## ANALISIS KANDUNGAN KAFEIN PADA EKSTRAK BUAH KOPI MENTAH DARI PERKEBUNAN MERAPI DAERAH ISTIMEWA YOGYAKARTA MENGGUNAKAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Isnindar 1) , Subagus Wahyuono 2) , Sitarina Widyarini 3) , Yuswanto 2)
1) Fakultas Kedokteran, Prodi Farmasi, Universitas Tanjungpura
2) Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada
3) Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada

## ABSTRACT
Coffee  is  one  of  the  plantation  species  that  has  long  been  cultivated  and  has  a  fairly  high economic  value.  The  main  compound  in  coffee  beans  is  caffein.  This  compound  affects  the  central nervous  system,  muscles  and  kidneys.  The  purpose  of  this  research  was to  determine  the  content  of caffeine  in  unripe  coffee  berries  extract  crude  chloroform  using  UV-Vis  spectrophotometer. Chloroform extract was obtained from maceration using chloroform. Caffeine content  was analyzed using UV-Vis spectrophotometer method. The maximum wavelength measured was 273 nm. Levels of caffeine in chloroform extract of raw coffee fruit was 838 939 ± 1.6103.
Keywords : caffeine, coffee, UV-Vis spectrophotometry

## ABSTRAK
Kopi  merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  perkebunan  yang  sudah  lama  dibudidayakan  dan memiliki  nilai  ekonomis  yang  cukup  tinggi.  Senyawa  dominan  didalam  buah  kopi  adalah  kafein. Senyawa  ini  mempengaruhi  sistem  syaraf  pusat,  otot,  dan  ginjal.  Tujuan  penelitian  ini  yaitu mengetahui  kandungan  kafein  dalam  ekstrak  klororform  buah  kopi  mentah  dengan  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis.  Ekstrak  kloroform  diperoleh  dari  metode  maserasi  menggunakan  pelarut kloroform. Metode analisis kadar kafein menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Panjang gelombang maksimum  yang  diperoleh  273  nm.  Kandungan  kafein  dalam  ekstrak  kloroform  buah  kopi  mentah adalah 838.939±1.6103.
Kata kunci : kafein, kopi, spektrofotometri UV-Vis

## PENDAHULUAN
Kopi  merupakan  salah  satu  hasil komoditi  perkebunan    yang    memiliki nilai    ekonomis    yang  cukup  tinggi  di antara  tanaman  perkebunan  lainnya  dan berperan  penting  sebagai  sumber  devisa negara.  Salah  satu  kandungan  senyawa dalam  kopi  adalah    kafein.    Kafein merupakan    suatu    senyawa  berbentuk kristal.    Penyusun    utamanya    adalah senyawa  turunan  protein  disebut  dengan purin xantin.  Senyawa   ini  pada  kondisi tubuh    yang  normal  memang  memiliki beberapa  khasiat  antara  lain    merupakan obat  analgetik  yang  mampu menurunkan rasa  sakit  dan  mengurangi  demam. Akan tetapi,  pada  tubuh  yang  mempunyai masalah  dengan    keberadaan    hormon metabolisme  asam urat,  maka  kandungan kafein    dalam    tubuh    akan  memicu terbentuknya  asam  urat  tinggi  (Burnham, 2001).
K opi  hijau  mengandung  kafein, senyawa fenolik, dengan  asam klorogenat. (Clifford,  1999).  Kopi  robusta  memiliki kadar  kafein  lebih  tinggi  daripada  kopi Arabika  (Soedibyo,  1998).  Kadar  kafein pada  kopi hijau  ( C.  Arabica dan C.canephora )  masing  masing  1,45%  dan 2,38% (Bicho et al ., 2013).
Kafein  atau  1,3,7  -trimetilxantin merupakan  senyawa  golongan  alkaloid purin  (Hesse,  2002)  dengan  rumus molekul C 8 H 10 N 4 O 2 . Kafein memiliki efek farmakologis  yang    bermanfaat    secara klinis,    seperti  menstimulasi    susunan syaraf    pusat,    relaksasi    otot  polos terutama    otot    polos    bronkus    dan stimulasi otot  jantung  (Coffeefag,  2001). Berdasarkan    efek  farmakologis    tersebut, kafein    ditambahkan    dalam  jumlah tertentu  ke  minuman.  Efek  berlebihan mengkonsumsi kafein dapat menyebabkan  gugup,  gelisah,  tremor,
insomnia,  hipertensi,  mual  dan  kejang (Farmakologi UI, 2002).
Spektrum UV-Vis merupakan korelasi  absorbansi  (sebagai  ordinat)  dan panjang  gelombang  sebagai  absis  berupa pita spektrum. Terbentuknya pita spektrum UV-Vis tersebut disebabkan transisi energi yang  tidak  sejenis  dan  terjadinya  eksistasi elektronik.  Senyawa  tak  berwarna  diukur pada  jangka  200  sampai  400  nanamoter (nm),  senyawa  berwarna  pada  jangka  200 sampai 700 nm  (Harborne, 1973). Metode spektrofotometri diharapkan dapat digunakan  untuk  penentuan  kadar  kafein dalam  buah  kopi  mentah  merapi  karena relatif  cepat,    sederhana,  dan  relatif murah.  Oleh  karena  itu  dalam  penelitian ini  dilakukan  metode  spektrofotometri untuk  penentuan  kadar  kafein  di  dalam buah  kopi  mentah.  Buah  kopi  hijau  yang digunakan  pada  penelitian  ini  merupakan hasil limbah yang dibuang dari hasil panen buah  kopi.  Salah  satu  usaha  dalam pemanfaatan  limbah  maka  telah  dilakukan penelitian  penentuan  kadar  kafein  dalam ekstrak  kloroform  buah  kopi  mentah merapi menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis. Tujuan penelitian ini yaitu mengetahui kandungan kafein dalam ekstrak klororform buah kopi mentah
dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## METODE PENELITIAN Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  buah  kopi mentah  yang  diperoleh  dari  perkebunan kopi  Dusun  Petung  Desa  Kepuharjo, Cangkringan  Sleman.  Bahan  pendukung yang  digunakan  adalah  kafein  standar (Sigma),  pelarut  kloroform  (E.Merck), asam klorida dan aquades.

## Cara Penelitian

## 1. Penyiapan bahan utama
Buah  kopi  diperoleh  dari  buah mentah  berwarna  hijau  dan  merupakan limbah terbuang hasil panen pada bulan maret 2015 dari perkebunan kopi Dusun Petung  Desa  Kepuharjo,  Cangkringan Sleman.

## 2. Pembuatan ekstrak
Sejumlah simplisia buah kopi hijau dimaserasi  dengan  pelarut  kloroform dalam  bejana  selama  3x24  jam,  setiap 1x24  jam  pelarut  diganti  dan  dilakukan pengadukan sesering mungkin.
Kemudian filtrat disaring dan
dipekatkan  dengan rotary  evaporator dan  penangas  air  hingga  diperoleh ekstrak kloroform.
3. Penentuan kandungan kafein  metode
spektrofotometri UV-Vis
Sejumlah ekstrak
kloroform masing  masing  ditimbang  0.1007  mg,
0.1009  mg,  dan  0.1008  mg  dilarutkan dalam  10  mL  pelarut,  dengan  faktor pengenceran 100 kali. Penentuan kandungan sampel  yaitu dibaca serapan sinar (absorbansi) dengan spektrofotometer pada panjang
gelombang  273  nm  dengan  blanko serapan dan dihitung jumlah kafein dari angka serapan masing-masing.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  kandungan  kafein pada buah  kopi  mentah  dengan    menggunakan metode spektrofotometri  UV-Vis (Hitachi U-2500).  Spektra  ultra  violet  ekstrak kloroform buah kopi mentah menunjukkan adanya absorbansi maksimum pada panjang  gelombang  (λ)  273  nm.  Adanya gugus kromofor yang panjang mengakibatkan ekstrak kloroform
berpendar pada deteksi awal menggunakan UV 254 .  Dari  spektra  ultra  violet  ini,  tidak begitu  banyak  memberikan  informasi, sehingga diperlukan data-data spektra yang lain seperti terlihat pada gambar 1.
Gambar 1. Panjang gelombang maksimum
Berdasarkan    hasil    analisis    kandungan kafein  pada  kopi  dapat  ditunjukkan  dalam Tabel  1  yakni  diperoleh    kadar    kafein rata-rata    pada  buah  kopi    mentah    adalah 838.939±1.6103.
Tabel  1.Hasil  Analisis  Kuantitatif  ekstrak  kloroform  buah  kopi  mentah  metode spektrofotometri UV-Vis
No Berat (mg) Volume pelarutan (mL) FP absorbansi Kadar regresi (mg/mL) Kadar sebenarnya (mg/mg) SD 1 0.1007 10 100 0.624 0.084 837.914 2 0.1009 10 100 0.625 0.085 838.107 1.6103 3 0.1008 10 100 0.626 0.085 840.795 Kadar rata rata ekstrak kloroform buah kopi mentah 838.939
y = 5,345x + 0,173 R² = 0,9973 0,000 0,500 1,000 0,00 0,05 0,10 0,15 ab sor b an si konsentrasi Kadar kafein pada ekstrak kloroform  buah  kopi  mentah  lebih  tinggi daripada  standar  FDA  (Food  Drug Administration)  yang  diacu  dalam  Liska (2004),  dosis  kafein  yang  diizinkan  100- 200mg/hari,  sedangkan  menurut  SNI  01- 7152-2006  batas  maksimum  kafein  dalam makanan dan minuman adalah 150 mg/hari dan 50 mg/sajian. Hal  ini disebabkan  oleh adanya  kandungan  senyawa    lain  berupa senyawa  organik  yang  mempengaruhi metabolit  sekunder.  Kafein    pada    kopi terdapat    baik    sebagai  senyawa    bebas maupun  dalam  bentuk  kombinasi dengan klorogenat sebagai senyawa kalium kafein klorogenat.  Kafein  dalam  basa bebas akan terikat oleh kloroform dan semakin banyak ( Williamson,  1987)  .  Hasil  pengujian kuantitatif  kafein  memberikan  persamaan Y=5.345x+0.173,  adapun  gambar  dapat dilihat pada gambar 2 di bawah ini:
Gambar 2. Kurva Baku Kafein
Hasil  perhitungan  menunjukkan bahwa  persamaan  memberikan  nilai  r yaitu  0.9973.  Dari  nilai  r  tersebut  dapat dikatakan  bahwa  kurva  kalibrasi  senyawa aktif cukup linear.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  ini,  dapat disimpulkan bahwa kandungan kafein pada ekstrak  kloroform  buah  kopi  mentah merapi yaitu 838.939±1.6103.

## DAFTAR PUSTAKA
Bicho,  N.C.,  Lidon,  F.C.,  Ramalho,  J.C.,
Leitao, A.E., 2013. Quality assessment of Arabica and Robusta green  and  roasted  coffees  –  a review.  Emir.  J.  Food  Agric.  25, 945–950
Burnham,  T.A.  2001.  Drug  Fact  and Comparison.  St  Louis  :  A  Wolters Kluwers Company
Clifford,    M.    N.,    1999.    Chlorogenic acids    and    other    cinnamates    - nature,    occurrence    and    dietary burden.  J.  Sci.  Food  Agr.  79,  362-
372
Coffefag.
2001. Frequently Asked
Questions  about  Caffeine.  Diakses
5 Mei  2016
Farmakologi  UI.  2002.  Farmakologi  dan Terapi Edisi 4. Gaya Baru : Jakarta Harborne,  J.B.,  1973,  Phytochemical
Methods, terbitan ke-2, diterjemahkan oleh Kosasih
Padmawinata  dan  Iwang  Sudiro, ITB, Bandung.
Hesse M. 2002. Alkaloids: Nature’s Curse or Blessing. Zurich: Verlag Helvetica Chimica Acta Liska, K. 2004. Drugs and The Body with Implication for Society. Edisi ke-7. New 1Jersey: Pearson.
Williamson, K, L. 1987. Microscale Organic Experiment. Canada, DC Heath and Compan.