Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan
PEMBERIAN EKSTRAK DAUN KATUK (Sauropus androgynus (L.) Merr.)

## TERHADAP KADAR TNF-α PADA GIGI MARMUT YANG DIGERAKKAN SEPARATOR ORTODONTI
(THE EFFECT OF KATUK LEAF EXTRACT ON TNF-Α LEVELS IN CAVIA COBAYA TEETH THAT MOVED BY ORTHODONTIC SEPARATOR)
Hillda Herawati 1 , Rahmadaniah Khaerunnisa 2 , Euis Reni Yuslianti 2 , Fadia Naura Adila 1
1 Departemen Ortodonti, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jenderal Achmad Yani,
Cimahi, Indonesia
2 Departemen Biologi Oral dan Biomedik, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Indonesia
Email korespondensi: ery.unjani@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Masyarakat semakin paham mengenai pentingnya perawatan ortodonti. Ortodonti cekat terdiri dari  komponen  aktif  dan  pasif.  Tekanan dari  pemakaian  komponen  aktif  dapat  menginduksi sitokin  proinflamasi,  salah  satunya  TNF-α,  sehingga  menyebabkan  nyeri.  Daun  katuk ( Sauropus androgynus (L.) Merr. )  mengandung flavonoid, sehingga dapat menurunkan sitokin proinflamasi.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  daun  katuk terhadap kadar TNF-α. Penelitian adalah eksperimental menggunakan 46 ekor marmut betina dengan  kelompok  kontrol  dan  kelompok  yang  diberi  dosis  daun  katuk  78,3  mg/kgBB. Pengamatan yang dilakukan pada pengujian ini yaitu TNF-α yang diambil dari sampel darah pada jantung marmut pada hari ke-3, hari ke-7 dan hari ke-14. Sampel marmut diaplikasikan separator  ortodonti  pada  gigi  insisif  kanan  dan  diberi  ekstrak  etanol  daun  katuk  sesuai kelompok,  setelah  hari  ke-14  dilakukan  analisis  TNF-α.  Data  dianalisis  dengan  uji  T- independen  (p>0,05).  Hasil  penelitian  menunjukkan  kelompok  kontrol  rerata  kadar  TNF-α tertinggi pada hari ke-3 sebesar 630,71 dan rerata terendah kadar TNF-α pada hari ke-7 sebesar 275,86. Kelompok perlakuan, rerata kadar TNF-α tertinggi pada hari ke-3 sebesar 595,26 dan rerata terendah kadar TNF-α pada hari ke-14 sebesar 209,99. Tidak terdapat perbedaan yang bermakna pengaruh daun katuk terhadap kadar TNF-α pada hari ke-3 (p=0,822), hari ke-7 (p= 0,185) dan hari ke-14 (p=0,062). Kesimpulan yang didapat dalam penelitian ini adalah ekstrak daun  katuk  berpengaruh  terhadap  peningkatan  rerata  kadar  TNF-α  namun  tidak  bermakna secara statistik.
Kata kunci: daun katuk, flavonoid, perawatan ortodonti, TNF-α
Herawati, H: Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan (2023); 6(3): 307-316
DOI:
DOI
ARTIKEL PENELITIAN 10.35990/mk.v6n3.p307-316

## ABSTRACT
People are increasingly aware to the importance of orthodontic treatment. Fixed orthodontic consist  of  active  and  passive  components.  Pressure  from  the  use  of  active  components  can induce  proinflammatory  cytokines,  one  of  them  is  TNF-α,  will  causing  pain.  Katuk  leaves (Sauropus  androgynus  (L.)  Merr.)  contain  flavonoids  that  can  reduce  proinflammatory cytokines. The purpose of this study was to determine the effect of ethanol extract of katuk leaves on  TNF-α  levels.  This  study  is  an  experimental  study  using  46  female  Cavia  cobaya  with  a control group and a group that was given a dose of 78.3 mg/kg BW of ethanol extract of katuk leaves. Observations made in this test were TNF-α taken from blood samples in Cavia cobaya hearts on day 3, day 7 and day 14 and analyzed by independent T-test (p<0.05). Samples of Cavia cobaya were applied with orthodontic separator on the right incisor and given ethanol extract  of  katuk  leaves  according  to  the  group,  after  the  14th  day,  we  started  the  TNF-α analysis. The results showed in the control group that the highest average TNF-α level on day 3 was 630.71 and the lowest average TNF-α level on day 7 was 275.86. Meanwhile, in the the group with ethanol extract of katuk leaves, the highest average TNF-α level on day 3 was 595.26 and the lowest average TNF-α level on day 14 was 209.99. Statistically, TNF-α levels on day 3 (p=0.822), day 7 (p= 0.185) and day 14 (p=0.062) so there was no significant difference. It was concluded that ethanol extract of katuk leaves has effectiveness on TNF-α levels but not statistically significant.
Keywords: katuk leaves, flavonoid, orthodontic treatment, TNF-α

## PENDAHULUAN
Perawatan ortodonti berkembang sejalan dengan tuntutan masyarakat bahwa gigi  tidak  hanya  untuk  mengunyah  tetapi juga  memiliki  nilai  estetika  yang  penting. Perawatan ortodonti bertujuan untuk mengoreksi  maloklusi.  Menurut World Health  Organization (WHO),  maloklusi adalah gangguan fungsional yang berpengaruh  bagi  kesehatan  fisik  dan emosional  penderita  sehingga memerlukan perawatan.    Prevalensi  maloklusi  di Indonesia sekitar 80% dari jumlah populasi, hal ini masih tergolong tinggi. 1–3
Perawatan  ortodonti  saat  ini  telah banyak  dilakukan  oleh  masyarakat,  baik menggunakan  ortodonti  cekat  maupun ortodonti lepasan. Ortodonti lepasan
memiliki  beberapa  komponen,  yaitu  plat akrilik  dan  klamer,  sedangkan  ortodonti cekat  memiliki  dua  komponen,  yaitu komponen  aktif  untuk  menggerakkan  gigi dan  komponen  pasif  untuk  membentuk pelekatan serta menahan komponen aktif. 4– 6
Gerakan gigi akibat komponen ortodonti  didapat  dari  gaya  mekanis  pada gigi sehingga terbentuk daerah tarikan dan tekanan  pada  ligamen  periodontal  yang menyebabkan terjadinya remodeling tulang akibat  proses  resorpsi  dan  aposisi  tulang sehingga  terjadi  perubahan  posisi  gigi. Penggunaan  komponen  ortodonti  akan menginduksi  respons  inflamasi,  sehingga akan  terjadi  perubahan  vaskuler  yang diikuti  oleh  sintesis growth  factor ,  sitokin
dan  prostaglandin.  Mediator  tersebut  akan mengaktivasi  remodeling  tulang  alveolar, melalui resorpsi dan aposisi tulang. Selama memakai  komponen  ortodonti,  daerah ligamen  periodontal  yang  mengalami regangan  (tarikan),  terdapat  penurunan proliferasi  fibroblas,  osteoblas,  dan  sel prekursor  sementoblas,  sedangkan  pada daerah  tekanan  (tertekan)  di  permukaan tulang  alveolar,  terdapat  peningkatan proliferasi osteoklas. TNF-α berperan dalam menginduksi  osteoklastogenesis. TNF-α diproduksi  makrofag  yang  berfungsi  juga untuk  menginduksi  pembentukan  sitokin interleukin  (IL)  yaitu  IL-1  dan  IL-6  pada proses  inflamasi  pergerakan  gigi  dan berpengaruh  dalam  proses  resorpsi    tulang pada pergerakan gigi. 7–9
Komponen  ortodonti  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  separator, kegunaannya  yaitu  untuk  melonggarkan kontak  interproksimal  agar  tercipta  ruang diantara  dua  gigi  yang  berdekatan, umumnya untuk pemasangan band . Separator jenis elastic module paling umum digunakan. 6,10
Perubahan  pada  gigi  dan  jaringan pendukungnya  dapat  terjadi  akibat  dari tekanan  komponen  ortodonti.  Pada  fase inisial dalam biomekanika pergerakan gigi, terjadi  banyak  reaksi,  seperti  migrasi  sel leukosit  dari  pembuluh  darah  kapiler ligamen  periodontal  dan  juga  perubahan vaskuler.  Ketika  komponen  ortodonti
memberikan tekanan mekanis, hal tersebut akan  menginduksi  faktor  pertumbuhan, pelepasan prostaglandin dan sitokin seperti IL-6, TNF-α dan IL-1 . 9
Daun  katuk mengandung  banyak provitamin  A  dalam  bentuk  β-karotin, vitamin  C,  protein,  dan  mineral.  Daun  ini juga  mengandung  fitokimia  yang  lebih tinggi  dibanding  sayuran  lain,  diantaranya senyawa  polifenol,  yang  terbagi  lagi menjadi  2  golongan  yaitu  flavonoid  dan tanin.  Selain  itu,  juga  terdapat  senyawa karotenoid,  terpenoid,  alkaloid,  sterol, vitamin  C,  dan  tanin  pada  katuk.  Semua senyawa tersebut memiliki manfaat spektrum luas seperti antioksidan, antiinflamasi, antiulser, antilipid,
antikarsinogen,
antidiabetes,
imunoregulasi, dan antidiare. 11,12–14
Manfaat  antioksidan  dari  daun  katuk, sebagian besar berasal dari adanya senyawa fitokimia golongan polifenol yaitu flavonoid. Bagi manusia sendiri, flavonoid berkhasiat farmakologi dan aktivitas biologis, serta bersifat melindungi kesehatan manusia dan juga dapat mencegah  kanker  karena  antioksidannya yang  begitu  baik.  Flavonoid  adalah golongan  fenol  alam  yang  besar  dan terdapat  pada  sebagian  besar  tumbuhan tingkat tinggi atau berbiji tertutup ( Angiospermae ). 11,15,16
BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian kelompok  riset  eksperimental  dengan rancangan post  test  control  group  design.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  apakah  terdapat  pengaruh sebelum  dan  sesudah  pemberian  ekstrak daun katuk terhadap kadar TNF-α pada gigi marmut yang digerakkan separator ortodonti. Penelitian ini telah mendapatkan etik dari Komisi Etik Penelitian Kedokteran Fakultas Kedokteran Universitas Padjajaran dengan surat etik nomor 964/UN6.KEP/EC/2021.
Penelitian dilakukan  pada  bulan  September  2021 sampai  Januari  2022  di  Laboratorium Biokimia  Fakultas  Kedokteran  Jenderal Achmad Yani,  Laboratorium Hewan Fakultas Kedokteran Universitas Padjajaran,  dan  Laboratorium  Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas
Brawijaya.
Sampel dan Objek Penelitian
Marmut  ( Cavia  cobaya) diperoleh  dari peternakan  Cililin,  dan  sebelumnya  telah melewati  masa  adaptasi  selama  7  hari  di Laboratorium  Hewan  Fakultas  Kedokteran Universitas Padjajaran. Kriteria inklusi  dari subjek penelitian ini adalah marmut betina, gerak  aktif,  merespons  rangsangan  dengan baik, usia 2 - 4 bulan, berat badan 350 – 450 gram,  dan  berasal  dari  satu  tempat pembiakan  serta  diberi  pakan  yang  sama. Kriteria  Eksklusi  adalah  kondisi  marmut sakit, memiliki diastema pada gigi
insisifnya, separator ortodonti lepas sebelum  masa  pengamatan  dan  marmut mati saat proses penelitian. Objek penelitian ini adalah ekstrak daun katuk, yang didapat dari Kebun Obat Fakultas Farmasi Universitas Jenderal Achmad Yani. Jumlah sampel  terdiri  atas  2  kelompok,  yaitu kelompok  1  adalah  kelompok  kontrol negatif, hanya diaplikasikan karet separator dan kelompok 2 adalah kelompok perlakuan  yang  diberi  ekstrak  daun  katuk 78,3  mg/kgBB  dan  diaplikasikan  karet separator. Jumlah minimal sampel penelitian ini dihitung dengan menggunakan  rumus  Federer  dan  di dapatkan  23  ekor  marmut  per  kelompok, yaitu 3 ekor marmut pada hari ke-3, 3 ekor marmut pada hari ke-7, dan 17 ekor marmut pada hari ke-14. Jumlah keseluruhan adalah 46 ekor sampel marmut.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  antara  lain  alat  untuk  perlakuan,  alat pemeliharaan, alat pembuatan ekstrak, alat pengambilan  sampel  dan  alat  pemeriksaan kadar TNF-α .  Alat  untuk  perlakuan,  yaitu scalpel dan tang separator. Alat pemeliharaan,  yaitu  kandang  marmut dengan  alas  bak  dari  jalinan  kawat, timbangan  digital  untuk  menimbang  berat badan  marmut,  dan  tempat  untuk  makan minum  marmut.  Alat  pembuat  ekstrak, yaitu  tabung  erlenmeyer,  oven,  pH  meter, neraca  analitik,  maserator, dan rotary
evaporator. Alat  pengambilan  sampel, yaitu  spuit  5  cc, vacuum  blood  tube, dan microtube 1,5  ml. Alat  pemeriksaan  kadar TNF-α, yaitu  TNF  ELISA kit  , microplate reader dengan  filter  450  ±  10nm,  Pipet presisi  tunggal  atau multiple-channel dan ujung  pipet  dengan  ujung disposable, Eppendorf tubes, air distalasi , 64 sumuran, dan plate  sealer. Bahan-bahan  yang digunakan  pada  penelitian  ini  antara  lain, bahan untuk pembuatan ekstrak daun katuk, bahan pewarnaan sediaan dan bahan untuk perlakuan. Bahan pembuatan ekstrak katuk, yaitu katuk basah, pelarut etanol dan kertas saring.  Bahan  untuk  perlakuan,  yaitu separator  ortodonti  merek  Forestadent. Bahan  untuk  pemeriksaan  kadar TNF-α, yaitu larutan kerja reagen deteksi A, reagen deteksi  B,  larutan  substrat tetramethyl benzidine, wash buffer, dan stop solution .

## Prosedur
Tahap pertama merupakan tahap membuat sediaan dengan mengekstraksi zat aktif  pada  daun  katuk.  Daun  katuk  basah sebanyak  1  kg  diberi  alas  kapas  dan dikeringkan dengan memasukkan ke dalam oven  bersuhu  40ºC  dalam  24  jam. Kemudian,  simplisia  yang  sudah  kering dihaluskan  dengan  blender  dan  disaring menggunakan  mesh  30.  Simplisia  kering daun  katuk  ditimbang  dengan  hasil  250  g, lalu  dimasukkan  pada  maserator  dan ditambahkan  pelarut  etanol  96%  ke  dalam
ampas pada maserator berulang kali hingga pelarut  etanol  yang  keluar  maserator  tidak berwarna  lagi,  kurang  lebih  5-6  kali rendaman.  Jika  sudah,  diuapkan  dengan penguap  berputar (rotary  evaporator) dan dipekatkan dengan tangas air hingga pekat atau  hingga  tidak  ada  lagi  pelarut  etanol yang menetes pada rotary evaporator.
Selanjutnya, persiapan marmut dilakukan  dengan  menempatkan  marmut pada  kendang  selama  7  hari.  Setelah diadaptasi, karet separator ortodonti dipasangkan pada semua kelompok marmut dengan menggunakan tang separator di satu gigi insisif pada rahang bawah marmut yang sebelumnya sudah dianestesi intraperitoneal  di  2/3  posterior  abdomen kanan  dengan  ketamin  20  mg/kgBB. Pemasangan  karet  separator  dilakukan selama  14  hari,  dengan  pergantian  karet separator pada hari ke-8. Setelah itu, ekstrak daun  katuk  yang  sebelumnya  sudah diencerkan dengan larutan CMC, diberikan secara  oral  pada  1  kelompok  perlakuan dengan dosis 78,3 mg/kgBB.
Masa aktivasi karet separator sampai 14 hari,  setelah  itu,  eutanasia  pada  penelitian ini,  marmut  diberi  anestesi  overdosis dengan ketamin sebanyak 30 mg/kgBB.
Sampel pada penelitian ini menggunakan  darah  yang  diambil  dari jantung  marmut  yang  telah  dieuthanasia. Pengambilan  sampel  dilakukan  pada  hari ke-3,  ke-7  dan  ke-14  setelah  perlakuan.
Darah  diambil  sebanyak  2  ml  dan ditampung  dalam vacuum  blood  tube .
Setelah  itu,  disentrifugasi  pada  4000  rpm selama 15 menit untuk memperoleh serum dan  tempatkan  sampel  pada microtube kemudian disimpan pada suhu -20 ° C.
Sampel  darah  diukur  dengan  metode ELISA  ( Enzyme-linked  Immunosorbent Assay) , menggunakan TNF ELISA Kit .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis TNF-α pada Kelompok Perlakuan dan Kontrol
Berikut analisis dari rerata kadar TNF-α hari  ke-3,  hari  ke-7,  dan  hari  ke-14  pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan yang diberi ekstrak daun katuk dengan dosis 78,3 mg/kgBB pada Tabel 1.
Tabel 1 Rerata kadar TNF-α Hari Kelompok Kontrol Kelompok Perlakuan rerata ± SD rerata ± SD 3 630,71 ± 231,32 595,26 ± 109.25 7 275,86 ± 180,43 536,32± 217.31 14 305,53± 161,01 209,99 ± 125.31
Berdasarkan dari Tabel 1, menunjukkan rerata kadar TNF-α tertinggi pada kelompok kontrol adalah pada hari ke-3, yaitu 630,71 dan terendah adalah hari ke-7, yaitu 275,86 . Sedangkan pada kelompok perlakuan yang diberi ekstrak daun katuk dengan dosis 78,3 mg/kgBB,  rerata  kadar TNF-α tertinggi adalah  pada  hari  ke-3,  yaitu  595,26  dan terendah  adalah  pada  hari  ke-14,  yaitu 209,99.
Uji normalitas menggunakan uji Saphiro  Wilk  dari  data  semua  kelompok penelitian ini, menunjukkan nilai
probabilitas lebih besar dari 0,05 (p>0,05). Jadi,  uji  statistik  yang  dipakai  pada penelitian ini adalah uji T-Test independent, karena data berdistribusi normal dan sampel yang digunakan tidak berpasangan.

## Pengaruh Ekstrak Daun Katuk terhadap
TNF-α pada Gigi Marmut
Berikut Tabel 2 menunjukkan pengaruh ekstrak daun katuk dengan dosis 78,3 mg/kgBB terhadap kadar TNF-α pada gigi marmut.
Tabel 2 Pengaruh ekstrak daun katuk terhadap kadar TNF-α Kelompok kontrol dan perlakuan
Hari Rarata Nilai P Kontrol Perlakuan Selisih 3 630,71 595,26 35,45 0,822 7 275,86 536,32 -260,46 0,185 14 305,53 209,99 95,54 0,062
Berdasarkan  Tabel  2,  nilai  p  pada  hari ke-3,  hari  ke-7  dan  hari  ke-14  lebih  dari 0,05.  Hal  ini  dapat  diartikan  bahwa  tidak terdapat  perbedaan  yang  bermakna  Hasil hipotesis dari penelitian ini adalah H0, yaitu ekstrak  daun  katuk  dengan  dosis  78,3 mg/kgBB  berpengaruh  terhadap  kadar TNF-α pada  gigi  marmut  yang  digerakkan separator  ortodonti,  namun  secara  statistik tidak terdapat perbedaan yang bermakna.
TNF-α merupakan  salah  satu  sitokin yang  berperan  penting  saat  terjadinya inflamasi, hilangnya pelekatan jaringan ikat dan  resorpsi  tulang  alveolar,  yang  sekresi utamanya  berasal  dari  makrofag.  Namun selain  diproduksi  oleh  makrofag, TNF-α diaktivasi  oleh  sel  mast,  limfosit  T,  dan sel Natural Killer (NK). 17–19
Penurunan rerata kadar TNF-α terjadi karena  sudah  berakhirnya  fase  inflamasi dan  mulai  masuk  ke  fase  proliferasi.  Pada fase  inflamasi  hari  ke-5  masih  terdapat kadar TNF-α namun  jumlahnya  menurun.
Penelitian  Enggardipta  dkk.    tahun  2016, melalui pembuatan preparat histologis dari rahang  gigi  tikus,  menyebutkan  makrofag dan limfosit mulai meningkat pada hari ke-
3 dan terbanyak pada hari ke-5. Kemudian, fase inflamasi berakhir dan memasuki fase proliferasi, sehingga makrofag dan limfosit mengalami  penurunan  pada  hari  ke-7  dan hari ke-14. 20
Hasil  dari  penelitian  ini  adalah  hasil analisis  kadar TNF-α yang  didapat  dari sampel  darah  jantung  marmut,  sejalan dengan penelitian sebelumnya, yaitu penelitian  Yudandi  S  tahun  2017,  dengan pembuatan  preparat  histologi  dari  organ duodenum,  ekstrak  etanol  daun  katuk (Sauropus  androgynus (L.)  Merr.)  dengan dosis 48,6 mg/200g BB mampu menurunkan  secara  bermakna  ekspresi TNF-α pada tikus putih. Menurut penelitian Tjahjani dkk. tahun 2016, dengan pembuatan  kultur  makrofag  dari  cairan peritoneal,  pemberian  ekstrak  etanol  daun ungu  yang  memiliki  kandungan  utama flavonoid,  pada  dosis  300  mg/kgBB  dapat menurunkan  kadar TNF-α dan  NO  pada mencit  Swiss  yang  diinfeksi S.  aureus secara bermakna. Rerata kadar TNF-α pada hari  ke-3,  hari  ke-7  dan  hari  ke-14 kelompok  perlakuan  yang  diberi  ekstrak daun  katuk  dengan  dosis  78,3  mg/kgBB
pada penelitian ini lebih rendah dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol. Namun,  secara  statistik  perbedaan  kadar TNF-α pada  kelompok  kontrol  dan kelompok perlakuan tidak bermakna.
Herawati  tahun  2021  melaporkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  katuk  dengan dosis 39,15 mg/kgBB, 78,3 mg/kgBB, dan 156,5  mg/kgBB  terbukti  efektif  terhadap penurunan osteoklas tulang alveolar marmut.  Osteoblas  dan  osteoklas  berperan dalam  proses  remodeling  gigi  dalam pergerakan  gigi  ortodonti  dan TNF-α sebagai sitokin yang dikeluarkan pada fase inflamasi  berperan  mengatur  pembentukan osteoklas.  Daun  katuk  dengan  kandungan flavonoid  bersifat  antiinflamasi  apabila diberikan  pada  tikus  yang  mengalami proses  inflamasi  karena  pergerakan  gigi. Hal  tersebut akan berdampak  pada berkurangnya  tanda  inflamasi  diantaranya nyeri akibat pemakaian komponen ortodonti. 4,9,21
Daun  katuk  sendiri  mengandung kadar  flavonoid  yang  tinggi.  Flavonoid mengikat  ion-ion  logam, menangkap radikal  bebas, anti-lipid  peroxidative dan menyumbangkan  ion  hidrogen  dalam perannya  sebagai  antioksidan.  Flavonoid dibagi menjadi 9 kelompok, yaitu isoflavon, aurone,  biflavonil,  glikoflavon,  flavanol, antosianin,  proathosianin,  flavon,  serta khalkon.  Flavonoid  dapat  menangkap radikal bebas setelah diberi atom hidrogen
oleh  gugus  hidroksil.  Radikal  yang  stabil menyebabkan ROS menurun, yang berbanding  lurus  dengan  aktivitas  stres oksidatif,  sehingga   jalur  aktivasi  NF-kB terhambat . Penghambatan  jalur  NF-kB menyebabkan  penurunan  faktor  transkripsi ( transcription factor ) untuk sitokin proinflamasi  termasuk  TNF-Alpha. Jika sitokin  proinflamasi  tidak  terbentuk,  maka akan  berhubungan  dengan  menurunnya aktivitas sel inflamasi dan meredakan nyeri akibat pemasangan separator ortodonti. 17,22,23

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  katuk dengan  dosis  78,3  mg/kgBB  berpengaruh terhadap  kadar TNF-α pada  gigi  marmut yang  digerakkan  separator  ortodonti, namun  secara  statistik  tidak  terdapat perbedaan yang bermakna.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Kami  menyatakan  tidak  ada  konflik kepentingan pada penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kami sampaikan  kepada  para  profesional  yang telah membantu penelitian dan penyusunan artikel  ini  yaitu  asisten  laboratorium Biokimia  Fakultas  Kedokteran  Unjani, laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran  Unpad,  dan  Dr  Satuman
Fakultas Kedokteran Universitas
Brawijaya.
DAFTAR PUSTAKA
1.   Ardhana  W.  Identifikasi  perawatan ortodontik spesialistik dan umum. Maj
Ked Gi Ind. 2013;20(1):1–8.
2.   Meiandari  S,  Taadi,  Widayati  A.  The relation between pain after using fixed orthodontic  appliance  and  follow-up compliance  of  patients  in  Kusuma Dental  Care  Clinic.  J  Kesehat  Gigi. 2020;7(1):35–9.
3.   Ratya  Utari  T,  Kurnia  Putri  M.
Orthodontic treatment needs in adolescents  aged  13-15  years  using orthodontic treatment needs indicators. J  Indones  Dent  Assoc.  2019;2(2):49– 55.
4.    Herawati H, Syarifah S. Effectiveness
of  katuk  leaves  ethanol  extract  to amount of osteoblast and osteoclast  in orthodontic  treatment.  Journal  of
Health and Dental Sciences.
2021;1(1):39-49.
5.   Yustisia  P,  Utama  MD,  Achmad  H.
The  influence  of  fixed  orthodontic treatment on tooth discoloration among dental students in makassar , indonesia. 2021;25(4):10720–8.
6.   Sinaga BS. Perbedaan jarak pergerakan gigi  ortodonti  terhadap  waktu  pada guinea pig. Medan:
Fakultas Kedokteran Gigi. Universitas Sumatera
Utara. 2018.
7.   Erwansyah  E,  Fajriani,  Ferry  AN. Persepsi rasa sakit terhadap perawatan ortodontik. Makassar Dent J.
2020;9(3):177–80.
8.   Tjahjani  NP,  Kristina  TN,  Lestari  ES. Efektivitas  ekstrak  etanol  daun  ungu (Gratophyllum  pictum  (L.))  untuk menurunkan  kadar  TNF-α  dan  NO. Pharmaciana. 2016;6(2):191–200.
9.   Amvitasari  R.  Efek  pemberian  kafein terhadap  jumlah  sel  osteoklas  pada tulang  alveolar  gigi  marmut  (cavia cobaya)  yang  diinduksi  gaya  mekanis ortodonti. Medan: Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara. 2016.
10.  Tarvade  Daokar  S.  Separators  in orthodontics: a review. Orthod J Nepal. 2016;6(1):37–40.
11.  Santoso  U.  Katuk,  tumbuhan  multi khasiat.  Badan  Penerbit  Fak  Pertan Univ Bengkulu. 2014 Nov 7;9–63.
12.  Prakoso  YA,  Puspitasari,  Rini  CS,
Aliviameita A, Salasia SIO, Kurniasih, et al. The Role of Sauropus androgynus (L.)  Merr.  Leaf  Powder  in  the  Broiler Chickens  Fed  a  Diet  Naturally Contaminated with Aflatoxin. J Toxicol. 2018.
13.  Desnita  R,  Luliana  S,  Anastasia  DS. Antiinflammatory activity patch ethanol extract of leaf katuk (Sauropus androgynus L. Merr). J Ilmu
Kefarmasian Indones. 2018;16(1):1.
14.  Proklamasiningsih  E,  Budisantoso  I,
Maula I. Pertumbuhan dan kandungan polifenol  tanaman  katuk  (Sauropus androgynus  (L.)  Merr)  pada  media tanam dengan pemberian asam humat. Al-Kauniyah  J  Biol.  2019;12(1):96– 102.
15.  Cikita  I,  Hasibuan  IH,  Hasibuan  R.
Pemanfaatan  flavonoid  ekstrak  daun katuk (Sauropus androgynus (L) merr) sebagai  antioksidan  pada  minyak kelapa. J Tek Kim USU. 2016;5(1):46.
16.  Djamil  R,  Zaidan  S.  Isolasi  senyawa flavonoid  dari  ekstrak  metanol  daun katuk  (Sauropus  androgynus  (L.)
Merr), euphorbiaceae. J Ilmu Kefarmasian Indones. 2017;14(1):58.
17.  Fatimatuzzahro  N,  Ermawati  T,
Prasetya RC, Destianingrum PQ. Efek pemberian gel ekstrak biji kopi robusta (Coffea  canephora)  terhadap  jumlah osteoblas  dan  osteoklas  pada  tulang alveolar  tikus  periodontitis  The  effect of  robusta  coffee  bean  (Coffea canephora) extract gel on the number of osteoblasts and ost. Padjadjaran J Dent Res Students. 2020 Oct 31;4(2):128.
18.  Rachmawati  N.  Pengaruh  pemberian salep  ekstrak  kulit  apel  manalagi (Malus sylvetris mill) terhadap pertumbuhan  epidermis  dan  ekspresi tumor  necrosis  factor  alpha  (tnf-α) sebagai  penyembuh  luka  insisi  pada hewan  coba  tikus  Rattus  novergicus.
Malang: Fakultas Kedokteran. Malang: Fakultas Kedokteran. Universitas
Brawijaya. 2017;
19.  Andari  K,  Normasari  R,  Hasan  M.
Effect of lemuru (Sardinella longiceps) fish oil on tumor necrosis factor (tnf- α )  expression  of  cartilage  that  induced by complete Freud’s adjuvant. e-Jurnal Pustaka Kesehat. 2017;5(1):1–5. 20.Enggardipta RA, Haniastuti T,
Handajani  J.  Efek  eugenol  terhadap jumlah  sel  inflamasi  pada  pulpa  gigi molar tikus Sprague Dawley. Maj Ked Gi Ind. 2016;2(2):71.
21. Fakhirah ND. Ekspresi osteoprotegerin pada daerah tarikan tulang alveolar gigi tikus wistar jantan yang diinduksi gaya mekanik  ortodonti  dengan  aplikasi natrium fluorida (naf). Jember:
Fakultas Kedokteran Gigi. Universitas Jember. 2018.
22.  Enola  J,  Prasetyawan  S,  Vidiastuti  D.
Profil  protein  lambung  tikus  model ulkus  peptikum  hasil  induksi  aspirin dengan  terapi  ekstrak  daun  katuk (S auropus  androgynus) .  ARSHI  Vet
Lett. 2018;2(1):9–10.
23.  Suryarahman  S.  Genistein  topikal menurunkan  ekspresi  tnf-α  (tumor necrosis factor alpha) pada kornea mata tikus  (Rattus  novergicus  strain  wistar) model  inflamasi.  Malang:  Fakultas Kedokteran. Universitas Muhammadiyah. 2016.