## JIUBJ
Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi, 22(2), Juli 2022, 1277-1282 Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat universitas Batanghari Jambi
ISSN 1411-8939 (Online), ISSN 2549-4236 (Print) DOI 10.33087/jiubj.v22i2.2272

## Pembuktian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Ketul (Bidens pilosa L) Terhadap Pertumbuhan Escherechia Coli Secara Invitro

## Lukas Seran*, Rikardus Herak
Program Studi Pendidikan Biologi, Universitas Katolik Widya Mandira *Correspondence email: lukaseran08@gmail.com, herakricky@gmail.com
Abstrak. Secara  tradisional  masyarakat  dari  setiap  etnis  sering  menggunakan  obat  tradisional  berbahan  tumbuhan  untuk mengobati penyakit yang menyerang manusia. Demikian halnya di desa Oelnasi Kecamatan Kupang Tengah Kabupaten Kupang masyarakat  biasa  meminum  rebusan  daun  ketul  ( Bidens  pilosa L)  untuk  menyembuhkan  penyakit  diare.  Kepastian  khasiat  obat rebusan  daun  ketul  yang  diambil  dari  Timor  belum  pernah  dibuktikan  secara  ilmiah.  Oleh  karena  itu  penelitian  untuk membuktikannya perlu dilakukan. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan aktivitas ekstrak daun ketul ( Bidens pilosa L) dari Timor ebagai antibakteri terhadap terhadap pertumbuhan Escherichia coli Secara Invitro.  Jenis penelitian  ini adalah eksperimen laoboratoris dengan menggunakan Posttest Only Control Group Design yang terdiri dari empat perlakuan yang diulang tiga kali. Data  dianalisis  dengan    anava  satu  arah  dan  dilanjutkan  dengan  uji  beda  nyata  terkecil  (BNT)  dengan  tingkat  signifikansi  1%. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  ketul  ( Bidens  pilosa,  L )  dari  Timor  terbukti  memiliki  aktivtas  sebagai antibakteri terhadap pertumbuhan Escherichia coli secara In  vitro.  Berdasarkan  hasil uji  lanjutan  BNT 1%  disimpulkan  bahwa konsentrasi 20% berbeda nyata dengan  konsentrasi 40%,60% dan 80%; konsentrasi 40% berbeda nyata dengan konsentrasi 20% ,40% dan 80%;  konsentrasi 60%  berbeda  nyata dengan konsentrasi 20%,40% dan 80%; konsentrasi 80%  berbeda  nyata dengan konsentrasi 20%, 40%, dan 60%.
Kata kunci : Antibakteri; Ekstrak Daun Ketul; Escherichia Coli ; Invitro
Abstract.  Traditionally, people of every ethnicity  often use traditional medicines  made from plants to  treat diseases that attack humans. Likewise, in Oelnasi Village, Central Kupang District, Kupang Regency, people used to drink boiled ketul leaves (Bidens pilosa L) to cure diarrheal diseases. The certainty of the medicinal efficacy of boiled ketul leaves taken from Timor has never been scientifically proven. Therefore, research to prove it needs to be done. This study aims to prove the activity of extract of ketul leaf (Bidens  pilosa  L)  from  Timor  as  an  antibacterial  against  the  growth  of  Escherichia  coli  In  vitro.  This  type  of  research  is  a laboratory  experiment  using  Posttest  Only  Control  Group  Design  which  consists  of four  treatments  which  were  repeated  three times.  The  data  were  analyzed  using  one-way  ANOVA  and  continued  with  the  smallest  significant difference  test  (BNT)  with  a significance level of 1%. The results showed that ketul leaf extract (Bidens pilosa, L) from Timor was proven to have antibacterial activity  against  the  growth  of  Escherichia  coli  in  vitro.  Based  on  the  results  of  the  1%  Key  BNT  follow-up  test  that  the  20% concentration was significantly different from the 40%, 60% and 80% concentrations; the concentration of 40% was significantly different from the concentration of 20%, 40% and 80%; concentration of 60% was significantly different  with concentrations of 20%, 40% and 80%; concentration of 80% was significantly different with concentrations of 20%, 40%, and 60%.

## Keywords: Antibacterial; Ketul Leaf Extract; Escherichia coli; Invitro

## PENDAHULUAN
Setiap  manusia  atau  individu  menginginkan kehidupan  yang  sehat,  karena  kesehatan  adalah  sesuatu yang  tak  ternilai  (Seran,  Herak,  Ndukang,  et  al.,  2020). Salah satu syarat untuk mencapai keserasian perkembangan  rohani,  jasmani,  dan  sosial  adalah kesehatan  (Seran,  Herak,  &  Missa,  2020).  Kesehatan merupakan  bagian  dari  hak  asasi  manusia  sehingga negara  menjadikan  kesehaan  sebagai  salah  satu  pilar pembangunan  penting  dengan  menetapkannya  secara yuridis formal di dalam Undang-undang RI No.36 Tahun 2014  tentang  kesehatan.  Sebagai  implementasi  terhadap amanat  undang-undang  tersebut  di  atas,  maka  negara melalui  pemerintah  membangun  berbagai  fasilitas kesehatan  dalam  rangka  terwujudnya  kehidupan  yang sehat  baik  melalui  pembangunan  sarana  maupun prasarana  kesehatan  erta  didukung  dengan  program kulturalisasi  dan  tradisionalisasi  Pola  Hidup  Bersih  dan Sehat (PHBS).
Perilaku  hidup  bersih  dan  sehat  (PHBS)  tersebut meliputi  perilaku  proaktif  untuk:  (a)  memelihara  dan meningkatkan  kesehatan  dengan  cara  olah  raga  teratur dan  hidup  sehat;  (b)  menghilangkan  kebudayaan  yang berisiko  menimbulkan  penyakit;  (c)  usaha  untuk melindungi  diri  dari  ancaman  yang  menimbulkan penyakit;  (d)  berpartisipasi  aktif  dalam  gerakan kesehatan  masyarakat  (Wati  &  Ridlo,  2020).  Lebih lanjut  menurut    (Wati  &  Ridlo,  2020)  mengatakan bahwa  Pola  Hidup  Bersih  dan  Sehat  (PHBS)  dapat dilakukan di manapun manusia berada, yaitu 1) PHBS di Rumah  Tangga,  2)  PHBS  di  Sekolah,  3)  PHBS  di Tempat  Kerja,  4)  PHBS  di  lingkup  Fasilitas  Pelayanan Kesehatan  (Rumah  Sakit).  Pola  hidup  sehat  merupakan perwujudan  paradigma  sehat  yang  berkaitan  dengan perilaku perorangan, keluarga, kelompok, dan masyarakat yang berorientasi sehat dengan meningkatkan,  memelihara,  dan  melindungi  kualitas kesehatan  baik  fisik,  mental,  spiritual  maupun  sosial.
Lukas  Seran  dan  Rikardus  Herak,  Pembuktian  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Ketul  (Bidens  pilosa  L)  Terhadap

## Pertumbuhan Escherechia Coli Secara Invitro
Kendatipun  demikian,  fakta  menunjukkan  bahwa penyakit  tertama  penyakit  menular  di  Indonesia  masih menimpa manusia.
Penyebaran  penyakit  menular  memiliki  peluang yang  lebih  tinggi  pada  negara  beriklim  tropis  seperti Indonesia. Penyakit infeksi merupakan penyakit menular terutama  di  daerah  tropis  seperti  Indonesia  karena keadaan  udara  yang  berdebu,  temperatur  yang  hangat, dan  lembab  sehingga  mikroba  dapat  tumbuh  subur. Keadaan  tersebut  ditunjang  dengan  keadaan  sanitasi yang buruk sehingga lebih memudahkan penyakit infeksi semakin    berkembang.  Pada  bagian  lain  (Irwan,  2016) mengatakan bahwa terdapat tiga faktor yang berpengaruh  terhadapat  terjadinya  penyakit  menular yaitu Host (Penjamu), Agent (Penyebab), dan
Environment (Lingkungan). Dalam kesehatan masyarakat,  bakteri  Escherechia  coli  yang  merupakan penyebab  diare  masih  menjadi  permasalahan  utama. Penyakit  diare  diartikan  sebagai  buang  air  encer  secara intens,  baik  disertai  lendir  dan  darah  maupun  tidak  (Z. Bakri,  M.  Hatta,  2015).  Menurut  (Prawati,  2019) rendahnya pengetahuan dan edukasi masyarakat mengenai  diare  atau  malnutrisi,  faktor  perilaku masyarakat,  dan  faktor  lingkungan  merupakan  beberapa faktor risiko penyebab diare.
Di  negara  berkembang,  diare  adalah  salah  satu penyakit  yang  menyebabkan  kematian  pada  balita dengan  1,6  juta  korban  secara  global.  Setiap  tahunnya angka  kejadian  diare  di  seluruh  dunia  diperkirakan mencapai 2,5 milyar, dimana lebih dari 50%-nya berada di  Afrika  dan  Asia  Selatan.  (Z.  Bakri,  M.  Hatta,  2015). Angka mortalitas dan morbiditas yang tinggi menyebabkan  diare  menjadi  masalah  kesehatan  di Indonesia. Survei morbiditas yang dilakukan oleh Subdit Diare  Departemen  Kesehatan  dari  tahun  2000  s/d  2010 terlihat  kecenderungan  insidensinya  meningkat.  Pada tahun  2000  penyakit  Diare  301/  1000  penduduk,  tahun 2003 naik menjadi 374 /1000 penduduk, tahun 2006 naik menjadi  423  /1000  penduduk  dan  tahun  2010  menjadi 411/1000  penduduk  (Kemenkes  RI,  2011).  Diare  dapat disebabkan  oleh  infeksi  bakteri,  virus  dan  parasit. Penyebab diare terbanyak kedua setelah rotavirus adalah infeksi  karena  bakteri Escherichia  coli (Z.  Bakri,  M. Hatta, 2015). Menurut data (Kementerian Kesehatan RI, 2018).  Provinsi  Nusa  Tenggara  Timur  tahun  2018, gambaran  penanganan  kasus  diare  tahun  2014-2018 yaitu  sebagai  berikut  :  pada  tahun  2014  ditemukan penderita  diare  yang  mendapat  penanganan  sebesar 86.429  kasus  (80,2%),  pada  tahun  2015  ditemukan penderita  diare  dan  mendapat  penanganan  meningkat menjadi  98.918  (90  %),  pada  tahun  2016  diperkirakan kasus  diare  kembali  mengalami  peningkatan  menjadi 111.355,  yang  mendapat  penanganan  sebanyak  91.938 (82,6%), pada  tahun  2017 Profil  Kesehatan  NTT  Tahun 2018  117  meningkat  lagi  menjadi  113.148  kasus  dan yang  ditanganin  80.2019  kasus  (70,9%)  dan  pada  tahun
2018  menurun  menjadi  145.031  kasus  dan  yang ditangani sebanyak 102.617 (70,75%).
Berhadapan  dengan  fakta  adanya  serangan penyakit  diare  di  atas,  upaya  pengendalian  yang dilakukan  yaitu  dengan  menggunakan  antibiotika,  yang dapat menyebabkan multidrug-resistance jika digunakan dalam  kurun  waktu  yang  lama.  Multidrug-resistance dapat  menyebabkan  pengobatan  menjadi  tidak  efektif, membengkaknya  biaya  kesehatan,  dan  meningkatnya peluang  mortalitas  dan  morbiditas  pasien  (Pratiwi, 2017).  Pada  bagian  lain  (Walewangko  et  al.,  2015) mengatakan bahwa berdasarkan hasil penelitian antimicrobial  resistance  in  Indonesia  (AMRIN-Study) terbukti  bahwa  dari  2.494  individu  tersebar  di  seluruh Indonesia,  43% Escherichia  coli resisten  terhadap berbagai  jenis  antibiotik.  Di  antaranya  kebal  terhadap ampisilin (34%), kotrimoksazol (29%) dan kloramfenikol (25%).
Berdasarkan  fakta  farmakologis  perlu  dilakukan upaya  yang  intensif  untuk  menemukan  alternatif  obat yang  efektif  dan  aman.  (Wahid  et  al.,  2018) menyarankan  agar  pengobatan  berbagai  penyakit menular  sebaiknya  menggunakan  obat-obatan  herbal alami  dari  tumbuh-tumbuhan  yang  berkasiat  sebagai obat  secara  tradisional.  Mendukung  pendapat  di  atas (Hikmat  et  al.,  2011),  mengatakan  bahwa  pemanfaatan tanaman  obat  sudah  sejak  lama  dilakukan  oleh masyarakat di Indonesia. Pemanfaatan tumbuhan sebagai obat juga semakin beragam, sesuai keanekaragamn etnis yang ada. Berdasarkan penuturan dari kedua orang yang memiliki  pengetahuan  yang  luas  mengenai  obat tradisional di Desa Oelnasi, Kecamatan Kupang Tengah Kabupaten  Kupang  yaitu  bapak  Kornelis  Sabaat  dan bapak Yunus Ome diperoleh informasi bahwa salah satu jenis tumbuhan  yang memiliki khasiat ganda yaitu daun ketul  ( Bidens  pilosa L.)  yang  dapat  menyembuhkan penyakit  diare.  Mereka  menuturkan  bahwa  untuk mengobati diare dilakukan dengan cara memetik 1 (satu) genggam  daun  ketul,  direbus  dengan  3  gelas  air  sampai tersisa  kira-kira  1  (satu)  gelas,  kemudian  disaring  dan diminum  dalam  keadaan  hangat  untuk  satu  kali  minum, dan  sehari  diminum  2  (dua)  kali  yaitu  pada  pagi  dan malam  selama  4  sampai  6  hari.  Hasilnya,  pasien  diare sembuh. Penelitian terhadap aktivitas antibakteri ekstrak daun  ketul  telah  dilakukan  di  Nigeria  oleh  (Ajanaku  et al.,  2018)  dalam  (Meira  et  al.,  2021)  hasilnya menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  ketul  ( Bidens  pilosa ) memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri  termasuk terhadap  bakteri Eschericia  coli .  Hal  ini  tentu  saja dilakukan  terhadap  bakteri  dengan  frekuensi  terpapar obat-obatan  yang  berbeda  dengan  bakteri  jenis  yang sama yang diperoleh dari rumah sakit yang berbeda. Bila bakteri  dengan  jejak  terpapar  yang  berbeda  akan menimbulkan  status  resistensi  yang  berbeda  sehingga responnya  terhadap  suatu  obat  akan  berbeda  pula (Sudigdoadi, 2015).

## Lukas  Seran  dan  Rikardus  Herak,  Pembuktian  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Ketul  (Bidens  pilosa  L)  Terhadap Pertumbuhan Escherechia Coli Secara Invitro
Bila dikaji dari aspek tumbuhan terkait kandungan metabolit  sekunder  berdasarkan  habitat  tumbuhan, menurut (Utomo et al., 2020) faktor yang mempengaruhi produksi  metabolit  sekunder  adalah  kondisi  lingkungan, di  mana  ada  dua  faktor  yang  mempengaruhi  produksi metabolit  sekunder  yaitu  suhu  dan  karbon  dioksida (CO 2 ),  di  mana  semakin  tinggi  suhu  dan  kadar  CO 2 maka  akan  semakin  tinggi  produksi  metabolit  sekunder yang  dihasilkan.  Fakta  empirik  dan  fakta  teoretik sebagaimana  diuraikan  di  atas,  agar  diperoleh  kapastian kasiat secara akademis maka perlu dilakukan pembuktian  secara  akademik  ilmiah  melalui  penelitian. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  membuktikan kemampuan  ekstrak  daun  ketul  ( Bidens  pilosa  L .)  dari Timor  dalam  menyembuhkan  penyakit  diare  melalui indikator  antibakteri  terhadap  bakteri Escherichia  coli secara  In  Vitro  dan  untuk  mengetahui  level  konsentrasi ekstrak  daun  ketul  ( Bidens  pilosa, L )  dari  Timor  yang berkemampuan  penyembuhan  penyakit  diare  terbaik melalui  indikator  anti  bakteri  terhadap Escherichia  coli secara in vitro

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  eksperimen  laoboratoris dengan  menggunakan Posttest  Only  Control  Group Design . Denah rancangan hasil modifikasi dari Zainudin M. (2012) sebagaimana pada Gambar 1:
Sumber: Zainudin M. (2012 Gambar 1. Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Mikrobiologi,  Universitas  Katolik  Widya  Mandira Kupang,  pada  bulan  Maret  sampai  Juni  2021.  Yang menjadi  populasi  dalam  penelitan  ini  yaitu  tumbuhan ketul  yang  diambil  dari  Desa  Oelnasi,  Kecamatan Kupang  Tengah  –  Kabupaten  Kupang.  Sedangkan sampel  dari  penelitian  ini  yaitu  ekstrak  daun  ketul sebanyak  500  gram.  Proses  pengumpulan  data  dilakkan dengan  mengikuti  tahapan-tahapan  sebagai  berikut;  1) sterilisasi  peralatan  penelitian  secara  panas  basah menggunakan autoclave dengan  suhu 121℃ selama  15 menit  dan  pengeringan  peralatan  tersebut  dengan menggunakan  oven,  2)  pembuatan  media Nutrien  Agar (NA)  dengan  cara  melarutkan  40  gram  bubuk Nutrien
Agar (NA)  di dalam 1000 ml aquades steril, disterilkan dengan autoclave pada  suhu 121 o C  selama  15  menit, kemudian  dituangkan  ke  dalam  12  cawan  petri  setelah proses  inokulasi  bakteri  uji  dengan  metode pour  plate (cawan  tuang)  3)  pembuatan  ekstrak  dengan  cara mengekstraksi  larutan  daun  ketul rotary  evaporator. Ekstrak  yang  diperoleh  dibuatkan  konsentrasi  uji  yang terdiri  dari  20%,  40%,  60%  dan    80%,    dengan menggunakan  rumus  konsentrasi  ekstrak  = 𝑚 𝑉 × 100% . 4).  Mempersiapkan  bakteri  uji  dengan  cara  melakukan peremajaan  dan  pengenceran  bakteri  menjadi  4  seri pengencaran yaitu 10 -1 , 10 -2 , 10 -3 dan 10 -4 . 5) pengujian kemampuan  antibakteri  dari  ekstrak  uji  dengan  cara menginokulasikan  bakteri  uji  dari  konsentrasi  10 -4 sebanyak  0,1  ml  ke  dalam  cawan  petri  dengan  teknik pour plate , kemudian diikuti dengan mengisi cawan petri dengan  larutan  media  pertumbuhan  Nutrien  Agar  (NA) steril,  biarkan sampai beku. Selanjutnya, membenamkan kertas  cakram  steril  ke  dalam  ekstrak  uji  pada konsentrasi 20%, 40%, 60% dan  80% dan 0% (aquades steril  tanpa  ekstrak)  selama  30  menit,  tempelkan  pada media Nutrien Agar (NA) yang sudah diinokulasi bakteri uji, kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37℃ di  dalam  inkubator  selama  24  jam.  Ukur  luas  zona hambat  dengan  menggunakan  jangka  sorong.  Zona hambat  merupakan  indikator  kemampuan  antibakteri ekstrak terhadap bakteri Eschericia coli.
Teknik  analisis  data,  data  hasil  penelitian dianalisis  dengan  menggunakan  anava  satu  arah  dan dilanjutkan dengan uji beda nyata terkecil (BNT) dengan tingkat  signifikansi  1%.  Untuk  dapat  terlaksananya proses  pengumpulan  data  dibutuhkan  pealatan  sebagai berikut; blender untuk menghaluskan daun  katul kering, tabung  reaksi  sebagai  wadah  pengenceran,  Labu Erlenmeyer  untuk  menampung  larutan  bahan  hasil maserasi,  gelas  kimia  sebagai  wadah  maserasi,  Vortex untuk  menghomogenkan  larutan,  Autoclave  Untuk sterilisasi  media,  Jangka  sorong  (mm)    untuk  mengukur luas zona  hambat bakteri pada media pertumbuhan, Hot plate  Untuk  memanaskan  media,  Bunsen  untuk sterilisasi  kawat  ose,  gunting:  Untuk  memotong  kerta saring,  rotari  evaporator:  untuk  ekstrasi  larutan  daun ketul,  Neraca  analitik:  untuk  menimbang  serbuk  daun ketul,  Micro  pipet:  untuk  memindahkan  biakan  bakteri, Cawan  petri:  sebagai  wadah  pembiakan  bakteri, Indkubator:  untuk  menginkubasi  bakteri,  Jarum  Ose; Untuk mengambil biakan bakteri pada proses peremajaan bakteri dan Spatula; untuk mengaduk larutan hasil maserasi. Sedangkan bahan yang dibutuhkan dalam penelitian  ini  yaitu  daun  ketul,  Kertas  cakram  10  mm, biakan  bakteri  Eschdricia  coli,  aquades  steril,media Nutrien  Agar  (NA),    alkohol  90%,  kapas,  aluminium foil.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Lukas  Seran  dan  Rikardus  Herak,  Pembuktian  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Ketul  (Bidens  pilosa  L)  Terhadap Pertumbuhan Escherechia Coli Secara Invitro
Tabel 1. Data Luas Zona Hambat Pada Setiap Perlakuan
Konsentrasi Ekstrak Luas Zona Hambat Tiap Ulangan Total Rata-Rata I II III 0% 0 0 0 0 0 20% 3,24 2,72 4,31 10,27 3,42 40% 7,46 6,24 8,16 21,86 7,28 60% 12,42 14,30 15,45 42,17 14,05 80% 20,20 18,30 18,45 56,95 18,98
Sumber: data olahan
Keterangan : Pengukuran dilakukan dengan menggunakan jangka sorong dimulai dari tepi kertas cakram hingga tepi ujung zona bening yang terbentuk.
Tabel  1  terlihat  bahwa,  pada  media  pertumbuhan unit  kontrol  yaitu  perlakuan  tanpa  ekstrak,  tidak terbentuk  zona  hambat.  Pada  perlakuan  dengan  ekstrak daun ketul ( Bidens pilosa L.) berkonsentrasi  20%,  rata- rata  luas  zona  hambat  dari  ke  tiga  ulangan  sebesar  3,24 mm.  Pada  perlakuan ekstrak daun ketul ( Bidens pilosa L.) dengan konsentrasi  40%    diperoleh  rata-rata  luas zona hambat dari 3 kali  ulangan  sebesar 7,28 mm. Pada perlakuan  ekstrak  daun  ketul  ( Bidens  pilosa  L.) dengan
konsentrasi  60%  rata-rata  luas  zona  hambat  dari  3  kali ulangan  sebesar  14,05  mm.  Sedangkan  pada  perlakuan ekstrak daun ketul ( Bidens pilosa L.) dengan konsentrasi 80  %  rata-rata  luas  zona  hambat  dari  3  kali  ulangan sebesar  18,95  mm.  Hal  tersebut  sepintas  menunjukkan bahwa  ekstrak  daun  ketul  ( Bidens  pilosa  L.) memiliki kemampuan  sebagai  antibakteri  yaitu  dalam  hal menghambat  pertumbuhan  bakteri  penyebab Eschericia coli secara invitro.
Tabel 2. Hasil Analisis Varians (ANAVA) Pengaruh Ekstrak Daun Ketul (Bidens pilosa L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri E.
Coli Secara In Vitro. Sumber Variasi DB JK KT F hitung (0.01) F tabel (0.01) Perlakuan 3 433,9 144,63 60,89 7,59 Galat 8 -19 -2,375 Total 11 414,48 Sumber: data olahan
Berdasarkan  hasil  analisis  varians  satu  arah  (data pada  tabel  2)  terlihat  bahwa  F  hitung  >  F  tabel.  Hal  ini bermakna bahwa ekstrak daun ketul terbukti secara nyata memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri  terhadap pertumbuhan  bakteri E  coli secara Invitro pada  tingkat signifikansi  1%,  yang  dibuktikan  dengan  hasil  analisis varians (ANAVA) pada taraf signifikan 1% dengan nilai F_hitung    60,89  >  F  tabel  7,59.  Hal  ini  terjadi  karena
menurut (Nakibuule et al., 2019) dalam ekstrak air daun B.  Pilosa  L teridentifikasi  senyawa  berupa  alkaloid, saponin,  flavonoid,  terpenoid,  fenol,  zat  pahit  dan minyak  atsiri.  Oleh  karena  hasil  analisis  varians menunjukkan  F  hitung  lebih  besar  dari  F  tabel  maka dilanjutkan  dengan  analisis  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT) pada taraf signifikan 1%.
Tabel 3. Hasil uji lanjut Beda Nyata Terkecil (BNT) Pengaruh Ekstrak Pada Taraf Signifikan 0,01
(I)x (J)x Mean Difference (I-J) Std. Error Sig. 99% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound 20% 20% 40% -2,9 -3,9 * 91.8 91.8 003 .000 -584.3 -694.4 -79,4 -78.3 60% -10,6 * 91.8 .000 -1371.3 -755.3 80% -15,6 * 91.8 .000 -1864.0 -1247.96 40% 20% 3,9 * 91.8 .003 78.3 694.4 60% -6,8 * 91.8 .000 -985.04 -368.96 80% -11,7 * 91.8 .000 -1477.7 -861.6 60% 20% 10,6 * 91.8 .000 755.3 1371.4 40% 6,8 * 91.8 .000 368.96 985.0 80% -4,9 * 91.8 .001 -800.71 -184.6 80% 20% 15,6 * 91.8 .000 1247.96 1864.0 40% 11.8 * 91.8 .000 861.6 1477.7 60% 4,9 * 91.8 .001 184.6 800.7 Sumber: data olahan
Keterangan :* =  Berbeda nyata; tn =  Berbeda tidak nyata

## Lukas  Seran  dan  Rikardus  Herak,  Pembuktian  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Ketul  (Bidens  pilosa  L)  Terhadap Pertumbuhan Escherechia Coli Secara Invitro
Tabel  3  menjelaskan  bahwa  Konsentrasi  20% berbeda  nyata  dengan    konsentrasi  40%,60%  dan  80%; konsentrasi 40% berbeda nyata dengan konsentrasi 20% ,40%  dan  80%;  konsentrasi  60%  berbeda  nyata  dengan konsentrasi  20%,40%  dan  80%;  konsentrasi  80% berbeda  nyata  dengan  konsentrasi  20%,  40%,  dan  60%. Kendatipun peneliti tidak melakukan identifkasi terhadap  senyawa  aktif  yang  terkandung  pada  ekstrak daun  ketul  ( Bidens  pilosa,L ),  namun  berdasarkan  luas zona  hambat  yang  terjadi  pada  media  pertumbuhan bakteri Eschericia  coli dalam  hasil  penelitian  peneliti, terbukti  bahwa  luas  zona  hambat  yang  terbentuk  yaitu pada  konsentrasi  terendah  20%  luas  zona  hambat  yang terbentuk sebesar 10,46 mm. Sedangkan pada konsentrasi  40%  sebesar  17,68  mm,  pada  konsentrasi 60%  luas  zona  hambat  sebesar  21,54  mm  dan  pada konsentrasi 80% terjadi luas zona hambat sebesar 22,98. Sedangkan  luas  zona  hambat  yang  terjadi  pada  hasil penelitian  (Ajanaku  et  al.,  2018)  dengan  menggunakan fraksi  metanol  sama  seperti  yang  digunakan  oleh peneliti,  terlihat  bahwa  kemampuan  antibakteri  ekstrak daun Bidens  pilos,L yang  diambil  dari  Nigeria  sebesar 15 mm,  lebih  besar  dari  pada  konsentrasi  terendah  20% ekstrak  daun Bidens  pilosa,L yang  diambil  dari  pulau Timor,  Demikian  juga  bila  dibandingkan  dengan konsentrasi 40%, 60% dan 80%, maka luas zona hambat yang terbentuk oleh ekstrak Bidens pilosa,L Timor lebih kecil dari zona hambat yang ditemukan di Nigeria  yaitu 15  mm  lebih  besar  dari  7,28  mm  dengan  konsentrasi 40%,    14,05  pada  konsentrasi  60%  dan  18,98  pada konsetrasi 80%.
Pada  bagian  lain  ditemukan  hasil  review  artikel oleh  (Bartolome  et  al.,  2013)  menunjukkan  bahwa esktrak  daun Bidens  pilosa ,L  yang  diekstraksi  dengan methanol  memiliki  kemampuan  sebagai  antibateri dengan  zona  hambat  seluas  10.2  mm  lebih  besar  dari luas zona hambat yang ditimbulkan ekstrak daun Bidens pilosa, L  Timor  dengan  konsetrasi  terendah  dalam penelitan  ini  yaitu  20%  sebesar 3,42  mm.  Hasil penelitian  terdahulu  yang  ditemukan,  belum  memuat secara  jelas  konsentrasi  uji  ekstrak  yang  digunakan  di dalam penelitian yang mereka lakukan. Sedangkan aspek yang belum dilakukan peneliti mengenai Bidens pilosa, L Timor  sehubungan  dengan  uji  kemampuan  antibakteri ekstrak  daun Bidens  pilosa, L yaitu  menentukan konsentrasi  bakteriostatik  minimum  dan  konsentrasi bakterisida  minimum,  sehingga  nilai  konsentrasi  yang digunakan  di  dalam  penelitian  ini  masih  berada  pada rentang yang besar yaitu 20%, 40%, 60% dan 80%. Hal lain  yang  belum  diteliti  (Ajanaku  et  al.,  2018)  dan (Bartolome  et  al.,  2013)  yaitu  menentukan  konsentrasi yang  paling  tinggi  kemampuan  anti  bakteri  dari  ekstrak daun ketul ( Bidens pilosa, L ) dari Timor secara in vitro.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  analisis  varian  dimana  nilai  F hitung  60,89 lebih  besar  dari  nilai  F  tabel  7,  59  maka disimpulkan bahwa ekstrak daun ketul ( Bidans pilosa, L) terbukti  memiliki  aktivtas  sebagai  antibakteri  terhadap pertumbuhan Eschericia colli secara invitro. Kemampuan  antibakeri  suatu  ekstrak  terhadap  suatu bakteri  pathogen  menjadi  indikator  awal  bahwa  ekstrak tersebut dapat menyembuhkan penyakit yang ditimbulkan oleh bakteri penyebab. Sedangkan berdasarkan hasil analisis lanjutan BNT diketahui bahwa level  konsentrasi  ekstrak  60%  dan    80%  memiliki kemampuan  penyembuhan  penyakit  diare  paling  tinggi melalui  indikator  anti  bakteri    terhadap Eschericia  colli secara in vitro.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajanaku, C., Echeme, J., Mordi, R., Bolade, O., Okoye, S.,  Jonathan,  H.,  &  Ejilude,  O.  2018.  In-vitro antibacterial,  phytochemical,  antimycobacterial activities  and  GC-MS  analyses  of  Bidens  pilosa leaf extract. Journal of Microbiology, Biotechnology and Food Sciences , 8 (1), 721–725. https://doi.org/10.15414/jmbfs.2018.8.1.721-725
Bartolome,  A.  P.,  Villaseñor,  I.  M.,  &  Yang,  W.  C. 2013.  Bidens  pilosa  L.  (Asteraceae):  Botanical properties,  traditional  uses,  phytochemistry,  and pharmacology. Evidence-Based  Complementary and Alternative Medicine , 2013 . https://doi.org/10.1155/2013/340215
Hikmat,  A.,  Zuhud,  E.  A.  M.,  Siswoyo,  Sandra,  E.,  & Sari,  R.  K.  2011.  the  Revitalization  of  Family Medicine  Plant  (Toga)  Conservation  for  Crease Health  and  Economic  in  Village  Exemplary  Ipb Campus  Darmaga  Bogor. Jurnal  Ilmu  Pertanian Indonesia , 16 (2), 71–80.
http://journal.ipb.ac.id/index.php/JIPI/article/view/ 6600/5128
Irwan,  S.  M.  K.  2016.  Epidemiologi  Penyakit  Menular. In Pengaruh Kualitas Pelayanan… Jurnal EMBA , 109(1).
Kementerian  Kesehatan  RI,  B.  P.  dan  P.  K.  2018.
Laporan Nasional RISKESDAS 2018 .
Meira, G., Iwansyah, A. Z., Santoso, H., & Wahjudi, M. 2021. Minireview: Formulasi Obat Kumur Ekstrak Daun  Ketul  (Bidens  pilosa). KELUWIH:  Jurnal
Sains dan Teknologi , 2 (1), 1–11. https://doi.org/10.24123/saintek.v2i1.3986
Nakibuule,  M.  K.,  Ntulume,  I.,  Mwandah,  D.  C., Tibyangye, J., Bashir, A., Odoki, M., Okoche, D., Maniga,  J.  N.,  Emmanue,  E.,  Kwizera,  E., Richard,  B.,  &  Aliero,  A.  A.  2019. Anti-bacterial Activity of Crude Flavonoid Fraction from Bidens pilosa  Leaves  against  Selected  Chronic  Wound
Bacterial Pathogens . 8 (July), 1–13. https://doi.org/10.9734/JOCAMR/2019/v8i13011
Lukas  Seran  dan  Rikardus  Herak,  Pembuktian  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Ketul  (Bidens  pilosa  L)  Terhadap

## Pertumbuhan Escherechia Coli Secara Invitro
5
Pratiwi,  R.  H.  2017.  Mekanisme  Pertahanan  Bakteri Patogen  Terhadap  Antibiotik. Jurnal  Pro-Life , 4 (3), 418–429.
Prawati,  D.  D.  2019.  Faktor  Yang  Mempengaruhi Kejadian  Diare  Di  Tambak  Sari,  Kota  Surabaya.
Jurnal Promkes , 7 (1), 34.
https://doi.org/10.20473/jpk.v7.i1.2019.34-45 Seran,  L.,  Herak,  R.,  &  Missa,  H.  2020.  Pembuktian Kemampuan Anti Bakteri Ekstrak Daun dan Kulit Jarak  Pagar  (Jatropha  culcas)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus  Secara  In  Vitro  Dalam Pembelajaran  Dengan  Metode  PBL  Terhadap
Mahasiswa Semester VII Program Studi Pendidikan Biologi FKIP UNWI. 3 (1), 39–50. Seran, L., Herak, R., Ndukang, S., Eduk, E. J., & Djalo, A.  2020.  Kemampuan  Anti  Bakteri  Ekstrak  Daun
Kersen  Terhadap  Salmonella  typhi  Secara  Invitro
Melalui Modified Free Inquiry. 5 , 56–65. Sudigdoadi,  S.  2015. Mekanisme  Timbulnya  Resistensi

## Antibiotik Pada Infeksi Bakteri
Utomo, D. S., Betty, E., & Kristiani, E. 2020. Pengaruh Lokasi  Tumbuh  Terhadap  Kadar  Flavonoid, Fenolik,  Klorofil,  Karotenoid  dan  Aktivitas
Antioksidan Pada Tumbuhan Pecut Kuda (Stachytarpheta  Jamaicensis). Bioma , 22 (2),  143– 149.
Wahid,  A.  R.,  Wardani,  A.  K.,  &  Astuti,  R.  201).  Uji Efek  Antidiare  Ekstrak  Etanol  Daun  Sawo (Manilkara  Zapota  L.)  Terhadap  Mencit  Jantan Dengan  Metode  Transit  Intestinal. Jurnal  Ulul
Albab , 22 (2), 61–63.
https://doi.org/10.31764/jua.v22i2.587 Walewangko, G. V. C., Bodhi, W., & Kepel, B. J. 2015. Uji  Resistensi  Bakteri  Escherichia  Coli  Yang  Di Isolasi Dari Plak Gigi Menggunakan Merkuri Dan
Ampisilin. Jurnal E-Biomedik , 3 (1).
https://doi.org/10.35790/ebm.3.1.2015.6634
Wati,  P.  D.  C.  A.,  &  Ridlo,  I.  A.  2020.  Hygienic  and Healthy Lifestyle in the Urban Village of Rangkah
Surabaya. Jurnal Promkes , 8 (1), 47. https://doi.org/10.20473/jpk.v8.i1.2020.47-58
Z. Bakri, M. Hatta, M. N. M. 2015. Deteksi Keberadaan Bakteri Eschericia  coli O157:H7  Pada  Feses Penderita Diare Dengan Metode Kultur dan  PCR. JST Kesehatan , 5 (2), 184 – 192. Zainudin,  M.  2012. Metodologi  Penelitian ,  Universitas Airlangga, Surabaya