e- Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan
Volume VII No 1 Oktober 2018 p-ISSN: 2302-3600, e-ISSN: 2597-5315

## EFEKTIVITAS PEMBERIAN BAKTERI Bacillus polymyxa MELALUI PAKAN TERHADAP IMUNITAS NON SPESIFIK UDANG VANNAMEI (Litopenaeus vannamei)
Muhammad Haris Kurniawan, Berta Putri* 1 , dan Yeni Elisdiana* 2

## ABSTRACT
The addition of Bacillus polymyxa bacteria in the feed as immunostimulant is one  of  the  efforts  of  disease  prevention  on  vannamei  shrimp  (Litopenaeus vannamei).  The  aimed  of  this  research  was  to  know  the  effectivity  of  the  use  of Bacillus polymyxa bacteria in feed towards the non-specific imunity of vannamei shrimp.  This  research  consisted  of  4  treatments  namely  feed  with  the  density  of Bacillus polymyxa bacteria 0 cell/ml as control (A), 10 4 cell/ml (B), 10 6 cell/ml (C) and 10 8 cell/ml (D) and each treatment is repeated 3 times. This research has been done  in  15  days.  Parameters  that  observed  this  research  were  total  haemocyte count (THC), phagocytosis activity, differential haemocyte count (DHC) and water quality.  The  results  showed  that  the  addition  Bacillus  polymyxa  bacteria  of  10 6 cell/ml  was able to  improve THC value 6,6x10 7 cell/ml  on the day 10. The DHC value was in the normal range which is hyalin cell was 52-89% and granular cell was 11-48%. The quality of water maintenance media during this research was in the normal range there were temperature 27,2-28,1°C, DO 3,70-3,91ppm, pH 3,70- 3,91, and salinity 30-35 ppt.

## Keywords:  Litopenaeus vannamei,  immunostimulant, Bacillus polymyxa,  non spesific imunity

## Pendahuluan
Udang  vanamei  ( Litopenaeus vannamei )  merupakan  salah  satu komoditas  unggulan  dalam  sektor perikanan budidaya yang permintaannya  terus  meningkat  dan berkembang  pesat.  Berdasarkan  data sementara statistik Direktorat Jenderal Perikanan Budidaya (DJPB)
tahun 2015, produksi udang vannamei mencapai  17,6  juta  ton.  Dalam memenuhi  permintaan  pasar  akan
1 E-mail: berta.putri@fp.unila.ac.id
2 Jurusan Perikanan dan kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung Jl. Prof. S. Brodjonegoro No.1 Gedong Meneng Bandar Lampung 35145
udang vannamei memberikan dampak yang  positif  terhadap  perkembangan sistem  budidaya  udang  putih  dari sistem  tradisional  sampai  sistem intensif. Semakin berkembang sistem budidaya  maka  padat  tebar  yang digunakan  semakin  meningkat.  Hal tersebut dapat berpotensi menyebabkan berkembangnya penyakit.
Sistem  imunitas  pada  udang masih  sangat  primitif  dan  tidak memiliki  sel  memori,  tidak  sama
halnya  dengan  hewan  vertebrata lainnya  yang  sudah  mempunyai antibodi  spesifik  dan  komplemen. Sistem  imunitas  pada  udang  tidak mempunyai  immunoglobulin  yang berperan dalam mekanisme kekebalan, udang hanya mem-punyai sistem  kekebalan  alami.  Udang mempunyai  daya  tahan  alami  yang bersifat non spesifik terhadap organisme patogen berupa pertahanan fisik  (mekanik),  kimia,  seluler  dan humoral.  Daya  tahan  alami  ini dipengaruhi  oleh  faktor  genetik  dan lingkungan, sehingga terdapat tingkatan yang berbeda-beda bergantung strain,
lingkungan pemeliharaan, spesies  maupun  famili (Ridlo & Pramesti, 2009).
Sistem  imun  udang  bergantung pada  sistem  pertahanan  non  spesifik sebagai  pertahanan  terhadap  infeksi (Lee &  Shiau,  2004).  Pertahanan pertama  terhadap  penyakit  pada udang dilakukan oleh hemosit melalui fagositosis,  enkapsulasi  dan nodule formation  (Ridlo  &  Pramesti,  2009). Hemosit  merupakan  faktor  yang sangat penting dalam sistem pertahanan  seluler  yang  bersifat  non spesifik.  Infeksi  yang  sering  terjadi adalah infeksi bakterial (Kharisma & Abdul, 2012). Selama ini, penanggulangan penyakit infeksi bakteri  pada  udang  masih  banyak menitikberatkan kepada upaya pengobatan setelah infeksi menyerang. Upaya-upaya
pencegahan yang cukup efektif untuk meningkatkan  imunitas udang  belum menjadi prioritas utama. Peningkatan pertahanan  tubuh  ter-hadap  serangan penyakit tidak hanya dapat dilakukan dengan  pemberian  pakan  dengan komposisi  nutrien  yang  seimbang, melainkan dapat juga disertai
pemberian  imunostimulan  (bakteri dan  produk  bakteri,  yeast,  kompleks karbohidrat,  faktor  nutrisi,  ekstrak hewan,  ekstrak  tumbuhan,  dan  obat- obatan sintetik) dalam pakan.
Imunostimulan berhubungan langsung  dengan  sel  sistem  imun yang membuat sel tersebut lebih aktif (Irianto,  2005).  Saat  ini,  penggunaan imunostimulan  semakin  men-dapat perhatian untuk dikembangkan sebagai  metode  kontrol  penyakit dalam  budidaya  udang.  Beberapa fakta menujukkan bahwa imunostimulan  yang  ditambahkan dalam  pakan  dapat  me-ningkatkan resistensi  ikan  dan  udang  terhadap infeksi penyakit  melalui peningkatan respon imun non spesifik (Pais et al., 2008).
Pemanfaatan  beberapa  bakteri dari  tambak,  air  laut  dan  tubuh organisme  sebagai    probiotik  yang berfungsi sebagai imunostimulan menunjukkan pengaruh positif terhadap pertumbuhan dan kesehatan ikan  dan  udang.  Probiotik  dapat menguntungkan  dan  dapat  berperan secara  baik  berdasarkan  mekanisme aksi pro-biotik yaitu produksi senyawa inhibitor, kompetisi terhadap senyawa kimia atau sumber energi,    kompetisi  terhadap  tempat pelekatan,  peningkatan  sistem  imun, perbaikan  kualitas  air  dan  interaksi dengan fitoplankton (Verschure et al ., 2000).  Beberapa  bakteri  yang  telah berhasil  digunakan  sebagai  probiotik antara lain Vibrio agliniticus (Gullian
&  Rodríguez, 2004), Bacillus  spp.
(Moriarty, 1998) dan Thalassobacter
utilis (Maeda & Liao, 1992). Bakteri- bakteri tersebut bekerja dan
berkompetisi dengan  bakteri patogen pada udang.
Salah  satu  bakteri  yang  dapat menjadi imunostimulan adalah bakteri Bacillus polymyxa yang telah diketahui  mampu  memproduksi  zat polimiksin sebagai antibiotik ( Shaheen  et  al., 2011 ). Bakteri tersebut  tidak  bersifat  patogen  dan berpotensi untuk dikembangkan menjadi probiotik pada sistem budidaya udang. Hasil penelitian Ravi et  al. (2007)  menyebutkan  bahwa probiotik  dari  jenis Paenibacillus spp., Bacillus cereus dan Paenibacillus polymyxa yang diaplikasikan lewat air dapat menghambat  pertumbuhan Vibrio pada  larva  udang  windu  ( Penaeus monodon ).  Hasil  penelitian  Fajri (2017) menyebutkan bahwa perlakuan kombinasi bakteri Bacillus polymyxa dan Bacillus  coagulans yang  diaplikasikan  lewat  air  dapat meningkatkan sintasan rata-rata sebesar  72%  dibandingkan  tanpa perlakuan  sebesar  65%.  Penelitian mengenai  aplikasi  probiotik  bakteri Bacillus  polymyxa yang  dicampur pakan terhadap imunitas non spesifik udang  vannamei  belum  banyak dilakukan,  sehingga  perlu  dilakukan penelitian mengenai pengaruh pemberian bakteri Bacillus polymyxa terhadap imunitas non spesifik udang vannamei.

## Metode
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Mei  -  Juni  2017,  bertempat  di
Laboratorium Perikanan dan Kelautan,  Jurusan  Perikanan  dan Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung. Alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi wadah pemliharaan
berupa akurium
50x40x40  cm 3 ,  instalasi  aerasi,  pH meter, DO meter, mikropipet, spektro-fotometer, timbangan digital, tabung  reaksi,  labu  erlenmeyer,  labu ukur,  jarum  inokulan,  bunsen,  spuit 26G,  kaca  preparat,  cover  glass, mikrotube,  yellow  tip,  mikropipet, alumunium  foil,  sprayer,  hand  tally counter,  laminary  airflow,  hot  plate stirrer,  autoklaf,  inkubator,  haema- cytometer  dan  waring.  Sedangkan udang uji yang digunakan yaitu udang yang  berbobot  10-12  gram,  pakan komersil,  air  laut  steril,  akuades,  Na sitrat  10%,  alkohol  70%,  PBS,  NaCl 0,85%, safranin 10%, bakteri Staphylococcus aureus, pewarna giemsa, molase, urea, media TSB, dan isolat bakteri Bacillus polymyxa.
Bakteri  uji  dipersiapkan  dengan meng-kultur kembali bakteri Bacillus polymyxa pada  media  agar  miring TSA (Tryptone  Soy  Agar) 70  %  air laut. Selanjutnya bakteri dikultur pada media cair TSB (Tryptone Soy Broth) 70 % air  laut  untuk  disimpan  hingga waktu  penggunaan.  Bakteri  dikultur pada media hingga mencapai kepadatan antara 10 5 - 10 9 sel/ml. Hasil biakan bakteri dalam media TSB kemudian dikultur secara massal ke  dalam  1  liter  media  yang  terdiri dari  campuran  molase,  urea  dan akuades. Perhitungan kepadatan bakteri dilakukan dengan menggunakan  metode turbiditymetri dengan  mengukur  absorbansi  media menggunakan spektrofotometer (panjang  gelombang  625  nm)  dan menghitung kepadatan menggunakan persamaan McFarland (Volk &Wheeler, 1993) : 𝑌 = 𝑎𝑋 + 𝑏
Keterangan:
Y  = Kepadatan (sel/ml) a = 2,62x10 9
X  = Nilai absorbansi b = 6,39x10 7
Pakan  udang  vannamei  yang digunakan  adalah  pakan  komersil dengan  kandungan  protein  30%,
kemudian pakan disemprotkan bakteri Bacillus  polymyxa sesuai dosis  perlakuan,  selanjutnya  pakan dikering anginkan selama 5–15 menit, setelah  itu  pakan  diberikan  pada udang  vannamei  dengan  metode ad satiation. Wadah untuk pemeliharaan adalah akuarium berukuran 50x40x40cm  sebanyak  12  buah.
Akuarium  diisi  air  laut  sebanyak  50 liter  dengan  salinitas  30  ppt  dan diaerasi  selama  24  jam.  Setelah  itu udang  uji  dimasukkan  sebanyak  10 ekor/akuarium.
Pengambilan sampel haemolymph dilakukan pada hari ke- 0,  ke-5,  ke-10,  dan  ke-15.  Sampel diambil  dari  4  ekor  udang  per perlakuan  secara  acak  sebanyak  0,1 ml dari setiap sampel udang.
Pengambilan  sampel haemolymph dilakukan berdasarkan prosedur yang
dikemukakan  oleh  Liu  &  Chen (2004). Secara singkat, sekitar 0,1 ml haemolymph  diambil  dari  ventral sinus  pada  pangkal  ruas  tubuh pertama  dengan  menggunakan  alat suntik 1  ml  yang sebelumnya dibilas antikoagulan (Na Sitrat 10%). Kemudian haemolymph dimasukkan ke  dalam  mikrotube  dan  disimpan dalam cool box. Haemolymph
tersebut  akan  didistribusikan  untuk uji THC sebanyak 10 µl, AF sebanyak 20 µl dan DHC sebanyak 10 µl.
Data  hasil  pengamatan  meliputi Total  Haemocyte  Count (THC)  dan aktifitas  fagositosis  (AF)  dianalisis dengan uji normalitas dan homogenitas, kemudian dilakukan uji ANOVA. Jika hasil uji berbeda nyata maka  dilakukan  uji  lanjut  BNT  pada selang  kepercayaan  95%.  Parameter Differential Haemocyte Count (DHC) dan  kualitas  air  dianalisis  secara deskriptif.

## Hasil dan Pembahasan
Total Haemocyte Count (THC)
Hasil  perhitungan  THC  dapat dilihat pada Gambar 1. Gambar 1. Hasil perhitungan THC a a a a a a a a a b b a a a c a 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 5 10 15 (TH C x 10 7 se l/ m l) Hari Ke- Total Haemocyte Count A (Kontrol) B (30 ml x 104) C (30 ml x 106) D (30 ml x 108)
Gambar  1  menunjukkan  bahwa THC  terendah  ditemukan  pada  hari ke-0  perlakuan  D  yaitu  udang  yang tidak  diberi  pakan  buatan  dengan campuran probiotik Bacillus polymyxa .  Sedangkan  THC  tertinggi ditemukan pada hari ke-10 perlakuan
C  yang  menunjukkan  hasil  berbeda nyata  dengan  perlakuan  lainnya (P<0,05).  Hasil  analisis  menunjukan bahwa pada hari ke-0 sampai hari ke hari  ke-5  perlakuan  A,  B  dan  D memberikan  pengaruh  yang  sama (P>0,05)  terhadap  jumlah  hemosit udang vannamei, tetapi menunjukkan adanya  peningkatan  THC.  Pada  hari ke-10  perlakuan  A  dan  B  juga menunjukkan  pengaruh  yang  sama (P>0,05) terhadap jumlah sel hemosit udang vannamei begitu juga pada hari ke-15 pada semua perlakuan. Hal  ini diduga  selama  penelitian  terjadi infeksi pada saat pengambilan hemolim pada udang. Adanya infeksi tersebut menyebabkan terjadinya peningkatan sel granular pada bagian tubuh udang yang terkena infeksi. Hal ini akan menyebabkan adanya perubahan THC pada udang (Van De Braak,  2002).  Kemudian  pendapat dari Anderson & Siwicki (1995) pada saat  terjadi  infesksi  sel  darah  akan bermigrasi  ke  daerah  yang  terinfeksi tersebut,  hal  ini  menyebabkan  pada saat  pengambilan  darah  pada  organ sirkulasi akan menyebabkan terdinya penurunan  THC.  Hal  tersebut  sesuai dengan  pendapat dari Van de Braak (2002)  yang  mengatakan  bahwa terjadi  penurunan  THC  dan  DHC pada sirkulasi darah udang jika terjadi infeksi, karena sel haemosit
bermigrasi  ke  daerah  di  sekitar infeksi.
Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa pemberian bakteri B. polymyxa mampu  meningkatkan  respon  imun udang  vannamei.  Hasil  penelitian juga  me-nunjukkan  nilai  THC  yang berbeda nyata  pada  hari  ke-5 perlakuan  C,  dan  pada  hari  ke-10 perlakuan  C  dan  D  (P<0,05).  Data THC  pada  Gambar  1.  menunjukkan bahwa  terjadi  peningkatan  jumlah THC  pada  hari  ke-10  perlakuan  C. Terjadinya peningkatan THC disebabkan  karena  molekul  lectin yang  merupakan  bagian  pertahanan imun  udang  yang  berfungsi  untuk melakukan pengenalan terhadap benda  asing  ( non  self recognition ) yang  masuk  kedalam  tubuh  udang (Rodriguez  &  Le  Moullac,  2000). Sedangkan  menurut  Lopez et  al. (2003), hemosit akan meningkat pada udang  yang  diberi  pakan  yang mengandung imuno-stimulan.
Menurut  Chang et  al. (1999) jumlah  THC  normal  pada  udang penaeid berkisar antara 2x10 7 – 4x10 7 sel/ml.  Hal  ini  sesuai  dengan  hasil penelitian  yang  didapatkan  dengan nilai  THC  1,4x10 7 –  6,6x10 7 sel/ml. Kisaran nilai THC pada penilitian ini masih  dalam  kisaran  THC  normal udang vannamei. Hal ini menunjukkan  bahwa  pakan  yang diberikan  probiotik B.  polymyxa mampu mempertahankan total hemosit  pada  kisaran  normal,  yang berarti udang dalam kondisi sehat dan tidak stres.

## Aktifitas Fagositosis
Hasil rata-rata pengamatan aktifitas fagositosis pada tiap perlakuan dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Hasil perhitungan persentase aktifitas fagositosis
Untuk mengetahui bahwa hemosit merupakan pertahanan tubuh yang bersifat seluler dapat dilihat dari kemampuannya dalam aktivitas fagositosis  yang  dapat  meningkat pada  saat  terjadi  infeksi.  Pemberian bakteri B. polymyxa sebagai probiotik pada penilitian ini menunjukkan hasil yang tidak berbeda  nyata  pada  tiap  perlakuan. Hasil  analisis  menunjukkan  bahwa aktivitas fagositosis
mengalami penurunan  pada  hari  ke-5  sampai dengan  hari  ke-15.  Peningkatan terjadi  pada  perlakuan  A  hari  ke-10 dan  perlakuan  C  pada  hari  ke-15. Peningkatan aktivitas fagositosis dari hemosit merupakan indikator meningkatnya  pertahanan  imun  pada udang  vannamei,  masuknya  benda asing  dalam  tubuh  inang  akan direspon  dengan  terjadinya  proses fagositosis.  Fagositosis  merupakan mekanisme  pertahanan  non  spesifik yang secara umum
mampu melindungi  dari  serangan  patogen (Syahailatua,  2009).  Hasil  rata-rata pengamatan aktivitas fagositosis pada tiap  perlakuan  dapat  dilihat  pada Gambar 2.
Hasil analisis menunjukkan bahwa semua perlakuan memberikan pengaruh yang sama (P>0,05)
terhadap  aktivitas  fagositosis.  Hasil tersebut menunjukkan bahwa pemberian  probiotik B.  polymyxa dengan  dosis  yang  berbeda  pada pakan  memberikan  pengaruh  yang sama  terhadap  aktivitas  fagositosis atau kemampuan sel respon imun non spesifik pada udang vannamei dalam memfagosit agen patogen. Hal tersebut juga didukung oleh pendapat Quinn et al. (2012) bahwa bakteri B. polymyxa hanya  mampu  memfagosit biofilm dari sel bakteri Staphylococus aureus sebesar 10-25%. Staphylococus  aureus merupakan bakteri  penghasil  koagulase  yang diasosiasikan dengan patogenitas karena penggumpalan serat-serat benang yang tidak larut dalam plasma darah  (fibrin),  yang  mengakibatkan enzim  ini  terakumulasi  di  sekitar bakteri  sehingga  agen  pelindung inang kesulitan mencapai bakteri dan fagositosis terhambat (Madigan et al., 2008).
Differential Haemocyte Count (DHC) Hyalin
Pada hasil pengamatan sel hyalin pada  udang  vannamei  memiliki  inti sel  yang  lebih  besar  dibandingkan sitoplasmanya  dan  memiliki  granul-
a a a a a a a a a a a a a a a a 0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 P e r se n tas e A F (% ) Hari Ke- Aktifitas Fagositosis B (30 ml x 104) C (30 ml x 106) D (30 ml x 108) A
granul  yang  sangat  sedikit  bahkan tidak terdapat granul, serta bentuknya tidak beraturan. Hal ini sesuai dengan pendapat  Syahailatua  (2009)  bahwa sel  hyalin  mempunyai  bentuk  yang tidak  beraturan  yang  memiliki  inti yang  lebih  besar  dari  sitoplasma dengan  ukuran  6-13  µm.  Sel  hyalin pada  udang  vannamei  dapat  dilihat pada Gambar 3. Gambar  3.  Sel  hyalin  (Perbesaran 40x) Gambar 4. Persentase jumlah sel hyalin Gambar  4  menunjukkan  bahwa persentase  sel  hyalin  berada  dalam kisaran 52%-89%. Sel hyalin tertinggi terdapat  pada  perlakuan  B  pada  hari ke-5  sebesar  89%  (Gambar  4). Menurut  Owens  &  O’Neill  (1997) persentase  hyalin  pada  udang  yang normal  terdiri  dari  60%-93%  dari total  hemosit.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  sel  hyalin  pada  udang  uji masih dalam kondisi normal. Meningkatnya  jumlah  sel  hyalin sesuai  dengan  pendapat  Hauton (2012) bahwa sel hyalin juga berperan dalam fagositosis. Penurunan persentase  sel-sel hyalin bukan merupakan  pengaruh  negatif  dari pemberian probiotik Bacillus polymyxa tetapi merupakan implikasi dari peningkatan sel-sel granular.
Mekanisme  pertahanan  tubuh pada  udang  tidak  seperti  pada  ikan dan mamalia yang mempunyai imunoglobulin.  Imunoglobulin  pada udang digantikan oleh
Prophenoloxidase  Activating  Enzim (PPA) (Soderhall  & Cerenius, 1992). PPA adalah protein yang berlokasi di sel granular hemosit.
Dalam penelitian ini PPA tersebut diaktifkan oleh imunostimulan yang masuk ke dalam tubuh  udang,  yang  akan  merangsang prophenoloksidase menjadi phenoloksidase.  Sebagai  akibat  dari perubahan ini akan dihasilkan protein Opsonin Factor yang dapat menginduksi  sel-sel  hyalin  untuk meningkatkan aktivitasnya (Soderhall & Cerenius, 1992).
0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 P er se n tas e Hyal in ( % ) Hari Ke- Hyaline A (Kontrol) B (30 ml x 104) C (30 ml x 106) D (30 ml x 108)

## Granular
Pada hasil pengamatan sel granular pada udang vannamei memiliki  bentuk  yang  bulat  dan  inti sel  yang  lebih  kecil  dibandingkan sitoplasmanya serta memiliki granul- granul.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Syahailatua  (2009)  bahwa bentuk sel granular bulat dengan  inti lebih kecil dari sitoplasma yang berisi butiran  halus  dengan  ukuran  10-20 µm.
Gambar  5.  Sel  granular  (Perbesaran 40x)
Gambar 6. Persentase jumlah sel granular
Hasil menunjukkan bahwa
persentase sel granular  berada dalam kisaran  11%-48%.  Sel  granular tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  A hari  ke-0  sebesar  48%  (Gambar  6). Menurut  Owens  &  O’Neill  (1997) persentase  granular pada udang  yang normal  terdiri  dari  17%-  40%  dari total  hemosit.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  sel  granular  pada  udang  uji masih dalam kondisi normal. Terjadinya  peningkatan  dari  sel granular disebabkan karena
imunostimulan yang masuk ke dalam tubuh  udang  dapat  menginduksi mekanisme  pertahanan  tubuh  udang. Van  de  Braak  (2002)  menyatakan bahwa  bahwa  sel  hemosit  akan melakukan degranulasi, dan beberapa protein akan dilepas untuk
kepentingan  respon  imun,  seperti: meningkatnya  sel  haemosit,  dan  me- ningkatnya  aktifitas  penjeratan  dan fagositosis. Imunostimulan yang masuk  ke  dalam  tubuh  udang  akan merangsang haemosit untuk melepaskan  proPO  dan  protein- binding  enzim  PPA.  Hal  tersebut mengakibatkan sel
hemosit meningkatkan aktifitasnya sebagai sel pertahanan tubuh.

## Kualitas Air
Parameter  kualitas  air  yang diukur  selama  penelitian  meliputi temperatur  (suhu),  oksigen  terlarut (DO),  pH  dan  salinitas.  Pengukuran dilakukan  pada  awal,  tengah  dan akhir  masa  pemeliharaan.  Kisaran
0 10 20 30 40 50 60 0 5 10 15 P er se n tas e Gr an u lar (% ) Hari Ke- Granular A (Kontrol) B (30 ml x 104) C (30 ml x 106) D (30 ml x 108)
nilai kualitas air selama pemeliharaan disajikan pada Tabel 1.
Tabel  1.  Nilai  Kisaran  Kualitas  Air Media Pemeliharaan Udang Vannamei Pada Berbagai Perlakuan Parameter Kualitas Air Selama Pemeliharaan Kisaran Optimum (SNI, 2006) Suhu °C 27,2-28,1 20,5-31,5 DO (ppm) 3,70-3,91 >3,5 pH 7,47-8,12 7,5-8,5 Salinitas (ppt) 30-35 15-25 Tabel  1  di  atas  menunjukkan bahwa salinitas yang didapat berkisar antara  30-35  ppt.  Salinitas  ini  masih dianggap cukup baik pada pemeliharaan  udang  vannamei.  Pada penelitian  Sahrijanna  &  Sahabuddin
(2014) yang  menggunakan  probiotik pada  pemeliharaan  udang  vannamei didapatkan hasil  rata-rata kualitas air menggunakan  probiotik  yakni  suhu 26,79°C, oksigen 3,55 mg/L, pH 7,80 dan  salinitas  34,12  ppt.  McGraw  & Scarpa (2002) mengemukakan bahwa udang  vannamei  dapat  hidup  pada kisaran  salinitas  0,5-45  ppt.  Kualitas air media  pemeliharaan  selama
penelitian  berada  pada  kisaran  yang ideal  untuk  pemeliharaan  udang vannamei, sehingga diasumsikan perubahan respon imun yang meliputi parameter  uji total  haemocyte  count (THC), aktivitas fagositosis (AF) dan differential  haemocyte  count (DHC) pada  perlakuan  bukan  diakibatkan oleh kualitas air media pemeliharaan.

## Kesimpulan dan Saran
Pemberian bakteri Bacillus polymyxa dalam pakan udang vannamei efektif untuk meningkatkan
Total Haemocyte Count (THC) udang vannamei.

## Daftar Pustaka
Anderson, D.P & Siwicki, A.K. 1995. Basic  haematology  and  serology for  fish  health  program.  In: Diseases  in  Asian  aquaculture  II. M.  Shariff, J. R. Arthur and R. P. Subasinghe (Eds).  Fish  Health Section,  Asian  Fisheries  Society, Manila, 185-202 hal. Chang,  C.F.  Su,  M.S.  &  Chen,  H.Y. 1999.  A  rapid  method  to  quantity total  haemocyte  count  of penaeus monodon using  ATP  analysing. Fish Pathology , 34: 211-212. Direktorat Jenderal Perikanan Budidaya  (DJPB).  2015.  Data produksi perikanan 2015. Statistik DJPB. 11 Februari 2015.
Fajri,  N.M.  2017. Kajian  efektivitas bakteri  Bacillus  coagulans  dan Bacillus polymyxa terhadap pertumbuhan  dan  sintasan  udang putih (Litopenaeus vannamei) yang  dipelihara  pada  salinitas rendah . (Skripsi) . Universitas Lampung, Lampung. Gullian, M.F. Thompson & Rodríguez,  J.  2004.  Selection  of
Probiotic  bacteria  and  study  of their immunostimulatory  effect in Penaeus  vannamei . Aquaculture, 233: 1-14.
Hauton,  C.  2012.  The  scope  of  the crustacean  immune  system  for disease control. Journal Invertebrata Pathology, 110: 251-
260.
Irianto,  A.  2005. Patologi  Ikan
Telestoei .  Gajah  Mada  University Press, Yogyakarta.
Kharisma,  A  &  Abdul,  M.  2012. Kelimpahan  Bakteri  Vibrio  sp.
Pada  Air  Pembesaran  Udang Vannamei ( Litopenaeus vannamei )  Sebagai  Deteksi  Dini Serangan Penyakit Vibriosis.
Jurnal  Ilmiah  Perikanan  dan Kelautan, (4) : 2. Lee,  M.H.  &  Shiau,  S.Y.  2004. Vitamin E Requirements of Juvenile  Grass  Shrimp, Penaeus monodon and Effects on Nonspecific  Immune  Responses , Fish  & Shellfish Immunology , 16: 475-485.
Liu,  C.H.  &  Chen,  J.C.  2004.  Effect of  ammonia    on    the    immune responsse    of  white  shrimp Litopenaeus  vannamei and  its susceptibility to Vibrio alginolyticus . Fish  &  Shellfish
Immunology. 16: 321–334. Lopez,  N.  Cuzon,  G.  Gaxiola,  G. Taboada,  G.  Valenzuela,  M. Pascual, C. Sánchez,  A. & Rosas, C. 2003. Physiological, nutritional, and immunological role of dietary ß-1,3-glucan  and  ascorbic  acid  2- monophosphate  in Litopenaeus vannamei juveniles. Aquaculture, 224: 223-243.
Madigan, M.T. Martinko, J.M.
Dunlap, P.V. & Clark, D.P. 2008.
Biology  of  Microorganisms  12th edition . San Francisco: Pearson.
Maeda, M. & Liao, I.C. 1992. Effect of  bacterial  population  on  the growth of a prawn larva, Penaeus monodon.  Bulletin  of  National Research Institute of Aquaculture , 21: 25-29.
McGraw,  W.J.  &  Scarpa,  J.  2002. Determining ion concentration for
Litopenaeus  vannamei culture  in freshwater. Global  Aquaculture Advocate , 5: 36-37.
Moriarty,  D.J.  1998.  Control  of luminous Vibrio species in penaeid
aquaculture  ponds. Aquaculture, 164: 351-358. Owens, L. & O’Neill, A.1997. Use of Clinical  Cell  Flow  Cytometry  for Differential  Counts  of  Prawn (Penaeus  monodon) Haemocytes. Diseases  of  Aquatic  Organisms ,
31: 147-153. Pais, R. Khushiramani, R. & Karunasagar,  I.  2008.  Effect  of immunostimulants on hemolymph haemagglutinins  of  tiger  shrimp
Penaeus  monodon . Aquaculture Research, 38: 1339-1345. Quinn, G.A. Maloy, A.P. McClean, S. Carney, B.S. & Slater, J.W. 2012 .
Lipopeptide  Biosurfactants  from Paenibacillus  polymyxa Inhibit Single and Mixed Species Biofilms. Biofouling, 28(10): 1151–66 . Ravi, A.V. Musthafa, K.S. Jegathammbal,  G.  Kathiresan,  K. &  Pandian,  S.K.  2007.  Screening and  evaluation  of  probiotics  as  a biocontrol agent against pathogenic Vibrio s  in  marine aquaculture. Applied Microbiology, 45: 219-22. Ridlo,  A.  &  Pramesti,  R.  2009. Aplikasi  Ekstrak  Rumput  Laut sebagai Agen Imunostimulan Sistem  Pertahanan  Non  Spesifik pada Udang Vannamei ( Litopennaeus vannamei ). Ilmu Kelautan , 14(3): 133-137.
Rodriguez, J. & Le Moullac, G. 2000. State of The Art of Immunological Tools  and  Health  Contol  of Penaeid (Penaeus monodon) . PhD Thesis,  Wageningen  University. Netherland.
Sahrijanna,  A.  &  Sahabuddin.  2014. Kajian Kualitas Air Pada Budidaya Udang Vaname ( Litopenaeus Vannamei ) Dengan Sistem
Pergiliran  Pakan  Di  Tambak
Intensif .  Balai    Penelitian  dan Pengembangan Perikanan Budidaya  Air  Payau. Prosiding Forum Inovasi Teknologi Akuakultur. Sulawesi Selatan. Shaheen,  M.  Li,  J.  Ross,  A.C. Vederas, J.C. & Jensen, S.E. 2011. Paenibacillus  polymyxa PKB1 Produces Variants of Polymyxin B- type Antibiotics . Chemistry &
Biology, 18(12): 1640–1648. SNI, 2006. Produksi udang vannamei
(Litopenaeus  vannamei)  ditambak dengan teknologi intensif. Jakarta:
Badan  Standarisasi  Nasional  :
SNI-01-7246-2006.
Soderhall,  K.  &  L.  Cerenius.  1992. Crustacean immunity. Annual Review of Fish Disease , 2: 3-23.
Syahailatua,  D.Y.  2009 . Seleksi Bakteri Probiotik sebagai Stimulator  Sistem  Imun  pada Udang  Vannamei  ( Litopenaeus vannamei ). (Tesis). Sekolah Pascasarjana.  Institut  Pertanian Bogor. Bogor, 58 hal. Van  de  Braak,  K.  2002. Hemocytic Defence  in  Black  Tiger  Shrimp (Penaeus  monodon).  Disertasi, Wageningen University, Wageningen  Institute  of  Animal Source Science, Wageningen, Netherlands. Verschure, L. Rombaut, G. Sorgeloos,  P.  &  Verstraete,  W. 2000. Probiotic bacteria as biological control agents in
aquaculture. Microbiology  and Molecular Biology Reviews, 64(4):
655-671.
Volk, & Wheeler. 1993. Dasar-Dasar Mikrobiologi . Erlangga. Jakarta.