Journal Syifa Sciences and Clinical Research Volume 2 Nomor 1, Maret 2020
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187

## Aktivitas Antidiare Daun Harendong

## ( Malestoma malabathricum L)
Ika Kurnia Sukmawati 1* , Elin Yulinah Sukandar 2 ,Neng Fisheri Kurniati 3 1 Fakultas Farmasi Universitas Bhakti Kencana, Jl. Soekarno Hatta No. 754 Cibiru, Bandung, Indonesia 2,3 Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung, Jl. Ganesha No. 10, Bandung, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: ika.kurnia@bku.ac.id

## ABSTRAK
Penyakit diare masih menjadi masalah kesehatan terutama di berbagai Negara berkembang termasuk  Indonesia.  Secara  tradisional  masyarakat  telah  menggunakan    daun  Harendong ( Malestoma malabathricum L) untuk mengatasi berbagai gangguan pencernaan termasuk diare. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  menguji  aktivitas  antidiare  dan  antibakteri  ekstrak maupun  fraksi  daun  Harendong    ( Malestoma  malabathricum L).  Ekstraksi  dilakukan  dengan metode  refluks  menggunakan  pelarut  etanol.  Ekstrak  terpilih  difraksinasi  dengan  metode ekstraksi cair- cair menggunakan pelarut n-heksan dan etilasetat secara bertahap. Uji aktivitas antimikroba  dilakukan  secara in  vitro dengan  menggunakan  metode broth  microdilution terhadap ekstrak dan fraksi daun Harendong  ( Malestoma malabathricum L). Mikroba uji yang digunakan  adalah Escherichia  coli,  Shigella  dysenteriae,  Shigella  fleksneri, dan Salmonella  typhi. Dilakukan uji antidiare pada hewan uji yang diinduksi minyak jarak. Sediaan uji diberikan satu  jam  sebelum  induksi  kemudian  dilakukan  pengamatan  terhadap  feses  (frekuensi, konsistensi dan berat). Metode waktu linta susus juga dilakukan pada percobaan ini dengan prinsip membandingkan usus yang dilalui marker dengan panjang usus seluruhnya. Dari hasil uji aktivitas antidiare yang menunjukkan aktivitas penurunan frekuensi defekasi, konsistensi feses dan berat feses paling baik adalah ekstrak daun harendong dosis 50 mg/kg bb dan 100 mg/kg bb. Aktivitas penghambatan terhadapbakteri Shigella dysentriae dapat diberikan fraksi etilasetat daun harendong pada KHM 128 µg/ml.
Kata Kunci: Harendong, Malestoma malabathricum L,.antimikroba, antidiare.
Diterima:
24-09-2019 Disetujui: 12-01-2020 Online: 25-02-2020

## ABSTRACT
Diarrhea  still  become  main  health  problem  especially  in  several  developing  countries  including Indonesia.  Hharendong  leaf  have  been  used  by  people  traditionally  as  the  treatment  of  various Gastrointestinal tract disorders including diarrhea. The purpose of this study was tested antidiarrhea and  antibacterial  activity  of  extracts  and  fractions  of  the  three  selected  plants.  The  extraction  was conducted using reflux method with ethanol 96% as solvent. Extract was fractinated by liquid-liquid extraction methods using n-hexane and ethylacetate solvents gradually. Antimicrobial activity assays was performed by using broth microdiluiton methods toward extract and fractions of plants selected. Escherichia coli, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, and Salmonella typhi. were used as microbes test. Antidiarhhea activity was tested to diarrhea animal induced by castor oil. Dosage test was given one hour before induction then carried out observations of feces (frequency, consistency and weight). Transit  intestinal  method  was  also  performed  in  this  experiment  with  comparing  the  length  of  the intestinal through by marker with the total length of the intestine. Antidiarrhea activity result have shown that Harendong leaf  extract at the doses 50 and 100 mg/kg BW  showed decreased of frequency ,consistency and weight of feces better than another extract. Ethylacetate fraction of the leaf harendong showed antibacterial activity to Shigella dysenteriae ( MIC of 128 µg/ml), dan Salmonella typhi (MIC 512  µg/ml),  and  fraction  n-heksan  of  the  leaf  harendong  showed  antibacterial  activity  to  Shigella dysenteriae and  Salmonella typhi   the MIC 512 µg/ml
Copyright © 2019 Jsscr. All rights reserved.
Keywords: Antidiarrheal, Antibacterial,  Harendong, Malestoma malabathricum L. Received: 2019-09-24 Accepted: 2020-01-12 Online: 2020-02-25

## 1. Pendahuluan
Diare adalah suatu gejala klinik gangguan pada saluran pencernaan dimana konsistensi tinja  berbentuk  cairan  atau  setengah  cairan  dan  frekuensi  terjadinya  defekasi  lebih sering  dari  keadaan normal  sekitar  empat  sampai  lima  kali  sehari,  dengan  demikian kandungan air pada tinja lebih banyak dari normal yaitu 200 gr/hari. Karena berat feses sebagian  besar  ditentukan  oleh  air  feses,  kebanyakan  kasus  diare  disebabkan  oleh gangguan  air  dan  elektrolit  di  usus.  Penyebab  diare  yaitu  1.  Peningkatan  tekanan osmotik  di  dalam  usus  sehingga  menyebabkan  retensi  air  didalam  lumen;  2.  Sekresi elektrolit dan air yang berlebihan ke dalam lumen usus; 3. Eksudasi protein dan cairan dari mukosa; 4. Peningkatan motilitas usus sehingga mempercepat transit.[1]
Angka kejadian diare cukup tinggi menurut WHO tahun 2018, Hampir dua miliar orang menggunakan sumber air minum yang terkontaminasi dengan feses. Air minum yang terkontaminasi  diperkirakan  menyebabkan  lebih  dari  500.000  kematian  diare  setiap tahun dan merupakan faktor utama dalam beberapa penyakit tropis terabaikan.
Menurut Profil Kesehatan Indonesia  tahun 2016, Penyakit diare merupakan penyakit endemis di Indonesia dan juga merupakan penyakit potensial Kejadian Luar Biasa (KLB) yang sering disertai dengan kematian. Pada tahun 2016 terjadi 3 kali KLB diare yang tersebar di 3 provinsi, 3 kabupaten, dengan jumlah penderita 198 orang dan kematian 6 orang. Jumlah penderita diare di fasilitas kesehatan pada tahun 2016 adalah 6.897.463 orang,  sedangkan  jumlah  penderita  diare  yang  dilaporkan  ditangani  di  fasilitas kesehatan  adalah  3.198.411  orang  .Diare  merupakan  penyebab  kematian  nomor  4 (13.2%) pada semua umur. Proporsi  diare sebagai  penyebab kematian nomor 1 pada bayi post neonatal (31.4%) dan pada anak balita (25,2%). Jumlah Penderita Diare yang ditangani di Jawa Barat tahun 2016 sebanyak 1.032.284 orang. [2]
Masyarakat  secara  tradisional  telah  menggunakan  beberapa  jenis  tumbuhan  untuk mengobati diare, dan pengetahuan ini biasanya diwariskan kepada generasi berikutnya. Adapun tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efek antidiare ekstrak dan fraksi daun Harendong  ( Melastoma malabathricum L).([3][4])

## 2.  Metode
Penelitian ini melalui beberapa tahap utama yaitu tahap penyiapan bahan, karakterisasi simplisia,  penapisan  fitokimia,  ekstraksi,  fraksinasi,  pengujian  aktivitas  antibakteri dengan  metoda  broth  mikrodilusi,  kemudian  pengujian  aktivitas  antidiare menggunakan  metoda  proteksi  terhadap  minyak  jarak  dan  metoda  transit  intestinal usus.
Penyiapan bahan meliputi pengumpulan bahan, determinasi tanaman dan pengolahan bahan.  Pengolahan  bahan  meliputi  sortasi  basah,  pencucian,  pengeringan  dan penggilingan.  Karakterisasi  simplisia  meliputi  penetapan  kadar  air,  penetapan  kadar abu total, penetapan abu tidak larut asam, dan penetapan abu larut air, penetapan kadar sari larut air, dan penetapan sari larut etanol serta penetapan susut pengeringan.
Penapisan  fitokimia  meliputi  pemeriksaan  terhadap  golongan  senyawa  alkaloid, flavonoid,  saponin,  kuinon,  tanin,  dan  steroid/triterpenoid  yang  terdapat  dalam simplisia. Ekstraksi simplisia dengan refluks menggunakan pelarut etanol. Fraksinasi ekstrak  dilakukan  dengan  ekstraksi  cair-cair,  kromatografi  cair  vakum  dan  kolom, pemantauan ekstrak dan fraksi menggunakan kromatografi lapis tipis.
Ekstrak etanol dan fraksi yang diperoleh di uji aktivitas antimikrobanya secara invitro dengan menggunakan metode Broth Microdilution dan difusi. Mikroba yang digunakan adalah Escherichia  coli,  Shigella  dysenteriae,  Shigella  flexneri,  dan    Salmonella  typhi. Uji aktivitas antidiare juga dilakukan pada hewan percobaan
Sediaan uji diberikan pada hewan percobaan yang satu jam kemudian hewan percobaan diinduksi  dengan  minyak  jarak,  yang  mampu  menimbulkan  diare.  Pengamatan dilakukan dengan memperhatikan frekuensi defekasi, konsistensi  feses, dan berat feses. Metode waktu lintas usus juga dilakukan dengan prinsip membandingkan usus yang dilalui marker dengan panjang usus seluruhnya.
2.1. Bahan
D aun Harendong  ( Melastoma malabathricum L), etanol, kloroform, methanol, besi (III) klorida,  pereaksi  Dragendorff,  Pereaksi  Mayer,  Pereaksi  Liebermann-Buchard,  kertas saring, kertas saring bebas abu, Mueller Hinton Agar, Mueller Hinton Broth, cakram kertas, kapas berlemak, alumunium foil, tinta cina, loperamid, tetrasiklin HCL BPFI, n- heksan, etilasetat.etanol 70% (Bratachem, Indonesia), NaCl 09% (B-Braun, Indonesia), dst.

## 2..2 Metode Proteksi Terhadap Diare Oleh Minyak Jarak.
Mencit putih jantan swiss Webster sehat dengan bobot 20-25 g. Hewan yang digunakan untuk percobaan memiliki feses normal. Satu jam sebelum percobaan dimulai mencit dipuasakan makan dan minum sediaan uji diberikan dengan cara  oral 0,5 mL/ 20 g bobot badan mencit, kemudian ditempatkan didalam bejana individual yang beralaskan kertas saring pengamatan. Satu jam setelah perlakuan diberikan 0,75 mL minyak jarak. Respon yang terjadi pada tiap mencit diamati selang 30 menit sampai 4 jam, kemudian selama satu jam sampai 5 jam setelah pemberian oleum ricini. Parameter yang diamati meliputi frekuensi defekasi, konsistensi, berat feses, onset dan durasi diare.[5]

## 2.3 Metode Transit Intestinal
Mencit  putih  swiss  Webster  jantan  dewasa  sehat  dengan  berat  20-25  g.  Hewan percobaan dipuasakan selama lebih kurang 18 jam, minum tetap diberikan pada waktu t=0,  sediaan uji  diberikan secara oral  0,5 mL /20 g bobot badan mencit. Setelah t=45 menit,  mencit  diberikan  tinta  cina  0,1  ml/10  g  secara  oral.  Pada  t=65  menit,  mencit dikorbankan  secara  dislokasi  tulang  leher.  Usus  mencit  dikeluarkan  secara  hati-  hati sampai terenggang. Panjang usus yang dilalui marker tinta mulai dari pylorus sampai ujung akhir (yang berwarna hitam) diukur. Demikian pula panjang seluruh usus dari masing-masing  hewan  dihitung  rasio  normal  jarak  yang  ditempuh  marker  terhadap panjang  usus  seluruhnya  .Uji  ini  mengikuti  metode  Mikrodilusi.  Selama  percobaan mencit jantan galur DDY dengan berat antara 20-30 g dipelihara guna menyesuaikan kondisi lingkungan percobaan dengan pemberian pakan standar dan minum ad libitum selama 7 hari.[5]

## 2.3. Pengujian Aktivitas Antimikroba dengan metode Broth Microdilution
Pada kolom pertama sebanyak 100 µL MHB di masukkan kedalam plat mikro sebagai kontrol negative. Suspensi mikroba sebanyak 5 µL ditambahkan kedalam 10 mL, MHB kemudian diaduk dengan alat vortex. Sebanyak 100 µL campuran tersebut dimasukkan dalam pelat mikro pada kolom kedua sampai  kedua belas. Pada kolom kedua belas, ditambahkan 100 µL larutan ekstrak kemudian dihomogenkan. Dari kolom keduabelas, diambil 100 µL kemudian dipindahkan ke kolom sebelas. Pengenceran terus dilakukan sampai pada kolom ketiga yang akan memiliki konsentrasi terkecil. Plat diinkubasi pada suhu 37 ºC selama 24 jam kemudian diamati bagian yang jernih (tidak ada pertumbuhan mikroba). Konsentrasi terkecil dimana tidak terlihat pertumbuhan mikroba ditetapkan sebagai KHM. Sebanyak 5 µL alikuot dari setiap bagian yang jernih di pindahkan dalam MHA dan diinkubasi pada suhu 37 ºC selama 24 jam kemudian diamati. Konsentrasi terendah  dimana  tidak  terlihat  adanya  pertumbuhan  mikroba  ditetapkan  sebagai KBM.([6][7])

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Daun  Harendong  ( Melastoma  malabathricum L)  diperoleh  dari  daerah  Bantarujeug, Majalengka.  Dari  data  determinasi  yang  dilakukan  di  Herbarium  Bandungense, Program Studi Biologi, Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, Institut Teknologi Bandung diperoleh  informasi  bahwa  tanaman  uji  yang  digunakan  merupakan  Harendong ( Melastoma malabathricum L).
Daun  Harendong  dibersihkan  dari  bagian  daun  yang  telah  menguning  kemudian dilakukan  pencucian.Pencucian  menggunakan  air  mengalir,  tujuannya  agar  seluruh kotoran  yang  melekat  terutama  bahan-bahan  yang  berasal  dari  tanah  dapat hilang.Selanjutnya dilakukan perubahan bentuk yaitu perajangan. Tujuan dilakukannya untuk memperluas permukaan bahan baku. Semakin luas permukaan maka bahan baku akan  semakin  cepat  kering.    Daun,  batang,  buah  dan  bunga  dipisahkan  untuk mempercepat proses pengeringan. Pengeringan dilkaukan dengan cara di oven pada suhu 50 ºC bertujuan untuk menurunkan kadar air sehingga bahan baku tidak mudah ditumbuhi kapang dan bakteri.
Karakterisasi  simplisia  merupakan  salah  satu  parameter  standarisasi  simplisia, dilakukan  untuk  mengetahui  mutu  simplisia  yang  digunakan.  Pemeriksaan  meliputi penetapan kadar air, penetapan kadar abu, kadar sari dan susut pengeringan.[8]
Tabel 1 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia No Jenis pemeriksaan Daun Harendong (%b/b) 1 Kadar air 5,65 2 Kadar abu total 7,19 3 Kadar abu tidak larut asam 0.48 4 Kadar abu larut air - 5 Kadar sari larut air 12,58 6 Kadar sari larut etanol 13,77 7 Susut pengeringan -
Pemeriksaan  kadar  air  menggunakan  teknik  destilasi.  Kadar  air  yang  tinggi  dapat mempengaruhi penyimpanan simplisia dimana bakteri dan jamur dapat dengan mudah tumbuh pada simplisia, kadar air simplisia yang berada di bawah 10% merupakan batas kadar  yang  ditetapkan. Kadar  abu  dilakukan  dengan  tujuan  untuk melihat  pengotor yang  terkandung  di  dalam  simplisia.  Penetapan  susut  pengeringan  menunjukkan kandungan  senyawa  yang  hilang  pada  proses  pengeringan.  Kadar  abu  total menunjukkan  kandungan  bahan  anorganik  seperti  logam-logam  alkali,  alkali  tanah serta  silikat  yang  terdapat  dalam simplisia.  Syarat  kadar  abu  total  menururt  Materia Medika Indonesia untuk sebagian besar simplisia tidak lebih dari 2%. ([9][10])
Kadar  abu  tidak  larut  asam  menggambarkan  tingkat  pengotor  non  fisiologis,  yaitu pengotor yang ada dalam simplisia yang berasal dari lingkungan luar seperti tanah dan pasir. Besarnya kandungan senyawa anorganik suatu tanaman erat kaitannya dengan kondisi  tempat  tanaman  tersebut  tumbuh,  kadar  abu  yang  tinggi  menunjukkan tingginya kandungan logam dalam simplisia. Kadar sari larut air yang lebih tinggi dari pada kadar sari larut etanol menunjukkan tingginya kandungan senyawa yang larut air daripada kandungan senyawa yang larut etanol.[11]

## 3.1.  Hasil Penapisan Fitokimia
Penapisan  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  golongan  kandungan  metabolit sekunder  yang  terkandung  dalam  simplisia,  ekstrak  etanol  dan  fraksi  dari  tanaman uji.[12]
Hasil pengujian penapisan dapat dilihat pada tabel 2
Tabel 2. Hasil Penapisan Fitokimia Sampel Golongan Senyawa Alkaloid   Flavonoid Saponin Kuinon Tanin Steroid/Triterpenoid SH +              + + +                +                       - EH +              + + +                +                       - FNH                   -               -                        -                          -                 -                        + FEH +              + - -                  -                        + FMH + +                       + +                 +                       -
Ket:    SH=  Simplisia  Harendong,  EH=  Ekstrak  Harendong,  FNH=  Fraksi  n-heksan Harendong, FEH= Fraksi etilasetat Harendong, FMH=Fraksi Metanol air Harendong (+) terdeteksi, (-) tidak terdeteksi.
Golongan senyawa yang di duga mempunyai efek antidiare adalah tanin dan alkaloid dimana  tanin  bersifat  adstringensia  yang  menciutkan  selaput  lendir  usus  sehingga bersifat  obstipansia,  dan  alkaloid  mempunyai  sifat  antidiare  yang  kerjanya  menekan peristaltik  usus.  Sedangkan  golongan  senyawa  yang  di  duga  mempunyai  efek antibakteri  adalah  alkaloid,tannin,  saponin  dan  flavonoid,  dimana  alkaloid  sebagai antibakteri  mempunyai  gugus  aromatik  yang  dapat  mempengaruhi  DNA  bakteri sehingga menyebabkan terhambatnya pertumbuhan bakteri, sedangkan pada flavonoid memiliki  mekanisme  kerja  antibakteri  di  duga  karena  kemampuannya  membentuk kompleks dengan protein ekstraseluler sehingga dapat merusak membrane sel bakteri diikuti  dengan  keluarnya  senyawaintraseluler,  semakin  lifopil  suatu  flavonoid  maka kemampuannya  merusak  membran  sel  bakteri  akan  semakin  besar.  Saponin  dapat menurunkan  tegangan  permukaan  sehingga  menaikkan  permeabilitas/kebocoran  sel dan  mengakibatkan  senyawa  intraseluler  akan  keluar,  sedangkan  tanin  dapat menghambat enzim reverse transkriptase dan DNA topo isomerase sehingga sel bakteri tidak dapat terbentuk.([5][6])

## 3.2.  Hasil Pengujian aktivitas Antidiare
Diare  adalah  suatu  keadaan  yang  ditandai  pengeluaran feses cair  atau  seperti  bubur berulangkali (lebih dari 3 kali sehari) dengan peningkatan konsistensi feses yang encer yang disebabkan oleh peningkatan motilitas usus karena infeksi bakteri dan berbagai hal lainnya sehingga parameter yang diambil adalah konsistensi feses, frekuensi feses, berat feses dan kemampuan ekstrak simplisia uji untuk memberikan hambatan terhadap bakteri yang digunakan. Konsistensi feses perlu dilihat untuk mengetahui kemampuan zat uji  untuk menurunkan konsistensi feses dengan menurunkan pengeluaran cairan tubuh. Frekuensi defekasi dan transit usus diperlukan untuk melihat kemampuan zat uji  dalam  menurunkan    frekuensi  defekasi  yang  dapat  dilihat,  berat  feses menggambarkan jumlah masa feses yang dikeluarkan.
Penggunaan  oleum  ricini  untuk  penginduksi  diare  pada  hewan  percobaan  dalam penelitian ini adalah karena oleum ricini mengandung trigliserida dari asam rieinoleat yang  dihidrolisis  dalam  usus  oleh  enzim  lipase  pancreas  menjadi  gliserin  dan  asam ricinoleat  sebagai  surfaktan  anionic,  zat  ini  bekerja  mengurangi  absorpsi  cairan  dan elektrolit serta menstimulasi  peristaltik usus. [13]
Pemilihan  loperamid  sebagai  pembanding  karena  loperamid  dapat  memperlambat motilitas  intestinal  sehingga  mampu  memperpanjang  waktu  transit  intestinal, menurunkan  frekuensi  defekasi,  meningkatkan  viskositas  feses,  dan  mencegah kehilangan  cairan  dan  elektrolit.  Bakteri  tertentu  juga  dapat  menimbulkan  diare sehingga perlu dilakukan pengukuran aktivitas antimikroba.
Hasil pengujian aktivitas antidiare masing-masing ekstrak dan fraksi dapat dilihat pada tabel 3. berikut.
Table 3. Tabel frekuensi feses dari ekstrak etanol dan fraksi daun harendong
Kelompok Waktu pengamatan menit ke- 0-30 30-60 60-90  90- 120 120- 150 150- 180 180- 210 210- 240 240- 270 270- 300 Jml Kontrol oleum ricini 1.20 1.80 0.00 1.80 2.40 1.40 1.40 0.40 0.80 0.20  11.4 EDH 25 mg/kgBB 1.20 2.80 2.20 2.40 0.40 0.80 0.40 1.80 0.00 0.00 12 EDH 50 mg/kgBB 0.60 1.20 1.00 0.60 0.60 0.00 1.00 0.40 0.00 0.00 5.4 EDH 100 mg/kgBB 1.00 0.20 0.40 1.20 0.40 0.00 1.20 0.80 0.00 0.00 5.2 FNH 25 mg/kgBB 0.40 0.00 0.80 2.60 0.20 0.20 0.40 0.20 0.80 3.00 8.6 FEH 25 mg/kgBB 0.00 0.20 1.60 1.60 1.80 0.00 0.80 0.00 0.00 0.40 6.4 FMH 25 mg/kgBB 2.00 3.60 6.60 1.40 0.20 3.80 1.80 1.40 0.80 0.40 22 Loperamid 0.40 2.20 0.40 0.80 0.60 0.40 0.80 0.20 0.20 0.20 6.2
Ket:  EDH= Ekstrak Daun Harendong, FNH= Fraksi n-heksan Harendong, FEH= Fraksi etilasetat Harendong, FMH=Fraksi Metanol air Harendong
Frekuensi  terjadinya  diare  selama  5  jam  pengamatan  dapat  terlihat  dari  adanya perbedaan antara kedelapan kelompok perlakuan. Kelompok olium Ricini merupakan kelompok kontrol yang seharusnya paling banyak mengalami diare sebanyak 11,4 kali tetapi  ada  kelompok  perlakuan  yang  mengalami  frekuensi  diare  lebih  banyak  di bandingkan kelompok kontrol yaitu kelompok Ekstrak Daun Harendong 25mg/kgBB sebanyak 12 kali.  Sedangkan kelompok hewan yang lain mengalami diare lebih sedikit frekuensinya dibandingkan kontrol olium ricini. Dari dosis yang di berikan makin besar dosis yang diberikan makin kecil frekuensi terjadinya diare. Dari hasil yang diperoleh menunjukkan semakin cepat terjadinya diare maka efek antidiare dari kelompok ekstrak uji semakin lemah dan sebaliknya semakin lama terjadinya diare maka efek antidiare dari kelompok ekstrak uji semakin kuat[14]
Setelah di analisis dengan Anava kelompok olium ricini di bandingkan dengan semua kelompok dosis ekstrak daun harendong  menunjukkan perbedaan yang nyata (p>0.01), kelompok  loperamid  dengan  kelompok  olium  ricini  menunjukkan  perbedaan  yang nyata  sementara  jika  di  bandingkan  dengan  kelompok  dosis  tidak    berbeda  nyata. (p>0.01).
Dilihat dari konsistensi feses selama 5 jam pengamatan dapat terlihat Kelompok olium Ricini merupakan kelompok kontrol yang seharusnya harga konsistensi fesesnya sangat besar  yaitu    6.88  artinya  tinja  yang  keluar  encer  dan  berlendir  sedangkan  loperamid harga  rata-rata  konsistensi  fesesnya  1.00  tetapi  ada  kelompok  perlakuan  yang mempunyai harga konsistensi fesesnya lebih besar dibandingkan kontrol seperti fraksi n  heksan  dan  fraksi  air  harendong  dosis  25  mg/kgbb.  Hal  ini  menunjukkan  waktu diarenya lebih lama dengan konsistensi yang encer dan berlendir dibandingkan kontrol olium ricini.

## Table 4. Tabel konsistensi feses dari ekstrak etanol dan fraksi Daun Harendong
Kelompok Waktu pengamatan menit ke- 0-30  30- 60 60- 90 90- 120 120- 150 150- 180 180- 210 210- 240 240- 270 270- 300 Jml Kontrol oleum ricini 0.00  0.20  0.40  1.00  1.60 1.20 0.80  1.04 0.44 0.20 6.88 EDH 25 mg/kgBB 0.00  0.40  1.00  1.80  0.80 0.00 0.80  0.80 0.20 0.00 5.8 EDH 50 mg/kgBB 0.20  0.40  0.80  0.00  0.20 0.00 0.40  0.00 0.20 0.00 2.2 EDH 100 mg/kgBB 1.00  0.40  0.40  0.00  0.00 0.00 0.00  0.20 0.00 0.00 2 FNH 25 mg/kgBB 0.40  0.00  0.80  2.60  0.20 0.20 0.40  0.20 0.80 3.00 8.6 FEH 25 mg/kgBB 0.00  0.20  1.60  1.60  1.80 0.00 0.80  0.00 0.00 0.40 6.4 FMH 25 mg/kgBB 2.00  3.60  6.60  1.40  0.20 3.80 1.80  1.40 0.80 0.40 22 Loperamid 0.20  0.20  0.60  0.00  0.00 0.00 0.00  0.00 0.00 0.20 1
Ket:  EDH= Ekstrak Daun Harendong, FNH= Fraksi n-heksan Harendong, FEH= Fraksi etilasetat Harendong, FMH=Fraksi Metanol air Harendong
Dengan uji Anava kelompok olium ricini di bandingkan dengan semua kelompok dosis ekstrak  daun  harendong    menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  (p>0.01),  kelompok loperamid  dengan  kelompok  olium  ricini  menunjukkan  perbedaan  yang  nyata sementara jika di bandingkan dengan kelompok dosis tidak  berbeda nyata.(p>0.01).
Table 5. Tabel berat feses dari ekstrak etanol dan fraksi uji
Kelompok Waktu pengamatan menit ke- 0-30  30- 60 60- 90 90- 120 120- 150 150- 180 180- 210 210- 240 240- 270 270- 300 Jml Kontrol oleum ricini 0.49  0.10  0.21  0.05  0.21  0.03  0.04  0.01  0.04 0.02 1.204 EDH 25 mg/kgBB 0.10  0.20  0.35  0.25  0.04  0.04  0.02  0.10  0.00 0.00 1.096 EDH 50 mg/kgBB 0.06  0.07  0.02  0.04  0.06  0.01  0.08  0.00  0.10 0.00 0.436 EDH 100 mg/kgBB 0.13  0.02  0.06  0.13  0.01  0.00  0.04  0.18  0.14 0.00 0.68 FNH 25 mg/kgBB 0.30  0.00  0.23  0.06  0.05  0.00  0.02  0.03  0.06 0.47 1.226 FEH 25 mg/kgBB 0.00  0.01  0.08  0.22  0.20  0.00  0.04  0.00  0.00 0.13 0.678 FAH 25 mg/kgBB 0.18  0.16  0.62  0.10  0.16  0.26  0.11  0.08  0.00 0.00 1.676 Loperamid 0.32  0.36  0.21  0.06  0.05  0.01  0.02  0.00  0.09 0.00 0.74
Ket:  EDH= Ekstrak Daun Harendong, FNH= Fraksi n-heksan Harendong, FEH= Fraksi etilasetat Harendong, FMH=Fraksi Metanol air Harendong
Jika dilihat pada tabel 5, Dilihat dari berat feses selama 5 jam pengamatan dapat terlihat rata rata Kelompok olium Ricini merupakan kelompok kontrol dengan berat fesesnya paling tinggi  yaitu  1.204 gram dibandingkan kelompok dosis uji hal ini berarti masa air yang dihasilkan dari kontrol olium ricini lebih padat dan berair. Kecuali untuk dosis fraksi n heksan dan air  dari Harendong dosis 25 mg/kgbb yang memiliki berat feses lebih tinggi dibandingkan kontrol positif.
Tabel 6 Tabel transit Intestinal dari ekstrak dan fraksi daun harendong Kelompok Ratio (X/Y) % Reduksi motilitas Kontrol 0.49  ± 0.14 - EDH 25 mg/kgBB 0.46 ± 0.17 6.12
EDH 50 mg/kgBB 0.49 ± 0.16 - EDH 100 mg/kgBB 0.50 ± 0.21 2.0 FNH 25 mg/kgBB 0.54 ± 0.26 10.20 FEH 25 mg/kgBB 0.56 ± 0.19 0.14 FMH 25 mg/kgBB 0.57 ± 0.13 16.32 Loperamid 0.34± 0.12 30.6
Penentuan tingkat dosis yang memberikan efek pada metoda ini dilanjutkan dengan uji perbedaan antar kelompok (uji T) dapat dilihat bahwa penggunaan ekstrak etanol dari tanaman uji dengan dosis kecil memberikan efek yang tidak nyata dengan loperamid. Yang memberika efek terbaik adalah fraksi methanol air harendong, dimana senyawa yang  ada  di  dalam  fraksi  tersebut    mampu    menstimulasi  reseptor  sistem  saraf, menghambat  gerakan  peristaltik  dan  sekresi  cairan  didalam  usus,  sehingga  gerakan peristaltik  usus  berkurang  dan  menyebabkan  marker/tinta  cina  akan  sulit  bergerak didalam usus yang menjadikan jarak yang ditempuh oleh marker/tinta cina semakin pendek [15].

## 3.3.  Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antimikroba  terhadap  bakteri  penyebab  diare  dilakukan  dengan menggunakan metode Broth  mikrodilution, diperoleh hasil seperti  yang tertera pada tabel  7.  Pada  pengujian  tersebut  terlihat  ekstrak  daun  harendong  memiliki  aktivitas cukup baik. Dari tabel dapat di lihat bahwa pertumbuhan bakteri Shigella dysentri dapat dihambat oleh fraksi etil asetat daun Harendong dengan konsentrasi  64 µg/mL.Bakteri Shigella fleksneri  dapat dihambat oleh fraksi n heksan herba Ciplukan pada konsentrasi 256 µg/mL. Pertumbuhan Salmonella typhi dapat dihambat oleh fraksi etil asetat daun harendong  pada  konsentrasi    512  µg/mL.  Fraksi  daun  harendong  yang  mempunyai aktifitas lebih baik adalah fraksi etil asetat pada bakteri Shigella dysentri.
Tabel 7.  Hasil penentuan nilai KHM dan KBM (µg/mL) fraksi dari ekstrak etanol Daun Harendong  terhadap  mikroba uji.
Mikroba          E etanol                 F.air                     F etil                     F Heksan                     Tetrasiklin KHM   KBM      KHM  KBM      KHM KBM       KHM       KBM        KHM          KBM S. dysentri 12.500  >25000   >512     >512      128     >128          512        >512           16             16 S. fleksneri >6250  >25000   >512      >512      >512    >512         >512      >512           16             32
S. typhi 6250    >25000 >512     >512       512     >512          512        >512          16             16 E. coli 6250   >25000 >512      >512      >512    >512          >512      >512         64            64

## 4.  Kesimpulan
Dari hasil uji aktivitas antidiare yang menunjukkan dosis yang menunjukkan aktivitas penurunan frekuensi dan konsistensi feses paling baik dosi ekstrak daun harendong 100 mg/kg bb. Sedangkan yang dapat menurunkan berat feses adalah dosis 50 mg/kg bb dan 100 mg/kg bb. Aktivitas penurunan motilitas usus yang baik dapat di tunjukkan oleh fraksi methanol air 25 mg/kg bb. Aktivitas penghambatan terhadap bakteri Shigella dysentriae dapat diberikan oleh fraksi etil asetat daun harendong pada KHM 128 µg/ml.

## Ucapan Terima Kasih
Terimakasih kepada Sekolah Tinggi Farmasi Bandung, Prof. Dr. Elin Yulinah M.Si.,Apt dan Dr. Neng Fisheri M.Si.,Apt yang telah membimbing penelitian ini

## Referensi
[1] Goodman and Gilman,(2007) : Dasar Farmakologi Terafi Vol I, EGC, Jakarta, 1009 – 1012
[2]  Kementrian  Kesehatan  RI.  (2017).  Data  dan  Informasi  Profil  Kesehatan  Indonesia 2016. Jakarta.
[3]Heyne K, (1995) : Tumbuhan Berguna Indonesia Jilid III, terjemahan Badan Litbang Kehutanan Republik Indonesia, Jakarta
[4]Peerry,  Lily  M,  (1980)  Medicinal  Plants  of  east  and  Southeast,  The  MIT  Press Cambridge, Massachusetts and London, England
[5] Sukmawati, I . K. , Sukandar, E. Y. ,Kurniati, N. F. (2017). Aktivitas Antidiare Ekstrak Etanol Daun Suji (Dracaena angustifolia Roxb). vol.14. Bandung.
[6] Sukmawati,I.K., Susilawati.E.,Putri,S,D., (2019). Antibacterial activity of extracts and fractions of wood ear mushroom ( Auricularia auricula ), Vol.9 Yogyakarta.
[7] National Committte for Clinical Laboratory Standars, 2003 Performance Standards of Antimicrobial  Suspectibility  Testing,  8th  Informational  Suplements  M100  S12 National Committee for Laboratory Standars. Villanova, 9-20.
[8]  Kementrian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2013).  Farmakope  Herbal  Indonesia Suplemen III. Jakarta : Kementrian Kesehatan Republik Indonesia.
[9] Depkes Republik Indonesia (2000) : Parameter Standar Umum Pembuatan Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta : Depkes Republik Indonesia.
[10]  Arika,  F.  (2018).  Uji  Aktivitas  Antidiare  Ekstrak  Etanol  Daun  Situduh  Langit ( Erigeron sumatrensis Retz .) Terhadap Tikus Jantan dengan Metode Transit Intestinal.
[11]Depkes Republik Indonesia (1979) : Farmakope Indonesia (Edisi III). Jakarta : Depkes Republik Indonesia
[12]  Harborne,  J.B.1996.  Metode  Fitokimia  Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan,  terbitan  kedua,  terjemahan Padmawinata, K  dan  Soediro,  I.,  Penerbit ITB, Bandung
[13]  Ambari,  Y.  (2018).  Uji  Aktivitas  Antidiare  Ekstrak  Etanol  Daun  Salam  ( Eugenia polyantha Wight) Pada Mencit Putih (Mus musculus) Jantan Galur Balb-C.
[14] Enda, W. G. (2013). Uji efek antidiare ekstrak etanol kulit batang salam ( Syzygium polyanthum (wigh)  Walp.)  Terhadap  Mencit  jantan.  Jurnal  Sains  Dan  Kesehatan, (Universitas Sumatra Utara), 56.
[15] Hartaya, M. P. (2015). Daya Antidiare Sari Buah Salak Pondoh ( Salacca edulis Reinw) Pada Mencit Dengan Metode Transit Intestinal