DOI: 10.29303/jrpb.v9i2.266 ISSN 2301-8119, e-ISSN 2443-1354 Tersedia online di http://jrpb.unram.ac.id/

## OPTIMASI KONDISI EKSTRAKSI ULTRASONIKASI PADA VITAMIN C BUAH DELIMA (Punica granatum L.) MENGGUNAKAN RESPON PERMUKAAN
Optimization of Ultrasonication Extraction Conditions in Vitamin C Pomegranate (Punica granatum L.) using Surface Response
S.Rosalinda 1*) , Hilda Ayu Aulia 1 , Asri Widyasanti 1 , Efri Mardawati 2
1 Laboratorium Pascapanen dan Teknologi Proses, Departemen Teknik Pertanian dan Biosistem, Fakultas teknologi Industri Pertanian Universitas Padjadjaran, Jl. Raya Bandung Sumedang Km.21, Jatinangor, Kabupaten Sumedang, Jawa Barat, Indonesia 45363
2 Departemen Teknologi Industri Pertanian Fakultas Teknologi Industri Pertanian Universitas Padjadjaran, Jl. Raya Bandung Sumedang Km.21, Jatinangor, Kabupaten Sumedang, Jawa Barat Indonesia 45363
Email *) : s.rosalinda@unpad.ac.id
Diterima: Juli 202 1 Disetujui: September 202 1

## ABSTRACT
Pomegranate (Punica granatum L.) is a plant that has many benefits, including antioxidant content.  The  main  antioxidant  content  in  pomegranate  is  vitamin  C.  Vitamin  C  as  an antioxidant is needed in the immune system to maintain immunity and maintain skin elasticity. The content of vitamin C from a pomegranate can be obtained by extraction. Vitamin C is not resistant to high temperatures; therefore, proper extraction technology is needed. Ultrasound- Assisted Extraction (UAE) is the ultrasonication extraction chosen because it does not use high temperatures  and  shorter  extraction  times.  This  study  aims  to  determine  the  optimum  UAE conditions, including a combination of 3 variables, namely amplitude, time, and the amount of solvent that produces optimum vitamin C from pomegranate pulp extract. The UAE device used in this study is Qsonica – Q500 type (500 W, 20 kHz). The research method is an experimental laboratory using RSM (Response Surface Methodology) type CCD (Central Composite Design) with a minimum amplitude of 40% and a maximum of 50%; a minimum time of 20 minutes and a maximum of 25 minutes. Furthermore, the minimum amount of solvent is 150  ml, and the maximum  is  225  ml.  The  study  results  concluded  that  a  large  number  of  solvents  had  a significant effect, while the amplitude and length of extraction time had no significant effect. The model was significant at P value < 0.05 with optimum UAE conditions at a combination of 50% amplitude treatment, 25 minutes, and 150 ml of solvent, resulting in the optimum value of vitamin C content of 47.79 mg/100 grams.
Keywords: pomegranate; RSM; UAE; vitamin C

## ABSTRAK
Buah  Delima  ( Punica  granatum  L. )  merupakan  tanaman  yang  memiliki  banyak  manfaat, diantaranya memiliki kandungan antioksidan. Kandungan antioksidan dalam buah delima yang utama adalah vitamin C. Vitamin C sebagai antioksidan dibutuhkan dalam sistem imun untuk menjaga kekebalan tubuh dan juga dapat menjaga elastisitas kulit. Kandungan vitamin C dari buah  delima  dapat  diperoleh  dengan  cara  ekstraksi.  Vitamin  C  tidak  tahan  pada  suhu  yang tinggi,  sehingga  dibutuhkan  teknologi  ekstraksi  yang  tepat. Ultrasound  Assisted  Extraction (UAE) merupakan ekstraksi ultrasonikasi yang dipilih karena tidak menggunakan suhu yang tinggi  dan  waktu  ekstraksi  lebih  singkat.  Penelitian  ini  bertujuan  menentukan  kondisi  UAE optimum yang meliputi kombinasi 3 variabel, yaitu amplitudo, waktu, dan jumlah pelarut yang menghasilkan  vitamin  C  optimum  dari  ekstrak  daging  buah  delima.  Tipe  alat  UAE  yang digunakan pada penelitian ini adalah tipe Qsonica – Q500 (500 W, 20 kHz). Metode penelitian adalah eksperimental laboratorium menggunakan RSM ( Response Surface Methodology ) tipe CCD  ( Central  Composite  Design )  dengan  amplitudo  minimum  40%  dan  maksimum  50%; waktu minimum 20 menit dan maksimum 25 menit; dan jumlah pelarut minimum 150 ml dan maksimum  225  ml.  Hasil  penelitian  menyimpulkan  bahwa  banyaknya  jumlah  pelarut memberikan  pengaruh  yang  nyata,  sedangkan  amplitudo  dan  lama  waktu  ekstraksi  tidak berpengaruh nyata. Model signifikan pada nilai P < 0,05 dengan kondisi UAE optimum pada kombinasi  perlakuan  amplitudo  50%,  waktu  25  menit,  dan  jumlah  pelarut  150  ml  yang menghasilkan nilai kadar vitamin C optimum sebesar 47,79 mg/100 gram.
Kata kunci: buah delima; RSM; UAE; vitamin C

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Pencemaran  lingkungan  khususnya udara  merupakan  masalah  seluruh  negara dunia  khususnya  di  Indonesia.  Menurut Badan  Pusat  Statistik  (2018),  jumlah kendaraan bermotor terus  meningkat  setiap tahun.  Peningkatan  jumlah  kendaraan bermotor menyebabkan meningkatnya pencemaran udara.  Menurut Fakriah, et al. (2019),  asap  kendaraan  bermotor  sangat berbahaya bagi  manusia  karena merupakan sumber  radikal  bebas  yang  beracun  bagi tubuh  manusia.  Kadar  radikal  bebas  yang melampaui kemampuan tubuh menyebabkan  kondisi  stress  oksidatif. Stress  oksidatif  yang  menjadi  penyebab utama  penyakit-penyakit  dalam  tubuh, seperti  stroke,  penyakit  jantung,  tekanan darah  tinggi,  dan  kanker.  Salah  satu  bahan aktif    dalam  mengurangi  efek  dari  radikal bebas adalah Antioksidan.
Menurut Suranto (2011), buah delima memiliki  kandungan  antioksidan  tiga  kali lebih  banyak  dibandingkan  teh  hijau  dan
anggur  merah.  Buah  delima  memiliki kandungan  antioksidan  yang  tinggi  yaitu sebesar 62,7% dibandingkan dengan anggur (26,6%),  apel  (25,7%),  dan  pir  (13,7%). Buah  delima  merah  mengandung  lebih banyak  vitamin  C  dibandingkan  dengan buah delima putih (Karadeniz, et al ., 2005). Kandungan antioksidan dalam buah delima yang utama adalah asam askorbat atau biasa disebut  dengan  vitamin  C  dan  golongan polifenol  seperti  flavonoid  dan  tanin (Suranto, 2011). Vitamin C adalah salah satu antioksidan  non  enzimatis  yang  berfungsi untuk  mencegah  proses  oksidasi,  penuaan, gangguan kardiovaskular, hingga regenerasi sel (Suksesi & Sirat, 2012). Vitamin C pada buah  delima  banyak  terdapat  pada  daging buahnya (Fatmawati, 2019).
Kandungan  vitamin  C  pada  daging buah  delima  dapat  diperoleh  dengan  cara melakukan ekstraksi menggunakan bantuan pelarut.  Menurut  Leba  (2017),  ekstraksi menggunakan  pelarut  tertentu  yang  sesuai merupakan  salah  satu  teknik  pemisahan
secara  kimia.  Stabilitas  vitamin  C  sangat dipengaruhi oleh suhu. Kenaikan suhu akan mempercepat  reaksi  oksidasi,  dimana semakin  tinggi  suhu  maka  semakin  tinggi juga kerusakan vitamin C (Winarno, 1997). Pencegahan kerusakan vitamin C membutuhkan  teknologi  ekstraksi  yang tepat.  Teknologi  ekstraksi  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  ekstraksi ultrasonik. Ekstraksi UAE dengan berbantu gelombang ultrasonik mengalami fenomena kavitasi.  Proses  kavitasi  adalah  proses pembentukan, pengembangan dan pemecahan gelembung pada pelarut. Kavitasi menyebabkan membran sel tanaman  rusak  dan  pecah.  Rusak  dan pecahnya membran sel tanaman menghasilkan  ekstrak  yang  larut  dalam pelarut  (Wardiyati,  2004).  Ekstraksi  UAE memiliki  penggunaan  waktu  yang  singkat, temperatur yang rendah dan jumlah pelarut yang  sedikit  (Chemat, et  al .,  2011). Ekstraksi  UAE  merupakan  ekstraksi  pada bahan  yang  sensitif  terhadap  perubahan suhu.  Ekstraksi  UAE  dipengaruhi  oleh beberapa  faktor,  diantaranya  adalah  besar amplitudo, rasio antara padatan dan jumlah pelarut. dan lama waktu ekstraksi (Sholihah, et  al .,  2017).  Berdasarkan  faktor-faktor tersebut  perlu  dilakukan  optimasi  kondisi UAE  yang  meliputi  besar  amplitudo,  lama waktu, dan rasio antara padatan dan jumlah pelarut  yang  menghasilkan  ekstrak  daging buah  delima  dengan  vitamin  C.  Salah  satu cara optimasi yang dikenal dalam perancangan  desain  adalah  menggunakan metode RSM.
RSM adalah kumpulan teknik matematis  dan  statistik  yang  digunakan untuk pemodelan dan analisis masalah pada respon  yang  dipengaruhi  oleh  beberapa variabel dan bertujuan untuk mengoptimasi respon tersebut (Oramahi, 2008). RSM tidak saja digunakan untuk mengetahui pengaruh variabel  terhadap  respon,  tetapi  juga mendapatkan  model  matematis  hubungan antara  variabel  dengan  respon,  serta mendapatkan  prediksi  kondisi  proses  yang menghasilkan  respon  terbaik  (Nurmiah et al .,  2013).  RSM  mampu  mengidentifikasi
titik  di  luar  jangkauan  percobaan  yang merupakan  model  orde  1  dan  mencari kondisi  optimum  suatu  respon  yang dipengaruhi  oleh  variabel  yang  komplek yang  merupakan  model  orde  2  (Oramahi, 2008). Sehingga dengan model ini diharapkan akan diperoleh kondisi ekstraksi optimum dengan kandungan vitamin C.
Berdasarkan  studi  literatur  penentuan amplitudo,  waktu,  rasio  pelarut  terhadap bahan dan jenis pelarut pada penelitian yang dilakukan  oleh  Zivkovic, et  al .  (2018), ekstrak kulit delima terbaik didapatkan pada perlakuan  dengan  rasio  bahan  terhadap pelarut  1:44  (b:v);  waktu  ekstraksi  selama 25  menit,  dengan  menggunakan  pelarut etanol  menghasilkan  total kandungan fenolik, kandungan asam elagik kandungan punikalin.  Waktu  yang  digunakan  pada penelitian  oleh  Zivkovic, et  al .  (2018)  dan Rosalinda, et  al .  (2019)  akan  digunakan sebagai  acuan  batas  maksimum  25  menit dan  batas  minimum  20  menit.  Besar amplitudo  maksimum yang  digunakan adalah  sebesar  50%  dan  batas  minimum yang digunakan sebesar 40%. Ekstrak buah delima yang dihasilkan kemudian dilakukan pengujian  kuantitatif  kadar  vitamin  C dengan  metode  iodimetri  (Sudarmadji, et al .,  2010).  Selain  itu,  dilakukan  juga pengujian  mutu  terhadap  rendemen  parsial dan  rendemen  total,  pH  warna  yang dihasilkan,  bobot  jenis  ekstrak  sebagai penggambaran  tingkat  kemurnian  ekstrak (SNI  06-2385-2006  Minyak  Nilam,  2006), serta  kadar  sisa  pelarut  pada  ekstrak (Guenther, 1987).

## Tujuan
Berdasarkan  uraian  latar  belakang tersebut, tujuan penelitian adalah menentukan  kondisi  UAE  optimum  yang meliputi  kombinasi  3  variabel,  yaitu amplitudo, waktu,  dan rasio  antara padatan dan jumlah pelarut pada produksi vitamin C daging buah delima menggunakan RSM.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Bahan baku adalah buah delima merah (Punica granatum Linn ) matang.
Kematangan  ditandai  dengan  warna  merah yang merata. Buah delima matang menurut Pomegranate  Council adalah  buah  delima dengan berat satuan sebesar 250 – 450 gram, dengan  kulit  tidak  berkerut  dan  tidak memiliki  bercak  hitam.  Buah  delima diperoleh  dari  supermarket.  Adapun  bahan lain  yang  digunakan  adalah  pelarut  etanol 96% food  grade ,  akuades,  amilum,  dan larutan iodium sebagai bahan analisis.
Alat  yang  digunakan  diantaranya adalah beaker glass ( pyrex ), biuret ( pyrex 50 ml), cawan, corong kaca (Herma), desikator, erlenmeyer  (Herma),  gelas  ukur  (Herma), kertas  pH,  kertas  saring  (Whatmann  42), oven (Memmert), pipet (Herma), piknometer  ( Pyrex 1  ml),  Rotary  Vacuum Evaporator (Heidolph p/n 562 – 01300–00), termometer
inframerah (GM300),
timbangan analitik
(Adventure–pro, ketelitian  0,0001  g),  timbangan  teknis (Boeco  r–300,  ketelitian  0,01  g),  dan Ultrasonic processor (Qsonica – Q500, 500 W,  20  kHz). Ultrasonic  processor dengan spesifikasi power  rating 500  watts; frekuensi 20 KHz, voltage 110 V, 50/60Hz dapat dilihat dari Gambar 1.
Gambar 1. Ultrasonic Processor (Qsonica- Q500) Sumber: Operation Manual Qsonica-Q500

## Metode
Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  metode  eksperimen  laboratorium dengan  RSM  tipe CCD pada design  expert 11. Rancangan
penelitian mengkombinasikan  3  variabel  bebas  yaitu amplitudo  (A)  dalam  satuan  %,  waktu  (B) dalam  satuan  menit,  dan  rasio  padatan dengan  pelarut  atau  jumlah  pelarut  (C) dalam  satuan  ml,  sedangkan    D  adalah respon  (D)  yaitu  hasil  pengukuran  untuk vitamin  C  dalam  satuan  mg/100g.  Setiap variabel memiliki nilai batas maksimum (+) dan batas minimum (-). Berdasarkan metode RSM  tipe  CCD  dengan  interval  variabel dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Nilai Interval Variabel Desain CCD
Variabel Bebas –α –1 0 +1 +α
A 37 40 45 50 53
B 18,3 20 22,5 25 26,7 C 124,4  150  187,5  225  250,6
Berdasarkan  Tabel  1,  rancangan percobaan  dalam  penelitian  menghasilkan 20  sampel  ( run )  yang  terdiri  dari  6  kali ulangan titik tengah ( central point ), 8 batas maksimum  dan  batas  minimum  ( factorial point ),  dan  6  perlakuan  di  atas  titik maksimum  dan  di  bawah  titik  minimum ( axial point) .
Gambar 2. Buah dan Daging Delima
Penelitian ini terdiri dari tiga tahapan. Tahap pertama persiapan bahan baku; buah delima  dilakukan  pencucian,  selanjutnya
dilakukan  pembelahan  dan  pemisahan sehingga  dihasilkan  daging  buah  delima seperti  Gambar  2.  Daging  buah  delima dianalisis karakteristik bahan baku meliputi: kadar air dan kadar vitamin C.
Tahap  kedua  penelitian  utama,  yaitu sebanyak  15  gram  daging  buah  delima dilakukan  ekstraksi  menggunakan  UAE dengan  pelarut  etanol  96%  food  grade. Ekstraksi dilakukan sebanyak 20 run sesuai hasil dari input di RSM. Hasil ekstraksi yang dihasilkan lalu disaring hingga menghasilkan  filtrat.  Filtrat  selanjutnya dipekatkan dengan evaporator. Ekstrak yang
dihasilkan  kemudian  dianalisis  kandungan vitamin C.
Tahap ketiga, dilakukan analisis ekstrak dengan pengujian bobot jenis (SNI 06-2385- 2006,  2006)  dan  pH  (Mukaromah, et  al , 2010)  yang dilakukan pada 5 kondisi, yaitu pada  perlakuan  kondisi  ekstraksi  yang menghasilkan ekstrak dengan kadar vitamin C optimum, kadar vitamin C tertinggi, kadar vitamin C sedang, kadar vitamin C terendah, dan  ekstrak  dengan  perlakuan  kontrol. Tahapan  penelitian  secara  keseluruhan dapat dilihat pada Gambar 3.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Analisis Bahan Baku
Analisis bahan baku meliputi pengujian kadar air dan pengujian kadar vitamin C.

## Kadar Air
Pengujian kadar air daging buah delima dilakukan  dengan  cara  mengeringkan daging  buah  delima  hingga  beratnya konstan.  Hasil  pengujian  kadar  air  delima sebesar 82,25 ±  0,63  %. Nilai kadar  air ini tidak  jauh  berbeda  dengan  penelitian  yang Roswiem, et al . (2014),  yang mendapatkan kadar air buah delima segar sebesar 83,11%. Menurut  Bhowmik, et  al .  (2013),  buah delima  memiliki  kadar  air  sebesar  78,00%. Perbedaan kadar air pada buah delima dapat dipengaruhi  pada  ukuran  buah  yang digunakan,  kematangan  buah,  tempat tumbuh, dan kondisi pertumbuhan tanaman (Maiman & Ahmad, 2002).
Kadar Vitamin C Pengujian  vitamin  C  daging  buah delima  dilakukan  untuk  mengetahui  kadar vitamin C pada bahan awal  sehingga dapat diketahui  perubahan  setelah  dilakukan proses ekstraksi UAE. Pengujian vitamin C pada 3 gram daging buah delima dilakukan dengan metode titrasi iodimetri. Berdasarkan  pengujian  vitamin  C  daging buah  delima  diperoleh  100,42  ±  3,10 mg/100g.  Menurut  Opara, et  al .  (2008), vitamin C buah delima berkisar antara 52,8 mg/100g  sampai  72,0  mg/100g.  Kadar vitamin  C  yang  berbeda  ini  diduga  karena kadar  vitamin  C  pada  suatu  tanaman termasuk  buah  dipengaruhi  oleh  varietas buah, jenis tanah pada saat penanaman, suhu lingkungan,  tempat  tumbuh,  pemakaian jenis  pupuk,  proses  fotosintesis,  polutan, paparan  matahari,  kondisi  panen,  dan tingkat kematangan (Winarno, 1984; Rahman, et al ., 2015).

## Ekstraksi Ultrasonikasi
Semakin  lama  waktu  ekstraksi  yang dilakukan  maka  suhu  semakin  meningkat. Suhu  ekstraksi  dipengaruhi  oleh  besarnya
amplitudo yang digunakan. Proses ekstraksi ultrasonik  dilakukan  menggunakan  energi gelombang,  memiliki  frekuensi  sebesar  20 kHz.  Gelombang  ultrasonik  dipancarkan melalui probe  ultrasound  processor yang kemudian  mengenai campuran  bahan pelarut  etanol  96%  pada  daging  buah delima.  Setiap  proses  akan  mengalami kenaikan suhu yang berbeda-beda, tergantung  kombinasi  perlakuan  antara besar amplitudo, lama waktu ekstraksi, dan jumlah  pelarut  yang  digunakan.  Kenaikan suhu  pada  perlakuan  dapat  dilihat  pada Gambar 4.
Gambar 4. Kenaikan Suhu Ekstraksi
Penerapan ultrasonik ke dalam cairan menyebabkan  efek  kavitasi.  Efek  kavitasi menyebabkan  terbentuk  dan  pecahnya gelembung secara terus menerus. Gelombang  ultrasonik  bekerja  dengan memindahkan  energi  secara  mekanik. Energi gelombang merambat dengan vibrasi atau  osilasi,  dari  satu  massa  ke  massa berikutnya.  Vibrasi  ini  mengakibatkan adanya  gesekan  antar  partikel  massa,  yang kemudian  menghasilkan  panas.  Semakin rapat  partikel  (dalam  konteks  ini  semakin tinggi  konsentrasi  pelarut),  jarak  antar massa  semakin  pendek,  besarnya  osilasi semakin kecil, maka dengan energi eksitasi yang sama, laju perambatan semakin tinggi.
(Majid, et al ., 2015).
0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 Su hu ( o C) Waktu (menit) Kenaikan suhu

## Optimasi Kondisi Ekstraksi UAE
Variabel  bebas  (A,  B  dan  C) merupakan  hasil  dari  RSM  dan  D  adalah respon  yang  merupakan  hasil  pengukuran vitamin  C  dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Berdasarkan  Tabel  2,  dapat  dilihat  bahwa kadar  vitamin  C  yang  dihasilkan  berkisar antara 19,05 mg/100 gram pada run 16 yaitu dengan kombinasi amplitudo ekstraksi 45%, waktu  ekstraksi  22,5  menit,  dan  jumlah pelarut  250,6  mL,  hingga  87,21  mg/100 gram  pada  run  11  yaitu  dengan  kombinasi amplitudo  ekstraksi  45%,  waktu  ekstraksi
22,5  menit,  dan  jumlah  pelarut  124,4  mL. Kadar  vitamin  C  yang  dihasilkan  memiliki perbedaan  jika  dibandingkan  dengan  kadar vitamin  C  daging  buah  delima  segar,  yaitu sebesar 100,42 mg/100 gram. Kadar vitamin C  dapat  dipengaruhi  oleh  perlakuan  proses pemanasan, proses oksidasi, proses pengolahan  bahan  dan  lama  penyimpanan (Andarwulan, et  al .,  1992).    Selain  itu, vitamin  C  akan  mudah  rusak  oleh  kontak dengan logam (Setyawati, et al ., 2017).
Tabel 2. Variabel Bebas (A, B dan C) dan Respon (D)
Run A B C D 1 45 18,3 187,5 24,93 2 40 20 150 46,92 3 40 25 225 28,58 4 50 20 225 35,18 5 45 22,5 187,5 29,32 6 45 26,7 187,5 40,31 7 45 22,5 187,5 27,85 8 40 25 150 41,78 9 50 25 150 35,91 10 50 25 225 26,39 11 45 22,5 124,4 87,21 12 40 20 225 29,32 13 45 22,5 187,5 28,59 14 53 22,5 187,5 37,38 15 45 22,5 187,5 35,18 16 45 22,5 250,6 19,05 17 50 20 150 40,31 18 45 22,5 187,5 29,32 19 37 22,5 187,5 25,65 20 45 22,5 187,5 27,12

## Analysis of Variance (ANOVA)
Analisis keseragaman (ANOVA) dilakukan berdasarkan  model  yang  dipilih.  Pemilihan model  yang  disarankan  oleh  RSM  dapat dilihat  pada  Tabel  3.  Berdasarkan  Tabel  3, model quadratic tidak  dipilih  karena modelnya tidak signifikan, meskipun memiliki  nilai  R 2 =0,4781  lebih  besar  jika dibandingkan dengan model linear R 2 =0,4047,  selain  model quadratic ,  model 2FI juga tidak dipilih karena modelnya tidak signifikan.  Model cubic juga  tidak  dipilih karena tidak disarankan oleh program RSM
atau aliased yang  berarti  model cubic ini tidak  akurat  sesuai  dengan  desain  pada penelitian,  sehingga  model cubic tidak dipertimbangkan  dan  tidak  menunjukkan adanya  persamaan  matematika.  Model linear dipilih  karena  modelnya  signifikan. Signifikansi model ditunjukkan oleh nilai P, dimana  nilai  P  yang  kurang  dari  0,05 (P<0,05)  menunjukkan  bahwa  model  yang didapatkan  signifikan.  Hasil  perhitungan ANOVA dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 3. Pemilihan model yang disarankan oleh RSM
Tabel 4 . Hasil Perhitungan ANOVA
Source Sum of Square Df Mean Square F value P value Model 1888,14 3 629,38 5,31 0,0099 Significant A-Amplitudo 7,57 1 7,57 0,0638 0,8039 B-Waktu 3,39 1 3,39 0,0285 0,8680 C-Jumlah Pelarut 1877,19 1 1877,19 15,82 0,0011 Residual 1898,16 16 118,63 Lack of Fit 1856,62 11 168,78 20,32 0,0019 Significant Pure Error 41,54 5 8,31 Cor Total 3786,30 19 R² 0,4987 Adjusted R² 0,4047 Predicted R² 0,1219 Adeq Precision 8,0983
Pada  Tabel  4  model  linear  memiliki nilai  P<0,05  yaitu  sebesar  0,0099,  artinya signifikan  jika  nilainya  kecil  dari  0,05  (α= 5%).  Pengaruh  kondisi  operasi  ekstraksi daging buah delima dengan kadar vitamin C menunjukkan model adalah linear. Variabel bebas  yang  paling  berpengaruh  terhadap respon adalah jumlah pelarut dengan nilai P yang  kecil  dari  0,05,  sedangkan  amplitudo tidak  memiliki  pengaruh  terhadap  respon karena  modelnya  tidak  signifikan  dengan nilai  P  >  0,05.  Nilai lack  of  fit yang signifikan  karena  memiliki  nilai  P  <  0,05, dimana  nilai lack  of  fit yang  signifikan menunjukkan terdapat simpangan pada data. Nilai  R 2 belum  mendekati  1,  sedangkan model  dengan  data  yang  baik  ditunjukkan dengan  nilai  R 2 yang  mendekati  1.  Selisih antara R 2 adjusted dengan R 2 predicted >0,2 yaitu  sebesar  0,2828,  dimana  nilai  selisih yang  lebih  dari  0,2  menunjukkan  terdapat masalah  dengan  model  atau  data  yang digunakan.  Masalah  yang  menyebabkan
terdapatnya  simpangan  pada  model  karena beberapa  variabel  bebas  yang  tidak signifikan  sehingga  kemampuan  variabel- variabel  bebas  tersebut  sangat  terbatas dalam menjelaskan respon yang menyebabkan R 2 memiliki nilai yang kecil. Permasalahan  pada  model  diduga terjadi karena pemilihan nilai rentang batas maksimum  dan  batas  minimum  variabel bebas  memiliki  rentang  yang  pendek. Contoh  amplitudo  dan  waktu  memiliki rentang  yang  pendek  sehingga  tidak memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap kadar vitamin C yang dihasilkan. Meskipun demikian,  penelitian  ini  menunjukkan  nilai rasio adequate  precision yang  baik  yaitu sebesar  8,0983  atau  lebih  dari  4  ( adeq prediction >  4),  sehingga  model  pada penelitian  ini  dapat  digunakan  untuk menavigasi  ruang  desain  RSM.  Persamaan model matematis yang diperoleh dari RSM pada  optimasi  kombinasi  variabel  bebas
Source Sequential p-value Lack of Fit p-value Adjusted R² Predicted R² Selection Model Linear 0,0099 0,0019 0,4047 0,1219 Suggested 2FI 0,9635 0,0010 0,2824 -0,5097 Not significant Quadratic 0,1081 0,0017 0,4781 -1,0628 Not significant Cubic 0,0028 0,0522 0,9206 -2,2201 Aliased
terhadap respon vitamin C dapat dilihat pada persamaan 1.
Y=  82,11046  +  0,151871A  +  0,199247B  –
0,312575C ............................................. (1)

## Dimana:
Y  = respon vitamin C (mg/100g) A  = amplitudo (%) B  = waktu (menit) C  = jumlah pelarut (ml)
Persamaan  tersebut  dapat  digunakan untuk  mengetahui  nilai  kadar  vitamin  C yang dihasilkan apabila menggunakan nilai variabel  bebas  amplitudo,  waktu,  dan jumlah  pelarut  yang  berbeda  dari  data penelitian  yang  dilakukan.  Pada  ekstraksi menggunakan  UAE,  semakin  lama  waktu yang  digunakan  maka  rendemen  yang dihasilkan akan semakin besar (Sholihah, et al .,  2017).  Peningkatan  waktu  ekstraksi berkaitan  dengan  kenaikan  suhu  proses ekstraksi, dimana menurut Wardiyati (2004),  peningkatan  suhu  tertentu  akan menyebabkan peningkatantekanan uap sehingga  kavitasi  akan  mudah  terbentuk. Efek  kavitasi  ini  yang  akan  merusak  sel
tanaman  sehingga  senyawa-senyawa  pada bahan  akan  banyak  terekstrak.  Gambar  5 menunjukkan  vitamin  C  yang  konstan dengan  kenaikan  persentase  amplitudo  dan waktu  ekstraksi.  Vitamin  C  yang  kostan membuktikan  bahwa  sangat  sedikitnya pengaruh  amplitudo  dan  waktu  ekstraksi. Pengaruh  variabel  amplitudo  dan  waktu yang tidak signifikan seperti yang ditunjukkan  pada  Tabel  4.  Vitamin  C  akan semakin  meningkat  dengan  berkurangnya jumlah  pelarut  yang  digunakan  yang ditunjukkan  dengan  nilai  konstanta  yang negatif  pada  Persamaan  1.  Jumlah  pelarut berkaitan  dengan  distribusi  vitamin  C, semakin  sedikit  pelarut  yang  digunakan menyebabkan vitamin C tidak tersebar luas, distribusi  vitamin  C  semakin  sempit sehingga  vitamin  C  yang  dihasilkan  lebih tinggi.  Berbeda  jika  menggunakan  jumlah pelarut  yang  besar.  Vitamin  C  yang terdistribusi  sangat  luas  sehingga  kadar vitamin C pada ekstrak daging buah delima semakin kecil.
Gambar 5. Amplitudo dan Waktu terhadap Vitamin C
Gambar 6. Amplitudo dan Jumlah Pelarut terhadap Vitamin C
Gambar  6  menunjukkan  pengaruh amplitudo  dan  jumlah  pelarut  terhadap vitamin  C.  Vitamin  C  akan  semakin  kecil dengan  semakin  besar  jumlah  pelarut  yang digunakan,  dapat  dilihat  dari  warna  grafik yang  semakin  berwarna  biru.    Vitamin  C akan  semakin  besar  sedangkan  jumlah pelarut yang digunakan semakin kecil yang dapat dilihat dari warna grafik yang semakin berwarna hijau. Berdasarkan hasil penelitian ini  dapat  dibuktikan  bahwa  UAE  menjadi metode  ekstraksi  yang  sangat  efektif  untuk mengurangi jumlah pelarut yang dibutuhkan (Wang, et al ., 2013).

## Hasil Optimasi dan Validasi Model
Kombinasi  perlakuan  terbaik  dapat diketahui  dengan  melakukan  optimasi sehingga dapat diketahui respon yang sesuai dengan  yang  diharapkan.  Berdasarkan proses optimasi pada penelitian ini, program Design  Expert  11  memberikan  88  solusi
kombinasi  perlakuan.  Solusi  kombinasi perlakuan  terbaik  ditunjukkan  dengan  nilai target  optimasi  ( desirability )  yang  tinggi, yaitu  nilai desirability yang  mendekati  1. Kombinasi  perlakuan  pada  penelitian  ini yang  memiliki  nilai desirability tertinggi adalah  pada  solusi  1,  yaitu  sebesar  0,422 dengan  kombinasi  perlakuan  amplitudo sebesar  50%,  waktu  ekstraksi  selama  25 menit, dan jumlah pelarut sebanyak 150 ml. Kombinasi perlakuan tersebut akan menghasilkan  ekstrak  daging  buah  delima yang  memiliki  karakteristik  sesuai  dengan target  optimasi  sebesar  42,2%,  dengan prediksi vitamin C sebesar 47,7989 mg/100 gram.  Hasil  optimasi  dan desirability tersebut  dapat  digambarkan  dalam  bentuk kontur  yang  dapat  dilihat  pada  Gambar  7. Kombinasi perlakuan dengan prediksi kadar vitamin  C  tertinggi  dan  nilai desirability tertinggi  ditunjukkan  oleh  tanda  panah merah pada Gambar 7.
Gambar 7 . Grafik Kontur Kondisi Optimum
Untuk  mengetahui  keakuratan  model matematis, maka dilakukan validasi model. Validasi  model  dilakukan  dengan  cara membandingkan  antara  kadar  vitamin  C yang  diprediksi  oleh  RSM  dengan  kadar vitamin  C  aktual  yang  diperoleh  dari penelitian. Hasil validasi model dapat dilihat pada Tabel 6.
Berdasarkan Tabel 6, diketahui bahwa vitamin  C  yang  diprediksi  oleh  RSM memiliki perbedaan dengan kadar vitamin C aktual  yang  diperoleh  dari  penelitian  yang dilakukan. Keakuratan hasil validasi model RSM  yang  didapatkan  masih  belum mendekati  100%,  yaitu  sebesar  75,15% yang  menandakan  bahwa  kadar  vitamin  C hasil  pengujian  belum  sesuai  dengan  nilai kadar vitamin C yang diprediksi RSM. Hal ini  disebabkan  karena lack  of  fit yang signifikan  dan  nilai  R 2 yang  kecil  yang berarti  terdapat  simpangan  yang  terjadi karena adanya masalah pada model atau data yang  digunakan  pada  RSM  sehingga  perlu ditinjau  kembali  pemilihan  nilai  dan  jarak batas maksimum dan batas minimum setiap variabel bebas.

## Hasil Analisis Ekstrak
Pengujian karakteristik ekstrak dilakukan  pada  5  kondisi,  yaitu  pada
perlakuan  kondisi  ekstraksi  optimum  yang menghasilkan ekstrak dengan kadar vitamin C maksimum yaitu run 9, kondisi perlakuan yang  menghasilkan  ekstrak  dengan  kadar vitamin  C  tertinggi  yaitu run 11,  kondisi perlakuan  yang  menghasilkan  ekstrak dengan kadar vitamin C sedang yaitu run 18, kondisi  perlakuan  yang  menghasilkan ekstrak  dengan  kadar  vitamin  C  terendah yaitu run 16, dan ekstrak dengan perlakuan kontrol (maserasi panas).

## Rendemen Total
Rendemen
total merupakan perbandingan  antara  massa  ekstrak  daging buah  delima  yang  diperoleh  dengan  massa daging  buah  delima  yang  digunakan. Rendemen  total  setiap  perlakuan  tersebut dapat dilihat pada Tabel 7.
Berdasarkan  Tabel  7  dapat  diketahui bahwa kombinasi perlakuan yang menghasilkan  rendemen  total  tertinggi adalah run 16  sedangkan  kombinasi perlakuan  yang  menghasilkan  rendemen total  terendah  adalah run 9.  Dibandingkan dengan  perlakuan  kontrol  yang  hanya menghasilkan  rendemen  total  sebesar 8,16%,  maka  ekstraksi  ultrasonik  mampu menghasilkan  rendemen  total  yang  lebih banyak. Hal ini disebabkan karena ekstraksi
ultrasonik dapat menyebabkan efek kavitasi. (Chemat  &  Khan,  2011).  Karena  itu, ekstraksi dengan bantuan gelombang ultrasonik  mampu  mengekstrak  senyawa-
senyawa  pada  daging  buah  delima  lebih banyak  dibandingkan  dengan  perlakuan kontrol.
Tabel 6. Validasi Model
Run A B C D Hasil Validasi (%) Prediksi 50 25 150 47,79 75,15 Aktual 50 25 150 35,91
Tabel 7. Rendemen Total
Sampel Perlakuan Rendemen Total  (%) Run 9 A=50%; B= 25 menit; C= 150 ml 13,23 Run 11 A=45%; B= 22,5 menit; C=124,4 ml 15,17 Run 16 A=45%; B=22,5 menit; C= 250,67 ml 28,49 Run 18 A= 45%; B=22,5 menit; C=187,5 ml 15,49 Kontrol Maserasi Panas 8,16

## Bobot Jenis
Perhitungan  bobot  jenis  ekstrak dilakukan  berdasarkan  perbandingan  bobot
dari volume sampel dengan massa air pada suhu  dan  volume  yang  sama.  Hasil pengujian bobot jenis tersaji pada Tabel 8.

## Tabel 8. Bobot Jenis
Sampel Perlakuan Bobot Jenis (g/ml) Run 9 A=50%; B= 25 menit; C= 150 ml 0,86 Run 11 A=45%; B= 22,5 menit; C=124,4 ml 0,90 Run 16 A=45%; B=22,5 menit; C= 250,67 ml 0,81 Run 18 A= 45%; B=22,5 menit; C=187,5 ml 0,82 Kontrol Maserasi Panas 0,85
Berdasarkan  hasil  pengujian  bobot jenis  pada  Tabel  8,  dapat  diketahui  bahwa bobot  jenis  dipengaruhi  oleh  kombinasi perlakuan  antara  besar  amplitudo,  lama waktu  ekstraksi  dan  jumlah  pelarut  yang digunakan.  Perbedaan  nilai  bobot  jenis  ini terlihat  dari run 11,  16,  dan  18  yang menggunakan  besar  amplitudo  dan  waktu ekstraksi yang sama yaitu dengan amplitudo 45%  dan  waktu  ekstraksi  25  menit  namun dengan  jumlah  pelarut  yang  berbeda. Berdasarkan data tersebut, diketahui bahwa
semakin besar jumlah pelarut yang digunakan  maka  bobot  jenisnya  akan semakin kecil. Hal ini disebabkan kenaikan suhu  proses  ekstraksi  lebih  besar  pada penggunaan  pelarut  yang  lebih  kecil. Menurut Wardiyati (2004), suhu yang tinggi akan  menaikkan  tekanan  uap  sehingga kavitasi  akan  mudah  terbentuk  sehingga akan lebih banyak senyawa yang terekstrak sehingga  bobot  jenis  ekstrak  akan  semakin besar.  Hal  ini  juga  membuktikan  bahwa UAE menjadi metode ekstraksi yang sangat
efektif  untuk  mengurangi  jumlah  pelarut yang dibutuhkan (Wang, et al ., 2013). Hasil ekstraksi dengan bantuan gelombang  ultrasonik  memiliki  nilai  bobot jenis yang sedikit lebih besar dibandingkan dengan  perlakuan  kontrol.  Hal  ini  dapat dilihat  dari run 9  yang  merupakan  kontrol optimum menggunakan jumlah pelarut sama dengan  perlakuan  kontrol  yaitu  sebanyak 150 ml. Run 9 memiliki bobot jenis sebesar 0,86  g/ml  yaitu  sedikit  lebih  besar dibandingkan  dengan  perlakuan  kontrol yang  memiliki  kadar  sisa  pelarut  sebesar 0,85 g/ml. Hal ini disebabkan karena proses ekstraksi  daging  buah  delima  berbantu gelombang  ultrasonik  sangat  terbantu  oleh efek  kavitasi  yang  ditimbulkan  (Chemat  & Khan, 2011). Data penelitian juga menunjukkan  nilai  bobot  jenis  setiap kombinasi perlakuan lebih kecil daripada 1 (< 1) yaitu lebih kecil daripada air.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak daging  buah  delima  ini  memiliki  bentuk fisik  yang  cair.  Ekstrak  ini  juga  memiliki nilai  bobot  jenis  yang  lebih  tinggi dibandingkan massa jenis etanol yaitu 0,798 g/ml.  Hal  ini  disebabkan  senyawa  pada
daging buah delima terikat oleh etanol yang digunakan dalam proses ekstraksi, sehingga menyebabkan  bobot  jenis  ekstrak  memiliki nilai  yang lebih tinggi dibandingkan massa jenis etanol.

## Nilai pH
Pengujian  pH  pada  penelitian  ini dilakukan  menggunakan  kertas  pH  yang kemudian  disesuaikan  dengan  indikator warna  pH.  pH  ekstrak  daging  buah  delima yang diperoleh dapat dilihat pada Gambar  8. Berdasarkan data tersebut, diketahui bahwa pH  ekstrak  yang  diperoleh  pada  setiap kombinasi  perlakuan  memiliki  pH  yang tidak jauh berbeda, yaitu berkisar antara 5- 6.
Nilai pH tersebut menunjukkan bahwa ekstrak yang diperoleh dalam kondisi asam. Nilai pH terendah didapatkan pada kombinasi perlakuan dengan nilai vitamin C tertinggi  yaitu  pada run 11.  Vitamin  C merupakan  senyawa  asam  lemah  (Atisanto et al ., 2017). Sehingga semakin besar kadar vitamin  C-nya  maka  pH  akan  semakin rendah karena semakin asam.
Gambar 8. Grafik Nilai pH Ekstrak Daging Buah Delima
Nilai pH pada penelitian ini dipengaruhi  oleh  jumlah  pelarut  yang digunakan. Hal ini dapat dilihat dari run 11, 16,  dan  18  yang  menggunakan  besar amplitudo  dan  waktu  ekstraksi  yang  sama yaitu  dengan  amplitudo  45%  dan  waktu ekstraksi  25  menit  namun  dengan  jumlah pelarut  yang  berbeda  yaitu  124,4  ml  untuk run 11, 250,6 ml untuk run 16, dan 187,5 ml
untuk run 18. Berdasarkan data tersebut dan Gambar  8,  diketahui  bahwa  nilai  pH terendah didapat pada run 11 dengan jumlah pelarut yang kecil. Hal ini berkaitan dengan semakin  sedikit  jumlah  pelarut  yang digunakan  maka  semakin  banyak  senyawa yang  terekstrak  dari  bahan,  termasuk vitamin  C  yang  merupakan  senyawa  asam
Run 9, 6 Run 11, 5 Run 16, 6 Run 18, 6 Kontrol, 5 0 1 2 3 4 5 6 7 N il ai pH Perlakuan
lemah, sehingga nilai pH nya rendah karena semakin asam.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Model  signifikan,  model  linear  pada nilai P < 0,05 dengan kondisi UAE optimum pada  kombinasi  perlakuan  amplitudo  50%, waktu 25 menit, dan jumlah pelarut 150 ml menghasilkan  nilai  kadar  vitamin  C maksimum  sebesar  47,79  mg/100  gram berdasarkan  nilai desirability tertinggi sebesar  0,422  dan  dengan  keakuratan validasi sebesar 75,15%.

## Saran
Pemilihan  batas  maksimum  dan  batas minimum  variabel  bebas  harus  lebih diperhatikan.  Saran  penelitian  selanjutnya mengenai  optimasi  kondisi  ekstraksi  pada produksi vitamin C dengan metode ekstraksi berbantu
gelombang ultrasonik menggunakan  variabel  perlakuan  yang berbeda.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih atas pendanaan kegiatan Penelitian 2020/2021  kepada  Universitas  Padjadjaran dengan Skema HIU RPLK (Riset Percepatan Lektor Kepala).

## DAFTAR REFERENSI
Andarwulan,  N.,  &  Koswara,  S.  (1992).
Kimia Vitamin . Jakarta: Rajawali.
Atisanto, S. V., Mulyani, S., & Triani, I. G.
A.  L.  (2017).  Pengaruh  jenis  pelarut dan suhu pengeringan terhadap
karakteristik ekstrak pada buah kelubi (Eleiodoxa  conferta).  Jurnal  Dari Rekayasa Dan Manajemen Agroindustri, 5(3), 35-44. Badan Pusat Statistik. (2018).
Perkembangan  Jumlah  Kendaraan Bermotor Menurut Jenis. Diambil dari
www.bps.go.id
Bhowmik,  D.,  Gopinath,  B.,  &  Kumar,  K. (2013).  Medicinal  Uses  of  Punica granatum  and  Its  Health  Benefits.
Journal of Pharmaconosy and Phytochemistry , 5 , 29–36.
Chemat,  F.,  &  Khan,  M.  K.  (2011). Applications  of  ultrasound  in  food technology:  processing,  preservation and extraction. Ultrasonics sonochemistry , 18 (4), 813- 835. Fakriah,  Kurniasih,  E.,  Adriana, & Rusydi. (2019). Sosialisasi Bahaya Radikal Bebas dan Fungsi Antioksidan  Alami  Bagi  Kesehatan. Jurnal Vokasi , 3 (1), 1–7.
Fatmawati,  S.  (2019). Bioaktivitas  dan Konstituen  Kimia  Tanaman  Obat Indonesia .  Yogyakarta:  CV.  Budi Utama.
Guenther,  E.  (1987). Minyak  Atsiri  Jilid  I (Penerjemah  S.  Ketaren) .  Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia.
Karadeniz, F., Burdurlu, H. S., Koca, N., & Soyer, Y. (2005). Antioxidant
Activity  of  Selected  Fruits  and Vegetables  Grown  in  Turkey. Turk  J Agric For , 29 , 297–303.
Leba,  M.  (2017). Buku  Ajar  Ekstraksi  dan Real  Kromatografi .  Yogyakarta:  CV. Budi Utama.
Maiman,  A.,  &  Ahmad,  D.  S.  (2002).
Change  in  Physical  and  Chemical Properties During Pomegranate (Punica granatum L.) Fruit
Maturation. Food Chemistry , 76 , 437– 441.
Majid, I., Nayik, G. A., & Nanda, V. (2015).
Ultrasonication  and  food  technology: A review. Cogent Food & Agriculture, 1(1), 1071022.
Mukaromah,  U.,  Susetyorini,  S.  H.,  & Aminah, S. (2010). Kadar vitamin C, mutu fisik, ph dan mutu organoleptik sirup  rosella  (Hibiscus  Sabdariffa,  L) berdasarkan  cara  ekstraksi.  Jurnal Pangan dan Gizi, 1(1).
Nurmiah,  S.,  Rizal,  S.,  Sukarno,  R.  P.,  &
Budi,  N.  (2013).  Aplikasi  Response Surface Methodology pada Optimalisasi Kondisi Proses Pengolahan  Alkali  Treated  Cottoni. Jurnal Kelautan dan Perikanan , VIII , 9–22.
Opara, L., Majeed, R., & Yusra, S. (2008).
Physico-Chemical Properties Vitamin
C Content and Antimicrobial Properties  of  Pomegranate  Fruit (Punica granatum L). Food
Bioprocess Technol , 2 , 315–321.
Oramahi,  H.  A.  (2008). Teori  dan  Aplikasi Penggunaan  RSM  (Response  Surface
Methodology) .  Yogyakarta:  Ardana Media.
Qsonica,  Operation  Manual  Part  Qsonica-
Q500,  LLC.53  Church  Hill  Rd. Newtown, CT 06470 USA.
Rahman, N., Mairet, O., & Irwan, S. (2015). Analisis  Kadar  Vitamin  C  Mangga Gadung  (Mangifera  sp)  dan  Mangga Golek (Mangifera Indica L) Berdasarkan  Tingkat  Kematangan dengan Menggunakan Iodimetri. Jurnal Akademi Kimia , 4 (1), 33–37.
Rosalinda,  S.,  Sarifah,  N.,  Rudi,  A.,  & Nurpilihan,  B.  (2019).  Optimalisasi Pemisahan  Menggunakan  Kecepatan dan  Waktu Sentrifuge yang  Berbeda pada  Ekstraksi  Pati  Jagung  Varietas Lokal Kabupaten  Garut. Jurnal Teknotan , 13 (1), 28–33.
Roswiem,  A., Heryani,  &  Dian, A. (2014). Aktivitas  Jus  Buah  Delima  (Punica granatum  L)  terhadap  Peroksidasi
Lipid  Darah  Tikus  yang  diinduksi Paracetamol. Jurnal Kedokteran Yarsi , 22 (2), 114–124.
Setyawati,  H.,  &  Mustofa,  A.  (2017).
Analisis  Kadar  Vitamin  C  Kelopak Rosella  (Hibiscus  sadariffa  L)  Muda dan Tua yang Dikoleksi dari Berbagai Ketinggian  Tempat  yang  Berbeda. Jurnal  Ilmiah  Biologi  (Biogenesis) ,
5 (2), 99–103.
Sholihah,  M.,  Ahmad,  U.,  &  Budiastara,  I.
W.  (2017).  Aplikasi  Gelombang Ultrasonik untuk Meningkatkan
Rendemen  Ekstraksi  dan  Efektivitas Antioksidan  dari  Kulit  Manggis. Jurnal Keteknikan Pertanian , 5 , 161– 168.
Sudarmadji,  S.,  Haryono,  B.,  &  Suhardi. (2010). Analisis Bahan Makanan dan Pertanian . Yogyakarta: Liberty Yogyakarta.
Suksesi & Sirat, W. D. (2012). Antioksidan dalam  Bakso  Rumput  Laut  Merah Euchema  cottoni. Jurnal  Sains  dan Seni Pomits , 1 (1), 1–4.
Suranto, A. (2011). Terbukti Pome Tumpas Penyakit . Depok: Pustaka Bunda.
Wang,  J.,  Yong-Ming,  Z.,  Ya-Ting,  T., Chun-Lin,  Y.,  &  Chun-Yan,  G.
(2013). Ultrasound-Assisted Extraction of Total Phenolic Compounds from Inula helenium. The Scientific World Journal , 13 , 1–5.
Wardiyati, S. (2004). Pemanfaatan Ultrasonik  Dalam  Bidang  Kimia. Tangerang:  Puslitbang  IPTEK  Bahan BATAN.
Winarno,  F.  G.  (1984). Kimia  Bahan Pangan  dan  Gizi .  Jakarta:  Gramedia Pustaka Utama.
Winarno,  F.  G.  (1997). Kimia  Pangan  dan Gizi . (G. P. Utama, Ed.). Jakarta.
Zivkovic,  J.,  Savikin,  K.,  Jankovic,  T.,
Cujic,  N.,  &  Menkovic,  N.  (2018). Optimization  of  Ultrasound-Assisted Extraction of Polyphenolic Compounds  from  Pomegranate  Peel using Response Surface Methodology, Separation and Purification Technology. IJRAR  UGC  Approved Journal , 194 , 40–47.