PENAMBAHAN Ulva reticulata SEBAGAI PERANGSANG DALAM PAKAN BUATAN TERHADAP KONDISI GONAD BULU BABI KOLEKTOR
( Tripneustes gratilla LINNAEUS 1758)

## THE ADDITION OF Ulva reticulata AS A STIMULANT INTO ARTIFICIAL FEED ON THE GONAD CONDITION OF THE COLLECTOR SEA URCHIN
( Tripneustes gratilla LINNAEUS 1758)
Wahyu Purbiantoro 1* , Nur Bambang Priyo Utomo 2 , dan Oman Agus Sudrajat 2
1 Pusat Penelitian Laut Dalam (P2LD), LIPI, Ambon
* Email: wahyu.purbiantoro@gmail.com
2 Departemen Budidaya Perairan, FPIK, IPB, Bogor

## ABSTRACT
Dried  Ulva  reticulata  has  been  proven  as  a  feeding  stimulant  for  the  collector  sea  urchins ( Tripneustes gratilla ) . The purposes of this study were to determine the optimal dose of dried U. reticulata as a feeding stimulant into artificial feed and its effect on the gonad condition of the collector  sea  urchins,  T.  gratilla.  Previously,  starved  sea  urchins  (ca.  66  mm  diameter,  n=7) was  held  in  80-l  aquarium  volume  with  flow  through  seawater  system  (6.25  l/hour inlet  and outlet).  Sea  urchins  were  fed  with  diet  containing  0,  10,  20,  or  30%  of  dried  U.  reticulata (designated control, U-10, U-20, and U-30 respectively) ad libitum for 38 days. Each treatment was  given  3  replicates.  Survival  rate,  feed  consumption,  and  gonad  conditions  (gonad  index, biochemical  composition  of  the  gonad,  gonad  histology,  and  egg  diameter)  parameters  were quantified  and  compared  to  sea  urchins  fed  with  the  mixture  of  fresh  macroalgae  (Gracilaria lichenoides  and  Padina)  and  seagrass  (Enhalus  acoroides).  The  results  showed  that  the addition  of  dried  U.  reticulata  into  artificial  feed  by  10%  from  feed  weight  (U-10)  was  the optimal  dose  recommended. Sea  urchins  treated  U  -  10  diet  resulted  in  gonad  index  and  egg diameter  (5.02  %  and  82.66  µm  each),  were  higher than  other  diet  treatments. However,  this diet treatment was not able to homogenize the reproductive phase composition of T. gratilla.
Keywords: Ulva reticulata, Feeding Stimulant, Tripneustes gratilla, Gonad Condition

## ABSTRAK
Ulva  reticulata kering  telah  terbukti  sebagai  perangsang  pakan  untuk  bulu  babi  kolektor ( Tripneustes  gratilla ) .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan  dosis  optimal U.  reticulata kering  sebagai  perangsang  dalam  pakan  buatan  dan  pengaruhnya  terhadap  kondisi  gonad T. gratilla. Sebelumnya, bulu babi (diameter 66 mm, n =7) yang telah dipuasakan dipelihara dalam akuarium volume 80-l dengan sistem air laut mengalir (debit air masuk dan keluar 6,25  l/jam). Bulu babi diberi diet salah satu pakan yang mengandung 0, 10, 20 atau 30% U. reticulata kering (kontrol,  U-10,  U-20,  dan  U-30)  secara ad  libitum selama  38  hari.  Setiap  perlakuan  diberi  3 ulangan.  Parameter  kelangsungan  hidup,  tingkat  konsumsi  pakan  dan  kondisi  gonad  (indeks gonad,  komposisi  biokimia  gonad,  gambaran  histologi  gonad  dan  diameter  telur)  diukur  dan dibandingkan  dengan  bulu  babi  yang  diberi  pakan  campuran  segar  makroalga  ( Gracilaria lichenoides dan Padina ) dan lamun ( Enhalus acoroides ). Hasil penelitian menunjukkan bahwa penambahan U. reticulata kering ke dalam pakan buatan sebesar 10% dari bobot pakan (U-10) merupakan  dosis  optimal  yang  direkomendasikan.  Bulu  babi  yang  diberi  perlakuan  diet  U-10 menghasilkan  indeks  gonad  dan  diameter  telur  (masing-masing  5,02%  dan  82,66  µm),  lebih besar apabila dibandingkan dengan perlakuan diet lainnya. Walaupun perlakuan diet ini belum mampu menyeragamkan komposisi fase reproduktif T. gratilla.
Kata kunci: Ulva reticulata , Perangsang Pakan, Tripneustes gratilla , Kondisi Gonad

## I. PENDAHULUAN
Gonad  bulu  babi  ( roe )  sebagai produk  perikanan  telah  menjadi  komoditi penting  di  berbagai  negara  (Keesing  and Hall, 1998). Namun sejak puncak produksi pada tahun 1995, produksi global perikanan  bulu  babi  terus  mengalami penurunan.  Di  sisi  lain  permintaan terhadap  produk  bulu  babi  selalu  ada bahkan  terus  meningkat  (Andrew et  al., 2002).  Kondisi  ini  menciptakan  peluang bagi  kegiatan  akuakultur  bulu  babi, terutama di negara-negara yang selama ini masih mengandalkan hasil tangkapan bulu babi dari alam untuk memenuhi permintaan ekspor.
Di  Indonesia,  potensi  bulu  babi belum  optimal  dikembangkan.  Angka statistik  menunjukkan  kuantitas  ekspor bulu babi hidup ke Jepang kurang dari 0,5 metrik ton per tahun (JFTA, 2003 in Sonu, 2003).  Bulu  babi  kolektor  ( Tripneustes gratilla Linnaeus  1758)  merupakan  bulu babi  tropis  yang  memiliki  nilai  komersial tinggi.  Di  Indonesia  biota  ini  tersebar  di Kawasan  Tengah  dan  Timur  Indonesia seperti Bali, Nusa Tenggara, Sulawesi dan Maluku  terutama  di  ekosistem  lamun (Aziz,  1993).  Biota  ini  memiliki  tingkat pertumbuhan  yang  cepat  (Dworjanyn et al., 2007),  warna  gonadnya  memenuhi selera  pasar,  berwarna  kuning  cerah sampai  oranye  dengan  tekstur  halus sampai  kasar  (berbutir)  (Chasanah  dan Andamari, 1997) dan induk matang gonad tersedia  di  alam  cukup  lama,  sehingga keperluan  induk  siap  memijah  bagi  usaha pembenihan tidak menjadi masalah (Tuwo dan Pelu, 1997).
Pengembangan pakan buatan untuk  mengurangi  penggunaan  pakan alami  sekaligus  untuk  meningkatkan pertumbuhan  somatik  dan  kualitas  gonad merupakan  salah  satu  fokus  penelitian dalam  kegiatan  akuakultur  bulu  babi (Agatsuma et  al., 2010;  Barker,  2010; Kelly  and  Chamberlain,  2010).  Ukuran
gonad  yang  besar,  mengandung  sedikit atau  tanpa  gamet,  tekstur  yang  teguh  dan memiliki  warna  kuning  cerah  atau  oranye merupakan karakteristik gonad berkualitas yang ditujukan untuk konsumsi (Robinson et  al., 2002;  Shpigel et  al., 2004). Sementara  karakteristik  gonad  untuk tujuan  pembenihan  terutama  dibutuhkan gonad yang mengandung banyak gamet.
Salah  satu  kendala  penggunaan pakan  buatan  bagi  bulu  babi  adalah tingkat konsumsi pakan buatan yang lebih rendah dibandingkan pakan alami (Lawrence et  al., 1997;  McBridge et  al., 1997). Proses penelanan makanan merupakan  aspek  penting  dari  nutrisi. Jumlah  dan  frekuensi  konsumsi  oleh  bulu babi  salah  satunya  dipengaruhi  oleh karakteristik fisik dan kimia dari makanan. Seekor binatang mungkin tertarik  ( attractant) untuk  makan  tetapi tidak  dirangsang  untuk  memakannya  dan binatang  mungkin  terdorong  ( incitant ) untuk
makan tetapi kemudian menghindarinya  ( deterrent )  (Lindsteadt, 1971). Tahap-tahap ini tidak selalu secara eksplisit  diakui  dalam  studi  mengenai pemberian  makan  terhadap  bulu  babi. Klinger  and  Lawrence  (1984)  menyakini perbedaan  konsumsi  oleh  bulu  babi  hijau ( Lytechinus variegatus ) terutama ditentukan  oleh  ketekunan  dalam  makan bukan  pemilihan  makanan.  Ketekunan bulu  babi  saat  kontak  dengan  makanan menunjukkan stimulasi makan.
Konsumsi  bulu  babi  terhadap pakan  buatan  dapat  ditingkatkan  melalui penambahan  perangsang  ( stimulant )  ke dalam  pakan  buatan  untuk  memperbaiki palatabilitas atau kesedapan pakan
(McClintock et  al. ,  1982;  Klinger  and Lawrence,  1984;  Sakata et  al., 1989). Dworjanyn et  al. (2007)  melaporkan penambahan Sargassum linearifolium kering  ke  dalam  diet  formulasi  dapat bertindak  sebagai  perangsang  pakan  bagi juvenil T.  gratilla. Adapun  Cyrus et  al. (2012)  menunjukkan  bahwa  penambahan
Ulva spp.  (predominan U.  rigida )  kering sebesar  20%  dari  berat  pakan  dapat menghasilkan  gonad T.  gratilla yang diterima  oleh  pasar,  dari  sisi  ukuran  dan warna  gonad.  Sementara,  penelitian  yang dilakukan  Purbiantoro et  al. ( in  press ) menunjukkan  bahwa  penambahan U. reticulata kering  sebesar  5%  dari  berat pakan mampu bertindak sebagai perangsang  pakan  ketika  ditambahkan pada  pakan  buatan  untuk T.  gratilla dewasa.  Namun  demikian,  penelitian tersebut belum menggambarkan penggunaan  dosis  optimal U.  reticulata kering  sebagai  perangsang  pakan  dan pengaruhnya  terhadap  kondisi  gonad . Penelitian ini bertujuan untuk menentukan dosis optimal U. reticulata kering sebagai perangsang pakan dan pengaruhnya terhadap kondisi gonad T. gratilla.

## II. METODE PENELITIAN
2.1. Pengumpulan dan Preparasi Ulva reticulata Alga hijau Ulva reticulata
dikumpulkan  dari  pantai  Tantui  (S 03 o 40’09,1”,  E  128 o 11’46,0”;  Gambar  1) saat berlimpah ( blooming ). Selanjutnya U. reticulata segar  dibawa  ke  Laboratorium Budidaya,  Pusat  Penelitian  Laut  Dalam (P2LD),  LIPI,  Ambon  dalam  bak  plastik berisi  air  laut.  Setibanya  di  laboratorium, U. reticulata dicuci menggunakan air laut dan  dikering-anginkan  di  atas  rak  bambu yang diberi naungan sampai kristal garam pada  thalus  muncul.  Kemudian U. reticulata
kembali dicuci dengan menggunakan  air  tawar  dan  dikering- anginkan  kembali  selama  5  hari.  Setelah kering U. reticulata dihancurkan
Gambar 1. Peta lokasi penelitian.
dengan  alat  pelumat  ( blender ),  dan kemudian dilewatkan pada saringan berpori 3 mm. U. reticulata kering dengan kadar  air  10-12%  disimpan  dalam kontainer kedap udara yang dilengkapi gel silika  selama  sekitar  6  bulan  hingga digunakan untuk penelitian.

## 2.2. Pengumpulan  dan  Pemeliharaan Tripneustes gratilla
Bulu  babi  kolektor  ( Tripneustes gratilla )  dikumpulkan  dari  pantai  Liang, Kabupaten Maluku Tengah pada kedalaman  0,3-3  m  (S  03 o 48’76,7”,  E
128 o 25’36,5”;  Gambar  1).  Sebelum digunakan bulu babi diadaptasikan selama 14 hari pada bak pemeliharaan dengan air laut  mengalir,  diaerasi,  serta  diberi  pakan berupa campuran makroalga segar ( Gracilaria  lichenoides dan Padina ) secara ad  libitum .  Setelah  diadaptasikan bulu babi dipuasakan selama 21 hari untuk mempermudah evaluasi penggunaan protein.  Kemudian  dipelihara  dalam  bak fiber (volume 2 m 3 ) dengan sistem air laut mengalir  (debit  air  masuk  dan  keluar sebesar  6,25  L/jam)  sebelum  dipindahkan ke dalam wadah percobaan.

## 2.3. Formulasi Pakan Buatan
Kandungan  proksimat  bahan  dasar pakan  buatan  dievaluasi  sebagai  dasar untuk memformulasikan pakan perlakuan. Analisis  kadar  protein  menggunakan metode Kjehdall, sedangkan analisis kadar lipid menggunakan metode Soxhlet (pelarut n-heksana) (AOAC, 1980).
Komposisi pakan dasar (Kontrol)
merupakan  modifikasi  formulasi  pakan yang  memberikan  efek  negatif  terhadap palatabilitas  bulu  babi  (Fernandez  and Boudouresque,  2000).  Pakan  buatan  yang digunakan  dalam  percobaan  mengandung 56% bahan dasar yang dicampur ke dalam 12,5%  larutan  pengikat.  Gelatin  yang terbuat  dari  kulit  sapi  (kadar  protein
88,28%) digunakan sebagai bahan pengikat  untuk  memperoleh  konsistensi pakan yang kuat namun lembut (Robinson et  al., 2002).  Komposisi  nutrien  pakan buatan  dinyatakan  sebagai  persentase (bobot  basah,  bb)  dan  tingkat  energi dinyatakan  dalam  kkal/kg  bb.  Formulasi pakan buatan untuk setiap jenis perlakuan ditunjukkan pada Tabel 1.

## 2.4. Prosedur Pengujian dan Parameter yang Diukur
Individu T.  gratilla yang  telah dipuasakan  diseleksi  berdasarkan  bobot utuh  dan  diameter  cangkang,  selanjutnya diuji  dengan  lima  jenis  perlakuan  diet (Tabel  2).  Setiap  perlakuan  diet  diujikan sebagai  pakan  tunggal  sebanyak  tiga ulangan.  Pakan  diberikan  satu  kali  sehari menjelang  matahari  terbenam  selama  24 hari  pertama,  berikutnya  sampai  hari  ke- 38  pakan  diberikan  dua  kali  sehari menjelang  matahari  terbit  dan  terbenam. Selama  pengujian  berlangsung,  bulu  babi dipelihara  pada  kepadatan  1  individu  per 10  L air laut ( n =7 individu) dalam wadah percobaan  berukuran  60  x  40  x  40  cm 3 yang  dilengkapi  sistem  air  laut  mengalir (debit  air  masuk  dan  keluar  sebesar  6,25 L/jam).  Parameter  utama  yang  diukur meliputi  kelangsungan  hidup,  tingkat konsumsi pakan, konsistensi pakan,
kondisi  gonad  (indeks  gonad,  komposisi biokimia  gonad,  fase  reproduktif  dan diameter  telur;  Tabel  3).  Kondisi  gonad (kecuali diameter telur) selain dibandingkan  antar  perlakuan  diet,  juga dibandingkan  dengan  kondisi  gonad  bulu babi yang ditangkap dari alam. Parameter kualitas  air  yang  diukur  meliputi  suhu, salinitas,  pH  dan  oksigen  terlarut  (Horiba tipe  U52G,  USA).  Sementara,  total amonia nitrogen (TAN) diukur menggunakan  spektrofotometer  (λ=630 nm) berdasarkan metode phenol hypochlorite (Solorzano, 1969).
Tabel 1. Formulasi pakan buatan yang digunakan dalam percobaan.
Bahan dasar Protein (%) Komposisi bahan dasar dalam perlakuan 1 (%) Kontrol U-10 U-20 U-30 Tepung ikan 54.17 55,22 55,46 55,72 55,96 Tepung jagung 9.38 17,04 11,92 6,79 1,67 Tepung pollar 13.46 17,04 11,92 6,79 1,67 U. reticulata 10.38 0,00 10,00 20,00 30,00 Minyak ikan 0,00 4,50 4,50 4,50 4,50 Minyak sawit 0,00 4,50 4,50 4,50 4,50 Filler, vitamin dan mineral mix 2 3.49 1,70 1,70 1,70 1,70 Analisis proksimat pakan 3 Kadar protein 31,77 31,69 31,91 31,81 Kadar lemak 9,80 8.86 9,20 9,12 Serat kasar 0,88 1,49 2.03 2,08 BETN 18,55 18,84 16,96 16,92 Kadar abu 6,06 6,69 7,82 7,98 Energi kasar 4 3460.87 3379.92 3347.12 3332.36 GE/P 10.89 10.67 10.49 10.48 1 Empat jenis perlakuan diet, yaitu Kontrol= pakan dasar, U-10= Kontrol + U. reticulata
10%, U-20= Kontrol + U. reticulata 20%, U-30= Kontrol + U. reticulata 30%.
2 Vitamin dan mineral mix tersusun atas (mg atau UI per kg terhadap pakan): tocopherol acetate 70,8 UI; ascorbic acid 283 mg; thiamin 7,1 mg; riboflavin 7,6 mg; pyridoxine 9,4  mg;  cyanobalanine  0,014  mg;  biotin  0,47  mg;  folic  acid  1,89  mg;  calcium panthothenate 23,6 mg; vitamin A 710 UI, vitamin D 3 700 UI; niacin 14,6 mg; CaCO 3 2,1 mg; CuSO 4 9,4 mg; Fe SO 4 4,7 mg; NaF 7,1 mg; Mg CO 3 174 mg; Mn SO 4 18,9 mg; CaHPO 4 75,5 mg; Zn SO 4 7,7 mg.
4 Hasil analisis proksimat, Laboratorium Nutrisi Ikan Departemen BDP, FPIK, IPB.
3 Perhitungan  manual,  protein:  5,6  kkal/g;  lemak  9,4  kkal/g;  karbohidrat  4,1  kkal/g (NRC, 1977).
Tabel  2.  Bobot  utuh  (BU)  dan  diameter  cangkang  (DC) Tripneustes  gratilla dari  lima jenis perlakuan diet ( n =21 individu/perlakuan). Perlakuan diet Kontrol U-10 U-20 U-30 MS* BU (g) 112,38±1,77 113,76±0,84  113,37±0,49  114,79±1,02 113,49±0,66 DC (mm) 66,27±1,76 67,23±0,10 66,48±0,31 67,17±0,97 66,64±1,04
* MS=  Campuran  makroalga  segar  ( Gracilaria  lichenoides dan Padina sp .)  +  lamun ( Enhalus acoroides ).
Tabel 3. Parameter utama yang diukur selama percobaan berlangsung.
Parameter Persamaan/Metode Uji/Prosedur Pustaka Kelangsungan hidup (SR) (%) N o dan N t = jumlah individu T. gratilla pada awal dan akhir pemeliharaan - Konsumsi pakan (KP) (g berat basah ind -1 hari -1 ) U i = bobot pakan awal ; U f = sisa pakan serta C i dan C f = bobot pakan kontrol
sebelum dan setelah pengujian Dworjanyn et al. (2007) Konsistensi pakan Pakan direndam dalam air laut selama 24 jam dan diamati berubahan bentuknya setiap jam tanpa memperhitungkan bobot bahan kering yang hilang - Indeks Gonad (GI) (%) %
W g = bobot gonad (g bb) dan W t =
bobot utuh (g bb). Perhitungan indeks gonad hari ke 0 mengorbankan 10 individu bulu babi Cook and Kelly (2007) Komposisi Biokimia Gonad - Kadar air (%) - Protein (%) Metode gavimetri Metode Kjehdall AOAC (1980) - Lipid (%) Prosedur Folch Folch et al. (1957) Fase reproduktif - Preparasi histologi gonad Penentuan jaringan, fiksasi jaringan (gonad setebal 2–3 mm 3 direndam dalam larutan Bouin’s ) , proses perlakuan jaringan ( dehidration ,
clearing , impregnation , embedding dan blocking ), pemotongan jaringan dan pewarnaan jaringan Hewitson et al.
(2010)
- Pengamatan fase reproduktif 6 Di bagi dalam empat fase utama, yakni (I) inter- gametogenesis dan NP phagocytosis , (II) pre-gametogenesis
dan NP renewal , (III) gametogenesis dan NP utilisation dan (IV) end of gametogenesis, NP exhaustion dan spawning Walker et al. (2007) Diameter Telur Telur dikumpulkan dari gonad yang dibedah, diamati menggunakan mikroskop binokuler (perbesaran lensa 10x) dan diukur menggunakan aplikasi perangkat lunak yang terintegrasi didalamnya (Nikon 5Ɛi, USA) -

## 2.5. Analisis Data
Tingkat  konsumsi  pakan,  indeks gonad dan diameter telur diuji menggunakan one  way ANOVA  dan  uji lanjut  menggunakan  uji Tukey’s  HSD pada  derajat  kepercayaan  5%.  Perbedaan konsumsi  pakan  berdasarkan  frekuensi pemberian  pakan  diuji  menggunakan  uji  t sampel bebas ( independent  sample t  test ). Analisis statistik dilakukan dengan bantuan software IBM SPSS Statistics ver.
19 .

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Sintasan dan Kualitas Air
Nilai kelangsungan hidup mencapai  100%  untuk  semua  perlakuan diet. Selama  percobaan  berlangsung parameter  kualitas  air  berupa  oksigen terlarut,  TAN,  temperatur,  salinitas  dan pH  berada  dalam  kondisi  baik  (Tabel  4). Siikavuopio et  al. (2007)  mengemukakan kualitas air yang buruk dalam pemeliharaan  bulu  babi  berkontribusi terhadap  tingginya  kematian  bulu  babi. Berdasarkan  karakteristiknya  bulu  babi kolektor ( Tripneustes gratilla ) digolongkan  dalam  jenis  ruderal  ( ruderal spesies ), walaupun memiliki laju
pertumbuhan  yang  cepat  dan  upaya reproduktif  yang  besar,  bulu  babi  yang tergolong  dalam  jenis  ruderal  diketahui sensitif  terhadap  penurunan  kualitas  air terutama naiknya level amonia (Lawrence, 2007). Siikavuopio et al. (2004)
melaporkan  nilai  kritis  TAN  (LC 50 ) S. droebachiensis (jenis ruderal) adalah pada 6,48 mg L -1 . TAN pada penelitian ini jauh lebih rendah dari batas tersebut (Tabel 4).

## 3.2. Konsumsi Pakan
Tingkat  konsumsi T.  gratilla
terhadap  campuran  makroalga  dan  lamun segar  pada  percobaan  ini  digambarkan oleh konsumsinya terhadap perlakuan diet MS.  Jumlah  biomassa  dari  setiap  jenis makroalga  yang  diberikan  tidak  sama, bergantung  pada  ketersediaan  makroalga segar  yang  diperoleh  dari  pantai  di perairan  Teluk  Ambon.  Total  makroalga segar  dan  lamun  yang  diberikan  selama percobaan  sebanyak  437,86  g  berat basah/individu. Gracilaria  lichenoides dan Padina  crasa merupakan  jenis makroalga  yang  paling  banyak  diberikan (masing-masing  50,57  dan  32,30%  dari total  konsumsi/individu;  Gambar  2).
Tingkat  konsumsi  pakan  pada  perlakuan diet ini tidak dianalisis lebih lanjut.
Tabel 4. Kisaran nilai parameter kualitas air selama percobaan. Grafik di samping data menunjukkan fluktuasi hasil pengukuran selama percobaan berlangsung.
Parameter Waktu Pengukuran Pagi-Siang Malam Oksigen Terlarut (mg/L ) 4,37-6,24 4,62-6,13 Total Amonia Nitrogen (TAN) (mg/L) 0,02-0,095 - - Temperatur ( o C) 23,30-26,24 24,99-25,84 Salinitas (g/L)* 22,80-33,00 30,86-32,74 pH 7,94-8,44 8,30-8,43 * Hari  ke-38 T.  gratilla terekspose  air  laut  dengan  salinitas  22,80  g/L  selama  sekitar  3 jam, sehingga percobaan dihentikan.
Gambar 2. Komposisi pemberian makroalga segar dan lamun pada Tripneustes gratilla ( n =21 individu/perlakuan) selama percobaan berlangsung.
Tanggap T.  gratilla terhadap perlakuan  diet  pakan  buatan  dalam percobaan  ini  tergambar  dari  tingkat konsumsi  pakan/individu/hari  (g  bb)  dan total  konsumsi  pakan/individu  (g  bb). Tanpa  bergantung  pada  jenis  perlakuan diet, setiap harinya konsumsi pakan harian T. gratilla cenderung mengalami kenaikan (Gambar  3).  Cook  and  Kelly  (2007) melaporkan Psammechinus miliaris mengkonsumsi Palmaria palmata dua kali lebih banyak setelah hari ke-30. Konsumsi pakan  yang  lebih  rendah  di  awal perlakuan  diyakini  dipengaruhi  oleh ukuran saluran pencernaan (faring, esofagus, lambung, usus dan rektum) yang mengecil  setelah  dipuasakan.  Frantzis (1992) dalam Fernandez and Boudouresque  (2000)  melaporkan  bahwa konsumsi  pakan  bulu  babi  diatur  oleh volume saluran pencernaan.
Jauh
sebelumnya,  Lawrence et  al. (1966) dalam Hammer et  al. (2006a)  telah mengindikasikan hal tersebut saat mempelajari  perubahan  ukuran  saluran pencernaan Strongylocentrotus purpuratus pada  musim tertentu dan saat  dipuasakan, di  mana  ukuran  saluran  pencernaan  yang
lebih  kecil  diyakini  membatasi  jumlah nutrien yang dapat disimpan.
Hasil percobaan menunjukkan pula bahwa frekuensi pemberian pakan mempengaruhi tingkat konsumsi pakan T. gratilla .  Uji  t  sampel  bebas  antara frekuensi  pemberian  pakan  satu  kali dengan  dua  kali  sehari  menunjukkan berbedaan ( p <0,025). Frekuensi pemberian  pakan  dua  kali  sehari  selama 13  hari  (hari  ke-26  sampai  dengan  38) memberikan  tanggap  tingkat  konsumsi pakan harian yang lebih baik dibandingkan  dengan  pemberian  pakan satu  kali  sehari  selama  24  hari  (hari  ke-1 sampai  dengan  24)  (0,75  dan  0,36  g bb/individu/hari;  Gambar  3).  Secara keseluruhan,
hasil
percobaan menunjukkan  perbedaan  total  konsumsi pakan  yang  signifikan  antar  kelompok perlakuan  diet  ( p <0,05).  Perlakuan  U-10 merupakan perlakuan diet dengan konsumsi pakan terbesar (22,01 g bb/individu).  Meski  hasil  uji  lanjut menunjukkan bahwa perlakuan U-10 tidak berbeda  dengan  perlakuan  diet  Kontrol ( p >0,05; Gambar 4).
Gambar 3. Konsumsi pakan harian Tripneustes gratilla dari empat jenis perlakuan diet ( n= 21 individu/perlakuan).
Gambar  4.  Total  konsumsi  pakan Tripneustes  gratilla dari  empat  jenis  perlakuan  diet ( n= 21 individu/perlakuan, rerata ± simpangan baku Huruf yang sama di atas bar tidak berbeda nyata menurut uji Tukey’ HSD ( p >0,05).
Terdapat  tiga  faktor  yang  diduga mempengaruhi perbedaan konsumsi pakan antar  perlakuan  diet  pada  percobaan  ini. Hasil pengujian konsistensi pakan memperlihatkan  meningkatnya  dosis U. reticulata yang  ditambahkan  ke  dalam pakan  buatan  menyebabkan  kemampuan
pakan  untuk  mempertahankan  formasinya di  dalam  air  laut  semakin  berkurang. Perlakuan  kontrol  merupakan  perlakuan dengan konsistensi pakan terbaik, sementara U-10 merupakan perlakuan diet dengan  penambahan U.  reticulata yang memiliki  kemampuan  mempertahankan
formasi  di  dalam  air  laut  lebih  lama dibandingkan U-20 dan U-30 (Gambar 5). Bulu  babi  regularia  makan  dengan  cara ‘ grazing ’ sehingga  pakan  buatan  yang segera  rusak  setelah  dicelupkan  ke  dalam air  laut  tidak  dapat  dikonsumsi  dengan cepat seperti pakan yang masih utuh.
Di  sisi  lain,  penambahan U. reticulata kering  dengan  dosis  yang semakin  meningkat  tidak  serta  merta menambah  tingkat  konsumsi  pakan T. gratilla .  Selain  menyebabkan  konsistensi pakan menurun, penambahan U. reticulata dengan  dosis  terlalu  besar  potensial meningkatkan  konsentrasi  senyawa  yang bertindak  sebagai  penghalang  ( deterrent ) pakan,  sehingga  mempengaruhi  proses penelanan  makanan  oleh  bulu  babi. Nelson (2003) dalam Daggett et al . (2005) melaporkan  alga  hijau U.  obscura mengandung  fenol  dalam  kadar  yang relatif  tinggi.  Beberapa  senyawa  fenolik, misal flurotannin pada konsentrasi tertentu akan  bertindak  sebagai  penghalang  pakan bagi T. gratilla (Steinberg and van Altena, 1992).  Faktor  lain  yang  diduga  mengatur konsumsi  pakan T.  gratilla adalah
perbedaan  umur  antar  individu  bulu  babi yang  digunakan  dalam  percobaan.  Hal serupa  dilaporkan  Cook  and  Kelly  (2007) yang  menyakini  variasi  tingkat  konsumsi Paracentrotus lividus tidak semata dipengaruhi  kandungan  pakan  perlakuan akan  tetapi  juga  dikontrol  oleh  perbedaan umur  antar  individu  bulu  babi  tersebut. Penelitian ini menggunakan bulu babi dari alam,  sehingga  besar  kemungkinan  umur antar  individu  bulu  babi  yang  digunakan berbeda.

## 3.3. Kondisi Gonad
3.3.1. Indeks Gonad (GI) Evaluasi  kondisi  gonad  di  akhir percobaan menunjukkan bahwa pemberian pakan buatan terhadap individu
T.  gratilla selama  38  hari  menghasilkan indeks  gonad  (GI)  yang  lebih  tinggi dibandingkan  GI  individu  bulu  babi  yang diberikan perlakuan diet berupa makroalga  segar  dan  lamun  (MS). Perlakuan diet U-10 dan Kontrol memiliki indeks  gonad  (GI)  sebesar  5,02  dan 4,61%, signifikan lebih besar dibandingkan  dengan  GI  bulu  babi  pada
Gambar 5. Konsistensi pakan perlakuan dalam media pemeliharaan. Arah gradasi warna dari gelap ke terang menunjukkan konsistensi pakan perlakuan dalam media pemeliharaan.
perlakuan  diet  lainnya  ( p<0 ,05).  Namun hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa  GI pada  perlakuan  diet  U-10  dan  Kontrol tidak  berbeda  nyata  ( p >0,05;  Gambar  6). Beberapa peneliti telah melaporkan produksi  gonad  bulu  babi  sangat  baik ketika  diberi  pakan  buatan  (de  Jong- Westman,  1993;  Lawrence et  al. , 1997; Fernandez  and  Boudouresque,  2000; Shpigel et  al. ,  2005;  Hammer et  al. ,
2006b).  Begitu  pula  dalam  percobaan  ini, bulu  babi  yang  diberikan  pakan  buatan menghasilkan  GI  lebih  tinggi  dibanding- kan bulu babi yang diberikan pakan alami. Hal  ini  karena  proses  absorpsi  dan efisiensi  asimilasi  bulu  babi  terhadap pakan  tinggi  protein  lebih  baik  diban- dingkan  dengan  pakan  rendah  protein (Fernandez and Boudouresque, 2000).
Hasil percobaan menunjukkan bahwa  perlakuan  diet  U-10  merupakan perlakuan  diet  dengan  tingkat  konsumsi pakan  tertinggi  dibandingkan  dengan perlakuan  diet  lainnya  (Gambar  4).
Sementara, semua perlakuan diet (Kontrol,  U-10,  U-20  dan  U-30)  pada level  protein  yang  sama  (sekitar  31%). Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tingkat retensi  protein  oleh  individu  bulu  babi akan berdampak secara langsung terhadap GI.  Hammer et  al. (2006b)  melaporkan penambahan  bobot  gonad L.  variegatus bergantung  pada  dietari  protein  dan  lama periode pemberian diet.
3.3.2. Komposisi Biokimia Gonad Analisis proksimat terhadap komposisi  protein,  lipid  dan  kadar  air gonad T.  gratilla menunjukkan  bahwa  di akhir percobaan gonad bulu babi mengalami kenaikan kadar air dan protein serta  penurunan  lipid  untuk  semua perlakuan  diet.  Perlakuan  diet  dengan penambahan U.  reticulata memiliki  kadar air, protein dan lipid lebih tinggi daripada perlakuan  diet  kontrol.  Meningkatnya dosis U.  reticulata dalam  pakan  buatan berkorelasi positif dengan kadar air gonad.
Gambar  6.  Indeks  gonad Tripneustes  gratilla dari  sampel  awal  ( n =5  individu),  lima jenis  perlakuan diet ( n =15 individu/perlakuan) dan sampel dari  alam  ( n =4 individu,  rerata±simpangan  baku).    Huruf  yang  sama  di  atas  bar  tidak berbeda nyata menurut uji Tukey’ HSD ( p >0,05).
Tabel  5.  Protein,  lipid  (%  bobot  kering,  bk)  dan  kadar  air  gonad Tripneustes  gratilla dari sampel awal, lima jenis perlakuan diet dan sampel alam.
Parameter Awal Perlakuan Alam Kontrol U-10 U-20 U-30 MS Protein (% bk) 35,98 38,19 50,71 55,02 43,73 42,83 70,16 Lipid (% bk) 38,78 16,42 26,35 26,12 28,71 17,94 23,56 Kadar air (%) 77,49 78,50 79,47 79,48 80,95 78,87 80,26
U-30  merupakan  perlakuan  diet  dengan kadar  air  dan  lipid  tertinggi  (80,95  dan 28,71%).  Sementara  itu,  U-20  merupakan perlakuan  diet  dengan  kadar  protein tertinggi (55,02%; Tabel 5).
Tingginya  komposisi  lipid  di  awal percobaan  diyakini  terjadi  karena  saat dipuasakan  bulu  babi  memperoleh  energi untuk  proses  metabolisme  terutama  dari perombakan  cadangan  glikogen  yang tersimpan  di  dalam nutritive  phagocytes pada  gonad  melalui  proses  glikogenesis, yang  mulanya  diperuntukkan  sebagai energi  seluler  siap  pakai  yang  dibutuhkan untuk  proses  gametogenesis.  Marsh  and Watts  (2007)  dalam  tinjauannya  perihal metabolisme  karbohidrat  menyebutkan bahwa  kandungan  karbohidrat  pada  telur ekinoid  rendah,  ini  mengindikasikan bahwa  karbohidrat  yang  terkadung  di dalam nutritive phagocytes
tidak
dialokasikan  untuk  perkembangan  gamet, akan  tetapi  lebih  diperuntukkan  sebagai energi  seluler  siap  pakai  yang  dibutuhkan untuk proses gametogenesis. Proses pengalokasian  glikogen  sebagai  sumber energi  untuk  proses  metabolisme  oleh bulu  babi  saat  dipuasakan  melalui  proses glikogenesis,  terjadi  pula  pada  mamalia yang  dipuasakan.  Berbeda  dengan  ikan yang  terlebih  dahulu  merombak  lipid  dan protein melalui proses glukogenesis sebagai sumber energi saat dipuasakan.
Hasil  analisis  proksimat  juga menunjukkan  bahwa  komposisi  diet berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  dan komposisi  biokimia  gonad  bulu  babi, sebab  gonad  bertindak  sebagai  organ utama  untuk  menyimpan  nutrien  pada
bulu  babi  (Walker  1982).  Nutrien  berupa protein  dan  lipid  dalam  jumlah  besar diakumulasi  di  dalam  gonad  terutama untuk  perkembangan  gonad  (Giese et  al . 1959). Protein yang diakumulasi di dalam gonad  berupa mayor  yolk  protein (MYP), di  mana  perubahan  kuantitatif  MYP  dan komponen  lainnya  terjadi  selama  proses gametogenesis, ditunjukkan adanya hubungan terbalik antara ukuran sel gonad (NP)  tempat  cadangan  nutrien  disimpan dengan  jumlah  sel  gametogenik  (Walker et  al., 2007).  Karenanya  dalam  mengeva- luasi  status  protein,  lemak  dan  komponen lain  yang  terkandung  dalam  gonad  harus mempertimbangkan  pula  fase  reproduktif bulu  babi,  sebab  hal  tersebut  sangat  erat kaitannya.

## 3.3.3. Gambaran Histologi Gonad
Analisis histologis gonad T. gratilla atas  sampel  awal  dan  lima perlakuan  diet  menunjukkan  kondisi reproduktif  gonad  yang  beragam  (fase  I- IV),  baik  individu  antar  perlakuan  diet yang  berbeda  ataupun  individu  dalam perlakuan  diet  yang  sama.  Berbeda dengan  kondisi  reproduktif  individu  bulu babi dari alam hanya terdiri atas fase III.
Tanpa membedakan individu jantan dan betina penafsiran hasil gambaran histologi memperlihatkan bahwa  kondisi  reproduktif  gonad T. gratilla sedikit  mengalami  perubahan dibandingkan dengan sampel awal. Sebagian  besar  fase  reproduktif  bulu  babi setelah percobaan berada pada fase II dan III.  Perubahan  fase  II  ditemukan  pada perlakuan diet U-10 dan sedikit
penambahan pada fase III ditemukan pada perlakuan  diet  U-20  dan  kontrol (Gambar 7).  Hasil  analisis  proksimat  menunjukkan terjadinya  peningkatan  kadar  protein  dan air  diikuti  menurunnya  kadar  lipid  pada gonad  bulu  babi pada  akhir  percobaan untuk  semua  perlakuan  diet  (kontrol,  U- 10,  U-20,  U-30  dan  MS).  Hal  tersebut menunjukkan bahwa pada semua perlakuan mulai mengalami proses
gametogenesis  dan  pemanfaatan  NP  (fase II),  tetapi  dalam  waktu  bersamaan  juga masih  mengakumulasi  tambahan  nutrien sebagaimana ditunjukkan oleh hasil analisis  gambaran  histologi  gonad  yang memperlihatkan beragamnya kondisi reproduktif  gonad  individu  bulu  babi.
Pada  fase  II,  MYP  dan  lipid  serta komponen  lain  mulai  dialokasikan  untuk pembentukan ovum dan sperma. Persediaan MYP bulu babi jantan sebagian  besar  digunakan  pada  akhir spermatogenesis.  Sementara  pada  bulu babi betina sebagian dari persediaan MYP
ditransfer  dari  ovum  melalui  endositosis dynamic-dependent  mechanism (Brook and  Wessel  2003,  2004, dalam Walker et al .,  2007)  dan  berakhir  dalam  bentuk butiran  kuning  telur  ( yolk  granules ) (Ozaki et  al., 1986, dalam Walker et  al., 2007).

## 3.3.4. Diameter Telur
Hasil pengukuran diameter telur T. gratilla di  akhir  percobaan  menunjukkan perbedaan  nyata  antar  perlakuan  diet dalam  percobaan  ini  ( p <0,05).  Uji  lanjut memperlihatkan  bahwa  perlakuan  diet  U- 10  menghasilkan  telur  dengan  rerata diameter  telur  terbesar  (82,66  µm) berbeda  nyata  dengan  perlakuan  diet lainnya  ( p <0,05;  Gambar  8).  Hal  ini selaras  dengan  akumulasi  nutrien  melalui konsumsi pakan oleh bulu babi yang lebih besar pada perlakuan diet U-10
dibandingkan  dengan  perlakuan  diet lainnya  (lihat  Gambar  4).  George et  al. (1990) menyatakan ukuran dan kandungan
Gambar  7.  Fase  reproduktif Tripneustes  gratilla (‘fase  I= inter-gametogenesis dan  NP phagocytosis ’,  fase  II  ‘ pre-gametogenesis  and NP renewal ’,  ‘fase  III= gametogenesis  and  NP  utilisation ’,  ‘fase  IV= end  of  gametogenesis,  NP exhaustion  and  spawning ’  pada  sampel  awal  ( n =10  individu),  lima  jenis perlakuan  diet  ( n =10  individu/perlakuan)  dan  sampel  dari  alam  ( n =4 individu).
Gambar  8.  Diameter  telur Tripneustes  gratilla dari  lima  jenis  perlakuan  diet  ( n =2 individu/perlakuan,  80  telur/perlakuan,  rerata±simpangan  baku).  Huruf yang  sama  di  atas  bar  tidak  berbeda  nyata  menurut  uji Tukey’  HSD ( p >0,05).
kimia  telur  ekinodermata  bervariasi  tidak hanya  antar  individu  dari  populasi  yang berbeda  tetapi  juga  antar  individu  dari populasi  yang  sama.  Vaitilingon et  al. (2005)  melaporkan  ukuran  diameter  telur T. gratilla berkisar 85-90 µm, bergantung pada  temperatur,  ketersediaan  makanan dan lama pemeliharaan.

## IV. KESIMPULAN
Penambahan Ulva reticulata kering  ke  dalam  pakan  buatan  sebesar 10%  dari  bobot  pakan  merupakan  dosis optimal yang
direkomendasikan.
Perlakuan  tersebut  terbukti  signifikan meningkatkan  konsumsi  pakan  buatan, indeks  gonad  dan  diameter  telur  akan tetapi  belum  mampu  menyeragamkan komposisi fase reproduktif gonad Tripneustes gratilla.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kami ucapkan kepada Kementerian  Negara  Riset  dan  Teknologi
dan  P2LD,  LIPI,  Ambon  yang  member- kan dana bagi penelitian ini. Terima kasih kami  sampaikan  pula  kepada  Prof.  Riset. Sulistijo  dan  Prof.  Riset.  Gono  Semiadi atas saran dan masukannya.

## DAFTAR PUSTAKA
Agatsuma,  Y.,  Y.  Sakai,  and  K.  Tajima. 2010.  Recent  advances  in  sea urchin aquaculture in Japan. Bulletin of the Aquaculture
Association of Canada, 108(1):4-9.
Andrew, N., Y. Agatsuma, E. Ballesteros, A.G. Bazhin, E.P. Creaser, D.K.A. Barnes, L.W. Botsford, A.
Bradbury, A. Cambell, J.D. Dixon,
S.  Einarsson,  P.K.  Gerring,  K. Hebert, M. Hunter, S.B. Hur, C.R.
Johnson,  M.A.  Juinio-Menez,  P.
Kalvass, R.J. Miller, C.A. Moreno, J.S.  Palleiro,  D.  Rivas,  S.M.L. Robinson,  S.C.  Schroeter,  R.S. Steneck, R.L. Vadas, D.A.
Woodby,  and  Z.  Xiaoqi.  2002.
Status  and  management  of  world
sea urchin fisheries. Oceanography and  Marine  Biologi:  an  Annual Review, 40:343-425.
[AOAC] Assocation of Official Analytical
Chemist. 1980. Official methods of analysis.  AOAC  Inc.  Virgina. 1018p.
Aziz,  A.  1993.  Beberapa  catatan  tentang perikanan  bulu  babi. Oseana, 18(2):65-75.
Barker,  M.F.  2010.  Recent  advances  in sea  urchin  aquaculture  in  New Zealand  and  Australia. Bulletin  of the  Aquaculture  Association  of Canada, 108(1):10-17.
Chasanah,  E.  dan  R.  Andamari.  1997. Komposisi  kimia,  profil  asam  dan asam amino gonad bulubabi
Tripneustes  gratilla dan Salmacis sp  dan  potensi  pengembangannya. Dalam : Prosiding Seminar Kelautan  LIPI-UNHAS,  Ambon, 4-6 Jul 1997. Hlm.:269-274. Cook, E.J. and M.S. Kelly. 2007. Effect of
variation in the protein value of the red  macroalga Palmaria  palmata on  the  feeding,  growth  and  gonad composition  of  the  sea  urchins
Psammechinus miliaris
and Paracentrotus  lividus (Echinoder- mata). Aquaculture, 270:207-217. Cyrus,  M.D.,  J.J.  Bolton,  D.W.  Lourens, and  B.M.  Macey.  2012.  The development  of  a  formulated  feed containing Ulva (Chlorophyta)  to promote rapid growth and enhanced  production  of  high quality  roe  in  the  sea  urchin Tripneustes  gratilla (Linnaeus). Aquaculture  Research, 1-18.  doi: 10.1111/j.1365-2109.2012.03219.x Daggett,  T.L.,  C.M.  Pearce,  M.  Tingley,
S.M.C.  Robinson,  and  T.  Chopin. 2004.  Effect  of  prepared  and macroalgal  diets  and  seed  stock source  on  somatic  growth  of juvenile green sea urchins
( Strongylocentrotus  droebachien- sis ). Aquaculture, 244:263-281.
De Jong Westman, M.M. 1993. The effect of artificial diet on gonad size, egg size, egg quality, and larva vitality in  green  sea  urchin.  Thesis.
Department  of  Zoology,  the  Uni- versity of British Columbia. 82p. Dworjanyn,  S.A.,  I.  Pirozzi,  and  W.  Liu.
2007. The effect of the addition of algae feeding stimulants to
artificial  diets  for  the  sea  urchin Tripneustes  gratilla . Aquaculture,
273:624-633.
Fernandez,  C.  and  C.F.  Boudouresque. 2000.  Nutrition  of  the  sea  urchin Paracentrotus  lividus (Echinoder- mata:  Echinoidea)  fed  different artificial  food. Marine  Ecology Progress Series, 204:131-141. Folch,  J,  M.  Lees,  and  G.H.  Sloane- Stanley.  1957.  A  simple  method for the isolation and purification of total  lipids  from  animal  tissues. J. of  Biological  Chemistry, 226:497–
509.
George,  S.B.,  C.  Cellario,  and  L.  Fenaux.
1990.  Population  differences  in egg  quality Arbacia  lixula .  Proxi- mate  composition  of  eggs  and larval  development. J.  of  Experi-
mental Marine Biology and
Ecology, 141:107-118.
Giese,  A.C,  L.  Greenfield,  H.  Huang,  A. Farmanfarmaian,  R.  Boolootian, and  R.  Lasker.  1959.  Organic productivity  in  the  reproductive cycle of the purple sea urchin. The Biological Bulletin , 116:49-58. Hammer,  H.,  B.  Hammer,  S.  Watts,  A. Lawrence, and J. Lawrence . 2006a. The  effect  of  dietary  protein  and carbohydrate  concentration  on  the biochemical composition and
gametogenic  condition  of  the  sea urchin Lytechinus variegatus . J.  of Experimental  Marine  Biology  and
Ecology, 334:109-121.
Hammer.  H.,  S.  Watts,  A.  Lawrence,  J. Lawrence, and R. Desmond. 2006b.  The  effect  of  dietary protein  on  consumption,  survival, growth  and  production  of  the  sea urchin Lytechinus variegates .
Aquacul-ture, 254:483-495.
Hewitson T.D., B. Wigg, and G.J. Becker .
2010. Tissue preparation for histochemistry:  fixation,  embed- ding and antigen retrievel  for light microscopy. In : Hewitson T.D. and I.A.  Daroy  (eds.).  Method  in Moleculer Biology: Histology Protocols . Humana Press, Springer Sci. New York. 3-8pp. Keesing J.K. and K.C. Hall. 1998. Review of harvests and status of world sea urchin fisheries points to opportunities  for aquaculture. J. of Shellfish Research, 17:1597-1604.
Kelly,  M.S.  and  J.  Chamberlain.  2010.
Recent  advances  in  sea  urchin aquaculture  and  enhancement  in
Scotland  and  Ireland. Bulletin  of the  Aquaculture  Association  of Canada, 108(1):23-29.
Klinger,  T.S.  and  J.M.  Lawrence.  1984. Phagostimulation  of Lytechinus varigatus (Lamarck)  (Echinoder- mata: Echinoidea). Marine Behavi- our and Physiology, 11: 49-67.
Lawrence,  J.M.  2007.  Edible  sea  urchins: use  and  life-history  strategies. In :
Lawrence  J.M.  (ed).  Edible  Sea Urchin: Biology  and Ecology, (2 nd Ed.). Elsevier. Oxford. 1-9pp. Lawrence, J.M., S. Olave, R. Otaiza, A.L. Lawrence,  and  E.  Bustos.  1997. Enhancement  of  gonad  production in the sea urchin Loxechinus albus in  Chile  fed  extruded  feeds. J.  of the  World  Aquaculture  Society, 28:91-96.
Siikavuopio, S.I., T. Dale, A. Foss, and A. Mortensen. 2004. Effect of chronic ammonia  exposure  on  gonad growth  and  survival  in  green  sea
urchin Strongylocentrotus  droeba- Lindstedt,  K.J.  1971.  Chemical control of feeding behavior. Comparative Biochemistry Physiology , 39A: 553-581. Marsh,  A.G.  and  S.A.  Watts.  2007.
Biochemical  and  energy  require- ments  of  gonad  develop-ment. In : Lawrence  J.M.  (ed).  Edible  sea urchin:  biology  and  ecology,  (2 nd Ed.). Elsevier. Oxford. 35-69pp.
McBride, S.C, W.D. Pinnix, J.M. Lawrence,  A.L.  Lawrence,  and T.M. Mulligan. 1997. The effect of temperature  on  production  of gonads  by  the  sea  urchin Strongy- locentrotus franciscanus fed natural and prepared diets. J. of the World Aquaculture Society, 28:357-365. McClintock,  J.B.,  T.S.  Klinger,  and  J.M. Lawrence. 1982. Feeding preferen- ces  of  echinoids  for  plant  and animal  food  models. Bulletin  of Marine Science, 32(1): 365-369.
[NRC]  National  Research  Council.  1977.
Nutrient  requirements  of  warm water fishes. National Academy of
Sciences. Washington DC. 78p. Robinson,  S.M.C.,  J.D.  Catell,  and  E.J. Kennedy. 2002. Developing suitable  colour  in  the  gonads  of cultured green sea urchins ( Strongylocentrotus  droebachien- sis ). Aquaculture, 206:289-303.
Sakata,  K.,  K.  Kato,  K.  Ina,  and  Y. Machiguchi.  1989.  Glycerolipids as potent feeding stimulants for the sea urchin, Strogylocentrotus intermedius . Agricultural  Biology and Chemistry, 53:1457-1459.
Shpigel,  M.,  S.  Marciano,  S.C.  McBride, and  I.  Lupatsch.  2004.  The  effect of photoperiod and temperature on the  reproduction  of  the  European sea  urchin Paracentrotus  lividus . Aquaculture , 232:343–355.
Shpigel,  M.,  S.C.  McBride,  S.  Marciano, S.  Ron,  and  A.  Ben-Amotz.  2005.
Improving gonad colour and somatic  index in  the  European  sea rchin Paracentrotus lividus . Aquaculture, 245:101–109.
chiensis . Aquaculture, 242:313-320.
Siikavuopio,  S.I., T. Dale, and Mortensen A.  2007.  The  effect  of  stocking density  on  gonad  growth,  survival and  feed  intake  of  adult  green  sea urchin ( Strongylocentrotus droeba- chiensis ). Aquaculture, 262:78-85.
Solozarno,  L.  1969.  Determination  of ammonia  in  natural  waters  by  the phenolhypochlorite
method.
Limnology  and  Oceanography,
14:799-801.
Sonu,  S.C.  2003.  Japanese  sea  urchin market.  NOAA  Technical  Memo- randum.  NOAA-TM-NMFS-SWR,
040:1–34. Steinberg,  P.D.  and  I.  van  Altena.  1992.
Tolerance  of  marine  invertebrate herbivores to brown algal phlorotannins in temperate Austra-
lasia. Ecological  Monographs, 62: 189-222.
Tuwo,  A.  dan  U.  Pelu.  1997.  Biologi reproduksi  bulubabi Tripneustes gratilla . Dalam : Prosiding Seminar Kelautan  LIPI-UNHAS,  Ambon, 4-6 Jul 1997. Hlm.:1-4. Vaitilingon, D., R. Rasolofonirina, and M. Jangoux . 2005. Reproductive cycle of  edible  echinoderms  from  the Southwestern  Indian  Ocean.  I. Tripneustes gratilla L (Echinoidea, Echinodermatata). Western  Indian Ocean  J.  of  Marine  Science, 4(1):47-60. Walker, C. 1982. Nutrition of gametes. In : Jangoux,  M,  J.  M.  Lawrence  and A.A.  Balkema  (ed). Echinoderm Nutrition . Rotterdam . 449-466pp.
Walker,  C.W.,  T.  Unuma,  and  M.P.
Lesser . 2007.  Gametogenesis  and reproduction  of  sea  urchins. In : Lawrence  J.M.  (ed.).  Edible  Sea Urchin: Biology  and Ecology, (2 nd Ed.). Elsevier. Oxford. 11-33pp.
Diterima : 9 Januari 2014 Direview : 11 April 2014 Disetujui : 2 Mei 2014