Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...

## Eksplorasi Dan Identifikasi Jamur Antagonis Pada Rizosfer Tanaman Cengkih (Syzygium aromaticum L.) di Pulau Ambon

## Agustina Widiyanti, Jogeneis Patty, Gratiana N.C Tuhumury
Fakultas Pertanian Universitas Pattimura, Jl. Ir. M. Putuhena Kampus Poka Ambon Email: agustinawidiyanti.dia@gmail.com

## ABSTRAK
Jamur antagonis merupakan kelompok jamur yang dapat menekan atau menghambat pertumbuhan dan perkembangan patogen tanaman, daerah rizosfer  tanaman kaya oleh mikroba salah satunya adalah kelompok jamur. Penelitian ini bertujuan  untuk  mengisolasi  jamur  dari  rizosfer  tanaman  cengkih  ( Syzygium  aromaticum L.)  dari  dua  kecamatan Leihitu Barat dan Leihitu, serta menguji kemampuan isolat tersebut dalam menghambat Rizoctonia solani . Eksplorasi dilaksanakan dengan metode Simple random sampling pengambilan sampel tanah rizosfer dari tanaman cengkih yang berasal  dari  Negri  Hatu,  Negri  Allang,  Negri  Asilulu  dan  Negri  Seith.  Selanjutnya  diisolasi  dengan  metode dual culture setelah  itu,  diidentifikasi  berdasarkan  buku  kunci  identifikasi  serta  menghitung  daya  hambatnya  terhadap patogen  tanaman.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  diperoleh  10  isolat  jamur  yang  berhasil  diidentifikasi didapatkan  4  genus  jamur  yaitu Trichoderma,  Aspergillus,  Penicillium dan Rhyzopus .  Tanah  di  sekitar  rizosfer tanaman  cengkih  mengandung  jamur  antagonis  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan  patogen  rebah  kecambah pada  tomat  ( Rhizoctonia  solani ).  Diperoleh  7  isolat  jamur  antagonis  adalah Trichoderma sp.  dengan  hasil  uji antagonism menunjukkan daya hambat tertinggi dicapai oleh isolat Tricho RCTAL 2 (89,52%), dan presentase terendah ada pada isolat Tricho RCTAS 4 (44,07%).
Kata Kunci: jamur antagonis, rizosfer, cengkih, pulau Ambon

## Exploration And Identification Of Antagonic Fungi On The Rhizosphere Of Clove Plants (Syzygium aromaticum L.) In Ambon Island

## ABSTRACT
Antagonistic fungi are a group of fungi that can suppress or inhibit the growth and development of plant pathogens. This study aimed to isolate the fungus from the rhizosphere of the clove plant ( Syzygium aromaticum L.) from two sub-districts  of  Leihitu  Barat  and  Leihitu,  and  to  test  the  ability  of  these  isolates  to  inhibit  Rizoctonia  solani. Exploration was carried out using the simple random sampling method, taking rhizosphere soil samples from clove plants from Hatu, Allang, Asilulu and Seith.  Then isolated by the dual culture method after that, identified based on the identification key book and calculated its inhibition against plant pathogens. The results showed that 10 fungal isolates were identified, namely 4 fungal genera, namely Trichoderma, Aspergillus, Penicillium and Rhyzopus.  The soil around the rhizosphere of clove plants contains antagonistic fungi that can inhibit the growth of tomato sprouting pathogens (Rhizoctonia solani).  Obtained 7 isolates of the antagonist fungus Trichoderma sp. with the results of the antagonism test showing the highest inhibition was achieved by isolates of TrichoRCTAL2 (89,52%), and the lowest percentage was by isolates of TrichoRCTAS4 (44,07%).
Keywords: antagonistic fungus, rhizosphere, clove, Ambon island

## PENDAHULUAN
Cengkih  ( Syzygium  aromaticum L.) adalah  tumbuhan  asli  Indonesia  yang  dikenal dunia. 80% kebutuhan cengkih dunia dipenuhi
dari  Indonesia  hal  ini  sekaligus  menjadikan Indonesia  sebagai  negara  penghasil  cengkih terbesar  di  dunia.  Cengkih  dikenal  karena kekhasannya  yakni  sebagai  rempah  yang memiliki  aroma  harum  yang  disebabkan
kandungan  eugenol  sebanyak  80%  dan eugenyil  5% [1] .  Tanaman  cengkih  memiliki nilai  ekonomi  tinggi  dan  banyak  manfaatnya seperti  penghasil  minyak  atsiri    untuk  bahan industri  farmasi  maupun  makanan [2] dan bahan baku rokok [3] .
Cengkih dimanfaatkan karena kandungan  eugenolnya  sebagai  penghasil minyak atsiri. Minyak cengkih dapat diperoleh dari bunga cengkih ( clove oil ), tangkai bunga ( clove steam oil ), dan daun cengkih ( clove leaf oil ) [4] .  Minyak  cengkih  memiliki  kandungan bahan  lain  seperti  eugenil  metileter,  eugenil asetat,  senyawa  kimia  seperti  eugenin,  asam oleanoat,  asam  galotamat,  fanilin,  karyofilin, resin dangom [5] .
Pertanian  memegang  peranan  penting dari seluruh perekonomian nasional. Banyaknya penduduk yang hidup dan bekerja pada  sektor  pertanian  atau  dari  produk nasional yang berasal dari pertanian, sehingga pembangunan  bangsa  dititik  beratkan  pada sektor pertanian. Sektor pertanian di Indonesia merupakan  sektor  yang  cukup  tangguh dibandingkan dengan sektor lainnya.
Sejauh ini petani masih bergantung pada pestisida sintetik dalam mengendalikan penyakit tanaman. Oleh karena itu, penggunaan agens hayati lokal perlu dikembangkan  sebagai  salah  satu  alternatif pengendalian.  Tujuannya  untuk  mengurangi terjadinya  penyakit  pada  tanaman  atau aktivitas  yang  mengkibatkan  penyakit  pada tanaman  dengan  cara  menekan  aktivitas patogen,  terjadinya  infeksi  dan  intensitas serangan patogen terutama untuk patogen tular tanah. Rizosfer merupakan bagian tanah yang berada  di  sekitar  perakaran  tanaman  dan berperan sebagai pertahanan luar bagi tanaman terhadap  serangan  patogen  akar.  Populasi mikroorganisme  di  rizosfer  biasanya  lebih banyak dan beragam dibandingkan pada tanah bukan rizosfer.
Usaha dalam meningkatkan hasil produksi tanaman melalui bioteknologi pertanian dengan pemanfaatan mikroorganisme yang  dapat  menunjang pertumbuhan  tanaman  seperti  Plant  Growth
Promoting  Rhizobacteria  (PGPR)  dan  Plant Growth  Promoting  Fungi  (PGPF).  Namun perlu  juga  diterapkan t eknologi  pengendalian hayati  terhadap  Organisme  Pengganggu Tanaman (OPT), seperti memanfaatkan mikroorganisme,  misalnya  jamur  antagonis terhadap patogen tanaman selain Trichoderma sp.  ada  juga Penicillium,  Rhyzopus,  fusarium roseum, Aspergillus fumigant, dan Cenococcum gepp Hylum .
Jamur  rizosfer  merupakan  jamur  yang berada  pada  perakaran  tanaman  dan  dapat berperan  dalam  membantu  pertumbuhan tanaman,  menguraikan  bahan  organik  serta menekan  perkembangan  patogen  tanaman. Hasil  penelitian [6] menyatakan telah  berhasil diisolasi jamur Aspergillus flavus, A. fumigatus,  A.  niger,  Curvularia sp.  dan Trichoderma harzianum dari rizosfer tanaman padi  ( Oryza  sativa L.)  yang  berpotensi antagonis terhadap jamur patogen Pyricularia grisea . Daerah rizosfer suatu tanaman merupakan  daerah  yang  kaya  oleh  mikroba, salah  satunya  adalah  kelompok  jamur [7] . Jamur  rizosfer  merupakan  salah  satu  faktor biotik  yang  dapat  menginduksi  ketahanan tanaman  terhadap  penyakit.  Jenis  tanah  yang mengandung  mineral  organik  dan  anorganik mempengaruhi  jenis  jamur  yang  ada.  Jamur yang ada di rizosfer dapat melindungi tanaman terhadap patogen dan meningkatkan kesuburan  pertumbuhan  tanaman  sehingga digolongkan sebagai jamur pemacu kesuburan tanaman  (biofertilizer).  Dengan  demikian isolat  jamur  yang  diisolasi  dari  rizosfer tanaman  sehat,  berpeluang  besar  menjadi alternatif  penting  bahan  baku  biofertilizer tanaman.
Banyak organisme tanah yang menguntungkan  dan  dijadikan agen  hayati d alam  pengendalian  hayati  maka  untuk mendapatkan mikroorganisme antagonis tersebut  perlu  dilakukan  eksplorasi  dari rizosfer  berbagai  jenis  tanaman,  seperti tanaman perkebunan terutama tanaman perkebunan endemik Maluku seperti cengkih. Sebaran  cengkih  di  Pulau  Ambon  terdapat  di
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...
beberapa daerah seperti di Kecamatan Leihitu Barat,  Leihitu  dan  Salahutu,  Kabupaten Maluku Tengah yang berada di Pulau Ambon. Berdasarkan  hal-hal  tersebut,  maka  perlu dilakukan  penelitian  tentang  eksplorasi  dan identifikasi  jamur  antagonis  pada  rizosfer tanaman cengkih ( Syzygium aromaticum L.) di Pulau Ambon.

## BAHAN DAN METODE
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah  tanah  di  sekitar  perakaran tanaman  cengkih  yang  sehat, Rhizoctonia solani, kentang,  agar-agar,  dextrose,  air steril/ akuades methil  blue ,  label  nama,  plastik bening,  kapas,  tissue,  alumunium  foil,  pH indicator, alkohol 70%.

## Desain Penelitian
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksplorasi dan uji antagonis.  Pengambilan  sampel  dilakukan secara sampling dengan  metode Simple random sampling , dan  menetapkan 4 lokasi di Kecamatan  Leihitu  Barat  (Negri    Hatu  dan Allang) dan di Kecamatan Leihitu (Asilulu dan Seith). Pada tiap lokasi, sampel yang diambil sebanyak  4  tanaman  dengan  jarak  dari  satu tanaman  ke  tanaman  lain  adalah  100  meter untuk  mendapatkan  titik  koordinat  yang berbeda, pada tiap tanaman sampel diambil 4 titik sesuai arah mata angin yaitu utara, selatan, timur  dan  barat.  Jadi,  untuk  4  lokasi  sampel yang  diambil  yaitu  sebanyak  16  tanaman sampel. Sampel tanah di sekitar akar (rizosfer) tanaman  cengkih  ( Syzygium  aromaticum L.) yang terlihat  produktif diambil dan diamati di Laboratorium  Diagnosis  Penyakit  Tanaman dan dilakukan uji antagonis terhadap patogen rebah  kecambah  pada  tomat  ( Rhizoctonia solani ).

## Prosedur Penelitian

## Pengambilan Sampel Tanah
Pada  penelitian  ini  eksplorasi  yang dilakukan  untuk  mendapatkan  isolat  jamur
antagonis  yaitu  metode  eksplorasi  pada rizosfer  tanaman  cengkih  tuni  yang  terlihat sehat dan produktif. Tanah di sekitar perakaran (rizosfer) tanaman cengkih tuni dari desa Hatu, Allang,  Asilulu  dan  Seith  digali  sedalam  30 cm. Sampel tanah diambil sebanyak 200 gram/ tanaman. Setiap pengambilan sesuai arah mata angin  yaitu  50  gram  pada  setiap  titik  dengan jarak  sekitar  1  meter  dari  batang  pohon, kemudian dimasukan ke kantong plastik diberi label  tanggal,  lokasi,  asal  tanaman  kemudian dibawa  ke  laboratorium  untuk  diisolasi jamurnya.

## Pembuatan  Media  Potato  Dextrose  Agar (PDA)
Medium  PDA  merupakan  media  untuk perbanyakan  jamur  secara  in  vitro,  dengan bahan utama kentang, dextrose, agar-agar dan akuades.  Kentang  yang  telah  disiapkan kemudian  dikupas,  dibersihkan,  dipotong- potong  dengan  ukuran  lebih  dari  1  x  1  cm berbentuk dadu, lalu ditimbang sebanyak 100 g. Kentang kemudian direbus dengan akuades sebanyak  500  ml  selama  kurang  lebih  25 menit.  Air  rebusan  kentang  yang  telah mendidih kemudian disaring dan dimasukkan dalam  Erlenmeyer  500  ml,  dicampur  dengan 10  gram  agar  dan  10  gram  dextrose,  lalu dipanaskan  hingga  homogen.  Selanjutnya medium PDA ini disterilkan dengan menggunakan  Autoclave  pada  suhu  121 0 C dan tekanan 1 atm selama 15 menit [8] . Medium PDA  yang  telah  steril,  dituang  pada  cawan petri  steril  masing-masing  sebanyak  10  ml, didinginkan  hingga  memadat,  lalu  siap digunakan untuk inokulasi jamur.
Isolasi  Jamur  Asal  Rizosfer  Tanaman Cengkih Tuni
Isolasi jamur dilakukan dengan pengenceran  bertingkat.  Isolasi  jamur  dari tanah  dilakukan  dengan  cara  menambahkan akuades 100 ml pada 10 gram tanah ke dalam Erlenmeyer.  Dari  larutan  yang  diperoleh diambil  1  ml  dan  ditambahkan  9  ml  akuades dalam  tabung  reaksi  dan  dihomogenkan menggunakan vortex pada kecepatan 120 rpm
selama  3  menit  ,  demikian  seterusnya  hingga diperoleh  tingkat  pengenceran  sampai  10 -4 . Untuk pengenceran 10 -2 sampai 10 -4 diambil 1 ml  dengan  menggunakan  pipet,  larutan  tanah yang  telah  homogen  dan  diteteskan  di  atas media PDA, dan di inkubasi selama 3 hari pada suhu ruang. Setiap koloni jamur yang tumbuh dicatat, di hitung jumlahnya dan dikelompokkan berdasarkan bentuk dan warna koloni kemudian dimurnikan pada media PDA [9] .
Uji
Antagonis terhadap Patogen Rhizoctonia solani
Metode  yang digunakan  adalah Metode Biakan Ganda ( Dual Culture Method ). Koloni jamur rizosfer (T) berukuran 7 mm diletakkan 2  cm  dari  satu  sisi  pinggiran  cawan  petri, demikian juga 7 mm koloni Rhizoctonia solani (R) diletakkan 2 cm dari pinggiran cawan petri pada sisi lainnya, kemudian koloni Rhizoctonia solani dengan ukuran  yang sama diletakkan  2  cm  dari  pinggiran  cawan  petri pada media biakan tanpa koloni jamur rizosfer sebagai kontrol. Setelah dilakukan inokulasi R. solani dan  isolat  jamur  rizosfer  pada  semua perlakuan,  selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu ruangan  28 0 C.  Aktivitas  antagonis  dapat diamati  selama  kurang  lebih  4  hari  setelah diinkubasi,  dengan  melakukan  pengamatan dan  pengukuran  terhadap  diameter  koloni R. solani yang  mengarah  pada  koloni  jamur rizosfer  (R 2 )  dan  diameter  koloni R.  solani pada  biakan  kontrol  (R 1 ).  Berdasarkan  hasil pengamatan  itu  dapat  dilakukan  perhitungan presentase penghambatan (PIRG = Percentage Inhibition of Radial Growth ) dengan menggunakan rumus [10] sebagai berikut:
PIRG = 𝑅1−𝑅2 𝑅1 𝑋 100 %
Keterangan :
PIRG   =  Presentase  hambatan  pertumbuhan koloni  ( Percentage  Inhibition  of
Radil Growth ) R 1 =  Diameter  koloni R.  solani pada biakan kontrol
R2 =  Diameter  koloni R.  solani yang mengarah pada koloni jamur rizosfer

## Dual Culture Plate
Selain daya hambat jamur antagonis juga dilakukan  pengamatan  terhadap  pertumbuhan koloni  antagonis  yang  tumbuh  menutupi permukaan  koloni Rhizoctonia  solani, serta indikasi  adanya  mekanisme  antagonisme. Penilaian daya antagonis dilakukan berdasarkan  kriteria [11] .  Kriteria  tersebut terdiri  dari  5  tingkatan  kelas  antagonism sebagai berikut :
Kelas  1  =  jamur  antagonis  tumbuh  cepat  dan menutupi seluruh permukaan media Kelas  2  =  jamur  antagonis  tumbuh  menutupi paling sedikit 2/3 permukaan media Kelas 3 = jamur antagonis dan patogen tumbuh menutupi ½ permukaan media Kelas  4  =  jamur  patogen  menutupi  tumbuh paling sedikit 2/3 media
Kelas  5  =  jamur  patogen  tumbuh  cepat  dan menutupi seluruh permukaan media

## Identifikasi Jamur Asal Rizosfer Tanaman Cengkih
Jamur  rizosfer  di  identifikasi  sampai tingkat  genus  berdasarkan  ciri  morfologi makroskopis  dan  mikroskopis [12] .  Kemudian diidentifikasi  dengan  menggunakan  preparat. Jamur  ditetesi methil  blue dan  diamati  di bawah mikroskop dengan perbesaran 400 kali. Identifikasi  morfologi  dianalisa  dan  dicari kesamaan  morfologinya  dengan  kriteria  yang terdapat  pada  buku  kunci  identifikasi  “The Diversity  Of Trichoderma spp.  In  South Africa” [13] ,  Identification  and  Nomenclature of the genus Penicillium [14] , Taxononic studies on the genus Aspergillus [15] , Phylogenetic and taxonomic  studies  on  the  genera  Penicillium and  Talaromyces [16] , Trichoderma and Gliocladium [17] , Phylohenetic and Taxonomic Studies on the Genera Rhyzopus [18]

## Pengamatan
Variabel  pengamatan  terdiri  dari  :  (1) Populasi  jamur  pada  rizosfer,  (2)  Jenis  jamur antagonis, (3) Diameter koloni jamur
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...
antagonis,  (4)  Persentase  penghambatan pertumbuhan jamur antagonis.

## Analisis data
Data  disajikan  dalam  bentuk  Tabel  dan grafik. Analisis data menggunakan rumus dari masing-masing perlakuan yaitu rumus Coloni Forming Unit , diameter koloni jamur antagonis, dan Percentage Inhibition of Radil Growth .  Pengolahan  dan  analisis  data dilakukan  dengan  menggunakan  bantuan software Microsoft Excell.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Populasi  Jamur  Pada  Rizosfer  Tanaman Cengkih
Jumlah  populasi  jamur  tanah  dalam penelitian  ini  dapat  diketahui  dengan  metode pengenceran  bertingkat  yaitu  empat  seri pengenceran (10 -1 , 10 -2 , 10 -3 , dan 10 -4 ) dan tiga kali ulangan. Dari 16 sampel tanah diperoleh 4 genus jamur tanah ( Trichoderma, Aspergillus, Penicillium, dan Rhizopus ).
Berdasarkan  data  pada  tabel  2,  jumlah koloni jamur yang ada pada rizosfer tanaman cengkih  terdapat  variasi  berbeda  tiap  lokasi pengambilan  sampel.  Jumlah  populasi  koloni jamur  tertinggi  adalah  pada  tanaman  RCTS 1 (3,0 x 10 2 ) dan yang terendah RCTAL 4 (0,5 x
10 2 ). Hal ini menyatakan bahwa pertumbuhan jamur di lokasi Negeri Seith tanaman pertama memiliki ketersediaan nutrisi yang cukup baik bagi  pertumbuhan  jamur  serta  keadaan lingkungan sekitar yang mendukung, sehingga populasi  koloni  jamur  pada  lokasi  tersebut merupakan populasi tertinggi. Apabila kebutuhan nutrisi jamur dalam tanah terpenuhi maka populasinya akan meningkat [19] . Sedangkan  tingkat  populasi  jamur  tanah dipengaruhi  oleh  ketersediaan  makanan, ketersediaan  air,  dan  ekologi  lain  yang mendukung [20] .  Hasil  dari  jumlah  propagul estimasi kuantitatif tidak saling mempengaruhi dengan hasil pada saat uji aktivitas antagonisme. Misalnya, jumlah propagul pada sampel  tanah  menghasilkan  populasi  jamur tertinggi  namun  pada  saat  uji  antagonisme memiliki  aktivitas  antagonisme  yang  rendah, begitupun  sebaliknya  jika  jumlah  propagul pada  sampel  tanah  menghasilkan  populasi jamur  terendah  namun  pada  saat  uji antagonisme  memiliki  aktivitas  antagonisme yang  paling  tinggi.  Karena  jumlah  propagul estimasi  kuantitatif  adalah  jumlah  keseluruan populasi  yang  ada  pada  sampel  tanah  yang diisolasi, kemudian di uji aktivitas antagonisnme pada setiap jamur yang tumbuh untuk  mengetahui  mana  yang  memiliki  daya antagonis.
Tabel 1.  Populasi Koloni Jamur pada Rizosfer Tanaman Cengkih di Negeri Asilulu, Allang,
Hatu, dan Seith No Sampel Tanah Rizosfer *) Jenis Jamur Total Koloni Estimasi Kuantitatif (cfu g -1 ) 1. RCTH 1 Penicillium , Aspergillus 12 1,2 x 10 2 2. RCTH 2 Penicillium , Aspergillus 14 1,4 x 10 2 3. RCTH 3 Penicillium , Aspergillus 25 2,5 x 10 2 4. RCTH 4 Trichoderma , Penicillium , Aspergillus 15 1,5 x 10 2 5. RCTAL 1
Trichoderma , Penicillium , Aspergillus 26 2,6 x 10 2 6. RCTAL 2
Trichoderma , Penicillium , Aspergillus, Rhizopus 8 0,8 x 10 2 7. RCTAL 3 Penicillium , Aspergillus 28 2,8 x 10 2 8. RCTAL 4 Penicillium , Aspergillus, Rhizopus 5 0,5 x 10 2 9. RCTAS 1 Aspergillus , Rhizopus 8 0,8 x 10 2
10 RCTAS 2 Penicillium , Aspergillus , Rhizopus 14 1,4 x 10 2 11.  RCTAS 3
Trichoderma , Penicillium , Aspergillus , Rhizopus 6 0,6 x 10 2 12.  RCTAS 4
Trichoderma , Penicillium , Aspergillus , Rhizopus 13 1,3 x 10 2 13.  RCTS 1
Trichoderma , Penicillium , Aspergillus , Rhizopus 30 3,0 x 10 2 14.  RCTS 2
Penicillium , Aspergillus , Rhizopus 23 2,3 x 10 2 15.  RCTS 3
Trichoderma , Penicillium , Aspergillus , Rhizopus 14 1,4 x 10 2 16.  RCTS 4
Penicillium , Aspergillus , Rhizopus 21 2,1 x 10 2
*) RCTH 1,2,3,4 = Rizosfer Cengkih Tunidi Negeri Hatu pada Tanaman Sampel 1,2,3,4; RCTAL 1,2,3,4 = Rizosfer Cengkih Tuni di Negeri Allang pada Tanaman sampel 1,2,3,4; RCTAS 1,2,3,4 = Rizosfer Cengkih Tuni di Negeri Asilulu pada Tanaman Sampel 1,2,3,4; RCTS 1,2,3,4 = Rizosfer Cengkih Tuni di negeri Seith pada tanaman Sampel 1,2,3,4.

## Identifikasi  Jamur  asal  Rizosfer  Tanaman Cengkih
Dari  hasil  isolasi  diperoleh  jamur  4 genus yaitu Trichoderma, Aspergillus, Penicillium, dan Rhizopus (Tabel 1).
Identifikasi jamur dilakukan dengan mengamati  karakteristik  makroskopis  jamur pada media PDA dan karakteristik mikroskopis dengan menggunakan mikroskop binokuler  serta  mengacu  pada  buku  kunci identifikasi
.
Tabel 2. Hasil identifikasi jamur Rizosfer tanaman cengkih
No Kode Isolat Genus Ciri-ciri 1. Tricho RCTH 4 ( Trichoderma Rizosfer Cengkih Tuni Hatu Tanaman
ke-4) Trichoderma sp. (3 HSI) Makroskopis - Koloni awalnya berwarna putih kemudian menjadi hijau tua, sekelliling berwarna hijau muda dan putih kehijauan - Tepi koloni rata - Permukaan koloni bertekstur seperti kapas Mikroskopis - Konidiofor panjang - Konidia berbentuk lonjong - Fialid pendek dan tebal
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...
(k) Konidia, (kf) Konidiofor, (f) Fialid 2. Tricho RCTAL 1 ( Trichoderma Rizosfer Cengkih Tuni Allang Tanaman ke-1) Trichoderma sp. (3 HSI)
(k) Konidia, (kf)
Konidiofor, (f) Fialid Makroskopis - Koloni awalnya berwarna putih kemudian menjadi hijau tua, sekeliling berwarna hijau muda dan putih kehijauan. - Tepi koloni rata - Permukaan koloni bertekstur seperti kapas Mikroskopis - Konidiofor panjang dan tebal - Konidia berbentuk agak lonjong - Fialid pendek dan lancip kearah pusat
3. Tricho RCTAL 2
( Trichoderma Rizosfer Cengkih Tuni Allang Tanaman
ke-2) Trichoderma sp. (3 HSI) Makroskopis - Koloni awalnya berwarna putih kemudian menjadi hijaun tua dan sekeliling berwarna putih kehijauan
- Tepi koloni rata
- Utuh - Permukaan koloni bertekstur seperti kapas Mikroskopis - Konidiofor pendek dan tebal - Konidia berbentuk bulat - Fialid pendek dan tebal
(k) Konidia, (kf) Konidiofor, (f) Fialid 4. Tricho RCTAS 3 ( Trichoderma Rizosfer Cengkih Tuni Asilulu Tanaman ke-3) Trichoderma sp. (3 HSI)
(k) Konidia, (kf)
Konidiofor, (f) Fialid Makroskopis - Koloni awalnya berwarna putih kemudian menjadi kehijauan dan sekeliling berwarna putih
- Tepi koloni rata
- Permukaan koloni bertekstur seperti kapas Mikroskopis - Konidiofor panjang - Konidia berbentuk agak bulat - Fialid pendek dan tebal
5. Tricho RCTAS 4
( Trichoderma Rizosfer Cengkih Tuni Asilulu Tanaman ke-4) Trichoderma sp. (3 HSI) Makroskopis - Koloni awalnya berwarna putih kemudian menjadi hijau tua dan sekeliling berwarna putih kehijauan
- Tepi koloni rata
- Permukaan koloni bertekstur seperti kapas Mikroskopis - Konidiofor pendek dan tebal - Konidia berbentuk bulat - Fialid pendek dan tebal
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...
(k) Konidia, (kf) Konidiofor, (f) Fialid 6. Tricho RCTS 1 ( Trichoderma Rizosfer Cengkih Tuni Seith Tanaman ke-1) Trichoderma sp. (3 HSI)
(k) Konidia, (kf)
Konidiofor, (f) Fialid Makroskopis - Koloni awalnya berwarna putih kemudian menjadi kehijauan dan sekeliling berwarna putih tepi koloni berwarna hijau tua - Tepi koloni rata - Permukaan koloni bertekstur seperti kapas Mikroskopis - Konidiofor panjang dan tebal - Konidia berbentuk lonjong - Fialid pendek dan tebal
7. Tricho RCTS 3 ( Trichoderma Rizosfer Cengkih Tuni Seith Tanaman ke-3) Trichoderma sp. (3 HSI) Makroskopis - Koloni awalnya berwarna putih kemudian menjadi hijau tua dan sekeliling betwarna kehijauan
- Tepi koloni rata
- Utuh
- Permukaan koloni bertekstur seperti kapas
Mikroskopis
(k) Konidia, (kf) Konidiofor, (f) Fialid - Konidiofor tegak bercabang dan tebal - Konidia berbentuk agak lonjong - Fialid pendek dan tebal 8. Asper RCT ( Aspergillus Rizosfer Cengkih Tuni) Aspergillus flavus
(3 HSI) (k) Konidia, (kf) Konidiofor Makroskopis - Hijau pudar dasar berwarna kuning
- Permukaan kasar
- Bentuk berbelah dan permukaan rata Mikroskopis - Konidiofor panjang - Konidia terdiri dari satu sel berbentuk bulat
9. Rhizop RCT ( Rhizopus Rizosfer Cengkih Tuni) Rhizopus stolinifer (3 HSI) Makroskopis - Dasar berwarna putih tebal permukaan berwarna hitam - Timbul rata
- Berbenang dan permukaan agak kasar
- Dasar berwarna putih kekuningan Mikroskopis
k kf
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...
- Sporangium yang bulat terdapat spora yang belum pecah - Memiliki hifa yang tidak bersekat - Konidiofor berbentuk bulat 10. Penicillium RCT ( Penicillium Rizosfer
Cengkih Tuni) Penicillium sp. (3 HSI) Makroskopis - Abu kehijauan - Bentuk titik-titik - Permukaan timbul datar - Kapas
- Warna abu-abu di kelilingi warna putih, dasar warna putih Mikroskopis - Konidiofor bersekat - Kepala spora berbentuk seperti sapu - Konidia membentuk seperti rantai karena muncul satu persatu dari serigmata.

## Daya Hambat Jamur Rizosfer terhadap Rhizoctonia solani
Presentase  hambatan  berdasarkan  data  dan  gambar  secara  umum  menunjukkan  bahwa  7 isolat Trichoderma spp. dapat menghambat pertumbuhan jamur Rhizoctonia solani .

## Aktivitas Antagonisme TrichoRCTH
4 terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 1. Daya hambat antagonis isolat Tricho RCTH 4 terhadap jamur Rizoctonia solani
Aktivitas Antagonisme TrichoRCTAL 1 terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 2. Daya hambat antagonis isolat Tricho RCTAL 1 terhadap jamur Rizoctonia solani
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...

## Aktivitas Antagonisme TrichoRCTAL
2 terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 3. Daya hambat antagonis isolat Tricho RCTAL 2 terhadap jamur Rizoctonia solani

## Aktivitas Antagonisme TrichoRCTAS
3 terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 4. Daya hambat antagonis isolat Tricho RCTAS 3 terhadap jamur Rizoctonia solani

## Aktivitas Antagonisme TrichoRCTAS
4 terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 5. Daya hambat antagonis isolat Tricho RCTAS 4 terhadap jamur Rizoctonia solani
Aktivitas Antagonisme TrichoRCTS 1 terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 6. Daya hambat antagonis isolat Tricho RCTS 1 terhadap jamur Rizoctonia solani
R R
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...

## Aktivitas Antagonisme TrichoRCTS 3 terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 7. Daya hambat antagonis isolat Tricho RCTS 3 terhadap jamur Rizoctonia solani
Uji Aktivitas Antagonisme Jamur Penicillium sp., Rhizopus sp. dan Aspergillus sp. terhadap Jamur Rhizoctonia solani
Gambar 8. Daya hambat isolat Penicillium sp., Rhizopus sp. dan Aspergillus sp.  terhadap jamur Rizoctonia solani
Berdasarkan  hasil  yang  di  peroleh  dari uji  antagonisme  jamur  rizosfer  terhadap
patogen R. solani , maka hipotesis diterima dari 10  isolat  yang  di  uji  hanya  isolat  jamur
R
R R R
Trichoderma spp.  yang  memiliki  daya antagonis dengan nilai berdasarkan persentase penghambatan  pada  hari  kesatu  setelah inkubasi  dan  berkembang  sampai  pada  hari kedelapan setelah inkubasi.
Antagonisme ketujuh isolat Trichoderma spp. terhadap patogen Rhizoctonia  solani menunjukkan  bahwa patogen Rhizoctonia solani mengalami penghambatan dalam proses pertumbuhannya untuk  semua  perlakuan.  Persentase  hambatan tertinggi  yaitu  isolat Trichoderma Rhizosfer Cengkih  Tuni  Allang  Tanaman  Kedua ( Tricho RCTAL 2 )  yaitu  89,52%,  kemudian diikuti  oleh  isolat Trichoderma Rhizosfer Cengkih Tuni Seith Tanaman Ketiga ( Tricho RCTS 3 ) yaitu 83,89%, isolat Trichoderma Rhizosfer  Cengkih  Tuni  Hatu Tanaman  Keempat  ( Tricho RCTH 4 )  yaitu 77,96%, isolat Trichoderma Rhizosfer Cengkih  Tuni  Allang  Tanaman  Kesatu ( Tricho RCTAL 1 ) yaitu 65,33%, isolat Trichoderma Rhizosfer Cengkih Tuni Asilulu Tanaman  Ketiga  ( Tricho RCTAS 3 ) yaitu 63,52%, isolat Trichoderma Rhizosfer Cengkih Tuni Seith Tanaman Kesatu ( Tricho RCTS 1 )  yaitu  52,64%,  dan  persentase terendah  ada  pada  isolat Trichoderma Rhizosfer  Cengkih  Tuni  Asilulu  Tanaman Keempat ( Tricho RCTAS 4 ) yaitu 44,07% . Hal ini  menunjukkan  bahwa  isolat Trichoderma Rhizosfer  Cengkih  Tuni  Allang  Tanaman Kedua  ( Tricho RCTAL 2 )  merupakan  jamur yang memiliki kemampuan daya hambat yang paling  baik  untuk  mengendalikan  jamur R. solani dibandingkan  dengan  isolat  yang  lain. Sedangkan  penghambatan  dari  Ketiga  isolat yaitu Aspergillus sp., Penicillium sp.  dan Rhizopus sp. 0,00% atau tidak ada penghambatan.  Ketiga  isolat  jamur  ini  tidak mampu  melawan  patogen Rhizoctonia  solani dengan  cepat  dan  penghambatannya  terjadi secara  perlahan-lahan.  Daya  hambat  jamur yang  rendah  menunjukkan  bahwa  isolat tersebut tidak mampu menghambat pertumbuhan Rhizoctonia  solani ,  bahkan R. solani mampu  tumbuh  melewati  isolat  jamur uji. Ketiga isolat tidak memiliki
kemampuannya  dalam  kompetisi  ruang  dan nutrisi,  serta  tidak  dapat  memarasit  patogen secara langsung.  Hal ini menunjukkan bahwa Ketiga    isolat  tersebut  tidak  memiliki  daya antagonis yang kuat seperti jamur Trichoderma spp.  Penghambatan  ini  terlihat pada  media  PDA  biakan  ganda  ( dual  culture plate ), sedangkan pada media  kontrol terlihat patogen Rhizoctonia  solani masih  terus berkembang  sampai  dengan  hari  Kedelapan setelah  inkubasi.  Hal  ini  jelas  menandakan bahwa penghambatan patogen R.solani terjadi karena keberadan isolat Trichoderma spp. Pertumbuhan dari ketujuh isolat Trichoderma spp.  dalam  media  biakan  ganda ( dual culture plate ) menutupi bagian permukaan  media,  bahkan  pertumbuhannya sampai  menutupi  dinding  cawan  petri  pada hari Kedelapan setelah inkubasi, dapat dilihat pada  gambar  9  sampai  dengan  gambar  15 untuk  masing-masing  isolat  yang  telah  di  uji sangat terlihat adanya zona hambatan inhibisi. Hal ini menandakan bahwa isolat Trichoderma spp.  dapat  berkompetisi  dalam  memperoleh nutrisi dan ruang sehingga patogen Rhizoctonia  solani terhambat. Trichoderma spp.  merupakan  jamur  parasit  yang  dapat menyerang dan mengambil nutrisi dari jamur lain.  Kemampuan  dari Trichoderma spp.  ini yaitu  mampu  memarasit  jamur  patogen tanaman  dan  bersifat  antagonis,  karena memiliki  kemampuan  untuk  mematikan  atau menghambat pertumbuhan jamur lain [21].
Trichoderma spp. memiliki kemampuan dalam mengeluarkan senyawa antibiotik yang berfungsi sebagai antifungal dalam menghambat pertumbuhan dan bahkan menjadi mikroparasit jamur patogen R. solani . Trichoderma spp.  dapat  menghasilkan  enzim hidrolitik  β-1,3  glukonase,  kitinase  dan selulase  yang  dapat  mendegradasi  sel-sel jamur lain yang sebagian besar tersusun dari β- 1,3  glukon  dan  kitin,  sehingga  jamur Trichoderma spp. mampu melakukan penetrasi  ke  dalam  hifa  jamur  lain [22] . Senyawa  antibiotik  yang  dihasilkan  oleh Trichoderma spp.  berupa  asam  harzianic, alamethicins,  tricholin,  peptaibols,  6-penthyl-
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...
α-pyrone,  massoilactone,  viridian,  gliovirin, glisoprenins,  asam  hiptelidic,  trichodermin, dermadin dan lain-lain [17] [23] [24] . Trichoderma spp.  bertindak  sebagai  mikroparasit  bagi cendawan  lain  dengan  tumbuh  mengelilingi miselium  patogen [25] .  Berdasarkan  hasil pengamatan  dari  gambar  satu  sampai  dengan gambar tujuh, dapat dilihat adanya pertumbuhan miselium jamur isolat Trichoderma spp.  menuju  miselium  jamur patogen Rhizoctonia  solani .  Pertumbuhan miselium Trichoderma spp.  ke  arah  jamur patogen karena adanya rangsangan dari protein α-lektin yang berikatan dengan kitin penyusun dinding  sel  jamur  patogen [26] . Trichoderma bersifat antagonis terhadap Rhizoctonia solani dengan  cara  melingkari  hifa R.  solani yang kemudian membentuk appressoria, setelah itu Trichoderma memproduksi enzim-enzim pemecah  dinding  sel.  Produksi  berlebihan enzim  seperti  kitinase  dan β-1,3-glukanase menunjukkan  biokontrol  yang  baik  terhadap pathogen [27]
Berdasarkan tingkatan atau kelas antagonis  yang  ada,  maka  keempat  isolat Tricho RCTAL 2 , Tricho RCTS 3 , Tricho RCTH 4 , Tricho RCTAL 1 , Tricho RCTS 1 ,  Tricho RCTAS 3 , dikategorikan ke dalam tingkat atau kelas antagonisme kelas 1 (jamur antagonis tumbuh cepat dan menutupi seluruh  permukaan  media)  karena  pada pengujian daya hambat, keempat koloni isolat Trichoderma spp.  tumbuh  menutupi  koloni patogen R.  solani di  atas  50%.  Sedangkan isolat Tricho RCTAS 4 dikategorikan ke dalam tingkat  atau  kelas  antagonism  kelas  2  (jamur antagonis  menutupi  paling  sedikit  2/3 permukaan  media),  karena  pada  pengujian persentase daya hambat, isolat Tricho RCTAS 4 tumbuh tidak sampai menutupi lebih dari 50%. Sedangkan  ketiga  isolat Asper RCT  dan Penicillium RCT  dan Rhizopus RCT  termasuk dalam tingkat kelas 5 (jamur patogen tumbuh cepat  menutupi  seluruh  permukaan  media). Hal  ini  jelas  menunjukkan  bahwa  dalam pengujian  daya  hambat  jamur Trichoderma spp.  merupakan  isolat terbaik. Dalam penelitian  ini  jamur Trichoderma dapat
digunakan  sebagai  agen  biokontrol  melawan jamur patogen salah satunya adalah patogen R. solani .

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa dari  rizosfer  isolat  jamur  yang  berhasil diisolasi  4  genus  jamur  yang  teridentifikasi sebagai Trichoderma , Aspergillus , Penicillium ,  dan Rhyzopus .  Tanah  disekitar rizosfer  tanaman  cengkih  mengandung  jamur antagonis yang mampu menghambat pertumbuhan  patogen  rebah  kecambah  pada tomat  ( Rhizoctonia  solani ).  Daya  hambat tertinggi  terdapat  pada  isolat Trichoderma Rizosfer  Cengkih  Tuni  Allang  Tanaman Kedua  ( Tricho RCTAL 2 )  yaitu  89,52%,  dan persentase terendah ada pada isolat Trichoderma Rizosfer  Cengkih  Tuni  Asilulu Tanaman  Keempat  ( Tricho RCTAS 4 )  yaitu 44,07%.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Boughendjioua,  H.  2018.  Esential  Oil Composition  of Syzygium  aromaticum
(L.).  International  Research  Journal  of Pharmacy and Medical Sciences (IRJPMS) 1(3):26-28. [2] Bustaman, S. 2011. Potensi Pengembangan  Minyak  Daun  Cengkih Sebagai  Komoditas  Ekspor  Maluku. Jurnal Litbang Pertanian. Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian Kementerian Pertanian Republik Indonesia.
[3] Towaha,  J.  2012,  Manfaat  Eugenol Cengkih  Dalam  Berbagai  Industri  di Indonesia, Indonesian Research Institute for  Industrial  and  Beverage  Crops,  11 (20): 79-90.
[4] Hadi,  S.  2012.  Pengambilan  Minyak Atsiri Bunga Cengkih (Syzigium aromaticum)  Menggunakan  Pelarut  n- Heksana  dan  Benzena.  Jurnal  Bahan Alam Terbarukan. 1(2) ; 25-30.
[5] Thomas,  A.N.S.  2017.  Tanaman  Obat Tradisional 2. Penerbit Kanisius, Yogyakarta.
[6] Meiniwati, S. Khotimah dan Mukarlina. 2014.  Uji  antagonis  pyricularia  grisea sacc.  penyebab  blas  tanaman  padi menggunakan jamur rizosfer isolat lokal. Jurnal Protobiont, volume 3 (1): 17-24.
[7] Liza, Y. E., Adrinal dan T. Jumsu. 2015. Keragaman Jamur Rizosfer dan Potensinya  sebagai  Agens  Antagonis Fusarium oxysporum Penyebab Penyakit  Layu  Tanaman  Krisan.  Jurnal Fitopatologi Indonesia. 11(2): 68-72.
[8] Atlas,  R  M.  2010.  Handbook  of Microbiological  Media  Fourth  Edition. CRC Press London.
[9] Amaria W., Taufiq E dan Harni R. 2013. Seleksi dan Identifikasi
Jamur Antagonis Sebagai Agens Hayati Jamur
Akar  Putih Rigidoporus  microporus pada  Tanaman  Karet.  Buletin  Ristri.  4 (1): 55-64.
[10] Skidmore,  A.M.,  and  C.M.  Dickson. 1976.  Colony  interactions  and  hyphae interferences between Septoria nodorum and pHylloplane
fungi.
Trans.Br.Mycol.Soc, 66: 57-64.
[11] Bella,  D.K.,  Wells,  H.D.  and  C.R., Markham. 1982.  In vitro antagonism of Trichoderma spp.  Against  six  fungal plant  patogens”. Phytopathology ,  72: 379-382.
[12] Watanabe T, 2002. Pictprial Atlas of Soil and  seed  Fungi:  Morphologies  of Cultured  Fungi  and  key  to  Species. Second  Ed.  Washington  DC  (US):CRC Press.
[13] Ihan  L. du Plessis.  2015. The Diversity Of Trichoderma spp.  In  South  Africa. Biology.
[14] Visagie,  C.M.,  Seifert,  K.A.  and  J. Houbraken. 2014. Diversity of
Penicillium section Citrina within  the fhynbos biome of south Africa, including  a  new  special  from  a Protea repens infructescence. Mycologia 106: 537-552.
[15] Samson,    R.A.,    Varga,  J.  and  J.  C. Frisvad, 2011.  Taxononic studies on the genus  Aspergillus.  Fungal  Biodiversity Centre, Utrecht, The Netherland.
[16] Samson, R. A. and J. Houbraken, 2011.
PHylogenetic and taxonomic studies on the genera Penicillium and Talaromyces. Fungal Biodiversity Centre,  Utrecht, The Netherland.
[17] Cubicek, C. P. and G. D. Harman, 2002. Trichoderma  and  Gliocladium,  volume 1,  Basic    Biology,  taxonomy,  and Genetics.  Taylor  &  Francis    Ltd. London.
[18] Frisvad,  J.  C.  and  J.  Houbraken,  2012.
PHylohenetic and Taxonomic Studies on the Genera Rhyzopus. Fungal Biodiversity Centre, Utrecht, The Netherland.
[19] Sudhakaran, M., Pamamoorty, D. and S. R. Kumar. 2013. Impact of
Conventional,  Sustainable  and  Organic Farming  System  on  Soil  Microbial Population and Soil Biochemical Properties, Puducherry, India.
International  Journal  Of  Environmental Sciences. Sci, (4)1.
[20] Winarso,  S.  2005.  Kesuburan  Tanah: Dasar  Kesehatan  dan  Kualitas  Tanah. Gava Media, Yogyakarta.
[21] Purwantisari  S.  2009.  Isolasi  dan identifikasi cendawan indigenous rhizosfer  tanaman  kentang  dari  lahan pertanian kentang organik di Desa Pakis.
Magelang. Jurnal BIOMA. ISSN: 11 (2): 45.
[22] Sukamto, S., Junianto, Y.D., Sulistyowati  L.  Dan  Sari  L.  1999. Keefektifan  Trichoderma  sp.  Sebagai Agens  Pengendali  Hayati  Rhizoctonia solani pada Bibit Kopi. Pelita Perkebunan Universitas Lampung. Lampung.
[23] Benitez, T. Rincon, A.M., Limon, M.C. and  A.C.  Codon.  2004.  Biocontrol mechanisms  of  Thricoderma  strains, International Microbiology 7(4):  249- 260.
Widiyanti et al . 2022. Eksplorasi dan Identifikasi ...
[24] Sundari, A. Khotimah, S. dan R. Linda,
2014. Daya Antagonis Jamur Trichoderma sp. Terhadap Jamur Diplofia  sp.  Penyebab  Busuk  Batang Jeruk  Siam  (Citrus  nobilis),  Jurnal
Protobiont 3(2): 106-110.
[25] Supriati,  L.R.B.  Mulyani,  dan  Y. Lambang,
2010. Kemampuan antagonisme beberapa isolate Trichoderma  sp.indigenous  terhadap Sclerotium  rolfsii  secara  in  vitro,  J. Agroscientic. 17(3): 119-122. [26] Soseanto. L. 2008. Pengantar Pengendalian Hayati Penyakit Tanaman. Rajawali Pers. Jakarta.
[27] Almeida,  F.  B.d.  R.,  Cerqueira,  F.  M., Silva  R.d.  N.,  Ulhoa,  C.  J.  dan  A.  L. Lima. 2007. Mycoparasitism  Studies  of Trichoderma Harzianum Strains Against Rhizoctonia  Solani :  Evaluation  Of
Coiling And Hydrolytic Enzyme
Production. Biotechnology Letters
29(8): 1189-1193