KELIMPAHAN BAKTERI Vibrio sp. PADA AIR PEMBESARAN UDANG VANNAMEI ( Litopenaeus vannamei ) SEBAGAI DETEKSI DINI SERANGAN PENYAKIT VIBRIOSIS
THE ABUNDANCE OF Vibrio sp. BACTERIA ON ENLARGEMENT WATER OF WHITELEG SHRIMP ( Litopenaeus vannamei ) AS THE EARLY DETECTION OF VIBRIOSIS
Adnan Kharisma dan Abdul Manan
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
The  abundance  of  bacteria  is  an  activity  that  aims  to  determine  the  distribution  and  the abundance of  bacteria  in a water area, so  an effort to  control and prevent against these  bacteria  can  be made  to  avoid  it’s  wide  spread.  The  function  of  this  monitoring  activities  is  for  an  early  detection  of animal  health  conditions  that  is  the  white  leg  shrimp  due  to  bacterial  attack.  Given  the  importance  of health  level  in  the  cultivation  of  white  leg  shrimp, then  the  monitoring  activity  in  bacterial  abundance should  be  done  because  the  number  of  bacteria  found  in  aquatic  environments  shouldn’t  exceed  the minimum threshold number of bacteria that is 10 4 CFU/ml.
The purpose of this study case is to know the abundance of Vibrio sp. on white leg shrimp water augmentation.  Because  the  Vibrio  sp.  bacteria  is  known  as  the  opportunistic  pathogen  of  white  leg shrimp,  which  can  cause  disease  if  the  environmental  conditions  are  bad.  Working  methods  used  is descriptive method of data collection techniques include primary and secondary data.
The  stage  of  the  monitoring  activity  include:  (1)  Preparation  phase  which  includes  the preparation of equipment and materials and sterilization equipment and media. (2) Phase of making trisalt solvent  and  bacterial  culture  media.  (3)  Phase  of  retrieval  and  delivery  the  water  samples.  (4)  Phase planting  the  water  samples.  (5)  Phase  counting  the  bacteria.  (6)  Interpretation  the  results  of  the calculation.
Based  on  the  results  of  monitoring  the  abundance  of  bacteria  in  white  leg  shrimp  water augmentation  activity,  the  conclusion  is  the  abundance  of Vibrio sp.  on  white  leg  shrimp  water augmentation has exceeds the minimum threshold number of bacteria that is 10 4 CFU/ml, so the white leg shrimp culture is susceptible againts these Vibriosis disease.
Keywords : Vibrio sp., whiteleg shrimp, early detection

## Pendahuluan
Sektor  perikanan  di  Indonesia  sangat potensial  dan  mempunyai  prospek  yang  besar dalam  peningakatan  devisa  negara,  salah satunya adalah usaha budidaya udang vannamei ( Litopenaeus  vannamei ).  Permintaan  udang vannamei di pasar luar negeri yang sangat tinggi dapat  meningkatkan  devisa  negara  (Agustatik dkk.,  2003).  Usaha  budidaya  udang  vannamei baru  diperkenalkan  pada  tahun  2000  di Indonesia,  sejak  turunnya  produksi  udang windu.  Industri  budidaya  udang  windu  di Indonesia  telah  berkembang  sejak  tahun  1980 dan  mencapai  prestasi  yang  membanggakan pada  tahun  1994  sebagai  negara  yang memproduksi  dan  mengeksport  udang  windu terbesar  kedua  di  dunia.  Udang  windu  saat  ini tidak  berkembang  lagi  karena  terserang berbagai  macam  penyakit  udang yang  ganas seperti  penyakit white  spot atau  virus bintik putih (Chamberlain, 1991).
Permintaan  udang  vannamei  sangat besar  baik  pasar  lokal  maupun  internasional, karena  memiliki  keunggulan  nilai  gizi  yang sangat  tinggi  serta  memiliki  nilai  ekonomis yang  cukup  tinggi  menyebabkan  pesatnya budidaya udang vannamei (Mahbubillah, 2011). Hal  tersebut  menyebabkan  kemungkinan serangan penyakit pada udang vannamei sangat besar.  Penyakit  yang  ditimbulkan  oleh  bakteri, virus,  dan  jamur  dapat  terjadi  apabila  terjadi ketidakseimbangan  antara Host , Pathogen Agent ,  dan Environment .  (Zonneveld et  al.,
1991).  Pada  budidaya  udang,  penyakit  yang mudah  timbul  umumnya  disebabkan  oleh bakteri Vibrio sp. (Ruangpan dan  Kitao, 1991). Jenis  bakteri  ini  mampu  berkembang  dengan cepat  jika  bahan  organik  dalam  air  tambak banyak.  Menurut  Singh  (1986)  dan  Hameed (1993), apabila populasi Vibrio sp. lebih banyak dibanding  dengan  populasi  bakteri  yang  lain dapat menyebabkan penurunan tingkat
kelulushidupan  udang  pada  masa  pembenihan dan pembesarannya.
Chanratchakool et  al (1994)  dan Lightner et  al (1996)  menyatakan  bahwa fluktuasi  pH,  tingkat  oksigen,  temperatur, salinitas, kadar amonia, dan sulfat, serta bahan- bahan organik yang lain dapat sebagai penyebab stress  pada  udang  dan  memicu  terjadinya penyakit.  Namun,  peningkatan  jumlah  bakteri Vibrio sp. tetap  menjadi  penyebab  utama timbulnya penyakit pada  air pembesaran udang di  kolam.  Penerapan  manajemen  lingkungan merupakan  salah  satu  langkah  efektif  yang dapat ditempuh untuk  mencegah penularan dan penyebaran  penyakit  di  tambak  budidaya  ikan maupun  udang,  sebab  tingkat  kesehatan  ikan dan  udang  merupakan  faktor  yang  sangat menentukan dalam
usaha budidaya (Rosenberry,  1997).  Menurut  Taslihan  dkk (2004),  untuk  menjaga  agar  produksi  ikan  dan udang tetap melimpah dapat dilakukan langkah- langkah  sebagai  berikut:  pengawasan  kualitas air,  pemberian  takaran  pakan,  dan  pemberian dosis  probiotik  atau  antibiotik  dalam  air  kolam dengan tepat (Moriarty, 1999).
Mengingat pentingnya
tingkat kesehatan  udang  dalam  usaha  budidaya,  maka deteksi  dini  tentang  kondisi  kesehatan  udang vannamei  dan  kondisi  lingkungan  perairan sangat  diperlukan.  Atas  dasar  pemikiran tersebut,  maka  dilakukan  studi  kasus  tentang kelimpahan  bakteri Vibrio sp.  pada  air pembesaran  udang  vannamei  sebagai  deteksi dini  penyakit  Vibriosis.  Deteksi  dini  bakteri Vibrio sp. pada air pembesaran udang vannamei dapat  juga  digunakan  sebagai  upaya  dalam pengawasan kualitas air tambak.
Tujuan  dari  studi  kasus  ini  adalah untuk mengetahui kelimpahan bakteri Vibrio sp. pada  air  pembesaran  udang  vannamei  sebagai deteksi dini penyakit Vibriosis.

## Metodologi
Metode yang digunakan adalah metode deskriptif,  yaitu  metode  yang  menggambarkan kejadian  atau  keadaan  pada  suatu  kondisi tertentu.  Menurut  Suryabrata  (1993),  metode deskriptif  adalah  suatu  metode  yang  bertujuan untuk memberikan gambaran umum, sistematis, faktual  dan  valid  mengenai  data-data  yang berupa  fakta-fakta  dan  sifat  populasi  tertentu dari suatu kegiatan. Studi dilaksanakan di Balai Besar  Pengembangan  Budidaya  Air  Payau (BBPBAP)  Jepara,  Jawa  Tengah  pada  tanggal 24 Januari 2011 sampai 24 Februari 2011.
Tahapan  dalam  kegiatan  monitoring kelimpahan  bakteri  menurut  Taslihan  dkk (2004)  adalah: (1)  Tahap  Persiapan,  meliputi
persiapan alat dan bahan dan Sterilisasi alat dan media, (2) Tahap pembuatan larutan Trisalt dan media  kultur  bakteri,  (3)  Tahap  pengambilan dan  pengiriman  sample  air,  (4)  Tahap penanaman sampel air, (5) Tahap penghitungan bakteri, dan (6) Interpretasi hasil penghitungan.
Tahap Persiapan Persiapan Alat dan Bahan Alat  yang  digunakan  antara  lain: Tabung reaksi bertutup, sumbat tabung (kapas), rak  tabung,  cawan  petri, pippeting  aid ,  pipet volume,  pembakar  spirtus  /  bunsen,  vorteks, erlenmeyer, magnetic  stirer , hot  plate ,  ose, spatula,  timbangan  elektrik,  gunting,  kertas label, aluminium foil, inkubator, oven, autoklaf. Bahan  yang  digunakan  antara  lain:  Sample  air, nutrient  agar,  agar  TCBS,  larutan  3  garam (Trisalt ), aquadest, alkohol 70% dan 96%.
Sterilisasi Alat dan Media Sterilisasi  alat  dan  media  yang dilakukan menggunakan:
1. Pembakar  Bunsen,  untuk  mensterilkan peralatan  seperti  ose,  jarum,  dan  spatula dengan  cara  membakar  ujung  peralatan tersebut di atas api bunsen sampai berpijar.
2. Oven, untuk mensterilkan cawan petri dan pipet volume. Penggunaan alat  ini dengan memasukkan  alat-alat  tersebut  kedalam oven  dan  dipanaskan  dengan  suhu  160- 170 o C selama 1-2 jam.
3. Autoklave,  untuk  mensterilkan  tabung reaksi bertutup dan erlenmeyer. Penggunaan  alat  ini  dengan  memasukkan alat-alat  tersebut  kedalam  autoklave  yang ditutup  dengan  rapat  dan  nyalakan autoklave  dengan  temperature  121 ℃ dan tekanan  antara  15-17,5  psi  ( pound  per square inci ) atau 1 atm selama 1 jam.
Tahap  Pembuatan  Larutan  Trisalt  dan  Media Kultur Bakteri Pembuatan larutan Trisalt Pembuatan  larutan  Trisalt  ini  dengan mencampurkan  0,75  gram  KCl,  6,94  gram MgSO 4 dan  23,4  gram  NaCl  kedalam  labu Erlenmeyer  yang  berisi  1000  ml  akuades kemudian  dilarutkan.  Lalu  9  ml  larutan  Trisalt dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  berpenutup dan  disterilkan  dengan  memasukkan  kedalam Autoklave.
Media Kultur Bakteri
Media kultur bakteri yang
dipergunakan  adalah  Nutrient  Agar  (NA)  dan Thiosulfat  Citrate  Bile  Salts  Sucrose  Agar (TCBSA).
Tahap Pengambilan dan Pengiriman Sampel Air Menurut  Frerichs  and  Millar  (1993), untuk  mendapatkan  sampel  yang  baik  dan representatif  diperlukan  beberapa  persyaratan antara lain: (1) Pemilihan lokasi yang tepat, (2) Penetapan  frekuensi  pengambilan  sampel,  (3) Cara  pengambilan  sampel,  dan  (4)  Perlakuan sampel di lapangan.
Pengambilan sampel air,  pertama-tama dengan  mencuci  botol  tempat  sampel  dengan detergen sampai bersih, lalu botol dibilas ulang dengan  aquades  bebas  ion,  bebas  amoniak, bebas  nitrit,  sesuai  dengan  uji  parameter. Setelah  itu  diletakkan  di  box  tertutup  untuk menghindari  kontaminasi.  Sample  air  di  ambil dari 6 bak terpisah dengan kode bak B4, B5, B7, B8,  B9,  dan  BLT  B2,  sebanyak  5x  selama  5 minggu.
Dalam proses pengambilan sample air, lokasi pengambilan sampel air dilakukan secara random.  Air  tambak  kemudian  dimasukkan kedalam  tabung  sample  dengan  cara  membuka tutup  tabung  sample  dalam  keadaan  tercelup didalam  bak  tersebut.  Ambil  sample  air sebanyak  10  ml.  Pengisian  dilakukan  sampai penuh  dan  pastikan  tidak  ada  celah  antara sample air dengan tutup botol, agar tidak terjadi kontaminasi dengan udara.
Catat  identitas  contoh  antara  lain tanggal,  lokasi,  dan  paraf  pengambil  sample. Sample  air  disimpan  dalam  box  penutup  botol sampel  kemudian  ditutup  rapat,  disegel  dan ditutup  dengan  alumunium  foil  agar  terhindar dari cahaya matahari. Tabung sample kemudian dibawa  ke  laboratorium  mikrobiologi  divisi
Manajemen Kesehatan Hewan Akuatik (MKHA) Balai Besar Pengembangan Budidaya Air  Payau  (BBPBAP)  Jepara untuk  dilakukan analisis  kualitas  air  berdasarkan  total  bakteri yang ada.
Proses  pengambilan  dan  pengiriman sampel  air  yang  dilakukan  sesuai  prosedur kelayakan  seperti  yang  diungkapkan  oleh Frerichs  dan  Millar,  sehingga  sampel  air  yang didapat  dipastikan  bebas  kontaminasi  sehingga layak untuk dianalisis hasilnya.
Tahap Penanaman Sampel Air Cara  dalam  penanaman  sampel  air  ini yaitu  sample  air  dihomogensikan  dengan  cara dikocok  terlebih  dahulu  menggunakan  vorteks, diambil  sebanyak  1  ml  dengat  pipet  ukur  dan dimasukkan  kedalam  larutan  trisalt  secara aseptik.  Menurut  Taslihan  dkk  (2004),  untuk pengisolasian  total  bakteri,  sample  air diencerkan  hingga  100  ml  sedangkan  untuk pengisolasian bakteri Vibrio sp., sampel air dari diencerkan  hingga  10  ml.  Setelah  diencerkan,
sebanyak  0,1  ml  larutan  dimasukkan  ke  dalam media  kultur  (media  NA  untuk  pengisolasian total  bakteri  umum  dan  media  TCBSA  untuk pengisolasian  bakteri Vibrio sp.). Pengisolasian bakteri  dilakukan  secara  aseptik  dengan menerapkan  metode  sebar  dimana  setelah larutan  dimasukkan  ke  dalam  media,  larutan tersebut  disebar  ratakan  di  permukaan  media menggunakan spatula. Media kemudian diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam dalam inkubator.
Tahap Penghitungan Bakteri Menurut  Bailey  and  Scott’s  (1982),
penghitungan bakteri dilakukan dengan menerapkan  metode total  plate  count  (TPC) . Jumlah  bakteri  yang  muncul  dihitung  dengan menggunakan  alat colony  counter yang kemudian dicatat dan dikalikan dengan besaran pengenceran  yang  telah  dilakukan.  Jumlah bakteri  dinyatakan  dalam  satuan  CFU/ml ( colony-forming unit / ml ). Data  hasil plate  count penghitungan bakteri  yang  diperoleh  ditabulasi  dengan menggunakan  program  excel  menjadi  sebuah grafik. Grafik tersebut kemudian diinterpretasikan  hasilnya  apakah  total plate count bakteri  tersebut  dapat  menyebabkan penyakit  Vibriosis  pada  udang  vannamei. Sumbu axis dari grafik  yang dibuat  merupakan tanggal pengambilan sampel  air selama 30 hari mulai  tanggal  24  Januari  2011  hingga  24 Februari 2011.
Data  diambil  sebanyak  lima  kali selama  lima  minggu  dan  diambil  pada  setiap minggunya. Minggu I tanggal 24 Januari 2011, minggu  II tanggal  31  Januari  2011,  minggu  III tanggal 07 Pebruari 2011, minggu IV tanggal 14 Pebruari  2011,  dan  minggu  V  tanggal  21 Pebruari 2011.
Sumbu ordinat merupakan jumlah total plate  count bakteri.  Pada  penghitungan  jumlah bakteri Vibrio sp.,  sumbu  ordinat  dalam  skala 10 4 sedangkan pada bakteri umum menunjukkan skala  10 6 .  Data  kelimpahan  bakteri  diperoleh dari  6  bak  air  pembesaran  udang  vannamei dengan kode bak B4, B5, B7, B8, B9, dan BLT B2.

## Hasil dan Pembahasan
Menurut  Taslihan  dkk  (2004),  ambang batas  minimal  keberadaan  bakteri Vibrio sp. dalam  air  adalah  10 4 CFU/ml,  sedangkan  batas minimal  bakteri  umum  diperairan  adalah  10 6 CFU/ml. Jika ambang batas ini dilampaui maka kematian massal udang budidaya dalam tambak dapat  terjadi.  Grafik  data  hasil  monitoring kelimpahan  bakteri  pada  air  pembesaran  udang
vannamei  dapat  dilihat  pada  gambar  1  dan gambar 2.
Jumlah  bakteri Vibrio sp.  yang termonitor  pada  Bak  B4  dan  BLT  B2  terlihat serupa  di  mana  pada  minggu  ke-1  dan  ke-2 meningkat  sedikit  dan  minggu  ke-3  turun, namun  pada  minggu  ke-4  meningkat  drastis sampai 5,1 x 10 4 bakteri CFU/ml, dan menurun kembali  pada  minggu  ke-5.  Meningkatnya jumlah  bakteri  pada  minggu  ke-4  disebabkan suhu air  yang  menurun drastis  hingga 27,1 dan 26,8 o C  pada  kedua  bak  tersebut.  Pada  minggu ke-5  jumlah  bakteri  berangsur  menurun  karena suhu bak meningkat menjadi 28,3 dan 27,6 o C. Jumlah  bakteri Vibrio sp.  yang termonitor pada Bak B5 dan B7 terlihat serupa di  mana  pada  minggu  ke-1  dan  ke-2  menurun sedikit  dan  minggu  ke-3  meningkat  drastis mencapai 7 x 10 4 CFU/ml, namun pada minggu ke-4 menurun drastis sampai 1,1 x 10 4 CFU/ml, dan  keadaan  tetap  sampai  minggu  ke-5. Meningkatnya jumlah bakteri pada minggu ke-3 disebabkan  suhu  air  yang  menurun  drastis hingga  26,6 o C  pada  kedua  bak  tersebut.  Pada minggu ke-4 jumlah bakteri berangsur menurun karena  suhu  bak  meningkat  menjadi  28,9  dan 27,5 o C pada kedua bak.
Jumlah  bakteri Vibrio sp.  yang termonitor pada Bak B8 dan B9 terlihat serupa di mana pada minggu ke-1 dan ke-2 meningkat sedikit  dan  minggu  ke-3  turun  sampai  dengan minggu ke-4 sampai 1,8 x 10 4 CFU/ml,  namun pada minggu ke-5 meningkat drastis hingga 6,7 x 10 4 CFU/ml dan perlu dilakukan monitor pada minggu ke-6. Menurunnya  jumlah  bakteri pada minggu ke-3 dan ke-4 disebabkan suhu air yang naik  hingga  28,2  dan  28,1 o C  pada  kedua  bak
tersebut.  Peningkatan  jumlah  bakteri  pada minggu  ke-5  disebabkan  suhu  bak  yang  turun drastis menjadi menjadi 27,1 o C pada kedua bak. Hasil  monitoring  kelimpahan  bakteri Vibrio sp. pada air pembesaran udang vannamei menunjukkan  bahwa  kelimpahan  bakteri  telah melebihi  ambang  batas  minimal  bakteri  di perairan  yaitu  10 4 =  10000  CFU/ml,  sehingga rentan  terhadap  serangan  penyakit  Vibriosis. Kelimpahan ini terjadi akibat kondisi lingkungan perairan yang tidak baik disebabkan oleh musim hujan.
Kondisi  lingkungan  perairan  yang tidak  baik  dibuktikan  dengan  membandingkan parameter fisika dan kimia kualitas air menurut pustaka yang diperoleh dengan kondisi perairan. Berdasarkan  sumber  dari  Standar  Nasional Indonesia  (SNI)  no  7310  (2009),  suhu  optimal kualitas air pembesaran udang vannamei adalah 28-32 0 C,  namun  kondisi  air  pembesaran  udang menunjukkan  suhu  rata-rata  27,7 o C  dengan adanya  suhu  yang  menurun  drastis  hingga 26,6 o C.  Suhu  yang  terlalu  rendah  inilah penyebab  terjadinya  kelimpahan  bakteri Vibrio sp.  diperairan.  pH  optimal  adalah  antara  7,5  - 8,5,  sesuai  dengan  pH  rata-rata  air  yaitu  7,58 namun  ada  pH  yang  berfluktuasi  hingga  7,02. Berdasarkan  parameter  kimianya,  jumlah amoniak  maksimal  adalah  <  0,01  mg/l,  nitrit maksimal  <  0,01  mg/l,  dan  nitrat  maksimal  < 0,5  mg/l.  Sedangkan  kondisi  parameter  kimia pada  air  pembesaran  udang  vannamei  semua data melebihi ambang batas maksimalnya yaitu kadar  amoniak  0,1005  mg/l,  dengan  nitrit mencapai 0,095 mg/l, dan kadar nitrat mencapai 0,948833 mg/l.
Gambar 1. Pertumbuhan Bakteri Vibrio sp. Selama 5 Minggu
Parameter  fisika  dan  kimia  kualitas  air yang tidak baik menjadi penyebab melimpahnya jumlah  bakteri Vibrio sp.  pada  air  pembesaran udang  vannamei.  Selain  itu,  budidaya  udang vannamei  skala  intensif  menjadi  faktor  penye- bab  mudahnya  penyakit  Vibriosis  menyerang udang  vannamei.  Hal  tersebut  dikarenakan udang  yang  dibudidayakan  mengalami  stress disebabkan oleh kepadatan populasi udang.
Jumlah  bakteri  umum  yang  diperoleh pada air pembesaran udang vannamei menunjukkan  bahwa kelimpahan  bakteri  belum melewati ambang batas minimum bakteri umum diperairan  yaitu  10 6 =  1000000  CFU/ml. Artinya  jumlah  bakteri  umum  yang  ada  di perairan  masih  dalam  jumlah  sewajarnya, sehingga  tidak  rentan  terhadap  serangan  suatu penyakit.

## Kesimpulan
Kelimpahan bakteri Vibrio sp. pada air pembesaran  udang  vannamei  telah  melebihi ambang batas minimal bakteri di perairan yaitu 10 4 = 10000 CFU/ml, sehingga rentan terhadap serangan penyakit Vibriosis.
Monitoring  kelimpahan  bakteri Vibrio sp.  perlu  dilakukan  secara  berkala  untuk mendeteksi  secara  dini  serangan  penyakit Vibriosis.
Daftar Pustaka Agustatik,  S.,  L.  Surya.,  M.B.  Manja.,  H.W. Arik.,  S.  Akbar.,  H.  Nono.,  Zakimin., H.  Tinggal  dan  Rusfian.  2003.
Manajemen Pembesaran Kerapu Macan  Di  Karamba  Jaring  Apung. Loka Budidaya Laut Batam. 45 hal. Bailey and Scott’s. 1982. Diagnostic Microbiology . The CV. Mosby Company S.T. Louis, Toronto, London. Chamberlain,  G.W.  1991. Shrimp  Farming  in Indonesia , Seedstock Production. World Aquaculture.
Chanratchakool,  P.,  J.F.  Turnbull.,  and  C. Limsuwan.  1994. Health  Management in  Shrimp  Ponds. Aquatic  Animal Health Research Institute, Thailand. Hameed,  A.S.S.  1993. A  Study  of  the  Aerobic Heterotrophic  Bacterial  Flora  of Hatchery-Reared  Eggs,  Larvae  and
Postlarvae of Penaeus indicus. Aquaculture, 117:195-204. Lightner, D.V., T.A. Bell., R.M. Redman., L.L. Mohney., J.M. Natividad., A. Rukyani.,  and  A.  Poernomo.  1992. A
Review  of  Some  Major  Disease  of Economic  Significance  in  Penaeid Prawns / Shrimp of the Americans and Indopacific. Proceedings  of  the  First Symposium  on  Disease  in  Asian Aquaculture Bali, Indonesia.
Mahbubillah, M.A. Budidaya Udang Vannamei. http://marinebiologi.blogspot.com/ Moriarty,  D.J.W.  1999. Disease  Control  in Shrimp  Aquaculture  with  Probiotic Bacteria. Microbial  Interactions  in
Aquaculture. Rosenberry,  B.  1997. World  Shrimp  Farming. Annual Report. Shrimp News
International,  San  Diego,  California, USA. 164 hal.
Ruangpan,  L.  and  T.  Kitao.  1991. Vibrio Bacteria  Isolated  from  Black  Tiger
Gambar 2. Pertumbuhan Total Bakteri Selama 5 Minggu
Shrimp,  Penaeus  monodon  Fabricius. J. Fish Disease. Hal 383-388. Singh,  B.I.  1986. Studies  on  the  Bacteria Associated  with  Penaeus  indicus  in  a Culture  System. Ph.D.  Thesis.  Cochin University of Science and Technology,
Cochin, India, 230 pp.
Suryabrata,  S.  1993.  Metode  Penelitian.  CV.
Rajawali. Jakarta. 115 hal. Taslihan,  A,  Ani  W,  Retna  H,  S.M.  Astuti. 2004.  Pengendalian  Penyakit  Pada Budidaya  Ikan  Air  Payau,  Direktorat Jenderal Perikanan Balai Besar Budidaya Air Payau Jepara. Zonneveld,  N.,  E.  A.  Huismann.,  dan  J.  H. Boon.  1991.  Prinsip-prinsip  Budidaya
Ikan.  PT.  Gramedia  Pustaka  Utama. Jakarta. 318 hal.