## Aktivitas Antijamur Fraksi Ekstrak Etanol Daun Pare

## ( Momordica charantia L.) terhadap Microsporum canis ATCC 32699
Reza Agung Sriwijaya, Rini Isromarina, dan Meyla Rosada

## Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Bhakti Pertiwi Palembang
Intisari: Pare merupakan salah satu tanaman yang digunakan sebagai obat herbal, salah satunya untuk penyakit infeksi. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui aktivitas antijamur fraksi ekstrak etanol daun Pare.  Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dan dilanjutkan dengan fraksinasi mengunakan pelarut n-heksan, etil asetat dan air. Uji aktivitas antija- mur dilakukan dengan menggunakan metode difusi agar. Jamur uji yang digunakan adalah Microsporum canis dengan konsentrasi 1,5%, 1% dan 0,5%. Hasil uji aktivitas antijamur fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi air ekstrak eta- nol daun Pare menunjukkan adanya diameter zona hambat. Pada fraksi n-heksan, etil asetat dan fraksi air diameter zona hambat paling besar adalah 11,7 mm,11,6 mm dan 10,1 mm. Zona hambat yang terbentuk menunjukkan bahwa fraksi ek- strak etanol daun Pare mempunyai aktivitas antijamur.
Kata kunci: Momordica charantia, antijamur, infeksi kulit, ekstraksi, fraksi
Abstract: Pare is one of the plants used as an herbal medicine, one of which is for infectious diseases. This study aimed to evaluate the antifungal activity ethanol extract fraction leaves of Pare. The extraction was carried out using maceration method and then fractionated using n-hexane, ethyl acetate and water solvents. The antifungal activity  was determined using the agar diffusion method. The test fungus was using Microsporum canis at a serial concentration of 1,5%, 1% and 0,5%. The results of antifungal  activity test  of n-hexane fraction, ethyl  acetate  fraction and water fraction of Pare leaf ethanol extract showed the existence of inhibitory zone diameter. In the n-hexane fraction, ethyl acetate and water frac- tion the diameter of the largest inhibitory zone was 11,7 mm, 11,6 mm and 10,1 mm. Inhibitory zone showed that the fraction of ethanol extract of Pare leaves has antifungal activity.
Keywords: antifungal, skin infectious, extraction, fraction Momordica charantia
Email: rezaagungsriwijaya@gmail.com

## 1 PENDAHULUAN
enyakit  kulit  merupakan  kelainan  kulit  yang disebabkan  oleh  mikrobia.  Pemicu  terjadinya penyakit  kulit  karena  beberapa  faktor,  antara  lain kebersihan,  daya  tahan  tubuh  rendah,  lingkungan, suhu,  kelembaban  kulit,  ketersediaan  vitamin  dan hormon dikulit (Maharani, 2015).
Mikroba yang dapat menyebabkan infeksi penya- kit  kulit  antara  lain Epidermophyton  floccosum , Mi- crosporum  canis dan Trichophyton  rubrum .  Jamur tersebut  umumnya  mengakibatkan  kurap,  kutu  air dan  jamur  diantara  selangkangan(Tjay  dan  Rahard- ja, 2008).
Dermatofitosis  merupakan  penyakit  kulit  yang disebabkan dermatofit (jamur permukaan) yang me- rupakan kelompok fungi patogen terbesar pada ma- nusia.  Dermatofit  yang  umum  menyebabkan  infeksi kulit  antara  lain Microsporum (kulit  dan  rambut). Misrosporum hidup  di  lapisan  tanduk,  serta  rambut dan  memiliki  enzim  yang  mampu  melarutkan  kera- tin. Infeksi  ditandaidengan bercak-bercak melingkar
dikulityang  tertutup  dengan  sisik  atau  gelembung kecil (Tjay dan Rahardja, 2008).
Obat yang umumnya digunakan untuk mengoba- ti  infeksi  kulit  antara  lain,  golongan  azol  yaitu  keto- konazol,  mikonazol,  fluconazol  dan  golongan  polie- na seperti amfoterisin dan nistatin (Tjay dan Rahard- ja, 2008). Obat kimia tersebut mampu menurunkan jumlah  koloni  mikrobia  penyebab  penyakit  kulit (Irianto,  2015).  Namun  obat  tersebut  memiliki  efek samping  dalam  penggunaannya  antara  lain  iritasi dan  resistensi  antibiotik  (Muhammad  dkk,  2013). Cara mengatasi masalah yang timbul akibat penggu- naan antibiotik maka dicari alternatif dengan meng- gunakan bahan  alam yang aman dan memiliki efek samping  minimal  daripada  penggunaan  antibiotik (Fissy  dkk,  2014).  Salah  satu  tanaman  yang  dapat digunakan sebagai obat herbal adalah tanaman Pare ( Momordica  charantia L)  (Hidayat  dan  Napitupulu, 2015).
Pare  merupakan  tanaman  yang  banyak  tumbuh di Indonesia. Pare dikenal dengan rasan yang pahit. Rasa  pahit  pare  tidak  mengurangi  khasiat  yang  di-
P
kandungannya  sebagai  obat  berbagai  penyakit.  Sa- lah  satu  bagian  tanaman  Pare  yang  dimanfaatkan untuk pengobatan adalah daun. Perasan  daun Pare dapat  digunakan  sebagai  obat  kudis,  cacingan,  de- mam,  membersihkan  darah  nifas  dan  mengobati batuk  (Schormoulo  dkk,  2005;  Hidayat  dan  Napitu- pulu, 2015).
Daun Pare mengandung senyawa aktif metabolit sekunder  seperti  alkaloid,  tanin,  saponin,  flavanoid, glikosida  dan  steroid  (Mada  dkk,  2013).  Menurut penelitian  Soares  dkk  (2015)  bahwa  ekstrak  etanol daun  Paremempunyai  aktivitas  antifungi  pada  kon- sentrasi  1%  terhadap Microsporum  canis dengan daya hambat sebesar 13 mm.
Berdasarkan  uraian  tersebut  akan  dilakukan  pe- nelitian  lebih  lanjut  terhadap  uji  aktivitas  antifungi ekstrak  etanol  daun  Pare  dengan  menggunakan fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi air terha- dap jamur penyebab infeksi kulit yaitu Microsporum canis ATCC32699.

## 2 METODE PENELITIAN

## 2.1  Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah  gelas  beker  500  mL, rotary evaporator , corong kaca, bunsen, cawan petri, gelas  beker,  batang  pengaduk,  pipet  tetes,  jarum ose,  pinset,  erlenmeyer  250  mL,  erlenmeyer  1000 mL, vial, tabung reaksi, gelas ukur, autoklaf, spektro- fotometer UV-Vis, dan jangka sorong.
Bahan yang akan digunakan daun Pare ( Momor- dica  charantia L), Potato  Dextrose  Agar (PDA) (Merck),  kertas  cakram,  NaCl  0,9%  (Otsu-NS),  eta- nol,  ketokonazol  (Piramal  Health  Care),  aquades (Brataco), etil asetat (Brataco) dan N-heksan (Brata- co).

## 2.2  Prosedur Penelitian

## Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  adalah  daun  Pare  yang  di- peroleh  dari  dusun  II  Lumpatan  II  Kecamatan  Se- kayu Kabupaten Musi Banyuasin Sumatera Selatan.

## Pembuatan Ekstrak Daun Pare
Daun pare 1 kg di maserasi dengan etanol selama 5 hari  lalu  maserat  disaring  menggunakan  kertas  sar- ing.  Ulangi  3  kali  sampai  pelarut  bening.  Maserat yang  diperoleh  diuapkan  dengan  destilasi  vakum dan rotary  evaporator untuk  mendapatkan  ekstrak kental.
Fraksinasi
Ekstrak  etanol  daun  Pare  40  gr  dimasukkan  ke  da- lam  corong  pisah  500  mL  kemudian  ditambahkan aquades  300  ml,  selanjutnya  difraksinasi  dengan  n- heksan  200  ml  dalam  corong  pisah.  Fraksinasi  dila- kukan  5  kali  pengulangan  sampai  pelarut  n-heksan berwarna  bening  sehingga  diperoleh  2  fraksi  yaitu fraksi  air  dan  fraksi  n-heksan.  Fraksi  n-heksan  diua- pkan  dengan rotary  evaporator sehingga  di  dapat fraksi  kental  n-heksan.  Selanjutnya,  fraksi  air  difrak- sinasi  dengan  pelarut  etil  asetat  sebanyak  200  ml. Fraksinasi  dilakukan  5  kali  pengulangan  sampai  pe- larut etil asetat berwarna bening sehingga diperoleh 2 fraksi yaitu fraksi air dan fraksi etil asetat. Fraksi etil asetat  dan  fraksi  air  diuapkan  dengan rotary  evapo- rator .

## Jamur Uji
Jamur  yang  digunakan  adalah Microsporum  canis ATCC 32699  yang diperoleh dari Laboratorium Mi- krobiologi Klinis, Universitas Indonesia.
Pembuatan Larutan Kontrol Positif dan Kontrol Negatif Larutan  kontrol  positif    yang  digunakan  yaitu  keto- konazol  dengan  konsentrasi    0,1%  sebagai  larutan induk,  dilarutkan  dengan  etanol  hingga  50  mL.  Ke- mudian diencerkan dengan konsentrasi 0,01%. Laru- tan kontrol negatif yang digunakan yaitu etanol.

## Pembuatan Larutan Uji
Pembuatan  larutan  uji  fraksi  kental  n-heksan,  fraksi etil  asetat  dan  fraksi  air  daun  Pare  dengan  konsen- trasi 1,5%, 1% dan 0,5%. Ekstrak etanol 0,45 gr dari masing-masing  fraksi  (n-heksan,  etil  asetat  dan  air) ditambahkan  dengan  etanol  destilat  10  ml  untuk konsentrasi  1,5%.  Kemudian,  diencerkan  menjadi konsentrasi 1% dan 0,5%.

## Pembuatan Media Agar Miring
Potato  Dextrose  Agar (PDA)  28  gr  dilarutkan  dalam 1000  mL  aquades,  kemudian  dipanaskan  hingga mendidih.  Kemudian,  disterilkan  dengan  autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit.

## Pembuatan Suspensi Jamur Uji
Koloni jamur diambil 1 ose, kemudian disuspensikan ke dalam 15 mL NaCl 0,9% fisiologis dihomogenkan. Kekeruhan  suspensi  mikroba uji diukur  dengan alat spektrofotometer    UV-Vis  yaitu  580  nm  dengan transmitan  90%  untuk  jamur  (Cappuccino  dan James, 2009).

## Uji Penghambatan Pertumbuhan Mikroba dengan Me- tode Difusi Agar
Suspensi jamur uji 0,1 mL dituangkan ke dalam Ca- wan petri yang berisi PDA 10 mL yang telah mema-
dat  dan  dihomogenkan.  Biarkan  pada  suhu  kamar selama  15  menit.  Kertas  cakram  dicelupkan  pada masing-masing  konsentrasi  larutan  uji  yang  telah dibuat.  Kemudian  diletakkan  ke  dalam  cawan  agar yang telah diinokulasi dengan jamur uji. Kemudian, diinkubasi  pada  suhu  ruang.  Setelah  diinkubasi,  di- amati  diameter  zona  bening  ( clear  zone )  yang  ter- bentuk  dan  diukur  dengan  jangka  sorong  (Cappuc- cino dan James, 2009).

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  daun  Pare  dengan  pelarut  etanol  di- peroleh  ekstrak  etanol  daun  pare  93,96  gr  dengan rendemen  ekstrak  9,39%.  Ekstrak  etanol  daun  Pare secara  organolepstis  diperoleh  hasil  pengamatan bahwa  daun  tanaman  pare  berwarna  cokelat,  rasa pahit serta mempunyai bau yang khas.
Ekstrak  kental  daun  pare  ( Momordica  charantia L) sebanyak 40 gram difraksinasikan. Fraksinasi dila- kukan  dengan  menggunakan  pelarut  berdasarkan tingkat kepolaran, yaitu n-heksan, etil asetat dan air. Pelarut  n-heksan  akan  menarik  senyawa  yang  non polar,  perlarut  etil  asetat  akan  menarik  senyawa semi polar dan air menarik senyawa yang polar. Ha- sil  fraksi  kental  yang  diperoleh  yaitu  fraksi  kental  n- heksan  16,78  gr,  fraksi  etil  asetat  7,97  gr  dan  fraksi kental air 12,20 gr. Menurut Djamal (2010) Fraksina- si  dilakukan  untuk  memisahkan  senyawa  kimia  ber- dasarkan kepolarannya.
Pengujian  aktivitas  antijamur  fraksi  n-heksan  ek- strak etanol daun Pare ( Momordica charantia L) ter- hadap jamur Microsporum canis diperoleh diameter zona  hambat  berturut-turut  sebesar  11,7  mm,  9,6 mm dan 8,6 mm. Kemudian, fraksi etil asetat ekstrak etanol  daun  Pare  didapat  diameter  zona  hambat berturut-turut 11,6 mm, 9,6 mm dan 8,3 mm. Selan- jutnya, hasil pengujian uji aktivitas antifungi fraksi air ekstrak  etanol  daun  Pare  diperoleh  diameter  zona hambat  yaitu  10,1mm,  9,2  mm  dan  8,0  mm  (Tabel 1).
Tabel 1. Rerata diameter Zona Hambat Microsporum canis
ATCC 32699 Konsen- trasi (%) Rerata diameter Zona Hambat Microsporum canis ATCC 32699 Fraksi n -Heksan Fraksi Etil Asetat Fraksi Air K + 18,4 ± 0,2 18,1 ± 0,25 18,2 ± 0,05 K - 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 1,5% 11,7 ± 0,05 11,6 ± 0,25 10,1 ± 0,05 1% 9,6 ± 0,05 9,6 ± 0,11 9,2 ± 0,1 0,5% 8,6 ± 0,15 8,3 ± 0,05 8,0 ± 0,05
Berdasarkan  Tabel  1  menunjukkan  bahwa  fraksi n-heksan  ekstrak  etanol  daun  Pare  memiliki  zona hambat terbesar yaitu 11,7 mm, kemudian fraksi etil asetat  ekstrak  etanol  daun  Pare  yaitu  10,6  mm  dan terendah adalah fraksi air ekstrak etanol daun Pare, yaitu  10,1  mm  pada  konsentrasi  1,5%.  Hal  ini  me- nunjukkan  bahwa  fraksi  dengan  pelarut  non  polar mampu  menghambat  aktivitas  jamur  lebih  tinggi dari pada fraksi dengan pelarut polar.  Menurut Mu- tiara  dan  Wildan (2014) bahwa  fraksi n-heksan  dan etil asetat daun Pare  ( Momordica charantia L) men- gandung senyawa steroid, dan senyawa fenolik yang berpotensi sebagai antijamur.
Pada uji aktivitas antijamur  terbentuk zona ham- bat. Hal menunjukkan bahwa adanya senyawa yang terkandung  pada  daun  Pare  sehingga  mampu menghambat  aktivitas  jamur.  Menurut  Mada  dkk, (2013) daun Pare mengandung senyawa aktif meta- bolit sekunder seperti alkaloid, tanin, saponin, flava- noid, glikosida dan steroid.
Penelitian sebelumnya Soares dkk (2015) menya- takan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  Pare  ( Momordica charantia L)  mempunyai  aktivitas  antifungi  pada konsentrasi 1% terhadap Microsporum canis dengan daya  hambat  sebesar  13  mm.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  lebih  berpotensi  sebagai  anti- fungi dibandingkan dengan fraksi n-heksan,etil asetat dan fraksi air ektrak etanol daun Pare.

## 4 SIMPULAN
Fraksi  n-heksan,  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  air  ek- strak  etanol  daun  Pare  ( Momordica  charantia L) memiliki  aktivitas  antijamur  terhadap Microsporum canis ATCC 32699 .
Fraksi  n-heksan  memiliki  diameter  daya  hambat paling  besar  yaitu  11,7  mm  dibandingkan  fraksi  etil asetat dan fraksi air.

## REFERENSI _____________________________
[1] Cappuccino dan James, G. 2009. Manual Laboratorium Mikrobiologi . Jakarta : Medical Publisher.
[2] Castro.C.M.S., Vilanova, N.S., Cavalcante., Rocha, M.F.G. 2015. Antifungal Activity of Plant Extract Againts Microsporum canis and Candida spp. Strain. Boletin Latinoam Caribe Plant Med Aromat . 14(4) : 263
– 272.
[3] Djamal, R. 2010. Kimia Bahan Alam : Prinsip-prinsip Dasar Isolasi dan Identifikasi. Padang : Universitas Bai- turrahman.
[4] Fissy, O.N, Sari, R., Pratiwi, L. 2014. Efektivitas Gel Anti Jerawat Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah ( Zingiber officinale Rose) terhadap Propionibacterium
acnes dan Staphylococcus epidermidis. Jurnal Ilmu Ke- farmasian Indonesia : 193-201.
[5] Hidayat, S dan Napitupulu, M.R. 2015. Kitab Tumbu- han Obat . Jakarta : Agriflo Penebar Swadaya Timur Group.
[6] Mada, B.S., Garba, A., Mohammed, A.H., Muhammad, A., Olagunjo, A and Muhammad, B.A. 2013. Antimi- crobial Activity and Phytochemical Screening of Aquous and Ethanol Extracts of Momordica charantia L. Journal Medicinal Plants Research . 7(10) : 579 – 586.
[7] Maharani, A. 2015. Penyakit Kulit : Perawatan, Pence- gahan, dan Pengobatan. Yogyakarta : Pustaka Baru Press.
[8] Muhammad, M., Ted, B.A., Rosen, M.D. 2013. Skin Theraphy Letter, No More Antibiotics for Acne. The US National Library of Medicine and Pudmed . 18(5).
[9] Schormoulo, G., Mendonca, R.R., Alviano, C.S, Costa, S.S. Screening of Antifungal Agents Using Ethanol Pre- cipitation and Bioautography of Medical and Food Plants. Journal Ethnopharmacol . 96 : 563-568.
[10] Soares, B.V., Morais, S.M, Fontenelle, R., Brito, E.H.S., Queiroz, V.A., Mutiara, E.D dan Wildan, A. 2014. Ek- straksi Flavonoid Daun Pare (Momordica charantia L) Berbantu Gelombang Mikro Sebagai Penurun Kadar Glukosa Secara Invitro. Metana . 10(01) : 1-11.
[11] Tjay, TH dan Rahardja, K. 2008. Obat-obat Penting, Khasiat, Penggunaan dan Efek Sampingnya. Edisi ke- enam. Jakarta : Elex Media Komputindo. __________