## ABSTRAK
Dislipidemia  merupakan  salah  satu  penyebab  utama  morbiditas,  mortalitas,  dan  biaya pengobatan yang tinggi. WHO menyebutkan dislipidemia berhubungan dengan kejadian penyakit jantung koroner (PJK) yang menyebabkan 4 juta kematian setiap tahun. Estro- gen, hormon yang diproduksi wanita selama menarche melindungi wanita dari PJK. Saat menopause  terjadi  penurunan  produksi  estrogen  sehingga  resiko  dislipidemia  dan  PJK semakin tinggi. Terapi fitoestrogen digunakan untuk mencegah dislipidemia dan PJK saat menopause.  Fitoestrogen  merupakan  senyawa  mirip  estrogen  dan  terdapat  pada  akar tanaman Boehmeria  nivea yang  digunakan  dalam  penelitian  ini.  Efek  estrogenik  akar tanaman Boehmeria nivea terutama disumbang oleh kandungan isoflavon dan lignannya. Penelitian  ini  bertujuan  membuktikan  kandungan  fitoestrogen  ekstrak  akar Boehmeria nivea untuk  meningkatkan  berat  uterus  dan  memperbaiki  dislipidemia  tikus  yang diovariektom dan diinduksi diet aterogenik. Desain penelitian menggunakan eksperimental semu dengan rancangan post test only . Tikus putih betina diovariektomi kemudian diberi diet aterogenik berupa kuning telur 3,5 cc/hari disertai injeksi adrenalin intravena 0,006 mg/200  gBB.  Sampel  dibagi  menjadi  6  kelompok  terdiri  atas  kontrol  negatif,  kontrol ovariektomi,  kontrol  ovariektomi  dengan  induksi  diet  aterogenik,  kelompok  perlakuan ekstrak etanolik Boehmeria nivea (EBN) dosis 125 mg/kgBB,  250 mg/kgBB, dan 500 mg/kgBB. Berat uterus kelompok ovariektomi mengalami penurunan signifikan dibanding kelompok kontrol, sedangkan berat uterus kelompok perlakuan EBN meningkat signifikan dibanding kelompok ovariektomi. Kadar kolesterol darah menunjukkan penurunan akibat perlakuan EBN, sedangkan kadar trigliserida mengalami peningkatan akibat perlakuan EBN. Kandungan fitoestrogen ekstrak akar rami meningkatkan berat uterus dan menurunkan hiperkolesterolemia pada tikus yang diovariektomi.

## ABSTRACT
Dyslipidemia  is  a  major  cause  of  morbidity,  mortality  and  high  cost  of  treatment. Dyslipidemia  associated with  coronary heart  disease (CHD), which  causes 4  million deaths every year. Estrogen, a hormone produced by women during menarche protect

## NurseLine Journal

## Vol. 1 No. 1 Januari 2016 ISSN 2540-7937
KANDUNGAN FITOESTROGEN EKSTRAK ETANOLIK AKAR RAMI ( Boehmeria nivea )

## MENURUNKAN KADAR KOLESTEROL TIKUS YANG DIOVARIEKTOMI
( PHYTOESTEROGEN  COMPONENT  OF  ETHANOLIC  ROOT  EXTRACT  OF  FLAXSEED (Boehmeria  nivea)  DECREASES  CHOLESTEROL  SERUM  LEVEL  ON  OVARIECTOMIZED RATS )
Ika Rahmawati Sutejo 1* , Hazmi Dwinanda Nurqistan 2 , Imama Rasyada 3 , Ni Nyoman Yuniasih 4 , Annafira Yuniar 5 , Rakhmat Ramadhani 6
1,2,3,4,5,6 Fakultas Kedokteran Universitas Jember Jl. Kalimantan No. 37 Jember 68121
1* e-mail: ikarahmawati.fk@unej.ac.id

## Keywords:
Boehmeria nivea Fitoestrogen Hiperkolesteroemia Berat uterus
Keywords: Boehmeria nivea Phytoestrogens
women from coronary heart disease. The decrease of estrogen production during meno- pause periode, higher the risk of dyslipidemia and coronary heart disease. Phytoestrogen therapy  used to  prevent dyslipidemia  and  coronary heart  disease during  menopause. Phytoestrogens are estrogen-like compounds found in plants. Phytoestrogenic effects of Boehmeria nivea, which was used in this study, mainly contributed by isoflavone and lignan compounds. The purpose of this study was to prove the ability of ethanolic extract of root of Boehmeria nivea (EBN) to increase uterine weight and improve dyslipidemia on  ovariectomized  mice  using  a  quasi-experimental  with  post  test  only  design  of  re- search. Ovariectomized female rats were given an atherogenic diet of 3.5 cc egg yolk each day with an intravenous injection of 0.006 mg/200 gBB adrenaline. There are 6 groups consisting of a negative control, ovariectomized group, ovariectomized and athero- genic diet group, group with treatment of Boehmeria nivea (EBN) dose 125 mg/kg, 250 mg/kg, and 500 mg/kg. The results shows that there is a decrease of uterine weight on ovariectomized  group  compare  to  control  group.  Treatment  of  EBN  increase  uterine weight, decrease the levels of blood cholesterol and increase the levels of blood triglyc- eride.  It  can  be  concluded  that  fitoestrogen  content  of  EBN  improve  lipid  profile  in ovariectomized rats.
Cholesterol Uterine weight

## PENDAHULUAN
Penyakit jantung koroner (PJK) merupakan penyebab nomor satu kematian akibat penyakit tidak menular di dunia. PJK menyebabkan 74.000 kematian setiap  tahun,  yang  berarti  200  orang  setiap  hari meninggal akibat penyakit ini. Setiap 1 menit 24 detik terdapat  satu  penduduk Amerika  meninggal  akibat serangan jantung dan setiap 34  detik terdapat  satu orang yang mengalami serangan jantung (Mozaffarian et al, 2016). Di Indonesia sendiri prevalensi PJK tahun 2013 sebesar 0,5%, yaitu sekitar 883.447 orang. PJK juga menempati posisi pertama penyebab kematian, yaitu  26%  dari  seluruh  jumlah  kematian  akibat penyakit. Berdasarkan hasil Survei Kesehatan Rumah Tangga  Nasional  (SKRTN)  angka  kejadian  dan kematian akibat PJK ini terus meningkat dari tahun ke tahun (Kemenkes RI, 2014).
Dislipidemia  merupakan  patofisiologi  yang mendasari  PJK  dan  hormon  estrogen  memengaruhi kejadian dislipidemia pada wanita. Setelah menopause produksi  estrogen  menurun  dan  menyebabkan kolesterol total dan kolesterol LDL meningkat serta kolesterol HDL menurun (Phan & Toth, 2014). Resiko PJK wanita  usia muda yang sebelumnya  jauh lebih kecil daripada laki-laki, menjadi sama besar setelah wanita  mengalami  menopause.  Selain  melalui penurunan  kolesterol,  estrogen  yang  dihasilkan ovarium  berperan  sebagai  anti-PJK  melalui vasodilatasi  dan  mengurangi  aktivitas  fagosit makrofag yang memodifikasi LDL (Nofer, 2012).
Fitoestrogen  merupakan  senyawa  dengan struktur kimia mirip dan dapat menggantikan peran estrogen.  Fitoestrogen  terdapat  pada  tanaman,
misalnya  kacang-kacangan,  kedelai,  biji-bijian  dan lain-lain.  Peran  utama  fitoestrogen  berasal  dari aktivitas estrogeniknya melalui ikatan dengan kedua reseptor estrogen pada manusia (ER alfa dan ER beta). Fitoestrogen  dibagi  menjadi  beberapa  kelompok berdasarkan sifat kimianya dan dua golongan utama yang sering diteliti pengaruhnya pada manusia adalah isoflavon  serta  lignan  (Richter  et  al,  2010). Fitoestrogen telah terbukti meningkatkan berat uterus melalui  peningkatan  ketebalan  endometrium  dan memperbaiki  profil  lipid.  Fernandez  et  al  (2015) membuktikan bahwa kandungan fitoestrogen ekstrak daun ekor naga dosis 100 mg/kgBB selama 14 hari meningkatkan  ketebalan  endometrium  dan  diameter uterus.  Lestari  et  al  (2014)  membuktikan  bahwa senyawa  lignan  dalam  biji  labu  kuning  mampu meningkatkan  berat  uterus  dan  memperbaiki  profil lipid.
Tanaman Boehmeria  nivea atau  rami merupakan tanaman dengan kandungan isoflavon dan lignan sebagai komponen fitoestrogen utama. Ekstrak metanolik akar rami menunjukkan efek antidiabetik, antihiperlipidemik,  dan  antioksidan  (Sancheti  et  al, 2011).  Ekstrak  air  daun  rami  terbukti  sebagai antimikrobia (Chang et al, 2010). Penelitian Wei et al (2014) membuktikan ekstrak etanolik akar Boehmeria nivea memiliki aktivitas anti-hepatitis virus B. Peneliti belum menemukan adanya studi yang mengkaji efek estrogenik  akar  tanaman Boehmeria  nivea untuk menurunkan dislipidemia tikus yang ovariektomi dan diinduksi  diet  aterogenik.  Adanya  kandungan fitoestrogen akar Boehmeria nivea yang bermanfaat menurunkan kadar kolesterol darah merupakan sebuah potensi pencegahan PJK pada wanita menopause.

## METODE
Pembuatan Ekstrak Etanolik akar Boehmeria nivea
(EBN)
Akar  rami  diperoleh  dari  Balittas  (Balai Penelitian Tanaman Pemanis dan Serat) Malang, Jawa Timur, merupakan Boehmeria nivea varietas Pujon 303  (Gambar  1.a  dan  b). Akar  rami  seberat  20  kg dikeringkan dengan cara diangin-anginkan kemudian dihaluskan  hingga  mendapat  5,2  kg  serbuk  kering. Serbuk  kemudian  dimaserasi  menggunakan  etanol 70% dengan perbandingan 1:5. Ekstrak kental yang didapat  berwarna  coklat  muda  dengan  rendemen sebesar 1,2%.

## Perlakuan Hewan Coba a. Pembuatan Hewan Coba Ovariektomi
Peneliti  membagi  hewan  coba  menjadi  6 kelompok yaitu kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol  ovariektomi  (OVX),  kelompok  ovariektomi dan  induksi  diet  aterogenik  (OVX+AT),  kelompok perlakuan  EBN  dosis  125  mg/kgBB,  kelompok perlakuan EBN dosis 250 mg/kgBB, dan kelompok perlakuan EBN dosis 500 mg/kgBB. Masing-masing kelompok terdiri dari 5 tikus. Setelah 2 minggu pasca adaptasi, dilakukan ovariektomi seluruh tikus kecuali pada kelompok kontrol. Tikus usia 50 hari dianestesi dengan ketamin intra muscular. Rambut tikus dicukur di  area  bedah  seluas  4  cm 2 pada  punggung,  Insisi dilakukan pada area bedah. Ovarium dipotong, diambil dan kulit dalam dijahit sebanyak satu simpul serta kulit luar  dijahit  sebanyak  dua  simpul  (Lestari,  2014). Pemulihan  luka  pada  tikus  berlangsung  selama sepuluh hari.

## b. Penginduksian Aterosklerosis Hewan Coba
Pemberian diet aterogenik dilakukan selama 14 hari. Pemberian diet aterogenik berupa kuning telur dengan cara melalui sonde dengan dosis sekali dalam sehari  sebanyak  3,5  cc  pada  setiap  tikus  kecuali kelompok kontrol dan kontrol ovariektomi. Sebelum diberikan  diet  aterogenik,  tikus  terlebih  dahulu diinjeksi adrenalin intra vena 0,006 mg/200g BB pada vena  lateralis  ekor  tikus  di  hari  pertama  perlakuan (Prasetyo et al, 2003).

## c. Penginduksian Ekstrak pada Tikus
Pemberian EBN melalui per oral dilakukan selama  21  hari.  Untuk  mengencerkan  ekstrak ditambahkan aquades. Dosis pemberian EBN masing- masing sebesar 125 mg/kgBB, 250 mg/kgBB, dan 500 mg/kgBB. Pemberian EBN dilakukan selama satu kali dalam sehari (Sancheti et al, 2011).

## Pengukuran Berat Basah Uterus dan Berat Kering Uterus
Uterus  diambil  setelah  tikus  didekapitasi kemudian diletakkan di kertas saring untuk dibersihkan dari darah dan cairan tubuh. Uterus ditimbang untuk mendapatkan data berat basah ( uterine wet weight ).
Untuk  mendapatkan  berat  kering,  diambil  contoh uterus seberat 50 g kemudian dikeringkan dengan oven suhu 54°C selama 48 jam. Sampel kering selanjutnya ditimbang  untuk  mendapatkan  berat  kering  uterus (Lestari, 2014).

## Pengukuran Profil Lipid
Sampel darah diambil dari orbita sebanyak 2 ml  kemudian  disentrifuse  dan  diambil  bagian serumnya. Serum yang didapatkan digunakan untuk menentukan kadar kolesterol dan trigliserida dengan menggunakan metode enzimatik-kalorimetrik. Analisis kolesterol total dan trigliserid dilakukan dengan cara mencampurkan 10 µL serum ke dalam 1 mL reagen kit dan dilakukan inkubasi selama 10 menit, kemudian
Gambar 1.b Akar tanaman Boehmeria nivea
Gambar 1.a Tanaman Boehmeria nivea
Kandungan Fitoestrogen Ekstrak Etanolik Akar Rami            85
dibaca absorbansinya pada lamda 546 nm (Lestari, 2014).

## HASIL

## Berat Basah dan Berat Kering Uterus
Pada  kelompok  kontrol  yang  tidak
mendapatkan  perlakuan  sama  sekali  terlihat  berat uterus  paling  besar,  sedangkan  pada  kelompok ovariektomi,  berat  uterus  paling  rendah.  Hal  ini memperlihatkan tindakan ovariektomi yang dilakukan telah berhasil. Perlakuan EBN mengakibatkan berat uterus  basah  maupun  kering  meningkat  jika dibandingkan kelompok kontrol ovariektomi maupun
Gambar 2. Berat uterus pada tiap kelompok perlakuan
Gambar 3. a Profil lipid darah pada tiap kelompok perlakuan (kadar kolesterol, yang menunjukkan nilai rata- rata+SD)
kelompok  ovariektomi  disertai  diinduksi  diet aterogenik  (Gambar 2).
Pada gambar 2 didapatkan nilai menunjukkan rata-rata+SD. Tanda (*) menunjukkan nilai berbeda signifikan terhadap kelompok tikus yang diovariektomi berdasarkan analisis data menggunakan uji Kruskal Wallis dilanjutkan uji perbandingan berganda dengan taraf kepercayaan 95%.

## Profil Lipid Darah Akibat Perlakuan Ovariektomi dan Diet Aterogenik
Kadar kolesterol kelompok ovariektomi dan kelompok  ovariektomi  yang  disertai  induksi  diet aterogenik  meningkat  signifikan  dibanding  dengan kelompok kontrol (gambar 3.a dan b). Pemberian EBN mampu  menurunkan  kadar  kolesterol  pada  ketiga kelompok  dosis,  meskipun  penurunan  ini  tidak signifikan.  Kelompok dengan  perlakuan EBN  dosis 250 mg/kgBB memiliki kadar kolesterol yang paling rendah  dibandingkan  dengan  dosis  perlakuan  yang lain.
Gambar 3.a dan 3.b menunjukkan data kadar kolesterol dianalisis dengan menggunakan uji Kruskal Wallis dilanjutkan dengan uji perbandingan berganda (p  <0,05).  Data  kadar  trigliserida  yang  dianalisis dengan menggunakan uji Anova dilanjutkan dengan uji  LSD  (p  <0,05).  Tanda  (*)  menunjukkan  nilai perbedaan yang signifikan terhadap kelompok kontrol yang diovariektomi.

## PEMBAHASAN
Ovariektomi yang dilakukan pada penelitian ini  bertujuan  untuk  menghilangkan  fungsi  ovarium sebagai penghasil hormon  estrogen sehingga terjadi defisiensi estrogen serupa dengan keadaan menopause pada  wanita.  Hormon  estrogen  mempengaruhi pertumbuhan  dan  fungsi  organ  reproduksi.  Uterus merupakan  organ  yang  sangat  responsif  dengan perubahan kadar hormon estrogen tersebut (Sheehan, 2005). Hal ini dibuktikan dengan turunnya berat uterus pada kelompok yang mengalami defisiensi estrogen.
Estrogen dalam tubuh bekerja melalui ikatan dengan reseptor (ER alfa dan ER beta) pada sel tar- get. Ikatan hormon-reseptor kompleks ini kemudian menempati  DNA binding  site untuk  menginduksi ekspresi gen melalui proses transkripsi dan translasi. Sintesis  material  sel  meningkat  dan  mendukung proliferasi sel penyusun endometrium (Baki, 2013). Afinitas  fitoestrogen  terhadap  reseptor  jauh  lebih rendah daripada estrogen, akan tetapi dalam kondisi defisiensi estrogen,  banyak kelebihan  reseptor yang tidak  terikat  hormon,  sehingga  fitoestrogen  dapat menghasilkan efek estrogenik melalui ikatan dengan reseptor  estrogen  yang  kosong  (Sheehan,  2005). Meningkatnya berat uterus pada kelompok perlakuan EBN  membuktikan  adanya  kandungan  fitoestrogen dan  efek  estrogeniknya  pada  uterus.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  sebelumnya  yang  membuktikan
Gambar 3.b Profil lipid darah pada tiap kelompok perlakuan (kadar trigliserida, yang menunjukkan nilai rata- rata+SD)
kandungan  fitoestrogen  meningkatkan  bobot  uterus melalui peningkatan proliferasi endometrium (Lestari, 2014; Fernandez, 2105).
Peningkatan  berat  uterus  secara  bermakna terjadi pada kelompok perlakuan EBN dosis 125 mg/ kgBB dan 250 mg/kgBB, sedangkan pada perlakuan EBN dosis 500 mg/kgBB cenderung terjadi penurunan kembali berat uterus dibandingkan dengan perlakuan EBN  dosis  lebih  rendah.  Aktifitas  estrogenik fitoestrogen yang dikonsumsi sangat bergantung pada konsentrasi  fitoestrogen,  reseptor  estrogen,  dan konsentrasi estrogen endogen yang mampu bersaing (Kim, 1998). Dosis efektif EBN untuk menimbulkan efek estrogenik pada penelitian ini sebesar 125 mg/ kgBB dan 250 mg/kgBB. Dosis fitoestrogen yang lebih tinggi  (pada  penelitian  ini  500  mg/kgBB)  bersifat menghambat  sintesis  DNA  sehingga  menghambat proliferasi  endometrium.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian Wang & Kurzer (2003) yang melaporkan kerja  fitoestrogen  bersifat  bifasik  terhadap  sintesis DNA,  yaitu  pada  konsentrasi  0,1-10  µM  dapat menginduksi DNA  sedangkan pada  konsentrasi 20- 90 µM justru menghambat sintesis DNA.
Kadar  trigliserida  kelompok  tikus  yang diovariektomi  menunjukkan  penurunan  signifikan dibanding  dengan  kelompok  kontrol.  Hal  ini menunjukkan defisiensi estrogen pada kondisi meno- pause menurunkan kadar trigliserid. Perlakuan EBN yang  mengandung  fitoestrogen  pada  penelitian  ini menyebabkan peningkatan signifikan kadar trigliserida dibandingkan dengan kelompok ovariektomi. Kondisi ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian  Suglin  &  Prasad (2005) bahwa ekstrak  rami dapat meningkatkan kadar trigliserida darah. Peningkatan trigiserida yang terjadi melalui  peningkatan  pengeluaran  VLDL  dan penurunan trigliserida lipase hepar (Lee & Goldberg, 2008). Efek fitoestrogen rami sendiri terhadap kadar trigliserida masih menjadi perdebatan, hasil penelitian lain  menyebutkan  ekstrak  biji  rami  tidak mempengaruhi  kadar  trigliserida  darah  (Pan  et  al, 2009), akan tetapi penelitian lain membuktikan bahwa ekstrak akar rami menurunkan kadar trigliserida darah (Sancheti  et  al,  2011).  Keadaan  yang  mungkin menyebabkan  perbedaan  hasil  penelitian-penelitian tersebut  adalah  kondisi  kesehatan  dan  penyakit penyerta lain dari sampel (organisme sehat, diabetes, hiperlipidemia,  atau  menopause)  dan  dosis  ekstrak yang digunakan.
Tindakan  ovariektomi  menyebabkan defisiensi estrogen yang mengakibatkan peningkatan kadar kolesterol total. Hal ini sesuai dengan teori yang menyatakan saat menopause, produksi estrogen yang menurun  menyebabkan  kolesterol  total  meningkat,
Kolesterol  LDL  meningkat  dan  kolesterol  HDL menurun  (Phan  &  Toth,  2015).  Hasil  penelitian sebelumnya  sedikit  berbeda  dengan  penelitian  ini. Penelitian  sebelumnya  membuktikan  EBN  dengan dosis  500  mg/kgBB  efektif  menurunkan  kadar kolesterol pada tikus model diabetes (Sancheti et al, 2011). Perbedaan hasil ini mungkin disebabkan karena penelitian ini tidak melakukan induksi diabetes, akan tetapi melakukan induksi diet aterosklerosis dengan memberikan kuning telur yang tinggi kolesterol, maka perlakuan  EBN  hanya  mampu  menurunkan  kadar kolesterol dalam jumlah kecil dan tidak signifikan.

## SIMPULAN
Ekstrak  etanolik  akar Boehmeria  nivea meningkatkan  berat  uterus,  menurunkan  kadar kolesterol dan meningkatkan kadar trigliserida darah tikus yang diovariektomi dan diinduksi diet aterogenik.

## SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah diperoleh, terdapat beberapa hal yang perlu dikaji lebih lanjut, yaitu: 1) diperlukan uji untuk menentukan jenis fitoesterogen  yang  terdapat  pada  akar  rami;  2) penentuan peningkatan kadar esterogen dalam darah akibat perlakuan EBN; 3) uji aktivitas fitoesterogen EBN  pada  berbagai  organ  lain,  misalnya  tulang, pembuluh darah serta jantung.

## KEPUSTAKAAN
Baki, H. 2013. Estrogen and Growth Hormone and their Roles in Reproductive Function. Inter- national Journal of Animal and Veterinary Ad- vances 5(1): 21-28.
Chang, J. M., Huang, K. L., Yuan T. T. T., Lai, Y. K., & Hung L. M. 2010. The Anti-Hepatitis B Virus Activity of Boehmeria nivea Extract in HBV-viremia SCID Mice. eCAM 7(2):189- 195.
Fernandez, M. A. M., Wiratmini, N.  I., Ermayanti,
N.  G.  A.  M.  2015.  Pengaruh  Pemberian Ekstrak  Daun  Ekor  Naga  (Rhaphidophora pinnata,  Schott)  terhadap  Perkembangan Uterus Mencit (Mus musculus) Betina yang Telah Diovarektomi. Jurnal Biologi, Vol 19 No 2 Desember 2015.
Kemenkes  RI.  2014.  Situasi  Kesehatan  Jantung. Jakarta:  Pusat  Data  dan  Informasi Kementrian Kesehatan RI.
Kim, H., Peterson, T. G., &  Barnes, S. 1998. Mecha-
nism  of  Action  of  the  Soy  Isoflavone Genestein:  Emerging  Role  of  its  Effect Trough  Transforming  Growth  Factor  Beta Signaling. American Journal Clinical Nutri- tion. 68: 1418-1425.
Lee, J. & Goldberg, I. J. 2008. Hypertrigliceridemia- induced pancreatitis Created by Oral Estro- gen and in Vitro Fertilization Ovulation In- duction.  J Clin lipidol, 2:63-6.
Lestari, B., Murwanti, R., Meiyanto, E. 2015. Efek Estrogenik  Ekstrak  Etanolik  Biji  Labu Kuning (Cucurbita moschata (Duch.) Poir) pada  Tikus  Betina  Sprague  Dawley Terovariektomi:  Tinjauan  terhadap  Bobot Uterus dan Profil Lipid Darah. Skripsi. Uni- versitas Gadjah Mada.
Mozaffarian,  D.,  Benjamin,  E.  J.,  Go, A.  S.,  et  al. 2016. Heart Disease and Stroke Statistic 2016
Update. Circulation, 2016;133:e38-e360. Nofer,  J.,  2012.  Estrogens  and Atherosclerosis:  In- sight from Animal Models and Cell System.
Journal  of  Molecular  Endocrinology,  48:
R13-R29.
Pan, A., Yu, D., Demark-Wahnefried, W., Franco, O.
H., Lin,  X. 2009. Meta-analysis of  the Ef- fects of Flaxseed Interventions on Blood Lip- ids. Am J Clin Nutr, 90(2):288-97.
Phan, B. A.  P. & Toth, P. P.  2014. Dyslipidemia in
Women: Etiology and Management. Interna- tional Journal of Women's Health, 6(1):185- 194.
Prasetyo,   A.,    Sarjadi,    Pudjadi.    2003.  Pengaruh Injeksi  Inisial  Adrenalin  dan  Diet  Kuning
Telur terhadap Kadar lipid, Jumlah Sel Busa dan  Ketebalan  Dinding Aorta Abdominalis Tikus  Wistar.  Media  Medika  Indonesia, 38(1). Ritcher,  D.  U., Abarzua,  S.,  Chrobak,  M.,  Scholz,
C.,  Kuhn,  C.,  Schulze,  S.,  Kupka,  M.  S., Friese, K., Briese, V., Piechulla, B., & Jesche, U.  2010.  Effect  of  Phytoestrogen  Extracts Isolated from Flax on Estradiol Production and ER/PR Expression in MCf7 Breast Can- cer Cells. Anticancer Research 5: 1695-1699.
Sancheti, S., Sancheti, S., Bafna, M., Kim, H., You, Y., Seo, S. 2011. Evaluation of Antidiabetic, Antihyperlipidemic and Antioxidant Effects of  Boehmeria  nivea  (L.)  Gaudich., Urticaceae, Root Extract in Streptozotocin- induced Diabetic Rats. Brazilian Journal of Pharmacognosy, 21(1): 146-154. Sheehan,  D.  M.  2005.  The  Case  for  Expanded Phytoestrogen  Research.  Proc  Soc  Exp.
Biologi Medicine, 208:3-5.
Stuglin,  C.  &  Prasad,  K.  2005.  Effect  of  Flaxseed Consumtion on Blood Pressure, Serum Lip- ids, Hemopoetic System and Liver and Kid- ney  Enzymes  in  Healthy  Humans.  J Cardiovasc Pharmacol Ther, 10(1);23-7. Wang, C. & Kurzer, M.S. 2003. Phytoestrogen Con- centration Determines Effects on DNA Syn- thesis in Human Breast Cancer Cells. Nutri- tion and Cancer 28 (3): 236-247.
Wei,  J.,  lin,  L.,  Su,  X.,  Qin,  S.,  Xu,  Q.,  Tang,  Z., Deng, Y., Zhou, Y., & He, S. 2014 Anti-hepa- titis B Virus Activity of Boehmeria nivea Leaf Extract  in  Human  HepG2.2.15  Cells.  Bio- medical Reports, 2:1 (147-151.