Jurnal Pharmascience, Vol. 07 , No.01, Februari 2020, hal: 1 - 8 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience
Research Article
Sand Granules Ekstrak Etanol Daun Kirinyuh
( Eupatorium inulifolium Kunth.) sebagai Larvasida Alami Pemberantas Demam Berdarah Dengue
Puji Hartati 1 , Yance Anas 2 * , Ririn Lispita Wulandari 2
1 Program Studi S1 Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim, Semarang 2 Bagian Farmakologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim, Semarang *Email: yance.apt@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  sebelumnya  telah  mengungkap  efek  larvasida  ekstrak  etanol  daun kirinyuh  ( Eupatorium  inulifolium Kunth.)  terhadap  larva  nyamuk Aedes  aegypti . Ekstrak  ini  selanjutnya  dapat  dikembangkan  dalam  bentuk  sediaan sand  granules sehingga  mudah  digunakan  sebagai  larvasida  alami.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mendapatkan formula sand granules ekstrak etanol daun Eupatorium inulifolium Kunth (EEDE)  yang  memenuhi  standar  karakteristik  fisik  granul  dan  menguji  efek larvasidanya  pada  larva  nyamuk Aedes  aegypti. Sand  granules EEDE  dibuat  dengan metode    granulasi  basah  dengan  variasi konsentrasi  kollidon  (1%-5%),  explotab  (1%- 3%) dan sacharum lactis (78,44%-84,44%). Karakteristik fisik berbagai formula Sand granules EEDE  yang  diuji  adalah  kecepatan  alir  dan  sudut  diam.  Uji  efek  larvasida dilakukan  pada  25  ekor  larva  instar  III  nyamuk Aedes  aegypti selama  24  jam  dengan replikasi  sebanyak  5  kali . Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  semua  formula Sand granules EEDE  (F1-F5)  memenuhi  standar  karakteristik  fisik  dengan  kecepatan  alir (16,69-19,35)  g/detik  dan  sudut  diam  granul  32,94°-35,76°.  F1-F5  juga  memiliki  efek larvasida  terhadap  larva  nyamuk Aedes  aegypti dengan  persentase  kematian  larva dalam  24  jam  sebesar  (33,0-39,2)  %.  Akan  tetapi,  efek  larvasida  tersebut  lebih  kecil dibandingkan dengan EEDE 670 ppm (49,6%) dan Temefos ® 0,01 ppm (100,0%). Hasil penelitian  ini  juga  menyimpulkan  bahwa  proses  pembuatan sand  granules akan menyebabkan penurunan efek larvasida EEDE.
Kata Kunci: Daun kirinyuh, efek larvasida, karakteristik fisik, sand granules

## ABSTRACT
Previous  studies  reported  Eupatorium  inulifolium Kunth. leaves  ethanol  extract (ELEE)  have  a  larvicidal  effect  on Aedes  aegypti larvae.  This  extract  can  be  developed into  sand  granules  formulation,  making  it  easy  to  use  as  a  natural  larvicidal.  This  study means  to  obtain  the  ELEE  sand  granules  formula  that  meets  the  granule's  physical
characteristics  standard,  and  asses  it's  a  larvicidal  effect on Aedes  aegypti larvae.  Sand granules  of  ELEE  produced  with  the  wet  granulation  method.  The  differences  between formulas  are  variations  of  Kollidon  (1%-5%),  Explotab  (1%-3%),  and  Saccharum  Lactis (78.44%-84.44%)  concentration.  The  physical  characteristics  of  the  various  KLEE  sand granules  formulas  observed  are  flow  rate  and  angle  of  repose.  The  assay  of  the  ELEE larvicidal effect was carried out on twenty-five Aedes aegypti Instar III larvae for 24 hours with five replications. The results showed that all  ELEE sand granules formulas (F1-F5) met the physical characteristics standard, with a flow rate (16.69-19.35) g/sec and an angle of  repose  32.94  °-35.76°.  F-F5  also  had  larvicidal  effects  on  Aedes  aegypti  larvae,  with larval  mortality  within  24  hours  (33.0-39.2)  %.  However,  their  larvicidal  effect  is  slight compared  to  ELEE  670  ppm  (49.6%)  and  Temefos ® 0.01  ppm  (100.0%).  This  study  also concludes that the process of sand granules preparation will diminish the larvicidal effects of ELEE.
Keywords: Kirinyuh leaves, larvacidal effect, physical characteristics, sand granules

## I. PENDAHULUAN
Demam  Berdarah  Dengue (DBD) masih  menjadi  permasalahan  serius  di indonesia,  terutama  di    propinsi  Jawa Tengah.  Masyarakat  di  35  kabupaten/kota yang ada di Jawa Tengah pernah terjangkit penyakit ini, dengan angka kesakitan pada tahun 2016 sebesar 43,4/100.000 penduduk  (Dinkes Prov.  Jateng,  2016). Salah  satu  cara  dalam  pengendalian  DBD adalah melalui pemutusan rantai penularan dan  pengendalian  vektor  (Suwito et  al , 2013). Vektor utama DBD adalah nyamuk Aedes  aegypti yang  mempunyai  daerah distribusi geografis tidak terbatas (Kemenkes,  2011).  Metode  pengendalian vektor  DBD  dapat  dilakukan  secara kimiawi,  biologi  dan  dengan    cara pemberantasan sarang nyamuk (Kemenkes RI,  2012).  Salah  satu  pengendalian  vektor dengan  cara  kimiawi    adalah  dengan menggunakan larvasida  (pembasmi jentik)
yang cukup populer di Indonesia (Kemenkes RI, 2011).
Larvasida  yang  biasa  digunakan  di Indonesia  adalah  Temefos ® .  Beberapa insektisida bersifat toksik terhadap lingkungan  dan  mikroorganisme  alami yang  bermanfaat  bagi  keseimbangan ekosistem  sehingga  penggunaannya  harus mempertimbangkan dampak yang merugikan  tersebut  (Panghiyangani  dan Marlinae,  2012).  Penggunaan  larvasida berulang  di  satuan  ekosistem  dapat menimbulkan terjadinya resistensi (Kemenkes RI, 2011). Munculnya resistensi  larva  nyamuk Aedes  aegypti terhadap  Temefos ® sudah  terjadi  di berbagai  negara  dan  kota,  diantaranya  di Venezuela,  Kuba  (Rodriguez et  al ,  2001), Thailand (Ponlawat et al , 2005),
Banjarmasin  Barat  (Istiana et  al ,  2012).
Oleh  karena  itu,  penelitian  dalam  rangka penemuan  larvasida  baru  perlu  terus
dilakukan,  terutama  yang  bersumber  dari bahan bahan alam yang ada di Indonesia.
Salah satu bahan alam yang berpotensi dikembangkan sebagai larvasida  alami  adalah  daun  kirinyuh ( Eupatorium  inulifolium Kunth.).  Daun E.
inulifolium telah  dimanfaatkan  sebagai insektisida pada bidang pertanian (Setiawati et  al ,  2008).  Lia  (2011)  telah membuktikan efek larvasida ekstrak etanol daun Eupatorium inulifolium Kunth (EEDE) pada larva nyamuk Aedes aegypti dengan  LC 90 sebesar  6,7  x  10 -2 %  (b/v) atau  670  ppm.  Daun E.  inulifolium mengandung  senyawa  golongan  alkaloid, saponin,  polifenol,  dan    antrakuinon (Depkes  RI,  2006).  Senyawa  aktif  yang diduga  kuat  bertanggungjawab  terhadap efek    larvasida  EEDE  adalah  saponin. Bagavan et  al .  (2008)  melaporkan  bahwa isolat  saponin  dari  fraksi  etil  asetat
Achyranthes aspera memiliki efek larvasida pada larva Aedes aegypti dengan LC 90 sebesar 18,20 ppm.
Larvasida  umumnya  diaplikasikan dalam  bentuk  sediaan sand  granules .
Dalam  penelitian  ini,  EEDE  dibuat  dalam beberapa  formula sand  granules yang diharapkan  memenuhi  syarat  karakteristik fisik (waktu alir dan sudut diam). Dua sifat fisik  tersebut  akan  menentukan  apakah sand  granules mudah  mengalir  dari kemasan  pada  saat  digunakan.  Efek larvasida  lima  formula sand  granules
EEDE  (F1-F5)  dilakukan  terhadap  larva nyamuk Aedes  aegypti .  Efek  larvasida yang  dihasilkan  selanjutnya  dibandingkan dengan  produk  larvasida  yang  ada  di pasaran  (Temefos ® 0,01  ppm)  dan  EEDE 670 ppm.

## II. METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental dengan rancangan randomized  matched  control  group  post test  only .  Variabel  bebas  dalam  penelitian ini adalah 5 formula sand granules EEDE (F1-F5) dengan variasi konsentrasi kollidon  (1%-5%),  explotab  (1%-3%)  dan sacharum lactis (78,44%-84,44%).
Sementara  itu,  variabel  tergantung  sifat fisik  granul  (Waktu  alir  dan  sudut  diam) dan  persentase  keamtian  larva Aedes aegypti dalam waktu 24 jam.

## A. Alat dan Bahan
Daun E.  inulifolium yang  digunakan dalam  penelitian  ini  diperoleh  dari  Desa Batursari, Kelurahan Batursari, Kecamatan Mranggen,  Demak.  Bahan-bahan  yang digunakan  adalah  etanol  96%  (PT. Bratacho.Tbk.), laktosa (Kerry Bio Science, USA), kollidon (Nanhang industrial China), explotab (Shaanxi Chonyu  I/E  Co.,  Ltd.),  natrium  benzoat (Connell Bros.), larva Aedes aegypti instar III (Balai Besar Penelitian dan Pengembangan  Vektor  dan  Reservoir
Penyakit  Salatiga),  larutan  Temefos ®
0,01%b/v.  Peralatan  yang  digunakan dalam penelitian ini adalah oven (Binder), moisture analyzer (Ohous), blender (Philips),  ayakan  ukuran  16  mesh, rotary vaccum  evaporator (Heidolph), flowbility tester (Alfamas), penggaris, stopwatch dan timbangan (Ohous).

## B. Pembuatan ekstrak etanol daun kirinyuh (EEDE)
Daun E.  inulifolium dipetik  (3-5 daun  dari  pucuk)  pada  pagi  hari, dikumpulkan,  dipisahkan  dari  tangkai  dan dicuci  dengan  air  mengalir.  Daun E. inulifolium selanjutnya  dikeringkan  dalam oven  (suhu  ±  50ºC),  diukur  kadar  airnya dengan moister  balance  analyzer (hingga kadar  air  <  10%),  dihaluskan  dengan blender, dan diayak dengan ayakan ukuran 16 mesh. Sebanyak 1.500 g simplisia daun E. inulifolium dimaserasi dengan 3,75 liter etanol  96%  selama  5  hari.  Ampasnya kembali  diremaserasi  dengan  1,25  liter etanol 96% selama 2 hari. Maserat disaring dan  dipekatkan  dengan rotary  vacuum evaporator . Ekstrak selanjutnya ditimbang untuk perhitungan rendemen.

## C. Pembuatan sand granules EEDE
Setiap formula sand granules EEDE atau  F1-F5  (Tabel  I)  dibuat  dengan menggunakan  metode  granulasi  basah. Tiap formula akan menghasilkan 120 gram
sand  granules .  Kollidon,  explotab  dan saccharum  laktis  ditambahkan  ke  dalam EEDE dan diaduk sampai homogen hingga terbentuk  massa  yang  siap  untuk  proses granulasi.  Massa  granul  basah  diayak dengan  ayakan  18  Mesh  dan  selanjutnya granul  dikeringkan  dalam  oven  (suhu  50- 80  °C)  dan  kembali  diayak  kering  dengan ayakan 18 Mesh untuk menghasilkan sand granules EEDE.
Tabel I. Formula s and granules EEDE
Formula Kollidon (%) Explotab (%) Natrium Benzoat (%) Saccharum Lactis (%) EEDE (%) F1 1 1,0 0,1 84,44 13,46 F2 2 1,5 0,1 82,94 13,46 F3 3 2,0 0,1 81,44 13,46 F4 4 2,5 0,1 79,94 13,46 F5 5 3,0 0,1 78,44 13,46

## D. Uji  kecepatan  alir  dan  sudut  diam
sand granules EEDE
Sebanyak  100  g  masing-masing formula sand  granules EEDE  (F1-F5) dimasukkan ke dalam alat flowbility tester . Alat  dinyalakan  dan  granul  dibiarkan mengalir  sampai  habis.  Waktu  yang dibutuhkan  semua  granul  untuk  mengalir (waktu  alir)  dicatat  dan  selanjutnya dilakukan  perhitungan  kecepatan  alir (Rumus  1).  Sudut  diam  granul  (Rumus  2) dihitung  dari  data  jari-jari  (r)  dan  tinggi kerucut  (h)  yang  dibentuk  oleh  tumpukan granul pada saat uji kecepatan alir.
( )

## Keterangan:
α :  sudut diam (°) h   :  tinggi kerucut (cm) r  :  jari-jari alas kerucut (cm)

## E. Uji efek larvasida EEDE terhadap
larva Aedes aegypti Sebanyak 5 g masing-masing formula sand  granules EEDE  (F1-F5);
0,67  g  EEDE  dan  0,1  g  Temefos ®
dilarutkan  dengan  1.000  mL  air  ledeng dalam beaker  glass ,  dan  diisi  dengan  25 ekor larva nyamuk Aedes aegypti instar III.
Air  ledeng  1.000  mL  digunakan  sebagai sediaan  uji  kelompok  kontrol  negatif. Kematian  larva  diamati  setelah  24  jam perendaman  dan  selanjutnya  dilakukan perhitungan  persentase  keamatian  larva. Pengujian  dilakukan  dengan  replikasi sebanyak 5 kali.

## F. Analisis data
Data  kecepatan  alir  (g/detik)  dan sudut diam (°) F1-F5 dianalisis dengan uji T  satu  variabel  untuk  melihat  perbedaan data  yang  didapatkan  dengan  standar kecepataan  alir  dan  sudut  diam  granul yang  terdapat  pada  literatur  standar (p=0,95).  Data  perbedaan  kecepatan  alir (g/detik)  F1-F5,  EEDE  670  ppm  dan
Temefos ® 0,01  ppm  dianalisis  dengan Anova  satu  jalan  pada  taraf  kepercayaan 95%.  Sementara  itu,  perbedaan  data  sudut diam (°)dan persentase kematian larva (%) dianalisis dengan uji Kruskall-Wallis yang dilanjutkan  dengan  uji  Mann-Whitney pada  taraf  kepercayaan  95%.  Nilai signifikansi  (p)  <  0,05  menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Pembuatan EEDE dan sand garnules

## EEDE
Berat ekstrak etanol daun E. inulifolium (EEDE) yang dihasilkan dalam penelitian  ini  adalah 315,59  g,  dengan rendemen sebesar 21,04%. Ekstrak tersebut  (Gambar  1.a)  berupa  ekstrak kental yang masih dapat dituang, berwarna hijau kehitaman dan berbau khas. Sementara  itu,  sifat  organoleptis  F1-F5 yang  didapatkan  berupa sand  granules berwarna  hijau,  berbau  khas  dan  sedikit sukar larut dalam air (Gambar 1.b).
(a) (b)
Gambar 1. Ekstrak  etanol  daun  kirinyuh  (a)  dan (b)  organoleptis sand  granules EEDE (F1-F5)

## B. Kecepatan  alir  dan  sudut  diam sand granules EEDE
Data  kecepatan  alir  dan  sudut  diam granul  diperlukan  untuk  menilai  apakah F1-F5 mampu menghasilkan granul dengan  sifat  alir  yang  baik.  Hasil penelitian  menyimpulkan  bahwa  F1-F5 yang  dihasilkan  memenuhi  syarat  sifat fisik granul yang baik. Rata-rata kecepatan alir  berkisar  antara  16,69  g/detik  -19,35 g/detik  dengan  sudut  diam  berkisar  antara 32,94°-35,76°  (Tabel  II).  Siregar  (2010) dalam  bukunya  mengatakan  bahwa  sifat alir granul dikatakan baik apabila kecepatan  alir  granul  ≥  10  g/detik  dengan sudut  diam  tidak  lebih  dari  40°.  Hasil  uji Anova  satu  jalan  dan  uji  Kruskal-Wallis menunjukkan  bahwa  tidak  ada  perbedaan yang  signifikan  pada  data  kecepatan  alir dan  sudut  diam  F1-F5  tersebut  (p>0,05). Hal ini berarti bahwa perbedaan konsentrasi  bahan  pengikat,  penghancur dan  pengisi  pada  kelima  formula sand granules EEDE  tidak  berpengaruh  pada kecepatan  alir  dan  sudut  diam sand granules yang dihasilkan.
Tabel  II. Karakteristik  fisik  (kecepatan  alir  dan sudut diam) sand granules EEDE Karakteristik Fisik Formula F1 F2 F3 F4 F5 Kecepatan Alir (( ̅ g/detik) 17,79 ± 1,09 16,69 ± 1,15 17,91 ± 0,41 18,83 ± 2,06 19,35 ± 1,38 Sudut diam (( ̅ ) °) 35,76 ± 0,59 33,69 ± 0,00 32,94 ± 0,66 33,74 ± 1,07 32,99
± 1,84
C. Efek  larvasida sand  granules EEDE pada larva Aedes aegypti
Uji  efek  larvasida  F1-F5  dilakukan pada  25  larva Aedes  aegypti instar  III (replikasi 5 kali) dan hasilnya dibandingkan dengan EEDE 670 ppm  dan Temefos ® 0,01  ppm.  Persentase  kematian larva  diamati  selama  24  jam.  Rata-rata persentase  kematian  larva nyamuk Aedes aegypti setelah  direndam  dalam  F1-F5 berkisar  antara  33,0  %  -  39,2  %.  Akan tetapi,  efek  larvasida  F1-F5  tersebut  lebih kecil  dibandingkan  dengan  EEDE  670 ppm  (49,6%)  dan  Temefos ® 0,01  ppm (100,0%) (p<0,05). Data rata-rata persentase  kematian  larva  Aedes  aegypti semua  kelompok  perlakukan  dapat  dilihat pada Tabel III.
Tabel  III. Efek  larvasida  lima  formula  s and granules EEDE,  EEDE  670  ppm  dan Temefos ® 0,01  ppm  terhadap  larva Aedes aegypti Instar III selama 24 jam
Kelompok
Persentase Kematian Larva dalam 24 jam ( ̅ ±SD)*
F1 F2 F3 F4 F5 EEDE 670 ppm Temefos 0,01 ppm Air Ledeng 37,73±7,478 33,07±10,194 35,20±6,270 39,20±9,586 33,87±5,630 49,60±6,066 100,00±0,000 0,00±0,000
*data rata-rata diperoleh dari 5 kali replikasi
Efek larvasida
F1-F5 dalam penelitian  ini  lebih  kecil  daripada  EEDE 670  ppm  (p<0,05).  Perbedaan  efek larvasida  tersebut  menyiratkan  bahwa proses  pembuatan sand  granules dari EEDE berpotensi mengurangi efek larvasida  EEDE  tersebut.  Berbagai  bahan tambahan  dalam  F1-F5  seperti  kollidon, explotab  dan saccarum  lactis mungkin mempengaruhi  pelepasan  zat  aktif  dari EEDE.  Kemungkinan  ini  dapat  terlihat dari  sifat  organoleptis  F1-F5  yang  sedikit sukar  larut dalam air.  Selain  itu, penggunaan  panas  pada  saat  pengeringan sand  granules EEDE  juga  berpotensi merusak kandungan zat aktif dalam EEDE, sehingga  mungkin  akan  menurunkan  efek larvasidanya.  Oleh  karena  itu,  penelitian selanjutnya dapat diarahkan pada optimasi formula sand  granules EEDE  untuk meningkatkan  efek  larvasidanya  terhadap larva nyamuk Aedes aegypti .

## IV. KESIMPULAN
Lima formula Sand granules EEDE (F1- F5)  memenuhi  standar  karakteristik  fisik granul  yang  baik.  F1-F5  memiliki  efek larvasida  terhadap  larva  nyamuk Aedes aegypti .  Efek  larvasida  F1-F5  lebih  kecil dibandingkan  dengan  EEDE  670  ppm (49,6%) dan Temefos ® 0,01 ppm (100,0%).
Proses  pembuatan sand  granules akan menyebabkan  penurunan  efek  larvasida EEDE.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti mengucapkan banyak terima kasih  pada  Plt.  Kepala  Balai  Besar Penelitian  dan  Pengembangan  Vektor  dan Reservoir  Penyakit  (B2P2VRP)  Salatiga dan  staff  yang  telah  membantu  dan mengijinkan  pembelian  serta  penggunaan telur nyamuk Aedes aegypti untuk ditetaskan  menyadi  larva  nyamuk Aedes aegypti Instar III dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Bagavan, A., Rahuman, A.A., Kamaraj, C. and  Geetha,  K.,  2008,  Larvicidal
Activity of Saponin from Achyranthesaspera against Ae desaegypti and Culexquinquefasciat us (Diptera:Culicidae), Parasitol Res. , Vol. 103, No. 1 : 223–229.
Depkes  RI,  2006, Inventaris  Tanaman Obat Indonesia , Balitbang Kesehatan, Tawangmangu. Dinkes  Prov.  Jateng,    2016, Profil Kesehatan  Provinsi  Jawa  Tengah Tahun 2016 , http://www.depkes.go.id/resources/d ownload/profil/PROFIL_KES_PRO
VINSI_2016/13_Jateng_2016.pdf, (diakses 3 September 2019).
Kemenkes RI., 2011, Modul Pengendalian Demam Berdarah Dengue ,
Kementerian Kesehatan RI, Jakarta. Kemenkes  RI.,  2012, Petunjuk  Teknis Pemberantasan Sarang Nyamuk Demam  Berdarah  Dengue  (PSN DBD)  oleh  Juru  Pemantau  Jentik (Jumantik ),  Kementrian  Kesehatan RI, Jakarta.
Panghiyangani, R., dan Marlinae, L., 2012,
Efek Ekstrak Rimpang Kunyit ( Curcuma  domestica val.)  sebagai Larvasida Aedes  aegypti Vektor Penyakit Demam Dengue dan Demam  Berdarah  Dengue  di  Kota
Banjarbaru, Jurnal  Buski ,  Vo.  4,
No.1 : 1-6.
Ponlawat, A., Scott , J.G., and Harrington, L.C., 2005. Insecticide Susceptibility of Aedes aegypti and Aedes albopictus Across  Thailand, J  Med Entomol , Vol. 42, No. 5 : 821-825.
Istiana,  Heriyani  F.  dan  Isnaini,  2012,
Status  Kerentanan  Larva Aedes aegypti terhadap Temefos di
Banjarmasin Barat, Kalimantan, Jurnal Buski , Vol. 4, No. 2 : 53-58.
Lia,  2011,  Daya  Larvasida Ekstrak  Etanol Daun
Kirinyuh ( Eupatorium inulifolium H.B.K.)  terhadap  Larva Aedes  sp .  Vektor  Primer  DBD, Karya Tulis Ilmiah , Akademi Farmasi Theresiana, Semarang. Rodriguez, M.M., Bisset, J., De
Fernandez,  D.M.,  Lauzan,  L.  and
Soca,  A.,  2001,  Detection  of Insecticide  Resistance  in Aedes aegypti (Diptera:  Culicidae)  from Cuba and Venezuela, J Med
Entomol , Vo. 38, No. 5 : 623-628.
Setiawati.  W.,  Mutiningsih.  R.,  Gunaeni. N., dan Rubiati. T., 2008, Tumbuhan Pestisida Nabati dan Cara
Pembuatannya  untuk  Pengendalian Organisme  Pengganggu  Tumbuhan , Balitbang Pertanian, Bandung.
Siregar,  C.J.P.,  2010, Teknologi  Farmasi Sediaan  Tablet ,  Penerbit  Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Suwito, Farich, A., Winarno, dan Santoso,
B., 2013, Efektivitas Bacillus thuringiensis Varian Israelensis erotipe  H-14  dalam  Mematikan Larva Aedes  aegypti pada  Skala Lapangan, Jurnal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan , Vol. 3, No. 1 : 1-3.