Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR) Volume 4 Nomor 1, Maret 2022
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v4i1.15379

## Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etil Asetat Daun
Lamun ( Enhalus acoroides ) Pada Mencit ( Mus musculus )
Hamsidar Hasan 1 , A.Mu'thi Andy Suryadi 2 , Zulfianto Djufri 3 1,2,3 Jurusan Farmasi Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Jl. Jenderal Sudirman No. 06 Kota Gorontalo 96128, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: hamsidar.hasan@ung.ac.id

## ABSTRAK
Diabetes  mellitus  merupakan  kondisi  serius,  bersifat  kronis  yang  terjadi  ketika  ada peningkatan kadar glukosa darah sewaktu (GDS) ≥ 200 mg/dL atau kondisi hiperglikemia. Beberapa tanaman dilaporkan memiliki efek antidiabetik. Salah satu tanaman tersebut yaitu Lamun ( Enhalus acoroides ) yang diketahui memiliki efek inhibisi enzim α-glukosidase secara in vitro. Lamun Enhalus acoroides sering dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai obat tradisional. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antidiabetes dari ekstrak etil asetat daun  lamun  ( Enhalus  acoroides )  terhadap  mencit  jantan  ( Mus  musculus )  yang  dibebankan larutan sukrosa 90%. Penelitian menggunakan metode Oral Sucrose Tolerance Test (OSTT). Uji aktivitas  pada  mencit dilakukan  pada  5  kelompok  perlakuan  yaitu  kelompok  I  merupakan kontrol  negatif  (Na-CMC  1%  b/v),  kelompok  II  kontrol  positif  (acarbose),  kelompok  III (ekstrak  etil  asetat  dosis  50  mg/kgBB),  kelompok  IV  (ekstrak  etil  asetat  dengan  dosis  150 mg/kgBB), kelompok  V (ekstrak  etil  asetat  dosis  250  mg/kgBB).  Hasil  penelitian  dianalisis dengan uji statistik One-Way ANOVA . Hasil penelitian menunjukan bahwa ekstrak etil asetat daun lamun mampu menghambat penyerapan sukrosa di mana total penghambatan terbesar terjadi pada pemberian dosis 250 mg/kgBB yakni 68 mg/dL, lalu pada dosis 150 mg/kgBB, yakni  82  mg/dL  dan  terakhir  pada  dosis  50  mg/dL  yakni  103  mg/dL.  Berdasarkan  hasil tersebut,  dapat  disimpulkan  bawha  ekstrak  etil  asetat  daun  lamun  memiliki  aktivitas antidiabetes
Kata Kunci: Daun Lamun ( Enhalus acoroides ), Antidiabetes, Mencit ( Mus musculus ), Ekstrak Etil asetat
Diterima:
04-02-2022 Disetujui: 03-03-2022 Online: 15-03-2022

## ABSTRACT
Diabetes mellitus is a severe condition, chronic in nature, that occurs when there is an increase in blood glucose levels (GDS) 200 mg/dL or hyperglycemic conditions. Some plants are reported to have anti- diabetic effects. One of the examples is seagrass (Enhalus acoroides), which has α-glucosidase enzyme inhibitory  effects  in  vitro.  The  community  often  uses  it  as  traditional  medicine.  This  present  work explores the anti-diabetic activity of ethyl acetate extract of seagrass (Enhalus acoroides) leaves against male mice (Mus musculus) charged with 90% sucrose solution. It employed the oral sucrose tolerance test (OSTT) methodology. Activity tests on mice were carried out in five treatment groups, namely: group I or a negative control (Na-CMC 1% w/v); group II or a positive control (acarbose); group III (ethyl acetate extract dose 50 mg/kg BW); group IV ( ethyl acetate extract at a dose of 150 mg/kg BW), and; group V (ethyl acetate extract at a dose of 250 mg/kg BW). All data were analyzed by using a one- way ANOVA statistical test. The results show that the ethyl acetate extract of seagrass leaves can inhibit the absorption of sucrose, in which the most significant total inhibition occurred at a dose of 250 mg/kg BW, i.e., 68 mg/dL. A substantial inhibition was also found at a dose of 150 mg/kg BW, which was 82
mg/dL and at a dose of 50 mg/dL or 103 mg/dL. In conclusion, the ethyl acetate extract of seagrass leaves has anti-diabetic activity.
Copyright © 2022 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Seagrass (Enhalus acoroides L) Leaf,; Antidiabetic;  Mice (Mus musculus);  Extract, Ethyl acetate
Received: 2022 -02-04 Accepted: 2022 -03-03 Online: 2022 -02-7

## 1. Pendahuluan
Diabetes  mellitus  merupakan  kondisi  serius,  jangka  panjang  (atau  bersifat kronis) yang terjadi ketika ada peningkatan kadar glukosa (kadar glukosa darah puasa (GDP)  ≥  126  mg/dL  dan  glukosa  darah  sewaktu  (GDS)  ≥  200  mg/dL)  dalam  darah seseorang yang dikarenakan tubuh tidak dapat memproduksi hormon insulin atau tidak dapat menggunakan insulin yang dihasilkannya secara efektif. [1,2]. Menurut Alam et al [3], Diabetes merupakan salah satu penyakit akibat adanya gangguan metabolisme yang bersifat kronis di mana dihasilkan dari berbagai interaksi yang kompleks antara faktor genetik ( genetic factors ) dan faktor lingkungan ( environmental factors ) dan biasanya ditandai dengan hiperglikemia, poliuria, polidipsia dan polifagia.
Berdasarkan laporan yang dikeluarkan International Diabetes Federation (2019) Indonesia menempati urutan ke 7 dari 10 negara dengan penderita diabetes terbanyak (sekitar  9.2–11.5  juta  jiwa).  Angka  tersebut  kemungkinan akan  naik  pada  tahun 2030 sekitar  11.9–14.9  juta  jiwa  dan  pada  tahun  2045  diprediksi  Indonesia  akan  turun  1 peringkat secara global (mesir akan menempati posisi ke 7, dan Indonesia ke 8) namun, dalam  edisi  terbaru  dari  laporan  IDF  yang  dikeluarkan  pada  akhir  tahun  2021 menunjukan angka penderita diabetes di Indonesia meningkat sampai 19.5 juta jiwa dan ini  membuat  Indonesia  menduduki  urutan  ke  5  dengan  jumlah  penderita  diabetes terbanyak secara global. Mirisnya lagi, Indonesia menempati urutan ke 3 dengan jumlah kasus diabetes yang tidak terdiagnosis, yakni sekitar 14.3 juta [1,2].
Pengobatan  diabetes  saat  ini  sebagian  besar  hanya  menggunakan  obat-obat konvensional atau sintetik yang notabenenya memiliki potensi efek samping yang lebih besar dibandingkan obat-obat herbal/tradisional [4]. Menurut beberapa sumber, efek samping  yang  disebabkan  oleh  obat-obat  antidiabetes  diantaranya  hipoglikemia  [5], laktat asidosis [6], naiknya berat badan [7] dan beberapa Drug Adverse Reaction (ADR) sering  timbul  setelah  pemakaian  obat  hipoglikemik  oral  diantaranya  mual,  muntah, diare, pusing, reaksi alergi pada kulit, berkeringat, lemas, susah tidur, udem [8]
Dengan  pertimbangan  banyaknya  efek  samping  yang  ditimbulkan  akibat penggunaan obat sintetik, maka tak jarang pasien dan juga peneliti mulai melirik pada pengobatan tradisional. Penggunaan bahan alamiah sebagai tanaman obat tradisional cenderung meningkat saat ini. Hal dikarenakan penggunaan obat tradisional khususnya yang berasal dari tanam-tanaman relatif lebih murah, ketersediaannya juga melimpah dan  relatif  aman  (sedikit  efek  samping)  jika  dibandingkan  dengan  obat  sintesis  [9]. Sejauh ini, ada sekitar 800 tanaman di seluruh dunia yang memiliki potensi sebagai agen antidiabetik [10].
Salah satu tanaman yang belum banyak diteliti secara ilmiah digunakan sebagai agen antidiabetes, yaitu lamun ( Enhalus acoroides ). Lamun ( Enhalus acoroides ) dilaporkan memiliki aktivitas antibakteri dan antioksidan serta antifouling [11,12]. Qi et al [13] dan Monisha et al [14] melaporkan bahwa ekstrak Enhalus acoroides juga memiliki aktivitas antilarva  dan  antifeedant.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Widiyanto et  al [15]  dan
Senthilkumar et al [16] menunjukan bahwa ekstrak Enhalus acoroides memiliki aktivitas penghambatan enzim α-glukosidase secara in vitro yang mana dapat berpotensi sebagai agen  antidiabetes  di  mana  ekstrak  etanol  memiliki  aktivitas  paling  tinggi.  Namun penelitian terhadap hewan coba ( in vivo ) belum pernah dilakukan serta masih kurang yang  melakukan  penelusuran  senyawa  pada  lamun  Enhalus  acoroides  yang  bersifat sebagai α-glukosidase inhibitor. Namun penelitian terhadap hewan coba ( in vivo ) belum pernah dilakukan serta masih kurangnya uji aktivitas ekstrak etil asetat lamun Enhalus acoroides yang bersifat sebagai antidiabetes 2.  Metode Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium untuk melihat adakah  efek  antidiabetik  dari  ekstrak  etil  asetat  daun  lamun  ( Enhalus  acoroides )  pada mencit  jantan  ( Mus  musculus )  dengan  menggunakan  metode  pembebanan  larutan sukrosa

## Bahan penelitian
Aquades,  etanol  70%,  pelarut  n-Heksan,  pelarut  etil  asetat,  tablet  Acarbose, sampel daun lamun ( Enhalus acoroides ), natrium karbosil metil selulosa (Na-CMC), dan mencit  jantan  ( mus  musculus )  FeCl 3 ,  HCl,  H 2 SO 4 Serbuk  Mg,  pereaksi  Lieberman- Burchard dan Dragendorff.

## Alat penelitian
Bejana Maserasi, batang pengaduk, Blender, disposible syringe 1, 3, dan 5 ml, evaporator, gelas kimia ( Pyrex ), gelas ukur ( Pyrex ), glucometer ( nesco ), lumping dan alu, Sonde oral, sudip, timbangan analitik ( Osuka ), timbangan hewan ( Kitchen Scale SF-400 ).
Ekstraksi Daun Lamun ( Enhalus acoroides )
Daun  Lamun  diperoleh  dari  pesisir  pantai  desa  Kalumbatan,  Kecamatan Totikum Selatan, Kabupaten Banggai Kepulauan, Provinsi Sulawesi Tengah (N -1° 28' 4.0692 E 123° 29' 13.038). Daun Lamun kemudian dicuci, dan dikeringkan lalu dibuat serbuk  simplisia.  Ditimbang  400  g  simplisia  kering  serbuk  daun  lamun  ( Enhalus acoroides ),  kemudian diekstraksi  dengan metode  maserasi  bertingkat  di  mana  pelarut yang digunakan yaitu n-heksan dan etil asetat. Mula-mula simplisia diekstraksi dengan pelarut  n-heksan,  lalu  residunya  diekstraksi  dengan  etil  asetat.  Proses  ekstraksi dilakukan selama 3 x 24 jam masing-masing pelarut sambil sesekali diaduk. Setelah itu disaring  untuk  memisahkan  filtrat  dan  residunya.  Filtrat  dari  ekstrak  etil  asetat dievaporasi menggunakan rotary evaporator sesuai suhu pelarut sampai mendapatkan ekstrak  kentalnya.  Setelah  itu,  dihitung  persen  rendamen  ekstrak  kental  dengan menggunakan rumus:
% Rendamen = Berat Ekstrak yang Diperoleh Berat Bahan yang Diekstrak x 100%
Skrining Fitokimia Ekstrak Etil Asetat Daun Lamun ( Enhalus acoroides ) Uji Flavonoid
Sebanyak 0.1 gram ekstrak daun lamun ( Enhalus acoroides ), dilarutkan ke dalam 2 ml etanol, kemudian ditambahkan serbuk Mg dan HCl pekat sebanyak 5 tetes. Adanya senyawa flavonoid ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah atau jingga.

## Uji alkaloid
Ekstrak diambil sebanyak 0,1 gram kemudian ditambahkan dengan 5 mL H 2 SO 4 2  M.  Fraksi  asam  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi  kemudian  ditambah  pereaksi Dragendrof.  Alkaloid  pada  sampel  ditandai  dengan  adanya  endapan  merah  pada pereaksi Dragendrof

## Uji Terpenoid dan Steroid
Diambil 0.1 gram ekstrak daun lamun ( Enhalus acoroides ), kemudian dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi  lalu  Kemudian ditambahkan  pereaksi  Liebermann-Burchard. Adanya triterpenoid pada sampel ditunjukkan dengan adanya warna merah dan warna hijau untuk steroid

## Uji Saponin
Diambil  0.1  gram  ekstrak  daun  lamun  ( Enhalus  acoroides ),  ditambah  dengan etanol, kemudian dipanaskan selama beberapa menit. Larutan dituang ke dalam tabung reaksi dalam keadaan panas. Larutan diambil sebanyak 10 ml, kemudian dikocok kuat secara vertikal. Adanya saponin ditandai dengan terbentuknya busa dan tidak hilang pada saat ditambahkan dengan satu tetes HCl 2 N

## Uji Tanin
Sejumlah  0.1  gram  ekstrak  diambil  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi kemudian  ditambahkan  methanol/aquades  dan  dikocok  hingga  homogen.  Sampel ditambahkan  5  tetes  FeCl 3 1%  dan  dikocok.  Hasil  positif  yaitu  terbentuk  wana  hijau kehitaman

## Uji Aktivitas Antidiabetes Pada Mencit
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah 15 ekor mencit jantan ( Mus musculus ) dengan berat badan 20-30 gram yang dibagi ke dalam 5 kelompok yakni Kelompok kontrol negatif (Na-CMC 1% b/v), Kontrol Positif (Acarbose 0.13 mg/30 mg BB mencit ), Kelompok uji 1 (50 mg/kgBB Ekstrak etil asetat daun lamun), Kelompok Uji 2 (150 mg/kgBB Ekstrak etil asetat daun lamun) dan kelompok uji 3 (250 mg/kgBB Ekstrak etil asetat daun lamun). Tiap Kelompok terdiri dari 3 ekor mencit. Hewan uji diaklimatisasi terlebih dahulu di lingkungan baru selama 1 minggu sebelum dilakukan pengujian. Semua  mencit dipuasakan  10-12 jam  tapi  tetap diberi  minum,  lalu  diukur kadar  gula  darahnya  pada  0  menit  yang  mana  ditetapkan  sebagai  kadar  gula  darah basal.  Lalu,  semua  mencit  diberikan  perlakuan  sesuai  kelompok  masing-masing, dimana pada kontrol negatif diberikan 1 ml Na-CMC, Kontrol positif diberikan 1 ml larutan acarbose, dan pada kelompok uji, diberikan masing-masing ekstrak etil asetat
daun  lamun  ( Enhalus  acoroides )  dengan  dosis  50,  150,  250  mg/kgBB.  Pemberian dilakukan secara oral dengan menggunakan sonde oral. Setalah 10 menit, semua mencit diberikan larutan sukrosa 90% sebanyak 2.5 ml secara oral. Pengukuran kadar glukosa darah  mencit  dilakukan  pada  menit  ke-30,  60,  90  dan  120  dengan  menggunakan glucometer nesco.

## Analisis data
Analisa data dilakukan menggunakan uji statistik Analsis variansi satu arah ( One Way  ANOVA )  dengan  nilai  p<0.05  untuk  mengetahui  adanya  perbedaan  bermakna dalam perlakuan setiap kelompok. Analisis data dilanjutkan dengan uji post hoc untuk melihat variabel yang memiliki perbedaan yang signifikan.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Ekstraksi Daun Lamun ( Enhalus acoroides )
Sampel  daun  lamun  (Enhalus  acoroides)  yang  diperoleh  dari  pantai  desa Kalumbatan,  Kecamatan  Totikum  Selatan,  Kabupaten  Banggai  Kepulauan,  Provinsi Sulawesi  Tengah  dibersihkan  menggunakan  air  mengalir.  Sampel  yang  telah dibersihkan  dirajang  dan  dikering  anginkan.  Sampel  yang  telah  kering,  kemudian dihaluskan
Tabel 1. Hasil Rendemen yang diperoleh Berat sampel (g) Jenis dan Volume Pelarut (mL) Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) 400 N-heksan (2000) 42 10.5% 320 Etil Asetat (2000) 37 11.5%
Tabel 1 menunjukkan bahwa hasil dari proses ekstraksi daun Lamun ( Enhalus acoroides ) sebanyak 320 gram dengan menggunakan pelarut etil asetat sebanyak 2000 ml diperoleh hasil ekstrak kental sebanyak 37 gram dengan persentase rendamen sebanyak 11.5%. Hasil rendemen ini termasuk dalam rentang nilai rendemen yang baik yaitu 10- 15%  (Depkes  RI,  2000).  Hal  ini  menunjukan  bahwa  proses  ekstraksi  daun  Lamun ( Enhalus acoroides ) dengan pelarut etil asetat berlangsung dengan cukup sempurna. Daun lamun yang digunakan sebanyak 400 gram dan diekstraksi menggunakan metode maserasi bertingkat di mana menggunakan dua pelarut saja yaitu n-heksan dan etil asetat. Maserasi merupakan suatu metode ekstraksi dengan cara merendam sampel simplisia dalam cairan penyari tanpa pemanasan (ekstraksi dingin) sehingga mencegah rusaknya senyawa-senyawa yang terkandung dalam sampel [17]
Skrining Fitokimia Ekstrak Etil Asetat Daun Lamun ( Enhalus acoroides )
Skrining fitokimia dilakukan dengan tujuan mengidentifkasi senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak etil aseta daun lamun (Enhalus acoroides). Hasil uji skrining fitokimia yang menunjukan hasil positif pada ekstrak etil asetat daun lamun (Enhalus acoroides) adalah flavonoid, alkaloid, tanin dan steroid
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etil Asetat Daun Lamun ( Enhalus acoroides ) Uji Fitokimia Reagen Hasil Keterangan Flavanoid Magnesium + HCl Kuning/Jingga + Steroid Lieberman-Burchard hijau-kebiruan + Terpenoid Lieberman-Burchard Merah - Saponin HCl berbuih - Alkaloid Dragendorf cokelat + Tanin FeCl 3 Biru/hijau kehitaman +
Tabel 2 menunjukkan data hasil uji skrining fitokimia dari hasil ekstrak etil asetat daun  Lamun (Enhalus  acoroides )  memperoleh  hasil  bahwa  daun  Lamun  positif mengandung senyawa Flavonoid, Alkaloid, Steroid dan Tanin. Uji Skrining Fitokimia bertujuan  untuk  mendeteksi  senyawa  yang  terkandung  pada  sampel  berdasarkan golongannya sebagai informasi awal dalam mengetahui golongan senyawa kimia yang memiliki  aktivitas  biologis  dari  suatu  tanaman.  Menurut  Menajang et  al [18]  dan Amudha et al [19] daun lamun mengandung senyawa Flavonoid, Alkaloid, Steroid dan Tanin
Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etil Asetat Daun Lamun ( Enhalus acoroides ).
Uji ini dilakukan dengan metode uji pembenanan larutan sukorosa pada mencit jantan dengan parameter besar kenaikan kadar gula darah
Tabel 3. Ka dar Gula Darah Mencit Kelompok Mean Kadar Gula darah (KGD) (mg/dL) Σ KGD (mg/dL) 0 menit 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit Kontrol negatif (Na-CMC) 53 134 185 201 205 153 Kontrol Positif (Acarbose) 58 111 100 89 85 53 Dosis 50 mg/kgBB 53 125 151 156 154 103 Dosis 150 mg/kgBB 56 104 117 138 135 82 Dosis 250 mg/kgBB 54 97 110 122 118 68
Pada  Tabel  3  menunjukan  total  kenaikan  kadar  gula  darah  mencit  setelah  uji pembebana  larutan  sukrosa  pada  masing-masing  kelompok.  Berdasarkan  hasil  yang
diperoleh, kelompok yang diberikan Na-CMC 1% sebagai kontrol negatif menunjukan efek kenaikan kadar glukosa darah pada mencit yang sangat besar dibanding kelompok lainnya yakni sebesar 153 mg/dL. Hal ini dikarenakan Na-CMC 1% tidak memiliki efek antihiperglikemik atau belum mampu menghambat penyerapan sukrosa pada mencit sehingga  kadar  gula  darah  mencit  terus  mengalami  kenaikan.  Hal  tersebut  juga ditunjukan pada gambar 1, di mana pemberian Na-CMC tidak bisa mempertahan kadar gula darah mencit direntang normal <200 mg/dL.
Gambar 1. Grafik perubahan kadar gula darah mencit tiap satuan waktu
Pada  kelompok  kontrol  positif  yang  diberikan  obat  acarbose,  menunjukan peningkatan kadar gula darah yang sangat minimum. Terlihat bahwa obat ini mencegah kenaikan kadar gula darah dan tetap mempertahankannya pada kadar normal, dimana total kenaikan kadar gula darah pada kelompok ini yakni hanya sebesar 53 mg/dL. Hal ini  sesuai  dengan  mekanisme  obat  itu  sendiri.  Acarbose  merupakan  salah  satu  obat hipoglikemik oral (OHO) yang termasuk dalam golongan α-glukosidase inhibihitor [20- 22]. Enzim  α-glukosidase  berfungsi  untuk menghidrolisis karbihidrat  yang  kompleks menjadi glukosa, suatu gula sederhana sehingga penyerapannya lebih mudah [23,24]. Acarbose bekerja dengan menghambat kerja dari enzim tersebut, akibatnya pemecahan karbohidrat  menjadi  glukosa  menjadi  terhambat,  dan  terjadi  penundaan  penyerapan glukosa [22, 25-26]. Selain itu, obat ini memiliki efek penurunan glukosa darah melalui mekanisme peningkatan pelepasan hormon GLP-1 ke dalam sirkulasi darah, dan juga memperlama efek hormon tersebut [21, 27-28]. Hal ini dibuktikan pada menit ke 60-120 kadar gula darah mencit menurun hingga mencapai 85 mg/dL
Pada  kelompok  perlakuan  dengan  pemberian  ekstrak  etil  asetat  daun  lamun dosis 50, 150, dan 250 mg/kg BB memperlihatkan efek  antidiabetes yang cukup baik. Kenaikan  kadar  glukosa  darah  pada  masing-masing  dosis  yaitu  103  mg/dL  pada pemberian dosis 50 mg/kg BB, 82 mg/dL pada dosis 150 mg/kg BB dan 68 mg/dL pada dosis  250  mg/kg  BB.dan  pada  menit  ke  90-120  masing-masing  kelompok  uji, menunjukan penurunan kadar glukosa darah mencit. Hal ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Widiyanto et al. [15] dan Senthilkumar et al., [16] yang menunjukan bahwa  ekstrak  lamun  ( Enhalus  acoroides )  memiliki  aktivitas  penghambatan  terhadap enzim α-glukosidase dengan nilai IC 50 yakni :168.15 ± 2.71 µg/mL [15] dan 47 µg/ml [16]. Penelitian in silico yang dilakukan oleh Fatmawati et al, [29] juga mengkonfirmasi bahwa  senyawa  fitokimia  yang  terkandung  dalam  lamun  ( Enhalus  acoroides )  mampu
0 50 100 150 200 250 0 50 100 150 Kad ar G u la D ar ah (mg /d L) Waktu (Menit) Grafik Perubahan Kadar Gula Darah Mencit K- (Na-CMC) K+ (Acarbose) 50 mg/kgBB 150 mg/kgBB 250 mg/kgBB
berikatan pada reseptor α-glukosidase, AMP-activated protein kinase , NAMPT, dan 11-β- hydroxysteroid  dehydrogenase  1 ,  di  mana  diketahui  reseptor  tersebut  berperan  penting dalam metabolism glukosa .
Aktivitas  antidiabetik  tersebut  diakibatkan  oleh  senyawa  yang  terkandung dalam  ekstrak.  Ekstrak  etil  asetat  daun  lamun  ( Enhalus  acoroides )  yang  diuji  dalam penelitian ini positif mengandung beberapa senyawa seperti flavanoi, alkaloid, steroid dan tanin. Dalam beberapa penelitian menunjukan bahwa Flavanoid memperlihatkan efek antidiabetik. Flavanoid bekerja dengan berbagai mekanisme diantaranya dengan menghambat  enzim  α-glukosidase  di  usus  sehingga  memperlambat  penyerapan glukosa  [30-33].  Ada  beberapa  poin  yang  menjelaskan  hubungan  struktur  flavonoid dengan aktivitas penghambatan α-glukosidase diantaranya gugus hidroksil pada posisi atom C nomor 3 mempunyai peranan yang penting dalam aktivitas penghambatan α- glukosidase  serta  semakin  banyak  gugus  hidroksil  yang  melekat  pada  cincin,  maka aktivitas penghambatannya semakin besar [30, 34]. Flavonoid juga menghambat enzim α-amylase  [35-37].  Selain  itu,  beberapa  penelitian  menunjukan  bahwa  flavonoid  juga bekerja  dengan  mengaktifkan  ekspressi  gen  PPAR-γ  sehingga  memperbaiki  ambilan glukosa  dan  resistensi  insulin  [38],  menghambat  proses  gluconeogenesis  di  hepatik [39,40],  mampu  menstimulasi  pengambilan  glukosa  melalui  regulasi  GLUT4  dan pengaktivan jalur AMPK [41, 42], meningkatkan sekresi insulin dan faktor-faktor yang berhubungan dengan sensitivitas insulin [43, 44] serta karena aktivitas antioksidannya, flavonoid  mampu  menangkal  radikal  bebas  sehingga  mencegah  terjadinya  apoptosis pankreas dan kerusakan sel beta pankreas [45-47].
Senyawa  alkaloid  dalam  beberapa  penelitian  juga  menunjukan  aktivitas antidiabetes.  Rahman et  al [48]  yang  melakukan  secara in  silico ,  menyatakan  bahwa alkaloid jenis nummularine-R dan vindoline mampu berikatan pada situs aktif enzim α- glukosidase. Hal ini dikuatkan dengan penelitian in vitro yang dilakukan oleh Goboza et  al, [49]  yang,berhasil  membuktikan  vindoline  mempunyai  aktvitas  penghambatan yang lemah terhadap enzim penghambatan α-glukosidase. Uji in vivo yang dilakukan oleh Njoku et al [50] menyatakan bahwa ekstrak alkaloid dari beberapa tanaman mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah.  Menurut  Larantukan et  al, [51]  ekstrak  alkaloid terbukti  dapat  meregenerasi  sel-β  pankreas  yang  rusak.  Selain  itu,  alkaloid  dapat memberi  rangsangan  pada  saraf  simpatik  (simpatomimetik)  yang  kemudian  berefek pada peningkatan sekresi insulin. Mekanisme kerja alkaloid dalam menurunkan gula darah  yaitu  dengan  cara  meningkatkan  transportasi  glukosa  di  dalam  darah, menghambat absorbsi glukosa di usus, merangsang sintesis glikogen dan menghambat sintesis glukosa dengan menghambat enzim glukosa 6-fosfatase, fruktosa 1,6-bifosfatase yang  merupakan  enzim  yang  berperan  dalam  glukoneogenesis,  serta  meningkatkan oksidasi glukosa melalui glukosa 6-fosfat dehidrogenase. Penghambatan pada enzim 6- fosfatase dan fruktosa 1,6-bifosfatase ini akan menurunkan pembentukan glukosa dari substrat lain selain karbohidrat. Selain itu mekanisme lain menurut Zhu et al [52], yaitu meliputi agonis reseptor 119 G protein-coupled (GPR119), inhibisi terhadao protein tyrosine phosphatase  1B (PTP1B),  peroxisome  agonis  terhadap  reseptro proliferator-activated receptor (PPAR) α/γ, dan menghambat dipeptidyl peptidase 4 (DPP-4) dan sodium-glucose cotransporters (SGLTs).
Senyawa lain yang diduga memiliki aktivitas antidiabetes yaitu steroid. Belum banyak yang melaporkan hal ini, namun penelitian baru-baru ini yang dilakukan oleh Abd El Hafez et al [53], bahwa dua senyawa turunan steroid yang diisolasi dari bintang laut spesies Acanthaster planci menunjukan aktivitas penghambatan terhadap enzim α- glukosidase secara in vitro dengan nilai IC 50 58 ± 0.8 dan 55 ± 0.5 mg/mL. Penelitian
Junejo et al [54], juga mengkonfirmasi bahwa senyawa turunan steroid yakni stigmasta- 5,22-dien-3β-ol mampu  berikatan  pada  sisi  aktif  enzim  α-glukosidase  secara in  silico , namun  pengujian  secara  in  vitro,  hambatannya  lebih  rendah  dari  pada  senyawa flavonoid. Daisy et al [55] juga telah mengisolasi suatu steroid yaitu 28 Nor22(R)With a 2,6,23-trienolide .  dari  tanaman  Tapak  liman  ( Elephantopus  scaber )  yang  dapat menstimulasi sel beta pankreas untuk mensekresikan insulin.
Ekstrak  etil  asetat  daun  lamun  ini  juga  positif  akan  senyawa  tannin.  Tannin merupakan  salah  satu  jenis  dari  kelompok  senyawa metabolit  fenolik  yang memiliki aktivitas  pembersih  radikal  bebas  serta  dapat  menghambat  lipoksigenase  dan peroksidase  lipid.  Tannin  juga  mampu  memberikan  efek  perlindungan  dengan bertindak  sebagai  penangkap  radikal  bebas  dan  mengaktifkan  enzim  antioksidan. Tannin  juga  dapat  meningkatkan  pengambilan  glukosa  melalui  mediator  jalur pensinyalan insulin, seperti aktvasi PI3K, P38 MAPK dan translokasi GLUT-4 [31, 56]. Penelitian  oleh  Kato et  al [57]  menyatakan  bahwa  tannin  terhidrolisis  dan  tannin terkondensasi mampu menghambat enzim 𝛼 -amylases secara in vitro dengan nilai IC 50 41.1 𝜇 M  dan  248.1 𝜇 M  secara  berturut-turut.  Kedua  tannin  tersebut  mampu memperlambat penyerapan glukosa pada intestinal.

## Analisis Data
Hasil  uji  post  hoc  HSD  One-Way  Anova  dengan  tingkat  kepercayaan  95% (p<0.05) menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna antara kontrol negatif dengan kontrol positif dan kelompok ekstrak yang ditunjukkan dengan nilai signifikan yaitu p= 0.000. Sedangkan untuk uji 2 dan 3 tidak berbeda makna dengan kontrol positif dengan nilai signifikan p= 0.657 dan p= 0.927.

## 4.  Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakuan, dapat disimpulkan bahwa Ekstrak etil asetat daun lamun ( Enhalus acoroides ) memiliki efek antidiabetes pada mencit jantan ( Mus musculus ) Dari ketiga dosis yang digunakan dalam penelitian, dosis 250 mg/kg BB menunjukan aktivitas yang lebih besar dibandingkan dosis 150 ataupun 50 mg/kg B.

## Referensi
[1]. IDF. (2019). IDF Diabetes Atlas (9th ed.). Belgium: International Diabetes federation [2]. IDF. (2021). IDF Diabetes Atlas (10th ed.). Belgium: International Diabetes federation [3]. Alam, S.; Hasan, M.K.; Neaz, S.; Hussain, N.; Hossain, M.F.; Rahman, T. (2021). Diabetes  Mellitus:  Insights  from  Epidemiology,  Biochemistry,  Risk  Factors, Diagnosis, Complications and Comprehensive Management. Diabetology (2):36–50. https://doi.org/10.3390/diabetology2020004
[4]. Pane, M., Rahman, A., & Ayudia, E. (2021). Gambaran Penggunaan Obat Herbal Pada  Masyarakat  Indonesia  Dan  Interaksinya  Terhadap  Obat  Konvensional Tahun 2020. Journal of Medical Studies , 1 (1), 40-62.
[5]. Harsch, I. A., Kaestner, R. H., & Konturek, P. C. (2018). Hypoglycemic side effects of  sulfonylureas  and  repaglinide  in  ageing  patients-knowledge  and  self- management. Journal Physiol Pharmacol , 69(4), 647-9. https://doi.org/10.26402/jpp.2018.4.15
[6]. DeFronzo,  R.,  Fleming,  G.  A.,  Chen,  K.,  &  Bicsak,  T.  A.  (2016).  Metformin- associated  lactic  acidosis:  Current  perspectives  on  causes  and  risk. Metabolism , 65(2), 20-29. https://doi.org/10.1016/j.metabol.2015.10.014
[7]. Nunes, A. P., Iglay, K., Radican, L., Engel, S. S., Yang, J., Doherty, M. C., & Dore, D.  D.  (2017).  Hypoglycaemia  seriousness  and  weight  gain  as  determinants  of cardiovascular disease outcomes among sulfonylurea users. Diabetes, Obesity and Metabolism , 19(10), 1425-1435. https://doi.org/10.1111/dom.13000
[8]. Yosmar,  R.,  Inanta,  N.  P.,  &  Sari,  Y.  O.  (2019).  Studi  Prospektif  Adverse  Drug Reactions  (ADRS)  Obat  Hipoglikemik  Oral  Terhadap  Pasien  Diabetes  Mellitus Tipe 2 di Suatu Rumah Sakit, Padang. Jurnal Sains Farmasi & Klinis, 5(3), 169-175. https://doi.org/10.25077/jsfk.5.3.169-175.2018
[9]. Salehi,  B.,  Ata,  A.,  V  Anil  Kumar,  N., et  al .  (2019).  Antidiabetic  Potential  of Medicinal  Plants  and  Their  Active  Components. Biomolecules , 9 (10),  551. https://doi.org/10.3390/biom9100551
[10]. Baehaki, A., Lestari, S., Hendri, M., & Ariska, F. (2020). Antidiabetic Activity with N-Hexane,  Ethyl-Acetate  and  Ethanol  Extract  of Halodule  uninervis Seagrass.
Pharmacognosy Journal, 12(4): 805-8. https://doi.org/10.5530/pj.2020.12.115 [11]. Amirah, N. F. (2019). Uji Aktivitas Antimikroba, Aktivitas Antioksidan Dan Skrining Fitokimia  Ekstrak  Enhalus  acoroides Doctoral  dissertation,  Surabaya:  Universitas Airlangga. http://repository.unair.ac.id/id/eprint/81980
[12]. Nurafni,  N.,  &  Nur,  R.  M.  (2018).  Aktivitas  Antifouling  Senyawa  Bioaktif  Dari Lamun  di  Perairan  Pulau  Morotai. Jurnal  Ilmu  Kelautan  Kepulauan ,  1(2). http://dx.doi.org/10.33387/jikk.v1i2.942
[13]. Qi  SH,  Zhang  S,  Qian  PY,  Wang  BG.  (2008).  Antifeedant,  antibacterial  and antilarval compounds from the South China sea seagrass Enhalus acoroides. Bot Mar; 51: 441-7. https://doi.org/10.1515/BOT.2008.054
[14]. Monisha, D., Sivasankar, V., Mylsamy, P., & Gabriel Paulraj, M. (2020). Mosquito larvicidal  activity  of  Enhalus  acoroides  (L.f)  royle  and  Halophila  ovalis  (Robr) hook.  f.  against  the  deadly  vectors  Aedes  aegypti  and  Culex  quinquefasciatus. South African Journal of Botany. https://doi.org/10.1016/j.sajb.2020.06.021
[15]. Widiyanto A, Anwar E, Nurhayati T. (2018). In vitro Assay of Alpha-Glucosidase Inhibitor  Activities  of  Three  Seagrasses  from  Banten  Bay,  Indonesia. Pharmacog J .;10(5):907-10. https://doi.org/10.5530/pj.2018.5.152
[16]. Senthilkumar, P., Santhosh Kumar, D. S., Sudhagar, B., Vanthana, M., Parveen, M. H.,  Sarathkumar,  S.,  ...  &  Kannan,  C.  (2016).  Seagrass-mediated  silver nanoparticles  synthesis  by Enhalus  acoroides and  its  α-glucosidase  inhibitory activity from the Gulf of Mannar. Journal of Nanostructure in Chemistry , 6(3), 275- 280. https://doi.org/10.1007/s40097-016-0200-7
[17]. Hermawan, H., Sari, B. L., & Nashrianto, H. (2018). Kadar polifenol dan aktivitas antioksidan  ekstrak  etil  asetat  dan  metanol  buah  ketapang  (T erminalia  catappa L.). Jurnal online mahasiswa (JOM) bidang farmasi , 1 (1).
[18]. Menajang, F., Mahmudi, M., Yanuhar, U., & Herawati, E. Y. (2019). Evaluation of phytochemical and superoxide dismutase activities of Enhalus acoroides (L.f.) Royle from coastal waters of North Sulawesi, Indonesia. Veterinary world , 13(4), 676–680. https://doi.org/10.14202/vetworld.2020.676-680
[19]. Amudha, P., Vanitha, V., Bharathi, P. N., Jayalakshmi, M., & Mohanasundaram, S. (2017).  Phytochemical  analysis  and  in  vitro  antioxidant  screening  of  seagrass Enhalus acoroides. Int. J. Res. Pharm. Sci, 8(2), 251-258.
[20]. Wang, B., Zhao, J., Zhan, Q., Wang, R., Liu, B., Zhou, Y., & Xu, F. (2021). Acarbose for Postprandial Hypotension With Glucose Metabolism Disorders: A Systematic Review  and  Meta-Analysis. Frontiers  in  cardiovascular  medicine, 8,  388. https://doi.org/10.3389/fcvm.2021.663635
[21]. Brunton, Laurence L., Randa Hilal-Dandan., Björn C. Knollmann,. (2018). Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics Thirteenth Edition . New York: McGraw-Hill Education
[22]. Katzung, Bertram G.(2018). Basic and Clinical Pharmacology Fourteenth Edition . New York: McGraw Hill Education
[23]. Rodwell VW, Bender DA, Botham KM, Kennely PJ, and Weil PA. (2018). Harper’s Illustrated Biochemistry. 31th ed. New York: McGraw-Hill Education [24]. Yuniarto, A., & Selifiana, N. (2018). Aktivitas Inhibisi Enzim Alfa-glukosidase dari Ekstrak Rimpang Bangle (Zingiber cassumunar Roxb.) secara In vitro. MPI (Media Pharmaceutica Indonesiana), 2(1), 22-25. https://doi.org/10.24123/mpi.v2i1.1299
[25]. Gao, F., Ma, X., Peng, J., Lu, J., Lu, W., Zhu, W., ... & Zhou, J. (2020). The effect of acarbose on glycemic variability in patients with type 2 diabetes mellitus using premixed insulin compared to metformin (AIM): an open-label randomized trial.
Diabetes technology & therapeutics , 22(4), 256-264. https://doi.org/10.1089/dia.2019.0290
[26]. Golan,  D.  E.,  Armstrong,  E.  J.,  &  Armstrong,  A.  W.  (2016). Principles  of pharmacology:  The  pathophysiologic  basis  of  drug  therapy: Fourth  edition.  Wolters Kluwer Health.
[27]. Dalsgaard,  N.  B.,  Gasbjerg,  L.  S.,  Hansen,  L.  S.,  Hansen,  N.  L.,  Stensen,  S., Hartmann, B., ... & Knop, F. K. (2021). The role of GLP-1 in the postprandial effects of acarbose in type 2 diabetes. European Journal of Endocrinology , 184(3), 387-398. https://doi.org/10.1530/EJE-20-1121
[28]. Zhang, J., & Guo, L. (2017). Effectiveness of acarbose in treating elderly patients with  diabetes  with  postprandial  hypotension. Journal  of  Investigative  Medicine , 65(4), 772-783. http://dx.doi.org/10.1136/jim-2016-000295
[29]. Fatmawati, Y., Sandrina, S., Aina, R. N., & Narulita, E. (2022). Molecular docking analysis  of  seagrass  ( Enhalus  acoroides )  phytochemical  compounds  as  an antidiabetic. Journal of Biological Research-Bollettino della Società Italiana di Biologia Sperimentale . 95:10224. https://doi.org/10.4081/jbr.2022.10224
[30]. Suprayogi, A., Rahminiwati, M., Satyaningtijas, A., Nugraha, A. T., Sukandar, D., Pangestika,  H.,  &  Pratiwi,  L.  (2020).  Identification  Of  Compounds  Flavonoids Namnam  Leaf  Extract  ( Cynometra  Cauliflora )  As  Inhibiting  A-Glucosidase. In Journal of Physics: Conference Series ( Vol. 1594, No. 1, p. 012005). IOP Publishing. https://doi.org/10.1088/1742-6596/1594/1/012005
[31]. Anggraini, A. (2020). Manfaat Antioksidan Daun Salam Terhadap Kadar Glukosa Darah  Dan  Penurunan  Apoptosis  Neuron  Di  Hippocampus  Otak  Tikus  Yang Mengalami Diabetes. Jurnal Medika Hutama, 2(01), 349-355 [32]. Supasuteekul,  C.,  Nonthitipong,  W.,  Tadtong,  S.,  Likhitwitayawuid,  K., Tengamnuay,  P.,  &  Sritularak, B.  (2016).  Antioxidant,  DNA  damage  protective, neuroprotective, and α-glucosidase inhibitory activities of a flavonoid glycoside from  leaves  of Garcinia  gracilis . Revista  Brasileira  de  Farmacognosi a,  26,  312-320. https://doi.org/10.1016/j.bjp.2016.01.007
[33]. Do,  N.  H.,  Le,  T.  M.,  Nguyen,  C.  D.,  &  Ha,  A.  C.  (2020).  Optimization  of  total flavonoid  content  of  ethanolic  extract  of Persicaria  pulchra (Bl.)  Soják  for  the inhibition  of  α-glucosidase  enzyme. Fine  Chemical  Technologies ,  15(4),  39-50. https://doi.org/10.32362/2410-6593-2020-15-4-39-50
[34]. Şöhretoğlu,  D.,  &  Sari,  S.  (2020).  Flavonoids  as  alpha-glucosidase  inhibitors: Mechanistic approaches merged with enzyme kinetics and molecular modelling.
Phytochemistry  Reviews ,  19(5),  1081-1092. https://doi.org/10.1007/s11101-019- 09610-6
[35]. Hua, F., Zhou, P., Wu, H. Y., Chu, G. X., Xie, Z. W., & Bao, G. H. (2018). Inhibition of α-glucosidase and α-amylase by flavonoid glycosides from Lu'an GuaPian tea: molecular  docking and  interaction  mechanism. Food &  function ,  9(8), 4173-4183. https://doi.org/10.1039/C8FO00562A
[36]. Zhao,  Y.,  Wang,  M.,  &  Huang,  G.  (2021).  Structure-activity  relationship  and interaction  mechanism  of  nine  structurally  similar  flavonoids  and  α-amylase. Journal of Functional Foods , 86, 104739. https://doi.org/10.1016/j.jff.2021.104739 [37]. Saidi, I., Manachou, M., Znati, M., Bouajila, J., & Jannet, H. B. (2022). Synthesis of new halogenated flavonoid-based isoxazoles: In vitro and in silico evaluation of a- amylase inhibitory potential, a SAR analysis and DFT studies. Journal of Molecular Structure, 1247, 131379. https://doi.org/10.1016/j.molstruc.2021.131379
[38]. Ghorbani,  A.  (2017).  Mechanisms  of  antidiabetic  effects  of  flavonoid  rutin. Biomedicine & Pharmacotherapy , 96, 305-312. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2017.10.001
[39]. Prasath, G. S., Pillai, S. I., & Subramanian, S. P. (2014). Fisetin improves glucose homeostasis through the inhibition of gluconeogenic enzymes in hepatic tissues of streptozotocin induced diabetic rats. European journal of pharmacology , 740, 248-254. https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2014.06.065
[40]. Al-Ishaq,  R.  K.,  Abotaleb,  M.,  Kubatka,  P.,  Kajo,  K.,  &  Büsselberg,  D.  (2019). Flavonoids  and  their  anti-diabetic  effects:  cellular  mechanisms  and  effects  to improve blood sugar levels. Biomolecules , 9(9), 430. https://doi.org/10.3390/biom9090430 [41]. Yao, Z., Gu, Y., Zhang, Q., Liu, L., Meng, G., Wu, H., ... & Niu, K. (2019). Estimated daily  quercetin  intake  and  association  with  the  prevalence  of  type  2  diabetes mellitus  in  Chinese  adults. European  journal  of  nutrition ,  58(2),  819-830. https://doi.org/10.1007/s00394-018-1713-2
[42]. M  Eid,  H.,  &  S  Haddad,  P.  (2017).  The  antidiabetic  potential  of  quercetin: underlying  mechanisms. Current  medicinal  chemistry ,  24(4),  355-364. https://doi.org/10.2174/0929867323666160909153707
[43]. Cirmi, S., Ferlazzo, N., Lombardo, G. E., Maugeri, A., Calapai, G., Gangemi, S., & Navarra, M. (2016). Chemopreventive agents and inhibitors of cancer hallmarks:
may citrus offer new perspectives?. Nutrients , 8(11), 698.
https://doi.org/10.3390/nu8110698
[44]. Zang, Y., Igarashi, K., & Li, Y. (2016). Anti-diabetic effects of luteolin and luteolin- 7-O-glucoside  on  KK-A  y  mice. Bioscience,  Biotechnology,  and  Biochemistry ,  80(8), 1580-1586. https://doi.org/10.1080/09168451.2015.1116928
[45]. Yin,  H.,  Huang,  L.,  Ouyang,  T.,  &  Chen,  L.  (2018).  Baicalein  improves  liver inflammation  in  diabetic  db/db  mice  by  regulating  HMGB1/TLR4/NF-κB signaling pathway. International Immunopharmacology , 55, 55-62.
https://doi.org/10.1016/j.intimp.2017.12.002
[46]. Ma, L., Li, X. P., Ji, H. S., Liu, Y. F., & Li, E. Z. (2018). Baicalein protects rats with diabetic  cardiomyopathy  against  oxidative  stress  and  inflammation  injury  via phosphatidylinositol  3-kinase  (PI3K)/AKT  pathway. Medical  science  monitor: international  medical  journal  of  experimental  and  clinical  research ,  24,  5368. https://doi.org/10.12659/MSM.911455
[47]. Al-Dosari, D. I., Ahmed, M. M., Al-Rejaie, S. S., Alhomida, A. S., & Ola, M. S. (2017). Flavonoid  naringenin  attenuates  oxidative  stress,  apoptosis  and  improves neurotrophic  effects  in  the  diabetic  rat  retina. Nutrients, 9(10),  1161. https://doi.org/10.3390/nu9101161
[48]. Rahman, N., Muhammad, I., Khan, H., Aschner, M., Filosa, R., & Daglia, M. (2019). Molecular  docking  of  isolated  alkaloids  for  possible  α-glucosidase  inhibition. Biomolecules, 9(10), 544. https://doi.org/10.3390/biom9100544
[49]. Goboza,  M.,  Meyer,  M.,  Aboua,  Y.  G.,  &  Oguntibeju,  O.  O.  (2020).  In  vitro antidiabetic and antioxidant effects of different extracts of Catharanthus roseus and its indole alkaloid, vindoline. Molecules, 25(23), 5546. https://doi.org/10.3390/molecules25235546
[50]. Njoku, O. C., Airaodion, A. I., Awosanya, O., Ekenjoku, J. A., Okoroukwu, V. N., Ogbuagu, E. O., ... & Igwe, C. (2019). Antidiabetic potential of alkaloid extracts from Vitex  doniana and Ficus  thonningii leaves  on  alloxan-induced  diabetic  rats.
International Research Journal of Gastroenterology and Hepatology , 2(2), 1-12.
[51]. Larantukan,  S.  V.  M.,  Setiasih,  N.  L.  E.,  &  Widyastuti,  S.  K.  (2014).  Pemberian ekstrak  etanol  kulit  batang  kelor  glukosa  darah  tikus  hiperglikemia. Indonesia Medicus Veterinus, 3(4), 292-299.
[52]. Zhu, Y., Zhao, J., Luo, L., Gao, Y., Bao, H., Li, P., & Zhang, H. (2021). Research progress of indole compounds with potential antidiabetic activity . European Journal of Medicinal Chemistry , 223, 113665. https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2021.113665
[53]. Abd El Hafez, M. S., Aziz Okbah, M. A. E., Ibrahim, H. A., Hussein, A. A. E. R., El Moneim, N. A. A., & Ata, A. (2021). First report of steroid derivatives isolated from starfish Acanthaster  planci with  anti-bacterial,  anti-cancer  and  anti-diabetic activities. Natural Product Research , 1-8. https://doi.org/10.1080/14786419.2021.2021200
[54]. Junejo, J. A., Zaman, K., Rudrapal, M., Celik, I., & Attah, E. I. (2021). Antidiabetic bioactive compounds from Tetrastigma angustifolia (Roxb.) Deb and Oxalis debilis Kunth.: Validation of ethnomedicinal claim by in vitro and in silico studies. South African Journal of Botany , 143, 164-175. https://doi.org/10.1016/j.sajb.2021.07.023
[55]. Daisy, P., Jasmine, R., Ignacimuthu, S., & Murugan, E. (2009). A novel Steroid from Elephantopus  scaber L.  an  Ethnomedicinal  plant  with  antidiabetic  activity. Phytomedicine , 16(2-3), 252–257. https://doi.org/10.1016/j.phymed.2008.06.001 [56]. Kumari,  M.,  &  Jain,  S.  (2012).  Tannins:  An  antinutrient  with  positive  effect  to manage diabetes. Research Journal of Recent Sciences . 1(12), 1-8 [57]. Kato, C. G., Gonçalves, G. D. A., Peralta, R. A., Seixas, F. A. V., de Sá-Nakanishi, A. B., Bracht, L., ... & Peralta, R. M. (2017). Inhibition of α-amylases by condensed and  hydrolysable  tannins:  Focus  on  kinetics  and  hypoglycemic  actions. Enzyme Research , 2017:1-12. https://doi.org/10.1155/2017/5724902