ISSN 2354-6565
EFEK EKSTRAK ETANOL HERBA CECENDET ( Physalis angulata L.) PADA KADAR PROTEINURIA HEWAN MODEL LUPUS ERITEMATOSUS SISTEMIK
Suci Nar Vikasari 1, 2 , Afifah B. Sutjiatmo 1,2 , Elin Yulinah Sukandar 3 , Suryani 1 , Puput Ayu Perdana 1
1 Fakultas Farmasi, Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Indonesia
2 Pusat Ilmu Hayati, Institut Teknologi Bandung, Indonesia
3 Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung, Indonesia suci.narvikasari@gmail.com

## ABSTRAK
Penderita lupus eritematosus  sistemik  menggunakan imunosupresan untuk mengurangi manifestasi  klinik  yang timbul,  diantaranya adalah proteinuria.   Penelitian sebelumnya menunjukkan  herba  cecendet  ( Physalis  angulata L.)  mempunyai  efek  imunosupresan. Pristana  merupakan  senyawa  yang  dapat  menginduksi  lupus  pada  tikus.  Penelitian  ini dilakukan  untuk  menguji  efek  ekstrak  etanol  herba  cecendet  terhadap  proteinuria  pada tikus Wistar yang  diinduksi  pristana.  Pembuatan  ekstrak  etanol  herba  cecendet dilakukan  menggunakan  seperangkat  alat  Soxhlet.  Pemodelan  Lupus  Eritematosus Sistemik  dilakukan  dengan  induksi  0,5  mL  pristana  ip.  Empat  minggu  setelah  induksi pristana, ekstrak etanol  herba cecendet  dosis 50 dan 100 mg/kg bb diberikan selama 6 minggu,  dan  sebagai  pembanding  digunakan  Metilprednisolon1,4  mg/kg  bb  serta siklofosfamid  35  mg/kg  bb.  Kadar  protein  dalam  urin  diukur  pada  setiap  3  minggu. Hasil uji proteinuria menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanol herba cecendet dosis 50  mg/kg  bb  selama  6  minggu  dapat  menghambat  kenaikan  protein  dalam  urin  dan berbeda  jika  dibandingkan  kontrol  (p<0,1),  sedangkan  ekstrak  etanol  herba  cecendet dosis  100  mg/kg  bb  dapat  menghambat  kenaikan  protein  dalam  urin  meskipun  tidak berbeda  bermakna  jika  dibandingkan  kontrol  (p>0,1).  Dapat  disimpulkan  bahwa  dosis terbaik  ekstrak  etanol  herba  cecendet  untuk  menurunkan  kadar  proteinuria  adalah  50 mg/kg bb.
Kata kunci : Cecendet, Physalis  angulata L.,  lupus  eritematosus  sistemik,  proteinuria, pristana

## ABSTRACT
Previous  study  stated  that  cecendet  ( Physalis  angulata L.)  had  immunosuppressan effect.  Immunosuppressan  is  used  to  reduce  clinical  manifestation  of  systemic  lupus erythematosus which is proteinuria. Pristane is used to induce a disease similar to lupus nephritis in animal. This study is done in order to test the effect of ethanolic extract of cecendet  in Wistar rats  induced  Pristane.  Ethanolic  extract  of  cecendet  is  made  by Soxhlet.  Animals  were  induced  with  0.5  mL  Pristane  intraperitoneal.  A  month  after induction,  animal  models  were  given  ethanolic  extract  of  cecendet  at  doses  of  50  and 100 mg/kg bw for 6 weeks. Metilprednisolon 1.4 mg/kg bw and cyclophosphamide 35 mg/kg  bw  were  used  as  comparator.  Proteinuria  was  measured  every  3  weeks.  The results  showed  that  ethanolic  extract  of  cecendet  at  dose  of  50  mg/kg  bw  for  6  weeks could  reduce  proteinuria  level  compared  to  control  group  (p<0.1).  Although  ethanolic extract at dose of 100 mg/kg bw could reduce proteinuria level, but it is not significantly
different compared to  control  group  (p>0.1).  It  can be concluded thatthe  best  dose   of ethanolic  extract  of  cecendet  to  reduce  proteinuria  level  in  animal  model  of  systemic lupus erythematosus was 50 mg/kg bw.
Keywords : Cecendet, Physalis angulata L., systemic lupus erythematosus, proteinuria, pristane

## PENDAHULUAN
Lupus  eritematosus  sistemik  (LES) merupakan  penyakit  autoimun  kronis yang  dapat  merusak  setiap  bagian  dari tubuh (kulit, sendi, dan atau organ dalam tubuh).  Penderita  LES  dapat  mengalami kondisi  flare  (gejala  memburuk  dan penderita merasa sakit) dan remisi (gejala berkurang  dan  penderita  merasa  sehat). (Anonim, 2013)  Kriteria  yang digunakan untuk  menegakkan  diagnosa  LES  adalah terjadinya  malar  rash,  diskoid  rash, sensitivitas terhadap cahaya, tukak mulut, artritis, serositis, kelainan ginjal, kelainan sistem saraf, kelainan hematologi, kelainan imunologi, dan antibodi antinuklear.(O'Neill,  2010)  Faktor  resiko yang  dapat  mempengaruhi  kondisi  lupus adalah peran eksogen misalnya
lingkungan  (ultraviolet,  hormon)  dan faktor  endogen  seperti  faktor  genetik. (O‘Neill, 2010)
Obat  yang  digunakan  untuk  terapi lupus umumnya digunakan untuk mengurangi  gejala  yang  kambuh.  Salah satu  obat  yang  digunakan  untuk  terapi lupus  adalah  obat  adalah  obat  anti inflamasi  steroid,  yang  digunakan  untuk menekan  radang,  tetapi  jika  digunakan dalam  jangka  waktu  yang  cukup  lama dapat  menyebabkan  efek  samping  yang berbahaya,  diantaranya  osteoporosis  usia dini,  patah  tulang  tanpa  sebab,  wajah bulat  seperti  bulan,  gemuk  yang  tidak proporsional,  kerusakan  sendi  paha, bahkan penapuran/penyumbatan pembuluh darah hingga serangan jantung dan gangguan psikologis. (Tjay, 2007) Cecendet  merupakan  tumbuhan  yang tumbuh di tanah kosong, pekarangan, dan tempat-tempat  lain  yang tidak tergenang. Di masyarakat, daunnya digunakan untuk
penyembuhan  patah  tulang,  busung  air, bisul,  bork,  penguat  jantung,  keselo, nyeri  perut,  dan  kencing  nanah.  Buah cecendet  dapat  dimakan,  dan  dapat digunakan  untuk  mengobati  epilepsi, susah  buang  air  kecil,  dan  penyakit kuning. (Depker, 2001)
Pristana  merupakan  senyawa  yang dapat  menginduksi  lupus  pada  tikus. Pristana merupakan minyak mineral yang dikenal  tidak  toksik,  tetapi  Kuroda  dkk
(2004) menyatakan bahwa penggunaannya dapat memicu pengeluaran  autoantibodi  sehingga  dapat berimplikasi  patogen  pada  penyakit autoimun.  (Kuroda,  2004)  Penelitian  ini dilakukan  untuk  menguji  efek  ekstrak etanol herba cecendet terhadap kerusakan ginjal  yang ditandai dengan tingga kadar proteinuria  pada  tikus Wistar yang diinduksi pristana.

## BAHAN DAN HEWAN UJI
Bahan. Herba  cecendet  ( Physalis angulata L.)  yang  digunakan  diperoleh desa  Haurwangi,  Kecamatan  Cianjur, Provinsi  Jawa  Barat.  Determinasi  herba cecendet dilakukan di Herbarium Bandungense Sekolah Ilmu dan
Teknologi  Hayati,  Institut  Teknologi Bandung.  Bahan  lain  yang  digunakan pristana  (Santa  Cruz®  Biotechnology USA),  pereaksi  protein  total  (Dialab®), injeksi  metilprednisolon  (OGB  Dexa®), dan injeksi siklofosfamid (Baxter®).
Hewan uji . Hewan uji yang digunakan  adalah  tikus Wistar betina dengan bobot 200-250 gram berusia rata- rata  2  bulan,  yang  diperolej  dari Laboratorium  Hewan  Pusat  Ilmu  Hayati Institut Teknologi Bandung.
METODE Pembuatan simplisia. Herba cecendet  yang  diperoleh,  dicuci  dengan air hingga bersih, ditiriskan dan dikeringkan,  kemudian  digiling  serta diayak  dengan  ayakan  mesh  no.  44 sehingga berukuran seragam.
Pembuatan  ekstrak  etanol  herba cecendet. Ekstrak  etanol  herba  cecendet dibuat dengan menggunakan seperangkat alat  Soxhlet  menggunakan  etanol  96%. Rendemen yang dihasilkan ±11,1046%.
Pengujian  Efek  Ekstrak  Etanol Herba Cecendet ( Physalis Angulata L.) Pada  Kadar  Proteinuria. Uji  efek ekstrak  etanol  herba  cecendet  terhadap kadar proteinuria dilakukan
menggunakan  model  hewan  LES  pada tikus Wistar yang diinduksi pristana. Tahapan  pengujian  dilakukan  sebagai berikut:
1. Hewan uji dibagi menjadi 6 kelompok dengan masing-masing kelompok
terdiri dari 4 ekor.
- Kelompok  normal,  hewan  tidak diinduksi  pristana  dan  tidak  diberi sediaan apapun
- Kelompok  kontrol,  hewan  diinduksi pristana 0,5 mL ip dan diberi larutan pembawa
- Kelompok  uji  1,  hewan  diinduksi pristana 0,5 mL ip dan diberi ekstrak etanol  herba  cecendet  dosis  50 mg/kg bb po
- Kelompok  uji  2,  hewan  diinduksi pristana 0,5 mL ip dan diberi ekstrak etanol  herba  cecendet  dosis  50 mg/kg bb po
- Kelompok  pembanding  1,  hewan diinduksi  pristana  0,5  mL  ip  dan diberi  metilprednisolon  dosis  1,4 mg/kg bb ip
- Kelompok  pembanding  2,  hewan diinduksi  pristana  0,5  mL  ip  dan diberi  siklofosfamid  dosis  35  mg/kg bb ip
2. Pada  awal  pengujian,  diukur  kadar proteinuria.
3. Empat minggu setelah induksi, urin 24 jam dikumpulkan dan dihitung jumlah protein totalnya.
4. Kemudian hewan uji diberikan sediaan sesuai kelompok selama enam minggu.
5. Tiga  dan  enam  minggu  setelah pemberian  sediaan,  urin  24  jam dikumpulkan  dan  dihitung  jumlah protein totalnya.
6. Data yang diperoleh dianalisis statistik dengan  uji-t  student  menggunakan perangkat  lunak SPSS  20.0  for windows .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini,  pemodelan  hewan LES  dilakukan  dengan  induksi  pristana. Pemberian pristana secara intraperitoneal pada  hewan  uji  dapat  menginduksi terjadinya  inflamasi  kronik,  sehingga dapat  menyebabkan  terjadinya lupus-like disease .  Mekanisme  yang  terlibat  pada gangguan  imun  berhubungan  dengan overproduksi  interferon  (IFN)  tipe  1  α dan  β  serta  IgG  yang  akan  menginduksi autoantibodi  dan  manifestasi  klinik  dari LES. (Reeves, 2009)
Hasil  penimbangan  bobot  badan hewan  uji  selama  10  minggu  pengujian dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1.  Grafik bobot badan hewan uji
selama pengujian Hasil  pengamatan  bobot  badan  secara visual  menunjukkan  bahwa  peningkatan bobot badan pada kelompok kontrol lebih tinggi  jika  dibangingkan  pada  kelompok uji  ekstrak  etanol  herba  cecendet  dan pembanding metilprednisolon serta pembanding siklofosfamid.
Hasil  pengukuran  kadar  protein  total dalam  urin  24  jam  selama  10  minggu pengujian dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2.  Diagram batang kadar proteinuria hewan uji selama pengujian
Hasil  pengujian  kadar  proteinuria
hewan yang  diberi  ekstrak  etanol cecendet  dosis                    50 mg/kg bb pada minggu ke-7 tidak berbeda jika dibandingkan kelompok kontrol (p>0,05),  tetapi  kadar  proteinuria  pada minggu ke-10 berbeda jika dibandingkan kelompok  kontrol  (p<0,1)  dan  setara dengan kelompok
pembanding siklofosfamid  (p>0,1).  Hasil  pengujian kadar  proteinuria  hewan  uji  yang  diberi ekstrak etanol cecendet dosis 100  mg/kg  bb  pada  minggu  ke-7  tidak berbeda  jika  dibandingkan  kelompok kontrol (p>0,05), tetapi  kadar proteinuria pada minggu ke-10 berbeda jika dibandingkan kelompok kontrol (p<0,1).
Herba cecendet ( Physalis angulata L.)
mengandung asam sitrat, fisalin,
sterol/terpen, saponin, flavonoid,
alkaloid,  polifenol,  asam  klorogenat (daun),  batang  dan  akar  mengandung polifenol  dan  saponin,  biji  mengandung asam  elaidat,  kulit  buah  mengandung C77H44O-H2O, cairan buah mengandung  zat  gula.  Kandungan  kimia Physalis  angulata  L.  antara  lain  Physalin F,  Physalin  B,  Physalin  D,  Physalin  J, Physalin E, Withangulatin A, Withangulatin  I.  (Heyne,  1995;  Pitojo,
2002)
Physalin merupakan seko-steroid yang berefek  imunomodulator.  Physalin  B,  F, atau  G  dapat  mereduksi  produksi  nitrit
0 50 100 150 200 250 300 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 B o b o t b a d a n ( g ) Waktu pengamatan (minggu) Kontrol Metilprednisolon Siklofosfamid Eks.Et.Cecendet 50 mg/kg bb Eks.Et.Cecendet 100 mg/kg bb Normal 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 0 4 7 10 K a d a r (m g /L) Waktu (Minggu) Normal Kontrol Eks. EtOH Herba Ciplukan 50 mg/kg bb
oksid  karena  makrofag  terstimulasi  oleh lipopolisakarida  dan  interferon  (IFN)-γ.
Physalin  B  juga  dapat  membantu menghasilkan  jumlah  tumor  nekrosis factor (TNF)-α, interleukin-6 dan interleukin-12  lebih  sedikit.  (Soares,
2003)  Salah  satu  tipe  mekanisme patogenik  pada  kondisi  lupus  nefritis adalah terjadinya glomerulonefritis, dimana  pada  kondisi  glomerulonefritis terjadi defisiensi IFN- γ. (Richards, 2001)
Withangulatin  A  yang  berasal  dari Physalis  angulata juga  memiliki  efek imunosupresan  dengan  mempengaruhi jalur  heme-1-oksigenase.  Withangulatin A  akan  menurunkan  over-proliferasi ConA yang akan menginduksi limfosit T sehingga keseimbangan Th1/Th2 terganggu. (Sun, 2011)

## KESIMPULAN
Pemberian ekstrak etanol herba cecendet  ( Physalis  angulata L.)  dosis  50 mg/kg  bb  pada  minggu  ke-7  dapat menurunkan kadar proteinuria jika dibandingkan  kelompok  kontrol  (p<0,1) dan setara dengan kelompok pembanding siklofosfamid (p>0,1).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih ditujukan kepada
Syamsi  Dhuha  Foundation  yang  telah membiayai penelitian ini melalui Program  SDF  Awards  –  Riset  Bahan Alam.

## DAFTAR PUSTAKA
Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan.  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia.
Inventaris
Tanaman  Obat  Indonesia (I).  Jakarta: Depkes RI; 2000. Hal. 179-180
Heyne, K. Tumbuhan Berguna Indonesia
Jilid  III.  Terjemahan  Badan  Litbang
Kehutanan Republik Indonesia. Jakarta: Dephut; 1995. Hal. 1706. Kuroda, Y., Nacionales, D.C., Akaogi, J., Reeves, W.H., Satoh, M. Autoimmunity  induced  by  adjuvant hydrocarbon oil component of vaccine. Biomedicine and Pharmacotherapy ; 58; 2004. Hal. 325-
337.
O'Neill,  S.,  and  Cervera,  R.  Systemic lupus erithematosus. Best Practise and Research  Clinical  Rheumatology ;  24; 2010. Hal. 841-855.
Pitojo, Setijo. Ceplukan Herba Berkasiat Obat .  Yogyakarta:  Kanisius;  2002. Hal. 13-21, 61-62.
Reeves,  WH.,  Lee,  PY.,  Weinstein,  JS., Satoh, M., dan Lu Li. 2009. Induction of autoimmunity by pristane and other naturally occurring hydrocarbons. Trends  in  Immunology ,  Vol.30,  No.9, 455-464.
Richards  HB,  Satoh  M,  Jennette  JC, Croker  BP,  Yoshida  H,  Reeves  WH. 2001.  Interferon-gamma  is  required for lupus nephritis in mice treated with the  hydrocarbon  oil  pristane. Kidney Int 60:2173–2180.
Seavey, M.M., Lu, L.D., and Stump, K.L. Animal  Models  of  systemic  lupus erythematosus  (SLE)  and  ex  vivo assay  design  for  drug  discovery .
Wiley Online Library: Current protocols  in  Pharmacology;  June 2011. hal 5.60.1-5.60.40.
Soares.  MBP,  Bellintani,  MC,  Ribeiro,
IM, Tomassini, TCB, dos Santos, RR.
2003. Inhibition of macrophage activation and lipopolysaccarideinduced  death  by seco-steroids  purified  from Physalis angulata L. European  Journal  of Pharmacology , 459, 107-112.
Sun,  L.,  Liu,  J.,  Liu,  P.,  Yu,  Y.,  Ma,  L., and  Hu,  L.  2011. Immunosuppression effect  of  Withangulatin  A  from Physalis angulata via heme oxygenase
1-dependent pathways . Process Biochemistry; 46; 482–488.
Sun,  L.,  Zhou,  L.,  Chen,  M.,  Zhong,  R., and  Liu,  J.  2011.  Amelioration  of systemic  lupus  erythematosus  by Withangulatin  A  in  MRL/lpr  mic.
J.Cell Biochem ; 112, 2376-23.