## EKSTRAKSI DAN OPTIMASI VITAMIN E DARI FRAKSI NON POLAR CRUDE PALM OIL (CPO)
Rahmiwati Hilma 1 , Anggi Fisi Anggita 1 , Ihsan Ikhtiarudin 2
1 Program Studi Kimia, Universitas Muhammadiyah Riau.
2 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau
email : rahmiwatihilma@umri.ac.id

## Abstract
Vitamin E has many benefits for human health. Besides being known as supplements, vitamin  E  is  known  to  have  activities  as  an  anticancer  compound,  preventing  premature aging,  preventing  cardiovascular  diseases  and  other  degenerative  diseases.  In  this  study carried  out  the  extraction  and  optimization  process  of  vitamin  E  from  sample  non-polar fraction  of  fresh  CPO.  The  extraction  process  was  carried  out  by  saponification  reaction, vitamin  E  optimization  was  carried  out  on  the  non-polar  fraction  with  the  addition  of methanol,  then  to  the  oil  fraction  added  2-propanol  (1%)  in  hexane.  From  the  fresh  CPO samples used, it was seen that the samples met the quality standards of fresh CPO. From the results of extraction and optimization of vitamin E, it was found that the yield was quite large (52.77%). Characterization results with TLC and analyzed with UV light at a wavelength of 254  and  366  nm  seen  vitamin  E  still  has  2  stains,  the  possibility  was  tocopherol  and tootrienol which was usually components contained in vitamin E.
Key words : Crude Palm Oil (CPO), extraction, optimation, vitamin E

## Abstrak
Vitamin  E  memiliki  banyak  manfaat  bagi  kesehatan  manusia.  Selain  yang  dikenal sebagai  suplemen,  vitamin  E  diketahui  mempunyai  aktivitas  sebagai  senyawa  antikanker, mencegah penuaan dini, mencegah penyakit kardiovaskuler dan penyakit degeneratif lainnya. Pada  penelitian  ini  dilakukan  dilakukan  proses  ekstraksi  dan  optimasi  vitamin  E  fraksi  non polar  sampel  CPO  segar.  Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan  reaksi  saponifikasi,  optimasi vitamin  E  dilakukan  terhadap  fraksi  non  polar  dengan  penambahan  metanol,  selanjutnya terhadap fraksi minyak ditambahkan 2-propanol (1%) dalam heksana. Dari sampel CPO segar yang digunakan terlihat bahwa sampel memenuhi baku mutu CPO segar. Dari hasil ekstraksi dan optimasi vitamin E didapatkan rendemen yang cukup besar (52,77%). Hasil karakterisasi dengan  KLT  dan  dianalisa  dengan  lampu  UV  pada  panjang  gelombang  254  dan  366  nm terlihat  vitamin  E  masih  mempunyai  2  noda,  kemungkinanannya  adalah  tokoferol  dan tokotrienol yang biasanya menjadi komponen yang terdapat didalam vitamin E.
Kata kuci : Crude Palm Oil (CPO), ekstraksi, optimasi, vitamin E

## PENDAHULUAN
Vitamin E termasuk dalam vitamin yang  larut  dalam  lemak  dan  mempunyai aktivitas menghambat pembentukan
radikal  bebas  atau  yang  lebih  dikenal sebagai  antioksidan.  Vitamin  E  terbagi menjadi beberapa isomer, yaitu struktur α- tokoferol,  β-  tokoferol,  γ-  tokoferol,  δ- tokoferol, dan tokotrienol (Śebayang et al.,
2016).    Tokoferol  merupakan  salah  satu
antioksidan  fenol  alami  yang  paling banyak  ditemukan  dalam  minyak  nabati (Amelia, et al., 2014). Tokoferol mempunyai  keaktifan  vitamin  E  dan mempunyai  banyak  ikatan  rangkap  yang mudah dioksidasi sehingga akan melindungi  lemak  dari  oksidasi  (Arpi, 2014).  Vitamin  E  memiliki  banyak manfaat  bagi  kesehatan  manusia.  Selain yang dikenal sebagai suplemen, vitamin E diketahui  mempunyai  aktivitas  sebagai senyawa  antikanker,  mencegah  penuaan dini,  mencegah  penyakit  kardiovaskuler dan penyakit degeneratif lainnya (Kresnawaty et al ., 2012).
Minyak  sawit  atau Crude  Palm  oil (CPO)  memiliki  potensi  besar  untuk dikembangkan menjadi produk farmaseutikal dan nutraseutikal, di antaranya  karena  kandungan  tokoferol (Sinaga et  al. ,  2015).  Kandungan  vitamin
E  yang  terdapat  pada  kelapa  sawit didominasi  oleh  tokoferol.  Jenis  tokoferol lainnya  diantaranya  tokotrienol  pada kelapa  sawit  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  sumber  lain,  seperti,  minyak kacang,  padi,  barley,  gandum,  jagung, kapuk,  bunga  matahari,  dan  kacang- kacangan.  Tokoferol  di  dalam  minyak sawit  berkisar  antara  600–1.000  ppm, bahkan  pada  residu  minyak  serabut  sawit
kandungan  tokoferol  mencapai  2.000- 4.000 ppm (Kresnawaty et al., 2012).
Berbagai cara dikembangkan untuk mendapatkan  tokoferol  dari  minyak  sawit, tetapi  kompleksitas  dan  variasi  struktur yang  luas,  menyebabkan  perlunya  teknik isolasi, diferensiasi dan kuantifikasi masing-masing  komponen  dari  campuran yang diperoleh dari suatu sampel. Ekstraksi  umum  yang  digunakan  adalah dengan  menggunakan  saponifikasi  alkali dan ekstraksi fraksi yang tidak tersaponifikasi  dengan  dietil  eter  yang diikuti  oleh  analisis  penentuan  tokoferol (Sinaga et al., 2015). Penelitian sebelumnya oleh Andulaa et  al., (2017)  melaporkan  studi perbandingan  analisis  vitamin  E  minyak sawit  merah  tersafonifikasi  antara  metode spektrofotometri  UV  Visdan  HPLC.  Pada penelitian  tersebut,  vitamin  E  yang diperoleh  hanya  berupa  fraksi  hasil ekstraksi saponifikasi minyak sawit merah. Oleh  karena  itu,  pada  penelitian  ini, penulis  tertarik  untuk  mengisolasi  vitamin E  dari  CPO  yang  diproduksi  oleh  PT. Minamas  dengan  metode  ekstraksi  dan optimasi  saponifikasi  vitamin  E  untuk mendapatkan  vitamin  E  denagn  rendemen yang lebih banyak.

## METODOLOGI PENELITIAN Alat dan bahan yang digunakan
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  spektrofotometerUV- Vis,  neraca  analitik,  alat-alat  gelas  yang biasa diapakai di Laboratorium.
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah Crude  Palm  Oil (CPO)  yang  diperoleh  dari  PT.  Minamas Plantation, n -heksana, NaOH, Butil
Hidroksi  Toluena (BHT),  NaCl,  etanol, aquades,  silika  gel,  zeolit, Tetrahidrofuran
(THF), petrolium benzen, dietil eter, asam asetat, dan 2-propanol, larutan wijs, etanol, kloroform, KI, Na 2 S 2 O 3, HCl, indikator pp, asam asetat, larutan amilum dan aquadest.

## Prosedur Penelitian
Preparasi CPO (SNI 7709:2012) CPO didapatkan dari pabrik pengolahan  minyak  kelapa  sawit  PT.
Minamas  di  Kabupaten  Siak,  Propinsi Riau.  Kemudian  CPO  di  bawa  ke Laboratorium Kimia
Universitas

## Muhammadiyah  Riau.  Di  Laboratorium
CPO  langsung  dimasukkan  ke  dalam freezer agar awet dan tidak rusak.

## Pengujian Mutu Sampel CPO yang akan digunakan
Pengujian  mutu  CPO  meliputi  Uji Asam Lemak Bebas (ALB),  Uji Peroksida dan  Uji  Bilangan  Iod  mengikuti  SNI 7709:2012

## Reaksi  Saponifikasi  (Modifikasi  metode
Andula et al.,2017)
20  g  sampel  dimasukkan  ke  dalam erlemenyer  250  mL  dan  ditambahkan  20 mL etanol 96%, 60 mL NaOH 0,25 M dan 50 mL BHT 0,3 M. Kemudian ditempatkan  dalam  penangas  air  pada temperatur  70°C    selama  45  menit  dan dikocok  setiap  5-10  menit  selama  proses saponifikasi.  Setelah  itu  didinginkan dalam penangas es dan ditambahkan NaCl 0,02 M sebanyak 100 mL. Dimasukkannya kedalam  corong  pisah  dan  dibiarkan hingga  terbentuk  tiga  lapisan.  Bagian  atas adalah fraksi minyak yang tak tersabunkan,  bagian  tengah  adalah  fraksi minyak  yang  tersabunkan  dan  bagian bawah  adalah  fraksi  air.  Hasil  reaksi saponifikasi  dilakukan  optimasi  ekstraksi vitamin  E  dengan  cara  dipisahkan  fraksi yang tak tersabunkan atau fraksi non polar, lalu  ditambahkan  dengan  70  mL  metanol, dan  didiamkan  hingga  terbentuk  menjadi dua  fraksi.  Fraksi  bagian  atas  diambil  dan ditambahkan  dengan  20  mL  2-propanol (1%) dalam heksana.
Fraksi non polar atau  yang larut n- heksan  (bagian  atas)  diuapkan  pelarutnya dan  dikarakterisasi  dengan  KLT  dan lampu UV.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  Nimai  Mutu  Sampel  CPO  Segar Yang Digunakan
Pada  penelitian  ini  dilakukan isolasi  α-tokoferol  dari  CPO  dengan menggunakan  metode  saponifikasi  yang dilanjutkan  optimasi  vitamin  E.  Metode saponifikasi  terdiri  dari  beberapa  tahap antara lain saponifikasi CPO, ekstraksi dan optimasi vitamin E. Selanjutnya vitamin E hasil ekstraksi dan optimasi di karakterisasi dengan KLT dan lampu UV.
Gambar  1.  Sampel  CPO  segar  yang digunakan
Hasil  uji  mutu  sampel  awal  CPO meliputi:  kadar  asam  lemak  bebas,  kadar peroksida dan bilangan Iod harus memenuhi baku mutu  standar CPO segar. Kadar FFA < 3,5 % (SNI -01-2901-2006), Standar  BP  maks  10  Meq/kg  (SNI  3741- 2013)dan    Standar  Bilangan  Iod  :  50-55 (SNI -01-2901-2006). Dari hasil pengujian mutu  terlihat  bahwa  sampel  CPO  yang digunakan  memenuhi  baku  mutu  CPO segar  dan  sanagt  layak  untuk  dijadikan sampel penelitian.

## Hasil Uji Asam Lemak Bebas
Hasil  uji  asam  lemak  bebas menggunakan  metode  titrimetri  pada sampel  CPO  yang  digunakan,  didapatkan hasil seperti pada tabel 1.

## Tabel 1. Hasil Uji nilai asam lemak bebas CPO
Paramater Asam Lemak Bebas Ulangan 1  Ulangan 2 %RPD ALB 1.8772 1.7064 6.2555
*Standar ALB < 3.5%  (SNI -01-2901-2006)
*%RPD : ≤ 10%

## Kadar Peroksida
Hasil uji kadar peroksida menggunakan metode AOAC 1995 pada sampel CPO yang digunakan.
Tabel 4. Rata-rata bilangan peroksida pada CPO Paramater Antioksidan (g/ 250 mL CPO) Ulangan 1  Ulangan 2 %RPD BP H-0 0.4414 a 0.4415 0.0151
*Standar BP maks 10 Meq/kg (SNI 3741-2013)
*%RPD : ≤ 10%

## Bilangan Iod (BI) Pada CPO
Hasil  uji  kadar  bilangan  iod
menggunakan  metode  AOAC  1995  pada
sampel  CPO  yang  digunakan,  didapatkan hasil seperti pada tabel 4.
Tabel 4. Rata-rata bilangan iod pada CPO
Paramater Antioksidan (g/ 250 mL CPO) Ulangan 1 Ulangan 2  %RPD BI H-0 52.4946 53.0654 0.7223
*Standar BI : 50-55 (SNI -01-2901-2006)
* %RPD : ≤ 10% Ekstraksi Saponifikasi vitamin E dari

## CPO
Saponifikasi dilakukan untuk memisahkan komponen minyak dan vitamin  E  yang  dapat  mempengaruhi Vitamin  E.  Komponen  minyak  akan tersaponifikasi  karena  adanya  reaksi  basa kuat dengan asam lemak. Fungsi penambahan BHT pada reaksi saponifikasi yaitu  sebagai  antioksidan  yang  berperan untuk mencegah reaksi oksidasi vitamin E
yang sudah terpisah dari lemak (Kresnawaty et  al. ,  2012).  Saponifikasi dilakukan pada suhu 70°C agar mempercepat  reaksi,  suhu  yang  lebih tinggi  dan  waktu  yang  relatif  lama  akan merusak  isomer  vitamin  E,  sedangkan waktu  yang  lebih  singkat  menyebabkan penurunan tingkat regenerasi isomer (Andulaa dkk,  2017).
Gambar 2. Proses penimbangan CPO dan
penambahan etanol 70%
Setelah dilakuan penambahan etanol  ditambahakan  NaOH  0,25M  dan BHT 0,3 M seperti pada gambar 3.
Gambar 3. Penambahan NaOH dan BHT pada CPO
Selanjutnya  dilakukan  pemanasan dalam  penangas  air  pada  temperatur  70°C selama    45  menit  dan  aduk  setiap  5-10 menit  dan  didinginkan,  seperti  pada gambar 4.
Gambar 4. Proses Saponifikasi pada sampel CPO
Penambahan    NaCl  0,02  M sebanyak  100  mL  dan  dimasukkan kedalam  corong  pisah  tempat  reaksi saponifikasi  berlangsung  dan  dibiarkan sampai di dapatkan 3 lapisan, seperti pada gambar 5.
Gambar 5. Reaksi saponifikasi Hasil  reaksi  saponifikasi  terdiri dari  lapisan  air  (paling  bawah),  Fraksi fraksi  minyak  yang  tersabunkan  (tengah) dan  Fraksi  minyak  yang  tak  tersabunkan (tengah), seperti pada gambar 6.
(a) (b)                            (c)
Gambar 6.Fraksi air (a), fraksi minyak yang tersabunkan (b) dan fraksi minyak atau tak tersabunkan (c)
Optimasi  vitamin  E  hasil  ekstraksi saponifikasi
Fraksi yang tak tersabunkan ditambahkan 70 mL Metanol dan didiamkan  hingga  terbentuk    2  lapisan, seperti pada gambar 7.
Gambar 7. Fraksi tak tersabunkan dengan penambahan metanol
Terhadap  fraksi  ini  dilakukan isolasi  dengan  mengambil  lapisan  atasnya dan  ditambahkan  2-propanol  (1%)  dalam heksana, seperti pada gambar 8.
(a) (b)     (c)
Gambar 8. Isolasi terhadap vitamin E (a) dipisahkan lapisan atas (b) dan setelah ditambahkan 2-propanol (c)
Sampel (c) ditimbang dan dimasukkan  ke  dalam  vial  untuk  lebih mempercepat  penguapan  pelarut,  seperti pada gambar 9.
(a) (b) (c)
Gambar 9. Vitamin E (a) yang dibiarkan pelarutnya menguap (b) selama satu minggu penguapan (c)
Dari  hasil  optimasi  tokoferol  dari CPO didapatkan tokoferol seberat 10,77 gr atau  dengan  rendemen  sebesar  52,77% (dari  20,71  gr  CPO  segar).  Karakterisasi tokoferol  yang  diisolasi  dilakukan  dengan plat  KLT  dan  dielusi  dengan  pelarut  n- heksan  :etil  asetat  dan  n-heksan  : kloroform.  Hasil  elusi  dengan  pelarut dilihat dengan lampu UV 254 nm dan 366 nm. Seperti pada gambar 10
(c)                     (d)
Gambar 10.Karakterisasi tokoferol pada lampu UV 254 nm(a, b,c) dan 366 nm (d)
Dari  hasil  karakterisasi  dengan KLT  dan  lampu  UV  terlihat  bahwa vitamin  E  yang  dihasilkan  kemungkinan masih mengandung 2 senyawa,
kemungkinan seperti tokoferol dan tokotrienol  yang  merupakan  komponen dari vitamin E

## KESIMPULAN DAN SARAN
Dari ekstraksi dan optimasi vitamin E  yang  dilakukan  terhadap  CPO  didapat disimpulkan antara lain :
1. Sampel CPO segar yang digunakan  memenuhi  baku  mutu
CPO segar
2. Rendeman vitamin E yang dihasilkan  cukup  besar  yaitu 52,77%
3. Dari  karakterisasi  vitamin  E  yang dihasilkan  masih  mengandung  2 senyawa

## SARAN
Saran  untuk  penelitian  selanjutnya agar  vitamin  E  ini  sangat  mungkin  bisa dimurnikan  dengan  pengoloman,  sehingga bisa didapatkan tokoferol murni.

## DAFTAR PUSTAKA
Andula,  M.  A.,  Ruslan.,  Ys  Hadi  dan Puspitasari,  J.  D.  2017.  Studi perbandingan  analisis  vitamin  E minyak  sawit  merah  tersaponifikasi antara  metode  spektrofotometri  UV- VIS dan KCKT. Kovalen. 3 : 50-57. Amelia,  P,  Fithariyah,  N.,  Chairul.  2014. Analisis  A-Tokoferol  (Vitamin  E) Pada  minyak  biji  kelor (Muringa Oleifera  Lam.) Secara  Kromatografi
Cair  Kinerja  Tinggi. Jurnal  Kimia Valensi 2  :  142-147.ISSN  :  1978- 8193.
Arpi,  N.  2014.  Kombinasi  antioksidan alami  α-tokoferol  dengan  asam askorbat  dan  antioksidan  sintesis BHA dengan BHT dalam
menghambat ketengikan kelapa gongseng giling (U Neulheu) selama penyimpanan. Jurnal  Teknologi  dan Industri Pertanian Indonesia . Universitas Syiah Kuala. Kresnawaty,  I.,  Budiani,  A.,  Panji,  T  dan Suharyanto. 2012. Isolasi dan mikroenkapsulasi  vitamin  E  dari crude  palm  oil  sebagai  sumber antioksidan  bahan  pangan. Menara perkebunan . 2 : 68-76.
Sammugasamy,  B.,  Ramakrishnan,  Y., Ghazali,  M,  H.,  Muhammad,  K. 2013. Combination of saponification and dispersive liquid-liquid microextraction for the determination  of  tocopherols  and tocotrienols  in  cereals  by  reserved- phase high-performance liquid chromatography . Journal of chromatography A. 1300 : 31-37
Sandhiutami,  D.  M.  N.,  Ngatidjan  dan Kristin,  E.  2012.  Penetapan  kadar tokoferol dalam  minyak  buah merah (Pandaus conoideus LAM ) Dan dalam darah pada tikus wistar jantan yang  diberi  bahan  aktivitas  fisik maksimal. Seminar
Nasional
POKJANAS  TOI  XLII .  Universitas Jendral Achmad Yani. Bandung.
Sebayang,  F.,  Kaban,  J.,  Bangun,  N., Bulan,  R.,  Putri,  N.K.,  2016. Enrichment  of  Tocopherol  and Tocotrienol  using  Polar  Adsorbents from  Candlenut  Oil,  Int’l  Journal  of
Advances  in  Chemical  Engg.,  & Biological Sciences (IJACEBS) Vol.
3,  (1)ISSN  2349-1507  EISSN  2349- 1515 Sinaga, A.G.S., Siahaan, D. 2015.
Characterization  and  Antioxidant
Activity  of  Non-Polar  Extractfrom Crude  Palm  Oil  and  Palm  Methyl Ester. International Journal of
ChemTech  Research,  Vol.8(4).  pp 1810-1816