Pengaruh waktu panen dan nutrisi, Setyaningsih I, et al.
PENGARUH WAKTU PANEN DAN NUTRISI MEDIA TERHADAP BIOPIGMEN Spirulina platensis
Eff ect of Harvest Periods and Media Nutrition on Spirulina platensis Biopigment
Iriani Setyaningsih 1 *, Kustiariyah Tarman 1 , Woro Hastuti Satyantini 2 , Dita Agustina Barus 1
1 Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor, Jl. Agatis, Bogor 16680 Jawa Barat Telp. (0251) 8622909-8622907, Fax. (0251) 8622907
2 Jurusan Budidaya Perairan, Fakutas Perikanan dan Ilmu Keluatan Universitas Airlangga, Mulyorejo, Surabaya, Jawa Timur 60115 *Korespondensi: e-mail: iriani25@gmail.com Diterima 01 November 2013/Disetujui 21 Januari 2014

## Abstract
Spirulina platensis is a blue green algae containing phycocyanin biopigment and antioxidant, which are benefi cial for healthy. Production of biopigments from microalgae are infl uenced by nutrition and harvest periods . Th is study aimed to determine eff ect of nutrition and harvest periods on biopigment production of Spirulina platensis . Th e cultivation was conducted in the laboratory using media of KT (Zarrouk modifi cation by LIPI), MT (Zarrouk modifi cation by Hastuti) and Walne. Th e phycocyanin content of S. platensis in media MT (10.07 mg/mL) was not signifi cantly diff erent from Walne medium (7.49 mg/mL), but signifi cantly diff erent in media KT (0.71 mg/mL). Th ere was no signifi cant antioxidant activity of S. platensis in the three medias. Phycocyanin content of S. platensis on the 12 th days (10.42 mg/mL) was signifi cantly diff erent from the 6 th days (2.70 mg/mL), the 14 th days (8.14 mg/mL), and the 17 th days (3.09 mg/mL). Th ere was no signifi cant antioxidant activity of S. platensis at the four harvest period.
Keywords: biopigment, harvest period, media, Spirulina platensis

## Abstrak
Spirulina platensis merupakan alga hijau biru yang mengandung biopigmen fi kosianin dan antioksidan yang bermanfaat bagi kesehatan. Produksi biopigmen dipengaruhi oleh nutrien dan umur kultur. Penelitian ini bertujuan menentukan pengaruh media dan umur panen terhadap kandungan fi kosianin dan aktivitas antioksidan. Kultivasi S. platensis dilakukan di dalam laboratorium menggunakan media KT, MT, dan Walne. Ekstraksi fi kosianin dilakukan menggunakan pelarut akuades dan bufer fosfat. Kandungan fi kosianin S. platensis dalam media MT (10,07 mg/mL) tidak berbeda nyata dengan media Walne (7,49 mg/mL), tetapi berbeda nyata dengan media KT (0,71 mg/mL). Aktivitas antioksidan S. platensis pada ketiga media tidak berbeda nyata. Kandungan fi kosianin S. platensis pada hari ke-12 (10,42 mg/mL) berbeda nyata dengan hari ke-6 (2,70 mg/mL), hari ke-14 (8,14 mg/mL), dan hari ke-17 (3,09 mg/mL). Aktivitas antioksidan S. platensis pada keempat umur panen tidak berbeda nyata.
Kata kunci: antioksidan, fi kosianin, Spirulina platensis , waktu panen

## PENDAHULUAN
Spirulina merupakan alga hijau biru, berbentuk seperti fi lamen dan tipis. Ukuran Spirulina yang kecil, berbanding terbalik dengan manfaatnya yang sangat besar ( micro food macro blessing ) (Tietze 2004). Biopigmen C-fi kosianin Spirulina memiliki aktivitas antiinfl amatori, namun mekanismenya belum diketahui
(Cherng et al. 2007). Polisakarida dalam Spirulina memiliki efek antitumor dan antiviral, γ-asam linoleat (GLA) yang berfungsi dalam penurun kolesterol (Spolaore et al. 2006), antikarat (Kamal dan Sethuraman 2010), pencegah hepatitis (Gonzalez et al. 2003), pengkelat logam (Bermejo et al. 2008). Ilmuwan Cina mencatat fi kosianin yang menstimulasi

## berasal dari Laboratorium Pakan Alami,
Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Payau (BBPBAP) Jepara. Bahan kimia yang digunakan, yaitu NaOCl (klorin), Na 2 C 2 O 3 (natrium thiosulfat), akuades, bufer sodium fosfat 10 mM pH 7, larutan NaOH 4%, larutan Na 2 CO 3 20%, larutan Na-K-Tartrat 20%, dan larutan CuSO 4 .5H 2 O 5%, bovine serum albumin (BSA), dan Folin-Ciocalteu-fenol. Alat-alat yang digunakan meliputi fl ask untuk kultivasi,  luxmeter, oven (Yamato dv-41), sentrifus, dan spektrofotometer (UV-Vis RS UV-2500).

## Metode Penelitian
Penelitian ini meliputi persiapan air, kultivasi S. platensis , analisis kandungan pigmen fi kosianin, dan antioksidan serta analisis data.

## Persiapan Air untuk Media Kultur
Persiapan air meliputi penyaringan, penurunan salinitas, dan sterilisasi air laut. Penyaringan dilakukan menggunakan fi lter berdiameter 50 μm. Penurunan salinitas air laut sampai 15 ppt dilakukan dengan menambahkan air tawar salinitas 0 ppt dan diukur menggunakan WQM. Air laut yang sudah diturunkan salinitasnya, disterilisasi dengan menambahkan NaOCl 60 ppm dan diaerasi selama 24 jam. NaOCl yang ditambahkan dinetralisasi menggunakan Na 2 C 2 O 3 20 ppm dan diaerasi selama 24 jam.

## Kultivasi S. platensis
Kultivasi S. platensis dilakukan dalam tiga media yang berbeda, yaitu media Walne, media Zarrouk teknis modifi kasi Hastuti (MT), dan media Zarrouk teknis modifi kasi LIPI (KT) (komunikasi pribadi 2011**). Media Walne yang digunakan diperoleh dari Laboratorium Pakan Alami BBPBAP Jepara. Pemakaian media yaitu 1 mL/L dan konsentrasi bibit yang digunakan adalah 10% dari total kultur, aerasi terus menerus, dan intensitas cahaya yang diberikan adalah 3000 lux mengacu pada penelitian Diharmi (2001). Kultur dalam media
**Komunikasi pribadi dengan Woro S. Hastuti, dosen Univesitas Airlangga
pembentukan darah (Tietze 2004) dan bermanfaat sebagai antitumor (El-Baky 2003).
Penggunaan Spirulina di berbagai industri mengakibatkan konsumsi Spirulina dari tahun ke tahun semakin meningkat. Berbagai penelitian dan pengembangan telah dilakukan untuk memproduksi biomassa Spirulina sp. yang meliputi teknik kultur dalam berbagai skala produksi, optimasi kondisi lingkungan kultur, dan uji galur Spirulina sp. (Reinehr dan Costa 2006). Kultivasi Spirulina tidak membutuhkan lahan yang luas. Kultivasi pada lahan satu are (0,4646 hektar) Spirulina dapat memenuhi kebutuhan protein 400 orang, sedangkan kacang kedelai hanya mampu memenuhi 20 orang dan beras hanya dua orang dalam satu tahun (Tietze 2004).
Spirulina tumbuh di lingkungan basa.
Budidaya Spirulina tidak memerlukan pestisida atau herbisida. Bercocok tanam Spirulina dalam jangka waktu yang panjang merupakan metode yang terbaik dan teraman untuk menghasilkan makanan sehat tanpa merusak lingkungan jika dibandingkan dengan tanaman lainnya. Tietze (2004) menyatakan bahwa Spirulina merupakan salah satu sumber makanan yang terkenal di Meksiko dan Afrika sejak tahun 1524 serta merupakan makanan yang telah dipilih NASA sebagai sumber makanan di masa depan.
Kandungan kimia Spirulina bermanfaat bagi industri pangan, pakan, dan industri lainnya namun media kultivasinya mahal. Nutrien dan umur pemanenan merupakan faktor yang berpengaruh pada kandungan nutrisi alga sehingga perlu dicari media yang lebih murah yaitu media modifi kasi untuk menumbuhkan mikroalga ini serta menentukan umur panen yang baik untuk memperoleh komponen kimia yang sesuai. Penelitian ini bertujuan menentukan pengaruh media dan umur panen terhadap fi kosianin dan antioksidan S. platensis .

## BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan adalah air laut, air mineral, inokulum S. platensis yang
Pengaruh waktu panen dan nutrisi, Setyaningsih I, et al.
MT dilakukan dalam tiga stoples bening, aerasi terus menerus, disinari cahaya lampu tube lamp (TL) dengan intensitas 3000 lux selama
18 jam menyala dan 6 jam gelap. Kultur dalam media KT dilakukan dalam tiga stoples bening, aerasi terus menerus, disinari cahaya lampu TL dengan intensitas 4000 lux selama 18 jam menyala dan 6 jam gelap. Semua kultur tersebut diukur kandungan fi kosianin dan antioksidan pada hari ke-6, hari ke-12, hari ke-14, dan hari ke-17.
Ekstraksi fi kosianin dilakukan dengan menyaring 50 mL S. platensis menggunakan nylon mesh , dibilas menggunakan akuades 2-3 kali dan dimasukkan ke dalam tabung eppendorf . Sampel dikeringkan dalam oven pada suhu 50oC selama ±(24-48) jam. Ekstraksi fi kosianin dilakukan menggunakan pelarut yang berbeda, yaitu air destilasi (akuades) dan bufer sodium fosfat 10 mM (pH 7,0).
Spirulina platensis kering digerus dan ditambahkan pelarut bufer sodium fosfat dan akuades, masing-masing 1 mL untuk 0,04 g berat kering sampel. Sampel dihomogenkan menggunakan shaker (100-120) rpm selama ±24 jam pada suhu ruang, setelah itu dipisahkan antara endapan dan supernatan menggunakan sentrifugal pada kecepatan 12.000 rpm selama 15 menit dan diperoleh fi kosianin.

## Prosedur Analisis
Prosedur analisis pada penelitian ini meliputi: pengamatan laju pertumbuhan harian, ekstraksi fi kosianin, dan analisis kandungan fi kosianin serta antioksidan. Pertumbuhan S. platensis diamati dengan mengukur nilai rapat optis atau optical density (OD) menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang λ=670 nm, mengacu metode Silveira et al.
(2007). Sebanyak 10 mL sampel diambil menggunakan pipet volumetrik yang aseptik, dimasukkan dalam tabung reaksi, dan diukur menggunakan spektrofotometer sesuai dengan standard operational procedure (SOP) yang berlaku. Data yang diperoleh diplotkan dalam kurva pertumbuhan.
Fikosianin yang sudah diekstraksi diencerkan sesuai dengan masing-masing pelarut dan diukur
menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 615 nm dan 652 nm. Konsentrasi fi kosianin (PC) dihitung dengan persamaan Bennet dan Bogoard (1973), yaitu:
Pengujian aktivitas antioksidan S. platensis dilakukan menggunakan radikal bebas yang stabil yaitu DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) sesuai dengan metode Molyneux (2004). Konsentrasi bahan yang disediakan, yaitu 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 dan 1,0 mg/mL. Semua stok solusi dilarutkan dalam metanol p.a. Sebanyak 2,25 mL sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambah larutan   0,25 mL DPPH 1 mM. Analisis dilakukan secara duplo. Blanko disediakan dengan mencampur metanol dan DPPH dengan perbandingan yang sama seperti sampel. Tabung reaksi tersebut diinkubasi dalam suhu 37°C selama 30 menit dan diukur absorbansi pada λ=517 nm. Absorbansi yang rendah menunjukkan tingginya penangkal radikal bebas. Besarnya aktivitas penangkal radikal bebas ditentukan menggunakan rumus (%)=( (AA-AB)⁄AA ) x 100; AA adalah absorbansi blanko dan AB adalah absorbansi sampel.
Rancangan percobaan yang digunakan pada penelitian ini adalah rancangan acak lengkap (RAL) dengan percobaan dua faktor. Faktor pertama adalah perbedaan media tumbuh S. platensis , terdiri atas media Walne, media MT, dan media KT. Faktor kedua adalah perbedaaan umur panen yang terdiri atas hari ke-6, hari ke-12, hari ke-14, dan hari ke-17. Kedua faktor tersebut diuji untuk menentukan pengaruh terhadap kandungan protein, fi kosianin, dan antioksidan. Perlakuan yang berpengaruh terhadap respon, selanjutnya diuji lanjut Tukey .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kultivasi Spirulina platensis
Kepadatan sel dalam media MT lebih tinggi dibandingkan dengan dalam media Walne dan KT  pada hari yang sama (Gambar 1). Sumber nitrogen yang digunakan
dapat digambarkan sebagai suatu grafik pertumbuhan yang konstan. Utomo et al.
(2005) menyatakan bahwa dalam fase stasioner tidak terjadi penambahan jumlah sel. Kultur hari ke-17 diduga berada pada fase penurunan pertumbuhan yang ditandai dengan menurunnya jumlah sel. Pertumbuhan populasi terus berkurang seiring dengan waktu kultur dan laju kematian lebih tinggi dari laju pertumbuhan yang disebut sebagai fase kematian.
Kandungan Fikosianin S. platensis
Fikosianin adalah pigmen biru pada S. platensis yang dihasilkan melalui proses ekstraksi. Biopigmen fi kosianin larut dalam air sehingga dapat diekstraksi menggunakan akuades maupun buff er.
Ekstraksi kandungan fi kosianin S. platensis

## menggunakan akuades
Akuades merupakan bahan pelarut yang bersifat polar. Senyawa polar dapat melarutkan senyawa polar, senyawa organik, dan garam dari asam maupun basa organik (Achmadi 1992). Perbedaan media dan umur panen S. platensis memberikan pengaruh berbeda ( p <0,05) terhadap kandungan fi kosianin namun tidak ada interaksi antara kedua faktor tersebut. Hasil uji lanjut Tukey kandungan fi kosianin pada media dan umur berbeda disajikan pada Tabel 1 dan Tabel 2. Kandungan fi kosianin dalam media Walne dan MT tidak berbeda nyata tetapi berbeda nyata terhadap kultur dalam media KT ( p <0,05). Kandungan fi kosianin kultur pada hari ke-12 tidak berbeda
adalah (NH 4 ) 2 CO (urea) 0,13 g/L dan (NH 4 ) 2 SO 4 (ZA) 0,06 g/L cepat larut dalam air sehingga cepat dimanfaatkan oleh mikroalga untuk proses metabolisme. Leiwakabessy dan Sutandi (2004) melaporkan bahwa nitrogen dalam ammonium sulfat (ZA) dan urea cepat larut dalam air. Choi et al. (2003) melaporkan bahwa S. platensis yang ditumbuhkan dalam media urea sebagai sumber nitrogen memiliki rasio pertumbuhan spesifi k yang lebih tinggi dibandingkan kultur dengan sumber nitrogen amonium, nitrat, dan nitrit.
Kepadatan sel mikroalga dalam media KT fl uktuatif dan lebih tinggi dibandingkan mikroalga dalam media Walne, hal ini diduga karena pengaruh sodium bikarbonat yang tidak larut sempurna dalam media KT. Aerasi yang terus menerus menyebabkan sodium bikarbonat terbawa saat pengambilan sampel sehingga berpengaruh dalam pengukuran kerapatan sel menggunakan spektrofotometer.
Aerasi terus menerus menyebabkan endapat terus teraduk sehingga kultur terlihat lebih keruh. Siregar (2012) dalam penelitiannya mengenai zooxanthella melaporkan bahwa meningkatnya kekeruhan menghambat penetrasi cahaya matahari ke dalam perairan dan berbanding lurus dengan kemampuan fotosintesis serta mengurangi daya ikat energi cahaya matahari yang menghambat proses fotosintesis yang berakibat kurangnya populasi zooxanthella di perairan.
Kultur hari ke-14 diduga berada pada fase stasioner. Fase stasioner merupakan akhir dari produksi biomassa (akhir fase eksponensial). Kondisi ini
Gambar 1 Kurva pertumbuhan S. platensis dengan media berbeda:
( ........ ) MT; ( ........ ) Walne.
Pengaruh waktu panen dan nutrisi, Setyaningsih I, et al.
nyata dengan hari ke-14 tetapi berbeda nyata terhadap hari ke-6 dan hari ke-17 ( p <0,05).
Ekstraksi kandungan fi kosianin S. platensis dengan bufer fosfat
Ekstraksi menggunakan bufer fosfat termasuk metode ekstraksi dengan cara organic phase . Organic phase dilakukan dengan pelarut organik yang dapat melarutkan senyawa organik (Achmadi 1992). Kandungan fi kosianin S. platensis yang diekstraksi menggunakan bufer fosfat dalam media dan umur berbeda disajikan pada Tabel 3 dan Tabel 4.
Kandungan fi kosianin dalam media Walne dan MT tidak berbeda nyata tetapi berbeda nyata dengan media KT ( p <0,05). Kumar et al . (2011) a menyatakan bahwa intensitas cahaya merupakan salah satu faktor yang berpengaruh dalam pembentukan fi kosianin. Intensitas cahaya kultur dalam media Walne dan MT adalah 3000 lux menghasilkan fi kosianin yang tidak berbeda nyata. Intensitas cahaya kultur dalam media KT adalah 4000 lux dan menghasilkan fi kosianin yang lebih rendah.
Kandungan fi kosianin kultur pada hari ke- 12 berbeda nyata dengan hari ke-17 tetapi tidak berbeda nyata dengan hari ke-6 dan hari ke-14 ( p <0,05). Kumar et al. (2011) a melaporkan hasil penelitiannya bahwa konsentrasi fi kosianin (PC) pada kultur dengan intensitas cahaya 3000 lux adalah (61±0,35)%, sedangkan PC kultur pada intensitas cahaya lebih besar 3000 lux adalah (5,38±0,42)%. Kultur dengan intensitas cahaya lebih dari 3000 lux mengandung karotenoid yang lebih tinggi dibandingkan kandungan fi kosianin dan klorofi l.
Akuades dan bufer fosfat dapat melarutkan senyawa organik (Achmadi 1992). Kekuatan ion dan pH berpengaruh dalam ekstraksi fi kosianin (Silveira et al. 2007). Pola kandungan fi kosianin dalam media dan umur berbeda menggunakan pelarut bufer fosfat dan akuades adalah sama, hal ini diduga karena pelarut yang digunakan memiliki sifat yang sama. Akuades dan bufer fosfat memiliki pH yang sama yaitu 7 sehingga menghasilkan fi kosianin yang tidak berbeda nyata.
Aktivitas antioksidan S. platensis
Aktivitas antioksidan ditunjukkan dengan perubahan warna violet radikal bebas DPPH menjadi kekuningan karena berikatan dengan S. platensis memiliki aktivitas antioksidan. Daya hambat S. platensis terhadap radikal bebas meningkat seiring dengan peningkatan konsentrasi S. platensis . Nilai absorbansi berbanding terbalik dengan daya hambat. Inhibition concentration 50% (IC 50 ) adalah salah satu parameter untuk menginterpretasikan aktivitas antioksidan pada metode DPPH (Molyneux 2004). Perbedaan media dan umur kultur memberikan pengaruh berbeda ( p <0,05) terhadap aktivitas antioksidan S. platensis tetapi tidak ada interaksi antara keduanya. Nilai IC 50 S. platensis pada media dan umur berbeda disajikan pada Tabel 5 dan Tabel 6.
Nilai IC 50 kultur dalam media Walne lebih rendah dibandingkan media lainnya, hal ini menunjukkan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi. Aktivitas antioksidan dalam ketiga media dan umur yang berbeda.  Hasil penelitian yang sudah pernah dilakukan, beberapa kandungan S. platensis yang berperan sebagai antioksidan yaitu fi kosianin dan klorofi l  (Romay et al.
2003), fl avonoid, β-karoten, vitamin A, dan α-tokoferol (Wang et al. 2007). Wang et al.
(2007) melaporkan bahwa perbedaan jenis spesies Spirulina yang diteliti, perbedaan kondisi lingkungan tempat pembiakan Spirulina, yaitu pH media, cahaya matahari, dan kandungan oksigen serta nitrogen mempengaruhi kandungan komponen-komponen tersebut.  Colla et al.
(2007) melaporkan bahwa semakin tinggi kandungan nitrogen yang ditambahkan maka akan meningkatkan sel dan berbanding lurus dengan peningkatan sintesis komponen fenol. Peningkatan 0,625 g/L sumber nitrogen menyebabkan peningkatan kandungan antioksidan sebesar 6%. Hal yang sama dilaporkan El-Baky (2003) menyatakan bahwa peningkatan kandungan allofi kosianin  (A-PC) Spirulina berbanding lurus dengan penambahan nitrogen dan garam dalam medium pertumbuhan S. platensis .
Kumar et al. (2011) b melaporkan bahwa peningkatan komponen-komponen antioksidan
berkolerasi dengan peningkatan jumlah sel kultur. Salah satu parameter yang diukur adalah kandungan klorofi l. Kandungan klorofi selama pertumbuhan selalu meningkat dan kandungan klorofi l tertinggi diperoleh pada puncak populasi.
Aktivitas antioksidan yang diklasifi kasikan Blois dan Zhao (1958) yaitu aktivitas antioksidan
sangat kuat apabila nilai IC 50 kurang dari 50 ppm, kuat apabila nilai IC 50 antara (50-100) ppm,  dan sedang apabila nilai IC 50 berkisar antara (150- 200) ppm. Aktivitas antioksidan S. platensis yang dikultivasi dalam media Walne, MT, dan KT tergolong sangat rendah, hal ini diduga karena tidak dilakukan ekstraksi terlebih dahulu pada saat dianalisis. Fu et al. (2011)
Tabel 1 Kandungan fi kosianin S. platensis dalam media berbeda (ekstraksi menggunakan akuades) Media Kandungan fi kosianin (mg/mL) Walne 7,49 a MT 10,07 a KT 0,71 b
Keterangan: Superscript menunjukkan hasil ANOVA, huruf berbeda menunjukkan hasil berbeda nyata ( p <0,05)
Tabel 2 Kandungan fi kosianin S. platensis pada waktu panen berbeda (ekstraksi
menggunakan akuades) Media Kandungan fi kosianin (mg/mL) Hari ke-6 2,70 a Hari ke-12 10,42 b Hari ke-14 8,14 ab Hari ke-17 3,09 a Keterangan: Superscript menunjukkan hasil ANOVA, huruf berbeda menunjukkan hasil berbeda nyata ( p <0,05)
Tabel 3 Kandungan fi kosianin S. platensis dalam media berbeda (ekstraksi
menggunakan buff er fosfat) Media Kandungan fi kosianin (mg/mL) Walne 6,68 a MT 6,51 a KT 1,77 b
Keterangan: Superscript menunjukkan hasil ANOVA, huruf berbeda menunjukkan hasil berbeda nyata ( p <0,05)
Tabel 4 Kandungan fi kosianin S. platensis pada umur berbeda (ekstraksi
menggunakan buff er fosfat) Media Kandungan fi kosianin (mg/mL) Walne 6,68 a MT 6,51 a KT 1,77 b
Keterangan: Superscript menunjukkan hasil ANOVA, huruf berbeda menunjukkan hasil berbeda nyata ( p <0,05)
Pengaruh waktu panen dan nutrisi, Setyaningsih I, et al.
menyatakan bahwa aktivitas antioksidan suatu bahan tergantung pada beberapa faktor, yaitu sistem uji dan tidak dapat dijelaskan hanya dengan menggunakan satu metode saja.

## KESIMPULAN
Spirulina platensis yang ditumbuhkan dalam media Walne, MT, dan KT mempunyai pola pertumbuhan yang sama. Kandungan fi kosianin dan aktivitas antioksidan (IC 50 ) Spirulina platensis yang dikultivasi dalam media MT tidak berbeda nyata dengan media Walne sehingga MT dapat digunakan untuk menggantikan media Walne sebagai media yang lebih ekonomis. Waktu panen yang baik untuk mendapatkan biopigmen fi kosianin yang tinggi adalah hari ke-12.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmadi SS. 1992. Teknik Kimia Organik . Bogor: Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.
Bennet A, Bogorad L. 1973. Complementary chromatic adaptation in a fi lamentous blue-green alga. Th e Journal of Cell Biology 58: 419-435.
Bermejo P, Pinero E, Villar A. 2008. Iron- chelating ability and antioxidant
properties of phycocyanin isolated from a protean extract of Spirulina platensis . Food Chemistry 110: 436-446.
Blois MS, Zhao XY. 1958. Antioxdant determinations by the use of a stable free radical. Nature 181: 1199-1200.
Cherng S, Cheng S, Tarn A, Chou Tz. 2007. Anti-infl amatory activity of c-phycocyanin in lipopolysaccharide- stimulated RAW 264,7 macrophages. Life Sciences 81: 1431-1435.
Choi A, Gun Kim S, Yoon B, Oh H. 2003. Growth and amino acid contents of Spirulina platensis with diff erent nitrogen sources. Journal of Biotechnology and Bioprocess Engineering 8 : 368-372. Colla LM, Furlong EB, Costa JAV. 2007. Antioxidant properties Spirulina ( Arthospira ) platensis cultivated under diff erent temperatures and nitrogen regimes. Brazilian Archives of Biology and Technology 50(1): 161-167.
Diharmi A. 2001. Pengaruh pencahayaan terhadap kandungan pigmen bioaktif mikroalga Spirulina platensis strain lokal (INK) [tesis]. Bogor: Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
El-Baky H. 2003. Over production of phycocyanin pigment in blue green alga
Tabel 5 Nilai IC 50 aktivvitas antioksidan S. platensis dalam media berbeda Media Nilai IC 50 (ppm) Walne 1381,38 a MT 2273,72 a KT 4092,06 a
Keterangan: Superscript menunjukkan hasil ANOVA, huruf berbeda menunjukkan hasil berbeda nyata ( p <0,05)
Tabel 6 Nilai IC 50 aktivitas antioksidan S. platensis pada umur berbeda Media Kandungan fi kosianin (mg/mL) Hari ke-6 3467,97 a Hari ke-12 1854,74 a Hari ke-14 2405,16 a Hari ke-17 1517,50 a
Keterangan: Superscript menunjukkan hasil ANOVA, huruf berbeda menunjukkan hasil berbeda nyata ( p <0,05)
Spirulina sp. and it's inhibitory effect on growth of enrich ascites carcinoma cells. Journal Medical Science 3 (4):
314-324.
Fu L, Tao Xu B, Rong Xu X, You Gan R, Zhang Y, Qin Xia E, Bin Li H. 2011. Antioxidant capacities and total phenolic content of 62 fruits. Food Chemistry 129: 345-350. Gonzalez R, Gonzalez A, Remirez D, Romay
C, Rodriguez S, Ancheta O, Merino N. 2003. Protective eff ects of phycocyanin on galactosamine-induced hepatitis in rats. Biotechnology Aplicada 20: 107-110. Kamal C, Sethuraman MG. 2010. Spirulina platensis- A novel inhibitor for acid corrosion of mild steel. Arabian Journal of
Chemistry 5: 155-161.
Kumar M, Kulshreshtha J, Singh G. 2011a. Growth and biopigment accumulation of cyanobacterium Spirulina platensis at diff erent light intensities and temperature. Brazilian Journal of Microbiology 42: 1128-1135.
Kumar M, Kulshreshtha J, Singh G. 2011b. Growth and pigment profi le of Spirulina platensis isolated from Rajasthan, India. Research Journal of Agricultural Sciences 2 (1): 83-86. Leiwakabessy F, Sutandi A. 2004. Diktat
Perkuliahan Pupuk dan Pemupukan . Bogor: Departemen Tanah, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor. Molyneux P. 2004. Th e use of stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Journal of Science Technology 26: 211-219.
Oliveira M, Monteiro M, Robbs P, Leite S. 1999. Growth and chemical composition of Spirulina maxima and Spirulina platensis biomass at diff erent temperatures.
Aquaculture International 7: 261-275.
Reinehr CO, Costa JAV. 2006. Repeated batch cultivation of the microalga Spirulina platensis . Journal of Microbiology and Biotechnology 22: 937-943.
Romay Ch, Gonzalez, Ledon N, Remirez N, Rimbau V. 2003. C-Phycocyanin: A biliprotein
with antioxidant, anti-infl ammatory,  and neuroprotective eff ects. Current Protein and Peptide Science 4 (3): 207-216.
Setyaningsih I, Saputra A, Uju. 2011. Komposisi kimia dan pigmen Spirulina fusiformis pada umur panen yang berbeda. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia 14 (1): 1-12. Silveira ST, Burkert JFM, Costa JAV, Burkert CAV, Kalil SJ. 2007. Optimization of phycocyanin extraction from Spirulina platensis using factorial design. Bioresources Technology 98: 1629–1634.
Siregar CM. 2012. Densitas Zooxanthella pada karang Acropora sp. di Pulau Sikuai Kota Padang Sumatera Barat Provinsi Sumatera Barat [Internet]. Riau: Universitas Riau.  [diunduh 2013 Feb 12]. Tersedia pada: http://repository.unri.ac.id/ handle/123456789/795.
Spolaore P, Joannis-Cassan C, Duran E, Isambert A. 2006. Commercial application of microalgae. Journal of Bioscience and Bioengineering 101(2): 87-96.
Suantika G, Hendrawati D. 2009. Efektivitas teknik kultur menggunakan sistem kultur statis, semi-kontinyu, dan kontinyu terhadap produktivitas dan kualitas kultur Spirulina sp. Jurnal Matematika dan Sains 14 (2): 1-10.
Suminto. 2009. Penggunaan jenis media kultur teknis terhadap produksi dan kandungan nutrisi sel Spirulina platensis . Jurnal Saintek Perikanan 4(2): 53-61. Tietze HW. 2004. Spirulina Micro Food Macro Blessing , Ed ke-4. Australia: Harald W. Tietze Publishing.
Utomo NBP, Winarti, Erlina A. 2005. Pertumbuhan Spirulina platensis yang dikultur dengan pupuk inorganik (Urea, TSP dan ZA) dan kotoran ayam. Jurnal Akukultur Indonesia 4(1): 41-48.
Wang L, Pan B, Sheng J, Xu J, Hu Q. 2007. Antioxidant activity of Spirulina platensis extracts by supercritical carbon dioxide extraction. Food Chemistry 105: 36-41.