## Hidayatullah et al./Galenika Journal of Pharmacy

## PROFIL KANDUNGAN KIMIA DAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK
METANOL DAUN BAMBAN ( Donax canniformis (G. Forst.) K. Schum . ) TERHADAP

## Staphylococcus aureus
CHEMICAL  COMPOUNDS PROFILE  AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF METHANOLIC EXTRACT OF BAMBAN ( Donax canniformis (G. Forst.) K. Schum.)

## LEAF AGAINST Staphylococcus aureus
Hidayatullah 1* , Syariful Anam 1 , Muhamad Rinaldhi Tandah 1
1 Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu, Indonesia.
Received 30 Agustus 2015, Accepted 28 September 2015

## A B S T R A K
Bamban ( Donax canniformis (G. Forst.) K. Schum . ) merupakan salah satu tanaman famili Marantaceae yang  memiliki  banyak  kegunaan  diantaranya  sebagai  obat  tradisional.  Ekstrak  metanol  bamban  mengandung senyawa fenolik, tanin dan saponin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui golongan senyawa yang memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus dan  menentukan  kadar  hambat  minimum  (KHM)  serta kadar  bunuh  minimum  (KBM).  Ekstrak  bamban  dibuat  dengan  melakukan  maserasi  menggunakan  pelarut metanol. Penentuan golongan senyawa diawali dengan melakukan uji bioautografi untuk mengetahui noda yang memiliki  aktivitas  antibakteri.  Noda  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri  kemudian  diidentifikasi  golongan senyawanya menggunakan pereaksi semprot FeCl 3 dan H 2 SO 4 10%. Penentuan KHM dan KBM menggunakan metode dilusi cair. Hasil Penelitian menunjukan terdapat tiga noda yang memiliki aktivitas antibakteri. Senyawa tersebut diduga noda I dan noda II merupakan senyawa fenolik serta noda III merupakan senyawa saponin. Nilai KHM dan KBM ekstrak metanol bamban masing-masing 8% dan 13%.
Kata kunci:Bamban ( Donax canniformis (G. Forst.) K. Schum . ), fenolik, saponin, KHM, KBM

## A B S T R A C T
Bamban  (Donax  canniformis  (G.  Forst.)  K.  Schum.)  is  one  of  the  family  Marantaceae  plant  that  has many  uses  such  as  traditional  medicine.  Methanol  extract  of  bamban  leaves  contains  phenolic,  tannins  and saponins compounds. The purpose of this research is to determine the class of compounds that has antibacterial activity  against Staphylococcus  aureus and  determine  the  minimum  inhibitory  concentration  (MIC)  and minimum bactericidal concentration (MBC) methanol extract of bamban leaves. This extract was prepared using maceration method with methanol solvent. Determination the class of compounds was initiated by bioautografi test in order to determine spots which has have antibacterial activity. Subsequently, the spot were identified the class  of  compound  using  reagent  spray  FeCl 3 and  H 2 SO 4 10%.  The  determination  of  MIC  and  MBC  using dilution method. Research showed there are three compounds that had antibacterial activity. These compounds were predicted as spot I and spot II which were phenolic compounds and spot III as a saponin compound. MIC and MBC value of the methanol extract of leaves bamban leaves 8% and 13%, respectively.
Keywords: Bamban (Donax canniformis (G. Forst.) K. Schum.), Phenolics, saponins, MIC, MBC
GALENIKA Journal of Pharmacy Vol. 1 (2) : 141 - 148
October 2015

## PENDAHULUAN
Tanaman  dapat  menjadi  sumber  untuk menemukan  obat  baru.  Tanaman  sangat terkenal  memiliki  berbagai  macam  kegunaan dalam  mencegah  dan  mengobati  penyakit. Tanaman  adalah  sumber  yang  baik  untuk sumber  berbagai  macam  bentuk  senyawa metabolit  sekunder    penting  seperti  fenolik, glikosida,  saponin,  flavonoid,  steroid,  tanin, alkaloid  dan  terpenoid  (Sen  dkk.,  2012). Senyawa tersebut memiliki aktivitas antioksidan, antitumor, antimutagenik, antikarsinogenik,  antibakteri,  dan  antifungi. Tanaman obat merupakan sumber penting dari senyawa  aktif  yang  digunakan  untuk  menjaga kesehatan  dan  mengobati  berbagai  macam penyakit  manusia  termasuk  penyakit  akibat infeksi bakteri (Malini, 2013)
Sebagian  besar  infeksi  kulit  yang merugikan bagi manusia disebabkan oleh
bakteri
Staphylococcus aureus yang merupakan  bakteri  flora  normal  yang  dapat bersifat  patogen  oportunistik  dan  berbahaya diantara
marga
Staphylococcus . Staphylococcus aureus menghasilkan sejumlah faktor virulen termasuk toksin yang menentukan  patogenisitasnya. Staphylococcus aureus mengeluarkan exfoliative  toxin yang menyebabkan nekrolisis epidermis dan eksotoksin  yang  menyebabkan toxic  shock syndrome (Garna, 2001).
Bamban ( Donax canniformis (G. Forst.) K.  Schum . )  adalah  tanaman  yang  sangat potensial  sebagai  tanaman  obat.  Berdasarkan beberapa  hasil  kajian  etnofarmasi  yang dilakukan  di  berbagai  tempat  yaitu  Serampas, Jambi  dan  Serang,  Banten  diketahui  bahwa tanaman bamban digunakan sebagai obat bisul (Hariyadi  dkk.,  2012)  dan  (Djarwaningsih, 2010),  di  Mempawah,  Sanggau  dan  Landak, Kalimantan  Barat  digunakan  sebagai  obat jerawat  (Diba  dkk . ,  2013),  di  Pulau  Wawonii dan  Muna,  Sulawesi  Tenggara  dan  digunakan sebagai  penutup  luka  untuk  mencegah  infeksi (Rahayu  dkk.,  2006)  dan  (Windadri  dkk., 2006).  Namun,  sedikit  sekali  penelitian  untuk menguji  efek-efek  farmakologi  yang  dimiliki
oleh  bamban.  Sejauh  ini  penelitian  yang dilakukan hanya untuk menguji efek antioksidan (Daud dkk., 2011).
Daud  dkk.  (2011)  melaporkan  bahwa bamban  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  yang  cukup  variatif  diantaranya senyawa  fenolik,  flavanoid,  tanin,  fitosterol, terpenoid,  steroid,  alkaloid,  glikosida  jantung dan  saponin  yang  terdistribusi  pada  beberapa bagian tanaman. Keberadaan senyawa fenolik, flavanoid, alkaloid, dan terpenoid dalam suatu tanaman dapat bersifat sebagai agen antibakteri  (Saleem  dkk . ,  2009)  dan  (Cushnie dkk,  2005).  Oleh  karena  itu,  sangat  penting untuk melakukan penelitian untuk mengetahui golongan  senyawa  yang  memiliki  aktivitas sebagai  antibakteri  serta  kadar  hambat minimum  (KHM)  dan  kadar  bunuh  minimum (KBM)  tanaman bamban.

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  dari  bulan Januari 2015 sampai dengan bulan April 2015 di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia
Jurusan  Farmasi  Fakultas  Matematika  dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Tadulako dan Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Tadulako.

## Proses Ekstraksi
Proses ekstraksi diawali dengan pembuatan  simplisia.  Simplisia  daun  bamban sebanyak 500 gram diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut metanol sebanyak  2  liter.  selama  36  jam  dan  diaduk setiap  12  jam.  Proses  tersebut  dilakukan  dua kali  untuk  simplisia  yang  sama.  Ekstrak  cair disaring  kemudian  ditampung.  Ekstrak  yang diperoleh  dipekatkan  menggunakan rotary vacuum  evaporator pada  suhu  40°C  dengan kecepatan  100  rpm  dan  tekanan  337  mbar, sehingga  diperoleh  ekstrak  kental  kemudian diuapkan  pada  suhu  kamar  hingga  diperolek ekstrak  kering.  Ekstrak  kering  kemudian di freeze  dryer untuk  menghilangkan  sisa pelarut.

## Uji Kandungan Kimia
Pengujian  kandungan  kimia  alkaloid, saponin,  flavonoid,  tannin  dan  polifenol, terpenoid, serta fenolat (Mustarichie, 2011).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pertama-tama, dilakukan proses sterilisasi,  alat-alat  yang  terbuat  dari  kaca disterilkan  dengan  menggunakan  oven  pada suhu  180 0 C  selama  2  jam.  Alat-alat  logam disterilkan dengan cara dipijarkan menggunakan  bunsen,  sedangkan  untuk  alat- alat  dan  medium  yang  tidak  pada  pemanasan dengan  suhu  yang  digunakan  pada  sterilisasi menggunakan  oven  disterilkan  dalam  autoklaf pada  suhu  121 0 C  tekanan  2  atm  selama  15 menit (Atikah, 2013).
Kedua,  dilakukan  ditimbang  sebanyak 28 gram NA, kemudian dimasukkan ke dalam erlenmeyer  lalu  ditambahkan  akuades    1  L secara perlahan sambil diaduk dengan magnetic  strirrer sampai  homogen.  Medium kemudian  dipanaskan  hingga  larut  sempurna. Setelah  larut  sempurna,  medium  disterilisasi dengan  autoklaf  pada  suhu  121 ° C  selama  15 menit (Bridson, 1998).
Pada  pembuatan  media  NB,  ditimbang sebanyak  13 gram NB kemudian dimasukkan ke  dalam  erlenmeyer  lalu  dimasukan  secara perlahan 1 L akuades kemudian diaduk dengan magnetic  strirrer sampai  homogen.  Setelah homogen medium disterilisasi dengan autoklaf pada  suhu  121 ° C  selama  15  menit  (Bridson, 1998)
Ketiga,  dilakukan  peremajaan  bakteri uji. Staphylococcus  aureus diambil  1  ose  dari media agar yang tersedia, kemudian diinokulasi  dengan  cara  digoreskan  pada medium  nutrient  agar  (NA).  Proses  tersebut dikerjakan  secara  aseptik  pada  LAF  ( laminar air  flow ).  selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C selama 24 jam dalam inkubator. Keempat, dilakukan pembuatan suspense  bakteri  uji.  Sebanyak  2  ose  bakteri Staphylococcus aureus yang sudah diremajakan  diambil  dari  media  agar  yang tersedia  secara  aseptik,  lalu  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  3  mL  NaCl
0,9%  kemudian  di  vortex.  Setelah  itu  diamati kekeruhannya dan dibandingkan dengan standar Mc Farland.
Kelima,  dilakukan  penentuan  nilai KHM  dan  KBM  mengacu  pada  metode  dilusi (Bonang  dan  Koeswardono,  1979).  Pertama- tama  dibuat  stok  ekstrak  dengan  konsentarasi 50%  dengan  cara  melarutkan  5  gram  ekstrak dalam  10  ml  DMSO.  Kontrol  positif  asam fusidat dibuat dengan cara melarutkan 5 gram dalam  5  ml  media  NB.  Kontrol  negatif menggunakan  5  ml  medium  NB.  Ekstrak tanaman  dimasukan  ke  dalam  tabung  reaksi beserta suspensi bakteri Staphylococcus aureus dan  medium nutrien  broth hingga diperoleh  konsentrasi  6%,  7%,  8%,  9%,  10%, 11%,  12%,  13%,  dan  14%.  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam. Tabung  tersebut  kemudian  diambil  lalu  amati kekeruhan  tabung.  Tabung  yang  berkurang kekeruhannya  dibandingkan  dengan  kontrol negatif menanandakan bahwa terjadi penghambatan
pertumbuhan
bakteri.
Konsentrasi terkecil yang masih dapat menghambat pertumbuhan mikroba uji ditetapkan  sebagai  KHM.  Suspensi  dalam tabung  kemudian  diambil  satu  ose  kemudian ditumbuhkan  pada  medium nutrien  agar lalu diinkubasi  selama  24  jam.  Setelah  itu  diamati pertumbuhan  bakteri  konsentrasi  terendah yang  tidak  terdapat  pertumbuhan  mikroba  uji. Jika  tidak  terdapat  pertumbuhan  bakteri  maka konsentasi  tersebut  adalah  konsentrasi  yang bersifar bakterisidal atau membunuh pertumbuhan  bakteri  dan  ditetapkan  sebagai nilai KBM.

## Uji  Aktivitas  Antibakteri  dengan  Metode KLT Bioautografi
Pertama,  dibuat  lempeng  KLT  dengan ukuran  10  x  2  cm  lalu  dipanaskan  pada  oven pada  suhu  110°C  selama  10  menit.  Eluen  n- heksan:etil  asetat  dibuat  dengan  perbandingan 1:2  sebanyak  5  ml.  Ekstrak  metanol  daun bamban  ditotolkan  dengan  menggunakan  pipa kapiler pada lempeng kromatografi lapis tipis, lalu  dieluasi  dengan  eluen  n-heksana:  etil asetat  (1:2).  Setelah  perambatan  pelarut  yang
telah  mencapai  ketinggian  yang  ditentukan, keluarkan  lempeng,  keringkan  dan  amati bercak  yang  timbul  dengan  sinar  ultraviolet pada panjang gelombang 254 nm dan 366 nm. Nilai Rf dihitung dari masing- masing bercak.
Kedua, Suspensi bakteri dipipet sebanyak  0,1  mL,  kemudian  dimasukkan  ke dalam  cawan  petri.  Setelah  itu  tambahkan  10 mL  medium  NA,  lalu  dihomogenkan  (tebal inokulum  3-4  mm)  dan  dibiarkan  pada  suhu kamar  selama  15-30  menit.  Setelah  agar memadat diletakkan lempeng KLT yang berisi larutan  uji,  dibiarkan  pada  suhu  kamar  15-30 menit,  setelah  itu  lempeng  kromatogram diangkat  dan  disisihkan.  Cawan  Petri  yang berisi  biakan  bakteri  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24  jam.  Setelah  waktu  inkubasi selesai  bercak  yang  timbul  diamati  zona hambat (Kumala dkk., 2006).
Identifikasi  Golongan  Senyawa  Antibakteri dengan Pereaksi Semprot
Noda yang memiliki aktivitas antibakteri  sesuai  dengan  hasil  uji  KLT bioautografi
diidentifikasi golongan senyawanya  menggunakan  pereaksi  semprot yaitu  pereaksi  asam  sulfat  10%  untuk  deteksi golongan  senyawa  saponin  dan  pereaksi  besi (III) klorida untuk deteksi senyawa fenolik dan tanin.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Penelitian
Dari  hasil  identifikasi  di  UPT.  Sumber Daya  Hayati  Sulawesi,  diketahui  bahwa sampel adalah tanaman Donax canniformis (G. Forst) K. Schum. yang berasal dari Desa Kilo, Kecamatan  Poso  Pesisir  Utara,  Kabupaten Poso
Dari  hasil  ekstraksi  simplisia  daun bamban diperoleh ekstrak kental sebanyak 103 gram  atau  persen  rendamen  sebesar  20,6  %. Setelah dilakukan proses freeze dryer diperoleh  ekstrak  kering  sebanyak  87  gram atau persen rendamen 17,4 %.
Hasil pengujian kandungan kimia untuk mengetahui  senyawa  yang  terdapat  dalam
ekstrak metanol daun bamban. Hasil pengujian disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Pengujian Kandungan Kimia
Hasil  pengujian  uji  aktivitas  antibakteri untuk  mengetahui  senyawa  yang  memberikan aktivitas antibakteri dapat dilihat pada tabel 2. Tabel 2. Hasil Uji Bioautografi
Hasil  uji  KHM  untuk  menentukan konsentrasi  terkecil  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  uji  dapat  dilihat  pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji KHM
Hasil  uji  KBM  untuk  menentukan konsentrasi  terkecil  yang  dapat  mematikan pertumbuhan bakteri dapat dilihat pada tabel 4. Tabel 4. Hasil Uji KBM
Hasil  identifikasi  golongan  senyawa dengan  pereaksi  semprot  untuk  mengetahui golongan senyawa yang memiliki aktivitas anti bakteri dapat dilihat pada tabel 5.
Tabel 5. Hasil Identifikasi Golongan Senyawa dengan Pereaksi Semprot

## Pembahasan
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah metode maserasi menggunakan pelarut metanol. Metode maserasi digunakan karena maserasi merupakan  metode  ekstraksi  yang  tidak menggunakan  pemanasan  sehingga  dapat menghindari  rusaknya  senyawa  yang  tidak tahan pada suhu tinggi sebab dapat menyebabkan degradasi pada senyawa- senyawa  tertentu  khususnya  senyawa  fenolik yang  diduga  merupakan  kandungan  utama tanaman  bamban.  Pelarut  metanol  merupakan pelarut  polar  sehingga  diharapkan  dapat menarik senyawa sebanyak-banyaknya. Selain itu,  berdasarkan  laporan  Daud  (2011)  pelarut metanol  dapat  mengekstraksi  lebih  banyak komponen  senyawa  pada  daun  bamban.  Dari hasil  maserasi  akan  diperoleh  ekstrak  cair yang dipekatkan pada rotary vacuum evaporator pada suhu 40°C dengan kecepatan rotasi 100 rpm dan vacum diatur pada tekanan 337  mbar  untuk  mendapatkan  ekstrak  kental kemudian  diuapkan  pada  suhu  kamar  hingga diperoleh  ekstrak  kering. Rotary  vacuum evaporator dilengkapi  dengan  vakum  yang dapat  mengurangi  tekanan  udara  sehingga dapat  menurunkan  titik  didih  pelarutnya. Menggunakan  suhu  40°C  karena  dengan menggunakan rotary  vacuum  evaporator pelarut  dapat  diuapkan  dibawah  titik  didih pelarut  metanol  yakni  64,7°C  dan  pada  suhu tersebut  kemungkinan  kerusakan  senyawa aktif  akibat  pemanasan  suhu  tinggi  dapat dihindari (Ridho, 2013). Kecepatan rotasi 100 rpm  karena  pada  kecepatan  rotasi  tersebut terjadi turbulensi optimum yang meningkatkan proses penguapan.
Ketika rotasi terlalu cepat maka ekstrak akan menekan dinding labu sehingga turbulensi  menurun  sedangkan  jika  terlalu pelan  turbulensi  juga  sangat  kecil  sehingga proses penguapan berlangsung lama (Anonim, 1998). Tekanan  337  mbar merupakan  tekanan optimal untuk pelarut metanol pada suhu 40°C (Anonim, 2010). Ekstrak kering yang dihasilkan  berwarna  biru  kehitaman,  lembab dan  berbau  khas  ekstrak  metanol.  Jumlah ekstrak  kering  yang  diperoleh  103  gram  atau persen  rendamen  sebesar  20,6  %.  Ekstrak kering  kemudian  dibebaskan  dari  pelarut menggunakan frezze  dryer .  Pelarut  metanol dapat  mengganggu  proses  pengujian  sebab memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan  bakteri. Freeze  dryer bekerja dengan cara membekukan kandungan air pada sampel  yang  kemudian  dikeluarkan  atau dipisahkan  dengan  metode  sublimasi.  Suhu yang  digunakan  adalah  -40°C.  Ekstrak  yang diperoleh  berupa  serbuk  kering,  berwarna hitam  kebiruan,  dan  tidak  berbau.  Setelah dilakukan frezze  dryer diperoleh  serbuk ekstrak  kering  sebanyak  87  gram  dengan persen rendamen 17,4 %.
Pengujian  KHM  dilakukan  dengan menggunakan metode dilusi dengan uji tabung mengacu  pada  metode  Bonang  dkk.  (1979). Metode tersebut digunakan karena kemudahan dalam  mengamati  kekeruhan  tabung  sehingga lebih  mudah  menentukan  KHM.  Kekeruhan pada tabung menandakan adanya pertumbuhan bakteri.  Prosedur  kerja  metode  dilusi  tabung adalah  ekstrak  kering  dari  sampel  dibuat dalam  beberapa  variasi  konsentrasi.  Variasi konsentrasi  bertujuan  untuk  memperoleh konsentrasi  terendah  yang  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri.
Pada  penentuan  KHM  kontrol  positif yang  digunakan  adalah  asam  fusidat  sebab aktivitas antibakterinya secara khusus ditujukan  pada  penyakit  kulit  akibat  mikroba secara umum, termasuk Staphylococcus aureus dan  termasuk  salah  satu  antibakteri paling  ampuh.  Asam  fusidat  bekerja  pada infeksi  kulit  ringan  sampai  pada  infeksi  yang cukup  parah  (Wilkinson,  1998).  Dosis  asam
fusidat yang digunakan adalah 2% sesuai dosis asam fusidat pada sediaan topikal.
Hasil penentuan KHM diperoleh konsentrasi  terendah  ekstrak  daun  bamban yang menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus adalah  8%  (gambar 4.2).    Nilai  KBM  diperoleh  konsentrasi terendah yang dapat mematikan bakteri adalah 13% (gambar 4.3). Nilai ini masih sangat besar jika  dibandingkan  dengan  nilai  KHM  dan KBM asam fusidat yaitu masing-masing hanya 0,007-0,195 µg/ml atau 0,0000007-
0,0000195% dan 0,097-25 µg/ml atau 0,0000097-0,0025% (Anonim, 2012)
Penentuan  golongan  senyawa  ekstrak metanol daun bamban yang memiliki aktivitas antibakteri  menggunakan  metode  bioautografi yang dilanjutkan dengan identifikasi menggunakan  pereaksi  semprot.  Metode  ini diawali dengan melakukan pemisahan komponen  senyawa  ekstrak  metanol  daun bamban  pada  plat  KLT  dengan  fase  diam silika  gel  60  F 254 yang  dielusi  dengan  fase gerak  n-heksan:etil  asetat  (1:2).  Berdasarkan hasil  orientasi  n-heksan:etil  asetat  (1:2) memberikan  pemisahan  yang  baik  pada  noda yang  memiliki  aktivitas  antibakteri.  Silika  gel 60  F 254 digunakan  secara  luas  karena kelembaban  mudah  dikontrol,  praktis  dapat memisahkan  hampir  semua  senyawa  dan cocok  untuk  hampir  semua  jenis  fase  gerak (Harborne, 1998). Proses identifikasi menggunakan  pereaksi  semprot  FeCl 3 dan H 2 SO 4
10%. FeCl 3 digunakan untuk mengidentifikasi  senyawa  golongan  fenolik dan  tanin  sedangkan    H 2 SO 4 10%  untuk mengidentifikasi  senyawa  golongan  saponin (Wagner, 1996).
Hasil  uji  bioautografi  ekstrak  metanol daun  bamban  diperoleh  tiga  senyawa  yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus yaitu noda I, II, dan III dengan  nilai  R f masing-masing  0;  0,11;  dan 0,67.  Nilai  Rf  dapat  digunakan  sebagai perbandingan  relatif  antar  sampel.  Dari gambar  4.1  dapat  dilihat  bahwa  noda  yang memiliki  aktivitas  antibakteri  paling  potensial adalah  noda  I.  Sedangkan  noda  nomor  II
memberikan  aktivitas  yang  tidak  terlalu signifikan  sebab  jumlah  senyawanya  sedikit dibuktikan  dengan  ukuran  noda  yang  kecil. Noda  III  cukup  potensial  sebagai  antibakteri zona  hambat  yang  cukup  besar  dan  ukuran noda juga cukup besar.
Berdasarkan  hasil  identifikasi  golongan senyawa  menggunakan  pereaksi  semprot. Noda  I  memberikan  warna  hitam  kebiruan setelah  disemprot  dengan  pereaksi  FeCl 3 . Senyawa  fenol  dideteksi  dengan  pereaksi semprot FeCl3 dan secara visual menunjukkan warna  hijau,  merah,  ungu,  biru,  atau  hitam yang kuat (Harborne, 1998) maka kemungkinan senyawa Noda I adalah senyawa fenolik.  Noda  II  berwarna  biru  secara  visual dan  memberikan  noda  berwarna  gelap  pada panjang  gelombang  254  nm.  Oleh  karena  itu, noda  II  kemungkinan  adalah  senyawa  fenolik (Harborne,  1998).  Noda  III  (gambar  4.1) memberikan  warna  kuning  secara  visual  dan berwarna  ungu  setelah  disemprot  dengan H 2 SO 4 10%  maka  noda  III  adalah  golongan senyawa saponin (Kaur dkk., 2015).
Senyawa  fenolik  adalah  senyawa  yang dapat bersifat antibakteri dengan cara memutuskan  ikatan  peptidoglikan  ketika melewati  dinding  sel  (Pelczar  dkk.,  2008). Sedangkan mekanisme aksi aktivitas antibakteri  senyawa  golongan  saponin  adalah pembentukan  kompleks  dengan  sterol  pada membran  plasma  sehingga  menghancurkan semipermeabilitas  sel  lalu  mengarah  kepada kematian  sel  (Hostettmann  dkk.,  1995). Senyawa  saponin  juga  dapat  menghambat sintesis  protein  karena  terakumulasi  dan menyebabkan kerusakan komponen- komponen penyusun sel bakteri (Brooks  dkk., 2001)

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. (1998). Training Papers: Distillation with  a  Rotary  Evaporator .  English Version:  Rosemary  Hoegger,  BUCHI Labortechnik AG. Flawil. Switzerland.
Anonim.  (2010). Buchi  20/40/60  Rule  for Rotary  Evaporators ,  University  of
Wollongong.  New  South  Wales. Australia.
Anonim. (2012). Product Monograph:
Pr FUCIDIN  H ® . LEO  Pharma  Inc. Ontario.
Atikah,  N.  (2013).  Aktivitas  Antimikroba
Ekstrak  Herba  Kemangi  ( Ocimum americanum L) Terhadap Staphylococcus  aureus dan Candida albicans ( Skripsi). UIN Syarif Hidayatullah. Jakarta. Bonang,  G.  &  E.S.  Koeswardono.  (1979) Mikrobiologi Kedokteran untuk Laboratorium  dan  Klinik. Gramedia.
Jakarta.
Bridson,  E.  Y.  (1998) The  Oxoid  Manual, 8 th edition, Oxoid Limited, Basingstoke.
Brooks,  G.  F.,  J.  S.  Butel  &  Morse  (2001).
Mikrobiologi Kedokteran. Terjemahan Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran  Universitas  Airlangga. Salemba Medika. Jakarta.
Cushnie,  T.  P.  T.  dan  A.  J.  Lamb.  (2005) Review:  Antimicrobial  activity  of flavonoids. International  Journal  of Antimicrobial  Agents.  Vol.  26:  343– 356.
Daud, J. M., H. H. M. Hassan, R. Hashim and M.  Taher.  (2011).  Phytochemicals Screening  and  Antioxidant  Activities of Malaysian Donax Grandis Extracts.
European Journal of Scientific
Research, Vol.61, No.4: 572-577 . Diba,  F.,  F.  Yusro,  Y.  Mariani  &  K.  Ohtani. (2013).  Inventory  and  Biodiversity  of Medicinal  Plants  from  Tropical  Rain Forest Based on Traditional Knowledge  by  Ethnic  Dayaknese Communities  in  West  Kalimantan
Indonesia. Kuroshio  Science  Vol.  7, No. 1 : 75-80.
Garna, H. (2001). Patofisiologi Infeksi Bakteri
pada  Kulit . Sari  Pediatri,  Vol.  2,  No. 4: 205 – 209 .
Harborne,  J.  B.  (1998). Phytochemical
Methods: A guide to modern techniques  plant  analysis. Edisi  III, Chapman & Hall, London.
Hariyadi,  B.  dan  T.  Ticktin.  (2012).  Uras: Medicinal  and  Ritual  Plants  of Serampas, Jambi Indonesia . Ethnobotany Research & Applications Vol. 10: 133-149.
Hostettmann,  K.,  &  Marston  A.  (1995).
Saponins : Chemistry
and
Pharmacology  of  Natural  Products.
Cambridge  University  Press.  New York.
Kaur,  Rajinder,  S.  Arora  &  A.K.  Thukral.
(2015).  Quantitative  and  Qualitative Analysis  of  Saponins  in  Different Plant Parts of Chlorophytum borivilianum. International  Journal  of Pharma and Bio Sciences, 6(1): 826 – 835.
Kumala,  Shirly,  Tambunan,  R.M.  &  Mochtar, D.  (2006).  Uji  Aktivitas  Anti-Bakteri Ekstrak  Etil  Asetat  Kembang  Pukul Empat  (Mirabilis  Jalapa  L.)  dengan Metode  Bioautografi, Jurnal  Farmasi Indonesia Vol. 3 No. 2: 78-83 .
Malini  M.,  G.    Abirami,  V.  Hemalatha  &  G.
Annadurai. (2013). Antimicrobial activity  of  Ethanolic  and  Aqueous Extracts  of  medicinal  plants  against waste  water  pathogens. International Journal  of  Research  in  Pure  and Applied Microbiology, 3(2): 40-42 .
Mustarichie,  R.,  I.  Musfiroh  &  J.  Levita.
(2011). Metode  Penelitian  Tanaman Obat. Widya Padjajaran. Bandung.
Pelczar,  M.  J.  dan  E.  C.  S.  Chan.  (2008).
Dasar-Dasar Mikrobiologi 1 . Universitas Indonesia Press. Jakarta.
Rahayu,  M.,  S.  Sunarti,  D.  Sulistiarini,  &  S. Prawiroatmodjo.  (2006).  Pemanfaatan Tumbuhan  Obat  secara  Tradisional oleh  Masyarakat  Lokal  di  Pulau Wawonii, Sulawesi
Tenggara. Biodiversitas, Vol. 7, No. 3: 245-250. Ridho, E. A. (2013). Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Buah Lakum (Cayratia  trifolia)  dengan  Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil)
(Skripsi).  Program  Studi  Farmasi
Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura. Pontianak. Saleem, M., Nazir, M., Ali, M.S., Hussain, H., Lee,  Y.S.,  Riaz,  N.  &  Jabbar,  A. (2009). Antimicrobial
natural products: an update on future antibiotic  drug  candidates. Natural Product Reports, Vol. 27: 238–254 .
Sen,  A.  dan  A.  Batra.  (2012).  Evaluation  of
Antimicrobial  Activity  of  Different Solvent  Extracts  of  Medicinal  Plant: Melia  azedarach L. International Journal  of  Current  Pharmaceutical Research, Vol 4 (2):67-73 . Wagner,  H.  dan  S.  Bladt.  (1996). Plant  Drug Analysis: A Thin Layer Chromatography Atlas . second edition, Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York. Berlin. Wilkinson. (1998). Fusidic Acid in Dermatology . British Journal of
Dermatology, Vol. 139, Hal. 37-40 .
Windadri,  F.  I.,  M.  Rahayu,  T.  Uji,  &  H.
Rustiami. (2006). Pemanfaatan Tumbuhan  sebagai  Bahan  Obat  oleh Masyarakat  Lokal  Suku  Muna  di Kecamatan  Wakarumba,  Kabupaten Muna, Sulawesi Tenggara. Biodiversitas, Vol. 7, No. 4: 333-3.