© (2015) Program Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia

## CURCUMIN SEBAGAI PHOTOSENSITIZERS TERAPI

## CAHAYA LED BIRU UNTUK PENYEMBUHAN LUKA
INFEKSI SECARA IN VIVO
Juandri S. Tusi* 1 , Dr. Suryani Dyah A. 2 , Dr. Andi H. Zaidan 3 1,2 Sekolah Pascasarjana Unair; Jl. Airlangga 4-6, 031-5041566/031-5030076
3 Prodi S2 Teknobiomedik, Universitas Airlangga, Surabaya e-mail: * 1 sepriantojuand@gmail.com

## Abstrak
Salah satu penyebab infeksi luka adalah bakteri Staphylococcus Aureus. Penelitian ini bertujuan untuk efektifitas  fotoinaktivasi  LED  biru  dengan  curcumin  untuk  penyembuhan  luka  infeksi  secara  in  vivo.  Sampel terdiri  dari  (a)  kontrol  negatif,  (b)  curcumin,  (c)  LED  biru,  dan  (d)  tritmen  LED  biru  dengan  curcumin menggunakan dosis energi 10, 20, 30, dan 40 menit untuk melihat parameter yang diamati dengan uji Anova. Hasil penelitian pada mencit menunjukan bahwa presentase kolagen dan fibroblas dari setiap kelompok kontrol adalah kontrol negatif (1) kolagen sebesar 11.84% dan fibroblas 9,35%, LED (2) kolagen sebesar 16.94% dan fibroblas  25,29%,  Curcumin  (3)  kolagen  sebesar  13.07%  dan  fibroblas  24,49%,  LED  dengan  Curcumin  10 menit (4) kolagen sebesar 21.98% dan fibroblas 23,23%, LED dengan Curcumin 20 menit (5) kolagen sebesar 36.72%  dan  fibroblas  24,17%,  LED  dengan  Curcumin  30  menit  (6)  kolagen  sebesar  45.31%  dan  fibroblas 26,13%, LED dengan Curcumin 40 menit (7) kolagen sebesar 55.17% dan fibroblas 26,85%. Kesimpulan dari hasil uji Histopatologi dengan control perlakuan curcumin dengan  LED biru 40 menit menghasilkan jumlah kolagen  sebanyak  55,17%  dan  fibroblas  26,85%,  sedangkan  analisis  dengan  pengujian  secara  makroskopik diketahui luka telah sembuh pada hari keenam pada kelompok kontrol tersebut.
Kata kunci : luka infeksi, curcumin, LED biru.

## Abstract
One  cause  of  wound infection  is  a  bacterium  Staphylococcus  aureus.  This  study  aims to  effectiveness photoinactivation  blue  LED  with  curcumin  for  wound  healing  in  vivo  infection.  The  sample  consisted  of  (a) negative control, (b) curcumin, (c) a blue LED, and (d) tritmen blue LEDs with curcumin doses of energy 10, 20, 30, and 40 minutes to see the parameters observed by Anova. The results of the study in mice showed that the percentage of collagen and fibroblasts from each of the control group were negative control (1) amounted to  11.84%  collagen  and  fibroblasts  9.35%,  LED  (2)  collagen  amounted  to  16.94%  and  25.29%  fibroblasts, Curcumin  (3)  at  13:07%  collagen  and  fibroblasts  24.49%,  LED  with  Curcumin  10  minutes  (4)  collagen amounted to  21.98%  and  23.23%  fibroblasts,  LED  with  Curcumin  20  minutes  (5)  th e collagen  by  fibroblasts 36.72% and 24.17%, LED with Curcumin 30 minutes (6) amounted to 45.31% collagen and fibroblasts 26.13%, LED  with  Curcumin  40  minutes  (7)  amounted  to  55.17%  collagen  and  fibroblasts  26.85%.  Histopathology conclusion of the test results with a control treatment of curcumin with a blue LED 40 minutes to produce the amount  of  collagen  as  much  as  55.17%  and  26.85%  fibroblasts,  whereas  macroscopic  analysis  by  testing known injury has healed on day six in the control group.
Keywords: wound infections, curcumin, a blue LED

## 1. PENDAHULUAN
Infeksi Staphyloccoccus aureus dapat menyebar melalui  kontak  dengan  nanah  dari  luka  yang  terinfeksi. Dalam  Kamus  Keperawatan  disebutkan  bahwa  infeksi adalah  invasi  dan  multiplikasi  mikroorganisme  dalam jaringan  tubuh,  khususnya  yang  menimbulkan  cedera seluler  setempat  akibat  metabolisme  kompetitif,  toksin, replikasi  intraseluler  atau  reaksi  antigen-antibodi. Munculnya  infeksi  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor yang  saling  berkaitan  dalam  rantai  infeksi.  Adanya patogen tidak berarti bahwa infeksi akan terjadi (Utama, 2006). Tanda dari infeksi yaitu calor (panas), dolor atau rasa  sakit, rubor atau  kemerahan, tumor (  bengkak)  dan functiolaesa (gangguan fungsi).
Luka  adalah  kerusakan  pada  struktur  anatomi  kulit yang  menyebabkan  terjadinya  gangguan  kulit.  Contoh yang  paling  mudah  jika  jari  tangan  tersayat  oleh  pisau, maka  luka  yang  timbul  akan  menyebabkan  terjadinya kerusakan  pada  kulit  sehingga  kulit  tidak  dapat melindungi  struktur  yang  ada  dibawahnya.  Jika terkontaminasi  oleh  debu  dan  bakteri  dan  tidak  terawat maka  akan  terjadi  infeksi.  Salah  satu  bakteri  yang menyebabkan  infeksi  pada  kulit  luka  yaitu  bakteri Staphyloccoccus  aureus  (S.  Aureus) (Sim,  Romi,  2009). Infeksi  yang  disebabkan  oleh S.aureus dapat  terjadi secara  langsung  maupun  tak  langsung,  sehingga  luka menghasilkan  nanah  dan  disebut  bakteri  piogenik (WHO, 2004). S. Aureus merupakan bakteri coccus gram positif, susunannya bergerombol dan tidak teratur seperti anggur  (Dowshen ,  et  al ,  2002),  dapat  ditemukan  pada permukaan kulit sebagai flora normal, terutama disekitar hidung, mulut, alat kelamin, dan disekitar anus.
Pengobatan  infeksi  biasanya  dilakukan  dengan pemberian  obat  antibiotik,  akan  tetapi  pemberian  yang terlalu  lama  dapat  menyebabkan  kuman/bakteri  menjadi resisten terhadap antibiotik tersebut.  Diperlukan metode alternatif  lain  untuk  mengatasi  bakteri  yang  resisten terhadap antibiotik yaitu dengan memanfaatkan antibakteria  berbahan  alam curcumin yang  diaktifasi oleh Light  Emitting  Diode (LED). Curcumin di  alam terdapat  bersama-sama  dengan  dua  senyawa  lain  yaitu demetoksi curcumin dan  bis-demetoksi curcumin ,  yang dikenal  dengan  nama  kurkuminoid  (Badreldin  dkk, 2006).  Berdasarkan  hasil  penelitian  senyawa curcumin tersebut  memiliki  berbagai  aktivitas  biologis  seperti antibakteri, antiprotozoa, antivirus, antikoagulan, antioksidan,  antitumor  dan  antikarsinogenik.  Sedangkan
untuk  senyawa  demetoksi curcumin dan  bis-demetoksi curcumin memiliki aktivitas antioksidan (Chattopadhyay dkk,  2004).   Hasil  isolasi  tanaman Curcumalonga diperoleh  berbagai  senyawa  curcumin  lainnya  seperti sodium curcuminat yang memiliki aktivitas antiinflamasi  dan  antibakteri,  dan curcumin yang memiliki  aktivitas  antiprotozoa  (Chattopadhyay  dkk, 2004).  Studi  awal  menunjukan  bahwa Curcumin dapat menghambat bakteri gram negatif dan gram positif.
Efektifitas  antibakteri curcumin dapat  ditingkatkan dengan Photodinamic Therapy (PDT). Mekanisme kerja PDT  dapat  merusak  dinding  membran  gram  positif sehingga  terjadinya  interaksi  langsung  antara  senyawa curcumin dengan  peptidoglikan  bakteri  sehingga menghambat  sintesis  dinding  sel  bakteri.Teknik  terapi PDT  ini  bersifat  non-farmakologi,  antimikroba  dan berbasis cahaya  yang dapat digunakan sebagai alternatif terhadap antibiotik tradisional (Dai, 2011).
Pendekatan kombinasi ini memperkenalkan fotosensitizer dalam  bakteri  tertentu  dan  ke  dalam jaringan  yang  terinfeksi  (Wainwright,  1998).  LED  biru menjadikan  fungsi  sumber  cahaya  sebagai  faktor tambahan  dalam  proses  fotosensitiser  dalam  mengatasi infeksi  yang disebabkan oleh  kuman/bakteri. Kombinasi dengan  cahaya  biru  dapat  mengaktivasi curcumin sebagai  agen photosensitizer untuk  membunuh  bakteri (Yuan Jiang et al , 2014).
Penelitian  sebelumnya  menyatakan  bahwa  aksi photodynamic LED mengaktivasi curcumin berpengaruh pada  kelangsungan  hidup  sel,  permeabilitas  membran, dan  spesies  oksigen  reaktif  intraseluler  dari S.  aureus . Pada S. aureus yang diinkubasi dalam curcumin dengan konsentrasi  yang  berbeda,  selama  60  menit  dan  disinari oleh cahaya biru dengan panjang gelombang 470nm dan dengan  dosis  ringan  dari  3  J/cm 2 hasilnya  diperoleh membran  sel S.aureus terlihat  hampir  72%  mengalami kematian atau kerusakan. Koloni diuji dengan menyelidiki  sitotoksitas S.aureus pada  pemberian curcumin dengan hasil banyak S.aureus yang mengalami kerusakan  membran.  Untuk  pengujian  permeabilitas membran  dilakukan  dengan Mikroskop  Confocal  Laser (CLSM)  dan flow  Cytometry (FCM)  dengan  hasil curcumin 2,5  µm  dengan  waktu  60  menit  pada  ruang gelap  dengan  suhu  ruangan  37 0 C  dan  kemudian  disinari oleh  cahaya  biru  dengan  dosis  3J/cm 2 S.aureus mengalami  kematian  sel  membran,  sedangkan  untuk pengujian mengamati morfologi dan struktur
© (2015) Program Pascasarjana Universitas Airlangga, Indonesia
menggunakan Mikroskop  Elektron  Transmisi (TEM) adapun  untuk  melihat  pewarnaan  pengukuran  tingkat ROS  ( reaksi  oksigen  spesies )  menggunakan  analisis FCM  dengan  DCFH-DA  ( dichlorodihydrofluorescein diasetat )  hasilnya  yaitu  cahaya  biru  mengaktifasi curcumin secara  signifikan  membunuh S.  Aureus tergantung  pemberian  dosis.  Pada  pengamatan  dengan TEM  terlihat  kerusakan  struktur S.aureus .  Peningkatan intraseluler  ROS  diamati  setelah curcumin diaktivasi oleh  cahaya.  Dari  penjelasan  maka  dapat  disimpulkan bahwa curcumin diaktifasi  oleh  cahaya  biru  dapat merusak  permeabilitas  membran  dan  memyebabkan kematian  sel S.aureus ,  juga  melihat  peningkatan  ROS yang  berperan  penting  dalam  membunuh S.  aureus (Yuan Jiang dkk,2014).
Penelitian  ini  akan  membahas  bagaimana curcumin sebagai fotosensitizer dengan penyerapan cahaya tampak menggunakan  LED  biru  untuk  penyembuhan  luka infeksi.

## 2. MATERI DAN METODE
Sampel  penelitian  adalah Staphylococcus  aureus . Curcumin sebagai  fotosensitiser  di  dapat  dari  sigma. Peralatan  yang  diperlukan  adalah  seperangkat  peralatan LED untuk penyinaran, dengan dosis energi 10 menit,20 menit,30 menit dan 40 menit diuji menurut HPA dan uji makroskopik.

## 2.1 Staphylococcus aureus
Staphylococcus  aureus (S.  aureus)  merupakan bakteri coccus gram  (+),  susunannya  bergerombol  dan tidak  teratur  seperti  anggur  (Gambar  2.4).  S.  aureus tumbuh  pada  media  cair  dan  padat  seperti  NA  ( Nutrien Agar )  dan  BAP  ( Blood  Agar  Plate ). S.  aureus dapat ditemukan  pada  permukaan  kulit  sebagai  flora  normal, terutama  disekitar  hidung,  mulut,  alat  kelamin,  dan sekitar anus.
S.  aureus dapat  menyebabkan  infeksi  pada  luka biasanya berupa abses yang merupakan kumpulan nanah atau cairan dalam jaringan yang disebabkan oleh infeksi. Jenis-jenis  abses  yang  spesifik  diantaranya  bengkak ( boil ),  radang  akar  rambut  ( folliculitis ).  Infeksi  oleh S. aureus bisa menyebabkan sindroma kulit dan juga dapat menular  selama  ada  nanah  yang  keluar  dari  lesi  atau hidung.  Selain  itu  jari-jemari  juga  dapat  membawa Infeksi S.  aureus dari  satu  bagian  tubuh  yang  luka  atau robek (Dowshen , et al, 2002).
2.2 Curcumin
Kunyit  ( Curcuma  domestica  val )  merupakan  salah satu  tanaman  yang  digunakan  untuk  pengobatan tradisional  oleh  nenek  moyang  kita  sejak  lama. Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  secara invitro,  membuktikan  bahwa  senyawa  aktif  dalam rimpang  kunyit  mampu  menghambat  pertumbuhan jamur,  virus,  dan  bakteri  baik  Gram  positif  maupun Gram negatif, seperti E.coli dan S. aureus , karena kunyit mengandung  berbagai  senyawa  diantaranya  adalah curcumin dan minyak siri (Said, 2001). Curcumin adalah suatu  senyawa  fenolik.  Turunan  fenol  ini  akan berinteraksi  dengan  dinding  sel  bakteri,  selanjutnya terabsorbsi  dan  penetrasi  ke  dalam  sel  bakteri,  sehingga menyebabkan presipitasi dan denaturasi protein,akibatnya akan melisis membran sel bakteri.
Efek fotokimia akibat paparan laser menyebabkan induksi  apoptosis  baik  oleh  jalur  mitokondria  yang melibatkan caspases dan  pelepasan  sitokrom,  atau  jalur melibatkan ceramide atau  reseptor  kematian.  Ketika fotosensitiser  terlokalisasi  pada  mitikondria  maka kematian sel terjadi dinamakan apoptosis, sedangkan jika fotosensitiser  terlokalisasi  pada  membran  plasma kematian yang terjadi disebut nekrosis (Prasad, 2003).

## 2.3 LED
Light Emitting Diode (LED) adalah salah satu komponen elektronika yang terbuat dari bahan semikonduktor jenis dioda  yang  mempu  mengeluarkan  cahaya.  LED menghasilkan  cahaya  monokromatik,  prinsip  kerjanya ketika LED diberi tegangan panjar maju maka LED akan mengalami  medan  elekromagnetik  sehingga  elektron akan  mengalami  rekombinasi  dengan hole ,  rekombinasi ini  melepaskan  energi  berupa  foton,  foton  inilah  yang menyebabkan cahaya terpancar dari LED.
Penyinaran LED difokuskan pada perusakan membran  sitoplasma  pada  bakteri  dengan  gram  (+)  dan gram  (-)  didasarkan  pada  konsep  fotosensitiser.  PS sendiri  sangat  baik  mengikat  pada  bakteri  gram  (+)  dan juga  memperhambat  pertumbuhan  bakteri.  Penelitian lebih  lanjut  telah  menetapkan  bahwa  gram  bakteri  (+) sangat  sensitif  terhadap  tindakan  photosensitising  dari anionik karena PS menyerap cahaya tampak.

## 2.4 Dosis Energi
Pengujian dengan dosis energi 10 menit, 20 menit, 30 menit  dan  40  menit  dari  cahaya  LED  biru.  Hasil karakterisasi  pada  setiap  kelompok  kontrol  akan  diuji histopatologi da makroskopik untuk mengetahui perbandingan setiap kelompok kontrol.

## 3. Hasil Dan Diskusi
Pada  percobaan  penelitian  ini  mencit  dipaparkan dengan  LED  dengan  panjang  gelombang  450-470  nm dan  penambahan  eksogen  phosensitizer  curcumin.  Pada mencit dilakukan perlakuan secara berbeda yaitu kontrol negative  (1),  kontrol  positif  LED  (2),  kontrol  positif Curcumin (3), kontrol positif LED dengan Curcumin 10 menit  (4),  kontrol  positif  LED  dengan  Curcumin  20 menit  (5),  kontrol  positif  LED  dengan  Curcumin  30 menit (6), dan kontrol positif LED dengan Curcumin 40 menit (7).
Perlakuan  kontrol  negatif (1) rata-rata  memiliki  nilai presentase  kolagen  sebesar  11.84%,  mencit  dengan perlakuan kontrol positif LED (2) rata-rata memiliki nilai presentase  kolagen  sebesar  16.94%,  mencit  dengan perlakuan  kontrol  positif  Curcumin  (3)  rata-rata memiliki  nilai  presentase  kolagen  sebesar  13.07%, mencit  dengan  perlakuan  kontrol  positif  LED  dengan Curcumin  10  menit  (4)  rata-rata  memiliki  nilai presentase  kolagen  sebesar  21.98%,  mencit  dengan perlakuan  kontrol  positif  LED  dengan  Curcumin  20 menit  (5)  rata-rata  memiliki  nilai  presentase  kolagen sebesar 36.72%, mencit dengan perlakuan kontrol positif LED  dengan  Curcumin  30  menit  (6)  rata-rata  memiliki nilai presentase kolagen sebesar  45.31%, mencit dengan perlakuan  kontrol  positif  LED  dengan  Curcumin  40 menit  (7)  rata-rata  memiliki  nilai  presentase  kolagen sebesar 55.17%.
Gambar  1  presentase  kolagen  pada  setiap kelompok percobaan
Perlakuan kontrol negatif (1) rata-rata memiliki nilai presentase  fibroblas  sebesar  9.35%,  mencit  dengan perlakuan kontrol positif LED (2) rata-rata memiliki nilai presentase  fibroblas  sebesar  25.29%,  mencit  dengan perlakuan  kontrol  positif  Curcumin  (3)  rata-rata memiliki  nilai  presentase  fibroblas  sebesar  24.49%, mencit  dengan  perlakuan  kontrol  positif  LED  dengan Curcumin  10  menit  (4)  rata-rata  memiliki  nilai presentase  fibroblas  sebesar  23.23%,  mencit  dengan
perlakuan  kontrol  positif  LED  dengan  Curcumin  20 menit  (5)  rata-rata  memiliki  nilai  presentase  fibroblas sebesar 24.17%, mencit dengan perlakuan kontrol positif LED  dengan  Curcumin  30  menit  (6)  rata-rata  memiliki nilai presentase fibroblas sebesar 26.13%, mencit dengan perlakuan  kontrol  positif  LED  dengan  Curcumin  40 menit  (7)  rata-rata  memiliki  nilai  presentase  fibroblas sebesar 26.85%.
Gambar  2  presentase  fibroblas  dalam  setiap kelompok percobaan
3.1 Uji Normalitas

## Table 3.1 hasil uji normalitas
Variabel P-Value Keterangan %Kolagen 0.251 Data Normal %Fibroblas 0.101 Data Normal
Sebelum  dilakukan  uji  dengan  menggunakan One  Way  Anova,  maka  data  perlu  diuji  dahulu normalitasnya  dengan  menggunakan  Kolmogorov  – Smirnov.  terlihat  bahwa  nilai  p  >  0,05.  Karena  nilai  p untuk semua variabel adalah lebih besar dari 0,05, maka dapat  diambil  kesimpulan  bahwa  sebaran  data  pada variabel  %Kolagen  dan  %Fibroblas    tersebut  adalah normal.

## 3.2 Uji Homogenitas

## Table 3.2 hasil uji Homogenitas
Variabel P-Value Keterangan %Kolagen 0.134 Data Normal %Fibroblas 0.742 Data Normal
Hasil  uji  homogenitas  varian  dari  variabel %Kolagen  dan  %Fibroblas.  uji  homogenitas  varian  di atas  terlihat  bahwa  hasil  uji  varian  ketujuh  kelompok
dari  variabel  persentase  kolagen  tersebut  sama  (P-value =  0.134),  sehingga  uji  Anova  valid  untuk  menguji hubungan ini.
Selanjutnya, untuk variabel persentase fibroblas,  terlihat  bahwa  hasil  uji  varian  ketujuh kelompok  tersebut  sama (P-value =  0.742), sehingga uji Anova valid untuk menguji hubungan ini. Karena syarat normalitas  dan  homogenitas  terpenuhi,  maka  dapat dilakukan uji One Way Anova.

## 3.3 Uji One Way Anova
Selanjutnya untuk melihat apakah ada perbedaan  presentase  kolagen  dari  ketujuh  kelompok perlakuan tersebut dapat dilihat pada tabel ANOVA.
3.3.1 Kolagen 4. Kelom pok N Rata- rata SD Anova Hasil Kesi mpul an Wa ktu K.- C LED 10 m 20 m 30 m 40 m 3 3 3 3 3 3 3 11.8 16.9 13.0 21.9 36.7 45.3 55.1 175 122 798 494 535 621 620 Tuke y F=30 89.21 2 p=0.0 00 Beda berm akna Total 21 28.7 16.2
Keterangan  :  N=  jumlah  sampel.  SD=standar  deviasi. Superscript yang sama menunjukan beda tidak bermakna dari hasil uji Tukey
3.3.2 Fibroblas Fakt or Kelom pok N Rata- rata SD Anova Hasil Kesi mpula n Wa ktu K - C LED 10 m 20 m 30 m 40 m 3 3 3 3 3 3 3 9.35 25.2 24.4 23.2 24.1 26.1 26.8 365 557 490 430 451 355 745 Tukey F=437. 924 p=0.00 0 Beda berma kna Total 2 1 22.78 86 5.753 73
Keterangan  :  N=  jumlah  sampel.  SD=standar  deviasi. Superscript yang sama menunjukan beda tidak bermakna dari hasil uji Tukey
Pada  kolom  Sig.  diperoleh  nilai  P  (P-value)  = 0.000.  Dengan  demikian  pada  taraf  nyata  =  0.05, menolak  Ho,  sehingga  kesimpulan  yang  didapatkan adalah  ada  perbedaan  yang  bermakna  rata-rata presentase  kolagen  berdasarkan  ketujuh  kelompok perlakuan tersebut.
Karena  hasil  uji  Anova  menunjukan  adanya perbedaan  yang  bermakna,  maka  uji  selanjutnya  adalah melihat  kelompok  perlakuan  mana  saja  yang  berbeda. Hasil  Test  of  Homogeneity  of  Variances  menunjukan varian  sama,  maka  uji  lanjut  yang  digunakan  adalah  uji LSD.  Dari  tabel  Post  Hoc  Test  di  atas  memperlihatkan bahwa seluruh kelompok menunjukan adanya perbedaan rata-rata  presentase  kolagen  (ditandai  dengan  tanda bintang "*").
Pada  kolom  Sig.  diperoleh  nilai  P  (P-value)  = 0.000.  Dengan  demikian  pada  taraf  nyata  =  0.05, menolak  Ho,  sehingga  kesimpulan  yang  didapatkan adalah  ada  perbedaan  yang  bermakna  rata-rata presentase  fibroblas  berdasarkan  ketujuh  kelompok perlakuan tersebut.
Karena  hasil  uji  Anova  menunjukan  adanya perbedaan  yang  bermakna,  maka  uji  selanjutnya  adalah melihat  kelompok  perlakuan  mana  saja  yang  berbeda. Hasil  Test  of  Homogeneity  of  Variances  menunjukan varian  sama,  maka  uji  lanjut  yang  digunakan  adalah  uji LSD.
Dari tabel Post Hoc Test di atas
memperlihatkan  bahwa  seluruh  kelompok  menunjukan adanya perbedaan rata-rata presentase fibroblas (ditandai dengan tanda bintang "*").

## 3.4 Makroskopik
Hari Panjang Luka Mencit Dalam Cm 1 2 3 4 5 6 K - 1,5-2 cm 1,5-2 cm 1,4-1,9 cm 1,3-1,7 cm 1-1,4 cm 0,8-1,1 cm K. C 1,5-2 cm 1,5-2 cm 1,4-1,8 cm 1,2-1,5 cm 0,8-1,2 cm 0,4-0,8 cm K.LB 1,5-2 cm 1,5-2 cm 1,4-1,8 cm 1,2-1,6 cm 0,8-1,2 cm 0,4-0,8 cm K.LB.C10 menit 1,5-2 cm 1,5-2 cm 1,4-1,8 cm 1,1-1,4 cm 0,6-0,9 cm 0,3-0,5 cm K.LB.C20 menit 1,5-2 cm 1,5-2 cm 1,3-1,8 cm 1,1-1,4 cm 0,6-0,9 cm 0,3-0,5 cm K.LB.C30 menit 1,5-2 cm 1,5-2 cm 1,3-1,8 cm 1,1-1,4 cm 0,6-0,8 cm 0,1-0,3 cm
K.LB.C 40 menit 1,5-2 cm 1,5-1,9 cm 1,3-1,6 cm 1-1,3 cm 0,4-0,7 cm 0,2-luka sembuh
Gambar 5.4 Panjang luka mencit pada setiap sampel kontrol dari hari pertama sampai hari keenam.
Kelompok  perlakuan  hari  (1)  kontrol  negatif, LED,  Curcumin,  LED  dengan  curcumin  10  menit,  20 menit,  30  menit,  dan  40  menit  panjang  luka  mencit sama 1,5-2 cm, perlakuan hari (2) kontrol negatif, LED, Curcumin,  LED  dengan  curcumin  10  menit,  20  menit, 30 menit, 40 menit panjang luka 1,5-1,9 cm, perlakuan hari  (3)  kontrol  negatif,  LED,  Curcumin,  LED  dengan curcumin  10  menit,  20  menit,  30  menit,  40  menit panjang  luka  mencit  sekita  1,3-1,9  cm,  perlakuan  hari (4)  kontrol  negatif,  LED,  Curcumin,  LED  dengan Curcumin  10  menit,  20  menit,  30  menit,  40  menit panjang luka mencit sekitar 1-1,7 cm, perlakuan hari (5) kontrol  negatif,  LED,  Curcumin,  LED  dengan Curcumin  10  menit,  20  menit,  30  menit,  40  menit panjang  luka  mencit  sekitar  0,4-1,4  cm  dan  perlakuan hari  (6)  kontrol  negatif,  LED,  Curcumin,  LED  dengan Curcumin  10  menit,  20  menit,  30  menit,  40  menit panjang luka mencit sekitar 0,8- Sembuh.
3.5 Dosis Energi yang digunakan dalam pengobatan fotodinamik untuk beberapa kali paparan
(1) 2. , T = 4,764 x 10 -4
Jadi  penyerapan  curcumin  di%  =  (1-4,764x  10 -4 )  x
100% = 99,95%. Dari hasil ini dosis energi pengobatan photodynamic  dapat  dihitung  untuk  berbagai  paparan kali.  Dosis  energi  didefinisikan  sebagai  waktu penyerapan  persentase  x  daya  x  paparan  /  luas penampang.  Tabel  menunjukkan  dosis  energi  yang dihitung untuk berbagai paparan kali.
Table 3.5 dosis energy pada pengobatan fotodinamik
Panjang gelombang (nm) absorbansi  Power (mW) Area (cm 2 ) Waktu (s) Dosis energi (J/cm 2 ) 450-470 nm 99,95% 100 mW 2 cm 2 10 20 30 40 30 60 90 120
4. Kesimpulan
Berdasarkan hasil analisis dan pembahasan maka dapat diambil kesimpulan:
1.  Berdasarkan  uji  makroskopik  Curcumin  dengan  paparan  cahaya LED  biru  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  penyembuhan  luka dilihat  dari  setalah  dilakukan  perlakuan  selama  6  hari,  luka  pada mencit  dengan  kelompok  kontrol  curcumin  dengan  LED  40  menit sudah mengalami penyembuhan.
2. Dosis energi optimum dalam proses fotosensitiser curcumin dengan paparan LED biru untuk infeksi luka pada mencit yaitu kontrol aktif curcumin dengan LED biru 40 menit.
3. berdasarkan uji HPA kelompok kontrol curcumin dengan LED 40 menit terdapat paling banyak jumlah kolagen 55, 17% dan fibroblas 26, 85%.
6.2 Saran
Berdasarkan hasil penelitian, didapatkan beberapa saran yang perlu dilakukan untuk melengkapi dan pengembangan penelitian ini, yaitu
1. Karakteristik fotosensitizer curcumin melalui pengukuran untuk pemberian pada mencit secara in vivo.
2. Karakteristik serapan cahaya LED biru pada bahan aktif potosintesisizer (curcumin), untuk kosentrasi larutan curcumin yang berbeda.
3. Karakterisitik tingkat serapan cahaya LED biru pada berbagai varietas curcumin (ekstrak)

## DAFTAR PUSTAKA
Chattopdhyay,  I.,  Biswas,  K.,  Bandyopdhyay,  U.,  dan Banerje,  K.R.  2004.  Turmeric  and  Curcumin: Biological Actions And Medicinal Applications. Current Science 87(1): 44-53
DEPKES  RI  (2007),  Pedoman  Manajerial  Pencegahan Dan  Pengendalian  Infeksi  Di  Rumah  Sakit  dan Fasilitas Kesehatan Lainnya, Jakarta
Dowshen,  et  al.  2002. Staphylococcus  aureus . http:ud/ac.id/primahapsa/files/
2012/06/jtptunimus-gdl-primahapsa-5337-1- bab1.pdf .
Grossweiner LI, 2005. The Science of Phototherapy : An Introduction . Springer: USA.
Hamblin MR, Hasan T, 2004. Photodynamic therapy: a new  antimicrobial  approach  to  infectious disease?  J  of  Photochemical  and  Photobiology, 3: 436-450.
Hegge,  A.B.,  Nielsen,  T.T.,  Larsen,  K.L.,  Bruzell,  E., Tønnesen,  H.H.,  2011.  Impact  of  curcumin supersaturation  in  antibacterial  photodynamic therapy (aPDT) –effect of cyclodextrin type and amount. Studies on curcumin and curcuminoides XLV. J. Pharmacology. Sci. http://dx.doi.org/10.1002/jps . 23046.
Hegge, A.B., Schuller, R.B., Kristiansen, S., Tønnesen, H.H.,  2008.  In  vitro  release  of  curcumin  from vehicles  containing  alginate  and  cyclodextrin.
Studies of curcumin and curcuminoides XXXIII.
Pharmazie 63, 585–592.
Jawetz, Melnick, Alderberg’s,  2001.  Medical Microbiology,  McGraw-Hill  Companies  Inc. 22nd edition, 235-23. M. Wainwright, “Photodynamic antimicrobial chemotherapy (PACT),” Journal of Antimicrobial Chemotherapy, vol. 42, no. 1, pp. 13–28, 1998.
Niemz,  Markolf  H.  2007. Laser-Tissue  Intractions Fundamentals and Applications Third, Enlarged Edition. Germany: Springer.
Papageorgiu  P  et  al.,  2000.  Phototherapy  with  Blue (415  nm)  and  Red  (660  nm)  Light  in  The Treatment  of  Acne  Vulgaris,  British  Journal  of Dermatology.
Prasad,  Paras  N.  2003.  Introduction  To  Biophotonics. New Jersey: Jhon Wiley & Sons, Inc.
T.  Dai,  Y.Y.  Huang,  M.R.  Hamblin,  Photodynamic therapy for localized infections – state of the art, Photodiag. Photodyn. Ther. 6 (2009) 170–188.
Utama, H. W. (2006). Infeksi nosokomial. Jakarta. Wainwright M, 2009. Photosensitizers in Biomedicines, John Willey & Sons Ltd.
WHO (2004).Prevention of Hospital Acquired Infection, A Practical Guide, 2 http://www.who.int/research/en/emc,  diperoleh 19 maret 2009) nd Edition.
Y. Jiang, A. W. Leung, X. Wang, H. Zhang, and C. Xu, “Effect of photodynamic therapy with hypocrellin  B  on  apoptosis,  adhesion,  and migration  of  cancer  cells,”  International  Journal of Radiation Biology, 2014.
Y. Jiang, A. W. Leung, X. Wang, H. Zhang, and C. Xu, “Inactivation of Staphylococcus aureus by photodynamic action of hypocrellin B,”
Photodiagnosis and Photodynamic Therapy, vol. 10, no. 4, pp. 600–606, 2013.