## Aktivitas Ekstrak Averrhoa bilimbi, Annona squamosa, dan Tithonia diversifolia terhadap Mortalitas dan

## Penghambatan Pertumbuhan Larva Crocidolomia pavonana (Lepidoptera: Crambidae)
The Activity of Averrhoa bilimbi, Annona squamosa, and Tithonia diversifolia Extracts on Mortality and Growth Inhibition of Crocidolomia pavonana (Lepidoptera: Crambidae) Larvae
Harlina Kusuma Tuti 1 , Dadang 2 *, dan Endang Sri Ratna 2
Diterima 06 April 2018/Disetujui 04 Februari 2019

## ABSTRACT
Crocidolomia pavonana (F.) (Lepidoptera: Crambidae) is one of the important insect pests that can  reduce  production  of  cruciferous  plants.  Generally  farmers  control  this  insect  pest  by  using synthetic insecticides. However, the intensive and excessive use of synthetic insecticides may cause negative impact to the insect and environment, such as the occurence of resistance and resurgence of pests and chemical residues in agricultural products. One of alternative strategies that can be adopted to reduce the negative impact of synthetic insecticide use is by utilization of botanical insecticide. The aim of this research was to study the activities of extract Averrhoa bilimbi leaves, Annona squamosa seeds, and  Tithonia diversifolia  flowers on mortality and growth inhibition of C.  pavonana  larvae. The  mortality  activity  was  assessed  by  single  and  extract  mixture  using  leaf  residual  method.  The larval growth inhibition activity was also tested by using leaf residual method. A. squamosa extract at concentration of 0.015% could kill 100% of larvae at 72 hours after treatment (HAT). Meanwhile, T. diversifolia extract at 5% could kill 88% of larvae at 144 HAT. Extract mixtures of T. diversifolia and A. squamosa at ratios 1:1, 1:2 and 2:1 (w/w) gave low mortality activity. These three extract showed growth inhibition activity against the larvae of C. pavonana.
Keywords: Botanical insecticides, cabbage pest, extract mixture, toxicity

## ABSTRAK
Crocidolomia  pavonana (F.)  (Lepidoptera:  Crambidae)  merupakan  salah  satu  hama  penting yang dapat menurunkan produksi tanaman kubis-kubisan. Petani umumnya mengendalikan serangan hama  ini  dengan  menggunakan  insektisida  sintetik.  Namun,  penggunaan  insektisida  sintetik  yang terus-menerus  dan  berlebihan  dapat  menyebabkan  dampak  negatif  pada  serangga  dan  lingkungan seperti terjadinya resistensi dan resurjensi hama serta residu pada produk pertanian. Salah satu strategi alternatif  yang  dapat  dilakukan  untuk  mengurangi  dampak  negatif  penggunaan  insektisida  sintetik adalah dengan memanfaatkan insektisida nabati. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas ekstrak  daun Averrhoa  bilimbi ,  biji Annona  squamosa ,  dan  bunga Tithonia  diversifolia terhadap mortalitas  dan  penghambatan  pertumbuhan  larva C.  pavonana .  Aktivitas  mortalitas  diuji  dengan ekstrak  tunggal  dan  campuran  menggunakan  metode  residu  pada  daun.  Aktivitas  penghambatan pertumbuhan  larva C. pavonana juga  diuji  dengan  metode  residu pada  daun. Ekstrak A.  squamosa pada konsentrasi 0.015% dapat mematikan larva C. pavonana sebesar 100% pada pengamatan 72 jam setelah perlakuan (JSP). Sementara itu, ekstrak T. diversifolia pada konsentrasi 5% mampu mematikan 88% larva pada pengamatan 144 JSP. Ekstrak campuran T. diversifolia dan A. squamosa pada rasio
1 Mahasiswa Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor Jl. Kamper Kampus IPB Darmaga 16680, Indonesia
2 Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor Jl. Kamper Kampus IPB Darmaga 16680, Indonesia
E-mail : dadangtea@ipb.ac.id (*Penulis korespondensi)
1:1,  1:2,  dan  2:1  (w/w)  memberikan  aktivitas  mortalitas  rendah.  Ketiga  ekstrak  ini  menunjukkan aktivitas penghambatan pertumbuhan terhadap larva C. pavonana .
Kata kunci: Ekstrak campuran, hama kubis, insektisida nabati, toksisitas

## PENDAHULUAN
Tanaman  kubis-kubisan  ( Brassicaceae ) merupakan jenis tanaman sayuran yang banyak dibudidayakan dan dikonsumsi oleh masyarakat Indonesia.  Produksi  beberapa  tanaman  kubis- kubisan  pada  tahun  2013-2014  mengalami penurunan seperti kubis 3.03%, kol kembang 9.77%,  dan  sawi  5.23%  (Kementan,  2015). Beberapa  faktor  yang  menjadi  penyebab penurunan  produksi  tersebut  diantaranya menurunnya  kesuburan  lahan,  berkurangnya luas  lahan  produksi,  dan  adanya  serangan organisme pengganggu tanaman (OPT) (Sastrosiswojo et  al .,  2005).  Ulat  krop  kubis Crocidolomia  pavonana F.  (Lepidoptera: Crambidae) merupakan salah satu hama penting pada  pertanaman  kubis-kubisan  (Kalshoven, 1981) di berbagai daerah di Indonesia (Deptan, 2007).  Menurut  Bardjo et  al .  (2015)  serangan C. pavonana dapat mengakibatkan kehilangan hasil produksi kubis hingga 49%. Pengendalian dengan menggunakan insektisida sintetik merupakan cara pengendalian hama kubis yang paling umum dilakukan oleh petani. Penggunaan insektisida sintetik dengan frekuensi tinggi dan secara terus-menerus dapat mengakibatkan dampak negatif seperti terjadinya resistensi dan resurjensi hama (Kau dan Cheng, 2001), berpengaruh pada kesehatan lingkungan  dan  residu  pada  produk  pertanian yang  berbahaya  bagi  konsumen  (Dadang  dan Prijono,  2008;  Dharmaputra et  al .,  2016). Untuk  itu,  diperlukan  upaya  pengendalian lainnya yang aman bagi lingkungan, organisme bukan  sasaran,  dan  diharapkan  mampu mengurangi  penggunaan  insektisida  sintetik yaitu  menggunakan  insektisida  nabati  yang terbuat  dari  bahan  alami  seperti  tumbuhan. Kelebihan  insektisida  nabati  dibandingkan insektisida sintetik antara lain mudah terurai di alam,  umumnya  aman  terhadap  organisme bukan  sasaran  (bersifat  selektif),  tidak  cepat menimbulkan  resistensi  hama  bila  digunakan dalam  bentuk  ekstrak  kasar,  dapat  dipadukan dengan teknik pengendalian hama lainnya, dan beberapa  jenis  insektisida  nabati  dapat disiapkan secara sederhana (Guleria dan Tiku,
2009).  Indonesia  memiliki  keanekaragaman flora yang dapat dimanfaatkan sebagai sumber bahan insektisida nabati di antaranya belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi, Oxalidaceae), srikaya ( Annona  squamosa, Annonaceae),  dan  kipait ( Tithonia  diversifolia, Asteraceae).  Pada  daun belimbing wuluh mengandung saponin, flavonoid, dan tanin yang mempunyai aktivitas antifeedant terhadap  rayap  tanah Coptotermes formosanus (Isoptera: Rhinotermitidae) (Ohmura et  al. ,  2000),  serta  dapat  mengendalikan Periplaneta  americana (Blattodae:  Blattidae)
(Krisman et  al. ,  2016), Anopeles  aconitus (Diptera:  Cullicidae),  dan  (Nopianti et  al. , 2008).  Biji  srikaya  mengandung  asetogenin yang terdiri atas squamosin dan asimisin yang bersifat racun perut pada Chrysomya bezziana (Diptera:  Calliphoridae)  (Wardhana et  al., 2004) dan dapat mengendalikan wereng cokelat ( Nilaparvata lugens ) (Hemiptera: Delphacidae) (Prakash et  al .,  2008).  Sementara  itu,  kipait mengandung  senyawa-senyawa  yang  bersifat toksik terhadap Atta cephalotes (Hymenoptera:
Myrmicinae)  (Castano-Quintana et  al .,  2013), larva Chlosyne lacinia (Lepidoptera: Nymphalidae) (Ambrosio et  al .,  2008),  larva C.  bezziana (Wardhana dan Diana, 2014), dan hama gudang Callosobrochus maculatus (Coleoptera: Bruchidae) (Kolawole et al ., 2014) seperti flavonoid, tanin, polifenol,  dan  triterpena  (Kemenhut,  2010). Ekstrak daun A. bilimbi , biji A. squamosa dan bunga T. diversifolia mempunyai sifat insektisida akan tetapi potensi untuk mengendalikan larva C.  pavonana belum  banyak  dipelajari,  dan belum  diketahui  sifat  insektisidanya.  Tujuan penelitian  ini  untuk  mempelajari  aktivitas ekstrak daun A. bilimbi , biji A. squamosa , dan bunga T.  diversifolia terhadap  mortalitas  dan penghambatan pertumbuhan larva C. pavonana.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Fisiologi dan Toksikologi Serangga Departemen Proteksi  Tanaman,  Fakultas  Pertanian,  Institut Pertanian  Bogor  pada  bulan  Januari  sampai September 2017.

## Ekstraksi Bahan Tumbuhan
Metode  maserasi  digunakan  untuk mendapatkan  ekstrak  daun A.  bilimbi ,  biji A. squamosa ,  dan  bunga T.  diversifolia yang mengacu  pada  Dadang  dan  Prijono  (2011). Masing-masing  bahan  tumbuhan  dipotong- potong lalu dikeringanginkan selama beberapa hari tanpa terpapar cahaya matahari. Potongan bahan  tumbuhan  yang  telah  keringanginkan dihaluskan  menggunakan  blender  hingga menjadi  serbuk.  Sebanyak  200  g  masing- masing  serbuk  bahan  tumbuhan  direndam dalam 2 000 ml metanol (1:10, w/v) selama 48 jam.  Hasil  rendaman  disaring  dengan  kertas saring  dan  filtrat  yang  dihasilkan  diuapkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 50
0 C  dan  tekanan  400-450  mmHg  hingga diperoleh  ekstrak  kasar.  Setiap  ekstrak  yang diperoleh  dimasukkan  ke  dalam  botol  gelas gelap  lalu  disimpan  dalam  lemari  pendingin pada suhu ± 4 0 C hingga saat digunakan.

## Pemeliharaan dan Perbanyakan Serangga Uji
Imago C.  pavonana dikoleksi  dari pertanaman kubis di Cisarua, Bogor. Selanjutnya  imago  yang  dipelihara  dan diperbanyak  di  Laboratorium  Fisiologi  dan Toksikologi  Serangga,  Departemen  Proteksi Tanaman,  Fakultas  Pertanian  IPB  dan  diberi pakan larutan madu 10% yang diserapkan pada kapas.  Larva C.  pavonana diberi  pakan  daun brokoli  bebas  pestisida  yang  diperoleh  dari pertanian organik Bina Sarana Bhakti, Cisarua, Bogor.

## Uji Ekstrak Tunggal
Pengujian  ekstrak  tunggal  dilakukan dengan metode celup daun (Abizar dan Prijono, 2010).  Setiap  ekstrak  diuji  pada  lima  taraf konsentrasi  yang  ditentukan  berdasarkan  uji pendahuluan.  Konsentrasi  ekstrak  daun A. bilimbi adalah  5%,  3.75%,  2.5%,  1.5%,  dan 0.75%,  ekstrak  biji A.  squamosa adalah 0.015%,  0.01%,  0.005%,  0.0025%,  dan 0.00125%,  dan  ekstrak  bunga T.  diversifolia adalah  5%,  2%,  1%,  0.5%,  dan  0.2%. Pembuatan konsentrasi sediaan ekstrak dilakukan dengan metode pengenceran berseri ( serial dilution ). Masing-masing ekstrak dilarutkan  dalam  metanol  dan  pengemulsi tween-80  (5:1;  v/v),  kemudian  diencerkan dengan menambahkan akuades sampai volume
tertentu  sesuai  dengan  konsentrasi  uji  yang dibutuhkan.  Agar  sediaan  ekstrak  tercampur secara merata, sediaan ekstrak diaduk menggunakan magnetic stirrer . Kontrol berupa akuades  yang  mengandung  metanol  1%  dan tween-80 0.2%.
Potongan  daun  brokoli  (4  cm  x  4  cm) dicelupkan  satu  persatu  dalam  sediaan ekstrak pada konsentrasi  tertentu  hingga basah  merata lalu  ditiriskan.  Pada  perlakuan  kontrol  daun dicelupkan  dalam  larutan  kontrol.  Dua potongan  daun  brokoli  perlakuan  dan  kontrol diletakkan  dalam  cawan  petri  yang  terpisah yang  telah  dialasi  tisu,  kemudian  dimasukkan 15  larva C.  pavonana instar  I  dengan  lima ulangan.  Setelah  2x24  jam,  daun  pakan perlakuan  dan  kontrol  diganti  dengan  daun tanpa  perlakuan.  Data  kematian  larva  dicatat pada  saat  24-144  jam  setelah  perlakuan  (JSP) dengan  menghitung  larva  yang  mati  serta mengamati  perubahan  instar  tiap  serangga. Ekstrak yang memberikan aktivitas insektisida terbaik  digunakan  pada  uji  campuran.  Data mortalitas  yang  diperoleh  dianalisis  dengan program POLO-PC (LeOra Software, 1987).

## Uji Campuran Ekstrak
Hasil aktivitas insektisida nabati terbaik yang diperoleh pada pengujian ekstrak tunggal digunakan  dalam  uji  campuran,  yaitu  ekstrak bunga T.  diversifolia dan  biji A.  squamosa. Pengujian terdiri dari tiga perbandingan, yaitu 1:1,  1:2  dan  2:1  (w/w).  Konsentrasi  ekstrak yang digunakan untuk uji campuran ditentukan dari  uji  ekstrak  tunggal  yang  dihitung  dengan bantuan Microsoft Excel 2013, pada perbandingan  1:1  adalah  0.02%,  0.0062%, 0.0032%,  0.0019%,  dan  0.00064%,  pada perbandingan  1:2  adalah  0.0123%,  0.0047%, 0.0024%,  0.0014%,  dan  0.00048%,  dan  pada perbandingan  2:1  adalah  0.024%,  0.0093%, 0.0048%, 0.00285%, dan 0.00095%.
Metode  pembuatan  konsentrasi  sediaan ekstrak,  perlakuan,  dan  pengamatan  pada  uji campuran ekstrak sama seperti pada uji ekstrak tunggal.  Data  mortalitas  pada  24-144  JSP diolah  dengan  analisis  probit  menggunakan program  POLO-PC  (LeOra  Software,  1987) untuk  menentukan  hubungan  konsentrasi mortalitas termasuk nilai LC 50 dan LC 95 . Nilai- nilai  LC/LD  yang  diperoleh  digunakan  untuk menentukan  nilai  indeks  kombinasi  (IK)  yang selanjutnya digunakan untuk menentukan sifat
interaksi  campuran  ekstrak  yang  dihitung menggunakan rumus Chou dan Talalay (1984):
IK = LC x 1 (cm) LC x 1 + LC x 2 (cm) LC x 2 + ( LC x 1 (cm) LC x 1 X LC x 2 (cm) LC x 2 )
dimana,  LC x 1 dan  LC x 2 merupakan  nilai  LC ekstrak  tunggal.  LC x 1  (cm) dan  LC x 2  (cm) merupakan  LC/LD  campuran  yang  dikalikan proporsi  ekstrak  di  dalam  campuran  yang mengakibatkan  mortalitas  (15-95%).  Kategori sifat interaksi campuran adalah sebagai berikut (Kosman dan Cohen, 1996): (1) bila IK < 0.5, komponen  campuran  bersifat  sinergistik  kuat; (2)  bila  IK  0.5  ≤  IK  ≤  0.77,  komponen campuran  bersifat  sinergistik  lemah;  (3)  bila 0.77 < IK ≤ 1.43, komponen campuran bersifat aditif; (4) bila IK > 1.43, komponen campuran bersifat antagonistik.

## Uji Penghambatan Pertumbuhan
Pengujian  penghambatan  pertumbuhan C.  pavonana dilakukan  pada  15  larva  instar  I dengan  mengaplikasikan  ekstrak  tumbuhan dengan  berbagai  konsentrasi  yang  telah ditentukan  (LC 5 ,  LC 30 ,  dan  LC 50 )  dan  kontrol dengan metode pencelupan daun yang diulang sebanyak lima kali. Data dicatat pada saat 24- 144  JSP  dengan  mengamati  perubahan  instar tiap serangga. Data penghambatan pertumbuhan larva C.  pavonana yang  diperoleh  dianalisis
ANOVA-nya dengan Program SPSS ( Statistical  Product  and  Service  Solution ). Apabila  hasilnya  menunjukkan  berbeda  nyata maka  dilakukan  uji  lanjutan  menggunakan Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT)  pada taraf α= 0.05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Mortalitas  larva C.  pavonana pada perlakuan  ekstrak  daun A.  bilimbi ,  biji A. squamosa dan bunga T. diversifolia meningkat seiring  dengan  meningkatnya  konsentrasi  dan waktu  pengamatan  (Gambar  1).  Mortalitas larva C. pavonana pada ketiga perlakuan mulai terjadi sejak 24 JSP yang mana ekstrak daun A. bilimbi ,  biji A.  squamosa ,  dan  bunga T.
diversifolia menyebabkan  mortalitas  berturut- turut  sebesar  27%,  19%,  dan  1%  pada konsentrasi  tertinggi.  Pengamatan  48  JSP  dan 72  JSP  menunjukkan  adanya  peningkatan mortalitas  pada  perlakuan  ekstrak  daun A. bilimbi ,  biji A.  squamosa ,  dan  bunga T. diversifolia berturut-turut  menjadi  sebesar 31%, 96%, dan 4%, dan 35%, 100%, dan 15%. Pengamatan 72 JSP  ini,  perlakuan konsentrasi tertinggi  ekstrak  biji A.  squamosa sudah mampu menyebabkan 100% mortalitas.
Pengamatan 96 JSP mortalitas meningkat pada perlakuan ekstrak daun A. bilimbi dan bunga T. diversifolia berturut-turut  menjadi  41%  dan 27%. Sementara itu, pada pengamatan 120 JSP tidak  terjadi  peningkatan  mortalitas  larva C. pavonana pada  ekstrak  daun A.  bilimbi .  Hal tersebut  kemungkinan  senyawa  aktif  dalam tubuh  larva  telah  mengalami  penguraian ( detoksifikasi ) atau diekresikan bersama feses, sedangkan pada perlakuan ekstrak T. diversifolia masih  menunjukkan  peningkatan mortalitas  menjadi  72%,  dan  pada  144  JSP mortalitas meningkat mencapai 88% (Gambar 1). Secara keseluruhan, aktivitas insektisida dari  ketiga  ekstrak  tumbuhan  yang  diujikan secara  tunggal  menunjukkan  bahwa  ekstrak metanol biji A. squamosa mempunyai aktivitas insektisida  yang  paling  baik  sebagai  racun perut. Hal  ini ditunjukkan  oleh  nilai  LC 50 dan LC 95 yang paling rendah dibandingkan dengan perlakuan ekstrak lainnya (Tabel 1).
Ekstrak bunga T. diversifolia dan biji A. squamosa pada uji toksisitas tunggal menunjukkan  pengaruh  mortalitas  yang  baik sehingga dilakukan pengujian campuran kedua ekstrak.  Campuran  ekstrak  diuji  dengan  tiga perbandingan  yaitu  1:1,  1:2  dan  2:1  (w/w). Menurut Dadang dan Prijono (2008),
penggunaan  insektisida  nabati  campuran  yang bersifat sinergis mampu mengurangi penggunaan  jumlah  bahan  baku  dibandingkan dengan  mengaplikasikan  insektisida  nabati secara  tunggal.  Selain  itu,  penggunaan campuran  ekstrak  dengan  konsentrasi  atau dosis  yang  rendah  dapat  mengurangi  dampak negatif terhadap organisme bukan sasaran dan lingkungan.
(a)
(b)
(c)
Gambar 1. Perkembangan mortalitas larva C. pavonana pada perlakuan tiga ekstrak tumbuhan yang diuji dengan metode residu pada daun.
Tabel  1.  Penduga  parameter  persamaan  regresi  probit  hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak  dengan mortalitas larva C. pavonana pada pengamatan 144 jam Ekstrak a ± GB b ± GB LC 50 (SK 95%) (%) LC 95 (SK 95%) (%) Ekstrak Tunggal Ab 3.79 ± 0.14 1.50 ± 0.29 6.39   (4.69   - 11.55  )  79.32   (30.92 - 607.14) As 11.55 ± 0.69 2.34 ± 0.27 0.002 (0.001 -   0.002)    0.008 (  0.01 -     0.01) Td 4.86 ± 0.776E-01  1.86 ± 0.19 1.19   (0.82   -   1.75  )    9.10   (  4.79 -   34.06) Campuran Ekstrak Td:As (1:1) 6.28 ± 0.35 0.77 ± 0.15 0.021 (0.01   -   0.06  )    2.95   (  0.48 -  149.16) Td:As (2:1) 6.53 ± 0.45 0.89 ± 0.18 0.019 (0.01   -   0.07  )    1.33   (  0.23 -    74.18) Td:As (1:2) 5.83 ± 0.45 0.84 ± 0.21 0.102 (0.04   -   1.35  )    9.43   (  0.88 -9244.20)
Keterangan: Ab= ( Averrhoa bilimbi ), As= ( Annona squamosa ), Td = ( Tithonia diversifolia ), a = (intersep regresi probit), b= (kemiringan regresi probit), GB= (galat baku), SK= (selang kepercayaan), LC= ( lethal concentration ).
LC 50 dan  LC 95 ekstrak A.  squamosa secara terpisah nilainya lebih rendah dibandingkan  dengan  LC 50 dan  LC 95 secara campuran  (Tabel  1).  Selain  itu,  pada pengamatan  144  JSP  campuran  ekstrak konsentrasi tertinggi perbandingan 1:1, 1:2, dan 2:1  (w/w)  memiliki  nilai  mortalitas  berturut- turut sebesar 49%, 41%, dan 31% (Gambar 2). Nilai  tersebut  lebih  rendah  dibandingkan dengan  nilai  mortalitas  pada  ekstrak A.
squamosa secara terpisah, yaitu 100% (Gambar 1).  Hal  ini  mencerminkan  bahwa  perlakuan secara terpisah lebih efektif terhadap mortalitas larva C.  pavonana dibandingkan  dengan  hasil pada  perlakuan  campuran  ekstrak  bunga T. diversifolia dan A. squamosa . Berdasarkan nilai indeks  kombinasi,  sifat  interaksi  campuran ekstrak menunjukkan bahwa pada pengamatan 24 JSP, perbandingan 1:1 bersifat sinergis kuat pada  LC 50 dan  LC 95 ,  sedangkan  pada
0 20 40 60 80 100 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 0 1 4 4 Kontrol 0.75% 1.50% 2.50% 3.75% 5% A. bilimbi 0 20 40 60 80 100 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 0 1 4 4 Kontrol 0.00125% 0.0025% 0.005% 0.01% 0.015% A. squamosa 0 20 40 60 80 100 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 0 1 4 4 Kontrol 0.2% 0.5% 1% 2% 5% T. diversifolia Waktu Pengamatan (JSP) Waktu Pengamatan (JSP) M o rtalit as (% ) M o rtalit as (% ) M o rtalit as (% ) Waktu Pengamatan (JSP)
pengamatan  lainnya  bersifat  antagonistik. Sementara itu perbandingan 1:2 dan 2:1 (w/w) bersifat  antagonistik  pada  semua  pengamatan (Tabel  2).  Selain  mengakibatkan  kematian, perlakuan  tiga  ekstrak  dapat  memperpanjang lama pertumbuhan larva instar II C. pavonana yang  bertahan  hidup  memasuki  instar  III dan/atau  instar  IV.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  daun A. bilimbi pada konsentrasi 5% mampu memperlambat  waktu  pertumbuhan  larva C. pavonana dari instar II ke instar IV (Tabel 2). Senyawa saponin  yang terdapat  dalam  ekstrak daun A.  bilimbi dapat  mengganggu  proses pergantian  kulit  ( molting )  pada  serangga sehingga mampu memperlambat proses perkembangan larva (Syah dan Purwani, 2016). Perlakuan  ekstrak  biji A.  squamosa, konsentrasi  rendah  0.0025%,  0.005%  dan 0.01% mampu memberikan pengaruh terhadap lama  pertumbuhan  larva C.  pavonana dari instar II ke III dan dari instar II ke IV (Tabel 3). Adanya  pengaruh  terhadap  lama  pertumbuhan larva  menunjukkan  bahwa  ekstrak  tanaman
yang  termakan  oleh  serangga  uji  memberikan pengaruh  buruk  bagi  kehidupan  serangga tersebut.  Menurut  Santoso  (2011),  senyawa aktif biji A. squamosa mempengaruhi penyerapan makanan pada mesenteron dan hal ini dapat mengakibatkan penghambatan perkembangan larva uji. Lama waktu terbentuknya  imago  akan  mempengaruhi proses  perkembangan  selanjutnya,  seperti proses  peneluran  sehingga  apabila  terjadi perlambatan  pembentukan  imago,  proses selanjutnyapun  akan  terlambat  (Firmansyah, 2016). Perlakuan ekstrak bunga T. diversifolia pada  semua  konsentrasi  tidak  berpengaruh terhadap lama perkembangan larva dari instar II ke  IV,  tetapi  berpengaruh  terhadap  lama perkembangan larva dari instar II ke III (Tabel 3).  Hal  ini  disebabkan  residu  senyawa  aktif sudah tidak terdapat dalam tubuh serangga uji karena  diekresikan  bersama  feses,  atau  dapat juga disebabkan pada larva C. pavonana instar III dan IV sudah terjadi penguraian bahan aktif yang  lebih  tinggi  pada  tubuh  serangga  uji (Prijono dan Hassan, 1992).
(a) (b) (c)
Gambar  2.  Perkembangan  mortalitas  larva C.  pavonana pada  perlakuan  campuran  ekstrak T. diversifolia (Td) dan A. squamosa (As).
0 10 20 30 40 50 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 0 1 4 4
Kontrol 0.00064% 0.0019% 0.0032%
0.0062% 0.02% Td : As (1 : 1 (w/w)) Mor tal it as ( % ) 0 10 20 30 40 50 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 0 1 4 4 Kontrol
0.00048% 0.0014%
0.0024%
0.0047%
0.0123% Td : As (1 : 2 (w/w)) Mor tal it as (%) 0 10 20 30 40 50 2 4 4 8 7 2 9 6 1 2 0 1 4 4 Mor tal it as ( % ) T d : A s   ( 2 : 1 ( w / w ) ) Kontrol 0.00095% 0.00283% 0.0048%
0.0093%
0.024%
Waktu Pengamatan (JSP)
Waktu Pengamatan (JSP) Waktu Pengamatan (JSP)
Tabel 2. Sifat aktivitas campuran ekstrak T. diversifolia , dan A. squamosa terhadap larva C. pavonana Ekstrak (w/w) Waktu Pengamatan (JSP) Indeks Kombinasi Sifat Interaksi LC 50 LC 95 LC 50 LC 95 Td : As (1 : 1) 24 0.42 0.45 Sinergistik kuat Sinergistik kuat 48 9.79 61.22 Antagonistik Antagonistik 72 11.82 192.85 Antagonistik Antagonistik 96 8.35 205.38 Antagonistik Antagonistik 120 9.79 171.73 Antagonistik Antagonistik 144 6.77 208.59 Antagonistik Antagonistik Td : As (1 : 2) 24 77.00 8268.50 Antagonistik Antagonistik 48 23.32 880.46 Antagonistik Antagonistik 72 10.31 192.64 Antagonistik Antagonistik 96 7.73 107.89 Antagonistik Antagonistik 120 9.50 110.69 Antagonistik Antagonistik 144 7.91 116.14 Antagonistik Antagonistik Td : As (2 : 1) 24 21.64 255.27 Antagonistik Antagonistik 48 1130.51 870258.94 Antagonistik Antagonistik 72 266.26 62751.26 Antagonistik Antagonistik 96 166.50 50784.54 Antagonistik Antagonistik 120 45.95 5026.16 Antagonistik Antagonistik 144 23.16 643.64 Antagonistik Antagonistik Keterangan:  Td=  ( Tithonia  diversifolia ),  As=  ( Annona  squamosa ), JSP=  jam  setelah  perlakuan, Sinergistik  kuat  = indeks kombinasi > 0.5; Antagonistik = indeks kombinasi > 1.43.
Perlakuan  ekstrak  biji A.  squamosa, konsentrasi  rendah  0.0025%,  0.005%  dan  0.01% mampu  memberikan  pengaruh  terhadap  lama pertumbuhan larva C. pavonana dari instar II ke III dan dari instar II ke IV (Tabel 3). Adanya pengaruh terhadap  lama  pertumbuhan  larva  menunjukkan bahwa  ekstrak  tanaman  yang  termakan  oleh serangga  uji  memberikan  pengaruh  buruk  bagi kehidupan  serangga  tersebut.  Menurut  Santoso (2011),  senyawa  aktif  biji A.  squamosa mempengaruhi  penyerapan  makanan  pada
mesenteron  dan  hal  ini  dapat  mengakibatkan penghambatan  perkembangan  larva  uji.  Lama waktu  terbentuknya  imago  akan  mempengaruhi proses  perkembangan  selanjutnya,  seperti  proses peneluran  sehingga  apabila  terjadi  perlambatan pembentukan  imago,  proses  selanjutnyapun  akan terlambat  (Firmansyah,  2016).  Perlakuan  ekstrak bunga T. diversifolia pada semua konsentrasi tidak berpengaruh  terhadap  lama  perkembangan  larva dari instar II ke IV, tetapi berpengaruh terhadap lama perkembangan larva dari instar II ke III (Tabel 3).
Tabel 3. Lama perkembangan larva C. pavonana yang diberi perlakuan tiga ekstrak tanaman Ekstrak Konsentrasi (%) Rata-rata Lama Perkembangan ± SD (hari) Instar II ke III Instar II ke IV Daun Averrhoa bilimbi Kontrol 2.2 ± 0.1 (74) a 3.8 ± 0.2 (73) a 0.75        (LC 5 ) 2.4 ± 0.1 (68) a 4.0 ± 0.4 (55) a 2.5          (LC 30 ) 2.4 ± 0.6 (55) a 4.1 ± 0.3 (42) a 5.0          (LC 50 ) 3.3 ± 0.3 (42) b 4.6 ± 0.4 (34) b Biji Annona squamosa Kontrol 2.0 ± 0.0 (74) a 3.7 ± 0.4 (73) a 0.00125  (LC 5 ) 3.1 ± 0.2 (46) b 4.0 ± 0.2 (44) ab 0.0025    (LC 30 ) 3.1 ± 0.3 (27) b 4.3 ± 0.4 (23) bc 0.005      (LC 50 ) 3.1 ± 0.2 (  9) b 4.8 ± 0.4 (  8) c Bunga Tithonia diversifolia Kontrol 2.0 ± 0.0 (75) a 3.8 ± 0.2 (73) 0.2          (LC 5 ) 3.2 ± 0.1 (71) b 3.8 ± 0.3 (70) 0.5          (LC 30 ) 3.3 ± 0.4 (63) b 3.8 ± 0.8 (42) 1.0          (LC 50 ) 3.3 ± 0.4 (61) b 3.8 ± 0.5 (28)
Keterangan: Angka-angka pada kolom yang sama yang diikuti huruf yang berbeda menunjukan perbedaan nyata pada uji jarak berganda Duncan (DMRT) α = 5%. SD ( Standard deviasi ), LC ( lethal concentration ).

## KESIMPULAN
Ekstrak  biji A.  squamosa menunjukkan aktivitas mortalitas paling tinggi dibandingkan ekstrak  daun A.  bilimbi dan  bunga T. diversifolia dengan  tingkat  mortalitas  100%
pada  konsentrasi  0.015%.    Ekstrak  bunga T. diversifolia dan  biji A.  squamosa secara terpisah  lebih  efektif  terhadap  mortalitas  larva C.  pavonana dibandingkan  dengan  campuran- nya.  Setiap  jenis  ekstrak  pada  konsentrasi tertentu  memiliki  pengaruh  yang  berbeda terhadap lama perkembangan larva C. pavonana .

## DAFTAR PUSTAKA
Abizar,  M.,  D.  Prijono.  2010.  Aktivitas insektisida  ekstrak  daun  dan  biji
Terphrosia vagelii J.D. Hooker
(Leguminosae)  dan  ekstrak  buah Piper cubeba L.  (Piperaceae)  terhadap  larva Crocidolomia pavonana (F.)
(Lepidoptera:  Crambidae).  JHPT  Trop.
10(1): 1-12.
Ambrosio,  S.R.,  Y.  Oki,  V.C.  Heleno,  J.S. Chaves, P.G. Nascimento, J.E. Lichston, M.G.  Constantino,  E.M.  Varanda,  F.B. Da  Costa.  2008.  Constituents  of glandular trichomes of Tithonia diversifolia :  relationships  to  herbivory and antifeedant activity. Phytochemistry. 69(10): 2052-2060.
Badjo,  R.,  C.S.  Rante,  E.R.M.  Meray,  B.H.
Assa,  M.F.  Dien.  2015.  Serangan  hama ulat  krop  ( Crocidolomia  pavonana F.) pada  tanaman  kubis  ( Brassica  oleracea
Var. Capitata I.) di Kelurahan
Kakaskasen  II,  Kecamatan  Tomohon Utara,  Kota  Tomohon.  Jurnal  Ilmiah Fakultas  Pertanian  Universitas  Sam Ratulangi. 6(14): 29-37.
Castano-Quintana,  K.,  J.  Montoya-Lerma,  C. Giraldo-Echeverri.  2013.  Toxicity  of foliage  extracts  of Thitonia  diversifolia
(Asteraceae) on Atta cephalotes
(Hymenoptera:  Myrmicinae)  workers. Industrial  Crops  and  Products.  44:  391- 395.
Chou,  T.C.,  P.  Talalay.  1984.  Quantitative analysis of dose-effect relationships: the combined  effects  of  multiple  drugs  or enzyme  inhibitors.  Adv  Enzyme  Regl. 22(3): 27-55.
Dadang,  D.  Prijono.  2008.  Insektisida  Nabati: Prinsip, Pemanfaatan dan Pengembangan. Departemen  Proteksi  tanaman.  Fakultas Pertanian. Institut Pertanian Bogor.
Dadang,  D.  Prijono.  2011.  Pengembangan teknologi  formulasi  insektisida  nabati untuk  mengendali  hama  sayuran  dalam upaya  menghasilkan  produk  sayuran sehat. JIPI. 6(2): 100-111.
Dharmaputra,  O.S.,  L.I.  Sudirman,  M.M. Misnawati1.  2016.  Potensi  khamir sebagai  agens  pengendalian  hayati Colletotrichum capsici , cendawan penyebab antraknosa pada buah cabai. J.
Hort. Indonesia. 7(2): 91-101
[Deptan]  Departemen  Pertanian.  2007.  Ulat krop  (large  cabbage  heart  caterpillar) Crocidolomia binotalis Zell. http://www. deptan.go.id/ditlinhorti/opt/kubis/ulat_kr op. [12 Agustus 2016].
Firmansyah,  E.  2016.  Ekstrak Thitonia diversifolia (Hemsl.)  A.  Gray  sebagai insektisida  nabati  untuk  pengendalian ulat daun kubis Plutella xylostella Linn. (Lepidoptera:  Yponomeutidae).  Tesis. Sekolah  Pascasarjana  Institut  Pertanian Bogor. 21 hal.
Guleria, S., A.K. Tiku. 2009. Botanicals in pest management:  Current  status  and  future perspectives.  p.  317-329.  In  R.  Peshin, A.K.  Dhawan  (eds.).  Integrated  Pest Management:  Innovation-Development Process. Springer Science. London.
Kalshoven,  L.G.E.  1981.  Pests  of  Crops  in Indonesia. Van Hoeve. PT. Ikhtiar Baru.
Jakarta.
Kau,  C.H.,  E.Y.  Cheng.  2001.  Insecticides resistence  in Plutella  xylostella L.  Jour Agric Res China. 50(4): 80-89.
[Kemenhut]  Kementerian  Kehutanan.  2010.
Pengenalan tumbuhan penghasil pestisida  nabati  dan  pemanfaatannya secara  tradisional.  ISBN:  978-602- 98588-0-8. Kemenhut. Jakarta.
[Kementan]  Kementerian  Pertanian.  2015. Statistika  Produksi  Hortikultura  2014. Direktorat Jenderal Hortikultural. Kementerian Pertanian.
Kolawole,  A.O.,  F.M.  Olajuyigbe,  J.O.  Ajele,
C.O.  Adedire.  2014.  Activity  of  the antioxidant  defense  system  in  a  typical bioinsecticide  and  synthetic  insecticide- treated cowpea storage beetle
Callosobrochus maculatus F. (Coleoptera: Chrysomelidae). Int. J. Insect Sci. 6: 99- 108.
Kosman,  E.,  Y.  Cohen.  1996.  Procedures  for calculating and differentiating synergism and  antagonism  in  action  of  fungicide mixtures.  Phytopathology.  86(4):  1255- 1264.
Krisman,  Y.,  P.  Ardiningsih,  I.  Syahbanu. 2016.  Aktivitas  bioinsektisida  ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi ) terhadap kecoak ( Periplaneta americana ). J. Kimia Khatulistiwa. 5(3): 1-7.
LeOra  Software.  1987.  POLO-PC  User’s Guide. LeOra Software. Petaluma. USA.
Nopianti,  S.,  D.  Astuti,  S.  Darnoto.  2008. Efektivitas buah belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.)  untuk  membunuh larva nyamuk Anopheles aconitus instar III. Jurnal Kesehatan. 1(2): 103-114.
Ohmura,  W.,  S.  Doi,  M.  Aoyama,  S.  Ohara. 2000. Antifeedant activity of flavonoids and  related  compounds  against  the subterranean termite
Coptotermes formosanus Shiraki.  Journal  of  Wood
Science. 46(2): 149-153.
Prakash,  A.,  J.  Rao,  V.  Nandagopal.  2008. Future  of  botanical  pesticides  in  rice, wheat,  pulses  and  vegetables  pest management. J. Biopest. 1(2): 154-169.
Prijono,  D.,  E.  Hassan.  1992.  Life  cycle  and demography of Crocidolomia pavonana Zeller  (Lepidoptera:  Pyralidae)  on broccoli in the laboratory. Indon. J. Trop Agric. 4(1): 18-24.
Santoso,  G.B.  2011.  Aktivitas  insektisida ekstrak biji srikaya ( Annona squamosa L.) dari  lokasi  berbeda  dan  sinergismenya dengan  ekstrak  buah  sirih  hutan  ( Piper aduncum L.) terhadap larva Crocidolomia pavonana (F.)  (Lepidoptera:  Crambidae).
Tesis.  Sekolah  Pascasarjana  Institut Pertanian Bogor. 36 hlm.
Sastrosiswojo, S., T.S. Uhan, R. Sutarya. 2005. Penerapan Teknologi PHT pada Tanaman Kubis. Balai Penelitian Tanaman Sayuran. Bandung.
Syah,  B.W.,  K.I.  Purwani.  2016.  Pengaruh ekstrak daun belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi ) terhadap mortalitas dan perkembangan  larva Spodoptera  litura .
Jurnal Sains. 5(2): 23-28.
Wardhana,  A.H.,  E.  Widyastuti,  A.W.A. Wirakmana,  S.  Muharsini,  Darmono. 2004. Uji  efikasi  ekstrak  heksan  daging biji  srikaya  ( Annona  squamosa L.) terhadap pertumbuhan larva lalat Chrysomya  bezziana secara in  vitro . Jurnal  Ilmu  Ternak  dan Veteriner.  9(4): 272-280.
Wardhana, A.H., N. Diana. 2014. Biolarvasidal activity  of  methanol  extract  of  kipahit leaves  ( Tithonia  diversifolia )  against larvae of Chrysomya bezziana fly. Jurnal Ilmu Ternak dan Veteriner. 19(1):43-51.