Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, Vol. 8 No.2  Desember 2022 Avaiable online at www.jurnal-pharmaconmw.com/jmpi p -ISSN : 2442-6032 e -ISSN :  2598-9979
Potensi  Bajakah  Tampala  ( Spatholobus  littoralis Hassk)  Sebagai Antibakteri dan Antijamur Terhadap Staphylococcus aureus dan Candida albicans
Chaerul Fadly Mochtar 1,2 , Lysa Oktaviani Saleh 1 , Hasyrul Hamzah 1,2 , Nita Magfirah Ilyas 3 1 Program Studi Farmasi, Universitas Muhammadiyah Kalimantan Timur
2 Pusat Kolaborasi Riset Biofilm Indonesia
3 Program Studi Pendidikan Kimia, Universitas Negeri Makassar

## ABSTRAK
Bajakah  Tampala  merupakan  tanaman  asli Kalimantan  Timur  yang  mempunyai  aktivitas antibakteri,  tetapi  hingga  saat  ini  aktivitas antibakteri  dan  antijamurnya  terhadap S.  aureus dan C.  albicans belum  ada  yang  melaporkan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi bajakah  tampala  sebagai  antibakteri  terhadap S. aureus dan  antijamur C.  albicans. Efektivitas antibakteri  bajakah  tampala  terhadap S.  aureus dan antijamur C. albicans dilakukan menggunakan metode microbroth dilution dengan melihat   nilai minimal    inhibitory concentration
(MIC 50 ).  Ekstrak  etanol  kulit  bajakah  tampala mempunyai  senyawa  flavonoid,  alkaloid  dan terpenoid.  Ekstrak  etanol  bajakah  tampala mempunyai  aktivitas  terhadap  antibakteri S. aureus serta  antijamur C.  albicans. Oleh  karena itu,  etanol  kulit  bajakah  tampala  dapat dikembangkan menjadi kandidat agen antibakteri dan atijamur terhadap S. aureus dan C. albicans.
Kata  Kunci  :  Bajakah  Tampala,  Bakteri,  Jamur, Staphylococcus aureus, Candida albicans

## ABSTRACT
Bajakah  Tampala  is  a  native  plant  of  East Kalimantan  which  has  antibacterial  activity,  but until  now  its  antibacterial  and  antifungal  activity against  S.  aureus  and  C.  albicans  has  not  been reported.  This  study  aims  to  determine  the potential  of  bajakah  tampala  as  an  antibacterial against  S.  aureus  and  antifungal  C.  albicans.  The antibacterial  effectiveness  of  Bajakah  tampala against   S.  aureus  and  antifungal  C.  albicans  was carried  out  using  the  microbroth  dilution  by looking at the   minimum  inhibitory  concentration
(MIC 50 ).  The  ethanol  extract  of  Bajakah  tampala bark  has  flavonoid,  alkaloid  and  terpenoid compounds.  Bajakah  tampala  ethanol  extract  has antibacterial  activity  against  S.  aureus  and antifungal C. albicans. Therefore, the ethanol of the tampala rhizome can be developed as a candidate for  antibacterial  and  antifungal  agents  against  S. aureus and C. albicans.
Keywords  :  Bajakah  Tampala,  Bacteria,  Yeast, Staphylococcus aureus, Candida albicans
Penulis Korespondensi : Informasi Artikel Lysa Oktaviani Saleh Submitted : 03 Agustus 2022 Program Studi Farmasi, Universitas Muhammadiyah Kalimantan Timur Accepted : 08 September 2022 E-mail : lysaoktaviani081000@gmail.com Published : 27 Desember 2022 DOI :https://doi.org/10.35311/jmpi.v8i2.212

## PENDAHULUAN
Indonesia adalah salah  satu  negeri
dengan mega biodiversitas karena mempunyai  hutan  tropis  terluas  ke  2 didunia  dan  mempunyai  sekitar  20.000 jenis  tanaman  obat,  tetapi  kurang  lebih 1.000  macam  tanaman  saja  yang  terdata dan telah dimanfaatkan buat pengobatan tradisional  namun  hanya  kurang  lebih 300 macam (Hariana;, 2013). Masyarakat Indonesia memiliki cara untuk mengobati berbagai  macam  penyakit,  salah  satunya ialah dengan menggunakan obat
tradisional. Obat
tradisional menggunakan  bahan  alami  nabati  yang memiliki kandungan senyawa kimia yang disebut  metabolit  sekunder.  Tanaman bajakah  ( Spatholobus  littoralis Hassk) adalah  salah  satu  dari  4.444  tanaman obat  tradisional  yang  tersedia  bagi penduduk pedalaman Kalimantan.
Warga  negara  Indonesia  yang bersuku  Dayak  memiliki  kepercayaan sejak dahulu, tanaman bajakah digunakan dalam  pengobatan  untuk  memulihkan tenaga  ketika  beraktivitas  didalam  hutan dan dapat dipercaya mampu memulihkan beragam  penyakit  lainnya.  Berdasarkan penelitian  kualitatif,  tanaman  bajakah tampala  memiliki  senyawa  saponin, flavonoid, fenolik serta tanin.
Kandungan  senyawa  metabolit  sekunder yang terdapat pada tanaman
bajakah tampala
mampu
meyembuhkan  berbagai  macam  penyakit degeneratif,  seperti  kencing  manis,
kanker,  tumor  dan  lain-lain  (Anshari;, 2013).
Tanaman bajakah tampala mampu memberikan penyembuhan dalam proses pengobatan  penyakit  kanker  (Syarifah  et al.,  2015).  Tanaman  bajakah  tampala selain  mempunyai  senyawa  saponin, flavonoid  serta  tannin,  ternyata  juga mempunyai  kadar  senyawa  fenolik sebanyak  12,33  GAE/mg  (Ayuchecaria  et al.,  2020).  Tanaman  bajakah  tergolong dalam genus Spatholobus adalah tanaman berkayu yang tumbuh di pohon berdasarkan suku Phaseolaea. Justus Karl Hasskal  merupakan  pakar  nabati  yang berasal  dari  negara  Jerman  pertama  kali menemukan  tanaman  tersebut  di  tahun 1842 (Saputera & Ayuchecaria, 2018).
Sampai  saat  ini,  studi  pencarian senyawa  antibakteri  dan  antijamur  dari tanaman  bajakah  tampala  masih  sangat sedikit.  Oleh  karena  itu,  berdasarkan permasalahan diatas dalam penelitian  ini akan  mengkaji  potensi  bajakah  tampala ( Spatholobus  littoralis Hassk)  sebagai antibakteri  dan  antijamur  terhadap S. aureus dan C. albicans.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  dengan design  studi  eksperimental in  vitro menggunakan  pembacaan microplate reader .  Hasil  pembacaan microplate reader berupa  nilai  OD  yang  akan digunakan  untuk  menghitung  persen penghambatan.  Akumulasi  data  yang
digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah observasi.  Observasi  yaitu  suatu  teknik pengumpulan  data  dengan  mengamati secara  langsung  objek  yang  diteliti menggunakan  mikrodilusi  dari  ekstrak bajakah  tampala  dengan  4  kadar konsentrasi  yang  berbeda  yaitu  1%  b/v, 0,5% b/v, 0,25% b/v, 0,125% b/v terhadap bakteri S.  aureus dan  jamur C.  albicans yang  terdapat  pada  media  BHI  dan kontrol obat ciprofloxacin dan flukonazole.  Teknik  analisis  data  dengan mengukur  absorbansi  dan  rata-rata  pada pengelolaan menggunakan MIC 50 .
Alat
Autoclave  ( Sakura,  Japan ),  blue tip, cover slip (2001212mm)(spl),
inkubator (If-2b)( Sakura, Japan ), laminar air flow ( LAF) , micropipette flat- bottom polystyrene 96 dan 24 well ( Iwaki, Japan ), micropipette  pipetman ( Gilson,
France ), microtiter  plate  reader ( Optic Ivymen System 2100-c, Spain ), peralatan gelas,  silika  gel  f254  10x10cm  ( Merck, Germany ), Spektrofotometer ( Genesys 10 yv  Scanning,  335903((thermo  scientific spectronic,  USA) ,  timbangan  analitik
( ab204-5, Switzerland ), white tip, yellow tip.

## Bahan
Aquadest,  bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923, etanol, media BHI, , jamur Candida  albicans ATCC  10231 , tanaman  bajakah  tampala  diperoleh didalam  hutan  yang  berlokasikan  di
Kabupaten  Berau  Provinsi  Kalimantan Timur.

## Metode Kerja

## Pengambilan sampel
Sampel  yang  diambil  berasal  dari kabupaten Berau.

## Determinasi tanaman
Bajakah tampala dilakukan determinasi  di  Laboratorium  Biologi, Fakultas  Farmasi,  Universitas  Gadjah Mada  Yogyakarta  untuk  memastikan bahwa  tanaman  yang  digunakan  dalam penelitian ini akurat. Determinasi tumbuhan  bajakah  tampala  di  lakukan dengan  mencocokkan  ciri-ciri  morfologi yang ada pada tumbuhan dengan literatur.

## Pembuatan ekstrak
Serbuk  simplisia  kulit  batang bajakah  tampala  dimasukkan  kedalam bejana  gelap,  lalu  dimasukkan  pelarut etanol  96%  sebanyak  750ml  kemudian ditutup  rapat  dan  hindarkan  cahaya matahari secara langsung. Proses perendaman membutuhkan waktu selama  3  hari  dengan pengadukan  setiap 8  jam  sekali.  Maserat  diendapkan semalaman, kemudian lakukan pemisahan residu dan lakukan pemekatan dengan  suhu  40°C  menggunakan rotary evaporator untuk  memperoleh  ekstrak kental  etanol  bajakah  tampala  (Hamzah, Rasdianah, et al., 2021).
Uji metabolit sekunder
Ekstrak kental yang telah diencerkan  menggunakan  pelarut  etanol
ditotolkan  di  sepanjang  lempeng  tepi bawah  dan  diangin-  anginkan  beberapa detik,  lalu  lempeng  diletakkan  ke  dalam chamber yang  telah  berisi  eluen  yaitu  n- heksan:etil asetat menggunakan perbandingan  3:1.  Lempeng  dibiarkan terelusi  terlebih  dahulu  sehingga  eluen akan  mencapai  batas  atas  lempeng,  lalu lempeng  dikeluarkan  dan  dikeringkan  di udara.  Deteksi  dilakukan  menggunakan sinar UV 254nm, 366nm dan menggunakan pereaksi semprot
anisaldehid asam sulfat, liberman bourchat,  dragendroff  (Maulina  et  al., 2019).

## Penyiapan bakteri
Bakteri S.  aureus ditumbuhkan dalam media BHI ( Brain Heart Infusion ) pada temperatur 37°C dengan memerlukan  waktu  sebanyak  24jam. Jamur C.  albicans ditumbuhkan  di sabouraud  dextrose  broth (SDB)  pada suhu 37°c selama 72 jam. Kepadatan optik dari  600  kultur  mikroba  disesuaikan menjadi 0,1 sesuai standar Mcfarland 0,5 -  1,5  x  108  CFU/ml),  dan  kemudian diencerkan  dalam  media  pertumbuhan baru OD 600 0.01 untuk bakteri dan OD 520 0.38 untuk jamur (Hamzah, Siregar, et al., 2021) .

## Uji antibakteri dan antijamur
Metode  mikrodilusi  digunakan untuk pengujian antibakteri.
Dilakukan pengujian menggunakan microtiter  plate  flat-bottom  polystyrene 96 wells terdapat 4 kekuatan konsentrasi senyawa  uji  meliputi  1%,  0,5%,  0,25%, 0,125%  b/v.  Obat  ciprofloxacin  dan  obat flukonazole  adalah  kontrol  obat  yang digunakan  dalam  penelitian.  Suspensi mikroba  digunakan  sebagai  kontrol pertumbuhan dan kontrol pelarut disesuaikan dengan pelarut senyawa uji ke dalam  masing-masing wells  microplate , kemudian  dimasukkan  media  BHI.  Lalu dilakukan  masa inkubasi, membutuhkan waktu  selama  24  jam  untuk  bakteri  dan 72  jam  untuk  jamur  pada  suhu  37°C.
Sistem pembacaan absorbansi memerlukan  alat microplate  reader dengan  panjang  gelombang  595  nm (Hamzah, Hertiani, Utami, Nuryastuti, et al., 2020; Hamzah, Hertiani, et al., 2021).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengambilan sampel
Kegiatan pertama dalam penelitian ini  melakukan  pengambilan  sampel  kulit batang bajakah tampala berlokasi di hutan yang terletak di Kabupaten Berau Provinsi Kalimantan  Timur.  Sampel  bajakah tampala  yang  telah  dikeringkan  terdapat pada gambar 1.

## Gambar 1. Sampel bajakah tampala yang telah dikeringkan

## Pembuatan ekstrak
Ekstrak  bajakah  tampala  diambil dengan  menggunakan  metode  maserasi pada bagian kulit batang bajakah tampala. Proses  pengambilan  ekstrak  dengan  cara serbuk  kulit  batang  bajakah  tampala ditimbang, kemudian dilakukan maserasi dengan  menggunakan  pelarut  etanol hingga simplisia terendam secara sempurna  didalam  pelarut.  Maserasi memerlukan waktu selama 3x24 jam dan proses tersebut dilakukan secara berulang, sehingga diperoleh filtrate yang bening. Kertas saring whatman dipergunakan  untuk  memisahkan  ampas simplisia  yang  merupakan  hasil  dari maserasi tersebut, lalu diuapkan
menggunakan alat rotary vacuum evaporator pada  temperature  40  hingga 45°C dengan kecepatan 65 hingga 90rpm, sehingga diperoleh ektrak yang kental.

## Hasil uji metabolite sekunder
Penelitian  ini  memperoleh  hasil dari analisis kromatografi lapis tipis/KLT bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan yang  terdapat  dalam  tanaman  tersebut. Analisis menggunakan kromatografi lapis tipis/KLT  untuk  melakukan  pemisahan kandungan  kimia  berdasarkan  prinsip adsorbansi  dan  partisi  yang  telah ditentukan  menggunakan  fase  diam (adsorben) dan fase gerak (eluen). Berikut adalah hasil yang telah diperoleh:

## Tabel 1. Hasil identifikasi ekstrak dengan pereaksi
No. Jenis Identifikasi Pereaksi Warna Noda 1 Flavonoid Sitroborat Kuning 2 Alkaloid Dragendrof Orange 3 Terpenoid Anisaldehid asam sulfat Merah Keunguan

## Hasil uji antibakteri dan antijamur
Hasil diagram dibawah (gambar 2), diketahui ekstrak etanol Bajakah Tampala dapat             memberikan              aktivitas
terhadap  antibakteri S.  aureus dan antijamur C.  albicans pada  kadar konsentrasi  1%  hingga  0,125%.  Dimana aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol
0 20 40 60 80 100 1% 0,5 0,25% 0,13%
Ciprofloxacin Fluconazole Aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus dan antijamur Candida albicans S. aureus
C. albicans
bajakah  tampala  ditunjukkan  pada antibakteri S. aureus sebesar 82.30 % dan antijamur C.  albicans sebesar  85,77% pada konsentrasi 1% b/v.
Hasil  ini  (gambar  2)  memberikan bukti  bahwa  senyawa  alkaloid  memiliki potensi  untuk  dikembangkan  sebagai antibakteri.  Senyawa  yang  mempunyai aktivitas sebagai antibakteri yaitu alkaloid dengan memperlambat respirasi sel serta memiliki  fungsi  saat  interkalasi  pada DNA.  Proses  penghambatan  biosintesis asam  nukleat  jamur  disebabkan  oleh senyawa  alkaloid,  yang  mengakibatkan pertumbuhan pada jamur tidak berkembang dan jamur menjadi mati serta senyawa  lain  yaitu  flavonoid  mempunyai efek  farmakologi  sebagai  antijamur. Senyawa  flavonoid  memiliki  kemampuan dalam  membentuk  kompleks  dengan senyawa lain yaitu protein dan terjadinya kerusakan pada membran sel dengan cara mendenaturasi  ikatan  protein  pada membran  sel,  maka  membran  sel  akan menyebabkan  lisis  dan  senyawa  tersebut mampu  melewati  kedalam  inti  sel  yang membuat  jamur  tidak  dapat  bertumbuh. Kelompok  senyawa  terbanyak  di  alam
yang  diketahui  sebagai  antioksidan  efek antibakteri serta antijamur yang disebabkan  memiliki  gugus  fenol  disebut senyawa  flavonoid.  Gugus  fenol  yang terkandung  dalam  flavonoid  mampu mengkoagulasikan  senyawa  protein  serta menurunkan  tegangan  permukaan  pada sel  mikroba  (Hamzah,  Hertiani,  Utami, Pratiwi, et al., 2020).
Protein  ekstraselular  dan  protein terlarut akan terbentuk menjadi kompleks dengan dinding sel merupakan kemampuan  yang  dimiliki  oleh  senyawa flavonoid,  sedangkan  membran  mikroba akan  terganggu  disebabkan  oleh  lipofilik yang  berasal  dari  flavonoid  (Hamzah, Hertiani,  Utami,  Pratiwi,  et  al.,  2020). Kondisi  ini,  membuat  penjagaan  sistem dari  jamur C.  albicans dalam  proses pertumbuhannya  akan  terhambat  secara perlahan. Senyawa bioaktif yang mempunyai  fungsi  sebagai  antijamur yaitu  triterpenoid  yang  tergolong  dalam terpenoid.  Pertumbuhan  jamur  akan terhambat  meskipun  melewati  membran sitoplasma  maupun  pertambahan  spora jamur  yang  disebabkan  oleh  adanya terpenoid.
Gambar  2.  Aktivitas  antibakteri Staphylococcus  aureus dan  antijamur Candida  albicans pada ekstrak etanol bajakah tampala

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  bajakah  tampala
memiliki aktivitas penghambatan
antibakteri secara in vitro pada mikroorganisme Staphylococcus  aureus dan Candida albicans dengan menggunakan  kontrol  obat  ciprofloxacin memberikan  aktivitas  pada  bakteri Staphylococcus  aureus 83,21%  ±  0,01 sedangkan  pada kontrol obat flukonazole memberikan aktivitas 74,20% ± 0,01 pada jamur Candida albicans .

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengutarakan  rasa  terima kasih  untuk  Laboratorium  Mikrobiologi
Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah  Kalimantan  Timur  dan Pusat  Kolaborasi  Riset  Biofilm  Indonesia atas dukungan isolat bakteri dan beberapa bahan habis pakai yang digunakan selama penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Anshari;,  M.  I.  (2013). Isolasi  dan identifikasi senyawa kimia fraksi etil asetat  batang  Bajakah  Tampala (Spatholabus  Littoralis  Hassk.)  asal Kal - Tengah . Ayuchecaria, N., Saputera, M., & Niah, R. (2020).  Penetapan  Kadar  Fenolik Total Ekstrak Batang Bajakah Tampala (Spatholobus littoralis Hassk.) Menggunakan Spektrofotometri  Uv-Visible. Jurnal
Insan  Farmasi  Indonesia , 3 (1  SE- Articles). https://doi.org/10.36387/jifi.v3i1.47 8
Hamzah,  H.,  Hertiani,  T.,  Utami,  S., Nuryastuti,  T.,  &  Puspitasari,  A. (2020). Antibiofilm studies of
zerumbone  against  polymicrobial biofilms  of  Staphylococcus  aureus,
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa,  and  Candida  albicans. International Journal of
Pharmaceutical Research , 12 , 1307– 1314.
https://doi.org/10.31838/ijpr/2020. SP1.211
Hamzah,  H.,  Hertiani,  T.,  Utami,  S., Pratiwi, T., Nuryastuti, T., & Murti, Y. B. (2020). The biofilm inhibition and eradication  activity  of  curcumin againts  polymicrobial  biofilm. BIO Web  of  Conferences , 28 ,  04001. https://doi.org/10.1051/BIOCONF/2
0202804001 Hamzah, H., Hertiani, T., Utami Tunjung Pratiwi, S., Nuryastuti, T., Kalimantan  Timur,  M.,  Biologi Farmasi,  D.,  Farmasi,  F.,  Gadjah Mada, U., Mikrobiologi, D., Kedokteran,  F.,  &  Masyarakat  dan Keperawatan, K. (2021). Efek Saponin  Terhadap    Penghambatan Planktonik dan Mono-Spesies Biofilm Candida  albicans  ATCC  10231  pada Fase  Pertengahan,  Pematangan  dan Degaradasi. Majalah  Farmaseutik , 17 (2),
198–205. https://doi.org/10.22146/FARMASE UTIK.V17I2.54444 Hamzah, H., Rasdianah, N., Nurwijayanto,  A.,  &  Nandini,  E.
(2021).  Aktivitas  Ekstrak  Etanol Daun  Calincing  terhadap    Biofilm Candida Albicans. Jurnal Farmasetis , 10 (1), 21–28.
https://doi.org/10.32583/FARMASE
TIS.V10I1.1319
Hamzah,  H.,  Siregar,  K.  A.  A.  K., Nurwijayanto, A., Wahyuningrum, R., &  Sari,  S.  (2021).  Effectiveness  of Oxalis corniculata L. Ethanol Extract against  Mono-Species  of  Biofilm Staphylococcus aureus. Borneo
Journal of Pharmacy , 4 (3), 184–191. https://doi.org/10.33084/BJOP.V4I 3.2418
Hariana;, A. (2013). 262 Tumbuhan Obat dan Khasiatnya / Arief Hariana . 412.
//senayan.iain- palangkaraya.ac.id/index.php?p=sho w_detail&id=9659
Maulina,  S.,  Pratiwi,  D.  R.,  &  Erwin,  E. (2019). Skrining  Fitokimia  Dan Bioaktivitas  Ekstrak  Akar  Uncaria nervosa Elmer (Bajakah) .
Saputera,  M.  M.  A.,  &  Ayuchecaria,  N.
(2018).  Uji  Efektivitas  Ekstrak Etanolik  Batang  Bajakah  Tampala (Spatholobus littoralis Hassk.) Terhadap Waktu Penyembuhan Luka.
Jurnal  Ilmiah  Ibnu  Sina , 3 (2),  318– 327.
https://doi.org/10.36387/JIIS.V3I2. 185
Syarifah, R. S., Mulyanti, D., & Gadri, A. (2015). Formulasi Sediaan Masker Gel Peel-Off Ekstrak Daun Pepaya (Carica Papaya L.) sebagai Antijerawat Dan Uji Aktivitasnya terhadap Bakteri Propionibacterium Acnes. Prosiding Farmasi , 0 (0), 662–670. https://doi.org/10.29313/.V0I0.228
3