## Pengaruh Hormon NAA dan IBA Pada Eksplan Nibung
( O. tigillarium ) Terhadap Umur Muncul Kalus (Hari)
Mellisa * dan Asyti Febliza Program Studi Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan Ilmu Pendidikan, Universitas Islam Riau, Jl. Kaharuddim Nasution 13 Pekanbaru *email: mellisabio@edu.uir.ac.id, HP: 081365430272 Received: September 1, 2018 Accepted:September 20, 2018 Published:September 30, 2018
Abtract: The Effect of NAA and IBA Hormones on Nibung Explant (O. tigillarium) To The Callus Development Duration (Days) . Nibung (O. tigillarium) is a type of palm that generally grows naturally and clumps like bamboo. Nibung is a Non-Timber Forest Product (NTFP) including the palm that is used by the trunk. Nibung (O. tigillarium) is designated as  a flora  identity originating from Riau Province. Nibung  trees have long been used by the Riau community. Almost all parts of bamboo can be utilized, starting from the stem, fruit to the flower. Embryos contained in the fruit can be used as tissue culture  explants  as  an  alternative  to  multiply  plants.  Tissue  culture  is  one  of  the approaches to farming that has been based on how to be created as a complement and allows  for  the  improvement  of  the  effectiveness  and  productivity  of  traditional  and conventional  farming  methods.  Tissue  culture  research  using  Completely  Randomized Design (CRD) and added growth regulating hormone IndolebutyricAcid (IBA) and NAA (Naphthalene Acetic Acid) which obtained results that the IBA and NAA hormones had significant or significant effect on the age of callus.
Keywords : IBA hormone, NAA hormones, plant growth, tissue culture
Abstrak: Pengaruh Hormon NAA dan IBA Pada Eksplan Nibung ( O.  tigillarium ) Terhadap  Umur  Muncul  Kalus  (Hari). Nibung  ( O.  tigillarium) merupakan  sejenis palmae  yang  umumnya  tumbuh  secara  alami  dan  berumpun  seperti  bambu.  Nibung merupakan  Hasil  Hutan  Bukan  Kayu  (HHBK)  termasuk  palem  yang  dimanfaatkan batangnya. Nibung ( O. tigillarium ) ditetapkan menjadi identitas flora yang berasal dari Provinsi  Riau.  Pohon  nibung  telah  lama  dimanfaatkan  oleh  masyarakat  Riau.  Hampir semua  bagian  nibung  dapat  di  manfaatkan,  mulai  dari  batang,  buah  hingga  bunganya. Embrio yang terdapat pada buahnya dapat dimanfaatkan sebagai eksplan kultur jaringan sebagai  salah  satu  alternatif  perbanyakkan  tanaman.  Kultur  jaringan  adalah  salah  satu pendekatan budidaya pertanian yang sudah berpijak pada konsep ‘how to created’ yang melengkapi  serta  memungkinankan  peningkatan  efektifitas  dan  produktifitas  cara-cara bertanam  tradisional  dan  konvensional. Penelitian  kultur  jaringan  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dan  ditambahkan  zat  pengatur  tumbuh hormon Indolebutyric Acid (IBA) dan NAA ( Naphthalene Acetic Acid ) yang mendapatkan hasil bahwa hormon IBA dan NAA berpengaruh nyata atau signifikan terhadap umur muncul kalus.
Kata kunci : hormon NAA, hormone IBA, kultur jaringan, tanaman

## PENDAHULUAN
Nibung ( O. tigillarium) merupakan sejenis palmae yang
umumnya  tumbuh  secara  alami  dan berumpun seperti bambu. Nibung merupakan  Hasil  Hutan  Bukan  Kayu (HHBK) termasuk palem yang dimanfaatkan batangnya (Permenhut No 35, 2007). Secara alami, nibung tersebar di Srilangka, Filipina, Thailand,
Indonesia,  dan  Vietnam.  Berdasarkan Surat  Keputusan Menteri Dalam Negeri Nomor  48  tahun  1989  tanggal  1 September  1989  tentang  pedoman penetapan  identitas  flora  dan  fauna daerah.
Nibung ( O. tigillarium )
ditetapkan  menjadi  identitas  flora  yang berasal  dari  Provinsi  Riau.  Hampir seluruh kabupaten di Provinsi Riau yang mempunyai  daerah  pesisir  memiliki populasi tumbuhan nibung ( O.
tigillarium ),  populasi  tumbuhan  nibung ( O.  tigillarium )  terbesar  berada  di Kabupaten Kepulauan Meranti,
kabupaten termuda di Provinsi Riau ini, seratus  persen  daerahnya  merupakan daerah  pesisir.  Kabupaten  Kepulauan Meranti  yang  terdiri  dari  empat  pulau besar  yaitu  Pulau  Tebing  tinggi,  Pulau Merbau,  Pulau  Padang  dan  Pulau Rangsang,  pada  tiap  pulau  yang  berada di  kabupaten  ini  memiliki  potensi tanaman  nibung  yang  besar  yaitu  ± 14.260 ha.
Pohon nibung telah lama dimanfaatkan  oleh  masyarakat  Riau. Hampir  semua  bagian  nibung  dapat  di manfaatkan,  mulai  dari  batang,  buah hingga  bungannya.  Batang  nibung digunakan  sebagai  bahan  bangunan  dan daunnya digunakan untuk membuat atap
rumah  dan  anyaman  keranjang.  Bunga pohon nibung digunakan untuk mengharumkan beras, sedangkan umbut dan  kuncup  bunga  dapat  dibuat  sayur. Buah  nibung  dapat  dipakai  sebagai teman makan sirih pengganti pinang dan durinya  yang  disebut “Pating” dapat dipakai  sebagai  paku  bangunan  sesaji dalam  upacara  adat.  Batang  maupun daun pohon nibung memiliki daya tahan yang  lama  dan  tidak  mudah  lapuk meskipun  terendam  dalam  air  payau (Alamendah, 2011).
Hambali et al., (2006) mengemukakan  bahwa  perbanyakkan tanaman  melalui  kultur  jaringan  ( in vitro )  menawarkan  peluang  besar  untuk menghasilkan  jumlah  bibit  tanaman yang banyak dalam waktu relatif singkat sehingga lebih ekonomis. Embrio digunakan dalam kultur  jaringan karena embrio  memiliki  daya  totepotensi  yang sangat  tinggi,  karena  embrio  adalah suatu  tanaman  baru  yang  terjadi  dari bersatunya gamet jantan dan betina pada suatu proses tumbuhan. Embrio merupakan sporofit muda, pada beberapa tumbuhan embrionya
mempunyai  kloroplas  dan  berwarna hijau. Tetapi dalam kultur jaringan tidak hanya  mengutamakan  eksplan  saja, namun  media  dan  hormon  juga  sangat penting untuk diperhatikan.
Media dan hormon dipilih sesuai dengan  kebutuhan  dan  eksplan  yang digunakan. Pada kultur jaringan tanaman  nibung  ini  digunakan  hormon IndolebutyricAcid  (IBA)  dan NAA ( Naphthalene  Acetic  Acid ). Peran  IBA dalam  teknik  kultur  jaringan  adalah mampu  menginduksidan  meningkatkan pertumbuhan akar pada berbagai
tanaman  nangka  dan  peran  NAA  dalam teknik  kultur  jaringan merangsang perpanjangan  sel,  merangsang  aktivitas sel (Roy et  al .,  1990),  zaitun  (Rama, 1990), dan pepaya (Teo, 1994).
Berdasarkan paparan latar
belakang  masalah  di  atas,  peneliti tertarik untuk melihat Pengaruh Hormon NAA  dan  IBA  Pada  Eksplan  Nibung ( O. tigillarium ) Terhadap Umur Muncul Kalus  (Hari).  Adapun  rumusan  masalah dalam penelitian ini adalah “ Bagaimanakah pengaruh hormon NAA dan  IBA  terhadap Umur  Muncul  Kalus (Hari) secara Kultur Jaringan?”

## METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di Laboratorium  Bioteknologi  Tanaman Fakultas  Pertanian  Universitas  Riau, Jalan  Kaharuddin  Nasution  Km  11  No.
113, Kelurahan Simpang Tiga, Kecamatan Bukit Raya, Kota Pekanbaru .  Eksplan  yang  digunakan untuk  pengulturan  adalah  eksplan  dari biji nibung berupa embrio yang memiliki  kualitas  baik  dan  tidak  cacat secara  fisik.  Parameter  yang  diamati adalah  Umur  Mucul  Kalus  (Hari), pengamatan dilakukan setiap hari dengan  menghitung  hari  pada  saat muncul  kalus  pertama  kali  setelah penanaman. Pembentukan
kalus dilakukan  setelah  50%  dari  eksplan keselurahan  membentuk  kalus  dan dicatat  pada  hari  ke  berapa  kalus tersebut  tumbuh  setelah  diinkubasi. Nibung  diperoleh  dari  Desa  Tenggayun kabupaten  Bengkalis.  Bahan yang
digunakan  dalam  penelitian  meliputi Eksplan ditanam dalam media
Murashige  Skoog  (MS)  padat  yang
ditambah  NAA  (N0  =  Tanpa  NAA,  N1 =  NAA  0,1  ppm,  N2  =  NAA  1,0  ppm, N3  =  NAA  10  ppm)  dan  IBA  (A0  = Tanpa  IBA,  A1  =  IBA  0,1  ppm,  A2  = IBA  1,0  ppm,  A3  =  IBA  10  ppm)  ) aquades  dan  alkohol.  Sedangkan  alat yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  karet  gelang,  clingpark,  plastik bening,  panci,  pengaduk,  botol  kultur, laminair  air  flow  cabinet  (LAFC), timbangan  analitik,  magnetik  stirer, lampu ultra violet (UV), labu erlenmeyer, labu ukur, pH meter digital, cawan  petri,  kompor  gas,  scalpel, westclaf,  pinset,  bunsen,  gunting,  dan pisau.

## RANCANGAN PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) faktorial 4x4  yang  terdiri  dari  2  faktor  yaitu faktor N (NAA) dan A (IBA) Berdasarkan Layout Penelitian (lampiran  1),  yang  masing-masing terdiri  4  taraf  sehingga  terdapat  16 kombinasi  perlakuan  dan  setiap  taraf diulang  3  kali  ulangan  sehingga  di peroleh  48  satuan  percobaan.  Setiap botol kultur terdapat 2 eksplan sehingga keseluruhan  embrio  adalah  96.  Data pengamatan  terakhir  dianalisa  secara statistik  dengan  menggunakan  analisis sidik  ragam  (ANOVA).  Apabila  F hitung yang diperoleh lebih besar dari F tabel, maka dilanjutkna dengan melakukan  uji  lanjut  Beda  Nyata  Jujur (BNJ) pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Data  hasil  pengamatan  Umur Muncul  Kalus pada  akhir  pengamatan disajikan pada Tabel 1. Hasil
pengamatan terhadap persentase eksplan membentuk  kalus  menunjukkan  bahwa terjadi  pengaruh  hormon  NAA.  Data presentase membentuk  kalus  pada akhir pengamatan disajikan pada Tabel 1.
Tabel    1.  Persentase  membentuk  kalus (%) pada eksplan nibung (O. tigillarium).
Konsentra si IBA (ppm) Konsentrasi Kinetin (ppm)
Rerata
N 0 ppm N 0,1 ppm N 1,0 ppm N 10 ppm I 0 ppm 83,33 (a) 66,67 (a) 50,00 (a) 25,00 (b) 56,25 I 0,1 ppm 58,33 (a) 58,33 (a) 50,00 (a) 75,00 (a) 60,42 I 1,0 ppm 41,67 (a) 83,33 (a) 37,50 (a) 50,00 (a) 56,25 I 10 ppm 41,67 (a) 41,67 (a) 25,00 (b) 25,00 (b) 33,33 Rerata 56,25 62,50 40,63 43,75 KK = 9,55% Sumber: Data Primer Penelitian
Ket: KK = Koefisien Keragaman, BNJ = Beda Nyata Jujur, IBA = Indole Butirat Acid (IBA), N =  NAA.
Angka-angka pada baris dan kolom yang diikuti oleh huruf kecil yang sama tidak berbeda nyata menurut Uji Lanjut BNJ pada taraf 5%
Berdasarkan  Tabel  1,  Pengaruh IBA  dan  NAA  terhadap  persentase membentuk  kalus  pada  tanaman  nibung menunjukkan  bahwa  IBA  dan  NAA sebagai  auksin  mampu  membentuk kalus  dan  memiliki  perbedaan  nyata pada setiap perlakuan dilihat  dari setiap rata-rata  yang  memiliki  notasi  huruf yang berbeda dengan notasi a
merupakan  perlakuan  yang  paling  baik.
Pada  setiap  perlakuan  IBA  dan  NAA memiliki
persentase
eksplan membentuk  kalus  yang  beragam.  Pada perlakuan  IBA  (10  ppm)  +  NAA  (1,0
ppm)  dan  perlakuan  IBA  (10  ppm)  +
NAA (10 ppm) persentase pembentukkan  kalus  terendah    dengan rata-rata 25,00%, kemudian pada perlakuan IBA (0 ppm) + NAA (0 ppm)
dan  IBA  (1,0  ppm)  +  NAA  (0,1  ppm) persentase pembentukkan kalus
tertinggi  dengan    rata-rata  83,33%. Penambahan  hormon  IBA  dan  NAA persentase membentuk kalus yang tinggi tergantung  pada  kondisi  eksplan,  jenis dan  komposisi  media,  hormon  endogen yang  ada  pada  eksplan  itu  sendiri  serta kandungan  zat  pengatur  tumbuh  yang diberikan.  Jika  eksplan  yang  digunakan dalam  kondisi  yang  sesuai yaitu jaringan yang aktif membelah, didukung dengan jenis dan kombinasi media yang cocok  serta  kandungan  zat  pengetur tumbuh  yang  sesuai  akan  menyebabkan eksplan  yang  dikulturkan  memiliki persentase  membentuk  kalus  yang tinggi.
Pembentukan kalus sangat dipengaruhi  oleh  jenis  eksplan  dan  zat pengatur  tumbuh  yang  digunakan. Eksplan  daun  dengan  jaringan  yang meristematik akan lebih mudah membentuk  kalus  dibanding  dengan jaringan  yang  sudah  tua.  Eksplan  dari daun lebih banyak mengandung senyawa pektat dan protein.
Agar  hasil  pengamatan  pada persentase  membentuk  kalus  dapat terlihat  lebih  jelas  perbedaannya,  maka peneliti menyajikan data tersebut  dalam bentuk  grafik.  Grafik  tersebut  dapat dilihat  pada  Gambar  1.  Persentase Membentuk  Kalus  (%)  Pada  Eksplan Nibung (O. tigillarium).
Pada  gambar  1.  Persentase  kalus  yang hidup  sempurna  dalam  satu  botol  pada perlakuan  I0N0  dan  I2N1  dengan persentase  83,33%.  Pemberian  auksin secara eksogen, berperan penting dalam pembelahan sel, dan ini sangat berkaitan dengan  inisiasi  pembentukan  embrio somatik. Utami dkk. (2007) menyatakan bahwa  untuk  inisiasi  kalus  embriogenik dibutuhkan program ekspresi gen
embriogenik
Penambahan  auksin  pada  media kultur  akan  memberikan  pertumbuhan jaringan  tanaman  yang  baik.  Sehingga akan  berdampak  terhadap  pertumbuhan dan perkembangan  tanaman  itu  sendiri (Rahmaniar,  2007).  Pada  Gambar  14 menujukkan  grafik tingginya presentase membentuk  kalus  pada  perlakuan  I0N0 dan  I2N1  juga  disebebkan  berjalan dengan  baiknya  fungsi  pada  ekspaln kultur, sehingga menghasilkan persentase yang lebih baik dibandingkan dengan  konsentrasi  perlakuan  yang lainnya.
Menurut Zulkarnain (2014) tanaman  yang  berbeda  dapat  merespon hormon  (auksin  dan  sitokinin)  dalam berbagai  konsentrasi  secara  berbeda pula. Hal ini disebebabkan oleh perbedaan  hormon  endogen  pada  setiap tanaman. Sehingga kecepatan
pertumbuhan  yang  terjadi  pada  eksplan karena  adanya  interaksi  yang  tepat antara  hormon  endogen  eksplan  dengan penambahan  hormon  eksogen  yang mengakibatkan  proses  fisiologis  dalam eksplan dapat berlangsung efektif sehingga mampu awal pertumbuhan.
Dari  hasil  pengamatan  seperti pada Tabel  1. dan Gambar 1. dilakukan uji  analisis  statistik  ANOVA  untuk melihat  apakah  parameter  jumlah  tunas dapat  dinyatakan  signifikan  atau  tidak yang  ditandai  dengan  Fhitung  > Ftabel.Uji  analisis  statistik  ANOVA dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2.  Tabel ANOVA pengaruh IBA dan NAA terhadap persentase membentuk  Kalus    Pada  Eksplan Nibung ( O. tigillarium ).
SK DK JK KT
F-Hit F-Tab 5% FK 1 - - - I 3 5455,81 1818,58 5,37 *s 2,9 N 3 3164,06 1054,69 3,12 *s 2,9 IN 9 7304,69 811,63 2,40 *s 2,19 EROR 8 10833,33 338,54 TOTAL 47
Berdasarkan  uji  analisis  statistik ANOVA  pada  Tabel  2.  diperoleh  Nilai F-hitung  pada  perlakuan  I  (IBA)  yaitu 5,37  dengan  derajat  bebas  3,  error (galat)  32  ,  dan  taraf  α  5%  (F 3,  12,  0.05 ) adalah  2,9.    Terlihat  bahwa  F-hitung  >
0 10 20 30 40 50 60 70 80 83,33 66,67 50,00 58 ,33 25,00 41,67 83,33 50,00 25,00 58,33 50,00 25,00 75,00 37,50 41,67 41,67 I0N0 I0N1 I0N2 I0N3 I1N0 I1N1 I1N2 I1N3 I2N0 I2N 1 I2N2 I2N3 I3N0 I3N1 I3N2 I3N3
F-tabel  yaitu  5,37  >  2,9,  hal  ini  berarti H0  ditolak.  Sedangkan  nilai  F-hitung untuk  perlakuan  N  (NAA)  yaitu  3,12, dengan derajat bebas 3, error (galat) 32 , dan  taraf  α  5%  (F 3,  12,  0.05 )  adalah  2,9.
Terlihat bahwa F-hitung > F-Tabel yaitu 3,12  >  2,9,  hal  ini  berarti  H0  ditolak.
Sedangkan Nilai F-hitung pada perlakuan  kombinasi  I  (IBA)  dan  N
(NAA)  yaitu  2,40  dengan  derajat  bebas 9, error (galat) 32 , dan taraf α 5% (F 3, 12,  0.05 )  adalah  2,19.  Terlihat  bahwa  F- hitung  >  F-tabel  2,40  >  2,19,  hal  ini berarti  H0  ditolak.  Dapat  disimpulkan bahwa secara interaksi pemberian konsentrasi  IBA  dan  NAA  berpengaruh nyata terhadap persentase tumbuh kalus. Perlakuan  tunggal  IBA  berpengaruh nyata terhadap persentase tumbuh kalus, begitu juga dengan perlakuan NAA.
Sumber: Dokumentasi Peneliti
Gambar 2.  Persentase tumbuh kalus,
Dengan perlakuan kombinasi hormon
IBA (1,0 ppm) dan NAA ( 0,1 ppm), umur 90 hari setelah tanam.

## SIMPULAN
Pemberian  Hormon  IBA  dan NAA berpengaruh nyata atau signifikan terhadap umur muncul kalus.

## DAFTAR RUJUKAN
Hartman, H. T., D. E. Kester, dan F. T.
Davies Jr. 1990. Plant propagation principles  and practices. Englewood
Clifts. New  Jersey:  Prentice- Hall International, Inc.
Hendrayono  &  Wijani.  2002. Teknik Kultur  Jaringan,  Pengenalan Dan Petunjuk Perbanyakn Secara Vegetative Secara Modern . Kanisus: Yogyakarta. Satyvathi, V.V., P.P. Jauhar, E.M Elias, And M.B Rao. 2004. Genomics,  Molecular  Genetic And  Biotechnologyefects  Of Growth  Regulator  On  In-Vitro Plantregeneration .  Crop  Sci. 44:  1839-1846.  (Diakses  pada tanggal 10 April 2018). Sugiyanti, E. 2008. Pengaruh Kombinasi  Bap  (Benzil  Amino Purine)  Dan  Naa  (Naphtalene Acetic Acid) Terhadap Pertumbuhan Tunas Zodia (Euodia  Suaveolens  Scheff.) Secara  In  Vitro. Universitas Sebelas Maret. Surakarta. Skripsi  Online .  (Diakses  pada tanggal 10 April 2018).