Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia , 1 (1) (2019) 1 0-13

## Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia
Website: https://journal.ubb.ac.id/index.php/stannum doi:
Research paper
Total Phenolic and Antioxidant Capacity of Acetone Extract of Tristaniopsis meguensis Leaves
Total Fenolik dan Kapasitas Antioksidan dari Ekstrak Aseton Daun

## Tristaniopsis merguensis
O. Roanisca 1 , R. G. Mahardika 1* , dan F. I. P. Sari 1
1) Department of Chemistry, Universitas of Bangka Belitung Kampus Terpadu Universitas Bangka Belitung, Bangka, Bangka Belitung, 33172
* Corresponding author: robbygusmahardika@gmail.com

## ABSTRACT
The purpose of this study was to determine the total phenolic and antioxidant capacity of Tristaniopsis merguensis leaf acetone extract. In this study extraction using the maceration method for 3 days with a ratio of dry leaves and solvents of 1: 10 (w / v). Analysis of total polyphenols  in  this  study  was  carried  out  using  the  Follin-Ciocalteu  method.  Total polyphenols  were  measured  based  on  gallic  acid  standards.  The  antioxidant  capacity  is calculated based on the DPPH method. The results of this study, obtained extract yield of 9.34%. The total phenolic content of the Tristaniopsis merguensis leaf acetone extract was 215.22 mg GAE / g DW. While the antioxidant capacity of the acetone extract has an IC50 value of 22,1454 µg / mL.
Kata kunci : fenolik, aktivitas antioksidan, ekstraksi

## PENDAHULUAN
Tristaniopsis  merguensis (Griff.)  merupakan salah satu pohon yang banyak tersebar di hutan Kepulauan  Bangka  Belitung.  Spesies  ini merupakan  anggota  dari  genus Tristaniopsis dengan famili Myrtaceae. Pohon
Tristaniopsis  merguensis (Griff.)  dikenal  oleh masyarakat  bangka  sebagai  pohon  pelawan. Pohin ini dimanfaatkan oleh masyarakat untuk mendapatkan  madu  pelawan  dan  jamur pelawan,  yang  dipercaya  memiliki  banyak khasiat.  Madu  pelawan  memiliki  rasa  pahit bercampur rasa manis yang dipercaya sebagai
obat  batuk  dan  obat  antidiabetes.  Manfaat pohon pelawan sebagai obat tradisional sangat banyak,  tetapi  informasi  metabolit  sekunder dari Tristaniopsis  merguensis masih  terbatas khususnya di Indonesia.
Berdasarkan  penelitian  terdahulu,  kajian fitokimia  dari  daun  pada  genus Tristaniopsis mengandung 0,03% flavonoid, 0,95% saponin, dan  1,04%  tanin.  Senyawa  aktif  mayor  dari genus Tristaniopsis yaitu  senyawa  golongan fenolik  seperti  flavonoid  dan  tanin.  Senyawa fenolik  yang  terkandung  dalam  genus Tristaniopsis mempunyai  keunikan  fenol
terglikosilasi.  Tingginya  kandungan  fenolik pada  genus Tristaniopsis dan  khasiat  pada pohon pelawan ( Tristaniopsis merguensis ) yang banyak,  membuat  peneliti  tertarik  untuk mengungkap  kandungan  fenolik  total  ekstrak daun  pelawan  ( Tristaniopsis  merguensis ) Bangka  (Enggiwanto,  Istiqomah,  Daniati, Roanisca, & Mahardika, 2018).
Pada  umumnya,  ekstrak  tumbuhan  yang mengandung senyawa fenolik dengan aktivitas antioksidan  yang  tinggi  dapat  dijadikan prekursor  obat  herbal  (Mokgope  2006).  Oleh sebab  itu  penelitian  ini  akan  mengkaji  total fenolik  dan  kapasitas  antioksidan  dari  ekstrak daun Tristaniopsis merguensis.
Perkembangan penggunaan antioksidan saat ini semakin pesat. Kapasitas antioksidan suatu senyawa atau ekstrak sering dikaitkan dengan penggunaannya sebagai obat beberapa penyakit  degeneratif  seperti  jantung  dan kanker.  Selain  digunakan  sebagai  obat antioksidan  juga  mulai  dimanfaatkan  sebagai bahan  aditif  makan  untuk  meningkatkan  nilai gizinya  (Hanani,  Mun,  &  Sekarini,  2005).  Oleh sebab  itu  kebutuhan  akan  pencarian  ekstrak atau senyawa baru yang kuat akan antioksidan masih  menjadi  penelitian  yang  menarik  untuk diteliti mengingat kebutuhan akan antioksidan semakin meningkat.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan total denolik dan kapasitas antioksidan ekstrak aseton Tristaniopsis merguensis .

## METODOLOGI
Bahan
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini meliputi metanol p.a, aseton, DPPH, asam galat, dan kertas saring.
Alat Peralatan  yang  digunakan  yaitu  rlenmayer, gelas  ukur, corong  Büchner, rotary evaporator , neraca  analitik,    pipet    tetes,    tabung    reaksi, batang pengaduk, spatula, labu ukur, rak tabung reaksi, spekrofotometer UV-Vis 1800 Shimadzu dan hot plate .

## Prosedur
Preparasi Sampel
Daun    pelawan  ( Tristaniopsis  merguensis Griff)  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini berasal  dari  Desa  Sempan,  Kecamatan  Pemali, Kabupaten  Bangka.  Selanjutnya  sampel tersebut  akan  dikeringkan  di  udara  terbuka,
setelah itu digiling menjadi serbuk kering yang selanjutnya siap untuk dimaserasi.

## Ekstraksi Metabolit Sekunder
Serbuk kering daun pelawan sebanyak 1 kg dimaserasi dengan pelarut aseton sebanyak 10 L  selama  3  x  24  jam.    Maserasi  dilakukan  tiga kali  setiap  1  x  24  jam  dilakukan  pergantian pelarut dan penyaringan dengan menggunakan corong    buchner  untuk  memisahkan  filtrat dengan    residu.    Filtrat  yang  diperoleh dipekatkan  dengan rotary  evaporator  vacuum hingga  diperoleh  ekstrak  pekat aseton (Dungir dkk., 2012).

## Total Fenolik
Total  fenolik  dilakukan  secara  kuantitatif dengan  metode  Follin-Ciocalteu  [22].  Ekstrak dilarutkan dengan metanol dengan konsentrasi 10 mg / mL. Ekstrak ini kemudian diambil 0,5 ml  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi yang  mengandung  2,5  mL  reagen  Follin- Ciocalteu  10%  dan  2,5  mL  Na 2 CO 3 7,5%. Kemudian  sampel  diinkubasi  pada  suhu  27 o C selama  30  menit.  Sebagai blanko ,  0,5  mL metanol  ditambahkan  dengan  2,5  mL  reagen Follin-Ciocalteu  1%  dan  2,5  mL  Na 2 CO 3 7,5%. Perubahan  absorbansi  diukur  pada  panjang gelombang  765  nm  dengan  spektroskopi  UV- Vis.  Kontrol  positif  menggunakan  asam  galat dengan  variasi  konsentrasi  asam  galat.  Total ekstrak  fenolik  dihitung  berdasarkan  kurva asam  galat  standar  kalibrasi  dan  dinyatakan dalam  mg  ekuivalen  asam  galat  (EAG)  /  g ekstrak kering.

## Uji Antioksidan
Aktivitas antioksidan menggunakan metode DPPH  secara  spektroskopi.  Ekstrak  daun pelawan  dibuat  dalam  konsentrasi  berbeda- beda.  Masing–masing  konsentrasi  dimasukkan dalam tabung reaksi sebanyak 1 mL dan larutan DPPH 100 μg/mL 1 mL serta metanol p.a. 2 mL. Larutan yang telah ditambah DPPH diinkubasi selama  30  menit  pada  suhu  37 o C.  Larutan tersebut  diukur  absorbansinya  menggunakan spektroskopi  UV-Vis  pada  λ-maksimum.  IC 50 yang didapat dari nilai x dengan y=50 dari hasil persamaan  regresi  linier  antara  persentase inhibisi  dengan  konsentrasi.  Inhibisi  dihitung berdasarkan persamaan berikut:
Inhibisi %= [(A kontrol –A sampel )/A kontrol ] x 100

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis  total  fenolik  pada  penelitian  ini dilakukan dengan menggunakan metode Follin- Ciocalteu  yang  diukur  berdasarkan  standar asam  galat  (GAE).  Standar  asam  galat  yang digunakan yaitu 10, 30, 40, 50, dan 80 ppm dan diukur  ada  panjang  gelombang  765  nm. Absorbansi  yang  didapat  diplot  terhadap konsentrasi  menghasilkan  persamaan  garis lurus pada gambar 1. Persamaan garis dari plot ini yaitu y=0,018x + 0,2446 dengan R 2 = 0,9924.
Pengukuran
ekstrak aseton daun Tristaniopsis meguensis didapatkan absorbansi
0,632.  Jika  diplotkan  dalam  persamaan  garis lurus tersebut didapatkan konsentrasi sebesar 21,522 ppm. Sehingga konsentrasi total fenolik dari  ekstrak  daun Tristaniopsis  merguensis sebesar 215,22 mg GAE/g ekstrak. Nilai ini jauh lebih  besar  dibandingkan  kandungan  fenolik pada ekstrak bunga rosela ( Hibiscus sabdariffa L.) 21,2 g GAE/g ekstrak, maupun pada ekstrak Citruss  reticulate L.)  28,  mg  GAE/g  ekstrak (Safdar et al., 2017) (Riza & Susanti, 2013).
Aktivitas Antioksidan Aktivitas  antioksidan  pada  penlitian  ini menggunakan metode DPPH dengan konsentrasi ekstrak 10, 20, 30, dan 40 µg/mL. Ekstrak  diukur  pada  panjang  gelombang maksimum 516 nm (gambar 2).
Pada panjang gelombang tersebut dilakukan pengkuran  absrobansi  terhadap  ekstrak
Tristaniopsis  merguensis .  Data  pengkuran aktivitas antioksidan disajikan pada tabel 1. Tabel 1. pengkuran aktivitas antioksidan Konsentrasi Ekstrak (µg/mL) Absorbansi % Inhibisi Persamaan Linier IC 50 Ket. Blanko Sampel Uji (µg/mL) 10 0.921 0,673 26,927 y = 1,8588x + 9,5005 R² = 0,9963 22,1454  Kuat 20 0,482 47,666 30 0,306 66,775 40 0,161 82,519
Menurut  Suratmo  (2009)  dalam  Putri  dkk. (2015)    kapasitas  antioksidan  dengan  metode DPPH  dikelompokkan  berdasarkan  nilai  IC 50 . Aktivitas antioksidan dikategorikan sangat kuat jika nilai IC 50 < 50 µg/mL, kuat mempunyai nilai IC 50 50-100  µg/mL,  sedang  nilai  IC 50 100-250 µg/mL, dan lemah  250-500  µg/mL. Nilai IC 50 ekstrak  aseton Tristaniopsis merguensis adalah 22,1454  µg/mL,  maka  ekstrak  tersebut memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat (Enggiwanto et al., 2018)
Aktivitas  antioksidan  ekstrak  aseton Tristaniopsis  merguensis ini  lebih  lemah  jika dibandingan dengan ekstrak etanolnya dengan nilai  IC 50 18,2772  µg/mL.  Tetapi  jika dibandingkan  dengan  ekstrak  tanaman  lain, aktivitas  antioksidan  ekstrak  aseton  daun Tristaniopsis  merguensis jauh  jauh  lebih  kuat dibandingkan  ekstrak  tanaman  lain  seperti
ekstrak  batang  pakis  ( Alsophila  glauca J.  Sm) dan  ekstrak  etil  asetat Cratoxylum  glaucum dengan  nilai  IC 50 178,4  µg/mL  dan  32,212 µg/mL (Wahdaningsih, Setyowati, & Wahyuono, 2011) (Mahardika & Roanisca, 2018).
Sangat  kuatnya  aktivitas  antioksidan  ini tidak  terlepas  dari  tingginya  kandungan  total fenolik  dari  ekstrak  aseton Tristaniopsis merguensis. Senyawa golongan fenolik ini yang berpengaruh pada tingginya aktivitas antioksidan  ekstrak  aseton Tristaniopsis merguensis.

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan didapatkan rendemen ekstrak 9,34%.
Kandungan  total  fenolik  ekstrak  aseton  daun Tristaniopsis  merguensis sebesar  215,22  mg GAE/g  ekstrak  kering.  Sedangkan  kapasitas
antioksidan  ekstrak  aseton  memiliki  nilai  IC 50 22,1454  µg/mL.  Sangat  kuatnya  aktivitas antioksidan  ini  tidak  terlepas  dari  tingginya kandungan  total  fenolik  dari  ekstrak  aseton Tristaniopsis merguensis.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih  kepada Kementrian  Riset,  Teknologi,  dan  Pendidikan Tinggi  melalui  hibah  Penelitian  Dosen  Pemula (PDP)  sesuai  dengan  Surat  Keputusan  Nomor 7/E/KPT/2019    dan  Perjanjian  /  Kontrak Nomor 052/SP2H/LT/DRPM/2019
dan 187.O/UN.50.3.1/PP/2019.

## REFERENSI
Enggiwanto,  S.,  Istiqomah,  F.,  Daniati,  K., Roanisca,  O.,  &  Mahardika,  R.  G.  (2018).
Ekstraksi  Daun  Pelawan  ( Tristaniopsis merguensis ) Sebagai Antioksidan Menggunakan Microwave Assisted Extraction  (  MAE  ). Indonesian  Journal  of
Pure and Applied Chemistry , 1 (2), 50–55. Hanani,  E.,  Mun,  A.,  &  Sekarini,  R.  (2005). Identifikasi  Senyawa  Antioksidan  Dari Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian , II (3), 127–133.
Mahardika,  R.  G.,  &  Roanisca,  O.  (2018).
Antioxidant Activity And Phytochemical Of Extract Ethyl Acetat Pucuk Idat ( Cratoxylum  glaucum ). Indo.  J.  Chem.  Res ,
5 (2), 481–486. Mokgope,  L.  B.  2006.  Cowpea  Seed  Coats  and
Their Extracts : Phenolic Composition and Use as Antioxidants in Sunflower Oil. South Africa: University of Pretoria
Putri,  A.A.S.,  Hidajati,  N.  (2015).  Uji  aktivitas antioksidan  senyawa  fenolik  ekstrak metanol kulit batang tumbuhan nyiri batu ( Xylocarpus  moluccensisi ). UNESA  Journal of Chemistry , 4. 1-6. Riza, A., & Susanti, H. (2013). penetapan kadar fenolik  total  ekstrak  metanol  kelopak bunga  rosella  merah  ( Hibiscus  sabdariffa Linn)  dengan  variasi  tempat  tumbuh secara  spektrofotometri. Jurnal  Ilmiah Kefarmasian , 33 (3), 324–333.
Safdar, M. N., Kausar, T., Jabbar, S., Mumtaz, A., Ahad,  K.,  &  Saddozai,  A.  A.  (2017).
Extraction and quantification of polyphenols from kinnow ( Citrus reticulate L.)  peel  using  ultrasound  and
maceration techniques. Journal of Food and
Drug Analysis , 25 (3), 488–500. https://doi.org/10.1016/j.jfda.2016.07.01 0 Wahdaningsih, S., Setyowati, E. P., & Wahyuono,
S.  (2011).  Aktivitas  Penangkap  Radikal Bebas Dari Batang Pakis ( Alsophila glauca J.Sm  ). Majalah  Obat  Tradisional , 16 (3), 156–160.