UJI PRAKLINIS E FEK HIPOGLIKEMIK BLIMBING WULUH ( AVERRHOA BILIMBI L.) DAN DAUN TAPAK DARA (CATHARANTHUS ROSEUS G)
PRECLINICAL STUDY OF HYPOGLYCEMIC EFFECT OF  BLIMBING WULUH  ( AVERRHOA BILIMBI L.) AND LEAVES OF TAPAK DARA ( CATHARANTHUS ROSEUS G)
EM Sutrisna * 1 , Sahila Ermawati 2 , Mulyadin 2 , Mios Agung SP 2
1 Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta
2 Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Surakarta em_sutrisna@yahoo.com

## ABSTRAK
Beberapa  penelitian  sebelumnya  menyatakan  bahwa  perasan  air  blimbing  wuluh ( Averrhoa  bilimbi L.) dan  dekokta  daun  tapak  dara  ( Catharanthus  roseus G)  mampu  menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada hewan uji.  Penelitian ini bertujuan menguji efek hipoglikemik dari buah blimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.)  dan  daun  tapak  dara ( Catharanthus  roseus G)  dengan  larutan  penyari  etanol  70%. Sebanyak  40  ekor tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus )  galus  Wistar  dibagi  dalam  8  kelompok  dan  diukur kadar  glukosa darah  puasanya  (GD1).  Semua  tikus  kemudian  diinjeksi  alloksan  monohydrate  dosis  30mg/200g  bb  tikus secara intraperitoneal dan diukur kadar glukosa darah puasanya (GD2). Setelah itu, tikus pada Kelompok I diberi aquadest ad libitum selama 7 hari, kelompok II diberi glibenklamid 0,126 mg/200g BB 1x pemberian. Kelompok  III  sampai  V  diberi  ekstrak  etanol  70%  blimbing  wuluh  berturut-turut  dosis  20mg/200g  tikus, 40mg/200g tikus, 80mg/200g tikus. Kelompok VI-VIII diberi ekstrak  etanol 70% daun tapak dara berturut- turut dosis 20mg/200g tikus, 40mg/200g tikus, 80mg/200g tikus.  Semua ekstrak diberikan per oral selama 7 hari.  Semua  tikus  kemudian  diukur  kadar  glukosa  darah  puasanya  (GD3). Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  70%  blimbing  wuluh  dosis  20g/200g;  40g/200g  dan  80g/200g  mampu  menurunkan kadar glukosa darah dengan persen penurunan berturut-turut sebesar 42,51%; 43,40% dan 58,95%. Ekstrak etanol  70%  daun  tapak  dara ( Catharanthus  roseus G) dosis  20g/200g;  40g/200g  dan  80g/200g  mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah  dengan  persen  penurunan  berturut-turut  sebesar  43,46%;  53,70%  dan 58,85%
Kata kunci: Hipoglikemik, Averrhoa bilimbi L. dan Catharanthus roseus G

## ABSTRACT
Previous  studies  showed  that Blimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L.)  and  decocta  of  leaves  of  Tapak dara( Catharanthus roseus G)  can lower blood glucose levels in test animals. This experiment was aimed to examine the hypoglycemic effect of 70% ethanol extract  of fruit Blimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) and leaf  of  Tapak  dara  ( Catharanthus  roseus G).Male  white  rats  ( Rattus  norvegicus )  Wistar  strain  (40)  were divided  into  eight  group.  Each  group  consist  of  5  rats.  All  rats  were  measured  fasting  blood  glucose  level (GD1).  After  that,  all  rats  were  injected  by  alloxan  monohydrate  30mg/200g  bw  and  then  were  measured fasting blood glucose level (GD2) on third day. Group I were treated by water for injection (WFI) ad libitum. Group II were treated by  glibenclamide 0.126 mg/200g bw once a day. Group III to V were treated by 70% ethanol extract of Blimbing wuluh 20mg/200g bw; 40mg/200g bw and 80mg/200g bw respectively. Group VI- VIII  were  treated  by  70%  ethanol  extract  of  leaves  of  Tapak  dara    20mg/200gbw;  40mg/200gbw, 80mg/200gbw  respectively. All  the  extracts  were  treated  orally  for  7  days.  Then all  rats  were  measured  in fasting  blood  glucose  levels  (GD3). The  results  showed  that  the  70%  ethanol  extract  of  Blimbing  wuluh ( Averrhoa bilimbi L.) 20mg/200g bw; 40mg/200g bw and 80mg/200g bw able to reduce blood glucose levels with  the  percentage  of  reduction  42,51%;  43,40%  and  58,95%  respectively.  The  70%  ethanol  extract  of leaves  of  Tapak  dara  ( Catharanthus  roseus G)  20mg/200g  bw;  40mg/200g  bw  and  80mg/200g  bw  able  to reduce blood glucose levels  with the percentage of reduction 43,46%; 53,70% and 58,85% respectively
Key  words: hypoglycemic,  Blimbing  wuluh    ( Averrhoa  bilimbi L.)  and  leaves  tapak  dara  ( Catharanthus roseus G)

## PENDAHULUAN
Eksplorasi  tanaman  asli  Indonesia  sebagai agen  fitofarmaka  terus  digalakkan.  Lebih  dari  400 tanaman dilaporkan digunakan secara empiris untuk mengobati  diabetes  (Subroto,  2006).  Dua  macam tanaman  yang  saat  ini  banyak  diteliti  untuk menurunkan  kadar  gula  darah  adalah  blimbing wuluh dan tapak dara.
Blimbing  wuluh  banyak  digunakan  dalam mengobati berbagai keluhan. Antara lain antibakteri, antiskorbut ,  astringent,  mengobati  demam,  mumps, diabetes,  sipilis,  batuk,  hipertensi,  ulkus  lambung (Kumar, et  al .,  2011).Vitamin  dan  mineral  yang terdapat  dalam  buah  belimbing  antara  lain ribovlavin,  vitamin  B1,  niacin,  asam  askorbat, carotene,  vit  A,  sedang  mineralnya  antara  lain
phosphor,  kalsium  dan  besi  (Anita et  al, 2011). Ekstrak  etanol  daun  Blimbing  wuluh  mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah  sebesar  50%, menurunkan kadar trigliserida 130%, dan menaikkan HDL sebesar 60% (Pushparaj, et al ., 2000). Pada uji toksisitas dinyatakan bahwa  pemberian jus blimbing wuluh  selama  15  hari  dosis  1g/kgbb  tidak menyebabkan  toksik  pada  mencit  (Ambili, et  al ., 2009).
Dekokta daun dan tanaman utuh ( whole plant )  tapak  dara  ( Catarathus  roseus ),  telah  digunakan sebagai obat diabetes dibeberapa Negara antara lain Brazil,  dominica,  Enggris,  Jamaica,  mosmabiq, Pakistan,  Taiwan,  Tailan  (Don,  1999).  Jus  daun segar Catharantus roseus dilaporkan dapat menurunkan  kadar  glukosa  darah  pada  kelinci  yang diinduksi alloksan (Nammi, et al ., 2003). Campuran ekstrak methanol dan dikloromethane, perbandingan (1:1) mempunyai efek hipoglikemik pada tikus yang diinduksi streptozosin (Sing et al ., 2001). Ekstrak air daun  Cataranthus  roseus  yang  diberikan  selama  15 hari dosis tunggal 500mg/kgbb mampu menurunkan kadar  glukosa  darah    (290.33–156.33 mg/dL)  pada tikus  albino  yang  diinduksi  streptozotocin  (Prasad, 2009). Penelitian  Armenia  dan  kawan-kawan  tahun 2004,  membuktikan  bahwa  air  perasan  blimbing wuluh dosis 30ml/kgBB mencit, mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah  dengan  persen penurunan  sebesar  55,27%  pada  mencit  yang diinduksi dengan aloksan. Penelitian lain menyataka bahwa dekokta daun tapak dara mampu menurunkan kadar  gula  darah  pada  tikus  yang  diinduksi  aloksan dengan persen penurunan 20% (Anggarani, 2005).
Penelitian  ini  melanjutkan  penelitian  di  atas dengan menguji efek penurunan kadar glukosa darah buah  blimbing  wuluh  dan  daun  tapak  dara    dengan cairan penyari etanol 70%.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat : spuit needle feeding , tabung mikrokapiler, ependorft, sentrifuge, Star Dust FC15. Bahan  :  buah  blimbing  wuluh,  daun  tapak  dara, GOD  PAP  reagen,  alloksan  monohydrate,  etanol 70%, aquadest Hewan  uji:  tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus ) galus Wistar
Jalannya Penelitian
1. Determinasi  tanaman  uji  dilakukan  di  FKIP laboratorium Biologi Universitas Muhammadiyah Surakarta
2. Ekstraksi  tanaman  uji  dilakukan  dengan maserasi  dengan  cairan  penyari  etanol  70%. Cara  ekstraksi  sebagai  berikut:  simplisia  kering dari  blimbing  wuluh  dan  tapak  dara  direndam dalam  etanol  70  %  dengan  perbandingan  1;7,5 dengan  sesekali  diaduk.  Setelah  2  hari  filtrat dipisahkan  dari  residu.  Residu  direndam  lagi dengan  etanol  75%  perbandingan  1:4  selama  2 hari.  Setelah  dua  hari  filtrat  dituang  dan digabungkan  dengan  filtrat  yang  pertama. Gabungan  filtrat  tersebut  diuapkan  dengan vacuum  evaporator  sampai  didapatkan  esktrak kental.
3. Pengujian kadar gula darah
a. Hewan uji dikelompokan dalam 8 kelompok. Masing-masing kelompok berjumlah  5  tikus.  Diadaptasikan  selama  1 minggu
b. Setelah  1  minggu  semua  tikus  diperiksa kadar glukosa darah puasanya (GD1)
c. Kemudian semua tikus uji diinduksi dengan alloksan  monohydrate  dosis  30mg/200g  bb tikus secara intraperitoneal
d. Tikus kemudian dipuasakan selama 16 jam, kemudian  diukur  kadar  glukosa  darah (GD2)
e. Setelah  itu,  tikus  pada  Kelompok  I  diberi aquadest ad  libitum selama  7  hari, kelompok  II  diberi  glibenklamid  0,126 mg/200g  bb  1x  pemberian.  Kelompok  III sampai  V  diberi  ekstrak  etanol  70% blimbing wuluh berturut-turut dosis 20mg/200g tikus, 40mg/200g tikus, 80mg/200g tikus. Kelompok VI-VIII diberi ekstrak    etanol  70%  daun  tapak  dara berturut-turut dosis 20mg/200g tikus, 40mg/200g  tikus,  80mg/200g  tikus.  semua ekstrak diberikan per oral selama 7 hari.
f. Pada  hari  ke-8  semua  tikus  diukur  kadar glukosa darah puasanya(GD3)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  dengan  etanol  70%  terhadap simplisa  blimbing  wuluh  sebesar  12,2%  dan  tapak dara  sebesar  16,5%.  Kedua  ekstrak  diuji  kadar glukosa  darahnya.Rerata  kadar  glukosa  darah  dapat dilihat pada Tabel 1
Tabel 1- Rerata kadar glukosa darah awal, post alloksan dan kadar glukosa akhir
Kelompok Awal  (mg/dL) Post Aloksan (mg/dL) Akhir (mg/dL) Kontrol (-) akuadest 98.20 ± 14.22 269.20 ± 75.76 380.60 ± 221.13 Kontrol (+) glibenklamid 91.60 ± 10.52 248.60 ± 66.99 145.60 ± 38.96* Ekstrak etanol 70% blimbing wuluh 20g/200g bb 96.60 ± 15.62 311.40 ± 36.4 218.80 ± 84.95* Ekstrak etanol 70% blimbing wuluh 40g/200g bb 82.40 ± 10.11 292 ± 30.5 215.40 ± 65.75* Ekstrak etanol 70% blimbing wuluh 80g/200g bb 93.8 ± 22.72 285.20 ± 65.73 156.20 ± 24.95* Ekstrak etanol 70% daun tapak dara 20g/200g bb 94.00 ± 15.73 254.40 ± 18.51 214.80  ± 32.44* Ekstrak etanol 70% daun tapak dara 40g/200g bb 90.40 ± 12.68 275.20 ± 35.4 176.20  ± 73.60*
Ekstrak etanol 70% daun tapak dara 80g/200g bb 87.20 ± 12.27 248.80 ± 86.71 156.60  ± 26.29*
Keterangan: *: berbeda signifikan dengan control negatif
Data  kadar  glukosa  darah  awal,  glukosa  post induksi  alloksan  dan  glukosa  akhir  dianalisis distribusinya  dengan  Sapiro  Wilk  dan  homogenitas data  dengan Test  of  Homogenecity  of  Variance . Hasil  uji  Sapiro  Wilk  didapatkan  nilai  p  0,642 (P>0,05).  Hal  ini  berarti  data  terdistribusi  normal. Pada Test  of  Homogenecity  of  Variance dengan levene test didapatkan nilai P 0,327 (P>0,05). Hal ini berarti  data  homogen.  Karena  data  terdistribusi normal dan homogen maka kadar glukosa awal diuji dengan  annova.  Hasilnya  adalah  P.  0,217.  Hal  ini berarti kadar glukosa awal tidak berbebda signifikan.
Pada  uji  Sapiro  Wilk  kadar  glukosa  post induksi  alloksan  didapatkan  nilai  p  0,318  (P>0,05). Hal ini berarti data terdistribusi normal. Pada Test of Homogenecity  of  Variance dengan  levene  test didapatkan  nilai  P  0,427  (P>0,05).  Hal  ini  berarti data homogen. Karena data terdistribusi  normal dan homogen  maka  kadar  glukosa  awal  diuji  dengan annova.  Hasilnya  adalah  P.  0,325.  Hal  ini  berarti kadar glukosa awal tidak berbeda signifikan. Karena kadar glukosa post alloksan tidak berbeda signifikan, maka  penentuan  perbedaan  efek  penurunan  glukosa dilhiat dari kadar glukosa akhir saja.
Pada  kadar  glukosa  akhir,  uji  Shapiro  Wilk didapatkan  data  p  0,463  (P>0,05),  sedang  pada  uji Levene  didapatkan  nilai  P.0,  528  (P>0,05).  Hal  ini berarti data terdistribusi normal dan homogen. Pada uji anova didapatkan nilai P. 0,003 (P<0,05). Hal ini berarti  terdapat  perbedaan  bermakna  kadar  glukosa darah antar kedelapan kelompok perlakuan tersebut. Pada  uji  LSD  didapatkan  hasil  bahwa  ekstrak ethanol  70%  blimbing  wuluh  dan  tapak  dara berbebeda  signifikan  dengan  kontrol  negatif  (tabel 1)
Pada  perhitungan  persen  penurunan  kadar glukosa  darah  menunjukkan  bahawa  semakin  tinggi dosis  ekstrak  etanol  70%  blimbing  wuluh  maupun daun  tapak  dara  semakin  besar  penurunan  kadar glukosa darah (tabel 2).
Tabel 2- Persen penurunan kadar glukosa darah Kelompok % penurunan Glibenklamid 0,126mg/200 g tikus 61.74 Ekstrak etanol 70% blimbing wuluh 20g/200g tikus 42.51 Ekstrak etanol 70% blimbing wuluh 40g/200g tikus 43.40 Ekstrak etanol 70% blimbing wuluh 80g/200g tikus 58.95 Ekstrak etanol 70% daun tapak dara 20g/200g tikus 43.56 Ekstrak etanol 70% daun tapak dara 40g/200g tikus 53.70 Ekstrak etanol 70% daun tapak dara 80g/200g tikus 58.85
Pada  penelitian  ini  terbukti  bahwa  ekstrak etanol  70%  belimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L) mampu menurunkan kadar glukosa darah tikus yang diinduksi  alloksan.  Hal  ini  mendasari  pemikiran bahwa  senyawa-senyawa  yang  diduga  berefek sebagai  agen  hipoglikemik  adalah  senyawa  semi polar.  Senyawa  flavonoid  yang  terdapat  dalam blimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L)  diduga mempunyai kemampuan meregenerasi dan merangsang pelepasan insulin oleh sel beta pancreas (Dheer dan Bhatnagar, 2010).
Esktra etanol 70% daun tapak dara ( Catarathus roseus G. Don) pada penelitian ini juga terbukti  memiliki  kemampuan  mampu  menurunkan kadar glukosa darah. Dengan melihat penelitian lain yang membuktikan bahwa dekokta, jus dan  ekstrak methanol daun tapak dara juga mampu  menurunkan kadar glukosa darah, maka diduga senyawa-senyawa yang  berefek  hipoglikemik  tersebut  adalah  senyawa yang  sifatnya  polar  dan  semi  polar.  Salah  satu senyawa  dalam  kandungan  tapak  dara  ( Catarathus roseus G. Don) yang diduga mempunyai kemampuan  menurunkan  kadar  glukosa  darah adalah  flavonoid  terutama  quersetin.  Flavonoid secara umum diduga memiliki kemampuan meregenerasi  dan  merangsang  pelepasan  insulin pada sel beta pancreas (Dheer dan Bhatnagar, 2010). Sedang  quersetin  diduga  mampu  menghambat transport glukosa oleh GLUT2 dan GLUT5 (Piparo, et al ., 2008 dan Patel, 2009).
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol  70%  belimbing  wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L) dan ekstrak etanol 70% daun tapak dara ( Catarathus roseus G.  Don)  memiliki  kemampuan  yang  sama dalam  menurunka  kadar  glukosa  darah  pada  tikus yang diinduksi alloksan.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak etanol 70% belimbing wuluh ( Averrhoa bilimbi L)  mampu  menurunkan  kadar  glukosa darah tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus )
galus Wistar yang diinduksi alloksan
2. Ekstrak etanol 70% daun tapak dara ( Catarathus roseus G. Don) mampu
menurunkan  kadar  glukosa  darah tikus  putih jantan  ( Rattus  norvegicus )  galur  Wistar yang diinduksi alloksan
3. Kemampuan  menurunkan  kadar  glukosa  darah dari  ekstrak  etanol  70%  belimbing  wuluh
( Averrhoa  bilimbi L)  dan  ekstra  etanol  70% daun  tapak  dara  ( Catarathus  roseus G.  Don) adalah sama.

## DAFTAR PUSTAKA
Ambili,S.,Subramoniam,A.,  Nagarajan,N.S.,  2009,    Studies  on  the  Antihyperlipidemic  Properties  of Averrhoa bilimbi Fruit in Rats, Planta Med ; 75(1) : 55-58
Anggraini, N. 2005. Pengaruh dekok daun tapak dara (catharanthus roseus) sebagai anti hiperglikemia pada tikus (rattus norvegikus) yang diinduksi aloksan . Malang : FKIP UMM
Anita,  R.Y.,  Geetha,  R.V.,  &  Laksmi,  T.,  2011,  Averrhoa  bilimbi  Linn–Nature’s  Drug  Store-  A Pharmacological Review, Inter. J. of Drug Development & Research , Vol. 3, Issue 3 ,101-108.
Armenia,  Megawati,  dan  Rusdi.,  2004.  Efek  Penurunan  Gula  Darah  Air  Perasan  Buah  Belimbing  Wuluh Pada  Mencit  Diabetes  Yang  Diinduksi  Aloksan  Dan  Mencit  Yang  Dibebani  Glukosa. Jurnal  sains  dan teknologi farmasi . Vol 9:62-9
Don,  G.,  1999. Catharanthus  roseus In:  Ross  I.A.  (Ed.),  Medicinal  plants  of  the  world.  Human  Press, Totowa, NJ, pp. 109–118
Dheer R.   dan  Bhatnagar P., 2010. A study of the  Antidiabetic Activity of  Barleria prionitis Linn. Indian Journal of Pharmacology . Vol 42 (2): 70-3.
Tjitrosoepomo,G., 1998. Taksonomi Tumbuhan Spermatophyta . Yogyakarta: UGM Press
Kumar, A.S., Kavimani,S., &  Jayaveera, K.N., 2011,  review on medicinal plants with potential antidiabetic activity , Int. J. of Phytopharmacology , 2(2), 53-60.
Nammi,  S.,  Boini,  M.K.,Lodagala,  S.D.,  and  Behara,  R.B.,  2003,The  juice  of  fresh  leaves  ofCatharanthus roseus Linn.  reduces  blood  glucose  in  normal  and  alloxan  diabetic  rabbits, BMC  Complementary  and Alternative Medicine , vol. 3, article 4
Petel J. A Review of Potensial Health Benefits of Flavonoids . LURJ (Serial oneline) 2008 (cited 2009  may 22);3:2. Available from: http//www.lurj.org
Piparo E.,2008,  Flavonoids for Controlling Starch Disgestion: Structural Reguirements for Inhibiting Human α-Amylase. J Med Chem. Vol. 51, No. 12.
Prasad,  S.K.,  Kulshreshtha,  A.,    and  Qureshi,T.N.,  2009,    Antidiabetic  activity  of  some  herbal  plants  in streptozotocin induced diabetic albino rats, Pakistan Journal of Nutrition , vol. 8, no. 5, pp. 551–557
Pushparaj, P., Tan C.H., dan  Tan BK., 2000,  Effects of  Averrhoa bilimbi leaf extract on blood  glucose and lipids in streptozotocin-diabetic rats, J Ethnopharmacol. 72(1-2):69-76.
Singh, S.N., Vats,P., and Suri, S.,2001,  Effect of an antidiabetic extract of Catharanthus  roseus on enzymic activities in streptozotocin induced diabetic rats, Journal of Ethnopharmacology , vol. 76, no. 3, pp. 269–277.
Subroto, A. 2006. Ramuan Herbal untuk Diabetes Melitus . Jakarta: Penebar Swadaya
Van Steenis, C.G.G.J. 2005. Flora . Jakarta : PT. Pradnya Paramita.