## Standarisasi dari Daun Kirinyuh ( Chromolaena odorata ) dan Simplisia Kering dari Tiga Daerah yang Berbeda
Paulina Erlianda Ance * , Sumi Wijaya, Henry Kurnia Setiawan Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya
Kirinyuh ( Chromolaena odorata ) digunakan secara tradisional untuk pengobatan luka, amenore, antidiabetes dan antimikroba. Penelitian sebelumnya, menunjukkan bahwa belum adanya acuan mengenai standarisasi simplisia daun  kirinyuh.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menetapkan  makroskopis  dan  mikroskopis  tanaman  segar  daun kirinyuh diperoleh dari daerah Surabaya, dan menetapkan profil parameter kualitas simplisia secara spesifik dan non  spesifik.  Simplisia  daun  kirinyuh  didapatkan  dari  tiga  daerah  berbeda  (Bogor,  Malang  dan  Surabaya). Penetapan parameter kualitas yaitu parameter spesifik meliputi identitas, organoleptis, mikroskopis, penetapan kadar  sari  larut,  skrining  fitokimia,  profil  kromatogram  secara  Kromatografi  Lapis  Tipis,  profil  spektrum  secara spektrofotometer UV-Vis dan Inframerah, penetapan kadar (alkaloid, fenol dan flavonoid). Parameter non spesifik meliputi kadar abu total, kadar abu larut air, kadar abu tidak larut asam, kadar air dan ph simplisia. Berdasarkan hasil pengamatan disimpulkan daun kirinyuh memiliki daun bentuk oval pada bagian tengah daun, runcing ujung atas dan bawah, permukaan atas dan bawah berwarna hijau, tepi daun berombak, 6,4 – 11,8 cm (P), 3,3 – 5,9 cm  (L),  tulang  daun  menyirip,  tekstur  daun  berbulu  halus  dan  filotaksis  daun  tunggal  berhadapan,  secara mikroskopis memiliki fragmen-fragmen yang sama dengan simplisia kering, kadar sari larut etanol ≥ 12%, kadar sari larut air ≥ 20%, fase gerak yang dapat digunakan untuk profil kromatogram secara KLT yaitu kloroform : etil asetat (15:1), profil spektrum dengan spektrofotometer UV-Vis memiliki panjang gelombang 533,5 nm, 500 nm, 534,5  nm,  501,5  nm,  284,5  nm,  289  nm  dan  292  nm,  profil  spektrum  dengan  spektrofotometer  inframerah memiliki  bilangan  gelombang  ialah  3266,28  cm -1 -3282,21  cm -1 ,  1416,01  cm -1 ,  1514,53  cm -1 ,  1514,93  cm -1 , 1245,35 cm -1 -1251,27 cm -1 , 1022,32 cm -1 -1061,17 cm - 1, kadar flavonoid ≥ 0,4%, fenol ≥ 1,0 % dan alkaloid ≥ 1,0%, kadar abu total ≤ 14 %, kadar abu larut air ≤ 5%, kadar abu tidak larut asam ≤ 10%, kadar air ≤ 11 % dan rentang pH simplisia 5-7.
Kata Kunci: Daun Kirinyuh, Simplisia, Standarisasi.

## Standardization of Siam Weed ( Chromolaena odorata ) Leaves and Dry Powder Form Collected from Three Different Areas
Siam  wead  ( Chromolaena  odorata )  is  used  traditionally  for  treatment  lesoin,  amenorrhea,  antidiabetic  and antimicrobial.  Based  on  previous  research,  there  is  no  reference  about  the  standardization  Siam  Weed  leaves dried  powder.  This  study  aims  to  determine  macroscopic  and  microscopic  of  siam  weed  leaves  fresh  plant obtained from, Surabaya, to determine the spesific and non spesific quality profile of dried powder of siam weed leaves  dried  powder  obtained  from  different  areas  (Bogor,  Malang  and  Surabaya).  The  spesific  parameter  that used  were  identity,  organoleptic,  microscopic,  determination  of  soluble  extract,  phytochemical  screening, determination  chromatogram  profile  using  Thin  Layer  Chromatography,  determination  spectrum  profile  using spektrophotometer  UV-Vis  and  Infrared,  determination  of  alkaloid,  phenol  and  flavonoid  content.  Non  spesific parameters that used were the determination of total ash value, water soluble ash value, acid insoluble ash value, drying  losses  and  pH.  Based  on  result  of  the  study,  it  was  concluded  that  siam  weed  fresh  plant  leaves  have elliptico-oblongus  shape,  acutus  shape  for  the  upper  and  lower  base,  green  colored  for  the  top  and  bottom surfaces, adge shape for the wavy , 6.4-11.8 (L), 3.3-5.9 (W), wavely leaf rib, fluffy leaf texture, and the position of facing  a  single,  microscopically  have  the    fragments  as  same  as  the  dried  powder  fragments,  ethanol  soluble concentration ≥ 12%, water soluble concentration ≥ 20%, solvent can be used for chromatogram profile in TLC is chloroform : ethyl acetate (15:1), spectral profile with spectrophotometer UV-Vis have wavelength 533.5 nm, 500 nm,  534.5  nm,  501.5  nm,  284.5  nm,  289  nm  and  292  nm,  spectral  profile  with  IR  spectrophotometers  have wavenumber 3266.28 cm -1 -3282.21 cm -1 , 1416.01 cm -1 , 1514.53 cm -1 , 1514.93 cm -1 , 1245.35 cm -1 , 1249.52 cm -1 dan 1251.27 cm -1 , flavonoid content ≥ 0.4%, phenol content ≥ 1.0% and alkaloid content ≥ 1.0%, total ash content ≤ 14%, water ash soluble ≤ 5%, acid unsoluble ash ≤ 10%, drying losses ≤ 11% and range pH 5-7.
Keywords : Siam wead leaves , dried powder, standardization.
*Corresponding  author:  Fakultas  Farmasi Universitas  Katolik  Widya  Mandala  Surabaya ,  Jl .  Raya  Kalisari Selatan No. 1 Surabaya, e-mail: paulina22ance@gmail.com

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  berbagai  keaneka ragaman  hayati  yang  dapat  digunakan  sebagai sumber  bahan  obat  alam  dan  tradisional. Tanaman  obat  sudah  ada  sejak  zaman  dahulu yang dipergunakan untuk meningkatkan kesehatan,  memulihkan  kesehatan,  pencegahan penyakit  dan  penyembuhan  (Saifudin,  Rahayu dan Teruna, 2011). Tanaman ini digunakan secara tradisional  untuk  pengobatan  luka,  amenore, gigitan  lintah,  radang  selaput  lendir  hidung, dekongestan,  diare  pada  pederita  diabetes, demam  dan  rematik  (Chakraboty,  Sujit  dan Umesh , 2011). Pada penelitian terdahulu tanaman kirinyuh  memiliki  aktivitas  antidiabetes  dan antikatarak (Marianne et al., 2014; Onkaramurthy et  al., 2013),  antimikroba  (Stanley et  al., 2014), penyembuhan  luka  pada  mencit  diabetes (Nurhalimah,  2014).  Kirinyuh  diketahui  memilki beberapa  kandungan  senyawa  seperti  alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin,  dan  steroid  (Ngozi, Jude  dan  Catherine,  2009).  Berdasarkan  studi literatur yang dilakukan oleh peneliti menunjukkan  bahwa  belum  adanya  acuan  dan penelitian tentang standarisasi dari daun Kirinyuh segar  dan  simplisia  kering  daun  Kirinyuh. Penentuan  parameter  standarisasi  tidak  dapat hanya  ditentukan  dari  satu  titik  lokasi  saja.  Pada penelitian  ini  daun  Kirinyuh  yang  akan distandarisasi  diperoleh  dari  tiga  lokasi  berbeda yaitu  Bogor,  Batu  dan  Surabaya.  Pengambilan sampel dari tiga lokasi yang berbeda dikarenakan adamya beberapa faktor yang dapat mempengaruhi  mutu  simplisia  dan  metabolit sekunder  yang  dihasilkan,  diantaranya  lokasi tumbuh,  curah  hujan,  kelembaban,  suhu,  dan kualitas tanah.

## METODE PENELITIAN
Alat IR mostuire balance (Kett, Germany), oven (Memmet, Germany), timbangan analitik (Satorius,  Germany),  tabung  reaksi  (Pyrex, Germany),  cawan  porselin,  gelas  ukur  (Pyrex, Germany),  beaker  glass  (Pyrex,  Germany), pengaduk,  pipet  tetes,  mikroskop,  kertas  saring, waterbath ,  Spektrofotometer  UV-Vis  Tipe  UV 1201  (Shimadzu,  Japan)  Lampu  UV  254  dan  UV 366  nm  (Camag,  Switzerland),  pH  indikator, spektrofotometer inframerah UATR (Perkin Elmir Spektrum Two, Chalfont).

## Bahan
Daun kirinyuh (Kalisari, Surabaya), simplisia  kering  daun  kirinyuh  dari  tiga  daerah berbeda  (Bogor,  Batu  dan  Surabaya),  aquadest, Aluminium  Klorida  (PT.  Brataco  Chemika, Indonesia),  Amil  Alkohol,  Dragendorff,  etanol 95% (PT. Brataco Chemika, Indonesia), etil asetat (PT.  Brataco  Chemika,  Indonesia),  FeCl3  1%, gelatin,  kloroform  (PT.  Brataco  Chemika, Indonesia), Liebermann  Burchard ,  toluen  (PT. Brataco  Chemika,  Indonesia),  metanol  p.a  (PT.
Brataco  Chemika,  Indonesia),  magnesium,  NaOH dan plat Silika Gel F 254 (E. Merck, Germany).

## Tahapan Penelitian

## Penyiapan Bahan
Sampel tanaman segar didapat dari daerah kalisari,  Surabaya.  Simplisia  kering  dikumpulkan dari  tiga  daerah  berbeda  yaitu  Bogor,  Batu  dan Surabaya.

## Pemeriksaan Makroskopis dan Mikroskopis pada Daun Segar Kirinyuh
Tanaman  segar  daun  kirinyuh  dilakukan pengamatan  secara  makroskopis  meliputi  tepi daun  ( margo) ,  pertulangan  daun,  permukaan daun ( nervatio ), warna permukaan atas daun dan bawah  daun,  ujung  daun  ( apex) ,  bagian  bawah daun  ( basal) serta  panjang  dan  diameter  daun serta  pengamatan  mikroskopis  dengan  alat mikroskop.
Pengamatan Identitas, Organoleptis dan Mikroskopis Simplisia Kirinyuh
Pengamatan  identitas  simplisia  dilakukan meliputi  deskripsi  tata  nama  diantaranya  nama simplisia,  nama  latin,  bagian  tumbuhan  yang dibutuhkan,  nama  Indonesianya,  dan  senyawa identitasnya.  Pengamatan  organoleptis  dilakukan meliputi  bentuk,  warna  dan  bau  dari  simplisia. Pengamatan mikroskopis dilakukan menggunakan alat mikroskop.

## Penetapan  Kadar  Sari  Larut  pada  Pelarut Tertentu pada Simplisia Daun Kirinyuh
Penetapan  kadar  sari  dari  simplisia  daun kirinyuh dilakukan dengan cara serbuk kirinyuh 5 gram  dimaserasi  24  jam  dalam  100  ml  masing- masing menggunakan pelarut aquadest dan etanol 95%  selama  6  jam  pertaman  dikocok.  Setelah  24 jam larutan disaring dengan menggunakan kertas saring,  filtrat  sebanyak  20  ml  diambil  dan diuapkan  hingga  kering  dalam  cawan,  kemudian residu dipanaskan pada suhu 105°C hingga bobot konstan.  Penetapan  kadar  sari  larut  masing- masing  dalam  aquadest  dan  etanol  dilakukan dengan menghitung kadar dalam persen senyawa yang  larut  terhadap  serbuk  simplisia  awal (DepKes, 1989).

## Pemeriksaan  Reaksi  Identifikasi  pada  Simplisia Daun Kirinyuh
Pengamatan  dilakukan  dengan  cara  serbuk simplisia secukupnya diletakan diatas papan tetes kemudian  masing-masing  ditambahkan  pereaksi NaOH, HCl (p) , H 2 SO 4(p), dan FeCl 3 .
Penetapan  Profil  Kromatogram  dengan  Motode Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Masing-masing  sampel  disiapkan  dalam konsentrasi  100mg/ml  kemudian  ditotolkan sebanyak 10µl pada plat silika gel F254 berukuran 10  cm  x  10  cm  lalu  dieluasi  dengan  fase  gerak. Fase  gerak  yang  gunakan  yaitu  kloroform  :  etil
asetat  (15:1  v/v),  n-heksan  :  etilasetat  (3:1  v/v), toluen  :  etilasetat  (4:1  v/v),  etilasetat  :  metanol (1:1 v/v) dan etil asetat : etanol (8:2 v/v), dengan indeks  kepolaran  dari  masing-masing  fase  gerak secara  berturut-turut  yaitu  4,12;  1,175;  2,8;  2,75; dan 4,38. Plat yang telah dieluasi diamati pada UV 254  nm  dan  UV  366  nm  kemudian  disemprot dengan  penampak  bercak  Vanilin  Sulfat  lalu diamati pada UV 366 nm.

## Pengujian Skrining Fitokimia
Pengujian skrining fitokimia untuk mengetahui  golongan  senyawa  yang  terkandung dalam  simplisia  daun  kirinyuh  meliputi  uji skrining  terhadap  alkaloid,  flavonoid,  polifenol, tanin, kuinon, saponin, triterpenoid dan steroid.
Penetapan Profil
Spektrum dengan

## Spektrofotometer Infrared (IR)
Serbuk  simplisia  dihaluskan  kemudian diletakkan  secukupnya  pada  tempat  sampel  pada alat  UATR.  Tuas  diletakan  diatas  sampel  dan diputar  hingga  tekanan  lebih  dari  80  kemudian dilakukan scan pada sampel tersebut.

## Penetapan Kadar Metabolit Sekunder
Penetapan  kadar  metabolit  sekunder  yang dilakukan meliputi total flavonoid, total fenol dan total  alkaloid  dari  simplisia  daun  kirinyuh  dari tiga  daerah  berbeda  yaitu  Bogor,  Batu  dan Surabaya.

## Penetapan kadar abu
Serbuk  daun  Kirinyuh  ditimbang  lebih kurang  2  gram  sampai  3  gram,  dimasukkan  ke dalam  krus  silikat  yang  telah  dipijarkan  dan ditara,  lalu  diratakan.  Kurs  dipijarkan  perlahan- lahan  hingga  arang  habis,  didinginkan  dan ditimbang.  Kadar  abu  dihitung  terhadap  serbuk simplisia yang telah dikeringkan di udara (DepKes RI, 1989).

## Kadar abu tidak larut asam
Abu  yang  diperoleh  pada  penetapan  kadar abu,  didihkan  dengan  25  ml  asam  sulfat  encer selama  5  menit,  kumpulkan  bagian  yang  tidak larut  asam,  saring  melalui  krus  kaca  masir  atau kertas  saring  bebas  abu,  cuci  dengan  air  panas, pijarkan  hingga  bobot  tetap  dan  timbang.  Kadar abu  yang  tidak  larut  asam  dihitung  terhadap bahan  yang  telah  dikeringkan  di  udara  (DepKes RI, 1989).

## Kadar Abu Larut Air
Abu dididihkan dengan 25 ml air selama 5 menit, kumpulkan bagian yang tidak larut, saring melalui krus kaca masir atau kertas saring bebas abu, cuci dengan  air  panas  dan  pijarkan  selama  15  menit pada  suhu  tidak  lebih  dari  45°C  hingga  bobot tetap.  Kadar  abu  yang  larut  dalam  air  kemudian
dihitung  terhadap  bahan  yang  dikeringkan  di udara (DepKes RI, 1989).

## Penetapan Susut Pengeringan
Serbuk  daun  kirinyuh  ditimbang  seksama  lebih kurang  5  gram,  diletakkan  dalam  cawan  timbang yang  terdapat  pada  alat IR  Moisture  Balance Model  F-IA.  Lampu infra  red dinyalakan  dan diarahkan  pada  cawan  yang  telah  berisi  serbuk tanaman.  Selama  penyinaran  suhu  dijaga  agar tidak lebih dari 105º C dan diatur agar skala tetap seimbang.  Jika  skala  telah  konstan,  dibaca  nilai yang tertera pada skala (DepKes RI, 1989).

## Pengukuran pH
Serbuk  simplisia  daun  kirinyuh  ditimbang sebanyak  1000  mg  masing-masing  untuk  dua pelarut  yang  digunakan  yaitu  100  ml  etanol  dan 100  air,  larutkan  dalam beaker  glass kemudian disaring  filtrat  ditampung  biarkan  beberapa menit.  Filtrat  etanol  dan  filtrat  air  dicek  pH dengan  menggunakan  pH  meter  yang  telah dikalibrasi.
Penetapan  Bahan  Organik  Asing dilakukan dengan cara Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 50  gram  dari  masing-masing  daerah,  lalu  diayak dengan ayakan. Masing-masing daerah direplikasi tiga  kali.  Sisa  yang  tidak  melewati  ayakan ditimbang.  Persentase  bahan  asing  dihitung terhadap berat simplisia yang ditimbang (DepKes, 1989).

## HASIL PENELITIAN
Pengamatan  secara  mikrokopis  pada  daun segar  kirinyuh  yang  diperoleh  dari  daerah Kalisari,  Surabaya  menunjukkan  bentuk  daun jorong, ujung atas dan bawah berbentuk runcing, tepi  daun  bergerigi,  permukaan  atas  dan  bawah daun  berwarna  hijau,  panjang  daun  6,4-11,8  cm, lebar  3,3-5,9  cm,  tulang  daun  menyirip,  tekstur daun berbulu halus dan kedudukan daun tunggal berhadapan
(Gambar 1). Pemeriksaan mikroskopis  tanaman  segar  daun  kirinyuh menunjukkan  susunan  sel  terdiri  atas  jaringan epidermis,  kolenkim,  palisade,  xylem,  floem, parenkim,  kolenkim,  sponge  dan  trikoma,  tipe berkas  pembuluh  kolateral  dan  tipe  stomata anomositik  (Gambar  2).  Hasil  pengamatan mikroskopis  pada  tanaman  segar  daun  kirinyuh memiliki  fragmen  epidermis  atas  dan  epidermis bawah  dimana  palisade  terletak  persis  dibawah epidermis  atas  dan    epidermis  dilindungi  oleh kutikula.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tipe  daun dorsivental.  Berkas  pembuluh  pada  tanaman kirinyuh  xylem  dan  floem  hal  ini  menunjukkan tipe berkas pembuluh kolateral.
Hasil  pengamatan  mikroskopis  simplisia daun  kirinyuh  memiliki  tipe  stomata  anomositik, trikoma,  berkas  pembuluh  dengan  penebalan spiral, kristal Ca-Oksalat berbentuk prisma (Tabel 1).  Hasil  Penetapan  kadar  sari  dengan  pelarut tertentu  (Air  dan  Alkohol)  pada  simplisia didapatkan hasil %  yang bersifat ± SD kan (Tabel 2).
Larutan simplisia daun kirinyuh ( Chromolaena  odorata )  dari  tiga  daerah  berbeda digunakan  konsentrasil  10  g  /  100  ml  kemudian ditotolkan  10  µl.  Hasil  eluasi  dari  kelima  fase gerak  menunjukkan  keterpisahan  noda  yang  ada pada  setiap  simplisia  yang  berasal  dari  ketiga daerah berbeda. Fase gerak yang dapat digunakan untuk  profil  kromatogram  secara  KLT  yaitu kloroform  :  etil  asetat  (15:1)  (Gambar  3)  yang memiliki  indeks  polaritas  4,12.  Hasil  identifikasi KLT  didapatkan  5  noda  yang  diamati  secara visual, 8 noda pada UV 254 nm, 15 noda pada UV 366  nm  dan  13  noda  setelah  disemprot  dengan penampak bercak vanilin sulfat.
Gambar 1. Hasil Pengamatan Makroskopis Daun Kirinyuh ( Chromolaena odorata )
Keterangan  :  a)  tampak  depan  daun  kirinyuh;  b)  tampak belakang  daun  kirinyuh;  dan  c)  tanaman  utuh  yang mencerminkan filotaksis daun.
Simplisia  daun  kirinyuh  dari  tiga  daerah berbeda  dilakukan  skrining  dengan  perekasinya maka  didapatkan  senyawa  yang  terkandung dalam  simplisia  yaitu  Alkaloid,  Flavonoid, Polifenol  dan  tanin,  Saponin  dan  Steroid  (Tabel 1).  Untuk  mendukung  data  skrining    fitokimia yang  dilakukan  menggunakan  metode  tabung dilakukan skrining fitokimia mengunakan metode KLT dengan penampak bercak AlCl 3 1%, FeCl 3 1%, Dragendorff  dan Liebermann  Burchard (Gambar 4).
Gambar  2. Penampang  Melintang  Daun  Segar Tanaman  Kirinyuh  ( Chromolaena  odorata ) Dalam  Media  Floroglusin  HCl  dalam  perbesaran 10×42,3
Keterangan. 1. Epidermis atas; 2. Palisade; 3. Xilem; 4. Floem; 5.  Jaringan  Parenkim;  6.  Trikoma;  7.  Epidermis  Bawah;  8. Sponge.
Profil spektrum dengan metode spektrofotometer  Infrared  pada  simplisia  daun kirinyuh dari tiga daerah berbeda yang bertujuan untuk  menganalisis  secara  kualitatif  kandungan senyawa  yang  terdapat  dari  serapan  yang ditunjukkan masing-masing daerah dan membandingkan spektrum simplisia pada (Gambar 5).
Penetapan  kadar  metabolit  sekunder meliputi  flavonoid,  fenol  dan  Alkaloid.  Hasil penetapan  kadar  flavonoid,  fenol  dan  alkaloid dapat  dilihat  pada  (Tabel  3  ).Hasil  standarisasi simplisia  pada  parameter  non  spesifik  yang dilakukan  meliputi  penetapan  kadar  abu  total, kadar  abu  larut  air,  kadar  abu  tidak  larut  asam, kadar air, persen bahan asing dan pengukuran pH simplisia. Hasil yang didapatkan dirata-rata ± SD (Tabel 2).

## PEMBAHASAN
Hasil  standarisasi  paramter  spesifik  dari simplisia  daun  kirinyuh  dengan  penetapan  kadar sari  larut  dalam  pelarut  (air  dan  alkohol) menunjukkan kadar sari larut air lebih besar jika dibandingkan dengan kadar sari larut etanol. Hal ini menunjukkan bahwa kandungan senyawa yang terdapat  dalam  simplisia  daun  kirinyuh  bersifat polar  sehingga  dapat  disarankan  pelarut  yang cocok untuk proses ekstraksi daun kirinyuh dapat menggunakan pelarut air.
Skrining  fitokimia  pada  simplisia  daun kirinyuh dari tiga daerah berbeda bertujuan untuk mengetahui  kandungan  senyawa  yang  ada  dalam simplisia tersebut. Hasil pengamatan menggunakan  metode  tabung  menunjukkan bahwa simplisia daun kirinyuh positif mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, polfenol dan tanin, saponin dan steroid.
a b c 1 2 3 4 8 5 7 6
Tabel 1. Hasil Pengamatan Simplisia Daun Kirinyuh ( Chromolaena odorata ) dari Tiga Daerah Berbeda dalam Media Air , Kloralhidrat dan Floroglusin HCl dalam perbesaran 10×42,3.
Bogor
Batu Surabaya Rambut penutup Kristal Ca-Oksalat Berkas Pembuluh dengan Penebalan Spiral
Tabel 2 . Hasil Pengamatan Standarisasi Parameter Spesifik dan Parameter Non Spesifik Simplisia Daun
Kirinyuh. Parameter Standarisasi Jenis Uji Nilai Parameter Parameter non spesifik Kadar air atau Susut Pengeringan (%) ≤ 11% Kadar abu total (%) ≤ 14% Kadar abu larut air(%) ≤ 5% Kadar abu tidak larut asam (%) ≤ 10% Bahan organik asing (%) ≤11% PH Pelarut EtOH
5 Pelarut Air Parameter spesifik
Penetapan Kadar Sari Larut Air (%) ≥ 20% Penetapan Kadar Sari Larut Etanol (%) ≥ 12 % Reaksi Identifikasi dengan NaOH Berflourosensi pada UV 366 nm menjadi hijau kekuningan Reaksi Identifikasi dengan H 2 SO 4
Berflourosensi pada UV 366 nm menjadi hijau kekuningan Reaksi Identifikasi dengan FeCl 3 Tidak berflourosensi pada UV 366 nm Reaksi Identifikasi dengan HCl Tidak berflourosensi pada UV 366 nm Penetapan Kadar Flavonoid (%) ≥ 0,4% Penetapan Kadar Fenol (%) ≥ 1,0 % Penetapan Kadar Alkaloid (%) ≥ 2,0 %
Hasil  tersebut  didukung  dengan  hasil skrining  fitokimia  menggunakan  metode  KLT dengan  penampak  bercak  AlCl3  1%  terbentuk
warna  hijau  kekuningan  pada  UV  366  nm  yang mengidentifikasi  senyawa  flavonoid,  penampak
bercak FeCl3 1% terbentuk warna biru kehitaman mengidentifikasi senyawa fenolik.
Tabel  3. Hasil  Pengamatan  Skrining  Fitokimia Simplisia Daun Kirinyuh ( Chromolaena odorata ).
Skrining Pereaksi Lokasi tumbuhan Bgr Ba  Sby Alkaloid Dragendorff + + + Flavonoid AlCl 3 + + + Wilstater + + + Polifenon + Tanin FeCl 3 +Gelatin + + + Saponin Aquadest + + + Steroid Liebermann Burchard + + +
Keterangan : Bgr = Bogor; Ba = Batu; Sby = Surabaya. (+) = Positif; (-) = Negatif
Gambar
3. Hasil
Pengamatan Profil
Kromatografi Lapis Tipis Simplisia Daun Kirinyuh ( Chromolaena  odorata )  dengan  fase  gerak Kloroform : Etil Asetat (15:1). Keterangan : 1= Simplisia berasal dari Daerah Bogor. 2= Simplisia berasal dari Daerah Batu. 3= Simplisia berasal dari Daerah Surabaya. a= Pengamatan secara Visual. b= Pengamatan pada UV 254 nm. c= Pengamatan pada UV 366 nm. d=  Sesudah  disemprot  dengan  penampak  bercak  Vanilin Sulfat.
Hasil dari profil spektrum IR pada simplisia daun  kirinyuh  dari  tiga  daerah  berbeda didapatkan  rentang  bilangan  gelombang  3266,28 cm -1 -  3282,21  cm -1 dengan  intensitas  sedang menunjukkan  adanya  gugus  OH  aromatis  yang diduga dalam simplisia daun kirinyuh mengandung senyawa fenol, flavonoid dan sterol, sedangkan rentang bilang gelombang 2849,63 cm - 1 -2917,50  cm -1 menunjukkan  adanya  gugus  C-H aromatik yang diduga mengandung senyawa fenol dan  flavonoid,  intensitas  yang  sedang  pada
rentang  bilangan  gelombang  1416,01  cm -1 -1602,3 cm -1 menunjukkan  ikatan  C=C  aromatis  yang diduga  memiliki  kandungan  senyawa  terpenoid, bilangan  gelombang  1245,35  cm -1 -1251,27  cm -1 dengan  intensitas  tajam  menunjukkan  adanya serapan  C-O  yang  diduga  memiliki  kandungan senyawa  steroid  dan  terpenoid,  bilangan gelombang  1022,32  cm -1 -1061,17  cm -1 dengan intensitas lemah menunjukkan adanya serapan N- H  Alifatis  yang  diduga  memiliki  kandungan senyawa  alkaloid  didalam  simplisia  daun kirinyuh.
Gambar  4. Hasil  Pengamatan  Profil  KLT  dari Simplisia  Daun  Kirinyuh  dengan  Fase  Gerak Kloroform  :  Etil  Asetat  (15:1)  dengan  penampak bercak  AlCl 3 1% , FeCl 3 1%,  Dragendorff  dan Liebermann Burchard . Keterangan:
1= Simplisia berasal dari daerah Bogor.
2= Simplisia berasal dari daerah Batu. 3= Simplisia berasal dari daerah Surabaya. a= Sesudah disemprot dengan penampak bercak Lierbermann Burchard .
b= Sesudah disemprot dengan penampak bercak FeCl 3 1% . c= Sesudah disemprot dengan penampak bercak Dragendorff. d= Sesudah disemprot dengan penampak bercak AlCl 3 1% .
Hasil  penetapan  persen  kadar  flavonoid terbesar  adalah  dari  daerah  Surabaya,  hal  ini didukung hasil skrining dimana dengan penambahan  pereaksi  Wilstater  memiliki  warna kuning  yang  lebih  intens  jika  dibandingkan  dari Bogor dan Malang. Hasil penetapan persen kadar fenol terbesar adalah dari daerah Surabaya, hal ini didukung hasil dari penetapan spektrum Infrared yang  menunjukkan  serapan  3828  cm -1 dan  2917 cm -1 dimana  simplisia  dari  Surabaya  memiliki intensitas  serapan  yang  lebih  tinggi  jika dibandingkan  dengan  simplisia  dari  Bogor  dan Malang.  Hasil  penetapan  persen  kadar  alkaloid terbesar  adalah  dari  daerah  Malang,  hal  ini
a b c d a b c d 1  2  3 2 1 1  2  3 3 2 1 3
didukung  hasil  dari  penetapan  profil  spektrum infrared pada  bilangan  gelombang  1061,17  cm -1 yang  lebih  intens  jika  dibandingkan  profil spektrum simplisia dari Bogor dan Surabaya.
Gambar  5. Perbandingan  Spektrum  Simplisia Daun Kirinyuh dari Tiga Daerah Berbeda.
Keterangan  :  a=  Profil  spektrum  simplisia  dari  daerah Surabaya; b= Profil spektrum simplisia dari daerah Bogor; c= Profil spektrum dari daerah Batu.
Nilai  kadar  abu  dalam  simplisia  yang menunjukkan  kandungan  mineral  baik  secara organik  dan  anorganik  dari  ketiga  daerah berbeda. Tingginya nilai kadar abu dimungkinkan karena  dipengaruhi  oleh  jenis  tanah,  lingkungan tempat  tumbuh  tanaman  dan  proses  pembuatan simplisia. Jenis tanah yang kaya akan mineral dan unsur  hara  adalah  jenis  tanah  andosol  dimana ketiga  daerah  ini  memiliki  jenis  tanah  tersebut. Tingginya  kadar  abu  yang  terdapat  dalam simplisia  daun  kirinyuh  ( Chromolaena  odorata ) menunjukkan  bahwa  jumlah  kandungan  mineral secara  alami  dan  anorganik  dimana  jumlah kandungan  mineral  alami  didapatkan  dari penetapan  kadar  larut  air  dimana  jumlah  kadar abu  larut  air  lebih  tinggi  berasal  dari  Surabaya. Hal  ini  dimungkinkan  karena  tempat  tumbuh tanaman  yaitu  di  alam  bebas  yang  bertahan  dari segala  perubahan  lingkungan  tempatnya  tumbuh sedangkan, jumlah kandungan mineral anorganik didapatkan  dari  penetapan  kadar  abu  tidak  larut dalam asam dimana jumlah kadar abu tidak larut asam lebih tinggi berasal dari daerah Malang. Hal ini dimungkinkan karena selama proses pembuatan  simplisia  pada  tahap  sortasi  kering yang  kurang  baik  sehingga  masih  tertinggal  di simplisia.  Hasil  penetapan  kadar  air  atau  susut pengeringan  pada  simplisia  daun  kirinyuh ( Chromolaena odorarat ) dari tiga daerah berbeda yang  lebih  tinggi  nilainya  adalah  kadar  air  dari
daerah  Malang  yaitu  10,33±0,13%.  Tingginya kadar  air  dalam  simplisia  daun  kirinyuh dimungkinkan karena letak geografis dari tempat tumbuh  dan  curah  hujan  dari  tempat  tumbuh dimana curah hujan  yaitu 875-3000 mm dengan kelembapan  udara  sekitar  75-98%.  Hasil penentuan  pH  dengan  pelarut  etanol  dan aquadest adalah 5 untuk simplisia dari tiga daerah berbeda.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  larutan simplisia daun kirinyuh bersifat asam.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  daun  segar kirinyuh  memiliki  daun  bentuk  oval  pada  bagian tengah  daun,  runcing  ujung  atas  dan  bawah, permukaan  atas  dan  bawah  berwarna  hijau,  tepi daun  berombak,  6,4  –  11,8  cm  (P),  3,3  –  5,9  cm (L),  tulang  daun  menyirip,  tekstur  daun  berbulu halus  dan  kedudukan  daun  tunggal  berhadapan. Karakteristik simplisia secara organoleptis berupa serbuk  halus,  berwarna  hijau  dan  berbau  khas berasal  dari  Batu  dan  Surabaya,  serbuk  kasar, berwarna  hijau  tua  dan  berbau  khas  berasal  dari Bogor,  mikroskopis  memiliki  tipe  stomata anomositik,  berkas  pembuluh  dengan  penebalan spiral,  kristal  Ca-  Oksalat  berbentuk  prisma  dan kadar sari larut etanol ≥ 12%, kadar sari larut air ≥ 20  %.  Fase  gerak  yang  dapat  digunakan  untuk profil  kromatogram  secara  KLT  yaitu  kloroform  : etil  asetat  (15:1),  profil  spektrum  dengan spektrofotometer IR memiliki bilangan gelombang  ialah  3266,28  cm -1 -3282,21  cm -1 , 1416,01  cm -1 ,  1514,53  cm -1 ,  1514,93  cm -1 ,  1245,35 cm -1 ,  1249,52  cm -1 ,  1251,27  cm -1 ,  1022,32  cm -1 -
1061,17  cm -1 ,  kadar  flavonoid  ≥  0,4%,  fenol  ≥  1,0 %  dan  alkaloid  ≥  2,0%,  kadar  abu  total  ≤  14  %, kadar  abu  larut  air  ≤  5%,  kadar  abu  tidak  larut asam ≤ 10%, kadar air ≤ 11 %, bahan asing ≤ 11 % dan pH simplisia 5.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  menyampaikan  rasa  terimakasih yang  sebesar-besarnya  kepada  Fakultas  Farmasi Universitas  Katolik  Widya  Mandala  Surabaya yang  telah  mendanai  sebagian  besar  dari  biaya penelitian ini sehingga dapat terselesaikan dengan baik

## DAFTAR PUSTAKA
Chakraboty,  A.K.,  Sujit,  R.  dan  Umesh,  K.P.,  2011, Chromolaena  odorata (L.):  An  Overview, Journal  of Pharmacy Research, 4(2), 573-576.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  1989, Materia Medica  Indonesia, Jilid  V.  Jakarta:  Direktorat  Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Marianne, Dwi, L.P., Elin, Y.S., Neng, F.K., dan Rosanani, N., 2014, Antidiabetic   Activity of Leaves Ethanol Extract Chromolaena odorata (L.) R.M. King on Induced Male
c b
a
Mice with Alloxan Monohydrate. Jurnal Natural, Vol. 14, No. 1,pp. 1-4.
Ngozi,  I.M.,  Jude,  I.C.,  dan  Catherine,  I.C.,  2009,  Chemical Profile of Chomolaena odorata L. (King and Robinson) Leaves. Pakistan Journal of Nutrition. 8(5): 523.
Nurhalimah,  2014, Aktivitas Penyembuhan  Luka  dari Ekstrak Etanol  Daun  Tekelan  ( Chromolaena  odorata (L.)  R.M.King . ) yang  Diformulasi  dalam  Sediaan  Gel  pada  Mencit  Diabetes. Medan: Universitas Sumatra Utara.
Onkaramurthy,  M.,  Veerapur,  V.P.,  Thippeswamy,  B.S.,  dan Reddy, T.N.M., 2013, Anti- Diabetic and Anti-Cataract Effects  of Chromolaena  odorata Linn.,  in  Streptozotocin- Induced  Diabetic  Rats. Journal  of  Ethnopharmacology, 9;145(1):363-72
Saifudin,  A.,  V.  Rahayu  dan  H.Y.  Teruna,  2011, Standarisasi Obat Bahan Alam . Yogyakarta: Graha Ilmu.
Stanley, M.C., Ifeanyi, O.E., Nwakaego, C.C., and Esther, A.O., 2014, Antimicrobial Effect of Chromolaenna  odorata on Some  Human  Pathogens. International  Journal  of  Current Microbiology and Applied Sciences, Vol. 3, 1009-1012.