## PENGARUH STRESSOR SUHU DAN SALINITAS TERHADAP
PERKEMBANGAN EMBRIO IKAN NILEM ( Osteochilus hasselti )
Vitas Atmadi Prakoso 1)* dan Kurniawan 2)
1) Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Air Tawar
2) Aquaculture graduate Student, Flinders University-Australia
* email: vitas.atmadi@gmail.com

## ABSTRACT
Effects of Temperature and Salinity as Stressors on Embryo Development of Hard-

## Lipped Barb (Osteochilus Hasselti)
Exposure to environmental stressors on fish is an aspect of concern to researchers because its effects can be detrimental to metabolism, growth, disease resistance, reproductive ability, health, and survival of the fish. Although, according to  the researchers  that  stress  can  be  bad  for  the  fish, but  this  stress  phenomenon remains  to  be  studied  more  deeply.  Based  on  this  information,  this  paper  is  made  to  assess  the  effects  of environmental  stressors  on  fish,  especially  in  hard-lipped  barb  (Osteochilus  hasselti)  on  the  embryonic developmental  stages.  The  data  collected  comes  from  the  results  of  research  conducted  at  Institute  for Freshwater  Aquaculture  Research  and  Development  (IFARD),  Bogor.  This  paper  discussed  about temperature and salinity as environmental stressors related to development of early life stage of hard-lipped barb.  Hatching,  mortality,  and  survival  rates  were  the  indicators  of  environmental  stressors  decisive influence on the development of the embryo. In addition, the observation of embryonic development through the microscope is also used as supporting data. Based on research data, it was concluded that environmental stressors  such  as  temperature  and  salinity  beyond  the  limits  of  tolerance  could  interfere  with  embryonic development  of  fish  nilem.  The  stressor  temperatures  for  the  embryonic  development  of  hard-lipped  barb were 25 o C and 31 o C, while the salinity stressor for hard-lipped barb embryos was above 5 ppt. The results of this  study  could  be  used  as  reference  in  fish  farming  activities  of  hard-lipped  barb  to  optimize  seedling production.
Key Words: Osteochilus hasselti, embryo development, environmental stressors, temperature, salinity

## ABSTRAK
Paparan  terhadap  stressor  lingkungan  pada  ikan  merupakan  aspek  yang  menjadi  perhatian  bagi peneliti  karena  efeknya  dapat  merugikan  metabolisme,  pertumbuhan,  ketahanan  terhadap  penyakit, kemampuan  reproduksi,  kesehatan,  dan  kelangsungan  hidup  ikan.  Meskipun  menurut  para  peneliti  bahwa stress  dapat  berakibat  buruk  bagi  ikan,  namun  fenomena  stress  ini  masih  perlu  dipelajari  lebih  dalam  lagi. Berdasarkan informasi tersebut, tulisan ini dibuat untuk mengkaji pengaruh stressor lingkungan terhadap ikan, khususnya  pada  spesies  ikan  nilem  ( Osteochilus  hasselti )  pada  fase  perkembangan  embrio.  Data  yang dikumpulkan  berasal  dari  hasil  penelitian  yang  dilaksanakan  di  BPPBAT,  Bogor.  Jenis  stressor  lingkungan yang  akan  dibahas  pada  tulisan  ini  yaitu  suhu  dan  salinitas.  Derajat  penetasan,  mortalitas,  dan  tingkat kelangsungan  hidup  merupakan  indikator  penentu  pengaruh  stressor  lingkungan  terhadap  perkembangan embrio.  Selain  itu,  pengamatan  perkembangan  embrio  melalui  mikroskop  juga  dijadikan  sebagai  data pendukung.  Berdasarkan  data  penelitian,  dapat  disimpulkan  bahwa  stressor  lingkungan  berupa  suhu  dan salinitas  di  luar  batas  toleransi  dapat  mengganggu  perkembangan  embrio  ikan  nilem.  Suhu  yang  bersifat stressor bagi perkembangan embrio ikan nilem yaitu 25 o C dan 31 o C, sedangkan stressor salinitas bagi embrio ikan nilem yaitu di atas 5 ppt. Hasil dari studi ini dapat dijadikan sebagai acuan dalam kegiatan budidaya ikan nilem untuk mengoptimalkan produksi benih.
Kata Kunci : Osteochilus hasselti , Perkembangan embrio, stressor lingkungan, suhu, salinitas

## PENDAHULUAN
Penyebab  stress  (stressor)  fisik, kimia, dan yang lainnya pada ikan dapat memicu efek fisiologis dan efek lainnya. Selain  itu,  paparan  berulang  terhadap stressor  ringan  juga  dapat  mengubah kebiasaan ikan serta melemahkan neuroendokrin  dan  respon  metabolik terhadap  paparan  stressor  berikutnya (Iwama  et  al.,  1998; Reid  et  al.,  1998). Intensitas  stressor  yang  terlalu  parah akan  berpengaruh  negatif  terhadap kesehatan  dan  kondisi  ikan,  sehingga menjadi  maladaptif.  Kondisi  ini  dikenal juga  sebagai  " distress ”  (Selye,  1974; Barton & Iwama, 1991). Tahap  perkembangan  embrio  pada ikan  merupakan  tahap  yang  paling sensitif dalam seluruh siklus hidup ikan. Dalam reproduksi ikan budidaya,
perkembangan embrio dan larva merupakan  hal  yang  harus  diperhatikan, karena berkaitan dengan kualitas maupun kuantitas benih yang dihasilkan.
Jumlah  telur  yang  menetas  dan  tingkat kelangsungan  hidup  larva  ikan  dalam kegiatan  produksi  benih  dipengaruhi oleh  beberapa  jenis  stressor  lingkungan dapat  mengakibatkan  rendahnya  tingkat produksi benih ikan. Dua faktor diantaranya  yaitu  suhu  (Heming  &
Buddington,  1988;  Hallare  et  al.,  2005) dan  salinitas  (Petereit  et  al.,  2008;
Haque  et  al.,  2014).  Suhu  dan  salinitas di luar batas toleransi dapat mengakibatkan kegagalan penetasan
telur.
Beberapa  penelitian  telah  banyak dilakukan  mengenai  pengaruh  stressor lingkungan terhadap perkembangan telur dan  kelangsungan  hidup  larva  pada beberapa  jenis  ikan,  khususnya  pada jenis stressor suhu (Réalis-Doyelle et al., 2016; Ayala et al., 2016; Berlinsky et al., 2004)  dan  salinitas  (DiMaggio  et  al.,
2016; Bonisławska  et  al.,  2014;
Bonisławska, 2009; Navarro et al., 2014; Diana  et  al.,  2011; Dhaneesh  et  al., 2012).  Namun,  informasi  mengenai pengaruh  stressor  lingkungan  terhadap perkembangan embrio dan kelangsungan hidup  larva  ikan  nilem  ( Osteochilus
hasselti ) masih belum banyak dipelajari. Padahal informasi tersebut sangat penting  untuk  mendukung  optimalisasi pembenihan  ikan  nilem.  Ikan  ini merupakan jenis ikan daerah tropis yang umumnya  hidup  pada  kisaran  suhu optimal  18-28 o C  (Soeseno,  1985;  Riehl & Baensch , 1991) dan toleransi salinitas ≤6  ppt  (Amrullah  et  al.,  2015),  serta merupakan  salah  satu  spesies  ikan  yang ekonomis untuk dibudidayakan (Subagja et al., 2006). Tulisan ini bertujuan untuk membahas  tentang  pengaruh  stressor lingkungan pada tahap pembenihan ikan nilem,  khususnya  untuk  parameter  suhu dan salinitas.

## BAHAN DAN METODE
Data pada tulisan ini diperoleh dari data primer dan sekunder. Data sekunder dikoleksi dari hasil penelitian
sebelumnya  di  Balai  Penelitian  dan Pengembangan  Perikanan  Budidaya  Air
Tawar,  Bogor  yang  berkaitan  dengan pengaruh  stressor  suhu  dan  salinitas terhadap perkembangan telur ikan nilem. Sedangkan  data  primer  dikoleksi  untuk melengkapi informasi mengenai pengar- uh  suhu  terhadap  perkembangan  telur ikan nilem (tiga perlakuan suhu: 27, 29, dan  31 o C;  tiga  ulangan).  Telur  yang
telah dibuahi diperoleh melalui
pemijahan  buatan  dari  stok  induk  ikan nilem  di  IP3NPAT,  Cijeruk  (Bobot induk betina: 185±12.91 g; Bobot induk jantan: 104±10.82 g). Telur ditetaskan di akuarium  berukuran  50  ×  30  ×  30  cm dengan  volume  air  80  L  untuk  tiap perlakuan.  Tiap  akuarium  dilengkapi dengan  aerator.  Perkembangan  telur, derajat penetasan, mortalitas, dan sintasan diamati saat pengamatan ini.

## HASIL DAN BAHASAN
Hasil  dari  percobaan  stressor  suhu menunjukkan  adanya  kecenderungan bahwa  semakin  tinggi  suhu  air  maka semakin  cepat  perkembangan  embrio ikan  nilem.  Pada  suhu  25,  27,  29,  dan
31°C  fase  pembelahan  1  sel  ( cleavage ) berlangsung  pada  jam  ke-1  lewat  10 menit  setelah  pembuahan.  Sedangkan saat  pembelahan  kelima  (32  sel), perlakuan suhu 31°C berlangsung saat 3 jam  setelah  pembuahan,  lebih  cepat dibandingkan  perlakuan  lainnya  dengan waktu paling lambat ada pada perlakuan suhu  25°C  (4  jam  24  menit).  Hal tersebut  juga  terjadi  seterusnya  pada stadium  blastula,  gastrula,  sampai  ke organogenesis (Olivia et al., 2014). Namun  pada  suhu  31°C  perkembangan organnya  menjadi  kurang  sempurna  dan beberapa  embrio  dan  larva  menjadi abnormal  meskipun  proses  penetasan berlangsung  paling  cepat  di  antara perlakuan  suhu  lainnya  (25,  27,  dan 29°C) (Gambar 1).
Dari  hasil  pengamatan  tersebut, suhu  merupakan  salah  satu  faktor eksternal  atau  stressor  lingkungan  yang sangat  berpengaruh  terhadap  perkem- bangan embrio ikan nilem yang berhasil dibuahi.  Pada  penelitian  ini,  paparan suhu  di  luar  kisaran  optimal  pada
memiliki  hubungan  negative  terhadap durasi  masa  inkubasi.  Berkaitan  dengan hal  tersebut,  hasil  penelitian  yang  telah dipelajari pada ikan brown trout (Salmo trutta L.)  juga  menyatakan  bahwa terdapat  hubungan  yang  negatif  antara waktu  perkembangan  embrio  dengan peningkatan suhu di luar kisaran optimal ikan  tersebut.  Tren  tersebut  juga ditemukan  pada  beberapa  hasil  peneliti- an  di  beberapa  negara  yang  berbeda (Realis-Doyelle, 2016).
Selain berpengaruh terhadap durasi masa inkubasi, pada penelitian ini juga  diketahui  bahwa  suhu  yang  tinggi di luar batas toleransi juga menyebabkan peningkatan  persentase  jumlah  larva ikan nilem yang cacat (abnormal). Hasil yang  serupa  juga  menyatakan  adanya peningkatan abnormalitas larva beberapa jenis  ikan  selama  inkubasi  pada  suhu tinggi di luar kisaran toleransi (Lahnsteiner,  2012;  Blaxter,  1992; Linares  –  Casenave  et  al.,  2013; Sfakianakis et al, 2006).
(a) (b)                                              (c)

## (d)                                                      (e)
Gambar 1. Pengaruh stressor suhu pada perkembangan embrio ikan nilem ( Osteochilus hasselti ). (Keterangan: a. Stadium organogenesis normal; b. Embrio abnormal; c.  Embrio mati; d. Larva abnormal; e. Larva mati)
(a) (b)                                             (c)

## (d)                                                (e)
Gambar 2. Pengaruh stressor salinitas pada perkembangan embrio ikan nilem ( Osteochilus hasselti ).  (Keterangan: a. Stadium organogenesis normal pada 0 ppt; b. Stadium organogenesis normal pada 5 ppt; c. Embrio yang tumbuh normal; d. dan e. Telur yang gagal menetas pada 10 ppt). Sumber: Prakoso & Radona (2014)
Pengaruh lain yang dapat ditimbulkan  dengan  paparan  suhu  tinggi yaitu  ukuran  larva  ikan  yang  menetas menurun secara signifikan seiring dengan kenaikan suhu inkubasi yang lebih tinggi di  luar  batas  toleransi  (Ojanguren  & Brana, 2003; Jordaan et al., 2006; Kamler et  al.,  1994;  Schiemer  et  al.,  2003; Kaminski et al., 2006).
Sementara  itu,  hasil  dari  percobaan stressor  salinitas  menunjuk-kan  semakin tinggi  salinitas  dapat  berpotensi  meng- ganggu perkembangan embrio ikan nilem dan  dapat  mengakibatkan  kemati-an. Pada  salinitas  0,  5,  dan  10  ppt  fase pembelahan  1  sel  ( cleavage )  dan  pem- belahan kelima (32 sel), proses perkembangan  embrio  masih  berlang- sung  normal.  Namun  pada  tahap  se- lanjutnya,  perkembangan  embrio  pada perlakuan  salinitas  10  ppt  mulai  ter- ganggu. Sedangkan pada perlakuan 0 dan 5 ppt perkembangan embrio ber-langsung normal  (Prakoso  &  Radona,  2015).  Pada akhirnya,  perkembangan  embrio  pada perlakuan  10  ppt  terhenti  karena  semua embrio mengalami kematian (Gambar 2).
Perkembangan embrio pada salinitas yang  berbeda  sangat  dipenga-ruhi  oleh kisaran  salinitas  media  pe-meliharaan. Pada  perlakuan  10  ppt,  telur  tidak  dapat menetas karena embrio mengalami kematian.  Menurut  Oven  (1960)  dan Rykova (1970), embrio yang berkembang pada proses inkubasi dengan paparan  salinitas  di  luar  batas  toleransi dapat  menyebabkan  abnormal-itas  pada larva  yang  berhasil  menetas.  Hal  inilah yang  kemungkinan  juga  terjadi  pada larva  ikan  nilem  pada  perlakuan  stressor salinitas.  Embrio  pada  ikan  nilem  dapat mentoleransi  salinitas  5  ppt,  tetapi  untuk kisaran  di  atas  5  ppt  atau  sampai  10  ppt dapat  berpengaruh  pada  perkembangan embrio atau bahkan menyebabkan kematian. Beberapa pene-litian terdahulu juga  melaporkan  hal  yang  sama  tentang pengaruh  stressor  salinitas  terhadap perkembangan  embrio  pada  beberapa spesies ikan, seperti ikan zebra Brachydanio  rerio (Sawant  et  al.,  2001; Haque  et  al.,  2014),  Peipsi  whitefish Coregonus lavaretus (Albert et al., 2004), sichel Pelecus  cultratus (Kujawa  et  al.,
2016), dan river herring Alosa pseudoharengus (DiMaggio et al., 2016). Aktivitas  embrio  dan  pembentu-kan chorionase dipengaruhi oleh faktor eksternal  seperti  suhu, oksigen ,  pH, salinitas,  dan  intensitas  cahaya.  Pada penelitian ini, pengaruh stressor suhu dan salinitas pada derajat penetasan telur ikan nilem  ditunjukkan  pada  tabel  1.  Derajat penetasan  paling  rendah  pada  perlakuan stressor  suhu  terdapat  pada  suhu  31 o C (67,74  ±  8,44  %).  Sedangkan  derajat penetasan  paling  rendah  akibat  stressor salinitas ada pada perlakuan 6 ppt (15.79 ± 11.49 %).
Tabel  1  memperlihatkan  bahwa suhu  mempengaruhi  tingkat  penetasan telur  ikan  nilem  yang  mengalami peningkatan dari suhu 25°C ke 29°C dan akhirnya  mengalami  penurunan  pada suhu  31°C.  Telur  dan  larva  ikan  sangat sensitif  terhadap  fluktuasi  suhu  air  dan cenderung memiliki toleransi yang rendah  terhadap  suhu  jika  dibandingkan dengan  tahap  dewasa  (Das  et  al.,  2006). Penelitian  mengenai  pengaruh  negatif dan  positif  suhu  rendah  dan  tinggi  pada perkembangan  embrio  ini  telah  banyak
dilakukan  pada  beberapa  spesies  (Pepin, 1991; Hart & Purser, 1995; Hamel et al., 1997).  Kenaikan  suhu  mengakibatkan denaturasi  dan  terganggunya  aktivitas enzim, sehingga konsentrasi dan kecepatan enzim berkurang.
Embrio  ikan  nilem  yang  menetas pada  paparan  salinitas  yang  lebih  tinggi memiliki  persentase  yang  lebih  rendah dibandingkan  0  ppt.  Telur  ikan  yang rendah  toleransinya  terhadap  perubahan salinitas akan memiliki persentase derajat penetasan  yang  semakin  rendah  jika terpapar  pada  media  salinitas  di  luar kisaran  batas  toleransinya.  Hal  tersebut telah  banyak  diteliti  pada  beberapa spesies  ikan  (Haddy  &  Pankhurst,  2000; Sawant et  al. ,  2001).  Potts  &  Eddy (1973)  juga  mengungkapkan  bahwa  hal tersebut merupakan akibat dari konsentrasi osmotik tinggi yang
berdampak  pada  terganggunya  inti  sel embrio,  sehingga  keseimbangan  osmotik di  dalam  telur  menjadi  hilang  karena tekanan  osmotiknya  berada  di  luar kapasitas  osmoregulatori  dari  embrio yang sedang berkembang.
Tabel  1.  Derajat  penetasan  telur  ikan  nilem  ( Osteochilus  hasselti )  dengan  perlakuan stressor suhu dan salinitas
Perlakuan / Treatments Derajat penetasan (%) / Hatching rate (%) Referensi / References Suhu / Temperature 25 °C 77,03 ± 6,49 (Olivia et al., 2014) 27 °C 86,15 ± 1,72 (Olivia et al., 2014) 29 °C 89,20 ± 5,40 (Olivia et al., 2014) 31 °C 67,74 ± 8,44 (Olivia et al., 2014) Salinitas / Salinity 0 ppt 85.06 ± 4.56 c (Prakoso & Radona, 2015) 2 ppt 81.08 ± 5.82 bc (Prakoso & Radona, 2015) 4 ppt 76.60 ± 1.91 b (Prakoso & Radona, 2015) 6 ppt 15.79 ± 11.49 a (Prakoso & Radona, 2015)
Tabel 2. Sintasan telur ikan nilem dengan perlakuan stressor suhu dan salinitas
Perlakuan / Treatments Sintasan (%) / Survival rate (%) Referensi / References Suhu / Temperature 25 °C 74,39 ± 17,87 (Olivia et al., 2014) 27 °C 87,83 ± 12,99 (Olivia et al., 2014) 29 °C 92,86 ± 7,03 (Olivia et al., 2014) 31 °C 84,44 ± 7,86 (Olivia et al., 2014) Salinitas / Salinity 0 ppt 97,59 ± 1,19 (Prakoso & Radona, 2015) 2 ppt 97,87 ± 2,01 (Prakoso & Radona, 2015) 4 ppt 97,59 ± 0,86 (Prakoso & Radona, 2015) 6 ppt 61,84 ± 10,50 (Prakoso & Radona, 2015) Tingkat  kelangsungan  hidup  atau sintasan  dari  perlakuan  suhu  dan salinitas pada larva ikan nilem ditampilkan pada tabel 2. Sintasan larva paling  rendah  pada  perlakuan  stressor suhu  ada  pada  perlakuan  25 o C  (74,39  ± 17,87  %)  dan  kemudian  diikuti  dengan perlakuan  31 o C  (84,44  ±  7,86  %). Sementara  itu,  sintasan  larva  paling rendah  pada  perlakuan  stressor  salinitas ada  pada  perlakuan  6  ppt  (61.84  ± 10,50 %).
Suhu  pemeliharaan  31°C  dapat dikatakan hampir mendekati tingkat letal karena  nilai  sintasannya  mengalami penurunan dibandingkan perlakuan suhu yang  lebih  rendah.  Suhu  yang  terlalu tinggi  pada  media  budidaya  dapat mengakibatkan  kerusakan  sistem  saraf pada  lapisan  epidermis  kulit  dan  bagian organ sensori yang menghambat pembentukan  jaringan  dan  terhentinya penyempurnaan  organ  tubuh.  Akibatnya larva  tumbuh  abnormal  dan  mengalami kesulitan  untuk  bertahan  hidup.  Suhu memiliki dampak yang signifikan terhadap  keberhasilan  penetasan  dan
waktu  untuk  kematian  50%,  dengan guncangan  panas  besar  menyebabkan kematian  dipercepat  (Landsman  et  al., 2011).
Suhu  tampaknya  memiliki  pe- ngaruh  dominan  pada  telur  dari  ikan selama  inkubasi  (Fonds  et  al.,  1974; Laurence  &  Howell,  1981;  Meeuwig  et al.,  2005).  Tingkat  kelangsungan  hidup benih  yang  dibentuk  secara  signifikan berbeda  antara  suhu.  Pada  penetasan, total  panjang  benih  secara  signifikan berkurang ketika suhu meningkat.
Pada  salinitas  6  ppt  ini  sintasan larva  ikan  nilem  sudah  mulai  menurun. Paparan  salinitas  di  luar  batas  toleransi dapat  menyebabkan  kerusakan  pada bagian  organ  sensori  yang  dapat menghambat  pembentukan  jaringan  dan terhentinya penyempurnaan organ tubuh pada  larva  ikan  nilem.  Hasil  penelitian ini  juga  sesuai  dengan  pernyataan Limburg  &  Ross  (1995)  yang  me- nyatakan  bahwa  larva  yang  terpapar salinitas  di  luar  batas  toleransinya  akan mengalami  kesulitan  untuk  bertahan hidup karena perbedaan tekanan osmotik
antara  larva  dan  lingkungannya.  Hal  ini juga  berhubungan  dengan  sel  klorid pada  telur  ikan  tersebut,  seperti  yang diungkapkan  oleh  Kaneko  et  al.,  (2002) bahwa  sel  klorid  pada  telur  ikan merupakan osmoregulator yang berperan dalam  mentoleransi  paparan  salinitas pada  telur  ikan.  Kandungan  sel  klorid yang terpapar salinitas yang lebih tinggi akan merespon kondisi tersebut.
Menurut Bonisławska et al. (2014), gangguan  akibat  perubahan  salinitas dapat  menyebabkan  perbedaan  durasi embriogenesis, menurunkan derajat penetasan,  meningkatkan  kemungkinan abnormalitas  larva,  serta  mengurangi persentase kelangsungan hidup larva.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  data  penelitian,  dapat disimpulkan  bahwa  stressor  lingkungan berupa  suhu  dan  salinitas  di  luar  batas toleransi  dapat  mengganggu  perkem- bangan embrio ikan nilem. Stressor suhu pada  embrio ikan  nilem  yaitu  31 o C atau lebih,  sedangkan  stressor  salinitas  bagi embrio  ikan  nilem  yaitu  di  atas  5  ppt. Hasil  dari  studi  ini  dapat  dijadikan sebagai  acuan  dalam  kegiatan  budidaya ikan  nilem  untuk  mengoptimalkan produksi benih.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  berterimakasih  kepada Soulina  Olivia,  Gleni  Hasan  Huwoyon, dan  Deni  Radona  yang  telah  membantu dalam pengambilan
data dan dokumentasi penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Albert,  A.,  Vetemaa  M.,  Saat  T.  2004. Effects  of  salinity  on  the development of Peipsi whitefish Coregonus lavaretus marae-noides Poljakow embryos. Annales Zoologici Fennici  41: 85-88. Amrullah,  R.,  Rosmawati,  Mulyana. 2015. Gula darah dan mortalitas  benih  ikan  nilem
( Osteochilus  hasselti )  yang  di pelihara  pada  media  salinitas berbeda.  Jurnal  Mina  Sains
1(2): 49-57. Ayala, M.D., Martínez J.M., Hernandez- Urcera J.,  Cal  R.  2016.  Effect of the early temperature on the growth of larvae and postlarvae turbot, Scophthalmus maximus L.:  muscle  structural  and ultrastructural study. Fish Physiology and Biochemistry 42: 1027. Barton,  B.A.  &  Iwama  G.K.  1991. Physiological  changes  in  fish from  stress  in  aquaculture with emphasis on the response and  effects  of  corticosteroids. Annual Review of Fish Diseases 1: 3-26. Berlinsky,  D.L.,  Taylor  J.C.,  Howell R.A.,  Bradley  T.M.,  Smith T.I.J.  2004.  The  Effects  of Temperature  and  Salinity  on Early Life Stages of Black Sea Bass Centropristis striata . Journal of The World Aquaculture  Society  35(3): 335-344. Blaxter,  J.H.S.  1992.  The  effect  of temperature  on  larval  fishes. Netherlands Journal of Zoology 42: 336–357.
Bonisławska,  M.  2009.  Effects  of salinity  on  the  duration  and course  of  embryogenesis  in sea  trout  ( Salmo  trutta L.). Electronic  Journal of  Polish Agricultural Universities 12(4): 7. Bonisławska,  M.,  Tanski  A.,  Szulc  J., Machula  S.,  Formicki  K.. 2014. Water salinity effects on embryogenesis  of  the  lesser sandeel, Ammodytes  tobianus (Linnaeus, 1758). Central European  Journal  of Biology 9 (11): 1068-1077.
Das,  T.,  Pal  A.K.,  Chakraborty  S.K.,
Manush  S.M.,  Dalvi  R.S., Sarma  K.,  Mukherjee  S.C.
2006.  Thermal  dependence  of embryonic  development  and hatching  rate  in Labeo  rohita (Hamilton, 1822). Aquaculture 255, 536–541. Dhaneesh,  K.V.,  Devi,  K.N.,  Kumar T.T.A.,  Balasubramanian  T., Tissera  K.  2012.  Breeding, embryonic  development  and salinity  tolerance  of  Skunk clownfish Amphiprion akallopisos .  Journal  of  King Saud University – Science 24: 201–209. Diana, A.N., Masithah, E.D., Mukti, A.T. & Triastuti J. 2011. Embriogenesis  dan  daya  tetas telur  ikan  nila  ( Oreochromis niloticus ) pada salinitas. berbeda. Surabaya. Universitas Airlangga. 55p. DiMaggio  M.A.,  Breton  T.S.,  Kenter L.W.,  Diessner  C.G.,  Burgess
A.I., Berlinsky D.L. 2016. The effects  of  elevated  salinity  on river  herring  embryo  and larval survival. Environmental Bio-logy of Fishes  99:  451- 461. Fonds, M., Rosenthal H., Alderdice D.F. 1974. Influence of Temperature  and  Salinity  on Embryonic Development, Larval Growth and Number of Vertebrae  of  the  Garfish, Belone  belone .  In  “The  Early
Life  History  of  Fish”, J.H.S.
Blaxter (ed.). 509-525pp.
Haddy,  J.A.  &  Pankhurst  N.W.  2000.
The  effects  of  salinity  on reproductive development, plasma steroid levels, fertilisation  and  egg  survival in black bream Acanthopagrus butcheri .  Aqua-culture  188:
115–131.
Hallare, A.V., Schirling M., Luckenbach T., Kohler H.R., Triebskorn R. 2005.  Combined  effects  of temperature and Cd on developmental parameters and biomarker responses in zebrafish ( Danio rerio ) embryos.  Journal  of Ther-mal Biology 30: 7-17.
Hamel,  P.,  Magnan,  P.,  East,  P., Lapointe,  M.,  Laurendeau,  P. 1997. Comparison of different models  to  predict  the  in  situ embryonic developmental rate of  fish:  with  special  reference to  white  sucker  (Catostomus commersoni). Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences 54: 190–197. Hart, P.R. & Purser, G. 1995. Effects of salinity  and  temperature  on eggs and yolk sac larvae of the greenback  flounder  ( Rhombo- solea tapirina Günther, 1862). Aquaculture 136: 221–230.
Haque, F., Farhana T., Amin F.B., Islam
M.S.  2014.  Effect  of  different salinity  exposures  on  the embryonic  development  of zebrafish ( Danio rerio ). Proceedings of 5th
International  Conference  on Environmental Aspects of Bangladesh  (ICEAB  2014). Bangladesh: 114-115. Heming, T.A. & R.K. Buddington. 1988.
Yolk  absorption  in  embrionic and  larvae  fishes.  In:  Hoar W.S.  &  D.J.  Randall  (eds.),
1988. Fish physiology vol. XI. Academic  Press,  New  York. 408-446.
Iwama,  G.K.,  Thomas  P.T.,  Forsyth R.B.,  Vijayan  M.M.  1998.
Heat shock protein expression in  fish.  Reviews  in  Fish Biology  and  Fisheries  8:  35- 56. Jordaan,  A,  Hayhurst  S.E.,  Kling  J.L. 2006. The influence of temperature  on  the  stage  at hatch  of  laboratory  reared Gadus morhua and implications  for  comparisons of  length  and  morphology. Journal of Fish Biology 68: 7–
24.
Kaminski,  R.,  Kamler  E.,  Korwin-
Kossakowski M., Myszkowski L.,  Wolnicki  J.  2006.  Effects of different incubation temperatures  on  the  yolk- feeding  stage  of Eupallasella percnurus (Pallas).  Journal  of
Fish Biology 68: 1077–1090. Kamler,  E.,  Szlamínska  M.,  Kuczynski M.,  Hamácková  J.,  Kouril  J., Dabrowski R. 1994. Temperature-induced  changes of early development and yolk utilization  in  the  African catfish Clarias gariepinus. Journal  of  Fish  Biology  44: 311–326. Kujawa, R, Lach M., Pol P., Ptaszkowski M., Mamcarz A., Nowosad J., Furgała-
Selezniow  G.,  Kucharczyk  D. 2016.  Influence  of  water salinity  on  the  survival  of embryos  and  growth  of  the sichel larvae Pelecus cultratus (L.) under controlled conditions. Aquaculture Research 2016: 1-13. Kaneko,  T.,  Shiraishi  K.,  Katoh  F., Hasegawa  S.,  Hiroi  J.  2002. Chloride cells during early life stages  of  fish  and  their functional differentiation. Fisheries Science 68: 1-9. Lahnsteiner,  F.  2012.  Thermotolerance of  brown  trout,  Salmo  trutta, gametes  and  embryos  to increased  water  temperatures. Journal of Applied Ichthyology 28: 745–751. Landsman  S.J.,  Gingerich  A.J.,  Philipp D.P.,  Suski  C.D.  2011.  The effects  of  temperature  change on  the  hatching  success  and larval  survival  of  largemouth bass Micropterus salmoides and smallmouth bass Micropterus dolomieu . Journal  of  Fish  Biology  78: 1200–1212.
Laurence,  G.C.  &  Howell  W.H.  1981.
Embryology  and  Influence  of Temperature  and  Salinity  on Early Development and Survival of Yellowtail Flounder Limanda ferruginea .
Marine  Ecology  -  Progress Series, 6: 11-18.
Limburg,  K.E,  &  Ross  R.M..  1995. Growth  and  mortality  rates  of larval  american  shad, Alosa sapidissima , at different
salinities.  Estuaries  (2):  335–
340.
Linares-Casenave,  J.,  Werner  I.,  Van Eenennaam  J.P.,  Doroshov  S. 2013. Temperature stress induces notochord abnormalities  and  heat  shock proteins  expression  in  fry green sturgeon ( Acipenser medirostris Ayres 1854). Journal of Applied Ichthyology, 29: 958–967. Meeuwig M.H., Bayer J.M., Seelye J.G. 2005.    Effects  of  temperature on  survival  and  development of  early  life  stage  Pacific  and
Western  Brook  Lampreys. Transactions  of  the  American Fisheries Society, 134:19–27.
Navarro,  T.,  Carrapato  C.,  Ribeiro  F. 2014.  Effects  of  temperature,
salinity and feeding frequency on  growth  and  mortality  of twaite  shad  ( Alosa  fallax ) larvae. Knowledge and Management of Aquatic Ecosystems, 412: 07. Ojanguren  A.F.  &  Brana  F.  2003. Thermal dependence of embryonic growth and development  in  brown  trout. Journal  of  Fish  Biology,  62: 580–590. Pepin,  P.  1991.  Effect  of  temperature and  size  on  development, mortality, and survival rates of the  pelagic  early  life  history stages of marine fish. Canadian  Journal  of  Fisheries and  Aquatic  Sciences  48: 503–518.
Petereit,  C.,  Haslob  H.,  Kraus  G.,
Clemmesen  C.  2008.  The influence  of  temperature  on the development of Baltic Sea sprat  ( Sprattus  sprattus )  eggs and  yolk  sac  larvae.  Marine Biology 154: 295–306.
Potts,  W.T.W.  &  Eddy  F.B.  1973.  The permeability  to  water  of  the eggs of certain marine teleosts. Journal of Comparative Physiology 82: 305-315. Realis-Doyelle,  E.,  Pasquet  A.,  De Charleroy  D.,  Fontaine  P., Teletchea  F.  2016.  Strong Effects of Temperature on the Early  Life  Stages  of  a  Cold Stenothermal  Fish  Species,
Brown Trout ( Salmo trutta L.). PLoS ONE 11(5).
Reid,  S.  G.,  Bernier  N.  J.,  Perry  S.F.
1998.  The  adrenergic  stress response  in  fish:  control  of catecholamine  storage  and release. Comparative Biochemistry  and  Physiology, Part C 120:1-27. Sawant,  M.S.,  Zhang  S.,  Li  L.  2001. Effect of salinity on development of zebrafish,
Brachydanio  rerio. Current Science 81: 1347-1350.
Schiemer,  F.,  Keckeis  H.,  Kamler  E.
2003.  The  early  life  history stages of riverine fish: ecophysiological and environmental bottlenecks. Comparative Biochemistry and  Physiology  Part  A  133: 439–449. Selye,  H.  1974.  Stress  without  distress. McClelland  Stewart,  Toronto: 171. Sfakianakis,  D.G.,  Georgakopoulou  E., Papadakis  I.E.,  Divanach  P., Kentouri M., Koumoundouros G. 2006.Environmental determinants of haemal lordosis in European sea bass, Dicentrarchus labrax (Linnaeus, 1758). Aquaculture 254: 54–64.
Soeseno,  S.  1985.  Pemeliharaan  ikan  di kolam  pekarangan.  Kanisius. Yogyakarta. 80.
Subagja  J.,  Gustiano  R.,  Winarlin  L. 2006.  Pelestarian  ikan  nilem
( Osteochilus  hasselti C.V) melalui teknologi pembenihannya. Lokakarya Nasional Pengelolaan dan Perlindungan  Sumber  Daya Genetik di Indonesia: Manfaat Ekonomi  untuk  Mewujudkan
Ketahanan Nasional: 279-286.