Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan

## GAMBARAN DEPOSISI KOLAGEN TIPE I TERHADAP USIA TIKUS GALUR WISTAR: PENELITIAN IN VIVO
(DESCRIPTION OF TYPE I COLLAGEN DEPOSITION ON AGE OF WISTAR STRAIN

## RAT: IN VIVO RESEARCH)
Frieda 1 , Indah Julianto 2 , Nugrohoaji Dharmawan 2 , Arie Kusumawardani 2 ,  Novan Adi 3 , Endra Yustin Ellistasari 2
1 Program Studi Kulit dan Kelamin Program Pendidikan Dokter Spesialis 1, Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta, Indonesia
2 Bagian Kulit dan Kelamin Program Pendidikan Dokter Spesialis 1, Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta, Indonesia
3 Bagian Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta,
Indonesia

## Email Korespondensi: yanuarfrieda@gmail.com

## ABSTRAK
Penuaan  kulit  merupakan  akumulasi  berbagai  perubahan  progresif  yang  terjadi  pada  sel  dan jaringan  kulit.  Kulit  manusia  terdiri  matriks  ekstraseluler  (MES)  dermal  dengan  protein penyusunnya  adalah  kolagen.  Selama  penuaan,  kolagen  tipe  I  mengalami  perubahan organisasi dan struktural, penurunan sintesis protein MES, dan terjadi peningkatan degradasi metaloproteinase  mengakibatkan  hilangnya  kekuatan  mekanik.  Studi  menunjukkan  peran penurunan  fungsi  penghalang  kulit  terkait  usia  dalam  penuaan  pada  tikus.  Tujuan  penelitian ini untuk mengetahui deposisi kolagen tipe I berdasarkan usia pada jaringan kulit tikus Wistar. Desain penelitian merupakan observasional analitik cross-sectional . Penelitian menggunakan tikus Wistar yang telah memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Tikus dikelompokkan menjadi kelompok usia 3 bulan, 6 bulan, 12 bulan, dan 18 bulan. Pengambilan jaringan kulit dengan biopsi  plong  dilanjutkan  pembuatan  preparat  dengan  pewarnaan Trichome  masson . Perhitungan  deposisi  kolagen  dilakukan  pada  area  berwarna  biru  dan  diinterpretasikan  (%) menggunakan software ImageJ.  Rerata  persentase  deposisi  kolagen  terbesar  pada  kelompok usia  3  bulan  dengan  nilai  57,6±0,17%  dan  57,5±0,43%  pada  pembesaran  40x  dan  100x. Persentase  deposisi  kolagen  terendah  terdapat  pada  kelompok  usia  18  bulan  dengan  nilai 12,1±1,6%  dan  6,9±0,52%  pada  pembesaran  40x  dan  100x.  Pada  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  penurunan  deposisi  kolagen  jaringan  kulit  tikus  Wistar  seiring dengan pertambahan usia akibat proses penuaan, dengan deposisi kolagen jaringan kulit tikus Wistar kelompok usia muda lebih besar dibandingkan kelompok usia yang lebih tua.
Kata kunci: kolagen tipe I, kulit, penuaan, tikus wistar, usia
DOI DOI

## ARTIKEL PENELITIAN

## ABSTRACT
Skin  aging  is  the  accumulation  of  various  progressive  changes  that  occur  in  skin cells  and tissues.  Human  skin  consists  of  dermal  extracellular  matrix  (ECM)  with  the  constituent protein  being  collagen.  Type  I  collagen  undergoes  organizational  and  structural  changes, decreases  ECM  protein  synthesis,  and  increases  metalloproteinases  resulting  in  decreased mechanical strength. Studies show a role for age-related decline in skin function in aging in mice. Thus, the purpose of this study was to determine the deposition of type I collagen-based on  age  in  the  skin  tissue  of  Wistar  rats.  The  study  design  was  cross-sectional  analytic observational. The study used Wistar rats that had met the inclusion and exclusion criteria. Rats  were  divided  into  3,  6,  12,  and  18  months  age  groups.  Taking  the  skin  with  a  Plong biopsy  followed  by  Trichome  Masson  staining.  Calculation  of  collagen  deposition  was carried  out  in  the  blue  area  and  interpreted  (%)  using  ImageJ  software.  The  highest percentage of collagen deposition was in the 3 months age group with values of 57.6±0,17% and 57.5±0,43% at 40x and 100x, respectively. The lowest percentage of collagen deposition was in the 18 months age group with values of 12.1±1,6% and 6.9±0,52% at 40x and 100x, respectively. Accordingly, the decrease in collagen deposition in rat skin tissue with age due to  the  aging  process,  with  collagen  deposition  in  rat  skin  tissue  in  the  younger  age  group greater than in the older age group.
Keywords: age, aging, skin, type I collagen, wistar rat

## PENDAHULUAN
Proses penuaan pada kulit merupakan akumulasi dari berbagai perubahan  progresif  yang  terjadi  pada  sel dan  jaringan  kulit.  Proses  penuaan  yang kompleks dipengaruhi oleh faktor intrinsik dan  faktor  ekstrinsik. 1 Penuaan  intrinsik didefinisikan  sebagai  perubahan  yang terletak di dalam sel induk dan keturunannya,  termasuk  ekspresi  mikro RNA  (miRNA),  panjang  telomer,  ekspresi protein  apoptosis,  regulator  siklus  sel, sekretom  seluler,  reseptor  transmembran, dan  ekspresi  gen. 1–3 Penuaan  intrinsik dipengaruhi  oleh  usia,  faktor  genetik, hormonal,  serta  radikal  bebas.  Sedangkan penuaan  ekstrinsik  dipengaruhi  oleh  gaya hidup  dan  faktor  lingkungan,  terutama radiasi sinar ultraviolet (UV). 1,4
Kulit  manusia  terdiri  atas  matriks ekstraseluler  (MES)  dermal  dengan  salah satu  protein  penyusunnya  adalah  kolagen yang  diproduksi  oleh  sel  mesenkim fibroblas. 5 Kolagen  berperan  memberikan dasar  pembentukan  matriks  pada  fase proliferasi dan remodeling . 6 Secara keseluruhan,  terdapat  28  macam  kolagen yang diekspresikan oleh tubuh, akan tetapi kolagen  utama  yang  berkontribusi  dalam histologi dan fisiologi kulit adalah kolagen tipe I dan kolagen tipe III. 4,5,7 Kolagen tipe I  merupakan  bagian  utama  matriks ekstraseluler fibrial (kolagen serat) dengan jumlah terbanyak sehingga berperan dalam memberikan  integritas  struktural  dan ketahanan mekanis kulit. 8 Komposisi fibril kolagen  tipe  I  pada  kulit  muda  mencapai
85-90%  dengan  struktur  heliks  rangkap tiga  rantai  panjang. 4,5,9 Selama  penuaan, kolagen  tipe  I  mengalami  perubahan organisasi dan struktural, penurunan
sintesis protein MES, dan terjadi peningkatan  degradasi  metaloproteinase yang  memicu  fragmentasi  fibril  kolagen sehingga mengakibatkan hilangnya kekuatan  mekanik  secara  menyeluruh. 7
Berbeda dengan kulit muda, yang memiliki fibril kolagen  utuh, melimpah, padat, serta terorganisir dengan baik, penurunan kolagen pada kulit tua mengakibatkan kulit mengalami kerutan ( wrinkle ) dan hilangnya elastisitas. 10 Keadaan ini mengakibatkan berbagai produk anti-aging berfokus  pada  proses  inhibisi  mekanisme tersebut. 11
Studi  terkini  menunjukkan  bukti yang  mendukung  peran  penurunan  fungsi penghalang  kulit  terkait  usia  dalam penuaan  sistematik  pada  tikus. 12 Tikus Wistar  merupakan  model  sistem  mamalia yang unggul dan telah diakui. 9,13,14 Dengan karakteristik  tikus  Wistar  berupa  kepala lebar,  telinga  panjang,  dan  ukuran  ekor yang  lebih  pendek  dari  panjang  tubuhnya, serta  diketahui  lebih  aktif.  Perbedaan  usia merupakan  faktor  penting  pada  tikus  yang menandakan  variasinya  dalam  anatomi, fisiologi,  dan  proses  perkembangannya yang harus dipertimbangkan saat menganalisis  hasil  atau  memilih  dosis penelitian pada tikus. 14,15 Demikian, tujuan
pada  penelitian  ini  untuk  mengetahui deposisi  kolagen  tipe  I  berdasarkan  usia pada tikus Wistar.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini merupakan penelitian observasional analitik cross-sectional dengan  membandingkan  deposisi  kolagen tipe  1  pada  kulit  tikus  galur  Wistar berdasarkan  usia . Penelitian  dilakukan  di Laboratorium  Universitas  Setia  Budi Surakarta,
Laboratorium Klinik Bioteknologi  Dermama  Surakarta,  dan Laboratorium Patologi Anatomi Universitas Sebelas Maret Surakarta selama bulan Desember 2021-Januari 2022.
Penelitian ini  merupakan penelitian in  vivo  dengan  menggunakan  subjek penelitian  berupa  tikus  galur  Wistar. Dengan  penetapan  kriteria  inklusi  berupa tikus  Wistar  jantan  usia  3  bulan,  6  bulan, 12 bulan, dan 18 bulan. Sedangkan kriteria eksklusi penelitian ini berupa tikus dengan kecacatan,  umur  tidak  sesuai,  dan  tikus yang sakit selama pengambilan data. Tikus Wistar  yang  telah  memenuhi  kriteria ditempatkan  dalam  kondisi  dan  situasi yang  sama dan  dibagi  menjadi  4 kelompok,  yaitu  kelompok  usia  3  bulan, kelompok  usia  6  bulan,  kelompok  usia  12 bulan, dan kelompok usia 18 bulan.
Pengambilan  jaringan  kulit  perut tikus Wistar menggunakan biopsi plong 10 mm  hingga  kedalaman  subkutan.  Jaringan
Frieda : Gambaran Deposisi Kolagen Tipe I Terhadap Usia Tikus Galur Wistar: Penelitian In Vivo
ditempatkan  di  tabung  kontainer  biopsi yang berisi larutan formalin 10%.
Pembuatan
preparat histopatologi menggunakan pewarnaan Trichrome masson dengan interpretasi spesifik serabut kolagen  berupa  warna  biru.  Tahapan pembuatan  preparat  histopatologi  kulit dengan  pewarnaan Trichrome  masson sebagai  berikut:  1)  Fiksasi,  dengan memasukkan  jaringan  ke  dalam  larutan buffer formalin selama 18-24 jam kemudian  jaringan  dimasukkan  ke  dalam akuades selama 1 jam guna menghilangkan larutan fiksasi; 2) Dehidrasi, yaitu jaringan dimasukkan  ke  dalam  alkohol  konsentrasi bertingkat. Jaringan  yang  telah  didehidrasi akan  menjadi  lebih  jernih  dan  transparan kemudian  jaringan  dimasukkan  ke  dalam larutan  alkohol-xylol  selama  1  jam dilanjutkan  ke  dalam  larutan  xylol  murni selama  2x2  jam;  3)  Impregnasi,  yaitu pemotongan  jaringan  lalu  dimasukkan  ke dalam  parafin  cair  selama  2x24  jam, setelah itu masuk dalam tahap pengeringan. Preparat yang telah disimpan dalam bentuk blok parafin akan bertahan hingga 5 tahun dengan  penyimpanan  yang  benar  pada tempat kering atau lemari es; 4) Deparafinisasi,  yaitu  dengan  memanaskan preparat  pada  oven  selama  10  menit;  5) Pewarnaan Trichrome masson dengan cara jaringan  diberi  larutan neutral  red 0,5%
selama 5 menit kemudian dicuci dengan air mengalir  selama  5  menit  dan  dibilas
akuades selanjutnya diteteskan larutan acid fuchsin selama 5 menit dan dibilas akuades selama  5  menit,  kemudian  jaringan  diberi larutan phosphomolybdic  acid selama  5 menit  dengan  kelebihan  larutan  dapat dibuang.  Pada  tahap  selanjutnya,  jaringan diberi larutan methyl blue selama 2-5 menit dan dicuci menggunakan akuades selama 5 menit.  Larutan  terakhir  yang  diberikan pada  jaringan  adalah  asam  asetik  1% selama  2  menit  dilanjutkan  dengan dehidrasi  alkohol.  Tahap  akhir  adalah clearing dan mounting menggunakan kanada balsam.
Pengamatan preparat dilakukan menggunakan  mikroskop  pembesaran  40x dan  100x  pada  5  lapang  pandang. Perhitungan  deposisi  kolagen  dilakukan pada  area  berwarna  biru  yang  secara spesifik merupakan kolagen melalui pewaranaan Trichrome masson . Interpretasi  hasil  pengamatan  kolagen dilakukan  oleh  ahli  patologi  anatomi dengan  pembacaan  berulang.  Data  rerata kuantitatif  kepadatan  kolagen  didapatkan dengan  mengolah  gambar  menggunakan software imageJ untuk mengetahui kepadatan  kolagen  yang  diinterpretasikan dengan persen (%) area berwarna biru pada pengamatan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan preparat deposisi kolagen  pewarnaan Trichrome  masson
Frieda : Gambaran Deposisi Kolagen Tipe I Terhadap Usia Tikus Galur Wistar: Penelitian In Vivo
dilakukan  pada  pembesaran  40x  dan  100x pada  5  lapang  pandang  menggunakan  alat bantu optilab. Deposisi kolagen diinterpretasikan  dengan  warna  biru  dan dilakukan  perhitungan  kuantitatif  (%) menggunakan software imageJ  oleh  ahli patologi anatomi dengan pembacaan berulang.  Hasil  pengamatan  ditampilkan pada tabel 1.
Pada tabel 1 menunjukkan gambaran histopatologi jaringan kulit tikus pewaranaan Trichrome  masson yang diambil  melalui  optilab  pada  pembesaran 40x.  Preparat  kelompok  usia  muda,  yaitu usia 3 bulan dan usia 6 bulan menunjukkan warna  biru  (kolagen)  yang  lebih  luas dibandingkan  pada  kelompok  usia  yang lebih  tua  yaitu  18  bulan.  Preparat kelompok  usia  18  bulan  menunjukkan distribusi  warna  biru  (kolagen)  yang  lebih sempit  dibandingkan  kelompok  lainnya. Rerata  persentase  kuantitatif  deposisi kolagen  menggunakan software ImageJ ditampilkan pada gambar 1. Hasil deposisi kolagen pada pembesaran 40x
menunjukkan  rerata  persentase  deposisi
kolagen  pada  kelompok  usia  3  bulan,  6 bulan,  12  bulan,  dan  18  bulan  sebesar 57,6±0,17;  24,5±0,86;  22,7±1,47;  dan 12,1±1,6  secara  berurutan.  Di  satu  sisi, pada pembesaran 100x didapatkan deposisi kolagen  pada  kelompok  usia  3  bulan sebesar 57,5±0,43%, pada kelompok usia 6 bulan sebesar 14,9±0,95%, pada kelompok usia  12  bulan  sebesar  12,8±0,34%,  dan pada  kelompok  usia  18  bulan  sebesar 6,9±0,52%.  Persentase  deposisi  kolagen baik  pada  pembesaran  40x  maupun  100x menunjukkan  persentase  terbesar  pada kelompok  usia  3  bulan  dengan  nilai 57,6±0,17%  pada  pembesaran  40x  dan 57,5±0,43% pada pembesaran 100x. Kemudian,  persentase  deposisi  kolagen terendah  terdapat  pada  kelompok  usia  18 bulan  dengan  deposisi  kolagen  sebesar 12,1±1,6%  pada  pembesaran  40x  dan 6,9±0,52%  pada  pembesaran  100x.  Hasil penelitian menunjukkan adanya penurunan persentase  deposisi  kolagen  jaringan  kulit tikus  Wistar  seiring  dengan  peningkatan usia dengan rentang usia tikus Wistar pada penelitian adalah 3-18 bulan.
Tabel 1 Gambaran deposisi kolagen pada jaringan kulit tikus wistar pembesaran 40x dengan trichrome sasson staining dan pengamatan melalui ImageJ
0 50 100 3 6 1 2 1 8 D E P O S IS I
K O L A G E N ( % ) USIA TIKUS WISTAR (BULAN) Perbesaran 40x Perbesaran 100x
Kelompok Trichrome masson ImageJ Usia 3 Bulan Usia 6 Bulan Usia 12 Bulan
Usia 18 Bulan
Penelitian ini menggunakan sampel berupa  jaringan  kulit  tikus  Wistar  dengan usia  3  bulan,  6  bulan,  12  bulan,  dan  18 bulan.  Hasil  dari  penelitian  menunjukkan adanya  penurunan  persentase  deposisi kolagen  kulit  secara  progresif  seiring dengan  peningkatan  usia  tikus  Wistar, dengan  deposisi  kolagen  jaringan  kulit tikus  Wistar  tertinggi  didapatkan  pada kelompok  usia  3  bulan  dan  terendah  pada kelompok  usia  18  bulan.  Oleh  sebab  itu, dapat  diinterpretasikan  bahwa  terdapat adanya  pengaruh  usia  terhadap  deposisi kolagen  kulit.  Proses  yang  mendasari penurunan kolagen kulit seiring peningkatan usia pada penelitian ini adalah proses  penuaan  atau ageing .  Secara general,  penuaan  didefinisikan  sebagai dampak dari akumulasi berbagai kerusakan molekuler dan seluler seiring bertambahnya usia diikuti dengan penurunan  bertahap  terhadap  kapasitas fisik  serta  mental,  peningkatan  risiko penyakit,  dan  diakhiri  dengan  kematian. 16
Penuaan pada jaringan kulit secara spesifik definisikan  sebagai  perubahan  pada  kulit yang dapat dikategorikan sebagai perubahan  histologis,  morfologis,  dan fisiologis  yang  terjadi  karena  proses degeneratif. 17 Kulit yang mengalami penuaan  akan  kehilangan  karakteristik struktural  dan  fungsionalnya,  penuaan pada  kulit  dapat  dikategorikan  menjadi
penuaan intrinsik dan penuaan ekstrinsik. 4
Penuaan ekstrinsik diakibatkan oleh faktor oksidatif lingkungan, seperti ultraviolet  (UV)  matahari,  gaya  hidup, asap  rokok,  dan  faktor  polusi  lainnya. 4
Studi terkini menunjukkan etiologi terbanyak penuaan ekstrinsik adalah akumulasi dan paparan sinar matahari yang tidak  terlindungi  atau photoaging . 1,18
Degenerasi  kulit  oleh  radiasi  UV  adalah proses kumulatif dengan laju degenerasinya  tergantung  pada  frekuensi, durasi,  dan  intensitas  paparan  sinar matahari  serta  perlindungan  alami  oleh pigmentasi  kulit.  Penuaan  kulit  ekstrinsik ditandai  dengan  kerutan  yang  dalam, hilangnya elastisitas, kekeringan, kekasaran  atau  bertekstur,  teleangiektasis, dan  gangguan  pigmentasi.  Penampilan kulit  yang  menua  secara  ekstrinsik  cukup berbeda  dari  kulit  yang  mengalami penuaan intrinsik. 4,18
Penuaan  intrinsik  dipengaruhi  oleh usia,  faktor  genetik,  hormonal,  serta radikal  bebas. 1 Penuaan  kulit  secara intrinsik terjadi sangat lambat dan bervariasi  antar  individu  dalam  populasi dari  etnis  yang  sama  maupun  berbeda. 1,19
Pada  dasarnya  penuaan  kulit  intrinsik hanya  mampu  terlihat  pada  usia  yang cukup tua, ditandai dengan kulit yang lebih tipis,  kering,  kurang  elastis,  dan  keriput halus. 1,18 Penuaan intrinsik terjadi di dalam
Frieda : Gambaran Deposisi Kolagen Tipe I Terhadap Usia Tikus Galur Wistar: Penelitian In Vivo
jaringan  melalui  pengurangan  sel  mast dermal,  fibroblas,  produksi  kolagen,  serta hilangnya rete ridges .. Kerusakan oksidatif bertahap untuk basa DNA dalam kode gen kolagen dan elastin menyebabkan berkurangnya  ekspresi  kolagen  pada  kulit yang menua. 1
Secara umum, baik penuaan intrinsik maupun ekstrinsik hanya memiliki  perbedaan  pada  etiologi,  namun keduanya mengakibatkan reaksi biokimiawi  yang  serupa  terhadap  jaringan dermis  pada  struktur  dan  organisasi  MES, yang  mana  penyusun  utama  MES  adalah elastin  dan  serabut  kolagen. 20 Dalam proses  sintesisnya,  kolagen  memiliki  2 regulator  utama  yaitu  sitokin transforming growth factor (TGF-β) dan  faktor transkripsi activator  protein (AP-1).  TGF- β  dan  AP-1  akan  bekerja  secara kontradiktif,  yang  mana  TGF-β  akan memicu produksi kolagen sedangkan AP-1 akan  memicu  inhibisi  sintesis  kolagen  dan penghancuran  kolagen.  Penurunan  TGF-β dan Reactive  Oxygen  Species (ROS) merupakan  kontributor  dominan  pada penuaan intrinsik, sedangkan paparan sinar UV/ photoaging merupakan  kontributor utama penuaan ekstrinsik. 20,21 Di dalam sel mesenkim fibroblas, TGF-β akan berikatan dengan reseptornya sehingga mengakibatkan  fosforilasi  dari  Smad2, Smad2  akan  membentuk  kompleks  Smad dengan  Smad4.  Selanjutnya,  kompleks
Smad  mengalami  translokasi  ke  nukleus guna  aktivasi  protein  transkripsi,  termasuk Collagen  Type I Alpha 2 Chains  Gene (COL1A2)  yang  merupakan  gen  pengode prokolagen tipe 1. 22–24 TGF-β juga menginduksi  protein  perantara,  yaitu connective  tissue  growh  factor (CTGF) yang berperan dalam menstimulasi prokolagen  tipe  I. 20,22,23 Jaras  tersebut merupakan proses fisiologis sintesis kolagen,  sedangkan  pada  proses  penuaan yang  dipicu  oleh  penurunan  TGF-β  akan mengakibatkan  jaras  yang  berlawanan yaitu  penurunan  kadar  prokolagen  tipe  I diikuti dengan penurunan deposisi kolagen tipe I. 20
Di  satu  sisi,  penuaan  intrinsik  juga mengakibatkan metabolisme oksidatif yang memicu pembentukan ROS, pembentukan  ROS  juga  dipicu  oleh photoaging dari  penuaan  ekstrinsik  yang menyebabkan  terjadinya  akumulasi  ROS berlebih. Akumulasi ROS akan merangsang  sitokin  dan growth  factor receptor (GFR)  sehingga  mengaktifkan jalur  p38  dan  JNK  untuk  memproduksi Nuclear  Factor-kappa  Beta (NF-κB),  c- Fos, dan c-Jun. 20,24 Protein c-Fos dan c-Jun merupakan proto-onkogen yang meregulasi  aktivasi  AP-1. 24 Aktivasi  dari AP-1 mampu menginduksi matrix metalloproteinase (MMP)  mRNA  yang berperan dalam degradasi kolagen sehingga mengakibatkan penurunan
deposisi  kolagen  tipe  I. 20 Lalu,  aktivasi NF-κB akan  menginduksi cytokine- dependent  attraction  of  neutrophils yang mengandung  kolagenase  neutrofil  yang terlibat  dalam  degradasi  kolagen. 25 Proses
penuaan  intrinsik  dan  ekstrinsik  yang menyebabkan  penurunan  deposisi  kolagen tipe 1 digambarkan melalui gambar 2.
Gambar 2 Proses Penurunan deposisi kolagen tipe I pada proses penuaan. 20
Penelitian sebelumnya terkait produksi kolagen secara kronologis berdasarkan  usia  menunjukkan  penurunan kolagen  sebesar  68%  pada  kulit  tua dibandingkan  pada  kulit  muda.  Penurunan kolagen  pada  kulit  tua  terjadi  akibat penurunan  sintesis  mRNA  kolagen  tipe  I hingga 3 kali lipat lebih rendah dibandingkan pada kulit muda. 26 Penelitian tersebut  memiliki  hasil  serupa  dengan penelitian  ini,  yang  mana  pada  penelitian ini  menunjukkan  penurunan  deposisi
kolagen  hingga  88%  pada  pembesaran 100x  pada  kelompok  usia  3  bulan dibandingkan  kelompok  usia  18  bulan. Hasil penelitian lain menunjukkan penurunan  tingkat  ekspresi  gen  TGF-β, CTGF, dan prokolagen tipe I sebesar 30%; 50%;  dan  25%  secara  berurutan  pada dermis  tua  dibandingkan  dermis  muda. Penurunan tersebut mengakibatkan penurunan  kolagen  pada  kulit  tua,  hal  ini dapat  menjelaskan  bahwa  regulasi  protein persinyalan sintesis kolagen utama
Frieda : Gambaran Deposisi Kolagen Tipe I Terhadap Usia Tikus Galur Wistar: Penelitian In Vivo
dimediasi  oleh  TGF-β. 25,27 Penelitian  lain juga  menunjukkan  penurunan  kolagen sekitar  25%  selama  4  dekade,  dengan persentase  kolagen  usia  25-34  tahun sebesar  73,28±14.3  sedangkan  pada  usia 65-74  turun  menjadi  55,3±13,1.  Literatur juga menyatakan bahwa seiring bertambahnya usia, sintesis kolagen secara alami  mengalami  penurunan    sekitar  1- 1,5% pertahun. 5 Penurunan kolagen akibat penuaan  kulit,  selain  berdampak  pada wajah,  juga  berdampak  pada  bagian  kulit tubuh secara keseluruhan, seperti keratosis seboroik,  solaris  lentigo,  pruritus  senilis, dan actinic keratosis. 20
Demikian, secara teoritis dan dengan  membandingkan  penelitian  ini dengan  hasil  penelitian  sebelumnya  yang serupa,  didapatkan  bahwa  hasil  penelitian ini  memiliki  hasil  yang  sesuai.  Pada penelitian  ini  menyatakan  bahwa  terdapat adanya  penurunan  deposisi  kolagen  tipe  I seiring  dengan  bertambahnya  usia  pada jaringan  kulit  tikus  Wistar  akibat  proses penuaan.  Keterbatasan  pada  penelitian  ini berupa masih sedikit variasi kelompok usia tikus  yang  digunakan.  Diharapkan  untuk penelitian  selanjutnya  dilakukan  observasi gambaran  deposisi  kolagen  tipe  I  terhadap usia pada kelompok usia hewan coba yang lebih  beragam  dan  dilakukan  penelitian lanjutan dengan pemberian perlakuan pada hewan  coba  untuk  menghambat  proses degradasi kolagen tipe I.

## KESIMPULAN
Penelitian  menunjukkan  persentase deposisi  kolagen  kulit  kelompok  muda lebih  tinggi  dibandingkan  persentase deposisi  kolagen  kulit  kelompok  tua. Penurunan deposisi kolagen seiring dengan pertambahan  usia  dipengaruhi  oleh  proses penuaan.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Tidak terdapat konflik kepentingan.

## UCAPAN TERIMA KASIH

## Tidak ada

## DAFTAR PUSTAKA
1. Rani  S,  Ritter  T.  The  Exosome  -  A Naturally  Secreted  Nanoparticle  and its  Application  to  Wound  Healing. Adv Mater. 2015;28(27):1–11.
2. Poljšak  B,  Dahmane  RG,  Godic  A.
Intrinsic  Skin  Aging :  The  Role  of Oxidative Stress. Acta Dermatovenerol  APA.  2012;2(2):33–
6.
3. Lynch  K,  Pei  M.  Age  Associated Communication  Between  Cells  and Matrix:  a  Potential  Impact  on  Stem
Cell-Based Tissue Regeneration Strategies. Organogenesis.
2014;10(3):289–98.
4. Wong  R,  Geyer  S,  Weninger  W, Guimberteau  J,  Wong  JK.  The Dynamic  Anatomy  and  Patterning  of Skin. Exp Dermatol. 2016;25(2):92–8.
5. Reilly  DM,  Lozano  J.  Skin  Collagen Through  the  Lifestages :  Importance for  Skin  Health  and  Beauty.  Plast Aesthetic Res. 2021;8(2).
6. Stamov  DR,  Pompe  T.  Structure  and Function  of  ECM-Inspired  Composite Collagen  Type  I  Scaffolds.  Soft Matter. 2012;8(40):10200–12.
7. Cole  MA,  Quan  T,  Voorhees  JJ, Fisher GJ. Extracellular Matrix Regulation  of  Fibroblast  Function : Redefining  Our  Perspective  on  Skin Aging.  J  Cell  Commun  Signal. 2018;12(1):35–43.
8. Kruglikov IL, Scherer PE. Skin Aging as  a  Mechanical  Phenomenon :  The Main  Weak  Links.  Nutr  Heal  Aging.
2018;4(4):291–307.
9. Al-hajj  NQM,  Sharif  HR,  Aboshora W,  Wang  H.  In  Vitro  and  in  Vivo Evaluation  of  Antidiabetic  Activity  of Leaf  Essential  Oil  of  In  Vitro  and  in Vivo Evaluation of Antidiabetic
Activity  of  Leaf  Essential  Oil  of Pulicaria  inuloides  -Asteraceae.  J Food Nutr Res. 2016;4(7):461–70.
10. Shin J, Kwon S, Choi J, Na J, Huh C. Molecular  Mechanisms  of  Dermal Aging  and  Antiaging  Approaches.  Int J Mol Sci. 2019;20(9).
11. Zhang  S,  Duan  E.  Fighting  Against
Skin  Aging :  The  Way  from  Bench  to Bedside. Cell Transplant.
2018;27(5):729–38.
12. Hu L, Wang J, Zhou X, Xiong Z, Zhao J, Yu R, et al. Exosomes Derived from Human  Adipose  Mensenchymal  Stem Cells  Accelerates  Cutaneous  Wound
Healing
Via Optimizing the
Characteristics of Fibroblasts. Sci Rep. 2016;6(March):1–11.
13. Boulenguez  P,  Jaadane  I,  Martinsons C,  Carré  S,  Chahory  S,  Torriglia  A. Photobiology – Presentation of a Blue Light  Hazard  In  Vivo  Experiment  on the Rat. Light Eng. 2020;23(4):41–6.
14. 14.Sengupta  P.  The  Laboratory  Rat : Relating  Its  Age  with  Human’s.  Int  J Prev Med. 2013;4(6):624–30.
15. 15.Ghasemi A, Jeddi S, Kashfi K. The Laboratory Rat: Age and Body Weight Matter. EXCLI J. 2021;20:1431–45.
16. 16.Abyad  A.  From  Active  Ageing  to Health  Ageing.  QJM  An  Int  J  Med. 2018;111(Suppl_1):2018.
17. 17.Yi Q, Wong A, Chew FT. Defining Skin  Aging  and  Its  Risk  Factors :  a Systematic Review and Meta-analysis. Sci Rep. 2021;11:1–13.
18. Tobin DJ. Introduction to Skin Aging. J Tissue Viability. 2017;26(1):37–46.
19. Mohammed  SA,  Abd  NF,  Salam  E, Kalleny  NK,  Bahaa  N.  Effect  of Adipose-Derived Stem Cells on Induced  Photoaging  in  the  Skin  of Adult  Guinea  Pig:  Histological  and Immunohistochemical  Study.  Egypt  J Histol. 2017;40(2):184–200.
Frieda : Gambaran Deposisi Kolagen Tipe I Terhadap Usia Tikus Galur Wistar: Penelitian In Vivo
20. Zahruddin  A,  Damayanti  D.  Penuaan Kuli :  Patofisiologi  dan  Manifestasi Klinis.  Period  Dermatology  Venereol. 2018;30(3):208–15.
21. Pandel  RD,  Poljšak  B,  Godic  A, Dahmane  R.  Skin  Photoaging  and  the Role of Antioxidants in Its Prevention.
ISRN Dermatol. 2013;2013:1–11.
22. Zhu Y, Tao H, Jin C, Liu Y, Lu X, Hu
X,  et  al.  Transforming  Growth  Factor Beta  1  Induces  Type  II  Collagen  and Aggrecan  Expression  Via  Activation of Extracellular Signal ‑ Regulated Kinase  1/2  and  Smad2/3  Signaling Pathways. Mol Med Rep.
2015;12(4):5573–9.
23. Lin P, Chang H, Yeh C. Transforming
Growth  Factor  Beta  1  Increases Collagen  Content,  and  Stimulates Procollagen  I  and  Tissue  Inhibitor  of Metalloproteinase-1 Production of Dental Pulp Cells : Role of MEK/ERK and  Activin  Receptor-Like  Kinase- 5/Smad  Signaling.  J  Formos  Med Assoc. 2017;116(5):351–8.
24. Gustems  M,  Woellmer  A,  Rothbauer U, Eck SH, Wieland T, Lutter D, et al. c-Jun/c-Fos  Heterodimers  Regulate Cellular Genes Via a Newly Identified Class  of  Methylated  DNA  Sequence
Motifs. Nucleic Acids Res.
2014;42(5):3059–72.
25. Rackova  L,  Mach  M,  Brnoliakova  Z.
An  Update  in  Toxicology  of  Ageing.
Environ Toxicol Pharmacol.
2021;84(January).
26. Li  Y,  Lei  D,  Swindell  WR,  Xia  W,
Weng  S,  Fu  J,  et  al.  Age-Associated Increase  in  Skin  Fibroblast  –  Derived Prostaglandin E2 Contributes to Reduced  Collagen  Levels  in  Elderly Human  Skin.  J  Invest  Dermatol.
2015;135(9):2181–8.
27.  Li C,  Fu  Y, Dai  H,  Wang Q,  Gao R,
Zhang  Y.  Food  Science  and  Human
Wellness Recent Progress in Preventive Effect of Collagen Peptides on  Photoaging  Skin  and  Action Mechanism.  Food  Sci  Hum  Wellness. 2022;11(2):218–29.