## PERBANDINGAN DAYA HAMBAT MADU SEULAWAH DENGAN MADU TRUMON TERHADAP Staphylococcus aureus SECARA IN VITRO
1 Fadhmi, 2 Mudatsir dan 3 Essy Syaukani 1 Akademi Analis Kesehatan Banda Aceh; 2 Fakultas Kedokteran Universitas Syiah Kuala Banda Aceh; 3 Jurusan Biologi FMIPA Universitas Syiah Kuala Banda Aceh; Email: fadhmi_81@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  perbandingan  daya  hambat  madu  hutan  seulawah  dengan  madu hutan trumon terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro. Penelitian dilaksanakan pada bulan Juli sampai  dengan  Agustus  2014  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Akademi  Analis  Kesehatan  (AAK)  di Banda  Aceh.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  Faktorial  dengan  perlakuan terdiri atas kontrol negatif (diberi NaCl 0,85%), kontrol positif (antibiotik ciprofloxacin), madu hutan dengan konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% dengan enam ulangan. Data hasil pengujian dianalisis dengan Analisis  of  Varians (ANOVA).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  madu  hutan  Seulawah dan Trumon mempunyai daya hambat yang berbeda terhadap bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro.  Daya  hambat  dari  madu  hutan  Seulawah  lebih  tinggi  dibandingkan  daya  hambat  dari  madu hutan Trumon.

## Kata Kunci: Daya Hambat madu dan Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
This  research  aimed  to  determine  the  ratio  inhibition  of  forest  honey  Seulawah  and  Trumon  on Staphylococcus aureus in vitro. The research was conducted in July to August 2014 in the Laboratory of Microbiology Academy of Health Analyst (AAK) in Banda Aceh. This research used acompletely randomized factorial designwith  treatmentconsisting  ofnegative  control(NaCl  0,85% was  given), positive  control(ciprofloxacin  antibiotics  was  given), foresthoneywitha  concentrationof  25%, 50%, 75% and 100% with six replications. Data were analyzed by using Analysis of Variance (ANOVA). The  results  showed  that the  forest  honey  Seulawah  and  Trumon  had different  inhibition  on Staphylococcus  aureus in  vitro. The  inhibition  of  forest  honey  Seulawah was higher  than  the inhibition of forest honey Trumon.
Keywords: Inhibition of Honey, Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
elakangan  ini  ketika  banyak  bakteri menjadi  resisten  terhadap  obat-obatan, masyarakat kembali memanfaatkan madu  dalam  pengobatan  dan  pencegahan penyakit. Pengobatan secara alami ini dilakukan karena  bahan  tersebut  tidak  memiliki  efek samping  pada  kesehatan  dan  sebagai  terapi berbagai penyakit.
Madu  adalah  cairan    manis  yang  berasal dari  nektar  bunga  yang  diproses  oleh  lebah menjadi  madu  dan  tersimpan  dalam sel-sel sarang  lebah [1]. Madu  memiliki  berbagai manfaat,  antara  lain  pangan,  kesehatan  dan kecantikan.  Madu  sering  digunakan  sebagai bahan pemanis, penyedap makanan dan
campuran  saat  mengkonsumsi  minuman.  Selain itu,  madu  juga  digunakan  sebagai  obat-obatan pada berbagai penyakit seperti demam, mencegah  sariawan,  mengobati  batuk,  berguna untuk  penyembuh  luka,  dan  menjaga  kesehatan tubuh [2]. Madu dapat membantu menekan pertumbuhan  bakteri  tertentu  melalui  beberapa mekanisme  yaitu  kadar  gula  yang  tinggi  akan menghambat bakteri untuk hidup dan berkembang,  tingkat  keasaman  madu  yang tinggi (pH 3,65) akan  mengurangi pertumbuhan dan  daya  hidup  bakteri,  sehingga  bakteri  akan mati, adanya senyawa radikal hidrogen peroksida (H 2 O 2 ) yang bersifat dapat membunuh
Jurnal Biotik, ISSN: 2337-9812, Vol. 3, No. 1, Ed. April 2015, Hal. 9-14
mikroorganisme  patogen,  dan  adanya  senyawa organik  yang  bersifat  antibakteri  (polifenol, flavonoid, dan glikosida). Golongan senyawa ini sering  dipergunakan  sebagai  bahan  dasar  obat- obatan antibakteri modern [3].
Parwata  dkk.,  (2010)  menegaskan  bahwa madu  memiliki  komposisi  kandungan  senyawa kimia  yang  berbeda-beda  berdasarkan  sumber pakan  nektarnya.  Perbedaan  tersebut  diduga mempengaruhi perbedaan aktivitas madu sebagai antibakteri [4]. Staphylococcus  aureus merupakan bakteri Gram  positif yang  bersifat  patogen  utama  bagi manusia. Bakteri mudah tumbuh dalam berbagai perbenihan  dan  mempunyai  metabolisme  aktif, serta  menghasilkan  pigmen  yang  bervariasi  dari warna putih sampai kuning tua. Bakteri ini dapat masuk dalam kulit melalui folikel-folikel rambut dan  luka-luka  kecil.  Infeksi  yang  ditimbulkan oleh Staphylococcus  aureus ditandai  dengan kerusakan jaringan yang disertai abses bernanah. Beberapa penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri  ini  adalah    impetigo,  bisul,  jerawat, infeksi luka, sindrom syok toksik, dan jenis-jenis patogenik lainnya [5].
Madu  hutan  merupakan  salah  satu  jenis madu yang diperoleh lebah liar yang menghisap
bakal  kuncup  bunga  dari  beranekaragam tanaman yang ada di hutan [6]. Hutan Seulawah dan  Trumon  termasuk  hutan  penghasil  madu  di Provinsi Aceh.
Beberapa penelitian yang berkaitan dengan aktivitas  antioksidan  madu,  seperti  penelitian Parwata  (2010)  tentang  aktivitas  antioksidan yang  telah  diteliti  pada  madu  Randu  dan  madu Kelengkeng  menunjukkan  bahwa  madu  dari jenis  bunga  yang  berbeda  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  berbeda. Didukung  oleh penelitian lain tentang aktivitas antioksidan telah dilakukan  terhadap  madu  floral  Australia  dari jenis  bunga  yang  berbeda  memiliki  aktivitas antioksidan yang berbeda pula [7]. Oleh karena itu, perlu dianalisis perbandingan  daya  hambat  madu  seulawah dengan  madu  trumon  terhadap Staphylococcus aureus secara  in  vitro.  Berdasarkan  latar belakang di atas, yang menjadi permasalahannya adalah  bagaimana  perbandingan  daya  hambat madu  seulawah  dengan  madu trumon  terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro. Penelitian ini  bertujuan  mengetahui  perbandingan  daya hambat  madu  seulawah  dengan  madu  trumon terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Mikrobiologi Akademi Analis Kesehatan (AAK) di  Banda  Aceh  yang  dilaksanakan  pada  Juli sampai  dengan  Agustus  2014.  Sampel  adalah madu  hutan  yang  diambil  dari  dua  daerah  yang berbeda  yaitu  Seulawah  (Aceh  Besar)  dan Trumon (Aceh Selatan). Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorium dengan enam kali ulangan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) Faktorial.  Variabel  bebas  berupa  madu  yang berasal  dari  daerah  Seulawah  dan  Trumon dengan  konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan  100%. Variabel terikat berupa daya hambat Staphylococcus aureus. Alat yang digunakan adalah oven, inkubator,  autoklaf,  erlenmeyer,  timbangan analitik,  pipet  ukur,  mikropipet,  cawan  petri,
spatula,  pinset,  jarum  ose,  rak  tabung  reaksi, tabung  reaksi,  lampu  spirtus,  spektrofotometer, dan alat-alat tulis. Bahan yang digunakan adalah kertas Blank  Disc, kapas  lidi  steril,  masker, handscoon,  akuades,  dan  kertas  pembungkus. Media yang digunakan adalah Blood Agar (BA), media Nutrient Agar (NA), media Muller Hinton Agar (MHA). Kontrol negatif berisi NaCl 0,85%
dan kontrol positif berisi antibiotik ciprofloxacin.
Data  hasil  pengujian  dianalisis  dengan Analisis of Varians (ANOVA). Apabila terdapat pengaruh  yang  nyata  pada  perlakuan,  maka dilanjutka  dengan  Uji  Berganda  Duncan.
Analisis data dari hasil penelitian ini menggunakan Statistical  Product  and  Service
Solution (SPSS).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis Kadar Air pada Madu Hutan
Tabel  1 menunjukkan  hasil  analisis  kadar air  yang  terkandung  dalam  madu  hutan Seulawah dan madu hutan Trumon. Tabel  1. Hasil  Analisa  Kadar  Air  pada    Madu Hutan No Sampel (Madu) Hasil Analisa Kadar Air (%) 1 Madu Seulawah 19,81 2 Madu Trumon 22,05 Dari  Tabel  1  dapat  dilihat  bahwa kandungan  air  madu  Trumon  (22,05%)  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  madu  Seulawah (19,81%).  Kadar  air  yang  terkandung  dalam madu  mempengaruhi  daya  hambat  madu terhadap  bakteri Staphylococcus aureus. Bakteri  tidak  sanggup  bertahan  hidup  pada kadar air kurang dari 17%. Kehilangan air akan menyebabkan osmotic  shock dan  plasmolisis. Bervariasinya kadar air dalam madu disebabkan oleh kelembapan  udara, jenis  nektar,  proses produksi dan penyimpanan [6]. Uji Fitokimia Madu Hutan Uji fitokimia dilakukan untuk mengidentifikasi  senyawa  aktif  pada  madu hutan  yang  diduga  madu  tersebut  memiliki potensi  sebagai  antibakteri  dan  antioksidan. Hasil uji fitokimia dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Analisis Fitokimia Senyawa Aktif dari Madu Hutan
Kandungan Kimia Reagen Sampel (Madu) Hasil Pengamatan Seulawah Trumon Alkaloid Mayer - - Endapan putih Dragendorff - - Endapan coklat Wagner - - Endapan merah Steroid Uji Liebermann-Bourchard - - Hijau atau Biru Terpenoid Uji Liebermann-Bourchard + + Merah Saponin Pengocokan + + Berbusa  ±30 menit Flavonoid 0,5 g Mg dan HCl - - Merah muda atau ungu Fenol FeCl 3 - - Endapan hijau kehitaman Keterangan: + : Teridentifikasi mengandung senyawa aktif tersebut - : Tidak Teridentifikasi mengandung senyawa aktif tersebut Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia  (Tabel  2)
menunjukkan  bahwa  senyawa  aktif  yang terkandung  dari  madu  hutan  Seulawah  dan hutan Trumon adalah terpenoid dan saponin.
Menurut Prasetyo, et al., (2008) menyatakan bahwa saponin merupakan senyawa metabolik sekunder  yang  memiliki  kemampuan antibakteri. Adanya zat antibakteri tersebut akan menghalangi  pembentukan  atau  pengangkutan masing-masing  komponen  ke  dinding  sel  yang mengakibatkan  lemahnya  struktur  yang  disertai dengan penghilangan dinding sel dan pelepasan isi  sel  yang  akhirnya  akan  mematikan  maupun menghambat  pertumbuhan  sel  bakteri  tersebut [8].
Pada  umumnya  saponin  adalah  suatu glikosida  yang  mungkin  ada  pada  banyak tanaman.  Terpenoid  dapat  berkhasiat  juga berfungsi sebagai antibiotik dan fungisidal [9].
Perbedaan  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  dari  hasil  pengujian  yang  dilakukan terhadap bakteri Staphylococcus aureus
dipengaruhi  oleh  senyawa  aktif  yang  terdapat pada masing-masing madu hutan tersebut.

## Zona  Hambat  Madu  Hutan  Terhadap
Bakteri Staphylococcus aureus
Hasil  pengukuran  rata-rata  diameter  zona hambat  madu  hutan  Seulawah  dan  Trumon terhadap  daya  hambat Staphylococcus  aureus
secara in  vitro dapat  dilihat  pada  Gambar  1 berikut ini:
Gambar 1. Zona Hambat Madu Hutan Seulawah dan Trumon Terhadap Staphylococcus aureus
Berdasarkan  Gambar  1  menunjukkan bahwa madu hutan Seulawah dan Trumon pada perlakuan konsentrasi 25% serta kontrol negatif (-)  tidak  terbentuk  zona  hambat  terhadap Staphylococcus aureus. Pada perlakuan konsentrasi  50%  yang  tidak  terbentuk  zona hambat  hanya pada  madu  hutan  Trumon.  Pada konsentrasi  75%  dan  100%  ada  terbentuk  zona hambat.  Dengan  demikian,  pada  madu  hutan yang  terbentuk  zona  hambat  berarti  memiliki kemampuan untuk menghambat bakteri Staphylococcus aureus. Daya  hambat  madu  dipengaruhi  oleh semakin tinggi konsentrasi madu semakin besar
zona hambat yang terbentuk yang mengindikasikan  bahwa  semakin  kuat  daya hambat madu terhadap pertumbuhan bakteri.
Erguder  (2008)  menyatakan  bahwa  salah satu  faktor  yang  mempengaruhi  aktivitas antibakteri  pada  madu  antara  lain  adalah  kadar gula  madu  yang  tinggi  dan  tingkat  keasaman madu  yang  tinggi. Kadar  gula  pada  madu sebesar  81-85  %  yang  terdiri  dari  campuran glukosa dan fruktosa serta keasaman pada madu yang  dapat  menimbulkan  sifat  osmosis  pada madu [10]. Hasil uji  Berganda  Duncan  5% dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Hasil Uji Berganda Duncan Zona Hambat Madu Hutan Seulawah dan Trumon Terhadap Staphylococcus aureus
Gambar 2 menunjukkan bahwa madu yang berasal  dari  Seulawah  memiliki  rata-rata diameter  zona  hambat  lebih  besar  (9,93  mm) daripada  madu  yang  berasal  dari  Trumon  yang memiliki  diameter  zona  hambat  3,47  mm. Untuk  lebih  jelasnya  dapat  dilihat  pula  pada Tabel 3. Tabel  3.  Zona  Hambat  Berdasarkan  Asal  Madu Terhadap Daya Hambat Staphylococcus aureus No Asal Madu Rata-rata (mm) ± Standar Deviasi 1 Seulawah 9,93 mm c ± 9,06 2 Trumon 3,47 mm b ± 4,39 Terdapat  perbedaan  zona  hambat  dari  2 wilayah  pengambilan  madu.  Diameter  zona hambat  yang  dihasilkan  oleh  madu  hutan  yang berasal  Seulawah  berbeda  nyata  dengan  madu hutan yang berasal Trumon (Tabel 3).
Zona  hambat  bakteri  dinyatakan  dalam milimeter  yang  diukur  dari  diameter  zona bening  yang  terbentuk.  Terbentuknya  zona hambat menunjukkan adanya aktivitas antibakteri  dari  madu  hutan  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus. Semakin  luas  zona bening  menunjukkan  semakin  tinggi  aktivitas antibakteri  madu. Suranto  (2007)  menyatakan bahwa  tiap  jenis  madu  memang  memiliki  efek antiradikal  bebas  yang  berbeda-beda  dimana jumlah  dan  kandungan  antioksidannya  sangat tergantung dari sumber nektarnya [6].

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian tentang perbandingan  daya  hambat  madu  seulawah dengan  madu  trumon  terhadap Staphylococcus aureus secara in vitro, dapat disimpulkan bahwa madu  hutan  Seulawah  dan  Trumon  mempunyai
daya  hambat  yang  berbeda  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus secara in  vitro.  Daya hambat  dari  madu  hutan  Seulawah  lebih  tinggi dibandingkan  daya  hambat  dari  madu  hutan Trumon.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Winarno,  F.  G.  1982. Madu,  Teknologi, Khasiat  dan  Analisis. Jakarta:  Ghalia Indonesia. [2] Mulu,  A.,  B.  Tessema  and  F.  Derbie.  2004. In  vitro  Assesment  of  the  Antimicrobial Potential  of  Honey  on  Common  Human Patogens. Ethiop J Health Dev. 18(2):107-11. [3] Kamaruddin. 1997. Khasiat Madu. Departement  of  Biochemistry,  Faculty  of Medicine,  Universitas  of  Malaya,  Kuala Lumpur. [4] Parwata,  O.  A.,  K.  Ratnayani.,  dan  Ana Listya. 2010. Aktivitas Antiradikal Bebas Serta  Kadar  Beta  Karoten  Pada  Madu Randu  (Ceiba  pentandra)  Dan  Madu Kelengkeng  (Nephelium  longata  L.). Jurnal Kimia. Vol 4 (1): 54-62. [5] Vandepitte, J., J. Verhaegen, K, Engbaek, P. Rohner,  P.  Piot,  C.C.  Heack.  2010. Prosedur  Laboratorium  Dasar  untuk
Bakteriologi  Klinis.  Edisi  Ke-2  (Alih Bahasa:  Lyana  setiawan).  Jakarta:  Buku Kedokteran EGC.
[6] Suranto,  A.  2004. Khasiat  dan  Manfaat
Madu  Herbal.  Jakarta:  PT  Agro  Media
Pustaka.
[7] Bruce,  R.  D’Arcy.  2005. Antioxidants  In Australian  Floral Honeys-Identification of Health Enhancing Nutrient Components. Australia: RIRDC Publication. Jawetz,  E.,  J.L.  Melnick., E.A. Adelberg.1996. Mikrobiologi Kedokteran.  Edisi  ke-20  (Alih  Bahasa Nugroho & R.F. Maulany). Jakarta: Buku
Kedokteran EGC.
[8] Prasetyo,  et  al.,  2008. Aktivitas  Sediaan  Gel Ekstrat  Batang  Pohon  Pisang  Ambon dalam  Proses  Penyembuhan  Luka  Pada Mencit.  Fakultas  Kedokteran  Hewan.
InstitutPertanian Bogor, Bogor.
[9] Mahardhika,  C.  2013. Fraksionasi Ekstrak
Kulit Petai.  Bogor  (ID). InstitutPertanian Bogor, Bogor.
[10] Erguder  BI,  Kilicoglu  SS,  Namuslu  M, Kilicoglu B, Devrim E, Kismet K, Durak I.  2008.  Honey  Prevent  Hepatic  Damage Induced  by  Obstruction  of  the  Common Bile Duct. World J Gastroenterol 12(23): 3729-3732.