## Sterilisasi Dan Penggunaan Zat Pengatur Tumbuh Bap (Benzile Amino Purin) Terhadap Pertumbuhan Eksplan Tunas Pisang Abaka (Musa Textilis Nee) Melalui Teknik In Vitro
Sterilization And Use Growth Regulatory Regulation Of Bap (Benzile Amino Purine) On The Growth Of Abaka Banana (Musa Textilis Nee) Shoots Through In Vitro Technique
Nathalia Unsong (1) , Wenny Tilaar (2) , Bertje R.A. Sumayku (2)
1) Mahasiswa Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
2) Dosen Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
*Penulis untuk korespondensi: nathaliaunsong@gmail.com
Naskah diterima melalui Website Jurnal Ilmiah agrisosioekonomi@unsrat.ac.id : 28 September 2022 Disetujui diterbitkan : 30 September 2022

## ABSTRACT
This study aims to determine the most appropriate method and sterilization technique for the growth of abaca weevil shoot explants taken directly from the field and to determine the effect of the dose of growth regulator BAP (Benzile amino purine) on the growth of abaca feed. explants (Musa textilis Nee). through in vitro techniques. This study uses the multilevel sterilization method and the sterilization  method  using  direct  observation,  namely  when  the  explants  have  become  shoots.  The results showed that the appropriate sterilization method was a fixed sterilization method with bayclin treatment with a concentration of 30% for (30 minutes), 20% for (20 minutes), 10% for (10 minutes) with  several  techniques  carried  out  so  that  the  explant  was  successful.  grow,  namely  in  the  6th technique. Induction of shoots of abaka banana weevil explants in BAP treatment was best at 7 ppm treatment by producing 5 shoots. With the height of each shoot, namely: a (0.9 cm), b (0.3 cm), c (0.4 cm), d (0.4 cm), and e (0.5 cm).
Keywords: sterilization; shoots; abaka; in vitro and bap (benzile amino purine)

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui metode dan teknik sterilisasi yang paling tepat terhadap pertumbuhan  eksplan  tunas  bonggol  pisang  abaka  yang  di  ambil  langsung  dari  lapangan  dan  untuk mengetahui  pengaruh  dosis  zat  pengatur  tumbuh    BAP  (Benzile  amino  purin)  terhadap  pertumbuhan eksplan tunas bonggol pisang abaka (Musa textilis Nee) melalui teknik in vitro. Penelitian ini menggunakan metode  sterilisasi  bertingkat  dan  sterilisasi  tetap  dengan  menggunakan  teknik  observasi  langsung  yaitu ketika  eksplan  sudah  menjadi  tunas.  Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  metode  sterilisasi  yang  tepat adalah  pada  metode  sterilisasi  tetap  dengan  perlakuan  bayclin  konsetrasi  30%  selama  (30  menit),  20% selama (20 menit), 10% selama (10 menit) dengan beberapa teknik-teknik yang dilakukan sehingga eksplan berhasil tumbuh yaitu pada teknik yang ke-6. Induksi tunas eksplan bonggol pisang abaka pada perlakuan BAP yang paling baik yaitu pada perlakuan 7 ppm dengan jumlah tunas yang dihasilkan sebanyak 5 buah tunas. Dengan tinggi masing-masing tunas yaitu :        a (0,9 cm), b (0,3 cm), c (0,4 cm), d (0,4 cm), dan e (0,5 cm).
Kata kunci : sterilisasi; tunas; abaka; in vitro dan bap ( benzile amino purin )
Sterilisasi Dan Penggunaan Zat Pengatur Tumbuh……………………………..(Nathalia Unsong, Wenny Tilaar, Bertje Sumayku)

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Penyediaan  bibit  berkualitas  merupakan salah  satu  faktor  yang  menentukan  keberhasilan dalam  pengembangan  pertanian  di  masa  kini  dan masa  yang  akan  datang.  Tanaman  abaka merupakan  tanaman  jenis  pisang  yang  memiliki kegunaan  cukup  luas  dengan  nilai  produk  yang cukup tinggi. Produksi utama dari tanaman abaka ini  adalah  serat  ( fiber )  yang  terkenal  dalam perdagangan internasional sebagai serat berkualitas  tinggi.  Serat  yang  dihasilkan  oleh tanaman ini digunakan untuk pembuatan berbagai macam  kerajinan  tangan    seperti  bahan  pakaian, anyaman topi, tas, peralatan makan, kertas rokok, sachet  teh  celup,  uang  dolar,  dan  lain-lain (Wibowo, 1998). Selain itu juga untuk jenis kertas yang memerlukan kekuatan dan daya simpan yang tinggi  seperti  kertas  surat,  kertas  dokumen,  serta kertas  peta  (Triyanto,  Muliah  dan  Edi,  1982). Perbanyakan  tanaman  abaka  dapat  dibedakan menjadi  dua,  yaitu  perbanyakan  secara  generatif yang dilakukan dari biji dan perbanyakan vegetatif dilakukan dengan anakan, tunas dan bonggol.
Permasalahan utama yang di hadapi dalam budidaya  tanaman  pisang  abaka  ini  adalah kurangnya ketersediaan bibit dalam pembudidayaannya.  Permintaan  pasar  produksi yang  tinggi  dan  banyak  membuat  masyarakat kesulitan  dalam  mengejar  target  yang  sudah  di tentukan  oleh  pasar  tersebut.  Salah  satu  alternatif untuk  mengatasi  masalah  penyediaan  bibit  sehat, banyak,  dan  cepat  adalah  meggunakan  teknik  in vitro.  Dengan  teknologi  tersebut  bibit  dapat  di produksi  dalam  jumlah  banyak,  seragam,  bebas penyakit, dan biaya pengangkutan relatif  murah.
Teknik  sterilisasi  merupakan  salah  satu proses yang menentukan keberhasilan dalam kultur jaringan.  Sterilisasi  bertujuan  untuk  menciptakan kondisi (baik bahan, media, alat dan ruangan) yang steril dari mikroorganisme. Teknik sterilisasi dapat berupa metode panas basah, panas kering, kimiawi, filtrasi dan penyinaran cahaya menggunakan sinar ultraviolet    Sugiri  (2005).  Sterilisasi  eksplan merupakan  langkah  yang  sangat  penting  agar inisiasi  kultur  bebas  dari  kontaminan.  Teknik sterilisasi eksplan bergantung pada jenis tanaman. Sering  kali  proses  sterilisasi  dilakukan  dengan berbagai cara sampai beberapa kali agar mencapai kesesuaian.
Selain teknik sterilisasi, hal yang optimum akan didapatkan dengan penambahan zat pengatur tumbuh untuk merangsang pertumbuhan tanaman. Zat  pengatur tumbuh  eksogen  yang  sering ditambahkan  pada  media  yaitu  golongan sitokinin  dan  auksin.  Sitokonin  penting  dalam pengaturan  pembelahan  sel,  morfogenesis  dan banyak berperan dalam mengatur organogenesis, pembentukan  tunas,  mendorong  proliferasi meristem ujung, menghambat pertumbuhan akar dan  mendorong  pembentukan  klorofil.    Zat pengatur tumbuh dalam golongan sitokinin adalah salah  satunya    6- Benzyle  amino  purin (BAP) Santoso dan Nursandi (2004).
Menurut  George  dan  Sherrington  (1984) Benzyle  amino  purin  merupakan  salah  satu sitokinin sintetik yang aktif dan daya merangsangnya  lebih  lama  karena  tidak  mudah dirombak  oleh  enzim  dalam  tanaman.    Benzyle amino  purin  memilki  struktur  yang  mirip  dengan kinetin  dan  juga  aktif  dalam  pembentukan  dan poliferasi kalus. Benzyle amino purin mempunyai sifat yang lebih stabil, lebih murah, lebih tersedia dan paling efektif jika dibandingkan dengan jenis sitokinin lainnya.

## Rumusan Masalah
Berdasarkan uraian diatas, upaya perbanyakan  bibit  tanaman  abaka  melalui  kultur jaringan  perlu  dilakukan.  Bagian  tanaman  yang digunakan  berupa  tunas  yang  berasal  dari bonggol  diambil  langsung  dari  lahan  yang berasal  dari  Daerah  Kabupaten  Kepulauan Talaud  khususnya  Desa  Essang,  Kecamatan Essang karena tanaman ini memiliki potensi besar untuk dikembangkan dalam skala besar.

## Tujuan Penelitian
Berdasarkan  perumusan  masalah  di  atas maka  yang  menjadi  tujuan  penelitian  ini  adalah untuk:
1. Untuk mengetahui metode dan teknik sterilisasi yang  paling  tepat  terhadap  pertumbuhan Eksplan tunas bonggol pisang abaka yang di ambil langsung dari lapangan
2. Untuk  mengetahui  pengaruh  dosis  zat pengatur tumbuh  BAP (Benzile amino purin) terhadap pertumbuhan eksplan tunas bonggol pisang abaka (Musa textilis Nee) melalui teknik in vitro .

## Manfaat Penelitian
Adapun manfaat dari penelitian ini, yaitu: 1. Menjadi satu  bahan  informasi  yang  dapat digunakan  dalam  melakukan  sterilisasi Eksplan  tunas  pisang  abaka  khususnya eksplan yang berasal dari lapangan
2. Menjadi  satu  bahan  informasi  yang  dapat digunakan  sebagai  salah  satu  metode  untuk memudahkan kita dalam melakukan perbanyakan  tananaman  terlebih  khusus  pada pisang abaka.

## METODE PENELITIAN
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Kultur  Jaringan  Fakultas  Pertanian Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  mulai  bulan Desember 2021 sampai bulan Mei 2022.

## Bahan dan Alat Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah tunas pisang abaka, agar putih, gula putih, detergen,  tisu, streptomicyn,  dithane,  nordox, bayclin,  alkohol  70%,  alkohol  95%,  betadine, aquades,  MS,  BAP  7  5ppm,  BAP  7  ppm  dan spritus.

## Alat
Alat  yang  digunakan  adalah  peralatan gelas  (botol  kultur,  gelas  ukur,  beker  glass, Erlenmeyer,  dan  petridish),  timbangan  analitik, pH meter, autoclave, Laminar Air Flow (LAF), peralatan diseksi (pinset besar dan kecil, gunting, dan  scalpel),  Spatula,  lampu  spritus,  pisau,  rak kultur  dengan  lampu  40  watt,  plastik  alumunium foil, dan alat lain yang mendukung penelitian.

## Metode Penelitian
Metode Sterilisasi yang digunakan adalah metode sterilisasi bertingkat dan sterilisasi tetap. Penelitian  ini  menggunakan  teknik  observasi langsung. Metode penelitian observasi langsung ini diamati ketika eksplan sudah menjadi tunas. Zat  pengatur  tumbuh  yang  digunakan  adalah BAP (Benzylie  amino  purin  ) dengan  2  taraf konsetrasi  masing - masing :  5 ppm dan 7 ppm.

## Prosedur Kerja

## Sterilisasi Peralatan
Peralatan  tanam  dan  gelas  yang  akan digunakan dicuci terlebih dahulu dan dikeringkan kemudian  dibungkus  dengan  kertas.  Selanjutnya alat-alat  disterilisasi  didalam autoclave dengan suhu 121 0 C pada tekanan 15 psi selama 30 menit.
Pembuatan Media dan Sterilisasi Media Tanam 1. Melarutkan 4,43 gr MS, dan gula sebanyak 30 gr kedalam 200 ml aquades menggunakan hot plate lalu  menambahkan  larutan  stok  BAP  (0,1  gr dilarutkan  pada  100  ml  aqudes  steril)  diambil sebanyak  5  ppm  dan  diaduk  hingga  tercampur rata.
2. Mengukur  pH  media  menggunakan  pH  meter digital 5,8.
3. Media  dimasak  hingga  agar-agar  larut  dan tercampur  rata  kemudia  langsung  dituang kedalam botol steril dengan volume 20 ml botol -1 . Botol  kultur  ditutup  rapat  menggunakan  plastik alumunium  foil  dan  disterilkan  menggunakan autoclave pada  suhu  121 0 C  pada  tekanan  15 psi selama 20 menit.
4. Langkah  pembuatan  media  ini  dilakukan  sama ketika membuat media BAP 7 ppm.

## Sterilisasi dan Penanaman Eksplan
1. Mengupas tunas 1×5 cm dan dicuci menggunakan detergen sambil di sikat lalu dibilas menggunakan air bersih dan  mengalir sebanyak 3 kali cucian
2. Merendamkan  tunas  pada  larutan  tween  80  (3 tetes/300 ml aquades), fungisida (dithane 2g/400 ml  aquades),  bakterisida  (nordox  2g/400  ml aquades),  antibiotic  ( streptomicyn 0,2  g/  200  ml aquades).                Masing –  masing direnam selama 1 jam. Masing- masing perendaman tunas dibilas dengan aquades steril sebanyak 3 kali.
3. Tunas  dimasukan  kedalam LAF  (Laminar  Air Flow) dipotong  hingga  berukuran  3-4  cm dilajutkan  dengan  metode  sterilisasi  tetap  yaitu dengan  merendamkan  tunas    kedalam    larutan bayclin 30% (30 menit), 20%   (20 menit), 10% (10 menit). Kemudian tunas di bilas menggunakan aquades steril sebanyak 3 kali
4. Semua  peralatan  yang  di  gunakan  tadi  di  ganti dengan  yang  baru.  Lalu  eksplan  di  kupas  lagi hingga  berukuran  2-3  cm  dibelah  menjadi  dua bagian dan di celupkan kedalam larutan betadine 5% selama 1 menit
5. Tunas    langsung  di  tanam  pada  media  MS  yang sudah di siapkan.
Sterilisasi Dan Penggunaan Zat Pengatur Tumbuh……………………………..(Nathalia Unsong, Wenny Tilaar, Bertje Sumayku)

## Pemeliharaan
Botol-botol  kultur  yang  sudah  ditanam dipelihara di dalam ruang kultur dengan suhu 16- 20 0 C  dan  lampu  yang menyala  serta memisahkan eksplan  yang  terkontaminasi  dan  menjaga kesterilan alat-alat yang masuk kedalam ruangan.

## Pengamatan dan Pengambilan Data
Pengamatan  pada  teknik  dan  metode sterilisasi  eksplan  dilakukan  setiap  hari  selama penelitian  berjalan  dengan parameter  pengamatan adalah  jumlah eksplan  yang  tumbuh  dan kontaminasi.  Untuk  pengamatan  eksplan  yang dipindah tanam dilakukan 1 kali dalam seminggu selama 4 bulan berjalan. Parameter pengamatan pada perlakuan BAP antara lain : 1. Waktu Muncul Tunas Baru (Hari). Waktu muncul tunas baru yang ditanam pada media  dengan  penambahan  ZPT  BAP. Diamati  dan  dicatat  setiap  hari  saat munculnya tunas (dinyatakan dalam Minggu Setelah  Pindah  Tanam,  MSPT)  ditandai dengan  adanya  tonjolan  kehijauan  pada permukaan  eksplan.  Dikatakan  tunas  jika panjangnya sudah mencapai ± 2 mm.
2. Jumlah  Tunas  baru  yang  Tumbuh  (Buah). Jumlah  tunas  dihitung  dari  satu    minggu setelah  pindah  (MSPT)  sampai  pada  akhir pengamatan  dengan  cara  menghitung  jumlah tunas yang terbentuk.
3. Tinggi  Tunas    Baru  (cm).  Tinggi  tunas merupakan  salah  satu  variable  penting  dalam pengamatan  multiplikasi  tanaman.  Tunas dengan nodus yang banyak, akan memberikan eksplan yang banyak dalam kegiatan subkultur.  Hal ini disebabkan karena panjang tunas  dipengaruhi  oleh  interaksi  perlakuan yaitu  penambahan  zat  pengatur  tumbuh. Diukur  pada  akhir  penelitian  menggunakan penggaris  mulai  dari  tempat  muculnya  tunas sampai bagian paling ujung tunas.

## Analisis Data
Penelitian  ini  menggunakan  penelitian kualitatif.  Dimana  penelitian  ini  bertujuan memperoleh  gambaran  seutuhnya  mengenai  satu hal menurut pendangan manusia yang diteliti.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Teknik dan Metode Sterilisasi
Sterilisasi eksplan dilakukan untuk menekan  jumlah  mikroorganisme  yang  mungkin terbawa  saat  pengambilan  eksplan,  yang  dapat menimbulkan  kontaminasi  sehingga  menghambat pertumbuhan  eksplan  menjadi  tanaman  utuh. Sterilisasi  bertujuan  agar  eksplan  tersebut  dapat memperbanyak  diri  dan  beregenerasi  menjadi tanaman  yang  lengkap  kembali  dan  menjadi tanaman unggul serta bebas penyakit.
Teknik I dengan konsentrasi bayclin 30% (5 menit), 20% (10 menit), 10% (15 menit) dengan jumlah  eksplan  yang  ditanam  yaitu  sebanyak  15 botol.  Hari  pertama  dan  kedua  eksplan  tidak terkontaminasi.  Hari  ketiga  13  botol  eksplan terkontaminasi  dan  tersisa  2  botol  eksplan.  Hari  ke empat,  2  botol  eksplan  tersebut  ikut  juga terkontaminasi yang diakibatkan oleh bakteri dengan gejala berlendir pada area media dan eksplan.
Pada  teknik  ke  II  dengan  jumlah  eksplan yang  ditanam  sebanyak  7  botol  dengan  konsentrasi bayclin  30%  (10  menit),  20%  (20  menit),  10%  (30 menit).  Pada  hari  pertama  hingga  hari  ke-empat eksplan  masih  dalam  keadaan sehat  dan  belum terkontaminasi.  Hari  ke-5  ada  lima  eksplan mengalami kontaminasi  sehingga  tersisa  2  botol eksplan  namun  pada  hari  ke-6  dua  botol  eksplan tersebut ikut terkontaminasi juga oleh bakteri.
Pada  teknik  ke  III  jumlah  eksplan  yang ditanam sebanyak 5 botol dengan konsentrasi bayclin 30% (5 menit), 20% (10 menit) dan 10% (20 menit). Hari  pertama  sampai  hari  ke  empat  menunjukan bahwa  eksplan  masih  dalam  keadaan  sehat  namun ketika  hari  ke  lima  ada  1  botol  eksplan  yang mengalami kontaminasi sehingga tersisa 4 botol. Di hari  ke  tujuh  sisa  eksplan  tersebut  terkontaminasi diakibatkan oleh bakteri dengan gejala berlendir pada area eksplan dan media.
Teknik  ke  IV  eksplan  yang  ditanam sebanyak 4 botol yang di sterilisasi menggunakan metode  sterilisasi  bertingkat  konsentrasi  bayclin 30% selama 10 menit, 20% selama 15 menit, dan 10%  selama  30  menit.  Hari  pertama  hingga  pada hari  ketujuh  setelah  penanaman,  menujukkan bahwa  eksplan  masih  dalam  keadaan  sehat  dan tidak  menunjukan  adanya  gejala  kontaminasi.  Ke esokkan harinya seluruh eksplan tersebut terkontaminasi  dengan  gejala  yang  sama  seperti sebelumnya yang di lakukan yaitu terkontaminasi akibat  bakteri  dengan  gejala  berlendir  pada  area media dan eksplan.
Pada  teknik  V  dan  VI    metode  sterilisasi yang digunakan yaitu metode sterilisasi tetap dengan menggunakan  konsetrasi  bayclin  30%  selama  30 menit,  20%  selama  20  menit  dan  10%  selama  10 menit.  Teknik-teknik  yang digunakan  ini  juga  tidak berbeda  jauh  dengan  teknik  sterilisasi  sebelumnya. Pada  teknik  sterilisasi  yang  ke-  V,  eksplan  yang ditanam  sebanyak  3  botol.  Selama  ±  28  hari  (4 minggu) eksplan masih dalam keadaan sehat, namun pada  minggu ke-5,  1  botol  eksplan  mengalami kontaminasi  akibatkan  oleh  bakteri  sehingga tersisa 2 botol eksplan. Di minggu ke-6, dua  botol
eksplan  tersebut  ikut  terkontaminasi  oleh  bakteri. Dilanjutkan  pada  teknik  yang  ke-VI.  Teknik  dan metode Ke-6 ini berhasil membuat eksplan tumbuh selama 63 hari (9 minggu/ 2 bulan lebih). Melihat eksplan yang sudah tumbuh dalam keadaan sehat, maka  dilakukan  subkultur  atau  pindah  tanam  ke media perlakuan yang berisi zat pengatur tumbuh BAP masing-masing 5 ppm dan 7 ppm.
Eksplan  yang  mengalami  kontaminasi diakibatkan  oleh  jamur  dapat  dilihat  dengan  ciri- ciri  seperti  berwarna  abu-kehijauan  dengan  arah pertumbuhannya menyebar dari eksplan ke media, serta  produksi  spora  (gambar  A).  Sementara eksplan  yang  mengalami  kontaminasi  akibat bakteri  menunjukan  ciri-ciri  diantaranya  media menjadi  berwarna  lebih  keruh  atau  berwarna kecoklatan dan media menjadi lebih cair (gambar B).    Eksplan  yang  mengalami  kontaminasi diakibatkan  oleh  matinya  jaringan  tubuh  dengan ciri-ciri  eksplan  berubah  warna  menjadi  coklat kehitaman (Gambar C).
Waktu  Muncul  Tunas,  Jumlah  Tunas  baru yang  Tumbuh  (buah)  dan  Tinggi  Tunas  Baru (cm).
Pada perlakuan BAP ada 2 jenis konsetrasi yang digunakan yaitu 5 ppm  dan 7 ppm. Minggu ke-3 setelah disubkultur ada beberapa eksplan yang mengalami  kontaminasi  yakni  1  botol  pada perlakuan 5 ppm dan 1 botol pada perlakuan 7 ppm sehingga yang tersisa 2 botol eksplan yang tumbuh pada masing-masing perlakuan BAP 5 ppm dan 7 ppm.  Minggu  ke-11  setelah  pindah  tanam, perlakuan BAP 7 ppm muncul 1 tunas baru disusul lagi  pada  minggu  ke  13  muncul  lagi  1  tunas.  Di minggu ke 14 perlakuan BAP 5 ppm mengeluarkan tunas  pertama  disusul  minggu  ke-16  sampai minggu  ke-18  jumlah  tunas  yang  dihasilkan sebanyak 4 tunas baru. Pada BAP 7 ppm diminggu ke-16  sampai  minggu  ke-18  jumlah  tunas  yang dihasilkan  sebanyak  5  tunas  baru.  Pernyataan tersebut dapat dilihat pada (Tabel 2).
Sterilisasi Dan Penggunaan Zat Pengatur Tumbuh……………………………..(Nathalia Unsong, Wenny Tilaar, Bertje Sumayku)
Tabel 3.    Tinggi   tunas baru    pada  perlakuan  BAP  5  ppm  dan 7 ppm. Tunas Perlakuan  Zat Pengatur Tumbuh  BAP (Benzile amino purin) 5 ppm (Cm) 7 ppm (Cm) 1 0,4 0,9 2 0,3 0,3 3 0,5 0,4 4 0,3
0,4 5 0 0,5
Waktu  muncul  tunas  dihitung  dari  awal penanaman ke media perlakuan hingga terbentuknya tunas.  Jumlah  tunas  yang  tumbuh  dan  berkembang pada  eksplan  bonggol  pisang  abaka  ditentukan dengan  menghitung  jumlah  tunas  yang  terbentuk pada akhir pengamatan (120 HST), dapat dilihat pada gambar 3 dan  4. Mok (1987) menyatakan waktu yang dibutuhkan  untuk  pembentukan  tunas  adalah  10 sampai 20 hari pada tanaman pisang.
Hasil  penelitian  pada  perlakuan  BAP  5 ppm jumlah eksplan yang tumbuh sebanyak 4 tunas sedangkan pada BAP 7 ppm jumlah yang tumbuh ada 5 tunas. Setelah 3 minggu pengamatan jumlah tunas,  dilajutkan  dengan  melakukan  subkultur tunas-tunas  yang  ada  dengan  memindahkannya pada media baru yang berisi zat pengatur tumbuh BAP 7 ppm dengan jumlah 9 botol.
BAP  memiliki  aktivitas  yang  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  sitokonin  turunan  adenine jenis  lain.  Berat  molekul  BAP  adalah  225,26  g mol-1.  BAP  merupakan  sitokinin  yang  lebih ekonomis  dan  seringkali  digunakan  untuk merangsang  multiplikasi  tunas  aksilar  pada konsentrasi  0,5-10  mg  L-1  Pradana  (2011).  BAP mempengaruhi pertambahan jumlah tunas, terutama pada perlakuan perlakuan BAP 7,5 mg L- 1 di hasilkan 8 tunas Tilaar dan Sompotan (2007). Zat  pengatur  tubuh  golongan  sitokinin  pada konsentrasi yang tinggi dapat mendorong pembentukan  tunas  adventif  dan  tunas  aksilar (lateral) dan mengurangi pengaruh dominasi apikal Dahnil  (2004).  Dalam  perbanyakan  tanaman melalui  kultur  jaringan  yang  ditambahkan  zat pengatur  tumbuh  membentuk  tipe  pertumbuhan kultur seperti tunas, akar, dan daun. Mastuti (2017) mengatakan jika rasio auksin dan sitokinin masing- masing  lebih  tinggi  dari  yang  lain  maka  akan menghasilkan organogenesis langsung.
Dalam  perbanyakan  tanaman  melalui kultur  jaringan  yang  ditambahkan  zat  pengatur tumbuh  membentuk  tipe  pertumbuhan  kultur seperti tunas, akar, dan daun. Pertumbuhan eksplan
yang  baik  ini disebabkan  karena  eksplan  yang digunakan  berasal  dari  bonggol  pisang  abaka yang  bersifat  meristematik.  Selain  itu  juga disebabkan oleh cara atau metode sterilisasi yang tepat  sehingga  eksplan  mampuh  beradaptasi dengan media yang digunakan. Media yang ada sudah  cukup  untuk  eksplan  tetap  hidup  namun untuk  terbentuknya  planlet  perlu  ditambahkan zat  pengatur  tumbuh  seperti  salah  satu  contoh BAP  (sitokinin)  yang  membantu  dalam  proses pertumbuhan tunas.
Menurut  Liana  (2007)  pembentukan tunas  yang  cepat  disebabkan  karena  eksplan yang  digunakan  adalah  bonggol  pisang,  sudah ada calon mata tunas yang dapat tumbuh sebagai bibit  dengan  ciri  bentuknya  bulat,  warnanya lebih bening dari daging bonggol. Selain itu juga disebabkan oleh eksplan yang mampu beradaptasi  dengan  media  perlakuan.  Hal  ini sesuai dengan pendapat Hutami (2003) mempertegas bahwa faktor multiplikasi dari satu eksplan  sangat  ditentukan  oleh  kesegaran eksplan,  media  kultur,  dan  frekuensi  subkultur. Menurut  Guswira  (2005) daya  hidup  yang  baik disebabkan  karena  eksplan  yang  digunakan berasal  dari  jaringan  meristem  tunas  yang bersifat  meristematik,  jaringannya  masih  muda dan sel-selnya aktif membelah.
Eksplan yang dikulturkan secara in vitro menunjukan  perubahan  setelah  beberapa  hari setelah ditanam pada media, perubahan warna dari putih kehijauan menjadi kecoklatan yang menandakan bahwa ekplan mengalami pencoklatan ( browning ) yang disebabkan oleh oksidasi  senyawa  fenolik  akibat  jaringan eksplan  yang  dilukai.  Kultur  bonggol  pisang yang browning tetap hidup  dan  mengalami pertumbuhan karena tingkat browning nya tidak menghambat pertumbuhan eksplan. Hal tersebut disebabkan  oleh  tingkat  konsentrasi  dari kombinasi zat pengatur tumbuh yang digunakan dapat menunjang eksplan tetap hidup.
Menurut  pendapat  Onuha  (2011)  pada jaringan  pisang  terdapat  enzim-enzim  fenolik terutama  enzim  polifenol  oksidase  yang merupakan  auksin  yang  penting  secara  alami pada pisang. Berdasarkan pendapat Sadat (2017) bahwasanya  sintesis  senyawa  fenolik  yang menutupi permukaan eksplan berasal dari bagian
tanaman  yang  mengalami  luka  yang  apabila keadaan  ini  terus  berlangsung  maka  senyawa yang terakumulasi pada media dapat menyebabkan penyerapan unsur-unsur hara oleh eksplan terganggu sehingga menghambat pertumbuhan  eksplan.  Menurut  Ahmad,  Zaidi, Iqbal  dan  Shah  (1995)  waktu  yang  dibutuhkan untuk pencoklatan dipengaruhi oleh konsentrasi dan kombinasi zat pengatur tumbuh dalam media induksi  sehingga  dapat  mempertahankan  kalus tetap  putih  kehijauan  (hidup)  selama  10-13 minggu.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah di  lakukan  maka  dapat  di  simpulkan  bahwa metode  sterilisasi  yang  tepat  adalah    metode sterilisasi  tetap  dengan  perlakuan  bayclin konsetrasi 30% selama (30 menit), 20% selama (20  menit),  10%  selama  (10  menit)  dengan beberapa teknik-teknik yang dilakukan sehingga eksplan berhasil tumbuh yaitu pada teknik yang ke-6.
Induksi  tunas  eksplan  bonggol  pisang abaka  pada  perlakuan  BAP  yang  paling  baik yaitu pada perlakuan 7 ppm dengan jumlah tunas yang dihasilkan sebanyak 5 buah tunas. Dengan tinggi masing-masing tunas yaitu :
a. Tunas 1 : 0,9 cm
b. Tunas 2 : 0,3 cm
c. Tunas 3 : 0,4 cm
d. Tunas 4 : 0,4 cm
e. Tunas 5 : 0,5 cm

## Saran
Penelitian ini dapat dilajutkan pada tahap sub  kultur,  pembesaran  dan  aklimatisasi. Sementara  itu  teknik  dan  metode  yang disarankan untuk dilakukan sebaiknya menggunakan  teknik  yang  ke  6  dengan  metode sterilisasi tetap. Sambil memperhatikan kebersihan  diri,  lingkungan  serta  alat-alat  yang akan digunakan dan harus benar-benar konsetrasi  agar  pekerjaan  dapat  terselesaikan dengan maksimal.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, Z.A., N. Hussain,  Z. Zaidi,  Iqbal & Shah. 1995.  A  study    of      relationship    between growth    regulators    and    browning    in Pistacia vera  Calii.  Plant  Tiss  Cult,  5(2) : 125-129.
Danhil,  M.S..  2004.  Studi    tentang    Pemberian Hormon    BAP    dan    Kinetin  terhadap Pertumbuhan  Tunas  Azadirachta  excels
(Jeck) M. Jacobs. Skripsi. Fakultas Kehutanan,    Institut    Pertanian    Bogor. Bogor. Gambar rumus molekul BAP. https://cs.wikipedia.org/wiki/6- Benzylaminopurin.
George,  E.F.,  and  P.D.  Sherrington.  1984.  Plant Propagation  by  Tissue  Culture. Handbook
and Directionary of Commersial
Laboratories. Exegetic  Ltd.  England.
Guswira,  E.D..  2005.  Kultur  Tunas  Pisang  Raja Serai  Pada    Medium  Murashige-Skoog (MS) Dengan Penambahan BAP dan NAA.
Universitas Andalas. Padang.
Hutami, S., & R. Purmaningsih. 2003.
Perbanyakan Klonal Temu Mangga (Curcuma mangga) Melalui Kultur In Vitro. Buletin Plasma Nutfah, 9(1): 1-12.
Liana,  R..  2007.  Respon  Pisang  Talas  (Musa paradisiaca  var.  sapientum)  Terhadap
Pemberian  Zat  Pengatur  Tumbuh  IAA (Indole  Acetic  Acid)  dan  BAP  (Benzyl Amino  Purin)  Melalui  Teknik  Kultur
Jaringan.  Skripisi.  Universitas  Lampung. Bandar Lampung.
Mastuti, R.. 2017. Dasar – dasar  Kultur  Jaringan. UB  Press. Malang.
Onuha,  I.C.,  C.J.  Eze,  C.I.N.Unamba.  2011.  In Vitro Prevention in Plaintain Culture. Online
Journal of Biological Sciences, 11(1):13-17.
Pradana,  O.C.P..  2011.  Pengaruh    Konsentrasi Benzileadenine    dan    Kinetin    pada Multiplikasi  Tunas  Pisang  Ambon  Kuning in  vitro.    Skripsi.  Universitas    Lampung. Bandar  Lampung.
Sadat,  M.S.,  2017.  Pengaruh    IAA    dan    BAP terhadap  induksi  tunas  mikro  dari eksplan bonggol    pisang  kapok  (Musa  paradisiaca L). Fakultas Pertanian, Universitas Sumatera  Utara.  Medan. Santoso, U. & F. Nursandi. 2004. Kultur Jaringan Tanaman. Universitas Muhamadiyah Malang. Malang.
Sugiri,  A..  2005.  Pembentukan  Kalus  Embrioid Kultur  Ovary  Pisang  Melalui  Beberapa Komposisi  Media  Kultur.  Jurnal  Falsafah Sains Program Magister, (1): 1-8.
Tilaar, W. dan  S.  Sompotan.  2007. Perbanyakan in vitro pisang barangan (Musa  Paradisiaca Var.  Sapientum L.) pada  media  murashige dan  skoog    dengan    penambahan  Benzyl Amino Purin.  Eugenia, 13 (2) : 127-131.
Triyanto, H.S., Muliah,  dan M.  Edi. 1982. Batang abaka  (Musa  textilis  Nee)  sebagai    bahan baku  kertas. Berita Selulosa. 17 (2): 1-27.
Wibowo,  A..  1998.  Abaca    (Musa  textilis  Nee) penghasil serat. Duta  Rimba 24 (222) : 31- 37.