## PROSES PEMBENTUKAN FEOFITIN DAUN SUJI SEBAGAI BAHAN AKTIF
PHOTOSENSITIZER AKIBAT PEMBERIAN VARIASI SUHU
Ari Arfandi *) Ratnawulan, Yenni Darvina **)
*) Mahasiswa Jurusan Fisika FMIPA Universitas Negeri Padang, email: ariarfandi_unp@ymail.com
**) Staf Pengajar Jurusan Fisika FMIPA UNP

## ABSTRACT
Cancer  is  one  kind  of  disease  that  has  difficulties  to  treat,  can  be  cured  by  using drugs  which  derived  from  natural  materials  in  Indonesia.  This  treatment  know  a  cancer treatment  that uses three important  factors  such as the photosensitizer, oxygen and light, whereas this cancer therapy called photodynamic therapy (TFD). Photosensitizer which is required can be obtained from the suji leaves (Pleomele angusti-folia NE Brown) that were heated. The purpose of  this  researchs  determined the content  amount  of  chlorophyll con- tent that suji leaves before it was heated, and knew the maximum temperature required to produce  feofitin  with  maximum  absorbance  value  moreover,  determined  purpose  of  this research the correlation feofitin absorbance value and the number of chlorophyll content in  suji  leaves  after  heating process.  Base heating process  on the research conducted, the amount of chlorophyll content which in suji leaves have heating process is 11,26453 μg / ml, in addition the maximum absorbance value feofitin on process at 90 0 C with a maximum absorbance value is 1,90130 μg / ml. moreover  a correlation between the total value ab- sorbance with the amount  of  content chlorophyll in  the  suji  leaves, however the relation- ship is not continuous.
Keywords : suji leaves, feofitin, photosensitizer

## PENDAHULUAN
Kanker  sebagai  salah  satu  penyakit yang  ditakuti  pada  saat  ini,  sesungguhnya dapat  disembuhkan  dengan  menggunakan obat–obatan  yang  bahan  bakunya  sangat banyak  terdapat  di  alam  Indonesia.  Salah satu senyawa antikanker yang dapat diman- faatkan  ialah  feofitin  yang  terdapat  di  da- lam klorofil daun suji.
Klorofil  dikenal  sebagai  zat  pewarna alami,  karena  klorofil  sangat  banyak digunakan  pada  industri  makanan  untuk memberikan tampilan warna makanan agar lebih  menarik  dan  menggugah  selera, selain  itu  menurut  Reddy et  al dalam  Sari (2007)  klorofil  dan  turunannya  juga  dapat bertindak  sebagai  zat  antikanker.  Peran klorofil  khususnya  turunan  dari  klorofil
yaitu  feofitin sangat  bermanfaat  dalam terapi  pengobatan  kanker,  karena  feofitin mampu mengaktivasi senyawa radikal yang berbahaya  bagi  sel,  terapi  ini  disebut dengan terapi fotodinamika (TFD).
Klorofil  menyerap  cahaya  berupa radiasi  elektromagnetik  pada  spektrum kasat  mata  ( visible ).  Misalnya,  cahaya matahari mengandung semua warna spektrum  kasat  mata  dari  merah  sampai violet ,  tetapi  seluruh  panjang  gelombang unsurnya  tidak  diserap  dengan  baik  secara merata  oleh  klorofil.  Klorofil  a  memiliki serapan  pada  panjang  gelombang  662  nm dan klorofil b pada panjang gelombang 642 nm.
Klorofil  dapat  menampung  energi cahaya  yang  diserap  oleh  pigmen  cahaya
atau  pigmen  lainnya  melalui  fotosintesis, sehingga  klorofil  disebut  sebagai  pigmen pusat  reaksi  fotosintesis.  Dalam  proses fotosintesis, tumbuhan hanya dapat memanfaatkan sinar dengan panjang gelombang  antara  400-700  nm  (Gobel  dkk dalam Muththalib, 2009).
Sifat  fisika  klorofil  adalah  menerima dan  memantulkan  sinar  dengan    menyerap sinar  pada  panjang  gelombang  antara  400- 700  nm,  terutama  sinar  merah  dan  biru. Sifat  kimia  klorofil  antara  lain  (1)  tidak larut  dalam  air,  melainkan  larut  dalam pelarut  organik  yang  lebih  polar,  seperti etanol  dan  kloroform,  (2)  inti  Mg  akan tergeser  oleh  2  atom  H  bila  dalam  suasana asam, sehingga membentuk suatu persenyawaan  yang  disebut  feofitin yang berwarna coklat (Suyitno, 2008).
Klorofil  merupakan  ester  dan  larut dalam  kebanyakan  pelarut  organik.  Dalam larutan, baik klorofil a maupun b , keduanya bersifat fluoresen . Satu karakteristik penting  dari  klorofil  adalah  kelabilannya yang  ekstrim,  yaitu  sensitif  terhadap cahaya, panas dan oksigen (Nurdin, 2009).
Klorofil  yang  tidak  stabil  akan mengalami  perubahan  menjadi  senyawa derivatnya  sehingga  terdegradasi.  Dalam upaya  menghasilkan  feofitin  yang  akan digunakan  sebagai photosensitizer pada terapi  kanker,  maka  terlebih  dahulu  harus mengetahui  proses  dari  pembentukan feofitin.
Photosensitizer merupakan  obat  atau senyawa  kimia  yang  digunakan  dalam terapi  fotodinamik  (terapi  pengobatan kanker). Ketika diserap oleh sel kanker dan terkena  cahaya  dengan  panjang  gelombang tertentu, akan mengakibatkan obat  menjadi aktif  dan  dapat  membunuh  sel  kanker ( Jayashankar, 2007).
Dalam  upaya  menghasilkan  feofitin yang  akan  digunakan  sebagai photo- sensitizer pada terapi kanker, maka terlebih dahulu  harus  mengetahui  proses  dari pembentukan  feofitin  yang  disebut  proses feofitinisasi.  Menurut Gross (1991) proses feofitinisasi adalah  reaksi  pembentukan
feofitin  yang  berwarna  hijau  kecoklatan. Reaksi  ini  terjadi  karena  ion  Mg  di  pusat molekul  klorofil  terlepas  dan  diganti  oleh ion  H.  Denaturasi  protein  pelindung  dalam kloroplas  menyebabkan  ion  magnesium mudah  terlepas  dan  diganti  ion  hidrogen membentuk feofitin.
Pigmen  daun  klorofil  yang  berwarna hijau mempunyai sifat tidak stabil. Perlakuan  klorofil  a  dengan  penambahan asam menyebabkan perpindahan magnesium  digantikan  oleh  dua  atom hidrogen,  membentuk  sebuah  feofitin a yang berwarna hijau kecoklatan, komponen yang  sama  juga  terbentuk  untuk  feofitin b dari klorofil b.
Feofitin  memacu  perubahan  warna pada  daun  dari  kuning  menjadi  coklat. Degradasi  pigmen  klorofil  tersebut  terjadi pada  PH  rendah,  hal  inilah  yang  memicu terjadinya  proses  feofitinisasi.  Menurut Gross (1991) feofitin adalah derivat klorofil bebas  magnesium.  Selain  dapat  bereaksi dengan  asam,  klorofil  juga  dapat  bereaksi dengan  basa  yang  menghasilkan  gugus bernama  filin  ( phyllins )  yaitu  sebuah komponen  porpirin  bergugus  magnesium. Jenis  perubahan  dari  klorifil  a  ini membentuk  klorofilin  a,  filin  dapat bereaksi dengan asam membentuk porpirin.
Menurut  Elva  (2010)  degradasi klorofil  pada  jaringan  sayuran  dipengaruhi oleh  PH.  Pada  media  basa  (PH  9)  klorofil sangat  stabil  terhadap  panas,  sedangkan pada  media  asam  (PH  3)  tidak  stabil. Warna  klorofil  akan  segera  memudar setelah  pemanasan,  hal  ini  dikarenakan penurunan  nilai  PH  yang  terjadi  ketika pemanasan mengakibatkan pelepasan asam.
Pemanasan  merupakan  proses  fisika yang  dapat  mengakibatkan  kerusakan klorofil.  Klorofil  terdapat  dalam  bentuk ikatan  kompleks  dengan  protein  yang diduga  menstabilkan  molekul  klorofil dengan  cara  memberikan  ligan  tambahan. Pemanasan  dapat  mengakibatkan  dena- turasi  protein  sehingga  klorofil  menjadi tidak terlindung lagi (Oktaviani dalam Sari, 2005).
Selama  pemanasan,  akan  terjadi pelepasan asam-asam organik dari jaringan yang berdampak pada pembentukan feofitin. Pemanasan juga memberi pengaruh terhadap aktivitas enzim klorofilase dan enzim lipoksigenase. Klorofilase  merupakan  satu-satunya  enzim yang  dapat  mengkatalis  degradasi  klorofil (Manurung,  2011).  Menurut  laporan  Mac Kinney  dan  Weast  dalam  Sari  (2005) bahwa  aktifitas  maksimum  dari  enzim klorofilase  adalah  75 0 C.  Jones et  al dalam Sari (2005) melaporkan bahwa blansir pada suhu  100 0 C  selama  4  detik  secara  nyata menginaktivasi enzim klorofilase.
Kemudian  semakin  tinggi  suhu, viskositas  pelarut  akan  semakin  rendah sehingga  makin  mudah  untuk  mengekstrak pigmen  pada  daun  (Anam,  2010).  Hal  ini disebabkan  karena  difusivitas  solvent  yang semakin besar (Buchor, 2007).

## METODE  PENELITIAN
Bahan  yang  digunakan  ialah  daun suji,  Aquades,  Na 2 SO 4 anhidrat,  alumu- nium  foil,  methanol,  dietil  eter  dan  larutan aseton.
Adapun  alat-alat  yang  digunakan ialah  timbangan  digital,  kertas  label,  pipet tetes,  gelas  piala,  botol  kaca,  termometer 100 0 C,  isolasi  dan  labu  ukur  25  ml,  kertas saring,  kertas  tisu,  corong,  batang  peng- aduk,  corong  pisah,  oven, water  batch, rotary  evaporator, lemari  asam,  PH  meter dan spektrofotometer Uv Vis.
Daun suji yang digunakan ialah daun suji  yang  diperoleh  dari  daerah  sekitar kampus  Universitas  Negeri  Padang,  yang biasanya  digunakan  masyarakat  sebagai pewarna makanan. Selanjutnya daun dibersihkan  dengan  air  bersih  kemudian diiris kecil-kecil.
Daun  yang  telah  diiris  ditimbang sebanyak 5 gram, lalu dimasukkan kedalam botol kaca gelap yang telah diisi aseton dan methanol  dengan  perbandingan  (7:3)  seba- nyak  25  ml,  daun  suji  direndam  kedalam aseton:methanol  dan  didiamkan  selama satu  hari.  Proses  perendaman  ini  disebut
maserasi  dan  hasil  dari  maserasi  disebut maserat.  Maserat  yang  diperoleh kemudian disaring,  proses  maserasi  dilakukan  seba- nyak  dua  kali  dengan  pelarut  dan  jumlah pelarut  yang  sama  sampai  seluruh  pigmen terangkat.  Hasil  maserasi  (maserat)  kedua digabungkan dengan hasil maserasi pertama  kedalam  satu  buah  botol  kaca gelap.
Selanjutnya maserat dipanaskan namun,  pemanasan  hanya  dilakukan  pada maserat yang akan diberi variasi suhu, pada sampel  kontrol  maseratnya  tidak  dilakukan proses  pemanasan.  Maserat  yang  akan diberi  variasi  suhu dipanaskan dengan  satu maserat untuk satu suhu pemanasan, variasi suhu pemanasan yang akan diberikan untuk menghasilkan  feofitin  ialah  50 0 C,  60 0 C,
70 0 C, 80 0 C, 90 0 C dan 100 0 C.
Setelah  proses  pemanasan  selesai, setiap  maserat  difraksinasi  dengan  meng- gunakan corong pisah, untuk mengeluarkan feofitin  dari  maserat  diperlukan  pelarut berupa  dietil  eter.  Dietil  eter  yang digunakan  untuk  satu  kali  fraksinasi  ialah sebanyak  45  ml.  Fraksinasi  yang  me- rupakan  proses  pemisahan  feofitin  dari pelarutnya  dilakukan  sebanyak  3  kali perulangan,  dengan  waktu  untuk  satu  kali fraksinasi  ialah  1  jam  sehingga  dihasilkan feofitin dari hasil fraksinasi (filtrat).
Sebelum melakukan pengukuran absorbansi  klorofil  a,  absorbansi  klorofil  b dan absorbansi feofitin. Filtrat feofitin yang diperoleh  dari  proses  fraksinasi  diuapkan terlebih  dahulu  dengan  menggunakan rotary  evaporator, proses  ini  bertujuan untuk menguapkan pelarut  dari  feofitin.
Pada  pengukuran  nilai  absorbansi klorofil  a  dan  klorofil  b, klorofil  yang diekstrak tanpa menggunakan variasi  suhu, akan  dicari  jumlah  klrofil  a,  klorofil  b  dan nilai  PH  yang  terkandung  didalamnya, jumlah  klorofil  a  dan  b  dapat  diketahui dengan  cara  melakukan  pengukuran  nilai absorbansinya.  Nilai  absorbansi  klorofil  a diukur  pada  panjang  gelombang  663  nm dan klorofil b pada panjang gelombang 645
nm,  pengukuran nilai  absorbansi  dilakukan dengan menggunakan Uv Vis.
Selanjutnya  pendeteksian feofitin dilakukan  pada  panjang  gelombang  409,5 nm,  474,7  nm,  506,3  nm,  534,7  nm,  608,9 nm  dan  665  nm.  Larutan  yang  digunakan pada  pendeteksian  feofitin  ialah  seluruh maserat  klorofil  yang  telah  diberi  variasi suhu.
Pada  maserat  daun  suji  yang  telah diberi variasi suhu dilakukan pula pengukuran  nilai  absorbansi  klorofil  a  dan klorofil b yang dilanjutkan dengan pengukuran  nilai  PH.  Panjang  gelombang yang  digunakan  ialah    663  nm  untuk pengukuran  nilai  absorbansi  klorofil  a  dan 645  nm  untuk  pengukuran  nilai  absorbansi klorofil b.
Data  nilai  absorbansi  dari  klorofil  a, klorofil  b  dan  absorbansi  feofitin  dapat dihitung  dengan  menggunakan  persamaan yang  telah  dibuktikan  oleh  Lambert,  Beer dan Bouger, yaitu dengan rumusan:
𝐿𝑜𝑔 [1] [𝑇𝑟𝑎𝑛𝑠𝑚𝑖𝑡𝑎𝑛𝑠𝑖 ] = 𝐿𝑜𝑔 [𝐼𝑡] [𝐼0] = 𝑎𝑏𝑐 = 𝐴 bsorbansi
Kemudian data yang diperoleh dicari nilai klorofil  a, klorofil  b dan total  klorofil yang  terdapat  dalam  larutan  uji  dengan menggunakan  rumus  yang  dikemukan (Madalena dkk, 2007).
Klo. a = 12,25 A663,6 – 2,55 A646,6 Klo. b = 20,31 A646,6 – 4,91 A663,6 Total klorofil = 17,76 A646,6 + 7,34 A663,6

## Dimana : A merupakan absorbansi

## HASIL
Data hasil pengukuran
nilai
absorbansi klorofil a pada sampel daun suji sebelum  dipanaskan  (sampel    kontrol) ialah 0,61094 μg/m dan klorofil b sebanyak 0,38177  μg/ml,  dapat  dilihat  bahwa  nilai absorbansi  klorofil  a  lebih  tinggi  dari  pada nilai absorbansi klorofil b.
Pola  spektra  Uv  Vis  yang  terbentuk pada  sampel  kontrol  ketika  dilakukan pengukuran  nilai  absorbansi  klorofil  a  dan
klorofil  b,  dapat  dilihat  pada  Gambar  1. Pola spektra diukur pada panjang gelombang 409,5 nm, 474,7 nm, 506,3 nm, 534,7 nm, 608,9 nm dan 665 nm.
Gambar  1.  Pola  Spektra  Uv  Vis  Pada Pengukuran  Nilai  Absorbansi Klorofil a dan b Pada Sampel
Sebelum  Dipanaskan(Sampel 1)
Berdasarkan pola spektra yang terdapat  pada  Gambar  1,  dapat  dilihat bahwa  puncak  absorbansi  tertinggi  berada pada  daerah  sekitar  419  nm,  dari  seluruh panjang  gelombang  yang  menjadi  daerah serapan  feofitin,  panjang  gelombang  409,5 nm  menjadi  panjang  gelombang  dengan nilai  absorbansi  tertinggi  dari  seluruh panjang gelombang serapan feofitin.
Kemudian  pola  spektra  Uv  Vis  yang terbentuk pada sampel dengan enam variasi suhu pemanasan ketika dilakukan pengukuran  nilai  absorbansi  feofitin  pada panjang  gelombang  409,5  nm,  474,7  nm, 506,3 nm, 534,7 nm, 608,9 nm dan 665 nm dapat  dilihat  pada  Gambar  2,  Gambar  3, Gambar  4,  Gambar  5,  Gambar  6  dan Gambar  7.  Pola  spektra  feofitin  pada pemanasan 50 0 C dapat dilihat pada gambar
2.
Gambar  2.  Pola  Spektra  Feofitin  Pada Pemanasan 50 0 C (Sampel 2)
Pada  Gambar  2  dapat  dilihat  bahwa panjang  gelombang  409,5  nm  memiliki nilai absorbansi maksimum, nilai absorbansi  yang  terukur  tepat  berada  pada puncak tertinggi absorbansi. Panjang gelombang 474,7 nm, 506,3 nm, 534,7 nm, 608,9  nm  dan  665  nm  yang  juga merupakan  panjang  gelombang  serapan feofitin , namun memperlihatkan  nilai absorbansi  yang  lebih  rendah.  Kemudian pola spektra yang terbentuk pada saat daun suji  dipanaskan  dengan  suhu  60 0 C  dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar  3.  Pola  Spektra  Feofitin  Pada Pemanasan 60 0 C (Sampel 3)
Berdasarkan  Gambar  3  dapat  dilihat bahwa  nilai  absorbansi  maksimum  juga terletak pada panjang gelombang 409,5 nm, nilai  absorbansi  yang  terukur  tepat  berada pada  puncak  tertinggi  absorbansi.  Pola spektra  berikutnya  yaitu  pola  spektra  yang terbentuk  pada  saat  daun  suji  dipanaskan dengan  suhu  70 0 C,  dapat  dilihat  pada Gambar 4.
Gambar  4.  Pola  Spektra  Feofitin  Pada Pemanasan 70 0 C (Sampel 4)
Pada  Gambar  4  dapat  dilihat  bahwa puncak  hiperkromik    (peningkatan  nilai absorbansi  maksimum)  tidak  lagi  terletak pada  panjang  gelombang  409,5  nm, hiperkromik  bergeser  kedaerah  serapan sekitar  438  nm.  Namun,  dari  panjang gelombang yang menjadi pendeteksi feofitin panjang gelombang 409,5 nm tetap merupakan  panjang  gelombang  dengan nilai absorbansi maksimum feofitin. Kemudian  pola  spektra  yang  terbentuk pada  saat  daun  suji  dipanaskan  dengan suhu 80 0 C dapat dilihat pada Gambar 5.
Gambar  5.  Pola  Spektra  Feofitin  Pada Pemanasan 80 0 C (Sampel 5)
Pada  Gambar  5  dapat  dilihat  bahwa nilai absorbansi maksimum feofitin kembali  terletak  pada  panjang  gelombang 409,5  nm  dan  tepat  berada  pada  puncak hiperkromik  (peningkatan  nilai  absorbansi maksimum),  nilai  absorbansi  yang  terukur tepat berada pada puncak tertinggi absorbansi.
Panjang  gelombang  474,7  nm,  506,3 nm, 534,7 nm, 608,9 nm dan 665 nm yang juga merupakan panjang gelombang serapan  feofitin , memperlihatkan  nilai
absorbansi  yang  tidak  setinggi  nilai absorbansi  pada  panjang  gelombang  409,5 nm.  Pola  spektra  berikutnya  yaitu  pola spektra  yang  terbentuk  pada  saat  daun  suji dipanaskan dengan suhu 90 0 C, dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar  6.  Pola  Spektra  Feofitin  Pada Pemanasan 90 0 C (Sampel 6)
Pada  Gambar  6  dapat  dilihat  bahwa nilai  absorbansi  maksimum  feofitin  sedikit bergeser  kekiri  dari  nilai  absorbansi hiperkromik.  Dapat  juga  dilihat  bahwa pemanasan  daun  suji  dengan  suhu  90 0 C, merupakan  pemanasan  yang  menghasilkan feofitin  dengan  nilai  absorbansi  tertinggi, nilai  absorbansi  tertinggi  yang  dihasilkan berada pada panjang gelombang 409,5 nm.
Pola  spektra  berikutnya  yaitu  pola spektra  yang  terbentuk  pada  saat  daun  suji dipanaskan  dengan  suhu  100 0 C,  dapat dilihat pada Gambar 7.
Gambar  7.  Pola  Spektra  Feofitin  Pada Pemanasan 100 0 C (Sampel 7)
Berdasarkan  Gambar  7  dapat  dilihat bahwa  puncak  hiperkromik  tidak  lagi terletak pada panjang gelombang 409,5 nm, hiperkromik  bergeser  kedaerah  serapan sekitar 435 nm.
Kemudian agar dapat melihat pengaruh  pemanasan  terhadap  keasaman filtrat,  maka  dilakukan  pengujian  nilai  PH pada    setiap  filtrat  sebelum  dan  setelah diberi  variasi  suhu.  Data  nilai  PH  pada setiap  filtrat  yang  telah  diberi  variasi  suhu dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1.  Nilai  PH  Filtrat  Pada  Sebelum dan Setelah  Diberi  Variasi  Suhu Pemanasan Suhu PH Ruang 3,6 50 0 C 3,9 60 0 C 3,5 70 0 C 3,4 80 0 C 3,4 90 0 C 3,3 100 0 C 3,8
Selanjutnya agar dapat melihat pengaruh pemanasan terhadap nilai absorbansi  feofitin  dan  total  klorofil  yang terkandung  di  dalam  daun  suji,  maka dilakukan perhitungan terhadap nilai absorbansi  feofitin  dan  total  klorofil    daun suji  pada  masing-masing  variasi  suhu pemanasan. Data hasil perhitungan terhadap  nilai  absorbansi  feofitin  dan  total klorofil    daun  suji  pada  enam  variasi  suhu pemanasan dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2.  Nilai  Absorbansi  Klorofil  a  dan Klorofil  b  Pada  Enam  Variasi
Suhu Pemanasan Suhu Total Absorbansi Feofitin (μg/ml) Total Klorofil (μg/ml) 50 0 C 1,026677 18,19166 60 0 C 3,25094 12,03793 70 0 C 4,03003 4,883457 80 0 C 3,3279 11,38596 90 0 C 4,24616 16,71969 100 0 C 1,516866 6,544

## PEMBAHASAN
Nilai absorbansi klorofil a lebih besar dari pada nilai absorbansi klorofil b, hal ini sesuai dengan jumlah kandungan klorofil a yang  terdapat  di  dalam  daun  suji,  dimana kandungan klorofil a lebih banyak daripada klorofil  b  sehingga  menghasilkan  nilai absorbansi  yang  lebih  tinggi  pada  klorofil a.
Nilai  absorbansi  feofitin  sebelum dipanaskan  lebih  tinggi  daripada  nilai  ab- sorbansi pada pemanasan 50 0 C, hal ini me- nunjukkan  bahwa  feofitin  sebenarnya  telah terkandung di dalam daun suji namun, nilai absorbansinya masih rendah.
Kemudian  dapat  juga  dikatakan bahwa feofitin yang berkandung pada daun suji  yang  belum  dipanaskan,  merupaknan feofitin  yang  berasal  dari  klorofil  yang  cu- kup  stabil.  Berbeda  dengan  feofitin  yang terkandung  pada  pemanasan  50 0 C,  feofitin yang terkandung pada pemanasan 50 0 C me- rupakan  feofitin  yang  berasal  dari  klorofil yang  tidak  stabil,  nilai  absorbansi  feofitin yang  rendah  pada  pemanasan  50 0 C  meru- pakan  tahap  persiapan  untuk  menghasilkan feofitin  dengan  nilai  absorbansi  lebih  ting- gi.
Pemanasan  dengan  suhu  50 0 C  meru- pakan  pemanasan  dengan  nilai  absorbansi feofitin  terendah,  ini  menandakan  bahwa pada pemanasan 50 0 C feofitin masih berada pada  proses  pembentukan  sehingga  nilai absorbansi  yang  dihasilkan  feofitin  pun masih rendah.
Pembentukan  feofitin  selain  dipe- ngaruhi  oleh  pemanasan  juga  dipengaruhi oleh keberadaan asam (Gross, 1991). Untuk melihat  apakah  ada  asam  yang  terbentuk pada  proses  pemanasan,  maka  dilakukan pengujian  PH  pada  sampel  2  (pemanasan 50 0 C).  Dari  hasil  pengujian  didapatkan, nilai  PH  pada  sampel  2  sebesar  3,9,  nilai PH 3,9 tidaklah begitu asam sehingga nilai absorbansi  feofitin  yang  didapatkan  pun rendah.
Pemanasan dengan suhu 60 0 C (sampel  3),  merupakan  pemanasan  dengan
nilai  absorbansi  feofitin  nomor  2  terendah dari  enam  buah  sampel  yang  diberi perlakuan pemanasan, namun pada pemanasan  60 0 C  terjadi  peningkatan  yang signifikan pada nilai absorbansi feofitin, ini menandakan  bahwa  pada  suhu  60 0 C pembentukan  feofitin  berlangsung  lebih cepat.
Peningkatan  nilai  absorbansi  yang signifikan  dikarenakan  adanya  asam  yang terbentuk  ketika  proses  pemanasan,  asam yang  terbentuk  akan  menyebabkan  klorofil tidak  stabil  (Elva,  2010).  Hal  ini  dapat dibuktikan  dengan  melakukan  pengujian PH pada sampel 3. Dari data pengujian PH didapatkan nilai PH pada sampel 3 sebesar 3,5.
Menurut Oktaviani dalam Sari (2005)  pemanasan  dapat  mengakibatkan denaturasi protein sehingga klorofil menja- di  tidak  terlindung  lagi.  Peningkatan keasaman  sampel  3  dikarenakan  pada  pe- manasan  60 0 C  akan  menyebabkan  ikatan klorofil semakin tidak stabil, selain itu pada pemanasan  60 0 C,  protein  terdenaturasi yang  menyebabkan  protein  melepaskan atom  hidrogen  yang  berasal  dari  gugus  R- CH-COOH  yang  membuat  sifat  protein bertindak sebagai asam (Anwar, 1996)
Protein yang terdenaturasi dan ikatan klorofil  yang  tidak  stabil,  mengakibatkan protein  yang  bersifat  asam  menyum- bangkan atom hidrogen pada klorofil, yang menyebabhan  logam  Mg  pada  klorofil menjadi  terlepas  sehingga  terbentuklah feofitin,  yang  ditandai  dengan  berubahnya warna klorofil pada sampel 2 menjadi agak lebih  kecoklatan  daripada  warna  klorofil pada sampel 1 .
Pemanasan dengan suhu 70 0 C merupakan suhu dengan absorbansi feofitin tertinggi  nomor  2,  namun  jika  absorbansi feofitin pada suhu ini dibandingkan dengan absorbansi  feofitin pada  pemanasan  80 0 C, terjadi  penurunan  pada  nilai  absorbansi feofitin pada  pemanasan  80 0 C.  Hal  ini disebabkan selain karena denaturasi protein yang  masih  berlangsung,  daun  suji  yang digunakan  pada  sampel  dengan  pemanasan
70 0 C  ketika  tumbuh  menerima  paparan cahaya  matahari  yang  lebih  lama,  daripada daun  suji  yang  digunakan  pada  sampel dengan pemanasan 80 0 C.
Paparan  cahaya  matahari  yang  lebih lama  ketika  daun  suji  tumbuh  akan menghasilkan  zat  hijau  daun  yang  lebih banyak,  zat  hijau  daun  yang  lebih  banyak akan  menghasilkan  feofitin  yang  lebih banyak pula yang ditandai dengan peningkatan  nilai  absorbansi  dari  feofitin. Bukti  bahwa  denaturasi  protein  yang menyebabkan  keadaan  asam  pada  filtrat daun suji dengan pemanasan 70 0 C (sampel 4)  masih  berlangsung,  dapat  dilihat  dari nilai  PH  sampel  4,  nilai  PH  sampel  4 sebesar  3,4.  Dilihat  dari  data  hasil pengujian  PH sampel 4, nilai  PH mengala- mi  kenaikan  jika  dibandingkan  dengan  PH sampel 2 dan 3.
Pemanasan dengan suhu 80 0 C (sampel  5)  menghasilkan  nilai  absorbansi feofitin yang  lebih  rendah  dibandingkan dengan  nilai  absorbansi  feofitin  pada sampel  4,  meskipun  nilai  absorbansi feofitin  sampel  5  lebih  rendah,  sampel  5 masih  mengalami  keadaan  asam,  ini menandakan  bahwa  pada  pemanasan  80 0 C feofitin  masih  terbentuk.  Bukti  bahwa denaturasi  protein  yang  menyebabkan keadaan  asam  pada  sampel  5  masih berlangsung,  dapat  dilihat  dari  nilai  PH sampel  5  sebesar  3,4.  Nilai  pengujian  PH pada sampel 5 menunjukkan bahwa sampel 5 masih dalam keadaan asam yang tinggi.
Pada  suhu  pemanasan  90 0 C  (sampel 6)  merupakan  suhu  maksimum  yang diperlukan  untuk  menghasilkan  feofitin dengan nilai absorbansi maksimum, karena pada  suhu  ini  merupakan  puncak  dari terbentuknya keadaan asam yang disebabkan  oleh  denaturasi  protein,  pada suhu  90 0 C  asam  amino  yang  dilepaskan oleh protein sebagai dampak dari denaturasi  protein  mengalami  pelepasan asam  amino  terbesar,  sehingga  sampel  6 menjadi  sampel  yang  berada  dalam keadaan  paling  asam  diantara  seluruh sampel.  Keadaan  asam  yang  semakin
meningkat  yang  terjadi  pada  sampel  6 dapat dilihat dengan meningkatnya nilai PH hasil  pengujian  keasaman,  data  hasil pengujian keasaman pada sampel 6 sebesar 3,3. Nilai PH 3,3 merupakan nilai PH den- gan  tingkat  keasaman  tertinggi  dibanding- kan sampel-sampel lainnya.
Sampel  7  yang  merupakan  sampel dengan  pemanasan  100 0 C,  menghasilkan nilai  absorbansi  feofitin  yang  menurun drastis  jika  dibandingkan  dengan  nilai absorbansi  feofitin  sampel  2,3,4,5  dan  6. Pada  suhu  100 0 C  denaturasi  protein terhenti,  terhentinya  denaturasi  protein yang menyebabkan keadaan sampel mengalami  penurunan  derajat  keasaman, hal  ini  dikarenakan  pada  suhu  100 0 C klorofil mengalami kerusakan yang berakibat  pada  penurunan  nilai  absorbansi feofitin yang dihasilkan. Suhu 100 0 C juga dianggap merupakan  suhu  yang  sangat  tinggi  untuk pelarut  dietil  eter  yang  digunakan  untuk mengeluarkan  feofitin  dari  filtrat.  Titik didih  dietil  eter  ialah  64,7 0 C,  pemanasan dengan  suhu  100 0 C  menyebabkan  dietil eter sangat  cepat  menguap, pada saat  dietil eter  menguap  terdapat  pula  feofitin  yang ikut  menguap  bersama  dietil  eter,  hal  ini dibuktikan  dengan  nilai  PH  sampel  7  yang menurun,  nilai  PH  pada  sampel  7  sebesar 3,8.
Berdasarkan nilai pengujian PH pada sampel  7,  dapat  diartikan  bahwa  telah terjadi  penurunan  keadaan  asam  pada sampel  yang  berdampak  pada  penurunan nilai absorbansi feofitin.
Pada  data  Tabel  2,  dapat  dilihat bahwa  tidak  adanya  hubungan  yang kontinu  ataupun  berulang  antara  total  ab- sorbansi  feofitin  dengan  total  klorofil, hubungan  yang  tidak  kontinu  atapun  tidak berulang dikarenakan, data sampel pemanasan  90 0 C  tidak  kontinu  ataupun berulang  terhadap  data  sampel  pemanasan 50 0 C, 60 0 C, 70 0 C dan 80 0 C.
Terdapatnya  arah  perubahan  nilai total  klorofil  yang  berbeda  yang  terjadi pada  sampel  dengan  pemanasan  90 0 C,  hal
ini  disebabkan  karena  pada  sampel  90 0 C klorofil  mengalami  kecenderungan  peru- bahan  yang  berbeda.  Sedangkan  pada sampel  dengan  pemanasan  100 0 C  klorofil memang  mengalami  kerusakan.  Namun secara  keseluruhan  terdapat  hubungan meskipun tidak kontinu ataupun berulang.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dari  penelitian  yang telah  dilakukan  diperoleh  kesimpulan sebagai berikut :
1. Berdasarkan  hasil  pengukuran  dan perhitungan, jumlah kandungan klorofil yang  terdapat  di  dalam  daun  suji sebelum  dipanaskan  ialah  11,26453 μg/ml.
2. Suhu maksimum yang diperlukan untuk menghasilkan  feofitin  adalah  90 0 C dengan  nilai  absorbansi  maksimum sebesar 1,90130 μg/ml.
3. Ada  hubungan antara  nilai total absorbansi  feofitin  dengan  jumlah kandungan  klorofil  yang  terdapat  di dalam  daun  suji,  namun  hubungannya tidak kontinu.

## DAFTAR  PUSTAKA
Anam,
Choirul. 2010. Ekstraksi Oleoresin Jahe (Zingiber Officinale)  Kajian  Dari  Ukuran Bahan, Pelarut,Waktu Dan Suhu. Jurnal  Pertanian  MAPETA.  ISSN  : 1411-2817. Vol. XII. No. 2.
Anwar,
Chairil dkk. Pengantar Praktikum Kimia Organik. FMIPA UGM: Yogyakarta.
Buchor,  L.  2007. Pembuatan  Gula  Non
Karsinogenik  Non  Kalori  Dari Daun  Stevia. Jurnal  Reaktor.  Vol. 11 No.2. Elva.  2010. Stabilitas  Pigmen  Klorofil. http://foodstory2.blogspot.com/201 0/06/stabilitas-pigmen- klorofil.html).  (Akses  15  Juni 2012).
Gross,  J.  1991. Pigments  in  Vegetables, Chlorophylls  and  Carotenoids. Van  Nostrand  Reinhold,  New York.
Jayashankar,L.  2007. Porphyrins  :  Dy- namic  Photosensitizer  in  Photo- dynamic Therapy.
Madalena  dkk.  2007. The  Effect  Of Heating Time To The Content Of Pigments  And  Vitamin  A  In
Cassava (Manihot esculenta Crantz) Ans Ceara- Rubber(Manihot  glaziovii  Muell. Arg. Indo J Chem Vol 7.
Muththalib,  Abdul.  2009. Klorofil  dan
Penyebarannya Di Perairan.
(http://id.shvoong.com/exact- sciences/1947735-klorofil-dan- penyebarannya-di-perairan/). (Akses 15 Februari 2012). Nurdin.  2009. Pembuatan  Bubuk  Ek- strak  Cu-Turunan  Klorofil  Daun Cincau (Premna Oblongifolia Merr.)  Dan  Uji  Praklinis  Untuk Pencegahan  Aterosklerosis. Dis- ertasi  Sekolah  Pascasarjana  Institut
Pertanian Bogor: Bogor.
Sari, Kurniawati W. 2005. Studi
Kemampuan Pengikatan
Kolesterol  Oleh  Ekstrak  Daun Suji  (Pleomele  angustifolia  N.  E. Brown)  Dalam  Simulasi  Sistem Pencernaan  In  Vitro. Skripsi Institut Pertanian Bogor: Bogor. Suyitno. 2008. Modul  Pengayaan Materi
Projek Pendampingan Sma. UGM: Yogyakarta.