## UJI ANTIOKSIDAN FUNGI ENDOFITIK BS-1 YANG BERASOSIASI PADA BUNGA SAMBILOTO (ANDROGRAPHIS PANICULATA) DENGAN BERAS MERAH SEBAGAI MEDIA PERTUMBUHAN

## ANTIOXIDANT TEST OF ENDOPHYTIC FUNGI BS-1 ASSOCIATED WITH THE SAMBILOTO FLOWERS (ANDROGRAPHIS PANICULATA) WITH RED RICE AS A GROWTH MEDIA
Wandi Oktria 1 , Riga Riga 2* , Muhammad Habibul Ikhsan 3 , Dewi Meliati Agustini 4
123 Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Padang, Jalan Prof. Dr. Hamka, Air Tawar Barat, Padang
4 Jurusan Kimia, Kimia Fakultas Sains dan Informatika, Universitas Jendral Achmad Yani
* e-mail korespondensi: rigakimia@fmipa.unp.ac.id

## Abstrak
Andrographis paniculata (Sambiloto) adalah anggota famili Acanthaceae yang memproduksi beragam metabolit sekunder dan berpotensi sebagai senyawa antioksidan.  Disamping dari tumbuhan alaminya, senyawa  antioksidan  dari A.  paniculata juga  dapat  diperoleh  melalui  jamur  yang  berkolonisasi  di dalam  jaringannya.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  sifat  antioksidan  dan  komponen fitokimia  pada  jamur  endofitik  BS-1  yang  berkolonisasi  dalam  jaringan  bunga A.  paniculata menggunakan  beras  merah  sebagai  media  pertumbuhan.  Metode  penelitian  terdiri  dari  beberapa tahapan  yang  dimulai  dari  inokulasi,  optimasi,  kultivasi,  maserasi,  analisis  antioksidan  dan  analisis metabolit  sekunder  dari  jamur  endofitik  BS-1  pada  bunga A.  paniculata .  Analisis  antioksidan  pada ekstrak EtOAc jamur endofitik BS-1 dilakukan  mengikuti metode DPPH. Nilai IC 50 yang didapatkan adalah  91,56  ppm  menunjukkan  ekstrak  EtOAc  jamur  endofitik  BS-1  mempunyai  aktivitas antioksidan dengan kateorgi kuat.
Kata kunci: Antioksidan, BS-1, jamur endofitik, sambiloto

## Abstract
Andrographis paniculata (Sambiloto) is a plant from the Acanthaceae family that produces a variety of  secondary  metabolites  and  has  potential  as  an  antioxidant  compound.  Apart  from  natural  plants, antioxidant compounds from A. paniculata can also be obtained from fungi that colonize their tissues. The aim of the research was to analyze the antioxidant activity and phytochemical content of the BS-1 endophytic  fungus  that  colonized  the  floral  tissues  of A.  paniculata using  brown  rice  as  a  growth medium.  The  research  method  consisted  of  several  stages  starting  from  inoculation,  optimization, cultivation, maceration, antioxidant analysis and analysis of compounds obtained from the endophytic fungus  BS-1  from A.  paniculata flowers.  Antioxidant  analysis  of  the  crude  extract  was  carried  out using the DPPH method. The IC 50 value of the extract was 91.56 ppm indicating extract of the fungal BS-1 has strong antioxidant activity.
Keywords: Anntioxidant, BS-1, endophytic fungus, sambiloto

## PENDAHULUAN
Indonesia adalah negara penghasil sumber obat herbal dan fitofarmaka di dunia. Potensi ini dapat  dilihat  dari  sumber  daya  alamnya  yang sangat  melimpah.  Setidaknya  terdapat  30.000
spesies  tumbuhan  dimana  940  diantaranya termasuk tumbuhan yang memiliki khasiat untuk kesehatan.  Sambiloto  ( Andrographis  paniculata Nees)  adalah  tumbuhan  yang  umum  digunakan oleh  masyarakat  sebagai  obat  herbal  (Yunita,
2021).  Secara  empiris  berbagai  jaringan A. paniculata telah didayagunakan untuk
pengobatan  diabetes,  demam,  diare,  penyakit kulit,  perut  kembung,  kolik,  dan  influenza (Suryelita et al., 2021).
Laporan  mengindikasikan A.  paniculata mempunyai aktivitas antioksidan. Sifat antioksidan  tersebut  dipengaruhi  oleh  kehadiran senyawa  turunan  flavonoid  dan  fenolik  (Utami, 2021).  Khasiat A.  paniculata sebagai  tanaman obat yang sering digunakan masyarakat menarik minat  dan  perhatian  para  peneliti.  Kandungan senyawa aktif tanaman tersebut dapat dikembangkan lebih lanjut untuk menjadi bahan baku  obat  dimasa  yang  akan  datang  (Utami, 2021).
Penelitian  mengenai  senyawa  aktif  yang terdapat  pada A.  paniculata sudah  mulai dilakukan  oleh  Badan  Pengawas  Obat  dan Makana  (BPOM)  yang  bekerjasama  dengan beberapa  perguruan  tinggi  (Yunita,  2021). Andrografolida  merupakan  salah  satu  senyawa bioaktif  yang  diperoleh  dari  ekstrak A. paniculata dan  memiliki  aktivitas  antioksidan (Yunita,  2021).  Senyawa  bioaktif  ini  juga berkorelasi dengan jamur endofit yang berkolonisasi dengan A. paniculata (Purwanti et al. , 2023; Suryelita et al ., 2023). Pencarian lebih lanjut mengenai sumber bahan baku obat pilihan dari A.  paniculata dapat  dilakukan  dengan teknologi  yang  modern,  salah  satunya  dengan menggunakan  teknik  kultur  jamur  endofitik. Lebih  lanjut,  tumbuhan  inang A.  paniculata dilaporkan  berpotensi  menjadi  inang  yang potensial  untuk  jamur  endofitik ( Anshar et  al., 2021; Silvani et al. , 2023).
Jamur  endofitik adalah  jamur non patogenik  yang  tumbuh  dan  berkembang  dalam beragam  jaringan  tumbuhan.  Jamur  ini  dapat hidup  hampir  disemua  jaringan  tumbuhan, seperti  bunga,  akar,  ranting,  daun,  dan  buah secara  berkolonisasi  (Riga et  al. ,  2021).  Jamur endofitik  pada  umumnya  membentuk  simbiosis mutualisme  dengan  inangnya  (Riga  &  Hakim, 2021). Nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhan  jamur  endofitik  diperoleh  dari hasil  metabolisme  tanaman  inangnya  dan sebagai gantinya jamur endofitik akan memproduksi senyawa yang digunakan tanaman inang  untuk  melindungi  diri  (Febria et  al. , 2022).  Metabolit  sekunder  yang  disintesis  oleh jamur  endofitik  dapat  serupa  dengan  yang dihasilkan  oleh  inangnya,  karena  telah  terjadi pertukaran  informasi  genetik  secara  evolusioner antara  senyawa antioksidan dari jamur endofitik
dengan tanaman inangnya (A. E. Z. Hasan et al. , 2022).
Aktivitas  antibakteri  dari  jamur  endofitik yang  berkolonisasi  dengan A.  paniculata telah pernah  dilaporkan  sebelumnya  (Febria et  al. , 2022).  Menariknya,  sampai  saat  ini  belum  ada publikasi terkait aktivitas antioksidan dari jamur endofitik dari bunga A. paniculata yang diisolasi menggunakan  media  beras  merah.  Berdasarkan hal  tersebut,  pada  studi  ini  akan  dijelaskan aktivitas  antioksidan  jamur  endofitik  BS-1  yang berasosiasi  pada  bunga A.  paniculata dengan beras merah sebagai media pertumbuhan.

## METODE PENELITIAN Preparasi sampel
Bunga A.  paniculata (2x2  cm)  dicuci dengan  air  mengalir.  Bunga  yang  sudah  dicuci dilakukan  sterilisasi  permukaan  menggunakan etanol  70% (45  detik)  dan  dilanjutkan perendaman  dalam  larutan  NaOCl  3,5%  (30 detik) (Riga et al. , 2021) .

## Inokulasi Jamur Endofitik BS-1
Inokulasi  jamur  endofitik  pada  bunga A. paniculata mengikuti metode yang sudah pernah dilakukan  sebelumnya  (Riga et  al. ,  2021). Bunga  yang sudah disterilkan  kemudian dipotong lebih kecil (1x1 cm) untuk diinokulasikan  ke  media  padat  PDA  dan selanjutnya  diinkubasi  (suhu  28  ℃).  Setelah tujuh  hari, jamur  endofitik  yang  tumbuh di sub- kultur  di  atas  media  PDA  padat  lainnya  hingga didapatkan isolat tunggal jamur endofitik.  Isolat tunggal  jamur  endofitik  dipilih  berdasarkan morfologi  yang  paling  baik  untuk  dilanjutkan analisa fitokimianya (Riga et al. , 2021).

## Waktu  Kultivasi  Optimum  Jamur  Endofitik BS-1
Isolat  tunggal  dipotong  2x2  cm  dan dikultivasi  menggunakan  media  beras  merah  di dalam  enam  Erlenmeyer  250  mL.  Minggu kedua,  ketiga  dan  keempat  jamur  dipanen masing-masing dua erlenmeyer kemudian maserasi  menggunakan  etil  asetat  hingga diperoleh ekstrak pekat EtOAc. Waktu kultivasi optimumnya  ditentukan  dengan  analisis  ekstrak EtOAc berdasarkan masa yang diperoleh(Riga et al. , 2021).

## Kultivasi dan Ekstraksi Jamur Endofitik
Isolat  tunggal  dipotong  1x1  cm  kemudian dikultivasi  di  atas  100  mL  media  beras  merah
dalam  Erlenmeyer  250  mL  dan  di  dalam inkubator  pada  suhu  28  ℃.  Selanjutnya  jamur endofitik dipanen pada waktu kultivasi optimumnya,  dan  diekstraksi  menggunakan pelarut  etil  asetat  untuk  memperoleh  ekstrak pekat EtOAc. Ekstrak pekat EtOAc yang didapat dilanjutkan  untuk  analisa  aktivitas  antioksidan dan analisa kandungan metabolit sekunder.

## Analisa Fitokimia Ekstrak Pekat EtOAc a. Flavonoid
Etanol  70%  ditambahkan  kedalam tabung  reaksi  yang  berisi  ekstrak  EtOAc sambiloto  kemudian  dipanaskan.  Logam magnesium ditambahkan kedalam campuran dan  satu  tetes  HCl  pekat.  Warna  merah muda  menunjukkan  uji  positif  flavonoid (Elita A et al. , 2013).

## b. Fenolik
Ekstrak  EtOAc  sambiloto  diletakkan didalam  plat  tetes  kemudian  diteteskan  besi (III)  klorida  (FeCl 3 )  1%.  Warna  biru-hitam menunjukkan  positif  fenolik  (Elita  A et  al. , 2013).
c. Terpenoid
Ekstrak  pekat  EtOAc  (0,5  mL) direaksikan  dengan  0,5  mL  kloroform,  dan ditambahkan asam sulfat pekat sebanyak 0,5 mL  di  dalam  tabung  reaksi.  Sampel  positif terpenoid jika terdapat warna coklat kemerahan (Saqallah et al. , 2018).
d. Steroid
Ekstrak  pekat  EtOAc  sebanyak  0,5 mL  didalam  tabung  reaksi  ditambakan kloroform  sebanyak  0,5  mL,  1,0  mL anhidrida asetat, dan asam sulfat 1 hingga 2 tetes.  Warna  hijau  gelap  menunjukkan positif steroid (Saqallah et al. , 2018).
e. Alkaloid
Pereaksi  Dragendorf,  pereaksi  Mayer dan  pereaksi  Wagner  ditambahkan  kedalam tiga  tabung  reaksi  berisi  ekstrak  EtOAc sambiloto.  Sampel  positif  alkaloid  jika terdapat  endapan  warna      jingga,  putih  dan coklat (Elita A et al. , 2013).

## Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  EtOAc Sambiloto
Ekstrak EtOAc (2,5 mg) dilarutkan dalam metanol  pa  (25  mL)  sehingga  diperoleh  larutan induk  dengan  konsentrasi  100  ppm.  Larutan induk  diencerkan  menjadi  5,  6,  7,  8  dan  9  ppm dengan  metanol  pa.  Padatan  DPPH  (5  mg) dilarutkan dengan metanol pa (100 mL). Larutan
pembanding  dibuat  dengan  melarutkan  larutan induk DPPH sebanyak 1 mL dengan metanol pa 2 mL.
Analisa  antioksidan  dilakukan  dengan melarukan  ekstrak  sampel  (2  mL)  dengan larutan DPPH (2 mL). Campuran dimasukkan ke dalam  inkubator  30  menit  pada  suhu  27  ℃ hingga  terjadi  aktivitas  DPPH  yang  ditandai dengan  berubahnya  warna  larutan  dari  ungu  tua menjadi  kuning  terang.  Absorbansi  semua sampel  hasil  inkubasi  di  uji  pada  λ  =  517  nm dengan  spektrofotometer  (Tristantini et  al., 2016).

## Penentuan Nilai IC
50 Nilai  absorbansi  masing-masing  sampel dianalisis  menggunakan  kurva  regresi  sehingga diperoleh nilai IC 50 (Tristantini et al., 2016).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Riset  ini  dilakukan  untuk  mengkaji potensi bunga A. paniculata (sambiloto) sebagai sumber senyawa antioksidan dengan teknik yang lebih  modern,  yaitu  melalui  jamur  yang berkolonisasi di dalam jaringannya.

## Isolasi Jamur Endofitik BS-1
Bunga  segar A.  paniculata dicuci  dengan air  bersih  dan  direndam  dalam  etanol  70%  dan NaOCl  3,5%.  Proses  sterilasi  permukaan  ini dilakukan  untuk  menghilangkan  pengotor  pada permukaan bunga dan untuk memastikan bahwa hanya  jamur  endofitik  yang  akan  tumbuh(Riga et  al. ,  2021).  Bunga  steril  diinokulasi  ke  media agar  PDA.  Kandungan  pati  pada  ekstrak  umbi kentang dari media PDA dapat dijadikan sebagai sumber energi bagi pertumbuhan jamur endofitik  sehingga  dapat  dijadikan  dasar  dalam pemilihan  media  inokulasi  pada  penelitian ini(Yastanto, 2020).
Proses  inokulasi  dilakukan  selama  7  hari, dilanjutkan  dengan  sub-kultur  jamur  yang tumbuh  ke  dua  media  PDA  lain  dengan  kode BS-1  dan  BS-2.  Isolat  tunggal  dari  sub-kultur dilabeli  dengan  kode  BS.  Kedua  isolat  tunggal dipilih  berdasarkan  hasil  pengamatan  morfologi jamur.  Jamur  endofitik  BS-1  dipilih  karena memiliki  morfologi  yang  berbeda  dengan  jamur yang  telah  dilaporkan  dari A.  paniculata sebelumnya.  Jamur  BS-1  tumbuh  merata membentuk koloni yang memusat dengan warna putih, bentuk bulat.
Waktu  Kultivasi  Optimum  Jamur  Endofitik BS-1
Produksi  metabolit  sekunder  Jamur  BS-1 dari bunga  A.  paniculata ditentukan  melalui proses  kultivasi  skala  kecil.  Jamur  endofitik memproduksi  metabolit  sekunder  pada  tahap stasioner,  yaitu  tahap  mulai  habisnya  nutrisi yang  terdapat  pada  media.  Tahap  ini  akan memicu  terjadinya  produksi  metabolit  sekunder dalam  jumlah  yang  lebih  banyak(Riga et  al. , 2021).  Kandungan  metabolit  sekunder  jamur BS-1  dianalisis  berdasarkan  masa  ekstrak EtOAc  yang  diperoleh  pada  minggu  pertama, kedua,  ketiga  dan  keempat.  Berdasarkan  hasil analisis  senyawa  metabolit  sekunder  paling banyak  dihasilkan  adalah  pada  minggu  kedua waktu kultivasi. Hasil ini dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel  1. Massa  ekstrak  pekat  EtOAc  (mg)  hasil kultivasi Isolat Tunggal Minggu 1 2 3 4 Endofitik BS-1 15,3 mg 25,3 mg 24,6 mg 24,0 mg

## Kultivasi Jamur Endofitik BS-1
Kultivasi  skala  besar  terhadap  jamur endofitik  BS-1  dilakukan  untuk  mendapatkan massa  ekstrak  dalam  jumlah  yang  lebih  besar. Media beras merah digunakan karena mengandung  sumber  nutrisi  yang  dibutuhkan untuk pertumbuhan jamur (Ningsih et al. , 2020). Hasil  panen  isolat  jamur  BS-1  di  ekstraksi melalui  metode  maserasi  menggunakan  pelarut EtOAc  yang  termasuk  dalam  pelarut  semipolar. Pelarut  ini  mampu  mengekstrak  lebih  banyak senyawa,  baik  dari  fraksi  polar  maupun  non- polar. Ekstrak EtOAc dipekatkan selama selama satu  hari  sehingga  diperoleh  ekstrak  pekat EtOAc sebanyak 0,014 g.

## Uji  Fitokimia  Ekstrak  Pekat  EtOAc  Jamur BS-1
Berdasarkan  data  yang  disajikan  pada Tabel  2,  kandungan  ekstrak  pekat  EtOAc  jamur BS-1  terdiri  dari  senyawa  terpenoid,  steroid, fenolik  dan  alkaloid.  Warna  senyawa  yang diperoleh  dari  hasil  uji  fitokimia  menunjukkan keberadaan beberapa golongan senyawa tersebut.  Hasil  uji  terpenoid  yang  dilakukan menunjukkan  perubahan  warna  merah-coklat, sedangkan  warna  hujau-biru  pada  uji  steroid.
Gugus  hidroksil  hasil  hidrolisis  steroid  oleh H 2 SO 4 pa  bereaksi  dengan  anhidrida  asetat sehingga  menghasilkan  warna  hijau  pada  uji steroid  (Juliana  Najoan et  al. ,  2016).  Perubahan warna  ini  menunjukkan  uji  positif  golongan senyawa  terpenoid.  Uji  positif  menghasilkan warna  coklat  kemerahan  dan  warna  hijau-biru pada  uji  steroid  selaras  dengan  laporan penelitian terdahulu (Bhernama, 2020).
Tabel 2. Kandungan fitokimia ekstrak pekat EtOAc
No Analisa Fitokimia Hasil Analisa 1 Terpenoid + 2 Steroid + 3 Flavonoid - 4 Fenolik + 5 Alkaloid Mayer + Dragendorff + Wagner +
Ekstrak  pekat  EtOAc  jamur  BS-1  saat diteteskan besi (III)  klorida (FeCl 3 ) 1% pada uji fenolik  menghasilkan  warna  biru  kehitaman. Reaksi yang terjadi adalah FeCl 3 (aq) + 6 ArOH → 6H + (aq) +  3Cl - (aq) +  [Fe(OAr) 6 ] 3- (aq) .  Hasil  uji  ini menunjukkan  senyawa  tersebut  mengandung golongan  senyawa  fenolik  sesuai  dengan penelitian  yang  pernah  dilakukan  sebelumnya (Elita  A et  al. ,  2013).  Uji  alkaloid  dilakukan menggunakan  tiga  macam  pereaksi  diantaranya pereaksi  Dragendorf,  Mayer  dan  Wagner.  Hasil analisa  menunjukkan  adanya  endapan  warna jingga,  putih  dan  coklat.  Endapan  yang dihasilkan  diperkirakan  berasal  dari  kompleks kalium-alkaloid.  Endapan  jingga,  putih,  dan coklat kompleks kalium alkaloid ini berasal dari reaksi  antara  ion  K + dengan  nitrogen  pada alkaloid. (Ayu Pramudya Wardhani, 2015).

## Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Pekat EtOAc Jamur BS-1
Aktifitas antioksidan ekstrak pekat EtOAc jamur  BS-1  di  uji  menggunakan  metode  DPPH. Metode  ini  tergolong  sederhana  dan  hanya memerlukan  sedikit  sampel.  Larutan  induk  100 ppm  dilarutkan  menggunakan  methanol  p.a untuk  menjaga  keadaan  reaksi  dimana  DPPH menyediakan  radikal  bebas  sampel  uji  berperan sebagai  peredam  radikal  bebas  (Abdullah  & Maryam,  2020).  Larutan  sampel  kemudian diencerkan  menjadi  50,  60, 70,  80,  dan  90  ppm dan dilakukan pengukuran pada panjang 517 nm menggunakan spektrofotometer. Hasil
pengukuran  menggunakan  metode  DPPH  dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3. Hasil  analisa  aktivitas  antioksidan  ekstrak pekat EtOAc jamur endofitik BS-1
Absorban kontrol Konsentrasi Absorban %Antiok sidan 0,295 50 0,205 30,62 0,295 60 0,191 35,14 0,295 70 0,176 40,34 0,295 80 0,165 44,07 0,295 90 0,149 49,49
Gambar 1. Kurva antioksidan
Aktivitas  antioksidan  dapat  ditentukan menggunakan  nilai  IC 50 .  Berdasarkan  kurva antioksidan  (Gambar  1)  diperoleh  persamaan garis  y  =  0,4667x  +  7,2655.  Nilai  IC 50 dapat ditentukan  dengan  menggantikan  nilai  50  pada nilai  y,  sehingga  didapatkan  nilai  IC 50 sebesar 91,56  ppm.  Kriteria  antioksidan  berdasarkan rentang nilai IC 50 ditampilkan pada tabel 4.
Tabel 4. Kriteria aktivitas antioksidan (Tristantini et al. , 2016)
Nilai IC 50 (ppm) Kategori Antioksidan <50 Sangat kuat 50-100 Kuat 100-150 Sedang 150-200 Lemah
Nilai  IC 50 sampel  yang  didapat  berkisar pada  rentang  50-100  ppm  sehingga  dapat dinyatakan  bahwa  aktivitas  antioksidan  pada ekstrak  jamur  endofitik  BS-1  tergolong  kuat. Aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak  jamur endofitik  BS-1  ini  berhubungan  juga  dengan kandungan  senyawa  metabolit  sekundernya, yaitu steroid, terpenoid, fenolik, dan alkaloid.
Senyawa  steroid  memiliki  kemampuan meredam pembentukan radikal dengan
membentuk  produk  yang  lebih  stabil  melalui pememutusan  reaksi  berantai  (Maulida et  al. , 2016).  Fenolik  mampu  mendonorkan  atom hydrogen  sehingga  radikal  bebas  akan  tereduksi menjadi bentuk yang lebih. Aktivitas antioksidan akan semakin kuat dengan bertambahnya  jumlah  gugus  –OH  senyawa fenolik(H. Hasan et al. , 2022). Senyawa alkaloid juga  berperan  untuk  menutup  radikal  bebas dengan  mendonorkan  atom  hidrogen  (Kurniati, 2013).

## KESIMPULAN
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  jamur endofitik  BS-1  yang  berkolonisasi  dalam jaringan  bunga A.  paniculata menggunakan beras  merah  sebagai  media  pertumbuhan menghasilkan nilai IC 50 sebesar 91,56 ppm. Data ini  mengindikasikan  bahwa  ekstrak  EtOAc jamur  endofitik  memiliki  sifat  antioksidan dengan kriteria kuat.

## DAFTAR RUJUKAN
Abdullah,  M.,  &  Maryam,  S.  (2020).  Uji Aktivitas Antioksidan Isolat Fungi Endofit Daun  Galing-Galing  (Cayratia  trifolia  L.) dengan Metode 1,1-Diphenyl-2- Picrylhydrazil  (DPPH).  In Jurnal  Farmasi
Desember (Vol. 12, Issue 2).
Anshar,  V.,  Khairi,  A.,  Benti  Etika,  S.,
Suryelita, S., Ulfah, M., Riga, R., & Etika, B.  (2021).  Eksakta  Article  Study  of  The Antibacterial  Activity  of  Endophytic Fungus  That  Colonize  with  The  Twig  of Andrographis  paniculata. Eksakta , 22 ,
137–144.
http://www.eksakta.ppj.unp.ac.id/index.ph p/eksakta
Ayu  Pramudya  Wardhani,  R.  (2015).  Uji Akivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Buah Rambutan ( Nephelium lappaceum L. ) Pada Bakteri.
J. Chem. Sci , 4 (1). http://journal.unnes.ac.id/sju/index.php/ijc s
Bhernama,  B.  G.  (2020).  Skrining  Fitokimia Ekstrak Etanol Rumput Laut Gracilaria sp. Asal Desa Neusu Kabupaten Aceh Besar.
Elita  A,  Saryono  S,  &  Christine  J.  (2013).
Penentuan  Waktu  Optimum  Produksi Antimikroba  dan  Uji  Fitokimia  Ekstrak Kasar Fermentasi Bakteri Endofit
Pseudomonas  sp .  dari  Umbi  Tanaman Dahlia (Dahlia variabilis). Che.Acta , 3 (2). Febria,  F.  S.  S.  dan  R.  R.  (2022).  Antibacterial Actifity  and  Phytochemical  Screening  of
the Fraction of Endophytic Fungus Derivet from  Sambiloto  Flowers  (Andrographis paniculata  (Burm.f.)  Nees). Jurnal  Sains Natural , vol.12, No.3 , 134–142.
Hasan,  A.  E.  Z.,  Julistiono,  H.,  Bermawie,  N., Riyanti,  E.  I.,  &  Arifni,  F.  R.  (2022). Soursop  Leaves  (Annona  muricata  L.)
Endophytic  Fungi  Anticancer  Activity Against  HeLa  cells. Saudi  Journal  of Biological Sciences , 29 (8).
https://doi.org/10.1016/j.sjbs.2022.103354 Hasan,  H.,  Ain  Thomas,  N.,  Hiola,  F.,  &
Ibrahim,  A.  S.  (2022).  Skrining  Fitokimia dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Kulit Batang  Matoa  (Pometia  pinnata)  Dengan
Metode 1,1-Diphenyl-2 picrylhidrazyl (DPPH). Indonesian Journal of Pharmaceutical  Education , 1 (3),  67–73. https://doi.org/10.37311/ijpe.v2i1.10995
Juliana  Najoan,  J.,  John  Runtuwene,  M.  R.,  &
Wewengkang,  D.  S.  (2016).  Uji  Fitokimia dan  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Tiga  ( Allophylus  cobbe  L .).  In PHARMACONJurnal Ilmiah Farmasi- UNSRAT (Vol. 5, Issue 1).
Kurniati, R. I. (2013). Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi  Etanol  Daun  Buas-Buas  (Premna cordifolia  Linn.)  dengan  Metode  DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).
Maulida,  W.,  Fadraersada,  J.,  &  Rijai,  L. (2016).  Isolasi  Senyawa  Antioksidan  dari Daun  Pila-Pila  (Mallotus  paniculatus). 35 , 384–390.
Ningsih,  A.  W.,  Hanifa,  I.,  &  Yunil  Hisbiyah, A.  ’.  (2020).  Pengaruh  Perbedaan  Metode Ekstraksi  Rimpang  Kunyit  (Curcuma domestica) Terhadap  Rendemen  dan Skrining  Fitokimia.  In J-PhAM  Journal of Pharmaceutical Care Anwar Medika (Vol. 96, Issue 2).
Purwanti,  R.,  Iryani,  I.,  Riga,  R.,  &  Ulfah,  M. (2023). Antibacterial Activity of Endophyte Fungus from Sambiloto
Flowers  (Andrographis  paniculata)  on Black  Rice  Growing  Media. Indonesian
Journal of Chemical Science and
Technology (IJCST-UNIMED) , 06 (1).
https://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php /aromatika
Riga, R., Aulia Suhanah, R., Suryelita, S., Benti Etika,  S.,  &  Ulfah,  M.  (2021).  Jamur Endofitik  Yang  Diisolasi  dari  Bunga
Andrographis Panikulata (Sambiloto)
Sebagai  Sumber  Senyawa  Antibakteri.
Jurnal  Insan  Farmasi  Indonesia , 4 (1),
139–148.
https://doi.org/10.36387/jifi.v4i1.664 Riga,  R.,  &  Hakim,  E.  H.  (2021).  Aktivitas Sitotoksik  dan  Antibakteri  Ekstrak  Etil Asetat  Jamur  Endofitik  Colletotrichum gloeosporioides. Jurnal Farmasi Udayana , 193. https://doi.org/10.24843/jfu.2021.v10.i02. p15 Riga,  R.,  Happyana,  N.,  Quentmeier,  A., Zammarelli,  C.,  Kayser,  O.,  &  Hakim,  E. H.  (2021).  Secondary  metabolites  from Diaporthe lithocarpus isolated from Artocarpus heterophyllus. Natural Product
Research , 35 (14), 2324–2328. https://doi.org/10.1080/14786419.2019.16
72685
Saqallah, F. G., Hamed, W. M., & Talib, W. H.
(2018).  In  vivo  evaluation  of  Antirrhinum majus’  wound-healing  activity. Scientia
Pharmaceutica , 86 (4).
https://doi.org/10.3390/scipharm86040045 Silvani,  M.  A.,  Riga,  R.,  &  Agustini,  D.  M.
(2023).  Aktivitas  Antioksidan  Jamur Endofitik  BS-1  yang  Diisolasi  dari  Bunga Sambiloto  Menggunakan  Beras  Putih sebagai  Media  Pertumbuhan. Jurnal  Sains dan Kesehatan, 5 (2), 149-156.
Suryelita,  S.,  Riga,  R.,  Etika,  S.  B.,  Ulfah,  M., &  Artasasta,  M.  A.  (2021).  Antibacterial screening of endophytic fungus xylaria sp. Derived  from  andrographis  paniculata (sambiloto). Open  Access  Macedonian Journal  of  Medical  Sciences , 9 ,  971–975. https://doi.org/10.3889/oamjms.2021.7475
Suryelita,  S.,  Riga,  R.,  Etika,  S.  B.,  Ikhsan,  M. H.,  Febria,  F.,  Yolanda,  M.,  Ulfah,  M.,  & Artasasta,  M.  A.  (2023).  Phytochemical Screening  and  Biological  Activities  of Fungal Phyllosticta  capitalensis Derived from Andrographis  paniculata . Moroccan Journal of Chemistry , 11 (2), 553-565.
Tristantini,  D.,  Ismawati,  A.,  Pradana,  B.  T.,  & Jonathan, J. G. (2016). Pengujian aktivitas antioksidan  dengan  metode  dpph  pada ekstrak  etanol  daun  tanjung  (mimusops elengi L). 1–7. Utami,  Y.  P.  (2021).  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak Etanol Akar Sambiloto ( Andrographis paniculata
(Burm.F.)  Ness.)  Dengan  Metode  DPPH.
Pharmacy  Medical , Vol.4  No.1,2021 ,  20– 23.
Yastanto, A. J. (2020). Karakteristik
Pertumbuhan  Jamur  pada  Media  PDA
dengan  Metode  Pour  Plate . IndonesiSan Journal  of  Laboratory Vol.  2,  Issue  2. Online. Yunita, E. (2021). Mekanisme Kerja
Andrografiloda  dari  Sambiloto  Sebagai Senyawa Antioksidan (Vol. 4, Issue 1).