UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA KARANG LUNAK Dendronephtya sp., YANG

## DIKOLEKSI DARI DESA TUMBAK KECAMATAN PUSOMAEN, KABUPATEN MINAHASA TENGGARA TERHADAP
Escherichia coli, Staphylococcus aureus , dan Candida albicans
Gloria Ekaputri Silap 1) , Defny Wewengkang 1) , Henki Rotinsulu 1)
1 Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Mannado, 95115

## ABSTRACT
Soft coral Dendronephtya sp., living in the waters of coral reefs that are rather deep, at depths below 10  meters,  grow  attached  to  a  hard  substrate,  protected  under  lumps  of  living  coral  or  dead  coral. This study aims to determine the antimicrobial activity of soft coral Dendronephtya sp., collected from the waters of Tumbak Village, Pusomaen District, Southeast Minahasa Regency, against Escherichia coli,  Staphylococcus  aureus  and  Candida  albicans.  Dendronephtya  sp.,  extracted  by  maceration method  using 96% ethanol solvent,  fractionation using liquid-liquid  partition  method  with n-hexane, chloroform  and  methanol  solvent,  and  the  testing  of  antimicrobial  activity  using  the  Kirby  Bauer diffusion method. The results showed that ethanol extract of soft corals (Dendronephtya sp.), n-hexane fraction  had  inhibition  of  8  mm  against  Escherichia  coli  bacteria,  7  mm  against  Staphylococcus aureus while Candida albicans had very good activity in n-hexane fractions of n-hexane. 9.3 mm, so it can be recommended as an antimicrobial.
Keywords :  Antimicrobial,  Candida  albicans,  Escherichia  coli,  Soft  Coral  (Dendronephtya  sp.), Staphylococcus aureus.

## ABSTRAK
Karang lunak Dendronephtya sp., hidup di perairan terumbu karang yang agak dalam, pada kedalaman di bawah 10 meter, tumbuh melekat di dasar yang keras, terlindung di bawah bongkahan karang hidup atau karang mati. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya aktivitas antimikroba dari karang lunak Dendronephtya sp., yang  dikoleksi  dari  perairan  Desa  Tumbak  Kecamatan  Pusomaen Kabupaten  Minahasa  Tenggara  terhadap Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus dan Candida albicans . Dendronephtya sp.,  diekstraksi  dengan  metode maserasi  menggunakan pelarut  etanol  96% , fraksinasi menggunakan metode partisi cair-cair dengan pelarut n-heksan, kloroform dan metanol, dan pengujian  aktivitas  antimikroba  menggunakan  metode  difusi  agar Kirby  Bauer .  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  karang  lunak  ( Dendronephtya sp.)  Fraksi  karang  n-heksan memiliki  daya  hambat  sebesar  8  mm    terhadap  bakteri Escherichia  coli, 7  mm  pada Staphylococcus aureus sedangkan Candida  albicans aktivitas    yang  sangat  baik  terjadi  pada  fraksi  dan  ekstrak  n- heksan sebesar 9,3 mm, sehingga dapat direkomendasikan sebagai antimikroba.
Kata Kunci : Antimikroba, Candida albicans , Escherichia coli, Karang Lunak ( Dendronephtya sp.), dan Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Terumbu karang merupakan bagian dari ekosistem  laut  yang  penting  karena  menjadi sumber  kehidupan  bagi  keanekaragaman  biota laut.  Di  dalam  ekosistem  terumbu  karang  ini pada  umumnya  hidup  lebih  dari  300  jenis karang, 200 jenis ikan dan berpuluh-puluh jenis moluska,  crustacea,  sponge,  alge,  lamun  serta biota  lainnya.  Terumbu  karang  memiliki manfaat  untuk  menjaga  kestabilan  kondisi ekologi  perairan  laut,  antara  lain  sebagai habitat, tempat memijah, dan tempat berlindung  bagi  berbagai  jenis  hewan  (Dahuri, 2000).
Berbagai penelitian menunjukan bahwa biota  laut  memiliki  potensi  yang  sangat  besar dalam  menghasilkan  senyawa-senyawa  aktif yang dapat digunakan sebagai bahan baku obat. Sejak tahun 1980-an, perhatian dunia pengobatan  mulai  terarah  ke  biota  laut  yang diketahui  dapat  menghasilkan  senyawa  aktif (Ismet, 2007).
Dendronephtya sp.,  hidup  di  perairan terumbu  karang  yang  agak  dalam,  pada kedalaman di bawah 10 meter, tumbuh melekat di  dasar  yang  keras,  terlindung  di  bawah bongkahan  karang  hidup  atau  karang  mati. Kadang-kadang  ditemukan  di  dalam  gua  kecil atau  di  celah  lereng  terumbu  yang  curam  dan membentuk koloni seperti pohon kecil. Ukuran maksimum  pohon  dengan  cabangnya  secara keseluruhan  tidak  lebih  dari  30  cm.  Hal  yang unik,  hewan  ini  memiliki  batang  berwarna putih  transparan  dan  mudah  sobek.  Karena  itu sepanjang  tubuhnya  disokong  oleh  deretan duri-duri  kecil  yang  disebut  spikula,  dan  jelas kelihatan  dengan  mata.  Bagian  atas  batang terdapat kumpulan polip yang bergerombol dan identik  dengan  mahkota  pohon  atau  dahan dengan  daun  yang  berwarna-warni  baik jaringan  tubuh  maupun  spikulanya.  Bagian mahkota inilah yang bila dipegang terasa tajam karena mengandung sejumlah spikula kecil dan besar  yang menonjol keluar. Selain menambah
keindahan  bentuk  karang  lunak  ini,  spikula juga berfungsi sebagai alat penangkal, terhadap serangan  musuh  yang  akan  memangsanya (Manuputty, 1996).

## METODOLOGI PENELITIAN Bentuk Penelitian
Jenis penelitian ini merupakan penelitian  eksperimental  laboratorik  dengan menguji  aktivitas  antimikroba  ekstrak  karang lunak  ( Dendronephtya sp)  yang  dikoleksi  dari perairan

## Waktu dan Tempat Penelitian
Pengambilan  sampel  dilakukan di Perairan Desa Tumbak Kecamatan Pusomaen,  Kabupaten  Minahasa  Tenggara. Preparasi  Sampel,  Pengujian  dan  pengamatan dilakukan  di  Laboratorium  Lanjut  Program Studi  Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi Manado.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan Mei 2019 - Juli 2019.

## Alat dan Bahan a. Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  masker,  sarung  tangan,  gunting, tabung oksigen, scuba diving, zipper lock bag , botol  600  ml,  talenan, cool  box ,  pisau,
Erlenmeyer (Pyrex), corong, rotary evaporator, timbangan  analitik,  corong  pisah, gelas  ukur,  gelas  kimia  (Pyrex),  cawan  petri, autoklaf,  pinset,  pembakar  spritus, magnetic stirrer ,  pipet  tetes, micro  tubes , hot plate, batang pengaduk, Laminar air flow, rak tabung reaksi,  tabung  reaksi,  lemari  pendingin, inkubator,  cakram  ( paper  disc) ,  mikropipet, mistar berskala, kertas label, spidol permanen.

## b. Bahan
Bahan-  bahan  yang  digunakan  pada penelitian ini yaitu karang lunak Dendronephtya sp, Staphylococcus  aureus,
Escherichia  coli , Candida  albicans, aquades, etanol,  n-heksan,  kloroform,  metanol,  pepton, ekstrak daging ( meat  extract ), natrium klorida, nutrient  agar ,  kloramfenikol  ( paper  disc ), kertas  label,  spidol  permanen,  kertas  saring, kapas, aluminium foil dan tissue .

## Prosedur Penelitian Pembuata Estraksi
Karang  lunak  ( Dendronephtya sp. ) 530 g    d  maserasi  sebanyak  3  kali.  Sampel  yang sudah dipotomg kecil-kecil dimasukan kedalam  botol  lalu  direndam  dengan  larutan etanol  96%    selama  1x24  jam.  Kemudian sampel  disaring  menggunakan  kertas  saring menghasilkan  filtrat  1  dan  debris  1.  Debris  1 kemudian  ditambah  dengan  larutan  etanol  lalu ditutup  dengan aluminium  foil dan  dibiarkan selama  1x24  jam,  sampel  tersebut  disaring menggunakan  kertas  saring  menghasilkan filtrat  2  dan  debris  2.  Debris  2  kemudian ditambah  dengan  larutan  etanol  lalu  ditutup dengan aluminium  foil selama  1x24  jam, sampel  tersebut  di  lalu  disaring  menggunakan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  3  dan  debris 3.  Filtrat  1,  2,  dan  3  dicampur  menjadi  satu kemudian disaring, lalu diuapkan menggunakan  oven  hingga  diperoleh  ekstrak kental etanol.

## Pembuatan Fraksinasi
Ekstrak  kental  etanol  karang  lunak ( Dendronephtya sp. ) sebanyak 3 g  dimasukkan dalam Erlenmeyer, dilarutkan dengan
campuran metanol : air  (MeOH : H 2 O) (80:20) sebanyak  100  mL.  Setelah  sampel  larut, dimasukkan  kedalam  corong  pisah  lalu ditambahkan  pelarut  n-heksan  dengan  jumlah yang  sama,  setelah  itu  dikocok  berulangkali sampai  homogen.  Dibiarkan  sampel  sampai terbentuk lapisan metanol : air  (MeOH :  H 2 O) dan n-heksan. Masing–masing lapisan ditampung  dalam  wadah  yang  berbeda. Lapisan  n-heksan  dievaporasi  menggunakan
Oven hingga  kering,  lalu  ditimbang  dengan timbangan  analitik  dan  diperoleh  fraksi  n- heksan 3,62 g.
Lapisan  MeOH  :  H 2 O  ditambahkan akuades  sebanyak  100  mL  dipartisi  dengan pelarut kloroform dengan perbandingan 1:1 v/v dalam  corong  pisah,  lalu  dikocok  berulangkali sampai  homogen.  Dibiarkan  sampai  terbentuk dua  lapisan yaitu  lapisan  MeOH  dan kloroform. Masing – masing lapisan ditampung dalam wadah yang berbeda. Lapisan kloroform dievaporasi menggunakan Oven hingga kering lalu  ditimbang  dan  diperoleh  fraksi  kloroform 3,66  g.  Lapisan  MeOH  yang  ditampung  pada wadah  yang  lain  dievaporasi  menggunakan Oven hingga  kering  lalu  ditimbang  berat sampel,  dan  diperoleh  fraksi  MeOH  5,05  g. Rendemen-rendemen  fraksi  dihitung  dengan persamaan sebagai berikut :
Rendemen = x100%
Rendemen =
x 100%

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  dan  media    yang  digunakan dalam  penelitian  aktivitas  antimikroba  ini distrerilkan terlebih dahulu dengan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121  ºC selama  15  menit.  Pinset  disterilkan  dengan membakar  ujung  pinset  diatas  api  langsung (Ortez, 2005).

## Pembuatan Media Cair B1
Ditimbang Pepton 0,5 g, ekstrak daging 0,3  g  ( meat  extract )  ,  Natrium  klorida  0,3  g dilarutkan  dalam  akuades  sebanyak  100  mL menggunakan  Erlenmeyer,  dikocok  sampai homogen. Media yang telah homogen kemudian  disterilkan  dengan  menggunakan autoklaf  pada  suhu  121  ºC  selama  15  menit. Dipipet  1  mL  media  cair  B1,  kemudian masukkan  dalam  tabung  reaksi  dan  tutup dengan aluminium  foil .    Media  cair  B1  siap digunakan  sebagai  media  kultur  mikroba (Ortez, 2005).

## Kultur Mikroba
Mikroba yang sudah dikultur
( Escherichia  coli , Staphylococcus  aureus dan Candida albicans ) ditambahkan media cair B1 yang  disiapkan  sebelumnya  sebanyak  100  µL kedalam  tabung  reaksi  yang  berbeda  –  beda. Masing – masing tabung reaksi ditutup dengan aluminium  foil  dan  dimasukkan  kedalam incubator selama 1x24 jam dengan suhu 37 ºC.

## Pembuatan Media Agar B1
Pepton  0,5  g,  ekstrak  daging  ( meat extract ) 0,3 g, natrium klorida 0,3 g, agar 1,5 g dan  dilarutkan  dalam  akuades  sebanyak  100 mL menggunakan Erlenmeyer, dikocok sampai homogen.    Media  yang  telah  homogen kemudian  disterilkan  dengan  menggunakan autoklaf  pada  suhu  121  ºC  selama  15  menit. Media  agar  B1  siap  digunakan  untuk  uji aktivitas antimikroba.

## Pembuatan  Kontrol  Positif  dan  Kontol Negatif
Kontrol positif dalam pengujian antimikroba  ini  menggunakan kloramfenikol paper  disc. Kontrol  negatif  yang  digunakan dalam penelitian ini yaitu menggunakan pelarut methanol,  dengan  cara  membuat  larutan  stok metanol  dengan  mengambil  sebanyak  200  µL metanol  kemudian  ditotolkan  pada  kertas cakram.

## Pembuatan Larutan Uji
Larutan uji dibuat dengan cara melarutkan  ekstrak  etanol  karang  lunak ( Dendronephtya sp. ) sebanyak  1  mg  kedalam 200  µL  metanol  sehingga  menghasilkan konsentrasi larutan uji sebanyak 250 µg/50 µL. Perlakuan yang sama dilakukan untuk fraksi n- heksan,  fraksi  kloroform  dan  fraksi  metanol (Ortez,2005).

## Pengujian Aktivitas Antimikroba
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  agar  ( disc diffusion  Kirby  and  Bauer ).  Aktivitas  ini  diuji pada  mikroorganisme Escherichia  coli, Staphylococcus  aureus dan Candida  albicans.
Pada  pengujian  aktivitas  antibakteri  ini,  kertas cakram ( paper disc ) yang digunakan berukuran 6  mm  dengan  daya  serap  50μL  tiap  cakram. Kosentrasi  yang  digunakan  pada  pengujian  ini hanya  satu  kosentrasi  yaitu  250μg/50μL  pada setiap  sampel  yang  terdiri  dari  ekstrak  kental, fraksi  n-heksan,  fraksi  kloroform,  fraksi metanol-air, kontrol positif dan kontrol negatif. Sampel  yang  telah  ditentukan  kosentrasinya 250μg/50μL  ditotolkan  pada  masing-masing cakram dengan menggunakan mikropipet.
Untuk  media  agar  B1  yang  sudah diautoklaf  pada  suhu  121  ºC  selama  15  menit, kemudian  dinginkan  sampai  suhu  40  ºC. Tuangkan  media  agar  ke  cawan  petri,  Ambil sebanyak  100μL  mikroba  yang  telah  di  kultur dalam  tabung  reaksi,  dipipet  dan  diinokulasi pada media agar dan tunggu sampai media agar mengeras.  Masing-masing  cawan  petri  diberi label dan nomor sampel yang sesuai. Letakkan kertas cakram  yang telah ditotolkan sampel uji karang lunak ( Dendronephtya sp. ). Cawan petri lalu diinkubasi  selama 1x24 jam  pada suhu 37 ºC (Ortez, 2005).

## Pengamatan dan Pengukuran Zona Bening
Pengamatan
dilakukan dengan mengukur  diameter  zona  hambat  yang  terjadi pada  media  dengan  menggunakan  jangka sorong  beralaskan  kertas  berwarna  gelap. Diameter  zona  hambat  yang  diukur  yaitu daerah jernih yang terbentuk disekitar disk/cakram  (tidak  ada  pertumbuhan  bakteri) diukur dari ujung yang satu ke ujung yang lain melalui tengah-tengah disk/cakram atau diukur diameter vertikal dan horizontalnya (Soemarno,2000). Daerah jernih disekitar cakram menunjukkan kepekaan bakteri terhadap antibiotik atau bahan antibakteri yang digunakan  sebagai  bahan  uji  yang  dinyatakan dengan  diameter  zona  hambat.  Diameter  zona hambat  diukur  dalam  satuan  millimeter  (mm) menggunakkan  mistar  berskala  (Davis  and Stoud,  1971)  dengan  sedikit  modifikasi.
Klasifikasi  zona  Hambat  menurut  Davis  dan Stout  (1971)  dapat  lihat  pada  Tabel  1.

## Tabel 1. Klasifikasi zona Hambat menurut Davis dan Stout (1971)
Diameter Zona Hambat Respon Hambat Pertumbuhan > 20 mm Sangat kuat 11-20 mm Kuat 5-10 mm Sedang <5 mm Kurang

## Pengolahan Data dan Analisis Data
Pengolahan  data  dilakukan  dengan metode  penyajian  dalam  bentuk  tabel  dan gambar,  grafik  dan  analisis  secara  deskriptif. Aktivitas  antibakteri  diukur  menggunakan penggaris  besi  skala  millimeter  berdasarkan zona hambat yang terbentuk.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ektrak Karang Lunak ( Dendronephtya sp.) Ekstraksi  adalah  proses  pemisahan  zat dari campurannya dengan menggunakan pelarut  tertentu. Ekstraksi  terdiri  dari beberapa metode  di  antaranya  yaitu  metode  maserasi. Maserasi merupakan metode ekstraksi sederhana    yang  sering  digunakan  (Mukhriani, 2014).  Proses  maserasi  ini  dilakukan  dengan cara merendam sampel karang lunak ( Dendronephtya sp. ) sebanyak  3x24  jam dengan  menggunakan  larutan  etanol  96%. Sebelum  maserasi  dilakukan,  sampel  di bersihkan  dari  kotoran  dan  dipotong  kecil- kecil.  Pemotongan  sampel  dilakukan  untuk memperluas  permukaan  sentuh  sampel,  karena luas  permukaan  berpengaruh  terhadap  hasil yang  optimal  dari  proses  maserasi.  Semakin kecil  ukuran  sampel  maka  semakin  besar  luas permukaannya sehingga memudahkan senyawa aktif yang ada pada karang lunak ( Dendronephtya sp. ) dapat  larut  ke  dalam pelarut yang digunakan. Pelarut yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  pelarut
etanol  96%.  Menurut  Trifani  (2012),  etanol digunakan  sebagai  pelarut  karena  bersifat polar,  universal,  dan  mudah  didapat.  Beberapa proses  ekstraksi yaitu  penyaringan  dan penguapan menggunakan alat oven. Penyaringan  dilakukan  dengan  menggunakan kertas saring untuk memisahkan sampel karang lunak  ( Dendronephtya sp. ) dengan  pelarut etanol  yang  mengandung  senyawa  bioaktif. Penguapan  pelarut  dengan  oven dilakukan untuk  mempermudah  pemisahan  pelarut  yang digunakan  dengan  ekstrak  sehingga  diperoleh ekstrak kental.
Fraksi Karang Lunak ( Dendronephtya sp.) Fraksinasi  adalah  proses  penarikan suatu  senyawa  dengan  menggunakan  beberapa pelarut yang tidak saling bercampur. Senyawa- senyawa  yang  bersifat  non  polar  akan  larut dalam  pelarut  yang  nonpolar  sedangkan senyawa-senyawa  yang  bersifat  polar  akan larut  dalam  pelarut  yang  bersifat  polar  (Sari, 2012).
Pelarut yang digunakan untuk fraksinasi  yaitu    n-heksan,  kloroform,  dan metanol.  Pelarut  n-heksan  digunakan  untuk menarik  senyawa  yang  bersifat  non  polar, pelarut  kloroform  digunakan  untuk  menarik senyawa  yang  bersifat  semi  polar  sedangkan pelarut  metanol  digunakan  untuk  menarik senyawa-senyawa yang bersifat polar.
Tabel 2. Rendemen ekstrak dan fraksi karang lunak ( Dendronephtya sp.) No Sampel Rendemen (%) Warna Sampel 1 Ekstrak Etanol 3,21 Coklat kemerahan 2 Fraksi n-Heksan 0,085 Bening 3 Fraksi Kloroform 0,039 Coklat Pekat 4 Fraksi Metanol 0,088 Kuning Kecoklatan
Aktivitas antimikroba ekstrak dan fraksi karang lunak ( Dendronephtya sp.)
Uji  aktivitas  antimikroba  ekstrak  dan Fraksi  n-heksan,  fraksi  kloroform  dan  fraksi metanol  karang  lunak  ( Dendronephtya sp. ) terhadap bakteri Escherichia coli,
Staphylococcus  aureus dan Candida  albicans dengan  metode  difusi  agar  (Difusi  Kirby- Bauer)  yang  telah  dimodifikasi.  Pengujian dilakukan dengan mengukur zona hambat pada media  agar  B1  setelah  diinkubasi  dalam  alat inkubator  selama  1x24  jam.  Pertumbuhan bakteri  setelah  inkubasi  terlihat  menjauhi
cakram,  ini  berarti  terjadi  pembentukan  zona hambat di sekitar cakram yang telah ditotolkan sampel  uji  karang  lunak  ( Dendronephtya sp. ) dan  pada  cakram  antibiotik  Kloramfenikol sebagai  control  positif.  Pada  cakram  kontrol negatif tidak terlihat adanya zona hambat. Zona hambat  yang  terbentuk  diukur  diameternya dengan  menggunakan  jangka  sorong  dengan satuan  milimeter  (mm).  Pengukuran  dilakukan dengan  cara  mengukur  diameter  dari  ujung yang  satu  ke  ujung  yang  lain  melalui  tengah- tengah cakram.
Tabel 3. Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak dan fraksi karang lunak ( Dendronephtya sp.) terhadap Escherichia coli.
Ulangan Diameter zona hambat (mm) terhadap Escherichia coli Ekstrak EtOH Fraksi n-Heksan Fraksi CHCl 3 Fraksi MeOH Kontrol (+) Kontrol (-) I 8 8 8 7 22
-
II 7,5
8 7,5 7 III Total 7,5 23 8 24 7,5 23 7 21 ̅ 7,7 8 7,7 7
Diameter  zona  hambat  ekstrak  dan fraksi  karang  lunak  ( Dendronephtya sp. ) terhadap Escherichia  coli yang  paling  besar dihasilkan  oleh  fraksi  n-heksan  yaitu  sebesar 24  mm  dengan  nilai  rata-rata  8  mm, membuktikan bahwa adanya aktivitas antimikroba pada karang lunak
( Dendronephtya sp.)  yang  sedang  menurut Daviv  and  Stout  (1971).  Hasil  pengukuran diameter zona hambat dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 4. Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak dan fraksi karang lunak( Dendronephtya sp. ) terhadap Staphylococcus aureus.
Ulangan Diameter zona hambat (mm) terhadap Staphylococcus aureus Ekstrak EtOH Fraksi n-Heksan Fraksi CHCl 3 Fraksi MeOH Kontrol (+) Kontrol (-) I 7 7 7 8 18 - II 6,5 7 7 8 III Total 6,5 20 7 21 7 21 7 23 ̅ 6,7 7 7
Diameter  zona  hambat  ekstrak  dan fraksi  karang  lunak  ( Dendronephtya sp. ) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus yang paling  besar  dihasilkan  oleh  ekstrak  n-heksan yaitu  sebesar  21  mm  dengan  nilai  rata-rata  7 mm,  membuktikan  bahwa  adanya  aktivitas
antimikroba pada
karang lunak ( Dendronephtya sp.)  yang  sedang  menurut Daviv  and  Stout  (1971).  Hasil  pengukuran diameter zona hambat dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 5. Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak dan fraksi karangn lunak ( Dendronephtya sp. ) terhadap Candida albicans.
Ulangan Diameter zona hambat (mm) terhadap Candida albicans Ekstrak EtOH Fraksi n-Heksan Fraksi CHCl 3 Fraksi MeOH Kontrol (+) Kontrol (-) I 7 10 6,5 6,5 18 - II 7
9 6,5 6,5 III Total 7 21 9 28 7 20 6,5 19,5 ̅ 7 9,3 6,7 6,5
Diameter  zona  hambat  ekstrak  dan fraksi  karang  lunak  ( Dendronephtya sp. ) terhadap Candida  albicans yang  paling  besar dihasilkan  oleh  ekstrak  n-heksan  yaitu  sebesar 28    mm  dengan  nilai  rata-rata  9,3  mm.  Hasil pengukuran diameter zona hambat dapat dilihat pada Tabel 5.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang dilakukan  terhadap  mikroba Escherichia  coli, Staphylococcus  aureus dan Candida  albicans masing-masing sebanyak tiga kali pengulangan memperlihatkan  adanya  zona  hambat  yang
terbentuk  disekitar  disk/cakram.  Pada  fraksi etanol menunjukan adanya aktivitas
antimikroba  yang  terbentuk  tetapi  hanya  kecil, sedangkan pada
ekstrak metanol memperlihatkan  adanya  aktivitas  antimikroba terhadap Escherichia  coli,  Staphylococcus aureus dan Candida  albicans. Hal  ini ditunjukan  dengan  terbentuknya  zona  hambat disekitar  cakram  sebesar  14  mm  pada Escherichia  coli tergolong  kuat , 23  mm.  Hasil ini menunjukan bahwa fraksi metanol memiliki aktivitas  sebagai  antimikroba.  Pada  fraksi
metanol  memperlihatkan  aktivitas  antimikroba terhadap Escherichia  coli,  Staphylococcus aureus dan Candida  albicans yang  tergolong kuat . Hal  ini  ditunjukan  dengan  terbentuknya zona  hambat  disekitar  cakram  sebesar  18  mm pada Escherichia coli, 21 mm pada Staphylococcus  aureus 7  mm  dan  pada Candida  albicans  19,5. Jika  dibandingkan dengan  ekstrak  etanol  dan  fraksi  metanol, fraksi  n-heksan  memperlihatkan  daya  hambat yang  lebih  tinggi.  Hal  ini  ditunjukan  dengan aktivitas  antimikroba  sebesar  8  mm  pada Escherichia  coli tergolong  kuat,  7  mm  pada Staphylococcus  aureus tergolong  kuat  dan  9,3 mm pada Candida albicans tergolong kuat.
Hasil pengukuran diameter zona hambat  digolongkan  berdasarkan  klasifikasi zona  hambat  menurut  Davis  and  Stout  (Tabel 1).  Ekstrak  etanol  dan  fraksi  metanol merupakan  ekstrak  dan  fraksi  yang  efektif terhadap  mikroba Escherichia  coli dan Candida  albicans karena  memiliki  daya hambat mikroba yang kuat, hal ini dikarenakan gram negatif cenderung peka terhadap antimikroba  yang  bersifat  polar.  sedangkan pada ekstrak etanol, fraksi kloroform dan fraksi metanol terhadap  bakteri Staphylococcus aureus memiliki  kemampuan  menghambat mikroba  dengan  kategori  kuat.  Hal  ini menunjukkan bahwa bakteri gram positif lebih
peka dibandingkan dengan bakteri gram negatif. Hal ini disebabkan karena gram positif lebih  sensitif  terhadap  antibakteri  sehingga struktur dinding sel yang sederhana mempermudah  senyawa  antibakteri  masuk kedalam  sel  sedangkan  struktur  dinding  sel gram negatif lebih kompleks.
Kontrol positif memperlihatkan aktivitas  antimikroba  yang  paling  besar terhadap
mikroba Escherichia coli,
Staphylococcus  aureus dan Candida  albicans.
Kloramfenikol  merupakan  antibiotik  yang memiliki  spekrum  luas  terhadap  bakteri (Katzung, 2004). Kontrol positif yang memiliki diameter daya hambat lebih besar yaitu 22 mm pada Escherichia  coli, sedangkan  pada Candida  albicans 18  mm  dan  18  mm  pada Staphylococcus aureus .
Kontrol negatif (methanol) tidak
menunjukan  terbentuknya  zona  hambat,  hal tersebut menandakan bahwa tidak ada
pengaruh
pelarut methanol terhadap antimikroba yang diuji.
Aktivitas  antikiroba  yang  terbentuk disekitar  disk/cakram  ini  disebabkan  oleh aktivitas  senyawa  yang  terkandung  dalam ekstrak dan fraksi karang lunak
( Dendronephtya sp ). Semakin  besar  zona hambat  yang  terbentuk  maka  semakin  kuat
senyawa  yang  terkandung  dalam  karang  lunak ( Dendronephtya sp. ) untuk menghambat pertumbuhan mikroba.

## KESIMPULAN
Dendronephtya sp.,  diekstraksi menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut etanol  96% , fraksinasi  menggunakan  metode partisi  cair-cair  dengan  pelarut  n-heksan, kloroform dan metanol, dan pengujian aktivitas antimikroba  menggunakan  metode  difusi  agar Kirby  Bauer .  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa ekstrak etanol karang lunak ( Dendronephtya sp.)  Ekstrak  dan  fraksi  n- heksan  memiliki  daya  hambat  sebesar  8  mm terhadap  bakteri Escherichia  coli, 7  mm  pada Staphylococcus aureus sedangkan pada Candida  albicans aktivitas    yang  sangat  baik terjadi  pada  fraksi  n-heksan  sebesar  9,3  mm, sehingga  dapat  direkomendasikan  sebagai antimikroba untuk menjadi kandidat antimikroba

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut terdapat  karang  lunak  ( Dendronephtya sp.) dengan metode pengujian yang berbeda dan uji aktivitas  lainnya  agar  dapat  mengetahui manfaat lain selain antimikroba.

## DAFTAR PUSTAKA
Dahuri, R. 2000. Pendayagunaan Sumberdaya Kelautan Untuk Kesejahteraan Masyarakat . LISPI. Jakarta
Davis,  W.W  and  Stout,  T.R.  1971.  Disc  Plate Methods  of  Microbiological  Antibiotic Assay. Microbiology . 22(4): 659-665.
Dwidjoseputro, D. 1978. Dasar-Dasar
Mikrobiologi. Djambatan. Jakarta.
Entjang, I. 2003. Mikrobiologi dan Parasitologi untuk Akademi Keperawatan. Citra  Aditya  Bakti,
Bandung.
Frobisher and Fuerst’t.  1983. Microbiology  in Health  and  Disease.  Edisi  XV. Igaku Shoin, Sounders Imternational Edition.
Harborne,  J.  B.  1987. Metode  Fitokimia Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan . Penerbit : ITB. Bandung.
Ismet,  M.  S.  2007. Penapisan  Senyawa Bioaktif  Spons  Aaptops  dan  Petrosia sp.  dari  lokasi  yang  berbeda .  [ Skripsi ].
Pasca sarjana ITB, Bandung.
Katzung,  B.  G,.  2004.  Farmakologi  Dasar  dan Klinik.  Edisi  XIII.  Buku  3. Translation of  Basic  and  Clinical  Pharmacology Eight Edition. Alih Bahasa oleh Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Salemba Medika, Jakarta.
Kayser,  F.,  Bienz  KA.,  Eckert  J  and Zinkemengel  R,  M.  2005. Medical Microbiology. Thieme, New York.
Manuputty, A.E.W., 1996. Pengenalan beberapa karang lunak
(Octocorallia, Alcyonacea), di
lapangan. Oseana 21 (4) : 1 - 11.
Octaviani,  R.  2007.  Profil  kromatogram  dan aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol rimpang  lempuyang  gajah  ( Zingiber zerumbet )  terhadap  bakteri Escherichia coli in vitro. http://
eprints.undip.ac.id/22663  /1/Rima.pdf.
Diakses tanggal 2 Nopember 2018.
Ortez,  J.H.  2005.  Disk Diffusion  testing  in manual  of  antimicrobial  susceptibility testing .  Marie  B.  Coyle  (Coord.  Ed). American society for Microbiology.
Pelczar, M. J. dan E. C. S. Chan. 1988. Dasar–
dasar mikrobiologi . Terjemahan Universitas Indonesia Press. Jakarta. Post, K W. and Songer, GJ. 2005. MICROBIOLOGY Bacterial and Fungal  Agent  of  Animal  Disease . Elsevier Saunders: Philadelphia.
Rosenbach,  F.G.  1884. Mikro-Organismen  bei den  Wund-infection-Krankheiten  des Menschen. Wiesbaden, J. F. Bergmann.
Rostinawati,  T.  2009.  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Etanol Bunga Rosella ( Hibiscus sabdariffa  L.) Terhadap Escherchia coli, Salmonella typhi dan Staphylococcus  aureus Dengan  Metode Difusi Agar. Penelitian Mandiri: Fakultas Farmasi, Universitas Padjajaran. Ryan,  K.J.,  Champoux,  J.J.,  Falkow,  J.J., Plonde,  W.L.,  Drew,  F.C.,  Neidhardt, dan Roy, C.G. 1994. Medical Microbiology An Introduction to Infection  Diseases. Edisi  III,  253. Appleiton & Lange, Connecticut.
Sari,  Cahyo  IP.  2012.  Kualitas  Minuman
Serbuk Kersen ( Muntingia calabura L.) dengan Variasi Konsentrasi Maltodekstrin  dan  Ekstraksi  Kayu Secang ( Caesalpinia sappan L. ).
SKRIPSI. Fakultas
Teknobiologi
Universitas  Atma  Jaya  Yogyakarta,
Yogyakart.
Setiabudy,  Rianto.  2007. Farmakologi  dan Terapi  Edisi  V (  cetak  ulang  dengan perbaikan). Jakarta : Gaya Baru
Siregar,  R.S.  2005. Penyakit  Jamur  Kulit.
Penerbit Buku Kedokteran EGC,
Jakarta.
Siswandono  dan  Soekardjo.  1995. Kimia
Medisinal .  Airlangga  University  Press,
Surabaya.
Soemarno. 2000. Depertemen Kesehatan Republik Indonesia Isolasi Dan Identifikasi  Bakteri  Klinik.  Akademi Analisis Kesehatan Yogyakarta..
Yogyakarta.
Suprihatin,  S.  1982. Candida  dan  Kandidiasis Pada Manusia. Balai Penerbitan Jakarta
: Fakultas Kedokteran UI.
Syahrurachman, dkk. 2010. Buku Ajar
Mikrobiologi  Kedokteran.  Jakarta  :
Binarupa Aksara Publishers 2010
Waluyo  L.  2004.  Mikrobiologi  Umum. Malang: Umm Press.
Warsa, U. C. 1994. Kokus Positif Gram, dalam

## Buku  Ajar  Mikrobiologi  Kedokteran.
Edisi  Revisi.  Staf  Pengajar  Fakultas Kedokteran  Universitas  Indonesia,  103. Binarupa Aksara, Jakarta.