## STUDI PEMBUATAN SCAFFOLD BOVINE HYDROXYAPATITE DARI TULANG SAPI UNTUK APLIKASI IMPLAN TULANG MANDIBULA MENGGUNAKAN METODE KALSINASI
Solechan 1 dan Saifudin Alie Anwar 2

## Abstrak
Waste  cow  bone  bakso  balungan  in  Central  Java  own  produces  31.9  tons/day  of merchants  bakso.  Bovine  bone  hydroxyapatite  material  can  be  made  bioceramik derivative products to repair damaged hard tissues of the body due to brittle bones, bone cancer  or  accidents.  Tissue  damage  including  bone  tumors.  Tumors  of  the  mandibular potentially cause interference and need removal of mandibular tumors that cause cracks. It is necessary for the formation of mandibular reconstruction of mandibular continuity with transplantation scaffolds. The use of limited donor transplanstasi, whereas synthetic implant material is very expensive. Preparation of bovine hydroxyapatite scaffold waste cow  bone  bakso  balungan  of  reinforced  PCL  with  calcination  method  would  be  less costly.  The  process  of  manufacture  of  bovine  bone  hydroxyapatite  by  cutting  waste kanselosa  in  size  10  mm  x  10  mmx  10  mm,  and  then  calcined  at  300,  6000,  900,  and 1200 o C for 2 hours. Furthermore PCL scaffold is reinforced with a concentration of 1, 3, and  5%.  by  means  of  dip  coating  for  several  minutes.  Bovine  hydroxyapatite  scaffold tested  showed  an  increase  XRD  diffractogram  with  the  calcination  temperature  gave sharp  peaks  with  high  intensity  high  crystal  or  crystalline  form  perfect  but  with  the addition  of  PCL  deficient diffraction  process  with a  decrease  inttensitas.  The  pore  size and  porosity  influenced  the  high  calcination  but  lower  compressive  strength.  With  the addition  of  the  PCL  layer  increases  the  compressive  strength,  but  decrease  the  pore diameter  and  porosity  that  is  still  under  scaffolds  characteristics  and  mechanical properties of commercial.
Keyword: Bakso, Bovine, Mandibular, Scaffolds, Implants.

## PENADAHULUAN
Bakso adalah  bola  daging  dari  campuran  daging  sapi  giling  dan  tepung  tapioka, ( www.indonesiasik.com ). Di kota Demak memiliki bakso jenis sendiri yaitu bakso balungan, bagaimana pada Gambar 1.a. Bakso yang terdapat balungan atau potongan tulang-tulang sapi yang  masih  berbalut  irisan  daging  ( Rita  Fahry,  2013 ).  Limbah  tulang  sapi  bakso  balungan pada Gambar 1.b langsung dibuang di perkarangan dan tidak termanfaatkan. Padahal setiap tukang  bakso  mampu  menghasilkan  limbah  tulang  sapi  kurang  lebih  (3-4)  kg  per  hari ( wawancara  Bpk.  Slamet,  2013 ).  Jumlah  pedagang  bakso  tahun  2012  yang  terdaftar  di
1 Teknik Mesin-Fakultas Teknik- Universitas Muhammadiyah Semarang
2 Kedokteran Gigi-Fakultas kedokteran Gigi-Universitas Muhammadiyah Semarang
kabupaten  Demak  sendiri  sejum Pedagang  Mie  dan  Bakso  (APM jumlah pedagang bakso di Jawa T
Limbah  tulang  sapi  begitu riset yang memanfaatkan tulang produk bioceramik ( Meskinfam restorasi  kerusakan  jaringan  ke kasus  tumor  tulang.  Lokasi  tum maxillofacial  dan  mandibular  3 Survellience  System  Data,  201 pengunyahan,  saluran  napas, tumor  mandibula  sering  menimb diskontinuitas  tulang  mandibula pembentukan kontinuitas mandib
Gambar 1. a) Bakso B
Scaffolds  dikembangkan biomineralisasi  pada  tulang  sep Material  bioaktif  yang  telah  dip BioGran®,  45S5®,  AbminDent1 bioaktif  pilihan  bagi  perawata dikembangkankan  oleh  Etex  Co Substitute  Material)  dan  hidrox
(a)
TRAKSI Vol. 14 No. 2 Desember 2014
sendiri  sejumlah  657  buah  dan  Jawa  Tengah  7.982  m Bakso  (APMISO)  Indonesia.  Jika  limbah  tulang  sapi kso di Jawa Tengah menghasilkan limbah sebesar 31.928 g  sapi  begitu  melimpah  dan  belum  termanfaatkan.  Sekar atkan tulang sapi dibuat material hydroxyapatite sebagai Meskinfam, 2011 ). Bioceramik digunakan untuk aplikas jaringan  keras  ( Karageorgiou,  2005 ).  Kerusakan  jar Lokasi  tumor  paling  banyak  ditibia  41%,  tulang  fem andibular  3%,  tulang  radius  2%  dan  tulang  fibula  2
,  2011 ).  Tumor  mandibula  berpotensi  menimbu penelanan  dan  berbicara  ( Fonseca  RJ,  2000 ering  menimbulkan  cacat,  mulai  dari  celah  pada  tulang g  mandibula  ( Smith,  2006 ).  Maka  perlu  rekonstruksi  m uitas mandibula dengan transplantasi scaffolds ( Stošić S,
Balungan b) Limbah Tulang Sapi Bakso Balung
embangkan  menjadi  bahan  bioaktif  yang  akan  mem a  tulang  seperti  Calcium  Phosphate  atau  Tricalcium  ph ang  telah  dipasarkan  secara  luas  adalah  merk  Bioglass® AbminDent1®,  S53P4®,  yang  sampai  saat  ini  masih  m agi  perawatan  kedokteran  dan  kedokteran  gigi.  Pro leh  Etex  Corp  USA  adalah  powder  Calcium  Phosphate dan  hidroxyapatite  (HA)  berbentuk  powder  dan  cara
(b)
gah  7.982  menurut  Asosiasi tulang  sapi  bakso  dikalikan besar 31.928 kg (31,9 ton). aatkan.  Sekarang  ini,  banyak sebagai salah satu varian untuk aplikasi medik, seperti erusakan  jaringan  termasuk ,  tulang  femur  33%,  tulang ng  fibula  2  %  ( Nacomical nsi  menimbulkan  gangguan ,  2000 ).  Pengangkatan pada  tulang  alveolus  sampai konstruksi  mandibula  untuk
Stošić S, 2008 ).
akso Balungan
g  akan  memacu  terjadinya ricalcium  phosphate  (TCP). rk  Bioglass®,  PerioGlass®, t  ini  masih  menjadi  material n  gigi.  Produk  lain  yang m  Phosphate α -BSM  (Bone der  dan  cara  manufakturnya
( Hench,  1991 ),  tetapi  mahal  untuk  pasien  Indonesia  karena  produk  impor.  Sementara  HA sintesis dari bahan alam seperti gypsum dan calcite juga masih berupa serbuk dan harganya relatif mahal.
Dalam  praktek,  kebutuhan  dokter  ortopedi  adalah  berupa  scaffold  yang  langsung digunakan  untuk  mengisi  kekurangan  tulang.  Sehingga,  HA  serbuk  masih  harus  diproses lebih lanjut menjadi scaffold. Proses ini memerlukan temperatur tinggi sekitar 1400 o C  yang biaya  prosesnya  mahal.  Penggunaan  plat  logam  ini  tidak  dapat  dilakukan  karena  harus mengisi  kekurangan  tulangnya.  Meskipun  tulang  pengisi  ini  telah  tersedia  dipasaran,  yaitu produk  RS  Dr.  Sutomo  Surabaya,  namun  masih  diragukan  kompatibilitasnya  karena  masih berupa  tulang  sapi  dan  belum  menjadi  biokeramik.  Kalaupun  bisa  diproses  lanjut  menjadi hydroxyapatite,  scaffold  tersebut  masih  rapuh,  sehingga  belum  sesuai  dengan  kebutuhan dalam  praktek.  Oleh  karena  itu,  pada  riset  ini,  ingin  melakukan  studi  awal  pembuatan scaffold  bovine  hydroxyapatite  berpenguat  PCL  dengan  material  dasar  limbah  tulang  sapi bakso  balungan  dengan  metode  kalsinasi.  Keberhasilan  riset  awal  ini  akan  membuka  jalan untuk  fabrikasi  scaffold  dengan  jumlah  banyak,  sehingga  lebih  banyak  pasien  yang  dapat ditangani dengan biaya yang terjangkau di Indonesia.

## METODOLOGI PENELITIAN
Riset  yang  diusulkan  mengikuti  diagram  alir  pada  Gambar  2.  Pertama,  membuat  2 macam  spesimen  yaitu  scaffold  bovine  HA  dari  tulang  sapi  tanpa  penguat  PCL  dan berpenguat  PCL.  Variasi  konsentrasi  PCL  adalah  1%,  3%  dan  5%  w/v.  Kedua,  pengujian menggunakan uji  XRD,  tekan, SEM, dan porositas. Material  yang digunakan limbah tulang kanselosa sapi bakso balungan, Poly (ɛ-caprolactone) (PCL) komersial buatan Sigma Aldrich, dan  bone  graft  komersial  sebagai  pembanding.  Dalam  riset  ini,  spesimen  dibuat  2  macam yaitu  spesimen  yang  berupa  Bovine  Scaffold  tanpa  pelapis  PCL  dengan  kode  BS-x/PCL-0 dan berpelapis PCL atau BS-x/ PCL-y.
Langkah-langkah  penyiapan  specimen  dari  tulang  kanselosa  sapi  dipotong-potong ukuran 10x10x10 mm disebut  “ Bovine Bone atau BB”. Selanjutnya  BB direndam dalam air akuades  dan  direbus  hingga  mendidih  dalam  panci  presto  selama  2  jam.  BB  yang  sudah bersih selanjutnya direndam dalam H 2 O 2 sampai terlihat putih bersih. BB tersebut dikalsinasi dengan variasi temperatur 300, 600, 900 dan 1200 o C masing-masing variasi dilakukan selama 2  jam.  Selanjutnya  diberi  kode  BS-300/  PCL-0,  BS-600/PCL-0,  BS-900/  PCL-0  dan  BS-
1200/ PCL-0. Untuk spesimen macam ke-2 yaitu yang berpelapis PCL dilakukan dengan cara sebagai berikut: pilih spesimen tak berpelapis PCL yang sudah berupa hydroxyapatite,  yang dalam riset ini diambil BS-900/ PCL-0, untuk dilapisi PCL dengan variasi konsentrasi PCL dalam air destilasi 1, 3 dan 5% w/v dengan cara memanaskan akuades pada temperatur 80 o C dan  masukkan  serbuk  PCL  sedikit  demi  sedikit  hingga  serbuk  tersebut  larut  semua  dan larutan nampak bening.

## Gambar 2. Diagram Alir Penelitian
Pelapisan PCL dengan cara mencelupkan BS-900/ PCL-0 kedalam larutan PCL selama beberapa  menit  hingga  larutan  PCL  merasuk  kedalam  pori  karena  efek  kapiler.  Kemudian keringkan menggunakan microwave selama 5 menit pada daya 100 watt. Hasil pelapisan BS-
900/ PCL-0 dengan PCL ini masing-masing kemudian diberi kode BS-900/ PCL-1, BS-900/ PCL-3 dan BS-900/ PCL-5. Hasil kalsinasi dan pelapisan PCL diuji karakteristik dengan uji XRD, dan SEM.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Uji X-Ray Diffractometer (XRD)
Sampel  berbentuk  serbuk  ditaruh  dalam  anvil  (landasan)  pada  mesin  XRD. Penembakan  dilakukan  di  daerah  lapisan  ke  lapisan,  sehingga  dapat  mengidentifikasi  jenis mineral  yang  terkandung  dalam  lapisan,  baik  secara  total  maupun  khusus  lapisan.  Hasil pengujian sebuah sampel diprint-out dan dapat dicopy dengan perangkat pengcopy ( flashdisk ) untuk dapat diolah datanya dengan software lain semacam Origin-50.

## 1. Pengaruh Temperatur pada Kalsinasi
Pengaruh  temperatur  pada  kalsinasi  bahan  tulang  terhadap  produk  yang  dihasilkan, disajikan  pada  Gambar  3  (a,  b,  c,  d,  e  dan  f).  Gambar  3  menunjukkan  secara  umum  bahwa kenaikkan  temperatur  memberikan  difraktogram  dengan  pola  yang  serupa  namun  puncak- puncaknya  semakin  tajam.  Lebih  detil  dapat  dilihat  bahwa  kalsinasi  pada  temperatur  yang relatif  rendah  (300  dan  600) o C  pada  Gambar  3b  dan  3c  memberikan  difraktogram  dengan puncak-puncak  yang  lebar  dan  intensitas  yang  rendah.  Pola  seperti  ini  menggambarkan bahwa  sampel  tersebut  berfase  semi  kristal  atau  mempunya  kristalinitas  yang  masih  rendah ( Pujianto dkk, 2005 ).
Pada  temperatur  600 o C  memberikan  kristalinitas  yang  sedikit  lebih  tinggi  dari  pada temperatur 300 o C. Kenaikkan temperatur kalsinasi pada 900 o C pada Gambar 3d memberikan difraktogram dengan puncak-puncak yang tajam dengan intensitas yang tinggi ( Nasution, D., 2006 ). Hal ini menandakan bahwa sampel telah berbentuk kristal dengan tingkat kristalinitas yang  tinggi  atau  kristal  yang  sempurna.  Namun  demikian  kenaikkan  temperatur  1200 o C menyebabkan  penurunan  intensitas,  yang  menunjukkan  telah  terjadi  penurunan  kristalinitas terlihat pada Gambar 3e. Penurunan kristalinitas dapat disebabkan oleh kerusakan kristal dari sampel tersebut, akibat temperatur kalsinasi yang relatif tinggi.
a. Pola difraksi b. Pola difrak c. Pola difra c. Pola difrak e. Pola difrak f. Pola difra Gambar 3. Pola Difraksi Sin
TRAKSI Vol. 14 No. 2 Desember 2014
Pola difraksi sinar-X spesimen BB”M” T=2 jam (2x)
Pola difraksi sinar-X spesimen BB”M” T= 300 o C
Pola difraksi sinar-X spesimen BB”M” T= 600 o C
Pola difraksi sinar-X spesimen BB”M” T= 900 o C
Pola difraksi sinar-X spesimen BB”M” T= 1200 o C Pola difraksi sinar-X spesimen HA 200 komersil
Difraksi Sinar-X Dari Produk Kalsinasi Pada Berbagai T
da Berbagai Temperatur
Trend  kristalinitas  sampel  yang  telah  disajikan  mengindikasikan  bahwa  temperatur menentukan  proses  kristalisasi  bahan  tersebut.  Dari  data  tersebut  juga  dapat  diketahui bahwa kalsinasi pada temperatur 900 o C memberikan hasil yang terbaik, atau menunjukkan temperatur  yang  optimum.  Apabila  pola  difraksi  sampel  hasil  kalsinasi,  khususnya  yang dilakukan  pada  temperatur  900 o C  dan  1200 o C,  dibandingkan  dengan  pola  difraksi hidroksiapatit  standar  maka  terlihat    sama.  Kesamaan  pola  difraksi  ini  mengindikasikan bahwa sampel hasil kalsinasi berupa hidroksiapatit.

## 2. Pengaruh Kadar PCL
Pengaruh  penambahan  PLC  dengan  kadar  yang  bervarasi  pada  bahan  tulang  yang telah  dilaksinasi  pada  suhu  900 o C,  terhadap  produk  yang  dihasilkan  ditampilkan  sebagai Gambar  4a,  b,  c,  dan  d.  Gambar  4  tersebut  dapat  dilihat  secara  umum  bahwa  penambahan PCL  ke  dalam  bahan  memberikan  pola  difraksi  yang  sama  dengan  bahan  asal  namun mempunyai    intensitas  yang  lebih  rendah.  Ini  menunjukkan  bahwa  penambahan  PCL menyebabkan  penurunan  kristalinitas  bahan.  Penurunan  ini  dapat  disebabkan  oleh penempelan  PCL  pada  hidroksi  apatit  sehingga  menutupi  bidang  kristal  apatit  tersebut. Akibatnya  proses  difraksi  kurang  sempurna  yang  ditandai  dengan  penurunan  inttensitas. Kemungkinan  lain,  pengikatan  PCL  telah  merusak  kristal  hidroksi  apatit  meskipun kerusakannya relatif kecil.
Apabila  dicermati  lebih  detil,  terlihat  bahwa  intensitas  pada  bahan  dengan penambahan  PCL  yang  semakin  banyak  1  %  dan  3  %  mengalami  kenaikan,  meskipun kenaikkannya  relatif  kecil  yang  ditunjukan  pada  Gambar  4b  dan  4c.  Namun  penambahan PCL yang lebih banyak (5%) ternyata menyebabkan penurunan intensitas yang cukup besar, yang  menandakan  telah  terjadinya  penurunan  kristalinitas  yang  cukup  signifikan  ditunjukan pada  Gambar  4d.    peningkatan  PCL  dengan  jumlah  yang  relatif  besar  pada  hidroksiapatit dapat  menyebabkan  kerusakan  kristal  bahan  tersebut.  Dari  data  yang  telah  disajikan  dapat diketahui bahwa penambahan PCL yang optimum adalah 3%.
a. Pola difraksi sinar-X spesimen “BHA” T= 900 o C
b. Pola difraksi sinar-X spesimen BCM”PCL 1%” T= 900 o C
c. Pola difraksi sinar-X spesimen BCM”PCL 3%” T= 900 o C
d. Pola difraksi sinar-X spesimen BCM”PCL 5%” T= 900 o C
Gambar 4. Pola difraksi sampel dengan pelapisan PLC pada kadar yang bervariasi

## Pengujian SEM
Spesimen  dipotong  dengan  lebar  5  mm  dan  tinggi  3  mm  untuk  mengetahui strukturmikro scaffold tulang mandibula. Posisi pemotretan pada daerah lapisan yang terdiri dari  4  lapis  sehingga  mewakili  dari  semua  komposisi  paduan  sedangkan  studi  karakterisasi didaerah  retakan,  ukuran  pori-pori  dan  interface  antar  lapisan  untuk  analisa  hasil.  Hasil  uji SEM  cancelleus  bovine  bone  sebelum  dikalsinasi  pada  berbagai  temperatur  dengan  pelapis dan tanpa pelapis PLC disajikan dalam Gambar 5 hingga Gambar 9 dengan pembesaran 60x dan 2500x.
a)  Pembesaran 60 x                   b) Pembesaran 2500 x Gambar 5. Struktur mikro Bovine bone (tulang sapi) setelah digodog dan direndam dalam H 2 O 2 selama 20 jam: a) pembesaran 60x dan b) pembesaran 2500x
Gambar  5a  menunjukkan  porous  interkoneksi  cancelleus  bovine  bone  (tulang  sapi cancelleus).  Diameter  porous  ±  (200–300) µm .  Sedangkan  Gambar  5b  menunjukkan  detail permukaan dinding struktur tulang porous dengan kandungan material organiknya.
a)  Pembesaran 60 x b) Pembesaran 2500 x
Gambar 6. Struktur mikro cancelleus bovine setelah dikalsinasi pada temperatur 900 o C selama 2 jam tanpa pelapis PLC: a) pembesaran 60x dan b) pembesaran 2500x
Gambar  6a  menunjukkan  porous  interkoneksi  cancelleus  bovine  bone  setelah dikalsinasi  pada  temperatur  900 o C  selama  2  jam  tanpa  pelapis  PLC.    Ukuran  porous  ini relative  sama  dengan  kondisi  sebelum  dikalsinasi.  Proses  kalsinasi  ini  menghilangkan kandungan  material  organik  dan  menyisakan  anorganik  yang  disebut  hydroxyapatite  seperti tampak  pada  Gambar  6b.  Scaffold  ini  yang  selanjutnya  disebut  BS-900/PLC-0.  Setelah dilapisi dengan PLC 1, 3 dan 5%w/v, yang selanjutnya disebut BS-900/PLC-1, BS-900/PLC- 3 dan BS-900/PLC-5, hasil uji SEM disajikan dalam Gambar 7, 8 dan 9. Pada spesimen BS- 900/PLC-1  tampak  terlihat  penambahan  material  yang  menempel  pada  dinding  pori-pori scaffolds  yang  ditunjukan  pada  Gambar  70a.  Untuk  ukuran  pori-pori  juga  mengalami penyempitan  diameter  yang  ditampilkan  pada  Gambar  7b.  Semakin  tinggi  kadar  PLC  akan menurunkan  diameter  pori-pori  scaffolds  ( Tontowi,  A.E  .  dkk.,  2006 ),  dimana  ditunjukan pada Gambar 8 dan Gambar 9.
a)  Pembesaran 60 x
b)  Pembesaran 2500 x
Gambar 7. Struktur mikro cancelleus bovine setelah dikalsinasi pada temperatur 900 o C dengan pelapis PLC 1%w/v: a) pembesaran 60x dan b) pembesaran 2500x
a) Pembesaran 60 x
b)   Pembesaran 2500 x Gambar 8. Struktur mikro cancelleus bovine setelah dikalsinasi pada temperatur 900 o C dengan pelapis PLC 3%w/v: a) pembesaran 60x dan b) pembesaran 2500x
Gambar 8 distribusi lapisan coating (3 %) lebih tebal dibandingkan Gambar 7 PCL-1 %  yang  ditandai  dengan  warna  dinding  yang  lebih  putih.  Struktur  spesimen  lebih  tebal  dan muncul gelembung PLC yang nampak pada Gambar 9 dengan kadar PCL 5%. Spesimen BS- 900/PCL  5%  distribusi  lapisan  coating  menutupi  pori-pori  dari  scaffolds  dan  tergantikan gelembung-gelembung yang diakibatkan kandungan PCL yang tinggi ( Tontowi, A.E . dkk., 2006 ).
(a) (b) a) Pembesaran 60 x b) Pembesaran 2500 x
Gambar 9. Struktur mikro cancelleus bovine dikalsinasi pada temperatur 900 o C dengan pelapis PLC 5%w/v: a) pembesaran 60x dan b) pembesaran 2500x

## KESIMPULAN
1. Meningkatnya  temperatur  kalsinasi  mulai  dari  300 o C  sampai  1200 o C  pada  scaffolds tulang sapi akan menaikkan porositas, ukuran diameter pori-pori, dan kristalisasi
2. Bertambahnya  kadar  campuran  PCL  akan  menurunkan  porositas,  ukuran  diameter  pori- pori, dan kristalisasi.
3. Scaffolds  tulang  sapi  yang  paling  optimal  pada  temperatur  kalsinasi  900 o C  dan penambahan PCL 3% ditinjua dari sifat mekanik dan karakteristik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Direktorat  Jenderal  Pendidikan  Tinggi, Kementerian  Pendidikan  Nasional  Republik  Indonesia  yang  telah  memberikan  dana  untuk Penelitian Dosen Pemula tahun anggaran 2013-2014.

## DAFTAR PUSTAKA
Asosiasi  Pedagang  Mie  dan  Bakso  (APMISO),  2014,  Jumlah  Pedagang  Bakso  di  Jawa Tengah Tahun 2012.
ASTM E 290., 2004., standart test method  for bend testing of material for ductility. American Society for Testing and Materials E-290 Vol.2, 2002, Hal.187-196.
Etex  Corp.,  2004,  Patent  No.  5,650,176  Synthesis  of  Reactive  Calcium  Phosphates  - Divisional 1.
Fonseca  RJ,  (2000),  Masticatory  myalgias  In  Oral  and  Maxillofacial  Surgery.
Temporomandibular Disorderset al.: Philadelphia: WB. 38–45.
Hench,  L.L.,  Splinter,  R.J.,  Allen,  W.C.,  Greenlee,  T.,  1972,  Bonding  Mechanism  at  the Interface of Ceramic Prosthetic Material, Journal of Biomed Mater Res, 2, pp.117-41.
Herliansyah,  M.K.,  M,  Hamdi.,  2009.,  The  influence  of  sintering  temperature  of  the properties of compacted bovine hydroxyapatite., Material Science Engineering: C, 29, 1674-1680.
Herliansyah,  M.K.,  Toque,  J.A.,  Hamdi,  M.,  Ide-Ektessabi,  A.  and  Wildan,  M.W.,  2006,
ISTECS Journal, Vol. VIII, pp. 25-33.
Karageorgiou V, Kaplan D., 2005.,  Porosity of 3D biomaterial scaffolds and osteogenesis., Department  of  Chemical  and  Biological  Engineering,  Tufts  University,  4  Colby Street, Medford, MA 02155, USA
Meskinfam  M,  Sadjadi  MA,  et.al.,  2011.,  Biocompatibility  evaluation  of  nano hydroxyapatite-starch biocomposites. J Biomed Nanotechnol 7 (3): 455-9.
Nanocomial survellience sytem data rumah sakit Dr. Kariadi (2010).
Nasution,  D.,  2006,  Pembuatan  Hydroxyapatite  dari  Calcite  Gunung  Kidul  dan
Karakterisasinya, Tesis S2, Jurusan Teknik Mesin FT UGM, Yogyakarta.
Novianto,  Tontowi,  A.E.,  dan  Ana,  I.D.,  2007,  Uji  Kompresi  Scaffold  Komposit Hydroxyapatite-Gelatin, Prosiding Seminar Nasional ke-13 ‘Perkembangan Riset dan Teknologi, Pusat Studi Ilmu Teknik UGM, Yogyakarta.
Pujianto,  E.,  Tontowi,  A.E.,  Siswomih  ardjo,  W.,  dan  Ana,  I.D.,  2005,  Perbandingan Karakteristik  Hydroxyapatite  Hasil  Sintesa  Gypsum  Kulon  Progo  dan  Tasik  Malaya dengan Biopex, Jurnal Teknik, FT UNS.
Rita Fahry, 2013., Masakan popular Kota wali : Bakso Balungan., www.blogritarahry.com.
Smith. JE, Blackwell K,, 200 9,Mandibular
reconstruction, <http://emedicine.medscape.com/article> ( 23 Oktober 2009).
Stošić, S., Kozarski, J., Stošić-Opinćal, T., Jović, N., Kozomara, R. (2005) Mikrovaskularni osteoseptokutani  radijalni  režanj  u  nadoknadi  defekata  donje  vilice  nastalih  ratnim ranjavanjem. Vojnosanitetski pregled, vol. 62, br. 6, str. 429-434.
Salgado,. Anto´nio J., Olga P. Coutinho,. Rui L. Reis (2004)., Bone Tissue Engineering: State of the Art and Future Trends., Braga, Portugal., DOI: 10.1002.
Tontowi,  A.E.,  Ana,  I.D.,  dan  Siswomihardjo,  W.,  2006,  Pengembangan  dan  Pembuatan Material  Bioaktif  Menggunakan  Gypsum  Kulon  Progo  sebagai  Matrial  Restorasi Kerusakan Tulang,
www.indonesiasik.com
__________________________
PENULIS:

## 1. SOLECHAN
Teknik Mesin-Fakultas Teknik- Universitas Muhammadiyah Semarang Jl. Kasipah no.12 Semarang 50254 E-mail : solechan1981@gmail.com
2. SAIFUDIN ALIE ANWAR
Kedokteran Gigi-Fakultas kedokteran Gigi-Universitas Muhammadiyah Semarang