## Uji Efektivitas Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Jeruk Manis (Citrus
sinensis) dan Batang Serai (Cymbopogon citratus) Terhadap

## Bakteri Escherichia coli
Antibacterial Effectiveness Test of Essential Oil  of Sweet Orange Peel ( Citrus sinensis ) and Lemongrass Stem ( Cybopogon citratus )
Against Escherichia coli
Zulwanis 1 , , Periskila Dina Kali Kulla 2 , Diffa Aprilydia Saulie 2
1 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Syiah Kuala
2 Program Studi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Ubudiyah Indonesia *Koresponding Penulis: 1 zulwanis@usk.ac.id ; 2 periskila@uui.ac.id

## Abstrak
Diare  di  Indonesia  merupakan  suatu  penyakit  yang  umum  terjadi  dan  dapat  menjadi situasi Kejadian Luar Biasa (KLB) yang potensial sering disertai dengan kematian. Diare dapat  dipicu  oleh  berbagai  jenis  bakteri, salah  satunya adalah  bakteri  Escherichia coli, bakteri ini biasanya hidup disaluran pencernaan makhluk hidup. Metode pada penelitian ini  menggunakan  metode  difusi  cakram  Kirby  Bauer  dengan  beberapa  konsentrasi minyak  atsiri  kulit  jeruk  manis  dan  batang  serai  yaitu,  15%,  20%,  25%  dan  30%. Ceftiaxone  5%  sebagai  kontrol  positif  dan  n-Hexan  99%  sebagai  kontrol  negatif. Dari hasil penelitian menunjukkan bahwa, zona hambat pada minyak atsiri kulit jeruk manis pada konsentrasi 15%, 20%, 25% dan 30% memiliki masing-masing zona hambat dengan rata-rata 6,27 mm, 6,33 mm, 6,35 mm, 7,26 mm. Zona hambat pada minyak atsiri batang serai dengan konsentrasi yang sama memiliki masing-masing zona hambat dengan rata- rata 6,21 mm, 6,24 mm, 6,32 mm dan 7,2 mm. Sedangkan pada kombinasi minyak atsiri kulit jeruk manis dan batang serai tidak menghasilkan zona hambat (0 mm).
Kata kunci : Kulit jeruk manis, batang serai, aktivitas, Escherichia coli

## Abstract
Diarrhea in Indonesia is a common disease and can be a potential Extraordinary Event (KLB) situation that is often accompanied by death. Diarrhea can be triggered by various types of bacteria, one of which is the Escherichia coli bacteria, this bacteria usually lives in the digestive tract of living things. The method in this study uses the Kirby Bauer disc diffusion method with several concentrations of essential oils of sweet orange peel and lemongrass stems, namely, 15%, 20%, 25% and 30%. Ceftiaxone 5% as a positive control and  n-Hexan  99%  as  a  negative  control.  The  results  of  the  study  showed  that  the inhibition zones in sweet orange peel essential oil at concentrations of 15%, 20%, 25% and 30% had each inhibition zone with an average of 6.27 mm, 6.33 mm, 6.35 mm, 7.26 mm. The inhibition zones in lemongrass stem essential oil with the same concentration had each inhibition zone with an average of 6.21 mm, 6.24 mm, 6.32 mm and 7.2 mm. Meanwhile, the combination of essential oils, sweet orange peel and lemongrass stems does not produce an inhibition zone (0 mm).
Keywords : Sweet orange peel, lemongrass stalks, activity, Escherichia coli
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 10 No. 1 April 2024 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X

## PENDAHULUAN
Salah satu penyakit yang paling banyak ditemui di Indonesia adalah diare. Diare menyebabkan  sekitar  tiga  juta  kematian  pertahunnya  (Tivani  dkk.,  2021).  Diare  di Indonesia adalah suatu penyakit yang umum terjadi dan dapat menjadi situasi Kejadian Luar Biasa (KLB) yang potensial, seringkali disertai dengan kejadian kematian (Putri & Setiawati, 2021). Berdasarkan informasi dari Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), diare merupakan penyebab utama kematian pada anak-anak di bawah usia lima tahun di seluruh dunia.  Dampaknya  mencakup  842.000  kasus  kematian,  di  mana  361.000  di  antaranya terjadi pada anak balita (Putri & Setiawati, 2021).
Diare  dapat  dipicu  oleh  berbagai  jenis  bakteri,  salah  satunya  adalah  bakteri Escherichia coli. Escherichia coli termasuk dalam famili Enterobacteriaceae, yaitu bakteri yang biasanya hidup di saluran pencernaan makhluk hidup (Saputro & Purwanto., 2022). Penanganan  umum  untuk  diare  yang  disebabkan  oleh  bakteri  Escherichia  coli  adalah menggunakan obat antibiotik. Pemilihan atau penggunaan antibiotik untuk diare infeksi harus  dilakukan  secara  rasional.  Penggunaan  antibiotik  yang  tidak  tepat  (tidak  wajar) sesuai  petunjuk  pengobatan  akan  meningkatkan  berkembangnya  bakteri  yang  resisten terhadap antibiotik (Tivani dkk., 2021).
Pada  penelitian  Octaviani  dkk.,  (2023)  dilaporkan  bahwa  kulit  jeruk  manis mempunyai  kandungan  flavonoid,  fenolik  dan  alkaloid  yang  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  Salmonella  typhi,  Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli dan jamur Candida albicans dengan konsentrasi 50%; 25%; 12,5%;  6,25%;  3,125%;  dan  1,5625%.  Berdasarkan  penelitian  sebelumnya,  diketahui bahwa  tanaman  serai  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  terhadap  pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.  Pada konsentrasi 10% dapat menghambat pertumbuhan Escherichia coli dengan diameter daya hambat 7,25 mm, sedangkan pada Stahylococcus  aureus  memperlihatkan  daya  hambat  sebesar  8,33  mm  (Chusniasih  & Yuliana Rahayu, 2022).

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah beaker glass, batang pengaduk, erlenmayer , gelas ukur, tabung reaksi, rak tabung, pipet tetes, hot plate, spatula, corong pisah, autoklaf, incubator , cawan petri, kurs porselin, botol kaca gelap, batang bengkok, labu  ukur,  jarum  ose, magnetik  stirrer, neraca  analitik,  pipet  volume,  jangka  sorong, lampu  spiritus,  penggaris,  lemari  pengering,  oven,  cawan  porselen,  seperangkat  alat destilasi dan laminar air flow (LAF).
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah kulit jeruk manis, batang serai, aquadest, etanol 70%, HCl, H2SO4, asam asetat glasial, aluminium foil, kertas saring, kertas cakram, kertas perkamen, Mueller Hinton Agar (MHA), kertas minyak, pereaksi Dragendorff,  pereaksi  Mayer,  BaCl2,  pereaksi  Wagner,  Nutrient  Agar,  ceftriaxone,  N-
Heksana, NaCl 0,9%, Natrium sulfat, larutan Mc. Farland Standart 0,5 dan Escherichia coli .

## Pembuatan Simplisia Kulit Jeruk Manis dan Batang Serai
Terdapat  5  kg  kulit  jeruk  manis  yang  telah  dikumpulkan,  dibersihkan,  setelah dicuci  hingga  bersih  dan  5  kg  batang  serai  yang  telah  dikumpulkan,  dibersihkan  dan dipisahkan dari akar dan daunnya, setelah di cuci hingga bersih, kulit jeruk manis dan batang serai dirajang kecil kecil dan dikeringkan menggunakan oven dengan suhu tidak lebih dari 60°C.

## Pembuatan Minyak Atsiri Kulit Jeruk Manis dan Batang Serai
Kulit  jeruk manis  dan  batang  serai  segar masing-masing  dimasukkan  ke  dalam labu  destilasi  dan  disublimasi  selama  sekitar  4  jam.  Destilat  dibiarkan  diam  untuk memisahkan  fase  air  dan  minyak.  Setelah  itu,  fase  air  dan  minyak  dipisahkan menggunakan  corong  pemisah.  Minyak  atsiri  yang  diperoleh  ditambahkan  dengan 𝑁𝑎 2 𝑆𝑂 4  anhidrat,  kemudian  disaring  untuk  mendapatkan  minyak  esensial  yang  bebas dari air. Minyak atsiri kemudian disimpan dalam botol dan diukur.

## Standarisasi Simplisia Kulilt Jeruk Manis dan Batang Serai
Penelitian  ini  mengimplementasikan  standarisasi  simplisia  dengan  tujuan menetapkan kriteria mutu, keamanan, khasiat, dan standar bagi simplisia kulit jeruk manis dan  batang  serai.  Evaluasi  kualitas  simplisia  melibatkan  serangkaian  uji,  termasuk penentuan kadar air, pengukuran susut pengeringan, penentuan kadar abu total, analisis kadar sari larut air, penentuan kadar sari larut dalam etanol, serta pengukuran kadar abu yang tidak larut dalam asam.

## Skrining Fitokimia
Skrinig fitokimia pada penelitian ini adalah mengidentifikasi flavonoid, alkaloid, tanin, saponin dan steroid/triterpenoid.

## Pembuatan Media
Mueller Hinton Agar (MHA) sebagai media untuk pembenihan disiapkan dengan melarutkan 7,6 g MHA dalam 200 mL aquades (38 g/1000 mL) dan kemudian dipanaskan hingga  benar-benar  larut.  Media  ini  selanjutnya  disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu 121°C selama 15 menit.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  untuk  pengujian  bakteri  dibungkus  dengan  kertas minyak. Erlenmayer dan tabung reaksi di tutup menggunakan kapas yang dilapisis kassa steril. Alat-alat kaca disterilkan menggunakan oven pada suhu 160-170°C selama 2 jam. Pembuatan Suspensi Bakteri Escherichia coli
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 10 No. 1 April 2024 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Suspensi bakteri dibuat dengan mengambil 1 ose bakteri dan menambahkannya ke dalam tabung reaksi yang mengandung 10 ml larutan NaCl 0,9%, dengan biakan murni di  dalam  tabung  reaksi.  Campuran  tersebut  dikocok  hingga  homogen,  kemudian kekeruhan suspensi disesuaikan dengan standar McFarland (Amanda Rizki dkk., 2021). Selanjutnya, Bakteri akan diambil menggunakan cotton swab lalu ditanamkan media agar dan dibiarkan beberapa menit.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Menggunakan  catton  swab,  ambil  suspensi  bakteri  ke  dalam  cawan  Petri  steril yang  berisikan  media Mueller  Hinton  Agar .  Lakukan  sebaran  di  permukaan  media. Selanjutnya, rendam piring kertas selama dalam konsentrasi berbeda dari minyak atsiri kulit jeruk manis, batang serai, dan kombinasi keduanya (15%, 20%, 25%, 30%), kontrol posif dan negatif. Bagi cawan Petri menjadi beberapa sektor dan tempatkan kertas cakram yang sudah direndam dalam media MHA yang mengandung suspensi bakteri, dilakukan pengulangan masing-masing 3 kali. Lakukan inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Monitor pertumbuhan bakteri dengan mengukur area zona bening di sekitar kertas cakram menggunakan jangka sorong.

## Analisis Data
Data diuji normalitasnya menggunakan uji statistik; data dianggap berdistribusi normal  jika  nilai  p>  0,05.  Analisis  data  dilakukan  menggunakan  uji  Kruskal-Wallis. Apabila nilai Asymp. Sig > 0,05, maka hipotesis nol (H0) diterima, yang menunjukkan tidak adanya perbedaan signifikan antar kelompok. Sebaliknya, jika nilai Asymp. Sig < 0,05, maka hipotesis nol (H0) ditolak, menandakan adanya perbedaan signifikan rata-rata antar kelompok

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Standarisasi Simplisia  Kulit Jeruk Manis (Citrus sinensis)
Karakterisasi yang diakukan terhadap simplisia kulit jeruk meliputi analisis kadar air, kadar abu total, kadar abu tidak larut asam, kadar sari larut dalam etanol dan kadar sari larut dalam air. Hasil standarisasi simplisia tersebut dapat dilihat pada tabel 1 berikut
Tabel 1.
Hasil Standarisai Simplisia Kulit Jeruk Manis
No Penetapan Hasil (%) Syarat Menurut MMI (%) Keterangan 1.  Kadar Air 0,113% <10 % Memenuhi Syarat 2.  Kadar Abu Total 0,676 % <6 % Memenuhi Syarat
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 10 No. 1 April 2024 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
3.  Kadar Abu Tidak Larut Asam 1,13 % <1,5 % Memenuhi Syarat 4.  Kadar Sari Larut Etanol 46,33 % >12,5 % Memenuhi Syarat 5.  Kadar Sari Larut Air 50,66 % >18% Memenuhi Syarat
Penentuan kadar air simplisia kulit jeruk manis menunjukkan nilai 0,113%, yang sesuai  dengan  persyaratan  MMI  (Materi  Medika  Indonesia)  yaitu  di  bawah  10%. Penetapan kadar air ini penting untuk mencegah pertumbuhan jamur atau kapang yang dapat merusak simplisia, sehingga simplisia yang dihasilkan tidak mudah rusak dan dapat disimpan dalam jangka waktu yang lama (Amiliah dkk, 2021). Hasil penetapan kadar abu total adalah 0,675%, sesuai dengan standar MMI yaitu di bawah 6%, dan kadar abu tidak larut  asam  adalah  1,13%,  sesuai  dengan  syarat  MMI  yaitu  di  bawah  1,5%.  Penetapan kadar  abu  dan  abu  tidak  larut  asam  bertujuan  untuk  memberikan  gambaran  tentang kandungan  mineral  dari  proses  awal  hingga  terbentuknya  ekstrak,  serta  mengontrol jumlah pencemaran benda anorganik (Februyani & Khoiriah, 2023). Penetapan kadar sari larut  air  dan  larut  etanol  masing-masing  diperoleh  sebesar  50,66%  dan  46,33%. Penetapan  ini  bertujuan  untuk  memperkirakan  jumlah  kandungan  senyawa  aktif  polar yang  larut  dalam  air,  serta  senyawa  polar-nonpolar  yang  larut  dalam  etanol  (Amlia  & Hazar, 2022).
Menurut  penelitian  Auliasari  &  Siarumtias  (2020),  hasil  standarisasi  simplisia kulit jeruk nipis menunjukkan kadar air 2,00%, kadar abu total 4,34%, kadar abu tidak larut asam 0,30%, kadar sari larut etanol 89,00%, dan kadar sari larut air 67,30%.

## Hasil Standarisasi Simplisia  Batang Serai (Cybopogon citratus)
Karakterisasi yang diakukan terhadap simplisia kulit jeruk meliputi analisis kadar air, kadar abu total, kdar abu tidak larut asam, kadar sari larut dalam etanol dan kadar sari larut dalam air. Hasil standarisasi simplisia tersebut dapat dilihat pada tabel 1 berikut :
Tabel 2.

## Hasil Standarisai Simplisia Batang Serai
No Penetapan Hasil (%) Syarat Menurut MMI (%) Keterangan 1.  Kadar Air 0,02% <10 % Memenuhi Syarat 2.  Kadar Abu Total 0,82 % <6 % Memenuhi Syarat 3.  Kadar Abu Tidak Larut Asam  0,74 % <1,5 % Memenuhi Syarat 4.  Kadar Sari Larut Etanol 20,33 % >12,5 % Memenuhi Syarat 5.  Kadar Sari Larut Air 33 % >18% Memenuhi Syarat
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 10 No. 1 April 2024 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Penentuan  kadar  air  simplisia  kulit  jeruk  manis  sebesar  0,02%,  hal  ini  sesuai dengan  syarat  menurut  MMI  (Materi  Medika  Indonesia)  yaitu  dibawah  10%..  Hasil penetapan dari kadar abu total yaitu 0,82%, hal ini sesuai standar MMI <6% dan hasil penetapan kadar abu tidak larut asam yaitu 0,74%, hal ini sesuai dengan syarat menurut MMI  (Materi  Medika  Indonesia)  yaitu  <1,5%,  penetapan  kadar  sari  larut  air  dan larut etanol diperoleh masing-masing sebesar 20,33% dan 33%. Sedangkan penelitian Sapitri dkk, (2022) menunjukkan bahwa standarisasi simplisia serai wangi menghasilkan kadar air sebesar 5,05%, kadar abu total 12,29%, kadar abu tidak larut asam 0,84%, kadar sari larut etanol 33,62%, dan kadar sari larut air 23,74%.

## Hasil Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  mengidentifikasi  kelompok senyawa yang ada dalam ekstrak tumbuhan (Hasibuan dkk, 2020). Uji skrining fitokimia kulit  jeruk  manis  dan  batang  serai  meliputi  Identifikasi  Flavonoid,  Alkaloid, Steroid/Terpenoid, Saponin dan Tanin. Hasil skrining fitokimia dapat dilihat pada tabel 3 berikut ini:

## Tabel 3
Hasil Skrining Fitokimia Kulit Jeruk Manis dan Batang Serai No Uji Fitokimia Hasil Skrining Fitokimia Hasil Kulit Jeruk Hasil Batang Serai 1. Flavonoid Terbentuknya lapisan jingga/merah pada amil alcohol + + 2. Tanin Terbentknya warna hijau kehitaman + + 3.  Saponin Terbentuk busa yang stabil + + 4. Steroid/ Triterpenoid Terbentuk larutan bewarna ungu + + Mayer: tidak terbentuk endapan putih/kuning - - 5.  Alkaloid Wagner: tidak terdapat endapan coklat kehitaman - - Dragendroff: tidak terbentuk endapan kuning jingga - - Keterangan : (+) Positif
(-) Negatif
Hasil penelitian pada tabel 3 menunjukkan bahwa kulit jeruk manis dan batang serai  mengandung  senyawa  kimia  seperti  flavonoid,  tanin,  saponin,  dan steroid/triterpenoid.  Sedangkan  pada  pengujian  skrining  fitokimia  alkaloid  tidak menunjukkan adanya senyawa tersebut pada sampel kulit jeruk manis dan batang serai. Sejalan dengan penelitian Amliah dkk (2021), hasil skrining fitokimia pada serbuk kulit jeruk kalamansi juga menunjukkan keberadaan flavonoid, saponin, dan tanin, tetapi tidak mengandung alkaloid.

## Hasil Minyak Atsiri Kulit Jeruk Manis dan Batang Serai
Tabel 4 Hasil Minyak Atsiri Kulit Jeruk Manis Sampel Bobot Sampel (g) Pelarut (mL) Hasil Minyak Atsiri Rendemen (%) Kulit jeruk manis 9.000 18.000 7 mL 0,0778
Berdasarkan hasil ekstraksi, diperoleh 7 mL minyak atsiri dari kulit jeruk manis, dengan rendemen sebesar 0,0778%. Minyak atsiri tersebut berwarna kuning dan memiliki aroma khas jeruk. Sebaliknya, dalam penelitian yang dilakukan oleh Daryono dkk (2023), rendemen  minyak  atsiri  dari  kulit  jeruk  lemon  sebesar  4,88%,  berwarna  jernih kekuningan, dan memiliki aroma khas lemon. Perbedaan ini menunjukkan bahwa minyak atsiri  dari  kulit  jeruk  manis  memiliki  karakteristik  yang  berbeda  dibandingkan  dengan minyak atsiri dari kulit jeruk lemon.

## Tabel 5
Hasil Minyak Atsiri Batang Serai Sampel Bobot Sampel (g) Pelarut (mL) Hasil Minyak Atsiri Rendemen (%) Batang Serai 6.000 18.000 7 mL 0,116
Berdasarkan hasil ekstraksi, diperoleh 7 mL minyak atsiri dari batang serai, dengan rendemen  sebesar  0,116%.  Minyak  atsiri  tersebut  tidak  berwarna/bening  dan  memiliki aroma khas serai. Sementara itu, penelitian yang dilakukan oleh Qodri (2020) melaporkan bahwa rendemen minyak atsiri dari batang serai mencapai 0,72%, dengan karakteristik aroma yang khas dan aromatik.

## Hasil  Pengujian Aktivitas Antibakteri
Minyak atsiri kulit jeruk manis dan btaang serai digunakan sebagai larutan uji dengan konsentrasi 15%, 20%, 25% dan 30%. Kontrol negatif yang digunakan berupa n-Hexan 99% dan kontrol positif berupa Ceftriaxone 5%. Uji daya hambat minyak atsiri kulit jeruk manis dan batang serai serta kombinasi kedua sampel terhadap bakteri Escherichia coli dilakukan dengan menumbuhkan terlebih dahulu bakteri uji, bakteri ditumbuhkan pada
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 10 No. 1 April 2024 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
media Mueller-Hinton  Agar (MHA).  Aktivitas  antbakteri  pada  penelitian  ini  diuji menggunakan metode difusi cakram Kirby Bauer . Kertas cakram diletakkan pada media MHA  yang  telah  dioleskan  dengan  bakteri  uji,  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C. Zona  bening  yang  terdapat  disekitar  kertas  cakram menunjukkan  adanya  pertumbuhan bakteri.
Hasil uji aktivitas antibakteri minyak atsiri kulit jeruk manis dan batang serai serta kombinasi keduanya terhadap bakteri Escherichia coli setelah masa inkubasi selama 24 jam dapat dilihat pada tabel 6 berikut ini :
Tabel 6

## Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri
No Sampel Konsentrasi (%) Zona Hamat (mm) U1 U2 U3 Rata-Rata 1. Kulit Jeruk Manis 15 6.27 6.20 6.35 6.27 20 6.31 6.21 6.48 6.33 25 6.38 6.33 6.35 6.35 30 7.35 7.25 7.20 7.26 K+ 27.51 28.19  29.07 28.26 K- 0 0 0 0 2. Batang Serai 15 6.13 6.17 6.35 6.21 20 6.15 6.20 6.38 6.24 25 6.17 6.35 6.45 6.32 30 7.20 7.21 7.19 7.2 K+ 27.51 28.19  29.07 28.26 K- 0 0 0 0 3. Kulit Jeruk Manis 15 0 0 0 0 + Batang Serai 20 0 0 0 0 25 0 0 0 0 30 0 0 0 0 K+ 29.55 28.59  30.69 29.61 K- 0 0 0 0
Rata-rata zona hambat yang terbentuk pada setiap perlakuan konsentrasi minyak atsiri kulit jeruk manis adalah 6.27 mm untuk 15%, 6.33 mm untuk 20%, 6.35 mm untuk 25%,  dan  7.26  mm  untuk  30%.  Kontrol  positif  ceftriaxone  5%  memiliki  zona  hambat sebesar 28.26 mm, sementara kontrol negatif n-Hexan 99% tidak memiliki zona hambat (0 mm). Rata-rata zona hambat yang terbentuk pada setiap perlakuan konsentrasi minyak atsiri batang serai adalah 6.21 mm untuk 15%, 6.24 mm untuk 20%, 6.32 mm untuk 25%, dan 7.2 mm untuk 30%. Kontrol positif ceftriaxone 5% memiliki zona hambat sebesar 28.26 mm, sementara kontrol negatif n-Hexan 99% tidak memiliki zona hambat (0 mm). Sedangkan untuk konsentrasi minyak atsiri kombinasi kulit jeruk manis dan batang serai, tidak  terdapat  zona  hambat  yang  terbentuk  pada  semua  konsentrasi  (0  mm).  Kontrol
positif  ceftriaxone  5%  memiliki  zona  hambat  sebesar  29.61  mm,  sementara  kontrol negatif n-Hexan 99% tidak memiliki zona hambat (0 mm).
Minyak  atsiri  dari  kombinasi  kulit  jeruk  manis  dan  batang  serai  tidak menunjukkan zona hambat pada bakteri Escherichia coli. Bakteri gram negatif diketahui lebih  resisten  terhadap  minyak  atsiri  (Yulinawati  dkk,  2021).  Komponen  hidrofobik dalam minyak atsiri kesulitan merusak lapisan pelindung sel bakteri Gram negatif yang bersifat hidrofilik. Secara struktural, bakteri Gram negatif memiliki membran luar yang mengandung lipopolisakarida yang berfungsi menghalangi masuknya makromolekul dan senyawa hidrofobik ke dalam sel (Aran dkk, 2021).

## Analisis Data
Data  hasil  penelitian  tentang  aktivitas  antibakteri  kemudian  dianalisis menggunakan  uji  Kruskal  Wallis.  Hal  ini  dikarenakan  data  yang  diperoleh  pengujian normalitas  tidak  menunjukkan  data  yang  berdistribusi  normal,  sehingga  digunakan  uji Kurskal  Wallis  yang  memiliki  fungsi  dan  tujuan  yang  sama  dengan  uji  ANOVA.  Uji Kurska-Wallis setelah dilakukan mendapatkan nilai signifikan 0,091 yang menunjukkan bahwa p>0,05 H0 diterima. Sehingga dapat di artikan bahwa tidak ada perbedaan yang bermakna antara konsentrasi 15%, 20%, 25% dan 30% (Rozi dkk, 2022).

## KESIMPULAN
Minyak  atsiri  dari  kulit  jeruk  manis  ( Citrus  sinensis )  menunjukkan  aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan Escherichia coli . Pengujian menghasilkan zona hambat dengan diameter 6,27 mm pada konsentrasi 15%, 6,33 mm pada konsentrasi 20%, 6,35 mm pada konsentrasi 25%, dan 7,26 mm pada konsentrasi 30%. Minyak atsiri dari batang serai ( Cymbopogon citratus ) menghasilkan zona hambat dengan diameter 6,21 mm pada konsentrasi 15%, 6,24 mm pada konsentrasi 20%, 6,32 mm pada konsentrasi 25%, dan 7,2  mm  pada  konsentrasi  30%.  Minyak  atsiri  dari  kombinasi  kulit jeruk  manis  ( Citrus sinensis ) dan batang serai ( Cymbopogon citratus ) tidak menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap  pertumbuhan Escherichia  coli .  Diameter  zona  hambat  tertinggi  dari  minyak atsiri  kulit  jeruk  manis  ( Citrus  sinensis )  dan  batang  serai  ( Cymbopogon  citratus ) ditemukan pada. konsentrasi 30%, dengan masing-masing menghasilkan diameter 7,26 mm dan 6,32 mm.

## SARAN
Diperlukan  penelitian  lebih  lanjut  terkait  kombinasi  kedua  sampel  dengan konsentrasi >30% apakah dapat menghambat bakteri Escherichia coli , dan diperlukan uji formulasi sediaan untuk mengetahui apakah minyak atsiri kulit jeruk manis dan batang serai dapat dijadikan produk penyembuh diare.
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 10 No. 1 April 2024 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X

## DAFTAR PUSTAKA
Amanda  Rizki,  S.,  Madyawati  Latief,  Fitrianingsih,  &  Havizur  Rahman.(2021).  Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  N-Heksan,  Etil  Asetat,  Dan  Etanol  Daun  Durian ( Durio  zibethinus  Linn .)  Terhadap  Bakteri Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus epidermidis.JAMHESIC .442-457
Auliasari, N., & siarumtias, F.F. 2020. Formulasi dan Evaluasi Gel Antioksidan Fraksi Ekstrak Kulit Jeruk Nipis ( Citrus aurantiifolia (Christm.) Swingle). Jurnal Farmasi Indonesia. 17(02):407-414
Amiliah., Nurhamidah., & Handayani, D. 2021. Aktivitas Antibakteri Kulit Buah Jeruk Kalamansi  ( Citrofortunella  microcarpa ) Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli. Jurnal Pendidikan dan Ilmu Kimia . 5(1): 92 – 105
Amlia,  D.R.,  &  Hazar,  S.  2022.  Karakterisasi  Simplisia  Daun  Tin  ( Ficus  carica L.). Jurnal Riset Farmasi (JRF) . 2 (2): 119-124
Aran,  D.H.,  Mariani,  Y.,  &  Yusro,  F.  2021.  Minyak  Atsiri  Daun  Jeruk  Purut  ( Citrus hystrix )  dan  Biaktivitasnya  Terhadap  Bakteri Propionibacterium  acnes dan Pseudomonas  aeruginosa.  Bioma  :  Jurnal  Biologi  dan  Pembelajaran  Biologi . 6(1):1-1
Chusniasih, D., & Yuliana Rahayu, R. (2022). Formulasi Sediaan Sabun Cair Antiseptik Ekstrak Etanol Serai Dapur ( Cymbopogon citratus (DC.) Stapf) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . In Jurnal Farmasi Malahayati (Vol. 5, Issue 1). 48-63
Daryono, E.D., Anggorowati, D.A., Verdina, F.P., & Laili, V.N. 2023. Ekstraksi Minyak Atsiri  Kulit  Jeruk  Lemon  ( Citrus  limon (L.)  Burm.f.)  dengan Pretreatment Microwave dan Distilasi Air-Uap. Jurnal Teknik Kimia USU . 12(2):116-123
Februyani,  N.,  &  Khoiriyah,  M.  2023.  Penetapan  Parameter  Standarisasi  Non  Spesifik Ekstrak Batang Sereh ( Cymbopogon citrus ). Open Journal System . 2(3): 310-324
Octaviani, M., Masnun, L., Nasution, M. R., Susanti, E., Utami, R., & Furi, M. (2023). Aktivitas  Antibakteri  dan  Antijamur  Fraksi  Etil  Asetat  Kulit  Buah  Jeruk  Manis ( Citrus sinensis (L.) Osbeck). JFIOnline . 15(2), 126–133.
Putri,  I.,  &  Setiawati,  S.  (2021).  Pemberian  Madu  Pada  Klien  Diare  Dengan  Masalah Keperawatan Peningkatan Frekuensi BAB Di Desa Rajabasa Lama Lampung Timur. Jurnal Kreativitas Pengabdian Kepada Masyarakat (PKM), 4(5), 1196–1201.
Rozi, F., Irma., & Maulidiya, D. 2020. Analisis Perubahan Inflasi Beberapa Kota Besar di  Indonesia  Dengan  Menggunakan  Uji  Kruskal-Wallis. Multi  Proximity:  Jurnal Statistika Universitas Jambi . 1(2): 103-115
Saputro, I.R.C, & Purwanto, A. (2022). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji ( Psidium Guahava L.) Terhadap Escherichia Coli Dengan Metode Difusi Silinder. Jurnal Ilmiah Ilmu Pendidikan . 5(6). 1900-1905.
Sapitri,  A.,  Mayasari,  U.,  &  Marbun,  E.D.  2022.  PemanfaatanDaun  Serai  Wangi
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 10 No. 1 April 2024 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
( Cymbopogon  winterianus Jowit  ex  Bor)  Sebagai  Obat  Kumur  Untuk  Mencegah Karies Gigi dan Sariawan. Jurnal Bilogi Indonesia . 18(2): 127- 138
Tivani, I., Perwitasari, M., Farmasi, D., Harapan Bersama, P., Mataram No, J., & Tegal, K. (2021). Efektivitas Antibakteri Ekstrak Beberapa Kulit Buah Terhadap Bakteri Eschericia coli. Current Pharmaceutical Sciences . (Vol. 4, Issue 2). 339-346
Yulinawati,  R.,  Handayani,  W.,  Rahmi,  D.,  Aminah.,  &  Imawan,  C.  2021.  Komposisi Kimia,  Aktivitas  Antibakteri,  Dan  Potensi  Untuk  Kemasan  Aktif  Dari  Beberapa Minyak Atsiri Tanaman Rempah Indonesia. Jurnal Kimia dan Kemasan . 43(1). 12- 21