## ARTERI : Jurnal Ilmu Kesehatan
Vol. 1, No. 1, Nopember 2019, hlm. 22-28

## Pengaruh Vitamin D3 Terhadap Kadar Hemoglobin Tikus Wistar yang Dipapar Asap Rokok
Hetti Rusmini 1 , Dita Fitriani 2 , Dessy Hermawan 3 , Diah Adelia Emilda 4
1 Departemen Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Malahayati, hettirusmini@gmail.com 2 Departemen Kimia Medik Fakultas Kedokteran Universitas Malahayati, ditafaal2012@gmail.com 3 Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Malahayati, hermawan.dessy@gmail.com 4 Program Studi Kedokteran Fakultas Kedokteran Universitas Malahayati, emildadiahadelia@gmail.com

## ABSTRAK
Hemoglobin  adalah  suatu  protein  tetrametrik  eritrosit  yang  mengangkut  O 2 ke  jaringan  dan  mengembalikan  CO 2 dan  proton  ke  paru-paru.  Asap  rokok  terbukti  dapat  menurunkan  kadar  hemoglobin  melalui  stres  oksidatif  yang menyebabkan membran  eritrosit mudah lisis, lisisnya membran eritrosit menyebabkan kadar hemoglobin menjadi rendah.  Vitamin  D  termasuk  kedalam  antioksidan  alami  yang  memiliki  sifat  neuroprotektif  melalui  mekanisme antioksidatif.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  vitamin  D3  terhadap  kadar hemoglobin pada tikus putih (Rattus norvegicus) galur Wistar jantan setelah dipapar asap rokok. Jenis penelitian ini  adalah  eksperimental  murni  (tue-experiment)  menggunakan  pre  and  post  with  control  group  design.  Sampel adalah  tikus  putih  (Rattus  norvegicus)  galur  Wistar  jantan  berusia  10-12  minggu  dengan  berat  150-200  gram sejumlah 24 ekor. Sampel dibagi empat kelompok  meliputi K1 merupakan kelompok yang tidak dipapar asap rokok dan tidak diberi vitamin D3, K2 merupakan kelompok yang dipapar asap rokok namun tidak diberi vitamin D3, K3 merupakan  kelompok  yang  tidak  dipapar  asap  rokok  namun  diberi  vitamin  D3 dosis  0,2  µgr/ekor,  P1  merupakan kelompok  yang  dipapar  asap  rokok  dan  diberi  vitamin  D3  dosis  0,2  µgr/ekor.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan adanya  pengaruh  pemberian  vitamin  D3  terhadap  kadar  hemoglobin  pada  tikus  putih  yang  dipapar  asap  rokok dengan hasil uji paired t-test menunjukkan perbedaan yang bermakna p <0,05 pada kelompok K2 dengan nilai p = 0,044, kelompok K3 dengan nilai p = 0,013, dan kelompok P1 dengan nilai p = 0,037. Sedangkan pada kelompok 1 tidak  menunjukan  perbedaan  bermakna  p  =  0,932.  Uji  One-way  Anova  didapatkan  hasil  dengan  nilai  p  =  0,027 (p<0,05) yang berarti terdapat perbedaan yang bermakna antar kelompok. Uji Post Hoc LSD menunjukan adanya perbedaan yang bermakna pada kelompok 1 dengan kelompok 2 bernilai p = 0,025 dan pada kelompok 2 dengan kelompok 3 bernilai p = 0,012.
Kata kunci: Anemia, Asap Rokok, Kadar Hb, Vitamin D

## ABSTRACT
Hemoglobin is a tetrametric erythrocyte protein that carries O 2 to the tissues and returns CO 2 and protons to the lungs.  Cigarette  smoke  is  proven  that  could  reduce  hemoglobin  levels  through  oxidative  stress  which  causes  the erythrocyte  membrane  to  be  easily  lysed.  The  lysis  erythrocyte  membrane  causes  hemoglobin  levels  to  be  low. Vitamin  D  is  included  in  natural  antioxidants  which  have  a  neuroprotective  tendency  through  antioxidative mechanisms.  To  determine  the  effect  of  giving  vitamin  D3  on  hemoglobin  levels  in  white  rats  (Rattus  norvegicus) male Wistar strain after being exposed by cigarette smoke. This type of pure experimental research (tue-experiment) used pre and post with control group design. Samples were white rats (Rattus norvegicus) male Wistar  strain aged 10-12 weeks with the weight of around 150-200 grams in a total of 24 individuals. Samples were divided into four groups including K1 which is not exposed by cigarette smoke and not given of vitamin D3, K2 is a group exposed by cigarette  smoke  but  not  given  of  vitamin  D3,  K3  is  a  group  that  is  not  exposed  by  cigarette  smoke  but  given  of vitamin D3 a dose of 0.2 µgr /head, P1 is a group exposed by cigarette smoke and given a vitamin D3 dose of 0.2 µgr /head. The test of paired t-test showed a significant difference p <0.05 in the K2 group with p = 0.044, the K3 group with p = 0.013, and P1 group with p = 0.037. Whereas in group 1 there was no significant difference p = 0.932. The One-way Anova test obtained results with a value of p = 0.027 (p  <0.05) which means that there were significant differences between groups. The Post Hoc LSD test showed a significant difference in group 1 whit group 2 p = 0.025 and in group 2 with group 3 p = 0.012.

## Keywords: Anemia, cigarette smoke, hemoglobin levels, Vitamin D
*Korespondensi Author : Hetti Rusmini, Departemen Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Malahayati, hettirusmini@gmail.com, Telp. 08117241611

## ARTERI : Jurnal Ilmu Kesehatan
Vol. 1, No. 1, Nopember 2019, hlm. 22-28

## I. PENDAHULUAN
Perokok  didefinisikan  sebagai  seseorang yang  telah  merokok  lebih  dari  100  batang selama  hidup  mereka  dan  kadang-kadang merokok ataupun merokok setiap hari 1.
Pembakaran  rokok  menghasilkan  asap  rokok utama ( mainstream smoke ) yang dihasilkan dari hisapan  perokok  aktif  yang  mengandung  25% kadar bahan berbahaya dan asap rokok samping ( sidestream  smoke )  yaitu  asap  rok  ok  dari pembakaran  rokok  yang  terhirup  oleh  perokok pasif mengandung 75% kadar bahan berbahaya 2 . Asap rokok mengandung 4.800 macam komponen  kimia  yang  dapat  membahayakan kesehatan 3 .  Komponen  kimia  yang  terdapat dalam  asap  rokok  antara  lain  nikotin,  karbon monoksida, tar dan eugenol 4 . World Health Organization (2015), melaporkan bahwa jumlah perokok di dunia saat ini  mencapai  1,2  milyar  orang,  800  juta diantaranya berada di negara berkembang dan 6 juta  orang  meninggal  setiap  tahunnya  akibat rokok,  lebih  dari  600.000  orang  akibat  paparan asap  rokok  lingkungan,  dan  170.000  orang diantaranya adalah anak-anak. Indonesia merupakan  negara  perokok  terbesar  ke-3  (tiga) di  dunia  setelah  China  dan  India 5 .  WHO mencatat  28%  masyarakat  Indonesia  adalah perokok.  Indonesia telah mencapai  tingkat  yang sangat  memprihatinkan  dalam  konsumsi  produk tembakau,  terutama  rokok 6 . The  Tobacco  Atlas (2015),  Indonesia  menempati  tingkat  satu  dunia untuk jumlah pria perokok di atas usia 15 tahun. Data tersebut menunjukan sebanyak 66% pria di Indonesia  adalah  perokok.  Setiap  tahunnya prevalensi perokok di Indonesia terus mengalami  peningkatan,  baik  perokok  pria maupun perokok wanita 7 .
Merokok  merupakan  salah  satu  faktor risiko  timbulnya  berbagai  penyakit  jantung, inflamasi, stroke, kelainan pembekuan darah dan berbagai  penyakit  pernafasan 8 .  Islam et  al. (2007)  mengemukakan  bahwa  merokok  dapat mempengaruhi komponen-komponen darah, misalnya  berpengaruh  terhadap  jumlah  sel leukosit,  pada  perokok  ditemukan  peningkatan jumlah  sel  leukosit  dibandingan  dengan  yang bukan perokok 9 . Merokok juga dapat
mempengaruhi  komponen  darah  lain  seperti eritrosit, trombosit dan hemoglobin 8 . Hemoglobin adalah suatu protein tetrametrik  eritrosit  yang  mengangkut  O 2 ke jaringan dan mengembalikan CO 2 dan proton ke paru-paru 10 .  Nikotin,  CO  dan  bahan  kimia lainnya yang terdapat dalam asap rokok terbukti dapat  merusak  endotel  (dinding  pembuluh darah) dan mempermudah timbulnya penggumpalan  darah  sehingga  menyebabkan proses pembentukan eritrosit menjadi menurun 11 .  Asap  rokok  yang  masuk  kedalam sirkulasi  darah  menimbulkan Reactive  Oxygen Species (ROS) yang dapat meningkatkan radikal bebas  dalam  tubuh 12 .  Menurunnya  eritrosit akibat asap rokok juga diakibatkan oleh Reactive Oxygen  Species (ROS)  yang  bersifat  sangat reaktif  sehingga  menyebabkan  stres  oksidatif pada  eritrosit 13 .  Stres  oksidatif  yang  disebabkan asap  rokok  mengakibatkan  hilangnya  fluiditas dan meningkatkan fragilitas peroksida lipid pada membran  eritrosit  sehingga    eritrosit  akan mudah  lisis 14 .  Lisisnya  membran  eritosit menyebabkan  hemoglobin  terbebas  ke  dalam plasma,  sehingga  jumlah  hemoglobin  semakin berkurang.  Hal  ini  mengakibatkan  kadar hemoglobin  yang  terdapat  dalam  eritrosit rendah 15 .
Antioksidan  merupakan  zat  yang  dapat membersihkan  radikal  bebas  dan  mencegah radikal  bebas  merusak  sel.  Peningkatan  jumlah asupan  antioksidan  dapat  mencegah  berbagai penyakit  dan  dapat  mengurangi  permasalahan kesehatan. Sumber utama antioksidan didapatkan  dari  buah-buahan,  sayur-sayuran, dan obat herbal 16 . Salah satu obat herbal sebagai sumber antioksidan adalah vitamin D.
Vitamin  D  termasuk  kedalam  kelompok secosteroid larut dalam lemak  yang berasal dari kolesterol.  Dua  bentuk  utama  vitamin  D  adalah D3  (Cholecalciferol)  dan  D2  (Ergocalciferol), yang  berbeda  dalam  hal  strutur  dari  rantai sampingnya 17 . Vitamin D yang termasuk vitamin D  herbal  adalah  vitamin  D3.  Vitamin  D3 merupakan  antioksidan  alami  yang  dapat melewati  sawar  darah  otak 18. Vitamin  D  dapat merangsang  neurogenesis  dan  mengatur  sintesis faktor neurotropik yang penting untuk

## ARTERI : Jurnal Ilmu Kesehatan
Vol. 1, No. 1, Nopember 2019, hlm. 22-28
diferensiasi dan ketahanan hidup sel dengan sifat neuroprotektifnya.  Sifat  neuroprotektif  dari vitamin D terjadi melalui mekanisme antioksidatif, imunomodulasi, pengaturan kalsium  neuron,  detoksifikasi,  dan  perbaikan konduksi saraf 19.
Belum  terdapat  penelitian  sebelumnya mengenai pemberian vitamin D3 terhadap kadar hemoglobin  pada  tikus  putih  yang  dipapar  asap rokok,  namun  penelitan  lain  yang  menyerupai menyatakan bahwa terdapat pengaruh pemberian melon  ( Cucumis  melo )  dan gliadin sebagai antioksidan  terhadap  kenaikan  hemoglobin  dan menurunkan  HbCO  pada  tikus Wistar jantan yang  diberi  paparan  asap  rokok 20 .  Smith  dan Tangpricha  (2015)  juga  menyatakan  bahwa vitamin D dapat mendukung eritropoesis melalui pengurangan sitokin proinflamasi dan meningkatkan  poliferasi  sel  progenitor  eritroid sehingga  dapat  mencegah  terjadinya  anemia 21 . Namun demikian, sampai saat ini belum terdapat penelitian  di  Indonesia  yang  mengemukakan efek  vitamin  D3  sebagai  antioksidan  terhadap kadar  hemoglobin  pada  tikus  putih  yang  diberi paparan  asap  rokok,  selain  itu  tingginya  angka perokok di dunia maupun di  Indonesia menjadi urgensi penelitian yang nantinya dapat dijadikan preventive bagi  penderita  anemia  akibat  stress oksidatif  paparan  asap  rokok.  Sehingga  penulis tertarik melakukan penelitian mengenai Pengaruh  Pemberian  Vitamin  D3  Terhadap Kadar  Hemoglobin  Pada  Tikus  Putih (Rattus norvegicus) Galur Wistar Jantan  Yang  Dipapar Asap Rokok.

## II. METODOLOGI
Jenis  penelitian  ini  adalah  eksperimental murni (true experimental) menggunakan rancangan  penelitian pre  and  post  test  with control  group  design .  Penelitian  ini  dilakukan pada  bulan  Juli  –  Agustus  2019  di  Balai  Besar Veteriner  Lampung  untuk  pemeliharaan  dan pemberian  perlakuan  tikus  dan  Laboratorium Rumah  Sakit  Pertamina  Bintang  Amin  Bandar Lapung  untuk  pemeriksaan  kadar  hemoglobin sebelum  perlakuan  dan  setelah  perlakuan.  Hasil yang dianalisis pada penelitian ini  adalah  kadar hemoglobin.
Sampel  yang  digunakan  yaitu    tikus  putih (Rattus norvegicus) galur Wistar jantan usia 10- 12 minggu dengan berat badan 150-200 gr yang diperoleh  dari  Palembang  Tikus  Center  (PTC). Sampel penelitian sebanyak 24 ekor yang dipilih secara  acak  dan  dibagi  kedalam  4  kelompok, sesuai  dengan  rumus  federer  dan  menggunakan prinsip  3R  sesuai  dengan  etik  penelitian labolatorium  untuk  menghindari  terjadinya kriteria  eksklusi yang  meliputi Replacement : mengganti  hewan  dengan  organ  atau  jaringan yang  diperoleh  dari  Rumah  Potong  Hewan (RPH) atau mengganti dengan hewan yang lebih rendah  ordonya,  atau  mengganti  hewan  dengan kultur/jaringan  atau  dengan  program  komputer. Reduction :  mengurangi  penggunaan  hewan coba  dengan  tetap  memberikan  hasil  yang valid/sahih. Refinement :  mengurangi  stres/rasa nyeri  dengan  prosedur  yang  benar  dan  orang yang terlatih, serta bila memungkinkan menggunakan metoda non infasif.
Tikus  sebanyak  24  ekor  dikelompokkan dalam  4  kelompok.  Kelompok  kontrol  1  (K1) yaitu    tikus  yang  tidak  dipapar  dan  tidak  diberi vitamin  D3,  Kelompok  kontrol  2  (K2)  yaitu tikus yang dipapar asap rokok, kelompok kontrol 3 (K3) yaitu tikus  yang diberi vitamin D3 dosis 0,2  µgr/  ekor,  dan  kelompok  perlakuan  1  yaitu tikus yang dipapar asap rokok dan diberi vitamin D3  dosis    µgr/  ekor.    Seluruh  subjek  penelitian diberi diet standar Comfeed BR II sebanyak 120 gr/ kelompok/ hari serta  air minum ad libitum.
Perlakuan  paparan  asap  rokok  dilakukan dalam  tempat    yang  dinamakan Induksi Chamber 22 .  Pemaparan  dilakukan  setiap  pukul 14.00  WIB  dengan  menggunakan  8  batang rokok  selama  30  menit  per  hari 23 .  Pemberian vitamin  D3  dilakukan  2  jam  setelah  paparan asap  rokok,  setiap  hari  selama  14  hari 24 .  Dosis vitamin D3 yang diberikan adalah 0,2  µgr/ ekor di  injeksikan    secara  intramuskular  (IM) dibagian  posterolateral  paha  tikus 25 .  Pemberian vitamin  D3  dilakukan  dengan  menggunakan spuit  1  cc.  Karena  vitamin  D3  merupakan vitamin  larut  lemak  maka  harus  diencerkan menggunakan  minyak  zaitun.    Pengambilan darah  dilakukan  sebanyak  2  kali  yaitu  sebelum diberi  perlakuan  dan  setelah  diberi  perlakuan.

## ARTERI : Jurnal Ilmu Kesehatan
Vol. 1, No. 1, Nopember 2019, hlm. 22-28
darah  diambil  menggunakan  microhematokrit dibagian pleksus  retro  orbitalis setelah  hewan coba  dipuasakan  selama  ±  12  jam.  Seseuai dengan  prosedur  RSPBA  Bandar  Lampung sampel  darah  yang  diambil  untuk  pemeriksaan kadar  hemoglobin  sebanyak  1  cc,  kemudian dimasukkan  kedalam    tabung  darah  EDTA  dan di  homogenkan  dengan Blood  Roller  Mixer selama  5  menit,  setelah  homogen  tabung  darah EDTA  di  periksa  dengan  menggunakan Auto Hematology Analizer dan hasilnya akan keluar.
Data yang diperoleh dianalisis menggunakan  SPSS.  Dilakukan  uji  normalitas dan  homogenitas  menggunakan saphiro  wilk karena sampel < 50. Kemudian  uji paired T-test untuk menganalisis perbedaan nilai sebelum dan sesudah perlakuan  jika data terdistribusi normal dan  menggunakan Wilcoxon jika  data  tidak
terdistribusi normal. Kemudian dianalisis menggunakan  uji  komperatif One  way  ANOVA apabila  data  terdistribusi  normal,  apabila  tidak terdistribusi  normal  dianalisis  menggunakan Kruskal-Wallis. Dilanjutkan  uji Post  hoc untuk meganalisis  perbedaan  rerata  antar  kelompok yang paling berpengaruh perbedaannya 26 .

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Kadar
hemoglobin diperiksa menggunakan  alat Auto  Hematology  Analizer dengan  hasil  pengukuran  dinyatakan  dalam satuan gr/dL. Sebelumnya darah di homogenkan dengan Blood  Roller  Mixer selama  5  menit. Darah  diambil  sebanyak  2  kali  yaitu  sebelum tikus dipapar asap rokok dan diberi vitamin D3, dan  setelah  tiku  dipapar  asap  rokok  dan  diberi vitamin D3 selama 14 hari.
Tabel 1 . Perbedaan nilai rerata ± kadar hemoglobin sebelum dan setelah perlakuan Kelompok Kadar Hb Sebelum perlakuan Kadar Hb Setelah perlakuan Nilai p uji Paired T-Test Mean ± SD Mean ± SD K1 14,50 ± SD 0,62 14,46 ± SD 0,75 0,932 K2 15,27 ± SD 0,70 13,00 ± SD 1,53 0,044 K3 13,56 ± SD 0,57 14,70 ± SD 0,64 0,013 P1 13,00 ± SD 0,42 13,44 ± SD 0,43 0,037
(*) terdapat perbedaan bermakna (p<0,05)
Nilai  rerata  ±  SD  kadar  hemoglobin sebelum  dan  sesudah  perlakuan  dapat  dilihat pada  tabel  1.  Data  dianalisis  menggunakan program SPSS hasil uji normalitas menunjukkan kadar hemoglobin sebelum dan setelah perlakuan  berdistribusi  normal  dengan  p  >0,05 pada  semua  kelompok . Uji paired  t-test menunjukkan perbedaan yang bermakna p <0,05 pada  kelompok  K2  dengan  nilai  p  =  0,044,
kelompok  K3  dengan  nilai  p  =  0,013,  dan kelompok P1 dengan nilai p = 0,037.
Hasil  analisis  data  menggunkan  uji One way  Anova didapatkan  hasil  dengan  nilai  p  = 0,027  (p<0,05),  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa terdapat pengaruh pemberian vitamin D3 terhadap  kadar  hemoglobin  pada  tikus  putih (Rattus  norvegicus) galur Wistar jantan  yang dipapar  asap  rokok.  Selanjutnya  digunakan  uji statistik post hoc LSD dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Rerata ±  kadar hemoglobin sebelum dan setelah perlakuan dengan analisis post hoc LSD. (*) terdapat perbedaan yang bermakna (p<0,05) Kelompok Kelompok Mean Difference Std.Error Sig. K1 K2 * K3 P1 1,493 -0,240 1,020 0,597 0,157 0,157 0,025 0,650 0,069 K2 K1 * K3 * P1 -1,493 -1,733 -0,473 0,597 0,597 0,597 0,025 0,012 0,442

## ARTERI : Jurnal Ilmu Kesehatan
Vol. 1, No. 1, Nopember 2019, hlm. 22-28
Kelompok Kelompok Mean Difference Std.Error Sig. K3 K1 K2 P1 0,240 1,733 1,260 0,517 0,597 0,517 0,650 0,597 0,517 P1 K1 K2 K3 * -1,020 0,473 -1,260 0,517 0,597 0,517 0,069 0,441 0,029
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik  Post hoc  LSD  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang bermakna (p<0,05) antara kelompok K1 dengan K2  p  =  0,025,  K2  dengan  K3  P  =0,012,  K3 dengan P1 p = 0,029.
Pemberian  paparan  asap  rokok  dilakukan selama 14 hari dengan tujuan menurunkan kadar hemoglobin  sehingga  menyebabkan  anemia. Kadar  hemoglobin  normal  pada  tikus  putih (Rattus norvegicus) dengan nilai normal 11,1-18 gr/dl 27 .
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  dan dianalisis menggunakan uji paired t-test terdapat perbedaan  yang  bermakna  kadar  hemoglobin sebelum dan setelah dipapar asap rokok (p<0,05) kecuali  pada  kelompok  K1  tidak  terjadi penurunan  kadar  gluhemoglobin  karena  tidak dilakukan  paparan  asap  rokok  dan  tidak diberikan  vitamin  D3.  Hasil  uji one  way  anova didapatkan  perbedaan  yang  bermakna  antar kelompok  (p<0,05).  Sehingga  pada  penelitian pemberian  paparan  asap  rokok  selama  14  hari dapat  menurunkan  kadar  hemoglobin  yang diperantarai  melalui  mekanisme  stres  oksidatif yang  menyebabkan  hilangnya  fluiditas  dan meningkatkan  fragilitas  peroksida  lipid  pada membran  eritrosit  sehingga    eritrosit  akan mudah  lisis 15 .  Lisisnya  membran  eritosit menyebabkan  hemoglobin  terbebas  ke  dalam plasma,  sehingga  jumlah  hemoglobin  semakin berkurang.  Hal  ini  mengakibatkan  kadar hemoglobin  yang  terdapat  dalam  eritrosit rendah 14 .
Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Susanti  dan Wirjatmadi  (2016)  yang  menyatakan    bahwa paparann  asap  rokok  dapat  menurunkan  kadar Hb dan meningkatkan kadar HbCO dalam tubuh, pemberian antioksidan yang berasal dari ekstrak
melon  ( Cucumis  melo )  dan gliadin sebagai sesuai dengan dosis (250 IU/hr) dapat digunakan secara  signifikan  untuk  meningkatkan  kadar hemoglobin  dan  menurunkan  HbCO  pada  tikus wistar jantan  yang  diberi  paparan  asap  rokok 20 .
Sama  halnya  dengan  penelitian  Smith  dan Tangpricha  (2015)  yang  menyatakan  bahwa vitamin D dapat mendukung eritropoesis melalui pengurangan sitokin proinflamasi dan meningkatkan  poliferasi  sel  progenitor  eritroid sehingga dapat mencegah terjadinya anemia 21 . Keberadaan asap rokok dapat meningkatkan radikal bebas yang dapat menyebabkan  hemolisis  sel  darah  merah.  Efek hematotoksisitas dari timbal atau Pb menghambat  sebagian  besar  enzim  yang berperan  dalam  biosintesa  atau  metabolisme heme  sehingga  menyebabkan  kadar  hemoglobin rendah 28 . Karbondioksida (CO) pada asap rokok, apabila  terpapar  maka  karbondioksida  ini  akan mengikat  hemoglobin  dalam  darah,  yang  mana mestinya hemoglobin tersebut mengikat oksigen yang  diedarkan  ke  organ-organ  vital  dan  sel-sel di  seluruh  tubuh 11 .  Akibatnya  akan  mengurangi fungsi  kerja  dari  hemoglobin  dalam  tubuh  yang semestinya  berfungsi  mengikat  oksigen  yang digunakan  untuk  mendistribusikan  zat  makanan dari seluruh tubuh 29 .
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pemberian vitamin D3 sebagai antioksidan untuk meningkatkan kadar hemoglobin.
Hasil
penelitian  yang  telah  dilakukan  menunjukkan bahwa pemberian vitamin D3 dapat meningkatkan kadar hemoglobin pada kelompok kontrol  3  (K3)  dan  kelompok  perlakuan  1  (P1) sehingga dapat mencegah terjadinya anemia.
Hasil analisis uji paired t-test menunjukkan  perbedaan  signifikan  p<0,05, kadar  hemoglobin  pada  kelompok  K3  (p  =

## ARTERI : Jurnal Ilmu Kesehatan
Vol. 1, No. 1, Nopember 2019, hlm. 22-28
0,013) dan P1 (p = 0,037) . Pada analisis post hoc didapatkan  perbedaan  rerata  selisih  antara kelompok  kontrol  3  (K3)  dengan  kelompok perlakuan  1  (P1). Berarti  pada  pemberian vitamin D3 terdapat pengaruh dalam peningkatan kadar hemoglobin.
Penelitian yang dilakukan oleh Smith dan Tangpricha  (2015)  menyatakan  bahwa  vitamin D  dapat  mendukung  eritropoesis  melalui pengurangan sitokin proinflamasi dan meningkatkan  poliferasi  sel  progenitor  eritroid sehingga  terjai  peningkatan  kadar  hemoglobin dan terjadinya anemia dapat dicegah 21 .
Vitamin  D  termasuk  kedalam  kelompok secosteroid larut dalam lemak  yang berasal dari kolesterol.  Dua  bentuk  utama  vitamin  D  adalah D3  (Cholecalciferol)  dan  D2  (Ergocalciferol), yang  berbeda  dalam  hal  strutur  dari  rantai sampingnya 17 . Vitamin D yang termasuk vitamin D  herbal  adalah  vitamin  D3.  Vitamin  D3 merupakan  antioksidan  alami  yang  dapat melewati  sawar  darah  otak18.  Vitamin  D  dapat merangsang  neurogenesis  dan  mengatur  sintesis faktor neurotropik yang penting untuk diferensiasi dan ketahanan hidup sel dengan sifat neuroprotektifnya.  Sifat  neuroprotektif  dari vitamin D terjadi melalui mekanisme antioksidatif, imunomodulasi, pengaturan kalsium  neuron,  detoksifikasi,  dan  perbaikan konduksi saraf 19 .

## IV. KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang berjudul  Pengaruh  Pemberian  Vitamin  D3 terhadap  Kadar  Hemoglobin  pada  Tikus  Putih ( Rattus  norvegicus) Galur Wistar Jantan  yang Dipapar  Asap  Rokok,  disimpulkan  bahwa terdapat  pengaruh  pemberian  vitamin  D3 terhadap  kadar  hemoglobin  pada  tikus  putih (Rattus  norvegicus) galur Wistar jantan  yang dipapar asap rokok.

## Saran

## Bagi Peneliti
Hasil  penelitian  ini  dapat  digunakan sebagai perbandingan untuk melakukan penelitian yang sama dilain waktu.

## Bagi Institusi/Peneliti Selanjutnya
Hasil  penelitian  ini  dapat  digunakan sebagai  referensi  bagi  peneliti  selanjutnya. Untuk  penelitian  selanjutnya  perlu  dilakukan penelitian  yang  lebih  lama  untuk  menilai pengaruh  pemberian  vitamin  D3  terhadap  kadar hemoglobin  dan  dilakukan  penelitian  manfaat vitamin  D3  terhadap  penyakit  anemia  dan penyakit lainnya.

## Bagi Masyarakat
Masyarakat  dengan  Hb  rendah  atau masyarakat  yang  menderita  anemia  akibat  stres oksidatif paparan asap rokok dapat mengkonsumsi  vitamin  D3  sebagai  terapi komplementer  untuk  meningkatkan  maupun mempertahankan kadar hemoglobin.

## V. UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  kami  sampaikan  kepada Kementrian  Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan Tinggi  Republik  Indonesia  dan  Balai  Besar Veteriner Lampung.

## REFERENSI
1. Byeon  H.  The  association  between  lifetime cigarette  smoking  and  dysphonia  in  the  Korean general  population:  findings  from  a  national survey. PeerJ . 2015 Apr 28;3:e912.
2. Nurjanah N, Kresnowati L, Mufid A. Gangguan Fungsi  Paru  Dan  Kadar  Cotinine  Pada  Urin Karyawan  Yang  Terpapar  Asap  Rokok  Orang Lain.  KEMAS: Jurnal  Kesehatan  Masyarakat . 2014;10(1):43-52.
3. Gaur  DS,  Talekar  M,  Pathak  VP.  Effect  of cigarette  smoking  on  semen  quality  of  infertile men. Singapore medical journal. 2007 Feb;48(2):119.
4. Muhammad  IS. Efek  Antioksidan  Vitamin  C Terhadap  Tikus  (Rattus  norvegicus  L)  Jantan Akibat  Pemaparan  Asap  Rokok (Doctoral dissertation, Tesis. Bandung).
5. World Health Organization. WHO global report on  trends  in  prevalence  of  tobacco  smoking 2015. World Health Organization; 2015.
6. Kesehatan  K,  RI  KK.  Riset  kesehatan  dasar. Jakarta:  Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia. 2013.
7. The  Tobacco  Atlas.  Topic:  Cigarette  Use Globally. 2015.
8. Asif  M,  Karim  S,  Umar  Z,  Malik  A,  Ismail  T, Chaudhary A, Hussain Alqahtani M, Rasool M. Effect of cigarette smoking based on

## ARTERI : Jurnal Ilmu Kesehatan
Vol. 1, No. 1, Nopember 2019, hlm. 22-28
hematological  parameters:  comparison  between male smokers and non-smokers. Turkish Journal of  Biochemistry/Turk  Biyokimya  Dergisi.  2013 Jan 1;38(1).
9. Islam  MM,  Amin  MR,  Begum  S,  Akther  D, Rahman  A.  Total  count  of  white  blood  cells  in adult  male  smokers.  Journal  of  Bangladesh Society of Physiologist. 2007;2:49-53.
10. Murray,  R.  K.,  Granner,  D.  K.,  &  Rodwell,  V. W.Biokimia  harper  (27  ed.).  Jakarta:  Buku Kedokteran EGC; 2014
11. Sitepoe  M.  Kekhususan  rokok  Indonesia: mempermasalahkan  PP  no.  81  tahun  1999 tentang  pengamanan  rokok  bagi  kesehatan. Gramedia Widiasarana Indonesia; 2000.
12. Winarsi  H.  Radikal  bebas  dan  anti  oksidan dalam  Antioksidan  alami  dan  radikal  bebas: potensi dan aplikasinya dalam kesehatan. Jurnal. 2007:5-11.
13. Hoffbrand  V.  At  a  Glance  Hematology.  Jakarta (ID). EMS. 2006.
14. Ahumobe  AA,  Braide  VB.  Effect  of  gavage treatment  with  pulverised  Garcinia  kola  seeds on erythrocyte  membrane integrity and selected haematological  indices  in  male  albino  wistar rats. Nigerian Journal of Physiological Sciences. 2009;24(1).
15. Ratnaningtyas  N. Pengaruh  pemberian  ekstrak kulit  buah  delima  merah  (punica  ganatum) terhadap jumlah eritrosit dan kadar hemoglobin pada  tikus  putih  (rattus  norvegicus)  yang dipapar  gelombang  elektromagnetik  ponsel (Doctoral  dissertation,  Universitas  Sebelas Maret). 2010.
16. Sen S, Chakraborty R, Sridhar C, Reddy YS, De B.  Free  radicals,  antioxidants,  diseases  and phytomedicines:  current  status  and  future prospect.
International Journal of
Pharmaceutical  Sciences  Review  and  Research.
2010;3(1):91-100.
17. Herrmann  M,  Farrell  CJ,  Pusceddu  I,  Fabregat- Cabello N, Cavalier E. Assessment of vitamin D status–a changing landscape. Clinical Chemistry and  Laboratory  Medicine  (CCLM).  2017  Jan 1;55(1):3-26.
18. Ladas  EJ,  Jacobson  JS,  Kennedy  DD,  Teel  K, Fleischauer  A,  Kelly  KM.  Antioxidants  and cancer  therapy:  a  systematic  review.  Journal  of clinical oncology. 2004 Feb 1;22(3):517-28.
19. Llewellyn  DJ,  Lang  IA,  Langa  KM,  Muniz- Terrera G, Phillips CL, Cherubini A, Ferrucci L, Melzer  D.  Vitamin  D  and  risk  of  cognitive decline  in  elderly  persons.  Archives  of  internal medicine. 2010 Jul 12;170(13):1135-41.
20. Susanti YE, Wirjatmadi B. Efek Ekstrak Melon (Cucumis Melo) Dan Gliadinterhadap Kadar Hb Dan  Hbco  Tikus  Wistar  Jantan  Yang  Dipapar Asap  Rokok.  Indonesian  Journal  of  Public Health. 2016;11(1):78-88.
21. Smith  EM,  Tangpricha  V.  Vitamin  D  and anemia:  insights  into  an  emerging  association. Current opinion in endocrinology, diabetes, and obesity. 2015 Dec;22(6):432.
22. Febrina  L,  Helmi  H,  Rijai  L.  Profil  Kadar Malondialdehida,  Glukosa  dan  Kolesterol  pada Tikus Putih yang Terpapar Asap Rokok. Journal of  Trophical  Pharmacy  and  Chemistry.  2016 Dec 31;3(4):277-82.
23. Arkema  KK,  Abramson  SC,  Dewsbury  BM. Marine  ecosystem‐based  management:  from characterization  to  implementation.  Frontiers  in Ecology and the Environment. 2006 Dec;4(10):525-32
24. Zahara  NE,  Susianti  S,  Tjiptaningrum  A. Pengaruh  Pemberian  Thymoquinonepada  Paru Tikus  Putih  (Rattus  norvegicus)  Galur  Sprague dawley  yang  Dipapar  Asap  Rokok  Berdasarkan Gambaran  Histopatologi.  Jurnal  Majority.  2019 Mar 30;8(1):78-83.
25. Bir  FE,  Baltalarli  B,  Abban  G,  Demirkan  N. Protective  effect  of  vitamin  D  on  radiation- induced  lung  injury:  Experimental  evidence. International  Journal  of  Radiation  Research. 2014 Jul 1;12(3):229-33.
26. Notoatmodjo S. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta: Rineka Cipta. 2012.
27. Mitruka BM, Rawnsley HM. Clinical biochemical and hematological reference values in  normal  experimental  animals.  Clinical biochemical and hematological reference values in normal experimental animals.. 1977.
28. Palar. Pencemaran dan toksikologi logam berat. Jakarta: Rineka Cipta. 1994.
29. Guyton  AC,  Hall,  JE.  Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran.  Edisi  12.  Penerjemah:  Ermita,  I., Ibrahim, I., Singapura: Elsevier. 2016.