https ://ejour nal.uns rat.ac .id/v3/index.php/pharm ac on

## PHARMACON
ISSN (print): 2302 - 2493 ISSN (online): 2721 - 4923

## Uji Aktivitas Fagositosis Makrofag Ekstrak Tanaman Gedi (Ablemoschus
Manihot L.) Sebagai Imunomodulator
Ciptanti Putri Prakarsa 1* , Widdhi Bodhi 2 , Olvie Syenni Datu 3
1,2,3 Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi *Corresponding author email: ciptantiprakarsa105@student.unsrat.ac.id

## I N F O R M A S I A R T I K E L A B S T R A C T
Diterima pada 16 Juli 2023 Disetujui pada 1 Februari 2024 Dipublikasikan pada 2 Februari 2024 Hal. 419 - 430 Gedi plant (Abelmoschus manihot L.) is one of the plants that contain flavonoids which have not been made into preparations for medicinal purposes. The purpose of this study was to determine the effectiveness of gedi plant extract as an immunomodulator. By looking at the activity and capacity  of  mouse  macrophages  (Rattus  norvegicus)  with  Staphylococcus  auereus  bacteria  in vitro. The results showed that gedi leaf extract had a significant effect on the activity and capacity of  macrophages  P  (<0.05)  which  stated  that  gedi  leaf  extract  had  effectiveness  as  an immunostimulant.  At  a  concentration  of  gedi  plant  extract  of  1000  ppm,  the  activity  and phagocytosis capacity showed the highest values, namely 87.66% and 4.23
Keywords: Gedi Plants, Phagocytosis, Macrophages, Immunomodulators
A B S T R A K
DOI: 10.35799/pha.13.2024.49698
Tanaman Gedi ( Abelmoschus manihot L.) merupakan salah satu tumbuhan yang mengandung flavonoid yang belum banyak dibuat sediaan untuk menjadi pengobatan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetuhui efektivitas ekstrak tanaman gedi sebagai imunomodulator. Dengan melihat  aktivitas  dan  kapasitas  makrofag  tikus  ( Rattus  norvegicus )  dengan  bakteri Staphylococcus  auereus secara in  vitro .  Hasil  penelitian  menunjukan  ekstrak  daun  gedi memberikan  pengaruh  yang  signifikansi  terhadap  aktivitas  dan  kapasitas  makrofag  P(<0,05) menyatakan  bahwa  ekstrak  daun  gedi  memiliki  efektivitas  sebagai  imunostimulan.  Pada konsentrasi ekstrak tanaman gedi 1000 ppm menunjukan nilai aktivitas dan kapasitas fagositosis tertinggi yaitu 87,66% dan 4,23.
Kata Kunci: Daun Gedi ( Abelmoschus Manihot L.), Fagositosis, Makrofag, Imunomodulator

## PENDAHULUAN
Banyak jenis virus ataupun bakteri yang dapat menyerang tubuh dan membuat tubuh terserang penyakit.  Sistem  kekebalan  tubuh  memiliki  peran  penting  dalam  memengaruhi  kerja  tubuh  untuk melawan penyakit. Tubuh dapat dengan mudah terpapar penyakit jika imunitas atau sistem kekebalan tubuh tidak bekerja dengan optimal. Untuk mengatasi penurunan sistem imun terdapat senyawa yang digunakan  untuk  meningkatkan  kerja  dari  imun.  Bahan  yang  dapat  memodulasi  sistem  kekebalan tubuh disebut dengan imunomodulator.
Aktivitas imunomodulator dapat dikaji dengan melihat aktivitas fagositosis makrofag. Menurut Ponkshe (2002) fagositosis adalah salah satu proses  yang paling banyak digunakan untuk skrining bahan aktif yang mempengaruhi respon imun.
Terdapat  banyak  senyawa  yang  terkandung  dari  tanaman  yang  memiliki  kegunaan  untuk meningkatkan  sistem  kekebalan  tubuh.  Salah  satu  senyawa  yang  memiliki  efek  tersebut  adalah flavonoid. Flavonoid mempunyai efek imunostimulan yang dapat memberikan efek pada suatu respon imun  yang  non  spesifik  contohnya  peningkatan  fagositosis,  kemotaksis  neutrofil  dan  makrofag (Kurnianingtyas ,2013).
Terdapat  30.000  jenis  tanaman  yang  berada  di  indonesia  dan  dalam  hal  itu  ada  7.000  jenis tanaman  yang  memiki  khasiat  sebagai  obat  (Jumiarni,2017).  Khusus  di  wilayah  sulawesi  utara terdapat  tanaman  yang  sudah  dikenal  sejak  lama  yaitu  Tanaman  Gedi  ( Ablemoschus  manihot  L.) Tanaman ini merupakan tanaman obat yang di percaya masyarakat dapat menyembuhkan penyakit dan memiliki kandungan flavonoid yang tinggi (Mamahit dan Soekamto, 2010).
Berdasarkan  uraian  tersebut,  penelitian  ini  dilakukan  untuk  melihat  respon  imunologi  sel makrofag  terhadap  aktivitas  dan  kapasitas  fagositosis  sel  dengan  pemberian  ekstrak  tanaman  gedi ( Ablemoschus manihot L.) sebagai Imunomodulator.

## METODOLOGI PENELITIAN Pelaksanaan Penelitian
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan  pada  bulan  April  2023  hingga  bulan  Mei  2023  di Laboratorium  Mikrobiologi  Program  Studi  Farmasi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Alat dan Bahan Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah gunting, pisau, sarung tangan, blender, ayakan, pipet steril, hemositometer, mikroskop ,kaca objek, mikropipet, incubator,vortex, sentrifuge,vial 2 ml dan 10 ml, microtube, ose, gelas beaker, tabung reaksi, alumunium foil, autoklaf,timbangan, pisau bedah steril
Bahan Tanaman Gedi ( Abelmoschus manihot L . ), Tikus, Air, etanol 96%, etanol 70%, kloroform, kapas,  larutan  PBS (Phosphat  Buffered  Saline) ,  larutan  tripan  blue  0,4  %,  stimuno  forte ®,giemsa,Na2EDTA, BaCl 1%, NaCl 0,9%, H 2 SO 4 , aquadest.

## Preparasi sampel
Dilakukan sortasi basah 3 kg daun gedi hijau, daun gedi hijau dicuci dengan air yang mengalir, dikeringkan dan dilakukan sortasi kering.

## Pembuatan Simplisia
Pembuatan  simplisia  dilakukan  dengan  cara  preparasi  sampel,  kemudian  di  blender  dan diayak untuk memperoleh serbuk dari daun gedi.

## Pembuatan Ekstrak
Maserasi dilakukan selama 5 hari dengan etanol 96%.  Hal ini dilakukan untuk menperoleh ekstrak daun gedi. Simplisia dimaserasi dengan etanol 96% selama 5 hari dan remaserasi dengan lama dan perbandingan yang sama.

## Aklimatisasi Hewan Percobaan
Sebelum digunakan, hewan percobaan harus diadaptasikan dengan lingkungan. Aklimatisasi dilakukan  selama  tujuh  hari  dan  selama waktu  tersebut  hewan  percobaan  hanya  diberi  makan  dan minum (Mutiarahmi et al., 2021).

## Penyiapan Sel Makrofag Peritonium Tikus
Tikus dieutanasia dengan kloroform. Setelah mati, kulit bagian abdomen dibersihkan dengan etanol  70%  dan  dikelupas  dengan  gunting  dan  pisau  bedah  steril.  Suntikan  larutan  PBS  sebanyak kurang lebih 10 ml kedalam rongga peritonium. Abdomen diusap perlahan dengan tangan selama 2- 3 menit kemudian cairan peritonium disedot dengan pipet steril dan di sentrifus 1500 rpm selama 15 menit. (Marusin dan Chairul, 2012).

## Pembuatan Suspensi Bakteri
Pembuatan  bakteri  uji  digunakan  sebagai  komponen  yang  akan  difagositosis  oleh  sel makrofag saat pengujian fagositosis. Suspensi bakteri dibuat dengan mengambil biakan murni bakteri uji,  digunakan  bakteri Staphylococcus  aureus ,  diambil  dengan  ose  steril  dan  disuspensikan menggunakan larutan NaCl 0,9% sebanyak 2 mL. kekeruhan suspense dibandingkan dengan standar kekeruhan larutan McFarland 0,5. McFarland dibuat dengan mencampurkan 0,05 mL BaCl 2 1% dan 9,95 mL H 2 SO 4 (Wahyuni et al., 2019).

## Uji Viabilitas
Uji  viabilitas  makrofag  dilakukan  dengan  melihat  kemampuan  makrofag  untuk  hidup. Dihitung  jumlah  sel  viabel  (tidak  terwarnai)  dengan  jumlah  sel  yang  mati  (terwarnai).  Kemudian dihitung  persen  viabilitas  jumlah  sel  hidup  yang  diamati  di  bawah  mikroskop  perbesaran  100x. Suspensi sel makrofag dicampur dengan larutan tripan biru 0,4% lalu dimasukkan ke hemositometer. Selanjutnya  dilakukan  perhitungan  jumlah  sel  yang  hidup  (tidak  terwarnai  oleh  tripan  biru)  dan jumlah  total  sel  untuk  mengetahui  viabilitas  sel.  Menurut    Sugiartanti  dan  salasia  (2018)  syarat presentase viabilitas harus menunjukan angka >70%. Presentase viabilitas ini dapat dihitung dengan persamaan berikut.
%Viabilitas = Jumlah sel hidup Jumlah sel total × 100

## Uji Aktivitas Fagositosis
Aktivitas imunomodulator ditentukan dengan menghitung aktivitas fagositosis sel makrofag tikus.  Nilai  kapasitas  fagositosis  adalah  presentase  jumlah  bakteri  yang  terfagositosis  pada  100
makrofag  yang  aktif.  Untuk  menghitung  bakteri  yang  terfagositosis  menggunakan  mikroskop perbesaran 100x dan dilihat berapa banyak bakteri yang terdapat dalam 1 makrofag.   Nilai aktivitas fagositosis adalah persentase sel makrofag yang aktif melakukan proses fagositosis di antara 100 sel makrofag.
Kapasitas Fagositosis = Jumlah bakteri yang terfagositosis Jumlah makrofag yang aktif ( 100 )
Aktivitas Fagositosis = Jumlah makrofag yang ℎidup
Jumlah makrofag yang dihitung ( 100 ) × 1 00%
Hewan coba dibagi menjadi 3 kelompok:
1. Kelompok  I  (kontrol  negatif):  200  µl  suspensi  sel  makrofag  ditambahkan  dengan  200  µl suspense bakteri dan 200 µl PBS yang disiapkan.
2. Kelompok  II  (kontrol  positif)  :  200  µl  suspensi  sel  makrofag  ditambahkan  dengan  200  µl suspensi  bakteri  dan  200  µl  larutan  Stimuno  Forte®  yang  disiapkan  dengan  konsentrasi 0.1,1,10,100,1000 ppm.
3. Kelompok III (kontrol larutan uji) : 200 µl suspensi sel makrofag ditambahkan dengan 200 µl suspensi  bakteri  dan  200  µl  suspense  ekstrak  yang  disiapkan  dengan  konsentrasi 0,1,10,100,1000 ppm.
Masing-masing campuran di inkubasi pada suhu 37 o C, selama 30 menit, Kemudian 50 µl larutan Na 2 EDTA 0,2 M ditambahkan ke dalam setiap campuran untuk mengakhiri proses fagositosis dan diaduk sampai homogen. Setelah itu, masing-masing dibuatkan preparat ulas dengan diambilnya 100 µL campuran suspensi lalu diusapkan di atas kaca objek. Kemudian, difiksasi menggunakan methanol selama 6 menit. Pewarnaan dilanjutkan dengan mencelupkan kaca objek ke dalam larutan giemsa dan didiamkan selama 45 menit. Dan dilanjutkan pembilasan dengan aquades yang mengalir. Preparat selanjutnya didiamkan hingga mengering dengan posisi vertikal. Preparat yang telah kering diamati dibawah menggunakan mikroskop dengan perbesaran 10 x 40.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses dari ekstraksi daun gedi yaitu diawali dengan maserasi. Selama proses maserasi adanya pengadukan simplisia dan pelarut yang bertujuan untuk meningkatkan kontak antar serbuk simplisia dan pelarut sehingga banyak zat- zat aktif dalam larutan penyari, setelah itu diamkan selama 5 x 24 jam untuk zat aktif dari dalam sel dapat berdifusi keluar sel. Pelarut yang digunakan pada maserasi yaitu pelarut etanol 96% yang bersifat polar. Digunakannya etanol 96% sebagai pelarut diharapkan dapat  melarutkan  senyawa  flavonoid.  Etanol  96%  juga  bersifat  universal  yaitu  dapat  menarik Sebagian besar senyawa kimia yang terkandung di dalam simplisia (Salamah, 2015).
Pengujian  dari  aktivitas  fagositosis  makrofag  dengan  bakteri Staphylococcus  aureus ,  diawali dengan  mengisolasi  makrofag  yang  terdapat  pada  tikus  putih  jantan.  Alasan  digunakannya  tikus jantan  dibandingkan  tikus  betina  karena  tikus  betina memiliki  lebih  banyak  hormon  progesterone. Hormone  progesterone  dapat  menginhibisi  sel  pro  inflamasi  yang  dapat  menghambat  aktivasi makrofag (Astawa et al ,2012).
(Jensch-Junior et al ., 2006)
Sel makrofag diisolasi dari rongga peritoneum tikus, dikarenakan pada daerah rongga peritoneum tersebut  memiliki  jumlah  makrofag  yang  cukup  banyak  dan  mudah  dalam  pengambilannya (Baratawidjaja,  2009).  Uji  viabilitas  dilakukan  untuk  mengetahui  kemampuan  hidup  (daya  hidup) yang dinyatakan dalam % dengan melihat jumlah sel tidak hidup (terwarnai) oleh larutan trypan blue. Hasil  rata-rata  uji  viabilitas  yang  diperoleh  dari  penelitian  ini  sebesar  95,74%  sehingga  makrofag yang digunakan pada penelitian ini layak  digunakan untuk pengujian sel lanjutan karena melebihi persyaratan % viabilitas sel yaitu angka 70%. (Sugiartanti dan Salasia, 2018).
.
Gambar 1 . Hasil Uji viabilitas menunjukan makrofag yang aktif(A) dan tidak aktif (B)
Tabel 1. Hasil Uji Viabilitas Makrofag
Viabilitas Sel Makrofag Jumlah sel makrofag yang hidup Jumlah sel makrofag yang mati %Viabilitas Sel Replikasi 1 2974 313 95,01 Replikasi 2 2721 281 96,83 Replikasi 3 2871 301 95,38
Kemampuan fagositosis merupakan fungsi yang melekat pada sel makrofag dan merupakan aktivitas awal dari respon imun bawaan. Oleh karena itu, makrofag sering dugunakan dalam studi imunologi  untuk  mempelajari  aktivitas  fagositosis  dari  suatu  makrofag  (Pavlou et  al. ,  2017). Aktivitas  fagositosis  dan  kapasitas  fagositosis  merupakan  parameter  yang  dapat  digunakan  untuk mengukur kemampuan fagositosis suatu makrofag (Safri,2018).
Uji fagositosis makrofag dilakukan dengan 5 tingkat konsentrasi larutan uji 1000,100,10,1, dan 0,1 ppm dan ditambah kontrol positif dengan 5 konsentrasi yaitu 1000,100,10,1,dan 0,1 ppm dan kontrol negatif. Makrofag merupakan sel fagositik utama yang berperan menangkal serangan patogen melalui mekanisme fagositosis, berperan penting baik pada respon imun bawaan maupun respon imun adaptif
Kemampuan  fagositosis  dari  suatu  makrofag  diukur  dari  kemampuannya  dalam memfagositosis  suatu  bakteri.  Uji  kapasitas  fagositosis  makrofag  menggunakan  parameter  yaitu jumlah bakteri yang dapat difagositosis oleh 100 makrofag aktif dan aktivitas fagositosis yaitu jumlah makrofag yang mampu memfagosit bakteri.
A B
Nilai  aktivitas  fagositosis  sel  makrofag  diperoleh  dari  jumlah  sel  makrofag  yang  aktif memfagositosis bakteri Staphylococcus aureus dari total 100 sel makrofag yang dihitung kemudian di persentasikan.
Berdasarkan  analisis  statistika,  untuk  uji normalitas  menunjukan  bahwa  nilai  dari  aktivitas fagositosis yang terdapat pada masing-masing kelompok perlakuan terdistribusi normal. Untuk nilai signifikansi  normalitas  sebesar  0,00  (P>0,05).  Pada  uji  statistic  berikutnya  yaitu  uji  homogenitas menunjukan  nilai  signifikasi  sebesar  (P>0,05),  sehingga  untuk  data  yang  didapat  pada  penelitian disebut homogen. Setelah data yang diuji telah terbukti berdistribusi normal dan homogen, maka akan dilakukan uji One-Way ANOVA dengan dengan taraf signifikansi 5 %, agar dapat mengetahui ada atau tidak ada pengaruh dari ekstrak daun gedi terhadap aktivitas fagositosis makrofag.
Setelah  dilakukannya  uji One-Way ANOVA  sehingga  didapatkan  nilai  signifikansi  sebesar (P  >  0,05),  yang  menunjukan  bahwa  pemberian  dari  ekstrak  daun  gedi  secara  signifikan  dapat mempengaruhi  aktivitas  fagositas  makrofag.  Oleh  karena  itu,  data  diuji  lanjut  untuk  mengetahui perbedaan pengaruh pada masing-masing konsentrasi.
Tabel 2. Hasil Uji Aktivitas Fagositosis Makrofag Konsentrasi (ppm) % Aktivitas Fagositosis Makrofag Ekstrak Kontrol Positif Kontrol Negatif 0 - - 35,93±3,40 0,1 58,66±3,51* 72,66±3,21* - 1 70,33±1,52* 79,33±1,52* - 10 76,33±3,05* 84,33±1,52* - 100 81,66±2,08* 89±2* - 1000 87,66±2,52* 94,33±2,08* -
Keterangan: *) Menunjukan perbedaan yang nyata dengan kontrol negatif pada p<0,05
Tabel diatas menunjukan nilai dari kontrol positif 1000 ppm yang menunjukan nilai aktivitas fagositosis yang paling tinggi diantara beberapa perlakuan yang ada dengan diikuti dengan kontrol positif 100 ppm,ekstrak 1000 ppm hingga nilai terendah ditunjukan pada nilai dari kontrol negatif. Menurut tabel diatas ekstrak dari daun gedi memilki efek imunomodulator dengan aktivitas tertinggi yaitu pada ekstrak konsentrasi 1000 ppm, dengan rata-rata aktivitas yaitu 87,66%.
Terdapat  perbedaan  nilai  persentase  yang  nyata  antara  semua  konsentrasi  dari  ekstrak  dan kontrol  positif  dan  kontrol  negatif.  Kontrol  positif  1000  ppm  meningkatkan  aktivitas  fagositosis sebesar  94,33%  dan  Ekstrak  1000  ppm  87,66%  dibandingkan  dengan  kontrol  negatif  yang  hanya dapat meningkatkan aktivitas fagositosis sebesar 35,93 %.
Tabel 3. Hasil uji statistik
Uji lanjutan yang akan digunakan yaitu uji Duncan, uji ini dilakukan agar dapat mengetahui perbedaan antara kelompok perlakuan yang berpengaruh terhadap aktivitas makrofag. Hasil dari uji Duncan pada taraf signifikansi 0,05 sedangkan hasil analisis statistikan secara lengkap dapat dilihat pada tabel 2. Berdasarkan hasil dari uji lanjut Duncan pada setiap konsentrasi dari eksrak, kontrol positif dan kontrol negatif, dapat dijelaskan bahwa pada larutan uji 1 ppm menunjukan perbedaan yang tidak berbeda. ditunjukan dengan nilai aktivitas fagositosis yang diperoleh yaitu 70,33 % dan

## ANOVA Aktivitas Fagositosis
Nilai Aktivitas Fagositosis
Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups 8100.048 10 810.005 127.993 .000 Within Groups 139.227 22 6.328 Total 8239.275 32 Nilai Aktivitas Fagositosis Uji Duncan kelompok N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Duncan a kontrol negatif 3  35.93 Larutan uji 0,1 PPM 3 58.66 Larutan uji 1 PPM 3 70.33 Kontrol positif 0,1 PPM 3 72.66  72.66 Larutan uji 10 PPM 3 76.33  76.33 Kontrol positif 1 PPM 3 79.33  79.33 Larutan uji 100 PPM 3 81.66 81.66 Kontrol positif 10 PPM 3 84.33 84.33 Larutan uji 1000 PPM 3 87.66 87.66 Kontrol positif 100 PPM 3 89.00 Kontrol positif 1000 PPM 3 94.33 Sig. 1.000  1.000 .268 .088 .158 .268 .208 .119 .523 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
72,66 %, dan untuk konsentrasi yang lebih tinggi yaitu larutan uji 10 ppm memiliki perbedaan yang tidak jauh yaitu 72,66 % dan 76,33 % dengan kontriol positif 1 ppm. Sedangkan untuk konsentrasi tertinggi dari larutan uji yaitu 1000 ppm menunjukan aktivitas fagositosis yang tidak jauh berbeda dengan kontrol positif 100 ppm yang dengan ini dapat disimpulkan bahwa hasil dari uji Duncan untuk ekstrak  daun  gedi  dalam  penelitian  ini  efektif  untuk  meningkatkan  aktivitas  fagositosis  makrofag pada  semua  konsentrasi  karena  dibandingkan  dengan  nilai  kontrol  negatif  yang  menunjukan  nilai yang jauh berbeda yaitu 35,9.
Tabel 4. Nilai Kapasitas Fagositosis Makrofag Konsentrasi (ppm) Nilai Kapasitas Fagositosis Makrofag Ekstrak Kontrol Positif Kontrol Negatif 0 - - 2,05±0,02 0,1 2.23±0,10* 2,52±0,08* - 1 2,38±0,10* 2,87±0,07* - 10 2,78±0,22* 3,19±0,20* - 100 3,24±0,09* 3,62±0,17* - 1000 4,23±0,06* 4,58±0,12* - Keterangan: *) Menunjukan perbedaan yang nyata dengan kontrol negatif pada p<0,05
Perhitungan kapasitas fagositosis dari suatu sel makrofag pada penelitian ini dilakukan untuk mengamati  kemampuan  maksimal  dari  sel  makrofag  untuk  memfagositosis  antigen  asing  setelah diberikan  ekstrak  daun  gedi.  Pengamatan  Kapasitas  Fagositosis  makrofag  diperloeh  dari  jumlah bakteri Staphylococcus aureus yang difagositosis oleh 100 makrofag (Roznizar, 2017).
Dari hasil pengamatan yang ada didapat bahwa nilai rerata dari kapasitas fagositosis berbeda pada  setiap  konsentrasi,  yang  kemudian  data  dianalisis  secara  statistika  untuk  menguji  nilai normalitas dan homogenitas pada data tersebut.
Berdasarkan analisis statistika, uji normalitas menunjukan bahwa nilai kapasitas fagositosis yang dihasilkan pada masing-masing kelompok perlakuan terdistribusi normal. Nilai signifikansi tiap konsentrasi (P>0,05). Selanjutnya pada uji homogenitas menunjukan nilai signifikansi yang sesuai pada tiap konsentrasi (P>0,05), sehingga data pada penelitian ini telah homogen lampiran 10. Setelah data  yang  diuji  terbukti  berdistribusi  normal  dan  homogeny,  selanjutnya  dilakukan  uji One  Way - ANOVA dengan taraf signifikansi 5% untuk mengetahui ada atau tidaknya pengaruh ekstrak daun gedi terhadap kapasitas fagositosis.
Berdasarkan  uji One  Way ANOVA  menunjukan  nilai  signifikansi  antara  tiap  konsentrasi diatas  0,05  (lampiran  12),  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  gedi  secara  signifikan dapat  mempengaruhi  kapasitas  fagositosis  makrofag.  Oleh  karena  itu,  data  diuji  lanjut  untuk mengetahui perbedaan dari pengaruh dari masing- masing konsentrasi.
Tabel 5. Hasil Statistik Kapasitas Fagositosis

## ANOVA Kapasitas Fagositosis
Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 19.894 10 1.989 116.566 .000 Within Groups .375 22 .017 Total 20.269 32 Nilai kapasitas fagositosis Uji Duncan Kelompok N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 4 5 6 7 8 Duncan a kontrol negatif 3  2.05 Larutan Uji 0.1 ppm 3  2.22 2.22 Larutan Uji 1 ppm 3 2.38 2.38 kontrol positif 0,1 ppm 3 2.52 Larutan Uji 10 ppm 3 2.7 8 kontrol positif 1 ppm  3 2.8 7 kontrol positif 10 ppm 3 3.1 9 Larutan Uji 100 ppm  3 3.2 4 kontrol positif 100 ppm 3 3.62 Larutan Uji 1000 ppm 3 4.23 kontrol positif 1000 ppm 3 4.58 Sig. .118 .156 .183  .39
1 .64 4 1.000  1.000  1.000
Pada berdasarkan hasil dari uji Duncan menunjukan konsentrasi ekstrak 1000 ppm memiliki nilai tertinggi diantara konsentrasi ekstrak yang ada. Akan tetapi kontrol negatif dan larutan uji 0,1 ppm berada di tabel yang sama yang artinya hal tersebut menunjukan pengaruh yang tidak berbeda nyata  antara  kontrol  negatif  dan  larutan uji  konsentrasi  0,1  ppm.  Oleh  karena  itu,  berdasarkan  uji lanjut  Duncan  untuk  pemberian ekstrak  daun  gedi  pada  konsentrasi  1000  ppm  memiliki  pengaruh
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
yang berbeda secara nyata dengan kelompok konsentrasi yang ada. Dan larutan uji 0,1 ppm memiliki pengaruh yang tidak berbeda secara nyata dengan kontrol negatif.
Adanya nilai aktivitas dan kapasitas fagositosis dari kontrol negatif yang dapat menunjukan bahwa  respon  imun  bawaan  juga  disebut  dengan  respon  imun  alami  yang  muncul  sejak  lahir  dan bekerja dengan cepat untuk melindungi tubuh dari serangan-serangan pathogen (Coico dan Geoffrey, 2015). Sel makrofag memiliki respon imun yang berperan penting dalam imunitas bawaan berupa aktivitas  fagositosis,  sehingga  dapat  mempertahankan  imunitas  tubuh  dari  antigen yang  masuk  ke dalam tubuh (Rosales dan Uribe-Querol, 2017). Oleh karena itu aktivitas fagositosis yang ada pada kontrol  negatif  merupakan  respon  alami  yang  dilakukan  oleh  sel  makrofag  yang  muncul  akibat adanya paparan oleh bakteri Staphylococcus aureus yang berfungsi sebagai antigen yang masuk ke dalam tubuh.
Untuk peningkatan aktivitas dan kapasitas fagositosis pada larutan uji ekstrak tanaman gedi dikarenakan  ekstrak  daun  gedi  memiliki  flavanon  dan  flavanonol  yang  merupakan  flavonoid  dan memiliki  potensi  sebagai  imunomodulator.  Menurut  (Wang,  2022)  tanaman  gedi  abelmoschus manihot memiliki flavonoid yang tinggi dapat menstabilkan Reactive Oxidative Species (ROS) yang dihasilkan dari proses aktivitas seluler seperti aktivitas fagositosis makrofag, yag bertujuan agar sel makrofag terjaga dari kerusakan sel yang diakibatkan dari radikal bebas.
Kandungan  flavonoid  dari  ekstrak  daun  gedi  yang  tinggi  terbuukti  memiliki  kemampuan imunomodulator untuk memperbaiki sistem imun, sehingga mampu meningkatkan sel fagositik (Asti, 2015).  Berdasarkan  penjelasan  diatas,  maka  pada  penelitian  ini  menunjukan  bahwa  pemberian ekstrak  daun  gedi  dapat  mempengaruhi  aktivitas  dan  kapasitas  fagositosis  makrofag  secara signifikan. Hal tersebut dapat dibuktikan lewat hasil dalam uji One Way –ANOVA.
Perbedaan  kelompok  konsentrasi  ekstrak  yang  diberikan  menunjukan  pengaruh  yang beragam.  Pada  uji  lanjut  Duncan  menunjukan  bahwa,  pemberian  ekstrak  daun  gedi Abelmoschus manihot dengan konsentrasi 1000 ppm memiliki efektifitas paling baik diantara konsentrasi ekstrak yang lain  dalam meningkatkan aktivitas dan kapasitas fagositosis makrofag.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak  daun  tanaman  Gedi  ( Abelmoschus  manihot L. ) memiliki  efektivitas  sebagai imunomodulator  dikarenakan  terjadinya  peningkatan  aktivitas  dan  kapasitas  fagositosis makrofag.
2. Ekstrak  daun  tanaman  Gedi  ( Abelmoschus  manihot L. ) memiliki  peningkatan  aktivitas  dan kapasitas fagositosis makrofag dengan beberapa variasi konsentrasi untuk konsentrasi yang memiliki efek paling tinggi adalah 1000 ppm.

## SARAN
Perlu dilakukannya uji toksisitas Ekstrak daun tanaman Gedi ( Abelmoschus manihot) terhadap sel makrofag.

## DAFTAR PUSTAKA
Astawa,  N.M  ,Suaniti  NM,  Djelantik  AA,  Suastika  K,  (2012).  Kerusakan  hati  akibat  keracunan alkohol berulang pada tikus wistar. Jurnal Veteriner , 13(2) : 199-204.
Asti,  I.P.  2015.  Pengaruh  Ekstrak  Bijo  Kopi  Robusta( Coffea  Robbusta) Terhadap  Aktivitas Fagositosis Sek Monosit. [Skripsi]. Universitas Negeri Jember.
Baratawidjaja  K,  Rengganis  I.2009.  Imunologi  Dasar,  Edisi  Kedelapan.  Jakarta:  Balai  Penerbit Fakultas Kedokteran Indonesia;
Coico,Richard and Geoffrey Sunshine.2015. Immunology : A Short Course . John Wiley & Sons, New York.
Jumiarni W, Komalasari O. 2017. Inventory of Medicinal Plants as Utilized by Muna Tribe in Kota Wuna Settlement. Tradit Med J ; 22(1) :45–56.
Kurnianingtyas,  E.,  Djati,  M.  S.,  &  Rifa’i,  M.  2013.  Aktivitas  Imunomodulator  Polyscias  obtusa Terhadap  Sistem  Imunitas  Pada  Bone  Marrow  Broiler  Setelah  Pemberian  Salmonella typhimurium. The Journal of Experimental Life Sciences, 3(1) , 25–30.
Mamahit, L dan N. H. Soekamto. 2010.Satu Senyawa Asam Organik Yang Diisolasi dari Daun Gedi
( Abelmoschus Manihot L. Medik) Asal Sulawesi Utara. Chem. Prog.3(1) .42-45.
Marusin,  Sofnie  dan  Chairul  Chairul.2012.  Efek  Ekstrak  Air  dan  Alkohol  pada  Siwak  (Salvadora persica L.)Terhadap Peningkatan Aktivitas dan Kapasitas Fagositosis Sel Makrofag.Media Litbang Kesehatan.Cibinong: LIPI.
Mutiarahmi CN , Hartady T , Lesmana R. 2021. Kajian Pustaka: Penggunaan Tikus Sebagai Hewan Coba  di  Laboratorium  yang  Mengacu  pada  Prinsip  Kesejahteraan  Hewan.  Indonesia Medicus Veterinus. 10(1): 134-145
Pavlou  Sophia,  Luxi  Wang,  Heping  Xu,  Mei  ChenJ.2007.  Higher  phagocytic  activity  of thioglycollate-elicited  peritoneal  macrophages  is  related  to  metabolic  status  of  the  cells. Journal of Inflammation 14: 4
Ponkshe, Indap., 2002. In vivo and in vitro evaluation for immunomodulatory activity of three marine animal extracts with reference to phagocytosis . IJEB 40(12) 1399-1402
Rosales Carlos and Eileen Uribe-Querol. 2017. Phagocytosis: A Fundamental Process in Immunity. Biomed Res Int. 9042851 :
Rosnizar, S. Maulida, K. Eriani dan Suwarno. (2017). Potensi ekstrak daun flamboyan [Delonix regia (Boj. Ex Hook.) Raf.] terhadap peningkatan aktivitas dan kapasitas makrofag. BIOLEUSER 1(3) :104-115.
Safri,  S.F  2018. Pengaruh  aneka  sajian  minuman  kopi  robusta  terhadap  aktivitas  dan  kapasitas fagositosis  sel  makrofag  peritoneum  mencit  yang  diinduksi  bacillus  cereus. Skripsi  . Universitas negeri jember
Salamah, N & Erlinda Widyasari. (2015). Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Daun Kelengkeng (Euphoria  longan  (L.)  Steud.)  Dengan  Metode  Penangkapan  Radikal  2,2’-Difenil-1- Pikrilhidrazil. Pharmaciana ,Vol. 5, No. 1, Hal. 25-34.
Sugiartanti,  D.D.,  Salasia,  S.I.O.  (2018).  Kemampuan  Fagositosis  Sel  Makrofag  Terhadap Staphylococcus  aureus  Isolat  Asal  Ayam  dengan  Opsonisasi  Secara  In  vitro.  In  Seminar Hayati V. 101-109.
Wang  Shih-Wei,Chi-Chang  Chang , Chin-Feng  Hsuan,Tzu-Hsien  Chang,Ya-Ling  Chen,Yun-Ya Wang,Teng-Hung  Yu,Cheng-Ching  Wu,Jer-Yiing  Houng.  2022.  Neuroprotective  Effect of Abelmoschus manihot Flower Extracts against the H 2 O 2 -Induced Cytotoxicity, Oxidative Stress and Inflammation in PC12 Cells . Bioengineering.9(10) :596
Yulinery  T  dan  Nurhidayat  N.  2012.  Penggunaan  Ekstrak  Fermentasi  Beras  Dari  Beberapa  Jenis Monascus  Purpureus  Untuk  Aktivitas  Invitro  Fagositosis  Sel  Makrofag  Dan Polimorfonuklear Peritoneum Tikus Sebagai Immunomodulator. Berita Biologi 11(2)