Penghambatan Ekstrak Daun Kremah ( Alternanthera sessilis )
Terhadap Enzim α-amilase secara In-Vitro
In-vitro Study of α-Amylase Inhibition of Kremah Leaves Extract ( Alternanthera sessilis )
(UMPP), Jl. Raya  Ambo kembang No 8 Pekalongan Jawa Tengah Indonesia
3 Program Studi Diploma Keperawatan, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Pekajangan Pekalongan (UMPP), Jl. Raya  Ambo kembang No 8  Pekalongan, Jawa Tengah Indonesia Email: wirasti.kharis@gmail.com
Received: 27 Mei 2021; Accepted: 19 Juni 2021; Published: 30 Juni 2021

## Abstrak
Pengobatan yang penting untuk Diabetes Melitus (DM) tipe 2 adalah mengendalikan kadar glukosa darah. Enzim    α-amilase  di  dalam  tubuh  berperan  dalam  memecah  karbohidrat  menjadi  amilum.  Pengendalian enzim amilase tersebut sangat diperlukan pada kasus diabetes. Tanaman kremah ( Alternanthera sessillis ) merupakan  salah  satu  tanaman  yang  bagian  daunnya  dapat  digunakan  untuk  menurunkan  kadar  glukosa dalam  darah  karena  mengandung  metabolit  sekunder  salah  satunya  adalah  flavonoid  yang  dapat menghambat enzim α-mylase. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui aktivitas dan nilai daya hambat daun kremah terhadap enzim α-amilase. Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu reaksi enzimatis  dengan  pengukuran  intensitas  warna  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis.  Nilai  IC 50 yang diperoleh penghambatan enzim α-amilase sebesar 101,89±7,21 μg/mL sedangkan nilai IC 50 acarbose sebesar 127,17±4,42  μg/mL.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  kremah  mempunyai  aktivitas (hiperglikemia) dengan cara menghambat enzim penghidrolisis karbohidrat kompleks seperti penghambatan enzim α-amilase yang baik dibandingkan dengan acarbose karena nilai IC 50 ekstrak lebih kecil, sehingga daun kremah mempunyai  penghambatan terhadap enzim α-amilase.
Kata Kunci : Daun Kremah, ekstrak, α-amilase, Alternanthera sessillis

## Abstract
An important treatment for type 2 diabetes is controlling blood glucose levels. α-amylase enzyme in the body plays  a  role  in breaking down  carbohydrates  into  starch.  Control  of  the  amylase  enzyme  is  needed  in diabetes cases Kremah plant (Alternanthera sessillis) is a plant whose leaves can be used to lower blood glucose levels because it contains secondary metabolites, one of which is flavonoids which can inhibit the α-amylase enzyme. The purpose of this study was to determine the activity and inhibition value of kremah leaves  against  the  α-amylase  enzyme.  The  method  used  in  this  research  is  the  enzymatic  reaction  by measuring the intensity of the color using UV-Vis spectrophotometry. The IC50 value obtained by α-amylase enzyme inhibition was 101.89 ±7,21 μg / ml while the IC50 acarbose value was 127.17 ±4,42 μg / ml. These results indicate that kremah leaf extract has activity (hyperglycemia) by inhibiting complex carbohydrate hydrolyzing  enzymes  such  as  the  α-inhibition  enzyme  α-Amylase  which  is  good  compared  to  acarbose because the IC50 value of the extract is smaller, so that the leaves of kremah has inhibiting of the α-amylase enzyme.
Keywords : Kremah leaf, extract, α-amylase, Alternanthera sessillis

## PENDAHULUAN
Diabetes  mellitus  merupakan  suatu  keadaan kadar gula darah dalam tubuh melebihi batas normal (hiperglikemia). Salah satu cara untuk
mengatasi  kadar  gula  darah  yang  berlebihan yaitu  menghambat  enzim  penghidrolisis karbohidrat  yang  disebut  enzim  α-amilase (Rizza, 2010).
Wirasti Wirasti 1, Titi Lestari 2 , Isyti’aroh Isyti’aroh 3 1,2 Progam Studi S1 Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Pekajangan Pekalongan
Pemilihan  obat-obatan  untuk  mengatasi diabetes melitus tanpa efek  samping, merupakan suatu pertanyaan besar untuk para ahli  medis.  Pada  umumnya  obat-obatan sintetis  yang  digunakan  untuk  mengatasi diabetes  melitus  mempunyai  efek  samping yang buruk, seperti muntah, disentri, migrain, dan  anemia.  Obat  tradisional  merupakan pilihan  yang  baik  sebagai  alternatif  obat- obatan  sintetis,  karena  efek  samping  yang dihasilkan  obat  tradisional  lebih  sedikit (Verma et al., 2012). Menurut Informasi yang diperoleh  dari  Goel  (2012),  terdapat  800 tanaman yang berpotensi sebagai antidiabetes. Salah  satu  tanaman  obat  yang  memiliki khasiat tersebut adalah kremah (Alternanthera sessilis). Bagian  daun  kremah  mengandung banyak  metabolit  sekunder,  salah  satunya adalah  flavonoid  yang  berpotensi  sebagai penghambat enzim penghidrolisis karbohidrat sepetri enzim α-amilase.
Penelitian mengenai daun kremah sebagai antidiabetes  sebelumnya  pernah  dilakukan oleh beberapa peneliti. Mrinmay et al (2015) menunjukkan bahwa ekstrak etanol dari daun kremah dengan dosis 200 dan 400 mg/kgBB mempunyai aktivitas hipoglikemik pada tikus yang diinduksi dengan streptozotocin Dinyatakan  pula,  bahwa  ekstrak  etanol tanaman  kremah  dalam  dosis  100  mg/kgBB memiliki aktivitas antidiabetik karena secara signifikan  dapat  menurunkan  kadar  glukosa darah  pada  tikus  yang  telah  menderita diabetes selama 15 hari.
Penelitian  yang  telah  digunakan  oleh peneliti  sebelumnya  adalah  menggunakan metode secara in- vivo . Oleh karena itu, perlu dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai mekanisme  spesifik    ekstrak  daun  kremah pada  penurunana  kadar  gula  darah  terutama mengenai    penghambatan  terhadap  enzim  α- amilase  secara in-vitro yang  ditunjukkan dengan  nilai  IC 50 . Inhibitor  consentrasion (IC) 50 adalah    konsentrasi  penghambat  yang dapat  menghambat  enzim  α-amilase    50% (Afriyanti, 2015).

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat gelas, vial atau botol kaca, kain saring, vacum rotary evaporator (HEIDOLP), mikropipet,  cawan  porselen,  penangas  air, oven,  inkubator  dan  spektrofotometer  UV- Vis  (SHIMADZU).  Bahan  yang  digunakan dalam penelitian ini yaitu ekstrak etanol daun kremah ( Alternanthera sessilis ), etanol 96%, enzim  α-amylase,  Acarbose,  Amilum  5%, larutan  iodine  0,5%,  dan  larutan  dapar phospate.

## Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman dilakukan untuk memastikan bahwa tumbuhan yang digunakan  untuk  penelitian  adalah  jenis spesies kremah (Alternanthera sessilis).

## Pembuatan simplisia daun kremah
Pembuatan simplisia diawali dengan pengumpulan tanaman kremah yang diperoleh  dari  Desa  Klareyan,  Kecamatan Petarukan,  Kabupaten  Pemalang,  Jawa Tengah.  Bagian  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah daun kremah yang telah diperoleh  dibersihkan  dari  kotoran  yang melekat  dengan  cara  dicuci  dengan  air mengalir. Setelah itu dikeringkan dengan cara diangin-anginkan  pada  tempat  yang  tidak terkena  sinar  matahari  atau  dikeringkan dengan  oven  pada  suhu  40ºC.  Setelah  itu disortasi  kembali  dan  dibuat  serbuk  dengan menggunakan ayakan nomor 40 Mesh.

## Pembuatan ekstrak
Ditimbang daun kremah yang sudah menjadi serbuk  sebanyak  500  gram,  kemudian diekstraksi  dengan  menggunakan  metode maserasi,  dengan  cara  merendam  simplisia kering daun kremah dalam 6 L pelarut etanol 96%  selama 5 hari dengan sesekali dilakukan pengadukan. Selanjutnya sari yang diperoleh diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator dibawah  titik  didih  hingga diperoleh ekstrak yang kental.

## Pembuatan Larutan Uji Pembuatan larutan dapar fosfat
Pembuatan larutan dapar fosfat 0,01 M pH 7,0 dapat dilakukan dengan cara menimbang 5,99 gram natrium dihidrogen fosfat dan dilarutkan dalam  500  mL  air  suling  (larutan  A). Kemudian  sebanyak  8,52  gram  natrium hidrogen  fosfat  ditimbang  dan  dilarutkan dalam  600  mL  air  suling  (larutan  B).  Dari larutan A diambil 255 mL dan dari larutan B diambil  245  mL,  lalu  dicampurkan  kedua larutan  tersebut  dan  kemudian  dicek  pH sampai mencapai 7,0.
Penyiapan sampel Penyiapan sampel dilakukan dengan melarutkan  sebanyak  10,0  mg  ekstrak, masing-masing  ekstrak  dilarutkan  dengan  1 mL  DMSO  dan  aquadest  sampai  10  mL sehingga  diperoleh  konsentrasi  1000  µg. kemudian  dibuat  seri  konsentrasi  larutan sampel uji ekstrak.
Pembuatan enzim α-amilase Pembuatan larutan enzim α-amilase dilakukan  dengan  menimbang  sebanyak (0,5128  U/mL)  3,246  mg  α-amilase  dan dilarutkan dalam 100 mL dapar fosfat pH 7,0.

## Pembuatan larutan amilum
Pembuatan  larutan  amilum  0,5%  dilakukan dengan  melarutkan    500  mg  amylum  dalam 100  mL  aquadest  kemudian  dipanaskan sampai larut.

## Pembuatan larutan iodine
Pembuatan  larutan  iodin  0,5%  dilakukan dengan  melarutkan  0,75  gram  kalium  iodida dan 0,5 gram iodine dalam 100 mL aquadest kemudian dipanaskan sampai larut.

## Uji Aktivitas Enzim α-amilase
Uji  aktivitas  α-amilase,  menurut  Mugiyanto (2016)  dapat  dilakukan  dengan  tahapan berikut.

## Pengujian blanko
Pengujian  blanko  dapat  diukur  dengan mengambil  1000  µL  dapar  fosfat  pH  7,0, kemudian  diinkubasi  selama  10  menit  pada suhu 37 o C. Kemudian pada sampel ditambahkan  500  µL  amilum  0,5%,  lalu diinkubasi  kembali  selama  15  menit  pada
suhu  37 o C.  Setelah  masa  inkubasi  selesai, maka  ditambahkan  10  µL  iodine  0,5%. Absorbansinya diukur dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang 601 nm.

## Pengujian kontrol blanko
Pengujian  kontrol  blanko  dapat  dilakukan dengan  pembuatan  kontrol  blanko.  Kontrol blanko  dibuat  dengan  mengambil  1000  µL dapar  fosfat  Ph  7,  kemudian  diinkubasi selama 10 menit pada suhu 37 o C.  Kemudian pada  sampel  ditambahkan  500  µL  amilum 0,5%, lalu inkubasi kembali selama 15 menit pada suhu 37 o C. Setelah masa inkubasi selesai maka ditambahkan 10 µL dapar fosfat pH 7,0. Absorbansinya diukur dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang 601 nm. Pengujian sampel Pengujian sampel dilakukan dengan pembuatan berbagai konsentrasi. Konsentrasi sampel  dibuat  dengan  mengambil  500  µL sampel  lalu  dibuat  berbagai  konsentrasi  (15, 30,  45,  60,  75    g/mL)  dan  500  µL  enzim  α- amylase,  selanjutnya  diinkubasi  selama  10 menit pada suhu 37 o C. Selanjutnya ke dalam sampel  ditambahkan  500  µL  amilum  0,5%, lalu  inkubasi  kembali  selama  15  menit  pada suhu  37 o C.  Setelah  masa  inkubasi  selesai ditambahkan 10 µL iodine 0,5%. Absorbansinya diukur dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang 601 nm.
Pengujian kontrol sampel
Pengujian kontrol sampel dilakukan dengan  mengambil  500  µL  sampel  dengan berbagai  konsentrasi  (15,  30,  45,  60,  75 µg/ml)  dan  500  µL  dapar  fosfat  pH  7,0, kemudian  diinkubasi  selama  10  menit  pada suhu  37 o C.  Selanjutnya  ke  dalam  sampel ditambahkan  500  µL  dapar  fosfat  pH  7,0. Lalu  diinkubasi  kembali  selama  15  menit pada  suhu  37 o C,  setelah  masa  inkubasi selesai, ditambahkan 10 µL iodine 0,5%. Absorbansinya diukur dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang 601 nm.

## Analisis Data
Analisis data dilakukan dengan cara menghitung  persentase  inhibisi  α-amilase. Data  yang  diperoleh  dari  hasil  pengukuran absorbansi  dapat  dihitung  %  penghambatan menggunakan persamaan pada rumus 1.
1 − (𝑎𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝑎𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙) 𝑎𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑥100%
Menurut  Sugiwati  (2009),  perhitungan IC 50 menggunakan  persamaan  regresi  linear, konsentrasi  sampel  sebagai  sumbu  x  dan  % inhibisi  sebagai  sumbu  y.  Nilai  IC 50 dapat dihitung  dari  persamaan  y  =  bx  +  a,  dengan menggunakan rumus 2.
𝐼𝐶50 = 50 − 𝑎 𝑏
IC 50 : nilai aktivitas penghambatan (μg/mL) a  : nilai konstanta pada persamaan regresi linier b  : nilai gradien pada persamaan regresi linier

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan simplisia diawali dengan pengumpulan  bahan  baku  berupa  tanaman kremah (Alternanthera  sessilis) .  Proses memanen  daun  kremah  dilakukan  dengan cara memetik daun dari tanaman yang belum berbunga, karena hal tersebut akan mempengaruhi kadar kandungan senyawa zat aktif dalam simplisia.
Setelah  dipetik,  daun  kremah  dilakuan sortasi  basah  tujuannya  untuk  memisahkan kotoran atau bahan-bahan asing yang terbawa pada  saat  pengambilan  sampel.  Pencucian dengan  menggunakan  air  bersih  yang mengalir,  tujuannya  untuk  menghilangkan tanah, mengurangi mikroba dan zat pengotor lain  yang  melekat  pada  bahan  simplisia. Selanjutnya  simplisia  dikeringkan  dengan panas matahari selama 1 hari dan dilanjutkan dengan oven pada suhu 45ºC, tujuannya untuk mengurangi  kadar  air  sehingga  simplisia dapat  disimpan  dalam  waktu  yang  lama. Setelah  simplisia  kering,  langkah  berikutnya yaitu  disortasi  kering,  tujuannya  untuk memisahkan  pengotor  lain  yang  tertinggal pada simplisia kering. Setelah itu, dihaluskan
dan  diayak  dengan  nomor  pengayakan  40 mesh sehingga diperoleh serbuk dan disimpan dalam wadah tertutup baik pada suhu 15-30ºC (Susanti, 2016).
Pada  proses  ekstraksi  metode  yang digunakan adalah metode maserasi. Maserasi merupakan  metode  yang  paling  mudah  dan sederhana. Metode ini dilakukan dengan cara merendam  simplisia  pada  pelarut  yang dipilih. Pelarut yang digunakan dalam proses ekstraksi  adalah  etanol  96%,  karena  etanol 96%  merupakan  pelarut  pengekstrasi  yang terpilih  untuk  pembuatan  ekstrak  sebagai bahan  baku  sediaan herbal  medicine ,  dan mudah  untuk  menembus  dinding  sel  serta masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat  aktif  sehingga  zat  aktif  akan  larut  dan karena  adanya  perbedaan  konsentrasi  antara larutan  zat  aktif  didalam  sel  dengan  yang diluar  sel,  maka  larutan  yang  terpekat  akan didesak  keluar  sehingga  akan  menghasilkan ekstrak kental yang akan lebih mudah dalam proses identifikasi (Pujiyanto, 2019).
Proses  maserasi  dilakukan  dengan  cara merendam simplisia dengan pelarut menggunakan  perbandingan  1:6,  tujuannya untuk  meningkatkan  tersarinya  senyawa kimia  yang  berada  di  dalam  simplisia. Maserat  yang  diperoleh  dari  hasil  maserasi ditampung dan dipisahkan dengan pelarutnya menggunakan vacuum  rotary  evaporator pada  suhu  40ºC  dengan  kecepatan  60  rpm. Prinsip dari vacuum rotary evaporator adalah ekstrak  diputar  di  atas  air  hangat,  sehingga pelarut  dari  ekstrak  akan  menguap.  Adanya sistem vaccum akan  menyebabkan  tekanan pada  sistem  turun  mencapai  tekanan  yang telah  diatur  sehingga  pelarut  yang  menguap bisa  menetes  di  tempat  penampungan. Ekstrak yang telah dipisahkan dari pelarutnya selanjutnya  diuapkan  di  dalam  oven  untuk menghilangkan sisa pelarut sehingga diperoleh ekstrak yang kental.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas penghambatan ekstrak daun kremah terhadap  enzim  α-amilase.  Metode  yang digunakan  dalam  penelitian  ini yaitu menggunakan metode secara in-vitro. Larutan
iodin  yang  pada  dasarnya  berwarna  kuning kecokelatan  akan  membentuk  senyawa kompleks  yang  berwarna  biru  apabila bereaksi  dengan  pati.  Oleh  sebab  itu, absorbansi yang terukur oleh spektrofotometer  UV-Vis  pada  λ  601  nm menunjukkan  jumlah  pati  yang  tidak terhidrolisis oleh enzim.
Prinsip  pengujian  sampel  yaitu  semakin aktif ekstrak  yang digunakan, maka semakin sedikit  pati  yang  terhidrolisis  sehingga glukosa  yang  dihasilkan  semakin  sedikit, karena  ekstrak  dapat  menghambat  aktivitas enzim  α-amilase.  Aktivitas  enzim  α-amilase yang  dihambat  oleh  ekstrak  tidak  dapat bereaksi  dengan  substrat  amilum,  sehingga intensitas  warna  yang  dihasilkan  akan semakin berkurang (Afriyanti, 2015). Ekstrak yang  paling  aktif  yaitu  ekstrak  yang menunjukkan % inhibisi yang paling besar.
Pengujian sampel diawali dengan menghitung  %  inhibisi  dari  masing-masing konsentrasi  ekstrak  daun  kremah  dan pembanding  yaitu acarbosa. Nilai  % inhibisi menunjukkan  kemampuan  ekstrak  dalam konsentrasi  tertentu  dapat  menghambat aktivitas  enzim  α-amilase.  Hasil  data pengamatan  antara  konsentrasi  masing- masing  ekstrak  dan  pembanding  (Acarbosa) dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Hasil uji penghambatan α-amilase oleh ekstrak daun kremah dan acarbosa
Ekstrak  yang  paling  aktif  yaitu  ekstrak yang  menunjukkan  %  inhibisi  yang  paling besar.  Dilihat  dari  hasil  perbandingan  antara
sampel ekstrak daun kremah dengan pembanding  dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak etanol  daun  kremah  mempunyai  aktivitas inhibitor  α-amilase  sehingga  mampu  untuk menghambat kerja enzim α-amilase. Aktivitas inhibitor α-amilase ekstrak daun kremah lebih baik  dari  acarbosa,  karena  dilihat  dari  nilai persen inhibisi ekstrak etanol pada konsentrasi  75  μg/mL  mempunyai  nilai persen inhibisi yang lebih besar yaitu 38,30% daripada acarbosa pada konsentrasi 75 μg/mL yang  mempunyai  nilai  persen  inhibisi  yaitu 31%.  Menurut  Pujiyanto  (2017)  semakin tinggi  konsentrasi  sampel  yang  digunakan maka semakin tinggi aktivitas penghambatan enzim.
Pengujian  selanjutnya  yaitu  menentukan nilai  IC 50 .  Jumlah  konsentasi  penghambat yang  dapat  menghambat  enzim  α-amilase mencapai  penghambatan  50%  adalah  IC 50 . Nilai IC 50 semakin kecil maka penghambatan yang dihasilkan lebih baik (Afriyanti, 2015). Nilai  IC 50 ditentukan  melalui  regresi  linier, dimana  sumbu  x  menunjukkan  konsentrasi sampel  dan  sumbu  y  menunjukkan  % penghambatan.  Berdasarkan  persamaan  y  = bx + a dapat dihitung nilai IC 50 .
Gambar 2. Regresi linear antara kadar sampel dan

## % inhibisi terhadap α-amilase
Gambar  2  merupakan  hasil  kurva  baku pengujian  antara  sampel  ekstrak  dengan pembanding. Hasil pengujian sampel ekstrak daun kremah dalam menghambat aktivitas α-
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 0 50 100 ekstrak pembanding In h ib is i (%) Konsentrasi (µg/mL )
amilase  menunjukkan  nilai  IC 50 rata-rata sebesar 101,89±7,21 μg/mL dengan nilai r = 0,998  dan  persamaan  regresi  linear  y  = 0,447x+4,4451.  Hasil  pengujian  standar acarbosa dalam menghambat aktivitas enzim α-amilase  menunjukkan  nilai  IC 50 rata-rata sebesar 127,17±4,42 μg/mL dengan nilai r = 0,992 dan persamaan regresi linear y = 0,354 x  +  4,98.  Pengujian  standar  acarbosa bertujuan  untuk  mengetahui  nilai  IC 50 dari acarbosa  sebagai  kontrol  positif  pengujian dan  sebagai  pembanding  dengan  nilai  IC 50 ekstrak yang diuji.
Tabel 1. Nilai IC 50 penghambatan α-amilase dari ekstrak dan pembanding (acarbosa)
Sampel Nilai IC 50 (μg/ml)± SD Daun kremah 101,89±7,21 Acarbosa 127,17±4,22
Berdasarkan Tabel 1, hasil pengujian nilai IC 50 ekstrak  daun  kremah  dan  pembanding (acarbose)  menunjukkan  nilai  IC 50 ekstrak daun  kremah  lebih  kecil  daripada  acarbosa, yang  menunjukkan  ekstrak  daun  kremah memiliki kemampuan penghambatan
aktivitas enzim α-amilase yang lebih baik. Hal ini  dikarenakan  daun  kremah  mempunyai senyawa kimia aktif yang dapat menghambat aktivitas enzim α-amilase. Senyawa-senyawa tersebut  dapat  dilihat  dari  hasil  skrining fitokimia,  namun  senyawa  yang  berpotensi dalam  menghambat  enzim  α-amilase  adalah senyawa  golongan  glikosida,  alkaloid  dan flavonoid  (Pujiyanto,  2019).  Selain  itu, senyawa  xanton  yang  merupakan  golongan flavanoid  telah  terbukti  secara in-vitro menghambat  aktivitas  enzim  α-amilase. Senyawa flavanoid lainnya juga telah terbukti mampu  untuk  menghambat  aktivitas  α- glukosidase  dan  α-amilase  (Tadera et  al ., 2005).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  diperoleh maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak daun kremah dapat menghambat aktivitas enzim α- amilase  dengan  nilai  IC 50 lebih  kecil dibandingkan  dengan  acarbose  .  Nilai  IC 50 ekstrak
daun kremah yaitu
101,89±7,21μg/mL  dan  nilai  IC 50 acarbose yaitu 127,17±4,42μg/mL.

## Daftar Pustaka
Afriyanti, T. 2015, Uji potensi antidiabetik pada ekstrak daun Garcinia mangostana L. melalui penghambatan aktifitas alfa glukosidase dan alfa amilase serta penapisan fitokimia pada ekstrak teraktif. Universitas Indonesia
Goel,  R.,  Dask,  B.,  Sadaf,  J.G.,  and  Deepti,  K.  2012.  Medicinal  plants  as  anti-diabetics:  a review. International Bulletin of Drug Research; 1 (2) :100-107
Mrinmay,  D.,  Ashok,  K.D.,  Mastanaiah,  K.,  and  Das,  A.  2015.  Evaluation  of  anti-diabetic activity  of  ethanolic  extract  of Alternanthera  sessilis Linn.  in  streptozotocin-induced diabetic  rats.  International  Journal  of  Pharma  Sciences  and  Research  (IJPSR);  6  (7)  : 1027-1032
Pujiyanto,  S.,  Wijanarka.,  Budi,  R  and  Via,  A.  2019.    Aktivitas  inhibitor  α-amilase  ekstrak etanol tanaman brotowali ( Tinospora crispa L.). Bioma; 21 (2) : 91-99
Rizza, R.A. 2010. Pathogenesis of fasting and postprandial hyperglycemia in type 2 diabetes: Implications for Therapy. Diabetes Journal; 59(1): 2697-2707
Sugiwati  S.,  Siswati  S.,  and  Efy,  A.  2019.  Antihyperlycemic  activity  of  the  mahkota  dewa ( Phaleria  macrocarpa (Scheff.)  Boerl.)  leaf  extracts  as  an  alphaglucosidase  inhibitor. Makara Kesehatan; 13 (2): 74-78
Tadera,  K.,  Yuji,  M.,  Kouta,  T.,  and  Tomoko,  M.  2005.  Inhibition  of  α-glukosidase  and  α- amylase by flavonoids. Japan : Kagoshima University
Verma,  S.,  Madhu,  .G,  Harvinder,  P.,  &  Geeta,  A.  2018.  Diabetes  mellitus  treatment  using herbal drugs. International Journal Of Phytomedicine; 10(1) : 1-10