J.Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XX No. 2 Th. 2009

## KANDUNGAN ANTOSIANIN DAN ANTOSIANIDIN DARI JANTUNG PISANG KLUTUK
( Musa brachycarpa Back ) DAN PISANG AMBON ( Musa acuminata Colla)
[Anthocyanin Content and Identification of Anthocyanidin of Banana Bract Klutuk variety
( Musa brachycarpa Back) and Ambon variety ( Musa acuminata Colla)]
Lydia Ninan Lestario * , Dhanu Lukito, dan Kris Herawan Timotius
Program Studi Kimia, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Kristen Satya Wacana, Jl. Diponegoro 52-60 Salatiga – 50711.
Diterima 15 Mei  2009 / Disetujui  7 Desember 2009

## ABSTRACT
The aims of this research were to determine total anthocyanin content and to explore the type of anthocyanidin of banana  bract klutuk variety and ambon  variety.  The  total  anthocyanin  content  was  determined  with  pH  differential  method,  the  data  were  then  statistically-analyzed  with  t-test  with  5 replications, whereas the exploration of anthocyanidin was based on Rf value and maximum absorbance of the spots on TLC, and also time retention of the peak on HPLC equiped with anthocyanidin standards. The results showed that the total anthocyanin content of banana bract of klutuk variety 909,44 ± 280,53 mg/ 100 g; which was significantly different from  ambon variety 1515,40 ± 193,74 mg/ 100 g.  The type anthocyanidin of banana bract of klutuk variety include delphinidin and cyanidin, whereas ambon variety were delphinidin, cyanidin, and pelargonidin.
Key words : banana bract, total anthocyanin, type of anthocyanidin.

## PENDAHULUAN
Penentuan  mutu  bahan  pangan  tergantung  pada  beberapa faktor  diantaranya    warna,  cita  rasa,  tekstur  dan  nilai  gizinya. Umumnya  warna  merupakan  hal  penting  yang  dipertimbangkan mula-mula dalam penentuan pemilihan makanan (Winarno, 2002). Namun,  akhir-akhir  ini  banyak  dijumpai  penyalahgunaan  terhadap pewarna  makanan,  seperti  penggunaan  pewarna  sintetik  yang kurang aman, sehingga mendorong kepada usaha-usaha pencarian pewarna alami yang aman dengan harga yang relatif murah.
Salah satu pigmen alami yang dapat dipakai sebagai pewarna pangan  adalah  antosianin,  karena  tidak  bersifat  toksik  dan  sudah biasa  dikonsumsi.  JEFCA  menemukan  nilai  ADI  0-2,5  mg/  kg  bw untuk antosianin dari ekstrak kulit anggur. Namun, konsumsi harian antosianin  dari  buah  dan  sayur  jauh  melampaui  konsumsi antosianin  sebagai  pewarna  pangan  (Delgado-Vargas  dan Paredes-López, 2003).
Antosianin merupakan pigmen penyebab hampir semua warna merah  sampai  biru  dalam  bunga,  daun  dan  buah  pada  tanaman tingkat tinggi (Harborne, 1996). Warna ekstrak antosianin berbeda- beda tergantung pH medianya, pada media asam berwarna merah, pada media basa berwarna biru, dan dalam media netral berwarna ungu  (Suardi,  2005).  Menurut  Suda  (2003,  dalam  Suardi,  2005) antosianin  juga  mempunyai * potensi  sebagai  antioksidan, antimutagenetik, hepatoprotektif, antihipertensi, dan antihiperglisemik.  Ragam  antosianin  yang  sudah  teridentifikasi berjumlah    275  jenis,  sedang  antosianidin  hanya  22  jenis,  namun yang  umum  dijumpai  di  alam  hanya  6  jenis,  yaitu  :  sianidin,
* Korespondensi penulis:  HP. 08164248081
E-mail : ninanlestario@yahoo.co.id
delfinidin,  malvidin,  peonidin,  petunidin  dan  pelargonidin  (Francis, 1999).
Jantung  pisang  merupakan  salah  satu  bagian  dari  tanaman pisang yang mempunyai warna merah keunguan. Menurut Simonds (1962,  dalam  Pazmino-Duran et  al., 2001),  variasi  warna  pada jantung  pisang  berhubungan  dengan  keberadaan  antosianin. Kelebihan jantung pisang sebagai sumber antosianin dibandingkan dengan sumber antosianin yang lain adalah bahwa tanaman pisang dapat  tumbuh  sepanjang  tahun,  mudah  dibudidayakan,  dan Indonesia  merupakan  penghasil  pisang  terbesar  di  Asia  sehingga secara menghasilkan jantung pisang yang tinggi pula.
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan dan membandingkan kandungan antosianin total dari jantung pisang klutuk dan jantung pisang ambon serta mengetahui jenis antosianidinnya.

## METODOLOGI

## Bahan dan alat
Bahan baku dari penelitian ini adalah jantung pisang klutuk dan jantung  pisang  ambon  yang  di  peroleh  dari  Desa  Kesongo, Kecamatan  Tuntang,  Kabupaten  Semarang.  Bahan  habis  pakai meliputi  :  akuades,  kertas  saring,  metanol,  HCl,  KCl,  asam  sitrat, natrium  sitrat,  etil  asetat,  amil  alkohol,  asam  asetat,  asam  format, butanol  (pa.  Merck,  Jerman),  sianidin,  pelargonidin,  dan  delfinidin standar (Extrasynthese, Perancis).
Peralatan  yang  digunakan  meliputi  :  alat  gelas,  pengaduk magnetik, pH meter (Eutech pH510), spektrofotometer UV-Vis (Mini Shimadzu  1240),  penangas  air, ’rotary  evaporator’  ( Heidolph, Laborata 4000) , plat KLT selulosa (Merck, Jerman), chamber KLT, syringe,  lampu  UV,  seperangkat  peralatan  KCKT  serie  smartline (Knauer,  Jerman)  dengan  UV  detektor  2500,  Pompa  S-1000, pengatur pompa Manager 500 (Degasser), injektor Reodyne 7725 i,
injector load 20 μL, dilengkapi dengan kolom RP C-18 berdimensi 4,6 x 250 mm (Vydac, USA).

## Metode penelitian
Preparasi sampel dan  ekstraksi antosianin (Pazmino-Duran et al., 2001, yang dimodifikasi).
Lapisan  terluar  dari  jantung  pisang  klutuk  maupun  ambon dibersihkan dengan cara dilap pada permukaannya sampai bersih, lalu dipotong kecil-kecil, dan ditimbang masing-masing sebanyak 5 g, kemudian ditambah masing-masing dengan 100 ml metanol yang mengandung  0,1  %  HCl  pekat  dan  dimaserasi  selama  semalam pada  suhu  dingin  (±  5 C).  Filtrat  disaring  dan  residu  diekstrak kembali dengan pelarut yang sama (50 mL metanol-0,1 % HCl pk) dengan pengaduk magnetik sampai jantung pisang berwarna pucat. Filtrat  disatukan,  dipekatkan  dengan rotary  evaporator pada  suhu 35 C  sampai  diperoleh  ekstrak  pekat,  lalu  disimpan  pada  suhu dingin (± 5 C).

## Penentuan  antosianin  total  dengan  metode  perbedaan  pH (Giusti dan Wrolstad, 2000)
Penetapan  antosianin  total  dilakukan  dengan  metode perbedaan  pH,    yaitu  dengan  melarutkan  sejumlah  kecil  ekstrak pekat  jantung  pisang  dalam  buffer  pH  1,0  dan  pH  4,5,  kemudian diukur  absorbansinya  pada  λ  510  nm  dan  700  nm.  Buffer  pH  1,0 dibuat dengan cara melarutkan 1,49 g KCl dalam 100 ml akuades, kemudian  diatur  pH-nya  dengan  HCl  pekat  hingga  pH  1,0  ±  0,1; sedangkan  buffer  pH  4,5  dibuat  dengan  cara  melarutkan  1,64  g natrium asetat ke dalam 100 ml akuades, kemudian diatur pH-nya dengan menggunakan HCl pekat hingga pH 4,5 ± 0,1.  Pada pH 1,0 antosianin  berbentuk  ion  flavilium  yang  berwarna  merah,  sedang pada pH 4,5 antosianin berbentuk karbinol yang tidak berwarna.
Untuk  menghitung  konsentrasi  antosianin  total,  faktor pengenceran  yang  tepat  dari  sampel  harus  ditentukan  terlebih dahulu dengan cara melarutkan sampel dengan buffer KCl pH 1,0 hingga  diperoleh  absorbansi  kurang  dari  1,2  pada  panjang gelombang  510  nm.  Selanjutnya,  ekstrak  pekat  jantung  pisang dilarutkan  dalam  buffer  asetat  pH  4,5  dengan  pengenceran  yang sama. Sampel yang dilarutkan pada buffer pH 1,0 dibiarkan selama 15 menit, sedangkan sampel yang dilarutkan dengan buffer pH 4,5 dibiarkan  selama  5  menit,  sebelum  diukur  absorbansinya. Absorbansi dari kedua larutan diukur pada panjang gelombang 510 dan  700  nm  dengan  buffer  pH  1,0  dan  4,5  sebagai  blanko.
Absorbansi untuk masing-masing ekstrak pada panjang gelombang 510 dan 700 nm, dimasukkan ke dalam rumus :
A = [(A 510 -A 700 ) pH1 - (A 510 -A 700 ) pH4,5 ]
Kandungan antosianin total dihitung dengan rumus :
%b/b = ) ( xL A x MW x DF x Wt V x 100%
Keterangan : %b/b  = Kandungan antosianin (dalam %) =  Koefisien  ekstingsi  molar  sianidin-3-rutinosida  =  28.800  L  /  cm. mol
L = Lebar kuvet = 1 cm;
MW    Berat molekul sianidin-3-rutinosida = 445,2 g/mol DF   =  Faktor pengenceran V =  Volume akhir / volume ekstrak pigmen (L)
Wt     =  Berat sampel (g)

## Hidrolisis asam (untuk memperoleh antosianidin)
Sebanyak  ±  5  gsampel  yang  telah  dipotong  kecil  -  kecil dipanaskan dengan ± 10 mL HCl 2M selama 40 menit pada suhu 100 C.  Ekstrak  didinginkan,  lalu  disaring  dengan  kertas  saring, kemudian  ekstrak  dicuci  2  kali  dengan  etil  asetat  masing-masing dengan volume ± 5 mL. Fraksi etil asetat dibuang dan lapisan air dipanaskan  diatas  penangas  air  pada  suhu  80 C  selama  3  menit untuk  menguapkan  sisa  etil  asetat.  Fraksi  air  diekstraksi antosianidinnya  dengan  5  mL  amil  alkohol,  kemudian    fraksi  amil alkohol  ini  diuapkan  pada    gelas  arloji  di  atas  penangas  air  pada suhu  90 C.  Antosianidin  yang  telah  kering  dilarutkan  dengan beberapa  mL  metanol-0,1%  HCl.  Larutan  antosianidin  segera ditotolkan pada plat KLT.

## Kromatografi lapis tipis (KLT)
Ekstrak antosianidin (hasil hidrolisis asam) ditotolkan sebanyak kira-kira  5  kali  pada  pelat  KLT  selulosa,    lalu  dielusi  dengan beberapa  macam  pelarut  (eluen).  Pelarut  untuk  pemisahan antosiadinin,  terdiri  dari  4  macam,  yaitu  :  1)  Forestal  (HCl  pk  : HOAc: air = 3 : 30 : 10); 2)Format (HCl pk : asam format : air = 2 : 5 : 3); 3) Bu-HCl (n-Butanol : HCl 2M = 1:1); dan 4) BAA ( n- Butanol : HOAc : air = 4 : 1 : 5). Elusi dihentikan saat pelarut (eluen) sudah mencapai kira-kira 1-2 cm dari ujung atas pelat KLT atau saat spot- spot sudah terpisah dengan baik.
Warna dari masing-masing spot diamati di bawah sinar tampak dan  dibawah  sinar  UV,  nilai  Rf  dari  masing-masing  spot  dihitung, dan  dipakai  sebagai  dasar  untuk  menentukan  jenis  antosianidin yang dicocokkan dengan Tabel referensi (Tabel 1).
Tabel 1. Tabel Referensi untuk Penentuan Jenis Antosianidin Pigmen Rf x 100 Warna tampak λ maks Respon terhadap. AlCl3* Pelargonidin 68 33 80 80 Merah 520 - Sianidin 49 32 68 69 Merah lembayung 535 + Peonidin 63 30 71 72 Merah lembayung 532 - Delfinidin 32 13 42 35 Lembayung 546 + Petunidin 46 20 52 45 Lembayung 543 + Malvidin 60 27 58 53 Lembayung 542 -
Sumber : Harborne, 1996; Zweig dan Whitaker, 1971
(+) = ada pergeseran batokromik; ( - ) = tidak ada pergeseran batokromi

## Absorbansi maksimum
Untuk  memperoleh  data  absorbansi  maksimum,    dilakukan pemisahan  dengan  pelarut  yang  sama  dengan  KLT  sebelumnya. Spot  yang  muncul  dari  KLT  preparatif  dikerok  dan  dilarutkan dengan  kira-kira  10  mL  metanol  -  0,01%  HCl  kemudian  disaring untuk  memisahkan  larutan  pigmen  dari  serbuk  selulosa. Selanjutnya  larutan  pigmen  dimasukkan  dalam  kuvet,  dan  diukur absorbansinya maksimumnya pada panjang gelombang 200  - 800 nm dengan spektrofotometer UV-VIS.  Nilai absorbansi maksimum ini khas untuk setiap jenis antosianidin.
Tahap  berikutnya,  ekstrak  antosianidin  ditambah  sedikit  5% AlCl 3 (dalam metanol) untuk mengetahui ada atau tidaknya gugus ortodihidroksi  pada  antosianidin.    Bila    terjadi  perubahan  warna menjadi kebiruan dan terjadi pergeseran absorbansi maksimum ke arah yang lebih tinggi, menandakan adanya pergeseran batokromik dan  adanya  gugus  ortodihidroksi.  Antosianidin  yang  mempunyai gugus  ortodihidroksi  meliputi  sianidin,  delfinidin,  dan  petunidin, sedang  antosianidin  yang  tidak  mempunyai  gugus  ortodihidroksi meliputi pelargonidin, peonidin dan malvidin (Harborne, 1996).
Data absorbansi maksimum dan adanya pergeseran batokromik ini dicocokkan dengan Tabel referensi (Tabel 1), yang merupakan rangkuman dari Harborne (1996) dan Zweig dan Whitaker (1971).

## Kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT)
Ekstrak  hasil  dihidrolisis  dipisahkan  dengan  KCKT  untuk mengetahui  jenis  antosianidinnya  dengan  kolom  RP  C-18  (4,6  x 250  mm),  dan  fase  gerak  terdiri  dari  larutan  A  (10%  asam  format dalam  air)  dan  larutan  B  (asam  format  :  air  :  metanol  =  1:9:10  ), yang diprogram dengan gradien elusi sebagai berikut : menit ke 0-5 : 100% A/ 0%B menjadi 60%A/40%B; menit ke 5-10 : 60% A/ 40% B menjadi 45% A/ 55%B, menit ke 10-16 : 45% A/ 55%B menjadi 0%A/100%B,  selanjutnya  dibiarkan  pada  kondisi  tersebut  sampai menit ke 20. Volume injek 60 μl,  laju aliran 1,2 ml/ menit, detektor diatur pada panjang gelombang 520 nm.

## Analisis statistik
Analisis  statistik  dilakukan  terhadap  kandungan  antosianin total,  dan  untuk  mengetahui  adanya  perbedaan  antar  perlakuan (varietas)  dilakukan  uji  t,  dengan  5  ulangan  dan  tingkat kepercayaan  5%.  Untuk  identifikasi  jenis  antosianidin  tidak dilakukan  analisis  statistik,  melainkan  percobaan  dilakukan berulang-ulang sampai diperoleh pemisahan yang baik.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kandungan antosianin total
Hasil  pengukuran  kandungan  antosianin  total  jantung  pisang klutuk dan jantung pisang ambon dapat dilihat pada Tabel 2, yang menunjukkan  bahwa  kandungan  antosianin  total  jantung  pisang klutuk  berdasar  berat  kering  adalah  sebesar  909,44  ±  225,97 mg/100  g,  sedang  pisang  ambon  sebesar  1515,40  ±  156,06  mg/ 100 g, yang secara statistik berbeda nyata.
Tabel    2.  Kandungan  antosianin  total  jantung  pisang  klutuk  dan  jantung pisang   ambon (mg / 100 g sampel)
Keterangan  :  Pembacaan  hasil  analisis  statistik  dilakukan  mendatar/ke samping.Huruf  yang  tidak  sama  menunjukkan  secara  statistik berbeda nyata .
Penelitian  Pazmino-Duran et  al., (2001)  menunjukkan kandungan antosianin total jantung pisang kepok sebesar 250 mg /100 g bk, yang lebih kecil dari hasil penelitian ini. Kemungkinan hal ini  disebabkan  oleh  sifat  genetis  dari  tanaman  itu  sendiri,  atau kondisi  tempat  tanaman  tumbuh  seperti  :  kesuburan  tanah, ketinggian  tempat,  suhu  udara  dan  cahaya.  Semakin  tinggi  dari permukaan laut, suhu udara semakin rendah dan intensitas cahaya akan  semakin  besar,  dimana  keadaan  ini  menyebabkan  laju biosintesa  antosianin  semakin  besar  (Gross,  1987).  Hal  ini  juga ditunjukkan pada beberapa spesies eucalyptus, yaitu meningkatnya kandungan  antosianin  seiring  dengan  bertambahnya  ketinggian tempat (Strack dan Wray, 1989).
Kandungan  antosianin  total  per  100  g  berat  kering  dari beberapa jenis tanaman lain : blackcurrant 190-270 mg, chokeberry 1480  mg, eggplant 750  mg, orange ~200  mg, Marion  blackberry 317 mg, black raspberry 589 mg, raspberry 365 mg, wild blueberry 558 mg, cherry 350-400 mg, redcurrant 80-420 mg, red grape 888 mg, red wine 24-35 mg (Anonim, 2008). Kandungan antosianin total jantung pisang yang diperoleh dari penelitian ini secara umum lebih besar.

## Identifikasi antosianidin
Hasil  pemisahan  ekstrak  antosianidin  (hasil  hidrolisis  asam) dengan  KLT  dari  jantung  pisang  klutuk  dan  pisang  ambon  dapat dilihat  pada  Gambar  1,  Tabel  3,  dan  Tabel  4,  dan  kesimpulannya dapat dilihat pada Tabel 5.
Tanda  (+)  menunjukkan  adanya  pergeseran  batokromik,  yaitu memberikan reaksi positif saat ditambah dengan AlCl 3, yang terlihat dari terjadinya perubahan warna menjadi kebiruan dan pergeseran absorbansi  maksimum  ke  arah  panjang  gelombang  yang  lebih tinggi;  sedang  tanda  (–)  menunjukkan  tidak  terjadinya  pergeseran batokromik,  yaitu  tidak  terjadi  perubahan  warna  maupun pergeseran  absorbansi  maksimum  ke  arah  panjang  gelombang yang lebih tinggi saat ditambah dengan  AlCl 3.
Pengembang  format  (b)  menghasilkan  pemisahan  yang  paling jelas  diantara  semua  pengembang  lain,  dan  semua  spot  dapat teridentifikasi  dengan  mudah.  Pada  pengembang  forestal, pemisahan  juga  cukup  jelas  dan  semua  spot  dapat  diidentifikasi, namun ada senyawa berwarna coklat dengan Rf sangat tinggi yang tidak  membentuk  spot,  dan  bukan  termasuk  antosianidin  karena menurut  (Harborne,  1996)  tidak  ada  antosianidin  yang  berwarna coklat.  Senyawa  coklat  seperti  ini  juga  terlihat  pada  pengembang BAA  dan  Bu-HCl.  Diperkirakan  senyawa  ini  adalah  produk degradasi antosianin, yang terbentuk karena pemanasan pada saat hidrolisis  asam.  Kemungkinan  lain  senyawa  tersebut  adalah biflavonil, yang termasuk golongan flavonoid, yang mempunyai nilai Rf mendekati satu dengan pengembang forestal (Harborne, 1996).
Antosianin total Varietas klutuk (μ±SD) Varietas ambon (μ ± SD) Berdasar berat basah 29,66 ± 7,44 (a) 43,74 ± 3,62 (b) Berdasar berat kering 909,44 ± 225,97 (a) 1515,40 ± 156,06 (b)
Gambar  1.    Hasil  KLT  antosianidin  dari  jantung  pisang  klutuk  (K)  dan jantung  pisang  ambon  (A) dengan  pengembang  (a)  BAA  (  n- Butanol  :  asam  asetat  :  air  =  4  :  1  :  5),  (b)  Format  (HCl  pk  : asam  format  :  air  =  2  :  5  :  3),    (c)  Forestal  (HCl  pk  :  asam asetat : air = 3 : 30 : 10), (d) Bu-HCl = (n-Butanol : HCl 2M = 1:1).
Pada pisang klutuk dengan pengembang BAA, terlihat ada spot dengan  nilai  Rf  paling  rendah  (Rf=46,88)  yang  tidak  jelas  apakah merupakan  spot  tersendiri  atau  masih  bagian  dari  spot  diatasnya (Rf=56,25).    Hal  ini  juga  terlihat  pada  pengembang  Bu-HCl,  spot dengan  nilai  paling  rendah  (Rf=13,56)  tidak  terlalu  jelas  apakah merupakan  spot  tersendiri  atau  bagian  dari  spot  diatasnya (Rf=37,29).  Bila dicocokkan dengan tabel referensi, kedua spot ini tidak  sesuai  dengan  suatu  jenis  antosianidin  tertentu;  namun  bila memperhatikan  kesesuaian  hasil  dengan  pemisahan  dari pengembang  lain  (format  dan  forestal),  dimana  jantung  pisang klutuk hanya menghasilkan dua spot, (delfinidin dan sianidin) maka kedua  spot  tersebut  dianggap  masih  termasuk  ke  dalam  spot diatasnya.
Pada  pengembang  Bu-HCl,  spot  yang  diperoleh  cenderung agak  memanjang  sehingga  sulit  menghitung  nilai  Rf  yang  tepat, sehingga  nilai  Rf  yang  diperoleh  kurang  mendekati  nilai  Rf  pada Tabel  Referensi  (Tabel  1).  Meskipun  demikian,  tetap  dapat disimpulkan  bahwa  kedua  spot  yang  diperoleh  adalah  sama  jenis antosianidinnya  dengan  pengembang  lain,  karena  Bu-HCl  hanya merupakan  pengembang  pendukung,  sedang  pengembang  yang pokok  dalam  pemisahan  antosianidin  adalah  Forestal    (Harborne, 1996).
Tabel 5. Jenis Antosianidin yang terdeteksi pada jantung pisang klutuk dan pisang ambon Jenis Antosianidin Klutuk Ambon Sianidin + + Delfinidin + + Malvidin - - Peonidin - - Petunidin - - Pelargonidin - + Keterangan : +  = Terdeteksi -   = Tidak terdeteksi
Tabel 3. Data hasil kromatografi  lapis tipis antosianidin jantung pisang klutuk
Pengembang Rf x100 Warna tampak Warna UV λ maks Respons terhadap +AlCl 3 * Pendugaan Format Rf 1 = 15.29 Ungu Ungu 547 572 (+) Delfinidin Rf 2 = 25.88 Merah ungu Merah muda 536 546 (+) Sianidin BAA (Rf 1 = 46.88) Merah Ungu 538 569 (+) (Delfinidin) Rf 2 = 56.25 ungu Ungu 548 577 (+) Delfinidin Rf 3 = 75.00 Merah ungu Merah muda 536 548 (+) Sianidin Forestal Rf 1 = 30.12 Ungu Ungu 548 581 (+) Delfinidin Rf 2 = 50.60 Merah ungu Merah muda 536 558 (+) Sianidin Bu - HCl (Rf 1 = 13.56) Merah ungu 537 560 (+) (Delfinidin) Rf 2 = 37.29 Ungu Ungu 545 560 (+) Delfinidin Rf 3 = 74.58 Merah ungu Merah muda 536 553 (+) Sianidin
Keterangan :  BAA ( n- Butanol : asam asetat : air = 4 : 1 : 5), Format (HCl pk : asam format : air = 2 : 5 : 3),  Forestal (HCl pk : asam asetat :   air = 3 : 30 : 10), Bu-HCl = (n-Butanol : HCl 2M = 1:1).
*) (+) ada pergeseran batokramik

## Tabel 4. Data hasil kromatografi lapis tipis  antosianidin jantung pisang ambon
Pengembang Rf x100 Warna tampak Warna UV λ maks Respon terhadap +AlCl 3 * Pendugaan Format Rf 1 = 15.29 Ungu Ungu 547 561 (+) Delfinidin Rf 2 = 25.88 Merah ungu Merah muda 536 549 (+) Sianidin Rf 3 = 36.47 Merah ungu Merah muda 536 536 (-) Pelargonidin BAA Rf 1 = 56.25 Ungu Ungu 548 562 (+) Delfinidin Rf 2 = 75.00 Merah ungu Merah muda 539 551 (+) Sianidin Rf 3 = 84.38 Merah ungu Merah muda 537 537 (-) Pelargonidin Forestal Rf 1 = 30.12 Ungu Ungu 547 584 (+) Delfinidin Rf 2 = 50.60 Merah ungu Merah muda 536 558 (+) Sianidin Rf 3 = 73.81 Merah ungu Merah muda 536 536 (-) Pelargonidin Bu – HCl Rf 1 = 37.29 Ungu ungu 546 555 (+) Delfinidin Rf 2 = 74.58 Merah ungu Merah muda 536 544 (+) Sianidin
Keterangan  : BAA ( n- Butanol : asam asetat : air = 4 : 1 : 5), (b) Format (HCl pk : asam format : air = 2 : 5 : 3),  (c) Forestal (HCl pk : asam asetat : air = 3 : 30 : 10), (d) Bu-HCl = (n-Butanol : HCl 2M = 1:1).
*) (+) ada pergeseran batokramik, (-) tidak ada pergeseran batokromik
Dari  kesimpulan  pada  Tabel  5. terlihat  bahwa  jantung  pisang klutuk hanya mengandung dua jenis antosianidin yaitu sianidin dan delfinidin; sedangkan jantung pisang ambon mengandung tiga jenis antosianidin  yaitu  sianidin,  delfinidin  dan  pelargonidin.  Penelitian Pazmino-Duran et  al., (2000)  menunjukkan  bahwa  jenis antosianidin  pada  jantung  pisang  kepok  ada  enam  buah,  yaitu sianidin,  delfinidin,  petunidin,  pelargonidin,  peonidin,  dan  malvidin. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  jenis  antosianidin  dari  jantung  pisang berbeda  dari  varietas  yang  satu  ke  varietas  yang  lain  karena  tiap varietas  mempunyai  sifat  genetis  masing-masing.  Hal  ini  sejalan dengan  yang  dikemukakan  oleh  Gross  (1987)  bahwa  antosianin sering  dipakai  sebagai  alat  dalam  taksonomi  tumbuhan  untuk membedakan  antar  spesies  maupun  varietas  tanaman.  Delgado- Vargas    dan  Pardedes-López  (2003)  juga  menyatakan  bahwa setiap jenis buah  (sumber antosianin) mempunyai pola antosianin yang khas.
Kromatogram  Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi/KCKT  dari antosianidin  jantung  pisang  klutuk  dilihat  pada  Gambar  2,  sedang dari jantung pisang ambon dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 2. terlihat ada 1 puncak dengan waktu retensi 10,367 menit,  yang  sesuai  dengan  waktu  retensi  senyawa  standar delfinidin.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  jantung  pisang  klutuk mengandung  satu  jenis  antosianidin,  yaitu  delfinidin.    Pada kromatogram  KCKT  ini,  tidak  terdeteksi  adanya  puncak  sianidin, sedangkan dengan KLT terdeteksi adanya sianidin. Hal ini mungkin disebabkan karena ekstrak yang dipakai untuk KCKT terlalu encer ataupun antosianidin tersebut sudah mengalami degradasi selama proses hidrolisis.
Pada  Gambar  3  terlihat  ada  1  puncak  yang  dominan  dengan waktu  retensi  10,333  menit,  yang  sesuai  dengan  waktu  retensi senyawa  standar  delfinidin.  Dua  antosianidin  lain  yang  terdeteksi pada  KLT,  yaitu  sianidin  dan  pelargonidin,  pada  KCKT  ini  berada pada  persen  area  yang  sangat  rendah  sehingga  dapat  dikatakan tidak terdeteksi.
Gambar 2. Kromatogram  kromatografi cair  kinerja tinggi antosianidin dari jantung pisang klutuk, peak 1: delfinidin (dengan notasi 10,367), area 179 dan % area 0,40
Gambar 3. Kromatogram  kromatografi cair kinerja tinggi antosianidin dari jantung  pisang  ambon,  peak  1:  delfinidin  (dengan  notasi 10,333), area 116589 dan % area. 98,775
A b so rb an si (mA u ) Waktu retensi (menit) Ab so rb an si (m Au )
Waktu retensi (menit)

## KESIMPULAN
Kandungan antosianin total pada jantung pisang klutuk adalah sebesar  909,44  ±  225,97  mg/  100  g  berat  kering  ,  sedang  pada jantung pisang ambon adalah sebesar 1515,40 ± 156,06 mg/ 100 g berat  kering—sambung  Antosianidin  yang  terdeteksi  dengan  KLT pada  jantung  pisang  klutuk  adalah  sianidin  dan  delfinidin,  sedang dengan  KCKT  hanya  terdeteksi  delfinidin.  Antosianidin  pada jantung pisang  ambon yang terdeteksi dengan KLT adalah sianidin, delfinidin dan pelargonidin, sedang dengan KCKT hanya terdeteksi delfinidin.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.2008. Anthocyanin. http://en.wikipedia.org/wiki/Anthocyanin [9 Januari 2008].
Delgado-Vargas, F. Paredes-López, O., 2003. Natural Colorants for Food and Nutraceutical Uses, CRC Press, Boca Raton, London.
Francis FJ. 1982 . Analysis of Anthocyanins Dalam : P. Markakis.
Anthocyanin  as  Food  Color,  Series  Food  Science  and Technology. P. 181 – 207. Academic Press, New York.
Francis FJ. 1999. Colorants. Eagan Press, St Paul, Minnesota, USA
Giusti  MM,  RE.  Worlstad.  2000.    Characterization  and Measurement  of  Anthocyanins  by  UV-Visible  Spectroscopy. Oregon State University. http://does.org/masterli/facsample.htm. [10 April 2008].
Gross  J. 1987.  Pigments in Fruits, Academic Press, London.
Harborne  JB.  1996.  Metode  Fitokimia,  Penuntun  Cara  Modern Menganalisis Tumbuhan, Penerbit ITB, Bandung.
Pazmino-Duran, EA, Giusti MM, Wrolstad RE, Gloria MB. A. 2001. Anthocyanins  from  Banana  Bracts  ( Musa  X  paradisiaca )  as Potential Food Colorant, Food Chemistry 73 : 327-332.
Strack  D,  Wray  V.  1989.  Anthocyanins.  Dalam  :  Harborne,  J.  B. Methods  in  Plant  Biochemistry,  Academic  Press,  London,  hal 325-341.
Suardi  D.  2005.  Potensi  Beras  Merah  untuk  Peningkatan  Mutu Pangan, Jurnal Litbang Pertanian, 24 (3), hal 93 – 100.
Winarno  FG.  2002.  Kimia  Pangan  dan  Gizi.  Gramedia  Pustaka Utama, Jakarta.
Zweig  G,  Whitaker  JR.  1971.  Paper  Chromatography  and Electrophoresis. Volume II (Paper Chromatography). Academic Press, London.