## JURNAL BIOSILAMPARI: JURNAL BIOLOGI

## BIOREMEDIASI Pb OLEH BAKTERI INDIGEN LIMBAH CAIR AGAR
Senja Ikerismawati 1* 1 Universitas Yudharta Pasuruan , Jl. Yudharta No 7 (Pesantren Ngalah) Sengon Agung Purwosari Pasuruan Jawa Timur 67152
*Corresponding author, e-mail: *rismawati@yudharta.ac.id

## A B S T R A C T
Bacteria  isolated  from  ad  environment  contaminated  with  heavy  metals  are  very potential as heavy metal bioremediation agents called indigenous bacteria. The purpose of this study was to isolate and identify indigenic bacteria that have the potential as Pb bioremediation agents in agar liquid waste and to analyze the ability of indigenic bacteria in  reducing  Pb.  The  research  design  used  Completely  Randomized  Design  (RAL)  two factorial with variation of bacteria and eight days of treatment. Data were analyzed using two-way ANOVA with Duncan's advanced test. The results showed that there were eight isolates  resulting  from  the  isolation  of  agar  liquid  waste.  The  isolates  of  liquid  waste indigen bacteria so that the most potential in reducing Pb were isolated H, E and F. The three isolates were able to reduce Pb in sterile agar liquid waste by 82.6%, 81.3% and 79.3%  for  eight  days  of  treatment.  The  identification  results  using  Microbact  TM  GNB 12A / B / E, 24 Identification Kits showed that H bacterial isolates were Bacillus alvei, E isolates were Bacillus pumilus species and F isolates were Bacillus lichenformis species
Keywords : Bioremediation, Indigenous, Bacteria, Pb, Agar Liquid Waste

## PENDAHULUAN
Perkembangan  dan  kemajuan  teknologi  yang  berhubungan  dengan pembangunan  di  sektor  industri  banyak  memberikan  keuntungan,  akan  tetapi kemajuan  teknologi  juga  memberikan  dampak  buruk.  Pembangunan  di  bidang industri  tidak  jarang  menimbulkan  dampak  negatif  berupa  limbah  yang  dihasilkan baik    dalam  bentuk  padat,  cair  dan  gas  (Khasanah,  2009).  Meningkatnya industrialisasi  akan  menyebabkan  pula  meningkatnya  keluaran  bahan  kimia berbahaya  ke  lingkungan  yang  berasal  dari  limbah  industri,  terutama  limbah  yang mengandung  logam  berat  (Gerdhart,  dkk,  2008).  Kontaminasi  oleh  logam  berat menjadi  perhatian  serius  karena  dapat  mencemari  lingkungan,  terakumulasi  dalam tumbuhan  dan  hewan  sehingga  dapat  masuk  ke  dalam  rantai  makanan  yang  dapat menyebabkan  penyakit-penyakit  degeratif  (Zahoor  &  Rehman,  2009).  Salah  satu logam  berat  yang  memiliki  tokisitas  tinggi  adalah  Pb.  Logam  Pb  merupakan  neuro toxin yang bersifat kumulatif, destruktif dan kontinu pada sistem haemofilik, kardio- vaskuler dan ginjal (Gusnita, 2012)
Logam berat bersifat nonbiodegradable sehingga proses degradasi dan reduksi logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik (Gupta & Rastolgi, 2008). Degradasi  dan  reduksi  logam  berat  dapat  dilakukan  dengan  cara  fisik  dan  kimia melalui  pertukaran  ion,  presipitasi,  koagulasi, inverse  osmosis dan  adsorpsi.  Semua metode  tersbut  cukup  efisien  tetapi  akan  sangat  merugikan  jika  digunakan  untuk mengelola  limbah  industri,  karena  relatif  mahal,  membutuhkan  energi  dan  bahan kimia yang cukup besar (Zulaiaka, dkk., 2012) serta membutuhkan peralatan khusus (Park,  dkk.,  2010).  Pendekatan  secara  bioteknologi  dengan  menggunakan  bakteri
merupakan  alternatif  cara  yang  dapat  dilakukan  untuk  masa  yang  akan  datang  dan merupakan  rekayasa  yang  cukup  menjanjikan  (Vijayaraghavan  &  Yun,  2008). Pendekatan  secara  bioteknologi  secara  teknis  maupun  ekonomis  sangat menguntungkan dan merupakan cara yang ramah lingkungan (Suhendrayatna, 2011). Bioteknologi  menggunakan  bakteri  disebut  bioremediasi,  merupakan  proses penghilangan  logam  dengan  memanfaatkan  aktivitas  metabolisme  mikroogranisme (Lutfi, dkk., 2018). Bakteri indigen merupakan bakteri yang diisolasi dari limbah itu sendiri  yang  secara  alamiah  hidup  pada  limbah,  sehingga  berpotensi  dalam  proses bioremediasi (Fidiastuti & Suarsini, 2017)
Hasil  Observasi  limbah  cair  industri  penepungan  agar  di  PT  Agar  X,  Lawang Malang  diperoleh  data  bahwa  limbah  cair  proses  penepungan  agar  mengandung logam berat Pb sebesar 2,42 mg/L. Nilai tersebut sangat tinggi apabila dibandingkan dengan persyaratan logam berat Pb dalam air berdasarkan Peraturan Pemerintah RI No 82 Tahun 2001, nilai ambang batas logam berat Pb untuk baku mutu air kelas 1 sampai  dengan  kelas  3  adalah  sebesar  0,003  mg/L.  Mengacu  kepada  fakta  tersebut bahwa kandungan logam Pb dalam limbah cair industri pengolahan tepung agar telah melebihi ambang batas baku mutu air.

## M E T O DE
Penelitian ini merupakan penelitian deskriktif eksploratif dengan pendekatan observasi  laboratorium  yang  bertujuan  untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi bakteri  indigen  yang  berpotensi  sebagai  agensia  bioremidasi  Pb  pada  limbah  cair penepungan  agar.  Alat  yang  digunakan  adalah autoclaf, cawan  Petri,  tabung  reaksi, erlenmeyer,  batang  pengaduk,  erlenmeyer,  gelas  ukur,  timbangan  analitik,  lemari pendingin,  kompor  gas,  kontainer  es,  plastik  steril,  botol  steril,    inkubator shaker, aminar  air  flow,  inkubator,  tabung  reaksi,  votex,  mikro  pipet  5  ml  dan  10  ml,  rak tabung, bunsen, jarum ose, colony ounter , mikroskop, kaa benda, kaca benda cekung, kaca  penutup,  mangkuk  pewarna  kawat  penyangga,  pipet,  pinset,  bunsen,  botol penyemprot  dan  jarum  ose.  Bahan  yang  digunakan  adalah  medium  Luria  Bertani, nutrien  agar,  nutrien  cair,  pepton,  sampel  limbah  cair,  alkohol  70%,  aquades  steril, lisol,  kertas  penghisap,  sabun  cuci,  bahan  pewarnaan  gram,  alumunium  foil,  kertas label, tissu, kapas dan kasa

## Cara Kerja
Cara kerja penelitian ini sesuai dengan Pambudiono dkk  (2017) dengan modifikasi.

## Pengambilan Sampel Air Limbah
Sampel  air  limbah  diambil  dari  kolam  IPAL  PT  Agar  X  di  Lawang,  Malang menggunakan  botol  sampel  steril  pada  tiga  titik  pengambilan  dengan  tiga  kali ulangan  dan  ditransportasikan  dalam  termos  berisi  es  menuju  laboratorium  dan disimpan di lemari es selama penelitian berlangsung.

## Isolasi Bakteri Resisten Pb
Sampel  limbah  sebanyak  50  ml  dicampurkan  dengan  medium  Luria  Bertani 450 ml yang telah ditambah dengan Pb(NO 3 ) 2 sebanyak 1,65 mg sehingga konsentrasi logam berat Pb dalam 500 ml (limbah cair + medium Luria bertani) sebesar 3,3 ppm dan dikocok menggunakan shaker dengan kecepatn 100 rpm selama 7 hari. Setelah 7 hari,  sampel  limbah  diambil  sebanyak  1ml  diencerkan  hingga  konsentrasi  10 -10 menggunakan pepton water 9 ml dan diinokulasikan kedalam medium lempeng NA- Pb dan diinkubasi selama 2x24 jam pada suhu 37°C. Koloni bakteri yang tumbuh pada medium  lempeng  dipurifikasi  hingga  diperoleh  isolat  murni  dan  dilakukan pengkodean dan pengamatan morfologi.

## Uji Reduksi Pb Oleh Isolat Bakteri
Uji  kemampuan  isolat  bakteri  dalam  menurunkan  (mereduksi)  Pb  dilakukan dengan menginokulasikan tiap isolat bakteri hasil isolasi pada limbah cair agar steril selama 8 hari. Biakan murni tiap isolat bakteri dibiakkan dalam medium NC dengan konsentrasi  1,5x10 8 diinokulasikan  kedalam  botol  sampel  berisi  limbah  cair  agar steril  dengan  rasio  1:10  dan  digunakan  kontrol  adalah  aquades  steril.  Dikocok menggunakan shaker dengan kecepatan 100rpm. Setiap hari selama 8 hari dilakukan analisis  konsentrasi  Pb  menggunakan  metode spektrofotometry. Data  dinalisis menggunakan  ANAVA  dua  arah  dengan  uju  lanjut  Duncan  dengan  menggunakan software SPSS ver 18.

## Karakterisasindan Identifikasi Isolat Bakteri
Bakteri  paling  potensial  dalam  mereduksi  Pb  yang  terpilih  selanjutnya dilakukan karakterisasi dan indentifikasi menggunakan Microbact TM GNB 12A/B/E, 24  Identification  Kits. Data  hasil  isolasi  bakteri  indigen  limbah  cair  agar  dianalisis secara deskriptif.

## H A S I L D AN PE M B A H A S AN
Isolasi  bakteri  indigen  Limbah  cair  agar  (LCA)  berhasil  memperoleh  8  isolat bakteri yang dapat hidup dan tumbuh dalam medium Luria Bertani yang diperkaya dengan  Pb(NO 3 ) 2 dengan  konsentrasi  sebesar  3,3  ppm.  Adapun  ciri  morfologi kedelapan isolat bakteri hasil isolasi disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Ciri Morfologi Isolat Bakteri Indigen Hasil Isolasi
Kode Koloni Warna Bentuk Tepi Elevasi Mengkilat/su ram A krem bundar Kerang datar suram B krem bundar Licin timbul mengkilat C putih bundar menyebar datar suram D krem konsentris Berlekuk datar suram E putih tak beraturan  Berlekuk datar suram F krem bundar Kerang timbul suram G putih bundar menyebar datar suram H putih tak beraturan  Tak beraturan datar suram
Kedelapan macam isolat bakteri tersebut berhasil tumbuh sehingga memiliki potensi  dalam  menurunkan  konsentrasi  logam  berat  Pb.  Hal  ini  sesuai  dengan peryataan  Suyasa  (2012)  bahwa  pada  lingkungan  atau  habitat  yang  tercemar  serta kolam  pengolahan  limbah  dimungkinkan  terdapat  bakteri  pendegradasi  zat pencemar,  secara  alamiah  dimana  bakteri  tersebut  dapat  bersaing    maupun berkonsorsium  dengan  bakteri  lainnya.  Bakteri  yang  diisolasi  dari  lingkungan  yang tercemar  logam  berat  mempunyai  tolereansi  terhadap  logam  berat  yang  ada disekitarnya (Chojnacka, 2010).
Untuk  mengetahui  kemampuan  isolat  bakteri  indigen  dalam  menurunkan konsentrasi  logam  Pb  dilakukan  uji  reduksi.  Hasil  uji  ANAVA  dua  arah  (Tabel  2) menunjukkan bahwa variasi isolat bakteri, lama perlakuan dan kombinasi keduannya memiliki  pengaruh  terhadap  penurunan  (reduksi)  logam  Pb  Hal  ini  ditunjukkan dengan nilai signifikansi kurang dari  =5%
Tabel 2. Hasil Pengujian ANAVA Dua arah Sumber Signifikansi Keterangan Variasi Bakteri 0.000 Berbeda Nyata Lama Perlakuan (Hari) 0.000 Berbeda Nyata Variasi Bakteri * Hari 0.000 Berbeda Nyata
Untuk mengetahui pada variasi bakteri mana, hari ke berapa serta kombinasi antara hari dan variasi bakteri yang menyebabkan perbedaan penuruan konsentrasi Pb maka dilakukan uji lanjutan (Tabel 3).
Tabel 3. Hasil Uji Lanjut Penurunan (Reduksi) Konsentrasi Pb Berdasarkan Variasi Bakteri
Variasi Bakteri Rata-Rata (ppm) Notasi A 1,2131 g B 1,1206 f C 1,0538 e D 1,0122 c E 0,9667 b F 1,0105 c G 1,0238 d H 0,9571 a Kontrol 1,5377 h
Berdasarkan  Tabel  3  dapat  diketahui  bahwa  semua  jenis  bakteri  memiliki perbedaan  penuruan  konsentrasi  Pb  pada  limbah  cair  agar,  terkecuali  untuk  jenis bakteri  F  dan  D  yang  ditunjukkan  dengan  notasi  sama  yaitu  c.  Hasil  uji  lanjutan penurunan  konsentrasi  logam  Pb  berdasarkan  lama  perlakuan  (hari)  dapat  dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil Uji Lanjutan Reduksi Pb Berdasarkan Hari Hari 1 2 3 4 5 6 7 8 notasi 1 — 0.000*  0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000*  0.000* a 2 — 0.000* 0.000* 0.000* 0.000* 0.000*  0.000* b 3 — 0.000* 0.000* 0.000* 0.000*  0.000* c 4 — 0.000* 0.000* 0.000*  0.000* d 5 — 0.000* 0.000*  0.000* e 6 — 0.000*  0.000* f 7 — 0.000* g 8 — h
* : berbeda nyata pada taraf 5%
Berdasarkan Tabel 4 dapat diketahui bahwa terjadi penurunan konsentrasi Pb dari hari ke hari. Hal ini ditunjukkan dari nilai signifikansi masing pasangan hari yang kurang  dari  =5%  serta  notasi  yang  berbeda.  Untuk  mengetahui  lebih  jelas kombinasi antara hari dan variasi bakteri yang menyebabkan penuruan konsentrasi Pb dapat dilihat pada Gambar 1
Berdasarkan Gambar 1 dapat diketahui bahwa pada setiap jenis bakteri yang diamati  selama  8  hari  mengalami  penurunan  konsentrasi  logam  Pb.  Penurunan konsetrasi  logam  berat  Pb  pada  limbah  cair  agar  dengan  konsetrasi  paling  kecil terjadi pada hari ke-8 dengan jenis bakteri H yaitu sebesar 0.26 ppm.
Gambar 1. Grafik Kombinasi Variasi Bakteri dan Hari Terhadap Penurunan Konsentrasi Pb
Tabel 5 . Nilai Efisiensi Isolat Bakteri Indigen Jenis isolat Awal (ppm) Akhir (ppm) Efisiensi (%) A 1,557 0,628 59,66 B 1,557 0,552 64,54 C 1,557 0,421 72,96 D 1,557 0,385 72,27 E 1,557 0,291 81,31 F 1,557 0,322 79,31 G 1,557 0,338 78,29 H 1,557 0,255 83,62
Berdasarkan hasil uji statistik dan nilai efisiensi tiap isolat bakteri (Tabel 5), maka bakteri indigen limbah cair agar paling potensial dalam mereduksi logam berat Pb adalah bakteri F, E dan H.. Isolat bakteri F, E dan H merupakan isolat bakteri yang memiliki  kemampuan  menurunkan  logam  berat  Pb  paling  potensial,  karena  ke  tiga isolat  tersebut  dapat  menurunkan  logam  berat  Pb  dengan  konsentrasi  terkecil. Kemampuan  efiseiensi  reduksi  logam  berat  Pb  isolat  F  sebesar  79,31%,  isolat  E sebesar 81,31% dan isolat H sebesar 83,62%. Ketiga isolat tersebut mempunyai nilai efisiensi  reduksi  yang  paling  tinggi.  Nilai  akhir  konsentrasi  logam  berat  Pb  yang dicapai oleh isolat bakteri F, E dan H berturut-turut sebesar 0,32 ppm; 0,29 ppm; dan 0,25 ppm. Nilai akhir tersebut telah memenuhi baku mutu air golongan 4
Perbedaan  kedelapan  isolat  bakteri  dalam  menurunkan  logam  Pb  dapat disebabkan  oleh  perbedaan  metabolisme  dari  masing-masing  isolat.  Metabolisme bakteri  berkaitan  erat  dengan  mekanisme  toleransi  atau  resitensi  bakteri  terhadap logam  berat  Pb.  Sebagian  besar  bakteri  toleran  terhadap  logam  berat  dengan  cara melakukan mekanisme efflux (Spain, 2003). Terdapat juga mekanisme toleransi atau resistensi  lainya,  yaitu  dengan  cara  kompleksasi  meliputi  produksi  polisakarida ekstraselular  (EPS)  bersifat  anion  yang  berfungsi  sebagai  bioakumulator,  produksi metabolit  organik  yang  memiliki  sifat  pengkelat  dan  membentuk  kompleks  dengan logam,  presipitasi,  kristalisasi  ekstraselular  oleh  bakteri  pereduksi  sulfat  sehingga membentuk  deposit  sulfida  yang  kaya  akan  logam  dan  biakumulasi  interseluler melalui pembentukan metallotionein (protein kaya sistein dalam sel dapat mengikat logam)  yang  berfungsi  untuk  detoksifikasi,  penyimpanan,  dan  regulasi  ion  logam dalam sel (Naik & Dubey, 2013).
Ketiga  isolat  bakteri  yang  paling  berpotensi  mereduksi  Pb  selanjutnya  dilakukan karakterisasi dan identifikasi. Ketiga isolat bakteri memiliki karakter yang sama yaitu bakteri Gram Positif dan berbentuk basil (Gambar 2).  Hasil identifikasi menggunakan Microbact TM GNB 12A/B/E, 24 Identification Kits disajikan pada Tabel 6.
Gambar 2. Pewarnaan Gram  Isolat H, E dan F dari kanan ke kiri
Tabel 6 . Hasil Uji Microbact TM GNB 12A/B/E, 24 Identification Kits Jenis Tes E F H BGP + + + Spora + + + FERMENT GULA-GULA Glukosa + + + Xylosa - + - Mannitol + + - Laktosa - - - Sukrosa + + + Maltosa + + + Arabinosa + + - SUHU PERTUMBUHAN 20°C + + + 37°C + + + 40°C + + + 45°C + + + TUMBUH DI Nutrient Broth + + + SDA - - - TSI A/AH2S- A/AH2S- A/AH2S- Citrat + + - Indol + - + VP + + + Indol + - + VP + + + NaCl 7% + - + Mortilitas + + + Strach Hidrolisis - + + Casein Hidrolisis + + + PENICILIN Sensitif Sensitif Sensitif BETA-HEMOUSA + + + Katalase + + + Oksidase + + + Reduksi Nitrat - + - Reduksi Metylene Blue - - - DX-Lab B. pumilus B. lichenformis B. alvei
Tabel  6  menunjukkan  bahwa  ketiga  isolat  bakteri  indigen  tersebut  dalam genus  yang  sama  yaitu  genus  Bacillus.  Bakteri  yang  tergolong  genus  Bacillus merupakan  bakteri  yang  resisten  terhadap  logam  berat  Cu,  Cd,  Pb  dan  Hg  (Zulaika, dkk., 2012). Bakteri Bacillus merupakan bakteri lokal yang mampu menyerap logam berat  kedalam  sel-selnya  sehingga  logam  berat  tersebut  tidak  dapat  bergerak kedalam substrat lebih jauh atau terbawa aliran air bawah (Pudji dkk., 2006). Hasil
identifikasi  menunjukkan  bahwa  Isolat  H  merupakan  spesies Bacillus  alvei, isolat  E merupakan  spesies Bacillus  pumilus dan  isolat  F  merupakan  spesies Bacillus lichenformis.

## SIMPULAN
Isolat  bakteri  indigen  limbah  cair  agar  yang  berpotensi  untuk  mereduksi logam Pb adalah isolat H, E dan F . Ketiga isolat mampu menurunkan logam Pb pada limbah  cair  agar  steril  sebesar  83,62%,  81,31%  dan  79,31%.  isolat  Bakteri  H merupakan Bacillus  alvei, isolat  E  merupakan  spesies Bacillus  pumilus dan  isolat  F merupakan spesies Bacillus lichenformis
REFERENSI
Chojnacka,  K.  (2010).  Biosorption  and  Bioaccumulation  The  Prospects  for  Practical Applications. Environment International, 39 (3): 299-307. Fidiastuti,  H.,  &  Suarsini,  E.  (2017).  Potensi  Bakteri  Indigen  dalam  Mendegradasi Limbah  Cair  Pabrik  Kulit  Secara  In  Vitro. Bioeksperimen:  Jurnal  Penelitian Biologi , 3(1), 1-10. Gerdhart,  K.E.,  Huang,  X.,  Bernard  R.,  Greenberg.,  and  Bruce,  M.  (2008). Phytoremediation of organic soil contaminants: Potential and Challenge s. Plant Science, 176 (1):20-30.
Gusnita,  D.  (2012).  Pencemaran  Logam  Berat  Timbal  Di  Udara  dan  Upaya Penghapusan Bensin Bertimbal. Berita Dirgantara , 13 (3): 95-101. Gupta, V.K dan Rastolgi, A. (2008). Biosorption of Lead (II) From Aques Solutions by Non  Living  Algal  Biomass Oedogonium sp. and Nostoc sp. : A  Comparative Study,  Colloids  and  Surfaces .    Colloids  and  Surfaces  B:  Biointerfaces, 64  (2): 170-178.
Khasanah, Eliya. (2009). Adsorpsi Logam Berat. Oseana , XXXIV(4), 1-7. Lutfi,  SR.,  Wignyanto,  &  Kurniati,  E.  (2018).  Bioremediasi  Merkuri  Menggunakan Bakteri  Indigenus  dari  Limbah  Penambangan  Emas  di  Tumpang  Pitu Banyuwangi. Jurnal Teknologi Pertanian, 19 (1): 15-24. Naik,  M.M,  &  Dubey,  S.K.  (2013).  Lead  Resistant  Bacteria:  Lead  resistance mechanisms,  their  application  in  lead  bioremediation  and  biomonitoring. Ecotoxicology and Environmental Safety , 98(1), 1-7.
Pambudiono, A., Suarsini, E., & Amin, M. (2017) The Potensial of  Indigenous Bacteria for Removing Cadmium from Industrial Wastewater in Lawang East Java. The Jurnal of Tropical Life Science, 8(1), 62-67.
Park, J., Bolan, N., Megharaj, M & Naidu, R. (2010). Isolation of Phosphate-Solubilizing Bacteria  and  Characterization  of  Their  Effect  on  Lead  Immobilization. Pedologist , 53(3): 67-75
Peraturan  Pemerintah  Republik  Indonesia  Nomor  82  Tahun  2001. Tentang Pengelolaan Kualitas Air dan Pengendalian Pencemaran Air.
Pudji  S.R,  Sumingkrat,  Noer.  S.T,  Agustina  S,  Trisni  A,  Rofienda,  &  Deni.  (2006). Penelitian  Bioremediasi  (Ex-Situ)  Tanah  Terkontaminasi  Limbah  B3  Yang Mengandung Logam Berat . Buletin Penelitian, 28 (1): 8-17.
Suhendrayatna.  (2001). Bioremoval  Logam    Berat  dengan  Menggunakan Microorganime:  Suatu  Kajian  Kepustakaan  (Heavy    metal    bioremoval  by microorganisms  :  A  literature  study). Prosiding  Bioteknologi  untuk  Indonesia Abad 21. Sinergy Forum  - PPI Tokyo Institute of Technology
Suyasa, I.WB. (2012). Bakteri Pendegradasi Minyak Dari Beberapa Sedimen Perairan Tercemar dan Bak Penampungan Limbah. Bumi Lestari Journal of Environment, 7(1): 1-6.
Spain, A. (2003). Implications of microbial heavy metal tolerance in the environment.
Reviews in Undergraduate Research 2, 1-6.
Vijayaraghavan,  K.  &  Yun,  Y.S.  (2008).  Bacterial  biosorbents  and  biosorption.
Biotechnology Advances., 26 (3): 266-291 .
Zahoor, A. & Rehman, A. (2009). Isolation of Cr(VI) reducing bacteria from industrial effluents  and  their  potential  use  in  bioremediation  of  chromium  containing wastewater. Journal of Environmental Sciences , 21 (6): 814 – 820
Zulaika,  E.  (2012) .  Bakteri  Resisten  Logam  Berat  Yang Berpotensi  Sebagai  Biosorben dan  Bioakumulator. Seminar  Nasional  Waste  Managament  For  Suistainable Urban Developing Teknik Lingkungan ITS. Surabaya: ITS