Uji Aktivitas Ekstrak Daun Samarinda ( Carissa carandas L.) Terhadap Histopatologi Ginjal Tikus Putih ( Rattus norvegicus L.) Hiperkolesterolemia
Fauziah MZ (1), Husnarika Febriani (2), Rahmadina (3)
Program Biologi, Universitas Islam Negeri Sumatera Utara
fauziahmz2898@gmail.com (1), husnarikafebriani@uinsu.ac.id (2), rahmadina23mei@gmail.com (3)

## ABSTRAK
Hiperkolesterolemia  adalah  kondisi  dimana  kolesterol  darah  mengalami  kenaikan    ditandai  dengan peningkatan  kolesterol  total,  trigliserida,  kolesterol  LDL,  dan  kolesterol  HDL.  Daun  Samarinda  ( Carissa carandas L.)  merupakan  tanaman  herbal  yang  dapat  digunakan  sebagai  obat  tradisional  untuk  mengatasi hiperkolesterolemia.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  daun  Samarinda  ( Carissa carandas L.)  terhadap  histopatologi  ginjal  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus L.)  dan  dosis  ekstrak  daun Samarinda ( Carissa carandas L.) yang mempengaruhi histopatologi ginjal tikus putih ( Rattus norvegicus L.) hiperkolesterolemia.  Penelitian  ini  bersifat  eksperimen  dengan  Rancangan . Acak  Lengkap . (RAL)  dengan pembagian 6 kelompok yaitu: kontrol normal, kontrol negatif, kontrol positif, P1: 750 mg/kg BB, P2: 1000 mg/kg BB, P3: 1250 mg/kg BB, dengan masing masing 4 ulangan. Pengujian kandungan senyawa kimia pada daun samarinda dilakukan dengan skrining fitokimia. Pembuatan preparat histologi ginjal tikus menggunakan metode  parafin  dengan  pewarnaan  hematoksilin-eosin  (HE).  Data  histomorfometri  dianalisis  dengan ANOVA  one-way  dan  uji  Duncan  dengan  taraf  signifikan  0,05.  Hasil  statistik  terlihat  adanya  perbedaan signifikan . (p˂0,05) pada setiap kelompok dilihat dari skor sel normal Ftabel ≤ Fhitung (3,06 ≤ 12,539), skor sel degenerasi hidropik Ftabel ≤ F hitung (3,06 ≤ 20,847), skor nekrosis Ftabel ≤ F hitung (3,06 ≤ 12,494). Hal  ini  menyatakan  bahwa  terdapat  perbedaan  antara . kelompok  kontrol  dan  kelompok  perlakuan  dimana terjadi  perbaikan  histopatologi  ginjal  pada  dosis  1250  mg/kg  BB.  Kesimpulan  penelitian  ini  adalah  ekstrak daun  Samarinda  ( Carissa  carandas L.)  dengan  dosis  1250  mg/kg  BB  berpengaruh  terhadap  perbaikan histopatologi ginjal tikus hiperkolesterolemia ( Rattus norvegicus L.).
Kata Kunci : Hiperkolesterolemia, Daun Samarinda ( Carissa carandas L.), Ginjal

## ABSTRACT
Hypercholesterolemia is a condition in which blood cholesterol has increased marked by an increase in total cholesterol, triglycerides, LDL cholesterol, and HDL cholesterol. Samarinda leaf ( Carissa carandas L.) is an herbal  plant  that  can  be  used  as  a  traditional  medicine  to  treat  hypercholesterolemia.  The  purpose  of  this study  was  to  determine  the  effect  of  leaf  extract  of  Samarinda  ( Carissa  carandas L.)  on  the  kidney histopathology  of  white  rats  ( Rattus  norvegicus L.)  and  the  dose  of  leaf  extract  of  Samarinda  ( Carissa carandas L.) affecting the kidney histopathology of hypercholesterolemic white rats ( Rattus norvegicus L.) . This  study  is  an  experimental  study  with  a  completely  randomized  design  (CRD)  divided  into  6  groups, namely: normal control, negative control, positive control, P1: 750 mg/kg BB, P2: 1000 mg/kg BB, P3: 1250 mg/kg  BB,  with  4  replications  each.  Testing  the  content  of  chemical  compounds  in  samarinda  leaves  was carried  out  by  phytochemical  screening.  Preparation  of  rat  kidney  histology  preparations  using  the  paraffin method with hematoxylin-eosin (HE) staining. Histomorphometric data were analyzed by one-way ANOVA and  Duncan's  test  with  a  significance  level  of  0.05.  Statistical  results  showed  a  significant  difference. (p˂0.05)  in  each  group  seen  from  the  normal  cell  score  F table ≤F count (3.06≤12.539),  the  score  of  hydropic degenerated cells F table ≤F count (3.06 ≤20.847), the score necrosis F table ≤F count (3.06≤12.494). This indicates that there  is  a  difference  between  the  control  group  and  the  treatment  group  where  there  is  an  improvement  in renal  histopathology  at  a  dose  of  1250  mg/kg  BB.  The  conclusion  of  this  study  is  that  the  leaf  extract  of Samarinda  ( Carissa  carandas L.)  with  a  dose  of  1250  mg/kg  BB  has  an  effect  on  the  histopathological improvement of the kidney of hypercholesterolemic rats ( Rattus norvegicus L.)
Keywords : Hypercholesterolemia, Samarinda leaf ( Carissa carandas L.), Kidney

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Hiperkolesterolemia  adalah  kondisi  dimana  kadar  kolesterol  dalam  darah  terjadi peningkatan sehingga menyebabkan gangguan metabolik dalam tubuh (Rahma et al , 2014). Peningkatan  kadar  kolesterol  menyebabkan  penyempitan  pembuluh  darah  arteri  pada ginjal.  Ginjal  merupakan  organ  yang  dilalui  darah  sebesar  22%  dari  curah  jantung  atau sekitar 1,1  L/menit sehingga kerusakan endotel  ginjal  rentan terjadi. Apabila aliran  darah pada  ginjal  terjadi  penyempitan  maka  akan  mengakibatkan  aterosklerosis  (Gardenhira, 2012).  Menurut  Survei  Kesehatan  Rumah  Tangga  (SKRT)  di  tahun  2004,  di  Indonesia penyakit  hiperkolesterolemia  usia  25-34  tahun  adalah  9,3%,  sedangkan  usia  55-64  tahun sebesar 15,5% (Ulfa et al, 2015). Terjadinya hiperkolesterolemia akibat asupan serat yang rendah,  faktor  genetik,  pola  hidup  tidak  sehat  (Ruslianti,  2014).  Berbagai  upaya  dalam mengatasi  hiperkolesterolemia  salah  satunya  mengkonsumsi  simvastatin.  Simvastatin bersifat  merusak  dengan  cara  melemahkan  organ  tubuh  (Afrilliani et  al ,  2014).  Sehingga ditemukan  pengobatan  tradisional  tanpa  efek  samping  dengan  menggunakan  daun samarinda  ( Carissa  carandas L.).  Daun  samarinda  ( Carissa  carandas L.)  mengandung senyawa antioksidan seperti  flavonoid,  alkaloid, tanin, saponin  yang mampu menurunkan kadar  kolesterol  dan  mengatasi  kerusakan  sel  akibat  hiperkolesterolemia  (Tesfaye et  al , 2018).

## 2. Perumusan Masalah
Adapun rumusan masalah dalam penelitian ini, yaitu:
1. Bagaimanakah i pengaruh  pemberian  ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L . ) terhadap histopatologi ginjal tikus i putih ( Rattus norvegicus L . )  hiperkolesterolemia? 2. Berapakah ii dosis  ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L . )  yang  dapat mempengaruhi histopatologi ginjal tikus putih ( Rattus norvegicus L . ) hiperkolesterolemia?

## 3. Tujuan Penelitian
Adapun tujuan penelitian ini, yaitu:
1. Untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak daun samarinda ( Carissa carandas L . ) terhadap histopatologi ginjal i tikus putih ( Rattus norvegicus L . )  hiperkolesterolemia.
2. Untuk  mengetahui  jumlah  dosis i ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L . )  yang dapat  mempengaruhi  histopatologi  ginjal  tikus  putih  ( Rattus i norvegicus L . ) hiperkolesterolemia.

## 4. Manfaat Penelitian
Manfaat  penelitian  ini  adalah  memberikan  informasi  dan  menjadi  dasar  untuk  penelitian lebih  lanjut  tentang  pengaruh  ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L . )  yang  dapat digunakan  sebagai  pengobatan  tradisional  untuk  memperbaiki i histopatologi  ginjal  yang mengalami hiperkolesterolemia.

## II. METODE Tempat dan Waktu
Penelitian ini dilakukan di 4 tempat yaitu Laboratorium Biologi UINSU di Jl. IAIN No. 1 sebagai  tempat  pemeliharaan  hewan  coba  dan  perlakuan  hewan  coba,  Laboratorium Farmasi  USU  sebagai  pembuatan  ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L.), Laboratorium  Kimia  Organik  FMIPA  USU  sebagai  tempat  skrining  fitokimia, Laboratorium  Patologi  Balai  Veteriner  Medan  Jl.  Gatot  Subroto  No.  225  A  Kecamatan
MZ  Fauziah,  Febriani  H, Rahmadina,,:  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Samarinda ( Carissa  carandas L.) Terhadap Histopatologi Ginjal Tikus Putih ( Rattus norvegicus L.) Hiperkolesterolemia
Medan  Sunggal  untuk  tempat  pembuatan  preparat  histopatologi  ginjal  tikus  putih. Penelitian dilaksanakan pada bulan Januari 2021- April 2021.

## Alat dan Bahan Penelitian Alat
Alat pada penelitian ini adalah box plastik polipropilen, tempat pakan, botol minum, sonde lambung, syringe ,  timbangan  digital,  sarung  tangan,  kapas,  toples,  bak  bedah,  dissecting set, jarum pentul, cawan petri, kertas label, alat Easy touch & strip kolesterol, pisau silet, gelas  ukur,  wadah,  blender,  saringan,  spatula,  corong Buchner ,  pompa  hisap, rotary evaporator, labu  pisah,  kertas  saring,  objek glass ,  cover glass ,  botol  flakon,  mikroskop, mikrotom, dan cassette jaringan, water bath, tissue processor .

## Bahan
Bahan  pada  penelitian  ini  adalah  24  ekor  tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus L.), 800 gram  serbuk  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L.),  pakan  standard  secukupnya,  pakan tinggi  lemak  1.120  ml  (otak  sapi  dan  kuning  telur),  Simvastatin  50,4  mg,  kertas  saring, sekam  alas  kandang  secukupnya,  aquadest  secukupnya,  kapas  secukupnya,  etanol  96%, NaCl 0,9%, Na-CMC 1%,  Larutan  BNF ( Buffered Neutral Formalin) 10%,  alkohol 70%, 80%, 90%, Xylol, Xylene, parafin, air hangat secukupnya, dan Hematoksilin-eosin .

## Rancangan Penelitian
Penelitian  bersifat  eksperimental  dengan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  menggunakan 24 ekor tikus putih jantan ( Rattus norvegicus L.) terdiri dari 6 macam kelompok dengan 4 kali ulangan:
K N : Kontrol normal (N) dengan memberi makan  standar (pellet) dan minum selama 42 hari.
K  -  :  Kontrol  negatif  (-)  dengan  memberi  pakan  tinggi  lemak  sebanyak  3  ml/200  g  BB selama 42 hari.
K  +  :  Kontrol  positif  (+)  dengan  memberi  pakan  tinggi  lemak  sebanyak  3  ml/200  g  BB selama  28  hari,  dilanjutkan  pemberian  pellet  dan  minum  serta  diberi  obat  Simvastatin  1 ml/200 g BB selama 14 hari.
P 1 : Perlakuan 1 dengan memberi pakan tinggi lemak sebanyak 3 ml/200 g BB selama 28 hari,  dilanjutkan  pemberian  ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L.)  dengan  dosis 750 mg/Kg BB selama 14 hari.
P 2 : Perlakuan 2 dengan memberi pakan tinggi lemak sebanyak 3 ml/200 g BB selama 28 hari,  dilanjutkan  pemberian  ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L.)  dengan  dosis 1000 mg/Kg BB selama 14 hari.
P 3 : Perlakuan 3 dengan memberi pakan tinggi lemak sebanyak 3 ml/200 g BB selama 28 hari,  dilanjutkan  pemberian  ekstrak  daun  samarinda  ( Carissa  carandas L.)  dengan  dosis 1250 mg/Kg BB selama 14 hari.

## Prosedur Kerja
Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Samarinda ( Carissa carandas L . )
Daun  segar  tanaman  samarinda  sebanyak  1500  gr  dicuci  bersih  dan  dikeringkan.  Daun samarinda yang telah kering dihaluskan dengan blender hingga menjadi serbuk. Ditimbang 800  gr  serbuk  dan  direndam  dalam  24  liter  etanol  96%  untuk  ekstraksi  (perbandingan serbuk dan etanol 1:10) selama 3x24 jam (etanol diganti 1x24 jam sebanyak 3 kali). Saring hasil maserasi menggunakan kertas saring untuk memisahkan filtratnya.  Filtrat yang telah disaring  kemudian  dipekatkan  pada rotary  evaporator pada  suhu  50°C  hingga  dihasilkan
MZ  Fauziah,  Febriani  H, Rahmadina,,:  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Samarinda ( Carissa  carandas L.) Terhadap Histopatologi Ginjal Tikus Putih ( Rattus norvegicus L.) Hiperkolesterolemia
ekstrak  daun  samarinda  yang  kental.  Hasil  ekstrak  diencerkan  dengan  Na-CMC  1% kemudian dihitung sesuai dengan dosis setiap perlakuan (Mutia et al , 2018).

## Penentuan Dosis Simvastatin
Dosis  untuk  orang  dewasa  yaitu  10  mg/hari.  Menggunakan  faktor  konversi  manusia  dari tikus dengan berat 70 kg, dosis yang dikonversi untuk tikus dengan berat 200 gram adalah 0,018.  Dosis  untuk  tikus  adalah  10  mg  x  0,018  =  0,18  mg/hari/200  g  =  0,9  mg/kg  BB. Volume yang diberikan adalah 1 ml (Kertika & Ganet, 2020).

## Pemberian Pakan Tinggi Lemak
Untuk  menghasilkan  tikus  hiperkolesterolemia  diberikan  pakan  tinggi  lemak  dengan komposisi  minyak  jelantah  1  mL/tikus/hari,  kuning  telur  puyuh  1  mL/tikus/hari,  kuning telur  bebek  1  mL/tikus/hari.  Pakan  kolesterol  diberikan  sebanyak  3  mL/tikus/hari  secara oral menggunakan sonde lambung pada tikus selama 28 hari.

## Perlakuan Hewan Coba
Tikus  diaklimatisasi  selama  7  hari.  Setelah  aklimatisasi  tikus  dipuasakan  selama  12  jam, kemudian  dilakukan  pemeriksaan  kadar  kolesterol  dengan  mengambil  sampel  darah  dari vena caudal ekor tikus. Pada hari ke-8 tikus diberi pakan hiperkolesterolemia sampai hari ke-35  atau  selama  28  hari.  Hari  ke-35  tikus  dipuasakan  selama  12  jam  dan  hari  ke-36 dilakukan pemeriksaan ulang kadar kolesterol tikus untuk memastikan naik atau tidak. Setelah  terjadi    peningkatan  kadar  kolesterol,  diberi Simvastatin untuk  kelompok  kontrol positif  dan  ekstrak  daun  samarinda  untuk  kelompok  perlakuan.  Perlakuan  yang  diberikan pada setiap kelompok di hari ke-36 sampai hari ke-49 atau selama 14 hari. Setelah diberi perlakuan  sediaan Simvastatin dan  ekstrak  daun  samarinda,  tikus  dipuasakan  selama  12 jam pada hari ke-49. Setelah itu, pada hari ke-50 dilakukan pemeriksaan kadar kolesterol dengan  mengambil  sampel  dari vena  kaudalis ekor  sebagai  posttest  setelah  perlakuan (Ulan, 2016).

## III. HASIL PENELITIAN
Dari hasil pengamatan menggunakan mikroskop dengan perbesaran 400x, didapatkan hasil sebagai berikut:
Perdarahan Glomerulus Sel Normal Perdarahan Glomerulus Sel Normal

## Degenerasi Hidropik

## Nekrosis
Berdasarkan  hasil  pengamatan  terlihat  adanya  perdarahan  pada  glomerulus,  sel  normal, degenerasi  hidropik  dan  nekrosis  pada  tubulus  ginjal  tikus  putih.  Perdarahan  pada glomerulus  disebabkan  oleh  kerusakan  sel  endotel.  Kerusakan  sel  endotel  menyebabkan pelepasan  berbagai  respon  mediator  seperti  vasodilatasi  peningkatan  aliran  darah  dan permeabilitas  kapiler  dalam  bentuk  prostaglandin,  histamin,  dan  leukotrien  yang mengakibatkan darah diproduksi dalam plasma atau sel keluar dari kapiler (Pramudanti et al, 2012).  Kerusakan  pada  pembuluh  darah  akan  menyebabkan  perubahan  patologi  yaitu vasodilatasi  endotel  kapiler  yang  akan  berkembang  menjadi  perdarahan  pada  glomerulus (Vita,  2005).  Pemberian  ekstrak  daun  samarinda  dapat  menurunkan  perdarahan  pada glomerulus.  Semakin  tinggi  dosis  ekstrak  samarinda  yang  diberikan  maka  semakin berkurang perdarahan glomerulus.

## Tabel sel normal histopatologi ginjal tikus putih
Kelompok Rata-rata Sel Normal ± SD K- 14,50±1.29 a K+ 20,50±1.29 b P1 15,25±2.21 a P2 18,25±1.25 b P3 20,00±1.41 b
Sel  normal  merupakan  sel  yang  tidak  mengalami  kerusakan.  Sel  normal  ditandai  dengan tidak terdapat degenerasi hidropik dan nekrosis pada tubulus proksimal. Sel normal terjadi karena adanya perbaikan sel setelah pemberian obat maupun ekstrak daun samarinda yang mengandung flavonoid.
Tabel degenerasi hidropik histopatologi tubulus proksimal ginjal tikus putih Kelompok  Rata-rata Degenerasi Hidropik ±  SD
K- 94,00 ± 2.94 c K+ 81,50 ± 1.29 a P1 86,00 ± 1.63 b P2 81,50 ± 1.91 a P3 81,00 ± 3.55 a
Degenerasi Hidropik Nekrosis
MZ  Fauziah,  Febriani  H, Rahmadina,,:  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Samarinda ( Carissa  carandas L.) Terhadap Histopatologi Ginjal Tikus Putih ( Rattus norvegicus L.) Hiperkolesterolemia
Degenerasi hidropik yaitu kerusakan sel reversibel yang disebabkan oleh akumulasi cairan di dalam sel lebih bahaya jika adanya albumin. Degenerasi hidropik terjadi karena adanya toksin  yang  masuk  membran  sel  dan  mengakibatkan  terganggunya  proses  pengaturan  ion natrium-kalium.

## Tabel nekrosis histopatologi tubulus proksimal ginjal tikus putih
Perlakuan Rata-rata Nekrosis ± SD K- 129,75± 3.59 c K+ 116,75± 4.57 a P1 125.25± 2.21 b P2 123,00± 1.82 b P3 118,50± 1.29 a
Nekrosis  sel  disebabkan  karena  adanya  zat  toksik  yang  masuk  ke  aliran  darah  menuju ginjal.  Pemberian  pakan  tinggi  lemak  merupakan  zat  racun  yang  masuk  dalam  tubuh kemudian  bercampur  dengan  darah  (Fahrimal,  2016).  Pemberian  ekstrak  daun  samarinda yang mengandung senyawa flavonoid dapat mengurangi kerusakan pada ginjal dengan cara menjaga  permeabilitas  dan  meningkatkan  resistensi  pada  pembuluh  darah  kapiler (Pramudanti, 2012).

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun samarinda ( Carissa carandas L.) berpengaruh dalam memperbaiki gambaran histopatologi ginjal  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus L.)  hiperkolesterolemia  dan  dosis  yang  paling berpengaruh yaitu pada dosis 1.250 mg/kg BB.

## DAFTAR PUSTAKA
Afrilliani,  Dri  Ari,  Bambang  Supriyanta,  Muji  Rahayu.  2014. Pengaruh  Pemberian Rebusan  Daun  Salam  (Eugenia  polyantha  Wight.)  Terhadap  Kadar  Kolesterol  Low Density Lipoprotein (LDL) Serum Tikus Putih (Rattus norvegicus) Hiperkolesterolemia. Jurnal Teknologi Laboratorium. Volume 3 Nomor 2.
Fahrimal.  2016. Gambaran Histopatologis  Ginjal Tikus Putih (Rattus norvegicus)  Jantan yang  Diinfeksikan  Trypanosoma  evansi  dan  Diberi  Ekstrak  Daun  Sernai  (Wedelia biflora). Jurnal Medika Veterinaria Gardenhire,  Douglas  S.  2012. Respiratory  Care  Pharmacology .  Elsevier  Mosby.  China. pp: 314.
Kertika, Meta Untari & Ganet Elo Pramukantoro. 2020. Aktivitas Antihiperkolesterolemia Ekstrak  Etanol  Daun  Stevia  Rebaudiana  Bertoni  Pada  Tikus  Putih  Jantan. Journal Syifa Science and Clinical Research . Volume 2 Nomor 1. Mutia,  Sri,  Fauziah,  Zairin  Thomy.  2018. Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Etanol  Daun Andong  (Cordyline  fructicosa)  A.  Chev)  Terhadap  Kadar  Kolesterol  Total  Dan Trigliserida Darah Tikus Putih (Rattus norvegicus) Blood. Jurnal Bioleuser. Vol. 2, No. 2.
Pramudanti  DR,  Padaga  MC,  Winarso  D.  2012. Pengaruh  Terapi  Ekstrak  Air  Benalu Mangga  (Dendrophthoe  pentandra)  terhadap  Kadar  Albumin  dan  Gambaran Histopatologi  Ginjal  Hewan  Model  Tikus  (Rattus  norvegicus)  Hiperkolesterolemia. Universitas Brawijaya.
MZ  Fauziah,  Febriani  H, Rahmadina,,:  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Samarinda ( Carissa  carandas L.) Terhadap Histopatologi Ginjal Tikus Putih ( Rattus norvegicus L.) Hiperkolesterolemia
Rahma,  Sitti,  Rosdiana  Natsir,  Peter  Kabo.  2014. Pengaruh  Antioksidan  Madu  Dorsata dan  Madu  Trigona  Terhadap  Penghambatan  Oksidasi  LDL  Pada  Mencit Hiperkolesterolemia. JST Kesehatan . Vol.4 N. 4
Ruslianti. 2014. Kolesterol Tinggi Bukan untuk Ditakuti . Jakarta Selatan: FMedia (Imprint AgroMedia Pustaka).
Tesfaye  T.  dan  Yesudass  D.R.  2018. Traditional  Uses,  Pharmacological  Action  And Phytochemical  Analysis  Of  Carissa  carandas  Linn. :  A  Review.  Natural  Products Chemistry & Research. ISSN : 2329-6836. Vol. 6, No 5: 1-20.
Ulan,  Ayu  Rizki,  Cholid  AR,  Muttia  Amalia.  2016 .  Perbedaan  Efektivitas  Ekstrak Rimpang  Temulawak  (Curcuma  xanthorriza  Roxb.)  dengan  Ekstrak  Daun  Salam (Eugenia  polyntha  Wight)  Pada  Penurunan  Kadar  Kolesterol  Total  Tikus  Putih Jantan (Rattus norvegicus). Jurnal Profesi Medika. Vol.10 No.1. Ulfa,  Laila,  Randy  Hermawan.  2015. Kejadian  Hiperkolesterolemia  Pada  Pelaut  PT. Samudera Indonesia. Jurnal Bidang Ilmu Kesehatan. Vol. 5 No. 1. Vita,  J.A.  2005. Polyphenol  and  Cardiovascular  Disease:  Effect  On  Endothelial  and Platelet Function. Journal Bioscience 81 (1)
Accepted Date Revised Date Decided Date Accepted to Publish 17 November 2021 18 November 2021 22 November 2021 Ya