Kurang, R. Y. and Malaipada, N. A. (2021) “Uji Fitokimia dan Aktivitas Antioksi dan Ekstrak Metanol Daging Buah Mahkota Dewa (Phaleria Macrocarpa)”, Sebatik, 25(2). Submitted:  2021/05/15 Accepted:  2021/10/16 Published:  2021/12/01

## UJI FITOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK METANOL DAGING BUAH MAHKOTA DEWA ( PHALERIA MACROCARPA )
Rosalina Y. Kurang 1) dan Naomi A. Malaipada 2)
1,2 Kimia, Universitas Tribuana Kalabahi
1,2 Kalabahi, Alor – Nusa Tenggara Timur, 85813 E-mail : rosalinayuliana89@gmail.com 1) , naomimalaipada.kimiauntrib@gmail.com 2)

## ABSTRAK
Mahkota dewa ( Phaleria macrocarpa ) merupakan tanaman perdu yang berasal dari family Thymelaceae . Senyawa  bioaktif yang terkandung di dalam tanaman ini dapat digunakan sebagai obat. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan golongan  senyawa  dan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota  dewa.  Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  ekstraksi  dengan  pelarut  metanol  dan  metode  1,1-difenil-2-pikrilhidrazyl  (DPPH)  untuk  uji  aktivitas antioksidan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota  dewa  mengandung  golongan senyawa flavonoid, alkaloid, terpenoid dan fenolik. Uji aktivitas antioksidan  memberikan nilai IC 50 sebesar 127,983 ppm dengan kategori antioksidan sedang.
Kata Kunci: Mahkota Dewa (Phaleria Macrocarpa), Ekstraksi, Metode DPPH, Fitokimia, Antioksidan

## 1. PENDAHULUAN
Penggunaan  tanaman  herbal  sebagai  obat  sudah dilakukan secara turun-temurun dari dahulu kala. Bagian tanaman yang digunakan sebagai obat yaitu akar, batang daun,  buah,  daging  buah,  kulit  batang  maupun  kulit buah.  Salah  satu  tanaman  yang  digunakan  sebagai tanaman obat yaitu mahkota dewa ( Phaleria macrocarpa ).  Tanaman  mahkota  dewa  adalah  tanaman perdu  yang  berasal  dari family  Thymelaceae .  Tanaman ini  tumbuh  di  daerah  dengan  ketinggian  10-1.200  meter dari  permukaan  laut,  dan  tinggi  tumbuhan  ini  bisa mencapai 5 meter (Fiana dan Oktaria, 2016).
Manfaat  mahkota  dewa sebagai  obat  dapat  dilihat dari  kandungan  kimianya. Kandungan  bahan  aktif  yang terdapat  pada  tanaman  mahkota  dewa  yaitu  mineral, vitamin  C,  vitamin  E,  alkaloid,  flavonoid,  polifenol  dan saponin  (Candrarisna  dan  Kurnianto,  2018).  Alkaloid bersifat detoksifikasi, dapat menetralisasi racun di dalam tubuh.  Saponin  bermanfaat  sebagai  antibakteri dan antivirus,  mengurangi  kadar  gula  darah,  mengurangi penggumpalan  darah.  Flavonoid  berfungsi  sebagai antioksidan  dan  polifenol  yang  berfungsi  sebagai antihistamin  (Fiana  dan  Oktaria,  2016).  Tanaman Mahkota  dewa  juga  bermanfaat  sebagai  obat  kanker, obat  diabetes,  batu  ginjal,  antidiare  dan  kegunaan  lain yaitu sebagai teh fungsional dan juga sebagai penambah stamina (Candrarisna dan Kurnianto, 2018).
Ekstrak  etanol  daging  buah  mahkota  dewa  mampu meningkatkan  viabilitas  sel  limfosit  terhadap  paparan H 2 O 2 3%  (Yulianti  dan  Arijana,  2016).  Kandungan saponin  dalam  buah  mahkota  dewa  dapat  menurunkan kadar glukosa darah (Fiana dan Oktaria,  2016).  Ekstrak buah  mahkota  dewa  dapat  menurunkan  kadar  glukosa darah  pada  tikus  diabetes  (Arjadi  dan  Mustofa,  2017).
Ekstrak  kulit  buah  mahkota  dewa  dapat  digunakan sebagai  terapeutika  diabetes  mellitus  tipe-1  pada  tikus putih  yang  di  induksi  aloksan  (Candrarisna  dan Kurnianto, 2018).
Tumbuhan  yang  mengandung  senyawa  bioaktif seperti  flavonoid,  alkaloid,  terpenoid,  vitamin  C,  dan vitamin  E  merupakan  bahan  baku  yang  berpotensi sebagai  antioksidan  alami  (Purwanto  dkk.,  2017). Golongan  senyawa  yang  mengandung  antioksidan  dapat berpotensi  dijadikan  sebagai    minuman  dan  makanan fungsional  (Sukainah  dkk.,  2017).  Salah  satu  cara  untuk menghilangkan  rasa  pahit  pada  buah  mahkota  dewa sehingga  dapat  digunakan  sebagai  teh  fungsional  yaitu dengan menambahkan daun stevia (Yulianti dan Arijana, 2016).
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang  dapat menghambat  reaksi  oksidasi  dengan  mengikat  radikal bebas  dan  molekul  yang  sangat  reaktif  sehingga kerusakan  sel  dapat  dihambat.  Antioksidan  dapat menghentikan reaksi berantai dengan menghilangkan zat antara  radikal  bebas,  dan  menghambat  reaksi  oksidasi lainnya  (Vijayanand  dan  Thomas . ,  2016).  Ketika antioksidan menetralkan radikal bebas dengan menerima atau  menyumbangkan  elektron,  antioksidan  tidak  akan berubah menjadi radikal bebas dan tetap stabil.
Antioksidan  memiliki  peran  penting  untuk  menjaga kesehatan.  Hal  ini  disebabkan  oleh  kemampuan antioksidan  dalam  menangkap  radikal  bebas.  Apabila tubuh  manusia  tidak  punya  cadangan  antioksidan berlebih  maka  tubuh  membutuhkan  antioksidan.  Fungsi antioksidan adalah  menetralisasi radikal bebas, sehingga tubuh terlindungi dari berbagai penyakit degeneratif dan kanker  (Agustina  dkk.,  2017).  Salah  satu  metode  yang
digunakan untuk uji aktivitas  antioksidan adalah  metode 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH).
DPPH  merupakan  radikal  bebas  yang  stabil  pada suhu  kamar  dan  sering  digunakan  untuk  mengevaluasi aktivitas  antioksidan  beberapa  senyawa  atau  ekstrak bahan  alam.  DPPH  menerima  elektron  atau  radikal hidrogen  akan  membentuk  molekul  diamagnetik  yang stabil.  Radikal  bebas  merupakan  suatu  senyawa  atau molekul  yang  memiliki  satu  atau  lebih  elektron  tidak berpasangan  menyebabkan  senyawa  tersebut  sangat reaktif  mencari  pasangan,  dengan  mengikat  elektron molekul yang berada di sekitarnya.
Radikal bebas dapat berasal dari dalam tubuh sebagai bagian dari hasil proses metabolisme. Sedangkan radikal bebas  yang  bersumber  dari  luar  tubuh  dapat  disebabkan oleh  faktor  lingkungan,  termasuk  kebiasaan  merokok, penggunaan  pestisida  pada  makanan,  polusi  dan  radiasi (Mbaoji dkk., 2016).
Salah  satu  daerah  yang  memiliki  tanaman  Mahkota dewa  yaitu  Desa  Alim  Mebung,  Kabupaten  Alor. Berdasarkan  hasil  survei  tentang  pemanfaatan  tanaman mahkota  dewa,  salah  satu  masyarakat  menyebutkan bahwa    daging  buah  mahkota  dewa  digunakan  sebagai minuman  teh  sebelum  melakukan  aktivitas  pagi  dan sesudah melakukan aktivitas.  Kandungan fitokimia yang ada  pada  tanaman  tersebut  yang  menjadikannya  dapat digunakan  sebagai  minuman  seduh.  Pemanfaatan tanaman  mahkota  dewa  belum  banyak  di  ketahui sehingga tanaman ini di biarkan tumbuh liar. Jika dilihat dari  segi  khasiatnya,  manfaat  mahkota  dewa  sangatlah besar sehingga diperlukan pengolahan tanaman tersebut.
Meskipun  penelitian  tentang    uji  komposisi  kimia dan  bioaktivitas  dari  tanaman  mahkota  dewa  telah banyak dilakukan, tetapi secara kemotaksonomi perbedaan  iklim  tempat  tumbuh  suatu  tumbuhan  akan mempengaruhi komposisi kandungan senyawa kimia dari suatu  tanaman  (Munte  dan  Lubis,  2016).  Pemilihan pelarut  metanol  untuk  proses  ekstraksi  dikarenakan pelarut  metanol  merupakan  pelarut  universal  yang  dapat menarik  analit-analit  yang  bersifat  polar  maupun nonpolar.  Selain  itu  belum  pernah  dilaporkan  hasil penelitian  tentang  tanaman  Mahkota  dewa  dari  daerah ini.  Oleh  karena  itu  pada  penelitian  dilakukan  uji fitokimia  dan  aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanol daging buah mahkota dewa.

## 2. RUANG LINGKUP
Permasalahan dalam penelitian ini mencakup:
1. Bagaimana  hasil  uji  fitokimia  dan  aktivitas antioksidan  ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota dewa ( Phaleria macrocarpa )
2. Penelitian ini di batasi pada uji fitokimia dan aktivitas antioksidan  ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota dewa ( Phaleria macrocarpa )
3. Hasil  penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberikan informasi  ilmiah  tentang  kandungan  golongan senyawa  dan  aktivitas  antioksidan  tanaman  mahkota
dewa ( Phaleria macrocarpa ) dan potensinya  sebagai tanaman obat.

## 3. BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  bersifat  eksperimental  laboratorium dengan beberapa tahapan uji.

## 3.1 Bahan dan Alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  buah  mahkota dewa  yang  matang  diperoleh  dari  Desa  Alim  Mebung, metanol  PA  Merck,  asam  sulfat  pekat  Merck,  asam klorida,  besi  (III)  klorida,  serbuk  magnesium,  raksa  (II) klorida, 1,1-difenil-2-pikrilhidrazyl (DPPH), asam askorbat, aquades, kloroform, pereaksi Meyer, aluminium foil, kertas saring.
Alat-alat yang digunakan yaitu spektrofotometer UV-
Vis,  evaporator,  timbangan  analitis,  vortex  inkubator, tabung reaksi, pipet, blender, saringan dan mikro pipet .
3.2 Prosedur Kerja
1. Preparasi sampel
Sampel  yang  digunakan  adalah  buah  mahkota  dewa Sampel  diambil  dan  dicuci  bersih.  Buah  mahkota  dewa dibuang  biji  dan  cangkangnya  sehingga  tersisa  daging buah.  Daging  buah  dipotong  tipis-tipis  kemudian dikeringkan. Sampel yang kering dihaluskan menggunakan blender hingga menjadi serbuk.
2. Ekstraksi
Serbuk  daging  buah  mahkota  dewa  ditimbang sebanyak  250  gr  dan  di  maserasi  menggunakan  pelarut metanol  2  L  selama  24  jam,  disaring  dengan  kertas saring.  Filtrat  yang  diperoleh  di  evaporasi  sehingga diperoleh ekstrak pekat daging buah mahkota dewa.
3. Uji Fitokimia (Khotimah, 2016).
Beberapa tes fitokimia yang dilakukan adalah
1) Uji alkaloid Sebanyak  1  mg  ekstrak    ditambahkan  3  mL kloroform dan 3 tetes pereaksi Meyer. Endapan putih  yang  terbentuk  menunjukkan  adanya alkaloid.
2) Uji flavonoid Sebanyak  1  mg  ekstrak    ditambahkan  3  mL etanol dan dipanaskan. Setelah larut, ditambahkan  5  gr  serbuk  Mg  dan  3  tetes  HCl pekat.  Terbentuknya  warna  kuning,  jingga  atau merah menunjukkan adanya flavonoid.
3) Uji terpenoid Sebanyak  1  mg  ekstrak  dilarutkan  dalam  3  mL kloroform  dan  5  mL  larutan  H 2 SO 4 pekat melalui dinding tabung reaksi. Adanya terpenoid  ditunjukkan  dengan  terbentuknya warna cokelat kemerahan.
4) Uji fenolik Sebanyak  1  mg  ekstrak  ditambahkan  1  mL FeCl 3 1%.  Terbentuknya  warna  hitam  kebiruan menunjukkan adanya fenol.
© 2021, The Author(s). This is an open access article, free of all copyright, that anyone can freely read, download, copy,  distribute, print, search, or link to the full texts  or  use  them  for  any  other  lawful  purpose.  This  article  is  made  available  under  a  Creative  Commons  Attribution  4.0  International  License,  which  permits unrestricted  use,  distribution,  and  reproduction  in  any  medium,  provided  the  original  work  is  properly  cited.  SEBATIK  is  a  journal  of  the  STMIK  Widya  Cipta Dharma
5) Uji Antioksidan
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan  metode  DPPH.  Pembuatan  larutan DPPH  dengan    konsentrasi  6x10 -5 M  dibuat dengan  menimbang  1,182  mg  DPPH  dan dilarutkan ke dalam 50 mL metanol. Pembuatan larutan  uji  500  ppm  dilakukan  dengan melarutkan 0,05 gr ekstrak buah mahkota dewa ke  dalam  100  mL  metanol.  Kemudian diencerkan  menjadi  250 ppm, 125 ppm, dan 50 ppm dan 25 ppm. Larutan uji di pipet sebanyak 33,33  µL  dan  kemudian  dimasukkan  ke  dalam tube  yang  terlindung  dari  cahaya,  kemudian ditambahkan  1  mL  DPPH.  Campuran  larutan tersebut  diaduk  menggunakan  alat  vortex inkubator  selama  10  detik  atau  hingga homogen. Selanjutnya, larutan di inkubasi pada suhu  30ºC  selama  30  menit.    Larutan  DPPH radikal  akan  berubah  warna  dari  ungu  menjadi kuning  pucat  selama  proses  reduksi  oleh antioksidan.  Penurunan  absorbansi  ini  diukur dengan  spektrofotometer  UV  pada  panjang gelombang  515  nm  (As).  Larutan  blanko  yang digunakan sebanyak 33,33 µL. DPPH sebanyak 1 mL dalam metanol yang diukur pada panjang gelombang sama (Ab). Asam askorbat digunakan sebagai kontrol positif.
Perlakuan  pada  uji  DPPH  ini  dilakukan  sebanyak  3 kali  pengulangan  ( triplo ).  Aktivitas  penghambat  radikal dapat dihitung dengan menggunakan persamaan (1).
% inhibisi = ((Ab-As))/Ab  x 100% (1)
Ket. (1) Ab = Absorbansi blanko As = Absorbansi sampel
Setelah  diperoleh  persentase  inhibisi  dari  masing- masing  konsentrasi,  selanjutnya  hasil  perhitungan dimasukkan  ke  dalam  persamaan  regresi  dengan konsentrasi  ekstrak  (ppm)  sebagai  absis  (sumbu  x)  dan nilai  %  inhibisi  (antioksidan)  sebagai  koordinat  nya (sumbu  y). Dari persamaan  y=a+bx, dapat dihitung  nilai IC 50 . Nilai IC 50 didapatkan dari nilai x setelah mengganti y=50 (Molyneux, 2004).

## 4. PEMBAHASAN
Ekstraksi  daging  buah  mahkota  dewa  dilakukan menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  metanol. Pemilihan  pelarut  metanol  dikarenakan  pelarut  metanol merupakan  pelarut  universal  yang  memiliki  gugus  polar (-OH)  dan  gugus  nonpolar  (-CH 3 )  sehingga  dapat menarik  analit-analit  yang  bersifat  polar  maupun  non polar.  Hasil  ekstraksi  diperoleh  ekstrak  pekat  daging buah mahkota dewa sebesar 10 gram.
Uji    fitokimia  dilakukan  untuk  mengidentifikasi golongan  senyawa  yang  terkandung  dalam  sampel
tanaman  yang  diteliti.  Metode  skrining  fitokimia dilakukan dengan melihat reaksi pengujian warna dengan menggunakan  suatu  pereaksi  warna  (Khotimah,  2016). Uji  golongan  senyawa  dilakukan  pada  ekstrak  daging buah  mahkota  dewa  dengan  ditandai  adanya  perubahan warna sebagai uji positifnya. Hasil uji fitokimia terhadap ekstrak metanol daging buah mahkota dewa dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil uji kualitatif fitokimia Ekstrak metanol daging buah mahkota dewa ( Phaleria microcarpa ) Metabolit Sekunder Hasil uji Flavonoid + Alkaloid + Terpenoid + Fenolik + Ket + = terdapat golongan senyawa
Berdasarkan  Tabel  1  diketahui  bahwa  daging  buah mahkota  dewa  memiliki  kandungan  golongan  senyawa flavonoid, alkaloid, terpenoid dan fenolik.
Uji  flavonoid  dilakukan  dengan  menggunakan pereaksi serbuk magnesium (Mg) dan asam klorida pekat (HCl). Penambahan serbuk Mg bertujuan agar membentuk ikatan dengan gugus karbonil pada senyawa flavonoid. Penambahan HCl bertujuan untuk membentuk garam  flavilium  yang  ditandai  dengan  perubahan  warna menjadi  merah  (Parwati  dkk.,  2014).  Hasil  uji  terhadap golongan  senyawa  flavonoid  menunjukkan  hasil  positif dengan  terbentuknya  warna  merah.  Warna  yang terbentuk menunjukkan bahwa secara kualitatif kandungan  flavonoid  pada  ekstrak  metanol  daging  buah mahkota dewa adalah positif (+).
Uji alkaloid dilakukan menggunakan pereaksi Mayer (kalium  tetraiodomerkurat).  Sampel  yang  mengandung alkaloid  akan  membentuk  endapan  putih  bila  di  reaksi dengan  pereaksi  Mayer.  Hasil  uji  alkaloid  menunjukkan endapan  putih  yang  berarti  bahwa  secara  kualitatif kandungan  alkaloid  pada  ekstrak  metanol  daging  buah mahkota  dewa  adalah  positif  (+).  Flavonoid  termasuk senyawa fenolik alam yang potensial sebagai antioksidan dan mempunyai bioaktifitas sebagai obat.
Garam  alkaloid  berbeda  sifatnya  dengan  alkaloid dalam wujud basa. Alkaloid dalam wujud basa tidak larut dalam  air  tetapi  mudah  larut  dalam  pelarut  organik (seperti  benzena,  eter,  kloroform)  sedangkan  dalam bentuk  garamnya,  alkaloid  mudah  larut  dalam  pelarut polar  (Endarini,  2016).  Dengan  demikian  maka kandungan  senyawa  alkaloid  di  dalam  ekstrak  daging buah  mahkota dewa  merupakan senyawa alkaloid dalam wujud  garamnya  karena  reaksi  positif  ditunjukkan  pada pelarut yang bersifat polar.
Golongan  senyawa  terpenoid  pada  ekstrak  metanol daging  buah  mahkota  dewa  menunjukkan  hasil  positif dengan  dihasilkannya  warna  cokelat.  Warna  yang dihasilkan  merupakan  reaksi  antara  asam  sulfat  yang ditambahkan  ke  dalam  ekstrak  yang  telah  diencerkan
dengan  kloroform.  Hasil  uji  terpenoid  menunjukkan warna  cokelat  yang  berarti  bahwa  secara  kualitatif kandungan  terpenoid  pada  ekstrak  metanol  daging  buah mahkota dewa adalah positif (+).
Senyawa  fenolik  adalah  senyawa  yang  terdiri  dari cincin  aromatik  dengan  gugus  hidroksi  (-OH)  satu  atau lebih. Hasil  uji  terhadap  golongan  senyawa  fenol menunjukkan  hasil  positif  dengan  terbentuknya  warna biru  kehitaman.  Warna  yang  terbentuk  dikarenakan gugus fenol pada senyawa fenolik membentuk kompleks dengan ion Fe 3+ dari FeCl 3 . Dengan terbentuknya  warna biru kehitaman maka secara kualitatif kandungan fenolik pada ekstrak metanol daging buah mahkota dewa adalah positif  (+).  Senyawa  golongan  fenol  berperan  sebagai antioksidan, semakin besar kandungan senyawa golongan fenol maka semakin besar aktivitas antioksidan nya.
Kandungan  fitokimia  pada  suatu  tanaman  sangat dipengaruhi  oleh  tempat  tumbuh  tanam  tersebut.  Selain itu  dipengaruhi  oleh  faktor  internal  maupun  eksternal. Faktor  internal  seperti  gen  dan  faktor  eksternal diantaranya  seperti  cahaya,  suhu,  kelembaban,  pH, kandungan  unsur  hara  di  dalam  tanah  dan  ketinggian tempat. Dengan demikian maka diduga perbedaan tempat tumbuh  akan  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  dan perkembangan  tanaman.  Akibatnya  proses  metabolisme pada  tanaman  tersebut  juga  akan  terganggu  sehingga kandungan  senyawa  yang  dihasilkan  juga  akan  berbeda secara  kuantitatif.  Buah  mahkota  dewa  mengandung flavonoid,  alkaloid,  steroid  dan  fenolik  yang  ditandai dengan  parsial  positif  (+),  sedangkan  tidak  mengandung terpenoid  dan  saponin  (M a’ruf,  2017).  Selain  itu  ,  buah mahkota  dewa  mengandung  flavonoid,  fenol,  minyak atsiri,  lignin,  sterol,  alkaloid,  dan  tannin  (Harmanto, 2005; Yulianti, 2016).
Uji aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode DPPH (1,1-difenil-2-pikril hidrazil).  Pemilihan  metode  ini  dikarenakan  cepat, akurat,  efektif,  praktis  serta  hanya  memerlukan  sedikit sampel.  Hasil  reaksi  antara  DPPH  dengan  senyawa antioksidan  dapat  diketahui  melalui  perubahan  warna DPPH  dari  ungu  pekat  menjadi  kuning  yang  terjadi akibat  donasi  proton  yang  dilakukan  oleh  antioksidan bahan  alam  kepada  DPPH.  Perubahan  warna  ini dijadikan sebagai patokan pengukuran pada spektrofotometer cahaya tampak (Molyneaux, 2004).
Kemudahan    metode    ini    adalah    dapat  digunakan baik    untuk    sample    berwarna  juga    untuk    sample    tak berwarna.  Hal    ini  sesuai  dengan  kebutuhan  dalam pengujian  aktivitas  antioksidan,  dimana  senyawa  atau DPPH berperan  sebagai  radikal  bebas dalam  metanol berwarna    ungu    tua    yang  terdeteksi  pada    panjang gelombang    517  nm,  akan  bereaksi    dengan    senyawa antioksidan  sehingga    DPPH    akan    berubah    menjadi 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazin  yang  bersifat  non-radikal. Pengukuran  penangkapan  radikal  DPPH    menggunakan
spektrofotometri  UV-Vis  akan    diketahui  nilai  aktivitas perendaman radikal bebas yang dinyatakan dengan IC 50 . Setelah  diperoleh  hasil  pengukuran  absorbansi menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis,  dilakukan perhitungan  untuk  mencari  persen  perendaman  (% inhibisi).  Persen  inhibisi    ekstrak  metanol  daging  buah mahkota  dewa  ( Phaleria  microcarpa )  dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2. Persen inhibisi ekstrak metanol daging buah mahkota dewa ( Phaleria microcarpa ) Konsentrasi (ppm) % Inhibisi 25 15,616 50 24,728 125 54,663 250 85,683
Setelah  diperoleh  %  inhibisi  maka  dibuatlah  kurva hubungan  antara  %  inhibisi  dan  konsentrasi  sampel  uji maka akan diperoleh persamaan regresi linear y = ax + b untuk  menghitung  nilai  IC 50 .    Grafik  hubungan konsentrasi  sampel  dan  %  inhibisi  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 1. Kurva regresi penetapan IC 50 daging buah mahkota dewa ( Phaleria microcarpa )
Nilai  IC 50 ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota dewa didapat dari hasil perhitungan persamaan regresi y = ax + b. Koefisien y pada persamaan ini adalah sebagai IC  sedangkan  koefisien  x  pada  persamaan  ini  adalah konsentrasi  dari  ekstrak  yang  akan  dicari  nilainya,  di mana  nilai  dari  x  yang  didapat  merupakan  besarnya konsentrasi  yang  diperlukan  untuk  dapat  meredam  50% aktivitas radikal DPPH. Nilai R yang nilainya mendekati +1 (bernilai positif)  menunjukkan bahwa  semakin tinggi konsentrasi  ekstrak  maka  semakin  tinggi  pula  aktivitas antioksidan  nya  (Artanti  dan  Lisnasari,  2018).  Semakin tinggi  konsentrasi  larutan  uji  maka  semakin  banyak proton  yang  disumbangkan  kepada  1,1-difenil-2- pikrilhidrasil (DPPH) atau semakin banyak radikal bebas dari  DPPH  yang  dapat  di  netralkan  (Mangiwa,  2019). Berdasarkan  hasil  perhitungan,  diperoleh  nilai  IC 50 15,618 24,728 54,663 85,683 y = 0.3119x + 10.082 R² = 0.9858 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 50 100 150 200 250 300 % i n h ib isi Konsentrasi
© 2021, The Author(s). This is an open access article, free of all copyright, that anyone can freely read, download, copy,  distribute, print, search, or link to the full texts  or  use  them  for  any  other  lawful  purpose.  This  article  is  made  available  under  a  Creative  Commons  Attribution  4.0  International  License,  which  permits unrestricted  use,  distribution,  and  reproduction  in  any  medium,  provided  the  original  work  is  properly  cited.  SEBATIK  is  a  journal  of  the  STMIK  Widya  Cipta Dharma
ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota  dewa  ( Phaleria microcarpa ) yaitu 127,983 ppm.
Menurut  Putri  dan  Hidajati  (2015),  klasifikasi antioksidan    dibagi  menjadi  5,  yaitu  <  50  ppm  (sangat kuat),  50-100  ppm  (kuat),  100-150  ppm    (sedang),  150- 200  ppm  (lemah)  dan  >200  ppm  adalah  sangat  lemah. Dari  nilai  IC 50 ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota dewa  yang  diperoleh  maka    memiliki  aktivitas antioksidan yang sedang. Semakin tinggi kadar flavonoid maka  semakin  tinggi    antioksidan  nya.  Senyawa  yang berpotensi  sebagai  antioksidan  yaitu  flavonoid  dan fenolik.  Flavonoid  merupakan  senyawa  polifenol mempunyai  kemampuan  untuk  menyumbangkan  atom hidrogen  kepada  senyawa  radikal  bebas,  maka  aktivitas antioksidan  senyawa  polifenol  dapat  dihasilkan  pada reaksi  netralisasi  radikal  bebas  atau  pada  penghentian reaksi berantai yang terjadi. Kemampuan  dari  flavonoid untuk  kompleks  dengan  ion  logam  seperti  besi  yang memungkinkan  menambah  efek antioksidan nya.
Kontrol  positif  yang  digunakan  pada  uji  aktivitas antioksidan  adalah  asam  askorbat.  Asam  askorbat merupakan antioksidan yang larut dalam air. Penggunaan kontrol  positif  yaitu  untuk  mengetahui  seberapa  kuat potensi  antioksidan  yang  ada  pada  ekstrak  metanol daging  buah  mahkota  dewa  jika  dibandingkan  dengan asam askorbat. Dari hasil pengujian menunjukkan bahwa aktivitas  antioksidan  asam  askorbat  mempunyai  nilai IC 50 sebesar  2,666  ppm.  Hasil  uji  menunjukkan  bahwa asam  askorbat  memiliki  antioksidan  sangat  kuat  bila dibandingkan  dengan  ekstrak  metanol  daging  buah mahkota  dewa.  Asam  askorbat  memiliki  aktivitas antioksidan  sangat  kuat  dikarenakan  memiliki  2  gugus hidroksi  (-OH)  pada  ikatan  rangkapnya  yang  mudah mengalami  oksidasi  oleh  radikal  bebas,  selain  itu  asam askorbat  tidak  melalui  proses  ekstraksi  dan  fraksinasi sehingga  aktivitas  antioksidan  yang  diperoleh  lebih tinggi (Kumalaningsih, 2006).
Pada penelitian ini, aktivitas antioksidan berdasarkan penangkapan  radikal  DPPH  memiliki  hubungan  dengan kandungan fenolik dan flavonoid yang ada pada tanaman mahkota dewa ( Phaleria microcarpa ). Senyawa  fenolik yang  terkandung  dalam  daging  buah  mahkota  dewa memiliki  kemampuan  sebagai  antioksidan  karena    pada strukturnya    terdapat    gugus    hidroksil    yang    dapat mendonorkan  atom  hidrogennya  kepada radikal  bebas sehingga    radikal    senyawa    fenolik    dapat    meredam radikal  bebas.  Flavonoid    merupakan    senyawa pereduksi    yang    dapat    menghambat    banyak  reaksi oksidasi.    Flavonoid  memiliki  kemampuan  sebagai antioksidan  karena mampu mentransfer sebuah elektron kepada senyawa radikal bebas.
Antioksidan  dapat  melindungi  tubuh  dari  sejumlah penyakit  yang  ditimbulkan  radikal  bebas.  Saat  ini, penggunaan  antioksidan  alami  lebih  dipilih  karena dianggap  lebih  aman  dibandingkan  antioksidan  sintesis, karena  antioksidan  alami  berasal  dari  ekstrak  tanaman. Buah  mahkota  dewa  merupakan  salah  satu  sumber antioksidan  yang  mudah  dibudidayakan  di  Indonesia,  di
mana  pada  daging  buahnya  memiliki  kandungan senyawa  flavonoid  sebagai  zat  antioksidan  yang  paling tinggi.  Selain  flavonoid,  pada  daging  buah  Mahkota dewa  juga  mengandung  fenol,  minyak  asiri,  lignin, sterol,  alkanoid,  dan  tannin  (Harmanto,  2005  dalam Yulianti, 2016).
Senyawa-senyawa fenol mempunyai aktivitas antioksidan  karena  sifat-sifat  redoks  nya.  Semakin banyak  gugus  hidroksi  yang  terikat  pada  senyawa flavonoid  dan  fenolik  yang  ada  pada  sampel  uji  maka kandungan  antioksidan  nya  akan  semakin  tinggi. Apabila nilai IC 50 sampel  sama atau mendekati nilai IC 50 kontrol  positif  maka  dapat  dikatakan  bahwa  berpotensi sebagai  salah  satu  alternatif  antioksidan  yang  sangat kuat.

## 5. KESIMPULAN
Kandungan  senyawa  fitokimia  yang  terdapat  dalam ekstrak  metanol  daging  buah  mahkota  yaitu  flavonoid, alkaloid,  terpenoid  dan  fenolik.  Nilai  IC 50 ekstrak metanol  daging  buah  mahkota  dewa  yaitu  127,983  ppm dengan aktivitas antioksidan sedang.

## 6. SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan  tentang  aktivitas antioksidan  dengan  jenis  pelarut  yang  berbeda  dan  juga isolasi  senyawa dari ekstrak  daging buah  mahkota dewa untuk diketahui bioaktivitas nya.

## 7. DAFTAR PUSTAKA
Agustina,  W.,  Nurhamidah.,  &  Handayani,  D.,  2017. Skrining  Fitokimia  dan  Aktivitas  Antioksidan Beberapa  Fraksi  Dari  Kulit  Batang  Jarak  (Ricinus communis  L.). Jurnal  Pendidikan  dan  Ilmu  Kimia. 1(2), 117-122.
Arjadi,  I.,  &  Mustofa.  2017.  Ektrak  Daging  Buah Mahkota  Dewa  Meregenerasi  Sel  Pulau  Langerhans Pada Tikus Putih Diabetes. Biogenesis. 5(1) , 27-33. Artanti,  A.N.,  &  Lisnasari,  R.,  2018.  Uji  Aktivitas Antioksidan  Ektrak  Ethanol  Daun  Family  Solanum Menggunakan  Metode  Reduksi  Radikal  Bebas DPPH. Journal  of  Pharmaceutical  Science  and Clinical Research. (02), 62-69.
Candrarisna,  M.,  &  Kurnianto,  A.,  2018.  Aktivitas Ekstrak  Kulit  Mahkota  Dewa  (Phaleria  macrocarpa) Sebagai  Teraupetik  Diabetes  Mellitus  Terhadap Glukosa  Darah,  Leukosit  dan  Hemoglobin  pada Tikus  yang  Diinduksi  Aloksan,  Jurnal  Ilmiah Kedokteran Wijaya Kusuma. 7(1) 38-50.
Endarini,  L.  H.  2016.  Farmakognisi  dan  Fitokimia. Badan  Pengembangan  dan  Pemberdayaan  Sumber Daya Manusia Kesehatan, Jakarta.
Fiana,  N.,  &  Oktaria,  D.,  2016.  Pengaruh  Kandungan Saponin  dalam  Daging  Buah  Mahkota  Dewa (Phaleria  macrocarpa)  terhadap  Penurunan  Kadar Glukosa Darah, MAJORITY. 5(4), 128-132.
Khotimah, K., 2016. Skrining Fitokimia Dan Identifikasi Metabolit  Sekunder  Senyawa  Karpain  Pada  Ekstrak Metanol  Daun  Carica  pubescens  Lenne  dan  K.Koch Dengan  LC/MS  (Liqiud  Chromatograph-tandem Mass Spectrometry), Skripsi. Malang, Fakultas Sains Dan Teknologi, UIN. Kumalaningsih, S. (2006). Antioksidan Alami Penangkal Radikal  Bebas,  Sumber    Manfaat,  Cara  Penyediaan dan Pengolahan. Surabaya: Trubus Agrisarana. Ma’ruf,  M.  T.,  Setiawan,  S.,  &  Putra,  B.  P.  D.  (2017).
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Buah  Mahkota  Dewa (Phaleria  Macrocarpa)  Terhadap Staphylococcus aureus . Interdental:  Jurnal  Kedokteran  Gigi,  13(2), 16-23. Mbaoji, F. N., Ezike, A. C., Nworu, C. S., Onyeto, C. A., Nwabunike, I. A., Okoli, I. C., & Akah, P. A., 2016. Antioxidant  And  Hepatoprotective  Potentials  Of Stemonocoleus  Micranthus  Harms  (Fabaceae  )  Stem Bark Extract.
Munte,  N.,  &  Lubis,  R.,  2016.  Skrining  Fitokimia  dan Antimikroba Ekstrak Daun Kirinyuh terhadap Bakteri Staphylococcus  Aureus Dan Escherichia  Coli . BIOLINK  (Jurnal  Biologi  Lingkungan  Industri Kesehatan), 2(2), 132-140. Molyneux,  P.  2004.  The  Use  Of  Stable  Free  Radical Diphenylpicrylhidrazyl  (DPPH)  For  Estimating Antoxidant  Activity,  Songklanakarin, J.  Sci.Technol. 26 (2) , 211-219. Parwati, N.K.F., Napitupulu, N., & Diah, A.W.M., 2014. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Binahong (Anredera  Cordifolia  (Tenore)  Steenis)  Dengan  1,1- Difenil-2-Pikrilhidrazil (DPPH) Menggunakan Spektrofotometri  UV-VIS, Jurnal  Akademi  Kimia. 3(4), 206-213.
Putri,  A.  A.  S.  &  Hidajati,  N.  2015.  Uji  Aktivitas Antioksidan Senyawa Fenolik Ekstrak Metanol Kulit Batang Tumbuhan Nyiri Batu (Xylocarpus moluccensis). Unesa Journal of Chemistry, 4(1), 1–6. Purwanto,  D.,  Bahri,  S.,  &  Ridhay,  A.,  2017.  Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Buah  Purnajiwa (Kopsia  arborea  Blume.)  Dengan  Berbagai  Pelarut, Jurnal Riset Kimia Kovalen. 3(1), 24-32. Sukainah,  A.  S.,  Praja  P.,  &Gufran  D.  D.,  2017.  The QualitativeAnalysis,  Antioxidant  Test  AndToxicity Test  On  Extract  Of  LeavesMangrove  “Api-Api” (Avicennia.  Sp).  Asian  Journal  of  Microbiology. Biotechnology & Environmental Sciences Paper. (19) 290-295
Vijayanand,  S.,  &  Thomas,  A.  S.  2016.  Screening  of Michelia champacca and Muntingia calabura extracts for  potential  Bioactives. International  Journal  of Pharma Sciences and Research 7(6) , 266-273. Yulianti,  N.W.D.,  &  Arijana,  I.G.K.N.  2016.  Pengaruh Ekstrak  Etanol  Daging  Buah  Mahkota  Dewa (Phaleria  macrocarpa)  Terhadap  Viabilitas  Sel Limfosit Pada Kultur PBMC Yang Dipapar H 2 O 2 3%. E-Jurnal Medika, 5(8) , 1-5.