## EFEK  ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL GANGGANG
HIJAU ( Ulva lactuca L.) TERHADAP KADAR MALONDIALDEHID  (MDA)  DAN AKTIVITAS  ENZIM SUPEROKSIDA DISMUTASE (SOD) HEPAR

## TIKUS YANG DIINDUKSI CCl 4
ANTIOXIDANT EFFECT OF ETHANOLIC EXTRACT OF GREEN ALGAE ( Ulva lactuca L.) MALONDIALDEHYDE (MDA) LEVEL
AND ACTIVITY OF SUPEROXIDE DISMUTASE (SOD) IN LIVER OF RATS INDUCED BY CCl 4
Wahyu Widyaningsih, Riza Sativa, Indra Primardiana
Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan Jl. Prof. Dr. Soepomo, Janturan, Yogyakarta, Telp. (0274) 379418 Email :widyaningsihwahyu@yahoo.com

## ABSTRAK
Kerusakan  hepar  sering  disebabkan  karena  stress  oksidatif  yang  berkaitan  erat dengan  radikal  bebas.  Karbon  tetraklorida  merupakan  senyawa  toksik  sumber radikal  bebas  penyebab  timbulnya  stress  oksidatif.  Adanya  kerusakan  jaringan tersebut dapat ditandai dengan meningkatnya kadar malonildialdehid (MDA)  dan kenaikan  kadar  enzim  superoksid  dismutase  (SOD).  Ganggang  hijau  ( Ulva lactuca L.) mengandung senyawa melatonin  yang berfungsi  sebagai antioksidan.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas ekstrak etanol ganggang hijau ( Ulva lactuca L.) sebagai antioksidan dengan parameter kadar MDA  dan aktivitas enzim SOD hepar tikus yang diinduksi CCl 4 . Penelitian ini bersifat eksperimental menggunakan  post-test  only  control  group  design  dilakukan    pada  25  hewan  uji yang dibagi menjadi lima kelompok, terdiri dari kelompok I (normal) hanya diberi makan  dan  minum,  kelompok  II    diberi  CMC-Na  1%,  kelompok  III  (kontrol pembanding)  diberi  tablet  curcuma  200  mg/KgBB,  kelompok  IV  dan  V  diberi ekstrak etanol ganggang hijau dosis 100 dan 200 mg/KgBB. Perlakuan dilakukan selama  21  hari  dan  pada  hari  ke-22  diinduksi  CCl 4 1,0  ml/KgBB intraperitoneal(i.p)  kecuali  kelompok  I.  Setelah  24  jam,  hepar  tikus  diambil  dan diukur  kadar  MDA  hepar  dengan  metode  TBARs.  Aktivitas  enzim  superoksida dismutase  (SOD)  menggunakan  metode  spektrofotometri.    Analisis  data menggunakan One way  ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan  uji  LSD.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kadar  MDA  hepar meningkat    dan  aktivitas  enzim  SOD  menurun  secara  signifikan  akibat  induksi CCl 4 (p<0,05). Tablet curcuma dosis 200 mg/kgBB, ekstrak etanol ganggang hijau dosis  100  dan  200  mg/KgBB  dapat  menurunkan  kadar  MDA  dan  meningkatkan aktivitas  SOD  hepar  tikus  yang  diinduksi  CCl 4 secara  signifikan  (p<0,05). Kesimpulan penelitian ini adalah ekstrak etanol ganggang hijau ( Ulva lactuca L.)
mempunyai  aktivitas  antioksidan  dengan  menurunkan  kadar  MDA  dan meningkatkan aktivitas enzim SOD hepar tikus yang diinduksi CCl 4 .
Kata kunci : Ulva lactuca L. , melatonin, antioksidan, MDA, SOD

## ABSTRACT
Liver  damage  is  often  caused  by  an  oxidative  damage  strongly  associated  with free radicals and  oxidative stress. Carbon tetrachloride is a toxic compounds as source  of  free  radicals.  Tissue  damage  can  be  identified  by  increased  levels  of malondialdehyde (MDA)  and decreased Superoxide Dismutase (SOD) enzyme  in the tissue. Green algae (Ulva lactuca L.) contain of melatonin. as antioxidant. The purpose  of  this  study  is  to  determine  the  effect  of  ethanol  extract  of  green  algae (Ulva lactuca L.)  on levels MDA of liver and SOD enzyme activity  in rats which induced by CCl 4 . This study was an experimental study with design post-test only control  group  design.  This  study  used  25  male  rats  Wistar.  The  animals  were divided  into  5  groups.  Group  I  as  normal  controls,  each  of  which  test  animals were  not  given  any  treatment,  Group  II  as  hepatotoxic  group  each  test  animals were  given  an  aqueous  suspension  of  1%  CMC-Na.  Group  III  each  test  animals were  given  curcuma  tablet  doses  200  mg/KgBW,  group  IV  and  V  were  given ethanol  extract  of  green  algae  (Ulva  lactuca  L.)  at  a  dose  of  100  and  200 mg/KgBW respectively. All groups were treated for 21 days orally. On the day of 22,  all  groups  except  group  I,  were  induced  with  CCl 4 1,0  ml/KgBW intraperitoneal  IP  (i.p).  Twenty  four  hours  after  inducing  time,  all  rats  of  every group  were  sacrificed  to  take  its  liver.  Rats  liver  were  analyzed  using  TBARs method  to  calculate  MDA  level,  SOD  activity  was  analyzed  using spectrophotometric. The results obtained were analyzed statistically with One way ANOVA test followed by LSD test, with the significance level of 95%. The results showed  that  levels  of  liver  MDA  increased  and  SOD  activity  decreased significantly  due  to  the  induction  of  CCl 4 (p<0,05).  Curcuma  tablet  (200 mg/KgBW)  and  ethanol  extract  of  green  algae  (Ulva  lactuca  L.)  (100  and  200 mg/KgBW)  could  reduce  levels  of  liver  MDA  and  increase  SOD  activity    that induced by CCl 4 in rats significantly (p<0,05).
Keywords : Ulva lactuca L. , melatonin, antioxidant, MDA,  SOD
165 Wahyu Widyaningsih.dkk Efek Antioksidan Ekstrak

## PENDAHULUAN
Radikal bebas adalah atom atau molekul  yang tidak stabil dan sangat reaktif karena mengandung satu  atau lebih  elektron  tidak  berpasangan pada  orbital  terluarnya  (Kikuzaki et al .,  2002).  Radikal  bebas  berperan dalam    terjadinya  berbagai  penyakit. Paparan radikal bebas dapat menyebabkan  terjadinya  kerusakan dan  kematian  sel  hepar    (Mahdi et
al ., 2007).
Hepar merupakan organ parenkim dalam  tubuh manusia yang paling  besar  dan  sangat  penting untuk  mempertahankan  fungsi  hidup dan  berperan  dalam  hampir  setiap metabolisme tubuh (Tellingen, 2003). Kerusakan hepar yang bersifat kronis  dapat  menyebabkan  sirosis hati  (Crawford,  2007).  Berdasarkan data  WHO  (2004)  sirosis  hati merupakan penyebab kematian kedelapan  belas  di  dunia,  dengan prevalensi 1,3% (Malau, 2011). Pada tahun  2007,  prevalensi  penyakit sirosis hati di Indonesia sebesar 1,7% (Alfiani, 2008).
Kerusakan  sel  hepar  terjadi pada asam lemak tak jenuh fosfolipid membran  sel,  sehingga  terbentuk
peroksida lipid. Pada akhir rangkaian degradasi peroksida lipid akan menghasilkan  etana,  pentana  dan malondialdehid (MDA).
Malondialdehid  ini  dapat  dijadikan indikator peningkatan peroksida lipid yang  terbentuk  akibat  radikal  bebas (Cochrane, 1991). Enzim superoksida dismutase (SOD)
merupakan  enzim  endogen  yang berperan    untuk  menangkap  radikal bebas.
Tanaman ganggang hijau ( Ulva lactuca L.)  mengandung  senyawa melatonin  (Balzer  dan  Hardeland, 1996).  Melatonin  berfungsi  sebagai antioksidan, yaitu melalui aksi penangkapan  radikal  bebas  secara langsung  dan  meningkatkan  enzim antioksidan  (Reiter et  al .,  2003). Melatonin mengurangi Reactive Oxygen  Species (ROS)  seperti ● OH, oksigen singlet, H 2 O 2 , radikal peroksil  dan  asam  hipoklorit melalui aksi  penangkapan  langsung  (Zang et al., 1998). Dalam penelitian ini akan diamati  efek  pemberian  ganggang hijau  ( Ulva  lactuca L.)  dalam menurunkan  kadar  malondialdehid (MDA)  dan  peningkatan  aktivitas
enzim  SOD  hepar  tikus  yang diinduksi CCl 4 .

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan
penelitian eksperimental dengan rancangan post-test  only  control group design .
Bahan  yang  digunakan  untuk penelitian  ini  adalah  ganggang  hijau ( Ulva lactuca L.) yang diperoleh dari pantai  Drini  Wonosari  Yogyakarta yang diekstraksi dengan etanol 96 % (E  Merk).    Untuk  penginduksi radikal  bebas  digunakan  CCl 4 (E Merk) dengan  pensuspensi CMC-Na
1%. Sebagai kontrol positif digunakan  Tablet  Curcuma  (Soho ® ).
Bahan  kimia  yang  digunakan  untuk penetapan  kadar  SOD  adalah  buffer batrium  karbonat  (Merck)  50  mM, larutan  EDTA  (BDH)  pH  10,  xantin (Sigma)  10  mM,  xantin  oksidase (Sigma)  0,04  unit,  BSA  (Sigma) 0,5%,  NBT  (Merck)  2,5  mM,  dan PBS (Merck) sebagai larutan standar. Bahan  kimia  yang  digunakan  untuk penetapan  kadar  MDA  adalah  KCl 1,15%,  sodium  dodesil  sulfat  8,1%, asam  asetat  20%,  NaOH,  reagen asam tiobarbiturat 0,8%, n-
butanol:piridin  (15:1  v/v),  dan  TEP (1,1,3,3-tetraetoksipropan) sebagai larutan standar.
Hewan  uji  yang  digunakan adalah  tikus  jantan  galur  Wistar dengan  berat  badan  200-300  gram yang  diperoleh  dari  Laboratorium
Farmakologi Fakultas
MIPA Laboratorium  Farmasi  Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta.
Jalannya Penelitian Pembuatan Simplisia
Tanaman ganggang hijau ( Ulva lactuca L.)  diperoleh  dari  pantai Drini, daerah Wonosari, DIY.
Pengolahan  ganggang  hijau  ( Ulva lactuca L.)  untuk  menjadi  serbuk memerlukan beberapa tahapan. Tahapan  tersebut  adalah:  Ganggang hijau  dibersihkan    dan    dicuci dengan menggunakan  air  mengalir. Ganggang  hijau  dimasukkan  ke dalam wadah berisi air dan didiamkan  selama  12  jam  fase penyinaran dan 5 jam fase penggelapan, hal ini dilakukan karena  kadar  tertinggi  melatonin diperoleh pada 12 jam fase penyinaran dan 5 jam fase penggelapan (Kolar dan Machackova, 2001). Ganggang hijau
167 Wahyu Widyaningsih.dkk Efek Antioksidan Ekstrak
diambil  dari  wadah  pada  5  jam setelah dimulai fase penggelapan dan dipotong-potong dengan ketebalan 1- 5  mm.  Potongan-potongan  tersebut dijemur hingga kering di bawah sinar matahari dengan ditutupi kain hitam. Pembuatan Ekstrak Etanol Ganggang Hijau ( Ulva lactuca L.).
Ganggang  hijau  yang  sudah dalam  bentuk  serbuk  dilakukan ekstraksi dengan cara maserasi, yaitu serbuk ganggang hijau sebanyak 250 gram dibasahi dengan  pelarut etanol 96%  sebanyak  1  L,  dilakukan pengadukan selama 3 jam, kemudian didiamkan  selama  24  jam.  Maserat disaring dengan menggunakan corong buchner dan  proses  maserasi diulangi  2  kali  dengan  jenis  dan jumlah  pelarut  yang  sama.  Maserat yang  diperoleh  diuapkan  dengan menggunakan rotary evaporator pada  suhu  40 o C,  setelah  etanol  tidak menetes dilanjutkan penguapan dengan menggunakan waterbath
hingga  diperoleh  ekstrak  kental.
Ekstrak kental yang diperoleh dihitung rendemennya.
Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa Melatonin
Pemurnian  senyawa  melatonin dalam ekstrak etanol  ganggang hijau ( Ulva  lactuca L.)  dilakukan  dengan menambahkan  15  ml  asam  asetat 15%  pada  1,0  gram  ekstrak.  Larutan kemudian  disaring  menggunakan kertas  saring.  Filtrat  diekstraksi dengan 50 ml (3 kali) petroleum eter. Sari  asam asetat  diambil dan ditambah  NH 4 OH  hingga  pH  10. Selanjutnya, larutan diekstraksi dengan 50 ml   (2 kali) eter. Sari eter dipisahkan  dan  diuapkan  sampai kering, kemudian dilarutkan kembali dalam pelarut  etanol 5,0 ml.  Larutan etanol ditotolkan pada plate silika gel GF 254 untuk keperluan preparatif dan dielusi  dengan  menggunakan  fase gerak  BAW  (n-butanol:asam  asetat: air)  dengan  perbandingan  12:3:5. Bercak  yang  diperoleh  dikerok  dan dilarutkan  dalam  etanol,  kemudian disentrifuge  dan  disaring  untuk dipisahkan  dari  endapan  silika. Filtrat  yang  diperoleh  disaring  dan ditambah  etanol  hingga  5,0  ml, kemudian  dibaca  spektranya  pada panjang  gelombang  200-400  nm
menggunakan  spektrofotometer  UV (Fertaveni, 2012).
Hewan percobaan dibagi menjadi 5 kelompok, masing-masing kelompok  terdiri  dari  8  ekor    hewan uji  (tikus).  Kelompok  I  (normal) hanya  diberi  makan  dan  minum,
kelompok II (kelompok hepatotoksik)  diberi  suspensi  CMC- Na  1%  secara  per  oral  selama  21 hari, kelompok III (kontrol pembanding)  diberi  suspensi  tablet curcuma dengan dosis 200 mg/kgBB/hari secara per oral selama
21 hari, kelompok IV diberi suspensi ekstrak etanol ganggang hijau dengan  dosis  100  mg/kgBB/hari secara  per  oral  selama  21  hari  dan kelompok  V  diberi  suspensi  ekstrak etanol  ganggang  hijau  dengan  dosis 200  mg/kgBB/hari  secara  per  oral selama  21  hari.  Perlakuan  dilakukan selama  21  hari,  pada  hari  ke-22 diberi  suntikan  CCl 4 1,0    ml/kgBB kecuali  kelompok  I.  Setelah  24  jam semua kelompok hewan uji dikorbankan dan hepar tikus  diambil untuk  dianalisis  kadar  aktivitas enzim SOD dan kadar MDA.
Pengukuran  Kadar  Malondialdehid (MDA) Hepar.
Metode  pengukuran  kadar MDA yang digunakan dalam penelitian adalah metode Thiobarbituric acid reactive substance (TBARs).  Prinsip  metode ini  berdasarkan  kepada  kemampuan pembentukan  kompleks  berwarna merah  muda  antara  MDA  dan  Asam Tiobarbiturat  (TBA),  (Capeyron et al ,  2002). Satu  gram  jaringan  hepar dihomogenisasi dengan 9,0 ml larutan  KCl  1,15%  dengan  alat Teflon Potter-Elvehjem homogenizer . Sebanyak  0,2  ml  dari  homogenat hepar,  ditambah  dengan  0,2  ml sodium  dodesil  sulfat  8,1%  dan  1,5 ml  larutan  asam  asetat  20%  sampai pH  3,5  serta  1,5  ml  larutan  TBA 0,8%. Campuran tersebut ditambahkan  dengan  air  sampai volume  4,0  ml,  dipanaskan  pada suhu 95°C selama 60 menit, kemudian didinginkan dengan menggunakan  air.  Setelah  dingin, campuran  ditambahkan  1,0  ml  air dan 5,0 ml campuran n- butanol:piridin (15:1 v/v) lalu digojok.  Selanjutnya  disentrifuge dengan  kecepatan  4000  rpm  selama
169 Wahyu Widyaningsih.dkk Efek Antioksidan Ekstrak
10  menit,  lapisan  organik  diambil dan  diukur  absorbansinya  pada panjang gelombang 532 nm
menggunakan spektrofotometer visibel. Larutan standar yang digunakan adalah 1,1,3,3- tetraetoksipropan (TEP)  (Ohkawa et
al ., 1979). Senyawa 1,1,3,3- tetraetoksipropan  dapat  digunakan sebagai  standar  karena  pada  suasana asam TEP terhidrolisis menghasilkan hemiasetal  dan  etanol.  Hemiasetal yang terbentuk kemudian
terdekomposisi  menjadi  etanol  dan MDA (Conti et al., 1991).
Penetapan Aktivitas enzim SOD Sebanyak  0,06  ml  supernatan hati  direaksikan  dengan  campuran yang  terdiri  dari  2,70  ml  buffer natrium  karbonat  50  mM  yang mengandung  0,1  mM  EDTA  (pH 10); 0,06 ml xantin 10 mM; 0,03 ml bovine  serum  albumin (BSA)  0,5%; dan  0,03  ml  NBT  2,5  mM. Selanjutnya  dilakukan  penambahan xantin oksidase (0,04) unit.
Absorbansi  yang  dihasilkan  setelah 30  menit  diukur  pada  panjang gelombang  560  nm.  Sebagai  larutan kontrol  digunakan  larutan  yang dipakai  dalam  preparasi  sampel  hati
yaitu  PBS  yang  mengandung  11,5 g/L  KCl.  Aktivitas  SOD  (%) dihitung dengan menggunakan persamaan 1.
% ....................(1)
A = Absorbansi larutan sampel B = Absorbansi larutan kontrol

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Identifikasi Tanaman
Identifikasi  tanaman  dilakukan di  Laboratorium  Biologi  Fakultas MIPA  Universitas  Ahmad  Dahlan Yogyakarta. Hasil mikroskopik terlihat  adanya  fragmen  pengenal berupa  parenkim  yang  merupakan ciri  khas  ganggang  hijau  ( Ulva lactuca L.)
Gambar 1. Foto hasil mikroskopik ganggang hijau ( Ulva lactuca L.)
Gambar  2. Hasil  identifikasi  melatonin  pada  UV  254  nm  dengan  metode  KLT.  A:  Melatonin standar, B: Sampel hasil pemurnian ekstrak etanol ganggang hijau ( Ulva lactuca L.)
Gambar  3. Profil  spektra.  (A)  Melatonin  baku  ,  (B)  Sampel  hasil  pemurnian  ekstrak  etanol ganggang hijau ( Ulva lactuca L.)
Identifikasi Senyawa Melatonin dengan KLT Hasil  yang  diperoleh  setelah
bercak  dideteksi  dengan  sinar  UV
254 nm menunjukkan adanya kesamaan  warna  dan  harga  Rf  pada melatonin  standar  dan  sampel  hasil pemurnian.  Harga  Rf  melatonin
standar  dan  sampel  hasil  pemurnian sebesar  0,75  dengan  warna  bercak ungu.  Hal  ini  menandakan  bahwa ada  kemungkinan  kedua  senyawa tersebut  adalah  senyawa  yang  sama, yaitu melatonin (Gambar 2).
Kepastian adanya senyawa melatonin
A B
(A)
(B)
Wahyu Widyaningsih.dkk Efek Antioksidan Ekstrak
dibuktikan  dengan  spektra  UV  pada spektrofotometer UV-VIS.
Berdasarkan  gambar  tersebut diketahui  bahwa  melatonin  standar dan  bercak  sampel  hasil  pemurnian memiliki  spektra  yang  identik.  Jadi, dapat  disimpulkan  bahwa  senyawa hasil pemurnian ekstrak etanol ganggang  hijau  ( Ulva  lactuca L.) adalah melatonin (Gambar 3). Hasil penetapan kadar MDA dan Aktivitas enzim SOD
Rata-  rata    kadar  MDA  dan aktivitas  enzim  SOD  tiap  kelompok perlakuan dapat dilihat pada Tabel I.
Hasil rata-rata kadar MDA dan aktivitas  enzim  SOD  hepar  tikus kontrol  normal  dibanding  kelompok hepatotoksik yang diberi CCl 4 menunjukkan adanya perbedaan signifikan dengan meningkatnya
kadar  MDA  dan  penurunan  aktivitas enzim SOD. Hal tersebut
dikarenakan  terjadi  stress  oksidatif akibat pemberian CCl 4 menyebabkan terjadinya  stress  oksidatif  sehingga meningkatkan  proses  peroksidasi lipid  ditandai  dengan  peningkatan kadar  MDA  yang  merupakan  hasil peroksidasi  lipid  dan  penurunan aktivitas  enzim  enzim  SOD  hepar.
Hal  ini  sesuai  dengan  teori  bahwa CCl 4 yang   bersifat   toksik   dalam metabolismenya  akan  menghasilkan radikal bebas yang lebih reaktif yaitu radikal  triklorometil  (CCl 3 ● )  dan triklometilperoksi (CCl 3 OO ● ).
Radikal bebas tersebut akan berikatan  dengan  lipid  tak  jenuh ( PUFA )  untuk  memulai  terjadinya peroksidasi  lemak,  dan  peroksidasi akan menyebabkan kerusakan membran  lipid  dan  protein  serta menyebabkan penurunan antioksidan (Gutteridge dan Halliwel, 1999). Hal ini  didukung  teori  Batakov  dalam khalaf et  al. (2008)  pada  kerusakan hepar  akibat  induksi  CCl 4 ,  aktivitas SOD yang berperan dalam melakukan  pembersihan  “ scavenge” pada anion superoksida dan mengubahnya menjadi hidrogen peroksida serta menghilangkan toksisitas radikal bebas, akan mengalami  penurunan  karena  tidak mampu  mengimbangi  peningkatan peroksidasi  lemak  dan  peningkatan ROS akibat pemberian CCl 4 .
Tablet curcuma secara signifikan  menurunkan  kadar  MDA dan  meningkatkan    aktivitas  enzim SOD  jika  dibandingkan  dengan
Tabel I . Rata rata Kadar MDA dan aktivitas enzim SOD hepar tikus setelah pemberian CCl 4 Kelompok Perlakuan Kadar MDA (nmol/ gram) Rata-rata Aktivitas Enzim SOD (%)  ± SD Kontrol Normal 0,12 ± 0,02 72,44±1,47 kelompok hepatotoksik 1,15 ± 0,06 14,67±2,10 Curcuma 200 mg/kgBB/hari 0,29 ± 0,02* 53,44±2,98 * EEGH  100 mg/kgBB/hari 0,77 ± 0,03* 43,05±3,17* EEGH  200 mg/kgBB/hari 0,50 ± 0,02* 67,34±1,50*
Keterangan: Berbeda signifikan dibanding kelompok hepatotoksik dengan taraf kepercayaan 95%
Kelompok  hepatotoksik  (P<0,05) Tablet  Curcuma  adalah  salah  satu produksi Industri SOHO, mengandung  serbuk  dari  Rhizoma Curcuma, yang mengandung zat aktif kurkumin dan minyak atsiri (Wahyono et  al .,  2009).  Kurkumin dapat  menurunkan  kadar  MDA karena  kurkumin  mempunyai  gugus hidroksi fenolik yang dapat menangkap  radikal  bebas  terutama radikal  hidroksil  (Tonnesen  dan Greenhill,  1992).  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  sebelumnya  yang dilakukan oleh Tristanti et al. (2013) bahwa  pemberian  tablet  curcuma mampu  menurunkan  kadar  MDA hepar  tikus  Wistar  yang  diinduksi CCl 4 .
Pemberian  EEGH  dosis  100 mg/kgBB  dan  dosis  200  mg/kgBB selama  21  hari    dapat  menurunkan kadar  MDA  dan  meningkatkan aktivitas  enzim  SOD  hepar  secara
signifikan    setelah  pemberian  CCl 4. Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa EEGH dosis 100 mg/kgBB dan dosis 200  mg/kgBB  mempunyai  aktivitas antioksidan yang ditunjukkan dengan menurunnya  aktivitas  peroksidasi lipid    membran  ditandai  dengan penurunan kadar MDA dan peningkatan  aktivitas  antioksidan endogen  yaitu  enzim  SOD    yang menangkap    anion  superoksida  dan mengubah menjadi hidrogen peroksida. Peningkatan aktivitas enzim  SOD  tersebut  diduga  terjadi akibat  aktivitas  zat  antioksidan melatonin dalam  EEGH.  Mekanisme melatonin sebagai antioksidan meliputi penangkapan secara langsung  terhadap  radikal  bebas, menstimulasi    enzim  antioksidan, meningkatkan  efisiensi  fosforilasi oksidatif di mitokondria, dan meningkatkan  efisiensi  antioksidan lain  (Reiter et  al .,  2003).  Melatonin
Wahyu Widyaningsih.dkk Efek Antioksidan Ekstrak
dapat menetralisir zat radikal dengan menyumbangkan elektronnya bereaksi dengan radikal ● OH membentuk senyawa 4-hidroksimelatonin .  Melatonin  juga dapat menghambat pembentukan
peroksinitrit (prekursor radikal)
dengan  menghambat  enzim nitrit oksida sintetase membentuk senyawa N-nitrosomelatonin (Dun-Xian et al., 2007).  Selain  itu,  melatonin  juga mengurangi  stress  oksidatif  dengan meningkatkan  aktivitas  enzimantik oksidan  seperti  SOD,  CAT,  dan glutationperoksidase (GSH-Px) (Liu, 2000).    Hal  ini  sesuai  dengan penelitian yang dilakukan oleh
Ozturk et  al. ,  (2000),  meneliti tentang  pengaruh  melatonin  pada aktivitas enzim superoksida dismutase (SOD) hepar,  nitrat  serum dan  kadar  hormon  tiroid.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  tikus yang  diinduksi  melatonin  dosis  10 mg/kgBB  selama  7  hari  terjadi kenaikan  aktivitas  SOD  hepar.  Pada penelitian ini, kedua kelompok dosis menunjukkan peningkatan rerata aktivitas  enzim  SOD  dibandingkan dengan  kelompok  hepatotoksik.  Hal ini  sesuai  dengan  teori  dimana pemberian  antioksidan  pada  tikus
yang diinduksi CCl 4 dapat menstimulasi mekanisme
perlindungan  antioksidan  dengan meningkatkan  aktivitas  SOD  di homogenate  hepar  (Khalaf et  al ., 2008).

## KESIMPULAN
Pemberian ekstrak etanol ganggang  hijau  ( Ulva  lactuca L.) dosis 100 mg/kgBB dan 200 mg/kgBB selama 21 hari menunjukkan adanya aktivitas antioksidan dengan parameter penurunan kadar MDA dan peningkatan  aktivitas  SOD  hepar tikus yang diinduksi CCl 4 .

## DAFTAR PUSTAKA
Alfiani, E., 2008, Asuhan Keperawatan Pada Tn. S Dengan  Sirosis  Hepatitis  Di Ruang Cempaka BRSUD Sukaharjo, Karya  Tulis  Ilmiah Mahasiswa, Fakultas Kesehatan Universitas Muhammadiyah Surakarta. Balzer  I.,  Hardeland  R.,  1996, Melatonin  in  algae  and  higher plants:  possible  new  roles  as  a phytohormone and antioxidant,
Botanica Acta 109, 180–183. Capeyron,  C.  Julie.,  B.  Eric.,  P.
Jean., MR. Piere., L.L. Claude, D.  Benard,  2002,  A  diet cholesterol and deflcient in vite incudes  lipid  peroxidation  but
does  not  enhace  antioxidant enzyme  expression in  rat  liver, jnurt. Biochem . 13:296-301. Cochrane,  G.  C.,  1991,  Cellular injury by oxydant, Am.J.Med. Conti,  M.,  Morand  P.C.,  Laillain  P., Lemonniera A., 1991, Improve fluorometric  determination  of malondialdehyde,
J. Clin. Chem ., 37:1273-1275. Crawford,  J.M.,  2007,  The  Liver, Gallbladder,  and  Biliary  Tract; Robbins  Basic  Pathology 8th ed.  New  York:  Elsevier  inc. page 631-632
Dun-Xian T., Lucien C., Manchester, Maria P. Terron, Luis J. Flores and Russel J. Reiter, 2007, One molecule,  many  derivatives:  A never-ending  interaction  of melatonin with reactive oxygen and nitrogen species?, J. Pineal
Res . 42:28–42. Fertaveni,  B.  Z.,  2012,  Penetapan kadar  phytomelatonin  ekstrak etanol ganggang hijau ( Spirogyra  sp. )  hasil  penyarian dengan alat soxhlet dan maserasi secara spektrofotometri, Skripsi , Fakultas  Farmasi  Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta.
Gutteridge,J.M.C.,  Halliwel,B.,1999,
Free  radicals  in  Biology  and Medicine,  Third  Edition ,  New York, Oxford University Press.
Khalaf  A.A.,  Mekawy  M.E.M.,
Moawad  M.S.,  Ahmed  A.M.,
2008, Comparative  Study  on the  Protective  Effect  of  Some Antioxidant Against CCl 4 Hepatotoxity  in  Rats. Dalam Egyptoan  Journal  of  Natural Toxins,. Egypt: Egyptian
Journal . vol 6 (1): 59-82
Kikuzaki,H.,Hisamoto,M.,Hirose,K.,
Akiyama,K.,Taniguchi,
H.,
2002,  Antioxidants  Properties of Ferulic Acid and Its Related Compound, J. Agric.Food Chem, 50: 2161-2168. Kolar,  J.  and  Machackova,  I.,  2001, Occurrence and Possible function of melatonin in plants,
Endocytobiosis and cell Res 14 (1) : 75-84. Liu  F.  HG.  TB.,  2000,  Effect  of pineal  indoles  on  activities  of the antioxidant defense enzymes superoxide dismutase, catalase, and glutathione reductase, and levels of reduced and oxidized glutathione  in  rat  tissues, Biochem Cell Biol ; 78:447 453. Mahdi C, Aulaniam, Widodo, Sumarno, 2007, Yogurt Sebagai Detoksikan yang Efektif  Terhadap  Toksisitas Formalin  yang Terpapar  dalam
Makanan, Jurnal  Protein, Vol. 15 No. 1.
Malau,  A.  S.,  2011,  Karakteristik Penderita  Sirosis  Hati  yang Dirawat  Inap  di  Rumah  Sakit Martha  Friska  Medan  Tahun 2006-2010, Skripsi ,  Fakultas Kesehatan  Masyarakat,  USU, Medan.
Ohkawa, H., N. Ohishi and K. Yagi,
1979, Assay for lipid peroxidase in animal tissues by thiobarbituric  acid  reaction.
Ana , Biochem , 95:351-358. Ozturk, G., Coşkun, S., Erbaş, D., & Hasanoglu,  E.,  2000,  The effect  of  melatonin  on  liver superoxide  dismutase  activity, serum  nitrate  and  thyroid hormone  levels. The  Japanese journal  of  physiology , 50 (1), 149-153.
Reiter, R.J., Dun-Xian T., Juan C.M.,
Rosa M.S., Josefa L., Zbigniew
Wahyu Widyaningsih.dkk Efek Antioksidan Ekstrak
C.,  2003,  Melatonin  as  an antioxidant: biochemical mechanisms and pathophysiological implications  in  humans, Acta
Biochimica  Polonica ,  Vol. 50
No. 4:1129-1146.
Tellingen, C.V., 2003, Organ Physiology From a Phenomenological  Point  of View,  Louis  Bolk  Instituut, Driebergen, pp 89-90.
Tonnesen, H. and Greenhill J., 1992,
Studies on curcumin dan curcuminoids:  XXII  curcumin as  a  reducing  agents  as  a radical scavenger, International Journal of Pharmaceutical , 87:79-87. Wahyono, J., Arif R.H., Purwantiningsih, 2009, Pengaruh pemberian tablet curcuma terhadap farmakokinetika rifampisin pada tikus, Karya Tulis Ilmiah ,
Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Zang  L-Y,  Gosma  G,  Garder  H., 1998,  Scavenging  of  reactive oxygen  species  by  melatonin, Biochim Biophys Acta ; 1425:469–477.