## EFEKTIVITAS CENDAWAN ENTOMOPATOGEN ISOLAT LOKAL TERHADAP HAMA KUMBANG UBI JALAR Cylas formicarius

## FABRICUS
1) Nina Jeni Lapinangga, SP, M.Si    2) Yosefus F. da Lopez, SP, M.Sc
1) Dosen Politeknik Pertanian Negeri Kupang, email: ninalapinangga@yahoo.co.id
2) Dosen Politeknik Pertanian Negeri Kupang, email: yosdapisco@gmail.com

## ABSTRACT
Sweet potato production is plagued by pests Cylas formicarius Fabricus. These pests can be  controlled  by  using  entomopathogenic  fungus  as  a  biological  control  agent.  Local biological  agents  will  have  a  better  adaptation  and  higher  performance  to  control  pests compared with biological agents which are introduced from other areas. This study aims to explore  the  local  isolate  entomopathogenic  fungal  species,  identify  and  testing  the pathogenicity  on  C.  formicarius.  Implementation  of  the  study  consists  of  several  stages: collection  and  maintenance  of  insects,  exploration  entomopathogenic  fungus,  and  the effectiveness  test  of  entomopathogenic  fungal  isolates  in  the  laboratory.  The entomopathogenic fungus types which can be found in South Central Timor is Metarhizium anisopliae  and  Beauveria  bassiana.  Both  of  these  fungi  cause  mortality  in  larvae  of  C. formicarius  respectively  by  80.75%  (Metarhizium  anisopliae)  and  80.25%  (Beauveria bassiana).  Therefore,  both  types  of  the  fungus  should  be  developed  as  a  biopesticide  for controlling pests C. formicarius.
Keyword : Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Cylas formicarius

## PENDAHULUAN
Sebagai  pangan  alternatif  sumber  karbohidrat  pengganti  beras,  ubi  jalar dapat  dikembangkan  untuk  memperkuat  ketahanan  pangan  masyarakat (Gsiantury, 2003). Kabupaten Timor Tengah Selatan (TTS) termasuk daerah yang saat ini sedang menggalakan penanaman ubi jalar. Produktivitas ubi jalar di TTS pada  tahun  2013  sebesar  130,20  kw/ha,  jauh  lebih  rendah  dari  pada produktivitas  nasional  yaitu  sebesar  151,97  kw/ha  (BPS  TTS,  2013).  Faktor- faktor  yang mempengaruhi hasil ubi jalar antara lain adalah umur dan kultivar tanaman,  kesuburan  tanah,  tinggi  tempat  penanaman,  iklim  (musim  tanam), serta gangguan hama dan penyakit.
Beberapa  spesies  serangga  menjadi  hama  pada  ubi  jalar,  namun  yang paling merusak adalah Cylas formicarius , disebut juga kumbang penggerek umbi atau  hama  lanas.    Hama  ini  merusak  umbi  di  pertanaman,  dapat  juga menyerang  umbi  yang  telah  disimpan  di  gudang  (Nonci,  2005;    Powell,  2001). Serangan  hama  ini  dapat  menyebabkan  kehilangan  hasil  10  -  80  %  (Capinera, 2012;  Kalshoven, 1981).
318 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 317 - 327
Tindakan  pengendalian C.  formicarius yang  sering  dilakukan  oleh  petani adalah dengan menggunakan insektisida kimia, padahal penggunaan insektisida kimia  menimbulkan  berbagai  pengaruh  negatif  sehingga  perlu  dicari  teknologi alternatif yang ramah lingkungan, yaitu pengendalian hayati. Salah satu teknik pengendalian  hama  secara  hayati  yaitu  dengan  menggunakan  cendawan entomopatogen.  Menurut  Sembel  (2010),  ada  lebih  dari  36  genus  cendawan mengandung spesies yang dapat menyebabkan penyakit pada serangga.
Di Indonesia penelitian mengenai cendawan entomopatogen sebagai agens hayati telah banyak dilakukan. Misalnya Beauveria bassiana dan Metarrhyzium anisopliae. B.  bassiana telah  banyak  diuji  coba  untuk  pengendalian  hama jagung  yaitu Spodoptera  litura , Helicoverpa  armigera ,  dan Ostrinia  furnacalis ; hama  pada  kedelai  yaitu Riptortus  linearis dan S.  litura ;  hama  pada  padi  yaitu walang  sangit  ( Leptocorixa acuta );  hama  pada  kopi  yaitu  penggerek  buah  kopi Hypothenemus  hampei dan  hama-hama  pertanian  lainnya  (Prayogo,  2006; Sulistyowati dkk., 2003). M.  anisopliae isolat  lokal  Sulawesi  Utara  ternyata memiliki  daya  bunuh  yang  tinggi  pada  larva-larva  Lepidoptera  yang  diuji, diantaranya  yaitu S.exigua,  Croccidolomia  pavonana, dan C.  chalicities (Sembel dkk. ,  2008).  Sementara Fusarium sp    isolat  Sulawesi  Selatan  ternyata  mampu menyebabkan  mortalitas  larva  penggerek  batang  jagung Ostrinia  furnacalis sebesar 36,7% (Melina dkk ., 2008).
Hasil  penelitian  Prayogo  (2009),  mengindikasikan  bahwa  virulensi  isolat sangat  beragam  tergantung  dari  asal  isolat,  serangga  inang,  maupun  kondisi ekologi  setempat.  Untuk  memperoleh  isolat  yang  virulen  maka  langkah  awal yang  dapat  dilakukan  adalah  eksplorasi  dari  berbagai  lokasi  yang  berbeda (Amarasena et  al .,  2011).  Menurut  Shahid et  al., (2012),  virulensi  cendawan entomopatogen  dipengaruhi  oleh  karakter  fisiologi.  Karakter  fisiologi  cendawan berkaitan  erat  dengan  kecepatan  pertumbuhan  koloni,  sporulasi,  daya kecambah  konidia,  dan  toleransi  terhadap  perbedaan  suhu.  Semua  karakter fisiologis  tersebut  dipengaruhi  oleh  faktor  lingkungan.  Sehingga  keefektifan pengendalian hayati dengan menggunakan cendawan entomopatogen ditentukan juga oleh daya adaptasinya dengan lingkungan tempat pengendalian dilakukan. Sangatlah  penting  untuk  mengetahui  cendawan  entomopatogen  apa  saja  yang bersifat  insektisidal  yang  ada  di  Kabupaten  TTS,  sehingga  dapat  digunakan sebagai agens hayati untuk mengendalikan  serangan hama C. formicarius yang
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengeksplorasi  spesies  cendawan entomopatogen  isolat  lokal,  mengidentifikasi,  dan  menguji  patogenisitasnya sebagai agens pengendali hayati C. formicarius.

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan  selama  2  tahun,  tahun  pertama melakukan  pengujian  di  Laboratorium  Perlindungan  Tanaman  (Jurusan Tanaman  Pangan  dan  Hortikultura,  Politani  Negeri  Kupang)  dan  pada  tahun kedua pengujian skala lapangan di Kabupaten TTS.

## Prosedur Penelitian

## 1.  Pengumpulan dan Pemeliharaan serangga
Larva C.  formicarius dikumpulkan  dari  pertanaman  ubi  jalar  diberbagai sentra  produksi  ubi  jalar  di  Kabupaten  TTS.  Kemudian  larva  dibawa  ke laboratorium  dan  dipelihara  dalam  stoples  plastik  dengan  diameter  20  cm  dan tinggi 20 cm. Ke dalam stoples dimasukkan umbi ubi jalar sebagai pakan. Larva yang digunakan dalam penelitian ini adalah larva instar tiga.

## 2.   Eksplorasi Cendawan Entomopatogen

## a.   Sistem Pengumpanan Serangga
Eksplorasi  cendawan  dilakukan  dengan  metode  umpan  serangga  ( insect bait  method )  seperti  yang  dilakukan oleh Hasyim dan Azwana  (2003). Serangga umpan  yang  digunakan  adalah Tenebrio  molitor L.  (ulat  hongkong)  instar  tiga. Tanah yang digunakan untuk memerangkap cendawan entomopatogen tersebut diambil  secara purposive  sampling dari  tanah  di  lima  lokasi  pada  desa  yang berbeda.  Tanah  diambil  di  daerah  bebas  pestisida  sintetik,  seperti  di  kebun- kebun  pisang  dan  padang  rumput  yang  menurut  Hasyim  dan  Azwana  (2003) berpeluang besar untuk mendapatkan cendawan entomopatogen. Tanah diambil dengan menggalinya pada kedalaman 5- 10 cm. Tanah dibawa ke laboratorium
320 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 317 - 327
sebanyak 400 g, lalu dimasukkan ke nampan plastik (13 cm x 13 cm x 10 cm). Dari  tiap  lokasi  diambil  empat  sampel  tanah.  Ulat  hongkong  instar  tiga  yang baru ganti kulit dibenamkan sedalam 0,5 cm di dalam tanah tersebut sebanyak 20 ekor per nampan. Nampan kemudian ditutup dengan potongan kain puring hitam  yang  telah  dilembabkan.  Tiga  hari  kemudian  ulat  diperiksa  dan  yang terinfeksi cendawan diisolasi.
Ulat  hongkong  yang  terinfeksi  cendawan  disterilkan  permukaannya dengan  1%  natrium  hipoklorit  selama  tiga  menit  kemudian  dibilas  dengan  air steril  sebanyak  tiga  kali  dan  dikeringanginkan  di  atas  kertas  filter  steril.  Ulat tersebut  kemudian  diletakkan  dalam  cawan  petri  (diameter  9  cm)  berisi  tisu lembab  steril  dan  diinkubasikan  untuk  merangsang  pertumbuhan  cendawan. Cendawan  yang tumbuh dari tubuh ulat diambil dengan jarum inokulasi, lalu dibiakkan  pada  media Potato  Dextrose  Agar (PDA).  Lalu  biakan  murni  ini diidentifikasi  dengan  menggunakan  buku  acuan  Samson et  al .,  (1988).
Identifikasi  dilakukan  berdasarkan  pada morfologi  konidia,  hifa,  konidophore dan warna  koloni.

## b.  Isolasi dari Bangkai Serangga
Bangkai  serangga  (cadaver)  yang  terkolonisasi  cendawan  dapat dikumpulkan dari berbagai lahan pertanaman di lapangan. Cadaver yang sudah terkumpul dipotong-potong sebesar 0,5 cm kemudian direndam di dalam larutan hipoklorit  0,25%  selama  30  detik  untuk  mematikan  mikroba  kontaminan. Masing-masing  potongan  cadaver  direndam  di  dalam  air  steril  selama  60  detik dan dikeringkan menggunakan kertas saring sebelum ditumbuhkan pada media PDA. Pada umur tujuh hari setelah inokulasi (HSI), semua jenis koloni cendawan yang  tumbuh  selanjutnya  dapat  diidentifikasi  berdasarkan  karakter morfologinya.

## c.   Isolasi dari Contoh Tanah
Cendawan  entomopatogen  yang  infektif  juga  dapat  diperoleh  dari  dalam tanah. Hal ini disebabkan karena sebagian besar cendawan merupakan mikroba yang hidup di dalam tanah. Isolasi dari tanah dilakukan dengan cara mengambil contoh  tanah  dari  sekitar  lahan  tanaman  pangan,  perkebunan  maupun hortikultura  yang  banyak  mengandung  bahan  organik  terutama  yang  memiliki pH  (3–4)  dengan  kedalaman  ±10  cm  beserta  sisa-sisa  tanaman  kemudian
Nina Lapinangga, dkk., Efektifitas Cendawan Entomopatogen … 321 dicampur hingga homogeni. Contoh tanah ditimbang 1 g kemudian dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi,  serta  ditambahkan  air  steril  9  ml.  Tabung  reaksi dikocok  menggunakan  vortex  selama  60  detik  dan  suspensi  yang  terbentuk diambil 1 ml dengan mikro pipet kemudian dibuat seri pengenceran bertingkat hingga  memperoleh  seri  pengenceran  10 –4 .  Hasil  dari  masing-masing  seri pengenceran  diambil  1  ml  yang  sebelumnya  dikocok  menggunakan  vortex selama 30 detik kemudian diinkubasi di dalam media PDA 10 ml di dalam cawan Petri.  Setelah  tumbuh  koloni  cendawan  selanjutnya  diidentifikasi  berdasarkan karakter morfologi cendawan seperti kedua metode di atas.

## 3.   Uji Efektivitas Isolat Cendawan Entomopatogen di Laboratorium
Semua  isolat    cendawan    entomopatogen    yang    sudah  diidentifikasi kemudian  diuji  keefektifannya    terhadap  larva C.  formicarius. Setiap    jenis cendawan entomopatogen  diperbanyak  pada  medium  PDA. Setelah berumur 30 hari  (30 HSI), konidia cendawan dipanen.  Biakan cendawan di dalam cawan petri yang siap  dipanen    ditambah  air  kemudian  koloninya dikerok dengan kuas  halus,  setelah  itu  dimasukkan  ke  dalam    tabung    reaksi    dan    dikocok dengan shaker selama  60  detik.    Setelah  itu,  mengambil  suspensi konidia dengan  pipet  dan  diteteskan  pada  permukaan haemocytometer kemudian ditutup cover    glass .  Selanjutnya,    jumlah    konidia    dihitung    di    bawah mikroskop    stereo    dengan    pembesaran    400x  hingga  memperoleh  kerapatan konidia 10 6 /ml.
Setelah    biakan    isolat      cendawan    entomopatogen  tersedia,  lalu dilanjutkan  dengan  menyeleksi  isolat  cendawan  tersebut.  Seleksi    isolat cendawan  entomopatogen  ini dilakukan seperti metode Herlinda et al ., (2010).
Caranya  ialah  dengan  meneteskan  suspensi  cendawan entomopatogen    dengan kerapatan    1x10 6 konidia    ml -1 pada    serangga  uji.      Setiap    isolat    cendawan entomopatogen    diinokulasi   pada   20   ekor    larva C. formicarius instar ketiga yang  baru  ganti  kulit  dan  diulang  sebanyak  lima  kali.    Larva  yang  telah diaplikasi dengan isolat tadi selanjutnya dipelihara dalam stoples plastik dengan diameter  10  cm  dan  tinggi  20  cm  yang  bagian    atasnya    ditutupi    kain    kasa. Kemudian larva diberi makan umbi ubi jalar.
Pengamatan  dilakukan  setiap  hari    mulai  satu  hari  setelah  aplikasi sampai  munculnya  serangga  dewasa    (imago).  Parameter  yang  diamati  adalah mortalitas  larva,  persentase  pupa  yang  terbentuk  dan  persentase    kemunculan
322 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 317 - 327
imago.  Gejala  morfologis  yang  ditimbulkan  pada  masing-masing  fase perkembangan  diamati  dan  dicatat.  Cendawan  entomopatogen  yang  paling sesuai  dan  paling  efektif  untuk C.  formicarius dicirikan  atas  paling  tingginya mortalitas serangga tersebut. Isolat cendawan entomopatogen yang paling efektif yang akan digunakan dalam perlakuan di lapang (tahun kedua).
Persentase mortalitas larva dihitung dengan menggunakan rumus :
M  =  A / D x 100 % Keterangan   : M = Persentase mortalitas A = Jumlah serangga yang mati terinfeksi D = Jumlah serangga yang diuji
Isolat    cendawan    entomopatogen    yang  ditemukan  dianalisis  secara diskriptif.    Morfologi  koloni  dan    spora    ditampilkan    dalam    bentuk    gambar. Data  perbedaan  mortalitas  larva  dan  persentase  nimfa  menjadi  imago    yang disebabkan    oleh    cendawan    entomopatogen  dianalisis  menggunakan  Analisis Keragaman ( Analysis of Variance ). Percobaan masing-masing perlakuan disusun menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap (RAL).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Jenis  Cendawan Entomopatogen Hasil Eksplorasi
Hasil    eksplorasi  cendawan  entomopatogen    dari    beberapa  lokasi    di Kabupaten  Timor  Tengah  Selatan  (TTS)  diperoleh  dua  jenis  cendawan.    Kedua isolat  cendawan  hasil  isolasi  dari  bangkai  serangga  dan  contoh  tanah.  Jenis cendawan  tersebut  adalah Metarhizium anisopliae dan Beauveria bassiana (Tabel  1).  Hal  ini  didukung  oleh  pernyataan  Sila  (1983)  yang  mengemukakan bahwa  dua  dari  empat  cendawan  entomopatogen  yang    banyak    terdapat    di alam    yakni Metarhizium  sp., dan Beauveria  sp .  Biakan  murni  kedua  jenis cendawan pada media PDA dapat dilihat pada Gambar 1.
Tabel 1. Jenis Cendawan Entomopatogen di Kabupaten TTS No. Jenis Cendawan Lokasi Pengambilan Contoh (Desa) Benlutu Bua’at Nuinbila 1. Metarhizium anisopliae √ √ √
Nina Lapinangga, dkk., Efektifitas Cendawan Entomopatogen … 323 2. Beauveria bassiana √ √ √ a b
Gambar 1.   Biakan murni kedua jenis cendawan pada media PDA Metarhizium anisopliae(a), Beauveria bassiana(b). (Sumber : Data Primer, 2015) Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  metode  eksplorasi  dengan  isolasi dari contoh tanah lebih efektif, karena sebagian besar  cendawan entomopatogen yang    didapat  berasal  dari  metode  isolasi  dari  contoh  tanah.  Hal    ini  karena tanah  merupakan    reservoar    alami    atau  habitat  utama  bagi    cendawan entomopatogen  dan  sumber  infeksi  bagi serangga  dilapangan  sebagai  faktor mortalitas    hama  secara  alami.  Herlinda et    al .,  (2008)  menambahkan  bahwa cendawan  entomopatogen  yang  berasal  dari  serangga    terinfeksi    lebih    sulit diisolasi  karena  sering terkontaminasi oleh cendawan udara.
Hasil  pengamatan  secara  makroskopis,  warna    koloni    semua    isolat Beauveria  bassiana adalah  putih,  sedangkan  secara    mikroskopis  setelah dilakukan  isolasi  pada media  PDA menunjukkan  bahwa miselium Beauveria bassiana berwarna putih,  berbentuk  agak  bulat,  hialin  lebih besar  daripada konidia,  dan  memiliki  satu  sel.  Hal  ini  mendukung  hasil  penelitian  Suharto et al .,   (1998)  yang menyatakan  spora B.   bassiana berbentuk bulat, bersel satu, hialin  dan  terbentuk  secara  tunggal  pada  sterigma  yang  pendek.  Sedangkan, warna  semua  isolat Metarhizium anisopliae secara  makroskopis  di  awal pertumbuhan  berwarna  putih,  kemudian  berubah  warna  menjadi  hijau  gelap. Secara  mikroskopis  (perbesaran  1000x)  spora  hialin,  berbentuk  silindris  dan membentuk rantai. Morfologi kedua cendawan entomopatogen dapat dilihat pada Gambar 2.
b
324 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 317 - 327
Gambar 2.   Morfologi cendawan entomopatogen Metarhizium anisopliae (a) dan Beauveria bassiana (b). (Sumber : Data Primer, 2015)
Morfologi Beauveria  bassiana menurut  Samson et  al .,  (1988)  adalah sebagai  berikut.  Memiliki  hifa  pendek,  hialin  lurus,  dan  tebal.  Kelompok  hifa muncul  dari  tengah  dengan  ukuran  panjang  3-4  µm  dan  lebar  1-2  µm.  Koloni berwarna  putih,  konidia  bulat  dengan  ukuran  (2-3)  x  (2-2,4)  µm,  hialin,  bersel satu, terbentuk secara soliter pada ujung konidiofor, dan melekat pada sterigma yang  pendek  dengan  pola  pertumbuhan  berselang-seling,  pertumbuhan konidiofornya zigzag (simpodial).
a

## b

## c
Gambar 3. Beauveria bassiana , perbesaran 400x (a. Konidia  b. Konidofor  c. Hifa). (Sumber: Data Primer, 2015)
Sedangkan  morfologi Metarrhizium  anisopliae menurut  Samson et  al .,
(1988)  adalah  mempunyai  miselium  yang  bersekat,  konidiofornya  tersusun tegak,  dengan  ukuran  bervariasi  antara  (4-13,4)  x  (1,4-2,5)  µm,  berlapis  dan bercabang  yang  dipenuhi  dengan  konidia,  konidia  bersel  satu  dan  berbentuk silinder.  Konidia  berukuran  panjang  4-7  µm  dan  lebar  1,43-3,2  µm.  koloni cendawan berwarna putih, kemudian menjadi hijau gelap dengan bertambahnya umur.
a b

## c
Gambar 4. Metarrhizium anisopliae, perbesaran 400x (a. Hifa b. Konidia c. konidiofor). (Sumber: Data Primer, 2015)

## Efektivitas Isolat Cendawan Entomopatogen di Laboratorium
Hasil  pengamatan menunjukkan bahwa kematian  larva ditemukan pada semua  perlakuan.  Mortalitas  larva C.  formicarius oleh  cendawan  patogenik disebabkan  karena  kontak  konidia  pada  tubuh  larva.  Menurut  Surtikanti  dan Yasin    (2009),    peningkatan  mortalitas    terjadi    apabila  antara    larva  dengan
Nina Lapinangga, dkk., Efektifitas Cendawan Entomopatogen … 325 spora    cendawan    terjadi  kontak.  Pada  saat  terjadi  kontak,  spora  membentuk tabung kecambah dan mensekresikan enzim untuk melunakkan kutikula larva sehingga  spora  dapat   masuk  ke  tubuh  larva. Pertumbuhan  spora  dalam tubuh    larva    akan  menyebabkan  terganggunya  seluruh  aktivitas  organ  dan berakibat  pada  kematian  larva.    Data    mortalitas    larva C.  formicarius pada masing-masing cendawan secara rinci dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2.   Rata-rata  Kematian  larva C. formicarius Setelah Diinokulasikan dengan Masing-masing Cendawan No. Perlakuan Kematian Larva (%) 1. Metarhizium anisopliae 86,5 2. Beauveria bassiana 85
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa  kematian    larva C.  formicarius akibat  perlakuan B.  bassiana sudah    terjadi    lima  hari  setelah    perlakuan namun  puncak  kematian pada  delapan hari setelah  perlakuan.  Sementara M. anisopliae kematian  sudah  dimulai  pada  tiga  hari  setelah  perlakuan  dan mencapai  puncak  pada  hari  ketujuh.  Kematian    larva  akibat  cendawan entomopatogen  tidak  seketika  karena  cendawan  harus menumbuhkan  spora dalam  tubuh  inangnya setelah  spora  dapat  berkembang  dalam  tubuh inang terjadilah  proses  kematian  serangga  uji.
Menurut Strack (2003), lamanya  waktu  kematian  hama akibat  infeksi cendawan  entomopatogen disebabkan  oleh  cendawan  membutuhkan  proses dan tahapan-tahapan untuk menginfeksi dan mematikan  larva,  yaitu  inokulasi (kontak antara  propagul  cendawan  dengan  tubuh serangga,  penempelan  dan perkecambahan,  penetrasi,    destruksi    dan    kolonisasi    dalam  hemolimfa, menginfeksi    saluran    makanan  dan    sistem    pernafasan    baru    kemudian serangga  akan  mati,  proses  ini  umumnya berlangsung  1   –  2  hari  pada kondisi lingkungan yang sesuai.
Kematian  serangga  sasaran  oleh  cendawan  entomopatogen  sangat dipengaruhi    oleh    jumlah    konidia  yang    diinokulasikan,    keadaan    suhu  dan kelembaban  lingkungan  yang  sesuai untuk  pertumbuhan  cendawan.  Toksin yang dihasilkan  oleh  cendawan  entomopatogen memegang  peranan  penting yang    dapat  membunuh    inang    dengan    cara    merusak  struktur    organik, sehingga    terjadi    dehidrasi  dalam    sel,    menyebabkan    tidak    terjadinya regenerasi jaringan (Gillespie, 2007).

## 326 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 317 - 327
Cendawan  entomopatogen  diinokulasikan  dengan  cara  meneteskan suspensi cendawan dengan kerapatan  1x10 6 konidia  ml -1 pada  serangga uji. Setiap  isolat  cendawan entomopatogen  diinokulasi  pada  20  ekor  larva C. formicarius instar  ketiga.  Larva  yang  telah  diaplikasi  dengan  isolat  tadi selanjutnya dipelihara dalam stoples plastik dengan diameter 10 cm dan tinggi 20 cm yang bagian  atasnya  ditutupi  kain  kasa. Kemudian larva diberi makan umbi ubi jalar.
Pada    inokulasi    langsung    terhadap  larva  dan  makanan,  selain  dari konidia yang lebih  cepat  menempel  dan  berkecambah pada  tubuh  larva  di lipatan  antar  ruas tubuh,  konidia  juga  dapat  masuk secara  langsung  ke dalam    tubuh    larva  melalui    makanan    yang    telah    diinokulasi  dengan cendawan   entomopatogen    sehingga  mempengaruhi    sistem    pencernaan    dari larva. Akibat  infeksi  yang  terjadi  dari  luar dan dalam  tubuh secara serentak akan  lebih mempercepat  mortalitas  larva.
Menurut Chikwenhere dan Vestergaardt (2005), semakin banyak  jumlah konidia  yang  menempel pada  tubuh  larva,  maka  mortalitas  akan semakin cepat  apalagi  didukung  dengan kondisi  temperatur  dan  kelembaban  yang sesuai  dengan  yang  diinginkan  cendawan entomopatogen.  Banyaknya jumlah konidia  cendawan    entomopatogen    berhubungan    dengan  tingkat  konsentrasi yang  digunakan,  karena  semakin    tinggi    konsentrasi    maka    jumlah  konidia semakin  tinggi,  dan mortalitas  juga akan  semakin  tinggi.
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa  mortalitas  larva  lebih  cepat  dari pada munculnya koloni cendawan pada larva. Rata-rata munculnya koloni pada larva  terjadi  dua  hari  lebih  lama  dari  mortalitas  serangga.  Hal  ini  diakibatkan karena  cendawan  memerlukan  waktu  yang  lebih  lama  untuk  memunculkan hifanya  di  sekitar  tubuh  inangnya  karena  harus  melalui  beberapa  tahapan infeksi.
Hal  ini  sesuai  dengan  literatur  Freimoser dkk., (2003)  yang  menyatakan bahwa  mekanisme  infeksi M.  anisopliae dapat  digolongkan  menjadi  empat tahapan  etiologi  penyakit  serangga  yang  disebabkan  oleh  cendawan.  Tahap pertama  adalah  inokulasi,  yaitu  kontak  antara  propagul  cendawan  dengan tubuh  serangga.  Tahap  kedua  adalah  proses  penempelan  dan  perkecambahan propagul cendawan pada integumen serangga. Tahap ketiga yaitu penetrasi dan invasi,  yaitu  menembus  integumen  dapat  membentuk  tabung  kecambah
Nina Lapinangga, dkk., Efektifitas Cendawan Entomopatogen … 327
(appresorium).  Tahap  keempat  yaitu  destruksi  pada  titik  penetrasi  dan terbentuknya  blastospora  yang  kemudian  beredar  ke  dalam  hemolimfa  dan membentuk hifa sekunder untuk menyerang jaringan lainnya. Setelah serangga mati,  cendawan  akan  terus  melanjutkan  siklus  dalam  fase  saprofitik,  yaitu cendawan  akan  membentuk  koloni  di  sekitar  tubuh  inang.  Setelah  tubuh serangga  inang  dipenuhi  oleh  koloni  cendawan,  maka  spora  infektif  akan diproduksi.
Mekanisme  infeksi  cendawan B.  bassiana dimulai  dengan  infeksi langsung  hifa  atau  spora B.  bassiana ke  dalam  kutikula  melalui  kulit  luar serangga.  Pertumbuhan  hifa  akan  mengeluarkan  enzim  seperti  protease, lipolitik,  amilase,  dan  kitinase.  Enzim-enzim  tersebut  mampu  menghidrolisis kompleks  protein  di  dalam  integumen  yang  menyerang  dan  menghancurkan kutikula,  sehingga  hifa  tersebut  mampu  menembus  dan  masuk  serta berkembang  di  dalam  tubuh  serangga.  Mekanisme  infeksi  secara  mekanik adalah infeksi melalui tekanan yang disebabkan oleh konidium B. bassiana yang tumbuh.  Secara  mekanik  infeksi  cendawan B.  bassiana berawal  dari  penetrasi miselium  pada  kutikula  lalu  berkecambah  dan  membentuk  apresorium, kemudian  menyerang  epidermis  dan  hipodermis.  Hifa  kemudian  menyerang jaringan  dan  hifa  berkembang  biak  di  dalam haemolymph (Clarkson  dan Charnley, 1996).
Pada  perkembangannya  di  dalam  tubuh  serangga B.  bassiana akan mengeluarkan  racun  yang  disebut beauvericin yang  menyebabkan  terjadinya paralisis  pada  anggota  tubuh  serangga.  Paralisis  menyebabkan  kehilangan koordinasi  sistem  gerak,  sehingga  gerakan  serangga  tidak  teratur  dan  lama kelamaan melemah, kemudian berhenti sama sekali. Setelah lebih-kurang lima hari  terjadi  kelumpuhan  total  dan  kematian.  Toksin  juga  menyebabkan kerusakan jaringan, terutama pada saluran pencernaan, otot, sistem syaraf, dan system pernafasan.
Serangga  kemudian  mati  dan  cendawan B.  bassiana akan  terus melanjutkan  pertumbuhan  siklusnya  dalam  fase  saprofitik.  Setelah  serangga inang  mati, B.  bassiana akan  mengeluarkan  antibiotik,  yaitu Oosporein yang menekan populasi bakteri dalam perut serangga inang. Dengan demikian, pada akhirnya seluruh tubuh serangga inang akan penuh oleh propagul B. bassiana . Pada  bagian  lunak  dari  tubuh  serangga  inang,  cendawan  ini  akan  menembus
328 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 317 - 327
keluar  dan  menampakkan  pertumbuhan  hifa  di  bagian  luar  tubuh  serangga inang  yang  biasa  disebut  “ white bloom ”.  Pertumbuhan  hifa  eksternal  akan menghasilkan  konidia  yang  bila  telah  masak  akan  disebarkan  ke  lingkungan dan menginfeksi serangga sasaran baru (Wahyudi, 2008).
Berdasarkan  uraian    tersebut  menunjukkan    bahwa Metarhizium anisopliae dan Beauveria bassiana dapat  dimasukkan    ke    dalam  cendawan yang  berpotensi  untuk  dikembangkan  sebagai  bioinsektisida  untuk mengendalikan hama Cylas formicarius karena  mampu  mengendalikan  hama tersebut  di  laboratorium  sampai  di  atas  80%.  Cendawan  ini  tidak  dapat memproduksi  makanannya    sendiri,    oleh    karena    itu    ia  bersifat  parasit terhadap serangga inangnya.
Cendawan B.  bassiana menyerang  banyak  jenis  serangga,  diantaranya kumbang,    ngengat,  ulat,    kepik    dan    belalang.    Cendawan    ini  umumnya ditemukan  pada  serangga  yang hidup  di  dalam  tanah,  tetapi  juga  mampu menyerang  serangga  pada  tanaman  atau  pohon. M.  anisopliae merupakan cendawan  entomopatogen  penting  yang  sering  digunakan  dalam  teknik pengendalian hayati. Cendawan ini telah banyak dilaporkan mampu menginfeksi pada  beberapa  ordo  serangga  seperti  Orthoptera,  Coleoptera,  Hemiptera, Lepidoptera dan Hymenoptera (Lee dan Hou, 2003).

## KESIMPULAN
Jenis-jenis  cendawan  entomopatogen  yang  ditemukan  di  Kabupaten Timor  Tengah  Selatan  yaitu Metarhizium  anisopliae dan Beauveria  bassiana.
Kedua cendawan tersebut  menyebabkan  mortalitas  pada  larva C.  formicarius masing-masing sebesar 80,75% ( Metarhizium anisopliae) dan 80,25% ( Beauveria bassiana). Kedua  jenis  cendawan  tersebut  layak  dikembangkan  sebagai biopestisida untuk mengendalikan hama C. formicarius.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  R.  Z;  Haryuningtyas.  D  dan  Wardhana  A.,      2008.  Lethal    Time    50 Cendawan Beauveria    bassiana dan Metarhizium  anisopliae terhadap Sacoptes scabiei . Seminar  Nasional   Teknologi Peternakan  dan Veteriner.
Nina Lapinangga, dkk., Efektifitas Cendawan Entomopatogen … 329
Amarasena,  P.G.D.S;  K.M.  Mohotti  and  D.  Ahangama.  2011.  A  Locally  Isolated Entomopathogenic Fungus to Control Tea Red Spider Mites (Oligonychus coffeae Acarina -Tetranychidae). Tropical Agricultural Research Vol. 22 (4): 384 – 391 (2011). http://www.sljol.info. Diakses 10 April 2014.
Anaisie,  P.  E;  V.  Y.  Eziah  and  E.  O.  Owusu.  2011.  The  Ptential  of  Indigenous Entomopathogenic  Fungi  for  the    Management    of    the    Diamondback Moth, Plutella  xylostella L.  (Lepidoptera:  Yponomeutidae)  in  Ghana. International Research Journal of Biochemistry and Bioinformatics (ISSN- 2250-9941) Vol. 1(10) pp. 275-281 November, 2011. http://www.interesjournals.org . Diakses 10 April 2014.
BPS TTS. 2013. Produksi Ubi Jalar di Kabupaten TTS. http://bps.go.id/ubijalar.php. Diakses 4 Maret 2014 .
Capinera,  J.  L.    2012.  Sweetpotato  Weevil, Cylas  formicarius (Fabricius) (Insecta: Coleoptera: Brentidae (=Curculionidae)). https://edis.ifas.ufl.edu .  Diakses 15 Maret 2014.
Gsiantury.  2003.  Memperkuat  Ketahanan  Pangan  dengan  Umbi-Umbian. http://gizi.depkes.go.id .  Diakses 2 Maret 2014.
Harpootlian,  P.  2006.  Spesies Cylas  formicarius –  Sweet  Potato  Weevil. http://bugguide.net . Diakses 2 Maret 2014.
Hasyim ,  A.  dan  Azwana.        2003.        Patogenisitas    Isolat Beauveria bassiana (Balsamo)  Vuillemin  dalam  Mengendalikan  Hama Penggerek  Bonggol  Pisang Cosmopolites  sordidus Germar.    Jurnal Hortikultura, 13(2) 120-130.
Herlinda,  S;  Mulyati  S.I.  dan  Suwandi.    2008.    Selection  of  Isolates    of Entomopathogenic    Fungi    and    The  Bioefficacy    of    Their    Liquid Production    Against Leptocorisa    oratorius Nymphs.        Jurnal  Microbiol Indonesia, 2(3).
Herlinda,  S;  Chandra  Irsan,  Rekamayasari,  dan  Selly  Septariani.    2010. Identification  and  Selection  of  Entomopathogenic  Fungi  as  Biocontrol Agents  for  from  South  Sumatra.  Jurnal  Microbiology  Indonesia.  ISSN 1978-3477. Vol 4, No 3, Dec 2010, p 137-142. http://www.permi.or.id .
Kalshoven, L. G. E. 1981.  Pest of Crop in Indonesia. PT Ichtiar Baru-Van Hoeve. Jakarta.
Mahr;  Cloyd  R.A,  Mahr  D.L.  dan  Sadof  C.S.,    2001.  Biology  Control  of  Insects and  the  Other  Pest  of  the  Greenhouse  Crop.  North  Central  Regional Publication    581.    University    of  Wisconsin-Extention,  Cooperative Extention.
Melina;  Ahdin  Gassa,  D.P.Madika,  dan  Yumarto.  2008.  Pengujian  Cendawan Entomopatogen Fusarium spp. Terhadap Penggerek batang jagung Ostrinia furnacalis Guenee (Lepidoptera: Pyralidae).  Prosiding Seminar Ilmiah dan Pertemuan Tahunan PEI PFI XIX Komisariat Daerah Sulawesi Selatan,  5 Nopember 2008.
Nonci,  N.  2005.  Bioekologi  dan  Pengendalian  Kumbang Cylas  formicarius (Coleoptera:  Curculionidae). http://pustaka.litbang.deptan.go.id .  Diakses 10 Maret 2014.
330 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 317 - 327
Oka , I. N. 1995.  Pengendalian Hama Terpadu dan Implementasinya di Indonesia.

## Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.
Powell,  K.  S;    A.  E.  Hartemink,  J.  F.  Egenae,  C.  Walo.  and  S.  Poloma.    2001. Sweet Potato Weevil ( Cylas formicarius ) Incidence in the Humid Lowlands of PNG. www.alfredhartemink.nl . Diakses 21 Maret 2014.
Prayogo,    Y.    2004.    Keefektifan    Lima    Jenis    Cendawan  Entomopatogen Terhadap  Hama  Pengisap Polong Kedelai Riptortus  linearis (Hemiptera: Alydidae)  dan  Dampaknya  Terhadap  Predator Oxyopes  javanus Thorell (Araneida: Oxyopidae).  Tesis.  Sekolah  Pascasarjana. Departemen  Hama dan  Penyakit  Tanaman. Institut Pertanian Bogor.
Prayogo,    Y.    W.Tengkono    dan    Warwoto.    2005.    Prospek    Cendawan Entomopatogen Metarizium    Anisoplae Untuk    Mengendalikan    Ulat Grayak Spodoptera  litura Pada  Kedelai.  Jurnal    litbang  pertanian,  24  (i) 19-25
Prayogo,  Y.  2006.  Sebaran  dan  Efikasi  Berbagai  Genus  Cendawan Entomopatogen  Terhadap Riptortus  linearis Pada  Kedelai    Di  Lampung Dan Sumatra Selatan. Jurnal HPT  Tropika.  ISSN 1411-7525. Vol. 6,  No. 1: 14 – 22,  Maret 2006 . www. eprints.unsri.ac.id . Diakses 1 April 2014.
Priyono, J;  Y. Kusmayadi, E. Suryadi, dan H. Lanya. 2008.  Hama Boleng (Cylas formicarius) pada Ubijalar dan Pengendaliannya. Dirjen Tanaman Pangan. http://www.deptan.go.id .  Diakses 10 Maret 2014..
Richana, N. 2012. Ubi Kayu dan Ubi Jalar; Botani – Budidaya, Teknologi Proses, Teknologi Pascapanen.  Penerbit Nuansa. Bandung.
Rukmana,  R.  1997.  Ubi  Jalar  Budidaya  dan  Pasca  Panen.  Penerbit Kanisius. Jakarta.
Samson,  R.  A;  H.  C.  Evans  dan  J.  P.  Latge.  1988.  Atlas  of Entomopathogenic  Fungi.  Prinejerverlag  Berlin  Heodelberg,  New York. London. Tokyo.
Sembel, D. T; J. Rimbing, B. Pinaria, L. Taulu dan O. Tandi. 2008. Isolasi dan  Identifikasi  Cendawan-Cendawan  Patogen  pada  Hama-Hama Tanaman Sayuran di Sulawesi Utara. Eugenia 14 (1), 2008: 31-41.
Sembel,  D.  T.  2010.  Pengendalian  Hayati.  Penerbit  Andi  Offset. Yogyakarta.
Shahid,  A.  A;  Abdul  Qayyum  Rao,  Allah  Bakhsh  and  Tayyab  Husnain. 2012.  Entomopathogenic  Fungi  As  Biological  Controllers:    New Insights  Into  Their  Virulence  And  Pathogenicity.  Biol.  Sci., Belgrade, 64 (1), 21-42, 2012. http://www.thejaps.org.pk. Diakses 4 Maret 2014.
Sila, M.  1983.    Microbial  Control  of  Drywood  Termites Cryptotermes cyanocephales (Kalotermitidae;  Isoptera).    University  of  the Philipphines at Los Banos. Strack,  B.  H.    2003.    Biological  Control  of  Termites  by  The  Fungal Entomopathogen Metarhizium anisopliae . www. utoronto.ca/forest/termite/metani-1htm.  Diakses  pada  20  Juni 2015.
Sumartini,    Y.;  Prayogo,    S.    W.    Indiati    dan  S.  Hardaningsih.  2001. Pemanfaatan    Cendawan Metarhizium    anisopliae Untuk Pengendalian Pengisap  Polong  ( Riptortus  linearis )  pada Kedelai. Prosiding  Simposium    Pengendalian    Hayati    Serangga.    Balitpa Sukamandi. Sukamandi, Hal : 54-157.  14-15 Maret 2001.
Surtikanti    dan  Yasin.    M.,          2009.          Keefektifan  Entomopatogenik Beauveria bassiana Vuill. Dari Berbagai Media  Tumbuh  terhadap Spodoptera  litura F.  (Lepidoptera:  Noctuidae)  di  Laboratorium. Prosiding  Seminar  Nasional  Serealia.
Tanada,    Y.    dan    Kaya,    H.  K.,    1993.    Insect    Pathology.    Academik Press.    Inc.  Publishier    Sandiego    New    York    Boston.  London Sydney  Tokyo  Toronto. Hal: 359-360 .