## Potensi Pembuatan Replika Tulang Berpori Menggunakan Template Ampas Tebu
Reno Susanto* 1 , Bakti Yuza 1 , David Ali Hermawan 1 , Ahmad Fadli 1 1 Universitas Riau:Jalan Binawidya KM 12 Panam
Program Studi Teknik Kimia, FT Teknik Riau e-mail:* renosusanto12345@gmail.com
Diterima: 29 September 2020/ Disetujui: 26 November 2020/ Dipublikasi online: 14 Januari 2021 DOI: https://doi.org/10.22437/chp.v5i2.10612.

## ABSTRAK
Scaffold Hidroksiapatit dengan ukuran pori dari 400 nm sampai 4 mm dan porositas dalam kisaran 20%-97%  telah  diproduksi  dengan  menggunakan  template  alam  dengan  berbagai  metode  seperti replica method, direct foaming method, solvent casting katalisis, dan starch consolidation method. Pada  artikel  ini,  kami  meninjau  pemrosesan  natural  template  yang  dapat  digunakan  untuk pembuatan hidrokdisiapatit dengan mempertimbangkan hasil yang diperoleh berupa ukuran pori, porositas,  densitas,  kuat  tekan,  dan  hasil  analisa  uji  in  vitro  serta  in  vivo.  Pada  akhirnya  kami mengusulkan untuk membuat scaffold HA menggunakan Template Ampas tebu karena memiliki kuat tekan  yang  baik  serta  memilki  kandungan  silica  yang  cukup  tinggi  untuk  mendukung  kegiatan bioaktivitas hidroksiapatit.
Kata kunci: Ampas Tebu, Scaffold HA, Template Alam

## ABSTRACT
Scaffolds hydroxyapatite with pore sizes from 400 nm to 4 mm and porosity in the range of 20%  - 97%  have  been  produced  using  natural  templates  with  various  methods  such  as  the  replication method, direct foaming method, solvent casting catalysis, and starch consolidation method. In this article,  we  review  a  natural  template  that  can  be  used  for  the  manufacture  of  hydroxyapatite  by considering  the  results  obtained  from  pore  size,  porosity,  density,  compressive  strength,  and  the results of in vitro and in vivo assays. In the end, we built it to make HA scaffolding using Bagasse Templates  because  it  has  good  compressive  strength  and  high  enough  silica  content  to  support hydroxyapatite bioactivity.

## Keywords: Sugarcane Dregs, Scaffold HA, Natural Templates

## PENDAHULUAN
Menurut  Menteri  Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan  Tinggi  Muh  Nasir, kebutuhan  implan  tulang  di  Indonesia  sangat  tinggi  mencapai  80.000-100.000 keping pertahun, hal tersebut terjadi seiring dengan tingginya angka kecelakaan yang  mengakibatkan  fraktur  hingga  masalah  osteoporosis  pada  tulang,  dikutip dari  laman  resmi  Kemenristekdikti,  Senin  (20/02/2017).  Tingginya  angka kecelakaan lalu lintas bahwa sejak 2014 hingga 2019 lalu. Jumlahnya semakin banyak hingga mencapai 107.500 kasus, dan menurut (Rahmawati, 2012) bahwa 79,8%  korban  kecelakaan  lalu  lintas  mengalami  patah  tulang.  Hal  ini mengakibatkan  kebutuhan  implan  tulang  ( osteosynthesis )  semakin  meningkat.
Tetapi,  peningkatan  kebutuhan  akan  implan  tulang  ini  tidak  dibarengi  dengan produksi implan lokal, sehingga implan tulang produk impor masih menguasai pasar  Indonesia.  Namun,  biaya  yang  sangat  tinggi  untuk  implan  tulang  yang mencapai 400 USD membuat masyarakat sulit menjangkaunya (Kemenristekdikti, 2017).
Sementara itu, Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi (BPPT) melalui Pusat  Teknologi  Material  BPPT  telah  berhasil  mengembangkan  implan  tulang Stainless Steel 316 L dari bahan lokal Ferro-Nickel yang dapat mereduksi harga implan  tulang  sampai  dengan  60-70%  (BPPT,  2016).  Implan  yang  dihasilkan berbasis  metal.  Akan  tetapi,  penggunaan  metal  dalam  implan  ortopedik  dapat menyebabkan degradasi metal karena  korosi (Hosman et  al, 2010). Korosi yang berkelanjutan  dapat  menyebabkan  terbentuknya  ion-ion  metal  yang  bisa memasuki  sel  dan  berlabuh  di  jaringan  atau  ditransport  melalui  tubuh,  yang mana dapat menyebabkan dampak sitotoksik, genotoksik dan imunologis, baik di area sekitar implan ataupun tidak. Selain itu, prototype implan tulang berbahan dasar Stainless Steel 316 L yang diproduksi oleh BPPT hanya dapat diaplikasikan untuk jenis tulang keras ( compact bone ). Sedangkan untuk implan jenis tulang berpori ( spongy bone ) belum diusahakan dengan serius oleh peneliti di tanah air.
Berdasarkan  permasalahan-permasalahan  di  atas,  maka  diperlukan penelitian lebih lanjut tentang inovasi sintesis implan tulang berpori yang dapat memenuhi kebutuhan implan tulang dalam negeri. Salah satu bahan yang dapat digunakan dalam implan tulang adalah biomaterial sintetik yaitu hidroksiapatit (Dumitrescu,  2011).  Hidroksiapatit  (HA)  merupakan  senyawa  apatit  dengan rumus kimia Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 . HA merupakan komponen anorganik utama pada jaringan keras biologis seperti tulang dan gigi (Qi et al, 2012). HA memiliki sifat biokompatibilitas, osteokonduktivitas, dan afinitas kimia dan biologi yang sangat mirip  dengan  jaringan  tulang  (Zhang  et  al,  2012).  Oleh  sebab  itu,  HA  dikenal sebagai  material  pengganti  yang  baik  untuk  implan  tulang  disebabkan  karena kemiripan sifat kimia dan biologisnya dengan jaringan tulang manusia.
HA  berpori  merupakan  HA  yang  memiliki  sifat  biokompatibilitas  tinggi, berbentuk  mikro  kristal  dengan  ukuran  190-230  mikron  dari  struktur  berpori yang memungkinkan pembuluh darah dan jaringan ikat masuk diantara pori – pori sehingga  dapat  merangsang  pertumbuhan  tulang.  Scaffold  HA  dibuat  untuk meningkatkan pembentukan ikatan yang kuat antara implan dan tulang (Juwita, 2012).  Hidroksiapatit  (HA)  yang  berpori  (Scaffold)  lebih  resorbable  dan  lebih
osteokonduktif dibandingkan HA dense. Selain itu, scaffold HA berpori memiliki luas area permukaan yang besar. Pori-pori tersebut bermanfaat untuk adhesi sel jaringan biologis dan pertumbuhan fase tulang baru (Swain et al, 2015).
Pori pada scaffold dapat dibentuk dengan menggunakan polymeric sponge method,  dimana  metode  ini  merupakan  metode  ulang  yang  didasarkan  pada peresapan  (impregnation)  struktur  sel  dengan  suspense  keramik  untuk menghasilkan macroporous ceramics yang memiliki morfologi yang sama dengan material  berpori  aslinya  (Studart  et  al,  2006).  Pembentuk  pori  yang  digunakan adalah ampas tebu. Ampas tebu digunakan karena dapat dihilangkan pada saat proses burning pada suhu di atas 500 0 C dengan penambahan gas argon. Selain itu, tebu bukanlah tanaman yang sulit ditemukan karena merupakan tanaman tropis yang tumbuh subur di Indonesia.
Beberapa  material  yang  dapat  dijadikan  sebagai  template  untuk pembuatan macroporous  ceramics menggunakan  metode  replika,  salah  satunya polimer  berpori,  sehingga  metode  ini  sering  disebut polymeric-sponge  method . Penggunaan  polimer  berpori  dapat  menghasilkan  scafold  dengan  interkoneksi antar  pori  yang  baik.  Dimana  akan  dilakukan  pengujian  lebih  lanjut  terutama secara  in  vitro,  sehingga  implan  tersebut  belum  memenuhi  kualifikasi  secara medis untuk diaplikasikan ke tulang manusia.

## METODOLOGI PENELITIAN

## 1. Preparasi Bahan
Ampas  tebu  dipotong  ke  dalam  bentuk  silinder  dengan  diameter  1cm, dengan  tinggi  1  cm.  Potongan  tebu  kemudian  direndam  selama  1  hari  dalam wadah tertutup. Air rendaman diganti setiap 4 jam sekali. Setelah direndam, tebu kemudian  ditiriskan  lalu  dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari  untuk menghilangkan kadar airnya. Ampas tebu kemudian di sintering menggunakan suhu 780 0 C serta menggunakan gas argon sebagai gas inert.
2. Persiapan Binder dan Pencelupan Sampel
Untuk membentuk larutan binder, 12 g pati sagu, 4 g NaOH  dan 88 g air dicampur  dan  dibiarkan  selama  30  menit.  Sampel  ampas  tebu  kemudian dicelupkan  ke  dalam  larutan  grafting  selama  3  jam,  kemudian  dibilas  dengan akuades.

## 3. Pengendapan Hidroksiapatit
Sampel  ampas  tebu  kemudian  direndam  dalam  larutan  CaCl 2 1  M  dengan suhu  100 o C  dengan  lama  perendaman  12  jam.  Setelah  direndam  kemudian dikeringkan pada suhu 80 o C. Hasilnya kemudian direndam dalam larutan KH 2 PO 4 0,6  M  pada  suhu  110 o C  selama  18  jam.  Selanjutnya,  template  yang  telah diimpregnasi oleh larutan phospat dikeringkan dengan menggunakan oven pada temperatur 110 0 C selama 2 jam.

## Alat dan Bahan
Bahan  baku  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  Ampas  Tebu ( Saccharum  officinarum )  sebagai  replika  implan  tulang  yang  akan  disintesis, Akuades, Etanol, Pati sagu, Natrium Hidroksida (NaOH), Kalsium Klorida (CaCl 2 ) dan  Kalium  Dihidrogen  Posfat  (KH 2 PO 4 )  sebagai  bahan  yang  digunakan  dalam proses pembentukan senyawa hidroksiapatit pada replika ampas tebu. Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Hot Plate, Magnetic Stirrer, Oven dan Gelas Piala 250 ml.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1.   Analisis Pengaruh Bahan Template terhadap Ukuran Pori Scaffold
Ukuran pori hidroksiapatit merupakan salah satu karakterisasi yang harus dipenuhi untuk dijadikan sebagai implan tulang. Kriteria prasyarat implan  tulang  harus  memiliki  pori  mulai  dari  100- 400  μm  (Tsuruga dkk,1997).  Untuk  itu  perlu  dilakukan  treatment  untuk  memperoleh ukuran  pori  tersebut.  Ukuran  pori  scaffold  sangat  bergantung  terhadap bahan template yang digunakan. Menurut Emadi et al, (2010) ukuran pori yang  optimum  untuk  pertumbuhan  tulang  dibutuhkan  pori  berukuran 100-1000  µm  sebagai  saluran  distribusi  aliran  darah.  Ukuran  pori ditentukan oleh jenis template yang digunakan seperti yang dapat dilihat pada Gambar 1.

## Gambar 1. Ukuran Pori Masing Masing Bahan
Template alam sebagai pembentuk ukuran pori akan memberikan pengaruh terhadap besar kecilnya ukuran pori. Perbedaan ukuran pori yang dihasilkan oleh berbagai scaffold dengan template alam sebagai pembentuk pori disebabkan oleh perbedaan  struktur  pada  bahan-bahan  alam  tersebut.  Jika  ukuran  pori  bahan alam  tersebut  besar  maka  ukuran  pori  akan  besar  pula  dan  begitu  pula sebaliknya.  Ukuran  pori  yang  dimiliki  oleh  template  alam  akan  diturunkan  ke scaffold HA yang dihasilkan (Tampieri, 2009).

## 2.   Analisis  Pengaruh  Bahan  Template  Terhadap  Densitas  dan  Porositas Scaffold
Densitas  dan  porositas  merupakan  karakteristik  yang  menggambarkan distribusi  pori  pada  sampel.  Porositas  merupakan  karakteristik  yang  penting dalam  kesuksesan  pembuatan scaffold .  Untuk  digunakan  sebagai  rekayasa jaringan tulang, scaffold HA harus memiliki porositas yang tinggi dan kekuatan mekanik yang sesuai (Qian et al , 2008). Berikut merupakan porositas beberapa bahan yang digunakan sebagai template pembentuk pori. Ukuran Pori Rata-Rata P or os itas %

## Gambar 2. Porositas Masing-masing Bahan
Dengan menggunakan template alam sebagai pembentuk pori, bentuk dan distribusi  pori  yang  terbentuk  akan  mempertahankan  struktur template awal (Naga et al , 2015). Adapun template alam yang pernah dijadikan sebagai template pembentuk  pori  adalah  rotan  (Eichenseer et  al ,  2010;  Fadli et  al ,  2019  dan Tampieri et al , 2009), kayu (Bigoni et al , 2019 dan Ruffini et al , 2013), Seaweed based gum (Let et al , 2019), pinus (Qian et al , 2008), serabut gambas (Fadli et al , 2019), pektin (Shebi dan Lisa, 2018), putih telur (Khallok et al , 2018), polisakarida (Chunrong et al , 2012), bambu (Fadli et al , 2019) dan Lateks beads (Webler et al , 2018).
Perkembangan  struktur  pori  yang  saling  berhubungan  merupakan  fitur penting  untuk  keberhasilan  pembuatan scaffolds karena  dapat  meningkatkan perlekatan implan dengan memungkinkan infiltrasi jaringan tulang baru (Naga et al ,  2015).  Adapun  dari  beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  peneliti sebelumnya  didapatkan data perbandingan densitas dan porositas dari scaffold hidroksiapatit menggunakan bahan alam ditunjukkan pada Tabel 1.
Porositas % M o d u lu s Y o u n g ( M p a)
Tabel  1. Densitas dan Porositas Scaffold HA pada Beberapa Penelitian
No. Template yg digunakan Densitas (g/cm 3 ) Porositas (%) Referensi 1 Rotan - 70-80 Eichenseer et al , 2010 0,84-0,90 71,34-73,25  Fadli et al , 2019 - 60-95 Tampieri et al , 2009 2 Kayu 0,53 57,29 Bigoni et al , 2019 - 70 ± 5 Ruffini et al , 2013 3 Seaweed based gum - 68 Let et al , 2019 4 Pinus - 77 Qian et al , 2008 5 Serabut gambas - 56,51-53,26  Fadli et al , 2016 6 Pektin - 15-48 Shebi dan Lisa, 2018 7 Putih telur 0,44 86 Khallok et al , 2018 8 Polisakarida - 84 Chunrong et al , 2012 9 Bambu 0,84-0,90 80,95-83,93  Fadli et al , 2019 10  Lateks beads 3,10 70 Webler et al , 2018
Bahan  alam  sebagai template pembentuk  pori  akan  memperlihatkan pengaruh yang berbeda-beda terhadap bentuk pori, sebaran pori, besar kecilnya ukuran pori dan keterkaitan antar pori. Perbedaan porositas yang dihasilkan oleh scaffold dengan  bahan-bahan  alam  sebagai  pembentuk  pori  disebabkan  oleh perbedaan  struktur  makro  dan  mikro  yang  melekat  pada  bahan-bahan  alam tersebut (Qian, 2008).
Pada  beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  peneliti  sebelumnya didapatkan data densitas scaffold dengan bahan alam sebagai template berkisar antara  0,44-3,10  g/cm 3 .  Hasil  tersebut  sudah  sesuai  dengan  densitas  atau kepadatan  implan  tulang  komersial  yaitu  pada  kisaran  0,402-3,941  g/cm 3 (Tamayo et  al, 2009).  Selanjutnya  untuk  data  porositas  pada  penelitian sebelumnya pada Tabel 1 diketahui porositas scaffold HA yang dihasilkan berkisar antara 15-86%. Untuk implantasi, scaffold HA harus memiliki nilai porositas pada
kisaran 30-90% (Bonucci, 2000). Hal tersebut menandakan bahwa ada beberapa scaffold yang  dihasilkan  tidak  sesuai  dengan  standar  untuk  di  implantasikan kepada jaringan tulang manusia. Selanjutnya hampir semua template alam yang telah  digunakan  tersebut  memiliki  kekurangan  yaitu  bentuk  dan  ukuran  pori yang tidak beraturan serta sebaran pori yang tidak merata. Hal tersebut sangat berpengaruh  terhadap  porositas scaffold HA  yang  dihasilkan  yang  selanjutnya juga berpengaruh terhadap kuat tekan dan kompatibilitas implan tulang.
Penggunaan ampas tebu sebagai template pembentuk pori pada scaffold HA sangat  berpotensi,  hal  tersebut  dikarenakan  tebu  memiliki  kesamaan  struktur dan bentuk pori dengan tulang manusia. Sehingga implan yang dihasilkan akan memiliki  kemiripan  sifat  dengan  tulang  manusia.  Diperkirakan  besar  porositas yang dihasilkan dengan menggunakan ampas tebu sebagai template pembentuk pori  berkisar  antara  80-90%.  Nilai  porositas  yang  dihasilkan  tergolong  tinggi dibandingkan  beberapa template bahan  alam  lainnya.  Kim  dan  Mooney melaporkan  bahwa  perancah  biokompatibel  harus  memiliki  porositas  tinggi dengan  jaringan  pori  yang  saling  berhubungan  untuk  pertumbuhan  sel  dan pengangkutan aliran nutrisi dan limbah metabolik.
3 Analisis Pengaruh Bahan Template terhadap Kuat Tekan ( Mechanical Strength ) Scaffold
Sifat mekanis scaffold HA yang digunakan dalam rekayasa jaringan tulang merupakan  permasalahan  yang  sangat  penting.  Sifat  mekanis  tersebut  harus dapat bertahan lama hingga tulang baru yang terbentuk dapat menopang dirinya sendiri yaitu selama proses pertumbuhan, proliferasi dan diferensiasi osteoblast (Naga et al , 2015). Uji kuat tekan dilakukan untuk mengetahui ketahanan sampel apabila diberi sejumlah beban ( loading ). Mechnical strength diperoleh dari kurva stress-strain dengan cara membebani sampel dengan laju tertentu hingga sampel tersebut hancur ( failure ).
Adapun  dari  beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  peneliti sebelumnya didapatkan data perbandingan mechanical strength atau kuat tekan dari scaffold hidroksiapatit menggunakan bahan alam ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Mechanical Strength Scaffold HA pada Beberapa Penelitian
No. Template yg digunakan Mechanical Strength (MPa) Referensi 1 Rotan 3-5 Eichenseer et al , 2010 36-45 Fadli et al , 2019 2 Kayu 6,2 ± 2,5 Bigoni et al , 2019 - Ruffini et al , 2013 3 Seaweed based gum 1,4 Let et al , 2019 4 Pinus 0,29 ± 0,07 Qian et al , 2008 5 Serabut gambas 3,31-6,45 Fadli et al , 2016 6 Pektin 8,93±1,45 Shebi dan Lisa, 2018 10  Lateks beads - Webler et al , 2018
Bahan  alam  sebagai template pembentuk  pori  akan  meperlihatkan pengaruh yang berbeda-beda terhadap kuat tekan scaffold HA yang dihasilkan. Kuat  tekan scaffold HA  sangat  dipengaruhi  oleh  kekuatan  dinding  material pembentuk pori dan kecacatan material dinding (Fadli et al , 2016). Selanjutnya perolehan kuat tekan scaffold HA dipengaruhi oleh jenis template yang digunakan dan keberhasilan proses konversi bahan alam menjadi keramik. Semakin besar konversinya maka semakin besar pula kuat tekan yang diperoleh sesuai dengan struktur template yang digunakan.
Pada  beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  peneliti  sebelumnya didapatkan  data  kuat  tekan scaffold HA  dengan  bahan  alam  sebagai template berkisar antara 0,29-45 MPa. Untuk implantasi, scaffold HA harus memiliki nilai kuat  tekan  pada  kisaran  2-230  MPa  (Hench  &  Wilson,  1993).  Hal  tersebut menandakan bahwa ada beberapa scaffold yang dihasilkan tidak sesuai dengan standar  untuk  di  implantasikan  kepada  jaringan  tulang  manusia.  Selanjutnya hampir semua template alam yang telah digunakan tersebut menghasilkan kuat tekan yang tergolong rendah yaitu masih berada pada rentang 3-10,38 MPa. Hal tersebut  dikarenakan  jenis template yang  digunakan  dan  keberhasilan  proses konversi  bahan  alam  menjadi  keramik  yang  rendah  serta  kekuatan  dinding material pembentuk pori yang kecil.
Penggunaan ampas tebu sebagai template pembentuk pori sangat berpotensi menghasilkan kuat tekan yang tinggi pada scaffold HA, hal tersebut dikarenakan ampas tebu memiliki nilai modulus elastis yang tinggi mencapai 1 GPa. Kekuatan dinding yang dimiliki ampas tebu yang tinggi tersebut berpengaruh terhadap kuat tekan scaffold HA (Fadli et al , 2016). Selanjutnya penggunaan ampas tebu sebagai template  pembentuk  pori  diprediksi  memiliki  peluang  keberhasilan  yang  tinggi pada proses konversi bahan alam menjadi keramik, hal ini dikarenakan metode sacrificial method sangat tepat digunakan untuk pembentuk pori limbah ampas tebu. Selain itu, area pori scaffold yang dihasilkan dengan menggunakan limbah ampas  tebu  sebagai template juga  sangat  bagus  dikarenakan  tebu  memiliki kesamaan struktur dan bentuk pori dengan tulang manusia. Lorenzo et al (2001) melaporkan bahwa area pori memiliki pengaruh dominan terhadap sifat mekanis scaffold yang  diperoleh.  Sehingga  dengan  area  pori scaffold yang  dihasilkan dengan  menggunakan  limbah  ampas  tebu  diyakinkan  bahwa scaffold tersebut dapat meningkatkan sifat mekanisnya.

## 4. Analisis Pengaruh Bahan Template terhadap Hasil Uji Invitro   Scaffold
Implan tulang juga dilakukan uji In Vitro dengan menggunakan Simulated Body Fluid . Pengujian secara in vitro dilakukan untuk menguji bioaktivitas dari hidroksiapatit yang dihasilkan. Pengujian ini bergantung pada jenis template yang digunakan dan juga persebaran pori yang dihasilkan. Jika pori terlalu kecil dan tidak  merata  maka  Ca  akan  menempel  di  bagian  luar  scaffold  sehingga tumbuhnya Ca tidak merata sampai ke dalam bagian sehingga hanya menumpuk di  sisi  luar  Scaffold  HA  tersebut.  Penggunaan template berbahan  dasar  ampas tebu  diprediksi  akan  meningkatkan  bioaktivitas  HA  dikarenakan  kandungan silika pada tebu yang cukup tinggi yaitu mencapai 70% (Purnawan dkk, 2018). Silika terbukti mendukung dan mempromosikan pertumbuhan tulang silika dapat meningkatkan  aktifitas  sel  osteoblas  sehingga  bersifat  osteoinduktif  yang berpotensi sebagai scaffold untuk bahan sintetis bone graft . Menurut Koh & Atala (2004)  bahwa  biomaterial  yang ideal  harus  kompatibel  yaitu biodegradable dan bioresorbable untuk  mendukung  penggantian  jaringan  normal  tanpa  inflamasi. Bahan  yang  tidak  kompatible lemah  pada  inflamatori  atau  respon  benda  asing tubuh  yang  akhirnya  berperan  pada  penolakan  atau  nekrosis.  Selain  itu  hasil degradasi,  jika  dihasilkan  harus  dihilangkan  dari  tubuh  melalui  jalur metabolisme.

## KESIMPULAN
Penggunaan    natural  template  dengan  berbagai  metode  seperti  replica method, direct foaming method, solvent casting katalisis, dan starch consolidation method menghasilkan Scaffold HA dengan ukuran pori dari 400 nm sampai 4 mm dan porositas dalam kisaran 20% - 97%. Template Ampas tebu direkomendasikan sebagai  template  hidroksiapatit  karena  memiliki  kuat  tekan  yang  baik  dan mempunyai sebaran pori yang merata serta memilki kandungan silika yang tinggi untuk mendukung kegiatan dari bioaktivitas hidroksiapatit.

## DAFTAR PUSTAKA
Anita  Lett,  J.,  Sagadevan,  S.,  Joyce  Prabhakar,  J.,  &  Bavani  Latha,  M.  2020. Exploring  the  binding  effect  of  a  seaweed-based  gum  in  the  fabrication  of hydroxyapatite  scaffolds  for  biomedical  applications. Materials  Research Innovations , 24 (2), 75 – 81.
Badan Pengakajian dan Penerapan Teknologi (BPPT). 2016. Dukung Paket Ekonomi XI, Implan Tulang Buatan BPPT Lebih Murah 70 Persen dari Harga Impor . URL: https://www.bppt.go.id/teknologi-informasi-energi-dan-material/2597- dukung-paket-ekonomi-xi-implan-tulang-buatan-bppt-lebih-murah-70- persen-dari-harga-impor#. Diakses tanggal 16 Desember 2019.
Departemen Kesehatan (DEPKES). 2012. Kemenkes Ri Ajak Masyarakat Lakukan Pencegahan  Osteoporosis .  URL:  http://www.depkes.go.id/article/print /2083/kemenkes-ri-ajak-masyarakat-lakukan-pencegahan- osteoporosis.html. Diakses tanggal 29 Oktober 2019.
Doustkhah, E., Najafi Zare, R., Yamauchi, Y., Taheri-Kafrani, A., Mohtasham, H., Esmat, M., Ide, Y., Fukata, N., Rostamnia, S., Sadeghi, M. H., & Assadi, M. H. N.  2019.  Template-oriented  synthesis  of  hydroxyapatite  nanoplates  for  3D bone printing. Journal of Materials Chemistry B , 7 (45), 7228 – 7234.
Du, N., Toh, G. W., & Liu, X. Y. 2012. Bioinspiration. Bioinspiration , 57 – 105. Dumitrescu, A. L. (2011). Chemicals in Surgical Periodontal Therapy. In Chemicals in Surgical Periodontal Therapy .
Eichenseer,  C.,  Will,  J.,  Rampf,  M.,  Wend,  S.,  &  Greil,  P.  2010.  Biomorphous porous  hydroxyapatite-ceramics  from  rattan  (Calamus  Rotang). Journal  of Materials Science: Materials in Medicine , 21 (1), 131 – 137.
Elbadawi, M., Wally, Z. J., & Reaney, I. M. 2018. Porous hydroxyapatite-bioactive glass hybrid scaffolds fabricated via ceramic honeycomb extrusion. In Journal of the American Ceramic Society (Vol. 101, Issue 8, pp. 3541 – 3556).
Fadli,  A.,  &  Sopyan,  I.  2009.  Preparation  of  porous  alumina  for  biomedical applications  through  protein  foaming-consolidation  method. Materials Research Innovations , 13 (3), 327 – 329.
Fadli,  A,  Lubis,  A.,  Huda,  F.,  &  Komalasari,  K.  2016. Hydroxyapatite  Scaffolds Fabrication using Gambas Sponge ( Luffa cylindrica ) as Novel Template . 53 – 56.
Gopi,  D.,  Bhuvaneshwari,  N.,  Indira,  J.,  &  Kavitha,  L.  2013.  Synthesis  and spectroscopic investigations of hydroxyapatite using a green chelating agent as  template. Spectrochimica  Acta  -  Part  A:  Molecular  and  Biomolecular Spectroscopy , 104 , 292 – 299.
Gopi, D., Kanimozhi, K., Bhuvaneshwari, N., Indira, J., & Kavitha, L. 2014. Novel banana peel pectin mediated green route for the synthesis of hydroxyapatite nanoparticles and their spectral characterization. Spectrochimica Acta - Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy , 118 , 589 – 597.
Kemenristekdikti.  2017. Inovasi  Implan  Tulang  Buatan  dalam  Negeri  Bisa Mengurangi Beban Impor, Siaran Pers Ristek Dikti . URL: https://ristekdikti.go.id/inovasi-implan-tulang-buatan-dalam-negeri-bisa- mengurangi-beban-impor/. Diakses tanggal 10 Desember 2019.
Kumar, A. P., Mohaideen, K. K., Alariqi, S. A. S., & Singh, R. P. 2010. Preparation and characterization of bioceramic nanocomposites based on hydroxyapatite (HA)  and  carboxymethyl  cellulose  (CMC). Macromolecular  Research , 18 (12), 1160 – 1167.
Phatai, P, Futalan, C. M., Utara, S., Khemthong, P., & Kamonwannasit, S. (2018). Structural  characterization  of  cerium-doped  hydroxyapatite  nanoparticles synthesized  by  an  ultrasonic-assisted  sol-gel  technique. Results  in  Physics ,
10 (August), 956 – 963.
Pon-On,  W.,  Meejoo,  S.,  &  Tang,  I.  M.  2008.  Formation  of  hydroxyapatite crystallites  using  organic  template  of  polyvinyl  alcohol  (PVA)  and  sodium dodecyl sulfate (SDS). Materials Chemistry and Physics , 112 (2), 453 – 460.
Qi, C., Zhu, Y. J., Lu, B. Q., Zhao, X. Y., Zhao, J., & Chen, F. 2012. Hydroxyapatite nanosheet-assembled porous hollow microspheres: DNA-templated hydrothermal  synthesis,  drug  delivery  and  protein  adsorption. Journal  of Materials Chemistry , 22 (42), 22642 – 22650.
Qi, M. L., He, K., Huang, Z. N., Shahbazian-Yassar, R., Xiao, G. Y., Lu, Y. P., & Shokuhfar, T. 2017. Hydroxyapatite Fibers: A Review of Synthesis Methods.
Jom , 69 (8), 1354 – 1360.
Qian, G., Liu, W., Zheng, L., & Liu, L. 2017. Facile synthesis of three dimensional porous hydroxyapatite using carboxymethylcellulose as a template. Results in Physics , 7 , 1623 – 1627.
Qian, J., Kang, Y., Zhang, W., & Li, Z. 2008. Fabrication, chemical composition change  and  phase  evolution  of  biomorphic  hydroxyapatite. Journal  of Materials Science: Materials in Medicine , 19 (11), 3373 – 3383. Rhee, S. H., & Tanaka, J. 2001. Synthesis of a
hydroxyapatite/collagen/chondroitin  sulfate  nanocomposite  by  a  novel precipitation  method. Journal  of  the  American  Ceramic  Society , 84 (2),  459 – 461.
Ruffini,  A.,  Sprio,  S.,  &  Tampieri,  A.  2013.  Study  of  the  hydrothermal transformation  of  wood-derived  calcium  carbonate  into  3D  hierarchically organized hydroxyapatite. Chemical Engineering Journal , 217 , 150 – 158.
Selvakumar, M., Pawar, H. S., Francis, N. K., Das, B., Dhara, S., & Chattopadhyay, S.  2016.  Excavating  the  Role  of  Aloe  Vera  Wrapped  Mesoporous Hydroxyapatite  Frame  Ornamentation  in  Newly  Architectured  Polyurethane Scaffolds  for  Osteogenesis  and  Guided  Bone  Regeneration  with  Microbial Protection. ACS Applied Materials and Interfaces , 8 (9), 5941 – 5960.
Shebi,  A.,  &  Lisa,  S.  2018.  Pectin  mediated  synthesis  of  nano  hydroxyapatite- decorated  poly(lactic  acid)  honeycomb  membranes  for  tissue  engineering. Carbohydrate Polymers , 201 , 39 – 47.
Sopyan, I., Fadli, A., & Mel, M. 2012. Porous alumina-hydroxyapatite composites through  protein  foaming-consolidation  method. Journal  of  the  Mechanical Behavior of Biomedical Materials , 8 (January 2018), 86 – 98.
Sopyan,  Iis,  Rahim,  T.,  &  Abdurrahim,  T.  2010.  Recent  Progress  on  the Development  of  Porous  Bioactive  Calcium  Phosphate  for  Biomedical Applications. Recent Patents on Biomedical Engineeringe , 1 (3), 213 – 229.
Tampieri, A., Sprio, S., Ruffini, A., Celotti, G., Lesci, I. G., & Roveri, N. 2009. From wood to bone: Multi-step process to convert wood hierarchical structures into biomimetic  hydroxyapatite  scaffolds  for  bone  tissue  engineering. Journal  of Materials Chemistry , 19 (28), 4973 – 4980.
Tanobe, V.  O.  A.,  Sydenstricker,  T. H.  D., Munaro,  M.,  &  Amico,  S.  C. 2005.  A comprehensive characterization of chemically treated Brazilian sponge-gourds (Luffa cylindrica). Polymer Testing , 24 (4), 474 – 482.
/Utara,  S.,  &  Klinkaewnarong,  J.  2016.  Synthesis  and  characterization  of hydroxyapatite nanoparticles templated by ozonolysed natural rubber latex. Journal of Sol-Gel Science and Technology , 80 (3), 728 – 737.
Walsh, P. J., Buchanan, F. J., Dring, M., Maggs, C., Bell, S., & Walker, G. M. 2008. Low-pressure synthesis and characterisation of hydroxyapatite derived from mineralise red algae. Chemical Engineering Journal , 137 (1),
Wang, X., Qian, C., & Yu, X. 2014. Synthesis of nano-hydroxyapatite via microbial method  and  its  characterization. Applied  Biochemistry  and  Biotechnology , 173 (4), 1003 – 1010.
Webler, G. D., Rodrigues, W. C., Silva, A. E. S., Silva, A. O. S., Fonseca, E. J. S., Degenhardt, M. F. S., Oliveira, C. L. P., Otubo, L., & Barros Filho, D. A. 2018. Use  of  micrometric  latex  beads  to  improve  the  porosity  of  hydroxyapatite obtained by chemical coprecipitation method. Applied Surface Science , 436 (3),
141 – 151.
Yang,  C.  R.,  Wang,  Y.  J.,  &  Chen,  X.  F.  2012.  Preparation  and  evaluation  of biomimetric  nano-hydroxyapatite-based  composite  scaffolds  for  bone-tissue engineering. Chinese Science Bulletin , 57 (21), 2787 – 2792.
Zampieri, S., Pietrangelo, L., Loefler, S., Fruhmann, H., Vogelauer, M., Burggraf,
S., Pond, A., Grim-Stieger, M., Cvecka, J., Sedliak, M., Tirpáková, V., Mayr, W.,  Sarabon,  N.,  Rossini,  K.,  Barberi,  L.,  De  Rossi,  M.,  Romanello,  V., Boncompagni,  S.,  Musarò ,  A.,  …  Kern,  H.  2015 .  Lifelong  physical  exercise delays age-associated skeletal muscle decline. Journals of Gerontology - Series A Biological Sciences and Medical Sciences , 70 (2),
Zhang, Y., Kong, D., Yokogawa, Y., Feng, X., Tao, Y., & Qiu, T. 2012. Fabrication of  porous  hydroxyapatite  ceramic  scaffolds  with  high  flexural  strength through  the  double  slip-casting  method  using  fine  powders. Journal  of  the American Ceramic Society , 95 (1), 147 – 152.