Bain  et al./Jurnal Ilmu dan Teknologi Peternakan Tropis 5(3):11-19
Optimalisasi Penggunaan Level Sabun Kalsium Minyak Kedelai dalam Ransum Terhadap Karakteristik Fermentasi, Populasi Mikroba dan Kecernaan Nutrien Secara In Vitro Menggunakan Cairan Rumen Sapi Bali
Ali Bain 1* , Komang G. Wiryawan 2 , Dewi Apri Astuti 2 , Chairrusyuhur Arman 3 , Sri Suharti 2
1 Fakultas Peternakan, Universitas Halu Oleo, Jl. H.E.A. Mokodompit Kampus Hijau Bumi Tridharma, Anduonohu, Kendari 93232
2 Department Ilmu Nutrisi dan Teknologi Pakan, Institut Pertanian Bogor Kampus IPB Dramaga, Bogor, Indonesia
3 Fakultas Peternakan, Universitas Mataram Jl. Majapahit No. 62, Gomong, Kec. Mataram, Kota Mataram, Nusa Tenggara Barat 83121
*Email korespondensi: alibain1967@yahoo.com
(Diterima: 15-7-2018; disetujui 25-8-2018)

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk  mengevaluasi optimalisasi penggunaan level sabun kalsium yang berbeda dalam ransum secara in vitro terhadap karakteristik fermentasi, populasi mikroba dan kecernaan nutrien ransum,  menggunakan  sumber  inokulum  cairan  rumen  sapi  Bali.  Penelitian  dilaksanakan  menggunakan rancangan acak kelompok dengan 4 jenis perlakuan dalam 3 ulangan.  Ransum penelitian terdiri atas : R1, 40% rumput lapang (RL) + 60% konsentrat (K), R2 (40% RL + 60% K, mengandungn 2.5% SCa-kedelai), R3 (40%  RL + 60% K, mengandung 5% SCa-kedelai), R4 (40%  RL + 60% K, mengandung 7.5% SCa- kedelai).  Variabel  yang  diukur  terdiri  atas  karakteristik  fermentasi  in  vitro  (pH,  N-NH 3 ,  produksi  total volatile  fatty  acids),  populasi  mikroorganisme  (total  bakteri  dan  total  protozoa),  dan  kecernaan  nutrien (kecernaan bahan kering dan kecernaan bahan organik). Data dianalisis menggunakan analysis of varians (ANOVA) dan perbedaan antara perlakuan diuji dengan Duncan’s Multiple Range Test.  Hasil penelitian menunjukkan, penambahan SCa-kedelai pada level yang berbeda dalam konsentrat tidak mempengaruhi pH,  konsentrasi  amonia,  populasi  mikroba,  kecernaan  bahan  kering  dan  kecernaan  bahan  organik fermentasi tetapi berpengaruh sangat nyata (P<0.002) terhadap produksi total VFA. Produksi total VFA tertinggi diperoleh pada ransum perlakuan R4 (konsentrat yang mengandung 7.5% SCa-kedelai). Produksi total  VFA  tertinggi  diperoleh  pada  perlakuan  R4  dan  produksi  total  VFA  paling  rendah  terjadi  pada perlakuan  ransum  R1  (kontrol).    Produksi  total  VFA    ransum  R1  dan  R2  dan  ransum  R2  dan  R3  tidak berbeda nyata namun produksi total VFA ransum R3 lebih tinggi dibanding ransum kontrol. Penambahan SCa-kedelai dalam konsentrat menghasilkan produksi total VFA tetinggi namun mulai menekan populasi total  bakteri.  Mempertimbangkan  hasil  peubah  fermentasi  dan  populasi  mikroba  serta  biaya  pembuatan produk sabun kalsium, SCa-kedelai pada level 5% merupakan level penggunaan SCa-kedelai yang terbaik dalam ransum.
Kata kunci: sabun kalsium, fermentasi, in vitro , kecernaan

## ABSTRACT
The study to evaluate the optimalization the different level of soybean oil calcium soap (CaS-soybean) in ration on in vitro fermentation using Bali cattle rumen fluid. The experiment was arranged in a complete randomized block design with 4 different ration treatments and 3 replicates. Ration treatments were R1: 40% native grass (NG) + 60% concentrate (C), R2 : 40% NG + 60% C, supplemented with 2.5% soybean oil calcium soap (CaS-soybean), and R3 (40% NG + 60% C, supplemented with 5.0% CaS-soybean and R4 (40% NG + 60% C, supplemented with 7.5% CaS-soybean). Variables measured were fermentation
p-ISSN: 2406-7489    e-ISSN: 2406-9337

## Terakreditasi
Ditjen Penguatan Riset dan Pengembangan, Kemenristekdikti Keputusan No: 21/E/KPT/2018, Tanggal 9 Juli 2018
Jurnal Ilmu dan Teknologi Peternakan Tropis ,
September 2018, 5(3):11-19
http://ojs.uho.ac.id/index.php/peternakan-tropis
characteristics  (pH,  NH 3 -N,  total  volatile  fatty  acids),  microbial  population  (total  bacteria  and  total protozoa), and nutrient digestibility (dry matter and organic matter digestibility). Data were analyzed using analysis of variance (ANOVA) and the differences between treatments means were examined by Duncan Multiple Range Test. Results of the study  showed that the four different level of CaS-soybean in ration did not have any significant effect (P>0,05) on pH, NH3-N, total bacteria, total protozoa, dry matter and organic matter digestibility. The treatments significantly increased (P<0.05) the production of total volatile fatty acids.  The  highest  production  of total VFA  was  obtained  from  ration  R4 (concentrate  containing  7.5% CaS-soybean)  and  the  lowest  was  obtained  from  treatment  R1  (control).  There  were  no  significant differences between R1 and  R2, and between R2 and R3 on the total VFA production. However, the total productions of VFA in ration R3 were higher than that of the control ration. The addition of CaS-soybean in the concentrate had increased the total production of VFA, but at the same time, it began pressing the total population of bacteria. Considering the results of the fermentation variables and microbial population as well as the cost of making calcium soap products, CaS-soybean at 5% level was selected as the best level of CaS-soybean in ration.
Keywords : calcium soap, fermentation, in vitro , digestibility

## PENDAHULUAN
Minyak  kedelai  telah  banyak  digunakan pada ransum ternak sapi, unggas dan babi karena mengandung  asam lemak esensial (asam linoleat, C18:2n-6  dan  asam  oleat, C18:3n-3)  yang  tinggi (Garcia dan Casal 2013). Komposisi asam lemak minyak kedelai terdiri atas asam linoleat (>50%), asam oleat (21% sampai 25%) dan  asam linolenat (5%  sampai  6%)  (Jokić et  al. 2013).  Penelitian pemanfaatan minyak kedelai untuk meningkatkan kandungan  asam  lemak  tak  jenuh  produk  ternak ruminansia  telah  banyak  dilakukan,  tetapi  belum dapat memberikan  hasil yang optimal.
Awawdeh et  al. (2009)  melaporkan, penambahan minyak kedelai 32 g kg -1 pada pakan berbasis barley dapat meningkatkan konsumsi dan kecernaan lemak kasar. pertambahan bobot badan sebesar 237 g ekor -1 hari -1 dan bobot badan akhir, tetapi  belum  dapat  memperbaiki  kualitas karkasnya. Penambahan minyak kedelai 33 g kg -1 BK  berbasis  hijauan  tinggi  pada  pakan penggemukan  sapi  pedaging  meningkatkan kandungan conjugated  linoleic  acid (CLA)  yang terdeposisi  pada  lemak  intramuskuler  dan subkutan,  kandungan  asam  lemak  vasenik  dan profil  asam  lemak  tidak  jenuh  serta  menurunkan komposisi  asam  lemak  jenuh  (Aharoni et  al. 2005).
Pemanfaatan minyak nabati dalam ransum  ternak  ruminansia  dibatasi  oleh  adanya efek  negatif  PUFA  di  dalam  rumen.  PUFA  di dalam pencernaan ruminansia mengalami banyak perubahan  (Carriquiry et  al. 2008)  dan menimbulkan  efek  negatif  terhadap  fermentasi rumen,  pencernaan  serat  kasar  dan  konsumsi
bahan  kering  ransum  mengandung  jerami barley (jelai)  dan  konsetrat  (Manso et  al. 2006).  Lanier dan Corl (2015) melaporkan, PUFA yang terdapat dalam  pakan  ruminansia  mengalami  proses esterifikasi  dan  biohidrogenasi  ketika  memasuki pencernaan  rumen.  Proses  biohidrogenasi  dalam rumen merupakan mekanisme detoksifikasi untuk menghindari  efek  anti  bakterial  asam  lemak  tak jenuh yang dapat merusak integritas membran sel yang  berimplikasi  pada  penurunan  pertumbuhan dan aktivitas mikroba (Maia et al. 2010). Wynn et al. (2006)  melaporkan,  suplementasi  CLA  tanpa proteksi  akan  mengalami  biohidrogenasi  sebesar 91.5%  dalam  rumen  domba  sedangkan  jika diberikan  dalam  bentuk  terproteksi  hanya  35% mengalami biohidrogenasi.
Adanya  efek  negatif    PUFA  terhadap fermentasi  rumen  menjadi  alasan  utama  agar pemanfaatan  minyak  nabati  yang  mengandung PUFA  tinggi  harus  dibatasi  dan  diproteksi  agar tidak  mengganggu  fungsi  rumen.    Jika  hal  ini dapat dikontrol dan dilakukan dengan tepat maka penggunaan  minyak  nabati  mengandung  PUFA tinggi dapat berimplikasi positif dalam memperbaiki  produktivitas  dan  kualitas  produk ternak  ruminansia  (Garcia  dan  Casal  2013). Perbedaan  respon  ternak  terhadap  penggunaan minyak  tanaman  pada  ransum  sapi  dipengaruhi oleh  fase  pertumbuhan  sapi,  jumlah  lemak  atau minyak dalam total ransum dan  kadar asam lemak linoleat yang terkandung dalam minyak  nabati.
Beberapa  teknologi  telah  dikembangkan untuk memproteksi lemak pakan dalam pencernaan  rumen  yaitu  bentuk  lemak  aldehid, sabun  kalsium  dan  amida  asam  lemak  (Jenkins dan  Bridges  2007).  Block et  al. (2005) melaporkan, sabun kalsium asam lemak
dikembangkan  sebagai  salah  satu  teknologi proteksi  asam  lemak  yang  tahan  terhadap  enzim mikroba  dan  produk  yang  dapat  mencegah terganggunya proses fermentasi rumen oleh asam lemak.  Selain  itu  sabun  kalsium  asam  lemak mempunyai kecernaan yang lebih tinggi dibanding  sumber  asam  lemak  lainnya  (lemak sapi,  gliserida  terhidrogenasi,  minyak  biji  kapas, asam  lemak prilled dan    sabun  kalsium  asam lemak sawit) selanjutnya dapat menyediakan nilai energi  tercerna  untuk  meningkatkan  produksi ternak (Block et al. 2005).
Beberapa  produk  sabun  kalsium  telah diproduksi secara komersial untuk meningkatkan kandungan asam lemak tak jenuh dalam jaringan tubuh  ternak  daging  sapi  (Jenkins  dan  Bridges 2007).  Wu  dan  Palmquist  (1991)  melaporkan, pemberian  lemak  dalam  bentuk  sabun  kalsium dapat memproteksi sebagian asam lemak tersebut dari  proses  biohidrogenasi  mikroba  rumen. Adanya keragaman hasil yang diperoleh berkaitan dengan penggunaan sabun kalsium minyak nabati yang  disebabkan  oleh  perbedaan  jenis  minyak, jumlah  kandungan  PUFA,  kuantitas  dan  kualitas produk  sabun  kalsium  yang  digunakan,  faktor fisiologis  dan  pencernaan  ternak.  Beragamnya faktor  yang  dapat  mempengaruhi  efektivitas pemanfaatan dalam ransum ruminansia merupakan  alasan  utama  perlunya  kajian pemanfaatan  sabun  kalsium  masih  untuk  terus dilakukan. Beberapa alasan tersebut dikonfirmasi pula  dengan  data  yang  dilaporkan  (Bain et  al. 2014),  penggunaan  jenis  minyak  nabati  yang berbeda  dalam  bentuk  tidak  terproteksi  dan terproteksi  sabun  kalsium  tidak  menghasilkan kinerja fermentasi yang berbeda tetapi penggunaan  minyak  kedelai  dalam  bentuk  tidak terproteksi  dan  terproteksi  sabun  kalsium  secara
mandiri  menghasilkan  produksi  total  VFA  yang paling  tinggi,  kadar  pH,  konsentrasi  N-NH 3 , populai  mikroba  dan  kecernaan  nutrien  yang relatif  sama.    Namun  demikian  kombinasi perlakuan  dapat  menciptakan  peubah  fermentasi yang  kondusif  untuk  kelangsungan  proses fermentasi  dan  pertumbuhan  mikroba.  Penelitian dilakukan untuk mengevaluasi penggunaan sabun kaslium  minyak  kedelai  pada  level  berbeda terhadap karakteristik fermentasi, populasi mikroba  dan  kecernaan  nutrien  pakan  secara in vitro dalam cairan rumen sapi Bali.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  di  laboratorium Ilmu  Nutrisi  Ternak  Perah,  Departemen  INTP Fakultas  Peternakan  IPB.  Analisis  sampel penelitian  dilakukan  di  laboratorium  Balai Penelitian  Ternak  Ciawi  Bogor,  Laboratorium Terpadu  IPB  Laboratorium  Kimia  Analitik Fakultas  MIPA  IPB  dan  di  PT  ADEV  Natural Indonesia.    Pengukuran  populasi  mikroba  di Laboratorium Mikrobiologi, Fisiologi dan Biokimia  Nutrisi  Departemen  INTP,  Fakultas Peternakan IPB. Penelitian dilaksanakan menggunakan  rancangan  acak  kelompok  4  x  3 untuk menguji 4 jenis ransum perlakuan. Seluruh perlakuan  dilaksanakan  dalam  3  ulangan (berdasarkan  periode  pengambilan  cairan  rumen sapi  Bali).Ransum perlakuan  terdiri  atas  40% rumput  lapang  (RL)  dan  60%  konsentrat  (K). Rumput lapang yang digunakan adalah campuran rumput  yang  tumbuh  liar  pada  lahan-lahan  di lingkungan Institut Pertanian Bogor. Bahan pakan pembuatan  konsentrat terdiri atas dedak, bungkil kelapa,  onggok, pollard ,  sabun  kalsium  minyak kedelai (SCa-kedelai), molasses, CaCO 3 dan urea.
Tabel 1.  Komposisi bahan ransum perlakuan penelitian
Komposisi bahan ransum (%) Perlakuan R1 R2 R3 R4 Rumput Lapang 40.00 40.00 40.00 40.00 Kosentrat  : 60.00 60.00 60.00 60.00 Onggok 30.00 27.50 25.00 22.50 Pollard 31.50 31.50 31.50 31.50 Bungkil Kelapa 20.50 20.50 20.50 20.50 Molasses 15.00 15.00 15.00 15.00 CaCO 3 1.50 1.50 1.50 1.50 Urea 1.50 1.50 1.50 1.50 SCa- kedelai 0.00 2.50 5.00 7.50
R1 :  40% rumput lapang (RL) + 60% konsentrat (K), R2 (40% RL + 60% K , mengandung 2.5% SCa-kedelai), R3 (40% RL + 60% K, mengandung 5% SCa-kedelai), R4(40% RL + 60% K, mengandung 7.5% SCa-kedelai)

## Tabel 2. Kandungan nutrien ransum perlakuan penelitian
Kandungan nutrien ransum (% bahan kering ) Perlakuan R1 R2 R3 R4 Bahan Kering 76.00 76.05 76.09 76.13 Abu 6.37 6.64 6.91 7.17 Protein Kasar 13.21 13.19 13.17 13.15 Serat Kasar 16.71 16.55 16.38 16.22 Lemak Kasar 3.91 5.19 6.48 7.77 BETN 59.80 58.43 57.06 55.68 TDN 71.19 72.47 73.76 75.05 Ca 0.52 0.52 0.51 0.51 P 0.25 0.25 0.25 0.25
R1 :  40% rumput lapang (RL) + 60% konsentrat (K), R2 (40% RL + 60% K, mengandung 2.5% SCa-kedelai), R3 (40% RL + 60% K, mengandung 5% SCa-kedelai), R4(40% RL + 60% K, mengandung 7.5% SCa-kedelai). Komposisi nutrien adalah hasil estimasi berdasarkan komposisi nutrien bahan pakan ternak
Kandungan  nutrien  ransum  perlakuan disusun  menurut  standar  Kearl  (1982)  untuk memenuhi kebutuhan nutrisi sapi Bali bobot 250 kg  dengan  pertambahan  bobot  badan  0.75  kg ekor -1 hari -1 . Komposisi dan kadar nutrien ransum perlakuan  berturut-turut  disajikan  pada  Tabel  1 dan Tabel 2.
Kombinasi  ransum  perlakuan  yaitu:    R1 (40%  (RL)  +  60%  (K),  R2  (40%  RL  +  60%  K, mengandungn 2.5% SCa-kedelai), R3 (40%  RL + 60% K, mengandung 5% SCa-kedelai), R4 (40% RL + 60% K, mengandung 7.5% SCa-kedelai).
Peubah penelitian terdiri atas karakteristik fermentasi rumen (pH, N-NH 3 dan produksi total VFA),  populasi  mikroba  (populasi  total  bakteri dan  total  protozoa)  dan  kecernaan  nutrien (kecernaan  bahan  kering  dan  kecernaan  bahan organik). Analisis kandungan nutrisi ransum yang terdiri  atas  bahan  kering  (BK),  bahan    organik (BO),  protein  kasar  (PK),  serat  kasar  (SK)  dan lemak  kasar  (LK)  menggunakan  metode  AOAC (2005).    Analisis  kandungan  mineral  kalsium (Reitz et  al. 1960)  dan  phosphor  (Taussky  dan Shor  1953)  menggunakan Atomic  Absorption Spectrophotometer (AAS).  Analisis  kandungan Neutral  Detergent  Fiber (NDF)  dan Acid Detergent  Fiber (ADF)  menggunakan    metode Goering  dan  Soest  (1970).    Kandungan Total Digestible  Nutrient (TDN)  di  hitung    menurut persamaan  Hartadi  (1980).  Analisis  kadar  pH diukur  menggunakan  pH  meter  digital  merk Hanna 70, kadar N-NH 3 (Conway 1962), produksi total VFA (General Laboratory Procedures 1966) dan populasi bakteri dan protozoa diukur dengan metode Ogimoto dan Imai (1981). Data penelitian
dianalisis  dengan Analysis of Variance (ANOVA) menggunakan software SPSS 21.0  pada  taraf kepercayaan  5%  dan  1%.  Jika  perlakuan berpengaruh  nyata  dilanjutkan  uji  beda  antar perlakuan  menggunakan Duncan’s  Multiple Range Test (DMRT).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Efek penambahan level sabun kalsium minyak kedelai  yang  berbeda  dalam  konsentrat terhadap karakteristik fermentasi in vitro
Efek  perlakuan  terhadap  karakteristik fermentasi (kadar pH, konsentrasi      N-NH 3 dan produksi total VFA) in vitro pada setiap perlakuan disajikan pada Tabel 3.
Data  dalam  Tabel  3  menunjukkan, penggunaan  sabun  kalsium  minyak  kedelai  pada level yang berbeda tidak mempengaruhi kadar pH dan konsentrasi         N-NH 3. Penambahan SCa- kedelai  pada  level  yang  berbeda  sangat mempengaruhi  (P<0.002)  produksi  total  VFA. Produksi  total  VFA  tertinggi  diperoleh  pada perlakuan  R4  dan  produksi  total  VFA  paling rendah  terjadi  pada  perlakuan  R1  (kontrol). Produksi  total  antara  ransum  R1  dengan  R2  dan antara  R2  dab  R3  tidak  berbeda  nyata  namun produksi  total  VFA  R3  lebih  tinggi  di  banding ransum kontrol.
Penggunaan SCa-kedelai pada level yang berbeda  menghasilkan  rataan  kadar  pH  yang relatif  sama  pada  seluruh  perlakuan  yaitu  dalam kisaran  pH  6.5  sampai  6.64.  Kadar  pH  tersebut merupakan  kisaran  pH  yang  normal  untuk mendukung  kelangsungan  proses  fermentasi. McDonald et al. (2010) menyatakan, nilai rataan
pH  ruminal  (6  sampai  7)  merupakan  pH  yang normal dan ideal untuk mendukung pertumbuhan mikroba dan berlangsung proses fermentasi pakan dalam  rumen.  Franzolin  dan  Dehority  (2010) menyatakan,  bahwa  mempertahankan  kadar  pH rumen  sangat  penting  bagi  kelangsungan  dan stabilisasi pertumbuhan mikroba rumen. Kadar pH rumen  dipengaruhi  oleh  jenis  dan  frekwensi pemberian  ransum  pada  setiap  spesies  ternak ruminansia.  Kestabilan  pH  rumen  yang  dicapai dalam penelitian ini diduga berkaitan pula dengan efektivitas dari sabun kalsium dalam memproteksi asam  lemak  tak  jenuh  rantai  panjang  agar  tidak membentuk ikatan komplek dengan kation-kation yang dapat mempengaruhi kondisi pH rumen dan kebutuhan mikroba akan kation (Wina dan Susana 2013).  Kadar  pH  ruminal  pada  kisaran  pH  6.53 sampai  6.64  merupakan  pH  yang  ideal  untuk menjamin stabilisasi ketahanan ikatan asam lemak tak  jenuh  dan  ion  kalsium  dalam  produk  sabun kalsium  di  dalam  rumen  (Block et  al. 2005). Kestabilan  ikatan  PUFA  dan  ion  kalsium  akan mencegah  efek  negatif  dan  terjadinya  proses biohidrogenasi PUFA di dalam rumen. Perlakuan suplementasi  SCa-kedelai  pada  level  yang berbeda (2.5%, 5.0% dan 7.5%) dalam konsentrat juga  menghasilkan  kadar  N-NH 3 dan  produksi total  VFA  yang  ideal  untuk  mendukung pertumbuhan  mikroba  dalam  melakukan  proses fermentasi pakan di dalam rumen. McDonald et al. (2010)  menyatakan,  fermentasi  dalam  rumen dapat berlangsung normal jika kondisi ekosistem rumen mempunyai kisaran suhu, 38 sampai 42 0 C, pH, 6.0 sampai 7.0, konsentrasi N-NH 3 , 6 sampai 21 mM dan kadar total VFA, 70 sampai 150 mM. Kadar pH, konsentrasi N-NH 3 dan produksi total VFA  mempunyai  korelasi  yang  saling  berkaitan satu  sama  lain  dalam  menciptakan  kondisi ekosistem  rumen  yang  ideal  untuk  mendukung kelangsungan  proses  fermentasi.  Lana et  al. (1998) melaporkan, penurunan pH rumen dari 6.5 menjadi  pH  5.7  dapat  mengakibat  penurunan produksi N-NH 3 secara nyata.
Studi  lain  dilaporkan  Russell  (1998), produksi total VFA pada sapi yang mengkonsumsi konsentrat  tinggi  berkorelasi  positif  dengan  pH, yaitu  produksi  total  VFA  menurun  jika  pH menurun  sampai  5.3.  Kadar  pH    yang  normal dalam  penelitian  ini  memberi  kontribusi  positif terhadap  konsetrasi  N-NH 3 dan  produksi  total VFA  yang  berada  dalam  kisaran  normal,  yaitu kadar  N-NH 3 (9.43  sampai  10.55  mM)  dan produksi total VFA (125.29 sampai 167.89 mM). Data  kadar  pH,  konsentrasi  N-NH 3 dan  produksi total  VFA  yang  relatif  sama  pada  seluruh perlakuan  dapat  digunakan  sebagai  indikator bahwa penambahan SCa-kedelai pada level yang berbeda  dalam  konsentrat  tidak  memberikan dampak negatif terhadap ekosistem dan pencernaan substrat pakan.   Fenomena ini berarti pula  bahwa  suplementasi  minyak  kedelai  yang terproteksi sabun kalsium cukup efektif memproteksi  PUFA  dalam  ekosistem  rumen sehingga  keberadaan  PUFA  tersebut    tidak menggangu  pertumbuhan  dan  aktivitas  mikroba dalam  mendegradasi  fraksi  serat  pakan.  Tingkat degradasi serat pakan yang baik akan berimplikasi pada pembentukan komponen VFA selama proses inkubasi.  Fenomena ini  ditunjukkan  pula  dengan capaian  produksi  total  VFA  tertinggi  pada penggunaan  7.5%  SCa-kedelai  yaitu  mencapai 167.89  mM.  Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan Hidayah et  al. (2014),  suplementasi  minyak  biji rami yang diproteksi dalam bentuk sabun kalsium sangat  nyata  meningkatkan  produksi  total  VFA. Produksi  total  VFA  yang  tinggi  pada  perlakuan 7.5%  SCa-kedelai  diduga  berkaitan  tingginya kadar  PUFA  asam  linoleat  dalam  level  SCa- kedelai tersebut. Dimana semakin tinggi kandungan  PUFA  dari  minyak  nabati  yang digunakan  sebagai  bahan  pembuatan  sabun kalsium  akan  membutuhkan  ion  kalsium  yang lebih  banyak  pula  dalam  proses  penyabunannya. Banyaknya  jumlah  ion  kalsium  yang  tersedia tersebut  berpotensi  baik  untuk  menyediakan  ion kalsium yang dibutuhkan
Tabel 3. Efek  penambahan  level  sabun  kalsium  minyak  kedelai  yang  berbeda  dalam    konsentrat    terhadap karakteristik fermentasi in vitro Karakteristik fermentasi Perlakuan Nilai P R1 R2 R3 R4 pH 6.64 ± 0.17 6.59 ±  0.17 6.56 ±  0.20 6.53 ±  0.26 0.47 N-NH 3 (mM) 9.43 ± 0.88 10.55 ± 1.35 10.42 ± 0.87 10.13 ± 2.65 0.73 Total VFA (mM) 125.29 ± 35.75 A 133.75 ± 33.16 AB 148.19 ±28.55 B 167.89 ± 31.3 C 0.002
R1 :  40% rumput lapang (RL) + 60% konsentrat (K), R2 (40% RL + 60% K, mengandung 2.5% SCa-kedelai), R3 (40% RL + 60% K, mengandung 5% SCa-kedelai), R4(40% RL + 60% K, mengandung 7.5% SCa-kedelai). ABC Angka-angka  pada kolom yang sama yang diikuti oleh huruf yang berbeda berarti berbeda nyata pada taraf uji 1% (uji selang berganda Duncan)
untuk  merangsang  pertumbuhan  dan  aktivitas bakteri pencerna serat di dalam rumen (Hidayah et al. 2014).  Jenkins  dan  Palmquist  (1984) melaporkan,  CaCl 2 meningkatkan  kapasitas pembentukan sabun kalsium, toksisitasnya terhadap bakteri rumen rendah dan meningkatkan kecernaan  dinding  sel  tanaman  dibanding dicalcium  phosphate .  Mineral  kalsium  berperan dalam  sintesis  dan  stabilitas  struktur  dinding  sel mikroba dan mampu mengaktivasi berbagai enzim mikroba  seperti α-amylase dan  dibutuhkan  oleh mikroba  untuk  mencerna  selulosa  (Ruckebusch dan  Thivend  1980).    Meningkatnya  kecernaan fraksi  serat  pakan  selanjutnya  berimplikasi  pada peningkatan  produksi  total  VFA  yang  dihasilkan di dalam rumen.
Peningkatan  produksi  total  VFA  seiring dengan  penggunaan  level  sabun  kalsium  diduga berkaitan  pula  dengan  peningkatan  konsentrasi gliserol  yang  tersedia  di  dalam  rumen  yang merupakan  salah  satu  prekusor  pada  proses sintesis VFA.  Peningkatan jumlah glierol dalam rumen  seiring  dengan  peningkatan  level  sabun kalsium  dapat  dipahami  sebagai  implikasi  dari meningkatnya kadar lemak ransum (Tabel 2) yang digunakan  dalam  penelitian  ini.  Fenomena tersebut  berkaitan  pula  dengan  masih  adanya potensi  terpisahnya  ikatan  asam  linoleat  dengan ion  kalsium  dari  produk  sabun  kalsium  minyak kedelai  ketika  memasuki  pencernaan  rumen. Jenkins  dan  Bridges  (2007)  melaporkan,  asam lemak  tak  jenuh  rantai  panjang  seperti  asam linoleat dan asam linolenat sukar terlindungi dari proses  biohidrogenasi  bakteri  rumen  dibanding asam  lemak  oleat.    Peningkatan  produksi    total VFA  seiring  dengan  peningkatan  level  SCa- kedelai  yang  tidak  diikuti  dengan  peningkatan populasi  mikroba  dan  kecernaan  nutrien  (KcBK dan  KcBO)  diduga  merupakan  implikasi  masih adanya  pengaruh  PUFA  (asam  linoleat) SCa- kedelai  yang  terpisah  dari  ion  kalsiumnya. Peningkatan  kadar  PUFA  tersebut  selanjutnya meracuni dan menekan pertumbuhan dan aktivitas bakteri  yang  terlibat  dalam  proses  degradasi senyawa  yang  terkandung  dalam  substrat  pakan, khususnya fraksi serat. Fenomena ini ditunjukkan dengan  data  populasi  mikroba (Tabel 4),  dimana konsentrat  yang  mengandung  7.5%  SCa-kedelai menghasilkan produksi total VFA tertinggi tetapi mulai mengganggu pertumbuhan populasi bakteri total  dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya. Data  penelitian  ini  mengkonfirmasi  teori  bahwa meskipun  penggunaan  produk  sabun  kalsium asam lemak ditujukan untuk menekan efek negatif
lemak di dalam rumen namun jumlah masih tetap harus  dikontrol  karena  masih  adanya  potensi terpisahnya  ikatan  linoleat-ion  kalsium  dari produk  sabun  kalsium  ketika  berada  di  dalam ekosistem rumen.

## Efek penambahan level sabun kalsium minyak kedelai yang berbeda dalam konsentrat terhadap populasi mikroba
Efek  suplementasi  SCa-kedelai  pada level  yang  berbeda  dalam  konsentrat  terhadap populasi  mikroba  disajikan  pada  Tabel  4. Penggunaan SCa-kedelai pada level yang berbeda dalam  konsentrat  tidak  mempengaruhi  populasi total bakteri dan protozoa. Populasi total bakteri dan  populasi  protozoa  antar  perlakuan  tidak berbeda  nyata.  Meskipun  demikian  penggunaan SCa-kedelai  pada  level  7.5%  mulai  menekan populasi total bakteri.  Populasi total bakteri pada perlakuan  R4  (6.71±1.30  log  CFU  ml -1 )  lebih rendah jika dibandingkan dengan ransum kontrol (8.10 ± 0.61 log CFU ml -1 ) dan R3 (7.61 ± 0.61 log CFU ml -1 ). Hasil ini mengindikasikan bahwa penggunaan  SCa-kedelai  pada level  7.5% dalam ransum  sudah  memberikan  dampak  yang  buruk terhadap ekosistem in vitro , sehingga menyebabkan terganggunya pertumbuhan bakteri secara  keseluruhan  selama  proses  fermentasi. Pertumbuhan  total  bakteri  yang  mulai  tertekan tersebut kemungkinan berkaitan dengan tingginya kadar asam lemak linoleat yang masih berpotensi terpisah dari ion kalsiumnya selama berlangsungnya proses inkubasi.
Meskipun demikian, pada prinsipnya penambahan berbagai  level  SCa-kedelai  dalam  penelitian  ini belum  memberikan  dampak  negative  yang signifikan terhadap populasi protozoa, karakteristik fermentasi dan kecernaan nutrien.
Kadar  pH  yaitu,  pH  (6.53  sampai  6.64), kadar  N-NH 3 (9.43  sampai  10.55  mM)  dan produksi total VFA yang optimal (125.29 sampai 167.89 mM) yang diperoleh masih dalam kisaran yang  relatif  normal  untuk  kelangsungan  proses fermentasi dan pertumbuhan mikroba. Stabilisasi nilai  peubah  fermentasi  sangat  penting  dan merupakan  prasyarat  utama  untuk  mendukung pertumbuhan dan aktivitas mikroba dalam rumen.
McDonald et  al. (2010)  menyatakan bahwa fermentasi dalam rumen dapat berlangsung normal jika kondisi ekosistem  pada suhu,  38 0 C    sampai  42 0 C,  pH  6.0  sampai  7.0, konsentrasi  N-NH 3 ,  6  sampai  21  mM  dan  kadar total VFA, 70 sampai 150 mM. Senyawa N-
Tabel  4  Efek  penambahan  level  sabun  kalsium  minyak  kedelai  yang  berbeda  dalam  konsentrat  terhadap  populasi mikroba
Populasi mikroba Perlakuan Nilai P R1 R2 R3 R4 Bakteri Total (logCFU/ml) 8.10 ± 0.61 6.78 ±1.59 7.61± 1.02 6.71 ± 1.30 0.20 Protozoa (log sel/ml) 4.69 ± 0.64 5.00 ± 0.60 4.97 ± 0.30 5.00 ± 0.18 0.75
R1 :  40% rumput lapang (RL) + 60% konsentrat (K), R2 (40% RL + 60% K, mengandung 2.5% SCa-kedelai), R3 (40% RL + 60% K, mengandung 5% SCa-kedelai), R4(40% RL + 60% K, mengandung 7.5% SCa-kedelai)
amonia rumen merupakan sumber nitrogen utama dalam  proses  sintesis  protein  mikroba  rumen. Sintesis  protein  mikroba  sangat  penting  bagi ruminansia karena protein mikroba yang disintesis dalam  rumen  menyediakan  50%  dari  total  asam amino  untuk  sapi  potong.    Karsli  dan  Russell (2002)  melaporkan,  pertumbuhan  dan  sintesis protein  mikroba  tergantung  pada  kecukupan energi  (ATP)  yang  dihasilkan  dari  fermentasi bahan  organik  dalam  rumen  dan  ketersediaan nitrogen  yang  dihasilkan  dari  degradasi  sumber nitrogen  non  protein  (NPN)  dan  protein  serta nutrien  lain  seperti  mineral  sulfur,  phosphor  dan mineral  lainnya.  Populasi  protozoa    yang  relatif sama    antar  perlakuan  kemungkinan  berkaitan dengan efek level penggunaan sabun kalsium yang tidak membahayakan bagi pertumbuhan protozoa. Pada hal diketahui protozoa lebih sensitif terhadap keberadaan  lemak  dibandingkan  dengan  bakteri. Efek perlakuan yang tidak menghambat pertumbuhan protozoa berimplikasi pada tercapainya  stabilisasi  kadar  pH  inkubasi  yang optimal. Franzolin dan Dehority (2010) melaporkan,  protozoa  memiliki  peranan  penting dalam  menyangga    (mempertahankan)  stabilisasi pH rumen yang dikarenakan kemampuan protozoa mencerna  partikel  pati  yang  lebih  cepat. Terciptanya  kondisi  ekosistem  fermentasi  yang normal  tersebut  berkaitan  pula  dengan  peranan sabun  kalsium  dalam  menekan  efek  negatif  dan toksisitas  PUFA  terhadap  pertumbuhan  mikroba dan proses fermentasi selama proses inkubasi. Hal ini    sesuai  dengan  tujuan  penggunaan  sabun kalsium  asam  lemak  yaitu  agar  PUFA  tidak mengganggu  fermentasi  dalam  rumen  (Jenkins dan  Palmquist  1984),  tidak  bersifat  toksik  pada bakteri rumen dan mencegah penurunan
kecernaan  serat  kasar    (Palmquist et  al. 1986). Meskipun kadar pH, dan konsentrasi VFA dalam penelitian ini berada dalam kisaran normal namun pada  perlakuan  yang  mengandung  7.5%  SCa- kedelai mulai menekan pertumbuhan total bakteri jika  dibandingkan  dengan  populasi  total  bakteri pada  perlakuan  kontrol  dan    perlakuan  ransum yang mengandung 5% SCa-kedelai.

## Efek penambahan level sabun kalsium minyak kedelai yang berbeda dalam ransum terhadap kecernaan nutrien
Pengaruh  suplementasi  berbagai  level SCa-kedelai terhadap kecernaan bahan kering dan kecernaan bahan organik disajikan pada Tabel 5. Hasil  Anova  menunjukkan,  penggunaan  SCa- kedelai pada level yang berbeda tidak mempengaruhi  nilai  KcBK  dan  KcBO.  Nilai KcBK  dan  KcBO  yang    tidak  berbeda  pada seluruh perlakuan merupakan data yang mengkonfirmasi bahwa penambahan SCa-kedelai pada  level  yang  berbeda  dapat  menciptakan kondisi  ekosistem  rumen  yang  cukup  stabil  dan ideal  untuk  mendukung  pertumbuhan  mikroba dalam melakukan aktivitas fermentatif atau proses degradasi substrat pakan.
Doreau  dan  Chilliard  (1997)  melaporkan,  untuk menghindari  pengaruh  negatif  lemak  pada ruminansia  maka  penambahan  lemak  dalam ransum sebaiknya tidak lebih dari 6% sampai 7% dari  total  bahan  kering  ransum.  Teori  tersebut dikonfirmasi  dengan  data  penelitian  ini,  dimana penggunaan  SCa-kedelai  pada  level  7.5%  mulai menekan populasi total bakteri. Efek penambahan SCa-kedelai  yang  mulai  menekan  populasi  total bakteri  kemungkinan  juga  disebabkan  oleh kualitas dan ketahanan produk sabun kalsium
Tabel 5  Efek penambahan  level sabun kalsium  minyak kedelai  yang berbeda dalam  ransum  terhadap  kecernaan nutrien
Kecernaan nutrien (%) Perlakuan Nilai P R1 R2 R3 R4 KcBK 71.04  ± 2.03 70.94 ± 2.07 72.00 ± 1.14 71.19 ± 0.70 0.73 KcBO 74.63 ± 1.64 74.31 ± 2.85 75.28 ± 3.15 74.35 ± 0.47 0.79
R1 :  40% rumput lapang (RL) + 60% konsentrat (K), R2 (40% RL + 60% K, mengandung 2.5% SCa-kedelai), R3 (40% RL + 60% K, mengandung 5% SCa-kedelai), R4(40% RL + 60% K, mengandung 7.5% SCa-kedelai).
minyak kedelai yang belum dicapai secara optimal dalam  memproteksi  PUFA  proses  inkubasi. Fotouhi  dan  Jenkins  (1992)  melaporkan,  sabun kalsium linoleat tidak sepenuhnya dapat diproteksi  dan  lolos  dari  proses  biohidrogenasi bakteri  rumen.  Meskipun  demikian  dengan  nilai kecernaan  nutrien  (kecernaan  bahan  kering  dan kecernaan  bahan  organik)  ransum  yang  relatif sama  antara  perlakuan  dalam  penelitian  ini mengindikasikan bahwa produk SCa-kedelai yang digunakan  cukup  bermanfaat  dalam  mencegah efek  negatif  terhadap  keberlangsungan  proses fermentasi  selama  proses  inkubasi.  Hasil  positif yang diperoleh dalam penelitian ini dikonfirmasi dengan nilai rataan kecernaan bahan kering yang mencapai  72%  dan  kecernaan  bahan  organik (75.28%) yang lebih tinggi dibanding dengan hasil hasil  penelitian  yang  dilaporkan  (Hidayah et  al. 2014),  dimana  ransum  yang  disuplementasi dengan  sabun  kalsium  minyak  wijen,  canola dan tanaman flax mempunyai kecernaan bahan kering dan  bahan  organik  tertinggi  masing-masing 64.96%  dan  64.58%.  Efektivitas  produk  sabun kalsium  dalam  menekan  efek  negatif  PUFA terhadap  nilai  kecernaan  nutrien  ransum  selama proses  fermentasi  di  dalam  rumen  sangat ditentukan dengan kualitas produk sabun kalsium yang digunakan yang mana sangat ditentukan oleh teknik  pembuatan  dan  proses  penyimpanan  dari produk sabun kasium sebelum digunakan (Block et al. 2005).

## KESIMPULAN
Penambahan SCa-kedelai dalam konsentrat  menghasilkan  produksi  total  VFA tetinggi  namun  mulai  menekan  populasi  total bakteri  secara in  vitro .  Mempertimbangkan  hasil peubah  fermentasi  dan  populasi  mikroba  serta biaya  pembuatan  produk  sabun  kalsium,  SCa- kedelai  pada  level  5%  merupakan  level penggunaan  SCa-kedelai  yang  terbaik  dalam ransum.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Kemristek  Dikti  Republik  Indonesia  yang  telah memberikan  dukungan  dana  penelitian  melalui program MP3EI,  No. 0263/E5/2014,  the  year 2014-2015

## DAFTAR PUSTAKA
Aharoni Y, A. Orlov, A. Brosh , R. Granit , Kanner J.  2005.  Effects  of  soybean  oil supplementation  of  high  forage  fattening
diet  on fatty  acid  profiles in  lipid  depots of fattening bull calves, and their levels of blood vitamin E. Anim Feed Sci Technol. 119(3-4):191-202.
AOAC. 2005. Official Methods of Analysis. 18 th . New York, AOAC International.
Awawdeh M.S., B.S. Obeidat, A.Y. Abdullah, & W.M.  Hananeh.  2009.  Effects  of  yellow grease  or  soybean  oil  on  performance, nutrient digestibility and carcass characteristics of finishing Awassi lambs. Anim  Feed  Sci  Technol. 153(3-4):216- 227.
Bain A, K.G. Wiryawan, D.A. Astuti, S. Suharti, S., & C. Arman. 2014. Effect of protected vegetable  oils  on  in  vitro  fermentation characteristics and nutrient digestibility of Bali  cattle  rumen  fluid. The  16th  AAAP Congress , ￼￼Yogyakarta, Indonesia.
Block  E.,  W.  Chalupa,  E.  Evans  ,  T.  Jenkins,  P. Moate, D. Palmquist, & C. Sniffen. 2005. Calcium  salts  are  highly  digestible.
Feedstuffs. 77(30):1-7.
Carriquiry  M.,  W.J.  Weber,  L.H.  Baumgard,  & B.A.  Crooker.  2008. In  vitro bio- hydrogenation  of  four  dietary  fats. Anim Feed Sci and Tech. 141:339–355.
Conway E.J. 1962. Microdiffusion  Analysis  and Volumetric    Error :  Crosby  Lockwood, London.
Doreau  M.  &  Y.  Chilliard.  1997.  Digestion  and metabolism of dietary fat in farm animals. British J  Nut. 78(Suppl. 1): S15-S35.
Fotouhi  N.  &  T.C.  Jenkins.  1992.  Ruminal biohydrogenation of linoleoyl methionine and calcium linoleate in sheep. J Anim Sci. 70(11):3607-3614.
Franzolin R. & B.A. Dehority. 2010. The role of pH on the survival of rumen protozoa in steers. R  Bras  Zootec. 39(10):2262-2267.
Garcia  P.T.  &  J.J.  Casal.  2013.  Effect  of  dietary plant  lipids  on  conjugated  linoleic  acid (CLA)  concentrations  in  beef  and  lamb meats. In Tech. 135-159.
Goering H.K. & P.J.V. Soest. 1970. Forage Fiber
Analyses (Apparatus, Reagents,
Procedures,  and  Some  Applications),
Agriculture  Handbook.    Agricultural Research Service. Washington DC : 1-20.
Hidayah N., S. Suharti, & K.G. Wiryawan. 2014.
In  vitro rumen  fermentation  of  ration supplemented  with  protected  vegetable oils. Med Pet. 37(2):129-135.
Jenkins T.C. & W.C. Bridges . 2007. Protection of fatty  acids  against  ruminal  biohydrogen- ation  in  cattle. Eur  J  Lipid  Sci  Technol.
109(8):778-789.
Jenkins  T.C.  &  D.L.  Palmquist.  1984.  Effect  of fatty acids or calcium soaps on rumen and total nutrient digestibility of dairy rations.
Journal of dairy science. 67(5):978-986.
Jokić S., S. Sudar, S. Vidović, M. Bilić, D. Velić, &  V.  Jurković.  2013.  Fatty  acid composition  of  oil  obtained  from soybeans by extraction with supercritical carbon  dioxide. Czech  J  Food  Sci.
31(2):116-125.
Karsli  M.A.  &  J.R.  Russell.  2002.  Effects  of source and concentrations of nitrogen and carbohydrate  on  ruminal  microbial protein  synthesis. Turk  J  Vet  Anim  Sci. 26:201-207.
Kearl  C.L.  1982.  Nutrient  Requirements  of Ruminants in Developing Countries Utah (US): Utah State University.
Lana  R.P.,  J.B.  Russell,  &  M.E.  Van  Amburgh. 1998. The role of pH in regulating ruminal methane and ammonia production. J Anim Sci. 76(8):2190-2196.
Lanier  J.S.  &  B.A.  Corl.  2015.  Challenges  in enriching  milk  fat  with  polyunsaturated fatty  acids. J  Anim  Sci  Biotechnol. 6(26):1-9.
Maia M.R., L.C. Chaudhary, C.S. Bestwick, A.J. Richardson, N. McKain, T.R. Larson, I.A. Graham,  &  R.J.  Wallace. 2010. Toxicity of  unsaturated  fatty  acids  to  the biohydrogenating  ruminal  bacterium,
Butyrivibrio
fibrisolvens . BMC Microbiol. 10(52):1-10.
Manso  T.,  T.  Castro,  A.R.  Mantecón,  &  V.
Jimeno.  2006.  Effects  of  palm  oil  and calcium  soaps  of  palm  oil  fatty  acids  in fattening diets
on digestibility,
performance and chemical body
composition  of  lambs. Anim  Feed  Sci Technol. 127:175-186.
McDonald P., R.A. Edwards, J.F.D. Greenhalgh, C.A.  Morgan,  L.A.  Sinclair,  &  R.G. Wilkinson.  2010. Animal  Nutrition :
Pearson  Education  Limited.  United Kingdom.
Ogimoto  K.  &  S.  Imai.  1981. Atlas  of  Rumen Microbiology :  Japan  Scientific  Societies Press. Tokyo.
Palmquist  D.L.,  T.C.  Jenkins,  &  A.E.  Joyner  J. 1986.  Effect  of  dietary  fat  and  calcium source on insoluble soap formation in the rumen J Dairy Sci. 69:1020-1025.
Reitz  L.L,  W.H.  Smith,  &  M.P.  Plumlee.  1960. Simple,  wet  oxidation  procedure  for biological materials. Anal Chem.
32(12):1728–1728.
Ruckebusch  Y.  &  P.  Thivend.  1980. Digestive Physiology and Metabolism in Ruminants.  MTP  Press  Limited  Falcon House Lancaster, England .
Russell  J.B.  1998.  The  importance  of  pH  in  the regulation of ruminal acetate to propionate  ratio  and  methane  production in vitro . J Dairy Sci. 81(12):3222-3230.
Taussky  H.H.  &  E.  Shor.  1953.  ￼A microcolorimetric method for the determination of inorganic phosphorus. J Biol Chem. 202:675-685.
Wina  E,  &  I.  Susana.  2013.  Manfaat  lemak terproteksi untuk meningkatkan produksi dan reproduksi ternak ruminansia.
Wartazoa. 23(4):176-184.
Wu  Z  &  D.L.  Palmquist.  1991.  Synthesis  and biohydrogenation  of  fatty  acids  by ruminal microorganisms in vitro . J Dairy Sci. 74:3035-3046.
Wynn  R.J.,  Z.C.  Daniel,  C.l.  Flux,  J.  Craigon, A.M. Salter, & P.J. Buttery. 2006. Effect of  feeding  rumen-protected  conjugated linoleic acid on carcass characteristics and fatty acid composition of sheep tissues. J Anim Sci. 84(12):3440-3450.