## Karakteristik Fitokimia Dan Aktivitas Antioksidan
Ekstrak Pupa Black Soldier Fly (BSF)
Tri Sutanti Budikania, Herawati dan Amalia Fitrian Nasution
Program Studi Analisis Kimia, Politeknik AKA Bogor Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
*) Email: trisbudikania@gmail.com (Received : 17 November 2021; Accepted: 12 Desember 2021; Published: 21 Desember 2021)

## Abstrak
The  Black  Soldier  Fly (BSF)  merupakan  spesies  lalat  daerah  tropis  yang  dapat  menguraikan  senyawa  organik, sehingga banyak dimanfaatkan untuk mengatasi limbah  organic di perkotaan. Larva BSF memiliki kemampuan mengkonsumsi limbah organik dalam jumlah besar dan cepat karena bagian mulut dan enzim pencernaan yang aktif. Larva BSF juga dimanfaatkan sebagai pakan ternak karena memiliki kadar protein dan lemak yang tinggi. Pupa  BSF  kaya  akan  senyawa  kitin  dan  digunakan  untuk  bahan  baku  kitosan.  Pupa  BSF  diduga  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  yang  memiliki  sifat  antioksidan.  Tujuan  penelitian  adalah  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  serta  sifat  aktivitas  antioksidannya.  Pengujian  senyawa  metabolit sekunder  menggunakan  skrining  fitokimia  sedangkan  aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode radical scavenger .  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  heksana  mengandung  alkaloid,  flavonoid,  saponin, terpenoid dan triterpenoid. Ekstrak etil asetat  mengandung  alkaloid, saponin dan terpenoid, sedangkan  ekstrak metanol  mengandung  alkaloid,  saponin  dan  terpenoid.  Nilai  IC 50 pada  larutan  ekstrak  n-heksan,  etil  asetat  dan metanol  berturut-turut  adalah  41,18;  36,92  dan  17,45  mg/L.  Nilai  IC 50 ini  menunjukkan  bahwa  pupa  BSF memiliki sifat antioksidan sangat kuat.
Kata Kunci : BSF, fitokimia, antioksidan

## Abstract
Black Soldier Fly (BSF) is a tropical fly species that can decompose organic compounds, thus overcome waste in urban area. BSF larvae can to consume large amounts of organic waste quickly because of their mouthparts and active  digestive  enzymes.  BSF  larvae  are  also  used  as  animal  feed  because  they  have  high  protein  and  fat content.  BSF  pupae  are  rich  in  chitin  compounds  and  also  as  raw  materials  for  chitosan.  BSF  pupae  may contain  secondary  metabolites  that  have  antioxidant  properties  This  study  aimed to  determine  the  content  of secondary  metabolites  and  the  nature  of  their  antioxidant  activity.  The  secondary  metabolite  compounds  were tested  using  phytochemical  screening  while  the  antioxidant  activity  use  the  radical  scavenger  method.  The results  showed  that  the  hexane  extract  contains  alkaloids,  flavonoids,  saponins,  terpenoids,  and  triterpenoids. The  ethyl  acetate  extract  contains  alkaloids,  saponins,  and  terpenoids,  while  the  methanol  extract  contains alkaloids,  saponins,  and  terpenoids.  The  IC50  values  in  the  n-hexane,  ethyl  acetate,  and  methanol  extract solutions  were  41.18,  36.92,  and  17.45  mg/L.  This  IC50  value  indicates  that  the  BSF  pupae  have  very  strong antioxidant properties.
Keywords : BSF, phytochemical, antioxidant

## PENDAHULUAN
The  Black  Soldier  Fly atau  dikenal  sebagai BSF,  lalat  tentara  hitam    ( Hermetia  illucens )  adalah anggota  keluarga  Stratiomyidae  merupakan  lalat dewasa  seperti  tawon  dan  panjang  15-20  mm.  H. illucens  berasal  dari  daerah  tropis,  sub-tropis  dan hangat  zona  beriklim  sedang  di  Amerika,  saat  ini tersebar  di  daerah  beriklim  tropis  dan  hangat (Ghangadar. B, et al.,2018).
Larva lalat BSF dewasa berbentuk pipih dan memiliki  tubuh  coklat  kemerahan,  memanjang  dan agak pipih. Panjangnya bisa mencapai 27 mm, lebar
6 mm dan beratnya menjadi 220 mg pada tahap larva terakhir. Larva bisa makan dengan cepat, mengkonsumsi  25  -  500  mg  bahan  segar  per  hari, pada  berbagai  bahan  organik  yang  membusuk, seperti  buah-buahan  dan  sayuran,  bubur  biji  kopi, biji-bijian penyuling, dan sisa olahan vegetarian serta non-vegetarian  (Ghangadar.  B,  et  al.,2018).  Larva lalat  BSF    dapat  mendegradasi  sampah  organik dengan  mengekstrak energi dan  nutrien dari sampah sayuran,  sisa  makanan,  bangkai  hewan,  dan  kotoran sebagai  bahan  makanannya.    Holmes  (2010)
menyatakan  larva  BSF  dapat  mendegradasi  baik sampah  padat  maupun  sampah  cair.  Selain  itu  larva BSF  mudah  untuk  dikembangbiakkan  dengan sifatnya  yang  tidak  berpengaruh  terhadap  musim, meskipun  lebih  aktif  pada  kondisi  yang  hangat. Larva  BSF  mampu  mendegradasi  sampai  dengan 80% jumlah sampah organik yang diberikan (Diener, et.al.,  2010).  Larva  BSF  mampu  mengkonsumsi sampah makanan dalam jumlah besar lebih cepat dan lebih  efisien  dibandingkan  spesies  lain  yang diketahui. Hal ini dipengaruhi oleh bagian  mulutnya dan  enzim  pencernaannya  yang  lebih  aktif  (Kim  et al., 2011).
Larva BSF tidak berbau, dapat dikeringkan, mudah  disimpan  dengan  tingkat  kerapuhan  lebih lama.  Hasil  analisis  menunjukkan  pre  pupa  BSF mengandung  kadar  air  55-65%,  protein  kasar  (40- 44%  bahan  kering),  lipid  yang  kaya  omega  3  dan asam lemak omega 6 dan serat kasar (7%) antara lain nutrisi.  Protein  serangga  ini  memiliki  kualitas  yang tinggi  dan  menjadi  sumber  daya  makanan  bagi  para peternak  ayam  dan  ikan.  Larva  BSF  kering  dapat dimanfaatkan  untuk  pakan  ternak,  bahan  biodiesel. Larva  BSF  juga  diketahui  merupakan  sumber  kitin (Diener  et  al.,  2010)  sehingga  dapat  digunakan sebagai  bahan  baku  pembuatan  kitosan.  Larva  BSF diduga  mengandung  senyawa-senyawa  metabolit sekunder  seperti  golongan  terpenoid,  flavonoid  dan fenolik.  Senyawa-senyawa  ini  mempunyai  potensi aktivitas antioksidan.
Antioksidan  adalah  senyawa  kimia  yang dapat  digunakan  untuk  melindungi  komponen biologi  seperti  lipida,  protein,  vitamin  dan  DNA melalui  perlambatan  kerusakan,  ketengikan  atau perubahan  warna  yang  disebabkan  oleh  oksidasi (Suryanto,  2012).  Sumber-sumber  antioksidan  dapat berupa  antioksidan  sintetik  maupun  antioksidan alami. Penggunaan senyawa antioksidan berkembang dengan  pesat  baik  untuk  makanan  maupun pengobatan.  Penggunaan  sebagai  obat  makin berkembang  seiring  dengan  makin  bertambahnya pengetahuan  tentang aktifitas  radikal bebas terhadap beberapa  penyakit  degeneratif  seperti  penyakit jantung dan kanker (Rumagit, 2015).
Hingga  saat  ini,  pemanfaatan  dari  pupa Black  Soldier  Fly adalah  untuk  sebagai  bahan  baku pembuatan  kitosan.  Untuk  itulah  maka  dilakukan penelitian  awal  sebagai  upaya  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  serta  sifat antioksidannya,  sehingga  dapat  dimanfaatkan  untuk membuat produk lainnya.

## BAHAN DAN METODE
Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  n-heksana,  etil  asetat,  etanol, asam  klorida  (p),  pereaksi  dragendorff,  metanol, serbuk  Mg,  KOH,  pereaksi  FeCl 3 ,  serbuk  Mg,
kloroform,  anhidrat  asetat,  asam  sulfat  pekat  dan akuades.
Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  oven,  neraca  analitik,  desikator, rotary evaporator ,  labu  distilasi,  pemanas,  termometer, magnetic stirrer, cawan porselin, kaca arloji, pengaduk, tabung reaksi, dan botol semprot.
Percobaan  dilakukan  melalui  2  tahap, pertama  dilakukan  proses  ekstraksi  dingin  melalui teknik  maserasi,  yaitu  sampel  direndam  secara bertahap menggunakan 3 jenis pelarut : n-heksan, etil asetat  dan  etanol.  Hasil  ekstraksi  selanjutnya didistilasi  vakum  menggunakan rotary  evaporator , sehingga diperoleh residu. Tahap berikutnya dilakukan    uji  senyawa  metabolit  sekunder  pada residu  yang  diperoleh  menggunakan  skrining fitokimia.  Terakhir  dilakukan  uji  antioksidan  pada masing-masing  residu  menggunakan  metode radical scavenger (DPPH).

## Cara Kerja Tahap ekstraksi
Ekstraksi  dilakukan  secara  maserasi  secara bertingkat  dengan  pelarut  n  heksana,  etil  asetat  dan etanol.  Sebanyak  kurang  lebih  100  g  pupa  BSF direndam  dengan  700  mL  n-heksana,  ditutup  lalu disimpan di ruang gelap selama satu minggu. Setelah itu,  filtrat  diambil  dan  residu  dimaserasi  kembali menggunakan  300  mL  n-heksana  selama  3  hari. Selanjutnya  filtrat  diambil  dan  residu  dimaserasi kembali  dengan  pelarut  etil  asetat  dan  etanol.  Cara maserasi  sama  dengan  yang  telah  dilakukan sebelumnya.  Dari  hasil  maserasi    diperoleh  filtrat  n heksan, etil asetat dan etanol. Filtrat dipekatkanmenggunakan rotary  evaporator pada suhu ±40  C.
Identifikasi  Senyawa  Kimia  Ekstrak Crude  BSF (Harbone, 1998)
Identifikasi  kandungan  metabolit  sekunder pada ekstrak crude BSF dilakukan sebagai berikut:
a. Uji alkaloid Sebanyak 2 mL sampel (±0,05% b/v) dilarutkan dalam  2  mL  HCl  2%  (v/v),  dipanaskan  5  menit dan  disaring.  Filtrat  yang  diperoleh  ditetesi dengan pereaksi Dragendorff sebanyak 2-3 tetes. Adanya  senyawa  alkaloid  ditunjukkan  dengan terbentuknya endapan jingga.
b. Uji flavonoid Sebanyak  2  mL  sampel  (0,05%  b/v)  dilarutkan dalam  2  mL  metanol,  kemudian  ditambahkan serbuk  Mg  dan  HCl  pekat  sebanyak  5  tetes. Adanya  senyawa  flavonoid  ditunjukkan  dengan terbentuknya warna merah atau jingga.
c. Uji saponin Sebanyak 2 mL sampel (±0,05% b/v) dilarutkan dalam  aquades  pada  tabung  reaksi,  lalu ditambah  10  tetes  KOH  dan  dipanaskan  dalam penangas  air  50  °C  selama  5  menit,  dikocok selama  15  menit.  Jika  terbentuk  busa  mantap
setinggi  1  cm  dan  tetap  stabil  selama  15  menit menunjukkan adanya senyawa saponin.
e. Uji terpenoid Sebanyak  2  mL  sampel  (±0,05%  b/v)  ditambah dengan  pereaksi  Liberman  Burchard  1  mL. Adanya  senyawa  terpenoid  ditujukan  dengan terbentuknya  warna  biru  tua  atau  hijau kehitaman.
f. Uji polifenol Sebanyak 2 mL sampel (±0,05% b/v) dilarutkan dalam  aquades  10  mL,  dipanaskan  5  menit  dan disaring.  Filtrat  yang  terbentuk  ditambahkan ditambahkan  4-5  tetes  FeCl 3 5%  (b/v).  Adanya fenol ditujukan dengan terbentuknya warna biru tua atau hijau kehitaman.
g. Uji steroid dan triterpenoid Sebanyak  1  mL  sampel  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi  lalu  tambahkan  2  mL  kloroform ditambahkan 10 tetes anhidrat asetat dan 3 tetes asam  sulfat  pekat  (reaksi  Lieberman-Burchad). Reaksi  positif  adanya  steroid  ditunjukkan dengan  terbentuknya  larutan  berwarna  biru  dan terbentuknya  warna  merah  jingga  atau  ungu untuk positif adanya terpenoid.
Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode Radical Scavenger / DPPH Pembuatan Larutan DPPH 50µM Ditimbang sebanyak  1,97  mg  DPPH  dan  dimasukkan  ke  dalam labu ukur 100 mL, kemudian dilarutkan menggunakan pelarut etanol dan ditepatkan volumenya  hingga  tanda  batas  (Molyneux,  2004). Selanjutnya  diukur  panjang  gelombang  maksimum DPPH mulai dari 450 nm – 550 nm.

## Metode Radical Scavenger/Uji DPPH
Disiapkan  larutan  DPPH  (1,1-difenil-2- pikril-hidrazil)  0,5  mM  dalam  metanol,  dipipet masing-masing 1  mL dan dimasukkan  ke botol  vial. Sampel  yang  akan  diuji  disiapkan  sebanyak  10,  30 dan  50    mg/L  dalam  metanol,  lalu  dimasukkan  ke botol  vial  yang  telah  berisi  larutan  DPPH  0,5  mM. Selanjutnya  diencerkan  dengan  metanol  sampai volume  menjadi  5  mL.  Absorbansi  DPPH  diukur dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang  515 nm, per lima  menit selama 30  menit.  Aktivitas  antioksidan  diukur  sebagai penurunan  serapan  larutan  DPPH  akibat  adanya penambahan sampel.
Aktivitas  antioksidan  sampel  oleh  besarnya hambatan  serapan  radikal  DPPH  dapat  diketahui melalui  perhitungan  persentase  inhibisi  serapan DPPH dengan menggunakan rumus :
Keterangan: Abs. Blanko = Absorbansi DPPH 50 µM Abs. Sampel = Absorbansi Sampel
Nilai  serapan  larutan  DPPH  terhadap sampel  disebut  sebagai  persen  inhibisi  (%  inhibisi). Selanjutnya  nilai  hasil  perhitungan  dimasukkan  ke persamaan  linier    (Y  =  aX  +  b)  dengan  konsentrasi ppm  (  mg/L  )  sebagai  absis  (sumbu  X)  dan  nilai  % inhibisi  sebagai  ordinatnya  (sumbu  Y).  Nilai  IC50 diperoleh  dari  perhitungan  pada  saat  %  inhibisi sebesar 50 %.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengambilan  senyawa  metabolit  sekunder yang  terkandung  dalam  pupa  BSF  dilakukan  secara ekstraksi  dengan  menggunakan  metode  maserasi. Metode  ini  dipilih    karena  menggunakan  alat-alat sederhana  serta  pengerjaannya  yang  mudah,  yaitu cukup  dengan  merendam  sampel  dalam  pelarut. Rendaman  hasil  maserasi  disimpan  ditempat  yang terlindung  dari  cahaya,  hal  ini  dilakukan  untuk mencegah  reaksi  yang  dikatalisis  cahaya  atau mencegah  terjadinya  perubahan  warna  (Malik,  A., dkk,  2014).  Beberapa  keuntungan  dari  proses maserasi  antara  lain  menggunakan  alat  sederhana, senyawa  yang  tidak  tahan  panas  tidak  akan mengalami  kerusakan.  Salah  satu  faktor  yang  harus diperhatikan  saat  maserasi  adalah  waktu  maserasi. Semakin  lama  waktu  maserasi  yang  diberikan  maka semakin  lama  kontak  antara  pelarut  dengan  bahan yang akan memperbanyak jumlah sel yang pecah dan bahan aktif yang terlarut (Wahyuni dan Widjanarko, 2015).  Pada  percobaan  ini,  proses  maserasi dilakukan dengan menggunakan 3 jenis pelarut, yaitu heksan, etil asetat dan metanol.
Berdasarkan  percobaan  yang  telah  dilakukan diperoleh  hasil  uji  fitokimia  sebagaimana  terlihat pada Tabel 1 berikut :
Tabel  1.  Hasil  Uji  Fitokimia  Larutan  Ekstrak dari Pupa BSF Uji Ekstrak Heksan Ekstrak Etil Asetat Ekstrak Metanol Alkaloid + + + Flavonoid + _ _ Saponin + + + Terpenoid + + + Polifenol _ _ _ Steroid _ _ _ Triterpenoid + _ _

## Uji Alkaloid
Uji  alkaloid  dilakukan  untuk  mengetahui adanya  senyawa  golongan  alkaloid.  Pengujian dilakukan  dengan  menambahkan  asam  klorida  dan larutan  Dragendorff  ke  dalam  larutan  uji.  Alkaloid merupakan  senyawa  yang  mengandung  atom nitrogen, sehingga bersifat basa. Untuk mengestraknya  dibutuhkan  asam,  dalam  hal  ini digunakan  asam  klorida.  Jika  suatu  senyawa  yang
mengandung  alkaloid  direaksikan  dengan  pereaksi Dragendorf,  maka  senyawa  alkaloid  akan  bereaksi dengan  ion  tetraiodobismutat  (III)  membentuk endapan  coklat  orange  atau  jingga.    Hasil  uji  yang diperoleh  menunjukkan  seluruh  ekstrak  membentuk endapan  berwarna  jingga  hingga  coklat,  dengan demikian  seluruh  larutan  ekstrak  mengandung alkaloid.    Reaksi  antara  alkaloid  dengan  pereaksi Dragendorf adalah sebagai berikut  :

## Uji Flavonoid
Flavonoid merupakan senyawa yang mengandung  dua  cincin  aromatik  dengan  gugus hidroksil  lebih  dari  satu.  Senyawa  fenol  dengan gugus  hidroksil  yang  semakin  banyak,  memiliki tingkat  kelarutan  dalam  air  semakin  besar  atau bersifat  polar,  sehingga  dapat  terekstrak  dalam pelarut-pelarut  polar  (Ergina,  dkk,  2014).  Uji flavonoid  dilakukan  menggunakan  Mg  dan  HCl. Harborne (1987) menyatakan bahwa  kedua  senyawa ini  dapat  mereduksi  flavonoid  menghasilkan  warna merah,  kuning  atau  jingga.  Hasil  uji  larutan  ekstrak heksan  menunjukkan  terbentuk  warna  merah  jingga pada  larutan,  sementara  pada  kedua  larutan  ekstrak lainnya  tidak.  Berikut  adalah  reaksi  yang  terjadi antara flavonoid dengan Mg dan HCl :
(Sumber : Harborne, 1987)

## Uji Saponin
Senyawa  saponin  bersifat  polar  yaitu  larut dalam  air  (hidrofilik).  Komponen  ikatan  glikosida yang terdapat didalamnya menyebabkan senyawa ini bersifat  polar  (Harborne,  1987).    Saponin  memiliki kemampuan  untuk  membentuk  busa  karena  bersifat aktif  permukaan  .  Dengan  demikian  keberadaan saponin  dikatakan  positif  apabila  terbentuk  busa setinggi 1-10 cm dalam waktu 10 menit (Depkes RI, 1995).  Hasil  pengujian  saponin  pada  seluruh  larutan ekstrak  menunjukkan  terbentuk  busa  yang  stabil, sehingga saponin positif.
Uji Terpenoid Uji terpenoid dilakukan dengan menggunakan  pereaksi  Lieberman  Burchard.  Hasil positif ditunjukkan dengan adanya cincin coklat pada batas  larutan  saat  penambahan  H 2 SO 4 .  Perubahan warna  ini  terjadi  disebabkan  oleh  oksidasi  pada senyawa  terpenoid  melalui  pembentukan  ikatan rangkap terkonjugasi (Illing, dkk, 2017).
Hasil pengujian  menunjukkan terbentuk  warna  ungu pada  seluruh  larutan  ekstrak.  Ini  mengindikasikan bahwa seluruh larutan ekstrak mengandung terpenoid.

## Uji Steroid dan Triterpenoid
Untuk  mengetahui  adanya  steroid  dan triterpenoid dalam sampel dilakukan dengan menggunakan  uji  Liebermann-  Burchard..  Steroid merupakan  senyawa  yang  dapat  terekstraksi  dengan pelarut  non  polar  atau  semi  polar  (Harborne,  1987). Steroid  akan  bereaksi  dengan  asam  asetat  glasial  dan asam  sulfat  pekat  membentuk  warna  biru  atau  hijau. Jika  terbentuk  warna  ungu  atau  merah,  maka menunjukkan adanya triterpenoid (Depkes R.I, 1995). Jika  steroid  bereaksi  dengan  asam  asetat  dan  asam sulfat  pekat  akan  terjadi  reaksi  asetilasi  gugus  –OH pada  steroid,  sehingga  terbentuk  warna  hijau  atau biru.
Triterpenoid memiliki rantai panjang hidrokarbon  C30  yang    menyebabkan  bersifat  non polar sehingga akan  mudah  terekstrak dalam pelarut yang  bersifat  non  polar.  Ada  beberapa  senyawa triterpenoid  memiliki  struktur  siklik  berupa  alkohol. Selain  itu  senyawa  triterpenoid  juga  dapat  terikat dengan gugus gula sehingga akan dapat tertarik oleh pelarut yang bersifat semi polar bahkan pelarut polar (Harborne, 1987). Uji senyawa triterpenoid didasarkan pada kemampuan senyawa tersebut untuk membentuk  warna  dengan  H 2 SO 4 pekat  dalam pelarut asam asetat anhidrat (Ciulei, 1984).
Hasil  uji  menunjukkan  seluruh  larutan ekstrak  memberikan  warna  ungu,  artinya  terdapat senyawa  triterpenoid  pada  seluruh  larutan  ekstrak dan tidak terdapat senyawa steroid.

## Uji Polifenol
Polifenol merupakansenyawa yang mempunyai  beberapa  gugus  hidroksil(-OH)  pada cincin  afomatiknya.  Beberapa  senyawa yang termasuk  kelompok  senyawa  fenolik  (polifenol) adalah  fenol  sederhana,  asam  fenolat,  tannin, kumarin dan flavonoid. Pengujian polifenol dilakukan  dengan  menggunakan  FeCl 3 ,  hasil  positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna biru tua atau kehitaman (Umirna, 2016).
Berikut adalah reaksinya :
Hasil pengujian menunjukkan seluruh larutan ekstrak membentuk warna kuning – orange. Ini mengindikasikan  bahwa  seluruh  larutan  ekstrak tidak mengandung polifenol.

## Aktivitas antioksidan
Pengujian  aktivitas  antioksidan  dilakukan menggunakan  metode  DPPH  karena  metode  ini merupakan metode yang sederhana, mudah, menggunakan  sampel  dalam  jumlah  sedikit  dan waktu  yang  singkat.  Pengujian  didasarkan  pada reduksi radikal DPPH ungu oleh antioksidan melalui mekanisme  transfer  hidrogen  yang    menyebabkan molekul  DPPH  berwarna  kuning  pucat  yang  stabil. Radikal  DPPH  berwarna  ungu  yang  tersisa  diukur absorbansinya  menggunakan  spektrofotometer  pada panjang  gelombang  515-520  nm    Reaksi  antara DPPH dengan antioksidan adalah sebagai berikut :
Sumber : (Sirivibulkovit, K. et.all, 2018)
Intensitas perubahan warna DPPH berbanding lurus dengan aktivitas antioksidan dalam meredam  radikal  bebas  tersebut  (Rahmawati,  A.M dan Sarif, L.M., 2015).
Untuk    mengetahui  besarnya  konsentrasi sampel  yang  dapat  bersifat radical  scavenger ,  maka dilakukan  variasi  konsentrasi  yang  dibandingkan terhadap kontrol (DPPH tanpa penambahan sampel). Berdasarkan  percobaan  yang  telah  dilakukan  pada larutan ekstrak n-heksan, diperoleh hasil sebagaimana  terlihat  pada  Gambar  3.  Berdasarkan hasil analisis aktivitas antioksidan larutan ekstrak  n- heksan    dari  pupa    BSF  (Gambar  3),  dapat dinyatakan bahwa dengan meningkatnya konsentrasi sampel, terjadi penurunan nilai absorbansi yang tidak terlalu tajam.
Gambar  4  memperlihatkan  hasil  analisis aktivitas  antioksidan  larutan  ekstrak      etil  asetat pupa  BSF,    dapat  dinyatakan  bahwa  dengan meningkatnya konsentrasi sampel, dapat menurunkan  nilai  absorbansi  yang  lebih  tajam  dari penurunan absorban pada larutan ekstrak n-heksan.
Gambar  5  memperlihatkan  hasil  analisis aktivitas antioksidan ekstrak metanol pupa BSF. Dari gambar  tersebut,    dapat  dinyatakan  bahwa  dengan meningkatnya konsentrasi sampel dapat menurunkan nilai  absorban  yang  lebih  tajam  dari  penurunan absorban pada larutan ekstrak etil asetat.
Gambar 3. Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Ekstrak n -Heksan Pupa BSF dengan Metode DPPH
Gambar 4. Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etil Asetat Pupa BSF dengan Metode DPPH
Gambar 5. Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Pupa BSF dengan Metode DPPH
Molyneux  (2004)  menyatakan  antioksidan bereaksi  dengan  1,1-difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH) yang  menstabilkan  radikal  bebas  dan  mereduksi DPPH. Kemudian DPPH akan bereaksi dengan atom hidrogen  dari  senyawa  peredam  radikal  bebas membentuk  1,1-difenil2-pikrilhidrazin  (DPPH-H) yang  lebih  stabil.  Penurunan  nilai  absorbansi  terjadi karena penangkapan radikal pada DPPH oleh sampel uji  yang  menyebabkan  jumlah  ikatan  rangkap  diazo pada  DPPH  berkurang  sehingga  terjadi  pemucatan warna  DPPH  yang  berakibat    menurunnya  nilai absorbansi.
Nilai  IC 50 Larutan  Ekstrak  (n  –  Heksan,  Etil Asetat dan Metanol) dari Pupa BSF
Persen inhibisi adalah kemampuan senyawa antioksidan  dalam  sampel  untuk  menangkap  radikal bebas  pada  konsentrasi  larutan  uji.  Nilai  %  inhibisi diperoleh  dari  perbedaan  antara  nilai  absorbansi larutan  DPPH  dengan  nilai  absorbansi  sampel menggunakan  spektrofotometer  uv-vis.  Kenaikan  % inhibisi dipengaruhi oleh menurunnya nilai absorbansi  DPPH  yang  dihasilkan  oleh  sampel Dengan  demikian,  semakin  tinggi  konsentrasi sampel,  nilai  serapan  makin  kecil,  akibatnya  % inhibisi  semakin  meningkat  (Wahdaningsih,  dkk; 2011).
IC 50 ( Inhibitor Concentration ) adalah konsentrasi  sampel  yang  dapat  menghambat  50% proses  oksidasi  (terbentuknya  radikal  bebas).  Nilai
IC 50 menunjukkan  kadar  dari  ekstrak  bahan  yang mengandung antioksidan yang menyebabkan penurunan DPPH menjadi 50%.
Nilai yang diperoleh sifatnya relatif tergantung  dari  konsentrasi  DPPH  yang  diberikan. Ada banyak faktor yang mempengaruhi hasil pengujian  aktivitas  antioksidan  bahan-bahan  ini, diantaranya  adalah  keadaan  media  atau  nutrisi, cuaca/iklim,  kematangan,  dan  penyimpanan  bahan. Jadi hasil yang diperoleh sifatnya tidak mutlak untuk setiap bahan.
Nilai  IC 50 suatu  sampel  semakin  kecil artinya  semakin  baik  aktivitas  antioksidan  yang dimiliki  oleh  sampel  tersebut.  Hasil  analisis  IC 50 masing-masing  sampel  uji  dapat  dilihat  dalam Gambar  6.  Suatu  senyawa  dikatakan  antioksidan sangat  kuat  jika  nilai  IC 50 <  50  mg/L,  kuat  jika  nilai IC 50 adalah  50  –  100  mg/L,  sedang  jika  nilai  IC 50 adalah  101  –  150  mg/L  dan  lemah  jika  IC 50 >  150 mg/L      (Fidrianny,  et.al,  2014).  Berdasarkan  hasil pengujian,  terlihat  bahwa  seluruh  larutan  ekstrak memiliki  nilai  IC 50 <  50  mg/L,  hal  ini  menunjukkan bahwa  ketiga  larutan  ekstrak  pupa  BSF  bersifat antioksidan  sangat  kuat.  Aktivitas  inhibisi  paling
baik  diberikan  oleh  ekstrak  metanol  pupa  BSF dengan nilai IC 50 sebesar 17,45 mg/L. Grafik potensi inhibisi  tersebut  memperlihatkan  bahwa  senyawa metabolit  sekunder  dalam  ekstrak  kasar  metanol (polar)  dalam  ekstrak  pupa  BSF  mengandung senyawa  bioaktif  yang  potensial  berperan  sebagai antioksidan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  percobaan  uji  senyawa metabolit  sekunder  pada  pupa  lalat  BSF  diperoleh hasil  sebagai  berikut  :  larutan  ekstrak  heksana mengandung  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  terpenoid dan  triterpenoid.    Larutan  ekstrak  etil  asetat mengandung  alkaloid,  saponin  dan  terpenoid, sedangkan  larutan  ekstrak  metanol  mengandung alkaloid,  saponin  dan  terpenoid.  Nilai  IC 50 pada larutan  ekstrak  n-heksan,  etil  asetat  dan  metanol berturut-turut  adalah  41,18;  36,92  dan  17,45  mg/L. Nilai  IC 50 ini  menunjukkan  bahwa  pupa  BSF memiliki sifat antioksidan sangat kuat.
Gambar 6. Nilai IC 50 dari Sampel Uji dengan Metode DPPH

## DAFTAR PUSTAKA
Ciulei,  J.  1984.  Metodology  for  Analysis  of
Vegetables and Drugs. Bucharest
Rumania:  Faculty  of  Pharmacy.  Pp.  11- 26. Depkes RI. 1995. Farmakope Indonesia. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Diener  S.  (2010).  Valorization  of  organic  solid waste  using  the  black  soldier  fly, Hermetia  illucens,  in  low  and  middle- income countries. Swiss Federal Institute of Technology (ETH), Zurich, Switzerland.
Ergina,  Nuryanti,  S.,  dan  Pursitasari,  I.D,  2014,
Uji Kualitatif Senyawa Metabolit
Sekunder  pada  Daun  Palado  (Agave angustifolia)  yang  Diekstraksi  dengan pelarut  Air  dan  Etanol,  J.  Akad.  Kim. 3(3):  165-172,  August  2014  ISSN  2302- 6030
Gangadhar,  B.S.  Anand  Kumar,  M.R.  Raghunath and  N.  Sridhar,  2018,Pre-pupae  (larvae) of  black  soldier  fl  y-a  potential  alternate protein  source  for  aquaculture  feeds ICAR-Central  Institute  of  Freshwater Aquaculture,  Regional  Research  Centre, Hesaraghatta  Lake  P.O.,  Bangalore-  560 089,  India,  Volume  22  No.  1,  January- March 2018
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia. Terjemahan: Padmawinata, K dan Soediro,  I.  Institut  Teknologi  Bandung, Bandung.
Halliwell B.2007. Dietary polyphenols: good, dad, or  indifferent  for  your  health.  J. Cardiovascular Research 73:341-347.
Holmes  LA,  Vanlaerhoven  SL,  Tomberlin  JK.
2013.  Substrate  effects  on  pupation  and adult  emergence  of  Hermetia  illucens (Diptera: Stratiomyidae).
Environ
Entomol. 42
Illning,  I.,  Safitri,  W.,  dan  Erfiana,  2017,  Uji
Fitokimia  Ekstrak  Buah  Dengen,  Jurnal Dinamika,  April  2017,  P-ISSN:  2087-
889  E-ISSN:  2503-4863  Vol.  08.  No.1
66
Kim W., Bae S., Park K., Lee S., Choi Y., Han S.
& Y. Koh (2011). Biochemical characterization  of  digestive  enzymes  in the  black  soldier  fly,  Hermetia  illucens (Diptera:Stratiomyidae). Journal of Asia- Pacific Entomology, 14 Malik,  A.,  Edward,  F.,  Waris,  R.,  2014,  Skrining Fitokimia  dan  Penetapan  Kandungan Flavonoid  Total  Ekstrak  Metanolik Herba  Boroco  (Celosia  argentea  L.), Jurnal  Fitofarmaka Indonesia, Vol 1, No 1.
Molyneux, P., 2004, The Use Of The Stable Free Radical Diphenyl Picrylhydrazyl (DPPH) For  Estimating  Antioxidant  Activity. New York : UJ. Sci. Technol.
Purwanto,  D,  dkk,  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak Buah Purnajiwa (Kopsia arborea Blume.)  dengan  Berbagai  Pelarut,  Jurnal Riset Kimia Kovalen, 3(1): 24 - 32, April 2017. ISSN: 2477-5398
Rahmawati,  A.M  dan  Sarif  L.M,  2015,  Analisis Aktivitas  Antioksidan  Produk  Sirup Buah  Mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.) dengan  Metode  DPPH,  Jurnal  Fitofar- maka Indonesia, Vol. 2 No.2
Rumagit,  H.M.,  dkk,  Uji  Fitokimia  dan  Uji Aktivitas  Antioksidan  Dari  Ekstrak
Etanol Spons ( Lamellodysidea
herbacea),  Jurnal  Ilmiah  Farmasi  – UNSRAT  PHARMACON  Vol.  4  No.  3 Agustus 2015 ISSN 2302 – 2493
Silalahi,  J.  2006.  Makanan  Fungsional.  Kanisius.
Jogjakarta Sirivibulkovit, K., Nouanthavong, S., and Sameenoi,  Y.,  2018,  Paper-based  DPPH Assay for Antioxidant Activity Analysis, Analytical  Sciences,  vol  34,  The  Japan Society for Analytical Chemistry
Suryanto  E.  2012.  Fitokimia  Antioksidan.  Putra Media Nusantara, Surabaya.
Umirna.  2016.  Analisis  Kandungan  Senyawa
Metabolit  Sekunder  Dari  Kulit  Buah Kecombrang  (Etlingera  Elatior)  Dengan Metode Spektrofotometer UvVis.
Skripsi.Program  Studi  Kimia  Fakultas
Sains Universitas Cokroaminoto Palopo
Wahdaningsih,  S,  Setyowati,E.P  dan  Wahyuono
S,  Aktivitas  Penangkap  Radikal  Bebas dari  Batang  Pakis  (Alsophila  glauca J.Sm),  Majalah  Obat  Tradisional,  16(3), 2011
Wahyuni,  D.T.  dan  S.B.  Widjanarko.  2015. Pengaruh jenis pelarut dan lama ekstraksi terhadap  ekstrak  karotenoid  labu  kuning dengan  metode  gelombang  ultrasonik.
Jurnal Pangan dan Agroindustri. 3(2):390-401.