## Pembuatan Bioetanol dari Campuran Kulit Nenas dan Pepaya Secara Fermentasi dengan Variasi Massa Ragi Roti
Salian 1 *, Vera Viena 2 , Irhamni 3
1,2,3 Program Studi Teknik Lingkungan Fakultas Teknik Universitas Serambi Mekkah Jl. Tgk Imum Luengbata Batoh, Banda Aceh, Indonesia 23245
* Koresponden email : veraviena@serambimekkah.ac.id Diterima : 24 Januari 2022
Disetujui: 30 April 2022

## Abstract
Fruit peel waste was one of carbohydrate feedstock for producing bioethanol. The research main purpose was analyzing the impact of yeast mass addition in fermentation process of pineapple  and papaya peels mixture (PPPM) for making of bioethanol. The procedure was carried out by adding 10 grams of glucose for each treatment, the yeast Saccharomyces cerevisiae mass varied from 1 to 4 % w/v, and the fermentation time were 24, 48, 72 and 96 hours at temperature 30 0 C. The initial sugar containment was tested by Brix refractometer  and  the  bioethanol  composition  was  characterized  using  Gas  Chromatography-Mass Spectrometry. The initial sugar content of the PPPM starter was range from 3 – 5 %. By addition of yeast weight (1 - 4% w/v), the comparison of bioethanol yield were in range 2 to 5% using hydrometer alcohol and in the range of  3,013–3,403% while using GC-MS. In conclusion, the sugar content of PPPM substrate and yeast starter percentage have significant effect on bioethanol earning.
Keywords : pineapple, papaya peels, fermentation, yeast mass, bioethanol yield

## Abstrak
Limbah kulit buah adalah salah satu sumber bahan baku karbohidrat untuk menghasilkan bioetanol. Tujuan utama  penelitian  ini  adalah untuk  menganalisa  pengaruh  penambahan  massa ragi roti  dalam  pembuatan bioetanol melalui proses fermentasi menggunakan campuran kulit nenas dan pepaya. Prosedur penelitian dilakukan dengan penambahan 10 gram glukosa untuk setiap perlakuan, variasi massa ragi sacharomyces cerevisiae sebesar  1  –  4  %  b/v,  dan  waktu  fermentasi  24,48,72 dan  96  jam  pada  suhu 30 0 C.  Pengujian kadar gula awal dilakukan dengan Brix meter dan komposisi bioetanol dianalisa dengan alat GC-MS. Hasil analisa kadar gula awal starter dari campuran limbah kulit nenas dan pepaya yaitu 3 - 5%. Pada penambahan massa ragi (1-4%) b/v, berturut-turut diperoleh perbandingan yield bioetanol sebesar 2 - 5% menggunakan alat hydrometer alkohol, dan menggunakan GC-MS diperoleh yield sebesar 3,013 – 3,403%. Kesimpulan penelitian  adalah  kadar  gula  dari  substrat  campuran  kulit  nenas  dan  pepaya  dan  persentase  ragi  starter berpengaruh signifikan terhadap rendemen bioetanol.
Kata Kunci : kulit nenas, kulit pepaya, fermentasi, massa ragi, rendemen bioetanol

## 1. Pendahuluan
Fermentasi  dari  gula  dan  komponen  pati  tanaman  dapat  menjadi  sumber  bioetanol  dalam pembuatan  energi  terbarukan.  Bioetanol  tersebut  berasal  dari  jagung,  tebu,  kentang,  beras,  ubi  bit  dan limbah hasil pengolahan produk pertanian [1]. Konversi bioetanol dapat diolah langsung dari gula, pati dan lignin selulosa. Salah satu sumber bioetanol yang mudah digunakan adalah kulit buah nenas dan pepaya. Menurut [2], kulit nenas memiliki komposisi air sebesar 81,72 %, serat kasar 20,87%, karbohidrat 17,53 %, protein  4,41 % dan gula reduksi  sebesar 13,65 %. Sedangkan dalam 100gr buah pepaya terdapat gula, air  86,7  gr,  karbohidrat  12,2  gr,  dan  kalori  46  kal.  Berdasarkan  hal  tersebut,  kulit  nenas  dan  pepaya berpotensi  sebagai  bahan  baku  bioetanol  karena  masih  terdapat  kadar  karbohidrat  dan  gula  yang  cukup tinggi.
Beragam  penelitian  tentang  pembuatan  bioetanol  secara  fermentasi  ragi  atau  enzim  dari  bahan limbah kulit buah telah banyak dilakukan. Pada riset [3], penggunaan yeast saccharomyces cereviceae pada fermentasi  bioetanol  bahan  kulit  nenas  diperoleh  waktu  optimum  3  hari  dan  kadar  bioetanol  sebesar 15,45%. Penelitian [4] menambahkan 20-40 gram saccharomyces cereviceae dan waktu fermentasi 2-10 hari. Hasil terbaik dengan kadar bioetanol tertinggi 3,965% diperoleh pada penambahan ragi 30 gram, dan waktu fermentasi 10 hari. Riset [5] menyebutkan peningkatan kadar bioetanol dari whey dengan subtitusi kulit nenas tidak dipengaruhi oleh lama fermentasi. Kadar  bioetanol tertinggi dalam kisaran 1,21-2,25% didapat pada waktu 60 jam. Ragi untuk fermentasi saccharomyces cereviceae digunakan sebanyak 50 gram dalam  waktu  12-60  jam.  [6]  Menggunakan Saccharomyces  cerevisiae dan Aspergillus  niger dalam
produksi bioetanol dari kulit pisang dan kulit nanas dengan metode hidrolisis dan fermentasi anaerob. Hasil pengurangan konsentrasi  gula  pada  kulit  nenas  dan  pisang berturut-turut  antara  (0,27-0,94  mg/cm 3 ) dan (0,20-0,82 mg/cm 3 ) setelah fermentasi 7 hari. Sedangkan [7] menyimpulkan bioetanol sebesar 5,98% v/v ± 1,01 g/L dapat dihasilkan pada proses fermentasi 48 jam menggunakan ragi dan baku kulit nenas.
Indonesia adalah negara kepulauan penghasil beragam jenis buah-buahan segar di Asia Tenggara, seperti  pepaya,  jeruk,  rambutan,  nenas,  dll.  Menurut  data  Badan  Pusat  Statistik  [8]  produksi  nenas  di Indonesia dari tahun 2017-2020 menurun dari 1.795.986 ton menjadi 1.641.087 ton. Sedangkan produksi pepaya tahun 2017-2020 meningkat dari 875.112 ton menjadi 937.639 tom. Kabupaten Bener Meriah di Aceh  dikenal  sebagai  daerah  penghasil  nenas  dan  pepaya  di  Aceh.  Menurut  data  BPS  Aceh  2020  [9] produksi  nenas  meningkat  dari  11.026  kuintal  menjadi  11.432  kuintal,  dan  produksi  pepaya  naik  dari 106.847  kuintal  menjadi  137.913  kuintal.  Sebagian  besar  buah-buahan  yang  dihasilkan  dari  sejumlah provinsi  di  Sumatera  belum  banyak  yang  diolah  menjadi  produk  buah  kalengan  atau  produk  bernilai ekonomis  lainnya,  sehingga  hanya  digunakan  sebagai  buah  meja,  diambil  isinya  dan  kulitnya  menjadi limbah.  Hal  tersebut  melatarbelakangi  dilakukannya  penelitian  tentang  pengaruh  penambahan  variasi massa ragi roti pada pembuatan bioetanol secara fermentasi dari campuran kulit nenas dan pepaya.
Pembuatan bioetanol dari campuran kulit buah nenas dan pepaya ini melalui dua tahapan proses yaitu proses fermentasi dan destilasi. Yield dipengaruhi oleh lama fermentasi dan variasi massa ragi  roti sacharomyces  cereviceae . Perlakuan  pH  dan  kadar  gula  awal  substrat  juga  diuji  sebelum  penambahan glukosa.  Proses  penambahan glukosa  dilakukan  agar  meningkatkan  hasil  bioetanol dan  berguna  sebagai sumber karbohidrat tambahan. Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji pemanfaatan campuran kulit nenas dan pepaya dengan variasi  waktu fermentasi  dan massa ragi roti saccharomyces  cereviceae (1-4 % b/v) pada  pembuatan  bioetanol.  Diharapkan  hasil  penelitian  bioetanol  ini  dapat  menjadi  alternatif  teknologi rekayasa limbah hasil pertanian sebagai potensi energi terbarukan dari biomassa.

## 2. Metode Penelitian

## 2.1. Bahan dan Peralatan
Peralatan penelitian yaitu: Erlenmeyer Pyrex 250 ml, pipet volume Pyrex 10 ml, labu takar Pyrex 500  ml,  corong  kaca,  botol  kaca  Pyrex,  labu  leher  tiga  Pyrex  500  ml,  bunsen,  kaki  tiga,  kasa  asbes, thermometer, pendingin, botol semprot, pipet tetes, gelas  arloji, blender Miyako, pisau Stainless, wadah kaca volume 5 liter, saringan plastik Nagata, timbangan teknis, timbangan analitik Ohaus, pH meter Hanna, alkohol meter Boeco, refraktometer ATC.
Bahan  penelitian  yaitu:  kulit  nenas,  kulit  pepaya,  akuades,  ragi  roti  ( Saccharomyces  cerevisiae) berbentuk serbuk dan glukosa. Adapun prosedur kerja yang dilakukan merupakan modifikasi dari metode penelitian [10] dan [4], tahapan kegiatan diuraikan sebagai berikut:

## 2.2. Preparasi Bahan Pembuatan Bioetanol
Bahan  kulit  nenas, dan pepaya dipilih  dari  sampah buah  busuk di  pasar.  Limbah  kulit  nenas,  dan pepaya setelah dicuci ditimbang masing - masing 250gr sesuai perlakuan berat sampel. Sampel campuran kulit  nenas  dan  pepaya  ditambahkan  akuades  sebanyak  1000  ml  untuk  masing-masing  500gr  sampel campuran bubur.

## 2.3. Pembuatan Substrat
Pembuatan substrat fermentasi yaitu 250g kulit Nenas + 250g kulit pepaya +1000ml akuades (1:1:4). Bubur halus hasil blender disaring hingga diperoleh filtratnya, dan dipasteurisasi pada suhu 70 o C selama 15 menit. Sampel substrat didinginkan sebelum digunakan pada pembuatan starter.

## 2.4. Starter
Starter  dibuat  dengan  mencampurkan  glukosa  10%  dan  variasi  massa  ragi  roti  ( Saccharomyces cerevisiae) dengan kisaran 1-4 % berat/volume. Starter di inkubasi selama 24 jam pada suhu 30 o C sesuai variasi perlakukan masing-masing.

## 2.5. Inokulasi
Starter  yang  telah  diinkubasi  dengan  penambahan  inokulan  ke  dalam  substrat  fermentasi  dengan variasi konsentrasi glukosa 10%. Didalam setiap  1% starter setara dengan 10 ml. Hal ini berguna untuk menumbuhkan  ragi S.  cerevisiae kedalam  substrat  fermentasi.  Selain  itu,  penambahan  glukosa  10% bermanfaat  sebagai  media  tumbuh  tambahan  dan  sumber  karbon  bagi  ragi  dalam  mempercepat pembentukan bioetanol.

## 2.6. Perlakuan Pengaruh Waktu Fermentasi
Ke dalam botol fermentasi ditambahkan filtrat sebesar 500 ml dari tiap sampel perlakuan. Inokulan Yeast (S.  cerevisiae )  sebanyak  1-4%  berat/volume  ditambahkan  pada  tiap  perlakuan.  Berdasarkan  [11], penambahan starter yang sesuai pada proses fermentasi adalah 5% dari volume sampel fermentasi. Botol
selanjutnya ditutup rapat, diberi lubang udara dan untuk aliran gas CO2 dipasang sebuah selang air. Waktu fermentasi divariasikan antara 24, 48, 72, dan 96 jam. Kadar bioetanol diuji setelah fermentasi berlangsung selama 24, 48, 72, dan 96 jam.

## 2.7. Pemurnian
Proses destilasi dilakukan untuk memurnikan kandungan bioetanol hasil fermentasi campuran kulit nenas dan pepaya.  Bioetanol disaring dengan kertas saring atau dengan penyaring vakum agar etanol yang dihasilkan  memiliki  kemurnian  yang  tinggi  dengan  minim pengotor. Pemilihan  suhu dan waktu  operasi yaitu  destilasi  75 0 C  dan  waktu  3  jam.  Labu  destilat  berisi  larutan  hasil  fermentasi  bioetanol  akan dipanaskan  pada  suhu  konstan  75°C.  Larutan  hasil  fermentasi  akan  menguap  sesuai  titik  didih  masing- masing larutan. Etanol akan menguap terlebih dahulu dan akan terembunkan oleh kondensor. Hasil etanol yang dihasilkan ditampung ke dalam gelas ukur dan dicatat volumenya.

## 2.8. Pengukuran Kadar Alkohol
Sebelum digunakan, alat Hydrometer Alkohol dikeringkan ke dalam oven suhu 100 o C selama 10 menit  kemudian didinginkan.  Hydrometer  kemudian ditimbang dan  dicatat  berat  awal  dan  berat  setelah ditambahkan distilat. Prosedur yang sama dilakukan pada larutan pembanding aquades [12].

## 2.9. Analisa Bioetanol Menggunakan Gas Chromatografy Mass Spectrometry
Komposisi kimia penyusun dalam bioetanol dari campuran kulit nenas dan kulit pepaya dilakukan menggunakan  alat  GG–MS  di  laboratorium  Politeknik  Lhokseumawe.  Prinsip  kromatografi  gas  adalah dengan  menyuntikkan  sampel  ke  dalam  ujung  kolom  kromatogram,  lalu  sampel  akan  menguap  dan mengelusi gas inert sebagai fase gerak.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1 Proses Pembuatan Bioetanol
Campuran  kulit  buah  nenas  dan  pepaya  sebesar  500gr  dihaluskan  menjadi  bubur  filtrat  air  bubur digunakan sebagai starter untuk fermentasi. Variasi penambahan ragi berkisar antara 1-4 % berat/volume. Menurut  [13]  penambahan  ragi Saccharomyces  cereviceae bentuk  bubuk  ke  dalam  substrat  berfungsi sebagai bibit mikroba untuk konversi karbohidrat menjadi etanol. Keberhasilan proses fermentasi diamati dengan perubahan warna dan bau dari filtrat  campuran kulit buah. Pada penelitian ini, starter pati  filtrat yang semula berwarna kuning berubah menjadi berbuih dan berwarna keputihan dibagian atas dan baunya berubah  menjadi  wangi  tape  atau  wangi  manis  alkohol.  Pemurnian  hasil  fermentasi  dilakukan  dengan proses  destilasi  selama  9  jam  pada  suhu  75 0 C.  Untuk  mendapatkan  hasil  alkohol  yang  lebih  murni dilakukan pengulangan proses destilasi selama 3 kali siklus.

## 3.2 Hasil Analisa kadar gula sebelum fermentasi
Pada Gambar  1 grafik  pengaruh  variasi  massa  ragi  roti  terhadap  kandungan  gula  awal  substrat. Kadar  gula  awal  dalam  substrat  semakin  meningkat  dengan  penambahan  massa  ragi.  Selain  itu, penambahan media glukosa sebanyak 10 % pada tiap perlakuan juga berperan dalam  peningkatan kadar gula dalam filtrat pati agar ragi inokulum dapat melakukan fermentasi secara maksimal selama waktu 24- 96 jam yang diharapkan.
Gambar 1. Pengaruh variasi massa ragi roti terhadap kadar gula substrat Sumber: Data penelitian (2021)
Walaupun  fermentasi  dapat  terjadi  tanpa  tambahan  glukosa,  tetapi  dengan  adanya  gula memungkinkan diperoleh kadar alkohol yang diharapkan. Minimum kadar gula sebesar 10% diperlukan untuk pertumbuhan ragi. Berdasarkan hasil analisa diatas menunjukkan kandungan glukosa dalam limbah kulit nenas dan pepaya pada penelitian sangat rendah, oleh karena itu dalam penelitian ini ditambah glukosa 10  gram  pada  starter,  sebagai  pembantu  pembentukan  etanol  oleh  bakteri Saccharomyces  cereviceae .
3 3 3 5 0 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 ka da r gul a (% ) Massa Ragi (%)
p-ISSN : 2528-3561 e-ISSN : 2541-1934
Temuan  [14]  menyebutkan Saccharomyces  cerevisiae dapat  mengoksidasi  gula  menjadi  CO 2 dan  air dengan bantuan oksigen. Ragi S.cerevisiae mengkonversi 70% glukosa di dalam substrat menjadi CO 2 dan alkohol.  Menurut  data  [15]  terdapat  kandungan  glukosa  13,65%  dalam  limbah  buah  nenas.  Sedangkan glukosa dalam pepaya sebesar 8,23%. Jadi dapat dinyatakan bahwa kadar glukosa dalam limbah buah nenas dan pepaya berpotensi besar untuk dimanfaatkan kembali sebagai bahan baku fermentasi bioetanol.

## 3.3. Hasil Analisa pH Sebelum dan Sesudah Fermentasi
Fermentasi  bioetanol  dipengaruhi  oleh  pH.  Pada  riset  ini  pengukuran  pH  dilakukan  sebelum fermentasi  substrat  campuran  limbah  kulit  buah.  Hasil  pengujian  pH  sebelum  fermentasi  diperoleh bervariasi, yaitu pada massa ragi 1%, pH 5,8; pada 2 % ragi, pH 6,2; pada 3% ragi, pH 5,8 dan pada 4% ragi  pH  diperoleh  5,9.  Hal  ini  diperlihatkan  pada Gambar  2 dengan  nilai  pH  maksimal  sebesar  4,5 diperoleh pada produksi etanol oleh saccharomyces cereviae . Fluktuasi nilai pH pada Gambar 2 tersebut dipengaruhi oleh pembentukan CO2 dan asam-asam organik selama proses fermentasi ragi.
Gambar 2. Pengaruh massa ragi terhadap pH substrat, sebelum dan sesudah fermentasi Sumber: Data penelitian (2021)
Perubahan  dan  penurunan  pH  awal  substrat  selama  proses  fermentasi  disebabkan  oleh pembentukan produk sampingan hasil metabolisme sekunder ragi berupa asam-asam organik yang melarut bersama  produk  etanol.  Hasil  pengujian  pH  selama  berlangsungnya  fermentasi  berkisar  antara  4-5.  Ini menunjukkan bahwa pH yang dibutuhkan dalam pertumbuhan ragi masih dalam kisaran hasil penelitian sebelumnya oleh  [16] yaitu antara pH 3-5.

## 3.4. Analisa Pengaruh Massa dan Waktu terhadap Rendemen Bioetanol
Kadar  bioetanol dipengaruhi  oleh  variasi  penambahan  ragi  sebagai  inokulum dan  lamanya  proses fermentasi.  Yang  dimaksud  dengan  waktu  fermentasi  yaitu  waktu  yang  diperlukan  untuk  mengonversi substrat berupa  glukosa  dalam  campuran kulit  buah menjadi  etanol.  Penggunaan  waktu  fermentasi  yang terlalu  dapat  mengganggu proses  fermentasi  karena  akan  menghabiskan nutrisi  dalam  substrat  dan  akan terbentuk produk sampingan yang menghambat produksi rendemen bioetanol. Keadaan operasi fermentasi berupa  suhu,  kadar  gula  berlebih,  dan  keadaan  lingkungan  juga  dapat  berpengaruh  pada  kadar yield bioetanol. Pada Gambar 3 ditampilkan grafik berat massa ragi terhadap rendemen bioetanol pada variasi waktu fermentasi (24 -96 jam).
0 2 4 6 8 10 12 14 0 0,5 1 1,5 2
2,5 3 3,5 4 4,5 pH sub st ra t Massa Ragi (%) pH substrat pH setelah fermentasi WF24 WF48 WF72 WF96 0,00 10,00 20,00 30,00 1 2 3 4 12,00 13,98 13,98 13,70 15,79 14,89 13,42 13,04 16,3 17,11 12,28 11,25 18,57 17,08 17,53 20,21
R en de m en B io et an o l (% )
massa ragi (%)
p-ISSN : 2528-3561 e-ISSN : 2541-1934
Pada Gambar  3 menunjukkan  variasi  penambahan  berat  ragi  mempengaruhi  peningkatan  kadar bioetanol produk. Menurut [10] kadar bioetanol dipengaruhi oleh volume inokulum, dengan peningkatan volume inokolum memungkinkan diperoleh konsentrasi bioetanol lebih tinggi. Hal tersebut dikarenakan nutrien tersedia dalam fase lag dapat digunakan untuk tahap pertumbuhan eksponensial yeast dan mikroba telah beradaptasi dalam waktu cepat untuk melakukan fermentasi. Menurut [3] jika fermentasi melebihi 48 jam maka sel mikroba akan mengalami masa konstan atau sampai ke tahap penurunan. Ini disebabkan oleh berkurangnya nutrien sejalan dengan fermentasi sehingga banyak mikroba yang mulai mati dan tidak aktif lagi melakukan proses fermentasi.
Telah  terbukti  bahwa  peningkatan  persen  massa  ragi  dapat  mempengaruhi  kadar  bioetanol  yang diperoleh. Pada penelitian ini kadar rendemen bioetanol terbesar diperoleh pada variasi yeast 4% dengan yield bioetanol sebesar 20,21 % pada waktu 96 jam fermentasi. Menurut [17] masa 3 hari adalah waktu paling baik bagi Saccharomyces cerevisiae membentuk bioetanol dari bahan baku glukosa.  Namun pada riset ini rendemen bioetanol terbaik  didapatkan pada waktu fermentasi 96 jam atau 4 hari. Hal ini dapat dipengaruhi oleh kandungan gula awal didalam starter yang hanya berkisar antar 3-5% b/v sehingga proses fermentasi berjalan agak lebih lambat dari hasil penelitian [17] tersebut.

## 3.5 Analisa Kadar Bioetanol Menggunakan Hydrometer Alkohol dan GC-MS
Pada Tabel 1 diuraikan hasil perbandingan kadar bioetnaol menggunakan alat  hidrometer alkohol dan pengujian dengan analisa GC-MS. Hasil bioetanol tertinggi pada kedua pengujian menunjukkan bahwa semakin  tinggi  massa  ragi  roti  yang  ditambahkan  akan  meningkatkan  hasil  produksi  bioetanol.  Kadar bioetanol  tertinggi  diperoleh  pada  massa  ragi  4%  dengan  kadar  bioetanol  menggunakan  alkohol  meter sebesar 5% sedangkan hasil pengujian GC-MS sebesar 3,403 %. Terdapat perbedaan hasil kadar bioetanol yang diperoleh berdasarkan perbedaan keakuratan masing-masing alat. Hal ini juga dipengaruhi oleh kadar gula awal dari starter campuran kulit buah nenas dan pepaya yang digunakan, namun kadar bioetanol yang diperoleh  masih  berkisar  dalam  range  3-5%.  Untuk  itu  perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  dengan menggunakan  variasi  massa  ragi  jenis  lainnya  dan  penambahan  glukosa  dan  urea  agar  diperoleh  kadar bioetanol  yang  lebih  tinggi  sesuai  SNI  bioetanol  yang  diharapkan.  Selain  itu  juga  dapat  dicari  sumber limbah lainnya yang masih banyak mengandung pati, lignin atau selulosa sebagai bahan baku pembuatan bioetanol sebagai sumber bioenergi terbarukan.
Tabel 1. Perbandingan kadar bioetanol menggunakan alat hydrometer alkohol
dan GC-MS Massa Ragi (%) Kadar Bioetanol Alkohol meter (%) GC-MS (%) 1 2,000 3,013 2 2,000 3,001 3 3,000 3,233 4 5,000 3,403 Sumber: Data penelitian (2021)
Komposisi  kimia  bioetanol  berdasarkan  pengujian  GC-MS  ditampilkan  pada Gambar  4 dan Gambar  5 .  Pada Gambar  4 ditampilkan  puncak  komponen  etanol  pada  massa  ragi  3%.  Hasil  pati campuran kulit nenas dan pepaya  setelah fermentasi 96 jam diperoleh 1 puncak tertinggi dengan  persen area terbesar 3,233% dan tinggi 3908765. Sedangkan pada Gambar 5 menunjukkan hasil bioetanol murni pada massa ragi 4% dari kandungan kulit nenas dan pepaya. Grafik ini juga menunjukkan 1 puncak tertinggi pada persen area 3.403% dan tinggi 7469904.
Berdasarkan data-data penelitian dapat disimpulkan bahwa peningkatan proses produksi bioetanol dari pati karbohidrat sebagai bahan baku energi terbarukan efisien. Diperlukan persyaratan penting berupa jenis  mikroba  yang  tepat  yang  dapat  mengonversi  beragam  tipe  gula  sebagai  bahan  baku  serta  dapat bertahan pada keadaan lingkungan penuh stress. Jenis bibit bakteri dan ragi yang efektif untuk metabolisme gula yang terbaik adalah Sacharomyces cerevisiae , Aspergillus niger , Esschercia coli dapat dipilih untuk produksi  bioetanol  secara  fermentasi  anaerobik  dengan  memperhatikan  faktor  massa  ragi  dan  waktu optimum fermentasi.
Gambar 4. Puncak komponen etanol dari campuran kulit buah pada massa ragi 3%
Sumber: Data penelitian (2021)
Gambar 5 . Puncak komponen etanol tertinggi dari campuran kulit buah pada massa ragi 4%. Sumber: Data penelitian (2021)
Berdasarkan  dari  hasil  riset  oleh  [18],  menunjukkan  bahwa  penggunaan  ragi (Saccharomyces cerevisiae) pada pembuatan bioetanol dari kulit nanas belum memiliki standar yang baku sehingga hasil etanol  masih  sangat  bervariasi.  Jadi  dapat  diketahui  bahwa  faktor-faktor  volume  inokulum,  jenis  strain mikroba, massa ragi dan waktu fermentasi sangat menentukan  efektivitas proses fermentasi dari glukosa yang berasal dari limbah kulit buah.
Output  penelitian  ini  dapat  menjadi  salah  satu  rujukan  bahwa  campuran  kulit  buah  nenas  dan pepaya  masih mengandung  kadar  gula  untuk  alternatif  sumber  nutrisi  glukosa  dalam konversi  bioetanol secara fermentasi anaerobik. Hasil karakteristik uji nyala yang dilakukan pada keempat sampel perlakuan bioetanol menunjukkan sifat nyala api biru pada suhu 100 0 C dan cepat terbakar dan menghilang. Kadar bioetanol menggunakan alkohol meter sebesar 5% sedangkan hasil pengujian GC-MS sebesar 3,403 %.

## 4. Kesimpulan dan Saran
Pembuatan bioetanol dari campuran kulit buah nenas dan pepaya dengan variasi massa ragi 1-4 % dan variasi waktu fermentasi telah dilakukan. Hasil menunjukkan bahwa kadar gula awal dari starter kulit buah  3-5  %  dapat  menghasilkan  bioetanol  tertinggi  sebesar  5%  pada  penambahan  ragi  4%,  dan  waktu fermentasi 96 jam. Semakin tinggi penambahan massa ragi dan waktu fermentasi dapat meningkatkan yield bioetanol yang diperoleh.
Selanjutnya  perlu  dilakukan  penelitian  menggunakan  variasi  jenis  enzim  atau  ragi  lainnya  agar diperoleh  kadar  bioetanol  yang  lebih  tinggi  dan  karakterisasi  bioetanol  yang  diperoleh  memenuhi  baku mutu bioetanol SNI dan internasional.

## 5. Ucapan Terima Kasih
Penulis memberikan penghargaan yang setingginya kepada Laboran Teknik Kimia dan Lingkungan USM, Laboran Instrumentasi Politeknik Lhokseumawe, dan mahasiswa Teknik Lingkungan  Leting 2017 yang telah banyak membantu dalam analisa data dan pengumpulan sampel di lapangan.

## 6. Daftar Pustaka
[1] Nurjanah,  R.,  Aznury,  M.  2020.  Variasi  Produksi  Bioetanol  Dari  Limbah  Kulit  Buah-Buahan Menggunakan Ragi Saccaromyces Cerevisiae, Review Artikel, Jurnal Kinetika Vol. 11, No. 02 (Juli 2020) : 60-64
[2]    Nulhakim, L., Anggo, B., Febriana, R. R., Lukmana, H., Erriana, F., Pratiwi, A. D., & Azizah, P. N. 2019.  Pembuatan  bioetanol  dari  kulit  nanas  oleh  saccharomyces  cerevisiae  terimobilisasi  dalam butiran alginat. Semin. Nas. AVoER XI , 444-448.
[3]    Ahmad,T., &  Antonius, P. 2010. Pembuatan  bioetanol  dari  kulit  Nenas. Tugas  akhir ,  Universitas Sebelas Maret Surakarta.
[4]    Setyawati,  H.,  N.A,  Rahman.  2017.  Bioetanol  Dari  Kulit  Nanas  Dengan  Variasi  Massa Saccharomyces Cereviceae Dan  Waktu  Fermentasi. Jurnal  UPN ,  tersedia  online  pada http://eprints.itn.ac.id/3057/1/76-257-1-PB.pdf/diakses 20 Desember 2021.
[5] Azizah , N., Al-baarri, N., Mulyani, S. 2012. Pengaruh Lama Fermentasi Terhadap Kadar Alkohol, PH, Dean Produksi Gas Pada Proses Fermentasi Bioetanol dari Whey dengan Substansi Kulit Nenas. Jurnal Aplikasi Teknologi , Pangan Vol. 01 No. 2,72-77
[6] Itelima  J.,  Onwuliri  F,  Onwuliri  E,  Onyimba  I,  dan  Oforji  S.  2013.  Bioethanol  production  from banana,  plantain  and  pineapple  peels  by  simultaneous  saccharification  and  fermentation  process. International Journal of Environmental Science and Development . 4(2):213-216.
[7] Casabar  J.T.,  Unpaprom  Y.,  Ramaraj  R.  2019.  Fermentation  of  pineapple  fruit  peel  wastes  for bioethanol production. Biomass Conversion and Biorefinery . 9:761–765.
[8] Badan Pusat Statistik. 2020. Produksi buah-buahan Indonesia, Badan Pusat Statistik (bps.go.id) , Diakses tanggal 20 Desember 2021.
[9] Badan  Pusat  Statistik.  2020.  Provinsi  Aceh  Dalam  Angka,  tersedia  online  pada https://www.bps.go.id/indicator/55/62/1/produksi-tanaman-buah-buahan.html/Diakses tanggal 20 Desember 2021
[10]   Nasrun., Jalaludin., Mahfuddah. 2015. Pengaruh Jumlah Ragi Dan Waktu Fermentsi Terhadap Kadar Bioetanol Yang Dihasilkan dari Fermentasi Kulit Pepaya. Jurnal Teknologi Kimia Unimal,4,1-10 [11]   Okafor, N., & Okeke, B. C. 2017. Modern industrial microbiology and biotechnology . CRC Press.
[12]   Jhonprimen H. S, Andreas Turnip, M. Hatta Dahlan, 2012, Pengaruh Massa Ragi, Jenis Ragi Dan Waktu  Fermentasi  Pada  Bioetanol  Dari  Biji  Durian, Jurnal  Teknik  Kimia Universitas Sriwijaya, Vol 18, No 2.
[13]   Salsabila, U., Mardiana, D., dan indahyanti, E., 2013, Kinetika Reaksi Fermentasi glukosa Hasil Hidrolisis Pati Biji Durian Menjadi Etanol, Student Journal 2 (1): 331-336.
[14]    Rahayu, W. P., & Nurwitri, C. C. 2019. Mikrobiologi pangan . PT Penerbit IPB Press.
[15]   Andriani,  R.D.,  Akeprathumchai,  S.,  Laoteng,  K.,  Poomputsa,  K.,  Mekvichitsaeng,  P.,  2013, Pemanfaatan Limbah Buah Nanas Sebagai Media Pertumbuhan Xanthophyllomyces Dendrorhous Untuk Produksi Lipid, Jurnal Teknologi Pertanian. Vol. 14 No. 3 [Edisi Desember 2013] 193- 200
[16]    Budiyanti dan Sunyoto. 2016. Varietas Unggul Baru Pepaya Merah Delima. Sinar Tani , Edisi 2- 8 No.3429 Tahun XLII.
[17]    Mandari, S., Yenie, E., Muria S. R. 2014. Pembuatan Bioetanol Dari Kulit Nenas (Anenas Comosus. L)  Menggunakan  Enzim  Selulase  Dan Yeast  Saccharomyces  Cerevisiae Dengan Simultaneous Sacharafication  And  fermentation (SSF). Jurnal  Online  Mahasiswa  Fakultas  Teknik .  Universitas Riau.
[18]    Thamrin  N.  H.  2019.  Studi  Pemanfaatan  Limbah  Kulit  Buah  Nanas  (Ananas  Comosus)  Menjadi Bioetanol  Dengan  Proses  Fermentasi. Skripsi .  Samarinda:  Program  Studi  Teknologi  Hasil Perkebunan Jurusan Teknologi Pertanian Politeknik Pertanian Negeri Samarinda.