PEMBUATAN KONSENTRAT PROTEIN DARI BIJI KELOR ( Moringa oleifera L.) DAN

## ANALISIS PROFIL ASAM AMINO
[The Production of Protein Concentrate from Moringa Seed ( Moringa oleifera L.) and its Amino Acid Profile Analysis]
Nurhayati 1* , Mappiratu 1 , Musafira 2
1) Jurusan Kimia Fakultas MIPA, Universitas Tadulako Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
2) Universitas Sulawesi Barat, Majene
*)Coresponding author: noerchemz@yahoo.co.id
Diterima  6 Desember 2017, Disetujui 25 Januari 2018

## ABSTRACT
A  reasearch  about  the  production  of  protein  concentrate  from moringa  seeds  and  analysis  of  amino acid profiles have been conducted. The aim of the reasearch is to determine the degree of saturation of ammonium sulphate with high rendament and protein content, ti determine the ratio of ammonium sulphate toward moringa seeds with high rendament and also high protein content, and to determine the amino acid profile of moringa seed protein concentrate. The completely randomized design (CRD) was  used  in  the  reasearch,  with  6  variations  of  ammonium  sulphate  saturation  degree  and  5 variations of the ratio of moringa seed flour toward ammonium sulphate (50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%  and  1:2, 1:3,  1:4,  1:5,  and  1:6  (w/v)  respectively).  Each  treatment  was  done  in  triplo.  The  best degree of saturation of ammonium sulphate  was 65% with 46.56% of the rendament and 72.19% of protein  content.  The  best  ratio  of  moringa  seed  flour  toward  ammonium  sulphate  was  1:6.  It  has 70.96%  of  rendament  and  74.16%  of  protein  content.  The  amino  acid  profile  consist  of  essential amino acid and non essential amino acids. The components of those amino acids were arginine (77.3 mg/g),  phenylalanine  (27.61  mg/g),  leucine  (27.39  mg/g),  valine  (15.19  mg/g),  isoleucine  (13.16 mg/g),  histidine  (13,16  mg/g),  threonine  (11,29  mg/g),  methionine  (10.67  mg/g)  lysine  (7.57  mg/g), triptofan (3.49 mg/g) and glutamc acid (97.2 mg/g), proline (26.3 mg/g), glysine (24.74 mg/g), alanine (17.57  mg/g),  aspartic  acid  (17.45  mg/g),  serine  (15.16  mg/g),  tyrosine  (11.29  mg/g),  cystein  (5,9 mg/g) respectively.
Keywords : Amino acids profile, moringa seeds, protein concetrate.

## ABSTRAK
Penelitian  tentang  pembuatan  konsentrat  protein  dari  biji  kelor  dan  analisis  profil  asam  amino  telah dilakukan,  dengan  tujuan  untuk  menentukan  tingkat  kejenuhan  amonium  sulfat  yang  menghasilkan konsentrat  protein  dengan  rendemen  dan  kadar  protein  tertinggi,  rasio  tepung  biji  kelor  terhadap amonium sulfat yang menghasilkan konsentrat protein dengan rendemen dan kadar protein tertinggi, dan  mengetahui  profil  asam  amino  konsentrat  protein  biji  kelor.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL),  dengan  variasi  tingkat  kejenuhan  amonium  sulfat 50%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% dan variasi rasio tepung biji kelor terhadap amonium sulfat 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, dan 1:6 (b/v), setiap perlakuan dilakukan sebanyak 2 kali. Tingkat kejenuhan amonium sulfat terbaik  diperoleh  pada  65%  dengan  rendemen  sebesar  46,56%  dan  kadar  protein  72,18%.  Rasio amonium  sulfat  terhadap  tepung  biji  kelor  diperoleh  rasio  terbaik    1:6  dengan  rendemen  sebesar 70,96%  dan  kadar  protein  sebesar  74,16%.  Profil  asam  amino  konsnentrat  protein  biji  kelor  yaitu asam amino essensial berupa arginin (77,3 mg/g), fenilalanin (27,61 mg/g), leusin (27,39 mg/g), valin (15,19 mg/g), isoleusin (13,16 mg/g), threonin (11,29 mg/g), metionin (10,67 mg/g),  lisin (7,57 mg/g), dan triptofan (3,49 mg/g). Asam amino non essensial berupa asam glutamat (97,2 mg/g), prolin (26,3 mg/g),  glisin  (24,74  mg/g),  alanin  (17,57  mg/g),  asam  aspartat  (17,45  mg/g),  serina  (15,16  mg/g), tirosin (11,29 mg/g), dan sistina (5,9 mg/g).
Kata kunci : Asam amino essensial biji kelor, Biji kelor, Konsentrat protein, Profil asam amino

## LATAR BELAKANG
Lembah  Palu  merupakan  salah  satu daerah  yang  memiliki  iklim  yang  sangat sesuai  untuk  tanaman  kelor  ( Moringa oleifera L.) tumbuh dengan subur (Laguni, 2012).  Tanaman  ini  banyak  dimanfaatkan oleh  masyarakat  Palu  sebagai  sayuran, baik  daun  maupun  buahnya.  Akan  tetapi, banyak  pula  buah  kelor  yang  jika  telah kering  hanya  terbuang  percuma,  tidak terkecuali  bagian  bijinya.  Biji  buah  kelor berbentuk  bulat  dan  bila  sudah  tua  akan bertekstur  agak  keras.  Dilain  pihak  biji buah  kelor  dapat  dimanfaatkan  untuk berbagai  terapan,  selah  satunya  sebagai sumber protein, sebagaimana menurut Al- Khalili, et al. (1997) dalam Srawaili (2008), biji tersebut mengandung protein 38,4%.
Protein termasuk jenis makromolekul yang  sangat  dibutuhkan  oleh  tubuh manusia  sebagai  zat  gizi  (Muchtadi, 2009).  Jenis  dan  jumlah  asam  amino penyusun  protein  sangat  menentukan kualitas  dari  protein  tersebut  (Toha,  2001 dalam Hermiastuti, 2013). Yuniastuti (2008)  mengemukakan  bahwa  protein memiliki  mutu  tinggi  apabila  mengandung semua  jenis  asam  amino  essensial  yang dapat  memberikan  manfaat  optimal  bagi pertumbuhan.
Kekurangan makanan yang mengandung  protein  merupakan  sa;ah satu  masalah  yang  selalu  dihadapi  oleh negara-negara berkembang termasuk Indonesia  (Purwitasari et  al. ,  2014).  Hal tersebut  dapat  diatasi  melalui  pembuatan dan  pemanfaatan  konsentrat  protein.
Konsentrat  protein  didefinisikan  sebagai protein dalam bentuk pekat  dengan kadar protein paling sedikit 50%. Protein jenis ini dibuat dengan cara menghilangkan senyawa  karbohidrat,  lemak,  mineral,  dan air  yang  termasuk  nonprotein,  sehingga kadar protein akan lebih tinggi dibandingkan  bahan  bakunya  (Amoo, et al. ,  2006  dalam  Karnila, et  al. ,  2011).
Pemanfaatan konsentrat protein diarahkan sebagai  bahan  baku  dalam  industri pangan,  seperti  industri roti  dan makanan tambahan (Purwitasari et al. , 2014).
Konsentrat protein dari hewan maupun  tumbuhan  dapat  dibuat  dengan beberapa  cara,  salah  satunya  dengan menggunakan  garam  amonium  sulfat secara pengendapan (salting out). Metode ini  merupakan  metode  banyak  digunakan dalam  pengendapan  protein  ataupun enzim dari suatu bahan. Senyawa amonium  sulfat  merupakan  jenis  garam dengan kekuatan ionik yang tinggi (Matthews et al. , 2000 dalam  Su’i, 2013), kelarutan  tinggi  dalam  air,  murah  (Wang, 2004  dalam  Su’i,  2013),  tidak  berbahaya, dan  memiliki  efek  penstabil  enzim  serta tidak  merusak  protein  sehingga  banyak dimanfaatkan pada metode ini (Chaplin et
al. , 2004 dalam Su’i, 2013).
Penelitian yang dilakukan oleh Purwitasari et  al. (2014),  mengenai pengaruh  suhu  dan  waktu  ekstraksi terhadap  sifat  kimia  dalam  pembuatan konsentrat protein kacang komak menggunakan pelarut etanol 95% dengan rasio  1:2  (b/v)  diperoleh  hasil  terbaik
dengan  kadar  protein  tertinggi  pada  suhu ekstraksi  30 o C  selama  60  menit  dengan rendemen 93,10%.
Isolasi enzim protease menggunakan amonium sulfat telah banyak dilakukan, salah satunya protease dari  getah  tanaman  biduri  menggunakan ammonium sulfat 65% (Hardi dan Diharnaini,  2014;  Witono et  al., 2006).
Selain  itu,  Bahri et  al. (2012)  mengisolasi enzim  amilase  dari  kecambah  biji  jagung ketan  melalui salting  out enzim  dengan tingkat  kejenuhan  ammonium  sulfat  55%. Berdasarkan  beberapa  kajian  di  atas, maka perlu dilakukan penelitian mengenai tingkat  kejenuhan  amonium  sulfat  dan rasionya  terhadap  tepung  biji  kelor  yang optimal  untuk  konsentrat  protein  terbaik serta profil asam amino untuk mengetahui kualitas proteinnya biji kelor.

## METODE PENELITIAN Bahan dan Peralatan
Bahan yang digunakan : biji kelor, n - heksan, amonium sulfat  ((NH 4 ) 2 SO 4 ) tehnis, aquades, kertas saring, NaOH 1 N,
HCl 6 N, alpha aminobutyric acid (AABA), aquabidest,  AccQ-flour  borate,  reagen flour A.
Alat  yang  digunakan  :  blender, ayakan 60 mesh, neraca analitik, seperangkat alat soxhlet, penyaring Buchner,  mesin  kocok,  spektrofotometer UV-Visible  (perkinElmer  Lambda  25), Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi  (KCKT), dan alat-alat gelas yang umum digunakan dalam laboratorium kimia.

## Prosedur Penelitian

## Pembuatan Tepung Biji Kelor
Buah kelor yang sudah tua diambil bijinya,  kemudian  dikeringkan.  Biji  kelor yang sudah kering dihilangkan kulit arinya, kemudian  dikeringkan  dibawah  sinar matahari.  Biji  kelor  yang  kering  diblender dan  diayak  menggunakan  ayakan  60 mesh hingga diperoleh tepung biji kelor

## Ekstraksi  Lemak  Tepung  Biji  Kelor (Sanusi dan Sitorus, 2013)
Ekstraksi  lemak  tepung  biji  kelor dilakukan  dengan  metode  soxhletasi tepung  biji  kelor  dimasukkan  ke  dalam solongsong  kertas,  disumbat  dengan kapas,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam alat  soxhlet  yang  dihubungkan  dengan labu lemak yang telah dikeringkan. Residu kemudian  dikeluarkan  dari  solongsong dan  diangin-anginkan  hingga  kering. Tepung biji kelor hasil ekstraksi dihaluskan  kemudian  disimpan  ddalam wadah tertutup.

## Pembuatan  Konsentrat  Protein  Biji
Kelor
1.  Penentuan Tingkat Kejenuhan Amonium  Sulfat  (Modifikasi  Cara

## Timumun, 2012)
Sebanyak  6  buah  gelas  kimia dimasukkan tepung biji kelor hasil ekstraksi  masing-masing  sebanyak  25  g, kemudian  ke  dalam  masing-masing  gelas kimia ditambahkan amonium sulfat tingkat kejenuhan  50%,  60%,  65%,  70%,  75%, dan  80%  sebanyak  100  mL.  Selanjutnya diaduk  selama  10  menit  dan  disimpan dalam  lemari  pendingin  selama  24  jam.
Konsentrat  protein  yang  terletak  di permukaan campuran, kemudian dipisahkan  dari  fasa  cairnya  dengan  cara vakum  sambil  dibilas  dengan  aquades. Konsentrat  protein  dalam  keadaan  basah tersebut  kemudian  dikeringkan  dalam oven  dengan  suhu  60 o C  selama  12  jam.
Konsentrat protein kering ditimbang, dihitung rendemennya kemudian dihaluskan. Setelah itu, dimasukkan dalam  wadah  dan  disimpan  dalam  lemari pendingin.
endemen a  a kon entrat protein tepun  biji kelor a  a tepun  biji kelor 100 2.  Penentuan Rasio Tepung Biji Kelor terhadap Amonium Sulfat
(Modifikasi Cara Timumun, 2012)
Tepung  biji  kelor  ditimbang  sebanyak 25  g,  kemudian  di  masukkan  ke  dalam gelas  kimia.  Selanjutnya,  ditambahkan dengan amonium sulfat tingkat kejenuhan terbaik  yang  diperoleh  pada  perlakuan sebelumnya  dengan  rasio  1:2,  1:3,  1:4, 1:5,  dan  1:6  (b/v),  kemudian  diaduk selama  10  menit  dan  disimpan  dalam lemari pendingin selama 24 jam.
Konsentrat  protein  dipisahkan  dari  fasa cainnya  dengan  cara  vakum  sambil dibiiloas  dengan  aquades.  Konsentrat protein  dikeringkan  dalam  oven  dengan suhu  60 o C  selama  12  jam,  setelah  itu ditimbang, dihitung rendemennya kemudian  dihaluskan.  Konsentrat  protein tersebut  dimasukkan  dalam  wadah  dan disimpan dalam lemari pendingin.
Analisis  Kadar  Protein  dengan  Metode Spektrofotometri (Sumantri, 2007)
Konsentrat  protein  yang  diperoleh ditimbang  sebanyak  0,25  g  dimasukkan dalam  Erlenmeyer  250  mL  kemudian ditambahkan 50 mL NaOH 1 N. Campuran dikocok  di  atas  mesin  kocok  selama  1 jam. Larutan yang telah dikocok, kemudian  disaring.  Filtrat  yang  diperoleh diambil  5  mL  kemudian  dimasukkan  ke dalam  labu  ukur  25  mL  dan  ditambahkan NaOh 1 N sampai garis batas. Filtrat hasil pengenceran  diukur  serapannya  pada panjan    elomban   (λ)  280  nm  dan  260 nm  menggunakan  spektrofotometer  UV- VIS.  Serapan  yang  terbaca,  digunakan untuk  menghitung  kadar  protein  dengan menggunakan persamaan :
adar protein ( ) 280 a 1000   berat  ampel 100
Keterangan :
FK (Faktor Koreksi) = A280/A260

## FP = Faktor Pengenceran
Analsisi  Profil  Asam  Amino  dengan Metode KCKT (Elfita, 2014)
Konsentrat protein ditimbang sebanyak 0,1 g, kemudian ditambahkan 5 mL  HCl  6  N  dan  divortex,  dihidrolisis selama 22 jam pada suhu 110 o C, setelah itu  didinginkan.  Larutan  dipindahkan  ke labu  ukur  50  mL,  kemudian  ditambahkan aquabides  sampai  tanda  batas.  Larutan kemudian  disaring  dengan  filter  0,45  µm. Filtrat  yang  dihasilkan,  diambil  sebanyak 500  µL,  ditambahkan  40  µm  AABA  ±  460 µL  aquabides.  Campuran  tersebut  dipipet sebanyak  10  µL,  ditambahkan  70  µL
AccQ-Flour  Borate  kemudian  divortex, setelah  itu  ditambahkan  20  µL  reagen flour  A,  divortex  dan  didiamkan  selama  1 menit.  Larutan  itu  diinkubasi  selama  10 menit  pada  suhu  55 o C,  kemudian disuntikan pada injektor KCKT.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Konsentrat  Protein  pada  Berbagai Tingkat Kejenuhan Amonium Sulfat
Pemisahan protein dilakukan
dengan  metode salting  out. Hasil  yang diperoleh (Gambar 1) menunjukkan rendemen  semakin  meningkat  seiring bertambahnya tingkat kejenuhan amonium sulfat  sampai  pada  tingkat  kejenuhan 65%.  Namun  rendemen  menurun  pada tingkat  kejenuhan  setelahnya.  Menurut Nooralabettu  (2014),  peningkatan  tingkat kejenuhan amonium sulfat dapat meningkatkan  koagulasi  protein  karena beberapa  bagian  hidrofilik  terkoagulasi pada  tingakt  kejenuhan  amonium  sulfat yang  lebih  rendah  dan  beberapa  protein dengan bagian hidrofilik terkoagulasi pada tingkat kejenuhan yang lebih tinggi.
Tingkat kejenuhan untuk koagulasi protein  itu  berbeda-beda,  bergantung pada  jenis  bahan  dasar  yang  digunakan. Tingkat  kejenuhan  untuk  mengkoagulasi enzim  amilase  dari  kecambah  biji  jagung ketan tingkat kejenuhan terbaik yaitu pada 65%  (Bahri, et  al. ,  2012),  sementara tingkat  kejenuhan  amonium  sulfat  terbaik untuk  enzim  lipase  dari  dua  bahan berbeda  yaitu  dedak  padi  pada  65% (Hutomo, 2004) dan koagulasi protein dari
getah biduri pada  tingkat kejenuhan 55% (Rahmawati, 2009).
Gambar 1  Grafik  hubungan  pengaruh  tingkat kejenuhan terhadap rendemen konsentrat protein
Hasil  uji  sidik  ragam  menunjukkan bahwa  tingkat  kejenuhan  amonium  sulfat berpengaruh nyata pada rendemen konsentrat  protein  tepung  biji  kelor  yang dihasilkan. Hasil analisis lanjut menggunakan  BNJ  menunjukkan  masing- masing  tingkat  kejenuhan  50%,  60%, 70%,  dan  75%  mempunyai  rendemen yang  berbeda  tidak  nyata,  sementara pada  tingkat  kejenuhan  65%  dan  80% rendemennya berbeda sangat nyata.
Kadar  Protein  Konsentrat  Protein  Biji Kelor  dari  Berbagai  Tingkat  Kejenuhan Amonium Sulfat
Kadar protein pada suatu konsentrat  protein  sangat  berpengaruh pada kualitas konsentrat tersebut. Konsentrat protein harus memiliki minimal kadar  protein  50%.  Jumlah  kadar  protein dalam  suatu  bahan  pangan,  menentukan kepadatan protein pangan tersebut (Tejasari, 2005).
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh (Gambar  2)  menunjukkan  kadar  protein meningkat  seiring  bertambahnya  tingkat
0 10 20 30 40 50 50% 60% 65% 70% 75% 80% Ren de m e n (% ) Tingkat Kejenuhan Amonium Sulfat
kejenuhan  amonium  sulfat  sampai  pada 65%,  sedangkan  pada  tingkat  kejenuhan selanjutnya kadar protein menurun.
Gambar 2  Grafik  hubungan  tingkat  kejenuhan amonium  sulfat  terhadap  kadar
protein
Kenaikan  kadar  protein  protein seiring seiring dengan peningkatan rendemen.  Pada  proses salting  out yang diinginkan adalah terjadi koagulasi protein yang  ditambahkan  suatu  larutan  garam sehingga terjadi peningkatan daya kelarutan (salting in) sampai titik
maksimumnya,
kemudian terjadi penurunan  daya  larutnya (salting  out) .
Saat  proses  ini  terjadi  kompetisi  diantara protein dan garam dalam menarik molekul air untuk proses pelarutan, maka interaksi antara  protein  dengan  protein  menjadi lebih  penting  (Bintang,  2010).  Hal  ini menyebabkan terjadinya proses koagulasi protein  hingga  menghasilkan  konsentrat protein.  Menurut  Witono, et  al. (2006), semakin banyak rendemen yang dihasilkan,  maka  kadar  protein  yang  ada pada rendemen konsentrat protein tersebut semakin banyak. Hal ini diakibatkan jumlah protein yang terkoagulasi semakin banyak.
Hasil  uji  sidik  ragam  menunjukkan bahwa kadar protein dari tingkat kejenuhan  amonium  sulfat  berpengaruh sangat nyata. Hasil analisis lanjut menggunakan  BNJ  menunjukkan  rasio 65%  memiliki  nilai  tertinggi  dan  berbeda nyata dengan perlakuan lainnya.
Konsentrat Protein dari Berbagai Rasio Tepung  Biji  Kelor  terhadap  Amonium Sulfat Tingkat Kejenuhan 65%
Pembuatan konsentrat protein dipengaruhi oleh beberapa factor, diantaranya  jumlah  pengkoagulan  untuk mengkoagulasi  protein.  Semakin  banyak jumlah pengkoagulan maka kemampuannya untuk mengkoagulasi protein  akan  semakin  besar  (Kurniati, 2009).

## Gambar 3  Grafik  hubungan  rasio  tepung  biji kelor  :  amonium  sulfat  terhadap rendemen konsentrat protein
Gambar  3  menunjukkan  semakin besar  rasio  tepung  biji  kelor  terhadap amonium  sulfat  yang  digunakan,  maka rendemen konsentrat protein yang dihasilkan semakin tinggi. Jumlah pengkoagulan yang semakin besar banyak  membuat  interaksi  antara  tepung biji  kelor  dengan  larutan  amonium  sulfat
0 10 20 30 40 50 60 70 80 50% 60% 65% 70% 75% 80% Kad a r Prote in (% ) Tingkat Kejenuhan Amonium Sulfat 0 10 20 30 40 50 60 70 80 1:2 1:3 1:4 1:5 1:6 Ren de m e n (% ) Rasio Tepung Biji Kelor Terhadap Amonium Sulfat 65% (b/v)
dalam proses salting out semakin meningkat,  karena  kompetisi  diantara protein dan garam dalam menarik molekul air  untuk  proses  pelarutan,  sehingga interaksi  protein  dengan  protein  menjadi lebih penting.
Hasil  uji  sidik  ragam  menunjukkan rendemen  konsentrat  protein  dari  rasio tepung  biji  kelor  terhadap  amonium  sulfat berbeda  nyata.  Hasil  analisis  lanjut menggunakan  BNJ  menunjukkan  pada rasio  1:3,  1:4,  dan  1:5  berbeda  tidak nyata, sementara 1:2 dan 1:6 mempunyai perbedaan yang sangat nyata.

## Kadar  Protein  dari  Berbagai  Rasio
Tepung  Biji  Kelor  terhadap  Amonium

## Sulfat
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh (Gambar  4)  kadar  protein  meningkat seiring dengan meningkatnya rasio tepung biji  kelor  terhadap  amonium  sulfat  yang diterapkan. Kadar protein terbaik diperoleh pada rasio 1:6.

## Gambar 4  Grafik hubungan konsentrat protein tepung  biji  kelor  terhadap  kadar protein
Hasil ini menunjukkan peningkatan kadar  protein  dari  biji  kelor  yang  awalnya 38,4%,  setelah  dibuat  menjadi  konsentrat
protein kadar kemurnian protein meningkat  menjadi  75,05%.  Pada  proses salting out, hanya protein yang terkoagulasi  sehingga  protein  menjadi lebih murni bebas dari karbohidrat, lemak, air,  dan  mineral  yang  terkandung  pada bahan sebelum proses pembuatan konsentrat protein.
Hasil  uji  sidik  ragam  menunjukkan kadar  protein  terhadap  rasio  konsentrat protein  tepung  biji  kelor  dan  amonium sulfat  berbeda  sangat  nyata.  Hasil  uji lanjut  dengan  BNJ  menunjukkan  pada rasio  1:4,  1:5  menunjukkan  perbedaan nyata,  sementara  rasio  1:2,  1:3,  dan  1:6 menunjukkan  perbedaan  yang  sangat nyata.  Dengan  demikian  rasio  1:6  adalah perlakuan  terpilih  untuk  penentuan  profil asam amino.

## Profil  Asam  Amino  Konsentrat  Protein Biji Kelor
Hasil  analisis  profil  asam  amino dari konsentrat protein biji kelor menggunakan
KCKT (Tabel 1)
menunjukkan  bahwa  terdapat  18  jenis asam  amino  penyusun  protein  biji  kelor, 10 jenis diantaranya diantaranya merupakan  asam  amino  essensial  dan  8 jenis merupakan asam amino non essensial. Asama amino essensial merupakan  asam  amino  yang  tidak  dapat disintesis  oleh  tubuh,  untuk  mencukupi kebutuhannya maka diperlukan dari bahan makanan yang dapat mencukupinya.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 1:2 1:3 1:4 1:5 1:6 Kad a r Prote in (% ) Rasio Tepung Biji Kelor terhadap
Amonium Sulfat 65%
Tabel 1 Profil asam amino biji kelor Jenis Asam Amino Kadar (mg/g) Essensial Arginin (arg) 77,33 Fenilalanin (phe) 27,61 Leusin (leu) 27,39 Valin (val) 15,19 Isoleusin (ile) 15,29 Histidin (his) 13,16 Threonin (thr) 11,29 Metionin (met) 10,67 Lisin HCl (lys) 7,57 Triptofan  (try) 3,49 Non essensial Asam glutamat (glu) 97,19 Prolin (pro) 26,3 Glisin (gly) 24,74 Alanin (ala) 17,57 Asam aspartat (asp) 17,45 Serin (ser) 15,16 Tirosin (tyr) 11,29 Sistein (cys) 5,9
Tabel  1  menunjukkan  asam  amino essensial  yang  lengkap  pada  konsentrat protein biji kelor. Namun jika dibandingkan dengan pola asam amino baku FAO/WHO belum  memenuhi  jumlah  asam  amino yang  dibutuhkan  dalam  setiap  bahan pangan.

## KESIMPULAN
Tingkat  kejenuhan  amonium  sulfat terbaik  diperoleh  pada  tingkat    kejenuhan 65%  dengan  rendemen  sebesar  46,56% dan  kadar  protein  sebesar  72,19%.  Rasio tepung  biji  kelor  terhadap  amonium  sulfat tingkat  kejenuhan  terbaik  diperoleh  rasio terbaik  diantara  rasio  yang  diterapkan pada  rasio  1:6  (b/v),  dengan  rendemen 70,96%  dan  kadar  protein  74,16%.  Profil asam  amino  konsentrat  protein  biji  kelor yaitu  asam  amino  esensial  (mg/g)  berupa arginin  (77,3),  fenilalanin  (27,61),  leusin
(27,39),  valin  (15,19),  isoleusin  (13,16), treonin  (11,29)  metionin  (10,67),  lisin (7,57),  lisin  (7,57),  triptopan  (3,49).  Asam amino  non  esensial  (mg/g)  berupa  asam glutamat  (97,19),  prolin  (26,3),  glisin (24,74),  alanin  (17,57),  asam  aspartat (17,45),  serin  (15,16),  tirosin  (11,29),  dan sisitein (5,9).
Rasio maksimum untuk memperoleh konsentrat  protein  belum  diperoleh,  kadar protein  yang  cukup  tinggi  serta  asam amino  esensial  yang  lengkap  pada  biji kelor dapat dipertimbangkan untuk dilakukan penelitian lanjutan dalam pemanfaatan konsentrat protein tersebut.

## DAFTAR PUSTAKA
Bahri,  S.,  Mirzan,  M.,  Hasan,  M.  (2012). Karakteristik  Enzim  Amilase  dari Kecambah  Biji  Jagung  Ketan (Zae  mays  ceratine  L.) . Jurnal Natural Sciences, 1(1) : 132-143 Bintang,  M.  (2010).  Biokimia  Tehnik Penelitian Jakarta : Erlangga.
Elfita, L. (2014). Analisis Profil Protein dan
Asam  Amino  Sarang  Burung Walet (Collocalia  Fuchiphaga) Asal Painan. Jurnal Sains
Farmasi dan Klinis. 1(1) : 27-37
Hardi,  J.,  &  Diharnaini,  D.  (2014). Penggunaan Protease dari Getah
Biduri  dalam  Produksi  Flavor
Udang Windu (Penaeus monodon). Natural Science: Journal of Science and Technology , 3(2).
Hermiastuti,  M.  (2013).  Analisis  Kadar Protein  dan  Identifikasi  Asam Amino  Ikan  Patin (Pangasius djambal). Skripsi. Jember:
Jurusan Kimia FMIPA Jember.
Hutomo,  G.S.  (2004).  Optimasi  Ekstraksi Lipase  dari  Dedak  Padi  Varietas
IR-64. Jurnal  Agroland. 11  (1)  : 32-36 Karnila,  R.,  Astawan,  M.,  Sukarno., Wresdiyati, T. (2011). Karakteristik  Konsentrat  Protein
Teripang Pasir (Hulothuria scabra
J.) dengan  Pengestrak  Aseton.
Jurnal  Perikanan  dan  Kelautan.
16 (1) : 90-102. Kurniati, E. (2009). Pembuatan Konsentrat Protein  dari  Biji  Kecipir  dengan Penambahan HCl. Jurnal Penelitian  Ilmu  Tehnik. 9  (2)  : 115-122. Laguni,  N.  (2012).  Penggunaan  Bungkil
Biji Kelor (Moringa oleifera) sebagai Adsorben Ion Fe (II) dan ion Pb (II). Skripsi. Palu: Jurusan Kimia FMIPA Universitas Tadulako.
Muchtadi,  D.  (2009).  Pengantar  Ilmu Gizi.
Bandung : Alfabeta. Nooralabettu  K.P.  (2014).  Optimasi  of Ammonium  Sulfate  Precipitation Method to Achieve High Throughtput Concentration of Crude Alkaline Phosphatase from Brown shrimp (Metapenaeus monoceros) Hepatopancreas. Int.
J. Anal Bio-Sci. 2 (1) : 7-16 Purwitasari A., Hendrawan Y., Yulianingsih  R.  (2014). Pengaruh Suhu dan Waktu Ekstraksi terhadap  Sifat  Fisik  Kimia  dalam Pembuatan  Konsentrat  Protein Kacang Komak (Lablab purpureus L.  Sweet ). Jurnal Bioproses Komoditas Tropis. 2(1) : 42-53 Rahmawati,  A.T.  (2009).  Isolasi  dan Karakterisasi Enzim Lipase
Getah Tanaman Biduri (Calletropis  gigantean). Skripsi .
Palu: Jurusan  Kimia FMIPA Universitas Tadulako. Sanusi,  I.,  Sitorus,  M.  (2013).  Tehnik Laboratorium Kimia Organik. Yogyakarta : Graha Ilmu. Srawaili  N.  (2008).  Efektivitas  Biji  Kelor (Moringa oleifera) dalam
Menurunkan  Kekeruhan,  Kadar Ion  Besi  dan  Mangan  dalam  Air. Tesis .  Bandung:  Program  Studi Kimia Institut Tehnologi Bandung.
Su’i M.S. (2013). Fraksinasi Enzim Lipase dari  Endosperm  Kelapa  dengan
Metode Salting Out. Jurnal
Agritech. 33 (4) : 377-383
Sumantri  A.R.  (2007).  Analisis  Makanan.
Yogyakarta : Gajah Mada University Press.
Tejasari.  (2005).  Nilai  Gizi  Pangan.
Yogyakarta : Graha Ilmu.
Timumun M.I. (2012). Isolasi Lipase Daun Pepaya (Carica papaya L. ) Varietas  Lokal  dan  Aplikasinya dalam  Biosintesis  Monolaurin. Skripsi .  Palu:  Jurusan  Kimia FMIPA Universitas Tadulako.
Witono Y.,   ulanni’am.,  Subagio  A., Bambang, Simon. (2006). Pemurnian Parsial Enzim Protease  dari  Getah  Tanaman Biduri (Calletropis gigantean) menggunakan  Amonium  Sulfate.
Jurnal  Teknologi  Pertanian. 7  (1)
: 20-26
Yuniastuti  A.  (2008).  Gizi  dan  Kesehatan. Yogyakarta : Graha Ilmu