Research Article

## UNPAD

## Local Hemostatic Activity of Several Varieties of Banana ( Musa Paradisiaca ) Pseudo-Stem Sap in Swiss Webster Mice
Cszahreyloren Vitamia 1,2 *, Ayu N Nuryanti 1
1Akademi Farmasi Bumi Siliwangi, Jl. Rancabolang No.104, Bandung 40286, Indonesia
2 Doctoral Study Program, Faculty of Pharmacy, Universitas Padjadjaran, Sumedang 45363, Indonesia Submitted 23 October 2023; Revised 20 December 2023; Accepted 22 December 2023; Published 30 December 2023 *Corresponding author: cszahreyloren@gmail.com
Abstract
Skin injuries requiring local hemostatics for effective treatment.Indonesians have upheld the tradition of utilizing herbal, and one prominent example is the utilization of the banana tree ( Musa paradisiaca ) for its medicinal advantages. The purpose is to assess the local hemostatic activity of different types of banana pseudo stem sap by measuring the bleeding time in experimental animals.  The research employed the Duke method, which entailed creating a minor injury on the mice's tails. As a result, the  mean  ±  SD  bleeding  times  for  the  five  groups  were  as  follows:  the  negative  control,  positive control,  and  treatment  groups  with  pseudo  stem  sap  of  ambon-banana,  jackfruit-banana  and  siem- banana consecutively 305.40 ± 79.45; 88.00 ± 29.45; 181.20 ± 91.19; 199.20 ± 64.77; and 135.40 ± 31.19 seconds. The collected data underwent ANOVA statistical analysis, followed by the LSD test. Significantly, a distinction was observed between the negative control group and the other treatment groups among the five groups. However, there was no significant difference found among the three treatment groups involving various varieties of banana tree stem sap.  In conclusion, the examination of three types of banana pseudostem sap displayed promising local hemostatic. The study revealed that the sap of pseudostem of Siem-Banana is the most effective in reducing bleeding time.
Keywords: banana pseudo-stem sap, duke method, local hemostatic.
Aktivitas Hemostatik Lokal Beberapa Varietas Getah Batang Semu Pisang ( Musa Paradisiaca ) pada Mencit Swiss Webster
Abstrak
Cedera kulit memerlukan hemostatik lokal untuk pengobatan yang efektif. Masyarakat Indonesia telah menjunjung tinggi tradisi pemanfaatan herbal, dan salah satu contoh yang menonjol adalah pemanfaatan pohon  pisang  ( Musa paradisiaca )  untuk  manfaat  pengobatannya. Tujuannya  adalah  untuk  menilai aktivitas hemostatik lokal berbagai jenis getah batang semu pisang dengan mengukur waktu perdarahan pada hewan percobaan. Penelitian ini menggunakan metode Duke, dengan membuat luka ringan pada ekor mencit. Hasilnya, rata-rata ± SD waktu pendarahan pada kelima kelompok adalah sebagai berikut: kelompok kontrol negatif, kontrol positif, dan perlakuan dengan getah batang semu pisang ambon, nangka-pisang, dan pisang siem berturut-turut 305,40 ± 79,45; 88,00±29,45; 181,20 ± 91,19; 199,20 ± 64,77; dan 135,40 ± 31,19 detik. Data yang terkumpul dilakukan analisis statistik ANOVA yang dilanjutkan dengan uji LSD. Secara signifikan, terdapat perbedaan antara kelompok kontrol negatif dan kelompok perlakuan lainnya di antara kelima kelompok. Namun tidak terdapat perbedaan nyata antara  ketiga  kelompok  perlakuan  yang  melibatkan  berbagai  varietas  getah  batang  pohon  pisang. Kesimpulannya, pemeriksaan terhadap tiga jenis getah batang semu pisang menunjukkan hemostatik lokal yang menjanjikan. Penelitian mengungkapkan bahwa getah batang semu Siem-Banana paling efektif dalam mengurangi waktu perdarahan.
Kata Kunci: getah batang pohon pisang, metode duke, hemostatik lokal.

## 1.  Pendahuluan
Organisasi  Kesehatan  Dunia,  atau WHO,  mendukung  upaya-upaya  untuk meningkatkan  keamanan  dan  efektivitas praktik medis konvensional. WHO menganjurkan  penggunaan  obat  tradisional untuk  menjaga  kesehatan  masyarakat, mencegah dan mengelola penyakit, terutama yang bersifat kronis dan degeneratif 1. Tradisi  penggunaan  ramuan  herbal telah  diwariskan  secara  turun  temurun  di Indonesia secara empiris2. Di antara berbagai tanaman  yang  digunakan  untuk  pengobatan tradisional, Musa paradisiaca, yang umumnya dikenal  sebagai  pohon  pisang,  memiliki banyak manfaat obat3.
Sebagai  tanaman  obat  tradisional, pohon  Pisang  ( Musa paradisiaca L.) merupakan salah satu pilihan yang beragam dalam penggunaannya4. Pohon pisang sangat berguna  dalam  berbagai  aspek  kehidupan sehari-hari,  termasuk  buahnya,  daunnya, bunganya,  bahkan  batangnya  juga  dapat dimanfaatkan  yang  memiliki  sifat  antibiotik serta  mempromosikan  pertumbuhan  sel-sel baru pada luka5.Dalam penelitian sebelumnya6 hasil  menunjukkan  bahwa  penggunaan topikal  getah  batang  pisang  ambon  dengan dosis 30 mg dan 60 mg pada area soket gigi mencit  meningkatkan  aktivitas  fibroblast dan  osteoblast  yang  berperan  dalam  proses penyembuhan luka pencabutan gigi.
Ekstrak    getah  batang    pisang mengandung  flavonoid,  tanin,  saponin,  dan alkaloid sebagai antioksidan untuk mengurangi radikal  bebas  dengan  mentransfer  atom hidrogen pada daerah luka serta meningkatkan penutupan luka dengan memproduksi jumlah fibroblas  dan  meningkatkan  pembentukan pembuluh-pembuluh kapiler darah7.
Getah  batang  pohon  pisang  memiliki kandungan  senyawa  fitokimia  seperti saponin, tannin, dan flavonoid yang memiliki kemampuan  dalam  penyembuhan  luka, antibiotik,  dan  penghilang  rasa  sakit.  Selain itu didalam getah batang pisang juga memiliki kandungan  lektin  yang  berfungsi  untuk menstimulasi pertumbuhan sel kulit8.
Dalam  penelitian  sebelumnya,  getah dari  batang  pisang  Ambon  dan  pisang
Kepok  dioleskan  secara  langsung  pada luka  pada  hewan  percobaan  mencit,  dan hasilnya  menunjukkan  kemampuan  untuk menyembuhkan luka9.
Karena itu, peneliti tertarik melakukan penelitian aktivitas hemostatik lokal beberapa varietas getah batang pohon pisang terhadap mencit jantan galur swiss webster ini.

## 2.  Metode
2.1.  Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  antara  lain  spuit  1  mL  (one  med),  gelas kimia  (pyrex),  cawan,  timbangan  hewan, gunting minor surgery, kertas  saring,  dan stopwatch (casio).
2.2.  Bahan Bahan yang digunakan dalam penelitian antara  lain  epinefrin  inj  1  ml  (Phapros), aqudes  steril  100  mL  (Otsuka),  dan  ethanol 70%, betadine (one med), kassa steril (hexa husada), plaster (hansaplast), sedangkan getah batang  pohon  pisang  ambon,  getah  batang pohon pisang nangka, dan getah pisang siem didapatkan  di  desa  Sawahsasap  kecamatan Cimanggu kabupaten Sumedang.
2.3.  Prosedur Mencit  dipilih  secara sample random. Pada  pengujian  ini  digunakan  hewan percobaan mencit jantan galur swiss webster berumur 2-3 bulan dengan bobot sekitar 20- 30 gram yang memiliki kondisi fisik yang sehat dan aktif 10 . Mencit yang dipakai berjumlah 25 ekor, dengan perhitungan rumus Federer 11 . Metode  penelitian  menggunakan metode  Duke 12 ,  yaitu  dengan  cara  memberi perlukaan pada ekor mencit, lalu darah yang keluar diserap menggunakan kertas saring 13 . Metode  ini  digunakan  untuk  pengujian hemostatik primer atau  perdarahan  kecil, yaitu  dengan  menghitung bleeding time 14 . Tiap kelompok terdiri dari 5 mencit. 1.  Kelompok  kontrol  negatif  diberikan aquades steril 1 mL.
2.  Kelompok  kontrol  positif  diberikan epinefrin 1 mL.
3.  Kelompok  perlakuan  1  diberikan  getah batang pohon pisang Ambon 1 mL.
4.  Kelompok  perlakuan  2  diberikan  getah batang pohon pisang Nangka 1 mL.
5.  Kelompok  perlakuan  3  diberikan  getah batang pohon pisang Siem 1 mL. Mencit  yang  telah  disiapkan  ekornya diberi tanda sepanjang 2-3 mm, dibersihkan dengan  etanol  70%.  lalu  diberi  perlukaan dengan  cara  memotong  ujung  ekornya menggunakan gunting bedah  minor. Ekor    mencit  dimasukan  kedalam masing-masing  bahan  uji  selama  10  detik. Kemudian  diangkat  kembali.  Darah  yang keluar  diserap  menggunakan  kertas  saring setiap 15 detik tanpa menyentuh permukaan luka 15 . Waktu perdarahan dihitung menggunakan stopwatch ketika  darah pertama  kali  keluar  hingga  darah  berhenti dengan ditunjukkan tidak ada lagi darah yang terserap di kertas saring.
3.  Hasil dan Pembahasan Dari  hasil  pengamatan,  rerata  waktu perdarahan  kelompok  kontrol  negatif paling  lambat  dibandingkan  dengan kelompok  lainnya.  Hal  ini  dikarenakan pemberian  aquades  steril  pada  kontrol negatif  yang  bersifat  netral,  sehingga tidak  akan  memberikan  efek  pada  proses penghentian  perdarahan 16 .  Pada  kontrol positif menunjukan rerata waktu paling cepat dalam proses penghentian perdarahan. Hal ini menunjukkan bahwa epinefrin 1:1000 sebagai kontrol positif mempunyai efek dalam proses penghentian  perdarahan,  karena  epinefrin bersifat  vasokontriksi  pada  pembuluh  darah dan mempercepat pembentukan bekuan darah,
sehingga  hal  ini  mempengaruhi  kecepatan waktu perdarahan 17 . Pada  kelompok  perlakuan,  yang menjukan  nilai  rerata  waktu  perdarahan paling  cepat  adalah  kelompok  perlakuan 3  yaitu  getah  batang  pohon  pisang  siem. Dengan  rerata  waktu  perdarahan  135,40 ±  73,194.  Rerata  waktu  perdarahan  ketiga kelompok perlakuan menunjukan hasil lebih cepat dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif.  Hal  ini  dimungkinkan  karena  getah batang pohon pisang mengandung tanin, yang bersifat sebagai hemostatik lokal 18 . Tanin  bekerja  sebagai  vasokontriktor melalui  efek  astringennya  akan  membantu proses  penghentian  perdarahan  pada  tubuh dengan  cara  mengurangi  sekresi  dan permeabilitas  kapiler,  kontraksi  ruang  antar sel,  pengerasan  endothelium  kapiler,  dan membentuk  lapisan  pelindung  sehingga lapisan superfisial sel akan mengencang dan menyusut  serta  menghasilkan  vasokontriksi lokal kapiler 19 . Data  yang  diperoleh  dari  penelitian, lalu  dianalisis  secara  statistik  dengan  uji normalitas  data  menggunakan  uji  Shapiro  – Wilk, dan uji homogenitas menggunakan uji homogenitas Levene Statistic .  dari  hasil  uji One Way ANOVA pada tabel 1 didapat hasil (p<0,05).
Hasil uji Post Hoc Test yang dilakukan dengan prosedur Least Significant Difference (LSD) menjukan berbagai perbandingan dari masing  masing  kelompok  perlakuan.  Pada tabel  2  kelompok  kontrol  negatif  memiliki perbedaan  yang  signifikan  terhadap  semua
Gambar 1. Rerata waktu perdarahan luka mencit
kelompok  dengan  nilai  probabilitas  tersebut menjukan hasil signifikan berbeda bermakna karena nilai (p<0,05).
Kelompok  kontrol  positif  menjukan hasil signifikan dibanding dengan kelompok kontrol  negatif  dan  kelompok  perlakuan  2, sedangkan  terhadap  kelompok  perlakuan 1  dengan  nilai  probabilitas  0,050  dan perlakuan  3  dengan  nilai  probabilitas  0,302 menunjukan  hasil  yang  tidak  signifikan, yang berarti berbeda tidak bermakna dengan nilai (p<0,05). Epinefrin, digunakan sebagai kontrol positif karena dapat bertindak sebagai hemostatik  melalui  reseptor  adrenergic  α1, menghasilkan vasokonstriksi pada pembuluh darah  kecil,  membatasi  suplai  darah  dan mengurangi perdarahan 17 . Kelompok perlakuan 1 hanya menjukan hasil  signifikan  terhadap  kelompok  kontrol negatif , dan tidak menjukan hasil signifikan terhadap  kelompok  kontrol  positif  dengan nilai probabilitas 0,050, kelompok perlakuan 2 dengan nilai probabilitas 0,692 dan kelompok perlakuan  3  dengan  nilai  probabilitas  0,318 yang berarti berbeda tidak bermakna dengan nilai  (p<0,05). Dari penelitian yang pernah dilakukan  pada  getah  batang  pohon  pisang ambon,  yang  mengandung  lektin  dengan konsentrasi  tinggi  dapat  digunakan  untuk penyembuhan luka melalui proses koagulasi atau  pembentukan  bekuan  darah,  pada pemberian  galektin-3(sejenis  lektin),  hasil menunjukkan  peningkatan  respon  terhadap angiogenesis  dengan  adanya  peningkatan vascular endhotelial growth factor (VEGF) dan basic fibroblast growth factor (b-FGF) 20 . Kelompok  perlakuan  3  menunjukan
hasil  signifikan  hanya  terhadap  kelompok kontrol  negatif,  dan  tidak  menujukkan hasil  signifikan  terhadap  kelompok  kontrol positif  dengan  nilai  probabilitas  0,302,  dan dengan  kelompok  perlakuan  1  dengan  nilai probabilitas  0,318,  dan  dengan  kelompok perlakuan  2  dengan  nilai  probabilitas  0,17 yang berarti berbeda tidak bermakna dengan nilai  (p<0,05).      Signifikansi  terdapat  pada setiap kelompok perlakuan yang dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif.

## 4.  Kesimpulan
Penelitian terhadap getah batang pohon pisang  menunjukkan  bahwa  ketiga  varietas memiliki    potensi  dalam  menghentikan perdarahan    dan  memiliki  efek  hemostatik lokal.  Dari ketiga varietas yang diuji, getah batang pohon pisang siem merupakan varietas yang  paling  efektif  dalam  mengurangi waktu  perdarahan  pada    hewan  uji  mencit dibandingkan dengan varietas lainnya.

## Referensi
1.  WHO.  WHO  Traditional  Medicine Strategy.  WHO  Library  Cataloguing- in-Publication  Data.  2013  Tersedia dari:  https://apps.who.int/iris/bitstream/ handle/10665/92455/9789241506090_ eng.pdf
2.  Kumotoy  GD,  Deeng  D,  Mulianti  T. Pemanfaatan tanaman herbal sebagai obat tradisional untuk kesehatan Masyarakat di desa Guaan kecamatan Mooat Kabupaten Bolaang  Mongondow  Timur.  Jurnal Holistik.2023;16(3)
3.  Hastari R., & Musrichan M. Uji Aktivitas
Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 132.657.360 4 33.164.340 6.620 .001 Within Groups 100.190.000 20 5.009.500 Total 232.847.360 24

## Tabel 1. Uji ANOVA data waktu perdarahan pada mencit
Kontrol (-)
Kontrol (+) Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3 Kontrol (-) - 0,000* 0,012* 0,028* 0,001* Kontrol (+) 0,000* - 0,050 0,022 0,302 Perlakuan 1 0,012* 0,050 - 0,692 0,318 Perlakuan 2 0,028* 0,022* 0,692 - 0,170 Perlakuan 3 0,001* 0,0302 0,318 0,170 -
Tabel 2. Uji LSD ( Least Significant Different ) waktu perdarahan pada mencit
Antibakteri  Ekstrak  Pelepah  Dan Batang  Tanaman  Pisang  Ambon  (Musa paradisiaca  var.  sapientum)  terhadap Staphylococcus aureus. Jurnal Kedokteran Diponegoro.2012:1(1), 111075.
4.  Megawati F. Artikel review pemanfaatan tanaman  pisang  (Musa  paradisiaca  L) sebagai sediaan kosmetik. Ushada: Jurnal Integrasi Obat Tradisional. 2023; 2(2)
5.  Ananta  GAPYV.  2020.  Potensi  Batang Pisang  (Musa  paradisiaca)  dalam penyembuhan  luka  bakar.  Jurnal Ilmiah  Kesehatan  Sandi  Husada.  2020; 11(1):334-340
6.  Budi HS, Astuti ER. The MMP-2, MMP- 9  Expression  and  Collagen  Density of  the  Ambonese  Banana  Stem  Sap Administration  on  Wound  Healing. Journal  of  International  Dental  and Medical Research. 2019;12(2)
7.  Khairunisa SF, Ningtyas AA, Haykal SA1 , Sari M. Efektivitas getah pohon pisang (Musa  paradisiaca)  pada  penyembuhan luka soket pasca pencabutan gigi. Jurnal kedokteran gigi UNPAD. 2018;30(2)
8.  Arifki HH, & Barliana MI. Karakteristik dan  manfaat  tumbuhan  pisang  di Indonesia:  Review  Artikel.  Farmaka 2018; 16(3)
9.  L.  Sundari,  “pengaruh  getah  pelepah pisang  kepok(musa  balbisiana)  terhadap waktu  penyembuhan  luka  mencit (mus  musculus),”  skripsi  Univ.  Negri Gorontalo, 2015.
10. E.  Ridwan.Etika  Pemanfaatan  Hewan Percobaan  dalam  Penelitian  Kesehatan Ethical  Use  of  Animals  in  Medical Research.  J  Indon  Med  Assoc.2013; 63(3), pp. 112–116
11. Mushlih  M,  Rosyidah  R.  Buku  ajar statistika  “Aplikasi  di  dunia  kesehatan”. Umsida Press. 2020:47-48
12. Mohammed  BM,  Monroe  DM,  Gailani D.  Mouse  Models  of  Hemostatisis.
Platelets.2020;31(4): 417-422
13. Purnamasari    O.R,  Arundina  I,  Budhy T. "Efek hemostatik ekstrak etanol daun teratai (Nymphae rubra Roxb.) pada luka potong ekor mencit (Mus musculus). Oral Biologt Dent J.  2012;1, 49–56
14. Saito  MS,  Lourenço  AL,  Kang  HC,
Rodrigues CR, Cabral LM, Castro HC, et al. New approaches in tail‐bleeding assay in mice: improving an important method for designing new anti‐thrombotic agents. Int. J. Exp. Pathol. 2016;97:285–292
15. Sidrotullah  M.  Efek  waktu  henti perdarahan  (bleeding  time)  daun babadotan  (Ageratum  conyzoides  L.) pada  mencit  (Mus  musculus).  Journal Syifa  Sciences  and  Clinical  Research. 2021; 3(1)
16. Luluhima A, Niwele A, Kadimas SS. Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  70% anggur laut (Caulerpa racemose) terhadap bakteri  Staphylococcus  aureus  dengan menggunakan  metode  difusi.  Jurnal Rumpun Ilmu Kesehatan. 2022;2(1):170- 179
17. Finkel,  R.,Clark,  M.A.,  Champe,  P.C., Cubeddu,  L.X.  Pharmacology.  4th  ed. Philadelphia:  Lippincott  Williams  & Wilkins. 2009 p 72-73
18. Budi  HS,  Juliastuti  WS,  Sulistyowati YP.  The  bleeding  and  clotting  time analysis  of  the  stem  extract  of  Musa paradisiaca var. sapientum (L.) Kunze on hemostatic  response.  Jordan  Journal  of Pharmaceutical Sciences, 2021; 14(1)
19. Istiyani,  Mita  N,  Masruhim  MA.  Uji Potensi  Hemostasis  Ekstrak  Etanol Daun Keji Beling (Strobilanthes crispus) pada  mencit  (Mus  musculus).Prosiding Seminar  Nasional  Tumbuhan  Obat Indonesia ke-50. 2016:234-242
20. Budi  HS,  Kriswandini  IL,  Sudjarwo SA.  Ambonese  banana  stem  sap  (Musa paradisiaca  var.  sapientum)  effect  on PDGF-BB  expressions  and  fibroblast proliferation  in  socket  wound  healing. International  Journal  of  ChemTech Research. 2016; 9(12):558-564