http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index

## Isolasi Dan Karakterisasi Senyawa Steroid Dari Ekstrak Biji Mahoni (Swietenia mahagoni Jacq.)
Fadillah Maryam 1* , Subehan 2 , Lilis Musthainah 2
1 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
2 Universitas Hasanuddin, Makassar
Article info Abstract History
Submission : 05-04-2019 Review : 26-12-2019 Accepted : 15-07-2020
* Email: dilla.guerjel@yahoo.co.id
DOI: 10.33096/jffi.v7i2.647
Keywords: Isolasi; Biji mahoni; Steroid
Mahogany seeds (Swietenia mahagoni Jacq .) Have many benefits as drugs such  as  febrifuge,  diabetes  (Diabetes  Mellitus),  high  blood  pressure,  fat decay,  colds,  colitis,  diarrhea,  wounds,  and  ulcers.  Swietenia  mahagoni Jacq  Contain  steroid  compounds.  This  study  aims  to  determine  the characterization of steroid compounds isolated from mahogany seed extract (Swietenia  mahagoni Jacq .).  Extracts  were  obtained  from  maceration processes  using  n-hexane,  ethyl  acetate,  and  ethanol  70%  solvents  with percent of rendament of 6.34%, 7.34%, and 8% respectively. The test results for  the  chemical  content  of  ethyl  acetate  extract  positively  contained steroids.  5  grams  of  extract  was  carried  out  using  conventional  column chromatography  to  produce  6  fractions.  Fraction  6  were  selected  and continued  with  preparative  thin  layer  chromotography  and  produced  2 isolates. Isolates P2b which showed one tonggal stain on the TLC profile with a value of Rf 0.50 were continued to be analyzed by UV-Vis and FT-IR spectrophotometry. The results of UV-Vis spectrophotometric isolates P2b had maximal absorption at a wavelength of 253.50 nm. FT-IR data shows the presence of functional groups C-H, C-O, C = O, C = C, and O-H which are thought to be steroid compounds.
I. Pendahulua n Indonesia  kaya  dengan  aneka  ragam  flora dan  fauna,  keanekaragaman  flora  tersebut menjadikan negara kita sebagai salah satu negara di dunia  yang  ikut  bangkit  mengembangkan pengobatan  herbal  untuk  penyembuhan  berbagai penyakit  dan  kosmetika  serta  produk-produk suplemen  untuk  kesehatan.  Data  menyebutkan Sekitar 30.000 jenis flora yang ada di hutan tropika Indonesia, kurang lebih 9.600 spesies telah diketahui berkhasiat sebagai obat (Timumu, 2010).
Biji  mahoni  ( Swietenia  mahagoni Jacq . ) memiliki banyak manfaat sebagai obat diantaranya sebagai  obat  penurun  panas,  obat  kencing  manis ( Diabetes Mellitus ), tekanan darah tinggi, peluruhan lemak,  masuk  angin, radang  usus,  diare,  luka,  dan bisul.  Sebagian  obat  alamiah  ini  berasal  dari  alam atau tumbuh-tumbuhan, inilah taraf permulaan dari obat  yang  dikenal  dengan  obat  tradisional (Dalimartha, 2006).
Secara empirik biji mahoni telah digunakan masyarakat  dengan  cara  menumbuk  biji  mahoni sampai  halus,  ditambah  dengan  air  hangat  dan diminum  secara  langsung  sehingga  komponen  biji mahoni  bisa  masuk  kedalam  tubuh.  Namun  jika tahan  pahit,  biji  mahoni  bisa  dimakan  mentah- mentah  (Hamzari,  2008).  Penelitian  terbaru menunjukkan  bahwa  biji  mahoni  memiliki  banyak sekali  aktivitas  farmakologik  seperti  antibakteri,
antimikroba,  sitotoksik,  antiulcer,  antifungi,  anti HIV, antiinflamasi, analgesik, antipiretik, hipoglikemik dan penghambatan aggregasi  platelet (Bhurat et al, 2011).
Biji mahoni mempunyai kandungan kimia alkaloid, saponin, flavonoid, steroid, dan terpenoid. Penelitian  sebelumnya  yang  telah  dilakukan  oleh (Mursiti,  2009)  berhasil  meneliti  senyawa  aktif flavonoid 7-hidroksi-2-(4-hidroksi-3-metoksi- fenil)-kroman-4-one dari biji mahoni ( S. mahagoni (L.) Jacq.) (Rasyad, 2012) telah berhasil mengisolasi ekstrak kasar triterpenoid sebanyak 21% dari ekstrak etanol biji mahoni. (Mursiti, 2004) berhasil meneliti senyawa  aktif  alkaloid  3,6,7-trimetoksi-4-metil- 1,2,3,4-tetrahido-isoquinolin.  (Anggrahini,  2010) berhasil  mengisolasi  senyawa  aktif  saponin  3-O- tigloyl-6-0-asetilswietenolide  sebanyak  14%  dari biji  mahoni.  (Aliyan,  2012)  berhasil  mengisolasi senyawa kimia aktif terpen dari fraksi aktif ekstrak biji mahoni.
Steroid berperan penting bagi tubuh dalam menjaga  keseimbangan  garam,  mengendalikan metabolism dan meningkatkan fungsi organ seksual serta perbedaan fungsi biologis lainnya antara jenis kelamin.  Steroid  pada  tumbuhan  menunjukan  efek menurunkan  kolesterol  dan  antikarsinogenik (Nasruddin, 2017).
Melihat  banyaknya  penelitian  tentang  biji mahoni  dan  manfaatnya,  maka  perlu  dilakukan
penelitian  tentang  isolasi  senyawa  steroid  dari  biji mahoni  ( Swietenia  mahagoni Jacq.).  Hasil  yang didapat akan dikarakterisasi menggunakan spektrofotometer UV-Vis dan FTIR.

## II. Metode Penelitian II.1 Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  batang  pengaduk,  bejana  maserasi,  cawan porselin, corong, lampu UV 254 dan 366 nm,  hot plate,  kertas  saring,  klem,  kolom  kromatografi, oven,  penyemprot  manual  plat  KLT,  pipa  kapiler, plat KLT preparatif silika gel 60 GF 254 , seperangkat alat gelas, statif, sentrifus, spektrofotometer UV-Vis dan  FTIR,  tabung  reaksi  dan  timbangan  analitik, rotavapor.
Adapun  bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  biji  mahoni  ( Swietenia mahagoni Jacq.),  aquadest,  etanol,  etil  asetat,  n- heksan,  asam  asetat  anhidrat,  asam  sulfat  p., kloroform, silika gel G-60(0,063-0,200).

## II.2 Pengambilan Sampel
Sampel  penelitian  berupa  biji  mahoni diperoleh di Kabupaten Kolaka, Sulawesi Tenggara.

## II.3 Pengolahan Sampel
Biji mahoni yang telah diperoleh dibersihkan terlebih dahulu (dipisahkan antara kulit dan  bijinya).  Sampel  kemudian  dirajang  dan dikeringkan dengan cara diangin-anginkan kemudian dilakukan sortasi kering.

## II.4 Proses Ekstraksi
Sampel  diekstraksi  menggunakan  metode maserasi dengan cara dimasukkan sampel ke dalam bejana  maserasi,  ditambahkan  pelarut  n-Heksan selama 3 x 24 jam sambil  sesekali diaduk. Setelah itu  disaring  hasil  maserasi  diambil  ampas  dan diulangi proses maserasi dengan cairan penyari yang baru  sampai  jernih.  Diulangi  proses  menggunakan pelarut etil asetat dan etanol. Masing-masing ekstrak cair  yang  diperoleh  diuapkan  menggunakan rotavapor hingga diperoleh ekstrak kental.

## II.5 Identifikasi Fitokimia Steroid
Sebanyak 0,5 g ekstrak kering dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi,  kemudian  ditambahkan pereaksi  Lieberman-Burchard  (0,5  ml  kloroform, ditambahkan 0,5 ml asam asetat anhidrat dan 2 ml asam  sulfat  P).  Apabila  terbentuk  cincin  merah kecoklatan atau ungu pada lapisan kedua sedangkan larutan pada bagian atas menjadi hijau atau ungu, hal ini menunjukkan bahwa ekstrak positif mengandung steroid (Depkes RI, 1987).

## II.6 Proses Pemisahan
1. Kromatografi Lapis Tipis
Pemisahan dengan kromatografi lapis tipis dari ekstrak biji mahoni dilakukan untuk menentukan eluen yang digunakan untuk fraksinasi kromatografi kolom konvensional. Ditandai
lempeng  dengan  batas  atas  dan  batas  bawah kemudian  diaktifkan  dalam  oven  pada  suhu  115 ○ C dalam  waktu  15  menit.  Kedalam  vial  dilarutkan masing-masing ekstrak kental etanol, etil asetat dan n-Heksan menggunakan pelarut awal dan selanjutnya  ditotolkan  pada  lempeng  yang  telah diaktifkan. Selanjutkan dilakukan orientasi.
Dimasukkan  eluen  ke  dalam  chamber,  setelah  itu dijenuhkan  kemudian  lempeng  dielusi.  Dilakukan pengamatan penampakan noda dengan menggunakan sinar UV 254 nm dan 366 nm. Hasil elusi  terbaik  diperoleh  eluen  n-hexan  :  etil  asetat (6:4) dipilih untuk proses fraksinasi selanjutnya.
2. Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom Ekstrak sebanyak 5 gram dilarutkan dengan
1  ml  n-Heksan,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam kolom  dibagian  atas  penjerap.  Setelah  itu  dielusi dengan  eluen  campuran  n-Heksan  dan  etil  asetat dengan  perbandingan  (6:4)  dalam  100  ml.  Hasil yang  keluar  ditampung  dalam  vial  masing-masing 10  ml  berupa  fraksi.  Fraksi  tersebut  kemudian digabungkan berdasarkan kesamaan profil KLT dan nilai  Rf. Setelah  itu fraksi-fraksi  tersebut  diuapkan kemudian ditimbang bobot fraksinya.
3. Identifikasi Senyawa Steroid pada Fraksi Semua  fraksi  ditotolkan  pada  lempeng, dimasukkan dalam chamber yang telah dijenuhkan, kemudian  dielusi  menggunakan  eluen.  Keringkan dan dan disemprot menggunakan pereaksi penampak bercak Lieberman-Burchard (asam asetat anhidrat sebanyak 2 ml, 2 ml asam sulfat P dan 16 ml  etanol  p.a).  Lempeng  yang  telah  disemprot dipanaskan menggunakan hot plate.
4. Isolasi dan Pemurnian
Fraksi  terpilih  dari  kromatografi  kolom konvensional  dilanjutkan  pada  Kromatografi  Lapis Tipis Preparatif (KLTP). Ditotolkan fraksi pada plat silica gel  60 GF 254 kemudian dielusi  menggunakan fase  gerak  eluen  n-Heksan  :  etil  asetat  (6:4). Selanjutnya  pita  pada  plat  KLTP  ditandai  dan dikerok kemudian  dilarutkan menggunakan pelarut etil asetat sebanyak 2 ml, kemudian disentrifus pada kecepatan  6  (6.000  rpm)  selama  15  menit. Dipisahkan  supernatan  dan  pelet.  Ulangi  proses sentrifus  pada  pelet  seperti  proses  sebelumnya sebanyak  2  kali.  Supernatan  digabungkan,  lalu diuapkan.
Uji kemurnian dilakukan dengan menggunakan KLT Dua Dimensi dan multi eluen n- Heksan  :  etil  asetat  (6:4)  dan  kloroform  :  aseton (9:1).  Jika  isolat  menunjukkan  noda  tunggal  pada plat kromatografi maka isolat tersebut relatif murni secara KLT.
5. Karakterisasi Isolat
Karakterisasi isolat murni dilakukan dengan menggunakan alat spektrofotometer UV-Vis dan FTIR.

## III. Hasil Dan Diskusi
Dalam penelitian ini telah dilakukan isolasi dan  karakterisasi  senyawa  steroid  dari  ekstrak  biji mahoni ( Swietenia mahagoni Jacq.) yang diperoleh dari  Kabupaten  Kolaka,  Sulawesi  Tenggara.  Biji mahoni  diekstraksi  dengan  metode  maserasi bertingkat menggunakan 3 jenis pelarut berdasarkan tingkat  kepolaran yang paling non polar hingga ke yang  paling  polar  yaitu  n-Heksan,  etil  asetat  dan etanol.
Berdasarkan  proses  tersebut  dihasilkan  % rendamen yang dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel  1. Data  rendamen  hasil  ekstraksi  biji mahoni( Swietenia  mahagoni Jacq.) dengan metode maserasi
Ekstrak  yang  diperoleh  selanjutnya dilakukan  skrining  fitokimia  untuk  mengetahui kandungan senyawa steroid dari ekstrak biji mahoni ( Swetenia  mahagoni Jacq.).  Hasil  dari  skrining senyawa steroid dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1 . Skrining fitokimia
Hasil identifikasi senyawa steroid beberapa ekstrak biji mahoni dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Identifikasi steroid ekstrak biji mahoni ( Swietenia mahagoni Jacq.) Sampel Hasil Literatur Pustaka Ket. Ekstrak  n- Heksan Batas kedua larutan terbentuk cincin merah kecoklatan,  larutan  bagian atas  berwarna  ungu  dan lapisan  bawah  berwarna merah Terbentuk  cincin  merah kecoklatan  atau  ungu pada lapisan kedua, sedangkan  pada  bagian atas menjadi hijau. Depkes, RI (1987) + Triterpenoi d Ekstrak Etil Asetat Terbentuk cincin coklat kemerahan,  lapisan  bawah ungu kemerahan dan lapisan atas berwarna hijau Terbentuk  cincin  merah kecoklatan  atau  ungu pada lapisan kedua, sedangkan  pada  bagian atas menjadi hijau. Depkes, RI (1987) + Steroid Ekstrak Etanol 70% Terbentuk cincin merah,lapisan  atas  bening lapisan bawah merah bata Terbentuk  cincin  merah kecoklatan  atau  ungu pada lapisan kedua, sedangkan  pada  bagian atas menjadi hijau. Depkes, RI (1987) + Triterpenoi d
Hasil  identifikasi  kandungan  senyawa steroid  berdasarkan  uji  skrining  fitokimia  pada beberapa ekstrak biji mahoni menunjukkan adanya senyawa  steroid  pada  ekstrak  etil  asetat.  Hal  ini didukung oleh penelitian Meydia, dkk 2016 bahwa penggunaan  pelarut  etil  asetat  dalam  ekstraksi senyawa  steroid  menghasilkan  rendamen  paling banyak dibanding pelarut n-heksan dan metanol dan dapat menarik senyawa steroid secara efektif.
Selanjutnya ekstrak biji mahoni sebanyak 5 gram  dipisahkan  dengan  metode  kromatografi kolom  dengan  fase  diam  silica  gel  G-60  dan  fase gerak n-Heksan : etil asetat yang sebelumnya telah
diuji  kelarutannya,  dilakukan  secara  kontinyu  dari kepolaran  yang  rendah  hingga  kepolaran  yang tinggi.  Kromatografi  kolom  merupakan  metode yang  bagus  untuk  memisahkan  komponen    kimia yang  jumlahnya  sedikit  dan  hasilnya  cepat diperoleh.  Sebanyak  6  fraksi  gabungan  diperoleh dari 70 vial yang didasarkan atas profil nilai Rf dan pola pemisahan pada hasil kromatogram KLT. Hasil kromatografi kolom konvensional dapat dilihat pada Tabel 3.
Sampel Bobot simplisia (g) Bobot ekstrak (g) Rendemen (%) Ekstrak n- heksan 150 9,513 6,34% Ekstrak etil asetat 150 11,024 7,34% Ekstrak etanol 70% 150 12 8%
Tabel 3. Data hasil perhitungan Rf pada fraksi
Fraksi Berat (g) UV 254 nm UV 366 nm Fraksi 1 0,14 Rf 1 =0,83 Rf 1 =0,83 Fraksi 2 2,51 Rf 1 =0,76 Rf 1 =0,76 Rf 2 = 0,2
Fraksi 3 0,26 - Rf 1 = 0,18 Fraksi 4 0,06 - - Fraksi 5 0,61 Rf 1 = 0,67 Rf 1 = 0,67 Fraksi 6 1,07 Rf 1 = 0,32 Rf 2 = 0,49 Rf 3 = 0,72 Rf 1 = 0,32 Rf 2 = 0,49
Rf 3 = 0,72
Dari data hasil perhitungan Rf pada fraksi 1-6, fraksi 6 yang dilanjutkan pada tahap pemurnian karena memiliki pola pemisahan yang paling baik, dan nilai Rf yaitu 0,32 positif mengandung steroid setelah disemprot menggunakan pereaksi penampak bercak  Lieberman-Burchard  yang  ditandai  dengan muncul bercak noda berwarna hijau pada lempeng setelah penyemprotan.
Pemurnian  pada  teknik  kromatografi  lapis tipis  preparatif  dilakukan  pada  fraksi  6 menggunakan  eluen  n-Heksan  :  etil  asetat  (6:4). Hasil kromatografi lapis tipis preparatif, diperoleh 2 pita. Pita 1 dan 2 dikerok dan dilarutkan dengan etil asetat lalu dilakukan pemisahan isolat dari gel silika menggunakan  teknik  sentrifugasi.  Isolat  1  dan  2 dilakukan pengujian dengan menggunakan pereaksi penampak bercak Lieberman-Burchard. Isolat pita 2 di  KLTP  kembali  menggunakan  eluen  n-Heksan  : etil asetat (6:4) diperoleh isolat pita 2a dan pita 2b, selanjutnya  dilakukan  pengujian  menggunakan pereaksi  penampak  bercak  Lieberman-Burchard. Dari  hasil  pengujian,  isolat  pita  2b  positif mengandung  steroid  yang  ditandai  dengan penampakan  noda  berwarna  hijau  pada  plat  KLT dengan  nilai  Rf  0,50.  Hal  ini  sejalan  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Afriza,  2008  yang mengisolasi  senyawa  triterpenoida/steroid  dari ekstrak  n-Heksana  daun  tumbuhan  ruku-ruku ( Ocimum sanctum l.) dengan nilai Rf 0,50. Isolat  yang  diperoleh  kemudian  dilanjutkan uji  kemurnian  dengan  metode  kromatografi  lapis
tipis dua dimensi dan multi-eluen yaitu n-Heksan : etil asetat (6:4), kloroform : aseton (9:1). Hasil elusi multi  eluen  ini  dapat  dilihat  pada  Gambar  2  tetap menunjukkan adanya noda tunggal. Berdasarkan hal tersebut,  diduga  isolat  yang  diperoleh  telah  murni. Isolat pita 2b yang diperoleh selanjutnya dianalisis menggunakan instrumen UV-Vis dan IR.
Gambar 2 . Penyemprotan pereaksi
Dari  hasil  spektrum  UV-Vis  diperoleh panjang  gelombang  maksimum  pada  253,50  nm. Transisi  pada  panjang  gelombang  senyawa  isolat menunjukkan pergeseran batokromik yang disebabkan  oleh  perubahan  pelarut  atau  adanya suatu  ausokrom  (Sudjadi,  1983  dan  Mulja,  1995). Hal  ini sejalan dengan penelitian uswatun  hasanah 2017  yang  mengisolasi  senyawa  steroid  dari teripang  batu  dengan  hasil  spektrum  UV-Vis diperoleh panjang gelombang maksimum 252 nm.
Tabel 4. Hasil Pembacaan Spektrum IR
No.
Bilangan Gelombang
Isolat (cm -1 ) Daerah Frekuensi (cm -1 ) Prediksi Gugus Fungsi Pustaka Silverstein Pustaka Harmita Pustaka Fessenden 1. 742,59 675-870 1000-650 - C-H (Alkena) 2. 1124,50 1300-1080 1300-1000 - C-O (Ester) 3. 1273,02 1300-1080 1300-1000 - C-O (Ester) 4. 1462,04 - - 1450-1600 C=C (Alkena) 5. 1539,20 1600-1500 - - C=C
(Aromatik) 6. 1730,15 1760-1690 1730-1750 - C=O (Ester) 7. 2924,09 2960-2850 3000-3200 - C-H (Alkana) 8 3448,72 3600-3000 3500-3200 - O-H (Bebas)
Data  pembacaan  hasil  spektrofotometri infra merah (IR) pada Tabel 4 menunjukkan adanya serapan  dengan  intensitas  kuat  pada  frekuensi 742,59  dan  2924,09  cm -1 mengindikasikan  adanya gugus  C-H.  Kemudian  adanya  serapan  dengan intensitas  kuat  pada  frekuensi  1124,50  cm -1 dan 1273,02 cm -1 mengindikasikan adanya gugus C-O. Terdapat  intensitas  sedang-lemah  pada  frekuensi 1462,04  cm -1 dan  1539,20  cm -1 menunjukkan adanya ikatan C=C. Terdapat intensitas sedang pada panjang gelombang 3448,72 yang mengindikasikan adanya  gugus  O-H  bebas  (Harmita,  2014  dan Silverstein, 2005).
Dari  hasil  analisis  data  spektrofotometri Infra  Red  (IR)  yang  dapat  dilihat  pada  Gambar  3, diduga  isolat  pita  2b  menunjukkan  bahwa  isolat merupakan  senyawa  siklik  (golongan  steroid). Vibrasi regang O-H pada bilangan 3448,72 cm -1 dan regang C-O pada bilangan gelombang 1124,50 cm -1 dan  1273,02  cm -1 juga  mendukung  bahwa  isolat merupakan senyawa steroid karena memiliki gugus hidroksil  dan  didukung  oleh  data  spektrofotometri UV-Vis dengan absorbansi maksimum pada panjang gelombang  253,50  nm  yang  diduga  menunjukkan adanya steroid.
Gambar 3. Analisis Spektrofotometri FTIR

## IV. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  isolasi  dan karakterisasi senyawa steroid ekstrak etil asetat biji mahoni,  isolat  P2b  yang  diperoleh  diduga merupakan senyawa steroid yang didukung oleh uji golongan senyawa pada ekstrak yang menunjukkan hasil  positif  mengandung  steroid,  dan  hasil identifikasi  isolat  menggunakan  pereaksi  spesifik positif mengandung steroid serta didukung oleh data spektrofotometri UV-Vis yang mempunyai absorbansi  maksimal  pada  panjang  gelombang 253,50  nm  dan  data  spektrofotometri  FT-IR  yang menunjukkan  gugus  fungsi  C-H,  C-O,  C=C,  C=O dan O-H.

## Daftar Pustaka
Aliyan, H. 2012. Uji  penghambatan aktivitas alfa- glukosidase  dan  identifikasi  golongan senyawa kimia dari fraksi aktif ekstrak biji mahoni . UI: Jakarta Anggrahini,  D.  2010. Isolasi  dan  identifikasi senyawa  saponin  dari  biji  mahoni (swietenia  macrophylla,  king). FMIPA UNNES: Semarang Dalimartha,  S.  2006. Biji  Mahoni  (Swietenia mahagoni  Jacq)  Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia .  Vol  2,  131-134.  Trubus Agriwidya:  Jakarta
Dalimartha,  S.  2009 .  Ramuan  tradisional  untuk pengobatan diabetes mellitus cetakan 6.
Hamzari. 2008. Identifikasi Tanaman Obat-Obatan Yang  Dimanfaatkan  Oleh  Masyarakat Sekitar Hutan Tabo-Tabo. Jurnal Hutan dan masyarakat: Tadulako Harmita.  2014. Analisis  Fisikokimia, Departemen FMIPA UI: Depok. Harianja, A. 2008. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya , Cetakan Kelima Meydia, Suwandi, R. dan Suptijah, P.2016. Isolasi Senyawa  Steroid  dari  Teripang  Gama dengan Berbagai Jenis Pelarut.
Mursiti,  S.  2004. Identifikasi  senyawa  alkaloid dalam  biji  mahoni  bebas  minyak  (swietenia macrophylla,  king)  dan  efek  biji  mahoni terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah tikus  putih  (Rattus  novergicus). UGM: Yogyakarta Mursiti,  S.  2009. Isolasi,  karakterisasi,  dan  uji aktivitas  hipoglikemik  senyawa  dalam  biji mahoni bebas minyak dan minyak biji mahoni (Swietenia Macrophylla King) Nasruddin, Wahyono, Mustofa, Ratna Asmah. 2017.
Isolasi  Senyawa  Steroid  dari  Kulit Senggugu (Clerodendrum serratum L.Moon). Universitas  Gadjah  Mada: Yogyakarta
Silverstein,  R.M.,  Webster,  F.X.  dan  and  Kiemle,
D.J.,  2005. Spectrometric  Identification  of Organic Compounds 7th edition, John Willey
& Sons. New York.
Sudjadi,  M.S.,  1983. Penetuan  Struktur  Senyawa Organik, Bandung, Ghali : Indonesia.