## IDENTIFIKASI Escherichia coli PADA MAINAN ANAK DI ARENA PERMAINAN DREAM LAND
Vauzya 1) , Mujahidah Basarang 1) , Hasnah 1)
1) Akademi Analis Kesehatan Muhammadiyah Makassar Alamat Korespondensi: vauzya912@gmail.com

## Abstrak
Mainan merupakan media hiburan dan media edukasi yang memungkinkan anak mempelajari hal- hal di sekitarnya sehingga dapat mengoptimalkan perkembangan otak serta daya pikir. Selain itu mainan juga dimanfaatkan oleh orang tua sebagai media untuk mengenali bakat anak sejak dini agar  dapat  dikembangkan  lebih  lanjut.  Akan  tetapi  mainan  yang  digunakan  secara  bergantian khususnya mainan di arena permainan dapat menjadi alat penyebaran bakteri seperti Escherichia coli.  Bakteri  ini  dapat  menyebar  melalui  beragam  cara,  salah  satu  di  antaranya  ialah  melalui sentuhan.  Escherichia  coli    ketika berada di  luar  usus  atau  jumlahnya  meningkat  dalam  saluran pencernaan maka akan menjadi patogen dan menyebabkan beberapa gangguan kesehatan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui keberadaan bakteri Escherichia coli pada mainan anak di  arena  permainan  Dream  Land.  Jenis  penelitian  ini  merupakan  observasi  laboratorik  untuk mengidentifikasi bakteri Escherichia coli pada mainan anak di arena permainan Dream Land. Dari 5  swab  sampel  mainan  anak  di  arena  permainan  Dream  Land  ditemukan  pertumbuhan  bakteri Gram positif pada media BHIB. Akan tetapi pada media Eosin Methylen Blue Agar (EMBA) tidak menunjukkan adanya pertumbuhan Escherichia coli. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa tidak ditemukan Escherichia coli pada mainan anak di arena permaian  Dream Land. Kata kunci : Mainan Anak , Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Perkembangan  anak  usia  dini  (usia pra  sekolah)  merupakan  “ golden  age period ”,  atau  masa  emas  untuk  seluruh aspek  perkembangan manusia,  baik  fisik, kognisi  emosi  maupun  sosial.  Anak berkembang  melalui  interaksi  dengan lingkungan.  Anak-anak  adalah  individu yang unik, mereka memiliki daya imajinasi yang  sangat  luas  dan  belum dibatasi  oleh realita  dan  konteks  sebagaimana  orang dewasa.  Karakter  ini  menjadikan  mereka bisa  mengapresiasi  hal-hal  yang  menurut orang  dewasa  sudah  tak  begitu  menarik, misalnya  bermain.  Bermain  berasal  dari kata  “main”  yang  berarti  melakukan perbuatan  untuk  bersenang-senang,  baik dengan  menggunakan  alat-alat  tertentu ataupun  tidak  (KBBI,  2008).  Alat-alat yang  digunakan  untuk  bermain  disebut dengan mainan.
Mainan  adalah  media  hiburan  dan media edukasi, yakni media yang memungkinkan  anak  mempelajari  hal-hal di sekitarnya, untuk meningkatkan perkembangan  otak  serta  daya  pikir  yang optimal. Selain itu mainan juga
dimanfaatkan  oleh  orang  tua  sebagai media  untuk  mengenali  bakat  anak  sejak dini agar dapat dikembangkan lebih lanjut. Mainan memiliki beragam jenis tergantung  bentuk  dan  fungsinya,  mainan yang  baik  adalah  mainan  yang  dapat mengasah  kreativitas,  interaksi,  rasa keingintahuan,  serta  dapat  memberikan stimulasi  pada  otak  anak  agar  dapat bekerja  dengan  baik.  Pada  penelitian  ini mainan  yang  dijadikan  sebagai  sampel adalah jenis mainan yang hanya dimainkan oleh  anak  usia  dini  yaitu  seperti  jenis mainan bola plastik, prosotan, kuda plastik, mobil-mobil dan kuda koin.
Namun  permainan  anak-anak  ini bisa  menjadi  alat  menularnya  berbagai penyakit.  Berdasarkan  penelitian  yang telah dilakukan oleh Putri (2017) ditemukan  bahwa  banyak  mainan  anak yang  mengandung  berbagai  jenis  bakteri patogen seperti bakteri Bacillus sp. Bakteri tersebut  menjadi  jenis  bakteri  yang teridentifikasi  sebagai  bakteri  patogen yang terdapat pada mainan anak.
Mainan  pada  anak  yang  sering digunakan dalam kondisi tidak steril dapat
menyebabkan  resiko  kesehatan  yang membahayakan.  Tangan  bisa  menjadi media  yang  paling  banyak  menularkan penyakit.  Bahkan  80%  penyakit  bisa ditularkan melalui tangan, khususnya pada anak-anak.  Tangan  anak  yang  kotor  jika menyentuh  mainan  akan  menyebabkan bakteri  berpindah  ke  mainan  yang disentuhnya. Penyakit yang paling banyak menular  melalui  tangan  adalah  yang disebabkan  oleh  bakteri,  seperti  diare. Bakteri penyebab diare bisa menempel di tangan,  yang  kemudian  berpindah  ketika seseorang memegang benda lain yang akan dipegang oleh orang lain. Salah satu jenis bakteri penyebab diare adalah Escherichia coli.
Escherichia  coli adalah  bakteri yang  merupakan  flora normal dalam usus, namun pada keadaan tertentu ketika berada diluar  usus  atau  jumlahnya  meningkat dalam  saluran  pencernaan  maka  akan menjadi patogen dan menyebabkan beberapa  gangguan  kesehatan.  Bakteri
Escherichia  coli dapat  menyebar  melalui beragam cara, salah satu di antaranya ialah melalui sentuhan. Terlebih apabila mainan tersebut  adalah  mainan  yang  dimainkan secara  bergantian  oleh  sejumlah  anak, maka  bakteri  yang  telah  berpindah  ke mainan akan berpindah kembali ke tangan anak  lain  yang  memainkan  mainan tersebut.  Bahayanya  jika  anak  tidak mencuci  tangan  setelah  bermain,  maka bakteri tersebut akan masuk dengan mudah ke  dalam  pencernaan  anak  melalui makanan  atau  jari  yang  dimasukkan  ke dalam mulut sehingga dapat menyebabkan berbagai  macam  penyakit  seperti  diare, muntah-muntah, feses mengandung banyak lendir, dan tidak bercampur dengan darah. Berdasarkan  survei  yang  telah dilakukan  kebanyakan  anak-anak  yang bermain di Dream Land tidak
memperhatikan  kebersihan  mainan yang ingin dimainkan, sehingga anak-anak dapat terkontaminasi mikroorganisme  yang  ada pada  mainan  seperti  bakteri Escherichia coli. Olehnya peneliti akan
mengidentifikasi  bakteri Escherichia coli pada mainan anak di arena Dream Land .

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah swab, mikroskop, objek glass, gelas ukur, tabung reaksi,  erlenmeyer,  cawan  porselen, sendok  tanduk,  pipet  voleme,  timbangan analitik, autoclave, cawan petri, penangas air,  beaker  glass , batang  pengaduk,  labu ukur, inkubator, lamari es, oven, ose bulat, nal dan rak tabung.
Bahan  yang  digunakan  adalah alkohol 70%, bunsen , NaCll 0,9%, sampel mainan  anak,  media  BHIB,  media  TSIA, media MRVP, media SIM, media sukrosa, media glukosa, media laktosa, media urea , dan aquadest.
Pembuatan  Media  BHIB,  EMBA, TSIA, SIM, SCA, Urea Masing-masing  media  BHIB,  EMBA, TSIA, SIM, SCA, Urea, ditimbang sesuai kebutuhan  kemudian  dimasukkan  ke dalam  labu  Erlenmeyer.  Ke  dalam  tiap Erlemeyer  yang  berisi  ditambahakan aquades kemudian dihomogenkan menggunakan hotplate .  Media  disterilkan dalam autoclave selama  15  menit  dengan suhu  121 0 C,  dikeluarkan  dingin  dan masukkan dalam lemari es.
Pembuatan media gula-gula Ditimbang pepton water, dibuat dalam 25 ml aquadest , kemudian larutan dihomogenkan  menggunakan hot  plate , ditambahkan  2,5  ml  (1%)  phenol  red, disterilkan  dalam autoclave selama  15 menit  dengan  suhu  121 0 C.  Media  0,5  gr glukosa, dibuat dalam 50 ml peptone water yang  telah  disterilkan,  kemudian  larutan dihomogenkan ,  di  pipet  5  ml  kemudian dimasukkan ke  dalam tabung reaksi yang berisi  tabung  durham,  disterilkan  dalam autoclave selama  15  menit  dengan  suhu 121 0 C,  diamkan  kemudian  masukkan dalam lemari es.
Preparasi Sampel
Menyiapkan  alat swab ,  Kemudian, mensterilkan  tangan  dengan  alkohol  70% siapkan bunsen, swab kemudian diusapkan
pada  bagian  depan,  belakang,  dalam,  dan luar mainan anak sebanyak 3 kali.
Kemudian swab yang telah digunakan untuk mengusap mainan sampel  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi  yang  berisi  BHIB  lalu  ditutup dengan  menggunakan  penutup  tabung reaksi dan segera dibawa ke laboratorium untuk diinkubas i selama 1 x 24 jam dengan suhu 37 0 C.
Sampel yang sudah diambil kemudian  ditanam  pada  media  BHIB. Dengan  cara  mesterilkan  mulut  tabung kemudian sampel swab mainan dimasukkan kedalam media hingga menyentuh dasar media lalu (dihomogenkan),  kemudian  mesterilkan kembali  mulut  tabung  dan  segera  ditutup dengan  penutup  tabung  reaksi  Lalu menginkubasi media BHIB pada inkubator selama  24  jam  dengan  suhu  37 0 .  Adanya kekeruhan  pada  media  ini  menandakan adanya pertubuhan bakteri.

## Kultur pada Media Selektif
Pemindahan  bakteri  dari  media BHIB  ke  media  selektif,  setelah inkubasi kemudian  dilakukan  pemindahan  bakteri yang tumbuh pada media BHIB ke media selektif yaitu EMBA dengan cara mengambil  bakteri  dengan  menggunakan ose pada media BHIB kemudian digoreskan  ke  permukaan  media  EMBA, dengan  tehnik  goresan  secara  zig  zag. Setelah diinkubasi  selama  24 jam  dengan suhu  37 0 .  Lalu  dilakukan  pengamatan pewarnaan gram.
Uji Biokimia Dengan  menggunakan ose ,  diambil koloni  dari  biakan  Suspensi,  kemudian ditanam pada media penanaman dilakukan dengan ditusuk media TSIA sampai dasar tabung  dan  buat  goresan  pada  daerah miring,  kemudian  diinkubasi  selama  24 jam  didalam  inkubator  pada  suhu  37 0 C, jika E.coli tumbuh  pada  media  TSIA lereng  dan  dasar  akan  berwarna  kuning (acid-acid),  tidak  membentuk  H2S  dan terdapat gas.
Dengan  menggunakan  ose,  diambil koloni  dari  biakan Suspensi ,  kemudian
ditanam  pada  media  SIM  dengan  cara menusuk ose tegak  lurus.  kemudian diinkubasi selama  24  jam  didalam
inkubator pada suhu 37 0 C. Dengan  menggunakan ose ,  diambil koloni  dari  biakan Suspensi ,  kemudian ditanam  pada  MRVP  dengan  cara ose dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang berisi media cair MRVP kemudian diaduk- aduk, kemudian diinkubasi pada suhu 370 C selama 24 jam, setelah diinkubasi media cair MRVP, kemudian dibagi menjadi dua untuk  dilakukan  uji  MR  dan  VP,  uji  MR dilakukan  dengan  meneteskan  cairan methyl  red  sebanyak  5  tetes,  uji  VP dilakukan  dengan  meneteskan  larutan KOH 10 o sebanyak 5 tetes, uji MR dan VP dikatakan  positif  jika  media  berubah menjadi warna merah.
Dengan  menggunakan ose ,  diambil koloni  dari  biakan  Suspensi,  kemudian ditanam pada media SCA. Cara penanaman  dilakukan  dengan  ditusuk media SCA sampai dasar tabung dan buat goresan  pada  daerah  miring,  kemudian diinkubasi selama  24  jam  didalam inkubator pada suhu 370 C.
Dengan  menggunakan ose ,  diambil koloni  dari  biakan Suspensi ,  kemudian ditanam pada media gula-gula dengan cara ose  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi yang berisi media  cair  kemudian  goyang- goyangkan secara berurutan pada glukosa, laktosa,  dan  sukrosa.  ditata  dalam  rak tabung  reaksi  kemudian diinkubasi di incubator selama 24 jam pada suhu 37°C.

## Pewarnaan bakteri
Untuk pewarnaan bakteri digunakan pewarnaan  gram  dengan  cara  diambil koloni  pada  media  selektif  kemudian dibuat  diratakan  pada objek  glass , kemudian  difiksasi objek  glass pada bunsen  sampai  kering  setelah  kering kemudian  objek  glass  diwarnai  lalu digenangi  zat  warna kristal  violet selama 1-3  menit,  kemudian  dibilas  dengan  air bersih yang mengalir, dilanjutkan
diteteskan  larutan  lugol  hingga  menutupi seluruh  permukaan  sediaan,  didiamkan
selama 20 detik, kemudian dibilas dengan air  bersih  yang  mengalir,  dilanjutkan dengan alcohol 95%  hingga  warnanya memudar,  kemudian  dengan  air  bersih yang  mengalir,  dan  terakhir  dengan menggunakan fuchsin selama  2-3  menit, kemudian  dibilas  dengan  air  mengalir. Preparat  kemudiaan  dikeringkan,  lalu diamati  dibawah  mikroskop. Grap positif apabila  bakteri  berwarna  ungu  dan  gram negatif apabila bakteri berwarna merah.

## Analisis data
Data  dari  penelitian  ini  akan diperoleh   secara deskripti dan disajikan dalam bentuk tabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  penelitian  Identifikasi Escherichia  Coli Pada  Mainan  Anak  di Arena  Permainan DREAM  LAND yang diperoleh data sebagai berikut:
Tabel  2.  Hasil  pemeriksaan    penelitian  Identifikasi  Escherichia  Coli  pada    Mainan
Anak Di Arena Permainan DREAM LAND Jenis Mainan Hasil Pemeriksaan Media BHIB Uji Mikroskopik Media EMBA Bola plastik Keruh Coccus gram positif Negatif Mobil-mobil Keruh Basil gram positif Negatif Kuda plastik Keruh Coccus gram positif Negatif Kuda koin Keruh Basil gram positif Negatif Prosotan Keruh Basil gram positif Negatif Hasil dari media BHIB yaitu keruh pada  ke  5  sampel  tersebut  yang menunjukkan adanya pertumbuhan bakteri.  Bakteri  pada  media  BHIB menujukkan coccus Gram positif dan basil Gram  positif.  Sedangkan  pada  media EMBA tidak terdapat pertumbuhan bakteri. Penelitian  ini  dilakukan  secara observasi laboratorik untuk mengidentifikasi Escherichia  coli pada mainan  anak  di  arena  permainan Dream
Land. Dari tabel 2 di atas, 5 sampel yang dibenihkan  pada  media  BHIB  terlihat keruh secara makroskopik. Adanya
kekeruhan  menandakan  adanya  bakteri pada media pembenihan. Interpretasi hasil pada  media  BHIB  ( Brain  heart  infusion broth ) yaitu positif terjadi kekeruhan pada media  BHIB  jika  negatif  tidak  terjadi kekeruhan  pada  media  BHIB  (Yunus.  R.
Dkk 2017).
Untuk  melihat  adanya E.  coli , dilakukan pemeriksaan secara mikroskopik  dengan  pewarnaan  gram dimana  menunjukkan  hasil  pada  mainan didapatkan  coccus  gram  positif  pada mainan  bola  plastik,  mainan  mobil-mobil basil  gram  positif,  kuda  plastik  coccus gram positif, kuda koin basil gram positif dan prosotan basil gram positif. Sedangkan Escherichia coli merupakan bakteri Gram negatif berbentuk basil (Leininger, 2001). Hal  ini  menandakan  bahwa  pada  media BHIB tidak ditemukan adanya Escherichia coli .
Untuk mengidentifikasi bakteri yang tumbuh pada media BHIB dilakukan penanaman  pada  media Eosin  Methylen Blue  Agar (EMBA). Escherichia  coli dapat  diidentifikasi  menggunakan  media EMBA.  Media  EMBA  selektif  untuk
menumbuhkan  bakteri  Gram  negatif  dan pada  umumnya  digunakan  untuk  isolasi dan diferensiasi bakteri non fecal coliform dan fecal coliform. Escherichia coli dapat memfermentasi laktosa pada media EMBA menghasilkan asam, dalam kondisi asam akan menghasilkan warna kompleks berwarna  ungu  gelap  atau  warna  hijau metalik.  Berdasarkan  hasil  pengamatan pada  media  EMBA  didapatkan  hasil negatif ditunjukkan tidak ada koloni yang tumbuh  pada  media  tersebut.  Hal  ini disebabkan  karena  pada  media  EMBA terdapat  eosin  Y  dan  methylen  blue  yang merupakan  inhibitor  bakteri  Gram  positif (Leininger, 2001).
KESIMPULAN Berdasarkan hasil penelitian identifikasi Escherichia  coli pada  mainan anak  di  arena  permainan Dream  Land dapat disimpulkan bahwa tidak ditemukan Escherichia  coli pada  mainan  anak  di arena permaian Dream Land . SARAN Bagi masyarakat agar memperhatikan  kebersihan  tangan  anak ketika  setelah  bermain  dapat  mencuci tangan  dengan  cara  yang    baik  dan  benar agar  tidak  dapa  terkena  penyakit.  Untuk peneliti  selanjutnya perlu dilakukan penelitian  lanjutan  terhadap  jenis-jenis bakteri lain pada mainan.

## DAFTAR PUSTAKA
Ariyadi, T. & Dewi, S. S. 2009. Pengaruh Sinar Ultra Violet Terhadap Pertumbuhan Bakteri Bacillus sp. Sebagai Bakteri Kontaminan.
Jurnal Kesehatan, 2.
BC Centre for Disease Control 2009. A
Quick Guide to Common Childhood Diseases Canada,
CDC. Bibiana W.Lay. !994. Analisis mikroba di laboratorium, PT. jakarta
RajaGrafindo Persada.
Entjang I, 2007. Mikrobiologi dan
Parasitologi Untuk Akademi
Keperawatan dan Sekolah Tenaga Kesehatan Sederajat. Citra Aditya. Bandung.
Gyles Cl, J. P, G Songer, dan CO Thoen 2010. Pathogenesis Of Bacterial Infectious in Animals 4th edition, USA, Wiley-Blackwell.
Herjanto, E. & Rahmi, D. 2010. Kajian
Kesiapan Pemberlakuan Secara Wajib Standar Mainan Anak- Anak Journal of Industrial Research (Jurnal Riset Industri), 4.
Hasria Alang, 2015. Deteksi Coliform Air PDAM di Beberapa Kecamatan
Kota Makassar.
Jarwetz, Melnick dan Adelberg’s. 2006.
Mikrobiologi kedokteran. Salemba medika. Jakarta. Juliantina. F. Manfaat sirih merah ( piper crocatum ) Sebagai Agen Anti Bakteri Terhadap Bakteri Gram Positif. Jurnal kedokteran dan kesehatan  indonesia.
Lestari, D dkk. 2015 Higiene perorangan
dan keberadaan bakteri
Escherichia coli pada tangan (Studi di kelurahan sumbersari) Leininger, D. G., Roberson, J. R., dan Elvinger, F. 2001. Use of eosin methylene blue agar to differentiate Escherichia coli from other gram-negative mastitis pathogens . J Vet Diagn Invest 13:273–275. Mckay, I. & Gillespie, T. 2000. Bacterial contamination of children's toys used in a general practitioner's surgery. Scottish medical journal, 45, 12-13. M.Natsir Djide dan Sartini 2006,
Bakteriologi,laboratorium
mikrobiologi farmasi, universitas hasanuddin.
Nirwana, A. B. 2011. Psikologi Bayi, Balita, dan Anak, Yogyakarta, Nuha Medika. Pudjiati, R. 2011. Bermain Bagi AUD dan Alat Permainan yang Sesuai Usia Anak, Jakarta, Kementrian Pendidikan Nasional.
Sujudi. 2006. Mikrobiologi kedokteran. Salemba Medikal. Jakarta. Soemarno, 2006. Isolasi dan identifikasi . Akademi Analis Kesehatan. Yogyakarta. Reni Yunus dkk, 2017. Cemaran Bakteri Gram NegatifPada Jajanan Siomay Di Kota Kendari. Tansey, S. 2009. Hygiene in Child Care. Australia: National Childcare Accreditation Council (NCAC).