KAJIAN POTENSIAL OSMOTIK DAN DURASI OSMOCONDITIONING TERHADAP DAYA HANTAR LISTRIK DAN KANDUNGAN KIMIA BENIH KACANG MERAH YANG TELAH MENGALAMI DETERIORASI

## Yosefina Lewar, Yohanes H. Dimu Heo, dan  Senny J. Bunga
Jurusan Tanaman Pangan dan Holtikultura  Politeknik Pertanian Negeri Kupang Jalan Prof. Herman Yohanes Penfui-Kupang P.O.Box 1152 Kupang 85011 Telepon :(0380)881600,881601; E-mail:yosefina.lewar087@gmail.com

## ABSTRACT
Using  quality  seeds  could  increase  crop  production,  including  kidney  bean,  "Inerie", cultivar. The qualified seeds providing enough food supply in the endosperm as a primary energy  for  a  normal  and  strong  germination  (viability)  and  seedling  growth  (vigor).  Seeds from harvested yield are stored for the next planting season. During storage the quality of the  seeds  will  be  deprived  physically,  physiologically  and  chemically,  impact  on  the production.  One  way  to  overcome  the  drawbacks  of  the  deteriorated  seeds  is  by osmoconditioning using Polyethylene Glycol solution. Osmoconditioning strongly influenced by  the  osmotic  potential  and  duration  of  osmoconditioning.  The  results  showed  that:  1) Osmoconditioning using PEG-6000 during invigoration affect the electrical conductivity and the chemical content of seeds, which has been deteriorating during 1 year storage; and 2) There  is  an  interaction  between  osmotic  potency  and  duration  of  osmoconditioning  using PEG-6000  in  relation  to  the  electrical  conductivity  and  chemical  composition  on  the  seed during 1 year storage. -1.0 MPa  with 1 hour osmoconditioning gave the best effect on the electrical conductivity, the levels of free fatty acids and P-total of the “Inerie” seeds.
Keywords: Kidney bean, osmotic potency, duration of osmoconditioning, deterioration, Polyethylene Glycol.

## PENDAHULUAN
Benih  bermutu  merupakan  salah  satu  faktor  yang  memegang  peranan penting dalam budidaya. Menurut Justice dan Bass (1994), ketersediaan benih bermutu  tinggi  menjadi  salah  satu  kunci  keberhasilan  usaha  di  bidang pertanian.  Ketersediaan  benih  dengan  tepat  mutu  dan  tepat  waktu  masih menjadi  kendala  di  tingkat  petani,  sehingga  berakibat  pada  penggunaan  benih bermutu masih sangat terbatas.
Benih bermutu tinggi mempunyai sifat fisiologis, fisik, kimia, dan genetik yang  baik  serta  dipengaruhi  oleh  proses  produksi  sampai  penyimpanan  benih (Sadjad,  1980).  Benih  yang  telah  mengalami  masak  fisiologis  akan  mengalami deteriorasi  secara  kronologis  sejalan  dengan  waktu.  Selama  periode penyimpanan  benih  akan  mengalami  kemunduran  ( deterioration )  yang menyebabkan  penurunan  viabilitas  benih.  Laju  kemunduran  benih  selama periode  penyimpanan  dipengaruhi  oleh  faktor  kadar  air  benih,  suhu  dan
294 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 293 - 303
kelembaban ruang penyimpanan. Kadar air benih akan meningkat jika suhu dan kelembaban ruang simpan relatif tinggi, karena sifat benih yang hygroskopis dan selalu ingin mencapai keseimbangan dengan kondisi lingkungan. Suhu ruangan penyimpanan  yang  tinggi  akan  memperbesar  terjadinya  penguapan  dari  dalam benih,  sehingga  benih  akan  kehilangan  daya  imbibisi  dan  kemampuan  untuk berkecambah.
Benih  kacang  merah  dalam  polong  dapat  disimpan  selama  4-5  bulan dalam  suhu  kamar,  selebihnya  benih  akan  mengalami  kemunduran  atau deteriorasi fisik, fisiologis dan kimia. Benih kacang merah Inerie tergolong benih yang  memiliki  kandungan  protein  tinggi  yaitu  23,1  g/100  g  dan  kandungan lemak  1,7  g/100  g  (Hosang,  dkk,  2006).  Hasil  penelitian  Lewar,  dkk  (2015) menunjukan bahwa kerapatan populasi dan dosis pupuk SP-36 mempengaruhi kualitas benih baik fisik, fisiologis, maupun kimiawi. Kandungan P-Total benih yang dihasilkan adalah 22,103% yang dihasilkan dari perlakuan jarak tanam 50 cm  x  30  cm  dengan  dosis  pupuk  SP-36  200  kg/ha.  Penyimpanan  pada  suhu yang tinggi pada benih yang memiliki kandungan protein tinggi akan berakibat pada kerusakan protein sehingga umur simpannya semakin pendek (Indartono, 2011)  atau  benih  cepat  mengalami  kemunduran  mutu.  Umur  simpan  yang dimaksud  berkaitan  dengan  viabilitas  dan  vigor  benih  selama  penyimpanan. Selain  itu  kadar  asam  lemak  bebas  yang  dihasilkan  terendah  adalah  0,592%, dengan  penyimpanan  juga  akan  memperbesar  kadar  asam  lemak  bebas  benih sehingga akan menurunkan viabilitas dan vigor benih.
Permasalahan terjadinya kemunduran benih selama periode penyimpanan  dapat  diatasi  dengan  melakukan  teknik  invigorasi.  Invigorasi merupakan  suatu  perlakuan  fisik  atau  kimia  untuk  meningkatkan  atau memperbaiki viabilitas dan vigor benih yang telah mengalami kemunduran mutu (Basu  dan  Rudrapal,  1982 dalam Rusmin,  2001).  Berbagai  metode  invigorasi benih  telah  dikembangkan  dan  pengaruhnya  spesifik  pada  setiap  benih.  Salah satu  perlakuan  teknik  invigorasi  yang  telah  banyak  diteliti  adalah osmoconditioning dengan  mengaktifkan  dan  mengefektifkan  proses-proses pemulihan  diri.  Penggunaan  larutan  osmotik  dilaporkan  efektif  sebagai  media osmoconditioning benih,  seperti Polyethylene  Glycol (PEG)  (Rusmin,  2001). Keberhasilan  proses  ini  ditentukan  oleh  potensial  osmotik  dan  durasi osmoconditioning .
Yosefina, dkk., Kajian Potensial Osmotik Dan Durasi … 295 Prinsip dasar preplant physiological seed conditioning atau osmoconditioning adalah  mengontrol  masuknya  air  ke  dalam  benih  sehingga memberikan  kesempatan  yang  lebih  lama  kepada  benih  untuk  pemulihan  diri. Osmoconditioning merupakan  salah  satu  metode  untuk  invigorasi  benih  yang sudah  mengalami  kemunduran  dengan  mengaktifkan  dan  mengefektifkan proses-proses  pemulihan  diri  setelah  pengeringan  atau  penurunan  kadar  air benih. Osmoconditioning didasarkan  pada  hidrasi  terkontrol  pada  benih  hingga berlangsungnya  aktivitas  metabolik  pra  perkecambahan  (Bradford,  1986). Selama osmoconditioning terjadi  aktivasi  enzim  dan  proses-proses  metabolisme penting untuk perkecambahan  sehingga  benih  siap untuk berkecambah,  tetapi pembelahan sel dan pembentukan struktur penting dari embrio belum muncul (Woodstock dan Taylarson, 1981).
Osmoconditioning berpengaruh  positif  terhadap  pemulihan  benih tergantung  pada  kondisi  (suhu,  potensial  air,  dan  ketersediaan  oksigen),  cara (dilembabkan  atau  direndam),  dan  durasinya  (Bray,  1995 dalam Come et  al ., 1996). Osmoconditioning dilakukan dengan cara mengatur jumlah dan kecepatan penyerapan  air  oleh  benih  dengan  menggunakan  larutan yang  bersifat  osmotik (Bradford,  1986;  Murray  and  Wilson,  1987).  Potensial  osmotik  selama osmoconditioning bervariasi  antara  -0,5  dan  -1,5  MPa  tergantung  spesies,  tapi umumnya  kadar  air  benih  dipertahankan  sekitar  40-45%  (berdasarkan  berat basah),  yang  mana  kadar  air  ini  lebih  rendah  daripada  kadar  air  yang dibutuhkan untuk keluarnya radikel (Bray, 1995 dalam Come et al ., 1997). Hasil penelitian  penelitian  Lewar  (2006)  yang  meng- conditioning benih  kopi  arabika kadar  air  12%  menggunakan  Polyethylene  Glycol-6000  konsentrasi  -0,4  MPa, terjadinya peningkatan daya tumbuh benih menjadi 78,75% dibandingkan tidak di osmoconditioning (62,5%). Pengaruh osmoconditioning pada proses perkecambahan  akan  meningkat  dengan  durasi  perlakuan  (sampai  batas tertentu) dan  pada  umumnya  menjadi  optimal  setelah  7 hari  (Corbineau et  al ., 1998 dalam Come et  al .,  1997).  Lebih  lanjut  Lewar  (2008)  menyatakan  bahwa terdapat  interaksi  antara  potensial  osmotik  dan  durasi osmoconditioning dalam menurunkan  daya  hantar  listrik  dan  kadar  asam  lemak  bebas,  serta meningkatkan  daya  tumbuh  benih  dan  indeks  vigor  bibit  kopi chanephora diberikan  dari  perlakuan  potensial  osmotik  -0,1  MPa  dengan  durasi osmoconditioning selama  72  jam.  Hasil  penelitian  Nuraini  (2001)  menunjukkan bahwa osmoconditioning dengan potensial osmotik -0,5 MPa (198 g/l) – -1,5 MPa
296 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 293 - 303
(335  g/l)  dalam  larutan  PEG  dapat  meningkatkan  vigor  dan  pertumbuhan tanaman kacang hijau yang telah mengalami deteriorasi.
Berkaitan  dengan  permasalahan  kemunduran  benih  kacang  merah Varietas  Inerie  Ngada  selama  periode  penyimpanan,  maka  perlu  dilakukan penelitian  tentang  perlakuan  invigorasi  benih  kacang  merah  menggunakan Polyethylene Glycol (PEG) untuk memulihkan mutu benih terkait viabilitas dan vigor  benih,  sehingga  mutu  benih  yang  ditanam  menunjukkan  hasil  yang maksimal di lapangan.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Juli sampai November 2016 di  Laboratorium  Hortikultura  dan Screen  House Politeknik  Pertanian  Negeri Kupang.

## Bahan dan Alat Penelitian
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  benih  kacang merah,  Polyethilene  Glycol-6000,  aquadest,  dan  bahan-bahan  analisa  kimiawi benih.  Alat  yang  digunakan  adalah aerator ,  ruangan  ber-AC,  gelas  ukur, pengaduk,  timbangan  analitik  dan  digital, conductivity  meter, dan  alat-alat analisa kimiawi benih.

## Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola faktorial 3 x 4. Terdapat dua faktor yang diteliti, yaitu :
1.   Faktor Potensial Osmotik (P) terdiri atas 3 aras yaitu : P 1 : -0,5 MPa  ; P 2 : - 1,0 MPa ; P 3 : -1,5 MPa
2.   Faktor Durasi Osmoconditioning (D) dengan 4 aras, yaitu : D 1 : 0,5 jam ; D 2 :1 jam ; D 3 : 1,5 jam ; D 4 :  2 jam
Terdapat  12  kombinasi  perlakuan  dan  setiap  kombinasi  perlakuan  yang diuji diulang sebanyak 4 kali. Selain itu juga terdapat kontrol (tanpa perlakuan = P 0 D 0 ).

## Prosedur Pelaksanaan Penelitian

## 1.   Persiapan benih
Benih yang digunakan adalah benih kacang merah yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  benih  yang  dihasilkan  pada  penelitian  tahun  pertama. Benih tersebut setelah dipanen dikemas dalam plastik polyethilene dan disimpan selama  ±  1  tahun.  Benih  yang  telah  disimpan  selama  ±  12  bulan  tersebut kemudian diberikan perlakuan sesuai dengan perlakuan yang dicobakan.

## 2. Perlakuan Osmoconditioning
Osmoconditioning benih  dilakukan  dengan  menggunakan  larutan  PEG- 6000  dengan  potensial  osmotik  dan  durasi  atau  lamanya osmoconditioning sesuai  perlakuan  yang  dicobakan.  Potensial  osmotik  sesuai  rumus  Michel  and Kaufmann (1973).
Ψ = -(1,18 x 10 -2 )C  -  (1,18 x 10 -4 )C 2 +  (2,67 x 10 -4 )CT  +  (8,39 x 10 -7 )C 2 T Keterangan : Ψ =    Potensial osmotik  larutan  (bar),  1  bar  = 0,1  MPa  ;
C =  Konsentrasi PEG (g PEG/kg H 2 O) ; T =   Suhu ruangan ( 0 C).
Potensial  osmotik  -0,5  MPa,  -1,0  MPa,  dan  -1,5  MPa  diperoleh  dengan cara melarutkan masing-masing 198 gram, 287 gram dan 355 gram PEG-6000 masing-masing dalam 1 liter aquades. Benih direndam dalam larutan PEG-6000 dengan  perbandingan  antara  benih  dengan  larutan  adalah  1  :  2 (volume/volume).  Untuk  menjamin  ketersediaan  oksigen  maka  digunakan aerator selama  berlangsungnya osmoconditioning .  Setelah  di osmoconditioning benih  dikeringanginkan  kembali  selama  1  jam  dan  dicuci  lagi  di  bawah  air mengalir  untuk  menghilangkan  lapisan  PEG  yang  melapisi  kulit  benih  dan dikeringanginkan, kemudian diuji daya hantar listrik, kadar asam lemak bebas dan P-Total benih.

## Variabel Penelitian
Variabel penelitian dilakukan terhadap parameter  sebagai berikut :
1. Kebocoran membran benih melalui uji daya hantar listrik (DHL)
2. Kadar Asam Lemak Bebas benih
298 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 293 - 303

## 3. Kandungan P-Total benih dengan metode Molibdat-Vanadat

## Model dan Analisis Data
Model analisis data dari Rancangan Acak Lengkap (RAL) :
Y ijk =    µ   +   α i +   β j +   αβ ij +   ε ij
Apabila  terdapat  pengaruh  yang  signifikan  maka  dilanjutkan  dengan  uji lanjut Duncan dengan taraf significant 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengamatan Umum
Obyek dalam penelitian ini adalah benih tanaman kacang merah Varietas Inerie  yang  merupakan  hasil  panen  pada  penelitian  tahun  2015  dan  telah disimpan selama 12 bulan.

## Gambar 1. Benih Hasil Panen Tahun 2015
Benih  tersebut  kemudian  diuji  kualitas  fisik,  fisiologis  dan  kimiawi sebelum dilakukan invigorasi secara osmoconditioning menggunakan Poliethilene Glycol 6000.
Gambar 2. Viabilitas Kacang Merah Sebelum Osmoconditioning
Yosefina, dkk., Kajian Potensial Osmotik Dan Durasi … 299
Pada  saat  penelitian  dilaksanakan  ternyata  menunjukan  bahwa  mutu benih  telah  mengalami  kemunduran.  Benih  yang  telah  disimpan  lama  akan mengalami  kemunduran  atau  penurunan  kualitas  fisik,  fisiologis  dan  kimiawi. Kemunduran benih adalah turunnya mutu benih yang menimbulkan perubahan secara menyeluruh di dalam benih dan berakibat pada berkurangnya viabilitas benih.  Kemunduran  benih  adalah  suatu  proses  yang  tidak  dapat  dihindari, sekali  benih  mengalami  kemunduran  tidak  akan  dapat  pulih  kembali  ke sediakala  ( irreversible). Penurunan  kualitas  ini  merupakan  proses  penurunan mutu  yang  berangsur-angsur  dan  kumulatif,  serta  tidak  dapat  balik  akibat perubahan fisiologis dan biokimia (Sadjad (1993).
Berdasarkan  pengamatan  hasil  pengujian  viabilitas  benih  kacang  merah Varietas  Inerie  di  lapangan  terdapat  kecambah  normal,  kecambah  abnormal, benih  busuk  dan  benih  mati  sampai  akhir  waktu  pengamatan.  Kecambah normal ditunjukan dengan epikotil, hipokotil, kotiledon dan akar kecambah yang tumbuh  baik  dan  normal.  Sedangkan  kecambah  abnormal  ditandai  dengan pertumbuhan  kecambah  yang  cacat,  dimana  akar  kecambah  yang  pendek, pertumbuhan epikotil dan hipokotil kecambah yang membengkok dan kecambah yang  tumbuh  memanjang  tanpa  klorofil  serta  tanpa  kotiledon.  Benih  busuk ditandai  dengan  benih  yang  sampai  terakhir  periode  pengamatan  mengalami pembengkakan  karena  menyerap  air  namun  tidak  mengalami  perkecambahan dan bila ditekan akan hancur dan mengeluarkan bau busuk. Sedangkan benih mati  ditunjukan  dengan  kondisi  benih  yang  tidak  menunjukkan  gejala pertumbuhan  sampai  akhir  periode  pengamatan  dan  juga  tidak  mengalami pembusukan.
Benih  kacang  merah  Varietas  Inerie  yang  telah  terdeteriorasi  mutu diperlakukan  dengan  cara osmoconditioning menggunakan  laruran  Poliethylene Glycol-6000.

## Daya Hantar Listrik
Daya  hantar  listrik  (DHL)  atau  konduktivitas  mencerminkan  tingkat kerusakan membran benih secara fisik, makin tinggi konduktivitas makin tinggi pula  tingkat  kerusakan  membran.  Hasil  analisis  ragam  pengaruh  potensial osmotik dan durasi osmoconditioning terhadap daya hantar listrik benih kacang merah Varietas Inerie menunjukkan adanya interaksi nyata. Hasil uji DMRT 5% terhadap rerata daya hantar listrik benih disajikan pada Tabel 1.

## 300 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 293 - 303
Tabel  1  Pengaruh Potensial  Osmotik  dan  Durasi Osmoconditioning Terhadap  Rerata  Daya  Hantar
Listrik Benih Kacang Merah Varietas Inerie (mS/cm) Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 1 D 2 D 3 D 4 P 1 0,79 b 0,78 bc 0,80 b 0,78 bc 0,78 ab P 2 0,78 bc 0,75 c 0,79 b 0,77 bc 0,77 b P 3 0,83 a 0,78 bc 0,77 bc 0,79 b 0,79 a Rerata 0,80 a 0,77 b 0,78 b 0,78 b (+) Kontrol (P 0 D 0 )   :     1,04
Keterangan  :  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang  sama  tidak berbeda nyata pada DMRT 5%
P 1 : Potensial osmotik -0,5 Mpa, P 2 : Potensial osmotik -1,0 MPa , P 3 : Potensial osmotik  -1,5  Mpa,D 1 :  Durasi Osmoconditioning 0,5  jam,  D 2 :  Durasi Osmoconditioning 1  jam  ,  D 3 :  Durasi Osmoconditioning 1,5  jam,  D 4 :  Durasi Osmoconditioning 2 jam
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  nilai  daya  hantar  listrik  tertinggi  dijumpai pada  perlakuan  tanpa osmoconditioning yakni  1,040  mS/cm,  hal  ini  diduga disebabkan  benih  telah  mengalami  kebocoran  membran  akibat  penyimpanan. Benih kacang merah yang disimpan selama 1 tahun telah mengalami penurunan kadar air benih dari kadar air awal 12% menjadi 9,5%. Daya hantar listrik tinggi menunjukkan  permeabilitas  sel  meningkat  akibat  ketidakteraturan  membran. Ketidakteraturan  membran  sel  menunjukkan  membran  sel  rusak.  Hilangnya integritas  membran  juga  sebagai  akibat  perombakan  lipid yang mengakibatkan sel tidak mampu melakukan penyerapan osmosa, kegagalan sel mempertahankan turgor, sel tidak dapat bermetabolisme dengan baik, sehingga perombakan  cadangan  makanan  dan  sintesis  senyawa  baru  juga  terganggu, akibatnya daya tumbuh dan vigor menurun.
Perlakuan osmoconditioning mampu menurunkan nilai daya hantar listrik benih.  Daya  hantar  listrik  terendah  akibat osmoconditioning adalah  0,750 mS/cm  dijumpai  pada  perlakuan  potensial  osmotik  -1,0  MPa  dengan  durasi osmoconditioning 1  jam  (P 2 D 2 ). Osmoconditioning memiliki  peran  penting  dalam mencegah kebocoran membran melalui water replacement hypotesis dan induksi senyawa-senyawa  yang  berfungsi  sebagai  antioksidan  dan  enzim-enzim pembersih  radikal  dan  peroksida  bebas.  Keberhasilan osmoconditioning tergantung pada potensial osmotik dan juga durasi osmoconditioning .
Potensial  osmotik  dan  durasi osmoconditioning terbaik  untuk  benih kacang  merah  Varietas  Inerie  yang  telah  mengalami  kemunduran  mutu terutama kebocoran membran adalah -1,0 MPa dan 1 jam osmoconditioning .
Perlakuan  invigorasi  secara osmoconditioning dalam  memperbaiki  sel secara nyata dapat dilihat pada daya hantar listrik (DHL). Nilai DHL mengalami penurunan yang sangat drastis pada benih yang mendapat perlakuan invigorasi dibanding dengan tanpa invigorasi baik pada benih dengan tingkat vigor sedang maupun  tinggi. Osmoconditioning dapat  menyebabkan  terjadinya  penguatan (penyembuhan)  membran  plasma,  memperkecil  kehilangan  elektrolit  dan meningkatkan  perkecambahan  serta  kekuatan  semai  (Tilden,  1984 dalam Gardner et al ., 1991). Selama perlakuan invigorasi secara osmoconditioning juga terjadi  perubahan  aktivitas  fisiologi  dan  biokimia  di  dalam  benih.  Perubahan komposisi  lemak  membran  akibat  aktivitas  enzim  menyebabkan  meningkatnya integritas membran sehingga mengurangi kebocoran metabolik (Sutariati, 2001).

## Kadar Asam Lemak Bebas
Hasil  analisis  ragam  pengaruh  potensial  osmotik  dan  durasi osmoconditioning  terhadap  kadar  asam  lemak  bebas    benih  kacang  merah Varietas Inerie menunjukkan adanya interaksi sangat nyata. Hasil uji DMRT 5% terhadap  rerata  kadar  asam  lemak  bebas  benih  kacang  merah  Varietas  Inerie disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2.   Pengaruh Potensial Osmotik dan Durasi Osmoconditioning Terhadap Rerata Kadar Asam
Lemak Bebas Benih Kacang Merah Varietas Inerie (%) Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 1 D 2 D 3 D 4 P 1 2,57 cd 2,14 ef 3,07 ab 2,41 de 2,55 ab P 2 3,17 a 1,99 f 2,56 cd 2,00 f 2,43 b P 3 3,18 a 2,80 bc 2,63 cd 2,05 ef 2,67 a Rerata 2,97 a 2,31 c 2,75 b 2,97 a (+) Kontrol (P 0 D 0 )   :      3,72
Keterangan  :  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang  sama  tidak berbeda nyata pada DMRT 5%
P 1 : Potensial osmotik -0,5 Mpa, P 2 : Potensial osmotik -1,0 Mpa, P 3 : Potensial osmotik -1,5 Mpa, D 1 : Durasi Osmoconditioning 0,5 jam, D 2 : Durasi Osmoconditioning 1  jam,  D 3 :  Durasi Osmoconditioning 1,5  jam,D 4 :  Durasi Osmoconditioning 2 jam
Tabel 2 menunjukkan bahwa kadar asam lemak bebas tertinggi dijumpai pada benih yang tidak mengalami osmoconditioning yakni 3,723%.  Hal tersebut diakibatkan  oleh  terurainya  cadangan  lemak  benih  dan  disertai  dengan peningkatan  permeabilitas  kulit  benih.  Akumulasi  asam  lemak  bebas  ini menyebabkan rusaknya membran sel dan meningkatnya konduktivitas listrik.
302 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 293 - 303
Perlakuan osmoconditioning mampu  menurunkan  kadar  asam  lemak bebas  benih.  Kadar  asam  lemak  bebas  terendah  yakni  1,985  %  dijumpai  pada perlakuan potensial osmotik -1,0 MPa dengan durasi proses osmoconditioning 1 jam.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada  potensial  osmotik  -1,0  MPa  dengan durasi  1  jam  mampu  menurunkan  kadar  asam  lemak  bebas  yang  diakibatkan oleh  kebocoran  membran  benih. Osmoconditioning dapat  menurunkan  kadar asam lemak bebas dan meminimalkan kebocoran sel dengan menjaga stabilitas fosfolipid  dwilapis  melalui water  replacement  hypotesis dan  induksi  senyawa- senyawa yang berfungsi sebagai antioksidan dan enzim-enzim pembersih radikal dan peroksida bebas. Hal tersebut di atas sejalan dengan pernyataan Bailly et al (2000)  bahwa  pengembalian  viabilitas  benih  selama osmoconditioning berhubungan  dengan  penurunan  asam-asam  lemak  bebas,  yaitu  penurunan pada  kadar  malondialdehid  dan  senyawa  yang  terkonjungasi  dengannya,  yang mengindikasikan  terhentinya  proses-proses  lipid  peroksidasi  dan  peningkatan pada  protein  (berhubungan  dengan  kembalinya  aktivitas  enzim-enzim detoksifikasi dengan mengontrol laju lipid peroksidasi melalui pembersihan H 2 O 2 dan memproduksi antioksidan).

## Kadar P-Total Benih
Hasil  analisis  ragam  pengaruh  potensial  osmotik  dan  durasi osmoconditioning  terhadap  kadar  P-Total  benih  kacang  merah  Varietas  Inerie menunjukkan  adanya  interaksi  sangat  nyata.  Hasil  uji  DMRT  5%  terhadap rerata kadar P-Total benih kacang merah Varietas Inerie disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3.   Pengaruh Potensial Osmotik dan Durasi Osmoconditioning Terhadap Rerata Kadar P-Total
Benih Kacang Merah Varietas Inerie (%) Potensial Osmotik Durasi Osmoconditioning Rerata D 1 D 2 D 3 D 4 P 1 22,32 c 21,56 d 20,78 ef 21,42 de 21,52 b P 2 23,98 b 25,39 a 22,07 cd 20,58 f 23,00 a P 3 23,78 b 23,71 b 23,52 b 22,106 cd 23,28 a Rerata 23,36 a 23,55 a 22,13 b 21,37 c (+) Kontrol (P 0 D 0 )   :      20,58
Keterangan  :  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  sama  pada  baris  dan  kolom  yang  sama  tidak berbeda nyata pada DMRT 5%
P 1 :  Potensial  osmotik  -0,5  Mpa,  P 2 :  Potensial  osmotik  -1,0  Mpa,  P 3 :  Potensial osmotik  -1,5  Mpa,D 1 :  Durasi Osmoconditioning 0,5  jam,D 2 :  Durasi Osmoconditioning 1  jam,  D 3 :  Durasi Osmoconditioning 1,5  jam  ,D 4 :  Durasi Osmoconditioning 2 jam
Tabel 3 menunjukkan bahwa kadar P-Total benih terendah dijumpai pada benih  yang  tidak  mengalami osmoconditioning yakni  20,575%.    Hal  tersebut diakibatkan  oleh  terurainya  cadangan  protein  benih  dan  disertai  dengan peningkatan  permeabilitas  kulit  benih.  Rusaknya  membran  sel  dan meningkatnya  konduktivitas  listrik  akan  menurunkan  kadar  P-Total  benih. Kadar P-Total benih akan rusak dipicu oleh penyimpanan yang tidak tepat pada kondisi  suhu  penyimpanan  yang  terlalu  tinggi  ataupun  berfluktuasi.    P-Total benih  merupakan  cadangan  makanan  yang  tersedia  dalam  embrio  benih. Cadangan  makanan  ini  sangat  penting  untuk  embrio  melangsungkan  proses perkecambahan benih.
Perlakuan osmoconditioning mampu  meningkatkan  kadar  P-Total  benih. Kadar P-Total benih tertinggi yakni 25,391 % dijumpai pada perlakuan potensial osmotik  -1,0  MPa  dengan  durasi  proses osmoconditioning 1  jam.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  pada  potensial  osmotik  -1,0  MPa  dengan  durasi  1  jam mampu    memulihkan  benih  dengan  cara  menaikan  kadar  P-Total  benih  yang diakibatkan karena proses kemunduran atau deteriorasi.
Pengaruh  positif osmoconditioning berhubungan  dengan  berbagai  proses biokimia, seluler, dan molekuler, termasuk di dalamnya sintesis RNA dan DNA, meningkatkan  aktivitas  ß-tubulin  dan  aktivitas  pernapasan  benih.  Bailly et  al (2000) menyatakan bahwa pada bunga matahari dan pada jagung manis (Sung dan  Chiu,  2001)  dengan osmoconditioning akan  meningkatkan  protein  benih. Peningkatan  pada  protein  berhubungan  dengan  kembalinya  aktivitas  enzim- enzim  detoksifikasi  seperti  superoksida  dismutase,  katalase,  dan  glutathion reduktase, dengan mengontrol laju lipid peroksidasi melalui pembersihan H2O2 dan memproduksi antioksidan.
Selama osmoconditioning terjadi proses-proses metabolisme penting untuk proses  perkecambahan  benih  seperti  peningkatan  aktivitas  enzim  enzim perombak  cadangan  makanan  seperti  enzim  protease.  Enzim  protease  akan merombak  cadangan  makanan  protein  yang  membantu  proses  perkecambahan benih  (Baily et  al., 2000).  Semakin  tinggi  kadar  P-Total  benih  maka  enzim protease  juga  semakin  besar  dibutuhkan  untuk  proses  perombakan.
304 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 293 - 303
Osmoconditioning dapat  menginduksi  P-Total  benih    yang  juga  merupakan antioksidan  untuk  mencegah  akumulasi  radikel-radikel  bebas  yang  dapat merusak benih (Come dan Corbineau, 1996; Bailly et al., 2000; Sung dan Chiu, 2001).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
1. Osmoconditioning menggunakan  PEG-6000  dalam  invigorasi  berpengaruh terhadap daya hantar listrik dan kimiawi benih kacang merah Varietas Inerie yang telah mengalami kemunduran selama penyimpanan selama 1 tahun.
2. Terdapat  interaksi  antara  potensial  osmotik  dan  durasi osmoconditioning menggunakan  PEG-6000  terhadap  daya  hantar  listrik  dan  kimia  benih kacang  merah  Varietas  Inerie  yang  telah  mengalami  kemunduran    selama penyimpanan  selama  1  tahun.  Potensial  osmotik  -1,0  MPa  dengan  durasi osmoconditioning 1 jam  memberikan pengaruh terbaik terhadap daya hantar listrik  benih,  kadar  asam  lemak  bebas  dan  P-Total  benih  kacang  merah Varietas Inerie.

## Saran
1. Dalam  rangka  mendukung  pengembangan  tanaman  kacang  merah  Varietas Inerie  di  dataran  rendah,  maka  salah  satu  faktor  yang  perlu  diperhatikan adalah  ketersediaan  benih.  Agar  benih  dapat  tersedia  pada  saat  musim tanam,  maka  benih  tersebut  perlu  disimpan  secara  baik.  Apabila  dalam penyimpanan  benih  mengalami  kemunduran  mutu  maka  salah  satu alternatif  yang  dapat  digunakan  untuk  memulihkan  kemunduran  benih tersebut  adalah  dilakukan  invigorasi  secara osmoconditioning menggunakan PEG-6000 dengan potensial osmotik -1,0 MPa dengan durasi osmoconditioning selama 1 jam.
2. Perlu  dilakukan  pengkajian  metode  lain  yang  lebih  murah  dan  baik  dalam proses  invigorasi  benih  kacang  merah  Varietas  Inerie  yang  telah terdeteriorasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Bailly, C., A. Benamar, F. Corbineau, and D. Come. 2000. Antioxidant System in Sunflower  ( Helianthus  annuus L.)  Seeds  as  Affected  by  Priming. Seed SciRes. 10(1): 35-42.
Bradford, K.J. 1986. Manipulation of Seed Water Relations via Osmotic Priming to  Improve  Germination  Under  Stress  Condition. Hort  Science 21(5):1105- 1112.
Come,  D.  dan  F.  Corbineau.  1996.  Metabolic  Damage  Related  to  Desiccation Sensitivity. In A.  S.  Ouedraogo,  K.  Poulsen  dan  F.  Stubsgaard  (Eds.). Proceedings of A Workshop on Improved Methods for Handling and Storage of Intermediate/Recalcitrant  Tropical  Forest  Tree  Seeds. IPGRI,  Rome  and DANIDA Forest Seed Centre, Humleboek, Denmark. Hal: 107-120.
Come, D., N. Ozbingol, M. A. Picard dan F. Corbineau. 1997. Beneficial Effects of Priming on Seed Quality. In A. G. Taylor dan X-L, Huang (Eds.). Progress in Seed  Research,  Conference  Proceedings  of  the  Second  International Conference on Seed and Technology 12-16, 1997. Hal: 257-263.
Gardner,  F.P.,  R.B.  Pearce  and  R.I.  Mitchel.  1991. Physiology  of  Crop  Plant (Fisiologi Tanaman Budidaya, alih bahasa H. Susilo). UI Press. Jakarta.
Justice  dan  Bass.  1994. Prinsip  Praktek  Penyimpanan  Benih.  Rajawali  Press. Jakarta .
Hosang, dkk. 2006. Pelepasan Benih Kacang Merah Sebagai Varietas Unggul di Badan  Benih  Nasional.  Laporan.  Badan  Bimas  Ketahanan  Pangan Kabupaten  Ngada,  Balai  Pengkajian  Teknologi  Pertanian  NTT  dan Unifersitas Nusa Cendana. Kupang.
Indartono. 2011. Pengkajian Suhu Ruang Penyimpanan dan Teknik Pengemasan Terhadap  Kualitas  Benioh  Kedelai .  Program  Diploma  III  Teknik  Mesin. Fakultas  Teknik  Universitas  Diponegoro.  Gema  Teknologi  Vol.16  No.3 Perode April 2011- Oktober 2011.
Lewar  Yosefina.  2006.  Uji  Potensi Cryopreservasion Benih  Kopi  Arabika.  Tesis. Fakultas  Pertanian.  Sekolah  Pasca  Sarjana.  Universitas  Gadjah  Mada. Yogyakarta.
Lewar  Yosefina,  Senny  Juniawati  Bunga,  Blasius  Paga.  2008.  Invigorasi  Benih Kopi  Canephora  Setelah  Pengeringan  Dengan Osmoconditioning .  Politani Negeri Kupang. Laporan Penelitian.
Lewar Yosefina, Yohanis H. Dimu Heo, Senny J. Bunga, 2015. Potensi Produksi dan  Kualitas  Benih  Kacang  Merah  Varietas  Inerie  di  Dataran  Rendah. Laporan Penelitian Hibah Bersaing Tahun Pertama. Politani Negeri Kupang.
Murray, G.A., and D. O. Wilson. 1987. Priming on Seed for Improve Vigor. Agric. Exp. Station. Univ. Idaho. Bull. No. 677.
Rusmin,  D.  dan  Sukarman.  2001.  Viabilitas Benih  Jambu  Mete ( Anacardium occidentale L.) pada  Beberapa  Metode  Invigorasi .  Jurnal  Ilamiah  Pertanian Gakuryoku Persada. Vol. VII : 4.
Sadjad,  S.  1993. Panduan  Pembinaan  Mutu  Benih  Tanaman  Kehutanan diIndonesia . Proyek Pusat Perbenihan Kehutanan Direktorat Reboisasi dan

## 306 PARTNER, TAHUN 21 NOMOR 2, HALAMAN 293 - 303
Rehabilitasi  Dirjen  Kehutanan  dan  Lembaga  Afiliasi  Institut  Pertanian Bogor. Bogor. 300 hal.
Sadjad,  S.  1980.  Dasar-dasar  Teknologi  Benih.  Capita  Selecta.  Departemen Agronomi. 214 hal.
Sung, J.M. dan K. Y.Chiu. 2001. Solid Matrix Priming Can Partially Reverse the Deterioration of Sweet Corn Seed Induced by 2,2-azobis (2-amidinopropane) Hydrocloride Generated Free Radicals. Seed Science and Technology . 29(2): 287-298.
Sutariati,  K.  G.  2002.  Peningkatan  Performansi  benih  Cabai  (Capsicum  annum L)  dengan  Perlakuan  Invigorasi  Benih.  Makalah  Pengantar  Falsafah  Sains (PPS702) Program Pasca Sarjana/S3 IPB. Bogor.