## KATA PENGANTAR
Dengan penuh rasa syukur kehadirat Allah SWT, Media Farmasi  Vol. 11 No. 1 Tahun 2014 telah terbit.
Pada  edisi  ini,  Jurnal  Media  Farmasi  menyajikan  11  artikel  yang  kesemuanya merupakan hasil penelitian. Sembilan artikel dari luar Fakultas Farmasi UAD membahas, (1) Uji aktivitas  penangkapan radikal (2) Perbandingan penggunaan sumber  asam  terhadap sifat fisik  granul  effervescent  (3)  Optimasi  formula  tablet floating nifedipin  (4)  Formulasi  gel menggunakan  serbuk  daging  ikan  haruan  (C hanna  striatus )  (5)  Formulasi  dan  aktivitas antibakteri lotion minyak atsiri buah adas (F oeniculum vulgare Mill) (6) Efek hepatoprotektor fraksi  etil  asetat  daun  sangitan  (S ambucus  canadensis  l. )  (7)  Kombinasi    ekstrak    etanol rimpang  Z ingiber  officinale Roscoe  dengan  Zn  (8)  Konseling  farmasis  merubah  perilaku pasien  hipertensi  rawat  jalan  (9)  Evaluasi  penggunaan  antibiotika  dengan  metode  DDD ( defined  daily  dose ).  Dua  artikel  dari  peneliti  Fakultas  Farmasi    UAD    yang  membahas tentang : (1) Evaluasi toksisitas hematologi akibat penggunaan 6-merkaptopurin (2) Evaluasi penggunaan antibiotika pada pasien pediatri leukimia limfoblastik akut.
Harapan  kami,  jurnal  ini  dapat  bermanfaat  bagi  pembaca  atau  menjadi  referensi peneliti lain. Kritik dan saran membangun, senantiasa kami terima dengan tangan terbuka.
AKTIVITAS PENANGKAPAN RADIKAL DPPH OLEH FRAKSI N-HEKSAN DAN FRAKSI ETIL ASETAT DAUN KELOR ( Moringa oleifera , Lamk)
THE RADICAL SCAVENGING ACTIVITY OF DPPH BY HEXANE FRACTION AND ETHYL ACETATE FRACTION ON
KELOR LEAVES( Moringa oleifera , Lamk )
Beta Ria Erika, Marita Dellima, Rini Sulistyawati
Akademi Analis Farmasi Al Islam Yogyakarta
Emai; lppmakafarmayk@yahoo.com beeta_reea@yahoo.com

## ABSTRAK
Radikal  bebas  dikenal  sebagai  mediator  berbagai  penyakit.  Beberapa  kandungan kimia  tumbuhan  seperti  senyawa  fenolik  dan  flavonoid  telah  dilaporkan berkorelasi  terhadap  aktivitas  penangkapan  radikal.  Salah  satu  tanaman  yang berpotensi  sebagai  penangkap  radikal  adalah  kelor  ( Moringa  oleifera Lamk). Penelitian ini bertujuan  untuk  mengevaluasi  aktivitas penangkapan  radikal  bebas 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil  (DPPH)  fraksi    n-heksan  (fraksi  non  polar)  dan  fraksi etil  asetat (fraksi  polar).Serbuk daun kelor dimaserasi  menggunakan etanol  80%, kemudian  pelarut  diuapkan.  Ekstrak  etanolik  daun  kelor  selanjutnya  difraksinasi menggunakan beberapa pelarut dengan polaritas yang berbeda. Setiap fraksi yang dihasilkan  kemudian  diuji  aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH  menggunakan metode  spektrofotometri  tampak  pada  panjang  gelombang  517  nm.Kemampuan fraksi-fraksi  daun  kelor  dalam  menangkap  radikal  DPPH  diamati  menggunakan parameter  IC 50 .  Fraksi  etil  asetat  mempunyai  IC 50 kecil  (6,59  μg/mL)  dibanding fraksi  n-heksan  (77,80μg/mL).Hal  ini  menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat mempunyai  kemampuan  menangkap  radikal  bebas  DPPH  yang  lebih  besar diibandinggkan fraksi heksana.
Kata kunci : daun kelor, penangkapan radikal bebas, DPPH.

## ABSTRACT
Free  radicals  are  known  as  mediator  of  various  diseases.  Some  phytochemical components such as phenolic and flavonoid have been reported to correlate with free  radical  scavenging  activity  toward  2,2’-diphenyl-1-picrilhydrazyl  (DPPH). One  of  potential  plant  to  be  explored  as  radical  scavenger  is  Moringa  oleifera Lamk.  This  research  is  aimed  to  evaluate  the  radical  scavenging  activity  of hexane  fraction  (non  polar  fraction)  and  ethyl  acetate  fraction  (polar  fraction) toward DPPH radical. The dried powder of M.oleifera leave was macerated with
Aktivitas Penangkapan Radikal Beta Ria, dkk 2
80% ethanol, followed by solvent evaporation. Ethanolic extract from M. oleifera leaves have been fractionated using some solvents with different polarities. Each fraction  was  tested  for  DPPH  free  radical  scavenging  activity  by  using spectrophotometric visible at 517 nm. The ability of M. oleifera leaves fraction in scavengingDPPH  free  radical  was  evaluated  by  determining  IC 50 value . Ethyl acetate  fraction  has  smallIC 50 (6,59  μg/mL)  compared  tothe  hexane  factions (IC50  =  77,80  μg/mL).  iIt  can  be  concluded  that  ethyl  acetate  fraction  exhibits more radical scavenger toward DPPH radical than that of hexane faction.

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  merupakan  mediator beberapa  penyakit  (Li,  dkk.,  2011). Semakin  banyaknya  radikal  bebas  di alam menjadi alasan semakin
banyaknya  penelitian  terkait  pencarian senyawa yang berfungsi sebagai penangkap  radikal  bebas  atau  sering disebut sebagai antioksidan. Penggunaan  antioksidan  dimaksudkan untuk  menangkap  radikal  bebas  ini. Salah  satu  contoh  radikal  bebas  adalah 2,2-difenil-1pikrilhidrazil (DPPH). DPPH sering digunakan sebagai radikal penangkapan radikal bebas seperti yang dilakukan oleh Rohman dkk. (2006).
Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi sebagai penangkap radikal bebas adalah kelor ( Moringa oleifera , Lamk). Tanaman  kelor  (Gambar  1)  banyak terdapat  di  daerah  Bantul  Yogyakarta, namun  pemanfaatan  tanaman  ini  di daerah  tersebut  belum  optimal.  Bagian tanaman  kelor  yang  pernah  diteliti aktivitasnya sebagai antioksidan adalah biji) dan daun (Siddhuraju  dan  Becker, 2003).  Siddhuraju  dan  Becker  (2003) melakukan  uji  aktivitas  penangkapan radikal 2,2-difenil-1pikrilhidrazil (DPPH) terhadap daun
kelor
menggunakan  beberapa  pelarut  untuk ekstraksi seperti air, etanol dan metanol dan  didapatkan  hasil  bahwa  pelarut yang  efektif  untuk  ekstraksi  adalah metanol  dan  etanol  namun  sejauh peneliti ketahui pengujian penangkapan radikal
2,2-difenil-1-pikrilhidrazil
(DPPH)  terhadap  fraksi  n-heksan  daun kelor  (mewakili  fraksi  non  polar)  dan fraksi  etil  asetat  daun  kelor  (mewakili fraksi polar) belum pernah dilakukan.
Berdasarkan  hal  tersebut,  penelitian ini bertujuan untuk melihat perbandingan daya penangkapan radikal 2,2-difenil-1pikrilhidrazil (DPPH)  fraksi  n-heksan  dan  fraksi  etil asetat daun kelor.

## METODE PENELITIAN
Alat  utama  yang  digunakan dalam penelitian ini adalah spektrofotometer UV-Vis Genesys (Jepang).Bahan  utama  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  daun  kelor yang  tumbuh  di  daerah  Samas,  Bantul, Yogyakarta,  dan  telah  dideterminasi kebenarannya di laboratorium
farmakognosi,  bagian  biologi  farmasi,
Keywords : M.oleifera leaves,  free radical scavenging, DPPH.
bebas untuk mengamati proses
Fakultas  Farmasi,  Universitas  Gadjah
Mada.Radikal  bebas  yang  digunakan
1pikrilhidrazil (DPPH) (Sigma.co, Alldrich, USA).
1. Alur Kerja
a.  Pembuatan  ekstrak  etanolik  daun kelor. Serbuk  daun  kelor  dimaserasi
diperoleh  sari/  etanol.  Sari  etanol ini  kemudian  diuapkan  pelarutnya menggunakan vaccumrotary evaporator dan  didapatkan  ekstrak etanoli daun kelor.
b.  Pembuatan      fraksi    n-heksan    dan fraksi etil asetat daun kelor. Ekstrak etanolik daun kelor difraksinasi secara cair-cair menggunakan  n-heksan  dan  etil asetat.  Proses  ini  berlangsung  3 kali,  dan  didapatkan  fraksi  n- heksan  daun  kelor  dan  fraksi  etil asetat daun kelor.
c.  Uji  aktivitas  penangkapan  radikal
DPPH. Uji aktivitas antioksidan ditentukan  dengan  metode  DPPH sesuai dengan Kikuzaki dkk (2003) dengan cara berikut:
Sebanyak  50  μL  fraksi  etil  asetat
dan fraksi n-heksan dengan
berbagai  konsentrasi  (konsentrasi yang  memberikan  nilai  IC 50 yakni konsentrasi fraksi yang memberikan persen aktivitas antioksidan senilai 50 % dibanding kontrol  melalui  suatu  persamaan garis  regresi  linier)  ditambah  1,0 mL  DPPH  0,4  mM  dan  3,950  mL
metanol. Campuran kemudian
divorteks  dan  dibiarkan  selama  30
pada  panjang  gelombang  517  nm terhadap  blanko  (blanko:  50  μL
ekstrak dan 4,950 mL metanol).
d.  Deteksi senyawa aktif
Deteksisenyawa  aktif  dilakukan dengan melihat profil

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Menginaktivasi atau menangkap radikal  merupakan  salah  satu  cara untuk  menghambat  reaktivitas  radikal bebas (Winarsi, 2007). Berdasarkan hal tersebut,  suatu  metode  uji  untuk menentukan aktivitas antioksidan dapat dilihat  dari  profil  penangkapan  radikal DPPH. DPPH merupakan suatu radikal yang  stabil  dan  dapat  larut  dalam pelarut  polar  seperti  metanol  (Rohman dan  Riyanto,  2005).  Parameter  yang digunakan  dalam  pengujian  ini  adalah Inhibitory  Concentration (IC 50 ),  yaitu konsentrasi senyawa uji yang dibutuhkan  untuk  mengurangi  radikal bebas  DPPH  sebesar  50%  (Zou,  dkk., 2004).  Nilai  IC 50 diperoleh  dari  regresi linier  yang  menyatakan  hubungan antara  konsentrasi  senyawa  uji  dengan persen  penangkapan  radikal  bebas DPPH.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 suatu sampel  uji  maka  sampel  uji  tersebut memiliki aktivitas penangkapan radikal bebas DPPH yang semakin kuat.
Fraksi n-heksan dan fraksi etil asetat yang  diperoleh  digunakan  sebagai sampel utama dalam pengujian aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH. Gambar  2  menunjukkan  persamaan regresi linier untuk penangkapan radikal  DPPH  oleh  fraksi  etil  asetat, dengan  y  =  0,823x  +  44,58.  Dari
dalam  penelitian  ini  adalah  2,2-difenil-
menit, lalu diukur  absorbansinya
menggunakan  etanol  80% sehingga kromatogram lapis tipis.
Aktivitas Penangkapan Radikal Beta Ria, dkk 4
persamaan ini kemudian dapat dihitung IC 50 fraksi  etil  asetat  sebesar  6,59 μg/mL.
Gambar 2 . Persamaan regresi linier penangkapan radikal DPPH oleh fraksi etil asetat.
Gambar 3 . Persamaan regresi linier penangkapan radikal DPPH oleh fraksi n-heksan
Media Farmasi, Vol. 11 No.1Maret 2014 :1-6 Gambar 3 menunjukkan persamaan regresilinier untuk penangkapan  radikal  DPPH  oleh fraksi  n-heksan,  yakni  y  =  0,241x + 31,25.  Dari  persamaan  ini  kemudian dapat  dihitung  IC 50 fraksi  etil  asetat sebesar 77,80 μg/mL.
Berdasarkan  parameter  IC 50 ,  fraksi etil  asetat  memberikan  nilai  IC 50 yanglebih  kecil  dibandingkan  dengan nilai  IC 50 fraksi  n-heksan,  sehingga dapat  dikatakan  bahwa  fraksi  etil asetat  (fraksi  lebih  polar)  mempunyai aktivitas  penangkapan  radikal  bebas DPPH  lebih  besar  dibandingkan dengan  fraksi  n-heksan  (fraksi  lebih
non  polar).  Pada  fraksi  non  polar (fraksin heksan) kemungkinan senyawa  yang  dominan  tersari  adalah klorofil,  sedangkan  pada  fraksi  polar (fraksi etil asetat) kemungkinan senyawa  yang  dominan  tersari  adalah kelompok  senyawa  flavonoid.  Hal  ini juga dapatdilihat dari profil kromatogram lapis tipis  senyawa  aktif yang terkandung dalam daun kelor,yang menunjukkan bahwa fraksi teraktif  merupakan  suatu  flavonoid, terlihat  dari  bercak  yang  dihasilkan memberikan warna kuning kecoklatan setelah  disemprot  dengan  reagen sitroborat.
N N* DPPH Radikal + O* O OH HO O OH OH DPPH Non Radikal NO 2 O 2 N O 2 N OH O OH HO O OH OH + Kuersetin N NH NO 2 O 2 N O 2 N Reaksi antara kuersetin (suatu f lvonoid) dengan DPPH
Gambar 4 . Reaksi antara flvonoid dengan DPPH
tersebut  (Heim,  dkk.,  2002).  Gambar 4 menunjukkan reaksi antara KESIMPULAN 50 UCAPAN TERIMA KASIH
Kemampuan  senyawa   flavonoid dalam menangkap radikal bebas dapat dikaitkan dengan adanya gugus hidroksi  fenolik  yang  dapat  sebagai donor  atom  hidrogen   pada  radikal
aktivitas penangkapan radikal bebasnya  lebih  besar  dibandingkan fraksi  yang  non  polar  (fraksi  n- heksan) (77,80 μg/mL).
asetat)  memberikan  nilai  IC yang Fraksi  yang  lebih  polar  (fraksi  etil kuersetin  (suatu  senyawa  flavonoid)
dengan DPPH.
lebih kecil (6,59  μg/mL)  atau Terimakasih  kepada  DIKTI   yang telah      membiayai      penelitian    ini melalui     Hibah     Penelitian     Dosen
Aktivitas Penangkapan Radikal
13.

## DAFTAR PUSTAKA
Heim,K.E.,Tagliaferro,A.R.,Bobilya, D.J., 2002, Flavonoid Antioxidants:Chemistry,Me tabolismand Structureactivity Relationships, Journal of Nutritional Biochemistry, 13 :572-584.
Kikuzaki,  H.,  Hisamoto,  M.,  Hirose, K., Akiyama, K., Taniguchi, H., 2002, Antioxidants  properties  of ferulic  acid  and  its  related compounds, J.  Agric.  Food Chem., 50 , 2161-2168.
Li, P., Huo, L., W., Lu, R., Deng, C., Liu,  L., Deng, Y., Guo,  N., Lu,  C.,  He,C.,  2011,  Free Radical Scavenging Capacity, Antioxidant Activity and Phenolic Content of Pouzolzia zeylanica, College of Pharmacy,  J.  Serb.  Chem. Soc., 76 (5) 709-717. Jack) secara In Vitro,
Majalah  Farmasi  Indonesia,
16 (3)136-140.
Rohman,  A.,Riyanto,  S.,  Utari,  D., 2006,Aktivitasantioksidan,
kandunganfenolik  total  dan kandungan  flavonoid  total ekstrak  etil  asetat  buah Mengkudu serta fraksi- fraksinya, MajalahFarmasi Indonesia , 17 (3)1-5.
Siddhuraju,  P.,  Becker,  K.,  2003,
Antioxidant  Properties  of Various Solvent Extracts of Total Phenolic Constituents from Three Different Agroclimatic  Origins  of Drumstick  Tree  ( Moringa oleifera Lam.) Leaves, J.Agric  Food  Chem, 51 ,
2144-2155.
Winarsi, H., 2007, Antioksidan Alami dan Radikal Bebas , Kanisius, Yogyakarta. Zou,  Y.,  Lu,  Y.,  Wei,  D.,2004, Antioxidant  Activity  of  a Flavonoid-RichExtract of . Pemula 2013, nomor:1788.1/K5/KL/2 ( Murraya paniculata (L)
Hypericum  perforatum L.
in vitro, J.Agric.Food
Chem, 52 :5032-5029 Rohman,  A.,  dan  Riyanto,  S.,  2005, . Daya  Antioksidan  Ekstrak Etanol Daun Kemuning