PENGARUH PEMBERIAN  KOLKISIN TERHADAP JUMLAH KROMOSOM BAWANG PUTIH ( Allium sativum ) LOKAL KULTIVAR DOULU
Tumiur Gultom
1) Tenaga Pengajar Program Studi Biologi, Jurusan Biologi, FMIPA Universitas Negeri Medan. Kampus: Jl. Willem Iskandar Pasar V Medan Estate 20221. tumiurgultom@unimed.ac.id

## ABSTRAK
Bawang  putih  lokal  kultivar  Doulu    berasal  dari    Desa  Doulu  Kabupaten  Karo  Sumatera  Utara. Bawang  putih    lokal  Doulu  dikenal  luas  oleh  masyarakat  di  Sumatera  Utara  karena  rasa    yang  pedas  dan aromanya yang tajam. Jumlah kromosom bawang putih lokal ini sebanyak 16 =2n. Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui  pengaruh  kolkisin  terhadap  jumlah  kromosom  bawang  putih  ( Allium  sativum )  pada konsentrasi dan lama waktu perendaman yang berbeda. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode  eksperimen  dengan  menggunakan  metode  squash.  Rancangan  percobaan  yang  digunakan  adalah percobaan  faktorial  dengan  dua  faktor  perlakuan.  Faktor  pertama  adalah  dosis  pemberian  larutan konsentrasi kolkisin (D) dengan  3 taraf yaitu : 0,1% (D1), 0,2% (D2), dan 0,3% (D3). Faktor kedua adalah lama waktu perendaman  (T) dengan 4 taraf perlakuan  yaitu 6 jam (T1), 12 jam (T2), 18 jam (T3), dan 24 jam (T4). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kromosom bertambah secara euploid dan aneuploidi yang menyebabkan  terbentuknya  sel-sel  poliploidi.  Tipe-tipe  poliploidi  yang  terbentuk  yang  ditemukan  yaitu euploidi yang tetraploid   (4n) pada perlakuan D1T2, D2T3 dan D3T4. Kromosom yang bertambah secara aneuploid yaitu  2n + 4 pada perlakuan D2T2, 2n + 6 pada perlakuan D1T1; 3n + 6 pada perlakuan D1T3 dan D1T4 ; 4n + 1 pada perlakuan D2T1 dan T3D3; 4n +8 pada perlakuan D3T2;  5n +8 pada perlakuan D3T1 dan 6n +4 pada perlakuan D2T4.
Kata kunci: Kolkisin, metode squash, poliploid, aneuploid , euploidi.

## EFFECT OF COLCHICINE ON CHROMOSOME NUMBER OF GARLIC (Allium sativum) LOCAL CULTIVARS DOULU

## Tumiur Gultom

## ABSTRACT
Local garlic cultivars Doulu Doulu from the village of Karo district of North Sumatra. Local garlic Doulu  known  by  the  people  in  North  Sumatra  because  of  spicy  flavor  and  aroma  sharp.  The  number  of chromosomes local garlic is as much as 16 = 2n. This study aims to determine the effect of colchicine on the number of chromosomes of garlic (Allium sativum) in the concentration and length of time of immersion is different. The method used in this study is an experimental method using squash. The experimental design used  was  a  factorial  trial  with  two  treatment  factors.  The  first  factor  is  the  concentration  of  a  solution administered  dose  colchicine  (D)  with  three  levels  ie:  0.1%  (D1),  0.2%  (D2),  and  0.3%  (D3).  The  second factor is the length of immersion time (T) with 4 levels are 6-hour treatment (T1), 12 hours (T2), 18 hours (T3), and 24 hours (T4). The results showed that chromosomal aneuploidy increases euploid and that cause cells to polyploidy. Types of polyploidy formed which found that euploidi the tetraploid  (4n) at treatment D1T2, D2T3 and D3T4. Increases aneuploid chromosome is 2n + 4 on treatment D2T2, 2n + 6 on  treatment D1T1; 3n + 6 on the treatment D1T3 and D1T4; 4n + 1 on the treatment D2T1and T3D3; 4n +8 on treatment D3T2; 5n +8 in treatment D3T1 and 6n +4 on D2T4 treatment.
Keywords: Colchicine, squash methods, polyploid, aneuploid, euploidi
Pendahuluan Penduduk Indonesia yang terus meningkat menyebabkan  peningkatan  kebutuhan  akan
makanan  dan  minuman.  Indonesia  sebagai  salah satu  negara  yang  memiliki  jumlah  penduduk  yang banyak,  menjadi  tujuan  perdagangan  terutama
untuk  produk  pertanian.  Perkembangan  impor produk pertanian termasuk produk hortikultura ke Indonesia  terus  meningkat.  Bawang  putih  salah satu yang mempunyai kecenderungan peningkatan volume  impor  yang  semakin  meningkat  dan merupakan
komoditas
yang mempunyai permintaan impor yang paling tinggi dibandingkan dengan  produk  pertanian  lainnya.  Bawang  putih merupakan  tanaman  rempah  yang  bayak digunakan  oleh  masyarakat  Indonesia  secara missal.  Peningkatan  permintaan  bawang  putih impor  dikarenakan  meningkatnya  konsumsi  akan bawang putih (Jumini, 2008).
Dalam rangka
pengembangan produktivitas bawang putih lokal maka diperlukan beberapa  usaha  perbaikan  terhadap  karakter bawang putih terutama karakter yang mendukung produktivitas  bawang  putih  local.  Perbaikan karakter  bawang  putih  lokal  untuk  meningkatkan kualitas  diutamakan    pada  ukuran  umbi  tanaman (Anonim, 2013).
Peningkatkan produktivitas dapat ditingkatkan  dengan  mutasi.  Mutasi  dapat dibedakan  atas  mutasi  sitologis  yakni  perubahan bentuk,  ukuran,  ataupun  jumlah  kromosom,  serta mutasi  gen  yang  secara  sitologis  tidak  tampak namun memengaruhi penampakan fenotif (Crowder,  1986).    Mutasi  buatan  (mutasi  induksi) terjadi  akibat  manipulasi  manusia  dengan  bahan kimia,  fisika    maupun  biologi.  Mutasi  fisika  dapat ditingkatkan dengan menggunakan sinar X, mutasi kimia yang bersifat poliploidi dapat dihasilkan dari induksi  kolkisin.  Kolkisin  dapat  menghalangi pembentukan gelendong pembelahan sel  sehingga pasangan  kromatid  pada  fase  metaphase  proses pembelahan  sel  tidak  dapat  memisahkan  diri  dan akhirnya  dihasilkan  poliploidi.  Induksi  poliploidi mempunyai  ciri-ciri  berbuah  besar,  tidak  berbiji, dan produktivitas tinggi (Anonim, 2011).
Kolkisin  (C 22 H 25 O 6 N)  merupakan  suatu alkaloid  berwarna  putih  yang  diperoleh  dari tanaman Cholchichun autumnale L (Famili liliaceae)
(Suminah, et  al., 2002),  sedangkan  menurut Haryanti, et  al., (2005)  Kolkisin  (C 22 H 25 O 6 N) merupakan alkaloid yang mempunyai
makrotubula,  sehingga  salah  satu  efeknya  adalah menyebabkan  penggandaan  jumlah  kromosom tanaman (terbentuk tanaman poliploidi).
Penelitian ini dimaksudkan untuk mengembangkan  potensi  poliploidi  bawang  putih local ( Allium sativum ) kultivar Doulu. Pengembangan bawang putih ini untuk meningkatkan  jumlah  kebutuhan  masyarakat terutaman pada petani bawang.

## Bahan dan Metode
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Biologi  Universitas  Negeri  Medan  Jln.  Willem Iskandar  Psr.  V  Medan  Estate,  pada  bulan  Mei    - Agustus 2015.
Bahan yang dipakai pada penelitan ini   antara lain ujung  akar  bawang  putih  ( Allium  sativum) yang diperoleh  dari kawasan Berastagi dan sekitarnya. Bahan  lain  yang  digunakan  adalah  kolkisin,  asam asetat  45%,  asam  klorida  1N,  asetokarmin  2%, gliserin, akuades, dan minyak immerse. Sementara alat  yang  digunakan,  botol  flakton,  gelas  penutup, kertas  aluminium,  kertas  label,  kertas  tisu,  kapas, pinset,  silet  /  scalpel,  kuas,  jarum  preparat,  pipet dan penggaris, mikroskop cahaya, dan kamera.
Menggunakan  rancangan  acak  kelompok dengan  dua  faktor.  Faktor  pertama  adalah konsentrasi kolkisin  (D)  dengan 3 taraf perlakuan yaitu 0,1% (D1), 0,2% (D2), dan 0,3% (D3). Faktor yang  kedua  adalah  lama  waktu  perendaman  (T) dengan 4 taraf perlakuan yaitu 6 jam (T1), 12 jam (T3),  18  jam  (T3)  dan  24  jam  (T4).  Kombinasi perlakuan  yang  diperoleh  sebanyak  12  kombinasi perlakuan yaitu : D1T1  ,  D1T2,  D1T3,  D1T4;
D2T1, D2T2, D2T3, D2T4; D3T1    D3T2, D3T3, D3T4
Pemilihan Bibit Bibit dipilih  dari umbi yang telah tua dan disinari matahari sekitar 4 hari untuk mematahkan dormansi.
Penanaman Sediaan Akar Allium  sativum diperoleh  dengan merendam umbi sedalam kurang lebih seperempat atau  meletakkan  umbi  diatas  kapas  basah.  Air harus  diganti  setiap  hari  untuk  mencegah tumbuhnya  bakteri  dan  jamur.  Akar  akan  muncul setelah 2-3 hari, tergantung umur lapis (Radford et al ., 1974). Pembuatan Konsentrasi Kolkisin Adapun  cara  pembuatan    konsentrasi kolkisin  0,1%,  0,2%  dan  0,3%  adalah  sebagai berikut:
1. Kolkisin  0,1%.  Kolkisin  0,1  gr  dilarutkan dengan  5  ml  etanol,  lalu  ditambah  95  ml akuades  dan  diaduk  hingga  larut.  Disimpan dalam  botol  tertutup,  berwarna  gelap,  dalam lemari pendingin bersuhu 5 0 C.
2. Kokisin 0,2%.  Kolkisin 2 gr dilarutkan dengan 5 ml etanol, lalu ditambah  95 ml akuades dan diaduk  hingga  larut.  Disimpan  dalam  botol tertutup,  berwarna  gelap,  dalam  lemari pendingin bersuhu 5 0 C.
3. Kolkisin  0,3%.  Kolkisin  0,3  gr  dilarutkan dengan  5  ml  etanol,  lalu  ditambah  95  ml akuades  dan  diaduk  hingga  larut.  Disimpan dalam  botol  tertutup,  berwarna  gelap,  dalam lemari pendingin bersuhu 5 0 C.

## Pembuatan Kemikalia
Adapun  cara  pembuatan  kemikalia  sebagai bahan  tambahan  dalam  melakukan  penelitian  ini adalah sebagai berikut:
1. Asam  asetat  glasial  45  %.  Asam  asetat  glacial 45 ml dan 55 ml akuades diaduk hingga  larut, lalu  disimpan dalam botol tertutup pada suhu kamar.
2. HCl 1N. HCl pekat dalam 1 bagian ditambah 11 bagian  akuades,  digojok  hingga  larut  dan disimpan  dalam  botol  tertutup  pada  suhu kamar (Soesanti dan Setyawan, 2000).
3. Asetoorsein 2%. Asam asetat. Sebanyak 45 ml asam asetat glacial dipanaskan perlahan-lahan hingga hamper mendidih (90 0 -100 0 C) ditambahkan  5  gr  karmil  sedikit  demi  sedikit lalu didihkan selama ± 10 menit sambil diaduk. Dinginkan pada suhu kamar lalu ditambahkan 55  ml  akuades  dan  dikocok  hingga  larut. Disaring  dan  disimpan  pada  suhu  kamar dalam  botol  berwarna  gelap.  Setiap  3  hari penyimpanan  biasanya  terdapat  endapan, untuk  itu  sebelum  digunakan  sebaiknya dikocok  dan  disaring  lagi  (Wheat  Genetict Center, 1997).

## Pembuatan Preparat
Preparat akan dibuat dengan metode squash  semi permanen ( Darnaedi dkk ., 1991) sebagai berikut:
1. Pra-perlakuan. Ujung akar dipotong 23 sampai 5 ml, dimasukkan ke dalam botol flakon berisi 2-3  mm  kolkisin  yang  berbeda  konsentrasi. Lalu  dibungkus  ketras  aluminium  foil  dan disimpan dalam lemari es selama 2-4 jam.
2. Pencucian. Kolkisin dibuang dan dicuci dengan akuades sebanyak 3 kali.
3. Fiksasi.  Akuades  dibuang,  diganti  asam  asetat glacial  45%  dan  disimpan  dalam  lemari  es bersuhu 5 0 C selama 15 menit.
4. Pencucian.  Asam  asetat  glacial  45%  dibuang dan dicuci akuades sebanyak 3 kali.
5. Hidrolisis.  Akuades  dibuang,  diganti  HCl  1N dan disimpan dalam oven bersuhu 60 o C selama ± 2 menit, tergantung besarnya bahan.
6. Pencucian.  HCl  1N  dibuang  dan  dicuci  dengan akuades sebanyak 3 kali.
7. Pewarnaan. Akuades dibuang, diganti asetoorsein  2%  selama  1-3  jam,  tergantung ukuran  badan  dan  kesegaran  pewarna. Dilakukan pada suhu kamar.
8. Squashing.  Diambil  1-2  buah  ujung  akar dengan kuas, diletakkan diatas gelas benda dan dipotong  hingga  tersisa  1-2  mm  dari  ujung. Ditetesi  gliserin,  ditutup  gelas  penutup  dan diketuk-ketuk, hingga hancur merata
9. Penyegelan.  Kelebihan  gliserin  ditepi  gelas penutup  dibersihkan  dengan  tisu,  disegel dengan cat kuku bening.
10. Pengamatan.  Dilakukan  dengan  mikroskop cahaya  untuk  memperbaiki  daya  resolusi mikrofotografi.  Hasil  pemotretan  diperbesar sehingga mudah diamati.

## Parameter pengamatan
Parameter  yang  diamati  adalah  jumlah kromosom yang dihitung pada saat pembelahan sel tahap metafase.
Hasil dan Pembahasan Pengamatan  pada  mikroskop  dilakukan pada  perbesaran  100x,  400x  dan  1000x  untuk mengamati  jumlah  kromosom.  Perbesaran  1000x ditampilkan pada Gambar 1.
Kontrol                             D1T1                     D1T2                           D1T3                  D1T4
D2T1                               D2T2                                 D2T3                                D2T4
D3T1                                  D3T2                            D3T3                             D3T4
Gambar 1. Hasil Pengamatan kromosom bawang putih lokal kultivar Doulu  di mikroskop  pada perbesaran 1000x
Dari  hasil  penelitian  pengaruh  pemberian konsentrasi  kolkisin  dan  lama  perendaman terhadap  jumlah  kromosom  bawang  putih  ( Allium
sativum )  lokal  kutivar  Doulu  yang  berbeda memberikan  pengaruh  yang  berbeda    dalam pertambahan jumlah kromosom (Tabel 1)
Tabel 1.  Jumlah kromosom bawang putih lokal (Allium sativum) kultivar Doulu  pada beberapa tingkat konsentrasi kolkisin dengan lama waktu perendaman yang berbeda. Kombinasi Perlakuan Jumlah kromosom Variasi jumlah Kromosom Konsentrasi 0,1% perendaman 6 jam  (D1T1) 22 2n + 6 Konsentrasi 0,1% perendaman 12 jam (D1T2) 32 4n Konsentrasi 0,1% perendaman 18 jam (D1T3) 30 3n + 6 Konsentrasi 0,1% perendaman 24 jam (D1T4) 30 3n + 6 Konsentrasi 0,2% perendaman 6 jam (D2T1) 33 4n + 1 Konsentrasi 0,2% perendaman 12 jam (D2T2) 20 2n + 4 Konsentrasi 0,2% perendaman 18 jam (D2T3) 32 4n Konsentrasi 0,2% perendaman 24 jam (D2T4) 54 6n + 4 Konsentrasi 0,3% perendaman 6 jam (D3T1) 48 5n + 8 Konsentrasi 0,3% perendaman 12 jam (D3T2) 40 4n + 8 Konsentrasi 0,3% perendaman 18 jam (D3T3) 33 4n + 1 Konsentrasi 0,3% perendaman 24 jam (D3T4) 32 4n Hasil penelitian menunjukkan bahwa perendaman bawang putih lokal ( Allium sativum ) dalam kolkisin dengan
berbagai konsentrasi memberikan pengaruh  yang  sangat  signifikan  terhadap penambahan  jumlah  kromosom  bawang  putih. Jumlah  kromosom  dasar  tanaman  bawang  putih normal  adalah  (x=8),  sehingga  2n  =  16. Berdasarkan  uji  sitologi,  induksi  kolkisin mengakibatkan  penambahan  jumlah    kromosom normal menjadi tetraploid (2n=4x=32)
Fase  pembelahan yang paling bagus untuk mengamati kromosom adalah fase metafase. Hal ini dikarenakan pada tahap metafase kromosom yang menjadi  kromatid  bergerak  menuju  bidang equator.    Selain  itu,  kromosom  pada  tahap  ini terlihat sejajar ditengah-tengah equator. Tahap ini dapat dilihat pada Gambar 1.
Penggandaan jumlah kromosom terbanyak terjadi  pada  pemberian  perlakuan  kolkisin  0,2  % pada  perendaman  24  jam  (D2T4).  Hal  ini  dapat
diasumsikan bahwa senyawa kolkisin efektif dalam menghambat  proses  pembelahan  sel  ( antimitosis ) sehingga  terjadi  peningkatan  jumlah  kromosom (Addink, 2002).
Senyawa  kolkisin  dapat  menghambat terbentuknya  benang spindel pada  saat  mitosis, sehingga kromosom tetap berserakan di dalam sel. Pemberian  konsentrasi  kolkisin  yang  tinggi  dan perendaman  dalam  jangka  waktu  yang  lama menyebabkan  struktur  kromosom  dalam  sel mengalami  penggumpalan  dan  pengkerutan. Secara  umum  pemberian  senyawa  kolkisin  lebih efektif  dibandingkan  mutagen  kimia  lain  seperti ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  dalam  membuat tanaman  poliploid  .  Hal  tersebut  mungkin disebabkan  karena  kolkisin  murni  (pure  analytic) yang sudah di purifikasi . Sedangkan  kandungan  vinkristin  dan vinblastin  pada  tapak  dara  masih  tercampur dengan  senyawa  lain  dalam  ekstrak  etanolik tersebut  (Indraningsih,  2010).    Senyawa  kolkisin dapat  menginduksi  mutasi  secara  acak,  sehingga memberikan efek yang tidak seragam pada masing- masing  sel  ditiap  individu.  Pada  beberapaa perlakuan  kolkisin  masih  ditemukan  individu  sel yang  tetap  diplod  (2n).  Pada  penelitian  ini  sel-sel yang  mengalami  penambahan  jumlah  kromosom atau  poliploid  hanya  ditemukan  tipe  triploid  (3n). Tipe  pentaploid  (5n),  heksaploid  (6n)  sampai nonaploid  (9n)  secara  hipotesis  masih  sangat mungkin terbentuk. Dalam penelitian ini kemungkinan  juga  terjadi  peristiwa  delesi  dan duplikasi  pada  kromosom.  Duplikasi  kromosom menyebabkan  penambahan  materi  genetik  pada kromosom  sedangkan  delesi  mengakibatkan berkurangnya jumlah kromosom karena hilangnya segmen-  segmen  kromosom.  Adanya  delesi  dan duplikasi  pada  kromosom  dapat  dibuktikan  dari beberapa  perlakuan  kolkisin  yang  menghasilkan sel  dengan  jumlah  kromosom  yang  tidak  tepat sebagai  kelipatan  jumlah  dasarnya  (haploid). Penelitian  pada  kesuna  Bali  duplikasi  kromosom ditemukan    pada  perlakuan  kolkisin  20%  yang menyebabkan  tanaman  kesuna  bali  memiliki jumlah  kromosom  triploid  (2n=3x=24)  pada penelitian  ini  ditemukan  kromosom  tetraploid pada  perlakuan  0,2%.  Teori  ini  didukung  oleh penelitian  Suminah et  al .  (2002)  menyatakan bahwa pemberian kolkisin 1% mampu memberikan  variasi  bentuk,  ukuran  dan  jumlah kromosom pada bawang merah ( Allium ascalonicum L).  Pada  level  ploidi  monoploid  (1n) hingga  oktaploid  (8n),  kromosom  yang  paling sering dijumpai berbentuk metasentris, sedangkan
pada  individu  nonaploid  (9n),  kromosom  yang paling sering dijumpai berbentuk submetasentris.
Induksi  kolkisin  merupakan  mekanisme yang  sering  digunakan  untuk    mendorong terjadinya  mutasi,  sehingga  terjadi  perubahan bentuk, ukuran dan jumlah kromosom (pengurangan dan penambahan). Dalam penelitian ini,  perubahan  yang  terjadi  ditandai  secara  visual dengan membesarnya ujung akar. Kolkisin dengan kadar 1% merupakan ambang batas tertinggi yang diperkenankan oleh Eigsti dan Dustin (1957) untuk menginduksi  terjadinya  mutasi  kolkisin  dengan konsentrasi  yang  demikian  tinggi  ini  diberikan dengan harapan daya kerjanya maksimal.
Menurut Eigsti dan Dustin (1957) kolkisin dapat  bekerja  secara  efektif  pada  konsentrasi 0,001 – 1 %, dengan lama perendaman 6 – 72 jam. Namun pada dasarnya setiap tumbuhan mempunyai respon yang berbeda-beda, tergantung jenis  dan  organ  yang  diberi  perlakuan.  Menurut Setyawan  (2001)  dalam  (Jami,  2010)  konsentrasi kolkisin 1% belum menyebabkan
keracunan/kematian  akar  pada  kebanyakan tanaman  bawang  budidaya  (genus alium), dan belum  menggumpalkan  materi  DNA  kromosom, sehingga  dapat  digunakan  untuk  menelusuri adanya  mutasi  dengan  hasil  memuaskan. Berdasarkan  jumlah kromosom  tanaman bawang putih  lokal,  senyawa  kolkisin  menunjukkan perubahan  yang  bervariasi  pada  setiap  perlakuan. Pada  tanaman  bawang  putih  lokal  kesuna  Bali terjadi perbedaan karakter vegetatif yang diinduksi kolkisin.  Bervariasinya  karakter  vegetatif  pada tanaman kesuna  Bali disebabkan karena pengaruh mutagen  yang  bersifat  acak  (Kahan et  al .,  2009). Pada  penelitian  ini  tidak  sampai  mengamati pertumbuhan di lapangan .
Mutagen  kolkisin  dapat  mengakibatkan mutasi  sitogenik  pada  inti  sel  ditandai  dengan perubahan  jumlah  kromosom  ataupun  perubahan struktur  pada  kromosom.  Perubahan  jumlah kromosom  pada  tanaman  menyebabkan  tanaman bersifat  poliploid.  Tanaman  poliploid  pada umumnya  memiliki  sifat  dan  karakter  yang  lebih baik  dibandingkan  tanaman  diploidnya  (Kristanto dan  Kamo,  2001).  Konsentrasi  kolkisin  0,1% dengan  lama  perendaman  12  jam,  0,2%  lama perendaman  18  jam  dan  0,3  %    kolkisin perendaman  24  jam  pada  penelitian  ini  berhasil menghasilkan  tanaman  bawang  putih  lokal  yang poliploidi yaitu  tetraploid  (2n=4x=32).
Sifat Morfometri Dalam  penelitian  ini  didapatkan  ukuran kromosom  bawang  putih  ( Allium  sativuim )  relatif pendek  dengan  posisi  yang  tumpang  tindih  pada kolkisin  0,3  persen  sedangkan  pada  kolkisin  0,1% dan  0,2%    belum  begitu  terlihat  pendek.  Posisi demikian  tetap  terjadi  meskipun  pada  saat pembelahan  mitosis  dinding  inti  hilang  dan ruangan  sebar  kromosom  dalam  sel  meluas. Penumpukan ini mempersulit pengamatan, sehingga  bentuk,  ukuran  dan  jumlah  kromosom ditentukan  secara  garis  besar,  dimana  bentuk  dan ukuran  kromosom  hanya  dihitung  sebagai  modus, didasarkan  pada  kromosom/sel  dengan  frekuensi tertinggi,  sedangkan  jumlah  kromosom  dihitung sebagai pendekatan terhadap jumlah dasarnya (x). Penelitian  ini  masih  merupakan  penelitian  awal untuk  menelaah  sifat  morfometri  dan  poliploidi bawang  putih  lokal  Doulu    akibat  pemberian kolkisin pada konsentrasi  0,1%, 0,2% dan  0,3%.

## Tingkat Poliploidi
Pengaruh  kolkisin  dalam  menginduksi mutasi bersifat acak , sehingga dalam penelitian ini dapat  ditemukan  individu  sel  yang  tetap  bersifat diploid  (2n),  sebagaimana  umumnya  sel  normal. Serta  sel-sel  yang  mengalami  penguranga  jumlah kromosom,  yakni  bersifat  monoploid  /  haploid (1n)  dan  sel-sel  mengalami  penambahan  jumlah kromosom atau poliploid yang meliputi: tetraploid (4n),  pentaploid  (5n),  heksaploid  (6n),  septaploid (7n),  oktaploid  (8n)  dan  nonaploid(9n).  Tipe poliploidi  yang  ditemukan    pada  penelitian  ini adalah tetraploid (4n)
Dalam  penelitian  ini  ditemukan  adanya sel-sel  normal  yang  tidak  mengalami  perubahan jumlah  kromosom,  bersifat  diploid  (2n)  serta berbagai  perubahan  jumlah  kromosom  secara aneuploid  yang  melahirkan  individu  poliploid  dan perubahan  jumlah  kromosom  secara  aneuploid yang  menyebabkan  jumlah  kromosom  berkurang atau  sedikit  berbeda  dengan  jumlah  kelipatan dasarnya. Salah satu bentuk aberasi kromoom yang ditemukan adalah berkurangnya jumlah kromosom karena  hilangnya  segmen-segmen  kromosom (delesi). Hal ini terlihat dengaan adanya kromosom aneuploid  (haploid)  yang  merupakan  delesi  dari kromosom  normal  diploid  (2n).  selain  itu ditemukan  pula  adanya  pertambahan  materi genetik  pada  suatu  kromosom  (duplikasi). Banyaknya sel dengan jumlah kromosom poliploid yang  tidak  tepat  sebagai  kelipatan  jumlah dasarnya,  kemungkinan  merupakan  akibat  delesi dan dupikasi kromosom.
Dalam  penelitian  ini  ditemukan  pula penambahan  jumlah  kromosom  secara  euploid yang menyebabkan terbentuknya sel-sel poliploid. Berbeda  dengan  prosedur  trangsgenik  yang  lebih terarah  indksi  bahan  kimia  atau  radiasi  bersifat acak dan tidak teratur, sehingga memberikan efek yang tidak seragam pada masing-masing sel dalam satu  individu.  Tipe-tipe  poliploid  yang  ditemukan adalah  diploid  (2n),  triploid  (3n),  tetraploid  (4), pentaploid  (5n),dan  heksaploid  (6n).  Tipe septaploid (7n), oktaploid (8n) dan nona ploid (9n) tidak ada ditemukan.
Perubahan jumlah kromoom ini disebabkan pemberian kolkisin dengan konsentrasi yang kritis dapat mencegah terbentuknya  benang-benag  mikrotubul  dari gelendong  inti  (benang-benang  spinde)  sehingga pemisahan kromosom yang menandai perpindahan dari tahap metafase ke anaphase tidak berlangsung dan  menyebabkan  penggandaan  kromosom  tanpa penggandaan  dinding  sel.  Oleh  karena  tidak terbentuk  benang  spindel  maka  kromosom  tetap dalam  sitoplasma.  Namun  kromosom  tidak memisah  dari  sentromernya  dan  dimulai  tahap  c- anafase  yang  dilanjutkan  dengan  pembentukan dinding  inti.  Sehingga  sel  mengandung  jumlah kromosom  berlipat  2.  Apabila  konsentrasi  kritis dibiarkan  terus  berlanjut  maka  pertambahan genom akan mengikuti deret ukur (Suryo, 2008).
Dalam  penelitian  ini  perhitungan  jumlah kromosom dilakukan secara pembulatan, mengingat  mutasi  sering  terjadi  secara  euploid, dimana  perubahan  jumlah  kromosom  sering  kali merupakan kelipatan jumlah  kromosom dasarnya. Apabila  jumlah  kromosom  yang  terhitung  berada diatas  atau  bawah  kelipatan  jumlah  kromosom dasar, maka dapat diduga telah  terjadi delesi atau duplikasi,  namun  hal  ini  juga  dapat  merupakan akibat kesalahan teknik penghitungan, oleh karena itu  dipilih  pembulatan.  Keanekaragaman  genetik yang  disebabkan  oleh  mutasi    sumber  plasma nutfah  untuk  program  pemuliaan  tanaman. Keanekaragaman ini memungkinkan untuk mengetahui  bayak  karakter  gen  sehingga  dapat dijadikan  sebagai  salah  satu  penemuan  kultivar unggul (Anggarwulan et al ., 1999; Suryo, 2008). Dalam  dunia  pertanian  peningkatan keanekaragaman genetik akibat mutasi, rekombinasi  serta  separasi  dan  segregasi  selama meiosi  merupakan  sumber  plasma  nutfah  untuk pemuliaan  tanaman.  Keanekaragaman  ini  dapat terjadi  secara  spontan  dengan  laju  yang  rendah atau dapat diinduksi oleh pengaruh kimia atau fisik dengan  mematahkan  kromosom  atau  mengubah
perilakuannya  selama  pembelahan  meiosis  atau mitosis (Crowder, 1986).
Keanekaragaman ini memungkinkan untuk  mengetahui  banyak  karakter  gen,  sehingga aberasi  dan  poliploidi  mempunyai  nilai  tinggi dalam  penemuan  kultivar  unggul.  Tanaman poliploid  biasanya  lebih  kuat  dari  pada  tanaman diploid, ukuran daun, batang, bunga, buah, dan inti sel  lebih  besar,  kandungan  vitamin  dan  protein bertambah,  tekanan  osmotic  berkurang,  serta pembelahan  sel  melambat,  sehingga  umur vegetatip lebih, (Suryo, 2008).

## Kesimpulan
Perbandingan  konsentrasi  dan  lama perendaman  yang  berbeda  memberikan  ploidi yang  berbeda  dalam  pertambahan  jumlah kromosom  bawang  putih  (Allium  sativum)  secara euploid  dan  uneuploidi.  Ploidi  yang  euploidi menghasilkan  2n=4x=32  adalah  pada  konsentrasi 0,1%  lama  perendaman  12  jam  (D1T2), konsentrasi  0,2%  lama  perendaman  18  jam  dan konsentrasi  0,3%  lama  perendaman  24  jam (D3T4).

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  kepada    Mika  Anita  Br Perangin-angin yang telah membantu pelaksanaan penelitian   di Laboratorium.

## Daftar Pustaka
Addink,  W.,  (2002).  Colchicine:  use  in  plant
breeding  work  to  induce  mutation (polyploidy). from: Opened at:
18.09.2014.08.45.
Aggarwulan,  E.,  N.  Etikawati,  dan  A.D.  Setyawan., (1999).  Karyotipe  Kromosom  pada Tanaman  Bawang  Budidaya  (Genus Allium; Familia: Amaryllidaceae). BioSMART 1 (2): 13-19. Anonim, (2011), http:www.anneahira.com/bawang- putih.html (diakses februari 2015). Anonim, (2013), http://obat-tradisional- mengobati/2013/03/klasifikasi- tumbuhan-bawng-putih.html (diakses Februari 2015) Cahyono,B.,  (1996).  Budidaya bawang  putih dataran  rendah  (usaha  mengembangkan, memasarkan  dan  analisis  produksi).  Cv Aneka, Solo.
Crowder, L, V., (1986). Genetika Tumbuhan. Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
Eigsti dan Dustin, (1957). Colchicine in Agriculture, Medicine,  Biology  and  Chemistry. Ames- Lowa: The Lowa State College Press. Haryanti,  Rini  Budi  Hastuti,  Nintya  Setiari,  Dan Agung Banowo., (2005). Pengaruh Kolkisin Terhadap  Pertumbuhan,  ukuran  Sel Metafase  Dan  Kandungan  Protein  Biji Tanaman  Kacang  Hijau  (  Vigna  radiate  L Wilczek). Jurnal  Penelitian  Sains  Dan Teknologi, Vol 10, No 2, 2009: 112-120 Indraningsih,  E.,  (2008).  Induksi  Poliploidisasi Bawang  Merah  ( Allium  cepa  L. )  dengan Ekstrak  Etanolik  Daun  Tapak  Dara ( Catharanthus roseus [L] G. Don.). Seminar. Fakultas Biologi  Universitas Gadjah  Mada: Yogyakarta.
Kimball,  J.W.,  (1983).  Biology  3 rd ed.  John  Willey and Sons, Inc., New York. Jumini,  (2008). Analisis  Faktor-faktor  yang mempengaruhi  permintaan  bawang  putih di Indonesia. IPB Press . Bogor.
Kristianto,  B.A  .,  B.  Sukamto  dan  Karno,  (2001). Poliploidasi  rumput  makanan  ternak dalam  rangka  mendapatkan  rumput unggul. Jurnal  pengembangan  peternakan tropis (Edisi Spesial): 172-180 Lamina,  (1989). Petunjuk  teknik  budidaya  bawang putih. CV. Simplex, Jakarta. Okada,  H.  (1981), Report  on  trainings  and investigations in LBN-LIPI , Osaka: Departemen of Biology Osaka University. Radfort,  A,  E.,  Et  All.  (1974). Vascular  plant
Sistematics, New  York:  Harper  and  Row Publishers. Rismunandar,  (1989). Membudidayakan  lima  jenis bawang . Sinar Baru, Bandung. Sastrosumarjo,  (2006). Sitogenetika  Tanaman. IPB Press Bogor.
Stack.  S,  M.  (1979).  The  Cromosome  and  DNA  of Allium cepa. CROMOSOME. 70:161-181 Suminah,  Sutarno,  dan  Setyawan  A.D.  (2002).
Induksi  poliploidi  bawang  merah  (Allium ascalonicum  L.)  dengan pemberian kolkisin. BIODIVERSITAS. 3(1): 174-180 Suprihati, D., Elimasni, E. Sabri, (2007). Identifikasi kariotipe  Terong  belanda  (Solanum betaceum cav.). Kultivar Berastagi Sumatera  Utara.  Jurnal  Biologi  Sumatera Utara, 2(1): 7-11
Suryatinah. S., (1998). Pengaruh pemberian kolkisin terhadap jumlah kromosom, distribusi serta usuran  stomata  dan  kadar  minyak  atsiri pada bawang ptih (Allium sativum). Skripsi
Fakultas  Pertanian  Universitas  Gadjah Mada, Yogyakarta. Suryo,  (2008). Sitogenetika. Gadjah  Mada University Press, Yogyakarta. Wibowo,  Singgih,  (1989). Budidaya  bawng (Bawang  putih,  bawang  merah,  bawang Bombay). Swadaya, Jakarta.