PENGARUH KONSENTRASI PUPUK Azolla pinata TERHADAP PERTUMBUHAN POPULASI
Spirulina platensis
THE EFFECT OF Azolla pinata FERTILIZER CONCENTRATION IN Spirulina platensis POPULATION GROWTH
Faricha Risma Nurani, Endang Dewi Masithah dan A. Shofy Mubarak
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Spirulina merupakan salah satu jenis alga  yang sangat diminati oleh produsen pembenihan dan suplemen  kesehatan.  Hal  yang  dapat  mendorong  peningkatan  produksi Spirulina adalah  peningkatkan pertumbuhan,  yaitu  meningkatkan  jumlah  sel.  Salah  satu  cara  untuk  meningkatkan  pertumbuhan fitoplankton adalah mengontrol kandungan nutrien baik makro maupun mikro pada lingkungan budidaya. Azolla pinata memiliki berbagai unsur hara antara lain N, P, K, Ca, S, Mg, Mn, Fe, Zn, Co. Kandungan unsur  kimia  dalam Azolla  pinata secara  kualitatif  dan  kuantitatif  dapat  memenuhi  kebutuhan  unsur makro  dan  mikro  pertumbuhan Spirulina  platensis . Azolla  pinata merupakan  tanaman  paku  mini  yang bersimbiosis dengan cyanobacteria pemfiksasi N 2 yaitu Anabaena azollae. Simbiosis  ini  menyebabkan Azolla pinata sebagai sumber N.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  konsentrasi  pupuk Azolla  pinata terhadap  pertumbuhan  populasi Spirulina  platensis dan untuk  mengetahui  konsentrasi  optimal  pupuk Azolla  pinata yang  dapat  menghasilkan  pertumbuhan  tertinggi Spirulina  platensis .  Penelitian dilaksanakan di Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Surabaya. Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan.
Bahan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah S. platensis yang dikultur pada botol kaca 500  ml  dengan  lima perlakuan dan empat  kali ulangan.  Bahan pupuk  yang digunakan adalah 500  gram Azolla pinata dan 2 liter aquades. Konsentrasi pupuk Azolla pinata yang diberikan pada perlakuan adalah A (3,5  ml), B (5,5  ml), C (7,5  ml), D (9,5  ml), E (kontrol  Walne 1  ml). Parameter utama  yang diamati adalah populasi, sedangkan parameter pendukung yang diamati adalah suhu, pH, dan salinitas.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  konsentrasi  pupuk Azolla  pinata memberikan  pengaruh yang berbeda nyata terhadap pertumbuhan populasi Spirulina platensis . Penambahan pupuk Azolla pinata kedalam  media  kultur  menggunakan  konsentrasi  3,5  ml  menghasilkan  populasi Spirulina  platensis tertinggi sebesar 1708,6 x 10 3 unit/ml.
Keywords : S. platensis , Azolla pinnata , sumber Nitrogen

## Pendahuluan
Spirulina merupakan  jenis  mikroalga golongan Cyanophyta atau alga hijau biru ( blue- green  algae ) yang  telah  banyak  digunakan sebagai  pakan  alami  dalam  usaha  budidaya khususnya  dalam  pembenihan.  Kultur S. platensis membutuhkan  nutrien  (pupuk)  untuk memperkaya  kandungan  nutrisi  untuk  menjaga kestabilan  produksi.  Nitrogen  merupakan  salah satu  unsur  makro  nutrien  yang  sangat  berperan sebagai penyusun senyawa dalam  sel, termasuk protein  (Chrismadha  dkk.,  2006)  dan  klorofil (Corsini  dan  Karidys,  1990 dalam Prabowo, 2009) untuk fotosintesis.
S. platensis merupakan mikroalga yang tidak  memiliki  heterosis,  sehingga  spesies  ini tidak  mampu  memfiksasi  Nitrogen  dari  udara. Pemenuhan  kebutuhan  Nitrogennya  sangat
bergantung pada ketersediaannya dalam medium  (Kurniasih,  2001).  Mahalnya  harga pupuk  sintetis  (pupuk  Walne)  menjadi  dasar pencarian  sumber  Nitrogen  alternatif  yang berasal  dari  alam,  yaitu  dengan  menggunakan sisa  hasil  pertanian  sehingga  tidak  perlu  biaya yang  banyak  untuk  menggunakannya.  Salah satu contohnya adalah Azolla pinnata . Azolla  pinata merupakan  tanaman paku mini yang bersimbiosis dengan cyanobacteria pemfiksasi  N 2 yaitu Anabaena azollae. Simbiosis  ini  menyebabkan Azolla pinata mempunyai  kualitas  nutrien  yang  baik sebagai  sumber  N  Ratna  (2007).  Fiksasi nitrogen  yang  dilakukan  oleh Anabaena  azolla yang  tergolong  bakteri  prokariotik  ini  dengan memanfaatkan  gas  nitrogen  yang  ada  di atmosfer  yang  berupa N 2 yang dirubah  menjadi
ammonia  NH 3. Sumber  nitrogen  dapat  berupa senyawa  nitrat  (NO 3 - ),  nitrit  (NO 2 - )  dan ammonium  (NH 4 + ).  Kaplan et  al .,  (1986) menyetakan  bahwa  nitrat  (NO 3 - )  tereduksi menjadi  nitrit  (NO 2 - ),  kemudian  nitrit  (NO 2 - ) tereduksi  menjadi  ammonium  (NH 4 + ).  Proses tersebut dapat terjadi karena adanya kerja enzim nitrat  reduktase  dan  besi  (FeCl 3 ).  Proses  ini disebut  nitrifikasi  (pembentukan  amonia  dari pemecahan  protein)  yang  dapat  dilakukan  oleh Anabaena  azollae yang  bersimbiosis  dengan Azolla  pinata yang  menjadikan  nitrogen tersedia.
Metodologi
Peralatan yang digunakan dalam penelitian  adalah  toples  kaca,  aerator,  selang aerator,  gelas  ukur,  erlenmeyer,  pipet  tetes, pipet  volume,  mikroskop, Sedgewick  Raffter, handtally  counter ,  refraktometer,  pH  paper, termometer,  lampu  TL  40  watt,  kapas,  corong air,  dan  kertas  saring.  Bahan  penelitian  yang digunakan  adalah S.  platensis ,  rendaman  bintil akar kacang tanah, pupuk  Walne, air tawar dan air  laut,  aquades,  alkohol,  khlorin  dan  Na Thiosulfat.
Rancangan  penelitian  yang  digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL), sebab dalam  penelitian  ini  semua  dikondisikan  sama kecuali  perlakuan  penambahan  pupuk Azolla pinnata (Kusriningrum,  2008).  Perlakuan  pada penelitian sebanyak 5 perlakuan dengan ulangan sebanyak  4  kali  yaitu  pupuk Azolla  pinnata sebanyak 3,5  mL (A), 5,5 mL (B), 7,5 mL (C), 9,5  mL  (D),  dan  kontrol  dengan  menggunakan pupuk Walne (E).
Persiapan penelitian meliputi sterilisasi air  laut  dan  sterilisasi  alat.  Sterilisasi  air  laut dilakukan dengan menggunakan khlorin 60 ppm dan  Na  Thiosulfat  (untuk  menetralisir  kadar klorin),  diberi  aerasi  selama  24  jam.  Air  laut yang  sudah  steril  disimpan  dalam  wadah  tidak tembus  cahaya  dan  tertutup  (Rusyani  dkk., 2007). Sterilisasi alat dilakukan dengan dua cara berbeda. Untuk peralatan yang terbuat dari kaca tahan  panas,  semua  peralatan  dicuci  bersih kemudian  disterilisasi  menggunakan autoclave pada  suhu  121 o C  selama  15  menit.  Sedangkan peralatan  yang  tidak  tahan  panas  disterilkan dengan larutan khlorin 150 ppm selama 24 jam. Kemudian  dibilas  dengan  air  tawar  hingga bersih dan bau khlorin hilang.
Pupuk  yang  digunakan  sebagai  media kultur  dan  kontrol  adalah  pupuk  Walne  yang didapatkan  dari  Balai  Besar  Pengembangan Budidaya Air Payau Jepara. Pupuk yang berasal dari Azolla  pinnata dibuat  dengan  cara mengeringkan Azolla pinnata kemudian dikeringkan.  Setelah  kering, Azolla  pinnata diambil  dan  digiling.  Hasil  gilingan Azolla pinnata ditimbang  sebanyak  500  gram  lalu direndam  dalam  2  L  aquades  selama  empat minggu  (dilakukan  pengocokan  setiap  hari), dengan  suhu  ruangan  (32 o C)  dan  berada  dalam keadaan  anaerob.  Setelah  empat  minggu, rendaman Azolla  pinnata diperas  dengan menggunakan kain untuk diambil hasil perasannya (Hutagalung, 2008).
Bibit S.  platensis dengan  kepadatan 10.000  unit/mL  (Swantika,  2009).   dimasukkan dalam  toples  kaca  yang  telah  diisi  air  laut  dan media  kultur,  yaitu  pupuk  Walne  dan  pupuk Azolla  pinnata sesuai  dengan  konsentrasi perlakuan.
Perhitungan Pertumbuhan Populasi S. platensis Pertumbuhan populasi dihitung dengan cara  menghitung  jumlah  unit  (sinusoid) S.
platensis . Penghitungan  dilakukan  dengan menggunakan Sedgewick  Raffter dan Handtally Counter untuk memudahkan perhitungan.
Pengamatan pertumbuhan S. platensis dilakukan setelah  24  jam  penebaran  awal  setiap  hari. Perhitungan dilakukan dengan rumus (Isnasetyo dan Kurniastuti, 1995) :
Sinusoid/ml = Jumlah x 1000 x P 3,14 x 10 Keterangan:
1000  =   Jumlah  bidang  pandang  yang terdapat  pada  lekukan sedwigh
rafter
3,14   = Diameter bidang pandang (mm)
10      = 10 kali pengamatan
P = Pengenceran Parameter Penelitian Parameter  utama  dalam  penelitian  ini adalah populasi S. platensis. Parameter pendukung  dalam  penelitian  adalah  suhu  air, suhu ruang, pH, dan salinitas. Pengukuran suhu menggunakan  termometer,  pengukuran  pH menggunakan  pH  paper,  dan  pengukuran salinitas menggunakan refraktometer.
Analisis Data Untuk  mengetahui pengaruh perlakuan
konsentrasi  pupuk Azolla  pinata terhadap pertumbuhan populasi Spirulina platensis digunakan  uji  statistik  ANAVA  (UJI  F  dengan taraf  kepercayaan  95%).  Apabila  nilai  uji  F berbeda  nyata  maka  dilanjutkan  dengan  Uji jarak  berganda  Duncan  untuk  mengetahui hubungan antara variabel bebas (perlakuan) dan variabel  tergantung  (hasil)  (Kusriningrum, 2008).

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  pengamatan  penelitian  berupa penghitungan  populasi Spirulina  platensis yang dikultur selama sepuluh hari. Pertumbuhan Spirulina  platensis selama  sepuluh  hari  dapat dilihat pada Tabel 1.
Hasil Analisis varian (ANAVA)
pengaruh  konsentrasi  pupuk Azolla  piñata terhadap pertumbuhan populasi Spirulina platensis menunjukkan  bahwa  masing-masing perlakuan  memberikan  pengaruh  yang  berbeda nyata  (P<0,05)  terhadap  pertumbuhan  populasi
Tabel 1. Rata-rata  Pertumbuhan  Populasi Spirulina  platensis Yang  Dikultur  Menggunakan  Pupuk Azolla pinata Pada Hari Ke-0 Sampai Hari Ke-10
Hari ke- Kepadatan Populasi Spirulina platensis 10 3 (unit/ml) Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D Perlakuan E 0 10 10 10 10 10 1 16,4 a 15,3 a
15,9 a
15,3 a 12,3 a 2 50,5 a 38,4 ab 34,8 ab 30,2 b 33,9 ab 3 96,3 a 72,1 a 64,8 a 79,8 a 149,2 a 4 258,6 a 255,1 a 144,8 ab 111,3 b 149,2 ab 5 509,2 a 357,5 ab 219,7 b 179,9 b 269,7 b 6 1148,1 a 1031,8 ab 227,2 c 184,5c 889,9 b 7 1708,6 a 1064,5 b 241,1 c 224,8 c 1071,1 b 8 1030,6 a 879,3 a 561,8 b 383,3 b 857,3 a 9 962,6 a 867,9 a 517,9 b 360,7 b 797,3 a 10 796,3 a 648,6 ab 458,4 bc 328,1 c 744,1 a
Keterangan: Superskrip berbeda dalam satu kolom menunjukkan perbedaan yang nyata  (p < 0,05) Perlakuan A = Pemberian pupuk Azolla pinata dengan konsentrasi 3,5 ml/l Perlakuan B = Pemberian pupuk Azolla pinata dengan konsentrasi 5.5 ml/l Perlakuan C = Pemberian pupuk Azolla pinata dengan konsentrasi 7,5 ml/l Perlakuan D = Pemberian pupuk Azolla pinata dengan konsentrasi 9.5 ml/l Perlakuan E = Pemberian pupuk walne dengan konsentrasi 1ml/l (kontrol)
Gambar 1.   Grafik Rata-Rata Pertumbuhan Populasi Spirulina platensis (unit/ml) Setelah Penambahan Pupuk Azolla piñata Yang Dikultur Selama Sepuluh Hari.
Spirulina  platensis. Hal  ini  diduga  karena adanya  pengaruh  yang  nyata  pada  penggunaan pupuk Azolla  pinnata sebagai  sumber  Nitrogen terhadap populasi S. platensis .
Pada  Gambar  1.  terlihat  bahwa Spirulina  platensis yang  dikultur  dengan menggunakan  pupuk Azolla  piñata terlihat mengalami  fase  adaptasi,  fase  eksponensial, fase  stasioner  dan  fase  kematian.  Fase  adaptasi (istirahat)  merupakan  fase  penyesuaian  diri (adaptasi) terhadap  lingkungannya. Pada  semua perlakuan  fase  ini  terjadi  pada  hari  ke-0 (penebaran inokulum) sampai hari pertama. fase adaptasi  yang  pendek  juga  disebabkan  media pada perlakuan sesuai dengan media pemeliharaan.  Menurut  Prihantini  (2007)  salah satu  faktor  yang  menentukan  lamanya  fase adaptasi  adalah  umur  kultur  yang  digunakan sebagai  inokulan.  Fase  adaptasi  akan  mejadi lebih  singkat  atau  bahkan  tidak  terlihat  apabila sel-sel  yang  dinokulasikan  berasal  dari  kultur yang  berada  dalam  fase  eksponensial.  Fase adaptasi  tidak  terlihat  jelas  pada  semua  media perlakuan kemungkinan juga disebabkan sel-sel yang  dinokulasikan  cepat  beradaptasi  terhadap media kultur yang baru (Prihantini, 2007).
Fase  eksponensial  berlangsung  pada hari  kedua,  hanya  saja  lama  waktu  yang berbeda.  Pada  fase  eksponensial  ini  jumlah kepadatan populasi meningkat. Fase
eksponensial  ditandai  dengan  meningkatnya pembelahan  sel  sehingga  populasi Spirulina platensis akan mengalami puncak pertumbuhan. Menurut Prihantini (2007) pada fase eksponensial  ini  ketersediaan  unsur  nitrogen dalam medium cukup besar sehingga memungkinkan  biosintesis dan  metabolisme  sel cepat  yang  menyebabkan  terjadi  puncak pertumbuhan.    Puncak  pertumbuhan  populasi tertinggi Spirulina platensis pada penelitian ini terjadi  pada  hari  ketujuh  dengan  populasi tertinggi  pada  perlakuan  pemberian  pupuk Azolla  piñata 3,5  ml  dengan  kepadatan maksimal  1708,6  x  10 3 unit/ml  dan  populasi terendah  pada  perlakuan  D  dengan  kepadatan minimal 224,8 x 10 3 unit/ml.
Fase stasioner pada penelitian berlangsung  singkat.  Hal  ini  disebabkan  karena pada  penelitian  ini  pengamatan  dilakukan selama 24  jam  sekali    (Prihantini dkk , 2005). Fase  ini  akan  tampak  lebih  jelas  apabila dilakukan  pengamatan  penelitian  setiap  6 jam/12  jam sekali (Surya, 2010). Fase stasioner terjadi  pada  perlakuan  pemberian  pupuk Azolla piñata 7,5  ml dan 9,5  ml,  sedangkan perlakuan yang  lainnya  tidak  tampak  mengalami  fase stasioner.  Pada  beberapa  perlakuan  yang  tidak mengalami  fase  stasioner  hal  ini  disebabkan
karena  pada  kultur  yang  mempunyai  kepadatan tinggi  cenderung  memiliki  fase  adaptasi  lebih singkat dan  fase  eksponensial  yang  lebih cepat, kemudian  cepat  mengalami  penurunan  jumlah populasi.  Hal  ini  disebabkan  karena  pada  saat populasi dalam kepadatan tinggi dan mengalami proses  metabolisme  sel,  terjadi  akumulasi senyawa  hasil  metabolisme dalam  konsentrasi tinggi  sehingga  dapat  meningkatkan  mortalitas
Spirulina platensis (Prihantini, 2005). Fase kematian pada perlakuan pemberian  pupuk Azolla  piñata terjadi  setelah Spirulina platensis mengalami puncak pertumbuahan  populasi,  kecuali  pada  beberapa perlakuan  yang  mengalami  fase  stasioner. Pengurangan  populasi  ini  disebabkan  karena ketersediaan unsur nitrogen sebagai makronutien pada pertumbuhan Spirulina platensis sudah  habis  digunakan  untuk  proses metabolisme  sel  yang  menyebabkan Spirulina platensis tidak  mampu  lagi  mempertahankan kepadatannya  dan  cepat  mengalami  penurunan (Prihantini, 2007).
Konsentrasi pupuk Azolla pinata terhadap pertumbuhan populasi Spirulina platensis menunjukkan  bahwa  masing-masing perlakuan  memberikan  pengaruh  yang  berbeda nyata  (P<0,05)  terhadap  pertumbuhan  populasi Spirulina  platensis .  Hasil  tersebut  diduga disebabkan  karena Spirulina  platensis mampu memanfaatkan  nutrient  yang  terkandung  dalam pupuk Azolla  pinata dengan  baik  untuk pertumbuhannya.  Rahma  (2007)  menjelaskan bahwa Azolla  piñata mengandung  unsur makronutrien  dan  mikronutrien  yang  sama dengan kebutuhuhan Spirulina platensis . Hari  pertama  hingga  hari  kesepuluh populasi Spirulina  platensis pada  perlakuan pemberian  pupuk Azolla  pinata 7,5  ml  dan pupuk Azolla  pinata 9,5  ml    lebih  rendah  jika dibandingkan  dengan  perlakuan  pemberian pupuk Azolla pinata 3,5 ml,pupuk Azolla pinata 5,5 ml. Hal tersebut disebabkan pada perlakuan pemberian  pupuk Azolla  pinata 7,5  ml  dan  9,5 ml diduga pupuk Azolla pinata yang ditambahkan  pada  media  melebihi  kebutuhan nutrisi Spirulina platensis sehingga nutrien yang ada tidak mampu dimanfaatkan secara maksimal sehingga menyebabkan pertumbuhannya  menjadi  terhambat.  Saptarini,
dkk (2003)  meyatakan  bahwa  jumlah  nitrogen dan  fosfor  yang  berlebihan  bisa  menjadi  racun bagi fitoplankton.
Menurut  Rostini  (2007)  faktor  yang menentukan  untuk  mendapatkan  efisiensi  dan efektivitas pemberian pupuk terhadap fitoplankton adalah dengan memberikan
konsentrasi  yang  sesuai. Spirulina  platensis
pada perlakuan  pemberian pupuk Azolla pinata 3,5 ml  dan 5,5 ml dapat tumbuh lebih baik dan kepadatan populasinya tinggi jika dibandingkan dengan  perlakuan  lainnya.  Populasi Spirulina platensis tertinggi  pada  penelitian  yaitu  pada pemberian  pupuk Azolla  pinata 3,5  ml  dengan jumlah  kepadatan Spirulina  platensis 1708,6  x 10 3 unil/ml    dan  populasi  terendah  pada pemberian  pupuk Azolla  pinata 9,5  ml  dengan jumlah  kepadatan Spirulina  platensis 224,8  x 10 3 unit /ml.  Hal ini disebabkan karena nitrogen dan  fosfor  yang  yang  terdapat  dalam  pupuk Azolla  pinata mampu  diserap  dengan  baik  oleh Spirulina  platensis setelah  penebaran  inokulan dalam  media  kultur,  sehingga  dapat  memacu pertumbuhannya  (Nishio et.al., 1985 dalam Surya, 2010).
Nitrogen  merupakan  nutrien  yang dibutuhkan  paling  banyak  untuk  pertumbuhan fitoplankton  (Wijaya,  2006).  Nitrogen  sebagai unsur penting dalam pembetukan klorofil a dan protein (Isnasetyo dan Kurniastuti, 1995). Unsur fosfor  ini  juga  sangat  dibutuhkan  dalam  proses metabolisme  sel,  pembelahan  sel  dan  transfer energi  (Richmond,  1986). Spirulina  platensis yang  dikultur  dengan  menggunakan  pupuk Azolla pinata dapat tumbuh dengan baik selama penelitian.  Hasil  analisis  kimia  pupuk Azolla pinata mempunyai  kandungan nitrogen sebesar 2,8  mg  (0,28%)  dan  fosfor    4  mg  (0,04%) (Lampiran  1).  Rasio  N:P  pupuk Azolla    piñata adalah 7:1 dimana nilai rasio N:P Azolla pinata ini  sesuai  dengan  rasio  N:P Blue  Green    Alga yaitu  <  10:1.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Edhy,  dkk  (2003)  yang    menyatakan  bahwa rasio N:P untuk Blue Green Alga adalah <10:1. Rasio  N:P  berpengaruh  tehadap  pertumbuhan fitoplankton  karena  apabila  rasio  jumlah nitrogen dan  fosfor belebih  bisa  menjadi toksik bagi fitoplakton itu sendiri dan dapat menghambat pertumbuhannya. Sebaliknya apabila jumlah nitrogen dan fosfor kurang maka fitoplankton akan mati.
Pertumbuhan Spirulina  platensis yang baik  selain  dipengaruhi  oleh  kandungan  nutrisi juga  dipengaruhi  oleh  kondisi  lingkungan  di dalam media pemeliharaan. Dalam penelitian ini faktor lingkungan seperti suhu, pH dan salinitas masih  dalam  kondisi  yang  optimal,  sehingga tidak nampak
pengaruhnya terhadap pertumbuhan Spiruina  platensis (Vonshak, 1997).  Faktor  lingkungan  yang  mendukung pertumbuhan Spirulina  platensis adalah  suhu air,  suhu  ruangan,  salinitas  dan  pH  (Vonshak, 1997).
Hasil  pengukuran  suhu  air  pagi  hari selama  penelitian  berkisar  antara  27  -  29 o C, suhu air siang hari  berkisar antara 29-31 ° C, dan
suhu air pada sore hari  berkisar antara 27-30°C suhu ruangan  berkisar antara 32-34 o C.  Suhu air dan  suhu  ruangan  dalam  media  pemeliharaan Spirulina  platensis ini  masih  dalam  kondisi baik  untuk  pertumbuhannya  karena  menurut dengan  pernyataan  Isnansetyo  dan  Kurniastuty (1995)  menyatakan,  suhu  optimal  untuk Spirulina skala laboratorium adalah 25 - 35 o C. Salinitas pada media pemeliharaan Spirulina  platensis berkisar  antara  28-48  ppt. Richmond (1986) bahwa  salinitas  yang optimal untuk  pertumbuhan Spirulina  platensis adalah berkisar  antara  20  –  70  ppt.  Darley  (1982) menyatakan, salinitas sangat berpengaruh terhadap  pertumbuhan  sebab  berhubungan dengan  aktifitas  osmosis  sel.  Hasil  pengukuran pH pada media pemeliharaan Spirulina platensis selama  penelitian  adalah  8.  Suryati (2002) menyebutkan bahwa pH yang baik untuk pertumbuhan Spirulina berkisar antara 8,5-9,5.

## Kesimpulan
Konsentrasi pupuk Azolla pinata memberikan  pengaruh  yang  berbeda  nyata terhadap pertumbuhan populasi Spirulina platensis .  Penambahan  pupuk Azolla  pinata kedalam media kultur menggunakan konsentrasi 3,5  ml  menghasilkan  populasi Spirulina platensis tertinggi  sebesar  1708,6  x  10 3 unit/ml pada hari ke-7. Pertumbuhan populasi Spirulina platensis dapat ditingkatkan dengan penambahan Pupuk Azolla pinata (500 g Azolla piñata dan  2  liter  aquades)  menggunakan konsentrasi 3,5 ml dalam media kultur.

## Daftar Pustaka
Chrismadha,T.,  M  Panggabean,dan  Yayah Mardiati.  2006.  Pengaruh  Konsentrasi
Nitrogen dan Fosfor Terhadap Pertumbuhan, Kandungan Protein, Karbohidrat  dan  Fikosianin  Pada  Kultur Spirulina  fusiformis .  Jurnal  Penelitian Limnologi –LIPI : 163-169. Darley, W.M.  1982. Algal Biology:  a
Physiological  Approach. Departement of Bontany.  The  Univercity  of  Georgia.
Blackwell  Sientific  Publications.  Oxford London. Edinburgh Boston Melburne. p.
97-98.
Hutagulung,  I.  2008.  Pembuatan  Pupuk  Cair. Heifer International Indonesia. 2 hal.
Isnansetyo,  A  dan  Kurniastuty.  1995.  Teknik Kultur  Phytoplankton  dan  Zooplankton. Kanisius. Yogyakarta. hal. 34-85.
Kurniasih. 2001. Komposisi Nutrisi dan Pigmen Spirulina  platensis  Galur  Lokal  INK
pada  Berbagai  Konsentrasi  Nitrogen.
Institut Pertanian Bogor. Bogor. 47 hal.
Kusriningrum, R. 2008. Perancangan Percobaan. Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 44 – 50. Prabowo., D. A. 2009. Optimasi Pengembangan
Media  untuk  Pertumbuhan  Chlorella  sp.
pada Skala Laboratorium . Skripsi.
Program  Studi  Ilmu  dan  Teknologi Kelautan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan,  Institut  Pertanian  Bogor.  hal. 11-12.
Prihantini,  B.  N.  2007.  Pertumbuhan Chlorella spp.  Dalam  Medium  Ekstrak  Tauge (MET)  Dengan  Variasi  pH  Awal. Departemen  Biologi  Fakultas  MIPA. Universitas Indonesia. Jakarta. 7 hal.
Rahma,  S.C.  2007.  Pengaruh Azolla  pinata
Terhadap  Sifat  Kimia  Kualitas  Air  di
Daerah  Hilir  Sungai  Bengawan  Solo. Skripsi.  Fakultas  Sains  dan  Teknologi. Universitas Islam Negeri Malang. Malang. 76 hal. Ratna  Intan  D.  A.  2007.  Fiksasi  N  Biologis Pada Ekosistem Tropis. Program Pascasarjana.Universitas Padjajaran. Bandung. 68 hal. Richmond, A. 1986. CRC Handbook
Microalgal  Mass  Culture.  CRC  Press, Inc. Florida. p. 199-244.
Rostini  I.  S.  Pi.  2001.  Kultur  Fithoplankton Chlorella sp.  Pada  Skala  Laboratorium. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas  Padjajaran.  Bandung.    Hal 33-36 Rusyani,  E.,  Sapta  A.I.M.  dan  Lydia  E.,  2007. Budidaya Fitoplankton Skala Laboratorium dalam Budidaya Fitoplankton  dan  Zooplankton.  Balai Budidaya  Laut  Lampung.  Direktorat Jendral Perikanan Budidaya. Departemen Kelautan  dan  Perikanan:  9.  Lampung.
hal. 48-59.
Saptarini.,  D.  Aunurohim  dan  Devie.,  Y.  2008. Fitoplankton  Penyebab  Harmful  Algae Blooms (HABs)  di  Perairan  Sidoarjo. Biologi  FMIPA.  Institut  Teknologi Sepuluh Nopember. Surabaya Surya,  A.  A.  2010.  Pemanfaatan  Limbah Kotoran  Ayam  Kering  Sebagai  Pupuk Untuk  Pertumbuahan  Populasi  Spirulina platensis.  Skripsi.  Fakultas  Perikanan dan  Kelautan.  Universitas  Airlangga. Surabaya. Hal. 35-40 Suryati, 2002. Pemanfaatan Limbah Cair Pabrik Gula (LCPG) untuk Pertumbuhan
Spirulina sp.. Skripsi. Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang. 74 hal.
Vonshak  ,  A.  2004.  Mixotropic  Growth Modifies the respone of Spirulina cell to light. J. Phycol., 36 (4): 675-679 Wijaya.  S.  A.  2006.  Pengaruh  Pemberian Konsentrasi Urea yang Berbeda Terhadap  pertumbuhan Nannochloropsis oculata . Skiripsi. Program Studi Budidaya  Perairan.  Fakultas  Kedokteran Hewan. Universitas Airlangga. Surabaya. 2-3 hal.