## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL BATANG TABAT BARITO (Ficus deltoideaJack) TERHADAP PERTUMBUHAN
Streptococcuspyogenes DENGAN  METODE CAKRAM KIRBY-BAUER
Asnan Azis Fatoni 1 , Francisca Diana Alexandra 2 , Triawanti 3
1 Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Palangka Raya
2 Departemen Farmakoterapi Fakultas Kedokteran Universitas Palangka Raya
3 Departemen Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Palangka Raya Fakultas Kedokteran, Universitas Palangka Raya
E-mail: asnanazisfatoni@gmail.com

## ABSTRAK
Latar Belakang: Penyakit infeksi kulit bakterial merupakan masalah kesehatan masyarakat, dimana infeksi bakterial pada kulit  yang  paling  sering  ditemui  adalah  pioderma.  Salah  satu  penyebabnya  adalah  Streptococcus  pyogenes.  Pioderma termasuk penyakit di Indonesia yang menempati urutan keempat. Tumbuhan herbal di Kalimantan Tengah yang digunakan untuk pengobatan infeksi kulit salah satunya adalah batang Tabat Barito (Ficus deltoidea Jack) yang memiliki potensi sebagai antibakteri.
Tujuan: Penelitian ini untuk membuktikan bahwa ekstrak etanol batang Tabat Barito memiliki aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan Streptococcus pyogenes dengan metode difusi cakram Kirby-Bauer.
Metode: Jenis penelitian menggunakan true experimental design dengan rancangan penelitian post test only control group design.  Ekstrak  batang  Tabat  Barito  dengan  konsentrasi  5%,  10%,  20%,  dan  40%  diuji  daya  antibakteri  terhadap Streptococcus pyogenes menggunakan metode difusi cakram Kirby-Bauer, serta menggunakan kontrol positif (ampisilin) dan kontrol negatif (DMSO). Data penelitian dianalisis secara statistik menggunakan uji One Way Anova.
Hasil: Ekstrak etanol batang Tabat Barito dengan konsentrasi 5%, 10%, 20% dan 40% dapat menghambat pertumbuhan bakteri  Streptococcus  pyogenes  dengan  rerata  masing-masing  yaitu  11,05  mm,  8,575  mm,  7,95  mm,  dan  4,825  mm. Kesimpulan: Ekstrak etanol batang Tabat Barito dapat menghambat pertumbuhan Streptococcus pyogenes dan konsentrasi efektifnya adalah 5%.
Kata kunci : Batang Tabat Barito, Streptococcus pyogenes, Cakram Kirby-Bauer

## ABSTRACT
Background: Bacterial skin infection is public health problem, which the most frequently encountered is pyoderma. One of the causes is Streptococcus pyogenes. Pyoderma ranked fourth in Indonesia. One of plant herbs in Central Kalimantan that used for skin infections treatment is Tabat Barito stem (Ficus deltoidea Jack) that have potential as antibacterial. Objective: This research is aimed to proof that the ethanol extract of Tabat Barito stem has antibacterial activity against streptococcus pyogenes growth with Kirby Bauer disc diffusion method.
Method: Study design using true experimental with post test only control group design. Tabat Barito Stem extract with 5%, 10%, 20%, and 40% concentrations was tested for antibacterial capability against Streptococcus pyogenes with Kirby Bauer disc diffusion method, and used positive control (Ampisilin) and negative control (DMSO). This study data was statistically analyzed by One Way Anova.
Results: Ethanol extract of Tabat Barito stem with concentration 5%, 10%, 20% and 40% can inhibit Streptococcus pyogenes growth with each mean inhibition zone diameter is 11,05 mm, 8,575 mm, 7,95 mm, and 4,825 mm.
Conclusion : Ethanol extract of Tabat Barito stem can inhibits Streptococcus pyogenes growth and the effective concentration is 5%.
Keywords : Stem of Tabat Barito , Streptococcus pyogenes , Kirby-Bauer disc .

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  kulit  masih  merupakan masalah utama penyebab tingginya angka morbiditas pada  anak-anak  di  negara-negara  berkembang  dan wilayah  beriklim  tropis  termasuk  di  Indonesia. 1
Infeksi  kulit  terjadi  paling  sering  disebabkan  oleh bakteri. 2 Penyakit  infeksi  kulit  bakterial  merupakan masalah  kesehatan  masyarakat,  dimana  infeksi bakterial pada kulit yang paling sering ditemui adalah pioderma. 3 Dari 18 penelitian bakteriologi menunjukan  bahwa Group  A  Streptococcus (GAS) merupakan etiologi utama pioderma di banyak negara berkembang tropis. 1
Penyakit infeksi kulit yang paling umum pada anak adalah penyakit kulit pioderma (0,2-35%) diikuti dengan tinea kapitis (1-19,7%), skabies (0,224%), dan gangguan kulit akibat virus (0,4-9%). 1 Pioderma dapat berupa  impetigo,  folikulitis,  furunkel/karbunkel, ektima, erisipelas, selulitis, flegmon, ulkus piogenik, abses multipel kelenjar keringat, maupun staphylococcal  scladed  skin  syndrome. 3 Terjadinya pioderma umumnya dipengaruhi oleh gizi, kebersihan, atau iklim. Berdasarkan laporan dari CDC (Centers for Disease Control and Prevention), di Amerika Serikat terjadi  lebih  dari  10  juta  infeksi  GAS  noninvasif terutama  infeksi  tenggorokan  dan  kulit  yang  terjadi setiap  tahunnya. 4 Prevalensi  pioderma  di  beberapa negara, seperti di Brazil, Ethiopia, Taiwan, dan lain- lain  adalah  0,2-35 %. 5 Sedangkan  data  dari  8  rumah sakit  di  6  kota  besar  di  Indonesia  pada  tahun  2001 didapatkan 13,86% dari 8919 kunjungan baru pasien
kulit  anak  adalah  pioderma. 1 Pioderma  termasuk sepuluh  penyakit  terbanyak  di  Indonesia  bahkan menempati urutan ke empat setelah ISPA, hipertensi primer dan demam. 5
Secara umum, obat herbal dinilai lebih aman daripada  penggunaan  obat  modern. 6 Hal  ini disebabkan  obat  tradisional  memiliki  efek  samping yang relatif lebih sedikit dari pada obat modern. Efek toksik  obat  herbal  bisa  dihindari  bila  cara pemakaiannya benar serta sudah diuji praklinik dan uji klinik. Obat herbal tidak memberikan dampak negatif pada kesehatan karena tidak mengandung bahan kimia yang berbahaya. 6 WHO (World Health Organization) telah  merekomendasi  penggunaan  obat  herbal  dalam pemeliharaan kesehatan masyarakat, pencegahan dan pengobatan penyakit. 6
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Amy Tan,  batang  Tabat  Barito  memiliki  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  seperti  flavonoid, alkaloid dan saponin. 7 Kandungan-kandungan tersebut  memiliki  aktivitas  yang  dapat  digunakan sebagai antibakteri. 8,9
Mekanisme kerja flavonoid sebagai antimikroba dapat dibagi menjadi 3 yaitu menghambat sintesis  asam  nukleat,  menghambat  fungsi  membran sel dan menghambat metabolisme energi. 10 Mekanisme antibakteri flavonoid menghambat sintesis  asam  nukleat  adalah  cincin  A  dan  B  yang memegang peran penting dalam proses interkelasi atau ikatan hidrogen dengan menumpuk basa asam nukleat yang menghambat pembentukan
DNA dan RNA. Letak gugus hidroksil di posisi 2’,4’ atau  2’,6’  dihidroksilasi  pada  cincin  B  dan  5,7 dihidroksilasi  pada  cincin  A  berperan    penting terhadap  aktivitas  antibakteri  flavonoid. 10 Flavonoid menyebabkan  terjadinya  kerusakan  permeabilitas dinding  sel  bakteri,  mikrosom,  dan  lisosom  sebagai hasil interaksi antara flavonoid dengan DNA bakteri. Mekanisme  kerja  flavonoid  menghambat  fungsi membran  sel  adalah  membentuk  senyawa  kompleks dengan  protein  ekstraseluler  dan  terlarut  sehingga dapat merusak membran sel bakteri dan diikuti dengan keluarnya  senyawa  intraseluler. 10 Penelitian  lain menyatakan  mekanisme  flavonoid  menghambat fungsi    membran  sel  dengan  cara  mengganggu permebealitas  membran  sel  dan  menghambat  ikatan enzim  seperti  ATPase  dan  phospholipase. Flavonoid dapat  menghambat  metabolisme  energi  dengan  cara menghambat  penggunaan  oksigen  oleh  bakteri. Flavonoid  menghambat  pada  sitokrom  C  reduktase sehingga  pembentukan  metabolisme  terhambat. Energi dibutuhkan bakteri untuk biosintesis makromolekul. 10
Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri yaitu dengan cara mengganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri, sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel  tersebut. Mekanisme  lain  antibakteri  pada  alkaloid  yaitu komponen  alkaloid  diketahui  sebagai  interkelator DNA  dan  menghambat  enzim  topoisomerase  sel bakteri. 10
Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri yaitu  dapat  menyebabkan  kebocoran  protein  dan
enzim  dari  dalam  sel.  Saponin  dapat  menjadi antibakteri  karena  zat  aktif  permukaannya  mirip detergen,  akibatnya  saponin  akan  menurunkan tegangan  permukaan  dinding    sel    bakteri    dan merusak permeabilitas membran. 10 Rusaknya membran  sel  ini  sangat  mengganggu  kelangsungan hidup  bakteri.  Saponin  berdifusi  melalui  membran luar dan dinding sel yang rentan kemudian mengikat membran  sitoplasma  sehingga  mengganggu  dan mengurangi  kestabilan  membran  sel.  Hal  ini menyebabkan sitoplasma bocor keluar dari sel yang mengakibatkan kematian sel. Agen antimikroba yang mengganggu membran sitoplasma bersifat bakterisida. 10

## METODOLOGI PENELITIAN

## Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan Experimental Design yang  menggunakan Post  test-only  Control Group Design dengan 6 variabel perlakuan dan 4 kali pengulangan  untuk  masing-masing  perlakuan.  Pada penelitian  ini  akan  diuji  ekstrak  etanol  batang tumbuhan Tabat Barito terhadapat aktivitas pertumbuhan Streptococcus pyogenes dengan metode difusi cakram Kirby-Bauer.

## Estimasi Besar Sampel
Penelitian  ini  menggunakan  6  variabel perlakuan,  yaitu  pada  konsentrasi  5%,  10%,  20%, 40%,  kontrol  positif  dan  kontrol  negatif  dengan pengulangan masing-masing sebanyak 4 kali.

## Bahan dan Alat Penelitian
Bahan  yang  digunakan  adalah  batang  Tabat Barito, Ampisilin, Etanol 96%, Dimethyl sulfoxide ,
Blood Agar, Mueller Hinton Agar (MHA) , BaCl 2 1%,  H 2 SO 4 1%,  Larutan  NaCl  (0,9%),  aquades, desinfektan  dan Streptococcus  pyogenes. Alat  yang digunakan pada penelitian ini adalah pisau, blender, neraca  analitik,  kain  hitam,  toples  maserasi, waterbath , batang pengaduk, kertas saring, labu Erlenmeyer, gelas parel, gelas ukur, gelas beker, tabung reaksi, rak tabung, labu ukur, kaca arloji, corong,  inkubator,  kertas  cakram  Kirby-Bauer, alumunium foil , Laminar air flow , kertas sampul, spatula,  lidi  kapas, autoclave ,  oven,  lemari pendingin, pipet hisap, cawan petri, bunsen , hot plate , jarum ose dan jangka sorong.

## Ekstraksi
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah dengan metode maserasi. Metode ini  dilakukan  dengan  memasukkan  serbuk  tanaman dan  pelarut  yang  sesuai  ke  dalam  wadah  inert  yang tertutup  rapat  pada  suhu  kamar.  Proses  ekstraksi dihentikan  ketika  tercapai  kesetimbangan  antara konsentrasi senyawa dalam pelarut dengan konsentrasi  dalam  sel  tanaman.  Setelah  proses ekstraksi,  pelarut  dipisahkan  dari  sampel  dengan penyaringan. 11

## Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat-alat yang   akan   digunakan disterilisasi di oven pada suhu 180 0 C. Media
pertumbuhan bakteri disterilisasi autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit. Jarum ose dan pinset dipanaskan dengan lampu bunsen.

## Pembuatan Media
Media yang digunakan antara lain :
a. Pembuatan Media Blood Agar
Perbandingan  dibuat  dengan  40  gram  dalam 1000 ml aquades. Medium dipanaskan menggunakan hot  plate sampai  mendidih  agar  tercampur  dengan sempurna.  Kemudian  didiamkan  dan  disterilkan  di dalam  autoclave  selama  15  menit  pada  suhu  121 0 C. Dinginkan beberapa saat dan ditambahkan 7% darah. Setelah  itu  dituangkan  di  atas  lapisan  dasar  cawan petri.
b. Pembuatan Media MHA (Mueller Hinton Agar)
Perbandingan  dibuat  dengan  38  gram  dalam 1000  ml  aquades,  kemudian  dipanaskan  sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna. Selanjutnya  disterilkan  dalam autoclave pada  suhu 121 0 C selama 15 menit. Setelah itu diangkat kemudian dituangkan di atas lapisan dasar cawan petri.
c. Standart Mc. Farland No. 0,5
Standar  kekeruhan  Mc  Farland  dibuat dengan  melarutkan  BaCl 2 1,175%  sebanyak  0,05  ml dan H 2 SO 4 1% sebanyak 9,95 ml. Campurkan kedua larutan  di  atas  ke  dalam  tabung  reaksi  dan  dikocok hingga homogen. 12

## Pembuatan Inokulum
Bakteri  ditumbuhkan  pada media  selektifnya yaitu Blood  Agar untuk  mendapatkan  koloni  dari Streptococcus  pyogenes. Koloni  dari Streptococcus pyogenes tersebut  diletakan  ke  dalam  tabung  yang berisi  10  ml  larutan  NaCl  0,9%  sampai  didapat
kekeruhan  suspensi  sama  dengan  kekeruhan  larutan standar Mc. Farland no. 0,5.

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Batang Tabat Barito Terhadap Streptococcus pyogenes
Langkah-langkah uji aktivitas antibakteri yaitu :
a. Masukkan lidi kapas steril ke dalam suspensi yang telah  dibuat.  Kemudian  tiriskan  pada  sisi  tabung reaksi tersebut dan tunggu beberapa saat. Goreskan lidi  kapas  tersebut  pada  permukaan  cawan  petri berisi Mueller  Hinton  Agar (MHA)  yang  telah dibuat sebelumnya hingga merata.
b. Kertas  Cakram Kirby-Bauer kosong  dicelupkan selama 15 menit ke dalam masing-masing larutan yang akan diuji yaitu ekstrak etanol batang Tabat Barito  pada  berbagai  konsentrasi,  kontrol  positif (Ampisilin) dan kontrol negatif ( dimethyl sulfoxide )  sesuai  dengan  jumlah  pengulangannya masing-masing.
c. Kertas Cakram Kirby-Bauer yang telah dicelupkan selama  15  menit  kemudian  ditiriskan  selama  5 menit  dan  dimasukkan  ke  dalam  masing-masing kelompok  perlakuan  dan  kontrol  tersebut  pada permukaan  media Mueller  Hinton  Agar (MHA), kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  24 jam.
d. Setelah  24  jam  inkubasi,  dilakukan  pengukuran diameter  zona  hambat  dengan  menggunakan jangka sorong.

## Alur Penelitian
Gambar 1. Alur Penelitian

## HASIL PENELITIAN
Tabel 1. Hasil Ekstraksi Tumbuhan Tabat Barito (Ficus deltoidea Jack)
Berat awal Berat simplisia Hasil filtrasi Ekstrak kental 5000 gram 1118 gram 3973 ml 15,06 gram Tabel 2. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Batang Tabat Barito (Ficus deltoidea Jack) Terhadap Pertumbuhan Streptococcus pyogenes
1x24 Jam Diameter Zona Hambat (mm) 5% 10% 20% Konsentrasi (%) 40% K (+) K (-) I 10,6 9,5 6,4 5,7 24,8 0 II 11,9 8,8 9,3 4,6 27,1 0 III 11,3 7,9 8,4 3,9 25,6 0 IV 10,4 8,1 7,7 5,1 29,4 0 Rata-rata 11,05 8,575 7,95 4,825 26,725 0

## PEMBAHASAN
Pada penelitian ini menggunakan bahan utama yaitu  batang  Tabat  Barito  ( Ficus  deltoidea Jack). Batang tumbuhan Tabat Barito ( Ficus deltoidea Jack) yang telah didapatkan dicuci bersih menggunakan air mengalir  lalu  ditimbang  dan  didapatkan  berat sebanyak 5 kg, kemudian dipotong kecil-kecil dengan ukuran 1-3 cm. Batang tumbuhan Tabat Barito ( Ficus deltoidea Jack)  yang  sudah  dikeringkan  dibuat menjadi  simplisia  dengan  cara  diblender  kemudian diayak  lalu  ditimbang  dan  didapatkan  simplisia  dari batang tumbuhan Tabat Barito ( Ficus deltoidea Jack) sebanyak 1118 gr.
Simplisia  batang  Tabat  Barito  ( Ficus deltoidea Jack)  yang  telah  ditimbang  menggunakan timbangan  digital  didapatkan  sebanyak  1118  gr
kemudian  dilakukan  perendaman  menggunakan etanol  96%  selama  1x24  jam.  Lalu  dilakukan pemisahan  filtrat  dengan  kertas  saring.  Perendaman dilakukan  sebanyak  3x  dengan  filtrat  total  yang didapatkan sebanyak 3973 L dan memerlukan etanol 96% sebanyak 7,5 L.
Filtrat  yang  telah  diperoleh  kemudian diuapkan dengan menggunakan waterbath .
Tujuannya  adalah  untuk mendapatkan  ekstrak  pekat. Suhu  yang  digunakan  untuk  pemekatan  ini  berkisar antara 60°C. Suhu harus selalu dijaga agar suhu tidak terlalu  tinggi  untuk  menghindari  kerusakan  senyawa metabolit  sekunder,  karena  beberapa  senyawa metabolit  sekunder  mudah  rusak  pada  suhu  tinggi. 13 Proses  pemekatan  ekstrak  dilakukan  selama  8  jam sehari. Menurut penelitian yang dilakukan oleh Ibiba, tentang pengaruh waktu ekstraksi terhadap kandungan senyawa  flavonoid  didapatkan  bahwa  kandungan flavonoid  akan  terus  meningkat  maksimal  dan  akan cenderung stabil di atas waktu ekstraksi 6 jam. 14 Pada penelitian  lain  oleh  Menghao  dkk,  dilakukan penelitian  tentang  pengaruh  lama  ekstraksi  terhadap kandungan  saponin.  Hasilnya,  kandungan  saponin akan mencapai maksimal pada waktu 4 jam dan di atas waktu  tersebut  kandungan  senyawa  cenderung stabil. 15 Sedangkan  pada  alkaloid  akan  mencapai kandungan maksimal pada waktu ekstraksi 90 menit. 16
Sehingga  pada  waktu  ekstraksi  selama  8  jam kandungan  alkaloid  akan  cenderung  turun  dan  tidak mencapai  kadar  maksimalnya.  Namun  yang  perlu diperhatikan  adalah  bahwa  aktivitas  antibakteri  yang terbentuk  merupakan  hasil  aktivitas  antar  senyawa yang  saling  bersinergi  satu  sama  lain  sehingga  tetap
dapat  memberikan  zona  hambat  pada  pertumbuhan bakteri.  Dari  hasil  pemekatan  didapatkan  sebanyak 15,06  gram  ekstrak  kental  batang  tumbuhan  Tabat Barito  ( Ficus  deltoidea Jack).  Ekstrak  yang didapatkan berwarna cokelat serta memiliki bau yang khas.
Setelah  didapatkan  ektrak  kental  batang tumbuhan  Tabat  Barito  ( Ficus  deltoidea Jack) kemudian  dibuat  dalam  beberapa  konsentrasi  yaitu 5%,  10%,  20%  dan  40%  serta  kontrol  negatif  dari DMSO dan kontrol positif dari ampisilin. Penelitian ini  menggunakan  bakteri Streptococcus  pyogenes yang  telah  diinkubasi  selama  1x24  jam  di  dalam inkubator  yang  ditumbuhkan  dalam  24  medium Muller  Hinton  Agar (MHA).  Masing-masing konsentrasi diberi perlakuan sebanyak 4 kali.  Pada penelitian  ini  didapatkan  zona  hambat  terbentuk  di sekitar disk mulai  dari  konsentrasi  5%,  10%,  20%, dan  40%  serta  pada  kontrol  positif.  Kontrol  negatif pada penelitian ini tidak membentuk zona hambat.
Data  diameter  zona  hambat  hasil  penelitian pemberian ekstrak etanol batang Tabat Barito ( Ficus deltoidea Jack)  terhadap Streptococcus  pyogenes dicantumkan  dalam  tabel  5.2.  Pada  masing-masing perlakuan konsentrasi terbentuk zona hambat Muller Hinton Agar (MHA) yang telah ditumbuhi
Streptococcus pyogenes . Pada konsentrasi 5% dapat membentuk  zona  hambat  dengan  rata-rata  zona hambat  11,05  mm,  10%  dengan  rata-rata  zona hambat  8,575  mm,  20%  dengan  rata-rata  zona hambat 7,95 mm, 40% dengan rata-rata zona hambat 4,825 mm, dan kontrol positif dengan rata-rata zona hambat  26,725  mm.  Kontrol  negatif  menggunakan
DMSO tidak membentuk  zona hambat. Konsentrasi yang  dapat  membentuk  zona  hambatan  tertinggi adalah  konsentrasi  5%  dan  yang  terendah  adalah konsentrasi 40%. Zona hambat yang dapat terbentuk pada  penelitian  ini  dapat  membuktikan  bahwa tumbuhan Tabat Barito memiliki aktivitas antibakteri atau mampu menghambat dari pertumbuhan bakteri Streptococcus  pyogenes .  Hal  ini  sesuai  dengan hipotesis pada penelitian ini yang mengatakan bahwa ekstrak etanol batang Tabat Barito dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus pyogenes .
Pada  umumnya  diameter  zona  hambat cenderung meningkat sebanding dengan meningkatnya  konsentrasi  ekstrak.  Tetapi  pada penelitian  ini  terdapat  penurunan  diameter  luas  zona hambat  pada  konsentrasi  yang  lebih  besar.  Menurut Elifah  dalam  Ariyanti  dkk,  diameter  zona  hambat tidak  selalu  naik  sebanding  dengan  naiknya konsentrasi zat antibakteri. 17 Hal tersebut dimungkinkan  karena  perbedaan  kecepatan  difusi senyawa  antibakteri  pada  media  agar  serta  jenis  dan konsentrasi  senyawa  antibakteri  yang  berbeda sehingga  dapat  menyebabkan  diameter  zona  hambat pada  konsentrasi  terkecil  lebih  besar  daripada konsentrasi  yang lebih  besar. 17 Menurut  Sarjono  dan Mulyani  dalam  penelitiannya,  aktivitas  antibakteri suatu  ekstrak  awalnya  akan  meningkat  sampai didapatkan  zona  hambat  maksimal  pada  konsentrasi tertentu.  Apabila  konsentrasi  tersebut  ditingkatkan lagi,  zona  hambatan  akan  menurun.  Semakin  tinggi konsentrasi, zona hambat akan semakin menurun dan cenderung konstan. 18
Davis  dan  Stout  dalam  Ningsih  dkk, menyatakan  bahwa  apabila  zona  hambat  yang terbentuk pada uji difusi agar berukuran kurang dari 5  mm,  aktivitas  penghambatan  dikategorikan  lemah. Apabila zona hambat berukuran 5-10 mm dikategorikan  sedang,  10-19  mm  dikategorikan  kuat dan  20  mm  atau  lebih  dikategorikan  sangat  kuat. 19 Berdasarkan  hasil  pengamatan  dan  pengukuran diameter daerah hambat ekstrak kental tanaman Tabat Barito  terhadap  bakteri Streptococcus  pyogenes diketahui  bahwa  ekstrak  tersebut  memiliki  aktivitas antibakteri  yang  lemah  hingga  kuat  terhadap  bakteri Streptococcus pyogenes .
Kontrol positif pada penelitian ini menggunakan antibiotik ampisilin dan kontrol negatif menggunakan DMSO. Antibiotik ampisilin menghasilkan diameter zona hambat dengan rata-rata 26,725 mm.  Berdasarkan CLSI  ( Clinical  Laboratory Standard  Institute ),  dapat  disimpulkan  bahwa antibiotik ampisilin sensitif terhadap bakteri Streptococcus pyogenes karena diameter zona hambat ≥24  mm. 20 Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa kontrol negatif tidak memberikan zona hambatan. Hal tersebut membuktikan bahwa pelarut tidak berpengaruh  terhadap  aktivitas  antibakteri,  sehingga aktivitas hanya berasal dari larutan ekstrak tumbuhan, bukan dari pelarut yang dipakai.
Setelah diameter zona hambat dihasilkan, maka dilakukan uji One Way Anova untuk mengetahui perbedaan setiap data. Hasil uji One Way Anova terhadap hasil penelitian didapatkan bahwa nilai signifikan yakni 0,000. Nilai signifikan tersebut
p<0,05 yang berarti terdapat perbedaan bermakna dari setiap data pada masing-masing kelompok.
Zona  hambat  yang  terbentuk  pada  setiap konsentrasi  disebabkan  karena  adanya  zat-zat  aktif yang  terkandung  dalam  batang  Tabat  Barito  seperti flavonoid, alkaloid, dan saponin. 7
Kandungankandungan  tersebut  memiliki  aktivitas yang dapat digunakan sebagai antibakteri. 8,9
Mekanisme kerja flavonoid sebagai antimikroba dapat dibagi menjadi 3 yaitu menghambat sintesis  asam  nukleat,  menghambat  fungsi  membran sel dan menghambat metabolisme energi. 10 Penelitian lain  menyatakan  bahwa  mekanisme  flavonoid menghambat  fungsi  membran  sel  dengan  cara menghambat  ikatan  enzim  seperti  ATPase  dan phospholipase. 10 Bakteri Streptococcus β haemolyticus grup  A  dapat  mengeluarkan  sejumlah  eksoprotein ekstraselular aktif seperti proteinase yang diantaranya adalah adenosin trifosfatase (ATPase), hialuronidase, dan lipoproteinase. 21 ATPase tersebut digunakan oleh bakteri  untuk  pembentukan  energi.  Sehingga  jika enzim  ATPase  tersebut  dihambat  maka  bakteri  tidak dapat  menggunakan  energi  lagi  untuk  melanjutkan kehidupannya.  Selain  itu,  flavonoid  juga  dapat menghambat  enzim  hialuronidase,  yang  memainkan peran penting dalam penetrasi mikroba ke dalam suatu substrat. Flavonoid berinteraksi dengan hialuronidase, terutama  melalui  gaya  elektrostatik  dan  hidrofobik, serta membentuk kompleks enzimflavonoid. Ikatan ini mempengaruhi  mikro  lingkungan  dari  situs  aktif enzim  dan  hasilnya  dapat  mengurangi  atau menghambat aktivitas dari enzim tersebut. 22
Hialuronidase  digunakan  oleh  bakteri Streptococcus
pyogenes untuk  memecah  asam  hialuronat,  suatu substansi komponen dasar yang membantu penyebaran organisme penginfeksi. 23 Sehingga apabila  hialuronidase  tersebut  dihambat,  penyebaran organisme pun akan terhambat.
Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri yaitu  dengan  cara  mengganggu  komponen  penyusun peptidoglikan  pada  sel  bakteri,  sehingga  lapisan dinding  sel  tidak  terbentuk  secara  utuh  dan menyebabkan  kematian  pada  sel  tersebut. 10 Rangka dasar dinding sel bakteri adalah lapisan peptidoglikan. Peptidoglikan tersusun dari N- asetil glukosamin dan N-asetil  asam  muramat.  Pada  Nasetil  asam  muramat terdapat rantai pendek asam amino: alanin, glutamat, diaminopimelat, lisin dan alanin, yang terikat melalui ikatan  peptida.  Peranan  ikatan  peptida  ini  sangat penting  dalam  menghubungkan  antara  rantai  satu dengan  rantai  yang  lain.  Mekanisme  kerusakan dinding bakteri terjadi karena proses perakitan dinding sel  bakteri  yang  diawali  dengan  pembentukan  rantai peptida  yang  akan  membentuk  jembatan  silang peptida  kemudian menggabungkan rantai  glikan  dari peptidoglikan  pada  rantai  yang  lain  sehingga menyebabkan dinding sel terakit sempurna. Terganggunya komponen penyusun peptidoglikan ini menyebabkan sel bakteri mudah mengalami lisis, baik berupa  fisik  maupun  osmotik  dan  menyebabkan kematian  sel. 24 Streptococcus  pyogenes merupakan gram  positif  yang  memiliki  lapisan  peptidoglikan tebal. Sehingga lebih rentan terhadap senyawasenyawa yang memiliki potensi merusak atau menghambat sintesis dinding sel.
Seperti yang telah diketahui, sitoplasma pada semua  sel  hidup  termasuk Streptococcus  pyogenes, dibungkus  oleh  membran  sitoplasma  yang  berperan sebagai  sawar  berpermeabilitas  selektif,  melakukan fungsi  transportasi  aktif  dan  mengatur  komposisi internal sel. 19 Senyawa saponin memiliki kemampuan dalam  merusak  membran  sitoplasma.  Saponin berdifusi melalui membran luar dan dinding sel yang rentan  kemudian  mengikat  membran  sitoplasma sehingga  mengganggu  dan  mengurangi  kestabilan membran sel. Hal ini menyebabkan sitoplasma bocor keluar dari sel. 10 Rusaknya membran sitoplasma dapat mengakibatkan  sifat  permeabilitas  membran  sel berkurang sehingga transport zat ke dalam sel dan ke luar  sel menjadi tidak terkontrol.  Zat  yang  berada  di dalam sel seperti ion organik enzim, asam amino, dan nutrisi  dapat  keluar  dari  sel.  Apabila  enzim-enzim keluar dari sel bersama dengan zat-zat seperti air dan nutrisi  dapat  menyebabkan  metabolisme  terhambat sehingga  terjadi  penurunan  ATP  yang  diperlukan untuk  pertumbuhan  dan  perkembangbiakan  sel, selanjutnya pertumbuhan sel bakteri menjadi terhambat dan menyebabkan kematian sel. 24

## Keterbatasan Penelitian
Penelitian  ini  terbatas  hanya  pada  pengujian aktivitas  antibakteri,  tanpa  dilakukan  isolasi  khusus terhadap  zat-zat  aktif  seperti  flavonoid,  alkaloid  dan saponin dalam batang Tabat Barito. Selain itu, dalam proses  pemekatan  esktraksi,  peneliti  menggunakan waterbath karena tidak tersedianya alat.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak  etanol  batang  Tabat  Barito  ( Ficus deltoideus Jack)  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes baik  pada konsentrasi 5%, 10%, 20% dan 40%. 2. Konsentrasi  ekstrak  etanol  batang  Tabat  Barito ( Ficus  deltoideus Jack)  yang  efektif  dapat menghambat pertumbuhan Streptococcus pyogenes adalah  konsentrasi  5%  dengan  rata-rata nilai  zona  hambat  yang  terbentuk  sebesar  11,05 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Pangow  CC,  Pandaleke  HEJ,  dan  Kandou  RT. Profil  Pioderma  pada  Anak  di  Poliklinik  Kulit dan  Kelamin  RSUP  Prof.  Dr.  R.  D.  Kandou Manado Periode Januari-Desember 2012.
Jurnal e-Clinic. 2015; 3(1): 217-223.
2. Mistik  S,  Uludag  A,  Kartal  D,  and  Cinar  SL. Bacterial  Skin  Infections:  Epidemiology  and Latest  Research. Turkish  Journal  of  Family Medicine & Primary Care. 2015; 9(2): 65-74.
3. Djuanda  A.  Ilmu  Penyakit  Kulit  dan  Kelamin. Edisi ke-6. Jakarta: Badan Penerbit FKUI. 2011: 57-63.
4. Centers  for  Disease  Control  and  Prevention (CDC). Group A Streptococcal (GAS) Disease. 2014.
5. Fahriah,  Pandaleke  HEJ,  dan  Kapantow  GM. Profil Pioderma pada Orang Dewasa di Poliklinik Kulit dan Kelamin RSUP Prof. Dr. R. D. Kandou Manado Tahun 2012. Journal e- Clinic. 2015; 3(1): 526-530.
6. Hernani.  Pengembangan  Biofarmaka  sebagai Obat Herbal untuk Kesehatan. Buletin Teknologi Pascapanen Pertanian . 2011; 7(1): 20-29.
7. Bee  ATB.  Proteomic-Based  Profiling  of  The Leaf  Extracts  of Ficus deltoidea [dissertation].
Kuala Lumpur: Faculty of Science University of Malaya. 2014.
8. Hendra R, Ahmad S, Sukari A, Shukor MY, and Oskoueian E. Flavonoid analyses and antimicrobial activity of various parts of Phaleria macrocarpa  (Scheff.)  Boerl  fruit. Int  J  Mol  Sci .
2011; 12: 3422-3431.
9. Madduluri  S,  Rao  KB,  and  Sitaram  B.  In  Vitro Evaluation  of  Antibacterial  Activity  of  Five Indegenous Plants Extract Against Five Bacterial Pathogens  of  Human. Int  J  Pharm  Pharm  Sci . 2013; 5 Suppl 4: 679-684.
10. Rijayanti  RP.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol Daun Mangga Bacang ( Mangifera foetida L. )  terhadap Staphylococcus secara  in  vitro [skripsi]. Pontianak: Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura. 2014.
11. Mukhriani.  Ekstraksi,  Pemisahan  Senyawa,  dan Identifikasi  Senyawa  Aktif.  Makassar: Jurnal Kesehatan . 2014; (7)2: 361-367.
12. Sutton  S.  Determination  of  Inoculum  For Microbiological  Testing.  New  York: Journal  of GXP Compliance . 2011; (15)3: 49-53.
13. Daniel.  Isolasi  Senyawa  Fenolik  pada  Fraksi Metanol-Air dari Umbi Tumbuhan Sarang Semut
( Myrmecodia  tuberose Jack). Jurnal  Kimia Mulawarman . 2010; 8(1): 1-6.
14. Ibibia EKT. Determination of the Total Phenolic Contents, Antimicrobial and Antioxidant Effects in  the  Ethanolic  Leaf  Extract  of Prunus Amgydalus . Journal  of  Applied  Pharmaceutical Science . 2013; 3(6):
94-100.
15. Du M, Huang S, Zhang J, Wang J, Hu L, et al.
Isolation  of  Total  Saponins  from Sapindus mukorossi Gaerth. Open Journal of Forestry . 2014; 4(1): 24-27.
16. Teng H dan Choi YH. Optimization of Extraction of  Total  Alkaloid  Content  from  Rhizome Coptidis  ( Coptis  chinensis Franch)  using Response  Surface  Methodology. J  Korean  Soc Appl Biol Chem . 2012; 55: 303−309.
17. Ariyanti NK, Darmayasa IBG, Sudirga SK. Daya Hambat Ekstrak Kulit Daun Lidah Buaya ( Aloe barbadensis Miller)  Terhadap  Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Eschericia coli ATCC 25922. Jurnal Biologi . 2012; 16(1): 1-4.
18. Sarjono  PR  dan  Mulyani  NS.  Aktivitas Antibakteri  Rimpang  Temu  Putih  ( Curcuma mangga Vall ). JSM . 2007; 15(2): 89-93.
19. Ningsih  AP,  Nurmiati  dan  Agustien  A.  Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kental  Tanaman Pisang Kepok Kuning ( Musa paradisiaca Linn.) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . J Bio UA . 2013; 2(3): 207213.
20. Patel  JB,  Cockrerill  FR,  Alder  J,  Bradford  PA, Eliopoulus GM, et al. Performance Standards for Antimicrobial  Susceptibility  Testing. Clinical and Laboratory Standards Institute . 2014; 34(1): 94-97.
21. Pardede  SO.  Struktur  Sel  Streptokokus  dan
Patogenesis Glomerulonefritis Akut Pascastreptokokus. Sari Pediatri . 2009; 11(1): 56-65.
22. Iranshahi M, Rezaee R, Parhiz H, Roohbakhsh A, dan  Soltani  F.  Protective  effects  of  flavonoids against  microbes  and  toxins:  The  cases  of hesperidin and hesperetin. Life Sciences. [serial on  the  internet].  2015.  [cited  2016  Aug  22];
[about 35 p.]. Available
from : https://www.researchgate.net.
23. Jawetz  M  dan  Adelberg. Streptokokus .  Dalam: Mikrobiologi Kedokteran Edisi ke-25. Jakarta:
EGC. 2012: 206-211.
24. Retnowati  Y,  Bialangi  N,  dan  Posangi  NW. Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus pada  Media  yang  Diekspos  dengan  Infus  Daun Sambiloto ( Andrographis paniculata ). Saintek . 2011; 6(2).