Website:  https://jurnal.yudharta.ac.id/v2/index.php/Teknologi-Pangan
Licensed : Creative Commons Attribution 4.0 International License. (CC-BY)

## Isolasi dan karakterisasi biokimia bakteri pembusuk buah cabai rawit

## Isolation and biochemistry characterization spoilage bacteria in cayenne pepper fruit
Yoga Aji Handoko 1)* , Yulius Adi Kristiawan 1) , Yohanes Hendro Agus 1)
1 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian dan Bisnis, Universitas Kristen Satya Wacana Jalan Diponegoro No. 52–60, Salatiga, Jawa Tengah, Indonesia *e-mail: yoga.handoko@uksw.edu
Informasi Artikel: Dikirim: 15/02/2020; ditinjau: 16/02/2020; disetujui: 20/03/2020

## ABSTRACT
Cayenne pepper (Capsicum frutescens L. ) is a species of chili that is usually consumed daily and used by the food industry. Although cayenne pepper has important roles, it is often found rotting before it is reached by consumers. Postharvest handling that did not apply  good  handling  practices  can  causes  decomposition  of  cayenne  peppers.  This decayed can be caused by the activity of microorganisms, such as bacteria. This study aims to isolate and examine the biochemical properties of spoilage bacteria in cayenne pepper.  The  stages  of  the  experiment  involved:  isolation  and  purification  of  the bacteria,  observation  of  cell  morphology  and  colonies,  and  biochemical  examination. The  results  showed  that  bacterial  isolates  in  cayenne  pepper  had  rod-shaped  cell characteristics,  shiny  colony  surfaces,  and  jagged  colony  edges.  Biochemical characteristics  show  that  these  bacteria  have  enzyme  catalase  activity,  phosphatase enzyme  activity,  are  able  to  produce  carotenoid  and  lecithinase.  However,  these bacteria can not hydrolyze starch and pectin.  These biochemistry characteristics were not  identic  with  Xanthomonas  campestris.  Based  on  the  assessment  of  lactose fermentation,  indole,  methyl  red,  and  Voges-proskaeur,  these  bacteria  could  not  be identified as Erwinia carotovora.
Keywords: biochemistry, cayenne pepper, characterization, isolation, spoilage bacteria

## ABSTRAK
Cabai rawit (Capsicum frutescens L .) merupakan spesies cabai yang berperan di bidang industri  makanan  maupun  konsumsi  harian  masyarakat.  Meskipun  cabai  rawit mempunyai  peranan  yang  penting,  seringkali  cabai  rawit  ditemui  telah  membusuk sebelum  sampai  di  tangan  konsumen.  Penanganan  pascapanen  yang  tidak  menerapkan standar  penanganan  yang  baik  dapat  menyebabkan  terjadinya  pembusukan  pada  buah cabai  rawit.  Pembusukan  ini  dapat  disebabkan  oleh  aktivitas  mikroorganisme,  seperti bakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi  dan  menguji  sifat  biokimia  bakteri pembusuk dalam buah cabai rawit. Tahapan penelitian yang dilakukan meliputi: isolasi dan  purifikasi  bakteri,  pengamatan  morfologi  sel  dan  koloni,  serta  uji  biokimia.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat bakteri  pembusuk dalam  cabai rawit mempunyai ciri sel yang berbentuk batang, permukaan koloni mengkilap, dan tepi koloni bergerigi. Karakteristik biokimia menunjukkan bahwa bakteri tersebut mempunyai aktivitas enzim katalase,  aktivitas  enzim  fosfatase,  mampu  memproduksi  karotenoid,  dan  mampu memproduksi lechitinase . Namun demikian, bakteri tersebut tidak dapat menghidrolisis pati  dan  pektin.  Karakteristik  biokimia  tersebut  tidak  identik  dengan  bakteri Xanthomonas  campestris .  Pengujian  fermentasi  laktosa,  indol, methyl  red, dan Voges-
Proskaeur juga menunjukkan bahwa bakteri pembusuk buah cabai rawit tersebut bukan spesies bakteri Erwinia carotovora . Kata kunci: bakteri pembusuk, biokimia, cabai rawit, isolasi, karakterisasi

## PENDAHULUHAN
Capsicum  frutescens L.  atau  yang dikenal  cabai  rawit  merupakan  salah  satu jenis  sayuran  yang  sangat  penting  di Indonesia (FAO, 2014). Buah cabai memiliki berbagai  nilai  nutrisi,  diantaranya,  berbagai macam  mineral  serta  vitamin  dengan kandungan  antioksidan  yang  tinggi,  seperti: vitamin  C,  vitamin  E,  vitamin  K,  fitosterol, beta–karoten, dan beta–kriptosantin (Suyanti, 2009).  Dari  sisi  nilai  ekonomisnya  dan konsumsinya,  cabai  mempunyai  peluang pasar  besar  dan  luas  dengan  rata-rata konsumsi  cabai  5  kg/kapita/tahun  2013  dan 90  %  cabai  rawit  dikonsumsi  dalam  bentuk segar  (Prajnanta,  2007;  Dermawan  dan Harpenas,  2010;  Badan  Pusat  Statistik, 2015).
Budidaya cabai, khususnya cabai rawit memang  menjanjikan  keuntungan  yang menarik,  tetapi  tidak  jarang  petani  cabai menemui  kegagalan  dan  juga  kerugian  yang cukup  besar  (Wiryanta,  2006; Sunarmani, 2012).  Penanganan  pascapanen  yang  tidak menerapkan Good Handling Practices (GHP) mengakibatkan kualitas cabai menurun  dan  daya  simpan  yang  sangat singkat  (Sembiring,  2009; Acedo,  2012), sehingga  cabai  rawit  seringkali  dijumpai sudah  membusuk  sebelum  sampai  di  tangan konsumen.  Jumlah  kerusakan  dan  pem- busukan  yang  terjadi  mulai  dari  lapangan sampai  ke  tingkat  pengecer  dapat  mencapai 23% (Suyanti, 2009; FAO, 2014). Pembusukan cabai ini salah satunya disebabkan  oleh  kehadiran  atau  serangan bakteri  (Hadas, et.  al., 2001).  Penelitian tentang  bakteri  pembusuk  pada  cabai  ini masih  terbatas,  khususnya  di  Indonesia sebagai  negara  tropis.  Sebagian  besar pustaka yang ditulis merujuk pada penelitian tentang penyebab cabai busuk yang dilakukan  di  daerah  sub  tropis  (Black et  al. , 1991;  Berke et  al., 2005),  sehingga  terdapat kemungkinan  ditemukannya  bakteri  penye-
bab  busuk  buah  cabai  yang  berbeda  antara negara  tropis  dan  sub  tropis.  Berdasarkan permasalahan tersebut, penelitian ini bertujuan  untuk  mengisolasi  dan  menguji sifat biokimia  bakteri pembusuk dalam buah cabai rawit.

## METODE PELAKSANAAN

## Bahan
Bahan yang  dipergunakan  dalam penelitian  ini  adalah  buah  cabai  rawit  yang membusuk  yang  dibeli  dari  supermarket  di Salatiga, Nutrient  Agar (Merck),  larutan kristal violet (Sigma-Aldrich), larutan oksalat  (Sigma-Aldrich),  larutan  iodium  5% (Sigma-Aldrich),  larutan  safranin  (Sigma- Aldrich),  larutan  glutamin  (Merk),  pepton (Merck), trypton e  (Merck), bacterial  agar (Oxoid), yeast  extract (Merck),  kalsium karbonat (Sigma-Aldrich), dektrose (Merck), starch  agar (Sigma-Aldrich), phenol  red broth  glucose (Merck),  glukosa  (Merck), laktosa  (Merck), sodium  cloride (Merck), KOH  40%,  Ca 3 (PO 4 ),  (NH4) 2 SO 4 ,  NaCl, MgSO 4 .7H 2 O,  KCl,  MnSO 4 ,  FeSO 4 ,  kuning telur, kovac’s  reagent (Sigma-Aldrich), methyl red (Sigma-Aldrich) , α-naftol (Sigma-Aldrich),  etanol  (Merck),  dan aseton (Merck).
Alat
Alat  yang  diperlukan  meliputi:  cawan petri, tabung reaksi, laminar air flow cabinet , inkubator  (Memmert),  jarum  ose needle , micro  pippet ,  mikroskop  cahaya  (Olympus CX-23).

## Tahapan penelitian
Tahapan  penelitian  yang  dilakukan untuk isolasi, purifikasi, hingga karakterisasi biokimia bakteri pembusuk buah cabai rawit (diadaptasi  dari  Kashyap,  Chandra,  dan Tewari , 2000;  Hadas, et.  al., 2001)  adalah sebagai berikut:

## Isolasi bakteri
Media  NA  disiapkan  untuk  proses isolasi  Setelah  media  tersebut  sudah  siap digunakan,  cabai  rawit  yang  membusuk (terlihat layu,  kulit  buah  lembek,  berair, dan berbau)  dispray  dengan  etanol  pada  bagian permukaan  kulit  buah,  lalu  bagian  dalam dicuplik  dengan  jarum  ose  dan  digoreskan pada  permukaan  media  NA  dengan  metode kuadran.  Kemudian,  sampel  diinkubasi selama 24–48 jam pada suhu 37 0 C.

## Purifikasi bakteri
Purifikasi  dilakukan  pada  saat  media yang  sudah  ditumbuhi  bakteri  dalam  proses isolasi.  Kemudian,  koloni  bakteri  tersebut dicuplik  dan  digoreskan  ulang  pada  media NA  yang  baru  hingga  memperoleh  isolat yang  seragam/terpisah.  Untuk  memastikan kemurnian  isolat,  proses  ini  dilakukan sebanyak  3  kali  dan  diamati  morfologi selnya.

## Karakteristik biokimia bakteri
Karakteristik  biokimia  bakteri  pembu- suk  pada  cabai  rawit  dilakukan  dengan  uji katalase,  fosfatase, lechitinase, Yellow Pigmen pada YDC ( Yeast Dextrose Calcium- carbonate ), pektinase, hidrolisis pati, fermentasi  laktosa,  indol, methyl  red,  voges- proskauer (Wolfe  and  Amsterdam,  1968; McDevitt, 2009; EPPO, 2013;).
Tahapan  penelitian  tersebut  dapat dideskripsikan  melalui  diagram  alir  berikut dibawah ini:
Gambar 1.  Diagram alir penelitian
Data  diperoleh  melalui  pengamatan morfologi  sel  dan  koloninya  serta  hasil  uji biokimia, kemudian dianalisis dan diintrepretasi secara diskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Isolasi dan purifikasi
Isolasi dan purifikasi merupakan tahapan  yang  penting  untuk  memisahkan atau  memindahkan  mikroba  yang  tercampur dari  lingkungannya,  sehingga  diperoleh kultur  murni  atau  biakan  murni,  seperti koloni  bakteri  yang  isolasi  dari  cabai  rawit yang membusuk (Gambar 1.).
Gambar 2.  Morfologi  Koloni  Bakteri  Pem- busuk Buah Cabai Rawit
Gambar 1. menunjukkan bahwa koloni bakteri yang membusukkan buah cabai rawit membentuk  tepian  koloni  yang  bergerigi dengan  permukaan  koloni  terlihat  halus  dan mengkilap. Koloni tersebut berwarna kuning setelah  diinkubasi  48  jam,  sedangkan pengamatan  gram  menunjukkan  bahwa  sel bakteri pembusuk buah cabai rawit berbentuk batang atau basil (Gambar 2).
Gambar 3.  Pengecatan  gram  sel  bakteri pembusuk buah cabai rawit
isolasi morfologi sampel purifikasi uji biokimia
Gingichashvili et  al. (2020)  melapor- kan bahwa Bacillus mempunyai kemampuan adaptasi  dalam  berbagai  media  dan  kondisi lingkungan,  sehingga  morfologi  koloni Bacillus dapat  mengekspresikan  warna maupun  bentuk  koloni  yang  berbeda  pada saat  ditumbuhkan  pada  berbagai  media. Lebih lanjut, Claus dan Barkeley (1986) dan Lu , Guo, dan  Liu (2018) menyatakan bahwa genus Bacillus mempunyai  sifat  fisiologi- biokimia  yang  menarik  karena  masing- masing  spesiesnya  mempunyai  kemampuan yang  berbeda-beda,  diantaranya:  (1)  mampu mendegradasi  senyawa  organik,  seperti: protein,  pati,  selulosa,  hidrokarbon;  (2) mampu  mengikat  nitrogen  yang  berperan dalam  nitrifikasi  dan  denitrifikasi;  (3) mampu  menghasilkan  antibiotik;  (5)  serta memiliki  sifat  khemolitotrof,  aerob  atau fakultatif anaerob, asidofilik, psikrofilik, atau termofilik.  Untuk  itu,  maka  uji  biokimia bakteri  pembusuk  buah  cabai  rawit  ini  perlu dilakukan  agar  dapat  memahami  karak- teristik yang khas.

## Karakteristik biokimia
Pengujian  biokimia  didasarkan  pada ekspresi hasil metabolisme yang  diakibatkan oleh aktivitas enzim yang dimiliki oleh suatu spesies  bakteri.  Setiap  hasil  uji  biokimia dibandingkan  dengan  bakteri Xanthomonas campetris ataupun Erwinia carotovora seperti yang pernah dilakukan oleh Black, et al (1991).  Tabel  1.  merupakan  hasil pengujian metabolisme yang memper- lihatkan sifat-sifat atau karakteristik biokimia bakteri pembusuk dalam buah cabai rawit.
Tabel 1.  Karakteristik  Biokimia  Bakteri Pembusuk dalam Cabai Rawit
No Jenis Uji Biokimia Hasil Uji 1 Katalase positif 2 Fosfatase positif 3 Lechitinase positif 4 Yeast Dextrose Calcium Carbonate (YDC) positif 5 Pektinase negatif 6 Hidrolisis pati negatif 7 Fermentasi laktosa negatif 8 Indol negatif 9 Methyl red positif 10 Voges-Proskeur
negatif
Kemampuan  bakteri  dalam  meng- hasilkan enzim katalase ditunjukkan kemam- puannya dalam memecahkan H 2 O 2 (hidrogen perioksida)  menjadi  H 2 O  (air)  dan  O 2 (oksigen).  Hasil  positif  dengan  indikator adanya  gelembung  disekitar  koloni  saat ditetesi  H 2 O 2 .  Adanya  gelembung  udara menunjukkan  proses  pemecahan  H 2 O 2 oleh enzim  katalase  yang  dihasilkan  oleh  bakteri itu sendiri untuk membentuk sistem pertahanan dari toksik H 2 O 2 yang dihasilkannya (Lay, 1994; Reiner, 2010) . Uji  fosfat  positif  yang  ditandai  zona bening  media pikovskaya  agar di  sekitar koloni  mengindikasikan  adanya  aktivitas enzim  fosfatase  yang  dilakukan  oleh  jenis bakteri  pelarut  fosfat.  Pada  umumnya,  efek pelarutan  fosfat  disebabkan  oleh  adanya produksi  asam  organik,  seperti:  asam  asetat, asam format, asam laktat, asam oksalat, asam malat,  dan  asam  sitrat  yang  dihasilkan  oleh metabolisme  bakteri  (Khan et  al., 2009). Media pikovskaya  agar mempunyai  warna putih  keruh  disebabkan  kandungan  tri- kalsium fosfat Ca 3 (PO 4 ) 2 sebagai fosfat tidak larut dalam medium . Zona bening pada agar yang  terbentuk  di  sekitar  koloni  akibat pelarutan suspensi trikalsium fosfat
Ca 3 (PO 4 ) 2 .
Kelompok  bakteri  yang  mempunyai enzim lechitinase ditunjukkan  dengan  ke- mampuannya  dalam  memecahkan  lesitin (trigliserida)  menjadi  digliserida  (Esselman and  Liu,  1961).  Uji  positif lechitinase menghasilkan zona buram yang menyebar di tepi  koloni  saat  bakteri  diinokulasikan  ke dalam media YPA yang ditambahkan dengan kuning telur dan NaCl 0,9%. Hasil positif ini mengkonfirmasi  bahwa  bakteri  pembusuk pada buah cabai rawit ini dapat memproduksi enzim lechitinase .  Sedangkan,  pengujian yellow  pigment bertujuan  untuk  mengetahui kemampuan  bakteri  memproduksi  pigmen karotenoid  (Akbar et  al., 2015),  yang ditunjukkan  dengan  koloni  bakteri  yang berwarna kuning  pada medium YDC  setelah diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 48 jam. Pektinase  merupakan  enzim  yang spesifik menghidrolisis pektin melalui reaksi depolimerisasi ( hydrolase dan lyase ) dan de-
esterifikasi  ( esterase ).  Dalam  lingkungan alaminya,  pektinase  diproduksi  oleh  bakteri, khamir,  maupun  kapang  (Kapoor et  al., 2000;  Kashyap,  Chandra,  dan  Tewari , 2000 , 2000). Hasil uji pektinase negatif pada media CVP  ( Crystal  Violet  Pectate )  menunjukkan bahwa  bakteri  pembusuk  buah  cabai  rawit tidak memproduksi enzim pektinase, sehingga  tidak  menunjukkan  zona  bening  di sekitar pertumbuhan koloni.
Hasil negatif di sekeliling medium agar pati  yang  tidak  tampak  zona  bening  juga mengindikasikan  bahwa  bakteri  tersebut tidak memiliki enzim amilase untuk menghidrolisis  pati  maupun  memanfaatkan pati  sebagai  sumber  energi  dan  karbon. Jika suatu  spesies  mampu  menghidrolisis  pati, maka  hasil  penguraian  senyawa  tersebut dapat menghasilkan maltosa, yang kemudian maltosa  ini  dihidrolisis  lebih  lanjut  menjadi glukosa  (Purba,  2009).  Penelitian  yang terkait  dengan  kemampuan Bacillus dalam mendegradasi  pati  dilakukan  oleh  Saputra, Triwidodo,  dan  Arif  (2015),  yang  hasil menunjukkan bahwa Bacillus spp . pada buah tomat  mampu  menghidrolisis  pati  dengan sangat baik.
Pengujian  fermentasi  laktosa,  indol, methyl red, voges-proskauer dilakukan untuk mengetahui  sifat-sifat  bakteri  yang  lebih spesifik, khususnya golongan Enterobacteriaceae (Wolfe  dan  Amsterdam, 1968;  McDevitt,  2009). Hasil  negatif  pada uji  fermentasi  laktosa  ditunjukkan  dengan media  kultur  yang  berubah  warna  menjadi merah  muda,  sehingga  bakteri  pembusuk buah  cabai  rawit  tidak  dapat  memanfaatkan laktosa sebagai sumber karbon dan memfermentasikannya  menjadi  asam  laktat. Sedangkan  uji  indol  menunjukkan  kapasitas dan  kemampuan  bakteri  dalam memecahkan senyawa  indol  dari  asam  amino  triptofan, yang  hasil  positifnya  ditandai  dengan terbentuknya  cincin  merah  terang  di  atas permukaan  medium  dalam  tabung  setelah penambahan kovac’s reagent . Namun demikian, bakteri pembusuk buah cabai rawit menunjukkan  hasil  negatif  dalam  pengujian indol.
Produksi asam selama pemecahan gula (glukosa)  dalam  proses  fermentasi  dapat dideteksi  dengan  uji methyl  red .  Hasil  uji yang positif ditunjukkan setelah penambahan indikator methyl  red dalam  media  kaldu- glukosa  dengan  bufer  pepton  dan  fosfat dipotassium  berubah  menjadi  merah  pada permukaan  koloni  seperti  ditunjukkan  pada Tabel  1.  Fermentasi  glukosa  ini  dapat menghasilkan  sejumlah  besar  asam  laktat, asam  asetat,  asam  suksinat,  asam  format, etanol, karbondioksida, dan hidrogen. Sedangkan  uji voges-proskauer digunakan untuk  mengidentifikasi  bakteri  yang  mampu memfermentasikan  karbohidrat  menjadi  2,3- butanadiol sebagai produk utama. Penambahan KOH 40% dan larutan α-naphtol 5% dalam etanol dapat mengindikasikan adanya asetolin ( asetilmethylcarbinol ).  Asetolin  merupakan senyawa  utama  dalam  pembentukan  2,3- butanadiol ( McDevitt,  2009).  Hasil  yang negatif  ditunjukkan  setelah  penambahan KOH tidak terjadi perubahan warna menjadi merah  muda  dalam  media  yang  telah dikultivasi bakteri pembusuk cabai rawit.
Berdasarkan  pengamatan  morfologi dan  berbagai  uji  biokimia  tersebut  diatas dapat  diatas,  bakteri  pembusuk  pada  cabai rawit  memiliki  kemampuan  melarutkan fosfat yang identik  dengan  golongan rhizobakteri,  diantraanya Bacillus spp.  dan Pseudomonas spp.  Khan et  al., (2009) menyatakan bahwa bakteri Bacillus spp. dan Pseudomonas spp.  merupakan  golongan bakteri yang dapat memperbaiki ketersediaan fosfat  di  dalam  tanah  secara  efektif. Pengujian  pektinase  negatif  mengkonfirmasi bahwa bakteri ini tidak sama dengan Erwinia carotovora . Hadas (2001) melaporkan bahwa bakteri E.  carotovora dalam  pengujian pektinase  terdapat  hasil  yang  positif . Sedangkan  pengujian  hidrolisis  pati  dengan hasil  negatif  pada  sampel  menunjukkan bahwa  bakteri  pembusuk  buah  cabai  rawit berbeda  dengan  pada  bakteri Xanthomonas campestris  pv.  campetris yang  mampu menghidrolisis  pati  (Radunovic,  2012). Dengan  demikian,  bakteri  tersebut  diduga tidak  dekat  dengan  bakteri Xanthomonas sp.
Selanjutnya, melalui pengujian uji fermentasi laktosa,  indol, methyl  red dan voges- proskaeur menunjukkan  bahwa  bakteri  yang diujikan  mengalami  perbedaan  karakteristik dari uji-uji biokimia sebelumnya.
Berdasarkan Bergey’s  Manual  of Systematic Bacteriology (Krieg et al., 2010), uji  laktosa  dan  uji  indol  yang  dengan  hasil negatif  menunjukkan  sifat  bakteri  pembusuk pada buah cabai rawit tersebut dekat dengan bakteri Yersinia pestis dan Y. pseudotuberculosis, Shigella sonnei, Serratia marcescens dan S.  liquefaciens,  Proteus penneri dan P.  mirabilis,  Erwinia  cacticida, serta Salmonella  bongori  dan  S.  enterica. Sedangkan  hasil  positif  pada  uji methyl  red dan  negatif  pada uji voges-proskauer dapat mengindikasikan bahwa
Citrobacter
freundii, Serratia fonticola, Klebsiella pneumoniae .  Sehingga,  ke-empat  uji  ini mengkonfirmasi  bahwa  bakteri  pembusuk pada  buah  cabai  tidak  sama  dengan karakteristik Erwinia  carotovora seperti yang dilaporkan oleh Black et al., (1991).

## KESIMPULAN
Berdasarakan  hasil  penelitian  disim- pulkan bahwa bakteri pembusuk dalam buah cabai  rawit,  selnya  berbentuk  batang  dan koloninya  bergerigi  dengan  permukaan koloni terlihat halus dan mengkilap. Karakteristik  biokimia  melalui  uji  katalase, fosfatase, lechitinase, yellow pigment, pektinase, hidrolisis pati menunjukkan bahwa  bakteri  tersebut  mempunyai  aktivitas enzim  katalase,  aktivitas  enzim  fosfatase, mampu  memproduksi lechitinase. mampu memproduksi  karotenoid,  namun  bakteri tersebut  tidak  dapat  menghidrolisis  pati  dan pektin.  Karakteristik  tersebut  menunjukkan ciri-cirinya  yang  tidak  mendekati  bakteri Xanthomonas campestris .  Sedangkan  uji fermentasi  laktosa,  indol, methyl  red, dan voges-proskaeur menunjukkan bahwa bakteri  pembusuk  buah  cabai  rawit  tidak sama karakteristiknya dengan spesies bakteri Erwinia  carotovora. Berdasarkan  observasi moroflogi  dan  uji  biokimia  ini  ini,  maka untuk  memastikan  spesies  bakteri  pembusuk
pada  cabai  rawit  tersebut  perlu  dilakukan identifikasi  molekuler  melalui  metode  16S rRNA pada penelitian selanjutnya.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami  mengucapkan  terima  kasih kepada  Universitas  Kristen  Satya  Wacana yang  telah  memfasilitasi  penelitian  ini melalui Hibah Penelitian Internal Wajib.

## DAFTAR PUSTAKA
Acedo, A. L. (2012). Postharvest technology for  fresh  chili  pepper  in  Cambodia, Laos,  and  Vietnam .  Tainan:  Asian
Vegetables Research and Development Center.
Akbar, A., Ahmad, M., Azra, Neelam, Khan, S.  Z.,  &  Ahmad,  Z.  (2015). Characterization of the causal organism  of  soft  rot  of  tomatoes  and other vegetables and evaluation of its most  aggressive  isolates. American Journal  of  Plant  Sciences ,  6 , 511– 517.
Badan  Pusat  Statistik.  (2015). Distribusi perdagangan  komoditas  cabai  merah Indonesia  2015 .  Jakarta:  Badan  Pusat Statistik.
Berke,  T.,  Black,  L.  L.,  Talekar,  N.  S.,
Wang, J. F., Gniffke, P., Green, S. K., Wang,  T.  C.,  &  Morris,  R.  (2005). Suggested  cultural  practices  for  chili pepper . In: CENTER,  A.  V.  R.  A.  D. (ed.).  Shanhua:  Asian  Vegetables Research  and  Development  Center— The World Vegetable Center.
Black, L. L., Green, S. K., Hartman, G. L., &
Poulos, J. M. (1991). Peppers diseases:  a  field  guide. Taipei:  Asian
Vegetables
Research and
Development Centre.
Czajkowski, R, Perombelon, M. C. M., Jafra, S.,  Lojkowska,  E.,  Potrykus,  M.,  van der  Wolf  J.  M.,  &  Sledz,  W.  (2015). Detection, identification and differentiation  of Pectobacterium and Dickeya species causing potato
blackleg and tuber soft rot . Ann. Appl. Biol ., 166 (1), 18–38.
Claus,  D.,  &  Berkeley,  R.  C.  W.  (1986). Genus  Bacillus , Bergey’s  manual  of sistematic  bacteriology .  Baltimore: Lippincott Willians dan Wilkins. Dermawan,  R.,  &  Harpenas,  A.  (2010). Budidaya  cabai  unggul,  cabai  besar, cabai  keriting,  cabai  rawit,  dan paprika . Jakarta: Penebar Swadaya. EPPO. (2013). Xanthomonasspp.
(Xanthomonas euvesicatoria,
Xanthomonas  gardneri,  Xanthomonas perforans,  Xanthomonas  vesicatoria) causing  bacterial  spot  of  tomato  and sweet  pepper .  Paris:  European  Plant Protection Organization
Esselman,  M.  T.,  &  Liu,  P.  V.  (1961).
Lecithinase production by gram- negative bacteria. J. Bacteriol., 81 (6), 939-945.
FAO. (2014). Budidaya cabai yang baik dan benar .  Jakarta:  Food  and  Agriculture
Organization dan Kementerian Pertanian Republik Indonesia. Gingichashvili, S., Duanis-Assaf, D., Shemesh.,  M.,  Featherstone,  J.  D.  B., Feuerstein,  O.,  &  Steinberg,  D. (2020).  The  adaptive  morphology  of Bacillus  subtilis bioﬁlms:  a  defense mechanism against bacterial starvation. Microorganisms,
28 (62),doi:10.3390/microorganisms8010
062
Hadas,  R.,  Kritzman,  G.,  Gefen,  T.,  &
Manulis, S. (2001). Detection, quantification  and  characterization  of Erwinia  carotovora  ssp.  carotovora contaminating  pepper  seeds .  Plant Pathology , 50 (1), 117-123.
Kapoor,  M.  Q.  K.,  Bhusan,  B.  B.,  Dadhich, K.  S.,  &  Hundal,  G.  S.  (2000). Production and partial purification and characterization  of  a  thermo-alkali stable polygalacturonase from Bacillus sp.  MG-CP-2.  Process.  Biochem., 36 (1), 467-473.
Kashyap,  D.  R.,  Chandra,  S.  K.  A.,  & Tewari, R. (2000). Production, purification  and  characterization  of
pectinase  from  a Bacillus  sp.  DT7. World  J.  Microbiol.  Biotechnol .,  16
(1), 277−282.
Khan  A.A,  Jilani  G,  Akhtar  M.S,  Naqvi S.M.S,  & Rasheed  M. (2009).
Phosphorus so-lubilizing bacteria: occurrence, mechanisms and their role in crop production. J. Agric. Biol. Sci.,
1 (1), 48-58.
Krieg,  N.  R.,  Ludwig,  W.,  Whitman,  W.  B.,
Hedlund, B. P., Paster, B. J., Staley, J. T.,  Ward,  N.  &  Brown,  D.  (2010). Bergey’s manual of systematic bacteriology ,  2nd  ed.,  vol.  4,  New York: Springer-Verlag.
Lay,  B.  W.  (1994). Analisis  mikroba  di laboratorium . Jakarta: PT Raja Grafindo Persada.
Lu , Z., Guo, W., & Liu, C. (2018). Isolation, identification  and  characterization  of novel Bacillus subtilis. Vet. Med. Sci. , 80(3): 427–433. doi: 10.1292/jvms.16- 0572
McDevitt,  S.  (2009).  Methylred  and  voges- proskauer  test  protocol.  New  York: American Society for Microbiology.
Purba,  E.  (2009). Hidrolisis  pati  ubi  kayu (Manihot Esculenta) dan pati ubi jalar (Impomonea batatas) menjadi glukosa secara  cold  process  dengan  acid fungal  amilase  dan  glukoamilase . Skripsi. Lampung: Universitas Lampung,
Prajnanta,  F.  (2007). Agribisnis  cabai hibrida . Jakarta: Penebar Swadaya.
Radunovic,  D.,  &  Balaz,  J.  (2012).
Occurrence of Xanthomonas campestris  pv.  campestris (Pammel, 1895)  Dowson  1939,  on Brassicas in Montenegro .  Pestic.  Phytomed. ,  27 (2), 131-140.
Reiner,  K.  (2010).  Catalase  test  protocol. New  York:  American  Society  for Microbiology.
Saputra,  R.,  Triwidodo,  A.,  &  Arif,  W. (2015).  Uji  aktivitas  antagonistik beberapa  isolat Bacillus  spp. terhadap penyakit layu bakteri (Ralstonia solanacearum) pada beberapa varietas
tomat  dan  identifikasinya. Biodev. Indo., 1 (5), 1116-1122.
Sembiring,  N.N.  (2009).  Pengaruh  jenis bahan  pengemas  terhadap  kualitas produk cabai merah (Capsicum annum L ). Tesis. Medan: Universitas Sumatera Utara.
Sunarmani.  (2012). Teknologi  penanganan
pascapanen  cabai .  Makalah  Pelatihan
Spesialisasi Widyaiswara. Bogor:
BBPP Pascapanen Pertanian.
Suyanti.  (2009).  Membuat  aneka  olahan cabai. Jakarta: Penebar Swadaya.
Wiryanta.  (2006). Bertanam  cabai  pada musim hujan . Tangerang: Agromedia. Wolfe, M. W. & Amsterdam D. (1968). New diagnostic system for the identification  of  lactose-fermentating gram-negative rods. Applied Microbiol, 16 (10), 1528-1531.