## UJI SITOTOKSIK TERHADAP SINTESIS DAN KARAKTERISASI MAGNETIK
NANOPARTIKEL CuFe 2 O 4 YANG DILINGKUPI BOVINE SERUM ALBUMIN
(BSA)

## Handajani Sri Usreg, Albari Husein, Fahmi Mochamad Zakki*
Departemen Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga, Surabaya 60115, Indonesia *email: m.zakki.fahmi@fst.unair.ac.id
Received 10 May 2019 Accepted 28 June 2019

## Abstrak
Nanopartikel,  dalam  beberapa  tahun  ini  mendapatkan  perhatian  lebih  dari  peneliti  dan ilmuan dunia, hal ini terlihat banyaknya jurnal maupun penelitian terutama dalam bidang kesehatan. Salah satu contoh aplikasi dalam bidang biomedis sebagai agen pengontras yaitu Magnetic  Resonance  Imaging (MRI).  Nanopartikel  magnetik  CuFe 2 O 4 telah  berhasil disintesis  yang  berasal  dari  bahan  Fe(acac) 3 dan  Cu(acac) 2 dengan  penambahan Bovine Serum  Albumin sebagai nanocarrier .  Sintesis  dilakukan  dengan  mencampurkan  bahan Fe(acac) 3 dan  Cu(acac) 2 ,  kemudian  mereaksikannya  secara solvothermal sehingga membentuk CuFe 2 O 4 . Proses selanjutnya mencampurkan larutan CuFe 2 O 4 dan larutan BSA dalam air kemudian diultrasonikasi. Produk CuFe 2 O 4 -BSA selanjutnya dikarakterisasi dan diuji  ketahanan  terhadap  perubahan  pH  dan  penambahan  garam.  Hasil  uji  menunjukkan bahwa CuFe 2 O 4 -BSA dapat mempertahankan kestabilan, terbukti pada pH 3-12 selama 24 jam dan pada konsentrasi garam 0,5 M masih tetap stabil. Proses sintesis dapat dikatakan berhasil  dilakukan  karena  hasil  XRD  menunjukkan  terdapatnya  senyawa  CuFe 2 O 4 sesuai database JCPDF 34-0425, dimana menunjukkan peak pada posisi pada 34,718º, 35,861º, dan  62,156º.  Hasil  karakterisasi  menggunakan  XRD  menunjukkan  bahwa  peak  produk muncul  pada  posisi  35.3896º  dan  62.6159º.  Hasil  karakterisasi  menggunakan  DLS menunjukkan  bahwa  produk  CuFe 2 O 4 -BSA  memiliki  rata-rata  diameter  partikel  sebesar 153,2 nm. Hasil karakterisasi MSB menunjukkan bahwa CuFe 2 O 4 memiliki momen magnet yang  tinggi  yaitu  sebesar  1,57BM.  Uji  Sitotoksik  CCK-8  menunjukkan  nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 -BSA, secara keseluruhan memiliki sifat yang tidak toksik terhadap sel HeLa dibuktikan dengan nilai derajat viabilitas terendah memiliki nilai 82%.
Katakunci : Nanopartikel Magnetik, CuFe 2 O 4 , Bovine Serum Albumin,Sitotoksik

## Abstract
Nanoparticles, in recent years, have gained more attention from researchers and scientists, things  that  are  visible,  both  in  the  field  of  education  and  healthy.  One  example  on  its applications is a contrast agent on Magnetic Resonance Imaging (MRI). CuFe 2 O 4 magnetic nanoparticles  have  been  successfully  synthesized  from  Fe(acac) 3 and  Cu(acac) 2 with  the addition  of  Bovine  Albumin  Serum  as  a  nanocarrier.  Synthesis  was  done  by  mixing Fe(acac) 3 and Cu(acac) 2 , then only solvothermally forming CuFe 2 O 4 . The mixing process CuFe 2 O 4 and BSA was accomodated using ultrasonic wave. The results show that CuFe 2 O 4 - BSA can maintain stability, proven at pH 3-12 for 24 hours and at 0.5 M salt concentration is still stable. The synthesis process can be said to be successful because the XRD results show  its  existence  according  to  CuFe 2 O 4 according  to  JCPDF  34-0425  database,  which shows peak at position at 34,718º, 35,861º and 62,156º. The characterization results using XRD indicates that the product peak appears at 35.3896º and 62.6159º. The characterization
results using DLS showed that the CuFe 2 O 4 -BSA product had an average diameter of vessel diameter  of  153.2  nm.  The  MSB  characterization  results  show  that  CuFe 2 O 4 has  a  high magnetic  moment  of  1,57  BM.  The  cytotoxic  test  of  CCK-8  shows CuFe2O4-BSA,  as  a whole has non-toxic properties to HeLa cells evidenced by the lowest viability value value of 82%.
Keywords: Magnetic Nanoparticles, CuFe 2 O 4 , Bovine Serum Albumin, Cytotoxic

## Pendahuluan
Nanopartikel didefinisikan sebagai partikel yang memiliki ukuran < 1000 nm. Pengaplikasian nanopartikel dalam kehidupan  seperti:  katalis,  agen  kontras MRI, penarget sel kanker, pembawa obat, biosensor,  mereduksi  polusi,  dan  baterai. Dalam  bidang  biomedis  nanopartikel magnetik  dapat  dimanfaatkan  sebagai sistem  pengangkutan  obat-obatan  (drug delivery), media kontras Magnetik Resonance Imaging (MRI), bahan diagnosis dan terapi kanker. Nanopartikel CuFe 2 O 4 memiliki  struktur  kristal  spinel terbalik.  Selain  berpotensi  memiliki  sifat superparamagnetik kelebihan nanopartikel CuFe 2 0 4 adalah  stabil,  mudah  untuk terbentuk. Nanopartikel magnetik
CuFe 2 O 4 yang  sudah  dilingkupi  albumin dapat  digunakan  sebagai  agen  pengontras dengan  syarat  memiliki  sifat  magnetik, kestabilan  koloid  nanopartikel  terhadap pH dan ionik (untuk mengetahui terjadinya denaturasi  dari  albumin)  serta  suatu senyawa  dikatakan  sebagai  nanopartikel memiliki  ukuran  sekitar  10-1000  nm (Mohanraj dan Chen, 2006). Batasan latar belakang  pada  penelitian  ini  sampai dengan  uji  karakteristik  serta  uji  invitro dari nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 -BSA.

## Metode Penelitian
Alat dan bahan Bahan yang diperlukan dalam penelitian  antara  lain  Feriasetilasetonat [Fe(acac) 3 ]  dengan  konsentrasi  97%, Kupriasetilasetonat  [Cu(acac) 2 ]  dengan konsentrasi 97%, oleilamina (C 18 H 35 NH 2 ) dengan  konsentrasi  70%,  benzil  eter (C 14 H 14 O)  dengan  konsentrasi  98%, Natrium
Klorida (NaCl), Natrium
Hidroksida (NaOH), Asam Klorida (HCl) 37%,  etanol  90%,  n-heksana,  dan  gas nitrogen (N 2 ), Bovine Serum Albumin, sel HeLa  ,  medium  kultur  sel  RPMI,  WST- 8[2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4- nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H- tetrazoliumair  yang  digunakan  adalah akuades.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian adalah alat yang biasa digunakan dilaboratorium , pengaduk magnetik, labu alas bulat leher dua, refluks, pipa bengkok, spatula, pipet tetes, mantel pemanas, kaca arloji,  alat  suntik, syring  filter ,  dan indikator  pH  meter,  wadah  whatman  32- well, mikropipet 200 dan 1000  L. Instrumen yang digunakan dalam penelitian adalah ultrasonikator,oven, s entrifuge , X-Ray  Diffractometer (XRD), Magnetic  Subceptibility  Balance (MSB), Dynamic Light Scattering (DLS) Malvern Zetasizer Nano Series , dan ELISA reader, Incubator.
Sintesis nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4
Nanopartikel magnetik CuFe2O4 dibuat dengan cara mencampurkan 2 mmol Fe(acac) 3 atau  sebanyak  0,7056  g  dan    1 mmol  Cu(acac) 2 atau  sebanyak  0,2615  g dalam larutan 15 mL benzil eter dan 15 mL oleylamine. Larutan campuran itu dipanaskan pada suhu 110°C selama 1 jam dan dipanaskan kembali pada suhu 300°C selama  1  jam.  Campuran  yang  dihasilkan didinginkan  pada  suhu  kamar,  kemudian dicuci dengan etanol 90% dan dipisahkan dengan sentrifugasi (6000 rpm, 25 menit).
Pencampuran nanopartikel magnetik
CuFe 2 O 4 dengan Bovine Serum Albumin Sebanyak  5  mg  nanopartikel  magnetik CuFe 2 O 4 dilarutkan  dalam  0,5  mL  n- heksana. Disisi lain, BSA dilarutkan dalam air  sebanyak  9,5  mL.  Kedua  campuran tersebut  di  ultrasonikasi    selama  2  menit. Suspensi yang dihasilkan dari ultrasonikasi,  kemudian  disentrifugasi pada  4500  rpm  selama  10  menit  untuk mempercepat  pemisahan  fasa  dan  produk yang tidak diinginkan. Dari hasil sentrifugasi  menghasilkan  2  lapisan  yaitu lapisan atas adalah n-heksana dan lapisan bawah  adalah  air  yang  mengandung CuFe 2 O 4 -BSA.  Produk  yang  dihasilkan dilambangkan sebagai CuFe 2 O 4 -BSA.

## Karakterisasi X-ray diffractometer (XRD)
Analisis dengan sinar Cu Kα ( λ = 1,5406 Å)  pada  2  theta  dengan  rentang  sudut antara  10°  hingga  70°.  Pada  karakterisasi dengan X-Ray  Diffractometer (XRD), sampel  digerus  sampai  halus  seperti bubuk,  dimasukkan  dalam  instrumen X- Ray  Diffractometer (XRD),  dan  diradiasi dengan  sinar-X.  Dari  penyinaran  sinar-X menghasilkan  data  yang  berupa  spektrum difraksi  sinar-X  dideteksi  oleh  detektor dan  dicatat  oleh  komputer  dalam  bentuk grafik difraktogram yaitu grafik antara 2ϴ dan intensitas.

## Dynamic light scattering (DLS)
Dynamic  Light  Scattering  ( DLS)  atau peristiwa penghamburan cahaya    adalah pengukuran partikel  yang berukuran kecil yang  digunakan  untuk  menganalisis nanopartikel berdasarkan difusi dari gerak Brown,  dimana  partikel  yang  bergerak secara acak terjadi karena adanya perbedaan elektrisitas.Sampel yang disiapkan  harus  dipastikan  terbebas  dari partikel  yang tidak diinginkan yang dapat berkontribusi  terhadap  hamburan  cahaya. Untuk  memastikannya,  sampel  harus disaring.
.

## Analisa stabilitas koloid
Pada  analisa  stabilitas  koloid,  kami menggunakan  2  analisa,  yang  pertama yaitu  uji  stabilitas  koloid  terhadap  pH dengan cara sebnyak 2 ml sampel CuFe 2 O 4 albumin  dimasukan  kedalam  vial  lalu ditambahkan  NaOH  atau  HCl    sehingga diperoleh  rentan  pH  antara  3-12.  Larutan yang  memiliki  rentan  pH  antara  3-12 diamati  pada  optimasi  waktu  menit pertama, 6, dan 24 jam pada suhu kamar. Kedua  uji  stabilitas  koloid  terhadap penambahan  garam  dengan  ditambahkan NaCl  dengan  variasi  konsentrasi  yaitu tanpa  penambahan  Natrium  Klorida (NaCl);  0,15  M;  0,3  M;  0,5  M  diamati selama menit pertama, 6, dan 24 jam pada suhu kamar.

## Magnetic susceptibility balance (MSB)
Alat  dihidupkan  dan  dibiarkan  selama 10  menit  dan  dikondisikan  sehingga penunjuk R menampilkan nilai 0. Tabung kosong Magnetic  Susceptibility  Balance (MSB)  ditimbang,  beratnya  dinyatakan sebagai  m0  dalam  satuan  gram,  lalu dimasukkan  ke  dalam  sel  uji  dan  harga pada penunjuk  nilai  R dicatat sebagai  R 0 . Sampel  yang  akan  dimasukkan  kedalam tabung ditimbang dinyatakan sebagai m1. Ketinggian  sampel  dalam  tabung  diukur dan dicatat sebagai l.

## Uji Sitotoksik
Uji Sitotoksik  dilakukan pada sel HeLa menggunakan Cell  Counting  Kit-8 .Uji CCK-8  dilakukan  untuk  mengevaluasi metabolisme  sel  terhadap  satu  zat  yang bersifat toksik maupun nontoksik. Pertama mempersiapkan  sel  HeLa  dengan  cara ditumbuhkan  dalam  medium  penumbuh Kemudian  pengujian  sitotoksik  sampel terhadap  sel  HeLa  dengan  mengambil sebanyak  0,1  mL  suspensi  sel  HeLa dimasukkan  ke  dalam  masing-masing sumuran  kemudian  ditambahkan  larutan uji  sebanyak  0,1  ml  dengan  berbagai konsentrasi  mulai  dari  konsentrasi  10 µg/ml sampai 400 µg/ml tiap sumuran.Lalu ditambahkan pereaksi CCK
yang  berupa  WST-8  (5  mg/mL)  dan  sel- selnya diinkubasi selama 4 jam. Selanjutnya  didiamkan  pada  suhu  kamar selama  satu  malam.  Esok  harinya  plat dibaca  dengan  menggunakan  Elisa  plate reader  pada  panjang  gelombang  540  nm. Absorbansi yang diperoleh
dari pengukuran digunakan dalam menentukan persentase sel yang masih hidup (viabilitas sel).

## Hasil dan Pembahasan
Sintesis Nanopartikel Magnetik CuFe 2 O 4 Nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 dibuat dengan mencampurkan 2 mmol  Fe(acac) 3 atau  sebanyak  0,706  g  dan    1  mmol Cu(acac) 2 atau  sebanyak  0,261  g  dalam larutan  15  mL  benzil  eter  dan  15  mL oleylamine . Benzil eter didalam penelitian ini  bertindak  sebagai  pelarut  sedangkan oleylamine bertindak  sebagai  sebagai pelindung  ligan  yang  dapat  menstabilkan reaksi  selama  proses  reaksi  berlangsung (Xu et  al., 2009).  Campuran  tersebut menghasilkan  warna  hitam  kecoklatan yang kemudian dimasukkan didalam  labu bulat  leher  2,  direfluks,  diaduk  dengan menggunakan  strirer,  dipanaskan  pada suhu 110ºC selama 1 jam dan pemanasan dilanjutkan  dengan  menggunakan  suhu 300ºC selama 1 jam.
Gambar 1 . Endapan nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4
Larutan  yang  dihasilkan  didinginkan pada  suhu  kamar  dan  setelah  dingin campuran  dipindahkan  ke  2  tabung sentrifus  dan  dicuci  dengan  etanol
sebanyak  1  kali  kemudian  dipisahkan dengan  sentrifugasi  (6000  rpm,  25  menit, Gambar  1).  Hasil  dari  larutan  yang  telah disentrifugasi  adalah  terjadi  pemisahan antara endapan dan larutan yang kemudian endapan tersebut dioven pada suhu 110ºC selama 2 jam.
Percampuran Nanopartikel Magnetik
CuFe 2 O 4 dengan  Bovine  Serum  Albumin (BSA)
Percampuran  nanopartikel  magnetik CuFe 2 O 4 dengan Bovine  Serum  Albumin (BSA) bertujuan agar nanopartikel magnetik  CuFe 2 O 4 yang  pada  mulanya tidak  larut  dalam  air  menjadi  larut  dalam air.  Menyiapkan  5  mg  nanopartikel magnetik  CuFe 2 O 4 dilarutkan  dalam  0,5 mL  n-heksana.  Disisi  lain,  disiapkan  20 mg Bovine  Serum  Albumin (BSA)  yang dilarutkan  dalam  akuades  sebanyak  9,5 mL.  Larutan  BSA  dengan  air  dan  larutan nanopartikel  n-heksana  dicampurkan  dan membentuk  2  lapisan  yang  tidak  saling bercampur, sebagaimana pada Gambar 2.
Gambar  2 .  Campuran  laurtan  BSA  dan nanopartikel
Kedua  larutan  yang  tidak  saling bercampur tersebut kemudian diultrasonikasi  dengan  frekuensi  80% (1000 W, 20 kHz) selama 2 menit. Fungsi
dari
ultrasonikasi adalah untuk mencampurkan bahan dengan menggunakan gelombang ultrasonik dengan frekuensi yang tinggi,
sebagaimana ditunjukkan pada Gambar 3.
Gambar 3 .
Hasil ultrasonikasi
CuFe 2 O 4 dengan BSA
Suspensi yang dihasilkan dari ultrasonikasi,  kemudian  disentrifugasi pada    4500  rpm  selama  10  menit  untuk mempercepat  pemisahan  fasa  dan  produk
yang  tidak  diinginkan,  sebagaimana ditunjukkan pada Gambar 4.
Gambar  4. Hasil  sentrifugasi  CuFe 2 O 4 - BSA
Karakterisasi x – ray diffroctometer (XRD)
Hasil karakterisasi nanopartikel magnetik  CuFe 2 O 4 didapatkan  berupa difraktogram.  Pada  penelitian  ini  sinar radiasi yang digunakan adalah kα1=1,54060  Ǻ,  kα2=  1,54443  Ǻ,  kβ= 1,39225  Ǻ,  dan  2θ  dengan  rentan  sudut antara  10º-70º.  Terdapat  2 peak tertinggi yang  diperoleh  berada  pada  35.3896º  dan 62.6159º (Gambar 5).
Gambar 5. Hasil difraktogram nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4
Selanjutnya Peak yang  telah  terbentuk dibandingkan dengan standar pada database  JCPDF  34-0425(Gambar  6). Standar  pada  database  JCPDF  34-0425 yang menunjukkan adanya terdapat 3 peak tertinggi  yang  muncul  pada  34,718º, 35,861º, dan 62,156º.
Kesamaan peak yang  muncul  antara hasil  karakterisasi  nanopartikel  magnetik CuFe 2 O 4 dengan  standar  nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 pada database JCPDF
34-0425 menunjukkan bahwa nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 telah terbentuk, namun hasil  yang  didapatkan  belum  maksimal dikarenakan  tidak  ada peak yang  muncul pada  34,718º.  Terdapat  beberapa peak yang  tidak  beraturan,  sehingga  data  yang didapatkan  masih  terdapat  senyawa  yang bersifat  amorf.  Senyawa  yang  masih bersifat amorf dapat terjadi karena adanya pemanasan  yang  tidak  merata  selama proses sintesis.
Gambar 6. Difraktogram  hasil karakterisasai  dengan standar pada database JCPDF 34- 0425.
Peak tertinggi  pada  nanopartikel  yang dilingkupi  albumin  BSA  berada  pada 35.5884º  dan  62.6228º  (Gambar  7) kemudian  dibandingkan  dengan peak
CuFe 2 O 4 .  Kesamaan  peak  menunjukan bahwa albumin BSA tidak mempengaruhi kristal dari nanopartikel CuFe 2 O 4
Gambar 7 . Hasil difraktogram nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 -BSA 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2Theta (°) 0 100 200 300 400 In te n s it y ( c o u n ts )

## Karakterisasi  dynamic  light  scattering (DLS)
Sampel  yang  dikarakterisasi  dengan menggunakan  instrumen Dynamic  Light
Scattering (DLS)  adalah  nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 , Bovine Serum Albumin (BSA),  dan  CuFe2O4-BSA  (Gambar  8  – 10).
Gambar 8 . Spektra nanopartikelmagnetik CuFe 2 O 4
Gambar 9. Spektra BSA
Uji  Dynamic  Light  Scattering (DLS) yang berfungsi  untuk  menentukan ukuran partikel  rata-rata  untuk  CuFe 2 O 4 sebesar 18,44  nm, Bovine  Serum  Albumin (BSA) sebesar  402,4  nm,  dan  CuFe 2 O 4 -BSA adalah  sebesar  153,2  nm.  CuFe 2 O 4 -BSA memiliki ukuran yang lebih kecil daripada BSA  dikarenakan  pada  saat  ultrasonikasi mengalami tekanan.

## Karakterisasi analisis stabilitas koloid
Pada analisa stabilitas koloid digunakan 2  analisa,  yaitu  uji  stabilitas  koloid terhadap  pH,  dan    garam  (NaCl).  Uji stabilitas  koloid  terhadap  pH  bertujuan untuk  mengetahui  kestabilan  pH  koloid CuFe 2 O 4 -BSA.Analisa  yang  kedua  yaitu uji  stabilitas  koloid  terhadap  ionik  yang bertujuan  untuk  mengetahui  kestabilan dari koloid CuFe 2 O 4 -BSA pada konsentrasi garam (NaCl).
Gambar 11 . CuFe 2 O 4 -BSA pada rentang pH 3-12 saat (a) menit awal, (b) 6 jam,  (c) 24 jam.
Tidak  adanya  perubahan  warna  dan tidak terdapat endapan atau gumpalan pada rentang  pH  3-12  (Gambar  11)  dengan rentan waktu menit pertama, 6 jam, dan 24
jam  pada  suhu  kamar  menunjukan  tidak mengalami denaturasi protein.
Gambar 12 . CuFe 2 O 4 -BSA pada konsentrasi garam tanpa penambahan garam (NaCl); (1) 0,15 M; (2) 0,3 M; (3) 0,5 M pada saat (a) menit pertama, (b) 6 jam, (c) 24 jam.
Pada Gambar 12 tidak adanya perubahan  warna  dan  tidak  terdapat endapan atau gumpalan pada penambahan garam  (NaCl)  dengan  konsentrasi  yang beragam  dalam  kurun  waktu  menit pertama,  6  jam,  dan  24  jam  pada  suhu kamar  menunjukan  tidak  mengalami denaturasi protein.

## Karakterisasi analisis kemagnetan
Dari  data  yang  telah  didapatkan dilakukan perhitungan untuk  memperoleh nilai  momen  magnet  efektif  (μeff).  Nilai momen magnet efektif (μeff) untuk Bovine Serum  Albumin (BSA)  adalah  sebesar  - 6,58  10 -3 BM,  sesuai  dengan  penelitian yang  telah  dilakukan  oleh  (Wang et  al .,
2008)  yang  menyebutkan  bahwa Bovine
Serum  Albumin (BSA)  memiliki  momen magnetik  yang  bernilai  negatif  (Tabel  1). Adanya nilai momen magnet efektif (μeff) yang bernilai negatif maka dapat dikatakan bahwa Bovine Serum Albumin (BSA) tidak memiliki sifat magnet.
Nilai  momen  magnet  efektif  (μeff) untuk  nanopartikel  magnetik  CuFe 2 O 4 adalah  sebesar  1,57  BM  sedangkan  nilai momen  magnet  efektif  (μeff)  untuk nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 - BSAadalah  1,65  BM.  Hal  tersebut  dapat dikatakan  bahwa  nanopartikel  magnetik CuFe 2 O 4 memiliki  sifat  magnet  karena nilai  momen  magnet  efektif  (μeff)nya bernilai  positif,  nanopartikel  CuFe 2 O 4 yang  diselimuti  oleh  BSA  juga  memiliki nilai positif.
Tabel 1 . Parameter-parameter magnetik dari sampel Senyawa C Balance 1(cm) R 0 R 1 M 0 M 1 Suhu µeff Bovine Serum Albumin (BSA) 1,1 1,5 -188  -203 0,8069 0,8965 303 -6,58.10 -3 Nanopart ikel
Magneti
k CuFe 2 O 4 1,1 1,1 -178 1 0,8185 0,8689 303 1,57
Nanoparti
kel Magnetik
CuFe 2 O 4 –BSA
1,1 1,1 -192 1 0,8166 0,8788 303 1,65

## Uji Sitotoksik
Sebanyak  0,1  mL  suspensi  sel  HeLa dimasukkan  ke  dalam  masing-masing sumuran  kemudian  ditambahkan  larutan uji  sebanyak  0,1  ml  dengan  berbagai konsentrasi  mulai  dari  konsentrasi  10 µg/ml  sampai  400  µg/ml  tiap  sumuran, sehingga  total  volume  satu  sumuran tersebut  adalah  0,2  mL.  Selanjutnya diinkubasi  pada  suhu  37°C,  CO 2 5% selama 24 jam.  Setelah diinkubasi 24 jam,
masing-masing sumuran dikeluarkan medianya sebanyak 170 µl. Suspensi yang tersisa 30 µl sengaja       ditinggalkan agar sel-sel  yang  ada  di  dalam  plat  tidak  ikut terbuang. Kemudian ditambahkan pereaksi WST-8    (5  mg/mL)  ke  masing-masing sumur  lalu  diinkubasi  selama  4  jam didalam inkubator. Selanjutnya didiamkan pada suhu kamar selama satu malam. Esok harinya  plat  dibaca  dengan  menggunakan

## Elisa plate reader pada panjang gelombang
540 nm.
Gambar 13. Grafik % viabilitas terhadap variasi konsentrasi CuFe 2 O 4 -BSA
Viabilitas adalah nilai yang
mengindikasikan  terhadap  adanya  sel-sel yang masih hidup. Dalam penelitian yang dilakukan,  nilai  viabilitas  ditentukan  dari absorbansi  yang  kemudian  dibandingkan antara nilai viabilitas kontrol dengan nilai viabilitas  berbagai  konsentrasi.  Jika  nilai viabilitas  konsentrasi  mendekati  nilai viabilitas kontrol maka sampel menunjukan bahwa masih banyak sel yang masih hidup. Dari Gambar 13 dapat dilihat bahwa derajat viabilitas terendah memiliki nilai  82%    jika  kurang  dari  60%  maka Nanopartikel  Magnetik  CuFe 2 O 4 -BSA yang  dihasilkan  bersifat  toksik  dan  dapat membunuh sel hidup.

## Kesimpulan
Bovine  Serum  Albumin  (BSA)  dapat digunakan sebagai transfer fasa dibuktikan dengan kedua larutan yang mulanya tidak saling  bercampur. X-Ray  Diffractometer (XRD)  yang  berfungsi  untuk  mengetahui struktur  kristal  dengan  menghasilkan  2 peak  tertinggi  pada  posisi  35.3896º  dan 62.6159º, uji  Dynamic  Light  Scattering
(DLS)  yang  berfungsi  untuk  menentukan ukuran  partikel  rata-rata  untuk  CuFe 2 O 4 sebesar 18,44 nm, Bovine Serum Albumin (BSA)  sebesar  402,4  nm,  dan  CuFe 2 O 4 - BSA adalah sebesar 153,2 nm dan analisa kemagnetan dengan menggunakan Magnetic  Susceptibility  Balance (MSB) yang  berfungsi  untuk  mengetahui  nilai momen  magnet  efektif  (μeff)CuFe 2 O 4 yaitu  sebesar  1,57BM.  Hasil  stabilitas koloid  CuFe 2 O 4 -BSA  terhadap  Ph  dan Ionik  menunjukan  tidak  adanya  endapan sehingga  tidak  mengalami  denaturasi protein.
Uji Sitotoksik CCK-8
menunjukkan nanopartikel magnetik
CuFe 2 O 4 -BSA, secara keseluruhan memiliki  sifat  yang  tidak  toksik  terhadap sel  HeLa  dibuktikan  dengan  nilai  derajat viabilitas terendah memiliki nilai 82%.

## Saran
Sintesis dan bermacam-macam karaterisasi
nanopartikel magnetik CuFe 2 O 4 -BSA  serta  uji  sitotoksik  telah terbukti  dalam  penelitian  ini.  Namun,
0 20 40 60 80 100 V iabi lit as S el l (% ) Konsentrasi (  g/mL)
Kontrol     10      25      50      100     150    300    400
pengembangan  nanopartikel  masih  dapat ditingkatkan dengan melakukan uji invivo

## Daftar Pustaka
Buzea, C., Blandino, I.I.P., dan Robbie, K.
2007. Nanomaterials and Nanoparticles : Sources and Toxicity. Biointerphase ,2(4):
MR17-MR71.
Bassen,  H.,  Schaefer,  D.  J.,  Zaremba,  L., Bushberg,  J.,  Ziskin.  M.,  2005,
Exposure  of  Medical  Personnel  to Electromagnetic Fields from Open Magnetic Resonance Imaging Systems, Health  Phys, 89:  684– 689.
Kumar,  A.S;  Thulasiram,  B.;  Laxmi,  S.
Bala; Rawat, V.S.; dan Sreedhar B. 2014. Magnetic CuFe 2 O 4 Nanoparticles : A Retrievable Catalyst  for Oxidative Amidation  of  Aldehydes  with Amine Hydrochloride Salts, Tetrahedron, 70: 6059-6067. Made, K. I., 1998, Sintesis dan Karakterisasi  Spektra  Inframerah
Kompleks  Asetilasetonato  M(II),
ISJD , 31: 32-43.
Mohanraj,  U.  J.,  Chen,  Y.,  2006,
Nanoparticles - A Review. Tropical Journal of Pharmaceutical  Research ,  5(1):
561-573.
Nicholson,  J.P.;  Wolmaran,  M.R.,  Pak.;
G.R. 2000.The Role of Albumin in Critical  Illness, British  Journal  of Anaesthesia , 85: 599-610.
Richert, S. A.,Tsang, P. K. S., Sawyer, D. T.,  1989,  Ligand-Centered  Redox
Processes for Manganese, Iron and
Cobalt,  MnL3,  FeL3,  and  CoL3,
Complexes (L = acetylacetonate, 8- quinolinate, picolinate, 2,2′bipyridyl, 1,10-phenanthroline) and for Their Tetrakis(2,6dichlorophenyl)Porphi nato Complexes [M(Por)], Inorganic Chemistry, 28(12):
2471-2475 .
Ruth,  D.,  Lorella,  I.,  2005,  Dendrimer Biocampatibility  and  Toxicity, Advanced  Drug  Delvery  Reviews
57: 2116-2129.
Xu, Z., Shen, C., Hou, Y., Gao, H., Sun, S.,
2009, Oleylamine as Both Reducing Agent and Stabilizer in A Facile  Synthesis  of  Magnetite Nanoparticles, Chemistry of Materials , 21(9), 1778-1780.