Journal of Animal  Science International Standard of Serial Number 2502-1869
Peran  Imbuhan  Pakan  Komersial  (Maxi-Yeast®)  Pada  Ayam  Pedaging  yang  Ditantang Dengan Campylobacter Jejuni Terhadap Gambaran Darah
1 *Agustina Viktoria Tae, 2 Sitarina Widyarini, 3 Yanuartono, 4 Agnesia E. T. H. Wahyuni
1 Program Studi Peternakan, Fakultas Pertanian, Universitas Timor, Kefamenanu, Indonesia 2 Departemen Patologi Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia
3 Departemen Klinik, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia
4 Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia
* Corresponding  email: viktoriataeagustina@gmail.com
Article Info

## Abstrak
Article history: Received  14 March  2023 Received in revised form 22 March 2023 Accepted  27  March  2023 Pakan merupakan faktor utama pemeliharaan ayam pedaging yang menempati 75% dari biaya  produksi. Pakan dengan  kandungan  AGP  menyebabkan  resistensi  pada  manusia  dan  hewan.  Oleh  karena  itu,  dikembangkan alternatif non-antibiotik seperti probiotik yeast. Salah satu mikroorganisme patogen unggas yaitu C. jejuni yang merupakan  bakteri    patogen    zoonosis.    Tujuan    penelitian    mengetahui    efek    imbuhan  pakan  pada  ayam pedaging  dengan  parameter  gambaran  darah  setelah diinfeksi  C.  jejuni.  Penelitian ini  menggunakan 36  ekor ayam yang dipelihara pada umur satu hari (DOC) sampai  36  hari.  Ayam dikelompokkan menjadi 3 perlakuan berdasarkan pemberian pakan: kelompok pakan komersial (I), pakan komersial + AGP (II), dan pakan komersial + imbuhan pakan (maxi-yeast) (III). Selanjutnya,  dibagi  lagi menjadi 2 perlakuan yaitu (A) uji tantang dan (B) tanpa  uji  tantang.  Proses  pencampuran  pakan  dilakukan  secara  manual,  air  minum  diberikan  secara  ad libitum,  dan  vaksinasi  dilakukan  sesuai  program  lapangan. Uji tantang C. jejuni dilakukan pada hari ke 22 (1x109  CFU/mL),  dan  pengambilan darah  dilakukan  pada hari  21  dan  35.  Hasil  gambaran  darah  antara kelompok  tidak  memiliki  perbedaan  yang  signifikan  (P>0,05). Disimpulkan bahwa gambaran darah secara keseluruhan (sebelum dan sesudah uji tantang) memberikan hasil  yang  berbeda  namun tidak  signifikan setelah diberikan pakan berdasarkan kelompok.
DOI: https://doi.org/10.32938/ja.v8i2.4096
Keywords: Ayam Pedaging AGP Maxi-yeast Campylobacter jejuni
Gambaran Darah

## 1. PENDAHULUAN
Faktor penting  yang perlu diperhatikan  dalam  pemeliharaan  ternak  ayam  adalah  faktor pakan,  manajemen,  dan bibit.  Pakan  merupakan  faktor  utama  pemeliharaan  ayam  pedaging  yang  menempati  75%  dari  biaya  produksi  dan memiliki  peran  penting  dalam  sistem  perekonomian.  Oleh  karena  biaya  pakan  yang  tinggi,  peternak  biasanya menggunakan antibiotic  growth  promotor (AGP)  untuk  meningkatan  pertumbuhan  ayam.  Namun,  penggunaan  AGP memiliki resiko bagi kesehatan ayam dan resistensi pada manusia ataupun hewan. Oleh karena itu, pemerintah secara resmi  telah  melarang  penggunaan  AGP  untuk  imbuhan  pakan  ternak  yang  produknya  dikonsumsi  manusia  melalui Peraturan  Menteri  Pertanian  Republik  Indonesia  Nomor  14/PERMENTAN/PK.350/5/2017  tentang  klasifikasi  obat hewan ( Kementerian Pertanian, 2017 ). Peraturan tersebut bertujuan untuk mencegah terjadinya residu obat pada ternak yang  dapat  menyebabkan  gangguan  kesehatan  manusia  jika  mengkonsumsi  suatu  produk  ternak  serta  mencegah timbulnya resistensi mikroba patogen.
Dampak negatif dari penggunaan AGP menyebabkan para ahli harus melakukan berbagai cara  untuk meningkatkan produktivitas ternak; khususnya unggas, dengan mencari pengganti yang difokuskan pada bahan-bahan alami, seperti probiotik, prebiotik, sinbiotik, phytobiotik, herbal, dan yeast. Probiotik yeast terdiri dari Saccharomyces cerevisiae  (S. cerevisiae)  var.  boulardii yang  memberikan  efek  menguntungkan  dalam  menghambat  berbagai  patogen  pencernaan ( James  &  Wang,  2019 ).  Mikroorganisme  patogen  yang  sering  menyerang  unggas  adalah Escherichia  coli , Clostridium perfringens , Salmonella spp , dan Campylobacter. Campylobacter merupakan bakteri patogen zoonosis yang menyebabkan Campylobacteriosis pada manusia melalui unggas dan produk unggas ( Kramer et al., 2000 ). Campylobacter pada unggas (ayam dan kalkun) menunjukkan gejala sub klinis, yang ditandai dengan menurunnya pertambahan berat badan secara drastis yang dapat menghambat tercapainya berat badan optimal, pial bersisik ( scaly combs ), lemah, menyendiri, dan diare ( Ebrahimi et al., 2016 ). Campylobacter juga menyebabkan penyerapan nutrisi di dalam usus halus ayam menjadi terhambat karena bakteri ini menyerang sistem imun dan tinggal di dalam usus halus ayam  ( Engberg et  al., 2000 ). Campylobacter dalam  konsentrasi  yang  tinggi  dapat  menimbulkan  penyakit  pada  ayam. Ayam yang terinfeksi dapat diisolasi kulturnya melalui swab kloaka maupun feses dan pemeriksaan darah ( Sahin et al., 2003 ).
Darah  merupakan  salah  satu  faktor  penting  yang  menentukan  status  fisiologis  tubuh  hewan  ataupun  manusia. Perubahan  fisiologis  tubuh  dapat  mengakibatkan  gambaran  darah  juga  berubah.  Perubahan  fisiologis  ini  dapat disebabkan secara internal dan eksternal. Perubahan secara internal dapat  berupa umur, status gizi, kesehatan, stres, siklus estrus, dan suhu tubuh. Sementara itu, perubahan secara eksternal dapat disebabkan  oleh  infeksi  dan perubahan suhu lingkungan ( Mugi, 2003 ). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek imbuhan pakan ( maxi- yeast ) pada ayam pedaging, dilihat dari gambaran darah rutin setelah diinfeksi C. jejuni.

## 2. Materi dan  Metode
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah DOC 36 ekor broiler strain Cobb sedangkan isolat C. jejuni yang digunakan untuk uji tantang berasal dari Balai Besar Penelitian Veteriner (BALITVET) dengan kode 2910.

## 2.1 Desain  Penelitian
Penelitian ini menggunakan broiler strain Cobb sebanyak 36 ekor yang dipelihara pada umur satu hari (DOC) hingga umur tiga puluh enam hari. Ayam dikelompokkan menjadi tiga kelompok berdasarkan pemberian pakan yaitu, kelompok pakan komersial (I), kelompok pakan komersial + AGP ( Enramycin ) (II), dan kelompok pakan komersial + imbuhan pakan
(maxi-yeast) (III) . Pemberian pakan dilakukan pada ayam umur satu hari sampai dengan  umur tiga puluh enam hari sesuai kelompok pakan selama masa pemeliharaan. Dosis pemberian AGP yang dicampurkan dengan pakan komersial sebanyak 250 mg/ton atau 0,25 gr/kg dan imbuhan pakan maxi-yeast sebanyak 2 kg/ton atau 2 gr/kg. Pencampuran pakan dilakukan secara manual dan air minum diberikan secara ad libitum . Umur satu sampai dua minggu ( starter ), ayam diletakkan pada kandang brooder dengan alas sekam. Selanjutnya, ayam dipindahkan ke kandang baterai untuk masing-masing kelompok dibagi menjadi dua perlakuan, yaitu tidak diuji tantang / kontrol (kelompok A) dan diuji tantang C. jejuni (kelompok B) sehingga dihasilkan 6 kelompok; masing–masing kelompok terdapat enam ekor ayam.
Vaksinasi  dilakukan  sesuai  program  lapangan.  Pengukuran  temperatur  ruang  dan  kelembaban  dilakukan  tiap kandang  untuk  menjaga  lingkungan  kandang  tetap  optimal  selama  masa  pemeliharan.  Pengambilan  darah  dilakukan pada hari ke  21 dan 35 untuk mengetahui  gambaran darah normal  sebelum dan sesudah dilakukan uji tantang C. jejuni. Uji tantang dilakukan pada hari ke 22 dan diamati perubahannya selama seminggu. Dosis pemberian pada ayam yang ditantang sebanyak 1 ml per ayam dengan konsentrasi 1 x 10 9 CFU/mL.

## 2.2 Uji  Tantang
Uji tantang C. jejuni dilakukan pada hari  ke  22 pemeliharaan  secara oral  sebanyak 1  mL  dengan konsentrasi 1 x 10 9 CFU/mL dan dilakukan selama satu hari. Pengamatan ayam dilakukan setelah uji tantang selama 7  –  14 hari sampai muncul gejala klinis.

## 2.3 Analisis  Darah
Pengambilan  darah  dilakukan  pada  hari  ke  21  dan  35  untuk  mengetahui  gambaran  darah  normal  sebelum  dan sesudah dilakukan uji tantang. Darah diambil melalui pembuluh vena branchialis di sayap dengan menggunakan spuit ukuran 3 cc dan ditampung dalam tabung yang sudah mengandung antikoagulan EDTA. Selanjutnya, darah dianalisis dan parameter yang dilihat pada penelitian ini meliputi total eritrosit, packed cell volume (PCV), total protein plasma (TPP), hemoglobin (Hb), dan leukosit (heterofil, eosinofil, limfosit, monosit, basofil).

## 2.4 Analisis Data
Data gambaran darah dianalisis secara statistik dengan metode Analysis of Variances (ANOVA).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemeriksaan gambaran darah ini bertujuan untuk melihat perbandingan gambaran darah antar kelompok pakan basal (A), basal + AGP (B) serta basal + maxi- yeast (C) hari ke 21 dan 35, juga perbandingan antar kelompok perlakuan (kontrol dan uji tantang dengan C. jejuni ) yang diberikan pakan yang sama.

## 3.1 Sel Darah Merah (Eritrosit)
Berdasarkan data pada Tabel 1 dan Tabel 2 , rata- rata jumlah eritrosit kelompok pakan A, B, dan C hari ke 21 dan 35 kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan sebelum dan sesudah uji tantang, secara statistik tidak terdapat perbedaan yang signifikan (P> 0,05). Hasil ini menunjukan bahwa pakan A, B, dan C tidak memberikan pengaruh nyata terhadap peningkatan atau penurunan jumlah eritrosit.
Tabel 1. Rata – rata gambaran darah kelompok kontrol dan perlakuan hari ke 21 sebelum dilakukan uji tantang.
Kode Pakan Kelompok Eritrosit (jt/µl) Hb (g/dl) TPP (g/dl) PCV (%) Fibrinogen (g/dl) Leukosit (sel/µl) Komersial  (A) Kontrol 2,606 8,333 4,8 28,333  0,533 13.383,33 Uji Tantang 2,23 6,766 3,066 24 0,4 13.500 Komersial + AGP (B) Kontrol 2,053 9,666 4,2 28,666  0,466 12.466,67 Uji Tantang 2,52 7,733 3,066 27 0,533 11.850 Komersial  +  Maxi yeast (C) Kontrol 2,306 12,033 4,133 28,333  0,533 11.333,33 Uji Tantang 2,34 11,333 3,5 28 0,6 11.233,33
Keterangan: Hb = Hemoglobin, TPP = Total Protein Plasma, PCV = Packed Cell Volume
Rata - rata jumlah eritrosit kelompok pakan A, B, dan C pada ayam pedaging berumur 21 hari sebelum dilakukan uji tantang dengan C.  jejuni memiliki nilai kisaran 2,05 - 2, 60 jt/µl. Nilai ini masih berada dalam kisaran normal, sesuai dengan hasil penelitian terdahulu oleh Habibi et al., (2019) yang menyatakan bahwa bahwa kadar normal eritrosit ayam broiler berkisar antara 2,26-3,32 jt/µl. Hasil ini menunjukkan bahwa kadar oksigen dalam darah dan kebutuhan eritrosit tercukupi  untuk  menjalankan  fungsinya.  Eritrosit  berfungsi  sebagai  pengangkut  hemoglobin  yang  membawa  oksigen dari paru-paru ke jaringan serta sisa - sisa hasil metabolisme dan nutrien dari saluran pencernaan ( Hartutik, 2013 ). Berdasarkan  hasil  pemeriksaan  eritrosit  hari  ke  35  pada  kelompok  kontrol  dan  perlakuan,  setelah  diuji  tantang dengan C.  jejuni antara kedua kelompok tersebut terdapat perbedaan yang nyata walaupun secara statistik tidak ada perbedaan yang signifikan (P> 0,05); dimana pada kelompok kontrol dengan pakan A, nilai eritrosit sebesar 2,34 jt/µl sedangkan pakan A dengan uji tantang sebesar 2,05 jt/µl. Sama  seperti hasil  pada hari 21, nilai rata- rata eritrosit masih dalam selang normal; sesuai pendapat Habibi et al., (2019) . Penelitian lain oleh Saputro et al., (2014) , menyatakan
bahwa  kadar  normal  sel  darah  merah  ayam  broiler  berkisar  antara  2,5-3,5  jt/µl.  Tinggi  rendahnya  jumlah  eritrosit dipengaruhi oleh aktivitas individu, nutrisi, ketinggian tempat, dan suhu lingkungan ( Guyton dan Hall, 2006 ). Penyebab lain jumlah eritrosit di bawah normal karena ayam kekurangan asupan gizi sehingga pembentukan eritrosit mengalami penurunan.  Nutrisi  yang  dibutuhkan  dalam  pembentukan  eritrosit  yaitu  protein  dan  vitamin.  Kurangnya  asupan  gizi berupa  protein  disebabkan  karena  rendahnya  kandungan  protein  dalam  pakan  penelitian.  Protein  berperan  sebagai komponen  eritrosit  sedangkan  vitamin  berperan  dalam  pematangan  eritrosit.  Rendahnya  konsumsi  protein  pakan cenderung mengakibatkan sintesis eritrosit menjadi rendah ( Shibata et al., 2007 ).
Tabel 2. Rata – rata gambaran darah eritrosit kelompok kontrol dan perlakuan hari ke 35 setelah dilakukan uji tantang dengan C. Jejuni. Kode pakan Kelompok Eritrosit (jt/µl) Hb (g/dl) TPP (g/dl) PCV (%) Fibrinogen (g/dl) Eritrosit (sel/µl) Komersial  (A) Kontrol 2,34 11,3 4,033 27 0,2 15.033,33 Uji Tantang 2,05 10,9 4,8 26,5 0,45 14.000 Komersial + AGP (B) Kontrol 2,39 9,2 4,1 27,33 0,23 15.066,67 Uji Tantang 2,20 8,5 4,8 24,33 0,26 14.666,67 Komersial  +  Maxi yeast (C) Kontrol 2,35 11,13 4,366 25 0,5 15.200 Uji Tantang 2,51 9,6 5,55 26 0,3 15.566,67 Keterangan : Hb = Hemoglobin, TPP = Total Protein Plasma, PCV  = Packed Cell

## 3.2 Hemoglobin  (Hb)
Berdasarkan hasil pemeriksaan rata - rata Hb kelompok pakan A, B, C hari ke 21 dan hari ke 35, kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan (sebelum uji tantang) tidak terdapat perbedaan signifikan (P> 0,05) antar  kelompok.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  pakan  A,  B,  dan  C  tidak  memberikan  pengaruh  nyata  terhadap peningkatan atau penurunan jumlah Hb dalam darah ayam pedaging.
Rata - rata jumlah Hb kelompok pakan A, B, dan C hari ke 21 memiliki nilai kisaran 6,76 - 12,03 g/dl sedangkan rata - rata hari ke 35 memiliki kisaran 8,5 - 11,3 g/dl. Berdasarkan penelitian terdahulu oleh Adamu et al., (2013) , rata - rata Hb ayam yaitu 7,0 - 13,0 g/dl. Hal ini berarti rata - rata kelompok pakan A hari ke 21 uji tantang yaitu 6,76 g/dl masih berada dibawah normal tetapi penelitian lain oleh Swenson (1997) menyatakan rata - rata Hb normal yaitu 6,5 - 9,0 g/dl. Hal ini berarti nilai Hb pada penelitian ini masih berada dalam kisaran normal tetapi secara umum rata - rata Hb pakan Maxi - yeast ® memiliki Hb yang tinggi dibandingkan dengan pakan basal dan AGP karena probiotik atau sinbiotik memiliki gula  yang  terfermentasi  sehingga  absorpsi  makanan  di  usus  halus  menjadi  lebih  baik  dan  vitamin  B - komplek yang dihasilkan oleh bakteri  baik pada probiotik yang membantu proses pembentukan darah ( Kander, 2004 ).  Hemoglobin merupakan  molekul  protein  pada  sel  darah merah.  Hb  berfungsi  sebagai  pengangkut  oksigen  (O 2 )  bagi  jaringan  dan membawa  karbondioksida  (CO 2 )  dari  jaringan  ke  paru-paru  ( Adriani  &  Wirjatmadi,  2012 ).  Kandungan oksigen yang rendah  dalam  darah  menyebabkan  peningkatan  produksi  Hb  dan  eritrosit  ( Swenson,  1997 ).  Berkurangnya  jumlah oksigen  dalam jaringan  juga  menyebabkan  rendahnya  kadar  hemoglobin  karena  fungsi  utama  hemoglobin membawa oksigen  dari  paru-paru  untuk  dibawa  ke  jaringan  ( Guyton  dan  Hall,  2006 ).  Rendahnya  kadar  hemoglobin akhirnya mengakibatkan  pembentukan  eritrosit  pun  terhambat  ( Virden et  al., 2007 ).  Peningkatan  dan  penurunan  Hb dipengaruhi oleh kadar oksigen dan jumlah eritrosit sehingga apabila jumlah eritrosit rendah maka kadar Hb rendah dan sebaliknya.  Jika oksigen dalam  darah rendah,  tubuh akan terangsang  untuk meningkatkan produksi Hb dan eritrosit ( Schalm, 2010 ).

## 3.3 Total Protein Plasma (TPP)
Hasil  uji  rata-rata  TPP  kelompok  pakan  A,  B,  C  hari  ke  21,  pada  kelompok  kontrol  yang  dibandingkan  dengan kelompok perlakuan (sebelum uji tantang) terdapat perbedaan rata - rata TPP secara signifikan (P< 0,05). Selanjutnya pada hari ke 35, kelompok pakan A, B, C pada kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan setelah uji tantang C. jejuni tidak terdapat perbedaan rata- rata TPP secara signifikan (P> 0,05). Rata - rata TPP hari ke 21 sebesar 3,06 - 4,8, kedua kelompok perlakuan ini memiliki perbedaan meskipun keduanya belum dilakukan uji tantang dan mengkonsumsi pakan yang sama. Kelompok perlakuan memiliki rata - rata yang rendah yaitu 3,06 - 3,5 g/dl, apabila dibandingkan dengan penelitian terdahulu oleh Widhyari et al., (2011) yaitu 4,5- 4,9 g/dl. Menurut Kaneko et al ., (1997) , nilai TPP dipengaruhi oleh umur, hormonal, nutrisi, stres, dan kehilangan cairan. Rata - rata TPP hari ke 35 setelah uji tantang memiliki kisaran 4,033 - 5,55 g/dl. Berdasarkan hasil tersebut, pakan C memiliki TPP yang tinggi yaitu 5,55g/dl. Hal ini karena pakan C mengandung Saccharomyces cerevisiae yang dapat meningkatkan konversi ransum sehingga intake protein meningkat diikuti dengan peningkatan total protein plasma.

## 3.4 Packed Cell Volume (PCV)
Hasil uji rata-rata PCV pada kelompok pakan A, B, C hari ke 21 dan 35 kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan sebelum dan sesudah uji tantang secara statistik tidak terdapat perbedaan yang signifikan(P> 0,05). Hal ini berarti penggunaan pakan A,B dan C tidak memberikan pengaruh nyata terhadap peningkatan  dan  penurunan presentase PCV.
Nilai  rata - rata  PCV  hari  ke  21  pada  penelitian  ini  sebesar  24 - 28,66  %  dan  pada  hari  ke  35  dengan  kisaran  24,33 - 27,33%. Hasil ini menunjukkan nilai PCV berada dalam kisaran normal, sesuai dengan yang dilaporkan oleh Parwati
et  al. (2017) yaitu  nilai  normal  PCV  ayam  antara  24  –  43  %.  Tingginya  dan  rendahnya  PCV  berhubungan  dengan kebutuhan oksigen, dimana jumlah oksigen yang diperlukan di dalam tubuh berhubungan dengan produk metabolisme. Pada hewan, normal PCV sebanding dengan jumlah eritrosit dan kadar hemoglobin ( Setyaningrum, 2010 ). Nilai PCV juga tergantung  pada  ukuran  eritrosit  serta  volume  darah.  Peningkatan  nilai  PCV  mengindikasikan  adanya  dehidrasi, pendarahan atau edema akibat dari adanya pengeluaran cairan dari pembuluh darah sedangkan penurunan nilai PCV dapat dijumpai pada kondisi anemia atau akibat kekurangan sel darah ( Wientarsih, 2013 ).

## 3.5 Leukosit
Hasil pemeriksaan rata - rata jumlah leukosit kelompok pakan A, B, dan C secara statistik menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan (P> 0,05) pada hari ke 21 dan 35 kelompok kontrol dan perlakuan. Hasil ini menunjukkan bahwa pakan A, B, dan C tidak berpengaruh nyata terhadap peningkatan dan penurunan jumlah leukosit.
Rata - rata  leukosit  pada  kelompok  kontrol  dan  perlakuan  hari  ke  21  berada  pada  kisaran  11.233,33 - 13.500  sel/µl sedangkan  pada hari  ke  35, berada pada kisaran  14.000 – 15.566,67  sel/µl. Hasil  tersebut menunjukkan  bahwa rata - rata jumlah leukosit pada hari ke 21  berada  di  bawah  batas  normal  sesuai  hasil  penelitian terdahulu  oleh Purnomo et al ., (2015) yaitu 16,03-28,13 ribu /ml. Pada hari ke 35, kelompok perlakuan memiliki  rata - rata yang hampir mendekati nilai normal. Penelitian  lain oleh Mangkoewidjojo dan  Smith (1988) , jumlah leukosit normal pada ayam pedaging adalah  16,0 - 40,0 x 10 3 /mm 3 . Rata - rata leukosit pada ayam penelitian yang  di  bawah  standar menandakan  bahwa  ayam tersebut tidak terinfeksi  atau  memiliki  gangguan  akibat  bakteri  patogen  sehingga  dapat  diasumsikan  bahwa  pakan  A,  B, dan C mampu menjaga tingkat kestabilan kesehatan ayam broiler.
Leukosit  merupakan  sel  darah  putih  yang  berfungsi  dalam  sistem  pertahanan  tubuh  terhadap  infeksi  ( Sutedjo, 2006 ). Menurut Moyes dan Schute (2008) dan Soeharsono et  al ., (2010) , kesehatan fisik ternak dapat diukur melalui jumlah  leukosit  yang  dihasilkan  dimana  peningkatan  jumlah  leukosit  menandakan  adanya  peningkatan  kemampuan pertahanan  tubuh.  Penurunan  jumlah  leukosit  juga  dapat  diasumsikan  bahwa  tidak  terdapat  infeksi  atau  gangguan bakteri patogen yang menyerang tubuh. Fungsi dari leukosit yaitu menjaga tubuh dari patogen dengan cara fagositosis dan menghasilkan antibodi ( Hartoyo et al., 2015 ).
Tabel 3. Rata - rata jumlah heterofil, eosinofil, limfosit, monosit, basofil ayam kelompok kontrol dan pada perlakuan hari ke 21. Kode Pakan Kelompok Heterofil (%) Eosinifil (%) Limfosit (%) Monosit (%) Basofil (%) Komersial(A) Kontrol 16 3,3333 56 3 0 Uji Tantang 16,3333 5,3333 54,6666 3,5 1 Komersial + AGP (B) Kontrol 15,6667 5 43 4,5 1 Uji Tantang 15 5 41,6666 3 1 Komersial + Maxi yeast (C) Kontrol 17 5,33333 43,6666 4 1 Uji Tantang 18 5,66666 57,6666 3,5 2 Tabel 4. Rata - rata jumlah heterofil, eosinofil, limfosit, monosit, basofil ayam kelompok kontrol dan perlakuan hari ke
35. Kode pakan Kelompok Heterofil (%) Eosinifil (%) Limfosit (%) Monosit (%) Basofil (%) Komersial  (A) Kontrol 23,33333 4,333333 59,66667 3 1,33333 Uji Tantang 30 5,333333 45 4,5 2 Komersial + AGP (B) Kontrol 21,33333 7 48 3 1,333333 Uji Tantang 22,66666 5,333333 43,33333 5 1,5 Komersial + Maxi yeast (C) Kontrol 24,6666 6,333333 56 5 0,5 Uji Tantang 20 6,666667 50 4,5 1
Faktor-faktor yang menentukan jumlah leukosit antara lain aktivitas biologis, kondisi lingkungan, umur, dan pakan. Hal ini sesuai dengan pendapat Guyton dan Hall (1997) yang menyatakan bahwa total leukosit yang menggambarkan tingkat  kesehatan  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  baik  internal  yang  meliputi  jenis  kelamin,  umur,  penyakit  dan hormon maupun faktor eksternal seperti keadaan lingkungan, aktivitas ternak, stres, dan pakan yang diberikan. Leukosit merupakan  sel  yang  berperan  dalam  sistem  pertahanan  tubuh  yang  sangat  tanggap  terhadap  agen  infeksi  penyakit. Leukosit  berfungsi  melindungi  tubuh  terhadap  berbagai  penyakit  dengan  cara  fagosit  dan  menghasilkan  antibodi ( Junguera, 1977 ).
Leukosit  dalam  tubuh  setiap  individu  memiliki  jumlah  yang  berbeda  dan  berubah  sesuai  dengan  kondisi  tubuh. Menurut Swenson (1997) , leukosit terbagi dalam dua kelompok utama, yaitu leukosit yang bersifat granulosit (eosinofil, heterofil, dan basofil) dan leukosit yang bersifat agranulosit (monosit dan limfosit).

## 3.5.1 Heterofil
Berdasarkan data pada Tabel 3 dan Tabel 4 , rata - rata jumlah heterofil kelompok pakan A, B, dan  C hari  ke  21 dan 35 kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan sebelum dan sesudah uji tantang secara statistik tidak terdapat perbedaan yang signifikan (P> 0,05). Hasil ini menunjukan bahwa pakan A, B, dan C tidak memberikan pengaruh nyata terhadap peningkatan atau penurunan jumlah heterofil.
Rata - rata jumlah heterofil kelompok pakan A, B, dan C pada ayam pedaging berumur 21 hari sebelum dilakukan uji tantang dengan C. jejuni memiliki nilai kisaran 15 - 21,66 % sedangkan pada hari ke 35 memiliki nilai 21 - 30 %. Nilai heterofil hasil pemeriksaan tersebut masih dalam kisaran normal berdasarkan penelitian terdahulu oleh Thongsong et al., (2008) yaitu 15 - 40%. Walaupun kedua hasil tersebut masih berada pada kisaran normal, nilai heterofil pakan A, B, dan C hari ke 35 sesudah uji tantang C. jejuni memiliki nilai lebih tinggi dari kelompok kontrol. Hal ini karena apabila ada infeksi bakteri maka nilai heterofil akan tinggi karena heterofil berperan sebagai sel leukosit yang memiliki respon pertama terhadap adanya benda asing (bakteri) yang masuk dengan menggunakan enzim lisosom yang dapat mencerna dinding sel bakteri, enzim proteolitik, ribonuklease, dan fosfolipase. Enzim-enzim ini bekerja secara bersama dan dapat membunuh bakteri. Penurunan heterofil dapat terjadi apabila adanya kenaikan jumlah limfosit dan sebaliknya apabila terjadi  peningkatan  heterofil  karena  terjadi  penurunan  jumlah  limfosit  yang  beredar  di  dalam  darah  ( Dharmawan,  2002 ). Proses pertahanan heterofil ini merupakan pertahanan tubuh yang bersifat nonspesifik ( Tizard, 1988 ).

## 3.5.2 Eosinofil
Hasil  pemeriksaan  rata - rata  jumlah  eosinofil  pakan  A,  B,  C  pada  hari  ke  21  dan  35  secara  statistik  tidak menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan (P>0,05). Rata - rata nilai eosinofil pakan A,B, dan C pada hari ke 21 sebesar 3,33 - 5,6 % sedangkan pada hari ke 35 sebesar 4,3 – 7 %. Hal ini berarti jumlah eosinofil masih berada pada kisaran normal berdasarkan penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Arfah (2015) yang menyatakan nilai eosinofil normal pada ayam sebesar 2 - 5%
Fungsi eosinofil sebagai toksifikasi terhadap protein asing yang masuk ke dalam tubuh yang dihasilkan oleh bakteri dan parasit. Eosinofil dapat pula mencegah penyebaran proses peradangan lokal dengan cara mendetoksifikasi toksin yang dapat menyebabkan radang yang dilepaskan oleh sel-sel mast, sel basofil dan mungkin juga oleh jaringan yang rusak ( Guyton dan Hall, 2006 ). Menurut Dharmawan (2002) , eosinofil mengandung histaminase yang dapat mengaktifkan dan melepaskan serotonin dan sel tertentu, juga dapat melepaskan zink yang menghalangi agregasi trombosit dan  migrasi makrofag.

## 3.5.3 Limfosit
Hasil uji rata-rata limfosit kelompok pakan A, B, C hari ke 21 dan 35, pada kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan sebelum dan sesudah uji tantang secara statistik tidak terdapat perbedaan yang signifikan (P>0,05). Rata - rata nilai limfosit pada hari ke 21 sebesar 41,6 - 57,6 % sedangkan pada hari ke 35 sebesar 43 - 59 %. Hasil ini menujukkan bahwa nilai limfosit masih berada dalam kisaran normal, sesuai dengan penelitian terdahulu oleh Harahap (2014) yaitu 42 – 66%. Fungsi utama dari limfosit yaitu sebagai sistem kekebalan tubuh. Limfosit memproduksi antibodi sebagai respons terhadap antigen yang dibawa oleh makrofag. Limfosit terdiri atas limfosit T  dan limfosit B; limfosit T memiliki fungsi dalam imunitas seluler dan limfosit B berfungsi untuk imun respons humoral ( Ganong, 1995 ). Sel limfosit B terdiri atas sel B plasma yang berfungsi untuk menghasilkan antibodi  secara spesifik juga sangat cepat. Sel B memori berfungsi mengingat antigen secara spesifik. Sel B bekerja cepat apabila terjadi suatu infeksi ( Guyton dan Hall, 2006 ).

## 3.5.4 Monosit
Berdasarkan data di atas, rata-rata monosit kelompok pakan A, B, dan C hari ke 21 dan 35 kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan sebelum dan sesudah uji tantang secara statistik tidak terdapat perbedaan yang signifikan (P> 0,05). Hasil ini menunjukan bahwa pakan A, B, dan C tidak memberikan pengaruh nyata terhadap peningkatan atau penurunan jumlah monosit.
Berdasarkan hasil pemeriksaan, rata - rata jumlah monosit hari ke 21 dan 35 memiliki nilai yang masih berada dalam  kisaran  normal  yaitu  3 - 5  %.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  dari Sismanto  (2007) yang  menyatakan  jumlah monosit normal pada ayam sebesar 3 - 5 %. Penelitian lain menyatakan jumlah monosit normal 3 - 9 % dari seluruh jumlah total leukosit yang beredar dalam aliran darah ( Dellman dan Brown, 1992 ).
Monosit merupakan garis pertahanan kedua terhadap infeksi. Fungsi utama monosit sebagai makrofag  benda asing yang masuk  dalam  tubuh,  sebagai  sel  pertahanan  tubuh,  dan  juga  reaksi  homeostatis.  Monosit  memfagositosis  mikroorganisme tertentu  (misalnya  mikobakteri)  dan  jaringan  yang  rusak  karena  inflamasi  ( Samuel, 1987 ).

## 3.5.5 Basofil
Berdasarkan data di atas, rata-rata basofil kelompok pakan A, B, dan C hari ke 21 dan 35 kelompok kontrol yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan sebelum dan sesudah uji tantang secara statistik tidak terdapat perbedaan yang signifikan (P> 0,05). Hasil ini menunjukan bahwa pakan A, B, dan C tidak memberikan pengaruh nyata terhadap peningkatan atau penurunan jumlah basofil.
Rata - rata jumlah basofil pada pakan A, B, dan C pada hari ke 21 dan 35 berkisar antara 0 - 2 %. Nilai ini masih berada  dalam  kisaran  normal.  Hal  ini  sesuai  penelitian  sebelumnya Dharmawan  (2002) yang  menyatakan  basofil merupakan leukosit granulosit yang memiliki jumlah paling sedikit sekitar 0,5 – 1,5 %  dari seluruh leukosit dalam aliran darah. Basofil merupakan prekursor bagi sel  mast, yang melepaskan histamin dalam reaksi peradangan jaringan dan dalam proses reaksi alergik ( Frandson, 1992 ). Menurut Tizard (1988) , basofil merupakan sel pertahanan yang paling lemah reaksinya.  Fungsi  utama  basofil  ialah  membangkitkan  reaksi  hipersensifitas  dengan  mengsekresikan  mediator  yang bersifat vasoaktif.

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian di atas, rata - rata gambaran darah ayam pedaging secara umum berada dalam kisaran normal. Rata - rata gambaran darah ayam setelah uji tantang ada perbedaan antara pakan Maxi - yeast ® dan basal, dimana pakan basal cendrung memiliki gambaran darah yang rendah atau tinggi sedangkan pakan Maxi - yeast ®
memiliki gambaran darah yang tinggi tetapi  masih  berada dalam kisaran normal. Perbedaan  gambaran darah secara keseluruhan sebelum dan sesudah uji tantang antar pakan berbeda namun tidak signifikan.

## Ucapan  Terima  Kasih
Peneliti mengucapkan terimakasih kepada Universitas Gadjah Mada sebagai pemberi dana penelitian, kepada rekan tim penelitian yang telah membantu melancarkan penelitian ini serta kepada Ketua Depertemen Mikrobiologi FKH UGM yang telah mengizinkan peneliti melakukan pengujian sampel di Laboratorium Mikrobiologi UGM.

## DAFTAR PUSTAKA
Adamu, M., Boonkaewwan, C., Gongruttananun, N., & Vongpakorn, M. 2013. Hematological, Biochemical and Histopathological Changes Caused by Coccidiosis in Chickens. Kasetsart Journal - Natural Science. 47(2): 238-246. Adriani, M., dan Wirjatmadi, B. 2012. Peranan Gizi dalam Siklus Kehidupan. Kencana. Jakarta.
Arfah, N. H. 2015. Pengaruh pemberian tepung kunyit pada ransum terhadap jumlah eritrosit, hemoglobin,  PCV, dan leukosit ayam broiler. [Skripsi]. Universitas Hasannudin Makasar. Makasar.
Dellmann, H., and E. M. Brown. 1992. Buku Teks Histologi Veteriner. R Hartono (Penerjemah), Edisi ke-3. Jakarta:
Universitas Indonesia.
Dharmawan, N. S. 2002. Pengantar Patologi Kllinik Veteriner. Cetakan II. Denpasar: Pelawa Sari .
Ebrahimi, H., Rahimi, S., Khaki, P., Grimes, J. L., & Kathariou, S. 2016. The effects of probiotics, organic acid, and a medicinal plant on the immune system and gastrointestinal microflora in broilers challenged with Campylobacter jejuni . Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences. 40(3): 329-336.
Engberg,  R.  M.,  Hedemann,  M.  S.,  Laser,  T.  D.,  &  Jensen,  B.  B.  2000.  Effect  of  Zinc  Bacitracin  and  Salinomycin  on Intestinal Mikrofola and Performance of Broilers. Poultry Science . 79(9): 1311-1319. Frandson, R. D. 1992. Anatomi dan Fisiologi Ternak. Yogyakarta: UGM Press. Ganong, W. F. 1995. Medical Physiology. Edisi 17. EGC. Jakarta.
Guyton,  A.  C.,  dan  J.  E.  Hall.  1997.  Sel  Darah  Merah,  Anemia,  dan  Poloisitemia  di  Dalam  Fisiologi  Kedokteran.
Terjemahan: dr. Irawati, dr. L. M. A. Ken Arita Tengadi dan dr. Alex Santoso. Penerbit Buku Kedokteran, E. G. C. Jakarta.
Guyton, A. C., and Hall, J. E. 2006. Textbook of Medical Physiology. 11th Ed. Elsevier Inc, Philadelphia. Habibi, B. Z., Wahyuni, H.  I., dan  Widiastuti  E. 2019. Profil  Darah Merah dan Bobot  Ayam Broiler  Dipelihara  Pada Ketinggian Tempat yang Berbeda. Journal Animal Research Applied Sciences. 1(1): 1-5.
Harahap, R.  A. 2014. Profil Darah Ayam Broiler Periode Finisher yang  Diberi Pakan Plus Formula Herbal. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Hartoyo, B., S. Suhermiyati, N. Iriyanti, dan E. Susanti. 2015. Performan dan profil hematologis darah ayam broiler dengan suplementasi  herbal  (fermenherfit). Prosiding  Seminar  Nasional  Teknologi  dan  Agribisnis  Peternakan  (Seri  III): Pengembangan   peternakan   berbasis   sumber   daya   lokal   untuk   menghadapi   Masyarakat  Ekonomi   ASEAN  (MEA) . Fakultas Peternakan Universitas Jendral Soedirman. Purwokerto. Hartutik, S. 2013. Pengaruh ekstrak bawang putih ( Allium sativum Linn ) dan pakan yang tercemar Aflatoksin B1 terhadap gambaran darah dan histopatologi hati, bursa fabrisius dan paru-paru ayam broiler. [Tesis]. Sain Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta.
James, A., & Wang, Y. 2019. Characterization, Health Benefits and Applications of Fruit and Vegetable Probiotics. CyTA: Journal of Food . 17(1): 770-780. Junguera, L. C. 1977. Basi Chistology. McGraw-Hill, New York.
Kander, M. 2004. Effect of  Bifidobacterium sp. on  the  health state  of  piglets,  determined on the  basis  of  hematological  and biochemical indices. EJPAU . 7(2).
Kaneko, J. J., Harvey, J. W., Bruss, M. L. 1997. Clinical Biochemistry of Domestic Animals. 5th edition. Academic Press Inc, New York.
Kramer, J. M., Frost, J. A., Bolton, F. J., & Wareing, D. R. 2000. Campylobacter contamination of raw meat and poultry at retail sale: Identification of multiple types and comparison with isolates from human infection. Journal of Food Protection. 63(12): 1654-1659.
Mangkoewidjojo, S., &  J. B. Smith. 1988. Pemeliharaan,  Pembiakan, dan Penggunaan Hewan Percobaan di  Daerah Tropis. UI Press, Jakarta.
Moyes, C. D., and P. M. Schulte. 2008. Principles of Animal Physiology. Second Edition. Perarson International Edition. New York.
Mugi, H.M. 2003. Jumlah butir darah merah, kadar hemoglobin, dan nilai hematokrit ayam broiler yang diberi probiotik B. mix. [Skripsi]. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Parwati, E. D., Ulupi, N., Afnan, R., dan Satyaningtijas, A. S. 2017. Gambaran Eritrosit Ayam  Broiler Dengan Waktu Tempuh Transportasi dan Level Pemberian ZnSO4 Berbeda. Jurnal Ilmu Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan. 5(3): 101-105.
Kementerian Pertanian. 2017. Peraturan Menteri Pertanian Republik Indonesia
Nomor 14/PERMENTAN/PK.350/5/2017. Klasifikasi Obat Hewan. Kementerian Pertanian. Jakarta.
Purnomo, Dian, Sugiharto, dan Isroli. 2015. Total leukosit dan diferensial leukosit darah ayam broiler akibat penggunaan tepung onggok fermentasi rhizopus oryzae pada ransum . Jurnal Ilmu-Ilmu Peternakan. 25(3): 59-68.
Sahin, O., Morishita, T., and Zhang, Q. 2003 Campylobacter colonization in poultry: Sources of infection and modes of transmission. Animal Health Research Reviews . 3(2): 95-105.
Samuel, I. R. 1987. Introduction to Hematology. Second Edition. Philadhelphia (US): JB Lippincott Company. Saputro, B., P. E. Santosa, dan T. Kurtini. 2014. Pengaruh Cara Pemberian Vaksin Nd Live Pada Broiler Terhadap Titer Antibodi, Jumlah Sel Darah Merah, dan Sel Darah Putih. Jurnal Ilmiah Peternakan Terpadu . 2(3): 43-48. Schalm, 2010. Schalm’s Veterinary Hematology. 6 th Ed. Editor : J. Douglas, Weiss K, Jane W. Blackwell Publishing Ltd, Oxford.
Setyaningrum, M. 2010. Profil Hematologi Darah Ayam Broiler yang Diberi Ransum Mengandung Aflatoksin. [Skripsi].

## Institut Pertanian Bogor. Bogor
Shibata,  T.,  M. Kawatana, K. Mitoma,  and T. Nikki.  2007.  Identification of  heat stableproteinin the fatty  livers  of thyroidectomized chickens. The Journal Poultry Science . 44: 182-188.
Sismanto,  L.  H.  2007.  Diferensial  leukosit  ayam  pedaging  setelah  pemberian  ekstrak  sambiloto  ( Andrographispaniculata nees )  dengan  pelarut  metanol  dosis  bertingkat  sebelum  diinfeksi Eimeria  tenella .  Institut  Pertanian  Bogor.  Bogor. Soeharsono, L. Adriani, E. Hernawan, K. A. Kamil, dan A. Mushawwir. 2010. Fisiologi Ternak: Fenomena dan Nomena Dasar, Fungsi, dan Interaksi Organ Pada Hewan. Widya Padjajaran. Bandung Sutedjo, A. 2006. Mengenal Penyakit Melalui Pemeriksaan Hasil Laboratorium. Yogyakarta: Amara Books . Swenson, M. J. 1997. Dukes Physiology of Domestic Animals. Ithaca. Cornel University Press.
Thongsong, B., Thongsong, S. K., and Chavananikul, V. 2008. Effects of the addition of probiotic containing both bacteria and yeast or an antibiotic on performance parameters, mortality rate and antibiotic residue in broilers. TJVM. 38(1): 17-26.
Tizard,  I.  1988.  Pengantar  Imunologi  Veteriner.  Masduki  Partideredjo.  Penerjemah.  Terjemahan  dari:  Immunology veteriner, An Introduce. Surabaya (ID): Airlangga University Press.
Virden, W. S., M. S. Lilburn, J. P. Thaxton, A. Corzo, D. Hoehler, & M. T. Kidd. 2007. The effect of corticosteroneinduced stress on amino acid digestibility in ross broilers. Poultry Science . 86: 338-342.
Widhyari, S. D., Esfandiari, A., dan Herlina. 2011. Profil protein total, albumin, dan globulin pada ayam broiler yang diberi kunyit, bawang putih dan Zinc (Zn). Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia . 16(3): 179-184.
Wientarsih, I., Widhyari, S. D., dan Aryanti T. 2013. Kombinasi Imbuhan Herbal Kunyit dan Zink Dalam Pakan sebagai Alternatif Pengobatan Kolibasiolosis Pada Ayam Pedaging. Jurnal Veteriner . 14(3): 327-334.