## IDENTIFIKASI DAN UJI SENSITIFITAS BAKTERI YANG DIISOLASI DARI SPUTUM PENDERITA PNEUMONIA DI RSUP PROF. DR. R. D. KANDOU MANADO TERHADAP ANTIBIOTIK ERITROMISIN, SEFTRIAKSON DAN SEFADROKSIL
Karundeng Raynaldi Joel 1) , Fatimawali 1) , Widya Astuty Lolo 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Pneumonia  is  one  of  disease  problem  with  a  high  mortality  rate.  This  disease  is  an infectious disease caused by microorganisms, such as bacteria. The purposes of this study were to  isolate,  to  identify  and  to  test  the  sensitivity  of  bacteria  that  presents  in  the  sputum  of pneumonia patients  against  antibiotics Erythromycin,  Ceftriaxone and Cefadroxil. Biochemical tests, physiological tests and the Gram stain was used to identify the bacteria obtained from the three  sputum  samples  of  patients  with  pneumonia.  Antibiotic  sensitivity  testing  of  identified bacteria  was  performed  by  the  agar  diffusion  method  using  antibiotic  discs  inoculated  with Erythromycin, Ceftriaxone and Cefadroxil. The bacteria were  obtained from the isolation were Erythrobacter  sp.,  Enterococcus  sp.,  Klabsiella  pneumonia,  Staphylococcus  aureus, Streptococcus  sp.  Where  these  five  isolated  bacteria  shown  the  highest  sensitivity  against antibiotic  Cefadroxil  (100%),  intermediate  against  Erythromycin  (16  %)  and  resistance  to  the Ceftriaxone (50 %).
Keywords :  Identification,  Sensitivity  Test,  Pneumonia,  Antibiotics,  and  Microorganis

## ABSTRAK
Pneumonia  adalah  masalah    dengan  angka  kematian  yang  tinggi.  Penyakit  ini  merupakan penyakit infeksi yang disebabkan oleh mikroorganisme, diantaranya adalah bakteri. Tujuan penelitian ini untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi  bakteri  yang  terdapat  dalam  sputum  penderita  pneumonia  dan menguji kepekaan bakteri hasil isolasi dan identifikasi dari sputum penderita pneumonia tersebut terhadap antibiotik Eritromisin, Seftriakson dan Sefadroksil.  Bakteri diperoleh dari tiga sampel sputum penderita pneumonia  dan  didentifikasi  dengan  uji  biokimia,  uji  fisiologi  dan  pewarnaan  Gram.  Uji  sensitivitas antibiotik  terhadap  bakteri hasil  identifikasi dilakukan  dengan  metode  difusi  agar  dengan  menggunakan cakram  antibiotik  Eritromisin,  Seftriakson  dan  Sefadroksil.  Bakteri  yang  diperoleh  dari  hasil  isolasi adalah  bakteri Erythrobacter  sp.,  Enterococcus  sp.,  Klabsiella  pneumonia.,  Staphylococcus  aureus dan Streptococcus  sp. dimana  antibiotik  dengan  sensitivitas  terbesar  pada  Sefadroksil  (100  %),  intermediet pada Eritromisin (16%) dan resistensi terbesar pada Seftriakson (50 %).
Kata kunci : Identifikasi, Uji sensitivitas, Pneumonia, Antibiotik dan Mikroorganisme.

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  jenis penyakit  yang  paling  banyak  diderita  oleh penduduk  di  negara  berkembang,  termasuk Indonesia.  Salah  satu  penyebab  penyakit infeksi  adalah  mikroorganisme  bakteri (Radji,  2011).  Penyakit  yang  diakibatkan oleh  infeksi  mikroorganisme  merupakan salah  satu  penyakit  yang  selalu  menjadi pusat perhatian para praktisi dan pemerhati kesehatan  (Wattimena,  1990).  Salah  satu penyakit  infeksi  akibat  bakteri  adalah pneumonia.
Pneumonia adalah keradangan parenkrim paru dimana asinus terisi dengan cairan  dan  sel  radang,  dengan  atau  tanpa disertai  infiltrasi  sel  radang  kedalam dinding  alveoli  dan  rongga  interstisium (Mukty  dan  Alsagaff,  2010).  Penyakit  ini sering menyerang anak balita, namun dapat juga ditemukan pada orang dewasa. Proses infeksi pneumonia adalah infeksi akut yang mengenai  jaringan  paru-paru  (alveoli). Gejala  pneumonia  pada  umumnya  antara lain  demam,  sesak  napas,  napas  dan  nadi berdenyut  lebih  cepat,  dahak  berwarna kehijauan  atau  seperti  karet  (Misnadiarly, 2008). Bakteri penyebab pneumonia diantaranya Streptococcus  pneumoniae , Staphylococcus aureus , Mycoplasma pneumoniae dan Legionella  pneumphilia . (Fransisca,  2000).  Pengobatan  penyakit infeksi  yang  disebabkan  oleh  bakteri  dapat dilakukan dengan menggunakan antibiotik.
Penggunaan antibiotik menurut Hayes Peter C (1993) sebagai penatalaksanaan pneumonia biasanya digunakan  golongan  penisilin  (Ampisilin), aminoglikosida  (Gentamisin),  sefalosporin (Sefiksim,  Seftriakson)  dan  kombinasi  dari
berbagai  antibiotik.  Penggunaan  antibiotik eritromisin dapat digunakan sebagai alternatif  penisilin  yang  dihubungkan  pada spektrum  antibiotiknya.  Terapi  eritromisin dapat diberikan dalam pengobatan pneumonia  untuk  kasus  nonkomplikasi (Leveno, 2003).
Penggunaan  antibiotik  yang  tepat harus  menjadi  landasan  yang  kuat  dalam penggunaan terapi penyakit infeksi, termasuk  perlu  mendapat  perhatian  khusus mengenai kepekaan suatu antibiotik terhadap bakteri penyebab infeksi (Anonim,  2011).  Oleh  karena  itu  perlu dilakukan penelitian mengenai uji kepekaan  melalui  kultur  bakteri  terhadap antibiotik  yang  digunakan  dalam  terapi pneumonia  agar  terapi  dilakukan  secara tepat.

## METODOLOGI PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian  yaitu  jarum  ose,  cawan  petri ( Normax ),  lampu  Bunsen,  tabung  reaksi ( Pyrex ),  rak  tabung,  pinset,  pipet  tetes, Magnetic  stirrer , Hot  plate , Laminair  air flow ( Biotek ),  autoklaf  ( ALP ),  Beker gelas ( Approx ),  timbangan  analitik  ( Kern ),  gelas ukur ( Pyrex ), kapas, mikropipet ( Ecoipette ), Erlenmeyer ( Approx ),
inkubator  ( Incucell ),  batang  pengaduk, mistar berskala, plastik wrap dan
aluminium foil , alat fotografi
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  :  sputum,  cakram  antibiotik Eritromisin 15µg ( Oxoid ), cakram antibiotik Seftriakson 30µg ( Oxoid ), cakram antibiotik Sefadroksil 30µg ( Oxoid ) aquades,  kristal  violet,  alkohol,  Larutan
NaCl,  Safranin,  Larutan  lugol,  H 2 O 2 , reagen  covac,  Simon  Citrat  Agar  ( Oxoid ),
Tripel  sugar  iron (TSI)  agar  ( Oxoid ), Nutrient  Broth  ( Oxoid ),  Lysine  Agar ( Oxoid ),  Tripton  ( Oxoid ),  Nutrient  Agar ( Oxoid ),  Agar bacteriological ( Oxoid ) dan Yeast extract ( Oxoid ).

## Bentuk Penelitian
Penelitian  ini  bersifat  deskriptif eksploratif
dan dilakukan dengan pendekatan  studi  prospektif.  Pengambilan sampel dilakukan secara total sampling dari tiga  pasien  pneumonia  yang  menjalani rawat  jalan  di  RSUP  Prof.  Dr.  R.  D. Kandou Manado dari bulan Mei - Juli 2016.

## Preparasi Sampel
Sampel sputum diambil pada pasien rawat  jalan  penderita  pneumonia  di  RSUP Prof.  Dr.  R.  D.  Kandou  Manado.  Sebelum dilakukan  pengambilan  sampel  sputum, penderita terlebih dahulu dijelaskan tentang pentingnya  memperoleh  sampel  yang benar.  Penderita  akan  dijelaskan  bahwa sputum  yang  dikeluarkan  berasal  dari dalam  paru-paru  bukan  air  liur/saliva. Sebelum  pengambilan  sampel  penderita disuruh  berkumur  dengan  air  untuk membersihkan  sisa-sisa  makanan  yang mungkin  masih  tertinggal.  Diminta  kepada penderita  agar  memasukan  sputum  dalam pot  sputum  steril  yang  berisi  larutan  dan kemudian  pot  sputum  ditutup  dengan  rapat dan diberi label identitas penderita. Setelah itu  dibawa  ke  laboratorium  untuk  di identifikasi  lebih  lanjut  sesuai  prosedur penelitian.

## Sterilisasi Alat
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  disterilkan  terlebih  dahulu. Alat-alat  gelas  disterilkan  dalam  autoklaf dengan suhu 121 0 C dalam 15 menit dengan tekanan  1  atm.  Pinset,  pipet  dan  jarum  ose disterilisasi langsung dengan fiksasi.

## Pembuatan Media
a. Pembuatan  Media Luria  Bertani  Agar Plate
Media
LB dibuat dengan menimbang tripton sebanyak 2 gram, NaCl sebanyak 2  gram, yeast  extract sebanyak 1 gram  dan agar  bacteriological sebanyak  3 gram, kemudian dimasukan kedalam
Erlenmeyer dan dilarutkan bersama aquades  sebanyak  200  ml  kemudian dihomogenkan. Media yang sudah homogen  ini  disterilkan  dalam  autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit tekanan 1  atm,  kemudian  dituangkan  pada  masing- masing  cawan  petri  sebanyak  20  mL  dan didinginkan  sampai  memadat.  Media  ini digunakan  sebagai  media  untuk  inokulasi bakteri dan media untik pengujian kepekaan antibiotik.
b. Pembuatan  Media Luria  Bertani  Agar Miring
Media LB dibuat denga menimbang tripton sebanyak  0,5  gram,  NaCl  sebanyak  0,5 gram, yeast extract sebanyak 0,25 gram dan agar  bacteriological sebanyak  0.75  gram, kemudian  dimasukan  kedalam  Erlenmeyer dan  dilarutkan  bersama  aquades  sebanyak 50  mL  kemudian  dihomogenkan.  Media yang  sudah  homogen  ini  disterilkan  dalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 15 menit tekanan 1 atm. Selanjutnya media
dituangkan  pada  masing-masing  tabung reaksi  sebanyak  5  mL  dan  dimiringkan sampai memadat pada kemiringan 30 0 .

## Inokulasi Bakteri Pada Media
Sampel  sputum  di  tambahkan  NaCl 0,9  %  sebanyak  5  ml  dan  dilakukan pengenceran bertingkat. Pengenceran bertingkat  ini  dilakukan  dengan  cara  yaitu disediakan 4 tabung reaksi yang berisi 5 ml NaCl  0,9  %.  Diambil  sampel  sputum sebanyak  1  ml  dan  dimasukan  dalam tabung  reaksi  pertama.  Kemudian  dari tabung  reaksi  yang  pertama  diambil sebanyak  1  ml  dan  dimasukan  kedalam tabung  reaksi  kedua  dan  seterusnya dilakukan  sampai  tabung  reaksi  yang keempat.  Selanjutnya dipipet sebanyak 100 µL  suspensi  sputum  untuk  masing-masing pengenceran  dan  dituangkan  ke  atas  media Luria  Bertani Agar Plate yang  sudah memadat.  Selanjutnya  dibungkus  cawan petri  tersebut  dengan  menggunakan  plastik Wrap .  Sputum  yang  mengandung  bakteri yang  telah  ditanamkan  pada  media Luria Bertani Agar Plate selanjutnya  diinkubasi dalam  inkubator  pada  suhu  35  -  36 o C selama  18  jam.  Jika  hanya  terdapat  sedikit koloni  maka  diinkubasi  kembali  selama  24 jam (Vandepitte, 2010).

## Isolasi Bakteri
Setiap  koloni  bakteri  yang  tumbuh pada  media Luria  Bertani Agar Plate diambil  menggunakan  jarum  ose  untuk dipindahkan  ke  media  agar  miring  untuk mendapatkan  isolat  bakteri  selanjutnya diinkubasi dalam  inkubator pada suhu 35 - 36 0 C  selama  ±  18  –  24  jam  (Vandepitte, 2010)

## Identifikasi Bakteri
a. Uji Biokimia Identifikasi bakteri secara uji biokimia  menggunakan  uji  katalase,  uji H 2 S,  uji lysine ,  uji  fermentasi  karbohidrat, uji sitrat.
b. Pewarnaan Gram
Kaca  objek  dibersihkan  dengan kapas  yang  telah  diberi  alkohol  lalu  diberi label.  Biakan  bakteri  pada  agar  miring  di ambil  dengan  menggunakan  jarum  ose, kemudian di  totol  pada bagian tengah kaca objek sampai merata dan ditambahkan satu tetes  NaCl  0,9%.  Preparat  selanjutnya difiksasi  diatas  lampu  Bunsen.  Sediaan yang  sudah  direkatkan  diwarnai  dengan Kristal  violet  selama  1  menit.  Kistal  violet dicuci pada air mengalir dan diganti dengan larutan  lugol  dibiarkan  selama  1  menit. Larutan  lugol  dicuci  pada  air  mengalir  dan dicuci dengan alkohol 96% selama 1 menit. Selanjutnya  sediaan  dicuci  dengan  air  dan diwarnai  dengan  safranin  selama  1  menit. Sediaan  dicuci  pada  air  yang  mengalir, dikeringkan  dan  diperiksa  di  mikroskop degan menambahkan minyak imerasi.
c. Uji Fisiologi
Uji  fisiologi  dilakukan  dengan menggunakan uji motilitas
Uji kepekaan bakteri terhadap antibiotik a. Pembuatan Larutan Mc. Farland 0,5 Larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  99,5 mL  dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 1,75% sebanyak 0,5 mL dalam Erlenmeyer. Kemudian dikocok sampai terbentuk larutan  yang  keruh.  Kekeruhan  ini  dipakai sebagai  standar  kekeruhan  suspensi  bakteri uji (Victor, 1980).
b. Pembuatan Suspensi Larutan Uji
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi diambil  dengan  menggunakan  jarum  ose steril  lalu  disuspensikan  ke  dalam  tabung yang  berisi  5  mL  larutan  NaCl  0,9%, hingga  diperoleh  kekeruhan  yang  sama dengan  standar  kekeruhan  larutan Mc. Farland 0,5. Perlakuan yang sama dilakukan pada setiap jenis bakteri uji.
c. Penanaman Cakram Dipipet suspensi bakteri uji sebanyak  200  µL  dan  dituangkan  ke seluruh  permukaan  media Luria  Bertani Agar Plate
selanjutnya diratakan menggunakan L-glass dan  didiamkan selama 5 menit. Kemudian cakram antibiotik  Eritromisin,  Kotrimoksazol  dan Sefadroksil  ditempatkan  secara  terpisah dengan  menggunakan  pingset  steril  pada media Luria Bertani Agar Plate yang berisi bakteri.  Selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C  selama  18-24  jam.  Dibuat  tiga  kali pengulangam  pada  cawan  petri  yang berbeda (Kumala, 2010).
d. Pengukuran dan Penetapan Zona
Hambat
Setelah  diinkubasi,  diamati  zona pertumbuhan  bakteri  di  sekitar  cakram antibiotik.  Koloni  bakteri  yang  sensitif terhadap antibiotik Eritromisin, Seftriakson dan Sefadroksil dilihat dengan adanya zona hambatan  berupa  daerah  bening  disekitar cakram antibiotik. Daerah hambayan antibiotik  terhadap  pertumbuhan  bakteri diukur menggunakan mistar berskala dengan  satuan  milimeter.  Zona  hambatan dibandingkan  berdasarkan  pedoman  CLSI ( Clinical and Laboratory Standards
Institute ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  isolasi  dan  identifikasi  secara uji morfologi, uji fisiologi, uji biokimia dan pewarnaan  gram  dari  3  Sampel  sputum diperoleh  6  isolat  bakteri.  Untuk  hasil penelitian  mengenai  identifikasi  bakteri berdasarkan  pengujian  ditentukan  dengan menggunakan  buku Bargey’s  Manual Determinative  of  Bacteriology dan  dapat dilihat hasil identifikasi pada Tabel berikut:
Tabel  1.  Hasil  identifikasi  isolat bakteri  dari  sputum    penderita  pneumonia di RSUP Prof. Dr. R. D. Kandou Manado Kode Isolat  Hasil Identifikasi Bakteri
A Erythrobacter sp. B Enterococcus sp. C Klabsiella pneumonia D Enterococcus sp. E Staphylococcus aureus F Streptococcus sp.
Dari  Tabel  1.  menunjukan  bahwa jenis  bakteri  yang  teridentifikasi  dari  uji biokimia  dan  pewarnaan  gram  hasil  isolasi dari  sputum  beragam,  yaitu Erythrobacter sp. (A), Enterococcus sp. (B,D), Klabsiella Pneumoniae (C), Staphylococcus  aureus (E) dan Streptococcus sp. (F).
Uji Kepekaan Bakteri Terhadap Antibiotik Sensitivitas bakteri terhadap antibiotik  diperoleh  melalui  pengukuran diameter  zona  hambatan  yang  terbentuk setelah  penempelan  cakram  antibiotik. Hasil  pengukuran  zona  hambat  selanjutnya dibandingkan dengan standar diameter zona hambatan  berdasarkan  pedoman  CLSI ( Clinical and Laboratory Standards Institute ).  Pada  uji  kepekaan  digunakan  3 jenis  cakram  antibiotik,  yaitu  Eritromisin, Seftriakson dan Sefadroksil.
Untuk  distribusi  frekuensi  pola sensitivitas  bakteri  terhadap  Eritromisin dapat dilihat pada Tabel berikut :
Tabel 2. Distribusi Frekuensi Pola Sensitivitas Terhadap Eritromisin Bakteri Eritromisin S I R Erythrobacter sp. 1 0 0 Enterococcus sp. 0 1 1 Klabsiella pneumonia 1 0 0 Staphylococcus aureus 1 0 0 Streptococcus sp 1 0 0 Total 4 (66 %) 1 (16 %) 1 (16 %) Keterangan  :  S  =  Sensitif,  I  =  Intermediet dan R = Resisten
Pada  Tabel  2.  menunjukan  bahwa antibiotik  Eritromisin  resisten  sebesar  16 %,  intermediet  sebesar  16  %  dan  sensitif sebesar  66  %  terhadap  bakteri  yang diisolasi dari sputum penderita pneumonia.
Untuk  distribusi  frekuensi  pola sensitivitas  bakteri  terhadap  Seftriakson dapat dilihat pada Tabel berikut:
Tabel 3. Distribusi Frekuensi Pola Sensitivitas Terhadap Seftriakson Bakteri Seftriakson S I R Erythrobacter sp. 0 0 1 Enterococcus sp. 0 1 1 Klabsiella pneumonia 0 1 0 Staphylococcus aureus 0 0 1 Streptococcus sp 0 1 0 Total 0 (0 %) 3 (50 %) 3 (50 %)
Keterangan  :  S  =  Sensitif,  I  =  Intermediet dan R = Resisten
Pada  Tabel  3.  menunjukan  bahwa antibiotik  Seftriakson  resisten  sebesar  50 %,  intermediet  sebesar  50  %,  namun  tidak menunjukan  sensitif  terhadap  semua  isolat bakteri yang diperoleh dari sputum penderita Pneumonia.
Untuk  distribusi  frekuensi  pola sensitivitas  bakteri  terhadap  Sefadroksil dapat dilihat pada Tabel berikut:
Tabel 4. Distribusi Frekuensi Pola Sensitivitas Terhadap Sefadroksil Bakteri Sefadroksil S I R Erythrobacter sp. 1 0 0 Enterococcus sp. 2 0 0 Klabsiella pneumonia 1 0 0 Staphylococcus aureus 1 0 0 Streptococcus sp 1 0 0 Total 6 (100 %) 0 (0 %) 0 (0 %)
Keterangan  :  S  =  Sensitif,  I  =  Intermediet dan R = Resisten
Pada  Tabel  4.  menunjukan  bahwa antibiotik  Sefadroksil  memiliki  angka sensitif  sebesar  100  %  untuk  semua  isolat bakteri  dari  sampel  sputum  penderita Pneumonia.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa : 1. Bakteri  yang  teridentifikasi  dari  isolasi tiga sampel sputum penderita pneumonia  di  RSUP  Prof.  Dr.  R.  D. Kandou Manado adalah bakteri
Erythrobacter  sp. , Enterococcus  sp. ,
Klabsiella Pneumoniae. , Staphylococcus aureus dan Streptococcus sp . 2. Pada  pengujian  sensitifitas  bakteri terhadap antibiotik,
bakteri Erythrobacter  sp. sensitif  terhadap antibiotik  Eritromisin  dan  antibiotik
Sefadroksil,  dan  resisten  terhadap antibiotik Seftriakson. Bakteri Enterococcus  sp. sensitif  terhadap
antibiotik  Sefadroksil  dan  resisten terhadap  antibiotik  Eritromisin  dan Seftriakson.
Bakteri Klabsiella pneumonia sensitif  terhadap  antibiotik Eritromisin dan Sefadroksil, dan intermediet terhadap seftriakson.
Bakteri Staphylococcus  aureus sensitif terhadap  antibiotik  Sefadroksil  dan antibiotik  Eritromisin,  dan  resisten terhadap  antibiotik  Seftriakson.  Bakteri Streptococcus  sp. sensitif  terhadap antibiotik  Sefadroksil  dan  antibiotik Eritromisin,  dan  intermediet  terhadap antibiotik Seftriakson. Sehingga pilihan antibiotik  yang  tepat  untuk  kasus pneumonia adalah Sefadroksil.

## SARAN
1. Dalam  penggunaan  terapi  antibiotik diusulkan  kepada  Instansi  terkait  untuk dapat    menjadikan  sefadroksil  sebagai salah satu pertimbangan dalam penatalaksanaan  terapi  antibiotik  pada pasien  penderita  pneumonia  dengan tetap didasarkan pada kultur bakteri dan uji kepekaan bakteri.
2. Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut dengan  jumlah  sampel  yang  lebih banyak dengan menggunakan antibiotik yang berbeda untuk mengetahui
antibiotik  yang  tepat  dalam  terapi penyakit pneumonia.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2011. Permenkes No:2406/MENKES/PER/XII/2011 Tentang Pedoman Penggunaan Antibiotik. Anonim,  2012.  Clinical  and  Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial
Susceptibility  Testing.  Seventeenth International Supplement.
Hayes, Peter C, Thomas W. Mackay., 1993.
Buku  Saku  Diagnosis  dan  Terapi.
Buku Kedokteran EGC. Jakarta
Holt. 1994. Bergeys Manual of Determinative Bacteriology 9 th
Edition  . USA:  Williams  and
Wilkins Baltimore.
Leveno, Kenneth J.. 2004. Obstetri Williams : Panduan Ringkas Ed.21.Buku Kedokteran EGC.Jakarta Misnadiraly, 2008. Penyakit Infeksi Saluran  Nafas  Pneumonia  Pada Anak,  Orang  Dewasa  dan  Usia Lanjut.Pustaka Obor Populer. Jakarta
Mukty  Abdul,  H.,  Alsagaff  Hood,  2010. Dasar — dasar  Ilmu Penyakit Paru, Surabaya : Erlangga.
Pratiwi,  S.T.,  2008.  Mikrobiologi  farmasi. Erlangga. Jakarta : 150–171
Radji,  M.,  2011.  Mikrobiologi  Panduan Mahasiswa  Farmasi  &  Kedokteran. Penerbit  Buku  Kedokteran  EGC. Jakarta.
Sarapi, D. Fatimawali, dan Budiarso. 2014. Identifikasi Bakteri Resisten Merkuri  Dalam  Urin,  Feses  dam Karang  Gigi  Pada  Indifidu  Di Daerah Pesisir Pantai Desa Pulisan Kecamatan Likupang Timur Kabupaten  Minahasa  Utara .  Jurnal e-Biomedik (eBM).2(2):476-480.
Siswandono,  2008. Kimia  Medisinal  Edisi II .  Airlangga  University  Press. Surabaya
Syahrurachman,  A, Staf  Pengajar  Fakultas Kedokteran.,  1994.  Mikrobiologi
Kedokteran.Universitas  Indonesia. Jakarta Vandepitte. J,, 2005. Prosedur Laboratorium Dasar Untuk Bakteriologis  Klinis .  Edisi  2.Buku Kedokteran EGC. Jakarta. Wattimena,  J.  R,  M.  B  Widianto,  E.  Y Sukandar.,  1990.  ―Patofisiology‖, Pusat Antar Universitas Ilmu Hayati, Institut Teknologi Bandung, Bandung