Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) 2018; 4 (2): 87 – 92 ISSN : 2442-8744 (electronic) http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/Galenika/index DOI : 10.22487/j24428744. 2018.v4.i2.10 472

## Efek Sinergitas Ekstrak Kulit Jeruk (Citrus  sinensis  L) Pada  Patch Bioselulosa Dalam Meningkatkan Penyembuhan Luka Bakar

## (Synergetic Effect of Orange Peel Extract in Biocellulose Patch Toward Burn Wound
Healing)
Tri Puspita Roska, Syahidah Sahati, Andi Dinul Fitrah, Nana Juniarti, Natsir Djide
Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin, Makassar, Indonesia, 90245
Article Info: Received: 24 agustus 2018
in revised form:02 September 2018
Accepted: 18 September 2018
Available Online:30 September 2018

## ABSTRACT
Burns is one of the incidents that can lead to death (mortality). One of the natural products that have  potential to serve as an alternative treatment of burns is orange peel. Orange peel has a chemical composition such as ascorbic acid, vitamin E, vitamin A,  and polyphenols  as antioxidants  that inhibit free radicals responsible  in the pathogenesis of both acute and chronic  inflammatory. In this study, formulation was  made in the form of biocellulose  which is the primary metabolism  product of bacteria.  The purpose of this research was to obtain the concentration of the extract of orange peel on  bioselullose  that have the effect of decreasing the burn wound  in rats. Orange peel was  extracted then fortified into biocellulose with a concentration of 3%, 6%, and 9%. After that, the wound healing was tested on animals in the form of decreasing the wound diameter.  The results showed that the concentration of extract of orange peel 3% on the fortification of biocellulose  showed  the  good percentage of burn wound decreasing  i.e. 45.52% with diameter average of 18.35 mm. This result indicates  the concentration of extract of orange peel 3% is better than others.
Keywords :
Orange peel Biocellulose
Wound burn
Corresponding Author: Tri Puspita Roska
Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin
Makassar 90245
Tripuspita.roska@yahoo.com
Copyright © 2017 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.

## How to cite (APA 6th Style):
Roska,  T.P., et al. (2018). Efek Sinergitas Ekstrak Kulit Jeruk (Citrus Sinensis L) Pada Patch Bioselulosa  Dalam Meningkatkan Penyembuhan Luka Bakar. Jurnal Farmasi Galenika : Galenika Journal of Pharmacy, 4(2),  87-92. doi:10.22487/j24428744.2018.v4.i2.10472

## ABSTRAK
Luka bakar merupakan salah satu insiden yang dapat menyebabkan kematian. Salah satu bahan alam yang mempunyai potensi untuk dijadikan sebagai alternatif pengobatan luka bakar adalah kulit jeruk. Kulit jeruk memiliki komposisi kimia seperti asam askorbat, vitamin E, vitamin A, dan polifenol sebagai antioksidan  yang  menghambat radikal bebas yang berperan penting dalam patogenesis inflamasi baik pada inflamasi akut maupun kronis. Dalam penelitian ini, sediaan luka bakar dibuat dalam bentuk bioselulosa yang merupakan hasil metabolisme primer dari bakteri.  Tujuan penelitian ini untuk memperoleh konsentrasi ekstrak kulit jeruk pada bioselulosa yang mempunyai efek penurunan luka bakar terbaik  pada tikus. Kulit jeruk diekstraksi kemudian difortifikasi kedalam bioselulosa dengan konsentrasi 3%, 6% dan 9%. Setelah itu, dilakukan pengujian penyembuhan luka pada hewan coba yang berupa penurunan diameter luka.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi ekstrak kulit jeruk 3% pada fortifikasi bioselulosa menunjukkan persentase penurunan luka bakar yang baik yaitu 45,52% dengan dimeter rata-rata 18,35 mm. Hasil ini menunjukkan bahwa konsentrasi kulit jeruk 3% lebih baik dibandingkan dengan lainnya.
Kata kunci : ekstrak kulit jeruk, bioselulosa, luka bakar

## PENDAHULUAN
Luka bakar merupakan insiden yang diperkirakan terjadi sekitar 2,4 juta kasus di berbagai negara yang berbeda, 650.000 dan 75.000 di antaranya memerlukan perawatan segera dan rawat inap (Ardabili, Abdi, Ghezeljeh, Hosseini, & Teymoori, 2016). Di Indonesia, belum ada angka pasti mengenai kejadian luka  bakar, ini disebabkan karena tidak semua rumah sakit di Indonesia memiliki unit pelayanan luka bakar. Data  perhimpunan  luka  bakar dan  penyembuhan  luka  Indonesia  pada tahun 2015, tercatat  bahwa sepanjang 2012-2014 terdapat 3.518 kasus luka bakar di 14 rumah sakit besardi Indonesia. Lebih dari 95% angka kejadian luka bakar menyebabkan kematian (mortalitas). Selain itu, data dari Rumah Sakit Wahidin Sudirohusodo Makassar menunjukkan dalam jangka waktu 5 tahun 2006-2009 jumlah penderita luka bakar yang dirawat di perawatan luka bakar adalah 102 kasus,dengan angka kematian sebanyak  9,2%,dan selama tahun 2010, jumlah kasus yang dirawat sebanyak 88 kasus dengan angka kematian 17,2% (Sarimin, 2009).
Tindakan yang dapat dilakukan pada luka bakar adalah dengan memberikan terapi lokal dengan tujuan untuk mendapatkan kesembuhan secepat mungkin. Selama ini obat yang sering digunakan oleh masyarakat dalam  menangani luka bakar adalah Bioplacenton ® . Bioplacenton ® menyebabkan iritasi kulit ditandai bintik-bintik merah pada kulit
(Burhanudin, 2014). Penanganan luka bakar dengan bahan alam merupakan salah satu cara yang aman untuk mengobati luka bakar dan sekaligus menekan biaya pengobatan luka bakar. Salah satunya dengan menggunakan kulit jeruk.
Kulit jeruk ( Citrus sinensis L) memiliki komposisi kimia seperti asam askorbat, vitamin E, vitamin A, dan polifenol. Sebagai antioksidan, polifenol menghambat radikal bebas yang berperan penting dalam patogenesis inflamasi baik pada inflamasi akut maupun kronis (Veres, 2012). Flavonoid yang merupakan substansi  polifenol memiliki efek anti inflamasi dengan menghambat cyclooxygenase (Kumar, Ramzi, & Stanley 2007), memiliki aktivitas antioksidan, dan antibakteri. Flavonoid juga memiliki efek dalam meningkatkan penyembuhan luka dengan mempercepat laju epitelisasi melalui induksi produksi transforming growth factor (TGF)-beta. Kandungan hesperidin mampu mengurangi pembengkakan dengan meregulasi mikrosirkulasi. Kandungan asam askorbat dalam kulit jeruk dapat  meningkatkan kekuatan dan integritas pada luka (Miloro, Ghali, Larsen, & Waite, 2012).
Beberapa macam sediaan topikal yang ada antara lain, salep, pasta, gel dan krim. Dalam penelitian ini, sediaan luka bakar dibuat dalam bentuk bioselulosa. Bioselulosa (selulosa bakteri) merupakan produk spesifik dari metabolisme primer bakteri serta berperan sebagai lapisan pelindung. Bioselulosa
memiliki berbagai keuntungan sebagai wound dressing dalam penyembuhan luka dibandingkan dengan wound dressing konvensional yaitu biokompatibel, elastis, transparan, memiliki serat yang rapat, kemampuan untuk mempertahankan lingkungan yang lembab pada luka dan menyerap eksudat selama fase inflamasi. Kemampuan tersebut dapat diperoleh melalui fermentasi air kelapa berupa bahan alam yang difermentasi dengan Acetobacter xylinium (Chawla, Bajaj, Survase, & Singhal, 2009). Oleh karena itu,penelitian ini bertujuan untuk memanfaatkan ekstrak kulit jeruk ( Citrus sinensis ) yang kemudian akan difortifikasikan ke dalam bioselulosa untuk terapi luka bakar. Bioselulosa mudah dilepaskan dari permukaan luka dan menyerap eksudat selama fase inflamasi sehingga lebih efektif dan efisien sebagai alternatif pengobatan luka bakar.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Rotary evaporator (Heidolph R ), pencukur bulu elektrik, spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu UV1800),  inkubator (Memmert R ),  autoklaf, oven, kompor listrik, timbangan analitik, timbangan digital, toples dan vortex
Kulit jeruk diperoleh dari pasar tradisional Daya Makassar.  Air kelapa, ammonium sulfat  (Merck), aqua destilata  (Water one), asam asetat, bahan pengujian histologi,   A cetobater xylinium , , daryantulle ® , etanol 70 %  (OneMed), asam galat, sitroborat, vanilin sulfat, Liberman Burchard (Merck),  etanol 96%  (OneMed), gula, handscun , Handsaplast, kapas, kelinci, larutan HCl 3%, larutan NaOH 3%, magnesium sulfat  (Merck), gula  pasir, teh, tikus, dan hypafix ®

## Ekstraksi Kulit Jeruk(Citrus sinensims L)
Ekstrak dibuat dengan metode maserasi, sebanyak 0,5 kg simplisia direndam dengan 1 L pelarut selama 5 hari berturut-turut yang sesekali diaduk. Maserat dikumpulkan dan diuapkan dengan Rotary evaporator dengan suhu 50 0 C

## Evaluasi Ekstrak Kulit Jeruk (Citrus sinensis L)
Skrining fitokimia meliputi uji alkaloid, terpenoid, fenol, flavonoid, saponin dan tanin.Kandungan flavonoid total ditentukan dengan menggunakan metode Folin Ciocalteu. Awalnya, ekstrak kulit jeruk disiapkan pada konsentrasi 0,1g/mL. Absorbansi diukur dengan spektrofotometri UV-Vis pada 798 nm terhadap Kurva standar asam galat.

## Pembuatan Media dan  Starter Acetobacter xylinum
Sebanyak 80 ml air kelapa disiapkan, kemudian dipanaskan hingga mendidih. Kedalam air kelapa yang telah didinginkan ditambahkan 10 gram gula, kemudian ditambahkan magnesium sulfat 0,02 gram, dan ammonium sulfat 0,06 gram. Pada wadah terpisah dibuat larutan teh 0,2 % kemudian disaring. Hasil saringan diambil 10 ml yang kemudian dimasukkan ke medium produksi. pH medium yang digunakan ialah pH 4 lalu menggunakan asam asetat glasial. Media disterilkan dalam autoklaf suhu 100 º C. Setelah dingin, pada setiap wadah ditambahkan 10 % biakan starter Acetobacter xylinum dan inkubasi pada suhu 30° selama 3 hari (Djide, 2012).

## Pemurnian Bioselulosa
Bioselulosa yang terbentuk setelah inkubasi pada permukaan tiap media diambil dan dibilas dengan air suling, kemudian diukur ketebalan serta bobot setiap bioselulosa. Bioselulosa diletakkan pada kertas saring untuk menghilangkan 80% fase cair kemudian direndam dalam larutan NaOH 3% selama 12 jam. Prosedur ini diulangi sebanyak 3 kali. Bioselulosa kemudian direndam pada larutan HCl 3% kemudian dibilas dengan air suling hingga pH dari air suling menjadi netral. Bioselulosa yang telah dimurnikan kemudian disterilkan menggunakan autoklaf suhu 121°C  selama 15 menit (Djide, 2012).

## Pencetakan dan Fortifikasi
Bioselulosa yang telah dimurnikan dipress terlebih dahulu hingga diperoleh lembaran-lembaran selulosa dan dipotong persegi dengan ukuran 1,5 cm x 1,5 cm kemudian dipotong sesuai yang dibutuhkan. Kemudian lembaran tersebut direndam dalam ektrak kulit jeruk dengan konsentrasi 3%, 6% dan 9% selama 1 -  2 hari. Hasil fortifikasi kemudian dikarakterisasi dan direkatkan pada plester dan diberi label Bioselulosa 1, 2 dan 3(Djide, 2012).

## Pengujian Penyembuhan Luka Bakar Pada Hewan Coba
Hewan coba yang digunakan ialah tikus sebanyak 6 ekor yang diadaptasikan dalam kandang selama 7 hari. Pakan diberikan ad libitum. Selanjutnya dilakukan pemberian tanda pada tiap tikus. Pembagian kelompok perlakuan antara lain : 1. Pada sisi kiri atas tidak diberikan luka apapun
2. sebagai kontrol negatif punggung tikus dilukai untuk memperoleh luka bakar derajat 2 menggunakan penginduksi panas 180 0 C  untuk
diameter 1,5 cm. Dengan daya 40 watt dan voltase 220 Volt diatas dermis tikus.
3. Punggung tikus dilukai menggunakan penginduksi panas 180 0 C    diameter 1,5 cm. Dengan daya 40 watt dan voltase 220Volt diatas dermis kelinci. Kemudian diaplikasikan bioselulosa terfortifikasi ekstrak kulit jeruk .
4. Sebagai kontrol positif  punggung kelinci dilukai menggunakan penginduksi panas 180 0 Cuntuk diameter 1,5 cm. Dengan daya 40 watt dan voltase 220 Volt diatas  kelinci. Kemudian diaplikasikan obat dariantule pada bagian luka tersebut.

## Penurunan diameter luka bakar
Pengamatan dan penggantian sediaan dilakukan setiap 2 hari hingga hari ke-8 dengan kriteria presentase penurunan diameter luka bakar, warna luka dan penampakan luka diamati secara makroskopik.Luka yang terjadi diukur diameternya, kemudiandihitung rata-ratanya. Penurunan diameter luka bakar dihitung sebagai berikut :
Px =  d1 2 + dx 2 x   100% d1 2
Dimana,  Px = persentase penurunan diameter luka bakar hari ke-x,  d1 = diameter luka hari pertama,  dx = diameter luka hari ke-x

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil ekstraksi kulit buah jeruk   menggunakan etanol 70%  diperoleh hasil ekstrak kental.      Hasil skrining fito kimia ekstrak dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil skrining fitokimia secara kualitatif
Parameter Hasil Keterangan Alkaloid Wagner : Coklat kemerahan Positif Mayer : Endapan Putih Positif Tanin Hijau Kehitaman Positif Flavonoid Hijau Positif Saponin Busa stabil Positif
Berdasarkan hasil penelitian,ekstrak kulit jeruk mengandungalkaloid, flavonoid, saponin dan tannin. Ekstrak etanol kulit jeruk dilakukan ujikualitatif
melalui metode uji tabung dengan melihat perubahan warna untuk mengetahui keberadaan senyawa kimia (Sari  &  Ayati, 2018). Pada pengujian kuantitatif menggunakan spektrofotometer UV-Vis, kadar total fenolik  pada ekstrak kulit jeruk yaitu 1,75mg/g esktrak dan kadar total flavonoid  yaitu 0,7088 mg/g ekstrak. Kulit jeruk memiliki komposisi kimia seperti asam askorbat, vitamin E, vitamin A, polifenol dan flavonoid. Hasil menunjukkan bahwa ekstrak kulit jeruk memiliki  nilai IC 50 sebesar 79 ppm. Dari hasil penelitian ini ekstrak kulit jeruk memiliki aktivitas antioksidan dalam kategori kuat (Sari & Ayati, 2018).
Pengujian efektivitas bioselulosa sebagai pembalut luka bakar dilakukan pada tikus yang telah diinduksi dengan plat panas denganparameter berupa penurunan diameter luka serta perbaikan pada warna dan tampakan luka bakar. Grafik  diameter rata-rata luka bakar dapat dilihat pada tabel 1.

## Gambar 1.   Presentase penurunan luka bakar setelah perlakuan
Pada kontrol negatif, luka ditutup dengan perban tanpa pengobatan, diperoleh hasil rata-rata diameter luka bakar yaitu 19,904 mm. Persentase penurunan diameter luka bakar sebesar 31,56 %.  Pada pengamatan terhadap warna luka menunjukkan luka berwarna agak putih kemudian lama-kelamaan menjadi berwarna agak coklat kemudian berangsur- angsur berubah menjadi agak lebih cerah dengan bagian  pinggir yang agak gelap. Sedangkan
0 10 20 30 40 50 Per sen ta se ( % ) Perlakuan Persentase Penurunan Diameter Luka Bakar
penampakan luka yaitu tetap kering dari pertama hingga terakhir pengamatan.
Pada kontrol positif dimana luka diobati dengan sediaan Daryanttulle ® diperoleh hasil rata-rata diameter luka bakar yaitu 19,794 mm. Persentase penurunan diameter luka bakar sebesar 38,39 %. Pada pengataman terhadap warna luka menunjukkan luka berwarna agak putih kemudian menjadi putih kecoklatan pada awalnya kemudian berangsur-angsur berubah menjadi agak lebih cerah dengan bagian pinggir yang agak kemerahan. Sedangkan penampakan luka yaitu agak basah pada hari ke 1-3 dan kemudian kering pada hari ke empat hingga terakhir pengamatan.
Pada bioselulosa I yang difortifikasi dengan ekstrak kulit jeruk konsentrasi 3% diperoleh hasil rata-rata diameter  luka bakar yaitu 18,35 mm dan persentase penurunan diameter luka bakar sebesar 45,52 %. Penurunan diameter luka bakar menunjukkan hasil yang baik dibandingkan dengan kontrol negatif meskipun persentasenya sedikit lebih rendah dari kontrol positif. Pada pengataman terhadap warna luka menunjukkan luka berwarna agak putih kemudian menjadi kecoklatan berangsur-angsur berubah menjadi agak lebih cerah dengan bagian pinggir yang agak kemerahan. Sedangkan penampakan luka yaitu tetap kering dari pertama hingga terakhir pengamatan.
Pada bioselulosa III yang difortifikasi dengan ekstrak kulit jeruk konsentrasi 6% diperoleh hasil rata-rata diameter luka bakar yaitu 20,29 mm dan  Persentase penurunan diameter luka bakar sebesar 23,36%. Penurunan diameter luka bakar menunjukkan hasil dibandingkan dengan  perlakuan lainnya. Pada pengataman terhadap warna luka menunjukkan luka berwarna agak putih kemudian menjadi putih kecoklatan berangsur-angsur berubah menjadi agak lebih cerah dengan bagian pinggir yang agak kemerahan dan masih ada bagian warna agak putih kekuningan terlihat. Sedangkan penampakan luka yaitu tetap kering dari pertama hingga terakhir pengamatan.
Kemampuan bioselulosa I dengan konsentrasi ekstrak 3% menunjukkan penurunan diameter luka bakar yang lebih baik dibandingkan dengan lainnya. Bioselulosa yang mempunyai kemampuan menahan air yang lebih besar. Kemampuan menahan air yang tinggi dapat mempertahankan kondisi yang lembap pada permukaan luka (Czaja, Krystynowicz, Bielecki, & Brown, 2006)  yang dapat meningkatkan perkembangan jaringan dan mempercepat proses re-
epitelisasi. Bioselulosa secara umum juga menciptakan kondisi lingkungan yang optimal bagi proses penyembuhan dengan mempertahankan lapisan uap air untuk migrasi dan pertumbuhan sel baru (Brown & Saxena, 2007). Selain itu, bioselulosa juga berperan sebagai lapisan pelindung dari infeksi bakteri  (Czaja, Krystynowicz, Bielecki, & Brown, 2006)  serta mudah untuk dilepaskan dari luka dibandingkan dengan pembalut konvensional lain yang dapat melengket pada permukaan luka (Lina, Yue, Jin, & Guang, 2011).  Diperlukan penelitian lebih lanjut tentang pengaruh konsentrasi ekstrak kulit jeruk (Citrus sinensis L) pada bioselulosa terhadap penyembuhan luka bakar t konsentrasi dibawah 3%.

## KESIMPULAN
Penambahan ekstrak kulit jeruk (Citrus sinensis L) pada bioselulosa dapat meningkatkan penurunana luka bakar pada tikus. Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, konsentrasi ekstrak kulit jeruk 3% yang difortifikasi pada bioselulosa memiliki persentase penurunan diameter luka bakar paling baik.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian ini merupakan penelitian yang didanai oleh kemenristekdikti melalui Program Kreatifitas Mahasiswa tahun 2018. Terimakasih diucapkan kepada Kemenristekdikti,  Universitas Hasanuddin, dosen pembimbing  Nana Juniarti, S.Si., M.Si., Apt., Kepala Laboratorium Patologi Anatomi RS Siloam Makassar dr. Rina Masadah  yang telah membantu dalam pelaksanaan penelitian,serta semua pihak yang telah membantu penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ardabili, F. M., Abdi, S., Ghezeljeh, T. N., Hosseini,
A. F., & Teymoori, A. (2016). Evaluation of the effects of patient-selected music therapy on the sleep quality and pain intensity of burn patients. Medical - Surgical Nursing Journal ,
5 (2), 27–34.
Brown, R. M., & Saxena, I. M. (2007). Cellulose: Molecular and Structural Biology: Selected Articles on the Synthesis, Structure, and Applications of Cellulose . Dordrecht:
Springer.
Burhanudin, F.N. (2014). Uji Efektifitas Formulasi Gel Ekstrak Daun Cermai (Phyllanthus acidus L.) Terhadap Lama Kesembuhan Luka
Bakar Pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus)
Jantan.  Semarang:  Sekolah  Tinggi Ilmu kesehatan Ngudi Waluyo.
Chawla, P. R., Bajaj, I. B., Survase, S. A., & Singhal,
R. S. (2009). Microbial Cellulose:
Fermentative Production and Applications.
Food Technology & Biotechnology , 47 (2),
107–124.
Czaja, W., Krystynowicz, A., Bielecki, S., & Brown,
R. M. (2006). Microbial cellulose —  the natural power to heal wounds. Biomaterials ,
27 (2), 145–151.
Djide, N.J.N. (2012). Pengaruh waktu pemanenan terhadap produksi bioselulosa oleh acetobacter xylinum dalam media air kelapa yang difortifikasi dengan teh sebagai pembalut luka bakar. Makassar: Skripsi
Fakultas Farmasi UNHAS.
Kumar, V., Ramzi S.C., dan Stanley, L.R., (2007).
Buku Ajar Patologi . EGC: Jakarta, pp. 76.
Lina, F., Yue, Z., Jin, Z., & Guang, Y. (2011). Bacterial Cellulose for Skin Repair Materials.
Biomedical Engineering -  Frontiers and Challenges .
Miloro, M., Ghali, G., Larsen, P., & Waite, P. (2012).
Peterson's principles of oral and maxillofacial surgery 3 rd edition .
Connecticut: People’s Medical Publishing House.
Sari, A. K., & Ayati, R. (2018). Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun jeruk purut
(citrus hystrix D.C) dengan metode
DPPH(1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl).
Journal of Current Pharmaceutical Science ,
1 (2), 69–74.
Sarimin S. (2009). Evaluasi kasus luka bakar di RS.
Wahidin  Sudirohusodo periode Januari 2006
-  maret 2009. Makassar:  Bagian Ilmu Bedah Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin. 1-47.
Veres, B. (2012). Anti-Inflammatory Role of Natural Polyphenols and Their Degradation Products. Severe Sepsis and Septic Shock - Understanding a Serious Killer .