## Potensi Antibakteri Ekstrak Daun
Nangka (Artocarpus heterophyllus L.) terhadap Bakteri Salmonella typhi
Antibacterial Potency of Jackfruit Leaf Extract (Artocarpus heterophyllus L.) Against
Salmonella typhi
Herlinda Mawardika * , Dwi Wahyuni, Siti Ma’rifatul Khasanah
1 Prodi S1 Farmasi, Fakultas Farmasi, Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata Jl. KH. Wahid Hasyim No. 65 Kediri, Indonesia, 64114
*E-mail: herlinda.mawardika@iik.ac.id
Received: 14 December 2022; Accepted: 27 December 2023; Published: 30 December 2023

## Abstrak
Demam tifoid merupakan penyakit kronis yang disebabkan oleh bakteri S. typhi . Penyakit ini dapat ditularkan melalui makanan atau air yang terkotaminasi serta kontak erat dengan orang yang terinfeksi. Gejala  demam  tipus  meliputi  demam  tinggi,  nyeri  perut,  pusing,  dan  konstipasi.  Daun  nangka ( Artocarpus  heterophyllus L.)    memiliki  senyawa  aktif    dengan  aktivitas  antibakteri.  Penelitian  ini dilaksanakan  untuk  menetapkan  daya  hambat  ekstrak  daun  nangka  terhadap  bakteri S.  typhi .  Daun nangka diperoleh melalui metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%. Setelah itu, dilanjutkan pemeriksaan  organoleptis,  uji  bebas  etanol,  dan  uji  fitokimia.  Aktivitas  penghambatan  ekstrak dilakukan dengan metode difusi sumuran, kemudian diikuti uji konsentrasi hambat minimum (KHM) dan  konsentrasi  bunuh  minimum  (KBM).  Hasil  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  nangka mengandung saponin, flavonoid, tanin, dan triterpenoid. Aktivitas penghambatan ekstrak ditunjukkan pada  konsentrasi  20%  (5,24  mm),  40%  (6,78  mm),  dan    konsentrasi  60%  (8,08  mm).  Konsentrasi hambat minimum ekstrak adalah 12,5%, sementara untuk KBM belum bisa ditentukan. Berdasarkan hasil  tersebut,  ekstrak  etanol  daun  nangka  memiliki  senyawa  potensial  untuk  menghambat pertumbuhan S. typhi . Kata Kunci : Artocarpus heterophyllus, Salmonella typhi , KBM, KHM

## Abstract
Typhoid fever is a chronic disease caused by S. typhi bacterium. This disease can be transmitted via contaminated  water or  food, and  close  contact  with an infected person.  The  symptomps of  typhoid fever  include  high  fever,  stomach  pain,  headache,  and  constipation.  Jackfruit  (Artocarpus heterophyllus L.) leaves extract contain active compounds with antibacterial activity. This research aims to determine the inhibitory activity of jackfruit leaves extract against  S. typhi. Jackfruit leaves were extracted by maceration using 70% ethanol as solvent. After that, organoleptic test, ethanol-free test  and  phytochemical  screening  of  extract  were  carried  out.  Inhibitory  activity  of  extract  was conducted  using  well  diffusion  method,  followed  by  determination  of  MIC  and  MBC.  The  results showed that jackfruit leaves extract contained flavonoid, tannins, saponin, and triterpenoid. Inhbitory activity of extract was found at concentration 20% (5.24 mm), 40% (6.78 mm), and concentration 60% (8.08 mm). The MIC value of extract was 12.5%. while the MBC could not be found. According to the results, ethanol extract of jackfruit leaves (70%) have potential compounds to inhibit the growth of S. typhi.
Keywords: Artocarpus heterophyllus, Salmonella typhi, MBC, MIC

## PENDAHULUAN
Penyakit infeksi diketahui menjadi salah satu  pemicu  terbesar  kematian  di  dunia. Mikroorganisme penyebab infeksi antara lain
yaitu parasit, virus, dan bakteri. Selain bakteri Salmonella , Vibrio cholerae , dan Escherichia coli ,  toksin  dari S.  aureus , Clostridium
perfringens, dan C.  botulinum juga  dapat memicu infeksi (Sinaga dan Limbong, 2019).
S.  typhi dikenal  sebagai  bakteri  yang sering  dikaitkan  dengan  penyakit  infeksi sistemik  yang  disebut  demam  tifoid.  Bakteri ini berbentuk batang dengan alat gerak berupa flagel  peritrik  dan  digolongkan  dalam  Gram negatif  tanpa  spora.  Perlekatan  bakteri  pada sel inang diperantarai oleh struktur berupa pili atau  fimbriae.  Dinding  selnya  disusun  oleh komponen  lipopolisakarida  yang  dikenal sebagai  endotoksin.  Karakteristik  lainnya yaitu S.  typhi tergolong  fakultatif  anaerob dengan  suhu  optimal  pertumbuhan  37ºC, mampu  memfermentasikan  D-glukosa,  dan menunjukkan  hasil  positif  pada  uji  katalase (Darmawati, 2009).
Penularan S. typhi dapat melalui beberapa cara,  seperti  mengonsumsi  makanan  atau minuman  yang  terkontaminasi  tinja,  air  seni, sekret  dari  saluran  pernafasan  atau  nanah penderita,    serta  sanitasi  dan  higenitas  pada industri  pengolahan  makanan  yang  belum memenuhi  standar  (Simanjuntak,  2009). Gejala yang muncul setelah terinfeksi S. typhi adalah  demam  tinggi,  nyeri  otot,  malaise, pusing,  batuk,  dan  konstipasi.  Demam  tifoid ditandai  dengan  masa  inkubasi  sekitar  1-3 minggu. Namun, periode paling singkat hanya 3  hari  dan  periode  lama  mencapai  3  bulan. Bakteri yang berhasil masuk ke sel inang akan memperbanyak  diri  dalam  sel  fagositik mononuklear  sebelum  menuju  ke  peredaran darah.  Waktu  inkubasi  dipengaruhi  oleh karakteristik  dari  strain  bakteri,  konsentrasi bakteri, dan faktor inang (Darmawati, 2009).
Penanganan  demam  tifoid  salah  satunya dengan  konsumsi  antibiotik.  Penggunaan antibiotik  yang  tidak  sesuai  ketentuan  dan dalam  jangka  waktu  yang  lama  dapat menimbulkan  risiko  resistensi  antibiotik. Beberapa  kandungan  senyawa  aktif  pada tanaman  diketahui  dapat  berpotensi  sebagai antibakteri untuk pengobatan infeksi. Antibakteri  adalah  senyawa  yang  mampu mengendalikan pertumbuhan mikroorganisme dengan  menghalangi  sintesis  komponen penyusun sel atau mengganggu
metabolismenya  (Madigan,  2005).  Pencarian senyawa  antibakteri  baru  dari  tanaman  perlu terus  dilakukan  untuk  pengobatan  penyakit infeksi bakteri.
Metabolit  sekunder  tertentu  dalam ekstrak  tanaman  dapat  menjadi  antibakteri alami (Kusuma dkk., 2018). Tanaman nangka telah banyak dikaji karena berkhasiat sebagai obat.  Buah  nangka  memiliki  kandungan vitamin  B-6  (pyridoxine),  niacin,  asam  folat, dan riboflavin. Kulit kayu terbukti mengandung  senyawa  golongan  flavonoid yang  berbeda,  seperti  artonin  E,  artonol  B, morusin  dan  sikloartobilosanton.  Sementara itu,  daun  nangka  diketahui  mengandung flavonoid,  tanin,  saponin,  dan  terpenoid (Siahaan  dkk.,  2019).  Dari  penelitian sebelumnya,  buah nangka  berkhasiat sebagai ekspektoran,  antiinflamasi,  dan  antikanker, kulit  kayu  dimanfaatkan  untuk  mengatasi demam  dan inflamasi  (Nasution dkk.,  2014). Daun  nangka  memiliki  potensi  sebagai pelancar  ASI,  obat  luka,  demam,  bisul, penyakit kulit, analgesik dan imunomodulator (Kusumawati  dkk.,  2017).  Selain  itu,  daun nangka  juga  dapat  meredakan  batuk  dan menyembuhkan  gangguan  pada  saluran pencernaan (Mambang dan Rezi, 2018).
Upaya  pemanfaatan  tanaman  nangka sebagai  bahan  obat-obatan  tradisional  mulai dilakukan sebagai bahan antibakteri. Penelitian  Katresna  dkk.  (2020)  menyatakan kemampuan ekstrak daun nangka konsentrasi 50%  mampu  menekan  pertumbuhan  bakteri patogen S.  aureus .  Penelitian  ini  bertujuan untuk  menguji  daya  hambat  ekstrak  etanol 70% daun nangka serta menentukan Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  dan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) terhadap bakteri S. typhi .

## METODE PENELITIAN
Sampel dalam penelitian ini adalah daun nangka  yang  diperoleh  dari  Materia  Medika Kota  Batu  Malang.  Kultur  bakteri S.  typhi (ATCC ® 700720D-5 TM ) didapatkan dari Laboratorium Bakteriologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.

## Persiapan Simplisia
Daun nangka dicuci hingga bersih untuk menghilangkan  kotoran  yang  melekat  dan ditiriskan. Daun dikeringkan dalam oven suhu 50 o C, dilanjutkan sortasi kering dan diblender hingga  mendapatkan  derajat  halus  40  mesh. Simplisia  ditimbang  untuk  menentukan beratnya (Kusumawati dkk., 2017).

## Pembuatan Ekstrak
Serbuk daun nangka diambil 400 g untuk dimaserasi  selama  5  hari.  Pelarut  yang digunakan  adalah  etanol  70%  (1:10).  Filtrat yang  telah  dipisahkan  dari  residu  kemudian diuapkan  dengan waterbath suhu  60 o C. Ekstrak  kental  yang  diperoleh  dihitung rendemennya dengan formula sebagai berikut (Majid dkk., 2019).
Rendemen = Bobot Ekstrak Pekat (G) Bobot Bahan Sampel (G) X 100% ……(1)

## Uji Bebas Etanol
Larutan  asam  asetat  (CH 3 COOH)  dan asam  sulfat  (H 2 SO 4 )  pekat  sebanyak  3  tetes ditambahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  berisi ekstrak lalu dipanaskan. Jika tidak ada aroma ester, maka ekstrak dinyatakan tidak mengandung etanol (Zhang et al., 2004). Uji Organoleptik
Pemeriksaan organoleptis dilakukan menggunakan  panca  indra  untuk  mengetahui kekhususan bau,  warna dan rasa  dari  ekstrak (Depkes RI, 2000).
Skrining Fitokimia
Ekstrak  daun  nangka  sebanyak  0,5  g dilarutkan dalam 50 ml etanol 70% (Cahyani dkk.,  2019).  Larutan  tersebut  dipisahkan  ke wadah uji berbeda.
Uji Alkaloid
Larutan ekstrak sebanyak 2 ml diuapkan dan residunya dilarutkan dalam 5 ml HCl 2N. Larutan  disaring  dan  dimasukkan  ke  tabung reaksi  berbeda.  Tabung  pertama  ditambah  3 tetes pereaksi Mayer, sedangkan tabung kedua ditambah 3 tetes pereaksi Dragendroff.  Hasil
diamati dari perubahan yang terjadi (Harborne, 1987).

## Uji Flavonoid
Larutan uji 2 ml ditambah 3 ml air panas, lalu  direaksikan  dengan  0,05  mg  serbuk  Mg dan  1  ml  HCl  pekat.  Adanya  warna  merah, jingga,  atau  kuning  pada  larutan  setelah dilakukan pengocokan dengan kuat menunjukkan hasil positif (Harborne, 1987).
Uji Saponin
Larutan ekstrak sebanyak 2 ml ditambahkan air panas 2 ml dan didinginkan. Setelah  dikocok  10  detik,  ditambah  1  tetes HCl 2 N. Kandungan saponin ditandai dengan buih yang stabil setinggi 1-10 cm (Depkes RI, 1995).
Uji Tanin
Kandungan tanin diuji dengan menambahkan  2  tetes  FeCl 3 1  %  ke  larutan ekstrak  2  ml.  Warna  cokelat  kehijauan  atau hijau  kehitaman  menunjukkan  hasil  positif (Harborne, 1987).

## Uji Steroid dan Terpenoid
Uji  diawali  dengan  larutan  ekstrak  2  ml diberi  5  tetes  CH 3 COOH  dan  2  tetes  H 2 SO 4 pekat.  Setelah  dikocok,  campuran  dibiarkan beberapa  menit.  Munculnya  warna  biru  atau hijau mengindikasikan positif steroid, sedangkan  merah  atau  ungu  untuk  positif terpenoid (Harborne, 1987).

## Uji Antibakteri Metode Difusi
Daya hambat ekstrak diuji menggunakan difusi  sumuran  dengan  variasi  konsentrasi 20%, 40%, dan 60%, disediakan pula larutan kloramfenikol  1%  sebagai  kontrol  positif. Suspensi bakteri S. typhi yang diinokulasikan ke media uji disetarakan pada konsentrasi 10 6 CFU/ml.  Semua  larutan  uji  dimasukkan  ke tiap  sumuran  sebanyak  50  µl  dengan mikropipet  dan  media  diinkubasi  pada  suhu 37 o C  selama  24  jam.  Diameter  zona  bening yang  terbentuk  diukur  menggunakan  jangka sorong  dan  dihitung  sesuai  rumus  berikut (Harti, 2015).
Diameter = (Dh-Dc)+(Dv-Dc)
2 …………..(2)
Keterangan: Dh= Diameter horizontal Dv= Diameter vertikal Dc=Diameter cakram/sumuran

## Penentuan KHM dan KBM
Konsentrasi hambat minimum ditentukan melalui  metode  dilusi  cair  menggunakan media  MHB  (Fitriana  dkk.,  2019).  Prosedur ini meliputi pembuatan media cair yang diberi perlakuan  ekstrak  dengan  variasi  konsentrasi (50%,  25%,  12,5%,  6,25%,  dan  3,125%), kemudian  diinokulasi  dengan  mikroba  uji sebanyak 1 mL (10 6 CFU/ml). Dua tabung lain disiapkan  sebagai  kontrol  media  dan  kontrol bakteri.  Perubahan  nilai  absorbansi  (OD  = Optical Density ) bakteri sebelum dan setelah inkubasi  selama  24  pada  setiap  tabung  uji diukur  dengan  spektrofotometer  Unico  UV- 2000 (λ = 600 nm). Jika selisih nilai OD sesuai hasil  perhitungan  negatif  (-),  maka  terdapat penghambatan  bakteri.  Selanjutnya,  0,2  ml larutan uji KHM dipindahkan ke media MHA dan  diinkubasi  dalam  inkubator  dengan kondisi yang sama. Cawan berisi ekstrak yang mampu  membunuh  bakteri  hingga  98-99,9% inokulum bakteri ditentukan sebagai KBM.

## Analisis Data
Uji  organoleptis  dan  fitokimia  ekstrak dianalisis  secara  deskriptif,  sedangkan  hasil uji antibakteri metode difusi dianalisis dengan One way ANOVA menggunakan SPSS.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  maserasi  menghasilkan  ekstrak kental  sebanyak  36,63  g  dengan  persentase rendemen  18,31%.  Karakteristik  dari  ekstrak yaitu  berwarna  coklat  kehitaman,  memiliki rasa  pahit,  dan  terdapat  bau  khas  aromatik. Sesuai hasil pemeriksaan, ekstrak sudah tidak mengandung  etanol  yang  ditandai  dengan tidak  adanya  bau  ester.  Reaksi  esterifikasi adalah terbentuknya senyawa ester dari reaksi alkohol  dengan  asam  karboksilat.  Hal  ini diakibatkan  oleh  asam  lemak  bebas  dari trigliserida  yang  diubah  menjadi  metil  ester.
Hasil lain dari proses tersebut adalah air (Nst dkk., 2015).
Berdasarkan  hasil,  ekstrak  daun  nangka memiliki  kandungan  fitokimia  berupa  tanin, saponin, flavonoid, dan triterpenoid ( Tabel 1 ). Kandungan  senyawa  flavonoid  dibuktikan
dengan  munculnya  warna  kuning  akibat tereduksinya  ikatan  glikosida  pada  flavonoid oleh penambahan HCL dan serbuk magnesium (Robinson, 1995). Pengujian tanin dilakukan  dengan  penambahan  FeCl 3 untuk mengidentifikasi  gugus  fenolik  pada  ekstrak. Perubahan  warna  terjadi  karena  tanin  yang merupakan  senyawa  polifenol  mereduksi  ion Fe 3+ menjadi ion Fe 2+ (Harborne, 1987). Pada uji  saponin  terbentuk  buih  stabil  selama  10 menit. Adanya HCl pada uji saponin mampu meningkatkan kepolaran saponin yang merubah  letak  gugus  penyusunnya.  Gugus polar  menghadap  keluar,  sedangkan  gugus non-polar menghadap ke dalam dan membentuk  struktur  misel.  Kondisi  ini mengakibatkan terbentuknya busa. Sementara itu,  pengujian  triterpenoid  yang  positif ditandai  dengan  warna  ungu.  Prinsip  uji  ini adalah  senyawa  akan  bereaksi  dengan  asam sulfat dalam pelarut asam asetat anhidrat dan asam sulfat untuk membentuk warna. Selama uji, terjadi pelepasan H 2 O dan penggabungan dengan karbokation (Ciulei, 1984).
Hasil  skrining  ini  didukung  oleh penelitian  sebelumnya,  dimana  daun  nangka terbukti  memiliki  komponen  bioaktif  yang sama, namun tidak mengandung alkaloid dan steroid  (Siahaan  dkk.,  2019).  Uji  alkaloid memberikan  hasil  negatif  karena  tidak ditemukan  endapan  atau  perubahan  warna
Tabel 1. Kandungan fitokimia ekstrak Senyawa Hasil Alkaloid - Flavonoid + Tanin + Saponin + Steroid Triterpenoid - +
setelah  ditambahkan  reagen  Dragendorf  dan Mayer. Hal ini bisa disebabkan jika kompleks kalium  alkaloid  yang  terbentuk  tidak  sampai batas maksimal (Minarno, 2015).
Uji  kepekaan  bakteri  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  70%  daun  nangka memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri S.  typhi .  Selain  pada  kelompok perlakuan ekstrak, zona hambat juga terdapat di  dekat  kontrol  positif  (kloramfenikol  1%). Sementara  area  disekitar  sumuran  berisi DMSO 10% (kontrol negatif) tetap ditumbuhi oleh bakteri S. typhi ( Gambar 1 ).
Diameter  zona  hambat  lebih  besar  pada konsentrasi  ekstrak  yang  lebih  tinggi  ( Tabel 2 ).  Menurut  Purba  dkk.  (2022),  hubungan antara diameter zona hambat dengan konsentrasi  sampel  adalah  berbanding  lurus. Senyawa  bioaktif  menjadi  lebih  banyak. Dengan  meningkatnya  konsentrasi,  jumlah senyawa bioaktifnya bertambah dan mempengaruhi  kemampuan  penghambatan. Setelah  hasil  diuji  dengan  One  Way  Anova, diketahui terdapat perbedaan dengan nilai Sig <0,05. Setiap kelompok menunjukkan
perbedaan yang signifikan terhadap kelompok lain.  Daya  hambat  dari  ekstrak  konsentrasi 60%  lebih  tinggi  dibandingkan  konsentrasi lainnya,  yaitu  sebesar  8,08  mm.  Berbeda dengan  hasil  penelitian  sebelumnya,  ekstrak daun  nangka  50%  sudah  menghasilkan  zona hambat sebesar 8,8 mm (Siahaan dkk., 2019).
Jika  diamati,  tidak  terdapat  zona  bening pada  kontrol  negatif.  Hasil  serupa  didukung oleh penelitian Amiliah dan Handayani (2021) yang  menunjukkan  DMSO  tidak  mampu menghambat  bakteri S.typhi .  DMSO  10% dikenal dengan kemampuannya untuk melarutkan  senyawa  baik  polar  maupun  non polar  dan  bukan  golongan  bakterisidal sehingga  tidak  memberikan  efek  dalam pengujian (Reynolds, 1996).
Perbedaan  hasil  yang  signifikan  salah satunya  terlihat  antara  kontrol  positif  dan ekstrak.  Aktivitas  antibakteri  daun  nangka termasuk dalam kategori sedang, masih lebih rendah  jika  dibandingkan  kloramfenikol  1% yang  diameter  zona  hambatnya  mencapai 21,69  mm  dan  tergolong  sangat  kuat. Aktivitas antibakteri kloramfenikol yang lebih baik  juga  ditunjukkan  oleh  penelitian  Dewi dkk.  (2014).  Kloramfenikol  yang  digunakan merupakan senyawa murni, sedangkan ekstrak  bersifat  kasar  dengan  kandungan senyawa  lain    yang  dapat  mempengaruhi fungsi flavonoid, tanin, saponin, dan triterpenoid  untuk  mengontrol  pertumbuhan bakteri.  Kloramfenikol  dapat  mengeliminasi berbagai  jenis  bakteri  penyebab  infeksi. Target dari antibiotik ini adalah mengganggu fungsi  dari  ribosom  subunit  50S  sebagai organel  pembentuk  protein  serta  enzim peptidil  transferase  yang  berkaitan  dengan pembentukan  ikatan  asam  amino  baru  pada pada rantai polipeptida bakteri (Muntasir dkk., 2022).
Selanjutnya dilakukan pengujian konsentrasi hambat dan bunuh minimum dari ekstrak.  Sampel  ekstrak  yang  diperoleh berwarna  kecoklatan  sehingga  pengukuran kekeruhan  sampel  sulit  diamati  secara langsung. Sesuai dengan pengujian,
Gambar 1. Hasil uji antibakteri ekstrak daun Nangka, (a) kontrol negatif, (b) kontrol positif, (c-e) berturut-turut ekstrak dengan konsentrasi 20, 40, dan 60%.
konsentrasi  12,5%  dengan  ∆OD  (-0,168) ditentukan sebagai KHM ( Tabel 3 ).
Nilai  ∆OD  yang  negatif  menunjukkan adanya  penurunan  konsentrasi  bakteri  yang terjadi  setelah  diletakkan  dalam  inkubator selama 24 jam (Maftuhah dkk., 2015). Tabung uji  yang  tidak  mengandung  ekstrak  (kontrol bakteri)  menghasilkan  nilai  OD  yang  lebih besar  setelah  inkubasi.  Hal  ini  membuktikan tidak  adanya  faktor  yang  menghambat pertumbuhan bakteri S. typhi sehingga jumlah sel  semakin  meningkat  dan  media  kultur tampak  keruh.  Jumlah  sel  bakteri  dapat direpresentasikan  oleh  nilai  absorbansi. Larutan  uji  yang  jernih  menandakan  nilai
absorbansi  yang  rendah  dan  sebaliknya (Benson, 2002).
Penentuan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) dilakukan melalui penanaman sampel dengan teknik spread plate . Setelah inkubasi,
terdapat koloni bakteri pada seluruh media uji yang  mengandung  ekstrak  daun  nangka
( Gambar 2 ). Jumlah bakteri semakin sedikit pada  konsentrasi  ekstrak  yang  lebih  tinggi. Total  koloni  bakteri  pada  cawan  yang  diberi ekstrak  lebih  rendah  dibandingkan  dengan perlakuan  tanpa  ekstrak.  Nilai  KBM  dipilih dari  media  uji  dengan  penambahan  ekstrak yang  menunjukkan  98-99.9%  bakteri  telah terbunuh  jika  dibandingkan  inokulum  awal (Balouiri et al., 2016). Pada media uji dengan konsentrasi  50%  masih  terdapat  >5  koloni bakteri. Dengan demikian, nilai KBM belum dapat  ditentukan.  Hal  ini  dapat  dikarenakan konsentrasi senyawa aktif yang rendah dalam sampel uji. Beberapa faktor yang mempengaruhi  aktivitas  antibakteri  suatu senyawa diantaranya kadar senyawa antimikroba, jenis dan jumlah
mikroorganisme uji, pH dan suhu senyawa uji (Khotimah  dkk.,  2020).  Ekstrak  perlu dikombinasikan  dengan  bahan  lain  untuk meningkatkan  aktivitas  penghambatannya. Penelitian  Windriani  dan  Safitri  (2020) menunjukkan  bahwa  dari  perlakuan  ekstrak buah asam jawa yang dikombinaskan dengan daun  sirih  diperoleh  KBM  sebesar  20% terhadap S. typhi .
Potensi  antibakteri  ekstrak  etanol  daun nangka  karena  mengandung  komponen bioaktif  flavonoid,  saponin,  tanin,  dan triterpenoid  (Siahaan  dkk.,  2019).  Semua
Gambar 2. Pengamatan jumlah koloni pada uji
KBM
Tabel 2. Diameter zona hambat S. typhi setelah ekstrak daun nangka
Diameter zona hambat (mm) Perlakuan R1 R2 R3 Rata-rata ±SD (mm) Ket Kontrol (+) 21,73 21,52 21,83 21,69±0,1 Sangat kuat Kontrol (-) 0 0 0 0,00±0,0 - Konsentrasi 20% 5,39 5,19 5,15 5,24±0,1 Sedang Konsentrasi 40% 6,8 7,32 6,23 6,78±0,5 Sedang Konsentrasi 60% 8,06 8,11 8,07 8,08±0,02 Sedang
Keterangan:
≤ 5 mm = lemah, 10-20 mm = kuat, 5-10 mm = sedang, ≥20 mm = sangat kuat (Davis and Stout, 1971)
komponen tersebut diketahui dapat menghambat biosintesis dinding sel, menghalangi  sintesis  protein,  meningkatkan permeabilitas membran sel, sehingga menekan pertumbuhan atau memicu kematian bakteri (Nourbakhsh et al., 2022). Kerusakan membran  sitoplasma  terjadi  ketika  terjadi pemecahan gugus fosfat oleh ion H+ senyawa flavonoid  yang  mengakibatkan  penguraian fosfolipid menjadi gliserol. Rusaknya fosfolipid menyebabkan terhambatnya replikasi  bakteri  karena  perubahan  struktur membran sitoplasma (Gilman et al., 1991).
Sementara  itu,  senyawa  tanin  memicu terbentuknya  kondisi  asam  yang  dapat mendenaturasi protein. Aktivitas tanin lainnya yaitu  juga  menghalangi  kerja  enzim reverse transcriptase dan DNA  topoisomerase untuk mencegah pembentukan sel bakteri (Robinson,  1995).  Saponin  menghambat bakteri  dengan  mempengaruhi  stabilitas membran  sel  bakteri  hingga  terjadi  lisis  sel. Pada  kondisi  ini,  sel  bakteri  kehilangan berbagai  molekul  penting  yaitu  protein  dan
DNA (Kurniawan dan Aryana, 2015). Selain saponin,  triterpenoid  juga  memiliki  aktivitas antibakteri. Triterpenoid diketahui mempengaruhi  ekspresi  gen  yang  terlibat dalam perubahan peptidoglikan, pembentukan biofilm  dan  autolisis  sel  (Wronska  et  al., 2022).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  nangka  konsentrasi 20, 40, dan 60% memiliki aktivitas antibakteri terhadap S.  typhi .  Ekstrak  tersebut  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM) sebesar  12,5%,  namun  tidak  menunjukkan aktivitas bakterisidal terhadap S. typhi .

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih kepada Institut Ilmu Kesehatan Bhakti Wiyata Kediri yang telah mendukung dan memfasilitasi pelaksanaan penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Amiliah,  N.  dan  Handayani,  D.,  2021.  Aktivitas  Antibakteri  Kulit  Buah  Jeruk  Kalamansi (Citrofortunella  microcarpa) terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli. ALOTROP. Jurnal Pendidikan dan Ilmu Kimia , 5(1), pp.92-105. https://doi.org/10.33369/atp.v5i1.16493.
Balouiri, M., Sadiki, M., Ibnsouda, S.K., 2016. Methods for in Vitro Evaluating Antimicrobial Activity:  A  review.  Journal  of  Pharmaceutical Analysis,  6(2),  pp.71-  79.
Tabel 3. Nilai Optical Density (OD) sebelum dan sesudah inkubasi
No Konsentrasi ekstrak Nilai Optical Density (OD) ∆OD Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 OD* OD** OD* OD** OD* OD** 1 50% 0,570 0,331 0,575 0,328 0,573 0,330 -0,243 2 25% 0,470 0,281 0,469 0,297 0,478 0,288 -0,183 3 12,5% 0,382 0,207 0,387 0,223 0,381 0,216 -0,168 4 6,25% 0,298 0,328 0,296 0,342 0,293 0,314 0,032 5 3,125% 0,228 0,308 0,223 0,317 0,226 0,312 0,129 6 Kontrol bakteri 0,046 0,350 0,033 0,340 0,047 0,353 0,305 7 Kontrol media 0 0 0 0 0 0 0
Keterangan : * sebelum inkubasi ** sesudah inkubasi
http://dx.doi.org/10.1016/j.jpha.2015.11.005 .
Benson,  H.  J.,  2002.  Microbiological  Applications  Laboratory  Manual  In  General Microbiology Eight Edition (pp . 91-92). Pasadena: Pasadena City College.
Cahyani,  N.  dkk.,  2019.  Karakteristik  Dan  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  70%  Batang Kepuh ( Sterculia foetida L.). Jurnal Kimia, 13(1), pp. 22–28. https://doi.org/10.24843/JCHEM.2019.v13.i01.p04.
Ciulei,  J.,  1984.  Metodology  for  Analysis  of  Vegetables  and  Drugs  (pp.  11-26).  Bucharest: Unido Rumania Center.
Darmawati,  S.,  2009.  Keanekaragaman  Genetik Salmonella  typhi. Jurnal  Kesehatan,  2(1), pp.27–33.
Davis, W.W dan Stout, T.R., 1971. Disc Plate Methods of Microbiological Antibiotic Assay. Applied  Microbiology,  22(4),  pp.  659–665.  https://doi.org/10.1128/am.22.4.659- 665.1971.
Depkes RI., 1995. Farmakope Indonesia. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Depkes RI., 2000. Parameter Standar  Umum  Ekstrak Tumbuhan Obat.  Jakarta:  Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Dewi,  M.  K.,  Ratnasari,  E.  dan  Trimulyono,  G.,  2014.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Majapahit (Crescentia  cujete) terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Ralstonia  solanacearum Penyebab Penyakit Layu. Lentera Bio , 3(1), pp.51–57.
Fitriana,  Y.,  Fatimah,  V.  dan  Fitri,  S.,  2019.  Aktivitas  Antibakteri  Daun  Sirih:  Uji  Ekstrak KHM  (Kadar  Hambat  Minimum)  dan  KBM  (Kadar  Bakterisidal  Minimum).  Sainteks, 16(2), pp.101-108. http://dx.doi.org/10.30595/sainteks.v16i2.7126.
Gilman,  A.G.T.,  Rall,  A.,  Nies,  A.S.  and  Taylor,  P.,  1990.  The  Pharmalogical  Basic  of Theraupetics 8 th Edition. New York: Pergamon Press Inc.
Harborne,  J.  B.,  1987.  Metode  Fitokimia:  Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan.
Bandung: Institut Teknologi Bandung.
Harti, S.A., 2015. Mikrobiologi Kesehatan (pp. 3–5). Yogyakarta: Andi Offset.
Katresna, H. W., Yuliawati, K. dan Sadiyah, E.R., 2020. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Nangka ( Artocarpus heterophyllus Lamk.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli. Prosiding Farmasi , 6(2), pp.682-686. http://dx.doi.org/10.29313/.v6i2.23654.
Khotimah, H., Diyantoro, Indriyati, D. dan Sundari, A., 2020. Screening in Vitro Antimicrobial Activity of Celery ( Apium graveolens ) Against Staphylococcus sp. Malaysian Journal of Medicine and Health Sciences, 16(SUPP16), pp.72-77.
Kurniawan, B. dan Aryana, W.F., 2015.  Binahong ( Cassia alata L) as Inhibitor of Escherichia coli Growth. Journal Majority, 4 (4), pp. 100-104.
Kusuma, S. A. F., Febrianti, M., Saraswati, A., 2018. Comparison of Unripe Banana Peel of Kepok  ( Musa  paradisiaca L.)  and  Klutuk  ( Musa  balbisiana colla):  Phytochemical  and anti- dysenteriae Activity. Journal of Pharmaceutical Sciences and Research, 10(4), pp. 911–914.
Kusumawati, E., Apriliana, A., dan Yulia, R., 2017. Kemampuan Antibakteri Ekstrak Etanol
Daun Nangka  ( Atrocarpus  heterophyllus Lam.) terhadap Escherichia coli . Jurnal  Sains dan Kesehatan, 1(7), pp.327–332. https://doi.org/10.25026/jsk.v1i7.51.
Madigan M., 2005. Brock Biology of Microorganisme (pp. 753). London: Prentice Hall.
Maftuhah, A., Bintari, S.H. dan Mustikaningtyas, D., 2015. Pengaruh Infusa Daun Beluntas ( Pluchea  indica )  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  epidermidis. Unnes Journal of Life Science, 4(1), pp. 60-65.
Majid,  N.  S.,  Yamlean,  P.  dan  Citraningtyas,  G.,  2019.  Formulasi  dan  Uji  Efektivitas  Krim Antibakteri  Ekstrak  Daun  Nangka  ( Artocarpus  heterophyllus Lam.)  terhadap  Bakteri Staphylococcus
aureus . Pharmacon, 8(1), pp.225-233. https://doi.org/10.35799/pha.8.2019.29257.
Mambang, D. E. P. dan Rezi, J., 2018. Efektivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Nangka ( Artocarpus  heterophyllus L.)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus . Jurnal Agroteknosains , 2(1), pp.179-187. http://dx.doi.org/10.36764/ja.v2i1.142.
Minarno, E. B., 2015. Skrining Fitokimia dan Kandungan Total Flavonoid pada Buah Carica pubescens Lenne dan K. Koch Di Kawasan Bromo, Cangar, Dan Dataran Tinggi Dieng. El-Hayah: Jurnal Biologi, 5(2), pp.73-82. https://doi.org/10.18860/elha.v5i2.3022.
Muntasir,  Abdulkadir,  W.,  Harun,  A.,  Tenda,  P.,  Makkasau,  Muliyadi,  Saksosno,  R.Y., Fernandez,  S.  dan  Wonga,  T.,  2022.  Antibiotik  dan  Resistensi  Antibiotik  (pp.  39-40) . Yogyakarta: Rizmedia Pustaka Indonesia.
Nasution,  H.,  Musyirna,  D.  dan  Nst,  R.,  2014.  Pengujian  Antiradikal  Bebas  Difenilpikril Hidrazil  (DPPH)  Ekstrak  Etil  Asetat  Daun  Nangka  ( Artocarpus  heterophyllu s  Lamk). Jurnal Sains Dasar , 3(2), pp. 137–141. http://dx.doi.org/10.21831/jsd.v3i2.4111.
Nourbakhsh, F., Lotfalizadeh, M., Badpeyma, M., Shakeri, A.,  & Soheili, V.,  2022. From Plants  to  Antimicrobials: Natural  Products  Against  Bacterial Membranes. Phytotherapy Research, 36(1), pp. 33-52. https://doi.org/10.1002/ptr.7275 .
Nst, S. L. A., Sutri, R. dan Iriany, 2015. Pembuatan Etil Asetat dari Hasil Hidrolisis, Fermentasi dan Esterifikasi Kulit Pisang Raja (Musa paradisiaca L.). Jurnal Teknik Kimia USU , 4(1), pp.1-6. https://doi.org/10.32734/jtk.v4i1.1439.
Purba, P. Y., Yoswaty, D. dan Nursyirwani., 2022. Antibacterial Activity of Avicennia alba Leaves  and  Stem  Extracts  Against  Pathogenic  Bacteria  ( Pseudomonas  aeruginosa, Aeromonas salmonicida, Staphylococcus aureus). Journal of Coastal and Ocean Sciences, 3(2), pp.144-151. https://doi.org/10.31258/jocos.3.2.144-151.
Reynolds,  J.  E.  F.,  1996.  Martindale,  The  Extra  Pharmacopeia  31th  Edition  (pp.  114-117).
London: The Royal Pharmaceutical Society Press.
Robinson, T., 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Bandung: ITB.
Siahaan, D., Gurning, K. Iksen., 2019. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Nangka ( Artocarpus heterophyllus Lamk) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli,  Staphylococcus  epidermis, dan Salmonella  typhi. Journal  of  Pharmaceutical  and Sciences, 2(2), pp.49-54. http://dx.doi.org/10.29313/.v6i2.23654.
Simanjuntak, C. H., 2009. Demam Tifoid, Epidemiologi dan Perkembangan Penelitian. Cermin Dunia Kedokteran, 1(83).
Sinaga, M. dan Limbong, D., 2019. Dasar Epidemiologi (pp.70-71). Yogyakarta: Deepublish Publisher
Windriani, I. dan Safitri, C.I., 2020. Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Daun Sirih Hijau dan Buah Asam Jawa Terhadap Salmonella typhi secara Mikrodilusi. Seminar Nasional Pendidikan Biologi dan Saintek ke-V, pp.545-552.
Wronska,  N.,  Szlaur,  M.,  Zawadzka,  K.,  Lisowska,  K.,  2022.  The  Synergistic  Effect  of Triterpenoids  and  Flavonoids-New  Approaches  for  Treating  Bacterial  Infections? Molecules, 27(3), 847. https://doi.org/10.3390/molecules27030847.
Zhang, Y., Wu, X., Ren, Y., Fu, J. and Zhang, Y., 2004. Safety Evaluation of a Triterpenoid- Rich Extract from Bamboo Shavings. Food and Chemical Toxicology, 42(11),1867-75. https://doi.org/10.1016/j.fct.2004.07.005 .