AGRICA: Journal of Sustainable Dryland Agriculture, 16 (1): 65-75 (2023) ISSN Online: 2715-4955; ISSN Cetak: 2715-6613 DOI: https://doi.org/10.37478/agr.v16i1.2702
Uji Aktivitas Antijamur Bacillus spp. Terhadap Colletrotrichum scovilei Penyebab Antraknosa Cabai Rawit
Antifungal Activity Test of Bacillus spp. against Colletrotrichum scovillei Cause Anthracnose of Cayenne Pepper
I Wayan Diksa Gargita 1*) , Khamdan Khalimi 2)
1) Program Studi Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Udayana
2) Program Studi Magister Bioteknologi Pertanian, Universitas Udayana Jl. PB. Sudirman, Denpasar, Bali, 80231
* email: diksa.gargita@unud.ac.id

## ABSTRAK
Penyakit  antraknosa  yang  disebabkan  oleh  jamur Colletotrichum  scovillei merupakan  salah  satu penyakit  utama  tanaman  cabai  rawit  ( Capsicum  frutescens L.)  yang  berpengaruh  terhadap produktivitas  tanaman.  Penyakit  tanaman  yang  disebabkan  oleh  patogen  dari  golongan  jamur  sudah banyak dilaporkan untuk memanfaatan agensia hayati yang diaplikasikan dalam biofungisida. Bacillus spp.  dilaporkan  memiliki  kemampuan  antagonis  terhadap  beberapa  jenis  jamur  patogen  penyebab penyakit  pada  tanaman.  Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk  mengetahuai  kemampuan  antagonis beberapa spesies Bacillus terhadap jamur Colletotrichum scovillei penyebab penyakit antraknosa pada tanaman  cabai  rawit.  Pengujian  diawali  dengan  peremajaan  jamur C.  scovillei dan  bakteri Bacillus subtillis , B.  cereus  B.  coagulans , B.  thuringiensis yang  sudah  teridentifikasi.  Selanjutnya  dilakukan pengujian  daya  hambat  bakteri Bacillus spp.  terhadap  pertumbuhan  dan  biomassa  jamur C.  scovillei secara in  vitro ,  serta  pengujian  daya  hambat  filtrat  bakteri Bacillus spp.  terhadap  koloni  jamur C. scovillei secara in  vitro .  Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa Bacillus spp.  memiliki  persentase  daya hambat  terhadap  pertumbuhan  jamur C.  scovillei sebesar  91,36%  sampai  dengan  96,46%  dan persentase  daya  hambat  85,35%  sampai  dengan  88,53%  terhadap  biomassa  jamur C.  scovillei dibandingkan dengan kontrol. Filtrat bakteri Bacillus spp. pada konsentrasi 20%-90% untuk menekan pertumbuhan  koloni  jamur C.  scovillei dengan  persentase  daya  hambat  sampai  dengan  99,84%. Kualitas daya hambat agensia hayati dikatakan baik apabila daya hambat yang dimiliki >70% jika diuji secara in  vitro .  Hambatan  yang  terjadi  oleh  bakteri Bacillus spp.  terhadap  pertumbuhan  jamur C. scovillei , kemungkinan disebabkan oleh adanya kompetisi makanan dan ruang. Kemungkinan tersebut berkaitan dengan keberadaan kitinase yang merupakan salah satu senyawa metabolit antijamur.
Kata kunci: Antijamur, Antraknosa, Bacillus spp, Cabai Rawit, Colletotrichum scovillei

## ABSTRACT
Anthracnose  caused  by  the Colletotrichum  scovillei is  main  diseases  of  cayenne  pepper  ( Capsicum frutescens L.) that affect on plant productivity. The control of plant diseases caused by pathogenic fungi has  been  widely  reported  by  utilizing  of  biological  agents  that  applied  in  biofungicides.  Bacillus  spp. was  reported  to  have  antagonistic  abilities  against  several  pathogenic  fungus.  The  purpose  of  this study  was  to  determine  the  antagonistic  ability  of  several  Bacillus  species  against Colletotrichum scovillei .  The  begins  was  rejuvenatio  of  the  C. scovillei and  B. subtillis ,  B. cereus ,  B. coagulans ,  B. thuringiensis that have been identified. The inhibition of Bacillus spp. on the growth and biomass of C. scovillei was  tested  in  vitro,  as  well  as  testing  the  inhibition  of  Bacillus  spp.  filtrates  on  C.  scovillei colonies. The inhibitions of Bacillus spp. against the growth of C. Scovillei were ranged from 91,36% to 96,46%  and  a  percentage  inhibition  on  biomass  of  C.  scovillei  were  ranged  from 85,35%  to  88,53% compared to the control. Bacillus spp. filtrates was tested at concentrations of 20%-90% were able to inhibit the growth of C. scovillei colonies with a percentage inhibition up to 99,84%. The good quality standard  of  biological  agent  must  have  >70%  of  inhibition  in  vitro.  The  inhibition  that  occurs  by Bacillus spp. on the growth of C. scovillei is likely due to competition for nutrient and space. And other, the possibility of an antagonistic mechanism in the form of the presence of chitinase, which is one of the antifungal metabolite compounds .
Keywords: Antifungal, Anthracnose, Bacillus spp, Cayenne Pepper, Colletotrichum scovillei

## PENDAHULUAN
Penyakit  antraknosa  merupakan penyakit utama dalam budidaya tanaman  cabai  rawit  dan  dapat berpengaruh  nyata  terhadap  kuantitas dan  kualitas  produksi  cabai  rawit, sehingga  diperlukan  upaya  untuk mengendalikannya.  Menurut  Khalimi et al ., (2019) bahwa jamur Colletotrichum scovillei merupakan patogen  yang  menyebabkan  penyakit antraknose  pada  tanaman  cabai  rawit ( Capsicum frutescens ). Salah satu usaha
dalam menanggulangi dan mengendalikan  penyakit  ini  adalah dengan  penggunaan  biofungisida  yang mengandung  agensia  hayati Bacillus sp.
Agensia  hayati Bacillus spp.  yang dapat digunakan antara lain B. subtilis , B. cereus , B. coagulans , B. thuringiensis . Beberapa  hasil  penelitian  melaporkan bahwa  agensia  hayati Bacillus spp. digunakan untuk mengendalikan jamur penyebab penyakit pada berbagai  jenis  tanaman.  Suriani  & Muis,  (2016)  menemukan  bahwa bakteri B.  subtilis berpotensi  menjadi agensia hayati karena mampu menghambat  perkembangan  jamur Fusarium verticillioides penyebab penyakit  pada  tanaman  jagung.  Selain itu, B. subtilis juga ditemukan memiliki potensi dalam mengendalikan
beberapa  penyakit  pada  tanaman tomat seperti penyakit busuk akar dan layu Fusarium (Khalil et  al .,  2021).
Rochmawati  &  Trimulyono,  (2021) melaporkan bahwa B. subtilis
berpotensi  sebagai  agensia  hayati karena
memiliki kemampuan
menghambat pertumbuhan jamur Cercospora sp.  patogen  penyebab
penyakit pada tanaman Nepenthes dan memiliki  efek  yang  sama  baiknya dengan  fungisida  sintetis  berbahan aktif mankozeb .  Microorganisme  yang diidentifikasi  oleh  Li et  al .,  (2018) menunjukan bahwa bakteri dari strain B.  subtilis berpotensi  menjadi  agen biokontrol  dan biofertilizer terutama untuk  upaya  pengendalian  penyakit yang  disebabkan  oleh  jamur Fusarium pada  beberapa  jenis  tanaman.  Dua strain dari Bacillus yaitu B. subtilis dan B. cereus dilaporkan bermanfaat sebagai agen biokontrol yang berpotensi untuk pengendalian penyakit  yang  disebabkan  oleh  jamur Fusarium pada tanaman tomat (Kamali et  al .,  2019).  Bakteri B.  coagulans dilaporkan  oleh  Aswar et  al., (2018), berpotensi  menjadi  agen  biokontrol dalam  mengendalikan  penyakit  layu pada  tanaman  cabai  yang  disebabkan oleh Rhizoctonia  solani .    Wang et  al .,
(2012) melaporkan bahwa B. coagulans berpotensi  menjadi  agensia hayati  karena  mampu  menghambat Botrytis cinera , Alternaria solani , Phytopthora drechsleri Tucker, Fusarium  oxysporum ,  dan Glomerella cingulate .  Bakteri B.  thuringiensis
dilaporkan sangat berpotensi dimanfaatkan  untuk  agen  biocontrol dalam mengendalikan beberapa penyakit tanaman akibat adanya serangan  patogen  seperti Fusarium oxysporum , Colletrotrichum gloeosporioides .
Lebih  lanjut  dijelaskan  bahwa B. subtilis mampu  menghambat  patogen melalui mekanisme parasitisme
(Setiaji et al ., 2023). Namun, informasi tentang bakteri antagonis untuk mengendalikan jamur patogen

## Gargita : Uji Aktivitas Antijamur Bacillus spp. Terhadap Collectrotrichum scovilei Penyebab Antraknosa Cabai Rawit
Colletotrichum scovillei yang menyebabkan  penyakit  antraknosa pada tanaman cabai rawit masih belum dilaporkan.  Penelitian  ini  bertujuan untuk mengetahuai
kemampuan antagonis  beberapa  spesies Bacillus terhadap jamur Colletotrichum scovillei penyebab  penyakit  antraknosa  pada tanaman cabai rawit.

## METODE
Penelitian ini dilakukan mulai bulan Februari  2023  sampai  bulan  April
2023 yang bertempat di Laboratorium Perlindungan Tanaman Fakultas Pertanian Universitas Udayana Denpasar Bali. Bahan yang diperlukan untuk
melakukan  pengujian  pada  penelitian ini  yakni  biakan  jamur C.  scovillei , bakteri B.  subtilis , B.  cereus , B.
coagulans , B.  thuringiensis ,  media
Potato  Dextrose  Agar (PDA), Potato Dextrose  Broth (PDB), Peptone  Potato Dextrose Agar (PPDA), air steril.
Peralatan  yang  diperlukan  yakni cawan  putri,  gelas  ukur, deck  glass , cover  glass ,  gelas  ukur, microscope slides , tabung reaksi, sendok pengaduk, timbangan  digital,  kertas  amplop, autoclave ,  api  bunsen,  kompor  gas, panci, pisau, jarum ose, gunting, mixer , shaker , haemocytometer , laminar  air flow ,  mikroskop,  penjepit,  saringan, tisu,  kain  kasa, aluminium  foil , masker , kapas, penggaris, kamera digital, meteran,  kertas  buram,  spidol,  dan kertas stiker.
Peremajaan jamur C. scovillei Peremajaan  jamur C.  scovillei dilakukan  dengan membiakan kembali jamur pada media PDA yang selanjutnya  diinkubasi  dalam  waktu  5
hari dalam kondisi suhu ruang. Biakan jamur berhasil
ditumbuhkan selanjutnya  dapat  digunakan  sebagai bahan pengujian selanjutnya.
Peremajaan bakteri C. Scovillei Peremajaan  bakteri B.  subtilis , B. cereus , B.  coagulans , B.  thuringiensis dilakukan dengan membiakkan kembali  bakteri  pada  media  PPDA yang  ditambah  dengan  200  mg nystatin/liter.  Pembiakan  dilakukan dengan  cara  menggoreskan  isolat bakteri pada media jamur dan diinkubasi  dalam  waktu  2  hari  pada kondisi  suhu  ruang.  Biakan  yang berhasil ditumbuhkan dapat digunakan  sebagai  bahan  pengujian selanjutnya.
Uji  daya  hambat  bakteri Bacillus spp. terhadap pertumbuhan C. scovillei secara in vitro
Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) digunakan  dalam  pengujian  daya hambat  bakteri B.  subtilis , B.  cereus , B. coagulans , B.  thuringiensis terhadap pertumbuhan jamur C. scovillei . Biakan jamur C.  scovillei diinokulasi  pada posisi  ditengah-tengah  cawan  petri yang  sudah  berisi  media  PDA  dan masing-masing  bakteri  uji  diinokulasi dengan  metode  empat  sisi  yang mengapit disc jamur C. scovillei dengan antar  bakteri  dengan  jamur  adalah  2 cm.  Masing-masing  perlakuan  pada pengujian  daya  hambat  mempunyai tiga kali ualangan. Kontrol menggunakan  media  yang  diinokulasi dengan jamur C. scovillei tanpa diinokulasi dengan bakteri dan memiliki empat kali ulangan.
AGRICA, Vol. 16 No. 1 (2023)
Pengamatan  dan  penghitungan luas koloni jamur C. scovillei dilakukan dengan menggunakan kertas milimeter blok  dan  kertas  kalkir.  Kertas  kalkir digunakan  untuk  menggambar  koloni jamur  pada  masing-masing  perlakuan dan  dilanjutkan  dengan  penghitungan luas koloni menggunakan kertas milimeter blok dari hasil salinan kertas kalkir.  Pengamatan  dilakukan  setiap hari  terhadap  luas  koloni C.  scovillei untuk  dapat  menentukan  persentase daya hambat bakteri terhadap pertumbuhan jamur C. scovillei . Persentase  daya  hambat  bakteri B. subtilis , B.  cereus , B.  coagulans , B. thuringiensis dihitung  menggunakan rumus:
Daya Hambat (%) = 100% ........ (1)
Ket: LK = Luas Koloni Kontrol LP = Luas Koloni Perlakuan Uji  daya  hambat  bakteri Bacillus spp.  terhadap  biomassa C.  scovillei secara in vitro Rancangan yang digunakan
adalah  RAL  dalam  pengujian  daya hambat  terhadap  biomassa  jamur C.
scovillei
dengan
menggunakan beberapa  bakteri  dari  genus Bacillus yaitu B. subtilis , B. cereus , B. coagulans ,
B.  thuringiensis .  Media  biakan  yang digunakan  dalam  pengujian  ini  adalah media PPDB. Pengujian diawali dengan menyiapkan  200  ml  media  PPDB  yang selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam masing-masing labu Erlenmeyer.
Erlenmeyer  yang  sudah  berisi  media selanjutnya dilakukan
sterilisasi menggunakan autoclave . Masing- masing  media  yang  sudah  disterilisasi kemudian  ditunggu  sampai  dingin  dan ditambahkan dengan bahan yang akan digunakan  sebagai  pengujian  sesuai
dengan perlakuan. Pada masing-
masing perlakuan selanjutnya
ditambahkan  sebanyak  1  ml  suspensi jamur C.  scovillei ke  dalam  200  ml media PPDB. Kemudian sebanyak 1 ml suspensi bakteri B. subtilis , B. cereus , B. coagulans , B.  thuringiensis dimasukan ke  dalam  200  ml  media  PPDB  pada masing-masing  perlakuan.  Suspensi yang sudah dimasukan ke dalam media PPDB  pada  masing-masing  perlakuan kemudia dikocok menggunakan shaker dalam  waktu  14  hari.  Setelah  dikocok sampai dengan 14 hari, masing-masing biomassa jamur dari perlakuan diambil dan disaring. Biomassa jamur selanjutnya dioven dan ditimbang.
Uji  daya  hambat  filtrat  bakteri Bacillus spp.  terhadap  koloni C. Scovillei secara in vitro Bakteri B.  subtilis , B.  cereus , B. coagulans , B.  thuringiensis dibiakkan pada  media  PPDB.  Media  PPDB  terdiri dari 5 g peptone , 200 g kentang, dan 20
g dextrose .  Semua  bahan  tersebut disesuaikan  menjadi  volume  1000  ml dan disterilisasi menggunakan autoclave pada  suhu  121°C  dengan tekanan  1,5  atm  selama    20  menit. B. subtilis , B.  cereus , B.  coagulans , B. thuringiensis yang  digunakan  sebagai perlakuan dibiakkan pada media PPDB.  Setelah  media  dingin,  maka masing-masing  media  ditambahkan dengan  suspensi  bakteri  sebanyak  1 ml. Kemudian kultur bakteri B. subtilis , B.  cereus , B.  coagulans , B.  thuringiensis dikocok  menggunakan shaker dengan mengatur  pada  kecepatan  100  rpm dan  dalam  waktu  14  hari.  Kultur bakteri yang sudah dikocok
selanjutnya disentrifugasi pada
kecepatan  4500  rpm  dalam  waktu  15
Gargita : Uji Aktivitas Antijamur Bacillus spp. Terhadap Collectrotrichum scovilei
Penyebab Antraknosa Cabai Rawit
menit. Supernatan yang terlihat kemudian  disaring  dengan  membran Millipore 0,45µm (Nihon Millipore Ltd. Yonezawa).  Setelah  itu,  filtrat  kultur yang diperoleh dapat digunakan dalam pengujian  daya  hambatnya  terhadap pertumbuhan  koloni  jamur C.  scovillei pada media biakan di cawan petri.
Pengujian  ini  mengggunakan  21 perlakuan dengan masing-masing
perlakuan dilakukan pengulangan
sebanyak tiga kali dengan
menggunakan  RAL.  Perlakuan  yang digunakan  yaitu  filtrat  bakteri  dengan konsentrasi 20%; 40%; 60%; 80% dan 90%.  Selanjutnya  dilakukan  persiapan disc jamur C. Scovillei dengan menggunakan cork borer yang berdiameter  4  mm,  yang  dilanjutkan dengan  pemindahan disc jamur  ke media  biakan  (campuran  media  PDA dan  filtrat)  yang  sudah  memadat dengan  menggunakan  jarum  ose  dan diletakan pada posisi di tengah-tengah cawan  petri.  Pengulangan  dilakukan sebanyak  empat  kali  pada  masing- masing  konsentrasi  filtrat  dan  kontrol menggunakan  kultur  jamur  yang  tidak ditambahkan  filtrat. Disc biakan  jamur yang  sudah  dipindahkan  pada  masing- masing  media  perlakuan  selanjutnya diinkubasi selama tujuh hari pada suhu ruang.  Pengamatan  dan  penghitungan luas koloni jamur C. scovillei dilakukan dengan menggunakan kertas milimeter blok  dan  kertas  kalkir.  Kertas  kalkir digunakan  untuk  menggambar  koloni jamur  pada  masing-masing  perlakuan dan  dilanjutkan  dengan  penghitungan luas koloni menggunakan kertas milimeter blok dari hasil salinan kertas kalkir.  Pengamatan  luas  koloni C. scovillei dilakukan  setiap  hari  yang
bertujuan  untuk  membandingkan  luas koloni  jamur C.  scovillei pada  masing- masing perlakuan filtrat bakteri dengan luas koloni pada kontrol.
Analisis Data
Data dianalisis menggunakan metode  statistic  dengan  Analysis  of Variance (ANOVA). Pengujian dilanjutkan apabila ditemukan perbedaan yang signifikan berdasarkan  hasil  analisis  dengan melakukan uji beda rata-rata Duncan’s Multiple Range Test pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji  daya  hambat  bakteri Bacillus spp. terhadap pertumbuhan C. Scovillei secara in vitro Hasil  beberapa  bakteri Bacillus spp.  yang  diuji  dalam  pengujian  daya hambat  terhadap  pertumbuhan  jamur C. scovillei menunjukkan bahwa bakteri Bacillus spp. ditemukan dapat memberikan  kemampuan  hambatan pada  pertumbuhan  koloni  jamur C. scovillei dan  memiliki  daya  hambat berkisar antara 91,36% sampai dengan 96,46%.  Hasil  pengamatan  luas  koloni jamur C.  scovillei yang  terendah  dan persentase daya hambat yang tertinggi ditunjukkan  pada  perlakuan  bakteri B. subtilis yaitu  sebesar  213,65mm 2 dengan persentase daya hambat sebesar  96,46%,  diikuti  perlakuan B. cereus sebesar  318,36mm 2 dengan persentase  daya  hambat  94,72%, perlakuan B.  thuringiensis sebesar 515,50mm 2 dengan  persentase  daya hambat  91,47%  dan  perlakuan B. coagulans sebesar  521,34mm 2 dengan persentase  daya  hambat   91,36%,  jika dibandingkan dengan perlakuan kontrol.  Sedangkan  pada  perlakuan

## AGRICA, Vol. 16 No. 1 (2023)
kontrol,  diperoleh  luas  koloni jamur  yang  paling  tinggi  dengan  nilai
sebesar 6040,82mm 2 (Tabel 4.1).
Tabel 1. Luas koloni jamur C. scovillei dan daya hambat Bacillus sp. terhadap pertumbuhan koloni jamur C. scovillei pada 7 hari setelah inokulasi Perlakuan Luas koloni jamur (mm2) Daya hambat (%) Kontrol ( C. scovillei ) 6040,82 c - B. subtilis + C. Scovillei 213,65 a 96,46 B. cereus + C. Scovillei 318,36 ab 94,72 B. coagulans + C. Scovillei 521,34 b 91,36 B. thuringiensis + C. Scovillei 515,50 b 91,47
Keterangan:  Nilai  yang  diikuti  huruf  sama  pada  masing-masing  perlakuan  pada kolom yang  sama  menunjukkan  berbeda  tidak  nyata  berdasarkan  uji DMRT 5%.
Hasil  uji  aktivitas  antijamur bakteri Bacillus spp. terhadap pertumbuhan jamur C. scovillei menunjukkan  bahwa Bacillus spp. mampu  menghambat  pertumbuhan jamur C. scovillei secara in vitro . Hal ini
dapat  dilihat  dari  koloni  jamur C. scovillei pada  perlakuan Bacillus spp. yang  tumbuh  terhambat.  Sedangkan koloni jamur C. scovillei pada perlakuan  kontrol  tumbuh  normal (Gambar 1).
Gambar  1.  Uji  daya  hambat  bakteri Bacillus sp.  terhadap  pertumbuhan C.  scovillei secara in vitro A: Perlakuan Kontrol C. scovillei ; B: B. subtilis + C. scovillei ; C: B. cereus + C. scovillei ; D: B. coagulans + C. scovillei + C. scovillei; E: B. thuringiensis + C. scovillei .
Hasil penelitian ini sesuai dengan hasil  penelitian  Hidayah  &  Yulianti, (2015)  yang  menemukan  bahwa B.
cereus memiliki  daya  hambat  dengan persentase  sebesar  70%  terhadap pertumbuhan
miselia jamur Rhizoctonia  solani .  Bakteri B.  subtilis juga  dilaporkan  oleh  Pratama et  al .
(2013) memiliki daya hambat terhadap  jamur  patogen Phytophthora palmivora sebesar  72,8%.  Salah  satu strain Bacillus juga dilaporkan mampu
memberikan efek penekanan terhadap perkecambahan spora jamur C. cutatum dan C.  gloeosporioides yang kemungkinan dikarenakan oleh adanya  produksi  senyawa  antijamur (Han  et  al.,  2015).  Selain  itu,  bakteri Bacillus spp.  mampu  menghambat jamur Colletotrichum sp.  pada  media Yeast  Potato  Glucose  Agar  (YPGA) dengan persentase daya hambat sebesar 76,6% (Fakhruddin & Nurcahyanti,  2020).  Efek  hambatan A B
C D
E
Gargita : Uji Aktivitas Antijamur Bacillus spp. Terhadap Collectrotrichum scovilei
Penyebab Antraknosa Cabai Rawit
kemungkinan berkaitan dengan beberapa  gen  yang  dibawa  oleh
Bacillus sp.  yang  terlibat  dalam produksi siklik lipopeptida dan  enzim hidrolik  yang  disekresikan  seperti kitinase  (Lee et  al .,  2018)  yang  mana kitinase merupakan enzim yang mampu mendegradasi dinding sel dari jamur (A. Dukare et al ., 2020).
Uji  daya  hambat  bakteri Bacillus spp.  terhadap  biomassa C.  scovillei secara in vitro
Berdasarkan hasil uji daya hambat Bacillus spp.  terhadap  biomassa  jamur C. scovillei menunjukkan bahwa Bacillus spp.  mampu  menghambat  biomassa jamur C.  scovillei dengan  persentase daya  hambat  berkisar  antara  85,35% sampai dengan 88,53% (Tabel 2).
Tabel 2. Hasil uji daya hambat Bacillus sp. terhadap biomassa jamur C. scovillei Perlakuan Biomassa jamur (g) Daya Hambat (%) C. scovillei 1,57b - B. subtilis + C. scovillei 0,23a 85,35 B. cereus + C. Scovillei 0,20a 87,26 B. coagulans + C. scovillei 0,19a 87,89 B. thuringiensis + C. Scovillei 0,18a 88,53
Keterangan: Nilai yang diikuti huruf sama pada masing-masing perlakuan pada kolom yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata berdasarkan uji DMRT 5%.
Efek hambatan salah satu spesies Bacillus terhadap  biomassa  jamur P.
chrysogenum
dilaporkan oleh Kadaikunnan et  al .,  (2015)  bahwa persentasa hambatan diperoleh sebesar 75,02% yang diuji pada media Potato Dextrose Broth yang
mengandung acetic  acid , lactic  acid , ethanol ,  dan succinic  acid .  Salah  satu isolat B.  subtillis dilaporkan  secara signifikan
mampu menekan pertumbuhan  miselia  jamur,  sehingga berpengaruh terhadap biomassa jamur F.  oxysporum sampai  dengan  70% dibandingkan dengan  kontrol (Putri et al .,  2021).  Rendahnya  biomassa  jamur C. scovillei yang terbentuk kemungkinan  disebabkan  oleh  adanya senyawa  metabolit  antijamur  yang dihasilkan  oleh Bacillus spp.  berupa enzim kitinase yang mampu mendegradasi  dinding  sel  jamur  (A. Dukare et  al .,  2020).  Lebih  lanjut dijelaskan  oleh  Dukare et  al .,  (2019)
bahwa aktivitas kitinase yang dihasilkan oleh bakteria dapat
membatasi pertumbuhan dan perkembangan jamur, sehingga tingkat virulensi  dari  jamur  patogen  akan menurun  karena  aktivitas  kitinase mampu  membatasi  perkecambahan spora jamur.
Uji  daya  hambat  filtrat Bacillus spp. terhadap koloni C. scovillei secara in vitro
Hasil  uji  filtrat Bacillus spp. terhadap  jamur C.  scovillei secara in vitro menunjukkan  bahwa filtrat bakteri Bacillus spp. mampu menekan  pertumbuhan  koloni  jamur
C. scovillei .  Filtrat  bakteri B.  subtilis pada  konsentrasi  20%-90%  mampu menghambat  pertumbuhan koloni dengan persentase daya hambat berkisar antara 85,07% sampai dengan  99,84%.  Filtrat  bakteri B. cereus pada  konsentrasi  20%-90%
AGRICA, Vol. 16 No. 1 (2023)
mampu  menghambat    pertumbuhan koloni dengan persentase daya hambat  berkisar  antara              82,79% sampai dengan  99,83%. Filtrat bakteri B.  coagulans pada  konsentrasi  20%-
90% mampu menghambat pertumbuhan koloni
dengan persentase daya hambat sampai dengan  99,74%.  Filtrat  bakteri B. thuringiensis pada  konsentrasi  20%- 90% mampu menghambat pertumbuhan koloni
dengan persentase daya hambat sampai dengan  99,69%  (Tabel  3).  Hasil penelitian  dari  Hadiwiyono et  al .,
(2013)  mendapatkan  filtrat  bakteri Bacillus spp.  mampu  menghambat koloni Fusarium  oxysporum berkisar 80-100% pada media biakan. Menurut Wibisono et al., (2014) bahwa standar kualitas  uji  daya  hambat  agensia hayati yang baik adalah agensia hayati yang  memiliki  daya  hambat  >70% secara in vitro . Tingginya daya hambat filtrat B. subtilis, B. cereus, B. coagulans , dan B.  thuringiensis terhadap  koloni jamur C.  scovillei membuktikan  bahwa filtrat B. subtilis, B. cereus, B. coagulans , dan B.  thuringiensis mengandung
senyawa yang memiliki aktivitas
antijamur. Hambatan yang terjadi oleh bakteri
Bacillus spp. terhadap pertumbuhan jamur patogen C. scovillei , kemungkinan disebabkan oleh adanya kompetisi makanan maupun  ruang  serta  kemungkinan terjadinya mekanisme antagonis berupa  keberadaan  kitinase  yang merupakan salah satu senyawa metabolit  antijamur.  Djenane et  al .,
(2017)  menyatakan  bahwa  kitinase merupakan  salah  satu  enzim  yang dapat  menghidrolisis  kitin  ( β-1,4-N- acetyl-aligned-glucosamine polymer ) yang merupakan kerangka luar invertebrata  dan  dinding  luar  dari jamur. Kemungkinan lain yang menyebabkan  terjadinya  hambatan pada  koloni  jamur  sudah  dilaporkan oleh  He et  al .,  (2020)  bahwa B. thuringiensis menghasilkan Volatile Organic Compound (VOC) yang merupakan salah satu aktivitas antijamur yang dapat menekan pertumbuhan miselia dari jamur patogen  seperti Fusarium  oxysporum .
Colletotrichum
gloeosporioides , Penicillium sp.  dan Botryosphaeria berengeriana .
Tabel 3. Hasil uji daya hambat filtrat Bacillus sp. terhadap koloni jamur C. scovillei
Perlakuan Luas koloni jamur C. scovillei (mm2) Daya Hambat (%) Kontrol ( C. scovillei ) 3855,50 a - 20 % filtrat B. subtilis 575,53 f 85,07 40 % filtrat B. subtilis 438,06 fg 88,63 60 % filtrat B. subtilis 317,65 h 91,76 80 % filtrat B. subtilis 6,95 j 99,81 90 % filtrat B. subtilis 6,08 j 99,84 20 % filtrat B. cereus 663,21 e 82,79 40 % filtrat B. cereus 479,22 f 87,57 60 % filtrat B. cereus 331,14 h 91,41
Gargita : Uji Aktivitas Antijamur Bacillus spp. Terhadap Collectrotrichum scovilei
Penyebab Antraknosa Cabai Rawit 80 % filtrat B. cereus 8,79 j 99,77 90 % filtrat B. cereus 6,23 j 99,83 20 % filtrat B. coagulans 1258,32 c 67,36 40 % filtrat B. coagulans 572,35 f 85,15 60 % filtrat B. coagulans 459,34 fg 88,08 80 % filtrat B. coagulans 146,35 i 96,20 90 % filtrat B. coagulans 9,87 j 99,74 20 % filtrat B. thuringiensis 1625,04 b 57,85 40 % filtrat B. thuringiensis 759,85 d 80,29 60 % filtrat B. thuringiensis 414,52 g 89,24 80 % filtrat B. thuringiensis 154,82 i 95,98 90 % filtrat B. thuringiensis 11,89 j 99,69
Keterangan:  Nilai  yang  diikuti  huruf  sama  pada  masing-masing  perlakuan  pada kolom  yang  sama  menunjukkan  berbeda  tidak  nyata  berdasarkan  uji  DMRT  5.

## SIMPULAN
Bakteri B.  subtilis,  B.  cereus,  B. coagulans , dan B. thuringiensis mampu menghambat  pertumbuhan  jamur C. scovillei dengan persentase daya hambat sebesar 91,36% sampai
96,46%  dan mampu  menghambat
biomassa  jamur C.  scovillei dengan persentase daya hambat sebesar 85,35% sampai 88,53%. Filtrat bakteri B.  subtilis,  B.  cereus,  B.  coagulans ,  dan B. thuringiensis pada konsentrasi 20%- 90% mampu menghambat pertumbuhan  koloni  jamur C.  scovillei
dengan persentase daya hambat
berkisar antara 57,85%-99,84%.
Berdasarkan hal tersebut, maka bakteri B.  subtilis,  B.  cereus,  B. coagulans ,  dan B.  thuringiensis teruji memiliki kemampuan antagonis terhadap C.  scovillei dan  berpotensi menjadi  agensia  hayati  yang  dapat dimanfaatkan sebagai biofungisida.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terima kasih disampaikan kepada  Ketua  Laboratorium  Penyakit Tanaman,
Fakultas Pertanian
Universitas Udayana atas fasilitas yang
sudah  diberikan  dalam  menyelesaikan penelitian  ini  dan  rekan-rekan  dosen maupun  tenaga  laboran  yang  sudah memberikan  dukungan  dalam  proses penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Aswar, D., Hasanuddin, & Syamsuddin. (2018). Pengaruh Perlakuan Benih dengan Menggunakan Agens Biokontrol terhadap Pengendalian Penyakit Rhizoctonia solani pada
Pertumbuhan  Bibit  Cabai  Merah.
Jurnal Agrista , 22 (2), 96–109.
Djenane,  Z.,  Nateche,  F.,  Amziane,  M., Gomis-Cebolla,  J.,  El-Aichar,  F., Khorf,  H.,  &  Ferré,  J.  (2017). Assessment  of  the  Antimicrobial Activity  and  the  Entomocidal Potential  of Bacillus  thuringiensis Isolates  from  Algeria. Toxins , 9 (139), 1–19. https://doi.org/10.3390/toxins9 040139
Dukare,  A.,  Paul,  S.,  &  Arambam,  A. (2020).  Isolation  and  Efficacy  of Native  Chitinolytic  Rhizobacteria for  Biocontrol  Activities  against Fusarium Wilt  and  Plant  Growth Promotion in Pigeon Pea
( Cajanus  cajan L.). Egyptian

## AGRICA, Vol. 16 No. 1 (2023)
Journal  of  Biological  Pest  Control , 30 (1), 30–56. https://doi.org/10.1186/s41938
-020-00256-7
Dukare,  A.  S.,  Paul,  S.,  Nambi,  V.  E., Gupta, R. K., Singh, R., Sharma, K.,
&  Vishwakarma,  R.  K.  (2019). Exploitation of Microbial Antagonists  for  the  Control  of Postharvest  Diseases  of  Fruits:  a
Review. Critical  Reviews  in  Food Science  and  Nutrition,  59 (9),
1498–1513.
https://doi.org/10.1080/104083
98.2017.1417235
Fakhruddin, D. K., & Nurcahyanti, S. D.
(2020).  Viabilitas Bacillus sp.
sebagai  Agen  Antagonis  Patogen
Tanaman dalam Formulasi Berbahan  Dasar  Tepung. Jurnal Pengendalian Hayati , 3 (1), 29–37. https://doi.org/10.19184/jph.v3 i1.17151 Hadiwiyono, Widyantoro, A., & Widono,  S.  (2013).  Antagonisme Bacillus terhadap  Infeksi  Layu Fusarium pada Bibit Pisang Hasil Kultur Jaringan. Agrosains , 15 (1),
21–26. https://doi.org/10.20961/agsjpa .v15i1.18990 Han, J. H., Shim, H., Shin, J. H., & Kim, K. S.  (2015).  Antagonistic  Activities of Bacillus spp.  Strains  Isolated from Tidal Flat Sediment Towards  Anthracnose  Pathogens Colletotrichum  acutatum and C. gloeosporioides in  South  Korea.
Plant  Pathology  Journal , 31 (2),
165–175. https://doi.org/10.5423/PPJ.OA.
03.2015.0036
He,  C.  N.,  Ye,  W.  Q.,  Zhu,  Y.  Y.,  &  Zhou, W. W. (2020). Antifungal Activity of  Volatile  Organic  Compounds Produced by Bacillus methylotrophicus and Bacillus thuringiensis against Five Common  Spoilage Fungi  on
Loquats. Molecules , 25 (15),
3360–3373.
https://doi.org/10.3390/molecul es25153360 Hidayah,  N.,  &  Yulianti,  T.  (2015).  Uji Antagonisme Bacillus cereus terhadap Rhizoctonia  solani dan Sclerotium rolfsii . Buletin
Tanaman  Tembakau,  Serat  &
Minyak Industri , 7 (1), 1–8.
Kadaikunnan,  S.,  Rejiniemon,  S.  S.,
Khaled,  J.  M.,  Alharbi,  N.  S.,  & Mothana,  R.  (2015).  In-Vitro Antibacterial, Antifungal, Antioxidant and Functional Properties of Bacillus amyloliquefaciens . Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials , 14 (9). https://doi.org/10.1186/s12941 -015-0069-1
Kamali,  M.,  Ahmadi,  J.,  Naeimi,  S.,  & Guo,  D.  (2019).  Characterization of Bacillus Isolates  from  the Rhizosphere of Tomato Suppressing Fusarium Wilt Disease. Acta Phytopathologica et Entomologica  Hungarica , 54 (1), 53–68.
https://doi.org/10.1556/038.54. 2019.006 Khalil, M. M. R., Fierro-Coronado, R. A., Peñuelas-Rubio,  O.,  Villa-Lerma, A.  G.,  Plascencia-Jatomea,  R.,
Félix-Gastélum, R., & Maldonado- Mendoza, I. E. (2021). Rhizospheric Bacteria as Potential Biocontrol Agents against Fusarium Wilt and Crown and Root Rot Diseases in Tomato.
Saudi Journal of Biological Sciences , 28 (12), 7460–7471.
https://doi.org/10.1016/j.sjbs.2
021.08.043
Khalimi,  K.,  Darmadi,  A.  A.  K.,  &
Suprapta,  D.  N.  (2019).  First Report  on  the  Prevalence  of Colletotrichum
scovillei
Gargita : Uji Aktivitas Antijamur Bacillus spp. Terhadap Collectrotrichum scovilei Penyebab Antraknosa Cabai Rawit
Associated  with  Anthracnose  on
Chili  Pepper  in  Bali,  Indonesia. International Journal of Agriculture  and  Biology , 22 (2),
363–368.
https://doi.org/10.17957/IJAB/
15.1072
Lee, Y. H., Jang, S. J., Han, J. H., Bae, J. S., Shin,  H.,  Park,  H.  J.,  Sang,  M.  K., Han, S. H., Kim, K. S., Han, S. W., & Hong,  J.  K.  (2018).  Enhanced
Tolerance  of  Chinese  Cabbage Seedlings  Mediated  by Bacillus aryabhattai H26-2 and B. Siamensis H30-3  against  High Temperature  Stress  and  Fungal Infections. Plant Pathology Journal , 34 (6), 555–566. https://doi.org/10.5423/PPJ.OA. 07.2018.0130 Li, Q., Liao, S., Zhi, H., Xing, D., Xiao, Y., & Yang, Q. (2018). Characterization  and  Sequence Analysis  of  Potential  Biofertilizer and  Biocontrol  Agent Bacillus subtilis Strain SEM-9 from Silkworm  Excrement. Can.  J.
Microbiol , 65 (1), 45–58.
Pratama, W. S., Sri-Sukamto, Asyiah, N.
I.,  &  Ervina,  Y.  V.  (2013). Penghambatan Pertumbuhan Jamur Patogen Kakao Phytophthora palmivora oleh Pseudomonas  fluorescence dan Bacillus subtilis . Pelita Perkebunan , 29 (2), 120–127.
Putri,  R.  E.,  Mubarik,  N.  R.,  Ambarsari,
L.,  &  Wahyudi,  A.  T.  (2021). Antagonistic Activity of Glucanolytic  Bacteria Bacillus subtilis W3.15  against Fusarium
oxysporum and its Enzyme
Characterization.
Biodiversitas , 22 (9),
4067–4077.
https://doi.org/10.13057/biodiv
/d220956 Rochmawati,  Z.  N.,  &  Trimulyono,  G. (2021).  Uji  Antagonis Bacillus subtilis dan Bacillus  megaterium
terhadap  Pertumbuhan  Jamur Cercospora sp. yang Diisolasi dari Nepenthes sp. LenteraBio: Berkala Ilmiah Biologi , 9 (3), 204–210.
Setiaji,  A.,  Annisa,  R.  R.  R.,  &
Rahmandhias, D. T. (2023).
Bakteri Bacillus sebagai  Agen Kontrol  Hayati  dan  Biostimulan Tanaman. Rekayasa , 16 (1),  96–
106. https://doi.org/10.21107/rekay asa.v16i1.17207
Suriani,  &  Muis,  A.  (2016).  Prospek Bacillus  subtilis sebagai  Agen Pengendali  Hayati  Patogen  Tular
Tanah  pada  Tanaman  Jagung. Jurnal Penelitian Dan Pengembangan  Pertanian , 35 (1),
37–45.
https://doi.org/10.21082/jp3.v3
5n1.2016.p37-45
Wang,  Y.,  Fu,  L.,  &  Lin,  J.  (2012). Probiotic  (Bacillus  coagulans) Cells in the Diet Benefit the White Shrimp Litopenaeus  vannamei .
Journal  of  Shellfish  Research , 31 (3), 855–860. https://doi.org/10.2983/035.03 1.0333
Wibisono,  A.,  Majid,  A.,  &  Mihardjo,  P. A.  (2014).  Efektivitas  Beberapa Isolat Pseudomonas  fluorescens untuk  Mengendalikan  Patogen Jamur Rhizoctonia  solani pada Tanaman  Kedelai. Berkala  Ilmiah Pertanian , 1 (1), 1–6.