UJI EFEK EKSTRAK ETANOL PATIKAN KEBO ( Euphorbia hirta Linn.) SEBAGAI DIURETIK PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR
WISTAR ( Rattus norvegicus sp.)
Irene Sondang Lingga 1) , Gayatri Citraningtyas 1) , dan Widya Astuti Lolo 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Empirically, Indonesian society using patikan kebo as a laxative urine (diuretic), but have not done scientific research. This study aimed to examine the effects of the ethanol of the patikan Kebo  ( Euphorbia  hirta Linn)  extract  on  white  male  Wistar  rats  ( Rattus  norvegicus )  as  a diuretic. A total  of 15 test  animals  were divided  into 5 groups, namely the negative  control (CMC  0,5%  suspension),  positive  control  (furosemide  5,04  mg/KgBB  suspension), suspension of the ethanol extract of the patikan kebo dose 0,045 g/KgBB, dose 0,09 g/KgBB, and dose 0,18g/KgBB. Tests on the diuretic effect is done by measuring the volume of urine released for 6 hours. Data were analyzed with SPSS ver. 20, one-way ANOVA test to see the difference  in  average  each  treatment  group,  if  there  is  a  significant  difference  followed  by LSD test to see any significant between treatment groups. The results of the test LSD showed that  treatment  groups  from  suspension  of  ethanol  extract  patikan  kebo  dose  0,045  g/KgBB does not give any significant effect with suspension CMC 0,5%, than the of ethanol patikan kebo  extract  dose  0,09  g/KgBB  and  suspension  of  ethanol  patikan  kebo  extracts  dose  0,18 g/KgBB give a significant increased urine effect.
Key words : Patikan Kebo, diuretics, Rattus norvegicus

## ABSTRAK
Secara  empiris,  masyarakat  indonesia  menggunakan  patikan  kebo  sebagai  peluruh  air  seni (diuretik),  namun  belum  dilakukan  penelitian  secara  ilmiah.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menguji  efek  ekstrak  etanol  patikan  kebo  ( Euphorbia  hirta Linn)  pada  tikus  putih  jantan galur wistar (Rattus norvegicus ) sebagai diuretik. Sebanyak 15 ekor hewan uji dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan, yaitu kontrol negatif (suspensi CMC 0,5%), kontrol positif (suspensi furosemid  5,04  mg/KgBB),  suspensi  ekstrak  etanol  patikan  kebo  dengan  dosis  0,045 g/KgBB,  dosis  0,09  g/KgBB,  dan  dosis  0,18  g/KgBB.  Pengujian  terhadap  efek  diuretik dilakukan  dengan  mengukur  volume  urin  yang  dikeluarkan  selama  6  jam.  Data  yang diperoleh dianalisis dengan spss ver. 20, uji one way ANOVA untuk melihat perbedaan rata- rata  setiap  kelompok  perlakuan,  jika  terdapat  beda  nyata  dilanjutkan  dengan  uji  LSD  untuk melihat signifikan antara setiap kelompok perlakuan. Hasil uji LSD menunjukkkan kelompok perlakuan dari suspensi ekstrak etanol patikan kebo 0,045 g/KgBB tidak jauh berbeda dengan suspensi CMC 0,5%, dibandingkan suspensi ekstrak etanol herba patikan kebo 0,09 g/KgBB dan  suspensi  ekstrak  etanol  patikan  kebo  dengan  dosis  0,18  g/KgBB  memberikan  efek peningkatan urin yang signifikan.
Kata kunci : Patikan Kebo, diuretik, Rattus norvegicus sp.

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara agraris  yang  memiliki  keanekaragaman hayati  yang  berlimpah  yaitu  memiliki 30000  jenis  tanaman  dan  sekitar  9600 berkhasiat  sebagai  obat  (Depkes,  2007). Masyarakat  Indonesia  sejak  dahulu  telah melakukan serangkaian upaya untuk penanggulangan  penyakit  menggunakan bahan-bahan  alam  sebagai  pengobatan tradisional  contohnya  dari  tanaman  yang diyakini berkhasiat sebagai obat.
Tanaman  obat  yaitu  tanaman  atau bagian  tanaman  yang  digunakan  sebagai bahan  obat  tradisional  atau  jamu  tanaman atau  bagian  tanaman  yang  digunakan sebagai  formula  bahan  baku  obat  atau tanaman  atau  bagian  tanaman  yang diekstraksikan, dan ekstrak tersebut digunakan  sebagai  obat  (Siswanto,  1997).
Penggunaan  bahan  alami  sebagai  obat semakin meningkat karena aman dikonsumsi  dan  efek  samping  yang ditimbulkan relatif kecil. Apabila digunakan  secara  tepat,  penggunaan  obat tradisional dinilai lebih aman dibandingkan obat sintetik (Sari, 2006).
Salah satu tanaman obat tradisional yang  telah  dimanfaatkan  oleh  masyarakat adalah tanaman patikan kebo. Tanaman ini juga  diyakini  dapat  dimanfaatkan  untuk mengobati  beberapa  penyakit  antara  lain abses paru, bronkitis kronis, asma, disentri, radang kelenjar payudara, tipus abdominalis dan peluruh air seni (diuretik) (Hariana, 2006). Kandungan senyawa yang terdapat  pada  patikan  kebo  mempunyai aktivitas  sebagai  diuretik  yaitu  flavonoid (Anna, 2011) dimana mekanisme kerjanya menghambat  reabsorbsi  Na + ,  K + ,  dan  Cl -
sehingga  terjadinya  peningkatan  elektrolit di  tubulus  sehingga  terjadilah  diuresis (Khabibah, 2011). Secara empiris masyarakat menggunakan tanaman patikan kebo ini sebanyak 60 gram sebagai peluruh air seni (diuretik) (Jangkaru, 2006). Diuretik adalah zat yang dapat memperbanyak pengeluaran kemih, bekerja  langsung  terhadap  ginjal.  Obat diuretik  sendiri  digunakan  pada  semua
keadaan  dimana  dikehendaki  pengeluaran air  seni  yang  lebih  banyak,  yakni  pada udema,  hipertensi,  diabetes  insipidus,  dan batu  ginjal.  Kebanyakan  diuretik  bekerja dengan  mengurangi  reabsorbsi  natrium, sehingga  pengeluarannya  dengan  kemih (Tjay dan Raharja, 2002).
Penelitian dan pengembangan tumbuhan  obat  yang  berkhasiat  sebagai diuretik  merupakan  salah  satu  prioritas didalam  pengembangan  dan  pemanfaatan tumbuhan obat Indonesia, karena penggunaan  obat  diuretik  yang  luas  dan sangat  penting,  sehingga  obat  diuretik menjadi  sangat  dibutuhkan.  Maka  peneliti tertarik  melakukan  penelitian  tentang  uji efek ekstrak etanol patikan kebo ( Euphorbia  hirta Linn)  sebagai  diuretik pada tikus putih jantan galur wistar.

## METODOLOGI PENELITIAN Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini yakni: tanaman patikan kebo segar,  furosemid  40  mg,  aquadest,  etanol 95%,  CMC (Carboxy  Methyl  Cellulose) 0,5%.
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  ialah  :  Kandang  hewan, sarung  tangan  dan  tempat  minum  hewan uji,  gelas  ukur  ( Pyrex ),  labu  ukur  ( Pyrex ), corong, batang pengaduk, sudip, lumpang, blender (Waring commercial), oven (Model  DHG),  ayakan mesh 200,  kertas saring, waterbath (Julabo), kandang metabolit,  masker,  NGT  ( Nasogastric Tube ) no. 5, disposible syringe 1 dan 5 ml, timbangan  digital  (HCB  302)  dan  wadah penampung urin modifikasi.

## Persiapan Sampel
Patikan kebo segar  sebanyak 2000 gram  dibersihkan  terlebih  dahulu  dengan cara  dicuci  bersih  dengan  air  yang mengalir  kemudian  ditiriskan.  Setelah ditiriskan herba patikan  kebo dirajang dan dikeringkan dengan cara diangin-anginkan terlebih  dahulu,  selama  2  hari  kemudian dikeringkan  lagi  dalam  oven  pada  suhu 40ºC  hingga  kering.  Setelah  kering
diblender, dan diayak dengan ayakan mesh 200  dan  didapat  serbuk  simplisia  herba patikan kebo sebanyak 300 gram.

## Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Patikan Kebo
Pembuatan  ekstrak  etanol  patikan kebo  dilakukan  dengan  metode  maserasi yaitu  sebanyak  300  gram  serbuk  patikan kebo  diekstraksi  dengan  1500  ml  etanol 95%  dan  direndam  dalam  wadah  gelap selama  3  hari  (setiap  hari  digojok). Kemudian ekstrak disaring dengan menggunakan  kertas  saring  (filtrat  1),  dan sisanya  diekstrak  kembali  selama  2  hari dengan  600  ml  etanol  95%  (filtrat  2). Selanjutnya    filtrat  1  dan  2  dikumpulkan, diuapkan  dengan waterbath pada  suhu  55 ºC sampai menjadi ekstrak kental. Didapatkan  ekstrak  kental  sebanyak  24,87 g.

## Pembuatan Suspensi Furosemid
Dosis  furosemid  pada  manusia dewasa  adalah  40  mg,  jika  di  konversikan pada  tikus  dengan  berat  badan  tikus  200 gram  ialah  1,008  mg/200gBB  maka furosemid pada tikus yakni 5,04 mg/KgBB.  Banyaknya  furosemid  yang akan diberikan ke tikus dihitung berdasarkan  berat  badan  dari  masing- masing  tikus,  kemudian  dilarutkan  dalam CMC  0,5%    dan  diinduksi  pada  masing- masing tikus.
Pengukuran volume urin Untuk melakukan pengukuran volume  urin,  tikus  ditempatkan  dalam kandang  metabolit  yang  telah  terdapat wadah  penampung  urin.  Selanjutnya, pengamatan  dilakukan  terhadap  volume urin yang dikeluarkan pada jam ke-1, 2, 3, 4,  5,  dan  6.  Urin  yang  akan  diukur volumenya diambil menggunakan disposible  syringe 1  cc  dan  dicatat volumenya selama waktu pengamatan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Pembuatan Ekstrak
Pada penelitian ini diperoleh serbuk  simplisia  tanaman  patikan  kebo
sebanyak                300  gram  dan  di  ekstraksi menggunakan cara maserasi. Proses maserasi  ini  dilakukan  selama  3  hari  dan remaserasi  selama 2 hari hingga diperoleh hasil maserat etanol patikan kebo (filtrat 1 +  filtrat  2)  sebanyak  1260  ml.  Hasil maserat  etanol  patikan  kebo  ini  kemudian diuapkan  dengan  menggunakan waterbath dengan  tujuan  menguapkan  etanol  dari proses  maserasi  dan  menghasilkan  ekstrak kental sebanyak 24,87 gram.

## Hasil Pengukuran Volume Urin Tikus
Pada  penelitian  ini  digunakan  15 ekor tikus yang dibagi menjadi 5 perlakuan dengan  berat  badan  tikus  yang  berkisar antara 150-250 gram. Kelompok perlakuan 1 diberikan dosis 0,045 g/KgBB,
kelompok perlakuan 2 diberikan dosis 0,09 g/KgBB,  kelompok perlakuan 3 diberikan dosis 0,18 g/KgBB dan sebagai pembandingnya diberikan furosemid dengan dosis 5,04 g/KgBB dan CMC 0,5% yang diberikan secara oral.
Sebelum  perlakuan  tikus  terlebih dahulu  dipuasakan  selama  8  jam  tanpa diberi  makan  agar  tidak  mempengaruhi efek  dari  patikan  kebo  yang  diberikan, tetapi  tetap  diberikan  minum  dengan tujuan  agar  kondisi  elektrolit  hewan  uji tetap stabil. Setelah dipuasakan 8 jam tikus diberi  perlakuan.  Perlakuan  selama  6  jam tanpa  diberikan  makan  maupun  minum. Hal  ini  dilakukan  untuk  menguji  efek diuretik dari ekstrak patikan kebo, furosemid  dan  CMC  0,5%.  Selanjutnya diukur  volume  urin  tiap  jamnya,  dan diperoleh hasil rerata volume urin pada 15 ekor tikus putih jantan galur wistar.
Pada  perlakuan,  hewan  uji  yang diberi  larutan  CMC  0,5%,  suspensi furosemid  dan  suspensi  ekstrak  dosis  1,  2 dan  3  diberikan  secara  oral  sesuai  dosis, lalu  ditambahkan  air  sampai  4  ml.  Hal  ini dilakukan  karena  maksimal  daya  tampung lambung tikus 200 gram adalah 5 ml untuk mencegah terjadinya gangguan keseimbangan  elektrolit  tubuh  tikus    dan juga  mencegah  terjadinya  radang  pada
lambung  tikus  dikarnakan  melebihi  daya tampung maksimal pada lambung tikus.
Pengamatan dilakukan pada volume  urin  yang  tertampung  selama  6 jam, dan diperoleh  data seperti pada Tabel 2. Tabel 1. Data rerata volume urin kumulatif tiap jam pengamatan Perlakuan Volume Urin (ml) Tiap Jam Ke- 1 2 3 4 5 6 K (-) 0,5 1,25 1,37 1,37 1,37 1,37 K (+) 1,76 2,94 2,94 2,94 2,94 2,94 KP 1 0,40 1,32 1,32 1,32 1,32 1,45 KP 2 1,46 1,72 1,90 1,90 1,90 1,90 KP 3 1,60 2,39 2,39 2,39 2,39 2,39
Keterangan  :  K  (-)  :  Larutan  CMC  0,5%,  K  (+)  :  Suspensi  Furosemid  dosis  5,04  g/KgBB, KP 1 :  Suspensi  Ekstrak  Etanol  Herba  Patikan  Kebo  Dosis  0,045  g/KgBB,  KP 2 :  Suspensi Ekstrak  Etanol  Herba  Patikan  Kebo  Dosis  0,09  g/KgBB,  KP 3 :  Suspensi  Ekstrak  Etanol Herba Patikan Kebo Dosis 0,18 g/KgBB.
Tabel  diatas  menunjukkan  rerata hasil  pengamatan  volume  urin  kumulatif selama  6  jam  pengamatan.  Volume  urin kumulatif menggambarkan kenaikan volume  urin  yang  signifikan  secara keseluruhan  selama  waktu  pengamatan. Berdasarkan  data  rerata  volume  kumulatif diatas,  dapat  dilihat  bahwa  kelompok perlakuan  CMC  0,5%    sebagai  kontrol negatif  diperoleh  sebanyak  1,25  ml, kelompok  perlakuan  furosemid  sebagai kontrol positif sebanyak 2,94 ml, sedangkan  kelompok  perlakuan  dosis  1 sebanyak  1,30  ml,  kelompok  perlakuan dosis  2  sebanyak  1,93  ml,  dan  kelompok perlakuan dosis 3 sebanyak 2,39 ml. Volume  urin  kumulatif  untuk  kelompok perlakuan CMC 0,5% menunjukkan rerata yang  paling  rendah  hal  ini  terjadi  karena CMC  0,5%  tidak  terkandung  zat  yang dapat  meningkatkan  jumlah  ekskresi  urin (diuretik).  Kemudian  pada  kelompok perlakuan  furosemid  menunjukkan  rerata volume  urin  kumulatif  yang  tinggi dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan lainnya.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa furosemid  memiliki  efek  diuretik  kuat
pada  hewan  uji.  Sedangkan  kelompok perlakuan  dosis  1,  2,  dan  3  menunjukkan rerata volume urin yang berbeda pada tiap dosis perlakuan. Pada kelompok perlakuan dosis 1 diperoleh rerata urin sebanyak 1,45 ml,  kelompok  perlakuan  dosis  2  diperoleh urin  sebanyak  1,9  ml  dan  kelompok perlakuan  dosis  3  diperoleh  rerata  urin sebanyak  2,39  ml.  Hal  ini  dikarenakan didalam  ekstrak  patikan  kebo  terkandung senyawa  flavonoid  yang  berperan  dalam meningkatkan pengeluaran urin. Flavonoid dapat  meningkatkan  volume  urin  dengan cara meningkatkan laju kecepatan glomerulus  (Jouad,  2001).  Selain  itu flavonoid  dapat  menghambat  reabsorbsi Na + dan  Cl - sehingga  menyebabkan peningkatan  Na + dan  air  dalam  tubulus.
Dengan  demikian,  terjadi  peningkatan volume  air  dalam  tubulus  dan  terjadi peningkatan  volume  urin.  Alkaloid  yang terkandung  dalam  ekstrak  etanol  patikan kebo juga dapat menyebabkan peningkatan volume  urin.  Alkaloid  bekerja  langsung pada  tubulus  dengan  cara  meningkatkan ekskresi Na + dan Cl - dengan meningkatnya ekskresi.  Na + juga  akan  meningkatkan
ekskresi air dan menyebabkan volume urin bertambah.
Untuk  mempermudah  pengamatan, rerata  urin  kumulatif  tiap  jam  pada
masing-masing kelompok perlakuan disajikan  dalam  bentuk  grafik  yang  dapat di lihat pada  gambar 5.
Gambar 1. Grafik rerata volume urin kumulatif tiap waktu pengamatan
Pada  grafik  diatas  terlihat  bahwa pemberian  kelompok  perlakuan  furosemid sebagai  kontrol  positif  menunjukkan  efek diuretik yang sangat signifikan dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan lainnya.  Kelompok  perlakuan  dosis  2  dan 3 memberikan efek diuretik yang signifikan dibandingakan kelompok perlakuan dosis 1 dan kelompok perlakuan CMC  0,5%  sebagai  kontrol  negatif.  Pada kelompok  tikus  perlakuan  CMC  0,5% menunjukkan  rerata  volume  urin  yang terendah  tetapi  jika  dilihat  pada  grafik pada jam ke-3, 4, dan 5 memberikan rerata volume  urin  yang  tinggi  dibandingkan dengan  kelompok  perlakuan  dosis  1.  Hal ini  terjadi  karena  pada  tikus  kelompok perlakuan  kelompok  negatif  (CMC  0,5%) mengekskresikan  urin  dalam  jumlah  yang cukup  besar  yang  disebabkan  adanya
fungsi  homeostasis  tubuh.  Fungsi  ini menjaga  keseimbangan  cairan  di  dalam tubuh  dengan  cara  menurunkan  sekresi hormon antidiuretik, mengurangi permeabilitas  tubulus  distal,  dan  duktus kolingentes terhadap air sehingga menurunkan  reabsorbsi  air  yang  pada akhirnya  akan  meningkatkan  ekskresi  urin (Guyton, 2006).
Untuk  melihat  perbedaan  rata-rata untuk  setiap  kelompok  perlakuan  maka dilakukan uji statistika dengan analisis one way ANOVA.  Sebelum  uji one  way ANOVA dilakukan, perlu dianalisis terlebih  dahulu  dengan  uji  homogenitas varians  untuk  melihat  data  yang  diperoleh apakah  telah  tersebar  secara  homogen. Pengujian  akan  dilanjutkan  dengana  uji one  way ANOVA  apabila  P  lebih  besar dari taraf nyata (0,05) (P>0,05).
Tabel 2. Hasil Uji Homogenitas Volume urin Levene Statistic df1 df2 Sig. ,505 4 25 ,733 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 1 2 3 4 5 6 V ol um e R er ata Urin CMC 0,5% Furosemid KP 1 KP 2 KP3

## Tabel 3. Hasil Uji one way ANOVA
Volume urin Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups 10,925 4 2,731 21,273 ,000 Within Groups  3,210 25 ,128 Total 14,134 29
Dari uji homogenitas pada Tabel 3. menunjukkan  nilai  signifikansi  0.733 dengan  nilai  signifikan  yang  lebih  besar dari  0,05  (P>0,05),  hal  ini  berarti pengujian  dapat  dilanjutkan,  karena  telah memenuhi  syarat  untuk  uji one  way ANOVA.
Hasil  pengujian one  way ANOVA dengan  menggunakan  uji  F,  menunjukkan F  hitung  sebesar  21,273  dan  signifikan 0,000. Untuk melihat signifikan nilai  rata- rata    antara  setiap  kelompok  perlakuan yang mengalami perbedaan secara statistik,  maka  pengujian  dilanjutkan dengan uji LSD dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 4. Hasil Uji LSD
Dependent Variable: volume urin LSD (I) Kelompok perlakuan (J) Kelompok perlakuan Mean Difference (I-J) Std. Error Sig. 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound CMC 0,5% FUROSEMID -1,53833 * ,20687 ,000 -1,9644  -1,1123 KP1 ,01667 ,20687 ,936 -,4094 ,4427 KP2 -,59167 * ,20687 ,008 -1,0177 -,1656 KP3 -1,05333 * ,20687 ,000 -1,4794 -,6273 FUROSEMID CMC 0,5% 1,53833 * ,20687 ,000 1,1123 1,9644 KP1 1,55500 * ,20687 ,000 1,1289 1,9811 KP2 ,94667 * ,20687 ,000 ,5206 1,3727 KP3 ,48500 * ,20687 ,027 ,0589 ,9111 KP 1 CMC 0,5% -,01667 ,20687 ,936 -,4427 ,4094 FUROSEMID -1,55500 * ,20687 ,000 -1,9811  -1,1289 KP2 -,60833 * ,20687 ,007 -1,0344 -,1823 KP3 -1,07000 * ,20687 ,000 -1,4961 -,6439 KP 2 CMC 0,5% ,59167 * ,20687 ,008 ,1656 1,0177 FUROSEMID -,94667 * ,20687 ,000 -1,3727 -,5206 KP1 ,60833 * ,20687 ,007 ,1823 1,0344 KP3 -,46167 * ,20687 ,035 -,8877 -,0356 KP 3 CMC 0,5% 1,05333 * ,20687 ,000 ,6273 1,4794 FUROSEMID -,48500 * ,20687 ,027 -,9111 -,0589 KP1 1,07000 * ,20687 ,000 ,6439 1,4961 KP2 ,46167 * ,20687 ,035 ,0356 ,8877
Hasil  uji  LSD  untuk  menunjukkan perbedaan  yang  signifikan  atau  bermakna, bila  nilai  signifikansi  tiap  kelompok perlakuan  yang  kurang  dari  0,05  atau  (≤ 0,05). Kelompok perlakuan kontrol negatif memberikan  perbedaan  yang  signifikan antara  kelompok  perlakuan  positif  dan kelompok  perlakuan  dosis  2  dan  3, sedangkan  untuk  kelompok  perlakuan ekstrak  perlakuan    dosis  1  memberikan perbedaan  signifikan  yaitu  0,936  dimana lebih besar dari 0,05. Kelompok perlakuan kontrol  positif,  memberikan  perbedaan yang  signifikan  dari  semua  kelompok perlakuan.  Kemudian  untuk  kelompok perlakuan  dosis  1  tidak  memberikan signifikansi  pada  kelompok  perlakuan kontrol  negatif,    dan  adanya  perbedaan yang signifikan untuk kelompok perlakuan kontrol  positif,  kelompok  perlakuan  dosis 2  dan  3,  sedangkan  untuk  kelompok perlakuan  dosis  2  dan  3  memberikan perbedaan  yang  signifikan  dengan  semua kelompok perlakuan.

## PENUTUP Kesimpulan
Berdasarkan    hasil  yang  diperoleh dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol patikan  kebo  memiliki  efek  diuretik terhadap  tikus  putih  jantan  galur  wistar (Rattus  norvegicus) .  Terdapat  pengaruh antara  konsentrasi  dosis  ekstrak  etanol patikan  kebo  dengan  efek  diuretik  pada tikus  putih  jantan  galur  wistar,  dimana ekstrak  etanol  patikan  kebo  dengan  dosis 0,18 g/KgBB memberikan efek peningkatan urin yang signifikan.

## Saran
Disarankan  peneliti  selanjutnya  untuk mengekstraksi  senyawa  flavonoid  murni serta  melakukan  uji  dosis  toksik  pada tanaman  patikan  kebo  ( Euphorbia  hirta Linn) sebagai obat alternatif diuretik.

## DAFTAR PUSTAKA
Anna.  2011. Uji  Efek  Diuretik  Ekstrak Etanol 70% Daun Ceplukan ( Physalis  angulata L.)  [Skripsi]. Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Depkes RI. 2007. Kebijakan Obat Tradisional  Nasional .  Depkes  RI. Jakarta.
Guyton,  A.  C.,  Hall,  J.  E.  2006. Textbook of  Medical  Physiology. Edisi  XI. Elvesier inc. Philadelphia. Hariana,  A.  2006. Tumbuhan  Obat  dan Khasiatnya. Edisi  II.  Penebar
Swadaya. Jakarta. hal 19-20.
Jangkaru Z. 2006. Tanaman Obat Pelancar  Air  Seni .    Penebar Swadaya. Jakarta.
Jouad, H., Lacaille-Dubois, M. A, Lyoussi, B.  and  Edduks,  M.  2001. Effect  of
The Flavonoids Extract from Spregularia  purpurea  Pers.  On Arterial  Blood  Pressure  and  Renal Fuction in Normal and Hypertensive  Rats .  Journal  of Ethnopharmacology. 76:156-163. Khabibah,    N.  2011, Uji  Efek  Diuretik Ekstrak Buncis (Phaseolus
Vulgaris  L)    Pada  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar .  [Skripsi]. STIKES Ngudi Waluyo. Ungaran. Sari,  L.,  O.  2006. Pemanfaatan  obat tradisional  dengan  pertimbangan manfaat dan keamanannya. Majalah  Ilmu  Kefarmasian 3(1):1- 7.
Siswanto,  Y.W.  1997. Penanganan  Hasil Panen  Tanaman  Obat  Komersial . Trubus Agriwidya. Jakarta
Tjay,  T.,  Raharja,  K.  2002. Obat  –  Obat Penting. Cetakan  2.  Dirjen  POM. Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia. Jakarta.