Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.9, No.1, Mei 2020, pp. 20-25 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338–5634 (Print)

## Teratogeneous Effects of Gynuraprocumbens (Lour.) Merr. Ethanol Extract Against Musculus Fetal
Rahimatul Uthia 1* , Riza Anggraini 2 , Fitra Fauziah 2 , Ira Oktaviani RZ 1 Riau Health Polytechnic of The Indonesian Health Ministry (Poltekkes Kemenkes Riau) 1 , STIFARM Padang 2 rahimatul@pkr.ac.id

## Abstract
This  study  looked  at  the  teratogenous  effects  of  ethanol  extracts  of Gynuraprocumbens (Lour.) Merr. on the white mice fetus. Experimental animals consisted  of  24  mices,  4  male  mices  and  20  female  mices,  divided  into  4 groups,  namely  the  negative  control  group,  ethanol  extracts  of Gynuraprocumbens (Lour.)  Merr.  150  mg/kgBW;  300  mg/kgBW;  and  600 mg/kgBW.  Provision  is  made  from  the  6 th day  until  the  15 th day  of pregnancy.  Laparactomy  is  carried  out  on  the  18 th day  of  pregnancy.  The parameters  observed  were  body  weight  of  mices,  number  of  fetuses, average  fetal  weight,  and  macroscopic  observation  of the  fetus.  The  results showed that the parent's body weight, number of fetuses, and average fetal weight  were  significantly  different  (sig  <0.05).  Macroscopic  observation  of the fetus obtained slow growth in ethanolic extracts dose of 600 mg/kgBW. This  study  can  be  concluded  that  the  ethanol  extract  of Gynuraprocumbens (Lour.)  Merr.has  a  teratogeniceffect  on  the  fetus  of  white mice . Keywords: Teratogeneous ; Gynuraprocumbens ( Lour.)Merr.); Fetal

## Abstrak
Penelitian  ini  melihat  efek  teratogen  ekstrak  etanol  daun  sambung  nyawa ( Gynuraprocumbens (Lour.)  Merr.)  terhadap  fetus  mencit  putih.  Hewan percobaan  terdiri  dari  24  ekor,  4  ekor  mencitjantan  dan  20  ekor  mencit betina, dibagi menjadi 4 kelompok yaitu kelompok control negatif, kelompok ekstrak etanol daun sambung nyawa 150 mg/kgBB; 300 mg/kgBB; dan 600 mg/kgBB. Pemberian sediaan dilakukan dari  hari ke-6 sampai dengan hari ke-15  kehamilan.  Laparaktomi  dilakukan  pada  hari  ke-18  kehamilan. Parameter yang diamati yaitu berat badan induk mencit, jumlah fetus,  berat rata-rata  fetus,  dan  pengamatan  fetus  secara  makroskopis.  Hasil  penelitian menunjukkan  berat  badan  induk,  jumlah  fetus,  dan  berat  rata-rata  fetus berbeda secara signifikan (sig<0,05). Pengamatan fetus secara makroskopis diperoleh  pertumbuhan  lambat  pada  ekstrak  etanol  daun  sambung  nyawa dosis 600  mg/kgBB. Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun sambung nyawa memiliki efek teratogen pada fetus mencit putih Kata Kunci Teratogen; Gynuraprocumbens ( Lour.)Merr.); Fetus

## Article Info

## Article history
Received date: 2020-06-03 Revised date: 2020-06-18 Accepted date: 2020-06-19
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.9, No.1, Mei 2020, pp. 20-25 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338–5634 (Print)

## PENDAHULUAN
Sambung nyawa (Gynura  procumbens (Lour.) Merr . )  merupakan  tanaman  herba  yang tersebar  luas  di  negara-negara  Asia  tropis seperti China, Thailand, Indonesia, Malaysia, dan  Vietnam  secara  tradisional.  Tanaman sambung  nyawa  ( Gynura  procumbens (Lour.) Merr.)  merupakan  tanaman  obat  yang mengandung senyawa kimia, seperti flavonoid,  sterol  tak  jenuh,  triterpenoid, polifenol,  saponin, steroid, asam  klorogenat, asam  kafeat,  asam  vanilat,  asam  para kumarat,  asam  para  hidroksi  benzoate  dan minyak atsiri [1].
Alkaloid  merupakan  zat  antiproliferatif, dimana zat antiproliperatif dapat mengurangi jumlah oosit yang
mengalamiovulasi  sehingga  mempengaruhi penampilan  reproduksi  mencit.Tanaman  ini digunakan  masyarakat  untuk  pengobatan berbagai  macam  penyakit  seperti  penyakit ginjal,  rematik,  diabetes  mellitus,  sembelit, dan hipertensi [2].
Beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan menunjukkan  bahwa  tanaman  sambung ( Gynura  procumbens (Lour.)  Merr.)  memiliki aktivitas
farmakologi diantaranya antiinflamasi [3], antihipertensi [4],
antioksidan  [5],  antidiabetes  [6],  dan kemoterapi  pada  sel  kanker  [7].Obat-obat yang  mempunyai  efek  sitotoksik,  berpotensi untuk  mematikan  sel  sehingga  obat-obat yang mempunyai aktivitas antikanker berpotensi teratogen yang dapat menyebabkan  kelainan  atau  cacat  pada embrio yang dikandung [8].
Daun  sambung  nyawa  banyak  digunakan untuk berbagai pengobatan tetapi penelitian  mengenai  uji  efek  teratogen ekstrak  etanol  daun  sambung  nyawa ( Gynuraprocumbens (Lour.)  Merr.)  terhadap fetus  mencit  putih  belum  pernah  dilakukan, sehingga  penulis  tertarik  untuk  meneliti apakah daun sambung nyawa ( GynuraProcumbens (Lour.)  Merr.)  aman dikonsumsi  oleh  ibu  hamil  pada  dosis
tertentu.  Hal  inilah  yang  mendasari  penulis untuk  melakukan  pengujian  mengenai  uji efek teratogen ekstrak etanol daun sambung nyawa ( Gynuraprocumbens (Lour.)
Merr.)
terhadap  fetus  mencit  putih  agar  diketahui tingkat keamanannya apabila mengkonsumsi daun  sambung  nyawa  diwaktu  hamil  pada dosis tertentu dapat menyebabkan terganggunya  pertumbuhan  fetus  sehingga dapat dihindari untuk menjaga kelangsungan  perkembangan  pada  fetus tersebut.

## METODE Alat
Alat-alat yang digunakan  pada  penelitian ini  adalah  timbangan  analitik  (Ohaus), penguap  putar  (Shimazu),  wadah  maserasi, kain  flanel,  kertas  saring,  krusporselen, timbangan  hewan  (Ohaus),  wadah  hewan, gelasukur  (Iwaki),  beaker  glass  (Iwaki), sonde (Terumo),  jarum oral (Terumo),  cawan petri (Iwaki), lumpang dan  stamfer,  corong (Iwaki),  pot  salep,  cawan  penguap,  kaca arloji  (Duran),  penangas  air  (Memmert), batang  pengaduk  (Meiden),  alat  bedah hewan, serta alat spektrofotometer (Shimazu®).

## Bahan
Bahan-bahan    yang    digunakan    pada penelitian  ini  adalah  daun  sambung  nyawa, etanol  70    (PT  Brataco), n-Heksan (  PT Brataco),  etilasetat  (PT  Brataco),  asam format  (PT  Brataco),  air  suling  (PT  Brataco), kloroform  (PT  Brataco)  asamklorida  (PT Brataco),  asamsitrat  P  (PT  Brataco),  asam Borat  (PT  Brataco), pakan  ternak  ayam  (Hi- Pro-Vite  511)  (PT  Charoen  Pokphand), Natrium  Carboxy  Methyl  Cellulose (NaCMC), silika  gel  60  F 254 (Merck),  formaldehid  (PT Brataco), Kalium Hidroksida  (Merck), benzen (PT  Brataco),  toluen  (PT  Brataco),  asam asetat (Merck), alizarin merah (PT Brataco).
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.9, No.1, Mei 2020, pp. 20-25 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338–5634 (Print)

## Cara Kerja
1. Pembuatan ekstrak etanol daun sambung nyawa Ekstrak dibuat dengan cara mengeringkan 3 kg daun sambung nyawa segar dengan cara dikering  anginkan,    kemudian  didapatkan simplisia  kering      yang  dihaluskan.    Dari proses    ini    didapatkan  simplisia  sebanyak serbuk  daun  sirih  merah  didapatkan  298,9 gram,    ekstrak  kental    36,045  gram. Kemudian  masukan  serbuk  simplisia  kering ke  dalam  botol  reagen  yang  gelap, tambahkan  pelarut  (etanol  70  %).  Rendam selama  6  jam  pertama  sambil  sekali-kali diaduk,  kemudian  diamkan  selama  18  jam pada    temperatur    ruangan  (kamar). Pisahkan  maserat  dengan  cara  filtrasi menggunakan  kain  flanel,  ulangi  proses penyarian  sebanyak  dua  kali  denganjenis da  jumlahpelarut  yang  sama  (remaserasi). Kumpulkan semua maserat kemudian dipekatkan  dengan rotary  evaporator sampai  didapatkan  ekstrak  kental.  Setelah itu hitunglah rendemen ekstrak [9].
2. Pengujian efek teratogen pada mencit Hewan  uji  dipilih  sebanyak  20  ekor  mencit putih  betina  dan  4  ekor  mencit  putih  jantan untuk dibagi menjadi 4 kelompok percobaan yang terdiri dari kelompok I sebagai kontrol negatif  hanya  diberikan  suspensi  Na  CMC 0,5%,  kelompok  II,  Kelompok  III  dan kelompok  IV  diberikan  ekstrak  etanol  daun sambung  nyawa  dengan  variasi  dosis  150 mg/kg BB, 300  mg/kg BB,  dan  600  mg/kg BB  satu  kali  sehari  mulai  hari  ke  6  sampai hari ke 15 kehamilan.
Pada masa estrus hewan dikawinkan dengan perbandingan  jantan  dan  betina  1:  5. Mencit jantan dimasukkan ke kandang mencit betina  pada  pukul  empat  sore  dan dipisahkan  lagi  besok  paginya.  Pada  pagi harinya  dilakukan  pemeriksaan  sumbat vagina.  Sumbat  vagina  menandakan  mencit telah  mengalami  kopulasi  dan  berada  hari kehamilan  ke-0.  Mencit  yang    telah  hamil
dipisahkan dan yang belum kawin dicampur kembali dengan mencit jantan [10].
Sediaan  uji  diberikan  dengan  jarum  sonde secara peroral selama 10 hari berturut-turut mulai  hari  ke-6  sampai  hari  ke-15 kehamilan,  tanpa  mempuasakan  hewan. Laparaktomi  dilakukan  pada  hari  ke-18 kehamilan.  Mencit  dibunuh  dengan  cara dislokasi leher, kemudian lakukan laparaktomi  untuk  mengeluarkan  fetus mencit,  amati jumlah  fetus, fetus  yang masih hidup dan fetus yang telah mati. Setelah itu fetus  dikeringkan  dengan  tisu,  berat  masing –  masing  fetus  ditimbang  untuk  mengetahui berat rata–rata kelahiran.
Kemudian  sebagian  fetus  direndam  dengan larutan Bouin’s amati ada tidaknya kelainan secara  visual  misalnya  ekor,  daun  telinga, kelopak  mata,  jumlah  jari  kaki  depan  dan belakang, sisanya direndam dengan larutan alizarin  merah  digunakan  untuk  mewarnai skeletal  dan  pertulangan  mencit,  amati  ada tidaknya kelainan tulang [11].

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak kental yang diperoleh 36,045 gram, nilai  rendemen  yang  didapat  adalah sebesar 12,06 %.
Kadar  abu  ekstrak  etanol  daun  sambung nyawa  adalah  6,49  %.  Hasil  pengukuran kadar  air  ekstrak  etanol  daun  sambung nyawa adalah 9,42 % (susut pengeringan ini memenuhi  syarat  karena  tidak  melebihi  11 %).
Ekstrak  dibuat  menjadi  tiga  variasi  dosis yaitu  ;  150 mg/kg BB, 300 mg/kg BB, dan 600  mg/kg  BB  dalam  bentuk  suspensi Natrium metil carboxy selulosa 0,5%.
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.9, No.1, Mei 2020, pp. 20-25 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338–5634 (Print)
Gambar 1. Tanaman Sambung Nyawa.
Tabel 1. Jumlah  fetus  pada masing-masingsediaan uji No mencit Jumlah fetus Kontrol negatif Dosis 150 mg/kgBB Dosis 300 mg/kgBB Dosis 600 mg/kgBB 1 11 7 10 6 2 7 8 7 6 3 9 10 8 10 4 10 7 10 14 5 8 8 8 11 Jumlah 45 40 43 47 Rata- rata 9 8 8,6 9,4 SD 1,5811 1,2247 1,3416 3,4351 Data di atas kemudian diolah menggunakan metode pengolahan data statistik menggunakan  ANOVA  satu  arah.  Dari analisa  data  diketahui  bahwa  ada perbedaan  secara  signifikan  antara  jumlah fetus  pada  kelompok  kontrol  dengan kelompok uji (p < 0,05)
Tabel 2.
Berat badan rata-rata fetus No mencit Berat badan rata-rata fetus (g) Kontrolnegati f Dosis 150 mg/kg BB Dosis 300 mg/kg BB Dosis 600 mg /kg BB 1 1,492 1,325 1,145 0,941
2 1,561 1,296 1,115 0,757 3 1,483 1,321 1,036 0,428 4 1,481 1,325 1,097 0,447 5 1,397 1,276 1,054 0,392 Jumla h 7,414 6,543 5,447 2,965 Rata- rata 1,482 1,308 1,089 0,593 SD 0,058 0,021 0,044 0,257 Data  di  atas  juga  kemudian  diolah menggunakan  metode  pengolahan  data statistik  menggunakan  ANOVA  satu  arah. Dari  analisa  data  diketahui  bahwa perbedaan  secara  signifikan  antara  berat badan fetus pada kelompok kontrol dengan kelompok uji   p < 0,05.
Dalam  penelitian  ini  tidak  terdapat perbedaan antara pertulangan kelompok uji dengan  kelompok  kontrol  (Gambar  2  dan 3).
Gambar 2. Fetus yang direndamdenganlarutan Alizarin merah pada kelompokkontrol.
Gambar 3. Fetus yang direndamdenganlarutan Alizarin merah pada kelompokEkstraketanoldaunsambungnyawa.
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.9, No.1, Mei 2020, pp. 20-25 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338–5634 (Print)
Jadi  dari  pengamatan  terhadap  hasil perendaman  dengan  larutan  Alizarin  merah dapat  disimpulkan  bahwa  sediaan  tidak menimbulkan  cacat  pada  fetus  secara makroskopis,  sedangkan  dari  pengamatan terhadap  hasil  perendaman  dengan  larutan Bouin’s  diperoleh  pertumbuhan  kerdil  pada Dosis 600 mg/KgBB. Untuk  mengamati  keadaan  morfologi  dan adanya celah pada langit-langit maka fetus direndam dalam larutan Bouin’s sampai fetus mengeras  dan  berwarna  kuning.  Dari  hasil perendaman tersebut dapat diamati kelopak  mata,  ekor,  daun  telinga,  dan  jari- jari.  Semua  hasil  pengamatan  pada kelompok uji dibandingkan dengan kelompok  kontrol  tidak  terdapat  adanya perbedaan (Gambar 4, 5 dan 6).
Gambar 4. Tidakterdapatperlubangan pada langit- langit pada fetus yang direndamlarutanBouins.
Gambar 5. Fetus yang direndamdenganlarutanBouin’s pada kelompokKontrol.
Gambar 6. Fetus yang direndamdenganlarutanBouin’s pada kelompokDosis 600 mg/kg BB.

## SIMPULAN
Dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat diambil  kesimpulan  bahwa  pemberian ekstrak  etanol  daun  sambung  nyawa ( Gynura procumbens (Lour.)Merr.) menyebabkan  teratogen.  Pada  Ekstrak Etanol  daun  sambung  nyawa (Gynura procumbens (Lour.)Merr.)  600  mg/kg  BB terjadi pertumbuhan lambat pada fetus.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]    Fadli, M. Y,“Benefits of sambungnyawa ( Gynuraprocumbens (Lour.) Merr.) substances as anticancer”, J Majority .vol 4. pp 50-53, 2015. [2]     Tan, H. L., Chan, K. G., Pusparajah, P., Lee, L. H., & Goh, B. H, “ Gynuraprocumbens :  An  Overview  Of the  Biological  Activities”, Frontiers  in Pharmacology , vol 52. pp 1-14, 2016.
[3]      Iskander,  M.,  Song,  Y.,  Coupar,  I., &Jiratchariyakul,  W,“ Antiinflamantory screening  of  the  medical  plant Gynuraprocumbens”, Plant  Foods  Hum. Nutr. Vol 57.pp 233-244, 2002.
[4]        Kim, M. J., Lee, H. J., Wiryowidagdo, S.,  and  Kim,  H.  K,  “ Antihypertensive effects of Gynuraprocumbens extract in
Jurnal Proteksi Kesehatan Vol.9, No.1, Mei 2020, pp. 20-25 ISSN 2580-0191 (Online), ISSN 2338–5634 (Print)
spontaneously  hypertensive  rats” ,  J. Med. Food. vol 9.pp 587-590, 2006.
[5]    Rosidah,  Yam,  M.,  Sadikun,  A.,  & Asmawi,  M, “Antioxidan  potential  of Gynuraprocumbens” ,  Pharm.  Biol.  vol 46. pp 616-625, 2008.
[6]        Hassan, Z.,  Yam, M. F.,  Ahmad, M.,  & Yusof, A. P. M, “ Antidiabetic properties and mechanism of action of Gynuraprocumbens  water  extract  in streptozotocin-induced  diabetic  rats” ,
Molecules.  vol  15.pp  9008-9023, 2010.
[7]    Jenie, I, R., Meiyanto, E,“Ko kemoterapi ekstrak etanolik daun sambung nyawa ( Gynuraprocumbens (Lour.) Merr) pada sel  kanker  payudara”,  Majalah
Farmasi  Indonesia.vol  18.  pp  81-87, 2007.
[8]    Sumastuti,  R  &  Sonlimar,  M,  "Efek Sitotoksik  Ekstrak  Buah  dan  Daun Mahkota  Dewa  ( Phaleriamacrocarpa (Scheff).  Boer.)  Pada  Tikus  Putih (Rattus  norvegicus L).  Galur  Wistar,
Skripsi,  Farmakologi  F.  Kedokteran UGM, Yogyakarta, 2002. [9] Departemen Kesehatan Republik Indonesia,  Parameter  standar  umum ekstrak  tumbuhan  obat.  Edisi  1. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2000.
[10]  Almady,  A,  Uji  aktivitas  vitamin Aterhadapefek  teratogen  warfarin pada  fetus  mencitputih.  Medan  :  USU Press, 2011.
[11]  Wilson,  J.G  and  Warkany,  J, Teratology  Principles  and  Techniques. Chicago : University of Chicago Press, 1975.