Abstract : Lactic Acid Bacteria (LAB) is a group of bacteria that produce lactic acid as the main product in carbohydrate  fermentation.  LAB  has  a  major  role  to  fight  against  pathogenic  bacteria  through  peptide compounds.  LAB  can  be  found  in  vegetables  that  contain  carbohydrates.  The  research  objective  was  to determine  biochemically  and  determine  the  antibacterial  activity  of  LAB  isolates  from  Brassica  juncea  L vegetable waste. Biochemical testing methods include TSIA, Indol, MR_VP, motility, temperature resistance and salt  resistance  tests.  While  testing  the  activity  using  the  disc  diffution  method  is  used  by  the  media  Mueller Hinton  Agar  against  Basillus  subtilis,  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus  epidermidis, Streptococcus mutans, Salmonella thypimurium, and Propionibacterium acnes.  Preparation of the test sample was carried out by inoculating LAB  isolate stock for 1x24 hours at 37 ° C. Biochemical identification results showed that LAB isolates were able to ferment glucose, negative in indole and VP testing, positive in MR testing was  characterized  by  obtaining  acidic  pH,  non-motile  nature,  living  at  37  °  C,  and  resistant  to  several  salt concentrations  (5-10%).  The  results  of  testing  antibacterial  activity  based  on  univariate  analysis  showed differences  in  the  activity  of  each  of  the  test  bacteria  obtained  p  =  0,730  (p>0,05).  LSD  analysis  showed  no significant differences between all isolates. Conclusion:  isolates obtained included LAB group from the family Lactobacillaceae, genus Lactobacillus sp and the antibacterial activity was broad spectrum.
Keywords :  Antibacterial; Lactic Acid Bacteria; Biochemistry; Identification; Mustard Greens
Abstrak  :  Bakteri  asam  laktat  (BAL)  merupakan  kelompok  bakteri  yang  memproduksi  asam  laktat  pada proses fermentasi karbohidrat. BAL mempunyai peranan penting untuk  melawan  bakteri  patogen melalui senyawa  peptida.  BAL  dapat  diperoleh  dari  sayuran  yang  mengandung  karbohidrat.  Tujuan  penelitian  ini adalah  menentukan  genus  BAL  berdasarkan  identifikasi  secara  biokimia  dan  menentukan  aktivitas antibakteri isolat BAL dari limbah sayur Sawi. Metode pengujian biokimia meliputi uji TSIA, Indol, MR_VP, motilitas, ketahanan suhu dan ketahanan garam. Sedangkan pengujian aktivitas antibakteri terhadap bakteri Basillus  subtilis,  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus  epidermidis,  Streptococcus  mutans, Salmonella  thypimurium,  dan  Propionibacterium  acnes  menggunakan  metode  disks  difusi  agar  dengan medium Mueller Hinton Agar. Penyiapan sampel uji dilakukan dengan menginokulasi stok isolat BAL selama 1x24  jam  pada  suhu  37°C.  Hasil  identifikasi  biokimia  menunjukkan  bahwa  isolat  BAL  mampu memfermentasi glukosa, negatif pada pengujian indol dan VP , positif pada pengujian MR di tandai dengan diperolehnya pH asam, bersifat non motil, hidup pada suhu 37°C, serta tahan terhadap beberapa konsentrasi garam (5-10%). Hasil pengujian aktivitas antibakteri dianalisis dengan metode one way Anova menunjukkan perbedaan  aktivitas  antar  bakteri  uji  p=0,730(p>0,05).  Analisis  LSD  menunjukkan  tidak  ada  perbedaan signifikan  antar  semua  isolat.  Kesimpulan:  isolat  yang  diperoleh  termasuk  kelompok  BAL  dari  famili Lactobacillaceae, genus Lactobacillus sp dan memiliki aktivitas antibakteri yang bersifat spektrum luas.
Kata Kunci :  Antibakteri; Bakteri Asam Laktat; Biokimia; Identifikasi; Sawi

## IDENTIFIKASI BIOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ISOLAT BAKTERI ASAM LAKTAT DARI LIMBAH SAYUR SAWI (Brassica juncea L.)
1| Sukriani Kursia, 2| Imrawati, 3| Aliansyah Halim, 4| Sasmita, 5| Fildzah Hanifah Email Korespondensi : sukriani.winie@yahoo.com Program Studi Sarjana Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar

## PENDAHULUAN
Bakteri  asam  laktat  (BAL)  merupakan  mikroorganisme  yang  mempunyai  sifat  sebagai probiotik.  BAL  dapat  memproduksi  komponen-  komponen  penghambat  mikroorganisme patogen    seperti  asam  laktat,  bakteriosin,  hidrogen  peroksida,  diasetil  dan  asetaldehid (Gatesoupe,  1999)  and    (Zapata  and  Lara-Flores,  2012)  BAL  tumbuh  pada  saluran pencernaan dan saluran urogenital hewan, manusia dan juga terdapat pada makanan seperti produk  susu,  buah-buahan  dan  fermentasi  sayuran.  BAL  dalam  taksonomi  merupakan kelompok  mikroorganisme  yang  mampu  memfermentasi  karbohidrat  menjadi  asam  laktat (Zapata and Lara-Flores, 2012) dan (Nikoskelainen et al., 2001).
Isolasi  BAL  dari  limbah  sawi  telah  dilakukan  oleh  (Sasmita  et  al.,  2018)  menghasilkan sebanyak 4 isolat. Karakterisasi menunjukkan bahwa isolat tersebut berbentuk bulat, tepian lingkaran,  berwarna  putih  susu  dan  permukaan  konsentris.  Bakteri  asam  laktat  tersebut diduga genus lactobasillus, tidak menghasilkan spora dan bersifat katalase negatif. Penelitian
lanjutan  dilakukan  oleh  (Kursia  et  al.,  2019)  yakni  melakukan  optimasi  produksi  bakteri asam  laktat  dengan  variasi  substrat.  Hasil  yang  diperoleh  pada  fermentasi  sayur  sawi menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi substrat yakni glukosa akan mempercepat produksi  BAL  yang  di  tandai  dengan  penurunan  pH  fermentat  yaitu  4-5  pada  kedua fermentasi. Penggunaan substrat glukosa menunjukkan hasil yang terbaik pada konsentrasi 1 % dalam memproduksi asam laktat.
Identifikasi  bakteri  asam    laktat  yang  dilakukan  oleh  (Sasmita  et  al.,  2018)  terbatas  pada identifikasi  makroskopik  dan  mikroskopik  serta  beberapa  identifikasi  biokimia.  Sedangkan penelitian  ini  akan  melengkapi  data  identifikasi  secara  biokimia  dari  isolat  BAL.  Sidik  jari biokimia  yaitu  sifat-sifat  yang  dikendalikan  oleh  aktivitas  enzimatik  sel  sidik  jari  ini menentukan  bioenergika,  biosintesis  dan  biodegradasi.  Keseluruhan  reaksi  kimia  tersebut didefenisikan  sebagai  metabolism  seluler  dan  transformasi-transformasi  biokimia  yang terjadi  baik  di  luar  maupun  di  dalam  sel  diatur  oleh  katalis  biologis  yang  disebut  enzim (Cappuccino and Sherman, 2014).
Senyawa utama yang dihasilkan oleh BAL yang memiliki kemampuan menghambat mikroba patogen  adalah  protein  bakteriosin.  Protein  tersebut  diaplikasikan  pada  makanan  dan pengobatan  kesehatan  (Papagianni  M,  2003).  Aktivitas  antimikroba  inilah  yang menyebabkan  BAL  juga  popular  digunakan  pada  biopreservativ  makanan  (Twomey  et  al., 2002). Hal ini dilakukan karena memiliki keuntungan yakni tidak bersifat toksik dan mudah mengalami  biodegradasi  yang  tidak  membahayakan  mikroflora  usus  serta  mudah  dicerna oleh enzim-enzim pencernaan serta  aman bagi lingkungan (Suardana and Suarsana, 2007). Oleh  karena  itu  kami  melakukan  pengujian  aktivitas  antibakteri  isolat  BAL  terhadap beberapa mikroba uji.

## METODE PENELITIAN

## Desain, tempat dan waktu
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi  (STIFA) Makassar pada tahun 2019. Desain penelitian ini adalah eksploratif.

## Bahan uji dan bakteri uji
Bahan  uji  menggunakan  stok  isolat  BAL  limbah  sawi  (Brassica  juncea  L.)  dari  penelitian sebelumnya  yang  disimpan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Sekolah  Tinggi  Ilmu  Farmasi (STIFA) Makassar.
Bakteri  uji  yang  digunakan  adalah  Basillus  subtilis  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus, Staphylococcus  epidermidis,  Streptococcus  mutans,  Salmonella  thypimurium,  dan Propionibacterium acnes.
Bahan yang digunakan alfanaftol, de Man rogosa sharpe Agar (Merck), de Man rogosa sharpe Broth  (Merck),  kalium  hidroksida  (KOH)  3  %,  kalsium  karbonat  (CaCO 3 ),  kuprum  sulfat (CuSO 4 )membran  filter  bakteri,  Mueller  Hinton  Agar  (Merck),  Natrium  clorida  (NaCl) fisiologis  0,9%,  natrium  hidroksida  (NaoH),  pembawa  bahan  uji  blank  paperdisc  (Oxoid), paperdisc tetrasiklin, reagen biuret, reagen Kovac’s, reagen metil red,  Sulfida indole motility (Merck), reagen Voges Poskauer (Merck) , Triple Sugar Iron Agar (Merck).

## Prosedur kerja

## Peremajaan sampel uji
Bahan uji stok isolat  limbah sawi (Brassica juncea L.) diinokulasikan pada medium  Mueller Hinton Agar (MHA) dan selanjutnya diinkubasi pada suhu 37°C selama 1x24 jam.

## Pengujian biokimia

## Pengujian TSIA
Isolat  bakteri  diinokulasikan  pada  media  Triple  Sugar  Iron  Agar  (TSIA)  dengan  cara diinokulasikan tegak luruspada bagian  butt dan cara goresan sinambung pada bagian slant. Kemudian biakan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24  jam dan diamati perubahan warna media.  Apabila  pada  bagian  slant  media  berwarna merah  dan  butt  berwarna  kuning,  maka bakteri mampu memfermentasi glukosa. Apabila pada bagian slant dan butt media berwarna kuning, maka bakteri mampu memfermentasi  glukosa, laktosa dan sukrosa (Cappuccino and Sherman, 2014).

## Pengujian Indol
Isolat bakteri diinokulasi ke dalam media Sulfida indole motility (SIM) dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Pengamatan hasil uji indol dilakukan dengan menambahkan 10 tetes reagen Kovac’s. Uji positif ditandai dengan terbentuknya lapisan berwarna merah dibagian atas biakan(Cappuccino and Sherman, 2014).

## Pengujian motilitas
Uji motilitas dilakukan dengan menginokulasikan satu koloni isolat bakteri ke dalam media SIM  kemudian  diinkubasi  selama  48  jam  pada  suhu  37°C.  Pertumbuhan  bakteri  di  sekitar tusukan  menunjukkan  hasil  uji  negatif.  Pertumbuhan  bakteri  yang  menyebar  pada  media menunjukkan hasil uji positif(Cappuccino and Sherman, 2014).

## Pengujian MR-VP (Metyl Red-Voges Poskauer)
Isolat bakteri diinokulasi ke dalam media MR-VP dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 48 jam.  Pengamatan  uji  MR  dilakukan  dengan  menambahkan  tiga  tetes  reagen  MR  ke  dalam media. Uji positif ditandai dengan perubahan warna media menjadi merah artinya terbentuk asam. Uji VP dilakukan dengan menambahkan tiga tetes KOH 3% dan lima tetes alfanaftol, lalu dikocok selama 30detik (Cappuccino and Sherman, 2014).

## Pengujian ketahanan suhu
Isolat  bakteri  diinokulasi  ke  dalam  media  de  Man  rogosa  sharpe  Broth  (MRSB)  broth  dan diinkubasi pada suhu 5°Cdan 37°C. Pertumbuhan bakteri ditandai dengan adanya kekeruhan pada media (Cappuccino and Sherman, 2014).

## Pengujian ketahanan garam
Isolat  bakteri  diinokulasi  ke  dalam  media  MRSB  dengan  konsentrasi  NaCl  5%  ;  6,5%  dan 10%.  Kemudian  biakan  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  7  hari.  Pertumbuhan  bakteri ditandai dengan adanya kekeruhan pada media (Cappuccino and Sherman, 2014).

## Pembuatan kultur isolat BAL dari limbah sawi
Isolat  BAL  dari  limbah  sawi  yang  sudah  diremajakan  dikultur  pada  medium  MRSB  selama 2x24 jam pada suhu 37 °C. Kultur cair tersebut disentrifugasi dengan kecepatan 10.000 RPM (Rotary per Minute) pada suhu 4°C selama  15 menit.  Selanjutnya filtrat dinetralkan hingga pH 7,0 menggunakan pH meter dengan menambahkan larutan NaOH 1 N. Filtrat disterilkan dengan  membran  filter  bakteri  berdiameter  0,22  μm  ke  dalam  tabung  steril  untuk memperoleh supernatan antibakteri (Sari, Apridamayanti and Octaviani, 2018).

## Pengujian Biuret
Supernatan sebanyak 1 mL ditambahkan dengan 1 mL NaOH 2,5 M kemudian dihomogenkan. Supernatan ditambahkan dengan setetes CuSO 4 0,01 M lalu dihomogenkan sampai berwarna ungu untuk melihat apakah positif mengandung protein (Bintang, 2010).

## Pengujian aktivitas antibakteri
Medium  MHA  untuk  bakteri  sebanyak  20  ml  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri dibiarkan  hingga  memadat.  Selanjutnya  diinokulasikan  masing-masing  bakteri  uji yakni  Basillus  subtilis,  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus epidermidis,  Salmonella  thypimurium,  Streptococcus  mutans,  dan  Propionibacterium acnes.  Setelah  itu  diambil  supernatan  sebanyak  20  µL  diteteskan  pada  paperdiscs blank.  paperdiscs  selanjutnya  diletakkan  di  atas  media  MHA  yang  telah  mengandung bakteri  uji  dan    diinkubasi  pada  37˚C  selama  24  jam  dan  diukur  diameter  zona hambatnya.

## Pengolahan dan analisis data
Data  pengujian  biokimia  dianalisis  secara  deskriptif  berdasarkan  Bergey’s  Manual  of Determinative  Bacteriology  (William  B.  Whitman,  2009)  dan  data  pengujian  aktivitas antibakteri diolah dengan SPSS analisis one way anova dan LSD.

## HASIL PENELITIAN
Tabel 1. Data Organoleptik Ekstrak Etanol Pada Daun Sawo Manila (Manilkara zapota L.)
Isolat Pengujian Biokimia Motilitas  Indol TSIA MR VP Ketahanan suhu  Ketahanan garam 5°C 37°C 5% 6,5% 10% A - - y/y + - - + + + + B - - y/y - - - + + + + C +/H - y/y + - - + + + + D - - m/y + - - + + + + E - - m/y + - - + + +
+
Ket : (+) : ada pertumbuhan; (-) : tidak ada pertumbuhan ; y/y:slant kuning/butt kuning, m/y: slant merah/butt kuning

## Tabel 2. Hasil pengujian aktivitas antibakteri
Perlakuan Rata-rata diameter zona hambat (mm) BS EC SA SE ST SM PA Isolat A 8,3 6,7 7,18 7,21 6,78 6,1 7,2 Isolat B 6,1 7,7 7,36 6,32 7,84 6,6 6,4 Isolat C 7,35 6,1 7,54 6,19 7,31 7,0 6,5 Isolat D 7,15 6,1 8,01 7,15 6,96 7,3 6,1 Isolat E 6,75 7,25 7,95 6,67 7,54 7,6 7,35 Kontrol (+) 18,21 21,86 23,14 18,36 17,01 17,98 23,63
Ket : BS: Basillus subtilis, EC: Escherichia coli, SA: Staphylococcus aureus, SE: Staphylococcus epidermidis, SM: Streptococcus mutans, ST: Salmonella thypimurium, and PA: Propionibacterium acnes.
Tabel 3. Hasil analisis statistik menggunakan One way Anova Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups .858 4 .214 .509 .730 Within Groups 12.648 30 .422 Total 13.506 34 Tabel 4. Hasil analisis statistik menggunakan LSD (I) PERLA KUAN (J) PERLA KUAN Mean Difference (I-J) Std. Error Sig. 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound A B .07857 .34707 .822 -.6302 .7874 C .12571 .34707 .720 -.5831 .8345 D .01429 .34707 .967 -.6945 .7231 E -.32000 .34707 .364 -1.0288 .3888 B A -.07857 .34707 .822 -.7874 .6302 C .04714 .34707 .893 -.6617 .7560 D -.06429 .34707 .854 -.7731 .6445 E -.39857 .34707 .260 -1.1074 .3102
C A -.12571 .34707 .720 -.8345 .5831 B -.04714 .34707 .893 -.7560 .6617 D -.11143 .34707 .750 -.8202 .5974 E -.44571 .34707 .209 -1.1545 .2631 D A -.01429 .34707 .967 -.7231 .6945 B .06429 .34707 .854 -.6445 .7731 C .11143 .34707 .750 -.5974 .8202 E -.33429 .34707 .343 -1.0431 .3745 E A .32000 .34707 .364 -.3888 1.0288 B .39857 .34707 .260 -.3102 1.1074 C .44571 .34707 .209 -.2631 1.1545 D .33429 .34707 .343 -.3745 1.0431

## DISKUSI
Isolat  BAL  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  berasal  dari  stok  yang  di  simpan  di Laboratorium Mikrobiologi STIFA Makassar. Hasil identifikasi awal isolat tersebut dilakukan oleh (Sasmita et al., 2018) menunjukkan bahwa BAL berbentuk bulat konsentris, berwarna putih susu, tidak menghasilkan spora dan bersifat Gram positif sehingga data tersebut perlu didukung  dengan  pengujian  biokimia  untuk  menambahkan  data  karakterisasi  isolat  BAL yang dihasilkan. Oleh karena itu penelitian ini akan menentukan identifikasi secara biokima isolat  limbah  sawi  (Brassica  juncea  L.)  dan  selanjutnya  akan  ditentukan  aktivitas  antibekterinya menggunakan beberapa bakteri uji yang mewakili bakteri Gram positif dan Gram negatif.
Pengamatan  uji  TSIA  dilakukan  berdasarkan  perbedaan  pola  fermentasi  karbohidrat.  Pada tabel 2. menunjukkan bahwa isolat BAL menunjukkan pembentukan warna slant kuning/butt kuning dan slant merah/butt kuning. Pola fermentasi yang ini diakibatkan karena perbedaan konsentrasi  asam  laktat  yang  dihasilkan  pada  fermentasi  laktosa.    Pembentukan  warna merah  pada  slant  dan  kuning  pada  butt  diakibatkan  karena  asam  laktat  yang  dihasilkan dalam  konsentrasi  kecil  sedangkan  jika  pembentukan  warna  kuning  pada  slant  dan  butt maka  asam  laktat  maka  asam  laktat  yang  dihasilkan  dalam  konsentrasi  lebih  tinggi.  Selain asam laktat, hidrogen disulfida juga diproduksi. Hal ini di tandai dengan pembentukan warna hitam pada media (Cappuccino and Sherman, 2014).
Sedangkan  pembentukan  indol  ditandai  oleh  warna  merah  diakibatkan  penggunaan  asam amino triptofan  (Lay, 1994). Hasil pengujian pada tabel 2. menunjukkan hasil negatif yang berarti tidak terbentuk senyawa kuinoid .

## Gambar 2. Mekanisme reaksi pengujian Indol
Pengujian indol digunakan untuk mengetahui adanya enzim triptofanase pada bakteri yang dapat  menghidrolisis  asam  amino  triptofan  menjadi  indol  dan  asam  piruvat.  Asam  amino triptofan merupakan asam amino yang lazim terdapat pada protein, sehingga asam amino ini dengan mudah dapat digunakan oleh mikroorganisme sebagai sumber energinya(Lay, 1994).
Pengujian  MR  menunjukkan  hasil  positif    karena  isolat  berada  pada  kisaran  pH  4,  yang ditandai dengan terbentuknya warna merah saat penambah indikator metyl red (Cappuccino and Sherman, 2014).
Gambar 3. Reaksi kimia pengujian metyl red
Pengujian  Voges-Proskauer(VP)  dilakukan  untuk  menentukan  kemampuan  beberapa organisme  membentuk  produk  akhir  non-asam  atau  netral  dari  asam-asam  organik  yang dihasilkan dari metabolisme glukosa .
Hasil  uji  VP  terhadap  isolat  BAL  sawi  menunjukkan    negatif  VP  karena  tidak  terbentuknya perubahan warna saat penambahan pereaksi yang menandakan organisme tidak membentuk produk akhir non-asam atau netral (Cappuccino and Sherman, 2014)
Pada pengujian ketahanan suhu terlihat isolat mampu bertahan atau tumbuh pada suhu 37°C karena  terjadi  kekeruhan  pada  media  yang  menandakan  bahwa  bakteri  dapat  tumbuh. Sedangkan  pada  suhu  5°C  isolat  tidak  mengalami  pertumbuhan  karena  tidak  terjadinya kekeruhan pada media. Menurut  (Susilawati, 2016) suhu optimum bagi pertumbuhan BAL adalah 35°-45°C.
Pada  pengujian  ketahanan  garam  dengan  konsentrasi  garam  5%,  6.5%  dan  10%  diperoleh hasil positif, hal ini berarti BAL dapat tumbuh pada beberapa konsentrasi. Uji toleransi garam dilakukan untuk mengetahui tingkat ketahanan isolat bakteri terhadap garam empedu yang harus  dilalui  untuk  dapat  mencapai  usus  dan  melakukan  aktivitas  metabolik,  sehingga mampu  menyeimbangkan  mikroflora  di  dalam  pencernaan  manusia  (Thakkar,  Modi  and Prajapati, 2015).
Berdasarkan  hal  tersebut  maka  menurut  Bergey’s  Manual  of  Determinative  Bacteriology (William B. Whitman, 2009) maka  isolat yang diperoleh termasuk kelompok BAL dari famili Lactobacillaceae,  genus  Lactobacillus  sp    yang  memiliki  ciri-ciri  yakni  berbentuk  bulat, bersifat Gram positif, tidak menghasilkan spora, bersifat non motil, mampu memfermentasi laktosa menjadi asam laktat, tidak menghasilkan senyawa kuinoid, memiliki pH 4,4, tumbuh pada suhu 37°-42°C dan bertahan pada konsentrasi garam 5-10% .
Pengujian  aktivitas  anti  bakteri  menunjukkan  bahwa  isolat  bersifat  spektrum  luas  yang mampu menghambat bakteri Gram positif dan negatif (Tabel 2.) Hasil pengujian pada tabel 2.  Di  analisis  menggunakan  one  way  anova.  Pengujian  analisis  ini  digunakan  untuk menentukan  pengaruh  antar  kelompok  perlakuan.  Hasil  yang  diperoleh  adalah  nilai p=0,730 (p>0,05) yang berarti tidak ada pengaruh jenis isolat terhadap aktivitas antibakteri pada beberapa bakteri  uji.  Berdasarkan klasifikasi yang dikemukanan  oleh  (Davis, 1971) maka aktivitas antibakteri isolat tergolong kategori sedang (5-10 mm).
Aktivitas antibakteri yang dihasilkan diduga karena adanya kandungan protein bakteriosin pada  isolat  BAL  sawi  (Brassica  juncea  L.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil  pengujian  kualitatif menggunakan  metode  biuret  pada  gambar  2.  menunjukkan  hasil  positif  mengandung protein.  Hasil  positif  ditandai  dengan  pembentukan  warna  biru  setelah  penambahan pereaksi CuSO 4 0,01 M pada suasana basa.

## Gambar 5. Reaksi kimia pengujian biuret
Bakteriosin  merupkan  protein  yang  memiliki  keragaman  yang  tinggi  baik  dari  bentuk, struktur dan aktivitas(Chen and Hoover, 2003)dan (Cotter, Hill and Ross, 2005). Bakteriosin yang dihasilkan oleh bakteri asam laktat merupakan substansi protein yang memiliki berat
molekul  yang  kecil  dan  dapat  berperan  sebagai  bakteriosida.  Mekanisme  kerja  bakteriosin yakni  berbentuk  kanal  pada  target  sel  membran,  menyebabkan  rendahnya  ikatan  molekul ion sehingga terjadi kebocoran pada sel bakteri dan melemahnya kekuatan proton sel(Dicks et al., 2011) dan (Hassan et al., 2012).
Menurut (Kusmiati, 2002) dan (Ogunbanwo, Sanni and Onilude, 2003) bahwa beberapa jenis bakteriosin  dari  bakteri  asam  laktat  digunakan  pada  beberapa  produk  fermentasi  karena bersifat  spektrum  luas  yakni  memiliki  aktivitas  penghambatan  terhadap  pertumbuhan beberapa  bakteri  Gram  positif  dan  Gram  negatif.  Terhambatnya  pertumbuhan  mikroba  uji pada hasil yang diperoleh menurut penelitian yang telah dilakukan oleh (Sari, Apridamayanti and Octaviani, 2018), bahwa metabolit yang terdapat pada bakteri asam laktat berdifusi pada media  pertumbuhannya  dengan  tingkat  kemampuan  yang  berbeda-beda,  tergantung  dari spesies bakteri asam laktat dan komposisi media pertumbuhan yang digunakan.  Oleh karena itu  isolat  BAL  dari  sawi  (Brassica  juncea  L.)  yang  merupakan  Famili  Lactobacillaceae  dan genus Lactobacillus sp dapat bersifat sebagai anti bakteri.

## KESIMPULAN
1. Isolat  BAL  limbah  sayur  sawi  (Brassica  juncea  L.)  termasuk  dalam  Famili Lactobacillaceae, genus Lactobacillus sp
2. Aktivitas  antibakteri  isolat  BAL  Sawi  bersifat  spektrum  luas  yakni  aktif  yang  dapat menghambat bakteri Gram positif dan Gram negatif.

## SARAN
Untuk  pengembangan  disarankan  untuk  penelitian  karakterisasi  bakteriosin  menentukan kadarnya

## DAFTAR PUSTAKA
Bintang, M. (2010) Biokimia.
Cappuccino,  J.  G.  and  Sherman,  N.  (2014)  Manual  Laboratorium  MiKrobiologi.  8th  edn. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Chen, H. and Hoover, D. G. (2003) ‘Bacteriocins and their Food Applications’, Comprehensive Reviews  in  Food  Science  and  Food  Safety,  2(3),  pp.  82–100.  doi:  10.1111/j.1541- 4337.2003.tb00016.x.
Cotter,  P.  D.,  Hill,  C.  and  Ross,  R.  P.  (2005)  ‘Bacteriocins:  developing  innate  immunity  for food’, Nature Reviews Microbiology, 3(10), pp. 777–788. doi: 10.1038/nrmicro1273.
Davis,  W.  W.  dan  T.  R.  S.  (1971)  ‘Disc  plate  methods  of  microbiological  antibiotic  assay’,
Microbiology, 22, pp. 659–665.
Dicks, L. M. T. et al. (2011) Medical and Personal Care Applications of Bacteriocins Produced by Lactic  Acid  Bacteria,  Prokaryotic  Antimicrobial  Peptides.  doi:  10.1007/978-1-4419- 7692-5.
Gatesoupe, F. J. (1999) ‘The Use of Probiotics in agliculture’, Agliculture, 191, pp. 147–165. Hassan,  M.  et  al.  (2012)  ‘Natural  antimicrobial  peptides  from  bacteria:  Characteristics  and potential  applications  to  fight  against  antibiotic  resistance’,  Journal  of  Applied Microbiology, 113(4), pp. 723–736. doi: 10.1111/j.1365-2672.2012.05338.x.
Kursia,  S.  et  al.  (2019)  ‘Optimasi  produksi  bakteri  asam  laktat  dari  limbah  sayuran  hijau’, (September), pp. 1–4.
Kusmiati (2002) ‘Aktivitas bakteriosin dari bakteri Leuconostoc mesenteroides Pbac1 pada berbagai  media’,  Pusat  Penelitian  Bioteknologi  LIPI  Universitas  Indonesia  Fakultas Matematikan dan Ilmu Pengetahuan, 6(1), pp. 1–7.
Lay, B. (1994) Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: PT. Raja Grafika Persada.
Nikoskelainen,  S.  et  al.  (2001)  ‘Protection  of  rainbow  trout  (Oncorhynchus  mykiss)  from furunculosis  by  Lactobacillus  rhamnosus’,  Aquaculture,  198(3–4),  pp.  229–236.  doi: 10.1016/S0044-8486(01)00593-2.
Ogunbanwo,  S.  T.,  Sanni,  A.  I.  and  Onilude,  A.  A.  (2003)  ‘Characterization  of  bacteriocin produced by Lactobacillus plantarum F1 and Lactobacillus brevis OG1’, African Journal of Biotechnology, 2(8), pp. 223–235. doi: 10.5897/ajb2003.000-1045.
Sari,  R.,  Apridamayanti,  P.  and  Octaviani,  M.  (2018)  ‘Optimasi  Aktivitas  Bakteriosin  yang Dihasilkan  oleh  Bakteri  Lactobacillus  plantarum  dari  Minuman  Ce  Hun  Tiau Optimization  of  Bacteriocin  Activity  Produced  by  Lactobacillus  plantarum  Bacteria from Ce Hun Tiau Beverages’, 5(1), pp. 1–6.
Sasmita  et  al.  (2018)  ‘Isolasi  Dan  Identifikasi  Bakteri  Asam  Laktat  Dari  Liur  Basa  (Limbah Sayur Bayam Dan Sawi)’, As-Syifaa Jurnal Farmasi, 10(2), pp. 141–151.
Suardana, I. W. and Suarsana, I. N. (2007) ‘Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat dari Cairan  Rumen  Sapi  Bali  sebagai  Kandidat  Biopreservatif  ISOLATION  AND IDENTIFICATION  OF  ACID  LACTIC  BACTERIA  FROM  BALI  CATTLE’S  GASTRIC  FLUID AS A POTENTIAL CANDIDATE OF BIOPRESERVATIVE’, Biology Published, 155–159(4), p.  8.  Available  at:  https://www.semanticscholar.org/paper/Isolasi-dan-Identifikasi- Bakteri-Asam-Laktat-dari-A-Suardana-
Suarsana/2a75726a78134714bb85f5cede68e7b2fcde2712.
Susilawati,  S.  (2016)  Isolasi  Dan  Karakterisasi  Bakteri  Asam  Laktat  (Bal)  Dari  Air  Cucian Beras, Universitas Riau.
Thakkar,  P.,  Modi,  H.  A.  and  Prajapati,  J.  B.  (2015)  ‘Isolation  ,  characterization  and  safety assessment of lactic acid bacterial isolates from fermented food products’, International Journal  of  Current  Microbiology  and  Applied  Sciences,  4(4),  pp.  713–725.  Available  at: http://www.ijcmas.com.
Twomey,  D.  et  al.  (2002)  ‘Lantibiotics  produced  by  lactic  acid  bacteria:  structure,  function and  applications.’,  Antonie  van  Leeuwenhoek,  82(1–4),  pp.  165–85.  Available  at: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12369187.
William B. Whitman (2009) ‘Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology’, in. Athens, USA. doi: 10.1007/b92997.
Zapata,  A.  A.  and  Lara-Flores,  M.  (2012)  ‘Antimicrobial  Activities  of  Lactic  Acid  Bacteria Strains Isolated from Nile Tilapia Intestine (Oreochromis niloticus)’, Journal of Biology and Life Science, 4(1), pp. 164–171. doi: 10.5296/jbls.v4i1.2408