EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr
Toksisitas Partisi N-Heksan dan Etil Asetat pada Ekstrak Sargassum sp. terhadap Larva Aedes aegypti Instar III
Alfianisa Permata Sari 1 *, Ervia Yudiati 1,2 , Sunaryo 1
1 Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro
2 Laboratory of Tropical Marine Biotechnology, Universitas Diponegoro Jl. Prof. H. Soedarto S.H, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia *Corresponding author, e-mail : alfianisaps1@gmail.com
ABSTRAK: Kejadian  demam  berdarah  dengue  pada  awal  2019  tercatat  lebih  dari  17.000  kasus demam berdarah dengan angka kematian mencapai 169 jiwa di seluruh Indonesia. Sargassum sp. merupakan  jenis  rumput  laut  cokelat  berlimpah  namun  belum  dimanffatkan  dengan  baik. Sargassum  sp    memiliki  beragam  aktivitas  biologis.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui toksisitas  ekstrak  rumput  laut  cokelat  Sargassum  sp.  larva  Aedes  aegypti  instar  III.  Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi sampel Sargassum sp. dengan pelarut metanol, dilanjutkan partisi dengan  pelarut  n-heksana dan  etil asetat  serta analisis  fitokimia menggunakan  kromatografi  lapis tipis. Sepuluh ekor larva nyamuk dipaparkan dalam 100 ml aquades dengan beberapa konsentrasi ekstrak (0, 50, 100, 250, 500 dan 1000 ppm), abate sebagai kontrol positif dan DMSO dengan tiga kali  ulangan.  Aktivitas  larvasida  ekstrak  Sargassum  sp.  juga  ditentukan  dengan  menghitung  nilai LC 50 pada jam ke-72. Perubahan morfologi diamati secara mikroskopis. Fraksi n-heksana dan etil asetat  Sargassum  sp.  memiliki  nilai  LC 50 berturut-turut  sebesar  3129.15  ppm  dan  996.28  ppm. Larva  yang  dipaparkan  dengan  ekstrak  etil  asetat  Sargassum  sp.  memiliki  kerusakan  morfologi pada  bagian  kepala,  siphon,  saluran  pencernaan,  papila  anal  serta  warna  tubuh  menjadi  lebih gelap.  Keseluruhan  fraksi  n-heksana  dan  etil  asetat  Sargassum  sp.  mengandung  senyawa golongan  fenolat  dan  terpenoid.  Berdasarkan  hasil  tersebut,  fraksi  etil  asetat  Sargassum  sp. berpotensi sebagai larvasida.
Kata Kunci: Aedes aegypti; LC 50 -72; Sargassum sp.
Partition Toxicity of N-Hexane and Ethyl Acetate in Sargassum sp. against Larva Aedes aegypti Instar III
ABSTRACT: In the  early  2019, there has  been  17,000  Indonesian  people suffered and  169  died from Dengue epidemic. Sargassum sp. in Indonesian waters were plentiful, rich in biological activity and  still  unexpolitated.  This  study  aimed  to  determine  the  72-h  LC 50 of  Sargassum  sp.  extract  to Aedes aegypti instar III larvae. Extraction was done by maseration with methanol, partitioned with n- hexane and ethyl acetate, folowed by TLC  analysis. Ten larvae were exposed with 100 mL aqudest in  a  serial  concentration  (0;  50;100;  25;  500  dan  1000  ppm),  completed  with  Abate®  powder  as positive, aquadest as negative control.  All treatments  were replicated three times. Observation on morphological  aberration  was  done  microscopically.  72-h  LC 50 of  n-hexane  and  ethyl  acetate fraction  were  3129.15  ppm  dan  996.28  ppm,  respectively.  There  were  larval  morphologically damage  in  head,  siphon,  digestive  tract  and  papilla  anal  and  dark  coloured  body.  Extract  were composed with phenolate and terpeniod coumpoud. It is concluded that Sargassum sp.  extract was a good source for larvacide.
Keywords: Aedes aegypti; 72-h LC 50 ; Sargassum sp.

## PENDAHULUAN
Salah  satu  penyakit  menular  yang  masih  menjadi  masalah  kesehatan  masyarakat  adalah Demam  Berdarah Dengue (DBD).  Demam  berdarah  adalah  penyakit  yang  banyak  ditemukan  di daerah  tropis  dan  sub-tropis,  terutama  di  kawasan  Asia  yang  menempati  urutan  pertama  jumlah
penderita DBD setiap tahunnya. Sejak tahun 1968 hingga tahun 2009, World Health Organization (WHO) mencatat negara Indonesia sebagai negara dengan kasus DBD tertinggi di Asia Tenggara (Kementerian  Kesehatan  RI,  2010).  Sementara  pada  awal  2019  tercatat  lebih  dari  17.000  kasus demam berdarah dengan angka kematian mencapai 169 jiwa di seluruh Indonesia.
Virus  Dengue  sebagai  penyebab  demam  berdarah  hanya  dapat  ditularkan  melalui  nyamuk Aedes  aegypti .  Selain  menularkan  virus  dengue, A.  aegypti juga  dapat  menularkan  penyakit demam  kuning,  filariasis  limfatik  dan  malaria  (Valentina et  al .,  2015).  Dalam  penyebaran  demam berdarah dipengaruhi oleh faktor iklim seperti curah hujan, suhu dan kelembaban. Menurut Suryani (2018), kelangsungan hidup nyamuk akan lebih lama bila tingkat kelembaban tinggi, seperti selama musim hujan.
Indonesia  memiliki  banyak  sumber  daya  alam  hayati  di  laut.  Salah  satunya  yang  banyak dimanfaatkan  adalah Sargassum sp.. Sargassum sp.  adalah  ganggang  makro  yang  berwarna cokelat  termasuk  dalam  kelas  phaeophyceae  dan  ordo  fucales. Sargassum sp.  termasuk  produk alam dari laut yang memiliki kemampuan sebagai antitumor, antioksidan, antibakteri, antijamur, anti inflamasi  dan  antivirus  (Mary et  al .,  2012).  Senyawa  yang  berperan  sebagai  antimikroba  adalah flavonoid (Ervina et al ., 2014), saponin dan terpenoid (Widawati dan Heni, 2013). Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan oleh Yu et al . (2015), ekstrak Sargassum binderi dan Padina  australis dari  perairan  Teluk  Kemang,  Malaysia  mampu  membunuh  larva A.  aegypti dengan  LC 50 berturut-turut  yaitu  192,43 mg/mL  dan  340,90 mg/mL. Penelitian  larvasida  terhadap rumput laut cokelat juga dilakukan oleh Valentina et al . (2015), yang diperoleh hasil bahwa ekstrak Turbinaria conoides memiliki nilai LC 50 64,27 mg/mL.
Sejauh  ini,  penanganan  preventif  terhadap  larva  nyamuk A.  aegypti yakni  menggunakan Abate®.  Dimana  Abate®  merupakan  larvasida  sintetik  yang  memiliki  dampak  negatif  terhadap lingkungan  seperti  polusi  lingkungan,  serangga  menjadi  resisten  dan  toleran  terhadap  pestisida serta keracunan bagi manusia atau hewan sekitarnya (Rochmat et al ., 2016). Adanya bahan-bahan alam seperti Sargassum sp. berpotensi sebagai pengganti larvasida kimia sintetik. Berdasarkan hal tersebut  maka  penelitian  ini  perlu  dilakukan.  Tujuan  dari  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengetahui tingkat toksisitas Sargassum sp. terhadap larva nyamuk A. aegypti .

## MATERI DAN METODE
Materi  yang  digunakan  adalah Sargassum sp.  yang  digunakan  berasal  dari  Pantai  Teluk Awur,  Jepara  dan  larva Aedes  aegypti diperoleh  dari  Balai  Penelitian  dan  Perkembangan Kesehatan, Banjarnegara. Metode penelitian ini menggunakan metode experimental laboratories . Tahapan  penelitian  terdiri  dari  ekstraksi,  penetasan  larva A.  aegypti ,  uji  toksisitas,  pengamatan morfologi dan uji kromatografi lapis tipis.
Pembuatan  ekstrak Sargassum sp.  mengacu  pada  Yu et  al. (2015). Sargassum sp.  yang diperoleh  dari  laut,  dicuci  terlebih  dahulu.  Selanjutnya  dipotong  kecil-kecil  dengan  ukuran  ±2  cm dan dihaluskan dengan blender. Sebanyak 150 g Sargassum sp. direndam dalam 600 mL metanol selama 3x24 jam. Hasil maserasi dipekatkan menggunakan rotary evaporator dengan suhu 50°C hingga  diperoleh  ekstrak  metanol  hingga  volume  tersisa  ±50  mL.  Kemudian  ekstrak  metanol tersebut  dipartisi  dengan  dua  pelarut  yang  berbeda,  yakni  etil  asetat  dan  n-heksana.  Ekstrak  ini disebut sebagai fraksi etil asetat dan fraksi n-heksana. Rendemen ekstrak dihitung dengan rumus berikut (Leksono et al ., 2018):
% Rendemen = ( )
( ) X 100%
Keterangan : Berat ekstrak = (Berat vial + ekstrak) - berat vial kosong (g)
Penetasan larva A.aegypti dilakukan dengan merendam ovitrap yang berisi telur nyamuk A. aegypti dalam  nampan  yang  berisi  air  galon  dan  diberi  makan  pelet.  Nampan  disimpan  pada tempat dengan penerangan secukupnya. Telur A. aegypti akan menetas dan menjadi larva instar III setelah 6-7 hari. Larva  yang digunakan adalah larva instar III yang aktif bergerak (Rochmat et al ., 2016).
Uji toksisitas ini mengacu pada penelitian Rochmat et al . (2016). Larutan uji toksisitas fraksi n-heksana dan  etil asetat dari Sargassum sp. dibuat dengan lima konsentrasi berbeda  yakni 50, 100, 250, 500 dan 1000 ppm, kontrol negatif (aquades) dan kontrol positif (abate 100 pm) dengan tiga  kali  ulangan.  Larva  nyamuk A.  aegypti dimasukkan  dalam  gelas  yang  berisi  aquades sebanyak  10  ekor.  Kemudian  ditambahkan  dengan  larutan  uji.  Pengamatan  mortalitas  larva dilakukan setiap 24 jam sampai jam ke-72.
Nilai  toksisitas  (LC 50 -72)  ditentukan  dengan  analisis  probit  yang  memiliki  persamaan Y=a+bX.  Nilai  LC 50 -72  diperoleh  dari  anti  log  m,  dimana  m  merupakan  logaritma  konsentrasi pelarut pada Y= 5, yaitu nilai probit 50% hewan uji. Nilai m diperoleh dari rumus berikut (Leuwol et al ., 2018):
Y = a+ bX bX =   Y – a X = b a - Y
Dimana X = m dan Y = 5, jadi persamaan regresinya menjadi:
m = b a - 5
Nilai a dan b diperoleh berdasarkan persamaan berikut:
b = 2 2 ) X 1/n( X ) Y . X 1/n( - XY       a = ) Y . b - X 1/n(  
Nilai LC 50 – 72 diperoleh sebagai berikut:
LC 50 – 72 = anti log m Keterangan :  Y  = Probit  persentase kematian; X = Logaritma konsentrasi; m  = nilai LC 50 -72;  n  = jumlah perlakuan konsentrasi ekstrak; a = Konstanta; b = Slope/ kemiringan
Morfologi  larva A.  aegypti sebelum  dan  setelah  uji  toksisitas  diamati  menggunakan mikroskop. Uji kromatografi lapis tipis mengacu pada Alen et al . (2017). Plat KLT yang digunakan berukuran 1x6 cm. Ujung plat masing-masing diberi garis pembatas ukuran 0,5 cm, sehingga jarak tempuhnya  adalah  5  cm.  Plat  dimasukkan  dalam  bejana  pengembang  yang  berisi  eluen. Campuran eluen yang digunakan untuk fraksi n-heksana yaitu, n-heksana dan etil asetat dengan perbandingan 7:3 (v/v). Sedangkan campuran eluen  untuk fraksi etil asetat yaitu, n-heksana dan etil asetat dengan  perbandingan  3:1 (v/v). Setelah itu  divisualisasi dengan sinar UV 366 nm  dan vanilin 6%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi Sargassum sp.  menggunakan  cara  maserasi  dengan  pelarut  metanol.  Metode maserasi  dipilih  karena  mampu  mengekstraksi  senyawa  dengan  baik  melalui  perendaman  tanpa pemanasan  sehingga  menghindari  kerusakan  pada  senyawa  yang  bersifat  termolabil  (Mukhriani, 2014). Metanol memiliki sifat universal sebagai pelarut, yakni mampu melarutkan analit yang memiliki sifat polar, semi polar dan non polar yang terkandung dalam Sargassum sp.. Metanol dapat menarik analit  berupa  alkaloid,  steroid,  saponin  dan  flavonoid  yang  berasal  dari  tanaman  (Agustina et  al ., 2018).  Sementara  untuk  partisi  menggunakan  pelarut  etil  asetat  dan  n-heksana  dimana  pelarut  etil asetat bersifat semi polar sedangkan n-heksana memiliki sifat non polar (Susanti et al ., 2012).
Hasil  ekstraksi  tersebut  menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat Sargassum sp.  memiliki  berat ekstrak lebih banyak dibanding fraksi n-heksana yakni 0,32% dan 0,28%. Susanty dan Fairus (2016) menjelaskan  bahwa  perbedaan  hasil  ekstrak  dapat  dipengaruhi  oleh  jenis  pelarut,  ukuran  partikel sampel serta lama waktu ekstraksi. Hasil ekstrak Sargassum sp.  pelarut etil asetat yang lebih besar
daripada pelarut n-heksana karena perbedaan polaritas antara kedua pelarut tersebut, yakni pelarut n- heksana  memiliki  polaritas  lebih  rendah.  Sehingga  menunjukkan  bahwa  senyawa  dalam  ekstrak Sargassum sp. memiliki kepolaran yang mendekati etil asetat, karena perolehan senyawa didasarkan pada kesamaan kepolaran dengan pelarut. Senyawa yang memiliki sifat seperti pelarut tersebut maka akan larut dalam pelarut yang sifatnya sama.
Rendemen  yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini  relatif  kecil.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kandungan  metabolit  sekunder  dalam  sampel  relatif  sedikit.  Faktor  lingkungan  tempat  tinggal Sargassum sp. merupakan perairan yang tenang dengan arus dan gelombang yang relatif kecil diduga menjadi  penyebabnya,  karena  tidak  banyak  metabolit  sekunder  yang  dihasilkan  untuk mempertahankan hidupnya. Uji toksisitas merupakan suatu uji yang dilakukan untuk mengetahui nilai LC 50 -72 mutu bahan ekstrak. Parameter uji toksisitas ini adalah jumlah mortalitas larva A. aegypti instar III  dari  total  hewan  uji.  Pada  pengujian  ini  digunakan  kontrol  positif  (Abate®  100  ppm)  dan  kontrol negatif (aquades).
Berdasarkan  hasil  perhitungan,  terjadi  peningkatan  mortalitas  tiap  perlakuan  pada  ekstrak  n- heksana  maupun  etil  asetat  seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi  ekstrak Sargassum sp..  Hal  ini sesuai  dengan  penelitian  Rahmayanti et  al .  (2016),  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  dan  semakin lama  waktu  paparan  maka  semakin  tinggi  juga  kematian  larva.  Kemampuan  larvasida  dalam membunuh  larva  sangat  bergantung  pada  bentuk  bahan,  cara  masuk  bahan  ke  dalam  tubuh, konsentrasi  dan  jumlah  (dosis)  larvasida.  Noshirma  dan  Ruben  (2016)  juga  menjelaskan  bahwa ekstrak  dikategorikan  aktif  jika  ekstrak  tersebut  menyebabkan  kematian  50%  hewan  uji  selama waktu  tertentu.  Aktivitas  toksititas  suatu  ekstrak  ditentukan  dengan  melihat  nilai  LC 50 .  Pada penelitian  ini ekstrak Sargassum sp. mampu membunuh  50%  hewan  uji.  Namun  dilihat  dari nilai LC 50 tergolong  tinggi,  dimana  LC 50 fraksi  n-heksana Sargassum sp.  adalah  3129,15  ppm sedangkan  fraksi  etil  asetat Sargassum sp.  adalah  996,28  ppm.  Fraksi  etil  asetat  bersifat  toksik karena nilai LC 50 -72˂1000 ppm. Sementara fraksi n-heksana bersifat tidak toksik karena nilai LC 50 - 72 ˃ 1000 ppm. Tingginya nilai LC 50 diduga karena kandungan metabolit sekunder yang terdapat dalam  sampel  relatif  rendah  sehingga  metabolit sekuder  yang  larut  dalam  proses maserasi  juga rendah. Hal inilah yang mempengaruhi rendahnya aktivitas larvasida. Faktor yang mempengaruhi rendahnya metabolit sekunder adalah kondisi habitat sampel. Perairan yang tenang dengan arus dan  gelombang  yang  rendah  maka  produksi  metabolit  sekundernya  juga  rendah.  Sementara perairan yang memiliki arus dan gelombang yang tinggi, produksi metabolit sekundernya juga akan tinggi.  Karena  organisme  tersebut  membutuhkan  metabolit  sekunder  untuk  mempertahankan hidupnya.
Tabel 1. Nilai LC 50 pada  Uji  Toksisitas  Fraksi  n-heksana  dan  etil  asetat Sargassum sp.  dengan waktu Pemaparan 72 Jam
Ekstrak Konsentrasi (ppm) Nilai Mortalitas Larva Rerata Persentase Mortalitas (%) LC 50 -72 (ppm) Ulangan 1  Ulangan 2 Ulangan 3 N- heksana 0 0 0 0 0 0 50 2 2 3 2,33 23,33 3129,15 100 3 2 4 3 30 250 3 4 3 3,33 33,33 500 4 4 3 3,67 36,67 1000 4 5 4 4,33 43,33 Abate® 10 10 10 10 100 Etil asetat 0 0 0 0 0 0 50 2 2 0 1,33 13,33 996,28 100 1 1 2 1,33 13,33 250 1 2 2 1,67 16,67 500 1 2 2 1,67 16,67 1000 5 5 8 6 60 Abate® 10 10 10 10 100
Analisis Kromatografi Lapis Tipis (KLT) merupakan penentuan golongan senyawa aktif yang terdapat dalam ekstrak berdasarkan warna dan nilai faktor retardasi (Rf) (Fajriaty et al ., 2017). KLT menggunakan  prinsip  adsorbsi  dan  partisi  yang  ditentukan  oleh  fase  diam  (adsorben)  dan  fase gerak  (eluen)  (Lestari et  al .,  2014).  Komponen  kimia  dari  ekstrak  bergerak  naik  mengikuti  eluen dan  akan  diserap  oleh  adsorben.  Adsorben  memiliki  daya  serap  yang  berbeda  terhadap komponen-komponen kimia sehingga komponen kimia dapat bergerak dengan jarak yang berbeda berdasarkan tingkat kepolarannya. Hal inilah yang menyebabkan terjadinya pemisahan komponen- komponen  kimia  di  dalam  ekstrak  (Alen et  al. ,  2017).  Uji  KLT  pada  ekstrak Sargassum sp. dilakukan  dengan  menotolkannya  pada  plat  KLT  yang  dielusikan  dengan  eluen  untuk  fraksi  n- heksana yaitu, n-heksana dan etil asetat dengan perbandingan 7:3 (v/v). Sedangkan untuk fraksi etil  asetat  yaitu,  n-heksana  dan  etil  asetat  dengan  perbandingan  3:1  (v/v).  Analisa  hasil  KLT dilakukan pada masing-masing fraksi dengan visualisasi sinar UV dan vanilin 6%.
Deteksi senyawa menggunakan sinar UV merupakan deteksi senyawa yang paling universal, karena  hampir  semua  senyawa  dapat  menyerap  sinar  tampak  atau  sinar  UV  dengan berfluoresensi  pada  panjang  gelombang  366  nm  (Wulandari,  2011).  Senyawa  yang  dapat berinteraksi dengan sinar UV yakni golongan senyawa fenolat yang memiliki gugus aromatik
(a)
(b)
Gambar 1. Profil  Ekstrak Sargassum sp.  Fraksi  n-heksana  Visualisasi  (a)  Sinar  UV  366  nm  (b) Vanilin 6% (Perbandingan Eluen n-heksana:Etil Asetat 7:3)
(a)
(b) Gambar 2. Profil  Ekstrak Sargassum sp.  Fraksi  Etil  Asetat  Visualisasi  (a)  Sinar    UV  366  nm  (b) Vanilin 6% (Perbandingan Eluen n-heksana:Etil Asetat 3:1)
Merah muda Biru flourisense Kuning muda Cokelat muda Cokelat muda Cokelat kemerahan Cokelat kemerahan Merah muda Kuning muda Cokelat muda Cokelat muda Cokelat kemerahan
karena gugus aromatik dapat menyerap sinar UV dengan panjang gelombang 366 nm (Adinata et al .,  2013).  Khadijah et  al .  (2017)  menjelaskan  bahwa  senyawa  fenolat  memiliki  gugus  aromatik dengan satu atau lebih gugus hidroksi (-OH) dan gugus-gugus lain penyertanya. Senyawa turunan dari fenolat yang jumlahnya sangat melimpah adalah flavonoid. Gugus keton juga terdapat dalam senyawa  flavonoid,  karena  teridentifikasi  terdapat  serapan  gugus  karbonil  pada  spektrum inframerah, tetapi tidak bereaksi dengan reagen Tollens dan Fehling (Arum et al ., 2012). Kelompok senyawa lain yang memiliki gugus keton yaitu saponin.
Pereaksi vanilin 6% digunakan untuk visualisasi senyawa yang mengandung gugus aldehid dan  keton.  Budimarwanti  (2007),  menyebutkan  bahwa  vanilin  mengandung  senyawa  aldehid, dimana  gugus  aldehid  yang  bereaksi  dengan  senyawa  yang  mengandung  gugus  aldehid  juga, akan  membentuk  suatu  spot  atau  warna  tertentu.  Alen et  al .  (2017)  menjelaskan  bahwa  vanilin mampu  mendeteksi  kandungan  senyawa  terpenoid,  steroid  dan  komponen  minyak  atsiri.  Pada penelitian  ini, setelah sampel disemprotkan vanilin 6% dan dipanaskan, terjadi  perubahan warna dari  merah  muda  sampai  ungu  kecokelatan  pada  ke-2  sampel.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian Alen et  al .  (2017),  bahwa  setelah  disemprotkan  vanilin  6%  dan  dipanaskan,  akan  terjadi perubahan  warna dari merah muda sampai  ungu kecokelatan. Berdasarkan penjelasan tersebut, dugaan  senyawa  yang  terdeteksi  pada  keseluruhan  ekstrak Sargassum sp.  adalah  golongan senyawa fenolat dan terpenoid.
Golongan senyawa tersebut yang membuat ekstrak Sargassum sp. mampu membunuh larva A . aegypti. Ervina et al. (2014), menjelaskan bahwa enyawa fenolat seperti flavonoid merupakan senyawa  pertahanan  yang  bersifat  toksik.  Flavonoid  bekerja  sebagai  racun  pada  sistem pernapasan.  Senyawa  ini  masuk  ke  dalam  tubuh  larva  melalui  sistem  pernapasan  (siphon), sehingga menyebabkan kerusakan dan mengakibatkan larva tidak bisa bernapas hingga akhirnya mati. Sementara senyawa saponin yang termasuk golongan terpenoid dapat masuk ke tubuh larva melalui mulut larva (termakan larva), sehingga aktivitas enzim protease dan penyerapan makanan menurun.  Hal  tersebut  dapat  menyebabkan  energi  untuk  pertumbuhan  larva  menjadi  berkurang, lalu  terhambat  dan  akhirnya  mati.  dapat  mengikat  sterol  bebas  dalam  pencernaan  makanan,  di mana  sterol  berperan  sebagai  prekusor  hormon  ekdison.  Sehingga  dengan  menurunya  jumlah sterol bebas akan mengganggu proses pergantian kulit pada serangga (Widawati dan Heni, 2013). Kerusakan  tersebut terjadi pada larva  yang digunakan dalam penelitian ini  dan ditampilkan pada Gambar 3.
(a)
(b)
Gambar  3. Hasil  Pengamatan  Morfologi  Larva A.  aegypti .  (a)  Larva  Sebelum  Diberi  Fraksi  Etil Asetat Sargassum sp.; (b) Larva Setelah Diberi Fraksi Etil Asetat Sargassum sp. pa s sp k sp s pa k
Berdasarkan hasil pengamatan diatas, pemberian fraksi etil asetat Sargassum sp. pada larva A.  aegypti menyebabkan  adanya  perubahan  morfologi.  Perbedaan  yang  terjadi  antara  sebelum dan  setelah  pemberian  fraksi  etil  asetat  adalah  kondisi  tubuh  yang  lebih  panjang  dari  sebelum pemberian fraksi etil asetat, warna tubuh yang semula transparan menjadi lebih gelap. Selain itu juga  adanya  kerusakan  di  bagian  ujung  kepala  (k)  menjadi  tidak  utuh,  perubahan  pada  ujung siphon  (s)  yang  sebelum  diberi  perlakuan  berbentuk  runcing  namun  setelah  diberi  perlakuan menjadi berbentuk tabung.  Bentuk  saluran pencernaan (sp) juga  rusak dan  semakin menyempit, serta bentuk papila anal (pa) menjadi lebih lebar setelah diberi fraksi etil asetat (Gambar 3). Hasil pengamatan ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Yu et al . (2015). Adanya perubahan morfologi ini diduga karena efek dari senyawa aktif/metabolit sekunder golongan senyawa fenolat dan terpenoid yang ada dalam ekstrak Sargassum sp..

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etil  asetat Sargassum sp. memiliki  kemampuan  toksisitas  terhadap  larva A.  aegypti instar  III  dengan  nilai  LC 50 -72  sebesar 996,28 ppm. Namun dari hasil tersebut perlu dilakukan uji lebih lanjut agar potensi Sargassum sp. sebagai larvasida dapat dimaksimalkan.

## DAFTAR PUSTAKA
Adinata, I.P.K., Anam, K. & Kusrini, D. 2013. Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Fraksi Aktif Daun  Jarak  Pagar  ( Jatropha  curcas L.)  dan  Uji  Aktivitas  Larvasida  terhadap  Larva  Nyamuk Aedes aegypti . Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi , 16(2):42-45.
Agustina, E., Andiarna, F.,  Lusiana, N., Purnamasari, R. & Hadi, M.I. 2018. Identifikasi Senyawa Aktif  Dari  Ekstrak  Daun  Jambu  Air  ( Syzygium  aqueum )  dengan  Perbandingan  Beberapa Pelarut Pada Metode Maserasi. Biotropic , 2(2):108-118.
Alen, Y., Agresa, F.L. & Yuliandra, Y. 2017. Analisis Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan Aktivitas Antihiperurisemia  Ekstrak  Rebung Schizostachyum  brachycladum Kurz  (Kurz)  pada  Mencit Putih Jantan. Jurnal Sains Farmasi dan Klinis , 3(2):146-152.
Arum, Y.P., Supartono & Sudarmin. 2012. Isolasi dan Uji Daya Antimikroba Ekstrak Daun Kersen ( Muntingia calabura ). Jurnal MIPA , 35(2):165-174.
Budimarwanti, C. 2007. Sintesis Senyawa Bibenzil Dari Bahan Awal Vanilin Melalui Reaksi Wittig dan Hidrogenasi Katalitik. Universitas Negeri Yogyakarta, Yogyakarta.
Ervina,  N.,  Pratiwi,  L.&  Natalia,  D.  2014.  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol  Daun  Singkong  ( Manihot utilissima Pohl)  Sebagai  Larvasida Aedes  aegypti . Jurnal  Mahasiswa  PSPD  FK  Universitas Tanjungpura, 1(1):1-12
Fajriaty,  I.,  Hariyanto,  Saputra,  I.R.  &  Silitonga,  M..  2017.  Skrining  Fitokimia  dan  Analisis Kromatografi Lapis Tipis dari Ekstrak Etanol Buah Lerak ( Sapindus rarak ). Jurnal Pendidikan Informasi dan Sains , 6(2):243-256.
Kementerian Kesehatan RI. 2010. Buletin Jendela Epidemiologi . 2:1-45.
Khadijah,  K.,  Jayali,  A.M.,  Umar,  S.  &  Sasmita,  I.  2017.  Penentuan  Total  Fenolik  dan  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Etanolik  Daunsamama  ( Anthocephalus  macrophylus )  Asal  Ternate, Maluku Utara. Jurnal Kimia Mulawarman , 15(1):11-18.
Leksono, W.B., Pramesti, R., Santosa, G.W. & Setyati, W.A. 2018. Jenis Pelarut Metanol dan N- Heksana Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Rumput Laut Gelidium sp. dari Pantai Drini Gunungkidul – Yogyakarta. Jurnal Kelautan Tropis , 21(1):9-16.
Lestari,  P.P.,  Kusrini,  D.  &  Anam,  K.  2014.  Anthocyanin  Identification  of  Methanol-HCl  Extract Active  Fraction  in  Rosella  ( Hibiscus  sabdariffa L)  and  Its  Potential  as  Xanthine  Oxidase Inhibitor. Jurnal Sains dan Matematika , 22(3):72-78.
Leuwol, C.F., Batu, D.T.F.L. & Affandi, R.. Uji Toksisitas Akut Insektisida Karbamat Terhadap Ikan Mas, Cyprinus carpio Linnaeus, 1758. Jurnal Iktiologi Indonesia , 18(3):191-198.
Mary, J.S., Vinotha P. & Pradeep, A.M. 2012.  Screening for in vitro Cytotoxic Activity of Seaweed, Sargassum sp.  Against  Hep-2  and  MCF-7  Cancer  Cell  Lines. Asian  Pasific  of  Cancer Prevention , 13:6073-6076.
Mukhriani.  2014.  Ekstraksi,  Pemisahan  Senyawa,  dan  Identifikasi  Senyawa  Aktif. Jurnal Kesehatan , 7(2):361-367.
Noshirma, M. & Willa, R.W. 2016. Larvasida Hayati Yang Digunakan Dalam Upaya Pengendalian Vektor Penyakit Demam Berdarah di Indonesia. Sel Jurnal Penelitian Kesehatan, 3(1):31-40.
Rahmayanti, R.,  Putri, S.K.  & Fajarna, F., 2016. Uji Potensi Kulit Bawang Bombay ( Allium cepa ) Sebagai  Larvasida  Terhadap  Kematian  Larva  Nyamuk Aedes  aegypti . Jurnal  Edukasi  dan Sains Biologi , 5(1):18-22.
Rochmat, A., Bahiyah, Z. & Adiati, M.F. 2016. Pengembangan Biolarvasida Jentik Nyamuk Aedes aegypti Berbahan Aktif Ekstrak Beluntas ( Pluchea indica Less.). Reaktor , 16(3):103-108. Suryani, E. . 2018. Gambaran Kasus Demam Berdarah Dengue di Kota Blitar Tahun 2015-2017. Jurnal Berkala Epidemilogi , 6(3):260-267.
Susanti,  A.D.,  Dwi, A.,  Gita,  G.  &  Yosephin, B.G.  2012. Polaritas  Pelarut  Sebagai  Pertimbangan Dalam Pemilihan Pelarut Untuk Ekstraksi Minyak Bekatul dari Bekatul Varietas Ketan ( Oriza sativa Glatinosa ). Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Susanty  &  Bachmid,  F.  2016.  Perbandingan  Metode  Ekstraksi  Maserasi  dan  Refluks  Terhadap Kadar Fenolik dari Ekstrak Tongkol Jagung ( Zea Mays L.). Konversi , 5(2):87-93.
Valentina, J., Poonguzhali, T.V. & Josmin, L.N.L.L. 2015. Mosquito Larvicidal and Pupicidal Activity of  Seaweed  Extracts  Against Aedes  aegypti , Anopheles  stephensi and Culex quinquefasciatus . International Journal of Mosquito Research , 2(4):54-59. Widawati, M. & Prasetyowati, H. 2013. Efektivitas Ekstrak Buah Beta vulgaris L. (Buah Bit) Dengan Berbagai Fraksi Pelarut Terhadap Mortalitas Larva Aedes aegypti . Aspirator , 5(1):23-39. Wulandari, L. 2011. Kromatografi Lapis Tipis. Cetakan 1. PT Taman Kampus Presindo, Jember. Yu,  K.X.,  Wong,  C.L.,  Ahmad,  R.  &  Jantan,  I.  2015.  Larvicidal  Activity,  Inhibition  Effect  On Development, Histopathological Alteration and Morphological Aberration Induced By Seaweed Extracts  In Aedes  aegypti (Diptera:  Culicidae). Asian  Pasific  Journal  Of  Tropical  Medicine , 8(2):1006-1012.