## RESEARCH ARTICLE
Total Phenolic Content, Antioxidant and Antibacterial Activities of Sargassum polycystum of Ethanol Extract from Waters of Kabung Island
(Total Fenol, Aktivitas Antioksidan dan Antibakteri dari Ekstrak Etanol Sargassum polycystum asal Perairan Pulau Kabung)
Ikha Safitri, Warsidah *) , Mega Sari J. Sofiana, Arie A. Kushadiwijayanto, T. Novi Sumarni Jurusan Ilmu Kelautan, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Tanjungpura Jl. Prof. Dr. Hadari Nawawi Pontianak

## ABSTRACT
Sargassum  policystum is  one  of  the  genus  Sargassum  from  the  brown  macroalgae  group  which  has  an  abundance  of  chemical constituents of fucoidan, fucoxanthin, phenolic acids and alginate which have important biological activities, such as antioxidants and antibacterials. This species thrives in the waters of Kabung Island, Bengkayang, West Kalimantan and has not been exploited so that it tends to act as a marine weed. This study aimed to determine the total phenolic content of the ethanolic extract of S. policystum and its antioxidant and antibacterial activity. Determination of the total content of phenolic compounds using the Folin Ciocalteu method, antioxidant testing using the DPPH method (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) and the indicator of sample color change with the addition of these radicals was measured by UV-Vis spectrophotometer. Antibacterial testing was carried out by the test sample diffusion method and the inhibition of the growth of the test bacteria Staphylococcus aureus and Escherichia coli as test bacteria was indicated by the formation of a clear area around the sample wells. The results showed that the phenol content of the ethanolic  extract  of S.  policystum was  79.8  mg/g  extract,  its  antioxidant  activity  (IC50)  was  98.903  ppm,  classified  as  a  strong antioxidant, while the comparison antioxidant, Vitamin C, had an IC50 of 6.26 ppm. The inhibitory ability of the ethanol extract against the test bacteria used was indicated by the formation of the largest inhibition diameter on S. aureus of 12.4 mm and E. coli of 12.0 mm.
Sargassum policystum adalah salah satu genus Sargassum dari golongan makroalga coklat yang memiliki kelimpahan kandungan kimia fukoidan,  fukosantin,  asam-asam  fenolik  dan  alginat  yang  memiliki  aktivitas  biologik  yang  penting,  seperti  antioksidan  dan antimikroba. Spesies ini tumbuh subur di perairan Pulau Kabung, Bengkayang, Kalimantan Barat dan belum dimanfaatkan sehingga cenderung bersifat sebagai gulma perairan laut. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan  kandungan  total senyawa fenol dari ekstrak etanol S. policystum serta aktivitas antioksidan dan antibakterinya. Penentuan kandungan total senyawa fenol dengan metode Folin  Ciocalteu,    pengujian  antioksidan  menggunakan  metode  DPPH  (2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl)  dan  indikator  perubahan warna sampel dengan penambahan radikal tersebut diukur dengan spektrofotometer UV-Vis. Pengujian antibakteri dilakukan dengan metode difusi dan penghambatan pertumbuhan bakteri uji Staphylococcus aureus dan Escherichia coli sebagai bakteri uji ditunjukkan dengan terbentuknya zona bening di sekeliling sumuran sampel. Hasil penelitian menunjukkan kandungan fenol dari ekstrak etanol S. policystum adalah sebesar 12,85 mg/g ekstrak, aktivitas antioksidannya  (IC50) sebesar 98,903 ppm, tergolong sebagai antioksidan kuat, sedangkan antioksidan pembanding yaitu vitamin C memiliki IC50 sebesar 6,26 ppm. Kemampuan penghambatan ekstrak etanol tersebut terhadap bakteri uji yang digunakan ditunjukkan dengan terbentuknya diameter hambatan yang paling besar pada bakteri S. aureus sebesar 12,4 mm dan E. coli sebesar 12,0 mm.
Keywords: antioxidant, antimicrobial, DPPH, Sargassum policysticum .
*)Corresponding author: Warsidah E-mail: warsidah@fmipa.untan.ac.id
Safitri et al, Total Phenolic Content, Antioxidant …

## PENDAHULUAN
Beberapa  senyawa  seperti  polifenol  dan  pigmen telah  dilaporkan  sebagai  senyawa  yang  potensial dikembangkan  dalam dunia  kesehatan.  Senyawa pigmen  fukosantin,  karotenoid  dan  astaxantin serta senyawa polifenol seperti fenolik, flavonoid dan tanin banyak terkandung  dalam  rumput  laut  yang  telah banyak  dilaporkan  memiliki  aktivitas  antioksidan dengan berbagai macam metode seperti penangkapan radikal  bebas  dan  penghambatan  reaksi  peroksidasi lipid [1], [2] dan [3].
Radikal  bebas  dengan  reaktivitas  tinggi  telah menjadi  pemicu  penyakit  degeneratif  seperti kardiovaskular, kanker dan peradangan. Meningkatnya jumlah  radikal  bebas akan  mengakibatkan  terjadinya stres  oksidatif  dalam  sel  [4]. Senyawa  antioksidan adalah  senyawa  yang  mampu  menghambat  proses oksidasi  dan  menunjang  sistem  pertahanan  endogen dalam meminimalisir kerusakan oksidatif [5].
Antioksidan alami merupakan metabolit sekunder yang  dapat  dihasilkan  oleh  tumbuhan.  Aktivitas biologik  dari  antioksidan  alami  yang  berasal  dari tumbuhan  umumnya  disebabkan  oleh  adanya kandungan  senyawa  fenol  [6]  dan  [7].  Aktivitas penghambatan  proses oksidasi senyawa fenol dalam tumbuhan  berdasarkan  pada  kemampuannya mendonorkan  elektron,  mereduksi  atau  mengkhelat ion logam [8] dan [9].
Rumput laut atau dikenal dengan makroalga adalah salah satu tumbuhan laut yang dapat tumbuh alamiah atau  dibudidayakan  di  lingkungan  perairan  laut, memiliki  potensi  antioksidan.  Makroalga,  secara taksonomi diklasifikasikan menjadi 3  kelompok besar yaitu makroalga hijau (Chlorophyta), makroalga coklat (Phaeophyta)  dan makroalga  merah  (Rhodophyta). Makroalga coklat  merupakan  tumbuhan  multiseluler dengan  1.800  keanekaragaman  spesies,  memiliki karakteristik  warna  hijau  zaitun  sampai  coklat  gelap, antara  lain  seperti genus Padina,  Sargassum dan Laminaria. Genus Sargassum dengan  keanekaragaman sekitar  400  spesies,  di  antaranya  adalah S. policystum tersebar  dengan  suburnya  di  seluruh  perairan Indonesia.  Spesies  ini,  lebih  dikenal  sebagai  gulma perairan,  dalam  masa  tertentu  dari  pertumbuhannya akan lepas dari habitatnya dan terseret ombak ke tepi pantai.  Spesies S. policystum adalah  salah  satu  spesies makroalga coklat yang tumbuh subur di perairan Pulau
Kabung,  Bengkayang,  Kalimantan  Barat dan  belum termanfaatkan.
Makroalga coklat memiliki kelimpahan kandungan fukosantin, fukoidan, florotanin, terpenoid dan asam- asam fenolik yang memiliki aktivitas biologik penting [10] dan [11]. Asam fenolat sebagai senyawa turunan fenolik  mengandung  sekurangnya  satu  gugus fungsional  asam  karboksilat,  yang  terbagi  atas  2 golongan berdasarkan jalur biosintetisnya yaitu asam hidroksibenzoat  dan  asam  hidroksisinamat.  Asam hidroksibenzoat seperti asam galat merupakan derivat dari  asam  benzoat  sedangkan  asam  hidroksisinamat seperti asam  kafeat dan  asam  kumarat  merupakan senyawa  turunan dari  sinamat  [12].  Menurut  Farvin dan  Jacobsen  [13],  asam-asam  fenolat  antara  lain seperti asam  galat, asam  protokatekuat dan hidroksibenzoat yang dikandung dalam hampir semua jenis  makroalga  sehingga  memiliki  kemampuan meredam  radikal  bebas  dari  DPPH  dan  mereduksi senyawa  besi  (III)  klorida.  Dengan  demikian,  setiap makroalga memiliki potensi yang kuat sebagai sumber senyawa  fenol  dan  senyawa  aktif  lain  yang  memiliki kemampuan  antioksidan.
S.  policystum juga mengandung makronutrien seperti protein, karbohidrat dan lemak serta mineral essensial seperti Mg, Na, Fe dan iodin.  Uraian komponen nutrisi yang dikandung makroalga menunjukkan bahwa komoditas ini  sebagai  sumber  nutrisi  penting,  sayangnya  belum begitu populer di kalangan masyarakat.
Selain aktivitas antioksidan, Sargassum sp. memiliki potensi  antimikroba,  yaitu  produk  metabolisme sekunder yang dalam jumlah tertentu dapat merusak atau  menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme. Penelitian  Sidawuruk  dkk  [14]    menunjukkan kemampuan  antimikroba  dari  ekstrak  metanol S. plagyophyllum dalam menghambat pertumbuhan bakteri Listeria  monocytogenes (kelompok  gram  positif)  dan Pseudomonas aeruginosa (kelompok gram negatif). Dalam  penelitian  ini  akan  dilakukan  penentuan kandungan total fenol, pengujian aktivitas antioksidan dengan  metode  DPPH  dan  pengujian  antibakteri menggunakan bakteri uji S. aureus dan E. coli dengan metode difusi sumuran dari ekstrak etanol S. policystum .

## METODE PENELITIAN
Ekstraksi S. policystum Sampel S.  policystum diambil  dari  perairan  Pulau Kabung. Sampel dibersihkan dari sampah dan rumput
Safitri et al, Total Phenolic Content, Antioxidant …
laut lainnya, kemudian dikeringanginkan selama 5 hari pada suhu kamar. Sampel yang telah kering selanjutnya dihaluskan  dengan  blender  dan  diayak  dengan pengayak  mesh  60. S.  policysticum serbuk  diambil sebanyak 500 g dan diekstraksi secara maserasi pelarut etanol (rasio 1:3), direndam selama 3 x 24 jam dalam ruangan gelap. Ekstrak hasil penyarian disaring untuk memisahkan ampas dan maserat. Maserat dipekatkan dengan rotary vacuum evaporator pada  suhu  40  °C hingga diperoleh ekstrak kental.
Penentuan Kandungan Total Fenol Penentuan kandungan total fenolik menggunakan metode Folin-Ciocalteau seperti yang dilakukan oleh Mega  SJ  Sofiana  [15].  Sebanyak  5  mg  serbuk  S. policystum  dilarutkan  dalam  2  mL  96%  etanol, kemudian  ditambahkan  5  mL  air  suling  dan  0,5  mL reagent  Folin-Ciocalteu  50%,  selanjutnya  diinkubasi selama 5 menit dan ditambahkan 1 mL Na 2 CO 3 5%. Larutan dihomogenkan, diinkubasi dalam ruang gelap selama  sejam,  selanjutnya  diukur  dengan spektrofotometer  pada  panjang  gelombang  725  nm dan replikasi tiga kali. Asam galat digunakan sebagai standar dibuat larutan berseri konsentrasi 0, 5, 10, 15 dan 20 ppm. Kurva kalibrasi dari larutan baku asam galat selanjutnya digunakan untuk menentukan kadar senyawa fenolik yang terkandung dalam ekstrak etanol S. policystum sampel menggunakan persamaan regresi dengan  menyatakan  satuan  mg  setara  dengan  asam galat  per  gram  ekstrak  (mg  GAE  /  g  ekstrak) mengikuti rumus:
C = C1 x (V/M) ………………………… (1) Di mana : C   = kandungan total fenol (mg GAE/g ekstrak), C1 = konsentrasi asam galat (mg/L), V   = volume (L), M  = bobot ekstrak (mg)
Pengujian Aktivitas Antioksidan Uji  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas  DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhidracyl)  dilakukan  seperti metode yang dilakukan Mega SJ Sofiana [16]. Dibuat larutan  DPPH  0,1  mM  DPPH  reagen  dilakukan dengan melarutkan 0,002 g DPPH dalam 50 ml etanol 96%.  Dibuat  larutan  ekstrak  etanol    S.  policystum konsentrasi  50,  100,  150,  200  dan  250  ppm,  dan larutan  antioksidan  pembanding vitamin  C  dengan konsentrasi 2, 4, 6, 8 dan 10 ppm. Diambil 1 mL dari masing-masing konsentrasi larutan sampel dan larutan
pembanding untuk ditambahkan dengan 2 mL larutan stok  DPPH  0,1  mM,  dilakukan  dalam  suhu  kamar, tanpa  cahaya  kemudian  dibiarkan  selama  30  menit sebelum dilakukan pengukuran absorbansi   pada λ maks 516 nm.
Persentase  penghambatan  radikal  bebas  dapat dihitung menggunakan persamaan berikut:
Ab - Aa Aktivitas inhibisi (%) = ---------- x 100%   (1) Aa Dimana Ab = absorbansi blanko As = absorbansi sampe
Pengujian Antibakteri Pengujian aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol S. policystum dilakukan  dengan  metode  difusi  sumuran seperti yang dilakukan oleh Warsidah [17]. Bakteri uji yang  digunakan  adalah  bakteri  uji  Staphylococcus aureus (Gram +) dan Escherichia coli (Gram -). Dari kultur  bakteri  uji  dibuat  suspensi,  sebanyak  100  µL dituang ke dalam cawan petri, kemudian ditambahkan media  Nutrien  Agar  (NA)  sebanyak  20  mL, dihomogenkan dan dibiarkan sampai media memadat, kemudian dibuat sumuran berdiameter 5 mm. Ekstrak etanol S. policystum dibuat dengan konsentrasi 5, 10, 15 dan 20%, secara aseptik sebanyak 100 µL dituang ke dalam sumuran, diinkubasi selama ± 48 jam pada suhu 37 o C. Aktivitas antibakteri ditandai dengan terbentuknya zona bening  di  sekitar  sumuran,  sebagai  efek  dari terhambatnya pertumbuhan bakteri uji.
Diameter zona hambat ditentukan sebagai berikut:
Zona  hambat  =  diameter  zona  hambat  terbentuk (mm)- diameter sumur (mm).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Senyawa  fenolik adalah  salah  satu  hasil  metabolit sekunder,  tidak  memiliki  peran  langsung  terhadap berlangsungnya  proses  fotosintetis  dan  reproduksi. Metabolit sekunder ini  dihasilkan  oleh  organisme dalam  kondisi  cekaman  seperti  kekurangan  nutrisi, suhu,  pH  dan  salinitas. Herero  [18]  melaporkan ditemukannya senyawa fenol hidroksinamit dan asam benzoat  serta  turunannya  pada makroalga  hijau, kemudian  oleh  Suleria  [19]  melaporkan  bahwa kandungan fenolik makroalga coklat lebih tinggi dari yang  dikandung  oleh makroalga  merah  dan  hijau.
Safitri et al, Total Phenolic Content, Antioxidant …
Selain itu, makroalga coklat juga mengandung senyawa florotanin seperti floroglusinol, ekol, dan diekol yang memiliki  aktivitas  antibakteri. Beberapa  penelitian melaporkan tentang kandungan total fenol makroalga Sargassum antara lain adalah Sargassum horneri sebesar 0,40±0,01 mg asam galat/g ekstrak kering, Sargassum thunbergii sebesar 0,29±0,01 mg asam galat/g ekstrak kering  [20],  dan Sargassum marginatum sebesar  11 mg asam galat/g ekstrak [21].
Dalam  penelitian  ini  dilakukan  ekstraksi menggunakan  pelarut  etanol  berdasarkan  efektivitas penyarian senyawa fenol dalam bahan alam. Menurut Mc Donald dkk [22],  bahwa besarnya afinitas suatu senyawa  organik  yang  diekstraksi  dari  tanaman  akan tergantung pada polaritas pelarutnya. Senyawa fenolik bersifat polar,  akan  lebih  efektif  diekstraksi menggunakan pelarut polar seperti etanol.
Folin-Ciocalteau adalah  pereaksi  yang  dapat mengidentifikasi  keberadaan  senyawa  fenol  dalam suatu matrik sampel [23]. Folin-Ciocalteau terdiri atas asam  fosfomolibdat-fosfotungsat  ketika  bereaksi dengan  senyawa  fenol  akan  tereduksi  menjadi molibdenum  tungsat  yaitu  kompleks  yang  berwarna biru,  di  mana  intensitasnya  warna  yang  terjadi  akan sebanding  besarnya  konsentrasi ion  fenolat  dalam sampel. Dari hasil perhitungan kandungan total fenol yang  dikandung  ekstrak  etanol S.  policystum asal perairan Pulau Kabung adalah sebesar 12,85 mg asam galat/g ekstrak kering. Pada makroalga coklat lainnya yaitu Padina  pavonica dari  perairan  yang  sama
dilaporkan  kandungan  total  fenol  ekstrak  etanolnya adalah sebesar 20,34 mg asam galat/gram ekstrak [15]. Angka  total  fenol  dalam  ekstrak  etanol S.  policystum lebih tinggi daripada total fenol yang dikandung oleh beberapa  spesies  Sargassum  di perairan  lain.  Jenis makroalga, iklim dan lokasi geografis pengambilannya akan sangat menentukan tinggi rendah produktivitas dan kualitas dari kandungan total fenolik di dalamnya [24]. Penentuan antioksidan ekstrak etanol S. policystum dilakukan  dengan  metode  DPPH.  Metode  DPPH digunakan  lebih  luas  dalam  penentuan  potensi antioksidan di mana dalam reaksi antara senyawa aktif dengan  DPPH  sebagai  radikal  bebas,  maka  radikal bebas  DPPH  akan  tertangkap  oleh  senyawa  aktif antioksidan    sehingga terjadi  elektron  yang berpasangan  yang  ditandai  dengan  terjadinya pemucatan  warna  ungu  dari  DPPH  [25].  Semakin besar kemampuannya untuk menangkap radikal bebas DPPH,  maka  intensitas  warnanya  makin  pudar. Senyawa  fenol  dan  senyawa-senyawa  aktif  lainnya yang  bersifat  antioksidan  dalam  ekstrak  etanol S. policystum ,  akan  menangkap  radikal  bebas  DPPH. Senyawa  fenol  memiliki  gugus  hidroksi  dan  menjadi donor hydrogen, sehingga terstabilkan oleh resonansi dari  struktur  fenolik.    Kandungan  total  fenol  setara dengan aktivitas  antioksidan.  Aktivitas  antioksidan dapat ditunjukkan dengan persen penghambatan atau nilai IC 50 , dimana IC 50 rendah menunjukkan aktivitas antioksidan yang tinggi.
Gambar 1. Reaksi reduksi 1,1-diphenil-2- pikrilhidrazil (DPPH) dari antioksidan [28]
Safitri et al, Total Phenolic Content, Antioxidant …

## a)
b)
Gambar 2. Kurva baku konsentrasi vs % inhibisi a) Ekstrak etanol S. policystum b) Vitamin C
Kurva  baku  antara  konsentrasi  dan  persen  (%) penghambatan  radikal  bebas  pada  gambar  2 menunjukkan  semakin  tinggi  konsentrasi yang digunakan,  persen  penghambatan  (inhibisi)  juga semakin  tinggi.  Dengan  memplotkan  hasil pengukuran  sampel  pada  kurva baku  tersebut, diperoleh  nilai  IC 50 sebagai  ukuran  aktivitas antioksidan.  IC 50 menunjukkan  konsentrasi  dari ekstrak yang digunakan dalam menangkap 50% radikal bebas  DPPH  dalam  reaksi  tersebut  sehingga menghambat  terjadinya  oksidasi.  Nilai  IC 50 yang terukur  adalah  98,903  ppm  tergolong  sebagai antioksidan kuat. Aktivitas antioksidan dikategorikan menjadi tiga, yaitu antioksidan sangat kuat (<50 ppm), kuat  (50-100  ppm),  lemah  (100-150  ppm)  [26]. Aktivitas antioksidan ekstrak ini lebih lemah daripada aktivitas  antioksidan (IC 50 )  yang  dilaporkan  oleh Hwang  dkk  [27]  dan  Boonchum  dkk.  [28] pada S. hemiphyllum dan S. binderi yaitu sebesar 1,58 ppm dan 45,047 ppm. Ekstrak Sargassum sp yang mengandung polifenol tinggi memiliki nilai IC 50 paling rendah [29]. Kandungan  polifenol  akan  berbanding  lurus dengan  aktivitas  antioksidannya.  Berdasarkan penelitian  Cahyaningrum  dkk  [30]  tingginya kandungan  polifenol  dalam  ekstrak S. policystum asal pantai Poktunggal Kabupaten Gunungkidul DIY yang diekstraksi  dengan  metode  yang  berbeda  dari penelitian ini menghasilkan polifenol sebesar 1,18 mg asam galat/mg ekstrak, dengan  aktivitas antioksidan IC 50 1,27  ppm.  Polifenol  adalah  salah  satu    senyawa yang  dihasilkan  makroalga,  digunakan  sebagai perlindungan diri dari sinar matahari [31].
Aktivitas  antibakteri    dari  ekstrak  etanol S. polycystum dilakukan  dengan  metode  sumuran menggunakan  bakteri  uji S.  aureus dan E.  coli dan antibiotik tetrasiklin  sebagai  pembanding.  Aktivitas
antibakteri  ditunjukkan  dengan  pembentukan  zona hambat sekitar sumuran.
a) b)
Gambar  3.  Zona  hambat  dengan  bakteri  uji  a)
Staphylococcus  aureus dan  b) Escherichia coli
Berdasarkan  hasil  uji  aktivitas  antibakteri  dengan mengukur zona hambat pada kedua medium dengan bakteri  uji S.  aureus dan E.coli menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol S.  policystum memiliki  aktivitas penghambatan  terhadap pertumbuhan kedua bakteri uji tersebut (Gambar 3a dan 3b).
Tabel 1. Zona hambat ekstrak etanol S. policystum pada bakteri uji
Bakteri Uji Rerata zona hambat (diameter = mm) Ekstrak etanol S. policystum Tetrasiklin 5% 10% 15% 20% Staphylococcus aureus 6,6 7,6 12,0 6,2 21,4 Escherichia coli 5,6 7,2 12,4 5,2 20,4
Pada  kedua  bakteri  uji,  zona  hambatan  terbesar dihasilkan pada konsentrasi ekstrak etanol S. policystum sebesar 15% yaitu pada S. aureus dan E. coli masing- masing sebesar 12,0 mm dan 12,4 mm. Zona hambat ekstrak  etanol S.  policystum pada konsentrasi 15% dengan diameter terbesar  menunjukkan  aktivitas antibakteri  berkategori  kuat  dimana  masuk  dalam rentang daerah  hambatan 10–20  mm  sedangkan ekstrak etanol S. policystum konsentrasi 5, 10 dan 20%
Safitri et al, Total Phenolic Content, Antioxidant …
termasuk  dalam    kategori  sedang  dengan  rentang diameter zona hambatan sebesar 5-10 mm  [32].
Secara  umum,  dari Gambar  3  menunjukkan diameter zona hambat dari ekstrak etanol S. policystum terhadap S. aureus lebih besar daripada E coli. S. aureus adalah bakteri gram positif dan E. coli gram negatif [33].  Perbedaan  aktivitas  antibakteri  ini  dapat disebabkan karena komposisi dinding sel yang berbeda dari  kedua  bakteri  uji.  Struktur  dinding  sel  bakteri gram  negatif  memiliki  lapisan  berlapis  dan  lebih komoleks  dibandingkan  bakteri  gram  positif sederhana  [34].    Dinding  sel  bakteri  gram  negatif terdiri  dari  lipopolisakarida,  protein  dan  fosfolipid [35]. Oleh karena itu, senyawa antibakteri akan lebih sulit untuk menembus dinding sel bakteri gram negatif [34].  Zona  hambat  yang  terbentuk  tidak  hanya dipengaruhi  oleh  senyawa  bioaktif  yang  terkandung didalamnya,  tetapi  juga  faktor  lain  seperti  kecepatan difusi,  ukuran  molekul,  jumlah  organisme  yang diinokulasi,  konsentrasi  dan  stabilitas  senyawa antibakteri [36].

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa kandungan total senyawa fenol dengan metode folin Folin  Ciocalteu  dari  ekstrak  etanol S.  policysticum sebesar  12.85  mg/g  ekstrak. Aktivitas  antioksidan (IC50) dari ekstrak etanol S. policysticum sebesar 98,903 ppm,  tergolong  sebagai  antioksidan  kuat  sedangkan pada aktivitas antibakteri menunjukkan terbentuknya zona hambat pada kedua bakteri uji Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli masing-masing  sebesar  12,4  mm dan 12,0 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Athukorala, Y., Lee, K.W., Song, C.B., Ahn, C.B., Shin, T.S.,  Cha,  Y.J.,  Shahidi,  F.,  Jeon,  Y.J.,  2003.  Potential Antioxidant Activity of Marine Red Alga Grateloupia Filicina Extracts. J. Food Lipids 10, 251–265.
[2] Heo, S.J., Jeon, Y.J., Lee, J., Kim, H.T., Lee, K.W., 2003. Antioxidant Effect of Enzymatic Hydrolyzate From a Kelp, Ecklonia cava. Algae 18, 341–347.
[3] Siriwardhana, N., Lee, K.W., Kim, S.H., Ha, J.W., Park, G.T.,  Jeon,  Y.J., 2004.  Lipid  peroxidation  inhibitory effects of  Hizikia Fusiformis Methanolic Extract on Fish Oil and Linoleic Acid. Food Sci. Tech. Int. 10(2), 65-72.
[4] Khan  M.A.,  Rahman,  M.M.  Sardar,  M.N.  Arman, M.S.I. Islam, M.B. Khandakar, M.J.A. Rashid, M. Sadik G., Alam A.H.M.K., 2016,  Comparative Investigation of The Free Radical Scavenging Potential  and Anticancer Property  of   Diospyros  blancoi (Ebenaceae), Asian Pac. J. Trop. Biomed. 6 :  410-417. [5] Dimitrijevic M. Jovanovic, V.S Cvetkovic,. J. Mihajilov- Krstev, T. Stojanovic, G. Mitic, V. 2015, Screening of Antioxidant, Antimicrobial and Antiradical Activities of Twelve Selected  Serbian Wild Mushrooms,  Anal. Methods. 7:  4181-4191.
[6] Das,S.C.  Hamid,  K.  Bulbul,  I.J.  Sultana,  S.,  2010,  In Vitro Antioxidant Activity of  Different Parts of The Plant Diospyros Discolor Assessment of  Free Radical Scavenging Activity by, Res. J. Agric. Biol. Sci. 6:  472- 475.
[7] Jang, H.W. Moon, J.K. Shibamoto T., 2015, Analysis and Antioxidant Activity of Extracts From Broccoli ( Brassica oleracea L.) sprouts, J. Agric. Food Chem. 63 (2015), pp. 1169-1174.
[8] Khoddami,  A.  Wilkes,  M.A.  Roberts,  T.H.. 2013, Techniques For Analysis  of Plant Phenolic compounds, Molecules. 18 (2013) pp. 2328-2375.
[9] Kasote, D.M. Katyare, S.S. Hegde, M. V. Bae, H. , 2015, Significance of Antioxidant Potential of Plants and Its Relevance to Therapeutic Applications, Int. J. Biol. Sci. 11 : 982-991.
[10] Barbosa, -M.,  Valentão, -P.,  Andrade,  P, -B.,  2014. Bioactive Compounds From Macroalgae in The New Millennium: Implications For Neurodegenerative Diseases. Marine Drugs. 12, 4934-4972.
[11] Barot, -M.,  Kumar  J,  I, -N.,  Kumar,  R, -N.,  2016. Bioactive Compounds  and Antifungal Activity  of Three Different Seaweed Species Ulva  lactuca, Sargassum tenerrimum and Laurencia obtusa collected from Okha Coast, Western India. Journal of  Coastal Life Medicine. 4, pp. 284-289.
[12] Munne-bosch, S., 2012. Phenolic acids: Composition, Applications  and Health Benefits.  Nova  Science Publishers, Inc., USA.
[13] Farvin,  K.  S.,  &  Jacobsen,  C.  (2013).  Phenolic Compounds  and Antioxidant Activities  of Selected Species of Seaweeds from Danish Coast. Food Chem., 138(2-3), 1670-1681.
[14] Sidauruk  SW,  Sari  NI,  Diharmi  A,  Arif   I.  2021. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Sargassum  plagyophyllum Terhadap Bakteri Listeria monocytogenes dan Pseudomonas aeruginosa .  Jurnal  Pengolahan  Hasil  Perikanan Indonesia. 24(1): 27-37.
[15] Sofiana  M.S.J,  Ikha  Safitri,  Shifa  Helena,  Warsidah, 2021, Phytochemical Screening, Total Penolic Content and  Antioksidant  Activity  of   Tropical  Brown Macroalgae  ( Padina  pavonica Hauck)    from  Kabung
Safitri et al, Total Phenolic Content, Antioxidant …
Island,  West  Kalimantan,:  Indonesian  Journal  of Fisheries Science and Technology, vol 17 No 1. [16] Sofiana M.S.J, Aritonang AB, Safitri I, Helena S, Syarif Irwan  Nurdiansyah,  Risko,  Dzul  Fadly,  Warsidah, 2020,  Proximate,  Phytochemicals,  Total  Phenolic Content  and  Antioxidant  Activity  of   Ethanolic Extract of Eucheuma spinosum Seaweed, Sys Rev Phar, vol 11 No 8.
[17] Warsidah,  Fadly,  D.,  Bohari,  2020.  Antibacterial  and Anti-inflammatory  Activities  of   Ethanol  Extract Obtained from The Hooks of Uncaria tomentosa (Wild. Ex  Schult)  DC  Originated  Kalimantan,  Indonesia. Syst. Rev. Pharm. 11, 65–70.
[18] Herrero, M., Cifuentes, A. and Ibañez, E., 2006. Sub- and Supercritical Fluid Extraction  of Functional Ingredients  from Different Natural Sources:  Plants, Food-by-products, Algae  and Microalgae:  A  review. Food chemistry, 98(1), pp. 136-148.
[19] Suleria, H.A.R., Osborne, S., Masci, P. and Gobe, G., 2015.  Marine-based Nutraceuticals:  An Innovative Trend in The Food and Supplement Industries. Marine drugs, 13(10), pp. 6336-6351.
[20] Tierney,  M.S.,  Croft,  A.K.  dan  Hayes,  M.  2010.  A Review  of Antihypertensive  and Antioxidant Activities in Macroalgae. Botanica Marina 53: 387-408.
[21] McDonald,  S.,  Prenzler,  P.D.,  Antolovich,  M.  and Robards, K. 2001. Phenolic Content and Antioxidant Activity of Olive Extracts. Food Chemistry 73: 73-84.
[22] Prior, R.L., Wu, X. & Schaich, K. 2005. Standardized Methods  for The Determination  of Antioxidant Capacity  and Phenolics  in Foods  and Dietary Supplements.  Journal  of  Agricultural  and  Food Chemistry. 53(10), 4290-4302.
[23] Djapiala, F.Y., Lita, Montolalu, A.D.Y. dan Mentang, F. 2011.  Kandungan Total Fenol Dalam Rumput Laut Caulerpa  racemosa Yang Berpotensi Sebagai Sntioksidan. Jurnal Media Teknologi Hasil Perikanan 1: 5-9
[24] Prakash,  A.,  Rigelhof,  F.,  dan  Miller,  E.,  2001, Antioxidant  Activity,  Medallliaoan  Laboratories,  Vol 19 (2): 1-4
[25] Kuncahyo, I., dan Sunardi, 2007. Uji Aktivitas Ekstrak Belimbing Wuluh ( Averhoa bilimbi L.) terhadap DPPH, SNT, 1-9.
[26] Blois, M.S. 1958. Antioxidant Determinations by The Use of A Stable Free Radical. Nature. 181:1199-1200
[27] Hwang, P., Chwen-Herg, W., Shu-Yun, G., Shih-Yung, C.  dan  Deng-Fwu,  H.  (2010).  Antioxidant  and Immunestimulating Activities  of Hot-water Extract from Seaweed  Sargassum  hemiphyllum.  Journal  of Marine Science and Technology 18: 41-46.
[28] Boonchum, W., Peerapornpisal, Y., Kanjanapoth, D., Pekkoh, J., Pumas, C., Jamjai, U., Amornlerdpison, D.,
Noiraksar,  T.  dan  Vacharapiyasophon,  P.  (2011). Antioxidant Activity of Some Seaweed from The Gulf of  Thailand. International Journal of  Agriculture and Biology 13: 95-99.
[29] Yangthong,  M.,  Hutadilok-Towatana,  M.  dan Phromkunthong,  W.  2009.  Antioxidant Activities  of Four Edible Seaweeds from The Southern Coast of Thailand. Plant Foods Human Nutrition 64: 218-223 [30] Cahyaningrum  K,  Husni  A,  Budhiyanti  SA.  2016.
Aktivitas  Antioksidan    Ekstrak  Rumput  Laut  Coklat ( Sargassum polycystum ), Agritech journal, vol. 36 No 2.
[31] Shibata,  T.,  Kawaguchi,  S.,  Hama,  Y.,  Inagaki,  M., Yamaguchi,  K.  dan  Nakamura,  T.  2004.  Local  and Chemical Distribution  of Phlorotannins  in Brown Algae. Journal of  Applied Phycology 16: 291-296
[32] Davis, W.W., dan T. R. Stout. 1971. Disc Plate Method of   Microbiological  Antibiotic  Assay. Applied Microbiology. 22: 659 -665.
[33] Suryati, N., Bahar, E., Ilmiawati. 2017. Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Aloe vera Terhadap Pertumbuhan Escherichia  coli  Secara  In  Vitro .  Jurnal  Kesehatan Andalas, 6(3): 518-522.
[34] Chairunisa,  I.,  Indradi,  R.B.  2020.  Review  Artikel: Aktivitas  Antibakteri  dan  Kandungan  Fitokimia Ekstrak  Etanol  Alga  Merah  ( Eucheuma  cottonii ). Farmaka. 17(1): 105-110.
[35] Iskandar,  Y,  Rusmiati,  D,  Rusma,  RD.  2010.  Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Rumput Laut Terhadap Bakteri Escherichia  coli dan Bacillus  cereus (skripsi).  Bandung:  Fakultas  MIPA  Universitas Padjajaran.
[36 ]Iriano A. 2008. Efektivitas Antibakteri Infusum Aloe vera Terhadap Porphyromonas gingivalis In Vitro (skripsi). Jakarta:  Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas Indonesia; 2008.