Merkubung leaf (Macaranga gigantea) was carried  out  by  using  different  organic  solvents  followed  by  an  antimalarial  bioactivity  test  using Plasmodium berghei. The results indicated that ethanol fraction of Merkubung left (Macaranga gigantea) had better antimalarial activity than others as a new candidate and supplemental source of antimalarial drugs.

## I N F O    A R T I K E L
Received:03 Apr 2018;
Revised: 20 May 2018; Accepted: 12 Jun 2018
* coresponding author : muhaimin_73@yahoo.de DOI : https://doi.org/10.22437/jisic.v10i2.6581

## Vol. 10

## No. 2
DECEMBER 2018
Kata kunci  : Fraksinasi; macaranga gigantea; malaria; Plasmodium berghei Keyword : fraction; Macaranga gigantea; malaria; Plasmodium berghei;

## PENDAHULUAN
Malaria  merupakan  penyakit  yang menjadi masalah di dunia. Penderita malaria pada  saat  ini  lebih  dari  250  juta,  bahkan yang  meninggal  dunia  lebih  dari  1  juta orang  (Contreras,  2004;  Wondimu,  2007). Penyebab  utama  penyakit  malaria  adalah protozoa jenis Plasmodium sp. Plasmodium falciparum  merupakan  penyebab  penyakit malaria  yang  paling  fatal  yang  dapat menyebabkan kematian.
Penanggulangan dan pencegahan terhadap penyakit malaria perlu ditingkatkan karena  adanya  resistensi  dan  keparahan penyakit  terutama  malaria  yang  disebabkan oleh
Plasmodium falciparum.
Penanggulangan  resistensi  P.  falciparum terhadap  obat-obat  antimalaria  seperti klorokuin, kinin, dan amodiakuin merupakan suatu tantangan dalam mencegah berlanjutnya  penularan  penyakit  malaria (Minqing,  2009;  Najila,  2002).  Resistensi disebabkan oleh pemakaian obat antimalaria tertentu pada waktu yang lama secara luas di suatu  daerah  endemik.  Adanya  resistensi terhadap  P.  falciparum  menyebabkan mortalitas  oleh  penyakit  malaria  semakin meningkat.
Keparahan  infeksi  dan  resistensi  P. falciparum  juga  merupakan  dasar  dalam pengembangan  obat  antimalaria  baru. Keanekaragaman  hayati  di  Indonesia khususnya  di  Provinsi  Jambi  dapat digunakan sebagai sumber obat alami dalam pengobatan  malaria. Telah  diketahui  bahwa ada  beberapa  senyawa  antimalaria  yang diisolasi  dari  tanaman  seperti  kinin  dan artemisinin. Oleh karena itu, salah satu cara untuk  menghasilkan  senyawa  antimalaria baru dan mengatasi adanya resistensi parasit dengan obat antimalaria yang telah ada yaitu dengan  mengembangkan  obat  antimalaria alami.
Penggunaan tanaman untuk pengobatan penyakit masih banyak dilakukan, hal ini didasarkan atas pertimbangan  bahwa  efek  samping  obat- obat  alamiah  lebih  kecil  dari  obat  kimia murni.  Pemakaian  obat-obat  alamiah  ini perlu  didukung  dengan  penelitian  ilmiah sehingga  penggunaannya  mempunyai  dasar
yang kuat. Tanaman Merkubung (Macaranga  gigantea)  sejak  lama  sudah diketahui  mempunyai  khasiat  sebagai  obat- obatan tradisional untuk mengobati beberapa penyakit (Ahmed, 2010; Harborne, 1987;  Harwoko,  2010;  Heyne,  1987; Kokpol,  1984;  Saenger,  1983).  Propinsi Jambi  dengan  wilayah  geografis  memiliki beberapa hutan dengan beranekaragam jenis tanaman  obat.  Tanaman  obat  ini  telah dimanfaatkan  oleh  masyarakat  yang  tinggal disekitar hutan sebagai sumber obat, seperti obat demam, diare dan luka. Tanaman yang digunakan  secara  turun  temurun  oleh masyarakat  sebagai  obat,  salah  satunya adalah  tanaman  Merkubung  (Macaranga gigantea)  (Rifai,  1988;  Soetarno,  2000; Tomlinson,  1986;  Vhargese,  2010).  Hasil pengujian  terdahulu  terhadap  bioaktivitas ekstrak metanol daun tumbuhan Merkubung (Macaranga  gigantea)  menunjukkan  adanya aktivitas antimalaria.
Pada  penelitian  sebelumnya  ekstrak metanol  dari  daun  Merkubung  (Macaranga gigantea)  memiliki  aktivitas  antimalaria yang  tinggi  terhadap  Plasmodium  berghei namun  belum  adanya  pengembangan  lebih lanjut  terhadap  ekstrak  metanol  daun Merkubung  (Macaranga  gigantea).  Untuk itu,  selanjutnya  terhadap  ekstrak  metanol daun  Merkubung  (Macaranga  gigantea) dilakukan fraksinasi untuk mengkaji aktivitas  antimalaria  dari  fraksinat-fraksinat tersebut

## METODE PENELITIAN

## Bahan Tumbuhan dan Plasmodium
Bagian  cuplikan  daun  tumbuhan Merkubung  (Macaranga  gigantea)  yang digunakan  adalah  bagian  tumbuhan  yang dikumpulkan  dari  hutan  Jambi.  Identifikasi tumbuhan  dilakukan  di  Laboratorium Bioteknologi dan Rekayasa FST Universitas Jambi.  Plasmodium  uji  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  :  Plasmodium berghei.
Plasmodium berghei yang digunakan  diperoleh  dari  Laboratorium Eijkman.

## Bahan Kimia
Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah  metanol,  n-heksana, benzena, dietil eter, metilen klorida, aseton, etil  asetat  dan  kloroform.  Larutan  jenuh Ce(SO4)21,5%  dalam  H2SO4  2  N  dan reagen  Dragendorf  digunakan  sebagai penampak  noda.  Reagen-reagen  khusus untuk uji antimalaria dan antioksidan. Silika gel  Merck  dengan  ukuran  mesh  tertentu untuk KKG dan KVC serta Plat KLT untuk penentuan eluen dan melihat pola pemisahan  senyawa.  Untuk  pengujian aktivitas antimalaria diperlukan hewan coba yang digunakan mencit jantan galur Balb-C dengan berat badan 15-20 g, Parasit malaria yaitu Plasmodium berghei yang didapat dari Lembaga  Biomolekuler  Eijkman,  RPMI 1640,  DMSO,  pewarna  Giemsa,  sorbitol, hematokrit.
Ekstraksi  dan  Partisi  Simplisia  Tumbu- han serta Isolasi Senyawa Aktif
Sebanyak  10  kg  serbuk  kering simplisia  daun  tumbuhan  Merkubung (Macaranga  gigantea)  dimaserasi  dengan pelarut metanol, dilanjutkan dengan fraksinasi  menggunakan  pelarut  etanol,  n- heksan,  diklorometan  dan  etil  asetat. Terhadap  ekstrak  metanol  awal  tersebut dilakukan  uji  antimalaria  begitu  juga terhadap fraksinat etanol, n-heksan, diklorometan  dan  etil  asetat.  Untuk  ekstrak dan  fraksinat  yang  aktif  diteruskan  untuk penentuan atau uji fitokimia.

## Pembuatan larutan uji
Pembuatan  larutan  stock  ekstrak, fraksinat dan isolat dilakukan dengan cara 5 mg  ekstrak,  fraksinat  atau  isolat  dilarutkan dalam  DMSO  sampai  volume  200 µ l sehingga  didapatkan  larutan  stock  25 mg/ml. Larutan stock kemudian dibuat dosis (0,5-100) µ g/ml dengan cara
mengencerkannya
secara serial menggunakan RPMI.

## Uji ex vivo
Pada  uji  aktivitas  ex  vivo  digunakan P. Berghei ANKA yang diinfeksi ke mencit galur  Balb-C.  Prosedur  pengujian,  10  mg ekstrak  metanol  dilarutkan  dalam  1000 mL DMSO  dan  dibuat  pengenceran  bertingkat dalam  ddH2O.  Kemudian  dimasukkan kedalam  lempeng  sumuran  dengan  24 lubang  yang  telah  berisi  RPMI  1640 komplit ( RPMI 1640, FCS dan gentamisin) konsentrasi  akhir  sebesar  300;  100;  30;  10 dan  3  µg/ml.  Kemudian  ditambahkan dengan  darah  dari  mencit  yang  telah terinfeksi  P.  Berghei  dengan  kadar parasitemia  1%  dan  hematokrit  3%.  Dibuat sediaan  apusan  darah  tipis  untuk  0  jam inkubasi.  Kemudian  diinkubasi  di  dalam incubator  CO2  selama  24  jam  dengan temperatur 37 °C. Kultur kemudian dipanen dan  dibuat  sediaan  apusan  darah  tipis kemudian  dilakukan  fiksasi  metanol  dan pewarnaan  menggunakan  giemsa  10%.  Uji ini dilakukan dua kali replikasi. Selanjutnya dihitung  level  parasitemia  dan  persentase hambatan  pertumbuhan  P.  Berghei  dengan menghitung  jumlah  eritrosit  yang  terinfeksi setiap 1000 eritrosit di bawah mikroskop.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  15  kg  serbuk  kering simplisia  daun  tumbuhan  Merkubung (Macaranga  gigantea)  dengan  pelarut metanol didapatkan ekstrak metanol pekatnya  2,18  kg.  Selanjutnya  terhadap ekstrak metanol tersebut dilakukan fraksinasi  dengan  pelarut  etanol  dan  etil asetat.
Aktivitas antimalaria ekstrak metanol, ekstrak  etanol  dan  ekstrak  etil  asetat  daun Merkubung (Macaranga gigantean)
diketahui  dengan  melakukan  penghitungan level parasitemia 24 jam sehingga diketahui penurunan  level  parasitemia  dan  persen penghambatan (tabel 1 dan 2).
Tabel 1. Level parasitemia setelah inkubasi 24 jam
Konsentrasi Ekstrak (µg/ml) Parasitemia Level Ekstrak metanol Ekstrak etanol Ekstrak Etil Asetat Pyrimethamine 300 0 0 0 0 100 0,32 0,41 0,64 0,27 30 0,77 0,86 0,98 0,73 10 1,42 1,62 1,95 1,21 3 1,74 1,95 2,37 1,62 Tabel 2. Persen penghambatan setelah inkubasi 24 jam Konsentrasi Ekstrak (µg/ml) % suppression Ekstrak metanol Ekstrak etanol Ekstrak Etil Asetat Pyrimethamine 300 88,5 92,1 88,2 94 100 79,9 85,7 76,6 87,5 30 56,7 64,1 52,9 44,8 10 l 35,7 41,5 36,1 15,2 3 18,8 21,7 19,7 15 Berdasarkan penurunan level parasitemia  dan  persen  penghambatan, diketahui  bahwa  ekstrak  etanol  daun Merkubung ( Macaranga gigantea ) memiliki persen penghambatan yang paling baik  dibanding  ekstrak  yang  lain  sebesar 92,1%,  85,7%,  64,1%,  41,5%  dan  21,7%
pada  konsentrasi  300,  100,  30,10  dam  3 µ g/ml  (tabel  2).  Aktivitas  antimalaria ekstrak etanol daun Merkubung
( Macaranga  gigantea )  mirip  dengan  obat antimalaria Pyrimethamine.
Gambar 1. Aktivitas antimalaria ekstrak Merkubung ( Macaranga gigantea ) untuk Parasitemia level
Seiring  dengan  penurunan  level parasitemia,  aktivitas  antimalaria  juga  dapat dilihat  dari  penghambatan  perkembangan siklus  hidup  plasmodium.  Ekstrak  metanol Merkubung  ( Macaranga  gigantea )  memiliki aktivitas menghambat perkembangan stadium cincin  yang  terlihat  dari  tidak  ditemukannya
skizon  pada  konsentrasi  ekstrak  300 µ g/mL. Pada  konsentrasi  yang  lain  masih  ditemukan trofozoid  dan  skizon  namun  dengan  kondisi morfologi  yang  tidak  sempurna.  Aktivitas antimalaria  yang  dimiliki  oleh  ekstrak metanol, ekstrak etanol dan ekstrak etil asetat disebabkan  oleh  metabolit  sekunder  yang
terkandung  dalam  masing-masing  ekstrak. Metabolit sekunder yang terkandung di dalam daun  Merkubung  ( Macaranga  gigantea ) inilah yang telah berkhasiat dalam pengobatan  di  masyarakat.  Secara  ilmiah terbukti memberi aktivitas antimalaria, karena uji aktivitas menunjukkan tingkat parasitemia level dan menghambat pertumbuhan
Plasmodium.  Pada  siklus  hidup  Plasmodium juga  terlihat  ada  aktivitas  penghambatan perkembangan  stadium  cincin,  dan  kondisi morfologi  yang  tidak  sempurna  untuk trofozoid  dan  skizon.  Hal  ini  membuktikan bahwa ekstrak daun Merkubung ( Macaranga gigantea )  dapat  digunakan  sebagai  kandidat sumber obat antimalaria baru.
Stadium Cincin Stadium Trofozoid Stadium Skizon muda
Gambar 3. Aktivitas antimalaria ekstrak Merkubung ( Macaranga gigantea ) untuk persen inhibisi
Gambar 2. Siklus  hidup  plasmodium  hasil  uji  aktivitas  ekstrak Merkubung ( Macaranga gigantea )
Skrining  fitokimia  yang  dilakukan terhadap  ekstrak  metanol,  etanol  dan  etil asetat  dari  daun  Merkubung  ( Macaranga gigantea ) diantaranya uji flavonoid, terpenoid,  steroid,  alkaloid,  saponin,  dan tanin.  Hasil  skrining  fitokimia  disajikan dalam tabel 3.
Tabel  3. Hasil  Uji  Fitokimia  daun Macaranga gigantea Pengujian Fitokimia Fraksi Metanol Fraksi Etil Asetat Fraksi Etanol Alkaloid ++ ++ + Flavonoid ++ + ++ + Tanin + - + Saponin - - - Triterpenoid - - - Steroid + + +
Keterangan : (+) : Ada; (-) : Tidak ada
Berdasarkan  tabel  3,  diketahui  bahwa ekstrak  etanol  daun Macaranga  gigantea secara  kualitatif  dominan  mengandung flavonoid, sedangkan untuk fraksi etil asetat daun Macaranga gigantea dominan mengandung  alkaloid.  Senyawa  golongan flavonoid  dan  alkaloid  inilah diperkirakan memberikan  aktivitas  antimalaria,  karena dari  beberapa  obat  antimalaria  yang  dijual dipasaran  menunjukkan  struktur  senyawa dan  kerangka  dasar  senyawa  memiliki kemiripan  dengan  golongan  zat  aktif  obat antimalaria.
Selain  itu  senyawa  yang  termasuk golongan  flavonoid  dan  alkaloid  juga mempunyai  aktivitas  sebagai  antioksidan, antibakteri,  antijamur,  antiinflamasi  dan lain-lain.  Melalui  penelitian  ini  telah memperkuat  alasan  tanaman  ini  digunakan sebagai  bahan  obat  di  masyarakat.  Oleh karena  itu,  salah  satu  cara  untuk menghasilkan senyawa antimalaria baru dan mengatasi adanya resistensi obat antimalaria yang telah ada
yaitu dengan mengembangkan obat antimalaria alami dari daun Merkubung ( Macaranga gigantea ).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan
penurunan level
parasitemia  dan  persen  penghambatan,
diketahui bahwa daun Merkubung
(Macaranga  gigantea)  memiliki  aktivitas antimalaria yang cukup baik. Ekstrak etanol daun  Merkubung  (Macaranga  gigantea) memilki aktivitas menghambat
perkembangan  stadium  cincin  yang  terlihat dari  tidak  ditemukannya  skizon  pada konsentrasi  ekstrak  300 µ g/mL.  Pada konsentrasi  yang  lain  masih  ditemukan trofozoid dan skizon namun dengan kondisi morfologi  yang  tidak  sempurna.  Hasil penelitian ini menunjukkan tanaman Merkubung (Macaranga gigantea) berpotensi  sebagai  sumber  obat  alami antimalaria. Fraksi  etanol  dan  etil  asetat  dari ekstrak metanol daun Merkubung (Macaranga  gigantea)  menunjukkan  juga aktivitas antimalaria.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian ini didanai oleh PNBP 2018- Fakultas  Sains  dan  Teknologi , peneliti mengucapkan  terimakasih  kepada  pimpinan FST Universitas Jambi.

## DAFTAR RUJUKAN
Ahmed, R., Moushumi, S.J., Ahmed, H., &
Ali,  M.,  (2010).  Serum  glucose  and lipid  profiles  in  rats  following administration of Sonneratia caseolaris  (L.)  Engl.  (Sonneratiaceae) leaf  powder  in  diet . Advances  in Natural and Applied Sciences 4(2),171-173 Chen,  L.,  Zan,  Q.,  Shen,  J.,  &  Liao,  W., (2009).  Litter  dynamics  and  forest structure of the introduced Sonneratia caseolaris mangrove forest in Shenzhen,  China. Estuarine, Coastal and Shelf Science 85(2):241-246.
Contreras,  C.E.,  Rivas,  M.A.,  Dominguez,
J.,Charris,  J.,  Palacios,  M.,  Bianco, N.E.,  &  Blanca,  I.,  (2004).  Stage- specifics Activity of Potential Antimalarial Compounds Measured in vitro by Flow Cytometry in Comparison to Optical .
Ghalib,  R.M.,  Hashim,  R.,  Sulaiman,  O., Awaluddin,  M.F.B.,  Mehdi,  S.H.,  & Kawamura,  F.,  (2011).  Fingerprint chematoxonomic  GC_TOFMS  profile of  wood  and  bark  of  mangrove  tree Sonneratia  caseolaris (L.)  Engl. Journal  of  Saudi  Chemical  Society 15(3):229-237.
Harborne,  J.B.,  (1987). Metode    fitokimia penuntun  cara  modern menganalisis tumbuhan . Institut Teknologi Bandung. Bandung. Harwoko,  Utami,  E.D.,  (2010).  Aktivitas sitotoksik fraksi n-Heksana: Kloroform dari ekstrak methanol kulit batang mangrove (Rhizopora mucronata)  pada  sel  kanke  myeloma. Majalah Obat Tradisional . 15-55.
Heyne,  K.,  (1987). Tumbuhan  berguna Indonesia  III .  Jakarta.Yayasan  Saran Warna Jaya.
Kokpol,  U.,  V.  Chittawong,  &  H.D.  Millis, (1984).  Chemical  constituents  of  the roots  of  acanthus  illicifolius. Journal of Natural Products , 49,355-356.
Minqing,  T.,  Haofu,  D.,  Xiaoming,  L.,  & Bingui, W., (2009). Chemical constituents  of  marine  medicinal mangrove  plant  Sonneratia  caseolaris. Advances  in  Natural  and  Applied Sciences. 27(2),288-296.
Najila,  M.J.S.,  Rain,  N.A.,  Kamel,  A.G.M., Zahir, S.I.S., Khozirah, S., Hakim, S.L., Zakiah, I. & Azizol, A.K., (2002). The screening  of  extract  from  Goniotha- lamus scortechinii, Aralidium pinnati- fidum  and  Andrographis  paniculata for  anti-malarial  activity  using  the
lactate  dehydrogenase  assay. Journal of Ethnopharmacology, 82 , 239-242. Rifai,
M.A., (1998). Pemasakinian etnobotani Indonesia: Suatu keharusan demi peningkatan upaya pemanfaatan, pengembangan  dan  penguasaannya. Prosiding Seminar Nasional EtnobotaniIII, (5-6 Mei 1998, Denpasar-Bali), 352-356.
Saenger,  P.,  Hegerl,  E.J.,  &  Davie,  J.D.S.,
(1983). Global  status  of  mangrove ecosystems .  IUCN  Commission  on Ecology Papers No. 3, Gland (SZ).
Soetarno,  S.,  (2000).  Potensi  dan  manfaat tumbuhan  mangrove  sebagai  sumber bahan  bioaktif. Acta  Pharmaceutica Indonesia , 12(4),84-103. Tomlinson,  P.B.,  (1986). The  Botany  of Mangroves .  Cambridge  University Press, Cambridge (UK).
Varghese,  J.K.,  Belzik,  N.,  Nisha,  A.R., Resmi, S., & Silvipriya, K.S., (2010). Pharmacognostical and phytochemical studies  of  a  mangrove  ( Sonneratia caseolaris )  from  Kochi  of  Kerala State  in  India. Journal  of  Pharmacy research, 3(11),2625-2627.
Wondimu,  T.,  Asfaw,  Z.,  &  Kelbessa,  E., (2007).  Ethnobotanical  study  of medicinal plants around dheeraa town, Arsi  Zone,  Ethiopia. Journal  of Ethnopharmacology.