Pengaruh pemberian ekstrak jamur merang ( volvariella volvacea ) terhadap kadar kolesterol total, enzim lppla 2 dan mda darah
Amelia Eka Damayanty 1 , Lisyani. B. Suromo 2 , Kisdjamiatun 2

## ABSTRACT
Background: Consumption of high-fat diet (HFD) is increasing blood total cholesterol, LpPLA 2 enzyme and MDA level which is a cause of atherosclerosis that should be controlled by antioxidants. Paddy straw mushroom (Volvariella v.) extract has an antioxidant compounds. This research proves the effect of Volvariella v. extract on blood total cholesterol (TC), LpPLA 2 enzyme and MDA level, and proves correlation between TC with LpPLA 2 enzyme and MDA level. Methods: A randomized post test only control group design to twenty four of 8-10 weeks old  male Rattus novergicus Wistar strain  with  180-200  gram  were  divided  into  four  group;  K1  with  standard  diet,  K2  with  HFD,  each  X1  and  X2  with HFD+Volvariella  v.  extract  500  mg/kg.bwt/day  and  1000  mg/kg.bwt/day.  All  treatments  for  56  days.  TC  levels  assesed  by enzymatic colorimetric test method, LpPLA 2 enzyme with ELISA method and MDA with TBARs method. Data were analyzed by one way Anova, LSD post hoc and Pearson’s correlation.
Results: TC mean of K1 (91,28±1,55 mg/dL), K2 (181,96±4,19 mg/dL), X1 (122,94±2,75 mg/dL) and X2 (105,86±2,25 mg/dL); p=0,001. Enzyme LpPLA 2 mean of K1 (2,65±3,19 ng/mL), K2 (1,29±1,35 ng/mL), X1 (3,92±2,18 ng/mL),  X2 (2,05±3,29 ng/mL); p=0,385  and  blood  MDA  mean  of  K1  (1,17±0,12  nmol/mL),  K2  (5,75±0,21  nmol/mL),  X1  (2,96±0,91  nmol/mL)  and  X2 (1,77±0,92 nmol/mL); p=0,001. Correlation between TC and LpPLA 2 enzyme was shown by X1 group (p=0,042; r = - 0,827). Conclusion: Volvariella v. extract decreased blood total cholesterol and MDA level significantly, did not significant to LpPLA 2 enzyme. There wss a correlation between TC and LpPLA 2 enzyme but was not to TC and blood MDA.
Key: High fat diet; total kolesterol; LpPLA 2 enzymes; MDA; Volvariella v. extract
Latar belakang: Konsumsi diet tinggi lemak (DTL) dapat meningkatkan kadar kolesterol total, enzim LpPLA 2 dan MDA darah yang  merupakan  penyebab  aterosklerosis  yang  dapat  dikendalikan  oleh  antioksidan.  Ekstrak  jamur  merang  (EJM)  memiliki senyawa antioksidan. Penelitian ini membuktikan pengaruh pemberian ekstrak jamur merang terhadap kadar kolesterol total (TC), enzim LpPLA 2 , MDA darah dan korelasi antara TC dengan enzim LpPLA 2 , MDA darah. Metode penelitian: Randomized post test only control group pada 24 ekor tikus Rattus novergicus galur Wistar jantan usia 8- 10 minggu berat 180-200 gram, dibagi 4 kelompok yaitu K1 (kontrol negatif) dengan diet standar, K2 (kontrol positif) dengan DTL, X1 dan X2 masing-masing DTL+EJM dosis 500 mg/kgBB/hari dan dosis 1000 mg/kgBB/hari. Semua perlakuan dilakukan selama 56 hari. Kadar TC diperiksa dengan metode enzymatic colorimetric test, enzim LpPLA 2 dengan metode ELISA dan MDA dengan metode TBAR S . Analisis data dengan one way Anova, post hoc LSD dan korelasi Pearson. Hasil: Rerata  kadar  TC  K1  (91,28±1,55  mg/dL),  K2  (181,96±4,19  mg/dL),  X1  (122,94±2,75  mg/dL)  dan  X2  (105,86±2,25 mg/dL); p=0,001. Rerata kadar enzim LpPLA 2 K1 (2,65±3,19 ng/mL), K2 (1,29±1,35 ng/mL), X1 (3,92±2,18 ng/mL) dan X2 (2,05±3,29  ng/mL);  p=0,385.  Rerata  kadar  MDA  darah  K1  (1,17±0,12  nmol/mL),  K2  (5,75±0,21  nmol/mL),  X1  (2,96±0,91 nmol/mL) dan X2 (1,77±0,92 nmol/mL); p=0,001. Korelasi antara TC dan enzim LpPLA 2 ditunjukkan oleh kelompok X1 dengan p=0,042 (r = - 0,827).
Simpulan: EJM menurunkan kadar kolesterol total dan MDA darah secara signifikan, namun tidak menurunkan kadar enzim LpPLA 2 darah secara signifikan. Terdapat korelasi antara kolesterol total dan enzim LpPLA 2 dan tidak terdapat korelasi antara kolesterol total dan MDA darah.
Kata Kunci: Diet tinggi lemak; kolesterol total; enzim LpPLA 2 ; MDA; ekstrak jamur merang

## PENDAHULUAN
Aterosklerosis masih  menjadi penyebab masalah  kesehatan  di  dunia,  terutama  penyakit kardiovaskular dan stroke, dimana prevalensinya terus meningkat pada negara maju dan sedang berkembang.WHO  memperkirakan  17,3  juta  orang meninggal karena penyakit kardiovaskular pada tahun 2008, dimana 7,3 juta orang meninggal karena penyakit jantung  koroner  (PJK)  dan  6,2  juta  orang  meninggal karena  stroke.  Perkiraan  pada  tahun  2030  kematian
akibat  penyakit  kardiovaskular  akan  meningkat mencapai  23,3  juta  jiwa,  terutama  yang  disebabkan oleh  PJK  dan  stroke. 1 Salah  satu  penyebab  PJK  dan stroke  adalah  adanya  penimbunan  lipid  dan  jaringan fibrosa  pada  sebagian  atau  total  pembuluh  darah sehingga  secara  progresif  mempersempit  lumen pembuluh  darah.  Penyempitan  lumen  menyebabkan resistensi  terhadap  aliran  darah  meningkat  dan membahayakan aliran darah ke jantung dan otak. 2 Lipid  plasma  yaitu  kolesterol,  trigliserida, fosfolipid,  dan  asam  lemak  bebas  yang  berasal  dari makanan (eksogen) dan dari sintesis lemak (endogen). Lipid tidak larut dalam plasma, tetapi lipid terikat pada
1. Fakultas Kedokteran, Universitas Islam Sumatera Utara
2. Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro
protein  sebagai  mekanisme  transpor  dalam  serum. 3 Istilah hiperlipidemia menyatakan peningkatan kolesterol  serum  di  atas  batas  normal.  Salah  satu konsekuensi  hiperlipidemia  yang  paling  penting (menurut WHO) adalah peningkatan kolesterol serum, yang  terutama  mencerminkan  kolesterol  lipoprotein serum densitas rendah (LDL-C), dimana terdapat 60%- 70%  kolesterol  terikat  pada  LDL  yang  merupakan faktor predisposisi terjadinya ateroma. 3
Petanda  inflamasi  pada  aterosklerosis  yang menjadi fokus baru-baru ini adalah enzim lipoprotein- associated  phospholipase  A 2 (LpPLA 2 )  plasma  dapat memprediksi kejadian penyakit kardiovaskular di masa depan  dan  berhubungan  dengan  faktor  risiko  klasik aterosklerosis, 4 seperti  hiperkolesterol, 5 diabetes, 6,7 hipertensi, 8 dan  sindrom  metabolik. 6,9 Enzim  LpPLA 2 dengan nama lain platelet activating factor asethilhydrolase (PAF-AH)  merupakan  enzim  yang dihasilkan  dan  disekresikan  oleh  makrofag  sebagai respon  terhadap  pembentukan  lipid  peroksida  dan peroksida fosfokolin, dimana dalam darah terikat pada apoB  dari  LDL,  dan  dalam  bentuk  tidak  aktif.  Enzim LpPLA 2 merupakan  petanda  non  konvensional  yang banyak  ditemukan  dalam  serum  yang  berkaitan  erat dengan proses aterogenesis. 10
Pemberian pakan tinggi lemak akan menimbulkan  3  faktor  risiko  aterosklerosis  yaitu meningkatnya  metabolisme  lipid,  stress  oksidatif  dan inflamasi.  Kadar  LDL  berpengaruh  pada  kadar malondialdehyde (MDA),  hal  ini  disebabkan  karena senyawa  prekursor  pembentukan  MDA  adalah  asam arakidonat  yang  banyak  terdapat  pada  lapisan fosfolipid  lapisan  luar  LDL. 11 Demikian  juga  faktor penyebab terjadinya oksidasi asam arakidonat di dalam lipoprotein  menjadi  MDA  dalam  serum  adalah  stress oksidatif yang juga dapat distimulasi oleh kadar LDL yang meningkat. 12
Jamur  pangan  telah  terbukti  mengandung antioksidan  yang  dapat  menghambat  stress  oksidatif. Volvariella  volvacea atau  jamur  merang  merupakan salah  satu  tanaman  pangan  yang  berkhasiat  obat. Kandungan  utama  jamur  merang  adalah  air,  dan mengandung  zat  gizi  makro  dan  mikro  yang  cukup tinggi.  Jamur  merang  juga  merupakan    sumber  yang baik dari polipeptida, terpen, dan steroid dan senyawa fenolik seperti flavonoid, asam fenolik, dan tanin yang
berkontribusi  terhadap  kapasitas  antioksidan  yang tinggi. 13,14,15

## BAHAN DAN METODE

## Subjek
Dalam  penelitian  ini  subjek  yang  digunakan  adalah hewan coba tikus putih Rattus novergicus strain Wistar jantan  berusia  8-12  minggu  dengan  berat  badan  rata- rata  180-200  gram.  Hewan  coba  berjumlah  24  ekor tikus  yang  diperoleh  dari  Laboratorium  Gizi  Pusat Studi Pangan dan Gizi PAU UGM Yogyakarta.

## Desain Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  desain true  experimental dengan  rancangan randomized  post  test  only  control group design . 24 ekor tikus dibagi menjadi 4 kelompok dengan  masing-masing  kelompok  berjumlah  6  ekor tikus.  Kelompok  K1  mendapat  diet  standar,  K2 mendapat  diet  tinggi  lemak,  X1  mendapat  diet  tinggi lemak dan ekstrak jamur merang 500mg/kgBB/hari dan X2  mendapat  diet  tinggi  lemak  dan  ekstrak  jamur merang 1000mg/kgBB/hari. Seluruh perlakuan diberikan selama 8 minggu  (56 hari) dan pengambilan darah hewan coba dilakukan pada hari ke 57.
Pemeriksaan  kadar  kolesterol  total  dilakukan dengan  menggunakan  metode enzymatic  colorimetric test. Sementara itu, pemeriksaan kadar enzim LpPLA2 dilakukan  dengan  menggunakan  metode  ELISA  dan kadar  MDA  darah  menggunakan  metode  TBARs. Dilakukan  uji  normalitas  dengan  menggunakan Shapiro  Wilk (n<50).  Sementara  itu,  untuk  data  yang berdistribusi  normal  dan  homogen  dilakukan  uji one way  anova untuk  kemudian  dilakukan  uji post  hoc untuk  melihat  perbedaan  masing-masing  kelompok. Uji  korelasi  Pearson  digunakan  untuk  menganalisis hubungan antar variable pada masing-masing kelompok.

## HASIL
Kadar Kolesterol Total, Enzim LpPLA 2 dan MDA darah hewan coba setelah perlakuan
Rerata  kadar  kolesterol  total,  enzim  LpPLA 2 dan MDA darah hewan coba ditunjukkan pada tabel 1.
Tabel 1. Rerata kadar kolesterol total, enzim LpPLA 2 dan MDA darah hewan coba setelah perlakuan
Kelompok Rerata Kadar kolesterol total darah (mg/dL) Rerata Kadar enzim LpPLA 2 darah (ng/mL) Rerata Kadar MDA darah (nmol/mL) K1 91,28 ± 1,55 2,65 ± 3,19 1,17 ± 0,12 K2 181,96 ± 4,19 1,29 ± 1,35 5,75 ± 0,21 X1 122,94 ± 2,75 3,92 ± 2,18 2,96 ± 0,91 X2 105,86 ± 2,25 2,05 ± 3,29 1,77 ± 0,92 P 0,001 0,385 0,001
Keterangan: KI  = Kelompok kontrol negatif K2 = Kelompok kontrol positif X1 = Kelompok diet tinggi lemak dan diberi ekstrak jamur merang 500 mg/kgBB X2 = Kelompok diet tinggi lemak dan diberi ekstrak jamur merang 1000 mg/kgBB
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  kelompok  K2 memiliki kadar kolesterol total yang paling tinggi dan kadar enzim LpPLA 2 yang paling rendah dibandingkan kelompok K1, X1 dan X2. Sementara itu, kelompok X1 dan X2 memiliki kadar MDA darah yang lebih rendah dibandingkan kelompok K2 masing-masing 2,96±0,91 dan 1,77±0,92 nmol/mL. Kelompok K1 memiliki kadar MDA  darah  yang  paling  rendah  yaitu  1,77±0,12
nmol/mL  sementara  Kelompok  K2  memiliki  kadar MDA  darah  yang  paling  tinggi  yaitu  5,75  ± 0,21(nmol/mL).
Korelasi  Kadar  Kolesterol  Total  dengan  Enzim LpPLA 2 dan MDA Darah Korelasi  kadar  kolesterol  total  dengan  enzim LpPLA 2 dan MDA darah ditunjukkan pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil Uji Korelasi Pearson
Kelompok Kolesterol total Enzim LpPLA 2 MDA p r p r K1 K2 X1 X2 0,625 0,751 0,042 0,270 - 0,256 - 0,167 - 0,827 0,339 0,996 0,056 0,125 0,917 -0, 003 0,801 0,696 0,056 Keterangan:
KI  = Kelompok kontrol negatif K2 = Kelompok kontrol positif X1 = Kelompok diet tinggi lemak dan diberi ekstrak jamur merang 500 mg/kgBB X2 = Kelompok diet tinggi lemak dan diberi ekstrak jamur merang 1000 mg/kgBB
Korelasi  antara  kolesterol  total  dengan  enzim LpPLA 2 darah  yang  ditunjukkan  kelompok  X1 merupakan  korelasi  kuat  negatif  yang  artinya  apabila kolesterol  total  meningkat  maka  enzim  LpPLA 2 akan menurun.  Tidak  ada  korelasi  antara  kolesterol  total dengan  MDA  darah  pada  semua  kelompok.  Secara keseluruhan ekstrak jamur merang dengan dosis 1000 mg/kgBB/hari pada tikus Wistar yang diberi diet tinggi lemak memiliki kadar kolesterol total, enzim LpPLA 2 dan MDA darah yang lebih rendah dibandingkan dosis 500  mg/kgBB/hari  yang  ditunjukkan  oleh  seluruh kelompok X2 pada semua variabel.

## PEMBAHASAN
Kelompok K2 memiliki kadar kolesterol total yang paling tinggi karena kelompok ini mendapat diet tinggi lemak sesuai dengan penelitian sebelumnya. 16,17,18 Kelompok  yang  mendapat  EJM memiliki  kadar  kolesterol  lebih  rendah  dibandingkan kontrol  positif,  hal  ini  sesuai  dengan  penelitian sebelumnya. 19 Penurunan  kadar  kolesterol  total  darah ini antara lain disebabkan kandungan serat yang tinggi pada  jamur  merang.  Sejalan  dengan  penelitian terdahulu  bahwa  serat  yang  terdapat  pada  jamur
merang antara lain adalah polisakarida β-glukan yang mampu  menurunkan  kadar  kolesterol  darah. 19,20,21 Beberapa  mekanisme  serat  terhadap  metabolisme lemak  diantaranya  adalah  menghambat  reaksi  enzim lipase  gastrointestin  seperti  enzim  lipase  pankreas, selain  itu  serat  makanan  akan  menghalangi  siklus enterohepatik (reabsorpsi empedu dalam usus ke hati) dengan  kemampuannya  menjebak micelles yang mengandung  asamempedu  dalam  usus  dengan viskositasnya dan mengeluarkannya dari ikatan dengan transporter  membran  luminal  epitelium  intestinal sehingga  menurunkan  absorpsi  dan  reabsorpsi  lemak termasuk  kolesterol  dan  asam  lemak  sehingga meningkatkan pengeluarannya pada feses, 22,23 hasilnya akan  terjadi  peningkatan  konversi  kolesterol  menjadi asam empedu oleh hati. 24 Pada jamur merang belum ada penelitian  mengenai  kandungan  senyawa  aktif  yang dapat menurunkan kadar kolesterol darah, namun pada jenis  jamur  lain  yaitu  jamur  tiram  ditemukan  adanya senyawa statin yaitu lovastatin yang dapat menurunkan kadar  kolesterol  darah.  Mekanisme  penurunan kolesterol  dan  lipid  darah  oleh  statin  meliputi penghambatan enzim pensintesis kolesterol, peningkatan  ekskresi  kolesterol,  dan  peningkatan ekskresi  garam  empedu.  Statin  merupakan  molekul
yang  memiliki  kemiripan  struktur  dengan  kolesterol, sehingga mampu menjadi inhibitor aktivitas enzim. 24
Kemungkinan  lain  yang  dapat  menurunkan kadar  kolesterol  total  darah  adalah  kandungan antioksidan  pada  jamur  merang. 13,14,15,25,26,27,28 Salah satu  antioksidan  yang  terdapat  pada  jamur  merang adalah  senyawa  fenolik  atau  amin  aromatik  yang merupakan antioksidan yang bekerja dengan memutus rantai  yang  akan  memotong  perbanyakan  reaksi berantai  dari  senyawa  radikal  bebas, 29,30 yang  sejalan dengan penelitian lain. 31,31,33,34
Sementara  itu,  kelompok  K2  memiliki  kadar enzim  LpPLA 2 yang  paling  rendah,  hal  ini kemungkinan  disebabkan  oleh  mekanisme  kerja antioksidan  enzim  LpPLA 2 .  Kelompok  K2  adalah kelompok yang mendapat diet tinggi lemak tanpa terapi dan pemberian diet tinggi lemak secara terus menerus dapat meningkatkan risiko stres oksidatif. Berdasarkan teori,  dalam  keadaan  normal  enzim  LpPLA 2 dalam bentuk tidak aktif  namun enzim LpPLA 2 menjadi aktif saat kolesterol LDL mengalami oksidasi dan fosfolipid sebagai  bagian  terluar  dari  LDL  juga  teroksidasi sehingga  mengaktifkan  enzim  LpPLA 2 yang  terikat pada  reseptor  apoB  LDL  untuk  menghidrolisis fosfolipid  teroksidasi,  hal  ini  merupakan  salah  satu mekanisme  kerja  enzim  LpPLA 2 yang  menyerupai mekanisme kerja antioksidan.
Stres  oksidatif  merupakan  salah  satu  faktor pemicu enzim LpPLA 2 . 35 Semakin tinggi kadar oxLDL maka  semakin  banyak  enzim  LpPLA 2 yang  menjadi aktif  dan  menghidrolisis  oxLDL,  sehingga  akan mengurangi kadar enzim LpPLA 2 dalam bentuk natural dan  tidak  aktif.  kadar  enzim  LpPLA 2 pada  kelompok K2  sebagai  kontrol  positif  lebih  rendah  dibanding kelompok  K1  sebagai  kontrol  negatif,  hal  ini  tidak sesuai dengan hipotesa dan teori yang ada. Keadaan ini perlu dikaji apakah hipotesis ini berlaku secara in vivo. Salah  satu  faktor  yang  menjadi  kontroversi  seputar LpPLA 2 adalah  kadarnya  yang  kurang  pada  model hewan sederhana seperti binatang pengerat dan kelinci dibandingkan  dengan  pola  distribusi  LpPLA 2 dan lipoprotein pada manusia, dimana pada manusia enzim LpPLA 2 terutama  berikatan  dengan  LDL,  sedangkan pada  hewan  ini  enzim  LpPLA 2 terutama  berikatan dengan  HDL. 36 Selain  apoB,  distribusi enzim  LpPLA 2 antara  LDL  dan  HDL  dapat  dipengaruhi  oleh ketersediaan  lipoprotein(a)  saat  kadar  lipoprotein plasma melebihi 30 mg/dl. 35
Kemungkinan  ada  mekanisme  lain  yang menyebabkan peningkatan kadar enzim LpPLA 2 pada kelompok X1 setelah mendapat EJM. Perlu pengkajian yang  lebih  lanjut  terhadap  kandungan  senyawa  aktif EJM,  tetapi tidak  menutup  kemungkinan  bahwa  EJM mengandung  senyawa  statin  seperti  lovastatin  pada jamur  tiram.  Penelitian  lain  menunjukkan  pemberian statin menginduksi peningkatan aktifitas HDL-LpPLA 2
dan menurunkan LDL-LpPLA 2 . 37 Beberapa studi yang memberi  terapi  obat-obat  statin  pada  pasien  dengan PJK  juga  menunjukkan  peningkatan  aktifitas  HDL- LpPLA 2 dan  penurunan  aktifitas  LDL-LpPLA 2 , 38 sehingga kadar LpPLA 2 yang meninggi pada kelompok X1  tidak  dapat  dipastikan  apakah  itu  LpPLA 2 yang terikat pada HDL atau LpPLA 2 yang terikat pada LDL terkait dengan kandungan antioksidan pada EJM yang dapat  meningkatkan  kadar  kolesterol  HDL,  seperti yang ditunjukkan pada penelitian sebelumnya. 32,38,39
Kelompok  K1  memiliki  kadar  MDA  darah yang  paling  rendah  yaitu  1,77±0,12  nmol/mL  karena hanya mendapat diet standar sehingga meminimalkan stres  oksidatif.  Kelompok  K2  memiliki  kadar  MDA darah  yang  paling  tinggi  karena  kelompok  ini mendapat  diet  tinggi  lemak  tanpa  terapi.  Keadaan  ini sesuai  dengan  penelitian  sebelumnya  dimana  kadar MDA  darah  akan  meningkat  2,48  kali  lipat  pada keadaan hiperlipidemia. 40
Pemberian diet tinggi lemak dapat menginduksi  obesitas,  hiperglikemik,  peningkatan kadar  lipid  darah  dan  jaringan  dan  inflamasi  kronis yang  kemudian  dapat  meningkatkan  peroksidasi lipid. 41,42 yang  akan  meningkatkan  kadar  MDA  darah. Kelompok  X1  dan  X2  memiliki  kadar  MDA  darah yang lebih rendah dibandingkan kelompok K2 masing- masing 2,96±0,91 dan 1,77±0,92. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian EJM berasosiasi terhadap penurunan kadar  MDA  darah  dan  peningkatan  dosis  EJM berasosiasi dengan penurunan kadar MDA darah. Hal ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  dimana subfraksi  dari  ekstrak  metanol  maupun  etanol  jamur merang  yang  memiliki  kandungan total  phenolics mampu menghambat peroksidasi lipid secara bermakna. 28,43 Senyawa  fenolik  merupakan  senyawa antioksidan yang bekerja dengan cara memutus rantai reaksi asam lemak dan radikal bebas. Antioksidan pada jamur merang bekerja secara langsung terhadap reaksi peroksidasi lipid sebagai respon terhadap radikal bebas sehingga  berpengaruh  terhadap  kadar  MDA  darah. Penelitian sebelumnya juga menyimpulkan pemberian kombinasi  serat  polisakarida  bersama  antioksidan polifenol merupakan terapi potensial terhadap obesitas yang berimbas pada penurunan kadar MDA darah. 44 Korelasi  antara  kolesterol  total  dengan  enzim LpPLA 2 darah  yang  ditunjukkan  kelompok  X1 merupakan  korelasi  kuat  negatif  yang  artinya  apabila kolesterol  total  meningkat  maka  enzim  LpPLA 2 akan menurun.  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan  karena enzim  LpPLA 2 dalam  bentuk  alami  atau  tidak  aktif yang  dapat  dibaca  oleh kit berkurang  jumlahnya  di sirkulasi.  Kolesterol  total  yang  meningkat  akan mencerminkan  peningkatan  kolesterol  LDL,  dimana kolesterol LDL sangat mudah teroksidasi oleh radikal bebas. Diet tinggi lemak  yang diberikan secara terus- menerus  dan  status  antioksidan  yang  kurang  dalam
tubuh  akan  meningkatkan  terjadinya  stres  oksidatif sehingga kolesterol LDL menjadi teroksidasi (oxLDL). OxLDL  akan  mengaktifkan  enzim  LpPLA 2 untuk menghidrolisa  fosfolipid  dan  LDL  yang  teroksidasi sehingga  dapat  meminimalkan  kadar  oxLDL  dan menurunkan  stres  oksidatif,  akibatnya  kadar  enzim LpPLA 2 alami  atau  dalam  bentuk  tidak  aktif  akan mengalami penurunan.
Tidak  ada  korelasi  antara  kolesterol  total dengan MDA darah  pada semua kelompok. Berdasarkan  teori  dan  studi  terdahulu  peningkatan kolesterol  total  seharusnya  berkorelasi  dengan  kadar MDA  darah  maupun  jaringan. 40,41,42 Pemberian  pakan tinggi  lemak  akan  menimbulkan  3  faktor  risiko aterosklerosis  yaitu  meningkatnya  metabolisme  lipid, stres  oksidatif  dan  inflamasi.Pada  penelitian  ini  tidak memeriksa profil lipid, status stres oksidatif dan status antioksidan  hewan  coba  terkait  dengan  peningkatan stres oksidatif yang dipicu oleh diet tinggi lemak dan penghambatan stres oksidatif oleh senyawa antioksidan sehingga mempengaruhi korelasi antara kolesterol total dan MDA darah, sehingga memerlukan penelitian lebih lanjut.
Secara  keseluruhan  ekstrak  jamur  merang dengan  dosis  1000  mg/kgBB/hari  pada  tikus  Wistar yang diberi diet tinggi lemak memiliki kadar kolesterol total,  enzim  LpPLA 2 dan  MDA  darah  yang  lebih rendah  dibandingkan  dosis  500  mg/kgBB/hari  yang ditunjukkan  oleh  seluruh  kelompok  X2  pada  semua variabel.
Keterbatasan  penelitian  ini  adalah peneliti tidak  mengukur  profil  kolesterol  darah  dan  apoB sebagai binding protein enzim LpPLA 2, kadar oxLDL yang mencerminkan stres oksidatif dan tidak mengukur kadar  SOD,  katalase  ataupun  GPx  yang  berperan sebagai status antioksidan dalam tubuh.

## SIMPULAN
Ekstrak  jamur  merang  menurunkan  kadar  kolesterol total  dan  MDA  darah  secara  bermakna,  tidak menurunkan  kadar  enzim  LpPLA 2 darah  secara bermakna,    terdapat  korelasi  antara  kolesterol  total dengan  enzim  LpPLA 2 dan  tidak  terdapat  korelasi antara kolesterol total dengan MDA darah.

## DAFTAR PUSTAKA
1. World  Health  Organisation.  Global  status  report on  noncommunicable  disease  2012.  Geneva Report 2013.
2. Price  SA,  Wilson  LM.  Penyakit  Aterosklerosis Koroner  dalam  Patofisiologi.  Konsep  klinis proses-proses penyakit. Penerjemah: dr. Brahm U. Pendit et al. Edisi 6. Vol. 1; 2005. hal.578-579.
3. Price  SA,  Wilson  LM.  Hiperlipidemia.  Dalam: Patofisiologi, Konsep klinis proses-proses penyakit. Penerjemah: dr. Brahm U. Pendit et al. Ed. 6. Vol. 1; 2005. hal. 580-2.
4. Kolodgie  FD,  Burke  AP,  Skorija  KS,  Ladich  E, Kutys  R,  Makuria  AT,  et  al. Lipoprotein- Associated Phospholipase A2 Protein Expression in  the  Natural  Progression  of  Human  Coronary Atherosclerosis. Arterioscler  Thromb  Vasc  Biol. 2006; 26:2523-29.
5. Gibson  M. Effect  of  Low  Density  Lipoprotein Apheresis on Lipoprotein Associated Phospholipase  A2. Am  J  Cardiol.  2005;  191:54- 62.
6. Noto  H,  Chitkara  P,  and  Raskin  P. The  Role  of Lipoprotrein-Associated Phospholipase A2 in the Metabolic Syndrome and Diabetes . J Diab and the Compli. 2006; 20:343-48.
7. Yang  C,  Chen  H,  Huang  MT,  Raya  JL,  Yang  J, Chen  C,  et  al. Pro-apoptotic  Low  Density Lipoprotein  Subfraction  in  Type  II  Diabetes.
Atherosclerosis. 2007; 193:283-91. 8. Gorelick PB. Lipoprotein
Assocoated phospholipase  A2  and  Risk  of  Stroke. Am  J Cardiol. 2008; 101:34F-40F.
9. Filippatos TD, Gazi IF, Liberopoulos VG, Elisaf MS, Tselepis AD, et al. The Effect of Orsilat and Fenofibrate,  alone  or  Combination,  on  Small dense LDL and Lipoprotein-associated Phospholipase  A2  in  Obese  patients  with Metabolic syndrome. Atherosclerosis. 2006;17:495-501.
10. Shi Y, Zhang P, Zhang L, Osman H, Mohler ER, Macphee C, et al. Role of Lipoprotein-associated Phospholipase  A2  in  Leukocyte  Activation  and Inflammatory  Responses .  Atherosclerosis.  2007; 191:54-62.
11. Gustone FD. Fatty acid and lipid chemistry. New York: Blackie Academic & Professional; 1996. p. 81.
12. Halliwell  B,  Guteridge  JMC. Free  radicals  in biology and medicine . 3th ed. NewYork: Oxford University  Press;  1999.  Dalam:  Sargowo  D, Susilowati R, Indra R, Tjokroprawiro A, Widyarti S.  Korelasi  antara  kadar  Lp-PLA2  serum  dan jaringan  aorta  dengan  jumlah  sel  busa  dalam proses aterogenesis pada tikus wistar . Maj Kardio Ind. 2012; 3.
13. Roy  A,  Gupta  N. Volvariella  volvacea:  A Macrofungus  having  nutritional  and  health potential. Asian J. Pharm Tech. 2014; 4(2):110-3. 14. Hung PV, Nhi NNY. Nutritional composition and antioxidant capacity of several edible mushrooms grown in the Southern Vietnam. Int Food Research J. 2012; 19(2):611-615.
15. Ramkumar  L. Evaluation  of  nutrients,  trace metals  and  antioxidant  activity  in  Volvariella volvacea (Bull. Ex. Fr.) Sing . Emir J Food Agric. 2012; 24 (2):113- 9.
16. Murwani S, Ali M, Muliartha K. Diet aterogenik pada tikus putih (Rattus novergicus strain Wistar) sebagai model hewan aterosklerosis . J Ked Braw. 2006; 22(1).
17. Setianingsih  H,  Ngesti  I,  Wibisono.  Pembuatan preparat  hiperkolesterolemia  dalam  penelitian sebagai upaya pengembangan teknologi kesehatan dan  terapi  alternatif . Prosiding  seminar  nasional.
2013.
18. Susilowati  R.  Pengaruh  akut  diet  aterogenik terhadap  profil  lipid  dan      lipoprotein- phospholipase  A2 . [Penelitian  hibah].  Universitas
Brawijaya. 2010.
19. Cheung  PCK. Plasma  and  hepatic  cholesterol levels  and  fecal  neutral  sterol  excretion  are altered  in  hamsters  fed  straw  mushroom  diets. J Nutr. 1998; 128:1512-16.
20. Cheung  P.C.K. Dietary  fiber  content  and composition of some cultivated edible mushroom fruiting bodies and mycelia. J. Agric. Food. Chem. 1996; 44:468-471.
21. Cheung P.C.K. The hypocholesterolemic effect of extracellular  polysaccharide  from  submerged fermentation  of  mushroom. Nutr.  Res.  1996;  16: 1953-1957.
22. Ellegard  LA.H. Oat  bran  rapidly  increases  bile acid  excretion  and  bile  acid  synthesis  :  an ileostomy study. Eur J Clin Nutr. 2007; 61: 938– 45.
23. Theuwissen E, M.R. Water-soluble dietary fibers and cardiovascular disease-a review. Physiology & Behavior. 2008; 94(2):285–92.
24. Eva  Guillamón  A.G.L.,  Miguel  Lozano,  Matilde D´Arrigo,  and  A.V.  Mauricio  A.  Rostagno,  José Alfredo Martínez. Edible mushrooms: Role in the prevention of cardiovascular diseases.
Fitoterapia. Elsevier. 2010; 81: 715–723.
25. Singdevsachan,  Kalava  S. Diversity,  nutritional composition  and  medicinal  potential  of  Indian mushrooms.  In:  A  review. Afr  J  Biotech; Academic Journal. 2014; 13(4):523-45.
26. Preeti  A,  Sharma  S,  Aggarwal  J. Antioxidant mushroom: A review. Int Researc J Pharm, 2012; 3: 6.
27. Warintorn  R,  Boonpisuttinant  K,  Jantrawut  P. Potent  in  vitro  collagen  biosynthesis  stimulating and  antioxidant  activities  of  edible  mushroom volvariella  volvacea  aqueous  extract .  Int  J Pharmacy and Pharmaceutical Sci, 2014. 6; 2.
28. Cheung  LM,  Cheung  PC,  Ooi  VEC. Antioxidant activity  and  total  phenolics  of  edible  mushroom
extract .  Food  Chemistry  Elsevier,  2003;  81:249- 55.
29. Murray  RK,  Granner  DK,  Mayes  PA,  Rodwell VW.  Lipid  yang  memiliki  makna  fisiologis. Dalam: Biokimia Harper. Penerjemah: dr. Andry Hartono DAN. Ed. 25. Appleton & Lange; 2003. hal. 148-59.
30. Mufidah. Aktivitas Aterosklerosis Ekstrak
Terstandar  Klika  Ongkea (Mezzetia  parviflora BECC.) Pada  Tikus  Wistar  Yang  Diberi  Asupan Kolesterol  :  Kajian  Efek  Anti-oksidan  dan  Anti- kolesterol  terhadap  Penghambatan  MCP-1  dan Disfungsi Endotel. [Disertasi]. Universitas Hasanuddin. 2011.
31. Moreno D.A., Ilic N., Poulev A., Brasaemle D.L., Fried S.K., Raskin I. Inhibitory Effects of Grape Seed Extract on Lipases. Nutrition. 2003; 19: 876- 879.
32. Wang  Y.,  Sun  C.,  Lu  B.,  Xie  Y.,  Sun  C.,  An  L. Effect  of  Grape  Seed  Procyanidin  to  Fat Deposition  of  Obese  Mice. Acta  Agriculturae Boreali-Occidentalis Sinica. 2011;06: 1-5.
33. Sergent T., Vanderstraeten J., Winand J., Baguin P., Schneider Y.J. Phenolic compounds and plant extracts as potential natural anti-obesity substances. Food  Chemistry.  Elsevier.  2012; 135(1): 68-73.
34. Hussein M.A. and El-Maksoud H.A. Biochemical effects of Resveratrol and Curcumin combination on  obese  diabetic  rats. Molecular  and  Clinical Pharmacology. 2013; 4(1): 1-10.
35. Alexandro  D  Tselepis,  M.J.C., Inflammation, bioactive  lipids  and  atherosclerosis:  A  potential roles  of  a  lipoprotein-associated  phospholipase A2,  platelet  activating  factor-acetylhydrolase.
Atheroscler Supp, 2002: 3 (57-68).
36. Macphee  CH,  Zalewski  A. Role  of  lipoprotein- associated  phospholipase  A2  in  atherosclerosis and  its  potential  as  a  therapeutic  target. Curent Opinion Pharm. 2006; 6:154-161.
37. Tsimihodimos  V,  Karabina  SP.,  Tambaki  AP, Bairaktari E, Goudevenos JA, and E.M. Chapman MJ,  Tselepis  AD. Atorvastatin  Preferentially Reduces LDL-Associated Platelet-Activating Factor Acetylhydrolase Activity in Dyslipidemias of  Type  IIA  and  Type  IIB. Arterioscler  Thromb Vasc Bio. 2002; 22:306-311.
38. Tsimihodimos  V,  Tambaki  AP,  Bairaktari  E, Miltiadous  G,et  al. Altered  distribution  of  PAF- acetylhydrolase activity between LDL and HDL as a function of the severity of hypercholesterolemia . J Lipid Res. 2002; 43:256-63.
39. Wang  Y.,  Sun  C.,  Lu  B.,  Xie  Y.,  Sun  C.,  An  L. Effect  of  Grape  Seed  Procyanidin  to  Fat Deposition  of  Obese  Mice. Acta  Agriculturae Boreali-Occidentalis Sinica. 2011;06: 1-5.
40. Sargowo D, Susilowati R, Indra R, Tjokroprawiro
A,  Widyarti  S.  Korelasi  antara  kadar  Lp-PLA2 serum dan jaringan aorta dengan jumlah sel busa dalam proses aterogenesis pada tikus wistar . Maj Kardio Ind. 2012; 3. 41. Noeman  SA,  Baalash  AA. Biochemical  study  of oxidative  stress  markers  in  the  liver,  kidney  and heart  of  high  fat  diet  induced  obesity  in  Rats.
Diabet & Met Synd. 2011; 3:17.
42. Yang  RL,  Hao  G,  Li  Wu,  Le  GW. Increasing oxidative  stress  with  progressive  hyperlipidemia in human: Realtion between malondialdehide and atherogenic  index .  J  Clin  Biochem  Nutr.  2008; 43:154–8.
43. Cheung  LM  and  Cheung  PCK. Mushroom extracts  with  antioxidant  activity  against  lipid peroxidation. Food  Chem.  Elsevier.  2005;  89: 403-409.
44. Yan  Xu,  Min  Zhang,  Tao  Wu,  Shengdong  Dai, Jinling  Xu  and  Zhongkai  Zhou. The  anti  obesity effect  of  green  tea  polysaccharides,  polyphenol and caffeine in rats fed with a high fat diet. Food and Function. 2014; 6: 296-303.