## 1.   Pendahuluan
E p i d e m i   i n f e k s i   H I V   ( H u m a n Immunodeficiency  Virus )  dan  AIDS ( Acquired Immune Deficiency Syndrome ) di Indonesia  disadari  sebagai  masalah kesehatan  masyarakat  yang  penting  dan memberikan dampak multifaktorial. Hal ini timbul  dari  permasalahan  sosial  ekonomi, lingkungan,  akulturasi  budaya  dan pergeseran  nilai-nilai  dalam  masyarakat. Indonesia  merupakan  Negara  yang  rentan terhadap  epidemi  HIV  /  AIDS  karena beberapa  faktor  risiko  ada  di  Indonesia seperti  perilaku  seksual  berisiko  tinggi, kemiskinan,  prevalensi  infeksi  menular seksual  yang  tinggi  serta  arus  perpindahan penduduk yang tinggi (Iweala, 2004; WHO 2007; Bertozi, Padian & Wergbeir, 2010).
Infeksi  HIV  dapat  ditularkan  melalui  3 cara utama yaitu hubungan seksual, paparan produk darah yang terinfeksi virus HIV dan penularan  selama  masa  perinatal  termasuk pada saat menyusui. Jenis penularan   mana yang  mudah  terjadi  pada  suatu  kelompok masyarakat  sangat  dipengaruhi  oleh  faktor sosial, kultural dan lingkungan yang sangat berbeda  antar  beberapa  negara.  Namun hampir  disemua  negara,  penularan  melalui hubungan  seksual  merupakan  proses penularan  yang  paling  banyak  terjadi (Iweala, 2004; Paul, Cadoff, Martin, 2004 ; WHO, 2009).
Kasus  HIV  / AIDS  sudah  menyebar  di seluruh  dunia.  Di  akhir  tahun  2005  tercatat ada  40  juta  orang  dengan  HIV  dengan kematian akibat AIDS sekitar 3 juta. Menurut data  di  Ditjen  PP  &  PL  Kemenkes,  jumlah kasus HIV di Indonesia dari Januari s/d Juni 2012 tercatat 9.883 dan kasus AIDS adalah 2.224,  sedangkan  di  Prop.  DIY  secara kumulatif  sejak  tahun  1987  sampai  dengan 2012  tercatat 1.519 kasus HIV dan 712 kasus
2 AIDS (Anonim , 2012)
Tingginya  kasus  HIV  dan  mudahnya penyebaran kasus ini, membutuhkan adanya upaya-upaya pencegahan. Beberapa hal yang telah  dilakukan  adalah  melalui  kegiatan surveilans,  skrining  darah  donor  dan penemuan kasus HIV secara aktif. Kegiatan tersebut  membutuhkan  peran  laboratorium yang  besar  karena  penderita  HIV  sering sekali  dalam  kondisi  sehat.  Dalam  hal  ini, p a r a m e t e r   y a n g   d i p e r l u k a n   a d a l a h pemeriksaan  anti  HIV.  (Iweala,  2004;
1 3
Anonim , 2006; Anonim , 2012)
Pemeriksaan  antiHIV  tidak  seperti pemeriksaan laboratorium lainnya. Dampak sosial dan moral terhadap hasil pemeriksaan ini  sangat  mempengaruhi  kehidupan seseorang.  Untuk  itu  diperlukan  suatu strategi dan persyaratan tertentu apabila akan dilakukan suatu tes HIV pada seseorang. Hal ini  juga  dipengaruhi  oleh  beredarnya bermacam-macam  metode  pemeriksaan
JURNAL FARMASI SAINS DAN KOMUNITAS, November 2012, hlm. 98-103
ISSN : 1693-5683

## STRATEGI PEMERIKSAAN LABORATORIUM ANTIHIV

## WORO UMI RATIH

## Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta
Abstract: Human Immunodeficiency Virus (HIV) infection has increased significantly in recent years. The virus continues to spread in all the countries. There are some strategies and programs to control HIV infection by activities carried out individually or groups. HIV testing technologies are needed for use in diagnostic testing. Data from diagnostic testing may be used as a source of surveillance information. Rapid Diagnostic Test (RDT) and ELISA with various reagents are the current diagnostic testing procedures. It is important to select reagents to get the good results.
Keywords : HIV, testing, diagnostic
antiHIV  dengan  berbagai  merk.  Dengan penerapan  strategi  ini  diharapkan  dapat d i p e r o l e h   h a s i l   y a n g   b e n a r   b e n a r mencerminkan  kondisi  individu  yang melakukan  pemeriksaan,  apakah  itu  positif maupun negatif.

## 2.  Pemeriksaan  Laboratorium  pada Kasus HIV
Virus  HIV  merupakan  virus  RNA  yang terdiri dari HIV 1 dan HIV 2. Infeksi HIV 1 lebih  banyak  ditemukan  daripada  HIV  2. Dilaporkan  bahwa  80%  penderita  HIV disebabkan  oleh  Virus  HIV  1.  Virus  ini menggunakan  limfosit  CD4  sebagai  tempat replikasinya. Sehingga jumlah limfosit CD4 menjadi  salah  satu  parameter  dalam pemberian  terapi  maupun  pemantauan penyakit. (Iweala, 2004; 2006;   Greenwald, 2006;  Cohen,  Shaw,  McMichael,  Haynes, 2011)
Keberadaan  virus  HIV  dalam  tubuh manusia  hanya  dapat  diketahui  melalui pemeriksaan  laboratorium  pada  sampel cairan  tubuh  seperti  darah,  plasma  dan lainnya.  Individu  dengan  HIV  di  dalam tubuhnya tidak menampakkan gejala kecuali apabila individu tersebut masuk dalam fase AIDS.   Ada tidaknya virus HIV berdampak pada pemberian terapi anti retroviral (ARV). Dalam  hal  ini  pemeriksaan  laboratorium memegang  peranan  yang  sangat  penting dalam  program  pengendalian  HIV.  (WHO, 2009  ;  Cohen,  Shaw,  McMichael,  Haynes, 2011).
Salah satu pintu masuk untuk mendeteksi infeksi  HIV  adalah  melalui  kegiatan konseling dan tes HIV. Kegiatan ini terbukti sangatlah  bernilai  tinggi  dalam  pelayanan kesehatan  dan  dukungan  yang  dibutuhkan dan  memungkinkan  intervensi  yang  aman dan  efektif  terutama  dalam  pencegahan 3 penularan dari ibu ke anak. (Anonim , 2012)
Konseling  dan  tes  HIV  tersedia  dalam berbagai  situasi  dengan  menggunakan pendekatan  sukarela  ( VCT=Voluntary Counseling  Test )  dan  konseling  yang diinisiasi  oleh  petugas  ( PITC  =  Provider Initiated  Tes  and  Counseling ).  Sasaran kegiatan VCT adalah masyarakat yang ingin
mengetahui status HIV/AIDS dan mencegah penularan,  masyarakat  yang  berperilaku risiko tinggi seperti sering berganti pasangan dan  pengguna  narkoba  jarum  suntik. Kegiatan VCT didahului oleh konseling pra tes  dan  diakhiri  oleh  konseling  pasca  tes. Untuk itu diperlukan konselor yang terlatih dan  professional.    Sedangkan  PITC merupakan kegiatan konsultasi dan tes HIV yang  diinisiasi  oleh  petugas  kesehatan manakala  petugas  kesehatan  menemukan seorang  pasien  yang  dicurigai  mempunyai faktor  risiko  terkena  HIV  /  AIDS.    Pada kedua  kegiatan  ini  harus  diikuti  dengan informed  consent dan  harus  dijamin kerahasiaannya.  (WHO-UNAIDS,  2009;
3, Anonim 2012)

## 2.1.  Parameter  Pemeriksaan  Laboratorium HIV
Beberapa  parameter  pemeriksaan laboratorium  pada  infeksi  HIV  bisa dilakukan  baik  dengan  tujuan  diagnosis m a u p u n   m o n i t o r i n g     p e n g o b a t a n . P e m e r i k s a a n   l a b o r a t o r i u m   u n t u k menegakkan  diagnosis  adalah  pemeriksaan antiHIV.  Pemeriksaan  ini  bertujuan  untuk mengetahui  ada  tidaknya  antibodi  terhadap HIV 1 dan atau HIV 2 pada seseorang yang dicurigai  terinfeksi  virus  ini.  Sedangkan untuk  pemantauan  terapi,  dapat  dilakukan pemeriksaan  CD4  dan  jumlah  virus  (viral load) pada penderita HIV yang mendapatkan terapi  ARV  (  Iweala,  2004;  Kishore, Cunningham, Menon, 2008).

## 2.2. Metode Pemeriksaan Laboratorium anti HIV
Semua  orang  yang  terinfeksi  HIV  akan membentuk  antibodi  terhadap  virus  ini. Adanya  antibodi  ini  dapat  dideteksi  dalam waktu 30 hari dengan metode ELISA. Tetapi sebagian besar akan terdeteksi dalam waktu 3 bulan. Pada saat antibodi ini belum terbentuk pada seseorang yang sudah terinfeksi, maka disebut  periode  jendela.  Pada  periode  ini, penularan  sudah  bisa  terjadi.  Untuk mengetahui  ada  tidaknya  antibodi  ini  maka dilakuakan  pemeriksaan  anti  HIV.  Selain pemeriksaan  anti  HIV,  parameter  lain  yang
WORO UMI RATIH 99
bisa dilakukan adalah pemeriksaan CD4 dan viral load yang bertujuan untuk pemantauan terapi (Iweala, 2004; Kishore, Cunningham, Menon., 2008; WHO-UNAIDS,2009).
B e b e r a p a   m e t o d e   p e m e r i k s a a n laboratorium anti HIV telah dikembangkan. Metode  pemeriksaan  antiHIV  meliputi metode  cepat  atau  yang  dikenal  dengan Rapid Diagnostic Test (RDT) , metode ELISA dan Metode Westernblot.  Pemeriksaan CD4 dan viral  load dapat  dilakukan  dengan metoda  flowcytometer.  (Iweala  2004; Greenwald,  2006;  ;  WHO-UNAIDS,  2009;
12 Anonim , 2012) Pemeriksaan laboratorium anti HIV bisa dilakukan  untuk  tujuan  skrining,  surveilans dan  diagnosis.  Pemeriksaan  skrining dilakukan  pada  skrining  donor  darah  UTD PMI.  Pemeriksaan  surveilans  bertujuan untuk  melihat  dinamika  epidemi  HIV  di Indonesia,    sedangkan  pemeriksaan diagnosis dilakukan di rumah sakit maupun 1 2 puskesmas (Anonim , 2006; Anonim , 2012).
Metode  pemeriksaan  cepat,  saat  ini sudah  banyak  digunakan.  Pertimbangan pemakaian  metode  ini  adalah  waktu  yang dibutuhkan  singkat,  sarana  dan  prasarana yang  sederhana  dan  jumlah  sampel  dalam sekali  pemeriksaan  cukup  banyak. Penggunaan  metoda  rapid  diagnostic  test (RDT) ini bisa digunakan pada klinik VCT untuk  tujuan  penegakan  diagnosis  infeksi
3 HIV(Anonim , 2012) .

## 2.3. Strategi Pemilihan Metode Pemeriksaan Anti HIV
Ketepatan pemeriksaan anti HIV dengan suatu metode ditentukan oleh   karakteristik seperti  sensitivitas,  spesifisitas  dan  nilai prediksi. Selain itu, pemilihan reagen untuk pemeriksaan  anti  HIV  diatur  dalam  SK Menkes  no  241/Menkes/SK/IV/2006. Menurut  SK  Menkes  tersebut  dalam p e m i l i h a n   r e a g e n   a n t i   H I V  h a r u s diperhatikan  bahwa  reagen  tersebut  sudah terdaftar di Kemenkes, sudah dievaluasi oleh Laboratorium  Rujukan  Nasional  RSCM, metoda pemeriksaan adalah EIA dan Rapid Test dan  memenuhi  sensitivitas  dan spesifisitas  tertentu  sesuai  dengan  tujuan
3 pemeriksaan (Anonim  , 2012).
Sensitivitas  menggambarkan  kemam- puan akurasi sebuah tes sehingga ditemukan hasil  positif  benar.  Metode  pemeriksaan dengan sensitivitas tinggi akan memberikan hasil negatif palsu yang kecil. Hal ini sangat dibutuhkan  pada  pelayanan  darah  untuk skrining  donor  darah  (Iweala,  2004;
2 3 Anonim , 2006;  Greenwald, 2006; Anonim , 2012).
S p e s i f i s i t a s   m e n g g a m b a r k a n kemampuan  ketepatan  suatu  metode pemeriksaan  sehingga  didapatkan  hasil negatif  benar.  Suatu  metode  pemeriksaan dengan spesifisitas tinggi akan memberikan hasil positif palsu yang kecil dimana kondisi ini  dibutuhkan  pada  penegakan  diagnosis infeksi HIV(Iweala 2004; Greenwald, 2006;
3 Anonim , 2012).
Dasar  pemilihan  reagen  anti  HIV didasarkan  pada  strategi  pemeriksaan  dan yang  bersifat  serial.  Strategi  pemeriksaan merupakan  pendekatan  pemeriksaan  untuk memenuhi  kebutuhan  khusus  seperti keamanan  darah,  surveilans  dan  diagnosis. Strategi ini harus bersifat serial yang berarti sampel  darah  diperiksa  dengan  reagen pertama  dan  hasil  reagen  pertama menentukan apakah dilakukan pemeriksaan 1 dengan  reagen  kedua  atau  tidak  (Anonim ,
3 2006; Anonim , 2012)
Pemilihan metode pemeriksaan anti HIV sesuai tujuan pemeriksaan, pemilihan reagen anti HIV dilaksanakan dengan syarat sebagai
1
3
berikut (Anonim , 2006; Anonim , 2012)
a. Untuk  tujuan  penyaring  dan  produk darah  serta  transplantasi  digunakan strategi I.
b. Untuk  tujuan  surveilans  digunakan strategi II
c. Untuk  tujuan  diagnosis  digunakan strategi III
Selain strategi pemeriksaan, pada proses pemeriksaan anti HIV perlu adanya jaminan kerahasiaan  dari  pasien.  Sesuai  tujuan pemeriksaan, untuk menjaga kerahasiaan ini, dilakukan  beberapa  metode  pendekatan  tes HIV  yang  diimplementasikan  pada pengambilan  dan  pelabelan  spesimen  yaitu
WORO UMI RATIH
dengan mandatory,  voluntary  confidential atau linked  confidential dan unlinked 1 anonymous (Anonim ,  2006;  WHO- UNAIDS, 2009).
Mandatory  test merupakan pendekatan tes  HIV  dimana  tes  HIV  ini  merupakan persyaratan  untuk  mendapatkan  sesuatu manfaat. Tes ini hanya boleh dilakukan untuk pemeriksaan  darah  donor  dan  transplantasi organ.  Dalam  hal  ini  donor  harus  mau d i l a k u k a n   p e m e r i k s a a n   H I V  d e m i kepentingan  pasien.  Sampel  yang  diambil tidak diberi nama dan hanya kode saja yang disesuaikan  dengan  kode  kantong  darah
1 (Anonim , 2006; WHO-UNAIDS, 2009).
Voluntary  confidential sering  juga disebut  dengan linked  confidential . Pendekatan ini sering dilakukan pada klinik VCT.  Pada  kondisi  ini,  seseorang  setuju untuk  dilakukan  tes  HIV  terhadap  dirinya. Hasil  pemeriksaan  hanya  diketahui  oleh beberapa orang saja yaitu dirinya sendiri dan konselor.  Pelabelan  sampel  darah  tanpa mencantumkan nama hanya kode saja yang diketahui oleh pasien dan konselor saja. Pada keadaan ini juga dilakukan informed consent 1 terlebih  dahulu  (Anonim ,  2006;  WHO- UNAIDS, 2009).
Unlinked  anonymous sering  digunakan pada  kegiatan  surveilans  HIV  untuk mengetahui  epidemi  HIV  di  suatu  daerah atau  negara.  Tes  HIV  dilakukan  secara anonymous (tanpa  nama)  dan  semua  data yang memungkinkan untuk menghubungkan hasil  pemeriksaan  dengan  pemilik  sampel tersebut dihilangkan ( unlinked ). Pendekatan ini  bisa  dilakukan  dengan  atau  tanpa
1 informed  consent (Anonim ,  2006;  WHO- UNAIDS, 2009).

## 2.3.1. Pemeriksaan anti HIV strategi I
Strategi  ini  dilakukan  pada  kegiatan pengambilan  darah    serta  transplantasi. Pemeriksaan  dilakukan  dengan  satu  reagen saja yang memiliki nilai sensitivitas > 99% dan  spesifisitas  >  99%.    Apabila  hasil pemeriksaan dengan reagen tersebut  positif, maka  dianggap  sebagai  hasil  yang  reaktif, sehingga  produk  darah  atau  organ transplantasi  tersebut  tidak  boleh  dipakai.
Tetapi bila hasilnya negatif, maka dinyatakan sebagai  nonreaktif  sehingga  produk  darah tersebut bisa dipakai (gambar 1).

## 2. 3.2. Pemeriksaan anti HIV Strategi II
Untuk  tujuan  surveilans  digunakan strategi  II  yaitu  dengan  menggunakan  dua reagen  dengan  syarat  reagen  pertama memiliki nilai sensitivitas > 99% sedangkan reagen kedua mempunyai nilai spesifisitas > 98%.  Pemeriksaan  diawali  dengan menggunakan reagen pertama. Apabila hasil positif,  maka  dilanjutkan  dengan  reagen  ke dua.  Namun,  apabila  hasil  pemeriksaan reagen  pertama  adalah  negatif,  maka  tidak perlu  dilanjutkan  dengan  reagen  kedua  dan sampel  dinyatakan  sebagai  sampel  non reaktif.  Apabila  hasil  pemeriksaan  reagen kedua  adalah  positif,  maka  disimpulkan bahwa sampel tersebut reaktif.
Gambar 2. Pemeriksaan Anti HIV Strategi II
Gambar 1. Pemeriksaan Anti HIV Strategi I
1 (Anonim , 2006) WORO UMI RATIH 101
Apabila  pemeriksaan  dengan  reagen kedua hasilnya negatif, maka perlu dilakukan pemeriksaan  ulang  dengan  kedua  reagen. Hasil  pemeriksaan  ulang  kedua  reagen semuanya  positif,  maka  hasil  pemeriksaan adalah  reaktif.  Namun  bila  salah  satu hasilnya  adalah  negatif,  maka  dinyatakan sebagai  indeterminate  (hasil  tidak  dapat ditentukan) ( Gambar 2).

## 2.3. 3.Pemeriksaan antiHIV Strategi III
Untuk  tujuan  diagnosis  digunakan strategi  III  dengan  menggunakan  3  macam reagen berbeda. Reagen pertama mempunyai sensitivitas  sebesar  >  99%,    reagen  kedua memiliki  spesifisitas  >  98%  dan  reagen ketiga  mempunyai  spesifisitas  >  99%. Pemeriksaan diawali dengan reagen pertama. Apabila  hasil  positif  maka  dilanjutkan dengan  reagen  kedua.  Hasil  positif  reagen kedua  kemudian  dilanjutkan  dengan pemeriksaan  reagen  ketiga. Apabila  reagen ketiga  hasilnya  positif,  maka  disimpulkan bahwa pemeriksaan anti HIV adalah reaktif. Sedangkan  apabila  pemeriksaan  dengan reagen  pertama  adalah  non  reaktif,  maka tidak perlu dilanjutkan dengan reagen kedua dan ketiga.
Hasil  negatif  pada  reagen  kedua mengharuskan  dilakukannya  pengulangan baik  pada  pemeriksaan  reagen  pertama maupun  kedua.  Dari  hasil  pemeriksaan u l a n g a n   t e r s e b u t ,   b i l a   k e d u a n y a menunjukkan hasil positif atau salah satunya
tetap  negatif,  maka  dilanjutkan  dengan reagen ke 3. Namun bila hasil pengulangan pemeriksaan  menunjukkan  hasil  negatif, maka dinyatakan sebagai non reaktif.   Hasil pemeriksaan  ketiga  reagen  menunjukkan salah  satunya  adalah  negatif,  maka dinyatakan hasilnya belum dapat ditentukan ( indeterminate ) jika pemeriksaan dilakukan pada  individu  dengan  risiko  tinggi  dan diperlukan  pemeriksaan  konfirmasi  yaitu Western  Blot. Sedangkan  jika  pemeriksaan dilakukan  pada  individu  dengan  risiko rendah, maka dilaporkan sebagai hasil yang nonreaktif (Gambar 3).

## 3.  Kesimpulan
Pemeriksaan  laboratorium  anti  HIV dilakukan  berdasarkan  strategi  I,  II  dan  III sesuai  tujuan  pemeriksaan  yang  dilakukan secara serial. Metoda yang digunakan adalah rapid  diagnostic  test dan  atau  ELISA  yang mempunyai nilai sensitivitas dan spesifisitas tertentu.  Pemeriksaan  anti  HIV  pada penegakan diagnosis   melalui kegiatan VCT yang diawali dan diakhiri dengan konseling dan  dijamin  kerahasiaannya  dengan informed consent .

## Daftar Pustaka
1 Anonim .,  2006.  Pedoman  Surveilanse  Infeksi  HIV. Depkes R.I. Dirjen P2L & PLP. Jakarta
2 Anonim ,  2012.  Statistik  Kasus  HIV  /  AIDS  di I n d o n e s i a .   A v a i l a b l e   a t
:http://spiritia.or.id/Stats/Stat.curr.pdfdiakses tanggal 29 November 2012.
3 Anonim ., 2012. Pelatihan Pemeriksaan Terkait HIV
b a g i   P e t u g a s   L a b o r a t o r i u m .   D i r j e n P2PL.Kemenkes R.I.
Bertozzi,B.,  Padian,  N.S.,  Wegbreit.,  2010. HIV/AIDS Prevention and Treatment. Available at  :  http:  //files.dcp2.org/pdf/DCP/DCP18.pdf  . Diakses tanggal 29 November 2012
Cohen, M.S., Shaw,G.M., McMichael, A.J.,
Haynes,B.F., 2011. Acute HIV-1 Infection. Review Article, NEJM , 364 (20)
Greenwald, J.L., 2006. A Rapid Review of Rapid HIV Antibody  Test. Current  Infectious      Diseases Reports. (8). 125 – 131.
Iweala,O.I., 2004. HIV Diagnostics Test : Overview. Contraception. 70. 141-142.
Kishore,  K.,  Cunningham,  P.,  Menon,  A.,  2008. Laboratory Diagnosis of HIV infection. Avalaible
Gambar 3. Pemeriksaan Anti HIV Strategi III 1 (Anonim , 2006)
WORO UMI RATIH
a t   :   / / h t t p :   w w w. a s h m . o rg . a u / i m a g e s / publications/booklet/isithiv/chapter_4.pdf .Diakses tgl 26 November 2012.
Paul,M.S.,  Cadoff,  E.M.,  Martin,  E.,  2004.  Rapid
Diagnostic Testing HIV: Clinical       Implication.
Clinical  Virology  &  Infectious  Disease.
Reference Section.
WHO,  2007.  AIDS  Epidemic  Update.  Joint  United
Nations on HIV/AIDS. UNAIDS.  Chapter 07.
WHO,  2009.  Guidelines  for  HIV  Diagnosis  and Monitoring  of  Antirtroviral  Therapy.    WHO Regional Office of South –East Asia.
WHO-UNAIDS,  2009.  Guidelines  for  Using  HIV
Testing Technologies in Surveillabce; Selection, Evaluation  and  Implementation.  Avalaible  at  : //http:www.who.int/hiv/pub/surveillance/hiv_tes ting.  Diakses tgl 1 Desember 2012
WORO UMI RATIH 103