DAYA ANTIBAKTERI EKSTRAK  ETANOL TUNAS BAMBU APUS TERHADAP BAKTERI Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus
SECARA IN VITRO
ANTIBACTERIAL ACTIVITY THE BAMBU APUS SHOOT OF Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus IN VITRO
Evi Kurniawati Info Artikel Abstrak
Latar  belakang: Penyakit  infeksi  bisa  disembuhkan  dengan  pengobatan tradisional,  salah  satu  contoh  tanaman  yang  memiliki  daya  antibakteri  yaitu tunas  bambu apus. Tujuan: Menguji daya antibakteri dari  ekstrak etanol tunas bambu    apus      terhadap    bakteri  Escherichia    coli    mewakili    bakteri  Gram negatif  (-)  dan  Staphylococcus  aureus  mewakili  bakteri  Gram  positif  (+). Metode: Ekstrak  etanol  tunas  bambu  apus  didapatkan  dari  hasil  maserasi dengan menggunakan  pelarut  etanol  70%.  Selanjutnya  ekstrak  etanol  yang diperoleh  dibuat  pengenceran  konsentrasi  12,5  mg/ml,  25  mg/ml,  50  mg/ml, 100  mg/ml  dan  150  mg/ml.  Metode  yang  digunakan  adalah  metode  difusi kertas cakram NA(Natrium agar). Aktivitas antibakteri ditunjukkan oleh adanya kadar  hambat  minimum  (KHM)  yang  terbentuk  dan  dilakukan  uji  kualitatif untuk  membuktikan  senyawa  yang  berkhasiat  sebagai  antibakteri. Hasil: Hasil uji  kualitatif  yang  diduga  sebagai  antibakteri  adalah  saponin  dan  flavonoid. Data hasil uji  antibakteri dianalisa statistika dengan  menggunakan  Anova satu arah  (One  away)  dilanjutkan  dengan  uji  kruskal  walis. Kesimpulan: Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  tunas  bambu  apus  mempunyai daya antibakteri terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus  dengan konsetrasi 150 mg/ml
Sejarah Artikel : Diterima 4 November 2015
Disetujui 20 November
2015 Dipublikasikan 16 Desember 2015 Kata Kunci: Tunas bambu apus, energi antibakteri, Escherichia coli, Stapylococcus aureus Keywords : Bamboo  Apus  Shoot, Antibacterial Energy, Escherichia  coli  and Stapylococcus aureus Abstract
Background: The  infection  disease  be  able  to  cure  by  traditional  medication that  is  plants,  and  one  of  the  plants  that  has  antibacterial  activity  is  Bamboo Apus  Shoot. Objective: To  test  antibacterial  power  from  ethanolic      bamboo apus   shoot   extract   to   Esherichia   coli   bacterial   which represented gram negative  (-)  and  Sthapylococcus  aureus  which  represented  gram  positive bacteri. Method: To  gel  ethanolic  extract  of  bamboo  shoot  is  being  done maseration by using ethanol solvent 70%. Then ethanolic extract  which gotten is made dilution by 12,5mg/ml, 25 mg/ml, 50 mg/ml, 100 mg/ml, and 150 mg/ml concentration, Ampicyllin as positive control and aquadest sterilic as negative control.  Method  which  used  is  paper  disc  diffusion  method  by  scratching bacteri  into  the  plate  which  has  given  NA(Natrium  Agar).  Bacteri  activity showed by there a minimum inhibit level which created and did qualitative test to  approve  compounds  are  effecius  as  antibacterial. Result: qualitative  test which  supposed  as  antibacterial  are  saponins  and  flavonoid.  Result  data  of bacterial  test  is  statistic  analyzed  by  using  one  away  continued  with  kruskal walis  test. Conclusion: this  research  has  showed  that  ethanolic  bamboo  shoot extract  have  antibacterial  activity  to  Escherichia  coli  and  Staphylococcus aureus with 150 mg/ml concentrasion.
Evi Kurniawati | Daya Antibakteri Ekstrak  Etanol .…. Jurnal Wiyata, Vol. 2 No. 2 Tahun 2015

## PENDAHULUAN
Masyarakat  Indonesia  sejak  zaman dahulu  sudah  mengenal  dan  memakai tumbuhan yang berkhasiat sebagai obat, salah satu upaya penanggulangan masalah kesehatan  yang  dihadapi.  Tunas  bambu merupakan  salah  satu  jenis  sayuran  yang sudah  lama  dikenal  dikonsumsi  manusia  dan tumbuhan  yang  oleh  sebagian  masyarakat dipercaya berkhasiat sebagai obat.
Tunas bambu memiliki tekstur
renyah 1 .  Kandungan  yang  terdapat  dalam tunas mengandung saponin, daunnya mengandung  flavonoid  dan  polifenol 2 .  Tunas bambu apus berkhasiat untuk menyembuhkan demam dan peluruh air seni 2 .
Escherichia  coli adalah  kuman  yang banyak    ditemukan    di    dalam  usus    besar manusia  sebagai  flora  normal,  sifatnya unik dapat  menyebabkan  infeksi  pada  usus misalnya diare pada anak dan travelersdiarrhea,  infeksi  saluran  kemih, meningitis  pada  bayi  baru lahir seperti juga kemampuannya  menimbulkan  infeksi  pada jaringan tubuh lain di luar usus 3 .
Staphylococcus  aureus merupakan bentuk koagulase positif, hal ini membedakan dari  spesies  lain Staphylococcus  aureus merupakan  patogen  utama  bagi  manusia  dan setiap  orang  akan  mengalami  beberapa  tipe infeksi Staphylococcus  aureus sepanjang hidupnya,  bervariasi  beratnya  mulai  dari keracunan makanan atau infeksi kulit 4 .

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  meliputi  uji  aktivitas antibakteri   dari   ekstrak etanol tunas bambu apus  serta  skrining  fitokimianya.  Metode penelitian  yang  digunakan  adalah  metode eksperimental parametrik, sedangkan rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  7 perlakuan  dan  setiap  perlakuan  terdiri  atas  5
ulangan.  Parameter  yang  diukur  adalah aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus secara
mikrobiologi  dengan  metode  difusi  agar, kemudian  daya  hambat  (zona  jernih)  diukur dengan jangka sorong.
Pembuatan  ekstrak  dilakukan  dengan menggunakan  prosedur  sebagai  berikut. Penyarian  dilakukan  dengan  pelarut  etanol 70%.  Ditimbang  200  gram  serbuk  tunas bambu apus direndam 1500  ml  etanol  70% dan  dilakukan  pengadukan  secara  kontinyu, pada  hari  ke-2  disaring.  Hasil  saringan ditampung dan disimpan  (Filtrat  A).  Ampas direndam  kembali  dengan  500  ml  etanol 70%,    setelah    hari    ke-5  disaring  dan  hasil. Saringan ditampung di  (filtrat B),  sedangkan ampas  dibuang.  Filtrat  A  dan  B  ditampung dalam  satu  wadah  kemudian  diuapkan  di rotary  evaporator  hingga  diperoleh  ekstrak encer.
Pemeriksaan  bebas  etanol  dalam ekstrak  tunas  bambu  apus  dilakukan  dengan menggunakan  prosedur  sebagai  berikut. Ekstrak  ditambah  dengan  H2SO4  (p)  lalu ditambah  lagi  dengan  CH3COOH,  lalu panaskan.  Hasil  uji negatif bila tidak tercium bau khas ester 5 . Pembuatan larutan uji dalam penelitian  ini  menggunakan  prosedur  sebagai berikut.  Larutan  uji  dibuat  12,5  mg/ml;  25 mg/ml;    50    mg/ml;    100    mg/ml;  dan    150 mg/ml    dengan    cara  ditimbang  125  mg,  250 mg,  500  mg,  1000  mg,  dan  1500  mg, kemudian  masing-masing  ekstrak  dilarutkan dalam 10 ml aquades.
Pembuatan media dilakukan dengan
menggunakan  prosedur  sebagai  berikut. Nutrien    Agar    (NA)    sebanyak  4,2  gram dilarutkan  dalam  15  ml  aquades  pada erlenmeyer  dipanaskan  hingga  mendidih  dan didapatkan  warna  kuning  kecoklatan  agak
Evi Kurniawati | Daya Antibakteri Ekstrak Etanol .…. Jurnal Wiyata, Vol. 2 No. 2 Tahun 2015
kental  jernih.  Media  disterilkan  di  autoclave dengan  suhu  121oC  selama  15  menit,  bila mulai  dingin  (belum  menjadi  agar)  dituang pada beberapa plate.
Inokulasi    bakteri  dilakukan  dengan menggunakan  prosedur  sebagai  berikut. Bakteri  uji  diambil  dengan  jarum    ose    steril, lalu    ditanamkan  pada  media  agar  miring dengan cara menggore, selanjutnya diinkubasi dalam  inkubator  pada  suhu  37˚C  selama  24 jam.  Perlakuan  yang  sama  dilakukan    pada setiap  jenis  bakteri uji. Bakteri uji yang telah diinokulasi  diambil  dengan  kawat  ose  steril lalu  disuspensikan  kedalam  tabung  yang berisi 2 ml larutan NaCl 0,9%. Uji   aktivitas antibakteri   dengan metode Kirby bauer.
Pengujian  golongan    senyawa  aktif berupa  uji  flavonoid,  uji  saponin,  dan  uji polifenol.  Adanya  senyawa  flavonoid  sampel ditunjukkan  oleh  terbentuknya  warna  merah kuat  atau  violet  setelah  sampel  dilarutkan dalam  etanol  dan  ditambah  HCl  pekat. Senyawa saponin ditunjukkan dengan terbentuknya buih  yang  tidak  menghilang selama  30  menit  setelah  sampel  dikocok. Adanya  senyawa  polifenol,  yaitu  tannin,
ditujukkan oleh terbentuknya endapan apabila filtrat  sampel  ditambah  garam  gelatin. Apabila  filtrat  sampel  ditambah  pereaksi FeCl3 dan menunjukkan warna hijau kecoklatan maka menunjukkan  adanya tannin terkondensasi  dan  terbentuk  warna  selain wana  ini  menunjukkan  adanya  senyawa polifenol 6 .

## HASIL PENELITIAN
Hasil  ekstraksi  yang  diperoleh  dalam penelitian ini awalnya diuji adanya etanol. Uji bebas  etanol  dilakukan  untuk  membebaskan ekstrak  dari  etanol  sehingga  didapatkan ekstrak  yang  murni  tanpa  ada  kontaminasi, selain  itu  etanol  sendiri  bersifat  sebagai antibakteri  dan  antifungi  sehingga  tidak  akan menimbulkan  positif  palsu  pada  perlakuan sampel.  Hasil  uji  bebas  etanol  ekstrak  tunas bambu  apus  menunjukkan  bahwa  ekstrak tersebut bebas etanol sehingga dapat disimpulkan  bahwa  diperoleh  ekstrak  yang dapat  digunakan  untuk  tahap  selanjutnya (Tabel 1).

## Tabel 1. Hasil uji bebas etanol
Ekstrak  yang  diperoleh  selanjutnya diidentifikasi  kandungan  senyawanya.  Hasil yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa  ekstrak positif  mengandung  saponin,  tetapi  negative
flavonoid.  Selain  itu,  ekstrak  juga  diketahui mengandung  polivenol  tepatnya  senyawa tannin (Tabel 2). Tabel 2. Hasil kandungan senyawa Identifikasi Prosedur Hasil Uji bebas etanol Ekstrak +H 2 SO 4 (p) + CH 3 COOH  dipanaskan Tidak tercium bau ester Identifikasi Prosedur Hasil Saponin Ekstrak + aquadest  dikocok sampai menimbulkan busa + Flavonoid Ekstrak  +  etanol  absolut  +  2  tetes  HCl  (p)  dipanaskan diatas penangas selama 15 menit + Polivenol   Ekstrak + 5 tetes NaCl 10% dan disaring. Filtrate  dibagi  3  bagian:  A  digunakan  sebagai  blanko,B tannin terhidrolisa
Evi Kurniawati | Daya Antibakteri Ekstrak  Etanol .…. Jurnal Wiyata, Vol. 2 No. 2 Tahun 2015
Ekstrak  yang  diperoleh  tersebut selanjutnya  diuji  aktivitas  antibakterinya terhadap bakteri Eschericia coli dan Staphylococcus aureus dengan  menggunakan metode Kirby bauer. Gambar 1 menunjukkan hasil  daya  hambat  ekstrak  tunas  bambu terhadap bakteri Eschericia coli . Hasil  yang diperoleh  menunjukkan  bahwa  aktivitas antibakteri  ekstrak  tunas  bambu  baik  pada bakteri Eschericia  coli mulai  terlihat  pada konsentrasi  50  mg/mL  dan  meningkat  pada konsentrasi yang lebih tinggi.
Gambar  1.    Hasil  Daya  Hambat  Antibakteri

## Eschericia coli
Hasil  yang  sama  juga  ditunjukkan terhadap Staphylococcus aureus. Hasil yang diperoleh  menunjukkan  bahwa  aktivitas antibakteri  ekstrak  tunas  bambu  baik  pada bakteri Staphylococcus  aureus mulai  terlihat pada  konsentrasi  50  mg/mL  dan  meningkat pada konsentrasi yang lebih tinggi. Gambar 2 menunjukkan hasil daya hambat ekstrak tunas bambu  terhadap  bakteri Staphylococcus
aureus Gambar  2.  Hasil  Daya  Hambat  Antibakteri Staphylococcus aureus PEMBAHASAN Penelitian ini dilakukan untuk menguji  daya  antibakteri  tunas  bambu  apus terhadap bakteri Eschericia coli dan Staphylococcus  aureus  secara  in  vitro.  Tunas bambu  apus  dalam  pengobatan  tradisional berkhasiat  sebagai  obat  demam  dan  peluruh air  seni 2 .  Bahan  yang  sudah  di  dapat dikumpulkan,  lalu  dicuci  dan  benar-benar bersih kemudian dilanjutkan dengan pengeringan. Pengeringan tunas bamboo apus sudah terlebih dahulu diiris tipis-tipis kemudian di oven ± 400C selama 2 x 24 jam. Proses  pengeringan  ini  dimaksudkan  untuk mengurangi  kadar  air,  pengurangan  kadai  air ini  bertujuan  umtuk  menghindari  tumbuhnya jamur  atau  bakteri  yang  akan  merusak simplisia,  sehingga  simplisia  yang  diperoleh tidak mudah rusak dan dapat disimpan dalam waktu  yang  cukup  lama  dan  setelah  kering, tunas  bamboo  apus  di  blender  sampai didapatkan serbuk yang halus.
Ekstraksi tunas bambu apus menggunakan  metode  maserasi.  Maserasi dilakukan  dengan  cara  merendam  serbuk simplisia  dalam  cairan  penyari  yang  akan menembus  dinding  sel  dan  masuk  ke  dalam rongga    sel    yang    mengandung    zat  aktif. Perbedaan konsentrasi  antara larutan  zat  aktif di  dalam  sel  dengan  yang    di    luar    sel membuat    larutan  yang  terpekat  didesak keluar.  Peristiwa  tersebut  berulang  sampai terjadi  keseimbangan  konsentrasi  antara larutan  diluar  sel  dan  di  dalam  sel 8 .  Pelarut yang  digunakan  dalam  maserasi  ini  adalah etanol  70%  sebagai  pelarut  penyari.  Tunas bambu  apus  mempunyai  kandungan  saponin, flavonoid,  dan  polifenol  yang  merupakan senyawa polar atau mudah larut air dan dapat
ditambah 3 tetes pereaksi FeCl 3 C ditambah garam gelatin
Evi Kurniawati | Daya Antibakteri Ekstrak Etanol .…. Jurnal Wiyata, Vol. 2 No. 2 Tahun 2015
diekstraksi  dengan  etanol  70% 9 .  Pelarut etanol 70% sangat efektif dalam menghasilkan  jumlah  bahan  aktif  yang optimal, dimana   bahan   penganggu   hanya skala   kecil   yang   turut   ke   dalam cairan pengekstraksi, etanol merupakan pelarut yang bersifat  universal  sehingga  dapat  menyari lebih  banyak  dibandingkan  dengan  pelarut lain.    Pengadukan    dalam  proses  ekstraksi bertujuan  untuk  mencapai  keseimbangan konsentrasi  bahan  ekstraktif  yang  lebih  cepat ke  dalam  cairan  dan  menghilangkan  bahan pengekstrak  maka  dilakukan  pemekatan dengan rotary evaporator 10 .
Hasil  ekstrak  tunas  bambu  apus diperoleh  randemen  13,21%  dari  200  gram simplisia  tunas  bambu  apus  dengan    pelarut etanol  70%, kemudian  dilakukan  pengujian ekstrak yaitu uji kualitatif kandungan saponin, flavonoid, dan polifenol lalu uji bebas etanol. Uji  kualitatif  merupakan  uji  pendahuluan yang  berfungsi  untuk  memastikan  adanya kandungan  fitokimia  yang  ada  didalam  tunas bambu  apus.  Uji  Saponin  pada  penelitian menunjukkan  hasil  positif  yang  ditunjukkan melalui  timbulnya  busa.  Busa  yang  terbentuk menunjukkan  adanya  glikosida  yang  mampu membentuk buih dalam air. Senyawa glikosida   terhidrolisis  menjadi glukosa   dan aglikon 6 .  Uji  Flavonoid  pada  penelitian menunjukkan hasil positif dengan penambahan  HCl  untuk  mendeteksi  senyawa yang  mengandung  inti  benzopiranon.  Warna merah      yang  terbentuk  pada    flavonoid disebabkan  karena      terbentuknya      garam flavilium 6 .  Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak tunas bambu apus yang diujikan pada bakteri Escherichia    coli  dan  bakteri  Staphylococcus aureus  dilakukan  dengan  metode  difusi  agar untuk  mengukur      daya      hambat.      Ekstrak yang  akan  diuji  diambil  dengan  cara mencelupkan kertas cakram kedalam konsentrasi  ekstrak  sehingga  didapat  zona hambat  terhadap  bakteri  Escherichia  coli  dan
Staphylococcus  aureus.  Kelebihan  kertas cakram  adalah  mudah  dilakukan,  tidak memerlukan  peralatan  khusus  dan  relatif murah 4 .
Diameter  zona    hambat  terhadap bakteri  tersebut  sangat  dipengaruhi  oleh konsentrasi ekstrak. Pengukuran zona hambat antibakteri dapat dilihat dengan  terbentuknya zona bening. Uji antibakteri ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  7 perlakuan  dan  setiap  perlakuan  terdiri  atas  5 ulangan.  Aquades  steril  digunakan  sebagai pelarut  dan  sekaligus  sebagai  kontrol  negatif yang  digunakan  untuk  memastikan  bahwa aquades steril sebagai   kontrol   negatif  tidak memiliki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Kontrol  positif  dalam penelitian  ini menggunakan ampisilin. Ampisilin
merupakan antibiotik spektrum luas golongan penisilin yang    paling    umum digunakan 12 . Ampisilin  adalah  turunan  penisilin      yang tahan      asam      tetapi  tidak  tahan  terhadap enzim penisilinase. Mekanisme kerja ampisilin    adalah    Menghambat  sintesis dinding sel bakteri dengan mengikat satu atau lebih  pada  ikatan  penisilin-protein,  sehingga menyebabkan  penghambatan  pada  tahapan akhir  transpeptidase  sintesis  peptidoglikan dalam dinding sel bakteri, akibatnya biosintesis  dinding  sel  terhambat  dan  sel bakteri menjadi pecah (lisis) 13 .
Konsentrasi  dibuat  5  macam  ekstrak yaitu  12,5  mg/ml,  25  mg/ml,  50  mg/ml,  100 mg/ml,  150  mg/ml    yang  diujikan  ke  media yang  telah  ditanami  bakteri  dengan  bantuan kertas  cakram  dan  setelah  diinkubasi  selama 24    jam,    diukur    zona  hambatan    yang terbentuk.  Pengukuran  diameter  zona  hambat menggunakan  jangka  sorong  dan  diperoleh diameter rata-rata daya hambat pada Escherichia  coli konsentrasi    12,5mg/ml adalah  0,00;  pada  konsentrasi  25mg/ml adalah 8,54; pada konsentrasi 50mg/ml adalah
Evi Kurniawati | Daya Antibakteri Ekstrak  Etanol .…. Jurnal Wiyata, Vol. 2 No. 2 Tahun 2015
8,58; pada konsentrasi 100mg/ml adalah 9,74 dan  pada  konsentrasi  150mg/ml  adalah  10,9. Diameter daya hambat Staphylococcus aureus yang  ditunjukkan  pada  konsentrasi  12,5 mg/ml adalah 3,06; pada konsentrasi 25mg/ml adalah 3,3; pada konsentrasi 50mg/ml   adalah 6,74; pada konsentrasi 100mg/ml adalah  7,94 dan  pada  konsentrasi  150mg/ml  adalah  9,50. Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  ekstrak tunas  bambu  apus  mampu  menghambat pertumbuhan    bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus .
Uji  statistik  dengan  menggunakan one  way  Anova  didapat    F    hitung    pada
Escherichia coli sebesar 50.339 dan Staphylococcus  aureus  sebesar152.180,  harga signifikan sebesar 0.00 kurang dari signifikansi yang ditentukan  yaitu 0,05. Hasil tersebut  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak tunas  bambu    apus    mempunyai  aktivitas antibakteri, selanjutnya dilakukan uji ANOVA  dan  uji  Kruskal  walis  untuk mengetahui  bahwa  adanya  perbedaan  dari data tersebut.
Hasil    di  atas    dapat    dilihat  bahwa aktivitas  antibakteri  tunas  bambu  apus terhadap bakteri Escherichia coli dan Stapylococcus aureus mempunyai daya hambat  dengan  konsentrasi  maksimal  150 mg/ml,  dengan  demikian  dapat  dikatakan bahwa  daya  antibiotika  dipengaruhi  oleh konsentrasi.  Konsentrasi  semakin  besar  akan menyebabkan  daya  hambat  terhadap  bakteri uji juga besar 14 .
Mekanisme  kerja  flavonoid  sebagai antibakteri dapat membentuk kompleks dengan    protein  ekstraseluler  dan  dinding  sel bakteri,  selain  itu  flavonoid  bersifat  lipofilik yang  dapat  merusak  membran  mikroba 15 . Tannin  juga  memiliki  mekanisme  kerja sebagai  antibakteri,  tannin    bersifat    astrigen (zat   yang dapat menciutkan). Tannin mampu merusak  membran  sel  dengan  mengikat  ion-
ion logam seperti Cu dan Fe. Saponin sebagai antibakteri  mengandung  zat  yang  mampu menghemolisis  sel  darah 16 .  Membran  sel darah  menyerupai  membran  sel  pada    bakteri sehingga  proses  yang terjadi pada sel bakteri sama seperti yang terjadi oleh sel darah.

## SIMPULAN
1. Ekstrak  Tunas  bambu  apus  mempunyai aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia  coli  dan  Staphylococcus aureus.
2. Ekstrak  Tunas  bambu  apus  yang  paling efektif sebagai antibakteri bakteri
Escherichia  coli  dan  Staphylococcus aureus adalah konsentrasi 150 mg/ml.

## SARAN
Perlu      dilakukan  penelitian  tentang uji  aktivitas  ekstrak  tunas  bambu  apus terhadap    bakteri    lainnya,  dengan    metode lain    dan  mencari  senyawa  aktif  lainnya dalam tanaman tunas bambu apus.

## REFERENSI
1. Andoko,  A.  2007. Budidaya  Bambu Rebung . Penerbit Kasinus.Yogyakarta.
2. Singhal,  P.,  Bal,  L.  M.,  Satya,  S., Sudhakar,  P.,  dan  Naik,  S.  N.  2013.
Bamboo  Shoots:  A  Novel  Source  of Nutrition  and  Medicine. Critical  Reviews in Food Science and Nutrition 53 (5).
3. Croxen  M.,  Law  R.J.,  Scholz  R.,  Keeney K.M.,  Wlodarska  M,  dan  Finlay  B.B. 2013.  Recent  Advances  in  Understanding Enteric  Pathogenic Escherichia  coli .
Clinical Microbiology Review 26 (4).
4. Otto,  M.  2013.  Staphylococcal  Infections:
Mechanisms  of  Biofilm  Maturation  and Detachment  as  Critical  Determinants  of Pathogenicity*. Annual Review of Medicine Annu. Rev. Med . 64(1).
Evi Kurniawati | Daya Antibakteri Ekstrak Etanol .…. Jurnal Wiyata, Vol. 2 No. 2 Tahun 2015
5. Zhang,  Y.,  Wu,  X.,  Ren,  Y.,  Fu,  J.,  &
Zhang,  Y.  2004.  Safety  Evaluation  of  a Triterpenoid-Rich  Extract  from  Bamboo Shavings. Food and Chemical Toxicology 42(11) 6. Samsumaharto,  R.A.  2009.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  N-Heksan,  Etil
Asetat  Dan  Etanol  70  %  Daun  Rosella
(Hibiscus              Sabdariffa    L)  terhadap Staphylococcus  aureus ATCC  25923. Fakultas  Farmasi    Universitas    Setia Budi. Surakarta.
7. Mustarichie.,  2011. Penelitian  Kimia Tanaman   Obat. Cetakan Pertama,
Bandung.
8. Zanbar,      A.      2005 .      Ilmu      Statistik. Cetakan        Pertama .  Rekayasa  Sains
Bandung. Bandung, 9. Depkes.R.I, 1979. Farmakope
Indonesia,  edisi ketiga , Jakarta.
10. Harborne,  J.B.  1996. Metode  Fitokimia Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan . Penerbit ITB. Bandung. 11. Voigt, R. 1994. Buku Pelajaran Teknologi  Farmasi,    edisi  ke-5,  Gajha
Mada University Press. Yogyakarta.
12. Lewis,  K.  2013.  Platforms  for  antibiotic discovery. Nature Reviews Drug Discovery Nat Rev Drug Discov 12(5). 13. Peach, K. C., Bray, W. M., Winslow, D., Linington,  P.  F.,  &  Linington,  R.  G. 2013. Mechanism of action-based Classification of Antibiotics Using High-
Content  Bacterial  Image  Analysis. Mol. BioSyst. Molecular BioSystems 9(7).
14. Bernier,  S.  P.,  &  Surette,  M.  G.  2013.
Concentration-dependent activity in natural  environments. Front.  Microbio.
Frontiers in Microbiology 4
15. Romano, B., Pagano, E., Montanaro, V., Fortunato, A. L., Milic, N., & Borrelli, F. 2013. Novel Insights into the Pharmacology  of  Flavonoids. Phytother. Res. Phytotherapy Research 27(11) 16. Lorent,  J.  H.,  Quetin-Leclercq,  J.,  & Mingeot-Leclercq, M. 2014. The Amphiphilic  Nature  of  Saponins  and Their Effects on Artificial and Biological Membranes  and  Potential  Consequences for  Red  Blood  and  Cancer  Cells. Org. Biomol. Chem. 12(44)