P-ISSN 1693-7945, E-ISSN : 2622-1969
Nanopartikel  ekstrak  etil  asetat  daun  melinjo  (gnetum  gnemon  l.)  dengan  aktivitas antioksidan dan antibakteri terhadap propionibacterium acnes
Ranny Puspitasari 1* , Deni Rahmat 2 , Ratna Djamil 3 1,2,3 Universitas Pancasila, Indonesia, * rannypuspitasari4@gmail.com
Diterima 18 Februari 2023, disetujui 29 April 2023, diterbitkan 30 April 2023 Pengutipan:  Puspitasari,  R.,  Rahmat,  D  &  Djamil,  R.  (2023).  Nanopartikel  ekstrak  etil  asetat  daun  melinjo ( gnetum  gnemon l.)  dengan  aktivitas  antioksidan  dan  antibakteri  terhadap propionibacterium  acnes . Gema Wiralodra , 14(1), 554- 560

## 1. Pendahuluan
Nanopartikel  adalah  partikel  berukuran  1-1000  nanometer  dan  kebanyakan  metode menyarankan sebaiknya ukuran diameter partikel antara 200 dan 400 nm. Nanoenkapsulasi dapat dibentuk dengan berbagai polimer, salah satunya adalah kitosan. Nanopartikel dengan polimer  kitosan  diketahui  dapat  melindungi  senyawa  aktif  dari  degradasi  (George  & Abraham,  2006;  Lin et  al,  2008). Selain itu, nanopartikel  kitosan juga memiliki  stabilitas yang  baik,  toksisitas  yang  rendah  dan  metode  preparasinya  yang  cukup  sederhana ( Tiyaboonchai,  2013). Beberapa  kelebihan  nanopartikel  adalah  kemampuan  untuk menembus    ruang-ruang  antar  sel  yang  dapat  ditembus  oleh  partikel  koloidal.  Selain itu,nanopartikel fleksibel untuk dikombinasikan dengan berbagai teknologi lain.Kemampuan ini membuka potensi luas untuk dikembangkan pada berbagai keperluan dan target. Kelebihan lain adalah adanya peningkatan afinitas dari sistem karena peningkatan luas permukaan kontak pada jumlah yang sama ( Buzea et al, 2007).
Metode pembentukan nanopartikel  salah satunya  yaitu metode  gelasi ionik. Metode gelasi ionik melibatkan proses sambung silang antara polielektrolit dengan adanya pasangan ion  multivalennya.  Gelasi  ionik  diikuti  dengan  kompleksasi  polielektrolit  dengan polielektrolit yang berlawanan. Pembentukan ikatan sambung silang ini akan memperkuat kekuatan  mekanis  dari  partikel  yang  terbentuk  (Hariyadi  et  al,  2022).  Kitosan  yang merupakan polimer kationik dapat bereaksi dengan anion multivalen seperti tripolifosfat Salah  satu  tanaman  yang  digunakan  sebagai  alternatif  pengobatan  tradisional  yaitu tanaman  melinjo  ( Gnetum  gnemon L.).  Salah  satu  bagian  tanaman  yang  dimanfaatkan sebagai obat tradisional adalah daun G. gnemon . Secara tradisional daun melinjo digunakan untuk mengobati luka gigitan anjing, penyakit mata, anemia dan busung lapar. Selain itu, efek farmakologis lain yang sering dimanfaatkan sebagai peluruh kencing (diuretik). Daun melinjo memiliki kandungan kimia di dalamnya seperti tanin, saponin dan flavonoid(Raven, 2007).
Fraksi etil asetat daun G. gnemon )  sangat aktif sebagai antioksidan dengan nilai IC 50 sebesar 19,50 mg/L(6).  Daun G. gnemon mengandung  flavonoid  yang berpotensi  sebagai antioksidan  yang  diduga  merupakan  senyawa  flavonoid  golongan  antosianin(7).  Selain sebagai antioksidan, Ekstrak etanol 90% daun G. gnemon ) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium  acnes berada  pada  konsentrasi  10%  dengan  diameter  zona hambat 10,94 mm dengan kategori sedang (Utama et al, 2019).
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  penelitian  ini  bertujuan  untuk  melakukan pembentukan sediaan nanopartikel dengan polimer kitosan yang diharapkan dapat menjaga senyawa aktif daun G. gnemon dari degradasi. Konsentrasi polimer, ekstrak, maupun cross- linker harus memiliki komposisi yang tepat untuk memperoleh sediaan nanopartikel  yang memiliki karakteristik yang baik. Serta melakukan uji aktivitas antioksidan dan antibakteri terhadap P. acnes dari nanopartikel ekstrak daun G. gnemon.
P-ISSN 1693-7945, E-ISSN : 2622-1969

## 2. Metode Penelitian

## Bahan dan Alat
Daun G. gnemon yang berasal dari daerah Saketi, Pandeglang-Banten Banten. Pelarut etil asetat  untuk  ekstraksi.  Bahan  untuk  pembuatan  nanopartikel  kitosan,  bufer  asetat  pH  4, NaTPP, DMSO. Bahan penyusun masker gel peel-off yang digunakan adalah PVA, HPMC, profilenglikol,  Phenoxietanol  dan  akuadest.  Bahan  uji  penentuan  aktivitas  antioksidan menggunakan  DPPH.  Bakteri Propionibacterium acnes, berasal  dari  Laboratorium  Biologi Universitas  Indonesia.  DMSO,  MHB  ( Mueller  Hinton  Broth ),  nutriant  agar  (NA),  Mc Farland,  BaCl2,  H2SO4.  Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  alat  gelas laboratorium, Magnetic Stirrers Hot Plate rotary evaporator , water bath , spektrofotometer UV-Vis.

## Maserasi Kinetik Daun G.gnemon
Daun G. gnemon yang telah dideterminasi di Pusat Biologi Bidang Botani LIPI Cibinong, dibuat simplisia, diekstraksi dengan menggunakan metode maserasi kinetic selama 3 x 24 jam dengan menggunakan pelarut etil asetat, lalu dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 40°C dan rotasi 60 rpm hingga diperoleh ekstrak kental etil asetat.

## Pembuatan Nanopartikel Ekstrak Daun G. gnemon
Pembuatan  nanopartikel  ekstrak  dilakukan  dengan  perbandingan  ekstrak:  kitosan:  NaTPP yaitu  2:  1:  35,6  µg/mL  .Ekstrak  dicampurkan  dengan  larutan  kitosan  dan  dihomogenkan dengan magnetic  stirrer pada  kecepatan  1000  rpm  selama  30  menit.  Larutan  NaTPP ditambahkan  dalam  larutan  kitosan  ekstrak  pada  temperatur  ruangan  dengan  putaran magnetic  stirrer pada  kecepatan  1000  rpm  selama  1  jam  hingga  terbentuk  koloid nanopartikel.

## Evaluasi Ukuran dan Indeks Polidipersitas Nanopartikel
Pengukuran  diameter  partikel  pada  penelitian  ini  menggunakan  alatparticle  size  analizer (PSA) dengan teknik dynamic light scattering (DLS).

## Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Nanopartikel Ekstrak Daun G. gnemon
Ekstrak dan nanopartikel ekstrak daun G. gnemon dibuat konsentrasi larutan 0, 20, 40, 60, 80 dan 100 ppm, kemudian dipipet sebanyak 2,4 mL, kemudian ditambahkan 0,6 mL larutan DPPH 0,002%. Campuran dihomogenkan dan diinkubasi selama 30 menit, serapan diukur dengan spektrofotometer UV-VIS pada panjang gelombang maksimal 515 nm. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan Nanopartikel Ekstrak Daun G.gnemon Sebanyak 0,3 mL suspensi bakteri uji 3 × 10 6 CFU/mL dimasukkan ke dalam cawan petri kemudian  ditambahkan  15  mL  media  NA  ke  dalam  cawan  petri,  dihomogenkan  lalu dibiarkan  memadat.  Media  inokulum  yang  telah  disiapkan,  ditanami  cakram  dengan menggunakan pinset steril, masing- masing cakram direndam dengan larutan uji ekstrak dan nanopartikel  ekstrak  daun G.  gnemon ,  cakram  direndam  DMSO  sebagai  kontrol  negative dan  masker  gel  merex  x  sebagai  kontrol  positif.  Kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37  °C selama 48 jam. Pertumbuhan bakteri  uji diamati, diukur diameter hambatan pertumbuhan yang terbentuk dengan jangka sorong.

## Analisis Data
Analisis  statistik  dilakukan  untuk  mengetahui  perbedaan  aktivitas  antioksidan  dan antibakteri  ekstrak  dan  nanopartikel  ekstrak  daun G.  gnemon. Analisis  data  dilakukan dengan uji Mann-Whitney dengan tingkat kepercayaan 95% (α = 0,05).

## 3. Hasil dan Pembahasan
Pembuatan  nanopartikel  ekstrak  daun G.gnemon dilakukan  dengan  metode  gelasi ionik, yakni dengan menambahkan NaTPP sebagai bahan pengikat silang dengan kitosan. Mekanisme pembentukan nanopartikel kitosan didasarkan pada interaksi elektrostatik antara
P-ISSN 1693-7945, E-ISSN : 2622-1969
amin dari kitosan dan muatan negatif dari polyanion (Gambar 1). Kitosan dapat dilarutkan dengan  asam  asetat.  Polianion  kemudian  ditambahkan,  sehingga  terbentuk  nanopartikel secara spontan dengan pengadukan pada suhu kamar( Meinisasti et al, 2019 ).

## Gambar 1
Reaksi kitosan dan natrium tripolifosfat
Konsep gelasi  ionik atau kompleksasi  ionik juga  memungkinkan untuk  penggunaan dua  macam  biopolimer  dalam  satu  sistem  formulasi.  Kedua  biopolimer  yang  digunakan harus memiliki muatan yang berlawanan, sehingga dapat membentuk matriks yang fleksibel untuk menyerap obat dengan sifat yang lebih luas. Kitosan dilarutkan pada larutan dengan pH asam untuk mengubah gugus amina (-NH 2 ) menjadi terionisasi positif (-NH 3+ ). Gugus yang telah terionisasi positif ini selanjutnya mampu membentuk interaksi ionik dengan obat yang bermuatan negative ( Meinisasti et al, 2019 ). Secara keseluruhan, sistem yang terbentuk cenderung  menyisakan  gugus  amonium  bebas  yang  akan  saling  tolak-menolak  sehingga melemahkan  kompleks  nanopartikel  yang  telah  terbentuk.  Oleh  karena  itu,  perlu ditambahkan adanya suatu pengikat silang ( cross linker ) yang mampu menstabilkan muatan positif yang tersisa. Pengikat silang ini harus berupa poli-anion, dan salah satu yang banyak digunakan  adalah  anion  tripolifosfat  (TPP)  ( Meinisasti  et  al,  2019) .  Meskipun  demikian, sistem ini memiliki kelemahan yaitu stabilitasnya sangat dipengaruhi oleh tingkat keasaman, di mana variasi pH akan mempengaruhi ionisasi kitosan yang pada akhirnya mempengaruhi kekuatani katan pada kompleks.
Kitosan  memiliki  kemampuan  untuk  membuka  kait  antar  sel  ( tightjunctio n)  pada membran  usus  secara  sementara  melalui  mekanisme  translokasi  protein  Claudin-4 (Cldn4),Zonnula occludens-1 (ZO-1), dan Occludin dari membran sel ke sitosol, sehingga sangat potensial untuk dikembangkan sebagai bahan utama pembuatan nanopartikel. Hal ini didukung kelebihan lain dari kitosan yaitu muatan padagugus amonium yang positif dapat mengadakan  interaksi  ionik  dengan  asam  sialat  pada  membran  intestinal  saluran  cerna. Biokompatibilitas  kitosan  dikarenakan  kitosan  merupakan  polimer  yang  diperoleh  dari hidrolisis polimer kitin yangberasal sumber alam yang sudah menjadi konsumsi umum pada cangkang hewanlaut, sehingga cenderung tidak menimbulkan ketoksikan pada dosis terapi, selaindari sifatnya yang sekaligus biodegradable(S ailaja et al, 2010) .
Pengukuran  diameter  partikel  pada  penelitian  ini  menggunakan  alatparticle  size analizer  (PSA)  dengan  teknik  dynamic  light  scattering  (DLS).  Hasil  dapat  dilihat  pada (Gambar 2). Teknik tersebut dinilai lebih akurat jika dibandingkan dengan metode Analisa gambar (mikrografi) dengan menggunakan SEM dan TEM terutama untuk sampel-sampel dalam ukuran nanometer dan submikron yang biasanya memiliki kecenderungan aglomerasi yang tinggi. Hal ini dikarenakan pada PSA partikel didispersikan ke dalam media sehingga
P-ISSN 1693-7945, E-ISSN : 2622-1969
partikel  tidak saling beraglomerasi,  dengan demikian ukuran partikel  yang terukur adalah ukuran  dari  single  particle.  Hasil  pengukuran  menggunakan  PSA  dalam  bentuk distribusi,sehingga hasil pengukuran dapat diasumsikan sudah menggambarkan keseluruhan kondisi sampel.
Gambar 2 Grafik hasil uji ukuran partikel nanopartikel  ekstrak daun G.gnemon

## Gambar 3

## Grafik hasil zeta potensial nanopartikel  ekstrak daun G.gnemon
Penentuan  nilai  indeks  polidispersitas  digunakan  untuk  melihat  persebaran  ukuran partikel  yang  terjadi  dalam  nanopartikel  ekstrak  daun G.  gnemon. Zeta  potensial  diukur untuk  mengetahui kestabilan dari koloid. Zetapotensial merupakan ukuran kekuatan tolak menolak antarpartikel. Sebagian besar sistem koloid dalam air distabilkan oleh gaya tolak elektrostatik,  semakin  besa  rkekuatan  tolak  menolak  antara  partikel  maka  semakin  kecil kemungkinan partikel untuk bergabung dan membentuk agregat Data ukuran partikel, indeks polidispersitas dihasilkan tergolong masuk ke dalam ukuran nanopartikel karena berukuran di bawah 1000 nm  Hasil nanopartikel dengan nilai zeta potensial lebih dari +/- 30 mV telah terbukti stabil dalam suspensi sebagai muatan permukaan yang mencegah agregasi (Tabel 1).
P-ISSN 1693-7945, E-ISSN : 2622-1969

## Tabel 1
Hasi Uji Karakteristin Nanopartikel Ekstrak Daun G.gnemon Ukuran partikel (mm)  Indeks pendisfersi (%) Potensi zeta (mV) 419,4 0,572 -68,5 9

## Aktivitas Antioksidan Ekstrak  dan  Nanopartikel Daun G.gnemon
Uji  aktivitas  antioksidan  nanopartikel  ekstrak  daun G.gnemon dilakukan  dengan menggunakan  metode  DPPH  ( 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ).  Metode  DPPH  mempunyai prinsip kerja yaitu adanya atom hidrogen dari senyawa antioksidan yang berikatan dengan elektron bebas pada senyawa radikal sehingga menyebabkan perubahan dari radikal bebas menjadi senyawa non-radikal(11). DPPH merupakan suatu uji yang dapat menangkal radikal bebas untuk menentukan aktivitas antioksidan(Pratiwi et al, 2016).
Hasil  menunjukkan  ekstrak  etil  asetat  daun G.  gnemon memmberikan  aktivitas antioksidan  lebih  baik  dibandingkan  dengan  nanopartikel  ekstrak  (Tabel  2).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ada  kandungan  senyawa  flavonoid  yang  tidak  terserap  pada  proses nanopartikel diduga karena terjadi kerusakan pada saat enkapsulasi,terutama karena oksidasi panas, oksigen, dan mekanis (Setiawan et al, 2018).
Tabel 2 Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Nanopartikel Ekstrak daun G. gnemon
Sampel Nilai IC50 (ppm) Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Melinjo (EDM) 35.602 Sangat kuat Nanopartikel Ekstrak Daun Melinjo (NEDM) 55.105 Kuat
Analisis data aktivitas antioksidan ekstrak etil asetat dan naopartikel ekstrak daun G. gnemon menggunakan uji Mann-Whitney dengan SPSS. Hasil analisis statistik menunjukkan nilai  Asymp  Sig  ( 2-tailed )  sebesar  <  0,05.  Hasil  analisis  data  menunjukkan  terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara  hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etil  asetat  dan nanopartikel ekstrak daun G.gnemon. Ekstrak etil asetat memiliki aktivitas antioksidan lebih baik dibandingan dengan nanopartikel ekstrak daun G. gnemon

## Aktivitas Antibakteri Ekstrak  dan  Nanopartikel daun G.gnemon
Hasil  penelitian  sebelumnya  menyatakan  bahwa  daun G.  gnemon yang  di  ekstrak dengan  etanol  90%  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium  acnes berada  pada  konsentrasi  10%  dengan  diameter  zona  hambat  10,94  mm  dengan  kategori sedang ( Meinisasti et al, 2019 ).
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun G.gnemon dilakukan  dengan menggunakan  metode  difusi  cakram  kertas,  dimana  metode  ini  memiliki  kelebihan  yaitu cepat,  mudah  dan  murah  karena  tidak  memiliki  alat  khusus.  Hasil  dari  uji  aktivitas antibakteri pada nanopartikel ekstrak kental daun G.gnemon mendapatkan nilai hambat rata- rata sebesar 12.4 mm, 12.5 mm dan 12,1 mm, sehingga mendapatkan nilai hambat rata-rata sebesar 12,3 mm dengan kategori kuat (Gambar 4).
Flavonoid  membunuh  bakteri  dengan  menyebabkan  terjadinya  kerusakan permeabilitas  dinding  sel  bakteri,  mikrosom,  dan  lisosom  sebagai  hasil  interaksi  antara flavonoid dengan DNA bakteri. Tanin diduga dapat mengkerutkan dinding sel atau membran sel sehingga mengganggu permeabilitas sel itu sendiri, akibat terganggunya permeabilitas, sel  tidak  dapat  melakukan  aktivitas  hidup  sehingga  pertumbuhannya  terhambat.  Saponin menurunkan  tegangan  permukaan  sehingga  mengakibatkan  naiknya  permeabilitas  atau kebocoran  sel  dan  mengakibatkan  senyawa  intraseluler  keluar.  Steroid  adalah  senyawa organik  lemak  sterol  tidak  terhidrolisis  yang  dapat  dihasilkan  dari  reaksi  penurunan  dari
P-ISSN 1693-7945, E-ISSN : 2622-1969
terpena atau skualena steroid membunuh bakteri dengan cara merusak membran sel bakteri (Robinson, 1995).

## Gambar 4
Grafik  Perbandingan  Diameter  Zona  Hambat  Antara  Ekstrak  dan  Naopartikel  Daun G.gnemon
Ket: EDM      : Ekstrak Daun Melinjo NEDM   : Nanopartikel  Ekstrak Daun G.gnemon Analisis data aktivitas antibakteri ekstrak etil asetat dan naopartikel ekstrak daun G. gnemon menggunakan  uji Mann-Whitney untuk  mengetahui  perbedaan  antara  dua  kelompok  rata- rata yang tidak berpasangan. Hasil analisis data menunjukkan nilai Asymp Sig ( 2-tailed ) < 0,05.  Hasil  analisis  data  menunjukkan  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antara  hasil aktivitas  antibakteri  ekstrak  etil  asetat  dan  nanopartikel  ekstrak  daun G.gnemon. Nanopartikel ekstrak memiliki aktivitas antioksidan lebih baik dibandingan dengan ekstrak daun G. gnemon .

## 4. Kesimpulan
Ekstrak daun G gnemon memiliki aktivitas antioksidan lebih baik dibandingkan nanopartikel ekstrak daun G gnemon dimana nilai IC 50 masing-masing sebesar 35,602 dan 55,105 ppm. Sedangkan  untuk  aktivitas  antibakteri  nanopartikel  ekstrak G  gnemon lebih  kuat dibandingkan masker ekstrak daun G gnemon dimana zona hambat sebesar 12,3 mm. Ukuran partikel (419,4 mm), indeks pendispersi (0,572%) dan potensi zeta (-68,5 9 mV).

## 5. Daftar Pustaka
Buzea, C., Pacheco, I. I., & Robbie, K. (2007). Nanomaterials and nanoparticles: sources and toxicity. Biointerphases , 2 (4), MR17-MR71.
George, M., & Abraham, T. E. (2006). Polyionic hydrocolloids for the intestinal delivery of protein drugs: alginate and chitosan—a review. Journal of controlled release , 114 (1), 1-14.
Hariyadi, D. M., Prestisya,  I., Suhariyono, G., Miatmoko, A., Rosita, N., & Rahmadi, M. (2022).  Characterization  of  dry  powder  inhaler  quercetin  solid  lipid  microparticle (SLM)  as  lung  delivery  system:  effect  of  polymer  concentration. Egyptian  journal  of chemistry , 65 (11).
10 11 12 13 EDM NEDM 11.2 12.3 Diam eter Z o n a Ham b at (m m ) Perbandingan Diameter Zona Hambat Ekstrak dan Nanopartikel Ekstrak Daun G.gnemon
P-ISSN 1693-7945, E-ISSN : 2622-1969
Lin,  Y. H., Sonaje, K., Lin,  K. M., Juang, J. H., Mi,  F. L., Yang, H. W., &  Sung, H. W.
(2008). Multi-ion-crosslinked nanoparticles with pH-responsive characteristics for oral delivery of protein drugs. Journal of Controlled Release , 132 (2), 141-149.
Meinisasti,  R.,  Puspita,  W.,  &  Sunita,  R.  (2019,  April).  Test  effectiveness  antimicrobial extract  etanol  leaves  melinjo  (Gnetum  gnemon  L.)  on  growth  of  bacteria propionibacterium acnes. In 1st International Conference on Inter-Professional Health Collaboration (ICIHC 2018) (pp. 99-102). Atlantis Press.
Pratiwi, L., Fudholi, A., Martien, R., & Pramono, S. (2016). Design and optimization of self- nanoemulsifying  drug  delivery  systems  (SNEDDS)  of  ethyl  acetate  fraction  from mangosteen peel (Garcinia mangostana, L.). Int J PharmTech Res , 9 (6), 380-387.
Prasetyo,  E.,  Kiromah,  N.  Z.  W.,  &  Rahayu,  T.  P.  (2021).  Uji  Aktivitas  Antioksidan Menggunakan  Metode  DPPH  (2,  2-difenil-1-pikrilhidrazil)  Terhadap  Ekstrak  Etanol Kulit  Buah  Durian  (Durio  zibethinnus  L.)  dari  Desa  Alasmalang  Kabupaten Banyumas. Jurnal  Pharmascience , 8 (1),  75-82. Tripolifosfat  Sebagai  Kandidat Antioksidan. Chem Prog. 2020;13(2):77–85.
Robinson  T.  (1995).  Kandungan  Organik  Tumbuhan  Tinggi.  ke-4.  Terjemahan  Kosasih Padmawinata., editor. Bnadung: ITB Press. Bandung.
Raven, R. R. (2017). Aktivitas Antioksidan Dan Kandungan Fenolik Total Berbagai Fraksi Dari  Ekstrak  Metanol  Daun  Melinjo  (Gnetun  gnemon  L.) (Doctoral  dissertation, Universitas Andalas).
Sailaja, A. K., Amareshwar, P., & Chakravarty, P. (2010). Chitosan nanoparticles as a drug delivery system. Res. J. Pharm. Biol. Chem. Sci , 1 (3), 474-484
Setiawan, F., Yunita, O., & Kurniawan, A. (2018). Uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol kayu  secang  (Caesalpinia  sappan)  menggunakan  metode  DPPH,  ABTS,  dan FRAP. Media Pharmaceutica Indonesiana , 2 (2), 82-89.
Tiyaboonchai,  W.  (2013).  Chitosan  nanoparticles:  a  promising  system  for  drug delivery. Naresuan University Journal: Science and Technology (NUJST) , 11 (3), 51-66 Utama, S. S., Mulkiya, K., & Syafnir, L. (2019). Isolasi Senyawa Flavonoid yang Berpotensi sebagai  Antioksidan  pada  Ekstraksi  Bertingkat  Daun  Melinjo  (Gnetum  gnemon L.). Prosiding Farmasi , 717-725.