PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL 70% DAUN BINAHONG (Anredera cordifolia, (Ten.) Steenis) SEGAR DAN DAUN BINAHONG (Anredera cordifolia, (Ten.) Steenis) KERING DENGAN METODE DPPH (2,2-DIPHENIL-1-PICRYL-HYDRAZYL)
Ariyanti 1) , Tsani Imada 1) , Ida Rifkasari 1)
1) Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal

## INTISARI
Kerusakan  pada  sel  dan  jaringan  yang  merupakan  akar  dari  sebagian  besar  penyakit disebabkan oleh spesies kimia yang sangat aktif dan berbahaya yang disebut radikal bebas.Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengkaji  nilai  pKa  dan  pengaruh  pembentukan  senyawa  kompleks ibuprofen dengan β -siklodekstrin terhadap peningkatan kelarutan  ibuprofen. Metode  penelitian  yang  digunakan  untuk  menentukan  nilai  pKa  adalah  dengan pengukuran  absorbansi  pada  panjang  gelombang  266  nm.  Pengujian  kelarutan  dan  optimasi kompleks  antara  ibuprofen  deng an  β -siklodekstrin  menggunakan  spektrofotometri    ultraviolet dengan  metode factorial  design .  Kompleks  ibuprofen  dengan  β -siklodekstrin  dievaluasi menggunakan  spektrofotometri  inframerah,  dan  dioptimasi    dengan  metode simplex  lattice design menggunakan software design expert versi 7.1.3.
Hasil  penelitian  ini  menunjukan  bahwa  pKa  ibuprofen  adalah  4,37  ±  0,07  dan  5,24  ± 0,07. Kompleks  ibuprofen  dengan  β -siklodekstrin  yang  terbentuk  dievaluasi  secara spektrofotometri  inframerah  menunjukan  hilangnya  puncak  gugus  -C=O-  dari  ibuprofen  pada bilangan  gelombang  1721  cm -1 dan  transmisi  baru  dengan  transmisi  12,77%  pada  bilangan gelombang    1908  cm -1 dan  9,785  pada  bilangan  gelombang  1698  cm -1 .    Peningkatan  kelarutan ibuprofen  dikompleks  dengan  β -siklodekstrin  adalah  2,30  kali  ±  0,12  pada  pH  2,39;  1,30  kali  ± 0,16  pada  pH  6,39;  1,74  kali  ±  0,06  pada  pH  3,2  dan  0,99  kali  ±  0,02  pada  pH  7,2.  Komposisi kelarutan optimum pada pH 2,39 dan 6,39 adalah pada pH 2,39, suhu 30°C, ibuprofen 100 mg, dan β -siklodekstrin 200 mg, sedangkan pada pH 3,2 dan 7,2 adalah pada pH 3,2, suhu 45°C, ibuprofen 100 mg, dan β -siklodekstrin 200 mg. Kata kunci : kelarutan, β -siklodekstrin, ibuprofen, pKa.

## ABSTRACT
Ibuprofen  is  a  nonsteroid  anti-inflammatory  drug  (NSAID)  that  can inhibit  activities  of siklooksigenase-1  and  siklooksigenase-2  isoenzyme,  so  thats  with  inhibiting  the  changing  of arachidonic acid to prostaglandin can be decreased. Ibuprofen belongs to BCS class II, because it has high permeability and low solubility. The goals of this research are to determine the pKa of ibuprofen and to know the influence of the complexe formation of  ibuprofen with β -cyclodextrin on ibuprofen solubility.
Determinnation  of  the  pKa  value  of  ibuprofen  has  been  conducted  by  measuring absorbance  at  wavelength  266  nm.  The  optimization  of  complexes  formation  has  been  worked using factorial design method. Then, the complex of ibuprofen and β -cyclodextrin evaluated using infrared spectrophotometry, and optimized with using software design expert version: 7.1.3.
The  result  of  this  research  showeds  that the  pKa value of ibuprofen  wasis  4,  37  ±  0,07 and  5,  24  ±  0,07.  The  complexes  ibuprofen  with β --siklodekstrin  was  evaluated  using  infrared spectrophotometry there was no peak at 1721 that indicated that there was no functional group of –C=O.  Based on simplex lattice design calculation, the best complexes consisted of ibuprofen and β -cyclodextrin in ratio 120 and 180. The solubility data showed that complexes of ibuprofen with β -cyclodextrin was 2,30 ± 0,12 times at pH 1,30 ± 0,16 times; 1,74 ± 0,06 times , and 0,99 time ± 0,02 at pH 7,2;  respectively at pH of 2,39; 6,39; and 7,2. Based on factorial design data, it was known that the combination of ibuprofen (100 mg) and β -cyclodextrin (200 mg) has an optimum
solubility in codition pH 2,39; 6,39 and temperature 30°C. In codition, pH of 3,2 this mixture has an optimum solubility at temperature  45°C.
Keywords:solubility, β -cyclodextrin, ibuprofen, pKa.

## PENDAHULUAN
Mekanisme  dari  ibuprofen  sendiri adalah menghambat isoenzim siklooksigenase-1 dan siklooksigenase-2
dengan  cara  mengganggu  perubahan  asam arakidonat  menjadi  prostaglandin.  Enzim siklooksigenase berperan  dalam  memacu pembentukan  prostaglandin  dan  tromboksan dari asam arakidonat, sedangkan prostaglandin  adalah  molekul  pembawa pesan pada proses inflamasi atau peradangan. Penggunaan ibuprofen digunakan  untuk  mengurangi  penyakit sebagai  analgetik-antipiretik.  Karakteristik ibuprofen termasuk dalam Biopharmaceutics Classification System (BCS) kelas II dengan ciri sifat permeabilitas tinggi dan kelarutannya  rendah  (Amidon et  al., 1995). Penelitian  ini  dilakukan  untuk  meningkatan kelarutan  melaui  pembentukan  kompleks antara  ibuprofen  dengan  beta-siklodekstrin (β -siklodekstrin)  menggunakan software Design  Expert versi  7.1.3(DX7)  dengan factorial  design dan simplex  lattice  design . Berdasarkan  pustaka  yang  telah  dipelajari ditemukan  adanya  perbedaan  nilai  pKa ibuprofen  yaitu  5,2  dan  4,39  (USP  32,
2009). Penentuan pKa sendiri pada penelitian  ini  perlu  dilakukan  karena  pKa dapat digunakan untuk mengetahui stabilitas dan  kelarutan  optimum  dari  suatu  produk obat (Shargel et al., 2005). Pada peningkatan kelarutan  obat  dengan  menggunakan  β - siklodekstrin  ini  dilakukan  karena  β - siklodekstrin  dapat  meningkatkan  kelarutan ibuprofen  yang  sukar  larut  dalam  air. Ibuprofen  yang  sukar  larut  dalam  air  dapat membatasi  aplikasi  obat  secara  biologi. Harapanya  dengan pembentukkan  kompleks antara  ibuprofen  dengan  β -siklodekstrin dapat  meningkatkan  efektifitas  obat.  Usaha memodifikasi  pelarutan  ibuprofen  pada penelitian  ini  dilakukan  dengan  metode pembentukan kompleks dengan β - siklodekstrin.

## METODE PENELITIAN
Metode  penelitian  yang  digunakan untuk  menentukan  nilai  pKa  adalah  dengan pengukuran absorbansi pada panjang gelombang  266  nm  .  Pengujian  kelarutan
dan  optimasi  kompleks  antara  ibuprofen dengan β -siklodekstrin menggunakan spektrofotometri  ultraviolet  dengan  metode factorial design . Kompleks ibuprofen dengan β -siklodekstrin dievaluasi menggunakan  spektrofotometri  inframerah, dan  dioptimasi    dengan  metode factorial design menggunakan software design expert versi 7.1.3.
Hasil dan Pembahasan Pengujian dan optimasi kelarutan ibuprofen  menggunakan  metode  factorial design Pengujian dan optimasi kelarutan ibuprofen pada pH 2,39 dan 6,39
Peningkatan  kelarutan  dianalisis  dari data  absorbansi  yang  kemudian  dimasukan ke dalam regresi linear pada masing-masing pH untuk mendapatkan kelarutan,
selanjutnya dianalisa untuk melihat
peningkatan  kelarutan  dan  hasilnya  terjadi peningkatan  pada  pH  2,39  sebesar  2,30  kali ±  0,12 ketika  ibuprofen  ditambahkan  β - siklodekstrin  200  mg  dan  pada  suhu  6,39 peningkatannya 1,30 kali ± 0,16.
Berdasarkan  analisis  menggunakan  metode factorial design , persamaan matematik yang menjelaskan  hubungan  pengaruh  faktor komposisi  β -siklodekstrin  (A),  pH  (B),  dan suhu  (C)  terhadap  kelarutan  ibuprofen adalah persamaan (1).
Y= 4,79 (A) – 2,54 (B) + 16,91 (A) (B)(1)
Keterangan: Y= proporsi kelarutan, A= proporsi β -siklodekstrin, B= proporsi Ph
Berdasarkan  hasil  analisis  dengan ANOVA diketahui  bahwa  model  yang dibuat nilai signifikan pada taraf signifikansi  95%  ( p-value lebih  besar  dari 0,05) merupakan model campuran komponen kuadratik karena model tersebut tepat dalam menerangkan hasil pengamatan kelarutan  ibuprofen  dengan  β -siklodekstrin pada  pH  2,39  dan  6,39.  Hal  tersebut diperkuat  dengan  hasil  analisis lack  of
fit yang  menghasilkan p-value yang  > 0,05; yang berarti tidak ada perbedaan bermakna antara  data  observasi  dengan  data  hasil prediksi dari model yang dibuat.
Gambar  1.  Kurva  normal  plot  of  residuals  untuk  pengujian  kelarutan  ibuprofen  pada  pH 2,39 dan 6,39
Gambar 2. Contour plot respon prediksi untuk pengujian  kelarutan optimal ibuprofen pada pH 2,39 dan 6,39
Pengujian dan optimasi kelarutan ibuprofen pada pH 3,2 dan 7,2
Data  absorbansi  dimasukan  ke dalam  persamaan  regresi  linear  yang masing-masing  pH  untuk  mendapatkan kelarutan.  Peningkatan  kelarutan  didapatkan dari  membandingkan  kelarutan  ibuprofen
dengan penambahan β -siklodekstrin
dibandingkan  dengan  kelarutan  ibuprofen tanpa penambahan β -siklodekstrin. Hasilnya terjadi  peningkatan  1,74  kali  ±  0,06  ketika ibuprofen  ditambahkan  β -siklodekstrin  200
mg  dan  pada  suhu  7,2  peningkatannya  0,99 kali ± 0,02. Berdasarkan analisis menggunakan  metode factorial  design , persamaan  matematik  yang  menjelaskan hubungan  pengaruh  faktor  komposisi  β - siklodekstrin  (A),  pH  (B),  dan  suhu  (C) terhadap kelarutan ibuprofen adalah persamaan (2).
Y= 4,41 (A) + 1,49 (B) + 17,06 (A) (B)(2)
Keterangan: Y= proporsi kelarutan, A= proporsi β -siklodekstrin, B= proporsi pH.
Berdasarkan  hasil  analisis  dengan ANOVA diketahui bahwa model yang dibuat signifikan  pada  taraf  signifikansi  95%  ( p- value lebih  besar  dari  0,05)  merupakan model campuran komponen kuadratik karena model tersebut tepat dalam menerangkan  hasil  pengamatan  kelarutan ibuprofen  dengan  β -siklodekstrin  pada  pH 3,2  dan  7,2.  Hal  tersebut  diperkuat  dengan hasil  analisis lack  of  fit yang  menghasilkan p-value yang  >  0,05;  yang  berarti  tidak ada perbedaan  bermakna  antara  data  observasi dengan  data  hasil  prediksi  dari  model  yang dibuat.
Gambar  3. Kurva  normal  plot  of  residuals  untuk  pengujian  kelarutan  ibuprofen  pada  pH 3,2 dan 7,2
Gambar 4.Contour plot respon prediksi untuk pengujian kelarutan optimal ibuprofen pada pH 3,2 dan 7,2
Penentuan Konstanta Disosiasi Berdasarkan nilai pKa yang diperoleh  dari  hasil  perhitungan  larutan ibuprofen  dalam  dapar  pH  4,39  dan  5,2 didapatkan  hasil  pKa  observasi  adalah  4,37 ±  0,07  dan  5,24  ±  0,07.  Hasil  nilai  pKa tersebut  mendekati  pKa  yang  terdapat  pada USP XXXII (2009) yaitu 4,39 dan 5,2. Profil pH-kelarutan menunjukan terjadinya ionisasi yaitu  pKa1  =  5,2  dan  pKa2  =  4,39,  ini menunjukan  bahwa  ibuprofen  memiliki  dua gugus  fungsi  yang  dapat  terionisasi,  yaitu gugus hidroksi dan gugus karbosil.
Hasil  Pengujian  dan  Optimasi  Kompleks Ibuprofen den gan β -siklodekstrin secaraSpektrofotometri Inframerah Pengujian interaksi analisis spektrofotometri  IR  kompleks  ibuprofen dengan  β -siklodekstrin  melaui  proses pelarutan
Pada kompleks tersebut juga terdapat  transmisi  lemah  di  dekat  bilangan gelombang  1650  cm -1 yaitu  pada  transmisi 9,78%  pada  bilangan  gelombang  1698  cm -1 yang  menunjukan  adanya  ikatan  rangkap  - C=C-  (cincin  aromatik),  dan  tidak  terdapat gugus  -C=O-  (karbonil)  pada  transmisi kompleks  tersebut,  tetapi  terdapat  transmisi baru dengan transmisi 12,77% pada bilangan gelombang    1908  cm -1 dan  9,785  pada bilangan  gelombang  1698  cm -1 .  Hilangnya puncak  gugus  -C=O-  dari  ibuprofen  pada bilangan  gelombang  1721  cm -1 menunjukan senyawa  baru  sebagai  hasil  kompleksasi antara  ibuprofen  dengan  β -siklodekstrin. Komposisi  kompleks  terbaik  berdasarkan metode simplex lattice design ibuprofen 120 dan β -siklodextrin 180.
Kesimpulan pKa ibuprofen
berdasarkan penelitian ini adalah 4,37 ± 0,07 dan 5,24 ±
0,07.  K ompleks  ibuprofen  dengan  β - siklodekstrin  yang  terbentuk  dievaluasi secara spektrofotometri inframerah menunjukan hilangnya puncak gugus -C=O- dari  ibuprofen  pada  bilangan  gelombang 1721 cm -1 dan bilangan gelombang 1908 cm - 1 .  Komposisi kompleks terbaik belum dapat ditentukan  menggunakan  metode simplex lattice design .Peningkatan kelarutan ibuprofen dikompleks dengan β - siklodekstrin  adalah  2,30  kali  ±  0,12  pada pH 2,39; 1,30 kali ± 0,16 pada pH 6,39; 1,74 kali ± 0,06 pada pH 3,2 dan 0,99 kali ± 0,02 pada pH  7,2.  Komposisi  kelarutan  optimum secara  teoritis  berdasarkan  metode factorial design pada  pH  2,39  dan  6,39  adalah  pada pH 2,39, suhu 30°C, ibuprofen 100 mg, dan β -siklodekstrin 200 mg, sedangkan pada pH
3,2 dan 7,2 adalah pada pH 3,20, suhu 45°C,
ibuprofen  100  mg,  dan  β -siklodekstrin  200 mg.

## Daftar Pustaka
Amidon,  G.L.,  Lennernas,  H.,  Shah,  V.P., Crison,  J.R.,  1995,  A  Theorectical Basic for a Biopharmaceutical Drug Classification:  Correlation  of  In Vitro Drug Product Dissolution and In  Vivo  Bioavailability,  Pharm. Res., 12: 413-420. USP  XXXII.  2009.  USP  32:  United  States
Pharmacopeia.  Rocville:  United
States  Pharmacopeial  Convention. 1209-1210.
Shargel, L., Yu, A., dan Wu-Pong, S., 2005. Applied Biopharmaceutics & Pharmacokinetics, Five Edition. New York: Mc.Graw Hill Professional. 377.