Pemanfaatan Ekstrak Daun Nimba ( Azadirachta indica A. Juss) untuk Pengendalian Penyakit Layu Fusarium pada Tanaman Tomat ( Lycopersicum esculentum Mill.)

## Juni Safitri Muljowati dan Aris Mumpuni
Fakultas Biologi Unsoed, Karangwangkal, Purwokerto

## Abstract
The aim  of  this  study  was  to  find out  the  effect of neem  leaf  extract  ( Azadirachta  indica A. Juss.)  on  the  growth  medium  of  tomato  plant  toward  fusarial  wilt  and  to  determine  effective concentration  and  time  of application  of  the  extract  to  control  the  wilt.  Experiments  arranged  in  a Completely  Randomized  Design  (CRD)  was  employed  for in  vitro antimicrobial  assay  and  in  a Randomized Complete Block Design (RCBD) for in planta antimicrobial assay, both of which were to find out the inhibitory effect of the extract on colony growth  of Fusarium oxysporum (Schlecht). f.sp.  lycopersici  (Sacc.)  Snyd.  et  Hans.  (Fol).    The  results  indicated  that  neem  leaf  extract concentration  of  5%  applied  at  7  DAP  (Day  After  Planting)  was  the  most  effective  treatment  in inhibiting disease intensity of fusarial wilt on tomato plant showing inhibitory effect of up to 89.32%.
Key words :  neem leaf extract, Azadirachta indica , wilt disease, Fusarium oxysporum , Fol., tomato

## Pendahuluan
Tanaman  tomat  ( Lycopersicum  esculentum Mill.)  termasuk  tanaman  sayuran  yang penting  peranannya  dalam  pemenuhan  gizi  masyarakat.    Selain  digunakan  sebagai bumbu  masakan  atau  dicampurkan  ke  dalam  masakan,  buah  tomat  juga  dapat dimanfaatkan  sebagai  obat.    Buah  tomat  mengandung  zat-zat  yang  berguna  bagi  tubuh seperti vitamin C, vitamin A, dan mineral (Tugiyono, 1999).
Budidaya  tanaman  tomat  hingga  kini  masih  banyak  menemui  kendala,  khususnya berupa  gangguan  organisme  yang  dapat  menurunkan  atau  bahkan  menghilangkan produksi.  Salah  satu  jenis  organisme  pengganggu  yang  sangat  merugikan  budidaya tomat  di  Indonesia  adalah  cendawan Fusarium  oxysporum (Schlecht).  f.sp. lycopersici (Sacc.)  Snyd.  et  Hans.  (biasa  disebut  dengan Fol ),  yang  menyebabkan  penyakit  layu fusarium  (Semangun,  1996).  Kerusakan  akibat  serangan  cendawan  patogen  tersebut dapat mencapai 100% (Ambar, 2003).
Dewasa  ini  telah  banyak  dikembangkan  usaha  pengendalian  hayati  terhadap patogen tanaman yang diharapkan merupakan cara pengendalian yang ramah lingkungan sehingga tidak membahayakan kehidupan. Pengendalian tersebut dapat dilakukan antara lain  dengan  memanfaatkan  bahan  nabati  yang  memiliki  aktivitas  antimikrobial  (Wall, 2000).
Ekstrak daun  nimba  ( A.  indica A. Juss) merupakan  salah  satu  bahan  nabati  yang memiliki  aktivitas  antimikrobial.    Metabolit  utama  dalam  ekstrak  daun  nimba  adalah azadirakhtin,  nimbin,  dan  salanin,  yang  telah  diketahui  memiliki  aktivitas  antimikrobial (Coventry dan Allan, 2001).  Menurut Isman (1997), ekstrak daun nimba kurang persisten di dalam tanah sehingga relatif aman.
Penelitian tentang pemanfaatan ekstrak nimba telah cukup banyak dilakukan.  Hasil penelitian Coventry dan Allan (2001) menunjukkan bahwa ekstrak nimba memiliki aktivitas antimikrobial  terhadap  bakteri  gram  positif  dan  bakteri  gram  negatif  serta  cendawan patogen.  Hasil  penelitian  Weintraub  dan  Horowitz  (1997)  menunjukkan  bahwa pembentukan  pupa  larva Liriomyza  huidobrensis dapat  direduksi  hingga  75%.    Pada pengendalian  cendawan  patogen  tanaman,  ekstrak  daun  nimba  dapat  mengendalikan Puccinia  arachidis (Suresh et  al .,  1997)  dan Sarocladium  oryzae (Jagannathan  dan
Sivaprakasam,  1996).    Pada  pengendalian  nematoda,  penggunaan  mulsa  daun  nimba dapat  mengendalikan  perkembangbiakan Meloidogyne  javanica pada  tanaman  tomat (Khan dan Saxena, 1997).
Bertolak  dari  beberapa  hasil  penelitian  tersebut,  diduga  ekstrak  daun  nimba  juga dapat  digunakan  untuk  mengendalikan Fol. yang  merupakan  penyebab  penyakit  layu fusarium  pada  tanaman  tomat.    Salah  satu  upaya  agar  masyarakat  tertarik  untuk memanfaatkan  ekstrak daun  nimba  tersebut  antara  lain  dengan  mengetahui  konsentrasi dan  waktu  aplikasi  yang  efektif.    Berdasarkan  atas  hal  tersebut,  dilakukan  penelitian mengenai  pemanfaatan  ekstrak  daun  nimba  ( A.  indica A.  Juss)  untuk  pengendalian penyakit layu fusarium pada tanaman tomat ( L. esculentum Mill.).

## Materi dan Metode
Bahan penelitian yang digunakan terdiri  atas daun nimba ( A. indica A. Juss), benih tanaman tomat varietas Ratna, biakan murni Fol ., PDA,  tanah steril, dan pupuk kandang sapi.  Penelitian  dilaksanakan  dengan  metode  eksperimen  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap  (untuk  uji  aktivitas  antimikrobial in  vitro )  dan  Rancangan  Acak Kelompok (untuk  uji  aktivitas  antimikrobial in  planta ).    Untuk  uji  aktivitas  antimikrobial in  vitro , percobaan terdiri  atas enam perlakuan, yaitu tanpa Ekstrak Daun Nimba (EDN), dengan EDN 1%, 2%, 3%, 4%, dan 5%.  Sementara itu, untuk uji aktivitas antimikrobial in planta , percobaan terdiri  atas 17 perlakuan, yaitu tanpa Fol ; tanpa EDN; dengan  pemberian Fol dan  EDN  1%,  2%,  3%,  4%,  5%  pada  saat  tanam;  dengan  pemberian Fol pada  7  hari setelah  tanam  (HST)  dan    EDN  1%,  2%,  3%,  4%,  5%  pada  saat  tanam  dan;  dan pemberian Fol pada saat tanam dan EDN  1%, 2%, 3%, 4%, 5% pada 7 HST. Sebanyak  25  kg  daun  nimba  segar  ditumbuk  sambil  ditambah  dengan  1liter  air. Daun  nimba  yang  telah  halus  disimpan  di  tempat  yang  sejuk  selama  tiga  hari. Selanjutnya,  daun  nimba  yang  telah  halus  tersebut  disaring  menggunakan  kain  belacu hingga diperoleh  ekstrak daun nimba yang  akan digunakan sebagai bahan bahan nabati induk yang diuji.
Untuk  uji  aktivitas  antimikrobial in  vitro ,  pada  cawan  petri  (d=9  cm)  diletakkan medium PDA yang dicampur dengan EDN sesuai dengan perlakuan.  Selanjutnya, biakan Fol yang telah diremajakan dipotong menggunakan bor gabus dan ditumbuhkan di tengah medium tersebut. Parameter yang diamati  adalah panjang jari-jari koloni Fol . Untuk uji aktivitas antimikrobial in planta , benih tanaman tomat disemaikan pada bak pesemaian.  Setelah  berumur  10  hari  bibit  tomat  dibumbung  hingga  selama  14  hari. Inokulum Fol dibuat dalam media dedak yang diinkubasi selama 10 hari.  Bibit tomat yang telah  dibumbung  ditanam  pada  media  tanam  yang  telah  disiapkan  sebelumnya  (terdiri atas campuran tanah dan pupuk kandang sapi steril dengan perbandingan 2 : 1 di dalam polybag ).  Selanjutnya,  dilakukan  pemberian Fol dan  EDN  sesuai  dengan  perlakuan. Parameter  yang  diamati  adalah  jumlah  daun  bergejala  layu.  Sebagai  parameter pendukung  dilakukan  pengukuran  terhadap  temperatur  rumah  kaca,  kelembaban  rumah kaca, dan pH tanah.
Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan  uji  F.    Apabila  ada  beda  nyata antarperlakuan, dilakukan pengujian lebih lanjut dengan Uji Beda Nyata Jujur pada tingkat kepercayaan 95% dan 99%.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  pengamatan  terhadap  penghambatan  pertumbuhan Fol oleh  EDN  pada  uji in vitro menunjukkan  bahwa  pemberian  EDN  1%  telah  mampu menghambat  pertumbuhan Fol pada  media  PDA.    Kemampuan  penghambatan  ini    sesuai  dengan  pernyataan Saxena  (1999)  bahwa  EDN  merupakan  salah  satu  bahan  nabati  yang  dapat  digunakan untuk mengendalikan patogen tumbuhan.
Pada  gambar  1  nampak  bahwa  pertambahan  panjang  jari-jari  koloni Fol pada perlakuan  EDN  1%,  2%,  3%,  4%,  dan  5%  lebih  lambat  daripada  pertambahan  panjang pada kontrol (EDN 0%).
0 10 20 30 40 50 1 2 3 4 5 6 7 8 WAKTU PENGAMATAN (HARI KE) PA N J A N G J A R I- JA R I K OLO N I F ol ( m m ) K 1% 2% 3% 4% 5%
Gambar  1.  Rata-rata  panjang  jari-jari  koloni Fol pada  pengamatan  hari  ke-1  hingga  hari ke-8 Figure 1.  Average Fol radial length from day-1 to day-8 observations.
Pada  gambar  tersebut  nampak bahwa  koloni Fol pada  pemberian  EDN  1%  hingga 5%  masih  mampu  tumbuh  tetapi  sangat  lambat  jika  dibandingkan  dengan pertumbuhannya  pada  perlakuan  kontrol.    Perlakuan  pemberian  EDN  1%  dan  2%  tidak berbeda  nyata  walaupun  kedua  perlakuan  tersebut  berbeda  nyata  dengan  kontrol. Sementara  itu,  perlakuan  EDN  3%,  4%,  dan  5%  tidak  saling  berbeda  pengaruhnya walaupun  ketiga  perlakuan  tersebut  berbeda  nyata  dengan  kontrol,  dan  dengan pemberian  EDN  1%  dan  2%.    Hal  ini  menunjukkan  bahwa  untuk  uji in  vitro ,  perlakuan EDN  mulai  3%  memberikan  pengaruh  yang  nyata  dalam  menghambat  pertumbuhan koloni Fol .  Hasil  analisis  regresi  linier  pada  pengamatan  hari  pertama  hingga  hari  ke-8 menunjukkan  bahwa  pada  setiap  hari  pengamatan,  perlakuan  EDN  memberikan pengaruh  yang  sangat  nyata  dalam  menghambat  pertumbuhan  koloni Fol . Penghambatan terhadap pertumbuhan Fol ini disebabkan oleh senyawa yang terkandung dalam  EDN,  yaitu  azadirakhtin  dan  nimbin.  Menurut  Novizan  (2004),  azadirakhtin  dan nimbin  merupakan  senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam  EDN.    Aromanya  seperti bawang  dan  rasanya  sangat  pahit.    Sebagai  fungisida,  EDN  dapat  digunakan  untuk tindakan preventif pada tahap awal pertumbuhan jamur karena dapat menyebabkan spora gagal berkecambah.
Hasil pengamatan uji in planta menunjukkan bahwa tanaman tomat memperlihatkan gejala layu.  Gejala pertama yang muncul adalah tulang-tulang daun memucat, terutama daun-daun  di  bagian  atas,  kemudian  diikuti  dengan  merunduknya  tangkai.  Akhirnya, tanaman menjadi layu secara keseluruhan. Beberapa hari kemudian tanaman tomat mati. Tanaman  yang  tidak mati  pun  menjadi  kerdil  dan  merana  pertumbuhannya  (Semangun, 1996).
Hasil  pengamatan  terhadap  intensitas penyakit  layu  fusarium  pada  tanaman  tomat menunjukkan  bahwa  rata-rata  intensitas  penyakit  layu  fusarium  tertinggi  diperoleh  pada perlakuan  tanpa  EDN  (T1),  pemberian  EDN  1%  hingga  5%  pada  saat  tanam  dan pemberian EDN 1% hingga 4% pada 7 HST, yaitu sebesar 100%. Sementara itu, rata-rata intensitas  penyakit  layu  fusarium  yang  terendah  diperoleh  pada  perlakuan  tanpa  EDN (T0) dan pemberian EDN 5% pada 7 HST.
Pemberian EDN 1% hingga 5% secara bersamaan dengan pemberian patogen (Fol) dan  saat  tanam  belum  mampu  menghambat  intensitas  penyakit  layu  fusarium.    Hal  ini disebabkan  oleh  persistensi  EDN  di  dalam  media  tanam  yang  rendah,  yaitu  mudah tercuci.
Pemberian  EDN  1%  hingga  5%  secara  bersamaan  dengan  saat  tanam  tetapi tidakbersamaan  dengan  pemberian  patogen  sudah  mampu  menghambat  intensitas penyakit  layu  fusarium  sebesar  28,48  %  hingga  37,88%.    Hal  ini  sesuai  dengan pernyataan Novizan (2004) bahwa EDN yang disiramkan pada pangkal batang tanaman
tomat dapat diserap oleh akar dan menyebar ke seluruh bagian tanaman (efek sistemik). Namun, setelah dilakukan uji BNJ ternyata perlakuan tersebut tidak berbeda nyata.   Hal ini  diduga  karena  konsentrasi  EDN  yang  masih  rendah  sehingga  belum  cukup  mampu untuk menghambat pertumbuhan dan perkembangan patogen.
Pemberian EDN 1% hingga 4% pada 7 HST setelah pemberian Fol belum mampu menghambat intensitas penyakit layu fusarium.  Hal ini karena konsentrasi EDN tersebut rendah sehingga belum cukup mampu untuk menghambat pertumbuhan Fol pada media tanam  tomat.    Pemberian  EDN  5%  pada  7HST  sudah  mampu  menghambat  intensitas penyakit  layu  fusarium  hingga  89,32%.    Hal  ini  karena  pemberian  EDN  5%  dilakukan pada  saat  mendekati  berakhirnya  masa  inkubasi  patogen.  Meskipun Fol pada  media tanam tomat sudah mulai mampu  menyesuaikan diri dengan  lingkungan, pertumbuhannya  menjadi  terhambat  dengan  pemberian  EDN  5%  karena  selain  spora gagal  berkecambah  juga  karena  efek  sistemik  EDN  yang  dapat  diserap  oleh  tanaman tomat.
Pengukuran  faktor-faktor  lingkungan  yang  dilakukan  selama  penelitian  meliputi  pH media  tanam,  suhu,  dan  kelembaban  rumah  kaca.    Kelembaban  mempunyai  pengaruh besar terhadap perkecambahan spora jamur dan penetrasi inang oleh tabung kecambah. Kelembaban rumah kaca yang diukur selama penelitian berkisar antara 55 dan 96%. Data tersebut menunjukkan  bahwa  kelembaban  lingkungan  pada  saat  penelitian  cukup tinggi. Agrios  (1996) menyebutkan  bahwa  penyakit  layu  fusarium  bersifat  lebih  merusak  pada tempat yang kelembabannya rendah.
Tumbuhan  dan  juga  patogen  membutuhkan  suhu  minimum  tertentu  agar  dapat tumbuh  dan  menjalankan  aktivitasnya  (Agrios,  1996).    Lingkungan  yang  cocok  untuk pertumbuhan  dan  perkembangan  tanaman  tomat  adalah  mempunyai  suhu  23 O C  pada siang hari dan 17 O C pada malam hari, serta pH 5 hingga 6.  Suhu tinggi yang diikuti oleh kelembaban  yang  relatif  tinggi  dapat  mendukung  perkembangan  penyakit,  sedangkan suhu  yang  relatif  rendah  dapat  mengganggu  pembentukan  buah  (Tugiyono,  1999). F. oxysporum berkembang  dengan  baik  pada  tanah  yang  suhunya  berkisar  antara  21  dan 31 o C  (Semangun,  1996)  dan  yang  pHnya  berkisar  dari  4,5  hingga  6,0.    Sporulasi  jamur tersebut melimpah pada pH >7,0 (Sastrahidayat, 1988).  Data pengukuran suhu di rumah kaca  berkisar  antara    24 O C  dan  37 O C,  sedangkan  pH  tanah  berkisar  antara  6,8  dan  7. Berdasarkan  atas  data  pengukuran  tersebut,  secara  umum  dapat  dikatakan  bahwa kondisi  lingkungan  di  rumah  kaca  selama  penelitian  masih  cukup  mendukung perkembangan F. oxysporum .

## Kesimpulan
Ekstrak daun nimba mampu menghambat intensitas penyakit layu  fusarium pada media tanam tomat. Ekstrak daun nimba dengan konsentrasi 5% yang diberikan pada 7 HST  paling  efektif  menghambat  intensitas  penyakit  layu  fusarium  pada  tanaman  tomat, yaitu  mampu  menghambat  hingga  89,32%.  Meskipun  demikian,  masih  diperlukan penelitian lebih lanjut untuk aplikasi perlakuan tersebut pada skala lapangan.

## Daftar Pustaka
Agrios, G.H. 1996. Ilmu penyakit tumbuhan. Gadjah Mada University Press, Yogyakarta
Ambar,  A.A.    2003.    Efektivitas  waktu  inokulasi Trichoderma  viridae dalam  mencegah penyakit layu fusarium tomat ( Lycopersicon esculentum Mill.) di rumah kaca.  Jurnal Fitopatologi Indonesia 7(1): 7-11.
Coventry,  E  and  E.J.  Allan.    2001.    Microbiological  and  chemichal  analysis  of  neem ( Azadirachta  indica )  extracts:  new  data  on  antimicrobial  activity.    Phytoparasitica 29(5): 1-10.
Isman, M.B.  1997.  Neem and other botanical insecticides: barriers to commercialization. Phytoparasitica 25(4): 339-344.
Jagannathan, R and, K. Sivaprakasam, 1996. Effect of botanicals on managing sheath rot of rice. International Research Notes 21(1): 49-50
Khan,  T.A  and  S.K.  Saxena.    1997.    Integrated  management  of  root  knot  nematode Meloidogyne  javanica infecting  tomato  using  organic  materials  and Paecilomyces lilacinus .  Bioresource Technology 61(3): 247-250.
Novizan,  2004.  Membuat  dan  Memanfaatkan  pestisida  ramah  lingkungan.  Agromedia Pustaka, Jakarta Sastrahidayat, 1988. Ilmu penyakit tumbuhan. Usaha Nasional, Surabaya.
Saxena,  R.C.  1999. Building  awareness  and facilitating  the  use  of  neem as  a  source  of natural pesticides and other useful products in sub-Saharan Africa.  Phytoparasitica 27(3): 177-181.
Semangun,  H.    1996.    Penyakit-penyakit  Tanaman  Hortikultura  di  Indonesia.  Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
Suresh, G, N.S. Narasimhan, S. Masilamani, P.D. Partho, and G. Gopalakrishnan.  1997. Antifungal  fractions  and  compounds  from  uncrushed  green  leaves  of Azadirachta indica . Phytoparasitica 25(1): 33-39.
Tugiyono, H. 1999. Bertanam Tomat.  Penebar Swadaya, Jakarta.
Wall, R.E. 2000. Perceptions of biological controls.  Phytoparasitica 28(1): 1–5.
Weintraub,  P.G  and  A.R.  Horowitz.  1997.    Systemic  effect  of  a  neem  insecticide  on Liriomyza huidobrensis larvae.  Phytoparasitica 25(4): 283-289.