HEMATOLOGI PERBANDINGAN HEWAN VERTEBRATA: LELE (Clarias batracus), KATAK (Rana sp.), KADAL (Eutropis multifasciata), MERPATI (Columba livia) DAN MENCIT (Mus musculus)
Diah Wulandari Rousdy 1) , Riza Linda 1)
1 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Tanjungpura, Jl. Prof. Dr. H. Hadari Nawawi, Pontianak, email: diah.w.rousdy@gmail.com
COMPARATIVE HEMATOLOGY OF VERTEBRATE: CATFISH (Clarias batracus), FROG (Rana sp.), LIZARD (Eutropis multifasciata), PIGEON
(Columba livia) AND MICE (Mus musculus)

## ABSTRACT
Hematology  studies  between  Vertebrate  classes  can  provide supporting  data  related  to  animal  activities  and  adaptation  to  their habitat. Low  Vertebrate  ektoterm  showed  different  hemotological profil than endoderm Vertebrate. The aims of this study is to compare hematological profile between Vertebrate which includes five classes animal  taxon.  Animal  species  was  taken randomly, considered  to represent  the  five  classes  taxon: Clarias  batracus from  Class  Pisces, Rana sp.  from  Class  Amphibia, Eutropis multifasciata from  Class Reptilia, Columba  livia from  Class  Aves  and Mus  musculus from Class  Mammalia.  Hematology  parameters  were  observed  was hemoglobins,  HCT,  erythrocyte  count,  leukocyte  count,  leukocyte differential,  MCV,  MCH  and  MCHC.  The  result  showed  Vertebrate from  Class  Pisces  (catfish),  amphibian  (frogs)  and  reptiles  (lizards) had  hemoglobin,  hematocrit,  erythrocytes  higher  than  Aves  and Mammals.  Leucocytes  count  in  Class  Pisces,  Amphibians,  Reptiles and  Aves  range  12.000-19.000  cells/mL higher  than  mammal leukocyte  5000 cells/mL.  Differential  leukocyte  in  catfish,  frogs, lizards, pigeons and mice have the highest percentage of lymphocytes (37-62%).
Keywords: catfish, frog, h ematology, lizard, mice, pigeon, vertebrate

## ABSTRAK
Studi  hematologi  hewan  kelas  Vertebrata  dapat  memberikan  data pendukung  terkait  aktivitas  hewan  dan  adaptasi  terhadap  habitatnya. Hewan  Vertebrata tingkat  rendah  yang  ektoterm  mempunyai  profil hematologi  yang  berbeda  dengan  Vertebrata  tinggi  yang  sebagian besar  endoterm. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk membandingkan  profil  hematologi  antar  hewan  Vertebrata  yang meliputi lima kelas hewan takson. Hewan sampel diambil secara acak dari  populasi  hewan yang mewakili  lima  kelas  takson: Clarias batracus dari kelas  Pisces, Rana sp.  dari kelas  Amfibi, Eutropis
multifasciata dari kelas Reptil, Columba livia dari kelas Aves dan Mus musculus dari kelas Mammalia. Parameter  hematologi  yang  diamati adalah  hemoglobin,  hematokrit,  jumlah  eritrosit,  jumlah leukosit, leukosit  diferensial,  MCV,  MCH  dan  MCHC.  Hasil  pengukuran hematologi  menunjukkan  Vertebrata  dari kelas  Pisces  (lele), Amfibi (katak)  dan Reptil  (kadal)  memiliki  hemoglobin,  hematokrit,  eritrosit lebih  tinggi  dari  pada  Aves  dan  Mamalia.  Jumlah  leukosit  di kelas Pisces, Amfibi, Reptil, dan Aves berkisar 12.000-19.000 sel/mL lebih tinggi dari leukosit mamalia yakni 5000 sel/mL. Pengamatan leukosit diferensial  pada  ikan  lele,  katak,  kadal,  merpati, dan  tikus menunjukkan  persentase  limfosit  tertinggi  (37-62%)  dibanding  jenis leukosit lain.
Kata  kunci: ikan  lele, katak, hematologi,  kadal, mencit, merpati, vertebrata

## PENDAHULUAN
Darah  merupakan  komponen  dalam  sistem  sirkulasi  yang  berperan  penting dalam mendistribusikan berbagai senyawa esensial yang dibutuhkan tubuh. Darah hewan Vertebrata terdiri atas sel-sel darah  yang tersuspensi di dalam plasma dan beredar  menuju  organ-organ tubuh.  Unsur  seluler  atau  sel  darah terbagi  menjadi sel  darah  merah  (eritrosit),  sel  darah  putih  (leukosit), dan  keping  darah (trombosit). Bentuk, ukuran, dan persentase jumlah eritrosit dan leukosit berbeda untuk setiap jenis hewan Vertebrata (Smith and Jarecki, 2011). Eritrosit Mamalia diketahui  tidak  memiliki  inti  sel,  namun  tidak  demikian  dengan  eritrosit  hewan dari kelas  Pisces,  Amphibia,  Reptilia, dan  Aves  yang  memiliki  inti. Demikian pula dengan jumlah dan tipe sel leukosit yang memiliki gambaran berbeda untuk tiap jenis hewan.
Studi mengenai profil darah antara kelas Vertebrata dapat menyediakan data pendukung dalam mempelajari aktivitas dan habitat hewan. Ukuran dan bentuk sel eritrosit  serta  kandungan  hemoglobin  dapat mengindikasikan  kemampuan respirasi  hewan  yang  kemudian  merupakan  hasil  adaptasi  terhadap  habitat  yang berbeda (Hartman and Lessler, 1964).
Parameter  hematologi  dan  kimia  darah  juga  dapat  digunakan  untuk memantau status  kesehatan  dan  fisiologi  suatu  populasi  hewan  (Lander et  al., 2003). Jumlah leukosit dan persentase hematokrit akan meningkat apabila hewan terinfeksi  mikroorganisme  atau  berada  dalam  kondisi  stres  akibat  berada  dalam cekaman  lingkungan (Alamanda et  al., 2007;  Hollamby et  al., 2004).  Gambaran leukosit  diferensial  dapat  digunakan  para  ahli  ekologi  sebagai  acuan  penentuan proses adaptasi hewan terhadap lingkungan baru (Davis et al., 2008). Berdasarkan latar  belakang  tersebut  maka  perlu  dilakukan  penelitian  mengenai  perbandingan profil hematologi dari hewan Vertebrata.

## MATERIAL DAN METODE

## Subjek Penelitian
Hewan  Vertebrata  yang  digunakan  sebagai  objek  berasal  dari  lima  kelas takson.  Masing-masing  kelas  takson  terdiri  dari  empat  ulangan  individu. Pemilihan individu hewan sehat dan berkelamin jantan. Vertebrata dari lima Kelas takson  yang  diwakili  oleh  hewan Clarias batracus (ikan  lele)  dari  Kelas  Pisces, Rana cancrivora (katak) dari kelas Amphibia, Eutropis multifasciata (kadal) dari kelas  Reptilia, Columba  livia (burung merpati)  untuk kelas  Aves  dan Mus musculus (mencit) mewakili kelas Mammalia.

## Prosedur Penelitian
Hewan dibius dengan kloroform. Sampel darah ikan diambil sebanyak 1 mL melalui  arteri  caudalis.  Pembuluh  darah  arteri  caudalis  berada  tepat  di  bawah vertebra. Sampel darah burung merpati diambil dari vena jugularis. Sampel darah katak  dan  kadal  yang  berukuran  kecil  diambil  dengan  menusukkan  jarum langsung ke jantung. Pengambilan sampel darah mencit dengan cara ujung tabung hematokrit ditusukkan pada vena orbitalis di mata. Darah yang keluar ditampung dalam mikrotube yang telah diisi antikoagulan NaEDTA.
Kadar  Hb  ditentukan  dengan  metode  Sahli, yaitu  hemoglobin  direaksikan dengan HCl 0,1N sehingga terbentuk senyawa hematin yang berwarna coklat tua.
Leukosit diferensial dihitung menggunakan preparat apus menggunakan pewarna Giemsa  (Gunarso,  1989).  Persentase  hematokrit  dihitung  menggunakan  tabung mikrokapiler yang diisi darah dan disentrifugasi pada kecepatan 6000 rpm selama 10  menit. Eritrosit  dan  leukosit  total  dihitung  menggunakan  hemositometer dengan  pengencer  larutan  Natt-Herick  untuk  non-mamalia  (Salasia  dkk.,  2001) dan Larutan Turk Hayem untuk Mammalia.

## Analisis dan Interpretasi Data
Means Corpuscular Haemoglobin Concentration (MCHC) merupakan nilai konsentrasi  rata-rata  hemoglobin  dalam  total  sel  darah. Means  Corpuscular Haemoglobin (MCH) adalah  kandungan  hemoglobin  tiap  sel  eritrosit  sedangkan Means  Corpuscular  Volume (MCV) merupakan  volume  eritrosit  rata-rata.  Nilai total  sel eritrosit  dan  leukosit,  MCH,  MCV, dan  MCHC  dihitung  menggunakan rumus berikut (Kori-Siakpere et al., 2005):
Jumlah eritrosit (/µL) = jumlah eritrosit x 4000 x 200
80
Jumlah leukosit (/µL) = jumlah leukosit x  160 x 200 64
MCHC (g/dL) = Hemoglobin (g/dL) x 100
Hematokrit (%)
MCH (pg) = Hemoglobin (g/dL) x  10
Eritrosit (10 6 /µL)
MCV (fL) = Hematokrit (%) x  10
Eritrosit (10 6 /µL)
Semua data hematologi kemudian dianalisis statistik menggunakan Analysis of  Varians (ANOVA)  satu  jalur.  Apabila  terdapat  perbedaan  antara  perlakuan (P<0,05)  maka  analisis  dilanjutkan  menggunakan  Uji  Duncan (Duncan  Multiple Range  Test). Semua  analisis  statistik  dilakukan  melalui  program  SPSS  versi  18.
Data yang diperoleh kemudian ditampilkan dalam nilai rata-rata±standar deviasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  profil  hematologi  untuk  lima  kelas  Vertebrata  menunjukkan nilai hematologi dipengaruhi oleh respons  yang berbeda tiap organisme terhadap lingkungan  atau  habitat  hidupnya.  Tabel  1  menampilkan  komparasi  hematologi untuk parameter hemoglobin, hematokrit, eritrosit, MCV, MCH, MCH dan ukuran eritrosit antar kelas Vertebrata. Hewan Vertebrata akuatik cenderung mempunyai kadar  hemoglobin,  jumlah  eritrosit  total  dan  persentase  hematokrit  lebih  rendah dibandingkan vertebrata  terestrial. Nilai MCV dan MCH pada Vertebrata rendah mempunyai nilai lebih tinggi.
Tabel 1. Hasil  Analisis  Parameter  Hematologi untuk Hemoglobin,  Hematokrit,

## Eritrosit, MCHC, MCH dan MCV
Parameter Pisces (C. batracus) Amphibia (R.cancrivora ) Reptilia (E.multifasciata) Aves (C.livia) Mammalia (M.musculus) Hemoglobin (g/dL) Hematokrit (%)
Eritrosit (10 6 /µL)
MCV (fL)
MCH (pg)
MCHC
(g/dL) Ukuran Eritrosit 7,52±1,29 33,70±1,59 1.622.000 ±330711 214,21±41,2 9
46,71±3,78 22,28±3,36
10,34 x 8,46
5,76±1,14 21,18±3,97 794.000 ± 103344 271,19±61,04 72,42±9,06 27,96±8,47 17,04 x 12,11 7,36±0,93 29,9±3,41 1.628.000 ±187536 184,55±20,47 46,17±11,5 25,13±6,25 14,58 x 9,68 11,4±0,68 45,14±1,00 2.686.000 ±115887 168,25±6,04 42,45±2,05 25,24±1,22 12,5 x 8,14 12,98±0,67 43,55±6,53 4.519.000 ±960456 97,97±10,15 29,87±6,87 30,23±3,65 6,20 x 6,20
Data ditampilkan dalam nilai rata-rata ± standar deviasi.
Anggota dari Kelas Pisces yang diwakili oleh ikan lele (C.batracus), Kelas Amphibia, katak (R.cancrivora) dan Kelas Reptilia, kadal kebun (E.multifasciata) memiliki  kadar  hemoglobin  (Hb)  cenderung  lebih  rendah  (5,76-7,52  g/dL) dibandingkan kelas  Aves  (C.livia)  dan  Kelas  Mammalia  (M. musculus)  dengan kadar Hb (11,4-12,98 g/dL). Ikan lele, katak, dan kadal mempunyai habitat hidup
di  air  sehingga  termasuk  dalam  hewan  akuatik  dan  semi-akuatik,  sedangkan burung merpati dan mencit termasuk hewan teresterial.
Hewan akuatik dan semi-akuatik cenderung memiliki kadar Hb lebih rendah dibandingkan  hewan  teresterial  disebabkan  kandungan  oksigen  dalam  air  lebih rendah  dibandingkan  medium  udara  sehingga  oksigen  yang  terikat  oleh  protein Hb  akan  lebih  sedikit.  Perbandingan  hematologi  antara  hewan  dengan  habitat yang  berbeda  ini  didukung  oleh  hasil  penelitian  Gul et  al. (2011)  yang menyatakan  kadar  Hb  hewan anura  teresterial Pelobates  syriacus lebih  tinggi (12,95 g/dL) dibandingkan anura semi-akuatik Rana damatina (8,2 g/dL).
Jumlah  ritrosit  dari  yang  terendah  ke  yang  tertinggi  masing-masing  adalah katak  memiliki  jumlah  eritrosit  (794.000  sel/mL),  ikan  lele  (1.662.000  sel/mL) dan kadal kebun (1.628.000 sel/mL), ketiganya adalah hewan ektoterm cenderung lebih rendah dibandingkan burung merpati dan  mencit masing-masing 2.686.000 sel/mL  dan  4.519.000  sel/mL. Hal  ini  sesuai  penelitian Hartman  dan  Lessler (1964) bahwa jumlah  eritrosit  pada  hewan  ektoterm  akan  lebih  rendah dibandingkan  hewan  endoterm. Hal  ini  dapat  dijelaskan  bahwa  ikan,  katak  dan kadal  termasuk  dalam  hewan  ektoterm  sebab  suhu  tubuh  bervariasi  mengikuti perubahan  suhu  lingkungan.  Burung  merpati  dan  mencit  mampu  menjaga  suhu tubuh  konstan  melalui  proses  metabolisme  sehingga  termasuk  hewan  endoterm (Willmer et al., 2000). Perbedaan regulasi panas tubuh antara hewan ektoterm dan endoterm didukung oleh jumlah eritrosit dan hemoglobin yang berperan mengikat oksigen.  Oksigen  yang  diikat  hemoglobin  dalam  eritrosit  akan  digunakan  hewan endoterm untuk metabolisme dan meregulasi panas tubuh.
Jumlah  eritrosit  burung merpati  hasil  penelitian  ini  (2.686.000  sel/mL) mendekati jumlah eritrosit ayam Gallus gallus yakni 3.000.000 sel/mL (Kayadoe dkk,  2008)  dibandingkan  burung  elang  yakni  1.880.000  sel/mL  (Santosa  dkk, 2003).  Perbedaan  jumlah  eritrosit  antar  spesies  burung  ini  selain  karena  faktor genetik juga disebabkan  oleh perilaku dan aktivitas hewan.  Burung elang adalah hewan  predator  yang  lebih  banyak  menghabiskan  waktunya  terbang  udara sehingga  oksigen  yang  diambil  saat  hinggap  lebih  banyak  digunakan  untuk aktivitas terbang.
Katak  (R.cancrivora.)  memiliki  nilai  hematokrit  terendah  (21,18%) sedangkan burung merpati (C.livia) memliki kadar hematokrit tertinggi (45,14%). Jumlah  eritrosit  darah  secara  langsung  berkorelasi  dengan  persentase  hematokrit (HCT). Mean Corpuscular Volume (MCV) menunjukkan rasio antara hematokrit dan  jumlah  eritrosit.  Berdasarkan  hasil  penelitian  (Tabel  1)  katak  dan  ikan  lele memperoleh nilai MCV paling tinggi (271-214 fL) dibandingkan hewan lainnya. Semakin  tinggi  nilai  MCV  menunjukkan  jumlah  eritrosit  paling  mempengaruhi nilai hematokrit dibandingkan unsur seluler darah lainnya.
Mean  Corpuscular  Haemoglobin (MCH)  menunjukkan  kandungan hemoglobin  dalam  eritrosit.  Katak,  ikan  lele, dan  kadal  memiliki  nilai  MCH terbesar  (72,42-46,12  pg).  Semakin  tinggi  nilai  MCH  maka  kandungan hemoglobin dalam  eritrosit  semakin  besar  pula.  Katak  meski  kandungan hemoglobin dan jumlah eritrosit relatif rendah namun memiliki nilai MCH paling tinggi.  Hal  ini  disebabkan  oleh  ukuran  sel  eritrosit  katak  paling  besar  (panjang 17,04 µm; lebar 12,1 µm) diantara hewan Vertebrata lainnya.
Mamalia  mempunyai  eritrosit  yang  tidak  berinti,  sedangkan  hewan  dari kelas Pisces, Amphibia, dan Reptilia mempunyai eritrosit berinti. Eritrosit berinti yang  dimiliki  ikan  lele,  katak,  kadal  dan  burung  mempunyai  ukuran  sel  lebih besar dibandingkan eritrosit tidak berinti yang dimiliki mencit. Ukuran eritrosit ini berkorelasi dengan nilai  MCV. Ukuran eritrosit  yang paling besar dimiliki katak (Rana cancrivora) yakni 17,04 x 12,11 µm. Ukuran eritrosit katak ini lebih kecil bila dibandingkan dengan hasil penelitian Hartman and Lessler (1964) yakni 27,9 x 15,4 µm. Perbedaan ukuran eritrosit katak ini disebabkan oleh perbedaan tingkat maturasi  eritrosit,  eritrosit  matang  cenderung  memiliki  ukuran  lebih  besar (Campbell, 2004).
Perbedaan ukuran eritrosit selain disebabkan faktor genetik, juga disebabkan oleh faktor anatomi pembuluh darah kapiler. Mammalia (mencit) memiliki ukuran eritrosit  terkecil  dan  berbentuk  cakram  bikonkaf.  Bentuk  dan  ukuran  eritrosit  ini berhubungan  dengan  efisiensi  pengangkutan  oksigen  dalam  eritrosit  menuju jaringan  terkecil.  Ukuran  eritrosit  mamalia  yang  kecil  dapat  melewati  kapiler darah  mamalia  yang  berukuran  kurang  7,5  µm.  Katak  memiliki  ukuran  eritrosit
paling  besar,  setara  dengan  diameter  kapiler  katak  yang  berkisar  12,5-13,4  µm (Hartman and Lessler, 1964).
Leukosit  merupakan  jenis  sel  darah  yang  terlibat  langsung  dalam  sistem pertahanan  tubuh  dari  partikel  asing  dan  mikroorganisme  yang  masuk  ke  dalam tubuh. Jumlah leukosit berbeda antar kelas Vertebrata (Tabel 2). Jumlah  leukosit tertinggi ditunjukkan oleh darah ikan lele (19.800 sel/mL), diikuti dengan burung merpati  (16.800 sel/mL),  katak  (13.200  sel/mL)  dan  kadal  (12.400  sel/mL). Jumlah leukosit terendah dimiliki oleh kelas Mammalia yakni 4.975 sel/mL.
Pada  pengamatan  histologi  sel  darah  menunjukkan  variasi  bentuk  dari  sel eritrosit  dan  leukosit  Vertebrata.  Eritrosit kelas Reptilia  (kadal)  mempunyai bentuk  paling oval dibandingkan  Kelas  Vertebrata  lainnya. Eritrosit  Mammalia tidak  berinti  dan  memiliki  bentuk  bulat  oval. Tampilan  histologi  juga menunjukkan  bahwa  eritrosit  yang tidak memiliki  inti  hanya  eritrosit  pada Mammalia.  Gambaran  leukosit  juga  sangat  bervariasi.  Leukosit  jenis  azurofil hanya  ditemukan  pada  kadal  (Gambar  1).  Jenis  limfosit  memiliki  persentase terbanyak dibandingkan jenis leukosit lain.
Gambar 1. Histologi Sel Darah Vertebrata. (1) Sel Darah Lele; (2) Sel Darah Katak; (3) Sel Darah Kadal; (4) Sel Darah Burung Merpati; (5) Sel Darah Mencit Ket: E. Eritrosit; L. Limfosit; M. Monosit; H. Heterofil; A. Azurofil; T. Trombosit

## Tabel 2. Hasil Pengukuran Parameter Hematologi untuk Leukosit Total
dan Leukosit Diferensial Parameter Kelas Pisces (C. batracus) Kelas Amphibia (R.cancrivora.) Kelas Reptilia (E.multifasciata) Kelas Aves (C. livia) Kelas Mammalia ((M. musculus) Leukosit 10 6 /µL)
Limfosit
(%)
Monosit
(%)
Neutrofil /Heterofil (%) Basofil (%) 19.800±3114 65,25±6,65 12,00±7,44 19,00±9,13 2,00±0,82 1,75±1,26 - 13.200±3114 51,25±10,31 10,25±2,87 29,25±5,97 3,00±1,41 6,25±5,97 - 12.400±5594 37,25±7,80 5,50±1,29 14,00±6,48 9,25±3,30 15,00±0,82 19,00±8,91 16.800±3684 61,00±4,97 11,00±1,41 22,75±3,86 1,25±0,96 4,00±1,83 - 4.975±1560 56,00±10,55 12,25±6,13 22,25±7,63 3,75±2,98 5,75±2,06 -
Data ditampilkan dalam nilai rata-rata ± standar deviasi.
Jumlah leukosit mencerminkan proses evolusi sistem imunitas. Vertebrata tingkat  rendah  seperti  ikan  dan  katak,  jumlah  leukositnya  dipengaruhi  oleh  suhu dan  fotoperiode  (Zapata et  al., 1992)  sehingga  variasi  jumlah  leukosit  antar individu  sangat  besar.  Jumlah  leukosit  Vertebrata  rendah  seperti  Kelas  Pisces, Amphibia, Reptil dan Aves sangat banyak (lebih 10.000 sel/mL) sedangkan pada Mammalia  jumlah  leukosit  normal  4000-10.000  sel/mL.  Banyaknya  jumlah leukosit  Vertebrata  tingkat  rendahnya  disebabkan  oleh  belum  terspesialisasinya organ  limfoid.  Campbell  (2004)  menyatakan  bahwa  nodus  limpa  dan  germinal center  tidak  dimiliki  hewan  ektoterm  (kelas  Pisces,  Amphibia,  Reptil)  sehingga sebagian besar leukosit bersirkulasi di darah.
Hasil penentuan jumlah  leukosit diferensial diperoleh data ikan lele, katak, kadal,  burung merpati, dan mencit memiliki persentasi limfosit tertinggi di antara jenis leukosit lainnya (37-62%). Persentase leukosit diferensial ini berbeda dengan Primata dan manusia  yang mempunyai jumlah neutrofil paling tinggi. Perbedaan ini  kemungkinan  disebabkan  proses  maturasi  limfosit  pada  manusia  dipengaruhi
oleh involusi timus (Ganong, 2005) sehingga pada manusia jumlah limfosit lebih rendah dibandingkan neutrofil.
Berdasarkan  pengamatan  preparat  apus,  bentuk  sel  eritrosit  pada  hewan Vertebrata  selain  Mammalia  berbentuk  oval  dan  mempunyai  inti  sel.  Sel  eritosit katak  dari  Kelas  Amphibia  mempunyai  ukuran  paling  besar  di antara  hewan Vertebrata  lain  yakni  17,04  x  12,11µm. Sedangkan  eritrosit  mammalia  dicirikan tidak mempunyai nukleus, berbentuk cakram bikonkaf dan berukuran paling kecil dibanding eritrosit Vertebrata lain yakni 6,2x6,2 µm (Tabel 1, Gambar 1).
Jenis  leukosit  diferensial  terdiri  dari  neutrofil,  basofil,  eusinofil,  monosit dan  limfosit,  kecuali  pada  kadal  ditemukan  leukosit  lain  yakni  azurofil.  Bentuk limfosit  berukuran  besar,  mempunyai  inti  bulat  berwarna  ungu,  biasa  terdapat  di tepi  sel  (eksentrik).  Sitoplasma  terpulas  biru  pucat  dan  sedikit  pada  tepi  sel. Monosit  merupakan  leukosit  berukuran  besar,  inti  berbentuk  ginjal.  Sitoplasma monosit  biru  keruh  dengan  granul  kecil  atau  vakuola.  Kadang-kadang  tepian sitoplasma membentuk pseudopodia atau cytoplasmic protrusions.
Sel  heterofil  atau  neutrofil  pada  kadal, burung  dan  mamalia  berbentuk sferis, nukleus tidak berlobus. Sedangkan neutrofil pada sebagian besar Amphibia mempunyai nukleus berlobus (Arikan & Cicek, 2014). Nukleus terpulas ungu-biru tua. Sitoplasma sedikit di bagian tepi sel dan terpulas biru pucat. Neutrofil burung mempunyai  ciri  khas  sitoplasma  tak  berwarna  dan  terdapat  granul  berbentuk batang  atau  sferis.  Granul  sitoplasma  heterofil  bersifat  refraktil  saat  pengamatan dengan mikroskop (Clark et al., 2009).
Pada  kadal  ditemukan  jenis  leukosit  yang  berbeda  dengan  Vertebrata lainnya,  yakni  azurofil.  Sel  azurofil  berbentuk  seperti  monosit  dengan  inti berbentuk  ginjal  (berlobus),  namun  sitoplasma  mengandung  granula  azurofilik yang  berwarna  pink.  Trombosit  mempunyai  ciri  yang  sama  diantara  jenis Vertebrata lain  yakni  berbentuk  oval  kecil,  inti  penuh  dan  dijumpai  dalam kelompok (cluster).
Vertebrata  Kelas  Pisces  (ikan  lele),  Amphibia (katak)  dan  Reptil  (kadal) mempunyai  kadar  hemoglobin,  hematokrit,  jumlah  eritrosit  lebih  rendah dibandingkan  Kelas  Aves  dan  Mammalia. Jumlah  leukosit  Vertebrata  rendah
seperti  Kelas  Pisces,  Amphibia,  Reptil  dan  Aves  lebih  dari  10.000  sel/mL sedangkan  pada  Mammalia  jumlah  leukosit  rata-rata  ± 5000  sel/mL.  Jumlah leukosit  diferensial  diperoleh  data  ikan  lele,  katak,  kadal, merpati  dan  mencit memiliki persentasi limfosit tertinggi diantara jenis leukosit lainnya (37-62%).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  pengamatan  hematologi  diperoleh  hasil  hewan Vertebrata Kelas  Pisces  (ikan  lele),  Amphibia (katak)  dan  Reptil  (kadal)  mempunyai  kadar hemoglobin,  hematokrit,  jumlah  eritrosit  lebih  rendah  dibandingkan  Kelas  Aves dan  Mammalia. Jumlah  leukosit  Vertebrata  rendah  seperti  Kelas  Pisces, Amphibia, Reptil dan Aves lebih dari 10.000 sel/mL sedangkan pada Mammalia jumlah leukosit rata-rata ± 4000 sel/mL. Jumlah leukosit diferensial diperoleh data ikan  lele,  katak,  kadal, merpati  dan  mencit  memiliki  persentasi  limfosit  tertinggi diantara jenis leukosit lainnya (37-62%).

## DAFTAR PUSTAKA
Adeyemo, O. K. 2007. “ Haemathological Profile of Clarias gariepinus (Burchell,
1822)  Exposed  To  Lead ” . Turkish  Journal  of  Fisheries  and  Aquatic Sciences, 7:163-169.
Alamanda,  I.A.,  N.S. Handajani, A.,  Budihardjo. 2007.  “Penggunaan  Metode Hematologi  dan  Pengamatan  Endoparasit  Darah  untuk  Penetapan Kesehatan  Ikan Lele  Dumbo  (Clarias  gariepinus)  di  Kolam  Budidaya Desa Mangkubumen Boyolali”. Biodiversitas 8(1): 34-38
Arikan,  H.  & K.  Cicek.  2014. “ Haematology  of  Amphibians  and  Reptiles:  a review ” . North-Western Journal of Zoology, 10(1): 190-209.
Campbell,  T.W.  2004. Hematology  of  Lower  Vertebrates. American  College  of Veterinary  Pathologists  &  American  Society  for  Veterinary  Clinical Pathology, Middleton WI, USA. Hal 1214.
Clark,  P.,  Boardmann,  W., S.Raidal. 2009. Atlas  of  Clinical  Avian Hematology. USA: Willey-Blackwel. Hal: 62-64.
Davis,  A.K., D.L.Maney, J.C. Maerz. 2008. “ The  Use  of  Leukocyte  Profiles  to Measure  Stress  in  Vertebrates:  A  Review  for  Ecologists ” . Functional Ecology, 22(5):  760-772.
Ganong, W. F. 2005. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi ke-22. Jakarta: EGC.
Gul,  C.,  Tosunoglu,  M., D. Erdogan, D.Ozdamar. 2011. “ Change  in  The  Blood
Composition of Some Anurans ” . Acta Herpetologica, 6(2): 137-147.
Gunarso,  W.  1989. Mikroteknik.  Departemen  Pendidikan  dan  Kebudayaan Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Pusat Studi Ilmu Hayati. Bogor: IPB.
Hartman,  F.A.  & M.A. Lessler. 1964. “ Erythrocyte  Measurements  in  Fishes,
Amphibia, and Reptiles ” . Biological Bulletin, 126(1): 83-88.
Hollamby  S., J.A. Azikuru,  , J.G.Sikarskie, J.B. Kaneene, J.N. Stuht, S.C. Fitzgerald, W.W. Bowerman, K. Cameron, R. Gandolf, G.N. Hui Dranzoa  C,  Rumbeiha.  2004.  “Clinical  Pathology  and  Morphometrics of African Fish Eagles In Uganda”. Journal of Wildlife Diseases, 40(3): 523 – 532
Kayadoe, M., P. Sambodo, Y. Aronggean. 2008. Perbandingan Gambaran Darah Maleo  Gunung  (Aerpodius  arfakianus)  dan  Unggas  yang  Telah Didomestikasi. Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner.
Kori-Siakpere, O., J.E.G.Ake, E. Idoge. 2005. “ Haematological Characteristics of the  African  Snakehead Parachanna  obscura ” . African  Journal  of Biotechnology. 4:527-530.
Lander, M.W., J.T. Harvey, F.M.D. Gulland. “Hematology and Serum Chemistry Comparisons Between  Free-Ranging  and  Rehabilitated  Harbor  Seal (Phoca  vitulina Richardsi)  Pups”. Journal  of  Wildlife  Diseases, 39(3): 600 – 609
Salasia,  S.I.O., D. Sulanjari, A. Ratnawati. 2001. “ Studi  Hematologi  Ikan  Air Tawar ” . Jurnal Biologi, 2:710-723.
Santosa,  E.B.  Asuan,  M., N.Fitrianingsih, S. Mulyani  2003. “ Studi  Gambaran Darah Burung Elang yang Dipelihara di Kebun Binatang Gembira Loka Yogyakarta ” . Jurnal Sains Veteriner, 21(2):43-46.
Smith  C. and A. Jarecki. 2011.  Atlas  of  Comparative  Diagnostic  and Experimental Hematology. United Kingdom: Willey-Blackwell.
Willmer,  P., G. Stone  , I. Johnston. 2000. Environmental  Physiology  of  Animal. United Kingdom: Blackwell Publishing.
Zapata, A.G., A.Varas, M. Torroba. 1992. “ Seasonal Variation in Immune System of Lower Vertebrate ” . Immunol Today, 13:142-147.