Efektivitas Gel Madu Hutan Akasia terhadap Jumlah Fibroblas pada Luka Sayat Tikus Putih ( Rattus novergicus )
Bimby Irenesia 1* , Puan Sadila Islami 2 , Riski Dwi Utami 3
1,3 Departemen Fisiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Abdurrab, Kota Pekanbaru, Indonesia
2 Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Abdurrab, Kota Pekanbaru, Indonesia
* E-mail: bimby.irenesia@univrab.ac.id
Article Info: Received:  09 Maret 2023 in revised form: 29 April 2023 Accepted: 11 Mei 2023
Available Online: 20  Mei  2023

## ABSTRACT
Cuts  are  wounds  caused  by  sharp  objects  such  as  knives, swords,  razors  and  glass.  According  to  data  from  the  Arifin Achmad  Regional  General  Hospital,  Riau  Province,  it  was noted that the most common type of wound in sharp violence was a cut (66.7%). When a wound occurs, the wound healing process  occurs,  namely:  inflammation,  proliferation,  and remodeling.  During  the  proliferative  phase,  fibroblasts influence the reepithelialization process that closes the wound. Handling  cuts  using  acacia  honey  because  acacia  honey  in wound  healing  has  anti-inflammatory,  antibacterial  and antioxidant  activities.  Knowing  the  effectiveness  of  acacia honey  gel  on  the  number  of  fibroblasts  in  white  rat  (Rattus novergicus)  incision  wounds.  This  type  of  research  is  an experimental  study  design  with  a  randomized  posttest  only control group design that uses acacia honey on cuts in white rats  ( Rattus  novergicus ).  There  was  no  significant  difference between  each  treatment  group:  20%  acacia  honey  gel,  60% acacia  honey  gel,  80%  acacia  honey  gel,  positive  control (povidone  iodine)  and  negative  control  (gel  without  honey). Giving  acacia  honey  gel  could  not  increase  the  number  of fibroblasts in white rat ( Rattus novergicus ) incision wounds.
Keywords : Fibroblasts;
Cuts;
Acacia honey; Gel
Corresponding Author: Bimby Irenesia Departemen Fisiologi Fakultas Kedokteran Universitas Abdurrab Kota Pekanbaru Indonesia E-mail: bimby.irenesia@univrab.ac.id
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style): Irenesia, B., Islami,P.S., Utami,R.D. (2023). Efektivitas Gel Madu Hutan Akasia terhadap Jumlah Fibroblas pada Luka Sayat Tikus Putih (Rattus novergicus). Indonesian Journal of Pharmaceutical  (e-Journal), 3 (2), 264- 269.
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2023; 3 (2): 264 – 269
ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v3i2.19872

## ABSTRAK
Luka sayat adalah luka yang disebabkan oleh objek yang tajam pisau, pedang, silet dan kaca. Menurut data dari Rumah Sakit Umum Daerah Arifin Achmad Provinsi Riau tercatat bahwa jenis luka tersering pada kekerasan tajam adalah luka sayat (66,7%). Apabila terjadi luka maka terjadi  proses  penyembuhan  luka  yaitu:  inflamasi,  proliferasi,  dan  remodeling.  Selama  fase proliferasi, fibroblas mempengaruhi proses reepitelisasi yang menutup luka. Penanganan luka sayat  menggunakan  madu  akasia  karena  madu  akasia  dalam  penyembuhan  luka  terdapat aktivitas  antiinflamasi,  antibakteri  dan  antioksidan.  Mengetahui  efektivitas  gel  madu  akasia terhadap  jumlah  fibroblas  pada  luka  sayat  tikus putih  ( Rattus  novergicus ).  Jenis  penelitian  ini adalah  desain  studi  eksperimen  dengan  rancangan  randomized  posttest  only  control  group design yang menggunakan madu akasia pada luka sayat pada tikus putih (Rattus novergicus). Tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antara  masing-masing  kelompok  perlakuan  :  gel madu akasia 20%, gel madu akasia 60%, gel madu akasia 80% , kontrol positif (povidon iodin) dan kontrol negative (gel tanpa madu). Pemberian gel madu akasia tidak dapat meningkatkan jumlah fibroblas pada luka sayat tikus putih ( Rattus novergicus ).
Kata Kunci: Fibroblas; Luka sayat; Madu akasia; Gel

## 1. Pendahuluan
Kulit merupakan bagian terluar dari tubuh manusia dan hewan. Apabila kulit terkena objek tajam seperti pisau akan mengakibatkan luka sayat. Penduduk Indonesia yang mengalami luka lecet sebanyak 70,9%, luka robek sebesar 23,2%. Sebanyak 40,9% luka disebabkan oleh terjatuh dan 40,6% oleh kecelakaan motor. Penyebab  lain yaitu benda  tajam  atau  tumpul  7,3%,  transportasi  darat  lain  7,1%,  dan  kejatuhan  2,5% (Riskesdas,  2013).  Menurut  data  dari  Rumah  Sakit  Umum  Daerah  Arifin  Achmad Provinsi Riau tahun 2010-2014 tercatat bahwa jenis luka tersering pada kekerasan tajam adalah luka sayat (66,7%) dan jenis luka tersering pada kekerasan tumpul adalah luka memar (60%) [1].
Proses penyembuhan luka sayat dimulai setelah kerusakan jaringan dan di bagi menjadi  tiga  tahap:  inflamasi,  proliferasi,  dan  remodeling.  Selama  fase  proliferasi, fibroblas menentukan hasil akhir penyembuhan luka [2]. Fibroblas merupakan sel besar, gepeng,  bercabang-cabang,  dari  samping  terlihat  berbentuk  gelendong  atau  fusiform [3]. Fibroblas akan aktif bergerak dari jaringan sekitar luka, kemudian akan berkembang (proliferasi)  serta  mengeluarkan  beberapa  substansi  seperti:  kolagen,  elastin, fibronektin, dan proteoglikan yang berperan dalam rekonstruksi jaringan baru [4].
Secara umum madu akasia memiliki warna yang terang serta memiliki potensi zat antioksidan yang tinggi dengan komponen utama seperti senyawa glukosa (sekitar 30 g/100ml), fruktosa (sekitar 44 g/100 ml) dan air (sekitar 22%) [5]. Madu akasia lambat mengkristal  dan  dapat  bertahan  dalam  bentuk  cair  untuk  waktu  yang  lama  karena memiliki konsentrasi fruktosa yang tinggi [6]. Pembuatan madu akasia dalam bentuk gel dapat mempercepat proses penyembuhan karena sifatnya yang lembab. Gel dapat mempertahankan sifat lembab di dalam dan di sekitar area luka. Kondisi kelembaban yang tinggi dapat mempercepat proses penyembuhan luka dengan meningkatkan re- epitelisasi dan migrasi epitel. Re-epitelisasi ini terjadi beberapa jam setelah luka. Selain itu, sediaan gel yang bersifat dingin terhadap luka bisa memberikan keadaan nyaman sehigga nyeri bisa berkurang [7].
Berdasarkan  penelitian  menjelaskan  bahwa  pengaruh honey  gel memiliki efektifitas  yang  lebih  besar  untuk  mempercepat  penyembuhan  luka  bakar  dan  luka sayat jika dibandingkan dengan kelompok yang tidak diberi pengobatan [8]. Belum ada penelitian  yang  membahas  tentang  madu  akasia  pada  luka  sayat.  Oleh  karena  itu,
peneliti  memilih  penelitian  terhadap  pengaruh  gel  madu  akasia  terhadap  jumlah fibroblas pada luka sayat tikus putih ( Rattus novergicus ).

## 2. Metode
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  laboratorik  dengan rancangan  penelitian randomized  posttest  only  control  group  design yang  menggunakan hewan coba sebagai objek penelitian.
Berdasarkan  jumlah  etika  minimal  yang  terdapat  pada  WHO . Adapun  besar sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah 30 ekor tikus yang dibagi menjadi 5 kelompok.  Kelompok  1  sebagai  kontrol  negatif  gel  tanpa  madu,  kelompok  2  diberi povidone iodin 10 % sebagai kontrol positif, kelompok 3 diberi olesan gel madu dengan konsentrasi 20%, kelompok 4 diberi olesan gel madu dengan konsentrasi 60%, kelompok 5 diberi olesan gel madu dengan konsentrasi 80%, gel diberi sebanyak 0,5 gram sehari sekali
Tabel 1. Formulasi Pembuatan Gel Madu Akasia [9] Bahan Kegunaan Komposisi Madu Akasia Zat aktif 20%, 60%, 80% Karbopol 940 Basic gel 2% Metil paraben Pengawet 0,2% Gliserin Humektan 10% Triethanolamin Surfaktan 2% Aquades Pelarut hingga 100%
Sebelum pembuatan luka sayat, kemudian bagian punggung hewan uji diberi desinfektan  alkohol  70%  lalu  rambut  disekitar  punggung  hewan  uji  dibersihkan menggunakan  pisau  cukur  [10].  Selanjutnya  hewan  uji  dianastesi  menggunakan  eter 10% secara inhalasi [11] kemudian dibuat luka sayat pada bagian punggung hewan uji setelah  30  menit  pemberian  eter  sejajar  dengan tulang  belakang  menggunakan  pisau bedah hingga menembus lapisan subkutan dengan kedalaman 2 mm dengan panjang 2 cm [12].

## Gambar 1. Luka Sayat Pada Tikus
Setelah masa perlakuan selama 7 dan 14 hari, dilakukan pengambilan sampel jaringan melalui biopsi jaringan. Sebelum dilakukan pengambilan jaringan luka, tikus dianastesi  dengan  memberikan  eter  10%  secara  inhalasi.  Jaringan  biopsi  yang  telah diperoleh kemudian difiksasi dengan larutan neutral buffer formalin 10%. Selanjutnya dilakukan pembuatan preparat histologi dan pewarnaan Hematoxylin Eosin (HE) sesuai prosedur. Preparat histologi yang telah siap dapat dibaca di bawah mikroskop cahaya binokuler pembesaran 400x [13]
Cara  menghitung  jumlah  fibroblas    menggunakan  mikroskop  cahaya  pada  6 lapang pandang dengan perbesaran 400x. Kemudian dari keenam lapang pandang yang teridentifikasi fibroblas dijumlahkan dan dihitung rata-ratanya [7].

## 3. Hasil dan Pembahasan
Penelitian  ini  dilakukan  selama  14  hari  yang  terdiri  dari  30  tikus  dibagi  5 kelompok yaitu 3 kelompok diberikan gel madu akasia dengan konsentrasi 20%, 60%, 80%,  kontrol  positif  dan  kontrol  negatif.  Selama  penelitian  berlangsung  terdapat  3 sampel yang drop out yaitu 1 tikus pada kelompok perlakuan gel tanpa madu pada hari ke-3, 1 tikus pada kelompok perlakuan gel madu 80% hari ke-5 dan 1 tikus pada kelompok perlakuan povidon iodin hari ke-9. Pemeriksaan histologis yang dilakukan menunjukkan hasil sel fibroblas pada gambar berikut:
Gambar 2. 1. Gel madu akasia 20%, 2. Gel madu akasia 60%, 3. Gel madu akasia 80%, 4. Kontrol positif (povidon iodin), 5. Kontrol negatif (gel tanpa madu)

## Rata-rata fibroblas pada hari ke-7 dan hari ke-14
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  rata-rata  fibroblas  yang  tertinggi  terdapat  pada kelompok perlakuan yang diberikan povidon iodin pada hari ke 7 yaitu 129,03 dan rata- rata fibroblas yang terendah terdapat pada kelompok kontrol negatif (tanpa diberikan apa-apa) pada hari 14 yaitu 79,40. Uji normalitas data yang digunakan adalah uji Saphiro- wilk karena  jumlah  sampel  <  50,  didapatkan  hasil  bahwa  data  terdistribusi  normal dengan p value >00,5. Uji homogenitas diperoleh data homogen dengan p value >00,5. Selanjutnya dilakukan uji One-Way ANOVA .
Tabel 2. Rata-rata fibroblas hari ke-7 dan hari ke-14 Fibroblas Kelompok perlakuan Mean ± SD Perlakuan hari ke 7 Gel madu akasia 20% 123,57 ± 61,36 Gel madu akasia 60% 118,60 ± 24,45 Gel madu akasia 80% 111,37 ± 52,07 Kontrol positif 129,03 ± 30,48 Kontrol negatif 118,23 ± 53,83 Perlakuan hari ke 14 Gel madu akasia 20% 104,27 ± Gel madu akasia 60% 99,03 ± 22,69 Gel madu akasia 80% 85,33 ± 18,42 Kontrol positif 118,57 ± 42,47 Kontrol negatif 79,40 ± 28,74
Berdasarkan uji One-Way  ANOVA tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan antara  kelompok  kontrol  dengan  kelompok  perlakuan  dengan  nilai p  value >0,05. Kelompok I terdiri dari 5 ekor tikus putih jantan yang diberi gel madu akasia 20%. Hasil dari rata-rata jumlah fibroblas hari ke-7 (123,57) dan hari ke-14 (104,27) menunjukkan bahwa  rata-rata  jumlah  fibroblas  hari  ke-14  mengalami  penurunan  dibandingkan dengan hari ke-7. Kelompok II terdiri dari 5 ekor tikus putih jantan yang diberi gel madu akasia 60%. Hasil dari rata-rata jumlah fibroblas hari ke-7 (118,60) dan hari ke-14 (99,03) menunjukkan  bahwa  rata-rata  jumlah  fibroblas  hari  ke-14  mengalami  penurunan dibandingkan dengan hari ke-7. Kelompok III terdiri dari 5 ekor tikus putih jantan yang diberi gel madu akasia 80%. Hasil dari rata-rata jumlah fibroblas hari ke-7 (111,37) dan hari ke-14 (85,33) menunjukkan bahwa rata-rata jumlah fibroblas hari ke-14 mengalami penurunan dibandingkan dengan hari ke-7. Kelompok IV terdiri dari 5 ekor tikus putih jantan pada kontrol positif yang diberikan povidone iodine . Hasil dari rata-rata jumlah fibroblas hari ke-7 (129,03) dan hari ke-14 (118,57) menunjukkan bahwa rata-rata jumlah fibroblas hari ke-14 mengalami penurunan dibandingkan dengan hari ke-7. Kelompok V terdiri dari 5 ekor tikus putih jantan pada kontrol positif yang diberikan gel tanpa madu.  Hasil  dari  rata-rata  jumlah  fibroblas  hari  ke-7  (118,23)  dan  hari  ke-14  (79,40) menunjukkan  bahwa  rata-rata  jumlah  fibroblas  hari  ke-14  mengalami  penurunan dibandingkan dengan hari ke-7.
Tabel 3. Hasil uji One-Way ANOVA Fibroblas P value Fibroblas hari ke-7 0,98 Fibroblas hari ke-14 0,33
Berdasarkan  5  kelompok  diatas  dapat  disimpulkan  bahwa  pada  nilai mean menunjukkan  bahwa  rata-rata  jumlah  fibroblas  hari  ke-14  mengalami  penurunan dibandingkan dengan hari ke-7. Pada penelitian Dwita tahun 2020 mengatakan setelah memasuki  hari  ke-14  mengalami  penurunan  jumlah  fibroblas.  Hal  ini  diduga  terjadi karena fibroblas sudah digantikan oleh matriks kolagen yang mengisi kavitas luka yang menunjukkan berakhirnya fase proliferasi.
Berdasarkan hasil uji One-Way  ANOVA yang  telah  dilakukan  menunjukkan bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antara  kelompok  kontrol  dengan kelompok  perlakuan  dengan  nilai p  value >0,05.  Hasil  penelitian  ini  berbeda  dengan penelitian  Mulia  tahun  2019  menunjukkan  bahwa  efektivitas  gel  madu  yang berpengaruh  baik  terhadap  proses  penyembuhan  luka  bakar  derajat  IIB  yang menggunakan madu local Aceh. Pada penelitian ini tidak didapatkan perbedaan yang signifikan dikarenakan faktor dari kesalahan dalam pengambilan kulit pada tikus yaitu pemotongan kulit yang sedikit keluar dari luka sayat pada tikus.

## 4. Kesimpulan
Tidak terdapat perbedaan yang bermakna terhadap masing-masing kelompok fibroblas  pada  hari  ke-7  dan  hari-14 . Pemberian  gel  madu  akasia  tidak  dapat meningkatkan jumlah fibroblas pada luka sayat tikus putih

## Referensi
[1] M. T. Indrayana, D. Afandi, S. P. Wanda, P. Novia,  and S. M. Tinardy, “Profil Kasus  Autopsi  Pada  Anak  Di  Provinsi  Riau  Periode  Tahun  2010-2014,” Maj.
Kedokt. Andalas , vol. 38, pp 201-207.2016.
[2] A. T. W. Putra, W. A. FW, and M. Y. Hamidy, “Tingkat Kepadatan Fibroblas Pada Luka Sayat Mencit Dengan Pemberian Gel Lidah Buaya ( Aloe chinensis Baker), 2015.
[3] E. M. Sumbayak, “Tinjauan Pustaka Fibroblas : Struktur dan Peranannya dalam Penyembuhan Luka,” J. Kedokt. Meditek , vol. 21, pp. 1–6, 2015.
[4] O. Masir, M. Manjas, A. Eka Putra, and S. Agus, “Pengaruh Cairan Cultur Filtrate Fibroblast (CFF)  Terhadap  Penyembuhan  Luka;  Penelitian  eksperimental  pada Rattus Norvegicus Galur Wistar,” J. Kesehat. Andalas , vol. 1, pp. 112–117, 2012.
[5] D.  Suhandy,  “Dari  NEKTAR  Uniflora  Acacia  Mangium  Menggunakan Spektroskopi Ultraviolet Dan Kemometrika, vol. 22, pp. 25–34, 2021.
[6] A. Muhammad et al. , “Potensi aktivitas biologis madu akasia”. pp. 351–357, 2016.
[7] M. I. Fuadi, U. Elfiah, and Misnawi, “Jumlah Fibroblas pada Luka Bakar Derajat II  pada  Tikus  dengan  Pemberian  Gel  Ekstrak  Etanol  Biji  Kakao  dan  Silver Sulfadiazine,” e-Jurnal Pustaka Kesehat. , vol. 3, pp. 244–248, 2015.
[8] A.  Lomban,  S.  J.  R.  Kalangi,  and  T.  F.  Pasiak,  “Manfaat  Olesan  Madu  Pada Penyembuhan Luka Kulit,” J. e-Biomedik , vol. 8, pp. 202–208, 2021.
[9] V. D. Mulia, M. Jailani, S. Rizal, and G. R. Jannah, “Efektivitas Gel Madu Lokal Aceh terhadap Penyembuhan Luka Bakar pada Tikus Putih (Rattus norvegicus),” J. Bioseluler , vol. 3, pp. 28–31, 2019.
[10]  U. Calsum, A. Khumaidi, and K. Khaerati, “Aktivitas Ekstrak Etanol Kulit Batang Kayu  Jawa  (Lannea  coromandelica)  terhadap  Penyembuhan  Luka  Sayat  pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus L.),” J. Farm. Galen. (Galenika J. Pharmacy) , vol. 4, pp. 113–118, 2018.
[11]  W. Rupina, H. F. Trianto, and I. Fitrianingrum, “Efek Salep Ekstrak Etanol 70% Daun  Karamunting  terhadap  Re-epitelisasi  Luka  Insisi  Kulit  Tikus  Wistar,” eJournal Kedokt. Indones. , vol. 4, pp. 26–30, 2016.
[12]  A. Alfiaturrohmah, M. Herbani, and D. Andriana, “Efek Perasan Aloe vera L . terhadap  Ketebalan  Epitel  dan  Kepadatan  Kolagen  pada  Luka  Sayat  Tikus Wistar,” J. Bio komplementer Med. , vol. 7, pp. 1–9, 2020.
[13]  P. Adi, Y. Aulia Hapsari, A. Nurin Nafilah, and Z. Arifin, “Jumlah Fibroblas Dan Angiogenesis  Setelah  Pemberian  Gel  Getah  Jarak  Cina  Pada  Ulserasi  Tikus Wistar,” E-Prodenta J. Dent. , vol. 3, no. 1, pp. 180–186, 2019.
[14]  A. Pribadi and M. E. Wiratmoko, “Karakteristik Madu Lebah Hutan (Apis dorsata Fabr.) Dari Berbagai Bioregion Di Riau (Apis dorsata Forest Honey Characteristics from Bioregions in Riau),” vol. 37, 2019.
[15]  M, Awais. et al. (2021) ‘Effects of a Mixture of Acacia Honey and Povidone-Iodine on  the  Healing  of  Full  Thickness  Skin  Wound  in  Normal  and  Dexamethasone Treated Rabbits’, pp. 1–6.