AKTIVITAS ANTIBAKTERI MINUMAN FUNGSIONAL SARI TEMPE KEDELAI HITAM DENGAN PENAMBAHAN EKSTRAK JAHE (STUDY OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY FUNCTIONAL DRINKS OF BLACK SOYBEAN TEMPE WITH ADDITION GINGER EXTRACT)

## Nurhidajah
Program Studi Teknologi Pangan Universitas Muhammadiyah Semarang Email: inung.bkj@gmail.com

## ABSTRACT
Nutrition in Tempe can be useful for metabolic reactions, also contains a natural antibiotic that can inhibit  the  emergence  of  various  diseases,  such  as  antibacterial  components  which  are  very  beneficial  to health. Beverage products form tempe which The addition of ginger extract on the functional beverage black soybean tempe. This study consists of 2 stages. Phase I is introductory, covering the manufacture of black soybean  tempe  (2  times  the  boiling),  followed  by  analysis  of  water  and  protein  content,  then  phase  2  is  a functional beverage processing optimization with ginger extract additional variation were 0 %, 1%, 2%, 3% and 4%, in treatment that is by non-instant and instant. The design of the study in phase 2 is 5x2 factorial experiment using a Completely Randomized Design. The first factor is the addition of ginger extract with 5 variations,  and  the  second  factor  of  2  variations  of  processing,  so  there  were  10  treatment  combinations. The  results  showed  black  soybean  tempe  has  a  water  content  of  61.81%, protein  20.36%,  fat  2.9%  and 0.97%  ash.  Organoleptic  assessment  showed  non  instant  processing  has  a  flavor  that  is  higher  than processed  an  instant. Protein  consentration  of  black  soybean  tempe  functional  beverage  with  the  highest non-instant processing with the addition of ginger extract 2%. Drink black soybean tempe has a relatively weak  antibacterial  activity  (<5  mm),  and  there  is  the  influence  of  treatment  with  antibacterial  activity  in soybean tempe drink black. suggested further research to otimasi black soybean tempe beverage processing and processing of instant non-instantaneous with the addition of ginger extract at least 4%.

## Key words: black soybean, functional drinks, antibacterial activity

## PENDAHULUAN
Tempe merupakan makanan hasil fermentasi  antara  kedelai  dengan  jamur Rhizopus sp.  Rasanya  yang  lezat,  harganya  murah  dan mudah  didapat.  Sepotong  tempe  mengandung berbagai  unsur  bermanfaat,  seperti  karbohidrat, lemak,  protein,  serat,  vitamin,  enzim,  daidzein, genisten.  Sifat  antibakteri  pada  tempe  juga dimanfaatkan  pada  penanganan  diit  untuk penderita diare, khususnya anak-anak.
Pada  umumnya  tempe  dibuat  dari  bahan kedelai kuning,  tempe  dapat  dibuat  dari bahan kedelai hitam yang banyak mengandung
anthosianin. Kandungan  anthosianin  tinggi pada kedelai  hitam mempunyai  aktivitas  antioksidan besar,  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  tokoferol (Purwanti, 2004). Selain antioksidan, dari segi gizi dan  citarasa    kedelai  hitam  juga  lebih  unggul dibandingkan  kedelai  kuning.  Hasil  penelitian Lunggani  (2008),    tentang diversifikasi produk tempe  dengan  bermacam-macam  bahan,    yang disukai  oleh  panelis  adalah  produk  tempe  dari bahan dasar kedelai hitam.
Selama  ini  tempe  masih  sangat  terbatas dalam hal pengolahan, sehingga penelitian tentang tempe, khususnya dalam hal diversifikasi pengolahan  misalnya  menjadi  minuman  sangat diperlukan  untuk  lebih  memperkaya  bentuk olahan tempe. Untuk menunjang produk minuman tempe  menjadi  minuman  fungsional  yang  kaya manfaat,  penambahan  ekstrak  jahe  diharapkan dapat  meningkatkan  citarasa  minuman  disamping manfaat jahe yang ikut menunjang kesehatan.
Berdasarkan  latar  belakang  di atas dirumuskan  permasalahan  penelitian  apakah  ada pengaruh jumlah ekstrak jahe dan jenis pengolahan  (instan  dan  non instan)  terhadap aktivitas  antibakteri  dan  kadar  protein  serta  mutu organoleptik  minuman  fungsional  tempe  kedelai hitam.  Penelitian  ini  bertujuan  mengkaji  aktivitas antibakteri,  kadar  protein  dan  mutu  organoleptik minuman  fungsional  tempe  kedelai  hitam  dengan penambahan ekstrak jahe.

## METODOLOGI
Merupakan  penelitian eksperimen  di bidang  kesehatan  dan  teknologi  pangan,  yang menjelaskan  hubungan  antar  variabel  dengan beberapa  variasi  perlakuan.  Tempet  penelitian dilakukan  di    Laboratorium  Gizi, Organoleptik dan Laboratorium  Kimia  Pangan  Unversitas Muhammadiyah Semarang.
Bahan  pembuatan  minuman  fungsional tempe  kedelai  hitam  adalah  kedelai  hitam diperoleh  dari  Purwodadi,  ragi  tempe  merk ”Raprima”,  jahe  emprit,  air,  gula  pasir,  garam tablet  katalis,  batu  didih,  dan  H 2 SO 4 pekat,  H 2 O 2 30%, H 3 BO 4 indikator MR (methyl red), HCL 0,2
N, k ultur  bakteri Escherichia  coli (gram-negatif) berumur  18 – 24  jam  dalam  Nutrien  Broth  (NB), media  Nutrien  Agar  (NA)  sedangkan  alat  yang dibutuhkan  adalah  timbangan,  waskom,  dandang, nyiru,  kompor,  indikator  pH,  blender,  cawan porselen,  oven,  desikator  dan  neraca.  Untuk analisis  kadar  protein  (Mikro  Kjeldahl)  dan aktivitas  anti  bakteri  adalah  seperangkat  alat destilasi, buret, erlenmeyer cawan petri. Penelitian ini  dilakukan  dalam  dua  tahap  yaitu  pembuatan tempe  dan  minuman  fungsional  dengan  variasi penambahan  ekstrak  jahe  dan  pengolahan  (instan dan non instan) serta tahap 2 pengujian minuman fungsional  yang  meliputi  mutu  organoleptik, kadar protein dan aktivitas antibakteri.
Pembuatan Tempe Kedelai Hitam dengan  cara pencucian  dan  perebusan  selama  60 menit, perendaman  dengan  air  perebusnya, kemudian didiamkan pada suhu ruang selama 20- 22  jam,  lalu  pengupasan  dan  pencucian. Perebusan  kedua  pada  kedelai  tanpa  kulit  selama 45-60  menit  selanjutnya  penirisan  dan  peragian dengan  inokulum  sebanyak  0,2%,  pembungkusan dengan plastik PE yang telah diberi lubang dengan ketebalan 3 cm.  Tahap terakhir pembuatan tempe adalah  pemeraman  (inkubasi)  pada  suhu  sekitar 30-37°C  selama  22-26  jam hingga  seluruh permukaan  tempe  tertutupi  miselium  kapang berwarna putih.
Pembuatan ekstrak jahe dengan pencucian jahe dan pengecilan ukuran. Setelah itu penghancuran  dengan  blender  ditambah    air dengan perbandingan 1:1 (jahe:air), lalu penyaringan. Pembuatan  minuman  fungsional tempe  kedelai  hitam  meliputi  proses blancing,
penghancuran (blender) dengan penambahan air 5 kali  berat  tempe,  dan  penyaringan  dengan  kain saring.  Perebusan  dengan  penambahan  ekstrak jahe  sesuai  variasi  perlakuan  dan  gula  pasir 8% dari  volume  cairan.  Proses  pembuatan  minuman fungsional  tempe  kedelai  hitam  instan  berbeda pada  penambahan  air,  yaitu  saat  penghancuran ditambahkan  2  kali  berat  tempe  dan  penambahan gula  pasir  1:1  kemudian  dipanaskan  sampai terbentuk kristal gula.
Analisis  mutu  organoleptik  (Rahayu, 1998)  dengan  15  panelis  agak  terlatih, penilaian meliputi  warna,  aroma,  rasa,  dan  kekentalan tempe  menggunakan  formulir  uji    kesukaan dengan kriteria penilaian adalah  4 = sangat suka, 3  =  suka,  2  =  tidak  suka  dan  1  =    sangat  tidak suka. Analisis  Kadar  Protein metode  Mikro Kjeldhal  (AOAC,1990) dan  analisis  antibakteri dengan metode Difusi Agar menggunakan bakteri Escherichia  coli (gram-negatif)  berumur  24  jam dalam  media Nutrien  Broth (NB). Rancangan penelitian  pada  tahap 2  adalah  percobaan Faktorial  5x2  dengan  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL), meliputi faktor penambahan  ekstrak  jahe  5  variasi  dan  faktor pengolahan  2  variasi,  sehingga  terdapat  10 kombinasi  perlakuan.  Data  diuji  homogenitas dengan  uji  Kolmogorov  Smirnov,  dilanjutkan dengan  analisa  sidik  ragam  atau Analysis  of Varians (ANOVA) dilanjutkan uji HSD.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan  Tempe  Kedelai  Hitam  (Astawan,

## 2008 dan Nurhidajah, 2009)
Pembuatan  tempe  kedelai  hitam  dengan karakteristik  tempe  yang  baik dilakukan  dengan dua kali pemasakan dan penambahan ragi  3 g / kg kedelai  kering.  Ukuran  ketebalan  tempe  2  cm. Hasil  pengamatan  tempe  kedelai  hitam  tampak miselium  berwarna  putih  tumbuh  sempurna  pada 24 jam setelah peragian di seluruh permukaan dan di  sela-sela  kedelai.  Gambar  tempe  kedelai  hitam dengan  konsentrasi  ragi  3  g  /  kg  kedelai  kering ditunjukkan pada Gambar 1.
Menurut  Astawan  (2008),  tempe  yang terlalu  banyak  bahan  akan  menyebabkan  suhu terlalu  tinggi  dan  menghambat  pertumbuhan jamur.

## Gambar 1. Tempe Kedelai Hitam

## Hasil Analisis Proksimat Tempe Kedelai Hitam
Hasil  analisis  proksimat  tempe  kedelai hitam  pada  Tabel  1  dibandingkan  tempe  kedelai kuning menurut Ditjen Gizi Depkes RI (1995) mempunyai  kadar  protein  yang  lebih  tinggi, sedangkan kadar air, abu dan lemak lebih rendah.
Tempe  kedelai  kuning  sebagai  pembanding  pada Tabel  1  adalah  dari  bahan  baku  kedelai  impor, sedangkan tempe kedelai sampel dalam penelitian ini digunakan kedelai lokal.

## Tabel 1. Hasil Analisis Proksimat Temp Kedelai Hitam
Zat Gizi Tempe kedelai kuning (Depkes 1995) Tempe Kedelai Hitam Air (%) Protein (BB %) Lemak (%) Abu (%) 64,0 18,3 4,0 1,0 61.81 20.36 2,90 0.97

## Analisis Mutu Organoleptik
Analisis  kesukaan  minuman  fungsional tempe  kedelai  hitam  dengan  variasi pengolahan instan dan non instan dengan variasi penambahan ekstrak jahe dari 0% sampai 4% dilakukan dengan menggunakan  uji  kesukaan  terhadap  warna,  rasa, aroma  dan  kekentalan.  Uji  kesukaan  yang dilakukan oleh 23 panelis agak terlatih dan umum, menunjukkan hasil tertinggi adalah pada pengolahan minuman non instan dengan penambahan ekstrak jahe tertinggi, yaitu 4 %. Hal ini  dimungkinkan  minuman  fungsional  tempe kedelai  hitam  non  instan  mempunyai  warna, aroma,  rasa  dan  kekentalan  yang  lebih  disukai panelis.
Warna  minuman  yang  paling  disukai adalah  minuman  non  instan  dengan  penambahan jahe  2%,  yaitu  memberikan  warna  coklat  muda, sedangkan yang mempunyai nilai terendah adalah
minuman  instan  dengan  jahe  0%,  dengan  warna coklat.  Secara umum minuman fungsional tempe kedelai hitam dengan pengolahan instan memberikan  warna  lebih  gelap  sehingga  tidak disukai konsumen.
Warna  coklat  pada  minuman  tempe kedelai hitam ini terbentuk karena reaksi Maillard antara  karbohidrat  pada  gula  yang  ditambahkan dan  protein  kedelai.  Pada  proses  pengolahan minuman  instan  dilakukan  penguapan  dengan suhu  yang  lebih  tinggi  dari  perebusan,  sehingga menimbulkan warna coklat yang lebih tua.
Penilaian  terhadap  aroma  tempe  kedelai hitam  menunjukkan  pola  yang  sama  dengan warna,  yaitu  tertinggi  pada  produk  minuman  non instan.  Hal  ini  disebabkan  minuman  tempe kedelai hitam non instan yang diolah dengan suhu perebusan (±100°C) aroma khas tempe yang agak langu  dapat  direduksi  oleh  jahe.  Nilai  aroma tertinggi adalah minuman non instan dengan jahe 4%.
Aroma  minuman  tempe  kedelai  hitam instan  dengan  semua  variasi  penambahan  jahe secara  umum  mempunyai  nilai  lebih  rendah. Menurut  komentar  panelis,  minuman  instan menimbulkan  aroma  yang over  cooking. Hal  ini karena proses penguapan dengan suhu lebih tinggi dengan waktu yang lebih lama akan menyebabkan terjadinya    reaksi browning non  enzimatis (maillard)    yang  berlebihan  dengan  aroma  agak gosong.
Penilaian  terhadap  rasa  minuman  tempe kedelai hitam mempunyai pola yang sama dengan warna dan rasa, yaitu lebih tinggi pada non instan. Rasa  minuman  non  instan  lebih  alami,  dengan
rasa  jahe  yang  lebih  tajam.  Prosentase  jahe tertinggi  paling  disukai  konsumen,  karena  rasa langu direduksi oleh rasa jahe. Menurut komentar panelis,  minuman  tempe  kedelai  hitam  dengan pengolahan instan mempunyai rasa agak hambar.
Kekentalan minuman tempe kedelai hitam non  instan  sangat  ditentukan  oleh  penambahan cairan  pada  saat  penghancuran  tempe.  Pada pengolahan  dengan  instan  yang  telah  mengalami penguapan,  juga  dipengaruhi  tingkat  kemanisan seduhan  instan.  Pada  penelitian  ini,  minuman instan  dengan  tingkat  kemanisan  yang  optimum mempunyai  tingkat  kekentalan  yang  lebih  rendah sehingga kurang disukai konsumen. Analisis mutu organoleptik  minuman  fungsional  tempe  kedelai hitam  untuk  masing-masing  kriteria  penilaian disajikan pada Gambar 2.
- 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 N il a i K e s u k a a n 0% 1% 2% 3% 4% 0% 1% 2% 3% 4% Non Instan Instan Pengolahan & Penambahan Jahe
Analisis Kesukaan Minuman Tempe Kedelai Hitam
Warna Rasa Aroma Kekentalan

## Gambar 2. Mutu Organoleptik Minuman Tempe Kedelai Hitam
Secara  keseluruhan,  perbandingan  citarasa minuman  fungsional  tempe  kedelai  hitam  dengan variasi pengolahan instan dan non instan disajikan pada  Gambar 2 yang  memperlihatkan  bahwa  dari semua  kriteria  penilaian  organoleptik  yang meliputi  warna,  aroma,  rasa  dan  kekentalan
minuman  tempe  kedelai  hitam,  pengolahan  non instan  mempunyai  citarasa  yang  lebih  tinggi dibanding  instan.  Penambahan  ekstrak  jahe menunjukkan  kecenderungan  semakin  banyak prosentase  yang  ditambahkan  semakin  tinggi tingkat  kesukaan  konsumen, dan  kecenderungan ini  berbanding  terbalik  pada  minuman  instan, seperti ditunjukkan pada Gambar 3.
0 1 2 3 4 N il a i K e s u k a a n 0% 1% 2% 3% 4% Penambahan Jahe Non Instan Instan

## Gambar 3. Citarasa Minuman Fungsional Tempe Kedelai Hitam
Uji statistik daya terima menunjukkan ada pengaruh  yang  sangat  bermakna  pada  semua kriteria penilaian dengan hasil p= 0,000 < 0,05.

## Kadar  Protein  Minuman  Fungsional  Tempe Kedelai Hitam
Hasil  analisis  kadar  protein  minuman fungsional  tempe  kedelai  hitam  menunjukkan secara  keseluruhan  minuman  yang  diolah  tanpa proses  instanisasi  mempunyai  nilai  yang  lebih tinggi  dibandingkan  minuman  tempe  kedelai hitam  yang  dibuat  instan.  Hal  ini  disebabkan karena  pada  proses  pengolahan  minuman  instan dengan  pemanasan  suhu  lebih  tinggi  dan  waktu lebih  lama  untuk  menguapkan  air  sampai
terbentuk  tekstur  yang  kering,  menyebabkan terjadinya penurunan protein.
Winarno (1997) menyatakan bahwa pemanasan  (perebusan dan  penggorengan)  yang dilakukan  secara  berlebihan  pada  waktu  yang lama  dapat  mengakibatkan  nilai  gizi  protein  akan berkurang  karena  terbentuknya  ikatan  silang dalam  protein.  Hasil  analisis  kadar  protein  tersaji pada Gambar 4.
0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 2,50 K a d a r P r o t e in ( % ) 0% 1% 2% 3% 4% Penambahan Ekstrak Jahe
Non Instan Instan Gambar 4.Kadar Protein Minuman Fungsional Tempe Kedelai Hitam Menurut Stodolak (2008), proses fermentasi
tempe dapat meningkatkan ketersediaan  protein  sekitar  25%.  Ketersediaan protein  dari  pengolahan  konvensional  lebih  besar dibandingkan  dari  biji-bijian  yang  difermentasi, tetapi pada analisa in invitro, lebih banyak protein larut    (10%)  yang  dilepaskan  pada  saat pengolahan.
Hasil  analisis Sidik Ragam  menunjukkan ada  pengaruh  variasi  pengolahan  dengan  kadar protein  minuman tempe kedelai hitam  dengan F hitung  7,615  dan  p  0,000  <  0,05.  Uji  lanjut menunjukkan  pengolahan  minuman  fungsional tempe kedelai hitam yang diolah secara non instan
dengan  penambahan  jahe  2%  mempunyai kandungan protein yang lebih tinggi dibandingkan variasi lain.

## Analisis  Antibakteri  Minuman  Fungsional Tempe Kedelai Hitam
Minuman  fungsional  dengan  bahan  tempe kedelai  hitam    ditambah  ekstrak  jahe  sebagai penambah  citarasa,  yang  juga  memiliki  metabolit sekunder  yang  potensial  sebagai  anti  mikroba, diharapkan dapat meningkatkan fungsi antibakterinya.  Hasil  analisis  antibakteri dengan metode Difusi Agar menunjukkan kecenderungan semakin  banyak  prosentase  ekstrak  jahe  yang ditambahkan,  semakin  luas  daerah  hambatan terhadap  bakteri. Hasil  analisis  kadar  protein tersaji pada Gambar 5.
0 1 2 3 4 5 D ia m e t e r h a m b a t a n ( m m ) 0% 1% 2% 3% 4% Penambahan Ekatrak Jahe Non Instan
Instan

## Gambar 5. Aktifitas Antibakteri Minuman Fungsional Tempe Kedelai Hitam
Aktifitas  antibakteri  minuman  tempe kedelai  hitam  yang  diukur  dengan  besar  diameter zona  bening  berkisar  antara  0,9-4,8  mm.  Pada penambahan  ekstrak  jahe  tertinggi  yaitu  4%  pada minuman  yang  diolah  non  instan  menunjukkan zona  bening  yang  tertinggi.  Dari  kecenderungan hasil  tersebut,  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak
jahe  mempunyai  aktifitas  antibakteri,  sehingga semakin  tinggi  prosen  penambahan  ekstrak  jahe, semakin besar aktifitas antibakterinya.
Lemahnya aktivitas antibakteri pada minuman  tempe  kedelai  instan  ini  dimungkinkan kulit  kedelai  yang  tersisa  saat  pembuatan  tempe sangat  kecil,  sedangkan  senyawa  antibakteri banyak  terdapat  pada  kulit  yang  berwarna  hitam tersebut.
Hasil  analisis Sidik Ragam  menunjukkan ada pengaruh variasi pengolahan dengan aktivitas antibakteri minuman tempe kedelai hitam  dengan p  0,000  <  0,05.  Uji  lanjut  menggambarkan pengolahan  minuman  fungsional  tempe  kedelai hitam  yang  diolah  secara  non  instan  dengan penambahan  jahe  4%  (prosentase  tertinggi) mempunyai  perbedaan    aktivitas  antibakteri  yang paling kuat dibandingkan variasi yang lain.

## KESIMPULAN
Tempe kedelai hitam mempunyai kandungan  air  61,81%,  protein  20,36%,  lemak 2,9%  dan  abu  0,97%.  Bila  dibandingkan  dengan tempe kedelai kuning, kandungan proteinnya lebih tinggi,  tetapi  lebih  rendah  kandungan  air,  lemak dan abu.
Semua kriteria penilaian organoleptik yang meliputi  warna,  aroma,  rasa  dan  kekentalan minuman  tempe  kedelai  hitam  menunjukkan pengolahan  non  instan  mempunyai  citarasa  yang lebih  tinggi  dibanding  yang  diolah  dengan  cara dibuat  instan.  Pada  minuman  non  instan,  ada kecenderungan  semakin  banyak  penambahan
ekstrak  jahe  semakin  tinggi  tingkat  kesukaan konsumen.
Uji statistik daya terima menunjukkan ada pengaruh  yang  sangat  bermakna  pada  semua kriteria  penilaian  yang  meliputi    warna,  aroma, rasa dan kekentalan dengan variasi pengolahan.
Kadar  protein  minuman  fungsional  tempe kedelai  hitam  tertinggi  pada  pengolahan  non instan dengan penambahan ekstrak jahe 2%. Pada semua  variasi  penambahan  ekstrak  jahe,  secara umum  menunjukkan  kecenderungan  kandungan protein  yang  lebih  tinggi  pada  pengolahan  non instan  dibandingkan  yang  instan.  Hasil  analisis Ragam  menunjukkan  ada  pengaruh  variasi pengolahan dengan kadar protein  minuman tempe kedelai hitam
Minuman tempe kedelai hitam mempunyai aktifitas antibakteri yang tergolong lemah, dan ada pengaruh  variasi  pengolahan  dengan  aktifitas antibakteri pada minuman tempe kedelai hitam.
Disarankan  pada  pengolahan  minuman tempe  kedelai  hitam  sebaiknya  secara  non  instan dengan  penambahan  ekstrak  jahe  minimal  4% sehingga menghasilkan minuman fungsional yang mempunyai  mutu  organoleptik  tinggi,  juga  kadar protein  dan  aktifitas  antibakterinya,  dan  perlu dilakukan  penelitian  lanjut  terkait  optimasi pengolahan  minuman  tempe  kedelai  hitam sehingga  dapat  meningkatkan  nilai  fungsionalnya untuk peningkatan kesehatan.

## DAFTAR PUSTAKA
AOAC. 1990. Official Methods of Analysis, 14 th edn.  Washington DC.

## Astawan, M. 2008. Sehat Dengan Tempe.Panduan
Lengkap Menjaga Kesehatan dengan
Tempe. PT Dian Rakyat, Jakarta.
Lunggani,AT.,  S.Nurjanah.,  B.  Raharjo.  2008.
Diversifikasi Produk Tempe Dengan Inokulum Rhizopus  Sp Indigenous Untuk Pengembangan Pangan Fungsional.

## Nurhidajah.  2009. Daya  Tarima  Dan  Kualitas
Protein  In  Vitro  Tempe  Kedelai  Hitam (Glycine  soja)  Yang  Diolah  Pada  Suhu Tinggi.  Tesis  Magíster  Gizi  Masyarakat
Universitas Diponegoro, Semarang.

## Purwanti,S.  2004. Kajian  Suhu  Ruang  Simpan
Terhadap Kualitas Benih Kedelai Hitam dan Kedelai  Kuning. Jurnal  Ilmu  Pertanian  Vol.
11 No.1, 2004 : 22-31.
Rahayu, WP. 1998. Penuntun Praktikum Penilaian  Organoleptik. Jurusan  Teknologi
Pangan dan Gizi. IPB. Bogor.
Stodolak,  Bożena.,  Starzyńska,.  Janiszewska,  A.

## 2008. The Influence Of Tempe Fermentation
And Conventional Cooking On Anti-Nutrient Level  And  Protein  Bioavailability (In  Vitro Test)  Of  Grass-Pea  Seeds. Journal  of  the Science  of  Food  and  Agriculture,  Volume 88, Number 13, October 2008.
Winarno,  FG.  1997. Kimia  Pangan  dan  Gizi.  PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.