Aktivitas Ekstrak Etanol Umbi Uwi Ungu (Dioscorea alata L.) terhadap Sel B220 + IgE +

## pada Mencit BALB/c Model Alergi Pencernaan
Yuyun Ika Christina 1)* , Muhaimin Rifa’I 2)
1,2 Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya nnyun91@gmail.com

## ABSTRAK
Uwi  ungu  (Dioscorea  alata  L.)  merupakan  famili  Dioscoreaceae  yang  mengandung  diosgenin  yang diketahui  bermanfaat  sebagai  agen  imunomodulator.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui adanya perubahan kuantitas sel B220 + IgE + pada organ lymph node mencit BALB/c model alergi pencernaan pasca pemberian ekstrak etanol umbi uwi ungu dan dosis optimum ekstrak etanol umbi uwi ungu. Pemberian ekstrak etanol umbi uwi ungu dilakukan pada  hari ke 1-28.  Hari ke-15 dilakukan injeksi ovalbumin (OVA) secara intraperitoneal. Kemudian 3 hari setelah injeksi OVA mencit dibedah. Hari ke-22 dilakukan challenge OVA  secara  intraperitoneal.  Hari  ke-23  sampai  28  mencit  dilakukan  injeksi  OVA  kembali  secara  oral. Kemudian  dilakukan  pembedahan  pada  hari  ke-29.  Limfosit  diisolasi  pada  organ  lymph  node  dan  dilihat profil  sel  B220 + dan  B220 + IgE + melalui  analisis  flow  cytometry.  Data  dianalisis  menggunakan  One-way ANOVA  (p<0,05)  dan  uji  Tukey  menggunakan  SPSS  16    for  Windows.  Jumlah  sel  B220 + IgE + menurun signifikan pada dosis 0,167 g/kg BB dibandingkan pada dosis 2,008 g/kg BB dan 10,039 g/kg BB. Variasi dosis ekstrak etanol umbi uwi ungu berbeda secara signifikan. Ekstrak etanol umbi uwi ungu (Dioscorea alata L.) mampu  menurunkan  jumlah  relatif  sel  B220 + IgE + pada  dosis  0,167  g/kg  BB.  Dosis  optimum  untuk menurunkan level B220 + IgE + adalah pada dosis rendah yaitu 0,167 g/kg BB.
Kata kunci : Alergi pencernaan, B220 + IgE + , Dioscorea alata L., immunomodulator

## ABSTRACT
Purple yam tuber (Dioscorea alata L.) is a family Dioscoreaceae that contain diosgenin which is known as an immunomodulatory agent. The purpose of this study is to understand about the quantitative changes of B220 + and B220 + IgE + cells in lymphnode BALB/c mice digestive allergy model after ethanol extract in purple yam tuber oral treatment and the optimum dose of purple yam tuber ethanol extract. The ethanol extract of purple yam tuber treatment conducted on 1st until 28th days. Then, on 15th day is conducted OVA injection intraperitoneally.  After  3  days  injection  of  OVA,  3  mice  for  each  treatment  were  sectioned.  OVA  challenge injection intraperitoneally conducted on 22th days. OVA  is injected orally on 23th until 28th days. Then, the mice  were  sectioned  on  29th  day.  Lymphocytes  was  isolated  from  lymphnode  organs  and  the  profiles  of  T B220 + and B220 + IgE + cells were observed through flowcytometry analysis. The hepar was isolated to make the histopathology analysis. Data were analyzed using One-way ANOVA (p <0.05) and Tukey test using SPSS 16 for Windows. Ethanol extract of purple yam tuber can reduced B220 + IgE + . The result indicated an decreasing number  of  B220+IgE+  in  dose  0.167  g/kg  BW  significantly  compared  with  dose  2.008  g/kg  BW  and  10,039 g/kg  BW.  Dose  variations  in  extract  ethanol  of  purple  yam  tuber  are  significant  and  the  optimum  dose  of purple yam ethanol extract to reduce the level of B220 + IgE + is  0.167 g/kg BW.
Keywords : B220 + IgE + , Digestive allergy, Dioscorea alata L., , immunomodulatory

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  kekayaaan  tumbuh- tumbuhan  yang  berpotensi  dijadikan  sebagai tanaman herbal. Tanaman herbal pada saat ini telah menjadi  alternatif  untuk  mengobati  berbagai penyakit.  Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi sebagai  tanaman  herbal  dan  belum  dimanfaatkan
secara  optimal  adalah  uwi  ungu  (Dioscorea  alata L.).  Uwi  ungu  merupakan  sumber  hayati  umbi- umbian  yang  mengandung  karbohidrat,  senyawa fenol,  dan  antosianin  [1].  D.  alata  juga mengandung  diosgenin  yang  merupakan  jenis saponin yang mirip dengan kolesterol, progesteron dan DHEA (dehidroepiandrosteron) [2].
Berdasarkan beberapa penelitian, saponin ini bermanfaat  bagi  kesehatan  antara  lain  aktivitas hipokolesterolemia,  imunostimulatori,  antitumoro- genik,  antimutagenik,    imunomodulatori  dan antiinflamasi  [3].  Hasil  analisis  menunjukkan kandungan  dalam  umbi  uwi  ungu  terdiri  dari  air 89,73  %,  abu  0,62  %,  abu  tak  larut  asam  0,55  %, kadar  serat  0,67  %,  pati  10,93  %,  lemak  0,82  %, dan protein 1,36 % [4].
Salah  satu  peran  dari  umbi  uwi  ungu  yang belum  diketahui  adalah  aktivitasnya  sebagai  agen antialergi.  Reaksi  alergi  terjadi  jika  seseorang terpapar  alergen  sehingga  memproduksi  antibodi IgE  (Immunoglobulin  E)  kemudian  terpapar kembali  oleh antigen  yang sama. Alergen memicu terjadinya  aktivasi  sel  mast  yang  mengikat  IgE pada jaringan. IgE merupakan antibodi yang sering terlihat  pada  reaksi  melawan  parasit,  terutama untuk  melawan  cacing  parasit  yang  umumnya mewabah pada negara yang masih terbelakang [5].
Alergi  atau  hipersensitivitas  merupakan sensitivitas  yang  terlalu  tinggi  terhadap  antigen sehingga  paparan  antigen  yang  selanjutnya  akan menimbulkan respon imun yang berlebihan. Dalam keadaan  normal  terjadi  keseimbangan  antara  Th1 dan  Th2,  tetapi  dalam  keadaan  alergi  akan  terjadi peningkatan Th2  dan  penurunan Th. Reaksi alergi melibatkan  antibodi  spesifik  IgE  yang  bertindak sebagai  mediator  respon  alergi  seperti  alergi makanan, asma, rhinitis, dan lain-lain [6].
Berdasarkan penelitian sebelumnya diketahui bahwa kandungan diosgenin  D. alata ini memiliki fungsi menangkap reaktif oksigen spesies (ROS),  antioksidan,  antidiabetik,  antiklastogenik, antiosteoporotik.  Pemberian  diosgenin  ini  dapat mengurangi  ekspresi  IL-4  dan  GATA-3  intestinal pada  mencit  Balb/C  yang  disensitisasi  ovalbumin [2].  Penelitian  tentang  sifat  antialergi  Dioscorea alata  sampai  sejauh  ini  belum  dilakukan.  Oleh karena  itu,  penelitian  ini  penting  untuk  dilakukan untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  etanol  dalam umbi  uwi  ungu  (Dioscorea  alata)  ini  pada  mencit BALB/c  model  alergi  pencernaan  berdasarkan perubahan kuantitas sel B220 + dan B220 + IgE + .

## METODE PENELITIAN
Waktu dan Tempat. Penelitian ini dilakukan  pada  Mei  2013  sampai  Januari  2014  di laboratorium  Fisiologi  Hewan,  Jurusan  Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Brawijaya , Malang.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Umbi  Uwi Ungu.  Umbi  Dioscorea  alata  disiapkan  sebanyak 20,7  kg,  dikuliti,  dicuci  bersih,  dipotong  tipis, kemudian dikeringkan di bawah sinar matahari dan ditutup  dengan  kain  hitam  hingga  kering.  Umbi yang  kering  dihaluskan  dengan  blender.  Simplisia ditimbang kemudian dimaserasi berkali-kali dalam toples  kaca  dengan  pelarut  etanol  70  %  dengan perbandingan  simplisia :  etanol  70  %  =  1:10  pada suhu  ruangan  selama  5x24  jam  dengan  volume etanol  70  %  adalah  75  %  dari  volume  totalnya, sambil  diaduk  3  kali  sehari  sampai  semua komponen  terekstrasi.  Setelah  5x24  jam,  ekstrak etanol  disaring  dengan  kain  saring  dan  ditampung pada  toples  kaca.  Sisa  bahan  penyaringan direndam  lagi  dengan  etanol  70  %  (remaserasi) selama 2x24 jam dengan sisa 25 % volume etanol 70  %.  Setelah  remaserasi,  bahan  disaring  lagi  dan hasilnya digabung dengan bahan yang sebelumnya sudah  disaring.  Bahan  yang  sudah  disaring kemudian diuapkan untuk menghilangkan kandungan  etanol  dalam  bahan  ekstrak  pada  suhu 50 o C  dalam  water  bath  menggunakan  vacuum pump evaporator. Hasil penguapan berupa ekstrak kental  yang  ditimbang  dan  dicatat  berapa  gram hasilnya.
Rancangan Penelitian. Penelitian ini menggunakan  mencit BALB/c jantan sebanyak 30 ekor  yang  berumur  3  bulan  dengan  berat 25-27  g. Mencit  dibagi  dalam  5  kelompok  perlakuan dengan  masing-masing  kelompok  sebanyak  6 mencit.  Perlakuan  dibagi  menjadi  5  yaitu  kontrol negatif  (K(-)),  kontrol  positif  (OVA),  uwi  dosis 0,167 g/kg BB (U1), uwi dosis 2,008 g/kg BB (U1) dan  uwi  dosis  10,039  g/kg  BB  (U1).Mencit disensitisasi dan dichallenge secara intraperitoneal dengan  ovalbumin  (OVA)  kecuali  pada  kelompok kontrol  (K(-)).  Mencit  diimunisasi  dengan  cara injeksi intraperitoneal pada hari ke-15 dengan 0,15 ml  OVA  dalam  Al(OH) 3 .  Pada  hari  ke-22  injeksi intraperitoneal  dengan  0,15  ml  OVA  dalam akuades. Pada hari ke-23 sampai dengan hari ke-28 mencit  dibooster  dengan  OVA  secara  oral  dengan 0,15 ml OVA dalam akuades.
Isolasi  Sel  Limfosit.  Mencit  dikorbankan setelah 24 jam dari pemaparan OVA yang terakhir. Pembedahan  dilakukan  dengan  cara  dislokasi leher.  Kemudian  organ  lymph  node  diisolasi  dan dicuci  dengan  PBS  2  kali.  Setelah  itu  organ dipencet  searah  jarum  jam  dengan  menggunakan
pangkal  spuit.  Setelah  itu  disaring  dengan  wire. Homogenat  yang  bercampur  PBS  dimasukkan dalam  tabung  propilen  15  ml  dan  ditambahkan PBS  sampai  volumenya  mencapai  10  ml. Kemudian  dilakukan  sentrifugasi  pada  kecepatan 2500  rpm,  4 o C  selama  5  menit.  Supernatan dibuang sedangkan pellet diambil dan diresuspensi dengan PBS 1 ml lalu dihomogenasi.
Perhitungan  Sel  Limfosit  Menggunakan Haemocytometer. Suspensi pellet dari hasil isolasi limfosit  pada  lymphnode  diambil  sebanyak  5 µ l untuk  perhitungan  sel  limfosit.  Suspensi  pellet ditambahkan  95 µ l  Evans  Blue  kemudian dihomogenkan.  Perhitungan  sel  hidup  dilakukan dengan  menggunakan  kamar  hitung  dalam haemocytometer  dan  hasil  perhitungan  digunakan untuk analisis flow cytometry.
Analisis  Flow  Cytometry.  Suspensi  pelet sebanyak 50 µ l ditambahkan 500 µ l PBS. Suspensi selanjutnya  disentrifugasi  dengan  kecepatan  2500 rpm, 4 o C selama 5 menit. Pelet kemudian ditambah 500 µ l  PBS  dan  diambil  masing-masing  50 µ l  ke dalam  tabung  eppendorf.  50 µ l  homogenate dimasukkan dalam tabung eppendorf dan ditambahkan 20 µ l cytofix-cytoferm lalu dipipeting dan  diinkubasi  selama  20  menit  pada  suhu  4 o C. Lalu  ditambahkan  washsperm  sebanyak  500 µ l. Setelah  itu,  disentrifugasi  dengan  kecepatan  2500 rpm,  suhu  4 o C  selama  5  menit  dan  dilanjutkan dengan  prosedur  pewarnaan  dengan  antibodi  PE- conjugated  anti-B220.  Sampel  tersebut  kemudian ditambah  1  ml  PBS  dan  ditempatkan  pada  kuvet flow  cytometer.  Flow  cytometer  akan  menghitung jumlah  sel  total  serta  jumlah  sel  yang  terdeteksi oleh label antibody, kemudian hasil yang diperoleh diolah dengan program BD cellquest Pro TM .
Analisis  Statistika.  Data  dianalisis  dengan menggunakan  SPSS  16.0  for  Windows.  One  Way ANOVA  digunakan  untuk  mengetahui  perbedaan pada  antar  perlakuan  (p<0,05  secara  statistik berbeda  nyata).  Apabila  diperoleh  hasil  yang signifikan maka dilakukan uji Tukey.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis Jumlah Relatif Sel B220 + IgE + pada organ Lymph Node.
Hasil  analisis  jumlah  relatif  sel  B220 + IgE + menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan  dari
masing-masing  perlakuan. Kelompok  mencit  yang terkena  alergi  pencernaan  (OVA)  menunjukkan jumlah relatif sel B220 + IgE + terbesar sebesar 41,33 %  dibandingkan  dengan  mencit  normal  sebesar 11,33  %.  Peningkatan jumlah sel B220 + IgE + pada mencit alergi pencernaan dikarenakan meningkatnya  jumlah  subset  sel  T  CD4 + yang menghasilkan  sitokin  IL-4.  Akibat  meningkatnya jumlah  IL-4  maka  akan  mengaktifkan  sel  B220 untuk membentuk immunoglobulin  E. IgE kemudian  akan  berikatan  dengan  sel  mast  dan akhirnya  terbentuk  respon  imun  terhadap  alergi pencernaan.
Gambar  1. Jumlah  relatif    B220 + IgE + setelah injeksi  peroral  0,15  ml  OVA  dalam akuades  pada  hari  ke  23-28    (p<0,05) (U1=    dosis  0,167  g/kg  BB, U2=  dosis 2,008  g/kg  BB, U3=  dosis  10,039  g/kg BB,  K(-)  =  kontrol  tanpa  perlakuan, OVA= kontrol positif.
Pemberian  ekstrak  etanol  umbi  uwi  ungu dosis  0,167  g/kg  BB  mampu  menurunkan  jumlah sel B yang mengekspresikan IgE secara signifikan (p>0,05)  sebesar  1,97  %    dibandingkan  mencit yang  diberi  ekstrak  etanol  dosis  2,008  g/kg  bb sebesar  33,75  %.  Dosis  10,039  g/kg  bb menurunkan level B220 + IgE + sebesar 13,06 %. Hal ini  menandakan  bahwa  pada  dosis  rendah,  ekstrak etanol  umbi  uwi  ungu  dapat  menurunkan  jumlah sel  B  yang  mengekspresikan  IgE.  Menurut  Huang dkk.  (2009),  pemberian  diosgenin  pada  mencit yang  terkena alergi pencernaan dapat menurunkan jumlah total IgE  yang terbentuk. Sebaliknya, level IgG2a  mengalami  kenaikan  akibat  pemberian diosgenin pada mencit yang disensitisasi OVA [2]. Hasil penelitian tersebut menujukkan bahwa secara in  vivo,  diosgenin  pada  umbi  uwi  ungu  memiliki efek  anti-alergi  yang  dibuktikan  dengan  adanya supresi produksi IgE.
Gambar 2.  Persentase  jumlah  relatif sel B220 + IgE + pada masing perlakuan  setelah  injeksi  per  oral OVA hari ke 23-28
IgE  diproduksi  oleh  sel  plasma  yang terletak  pada  lymph  node  dan  daerah  yang mengalami  reaksi  alergi,  yaitu senter  pada  jaringan  yang  mengalami  inflamasi. IgE  berbeda dengan  antibodi  yang lain dalam hal lokasinya.  IgE  sebagian  besar  menempati jaringan dan  berikatan  dengan  permukaan  sel reseptornya  yang  disebut  Fc ε RI.  Ikatan  antigen dengan IgE menyebabkan
terjadinya penggabungan silang antar reseptor yang berakibat tersekresinya  mediator  kimia  dari  sel Mekanisme ini menyebabkan terjadinya hipersensitif  tipe  I.  Basofil  dan  eosinofil  yang teraktivasi juga mengekspresikan Fc sehinggadua  macam  sel  tersebut  juga  dapat mengikat  IgE  dan  berkontribusi    pada  munculnya reaksi  hipersensitif  tipe  I.  Antigen  yang  secara khusus dapat mempengaruhi Th membelokkan  sintesis  antibodi  menjadi  IgE disebut alergen. Produksi ant memerlukan  bantuan  Th2  yang  mensekresi  IL dan  IL-13.  Peran  Th2  dapat  dihambat  oleh  Th
Jurnal Biotropika | Vol. 2 No. 2 | 2014
Persentase jumlah  relatif  sel pada masing-masing perlakuan  setelah  injeksi  per  oral
IgE  diproduksi  oleh  sel  plasma  yang dan  daerah  yang mengalami  reaksi  alergi,  yaitu  pada  germinal senter  pada  jaringan  yang  mengalami  inflamasi. IgE  berbeda dengan antibodi  yang lain  dalam hal lokasinya.  IgE  sebagian besar  menempati jaringan dan  berikatan  dengan  permukaan  sel  mast  dengan ε RI.  Ikatan  antigen gan IgE menyebabkan terjadinya penggabungan silang antar reseptor yang berakibat tersekresinya  mediator  kimia  dari  sel  mast. Mekanisme ini menyebabkan terjadinya hipersensitif  tipe  I.  Basofil  dan  eosinofil  yang teraktivasi juga mengekspresikan Fc ε R adua  macam  sel  tersebut  juga  dapat mengikat  IgE  dan  berkontribusi    pada  munculnya reaksi  hipersensitif  tipe  I.  Antigen  yang  secara mempengaruhi Th2 untuk membelokkan  sintesis  antibodi  menjadi  IgE
Produksi antibodi IgE
2  yang  mensekresi  IL-4
Peran  Th2  dapat  dihambat  oleh  Th1
yang memproduksi interferon antigen  pada  dosis  yang  sangat memungkinkan  terjadinya  aktivasi  Th menyebabkan aktivasi TH1 [5]
Gambar  3.  Perbedaan  berat  badan  mencit  tiap perlakuan selama 28 hari
Berdasarkan  grafik  perbedaan  berat  badan pada  gambar  3  menunjukkan  bahwa  mencit  sehat memiliki  berat  badan  paling  tinggi  dibandingkan dengan  mencit  yang  diberi  perlakuan.  Perlak mencit  alergi  pencernaan berat badan karena adanya reaksi pertahanan tubuh terhadap  masuknya  antigen  ke  tubuh.  Sedangkan pada  perlakuan  ekstrak  umbi  uwi  ungu  jugan mengalami  penurunan  berat  badan  seiring  dengan bertambahnya  hari  dalam  injeksi  OVA.  Secara umum  pada  hari  terakhir  injeksi,  mencit  alergi pencernaan  yang  diberi  ekstrak  etanol  umbi  uwi ungu relative stabil dan tidak mengalami kenaikan dan  penurunan.  Diosgenin  juga  dapat  menaikkan berat badan, berat limpa, dan berat kelenja pada tikus betina putih dewasa yang diovariektomi selama 45 hari [7].
Reaksi  alergi  terjadi  melal aktivasi  sel-sel  imunokompeten,  aktivasi  s struktural,  aktivasi  sel-sel  mast,  eosinofil  dan basofil,  reaksi  mediator  dengan  targ tahap  timbulnya  gejala.    Alergen  yang  berhasil masuk  tubuh  akan  diproses  oleh  APC.  Peptida alergen yang dipresentasikan oleh APC menginduksi aktivasi  Limfosit T.  Aktivasi Limfosit  T  oleh  APC  yang  memproses  alerg akan mengaktivasi limfosit Th memproduksi sitokin- specialized  pattern  recognition  receptors yaitu  Toll-like  receptors dendritik  (DCs)  atas  respons  imun menentukan  respons  imun  adaptif  Th1,  Treg  atau
si interferon- γ (IFN- γ ). Presentasi antigen  pada  dosis  yang  sangat  rendah  akan ungkinkan  terjadinya  aktivasi  Th2  dan  tidak
1 [5].
.  Perbedaan  berat  badan  mencit  tiap selama 28 hari
Berdasarkan  grafik  perbedaan  berat  badan pada  gambar  3  menunjukkan  bahwa  mencit  sehat memiliki  berat  badan  paling  tinggi  dibandingkan dengan  mencit  yang  diberi  perlakuan.  Perlakuan mencit  alergi  pencernaan  mengalami  penurunan berat badan karena adanya reaksi pertahanan tubuh terhadap  masuknya  antigen  ke  tubuh.  Sedangkan pada  perlakuan  ekstrak  umbi  uwi  ungu  jugan mengalami  penurunan  berat  badan  seiring  dengan am  injeksi  OVA.  Secara umum  pada  hari  terakhir  injeksi,  mencit  alergi pencernaan  yang  diberi  ekstrak  etanol  umbi  uwi ungu relative stabil dan tidak mengalami kenaikan
Diosgenin  juga  dapat  menaikkan berat badan, berat limpa, dan berat kelenjar adrenal pada tikus betina putih dewasa yang diovariektomi
Reaksi  alergi  terjadi  melalui  tahap-tahap imunokompeten,  aktivasi  sel-sel sel  mast,  eosinofil  dan basofil,  reaksi  mediator  dengan  target  organ  dan tahap  timbulnya  gejala.    Alergen  yang  berhasil masuk  tubuh  akan  diproses  oleh  APC.  Peptida alergen yang dipresentasikan oleh APC menginduksi aktivasi Limfosit T.  Aktivasi Limfosit  T  oleh  APC  yang  memproses  alergen akan mengaktivasi limfosit Th2 untuk -sitokinnya. Kontrol
pattern  recognition  receptors  (PRRs) like  receptors  (TLR)  dari  sel-sel
dendritik  (DCs)  atas  respons  imun  innate n  adaptif  Th1,  Treg  atau
Th2.  Limfosit  Th1  memproduksi  IL-2,  IFN- γ dan TNF- α , sedangkan Limfosit Th2 memproduksi IL- 4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-13, dan GM-CSF [8]. Limfosit  Th  yang  baru  diaktifkan  alergen akan  berfenotip  Th2.  Produksi  sitokin  Th2 terutama IL-4 akan mensupresi perkembangan Th1 dan  produksi  sitokin  Th1  terutama  TNF  akan mensupresi  perkembangan  Th2.  Bila  sitokin  yang dihasilkan  Limfosit  Th2  berinteraksi  dengan Limfosit  B,  maka  Limfosit  B  akan  berdiferensiasi menjadi  sel  plasma  yang  memproduksi  IgE. Sitokin yang dihasilkan Th2 menstimulasi produksi  sel  mast,  basofil  dan  eosinofil.  Interaksi antara  alergen,  sel  mast  dan  IgE  menghasilkan degranulasi sel mast [9].
Degranulasi sel mast melepaskan mediator histamin.  Histamin  yang  dilepaskan  sel  mast ditangkap  reseptor  histamin  di  target  organ.  Bila terjadi interaksi histamin dengan reseptornya  pada target  organ,  maka  reaksi  alergi  akan  terjadi. Reseptor  H1-histamin  mempunyai  peran  yang lebih  luas  dalam  proses  radang  daripada  sekedar mediator  yang  menyebabkan  alergi.  Reseptor  H2- histamin  mempunyai  peran  dalam  terjadinya  rasa gatal  dan  nyeri  pada  kulit  serta  peningkatan permeabilitas  dan  vasodilatasi  perifer.  Sedangkan reseptor  H3-histamin  meningkatan  pelepasan neurotransmitter seperti histamine, norepinephrine, asetilkolin, peptide dan 5-hidroksitriptamin [10].

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  umbi  uwi  ungu  (Dioscorea alata  L.)  mampu  menurunkan  jumlah  relatif  sel B220 + IgE + pada  dosis  0,167  g/kg  BB.  Dosis optimum  untuk  menurunkan  level  B220 + IgE + adalah pada dosis rendah yaitu 0,167 g/kg BB.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Bapak  Muhaimin  Rifa'i  S.Si,  Ph.D.Med.Sc. sebagai  pembimbing  penelitian  ini  dan  Ibu  Sri Nabawiyati  Nurul  Makkiyah  yang  mendanai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Peter, K.V. 2007. Underutilized and Underexploited  Holticultural  Crops.  Jai Bharat Printing Press. New Delhi.
[2]     Huang, C,H., Ku, C.Y. dan Jan, T.R. 2009. Diosgenin attenuates allergen-induced intestinal  inflammation  and  IgE  production
in  a  murine  model  of  food  allergy.  Planta Med. 75 (2):1300-1305.
[3]     Huang, C,H., Ku, C.Y. dan Jan, T.R. 2010. Diosgenin, a plant-derived sapogenin, enhances  regulatory  T-cell  immunity  in  the intestine  of  mice  with  food  allergy.  J.  Nat Prod. 73 : 1033-1037.
[4]     Lubag, A. 2008. Antioxidants of purple and greater  yam  (Dioscorea  alata  L.)  varieties from  the  Philippinesmore.  Philippine  J  of Sci. 137(1):61-67.
[5]      Rifa’i,  M.  2011.  Alergi  dan  Hipersensitif. Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan Ilmu pengetahuan Alam. Universitas Brawijaya. Malang.
[6]    Roitt,  I.M.  2003.  Essential  Immunology. Blackwell Science Limited. Oxford.
[7]      Benghuzzi,  H.,  Tucci,  M.,  Eckie,  R.,  dan Hughes,  J.  2003.  The  effects  of  sustained delivery of diosgenin on the adrenal gland of female rats. J Biomed Sci Instrum. 39 : 335- 340.
[8]    Sampson, H.A. 2004. Update on food allergy. J Allergy Clin Immunol. 113 (5) : 805-819.
[9]      Palomares,  O.,  Yaman,  G.,  Azkur,  A.K., Akkoc, T., Akdis, M., dan Akdis, C.A. 2010. Role  of  Treg  in  immune  regulation  of allergic disease. J Immunol. 40:1232-1240.
[10]    Taylor,  A.,  Verhagen,  J.,  Akdis,  C.A.,  dan Akdis, M. 2004. T regulatory cells in allergy and health : a question of allergen specificity and  balance. Int Arch  Allergy  and  Immunol. 135 : 73-82.