## ISSN: 0215-7950

## Volume 19, Nomor 3, Mei 2023
Halaman 99–110 DOI: 10.14692/jfi.19.3.99–110
Mekanisme Antagonisme  Cendawan  Entomopatogen terhadap Fusarium oxysporum f. sp. cubense Penyebab Penyakit Panama Pisang
Antagonistic Mechanism of Entomopathogenic Fungi Against Fusarium oxysporum f. sp. cubense,

## The Causal Agents of Banana’s Panama Disease
Sri Listiyowati * , Tya Rustiani, Gayuh Rahayu Institut Pertanian Bogor, Bogor 16880

## ABSTRAK
Fusarium oxysporum f. sp. cubense merupakan cendawan tular tanah penyebab penyakit panama pada tanaman pisang. Agens hayati dari kelompok cendawan telah banyak dilakukan untuk mengendalikan penyakit tanaman.  Oleh sebab itu, penelitian ini bertujuan mengidentifikasi empat koleksi cendawan entomopatogen berdasarkan pada ciri morfologinya dan mengevaluasi mekanisme antagonismenya terhadap F. oxysporum f. sp. cubense IPBCC 19 1472 . Isolat cendawan entomopatogen dengan kode PS 4, PS 9, PS 11  berasal dari kawasan Situ Gunung, Sukabumi, Jawa Barat dan isolat KRC berasal dari Kebun Raya Cibodas, Jawa Barat. Identifikasi  cendawan  dilakukan  berdasarkan  ciri  morfologi pada medium agar-agar dekstrosa kentang. Mekanisme antagonistik diteliti menggunakan metode biakan ganda dan sebagai kontrol digunakan biakan tunggal F. oxysporum f. sp. cubense . Pengamatan dilakukan terhadap daya hambat cendawan entomopatogen dan pertumbuhan koloni F. oxysporum f. sp. cubense .  Semua  cendawan  entomopatogen  tidak  dapat  diidentifikasi  secara  morfologi  karena tidak bersporulasi. Pertumbuhan koloninya lebih lambat daripada F. oxysporum f. sp. cubense . Semua cendawan entomopatogen menghambat F. oxysporum f. sp. cubense melalui mekanisme kompetisi ruang. Isolat KRC memiliki aktivitas antagonisme paling besar, diikuti berturut-turut oleh isolat PS 9, PS 11, dan PS 4. F. oxysporum f. sp. cubense membentuk klamidospora sebagai respons terhadap cendawan entomopatogen isolat PS 9 dan vakuolisasi ketika berinteraksi dengan tiga isolat cendawan entomopatogen lainnya .
Kata kunci: biakan ganda, daya hambat, klamidospora, patogen, vakuolisasi

## ABSTRACT
Fusarium oxysporum f. sp. cubense is a soil-borne fungus that causes Panama disease in banana plants. Fungus biological agents have been widely used to control plant diseases. Therefore, this study aimed to identify four collections of entomopathogenic fungi based on their morphological characteristics and evaluate their antagonism mechanism against F. oxysporum f. sp. cubense IPBCC 19 1472. The entomopathogenic fungus isolates with codes PS 4, PS 9, PS 11 came from the Situ Gunung area, Sukabumi, West Java and KRC isolate came from the Cibodas Botanical Gardens, West Java. Identification of the fungus was carried out based on morphological characteristics on potato dextrose agar medium.   While the antagonistic mechanism against F. oxysporum f. sp. cubense was studied

## PENDAHULUAN
Pisang ( Musa spp.) merupakan salah satu buah yang memiliki nilai gizi dan ekonomi, serta banyak dikonsumsi masyarakat. Produksi pisang di Indonesia hingga tahun 2015 berfluktuasi  dengan  rata-rata  pertumbuhan mencapai 4.16% per tahun (Pusat Data dan Sistem Informasi Pertanian 2016). Salah satu kendala produksi pada tanaman pisang di Indonesia ialah penyakit layu fusarium. Penyakit ini disebabkan oleh Fusarium oxysporum f. sp. cubense (Buddenhagen 2009, Dita et al . 2018, Rahayu et al. 2020a, 2020b).
Fusarium oxysporum f. sp. cubense merupakan patogen tular tanah yang mampu bertahan dalam jangka waktu lama dengan membentuk klamidospora. Cendawan ini menyerang berbagai fase pertumbuhan pisang, mulai dari plantlet, anakan sampai tanaman dewasa. Bahan tanam yang berasal dari tanaman sakit dapat juga menjadi sumber penularan. Massa miselium F. oxysporum f. sp. cubense pada tanaman pisang sakit menyumbat jaringan pembuluh xilem (Dita et al . 2018) dan menganggu aliran air dan mineral (Ruzicka et al . 2015). Gejala awal serangannya ialah daun tua menguning. Kolonisasi patogen akan merusak lebih banyak jaringan pembuluh dan menunjukkan gejala layu pada tanaman, selanjutnya tanaman yang terinfeksi ini akan mati. Pengendalian patogen tanaman umumnya menggunakan pestisida sintetik yang dapat menyebabkan kerugian bagi manusia dan lingkungan, resistensi, resurgensi, dan ledakan hama sekunder. Oleh karena itu perlu dicari alternatif pengendalian yang aman dan ramah lingkungan. Cendawan
entomopatogen Beauveria sp. dilaporkan sebagai antagonis terhadap berbagai fitopatogen secara in vitro (Deb et al . 2017), seperti menghambat pertumbuhan F. solani patogen melalui mekanisme antibiosis (Halwiyah et al. 2019) dan memiliki aktivitas anticendawan yang efektif terhadap F. oxysporum penyebab penyakit layu pada tanaman tomat (Culebro-Ricaldi et al. 2017). Oleh sebab itu, cendawan entomopatogen yang bersifat antagonis terhadap patogen tanaman dapat dijadikan salah satu alternatif pengendalian biologi cendawan patogen (Vega et al . 2009). Cendawan entomopatogen koleksi Laboratorium Mikologi, Departemen Biologi  belum  pernah  diidentifikasi  dan dievaluasi potensi antagonisnya. Oleh sebab itu,  penelitian  ini  bertujuan  mengidentifikasi empat galur cendawan entomopatogen dan mengevaluasi mekanisme antagonismenya terhadap F. oxysporum f. sp. cubense.

## BAHAN DAN METODE
Biakan Cendawan Cendawan entomopatogen yang diuji merupakan koleksi Laboratorium Mikologi, Departemen Biologi, FMIPA, IPB, yaitu galur PS 4, PS 9 dan PS 11 berasal dari kawasan Situ Gunung, Sukabumi, serta KRC berasal Kebun Raya Cibodas, Cianjur, sedangkan cendawan patogen yang digunakan ialah Fusarium oxysporum f. sp. cubense IPBCC 19 1472.
Karakterisasi Cendawan Entomopatogen dan Fusarium oxysporum f. sp. cubense Cendawan diinkubasi pada medium agar- agar dekstrosa kentang (ADK) selama 14 hari dan diamati morfologinya. Pengamatan
using dual culture method and a single culture of F. oxysporum f. sp. cubense was used as control. The entomopathogenic fungi grew slower than F. oxysporum f. sp. cubense. They produced no spore, so their identity cannot be conclusive.  All entomopathogenic fungi inhibited the growth of pathogen through space competition. KRC isolate showed the highest inhibition towards F. oxysporum f. sp. cubense followed in order by PS 9, PS 11, and PS 4. F. oxysporum f. sp. cubense formed chlamydospores during interaction with PS 9, while vacuolization when in contact with the other three entomopathogenic fungal isolates.
Key words: chlamydospores, dual cultures, inhibition, pathogen, vacuolization
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Listiyowati et al.
makroskopi meliputi bentuk, warna dan tekstur koloni, sebaran miselium (aerial atau nonaerial), serta pertumbuhan koloninya. Struktur cendawan diamati secara mikroskopi menggunakan preparat Riddle (1950) berumur 4-7 hari. Preparat disiapkan dalam larutan Shear’s dan diamati menggunakan mikroskop majemuk yang terhubung dengan kamera mikroskop pada perbesaran 400× dan 1000×. Struktur soma dan reproduksi diamati sebanyak 30 pengukuran menggunakan aplikasi Betaview versi 3.7.
Uji Antagonisme in Vitro dengan Metode Biakan Ganda Uji antagonisme antara 4 galur cendawan entomopatogen dan cendawan patogen F. oxysporum f. sp. cubense disusun dalam rancangan acak lengkap.  Masing masing perlakuan diulang sebanyak 5 kali. Uji antagonis antara cendawan entomopatogen dan cendawan patogen dilakukan menggunakan metode biakan ganda (Dennis dan Webster 1971) pada medium ADK di dalam cawan Petri ( Ɵ 9 mm). Cendawan entomopatogen F. oxysporum f. sp. cubense ditumbuhkan 7 hari lebih awal, kemudian cendawan patogen ditumbuhkan dalam cawan yang sama. Inokulum cendawan entomopatogen diletakkan pada jarak 30 mm dari tepi cawan dan cendawan patogen diinokulasikan berhadapan dengan cendawan entomopatogen pada jarak 30 mm (Gambar 1).
Biakan diinkubasi pada suhu ruang selama 14 hari dan diameter koloni cendawan patogen yang berpasangan dengan cendawan entomopatogen diamati pertumbuhannya. Biakan tunggal F. oxysporum f. sp. cubense digunakan sebagai kontrol. Daya hambat cendawan entomopatogen dihitung menggunakan rumus Fokkema: (1973):
Daya hambat (%) = r1-r2 r1 × 100%, dengan r1, jari-jari koloni F. oxysporum f. sp. cubense yang tumbuh berlawanan dengan koloni cendawan entomopatogen; dan r2, jari-jari koloni F. oxysporum f. sp. cubense yang tumbuh ke arah cendawan entomopatogen.
Selain itu, pertumbuhan koloni cendawan patogen F. oxysporum f. sp. cubense yang berpasangan dengan cendawan entomopatogen juga diukur. Pertumbuhannya dinyatakan sebagai rataan dari diameter koloninya (Gambar 2) yang dihitung menggunakan rumus sebagai Achmad dan Mulyaningsih (2015):
Diameter koloni (mm) = W+X+Y+Z 4 , dengan
W, X, Y dan Z, berturut-turut sebagai sumbu pengukuran diameter koloni.
Interaksi hifa cendawan diamati dengan teknik biakan preparat (Qiu et. al 2005). Sepotong lempeng ADK berdiameter 5 mm diletakkan pada bagian tengah kaca objek steril. Biakan cendawan entomopatogen dan
Gambar 1  Uji biakan ganda cendawan entomopatogen (CE) dan cendawan patogen (CP): Fusarium oxysporum f. sp. cubense. Inokulum CE dan CP, masing-masing berdiameter 5 mm.
Gambar 2 Skema pengukuran untuk memperoleh rataan pertumbuhan diameter koloni cendawan Fusarium oxysporum f. sp. cubense pada waktu dipasangkan dengan cendawan entomopatogen.
cendawan patogen ditumbuhkan berhadapan pada tepi lempeng ADK, lalu ditutup dengan kaca penutup steril. Kontrol dibuat dengan menumbuhkan cendawan patogen F. oxysporum f. sp. cubense saja.  Masing-masing kaca objek diletakkan di dalam cawan steril yang berisi kertas lembap steril dan diinkubasi pada suhu ruang (25–28 ℃) selama 3–5 hari. Pengamatan bentuk parasitisme dilakukan bila terjadi pertemuan kedua biakan pada ±3 hari inkubasi. Kaca penutup dipindahkan ke kaca objek steril yang ditetesi larutan Shear’s dan diamati parasitismenya menggunakan mikroskop pada perbesaran 400× dan 1000×.
Analisis Data Data dianalisis menggunakan varian one way anova pada selang kepercayaan 95% dengan program SPSS versi 25.0. Hasil analisis ragam yang berbeda nyata diuji lanjut dengan uji Tukey pada taraf nyata 5%.

## HASIL
Cendawan Entomopatogen Cendawan entomopatogen galur PS 4, PS 9, PS 11, dan KRC memiliki karakter makroskopis dan mikroskopis berbeda (Tabel 1 dan 2, Gambar 3 dan 4). Semua galur memiliki hifa septat, hialin, dengan diameter 1.90-2.26 µm, tetapi tidak ditemukan struktur reproduksinya (konidium). Konidium tidak ditemukan pada cendawan entomopatogen menyebabkan cendawan tidak dapat di- identifikasi  secara  morfologi  sehingga nama cendawan tidak dapat ditentukan. Ciri
cendawan entomopatogen ini sangat berbeda dari ciri F. oxysporum f. sp. cubense yang memiliki warna koloni putih kapas dengan semburat merah muda hingga ungu pada medium ADK, tekstur permukaan koloni mengapas dengan sebaran miselium aerial atau tidak rata. Pertumbuhan diameter koloni 81–87 mm dalam kurun waktu 14 hari inkubasi pada suhu ruang (28 ± 2 ℃). Hifa F. oxysporum f. sp . cubense bersekat, hialin dan berdiameter 3.41  µm  (Gambar  5a),  serta  memiliki  fialid (Gambar 5b). Bentuk makrokonidiumnya sedikit melengkung seperti perahu dengan ujung runcing dan berdiameter 8.35 µm (Gambar 5c), mikrokonidiumnya berbentuk bulat telur atau lonjong dan berdiameter 4.88 µm (Gambar 5d). Adapun pertumbuhan cendawan entomopatogen lebih lambat dibandingkan dengan F. oxysporum f. sp. cubense , yakni hanya mencapai kurang dari separuhnya (Gambar 6).
Potensi Antagonisme Cendawan Entomopatogen terhadap Fusarium oxysporum f. sp. cubense Jari-jari koloni cendawan patogen F. oxysporum f. sp. cubense yang tidak mengarah pada koloni semua cendawan entomopatogen
Tabel 1  Morfologi koloni galur cendawan entomopatogen pada medium agar-agar dekstrosa kentang berumur 14 hari
Galur cendawan entomopatogen Warna pada permukaan Bentuk Sebaran miselium Tekstur Diameter (mm) Atas Bawah PS 4 Putih Putih  krem sampai kekuningan Bulat Tidak rata / aerial Mengapas 35–37 PS 9 Putih Putih krem sampai kekuningan Bulat Rata / nonaerial Mengapas 42–44 PS 11 Putih Putih krem sampai kekuningan Bulat Tidak rata / aerial Mengapas 37–44 KRC Putih Putih krem dengan bagian pinggir mencokelat Bulat Tidak rata / aerial Mengapas 52–67 Tabel 2  Diameter hifa cendawan entomopatogen Galur cendawan entomopatogen Diameter (µm) PS 4 2.26 PS 9 1.97 PS 11 2.10 KRC 1.90
Jurnal Fitopatologi Indonesia
(r1) memiliki nilai rata-rata yang lebih panjang dibandingkan dengan jari-jari pertumbuhannya yang ke arah cendawan entomopatogen (r2) (Tabel 3). Hal ini mengindikasikan bahwa semua cendawan entomopatogen mampu menghambat koloni F. oxysporum f. sp. cubense. Galur KRC paling kuat menghambat F. oxysporum f. sp. cubense dibandingkan dengan cendawan entomopatogen lainnya, yakni hingga mencapai 67.18% (Tabel 4).
Uji antagonisme menunjukkan bahwa miselium kedua koloni cendawan yang dipasangkan saling bertemu pada hari ke- 14 (Gambar 7).  Koloni cendawan patogen tumbuh menutupi cendawan PS 4 sehingga pertumbuhan koloni PS 4 menjadi terhambat. Koloni F. oxysporum f. sp. cubense tumbuh mengelilingi koloni PS 9, begitu pula dengan koloni PS 11. Sebaliknya, koloni galur KRC tumbuh menutupi koloni F. oxysporum f. sp .
Galur cendawan entomopatogen
Gambar 3  Penampakan koloni cendawan entomopatogen berumur 14 hari pada medium agar- agar dekstrosa kentang. a, permukaan atas dan b, permukaan bawah.
Gambar 4  Morfologi mikroskopi struktur soma (hifa septat) galur cendawan entomopatogen. a, PS 4; b, PS 9; c, PS 11; dan d, KRC.
10 µm 10 µm
10 µm
10 µm a b
c d a b c d 10 µm 10 µm
10 µm
10 µm
Gambar 5  Morfologi mikroskopi struktur soma dan reproduksi cendawan patogen Fusarium oxysporum f. sp. cubense . a,  hifa septat; b, fialid; c, makrokonidium bersekat; d, mikrokonidium.
Pertumbuhan miselium (mm)

## Hari inkubasi
Gambar 6  Pertumbuhan miselium masing-masing galur cendawan entomopatogen serta Fusarium oxysporum f. sp. cubense pada medium agar-agar dekstrosa kentang pada suhu ruang.
, PS 4; , PS 9; , PS 1; , KRC; dan
, Fusarium oxysporum f. sp. cubense.
Tabel 3  Jari-jari koloni Fusarium oxysporum f. sp. cubense yang dipasangkan dengan cendawan entomopatogen pada medium agar-agar dekstrosa kentang pada umur 14 hari
Galur cendawan
F. oxysporum f. sp. cubense (cm) r1 r2 PS 4 3.00 2.66 PS 9 3.00 1.70 PS 11 2.98 2.56 KRC 2.45 0.43 Fusarium oxysporum f. sp. cubense 3.00* 3.00* Keterangan: r1, jari-jari koloni F. oxysporum f. sp. cubense berlawanan terhadap koloni cendawan antagonis; r2, jari-jari koloni F. oxysporum f. sp. cubense yang tumbuh ke arah cendawan antagonis. *, jari-jari koloni F. oxysporum f. sp. cubense yang ditumbuhkan sendiri.
Tabel 4  Daya hambat cendawan entomopatogen terhadap  pertumbuhan  koloni Fusarium oxysporum f. sp. cubense pada hari ke- 14 setelah inkubasi Galur cendawan entomopatogen Daya hambat  (%) PS 4 18.37 ± 2.09 c PS 9 31.86 ± 2.08 b PS 11 21.72 ± 2.39 c KRC 67.18 ± 2.62 a
Keterangan: Angka pada kolom yang sama dan diikuti huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan nyata berdasarkan uji Tukey pada α 5%.
PS 4 PS 9
PS 11 KRC
Gambar 7  Interaksi antara empat galur cendawan entomopatogen dan cendawan patogen Fusarium oxysporum f. sp. cubense pada masa inkubasi 14 hari . CE, cendawan entomopatogen; dan CP,  cendawan patogen .
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Listiyowati et al. cubense dan menghambat pertumbuhan F. oxysporum f. sp. cubense .
Koloni F. oxysporum f. sp. cubense yang dipasangkan dengan galur KRC memiliki rata- rata pertumbuhan diameter sebesar 20.9 mm dan berbeda nyata terhadap F. oxysporum f. sp. cubense yang ditumbuhkan sendiri (kontrol), maupun terhadap masing-masing F. oxysporum f. sp. cubense yang ditumbuhkan dengan tiga cendawan entomopatogen lainnya (Tabel 5). Rata-rata pertumbuhan diameter koloni F. oxysporum f. sp. cubense kontrol sebesar 55.5 mm. Hal ini mengindikasikan bahwa pertumbuhan koloni F. oxysporum f. sp. cubense yang dipasangkan dengan galur KRC menjadi terhambat.   Sebaliknya, koloni F. oxysporum f. sp. cubense yang dipasangkan
dengan galur PS 4 dan PS 9 tidak berbeda nyata terhadap F. oxysporum f. sp. cubense yang ditumbuhkan sendiri (kontrol), dengan rata-rata diameter pertumbuhan berturut-turut sebesar 48.6 mm dan 48.7 mm. Galur PS 4 dan PS 9 tidak menghambat F. oxysporum f. sp. cubense . Perubahan morfologi hifa F. oxysporum f. sp. cubense tampak dari pengamatan mikroskopis yang disebabkan oleh kehadiran cendawan entomopatogen (Gambar 8). Hifa F. oxysporum f. sp. cubense yang dipasangkan dengan galur PS 4, PS 11, dan KRC menunjukkan ada vakuolisasi pada hifa F. oxysporum f. sp. cubense (Gambar 8b, 8c-e, 8f-g). Hifa F. oxysporum f. sp. cubense yang dipasangkan dengan galur PS 9 membentuk klamidospora pada bagian terminal (Gambar 8h).
Tabel 5 Rata-rata pertumbuhan diameter koloni Fusarium oxysporum f. sp. cubense yang dipasangkan dengan empat galur cendawan entomopatogen Galur cendawan entomopatogen Diameter (mm) PS 4 48.6 ± 2.36 ab PS 9 48.7 ± 2.58 ab PS 11 46.1 ± 2.33 b KRC 20.9 ± 0.82 c Kontrol 55.5 ± 2.82 a
Keterangan: Angka pada setiap kolom yang diikuti dengan huruf sama menunjukkan tidak berbeda nyata berdasarkan uji Tukey pada α 5%.
a b c d 10 µm 10 µm 10 µm 10 µm e f g h 10 µm 10 µm 10 µm 10 µm
Gambar 8  Perubahan morfologi hifa Fusarium oxysporum f. sp. cubense pada interaksi biakan ganda dengan cendawan entomopatogen hari ke-14 inkubasi. a, Kontrol; b, Hifa tervakuolisasi (tanda panah) pada pertemuan dengan galur PS 4; c-e, Hifa tervakuolisasi (tanda panah) pada pertemuan dengan galur PS 11; f-g, Hifanya tervakuolisasi (tanda panah) pada pertemuan dengan galur KRC; h, Terbentuk klamidospora (tanda panah) pada pertemuan dengan galur PS 9.

## PEMBAHASAN
Cendawan entomopatogen yang diteliti tidak membentuk konidium pada medium ADK. Sporulasi cendawan entomopatogen Aspergillus spp. dan Talaromyces spp. lebih tinggi pada medium ADK dibandingkan dengan sporulasinya pada corn meal agar dan sabouraud dextrose agar (Fitriana et al . 2018). Sporulasi cendawan entomopatogen Verticillium lecanii juga dipengaruhi oleh jenis medium (Derakhshan et al . 2008). Pertumbuhan dan sporulasi cendawan entomopatogen tidak hanya dipengaruhi oleh bahan komposisi penyusun jenis medium, tetapi juga  galur cendawannya (Sharma et al. 2002, Senthamizhlselvan et al . 2010, Cojanu dan Lumînare 2021), bahkan bentuk medium padat atau cair, contohnya pada Beauveria bassiana (Sharma et al. 2002, Senthamizhlselvan et al . 2010). Sporulasi cendawan entomopatogen Beauveria bassiana IBC1201 dipengaruhi oleh suhu, cahaya, pH, potensial air, konsentrasi karbon, rasio C:N, serta kombinasi sumber karbon dan nitrogen (Gao 2011). Oleh sebab itu, cendawan entomopatogen yang diteliti harus dirangsang untuk bersporulasi dengan menumbuhkannya pada beberapa kondisi yang berbeda. Sporulasi beberapa cendawan nonentomopatogen dapat dipicu melalui pemberian sinar ultraviolet (Leach 1965) atau cahaya (Leach dan Trione 1965).
Karakteristik spora menjadi ciri pembeda pada hampir semua genus dan spesies cendawan. Keempat galur cendawan entomopatogen yang diamati pada penelitian ini belum dapat menjadi pembeda untuk tingkat takson mana pun.  Kini, cendawan yang  tidak  bersporulasi  dapat  diidentifikasi secara molekuler dengan menggunakan marka umum seperti ITS atau dengan marka yang khas ( barcode ) untuk genus cendawan, seperti TEF-1α,  RPB2,  atau TUB2  (Oliveira dan Azevedo 2022) atau menggunakan primer spesifik (Rahayu et al. 2019). Ciri F. oxysporum f. sp. cubense IPBCC 19 1472 mirip dengan ciri F. oxysporum yang diuraikan oleh Ploetz (2006). F. oxysporum dicirikannya memiliki miselium berwarna
putih hingga ungu dan sporodokium berwarna cokelat hingga oranye. Mikrokonidium dan makrokonidium  diproduksi  pada  monofialid bercabang dan tidak bercabang. Bentuk makrokonidium melengkung atau sabit dan bersel 4-8, sedangkan mikrokonidium berbentuk oval atau seperti ginjal, bersel satu atau dua. Selain itu, klamidospora terminal dan interkalar biasanya berbentuk bulat dan terbentuk secara tunggal atau berpasangan dalam hifa atau konidium.
Pertumbuhan koloni cendawan antagonis memengaruhi daya hambatnya terhadap cendawan patogen (Schoneberg et al . 2015). Cendawan antagonis yang memiliki pertumbuhan lebih lambat daripada pertumbuhan cendawan patogen akan memiliki kemampuan yang rendah dalam menekan pertumbuhan cendawan patogen (Rachmawati et al . 2016). Tovar et al . (2013) menyatakan bahwa cendawan entomopatogen yang ditumbuhkan lebih awal daripada cendawan yang akan dikendalikannya dapat meningkatkan kemampuan menghambatnya secara in vitro . Otten et al. (2004) melaporkan cendawan antagonis mampu menghambat cendawan patogen, jika persentase penghambatannya lebih besar dari 60%. Jika persentase penghambatan hanya mencapai 30% maka cendawan antagonis hanya memiliki kemampuan yang minimal dalam menghambat pertumbuhan cendawan patogen. Živković et al. (2017) membagi kemampuan daya hambat cendawan uji terhadap cendawan patogen menjadi tiga kategori, yaitu kuat (>67%), sedang (36-66%), dan lemah (<35%). Oleh karena itu, galur KRC merupakan cendawan antagonis yang memiliki aktivitas kuat dibandingkan dengan galur PS 4, PS 9, dan PS 11. Hanya galur KRC yang koloninya tumbuh sangat cepat di antara galur cendawan entomopatogen yang diuji. Cendawan antagonis yang memiliki laju pertumbuhan lebih cepat dari cendawan patogen dapat menunjukkan efektivitas yang lebih baik untuk menekan pertumbuhan patogen (Amaria et al. 2015). Biakan ganda dari cendawan yang diuji menunjukkan terdapat kontak miselium. Pada
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Listiyowati et al. pertemuan tersebut diduga terjadi persaingan perebutan ruang tumbuh di antara kedua cendawan dengan cara yang berbeda-beda. Tipe interaksi pada daerah pertemuan tersebut tergolong  dalam  interaksi  fisik  (Kolesidis et al .  2019).  Pada  interaksi  fisik,  salah  satu cendawan dapat tumbuh melewati dan atau mengelilingi cendawan lainnya. Mekanisme kompetisi ruang dan nutrisi merupakan mekanisme utama pada interaksi cendawan entomopatogen dengan F. oxysporum f. sp. cubense . Kompetisi tersebut menjadi mekanisme antagonisme pada sebagian besar agens hayati.
Respons F. oxysporum f. sp. cubense terhadap cendawan antagonis bervariasi, seperti vakuolisasi dan pembentukan klamidospora. Respons tersebut menunjukkan terdapat kelainan akibat berinteraksi dengan cendawan antagonisnya.  Antagonis Bacillus subtilis terhadap F. oxysporum mengakibatkan kelainan pada morfologi hifa yang berupa pembengkakan hifa, vakuolisasi, dan granulisasi hingga lisis (Chaurasia et al . 2005). Vakuolisasi ialah pembengkakan vakuola dan mengarah ke pembengkakan hifa (Medina-Romero et al . 2017) yang terjadi sebagai bentuk pertahanan (Palmer 2015). Klamidospora Fusarium oxysorum f. sp. lycopersici patogen mengandung dinding sel lebih tebal dan lebih banyak mengandung glikogen dan lipid daripada mikrokonidium sehingga memungkinkannya untuk bertahan hidup (YuanYu et al . 2019). Perubahan kondisi lingkungan dapat memengaruhi morfologi seluler dengan membentuk morfotipe berupa klamidospora yang mempunyai potensi bertahan hidup bagi Zymoseptoria tritici patogen (Francisco et al . 2019). Simpulan dari penelitian ini ialah galur cendawan entomopatogen PS 4, PS 9, PS  11,  dan  KRC  tidak  dapat  diidentifikasi secara morfologi. Semua galur cendawan entomopatogen menghambat melalui mekanisme kompetisi ruang. Cendawan entomopatogen galur KRC memiliki daya hambat terbesar dengan aktivitas antagonisme kuat, sedangkan tiga galur lainnya memiliki aktivitas antagonisme lemah. Fusarium
oxysporum f. sp. cubense membentuk klamidospora sebagai respons terhadap galur PS 9 dan mengalami vakuolisasi pada waktu berinteraksi dengan galur PS 4, PS 11, dan KRC.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad, Mulyaningsih I. 2015. Pengaruh pH, penggoyangan media, dan ekstrak daun sirih merah ( Piper crocatum Linn.) terhadap pertumbuhan cendawan Rhizoctonia sp. Jurnal Hortikultura. 25(2):150–159.
DOI: https://doi. org/10.21082/jhort.v25n2.2015.p150-159.
Amaria W, Harni R, Samsudin. 2015. Evaluasi jamur antagonis dalam menghambat pertumbuhan Rigidoporus microporus penyebab penyakit jamur akar putih pada tanaman karet. Jurnal Tanaman Industri dan Penyegar. 2(1):51–60. DOI: https:// doi.org/10.21082/jtidp.v2n1.2015.p51-60.
Buddenhagen I. 2009. Understanding strain diversity in Fusarium oxysporum f. sp. cubense and history of introduction of “Tropical Race 4” to better manage banana production. Acta Horticulturae. 828: 193–204. DOI: https://doi.org/10.17660/ ActaHortic.2009.828.19.
Chaurasia B, Pandey A, Palni LMS, Trivedi P,  Kumar  B,  Colvin  N.  2005.  Diffusible and volatile compounds produced by an antagonistic Bacillus subtilis strain cause structural deformations in pathogenic fungi in vitro . Microbiological Research. 160:75–81. DOI:  https://doi.org/10.1016/j. micres.2004.09.013.
Cojanu  D,  Lumînare  C-M.  2021.  Effect  of different  carbon  and  nitrogen  sources  on sporulation Beauveria bassiana romanian strains. Romanian Journal for Plant Protection. 11:24–31. DOI: https://doi. org/10.54574/RJPP.14.04.
Culebro-Ricaldi JM, Ruiz-Valdiviezo VM, Rodriguez-Mendiola MA, Avila-Miranda ME, Gutierrez-Miceli FA, CruzRodríguez RI, Dendooven L, Montes-Molina JA. 2017. Antifungal properties of Beauveria bassiana strains against Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici race 3
in tomato crop. Journal Environment Biology. 38:821–827. DOI: https://doi. org/10.22438/jeb/38/5/MRN-412. Deb L, Rajesh T, Tombisana RK, Majumder D.
2017. Antagonistic potential of Beauveria sp. against phytopathogens. Bulletin of Environment, Pharmacology and Life Sciences. 6(1):207–212.
Dennis C, Webster J. 1971. Antagonistic properties of species-groups of Trichoderma : III. Hyphal interaction. Transactions of British Mycological Society. 57(3):363–369. DOI: https://doi. org/10.1016/S0007-1536(71)80050-5.
Derakhshan A, Rabindra RJ, Ramanujam B,
Rahimi  M.  2008.  Evaluation  of  different media and methods of cultivation on the production and viability of entomopathogenic fungi, Verticillium lecanii (Zimm.) Viegas. Pakistan Journal of Biological Sciences. 11(11):1506– 1509. DOI: https://doi.org/10.3923/ pjbs.2008.1506.1509.
Dita M, Barquero M, Heck D, Mizubuti ESG, Staver CP. 2018. Fusarium wilt of banana: current knowledge on epidemiology and research needs toward sustainable disease management. Frontiers in Plant Science. 9:1–21. DOI: https://doi.org/10.3389/ fpls.2018.01468.
Fitriana Y, Suharjo R, Swibawa IG, Purnomo,
Lestari  P,  Merdiana  E.  2018.  Influence of culture medium on the sporulation and viability of Aspergillus spp. and Talaromyces spp. entomopathogenic fungi. Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika.  18 (1): 12–22. DOI: https://doi. org/10.23960/j.hptt.11812-22.
Fokkema NJ. 1973. The role of saprophytic fungi in antagonism against Drechslera sorokiniana ( Helminthosporium sativum ) on agar plate and on rye leaves with pollen. Physiological Plant Pathology. 3:195– 205. DOI: https://doi.org/10.1016/0048- 4059(73)90082-9.
Francisco CS, Ma X, Zwyssig MM, McDonald BA, Palma-Guerrero J. 2019. Morphological changes in response to environmental stresses in the fungal plant
pathogen Zymoseptoria tritici. Scientific Reports 9:9642. DOI: https://doi. org/10.1038/s41598-019-45994-3.
Gao L. 2011. A novel method to optimize culture conditions for biomass and sporulation of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana IBC1201. Brazilian Journal of Microbiology.
42:1574–1584. DOI: https://doi. org/10.1590/S1517-83822011000400045.
Halwiyah N, Ferniah RS, Raharjo B, Purwantisari S. 2019. Uji antagonisme jamur patogen Fusarium solani penyebab penyakit layu pada tanaman cabai dengan menggunakan Beauveria bassiana secara in vitro . Jurnal Akademika Biologi. 8(2):8–17. Kolesidis DA, Boddy L, Eastwood DC, Yuan C, Fowler MS. 2019. Predicting fungal community dynamics driven by competition for space. Fungal Ecology. 41:13–22. DOI: https://doi.org/10.1016/j. funeco.2019.04.003.
Leach CM, Trione EJ. 1965. An action spectrum for light induced sporulation in the fungus Ascochyta pisi . Plant Physiology. 40(5):808–812. DOI: https:// doi.org/10.1104/pp.40.5.808.
Leach CM. 1965. Ultraviolet-absorbing substances associated with light-induced sporulation in fungi. Canadian Journal of Botany. 43(2):185–200. DOI: https://doi. org/10.1139/b65-024.
Medina-Romero YM, Roque-Flores G, Macias-Rubalcava ML. 2017. Volatile organic compounds from endophytic fungi as innovative postharvest control of Fusarium oxysporum in cherry tomato fruits. Applied Microbiology and Biotechnology. 101(22):8209–8222. DOI: https://doi. org/10.1007/s00253-017-8542-8.
Oliveira M, Azevedo L. 2022. Molecular markers: an overview of data published for fungi over the last ten years. Journal of Fungi. 8(8):803. DOI: https://doi. org/10.3390/jof8080803.
Otten W, Bailey DJ, Gilligan CA. 2004. Empirical evidence of spatial thresholds to controlinvasion of fungal parasites and
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Listiyowati et al. saprotrophs. Journal New Phytologist. 163:125–132. DOI: https://doi. org/10.1111/j.1469-8137.2004.01086.x . Palmer  GE.  2015.  Vacuolar  trafficking and Candida albicans pathogenesis. Communicative & Integrative Biology. 4(2):239–242. DOI: https://doi. org/10.4161/cib.4.2.14717.
Ploetz RC. 2006. Fusarium wilt of banana is caused by several pathogens referred to as Fusarium oxysporum f. sp. cubense . Phytopathology. 96(6):653–656. DOI: https://doi.org/10.1094/PHYTO-96-0653.
Pusat Data dan Sistem Informasi Pertanian.
2016. Outlook Komiditas Pertanian Subsektor Hortikultura. Jakarta (ID): Kementerian Pertanian.
Qiu WY, Yao YF, Zhu YF, Zhang YM, Zhou P, Jin YQ, Zhang B. 2005. Fungal spectrum identified  by  a  new  slide  culture  and in vitro drug susceptibility using etest in fungal keratitis. Current Eye Research. 30(12):1113–1120. DOI: https://doi. org/10.1080/02713680500423671.
Rachmawati R, Rahabistara A, Afandhi A. 2016. Daya antagonis tiga jamur patogen serangga terhadap jamur patogen tular tanah Fusarium sp. (hypocreales = nectriaceae) secara in vitro . Jurnal Hama Penyakit Tumbuhan. 4(2):93–101. Rahayu G, Maulana I, and Widodo. 2020a. Endobacterial symbiont of Fusarium oxysporum f.sp. cubense and the pathogenicity of their symbiosis towards banana plantling. IOP Conf. Ser: Earth Environ. Sci. 457: 012051. DOI:   https://doi. org/10.1088/1755-1315/457/1/012051. Rahayu G, Thamrin JAD, Rianti P. 2020b. Community Structure of Fusarium oxysporum f. sp. cubense in Java and Sumatra Based on Cryphonectria parasitica Vic Primer. IOP Conf. Ser: Earth Environ. Sci. 457: 012052. DOI:  https://doi. org/10.1088/1755-1315/457/1/012052.
Rahayu G, Mahasari NPW, Widodo. 2019.
Identifikasi infraspesifik Fusarium oxysporum asal subtrat nonpisang dan kemampuan pindah inangnya ke tanaman pisang. Jurnal Fitopatologi
Indonesia. 15(1):27–35. DOI:  https://doi. org/10.14692/jfi.15.1.27.
Riddle RW. 1950. Permanent stained mycological preparation obtained by slide culture. Mycological Research. 42:265– 270. DOI: https://doi.org/10.1080/002755 14.1950.12017830.
Ruzicka K, Ursache R, Hejatko J, Helariutta Y. 2015. Xylem development - from the cradle to the grave. New Phytologist. 2 0 7 : 5 1 9 – 5 3 5 .   D O I :   h t t p s : / / d o i . org/10.1111/nph.13383.
Schoneberg A, Musa T, Voegele RT, Vogelgsang S. 2015. The potential of antagonistic fungi for control of Fusarium graminearum and Fusarium crookwellense varies depending on the experimental approach. Journal of Applied Microbiology. 118:1165–1179. DOI: https://doi.org/10.1111/jam.12775. Senthamizhlselvan P, Alice J, Sujeetha RP, Jeyalakshmi C. 2010. Growth, sporulation and biomass production of native entomopathogenic fungal isolates on a suitable medium. Journal of Biopesticides 3(2):466–469
Sharma S, Gupta RBL, Yadava CPS. 2002. Selection of a suitable medium for mass multiplication of entomofungal pathogens. Indian Journal of Entomologi 64(3):2254– 2262
Tovar MDL, Urquiza AO, Jurado IG, Casas AT, Moraga EQ. 2013. Assessment of entomopathogenic fungi and their extracts against a soil-dwelling pest and soil- borne pathogens of olive. Biological Control. 67:409–420. DOI: https://doi. org/10.1016/j.biocontrol.2013.09.006.
Vega FE, Goettel MS, Blackwell M, Chandler D, Jackson MA, Keller S, Koike M, Maniania NK, Monzon A, Ownley BH et al . 2009. Fungal entomopathogens: new insights on their ecology. Fungal Ecology. 2:149–159. DOI: https://doi.org/10.1016/j. funeco.2009.05.001.
YuanYu C, JennWen, Chihli W. 2019. Analysis of stress resistances of chlamydospores of Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici . Journal of Plant Medicine 61(4):21–30.
Živković  ST,  Stošić  SS,  Stevanović  ML, Gašić  KM,  Aleksić  GA,  Vučurović IB,  Ristić  DT.  2017. Colletotrichum orbiculare on  watermelon:  identification
and in vitro inhibition by antagonistic fungi. Matica Srpska Journal of Natural Science. 133:331–343. DOI: https://doi. org/10.2298/ZMSPN1733331Z.