EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr

## Pertumbuhan, Kadar Pigmen dan Aktivitas Antioksidan Spirulina platensis pada Kultur dengan Perbedaan Warna Pencahayaan Leds
Budi Aryono 1 , Muhammad Zainuddin 1 *, Risha Fillah Fithria 2
1 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Sain dan Teknologi, Universitas Islam Nahdlatul Ulama Jepara Jl. Taman Siswa, Tahunan, Jepara, Jawa Tengah 59451 Indonesia
2 Program Studi Profesi Apoteker, Fakultas Farmasi, Universitas Wahid Hasyim Jl. Menoreh Tengah X/22 Sampangan Semarang Jawa Tengah Indonesia *Corresponding author e-mail: zainudin@unisnu.ac.id
ABSTRAK : Antioksidan diperlukan tubuh untuk melindungi kesehatan kulit kita. Salah satu sumber antioksidan adalah mikroalga Spirulina sp. Permasalahan pemanfaatan spirulina adalah diperlukan teknologi kultur yang tepat untuk menghasilkan aktivitas antioksidan tinggi. Tujuan penelitian adalah melakukan  optimasi  pencahayaan  (warna  cahaya)  dalam  kultur  spirulina  untuk  mendapatkan pertumbuhan  terbaik,  kadar  pigmen  dan  aktivitas  antioksidan  tertinggi.  Penelitian  menggunakan metode  eksperimen  laboratoris  dengan  5  perlakuan  yaitu  pemberian  pencahaaan  dengan  LED warna  biru,  hijau,  merah,  putih  dan  lampu  TL  (fluoresens).  Perlakuan  perbedaan  warna pencahayaan dalam kultur berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan, kadar pigmen dan aktivitas antioksidan. Perlakuan terbaik adalah pemberian pencahayaan LED merah yaitu Spirulina platensis memiliki  pertumbuhan  mutlak  sebesar  1,602  d  x  10 4 sel/ml,  laju  pertumbuhan  0,108/hari,  jumlah generasi  2,028,  waktu  generasi  6,416  hari,  yield  9,649  gr/gr,  dan  produktifitas  24,740  gr/L.hari. Ekstrak spirulina mengandung klorofil a sebesar 10,153 mg/L, klorofil b sebesar 4,744 mg/L, total klorofil  16,053  mg/L,  karotenoid  5,893  mg/L.  selain  itu  juga  memiliki  kandungan  pigmen fikobiliprotein yaitu fikosianin 0,055 mg/L, alofikosianin 0,037 mg/L dan fikoeritrin 0,218 mg/L. eksrak spirulina  dari  hasil  kultur  dengan  pencahayaan  LED  merah memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan nilai  IC 50 sebesar  105,4  ppm.  Aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak Spirulina sp.  karena  adanya kandungan senyawa fitokimia dan pigmen.
Kata kunci : kultur; spirulina; pertumbuhan; pigmen; antioksidan
Growth, Pigment and Antioxidant Activity of Spirulina platensis in Culture with Different

## Color Lighting Leds
ABSTRACT : Antioxidants are needed by the body to protect the health of our skin. One source of antioxidants is the microalgae spirulina sp. The problem of using spirulina is that appropriate culture technology is needed to produce high antioxidant activity. The aim of the research was to optimize lighting  (light  color)  in  spirulina  culture  to  get  the  best  growth,  highest  pigment  content  and antioxidant activity. The study used a laboratory experimental method with 5 treatments, lighting with blue,  green,  red,  white  LEDs  and  fluorescent  lights.  The  treatment  of  different  lighting  colors  in culture had a significant effect on growth, pigment levels and antioxidant activity. The best treatment was the provision of red LED lighting, Spirulina platensis which had absolute growth of 1.602 d x 10 4 cells/ml,  growth  rate  of  0.108/day  ,  number  of  generations  2,028,  generation  time  of  6.416  days, yield of 9.649 gr/gr, and productivity of 24.740 gr/L/day. Spirulina extract contains chlorophyll a of 10,153 mg/L, chlorophyll b of 4,744 mg/L, total chlorophyll 16,053 mg/L, carotenoids 5,893 mg/L. In addition, it also contains phycobiliprotein pigments, phycocyanin 0.055 mg/L, allophycocyanin 0.037 mg/L and phycoerythrin 0.218 mg/L. Spirulina extract from culture results with red LED lighting has antioxidant activity with an IC 50 value of 105.4 ppm. The antioxidant activity of the sepirulina extract is due to the presence of phytochemical compounds and pigments.
Kaywords : culture; spirulina; growth; pigment; antioxidant

## PENDAHULUAN
Bagian terluar dari tubuh manusia adalah kulit. kulit berfungsi melapisi dan melindungi tubuh dari pengaruh lingkungan  (Jia et  al. , 2018; Zhao et  al. , 2019). Pengaruh lingkungan seperti  asap rokok, polusi udara dan radiasi sinar ultraviolet dapat memicu terbentuknya radikal bebas (Pan et al. , 2019; Chaikul et al. , 2020). Paparan radikal bebas ini mengakibatkan kerusakan kulit. sebagai contohnya radiasi ultraviolet mengakibatkan kerusakan kulit menjadi penggelapan, tekanan imuitas dan mempercepat penuaan kulit (Rodríguez, 2014; Albrecht et al. , 2019; Chaikul et al. , 2020). Oleh karena itu, tubuh memerlukan sediaan kosmetik yang mengandung antioksidan alami. kosmetik ini dapat memberi perlindungan dari paparan radikal bebas (Arsenie et al. , 2020; Haddada et al. , 2020; Othman et al. , 2020).
Senyawa yang bersifat antioksidan dapat diperoleh dengan melakukan ekstraksi dari bahan alam. Sumber senyawa antioksidan yang bersifat alami dapat berasal dari mikroalga. penelitian ini menggunakan  mikroalga Spirulina  platensis sebagai  sumber  antioksidan  (Junique et  al. ,  2021). Spirulina platensis merupakan mikroalga yang bersifat autrotrof dan memiliki warna hijau kebiruan. sel spirulina berkoloni membentuk filamen spiral (Chia et al. , 2020; Shanthi et al ., 2021). Senyawa antioksidan  pada  mikroalga  adalah  dari  golongan  pigmen  diantaranya  klorofil,  karotenoid,  dan fikobiliprotein (Chia et al. , 2020; Ren et al. , 2021).
Antioksidan alami dari Biopigmen Spirulina platensis telah digunakan dalam bidang makanan, suplemen dan kosmetik (Lafarga et al. , 2020; Alagawany et al. , 2021; Lim et al. , 2021). Dalam usaha mencukupi  kebutuhan  biopigmen  maka  dilakukan  kultur Spirulina  platensis .  Secara  umum  dalam produksi  mikroalga  skala  masal  menggunakan  cahaya  matahari  sebagai  sumber  pencahayaan. Kelebihan cahaya matahari adalah jumlah dan keberadaannya yang dapat menekan biaya produksi. Sedangkan  kekurangannya  adalah  terbatas  dengan  keberadaan  siklus  siang  dan  malam, perubahan  cuaca  dan  musim.  Sehingga  kelemahan  tersebut  dapat  berpengaruh  terhadap produktivitas dan kualitas produk yang dihasilkan. Salah satu cara untuk mengatasi permasalahan ini adalah dengan menggunakan pencahayaan dari sumber cahaya artifisial.
Penggunaan  sumber  cahaya  artifisial  memiliki  kelebihan  yaitu  pencahayaan  dapat disesuaikan  dengan  kebutuhan  dalam  proses  kultur.  Selain  itu  juga  kualitas  pencahayaan  yang optimal  dapat  meningkatkan  produksi  dan  kualitas  produk.  Sedangkan  kelemahan  dalam penggunaan  pencahayaan  artifisial  adalah  biaya  produksi  yang  tinggi  dari  pada  pencahayaan dengan cahaya matahari. Meskipun demikian, penggunaan cahaya artifisial dapat bernilai ekonomis jika biomassa yang dihasilkan memiliki jumlah yang besar dan digunakan sebagai bahan baku untuk memproduksi produk bernilai tinggi seperti kosmetik dan suplemen.
Saat ini pencahayaan artifisial yang secara umum sudah digunakan dalam kultur mikroalga adalah cahaya artifisial dari lampu fluoresens (lampu neon) (Zielinska et al. , 2017; Leopoldino et al. , 2019).  Lampu  neon  fluoresens  menghasilkan  cahaya  polikromatis  yang  terdiri  atas  beberapa panjang  gelombang.  Pencahayaan  warna  putih  dari  lampu  neon  fluoresens  memiliki  kekurangan yaitu tingkat efisiensi yang kurang karena keeradaan panjang gelombang lain yang mempengaruhi fotosintesis  dan memiliki  aktivitas  fotosintetik  yang  rendah  (Kadam et al., 2019).  Oleh  karena  itu, diperlukan alternatif sumber pencahayaan lain yang bisa meningkatkan produksi. kandidat sumber cahaya artifisial yang ideal adalah Light emitting diodes (LEDs).
Lampu LEDs memiliki keunggulan diantaranya hemat energi, memiliki masa penggunaan yang lama, dapat menghasilkan cahaya monokromatik (Cao et al. , 2020; Booysen et al. , 2021; Yap et al. , 2021). Sehingga dengan menggunakan pencahayaan pada panjang gelombang tertentu ataupun kombinasinya  diduga  dapat  meningkatkan  produksi  biomassa  maupun  meningkatkan  komponen kimia mikroalga seperti senyawa bioaktif dan biopigmen. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis pengaruh pencahayaan monokromatis LEDs (biru, hijau dan merah), lampu LEDs putih dan lampu TL  fluoresens  (kontrol)  terhadap  pertumbuhan,  kadar  pigmen  dan  aktivitas  antioksidan Spirulina platensis .

## MATERI DAN METODE
Materi  dalam  penelitian  ini  adalah Spirulina  platensis yang  didapatkan  dari  koleksi Laboratorium Budidaya Perairan, Program Studi Budidaya Peraian, Fakultas Sain dan Teknologi, Universitas  Islam  Nahdlatul  Ulama  Jepara  dan  selanjutnya  dilakukan scale  up dengan menggunakan pupuk walne yang didapatkan dari Laboratorium Pakan Hidup, BBPBAP – Jepara. Penelitian dilaksanakan pada bulan Juni 2022. Kultur dan Uji pertumbuhan Spirulina platensis bertempat di Laboratorium Budidaya Perairan, Program Studi Budidaya Peraian, Fakultas Sain dan Teknologi,  Universitas  Islam  Nahdlatul  Ulama  Jepara.  Pengukuran  kadar  pigmen  dan  aktivitas antioksidan  bertempat  di  Laboratorium  Marine  Science  Techno  Park  (MSTP),  Universitas Diponegoro, Jepara.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi  gelas  ukur,  erlenmeyer,  pipet  tetes,  pipet volume, instalasi aerasi, termometer,  luxmeter, pH meter, refraktometer, spektofotometer UV Vis, lampu LED biru (λ = 455,7 nm), hijau (λ = 515,8 nm), merah (λ = 633,8 nm), putih (λ = 456,6 nm, 515,8 nm, 6 32,9 nm) dan lampu TL fluoresens (λ = 407 nm, 443 nm, 537 nm, 592 nm). Mikroskop, Sedgwick-rafter, Handcounter. Bahan yang digunakan dalam  penelitian adalah kapas,  alkohol 70 %, aluminium foil, plastik wreb, aquades.
Penelitian menggunakan metode eksperimen laboratoris dengan 5 perlakuan dan 3 ulangan (terdapat  15  unit  eksperimen).  Media  kultur  yang  digunakan  adalah  air  laut  hasil  filtrasi  dengan salinitas 30 ppt. Sebanyak 15 erlenmeyer ukuran 2 liter masing - masing di isi dengan air laut 30 ppt sebanyak  1,5  L,  media  walne  sebanyak  1%  dengan  kepadatan  awal  0,5  x  10 4 sel/ml  dan  diberi aerasi (Yuan et al. , 2019). Perlakuan yang didiberikan adalah perbedaan warna pencahayaan dalam kultur Spirulina platensis yaitu dengan pencahayaan lampu LED biru (λ = 455,7 nm), hijau (λ = 515,8 nm), merah (λ = 633,8 nm), putih (λ = 456,6 nm, 515,8 nm, 632,9 nm) dan lampu fluoresens Philips TL- D  36W/865  1SL,  80  Ra8,  Cool  Daylight  (λ  =  407  nm,  443  nm,  537  nm,  592  nm).  Fotoperiot pencahayaan 24 jam terang dengan intensitas cahaya 2000 lux. Dilakukan pengukuran parameter kualitas media setiap hari sekali, yaitu pH, DO, salinitas serta memastikan tidak terjadi kontaminan terhadap mikroalga Spirulina platensis yang telah dikultivasi (da Fontoura Prates et al. , 2020; Han et al. , 2021)
Perhitungan kepadatan sel Spirulina platensis diamati setiaphari selama kultur berlangsung. Dilakukan pengambilan sampel kultur secara aseptis dan kemudian di lakukan penetesan ke alat hemositometer.  Sel  yang  ada  di  hemositometer  dilakukan  penghitungan  dengan  menggunakan mikroskop  Olympus  BH-2  (Olympus,  Japan)  pada  perbesaran  total  100  kali  (Soni et  al. ,  2019; Hadiyanto et  al. ,  2021). Teknik  pengenceran  dilakukan  saat  kepadatan Spirulina  platensis sudah tinggi, rumus perhitungannya kepadatan sel sebagai berikut :
N = (C x 10 4 ) / (A x D)
Keterangan: N = Kepadatan sel spirulina (sel/mL); C = Jumlah sel yang dihitung; A = Luas lapang pandang (mm 2 ); D = Kedalaman lapang pandang (mm)
Berdasatkan data kepadatan sel, selanjutnya dilakukan penghitungan pertumbuhan sel yang meliputi  pertumbuhan  mutlak,  jumlah  generasi,  waktu  generasi  dan  laju  pertumbuhan  spesifik dengan persamaan :
M = Nt – N0, g = (log Nt – log N0) / 0,301, Tg = t / g,
µ = (ln Nt – ln N0) / t
Keterangan: Nt = Kepadatan sel spirulina saat waktu t (sel/mL); N0 = Kepadatan sel spirulina saat waktu awal kultur (sel.mL); g = Jumlah generasi; Tg = Waktu generasi (hari); t = Waktu pengamatan (hari); µ = Laju pertumbuhan spesifik (hari)

## Pemanenan Dan Perhitungan Produksi Biomassa
Hasil kultur dilakukan pemanenan menggunakan filter pump dengan kertas saring (Whatman GF/C 0,45 μm). hasil filtrasi dikeringkan selama dua jam pada suhu 105°C dan selanjutnya ditimbang sebagai bobot akhir (Almomani et al. , 2019; de Jesus et al. , 2019; Lim et  al. , 2021). Perhitungan nilai yield dan produktivitas dengan persamaan berikut (Vonshak, 1997).
Yield = Wt / W0,                   Pm = (Wt – W0) / (V*t)
Keterangan: Wt = Berat kering biomassa pada waktu t (gram); W0 = Berat kering biomassa pada awal penelitian (gram); Pm = Produktivitas biomassa (gr/L.hari); V = Volume kultur (Liter); t = Waktu pengamatan (hari)

## Pengukuran Kadar Klorofil Dan Karotenoid
Sebanyak 5 mg sampel dihaluskan dengan mortar, kemudian ditambahkan 5 ml aseton 80%. Hasil  pelarutan  dimasukkan  kedalam  botol  sampel  ukuran  10  mL.  Agar  sampel  tidak  terkena paparan  cahaya  maka  dibungkus  menggunakan  alumunium  foil.  Sampel  dilakukan  inkubasi semalam di dalam refrigerator. Selanjutnya sampel di inkubasi suhu ruang. Dilakukan disentrifugasi selama  20  menit  dengan  kecepatan  3000  rpm  dan  dipisahkan  antara  endapan  dengan supernatannya  (Ranjitha et  al. ,  2020).  Supernatan  dilakukan  pengukuran  OD  dengan spektrofotometri  pada  panjang  gelombang  450  nm,  663  nm,  dan  645  nm  (Rizzi et  al. ,  2021). Kandungan klorofil a, b, total dan karotenoid dihitung menggunakan persamaan:
Klorofil a (mg/L) = 12,25 (A663) – 2,55
Klorofil b (mg/L) = 20,31 (A645) – 4,91
Total klorofil (mg/L) = 17,76 (A645) + 7,34 (663) Karotenoid (mg/L) = (1000*A450) – (3,27*Klorofil a) – [(104*klorofil b)/227]

## Pengukuran Pigmen Fikobiliprotein
Sebanyak  5  mg  sampel  dihaluskan  dengan  mortar,  kemudian  ditambahkan  5  ml  aquades. Hasil  pelarutan  dimasukkan  kedalam  botol  sampel  ukuran  10  mL.  Agar  sampel  tidak  terkena paparan cahaya maka dibungkus menggunakan alumunium foil. Sampel dilakukan inkubasi selama 14-16 jam di dalam refrigerator. selanjutnya sampel di inkubasi suhu ruang. Dilakukan disentrifugasi selama  30  menit  dengan  kecepatan  3000  rpm  dan  dipisahkan  antara  endapan  dengan supernatannya (Rathnasamy et al. , 2019; Rodrigues et al. , 2019). Supernatan dilakukan pengukuran OD dengan spektrofotometri pada panjang gelombang 562 nm, 615 nm, dan 652 nm (Pagels et al. , 2019;  Purvis et  al. ,  2019).  Penghitungan  Fikosianin,  Allofikosianin  dan  Fikoeritrin  menggunakan persamaan :
Fikosianin (mg/L) = [A620 – (0,7*A650)] / 7,38 Allofikosianin (mg/L) = [A650 – (0,19*A620)] / 5,65 Fikoeritrin (mg/L) = [A565 – (2,8*Fikosianin) – (1,34*Allofikosianin)] / 12,7

## Uji Aktivitas Antioksidan DPPH
Satu ml larutan sampel konsentrasi 25, 50, 75, 100, 125 dan 150 ppm. Selanjutnya masing- masing  dimasukkan  ke  dalam  vial  dan  ditambah  dengan  3  ml  reagen  DPPH  0,1  mM.  Larutan diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  30  menit.  Pengukuran  absorbansi  dilakukan  dengan menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 517 nm. Blanko dibuat dari 1 ml pelarut tanpa ekstrak ditambah dengan 3 ml reagen DPPH 0,1 mM (Kandi dan Charles, 2019; Romanet et al. , 2021; Yang et al. , 2021). Persentase inhibisi dihitung dengan rumus :
% Inhibisi = [(A0 – A1) / A1] * 100%
Keterangan: A0 = Absorbansi blangko; A1 = Absorbansi sampel

## Analisis Data
Data  kepadatan  sel  dilakukan  analisis  polynomial  untuk  menentukan  fase  pertumbuhan. Selanjutnya dilakukan analisis regresi linier sederhana untuk mengetahui tren eksponensial. Data pertumbuhan mutlak, jumlah generasi, waktu generasi, laju pertumbuhan, yield, produktifitas, kadar klorofil  a,  b,  total  karotenoid,  pigmen  fikobiliprotein  dilakukan  uji  homogenitas,  aditivitas  dan normalitas.  Selanjutnya  jika  memenuhi  kriteria  maka  data  dilakukan  uji  one  way  anova.  Jika perlakuan  memberikan  pengaruh  berbeda  secara  nyata  maka  dilanjutkan  denga  uji  Tukey.  Data persen inhibisi dilakukan analisis regresi linier sederhana untuk menentuan nilai IC 50 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  melakukan  optimasi  panjang  gelombang  pencahayaan  dalam  kultur Spirulina platensis .  perlakuan  tersebut  dian taranya  pemberian  pencahayaan  dengan  lampu  LED  biru  (λ  = 455,7 nm), hijau (λ = 515,8 nm), merah (λ = 633,8 nm), putih (λ = 456,6 nm, 515,8 nm, 632,9 nm) dan lampu TL fluoresens (λ = 407 nm, 443 nm, 537 nm, 592 nm). Parameter yang diamati meliputi pertumbuhan, kadar klorofil, kadar pigmen fikobiliprotein dan aktivitas antioksidan.

## Pertumbuhan Spirulina platensis
Berdasarkan hasil penelitian Gambar 1 menuntukkan bahwa perbedaan panjang gelombang (warna) pencahayaan dalam kultivasi Spirulina platensis berpengaruh terhadap pola pertumbuhan. Perlakuan lampu LED biru menuntukkan respon pertumbuhan pada fase penyesuaian terjadi sangat lama yaitu dari hari pertama hingga hari ke 7. Fase ekpotensial pada hari ke 8 hingga hari ke 12. hari  ke  12  hingga  13  merupakan  fase  stasioner  dengan  puncak  pertumbuhan  pada  hari  ke  13. Selanjutnya hari ke 14 dan 15 terjadi fase kematin.
y = -6E-05x 4 + 0,0011x 3 - 0,0015x 2 - 0,0021x + 0,5409
R² = 0,9915
y = -0,0002x 4 + 0,0069x 3 - 0,0617x 2 + 0,2419x + 0,3096
R² = 0,9618
y = -0,0002x 4 + 0,0059x 3 - 0,0379x 2 + 0,1541x + 0,4238 R² = 0,9841
y = -0,0001x 4 + 0,0028x 3 - 0,022x 2 + 0,1653x + 0,338 R² = 0,9735 y = -1E-04x 4 + 0,0022x 3 - 0,0167x 2 + 0,1593x + 0,3655 R² = 0,9654 0,5 0,7 0,9 1,1 1,3 1,5 1,7 1,9 2,1 2,3 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 K ep ad atan S el ( x 10 ⁴ sel /m l) Pengamatan hari ke-
LED Biru
LED Hijau
LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens)
Journal of Marine Research Vol 11, No. 4 November 2022, pp. 805-818
Perlakuan LED hijau memberikan fase penyesuaian hari ke 1 hingga 4, fase eksponensian pada hari ke 5 hingga 12 dan puncak tertumbuhan hari ke 13 selanjutnya fase kematian. Perlakuan LED merah memberikan fase penyesuaian pertumbuhan hari ke 1 dan 2, fase eksponensial pada hari ke 3 hingga 12, fase stasioner pada hari ke 12 hingga 14 dengan puncak pertumbuhan hari ke 13. fase kematian pada hari 14 dan 15.
Perlakuan  LED  putih  memberikan  fase  penyesuaian  yang  singkat  pada  hari  pertama,  fase eksponensial pada hari ke 2 hingga 11. Fase stasioner pada hari ke 11 hingga 14 dan terjadi puncak pertumbuhan pada hari ke 13. Fase keatian pada hari ke 14 dan 15. Perlakuan lampu TL memiliki respon fase penyesuaian yang singkat pada hari pertama. Fase eksponensial pada hari ke 2 hingga ke 12. Puncak pertumbuhan pada hari ke 13. Fase kematian pada hari ke 14 dan 15.
Spirulina platensis memiliki fase pertumbuhan yang meliputi fase penyesuaian, eksponensial, stasioner dan kematian. Fase penyesuaian ditandai pada garis polinomial yang stasioner pada awal kultifasi. kondisi jumlah sel adalah di kepadatan stagnan dan tidak mengalami perubahan signifikan. Fase penyesuaian merupakan fase dimana spirulina menyesiaikan diri terhadap media kultur yang baru. fase ini menggunakan energi untuk menjaga kestabilan proses metabolisme, sehingga hanya sebagian kecil energi untuk pertumbuhan (Almomani et al. , 2019; de Jesus et al. , 2019; Hadiyanto et al. , 2021).
Fase  eksponensial  ditandai  pada  garis  polinomial  yang  mengalami  peningkatan  laju pertumbuhan. kondisi jumlah sel mengalami kenaikan pesat dan mengalami perubahan signifikan. Peningkatan  laju  pertumbuhan  terjadi  karena  sel Spirulina  platensis melakukan  pembelahan  sel secara  aktif.  Peningkatan  pembentukan  protein  dan  komponen-komponen  penyusun  plasma  sel yang dibutuhkan dalam pertumbuhan (Soni et al. , 2019; da Fontoura Prates et al. , 2020; Han et al. , 2021).  Perlakuan  dengan  pencahayaan  LED  merah  memiliki  nilai  kepadatan  sel  tertinggi  hal  ini diduga bahwa perlakuan dapat mamcu pembelahan sel dan meningkatkan laju pertumbuhan.
Perlakuan  perbedaan  warna  pencahayaan  berpengaruh  terhadap  pola  pertumbuhan Spirulina  platensis .  Hasil  penelitian  gambar  2  menujukkan  bahwa  regresi  fase  eksonensial pertumbuhan Spirulina  platensis berbeda  karena  pengaruh  warna  pencahayaan.  perlakuan  LED merah  memiliki  fase  ekponensial  pertumbuhan  tertinggi  dengan  persamaan  linier  y  =  0,1391x  + 0,242  dengan  R 2 sebesar  0,9482.  Sedangkan  perlakuan  LED  biru  memiliki  fase  ekponensial pertumbuhan  terendah  yaitu  dengan  persamaan  linier  y  =  0,0462x  +  0,4124  dengan  R 2 sebesar 0,9448.  Kepadatan  sel  pada  fase  eksponensial  ini  selanjutnya  digunakan  untuk  menghitung  nilai pertumbuhan mutlak, laju pertumbuhan, jumlah dan waku generasi sel.
Gambar 2 . Regresi linier pertumbuhan Spirulina platensis pada fase eksponensial
y = 0,0462x + 0,4124 R² = 0,9448 y = 0,0735x + 0,3633 R² = 0,8998 y = 0,1391x + 0,242 R² = 0,9482 y = 0,0958x + 0,4178 R² = 0,9751 y = 0,0994x + 0,4526 R² = 0,9682 0,5 0,7 0,9 1,1 1,3 1,5 1,7 1,9 2,1 2,3 0 1 2 3
4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 K ep ad atan S el ( x 10 ⁴ sel /m l) Pengamatan hari ke-
LED Biru
LED Hijau
LED Merah
LED Putih Lampu TL (Fluoresens)
(a)
(b)
(c) (d)
Gambar 3 . Respon  pertumbuhan Spirulina  platensis :  (a)  Pertumbuhan  mutlak,  (b)  Laju pertumbuhan, (c) Jumlah generasi sel, (d) Waktu generasi sel.
Berdasarkan  hasil  penelitian  gambar  3  menunjukkan  bahwa  perlakuan  perbedaan  warna pencahayaan berpengaruh signifikan terhadap pertumbuhan mutlak, laju pertumbuhan, jumlah dan waktu generasi. Nilai respon pertumbuhan mutlak dari tertinggi hingga terendah adalah perlakuan LED  merah,  lampu  TL,  LED  putih,  hijau  dan  biru.  Nilai  pertumbuhan  mutlak  secara  berurutan sebesar 1,602 d, 1,197 c, 1,112 c, 0,946 b dan 0,485 a x 10 4 sel/ml. perlakuan LED putih dan lampu TL memiliki nilai pertumbuhan mutlak yang tidak berbeda secara signifikan tetapi keduanya berbeda terhadap perlakuan lainnya. Dua perlakuan dengan laju pertumbuhan terendah adalah perlakuan LED biru dan hijau yaitu dengan nilai 0,05 a dan 0,076 b hari -1 . Sedangkan perlakuan LED merah memiliki respon laju pertumbuhan tertinggi yaitu sebesar 0,108 d hari -1 . Nilai jumlah generasi dan waktu  generasi  memiliki  hubungan  korelasi  negatif.  perlakuan  LED  biru  memiliki  nilai  jumlah generasi terendah dan waktu generasi tertinggi yaitu sebesar 0,935 a dan 13,961 d hari. Perlakuan LED merah memiliki nilai jumlah generasi tertinggi dan waktu generasi terendah yaitu sebesar2,028 d dan 6,416 a hari.
Hasil penelitian Gambar 4 menunjukkan bahwa perlakuan warna pencahayaan berpengaruh terhadap  nilai  yield  dan  produktifitas.  Perlakuan  LED  biru  memiliki  nilai  yield  dan  produktifitas terendah  dari  perlakuan  yang  lain  yaitu  sebesar  1,163  a  gr/gr  dan  2,983  a  gr/L.Hari.  Sedangkan perlakuan dengan nilai yield dan produktifitas tertinggi adalah perlakuan LED merah yaitu sebesar
0,485 a 0,946 b 1,602 d 1,112 c 1,197 c 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) Pe rtu m b u h a n M u tla k (x 1 0 ⁴ se l/m l) 0,050 a 0,076 b 0,108 d 0,089 c 0,092 c 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) L a ju P e rt u m b u h a n ( 1 /H a ri) 0,935 a 1,424 b 2,028 d 1,662 c 1,727 c 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) J u m lah Ge n e ra s i 13,961 d 9,142 c 6,416 a 7,839 b 7,561 b 5 7 9 11 13 15 17 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) W a k tu Ge n e ra s i (H a ri)
9,649  e  gr/gr  dan  24,740  e  gr/L.Hari.  Terdapat  perbedaan  nilai  biomassa  hasil  panen  antar perlakuan.  Perbedaan  nilai  yield  dan  produktifitas  dikarenakan  pengaruh  kualitas  cahaya  yaitu panjang gelombang yang berasal dari LED sebagai sumber pencahayaan monokromatik. Panjang gelombang  dan  intensitas  pencayahaan  merupakan  faktor  utama  yang  memengaruhi  proses fotosintesis. Spirulina  platensis merupakan  organisme  fotoautotrof  yang  melakukan  proses fotosintesis  untuk  memperoleh  energi  yang  diperlukan  dalam  metabolisme  dan  pertumbuhan. Fotosintesis dipengaruhi oleh berbagai variabel internal maupun eksternal yang selanjutnya akan berdampak terhadap produksi biomassa Spirulina (Yuan et al. , 2019; Lim et al. , 2021).

## Kadar Klorofil Spirulina platensis
Hasil  penelitian  Gambar  5.a  menunjukkan  bahwa  perlakuan  warna  pencahayaan berpengaruh  terhadap  nilai  klorofil  a,  klorofil  b,  total  klorofil  dan  karotenoid.  Perlakuan  LED  biru memiliki nilai klorofil a, klorofil b, total klorofil dan karotenoid terendah dari perlakuan yang lain.
Perlakuan LED biru memiliki nilai klorofil a dan total klorofil sebesar 5,087 a mg/L dan 10,692 a mg/L. perlakuan LED biru dan hijau memiliki nilai klorofil b yang rendah dan saling tidak berbeda nyata yaitu sebesar 2,084 a dan 2,193 a mg/L. Selain itu juga memiliki nilai karotenoid yang tidak berbeda nyatau yaitu sebesar 2,908 a dan 3,101 a mg/L. Perlakuan LED merah memiliki nilai klorofil a, klorofil b, dan total klorofil tertinggi, secara berurutan yaitu sebesar 10,153 d, 4,744 c, 16,053 d mg/L.
Peningkatan  kadar  klorofil  mikroalga  dipengaruhi  oleh  intensitas,  panjang  gelombang pencahayaan dan foto periot penyinaran dalam proses kultur. Panjang gelombang yang tepat dan optimal,  akan  meningkatkan  proses  metabolisme  sel  dan  pembentukan  klorofi.  Semakin  tinggiya kadar  klorofil  akan  menyebabkan  proses  fotosintesis  berjalan  dengan  maksimal  sehingga  laju pertumbuhan sel spirulina meningkat eksponensial (Rizzi et al. , 2021). Terdapat korelasi linier positif antara  kepadatan  sel  mikroalga  terhadap  kadar  klorofil  yaitu  semakin  tinggi  kepadatan  sel  atau biomassa  maka  kadar  klorofil  semakin  tinggi.  Proses  fotosintesis  dipengaruhi  oleh  kuantitas  dan kualitas  pencahayaan.  Dalam  proses  fotosintesis  melibatkan  klorofil  dalam  metabolisme pembentukan  energi  dan  oksigen.  Reaksi  fotosintesis  dengan  menggunakan  pencahayaan merupakan reaksi fotosisntesis dalam reaksi terang  (Ranjitha et al. , 2020).
Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan LED merah memiliki nilai karotenoid tertinggi yaitu sebesar 5,893 c mg/L. Terdapat korelasi positif antara laju peningkatan fortosintesis dengan peningkatan  kadar  karotenoid,  yaitu  semakin  tinggi  reaksi  fotosintesis  maka  kadar  pigmen karotenoid  semkin  meningkat.  Selain  itu  juga  dengan  terjadinya  peningkatan  reaksi  fotosintesis maka  pertumbuhan  sel  dan  produksi  biomassa  selspirulina  platensi  mengalami  peningkatan (Rodrigues et al. , 2020).
Selain pigmen klorofil dan karotenoid, dalam penelitian ini juga dilakukan analisis terhadap kadar pigmen fikobiliprotein. Berdasarkan hasil penelitian Gambar 6 menunjukkan bahwa perlakuan perbedaan  warna  pencahayaan  berpengaruh n yata  terhadap  kadar  pigmen fikobiliprotein.
(a) (b)
Gambar 4 . Pertumbuhan biomassa sel Spirulina platensis : (a). yield dan (b). Produktifitas
1,163 a 2,270 b 9,649 e 5,687 c 6,720 d 0 2 4 6 8 10 12 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) Y ield ( g r/ g r) 2,983 a 5,821 b 24,740 e 14,583 c 17,231 d 0 5 10 15 20 25 30 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) P ro d u k tif it a s ( g r/ L t*H a ri)
(a) (b)
(c) (d)
Gambar 5 . Respon kadar pigmen klorofil dan karotenoid Spirulina platensis : (a). Kadar klorofil a,
(b). Kadar klorofil b, (c). Kadar total klorofil, (d). Kadar karotenoid.
Perlakuan lampu TL (fluoresens) memiliki nilai fikosianin dan fikoeritrin tertinggi yaitu sebesar 0,107 d  dan  0,335  e  mg/L.  Sedangkan  terhadap  nilai  alofikosianin  perlakuan  lampu  TL  memiliki  nilai terendah  yaitu  sebesar  0,022  a  mg/L.  Perlakuan  LED  biru  memiliki  nilai  fikosianin  dan  fikoeritrin terendah yaitu sebesar 0,029 dan 0,120 mg/L. Sedangkan pada alofikosianin perlakuan LED biru memiliki nilai tertinggi yaitu sebesar 0,046 c mg/L.
Mikroalga Spirulina  platensis memiliki  pigmen  protein  kompleks  fikobilisom  sebagai penangkap  sinar  matahari.  Fikosianin  merupakan  salah  satu  jenis  pigmen  fikobiliprotein  yang memberikan  warna  biru.  Pigmen  fikosisanin  merupakan  hasil  dari  proses  metabolisme  sekunder yang penting bagi proses pertumbuhan (Purvis et al. , 2019; Faieta et al. , 2021). Proses metabolisme sekunter terjadi tidak sepanjang pertumbuhan tetapi terjadi pada fase tertentu dengan kondisi yang sesuai  dan  dibutuhkan.  Pada  siklus  pertumbuhan Spirulina  platensis ,  fikosianin  di  produksi  pada fase eksponensial akir dan kondisi maksimum saat menuju ke fase stasioner. Hal itu dikerenakan metabolit sekunder terjadi disaat sel dalam tahap diferensiasi menjadi sel yang lebih terspesialisasi (Pagels et al. , 2019; Purvis et al. , 2019). Senyawa metabolit sekunder berfungsi untuk pertahanan diri  suatu  organisme.  mekanisme  pertahanan  tersebut  adalah  fikosianin  bekerja  sebagai  pigmen pelengkap untuk membantu klorofil dalam menyerap cahaya pada proses fotosintesis (Rathnasamy et al. , 2019; Rodrigues et al. , 2019).

## Aktivitas Antioksidan
Ekstak  spirulina  hasil  kultur  dengan  kondisi  perlakuan  perbedaan  panjang  gelombang pencahayaan selanjutnya dilakukan uji aktivitas antioksidan dengan metode radikal DPPH. Ekstrak
5,087 a 6,216 b 10,153 d 8,162 c 8,296 c 4 5 6 7 8 9 10 11 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) K lor o fil a ( m g /L ) 2,084 a 2,193 a 4,744 c 3,393 b 3,478 b 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) K lor o fil b ( m g /L ) 10,692 a 11,464 b 16,053 d 13,679 c 13,834 c 10 11 12 13 14 15 16 17 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) Total K lor o fil ( m g /L ) 2,908 a 3,101 a 5,893 c 4,181 b 4,403 b 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5 7,0 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) K a ro te n o id (m g /L )
dilakukan  pereaksian  dengan  larutan  DPPH  berbeda  konsentrasi.  Hasil  pereaksian  dilakukan inkubasi  dan  spektrofotometri.  Data  yang  didapatkan  dari  spektrofotometri  dilakukan  perhitungan persen inhibisi dengan menggunakan persamaan standart DPPH. Data persen inhibisi pada hasil penelitian Gambar 7 menunjukkan bahwa semua ekstrak dari perbedaan perlakuan pencahayaan menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak maka nilai persen inhibisi semakin tinggi. semikin tinggi konsentrasi ekstrak maka aktivitas antioksidan semakin kuat.
Perlakuan LED biru dan hijau memiliki nilai persen inhibisi 50 % pada konsentrasi diatas 200 ppm.  perlakuan  LED  biru  memiliki  persamaan  regresi  y  =  0,1511x  +  5,5893  dengan  koefisien korelasi sebesar 0,998 dan nilai IC 50 tertinggi yaitu sebesar 293,9 ppm. perlakuan LED hijau memiliki persamaan regresi y = 0,1909x +  5,7631 dengan koefisien korelasi sebesar  0,989 dan nilai IC50 sebesar  231,7  ppm.  Perlakuan  dengan  aktivitas  antioksidan  tertinggi  adalah  LED  merah  dengan persamaan regresi y = 0,3824x +  9,7036 dengan koefisien korelasi sebesar  0,993 dan nilai IC50 terendah yaitu sebesar 105,4 ppm.
(a) (b) (c)
Gambar 6 . Respon kadar pigmen fikobiliprotein Spirulina platensis : (a). Kadar fikosianin, (b). Kadar allofikosianin, (c). Kadar fikoeritrin.
0,029 a 0,040 b 0,055 c 0,057 c 0,107 d 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) F ik os ian in (m g/L ) 0,046 c 0,042 c 0,037 b 0,036 b 0,022 a 0,015 0,020 0,025 0,030 0,035 0,040 0,045 0,050 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) A llof ik os ian in (m g/L ) 0,120 a 0,187 b 0,218 c 0,254 d 0,335 e 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 LED Biru LED Hijau LED Merah LED Putih Lampu TL (Fluoresens) Fi k o e ri tri n (m g /L )
Tabel 1 . Pengaruh panjang gelombang pencahayaan dalam kultur terhadap aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis
Perlakuan Persamaan R² R IC ₅₀ (ppm) LED Biru y = 0,1511x + 5,5893 0,995 0,998 293,9 LED Hijau y = 0,1909x + 5,7631 0,978 0,989 231,7 LED Merah y = 0,3824x + 9,7036 0,987 0,993 105,4 LED Putih y = 0,2678x + 5,8660 0,987 0,993 164,8 Lampu TL (Fluoresens) y = 0,3125x + 6,7699 0,986 0,993 138,3
Gambar 7 . Bentuk hubungan konsentrasi ekstrak Spirulina platensis terhadap persen inhibisi
Senyawa antioksidan alami merupan senyawa yang didapatkan dari bahan alam dan senyawa tersebut  mampu  mendonorkan  atom  hidrogennya  pada  radikal  bebas  DPPH.  Reaksi  peredaman radikal  DPPH  ditandai  dengan  terjadinya  perubahan  warna  DPPH  dari  warna  ungu  menjadi memudar  (Romanet et  al. ,  2021).  Aktivitas  radikal  DPPH  dapat  diukur  dalam  bentuk  teroksidasi dengan  metode  spektrofotometri  pada  panjang  gelombang  517  nm  (Kandi  dan  Charles,  2019). Spirulina  platensi  memiliki  kandungan  senyawa  fitokimia  dan  biopigmen  yang  diduga  dapat berfungsi sebagai antioksidan. Kandungan tersebut berupa senyawa fenol dan alkaloid. sedangkan biopigmen  berupa  klorofil,karotenoid  dan  pigmen  fikobiliprotein  (Vigliante et  al., 2019;  de  Moraes Nogueira et al. , 2021).

## KESIMPULAN
Perlakuan  perbedaan  panjang  gelombang  pencahayaan  dalam  kultur Spirulina  platensis memberikan pengaruh yang nyata terhadap pertumbuhan, kadar pigmen dan aktivitas antioksidan. Perlakuan  terbaik  adalah  dengan  pemberian  pencahayaan  LED  merah  yaitu Spirulina  platensis memiliki puncak pertumbuhan hari ke 13 dengan kepadatan sel 2,122 x 10 4 sel/ml, pertumbuhan mutlak sebesar 1,602 d x 10 4 sel/ml, laju pertumbuhan 0,108 hari -1 , jumlah generasi 2,028, waktu generasi 6,416 hari, yield 9,649 gr/gr, dan produktifitas 24,740 gr/L.hari. Ekstrak spirulina hasil kultur dengan  LED  merah  memiliki  kandungan  klorofil  a  sebesar  10,153  mg/L,  klorofil  b  sebesar  4,744 mg/L, total klorofil 16,053 mg/L, karotenoid 5,893 mg/L. Selain itu juga memiliki kandungan pigmen fikobiliprotein yaitu fikosianin 0,055 mg/L, alofikosianin 0,037 mg/L dan fikoeritrin 0,218 mg/L. Eksrak spirulina  dari  hasil  kultur  dengan  pencahayaan  LED  merah memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan nilai IC 50 sebesar 105,4 ppm.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 25 50 75 100 125 150 175 P ersen Inh ibi si ( %) Konsentrasi (ppm)
LED Merah LED Biru LED Hijau LED Putih Lampu TL (Fluoresens)

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti mengucapkan terima kasih kepada LPPM Universitas Islam Nahdlatul Ulama Jepara dan LPPM Universitas Wahit Hasim yang telah memeberikan pendanaan penelitian dalam skema Penelitian  Kolaborasi  Antar  Perguruan  Tinggi  Dalam  Negeri.  Peneliti  mengucapkan  terima  kasih atas  dukungan  fasilitas  penelitian  dari  Laboratorium  Prodi  Budidaya  Perairan  UNISNU  Jepara, Laboratorium MSTP Undip Jepara, BBPBAP Jepara.

## DAFTAR PUSTAKA
Alagawany,  M.,  Taha,  A.E.,  Noreldin,  A.,  El-Tarabily,  K.A.  &  Abd  El-Hack,  M.E.  2021.  Nutritional applications of species of Spirulina and Chlorella in farmed fish: A review. Aquaculture . 42: 1 – 11. DOI: 10.1016/j.aquaculture.2021.736841
Albrecht, S., Elpelt, A., Kasim, C., Reble, C., Mundhenk, L., Pischon, H., Hedtrich, S., Witzel, C., Lademann,  J.,  Zastrow,  L.  &  Beckers,  I.  2019.  Quantification  and  characterization  of  radical production  in  human,  animal  and  3D  skin  models  during  sun  irradiation  measured  by  EPR spectroscopy. Free  Radical  Biology  and  Medicine ,  31:1 –23.  DOI:  10.1016/j.freeradbiomed. 2018.12.022
Almomani, F., Judd, S., Bhosale, R.R., Shurair, M., Aljaml, K. & Khraisheh, M.  2019. Intergraded wastewater  treatment  and  carbon  bio-fixation  from  flue  gases  using  Spirulina  platensis  and mixed  algal  culture. Process  Safety  and  Environmental  Protection ,  124:240 –50.  DOI: 10.1016/j.psep.2019.02.009
Arsenie, L.V., Lacatusu, I., Oprea, O., Bordei, N., Bacalum, M. & Badea, N. 2020. Azelaic acid-willow bark extract-panthenol –Loaded lipid nanocarriers improve the hydration effect and antioxidant action of cosmetic formulations. Industrial Crops and Products , 154 : p.112658. DOI: 10.1016/j. indcrop.2020.112658 Booysen, M.J., Samuels, J.A. & Grobbelaar, S.S. 2021. LED there be light: The impact of replacing lights at schools in South Africa. Energy and Buildings, 235: p.110736. DOI: 10.1016/j.enbuild. 2021.110736
Cao, S., Han, T., Li, Q., Peng, L., Zhao, C., Tang, Y. & Xu, J. 2020. Tunable spectrum resemblance of  LED  lights  for  improving  the  photosynthetic  action  of  Chinese  Cabbages. Life  Sciences  in Space Research , 26:28-33. DOI: 10.1016/j.lssr.2020.03.009
Chaikul, P., Sripisut, T., Chanpirom, S. & Ditthawutthikul, N. 2020. Anti-skin aging activities of green tea  (Camelliasinensis  (L)  Kuntze)  in  B16F10  melanoma  cells  and  human  skin  fibroblasts. European Journal of Integrative Medicine , 40: p.101212. DOI: 10.1016/j.eujim.2020.101212 Chia,  S.R.,  Chew,  K.W.,  Leong,  H.Y.,  Manickam,  S.,  Show,  P.L.  &  Nguyen,  T.H.P.,  2020.
Sonoprocessing-assisted solvent extraction for the recovery of pigment-protein complex from Spirulina  platensis. Chemical  Engineering  Journal ,  398:  p.125613.  DOI:  10.1016/j.cej.2020. 125613
da Fontoura Prates, D., Duarte, J.H., Vendruscolo, R.G., Wagner, R., Ballus, C.A., da Silva Oliveira, W., Godoy, H.T., Barcia, M.T., de Morais, M.G., Radmann, E.M. & Costa, J.A.V. 2020. Role of light emitting diode (LED) wavelengths on increase of protein productivity and free amino acid profile of Spirulina sp. cultures. Bioresource technology, 306: p.123184. DOI: 10.1016/j.biortech. 2020.123184 de Jesus, C.S., de Jesus Assis, D., Rodriguez, M.B., Menezes Filho, J.A., Costa, J.A.V., de Souza Ferreira,  E.  &  Druzian,  J.I.  2019.  Pilot-scale  isolation  and  characterization  of  extracellular polymeric  substances  (EPS)  from  cell-free  medium  of  Spirulina  sp.  LEB-18  cultures  under outdoor  conditions. International  journal  of  biological  macromolecules ,  124:  1106-1114.  DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2018.12.016 de Moraes  Nogueira,  A.O.,  Kokuszi,  L.T.F.,  Cordeiro,  A.P.,  Salgado,  H.Z.,  Costa,  J.A.V.,  Santos,
L.O. & de Lima, V.R. 2021. Spirulina sp. LEB 18- extracted phycocyanin: Effects on liposomes’ physicochemical parameters and correlation with antiradical/antioxidant properties. Chemistry and Physics of Lipids , 236: 105064.
Faieta,  M.,  Neri,  L.,  Di  Michele,  A.,  Di  Mattia,  C.D.  &  Pittia,  P.  2021.  High  hydrostatic  pressure treatment of Arthrospira (Spirulina) platensis extracts and the baroprotective effect of sugars on phycobiliproteins. Innovative  Food  Science  &  Emerging  Technologies ,  70:  p.102693.  DOI: 10.1016/j.ifset.2021.102693
Haddada, M.B., Gerometta, E., Chawech, R., Sorres, J., Bialecki, A., Pesnel, S., Spadavecchia, J. &  Morel,  A.L.  2020.  Assessment  of  antioxidant  and  dermoprotective  activities  of  gold nanoparticles  as  safe  cosmetic  ingredient. Colloids  and  Surfaces  B:  Biointerfaces ,  189: p.110855. DOI: 10.1016/j.colsurfb.2020.110855
Hadiyanto, H., Khoironi, A., Dianratri, I., Suherman, S., Muhammad, F. & Vaidyanathan, S., 2021.
Interactions  between  polyethylene  and  polypropylene  microplastics  and  Spirulina  sp. microalgae in aquatic systems. Heliyon , 7(8): p.e07676. DOI: 10.1016/j.heliyon.2021.e07676 Han, P., Lu, Q., Zhong, H., Xie, J., Leng, L., Li, J., Fan, L., Li, J., Chen, P., Yan, Y. & Wei, F., 2021.
Recycling nutrients from soy sauce wastewater to culture value-added Spirulina maxima. Algal Research, 53: p.102157. DOI: 10.1016/j.algal.2020.102157
Jia, H., Zhao, S., Shi, Y., Zhu, K., Gao, P. & Zhu, L. 2019. Mechanisms for light-driven evolution of environmentally  persistent  free  radicals  and  photolytic  degradation  of  PAHs  on  Fe  (III)- montmorillonite surface. Journal of hazardous materials , 362: 92-98. DOI:
10.1016/j.jhazmat.2018.09.019
Junique, L., Watier, L., Lejeune, H., Viudes, F., Deblieck, M. & Watier, D. 2021. Determination by response  surface  methodology  of  optimal  protein  and  phycocyanin  productivity  conditions  in Arthrospira  (Spirulina)  platensis  under  different  combinations  of  photoperiod  variation  and lighting intensity. Bioresource Technology Reports , 15: p.100763.
Kadam, A.R., Nair, G.B. & Dhoble, S.J. 2019. Insights into the extraction of mercury from fluorescent lamps:  A  review. Journal  of  Environmental  Chemical  Engineering ,  7(4):  p.103279.  DOI: 10.1016/j.jece.2019.103279
Kandi,  S.  &  Charles,  A.L.  2019.  Statistical  comparative  study  between  the  conventional  DPPH spectrophotometric  and  dropping  DPPH  analytical  method  without  spectrophotometer: Evaluation for the advancement of antioxidant activity analysis. Food chemistry , 287: 338-345. DOI: 10.1016/j.foodchem.2019.02.110
Lafarga, T., Fernández-Sevilla, J.M., González-López, C. & Acién-Fernández, F.G. 2020. Spirulina for the food and functional food industries. Food Research International , 137: p.109356. DOI: 10.1016/j.foodres.2020.109356
Leopoldino, C.C.L., de Mendonça, F.M., de Lima Siqueira, P.H. & Borba, É.L., 2019. The disposal of fluorescent lamps of industries of the metropolitan region of Belo Horizonte-MG. Journal of cleaner production , 233: 1486-1493. DOI: 10.1016/j.jclepro.2019.06.192
Lim,  H.R.,  Khoo,  K.S., Chew,  K.W.,  Chang,  C.K., Munawaroh,  H.S.H., Kumar,  P.S.,  Huy,  N.D.  &
Show,  P.L.  2021.  Perspective  of  Spirulina  culture  with  wastewater  into  a  sustainable  circular bioeconomy. Environmental Pollution , 284 : p.117492. DOI: 10.1016/j.envpol.2021.117492 Othman, A., Norton, L., Finny, A.S. & Andreescu, S., 2020. Easy-to-use and inexpensive sensors for assessing the quality and traceability of cosmetic antioxidants. Talanta , 208: p.120473. DOI: 10.1016/j.talanta.2019.120473
Pagels, F., Guedes, A.C., Amaro, H.M., Kijjoa, A. & Vasconcelos, V. 2019. Phycobiliproteins from cyanobacteria:  Chemistry  and  biotechnological  applications. Biotechnology  Advances, 37(3):422-443. DOI: 10.1016/j.biotechadv.2019.02.010
Pan,  B.,  Li,  H.,  Lang,  D.  &  Xing,  B.  2019.  Environmentally  persistent  free  radicals:  occurrence, formation mechanisms and implications. Environmental Pollution , 248:320-331.
Purvis,  K.,  Brittain,  K.,  Joseph,  A.,  Cisek,  R.  &  Tokarz,  D.  2019.  Third-order  nonlinear  optical properties  of  phycobiliproteins  from  cyanobacteria  and  red  algae. Chemical  Physics  Letters , 731: p.136599. DOI: 10.1016/j.cplett.2019.136599
Ranjitha,  S.,  Aroulmoji,  V.,  Selvankumar,  T.,  Sudhakar,  C.  &  Hariharan,  V.  2020.  Synthesis  and development of novel sensitizer from spirulina pigment with silver doped TiO2 nano particles for bio-sensitized  solar  cells. Biomass  and  Bioenergy ,  141:  p.105733.  DOI:  10.1016/j.biombioe. 2020.105733
Rathnasamy, S.K., sri Rajendran, D., Balaraman, H.B.  & Viswanathan, G. 2019.  Functional deep eutectic  solvent-based  chaotic  extraction  of  phycobiliprotein  using  microwave-assisted  liquid- liquid  micro-extraction  from  Spirulina  ( Arthrospira  platensis )  and  its  biological  activity determination. Algal Research , 44: p.101709. DOI: 10.1016/j.algal.2019.101709 Ren, H.T., jing Zhao, X., Huang, Y. & li Xiong, J., 2021. Combined effect of Spirulina and ferrous fumarate  on  growth  parameters,  pigmentation, digestive  enzyme  activity,  antioxidant  enzyme activity and fatty acids composition of Yellow River carp ( Cyprinus carpio ). Aquaculture Reports, 21: p.100776. DOI: 10.1016/j.aqrep.2021.100776 Rizzi, V., Gubitosa, J., Fini, P., Fraix, A., Sortino, S., Agostiano, A. & Cosma, P., 2021. Development of  Spirulina  sea-weed  raw  extract/polyamidoamine  hydrogel  system  as  novel  platform  in photodynamic therapy: Photostability and photoactivity of chlorophyll a. Materials Science and Engineering : C , 119: p.111593. DOI: 10.1016/j.msec.2020.111593 Rodrigues, R.D.P., de Lima, P.F., de Santiago-Aguiar, R.S. & Rocha, M.V.P., 2019. Evaluation of protic  ionic  liquids  as  potential  solvents  for  the  heating  extraction  of  phycobiliproteins  from Spirulina  (Arthrospira)  platensis. Algal  Research ,  38:p.101391.  DOI:  10.1016/j.algal. 2018.101391
Rodrigues, R.D.P., de Silva, A.S., Carlos, T.A.V., Bastos, A.K.P., de Santiago-Aguiar, R.S. & Rocha, M.V.P.  2020.  Application  of  protic  ionic  liquids  in  the  microwave-assisted  extraction  of phycobiliproteins from Arthrospira platensis with antioxidant activity. Separation and Purification Technology, 252: p.117448. DOI: 10.1016/j.seppur.2020.117448 Rodríguez, I.V., 2014. Publicaciones españolas para la fundamentación de un marco teórico sobre los  estudios  de  usuarios  de  información. Investigación  Bibliotecológica:  archivonomía, bibliotecología e información, 28(63): 223-257.
Romanet, R., Sarhane, Z., Bahut, F., Uhl, J., Schmitt-Kopplin, P., Nikolantonaki, M. & Gougeon, R.D. 2021. Exploring the chemical space of white wine antioxidant capacity: A combined DPPH, EPR and FT-ICR-MS study. Food Chemistry , 355: p.129566.
Shanthi,  G.,  Premalatha,  M.  &  Anantharaman,  N.  2021.  Potential  utilization  of  fish  waste  for  the sustainable  production  of  microalgae  rich  in  renewable  protein  and  phycocyanin-Arthrospira platensis/Spirulina. Journal  of  Cleaner  Production ,  294:  p.126106.  DOI:  10.1016/j.jclepro. 2021.126106
Soni,  R.A.,  Sudhakar,  K.  &  Rana,  R.S.  2019.  Comparative  study  on  the  growth  performance  of Spirulina  platensis  on  modifying  culture  media. Energy  Reports, 5:  327-336.  DOI: 10.1016/j.egyr.2019.02.009
Vigliante,  I., Mannino, G.  & Maffei, M.E.  2019. OxiCyan®,  a  phytocomplex  of  bilberry  (Vaccinium myrtillus)  and  spirulina  (Spirulina  platensis),  exerts  both  direct  antioxidant  activity  and modulation of ARE/Nrf2 pathway in HepG2 cells. Journal of Functional Foods , 61: p.103508. Yang, J., Chen, J., Hao, Y. & Liu, Y. 2021. Identification of the DPPH radical scavenging reaction adducts of ferulic acid and sinapic acid and their structure-antioxidant activity relationship. Lwt, 146: p.111411. DOI: 10.1016/j.lwt.2021.111411
Yap, E.S.P., Uthairatanakij, A., Laohakunjit, N., Jitareerat, P., Vaswani, A., Magana, A.A., Morre, J.
&  Maier,  C.S. 2021.  Plant  growth  and  metabolic  changes  in  ‘Super  Hot’chili  fruit  (Capsicum annuum)  exposed  to  supplemental  LED  lights. Plant  Science, 305:  p.110826.  DOI: 10.1016/j.plantsci.2021.110826
Yuan, D., Yao, M., Wang, L., Li, Y., Gong, Y. & Hu, Q. 2019. Effect of recycling the culture medium on biodiversity and population dynamics of bio-contaminants in Spirulina platensis mass culture systems. Algal research , 44: p.101718. DOI: 10.1016/j.algal.2019.101718
Zhao, S., Miao, D., Zhu, K., Tao, K., Wang, C., Sharma, V.K. & Jia, H. 2019. Interaction of benzo [a] pyrene  with  Cu  (II)-montmorillonite:  generation  and  toxicity  of  environmentally  persistent  free radicals  and  reactive  oxygen  species. Environment  international ,  129:  154-163.  DOI: 10.1016/j.envint.2019.05.037
Zielinska, O.A., Mayhorn, C.B. & Wogalter, M.S. 2017. Connoted hazard and perceived importance of  fluorescent,  neon,  and  standard  safety  colors. Applied  ergonomics ,  65:  326-334.  DOI: 10.1016/j.apergo.2017.07.011