## PEMANFAATAN HEWAN COBA PADA PENELITIAN NEURODEGERATIF
David Pakaya 1* , Rina Susilowati 2
1 Departemen Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Tadulako
2 Departemen Histologi Fakultas Kedokteran, Kesehatan Masyarakat dan Keperawatan UGM
* Email: davidpakaya@ymail.com

## ABSTRAK
Penyakit  neurodegeneratif  berhubungan  dengan  kerusakan  bahkan  kematian  sel -sel  saraf progresif. Untuk mempelajarinya diperlukan suatu kondisi serupa dari penyakit manusia pada hewan  coba.  Famili muri dae merupakan  hewan  coba  yang  paling  sering  digunakan.  Penelitian ini  bertujuan  untuk  Mengetahui  berbagai  metode  pengkondisian  hewan  coba  telah  dikembangkan dan digunakan dalam penelitian penyakit neurodegenratif. Dilakukan penelusuran literatur secara on- line dengan  menggunakan search  engine PubMed dengan  kata  kunci "animal  model"  AND "neurodegenerative". Berbagai metode pengkondisian hewan coba tersebut dapat dilakukan dengan cara merekayasa genetika, model cedera ataupun induksi bahan kimiawi dengan berbagai metode.
Kata kunci: hewan coba, muridae , neurodegeneratif

## ABSTRACT
Neurodegenerative  diseases  are  associated  with  damage  and  progressive  apoptosis  or  necrosis  of nerve cells. To study about neurodegenerative diseases we were need a condition similar to human disease  in  experimental  animals.  The  muridae  family  is  the  most  commonly  used  experimental animal.  This  research  aims  to  find  out  various  methods  of  conditioning  experimental  animals  that have been developed and used in research into neurodegenerative diseases. Online literature search was  performed  using  the  PubMed  search  engine  with  the  keyword  "animal  model"  AND "neurodegenerative". Various methods of conditioning experimental animals can be done by genetic manipulation, injury models or chemical induction.
Keywords: animal model, muridae, neurodegenerative

## PENDAHULUAN
Penyakit neurodegeneratif adalah penyakit dari sistem saraf yang berhubungan  dengan  kerusakan  bahkan kematian sel-sel saraf yang bersifat progresif 1 .  Munculnya  penyakit  ini  akan merubah  fungsi  fisiologis  tubuh,  seperti pengolahan informasi sensorik dan motorik maupun  fungsi  luhur.  Beberapa  contoh gangguan  yang  muncul  sebagai  akibat kerusakan atau kematian sel saraf
(neurodegenerasi) adalah
Amyotrophic Lateral sclerosis (ALS), Alzheimer, Parkinson, multiple sclerosis , Stroke,
Spinal Cord Injury (SCI) dan lain-lain 1,2 .
Untuk  mencari  jalan  keluar  dari permasalahan akibat penyakit neurodegeneratif  maka  perlu  dilakukan
berbagai penelitian. Penelitian yang dilakukan  mulai  dari  penelitian  dasar, penelitian terapan maupun uji-klinis termasuk  upaya  preventif 2 .  Penelitian  ini harus  menggunakan  subyek  hewan  dan bukan  manusia,  sehingga  diperlukan  suatu kondisi  serupa  dari  penyakit  manusia  pada hewan  coba.  Penyakit  tertentu  menyebabkan perubahan pada organ tertentu secara spesifik 1,2 . Berbagai metode telah
dikembangkan  untuk  mendapatkan  kondisi serupa  tersebut.  Metode  pengkondisian hewan coba ini bergantung pada penyakitnya.  Seluruh  efek  dan  gejala  yang muncul  akibat  pengkondisian  pada  hewan coba  harus  diamati  secara  detail.  Penelitian penyakit neurodegeneratif menggunakan hewan  coba  saat  ini  telah  berkontribusi menjelaskan  konsep  biologis,  sampai  terapi dan  prognosis.  Famili  muridae  termasuk mencit  dan  tikus  merupakan  hewan  coba yang paling sering digunakan dalam penelitian laboratorium 1,3 .
Artikel  ini  akan  membicarakan  berbagai metode pengkondisian hewan coba  yang telah dikembangkan dan digunakan dalam penelitian penyakit neurodegenratif.

## METODE
Prosedur  pencarian  literatur  dilakukan dengan  penelusuran  pustaka  secara on-line dengan  menggunakan search  engine PubMed yang dilakukan pada 16 Juni 2015 . Kata kunci yang  digunakan  adalah: "animal  model"  AND "neurodegenerative". Literatur yang digunakan  merupakan  publikasi free  fuul  text berbahasa  Inggris,  rentang  waktu  5  tahun 2010-2015.  Pada  penelusuran  ini  didapatkan 196  artikel.  Kriteria  inklusi  dipersempit dengan jenis publikasi hasil penelitian dengan menggunakan  subyek  hewan  coba  dari  famili muridae yang dilakukan pengkondisian penyakit neurodegeneratif .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hewan  coba  merupakan  hewan  yang sengaja  dipelihara  untuk  dipakai  sebagai hewan  model  suatu  kondisi  dalam  skala penelitian atau pengamatan laboratoris. Dalam menggunakan hewan coba harus mempertimbangkan  banyak  hal.  Dimulai dengan  melihat  kesesuaian  atau  kesamaan dengan  manusia,  kepraktisan  dari  sisi  analisis dan  ekonomis,  dan  pertimbangan  lainnya. Penggunaan hewan coba juga harus memenuhi segala  kebutuhan  fisiologis  hewan  coba  dan etik 2,3 .
Pemilihan  famili muridae sebagai  hewan coba  karena  mempunyai  banyak  keunggulan, antara lain banyak gennya relatif mirip dengan manusia,  kemampuan  berkembangbiak  tinggi, cocok  untuk  digunakan  dalam  eksperimen massal,  bentuk  badan  kecil  dan  mudah dipelihara  serta  berharga  murah.  Famili muridae juga  dapat  membuat  penelitian  lebih efisien  karena  anatomi,  fisiologi  dan  gennya telah diketahui 3 .

## Hewan coba sebagai pendukung penelitian neurodegeneratif
Jalur  patologis  seluler  dan  molekuler merupakan dasar dari penyakit-penyakit
neurodegeneratif 4 .  Jalur  ini  menjadi  dasar dalam  penelitian  baik  untuk  diagnosis  sampai target  terapi.  Diperlukan  kondisi  yang  serupa dengan keadaan patologis pada manusia untuk penelitian  pada  hewan  coba.  Untuk  itu  telah dikembangkan  berbagai  metode  pembuatan hewan model yang mendukung upaya tersebut. Dalam  mempelajari  fungsi  gen  pada  hewan coba/model  secara langsung dikenal  dengan 2 cara,  yaitu  transgenik  dan  penginaktifan  gen ( gene  disruption/gene  knock  out )  serta  model traumatik 1,3 .
Hewan  model  transgenik  dan knockout gene/gene disruption neurodegeneratif Hewan  transgenik  merupakan  hewan model  yang  memiliki  genom/susunan  gen yang  telah  dimodifikasi  dengan  rekayasa genetik dan dapat diturunkan 5 . Pada organisme transgenik,  gen  atau  fragmen  DNA  yang dimasukkan bisa merupakan gen atau fragmen DNA yang ditemukan pada organisme tersebut (endogen)  dengan  tujuan  untuk  mendapatkan ekspresi  yang  lebih  kuat  (overekspresi  gen), maupun  gen  atau  fragmen  DNA  yang  tidak ditemukan pada organisme tersebut (eksogen). Secara  umum  hewan  transgenik  digunakan untuk  mempelajari  regulasi  gen-gen  yang terkait  dengan  regulasi  biologi  maupun  gen- gen  yang  spesifik  pada  jaringan  atau  kondisi tertentu  dan  untuk  mempelajari  fenotip  dari gen pada jaringan 5,6 .
Pada  tabel  1,  memperlihatkan  berbagai model  hewan  dari  famili muridae yang digunakan  dalam  penelitian  neurodegeneratif. Beberapa  model  penyakit  telah  dihasilkan dengan metode transgenik. Satu  hewan model dapat dikembangkan menjadi berbagai kondisi penyakit  neurodegeneratif,  dan  untuk  1 kondisi  penyakit  dapat  dibentuk  dengan beberapa  metode  yang  berbeda.  Seperti Alzheimer  Sejumlah  mutasi  genetik  telah
dikaitkan  dengan  perubahan  patologis  yang terjadi  di  otak  pada  kasus  ini.  Dengan menggunakan model hewan transgenik Alzheimer berperan dalam menjelaskan regulasi  biologi  yang  terjadi,  misalnya  pada tikus APP transgenik, patologis dan perubahan fungsional  terjadi  sebelum  munculnya  plak amiloid 7,8,9 .  Pada  model  penyakit  Huntington dibentuk dengan penyisipan dan/atau perluasan  Polyglutamine  yang  terulang  pada posisi  N-terminal  dari  protein  huntingtin padaseluruh  fragmen  DNAnya 10,11 .  Teknik molekuler  untuk  model  ALS  yang  paling relevan  secara  klinis  ini  adalah  tikus transgenik  yang  mengekspresikan  mutasi  gen SOD1 12,13,14 . Untuk menghasilkan hewan model transgenik,  metode  yang  pertama  adalah mikroinjeksi. Proses transgenik diawali dengan memasukan/injeksi pronuklear fragmen DNA atau gen asing 5 . Fragmen DNA atau  gen  ini  harus  mengandung  promoter, complete protein coding region dan polyadenylation site 5 , 6 , 11 , 15 . Proses mikroinjeksi ini dilakukan dengan jarum halus ke  dalam  telur  (pronukleus)  hewan  model yang telah dibuahi. Transgen  yang didapatkan selanjutnya  di  amplifikasi  dengan Polymerase Chain  Reaction  (PCR) Hasil  PCR  ini  yang selanjutnya  ditanam  pada cloning  site dari plasmid  vektor  menggunakan  ligase.  Vektor ini  ditransfersikan  ke  dalam  bakteri  khusus melalui teknik heat shock . Selanjutnya bakteri dibiakan pada media agar. Plasmid  yang telah mengandung transgen ini selanjutnya diisolasi dari bakteri, dan fragmen transgen ini diisolasi dengan enzim restriksi. Terakhir adalah proses pemurnian pada gel agarose 5,16,17,18 .
Tabel 1. Hewan model dengan metode transgenik
Hewan Model Mutasi gen Metode Model Penyakit Referensi Mencit C57BL/6 c.307insC Gen CLN6 Retrovirus-mediated gene transfer NCL 15 Tikus FVB 498InsTC Mikroinjeksi Neuroferritinopathy 19 Mencit Tg2576 Gen FAD K670N, M671L Mikroinjeksi Alzheimer's Disease 3 , 20 Tikus Sprague Dawley SOD1-G93A ALS 21 Tikus BACHD full-length gene Human Htt CAG 97 HD 10 Tikus tgHD51 Fragment Transgenic  CAG 51 HD 11 Mencit B6SJL/C57BL/6 SOD1-G93A ALS 12,13,14,17,18, 22,23,24,25,26, 27,28,29,30 Mencit R26CT Cre-Lox Alzheimer's Disease 16 Mencit APP/PS1- 21 L166P Alzheimer's Disease 8 , 9 mencit C57BL/KsJ- db/db gen reseptor leptin Diabetic Retinal Neurodegeneration 31 Mencit rTgTauEC FVBTg(tetO- TauP301L) Alzheimer's Disease 32 Tikus SCA17 TBPQ64 Mikroinjeksi Spinocerebellar ataxia 33 Mencit R6/2 Repeat CAG HD 34 Mencit HuAPP695swe PSEN1dE9 Alzheimer's Disease 35 Mencit IL-1βXAT B/b Microinjeksi Neuroinflammation 36 Mencit 3xTg-AD APP K670N, M671L; PSEN1 M146V; tau P301L Alzheimer's Disease 37 Mencit B6C3F1/J A53T mutant α-syn. Parkinson 38 Mencit PEX13flox/flox Nestin-Cre Cre-Lox ZS 39 Mencit C57BL/6 Blocking ADAM10709- 729 Alzheimer's Disease 40
NCL: Neuronal ceroid lipofuscinosis
ALS: AmyotrophicLateral Sclerosis HD: Huntington's Disease ZS: Zellweger syndrome
Metode  kedua  adalah  transfer  fragmen DNA  atau  gen  dengan  media  retrovirus. Fragmen  DNA  atau  Gen  ditransferkan  pada media  retrovirus  sebagai  vektor,  kemudian hasil  transfer  tersebut  diinjeksikan  ke  dalam sel inang. DNA dari retrovirus berintegrasi ke dalam gen untuk bekerja. Masuknya retrovirus akan  menginfeksi  inang,  namun  retrovirus
bekerja  memproduksi copy DNA  dari  genom mRNA menggunakan enzim reverse transcriptase 6 , 15 .  Metode  yang  dijelaskan  di atas untuk mentransfer gen asing mengandalkan  integrasi.  Adapula  DNA  yang dimasukkan  ke  dalam  genom  inang.  Secara teoritis,  dengan  menggunakan  vektor  episom mampu  melakukan autoreplicating di  sel inang  dan  mentransfer  DNA  untuk  sel anakan 6 .
Metode  ketiga  adalah  teknologi  sel punca  embrionik,  Teknologi  ini  dilakukan
dengan mengenalkan DNA ke dalam sel punca embrional  yang  bersifat  pluripotensi.  Sel punca  embrional  didapatkan  dari  embrio preimplantasi  (morula  dan  blastosis)  yang dikultur, dengan manipulasi in vitro .
Selanjutnya  sel  tersebut  diinjeksi  langsung
pada  blastosit host atau  diinkubasikan  dengan morula. Embrio host kemudian ditransfer pada host intermediate atau  betina  pengganti  untuk kelanjutan  perkembangan.  Untuk  alasan  yang tidak  diketahui,  metode  ini  hanya  digunakan sampai turunan kedua 5,6 .
Tabel 2. Hewan model dengan metode Knockout
Hewan Model Perlakuan/Mutasi Metode Model Penyakit Referensi Mencit C57BL/6 Delesi exon 3 (parkin-/-) Cre-Lox Deletion Parkinson 41 Mencit S100A9 K670N/M671L AD 42 Mencit C57BL/6 IDS-ko Hunter Syndrome 43 Aicda deficient mice Induksi MOG125 Cre-Lox Insertion MS 44 Tikus Trembler-J MAG−/− Mencit C57BL/6 Aldh1a1 Cre-Lox Deletion Parkinson 45 Mencit C57BL/6 IFNAR-/-, IL10 KO Cre-Lox Deletion MS 46 Mencit C57BL/6 FGF-2)/) MS 47 C57BL/6J Olig1-/- Cre-Lox Deletion MS 48 Tikus CGG Knock-In (CGG repeat) Homolog Rekombinan Ataxia 49
Knockout  gene merupakan  metode menonaktifkan suatu  gen tertentu dengan cara membuat  gen  tersebut  menjadi  mutan. Tujuannya  untuk  mempelajari  fungsi  gen  dan regulasi  biologinya.  Perkembangan  teknologi DNA sequencing sangat  membantu  dalam membuat hewan model knockout 6 .
Pada  tabel  2,  memperlihatkan  berbagai model  hewan  yang  di  knockout  untuk menghasilkan kondisi  penyakit. Pada multiple sclerosis  beberapa  gen  yang  mengekspresikan berbagai  molekul  imunologis  dihilangkan 46,50 maupun  diinsersikan 44 untuk  menghasilkan kondisi  autoimun.  Pada  penyakit  Parkinson’s sel  dilakukan  dengan  system  cre-lox  deletion dengan menghilanghkan gen-gen yang berkaitan  dengan  terjadinya  penyakit  ini seperti gen parkin 41,45 .
Salah satu teknik untuk membuat knockout gen  adalah  dengan  menggunakan transposons.  Transposon  adalah  suatu  urutan DNA  yang  dapat  bergerak  atau  berpindah posisinya  dalam  suatu  genom  (transposisi). Dalam proses transposisi ini, dapat menyebabkan  mutasi  dan  perubahan  pada
DNA dalam suatu genom. Terdapat teknik lain juga  untuk  membuat knockout gen,  yaitu dengan menggunakan metode homolog rekombinan,  yaitu  dengan  cara  mengubah urutan gen. Pada homolog rekombinan, terjadi pertukaran  gen  pada  suatu  lokus,  yang  terjadi oleh karena pengenalan daerah atau urutan gen yang serupa 6,51,52 .
Metode Cre LoxP adalah jenis rekombinasi  DNA  yang  disbeut  sebagai site- specific
recombination .
Cre-Lox
recombination  adalah  jenis  rekombinasi  yang memiliki  target  pada  untai  DNA  spesifik kemudian  memotongnya  dengan  bantuan enzim  yang  disebut  sebagai Cre  recombinase . Cre- sebagai suatu protein enzim spesifik pada DNA.  Enzim  ini  mengkatalisis  rekomendasi DNA  di  antara  dua  lokasi  yang  spesifik sepanjang molekul DNA. Cre- dapat mengenali  LoxP.  LoxP  merupakan  untaian asam  nukleat  yang  terdapat  di  dalam  DNA. Saat  sel  memiliki  LoxP  pada  untaian  gen-nya juga  mengekspresikan  Cre,  maka  dapat dilakukan  rekombinasi  di  antara  kedua  lokasi LoxP 5 .  Metode  ini  dapat  dibuat  dengan  cara
mendelesi area atau target yang dikenalinya 41,46 atau  dengan  cara  insersi  pada target 50 .  Beberapa  model  penyakit  menuntut untuk  dilakukan  kombinasi  dari  beberapa metode  transgenik.  Karena  banyak  penyakit terjadi  akibat  efek  gabungan  dari  beberapa mutasi.

## Hewan model cedera neurodegeneratif
Hewan model digunakan untuk mensimulasikan cedera, dengan tujuan mempelajari patomekanisme cedera, diagnosis dan  terapi 4 .  Model  hewan  yang  sering  dibuat adalah  untuk  suatu  model  penyakit,  sehingga untuk  menghasilkan  hewan  model  cedera harus dilakukan manipulasi traumatik eksperimental  sesuai  standar.  Untuk  menjadi model  cedera,  hewan  harus  mirip  secara etiologi dan fungsinya dengan manusia. Secara umum, model eksperimental bisa terjadi secara alami  misalnya  hewan  yang  kecelakaan, penyakit  bawaan,  atau  diinduksi  (bedah,
genetik  rekayasa)  yang  mirip  dengan  kondisi manusia 2,3 .
Untuk  membuat  hewan  model  cedera paling  mungkin  adalah  menggunakan  metode bedah 3 ,  berikut  adalah  beberapa  metode pembuatan  hewan  model  cedera.  Kompresi, dilakukan dengan penekanan atau penjempitan menggunakan  alat  berupa impactor ataupun klem dengan menyesuaikan kekuatan tekanannya. Hasilnya  ditandai  dengan  adanya memar, hemoragik nekrosis, iskemia, peradangan,  dan  kavitasi.  Transeksi,  yang digunakan pada hewan model SCI, merupakan kerusakan  segmen  tulang  belakang.  Transeksi medula spinalis dilakukan setelah Laminektomi  dengan  gunting  bedah,  dan disesuaikan  dengan  target  kerusakannya. Model  Iskemik,  metode  ini  menggunakan sternotomi  anterior  dengan  oklusi  aorta. Metode  kombinasi,  untuk  beberapa  tujuan tertentu, menggunakan kombinasi dari berbagai metode lainnya 3 .
Tabel 3. Hewan model dengan metode cedera dan induksi
Hewan Model Perlakuan/prinsip injuri Model Penyakit Referensi Mencit C57BL/6J controlled cortical impact (CCI) mTBI 53 Mencit C57BL/6J controlled cortical impact (CCI)/ Chronic Traumatic Encephalopathy mTBI 54 Mencit BALB/c Cecal Ligation & Puncture Sepsis 55 Tikus Wistar ICV-STZ Alzheimer's Disease 56 Tikus Lewis indusi EAE MS 57 , 58 , 59 Mencit C57BL/6 indusi EAE MS 60 , 61 , 62 Mencit C57BL/6 Injeksi MOG35–55 MS 63 , 64 , 65 mencit hTau dan Tau−/− Injeksi MOG35–55 MS 66 Tikus Sprague-Dawley dan Mencit C57BL/6 injeksi MPTP Parkinson’s 67 Tikus Wistar Injeksi 6-OHDA pada SNC Parkinson’s 68 Mencit TWEAK-/-, Fn14-/- and TNFa-/- MCAO Iskemia Serebral 69 Mencit SJL/L indusi EAE MS 70 Mencit CD-1 Inhalasi Mn2+/Mn3+ Parkinson’s 71 mTBI: mild traumatic brain injury
ICV-STZ: intracerebroventricular injection of streptozotocin MS: Multiple sclerosis
MCAO: Middle cerebral artery Occlusion Bivalent and Trivalent Managanese (Mn2+/Mn3+)
Pada  Tabel  3,  memperlihatan  berbagai  hewan model yang trauma maupun penyakit neurodegenerative menggunakan metode induksi  bukan  rekayasa  genetika. Traumatic brain  injury (TBI)  adalah  penyebab  utama mortalitas  dan  morbiditas 3 .  Penderitaya  akan mengalani  kognisi  jangka  panjang,  perubahan fungsi  sensorimotor  dan  kepribadian.  Salah satu  cara  untuk  mempelajari  mekanisme patologisnya  dengan  hewan  coba  yang  dibuat model  cedera  dengan  metode. Controlled cortical  impact  injury (CCI),  pembuatan hewan  model  ini  menggunakan  dampak pneumatik  atau  elektromagnetik  dari  suatu perangkat  untuk  menekan  area  tertentu  dari otak  yang  akan  dicederai,  tujuannya  menekan dura  dan  meniru  kehilangan  jaringan  kortikal, subdural  akut  hematoma,  cedera  aksonal maupun gegar otak 53,54 .
Selain  itu,  beberapa  model  penyakit neurodegenartif, dapat dibentuk dengan menggunakan  induksi  bahan  tertentu  yang akan  mengganggu  keadaan  neurofisiologi. Cara  yang  digunakan,  paling  mudah  adalah secara  subkutan 64,57 ,  injeksi  intraperitoneal MPTP  dalam  menyebabkan  parkinsons 67 inhalasi,  keuntungannya  meminimialisir  efek traumatik 71 .

## KESIMPULAN DAN SARAN
Dalam
mempelajari penyakit neurodegenratif  baik  secara  preklnis  maupun klinis,  harus  menggunakan  hewan  coba. Hewan  coba  yang  dibuat  harus  dikondisikan dengan  keadaan  patologis  dan  etiologinya. Etiologi dan patogenesisnya akan menentukan metode  yang  akan  digunakan.  Hewan  model neurodegenerative dapat dibuat dengan merekayasa  genetika  ataupun  model  cedera dan  induksi  berbagai  bahan  kimiawi  dengan berbagai metode.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Narayanan R. Neurodegenerative Diseases:  Phenome  to  Genome  Analysis. MOJ Proteomics Bioinforma .
2014;2(1):00033.
doi:10.15406/mojpb.2015.02.00033
2.   Poindron  P,  Callizot  N,  Piguet  P.  New Animal  Models  of  Human  Neurological Diseases.  In: BioValley  Monogr.  Basel, Karger . ; 2008:1-10.
doi:10.1159/000117719
3.   Sharif-Alhoseini M, Rahimi-Movaghar V. Animal Models in Traumatic Spinal Cord Injury. In: Quevado A, ed. Brain Damage -  Bridging  Between  Basic  Research  and Clinics . InTech; 2012. doi:10.5772/57189 4.   Kim  Y,  Kim  Y,  Hwang  O,  Jin  D. Pathology of Neurodegenerative Diseases. In:  Quevado  A,  ed. Brain  Damage  - Bridging  Between  Basic  Research  and Clinics . InTech; 2012. doi:10.5772/38028
5.   Miao X. Recent Advances and
Applications of Transgenic Animal Technology.  In:  Rodriguez  PH,  ed. Polymerase  Chain  Reaction .  InTech; 2012:255-282. doi:10.5772/38040
6.   Houdebine  L.  Methods  to  Generate Transgenis  Animals.  In:  Engelhard  M, Hagen  K,  Boysen  M,  eds. Genetic Engineering in Livestock : New Applications and Interdisciplinary Perspectives . Springer; 2009:143.
7.   Gierut  JJ,  Jacks  TE,  Haigis  KM. Strategies  to  achieve  conditional  gene mutation  in  mice. Cold  Spring  Harb
Protoc . 2014;2014(4):339-349. doi:10.1101/pdb.top069807 8.   Zhang  ZY,  Li  C,  Zug C, Schluesener  HJ. Icariin ameliorates neuropathological changes, TGF-β1 accumulation and behavioral  deficits  in  a  mouse  model  of cerebral amyloidosis. PLoS One . 2014;9(8).
doi:10.1371/journal.pone.0104616
9.   Zhang  ZY,  Daniels  R,  Schluesener  HJ. Oridonin  ameliorates  neuropathological changes  and  behavioural  deficits  in  a mouse  model  of  cerebral  amyloidosis. J
Cell  Mol  Med .  2013;17(12):1566-1576. doi:10.1111/jcmm.12124
10.  Jansson  EKH,  Clemens  LE,  Riess  O, Nguyen  HP.  Reduced  motivation  in  the BACHD  rat  model  of  huntington  disease is  dependent  on  the  choice  of  food deprivation strategy. PLoS One . 2014;9(8).
doi:10.1371/journal.pone.0105662 11.  Y  M,  M  A,  I  N,  A  B.  Transgenic  Rat
Model  of  Huntington’s  Disease:  A Histopathological  Study  and  Correlations With  Neurodegenerative  Process  in  the Brain  of  HD  Patients. Biomed  Res  Int .
2014. doi:10.1155/2014/291531
12.  Nascimento F, Pousinha PA, Correia AM, Gomes  R,  Sebastião  AM,  Ribeiro  JA. Adenosine  A2A  receptors  activation facilitates  neuromuscular  transmission  in the pre-symptomatic phase of the SOD1(G93A)  ALS  mice,  but  Not  in  the symptomatic phase. PLoS One . 2014;9(8). doi:10.1371/journal.pone.0104081
13.  Lee  S-H,  Choi  S-M,  Yang  EJ.  Melittin Ameliorates  the  Inflammation  of  Organs in  an  Amyotrophic  Lateral  Sclerosis Animal Model. Exp Neurobiol .
2014;23(1):86-92.
doi:10.5607/en.2014.23.1.86 14.  Kong  Q,  Chang  LC,  Takahashi  K,  et  al.
Small-molecule  activator  of  glutamate transporter  EAAT2  translation  provides neuroprotection. J Clin Invest . 2014;124(3):1255-1267. doi:10.1172/JCI66163
15.  Jankowiak W, Kruszewski K, Flachsbarth K, et  al. Sustained neural  stem  cell-based intraocular  delivery  of  CNTF  attenuates photoreceptor  loss  in  the  nclf  mouse model  of  neuronal  ceroid  lipofuscinosis.
PLoS One . 2015;10(5). doi:10.1371/journal.pone.0127204
16.  Furgerson  M,  Clark  JK,  Crystal  JD, Wagner  JJ,  Fechheimer  M,  Furukawa  R. Hirano  body  expression  impairs  spatial working memory in a novel mouse model. Acta  Neuropathol  Commun .  2014;2(1).
doi:10.1186/s40478-014-0131-9
17.  Zhang  X,  Chen  S,  Song  L,  et  al.  MTOR- independent, autophagic enhancer trehalose  prolongs  motor  neuron  survival and ameliorates the autophagic flux defect in  a  mouse  model  of  amyotrophic  lateral sclerosis. Autophagy .  2014;10(4):588- 602. doi:10.4161/auto.27710
18.  Gerber  YN,  Privat  A,  Perrin  FE. Gacyclidine  improves  the  survival  and reduces  motor  deficits  in  a  mouse  model of  amyotrophic  lateral  sclerosis. Front
Cell Neurosci . 2013;7(DEC).
doi:10.3389/fncel.2013.00280
19.  Capoccia  S,  Maccarinelli  F,  Buffoli  B,  et al.  Behavioral  characterization  of  mouse models of neuroferritinopathy. PLoS One . 2015;10(2). doi:10.1371/journal.pone.0118990 20.  AbdAlla S,  Langer A,  Fu X, Quitterer U.
ACE  inhibition  with  captopril  retards  the development of
signs of
neurodegeneration  in  an  animal  model  of Alzheimer’s  disease. Int  J  Mol  Sci . 2013;14(8):16917-16942.
doi:10.3390/ijms140816917
21.  Thomsen  GM,  Gowing  G,  Latter  J,  et  al. Delayed  disease  onset  and  extended survival  in  the  SOD1G93A  rat  model  of amyotrophic lateral sclerosis after suppression of mutant SOD1 in the motor cortex. J  Neurosci .  2014;34(47):15587- 15600. doi:10.1523/JNEUROSCI.2037- 14.2014
22.  de Oliveira GP, Alves CJ, Chadi G. Early gene  expression  changes  in  spinal  cord from  SOD1G93A  amyotrophic  lateral sclerosis  animal  model. Front  Cell Neurosci . 2013;6(NOV). doi:10.3389/fncel.2013.00216
23.  Milanese M, Giribaldi F, Melone M, et al. Knocking  down  metabotropic  glutamate receptor  1  improves  survival  and  disease progression  in  the  SOD1G93A  mouse model  of  amyotrophic  lateral  sclerosis.
Neurobiol
Dis . 2014;64:48-59. doi:10.1016/j.nbd.2013.11.006 24.  Yang EJ, Choi S-M. α -Synuclein
Modification  in  an  ALS  Animal  Model.
Kohlmeier M, ed. Evidence-Based Complement Altern Med . 2013;2013:259381.
doi:10.1155/2013/259381
25.  Lilo  E,  Wald-Altman  S,  Solmesky  LJ,  et al.  Characterization  of  human  sporadic ALS  biomarkers  in  the  familial  ALS transgenic  mSOD1G93A  mouse  model. Hum  Mol  Genet .  2013;22(23):4720-4725. doi:10.1093/hmg/ddt325
26.  Eschbach  J,  Schwalenstöcker  B,  Soyal SM,  et  al.  PGC-1α  is  a  male-specific disease modifier of human and experimental
amyotrophic lateral
sclerosis. Hum Mol Genet .
2013;22(17):3477-3484. doi:10.1093/hmg/ddt202
27.  Gerber  YN,  Sabourin  J-C,  Rabano  M,
Vivanco  M  d  M,  Perrin  FE.  Early Functional Deficit and Microglial Disturbances  in  a  Mouse  Model  of Amyotrophic Lateral Sclerosis. Cai H, ed. PLoS One . 2012;7(4):e36000. doi:10.1371/journal.pone.0036000
28.  Finkelstein  A,  Kunis  G,  Seksenyan  A,  et al.  Abnormal  Changes  in  NKT  Cells,  the
IGF-1  Axis,  and  Liver  Pathology  in  an Animal  Model  of  ALS.  Zimmer  J,  ed. PLoS One . 2011;6(8):e22374.
doi:10.1371/journal.pone.0022374
29.  Henriques  A,  Pitzer  C,  Dittgen  T, Klugmann  M,  Dupuis  L,  Schneider  A. CNS-targeted  viral  delivery  of  G-CSF  in an  animal  model  for  ALS:  improved efficacy and preservation of the neuromuscular unit. Mol Ther . 2011;19(2):284—292. doi:10.1038/mt.2010.271
30.  Zhou  JY,  Afjehi-Sadat  L,  Asress  S,  et  al. Galectin-3  is  a  candidate  biomarker  for amyotrophic  lateral  sclerosis:  Discovery by  a  proteomics  approach. J  Proteome Res . 2010;9(10):5133-5141. doi:10.1021/pr100409r 31.  Bogdanov  P,  Corraliza  L,  Villena  JA,  et al.  The  db/db  mouse:  A  useful  model  for the
study of diabetic retinal neurodegeneration. PLoS  One .  2014;9(5). doi:10.1371/journal.pone.0097302
32.  Polydoro  M,  de  Calignon  A,  Suárez- Calvet M, et al. Reversal of neurofibrillary  tangles  and  tau-associated phenotype  in  the  rTgTauEC  model  of early  Alzheimer’s  disease. J  Neurosci . 2013;33(33):13300-13311.
doi:10.1523/JNEUROSCI.0881-13.2013
33.  Kelp A, Koeppen AH, Petrasch-Parwez E,
et  al.  A  novel  transgenic  rat  model  for spinocerebellar ataxia type 17 recapitulates  neuropathological  changes and  supplies  in  vivo  imaging  biomarkers. J Neurosci . 2013;33(21):9068-9081.
doi:10.1523/JNEUROSCI.5622-12.2013 34.  Im  W,  Ban  J,  Lim  J,  et  al.  Extracts  of
Adipose  Derived  Stem  Cells  Slows
Progression  in  the  R6/2  Model  of
Huntington’s Disease. PLoS One .
2013;8(4). doi:10.1371/journal.pone.0059438 35.  Furman  JL,  Sama  DM,  Gant  JC,  et  al. Targeting astrocytes Ameliorates neurologic  changes  in  a  mouse  model  of Alzheimer’s disease. J Neurosci . 2012;32(46):16129-16140. doi:10.1523/JNEUROSCI.2323-12.2012
36.  Hein  AM,  Zarcone  TJ,  Parfitt  DB,  et  al. Behavioral,  structural  and  molecular changes following long-term hippocampal IL-1β  overexpression  in  transgenic  mice. J Neuroimmune Pharmacol . 2012;7(1):145-155.  doi:10.1007/s11481-
011-9294-3
37.  Caccamo  A,  Maldonado  MA,  Majumder S,  et  al.  Naturally  secreted  amyloid-β increases mammalian target of rapamycin (mTOR)  activity  via  a  PRAS40-mediated mechanism.
J Biol Chem . 2011;286(11):8924-8932.
doi:10.1074/jbc.M110.180638
38.  Gao  HM,  Zhang  F,  Zhou  H,  Kam  W, Wilson  B,  Hong  JS.  Neuroinflammation and  α-synuclein  dysfunction  potentiate each other, driving chronic progression of neurodegeneration  in  a  mouse  model  of Parkinson’s  disease. Environ  Health Perspect . 2011;119(6):807-814. doi:10.1289/ehp.1003013
39.  Müller CC, Nguyen TH, Ahlemeyer B, et al. PEX13 deficiency in mouse brain as a model  of  Zellweger  syndrome:  Abnormal cerebellum formation, reactive gliosis and oxidative  stress. DMM  Dis  Model  Mech . 2011;4(1):104-119.
doi:10.1242/dmm.004622
40.  Epis  R,  Marcello  E,  Gardoni  F,  et  al. Blocking  ADAM10  synaptic  trafficking generates a model of sporadic Alzheimer’s disease. Brain . 2010;133(11):3323-3335.
doi:10.1093/brain/awq217
41.  Rial  D,  Castro  AA,  Machado  N,  et  al.
Behavioral phenotyping of Parkin- deficient mice: Looking for early preclinical features of Parkinson’s disease. PLoS One . 2014;9(12). doi:10.1371/journal.pone.0114216
42.  Kim  HJ,  Chang  KA,  Ha  TY,  et  al. S100A9  knockout  decreases  the  memory
impairment and neuropathology in crossbreed  mice  of  Tg2576  and  S100A9 knockout  mice  model. PLoS  One . 2014;9(2). doi:10.1371/journal.pone.0088924 43.  Fusar Poli E, Zalfa C, D’Avanzo F, et  al.
Murine  neural  stem  cells  model  Hunter disease  in  vitro:  Glial  cell-mediated neurodegeneration as a possible mechanism  involved. Cell  Death  Dis . 2013;4(11). doi:10.1038/cddis.2013.430
44.  Sun  Y,  Peng  I,  Senger  K,  et  al.  Critical role  of  activation  induced  cytidine deaminase  in  Experimental  Autoimmune
Encephalomyelitis. Autoimmunity . 2013;46(2):157-167.
doi:10.3109/08916934.2012.750301
45.  Wey  MCY,  Fernandez  E,  Martinez  PA, Sullivan  P,  Goldstein  DS,  Strong  R.
Neurodegeneration and motor dysfunction in mice lacking cytosolic and mitochondrial  aldehyde  dehydrogenases: Implications  for  parkinson’s  disease. PLoS One . 2012;7(2). doi:10.1371/journal.pone.0031522
46.  Zhang L, Yuan S, Cheng G, Guo B. Type I  IFN  promotes  IL-10  production  from  T cells  to  suppress  Th17  cells  and  Th17- associated autoimmune  inflammation. PLoS One . 2011;6(12). doi:10.1371/journal.pone.0028432
47.  Rottlaender  A,  Villwock  H,  Addicks  K, Kuerten  S.  Neuroprotective  role  of fibroblast growth factor-2 in experimental
autoimmune encephalomyelitis. Immunology . 2011;133(3):370-378. doi:10.1111/j.1365-2567.2011.03450.x 48.  Guo  X,  Harada  C,  Namekata  K,  et  al. Delayed onset
of experimental autoimmune  encephalomyelitis  in  olig1 deficient  mice. PLoS  One .  2010;5(9). doi:10.1371/journal.pone.0013083
49.  Hunsaker  MR,  Arque  G,  Berman  RF, Willemsen  R,  Hukema  RK.  Mouse models  of  the  fragile  X  premutation  and the  fragile  X  associated  tremor/ataxia syndrome. Results  Probl  Cell  Differ .
2012;54:255-269. doi:10.1007/978-3-642-
21649-7_14
50.  Guo  X,  Harada  C,  Namekata  K,  et  al. Delayed
onset of experimental
autoimmune  encephalomyelitis  in  olig1 deficient  mice. PLoS  One .  2010;5(9). doi:10.1371/journal.pone.0013083
51.  Austin  CP,  Battey  JF,  Bradley  A,  et  al. The Knockout Mouse Project. Nat Genet .
2004;36(9):921-924. doi:10.1038/ng0904- 921 52.  Berman RF, Buijsen RAM, Usdin K, et al. Mouse models of the fragile X premutation  and  fragile  X-associated tremor/ataxia  syndrome. J  Neurodev Disord . 2014;6(1). doi:10.1186/1866-
1955-6-25
53.  Petraglia  A,  Plog  B,  Dayawansa  S,  et  al.
The pathophysiology underlying
repetitive mild traumatic brain injury in a novel  mouse  model  of  chronic  traumatic encephalopathy. Surg Neurol Int . 2014;5(1). doi:10.4103/2152-
7806.147566
54.  Petraglia  AL,  Plog  BA,  Dayawansa  S,  et al.  The  spectrum  of  neurobehavioral sequelae  after  repetitive  mild  traumatic brain  injury:  A  novel  mouse  model  of chronic  traumatic  encephalopathy. J Neurotrauma . 2014;31(13):1211-1224.
doi:10.1089/neu.2013.3255 55.  Reisi  P,  Arabpoor  Z,  Rashidi  B,  et  al. Erythropoietin improves neuronal
proliferation in dentate gyrus of hippocampal  formation  in  an  animal model  of  Alzheimer′s  disease. Adv Biomed Res . 2012;1(1):50. doi:10.4103/2277-9175.100157
56.  Santos  T  de  O,  Mazucanti  CHY,  Xavier GF,  da  Silva  Torrão  A.  Early  and  late neurodegeneration and memory disruption after intracerebroventricular streptozotocin. Physiol Behav . 2012;107(3):401-413.
doi:10.1016/j.physbeh.2012.06.019
57.  Das  A,  Guyton  MK,  Smith  A,  et  al. Calpain  inhibitor  attenuated  optic  nerve damage  in  acute  optic  neuritis  in  rats. J Neurochem .
2013;124(1):133-146. doi:10.1111/jnc.12064
58.  Paintlia  AS,  Paintlia  MK,  Hollis  BW, Singh  AK,  Singh  I.  Interference  with RhoAROCK  signaling  mechanism  in autoreactive  CD4  +  T  cells  enhances  the bioavailability  of  1,25-dihydroxyvitamin
D 3 in experimental autoimmune encephalomyelitis. Am J Pathol . 2012;181(3):993-1006. doi:10.1016/j.ajpath.2012.05.028
59.  Guyton  MK,  Das  A,  Samantaray  S,  et  al. Calpeptin  attenuated  inflammation,  cell death,  and  axonal  damage  in  animal model  of  multiple  sclerosis. J  Neurosci
Res . 2010;88(11):2398-2408. doi:10.1002/jnr.22408
60.  Grasselli  G,  Rossi  S,  Musella  A,  et  al. Abnormal  NMDA  receptor  function exacerbates  experimental  autoimmune encephalomyelitis. Br  J  Pharmacol . 2013;168(2):502-517. doi:10.1111/j.1476- 5381.2012.02178.x
61.  Quinn  TA,  Dutt  M,  Shindler  KS.  Optic neuritis and retinal  ganglion cell loss in a chronic  murine  model  of  multiple sclerosis. Front  Neurol .  2011;AUG. doi:10.3389/fneur.2011.00050
62.  Leung  G,  Sun  W,  Brookes  S,  Smith  D, Shi  R.  Potassium  channel  blocker,  4- aminopyridine-3-methanol, restores axonal  conduction  in  spinal  cord  of  an animal  model  of  multiple  sclerosis. Exp Neurol . 2011;227(1):232-235. doi:10.1016/j.expneurol.2010.11.004 63.  Naddafi  F,  Reza  Haidari  M,  Azizi  G,
Sedaghat R, Mirshafiey A. Novel therapeutic  approach  by  nicotine  in experimental  model  of  multiple  sclerosis. Innov  Clin  Neurosci .  2013;10(4):20-25. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/236 96955.
64.  Mannara  F,  Valente  T,  Saura  J,  Graus  F, Saiz  A,  Moreno  B.  Passive  Experimental Autoimmune Encephalomyelitis in
C57BL/6  with  MOG:  Evidence  of Involvement  of  B  Cells. PLoS  One . 2012;7(12). doi:10.1371/journal.pone.0052361
65.  Fissolo  N,  Costa  C,  Nurtdinov  RN,  et  al. Treatment  with  MOG-DNA  vaccines induces  CD4+CD25+FoxP3+  regulatory T  cells  and  up-regulates  genes  with neuroprotective  functions  in  experimental autoimmune
encephalomyelitis. J Neuroinflammation . 2012;9.
doi:10.1186/1742-2094-9-139
66.  Weinger  JG,  Davies  P,  Acker  CM,  et  al. Mice  devoid  of  tau  have  increased susceptibility  to  neuronal  damage  in myelin oligodendrocyte glycoprotein- induced experimental autoimmune encephalomyelitis. J  Neuropathol  Exp Neurol .
2012;71(5):422-433.
doi:10.1097/NEN.0b013e3182540d2e 67.  Yi-Ching  Lo  1,  Yu-Tzu  Shih,  Yu-Ting Tseng  H-TH.  Neuroprotective  Effects  of San-Huang-Xie-Xin-Tang in the
MPP+/MPTP  Models  of  Parkinson’s Disease  In  Vitro  and  In  Vivo.  2012. doi:10.1155/2012/501032
68.  Eshraghi-Jazi F, Alaei H, Azizi- Malekabadi H, Gharavi-Naini M, Pilehvarian A, Ciahmard Z. The effect of red  grape  juice  and  exercise,  and  their combination  on  parkinson(')s  disease  in rats. Avicenna J phytomedicine . 2012;2(2):90-96.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/250 50236.
69.  Echeverry  R,  Wu  F,  Haile  WB,  Wu  J, Yepes  M.  The  cytokine  tumor  necrosis factor-like  weak  inducer  of  apoptosis  and its  receptor  fibroblast  growth  factor- inducible 14 have a neuroprotective effect in  the  central  nervous  system. J Neuroinflammation . 2012;9.
doi:10.1186/1742-2094-9-45
70.  Herges  K,  Millward  JM,  Hentschel  N,
Infante-Duarte  C,  Aktas  O,  Zipp  F. Neuroprotective  Effect  of  Combination Therapy  of  Glatiramer  Acetate  and Epigallocatechin-3-Gallate in
Neuroinflammation.  Zimmer  J,  ed. PLoS One .
2011;6(10):e25456. doi:10.1371/journal.pone.0025456
71.  Luis  Ordoñez-Librado  J,  Ver´  V,  Anaya- Martínez  V,  et  al.  Manganese  Inhalation as  a  Parkinson  Disease  Model.  SAGE- Hindawi  Access  to  Research  Parkinson’s Disease  model. SAGE-Hindawi  Access  to Res Park Dis . 2011;2011. doi:10.4061/2011/612989