## CURRENT BIOCHEMISTRY
ISSN: 2355-7877 e-ISSN: 2355-7931 Journal homepage: http://journal.ipb.ac.id/index.php/cbj Journal E-mail: current.biochemistry@gmail.com
The α-Glucosidase Inhibitory Activity of Seed Extract of Mahogany (Swietenia macrophylla King.)
(Aktivitas Inhibisi α-Glukosidase dari Ekstrak Biji Mahoni ( Swietenia macrophylla King.))
Waras Nurcholis 1* , Rini Muthoharoh 2 , Antonius Padua Ratu 2
1 Departemen Biokimia, IPB University, Bogor, 16680, Indonesia
2 Sekolah Tinggi Teknologi Industri dan Farmasi Bogor, Jalan Kumbang No. 23 Bogor, 16151, Indonesia
Received: 8 December 2017; Accepted: 25 May 2019
Corresponding author : Waras Nurcholis, Departemen Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB University;  Email: wnurcholis@apps.ipb.ac.id

## ABSTRACT
Diabetes mellitus is a chronic disorder that  affects the metabolism of blood glucose inside the body.  One of the alternative treatments  is  by using traditional  medicine plants, which has  the hypoglycemic effects. Mahogany seed is one of the traditional medicine plants that has been proven to be useful to treat diabetes and has been used for generations. The α-glucosidase activity of the aqueous, 96% ethanolic, the ethyl acetate, and the hexane extracts of mahogany seeds were assayed by  measuring  p-nitrofenol  from  p-nitrofenil-α-D-glukopiranosida  (pNPG)  on  400  nm.    The percentage  value  of  the  inhibition  for  α-glucosidase  ranged  from  6.36-56.77  %,  with  the  96  % ethanol  extract  showed  the  highest  value  and  the  hexane  extract  with  the  lowest  value. Phytochemical screening revealed the presence of alkaloids, flavonoids, saponins and triterpenoid, which could be responsible for the bioactivities shown by the 96 % ethanolic and aqueous extract of S. macrophylla.
Keywords: α-Glucosidase, Diabetes mellitus, Phytochemical screening, Swietenia macrophylla King.

## ABSTRAK
Diabetes  melitus  adalah  suatu  gangguan  kronis  yang  khususnya  menyangkut  metabolisme glukosa  di  dalam  tubuh.  Salah  satu  alternatif  penanggulangannya  adalah  dengan  menggunakan tanaman obat  tradisional  yang mempunyai  efek  hipoglikemia.  Biji mahoni merupakan  salah satu tanaman  obat  tradisional  yang  terbukti  dapat  menanggulangi  penyakit  diabetes  dan  telah digunakan secara turun menurun.  Ekstrak air, etanol 96 %, etil asetat dan heksan dari biji mahoni (Swietenia  macrophylla  King.)  diperiksa  aktivitas  inhibisi  α-glukosidasenya  dengan  mengukur  p- nitrofenol dari p-nitrofenil-α-D-glukopiranosida (pNPG) pada 400 nm. Nilai persen inhibisi untuk
α-glukosidase berkisar 6.36-56.77 %, dengan ekstrak etanol 96 % yang memiliki nilai tertinggi dan ekstrak  heksan  menunjukkan  nilai  terendah.  Skrining  fitokimia  menunjukkan  adanya  alkaloid, flavonoid,  saponin  dan  triterpenoid,  yang  diduga  berperan  dalam  bioaktivitas  yang  ditunjukkan oleh ekstrak etanol 96 % dan ekstrak air dari  S. macrophylla.
Keywords : α-Glukosidase, Diabetes mellitus, Penapisan fitokimia, Swietenia macrophylla King.

## 1. PENDAHULUAN
Diabetes  melitus,  penyakit  gula  atau kencing  manis  adalah  suatu  gangguan  kronis yang  khususnya  menyangkut  metabolisme glukosa di dalam tubuh. Rata-rata 1.5-2 % dari seluruh  penduduk  dunia  menderita  penyakit diabetes  yang  bersifat  menurun.  Jumlah penderita  diabetes  di  Indonesia  menurut  data WHO  pada  tahun  2009  mencapai  8  juta  jiwa dan  diprediksi  akan  meningkat  menjadi  lebih dari  21  juta  jiwa  pada  tahun  2025,  itu  yang membuat  Indonesia  menempati  peringkat empat  negara  dengan  jumlah  penderita diabetas terbanyak di dunia (Paramita 2010).
Diabetes merupakan sindrom metabolit yang ditandai dengan hiperglikemia, perubahan  metabolisme  lipid,  karbohidrat  dan protein  dan  peningkatan  resiko  komplikasi penyakit  pembuluh  darah  (Gilman  2007). Diabetes  melitus  disebabkan  oleh  kekurangan hormon  insulin  yang  menyebabkan  glukosa bertumpuk di dalam darah (hiperglikemia) dan akhirnya  diekskresikan  lewat  kemih  tanpa digunakan,  yang  disebut  juga  dengan  istilah glycosuria (Tjay dan Rahardja 2007). Hiperglikemia  timbul  karena  penyerapan glukosa  ke  dalam  sel  terhambat  serta metabolismenya  terganggu.  Dalam  keadaan normal,  kira-kira  50  %  karbohidrat  yang dikonsumsi mengalami metabolisme sempurna menjadi  CO 2 dan  air,  5  %  diubah  menjadi glikogen  dan  kira-kira  30-40  %  diubah menjadi  lemak,  pada  diabetes  semua  proses tersebut  terganggu  (Handoko  dan  Suharto 1995).  Penderita  diabetes  melitus  dapat mengalami  ketoasidosis  yang  menyebabkan penderita  pingsan  (Tjay  dan  Rahardja  2007).
Pada  hiperglikemia  yang  berkepanjangan dapat mengakibatkan mikroangiopati, retinopati, proteinuria, hipertensi, gagal ginjal, infark miokard (Silbernagl dan Lang 2006).6). Sebagian  penderita  diabetes  juga  dapat mengalami  stroke  dan  impotensi  pada  pria (Jhonson 1998).
Penyakit  diabetes  melitus  memerlukan pengobatan  jangka  panjang  dan  biaya  yang mahal, sehingga perlu mencari obat antidiabetes yang relatif murah dan terjangkau masyarakat.    Sebagai  salah  satu  alternatif adalah  dengan  melakukan  penelitian  tentang obat  tradisional yang  mempunyai  efek hipoglikemia. Pada tahun 1980 WHO merekomendasikan  agar  dilakukan  penelitian terhadap tanaman yang memiliki efek menurunkan kadar gula darah karena pemakaian  obat  kurang  aman  (Kumar et  al. 2005).    Salah  satu  mekanisme  pengobatan diabetes  melitus  yaitu  melalui  penghambatan enzim  α-glukosidase  yang  memecah  molekul pati menjadi molekul glukosa.
Mahoni merupakan salah satu tanaman kayu  yang  banyak  ditanam  di  tepi  jalan sebagai pohon pelindung.  Pohon mahoni bisa mengurangi  polusi  udara  sekitar  47-69  % sehingga  disebut  sebagai  pohon  pelindung sekaligus  filter  udara  dan  daerah  tangkapan air.  Kulit  kayu  mahoni  sudah  banyak digunakan  sebagai  pewarna  pakaian,  meubel, pembuatan  perabot  kayu,  hiasan  interior  serta ukiran  (Suhesti et  al. 2007).  Penelitian mengenai  efek  farmakologis  dari  bagian tumbuhan  mahoni  telah  banyak  dilakukan. Biji  mahoni  merupakan  salah  satu  bagian tumbuhan  yang  banyak  diteliti  dalam  bidang
pengobatan.  Biji  mahoni  terbukti  aktivitasnya sebagai  antipiretik,  antijamur,  menurunkan tekanan  darah  tinggi  (hipertensi),  kencing manis (diabetes melitus), kurang nafsu makan, rematik,  demam,  masuk  angin,  dan  eksim (Hariana 2007).
Menurut  Raja  (2008),  ekstrak  etanol biji  mahoni  memberikan  efek  menurunkan kadar gula darah pada tikus putih. Berdasarkan  hal  tersebut, peneliti  tertarik untuk  mencari  tahu  lebih  jauh  manfaat  biji mahoni yang sudah sering digunakan masyarakat untuk mengobati berbagai penyakit.    Namun,  tidak  banyak  yang mengetahui bahwa biji mahoni dapat dijadikan sebagai alternatif pengobatan untuk menurunkan  kadar  gula  darah  yang  relatif murah dan mudah didapat. Untuk membuktikan  adanya  aktivitas  ekstrak  biji mahoni  dalam  menanggulangi  diabetes,  maka perlu dilakukan penelitian terhadap ekstrak biji mahoni  dalam  menurunkan  kadar  gula  darah. Salah  satu  mekanisme  kerja  ekstrak  biji mahoni yaitu menghambat enzim α- glukosidase  sehingga  akan  memperlambat proses pencernaan karbohidrat menjadi glukosa. Oleh karena itu tujuan dari penelitian ini  adalah  mengevaluasi  daya  inhibisi  ekstrak air, ekstrak etanol 96 %, ekstrak etil asetat dan ekstrak  heksana  dari  biji  mahoni  dalam menginhibisi  enzim  α-glukosidase  secara in vitro.

## 2. METODOLOGI
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  Biji  mahoni  berasal  dari kebun  perhutani  Konservasi  Sumberdaya Hutan  (KSH)  Sukabumi,  Akuades,  etanol  96 %,  etil  asetat,  heksan,  asam  asetat  anhidrat, H 2 SO 4 pekat,  pereaksi  Lieberman-Buchard, kloroform,  pereaksi  Meyer,  Wagner  dan Dragendorf, amil alkohol, HCl pekat, H 2 SO 4 2 M,  eter  ,  serbuk  magnesium  (Mg),  larutan FeCl 3 1  %,  α-glukosidase  (Sigma  G  3651- 250UN), p- nitrofenil  α-D-glukopiranosida
( p NPG)  (Sigma  N  1337-5G),  tablet  Glucobay (Akarbosa)  (Bayer,  Jakarta-Indonesia),  HCl  2 N, Dimetilsulfoksida (DMSO), Larutan Na 2 CO 3 , Serum Bovin Albumin (SBA), buffer fosfat pH 7.
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  adalah  alat-alat  ekstraksi,  neraca analitik,  alat-alat  kaca,  penguap  putar  ( rotary evaporator )  (BUCHI,  R-250,  Switzerland), perangkat instrumen microplate reader (Epoch Microplate  Spectrophotometer), microplate (Thermo  Scientific  NUNC) dan micropipet (Thermo Scientific).

## Preparasi sampel
Serbuk  biji  mahoni  disiapkan  dari  biji mahoni  yang  sudah  tua,  dengan  ciri  kulit luarnya  dari  buah  berwarna  keabu-abuan  dan kulit biji terluarnya berwarna coklat tua.  Buah tersebut  dipanen  dari  kebun  perhutani  KSH Sukabumi.  Buah  yang  sudah  dipisahkan  dari kulitnya  kemudian  dijemur  selama  kurang lebih  3-4  hari.    Biji  yang  sudah  dikupas kulitnya  diuji  kadar  airnya.  Bila  kadar  airnya sudah  dibawah  10  %  maka  dapat  langsung diiris  dan  dihaluskan  dengan  blender  dan disaring  dengan  ukuran  60  mesh  hingga diperoleh  simplisia  biji  mahoni  berbentuk serbuk .

## Gambar 1 Persiapan simplisia biji  Mahoni

## Penetapan  susut  pengeringan  (Departemen
Kesehatan RI 1995)
Cawan  porselin  dikeringkan  pada  suhu 105 o C selama 30 menit lalu dikeringkan dalam deksikator  dan  ditimbang.    Sebanyak  5  gram sampel  biji  mahoni  yang  sudah  halus dimasukkan  dalam  cawan  dan  dipanaskan
pada  suhu  105 o C  selama  6  jam  sampai diperoleh bobot konstan, kemudian didinginkan dalam deksikator dan ditimbang.

## ( )

## Keterangan:
A adalah bobot sampel (g) B adalah bobot sampel setelah dikeringkan (g)

## Penyiapan ekstrak kasar
Sebanyak  10  gram  simplisia  biji mahoni  dimaserasi  dengan  pelarut  akuades, etanol  96  %,  etil  asetat,  dan  heksan  masing- masing  sebanyak  100  mL  selama  2  hari  pada suhu  kamar  di  dalam  maserator.    Rendaman disaring  menggunakan kertas  saring halus  dan filtratnya disimpan.  Residu direndam kembali dalam pelarut yang sama selama 1 hari hingga diperoleh  filtrat  yang  tidak  berwarna.  Filtrat yang  diperoleh  dijadikan  satu  kemudian dipekatkan  dengan  penguap  putar  (rotavapor) sehingga  diperoleh  ekstrak  (air,  etanol  96  %, etil  asetat,  dan  heksan).  Ekstrak  yang  telah dipekatkan  selanjutnya  dianalisis  kandungan senyawa aktifnya dengan uji fitokimia dan uji aktivitas inhibisi α-glukosidase.
en emen obot ekstrak obot simplisia 1   %

## Uji fitokimia (Harborne 1987)
Uji  flavonoid. Sebanyak  100  mg ekstrak  biji  mahoni  ditambahkan  10  mL  air kemudian  dididihkan  selama  5  menit  dan disaring.    Sebanyak  5  mL  filtrat  ditambahkan 0,5  mg  serbuk  magnesium  (Mg),  1  mL  HCl pekat dan 1 mL alkohol 96 % (1:1), dan 1 mL amil  alkohol.  Campuran  dikocok  kuat-kuat. Uji  positif  ditandai  dengan  munculnya  warna merah,  kuning,  atau  jingga  pada  lapisan  amil alkohol.
Uji  saponin. Sebanyak  100  mg ekstrak  biji  mahoni  ditambahkan  10  mL  air kemudian  dididihkan  selama  5  menit  lalu disaring.  Sebanyak 5 mL filtrat dikocok dalam
tabung  reaksi  tertutup  selama  10  detik  untuk kemudian  dibiarkan  10  menit.    Adanya saponin ditunjukkan dengan terbentuknya buih stabil.
Uji  tanin. Sebanyak  100  mg  ekstrak biji  mahoni  ditambahkan  10  mL  air  dan dididihkan  selama  5  menit  lalu  disaring. Filtrat  ditambahkan  FeCl 3 1%.    Uji  positif ditandai  dengan  munculnya  warna  hijau kehitaman.
Uji  triterpenoid  dan  steroid. Uji  ini menggunakan  pereaksi  Lieberman-Buchard. Pada  pengujian  ini,  sebanyak  100  mg  ekstrak biji  mahoni  dimaserasi  dengan  10  mL  etanol 96  %,  disaring  kemudian  residu  dipanaskan sampai pelarut menguap sempurna, dan residu ditambahkan  3  tetes  eter.    Kemudian ditambahkan 3 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes  asam  sulfat  pekat  secara  berurutan. Larutan  dikocok  perlahan  dan  dibiarkan beberapa  menit.    Uji  positif  ditandai  dengan terbentuknya  warna  merah  atau  ungu  untuk triterpenoid serta hijau atau biru untuk steroid.
Uji  alkaloid. Sebanyak  100  mg ekstrak biji mahoni dilarutkan dengan    10 mL kloroform dan 5 tetes NH 4 OH dan disaring ke dalam  tabung  reaksi  tertutup.    Ekstrak kloroform  dalam  tabung  reaksi  dikocok dengan  penambahan  10  tetes  H 2 SO 4 2  M kemudian lapisan asamnya dipindahkan kedalam  tabung  reaksi  yang  lain.    Lapisan asam  ini  diteteskan  pada  pelat  tetes  dan ditambahkan  pereaksi  Meyer,  Wagner,  dan Dragendorf  yang  akan  menimbulkan  endapan warna  berturut-turut  putih,  coklat,  dan  merah jingga.

## Uji inhibisi α-glukosidase (Sutedja 2003)
Analisis inhibisi α-glukosidase digunakan untuk mempelajari aktivitas antidiabetes pada sampel uji. Pada analisis ini, α-glukosidase  akan  menghidrolisis  substrat p NPG  menjadi  glukosa  dan p -nitrofenol  yang berwarna  kuning.    Adanya  sampel  yang ditambahkan  ke  dalam  campuran  substrat
diharapkan  sampel  tersebut  akan  menghambat kerja  enzim  sehingga  akan  mengurangi terbentuknya  glukosa  dan  intensitas  warna kuning yang terbentuk.
Sebanyak 1 mg α-glukosidase dimasukkan  dalam  10  mL buffer fosfat  100 mM  (pH  7)  kemudian  ditambahkan  20  mg Serum  Bovine  Albumin  (SBA)  yang  telah dilarutkan dalam buffer fosfat 100 mM (PH 7).
Sebelum  digunakan  larutan  enzim  tersebut diencerkan  25  kali  dengan buffer fosfat  100 mM  (pH  7).    Campuran  reaksi  terdiri  atas  50 µL larutan buffer fosfat 100 mM (pH 7), 50 µL larutan sampel dalam dimetilsulfoksida (DMSO)  dan  25  µL  pNPG  20  mM  sebagai substrat.  Campuran reaksi diinkubasi selama 5 menit pada suhu 37 o C dan ditambahkan 25 µL larutan  α-glukosidase  kemudian  diinkubasi selama  15  menit  pada  suhu  37 o C.    Reaksi enzim dihentikan dengan penambahan 100 µL Na 2 CO 3 . p- nitrofenol  yang  dihasilkan  dibaca absorbannya  dengan microplate  reader pada panjang  gelombang  400  nm.    Sampel  yang diuji dilarutkan dalam DMSO dengan konsentrasi  5  %  b/v.    Tablet  Glucobay (Akarbosa) dilarutkan dalam buffer dan HCl 2 N  (1  :  1)  dengan  konsentrasi  1  %  b/v  sebagai kontrol  positif,  endapan  dikumpulkan  dengan pemusingan  dan  supernatannya  sebanyak  10 µL  diencerkan  dengan  100  ml buffer fosfat 100 mM pH 7, sebanyak 50 µL dimasukkan ke dalam  campuran  reaksi  seperti  pada  sampel. Sampel  dan  kontrol  positif  dilakukan  dua  kali ulangan  (duplo).    Data  kontrol  positif digunakan sebagai pembanding dengan sampel yang diuji.
% inhibisi S 1   %
Keterangan:
S  =  absorbansi sampel (S 1 -S 0 ) S 1 =  absorbansi sampel dengan penambahan enzim
S 0 =  absorbansi sampel tanpa enzim C  =  absorbansi larutan kontrol (DMSO), tanpa sampel (kontrol-blanko).

## Analisis data
Data  aktivitas  inhibisi  α-glukosidase yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini  dianalisis secara  statistik  menggunakan  ANOVA  yaitu RAL  (Rancangan  Acak  Lengkap)  satu  faktor dengan  dua  kali  ulangan  pada  tingkat kepercayaan  95  %  dan  taraf  α  0.05  dan kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  DUNCAN. Semua  data  dianalisis  menggunakan  program Minitab 14.  Model rancangan tersebut:
Y ijk Y ijk = nilai pengamatan faktor suhu taraf ke-i faktor cutting taraf ke-j dan ulangan ke-j μ   = rataan umum
= pengaruh utama sampel ke -i ε ij = pengaruh acak yang menyebar normal

## 3. HASIL
Pada proses awal simplisia biji mahoni sebanyak  10  gram  diekstraksi  dengan  cara maserasi. Maserasi dilakukan dengan menggunaan  pelarut  air,  etanol  96  %  ,  etil asetat dan heksan selama 2x24 jam dengan dua kali  penyaringan,  dilakukan  tiga  kali  ulangan. Ekstrak  yang  diperoleh  kemudian  dipekatkan untuk menguapkan sisa pelarut yang digunakan  sehingga  diperoleh  ekstrak  kental berwarna  coklat  gelap  untuk  ekstrak  air, ekstrak  kental  berwarna  coklat  terang  untuk ekstrak  etanol  96  %  yang  cenderung  lebih kering  dari  ekstrak  air,  ekstrak  etil  asetat berwarna  putih  yang  hampir  menyerupai serbuk  garam  meja  dan  ekstrak  heksan  yang berwarna kuning khas minyak. Pada umumnya pemekatan dengan rotary evaporator dilakukan  pada  suhu  50-55 o C.    Niai  rata-rata rendemen ekstrak dapat dilihat pada gambar 2.
Persentase  rendemen  tertinggi  51.2  % ± 2.59 ditunjukkan oleh ekstrak heksan diikuti oleh ekstrak etil asetat, ekstrak air dan ekstrak etanol  96  %  dengan  nilai  50.92  %  ±  2.69  ; 13.36  %  ±  1.90  dan  12.01  %  ±  2.47  (Gambar 2).  Tingginya nilai rendemen yang dihasilkan oleh  ekstrak  heksan  biji  mahoni  kemungkinan
dikarenakan  kandungan  minyak  yang  terdapat pada biji mahoni.
Pengujian  fitokimia  merupakan  uji kualitatif  awal  terhadap  ekstrak  kasar  untuk mengetahui jenis senyawa metabolit sekunder/golongan  senyawa  yang  terkandung pada  ekstrak.  Golongan  senyawa  dalam
ekstrak  dapat  ditentukan  dengan  mengamati perubahan  warna  dan  terbentuknya  endapan setelah  ditambahkan  pereaksi  yang  spesifik untuk  setiap  uji  kualitatif.    Uji  fitokimia ekstrak kasar biji mahoni disajikan pada Tabel 1.
Gambar 2 Nilai rendemen ekstrak air, etanol 96 %, etil asetat dan heksan biji mahoni (Swietenia macrophylla King. )
Tabel 1 Skrining fitokimia dari ekstrak biji mahoni
Sampel Flavonoid Tanin Saponin Alkaloid Steroid Triterpenoid Eks. Air + - + + - - Eks. Etanol 96 % - - + + - + Eks. Et. Asetat - - - + - - Eks. Heksan - - - + - - Keterangan:
+ : mengandung senyawa uji,
-  : tidak mengandung senyawa uji
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  uji fitokimia  ekstrak  air,  etanol  96  %,  etil  asetat dan  heksan  biji  mahoni mengandung  senyawa kimia golongan alkaloid, yang ditandai dengan terbentuknya  endapan  coklat  pada  pereaksi wagner. Sedangkan senyawa golongan saponin ditemukan  pada  ekstrak  air  dan  etanol  96  % ditandai dengan terbentuknya busa tahan lama pada  permukaan  cairan.    Senyawa  golongan flavonoid  hanya  ditemukan  pada  ekstrak  air
biji mahoni ditandai dengan munculnya warna kuning  pada  lapisan  amil  alkohol.    Uji triterpenoid  ditandai  dengan  terbentunya warna  merah  pada  dinding  cawan,  senyawa golongan  triterpenoid  hanya  terdapat  pada ekstrak etanol 96 %.
Uji  inhibisi  terha ap  enzim  α- glukosidase  dilakukan  untuk  mengetahui aktivitas antihiperglikemik dari setiap ekstrak. Pa a  uji  ini  enzim  α-glukosidase  akan
Ekstrak Air ; 13.36
Ekstrak Etanol 96 % ; 12.01 Ekstrak Etil
Asetat ; 50.92
Ekstrak Heksan ; 51.92 R end em en (% )
menghidrolisis substrat p -nitrofenil-α-D- glikopiranosida  menjadi p -nitrofenol  yang berwarna kuning dan glukosa.
Ekstrak  (air,  etanol  96  %,  etil  asetat dan  heksan)  biji  mahoni  dianggap  sebagai inhibitor  α-glukosidase dengan persen inhibisi berada  dibawah  65  %  yang  sebanding  dengan Glukobay (Akarbosa) sebagai senyawa referensi.    Hasil  persentase  inhibisi  α- glukosidase dari ekstrak (air, etanol 96 %, etil asetat  dan  heksan)  biji  mahoni (Swietenia macrophylla King ) ini  seperti  yang  terlihat pada  Gambar  3.  Persentase  inhibisi  α- glukosidase  tertinggi  56.77  %  ±  2.10
ditunjukkan  oleh  ekstrak  etanol  96  %,  diikuti oleh  ekstrak  air  dan  ekstrak  etil  asetat  dengan nilai  inhibisi  45.16  %  ±  5.66  dan  24.84  %  ± 10.55.    Persentase  inhibisi  α-glukosidase terendah ditunjukkan oleh ekstrak heksan 6.36 % ± 2.21.
Berdasarkan analisis statistik diperoleh signifikansi  0.000  <  0.05  yang  berarti perlakuan (jenis sampel) berpengaruh terhadap respon  (daya  inhibisi).  Untuk  mengetahui perbedaan  yang  bermakna  antar  perlakuan maka dilakukan uji beda nyata.  Hasil uji beda nyata antar perlakuan dapat dilihat pada Tabel 2.
Gambar 3 Persentase inhibisi α-glukosidase pada ekstrak (air, etanol 96 %, etil asetat, dan heksan) biji mahoni (Swietenia macrophylla King. ) dibandingkan referensi Glukobay (akarbosa).
Tabel 2 Uji lanjut beda nyata antar perlakuan sampel Sampel Rata-rata ± StDev (kode) Ekstrak Air 45.164 ± 5.656 b Ekstrak Etanol 96% 56.767 ± 2.101 ab Ekstrak Etil Asetat 24.843± 10.551 c Ekstrak Heksan 6.363 ± 2.207 d Glukobay (Akarbosa) 65.762 ± 2.362 a

## Keterangan:
Pada  hasil  diatas  menunjukkan  bahwa  antara  kontrol  Glukobay  (Akarbosa)  dan  ekstrak etanol  96  %  tidak  berbeda  nyata.    Antara  ekstrak  etanol  dengan  ekstrak  air  pun  tidak berbeda  nyata.    Namun  antara  Glukobay  (Akarbosa)  dengan  ekstrak  air  saling  berbeda nyata.    Untuk  ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak  heksan  saling  berbeda  nyata.
Ekstrak Air; 45.16 Ekstrak Etanol 96 %; 56.77 Ekstrak Etil Asetat; 24.84 Ekstrak Heksan; 6.36 Glucobay (Akarbosa); 65.76 % In h ib isi

## 4. PEMBAHASAN
Simplisia  biji  mahoni  memiliki  susut pengeringan sebesar 6.53 % ± 0.53. Pengukuran  susut  pengeringan  merupakan pengukuran kadar air atau banyaknya air yang terdapat  dalam  simplisia.  Pengukuran  susut pengeringan dilakukan sebelum proses ekstraksi.    Menurut  Depkes  (1985)  kadar  air simplisia  sebaiknya  tidak  lebih  dari  10  %. Apabila  kadar  air  lebih  dari  10  %  akan menyebabkan  terjadinya  proses  enzimatik  dan kerusakan yang disebabkan oleh mikroba. Bila simplisia  disimpan  dalam  jangka  waktu  yang lama, enzim akan mengubah kandungan kimia yang telah terbentuk menjadi produk lain yang mungkin tidak lagi memiliki efek farmakologi seperti  senyawa  asalnya.  Hal  ini  tidak  akan terjadi  jika  bahan  yang  telah  dikeringkan memiliki  kadar  air  yang  rendah.    Kadar  air yang  tinggi,  juga  akan  mempengaruhi  proses penyarian  senyawa  aktif  yang  terdapat  pada simplisia  karena  akan  menyebabkan  simplisia yang  tertimbang  sedikit  dan  bila  dilakukan penyarian,  senyawa  aktif  yang  tersari  akan sedikit  juga.    Dengan  demikian  pengujian susut  pengeringan  dari  sampel  biji  mahoni telah memenuhi kriteria pustaka Cara Pembuatan Simplisia (Depkes 1985).
Tingginya nilai rendemen yang dihasilkan  oleh  ekstrak  heksan  biji  mahoni kemungkinan  dikarenakan  kandungan  minyak yang  terdapat  pada  biji  mahoni.  Menurut Harborne  (1987)  ekstraksi  dengan  metode maserasi  menggunakan  prinsip  kelarutan. Prinsip    kelarutan  adalah like  dissolve  like , yaitu  pelarut  polar  akan  melarutkan  senyawa polar,  demikian  juga  sebaliknya  pelarut nonpolar  akan  melarutkan  senyawa  nonpolar. Jadi,  dalam  hal  ini  minyak  yang  bersifat nonpolar  tersari  dalam  pelarut  heksan  yang bersifat  nonpolar.  Pernyataan  lain  mengenai kandungan  minyak  pada  biji  mahoni  telah dikemukakan  oleh  Putra  (2010),  bahwa minyak  biji  mahoni  dapat  digunakan  sebagai bahan  baku  alternatif  biodiesel,  komposisi
asam  lemak  penyusun  minyak  mahoni diantaranya  adalah  asam  palmitat,  asam stearat,  asam  oleat,  asam  linoleat,  dan  asam linolenat.    Kandungan  minyak  biji  mahoni terdiri  dari  beberapa  macam  asam  lemak dengan bobot molekul diatas 200.  Hal tersebut kemungkinan  yang  menyebabkan  ekstrak heksan memiliki persentase rendemen tertinggi. Adanya aktivitas enzim diukur berdasarkan hasil absorbansi p -nitrofenol yang berwarna kuning (Basuki et al, 2002). Dengan adanya  ekstrak  biji  mahoni  yang  berperan sebagai  inhibitor  α-glukosidase  maka p - nitrofenol  yang  dihasilkan  akan  berkurang yang  ditandai  oleh  berkurangnya  intensitas warna kuning. Persentase aktivitas penghambatan  persen  inhibisi  dihitung  dari persamaan  [(C-S)/C]  x  100  %;  dengan  S  = absorbansi  sampel  (S 1 –  S 0 dengan  S 1 , absorbansi  sampel  dengan  penambahan  enzim dan S 0 = absorbansi sampel tanpa penambahan enzim)  dan  C  =  absorbansi  kontrol  (DMSO) tanpa sampel (kontrol-blanko) (Sutedja 2003).
Adanya  aktivitas  inhibisi  terhadap enzim  α-glukosidase  dari  ekstrak  (air,  etanol 96  %,  etil  asetat  dan  heksan)  kemungkinan disebabkan  oleh  adanya  senyawa  metabolit sekunder  yang  berperan  sebagai  antidiabetes diantaranya  senyawa  golongan  triterpenoid, flavonoid  dan  alkaloid  yang  terkandung  di dalam  ekstrak.  Tingginya  persentase  inhibisi pada  ekstrak  etanol  96  %  kemungkinan disebabkan oleh kandungan senyawa metabolit sekunder  yang  terkandung  di  dalamnya  yaitu senyawa  golongan  alkaloid,  saponin  dan triterpenoid. Hal ini sejalan dengan Racmatiah et  al. (2015)  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak etanol  96%  biji  mahoni  mampu  menghambat aktivitas  α-glukosidase  dengan  persentase maksimum  9.129%  (konsentrasi  ekstrak  50 µg/mL).
Sama  halnya  dengan  ekstrak  air  yang memiliki kandungan senyawa golongan alkaloid, flavonoid dan saponin memiliki daya
inhibisi  tidak  berbeda  nyata  dengan  ekstrak etanol  96  %.  Kemungkinan  gabungan  antara senyawa  metabolit  sekunder  yang  bersifat sinergis  yang  terkandung  pada  ekstrak  etanol 95  %  dan  ekstrak  air  menyebabkan  nilai inhibisi  antara  kedua  ekstrak  tersebut  tidak berbeda nyata.  Lain halnya dengan ekstrak etil asetat  dan  ekstrak  heksan  yang  memiliki persen  inhibisi  yang  berbeda  nyata  dengan ekstrak  etanol  96  %,  karena  berdasarkan penapisan  fitokimia  ekstrak  etil  asetat  dan ekstrak  heksan  memiliki  kandungan  senyawa golongan alkaloid saja.
Seperti  yang  telah  dilaporkan  oleh Samson (2010) yang mengidentifikasi senyawa  alkaloid  dari  buah  mahkota  dewa yang  berwarna  merah  memiliki  aktivitas sebagai  inhibitor  α-glukosidase.  Enzim glukosidase  merupakan  enzim  yang  juga digunakan  untuk  mengetahui  potensi  suatu tumbuhan  sebagai  antidiabetes  secara in  vitro dengan  mekanisme  penghambatan.  Senyawa triterpenoid  telah  diketahui  mempunyai  efek farmakologis  yang  signifikan.  Diantaranya sebagai  obat  antidiabetes,  gangguan  kulit, malaria,  antijamur,  insektisida,  antivirus  dan antibakteri  (Robinson  1991).  Ivorra et  al (1989) mengemukakan bahwa senyawa golongan  flavonoid  dan  alkaloid  merupakan senyawa  aktif  yang  telah  diteliti  memiliki aktivitas antihiperglikemik.
Pada  percobaan  ini  yang  digunakan sebagai  kontrol  positif  adalah  Glukobay (Akarbosa).  Meskipun  nilai  persen  inhibisi Glukobay  (Akarbosa)  yang  dihasilkan  tidak berbeda  jauh  dengan  ekstrak  etanol  96  % tetapi  perlu  digarisbawahi  bahwa  dengan konsentrasi  10 -4 %  saja  Glucobay  (Akarbosa) sudah  memiliki  aktivitas  sebagai  inhibitor terha ap  enzim  α-glukosidase,  sedangkan untuk ekstrak etanol 96 % terlihat aktivitasnya sebagai inhibitor terha ap enzim α- glukosidase  pada  konsentrasi  5%.  Selain  itu, akarbosa merupakan senyawa tunggal sedangkan  penelitian  ini  masih  menggunakan
ekstrak  yang  terdiri  atas  lebih  dari  1  senyawa bioaktif.  Untuk  itu  perlu  dikaji  lebih  lanjut mengenai  identifikasi  golongan  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam sampel ekstrak yang berperan sebagai inhibitor α-glukosidase.
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh, dapat  disimpulkan  bahwa  esktrak  biji  mahoni mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin,  dan  triterpenoid.  Ekstrak  etanol  96% dan  ekstrak  air  biji  mahoni  memiliki  potensi sebagai  senyawa  antidiabetes  berdasarkan kemampuannya  menginhibisi  α-glukosidase secara in vitro.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Basuki  T,  Indah  DD,  Nina  A,  dan  LBS Kardono. 2002. Evaluasi  Aktivitas Daya Hambat  Enzim  α-Glukosidase  dari Ekstrak  Kulit  Batang,  Daun,  Bunga  dan Buah  Kemuning [ Murraya  paniculata (L.)  Jack.].  Prosiding  Seminar  Nasional
Tumbuhan Obat Indonesia XXI; Surabaya,  27-28  Maret  2002.  Surabaya: Fakultas  Farmasi  Universitas  Surabaya. hlm 314-318.
DepKes.  1985. Cara  Pembuatan  Simplisia .
Jakarta: Departemen
Kesehatan
Republik Indonesia.
Depkes. 1995. Materia Medika Indonesia Jilid VI.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia.
Gilman AG. 2007. Dasar Farmakologi Terapi. Volume  2.  Jakarta:  Penerbit  EGC.
Halaman 1655, 1670, 1673.
Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan, diterjemahkan  oleh  Kosasih Padmawinata dan Iwan Sudiro. Bandung
Ivorra et  al. 1989.  A  Review  of  natural  and plants  as  potential  antidiabetic  drugs. Journal  of  Ethnopharmacology. 27:243- 275.
Jhonson  M.  1998. Diabetes  Terapi  dan Pencegahannya. Bandung:  Indonesia Publishing House. Halaman 206.
Kumar  EK,  Ramesh  A,  Kasiviswanath  R.
2005. Hypoglicemic and Antihyperglicemic  Effect  of  Gmelina asiatica Linn . In Normal and in Alloxan Induced Diabetic Rats .  Andhra Pradesh: Departemen of Pharmaceutical Sciences. Page 729.
Paramita  D.  2010. Diabetes  Si  Penyakit  Gula
Madu. Diunduh dari http://kumpulan.info/sehat/artikel- kesehatan/48-artikel-kesehatan/271- diabetes-penyakit-gula.html.
Pada tanggal 15 Maret 2012 jam 21.00.
Putra  AK.  2010. Pengolahan  Biji  Mahoni (Swietenia  macrophylla King ) Sebagai
Bahan Baku Alternatif Biodiesel.
[Skripsi].  Bogor:  Departemen  Hasil
Hutan Institut Pertanian Bogor.
Rachmatiah T, Permatasari D, Dewi RT. 2015.
Potensi  antidiabetes  pada  daun,  kulit batang  dan  biji  mahoni  (Swietenia macrophylla  King). Sainstech. 25(2):88- 91.
Raja  LL.  2008. Uji  Efek  ekstrak  etanol  biji
mahoni (Swietenia  mahagoni Jack ) Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah Tikus Putih . [Skripsi]. Medan:
Universitas Sumatera Utara.
Samson  ZM.  2010. Senyawa  Golongan Alkaloid  Ekstrak  Buah  Mahkota  Dewa Sebagai  Inhibitor  Alfa  Glukosidase . [Skripsi].  Bogor  :  Departemen  Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam  Institut  Pertanian Bogor
Sirbenagl  S,  Lang  F.  2006. Teks  dan  Atlat Berwarna  Patofisiologi .  Alih  bahasa: Iwan  Setaiwan,  Iqbal  Mochtar;    Editor
Edisi Bahasa Indonesia: Titiek
Resmisari, Jakarta:  EGC. Halaman 288, 290.
Suhesti  TS,  Kurniawan  DW,  Nuryanti.  2007. Penjaringan  senyawa  Antikanker  Pada Kulit  Batang  Kayu  Mahoni  (Swietenia mahagoni Jack ) dan  Uji  Aktivitasnya Terhadap  Larva  Udang  (Artemia  salina Leach ). Jurnal Ilmiah Kesehatan Keperawatan 3: 155 – 162.
Sutedja  L.  2003. Bioprospecting  Tumbuhan Obat Indonesia Sebagai Sediaan Fitofarmaka Antidiabetes . Laporan Kemajuan  Tahap  II  Riset  Unggulan Terpadu, Pusat Penelitian Kimia-LIPI.
Tjay  TH,  Rahardja  K.  2007. Obat-Obat Penting: Khasiat, Penggunaan dan Efek- efek  samping. Edisi  VI.  Jakarta:    Elex Media  Komputindo.  Halaman  738,  743, 748-749.