## JPFS 3 (2) 2020 35-42

## Jurnal Pendidikan Fisika dan Sains (JPFS)
Journal homepage: http://journal.unucirebon.ac.id/index.php/jpfs
Fabrikasi Perancah Berpori Hidroksiapatit dari Tulang Ikan Tenggiri dengan Alginat Sebagai Binder Alami: Sebuah Kajian Naratif
Siswoyo* 1 , Kumalasari 1 , Sari Wulan 2 , Fitri Afriani 1
1 Jurusan Fisika, Fakultas Teknik, Universitas Bangka Belitung
2 Jurusan Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Bangka Belitung
* E-mail: woyosis735@gmail.com

## ABSTRAK
Perancah  berpori  merupakan  solusi  alternatif  yang  dikembangkan  untuk  membantu  proses  terapi tulang.  Hidroksiapati  (HAp)  merupakan  material  yang  banyak  dikembangkan  menjadi  perancah berpori  karena  memiliki  biokompatibilatas  yang  baik.  Sebagai  negara  maritime,  Indonesia  memiliki potensi  perikanan  yang  tinggi.  Salah  satu  potensi  limbah  produk  maritime  yang  berpotensi  dapat disintesis menjadi HAp adalah tulang ikang tenggiri karena mengandung CaO  dalam jumlah tinggi. Di dalam naratif ini dipaparkan  metode yang potensial untuk sintesis HAp dari tulang ikan tenggiri beserta dengan metode fabrikasi yang dapat diterapkan menjadi perancah berpori. Alginat merupakan bahan  alam  dari  alga  coklat  yang  dapat  digunakan  sebagai  porogen  dalam  sintesis  HAp  berpori. Karena berasal dari bahan alam berbasis maritime  maka alga relatif aman dan  mudah diproduksi di Indonesia.  Diharapkan  dari  kajian  ini  dapat  diperoleh  gambaran  yang  lebih  komprehensif  terkait pengembangan  perancah  berpori  berbasis  HAp  dari  tulang  ikan  tenggiri  sehingga  dapat  menjadi pertimbangan untuk pengembangan selanjutnya.
Kata kunci: perancah, hidroksiapatit, alginat, material alam

## ABSTRACT
Porous  scaffolding  is  an  alternative  solution  developed  to  assist  the  bone  therapy  process. Hydroxyapatite  (HAp)  is  a  widely  developed  material  into  porous  scaffolding  because  it  has  good biocompatibility.  As  a  maritime  country,  Indonesia  has  high  fisheries  potential.  One  potential maritime product waste that could be synthesized into HAp is mackerel bone because it contains high amounts  of  CaO.  This  narrative  describes  a  potential  method  for  HAp  synthesis  from  mackerel fish bones  and  a  fabrication  method  that  can  be  applied  to  a  porous  scaffold.  Alginate  is  a  natural ingredient from brown algae, which can be used as a porogen to synthesize porous HAp. Because it comes  from  maritime-based  natural  materials,  algae  are  relatively  safe  and  easy  to  produce  in Indonesia. It is hoped that from this study, a more comprehensive picture can be obtained related to the  development  of  HAp-based  porous  scaffolding  from  mackerel  fish  bones  so  that  it  can  be considered for further development.
Keywords: scaffold, hydroxyapatite, alginate, natural sources
@2020 Pendidikan Fisika FKIP Universitas Nahdlatul Ulama Cirebon __________________________________________________________________________________

## PENDAHULUAN
Tulang merupakan komponen penyusun tubuh yang berfungsi sebagai kerangka, tempat melekat otot  dan  pelindung  organ  lain  dalam  tubuh  (Triono  &  Murinto,  2015).  Namun  berbagai  kecelakaan dan adanya penyakit berpotensi untuk merusak kondisi tulang. Beberapa upaya perbaikan kerusakan tulang  konvensional  yang  lazim  dilakukan  diantaranya  adalah autograft , allograft ,  dan xenograft (Sedyono  &  Tontowi,  2008) .  Namun  berbagai  solusi  konvensional  tersebut  memungkinkan mengalami  beberapa  hal  negatif  seperti  adanya  potensi  kelangkaan  donor  dan  berpotensi  untuk
mengalami  terjadinya  transfer  penyakit  (Darwis  &  Warastuti,  2008).  Untuk  mengatasi  hal  tersebut, rekayasa jaringan muncul dengan menawarkan alternatif berupa penggunaan perancah yang terfokus pada perancah berpori  dalam proses perbaikan tulang (Kolk, et al., 2012; Zhao, et al., 2011) Pori pori yang  ada  pada  perancah  akan  menjadi  ruang  bagi  sel  untuk  melekat  dan  bermigrasi  serta  sebagai tempat untuk suplai nutrisi bagi pertumbuhan sel (Blaker, et al., 2005).
Hidroksiapatit  (Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 )  adalah  material  biokeramik  yang  memiliki  biokompatibilitas baik, biodegradable, dan tidak beracun (Sopyan, et al., 2007; Lins, et al., 2003). Hidroksiapatit dapat disintesis  dari  bahan  alam  yang  mengandung  kalsium  yang  cukup  tinggi  yang  nantinya  akan digunakan  sebagai  prekusor  kalsium  karena  senyawa  hydroxyapatite  dapat  diperoleh  dengan mencampurkan prekursor kalsium dengan prekursor fosfat. Beberapa penelitian telah memanfaatkan bahan  alam  seperti  cangkang  telur  ayam  (Prabakaran,  et  al.,  2005),  kulit  kerang  darah  (Azis,  et  al., 2014), gipsum (Sedyono & Tontowi, 2008) dan tulang ikan tenggiri (Anggresani, et al., 2019).
Ikan tenggiri ( Scomberomorus commerson ) merupakan salah satu komoditas unggulan perikanan di  Bangka  Belitung.  Pada  tahun  2005,  hasil  tangkapan  ikan  tenggiri  sudah  mencapai  6,2%  dari 19.641,60 ton tangkapan ikan di perairan Kabupaten Bangka (Sobari & Febrianto, 2010). Daging ikan tenggiri  banyak  dimanfaatkan  dalam  berbagai jenis  produk  olahan  makanan  sehingga  meninggalkan limbah  berupa  tulang  yang  belum  diolah  dengan  baik  (Murniyati  &  Peranginangin,  2014).  Tulang ikan  sangat  kaya  akan  kalsium,  fosfor,  dan  karbonat  sehingga  dapat  dijadikan  sebagai  bahan  dasar dalam pembuatan hidroksiapatit (Trilaksani, et al., 2006).
Namun, seperti umumnya  material keramik,  hidroksiapaptit memiliki kelemahan  terkait dengan sifat  mekaniknya.  Hidroksiapatit  cenderung  rapuh  dan  kelenturanya  rendah  sehingga  ketika diterapkan  menjadi  suatu  perancah  berpori  dikhawatirkan  tidak  dapat  menopang  beban  (Tripathi  & Basu, 2012). Padahal di sisi lain, pori-pori berperan sangat penting untuk memberikan ruang bagi sel untuk  menempel  dan  tumbuh  menjadi  suatu  jaringan  tulang  baru  (Nair,  et  al.,  2008).  Kelemahan tersebut  dapat  ditutupi  melalui  pengembangan  komposit  berbasis  hidroksiapatit  melalui penggabungan  dengan  material  polimer  yang  diketahui  memiliki  elastisitas  lebih  baik.  Salah  satu material  yang  dapat  dipadukan  dengan  hidroksiapatit  dalam  pembentukan  perancah  berpori  adalah alginat  (Rasyid,  2004).  Alginat  memiliki  sifat  biokompatibiltas  serta  biodegradabilitas  yang  baik sehingga memungkinkan untuk diaplikasikan dalam perbaikan jaringan (Aufan, et al., 2012).
Di  dalam  artikel  ilmiah  ini,  dilakukan  kajian  naratif  terkatit  pemanfaatan  tulang  ikan  tenggiri sebagai  sumber  kalsium  dalam  sintesis  hidroksiapatit.  Selanjutnya,  hidroksiapatit  hasil  sintesis tersebut dilakukan pemaduan dengan alginate untuk menghasilkan perancah berpori hidroksiapatit/alginate.  Beberapa  aspek  yang  akan  dikaji  meliputi  kandungna  tulang  ikan  tenggiri, komparasi metode sintesis hidroksiapatit serta metode sintesis perancah dengan alginate. Diharapkan melalui  kajian  ini  diperoleh  gambaran  yang  lebih  komprehensif  terkait  potensi  pengembangan perancah hidroksiapatit serta tantangan dan potensi pengembangan selanjutnya.

## KANDUNGAN TULANG IKAN TENGGIRI
Kandidat  limbah  yang  digunakan  dalam  sintesis  hidroksiapaptit  (HAp)  harus  mengandung kalsium yang tinggi karena HAp diekstrak dengan mereaksikan prekusor kalsium dan prekusor posfat (Andika, et al., 2015). Limbah tulang ikan seperti tulang ikan tenggiri, gabus dan tongkol adalah salah satu dari beberapa jenis limbah tulang ikan yang dapat dijadikan prekusor kalsium dalam sintesis Hap karena  kaya  akan  kalsium,  fosfor  dan  karbonat  karbonat  (Anggresani,  et  al.,  2020).  Umumnya kalsium  pada  tulang  ikan  masih  berbentuk  senyawa  kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  sehingga  untuk mendapatkan senyawa CaO diperlukan proses kalsinasi (Wardani, et al., 2015)
Proses  kalsinasi  merupakan  proses  pemecahan  suatu  senyawa  melalui  pemanasan  suhu  tinggi menyebabkan terjadinya reaksi terurainya kalsium  karbonat (CaCO 3 ) menjadi kalsium oksida (CaO) yang  digunakan  sebagai  prekusor  kalsium  (Wardani,  et  al.,  2015)  dengan  reaksi  seperti  pada Persamaan 1.
CaCO 3 → CaO + CO 2
(1)
Reaksi  di  atas  menunjukkan  kalsium  karbonat  terurai  menjadi  kalsium  oksida  dan  karbon  dioksida (CO 2 ), dimana karbon dioksida akan menguap di udara (Mutmainnah, et al., 2017). Berdasarkan  uji  XRF  (Anggresani,  et  al.,  2019)  melaporkan  bahwa  tulang  ikan  tenggiri  hasil kalsinasi  pada  suhu  800ºC  selama  3  jam  menghasilkan  senyawa  CaO  sebesar  50,814%.  Jumlah  ini lebih  besar  dibandingkan  dengan  CaO  dari  limbah  tulang  gabus  dan  tongkol  yaitu  38,20%  dan 31,36% dipaparkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Data kandungan beberapa limbah tulang ikan
Jenis Tulang Ikan Kandungan CaO (%) Referensi Tulang Ikan Tenggiri ( Scomberomorus lineolatus ) 50,814 (Anggresani, et al., 2019) Tulang Ikan Gabus ( Channa striata ) 38,20 (Muryati., et al., 2020) Tulang Ikan Tongkol ( Euthynnus affinis ) 31,36 (Astuti, et al., 2014)
Selain itu, pada tahun 2005, hasil tangkapan ikan tenggiri sudah mencapai 6,2% dari 19.641,60 ton  tangkapan  ikan  diperairan  Kabupaten  Bangka  sehingga  tulang  ikan  tenggiri  berpotensi  menjadi limbah  yang  tak  termanfaatkan  (Sobari  &  Febrianto,  2010).  Dengan  jumlah  limbah  yang  melimpah dan  kandungan  senyawa  CaO  yang  tinggi,  tulang  ikan  tenggiri  berpotensi  untuk  dikembangakan menjadi produk HAp bernilai ekonomis.

## HIDROKSIAPAPTIT BERBASIS LIMBAH TULANG IKAN TENGGIRI
Hidroksiapaptit merupakan salah satu biomaterial yang belakangan ini banyak disentesis  untuk keperluan regenerasi tulang, ortopedi,  implan tulang dan gigi, (Hariyanto & A. Taufiq, 2018) karena tidak beracun, bioaktif, biokompatibel, bioresorbabel, osteokonduktif (Hui, et al., 2010) dan memiliki struktur kristal yang identik dengan tulang  (Ardhiyanto, 2013). Sifat biocompatible dari HAp adalah kemampuan  untuk  menyesuaikan  diri  dengan  tubuh  (Ardabilly,  2013)  dan  tidak  adanya  penolakan oleh jaringan tubuh (Suryadi, 2011). Sifat bioactive dari HAp adalah dapat berikatan dengan jaringan tulang  dan  memberikan  respon  biologis  spesifik  (Dahlan,  2013)  yaitu  dapat  menstimulasi  sel osteoblast untuk membentuk jaringan tulang baru sehingga dapat membantu proses regenerasi tulang (Ardhiyanto, 2013). Hidroksiapatit (HAp)  memiliki rumus  molekul  Ca 5 (PO 4 ) 3 (OH) (Purnama, et al., 2006).  Sintesis  hidroksiapaptit  dapat  diekstrak  dengan  menggunakan  metode  presipitasi  dan  sol  gel dari  prekusor  kalsium  dan  fosfat.  Umumnya  hasil  sintesis  hidroksiapaptit  berupa  serbuk  yang  dapat berupa  kristal  dengan  ukuran  dan  bentuk  yang  berbeda-beda  (Wahl  &  Czernuszka,  2006).  Bentuk struktur dari hidroksiapatit terdiri atas dua yaitu monoklinik dan heksagonal. Namun pada umumnya, HAp yang disintesis dengan bahan alam memiliki struktur heksagonal.
Anggresani,  dkk  (2019)  telah  berhasil  mensintesisi  hidroksiapaptit  dari  limbah  tulang  ikan tenggiri  dengan  menggunakan  metode  sol  gel.  Sintesis  hidroksiapaptit  dilakukan  dengan mencampurkan  atau  mereaksikan  senyawa  CaCl 2 dengan  asam  fosfat  pada  suhu  600 0 C.  Senyawa CaCl 2 didapat  dari  sintesis  bubuk  tulang  ikan  (CaO)  yang  ditambah  HCl  membentuk  endapan  yang dikeringkan pada suhu 120 0 C selama 15 jam. analisis XRD menunjukan bahwa didapatkan senyawa hidroksiapati yang sesuai dengan standar ICSD No 01-074-9780 dengan rumus kimia Ca 5 (PO 4 ) 3 (OH) dengan bentuk kristal hexsagonal seperti pada Gambar 1 pada suhu 600 0 C.
Gambar 1 . Hasil analisis XRD sintesis HAp dari tulang ikan dengan metode sol-gel (Anggresani, et al., 2019)
Selain  melalui  metode  sol-gel,  Anggresani  dkk,  (2020)  juga  telah  berhasil  mensintesis hidroksiapaptit  dari  limbah  tulang  ikan  tenggiri  menggunakan  metode  presipitasi.  Sintesis hidroksiapaptit  dilakukan  dengan  mereaksikan  senyawa  Ca(OH) 2 dengan  prekusor  fosfat  yang  telah diencerkan  menjadi  (NH 4 ).2HPO 4 berdasarkan  rasio  mol  Ca/P  di  sekitar  1,67.  Melalui  hasil  analisi XRD  tampak  bahwa  puncak-puncak  yang  dihasilkan  sesuai  dengan  data  HAp  (ICSD:  No  01-074- 9780)  dan  juga  terdapat  puncak  impuritas  berupa  Ca 3 (PO 4 ) 2 (ICSD:  No.  01073-4869)  seperti ditunjukkan pada Gambar 2.
Gambar 2 . Hasil analisis XRD sintesis HAp dengan metode presipitasi (Anggresani, et al., 2020)
Hasil  analisis  menggunakan  SEM  menunjukan  bahwa  HAp  yang  dihasilkan  dari  ikan  tenggiri memiliki  bentuk  tidak  beraturan  dengan  distribusi  ukuran  partikel  berkisar  antara  0,39-0,479  µm (Anggresani,  et  al.,  2019).  Melalui  komparasi  yang  telah  dilakukan  tampak  bahwa  metode  sol-gel lebih  efektif  untuk  menghasilkan  HAp  dari  ikan  tenggiri  dibandingkan  dengan  metode  presipitasi karena memiliki kemurnian yang lebih tinggi.

## ALGINAT
Alginat  merupakan  produk  pemurnian  karbohidrat  yang  diekstraksi  dari  alga  coklat ( Phaeopyceae )  menggunakan  basa  lemah  (Heru,  et  al.,  2012).  Kemampuan  alginat  untuk  menyerap air  dipengaruhi  oleh  jumlah  ion  karboksilat,  berat  molekul,  dan  pH.  Alginat  juga  memiliki kemampuan  untuk  membentuk  gel,  natrium  dan  kalsium  alginat  dapat  membentuk  film,  sedangkan kalsium alginat dapat membentuk serat (Fehragucci, 2012). Alginat memiliki sifat non-alergenik, non- toksik, dapat terurai menjadi gula sederhana,  dan dapat diabsorpsi bila diaplikasikan di dalam tubuh (Setiadiputri, 2018).
Salah  satu  karakteristik  alginate  dapat  diindikasikan  melalui  FTIR  seperti  ditunjukkan  oleh Gambar  3. Tampak  bahwa  alginate  memiliki  puncak-puncak  yang  berada  pada daerah  sekitar  3500- 3200 cm -1 yang berkaitangugus hidroksil (O-H) yang berikatan dengan hidrogen. Bilangan gelombang 1680-1600 cm -1 menunjukkan adanya gugus karbonil (C=O) sebagai gugus aromatik, 1300 -1000 cm - 1 menunjukkan keberadaan gugus karboksil (C-O). Natrium dalam isomer alginat terletak pada puncak serapan  1614  cm -1 ,  1431  cm -1 .  Puncak  serapan  900-890  cm -1 menunjukkan  dearah  khas  sidik jariguluronat,  sedangkan  850  -810  cm -1 menunjukkan  daerah  khas  sidik  jari  mannuronat  (Anshar  & Wahid, 2013).
Gambar 3 . Hasil analisisFTIR aginat dari alga coklat jenis Sargassum sp (Anshar & Wahid, 2013)

## PERANCAH BERPORI HA/ALGINAT
Pengembangan  perancah  sudah  terfokus  pada  perancah  berpori  dalam  peningkatan  laju pertumbuhan  tulang  (Zhao,  et  al.,  2011).  Pori-pori  pada  perancah  berfungsi  menjadi  ruang  bagi  sel untuk melekat dan bermigrasi serta sebagai tempat untuk suplai nutrisi bagi pertumbuhan sel (Blaker, et  al.,  2005).  Pada  terapi  tulang,  dibutuhkan  ukuran  pori-pori  perancah  sebesar  100-400  μm  agar proses  kolonisasi,  proliferasi  dan  penetrasi  sel  dapat  berjalan  dengan  baik  (Lee  &  Mooney,  2012) (Kim,  et  al.,  2015).  Salah  satu  polimer  yang  diketahui  dapat  membentuk  perancah  berpori  dengan ukuran pori lebih besar dari 100 μm adalah alginat (Han, et al., 2010) yang bersifat biokompatibilitas, tidak beracun, dan harganya yang relatif murah  (Andersen, et al., 2013). Selain itu, alginat memiliki kemampuan minimally  invasive  manner ketika  diterapkan  ke  tubuh,  dapat  mengisi  efek  yang  tak
teratur, dan mendukung proses regenerasi sel (Lee & Mooney, 2012) sehingga dapat digunakan pada proses terapi tulang.
Afriani (2015) telah melakukan penelitian terkait pengembangan perancah berpori hidroksiapatit dengan  alginat  sebagai  porogen  alami.  Proses  sintesis  perancah  HAp  dengan  porogen  alginate dilakukan  dengan  menggunakan  metode freeze-drying .  Hal  ini  dikarenakan  metode freeze-drying dapat  menghilangkan  air  tanpa  proses  pemanasan  yang  dapat  merusak  struktur  polimer.  Selain karakteristik  porinya,  keunggulan  dari  perancah  berbasis  komposit  HAp/alginate  terletak  pada keelastisitasannya seperti ditunjukkan pada Gambar 4.
Gambar 4. (a) bentuk 3D perancah berpori berbasis HA/alginat dan (b) sifat elastis perancah berpori (Afriani, 2015)
Melalui  analisis  XRD  tampak  bahwa  perancah  berpori  berbasis  komposit  HAp/ alginate tidak mengalami  perubahan  fasa  yaitu  tetap  dalam  bentuk  HAp.  Hal  ini  juga  menunjukkan  bahwa  HAp tidak  bereaksi  dengan  alginate  secara  kimia.  Namun  berdasarkan  analisis  menggunakan  FTIR diketahui  bahwa  dalam  perancah,  selain  muncul  gugus  yang  berkaitan  dengan  HAp  juga  muncul gugus yang berkaitan dengan alginate.
Secara  lebih  detail  morfologi  pori  perancah  HAp/alginat  ditunjukkan  oleh  hasil  karakterisasi SEM  seperti  yang  ditunjukkan  pada  Gambar  5. Melalui  hasil  analisis  SEM  tampak  bahwa  perancah HAp/alginat  memiliki  pori  yang  saling  terinterkoneksi  meskipun  ukurannya  yang  cenderung  tidak seragam  dan  tidak  teratur.  Selain  karena  digunakan  metode  freeze-drying  untuk  membentuk  pori, hasil ini  kemungkinan disebabkan oleh gumpalan-gumpalan alginat yang saling bertumpuk. Adapun ukurna pori rata-rata perancah HAp/alginate berkisar 103 μm dengan porositas 70%. Oleh karena itu, maka dapat dinyatakan bahwa penggunaan alginat sebagai porogen perancah HAp/alginate memiliki prosepek  yang  menjanjikan  karena  telah  memenuhi  persyaratan  ukuran  ideal  pori  suatu  perancah untuk proses terapi tulang dalam dunia medis.
(a) (b)
Gambar 5 . Morfologi SEM perancah komposit HA/alginat (Afriani, 2015)

## TANTANGAN DAN PENGEMBANGAN SELANJUTNYA
Tantangan  yang  mungkin  ditemui  ketika  perancah  HAp/alginate  berbasis  tulang  ikan  tenggiri akan diaplikasikan secara luas diantaranya adalah (i) kemungkinan masih terdapatnya unsur pengotor dalam serbuk HAp yang disintesis karena umumnya material yang disintesis dari bahan alam bersifat kompleks. Keberadaan unsur pengotor tersebut dikhawatirkan dapat mengganggu proses terapi tulang. Oleh karena itu diperlukan berbagai pengujian terutama yang terkait dengan pengujian in-vivo dan in- vitro untuk menjamin bahwa perancah yang dihasilkan aman dan mempercepat proses terapi tulang; (ii) proses pembentukan pori melalui metode freeze-drying selain dipengaruhi oleh jenis porogen juga dipengaruhi oleh sifat fisis slurry terutama yang berkaitan dengan kekentalan atau viskositas. Apabila slurry terlalu encer maka perancah tidak akan terbentuk namun apabila terlalu pekat maka pori yang
terbentuk  menjadi  tidak  optimal;  (iii)  Sifat  keelastisitasan  perancah  HAp/alginate  dipengaruhi  oleh rasio  HAp  dan  alginate  yang  digunakan.  Dengan  demikian,  dibutuhkan  suatu  pengujian  yang  dapat menyatakan hubungan eksplisit rasio HAp dan alginate sehingga dapat disesuaikan dengan kebutuhan pasien.

## KESIMPULAN
Tulang  ikan  tenggiri  menghasilkan  kandungan  CaO  sekitar  50.814,  sehingga  tulang  ikan tenggiri lebih cocok dan berpotensi untuk dijadikan bahan dasar hidroksiapatit dengan menggunakan metode sol-gel. Secara morfologi penambahan porogan alginat menghasilkan perancah dengan ukuran pori-pori  yang  merata  dengan  porositas  70%  sehingga  HAp  dengan  alginat  sebagai  bider  alami berpotensi menjadi material yang bisa diaplikasikan pada terapi tulang dalam dunia medis.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  didanai  oleh  Kementerian  Pendidikan  dan  Kebudayaan  –  Direktorat  Jenderal Pendidikan  Tinggi  melalui  skema  Program  Kreativitas  Mahasiswa  Bidang  Penelitian  Eksakta  tahun 2020 (PKM-PE 2020).

## DAFTAR PUSTAKA
Afriani,  F.  (2015). Perancah  Berpori  Hidroksiapatit  dan  β-Tricalcium  Phosphate  dari  Limbah Cangkang Telur Ayam dengan Porogen Alginat. Tesis, Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Andersen, T.  et al. (2013).  Alginates  as  Biomaterials  in  Tissue  Engineering. Journal  Carbohydrate, 37(1), pp. 227-258.
Andika, R., Fadli, A. & Irdoni, H. (2015). Pengaruh Waktu Ageing dan Kecepatan Pengadukan Pada Sintesis  Hidroksiapatit  dari  Cangkang  Telur  dengan  Metode  Presipitasi. JOM  FTEKNIK, 2(1), pp. 1-8.
Anggresani, L., P., S. & Rahayu, I. (2019). Limbah Tulang Ikan Tenggiri (Scomberomorus guttatus) Sebagai Sumber. Jurnal Katalisator, 4(2), pp. 133-140.
Anggresani,  L.,  Perawat,  S.,  Diana,  F.  &  Sutrisno,  D.  (2020).  Pengaruh  Variasi  Perbandingan  Mol Ca/P  Pada  Hidroksiapatit  Berpori  Tulang  Ikan  Tenggiri  (Scomberomorus  guttatus). Jurnal Farmasi Higea, 12(1), pp. 55-64.
Anshar,  A.  M.  &  Wahid,  W.  A.  (2013).  Daya  Hambat  Ekstrak  Na-Alginat  dari  Alga  coklat  jenis Sargassum sp. Terhadap proses penanganan buah mangga.
Ardabilly,  T.  (2013). Sintesis  Hidroksiapatit  Berbasis  Limbah  Cangkang  Keong  Sawah  (Bellamya javanica) dan Modifikasi Pori Menggunakan Gelatin Skripsi, Bogor: IPB.
Ardhiyanto,  H.  (2013). Sintesis  dan  Karakterisasi  Hidroksiapatit  dari  Kalsit  Puger  Kabupaten Jember Sebagai Material Bone Graft, Jember: Universitas Jember.
Astuti, P., Anita, S. & Hanifah, T. (2014). Potensi Abu dari Tulang Ikan Tongkol Aebagai Absorben Ion Mangan Dalam Larutan, Pekanbaru: Universitas Riau.
Aufan,  M.  et  al.  (2012).  Sintesis  Scaffold  Alginat-Kitosan-Karbonat  Apatit  Sebagai  Bone  Graft Menggunakan Metode Freeze Drying. Jurnal Biofisika, 8(1), pp. 16-24.
Azis,  Y.,  Jamarun,  N.  &  Arif,  S.  (2014). Sintesis  Hidrotermal  Bio-Keramik  Hidroksiapatit  dari Terumbu Karang Sumatera Barat. s.l., Prosiding SEMIRATA Bidang MIPA BKS-PTN.
Blaker, J. et al. (2005). Mechanical properties of highly porous PDLLA/Bioglass® composite foams as scaffolds for bone tissue engineering. Acta biomaterialia, 1(6), pp. 634-652.
Dahlan,  K.  (2013).  Potensi  Kerang  Ranga  sebagai  Sumber  Kalsium  dalam  Sintesis  Biomaterial Substitusi Tulang. Prosiding SEMIRATA 2013, 1(1).
Darwis,  D.  &  Warastuti,  Y.  (2008).  Sintesis  dan  Karakterisasi  Komposit  Hidroksiapaptit  (HA)
Sebagai Graft Tulang Sintetik. Jurnal Ilmiah Aplikasi Isotop dan Radiasi, 4(2), pp. 143-153.
Fehragucci, H. (2012). Pengaruh Penambahan Plas tictize dan kitosan terhadap karakter Edidle Film Ca-ALginat, Surakarta: Univeritas Negeri Surkarta.
Han,  J.  et  al.  (2010).  Alginate  Chitosan/Hydroxyapatite  Polyelectrolyte  Complex  Porous  Scaffolds. International Journal of Biological, 46(2), pp. 199-205.
Hariyanto,  Y.  &  A.  Taufiq,  S.  (2018).  Sintesis,  Karakterisasi  Struktur  dan  Sifat  Optik  Nanopartikel Hidroksiapatit/Magnetit. Journal of Physical Science and Engineering, 3(1), p. 16–24.
Heru,  C.,  Marcelinus,  C.  &  Nur,  R.  (2012).  Pengaruh  Coating  AlginateChitosan  terhadap Pertumbuhan Mikroba pada buah melon kupasan. 1(175-178).
Hui,  P.  et  al.  (2010).  Synthesis  of  Hydroxyapatite  Bio  Ceramic  Powder  by  Hydrothermal  Method. Journal of Minerals & Materials Characterization & Engineering, 9(8), pp. 683-692.
Kim, H. et al. (2015). Preparation and Characterization of Nano-sized Hydroxyapatite/Alginate/Chitosan  Composite  Scaffold  for  Bone  Tissue. Journal  Materials Science and Engineering, 54(1), pp. 20-25.
Kolk, A. et al. (2012). Current trends and future perspectives of bone substitute materials–from space holders to innovative biomaterials. Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery, 40(8), pp. 706-718.
Lee,  K.  &  Mooney,  D.  (2012).  Alginate:  Properties  and  BiomedicalAlginate. Journal  Progress  in Polymer Science (Oxford), 37(1), pp. 106-126..
Lins,  L.  et  al.  (2003).  The  Influence  of  Hydroxyapatite  on  bone  Healing  in  Titanium  Implants  as Shown  by  Scanning  Electron  Microscopy. Brazilian Journal  of Morphological Sciences, 20(1), pp. 25-29.
Murniyati,  D.  &  Peranginangin,  R.  (2014). Teknik  Pengolahan  Tepung  Kalsium  Dari  Tulang  Ikan Nila, Jakarta: Penebar Swadaya.
Muryati.,  Hariani.,  P.  &  Said,  M.  (2020).  Analisis  Kadar  Kalsium  Limbah  Tulang  Ikan  Gabus (Channa  striata)  dan  Ikan  Tenggiri  (Scomberomorus  lineolatus). Unbara  Environment Enginering Journal, 1(1), pp. 21-27.
Mutmainnah,  M.,  Chadijah,  S.  &  Rustiah,  W.  (2017).  Hidroksiapatit  dari  Tulang  Ikan  Tuna  Sirip Kuning (Tunnus albacores) dengan Metode Presipitasi. Al-Kimia, 5(2), pp. 119-126.
Nair, M., Babu, S., Varma, H. & John, A. (2008). A triphasic ceramic-coated porous hydroxyapatite for tissue engineering application. Acta Biomaterialia, 4(1), pp. 173-181.
Prabakaran, K., Balamurugan, A. & Rajeswari, S. (2005). Development of calcium phosphate based apatite from Hen’s eggshell. Bulletin of Materials Science, 28(2), pp. 115-119.
Purnama,  E.  F.,  Nikmatin,  S.  &  Langenati,  R.  (2006).  Pengaruh  suhu  reaksi  terhadap  derajat kristalinitas  dan  komposisi  hidroksiapatit  dibuat  dengan  media  air  dan  cairan  tubuh  buatan (synthetic body fluid). Jurnal Sains Materi Indonesia, pp. 154-159.
Rasyid, A. (2004). Berbagai manfaat algae. Jurnal Kelautan (Oseana), XXIX(3), pp. 9-15.
Sedyono,  J.  &  Tontowi,  A.  (2008). Proses  Sintesis  dan  Karakterisasi  FTIR  Hidroksiapatit  dari Gipsum Alam Kulon Progo, Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada.
Setiadiputri,  J.  (2018). Sintesis  dan  Karakterisasi  Biokomposit  Hidrosiapatit-Alginat  Zinc  sebagai Bone Graf untuk penanganan Bone, Surabaya: Univeritas Airlangga.
Sobari, M. & Febrianto, A. (2010). Kajian Bio-Teknik Pemanfaatan Sumber Daya Ikan Tenggiri dan Distribusi  Pemasaranya  Dikabypaten  Bangka. Jurnal  Teknologi  Perikanan  dan  Kelautan, 1(1), pp. 15-29.
Sopyan,  I.,  Mel,  M.,  Ramesh,  S.  &  Khalid,  K.  (2007).  Porous  hydroxyapatite  for  artificial  bone applications. Science and Technology of Advanced Materials, 8((1-2)), pp. 116-123.
Suryadi. (2011). Sintesis dan Karakterisasi Biomaterial Hidroksiapatit dengan Proses Pengendapan Kimia Basah, Depok: Universitas Indonesia.
Trilaksani, W., Salamah, E. & Nabil, M. (2006). Pemanfaatan limbah tulang ikan tuna (Thunnus sp.) sebagai  sumber  kalsium  dengan  metode  hidrolisis  protein. Jurnal  Pengolahan  Hasil  Perikanan Indonesia, 9(2), pp. 36-45.
Triono,  P.  &  Murinto.  (2015).  Aplikasi  Pengolahan  Citra  untuk  Mendeteksi  Fraktur  Tulang  dengan Metode Deteksi Tepi Canny. Jurnal Informatika Ahmad Dahlan, 9(2), pp. 1115-1123.
Tripathi,  G.  &  Basu,  B.  (2012).  A  porous  hydroxyapatite  scaffold  for  bone  tissue  engineering: Physico-mechanical and biological evaluations. Ceramics International, 38(1), pp. 341-349.
Wahl,  D.  &  Czernuszka,  J.  (2006).  Collagen  Hydroxyapatite  Composites  for  Hard  Tissue  Repair. European Cell and Materials, 11(1), pp. 43-56.
Wardani,  N.,  Fadli,  A.  &  Irdoni,  I.  (2015).  Sintesis  Hidroksiapatit  dari  Cangkang  Telur  dengan Metode Presipitasi. JOM FTEKNIK, 2(1), pp. 1-6.
Zhao, K., Tang, Y., Qin, Y. & Luo, D. (2011). Polymer template fabrication of porous hydroxyapatite scaffolds with interconnected spherical pores. Journal of the European Ceramic Society, 31((1- 2)), pp. 225-229.