## FORMULASI EKTSTRAK POLIHERBAL KOMBINASI EKSTRAK TULANG CEKER AYAM TERHADAP BAKTERI STAPILOCOCUS AUREUS
Submitted : 5 September 2019 Edited : 20 Desember 2019 Accepted : 30 Desember 2019
Joko Santoso, Heru Nurcahyo
DIII Farmasi Politeknik Harapan Bersama Email : jk23sm@gmail.com

## ABSTRACT
The  development  of  traditional  plants  as  herbal  medicines  continues  to  be  increased, especially  in  local  use.  Aloe  vera  (Aloe  vera),  bay  leaf  (Eugenia  polyantha)  and  Turmeric Rhizome  (Curcuma  domestica  Val)  have compounds  that  function  as  antibacterial.  Chicken claw bones play a role in accelerating the growth of skin cells, but it also has the potential as an antibacterial. This combination is expected to increase the work of medicinal ingredients in killing bacteria. The work method begins with the selection of herbal ingredients, dry sorting, wet sorting and slicing. Drying the sample using an oven at a temperature of 40 which is then pollinated and sieved with 100 mesh. Before macerated with 70% ethanol solvent 1:10 ratio, the sample  was  tested  microscopically.  The  extract  was  made  of  three  formulas  and  tested  for antibacterial activity in Stapilococus aureus bacteria using the well method. The antibacterial activity  in  formula  1  was  7.1mm,  Formula  2  was  8.7mm  and  formula  3  was  10.2mm. Experiments were also carried out on extracts without collagen extracts with better inhibitory results compared to polyherbal extract combinations of collagen extracts. This research proves that  polyherbal  extract  from  chicken  claw collagen  extract  has  the  ability  of  antibacterial activity. Formula 3 has the best inhibition compared to formulas 1 and 2.

## Keywords : Polyherbal, antibacterial, Stapilococus aureus

## PENDAHULUAN
Pengembangan pengobatan tradisional sebagai  warisan  budaya  bangsa  terus ditingkatkan  salah  satunya dalam  bentuk poliherbal untuk  pemakaian  topikal. Daun lidah  buaya  (Aloe  vera)  merupakan  salah satu  tanaman  yang  digunakan  sebagai pengobatan luka. Lidah  buaya  mengandung komponen antioksidan seperti senyawa fenol dan flavonoid yang dapat digunakan sebagai antibakteri. Daun salam (Eugenia polyantha) juga  dapat  digunakan  untuk  mengobati  luka topikal  dengan  kandungan  kimia  pada  daun salam  yaitu  Flavonoid (1) . Rimpang  kunyit (Curcuma  domestica  Val)  secara  empiris diketahui mempunyai efek dalam
penyembuhan  luka.  Ekstrak  rimpang  kunyit konsentrasi  10%  memiliki  efek  dalam mempercepat  penyembuhan  luka.  Rimpang kunyit mengandung senyawa kuinon, flavonoid,  saponin,  tanin  dan  alkaloid  yang berperan terhadap proses penyembuhan luka sebagai  antibakteri (2) .  Tulang  kaki  ayam banyak  menjadi  limbah dibanyak  negara, padahal  tulang  ayam  dapat  dimanfaatkan sebagai pengobatan.
Huda (2013)
menyatakan bahwa tulang kaki ayam broiler memiliki  kolagen,  dimana  hasil  hidrolisis dari  kolagen  tersebut  akan  menghasilkan gelatin.  kaki  ayam  memiliki  kandungan kolagen,  suatu  zat  yang  dapat  membantu pertumbuhan jaringan baru pada manusia (3) .

## METODE PENELITIAN Bahan Baku
Daun  lidah  buaya,  daun  salam, rimpang  kunyit,  tulang  kaki  ayam  aquades, media  NA,  media  MHA,  media  BHI, gliserin  ,  metilparaben  alkohol  70%  dan bakteri Stapilococus aureus.

## Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini  meliputi  :  Neraca  analitik,  kain  flanel, spuit,  beaker  glass  500  mL,  gelas  ukur  100 mL,  gelas  ukur  10  mL,  glukometer,  botol coklat, termometer, batang pengaduk, pisau, sarung  tangan,  deg  glass,  mikroskop, blender.

## Pembuatan Ekstrak
Masing-masing cairan pelarut
maserasi  digunakan  etanol  70%.  Maserasi dilakukan  dengan  merendam  masing – masing  serbuk  sampel  sebanyak  100  gram dalam  1  liter  etanol  70%,  kemudian  diaduk setiap  12  jam  sekali  selama  5  hari.  Maserat disaring  menggunakan  penyaring  vakum kemudian dipisahkan dari ampasnya. Ampas
dimaserasi  ulang  dan  disaring  kembali sebanyak  2  kali  dengan  cara  yang  sama. Semua  maserat  dikumpulkan  dipekatkan dengan rotary evaporator suhu 600 C dengan kecepatan 50 rpm.

## Pembuatan Ekstrak Kolagen
Isolasi  kolagen  ceker  ayam  boiler dilakukan  dengan  merendaman  sampel kering  serbuk  tulang  dengan  menggunakan NaOH  0,10  dengan  rasio  1:10  (b/v)  selama 48 jam. Serbuk tulang selanjutnya direndam dalam larutan CH3COOH 1 M dengan rasio 1:10  (b/v)  selama  24  jam. Filtrat  yang diperoleh  kemudian  disaring  menggunakan kertas  saring  Whatman  No.1.  Kolagen  yang diperoleh  kemudian  dikeringkan  dengan freeze-dryer (4) .

## Formula Ekstrak Poliherbal
Formula  ektrak  poliherbal  dibuat dengan  mencampurkan  semua  hasil  ekstrak dikombinasikan  dengan  ektrak  kolagen. Formula  ekstrak  poliherbal  dapat  dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Formula Ekstrak Poliherbal
Bahan Komposisi % F1 F2 F3 lidah buaya 10 20 30 Ekstrak daun salam 20 20 20 Ekstarak kunyit 30 20 10 Ekstrak Kaki ayam ad 100 100 100 Tabel 2. Hasil dan Uji Ekstrak Sampel Rendemen (%) Alkaloid Saponin Flavonoid Kurkumin Daun Salam 55 + + + - Kunyit Lidah Buaya Kolagen 47,45 - 37,38 + + - + + - + + - + - -

## HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Mikroskopis
Sampel  bahan  alam  dan  ceker ayam  boiler  di  uji  secara  mikroskopis terlebih dahulu sebelum dilakukan ekstraksi.  Farmakope  Herbal  tahun  2008 menerangkan  bahwa  daun salam  secara mikroskopis  memiliki  hablur  kalsium oksalat,  epidermis  atas,  epidermis  bawah, fregmen  pembuluh  kayu,  rambut  penutup dan serabut hablur. Ciri-ciri terbut terdapat pada  sampel  daun  salam  yang  digunakan. Rimpang kunyit secara mikroskopis memiliki periderm,  butir  pati,  rambut penutup,  parenkim  dan  pembuluh  kayu. Ciri-ciri  terbut  terdapat  pada  sampel rimpang kunyit yang digunakan
Kolagen  memiliki  ukuran  partikel yang besar, berbentuk sedikit mirip seperti butir pati (5) . Pengamatan mikroskop dilakukan  pada  perbesaran  100x,  hasil pengamatan  dapat  dilihat  pada  tabel  4.1.
Ciri-ciri mikroskopik kolagen yang diterangkan Alhana (2015) dalam
penelitiannya  sama  dengan  sampel  yang digunakan pada penelitian ini (5) .

## Esktraksi Simplisia dan Ceker Ayam
Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara merendam  serbuk  1  bagian  ditambahkan 10  bagian  pelarut  etanol  70%.  Pelarut  ini sangat  cocok  untuk  menarik  flavonoid yang  terdapat  pada  daun  salam  dan alkaloid  pada  ekstrak  kunyit.  Lidah  buaya dalam  penelitian  ini  diambil  dagingnya kemudian dihaluskan.
Pengambilan  kolagen  dari  tulang ceker  ayam  diaali  dengan  menghilangkan kandungan  protein  nonkolagen  dengan cara  merendam  serbuk  tulang  ceker  ayam dengan  NaOH  0,10M.  Menurut  penelitian Budiarti  dkk  (2019)  penggunaan  pelarut NaOH 0,10M dapat menghasilkan rendemen yang baik (4) . Penggunaan NaOH
sering  digunakan  dalam  proses  ekstraksi kolagen  karena  memiliki  kemampuan meminimalkan  kehilangan  kolagen  secara signifikan jika dibandingkan dengan
pelarut golongan alkali lain (6) . Setelah tulang ceker ayam direndam  menggunakan    NaOH,  selanjut direndam  kembali  menggunakan  pelarut CH3COOH.  Pelarut  ini  menyebabkan terputusnya  ikatan  hidrogen  intramolekul dimana  sebagai  penstabil  struktur  triple helix  kolagen (7) .  Langkah  selanjutnya sampel  dicuci  dengan  air  mengalir  hingga didapatkan  pH  netral.  Sampel  dengan  pH netral  kemudian  dikeringkan  dengan  oven suhu  400C.  Sebanyak  50,07  gram  serbuk kaki  ayam  didapatkan  ekstrak  kolagen sebanyak 18,71 gram.

## Uji Fitokimia
Uji  ini  dilakukan  terhadap  ekstrak daun  salam,  ekstrak  rimpang  kunyit  dan lidah buaya untuk membuktikan teori yang sudah  didapat  dengan  hasil  uji  kandungan senyawa  aktif  secara  kualitatif.  Hasil  uji membuktikan  bahwa  ekstrak  daun  salam, ekstrak  kuyit  dan  lidah  buaya  memiliki senyawa  flavonoid,  alkaloid  dan  saponin. Hasil uji dapat dilihat pada tabel 2.

## Aktivitas Antibakteri
Sebanyak 3 formula ekstrak poliherbal kombinasi ektrak kolagen ceker ayam  dengan  variasi  konsentrasi  yang berbeda.  Selain  3  formula  yang  sudah dibuat,  disiapkan  juga  formula  tanpa ektrak kolagen ceker ayam untuk membandingkan  apakah  ekstrak  kolagen dapat  mempengaruhi  aktivitas  antibakteri ektrak  poliherbal.  Hasil  uji  aktivitas antibakteri dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Aktivitas Antibakteri Ektrak Formula 1 (mm) Formula 2(mm) Formula 3(mm) Ekstrak poliherbal 4,1 5,6 6,2 Ekstrak poliherbal dan ekstrak ceker ayam 7,1 8,7 10,2 Aktivitas daya hambat ekstrak
poliherbal  kombinasi  maupu  tanpa  ekstrak kolagen  ceker  ayam  paling  tinggi  pada formula  3.  Komposisi  lidah  buaya  berperan dalam  meningkatkan  daya  hambat  bakteri Stapilococus aureus, dimana konsentrasi lidah buaya pada formula 3 lebih tinggi
dibandingkan  dengan  formula  2  dan  formula
1. Sedangkan pada ekstrak poliherbal kombinasi kolagen ceker ayam memiliki daya hambat    bakteri  lebih  tinggi  dibandingkan dengan  ekstrak  poliherbal  murni.  Hasil tersebut menunjukan bawha kolagen memiliki kemampuan  dalam  menghambat  bakteri. Menurut  triyono  2005,  selain  mempercepat pertumbuhan  sel  kulit  baru  kolagen  juga memiliki peran antibakteri secara alami (8) .

## SIMPULAN
Ekstrak  poliherbal  kombinasi  ektrak tulang  kaki  ayam  dapat  digunakan  sebagai antibakteri. Konsentrasi ekstrak ekstrak poliherbal kombinasi ektrak tulang kaki ayam yang  menghasilkan  daya  hambat  terhadap bakteri Stapilococus  aureus paling  baik terdapat pada formula 3 sebesar 10,2mm.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Nublah.,  2011,  Identifikasi Golongan Senyawa Penurun Kadar Glukosa Darah. Tikus Putih (Rattus norvegicus Berkenhout,  1769)  Hiperglikemia  pada Daun  Sukun  (Artocarpus  altilis (park.) fosberg ), Tesis, Universitas.
2. Ningtyas G. 2017. Uji Efektivitas Ekstrak
Rimpang  Kunyit  (Curcuma  Domestica Val) Dalam Mempercepat Proses
Penyembuhan  LukaSayat  Pada  Mencit (Mus Musculus) Jantan. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta.
3. Huda, W.N., Atmaka, W., dan Nurhartadi, E., 2013, Kajian karaktersitik fisik dan kimia gelatin ekstrak tulang kaki ayam  (gallus  gallus  bankiva)  dengan variasi lama perendaman dan konsentrasi asam, Jurnal Kimia, 7(56): 57-65.
4. Budiarti, E.,Budiarti,P., Aristri,MA., Batubara,I.  2019.  Kolagen  dari  Limbah Tulang Ayam (Gallus gallus domesticus) terhadap  Aktivitas  Anti  Aging  secara  In Vitro.  ALCHEMY  Jurnal  Penelitian Kimia. Vol 15 (1) 5. Alhana. 2015. Ekstraksi Dan Karakterisasi  Kolagen  Dan  Nanokolagen Dari Daging Teripang Gamma (Stichopus  variegatus).  Bogor.  Institut Pertanian Bogor
6. Liu,  D.,  Wei,  G.,  Li,  T.,  Hua,  J.,  Lu,  J., Regenstein,  J.M.,  and  Zhou,  P.  2015. Effects of alkaline preatreatment and acid extraction  onditions  on  the  acid  sluble collagen from grass carp (Ctenopharyngodon  idella)  skin.  Food Chemistry 172, 836-843.
7. Ahmad,  M.  and  Benjakul,  S.  2010. Extraction and characterization of pepsin solubillised  collagen  from  the  skin  of unicorn leatherjacket (Aluterus
monocerous).  Food  Chemistry  120,  817-
824
8. Triyono,  B.,  2005,  Perbedaan  Tampilan Kolagen  di  Sekitar  Luka  Insisi  pada Tikus  Wistar  yang  Diberi  Infiltrasi Penghilang Nyeri Levobupikain dan yang Tidak  Diberi  Levobupikain,  Thesis, Semarang: Universitas Diponegoro.