PENGARUH EKSTRAK ETANOL BUAH  PINANG YAKI (Areca vestiaria ) TERHADAP GAMBARAN MAKROSKOPIS ORGAN JANTUNG PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR

## WISTAR (Rattus norvegicus)
I Dewa Ayu Rake Anggraeni 1) , Widdhi Bodhi 1) , Herny Simbala 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Crowshaft  palm  nuts  (Areca  vestiaria),  from  the  Arecaceae  family,  have  been  used  by  the people of North Sulawesi for cancer medicine, diabetes, and male contraception.This study aims to see the effect of the consumption of crowshaft palm nuts extract on macroscopic description of cardiac organ in white mouse.The study was conducted using 12 male wistar rats, divided into four groups of doses,  administered  with  ethanol  extract  of  crowshaft  palm  nutsoraly  (7,2  mg/mL,  14,4  mg/mL, 21,6mg/mL),  and  one  group  as  negative  control  group  for  a  comparison.The  testing  period  was conducted  for  40  days,  with  observations  made  in  the  form  of  rat  body  weight,  macroscopic observation  of  cardiac  organ  and  observation  of  organ  weight.The  results  showed  that  the administered  ofcrowshaft  palm  nuts  extracts  did  not  cause  significant  changes  in  macroscopic description of cardiac organ.In the analysis of the research using One Way ANOVA test, the result of the test showed that there was no significant difference in the average of body weight weighing and rat organ weight (p> 0.05).It can be concluded that the ethanol extract of crowshaft palm nutsdid not affect the macroscopic description of cardiac organ.
Keywords: Crownshaft  palm  (Areca  vestiaria),  cardiac  macroscopic,  white  rat (Rattusnorvegicus)

## ABSTRAK
Pinang yaki (Areca vestiaria) termasuk familia Arecaceae, telah digunakan oleh  masyarakat Sulawesi  Utara  sebagai  obat  kanker,diabetes,  dan  kontrasepsi  pria.Penelitian  ini  bertujuan  untuk melihat  pengaruh  yang  ditimbulkan  dari  konsumsi  ekstrak    Pinang  yaki  terhadap  gambaran makroskopis  organ  jantung  pada  tikus  putih.Penelitian  dilakukan  menggunakan  hewan  percobaan tikus  putih  jantan  galur  wistar  berjumLah  12  ekor,  yang  dibagi  dalam  empat  kelompok  dosis  yang diberi  ekstrak  etanol  buah  Pinang  yaki  secara  oral  yaitu    (7,2mg/mL,  14,4mg/mL,  21,6mg/mL)  dan satu  kelompok    kontrol  negatif  sebagai  pembanding.  Masa  pengujian  dilakukan  selama  40  hari, dengan pengamatan yang dilakukan berupa pengamatan berat badan tikus, pengamatan makroskopis organ  jantung  dan  pengamatan  berat  organ.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  ektrak buah Pinang yaki tidak  menimbulkan perubahan yang signifikan pada gambaran  makroskopis organ jantung.Pada  analisis  penelitian  menggunanakan  uji  One  way  ANOVA  hasil    pengujian  tersebut menunjukkan tidak ada perbedaan yang bermakna pada hasil penimbangan rata-rata berat badan dan berat  organ  jantung  tikus  (p  >  0.05).  dapat  disimpulkan  ekstrak  etanol  buah  Pinang  yaki  tidak berpengaruh pada gambaran makroskopis organ jantung.
Kata Kunci : Pinang yaki (Areca vestiaria), makroskopis jantung, tikus putih (Rattus norvegicus)

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  Pinang yaki  ( Areca vestiaria )  di  Indonesia    digunakan  oleh masyarakat sebagai bahan obat tradisional. Di  Sulawesi  utara  masyaratat  setempat menggunakan  buah  Pinang  yaki  ( Areca vestiaria )    untuk    pengobatan  penyakit seperti  diabetes  dan  diare,  juga  suatu  obat kontrasepsi  pria.  Hasil  analisis  Fitokimia menunjukkan  bahwa  ekstrak  buah  Pinang yaki  ( Areca  vestiaria )      mengandung senyawa  tanin, flavonoid dan triterpenoid. Senyawa-senyawa tersebut berpotensi sebagai  agen  pendamping  kemoterapi (Simbala 2007).
Merujuk  dari  potensi  anti  kanker yang  dimiliki  oleh  buah  Pinang  yaki ( Areca  vestiaria )    yang  sudah  digunakan sebagai  obat  tradisional  oleh  sebagian masyarakat    menyebabkan  ketertarikan untuk    mengembangkan  obat  tradisional Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  menjadi Fitofarmaka. Karena biaya untuk pengobatan    kemoterapi    sangat  mahal mengakibatkan  beberapa  pengobatan  kini mulai diarahkan pada pengobatan tradisional  menggunakan    bahan  alam yang berpotensi sebagai agen kemopreventif dan    berpotensi  sebagai agen pendamping kemoterapi.
Obat  tradisional  telah    banyak digunakan  oleh  masyarakat  dalam  usaha pengobatan sendiri (self-medication), profesi  kesehatan/dokter  umumnya  masih enggan untuk meresepkan ataupun menggunakannya.
Alasan
utama keengganan profesi kesehatan untuk meresepkan atau menggunakan obat tradisional  karena  bukti  ilmiah  mengenai khasiat  dan  keamanan  obat  tradisional pada  manusia  masih  kurang.(  Pramono 2002).
Berdasarkan  hal  tersebut  diatas, peneliti  tertarik  mengembangkan  obat tradisional  Pinang  yaki (Areca  vestiaria) menjadi Fitofarmaka. Dimana pengembangan  obat  tradisional  menjadi
Fitofarmaka harus melalui beberapa tahapan-tahapan  seperti  :  seleksi,  uji preklinik,  terdiri  atas  uji  toksisitas  dan  uji farmakodinamik  standarisasi  sederhana, penentuan  identitas,  pembuatan  sediaan terstandar dan uji klinik. ( Anonim, 2000).
Pada penelitian ini dilakukan uji farmakodinamik  secara  in  vivo  terhadap hewan coba yang bertujuan untuk  melihat pengaruh dari obat tradisional ekstrak buah Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )    terhadap gambaran makroskopis organ jantung pada tikus putih. pengamatan makroskopis yang dimaksud  ialah  pengamatan  organ  yang bisa  dilihat  dengan  mata  telanjang  tanpa bantuan alat pembesar.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ialah Alat: beaker gelas 500mL, batang pengaduk, blender (Philips),  kertas saring,  ayakan  200mesh,  aluminium  foil, rotary  evaporator (Bunchi),  timbangan analitik  (ADAM,KERN),  oven  (ecocell), corong  pisah,  gelas  ukur,  botol  kecil, hot plate, sonifikator  Janres  ultra  8060D-H), kulkas  pendingin,  cawan  petri,  rak penelitian, kandang tikus, wadah makanan tikus,  botol  minuman  tikus,  kawat  kasa, dadak  padi,  sonde  oral,  sarung  tangan lateks,  dispersible  10  cc  (One  Med), tempat  otopsi,  jarum  pentul,  gunting, pinset, pisau bedah dan toples.
Bahan    yang  digunakan  ialah  ialah buah  Pinang  yaki (Areca  vestiaria) yang sudah masak, etanol 96 % akuades, latutan CMC,  eter,    makanan  (pellet)  ayam  dan
tikus  putih  jantan  galur  wistar (Rattus norvegicus).

## Prosedur Kerja Pembuatan Simplisia
Tahap awal dilakukan pengumpulan  bahan  baku  buah      Pinang yaki (Areca vestiaria) . Buah  Pinang yaki (Areca  vestiaria) di  sortasi  basah  untuk memisahkan  kotoran  dan  bahan-bahan asing dari buah. Selanjutnya buah  Pinang yaki (Areca  vestiaria) dicuci  dibawah  air yang mengalir, ditiriskan kemudian dirajang  kecil-kecil  dengan  mengunakan pisau, selanjutnya dikeringkan dengan cara diangin-anginkan  selama  7  hari.  Sampel kering  kemudian  dihaluskan  mengunakan blender  dan  diayak  mengunakan  ayakan 200 mesh dan  didapatkan  serbuk  simplisia halus.
Pembuatan  Ekstrak  Buah  Pinang  yaki (Areca vestiaria)
Serbuk  dari  buah  Pinang  yaki (Areca  vestiaria) ditimbang  sebanyak  400 gr  kemudian  dimasukkan  didalam  wadah dan dimaserasi dengan pelarut etanol 96% sebanyak  1000  selama  5  hari  dan  di remaserasi  selama  2  hari,  larutan  tersebut disaring menggunakan kain sifon kemudian disaring dengan kertas Whatman No  42  dan  dimasukkan  kedalam  gelas erlenmeyer  untuk  dipisahkan  residu  dari filtrat  (Frengki  et  al.,  2014).  filtrat kemudian diuapkan menggunakan vacuum rotary evaporator pada suhu 40o C sampai diperoleh  ekstrak  etanol  yang  pekat. Ekstrak  etanol  pekat  kemudian  diuapkan didalam  oven  dengan  suhu  40o  C  sampai kental 1 x 24 jam, ektrak kental dari buah Pinang  yaki    (Areca  vestiaria)  di  timbang dan disimpan.
Pembuatan Larutan CMC 0,5 %
Larutan CMC dibuat dengan melarutkan  1g  CMC  ke  dalam  30  mL
aquadest dipanaskan sambil diaduk sampai homogen  kemudian  ditambahkan  dengan aquadest sampai volume 100mL,
kemudian didinginkan.

## Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Buah
Pinang yaki ( Areca vestiaria)
Dosis  pemakaian  ekstrak  buah Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria) dengan factor  konversi  dosis  dari  manusia  (70kg) ke  hewan  uji  (200g)  dengan  dikalikan 0,018  yaitu  7,2mg,  14,4mg  dan  21,6mg.
Ekstrak  buah    Pinang  yaki (Areca vestiaria) ditimbang  sesuai  dengan  dosis (0,72g,  1,44g,  dan  2,16g)  disuspensikan dengan  larutan  CMC  0,5%  dalam  labu ukur 100mL. Kemudian disonifikasi hingga homogen. Perlakuan Penelitian  dilakukan  perlakuan selama 40 hari, masing- masing konsentrasi  menggunakan  3  hewan  uji. Ekstrak buah Pinang yaki (Areca vestiaria) diberikan  sesuai  dengan  dosis,  yang diberikan secara oral dengan menggunakan  sonde  lambung  metal  dan dispo    10  mL  dengan  dosis  perhari  1cc sonde lambung dimasukkan melalui mulut sampai  esophagus,  dimasukkan  perlahan- lahan untuk menghindari refluks.

## Pembedahan
Tikus yang akan dibedah dimatikan dengan  cara    memasukkan  tikus  kedalam toples  yang  sudah  ditetesi  cairan  eter. Kemudian  Setelah  beberapa  saat  tikus  di pindahkan  di  letakkan  diatas  baki  parafin keempat  kaki  tikus  ditusuk  dengan  jarum untuk  mencegah  gerakan-gerakan  yang mengganggu pada saat pembedahan kemudian tikus siap di otopsi pembedahan diawali  dengan  membelah  bagian  perut bawah tikus hingga bagian dada, kemudian organ  diambil  keluar  dari  dalam  tubuh organ yang diambil ialah organ jantung.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambaran  Makroskopis    Tikus  Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Gambaran  makroskopis  tikus  putih jantan  galur  wiatar  ( Rattus  norvegicus) dapat dilihat pada Tabel 1 dibawah:
Tabel 1.  Gambaran makroskopis jantung  tikus putih jantan galur wistar
Pada  tabel  1.  Menunjukkan  bahwa gambaran  makroskopis    organ  jantung kelompok perlakukan memperlihatkan warna  merah  kecokelatan    sama  dengan kelompok  kontrol.  Konsistensi  jantung sama  yaitu  kenyal  sedangkan  berat  dan ukuran  bervariasi  antara  satu  kelompok dan kelompok lainnya.
Gambaran  makroskopis  tikus  putih jantan  galur  wistar (Rattus  norvegicus) kelompok kontrol negatif tidak
menunjukkan perubahan ataupun kelainan, jantung  tidak  mengalami  pengerasan, permukaan  halus  dan  berwarna  merah kecokelatan.  Pada  kelompok  perlakuan dosis  I,  dosis  II,  dan  dosis  III.  gambaran makroskopis  jantung    tikus  putih  jantan galur  wistar (Rattus  norvegicus) tidak menunjukkan  perubahan  ataupun  kelainan yang bermakna.  Jantung  tidak mengalami pengerasan,  permukaannya  halus  dan warnanya  terlihat  merah  kecokelatan.
Gambar 1. Kontrol                                                      Gambar 2. Dosis A400
Kelompok Hewan Uji Warna Konsistensi Berat Tikus Berat Organ Jantung Kontrol Merah kecokelatan Kenyal 165,333 0,682 A400 Merah kecokelatan Kenyal 131,666 0,571 A800 Merah kecokelatan Kenyal 137,666 0,623 A1200 Merah kecokelatan Kenyal 133,333 0,584
165,33 131,66 137,66 133,33 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 Kontrol A400 A800 A1200 BE RAT BAD AN (G RAM) KELOMPOK PERLAKUAN Chart Title
Salah  satu  organ  yang  memiliki fungsi  terpenting  adalah  jantung.  Jantung berfungsi  sebagai  alat  pompa  untuk mengedarkan  darah,  baik  ke  paru-paru maupun seluruh organ tubuh manusia yang lain.  Karna  pentingnya  fungsi  jantung  ini maka  jika  terjadi  suatu  gangguan  atau kerusakan pada organ ini akan mengakibatkan tergangunya seluruh kinerja  sistem  yang  ada  didalam  tubuh manusia. pada  penelitian  ini  pemberian ektrak  etanol                    buah  Pinang  yaki (Areca  vestiaria) selama  40  hari  tidak menimbulkan  perubahan  yang  signifikan, gambaran  makroskopis  jantung  tampak normal dan tidak berbeda bila dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol negatif  .  Hal  ini  menunjukan  bahwa ekstrak  etanol  buah  Pinang  yaki (Areca vestiaria) tidak memberi efek  yang dapat merusak jantung.
Pada  Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak Etanol  Daun  Klausena (Clausena  anisata Hook.f.) Hasil  pemeriksaan  mikroskopis terhadap  organ  jantung  hewan  percobaan
pada kelompok yang mendapatkan perlakuan secara deskriptif dapat dikatakan tidak  ditemukan  adanya  perubahan  yang berarti (Yusuf, 2011). Di dukung juga oleh hasil  penelitian Soeksmanto (2010), pada Uji  Toksisitas  Akut  Ekstrak  Air  Tanaman Sarang  semut  ( Myrmecodia  pendans ). Berdasarkan pengamatan patologi anatomi yang  dilakukan,  umumnya  pemberian dosis  ekstrak  air  tanaman  sarang  semut tidak menimbulkan kelainan yang menyebabkan  hewan  sakit.  Penampakan organ  jantung  yang  diamati  tampak normal.  Demikian  pula  pada  pengamatan mikroskopis,  menunjukkan  pemberian ekstrak  tanaman  sarang  semut,  tidak menyebabkan adanya kelainan yang berarti pada organ.
Hasil  Penimbangan  Berat  Badan  tikus Putih  Jantan  Galur  Wistar (Rattus norvegicus)
Data  rata-rata  hasil  penimbangan berat  badan  tikus  wistar  setelah  perlakuan dapat dilihat pada gambar 5.
Gambar 5 . Grafik rata- rata hasil penimbangan berat badan tikus wistar
Dari  grafik    hasil  penimbangan berat  badan  tikus  di  atas  dapat  di  lihat
bahwa  dari  keempat  kelompok    perlakuan yang    menunjukkan    penurunan  berat
badan  paling  rendah  terdapat  pada  dosis A400, sedangkan berat  badan  yang paling tinggi  terdapat  pada  kelompok  kontrol negatif  .  Akan  tetapi  perubahan  berat badan  pada  tikus  wistar  yang  mendapat perlakuan  tidak  begitu  berbeda,  bila dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol, untuk  itu  karena  data  berat  yang  didapat belum  bisa  memberikan  hasil  yang  pasti, maka  perlu  dilakukan  pengujian  secara statistic  untuk  melihat  apakah  terdapat perbedaan yang bermakna antara kelompok  perlakuan  terhadap  kelompok kontrol negatif.
Pengukuran  berat  badan  tikus adalah  salah  satu  data  pendukung  guna melihat  pengaruh  toksisitas.  Penimbangan berat  badan  hewan  uji  bertujuan  untuk mengetahui  kesehatan  hewan  uji  serta memantau  perubahan  berat  badan  pada hasil  rata  rata    penimbangan  berat  badan tikus  tiap  kelompok  perlakuan  diatas terdapat  perubahan  berat  badan  antara kelompok  perlakuan  dengan  kelompok kontrol negatif, terjadinya perubahan berat badan  tikus  dapat  dikarenakan  adanya proses  pertumbuhan  yang  dialami  oleh tikus,  dan  juga adanya  pengaruh pemberian ekstrak etanol buah Pinang yaki (Areca vestiaria).
Uji  toksisitas  buah  Pinang  yaki (Areca  vestiaria). menggunakan  Metode BSLT  (Brine  Shrimp  Lethality  Test) (Simbala,  2007).  pada  penelitian  tersebut konsentrasi  ekstrak  Pinang  yaki (Areca vestiaria). yang  digunakan  dalam  uji toksisitas  yaitu  400,  600,  800,  dan 1000ppm. dan hasil penelitian menunjukkan  ekstrak  biji  pinang  yaki (Areca  vestiaria). memiliki  potensi bioaktif,  dalam  hal  ini  berada  pada  nilai LC50  sebesar  334.99  ppm, berarti  pada konsenrasi tersebut menyebabkan kematian  50%  hewan  uji  Nilai  tersebut
menunjukkan  bahwa  secara  farmakologis bersifat toksik terhadap hewan uji.
penelitian  National  Centre  Institut (NCl) Amerika Serikat,  suatu ekstrak  atau fraksi  dari  suatu  tanaman  dianggap mempunyai  potensi  bioaktif  terhadap kematian  hewan  uji  jika  dinilai  LC50  < 1000  ppm,  hanya  spektrum  keaktifannya masih  sangat  luas,  semakin  kecil  nilai LC50nya, maka ekstrak tadi akan semakin toksik.  Hal  inilah  yang  menjadi  dasar adanya  penuruna  berat  badan  paling rendah  pada  kelompok  perlakuan  A400 (Meyer  et  al.  1982,  Solis  et  al. 1983).Didukung  oleh  hasil  penelitian Kuncarli  and  Djunarko  (2014),  uji toksisitas  subkronis  infusa  daun  Sirih merah  terhadap  gambaran  makroskopis jantung  pada  hasil  penelitiannya  pada pengukuran  berat  badan  tikus  jantan menunjukkan hasil yang berbeda bermakna  antara  kelompok  perlakuan  dan kontrol aquadest ,  terjadinya  perubahan berat  badan  dapat  dikarenakan  proses pertumbuhan  yang  dialami  oleh  tikus jantan  maupun  betina  dan  adanya pengaruh dari pemberian infusa daun sirih merah,  dan disimpulkan bahwa pemberian infusa  daun  Sirih  merah  maupun  kontrol pemberian aquadest menunjukkan peningkatan  dan  penurunan,  namun  tidak menunjukkan  hasil  perbedaan  yang bermakna.
Dari  hasil  pengujian  anova  pada pengujian  berat  badan  tikus  putih  jantan galur wistar (Rattus norvegicus)
menunjukkan  nilai  Sig  0,208  (p  >  0.05) artinya  tidak  ada  perbedaan  diantara perlakuan  secara  statistic.  Tidak  ada perbedaan  secara  statistik  menunjukkan bahwa  variasi  atau  keragaman  diantara kontrol  negatif,  perlakuan  dosis  A400, perlakuan dosis A800 dan perlakuan dosis 1200.  Sehingga  dari  hasil  uji  statistik  ini,
tidak ada perbedaan secara bermakna  pada berat  badan  tikus  kelompok  perlakuan terhadap  berat  badan  tikus  kelompok kontrol negatif.
Hasil  Penimbangan  Berat  Organ
Jantung  Tikus  Putih  Jantan  Galur
Wistar (Rattus norvegicus)
Data  rata-rata  hasil  penimbangan berat organ jantung tikus putih jantan galur wistar (Rattus norvegicus) setelah perlakuan  dapat  dilihat  pada  gambar  6  di bawah
Gambar 6 . Grafik rata- rata hasil penimbangan berat organ jantung   tikus putih jantan galur wistar ( Rattus norvegicus) hasil penimbangan di atas
menunjukkan  bahwa  hasil  rata  rata perubahan  berat  organ  jantung  pada kelompok  perlakuan  A400,  A800  dan A1200  tidak  begitu  berbeda  Bila dibandingkan  dengan  data  sebelumnya pada  rata-rata    berat  badan  tikus  wistar, yaitu    dari  keempat  kelompok    perlakuan yang    menunjukkan    penurunan  berat badan  paling  rendah  terdapat  pada  dosis A400, sedangkan berat badan paling tinggi terdapat  pada  kelompok    kontrol  negatif Akan  tetapi  perubahan  berat  badan  pada tikus  wistar  yang  mendapat  perlakuan tidak  begitu  berbeda,  bila  dibandingkan dengan  kelompok  kontrol  negatif,  untuk itu  karena  data  berat  yang  didapat  belum bisa  memberikan  hasil  yang  pasti,  maka perlu  dilakukan  pengujian  secara  statistic
untuk  melihat  apakah  data  rata-rata  hasil yang didapatkan  terdapat  perbedaan yang bermakna  antara  kelompok  perlakuan terhadap kelompok kontrol negatif.
Dari  hasil  pengujian  anova  pada pengujian  berat  organ  jantung  tikus  putih jantan  galur  wistar (Rattus  norvegicus) menunjukkan  nilai  Sig  menunjukkan  nilai Sig  0,683  (p  >  0.05)    artinya  tidak  ada perbedaan  secara  statistic.  Tidak  ada perbedaan  secara  statistic  menunjukkan bahwa  variasi  atau  keragaman  diantara kontrol  negatif,  perlakuan  dosis  A400, perlakuan dosis A800 dan perlakuan dosis 1200..  Sehingga  dari  hasil  uji  statistik  ini, tidak ada perbedaan secara bermakna pada berat  organ  Jantung  tikus  terhadap  berat organ Jantung tikus kontrol negatif.
0,68 0,57 0,62 0,58 0,5 0,52 0,54 0,56 0,58 0,6 0,62 0,64 0,66 0,68 0,7 Kontrol A400 A800 A1200 BE RAT ORG AN J AN TU N G (G RAM) KELOMPOK PERLAKUAN Chart Title

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang didapatkan  bahwa  ekstrak  etanol  buah Pinang  yaki (Areca  vestiaria  ) tidak berpengaruh terhadap
gambaran makroskopis  organ  jantung  pada  tikus putih jantan galur wistar (Rattus norvegicus) dan  pada  hasil  penimbangan rata-rata  berat  badan  dan  berat  organ Jantung  tikus di uji menggunakan uji One way ANOVA  Hasil    pengujian  tersebut menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna  pada  taraf  uji  0,05  antara  berat organ kelompok kontrol, dosis A400, dosis A800,  dan  dosis  A1200  (p>  0,05)  Hal  ini menunjukan  bahwa  ekstrak  etanol  buah Pinang  yaki (Areca  vestiaria) tidak memberi efek yang dapat merusak jantung.

## SARAN
Apabila melakukan penelitian yang sama  atau  sejenis  perlu  dilakukan pengamatan  histopatologi  pada  organ jantung  tikus  wistar,  agar  potensi keamanan suatu zat kimia lebih jelas serta dilakukan second  observer oleh  ahli patologi anatomi.
Apabila melakukan penelitian yang sama perlu dilakukan pengamatan makroskopis dan histopatologi pada organ organ vital seperti hati, ginjal dan lambung agar  potensi  ketoksikan    suatu  zat  kimia lebih jelas.

## DAFTAR PUSTAKA
Amaliyah,
R.F.2015.Uji Toksisitas Subkronik Ekstrak Air Daun Katuk (Sauropus  androgynus(L.)  Merr.) Terhadap Berat Jantung dan histology jantung tikus putih (Rattus norvegicus) Betina. Skripsi, Malang  :  Universitas  Islam  Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang.
Anonim.  2005.  Kebijakan  Obat  Nasional.
Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Anonim. 2006. Kebijakan Obat Tradisional Indonesia. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Kuncarli,I. Djunarko,I.2014 . Uji Toksisitas  Subkronis  Infusa  Daun Sirih  Merah  (Piper  Crocatum  Ruiz & Pav) Pada Tikus: Studi Terhadap  Gambaran  Mikroskopis Jantung    dan  Kadar  Sgot  Darah. Vol 11 No 2.
Listyorini,  I.  Puguh.2012.  Uji  Keamanan Ekstrak Kayu Jati (Tectona Grandis L.F)  Sebagai  Bio-Larvasida  Aedes Aegypti  Terhadap  Mencit.Skripsi, Semarang: Universitas Negeri Semarang. Mulyaningsih,B.  1999.  Uji  Toksisitas Minyak Atsiri jahe (Zingiber officenale  ) sebagai  antifilariasis pada  hewan  uji  mencit  dan  tikus. Vol 31 No 2.
Pramono  E.2002.  The  commercial  use  of traditional knowledge and medicinal  plants  in  Indonesia. Submitted  for  multi-stakeholder dialoque  on  trade,  intellectual property  and  biological  resources in Asia.
Sajoyono,  R.  2011. Efek  Perl  indungan Ekstrak Meniran (Phyllanthusniruri Linn.) Terhadap Kerusakan Histologi Lambung Mencit (Musmusculus) Yang Diinduksi Aspirin, Skripsi, Surakarta : FK UNS
Simbala.,  Rondonuwu  S.,  de  Queljoe  E. 2004. Keanekaragaman  Tumbuhan Obat di Kabupaten Bolaang Mongondow. Simbala, 2006. Kajian Etnobotani, Proksimat  dan  Fitokimia  Pinang yaki  (Areca  vestiaria  Giseke).
Eugenia 2006;12:173-183.
Simbala,  H.E.I.  2007. Keanekaragaman
Floristik dan pemanfaatan Sebagai Tumbuhan Obat di Kawasan
Konservasi  II  Taman  Nasional Bogani Nani Wartabone (Kabupaten  Bolaang  Mongondow, Sulawesi Utara). [Disertasi]. Institut Pertanian Bogor : Bogor. Simbala,  H.E.I.  2007.  Uji  Toksisitas  dan Uji Preklinik Areca vestiaria/Pinang yaki sebagai antifertilitas.
Soeksmanto, A. 2009. Uji Toksisitas Akut
Ekstrak  Air  Tanaman  Sarang Semut(Myrmecodia pendans)
Terhadap  Histologi  Organ  Hati Mencit. Vol 12 No 2.
Sumiwi  Adi,S.  Uji  Toksisitas  Subkronis Minyak  Atsiri  Kulit  Batang  Sintok
(Cinnamomum  sintoc  Bl.) Pada Tikus Putih Galur Wistar.
Permata Sari, W. 2010 . uji toksisitas akut campuran ekstrak etanol daun sirih (Piper  betle  L.)  dan  ekstrak  kering gambir  (  Uncaria  gambir  R.) terhadap  Mencit  putih  Jantan. Skripsi,  Jakarta:  Program  Studi Farmasi  Fakultas  Kedokteran  dan Ilmu  Kesehatan  Universitas  Islam Negri Syarif Hidayahtullah.
Yusuf,    H.  2011.  Uji  Toksisitas  Akut Ekstrak  Etanol  Daun  Klausena (Clausena anisata Hook.f.) . Vol 11 No 1.