Jurnal Lahan Suboptimal: Journal of Suboptimal Lands ISSN: 2252-6188 (Print), ISSN: 2302-3015 (Online, www.jlsuboptimal.unsri.ac.id) Vol. 8, No.1: 86-93 April 2019 DOI: https://doi.org/10.33230/JLSO.8.1.2019.404
Solubilisasi Fosfat Anorganik oleh Burkholderia spp . pada Rizosfer Kelapa Sawit ( Elaeis guineensis Jacq.) di Tanah Mineral Masam
Solubilization of Inorganic Phospate by Burkholderia spp. Associated with Oil Palm Rhizosphere in Mineral Acid Soil
Gregorius Baskara Aji Nugraha 1*) , Ruli Wandri 1 , Dwi Asmono 1
1 Departemen Riset dan Pengembangan, PT. Sampoerna Agro, Tbk., Palembang, 30127
*) Penulis untuk korespondensi: baskara.anugraha@gmail.com

## ABSTRACT
Phosphate  Solubilizing  Bacteria  (PSB)  play  important  role  by  enhancing  phosphate availability bounded with Al3+ or  Fe3+ in acidic soils to oil palm plants through release the inorganic phosphate by enzyme or organic acids solubilization. The aims of this  study were to  isolate  of  PSB  from  oil  palm  rhizosphere  and  to  conduct  a  comparative  analysis  of  the solubility  inorganic  phosphates  source  by  selected  PSB.  The  ability  of  15  selected  PSB  to grow  and  solubilize  aluminum  phosphate  (AlPO4)  and  iron  phosphate  (FePO4)  was examined  and  identified.  The  highest  phospate  solubilising  efficiency  showed  K3.1  isolate with phosphate solubilization index 3.2 on NBRIP media. Quantitative analysis revealed that isolate  K3.1  solubilized 53.52  mg/mL  phosphate  in  5  days  after  being  inoculated  in  AlPO4 containing  liquid  medium,  isolate  A4  solubilized  63.45  mg/mL  phosphate  in  5  days  after being inoculated in FePO4 containing liquid medium accompanied by a decrease in pH of the growth medium. Based on the 16s rRNA gene sequence analysis, isolate K3.1 and A.4 were closely related to Burkholderia arboris and Burkholderia gladioli . This potential isolates can be used in order to make oil palm crops more sustainable especially on marginal soil with low pH and less dependent on inorganic P fertilizers.
Keywords: AlPO 4 ; bacteria; FePO 4 ,; NBRIP; 16S rRNA

## ABSTRAK
Bakteri  Pelarut  Fosfat  (BPF)  berperan  penting  dengan  meningkatkan  ketersediaan fosfat  yang  terikat  kompleks  dengan  Al 3+ atau  Fe 3+ di  tanah  masam  bagi  tanaman  kelapa sawit  melalui  mekanisme  pelarutan  dengan  menggunakan  enzim  maupun  asam  organik. Tujuan dari penelitian ini adalah mengisolasi BPF dari rizosfer kelapa sawit dan melakukan analisis komparatif sumber kelarutan fosfat anorganik oleh BPF yang dipilih. Kemampuan 15 isolat BPF terpilih dalam melarutkan aluminium fosfat (AlPO 4 ) dan besi fosfat (FePO 4 ) sudah diteliti  dan  diidentifikasi.  Efisiensi  pelarut  fosfat  tertinggi  ditunjukkan  isolat  K3.1  dengan indeks  pelarutan  fosfat  sebesar  3.2  pada  media  NBRIP.  Pada  pengujian  kuantitatif,  isolat K3.1 melarutkan 53,52 mg/mL fosfat dalam 5 hari setelah diinokulasi dalam media cair yang mengandung  AlPO 4 ,  isolat  A4  melarutkan  63,45  mg/mL  fosfat  dalam  5  hari  setelah diinokulasi dalam media cair yang mengandung FePO 4 . Berdasarkan analisis urutan gen 16S rRNA,  isolat  K3.1  dan  A.4  terkait  erat  dengan Burkholderia  arboris dan Burkholderia gladioli .  Isolat  potensial  ini  dapat  digunakan  untuk  membuat  pupuk  hayati  bagi  tanaman kelapa  sawit  terutama  pada  tanah  marginal  dengan  pH  masam  dan  mengurangi ketergantungan terhadap pupuk P anorganik.
Kata kunci: AlPO 4 ; bakteri; FePO 4 ,; NBRIP; 16S rRNA

## PENDAHULUAN
Kelapa  sawit  ( Elaeis  guineensis Jacq.)  merupakan  salah  satu  komoditas unggulan  Indonesia  karena  menghasilkan devisa  terbesar  dari  sektor  perkebunan. Kebutuhan minyak nabati dari kelapa sawit untuk  industri  pangan  dan  bahan  bakar (biodiesel) mengalami  peningkatan  seiring dengan  meningkatnya  jumlah  penduduk  di dunia  (Euler et  al. ,  2017;  Hoffmann et  al. , 2017). Perkebunan kelapa sawit di Indonesia merupakan yang terluas di dunia, namun  produktivitasnya  cukup  rendah. Salah  satu  penyebabnya  adalah  rendahnya efisiensi  pemupukan  pada  perkebunan kelapa sawit terutama unsur fosfor (Acevedo et al. , 2014; Istina et al. , 2015).
Fosfor  (P)  adalah  unsur  hara  makro esensial  yang  berperan  penting  bagi pertumbuhan  terutama  tanaman  kelapa sawit.  Tanaman  yang  mengalami  defisiensi unsur ini
berpotensi terhambat pertumbuhan  tanamannya  sehingga  dapat menyebabkan  penurunan  produksi  (Sarker, Talukder,  dan  Islam,  2014).  Kandungan  P pada tanah - tanah suboptimal berada dalam jumlah yang sedikit dan sulit larut di dalam air  sehingga  diperlukan  pemupukan  P. Pemupukan  P  pada  lahan  pertanian  yang dilakukan  secara  intensif  menyebabkan tanah menjadi jenuh P. Efisiensi pemupukan  P  hanya  berkisar  antara  10%  - 30%  pada  tanah  -  tanah  masam  dengan kelarutan  Al  dan  Fe  yang  tinggi  (Panda, Rahman  dan  Panda,  2016;  Zheng et  al. , 2019). Beberapa  mikroorganisme  seperti bakteri  dan  jamur  memiliki  kemampuan untuk  melarutkan  P  di  dalam  tanah  agar tersedia  bagi  tanaman.  Peran  bakteri  dalam melarutkan  P  lebih  banyak  digunakan karena  bakteri  juga  mampu  menghasilkan senyawa  lain  seperti  asam  amino,  vitamin dan  hormon  pemacu  tumbuh  seperti giberelin  dan  IAA    yang  berguna  bagi pertumbuhan  tanaman  (Shahid  dan  Khan, 2018; Teng et al. , 2018; Zheng et al. , 2019) Mekanisme  kerja  bakteri  pelarut fosfat  (BPF)  dalam  melarutkan  P  yang berasal  dari  tanah  maupun  P  dari  aktivitas
pemupukan    pada  suatu  lahan  pertanian didasarkan  kemampuan  bakteri  dalam mensekresikan    asam-asam  organik  seperti asam  sitrat,  asam  format,  asam  oksalat, asam  laktat,  asam  asetat,  dan,  asam  malat. Peningkatan  asam  organik  biasanya  diikuti dengan  pembentukan  kelat  dari  Al,  Fe  dan Ca  oleh  asam  organik  tersebut  sehingga  P dapat  larut  sehingga  P  tersedia  bagi tanaman  meningkat  (Behera et  al. ,  2014; Chakdar et  al. ,  2018;  Shahid  dan  Khan, 2018).  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengisolasi  BPF  dari  rizosfer  tanaman kelapa  sawit  yang  unggul  berdasarkan kemampuannya  melarutkan  fosfat  yang tidak tersedia untuk tanaman, dan mengidentifikasinya  menggunakan  teknik molekuler berbasis gen 16S rRNA

## BAHAN DAN METODE

## Pengambilan  Sampel  Tanah  dan  Isolasi Bakteri
Tanah  rizosfer  di  sekitar  tanaman kelapa  sawit  dikumpulkan  dan  dibawa  ke laboratorium. Sampel tanah 10 g dipindahkan ke dalam labu erlenmeyer 250 ml dan dipindahkan ke 90 ml larutan 0,85% NaCl  steril.  Campuran  kemudian  dikocok selama  30  menit  pada  150  rpm.  Setelah pengocokan,  10  kali  pengenceran  suspensi dibuat  dengan  pemipetan  1  ml  suspensi  ke dalam  9  ml  larutan  NaCl  0,85%  steril. Suspensi 0,1 ml sampel dari masing-masing pengenceran  ini  dituangkan  ke  cawan  petri dengan  media  agar  National  Botanical Research  Institute  Fosfor  (NBRIP)  yang mengandung 10  g  glukosa, 3  g AlPO 4 atau 5  g  FePO 4 ,  5  g  MgCl 2 .6H 2 O,  0,25  g MgSO 4 .7H 2 O, 0,2 g KCl, 0,1 g (NH 4 ) 2SO 4 dan  10  g  agar  Gellan  dalam  air  suling  1  L (Nautiyal, 1999). Kadar pH media disesuaikan  menjadi  5  menggunakan  HCl. Cawan petri diinkubasi selama 7 hari dalam inkubator  pada  30°  C.  Koloni  dengan  zona halo dianggap bakteri pelarut fosfat. Bakteri ini  selanjutnya  dimurnikan  dan  disimpan dalam agar NBRIP pada suhu 30° C. Isolat yang  digunakan  untuk  tahap  selanjutnya berjumlah 15 isolat.
Pengujian  kualitatif  dan  kuantitatif pelarutan fosfat
Kultur bakteri berumur 48 jam yang ditumbuhkan sebelumnya diambil sebanyak 3  µl  diinokulasikan  pada  media  NBRIP padat  dan  diinkubasi  selama  10  hari  pada suhu  ruang.  Zona  bening  yang  terbentuk diukur  dan  dihitung  indeks  pelarutan fosfatnya.  Pengujian  kuantitatif  P  yang dilarutkan  oleh  isolat  bakteri  terpilih  (Peix et al. , 2001). Sebanyak 1 ose kultur bakteri diinokulasikan  ke  dalam  50  ml  medium NBRIP  cair,  kemudian  diinkubasi  dalam inkubator  goyang  selama  48  jam.  Setelah inkubasi, sebanyak 1 ml kultur diinokulasikan  ke  dalam  100  ml  medium NBRIP cair dengan berbagai  bentuk  fosfat, dan  diinkubasi  dalam  inkubator  goyang selama  7  hari  pada  suhu  30 o C.  Setiap  24 jam,  sebanyak  1  ml  kultur  bakteri disentrifugasi  pada  kecepatan  10.600  g selama  10  menit  untuk  memisahkan  sel bakteri  dari  supernatan.  Supernatan  hasil sentrifugasi  diambil  sebanyak  1  ml  dan direaksikan  dengan  pereaksi  pembentuk warna (2.5 ml natrium molibdat 2.5% dan 1 ml  hidrazin  sulfat  0.3%),  kemudian dipanaskan selama
10 menit dan didinginkan.  Setelah  terbentuk  warna  biru, aktivitas  pelarutan  P  diukur  dengan spektrofotometer  pada  panjang  gelombang 830  nm.  Kurva  standar  dibuat  dengan menggunakan  konsentrasi  KH 2 PO 4 untuk standar  0,  20,  40,  60,  80,  dan  100  ppm. Setiap  perlakuan  diulang  tiga  kali  dan  data dinyatakan sebagai nilai rata-rata ± kesalahan standar (SE).
Ekstraksi  DNA,  Amplifikasi  PCR,  dan Sekuensing Gen 16S rRNA
DNA
genom
diisolasi menggunakan kit DNA genomik QIAamp® mengikuti  instruksi  dari  pabriknya  dan  gen 16SrRNA diamplifikasi menggunakan primer universal,
27 f (5' AGAGTTTGATCCTGGCTCAG  3')  dan 1492 r (5' TACGGCTACCTTGTTACGACTT 3')
yang  merupakan  pelengkap  dari  wilayah bakteri  yang  dilindungi  untuk  bakteri  yang
dilindungi.  Gen  16Sr  RNA.  Amplifikasi dilakukan dalam volume reaksi 25 μL yang mengandung  instruksi  dari  pabrik  berikut. Volume  reaksi  disesuaikan  hingga  25  μL dengan  air  suling  ganda.  Kondisi  siklus termal  PCR  terdiri  dari  langkah  denaturasi awal  pada  94  °  C  selama  3  menit,  diikuti oleh 30 siklus denaturasi (1 menit pada 94° C),  anil  selama  1  menit  pada  57°  C  dan perpanjangan  selama  2  menit  pada  72°  C, diikuti  oleh  ekstensi  akhir  pada  72°  C selama 8 menit. Air suling ganda digunakan sebagai  kontrol  negatif  untuk  memeriksa false  positive  sebagai  hasil  kontaminasi reagen.  Produk  yang  diamplifikasi  PCR dipisahkan  pada  gel  agarosa  1,0%  dalam buffer 1X TBE  pada 70  V cm-1 selama 20 menit.  Gen  16S  rRNA  parsial  dari  isolat terpilih di masing-masing kelompok diurutkan  oleh  FIRSTBASE,  Malaysia. Akhirnya, urutan 16S rRNA isolat dibandingkan  dengan  mikroorganisme  lain dengan cara BLAST
(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/Blas t.cgi).

## HASIL
Pengujian  Kualitatif  dan  Kuantitatif Pelarutan Fosfat
Strain bakteri yang diisolasi sebanyak  15  isolat  mampu  melarutkan kalsium  fosfat  yang  ada  dalam  medium NBRIP  dan  membentuk  zona  beningg dengan  intensitas  yang  bervariasi  (Gambar 1). Efisiensi Pelarut Fosfat (PSE) berdasarkan  diameter  koloni  dan  diameter zona  halo  untuk  isolat  bakteri  ditunjukkan pada  Gambar  2.  Efisiensi  Pelarut  Fosfat tertinggi  ditunjukkan  isolat  K3.1  (PSE  = 3.2) diikuti oleh isolat A1 (PSE = 2.9).
Hasil  penelitian  ini  (Tabel  1) menunjukkan  bahwa  isolat  A.4  memiliki kemampuan  tinggi  dalam  melarutkan  besi fosfat  63,5  mg  L-1  dan  isolat  K3.1  yang mampu melarutkan aluminium fosfat tertinggi  dengan  53,5  mg  L-1  larut  fosfat. Sedangkan  isolat  K3.3  melarutkan  fosfat yang berikatan dengan Ca dengan kelarutan 58,6 mg L-1.
Ekstraksi  DNA,  Amplifikasi  PCR,  dan Sekuensing Gen 16SrRNA
Berdasarkan hasil sekuensing, ketiga  isolat  dimasukkan  dalam  genus Burkholderia  spp .  Isolat  A.4  diidentifikasi
sebagai Burkholderia  gladioli ,  isolat  K3.1 diidentifikasi sebagai Burkholderia arboris , dan  isolat  K3.3  diidentifikasi  sebagai Burkholderia seminalis (Gambar 3).
Tabel 1. Pelarut besi fosfat, aluminium fosfat, dan kalsium fosfat oleh isolat terpilih
Isolat Strengit-Besi Fosfat Variscit-Alumunium Fosfat Apatit-Kalsium Fosfat Konsentrasi Fosfat Terlarut Konsentrasi Fosfat Terlarut Konsentrasi Fosfat Terlarut (mg L-1) (mg L-1) (mg L-1) A.1 5.5 ± 0.25 a 1.7  ±  0.44 a 6.3  ± 6.31  a A.10 7.3 ± 0.19 b 45.0  ±  1.98 i 51.7  ± 51.73  h A.4 63.5 ± 2.28 h 4.6  ±  0.18 b 57.7  ± 57.70  kl B3.10 49.1 ± 1.71 e 7.6  ±  0.14 d 56.4  ± 56.43  jk B3.4 4.1 ± 0.03 a 22.7  ±  1.25 e 26.7  ± 26.72  d C1.1 4.3 ± 0.05 a 43.1  ±  0.61 h 47.6  ± 47.60  g F2.11 22.1 ± 0.56 c 0.7  ±  0.36 a 22.1  ± 22.05  c F2.7 4.3 ± 0.27 a 25.3  ±  0.86 f 29.6  ± 29.58  e K1.3 4.2 ± 0.29 a 48.7  ±  1.29 j 54.6  ± 54.58  i K2.2 58.8 ± 1.13 g 4.9  ±  0.01 b 55.3  ± 55.33  ij K2.4 4.2 ± 0.16 a 44.2  ±  2.11 hi 47.7  ± 47.72  g K3.1 4.2 ± 0.13 a 53.5  ±  1.21 k 57.1  ± 57.06  k K3.3 53.6 ± 1.99 f 6.3  ±  0.13 bc 58.6  ± 58.58  l NL 4.6 ± 0.13 a 36.1  ±  1.52 g 39.3  ± 39.34  f TB 30.2 ± 0.89 d 15.7  ±  0.14 d 13.1  ± 13.12  b
Keterangan :
Angka yang di ikuti oleh huruf yang sama pada kolom yang sama tidak berbeda nyata pada uji DMRT 5%
Gambar 1. Uji kualitatif bakteri pelarut fosfat isolat K3.1 pada media NBRIP suhu inkubasi 30 o C selama 10 hari.
Gambar 2. Efisiensi Pelarut Fosfat (PSE) pada beberapa isolat setelah 10 hari masa inkubasi.
Gambar  3.  Pohon  filogenetik  yang  menunjukkan  hubungan  antara  bakteri  pelarut  fosfat (BPF) dari rizosfer kelapa sawit berdasarkan urutan gen 16S r.
0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 NL K3.3 K2.2 B3.4 TB K1.3 K2.4 K3.1 F2.11 F2.7 B3.4 C1.1 A1 A4 A10 PSE ISOLAT

## PEMBAHASAN
Mikroba  pelarut  fosfat  adalah mikroba  yang  memiliki  kemampuan  untuk melarutkan  fosfat  tak  larut  menjadi  fosfat larut sehingga menjadi bentuk yang tersedia dan dapat diserap oleh tanaman. Mekanisme  dari  mikroba  pelarut  fosfat secara umum adalah dengan mensekresikan asam-asam  organik  jenis  tertentu  sehingga fosfat  yang  terikat  dengan  unsur  logam seperti  Ca,  Al,  maupun  Fe  dapat  terlepas. Mikroba  yang  dapat  melarutkan  fosfat berasal  dari  kelompok  bakteri,  fungi, maupun aktinomisetes (Tam, 2017).
Seluruh isolat hasil isolasi dilakukan pengujian kualitatif dalam pelarutan  fosfat  dengan  substrat  Ca3PO4 (Qian  et  al.,  2010).  Isolat  diuji  pada  media NBRIP  modifikasi  kemudian  ditumbuhkan pada  suhu  270C  selama  10  hari  dengan pengukuran indeks zona pelarutan dilakukan  setiap  hari.  Hasil  ditampilkan pada grafik di bawah ini:
Pada  pengujian  secara  kualitatif didapatkan  bahwa  isolat  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  mampu  menunjukkan zona  bening  dengan  zona  pelarutan  yang cukup tinggi. Selanjutnya, dilakukan pengujian secara kuantitatif pelarutan fosfat dengan  menggunakan  spektrofotometer. Pada  pengujian  ini  dihitung  kadar  fosfat pada media sebelum dan sesudah diinokulasikan  dengan  isolat  BPF.  Kadar fosfat  yang  mengalami  peningkatan  selama 10  hari  inkubasi  menunjukkan  aktivitas pelarutan  fosfat  yang  tinggi  (Li  et  al., 2017).
Pada  tanah  masam,  kelarutan  Al dan  Fe  sangat  tinggi  sehingga  ion  fosfat (H2PO4-,  HPO42,  PO43-)  akan  segera terikat  untuk  membentuk  senyawa  P  yang kurang tersedia untuk tanaman. Penggunaan pelarut  fosfat  mikroba  masih  menghadapi beberapa  kendala  seperti  faktor  tanah, karena masing-masing jenis tanah memiliki bentuk fosfat  yang berbeda seperti di tanah didominasi  asam  fosfat  yang  didominasi oleh Al-P, Fe-P atau tertambat-P.
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  isolat  A.4  memiliki  kemampuan tinggi dalam melarutkan besi fosfat 63,5 mg L-1  dan  K3.1  isolat yang  mampu melarutkan  fosfat  aluminium  tertinggi dengan 53,5 mg L-1 fosfat terlarut.
Pohon  filogenetik  menunjukkan hubungan  antara  bakteri  pelarut  fosfat (PSB)  dari  rhizhosfer  kelapa  sawit  dalam penelitian ini dan kerabat filogenik terdekat mereka  berdasarkan  sekuensing  gen  16S rRNA.  Burkholderia  adalah  kelompok bakteri  yang  mampu  melarutkan  P  dengan memproduksi asam organik (Rodríguez and Fraga,  1999;  Saikia  et  al.,  2018)  dan biasanya  dilaporkan  sebagai  pertumbuhan PGPR yang mempromosikan rhizobakteria) yang  mampu  menghasilkan  zat  yang tumbuh  seperti  IAA  (Grichko  and  Glick, 2001). Burkholderia dikenal sebagai bakteri fiksasi  N  dan  memiliki  kemampuan (Stephen  and  Jisha,  2011;  Wahdi,  Mubarik and Widyastuti, 2016). Burkholderia adalah bakteri  efisien  yang  digunakan  sebagai pupuk  hayati  di  lahan  pertanian  (Nautiyal, 1999).  Dalam  penelitian  ini,  sampel  tanah rhizosfer dari tanaman kelapa sawit disaring untuk  isolasi  PSB.  Di  antara  15  isolat pelarut fosfat, dua PSB efisien dipilih untuk studi solubilisasi anorganik. Menurut analisis urutan 16S rRNA, strain diidentifikasi  sebagai  Burkholderia  spp. Laporan  sebelumnya  juga  menggambarkan beberapa  Burkholderia  sebagai  pelarut fosfat  yang  efisien  (Fuentes-Ramı  et  al., 2001;  Peix  et  al.,  2001;  Sin  and  Viruel, 2011).

## KESIMPULAN
Isolat  A.4  memiliki  kemampuan tinggi dalam melarutkan besi fosfat 63,5 mg L-1  dan  isolat K3.1 yang  mampu melarutkan  aluminium  fosfat  tertinggi dengan 53,5 mg L-1 larut fosfat. Sedangkan isolat K3.3 melarutkan fosfat yang berikatan dengan Ca dengan kelarutan 58,6 mg  L-1.  Isolat  A.4  diidentifikasi  sebagai Burkholderia gladioli, isolat K3.1 diidentifikasi  sebagai  Burkholderia  arboris,
dan  isolat  K3.3  diidentifikasi  sebagai Burkholderia seminalis.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Semua  bagian  dalam  penelitian  ini didukung  oleh  Departemen  Riset  dan Pengembangan, PT. Sampoerna Agro, Tbk.

## DAFTAR PUSTAKA
Acevedo  E. et  al .  2014.  ‘Phosphate-
solubilizing microorganisms associated  with  the  rhizosphere  of oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) in Colombia’,  Applied  Soil  Ecology,
80:26–33.doi: 10.1016/
j.apsoil.2014.03.011.
Behera  BC. et  al .  2014.  ‘Diversity, mechanism  and  biotechnology  of phosphate solubilising microorganism  in  mangrove-A  review’,
Biocatalysis and Agricultural Biotechnology.  Elsevier,  3(2):97– 110. doi: 10.1016 /j
.bcab.2013.09.008.
Chakdar H. et al. 2018. ‘Characterization of mineral  phosphate  solubilizing  and plant  growth  promoting  bacteria from  termite  soil  of  arid  region’,  3
Biotech. Springer International
Publishing, 0(0), p. 0. doi: 10.1007/s13205-018-1488-4.
Euler  M.  et  al.  2017.  ‘Oil  Palm  Adoption,
Household  Welfare,  and  Nutrition Among  Smallholder  Farmers  in Indonesia’,  World  Development. Elsevier  Ltd,  93:  219–235.  doi: 10.1016/j.worlddev.2016.12.019. Fuentes-Ramı  LE. et  al .  2001.  ‘Novel nitrogen-fixing  acetic  acid  bacteria, Gluconacetobacter  johanne  sp.  nov. and Gluconacetobacter azotocaptans sp.  nov.,  associated  with  coffee plants’,  International  Journal  of
Systematic and Evolutionary Microbiology,  51,  pp.  1305–1314. doi: 10.1099/00207713-51-4-1305. Grichko VP, Glick BR. 2001.
‘Amelioration  of  flooding  stress  by
ACC  deaminase-containing  plant growth-promoting  bacteria’,  Plant Physiology and Biochemistry, 39(1):11–17.  doi:  10.1016/S0981-
9428(00)01212-2.
Hoffmann  MP. et  al .  2017.  ‘Yield  gap analysis  in  oil  palm:  Framework development  and  application  in commercial  operations  in  Southeast Asia’, Agricultural Systems. Elsevier  Ltd,  151,  pp.  12–19.  doi: 10.1016/j.agsy.2016.11.005.
Istina  IN. et  al .  2015.  ‘Phosphate- solubilizing  Microbe  from  Saprists Peat  Soil  and  their  Potency  to Enhance  Oil  Palm  Growth  and  P Uptake’,  Procedia  Food  Science. Elsevier  Srl,  3,  pp.  426–435.  doi: 10.1016/j.profoo.2015.01.047. Li  Y. et  al . 2017. ‘Colonization and Maize Growth  Promotion  Induced  by Phosphate  Solubilizing  Bacterial Isolates’. doi:
10.3390/ijms18071253.
Nautiyal  CS.  1999.  ‘An  e  ¤  cient microbiological  growth  medium  for screening  phosphate  solubilizing microorganisms’,  170(436),  pp.
265–270.
Panda  B,  Rahman  H,  Panda  J.  2016. ‘Phosphate  solubilizing  bacteria from  the  acidic  soils  of  Eastern Himalayan region and their antagonistic effect on fungal pathogens’,  Rhizosphere.  Elsevier,
2, pp. 62–71.
doi: 10.1016/j.rhisph.2016.08.001. Peix  A .  et  al .  2001.  ‘Growth  promotion  of common  bean  (Phaseolus  vulgaris L.)  by  a  strain  of  Burkholderia cepacia  under  growth  chamber conditions’, 33, pp. 1927–1935.
Qian,Y. et  al .  2010.  ‘Characterization  of Phosphate  Solubilizing  Bacteria  in Sediments from a Shallow
Eutrophic  Lake  and  a  Wetland: Isolation,  Molecular  Identification and  Phosphorus  Release  Ability Determination’, pp. 8518–8533. doi: 10.3390/molecules15118518.
Rodríguez  H,  Fraga  R.  1999.  ‘Phosphate solubilizing  bacteria  and  their  role in  plant  growth  promotion’,  17,  pp. 319–339.
Saikia J. et al . 2018. ‘Alleviation of drought stress  in  pulse  crops  with  ACC deaminase  producing  rhizobacteria isolated from acidic soil of Northeast India’, Scientific Reports.
Springer US. 8(1):1–16. doi: 10.1038/s41598-018-21921-w.
Sarker  A,  Talukder  NM,  Islam  T.  2014. ‘Phosphate  solubilizing  bacteria promote growth and enhance nutrient  uptake  by  wheat’,  1,  pp.
86–93. doi:
10.1080/00207729508929050.
Shahid  M,  Khan  MS.  2018.  ‘Glyphosate induced  toxicity  to  chickpea  plants and  stress  alleviation  by  herbicide tolerant phosphate solubilizing Burkholderia  cepacia  PSBB1  carrying multifarious plant growth promoting activities’,  3  Biotech.  Springer Berlin  Heidelberg,  8(2):1-17.  doi: 10.1007/s13205-018-1145-y. Sin  F,  Viruel  E.  2011.  ‘Plant  growth promotion  traits  of  phosphobacteria isolated from Puna , Argentina’, pp. 489–496.  doi:  10.1007/s00203-011- 0692-y.
Stephen  J,  Jisha  MS.  2011.  ‘Gluconic  acid production as the principal mechanism  of  mineral  phosphate solubilization  by  Burkholderia  sp  . (MTCC 8369 )’, 49(Mtcc 8369), pp. 99–103. Tam HM. 2017. ‘Isolation and Identification of Rhizospheric
Bacteria  in  Sugarcane  (Saccharum spp  .  L  .)  Cultivated  on  Acrisols  of Tay Ninh Province , Vietnam’, 8(2): 323–335.
Teng  Z. et  al .  2018.  ‘Isolation  and characterization of phosphate solubilizing bacteria from rhizosphere  soils  of  the  Yeyahu Wetland in Beijing, China’, Environmental Science and
Pollution  Research.  Environmental Science and Pollution Research. doi: 10.1007/s11356-018-2955-5.
Wahdi E, Mubarik NR, Widyastuti R. 2016.
‘Characterization of Phosphate Solubilising Bacteria from Limestone Quarry in Cirebon
Indonesia’. 11(4):312–317.
Zheng  B-X. et  al . 2019. ‘Responses to soil pH gradients of inorganic phosphate solubilizing  bacteria  community’, Scientific  Reports,  9(1):25.  doi: 10.1038/s41598-018-37003-w.