UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES CUKA KULIT NANAS ( Ananas comosus L. Merr.) PADA TIKUS PUTIH ( Rattus norvegicus ) JANTAN GALUR WISTAR

## YANG DIINDUKSI ALOKSAN
Mohammad Affan Dwica Putra 1 *, Siti Nur Jannah 2 , Agung Janika Sitasiwi 3
1,2,3) Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro, Semarang *Corresponding author : affandwica@students.undip.ac.id

## Abstract
Diabetes  mellitus  is  a  metabolic  disorder  characterized  by  increased  levels  of  glucose  in  the  blood (hyperglycemia). The increasing number of diabetics in the world encourages the discovery of certain drugs that are  effective  and  relatively  safe  for  managing  diabetes.  One  alternative  medicine that can  be used is  vinegar. Pineapple  skin  can  be  an  alternative  raw  material  for  making  vinegar  because  it  contains  a  large  amount  of sugar  and  contains  acetic  acid  and  various  secondary  metabolites  that  can  reduce  blood  glucose  levels.  The purpose  of  this  study  was  to  determine  whether  pineapple  skin  vinegar  has  antidiabetic  activity.  The  test  was carried  out  by  dividing  each  of  the  4  rats  into  six  groups  namely  normal  control,  positive  control,  negative control,  and  three  test  groups  that  were  given  pineapple  skin  vinegar  as  much  as  0.2,  0.4,  and  0.8  cc.  The treatment  was  carried  out for  28  days,  starting  4  days  after  induction  of  an  alloxan  dose of  150  mg /  kg  body weight. Measurement of blood glucose and body weight of rats were carried out before induction, after induction, and on the 7th, 14th, 21st, and 28th day, while the measurement of feed consumption was carried out every day starting  from  the  day  of  pineapple  skin  vinegar  administration.  The  results  of  the  analysis  showed  that  the administration  of  pineapple  skin  vinegar  by  0.4  cc  with  acetic  acid  levels  of  1.43%  can  reduce blood  glucose levels most significantly that is 41.63%.
Keywords : vinegar, pineapple skin, acetic acid, antidiabetic

## PENDAHULUAN
Diabetes  adalah  penyakit  kronis ditandai dengan meningkatnya kadar glukosa  dalam  darah  (hiperglikemia), terjadi  ketika  pankreas  tidak  lagi  mampu membuat  insulin,  atau  ketika  tubuh  tidak dapat menggunakan insulin yang dihasilkan  dengan  baik.  Insulin  adalah hormon  yang  dibuat  oleh  pankreas,  yang bertindak  mengatur  glukosa  darah  serta membantu glukosa masuk ke sel-sel dalam tubuh agar dapat diproses dan menghasilkan  energi.  Setiap  tahun  jumlah penderita diabetes terus mengalami peningkatan,  di  Indonesia  tahun  2017 terdapat  lebih  dari  10.276.100  kasus
diabetes  dengan  prevalensi  diabetes  pada orang  dewasa  sebesar  6.7%  (International Diabetes  Federation,  2017;  World  Health Organization, 2018).
Obat-obat  kimia  sintetis  untuk  terapi farmakologis  diabetes  yang  ada  saat  ini berpotensi menimbulkan efek samping jika digunakan  dalam  jangka  waktu  panjang. Metformin salah satunya, dapat menyebabkan  asidosis  laktat,  kekurangan vitamin B12, diare, nyeri otot, batuk, suara serak,  mual,  muntah,  alergi,  dan  berbagai gangguan  pencernaan  serta  pernapasan lainnya  (Nasri  &  Rafieian-Kopaei,  2014). Oleh  karena  itu,  diperlukan  alternatif pengobatan  diabetes  yang  lebih  aman
Mohammad Affan Dwica Putra et al. : Uji aktivitas antidiabetes cuka kulit Nanas ( Ananas comosus L. Merr.) pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan galur Wistar yang diinduksi aloksan
dengan  memanfaatkan  zat  bioaktif  dari bahan-bahan  alam  seperti  sayur  dan  buah- buahan.
Salah  satu  buah  yang  berpotensi mengandung  aktivitas  antidiabetes  adalah nanas  ( Ananas  comosus L.  Merr.).  Kulit nanas  yang  seringkali  menjadi  limbah ternyata  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  fenol  seperti  flavonoid,  saponin dan  steroid/triterpenoid  (Kalaiselvi et  al. ,
2012).  Dheer  &  Batnagar  (2012)  serta Kawatu et al. , (2013) dalam Muhtadi et al.
(2012)  menambahkan  bahwa  kandungan flavonoid  dalam  kulit  nanas  memiliki fungsi  sebagai  zat  antidiabetes  karena diduga  dapat  meregenerasi  kerusakan  sel beta  pankreas  dan  merangsang  sel  beta pankreas untuk memproduksi insulin.
Cuka  dalam  pengobatan  diabetes diketahui  memiliki  efek  fisiologis  sebagai berikut:  meningkatkan  sensitivitas  sel terhadap  insulin  postprandial  pada  subjek yang  resistan  terhadap  insulin;  menekan aktivitas  disakaridase;  dan  meningkatkan konsentrasi  glukosa-6-fosfat  dalam  otot rangka. Efek-efek fisiologis tersebut diketahui  serupa  dengan  metformin  dan akarbosa  (Carol et  al. ,  2004).  Proses fermentasi  kulit  nanas  menjadi  cuka  dapat meningkatkan  dan  menghasilkan  bentuk yang lebih bebas dari senyawa metabolitnya agar lebih bioavailable (Messen  &  Vuyst,  2002  dalam  Nazarni et al. , 2016; Adetuyi & Ibrahim, 2014). Kulit
nanas dapat diproses  menjadi cuka dengan kadar  asam  asetat  sebesar  4.77%  pada penambahan gula sebanyak 2% (Raji et al. , 2012).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  apakah  kulit  nanas  yang  telah diolah  menjadi  cuka  melalui  proses fermentasi memiliki aktivitas antidiabetes.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Cuka kulit nanas nonkomersial, tikus putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan  galur Wistar  berumur  2-3  bulan  dengan  berat ±200  gram  dari  Universitas  Negeri Semarang,  akuades  steril,  air,  aloksan monohidrat (Sigma Aldrich), garam fisiologis,  glukosa  monohidrat,  alkohol 70%,  pakan  standar  tikus,  sekam  padi  dan cuka apel komersial.
Rancangan Percobaan
Penelitian ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan hewan uji sebanyak 24 ekor dibagi menjadi 3  kelompok  kontrol  dan  3  kelompok  uji dengan  pembagian  sesuai  dengan  yang tertera  pada Tabel  1 .  Penentuan  besar sampel  sesuai  dengan  rumus  Federer (1967)  untuk  uji  eksperimental  adalah sebagai berikut.
(t-1)(n-1)≥15
Keterangan:
t = jumlah kelompok percobaan
n  =  jumlah  pengulangan/jumlah  sampel tiap kelompok
Penelitian  ini  menggunakan  6  kelompok percobaan  sehingga  perhitungan  sampel menjadi :
(6-1)(n-1) ≥ 15 5(n-1) ≥ 15 5n-5 ≥ 15 5n ≥ 20 n ≥ 4
Jadi, sampel yang digunakan tiap kelompok percobaan sebanyak 4 ekor.

## Adaptasi Hewan Uji
Tikus  diaklimatisasi  dalam  kondisi laboratorium  selama  7  hari,  diberi  pakan standar dan minum secara ad libitum . Berat badan  tikus  uji  ditentukan  pada  akhir periode  adaptasi  untuk  mengkonfirmasi apakah  tikus  dalam  kondisi  sehat.  Kadar glukosa  darah  awal  tikus  diukur  setelah dipuasakan selama 8-12 jam menggunakan glukometer.
Penentuan  Dosis  Aloksan  dan  Cuka

## Kulit Nanas
Dosis aloksan sebesar 150 mg/kg BB tikus,  sedangkan  dosis  cuka  kulit  nanas ditentukan  dengan  mengkalikan  dosis pemakaian pada manusia (2 sendok makan
=  20  cc)  dengan  faktor  konversi  manusia ke tikus (0.018), sehingga didapat persamaan 20 cc x 0.018 = 0.36 cc, dalam penelitian  ini  dibulatkan  menjadi  0.4  cc. Penelitian ini menggunakan tiga dosis yang didapat dengan menaikkan dan menurunkan  nilai  dosis  yang  telah  didapat diatas  sesuai  deret  hitung,  sehingga  di dapat dosis berikut: dosis 1 (0.2 cc/hari/ekor);  dosis  2  (0.4  cc/hari/ekor); dosis 3 (0.8 cc/hari/ekor) (Tanti & Sutrisna, 2010;    Elok  &  Fajri,  2015;  Kusumawati, 2004).

## Induksi Aloksan
Aloksan monohidrat dosis 150 mg/kg BB  yang  telah  dilarutkan  dalam  0.5  ml garam  fisiologis  diinjeksikan  pada  tikus secara  intraperitoneal.  Tikus  diberi  larutan glukosa  monohidrat  1.35%  secara  oral sehari setelah induksi aloksan agar didapat kondisi hiperglikemia. Setelah 3 hari pasca induksi  tikus  dipuasakan  selama  12  jam kemudian  diukur  kadar  glukosa  darah  dan ditimbang berat badannya. Tikus dikatakan diabetes apabila kadar glukosa darah > 135 mg/dL  (Kusumawati, 2004).
Tabel 1. Kelompok perlakuan tikus uji antidiabetes cuka kulit nanas.
Kelompok Perlakuan Jumlah Perlakuan P0 (Kontrol normal) P1 (Kontrol positf) P2 (Kontrol negatif) P3 (Uji 1) P4 (Uji 2) P5 (Uji 3) 4 4 4 4 4 4 Tikus normal tanpa perlakuan Tikus diabetes diberi cuka apel Tikus diabetes tanpa perlakuan
Tikus diabetes diberi cuka kulit nanas 0.2 cc Tikus diabetes diberi cuka kulit nanas 0.4 cc Tikus diabetes diebri cuka kulit nanas 0.8 cc
Mohammad Affan Dwica Putra et al. : Uji aktivitas antidiabetes cuka kulit Nanas ( Ananas comosus L. Merr.) pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan galur Wistar yang diinduksi aloksan

## Uji Atidiabetes Cuka Kulit Nanas
Pemberian bahan uji cuka kulit nanas dilakukan  secara  oral  menggunakan  jarum sonde.  Bahan  uji  diberikan  setiap  hari selama 28 hari dengan frekuensi pemberian yaitu  satu  kali  sehari.  Selama  masa  uji tikus tetap diberi makan minimal sebanyak 10% berat  badannya dan  minum secara ad libitum.  Pengukuran  glukosa  darah  dan berat  badan  tikus  uji  dilakukan  setiap  7 hari yaitu pada hari (Fika, 2016).
Pengukuran Konsumsi Pakan dan

## Minum
Selama  masa  uji,  konsumsi  pakan dan minum tikus diukur setiap hari dengan mengumpulkan dan menimbang pakan dan minum sisa, dinyatakan dalam satuan gram (pakan) dan mililiter (minum).

## Analisis Data
Parameter  yang  digunakan  adalah kadar glukosa darah yang diuji normalitasnya  dengan  metode Saphiro- Wilk .  Data  dikatakan  terdistribusi  normal jika p>0.05, kemudian dilanjutkan dengan
uji  homogenitas  (metode Levene ),  nilai p>0.05  berarti  data  yang  didapatkan homogen. Selanjutnya dilakukan uji statistik One  Way  Anova pada  taraf kepercayaan  95%.  Apabila  ada  perbedaan nyata  antar  kelompok  dilanjutkan  dengan uji analisis Post Hoc Duncan .

## HASIL DAN PEMBAHASAN Kadar Glukosa Darah
Kadar  glukosa  darah  awal  dan  akhir selama  empat  minggu  dapat  dilihat  pada Tabel  2 .  Berdasarkan  uji One-Way ANOVA terdapat  perbedaan  bermakna antara  data  glukosa  darah  pada  awal  dan akhir  perlakuan  di  setiap  kelompok perlakuan  (p≤0.05).  Kelompok  kontrol positif    mengalami  penurunan  kadar glukosa  darah  terbesar  yaitu  52.89%, diikuti oleh kelompok uji 2 sebesar 41.63%, dan kelompok uji 3 sebesar 10.71%. Hasil tersebut  membuktikan  bahwa  cuka  kulit nanas  memiliki  aktivitas  antidiabetes  pada dosis pemberian 0.4 cc dan 0.8 cc.
Tabel  2 .  Rerata  kadar  glukosa  darah  tikus  uji  sebelum  perlakuan  (awal)  dan  setelah  perlakuan pemberian cuka kulit nanas (akhir).
Kelompok Perlakuan Glukosa Darah (mg/dL) (Mean±SD) % Awal Akhir P0 100.50 b ± 15.7 107.75 d ±17.5 7.21 P1 450.50 a ± 109.6 212.25 cd ±114.8 -52.89 P2 428.25 a ± 140.8 407.50 ab ±168.8 -4.85 P3 452.00 a ± 120.2 524.25 a ±151.5 15.98 P4 522.50 a ± 116.8 305.00 bc ±96.3 -41.63 P5 551.00 a ± 58.7 492.00 a ±73.7 -10.71
Keterangan:
− Tanda  superscript  huruf  yang  berbeda  menunjukkan  adanya  perbedaan  nyata  antara  kelompok  perlakuan (P>0,05) berdasarkan ANOVA dengan menggunakan Duncan sebagai uji beda.
− Tanda minus (-) menunjukkan penurunan.
Kandungan  asam  asetat  dalam  cuka kulit  nanas  diduga  dapat  menurunkan kadar  glukosa  darah  pada  tikus  uji.  Cuka diketahui  memiliki  efek  fisiologis  sebagai berikut:  meningkatkan  sensitivitas  sel terhadap  insulin  postprandial  pada  subjek yang  resistan  terhadap  insulin;  menekan aktivitas  disakaridase;  dan  meningkatkan konsentrasi  glukosa-6-fosfat  dalam  otot rangka. Efek-efek fisiologis tersebut diketahui  serupa  dengan  metformin  dan akarbosa (Carol et al. , 2004).
Penelitian  oleh  Carol et  al. (2010) menyatakan  bahwa  10  g  (2  sendok  teh) cuka  apel  efektif  menurunkan  kadar glukosa postprandial sebesar 20% dibandingkan  dengan  plasebo  pada  orang dewasa  yang  sehat  ketika  dikonsumsi bersamaan  saat  makan.  Sensitivitas  sel terhadap  insulin  juga  meningkat  masing- masing  sebesar  34%  dan  19%  pada penderita diabetes yang resisten insulin dan diabetes tipe 2. Penelitian lain oleh Ogawa et  al. (2000)  mengungkapkan  bahwa paparan  asam  asetat  (5  mmol/L  selama  15 hari)  pada  sel  karsinoma  kolon  manusia (Caco-2)  terbukti  signifikan  menurunkan aktivitas  disakaridase  seperti  (sukrose, maltose,  trehalose  dan  laktase)  dan  enzim pengonversi  angiotensin-I.  Terhambatnya kerja disakaridase menyebabkan laju pemecahan  karbohidrat  kompleks  menjadi menurun,  sehingga  kadar  glukosa  dalam darah  juga  menurun. Fushimi et  al. (2001)
menambahkan,  diet  asam  asetat  dapat meningkatkan  penumpukan  glikogen  di hati  dan  otot  rangka  akibat  aktivasi glukoneogenesis  dan  penggunaan  glukosa- 6-fosfat  untuk  glikogenesis.  Peningkatan glikogenesis  ini  menandakan  ambilan glukosa  dalam  hati  dan  otot  rangka meningkat  sehingga  kadar  glukosa  darah dapat menurun.
Kulit nanas terbukti memiliki aktivitas  antioksidan  yang  juga  berperan dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah. Penelitian  oleh  Saraswaty et  al. (2017) yang  melakukan  uji  antioksidan  ekstrak kulit nanas dengan metode DPPH menunjukkan nilai IC50 0.2 mg.ml-1, nilai ini  menunjukkan  bahwa  kulit  nanas memiliki  potensi  sebagai  zat  sumber antioksidan. Kandungan antioksidan dalam kulit  nanas  memiliki  fungsi  sebagai  zat antidiabetes karena diduga dapat meregenerasi  kerusakan  sel  beta  pankreas dan  merangsang  sel  beta  pankreas  untuk memproduksi  insulin.  Penelitian  oleh Dheer  &Batnagar  (2010)  menunjukkan bahwa  terjadi  peningkatan  jumlah  insulin dalam  serum  darah  tikus  diabetes  yang diberi ekstrak daun Barleria prionitis Linn. yang  kaya  akan  kandungan  antioksidan seperti  flavonoid.  Proses  fermentasi  yang dilakukan  pada  kulit  nanas  menjadi  cuka dalam  penelitian  ini  diduga  meningkatkan kandungan  antioksidan  dalam  kulit  nanas. Fermentasi  menyebabkan  pelepasan  enzim
Mohammad Affan Dwica Putra et al. : Uji aktivitas antidiabetes cuka kulit Nanas ( Ananas comosus L. Merr.) pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan galur Wistar yang diinduksi aloksan
mikroba  yang  dapat  menghasilkan  bentuk yang  lebih  bebas  dari  suatu  bahan  kimia yang  terdapat  di  dalam  tanaman  seperti flavonoid, tannin, alkaloid dan fenilpropanoid  (Messen  &  Vuyst,  2002, dalam  Nazarni et  al. ,  2016).  Menurut Adetuyi  dan  Ibrahim  (2014),  peningkatan kandungan  flavonoid  sebagai  hasil  dari fermentasi mungkin disebabkan oleh peningkatan  nilai  asam  selama  fermentasi yang  membebaskan  komponen  flavonoid terikat dan membuatnya lebih bioavailable .
Konsumsi  Pakan,  Minum  dan  Berat Badan
Hasil  pengukuran  konsumsi  pakan, minum,  dan  berat  badan  tikus  uji  selama penelitian  tersaji  pada Gambar  1 .  Sampai minggu  terakhir  penelitian,  kelompok kontrol  positif  mengalami  penurunan konsumsi  pakan  paling  besar  yaitu  4.64g (30.95%), diikuti oleh kelompok uji 2 yang turun  sebesar  2.54g  (18.02%).    Konsumsi pakan tikus berbanding lurus jika dikaitkan dengan  tingkat  kadar  glukosa  darah.
Gambar 1. Grafik rerata konsumsi (a) pakan, (b) minum, dan (c) berat badan tikus uji sebelum perlakuan (awal) dan setelah perlakuan cuka kulit nanas (akhir).
205 200
187.5 185
190 187.5
280 212.5 230 207.5 232.5 167.5 0 50 100 150 200 250 300 P0 P1 P2 P3
P4 P5
B e ra t B a d a n ( g ) Kelompok  Perlakuan Awal Akhir c 27.9 46.2 68.6 60.8 50.6 55.3 31.8 51.5 85.1 83.2 57.8 67.4 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 P0 P1 P2 P3 P4 P5 K o n su m si Mi n u m (m l) Kelompok P erlakuan 13.1 15 19.1 13.9 14.1 15.8 14.2 10.4 18.9 13.8 11.5 16.1 0 5 10 15 20 25 P0 P1 P2 P3 P4 P5 K o n su m si P ak an (g ) Kelompok P erlakuan a b
Semakin  tinggi  kadar  glukosa  darah tikus,  maka  konsumsi  pakannya  akan semakin  tinggi.  Begitu  pula  sebaliknya ketika glukosa darah turun, maka konsumsi pakan  tikus  juga  akan  menurun.  Sesuai dengan penelitian Rizah (2015), pemberian ekstrak  protein  kecipir  pada  tikus  diabetes induksi  aloksan  dapat  menurunkan  kadar glukosa  darah  sampai  dengan  49%  serta mengakibatkan konsumsi pakan tikus lebih rendah  dibandingkan  dengan  kelompok tikus  yang  hanya  diberi  pakan  standar. Okon et  al. (2012)  juga  menyatakan  hal serupa  dalam  penelitiannya,  pemberian ekstrak  cair  daun Ocimum  gratissimum tikus diabetes yang diinduksi streptozotocin  menunjukkan kadar glukosa darah  serta  konsumsi  pakan  yang  lebih rendah dibandingkan dengan tikus diabetes yang tidak diberi perlakuan.
Berbeda  dengan  konsumsi  pakan, konsumi  minum  tikus  uji  sampai  akhir penelitian  di  semua  kelompok  perlakuan mengalami peningkatan. Hal ini dimungkinkan  karena  meskipun  kadar glukosa  darah  pada  beberapa  kelompok perlakuan terjadi penurunan tetapi penurunan  tersebut  tidak  ada  yang  sampai pada taraf normal. Tikus masih mengalami diabetes  sehingga  masih  terjadi  polydipsia (peningkatan  konsumsi  minum).  Sesuai dengan pernyataan Guyton dan Hall (2006, dalam Okon et  al. , 2012) polidipsia terjadi karena  konsentrasi  glukosa  dalam  ginjal
melampaui ambang batas sehingga glukosa dikeluarkan  bersama  urin.  Glukosa  yang tidak  terserap  tubuh  tersebut  kemudian bertindak  sebagai  zat  terlarut  osmotik dalam urin,  menyebabkan dieresis osmotik (poliuria).  Kehilangan  air  yang  berlebihan dalam  urin  ini  berakibat  pada  penurunan volume  ECF  ( extracellular  fluid )  dan mengakibatkan dehidrasi.
Keadaan hiperosmotik dan dehidrasi ini mengaktifkan  “pusat  haus”  dalam  otak yang  mengakibatkan  rasa  haus  yang berlebihan.
Berat badan tikus mengalami peningkatan di semua kelompok perlakuan sampai  akhir  penelitian,  peningkatan  berat badan terbesar terjadi pada tikus kelompok kontrol  normal  yaitu  75g  (36.59%). Peningkatan  berat  badan  ini  berbanding terbalik  dengan  turunnya  kadar  glukosa darah  tikus,  apabila  glukosa  darah  tikus mengalami  penurunan  menuju  normal maka  berat  badan  tikus  akan  meningkat. Rizah  (2015)  dalam  penelitiannya  juga menunjukkan  hasil  serupa  yaitu  berat badan tikus diabetes yang diberi perlakuan ekstrak protein kecipir mengalami peningkatan  setiap  pekan  selama  satu bulan  masa  percobaan  sejalan  dengan penurun kadar glukosa darahnya. Peningkatan  berat  badan  diduga  karena terjadinya  mekanisme  perbaikan  terhadap sel  β-pankreas  yang  sebelumnya  rusak akibat  induksi  aloksan,  sehingga  insulin
Mohammad Affan Dwica Putra et al. : Uji aktivitas antidiabetes cuka kulit Nanas ( Ananas comosus L. Merr.) pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan galur Wistar yang diinduksi aloksan
dapat  kembali  dieksresikan,  pengambilan glukosa  ke  dalam  sel  berangsur  normal, serta  proses  metabolisme  energi  dapat berlangsung.  Proses  regenerasi  terjadi akibat  aktivitas  dari  antioksidan  yang terkandung  dalam  cuka.  Dheer  dan Batnagar  (2012;  Kawatu et  al. ,  2013,
dalam  Muhtadi et  al. ,  2012)  menyatakan bahwa  kandungan  antioksidan  dalam  kulit nanas diduga dapat meregenerasi kerusakan  sel  β-pankreas  dan  merangsang sel β-pankreas untuk memproduksi insulin. Calcutt  (2004,  dalam  Firdaus et  al. ,  2016) menambahkan,  peningkatan  berat  badan pada  kelompok  uji  diabetes  dapat  terjadi dikarenakan regenerasi populasi sel-β yang menyebabkan  insulin  disekresi  secara normal,  sehingga  transportasi  glukosa  ke dalam  sel  dapat  berlangsung  untuk  proses pembentukan  energi  (glikolisis)  untuk asupan  kalori,  serta  proses  pencadangan energi dalam bentuk glikogen (glikogenesis) maupun lemak (lipogenesis), berdampak  pada  perlemakan  subkutan, sehingga berat badan bertambah.

## KESIMPULAN
Hasil  uji  aktivitas  antidiabetes  cuka kulit  nanas  pada  tikus  diabetes  dalam penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  cuka kulit  nanas  memiliki  aktivitas  antidiabetes pada  dosis  pemberian  0.4  cc  dan  0.8  cc, dibuktikan  dengan  turunnya  kadar  glukosa darah  tikus  uji  berturut-turut  sebesar
41.63% dan 10.71%, hal tersebut menunjukkan  bahwa  semakin  besar  dosis pemberian cuka kulit nanas tidak berkorelasi positif terhadap turunnya kadar glukosa  darah,  karena  terjadi  pada  dosis optimal tertentu.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terimakasih kepada Departemen  Biologi,  Fakultas  Sains  dan Matematika  UNDIP  atas  fasilitas  yang disediakan selama proses penelitian, kepada  dosen  kontributor  dan  laboran laboratorium  Biologi  dan  Struktur  Fungsi Hewan,  Departemen  Biologi,  Fakultas Sains  dan  Matematika  UNDIP,  Kepada Laboratorium Biologi UNNES atas penyediaan hewan uji tikus.

## DAFTAR PUSTAKA
Adetuyi FO & TA Ibrahim. 2014. Effect of fermentation  time  on  the  phenolic, flavonoid  and  vitamin  C  contents and  antioxidant  activities  of  Okra ( Abelmoschus  esculentus )  Seeds.
Nigerian  Food  Journal, 32(2):  128 – 137.
Badan Pusat Statistik. 2018. Produksi buah tanaman nanas . Online at https://www.bps.go.id/site/pilihdata [1 Desember 2018]. Carol  SJ,  CM  Kim  &  AJ  Buller.  2004. Vinegar improves insulin
sensitivity  to  a  high-carbohydrate meal  in  subjects  with  insulin resistance  or  Type  2  Diabetes.
Diabetes Care, 27(1): 281-282. Carol  SJ,  I  Steplewska,  CA  Long,    LN Harris & RH Ryals. 2010.
Examination  of  the  antiglycemic
properties  of  vinegar  in  healthy adults. Annals Nutrition and Metabolism, 56(1):74-9.
Dheer R & P Bhatnagar. 2010. A study of the antidiabetic activity of Barleria prionitis Linn. Indian J Pharmacol,
42(2): 70-73.
Elok  Z  &  IN  Fajri.  2015.  Efek  cuka  apel dan  cuka  salak  terhadap  penurunan glukosa  darah  dan  histopatologi pankreas  Tikus  Wistar  diabetes.
Jurnal Kedokteran Brawijaya, 28(4): 297-301.
Federer  WT.  1967. Experimental  design,
theory and application. Oxford and IBH Publ. Co., New Delhi, Ramsey SC, Galeano.
Fika HD. 2016. Uji efek antihiperglikemik ekstrak  etanol  70%  biji  Rambutan ( Nephelium  lappaceum L.)  pada Tikus  Putih  Jantan  dengan  Metode Induksi  Aloksan. Skripsi. Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan UIN  Syarif  Hidayatullah  Jakarta. Jakarta.
Firdaus  R,  SA  Marliyati  &  K  Roosita.
2016.  Model  tikus  diabetes  yang diinduksi streptozotocin-sukrosa untuk pendekatan penelitian diabetes melitus gestasional. Jurnal Media Kesehatan Masyarakat Indonesia, 12(1): 29-34. Fushimi  T,  K  Tayama,  M  Fukaya,  K Kitakoshi,  N  Nakai,  Y  Tsukamoto
&  Y  Sato.  2001.  Acetic  acid feeding enhances glycogen repletion  in  liver  and  skeletal muscle  of  Rats. The  Journal  of Nutrition, 131(7):1973-7.
International  Diabetes  Federation.  2017.
IDF Diabetes Atlas 8th Edition. Kalaiselvi M, D Gomathi & C Uma. 2012.
Occurrence of bioactive compounds in Ananas comosus (L): A Standardization  by  HPTLC. Asia Pac  J  of  Trop  Biomed S1341-
S1346.
Kusumawati  D.  2004. Bersahabat  dengan hewan  coba .  Yogyakarta:  UGM
Press.
Muhtadi  M,  E  Setyowati  &  T  Azizah.
2012. Aktivitas antidiabetes melitus ekstrak  kulit  buah  Jeruk  Manis ( Citrus  sinensis )  dan  kulit  buah Kelengkeng ( Euphoria longan (Lour.) Steud) terhadap Tikus Putih Jantan Galur Wistar yang diinduksi aloksan. Jurnal  Penelitian  Sains  & Teknologi, 13(1): 21-30.
Nasri  H  &  Rafieian-Kopaei  M.  2014.
Metformin: Current knowledge. Journal  of  research  in medical  sciences  :  the  official journal  of  Isfahan  University  of Medical Sciences, 19(7): 658–664. Nazarni  R,  D  Purnama,  S  Umar  &  H  Eni. 2016. The effect of fermentation on total phenolic, flavonoid and tannin content and its relation to antibacterial activity in Jaruk Tigarun  ( Crataeva nurvala ,  Buch HAM). International Food Research Journal, 23(1): 309-315.
Ogawa  N,  H  Satsu,  H  Watanabe,  M
Fukaya, Y  Tsukamoto, . Miyamoto &  M  Shimizu.  2000.  Acetic  acid suppresses the increase in disaccharidase  activity  that  occurs during  culture  of  Caco-2  cells. J Nutr, 130:507–513.
Okon  UA,  Owo  DU,  Udokang  NE,
Udobang  JA  &  Ekpenyong  CE. 2012. Oral administration of aqueous  leaf  extract  of Ocimum Gratissimum Ameliorates Polyphagia,  Polydipsia  and  Weight Loss in Streptozotocin-Induced
Diabetic Rats. American Journal of Medicine  and  Medical  Sciences,
2(3): 45-49.
Raji  YO,  M  Jibril,  IM  Misau  &  BY Danjuma.  2012.  Production  of vinegar from pineapple peel.
International  Journal  of  Advanced Scientific Research and
Technology, 3(2): 656-666.
Rizah  RW.  2015.  Pengaruh  hipoglikemik ekstrak protein kecipir ( Psopharpus tetragonolobus ) pada Tikus
Mohammad Affan Dwica Putra et al. : Uji aktivitas antidiabetes cuka kulit Nanas ( Ananas comosus L. Merr.) pada Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan galur Wistar yang diinduksi aloksan
Diabetik  Induksi  Aloksan. Jurnal Ilmiah Teknosains, 1(1): 1-6. Saraswaty  V,  C  Risdian,  I  Primadona,  R Andriyani,  DGS  Andayani  &  T Mozef. 2017. Pineapple peel wastes as  a  potential  source of  antioxidant compounds . Earth and Environmental Science, 60. Tanti  AS  &  EM  Sutrisna.  2010.  Pengaruh Lama Praperlakuan Flavonoid Rutin  terhadap  Efek  Hipoglikemik Tolbutamid pada Tikus Jantan yang diinduksi Aloksan. Jurnal Penelitian  Sains  &  Teknologi, 11( 2): 91–99. World Health Organization. 2018. Diabetes. Online at https://www.who.int/en/news- room/fact-sheets/detail/diabetes.  1
Desember 2018 .