Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia, 6(1) (2024) 48-56

## Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia
Website: https://journal.ubb.ac.id/index.php/stannum doi: 10.33019/jstk.v6i1.4401 Research paper
Meniran Leaf Extract ( Phyllanthus niruri L.): How does it affect the number of platelets in the blood?
Ekstrak Daun Meniran (Phyllanthus niruri L.) : Bagaimana Pengaruhnya Terhadap Jumlah Trombosit di Dalam Darah?
Risma Laila Sumiati * , Farhan Baehaki, Nurdin, dan Suyarta Efrida Pakpahan
1) Program Studi D3 Analis Kesehatan, Fakultas Kesehatan, Institut Kesehatan Rajawali, Jalan Rajawali Barat No 38, Bandung, 40184
* Corresponding author: rismaalailaa@gmail.com
Received: September 1, 2023  Accepted: April 26, 2024  Published: April 30, 2024

## ABSTRACT
Thrombocytopenia  is  a  condition  in  which  the  platelet  count  is  below  normal  (<150,000-450,000 cells/mm3). Until now, the treatment of thrombocytopenia has not yet found a specific drug and there are side effects from chemical treatment, so alternative solutions are needed, one of which is the use of meniran leaves (Phyllanthus niruri L.). The meniran plant is a wild plant that is often found in the wild, on the streets, as well as vacant land so that people can easily get these plants. The aim of this research was to determine the  effect  of  meniran  leaf  extract (Phyllanthus  niruri  L.) on  the  number  of  platelets  in  mice  induced  by sodium phenytoin. The method used in this research was True Experimental with Pretest and Posttest with Control Group Design consisting of 5 groups which aimed to determine the effect of meniran leaf extract on platelet counts. The data collection technique used in this study used primary data, which was obtained from the results of examining platelet counts on day 0, day 3 after induction and day 7 after treatment with meniran leaf extract (Phyllanthus niruri L.). Then the data obtained was tested using SPSS with the non- parametric Kruskal-Wallis and Mann-Whitney tests. From 25 experimental animals, the results showed that there was a relatively significant increase in the number of platelets after being given therapy with meniran leaf extract (Phyllanthus niruri L.) but there was no difference between each dose. Based on the research results, it can be concluded that meniran leaf extract (Phyllanthus niruri L.) has an effect on increasing the number of platelets.
Keywords : Thrombocyte, Meniran Leave, Phenytoin Sodium
PENDAHULUAN Trombosit
merupakan
fragmen
megakariosit yang tidak berinti, berukuran 2-4 mikron  dan  berbentuk  cakram  bikonveks, terbentuk  di  sumsum  tulang  belakang.  Jumlah trombosit  normal  adalah  150.000-450.000 sel/mm³  (Lobang  et  al.,  2021).  Trombosit memiliki peran dalam sistem hemostasis, suatu mekanisme  untuk  melindungi  diri  terhadap kemungkinan
pendarahan. Trombosit mempunyai  dinding  mukopolisakarida  yang berfungsi  dalam  reaksi  adhesi  dan  agregasi. Adapun kelainan-kelainan trombosit, diantaranya adalah trombositosis yaitu keadaan  dimana  jumlah  trombosit  berada  di atas normal (>400.000/ul) dan trombositopenia  atau  keadaan  dimana  jumlah trombosit berada
dibawah normal (<150.000/ul)  (Durachim  dan  Astuti,  2018). Trombositopenia  juga  dapat  disebabkan  oleh beberapa  faktor,  seperti  adanya  gangguan produksi di sumsum tulang dan destruksi atau
pemendekan  masa  hidup  trombosit (Agustina, 2019). Trombositopenia dapat disebabkan oleh beberapa  kondisi,  seperti  Demam  Berdarah Dengue (DBD), Idiopathic Trombocytopenic Purpura (ITP),  anemia  aplastik,  leukemia, konsumsi obat, bahkan HIV dan Hepatitis dapat mengakibatkan  penurunan  jumlah  trombosit (Sianipar, 2014 dan Wardana, 2020).
Penyakit  demam  berdarah dengue (DBD) adalah penyakit yang disebabkan oleh nyamuk Aedes  aegypti yang  membawa  virus dengue . DBD  merupakan  penyakit  akut  yang  dapat mengakibatkan  syok  dan  kematian  (Sukohar, 2014).  Kasus  DBD  di  Indonesia  pertama  kali ditemukan  di  Surabaya  pada  tahun  1968 terdapat  58  kasus  dan  angka  kematian sebanyak  24  orang,  kemudian  dari  tahun  ke tahun jumlah  kasus cenderung meningkat dan tahun  ke  tahun  jumlah  kasus  cenderung meningkat dan daerah penyebarannya bertambah luas (Rompis et al., 2020; Sukohar, 2014).  Menurut  data  Kementrian  Kesehatan Republik  Indonesia  (Kemenkes  RI)  yang didapat hingga bulan September 2022, terdapat 87.501  kasus  DBD  dengan  angka  kematian sebanyak  816  orang  (Kementerian  Kesehatan Indonesia,  2022).  Prevalensi  kasus  ini  terus meningkat dibandingkan dengan tahun sebelumnya, dimana pada tahun 2021 tercatat sebanyak 73.518 kasus dengan angka kematian 705 orang (Kementerian Kesehatan, 2021).
Selain  itu,  kejadian  trombositopenia  dapat disebabkan
oleh penyakit
Idiopathic
Trombocitopenia  Purpura (ITP)  penyakit  yang sering  ditemukan  pada  usia  dewasa.  ITP merupakan  suatu  kondisi  autoimun  yang disebabkan  oleh  antibody  antitrombosit  yang menyebabkan penurunan masa hidup trombosit  sehingga  terjadi  penurunan  jumlah trombosit  (Sari,  2018).  Pada  pemeriksaan laboratorik diperlukan untuk mencari penyebab  sekunder  ITP  termasuk  infeksi  HIV dan  Hepatitis  C,  pemeriksaan  serologi  untuk SLE  dan  lain  sebagainya  (Ardhi  Utama,  2018). Kemudian  penyakit  leukemia,  anemia  aplastic, kehamilan  serta  infeksi  virus  dan  penyakit autoimun  juga  dapat  menjadi  salah  satu penyebab  terjadinya  penurunan  trombosit (Sari, 2018).
Pemberian  obat  juga  menjadi  salah  satu faktor terjadinya penurunan jumlah trombosit, seperti  obat  natrium  fenitoin  yang  biasa digunakan untuk penanganan penyakit epilepsi. Obat  natrium  fenitoin  ini,  diketahui  dapat menurunkan  jumlah  trombosit  pertama  kali ditemukan  pada  tahun  1986  oleh  Brown,  dkk,
dalam  laporan  kasus  seorang  pria  berusia  35 tahun  dengan  penurunan  jumlah  trombosit 15.000  sel/mm³  setelah  2  minggu  inisiasi fenitoin (Al Ghamdi et al., 2020).
Sampai  saat  ini  pengobatan  penyakit penyebab  trombositopenia  masih  belum menemukan  obat  yang  spesifik.  Biasanya pelayanan kesehatan memberikan obat seperti acetaminophen,  obat  ini  merupakan  obat penyebab paling umum yang dapat mengakibatkan kerusakan hati, hasil metabolisme  tidak  dapat  di  netralisir seluruhnya  oleh gluthation  hepar sehingga mengakibatkan tingginya kadar SGOT dan SGPT dalam darah (Hidayat et al., 2020 dan Rafita et al.,  2015).  Obat  acetaminophen  juga  dapat merusak  fungsi  organ  ginjal  dengan  ditandai tingginya  kadar  kreatinin  dalam  darah  dan terjadi reaksi hipersensitivitas Pusat Informasi Obat  Nasional,  2015  dan  Dewi  dan  Nugroho, 2016).Penggunaan obat bahan kimia memerlukan biaya yang relatif mahal, sehingga masyarakat berupaya melakukan pengendalian kesehatan  dengan  menggunakan  obat  herbal yang  berasal  dari  buah  atau  tumbuhan. Terdapat  banyak  macam  buah  dan  tumbuhan yang dapat dijadikan sebagai obat herbal yang memiliki  fungsi  untuk  meningkatkan  jumlah trombosit,  hal  itu  karena  buah  dan  tumbuhan tersebut  memiliki  kandungan  flavonoid  jenis kuersetin (Wardana, 2020). Flavonoid kuersetin  ini  dapat  memperbaiki  keadaan trombositopenia yang dibantu oleh asam-asam amino,  serta  protein  yang  memiliki  fungsi sebagai  zat  pembangun,  serta  pembentuk  sel plasma  dan  organ  hati  yang  kemudian berpengaruh kepada trombopoietin yaitu faktor perangsang  megakariosit  (Handayani  dan Nurfadillah,  2018). Hal  ini  diperkuat  oleh penelitian yang telah dilakukan oleh Widhawati dan Solehah, (2018) mengenai pengaruh jambu biji  terhadap  jumlah  trombosit  yang  memiliki senyawa  flavonoid  mampu  meningkatkan jumlah trombosit dari 68.530 sel/mm³ menjadi 128.930 sel/mm³.
Penelitian  lain  yang  dilakukan  terkait peningkatan  jumlah  trombosit  dilakukan  oleh Bessi,  (2021)  tentang  pengaruh  ekstrak  daun papaya (Carica  papaya  L.) terhadap  jumlah trombosut  pada  mencit (Mus  musculus  L) juga mampu  meningkatkan  jumlah  trombosit  dari 134.750  sel/mm³  menjadi  246.250  sel/mm³. Tumbuhan  diatas  memiliki  kandungan  yang sama yaitu kandungan flavonoid jenis kuersetin sehingga dapat meningkatkan jumlah trombosit. Perlu diketahui bahwa masih banyak
tumbuhan  lainnya  yang  memiliki  kandungan senyawa  yang  sama,  salah  satunya  adalah tumbuhan meniran (Phyllantus niruri L.). Tumbuhan  meniran  merupakan  tumbuhan liar  yang  dapat  dijumpai  di  alam  bebas  atau jalanan,  dan  setiap  orang  dapat  mengambil tumbuhan  meniran  dengan  sangat  mudah (Handayani dan Nurfadillah, 2018). Tumbuhan meniran  memiliki  banyak  khasiat  untuk kesehatan,  seperti  sebagai  antiinflamasi, penyakit  hepatitis,  menerangkan  penglihatan anti-piretik  (demam),  melancarkan  kencing, melancarkan haid, dan menambah nafsu makan, sehingga  dapat  dijadikan  sebagai  solusi alternatif  untuk  pengobatan  suatu  penyakit. Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia,  tumbuhan meniran memiliki kandungan senyawa saponin, tannin, flavonoid, kuinon, triterpenoid, kumarin,  minyak  atsiri,  senyawa  damar  dan polifenol  (Himawan  et al.,  2021;  Tambunan  et al.,  2019;  Masyarakat  et  al.,  2012;  Rivai  et  al., 2013).

## METODOLOGI
Metode  yang  digunakan pada  penelitian ini adalah True  Experimental dengan Pretest  and Posttest with control group desain untuk melihat perbedaan jumlah trombosit sebelum dilakukan perlakuan  dan  setelah  dilakukan  perlakuan. Pemeriksaan  jumlah  trombosit  ini  dilakukan dengan  metode  manual  yaitu  menggunakan bilik  hitung Improved  Neubauer. Penelitian  ini dilakukan  pada  Bulan  Februari-Maret  2023  di Laboratorium Hematologi, Laboratorium Toksikologi  Klinik  Institut  Kesehatan  Rajawali Bandung dan Laboratorium Herbarium Departemen Biologi FMIPA Univesitas Padjajaran. Sampel Sampel  yang  digunakan  sebanyak  25  ekor hewan uji yang ditentukan dengan menggunakan  teknik  purposive  sampling. Sampel  yang terpilih  harus memenuhi kriteria diantaranya adalah mencit putih jantan dengan berat  badan  20-30  gram,  bergerak  aktif  serta tidak pernah digunakan penelitian sebelumnya. Hewan  uji  terbagi  menjadi  5  kelompok,  yaitu kelompok  kontrol  negative,  kontrol  positif, kelompok perlakuan dosis 50%, perlakuan 75% dan  perlakuan  100%  yang  masing-masing terdiri dari 5 ekor mencit.

## Alat dan Bahan
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  diantaranya, Haemocytometer ,
cawan  petri,  gelas  ukur,  mikropipet  10ul, mikroskop,  spuit  1cc,  tabung  reaksi,  tabung vakum darah, timbangan analitik, oven, gunting, mencit,  daun  meniran,  alkohol  swab,  aquades, natrium  fenitoin,  reagen  ammonium  oksalat 1%.

## Pengumpulan Data dan Analisis Data
Teknik  pengumpulan  data  pada  penelitian ini  adalah  menggunakan  data  primer.  Data primer diperoleh dari hasil pemeriksaan jumlah trombosit  yang  dilakukan  pada  hari  ke-0,  hari ke-3 setelah diinduksi natrium fenitoin dan hari ke-7  setelah  diberikan  terapi  ekstrak  daun meniran (Phyllanthus  niruri  L.). Data  yang didapatkan  dari  hasil  pemeriksaan  kemudian dilakukan pengujian dengan bantuan SPSS yang bertujuan  untuk  mengetahui  ada  atau  tidak adanya pengaruh antara ekstrak daun meniran dengan  jumlah  trombosit.  Uji  statistic  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  uji  non parametrik Kruskal  wallis dan Mann  Whitney. Adapun  tahapan-tahapan  penelitian  ini  dapat dilihat pada gambar 1.

## Gambar 1. Tahapan penelitian
Prosedur
Uji Determinasi Tumbuhan Uji  determinasi  tumbuhan  meniran  ini dilakukan di Laboratorium Herbarium Departemen Biologi FMIPA Universitas Padjajaran Bandung. Pembuatan Ekstrak Daun Meniran (Phyllanthus niruri L.)
Ambil daun meniran segar sebanyak 1000gr kemudian  cuci  bersih,  setelah  daun  meniran bersih  keringkan  daun  meniran  dengan  oven selama  15  menit  pada  suhu  100°C,  daun meniran  yang  sudah  kering  dihaluskan  dan ditimbang  serta  ditimbang  berat  simplisianya sebanyak  500gram  kemudian  direbus  dengan 500ml  air  dengan  suhu  60℃,  saring  hasil
rebusan  daun  meniran  kemudian  kentalkan dengan  hotplate  sampai  didapatkan  ekstrak kental  daun  meniran.  Setelah  didapatkan ekstrak  kental  kemudian  lakukan  pembuatan variasi konsentrasi ekstrak daun meniran 50%, 75%, dan 100% (Himawan et al., 2021).

## Uji Fitokimia
Pada  uji  fitokimia  dilakukan  pengujian screening  senyawa  flavonoid,  saponin,  dan tannin  serta  dilakukan  pengujian  flavonoid quersetin  total.  Menurut  Helmidanora  et  al., (2020)  pengujian  fitokimia  dapat  dilakukan dengan cara berikut, untuk pengujian flavonoid dengan  memanaskan  2ml  ekstrak  selama  5 menit,  kemudian  tambahkan  HCl  pekat sebanyak  5  tetes  dan  0,1gram  bubuk Magnesium,  lalu  homogenkan  dan  amati  ada atau tidak adanya perubahan warna, flavonoid menunjukkan perubahan warna menjadi jingga. Kemudian  untuk  pengujian  senyawa  saponin dilakukan  dengan  cara  masukkan  5ml  ekstrak daun  meniran  ke  tabung  reaksi  kemudian didihkan  selama  5  menit,  lalu  kocok  kuat  dan diamkan selama 10 menit, amati ada atau tidak adanya  buih,  jika  mengandung  saponin  maka akan  terbentuknya  buih.  Untuk  pengujian senyawa  tannin  dapat  dilakukan  dengan memasukkan  5ml  ekstrak  daun  meniran  ke tabung  reaksi  kemudiah  didihkan  selama  5 menit, kemudian teteskan FeCl3 1% sebanyak 5 tetes , amati  ada  atau  tidak  adanya  perubahan warna, tannin menunjukkan terjadinya perubahan warna menjadi hitam kehijauan.

## Uji Flavonoid Total
1. Penentuan  panjang  gelombang  serapan maksimum quercetin
Penentuan  panjang  gelombang  maksimum dilakukan dengan larutan induk quercetin pada range 350-550nm, digunakan untuk mengukur serapan  ekstrak  daun  meniran (Phyllanthus niruri L.) (Helmidanora et al., 2020) .
2. Pembuatan Standar Kuersetin Menurut  Helmidanora  et  al.,  (2020) pembuatan  standar  kuersetin  dapat  dilakukan dengan  cara  menimbang  25mg  baku  standar kuersetin dan larutkan dalam 25 ml etanol 95%. Dibuat  larutan  induk  kuersetin  100ppm, kemudian  buat  larutan  standar  kuersetin konsentrasi  2ppm,  4ppm,  6ppm,  8ppm  dan 10ppm, dari setiap larutan standar ambil 0,5 ml dan  tambahkan  0,1  ml  kalium  asetat  1M, kemudian homogenkan dan inkubasi selama 10 menit.
Absorbansi diukur dengan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 435nm.

## 3. Pengujian Kadar Flavonoid Total
Menurut  Helmidanora  et  al.,  (2020) pengujian kadar flavonoid total dapat dilakukan dengan  cara  timbang  sebanyak  0,105gram sampel kemudian larutkan dengan etanol 80% hingga volumenya 5ml. Sampel dihomogenkan dan di sentrifugasi dengan kecepatan 3000rpm selama 15 menit hingga diperoleh supernatant, kemudian  disaring  hingga  memperoleh  filtrat. Filtrat  diambil  sebanyak  25ul  dan  diencerkan sampai  volume  500ul,  tambahkan  AlCl3  2% sebanyak 500ul hingga volume total 1000rpm, inkubasi  selama  90  menit.  Ukur  absorbansi menggunakan  spektrofotometer  dengan  3  kali pengulangan.

## Pembuatan Suspensi Natrium Fenitoin 1%
Menurut Bessi, (2021) pembuatan suspensi Natrium Fenitoin dilakukan dengan menimbang Natrium  fenitoin  sebanyak  1gram,  masukkan kedalam gelas erlenmeyer dan larutkan dalam 100ml air, kemudian aduk hingga homogen.

## 1. Perlakuan Hewan Uji
Mencit  putih  jantan  di  adaptasikan  selama ±7 hari di tempat penelitian, sebelum dilakukan pengujian  mencit  harus  dipuasakan  terlebih dahulu  selama  ±8  jam  kemudian  mencit  putih jantan  sebanyak  25  ekor  dikelompokkan menjadi  5  kelompok  yaitu,  kelompok  kontrol positif,  kontrol  negatif,  kelompok  dosis  100%, kelompok dosis 75%, dan kelompok dosis 50%.
1. Pada  hari  ke-0  mencit  dilakukan pemeriksaan  jumlah  trombosit  sebelum dilakukan  induksi.  Setelah  dilakukan pemeriksaan jumlah trombosit, 1 kelompok  mencit  diberikan  aquadest untuk  kelompok  kontrol  negatif,  untuk  5 kelompok mencit lainnya di induksi dengan natrium fenitoin sampai hari ke-3.
2. Pada  hari  ke-3  mencit  yang  sudah  di induksi,  dilakukan  pemeriksaan  jumlah trombosit. Diharapkan terjadinya penurunan  jumlah  trombosit,  sehingga mencit dalam keadaan trombositopenia.
3. Setelah  selesai  diperiksa,  3  kelompok perlakuan diberikan ekstrak daun meniran (Phyllanthus  niruri  L.) dengan  masing- masing dosis sampai hari ke-10.
4. Pada  hari  ke-10  dilakukan  kembali pemeriksaan  jumlah  trombosit,  untuk dilihat ada atau tidak adanya peningkatan jumlah trombosit.
Jumlah Trombosit = N x P x KV

## Pengambilan Sampel Darah Hewan Uji
Prosedur  pengambilan  sampel  darah  dari hewan  mencit  dapat  dilakukan  dengan  cara bersihkan  bagian  ekor  mencit  menggunakan tissue  steril  beralkohol (alcohol  swab) , kemudian  potong  dibagian  ekor  sekitar  0,5cm dari ujung ekor, hal ini ditujukan supaya tidak terjadi  luka  yang  terlalu  lebar  dan meminimalisir  kemungkinan  terjadi  infeksi, kemudian  masukkan  darah  kedalam  tabung yang berisi antikogulan EDTA (Bessi, 2021) .

## Pemeriksaan Jumlah Trombosit Mencit
Prosedur  pemeriksaan  jumlah  trombosit dilakukan  dengan  cara,  pipet  990ul  larutan Ammonium oksalat 1% dan masukkan ke dalam tabung  reaksi,  kemudian  tambahkan  10ul sampel  darah.  Campurkan  hingga  homogen. Siapkan bilik  hitung,  letakkan  kaca  penutup pada bilik hitung. Supaya kaca penutup mudah melekat,  kedua  tanggul  bilik  hitung  dibasahi dengan  kapas  basah.  Kocok  tabung  beberapa kali  supaya  homogen,  kemudian  pipet  sampel dan  alirkan  perlahan-lahan  ke  dalam  bilik hitung. Letakkan bilik hitung dalam cawan petri yang  sudah  diberi  kapas  basah  selama  15-30 menit.  Hitung  sel  trombosit  pada  mikroskop dengan perbesaran obyektif 40x dalam seluruh kotak  kecil.  Untuk  menghitung  jumlah trombosit  dilakukan  dengan  menggunakan persamaan  yang  merujuk  pada  Bessi,  (2021).
Jumlah trombosit dihitung dengan menggunakan persamaan sebagai berikut: Keterangan: N   : Jumlah sel yang dihitung
P   : Pengenceran KV: Koreksi volume bilik hitung

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Uji Determinasi
Pada  penelitian  ini  yang  pertama  kali dilakukan  adalah  Uji  Determinasi  yang dilakukan di Laboratorium Herbarium Departemen Biologi FMIPA Universitas
Padjajaran.  Adapun  hasil  uji  determinasi disajikan pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Uji Determinasi Nama Ilmiah Phyllanthus niruri L. Sinonim Phyllanthus humilis Salisb. Nama Lokal Meniran Suku/Famili Phyllanthaceae Kingdom Plantae Divisi Magnoliophyta Class Magnoliopsida Ordo Malpighiales Famili Phyllanthaceae Genus Phyllanthus Species Phyllanthus niruri L.
Adapun  hasil  identifikasi  yang  didapatkan menyatakan  bahwa  daun  meniran  yang digunakan  adalah  Tumbuhan  Meniran  Hijau (Phyllanthus  niruri  L.) dan  tergolong  Famili Phyllanthaceae.

## Hasil Uji Fitokimia
Pengujian  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui senyawa-senyawa yang terkandung  di  dalam  ekstrak  daun  meniran (Phyllanthus  niruri  L.) .  Uji  fitokimia  dilakukan dengan  metode  kualitatif,  senyawa  yang  diuji adalah  senyawa  saponin,  tannindan  flavonoid. Hasil uji fitokimia disajikan pada tabel 2.
Tabel 2. Uji Fitokimia No Jenis Pemeriksaan Hasil Keterangan 1  Saponin - Negatif 2  Tannin + Positif 3  Flavonoid + Positif Tabel  2  menjelaskan  mengenai  ada  atau tidak  adanya  kandungan  senyawa  yang diperiksa, berdasarkan hasil pengujian fitokimia  ekstrak  daun  meniran (Phyllanthus niruri L.) didapatkan hasil bahwa ekstrak daun meniran  memiliki  kandungan  tannin  yang ditandai  dengan  adanya  perubahan  warna menjadi  hijau  kehitaman  dan  flavonoid  yang ditandai  dengan  terjadinya  perubahan  warna menjadi  jingga.  Adapun  hasil  pengujian  dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar 2. Hasil Uji Fitokimia Hasil uji fitokimia mendapatkan hasil bahwa ekstrak  daun  meniran  mengandung  seyawa tannin  yang  ditandai  dengan  terjadinya perubahan warna menjadi hijau kehitaman dan flavonoid  yang  ditandai  dengan  terjadinya perubahan  warna  menjadi  jingga.  Menurut Vifta.  Laila  dan  Advitasari  (2018)  skrining fitokimia merupakan analisis kualitatif terhadap senyawa-senyawa metabolit sekunder yang  terkandung  di  dalam  tanaman  yang diteliti.
Pada  penelitian  ini  juga  dilakukan  uji flavonoid  total  dalam  Quercetin  Ekuivalen. Adapun hasil pengujian didapatkan hasil 3,735 mg/QE  setelah  dilakukan  perhitungan  dari persamaan  kurva  kalibrasi  yang  telah didapatkan. Kurva kalibrasi dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 3. Kurva Kalibrasi Flavonoid Total Dari pengolahan kurva didapatkan persamaan  y=0,01088x-0,0614  dengan  nilai R²=0,9987,  nilai  R²  ini  merupakan  nilai  yang menyatakan adanya hubungan yang kuat antara konsentrasi  larutan  standar  dengan  nilai absorbansi.
Pengujian flavonoid total quercetin ekuivalen  (QE)  juga  dilakukan  untuk
mengetahui besaran flavonoid quercetin dalam ekstrak daun meniran. Pengujian ini menggunakan metode kolorimetri AlCl₃ dengan menggunakan spektrofotometri. Setelah dilakukan  pengujian  dan  didapatkan  nilai absorbansi  selanjutnya  dibuat  kurva  standar untuk mengetahui regresi linear flavonoid total dapat dilihat pada Gambar 3. Setelah dilakukan perhitungan,  ekstrak  daun  meniran  memiliki total  flavonoid  QE  sebesar  3,735  mg/QE.  Nilai ini terbilang tidak terlalu tinggi. Namun, perlu diketahui  bahwa  selain  flavonoid,  tanin  yang terkandung di dalam daun meniran pun dapat memiliki manfaat yang sama seperti flavonoid. Tanin dan flavonoid merupakan senyawa aktif yang  memiliki  fungsi  sebagai  agen  hemostasis pada  proses  pembekuan  darah  (Gaib  et  al., 2019; Kusumastuti et al., 2021).

## Hasil Pemeriksaan Jumlah Trombosit
Sebelum  pengujian  dilakukan,  mencit dipuasakan  terlebih  dahulu  selama  10-12  jam tetapi tetap diberi minum. Setelah di puasakan mencit  diambil  sampel  darahnya  untuk dilakukan pemeriksaan jumlah trombosit pada mencit.  Adapun  hasil  pemeriksaan  yang  telah dilakukan dapat dilihat pada tabel 3.
Berdasarkan data yang disajikan dalam tabel 3 terlihat bahwa jumlah trombosit pada setiap mencit  yang  diperiksa  pada  hari  ke-0  berada dalam jumlah yang normal dalam rentang nilai 150.000-450.000 sel/mm3. Selanjutnya, hewan uji  dilakukan  penginduksian  dengan  Natrium fenitoin  dosis  13mg/gr  BB  dengan  cara intraperitonial  dibagian  perut.  Hewan  uji  di inkubasi selama 3 hari namun tetap diberikan makan  dan  minum  kemudian  dilakukan pemeriksaan  jumlah  trombosit  di  hari  ke-3. Menurut hasil pemeriksaan trombosit hari ke-3, terlihat  jumlah  trombosit  pada  setiap  mencit mengalami  penurunan  akibat  dari  pemberian Natrium Fenitoin. Pengujian dilanjutkan dengan pemberian  ekstrak  daun  meniran  satu  kali sehari sesuai dengan kelompok masing-masing selama  7  hari.  Hasil  pemeriksaan  jumlah trombosit  pada  mencit  di  hari  ke-10 menunjukkan bahwa hasil pemeriksaan jumlah trombosit  setelah  dilakukan  pemberian perlakuan ekstrak daun meniran sesuai dengan dosis  masing-masing,  mengalami  peningkatan yang relatif signifikan. Berdasarkan hal tersebut untuk melihat ada atau tidak adanya pengaruh maka diperlukan uji statistic. Uji statistic yang digunakan  adalah  uji  non  parametrik  Kruskal wallis dan Mann-Whitney.
y = 0,1088x - 0,0614 R² = 0,9987 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0 2 4 6 Ab so rb an si Konsentrasi
Tabel 3. Hasil Pemeriksaan Jumlah Trombosit Mencit Kelompok Mencit Hari Ke-0 Hari Ke-3 Hari Ke-10 Kelompok Kontrol Negatif 1 188.750 183.000 203.000 2 193.250 198.750 173.500 3 220.000 222.000 220.500 4 313.000 300.250 297.500 5 307.250 327.500 317.000 Kelompok Kontrol Positif 1 275.000 218.000 187.750 2 230.500 197.500 164.000 3 160.750 145.500 110.500 4 200.000 188.750 149.750 5 215.750 175.000 142.750 Kelompok  Dosis 50% 1 163.000 110.000 145.000 2 157.500 127.000 157.000 3 180.750 143.000 178.000 4 161.000 139.000 167.500 5 153.250 108.500 153.250 Kelompok  Dosis 75% 1 119.000 85.750 110.000 2 155.000 110.000 167.000 3 206.000 167.000 183.000 4 213.000 143.000 157.500 5 345.000 218.000 247.750 Kelompok  Dosis 100% 1 198.000 112.000 143.000 2 260.000 188.000 213.750 3 217.500 128.000 160.000 4 233.750 131.500 209.250 5 281.000 153.000 252.000 Hasil Uji Statistik
Uji statistik yang digunakan pada penelitian ini adalah uji statistic non parametik. Uji yang digunakan  adalah  uji  Kruskal  wallis  dan  uji Mann whitney. Adapun hasil uji Kruskal wallis dapat dilihat pada tabel 4.
Tabel 4. Hasil Uji Statistik Kruskal Wallis Jumlah trombosit Kruskal-Wallis H 19.235 Df 4 Asymp. Sig. .001 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok
Pada  uji Kruskal-wallis hipotesis  diterima jika nilai signifikansi <0,05. Berdasar pada hasil analisis  uji Kruskal-wallis didapat  nilai signifikansi 0,001 yang menyatakan bahwa data memiliki  perbedaan  atau  pengaruh  antara ekstrak  daun  meniran  terhadap  jumlah trombosit,  pengujian  ini  mengacu  pada  nilai
signifikansinya.  Menurut  Quraisy  &  Hasni, (2021)  menyatakan  bahwa  hipotesis  diterima atau terdapat pengaruh pada uji Kruskal wallis adalah  jika  nilai  signifikansi  <0,05.  Kemudian perlu  dilanjutkan  ke  uji  lanjutan  untuk mengetahui  kelompok  mana  yang  memiliki pengaruh  yang  lebih  banyak.  Adapun  hasil analisis uji lanjutan dapat dilihat pada Tabel 5. Hasil  uji  Mann-whitney  didapatkan  hasil  tidak terdapat  perbedaan  pengaruh  dari  setiap dosisnya, namun terdapat data yang signifikan pada  hari  ke-0  dengan  hari  ke-3  perlakuan dengan menunjukkan nilai signifikansinya yaitu 0,004. Apabila nilai signifikansi >0,05 maka data dinyatakan  tidak  ada  perbedaan  pengaruh untuk setiap dosisnya.
Menurut  Quraisy  &  Madya,  (2021), pengambilan keputusan dari uji Mann-Whitney adalah dengan melihat nilai signifikansi (Exact. Sig/2-tailed),  jika  nilai  signifikansi  >0,05 sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  hipotesis diterima  atau  tidak  terdapat  perbedaan  antar
dosis.  Maka  dari  itu,  dapat  disimpulkan  dari hasil uji statistic bahwa ekstrak daun meniran memiliki  potensi  dalam  meningkatkan  jumlah trombosit akan tetapi tidak terdapat perbedaan dosis yang lebih berpengaruh.
Tabel 5. Hasil Uji Statistik Mann-Whitney Hasil Uji Mann-Whitney Signifikansi Jumlah Trombosit Dengan Dosis Kelompok 50% dengan Kelompok 75% 0,390 Kelompok 75% dengan Kelompok 100% 0,275 Kelompok 50% dengan Kelompok 100% 0,068 Jumlah Trombosit Dengan Hari Perlakuan Perlakuan Hari Ke-0 dengan Hari Ke-3 0,004 Perlakuan Hari Ke-3 dengan Hari Ke-10 0,070
Peningkatan  jumlah  trombosit  ini  dapat dipicu  oleh  beberapa  kondisi,  seperti  respons tubuh, asupan makanan serta pemberian obat. Dalam hal ini, konsumsi ekstrak daun meniran memiliki  potensi  dalam  meningkatkan  jumlah trombosit, terutama pada hari ke-0 hingga hari ke-3. Konsumsi esktrak daun meniran ini dapat diibaratkan  seperti  diberikan  obat  dengan bahan kimiawi dengan pemanfaatan tumbuhan yang  bersifat  senyawa  bioaktif,  seperti flavonoid  dan  tanin,  yang  memiliki  fungsi sebagai  antiinflamasi.  Senyawa  golongan flavonoid  dan  tanin  digunakan  sebagai  anti- agregasi trombosit untuk menghambat pembentukan  bekuan  darah  pada  penyakit pembuluh darah, termasuk penyakit pembuluh darah  perifer,  arteri  coroner,  dan  penyakit serebrovaskular  (Lobang  et  al.,  2021). Mekanisme flavonoid dalam penyakit trombositopenia  dapat  bekerja  dengan  cara menghambat aktivitas katalitik fosfodiesterase, siklooksigenase, fosfolipase A2 serta meningkatkan ekspresi mRNA Stem Cell Factor (SCF) dalam sel stroma di sumsum tulang, selain itu  juga  flavonoid  dapat  menghambat  enzim hyaluronidase yang berfungsi untuk mendegradasi asam hyaluronat. SCF dan asam hyaluronat  pada  sumsum  tulang  memiliki fungsi untuk mensekresi interleukin-6 (IL-6) sel mast untuk menginduksi hati agar mengeluarkan  trombopoietin,  kemudian  akan menstimulasi  megakariosit  sehingga  terjadi peningkatan  sel  trombosit  (Atik  et  al.,  2018 Faggio et al., 2017; Eriani et al., 2018).

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan didapatkan  kesimpulan  bahwa  ekstrak  daun meniran memiliki pengaruh signifikan terhadap peningkatan  jumlah  trombosit.  Hal  ini disebabkan karena adanya kandungan senyawa aktif  flavonoid  dan  tanin  yang  terkandung  di dalam daun meniran. Kedua senyawa tersebut memiliki peran sebagai agen hemostasis dalam proses  pembekuan  darah.  Namun,  dalam penelitian ini tidak ditemukan perbedaan dosis yang  secara  spesifik  lebih  berpengaruh terhadap pembekuan darah. Adapun dosis yang mendekati nilai signifikan yaitu dosis 100%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada Institut  Kesehatan  Rajawali,  Laboratorium Herbarium Departemen Biologi FMIPA Universitas Padjajaran, dan pihak-pihak lainnya yang  telah  membantu  pelaksanaan  penelitian ini.

## REFERENSI
Agustina,  A.  (2019).  Pengaruh  Daun  Pepaya (Carica  papaya  L.)  terhadap  Peningkatan Trombosit  pada  Pasien  Demam  Berdarah Dengue. Jurnal Dunia Farmasi , 4 (1), 34 – 44.
https://doi.org/10.33085/jdf.v4i1.4573 Al Ghamdi, R. M., Turkistani, A. N., & Ben Ali, H. (2020).  Phenytoin  Seizure  Prophylaxis Therapy Resulting in Severe Thrombocytopenia  After  Brain  Tumor Debulking  Surgery. American  Journal  of Case Reports , 21 . https://doi.org/10.12659/AJCR.919828 Ardhi Utama, S. Y. (2018). The effect of papaya leaf  extract  (Carica  papaya  l.)  to  the bleeding time on mice with trombositopenia. Jurnal  Gizi  Dan  Dietetik Indonesia (Indonesian Journal of Nutrition and Dietetics) , 6 (3). https://doi.org/10.21927/ijnd.2018.6(3). 133-138 Atik, N., Amrullah, A. H., & Rahmadi, A. R. (2018). Guava leaf juice effect towards number of megakaryocytes  in  bone  marrow  of thrombocytopenic mice. Universa Medicina , 37 (1), 19 – 24. https://doi.org/10.18051/univmed.2018.
v37.19-24
Bessi,  M.  (2021).  Pengaruh  Perasan  Daun Pepaya  (Carica  Papaya  L.)  Terhadap Jumlah Keping D. In 26 Jurnal FarmasiKoe (Vol.  4,  Issue  2).  Bulan  Desember  Tahun.
http://jurnal.poltekeskupang.ac.id/index. php/koe Cahaya  Himawan,  H.,  Apt,  P.,  &  Ayu  Resti,  D. (2021). Uji  Farmakologis  Ekstrak  Kental
Daun  Meniran(Phyllanthus  niruri  Linn)
Untuk Membantu Penyembuhan Luka Sayat Pada Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus strain Sprague-Dawley) . Dewi, G. P., & Nugroho, T. E. (2016). PENGARUH PEMBERIAN ANALGESIK KOMBINASI PARASETAMOL DAN TRAMADOL TERHADAP  KADAR  KREATININ  SERUM TIKUS WISTAR . 5 (4). Durachim, A., & Astuti, D. (2018). Hemostasis .
Gawley,  R.  E.  (2012). Principles  of  Asymmetric Synthesis (Second). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0-08- 044860-2.00007-6 Handayani,  V.,  &  Nurfadillah.  (2018).  KAJIAN
FARMAKOGNOSTIK  HERBA  MENIRAN HIJAU (Phyllanthus niruri L.) dan HERBA MENIRAN  MERAH  (Phyllanthus  urinaria L.). Jurnal Fitofarmaka Indonesia , 1 (1), 18 – 25.
Helmidanora,  R.,  Sukawaty,  Y.,  &  Warnida,  H. (2020). Penetapan Kadar Flavonoid Daun Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten) Steenis) Dengan Spektrofotometri Uv-Vis. Jurnal Farmasi Dan Kesehatan , 10 (2), 192 –
199. Hidayat,  R.  P.,  Dokter,  P.,  Kedokteran,  F.,  & Lampung, U. (2020). N-ACETYLCYSTEINE SEBAGAI TERAPI TOKSISITAS ACETAMINOPHEN. Jurnal Medika Hutama , 2 (1), 231 – 237. http://jurnalmedikahutama.com Kementerian  Kesehatan.  (n.d.). Prevalensi KASUS DBD INDONESIA 2021 .
Kementerian Kesehatan Indonesia. (n.d.). Kasus Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  Tahun
2022 . Korespondensi,  A.,  &  Benedictus  Sianipar,  N. (n.d.). TINJAUAN PUSTAKA Trombositopenia dan Berbagai Penyebabnya (Vol. 41, Issue 6). Lobang,  E.  W.  N.,  Putri,  I.  M.,  Hanafi,  Z.,  & Widhiyastuti, E. (2021). Pengaruh Kombinasi  Ekstrak  Carica  Papaya  dan Propolis Terhadap Peningkatan Trombosit. Jurnal  Farmasi  (Journal  of Pharmacy) , 9 (2), 26 – 32. https://doi.org/10.37013/jf.v9i2.107
Marisi Tambunan, R., Swandiny, G. F., & Zaidan,
S.  (2019).  Uji  Aktivitas  Antioksidan  dari Ekstrak  Etanol  70%  Herba  Meniran
(Phyllanthus  niruri  L.)  Terstandar. Sainstech Farma , 12 (2), 60 – 64. Masyarakat,  J.  K.,  Santika,  S.,  Komunitas,  N.  , Kawasan, P., & Rokok, T. (2012). EKSTRAK AKAR,  BATANG,  DAN  DAUN  HERBA MENIRAN  DALAM  MENURUNKAN  KADAR GLUKOSA DARAH . http://journal.unnes.ac.id/nju/index.php /kemas
Quraisy, A., & Hasni, N. (2021). Analisis Kruskal- Wallis  Terhadap  Kemampuan  Numerik Siswa. VARIANSI:  Journal  of  Statistics  and Its  Application  on  Teaching  and  Research , 3 (3), 156 – 161. https://doi.org/10.35580/variansiunm29 957 Quraisy,  A.,  &  Madya,  S.  (2021).  Analisis Nonparametrik  Mann  Whitney  Terhadap Perbedaan Kemampuan Pemecahan Masalah Menggunakan Model Pembelajaran  Problem  Based  Learning. VARIANSI:  Journal  of  Statistics  and  Its Application  on  Teaching  and  Research , 3 (1), 51 – 57. https://doi.org/10.35580/variansiunm23 810 Rivai,  H.,  Septika,  R.,  &  Boestari,  A.  (2013). KARAKTERISASI EKSTRAK HERBA MENIRAN  (Phyllanthus  niruri  Linn) DENGAN  ANALISA  FLUORESENSI.  In
Jurnal Farmasi Higea (Vol. 5, Issue 2). Rompis,  C.,  Sumampouw,  O.,  &  Joseph,  W. (2020). Apakah curah hujan berpengaruh terhadap  kejadian  demam  berdarah dengue? Public  Health  and  Community Medicine , 1 (1), 6 – 11.
Sari,  T.  T.  (2018).  Immune  Thrombocytopenic Purpura. SARI PEDIATRI , 20 (1), 58 – 64. Sukohar  A.  (2014). Demam  Berdarah  Dengue (DBD) . 2 (2), 1 – 15. Vifta. Laila, & Advitasari, Y. D. (2018). Skrining Fitokimia,  Karakterisasi  dan  Penentuan Kadar Flavonoid Total Ekstrak dan Fraksi- Fraksi  Buah  Parijoto  (Medinilla  speciosa B.) . 1 , 8 – 14. Wardana,  T.  T.  (2020). Faktor  faktor  yang berpengaruh terhadap kejadian trombositopenia pada pasien HIV/AIDS N . Widhawati, R., & Solehah, M. (2018). Pengaruh
Jambu Biji Terhadap Kenaikan Trombosit Pasien Demam Berdarah Dengue (DBD) Di Ruang  Ayana  Rumah  Sakit  Permata  Ibu Kunciran  Tangerang. Jurnal  Kesehatan , 7 (1), 1 – 9.