Jurnal Pharmascience, Vol. 06 , No.02, Oktober 2019, hal: 111 - 119 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience
Research Article
Formulasi Pasta Gigi Ekstrak Kulit Jeruk ( Citrus sp .) dan Daun Mint ( Mentha piperita L.) Serta
Aktivitas Terhadap Bakteri Streptococcus mutans
Widyastuti 1* , Hanifah Rifnola Fantari 2 , Vevia Risa Putri 2 , Intania Pertiwi 2
1 Program Doktoral Biomedik Universitas Andalas
2 Program Farmasi Universitas Mohammad Natsir Bukittinggi *Email: widya_apt161@yahoo.com

## ABSTRAK
Kulit jeruk merupakan limbah yang terbuang yang kurang dimanfaatkan, tetapi mempunyai aktivitas sebagai antibakteri. Minyak yang berasal dari daun mint banyak digunakan  sebagai  penyegar  mulut.  Kombinasi  kedua  tanaman  ini  belum  banyak diformulasi  dalam  bentuk  sediaan  pasta  gigi.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mendapatkan  formula  pasta  gigi  yang  mengandung  ekstrak  kulit  jeruk  dan  ekstrak daun mint yang mempunyai aktivitas menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans sebagai  penyebab  plak  pada  gigi.  Metode  ekstraksi  dengan  cara  maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Ekstrak  yang  diperoleh  dilakukan  skrining fitokimia  dan  selanjutnya  di  formulasi  dalam  bentuk  pasta  gigi  dengan membandingkan jumlah kedua ekstrak dengan basis yang sama. Aktivitas antibakteri sediaan  pasta  gigi  menggunakan  metode  difusi  dengan  cara  cetak  lobang.  Hasil penelitian menunjukkan ekstrak kulit jeruk mempunyai rendemen sebesar 8,27% dan mengandung  metabolit  sekunder  senyawa  fenolik  dan  flavonoid  sedangkan  ekstrak daun  mint  memiliki  rendemen  sebesar  4,53%  dan  mengandung  metabolit  sekunder senyawa fenolik dan flavonoid. Kedua ekstrak dapat di formulasi dalam bentuk sediaan pasta  gigi  dan  stabil  dalam  penyimpanan.  Semua  formula  memiliki  daya  hambat terhadap  pertumbuhan  bakteri Streptococcus  mutans dan  menunjukkan  perbedaan yang  signifikan  pada  p<0,05.  Formula  pasta  gigi  yang  memberikan  daya  hambat terbesar terdapat pada FII yang mengandung ekstrak daun mint 10%.
Kata kunci: kulit jeruk, daun mint, formulasi, pasta gigi, Streptococcus mutans

## ABSTRACT
Orange  peels  are  wasted  waste  that  is  underutilized,  but  has  antibacterial activity.  Oil  derived  from  mint  leaves  is  widely  used  as  a  mouth  freshener.  The combination of these two plants has not been much formulated in the form of toothpaste preparations. The purpose of this study was to obtain a toothpaste formula containing
extracts of orange peel  and mint leaves extract which has the activity of inhibiting the growth  of Streptococcus  mutans bacteria  as  a  cause  of  plaque  on  teeth.  Extraction method by maceration  using 96% ethanol  solvent. The extract obtained  was subjected to  phytochemical  screening  and  then  formulated  in  the  form  of  toothpaste  by comparing  the  amount  of  both  extracts  on  the  same  basis.  Antibacterial  activity  of toothpaste  preparations  using  the  diffusion  method  in  print  hole.  The  results  showed that  orange  peel  extract  had  a  yield  of  8.27%  and  contained  secondary  metabolites  of phenolic compounds and flavonoids while mint leaves extract had a yield of 4.53% and contained  secondary  metabolites  of  phenolic  compounds  and  flavonoids.  Both  extracts can  be  formulated  in  toothpaste  dosage  forms  and  are  stable  in  storage.  All  formulas had a inhibitory effect on the growth of Streptococcus mutans and showed a significant difference at p <0.05. Toothpaste formula that provides the higher inhibition is found in FII which contains 10% mint leaf extract.
Keyword: orange peels, mint leaves, formulation, toothpaste, Streptococcus mutan

## I. PENDAHULUAN
Karies  gigi  merupakan  salah  satu gangguan pada kesehatan gigi. Karies gigi terbentuk  karena  sisa  makanan  yang menempel  pada  gigi  mengalami  proses fermentasi  oleh  bakteri  yang  berada  pada mulut  yang  akan  membentuk  plak  pada gigi. Karies gigi menyebabkan pengapuran gigi  sehingga  gigi  menjadi  keropos, berlubang  bahkan  patah  (Widayati,  2014). Makanan  kariogenik  merupakan  faktor penyebab  utama  terjadinya  karies  gigi bersama-sama dengan factor mikroorganisme,  gigi  (host)  dan  waktu. Karbohidrat  adalah  bahan  yang  sangat kariogenik dan efektif menimbulkan karies gigi  (Ramayanti  &  Purnakarya,  2013). Salah  satu  cara  untuk  membersihkan  gigi adalah  dengan  menggunakan  pasta  gigi. Pemilihan pasta gigi selain untuk membersihkan gigi juga dapat
menghambat  pertumbuhan  bakteri  yang menyebabkan karies gigi seperti S. mutans . Kulit  jeruk  merupakan  limbah  yang banyak terbuang dan kurang dimanfaatkan. Jeruk mempunyai banyak jenis dan hampir keseluruhan  mempunyai  aktifitas  sebagai antibakteri.  Daun  dan  kulit  buah  jeruk nipis  mempunyai  aktifitas  menghambat pertumbuhan  bakteri  patogen  pada  mulut seperti Streptococcus dan Lactobacillus (Lemes  et  al.,  2018).  Kulit  buah  jeruk lemon  mempunyai  aktivitas  menghambat pertumbuhan  bakteri S.  mutans dan berpotensi  sebagai  pemutih  gigi  dan antisariawan  (Nurdianti  et  al.,  2016). Ekstrak  kulit  jeruk  nipis  pada  konsentrasi 10%  dapat  menghambat  aktivitas  enzim glukosiltransferase S. mutans (Adindaputri,  et.al,  2013).  Ekstrak  kulit buah  jeruk  purut  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri S. mutans (Purwanto, et.al.,  2018).  Ekstrak  kulit  buah  jeruk
manis  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri  penyebab  karies  gigi  yaitu S. mutans dan L.  acidophilus (Shetty  et  al., 2016).
Daun  mint  terutama  digunakan  dalam bentuk  minyak  atsiri  yang  sering  disebut dengan minyak permen yang berbau khas. Minyak  permen  mempunyai  aktivitas menghambat  pertumbuhan  bakteri S.
mutans dengan  harga Minimum  Inhibition Concentration (MIC)  sebesar  10,5  µg/mL (Golestannejad  et  al.,  2017).  Ekstrak  daun mint  mempunyai  aktivitas  antibakteri terhadap beberapa bakteri patogen (Bupesh et  al., 2007). Ekstrak etanol daun mint  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri  asam  asetat Asaia  spp dengan kadar  minimal  ekstrak  10%  v/v  (Antolak et.al,  2018).  Semua  bagian  tanaman  dari Mentha  piperita L  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  patogen  pada  mulut seperti S.  mutans (Fayed,  2019).  Ekstrak daun  mint  mempunyai  aktivitas  sebagai antioksidan  dan  antibakteri  pada  bakteri gram  positif  serta  gram  negatif  (Singh et.al., 2011).
Perlindungan  gigi  dari  penyebab karies  gigi  membutuhkan  pasta  gigi  yang dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri patogen  pada  mulut  seperti S.  mutans .
Pasta  gigi  yang  mengandung  herbal  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri S. mutan dibandingkan dengan pasta gigi non herbal  (Pratiwi,  2005).  Ekstrak  kulit  jeruk
dan  ekstrak  daun  mint  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri S.  mutans ,  oleh karena itu dapat dibuat suatu sediaan pasta gigi. Tujuan penelitin ini untuk mengetahui apakah ekstrak kulit jeruk dan ekstrak  daun  mint  dapat  dibuat  suatu sediaan pasta gigi yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri S.mutans

## II. METODE

## A. Ekstraksi kulit jeruk dan daun mint
Kulit  buah  jeruk  dan  daun  mint diekstraksi menggunakan metode maserasi yaitu  dengan  cara  merendam  kulit  buah jeruk  dan  daun  mint  masing-masing dengan  pelarut  etanol  96%  dalam  botol gelap,  tutup  dan  simpan  di  tempat  yang terlindung dari cahaya. Diamkan selama 3- 5  hari  sambil  sesekali  diaduk,  kemudian saring. Hasil saringan dipisahkan, sedangkan ampas kembali direndam dengan  etanol.  Ulangi  sampai  diperoleh larutan  jernih.  Kumpulkan  hasil  maserasi kemudian dipekatkan menggunakan rotary evaporator sehingga  diperoleh  ekstrak kental.  Hitung  rendemen  masing-masing ekstrak.

## B. Skrining fitokimia ekstrak
Ditimbang  2  gram  ekstrak,  lalu dibasakan  dengan  NH 4 OH,  kemudian tambahkan kloroform :  aquadest  sebanyak 1:1  10  ml  masing-masing  kocok  dalam corong  pisah,  biarkan  sejenak  hingga
terbentuk  dua  lapisan.  Lapisan  air  untuk pemeriksaan flavonoid, fenolik dan saponin  dan  lapisan  kloroform  untuk
pemeriksaan terpenoid, steroid dan alkaloid.
Tabel I. Formula pasta gigi ekstrak kulit jeruk dan daun mint
Bahan Formula Basis F1 F2 F3 F4 F5 Ekstr kulit jeruk - 10 - 5 2,5 7,5 Ekstr daun mint - - 10 5 7,5 2,5 Na CMC 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 Kalsium Karbonat 40 40 40 40 40 40 Gliserin 10 10 10 10 10 10 Na Lauril Sulfat 2 2 2 2 2 2 Sorbitol 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 Nipagin 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 Nipasol 0,025 0,025 0,025 0,025 0,025 0,025 Air sampai 100 100 100 100 100 100

## C. Formulasi sediaan pasta gigi
Pasta  gigi  dibuat  menurut  formula yang  tertera  pada  Tabel  I.  Cara  membuat pasta gigi pertama-tama Na CMC dimasukkan kedalam beaker glass kemudian  tambahkan  air  10  ml,  dimikser hingga  terbentuk  mucilago,  masukkan kalsium karbonat mikser sampai homogen. Masukkan ekstrak sambil tetap menggunakan  mikser,  tambahkan  gliserin, natrium  lauril  sulfat,  sorbitol,  nipagin  dan nipasol  yang  telah  dilarutkan  dalam  air panas.  Tambahkan  air  sampai  100  g, mikser  hingga  sediaan  homogen.  Pasta gigi  yang  terbentuk  selanjutnya  dilakukan evaluasi fisik meliputi organoleptis, homogenitas,  pengujian  kekerasan  dan ketajaman  partikel  abrasif,  abrasifitas,  pH dan tinggi pembentukan busa

## D. Uji aktifitas antibakteri pasta gigi
Semua  alat  dan  bahan  disterilkan dengan  cara  yang  sesuai.  Pembuatan suspensi  bakteri  uji,  diambil  satu  ose bakteri Streptococcus mutans , disuspensikan  dalam  NaCl  fisiologis. Cawan  petri yang  telah  disterilkan diletakkan boorprop berdiameter  6  mm sebanyak  6  buah.  Kemudian  ditambahkan media MHA sebanyak 10 ml, ditambah 0,5 ml  suspensi  bakteri  lalu  dituang  kedalam cawan  petri,  diamkan.  Setelah  media memadat,  sediaan  pasta  gigi  ditimbang sebanyak  50  mg,  diletakkan  didalam lubang. Inkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C. Amati ada tidaknya daerah hambatan  yang  jernih  disekeliling  lubang dan  ukur  diameternya.  Analisis  data  yang didapat  menggunakan  uji  ANOVA  satu arah  dengan  taraf  kepercayaan  95%  dan dilanjutkan  dengan  uji  Least  Significance
Different  (LSD)  jika  ada  perbedaan  yang signifikan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  yang  dilakukan  terhadap kulit  buah  jeruk  didapatkan  rendemen sebesar  8,27%.  Ekstrak  berupa  cairan kental, berwarna kuning kecoklatan, berbau  khas  jeruk.  Ekstrak  mengandung metabolit  sekunder  senyawa  fenolik  dan flavonoid.  Ekstrak  daun  mint  berupa cairan  kental  berwarna  hijau  kehitaman, berbau  khas  mint  dengan  rendemen sebesar  4,53%.  Ekstrak  mengandung metabolit  sekunder  senyawa  fenolik  dan flavonoid.
Ekstraksi bertujuan untuk memisahkan  senyawa  dari  campurannya atau simplisia. Pemilihan metode dilakukan untu memerhatikan sifat senyawa,  pelarut  yang  digunakan  dan  alat yang tersedia. Metode maserasi merupakan cara yang sederhana dimana cara ekstraksi dengan  merendam  dalam  pelarut  pada suhu  kamar  sehingga  kerusakan  atau degradasi  metabolit  dapat  diminimalisasi. Pada maserasi terjadi proses keseimbangan konsentrasi  antara  larutan  di  luar  dan  di dalam sel sehingga diperlukan penggantian pelarut secara berulang (Hanani, 2015).
Senyawa fenol dan flavonoid umumnya  lebih  mudah  larut  pelarut  polar seperti  air,  metanol  dan  etanol.  Karena dalam  penelitian  ini  menggunakan  pelarut
polar etanol 96%, maka kemungkinan juga menarik senyawa-senyawa metabolit sekunder  yang  bersifat  polar  seperti senyawa  fenol  dan  flavonoid.  Fenol  bebas relatif  jarang  terdapat  pada  tumbuhan, umumnya senyawa fenol berikatan dengan gula  membentuk  glikosida  yang  lebih mudah larut dalam pelarut polar. Demikian pula flavonoid yang berikatan dengan gula membentuk  glikosida  yang  juga  larut dalam  pelarut  polar,  sedangkan  flavonoid dalam  bentuk  aglikon  mempunyai  sifat kurang polar (Hanani, 2015).
Ekstrak  kulit  jeruk  dan  ekstrak  daun mint  yang  didapat  di  formula  dalam bentuk  pasta  gigi  dengan  menggunakan basis yang sama. Ekstrak dibuat menjadi 5 formula dengan variasi konsentrasi ekstrak kulit  jeruk  dan  daun  mint.  Na  CMC  pada formula pasta gigi berfungsi sebagai bahan pembentuk gel membuat tekstur pasta gigi lebih  lembut.  Kalsium  karbonat  berfungsi sebagai pembersih dan pemoles permukaan  gigi,  karena  itu  merupakan komponen  paling  besar  dalam  pasta  gigi, yang  merupakan  syarat  dari  suatu  sediaan pasta dimana banyak mengandung partikel padat. Gliserin berfungsi sebagai pelembab dan meningkatkan kelembutan serta melindungi pasta dari kemungkinan menjadi  keras  atau  kering.  Natrium  lauril sulfat  berfungsi  sebagai  deterjen  yang bertujuan untuk membantu gerakan pembersihan  sikat  gigi serta  untuk
memberikan daya kerja busa yang nyaman digunakan (Rowe, 2011).
Sorbitol  sebagai  pemberi  rasa  manis untuk  menutupi  rasa  tidak  enak  yang berasal dari bahan-bahan lain yang kurang enak  digunakan.  Nipagin  dan  nipasol merupakan kombinasi pengaet yang digunakan  dalam  pasta  gigi.  Pengawet diperlukan  dalam  formulasi  sediaan  pasta
gigi  mengingat  adanya  kandungan  air  dan ekstrak yang dapat menyebabkan terjadinya  pertumbuhan  mikroba.  Karena pasta  gigi  mengandung  ekstrak  kulit  jeruk atau  ekstrak  daun  mint  yang  berbau  khas, maka tidak diperlukan lagi  bahan pemberi bau,  sehingga  dapat  menutupi  bau  tidak enak pada pasta gigi (Rowe, 2011).
Tabel II. Evaluasi Sediaan Pasta Gigi
Pengamatan Basis FI FII FIII FIV FV Bentuk semisolid semisolid semisolid semisolid semisolid
semisolid Warna krem coklat tua hijau pekat coklat tua coklat kehijauan coklat muda
Bau khas khas khas khas khas khas Homogenitas + + + + + +
Partikel abrasif sangat halus halus halus halus halus halus Abrasifitas + + + + + + pH 8,30 7,30 7,20 7,22 7,08 7,23 Tinggi busa 30 mL 30 mL 30 mL 28 mL 30 mL 34 mL
Hasil evaluasi sediaan pasta gigi dapat dilihat  pada  Tabel  II  Berdasarkan  uji organoleptic  semua  formula  mempunyai bentuk  semisolid,  warna  yang  berbeda tergantung  ekstrak  dan  perbandingan ekstrak  serta  berbau  khas.  Pemeriksaan homogenitas  memperlihatkan  hasil  yang homogen. Pengujian kekerasan dan ketajaman  partikel  abrasif,  semua  formula sudah memenuhi syarat sediaan pasta gigi, karena  bila  suatu  sediaan  pasta  gigi  terasa kasar,  dikhawatirkan  dapat  melukai  gusi. Abrasifitas  bertujuan  untuk  mengetahui sediaan  pasta  gigi  yang  dibuat  mampu membersihkan  permukaan  gigi  tanpa merusak  email  dan  mempertahankan
ketebalan pelikel serta membantu menghilangkan  partikel  makanan  yang menempel  pada  gigi.  Dalam  pengujian semua  formula  mempunyai  kemampuan dalam  membersihkan  permukaan  gigi. Pengujian pH bertujuan mengetahui keamanan sediaan pasta gigi saat digunakan  sesuai  dengan  pH  mulut.  pH mulut  normal  berkisar  4,9  –  10.  Pada penelitian semua pasta gigi sudah memenuhi  pH  mulut  yaitu  berkisar  dari 7,08 – 8,30. Apabila pH sediaan pasta gigi sudah sesuai dengan pH mulut, maka pasta gigi tersebut aman digunakan pada gigi.
Bakteri  di  rongga  mulut  dikaitkan dengan  kesehatan  mulut  dan  karies  gigi.
Karies  merupakan  salah  satu  penyakit  di rongga  mulut  yang  prevalensinya  di Indonesia  masih  cukup  tinggi.  Karies  gigi merupakan  suatu  penyakit  infeksi  pada jaringan keras gigi, yaitu email, dentin dan sementum. Karies gigi disebabkan aktivitas  mikroba  pada  suatu  karbohidrat yang mengalami fermentasi. Karies ditandai  oleh  adanya  demineralisasi  pada jaringan  keras gigi,  diikuti  dengan kerusakan  bahan  organiknya.  Hal  ini  akan menyebabkan terjadinya invasi bakteri dan kerusakan  pada  jaringan  pulpa  serta penyebaran  infeksi  ke  jaringan  periapikal. Faktor  utama  karies  gigi  adalah  adanya koloni Streptococcus  mutans pada  biofilm di  permukaan  gigi.  Pembentukan  biofilm tergantung  pada  karbohidrat  dan  beberapa enzim yang diproduksi oleh S. mutans . Hal ini  akan  meningkatkan  lingkungan  mulut menjadi asam dan menyebabkan demineralisasi gigi (Fatmawati, 2011).
Streptococcus  mutans pertama  kali diisolasi  oleh  Clark  pada  tahun  1924  dari
gigi manusia yang mengalami karies.Streptococcus mutans berperan penting  terhadap  terjadinya  karies  gigi. Istilah S. mutans diambil berdasarkan hasil pemeriksaan mikrobiologi dengan pengecatan  gram.  Bakteri  ini  berebentuk oval  dan  lain  dari  bentuk  spesies Streptococcus yang  lain,  sehingga  disebut sebagai mutan dari Streptococcus (Fatmawati, 2011).
Penggunaan  pasta  gigi  membersihkan gigi dari sisa-sisa makanan, apabila dalam sediaan  pasta  gigi  ditambahakan  suatu bahan yang dapat menghambat pertumbuhan S.  mutans ,  maka  dapat mengurangi  terjadinya  karies  pada  gigi. Uji aktivitas antibakteri formula pasta gigi dilakukan  dengan  menggunakan  metoda difusi  dengan  cara  cetak  lobang.  Metoda ini digunakan karena pasta gigi merupakan sediaan  semisolid.  Hasil  daya  hambat sediaan pasta gigi dapat dilihat pada Tabel III dan Gambar 1.
Tabel III. Uji daya hambat formula pasta gigi ekstrak kulit jeruk dan ekstrak daun mint
Cawan Petri Diameter Daerah Hambat (mm) Basis FI FII FIII FIV FV 1 0 15,99 23,24 18,51 23,65 21,66 2 0 12,18 26,76 26,44 28,13 23,16 3 0 10,51 24,99 26,70 24,49 18,33 4 0 14,46 24,50 22,77 25,88 20,16 5 0 15,41 30,11 25,03 19,30 16,62 Rata- rata 0 13,71 ± 2,30 25,92 ± 2,66 23,89 ± 3,39 24,29 ± 3,26 21,13 ± 3,71
Gambar 1. Pengujian aktivitas pasta gigi
Pada  penelitian  dapat  dilihat  basis pasta  gigi  tidak  memberikan  aktivitas sebagai  antibakteri.  Dari  5  formula  pasta gigi,  FII  memiliki  daya  hambat  terbesar, merupakan  formula  yang  mengandung ekstrak  daun  mint  10%  dengan  daya hambat rata-rata sebesar 25,92 ± 2,66 mm.
Tetapi  secara  keseluruhan  formula  pasta gigi  mempunyai  aktivitas  antibakteri terhadap S.  mutans .  Pasta  gigi  yang mengandung  ekstrak  kulit  jeruk  saja mempunyai  aktifitas  antibakteri  yang paling  rendah.  Penambahan  ekstrak  daun mint  dengan  jumlah  yang  lebih  besar (7,5%) akan meningkatkan aktivitas antibakteri dari pasta gigi yang mengandung  kombinasi  ekstrak  jeruk (2,5%).
Berdasarkan uji statistik menggunakan ANOVA  satu  arah  dengan  rentang kepercayaaan  95%,  didapatkan  perbedaan yang  signifikan  p<0,05  pada  masing- masing  formula  pasta  gigi.  Setelah dilakukan  uji  lanjut  menggunakan  LSD,
didapatkan  FI  berbeda  secara  signifikan dengan  FII,  FIII  dan  FIV,  tetapi  tidak dengan  FV.  FII  berbeda  secara  signifikan dengan FI, tapi tidak dengan FIII, FIV dan FV. FIII berbeda secara signifikan dengan FI.  FIV  tidak  berbeda  secara  signifikan dengan  semua  formula.  FV  tidak  berbeda secara signifikan dengan FII, FIII dan FIV. Hal  ini  berarti  adanya  perbedaan  aktivitas antibakteri  pasta  gigi  yang  mengandung ekstrak  kulit  jeruk  dengan  yang  adanya kandungan  ekstrak  daun  mint  dalam menghambat aktivitas bakteri S. Mutans

## IV. KESIMPULAN
Penelitian  yang  dilakukan  terhadap formulasi pasta gigi ekstrak kulit jeruk dan ekstrak  daun  mint  didapatkan  semua formula  pasta  gigi  memenuhi  syarat evaluasi  fisik.  Pada  pengujian  aktivitas antibakteri  terhadap  S.  mutans  didapatkan perbedaan  yang  signifikan  p<0,05  pada masing-masing formula pasta gigi. Diameter daerah hambat terbesar pada  FII yang mengandung ekstrak daun mint 10%.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  didanai  dari  hibah
Program
Kreativitas
Mahasiswa
Kemenristek  Dikti  skim  Penelitian  tahun 2019

## DAFTAR PUSTAKA
Adindaputri,  Z.  U.,  Purwanti,  N.,  and Wahyudi,  A.,  2013,  Pengaruh  ekstrak kulit  jeruk  nipis  ( Citrus  aurantifolia Swingle)  konsentrasi  10%  terhadap aktivitas  enzim  glukosiltransferase
Streptococcus mutans , Majalah Kedokteran Gigi , Vol. 20, No. 2: 126– 131.
Antolak,  H.,  Czyzowska,  A.,  and  Kregiel, D., 2018, Activity of Mentha  piperita
L.  ethanol  extract  against  acetic  acid bacteria Asaia spp ., Foods , Vol. 7 No.
7: 1–10.
Bupesh,  G.,  Amutha,  C.,  Nandagopal,  S., Ganeshkumar,  A.,  Sureshkumar,  P., and  Murali,  K.,  2007,  Antibacterial activity  of Mentha piperita L,
(peppermint  )  from  leaf  extracts  –  a medicinal  plant, Acta  Agriculturae Slovenica , Vol. 89: 73–79.
Fatmawati,  D.  W.  A.,  2011,  Hubungan biofilm Streptococcus mutans terhadap  resiko  terjadinya  karies  gigi,
Stomatognatic , Vol. 8 No.3: 127–130. Fayed, M. A., 2019, Mentha piperita L., A promising  dental  care  herb  mainly against  cariogenic  bacteria, Universal Journal  of  Pharmaceutical  Research , Vol. 4 No. 3: 33–38.
Golestannejad, Z., Gavanji, S., Mohammadi, E., Motamedi, A., Bahrani, M., Rezaei, F., and Bakhtari, A.,  2017,  Comparison  of  antibacterial activity of essential oils of Foeniculum  vulgare Mill  , Mentha arvensis and Mentha  piperita against Streptococcus mutans , Advanced Herbal Medicine , Vol. 3 No. 1: 3–13. Hanani,  E.,  2015, Analisis  Fitokimia, EGC,  Penerbit  Buku  Kedokteran, Jakarta.
Lemes, R. S., Alves, C. C. F., Estevam, E. B. B., Santiago, M. B., Martins, C. H. G.,  Santos,  T.  C.  L.  D.,  and  Miranda, M. L. D, 2018, Chemical composition and  antibacterial  activity  of  essential oils  from Citrus  aurantifolia leaves
and  fruit  peel  against  oral  pathogenic bacteria, Anais Da Academia
Brasileira de Ciencias , Vol. 90 No. 2:
1285–1292.
Nurdianti,  L., Annissya,  W. ., Pamela, Y., Novianti, E., Audina, M., and Kurniasari, E., 2016, Formulasi sediaan  pasta  gigi  herbal  kombinasi ekstrak  daun  sirih (Piper  betle) dan kulit  buah  jeruk  lemon  ( Citrus  limon burm f.) sebagai pemutih dan antiseptik pada gigi, Jurnal Kesehatan Bakti  Tunas  Husada ,  Vol.  16  No.  1: 177–187.
Pratiwi,  R.,  2005,  Perbedaan  daya  hambat terhadap Streptococcus  mutans dari beberapa pasta gigi yang mengandung herbal. Majalah  Kedokteran  Gigi , Vol. 38 No. 2: 64–67.
Purwanto,  R.  M.  W.,  Pabontong,  J.,
Retnoningtyas, E. S., and Irawaty, W., 2018,  Antimicrobial  activity  of  kaffir lime peel extract against Streptococcus  mutans. Reaktor ,  Vol. 18 No. 4: 235–240.
Ramayanti,  S.,  and  Purnakarya,  I.,  2013,
Peran  makanan  terhadap  kejadian karies gigi. Jurnal Kesehatan
Masyarakat , Vol. 7 No.2: 89–93. Rowe,  R.  C.,  2011, Handbook  of
Pharmaceutical
Excipient,.
Pharmaceutical Press London.
Shetty,  S.  B.,  Mahin-Syed-Ismail,  P., Varghese,  S.,  Thomas-George,  B.,
Kandathil-Thajuraj,  P.,  Baby,  D.,  and
Devang-Divakar, D., 2016,
Antimicrobial effects of Citrus sinensis peel  extracts  against  dental caries  bacteria :  An  in  vitro  study, J Clin Exp Dent , Vol. 8 No. 1: 71–77. Singh,  R.,  Shushni,  M.  A.  M.,  and Belkheir,  A.,  2011,  Antibacterial  and antioxidant activities of Mentha piperita L. Arabian  Journal  of Chemistry .
Widayati, N., 2014, Faktor yang berhubungan  dengan  karies  gigi  pada anak  usia  4  -  6  tahun, Jurnal  Berkala Epidemiologi , Vol. 2 No. 2: 196–205