## JIUBJ
Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi, 19(3), Oktober 2019, pp.675-677 DOI 10.33087/jiubj.v19i3.718 ISSN 1411-8939 (Online) | ISSN 2549-4236 (Print)
Indah Sulistiyawati

## Kuantitas Total Bakteri Coliform pada Instalasi Pengolahan Limbah Cair Medis Laboratorium Klinik
Indah Sulistiyawati 1
Program Studi Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Nahdlatul Ulama Purwokerto Jl. Sultan Agung No.42 Karangklesem Purwokerto e-mail: i.sulistiyawati@unupurwokerto.ac.id
Abstrak. Kegiatan pelayanan kesehatan pada Laboratorium Klinik menghasilkan buangan limbah yang bersifat infeksius maupun non infeksius baik berupa padatan atau cair. Limbah cair laboratorium klinik merupakan salah satu sumber pencemaran lingkungan bila  konsentrasinya  melebihi  standar  baku  mutu  air  limbah.  Parameter  kualitas  air  tercemar  diantaranya  mikrobiologik  Kuman Golongan Coli / Total Coliform . Kualitas air dengan parameter mikrobiologi dapat digunakan untuk mengetahui keberadaan bakteri, virus,  parasit.  Bakteri  yang  digunakan  sebagai  indikator  adalah  bakteri Coliform. Saat  ini  beberapa  laboratorium  klinik  sudah menerapkan sistem Instalasi Pengolahan Air Limbah Cair (IPAL). Sehingga limbah yang dibuang ke lingkungan sudah memenuhi standar  baku  mutu  limbah  cair  rumah  sakit,  serta  minim  pencemaran.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kuantitas  Total Coliform pada titik inlet dan outlet IPAL limbah cair medis laboratorium. Hasil Penelitian menunjukkan hasil bahwa kuantitas Total Coliform pada titik sampling inlet limbah medisa cair di IPAL mencapai nilai tertinggi >1,6 x 10 5 MPN/100 ml, dan setelah dilakukan pengolah pada IPAL mengalami penurunan nilai menjadi 0 MPN/100 ml (tidak ditemukan coliform), dan dengan nilai tertinggi 2,7 x 10 3 MPN/100 ml, sesuai dengan standar baku mutu air limbah.
Kata kunci : Bakteri Coliform; Instalasi Pengolahan Limbah Cair; Limbah Cair Laboratorium,.
Abstract.  Health  service  activities  at  the  Clinical  Laboratory  produce  infectious  and  non-infectious  waste  in  the  form  of  solid  or liquid. Clinical laboratory liquid waste is one source of environmental pollution if the concentration exceeds the standard quality of wastewater.  Polluted  water  quality  parameters  include  microbiologics  of  Coli  /  Total  Coliform  Germs.  Water  quality  with microbiological parameters can be used to determine the presence of bacteria, viruses, parasites. Bacteria used as indicators are Coliform  bacteria.  At  present  several  clinical  laboratories  have  implemented  a  Liquid  Wastewater  Treatment  Plant.  So  that  the waste discharged into the environment meets the standard quality standards for hospital liquid waste, and minimal pollution.  This study aims to determine the quantity of Total Coliform at the inlet and outlet points of the Wastewater Treatment Plant Laboratory Medical Liquid.  The results showed that the quantity of Total Coliform at the inlet sampling point of the liquid media waste  at the Wastewater  Treatment  Plant  Laboratory  reached  the  highest  value  >  1.6  x  10 5 MPN  /  100  ml,  and  after  processing  at  the Wastewater Treatment Plant Laboratory decreased to 0 MPN / 100 ml (no coliform was found ), and with the highest value of 2.7 x 10 3 MPN / 100 ml, according to the waste water quality standard.
Keywords : Coliform Bacteria; Laboratory Liquid Waste; Liquid Waste Treatment Plant.

## PENDAHULUAN
Kegiatan pelayanan kesehatan pada Laboratorium Klinik menghasilkan buangan limbah yang bersifat  infeksius  maupun  non  infeksius  baik  berupa padatan  atau  cair.  Limbah  medis  cair  merupakan  salah satu  produk  buangan  akhir  Laboratorium  Klinik  yang berasal dari proses pencucian peralatan klinis laboratorium,  buangan  reagen  pasca  pemeriksaan laboratorium.  Menurut  Setiyanto et  al. ,  (2016)  limbah cair  medis  adalah  semua  air  limbah  yang  berasal  dari kegiatan  pelayanan  kesehatan  dan  mengandung mikroorganisme,  bahan  kimia  berbahaya,  serta  bahan organik  lainnya  yang  dapat  menyebabkan  pencemaran lingkungan.
Limbah  cair  laboratorium  klinik  merupakan  salah satu sumber pencemaran lingkungan bila konsentrasinya  melebihi  standar  baku  mutu  air  limbah. Parameter  kualitas  air  tercemar  dilihat  dari  beberapa faktor  diantaranya  :  fisik  meliputi  suhu,  TSS  ( Total Suspended  Solid );  faktor  kimia  meliputi  pH,  BOD ( Biological  Oxygen  Demand ),  COD  ( Chemical  Oxygen Demand ), kandungan NH3-N bebas, Phosphat (PO4-P); serta  faktor  mikrobiologik  Kuman  Golongan  Coli  /  Total Coliform .
Kualitas  air  dengan  parameter  mikrobiologi  dapat digunakan  untuk  mengetahui  keberadaan  bakteri,  virus, parasit. Bakteri yang digunakan sebagai indikator adalah
bakteri Coliform . Bakteri Coliform merupakan organisme nonspora  yang  motil  atau  nonmotil,  berbentuk  batang, dan mampu memfermentasi laktosa untuk menghasilkan asam  dan  gas  pada  temperatur  37 0 C  dalam  waktu inkubasi  48  jam  (Abdullah et  al .,  2019).  Konsentrasi Total Coliform yang  tinggi  melebihi  batas  standar  baku mutu  air  limbah  merupakan  indikator  adanya  cemaran patogen  infeksius  yang  menimbulkan  penyebaran penyakit  melalui  perantara  media  air  ( water  diseases ). Selain  itu  kandungan  limbah  cair  dengan  konsentrasi Total Coliform yang  tinggi  juga  dapat  mempengaruhi kehidupan  organisme  biota  pada  suatu  perairan. Penelitian  keberadaan Coliform di  perairan  sungai  juga menentukan  kelayakan  apakah  air  tersebut  layak digunakan dalam kehidupan sehari-hari, status pencemaran sungai dapat dikategorikan tercemar ringan hingga  sedang  sehingga  tidak  memenuhi  baku  mutu untuk budidaya perairan (Pratiwi et al ., 2018) Hal tersebut diatas saat ini sangat mengkhawatirkan  oleh  karenanya  diperlukan  usaha pengolahan  limbah  cair  medis  sebelum  dibuang  ke saluran  badan  air.  Saat ini  beberapa laboratorium  klinik sudah  menerapkan  sistem  Instalasi  Pengolahan  Air Limbah  Cair  (IPAL).  Sehingga  limbah  yang  dibuang  ke lingkungan  sudah  memenuhi  standar  baku mutu  limbah cair  rumah  sakit,  serta  minim  pencemaran.  Pentingnya IPAL  sesuai  dengan  regulasi  perundangan    yang
memperbolehkan  untuk  membuang  limbah  ke  media lingkungan  dengan  pesyaratan  harus  memenuhi  baku mutu  lingkungan  hidup  (Rahmawati et  al .,  2019).  IPAL yang  dikembangkan  diusahakan  memenuhi  metode pengelolaan yang ramah lingkungan, serta pengawasan dengan pengawasan yang benar (Perdana et al . 2018) Air  limbah  cair  yang  telah  melalui  proses pengolahan  IPAL  hasilnya  akan  meningkatkan  mutu kualitas  air  limbah.  Penelitian  yang  telah  dilakukan sebelumnya  menggunakan  penerapan  sistem  teknik pengolahan  IPAL  sisitem  biofilter  aerob  dan  anaerob mampu mengolah parameter total coliform dengan debit puncak  99,9  %  pada  air  limbah  rumah  sakit  (Hariyani dan Sarto, 2018). Selain itu penggunaan disinfektan juga menentukan kuantitas Total Coliform pada bak outlet.
Berdasarkan  permasalahan  diatas,  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  kuantitas  Total Coliform pada  titik  inlet  dan  outlet  IPAL  limbah  cair  medis laboratorium.

## METODE PENELITIAN
Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu metode  dengan  teknik  sampling purposive  sampling. Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi Universitas  Jenderal  Soedriman  Purwokerto pada  bulan Januari –  Juli  2019.  Pengambilan  sampel  limbah  cair medis  diambil  di  IPAL  Laboratorium  Klinik  An-Nur Purwokerto, dengan 2 titik sampling yaitu inlet dan outlet dilakukan 2 kali ulangan.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah botol  sampel  steril,  autoclave,  hot  plate  magnetik  stirer, petridish,  laminary  air  flow,  tabung  durham,  slide  glass, tabung  reaksi,  pipet  tetes,  mikroskop.  Bahan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  sampel  limbah  cair medis dari IPAL Laboratorium Klinik, media LTB ( Lauryl Tryptose Broth ), BGLB ( Briliant Green Lactose Bile ), EC Broth, LEMB, trisalt, akuades steril.
Metode penentuan Total Bakteri Coliform menggunakan  metode  MPN  (Most  Probable  Number) dari SNI-01-2332-1991. Metode analisa tersebut diantaranya terdiri dari (Widyaningsih et al ., 2016):
Uji  Pendahuluan  atau  Pendugaan  (persumtive  test) Coliform
Sampel  limbah  cair  sebanyak  1  ml  dimasukkan dalam larutan pengencer trisalt dengan pengenceran 10 -
1 ,  kemudian  di  kocok  dengan  vortex  sampai  homogen. Kemudian  dimasukkan  1  ml  ke  tabung  10 -2 dan seterusnya,  sampai  10 -3 .  Selanjutnya  diambil  1  ml  dari setiap  pengenceran  ke  tabung  berisi  media  LTB,  dan diinkubasi  pada  suhu  35 0 C,  selama  24-48  jam.  Tabung yang  positif  menampakkan  gelembung  pada  tabung durham.

## Uji konfirmasi atau penegasan (confirmative test) Coliform
Memindahkan  biakan  tabung  LTB  yang  positif dengan  jarum  inokulasi  ke  tabung-tabung  BGLB  2% yang berisi tabung durham. Diinkubasi pada suhu 35 0 C, selama  24-48  jam.  Tabung  yang  positif  menampakkan gelembung pada tabung durham. Kemudian dikonfimasi dengan  pencocokan  jumlah  tabung  positif  dengan  nilai pada tabel MPN untuk mengetahui jumlah Total Coliform pada sampel limbah cair medis yang diamati.

## Uji Pendugaan E. coli
Memindahkan  biakan  tabung  BGLB  yang  positif dengan jarum inokulasi ke tabung media EC Broth yang berisi  tabung  durham.  Diinkubasi  pada  suhu  35 0 C, selama  24-48  jam.  Tabung  yang  positif  menghasilkan gelembung  pada  tabung  durham.  Hasil  tersebut menunjukkan adanya bakteri E. coli .

## Uji Penegasan E. coli
Hasil  tabung  EC  Broth  yang  positif  diinokulasi pada  media  LEMB,  diinkubasi  selama  18-24  jam  pada suhu 35 0 C. Hasil yang diamati akantumbuh koloni E. coli dengan  warna  koloni  hitam  atau  gelap  pada  bagian pusat koloni dengan atau tanpa metalik kehijauan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kuantitas  Total Coliform yang  diamati  dari limbah cair medis pada IPAL Laboratorium Klinik, diamati pada 2 titik sampling yaitu titik inlet dan outlet, masing-masing titik  dilakukan  pengulangan  dua  kali.  Penghitungan dengan  menggunakan  tabel  MPN/100  ml,  dilakukan pengambilan  sampel  selama  4  (empat)  bulan  dengan hasil  yang  diperoleh  nilai  kuantitas  Total Coliform pada titik sampling inlet hasil menunjukkan nilai diatas standar baku  mutu  kulaitas  air  limbah.  Standar  baku  mutu  air limbah  menggunakan  Peraturan  Menteri  Lingkungan Hidup  dan  Kehutanan  Republik  Indonesia  Nomor. P.68/Menlhk/Setjen/Kum.1/8/2016.  Hasil  pengamatan ditampilkan dalam tabel 1.
Tabel 1. Kuantitas Total Coliform pada IPAL Limbah Cair Medis Laboratorium Klinik No Parameter Uji Satuan Hasil Inlet Outlet 1 A Total Coliform MPN/100 ml 22 x 10 4 0 1 B Total Coliform MPN/100 ml 4 x 10 3 0 2 A Total Coliform MPN/100 ml 4 x 10 3 2,7 x 10 3 2 B Total Coliform MPN/100 ml 7 x 10 4 3 x 10 2 3 A Total Coliform MPN/100 ml 44 x 10 4 0 3 B Total Coliform MPN/100 ml 50 x 10 4 2 x 10 3 4 A Total Coliform MPN/100 ml >1,6 x 10 5 4,9 x 10 2 4 B Total Coliform MPN/100 ml >1,6 x 10 5 1,7 x 10 3
Kualitas  air  limbah  cair  pada  titik  sampling  inlet, menghasilkan  nilai  tertinggi  >1,6  x  10 5 MPN/100  ml, pada bulan keempat, dan kuantitas Total Coliform pada titik  inlet  dengan  nilai  terendah  4  x  10 3 MPN/100  ml,
masih diatas standar baku  mutu yaitu 3 x 10 3 MPN/100 ml.  Hal  ini  dikarenakan  titik  sampling  inlet  pada  IPAL adalah  buangan  pertama  dari  kegiatan  Laboratorium Klinik,  pada  titik  inlet  ini  limbah  cair  belum  masuk
pengolahan  IPAL,  dan  baru  di  bak  pertama  screening utk  equalisasi  penampungan  dan  pengendapan,  jadi belum  diberikan  treatment  khusus.  Kuantitas  Total Coliform dari bulan pertama sampai bulan keempat pada titik inlet  IPAL menunjukkan peningkatan, karena terjadi penumpukkan limbah di bak penampungan pertama, hal ini  yang  mengakibatkan  tingginya  Coliform  pada  bulan keempat.  Kuantitas  Total Coliform yang  tinggi  pada  titik inlet  juga  sebagai  indikasi  adanya  bakteri  patogen  dari spesimen  sampel  makhluk  hidup  (kotoran  manusia, fecal/urine) yang tercampur  dalam penampungan IPAL. Di daerah padat penduduk pencemaran air limbah dapat menyebabkan  bawah  serius  terkait  respasan  air  minum dan hasil kesehatan (Jackson et al ., 2018)
Berbeda  halnya  dengan  titik  sampling  outlet kuantitas  total Coliform sudah  menunjukkan  penurunan menjadi  nilai  terendah  0  MPN/100  ml  (tidak  ditemukan Coliform ),  dan dengan  nilai  tertinggi  2,7  x  10 3 MPN/100 ml. Nilai tersebut juga masih  masuk dan sesuai dengan standar  nilai  baku  mutu  air  limbah.  Penurunan parameter  indikator  mikrobiologi  khususnya  Total Coliform dikarenakan  titik  sampling  outlet  merupakan titik  akhir  dari  bak  penampungan  IPAL,  dan  limbah  cair medis  tersebut  sudah  melalui  serangkaian  treatment/ perlakuan pengolahan untuk menurunkan Total Coliform .  Pada  pengolahan  IPAL  sebelum  bak  terakhir diberikan  klorin,  untuk  menurunkan  kuantitas  kuman patogen Coliform sebelum  air  buangan  di  alirkan  ke badan air. Penggunaan klorin pada bak-bak penampungan  IPAL  saat  ini  merupakan  cara  yang terbaik  dilakukan  untuk  menurunkan  cemaran Coliform , pada  limbah  cair  medis.  Penggunaan  berfungsi  klorin dapat  menyebabkan  kerusakan  pada  sel  bakteri, diantaranya  merusak  keemampuan  permeabilitas  sel dan  merusak  asam  nukleat  dan  enzim  (Busyairi et  al ., 2016)

## SIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  diatas  menunjukkan  hasil bahwa  kuantitas  Total Coliform pada  titik  sampling  inlet limbah  medisa cair di IPAL mencapai nilai tertinggi >1,6 x 10 5 MPN/100 ml, dan setelah dilakukan pengolah pada IPAL mengalami penurunan nilai menjadi 0 MPN/100 ml (tidak ditemukan Coliform ), dan dengan nilai tertinggi 2,7 x 10 3 MPN/100 ml.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdullah,  M.,  Umboh,  J.M.L.,  dan  Bernadus,  J.  (2019). Gambaran  Kualitas  Limbah  Cair  di  Rumah  Sakit Umum  Daerah  Bitung  (RSUD)  Tahun  2015. Community Health . 4(1), 47-52. Busyairi,M.,  Dewi  Y.P.,  dan  Widodo  D.I.  (2016). Efektivitas  Kaporit  pada  Proses  Klorinisasi terhadap Penurunan Bakteri Coliform dari Limbah Cair  Rumah  Sakit  X  Samarinda. Jurnal  Manusia dan Lingkungan .  23(2), 156-162.
Hariyani,  N.,  dan  Sarto.  (2018),  Evaluasi  Penggunaan Biofilter  Anaerob-Aaerob  untuk  Meningkatkan Kualitas Air Limbah Rumah Sakit. BKM Journal of Community  Medicine  and  Public  Health .  34(5), 199-204.
Jackson,  M.R.,  Meschke,  J.S.,  Simmons,  J.,  dan Isaksen,
T.B. (2018). Fecal Coliform Concentrations in Effluent from Ultraviolet
Disinfection  Units  Installed  in  Onsite  Wastewater Treatment  Systems. Joernal  of  Water  &  Health . 17(1), 113-123.
Kementerian Lingkungan Hidup. (2016) Permen  LH dan
Kehutanan RI No. P. 68/Menlhk/Setjen/Kum.1/8/2016 tentang Baku Mutu Air Limbah Domestik. Jakarta : Kemen LHK. Perdana,  A.V.,  Ashari,  M.L.,  dan  Dermawan,  D.  (2018).
Perancangan  Ulang  Instalasi  Pengolahan  Air limbah  (IPAL)  Rumah  Sakit  (Studi  Kasus  :  RSUD Dr.  R.  Koesma  Tuban).  Conference  Proceeding on Waste Treatment Technology. 157-164.
Pratiwi,  A.D.,  Widyorini,  N.,  dan  Rahman  A.  (2019). Analisis  Kualitas  Perairan  Berdasarkan  Total Bakteri  Coliform  di  Sungai  Plumbon  Semarang. Journal of Maquares . 8(3), 211-220.
Rahmawati,  D.,  Hemon  M.T.,  dan  Yuniar,  N.  (2019). Analisis Spasial Sebaran Ipal RS di Wilayah Kota Kendari  Berdasarkan  Efektivitas  Pengelolaannya. Jurnal Perencanaan Wilayah . 4(1), 1-15.
Setiyanto,  R.A.,  Danudianti,  Y.H.,  dan  Joko,  T.  (2016). Efektivitas Sistem Constructed Wetlands Kombinasi  Melati  Air  (Echinodorus  palaefolius) dan Karbon Aktif Dalam  Menurunkan Kadar COD (Chemical  Oxygen  Demand)  Limbah  Cair  Rumah Sakit Banyumanik Semarang. 4(1), 436-441.
Widyaningsih,  W.,  Supriharyono.,  dan  Widyorini,  N.
(2016). Analisis Total Bakteri Coliform di Perairan Muara  Kali  Wiso  Jepara.  Diponegoro  Journal  of Maquares  Management  of  Aquatic  Resources. 5(3), 157-164.