Perubahan Siklus Estrus Akibat Induksi Peningkatan Kadar Prostaglandin F 2 α (PGF 2 α ) Pada Fase Luteal Kambing Peranakan Boer
Aries Erlinda Ratna.Wardhani, Agung Pramana Warih Marhendra, Aris Soewondo Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,Universitas Brawijaya, Malang
aries.erlinda@gmail.com

## ABSTRAK
Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui pengaruh single injection PGF 2 α pada awal fase diestrus dan  pertengahan  diestrus  terhadap  siklus  estrus.  Perlakuan  pada  penelitian  ini  adalah  kontrol  fase diestrus awal, kontrol fase diestrus tengah, injeksi PGF 2 α pada diestrus awal dan injeksi PGF 2 α pada fase diestrus tengah (masing- masing kelompok n=3). 1,5 ml Capriglandin ® diinjeksikan secara intramuskular, injeksi  dilakukan  satu  kali.  Selanjutnya,  perubahan  fase  diperiksa  setiap  hari  sejak  satu  hari  setelah injeksi.  Fase  estrus  ditentukan  berdasarkan    pemeriksaan  sitologi  smear  vagina.  Data  yang  didapatkan dianalisa  dengan  metode  Mann-  Whitney  dengan  software  microsoft  excel  dan  SPSS  16,0  for  Windows. Perlakuan kontrol awal dengan injeksi diestrus awal tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan pada panjang  diestrus  dan  proestrus,  onset  estrus  pada  kelompok  injeksi  dan  kontrol  berturut-  turut  15  hari dan  16  hari.  Kelompok  kontrol  tengah  dengan  injeksi  diestrus  tengah  menunjukkan  perbedaan  yang signifikan  pada  onset  estrus  dan  panjang  diestrus  tetapi  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  pada panjang proestrus, onset estrus pada kelompok injeksi dan kontrol secara berurutan 6,7 hari dan 12 hari (P < 0,05). Dapat disimpulkan bahwa  single injection PGF 2 α tidak memberikan pengaruh terhadap siklus estrus  apabila  diberikan  pada  fase  diestrus  awal  sedangkan  apabila  diberikan  pada  fase  diestrus  tegah mengakibatkan fase diestrus lebih pendek yaitu 2,3 dibandingkan kambing kontrol diestrus tengah yang memiliki panjang diestrus 8 hari.
Kata Kunci: PGF 2 α , onset, sinkronisasi estrus, vaginal smear

## ABSTRACT
The objective of this study to understand the effect of PGF 2 α injection in early diestrus phase and mid- diestrus  to  the  estrous  cycle.  Treatment  in  this  study  are  early  diestrus  control,  mid-  diestrus  control, administration of PGF 2 α on early diestrus phase and administration of PGF 2 α in mid diestrus phase (each group n=3.) 1.5 ml Capriglandin ® was injected once intramusculary. Then, phase change observed every day start one day since injection. Estrous phase were determined by observation vaginal smear cytology. Data  were  analyzed  by  Mann-  Whitney  method  using  Microsoft  Excel  software  and  SPSS  16.0  for Windows.  There’s  no  significant  difference  in  diestrus  and  proestrus  length  on  injected  group  at  early diestrus and control early diestrus group, onset estrous of injected group and control group respectively on  day  15  and  on  day  16.  The  injected  group  at  mid  diestrus  and  control  mid  diestrus  group  have  a significant difference at onset estrous and diestrus length but there is no significant difference in proestrus length, onset of estrous in the injection group and control group respectively on day 6.7 and on day 12 day (P < 0.05). It can be concluded that there is no response of single injection of PGF 2 α when injected at early diestrus, but when injected at mid- diestrus causes a shorter diestrus phase than the control respectively 2,3 and 8 days.
Keywords : PGF 2 α , onset of estrous, estrous synchronization, vaginal smears

## PENDAHULUAN
Siklus reproduksi berlangsung dengan sintesis lutenaizing hormon (LH) dan folicular stimulating hormon (FSH) oleh hipofisa anterior. Sintesis dan sekresi FSH dan LH dirangsang oleh Gonadotropin  Releasing  Hormon  (GnRH)  yang disekresi  oleh  hipotalamus.  Hormon  ini  mulai bekerja  saat  hewan  mencapai  masa  pubertas (kematangan  kelamin).  Perkembangan  awal  sel folikel  diregulasi  oleh  FSH  yang  selanjutnya
merangsang  sel  granulosa  dan  sel  teka  ovarium untuk mensekresi estrogen[1].
Sinkronisasi    estrus    merupakan    salah    satu cara    mengatur    reproduksi    pada    ternak. Pengaturan  siklus  estrus  pada  sekelompok ternak  bertujuan  mempermudah  pemeliharaan, efisiensi  tenaga  kerja,  dan    efisiensi    reproduksi [2].  Prostaglandin  F 2 α (PGF 2 α )  telah  banyak dilaporkan memiliki tingkat keberhasilan sinkronisasi birahi 80-100% dan tingkat kebuntingan 60-100% [2,3,4,5].
Timbulnya  berahi  akibat  pemberian  PGF 2 α disebabkan    karena  penurunan    konsentrasi progesteron akibat induksi  perubahan  morfologi jaringan  luteal  melalui    perubahan    asetat    ke kolesterol.  Penurunan    kadar    progesteron    ini akan  merangsang  hipofisa  anterior  melepaskan FSH  kemudian  LH.  Kedua  hormon  ini bertanggung jawab dalam proses folikulogenesis    dan  ovulasi,  sehingga  terjadi pertumbuhan  dan  pematangan  folikel.  Folikel- folikel  tersebut  akhirnya  menghasilkan    hormon estrogen  yang  mampu  memanifestasikan    gejala berahi [4,6].
Pada  sinkronisasi  estrus,  terjadi  peningkatan kadar  prostaglandin  yang  dapat  melisiskan korpus luteum sehingga menginduksi perkembangan  folikel  tersier  dan  meningkatkan kadar  estrogen  sehingga  memicu  estrus  secara cepat  dibandingkan  siklus  normal.  Usia  korpus luteum  diketahui  berpengaruh  terhadap  respon prostaglandin, oleh karena itu untuk mempelajari pengaruh tersebut penelitian ini perlu dilakukan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  di  peternakan kambing    milik  Bapak  Ir  Agus  Tumulyadi  M.P. di  Bululawang  dan  Laboratorium  Lapangan Fakultas  Peternakan  Universitas  Brawijaya  di Sumber  Sekar,  Malang  pada  bulan  Februari hingga  april  dan  analisis  data  dilakukan dilaboratorium  anatomi  dan  histologi  hewan, Jurusan  Biologi, Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya.

## Persiapan awal
Persiapan  awal  penelitian  ini  yaitu  memilih 12  hewan  coba  dengan  kriteria  status  tidak bunting,  sehat  secara  klinis,  sudah  pernah melahirkan, umur 1,5 -3,0 tahun [7]. Hewan coba selanjutnya akan dikelompokkan menjadi kontrol fase  diestrus  awal,  kontrol  fase  diestrus  tengah, injeksi PGF 2 α pada fase diestrus awal dan injeksi PGF 2 α pada  fase  diestrus  tengah  (masing- masing kelompok n=3).
Smear Vagina Untuk  mengetahui  fase  estrus  sebelum perlakuan pada hewan coba, dilakukan pemeriksaan  fase  estrus  dengan  metode  smear vagina. Smear vagina dilakukan dengan menggunakan  cotton  bud  yang  telah  dibasahi dengan  alkohol  70%,  selanjutnya  dimasukkan dalam vagina kambing betina dengan sudut ±45 o dan  diusapkan  selama  2-3  kali  putaran. Selanjutnya  dibuat  preparat  apusan  pada  slide glass. Preparat apusan kemudian ditetesi ethanol
absolut dan didiamkan selama 15 menit. Preparat selanjutnya  ditetesi  pewarna  giemsa  20% kemudian  didiamkan  selama  10-  15  menit. Selanjutnya preparat dibilas dengan air mengalir dan  dikeringanginkan.  Preparat  yang  telah  jadi kemudian diamati morfologi sel epitel mengunakan  mikroskop  dengan  perbesaran lemah (100x) kemudian dengan perbesaran lebih kuat  (400x).  Hewan  dikelompokkan  pada masing-  masing  kelompok  perlakuan  sesuai dengan  fase  yang  sedang  berlangsung  pada masing- masing hewan.
Injeksi PGF 2 α
Kambing  pada  perlakuan  diestrus  awal  dan diestrus  tengah  diinjeksi  1,5  ml  capriglandin ® secara  intramuscular.  Injkesi  hanya  dilakukan satu kali.

## Pengamatan  Perubahan  fase  dan  Onset Estrus
Pengamatan dilakukan setiap hari mulai 1 hari setelah injeksi hingga fase estrus. Perubahan fase diamati  melalui  smear  vagina.  Parameter  untuk mengetahui  tingkat  keberhasilan  sinkronisasi diamati dari onset estrus.

## Analisa Data
Data  dianalisis  dengan  metode  Mann– Whitney    menggunakan  SPSS  16,0  for  windows dan Microsoft Excel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan  sebelum  injeksi  pada  kelompok diestrus  awal  dan  kontrol  diestrus  awal menunjukkan  adanya  sel-  sel  epitel  parabasal, dominasi  sel-  sel  parabasal  pada  preparat merupakan  ciri  fase  diestrus  awal.  Sel-  sel parabasal  ditandai  dengan  diameter  sel  yang kecil  (kurang  dari  30  µm),  inti  yang  besar  dan rasio  sitoplasma  dan  inti  sel  relatif  kecil.  Sel parabasal  berdiameter  sekitar  20  µm  dan  berinti dengan diameter sekitar 9 µm [8].
Gambar  1.  Sitologi  vagina  pada  pengamatan hari  ke-1  kelompok  injeksi  diestrus  awal  ditandai dengan  sel  epitel  parabasal  (panah  hitam)  perbesaran 200x
Injeksi  PGF 2 α yang  dilakukan  pada  fase diestrus awal tidak memberikan banyak perubahan  terhadap  durasi  masing-  masing  fase pada siklus estrus, durasi  fase diestrus kambing yang  diinjeksi  dengan  kambing  kontrol  tidak terdapat  perbedaan  signifikan  berdasarkan  uji dengan Mann–Whitney. Kelompok yang diiinjeksi PGF 2 α memiliki rata- rata panjang fase diestrus  11,3  hari,  sedangkan  kelompok  kontrol 12,3 hari. Fase proestrus merupakan fase lanjutan dalam siklus estrus setelah fase diestrus berakhir. Injeksi  yang  dilakukan  pada  fase  diestrus diperkirakan  akan  mempengaruhi  fase  proestrus pula.  Pada  fase  proestrus,  kedua  kelompok memiliki  durasi  rata-  rata  fase  proestrus  yang sama  yaitu  2,7  hari.  Hal  tersebut  membuktikan bahwa  injeksi  PGF 2 α pada  fase  diestrus  awal tidak  memberikan  pengaruh  yang  signifikan terhadap fase proestrus.
Onset estrus merupakan waktu yang dibutuhkan  untuk  kambing  mencapai  estrus/ birahi,  dihitung  sejak  dilakukannya  injeksi. Penelitian  ini  dilakukan  pada  waktu  yang bersamaan  sehingga  onset  estrus  kelompok kambing  kontrol  dihitung  sejak  dilakukannya injeksi  pada  kelompok  kambing  yang  diinjeksi PGF 2 α ,  sedangkan  pada  perulangan  kelompok kontrol  yang  tidak  dilakukan  pada  waktu  yang bersamaan,  onset  estrus  dihitung  sejak  kambing berada  pada  fase  yang  sama  dengan  kambing yang  diinjeksi  dilihat  dari  proporsi  sel  yang muncul  pada  preparat.  Rata-  rata  onset  estrus kelompok  yang  diinjeksi  PGF 2 α adalah  15  hari, sedangkan  pada  kelompok  kontrol  16  hari.  Dari hasil  tersebut,  dapat  diketahui  bahwa  injeksi pada  awal  fase  diestrus  awal  tidak  memberikan pengaruh  yang  signifikan  terhadap  pemendekan siklus estrus (gambar 2).
Gambar  2.  Rataan  panjang  fase  dan  onset  estrus kelompok  diestrus  awal  (injeksi  dan kontrol)
Pada  pengamatan  hari  pertama  fase  diestrus tengah,  sel-  sel  polymorphonuclear  sudah  tidak terlihat sedangkan sel- sel parabasal sudah mulai
berkembang menuju sel- sel intermediet. Sel- sel intermediet  terus  berkembang  dan  akan  menjadi sel-  sel  superfisial.  Sel  epitel  intermediet dicirikan  dengan  mengecilnya  inti  sel  sehingga rasio  inti  sel  dengan  sitoplasma  lebih  besar.  Sel intermediet  memiliki  ukuran  30-  50  µm  dan  inti sel sekitar 8 µm [8].
Gambar  3.  Sitologi  vagina  pengamatan  hari  ke-2 kelompok diestrus tengah. Sel intermediet (  panah  biru)  dan  sel  parabasal  (panah hitam)  perbesaran  100x    pada  kelompok kontrol    (a)  dan  pada  kambing  yang diinjeksi PGF 2 α perbesaran 200x (b)
Ketika sebagian besar sel epitel telah menjadi sel-  sel  superfisial  maka  hal  ini  menandakan bahwa kambing telah masuk fase proestrus yang selanjutnya  akan  mengalami  tanda-  tanda  estrus yang  akan  diikuti  terjadinya  birahi  dan  ovulasi. Pada  preparat,  estrus  akan  ditandai  dengan munculnya  sel-  sel  epitel  yang  terkornifikasi dengan  inti  sel  yang  telah  terdegradasi.  sel superfisial merupakan sel pada tingkat kematangan akhir, diameter sel superfisial sekitar 50  hingga  60  µm,  sitoplasma  sel  superfisial berbentuk  polygonal [8].
Kelompok  yang  diinjeksi  pada  fase  diestrus tengah  dan  kelompok  kontrol  fase  diestrus tengah  merupakan  kambing  yang  berbeda  dari kambing  yang  diinjeksi  pada  fase  diestrus  awal dan  kontrol  diestrus  awal.  Pada  kelompok kambing  yang  mengalami  injeksi  PGF 2 α pada fase  diestrus  tengah,  mengalami  rata-  rata diestrus  selama  2,3  hari,  sedangkan  pada
b a
kelompok kontrol memiliki panjang fase diestrus selama  8  hari.  Berdasarkan  analisis  dengan metode
Mann–Whitney menunjukkan signifikansi  yang  lebih  rendah  dari  alfa  (0,05) sehingga  H0  ditolak,  hal  ini  berarti  bahwa terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antara kambing yang diinjeksi pada fase diestrus tengah dengan  kambing  kontrol  pada  fase  diestrus tengah.
Pada fase proestrus, kelompok yang diinjeksi PGF 2 α memiliki  durasi  fase  proestrus  3,3  hari, sedangkan kelompok kontrol mengalami proestrus  selama  3  hari  dengan  kesimpulan bahwa injeksi PGF 2 α tidak memberikan pengaruh yang signifikan terhadap fase proestrus.  Durasi  onset  estrus  berbeda  secara signifikan  pada  kedua  kelompok.  Kelompok yang  diinjeksi  PGF 2 α memiliki  rata-  rata  onset estrus  6,7  hari,  sedangkan  kelompok  kontrol memiliki onset estrus 12 hari (gambar 4).
Gambar  4.  Rataan  panjang  fase  dan  onset  estrus

## kelompok    diestrus  tengah  (injeksi  dan kontrol)
Waktu  injeksi  sangat  mempengaruhi  onset estrus  dan  panjang  fase  pada  siklus  estrus.  Hal ini  dapat  dilihat  pada  durasi  fase  diestrus  dan onset estrus  antara kelompok yang diinjeksi saat diestrus  awal  dan  diestrus  tengah.  Pada  injeksi diestrus awal rata- rata panjang fase diestrus 11,3 hari  sedangkan  pada  kelompok  diestrus  tengah memiliki rata- rata diestrus 2,3 hari. Dari analisis Mann–Whitney  menunjukkan  bahwa  waktu injeksi  berpengaruh  secara  signifikan  terhadap fase  diestrus  hal  ini  berhubungan  dengan  usia korpus  luteum.  Pada  fase  proestrus,  kelompok injeksi  pada  awal  diestrus  memiliki  rata-  rata fase  proestrus  selama  2,7  hari,  sedangkan kelompok  diestrus  tengah  selama  3,3  hari sehingga tidak terdapat perbedaan yang signifikan  pada  kedua  kelompok.  Rata  –  rata onset  estrus  pada  kelompok  injeksi  saat  fase diestrus  awal  adalah  15  hari,  sedangkan  pada kelompok injeksi fase diestrus tengah selama 6,7 hari  hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan  waktu  yang  signifikan  terhadap  onset
estrus.  Jadi,  dapat  disimpulkan  bahwa  fase injeksi  diestrus  tengah  lebih  efektif  untuk memperpendek  onset  estrus  dibanding  fase diestrus awal (gambar 5).
Gambar  5.  Rataan  panjang  fase  dan  onset  estrus perlakuan  injeksi  diestrus  tengah  dengan injeksi diestrus awal
Kelompok  injeksi  pada  fase  diestrus  awal tidak  mengalami  pemendekan  siklus  disebabkan karena belum adanya korpus luteum atau korpus luteum yang dimiliki belum fungsional sehingga penyuntikan  PGF 2 α tidak  mampu  melisiskan korpus  luteum  dan  perkembangan  oosit  primer tidak  terjadi sehingga  tidak  muncul  tanda-  tanda birahi.  Pada  kambing  yang  diinjeksi  pada  fase diestrus  tengah,  korpus  luteum  telah  fungsional dan  mampu  diregresi  oleh    PGF 2 α sehingga terbentuklah  siklus  estrus  yang  baru  dimana terjadinya  perkembangan  oosit  primer  menjadi oosit sekunder yang selanjutnya akan mengalami ovulasi  yang  didahului  dengan  tingkah  laku estrus/  birahi.  Pada  sapi,  diasumsikan  bahwa transisi  dari  korpus  luteum  sapi    dari  masa refraktori  menuju  respon  terjadi  pada  hari  ke-5 dari    siklus  estrus  (hari  pertama=  estrus)  karena pada  5  dari  8  sapi  yang  diberikan  pada  PGF 2 α hari ke-5, regresi luteal awal tampak jelas selama pemeriksaan  24  jam  setelah  pemberian  PGF 2 α . Hal  ini  diasumsikan  bahwa  respon  dari  korpus luteum  untuk  PGF 2 α tergantung  pada  usia  yang tepat  dari  korpus  luteum  pada  saat  pemberian PGF 2 α [9].
Penelitian  pada  kelinci  [10]  dan  babi  [11] mnunjukkan  bahwa  konsentrasi  reseptor  PGF 2 α meningkat  hingga  5  kali  lipat  dari  awal  fase luteal  hingga  pertengahan  fase  luteal  dan konsentrasi tertingggi didapatkan pada akhir fase luteal.  Sebaliknya,  konsentrasi  tertinggi  reseptor PGE 2 berada  pada  awal  fase  luteal  dan  terus menurun  hingga  akhir  fase  luteal.  Rendahnya reseptor PGF 2 α pada awal fase luteal dimungkinkan
menjadi penyebab ketidaksensitifan korpus luteum terhadap kehadiran  PGF 2 α sehingga  injeksi  PGF 2 α pada
awal  fase  diestrus  tidak  mampu  menyebabkan luteolisis  yang  lebih  cepat.  Rendahnya  reseptor PGF 2 α kemungkinan berhubungan dengan tingginya  reseptor  PGE 2 pada  awal  fase  luteal [10].
Injeksi  PGF 2 α pada  pertengahan  diestrus mampu  meregresi  korpus  luteum  lebih  cepat dibandingkan siklus normal sehingga progesteron  segera  turun  dan  anterior  pituitari mensekresikan  FSH  sehingga  siklus  yang  baru dimulai.  Kemampuan  korpus  luteum  dalam merespon kehadiran PGF 2 α dimungkinkan karena  tingginya  konsentrasi  reseptor  PGF 2 α pada  pertengahan  fase,  sehingga  korpus  luteum menyadari  kehadiran  PGF 2 α dan  memberikan respon  luteolisis.  Bagaimanapun  juga,  hal  ini membutuhkan  penelitian  lebih  lanjut  karena kemungkinan  terdapat  mekanisme  yang  berbeda pada  spesies  yang  berbeda.  Berbeda  dengan kelinci  [10]  dan  babi  [11]  yang  memiiki konsentrasi  reseptor  PGF 2 α yang  rendah  pada awal  fase  luteal,  pada  sapi  konsentrasi  afinitas yang  tinggi  terhadap  PGF 2 α telah  ditemukan sejak awal fase luteal [11, 12].

## KESIMPULAN
Single  injection  PGF 2 α pada  fase  diestrus tengah  mampu  memperpendek  siklus  estrus. Perubahan  siklus  akibat  injeksi  PGF 2 α pada kelompok  injeksi  fase  diestrus  tengah  memiliki fase diestrus lebih pendek yaitu 2,3 dibandingkan kambing  kontrol  diestrus  tengah  yang  memiliki panjang diestrus 8 hari.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Dr. Agung  Pramana  W.  M.  M.Si.,  Drs.  Aris Soewondo M.Si. dan Dr. Ir. Gatot Ciptadi, DESS yang  telah  memberikan  banyak  masukan  yang sangat  membangun.  Tidak  lupa  juga  kepada Bapak  Ir.  Agus  Tumulyadi  M.P.  selaku  pemilik peternakan  yang  telah  mengizinkan  penulis untuk  melakukan  penelitian  dipeternakan  Bulu Lawang.  Bapak  Slamet  dan  Bapak  Sumali  S.Pt. M.Ag  serta  Bapak  Harmaji  yang  telah  banyak membantu  selama  penelitian,  terima  kasih  juga kepada Winda Rahayu, Ariani Mahdiyah dan M. Rizar Zakaria.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  Syari,  T.  N.  2012.  Pengaruh  Pemberian Ekstrak  Brotowali  (Tinospora  crispa,  l.)
terhadap  Perkembangan  Folikel  Ovarium Tikus  Putih    (Rattus  norvegicus,  L.). Skripsi.  Program  Studi  Biologi,Jurusan Pendidikan  Biologi,  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas Negeri Yogyakarta, Yogyakarta.
[2]  Dewi,  R.  R.,  Wahyuningsih  dan  D.  T. Widayati.  2011.  Respon  Estrus  Pada Kambing  Peranakan  Ettawa  Dengan  Body Condition  Score  2  Dan  3  Terhadap Kombinasi  Implant  Controlled  Internal Drug  Release  Jangka  Pendek  Dengan Injeksi  Prostaglandin  F 2 Alpha.  Jurnal Kedokteran Hewan. SSN : 1978-225X. Vol. 5(1).
[3]  Simoes,  J.,  Baril,  G.,  Almeida,  J.  C.,  . Azevedo, J., Fontes, P. dan Mascarenhas, R. 2008.  Time  of  ovulation  in  nulliparous  and multiparous goats. Animal. 2(5):761– 768.doi: 10.1017/S175173110800195X.
[4] Hafizuddin, Wenny N. S., T. N. Siregar, dan Hamdan.  2011.  Persentase  Berahi  Dan Kebuntingan  Kambing  Peranakan  Ettawa (PE)  Setelah  Pemberian  Beberapa  Hormon Prostaglandin Komersial. Jurnal Kedokteran Hewan. ISSN : 1978-225X. 5 (2).
[5]  Sutama,  I  K.  2011.  Inovasi  Teknologi Reproduksi Mendukung Pengembangan Kambing  Perah  Lokal.  Pengembangan inovasi pertanian 4(3):231-246.
[6]  Akhtar,  M.  S.,  A.  A.  Farooq  and  S.  Inayat. 2009.  Treatment  of  First      Degree Endometritis  by  Cloprostenol  and  Estradiol in Choolistani Cows. The Journal of Animal dan Plant Sciences 19(1):20-21.ISSN: 1018- 7081.
[7] Siregar, T. N. 2009. Profil Hormon Estrogen Dan  Progesteron  Pada  Siklus  Berahi Kambing  Lokal.  J.  Ked.  Hewan.  3(2):240- 247.
[8]  Casallas,  L.  H.  C.  2012.  Classication  of Squamous  Cell  Cervical  Cytology.  Thesis. Universidad Nacional de Colombia.
[9] Wenzinger, B. dan U. Bleul. 2012. Effect of a Prostaglandin  F 2 α Analogue  on  the  Cyclic Corpus Luteum during its Refractory Period in  Cows.  Wenzinger  and  Bleul  BMC Veterinary Research 2012, 8:220.
[10] Boiti, C., D. Zampini, M. Zerani, G. Guelfi dan  A.  Gobbetti.  2001.  Prostaglandin Receptors and Role of G Protein- Activated Pathways on Corpora Lutea of Pseudopregnant  Rabbit  in  Vitro.  Journal  of
Endocrinology vol 168 (11): 141–151.
[11] Wiltbank, M.C., T. F.  Shiao, D.R.  Bergfelt, dan  OJ. Ginther. 1995. Prostaglandin  F 2 α
Receptors  in  the  Early  Bovine  Corpus
Luteum. BIOLOGY OF REPRODUCTION vol 52 (5): 74-78.
[12]  Levy,  N.,  S.  Kobayashi,  Z.  Roth, D.Wolfenson, A. Miyamoto,dan R. Meidan. 2000. Administration of Prostaglandin  F 2 α During  the  Early Bovine  Luteal  Phase  Does  Not  Alter  the Expression  of  ET-1  and  of  Its  Type  a Receptor:    A  Possible  Cause  for  Corpus Luteum  Refractoriness.  BIOLOGY  OF REPRODUCTION vol 63 (6): 377–382.