JFFI. 2018; 5(2) 293-298 www.jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindonesia

## EFEKTIFITAS PEMANFAATAN POTENSI SENYAWA FENOLIK KUBIS UNGU (Brassica Oleraceae var.carpitata. L) SECARA INSTRUMEN UV-VIS
Mamat Pratama * , Aminah, Rizky Arfanita Mas’ud Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia
* mamatpratamas.farm@gmail.com

## ABSTRACT
Cabbage  Purple  (Brassica  oleracea  var.  Capitata  L.)  is  one  of  the  genus  Brasica  genus  that  is  widely available in Indonesia. Purple cabbage has many benefits because it has many content, among others, vitamins A, B, C and E, mineral  potassium, calcium, phosphorus, sodium and iron, sulforafan and contain anthocyanin. The purpose of this study was to perform and determine the total phenolic content of purple cabbage (Brassica oleracea var, capitata L .). The method used in qualitative analysis is through color reaction by using specific reagent, while for quantitative analysis done by UV-Vis spectrofotometry method. For antioxidant activity test through absorbance analysis of acid error and sample absorbance from observation result on UV-Vis spectrophotometer. The results of this study contain phenolic compounds, as for the total phenolic content of methanol extracts that the purple cabbage (Brassica oleraceavar, capitata L .) Amounted to 1.9873 mgGAE/g extract.
Keywords: phenolic, gallic acid, Purple cabbage, Spectrophotometry Uv-Vis

## I. PENDAHULUAN
Kubis  Ungu  ( Brassica  oleracea var. capitata L.)  merupakan  salah  satutanaman  genus Brasica  yang  banyak  terdapat  diIndonesia.  Kubis ungu mempunyai banyak manfaat karena mempunyai banyak kandungan antara lain vitamin A, B, C dan E, mineral  kalium,  kalsium,  fosfor,  natrium  dan  besi, sulforafan  serta  mengandung  antosianin  (Lin  dkk, 2008). Antosianin juga tergolong senyawa flavonoid yang memiliki fungsi sebagai antioksidan alami dan memiliki  kekuatan  antioksidan  150  kali  lebih  kuat dari  flavonoid  (Neelufar  dkk.,  2012).  Selain  itu, antosianin mampu menghentikan reaksi radikal bebas dengan menyumbangkan hidrogen atau elektron pada radikal  bebas  dan  menstabilkannya.  Senyawa antioksidan dalam kubis ungu dapat diperoleh dengan cara  ekstraksi.  Dalam  proses  ekstraksi  suatu  bahan tanaman,  banyak  faktor  yang  dapat  mempengaruhi kandungan senyawa hasil ekstraksi diantaranya: jenis pelarut,  konsentrasi  pelarut,  metode  ekstraksi  dan suhu  yang  digunakan  untuk  ekstraksi.  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh variasi pelarut terhadap  rendemen  ekstrak  kubis  ungu  dan  panjang gelombang  (λ)  maksimum  serta  mengetahui pengaruh  metode  ekstraksi  kubis  ungu  terhadap aktivitas  antioksidan.  Flavanoid,  tanin,  lignin, antarquinon,  asam  fenolat  dan  kumarin    merupakan senyawa  fenolik  yang  tersebar  dalam  tumbuhan berupa fenol sederhana.
Senyawa  fenolik  telah  diketahui  memiliki berbagai  efek  biologis  seperti  aktivitas  antioksidan
melalui  mekanisme  sebagai  pereduksi,  penangkap radikal bebas, penghelatlogam, peredam terbentuknya oksigen singlet serta pendonor elektron (Karadeniz,  2005).  Senyawa  fenolik  diketahui mampu menurunkan resiko kanker, penyakit jantung koroner,  stroke,  atherosclerosis,  ospteoporosis, inflamasi, dan penyakit neurodegenerative lain (Surh, 2003).
Berdasarkan  uraiaan  di  atas,    maka dilakukan  penelitian  mengenai  kandungan  fenolik total    yang  terdapat  pada  ekstrak  Kubis  ungu ( Brassica  oleracea var. capitate L.)  dengan menggunakan metode Uv-Vis untuk menambah data ilmiah  tumbuhan  ini,  sehingga  peranannya  sebagai obat  yang  dapat  menghasilkan  efek  yang  dapat ditingkatkan  dengan  maksimal  serta  penggunaanya dapat lebih dipertanggung jawabkan oleh masyarakat.

## II. METODE PENELITIAN
A. Pengambilan dan Pengolahan Sampel Sampel  kubis  ungu  ( Brassica  oleracea  var. capitata L .) diambil pada pukul 08.00-11.00 diperoleh dari  kecamatan  Runaha  Kabupaten  Kunawe  Selatan Provinsi  Sulawesi  Tenggara.  Sampel  kubis  ungu ( Brassica  oleracea  var.  capitata L.)  yang  telah diambil selanjutnya dikeringkan dengan cara diangin- anginkan.  Setelah  kering,  sampel  diserbukkan, kemudian diekstraksi dengan metode maserasi.

## B. Pembuatan Ekstrak Sampel
Ditimbang  600  gram  kubis  ungu  ( Brassica oleracea  var.  capitata L.)  dimasukkan  kedalam wadah  maserasi,  lalu ditambahkan pelarut etanol  96
% sebanyak 3.500 ml, dibiarkan selama 3 hari dalam bejana tertutup dan terlindungi dari cahaya matahari langsung  sambil  sesekali  dilakukan  pengadukan, setelah 3 hari dilakukan penyaringan untuk diperoleh ekstrak etanol cair dan ampasnya dimaserasi kembali dengan cairan penyari yang baru sampai jernih. Hasil penyarian yang diperoleh kemudian diuapkan hingga diperoleh ekstrak etanol kental.

## C. Analisis Kualitatif
1. Uji Flavonoid Ekstrak kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitata L.)  sebanyak  1  g  ditambahkan  10  mL methanol  dan  5  mL  petroleum  eter,  dikocok  dan didiamkan. Lapisan metanol, diuapkan pada suhu 40 o C.  Sisa  larutan  ditambahkan  5  mL  etilasetat  P, disaring.
Maka dilakukan uji sebagai berikut:
Larutan uji sebanyak 1 mL diuapkan hingga kering,  sisanya  dilarutkan  dalam  1-2  mL  etanol (96%) P, ditambahkan 0,5 g serbuk seng P dan 2 mL asam  klorida  2  N,  didiamkan  selama  1  menit. Ditambahkan  10  tetesasam  klorida  pekat.  Jika terbentuk  warnah  merah  intensif  menunjukkan adanya flavanoid (glikosida-3-flavonol).
Larutan  uji  sebanyak  1  mL  diuapkan,  sisa dilarutkan dalam 1 mL etanol (95%) P, ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium P dan 10 tetes asam klorida P.  Jika  terjadi  warna  merah  jingga  sampai  merah ungu, menunjukkan
adanya
flavanoid.
Jikawarnakuning jingga menunjukkan adanya flavonoid.
2. Tanin
Ekstrak  sebanyak  1  g  ditambah  15  ml  air panas. Larutan dipanaskan hingga mendidih selama 5 menit, disaring. Percobaan dilakukan sebagai berikut: a. Filtrat  sebanyak  5  mL  ditambah  beberapa  tetes FeCl 3 1 %, menghasilkan warna hijau violet.
b. Filtrat sebanyak 5  mL ditambahkan gelatin 10% membentuk endapan putih.
c. Filtrat sebanyak 5 mL ditambahkan NaCl-gelatin (larutan  gelatin  1%  dalam  larutan  NaCl  10%) membentuk endapan putih.

## D. Analisis Kuantitatif Senyawa Fenol
1. Pembuatan Pereaksi Na 2 CO 3 7% Ditimbang  sebanyak  3,5  gram  Na 2 CO 3
kemudian  dilarutkan  dengan  aquadest  steril  hingga 50 ml.
2. Penetapan Kadar Fenolik Total
Penetapan  kadar  fenolik  total  pada  ekstrak metanol kulit buah kubis ungu (Brassica oleracea var. capitata  L.) merujuk  pada  prosedur  Nugroho, et  al (2012) dengan beberapa modifikasi.
3. Pembuatan Larutan Standar Asam Galat Larutan standar asam galat 1000 ppm dibuat dengan  menimbang  10  mg  asam  galat  dilarutkan dengan  methanol  p.a  hingga  volume  10  mL.  Dari larutan  stok  dipipet  sebanyak  1  mL  diencerkan dengan  methanol  p.a  hingga  volume  10  mL  hingga dihasilkan  konsentrasi  100  ppm,  kemudian  dibuat konsentrasi 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 dan 1 ppm.
4. Pengukuran Larutan Standar Asam Galat Untuk masing-masing konsentrasi 8, 12, 16,
20 dan  24 ppm ditambahkan dengan 0,4 mL reagen Folin-Ciocalteau  dikocok  dan  dibiarkan  4-8  menit, tambahkan 4,0 mL larutan Na 2 CO 3 7% kocok hingga homogen.  Tambahkan  aquades  steril  hingga  10  mL dan diamkan selama 2 jam pada suhu ruangan. Ukur serapan pada panjang gelombangmaksimum 755 nm, lalu  buat  kurva  kalibrasinya,  hubungan  antara konsentrasi asam galat (µg/mL) dengan absorbansi.
5. Pembuatan  larutan  sampel  ekstrak  kubis  ungu (Brassica oleracea var. capitata L.)
Ditimbang ekstrak kubis ungu sebanyak 10 mg kemudian dilarutkan dengan 10 mL etanol.
6. Penetapan  kadar  fenolik  total  ekstrakkubis  ungu (Brassica oleracea var. capitata L.)
Dipipet sebanyak 0,5 mL larutan dari kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitata L.) Ditambahkan  dengan  0,4  mL  reagen Folin- Ciocalteau dikocok  dan  dibiarkan  4-8  menit, tambahkan 4,0 mL larutan Na 2 CO 3 7% kocok hingga homogen  menggunakan.  Tambahkan  aquades  steril hingga 10 mL dan diamkan selama 2 jam pada suhu ruangan.
Ukur  serapan  pada  panjang  gelombang serapan  maksimum  755  nm  yang  akan  memberikan kompleks biru. Lakukan 3 kali pengulangan sehingga kadar  fenol  yang  diperoleh,  hasilnya  dinyatakan sebagai mg ekuivalen asam galat/ g ekstrak.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian Tabel 1. Persen rendamen ekstrak etanol kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitata L.)
Tabel  2. Hasil uji kualitatif senyawa  fenolik  fraksi  kubis ungu  ( Brassica oleracea var. capitata L.) menggunakan FeCl 3 Sampel Uji fenolik (FeCl 3 ) Hasil pengamatan Berdasarkan literature (Seafast Centre, 2012) Kubis Ungu + Ungu merah, ungu, dan biru, Keterangan: (+) = adanya fenolik (-) = tidak adanya fenolik
Tabel  3. Hasil  pegukuran  larutan  standard  asam  gallat  pada  panjanggelombang  726  nm  dengan  menggunakan spektrofotometer UV-Vis
No Sampel ID Absorban 1 asam galat 8 ppm 0,215 2 asam galat 12ppm 0,372 3 asam galat 16 ppm 0,479 4 asam galat 20ppm 0,603 5 asam galat 24 ppm 0,726
Gambar 1 . Hasil runnig kurva kalibrasi asam galat pada panjang gelombang 726 nm
Tabel 4. Hasil pengukuran sampel ekstrak metanol kubis ungu dengan penambahan folin-ciocalteau dan Na 2 HCO 3 pada panjang gelombang 726 nm dengan menggunakan spektrofotometer Uv-Vis
No Sampel ID Absorban 1 Blank 0,000 2 ekstrak metanol kubis ungu R1 0,386 3 ekstrak metanol kubis ungu R2 0,394 4 ekstrak metanol kubis ungu R3 0,410
y = 0,1253x + 0,1031 r = 0,9979 0 0,2 0,4 0,6 0,8 0 1 2 3 4 5 6 ab so rb an s konsentrasi (ppm) STANDARD ASAM GALAT Series1 Linear (Series1) Jenis pelarut Jumlah Pelarut Berat Sampel (g) Berat Ekstrak (g) Rendamen ekstrak (%) Etanol 96% 4000 mL 500 g 22,0634 g 4,41286
Tabel 5. Hasil kurva running asam galat pada panjang gelombang700 - 800 nm secara spektrofotometri Uv-Vis
Panjang gelombang Absorbansi 712 1,908 714 1,912 716 1,915 718 1,918 720 1,92 722 1,922 724 1,927 725 1,931 726 1,936 727 1,931 728 1,929
Gambar 2 . Hasil runnig kurva baku asam galat pada panjang gelomban 600 nm – 800 nm
Tabel 6. Hasil analisis kuantitatif fraksi kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitate L.) Replikasi Absorbansi (y) Absorban kontrol ekstrak Kandungan fenolik total awal (mg/L) Kandungan total fenolik (mgGAE/g fraksi) Rata-rata kandungan fenolik total mgGAE/g 1 0,386 0,000 3,903 mg/L 1,9515mgGAE/g 1,9873 mgGAE/g 2 0,394 0,000 3,967 mg/L 1,9835 mgGAE/g 3 0,410 0,000 4,094mg/L 2,027 mgGAE/g B. PEMBAHASAN
Kubis  Ungu  ( Brassica  oleracea var. capitata L.)  merupakan  salah  satutanaman  genus Brasica  yang  banyak  terdapat  diIndonesia.  Kubis ungu mempunyai banyak manfaat karena mempunyai banyak kandungan antara lain vitamin A, B, C dan E, mineral  kalium,  kalsium,  fosfor,  natrium  dan  besi, sulforafan  serta  mengandung  antosianin  (Lin  dkk, 2008).
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk menentukan  kadar  fenolik  total  kubis  ungu ( Brassica oleracea var. capitata L.) Senyawa fenolik merupakan kelompok terbesar metabolit sekunder pada  tumbuhan.  Senyawa  ini  termasuk  ke  dalam alkohol aromatik karena gugus hidroksilnya selalu melekat pada cincin benzen (Pengelly 2006, h. 15). Senyawa fenolik merupakan molekul yang bertindak sebagai  antioksidan  untuk  mencegah  penyakit
jantung,  mengurangi  peradanganserta  mengurangi tingkat  mutagenesis  pada  sel  manusia  (Khoddami, Wilkes dan Roberts 2013, h. 2328).
Langkah awal untuk memperoleh ekstrak yang nantinya akan digunakan dalam penelitian ini adalah proses ekstraksi. Dimana metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi. Metode maserasi menjadi  pilihan  dalam  proses  ekstraksi  karena metode  ini  merupakan  metode  yang  paling sederhana  dan  tidak  membutuhkan  bantuan pemanasan  mengingat  sampel  yang  digunakan mengandung  gugus  hidroksil  yang  akan  terurai ketika  ada  pemanasan.  Pelarut  yang  digunakan dalam  proses  ekstraksi  kubis  ungu  ( Brassica oleracea var. capitata L.)  adalah  etanol  96%. Setelah  diperoleh  ekstrak  etanol  cair,  kemudian dilakukan  remaserasi  sebanyak  2  kali.  Semua ekstrak  etanol  cair  yang  diperoleh  kemudian
1,9 1,92 1,94 710 720 730 ab so rb an panjang gelombang (nm) Pengukuran panjang gelombang maksimum asam galat Series1
dikumpulkan  dan  diuapkan  untuk  memperoleh ekstrak etanol kental kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitate L.)
Dari  hasil  penguapan  ekstrak  etanol  kubis ungu  ( Brassica  oleracea var. capitate L.)  diperoleh persen rendamen sebesar 4,41286%. Adapun tujuan dilakukannya  penentuan  persen  rendamen  ekstrak adalah  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit sekunder  yang  tersari  oleh  pelarut  yang  digunakan namuntidak dapat menentukan komponen kimia yang tersari.
Selanjutnya  dilakukan  pengujian  kualitatif untuk  mengetahui  kandungan  fenolik  yang  terdapat pada  fraksi  kubis  ungu  ( Brassicaoleracea var. capitate L.), dengan menggunakan besi (III) klorida ( 𝐹𝑒𝐶𝑙 3 )  dan  diamati  perubahan  warna  yang terbentuk. Adapun perubahan warna  yang terbentuk pada perlakuan  ini adalah terbentuknya  warna  ungu yang  menandakan  bahwa  sampel  fraksi  kubis  ungu ( Brassica  oleracea var. capitate L.)  mengandung senyawa fenolik.
Penetapan  kadar  fenolik  total  dilakukan dengan  menggunakan  asam  galat  sebagai  larutan standar.  Asam  galat  termasuk  kedalam  senyawa fenolik  turunan  asam  hidroksibenzoat  yang tergolong  asam  fenol  sederhana.  Asam  galat menjadi  pilihan  standar  dikarenakan  ketersediaan substansi  yang  stabil  dan  murni  (Syarif,  Sari  dan Ahmad  2016,  h.  105).  Penetapan  kadar  fenolik total  dilakukan  dengan  menggunakan  metode Follin-Ciocalteau dimana, reagent Follin- Ciocalteau  direaksikan  dengan  asam  galat sehingga  membentuk  larutan  berwarna  biru  yang dapat diukur absorbansinya pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 726 nm.
Prinsip  metode  Follin-Ciocalteau  adalah terbentuknya  senyawa  kompleks  berwarna  biru keunguan  yang  dapat  diukur  absorbansinya. Pereaksi  ini  mengoksidasi    fenolat  (garam  alkali) atau  gugus  fenolik-hidroksi  mereduksi  asam heteropoli (fosfomolibdat-fosfotungstat) yang terdapat dalam pereaksi Folin Ciocanteau menjadi suatu  kompleks  molibdenum-tungsten.  Senyawa fenolik  bereaksi  denga  reagen  Folin  Ciocalteau hanya  dalam  suasana  basa  agar  terjadi  disosiasi proton pada senyawa fenolik menjadi ion fenolat.
Untuk membuat kondisi basa digunakan 𝑁𝑎𝐻𝐶𝑂 3 7,5%.  Gugus  hidroksil  pada  senyawa  fenolik bereaksi dengan reagen Folin Ciocalteau membentuk kompleks molibdenum-tungsten berwarna  biru  yang  dapat  dideteksi  dengan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  (Alfian dan Susanti 2012, hh. 77-78).
Dalam  menentukan  kadar  fenolik  total, langkah  awal  yang  perlu  dilakukan  adalah penentuan  panjang  gelombang  maksimal  dengan
merunning larutan standar pada panjang gelombang  600-800  nm.  Dan  pada  penelitian  ini diperoleh  panjang  gelombang  maksimal  726  nm. Larutan  standar  dengan  konsentrasi  8,  12,  16,  20 dan 24 ppm kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 726 nm yang didapatkan dari hasil  running  panjang  gelombang  maksimal  pada spektrofotometer UV-Vis. Pengukuran absorbansi standar  dilakukan  agar  mendapatkan  kurva kalibrasi  untuk  memperoleh  persamaan  regresi linear dengan tujuan untuk melihat apakah sampel yang  digunakan  dalam  penelitian  memenuhi standar ataupun tidak.
Berdasarkan  kurva  kalibrasi  asam  galat diperoleh persamaan regresi linear Y = 0,1253x + 0,1031  dengan  nilai  koefisien  korelasi    (r)  = 0,9979. Setelah diperolah absorbansi dari masing- masing konsentrasi larutan standar dan mendapatkan  persamaan  regresi  linear  maka selanjutnya  dilakukan  proses  penetapan  kadar fenolik  total  fraksi  kubis  ungu  ( Brassica  oleracea var. capitate L.).  penetapan  kadar  fenolik  total fraksi kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitate L.) dilakukan  dengan  melakukan  3  kali  replikasi dengan  tujuan  untuk  meminimalkan  kesalahan yang mungkin terjadi pada saat pengerjaan.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan di Laboratorium Kimia Farmasi Universitas  Muslim  Indonesia,  maka  dapat disimpulkan bahwa kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitate L.)    mengandung  senyawa  fenolik, adapun  kadar  fenolik  total  pada  ekstrak  metanol bahwa kubis ungu ( Brassica oleracea var. capitata L.) sebesar 1,9873 mgGAE/g ekstrak.

## DAFTAR PUSTAKA
Balls M, James, dan Jacqueline,  1991. Animals and Alternatives in Toxicology .
Darmansjah  I.,  1995. Toksikologi  Dasar  dalam Farmakologi dan Terapi . Bagian.Farmakologi  Universitas  Indonesia, Jakarta. Donatus I.A., 2001. Toksikologi Dasar. Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi . UGM Press, Yogyakarta. Ganong W.F., 2003. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran (terjemahan). Edisi  ke-20.Penerbit  Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Gunawan, G.S., 2007. Farmakologi Terapi  (edisi 5 ). Badan  Farmakologi  Fakultas  Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta Jassin,1987. Zoologi Vertebrata.Depkes RI . Jakarta
Koeman  J.H.,  1987. Pengantar  Umum  Toksikologi (terjemahan) . Gajah Mada University Press, Yogyakarta. Kusumo,  S.,  Hasanah,  M.,  Moeljopawiro,  S., Thohari,  M.,  Subandriyo.,  Hardja,  M., Nurhadi, A., dan Kasim, H., 2002. Panduan Karakterisasi  dan  Evaluasi  Plasma  Nutfah Talas . Bogor: Departemen Pertanian Badan Penelitian  dan  Pengembangan  Pertanian Komisi Nasional Plasma Nutfah. Leong, A.C., Yoshinori K., Masakuni T., Hironori I., Hirosuke  O.,  dan  Hajime  T.,  2009. Flavonoid glycosides in the shoot system of Okinawa Taumu ( Colocasia esculenta S. ). J. Food Chem . 2009.07.00 Loomis, T.A., 1978. Toksikologi Dasar . IKIP Press, Semarang. . Lu  F.C.,  1995. Toksikologi  Dasar  :  Asas,  Organ,
Sasaran,  dan  Penilaian  Resiko.  Edisi  ke-2 . UI Press, Jakarta. Malole,  M.  B.  M.,  dan  CSU  Pramono.,  1989. Penggunaan  Hewan-hewan  Percobaan  di Laboratorium. PAU-Bioteknologi IPB, Bogor. Mukono,  H.J.,  2005. Toksikologi  Lingkungan . Airlangga University Press Surabaya Rukmana,  R.,  1997. Ubi  jalar  budidaya  dan  pasca panen . Penerbit kanisius. Yogyakarta.
Siregar  CJP,  Sri,  Sanggariwati,  Sukirno,  Yuharni, dan Srikandi D., 1991. Prosedur Operasional  Baku  Uji  Toksisitas .  Pusat Pemeriksaan Obat dan Makanan. Siswandono dan Bambang, 1995. Kimia Mediasinal . Airlangga University Press, Surabaya