http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
PENGARUH KADAR GLISEROL TERHADAP KUALITAS SEMEN DOMBA LOKAL
Nurcholidah Solihati 1 , Siti Darodjah Rasad 2 , Rangga Setiawan 3 , Santi Nurjanah 4
1, 2, 3, 4 Fakultas Peternakan, Universitas Padjadjaran
Diterima : 25 April 2018 Disetujui :16 Mei 2018 Publish : 31 Mei 2018
Jl.  Raya  Jatinangor  Km. 21, Sumedang  45363  Jawa Barat, Indonesia e-mail : 1 nurcholidah@unpad.ac.id , 2 d447je.sdr@gmail.com , 3 rangga@yahoo.com , 4 santinurjanah306@gmail.com
e-ISSN : 2541-4208 p-ISSN : 2548-1606
Abstrak. Pengembangan  Domba  Lokal  melalui  program  Inseminasi Buatan  memerlukan  informasi  mengenai  kualitas  semen,  khususnya  se- men  beku  yang  dalam  pembuatannya  memerlukan  gliserol  sebagai krioprotektan  dengan  kadar  yang  tepat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  kualitas  semen  Domba  Lokal  dan  mengetahui  level  gliserol yang  menghasilkan  kualitas  semen  post-thawing  yang  paling  optimal. Penelitian  dilakukan  dengan  menggunakan  rancangan  acak  lengkap (RAL) dengan empat perlakuan level gliserol (4%,  5%, 6% dan 7%) dan 14 kali ulangan. Parameter yang diamati meliputi motilitas, abnormalitas dan recovery rate. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan analisis ragam  (ANAVA)  dan perbedaan  antar  perlakuan  diuji  menggunakan  Uji lanjut  Duncan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  level  gliserol berpengaruh nyata (p<0.05) terhadap motilitas dan recovery rate namun tidak berpengaruh nyata terhadap abnormalitas sperma. Perlakuan level gliserol  5%  nyata  (p<0.05)  menghasilkan  motilitas  (40,47%)  dan recovery  rate  (46,53%)  tertinggi  dibanding  perlakuan  lainnya. Disimpulkan bahwa semen Domba Lokal memiliki kualitas yang baik dan memenuhi syarat untuk dilakukan pengolahan lebih lanjut sampai semen beku dengan level gliserol 5% menghasilkan kualitas semen post-thawing yang paling optimal.
Kata kunci : domba lokal, kualitas semen, level gliserol
Abstract. Increasing  of Local  Ram  by  artificial insemination  need  the  in- formation of semen quality especially frozen semen that in its production need glycerol as cryoprotectan at right dose. The aim of this research was to know quality of Local Ram semen and to know glycerol level that pro- duce  optimum  post  thawed  semen  quality  of  Local  Ram.  This  research used completely randomized design (CRD) with four treatments of glyerol level  (4%,  5%,  6%  and  7%)  dan  14  replications.  Parameters  consist  of motility, abnormality and recovery rate. Data was analyzed with analysis of varians (ANOVA) and differences between treatment was analyzed us- ing  Duncan  test.  The  result  also  showed  that  glycerol  level  significantly (p<0.05)  affect  on  motility  and  recovery  rate  but  not  significantly  affect on  sperm  abnormality.  Treatment  of  5%  glycerol  level  resulting  highest motility (40,47%) and recovery rate (46,53%) than other treatments. It is concluded  that  Local  Rram  has  good  quality  and  fullfillment  to  further preservation  until  frozen  semen  with  5%  glycerol  level  provide  optimal post thawed semen quality.
Key words : local ram, semen quality, glycerol level

## http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati

## Cara Sitasi
Solihati, N., Rasad, S. D., Setiawan, R. & Nurjanah, S. (2018). Pengaruh Kadar Gliserol Terhadap Kualitas Semen Domba Lokal. Jurnal Biodjati , 3 (1), 63-71.

## PENDAHULUAN
Ternak  domba  memiliki  peran  penting dalam  pemenuhan  kebutuhan  daging  di masyarakat, sehingga pengembangan populasinya perlu terus ditingkatkan. Pengembangan  populasi  dipengaruhi  oleh performa reproduksi, dimana performa reproduksi  yang  baik  akan  mendukung percepatan  pengembangan  ternak  domba. Indikator  performa  reproduksi  dapat  terlihat pada  tingkat  fertilitas  yang  dipengaruhi  oleh performa  jantan dan  betina. Performa pejantan dapat  ditentukan  dari  kualitas  semen  yang diejakulasikan.
Domba  Lokal  merupakan  aset  plasma nutfah Jawa Barat yang memiliki potensi untuk dikembangkan  sebagai  penghasil  daging. Informasi  mengenai  performa  reproduksi Domba  Lokal  jantan  terutama  kualitas  semen masih  terbatas.  Sebelumnya  telah  dilakukan penelitian  mengenai  penambahan  antioksidan terhadap  kualitas  semen  domba  lokal  umur pubertas  (Solihati  et  al.,  2015).  Penelitian lainnya  telah  dilaporkan  pula  mengenai pengaruh  umur  terhadap  kualitas  semen Domba  Lokal,  dimana  umur  25-36  bulan menghasilkan  motilitas  dan  viabilitas  tertinggi dibanding kelompok umur lainnya (13-24;   37- 48;  dan  49-72  bulan)  (Solihati  et  al.,  2016). Penelitian-penelitian  lain  terkait  pengolahan semen  Domba  Lokal  perlu  dilakukan  untuk menunjang program perkawinan Domba Lokal melalui  program  inseminasi  buatan  (IB).  Hal ini mengingat bahwa kualitas semen merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi  kesuksesan  suatu  program  IB. Penelitian    tersebut    diantaranya    mengenai
penambahan krioprotektan yang tepat dalam pembuatan semen beku Domba Lokal.
Gliserol merupakan salah satu krioprotektan yang digunakan untuk pembekuan  semen.  Gliserol  akan  memberikan perlindungan yang efektif terhadap spermatozoa  bila  konsentrasinya  di  dalam pengencer  optimal.  Beberapa  peneliti  telah melaporkan  konsentrasi  gliserol  yang  optimal dalam  pembekuan  semen  domba.  Konsentrasi gliserol  optimal  dalam  proses  pembekuan semen  domba  adalah  4  –  6%,  dan  pada konsentrasi 8% terjadi kerusakan sel (Fiser dan Fairfull,  1986).  Konsentrasi  gliserol  5% merupakan  dosis  optimal  dalam  pembekuan semen Domba Garut (Rizal et al., 2002).
Kadar  gliserol  yang  ditambahkan  ke dalam  pengencer  untuk  pembekuan  semen dibatasi  oleh  sifat  toksiknya  yang  bergantung pada  tingkat  pendinginan  dan  pembekuan, komposisi  pengencer,  metode  penambahan, dan  jenis  sperma  (Fahy,  1986).  Penggunaan kadar  gliserol  yang  tepat  pada  pembekuan semen Domba Lokal belum diketahui sehingga perlu  dilakukan  penelitian  untuk  mendukung pelaksanaan program inseminasi buatan dengan  semen  beku  pada  domba  lokal. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui kualitas  semen  Domba  Lokal  dan  mengetahui level  gliserol  yang  menghasilkan  kualitas semen post-thawing yang paling optimal.

## BAHAN DAN METODE .
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental.  Materi  penelitian  berupa  14 ejakulat  semen  yang  berasal  dari  seekor pejantan  Domba  Lokal  berat  badan  45-50  kg dan umur sekitar 24-36 bulan. Pakan  hijauan
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
dan  pakan  tambahan  (ampas  tahu)  diberikan setiap  hari  sebanyak  ±5  kg/ekor  dan  ±  0,35 Kg/ekor.  Koleksi  semen  dilakukan  dengan metode  vagina  buatan  untuk  selanjutnya dibawa  ke  laboratorium  untuk  pemeriksaan makroskopis dan mikroskopis.
Komponen  pengencer  semen  terdiri  dari larutan  penyangga  (buffer),  kuning  telur  dan antibiotik.  Pengencer  yang  digunakan  adalah tris  kuning  telur.  Semen  yang  telah  diberi pengencer kemudian mendapat perlakuan level gliserol,  terdiri  dari  4%,  5%,  6%,  dan  7%. Pembekuan semen diawali dengan penghisapan  semen  yang  telah  diencerkan  ke dalam  straw  dengan  menggunakan  pompa penghisap  otomatis,  kemudian  ujung  straw yang  terbuka  ditekankan  pada  serbuk  perekat polyvinylalcohol. Straw yang digunakan adalah ministraw (0,25 ml). Proses selanjutnya yaitu memasukkan straw yang telah direkat ke dalam  lemari  pendingin  bersuhu  5ºC  untuk diekuilibrasi  selama  2-4  jam.  Setelah  proses ekuilibrasi  kemudian  straw  disusun  dalam sebuah  rak  yang  terletak  kurang  lebih  10  –  15 cm  di  atas  permukaan  nitrogen  cair  (-130ºC) selama  15  menit  dan  selanjutnya  dimasukkan kedalam  goblet  yang  langsung  dicelupkan  ke dalam larutan nitrogen cair (suhu -196ºC) yang ada  didalam  container.  Thawing  dilakukan pada air dengan suhu antara 38 – 40ºC.
Evaluasi kualitas semen dilakukan terhadap  14  kali  penampungan  semen  sebagai ulangan.  Penampungan  semen  dilakukan dengan  metode vagina  buatan. Kualitas  semen yang  diamati  meliputi  :  Volume  semen,  pH, Konsentrasi  sperma  total  (KST),  Motilitas, Abnormalitas,  Membran  Plasma  Utuh  (MPU). Penentuan  konsentrasi  sperma  total,  motilitas sperma,  dan  abnormalitas  sperma  dievaluasi menggunakan  mikroskop  binokuler  (Olympus CX 21).
Penelitian dilakukan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan
empat  perlakuan  level  gliserol  dan  14  kali ulangan.  Data  yang  diperoleh  dianalisis menggunakan  analisis  varian  (ANAVA)  dan perbedaan  antar  perlakuan  diuji  menggunakan Uji lanjut Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Karakteristik Semen Segar Domba Lokal
Karateristik  semen  segar  hasil  evaluasi makroskopis  dan  mikroskopis  terhadap  14 ejakulat  semen  Domba  Lokal  yang  digunakan pada penelitian ini disajikan pada Tabel 1.
Berdasarkan  Tabel  1,  rata-rata  volume semen  Domba  Lokal  yang  diperoleh  adalah 1,20 mL. Hal tersebut sesuai dengan pendapat Toelihere (1993) bahwa volume semen domba berkisar  antara  0,8-1,2  mL.  Menurut  Feradis (2010)  volume  semen  domba  bervariasi tergantung bangsa domba, umur, ukuran tubuh, kualitas  pakan,  kondisi  tubuh  ternak,  dan frekuensi  penampungan.  Semen  segar  yang dihasilkan  berwarna  krem,  konsistensi  agak encer  dengan  bau  yang  khas  dan  rata-rata  pH 7,22. Kondisi tersebut sesuai dengan pendapat Toelihere  (1993)  yang  menyatakan  bahwa warna  semen  domba  yang  normal  adalah seperti  susu  atau  krem  keputih-putihan  dan keruh  dengan  konsistensi  semen  domba  yang normal  adalah  encer  hingga  kental  serta memiliki bau yang khas. Selanjutnya dikatakan bahwa  pH  semen  segar  domba  yang  normal berkisar  antara  5,9-7,3.  Dwitarizki  et    al. (2015)  melaporkan  bahwa  pH  semen  Domba Garut  berkisar  6,64±0,28,  lebih  rendah  dari hasi penelitian ini.
Hasil  pengamatan  gerakan  massa  adalah (+++). Kondisi tersebut sesuai dengan pendapat  Toelihere  (1993)  bahwa  gerakan massa  spermatozoa  yang  normal  adalah (++/+++). Konsentrasi sel spermatozoa Domba Lokal  yang  dihasilkan  adalah  349,60  x 107sel/mL. Hasil penelitian ini sesuai  dengan
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
laporan  Susilawati  (2011)  yaitu  sebesar  350  – 600  x  10 7 sel/mL,  namun  lebih  rendah dibanding  yang  dilaporkan  Rizal  et  al.  (2015) pada  Domba  Garut  sebesar  429  ±  88.4x  107 sel/m  l.  Motilitas  semen  segar  diperoleh sebesar 87,62%. Hal ini sesuai pendapat Hafez (2000)  yang  menyatakan  bahwa  domba  jantan dikatakan  fertil  jika  mampu  menghasilkan spermatozoa  dengan  motilitas  antara  60-90%. Hasil penelitian ini lebih tinggi dibanding yang dilaporkan  Hartanti  dan  Karja  (2014)  bahwa semen  segar  Domba  Garut  memiliki  motilitas sebesar  81,25%.  Abnormalitas  spermatozoa yang  diperoleh  pada  penelitian  adalah  0,6%. Hal  ini  berarti  spermatozoa  termasuk  normal sesuai  dengan  pendapat  Evans  dan  Maxwell (1987) bahwa semen yang akan diinseminasikan  tidak  boleh  mengandung spermatozoa  abnormal  lebih  dari  15%  karena berpengaruh terhadap motilitas. Nilai abnormalitas  hasil  penelitian  ini  jauh  lebih
rendah dibandingkan dengan pendapat Toelihere  (1993),  Garner  dan  Hafez  (2000) yang  mengatakan  abnormalitas  semen  segar domba  sebesar  5-15%  dan  5-20%.  Afiati (2015) melaporkan bahwa tingkat abnormalitas spermatozoa Domba Garut lebih kecil dibandingkan  dengan  tingkat  abnormalitas spermatozoa Domba Priangan. Hasil perhitungan  MPU  pada  semen  segar  Domba Lokal  adalah  sebesar  92,60%  sesuai  dengan pendapat  Revell  dan  Mrode,  (1994)  dalam Solihati,  (2008)  yang  menyatakan  bahwa semen  dianggap  normal  apabila  keutuhan membran  plasma  spermatozoa  dalam  semen mencapai  60%.  Berdasarkan  hal  tersebut, karakteristik  semen  segar  domba  Lokal  yang diperoleh  memiliki  kualitas  yang  baik.  Hal  ini dapat  disimpulkan  bahwa  semen layak diproses  lebih  lanjut baik dalam  bentuk  semen cair maupun semen beku.
Tabel 1. Karakteristik Semen Segar Domba Lokal
Ulangan Volume (ml) Warna Konsistensi Bau pH Konsentrasi Sperma Total (10 7 sel/ml) Motilitas (%) Abnormalitas (%) MPU (%) 1 1,2 Krem Agak encer Khas 7,1 376 88,56 1,50 98,50 2 1,3 Krem Agak encer Khas 7,4 347 84,15 1,00 99,50 3 1,3 Krem Agak encer Khas 7,1 351 84,05 1,00 92,00 4 1,2 Krem Agak encer Khas 7,4 368 93,47 0,50 94,50 5 1,3 Krem Agak encer Khas 7,4 366 84,70 1,00 89,00 6 1,1 Krem Agak encer Khas 7,4 344 92,73 0,50 93,00 7 1,1 Krem Agak encer Khas 7,4 346 90,75 0,50 94,00 8 1,2 Krem Agak encer Khas 7,4 344 88,66 1,00 90,50 9 1,2 Krem Agak encer Khas 7,1 362 85,08 0,50 90,50 10 1,3 Krem Agak encer Khas 7,4 306 82,93 1,00 91,00 11 1,2 Krem Agak encer Khas 7,0 342 90,16 1,50 92,00 12 1,1 Krem Agak encer Khas 7,0 360 89,05 1,50 89,50 13 1,1 Krem Agak encer Khas 7,0 349 86,08 1,00 90,00 14 1,0 Krem Agak encer Khas 7,0 321 87,71 1,50 90,50 Rata- rata 1,2 Krem Agak encer  Khas  7,22 348,71 87,72 1,00 92,46

## http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
Kualitas Semen Domba Lokal Post-

## Equilibrasi dan Post-Thawing
Hasil  evaluasi  terhadap  kualitas  semen Domba Lokal post-thawing hasil penelitian ini ditampilkan  pada  Tabel  2.  Berdasarkan  Tabel 2, secara umum terjadi penurunan kualitas dari semen  segar  setelah  equilibrasi  dan  post thawing  pada  seluruh  perlakuan  level  gliserol. Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa level gliserol  berpengaruh  nyata  (P<0.05)  terhadap motilitas  namun  tidak  berbeda  nyata  terhadap abnormalitas.  Hasil  uji  Duncan  menunjukkan bahwa level gliserol 6% nyata menghasilkan
motilitas  post-equilibrasi  tertinggi  dibanding perlakuan  lainnya.  Kualitas  semen  post- thawing  mengalami  penurunan  dibanding kualitas  post-equilibrasi.  Hasil  analisis  ragam menunjukkan bahwa level gliserol berpengaruh nyata (P<0.05) terhadap  motilitas dan recovery  rate namun  tidak  berpengaruh nyata terhadap abnormalitas. Hasil uji Duncan menunjukkan bahwa level gliserol 5% menghasilkan  motilitas  post-thawing  dan re- covery  rate tertinggi  dibanding  perlakuan lainnya.
Tabel 2. Kualitas Sperma Domba Lokal Post-Equilibrasi dan Post-Thawing.
Level Gliserol (%) 4 5 6 7 Post-Equilibrasi ...........................................% ........................................ Motilitas 70,08±7.28 a 67,49±9.49 a 75,30±9.47 b 64,51±8.01 a Abnormalitas 1,46±0.82 a 1,43±0.51 a 1,43±0.43 a 1,68±1.01 a Post-Thawing ...........................................% ....................................... Motilitas 36,58± 1.81 a 40,76± 2.82 b 38,01± 4.34 a 36,44± 3.96 a Abnormalitas 2,25± 1.16 a 1,79± 0.70 a 2,25± 0.96 a 2,29± 1.10 a Recovery Rate 41,75± 2.47 a 46,53± 3.76 b 43,40± 5.30 a 41,67± 5.34 a
Keterangan: Huruf superscrif yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan berbeda nyata (p<0.05)
Berdasarkan  Tabel  2,  terjadi  penurunan kualitas  semen  tersebut  disebabkan  oleh ketidakseimbangan  antara  produksi  senyawa oksigen  reaktif  dengan  antioksidan  yang  ada. Kondisi  tersebut  menurut  Tariq  et  al.  (2015) disebut  dengan  stress  oksidatif.  Sejalan dengan  hal  tersebut,  menurut  Solouma  et  al. (2013),  peningkatan  senyawa  oksigen  reaktif selain  merusak  membrane plasma sel  sperma, juga  menyebabkan  penurunan  motilitas  dan kapasitasi sperma.
Peningkatan abnormalitas sekunder post-thawing pada penelitian ini dapat terjadi
karena peroksidasi lipid (Amalia et al.,  2013). Senyawa oksigen reaktif menyerang membran plasma  sel  sperma  dan  merusak  strukturnya, sehingga  pada  tingkat  stres  oksidatif  tinggi dimana  jumlah  senyawa  oksigen  reaktif  lebih banyak  daripada  antioksidan  yang  ada  maka akan meningkatkan abnormalitas sekunder sel sperma.  Hal  ini  karena  sperma  tidak  dapat mempertahankan  diri  oleh  serangan  tersebut dan  kehilangan  integritas  selnya.  Menurut Ansari et al. (2011) hal  ini terjadi disebabkan karena  proses  pembekuan  dan    thawing sperma merupakan suatu proses  oksidatif

## http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
dimana dalam setiap
prosesnya meningkatkan  level  senyawa  oksigen  reaktif yang menyebabkan  kerusakan membran plasma  sperma  akibat  terjadinya  peroksidasi lipid.
Kualitas  semen  post-thawing  terbaik berdasarkan  parameter  motilitas  dan recovery rate diperoleh  pada  perlakuan  level  gliserol 5%  yang  berbeda  nyata  (P<0.05)  dengan perlakuan lainnya, sedangkan untuk parameter abnormalitas tidak berbeda nyata.
Perbandingan  spermatozoa  hidup  yang bergerak  ke  depan  dengan  konsentrasi spermatozoa total  dalam  semen  menunjukkan persentase spermatozoa motil progresif (Evans  dan  Maxwell,  1987).  Berdasarkan Tabel 2, rata-rata persentase motilitas spermatozoa Domba Lokal post-thawing yang dihasilkan  pada  perlakuan  level  gliserol  4%, 5%, 6%, dan 7% dalam pengencer tris  kuning telur masing-masing sebesar 36,93%; 42,09%; 37,72%;  dan  37,36%.  Hasil  analisis  ragam menunjukkan bahwa penambahan level gliserol  memberikan  pengaruh  yang  berbeda nyata (P<0.05) terhadap
motilitas spermatozoa domba Lokal post-thawing.
Penambahan level gliserol 5% ke dalam pengencer tris kuning telur mampu mencegah terjadinya cold  shock dan  meminimalisir kristal-kristal es yang terbentuk selama proses pembekuan semen sehingga motilitas spermatozoa  dapat  dipertahankan.  Menurut Hafez  et  al.  (2000)  bahwa  gliserol  yang digunakan sebagai krioprotektan dapat berdifusi  menembus  dan  memasuki  sel spermatozoa, memiliki daya pengikat air yang kuat,  sehingga  pengaruh  perlindungannya yaitu  mampu  mencegah  terjadinya  dehidrasi yang ditimbulkan oleh cold shock dengan cara menggantikan  air  yang  keluar  dari  dalam  sel saat  pembekuan  berlangsung.  Sifat  demikian mempengaruhi  tekanan  uap  sehingga  titik beku medium menurun, akibatnya sel
spermatozoa  akan  memperoleh  kesempatan lebih  lama  untuk  mengeluarkan  air,  selain  itu gliserol digunakan oleh sel spermatozoa untuk metabolisme  oksidatif  dan  mendesak  keluar elektrolit-elektrolit,  menurunkan  konsentrasi elektrolit  intraseluler  serta  mengurangi  daya merusaknya terhadap sel spermatozoa sehingga kematian sel dapat diminimalisir.
Menurut Tambing (1999) selama proses pembekuan,  gliserol  mampu  memodifikasi kristal-kristal es yang terbentuk dan menghambat  kerusakan  membran  sel  secara mekanis pada waktu penurunan suhu ( cooling rate ),  sehingga  kerusakan  organel-organel  sel spermatozoa  seperti  lisosom  mitokondria dapat dihindari, sehingga rantai oksidasi tidak terputus  dan  proses  metabolisme  tetap berlangsung  yang  menyebabkan  spermatozoa tetap  hidup.  Gliserol  akan  memberikan perlindungan yang efektif terhadap spermatozoa  bila  konsentrasinya  di  dalam pengencer  optimal.  Selanjutnya  Tambing  et al.  (2000)  menyatakan  bila  konsentrasi gliserol  tidak  optimal  akan  menimbulkan gangguan berupa penurunan kualitas spermatozoa. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa penambahan level gliserol 5% dalam pengencer  tris  kuning  telur  merupakan  level optimum  untuk  mempertahankan  motilitas spermatozoa  Domba  Lokal  post-thawing,  dan apabila  dilihat  dari  sisi  aplikasi  di  lapangan, perlakuan  gliserol  5%  menghasilkan  rata-rata motilitas  (42,09%)  yang  layak  untuk  IB.  Hal ini  didasari  oleh  SNI  4869.1  (2014)  bahwa standar  motilitas  layak  IB  pada  semen  beku yang  telah  dicairkan  kembali  (post-thawing) adalah minimal 40%.
Recovery  rate merupakan  kemampuan pemulihan sperma setelah pembekuan. Perhitungan  nilai recovery  rate dilakukan untuk mengetahui berapa persen sperma dapat bertahan terhadap proses pembekuan.

## http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
Semakin tinggi nilai recovery rate menandakan  semakin  tinggi  pula  ketahanan sperma  dan  sebaliknya  semakin  rendah nilainya  maka  menandakan  semakin  rendah kemampuan  spermatozoa  bertahan.  Oleh karena  itu,  nilai recovery  rate yang  semakin tinggi akan menunjukkan kualitas spermatozoa  yang  semakin  baik  (Garner  dan Hafez, 2000).
Nilai recovery  rate tertinggi  hasil penelitian  ini  sebesar  46,53±3,76  yang diperoleh  dari  perlakuan  gliserol  5%,  nyata lebih  tinggi  dibanding  level  gliserol  3%,  4% dan 6%. Nilai tersebut mendekati standar nilai recovery  rate spermatozoa  sapi  berdasarkan SNI  4869-1,  (2017)  yaitu  50%.  Hasil  ini sesuai  dengan  penelitian  Suherlan  et  al. (2015) yang menggunakan gliserol 5%  dan DMF (Dimethylformamide) 3%, 5% dan 7%, mendapatkan  hasil recovery  rate semen Domba Lokal terbaik yaitu yang menggunakan gliserol 5% namun dengan nilai rataan recovery  rate yang  diperoleh  sebesar 53,16%.
Proses  pembuatan  semen  beku  meliputi pembekuan  dan  thawing,  akan  meningkatkan produksi  senyawa Reactive  Oxygen  Species (ROS),  yaitu  senyawa  yang  secara  alamiah diproduksi dalam metabolisme seluler, walaupun semen memiliki pertahanan enzimatik  dan  non-enzimatik  yang  dapat menangkal  ROS,  namun  produksi  ROS  yang berlebihan dan tidak seimbang akan melemahkan  sistem  pertahanan  enzimatik antioksidan  sehingga  menyebabkan  stres oksidatif.  Stres  oksidatif  pada  sperma  dapat menggangu stabilitas membran plasma sperma  (Michael  et  al.,  2009  dalam  Sianturi, 2012). Kerusakan sel akibat pembekuan dapat terjadi karena dehidrasi, peningkatan konsentrasi  elektrolit,  serta  terbentuknya kristal es intraseluler yang dapat mempengaruhi permeabilitas dinding sel  dan
pada akhirnya spermatozoa kehilangan daya motilitasnya (Zelpina et al., 2012).
Stres  oksidatif  akan  mengakibatkan reaksi  peroksidasi  lipid  yang  menjadi  kunci utama rendahnya kualitas semen beku. Reaksi ini tejadi akibat kontak semen dengan oksigen yang  pada  akhirnya  akan  meningkatkan jumlah  radikal  bebas.  Peningkatan  radikal bebas  ini  pada  awalnya  akan  menyerang membran  plasma  sperma,  ketika  membran plasma  sebagai  pertahanan  sudah  rusak  maka akan  menyebabkan  imbas  yang  selanjutnya yaitu menurunnya motilitas sperma (Rizal dan Herdis, 2010).
Berkurangnya  motilitas  sperma  yang didapatkan setelah pembekuan akan mempengaruhi  nilai recovery  rate yang diperoleh.  Penurunan  motilitas  yang  tinggi akan  menyebabkan  nilai recovery  rate semakin kecil, sedangkan penurunan motilitas yang rendah akan menghasilkan nilai recovery rate yang lebih besar. Semakin besar nilainya maka ketahanan spermatozoa terhadap  pembekuan  semakin  tinggi  dan menandakan kualitasnya  baik, dan sebaliknya jika  nilainya  semakin  kecil  maka  ketahanan spermatozoa semakin rendah dan menandakan kulitasnya  jelek.  Pengetahuan  mengenai penurunan  motilitas  pada  pembekuan  semen dianggap  sebagai  salah  satu  parameter  yang sering digunakan untuk mengetahui kemampuan  spermatozoa  membuahi  sel  telur (Junaedi, 2015).
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa pada  pembekuan  semen  Domba  Lokal,  level gliserol 5% cukup memadai untuk melindungi sperma  dari  kerusakan  sel.  Hasil  ini  juga menunjukkan  bahwa  level  giliserol  5% mampu menghasilkan motilitas yang memenuhi  syarat  untuk  program  IB  dengan nilai recovery  rate yang  memadai.  Nilai recovery  rate menunjukkan  kemampuan pengencer dalam mempertahankan  motilitas,
http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
sehingga untuk mendapatkan hasil  yang  lebih optimal  dapat  dilakukan  pengembangan penelitian dengan cara mencoba jenis pengencer  lain.  Berdasarkan  hasil  penelitian disimpulkan  bahwa  semen  Domba  Lokal memiliki  kualitas  yang  baik  dan  memenuhi syarat  untuk  dilakukan  pengolahan  lebih lanjut  sampai  semen  beku  dengan  level gliserol  5%  menghasilkan  kualitas  semen post-thawing yang paling optimal.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  terlaksana  atas  bantuan hibah  Penelitian  Unggulan  Perguruan  Tinggi (PUPT)  tahun  anggaran  2016,  untuk  itu penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Kementerian  Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan Tinggi  melalui  Direktorat  Riset,  Pengabdian Kepada  Masyarakat  dan  Inovasi  (DRPMI) Universitas
Padjadjaran
yang telah memberikan dana penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Afiati, F., Yulnawati1, Riyadi M. & Arifiantini R.I.  (2015).  Abnormalitas  spermatozoa domba  dengan  frekuensi  penampungan berbeda. Pros  Sem  Nas  Masy  Biodiv Indon , 1(4), 930-934
Amalia,  F.R.,  Suyadi,  &  Rachmawati,  A. (2013). Pengaruh  Glutathione  terhadap
Kualitas  Semen  Kambing  Boer  Post Thawing dalam Pengencer yang Mengandung  Dimetylsulfoxide  (DMSO). Universitas Brawijaya. Malang
Ansari, M. S. (2011). Antioxidant Fortification
of Semen Extender to Improve Freezability  and  Fertility  of  Buffalo  Bull Spermatozoa. Thesis Pir  Mehr  Ali  Shah Arid  University  Rawalpindhi.  Pakistan. 80-81.
Dwitarizki,  N.  D.,  Ismaya.  &  Asmarawati,  W.
(2015).  Pengaruh  Pengenceran  Sperma dengan Air Kelapa dan Aras Kuning Telur Itik  serta  Lama  Penyimpanan  terhadap Motilitas  dan  Viabilitas  Spermatozoa Domba  Garut  pada  Penyimpanan  5°C. Buletin Peternakan , 39 (3), 153.
Evans,  G.  &  Maxwell,  W.M.C.  (1987). Salamon’s  Artificial  Insemination  of Sheeps  and  Goat’s.Butterworth .  Sydney. 22-30; 90-117; 122-141.
Feradis. (2010). Reproduksi Ternak .  Alfabeta. Bandung. 42-87
Fiser, P. S. & Fairfull. R.W.. (1986). The effect of  glycerol  concentration  and  cooling  ve- locity on cryosurvival of ram semen . Cry- obiology.21:542-551.
Garner, D. L. & Hafez, E.S.E. (2000). Sperma- tozoa  And  Seminal  Plasma.  In  Reproduc- tion  In  Farm  Animals .  Edited  By  E.S.E Hafez  and  B.  Hafez.7th  Edition.  USA  : Lippincott  Williams  And  Wilkins,  Mary- land.
Hafez, E. S. E. (2000). Semen Evaluation. 6th Edition . Lippincott Williams dan Wilkins. Maryland. USA. 405-423.
Hartanti,  A.  W.  &  Karja,  N.  W.  K.  (2014). Karakteristik  Frozenthawed  Spermatozoa Domba  Garut  yang  Dikriopreservasi dalam Pengencer yang Mendapat Imbuhan Orvus ES Paste. Jurnal Veteriner . 15, 454- 460.
Junaedi.  (2015).  Daya  Tahan  Pembekuan  Se- men  Empat  Genetik  Ayam  Lokal  Pada Program  Kriopreservasi  Plasma  Nutfah Indonesia. Thesis .  Institut  Pertanian  Bo- gor. Bogor. 15
Parks, J. E. & Graham, J.K. (1992). Effects of cryopreservation  procedures  on  sperm membranes. Theriogenology. 38:202-222.
Rizal  &  Herdis.  (2010). Peranan  Antioksidan dalam  Meningkatkan  Kualitas  Semen Beku . Wartazoa, Vol. 20 No. 3 th 2010.

## http://journal.uinsgd.ac.id/index.php/biodjati
Rizal,  M.,  Herdis,  Nasrullah,  Riyadhi.,  M., Sangadji,  Insun.  &Yulnawati.  (2015).
Kriopreservasi  Semen  Domba  Garut dengan Pengencer Tris yang Disuplementasi Ethylene Diamine Tetraacetic Acid. Jurnal Veteriner , 16 (2), 252.
Setiono,  N.,  Suharyati,  S.  &  Santosa,  P.  E. (2015).  Kualitas  Semen  Beku  Sapi  Brah- man Dengan Dosis Krioprotektan Gliserol Yang  Berbeda  Dalam  Bahan  Pengencer Tris  Sitrat  Kuning  Telur .  Jurnal  Ilmiah Peternakan Terpadu , 3, 61-69.
SNI  (Standar  Nasional  Indonesia)  4896.1.
(2014). Semen Beku Sapi. Badan Standarisasi Nasional (BSN). sni.bsn.go.id. (diakses pada 5 Maret 2016, jam 17;23 WIB).
SNI  (Standar  Nasional  Indonesia).  (2017).
Semen Beku  -  Bagian 1:  Sapi (SNI 4869- 1:2017). BSN (Badan Standarisasi Nasional). Jakarta.
Solihati, N., Idi, R., Rasad, S. D., Rizal, M. & Fitriati,  M.  (2008).  Kualitas  Spermatozoa Cauda  Epididimis  Sapi  Peranakan  Ongol (PO)  dalam  Pengencer  Susu,  Tris  dan Sitrat Kuning Telur pada Penyimpanan 4- 5 o C. Animal Production , 10 (1), 22-29. Solihati, N., Rasad, S.D., Setiawan R., Kustini, T. (2015). Pengaruh Penambahan Glutation  dan  Alfa  Tokoferol  terhadap Daya  Hidup  Sperma  Domba  Lokal  Umur Pubertas. Prosiding  Seminar  Nasional Peternakan  Berkelanjutan  ke-7 .  Fakultas Peternakan  Universitas  Padjadjaran.  72- 77.
Solihati,  N.,  Rasad,  S.D.,  Setiawan  R., Alvionita C. (2016). Quality and Viability of Javanese Local Ram Semen at Different Age. Proceeding International Seminar on
Livestock  Production  and  Veterinary Technology .265-270.
Solouma,  G.M.A.  (2013).  The  Influence  of Adding  Glutathione  on  Semen  Character- istics  of  Sohagi  Rams.  Egyptian Journal of Sheep and Goat Sciences , 8(2), 61-68.
Susilawati, T. (2011). Spermatology. Universitas Brawijaya Press. Malang. 102. Suherlan N. E., Soeparna &  K.  Hidajat. (2015). Pengaruh  Penambahan  Berbagai Tingkat    DMF (Dimethylformamide) sebagai   Agen  Krioprotektan    terhadap Keutuhan Membran Plasma  dan Recovery Rate Semen   Beku Domba    Lokal. Universitas Padjajaran. Sumedang. 1-12.
Tambing,  S.  N.   1999.   Efektivitas  Berbagai Dosis  Gliserol  di  Dalam  Pengencer  Tris dan  Waktu  Ekuilibrasi  terhadap  Kualitas Semen Beku Kambing Peranakan
Etawah. Tesis . IPB. Bogor. 1-124.
Tambing, S. N., Toelihere, M.R., Yusuf, T .L. &  Sutama,  I.  K.  (2000).  Pengaruh  Level Gliserol  dalam  Pengencer  Tris  terhadap Kualitas Semen Beku Kambing Peranakan Etawah. Jurnal Ilmu Ternak dan Veteriner . 5:1-8.
Tariq, M., Khan, M.S., Shah, M.G., Nisha, A.R, Umer, M., Hasan, S. M., Rahman, A. & Rabbani, I. (2015). Exogenous Antioxi- dant  Inclusion  During  Semen  Cryopreser- vation of Farm Animals. Journal of Chem- ical  and  Pharmaceutical  Research ,  7(3), 2273-2280.
Toelihere,  M.  R.  (1993).  Inseminasi  Buatan pada  Ternak.Cetakan  keenam.  Angkasa. Bandung. 112-117.
Zelpina,  E.,  Rosadi,  B.,  &  Sumarsono,  T.
(2012).  Kualitas  Spermatozoa  Post Thaw- ing  dari  Semen  Beku  Sapi  Perah. Jurnal Ilmu-Ilmu Peternakan , 15 (2), 94-102.