DOI: 10.6066/jtip.2015.26.2.232 Hasil Penelitian

## SINTESA  POP FAT MELALUI  INTERESTERIFIKASI  DAN  FRAKSINASI BERBAHAN  MINYAK  SAWIT  DAN  OLEIN  SUPER TERHIDROGENASI
[Synthesis of POP Fat via Interesterification and Fractionation Based on Plam Oil and Hydrogenated Super Olein]
Hasrul Abdi Hasibuan 1) *, Syamsyah  Fitri 2) , dan Aga Prima Hardika 1)
1) Pusat Penelitian Kelapa Sawit, Jl.Brigjend Katamso No.51, Medan
2) Pendidikan Tinggi Kimia Industri, Jl. Menteng, Medan
Diterima 16 Juni 2015 / Disetujui 24 Desember 2015

## ABSTRACT
Interesterification of fat b lends containing palm oil (RBDPO) and hydrogenated super olein (HSOL) at weight ratios of 3:1, 2:1, 1:1, 1:2 and 1:3 and fractionation was studied for production POP  fat. POP fat is cocoa b utter equivalent (CBE) which contains high triglyceride of 1,3 -dipalmitoyl-2-oleoyl-glycerol (POP) and  its  can  b e used as alternative fat for cocoa b utter with the standard i.e. triglyceride composition of saturated-unsaturated-saturated  (SUS)  more  than  65%  and  melting  point  ab out  of  32-35°C. Interesterification was conducted chemically using sodium methoxide. Then, interesterified product was fractionated  two  stages  using  hexane  and  acetone  as  solvent,  respectively.  Interesterificatio n  of  the sub trates  resulted  change  of  triglycerides  composition  of  PPP,  PPS,  POP,  POS  and POO which were showed with the concentration of several triglycerides were increased, some were decreased and several new  triglycerides  were  formed.  The  change  of  tri glyceride  structure  cause  melting  point  and  solid  fat content  were  decreased.  Fractionation  2  stages  of  interesterified  product  resulted  fat  containing  high triglyceride  of  POP  (ab ove  62%)  and  POS range of 10 -17% and melting point ab out of 35-39°C. This product can b e categorized as CBE which produced from the sub strate of RBDPO to HSOL at weight ratio was 2:1 with characteristic i.e. POP 68.2%, POS 10.8 % and melting point of 35°C.
Keywords: cocoa b utter equivalent, interesterification, palm oil, POP fat, sodium methoxied

## ABSTRAK
Interesterifikasi campuran antara refined b leached deodorized palm oil (RBDPO) dan olein super terhidrogenasi (HSOL) pada rasio berat 3:1, 2:1, 1:1, 1:2 dan 1:3 yang dilanjutkan dengan fraksinasi telah dilakukan  untuk  mensintesis  POP  f at . POP  f at merupakan cocoa  b utter  equivalent (CBE)  yang mengandung  trigliserida  1,3- dipalmitoyl -2- oleoyl-glycerol (POP)  dan  dapat digunakan sebagai  lemak pengganti cocoa b utter dengan standar meliputi komposisi trigliserida saturated-unsaturated-saturated (SUS) > 65% dan titik leleh  berkisar 32-35°C. Interesterifikasi dilakukan secara kimiawi menggunakan natrium  metoksida.  Selanjutnya,  produk  terinteresterifikasi  difraksinasi  dua  tahap  masing -masing menggunakan  pelarut  heksan  dan  aseton.  Interesterifikasi  dari  substrat  menghasilkan  perubahan komposisi trigliserida PPP, PPS, POP, POS dan POO yang ditunjukkan dengan konsentrasi beberapa trigliserida  meningkat,  beberapa  menurun  dan  ada  terbentuk  trigliserida baru. Perubahan komposisi trgiliserida ini menyebabkan titik leleh dan kandungan lemak padat menurun. Fraksinasi 2 tahapan dari produk terinteresterifikasi menghasilkan lemak yang mengandung  trigliserida POP tinggi (lebih dari 62%) dan  POS  berkisar  antara  10-17%  serta  titik  leleh  sebesar 35-39°C. Produk yang dihasilkan ini dapat dikategorikan sebagai CBE yang dihasilkan dari campuran RBDPO dan HSOL pada rasio 2:1 dengan komposisi POP 68,2%, POS 10,8% dan titik leleh 35°C.
Kata kunci: cocoa b utter equivalent , interesterifikasi, minyak sawit, natrium metoksida, POP fat
PENDAHULUAN 1
Cocoa  Butter (CB)  mengandung  asam  palmitat (C16:0)  24,4%,  asam  stearat  (C18:0)  33,6%,  asam oleat  (C18:1)  37%,  asam  linoleat  (C18:2)  3,4%  dan yang  lainnya  1,6%.  Komposisi  trigliserida  CB  adalah
*Penulis Korespondensi: E-mail:  hasibuan_abdi@yahoo.com
1,3- dipalmitoyl -2- oleoyl-glycerol (POP)  10-20%,  1(3) - palmitoyl -3(1) stearoyl -2- oleoylglycerol (POS) 40- 55%,  SOS  (1,3- distearoyl -2- oleoylglycerol )  20-30% dan  asam  oleat  berada  pada  sn-2  dari  gliserol (Tchobo et  al., 2009;  Shekarchizadeh et  al., 2009;
Shekarchizadeh et al., 2014).
Komposisi  trigliserida  yang  spesifik,  CB  me- miliki  titik  leleh  yang  sempit  berkisar  antara  32-35°C sehingga  mudah  mencair  di  dalam  mulut  namun berbentuk  padat  pada  suhu  ruang  (Zaidul et  al., 2007;  Liu et  al., 2007). Cocoa  butter memiliki  harga tertinggi  dari  semua  jenis  minyak  dan  lemak  ko- mersial  dikarenakan  oleh  ketersediaannya  rendah dan  permintaannya  tinggi  (Jahurul et  al., 2014). Sebagai  alternatif  CB  dikembangkan  produk  yang menyerupainya  seperti cocoa  butter  substitute (CBS)  jenis  laurat  atau non laurat  dan cocoa  butter equivalent (CBE)  (Nazaruddin et  al., 2011;  Naik  dan Kumar,  2014).  CBS  memiliki  kemiripan  sifat  fisika dengan  CB  sementara  CBE  mirip  secara  fisika  dan kimia,  oleh  karena  itu,  CBE  dapat  dicampur  dengan CB. (O’brien,  2004;  Naik  dan  Kumar,  2014).  CBE memiliki  harga  30%  lebih  murah  dibandingkan dengan  CB  sehingga  pencampuran  antara  kedua- nya  dapat  menekan  biaya  produksi  dalam  pem- buatan  cokelat (Zaliha  dan  Norizzah,  2012).
Di  Indonesia,  CBE  secara  komersial  telah dihasilkan  dari  minyak  sawit  ( refined  bleached  deo- dorized  palm  oil, RBDPO)  yang  difraksinasi  multi- tahap  hingga  5  kali  tahapan.  Produk  yang  dihasilkan dikenal  sebagai hard  palm  mid  fraction ( hard PMF) yang  memiliki  bilangan  iodin  33,8-36,2  Wijs.  Namun dengan  cara  ini,  waktu  untuk  menghasilkan  CBE relatif  lama,  biaya  tinggi  dan  rendemennya  rendah (Zaidul et  al. ,  2007;  Elisabeth,  2009).  Selain  CBE, CBS  jenis  laurat  dan  non  laurat  juga  telah  dihasilkan menggunakan  teknologi  hidrogenasi  dan  fraksinasi. CBS  non  laurat  yang  dihasilkan  dari  minyak  sawit mengandung  asam  lemak  trans  (asam  elaidat) tinggi.  Hasibuan  dan  Siahaan,  2013  melaporkan bahwa  kadar  asam  lemak  trans  pada  CBS  non laurat  yang  dihasilkan  di  Indonesia  sebesar  52,02- 58,17%.  Cara  lain  untuk  menghasilkan  CBE  adalah dengan  interesterifikasi  antara  minyak  dan  lemak. Ciftci et  al., 2008  telah  melakukan  asidolisis  asam palmitat  dan  stearat  ke  dalam  triolein.  Sementara, Mohamed,  2012  telah  melakukan  interesterifikasi enzimatis  antara palm  olein dan  asam  lemak  jenuh destilat.  Selain  itu,  Abigor et  al., 2003  dan Soekapitojo et  al., 2009  melakukan  interesterifikasi fraksi  minyak  sawit  dengan  minyak  kedelai  terhidro- genasi  sebagai  asil donor  stearat.
Minyak  sawit  jenis olein  super memiliki  bilangan iodin  berkisar  60-64  Wijs  dengan  kandungan  asam oleat 42,61-46,03% dan  linoleat  11,37-14,07% (Hasibuan,  2012).  Hidrogenasi olein  super meng- konversi  asam  oleat,  linoleat  dan  linolenat  menjadi stearat.  Dengan  demikian, olein  super terhidro- genasi  (HSOL)  dapat  digunakan  sebagai  asil  donor palmitat  dan  stearat  bagi  RBDPO  dalam  sintesa CBE  yang  rendah  asam  lemak  trans.  Pada penelitian  ini  dilakukan  sintesa  POP fat sebagai CBE  melalui  interesterifikasi  antara  RBDPO  dan HSOL  secara  kimiawi  yang  dilanjutkan  dengan
fraksinasinya.  Produk  yang  dihasilkan  diharapkan memiliki  karakteristik  yang  menyerupai  CBE.  Selain itu,  penelitian  ini  juga  mempelajari  pengaruh  ber- bagai  rasio  berat  substrat  terhadap  karakteristik produk  CBE  yang  dihasilkan,  terutama  komposisi trigliserida  dan  profil  pelelehannya.

## BAHAN  DAN METODE

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini antara  lain  bahan  utama refined  bleached  deo- dorized  palm  oil (RBDPO)  dan olein  super (PT. Wilmar  Internasional,  Sumatera  Utara) . Sebagai pembanding  digunakan  POP fat komersial  (PT. Wilmar  Internasional,  Sumatera  Utara)  dan cocoa butter (CB)  (Pusat Penelitian  Kopi  dan  Kakao).
Persiapan hydrogenated  super  olein (HSOL) Hydrogenated super olein (HSOL) dibuat dengan  cara  hidrogenasi olein  super yang  dilakukan pada  reaktor  bertekanan.  Sebanyak  1000  g olein super dihidrogenasi  dengan  bantuan  katalis  nikel 0,5%  (Engelhard  De  Meen,  Germany)  dan  gas hidrogen  teknis  (PT.  Tri  Gasses,  Indonesia)  pada tekanan  7,5  bar,  suhu  reaksi  170°C,  kecepatan  pe- ngadukan  500  rpm  dan  waktu  reaksi  selama  8  jam. Setelah  waktu  tercapai  produk  hidrogenasi  didingin- kan  hingga  suhu  80-90°C  dan  selanjutnya  disaring menggunakan  kertas  saring  Whatman  No.  42. Produk  HSOL  kemudian  dideodorisasi  pada  suhu 245°C  selama  2  jam.  Peralatan  untuk  deodorisasi dirancang  menggunakan  labu  leher  3  (Pyrex, Germany),  kondensor  (Pyrex,  Germany),  pompa vakum  (Vacuubrand  2,5,  Germany)  dan  elektro- mantel  (Shin  Saeng,  China).  Selanjutnya,  produk HSOL  dikarakterisasi  meliputi  titik  leleh  dan  kom- posisi asam lemak.

## Interesterifikasi
Interesterifikasi  antara  RBDPO  dan olein  super terhidrogenasi  dilakukan  pada  rasio  berat  3:1,  2:1, 1:1,  1:2,  dan  1:3  menggunakan  katalis  natrium metoksida  (Merck,  Germany).  Sebanyak  50  g campuran  RBPDO  dan olein  super terhidrogenasi dengan  rasio  berat  tertentu  dipanaskan  pada  suhu 90°C  selama  15  menit  menggunakan hot  plate (Thermo  Scientific,  Germany).  Natrium  metoksida sebanyak  0,4%  (b/b)  (Merck,  Germany)  dari  substrat ditambahkan,  kemudian  campuran  diaduk  pada kecepatan  200  rpm  dan  dipanaskan  pada  suhu  90°C selama  1  jam.  Pada  akhir  reaksi  ditambahkan  asam sitrat  (25%)  sebanyak  1%  dari  substrat  dan  diaduk selama  15  menit.  Produk  interesterifikasi  dicuci menggunakan  air  bersuhu  90°C  sebanyak  3  kali. Setiap  perlakuan  dilakukan  ulangan  sebanyak  2  kali. Selanjutnya,  produk  interesterifikasi  dikarakterisasi meliputi titik  leleh,  komposisi  trigliserida  dan kandungan  lemak padat.
J. Teknol. dan Industri Pangan Vol. 26(2): 232-240 Th. 2015
Fraksinasi Produk interesterifikasi dilarutkan dengan heksan  pada  rasio  berat  1:5  dan  dinetralisasi dengan  NaOH  0,1  N  (dalam  etanol  50%  dengan indikator  PP).  Lapisan  atas  disaring  menggunakan Na 2 SO 4 dan  didinginkan  dalam water  bath (Thermo Scientific,  Germany)  pada  4°C  selama  4  jam. Setelah  waktu  tercapai  padatan  disaring  dan  fraksi cair  dihilangkan  pelarut  heksan  dengan  cara  pe- nguapan  menggunakan  rotary  evaporator  (Buchi, Switzerland).  Hasil  evaporasi  dilarutkan  dengan aseton  pada  rasio  berat  1:5  dan  didinginkan  dalam water  bath pada  4°C  selama  4  jam.  Setelah  waktu tercapai  fraksi  padat  dipisahkan  dan  pelarut  aseton dihilangkan  dengan  cara  penguapan  menggunakan rotary evaporator. Setiap perlakuan dilakukan ulangan  sebanyak  2  kali.  Selanjutnya,  produk  frak- sinasi  dikarakterisasi  meliputi  titik  leleh,  komposisi trigliserida  dan  kandungan  lemak padat.

## Analisa komposisi  asam lemak
Analisa  komposisi  asam  lemak  ditentukan menggunakan  alat  kromatografi  gas  (GC-2010, Shimadzu)  dengan  mengacu  pada  metode  standar AOCS,  1997 Official  Method Ce  1b-89.  Sebanyak 0,025  g  sampel  ditambahkan  1,5  mL  NaOH metanolik  0,5  N  (Merck,  Germany).  Campuran kemudian  dipanaskan  dalam water  bath pada  suhu 80°C  selama  5  menit.  Campuran  didinginkan kemudian  ditambahkan  2  mL  BF 3 metanol  (14%  b/v) (Merck,  Germany)  dan  dipanaskan  kembali  dalam water  bath pada  suhu  80°C  selama  30  menit. Campuran  didinginkan  kemudian  ditambahkan  1  mL isooktan  (Merck,  Germany)  dan  diaduk  selama  1-2 menit.  Campuran  ditambahkan  5  mL  NaCl  jenuh (Merck,  Germany)  dan  diaduk.  Lapisan  isooktana dipisahkan  dan  dipindahkan  ke  dalam  vial  lalu diinjeksikan  sebanyak  0,1  µL  ke  dalam  kromatografi gas. Kolom yang digunakan dalam analisa komposisi asam lemak adalah DB-23 J&W Scientific.  Kondisi  operasi  kromatografi  gas  adalah suhu detektor 260°C, suhu injektor 260°C. Temperatur  oven  terprogram  dengan  kondisi  awal 70°C,  kemudian  dinaikkan  sebesar  20°C/menit hingga  180°C,  kemudian  naik  1°C/menit  hingga 182°C,  kemudian  naik  10°C/menit  hingga  220°C  dan ditahan  selama  2 menit.

## Analisa komposisi  trigliserida (TG)
Analisis  komposisi  TG  dilakukan  mengguna- kan  kromatografi  gas.  Sampel  dilarutkan  dalam heksan  (Merck,  Germany)  dengan  konsentrasi  1%, lalu  disuntikkan  ke  dalam  GC  sebanyak  0,1 μL. Kolom  yang  digunakan  adalah  DB-17  HT  (panjang 30  m,  ketebalan  film  0,15  m,  dan  ukuran  diameter
0,32  mm).  Kondisi  GC  diatur  dengan  temperatur injektor 350°C dan detektor 350°C.  Program temperatur  oven  adalah  suhu  awal  330°C  kemudian ditahan  selama  2  menit.  Selanjutnya  suhu  dinaikkan 5°C/menit  hingga  350°C  dan  ditahan  selama  350°C. Analisis  komposisi  TG  dilakukan  terhadap  substrat sebelum  dan  sesudah  reaksi  interesterifikasi  serta hasil fraksinasi.
Analisa  kandungan  lemak  padat solid fat content (SFC)
Analisis  SFC  ditentukan  menggunakan  alat nuclear  magnetic  resonance (NMR)  (mqone,  Bruker) dengan  mengacu  pada  metode  standar  AOCS,  1997 Official Method Cd 16b-93. Sampel minyak dipanaskan  dalam water  bath pada  suhu  80°C. Sampel  yang  telah  cair  dimasukkan  ke  dalam  12 tabung  untuk  analisa  SFC  dengan  ketinggian sampel  sekitar  4±1  cm.  Sampel  dipanaskan  di dalam water  bath pada  suhu  100°C  selama  15  menit kemudian  dipindahkan  ke water  bath bersuhu  60°C selama  30  menit.  Sampel  dipindahkan  ke water  bath suhu  0°C  selama  90  menit.  Selanjutnya  sampel dipindah  ke water  bath suhu  26°C  selama  40  jam. Sampel  dipindahkan  lagi  pada water  bath suhu  0°C selama  90  menit.  Setelah  itu,  setiap  2  tabung sampel  dipindahkan  ke water  bath dengan  suhu masing-masing  10,  20,  25,  30,  35,  40°C  selama  30- 35  menit.  Kandungan  lemak  padat  setiap  sampel pada  masing-masing  suhu  diukur  dengan  memasuk- kannya  ke  dalam holder pada  alat  NMR  dengan metode Stab AOCS method. Kalibrasi  NMR  meng- gunakan  standar  SFC 0, 31,5  dan  72,9%.
Analisa titik  leleh ( slip melting point ) Analisis titik  leleh  (AOCS,  1997 Official Methods Cc  3-25)  dilakukan  terhadap  bahan  baku, campuran  sebelum  dan  sesudah  reaksi  interesteri- fikasi  serta  hasil  fraksinasi.  Sampel  dilelehkan  dalam water  bath pada  suhu  80°C  dan  dimasukkan  ke dalam  pipa  kapiler  (3  buah)  setinggi  1  cm.  Sampel disimpan  dalam refrigerator (Panasonic,  Indonesia) pada  suhu  4-10°C  selama  16  jam.  Setelah  waktu tercapai,  pipa  kapiler  diikatkan  pada  termometer (Alla,  France)  dan  kemudian  dimasukkan  ke  dalam beak er  glas (600  mL)  (Pyrex,  Germany)  yang  berisi air  (sekitar  300  mL).  Suhu  air  dalam beak er  glas diatur  pada  suhu  8-10°C  di  bawah  titik  leleh  sampel dan  suhu  air  dipanaskan  menggunakan hot  plate secara  perlahan  (dengan  kenaikan  0,5°C-1°C/menit) dengan  pengadukan.  Pemanasan  dilanjutkan  dan suhu  diamati  dari  saat  sampel  meleleh  sampai sampel  naik  pada  tanda  batas  atas.  Titik  leleh dihitung  berdasarkan  rata-rata  suhu  dari  ketiga sampel  yang diamati.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Olein super terhidrogenasi Hidrogenasi  mengkonversi  asam  lemak  tidak jenuh  (oleat,  linoleat  dan  linolenat)  menjadi  asam lemak  jenuh  (stearat).  Perubahan  komposisi  asam lemak  ini  khususnya  asam  stearat  dilakukan  agar dapat  digunakan  sebagai  asil  stearat  pada  minyak atau  lemak  lain  seperti  RBDPO.  Pada  penelitian  ini, hidrogenasi olein  super telah  mengkonversi  asam oleat  (C18:1)  42,1%  dan  linoleat  (C18:2)  12,7% menjadi  asam  stearat  (C18:0)  49.7  %  dan  menyisa- kan  asam  elaidat  sebesar  6,7%.  Akibat  dari  peru- bahan  komposisi  asam  lemak  ini  menyebabkan  titik leleh  juga  berubah.  Produk  HSOL  memiliki  titik  leleh sebesar  55,4°C  meningkat  dari  bahan  bakunya 12,8°C.
Asam  elaidat  merupakan  bentuk  trans  daripada asam  oleat  yang  timbul  akibat  dari  proses  hidro- genasi  yang  belum  sempurna  atau  total.  Kandungan asam  elaidat  pada  produk  hidrogenasi  ini  relatif rendah  dibandingkan  dengan  produk  hidrogenasi olein  super  dalam  menghasilkan  produk  CBS  jenis non  laurat.  Hasibuan  dan  Siahaan,  2013  melapor- kan  bahwa  produk  CBS  non  laurat  dari  minyak  sawit yang  dihasilkan  oleh  industri  CBS  di  Indonesia  me- ngandung  asam elaidat  sebesar  52,02-58,17%.
Karakteristik  RBDPO  dan  HSOL  setelah  interes- terifikasi
Komposisi  trigliserida  (TG)  dari  RBDPO,  HSOL dan  campurannya  dengan  beberapa  rasio  campuran ditunjukkan  pada  Tabel  1.  Komposisi  TG  utama  dari RBDPO adalah 1,2,3- tripalmitoyl - glycerol (PPP) 15,6%,  POP  36,1%  dan  1(3)- palmitoyl -2,3(1)- dioleyl- glycerol )  (POO)  19,6%  sedangkan  HSOL  adalah 1(3),2- dipalmitoyl -3(1)- stearoyl-glycerol (PPS) 49,3%,  1(3)- palmitoyl -2,3(1)- distearoyl-glycerol (PS S)  25,2%  dan  POS  17,8%.  Kandungan  POP  pada RBDPO  relatif  tinggi  namun  untuk  merubah  karak- teristiknya  menyerupai  CB  harus  dilakukan  fraksi- nasi  multi  tahap  sebanyak  5  kali  dengan  produk yang  dihasilkan  memiliki  kandungan  POP  lebih  dari 65% (Elisabeth, 2009). Atas  dasar  tersebut, penelitian  ini  dilakukan  untuk  mempersingkat  tahap- an  proses  dengan  menambahkan  HSOL  yang  me- ngandung  asam  palmitat  dan  stearat  tinggi  ke  dalam RBDPO.
Komposisi  TG  dari  campuran  antara  RBDPO dan  HSOL  merupakan  kombinasi  yang  linear  dari komponen  lemak  dalam  campuran.  Artinya,  dengan meningkatnya  persentasi  RBDPO  pada  campuran maka  persentasi  POP,  POO  dan  TG  lain  meningkat. RBDPO  mengandung  sedikit  asam  stearat  pada struktur  TG  sementara  HSOL  mengandung  cukup banyak  asam  stearat  pada  posisi  sn-1  dan  sn-2. Dari  komposisi  TG  RBDPO  mengindikasikan  bahwa RBDPO  cukup  baik  sebagai  bahan  baku  karena
kandungan  asam  oleat  yang  tinggi  pada  posisi  sn-2. Menurut Hossain, 2013  bahwa  minyak  sawit mengandung saturated-monounsaturated-saturated tinggi  yang  juga  merupakan  komponen  trigliserida tertinggi  dari  CB.  Pinyaphong  dan  Phutrakul,  2009 juga  menyatakan  bahwa  dalam  sintesis  CBE  asam oleat  berada  pada  sn-2  sangat  penting  agar  asil donor  palmitat  maupun  stearat  dapat  terikat  pada sn-1  dan  sn-3  sehingga  diperoleh  titik  leleh  yang sempit pada  produknya.
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  interesterifikasi dari  RBDPO  dan  HSOL  menghasilkan  campuran dengan  komponen  asilgliserol  yang  berbeda  dari bahan  bakunya.  Interesterifikasi  antara  RBDPO  dan HSOL  menyebabkan  beberapa  TG  meningkat,  se- bagian  menurun  dan  ada  yang  membentuk  senyawa TG  baru.  Abigor et  al., 2003;  Ciftci et  al., 2008  dan Soekopitojo et  al., 2009  juga  menyatakan  hal  yang sama  bahwa  dengan  interesterifikasi  akan  me- ngubah  komponen  trigliserida  dari  lemak  dan minyak.  Komponen  TG  yang  berubah  adalah  PPP, PPS,  POP,  POS,  dan  POO  dengan  perubahan  yang cukup  besar  ketika  jumlah  HSOL  meningkat.  Kandu- ngan  SOS  dalam  produk  interesterifikasi  campuran tidak  meningkat  disebabkan  oleh  komponen  OOO dalam  campuran  rendah  serta  kandungan  SSS  pada HSOL  hanya  sebesar  2,4%.
Interesterifikasi kimiawi menyebabkan ter- jadinya  pertukaran  asil  pada  gliserida  secara  acak yang  ditunjukkan  dengan  tidak  adanya  pola  pening- katan  maupun  penurunan  pada  setiap  komponen TG  yang  berubah  dengan  meningkatnya  jumlah HSOL.  Beberapa  peneliti  juga  telah  menyatakan  hal yang  sama  bahwa  interesterifikasi  secara  kimiawi menyebabkan  pertukaran  asil  pada  TG  terjadi secara  acak  dari  asam  lemak  penyusun  trigliserida (Idris  dan  Dian,  2005;  Pinyaphong  dan  Phutrakul, 2009;  Fauzi et  al., 2013;  Amir et  al., 2012). Sementara  interesterifikasi  secara  enzimatis  meng- gunakan  enzim  yang  spesifik  sn-1,3  akan  merubah komponen  trigliserida  pada  posisi  sn-1,3.  Per- pindahan  asil  merupakan  permasalahan  yang  serius dalam  sintesa  CBE  yang  dapat  menentukan  karak- teristik  dari  produk  yang  dihasilkan  serta  menunjuk - kan kemiripannya  denga  CB (Kadivar et al., 2013). Interesterifikasi  juga  memberikan  nilai  kan- dungan  lemak  padat  ( solid  fat  content, SFC)  ber- beda  dari  sebelum  reaksi  yang  disebabkan  oleh perubahan  komposisi  TG.  SFC  dari  campuran RBDPO/HSOL merepresentasikan kombinasi secara  linear  dari  RBDPO  dan  HSOL  (Gambar  1). Artinya,  nilai  SFC  akan  meningkat  dengan  pening- katan  persentasi  HSOL  dan  menurun  dengan  pe- ningkatan  persentasi  RBDPO.  Campuran  yang  telah diinteresterifikasi  memberikan  nilai  SFC  lebih  rendah dibandingkan  sebelum  diinteresterifikasi.
Tabel  1.  Komposisi trigliserida  dari  campuran  RBDPO  dan  HSOL  sebelum  dan  setelah  interesterifikasi
Trigliserida (% berat) Substrat Rasio Berat Substrat (RBDPO:HSOL) n= 2 RBDPO HSOL A (3:1) B (2:1) C (1:1) D (1:2) E (1:3) BIE AIE BIE AIE BIE AIE BIE AIE BIE AIE MMP 1 0 1,9 ± 0,2 0 1,8 ± 0,3 0 0 0 0,8 ± 0,5 0 0,9 ± 0,3 0 MPP 0,9 0 0,6 ± 0,1 2,1 ± 0,5 0,7 ± 0,5 1,2 ± 0,3 1,5 ± 0,5 2,1 ± 0,4 0,1 ± 0,1 0,1 ± 0,1 0 0 PPP 15,6 3,9 13,2 ± 0,2 13,4 ± 0,6 12,4 ± 0,5 7,8 ± 0,5 11 ± 0,4 12,1 ± 0,3 7,5 ± 0,3 13,2 ± 0,4 6,6 ± 0,3 12,6 ± 0,4 MOP 3,4 0 3,7 ± 0,3 3,7 ± 0,2 3,2 ± 0,6 0,2 ± 0,7 2,7 ± 0,7 3 ± 0,3 1,5 ± 0,3 3,3 ± 0,4 0,7 ± 0,2 2,8 ± 0,4 MLP 1 0 0 0,2 ± 0,1 0 0,5 ± 0,8 0 0 0 0 0 0 PPS 0,2 49,9 12,4 ± 0,5 11,2 ± 0,4 14,9 ± 0,2 31,7 ± 0,9 21,4 ± 0,7 23,7 ± 0,2 24 ± 0,4 15,5 ± 0,5 32 ± 0,6 34,2 ± 0,5 POP 36,1 0 35,8 ± 0,9 39,4 ± 0,6 35 ± 0,8 25,4 ± 0,4 31,2 ± 0,9 31,9 ±  0,5 23,9 ± 0,4 36,8 ± 0,6 20,9 ± 0 ,7 30,2 ± 0,5 PLP 9,5 0 5,1 ± 0,5 6,7 ± 0,8 5,6 ± 0,4 1,8 ± 0,6 3,7 ± 0,6 4 ± 0,4 2,1 ± 0,6 5,4 ± 0,7 0 1,8 ± 0,2 PSS 0 25,3 8,3 ± 0,2 4,8 ± 0,9 9,5 ± 0,6 7,8 ± 0,7 10,8 ±0,6 11,1 ± 0,4 17,9 ± 0,7 11,8 ± 0,5 18,9 ± 0,7 13,5 ± 0,7 POS 4,1 17,8 5,8 ± 0,8 4,6 ± 0,2 6,3 ± 0,7 9,8 ± 0,8 7,4 ± 0,4 5 ± 0,6 10,1 ± 0,9 6,4 ± 0,7 12 ± 0,8 4,9 ± 0,4 POO 19,6 0 11,1 ± 0,5 13,7 ± 0,3 9,5 ± 0,7 8,7 ± 0,8 9,3 ± 0,3 7,1 ± 0,7 9,4 ± 0,5 5 ± 0,5 6 ± 0,4 1,0 ± 0,1 PLO 5,4 0 2,1 ± 0,7 0,1 ± 0,6 1,1 ± 0,7 5,1 ± 0,5 1 ± 0,3 0 0,9 ± 0,5 2,4 ± 0,4 0 0 PLL 0,2 0 0 0,1 ± 0,3 0 0 0 0 0 0,1 ± 0,1 0 0 SSS 0 2,4 0 0 0 0 0 0 1,8 ± 0,3 0 2 ± 0,3 0 SOS 0,3 0,7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 SOO 0,9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 OOO 1,6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 SLO 0,1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 OLO 0,1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 SOA 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Keterangan: BIE=sebelum interesterifikasi, AIE=setelah interesterifikasi, 1(3),2- dimiristoyl -3(1)- palmitoyl-glycerol (MMP), 1(3)- miristoyl -2,3(1)- dipalmitoyl-glycerol (MPP), 1,2,3- tripalmitoyl - glycerol (PPP), 1(3)- miristoyl -2- oleyl -3(1)- palmitoyl-glycerol (MOP), 1(3)- miristoyl -2- linoleyl -3(1)- palmitoyl-glycerol (MLP), 1(3),2- dipalmitoyl -3(1)- stearoyl-glycerol (PPS),  1,3- dipalmitoyl -2- oleoyl-glycerol (POP),  1,3- dipalmitoyl -2- linoleyl-glycerol (PLP),  1(3)- palmitoyl -2,3(1)- distearoyl-glycerol (PSS),  1(3)- palmitoyl -3(1) stearoyl -2- oleoyl-glycerol (POS), 1(3)- palmitoyl -2,3(1)- dioleyl-glycerol (POO), 1(3)- palmitoyl -2- linoleyl -3(1)- linoleyl-glycerol (PLO), 1(3)- palmitoyl -2,3(1)- dilimoleyl-glycerol (PLL), 1,2,3- tristeroyl - glycerol (SSS), 1,3- disteroyl -2- oleoyl-glycerol (SOS), 1(3)- steroyl -2,3(1)- dioleyl-glycerol (SOO), 1,2,3- trioleyl - glycerol (OOO), 1(3)- steroyl -2- linoleyl -3(1)- oleyl-glycerol (SLO), 1,3- dioleyl -2- linoleyl-glycerol (OLO), 1(3)- steroyl -2- oleyl -3(1)- arachidat-glycerol (SOA)
Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2015.26.2.232 Hasil Penelitian J. Teknol. dan Industri Pangan Vol. 26(2): 232-240 Th. 2015 ISSN: 1979-7788 Terakreditasi Dikti: 80/DIKTI/Kep/2012 J. Teknol. dan Industri Pangan Vol. 26(2): 232-240 Th. 2015
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 10 20 25 30 35 40
Ka n d u n g a n L e m a k Pa d a t ( SF C ) (% ) Temperatur ( °C)
A (3:1) B (2:1) C (1:1)
D (1:2) E (1:3) 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 10 20 25 30 35 40 Ka n d u n g a n L e m a k Pa d a t (SF C ) (% ) Temperatur ( °C)
A (3:1) B (2:1) C (1:1) D (1:2) E (1:3)
Gambar  1.  Profil  SFC campuran  sebelum  diinteresterifikasi  (A) dan  setelah  diinteresterifikasi  (B)
Campuran interesterifikasi berbentuk padat pada  temperatur  ruang  dengan  titik  leleh  berkisar antara  42,6-46,8°C  sedikit  menurun  dengan  se- belum  interesterifikasi  (46-51°C)  (Tabel  2).  Titik  leleh yang  berbeda  antara  sebelum  dengan  sesudah interesterifikasi  menunjukkan  terjadinya  perubahan komposisi  trigliserida  seperti  yang  telah  dijelaskan sebelumnya.
Tabel  2.  Titik  leleh  campuran  RBDPO:HSOL  se- belum  dan  sesudah  interesterifikasi
Campuran Rasio MP Sebelum Interesterifikasi (°C) n=2 MP Setelah Interesterifikasi (°C) n=2 RBDPO: HSOL 3:1 46,0 ± 0,2 42,6 ± 0,8 RBDPO: HSOL 2:1 47,0 ± 0,3 43,6 ± 0,3 RBDPO: HSOL 1:1 49,0 ± 0,2 45,0 ± 0,5 RBDPO: HSOL 1:2 50,5 ± 0,3 46,0 ± 0,4 RBDPO: HSOL 1:3 51,0 ± 0,3 46,8 ± 0,7 RBDPO 37,4 HSOL 55,4 CB 1 32 - 35 CBE (POP fat ) 2 30,5 - 33,5
Sumber: 1 Zaidul et  al., 2007;  Liu et  al., 2007, 2 Hasibuan  dan  Siahaan,  2013
Fraksinasi  campuran  RBDPO  dan  HSOL  setelah interesterifikasi
Interesterifikasi  antara  RBDPO  dengan  HSOL menghasilkan  asam  lemak  bebas  <  2%.  Asam lemak  bebas  ini  dihilangkan  dengan  cara  netralisasi. Fraksinasi  campuran  RBDPO  dan  HSOL  yang diinteresterifikasi  secara  bertingkat  menggunakan heksan  dan  aseton  menghasilkan  POP fat dengan komponen  POP  >  62%  dan  POS  berkisar  antara  10-
17%  (Tabel  3).  Menurut  Soekapitojo et  al., 2011 bahwa  lemak  dikategorikan  sebagai  CBE  bila  me- ngandung  StOSt  >  65%  (St  = saturated ,  O  = oleic acid ).  Dengan  demikian,  POP fat yang  dihasilkan pada  penelitian  ini  dapat  disebut  sebagai  CBE karena  mengandung  trigliserida  POP  dan  POS tinggi  dengan  jumlah  > 65%.
Profil  SFC  dari  POP fat ditunjukkan  pada Gambar  2.  SFC  dari  interesterifikasi  campuran RBDPO  dan  HSOL  berubah  secara  signifikan  se- telah  difraksinasi.  POP fat memiliki  SFC  yang  lebih rendah  pada  temperatur  35°C  dan  40°C  dibanding- kan  dengan  sebelum  difraksinasi.  Hal  ini  disebabkan meningkatnya saturated-unsaturated-saturated dan menurunnya saturated-saturated-saturated pada TG.  Meskipun  komposisi  TG  dari  POP fat yang dihasilkan  sedikit  berbeda  dengan  CB  namun  profil SFC-nya  pada  temperatur  10-30°C  mirip  sementara pada  suhu  35°C  dan  40°C  sedikit  lebih  tinggi  diban- dingkan  dengan  CB.  Hal  ini  disebabkan  oleh  POP fat memiliki  kandungan  POP  tinggi,  POS  rendah  dan tidak  mengandung  SOS  (Tabel  3).  Sementara  CB mengandung  POP,  POS  dan  SOS  masing-masing sebesar  14,8;  36,8;  dan  25,3%  (Soekapitojo et  al., 2009).
Titik  leleh  POP fat yang  diperoleh  berkisar antara  35-39°C  (Tabel  4)  sementara  CB  berkisar antara  27-35°C  (Zaidul et  al. ,  2007)  dan  32-35°C (Shekarchizadeh et  al., 2009).  Di  samping  itu,  CBE yang  pernah  disintesis  dari  RBDPO  dan  metil stearat  memiliki  titik  leleh  37-39°C  (Pinyaphong  dan Phutrakul,  2009),  sementara  interesterifikasi  antara palm  mid  fraction dengan  campuran  asam  stearat dan  palmitat  diperoleh  produk  dengan  titik  leleh 31,6°C  (Mohamed,  2013).  Mohamed  2012  meng- hasilkan  CBE  dengan  titik  leleh  berkisar  antara  34,7- 39,6°C  dari  interesterifikasi palm  olein dan  asam lemak  jenuh  destilat.  Abigor et  al., 2003  melakukan interesterifikasi canola oil  terhidrogenasi  dan olive  oil pada  rasio  1:1  menghasilkan  CBE  dengan  titik  leleh
A
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 10 20 25 30
35 40
Ka n d u n g a n L e m a k Pa d a t (SF C ) (% ) Temperatur ( °C) A (3:1) B (2:1) C (1:1) D (1:2) E (1:3) CB
39°C.  Soekapitojo et  al., 2009  juga  melaporkan  inte- resterifikasi palm  mid  fraction dan soyabean  oil terhidrogenasi  dengan  titik  leleh  produk  sebesar 31,8-33,4°C.
Tabel  3.  Komposisi  TG  dari  fraksinasi  2  tahap  dari campuran  RBDPO  dan  HSOL  terinteres- terifikasi Komposisi TG (% berat) Rasio Berat Substrat (RBDPO/HSOL) n = 2 A (3:1) B (2:1) C (1:1) D (1:2) E (1:3) PPP 5,2 ± 0,7 4,5 ± 0,3 3,5 ± 0,5 5,7 ± 0,4 3,7 ± 0,5 MOP 3,7 ± 0,6 4,5 ± 0,5 3,9 ± 0,6 4,8 ± 0,3 5 ± 0,6 PPS 2,1 ± 0,2 2,4 ± 0,2 2,9 ± 0,6 3,1 ± 0,3 4,3 ± 0,6 POP 69 ± 1,2 68,2 ± 1,5 67,8 ± 1,2 62,7 ± 1,7 62,6 ± 0,9 PLP 4,6 ± 0,8 4,8 ± 0,7 4,0 ± 0,6 4,2 ± 0,5 2,4 ± 0,5 PSS 0,3 ± 0,6 0 0 0,9 ± 0,1 0,4 ± 0,8 POS 10 ± 0,6 10,8 ± 0,9 12,7 ± 0,5 12,3 ± 0,6 17,1 ± 0,7 POO 5,2 ± 0,4 4,6 ± 0,7 5,1 ± 0,5 6,3 ± 0,4 4,3 ± 0,9 PLO 0 0 0 0 0
Gambar  2. Profil  SFC POP fat yang dihasilkan
Tabel  4. Titik leleh  produk  POP fat Rasio RBDPO/HSOL Titik leleh (°C) n=2 3:1 37,2 ± 0,5 2:1 35,0 ± 0,6 1:1 35,2 ± 0,6 1:2 35,0 ± 0,8 1:3 39,0 ± 0,4 CB 1 32 – 35 CBE (POP fat ) 2 30,5 – 33,5
Sumber: 1 Zaidul et  al., 2007;  Liu et  al., 2007, 2 Hasibuan  dan  Siahaan,  2013
Rendemen  POP fat yang  dihasilkan  pada penelitian  ini  berkisar  antara  18,3-38,3%  dari  berat awal  RBDPO.  Beberapa  peneliti  lain  menghasilkan produk  CBE  dengan  rendemen  yang  berbeda-beda antara  lain  45,6%  (Abigor et  al., 2003),  55% (Pinyaphong  dan  Phutrakul,  2009)  dan  20,5% (Soekapotijo et  al .,  2009).  Rendahnya  rendemen yang  diperoleh  pada  penelitian  ini  disebabkan  ter- jadinya reaksi penyabunan antara trigliserida dengan  natrium  metoksida  yang  berlebih.  Meskipun demikian,  rendemen  POP fat yang  dihasilkan  dari penelitian  ini  lebih  tinggi  dibandingkan  yang  di- peroleh  secara  komersial  dengan  5  kali  fraksinasi yaitu  sebesar  14-15%  dari  bahan  baku  (Elisabeth, 2009).  Dengan  demikian,  interesterifikasi  antara RBDPO  dengan  HSOL  dan  fraksinasinya  dapat digunakan  sebagai  teknik  alternatif  dalam  mem- produksi  POP fat .
Karakteristik  POP fat POP fat yang  memiliki  kemiripan  titik  leleh dengan  CB  yaitu  sebesar  35°C  diperoleh  pada  rasio berat  RBDPO  dan  HSOL  2:1  dan  1:2  melalui  in- teresterifikasi  kimiawi  dan  fraksinasinya  (Tabel  4) namun  komponen  POP-nya  berbeda  masing-masing 68,2  dan  62,7%.  Menurut  Gibon et  al., 2009  bahwa POP fat dikategorikan  sebagai  CBE  dengan  kom- ponen  POP  sebesar  65-70%.  POP fat yang  di- peroleh  dari  rasio  2:1  memiliki  kemiripan  komposisi asam lemak dengan produk komersial yang dihasilkan  dari  fraksinasi  RBDPO  secara  multi-tahap dengan  5 kali fraksinasi  (Tabel  5).
Bilangan  iodin  dari  POP fat atau  CBE  yang dihasilkan  pada  penelitian  ini  menyerupai  CB.  Naik dan  Kumar,  2014  melaporkan  bahwa  bilangan  iodin CB  sebesar  32-35  Wijs.  Bilangan  iodin,  titik  leleh dan  komposisi  asam  lemaknya  juga  masuk  ke dalam range POP fat yang  telah  dilaporkan  oleh
Hasibuan dan Siahaan, 2013. Ditinjau dari komposisi  trigliserida  dari  POP fat penelitian  ini  ada beberapa  komponen  yang  mirip  dengan  produk komersial  seperti  POP,  PLP,  POS  dan  POO, sementara  PPP,  MOP  dan  PPS  lebih  tinggi.  Hal  ini yang  menyebabkan  titik  leleh  dan  kandungan  lemak padat  pada  suhu  35  dan  40°C  produk  dari  penelitian ini  lebih  tinggi.  Perbedaan  komponen  trigliserida pada  produk  diduga  karena  proses  pembuatannya juga  berbeda.  Menurut  Elisabeth,  2009  bahwa  POP fat komersial  diperoleh  dari  RBDPO  yang  difraksi- nasi  secara  multi  tahap  tanpa  pelarut  sementara penelitian  ini,  RBDPO  diinteresterifikasi  dengan HSOL  kemudian  difraksinasi  menggunakan  pelarut pada  suhu  rendah  (4°C).
Kelemahan  CBE  yang  dihasilkan  dari  pene- litian  ini  dibandingkan  dengan  CB  adalah  kandungan lemak  padat  pada  suhu  30°C  relatif  rendah  semen- tara  35  dan  40°C  relatif  tinggi.  Hal  ini  berdampak pada  aplikasinya  dalam  pembuatan  cokelat  karena
sulit  mencair  di  dalam  mulut.  Namun  demikian, produk  ini  sangat  sesuai  apabila  diaplikasikan  pada cokelat  di  iklim  tropis  agar  cokelat  tidak  mudah mencair  pada  suhu ruang.
Tabel  5. Karakteristik POP fat
Parameter POP Fat Penelitian POP Fat Komersial POP Fat (Hasibuan dan Siahaan, 2013) Bil, Iod (Wijs) 33,9 35,0 33,84-36,24 Titik leleh (°C) 35,0 32,2 30,5-33,5
Ko mp o si si Asa m L e ma k
( % ) C12:0 0,1 0,1 0,03-0,21 C14:0 1,0 0,7 0,38-1,04 C16:0 57,7 56,2 53,74-58,30 C16:1 0,1 0,1 ND-0,14 C18:0 5,1 5,4 4,33-6,49 C18:1 32,2 34,0 32,02-35,92 C18:2 3,4 3,1 1,75-4,45 C18:3 0 0 ND-0,32 C20:0 0,3 0,4 ND-0,21 C22:0 0 0,1 ND-0,09
SF C ( % )
10 78,3 91,1 85,47-95,71 20 63,8 82,9 80,73-84,43 25 49,7 71,1 64,98-76,01 30 38,2 48,1 44,61-51,51 35 18,4 6,2 3,99-7,84 40 4,6 0
ND-0,09
Ko mp o si si T ri g li se ri d a (% ) MMP 0
0,1 MPP 0 0,7 PPP 4,5 2,6 MOP 4,5 1,7 MLP 0 0,1 PPS 2,4 0,2 POP 68,2 68,4 PLP 4,8 4,3 PSS 0 0,1 POS 10,8 11,9 POO 4,6 4,7 PLO 0 1,3 PLL 0 0,2 SSS 0 0 SOS 0 1,1 SOO 0 0,4 OOO 0 0,6 SLO 0 0,2 OLO 0 0,1 SOA 0 0,1

## KESIMPULAN
Interesterifikasi  RBDPO  dengan  HSOL  secara kimiawi  dilanjutkan  dengan  fraksinasi  dua  tahap dapat menghasilkan  produk  POP fat dengan kandungan  POP  dan  POS  yang  tinggi  masing- masing  sebesar  68,2  dan  10,8%.  Produk  ini dikategorikan  sebagai  CBE  karena  sifat  fisikanya
menyerupai cocoa  butter (CB)  dengan  titik  leleh sebesar  35°C  dan  kandungan  lemak  padat  pada suhu  30°C  sebesar  38,2%.  Produk  yang  memiliki kemiripan  dengan  CB  diperoleh  dengan  substrat RBDPO:HSOL  pada  rasio 2:1.

## DAFTAR PUSTAKA
Abigor  RD,  Marmer  WN,  Foglia  TA,  Jones  KC, Diciccio  RJ,  Ashby  E,  Uadia  PO.  2003. Production  of  cocoa  butter-like  fats  by  the lipase-catalyzed  interesterification  of  palm  oil and  hydrogenated  soybean  oil.  J  AM  Oil  Chem Soc  80:  1193-1196.  DOI: 10.1007/s11746-003- 0841-7.
Amir  RA,  Shabbir  MA,  Khan  MR,  Hussain  S.  2012.
Interesterification  of  fats  and  oils-a  review. Pakistan J Food  Sci 22: 143-153.
[AOCS] American  Oil  Chemists’  Society.  1997.
Official  and  Recommended  Methods  of  the American  Oil Chemists’  Society.  5 th Ed.
Champaign  IL.
Ciftci  ON,  Fadiloglu  S,  Kowalski  B,  Gogus  F.  2008. Synthesis  of  cocoa  butter  triacylglicerols  using a  model  acidolysis  system.  Grasas  Aceites  59: 316-320.  DOI:  10.3989/gya.2008. v59.i4.524.
Elisabeth  JE.  2009.  Pengalaman  industri  kelapa sawit  dalam  diversifikasi  produk  olahan  hilir. Prosiding  Pertemuan  Teknis  Kelapa  Sawit.  95 – 103,  Pusat Penelitian  Kelapa  Sawit, Jakarta.
Fauzi  SHM,  Rashid  NA,  Omar  Z.  2013.  Effects  of chemical  interesterification  on  the  physic- chemical  properties  of  palm  stearin,  palm  kernel oil  and  soybean  oil  blends.  Food  Chem  137:  8- 17. DOI:  10.1016/j.foodchem.2012.09. 086.
Gibon  V,  Dijckmans  P,  Calliauw  G,  Goderis  B, Greyt WD.  2009.  Study  of  crystallization  properties  of soft  palm  mid  fractions  for  specialty  fats production.  Euro  Fed  Lipid  Congress:  Lipids Fats  and  Oils,  From  Knowledge  to  Application Edition:7 location:Graz, Austria date:18-21
October  2009.  Diakses  melalui  https://lirias. kuleuven.be/handle/123456789/293492. [12
Januari  2014].
Hasibuan  AH.  2012.  Kajian  mutu  dan  karakteristik minyak  sawit  Indonesia  serta  produk  fraksinasi- nya. J Standardisasi  14: 13-21.
Hasibuan  AH,  Siahaan  D.  2013.  Karakteristik  CPO, Minyak  Inti  Sawit  dan  Fraksinya.  Buku  Saku Seri  31.  45-50.  Penerbit:  Pusat  Penelitian Kelapa  Sawit.
Hossain  MB.  2013.  Applications  of  palm  oil and palm kernel  oils  in  different  food  products  of  Bangla- desh. J  Sci Technol  8: 33-38.
Idris  NA,  Dian  NLHM.  2005.  Interesterification  palm products  as  alternatives  to  hydrogenation.  Asia Pacific J Clin  Nutr  14: 396-401.
Jahurul  MHA,  Zaidul  ISM,  Nik  Norulaini  NA,  Sahena
F,  Kamaruzzaman  BY,  Ghafoor  K,  Omar  AKM. 2014.  Cocoa  butter  replacers  from  blends  of mango  seed  fat  extracted  by  supercritical carbon  dioxide  and  palm  stearin.  Food  Res  Int 65:  401-406.  DOI:  10.1016/j.foodres.2014.06. 039.
Kadivar  S,  De  Clercq  N,  Van  De  Walle  D,
Dewettinck  K.  2013.  Optimisation  of  enzymatic synthesis  of  cocoa  butter  equivalent  from  high oleic  sunflower  oil.  J  Sci  Food  Agric  94:  1325- 1331.  DOI:  10.1002/jsfa.6414.
Liu  KJ,  Chang  HM,  Liu  KM.  2007.  Interesterification of  lard  and  tristearin  in  supercritical  carbon dioxide  by  lipase  enzymatic  synthesis  of  cocoa butter  analog.  Food  Chem  100:  1303 –1311. DOI:  10.1016/j.foodchem.2005.12.010.
Mohamed  IO.  2012.  Lipase-catalyzed  synthesis  of cocoa  butter  equivalent  from  palm  olein  and saturated  fatty  acid  distillate  from  palm  oil physical  refinery.  Appl  Biochem  Biotechnol  168:
Mohamed  IO.  2013.  Lipase-catalyzed  acidolysis  of palm  mid  fraction  oil  with  palmitic  and  stearic fatty  acid  mixture  for  production  of  cocoa  butter equivalent.  Appl  Biochem  Biotechnol  171:  655- 66. DOI:  10.1007/s12010-013-0381-1.
Naik  B,  Kumar  V.  2014.  Cocoa  butter and its alterna- tives:  a  review.  J  Bioresource  Eng  Technol  2:  1- 11.
Nazaruddin  R,  Zakiyani  SN,  Mamot  S.  2011.  The effect  of  enzymatic  alcoholysis  on  the  physico- chemical  properties  of  commercial  cocoa  butter substitutes. Pakistan J Nutr 10:  718-723.
Pinyaphong  P,  Phutrakul  S.  2009.  Synthesis  of cocoa  butter  equivalent  from  palm  oil  by Carica papaya lipase-catalyzed  interesterification.  Chi-
ang  Mai  J  Sci  36:  359-368.  DOI:  10.1007/s1174 6-014-2412-7.
Shekarchizadeh  H,  Kadivar  M,  Ghaziaskar  HS, Rezayat  M.  2009.  Optimization  of  enzymatic synthesis  of  cocoa  butter  analog  from  camel hump  fat  in  supercritical  carbon  dioxide  by response  surface  method  (RSM).  J  Supercrit Fluid  49:  209-215.  DOI:  10.1016/j.supflu.2009. 03.005.
Shekarchizadeh  H,  Tikani  T,  Kadivar  M.  2014. Optimization  of  cocoa  butter  analog  synthesis variables  using  neural  networks  andd  genetic algorithm.  J  Food  Sci  Technol  51:  2099-2105. DOI:  10.1007/s13197-012-0695-y.
Soekapitojo  S,  Hariyadi  P,  Muchtadi  TR,  Andar- wulan  N.  2009.  Enzymatic  interes-terification  of palm  oil  mid  fraction  blends  for  the  production cocoa  butter  equivalents.  Asian  J  Food  Agro- Ind  2: 807-816.
Soekapitojo  S.  2011.  Asidolisis  enzimatik  fraksi tengah  minyak  sawit  dengan  asam  stearat untuk  sintesis cocoa  butter  equivalents .  J  Tek- nol  Kejuruan  34: 203-216.
Tchobo  FP,  Piombo  G,  Pina  M,  Soumanu  MM,
Villeneuve  P,  Sohounhloue  DK.  2009.  Enzy- matic  synthesis  of  cocoa  butter  equivalent through  transesterification  of  pentadesma  buty- raceae  butter.  J  Food  Lipids  16:  605-617. DOI:  10.1111/j.1745-4522.2009.01169.x.
Zaidul  ISM,  Norulaini  NAN,  Omar  AKM,  Smith  RL. 2007.  Blending  of  supercritical  carbon  dioxide (SC-CO 2 )  extracted  palm  kernel  oil  fractions and  palm  oil  to  obtain  cocoa  butter  replacers.  J Food  Eng  78:  1397-1409. DOI:  10.1016/j.jfood eng.2006.01.012.
Zaliha  O,  Norizzah  AR.  2012.  Physicochemical  pro- perties  and  compatibility  study  on  palm  oil  pro- ducts  with  cocoa  butter.  J  Oil  Palm  Res  24: 1349-1352.
1405-1415.  DOI:  10.1007/s12010-012-9866-6.