## PROFIL KROMATOGRAM DAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI
EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING ( Murraya paniculata (L) Jack. ) TERHADAP BAKTERI ESCHERICHIA COLI SECARA IN VITRO

## Gunardi dan Kartika Dwi S

## Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro

## ABSTRAK
Daun  kemuning  adalah  salah  satu  bahan  tanaman  yang  sering  digunakan  untuk  pengobatan penyakit infeksi di masyarakat. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui profil kromatogram dan aktivitas ekstrak etanol daun kemuning terhadap Escherichia coli. Penelitian ini merupakan penelitian deskripsi dan ekperimental. Ekstrak daun kemuning diperoleh dengan cara maserasi dengan pelarut etanol  40  %.  Untuk  mengetahui  profil  kromatogram  dilakukan  dengan  cara  pemisahan  secara kromatografi lapis tipis dan akvitas terhadap Escherichia coli dilakukan dengan metoda pengenceran yang dilanjutkan penanaman pada media agar Mac Conkey.
Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa,  profil  kromatogram  ekstrak  etanol  daun  kemuning didapatkan 6 bercak di bawah sinar UV panjang gelombang 254 nm dengan warna biru gelap, biru, ungu, ungu jingga, hijau dan coklat. Aktivitas ekstrak etanol daun kemuning terhadap Escherichia coli pada  analisis  uji  Tukey  menunjukan  daya  hambat  pada  konsentrasi  30  %  dan  daya  bunuh  pada konsentrasi 40 %. Diperkirakan terdapat 6 komponen senyawa dalam ekstrak etanol daun kemuning yang  meliputi  golongan  alkohol,  keton  ,  terpenoid,  steroid,  asam  organik  dan  minyak  atisiri  yang bertanggung jawab terhadap aktivitas Escherichia coli dengan nilai KHM 30 % dan KBM 40 %

## Kata kunci: Daun kemuning (Muraya paniculata (L) Jack) profil kromatogram, aktivitas terhadap Escherichia coli

## CHROMATOGRAM PROFILE AND IN VITRO ANTIBACTERIAL
ACTIVITY OF ETANOL EXTRACT KEMUNING ( Murraya paniculata (L)

## Jack ) LEAF AGAINST ESCHERICHIA COLI

## ABSTRACT
Kemuning leaf is a material plant used to treat infection . The aim of this research was to explore the  chromatogram  profile  and  antibacterial  activity  of  etanol  extract  of  kemuning  leaf  against Escherichia coli. This research was a description and experimental study . Kemuning leaf exctract was prepared by maseration with etanol 40 %. Chromatogram profile was using thin layer chromatography and antibacterial activity against Escherichia coli was done using dilution method and then cultured in Mac Conkey Agar media.
The results showed thad, thin layer chromatography shown 6 spot under UV light 254 nm wave leng with colour spot e.i dark blue, blue, violet, pink violet, green and brown. Antibacterial activity against Escherichia coli were inhibitory consentration at 30 % and letalis consentration at 40 %. There were 6 compounds predictly responsible to antibacterial activity included of alcohol , ketone, terpenoid, steroid, organic acid and volatile oil constituented within etanol extract of Kemuning leaf. It had been also obtained as antibacterial activity against Escherichia coli with MIC 30 % and MBC 40 %
Keywords:  Kemuning  (  Murraya  paniculata  (L)  Jack  )  leaf,  Chromatogram  profile,  antibacterial activity

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  obat  dan  Obat  Tradisional merupakan aset nasional yang perlu terus digali,
diteliti,  dikembangkan  dan  dioptimalkan pemanfaatannya. Penelitian dan pengembangan dalam  hal  ini  merupakan  bagian  dari  upaya pembangunan kesehatan nasional.
Kemuning  ( Murraya  paniculata (L.)  Jack ) adalah  salah  satu  tanaman  yang  sering digunakan sebagai obat. Tanaman ini termasuk suku Rutaceae, tumbuh  liar  di  semak  belukar atau sengaja ditanam di halaman rumah sebagai tanaman  hias.  Salah  satu  bagian  tanaman  yang sering  digunakan  untuk  obat  adalah  daun.  Di masyarakat  khasiat  daun  kemuning  ( Murraya paniculata (L.)  Jack ) diantaranya  digunakan untuk  mengatasi  nyeri,  menurunkan  demam, obesitas, penyakit infeksi seperti bisul, eksema, ulkus,  infeksi  saluran  kencing,  infeksi  saluran pernafasan,  diare  dan  disentri  (Darlimartha, 2002; Windono, 2002; Noor, 1999).
Daun kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack ) mengandung  senyawa  kimia  yang  merupakan metabolit  sekunder  seperti  minyak  atsiri, alkaloid,  flavonoid,  saponin,  damar,  dan  tanin (Windono, 2002). Untuk mengetahui kandungan senyawa  kimia  dalam  suatu  tanaman  dapat digunakan  metode  KLT  (kromatografi  lapis tipis). Kromatografi  lapis  tipis  dapat  dipakai dengan  tujuan  sebagai  metode  untuk  mencapai hasil kualitatif (letak warna, bentuk, dan ukuran suatu bercak) dan kuantitatif (kuantitas senyawa yang  terdapat  dalam  suatu  bercak).  Deteksi senyawa warna pada kromatogram yang paling sederhana  adalah  jika  senyawa  menunjukkan penyerapan  di  daerah  UV  gelombang  pendek (radiasi utama pada kira-kira 254 nm) atau jika senyawa  itu  dapat  dieksitasi  ke  fluoresensi radiasi  UV  gelombang  pendek  dan  /  atau gelombang  panjang  366  nm  (Stahl,  1985). Dengan  mengetahui kandungan senyawa kimia dalam  suatu  tanaman  kita  dapat  membuktikan khasiat tanaman tersebut secara ilmiah.
Senyawa metabolit sekunder yang terkandung di tanaman  Kemuning  ( Murraya  paniculata (L.) Jack ) dilaporkan  dalam  beberapa  karya  ilmiah mempunyai aktivitas biologi sebagai obat pemati rasa  ( anestesia ),  penenang  ( sedatif) ,  penurun panas  ( antipiretik ),  dan  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus (Darlimartha,  2002; Windono, 2002; Hendrik dkk, 2002; Pudjiastuti, 2002; Wahyudi dan Sayekti, 2002).
Khasiat antibakteri terhadap bakteri lain belum pernah dibuktikan. Berdasarkan penggunaannya di  masyarakat  untuk  mengatasi  infeksi  saluran kencing  dan  diare,  perlu  dilakukan  pengujian secara  ilmiah  mengenai  aktivitas  antibakteri daun kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack) terhadap  mikroorganisme  penyebab  penyakit, misalnya terhadap Escherichia coli.
Escherichia  coli merupakan  flora  normal  pada saluran  pencernaan  manusia,  sifatnya  tidak berbahaya  dan  dapat  bermanfaat  bagi  tubuh. Namun  bakteri  ini  dapat  juga  menimbulkan penyakit  jika  berada  pada  lokasi  yang  asing dalam  jumlah  banyak  dan  ada  faktor-faktor predisposisi  (Jawetz  dkk,  2005). Penyakit  yang dapat  disebabkan  oleh Escherichia  coli seperti diare akut karena infeksi, infeksi saluran kemih, meningitis , peritonitis , mastitis, septikemia dan pneumonia Gram- negatif (Feng, 2007). Beberapa faktor yang menentukan virulensinya di  antaranya  faktor  perlekatan  yakni  pili  pada patogenesis  diare,  toksin  berupa  lipo- polisakarida  dari  dinding  sel,  dan  produksi enzim hemolisin yang khas pada infeksi saluran kemih (ISK) (Jawetz dkk, 2005).
Penelitian  ini  dilakukan  bertujuan  untuk mengetahui  profil  kromatogram  dan  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  kemuning
Gunardi dkk: Profil Kromatogram dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kemuning
( Murraya  paniculata (L)  Jack)  terhadap Escherichia coli, dan diharapkan hasil penelitian ini dapat bermanfaat untuk menambah khasanah pustaka tentang tanaman obat dan khasiat daun kemuning  kepada  masyarakat,  serta  sebagai acuan penelitian lebih lanjut tentang fitofarmaka.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  laboratorium Kimia  dan  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Universitas  Diponegoro  pada  bulan Maret-Juni 2007.  Penelitian  profil  kromatogram  ekstrak etanol daun kemuning (Murraya paniculata (L.)
Jack) merupakan penelitian deskriptif sedangkan uji aktivitas antibakterinya terhadap Escherichia coli merupakan penelitian eksperimental dengan post test only control group design .
Bahan  uji  yaitu  daun  kemuning  ( Murraya paniculata (L.)  Jack.) kering  yang  berasal  dari
Ambarawa, Jawa Tengah dan bakteri
Escherichia  coli  strain  ATCC  25922 koleksi laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang. Daun kering dipisahkan dari ranting-rantingnya, dibersihkan dari  kotoran-kotoran  yang  melekat  dan ditimbang sebanyak 200 gram.
Ekstrak  daun  kemuning  ( Murraya  paniculata (L.)  Jack)  diperoleh  dengan  cara  maserasi menggunakan pelarut etanol 40%. Direndam dan didiamkan  selama  1  hari  sambil  digojog. Disaring dengan kain flanel ke dalam mangkuk porselin.  Sisa  ampas  direndam  lagi  dengan etanol  40%  dan  diperlakukan  sama  dengan sebelumnya.  Ekstrak  yang  diperoleh  kemudian diuapkan di atas tangas air dengan suhu 55° C hingga diperoleh ekstrak kental. Ekstrak kental
yang diperoleh dilakukan uji profil kromatogram dan aktivitas antibakteri.
Untuk  profil  kromatogram,  sebanyak  5  mg ekstrak kental dilarutkan dalam alkohol absolut kemudian ditotolkan pada lempeng KLT Silika gel  GF  254  (E.Merck).  Plat  dimasukkan  ke dalam  bejana  pengembang  yang  berisi  cairan pengembang  yaitu  eluen  etil  asetat.  Kemudian dieluasi sampai batas 10 cm dari titik pusat awal penotolan. Setelah sampai batas, lempeng KLT diangkat  dan  dibiarkan  mengering.  Kemudian diamati di bawah lampu UV Spectroline model ENF -280 C/FE dengan panjang gelombang 254 nm dan 366 nm. Bercak yang nampak dihitung jumlah  dan  dilihat  warna  fluoresensi  yang nampak. Setelah itu diukur harga Rf-nya. Jumlah bercak  menggambarkan  banyaknya  komponen senyawa  yang  ada  di  dalamnya,  harga  Rf  dan warna bercak dicocokkan dengan pustaka untuk mengetahui golongan senyawanya.
Untuk  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun kemuning( Murraya paniculata (L.) Jack ), e kstrak  kental  diencerkan  dalam  media  hingga diperoleh  ekstrak  uji  dengan  konsentrasi  akhir 40,  35,  30,  25,  20,  10,  5  %  b/v.  Konsentrasi ekstrak  40  %  adalah  4  gram  ekstrak  kental dilarutkan dalam 5 ml aquades dan ditambahkan ke dalam media tabung uji yang berisi Mueller Hinton  cair  hingga  volume  akhir  10  ml. Penentuan  daya  hambat  ekstrak  uji  dilakukan dengan  metode  pengenceran  menggunakan media Mueller Hinton cair. Biakan muda bakteri Escherichia coli strain ATCC 25922 disuspensikan  dan  diencerkan  dalam  5  ml larutan  NaCl  fisiologis  hingga  didapatkan kekeruhan  yang  sama  dengan Mc  Farland 0,5. Selanjutnya  sebanyak  0,1  ml  suspensi  bakteri
ditanam ke dalam media tabung yang berisi 0,5 ml Mueller  Hinton cair  dan  0,5  ml  ekstrak dengan  berbagai  konsentrasi.  Sebagai  kontrol positif digunakan 1 ml Mueller Hinton cair dan 0,1  ml  suspensi  bakteri.  Sedangkan  kontrol negatif adalah kontrol media yakni 1 ml Mueller Hinton cair  tanpa  bakteri.  Adapun  kontrol ekstrak berisi 0,5 ml Mueller Hinton cair tanpa bakteri  ditambahkan  0,5  ml  ekstrak  hingga didapat  konsentrasi  akhir  40  %.  Sediaan  uji dilakukan  pengulangan  sebanyak  5  kali, kemudian dimasukkan ke dalam inkubator suhu 37 °C selama 19 jam dan dinilai jernih tidaknya larutan  sampel  dibanding  kontrol  untuk menentukan  kadar  hambat  minimumnya. Selanjutnya  untuk  mengetahui  secara  pasti  ada tidaknya pertumbuhan bakteri ditentukan kadar bunuh  minimum,  yakni  sediaan  uji  tadi digoreskan  ke  media  agar  MacConkey  dan diinkubasi lagi selama 22 jam kemudian dinilai ada  tidaknya  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli pada  agar  tersebut  dibandingkan  dengan kontrol.  Untuk  mengetahui  pada  konsentrasi berapa ekstrak etanol daun kemuning ( Murraya paniculata (L.)  Jack ) memiliki  akivitas antibakteri  yang  bermakna  maka  dilakukan  uji beda  antara  kelompok  perlakuan  dengan kelompok kontrol positif.
Pengolahan  data  dilakukan  dengan  SPSS  15.0 for Windows. Data yang dikumpulkan kemudian akan  diedit,  dikoding,  ditabulasi  dan  data entering.  Uji  perbandingan  antara  kelompok kontrol positif dengan masing-masing kelompok perlakuan  (berbagai  konsentrasi  ekstrak)  diuji dengan Analisis Tukey, dengan nilai kemaknaan (p)<0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini  sebagai  ekstraksi  daun kemuning  dilakukan  secara  maserasi  dengan pelarut etanol  40%.  Ekstraksi  dilakukan  secara maserasi  dengan  maksud  untuk  mendapatkan ekstrak  yang  maksimal.  Karena  sebagian  besar senyawa  yang  berkhasiat  merupakan  senyawa yang  polar,  maka  digunakan  pelarut  yang mempunyai  polaritas  tinggi  yaitu  campuran etanol  40%  dalam  akuades  supaya  senyawa berkhasiat tersari secara sempurna. Di samping itu,  karena  senyawanya  bersifat  polar,  maka tidak  menyulitkan  pada  pemeriksaan  sebagai antibakteri dengan metoda pengenceran Muller Hinton.  Dari  200  gram  daun  kemuning  kering yang diekstraksi didapatkan 24,76 gram ekstrak kental.
Hasil  kromatografi  lapis  tipis  ekstrak  etanol daun kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack ) dengan larutan pengembang etil asetat, disajikan pada gambar 1 dan 2 serta tabel 1 dan 2 di bawah ini:
Gambar 1. Profil Kromatogram Ekstrak Daun Kemuning ( Murraya paniculata (L)Jack .) . Fase diam : Silika gel GF 254 (e Merck), pengembang etil asetat, penampak bercak UV 254 nm
Gunardi dkk: Profil Kromatogram dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kemuning
Tabel 1. Warna bercak dan harga Rf hasil kromatografi lapis tipis ekstrak etanol daun kemuning, dengan larutan pengembang etil asetat, penampak bercak sinar UV 254 nm No. Noda Warna Noda Rf 1 Fluoresensi biru gelap 0,45 2 Fluoresensi biru hijau 0,58 3 Fluoresensi ungu 0,62 4 Fluoresensi ungu jingga 0.67 5 Fluoresensi hijau 0.68 6 Fluoresensi coklat 0,70
Gambar 2. Profil Kromatogram Ekstrak Daun
Kemuning ( Murraya paniculata (L)Jack .) . Fase diam : Silika gel GF 254 (e Merck), pengembang etil asetat, penampak bercak UV 366 nm
Tabel 2. Warna bercak dan harga Rf hasil kromatografi lapis tipis ekstrak etanol daun kemuning, dengan larutan pengembang etil asetat, penampak bercak sinar UV 366 nm No. Noda Warna Noda Rf 1 Gelap meredam 0,62 2 Gelap meredam 0,67 3 Gelap meredam 0,68 4 Gelap meredam 0,70
Dari hasil analisis secara KLT terhadap ekstrak etanol daun kemuning dengan sinar UV 254 nm terdapat  6  bercak  pada  kromatogram  dengan harga Rf masing-masing 0,45; 0,58; 0,62; 0,67; 0,68; 0,70. Masing-masing bercak dapat terpisah dengan  baik  dan  tidak  terjadi penumpukan.  Ini menunjukkan  bahwa  larutan  pengembang  etil asetat  dinilai  sebagai  eluen  yang  baik  dalam
memisahkan  senyawa-  senyawa  kimia  yang terkandung dalam ekstrak etanol daun kemuning ( Murraya panicula (L.) Jack). Begitu juga pada warna  yang  dihasilkan  masing-masing  bercak terlihat  jelas  dengan  penampak  sinar  UV  254 nm. Sedangkan pada pengamatan di bawah sinar UV  366  nm  bercak  yang  nampak  lebih  sedikit terdeteksi dan semua meredam. Harga Rf yang dihasilkan pada 4 bercak dengan sinar UV 366 nm adalah sama dengan penampak sinar UV 254 nm untuk letak bercak yang sama pada lempeng KLT.  Ini  menunjukkan  bahwa  senyawa  kimia pada  bercak  itu  adalah  sama.  Warna  beberapa bercak di bawah sinar UV 254 nm yang memiliki intensitas  warna  paling  kuat  diantara  bercak lainnya antara lain ungu (Rf 0.62), ungu jingga (Rf  0.67) hijau (Rf 0.68) dan  coklat (Rf  0.70). Dengan  demikian  secara  kuantitatif  senyawa kimia  tersebut  kandungannya  lebih  tinggi. Menurut  pustaka,  warna-warna  dari  senyawa golongan alkohol dan keton tingkat tinggi akan memberikan  warna  hijau  dan  biru,  sedangkan untuk golongan steroid, asam organik dan terpen ditunjukkan  oleh  warna  coklat  (Bobit,  1963; Dummond,  1960).  Untuk  minyak  atsiri ditunjukkan dengan adanya noda melebar warna ungu sampai ungu jingga (Harborne, 1987). Dari keterangan sumber pustaka di atas kemungkinan bercak intensitas kuat tadi merupakan senyawa golongan alkohol, terpen, dan minyak atsiri.
Pada  percobaan  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol daun kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack ) metode  pengenceran  mempunyai  banyak keuntungan antara lain dapat menghemat dalam penggunaan  media,  bahan  uji  lebih  sensitif, suspensi  bakteri  dapat  tersebar  rata  dan  tidak
dipengaruhi tebal tipisnya medium seperti pada metode difusi.
Dari uji yang dilakukan terbukti ekstrak etanol daun kemuning ( Murraya paniculata (L.) Jack ) memiliki  daya  antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia coli . Hal ini dapat dilihat dari harga KHM  (Kadar  Hambat  Minimum)  dan  KBM (Kadar  Bunuh  Minimum)  .  KHM  dan  KBM ditentukan  dari  harga  konsentrasi  akhir,  yaitu konsentrasi setelah penambahan suspensi bakteri sehingga terjadi pengenceran. Dari hasil analisis secara statistik dengan SPSS 15.0 for Windows untuk  variabel  data  jernih  tidaknya  media  uji, terlihat  bahwa  terdapat  perbedaan  bermakna (p<0,05) pada tabung uji konsentrasi 40%, 35% dan  30%  dibandingkan  kontrol  positif. Kejernihan sudah tampak pada 2 tabung sampel konsentrasi 25%, namun dalam uji statistik tidak bermakna (p>0,05) di mana nilai p=0,451. Jadi dapat disimpulkan KHM untuk Escherichia coli adalah  pada  konsentrasi  akhir  30%  b/v. Kemampuan  bakteriostatik  ekstrak  etanol  daun kemuning  ( Murraya  paniculata (L.)  Jack ) terhadap Escherichia  coli lebih  rendah  bila dibandingkan  bakteri Staphylococcus  aureus pada penelitian terdahulu (Wahyudi dan Sajekti, 2002),  di  mana  KHM  didapatkan  pada konsentrasi  ekstrak  5%  b/v.  Hal  ini kemungkinan  disebabkan  oleh  perbedaan komponen  penyusun  dinding  sel  antara  bakteri gram  negatif  dan  gram  positif  yang  banyak berpengaruh  pada  adsorbsi  zat  antibakteri  ke dalam sel bakteri. Selanjutnya untuk memastikan  potensi  bakterisid  sediaan  uji digoreskan  ke  media  agar  padat  MacConkey. Pada  media  ini  bakteri Escherichia  coli akan tumbuh  dengan  sebagai  koloni  yang  spesifik.
Dari  hasil  analisis  data  pertumbuhan  bakteri pada  media  MacConkey,  ekstrak  dengan konsentrasi  40%  menunjukkan  adanya  efek bakterisid  yang  bermakna  secara  statistik (p<0,05) dibandingkan kelompok kontrol positif dimana nilai p = 0,000. Pada kadar 35% sudah memperlihatkan  efek  bakterisid  namun  tidak bermakna secara statistik (p>0,05), di mana nilai p=0,162. Dengan demikian ekstrak etanol daun kemuning  ( Murraya  paniculata (L.)  Jack ) mempunyai efek bakterisid terhadap Escherichia  coli dengan  KBM  40%  b/v. Pengujian  dilakukan  pada  konsentrasi  tertinggi 40%. Hal ini dikarenakan pada konsentrasi yang lebih  tinggi  dari  itu  ekstrak  kental  tidak  larut sempurna.
Hasil uji aktivitas antibakteri dapat dilihat pada tabel 3 dan 4:
Tabel 3. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun kemunimg terhadap Escherichia coli strain ATCC 25922 pada media Mueller hinton cair
Konsentrasi akhir (%b/v) Kekeruhan pada Mueller hinton cair Nilai p * P1  P2  P3  P4  P5 Kontrol + + + + + + Kontrol - - - - - - 0,000 Kontrol ekstrak - - - - - 0,000 40% - - - - - 0,000 35 % - - - + - 0,002 30 % - - - + + 0,049 25 % - - + + + 0,451 20 % + + + + + 1,000 10 % + + + + + 1,000 5 % + + + + + 1,000
*Uji Tukey
Keterangan tabel 3:
1. Kontrol positif : suspensi bakteri dalam Mueller hinton cair
2. Kontrol negatif (kontrol media): Mueller hinton cair
Gunardi dkk: Profil Kromatogram dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kemuning
3. Kontrol ekstrak : ekstrak cair daun kemuning dalam Mueller hinton cair tanpa bakteri
4. + : keruh artinya ada pertumbuhan bakteri
5. - : jernih artinya tidak ada pertumbuhan bakteri
Tabel 4. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun kemunimg terhadap Escherichia coli strain ATCC 25922
pada agar MacConkey Konsentrasi akhir (%b/v) Pertumbuhan bakteri pada agar MacConkey Nilai p * P1  P2  P3  P4  P5 Kontrol + + + + + + Kontrol - - - - - - 0,000 Kontrol ekstrak - - - - - 0,000 40% + - - - - 0,000 35 % + + - + - 0,162 30 % + + + + + 1,000 25 % + + + + + 1,000 20 % + + + + + 1,000 10 % + + + + + 1,000 5 % + + + + + 1,000
*Uji Tukey
Keterangan tabel 4:
1. Kontrol positif : suspensi bakteri dalam agar MacConkey
2. Kontrol negatif (kontrol media): agar MacConkey
3. Kontrol ekstrak : ekstrak cair daun kemuning dalam agar MacConkey tanpa bakteri
4. + : keruh artinya ada pertumbuhan bakteri
5. - : jernih artinya tidak ada pertumbuhan bakteri
Kontrol  ekstrak  diperlukan  untuk  mengetahui sterilitas bahan uji dan kontrol kejernihan warna. Tabung  uji  tiap-tiap  konsentrasi  ekstrak dibandingkan dengan kontrol positif dan kontrol negatif.  Kontrol  positif  digunakan  untuk mengetahui  adanya  pertumbuhan  bakteri, sedangkan  kontrol  negatif  digunakan  untuk mengetahui tidak adanya pertumbuhan bakteri.

## KESIMPULAN
Dari hasil kromatografi lapis tipis ekstrak daun Kemuning  ( Murraya  paniculata (L.) Jack ) dengan pelarut ekstraksi etanol 40%, menggunakan  larutan  pengembang  etil  asetat dan penampak bercak sinar UV 254 nm, 366 nm dapat  disimpulkan  sebagai  berikut:  Terdapat enam  komponen  senyawa  kimia  yang dimungkinkan  merupakan  senyawa  golongan alkohol,  keton  tingkat  tinggi,  steroid,  asam organik,  terpen  dan  minyak  atsiri.  Pada percobaan  uji  aktivitas  antibakteri  terbukti ekstrak  etanol  daun  kemuning  ( Murraya paniculata (L.)  Jack  mempunyai  daya antibakteri  terhadap Escherichia  coli secara in vitro dengan  Kadar  Hambat  Minimum  (KHM) 30 % b/v dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) 40 % b/v.

## SARAN
1. Perlu  dilanjutkan  penelitian  elusidasi struktur kimia yang terdapat dalam ekstrak etanol daun kemuning (Murraya paniculata (L) Jack )
2. Perlu  dilanjutkan  penelitian  tentang  isolasi senyawa aktif yang terkandung dalam daun kemuning  ( Murraya  paniculata (L.)  Jack ) yang berkhasiat sebagai antibakteri, serta uji farmakologi  lebih  lanjut  tentang  keamanan dan toksisitasnya.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih disampaikan kepada Ketua Bagian  dan  seluruh  staf  laboratorium  Kimia Kedokteran dan Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang.

## DAFTAR PUSTAKA
Bobit, J. M., 1963, Thin Layer Chromatography,
Reinhold  Publishing  Co.,  New  York,  p. 207.
Dalimartha., Obat  tradisional  kemuning (online ). Agustus  2002  (cited  2006  Dec 27)  ;  Available  from  :  URL  :  http:// www.pdpersi.co.id .
Dummond,  H.M.,  Patchouli,  1960, Journal  of Perfumarry  &  Essential  Oil  Record ,  51 (9) p. 484-492
Feng,  P., Escherichia coli (online).  22 January 2007 (cited 2007 Jan 22). Available from: URL: http://en.wikipedia.org/wiki/Escherichia_ coli
Harborne, J. B., 1987, Metode Fitokimia, Edisi II. ITB-Bandung
Hendrik,  S.  B.,  Yuliastuti,  W.  S.,  Maya,  P.,
Subagyo, R. L., 2002, Efek Analgesik dari Infusum Murraya  paniculata  (L.)  Jack. Terhadap  Respon  Nyeri  yang  Diinduksi Dengan  Asam  Asetat. Farmakologi
Universitas Airlangga Surabaya
Jawetz,  Melnic k,  &  Adelberg’s,  2005
Mikrobiologi Kedokteran, Salemba Medika, Jakarta Noor, S., 1999, Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam
Jilid 1 . Balai Penerbit FKUI, Jakarta
Pudjiastuti, L. W., 2002, Uji Efek Sedatif Infus Daun Kemuning (Murraya paniculata (L.) Jack.).  pada  Mencit  Putih. Puslitbang Farmasi Badan Penelitian dan
Pengembangan  Kesehatan  Departemen Kesehatan RI
Slamet,  W.,  2002, Penelitian  ekstraksi  daun kemuning  (Murraya  paniculata  L). Puslitbang Farmasi Badan Penelitian dan Pengembangan  Kesehatan  Departemen Kesehatan RI
Stahl,  E.,  1985, Analisis  Obat  Secara Kromatografi dan Mikroskopi . Terjemahan Kosasih Padmawinata,
Sudiro  I.  Penerbit  Institut  Teknologi Bandung. hal. 3, 4, 6.
Wahyudi, M., Sajekti, P., 2002, Uji Antimikroba
Ekstrak Etanol daun Kemuning (Murraya paniculata (L.) Jack.) terhadap Pertumbuhan  Candida  albicans  dan Staphylococcus aureus serta Kesetaraannya Dibandingkan Tetrasiklin
HCl .  Fakultas  Farmasi  Universitas Surabaya
Windono, T., 2002, Kajian Pustaka Kandungan Kimia  Kemuning  (Murraya  paniculata (L.) Jack.) . Fakultas Farmasi Universitas Surabaya