Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Konservasi Coelogyne pandurata Lindh. di Kalimantan Tengah: karakter morfologi, propagasi in vitro, dan pelestarian berbasis komunitas lokal
T. S. Wahyudiningsih 1* , Y. Jagau 2 , N. Ravenska 3
1 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Tidar, Magelang, Indonesia
2 Program Studi Budidaya Pertanian, Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Palangka Raya, Palangka Raya, Indonesia 3 Program Studi Pengelolaan Sumber Daya Alam dan Lingkungan, Pascasarjana, Universitas Palangka Raya, Palangka Raya, Indonesia

## Abstrak.
Coelogyne  pandurata  merupakan  anggrek  endemik, termasuk  Appendiks  I  menurut  CITES,  dan  mempunyai nilai  ekonomi  tinggi.  Kebakaran  hutan,  konversi  lahan, eksploitasi  tidak  terkendali,  periode  berbunga  sangat pendek,  dan  sulit  disilangkan  menjadi  faktor  penyebab yang  membuat  populasi  C.  pandurata  terancam  punah sehingga  perlu  dilakukan  konservasi.  Penelitian  ini bertujuan  mengkaji  perbedaan  karakter  morfologi  C. pandurata dari Muara Teweh dan Tewah, propagasi secara in vitro, serta pelestarian berbasis komunitas masyarakat lokal. Bunga asal Tewah memiliki ciri  seperti warna lidah lebih  hitam,  bulu  halus  dan  ornamen  lebih  jelas,  panjang dan  lebar  pada bulbus  dan  daun  asal  Tewah  lebih  besar. Eksplan serbuk biji ditanam pada medium perlakuan: I. MS (kontrol), II. MS + 3 mg/l BAP (Benzyl Amino Purine), III. MS + 3 mg/l BAP + Pisang, IV. MS + 3 mg/l BAP + air kelapa, dan V. MS + 3 mg/l BAP + tomat. Pada 10 HST (Hari Setelah Tanam) terjadi perubahan warna biji kuning menjadi hijau. Pro-meristem mengalami diferensiasi menjadi kutub calon akar  pada  suspensor  dan  kutub  calon  tunas.  Protocorm tumbuh  pada  21  HST.  Seedling  tumbuh  pada  8  MST (Minggu Setelah Tanam) pada perlakuan I, II, dan IV. Pada perlakuan III seedling dengan tunas 0,5 cm terlihat pada 9 MST.  Pada  perlakuan  V  seedling  tumbuh  pada  11  MST dengan perawakan sehat dan kuat. Komunitas masyarakat lokal  dan  hutan  adat  menjadi  prioritas  awal  pembinaan dan pemberdayaan melalui kegiatan pengenalan anggrek, teknik  budi  daya,  pemahaman  konservasi  serta penanaman  ke  habitat,  sehingga  konservasi  in-situ  dapat berjalan secara berkesinambungan.
Kata  kunci:  Coelogyne    pandurata,  karakter  morfologi, protocorm, seedling, komunitas lokal

## Abstract.
C. pandurata is an endemic orchid, classified as Appendix I according  to  CITES,  and  has  high  economic  value.  Forest fires, land conversion, uncontrolled exploitation, very short flowering  periods,  and  difficult  cross-breeding  are  factors that  make  C.  pandurata  populations  endangered,  so conservation  needs  to  be  carried  out.  This  study  aimed  to examine  the  differences  of  morphological  characters  from Muara  Teweh  and  Tewah,  in  vitro  propagation,  and preservation based local community. The flower from Tewah had  a  blacker  labellum,  fluff  and  ornament  more  clearly. Seed were planted in the treatment medium:  I. MS (control), II. MS + 3 mg/l BAP, III. MS + 3 mg/l BAP + bananas, IV. MS + 3  mg/l  BAP  +  coconut  water,  and  V.  MS  +  3  mg/l  BAP  + tomatos. At tenth days after planting, germination occurred in  all  treatments.  The  pro-meristem  underwent differentiation  into  pole  root  and  pole  buds.  The  average speed  appeared  protocorm  in  twenty  first  days  after planting.  Seedling  growth  began  at  the  eighth  weeks  after planting of treatment I, II, and IV. The treatment III, seedling grew with 0.5 cm of shoot in ninth weeks after planting. At the treatment V, seedling (healthy, strong, and proportional plants)  appeared  in  eleventh  weeks  after  planting.  Local community and customary forests became the initial priority to  be  fostered  and  empowered  through  orchid  recognition activities,  cultivation  techniques,  understanding  of conservation, and planting into habitats so that the  in-situ conservation can be sustainable.
Keywords:  Coelogyne  pandurata,  morphological  character, protocorm, seedling, local community

## 1. PENDAHULUAN
Genus Coelogyne terdiri dari 125 spesies terdistribusi mulai dari India dan China  hingga  Asia  Tenggara  (Indonesia,  Filipina,  Kepulauan  Pasifik  dan  Fiji
* Korespondensi Penulis Email : tri.s.w.basuki@gmail.com
(Abraham and Vatsala 1981). Genus Coelogyne di Kalimantan Tengah terdapat delapan spesies yaitu Coelogyne pandurata, C. asperata, C. cristata, C. cumingii, C. peltates,  C.  fuliginosa,  C.  rhocussenii,  dan  C.  zurowetzii.  Anggrek  C.  pandurata merupakan anggrek epifit dan simpodial pada umumnya tumbuh pada cabang batang pohon. Anggrek tersebut banyak ditemukan di Kalimantan Tengah yaitu di Tewah dan Muara Teweh.
Anggrek C. pandurata termasuk tumbuhan yang dilindungi berdasarkan PP RI  No  7  Tahun  1999.  Hal  ini  karena  terjadi  peningkatan  koleksi  dari  pecinta anggrek yang tidak terkendali, eksploitasi berlebihan, kerusakan habitat akibat reklamasi,  pembukaan  lahan  pertanian,  deforestasi,  hilangnya  pollinator, fragmentasi  populasi,  genetic  drift,  tekanan  antropogenik  dan  perdagangan ilegal, sehingga anggrek spesies ini mengalami ancaman punah dari alam liar. Menurut Balasubramanian and Murugesan (2004), konservasi di habitat alami, strategi  konservasi  yang  tepat,  dan  perencanaan  pengembangan  konservasi dapat melindungi biodiversitas anggrek di suatu daerah.
Propagasi  secara  in  vitro  secara  substansial  dapat  mengurangi  tekanan populasi C. pandurata di alam. Perkecambahan biji C. pandurata secara in vitro menjadi salah satu metode yang sangat umum diterapkan pada anggrek untuk tujuan  penelitian  dan  konservasi.  Teknik  kultur  in  vitro  tidak  hanya  untuk propagasi  secara  cepat  dan  dalam  skala  besar  tetapi  juga  untuk  konservasi secara  ex-situ.  Arditti  and  Ernst  (1993)  mengemukakan  bahwa  propagasi anggrek skala besar telah dilakukan  pada sejumlah  genus anggrek antara lain Cymbidium,  Vanda,  Phaphiopedilum  dan  Phalaenopsis  dengan  menggunakan macam eksplan yang berbeda. Propagasi yang lebih mudah dan praktis berasal dari protocorm yang dapat berproliferasi menjadi seedling (Yam et al. 1991; Chen et al. 2000).
Protocorm merupakan struktur unik biji pada anggrek, termasuk juga pada anggrek  C. pandurata. Protocorm adalah struktur awal yang terbentuk selama perkembangan embrio pada saat biji anggrek berkecambah (Ishii  et al. 1998). Biji tersebut tidak mempunyai cadangan makanan untuk berkecambah. Biji  C. pandurata  dapat  berkecambah  dan  tumbuh  menjadi  tanaman  baru  di  alam apabila  bersimbiosis  dengan  endomikorisa,  sehingga  hanya  beberapa  biji mampu berkecambah. Satu buah anggrek dapat berisi 1.500 hingga 3.000.000 biji. Buah anggrek C. pandurata mempunyai ukuran yang lebih besar dari buah anggrek lainnya, sehingga mempunyai jumlah biji yang lebih banyak. Proliferasi protocorm dan protocorm-like bodies (PLB) sering kali menjadi satu-satunya cara untuk  meningkatkan  jumlah  anggrek.  Upaya  untuk  meningkatkan  dan  atau mempercepat  proliferasi  dilakukan  dengan  cara  menambahkan  zat  pengatur tumbuh ke dalam medium (Arditti 1977). Vajrabhaya (1997) melaporkan bahwa medium yang mengandung hormon dapat mempercepat peningkatan tetapi juga
dapat menyebabkan mutasi yang tidak diharapkan. Efek samping mutasi dapat dikurangi  dengan  pengurangan  proporsi  penggunaan  medium,  termasuk  saat proliferasi protocorm atau PLB yaitu dengan menggunakan konsentrasi hormon yang rendah (Gu  et al. 1987) atau medium tanpa penambahan  hormon tetapi dengan penambahan bahan organik. Bahan organik tersebut antara lain berupa penambahan  bahan  aditif  kompleks  seperti  jus  pisang  (Yam  et  al.  1991),  air kelapa (Yam et al. 1991; Ishii et al. 1998) dan tomat.
Berdasarkan hal tersebut di atas maka perbedaan karakter morfologi dan pelestarian  jenis  C.  pandurata  asal  Muara  Teweh  dan  Tewah  tersebut  yang berbasis  komunitas  lokal  perlu  diteliti.  Demikian  juga  propagasi  C.  pandurata secara  in  vitro  dengan  eksplan  biji  pada  medium  MS  dengan  perlakuan  zat pengatur tumbuh BAP (Benzyl Amino  Purin) dan penambahan bahan organik berupa air kelapa, jus pisang dan tomat. Tujuan penelitian ini adalah:
1. Menerangkan perbedaan karakter morfologi daun dan bunga C. pandurata asal Tewah dan Muara Teweh, Kalimantan Tengah.
2. Menguraikan  pertumbuhan  dan  perkembangan  biji  C.  Pandurata berkecambah hingga hingga menjadi seedling.
3. Menguraikan  pelestarian  anggrek  C.  pandurata  berbasis  komunitas masyarakat  lokal  untuk  mendukung  keberlanjutan  konservasi  secara  in situ.

## 2. METODOLOGI

## 2.1. Lokasi kajian dan waktu penelitian
Penelitian propagasi secara in vitro dilakukan bulan Januari 2011 sampai Januari 2012. Tempat penelitian di  Laboratorium Manajemen Hutan, Fakultas Pertanian Universitas Palangka Raya. Penelitian karakteristik morfologi dan cara pemeliharaan C. pandurata asal Tewah dan Muara Teweh, Kalimantan Tengah dilakukan  di  koleksi  anggrek  hutan  Kalimantan  Tengah  milik  ibu  Setya Murniasih di Jalan Temanggung Tilung XIII Palangka Raya pada bulan Oktober- November 2016.

## 2.2. Alat dan bahan
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  disajikan  dalam bentuk tabel pada Tabel 1.
Tabel 1. Alat dan bahan penelitian.
Bahan Alat 1. Tanaman C. pandurata. 2. buah C. pandurata berumur 6 bulan setelah penyerbukan 1. Autoklaf 2. Laminar air flow (LAF)-cabinet
3. seperangkat alat gelas dan logam
4. mata pisau steril
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Bahan Alat 3. medium MS + agar (George and Sherington 1984), HCl, dan KOH
4. Benzyl adenin (BA)
5. Komponen tambahan: Pisang ambon, tomat, dan air kelapa
6. Desinfektan: alkohol 70 %, aquades steril, spiritus 5. kompor gas 6. kertas pH
7. kertas saring
8. sprayer
9. penggaris
10. mikroskop stereo dan kamera

## 2.3. Cara kerja
1. Melakukan  pencandraan  tanaman  C.  pandurata  asal  Muara  Teweh  dan Tewah.  Pencandraan  meliputi:  morfologi  batang,  daun,  bunga,  daun kelopak,  daun  mahkota,  struktur  lidah  (labelum),  lama  mekar  bunga, musim berbunga dan ekologi.
2. Mencari  komunitas  masyarakat  yang  melakukan  pelestarian  anggrek  C. pandurata dan melakukan wawancara.
3. Menyiapkan  pembuatan  medium  MS:  sterilisasi  botol  dan  alat  yang digunakan untuk menanam, pembuatan stok makro, mikro, dan vitamin, penimbangan  sukrosa,  agar,  pemblenderan  bahan  organik  (pisang  dan tomat), pencampuran seluruh medium, dan sterilisasi medium.
4. Mensterilkan buah C. pandurata di dalam LAF-cabinet: buah direndam dan digojok  dalam  larutan  deterjen  5  %  selama  15  menit,  kemudian  dibilas dengan  aquades  steril.  Buah  tersebut  dicelupkan  dalam  alkohol  70  % selama  30  detik,  kemudian  eksplan  dilewatkan  di  atas  lampu  bunsen  (3 kali). Eksplan dipindah  ke  cawan petri, diiris secara membujur. Biji siap ditanam  ke  dalam  botol  yang  telah  berisi  medium  perlakuan:  1)  MS (kontrol), 2) MS + 3 mg/l BAP, 3) MS + 3 mg/l BAP + Pisang, 4) MS + 3 mg/l BAP + air kelapa, dan 5) MS + 3 mg/l BAP + tomat.
5. Mengamati  perkecambahan,  pembentukan  protocorm  dan  seedling, dilakukan  setiap  hari  dengan  menggunakan  mikroskop  stereo  serta dilakukan pemotretan.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Karakter morfologi
Batang semu terletak berdekatan atau berjauhan, daun berjumlah 2 helai, lebar  atau  bulat  panjang.  Sistem  pembungaan  tegak  lurus  atau  bergantungan dengan  beberapa  atau  banyak  bunga.  Daun  kelopak  biasanya  sangat  cekung, daun mahkota bunga lebih sempit dibandingkan daun kelopak. Bibir bunga agak melengkung  ke  bagian  dasar,  terdapat  tiga  cuping,  cuping  bagian  pinggir melebar secara berangsur-angsur dari bagian dasar bibir bunga dan juga tegak lurus pada pinggir kolomnya.
Karakter kualitatif yang diamati meliputi warna bunga, lama mekar bunga, dan  warna  labelum.  Deskripsi  perbedaan  karakter  morfologi  batang,  daun, bunga, daun  kelopak, daun mahkota, dan struktur lidah anggrek  C. pandurata yang berasal dari Tewah dan Muara Teweh Kalimantan Tengah disajikan pada Tabel 2 dan Gambar 1. Persamaan C. pandurata asal Tewah dan Muara Teweh adalah  lama  bunga  mekar  yaitu  5-7  hari,  musim  berbunga  tergantung  pada kesuburan  tanaman,  kelembaban,  suhu,  dan  intensitas  cahaya  yang  sesuai. Ekologi  yang  diperlukan  juga  sama  yaitu  tempat  yang  teduh,  berupa  dataran rendah serta banyak dijumpai di dekat sungai hutan basah.
Gambar 1.  Morfologi bunga dan tanaman C. pandurata yang berasal dari (a) Tewah dan (b)

## Muara Teweh, Kalimantan Tengah.
Keterangan: Ornamen dan warna (tanda panah merah) lebih jelas dibanding tanda panah hitam. Labelum mempunyai struktur bulu seperti bludru lebih tebal (tanda panah biru) dibandingkan tanda panah kuning.
Pada penelitian ini konservasi dilakukan bersifat aktif (konservasi ex-situ), yaitu memindahkan tanaman anggrek dari tempat asalnya ke lingkungan yang baru atau tempat pemeliharaan baru, sehingga keanekaragaman plasma nutfah dapat  dipertahankan  dalam  kebun  koleksi  dan  pot-pot  pemeliharaan. Konservasi  ex-situ  dilakukan  dengan  menanam,  memperbanyak,  dan memelihara anggrek C. pandurata yang berasal dari Tewah dan Muara Teweh di Jalan Temanggung Tilung XIII.
Berdasarkan  pengamatan  dan  pengukuran,  maka  terdapat  perbedaan karakter  morfologi  organ  vegetatif  dan  organ  generatif  anggrek  C.  pandurata yang berasal dari Tewah dan Muara Teweh seperti disajikan pada Tabel 2. Salah satu perbedaan karakter morfologi yang menarik  dan  paling menonjol adalah pada karakter organ generatif yaitu warna, corak, dan ukuran bunga (Gambar 1), sehingga menarik diteliti bagi pemulia anggrek.
Tanaman anggrek mempunyai keistimewaan pada bunganya yang sangat beraneka-ragam  dalam  hal  ukuran,  bentuk,  warna  maupun  corak  warnanya.
a b
Demikian  juga  pada  anggrek  dari  genus  Coelogyne  maupun  dari  spesies  C. pandurata. Hal ini sesuai dengan hasil pengamatan bahwa terdapat perbedaan warna, ukuran, dan corak bunga C. pandurata yang berasal dari daerah Tewah dan  Muara  Teweh.  Menurut  Strickberger  (1985),  analisis  biokimia  terhadap pigmen bunga menunjukkan adanya korelasi antara sifat genetik dan perubahan biokimia. Pewarisan warna dalam hal ini memperlihatkan pengaruh gen dalam pengendalian  langkah-langkah  dari  peristiwa  biokimia  yang  spesifik.  Adanya beberapa  senyawa  yang  berperan  di  dalam  pewarnaan  bunga  anggrek menyebabkan  anggota  tanaman  dari  suku  Orchidaceae  ini  mempunyai  warna bunga dengan pola pewarnaan yang beraneka ragam dari yang berwarna putih sampai berwarna hampir hitam, ditambah dengan berbagai corak dan kombinasi warnanya. Bunga yang berwarna hijau juga bisa dilihat pada anggrek Cymbidium maupun  C.  pandurata.  Warna  hijau  pada  bunga  ini  disebabkan  oleh  adanya klorofil yang juga dapat mengadakan fotosintesis (Arditti 1966).
Tabel 2. Deskripsi morfologi batang, daun, bunga, daun kelopak, daun mahkota, dan struktur
lidah (labelum). No  Deskripsi Asal Tewah Asal Muara Teweh 1 Batang Berbentuk umbi semu, panjang: 1-10 cm. Berbentuk umbi semu, panjang: 1-6 cm. 2 Pseudobulbus Bentuk pipih, panjang: 2-10 cm, dan lebar: 1,5-8 cm. Bentuk pipih, panjang: 1,5-7 cm, dan lebar: 1-4 cm. 3 Daun Bentuk jorong, berlipat-lipat, panjang: 20-40 cm, dan lebar: 2-8 cm. Bentuk jorong, berlipat-lipat, panjang: 10-25 cm, dan lebar: 2- 6 cm. 4 Bunga Tersusun dalam rangkaian berbentuk tandan, panjang: 15-20 cm. Jumlah bunga tiap tandan: 7-14 kuntum. Tersusun dalam rangkaian berbentuk tandan. Panjang: 10- 15 cm. Jumlah bunga tiap tandan: 5-12 kuntum. 5 Daun kelopak Garis tengah tiap bunga: 10 cm, berbentuk lanset, lancip, panjang: 10-15 cm, lebar: 3-5 cm, berwarna hijau muda. Garis tengah tiap bunga: 8 cm, berbentuk lanset, lancip, panjang: 8-13 cm, lebar: 2-4 cm, berwarna hijau muda hingga hijau kekuningan. 6 Daun mahkota Bentuk lanset melancip dan berwarna hijau muda. Bentuk lanset melancip dan berwarna hijau muda hingga hijau kekuningan. 7 Struktur lidah (labelum) Warna ornamen pada lidah lebih hitam, bulu-bulu halus lebih tebal seperti bludru, garis dan ornamen hitam berbeda. Ornamen hitam pada lidah lebih sedikit dan lebih tipis, bulu-bulu halus tipis.

## 3.2. Perkecambahan biji C. pandurata hingga menjadi seedling
Pada Gambar 2a, eksplan berupa buah anggrek berumur 6 bulan setelah penyerbukan,  setelah  dibelah  berisi  serbuk  biji  berwarna  kuning  keputihan (Gambar 2b). Pada lima hari setelah  ditanam serbuk biji yang  viable tumbuh menjadi  warna  hijau  di  bagian  tengah  (Gambar  2c).  Hal  ini  karena  terjadi perubahan dari plastida menjadi klorofil yang berwarna hijau. Biji yang kosong dan  biji  yang  berisi  embrio  yang  telah  mati  menunjukkan  perubahan  warna menjadi cokelat pada lima hari setelah ditanam (Gambar 2d). Pertumbuhan dan perkembangan  tiap  biji  anggrek  tersebut  tidak  terjadi  secara  bersamaan.  Biji yang tidak berisi embrio menunjukkan warna kecokelatan meskipun setelah 10 HST (Gambar 2d).
Gambar 2.   Eksplan buah (a) yang berisi serbuk biji (b) yang viable tumbuh menunjukkan warna hijau (c), sedang yang biji yang embrio telah mati atau kosong mengalami perubahan menjadi warna cokelat (d).
Pada Gambar 3 mulai 7 HST biji berwarna hijau (a) terlihat bagian tengah berwarna hijau tua (prokambium). Pada 8-10 HST biji tumbuh dan berkembang menjadi  lebih  panjang  dan  lebar  (b).  Prokambium  tumbuh  memanjang,  pada kutub  atas  terdapat  meristem  pucuk  calon  tunas  dan  kutub  bawah  terdapat meristem  pucuk  calon  akar.  Protocorm  mulai  terbentuk  pada  15  HST  (c), suspensor  semakin  memanjang.  Pada  25  HST  struktur  globuler  semakin memanjang (d) diikuti pertumbuhan dan perkembangan tunas dan akar mulai 50 HST (e).
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Gambar 3. Pertumbuhan biji anggrek C. pandurata dilihat di bawah mikroskop stereo. Keterangan: a. Pertumbuhan biji umur 7 HST, b. Pertumbuhan biji umur 10 HST, c. Protocorm pada 15 HST, d.
Protocorm pada 25 HST, e. Pertumbuhan tunas dan akar pada 50 HST. 1) Pro-meristem, 2) Pro-kambium, 3) Meristem pucuk, 4) Meristem ujung calon akar, 5) Suspensor, 6) Protocorm
bentuk globuler, 7) Daun, dan 8) Akar.
3.3. Medium untuk pertumbuhan protocorm dan seedling C.  Pandurata
Perlakuan yang digunakan dalam penelitian ini ada lima yaitu medium MS (Kontrol/Perlakuan I), MS + 3 mg/l BAP (Perlakuan II), MS + 3 mg/l BAP + jus pisang (Perlakuan III), MS + 3 mg/l BAP + air kelapa (perlakuan IV), dan MS + 3 mg/l  BAP  +  jus  tomat  (Perlakuan  V).  Kelima  perlakuan  tersebut  dapat mengecambahkan biji anggrek C. pandurata. Pertumbuhan dan perkembangan biji anggrek C. pandurata pada kelima perlakuan disajikan pada Gambar 4.
Gambar 4. Pertumbuhan dan perkembangan biji anggrek C. pandurata pada 4 waktu pengamatan (HST) dari lima perlakuan medium yang berbeda.
Pada  10  HST  perkecambahan,  semua  perlakuan  terlihat  perubahan warna  biji  yang  sebelumnya  kuning  menjadi  tampak  hijau  di  permukaan medium,  selanjutnya  protocorm  tersebut  mengalami  pertumbuhan  dan perkembangan lebih lanjut. Rerata kecepatan muncul  protocorm pada 21 HST (Hari  Setelah  Tanam).  Pada  58  HST  calon  tunas,  akar,  dan  daun  mengalami pertumbuhan  dan  perkembangan  membentuk  seedling.  Rerata  kecepatan muncul seedling pada semua perlakuan yaitu 91 HST (13 MST).
Rerata jumlah tunas pada 7 MST (Minggu Setelah Tanam) dan jumlah akar pada  15  (MST)  dari  lima  perlakuan  medium  disajikan  pada  Tabel  3.  Pada medium  MS  tanpa  penambahan  BAP  dan  bahan  organik,  rerata  jumlah  tunas paling tinggi, namun tunas tersebut berukuran lebih kecil dibandingkan tunas pada perlakuan yang lain. Peringkat rerata jumlah tunas dan akar yang kedua menunjukkan seedling dengan perawakan yang sehat dan kuat, yaitu terdapat pada perlakuan penambahan jus tomat. Pada perlakuan penambahan jus pisang menunjukkan rerata jumlah akar tertinggi.
Tabel 3.  Rerata jumlah tunas pada 7 MST (Minggu Setelah Tanam) dan jumlah akar
pada 15 MST dari lima perlakuan medium. Perlakuan Rerata jumlah tunas (7 MST) Rerata jumlah akar (15 MST) MS MS + 3 mg/l BAP MS + 3 mg/l BAP + jus pisang MS + 3 mg/l BAP + air kelapa MS + 3 mg/l BAP + tomat 8,75 4,25 3,25 6,50 7,75 4,00 2,67 16,00 4,00 9,00
Rerata kecepatan muncul protocorm pada 21 HST atau 3 minggu setelah tanam.  Seedling terbentuk mulai 58 HST atau sekitar  8 minggu setelah tanam (MST). Medium MS lebih lengkap komposisi nutrisi untuk perkecambahan dan perkembangan seedling dari eksplan biji anggrek C. pandurata. Pada penelitian ini digunakan penambahan bahan organik berupa jus pisang, air kelapa dan jus tomat untuk mengurangi penggunaan  zat pengatur tumbuh sebagai  antisipasi efek samping mutasi akibat penggunaan hormon yang berlebihan.
Kecepatan perkecambahan dan terbentuk seedling pada penelitian ini lebih cepat  dibanding  hasil  penelitian  Lestari  dan  Deswiniyanti  (2015)  yang menyatakan  bahwa  perkecambahan  biji  anggrek  C.  pandurata  terjadi  pada minggu ke 5 dan seedling terbentuk pada minggu ke-16 dengan menggunakan media VW (Vacin dan Went) dan media organik. Media organik tersebut terdiri dari pupuk Growmore 4 gr, 60 gram pisang ambon, 20 gr gula, 150 mg vitamin C, 1 gr arang aktif, air kelapa 150 ml, air rebusan tauge 150 ml dan aquades steril hingga 1 liter.
Sumber  eksplan  (Ishii  et  al.  1998),  tingkat  kemasakan  biji  (Chen  et  al. 2000),  dan  ukuran  buah  (Park  et  al.  2002)  mempengaruhi  keberhasilan  pada prosedur  kultur  menggunakan  air  kelapa  dan  arang  aktif  untuk  multiplikasi protocorm Phalaenopsis gigantea yang dilukai dan tidak dilukai (Murdad  et al. 2006).  Perkecambahan  biji  pada  C.  nervosa  dalam  kondisi  asimbiotik  terjadi pada 44-100 hari (Shibu et al. 2012; Sonia et al. 2012). Perkecambahan biji pada genus  Coelogyne  dalam  kondisi  asimbiotik  sekitar  14-60  hari  (Kathiyar  et  al. 1987; Ananthan et al. 2003; Basker et al. 2004; Sebastinraj et al. 2006; Nongrum et al. 2007; Naing et al. 2011; Sathiyadash 2014).
Perkecambahan biji anggrek dapat juga dirangsang dengan menggunakan inokulasi fungi sehingga lebih cepat berkecambah dan meningkatkan persentase survival  seedling  saat  aklimatisasi.  Hal  tersebut  telah  diteliti  pada perkecambahan  biji  anggrek  Grammatophyllum  speciosum,  terjadi  perubahan warna  menjadi  hijau  pada  30  hari  setelah  medium  diinokulasi  dengan  fungi (Salifah  et  al.  2011).  Perkembangan  protocorm  pada  Coelogyne  nervosa tergantung pada keberadaan fungi  Epulorhia epidendreae, demikian juga pada Habenaria macroceratitis (Stewart and Kane 2006).

## 3.4. Pelestarian  anggrek  C.  pandurata  berbasis  komunitas  masyarakat lokal
Ekosistem  hutan  hujan  tropis  merupakan  habitat  utama  anggrek  C. pandurata. Labellum bunga anggrek berwarna hitam sehingga menyimpan gen spesifik  dan  mempunyai  keunikan  bagi  peneliti  dan  pecinta  anggrek. Berdasarkan hasil pengamatan terdapat gradasi warna hitam, corak dan ukuran bunga bervariasi, sehingga perlu dilakukan konservasi supaya plasma nutfah C. Pandurata  tetap  lestari.  Minat  pecinta  anggrek  C.  pandurata  semakin  besar, sehingga perilaku mengambil langsung anggrek spesies dari habitat dan hutan semakin  meningkat  di  wilayah  Palangka  Raya,  Tewah,  Muara  Teweh,  dan kabupaten lain di Kalimantan Tengah. Transaksi jual beli anggrek spesies yang masih bebas dilakukan serta pengambilan anggrek dengan membawa sebagian pohon  yang  menjadi  inangnya  berdampak  bukan  hanya  populasi  berkurang tetapi juga mengancam kelestarian hutan.
Pemerintah telah mengatur dan menyatakan bahwa anggrek C. pandurata termasuk  tumbuhan  yang  dilindungi  berdasarkan  PP  RI  No  7  Tahun  1999. Perdagangan/penjarahan  tumbuhan  anggrek  C.  pandurata  telah  melanggar Undang-Undang No 5 tahun 1990 tentang Konservasi Sumberdaya Alam Hayati dan  Ekosistemnya,  Pasal  21  ayat  (1)  huruf  (a  dan  b)  dinyatakan  mengambil, menebang,  memiliki,  merusak,  memusnahkan,  memelihara,  mengangkut,  dan memperniagakan  tumbuhan  yang  dilindungi  atau  bagian-bagiannya  dalam keadaan  hidup  atau  mati.  Upaya  perlindungan  terhadap  lingkungan  hidup
dilakukan  melalui  tindakan  preventif  berupa  penerapan  suatu  syarat-syarat yang  harus  dipenuhi  sebelum  usaha  atau  kegiatan  dilakukan.  Pelanggaran terhadap  ketentuan  yang  ada  dilakukan  tindakan  represif  berupa  sanksi administrasi,  perdata  atau  pidana.  Upaya  preventif  melalui  penyuluhan  dan sosialisasi  kepada  masyarakat  sekitar  hutan  serta  penjagaan  posko.  Upaya represif  dengan  penangkapan  dan  penyitaan  terhadap  masyarakat  yang memiliki  dan  menyimpan  tumbuhan  yang  dilindungi.  Peraturan  tersebut menunjukkan  hasil  yang  positif.  Namun  program  pemanfaatan  mengalami hambatan terutama disebabkan oleh masih terbatasnya peraturan perundang- undangan,  kesadaran  dan  persepsi  masyarakat  terhadap  bidang  konservasi, pengetahuan ekologi tumbuhan liar dan tenaga terampil dibidang pengelolaan tumbuhan liar (Sumual 2011).
Faktor-faktor  yang  menyebabkan  anggrek  C.  pandurata  semakin  langka antara  lain  faktor  ekonomi  (keuntungan  yang  berlipat  ganda  bila diperdagangkan),  kurangnya  pemahaman  masyarakat  tentang  peraturan  atau undang-undang yang berlaku, minimnya penyuluhan dari BKSDA dan lembaga terkait  tentang  tumbuhan  yang  dilindungi,  kurangnya  pengamanan  BKSDA dalam  penjagaan  kawasan  konservasi  yang  sangat  luas,  ringan  hukuman  bagi penjarah  serta  kurangnya  kesadaran  masyarakat  akan  pentingnya  plasma nutfah anggrek C. pandurata (Sumual 2011).  Kepunahan plasma nutfah anggrek menjadi tanggung jawab semua masyarakat sebagai warga negara dan pecinta anggrek.  Budi  daya,  memelihara  dan  mengembangbiakkan  anggrek  menjadi salah satu langkah konservasi.
Konservasi  ex-situ  oleh  pengepul  dan  upaya  budi  daya  konvensional anggrek spesies di Palangka Raya telah dilakukan pada tiga tempat yaitu di jalan Temanggung  Tilung  XIII,  beberapa  pedagang  tanaman  hias  di  Jalan  Lambung Mangkurat  dan  jalan  Yos  Sudarso.  Selain  itu,  budi  daya  dan  pemeliharaan anggrek  spesies  juga  dilakukan  di  lingkungan  kantor  Gubernur  Kalimantan Tengah  dan  para  pecinta  anggrek  dari  bermacam-macam  profesi.  Tindakan konservasi ex-situ tersebut belum efektif bila tidak disertai langkah konservasi secara in-situ.
Eksploitasi  anggrek  spesies  oleh  masyarakat  tanpa  memperhatikan kelestarian  hutan  menjadi  masalah,  sehingga  perlu  dilakukan  tindakan konservasi. Konservasi anggrek C. pandurata secara in-situ hanya dapat berhasil dan berkesinambungan dengan melibatkan masyarakat di sekitar wilayah hutan, misalnya  di  kawasan  hutan  sekitar  daerah  aliran  sungai  Kahayan  dan  Hutan Pendidikan  Universitas  Palangka  Raya.  Peran  eksploitor,  konservator,  dan rehabilitator  melalui  pemberdayaan  masyarakat  lokal  lebih  efektif  dibanding konsep  konservasi  secara  terpusat.  Semakin  banyak  gerakan  komunitas  lokal
pelestari  anggrek  spesies  yang  potensial  di  tingkat  bawah  maka  akan mempermudah jalannya upaya konservasi.
Upaya  adat  dalam  melestarikan  C.  pandurata  telah  dilakukan  oleh  suku dayak  Benuah  di  Kalimantan  Timur  yang  sangat  menghormati  keberadaan anggrek hitam. Suku tersebut berkeyakinan bahwa anggrek hitam mempunyai daya mistis sehingga tidak diperbolehkan mengambil dan mencuri dari kawasan hutan  (Sumual  2011).  Komunitas-komunitas  potensial  di  kawasan  habitat anggrek  alam  atau  yang  berbatasan  dengan  habitat  anggrek  harus  menjadi prioritas awal untuk dibina dan diberdayakan. Hal ini karena komunitas tersebut yang  berhubungan  langsung  dengan  kelestarian  habitat  anggrek.  Masyarakat lokal di sekitar hutan harus berpikir lebih jauh supaya potensi wilayahnya tidak langsung  dibawa  keluar  dari  wilayahnya.  Masyarakat  lokal  yang  menjual anggrek alam dengan harga tinggi bukan langkah efektif mengatasi kelestarian anggrek (Syahril 2013).
Pembinaan  dan  pemberdayaan  melalui  kegiatan  pengenalan  spesies anggrek, teknik budi daya, pemahaman konservasi, penanaman anggrek hitam ke  habitatnya  dan  ilmu-ilmu  yang  mendukung  perlu  dilakukan.  Sasaran ditujukan untuk masyarakat lokal di daerah sekitar habitat anggrek, pengepul dan penjual serta masyarakat pecinta anggrek spesies. Penguatan kelembagaan komunitas masyarakat lokal sekitar habitat dan pecinta anggrek spesies perlu didukung  oleh  institusi,  universitas,  LSM,  dinas  terkait  dan  investor  lokal. Komunitas lokal dan komunitas adat yang telah ada didorong untuk mempunyai tanggung  jawab  moril  dalam  penjagaan  kelestarian  anggrek  spesies  di habitatnya.  Rasa  memiliki  dengan  tidak  mengeksploitasi  perlu  dipupuk  dan ditingkatkan. Rasa ingin melindungi  kekayaan plasma  nutfah  anggrek sebagai warisan  yang  berkesinambungan  juga  perlu  dilakukan  komunitas  masyarakat lokal.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan  membeli  anggrek  spesies  yang  telah dibudidayakan dan bukan anggrek spesies yang diambil dari alam. Pelestarian anggrek  C.  pandurata  dan  anggrek  spesies  lainnya  akan  berjalan  apabila memberi  manfaat  yang  nyata  bagi  masyarakat  lokal  dan  masyarakat  pecinta anggrek.

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
Morfologi bunga asal Tewah mempunyai lidah lebih hitam, bulu halus dan ornamen  pada  lidah  lebih  jelas.  Perawakan,  panjang  dan  lebar  bulbus  serta panjang dan lebar daun yang berasal Tewah juga lebih besar.  Pada 10 HST (Hari Setelah Tanam) perkecambahan di semua perlakuan terjadi perubahan warna serbuk biji kuning menjadi hijau. Pro-meristem mengalami diferensiasi menjadi dua kutub yaitu kutub calon akar pada daerah suspensor dan kutub calon tunas. Rerata kecepatan muncul protocorm pada 21 HST.
Pertumbuhan  seedling  mulai  terlihat  pada  umur  8  MST  (Minggu  Setelah Tanam) pada perlakuan I, II, dan IV. Pada perlakuan III seedling tumbuh dengan tunas berukuran 0,5 cm terjadi pada 9 MST. Pada perlakuan V meskipun seedling muncul pada 11 MST,  namun perawakan sehat, kuat  dan proporsional antara tunas  dan  akar.  Komponen  kimia  yang  terkandung  dalam  tomat  dan  BAP berperan mempercepat pembelahan sel pada meristem akar dan tunas.
Komunitas  masyarakat  lokal  dan  hutan  adat  menjadi  prioritas  awal pembinaan  dan  pemberdayaan  melalui  kegiatan  pengenalan  anggrek,  teknik budi daya, pemahaman konservasi serta penanaman ke habitat, sehingga plasma nutfah dan konservasi in-situ lestari berkesinambungan.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Abraham A and Vatsala P. 1981. Introduction to orchids. Tropical Botanic Garden and Research Institute. Trivandrum.
Ananthan  R,  Narmatha  BV,  Jeyakodi  L  and  Jayakalaimathy  K.  2003.  Mass propagation of Coelogyne mossiae, an endemic orchid. In: Madhystha MN (Ed.).  Prospectus  and  problems  of environment  across  the  millennium. Daya Publishing House. New Delhi. p 267-274.
Arditti J. 1966. Orchids. Scientific American 214:70–78. Arditti  J.  1977.  Clonal  propagation  of  orchids  by  means  of  tissue  culture,  a manual. In: Orchid Biology Reviews and Prospectives. Cornell University Press.  New York. p 203–293.
Arditti J and Ernst R. 1993. Micropropagation of orchids. John Wiley & Sons, Inc.
New York. p. 682.
Balasubramanian  V  and  Murugesan  M.  2004.  A  note  on  the  commercially exploited  medicinal  plants  of  the  Velliangiri  Hills,  Coimbatore  District, Tamil Nadu. Ancient Science of Life Journal 23:9-12.
Basker C, Deepa MA and Narmatha BV. 2004. Asymbiotic seed germination and seedling  development of  Coelogyne stricta-an endemic orchid. Journal of Non Timber Forest Products 11:120-124.
Chen YC, Chang C and Chang WC. 2000. A reliable protocol for plant regeneration from callus culture of Phalaenopsis. In Vitro Cell. Dev. Biol. Plant 36:420– 423.
George  EF  and  Sherrington  PD.  1984.  Plant  propagation  by  tissue  culture: handbook  and  directory  of  commercial  laboratories.  Exegetics  Ltd. Eversley.
Gu  Z,  Pauline,  CH,  Michael,  MN,  Arditti  J  and  Leslie.  1987.  The  effect  of benzyladenine  2,4-dichlorophenoxyacetic  acid,  and  indolacetic  acid  on shoot tip culture of Cymbidium. Lindleyana 2(2):88–90.
Ishii Y, Takamura T, Goi M and Tanaka M. 1998. Callus induction and somatic embryogenesis of Phalaenopsis. Plant Cell Rep 17:446–450.
Kathiyar RS, Sharma GD and Mishra RR. 1987. Asymbiotic seed germination and seedling  development  in  Coelogyne  punctulata  and  Aerides  multiflorum. Indian Forester 113:574-577.
Lestari  NKD  dan  Deswiniyanti  NW.  2015.  Perbanyakan  anggrek  hitam (Coeloegyne pandurata) dengan media organik dan Vacin dan Went secara in vitro. Jurnal Virgin 1:30-39.
Murdad R, Hwa KS, Seng CK, Latip MA, Aziz ZA and Ripin R. 2006. High frequency multiplication of Phalaenopsis gigantea using trimmed bases protocorms technique. Scientia Horticulturae 111:73–79.
Naing AH, Chung JD, Park IS and Lim KB. 2011. Efficient plant regeneration of endangered  medicinal  orchid,  Coelogyne  cristata  using  protocorm  like bodies. Acta Physiologia Plantarum 33:659-666.
Nongrum  I,  Kumaria  S  and  Tandon  P.  2007.  Influence  of  in  vitro  media  on asymbiotic germination, plantlet development and ex vitro establishment of  Coelogyne  ovalis  Lindl.  and  Coelogyne  nitida  (Wall.  ex  Don.)  Lindl [Proceeding].  Proceedings  of  Indian  National  Science  Academy  73:205- 207.
Park  SY,  Yeung  EC,  Chakrabarty  D  and  Paek  KY.  2002.  An  efficient  direct induction  of  protocorm-like  bodies  from  leaf  subepidermal  cells  of Doritaenopsis hybrid using thin-section culture. Plant Cell Rep 21:46–51.
PP RI (Peraturan Pemerintah Republik Indonesia) Nomor 7 Tahun 1999 tentang pengawetan jenis tumbuhan dan satwa.
Salifah HAB, Muskhazli M, Rusea G and Nithiyaa P. 2011. Variation in mycorrhizal specificity  for  in  vitro  symbiotic  seed  germination  of  Grammatophyllum speciosum Blume. Sains Malaysiana 40:451-455
Sathiyadash K, Muthukumar T, Murugan SB, Sathishkumar R  and Pandhey RR.
2014.  In vitro symbiotic seed germination of South Indian endemic orchid Coelogyne nervosa. Mycoscience 55:183-189.
Sebastinraj J, Brito JJ, Robinson PJ, Kumar VD and Kumar SS. 2006. In vitro seed germination and plantlet generation of Coelogyne mossiae Rolfe. Biological Research 5:79-84
Shibu  S,  Devi  C,  Wesley  S  and  Moin  S.  2012.  Ex  situ  conservation  of  endemic orchids  of  Western  Ghats,  Tamil  Nadu,  India  via  asymbiotic  seed germination. Advanced Applied Science Research 3:3339-3343.
Sonia A, Augustine J and Thomas DT. 2012. Asymbiotic seed germination and in vitro  conservation  of  Coelogyne  nervosa  A.  Rich.  an  endemic  orchid  to Western Ghats. Physiology and Molecular Biology of Plants 18:245-251.
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Stewart SL and Kane ME. 2006. Asymbiotic germination and in vitro seedling development  of  Habenaria  macroceratitis  (Orchidaceae),  a  rare  Florida terrestrial orchid. Plant Cell Tissue and Organ Culture 86:147-158.
Strickberger MW. 1985. Genetics, third edition. Macmillan Publishing Company. New York.
Sumual  OR.  2011.  Upaya  Perlindungan  Anggrek  Hitam  (Coelogyne  pandurata Lind)  di  Cagar  Alam  Kersik  Luway  ditinjau  dari  UU  No.  5  Tahun  1990 tentang Konservasi Sumberdaya alam Hayati dan Ekosistemnya ⦋ Skripsi ⦌ . Fakultas Hukum, Universitas Mulawarman. Samarinda. Syahril R. 2013. Melestarikan anggrek langka dari puspa pesona sampai anggrek tebu ⦋ Skripsi ⦌ . Fakultas Pertanian, Universitas Hasanudin. Makassar. Undang-Undang  Nomor  5  tahun  1990  tentang  konservasi  sumberdaya  alam hayati dan ekosistemnya.
Vajrabhaya T. 1997. In: Arditti J. (Ed.). Orchid Biology Part I. Cornell University Press. New York. pp 179–201.
Yam TW, Ernst R, Arditti J and Ichihashi S. 1991. The effects of complex additives and  4-dimethylamino  pyridine  on  the  proliferation  of  Phalaenopsis protocorms. Lindleyana 6(1):24–26.