## Pendahuluan
Minuman es kelapa muda adalah jenis minuman tradisional yang dibuat dari air dan daging kelapa muda. Minuman kelapa muda memiliki  kadar  air  dan  kalium  yang  cukup tinggi.  Kadar  air  pada  kelapa  muda  sekitar 80%  dan  kalium  20%  (1).  Kadar  air  dan kalium  yang  tinggi  ini  merupakan  media yang baik untuk pertumbuhan mikroorganisme  karena  air  kelapa  muda mengandung nutrisi lengkap untuk pertumbuhan  bakteri,  terutama  asam  laktat sehingga  menyebabkan  air  kelapa  muda tidak tahan lama jika dibiarkan di suhu ruang (2).
Minuman kelapa muda dapat mengalami  kerusakan  secara  mikrobiologi melalui berbagai macam faktor. Faktor-faktor tersebut  antara  lain  kontaminasi  bahan- bahan  dasar  pembuatan  minuman  oleh
bakteri,  alat-alat  pembuatan  dan  faktor lingkungan penjualan, menggunakan peralatan  yang  bersih  dan  memperhatikan kebersihan  diri  dan  lingkungan  terutama dalam proses pembuatan minuman (3).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Irianty dkk  (4)  bahwa  dari  hasil  pemeriksaan  uji MPN  terdapat E.  coli pada  es  kelapa  muda dan  di  temukan  peralatan  yang  digunakan oleh  pedagang  tidak  di  cuci  dengan  air mengalir  hanya  saja  mereka  menggunakan air  yang  di  ada  di  dalam  ember  untuk mencuci  semua  peralatan.  Berdasarkan Departemen  Kesehatan  RI  (5)  bahwa ternyata minuman juga dapat terkontaminasi cemaran  biologi  salah  satunya  disebabkan oleh bakteri Escherichia coli . Infeksi Escherichia coli biasanya melalui  konsumsi  minuman  yang  tercemar, seperti  penggunaan  air  yang  tidak  diolah

## Identifikasi Eschericia coli pada Minuman Es Kelapa Muda dengan Metode Most Probable Number (MPN) di Kecamatan Banjarmasin Utara
Identification of Escherichia coli in Young Coconut Ice Drinks using the Most Probable Number (MPN) Method in North Banjarmasin Subdistrict
Hajrah Hidriya *1 , Siti Saidah 1 , Faridah Ariyani 2
1 Politeknik Unggulan Kalimantan Jl. Pangeran Hidayatullah RT. 14 Komplek Upik Futsal Benua Anyar Banjarmasin
2 Puskesmas Cempaka Jl. Cempaka Besar No.1, Kertak Baru Ilir, Banjarmasin
3 Rumah Sakit Umum Daerah Dr. H. Moch Ansari Saleh Jl. Hasan Basri No.1, Banjarmasin * Korespondensi: hajrahhidriya@gmail.com

## Abstract
Young coconut ice drink is a type of traditional drink containing good nutrition for the growth of microorganisms such as bacteria. One of the causes of young coconut ice contamination is  Escherichia  coli.  Escherichia  coli  is  a  gram-negative  bacterium  and  is  a  factor  causing disease,  especially  diarrhea.  This  study  aimed  to  determine  the  identification  of  young coconut ice drink with the most probable number (MPN) method. The examination used the MPN  method  in  three  stages.  The  initial  test  used  lactose  broth  as  a  fertilizer.  If  the  result was positive, it continued to EC Broth media as a confirmation test.  If the result in EC Broth media  was  positive,  it  continued  to  EMB  media  for  the  perfection  test.  The  results  of  the study  using  nine  samples  of  young  coconut  ice  showed  that  six  samples  were  positively contaminated by E. Coli (67%) and three samples were not contaminated by E. Coli (33%). Based on the results of the study, it could be concluded that young coconut ice drinks sold in the North Banjarmasin Subdistrict were mostly contaminated with E. Coli bacteria that were declared  not  to  meet  the  standard  requirements  for  food/beverage  sales  according  to  the Food and Drug Supervisory Agency (BPOM ISBN 978-602-3665-11-26) in 2012.
Keywords: Young coconut ice drink, Escherichia coli, MPN
terlebih dahulu. Gejala-gejala infeksi Escherichia coli yaitu kram pada perut, diare, kadang  bisa  diare  berdarah,  demam,  dan muntah-muntah.  Penderita  bisa  sembuh setelah  10  hari  namum  terkadang  bisa mengancam hidup manusia. Selain menyebabkan  diare, Escherichia  coli juga bisa  menginfeksi  saluran  urine,  saluran pernafasan, dan pneumonia (6).
Di  Kalimantan  Selatan,  masih  banyak ditemui  kasus  diare.  Sebagai  perbandingan, kasus  diare  pada  tahun  2008  sebanyak 54.316 kasus, 2009 sebanyak 72.020 kasus, tahun  2010  sebanyak  52.908  kasus,  serta tahun  2015  sebanyak  66.765  kasus  diare (7).
Saat ini banyak sekali para penjual es kelapa  muda  di  pinggir  jalan  wilayah Kecamatan Banjarmasin Utara, yang kurang memperhatikan  sanitasi  serta  hygine  dalam cara penyajian es kelapa muda. Air kelapa di tampung  dalam  satu  wadah  yang  tidak tertutup rapat sehingga hal ini tidak menutup kemungkinan  bahwa  air  kelapa  muda tersebut terkontaminasi bakteri.
Pada  peraturan  Menteri  Kesehatan Republik  Indonesia  (8)  tentang  angka persyaratan  Kualitas  Air  Minum  yaitu  0  per 100  ml  sampel  artinya  di  dalam  minuman tidak boleh terdapat bakteri coliform maupun Escherichia  coli sementara  pada  Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan  ( BPOM )  (9) untuk Escherichia  coli yaitu  <  3/ml  yang berarti  kadar  mikroba Escherichia  coli tidak boleh > 3/ml.  Ketika bakteri Escherichia coli mencemari  ke  dalam  minuman  itu  dapat menyebabkan  penyakit  diare.  Minuman  es kelapa  muda  yang  terkontaminasi  bakteri Escherichia  coli akan  membawa  penyakit yang  mengakibatkan  timbulnya  penyakit diare. Sebagian besar orang yang meninggal akibat  diare  karena  mangalami  dehidrasi berat dan kehilangan cairan (6).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh  Azizah  (10),  membuktikan  bahwa  12 (92%)  sampel  positif  mengandung  bakteri coliform dan 1 (8%) sampel tidak mengandung bakteri coliform dari 13 sampel yang diteliti, dan es kelapa muda yang di jual pada  Kecamatan  Banjarmasin  Tengah  tidak memenuhi syarat standar sesuai PERMENKES RI Nomor 492 tahun 2010.
Metode Penelitian Penelitian ini merupakan jenis penelitian deskriptif. Sampel dalam penelitian  ini  es  kelapa  muda  yang  dijual  di wilayah  Kecamatan  Banjarmasin  Utara. Teknik pengambilan sampel secara
purposive sampling .
Media pertumbuhan  bakteri yang digunakan pada penelitian ini yaitu menggunakan 1) lactose broth , 2) EC broth , dan  3)  EMB.  Penelitian  menggunakan metode Most  Probable  Number (MPN) dengan  uji  awal  ( presumptive  test), uji penegasan  ( confirmation  test) dan  uji kelengkapan ( complete test ).

## Hasil
Hasil  perhitungan  yang  didapatkan dengan menggunakan lactose broth pada uji awal  ( presumptive  test), dapat  dilihat  pada tabel berikut.
Tabel  1.  Hasil  Penanaman  di  Media Lactose Broth Kode Sampel Ragam 5 1 1 A + + + B + + + C + + + D + + + E + + + F + + + G + + + H + + + I + + +
Berdasarkan  tabel  1  terlihat  bahwa untuk mengetahui ada atau tidaknya pertumbuhan  bakteri  dengan  penanaman pada  media  Lactose  broth  ragam  511 ditemukan semuanya positif adanya kekeruhan dan gelembung gas.
Hasil  perhitungan  yang  didapatkan dengan  menggunakan  EC broth pada  uji penegasan  ( confirmation  test ),  dapat  dilihat pada tabel berikut.
Tabel 2. Hasil Penanaman di Media EC Broth Sampel Ragam Indeks MPN per 100 ml 5 1 1 A 3 1 1 16 B 3 1 0 12 C 2 1 1 10
D 1 1 1 7 E 5 1 1 ≥979 F 5 1 1 ≥979 G 3 1 1 16 H 2 1 1 10 I
5 1 1 ≥979
Berdasarkan  tabel  2  terlihat  bahwa ditemukan  adanya kekeruhan  dan  gas  pada semua  tabung  yang  menandakan    bahwa positif E.  coli, dengan  jumlah  bakteri  yang dibandingkan  dengan  tabel  MPN  511 menurut Indeks SNI.
Hasil  identifikasi  yang  didapatkan dengan menggunakan EMB pada uji kelengkapan ( complete test ), untuk memastikan  adanya E.  coli, maka  dari semua tabung yang positif E. coli ditanamkan  ke  media  EMB  dan  diinkubasi selama  24  jam  dengan  suhu  37 ℃ .  Hal  ini dapat dilihat pada tabel berikut.
Tabel 3. Hasil E. Coli pada Media EMB Agar
Sampel Ragam   Pertumbuhan Koloni Keterangan 5  1  1 A 3  1  1 Pink Negatif B 3  1  0 Pink Negatif C 2  1  1 Pink Negatif D 1  1  1 Hijau metalik Positif E 5  1  1 Hijau metalik Positif F 5  1  1 Hijau metalik Positif G 3  1  1 Hijau metalik Positif H 2  1  1 Hijau metalik Positif I 5  1  1 Hijau metalik Positif
Berdasarkan  hasil  di  atas,  didapatkan bahwa  ciri  dari  pertumbuhan  koloni  terdapat 6 sampel positif E. Coli pada kode sampel D, E,  F,  G,  H  dan  I  hal  ini  ditunjukkan  dengan adanya  koloni  berwarna  hijau  metalik  pada media  EMB,  sedangkan  3  sampel  yang  lain tidak menunjukkan ciri dari bakteri E. Coli . Berdasarkan  9  sampel  yang  diperiksa maka  didapatkan  hasil  persentase  bakteri pada  6  (67%)  positif  bakteri E.  Coli dan  3 (33%) negatif bakteri E. Coli . Hasil persentase dapat dilihat pada Gambar 1.

## Gambar 1 Persentase Bakteri terhadap Minuman Es Kelapa Muda
Pada pertumbuhan koloni di EMB agar didapatkan  hasil  dari  9  sampel  minuman  es kelapa  muda  tidak  memenuhi  syarat  Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM ISBN 978-602-3665-11-2)  sesuai  tahun  2012. Hasil  kualitas  minuman  es  kelapa  muda dapat dilihat pada gambar di bawah ini.

## Gambar 2 Kualitas Minuman Es Kelapa Muda

## Pembahasan
Minuman es kelapa muda adalah jenis minuman tradisional yang dibuat dari air dan daging kelapa muda. Minuman kelapa muda memiliki  kadar  air  dan  kalium  yang  cukup tinggi.  Kadar  air  pada  kelapa  muda  sekitar 80%  dan  kalium  20%  (1).  Kadar  air  dan kalium  yang  tinggi  ini  merupakan  media yang baik untuk pertumbuhan mikroorganisme  karena  air  kelapa  muda mengandung nutrisi lengkap untuk pertumbuhan  bakteri,  terutama  asam  laktat sehingga  menyebabkan  air  kelapa  muda tidak tahan lama jika dibiarkan di suhu ruang (2).
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan  dari  9  sampel  yang  digunakan pada  uji  penduga  menggunakan  media
67% 33% Positif Negatif 100%
lactose  broth didapatkan  9  sampel  positif. Sampel  positif  diamati  adanya  kekeruhan dan  gelembung  gas,  dari  hasil  tersebut dibuktikan  dari  kekeruhan  yang  terbentuk dari dalam tabung dan gelembung gas pada tabung durham.
Hasil  positif  pada  uji  penduga  akan dilanjutkan  ke  uji  penegasan  menggunakan media  EC broth ( Escherichia  coli  broth )  dan didapatkan  hasil  positif  bakteri Escherichia coli yang  dapat  dilihat  adanya  kekeruhan dan  gelembung  gas  pada  tabung  durham. Berdasarkan  hasil  positif  di  uji  penegasan dilanjutkan  ke  uji  kesempurnaan  di  media EMB  agar  untuk  mengetahui  pertumbuhan koloni khas bakteri E. coli yang terbentuknya koloni berwarna hitam serta hijau metalik.
Saridewi  (11),  mengatakan  bahwa  air terbentuknya  gas  pada  uji  penduga  dengan media lactose  broth yang  menunjukkan adanya  kehadiran  bakteri  coliform,  serta terbentuknya  gas  pada  uji  penegasan dengan  media  EC broth untuk  diferensiasi coliform dan uji konfirmasi E. coli .
Hasil  yang  diperoleh  pada  media  EC broth di  9  sampel  positif  dengan  persentase (100%) memiliki jumlah bakteri E. Coli ≥3 ml Sampel  yang  mengandung  bakteri E.  Coli tertinggi  berdasarkan  tabel  indeks  MPN adalah sampel E, F dan I yang menunjukkan ≥979/100 ml sampel. Sampel yang mengandung bakteri E. coli terendah adalah sampel  D,  H  yang  menunjukkan  10/100  ml sampel,  namun  masih  tetap  melebihi  batas ambang  maksimum  dari  cemaran E.  coli pada minuman es kelapa muda.
Sampel  yang  positif  akan  dilihat  dari hasil  akhir  di  uji  kesempurnaan  di  media EMB  untuk  melihat  pertumbuhan  bakteri E. Coli , dimana hasil positif tersebut baru dapat dinyatakan  positif  bila  pada  pertumbuhan  di media EMB  agar koloni berwarna hitam dan hijau  metalik.  Didapatkan  dari  9  sampel,  6 (67%)  bakteri E.  coli yang  tumbuh  dan dinyatakan  positif  dan  3  (33%)  sampel negatif bakteri E. coli .  Pada pertumbuhan di media  EMB  agar  terdapat  koloni  pink  dan berlendir  tidak  berwarna  hijau  metalik  pada koloni  yang  tumbuh,  menandakan  tidak  ada pertumbuhan E.  coli dan  yang  terdapat pertumbuhan  koloni  hitam  berwarna  hijau metalik menandakan positif E. coli.
Juwita  (12)  mengatakan  bahwa  untuk memastikan  bahwa  adanya  keberadaan E. coli dalam suatu minuman yaitu
menggunakan EMB agar. EMB agar mengandung laktosa, sukrosa, pepton, eosin Y,  dan  methylene  blue.  EMB  agar  disebut sebagai  media  selektif  karena  kandungan methylene blue pada media bisa menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram positif.
Berdasarkan nilai MPN yang
dibandingkan dengan BPOM akan menunjukkan  bahwa  minuman  es  kelapa muda yang dijual di Kecamatan Banjarmasin Utara  mengandung  cemaran  yang  melebihi dari  ketentuan  Badan  Pengawas  Obat  dan Makanan  (BPOM  ISBN  978-602-3665-11-2) tahun 2012.
Minuman  es  kelapa  muda  yang  dijual di Kecamatan Banjarmasin Utara diharapkan memiliki  hasil  yang  baik.  Namun,  dari penelitian  yang  dilakukan  kualitas  minuman es  kelapa  muda  tidak  memenuhi  syarat. Hasil  yang  diperoleh  berjumlah  6  sampel positif bakteri E. coli dan 3 sampel negatif E. coli .  Sampel  yang  mengandung  bakteri E. coli paling tertinggi terdapat di sampel E, F, I yang  menunjukkan  979/100  ml  sampel, penyebab  tingginya  cemaran E.  coli pada minuman  es  kelapa  bisa  disebabkan  oleh hyigine,  sanitasi  penjual  dari  tempat  serta kebersihan  penjual  yang  tidak  mencuci tangan terlebih dahulu menyebabkan terjadinya faktor kontaminasi pada minuman es kelapa tersebut.
Penelitian  ini  sejalan  dengan  Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan  (9)  yang menyatakan bahwa angka kualitas minuman pada  es  kelapa  muda  <3/ml.  Hal  ini  berati dalam makanan tidak boleh terdapat Escherichia  coli .  Ketika  bakteri Escherichia coli mencemari  makanan  dan  minuman, dapat  menyebabkan  diare.  Berdasarkan hasil  tersebut,  hygine  dan  sanitasi  yang kurang baik dari penjual minuman es kelapa muda  dapat  mempengaruhi  kualitas  dari minuman  es  kelapa  muda  yang  tidak memenuhi syarat BPOM tahun 2012.

## Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa  9 sampel  minuman  es  kelapa  muda  tidak memenuhi  syarat  Badan  Pengawas  Obat dan  Makanan  (BPOM  ISBN  978-602-3665- 11-2) tahun 2012.

## Daftar Pustaka
1.  Hamid,  M. Kandungan  &  Manfaat  Air Kelapa Muda . Jakarta: Penebar
Swadaya; 2014.
2.  Istanti,  M.I.,  Sayuti,  I.,  Wulandari,  S.  Uji Bakteri  Escherichia  coli  pada  Minuman Es  Kelapa  Muda  yang  Dijual  di  Jalan Suka  Karya  Kecamatan  Tampan  Kota Pekanbaru  sebagai  Rancangan  Modul pada  Konsep  Eubacteria  di  SMA  Kelas X. Jurnal Online Mahasiswa . 6: 2019.
3.  Prayekti, E. Analisis Mikrobiologi Jajanan Minuman  di Sekitar Sekolah Dasar  pada Wilayah Jemurwonosari, Surabaya.
Jurnal SainHealth 1(2): 41 – 45; 2017.
4.  Irianti,  H.,  Mahmudah.,  Agustina,  N. Analisis  Hygiene  Sanitasi  Pedagang  Es Kelapa  Muda  dengan  Pemeriksaan Kandungan Bakteri E. coli di Kecamatan Banjarbaru  Utara. Jurnal  Ilmiah  Manusia dan Kesehatan. 1(2); 2018.
5.  Depkes  RI. Tentang  Bakteri  Pencemar Makanan  dan  Penyakit  Bawaan .  Modul 4. Jakarta: Depkes RI; 2002.
6.  WHO. Escherichia  coli .  WHO:  Geneva. [online].
Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheet s/fs125/en/. 7.  Dinkes. Profil Kesehatan Provinsi Kalimantan Selatan . Banjarmasin:
Dinkes; 2015.
8.  Menteri Kesehatan RI. Peraturan Menteri Nomoe  492  Kesehatan  tentang  Angka Persyaratan Kualitas Air Minum . Jakarta:
Menteri Kesehatan RI; 2010.
9.  BPOM  RI. Pedoman  Kriteria  Cemaran pada  Pangan  Siap  Saji  dan  Pangan Industri Rumah Tangga . Jakarta:
Direktorat  Standarisasi  Pangan  Olahan BPOM RI; 2012.
10. Azizah,  N. Identifikasi  Bakteri  coliform
pada  Minuman  Es  Kelapa  Muda  di Warung Pinggiran Jalan Tarakan Kecamatan  Banjarmasin  Tengah .  Karya Tulis  Ilmiah.  Banjarmasin:  Politeknik Unggulan Kalimantan; 2018.
11. Saridewi,  I.,  Pambudi,  A.,  Ningrum,  F.Y. Analisis  Bakteri  Escherichia  Coli  pada Makanan  Siap  Saji  di  Kantin  Rumah Sakit  X  dan  Kantin  Rumah  Sakit  Y.
Bioma . 12(2): 90-103; 2016.
12. Juwita,  U.,  Haryani,  Y.,  Jose,  C.  Jumlah Bakteri Coliform dan Deteksi Escherichia coli pada  Daging  Ayam  di  Pekanbaru.
Jurnal Online Mahasiswa . 1(2); 2014.