## SKRINING FITOKIMIA DARI EKSTRAK DAUN KANGKUNG PAGAR
( Ipomoea carnea Jacq ) DAN UJI ANTIBAKTERI TERHADAP Bacillus subtilis
Ermi Abriyani*, Lia Fikayuniar, Iin Lidia Putama Mursal, Dedeh Komalasari
Fakultas Farmasi, Universitas Buan Perjuangan Karawang, Jawa Barat, Indonesia *Penulis Korespondensi: ermi.abriyani@ubpkarawang.ac.id

## Abstrak
Daun  Kangkung  Pagar  ( Ipomoea  carnea  Jacq )  merupakan  salah  satu  tumbuhan  yang  digunakan sebagai  pengobatan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  dan  aktivitas  antibakteri  daun  kangkung  pagar  terhadap Bacillus  subtilis. Ekstraksi menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut n -heksana,  etil  asetat,  dan  methanol.  Pengujian antibakteri  menggunakan  metode  difusi  sumuran.  Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  adalah    40%, 60%, 80% dan 100%. Kontrol positif yang digunakan adalah Ciprofloxacin dan kontrol negatif  yang digunakan adalah DMSO 5%.  Data dianalisis dengan uji one way ANOVA dilanjutkan uji Post Hoc Tukey . Hasil diperoleh bahwa ekstrak n -heksana, etil asetat dan metanol memiliki konsentrasi hambat minimum  yaitu  40%  dengan  zona  hambat  yang  terbentuk  yaitu  8,23  mm,  9,4  mm  dan  4,2  mm. Sedangkan  pada  konsentrasi  tertinggi  yaitu  100%  terbentuk  zona  hambat  12,6  mm  pada  ekstrak  etil asetat,  15,23  mm  pada  ekstrak  metanol  dan  11,4  mm  pada  ekstrak n -heksana.  Hasil  penelitian menunjukan  bahwa  ekstrak  Daun  Kangkung  Pagar  ( Ipomoea  carnea  Jacq )  mampu  mengambat pertumbuhan bakteri Bacillus subtilis.
Kata kunci: Ipomoea carnea Jacq, maserasi,  zona hambat, Bacillus subtilis

## Abstract
Kangkung  Pagar (Ipomoea  carnea Jacq)  leaves  is  one  of  the  plants  that  is  used  as  a  treatment.  This study  aims  to  determine  the  content  of  secondary  metabolites  and  antibacterial  activity  of  kangkong pagar leaves against Bacillus subtilis. Extraction using maceration method with n-hexane, ethyl acetat and methanol. Antibacterial assay using well diffusion method. The extract concentrations used were 40%, 60%, 80% and 100%. The positive control used was Ciprofloxacin and the negative control used was DMSO 5%. Data were analyzed by one way ANOVA test followed by Post Hoc Tukey test. The results  showed  that  the  extracts  of  ethyl  acetate,  methanol  and  n-hexane  had  a  minimum  inhibitory concentration of 40% with inhibition zones  formed of 8.23 mm, 9.4 mm and 4.2 mm. Meanwhile, at the  highest  concentration  of  100%,  an  inhibition  zone  of  12.6  mm  was  formed  in  the  ethyl  acetate extract, 15.23  mm in the  methanol extract and 11.4  mm in the n-hexane extract. The results showed that extract of Kangkung Pagar (Ipomoea carnea Jacq)leaves was able to inhibit the growth of Bacillus subtilis bacteria.
Keywords: Ipomoea carnea Jacq, maceration,  inhibition zones, Bacillus subtilis

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  adalah  penyakit  yang disebabkan  oleh  bakteri,  yang  menjadi  salah  satu masalah  terbesar  didunia  kesehatan.  Penggunaan antibiotik  yang  tidak  tepat  menimbulkan  resistensi antibiotik  oleh  bakteri  penyebab  infeksi  tersebut, sehingga  diperlukan  penemuan dan pengembangan obat  antibakteri  baru,  salah  satunya  dengan
memanfaatkan  dari  tumbuhan  obat  (Leonita et  al . 2015).
Masyarakat  Indonesia  sudah  sejak  lama menggunakan tumbuhan sebagai pengobatan maupun untuk pemeliharaan Kesehatan (Nuraeni et al .,  2022),  salah  satunya  adalah  tumbuhan kangkung  pagar  ( Ipomoea  carnea  Jacq) .  Memiliki aktivitas  farmakologis  yang  berpotensi  sebagai
antidiabetes,  antiinflamasi,  antimikroba,  anticemas dan antikanker (Jain, 2017).
Metabolit  sekunder  merupakan  hasil  reaksi sekunder dari  metabolit primer seperti karbohidrat, protein,  dan  lemak.  Tumbuhan  yang  mengandung bahan organik primer kemungkinan besar mengandung  bahan  organik  sekunder.  Beberapa senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada tanaman yaitu alkaloid, flavanoid, saponin, steroid, terpenoid  dan  tannin.  Senyawa  flavonoid  telah diketahui  mempunyai  aktivitas  biologi,  seperti bersifat  toksik  terhadap  sel  kanker,  menghambat pelepasan  histamin,  anti  jamur  dan  anti  bakteri (Ergina,  2014).  Fatime  et  al,  2014  melaporkan kandungan  senyawa  ekstrak  metanol  dalam  daun kangkung  pagar  yaitu  alkaloid,  karbohidrat,  tanin, senyawa  fenolik,  protein  dan  asam  amino, terpenoid, sterol dan saponin.
Banyak  penelitian  yang  telah  dilakukan bahwa,  daun  dan  bunga  kangkung  pagar  memiliki aktivitas  antimikroba  yang  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri diantaranya yaitu Streptococcus pneumonia, Bacillus subtillis, Escherichia coli dan Aspergillus fumigates (Kamal et  al ,  2017). Bacillus  subtilis merupakan  bakteri gram  positif,  berbentuk  batang,  membentuk endospora, bergerak dengan adanya flagel peritrikus  dan dapat  bersifat aerobik atau  fakultatif anaerobik serta bersifat katalase positif, yang dapat ditemukan  di  tanah  dan  air  termasuk  pada  air  laut. Menghasilkan  enzim  ekstraseluler  yang  dapat menghidrolisis  protein  dan  polisakarida  kompleks (Hatmanti, 2000). Bacillus subtilis dapat menyebabkan beberapa penyakit seperti meningitis, endocarditis,  infeksi  mata  dan  lain-lain  (Mayasari, 2020).
Berdasarkan  uraian  diatas,  maka  dilakukan penelitian  mengenai  Skrining  Fitokimia  Dari Ekstrak  Daun  Kangkung  Pagar  ( Ipomoea  carnea Jacq )  Dan  Uji  Antibakteri  Terhadap Bacillus subtilis ,  sehingga  dapat  memberikan  informasi  di bidang  farmasi  dan  berguna  dalam  pengembangan sediaan farmasi.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  laboratorium  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang terkandung pada ekstrak daun kangkung pagar dan pengujian antibakteri terhadap Bacillus subtilis.

## Alat dan Bahan
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini,  neraca  digital,  alat-alat  laboratorium kimia sederhana, chamber, oven, kaca arloji, cawan petri, rotary  evaporator  Buchi , waterbath ,  lemari pendingin,  jangka  sorong,  jarum  ose,  mikropipet, bunsen, laminar  air  flow (LAF),  autoclaf  dan cawan porselen. Simplisisa Daun kangkung pagar 1 kg, aquadest, tryptone soya agar (TSA), etil asetat, pereaksi  FeCl 3 , n -heksana,  metanol,  aquadest, kapas,  ciprofloxacin  500  mg,  DMSO  5%,  biakan bakteri Bacillus  subtilis ,  pipa  kapiler,  aluminium foil, kertas saring

## Determinasi tanaman
Sampel  yang  digunakan  dideterminasi  untuk diketahui  nama  latinya  dengan  pasti  yang dilaksanakan di BRIN.

## Persiapan sampel
Sampel  daun  kangkung  pagar  dikering- anginkan dan di haluskan sehingga menjadi serbuk. Serbuk  dari  daun  kangkung  pagar  kemudian  di
simpan  di  wadah  tertutup  untuk  perlakuan berikutnya.

## Penapisan  Fitokimia
Penapisan  fitokimia  yang  dilakukan  pada sampel  daun kangkung pagar dengan aplikasi dari Harborne (1996) dan  Abriyani,E., dan Fikayuniar, L., (2020).

## Ekstraksi
Daun kangkung pagar selanjutnya, diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi  dengan pelarut  n-heksana,  etil  asetat  dan  metanol  secara berturut-turut  yang  dilakukan  masing-masing  dan berulang-ulang  3  x  24  jam.  Kemudian  dilakukan penyaringan  dari  masing-masing  pelarut  tersebut dan  di  pekatkan  dengan  menggunakan rotary evaporator sehingga di dapatkan ekstrak kental

## Uji Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan dengan  menggunakan  metode  difusi  sumuran. Disiapkan media  tryptone  soya  agar (TSA)  steril sebanyak 25 ml, dituang ke dalam cawan petri steril secara  aseptik  dan  dibiarkan  hingga  memadat. Selanjutnya  suspensi  bakteri  digoreskan  ke permukaan  media  agar.  Kemudian,  media  agar dilubangi  dengan  alat  pelubang  sumuran  dan masing-masing  lubang  sumuran  diisikan  ekstrak dengan  konsentrasi  40%,  60%,  80%  dan  100%. Kontrol positif yang digunakan adalah ciprofloxacin  dan  kontrol  negatif  yang  digunakan adalah  DMSO  5%.  Selanjutnya  diinkubasi  pada suhu  37˚C  selama  24  jam,  diameter  zona  hambat disekitar  lubang  sumuran  diukur  menggunakan jangka sorong (Wahyuningsih et al ., 2023).
Analisis Data
Analisis  data  aktivitas  antibakteri  dilakukan dengan mengukur daerah zona bening menggunakan  jangka  sorong  pada  masing-masing konsentrasi.  Kemudian  dilakukan  analisis  statistik menggunakan ANNOVA .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Determinasi Tumbuhan
Daun  kangkung pagar  yang digunakan  untuk penelitian  dilakukan  determinasi  di  BRIN.  Hasil determinasi dengan Nomor surat B-
237/IV/D1.01/II/2021  pada  menunjukan  bahwa tanaman  yang  digunakan  benar Ipomoea  carnea Jacq dari famili Convolvulaceae.

## Ekstraksi
Hasil ekstrak kental dan persentase rendemen yang didapatkan dari sampel daun kangkung pagar adalah seperti yang terlihat pada tabel 1 berikut ini;
Tabel  1.  Hasil  ekstrak  dan  rendemn  dari  masing- masing  larutan  pada  sampel  kangkung  pagar, Ipomea carnea Jacq.
Pelarut Berat Simplisia (g) Berat Ekstrak Kental (g) Hasil Rendemen (%) n-heksana 1000 g 98,1 g 1,96 Etil Asetat 1000 g 127,3 g 12,73 metanol 1000 g 147,4 g 14,74
Terlihat  berat  ekstrak  kental  dan  persentase dari pelarut metanol paling tinggi, ini memperlihatkan  bahwa  banyak  senyawa  yang bersifat  polar  dalam  sampel  daun  kangkung  pagar dibandingkan  pelarut  lain  seperti  n-heksana  yang bersifat  non  polar  dan  etil  asetat  yang  bersifat semipolar.  Ardyanti  dkk,  (2020)  telah  melaporkan bahawa  jenis  pelarut,  konsentrasi  pelarut,  ukuran patikel serta lama waktu pengekstrakan mempengaruhi  hasil  dari  banyaknya  ekstrak  yang dihasilkan.

## Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  merupakan  suatu  analisa secara  kualitatif  yang  memperlihatkan  kandungan
metabolit  sekunder  dalam  suatu  sampel  (Abriyani, E dan Fikayuniar, L. 2020). Tabel 2 memperlihatkan  hasil  skrining  fitokimia  dari simplisia dan ekstrak.
Tabel 2. Hasil skrining fitokimia dari simplisia dan ekstrak dari daun kangkung pagar Ipomea carnea Jacq
(+) = teridentifikasi (-) = tidak teridentifikasi
Hasil  skrining  fitokimia  pada  ekstrak  daun kangkung  pagar  positif  mengandung  senyawa alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tannin  dan  steroid yang  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri. Flavonoid  merupakan  salah  satu  golongan  fenol terbesar  yang  mempunyai  kecenderungan  untuk mengikat  protein  sehingga  mengganggu  proses metabolisme.  Mekanisme  kerja  dari  flavonoid adalah  menghambat  pertumbuhan  bakteri  yang mengakibatkan kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri,  lisosom  dan  mikrosom  selaku  hasil interaksi  antara  flavonoid  dengan  DNA  bakteri (Fitriani, 2017).

## Uji Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  pada  ekstrak daun  kangkung  pagar  terhadap  penghambatan bakteri Bacillus  subtilis dilakukan  dengan  metode difusi  sumuran,  dengan  konsentrasi  40%,  60%, 80%  dan  100%  menggunakan  kontrol  positif Ciprofloxacin  dan  larutan  DMSO  5%  sebagai kontrol  negatif.  Berdasarkan  hasil  pengujian
menyatakan bahwa ekstrak etil asetat,  metanol dan n-heksan  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Bacillus subtilis.
Pada tabel 3 dapat dilihat bahwa menunjukan adanya aktivitas antibakteri pada ekstrak etil asetat, metanol  dan  n-heksana.  Hasil  penelitian  yang dilakukan  diketahui  ekstrak  etil  asetat  diameter zona  hambat  yang  terbesar  pada  konsentrasi  100% (12,6  ±  0,63)  dan  terendah  pada  konsentrasi  40  % (8,23  ±  0,52).  Ekstrak  metanol  memiliki  diameter zona  hambat  terbesar  pada  konsentrasi  100% (15,23  ±  1,05)  dan  terendah  pada  konsentrasi  40% (9,4  ±  0,30).  Kemudian  pada  ekstrak  n-heksan diameter  zona  hambat  terbesar  pada  konsentrasi 100%  (11,4  ±  0,41)  dan  terendah  pada  konsentrasi 40% (4,2 ± 0,42). Ekstrak eil asetat ,metanol dan n- heksan  daun  kangkung  pagar  dapat  menghambat bakteri S.subtilis dengan  konsentrasi  hambat minimum  40%,  hal  tersebut  menunjukkan  bahwa konsentrasi tersebut dapat menghambat pertumbuhan bakteri Bacillus subtili
.
Golongan Senyawa Simplisia Ekstrak Metanol Ekstrak Etil Asetat Ekstrak n-heksana Alkaloid + + + - Flavonoid + + + - Tannin + + + - Saponin - + - - Steroid + - + + Triterpenoid - - - -
Tabel 3. Rata-rata diameter zona hambat ekstrak daun kangkung pagar terhadap bakteri Bacillus subtilis
Konsentrasi % Rata-rata diameter zona hambat (mm) Ekstrak Etil Asetat Ekstrak Metanol Ekstrak n -heksana 40% 8,23 ± 0,52 9,4 ± 0,30 4,2 ± 0,42 60% 9,3 ± 0,25 11,6 ± 0,40 4,6 ± 0,63 80% 10,6 ± 0,36 14,3 ± 0,53 6,2 ± 0,81 100% 12,6 ± 0,63 15,23 ± 1,05 11,4 ± 0,41 Kontrol positif 21,3 ± 1,01 21,7 ± 1,73 21,4 ± 1,85 Kontrol negatif 0,00±0,00 0,00±0,00 0,00±0,00
Berdasarkan  hasil  zona  hambat  pada  ekstrak etil asetat daun kangkung pagar menunjukan bahwa pada  konsentrasi  40%,  60%,  80%  dan  100% dengan diameter 8,23 mm, 9,3 mm, 10,6 mm, 12,6 mm  menunjukan  kategori  daya  hambat  sedang sampai  kuat.  Pada  ekstrak  metanol  daun  kangkung pagar  menunjukan  bahwa  pada  konsentrasi  40%, 60%,  80%  dan  100%  dengan  diameter  9,4  mm, 11,6  mm,  14,3  mm,  15,23  mm  menunjukan kategori  sedang  sampai  kuat.  Sedangkan  pada ekstrak n-heksan daun kangkung pagar menunjukan bahwa pada konsentrasi 40%, 60%, 80% dan 100% dengan  diameter  4,2  mm,  4,6  mm,  6,2  mm,  11,4 mm  menunjukan  kategori  lemah,  sedang  sampai kuat.  Kontrol  positif  yang  digunakan  ciprofloxacin memiliki  aktivitas  zona  hambat  yang  besar  yaitu 21,3  mm  karena  merupakan  antibiotik  spektrum luas  yang  dapat  menghambat  bakteri  gram  positif dan  gram  negatif.  Sedangkan  pada  kontrol  negatif menggunakan  DMSO  tidak  adanya  zona  hambat yang terbentuk.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun Kangkung
Pagar ( Ipomoea carnea Jacq )  memiliki kandungan senyawa  metabolit  sekunder  alkaloid,  flavonoid, tannin, saponin dan steroid dan mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri Bacillus  subtilis dengan  konsentrasi  minimum  40%  dari  ekstrak metanol .

## DAFTAR PUSTAKA
Abriyani, E., Fikayuniar, L., dan Safitri, F. Skrining Fitokimia  Dan  Bioaktivitas  Antioksidan Ekstrak  Metanol  Bunga  Kangkung  Pagar (Ipomoea  Carnea  Jack.)  Dengan  Metode Dpph  (2,  2-Difenil-1-Pikrilhidrazil). Jurnal Sains  dan  Ilmu  Farmasi.  2021.  Vol  6(1),  32- 42.
Ergina.,  Nuryanti,  S.,  dan  Pursitasari,  I.  D.  Uji Kualitatif  Senyawa  Metabolit  Sekunder  Pada Daun  Palado  ( Agave  Angustifolia) Yang Diekstraksi  Dengan  Pelarut  Air  Dan  Etanol.
165-172.
Fatima,  N.,  Rahman,  MY.,  Khan,  Md.  A.,  dan  Fu,
J. A review on Ipomoea carnea:
Pharmacology,
toxicology
and phytochemistry. Journal  of  Complementary and Integrative Medicine. 2014. 11(2): 55-62.
Fitriani,  A.,  Setiyorini,  E.,  dan  Khanifah,  F.
Efektifitas  Ekstrak  Daun  Srikaya  (Annona squamosa L) Terhadap Pertumbuhan
Staphyloccoccus  aureus  Secara  In  Vitro. 2017. Jurnal Insan Cendekia . Vol 6 No. 1
Harbone, J. B. (1996). Metode Fitokimia penuntun cara modern menganalisis tumbuhan .
Bandung: Penerbit ITB Bandung.
Hatmanti,  A.  Pengenalan Bacillus SPP.  Oseana Volume XXV, Nomor 1, 2000 : 31-41
Jain,  N.  M.,  Jha,  V.,  Shrivastava,  N.,  Sihare,  V., dan  Jain,  A.  An  Experimental  Evaluation  Of Ipomoea  Carnea  Leaves  Extract  As  Anti- Furuncle  Modality:  A  Preliminary  Study. Indo  American  Journal  of  Pharmaceutical Research . 2017. Vol. 7 (8).
Kamal,  A.M.,  Shakour,  Z.  T.  B.,  All,  S.  R.  A.,
Sleem,  A.  A., dan  Haggag,  E.  G.
Phytochemical  and  Biological  Investigation of Ipomoea  carnea Jacq.  Grown  in  Egypt .
International Journal of Pharmacognosy and Phytochemical  Research .  2017.  Vol.  9(2); 266-281.
Leonita,  S.,  Bintang,  M.,  Pasaribu,  F.  H.  Isolation and  Identification  of  Endophytic  Bacteria from  Ficus  variegata  Blume  as  Antibacterial Compounds  Producer.  2015  Vol  2  (3):  116  - 128
Mayasari,  U  dan  Berutu,  AV.  Uji  Aktivitas  Ekstrak Daun  Pirdot  (Saurauia  Vulcani  Korth) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Bacillus Subtilis. Klorofil:  Jurnal  Ilmu  Biologi  dan Terapan. 2020. Vol 4(1): 1-5.
Nuraeni,  E.,  Alkandahri,  MY.,  Tanuwidjaja,  SM.,
Fadhilah,  KN.,  Kurnia,  GS.,  Indah,  D.,  et  al. Ethnopharmacological  Study  of  Medicinal Plants  in  the  Rawamerta  Region  Karawang,
West Java, Indonesia. Open Access
Macedonian  Journal  of  Medical  Sciences . 2022; 10(A): 1560-1564.
Wahyuningsih  ES,  Puspitasari  M,  Gunarti  NS,
Alkandahri  MY.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Face  Mist  Ekstrak  Etanol  Daun  Andong Merah  ( Cordyline  fruticosa (L)  A.  Chev.) Terhadap  Propionibacterium  acnes. Pharma Xplore:  Jurnal  Sains  dan  Ilmu  Farmasi . 2023;8(2):104-127
.
.
.