Fraksinasi dan Karakterisasi Fosfolipid dari Biji Nyamplung ( Calophyllum inophyllum )
(PhospholipidFractination and Characterisation of Calophylluminophyllum Kernel)
Desiana Nuriza Putri 1* , Chusnul Hidayat 2 , Pudji Hastuti 2
1 Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan – Fakultas Pertanian Peternakan - Universitas Muhammadiyah Malang Jl. Raya Tlogomas No. 246 – Malang Indonesia 65144
2 Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan – Fakultas Teknologi Pertanian - Universitas GADJAH MADA Jl. Flora No. 1 Bulaksumur Yogyakarta -  Indonesia 55281 Email : dndesiana.nuriza@gmail.com (085259648865)

## Abstract
The aim of this research is to obtain the Phospholipid characteristic of Calophylluminophyllum which is suitable with the need by means of fractination process.Phospholipidcharacterisation resulted from fractination will  generate  recommendation  of  Phospholipidfractination  use  on  suitable  product  and  food  processing.  The extraction process was performed by using chloroform-methanol (1:2 v/v). The polar lipid is separated by using ethanol,  then  ethanol  is  used  to  extract  Phospholipid.  Fractination  was  performed  based  on  the  soluability  in ethanol  and  acetone.  There  were  5  Phospholipid  fraction  namely  crude  Phospholipid  (without  fractination), ethanol  soluble,  ethanol  insoluble,  ethanol-acetone  insoluble  fraction.  Each  fraction  was  characterised  for phosphatidylcholine content (PC), hydrophilic-lipophilic balance (HLB), peroxide value, viscosity and color. The result  showed  that  the  highest  PC  content  was  found  on  ethanol-soluble  fraction,  whereas  highest  fatty  acid which arrange Phospholipid werepalmitat (C16:0) and Oleat (C:18). Phospholipid fraction which is suitable to be used as oil in water emulsifier is ethanol soluble fraction, and ethanol insoluble fraction is used as water in oil emulsifier.
Keywords : Calophylluminophyllum kernel, phosphatidylcholine, phospholipid, phospholipid characteristic

## 1. Pendahuluan
Fosfolipid  merupakan  struktur  penting  dan komponen  fungsional  dari  suatu    membran  sel. Fosfolipid  mempunyai  banyak  manfaat  dalam berbagai  aplikasi.  Menurut  Reddy et  al. (2005) fosfolipid  dapat  digunakan  pada  beberapa  aplikasi yang  cukup  penting  seperti  pengemulsi  pada produk  pangan,  farmasi,  dan  juga  kosmetika. Sejauh  ini  fosfolipid  yang  diproduksi  secara komersial  berasal  dari  lesitin  kedelai  dan  kuning telur  (Hara et  al., 2002).  Dengan  banyaknya manfaat dan potensi fosfolipid tersebut, diperlukan sumber  fosfolipid  yang  lain  agar  tingkat  produksi fosfolipid  juga  semakin  besar.  Salah  satu  sumber fosfolipid adalah dari Biji nyamplung.Biji nyamplung ( Calophyllum inophyllum )memiliki kandungan fosfolipid  yang  lebih  tinggi  dari  pada  kedelai. Penggunaan biji nyamplung sebagai sumber lesitin alternatif  dapat  mengurangi  ketergantungan masyarakat  akan  produk  berbasis  kedelai  serta dapat  menambah    nilai  dari  biji  nyamplung. Hermavanthy (1990) menyatakan bahwa dalam biji
nyamplung  mengandung  fosfolipid  sebesar  1,6%. Kandungan fosfolipid biji nyamplung ini lebih tinggi dari  pada  kedelai  yang  mengandung  fosfolipid sebesar 1,12% (Nzai and Proctor, 1998).
Penelitian  pada  biji  nyamplung  yang  telah dilakukan  adalah  mengenai  minyak  nyamplung sebagai biodiesel (Bustomi, et al ., 2008), komposisi kimia  anti  mikrobia  dari  biji  nyamplung  (Yimdjo et al ., 2004), evaluasi toksikologi biji nyamplung (Ajayi et al ., 2007) dan isolasi dan karakterisasi protein biji nyamplung  (Prima,  2009).Sedangkan  penelitian pada fraksinasi dan karakterisasi fosfolipid dari biji nyamplung  belum  dilakukan.Belum  diketahuinya potensi  pemanfaatan  dari  gum  minyak  biji nyamplung membuka peluang penelitian mengenai karakter  fosfolipid  biji  nyamplung  sebagai  sumber lesitin.
Fosfolipid  dalam  biji  nyamplung  terdiri  dari fosfatidiletanolamin  (46,3%)  fosfatidilkolin  (33,8%), dan  asam  fosfatidat  (8,1%).  Untuk  mendapatkan sifat  fosfolipid  biji  nyamplung  yang  sesuai  dengan kebutuhan  diperlukan  proses  fraksinasi.  Palacios dan  Wang  (2005)  menyatakan  bahwa  fosfolipid kuning telur diekstrak dengan menggunakan etanol, dilanjutkan  ekstraksi  aseton  untuk  menghilangkan
lemak  dari  fraksi  etanol.  Karakterisasi  fraksi fosfolipid  hasil  fraksinasi  diharapkan  dapat menghasilkan  rekomendasi  penggunaan  fraksi fosfolipid  pada  produk  dan  proses  pengolahan pangan yang sesuai.

## 2. Bahan dan Metode
2.1. Bahan dan Alat Bahan  baku  yang  digunakan  adalah  biji Nyamplung didapatkandariDesa
Mandiri Energi,  Kabupaten  Purworejo,  Jawa  Tengah. Bahan  kimia  yang digunakan  dalam  penelitian ini antara lain: etanol (teknis); metanol (teknis); aseton  (teknis),  gas  nitrogen,  akuades  dan bahan  kimia  yang  termasuk  dalam  “ analytical grade ”  antara  lain:  aseton,  metanol,  etanol BF3, asam klorida (HCl), Zinc oxide , potasium hidroksida  (KOH),  asam  sulfat  (H2SO4), sodium molibdate , hydrazine sulfate, potassium dihydrogen  phosphate diperoleh  dari  Merck. Standar fosfatidilkolin diperoleh dari Sigma. Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini antara  lain:  (IKAT-50), cabinet  dryer (Eyela  Type NDS  601D), shaker  waterbath (Julabo  SW23), stirrer (Glas-Col), rotary  vacuum  evaporator, sentrifuge (IKA-WERKE),  corong  kaca,  pengukur waktu, alat gelas seperti tabung reaksi, erlenmeyer 100 ml dan 250 ml, gelas ukur, gelas beker, pipet ukur,  dan  labu  ukur.  spektrofotometer  (Genesys- 20),  lampu  UV  λ  254  nm,  vortex,  timbangan elektronik,  timbangan  analitik  (Shimadzu  dan Metler),  pipet  mikro  100-1000  μL,  dan  propipet, oven,  plat  TLC  (Silica  gel  G60F254  diperoleh  dari Merck  KGaA,  Jerman),  chamber  TLC  (Camag), penggaris, microsyringe (Hamilton),  pipet  mikro  2- 20  μL,  Automatic  TLC  Scanner  (Shimadzu), kromatografi gas (Shimadzu).
2.2  Ekstraksi  Total  Lipid  (metode  modifikasi Yunoki et al., 2008)
Sejumlah  100  g  biji  nyamplung  yang  telah dikeringkan  dan  diiris  diekstrak  dengan  200  ml kloroform:metanol  (1:2  v/v)  selama  1  jam  pada suhu  ruang  (disertai  dengan  shaker).  Setelah disaring
menggunakan kertas saring,ekstrakdipekatkan  dengan  rotavapor  pada suhu  50°C.  Total  lipid  kasar  yang  diperoleh kemudian ditimbang.

## 2.3 Separasi Fosfolipid Kasar dari Ekstrak Total
Lipid
Total  lipid  yang  diperoleh  dari  proses ekstraksi diekstrak dengan menggunakan metanol.
Sebanyak  10  g  total  lipid  diekstrak  dengan menggunakan  20  ml  metanol  untuk  melarutkan fosfolipid/lipid  polar.  Fase  yang  larut  methanol diaerasi/dievaporasi sehingga didapatkan fase larut methanol (lipid polar/fosfolipid)
2.4 Fraksinasi Fosfolipid 5 gram fosfolipid kasar dilarutkan dalam 20 ml  etanol  kemudian  diagitasi  selama  60 menit.Supernatan dan endapan dipisahkan dengan sentifugasi  pada  15000  g selama  10  menit.Residu diambil  dan  merupakan  fraksi  tidak  larut  etanol. Fraksi larut etanol diambil dengan caramenguapkan aseton  dengan  menyemprotkan  gas  nitrogen.
Fraksi larut etanol diambil sebagian untukdikarakterisasi  dan  sebagian  lagidifraksinasi lebih  lanjut  denganmelarutkan  dalam  aseton  (1:4 b/v)  dan  diagitasi  selama  60  menit.  Fraksi  tidak larut  aseton  dipisahkan  dari  larutan  dengan sentrifugasi  selama  10  menit  pada  kecepatan 15000  g.  fraksi  larut  aeton  diambil  dengan  cara menguapkan  aseton  dengan  gas  nitrogen.  Dari hasil  fraksinasi  ini  diperoleh empat  fraksi  fosfolipid yaitu  fraksi  tidak  larut  etanol  ( etanol  insoluble ), fraksi larut etanol ( etanol soluble ), fraksi tidak larut aseton  ( etanol  soluble-acetone  insoluble ),  fraksi larut aseton ( acetone soluble-ethanol soluble ), dan fosfolipid  tanpa  fraksinasi.Fraksi-fraksi  tersebut kemudian  diidentifikasi  jenis-jenis  fosfolipid  dan asam  lemak  penyusunnya  serta  dikarakterisasi lebih lanjut.
2.5 Karakterisasi  fraksi-fraksi  fosfolipid  dan fosfolipid  tanpa  fraksinasi  (Fosfolipid Kasar)
Jenis-jenis fosfolipid dari hasil fraksinasi dan tanpa  fraksinasi  diidentifikasi  meliputi  kadar fosfolipid,  kadar  PC,  nilai  HLB  ( Hydrophillic lipophillic  balance ),  angka  peroksida,  warna  dan viskositas.
.
2.6 Pengamatan dan Analisa Pengamatan dan analisia pada penelitian ini dilakukan  pada  fosfolipid  kasar  dan  fosfolipid  hasil fraksinasi meliputi:
1. Kadar fosfolipid kasar biji nyamplung
2. Kuantifikasi  fosfatidilkolin  (PC)  setiap  fraksi dengan TLC scanner (Nzai dan Proctor, 1998) 3. Bilangan peroksida
4. Viskositas 5. Warna

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1 Ekstraksi Fosfolipid Biji Nyamplung
Proses ekstraksi total lipid dilakukan dengan menggunakan  pelarut  kloroform:methanol  (1:2 v/v)menghasilkan total lipid sebanyak 37% (persen gram  lipid  hasil  ekstraksi  terhadap  gram  biji nyamplung). Kloroform merupakan jenis pelarut non polar  yang  mampu  mengekstrak  lipid  dari  biji nyamplung.  Sedangkan  metanol  merupakan  jenis pelarut  polar  yang  dapat  mengoptimalkan  proses ekstraksi  fosfolipid  yang  termasuk  dalam  senyawa lipid  polar.  Penggunaan  kombinasi  kedua  jenis pelarut tersebut adalah untuk optimalisasi ekstraksi fosfolipid dari biji nyamplung.
Hasil  pengukuran  kadar  fosfolipid  pada ekstrak total lipid dengan pelarut kloroform:metanol diperoleh  kadar  fosfolipid  sebesar  60,57%.  Hal  ini karena  kombinasi  pelarut  kloroform:metanol memiliki  polaritas  yang  sesuai  dengan  lipid  biji nyamplung  sehingga  pelarut  kloroform:metanol sangat  baik  untuk  digunakan  dalam  ekstraksi  total lipid  pada  biji  nyamplung.  Nilai  indeks  polaritas pelarut  kloroform-metanol  berada  di  antara  etanol dan heksana. Penggunaan etanol mungkin bersifat terlalu  polar  sedangkan  heksana  terlalu  nonpolar. Oleh  karena  itu  campuran  kloroform  dengan metanol  (biasanya  2:1)  sering  dianjurkan  sebagai pelarut  dalam  ekstraksi  total  lipid  (Meeren et  al., 1996).
Hasil  ekstraksi  lipid  dari  biji  nyamplung masih terdiri dari lipid polar dan lipid netral dimana fosfolipid  merupakan  bagian  lipid  polar.  Fosfolipid merupakan  lipid  polar  karena  mempunyai  gugus fosfat  yang  teresterifikasi  pada  posisi  sn -3 dari kerangka  gliserol.  Proses  pemisahan  pada  lipid dilakukan  berdasarkan  polaritas  dan  kelarutan senyawa dalam pelarut. Menurut Schneider (1989)
pemisahan  lipid  netral  dan  lipid  polar  dapat dilakukan  dengan  perlakuan  pelarut  secara deoiling .  Prinsipnya  berdasarkan  sifat  lipid  polar seperti  glikolipid  dan  fosfolipid  yang  kebanyakan tidak larut dalam aseton.
Tabel 1. Hasil Separasi Metanol pada 10 g Lipid biji nyamplung
Fraksi Berat (g)  Proporsi (%) Larut Metanol Tidak larut 7,8 2,2 78 22 Catatan : Berat fraksi tidak larut etanol merupakan hasil pengurangan
Rendemen fosfolipid dalam sampel sebesar 2,02%  (persen  gram  fosfolipid  hasil  ekstraksi terhadap  gram  biji  nyamplung).  Hasil  ini  serupa dengan penelitian Hermavathy (1990) bahwa pada biji  nyamplung  terdapat  fosfolipid  sebesar  1,6%. Fosfolipid  yang  dihasilkan  dari  proses  ekstraksi memiliki  kenampakan  kuning  kecoklatan  yang dimungkinkan  karena  tingginya  senyawa  fosfatida yang  terkandung  dalam  fosfolipid.  Tabel  1 menunjukkan fraksi larut metanol sebesar 78%. Hal ini  menunjukkan  bahwa  proses  separasi menggunakan  pelarut  kloroform  dan  metanol berhasil  didapatkan  fraksi  lipid  polar  yang merupakan komponen fosfolipid sejumlah 78% dari ekstrak  lipid  biji  nyamplung.  Chow  dan  Ho  (2002) melaporkan  fosfolipid  dapat  dipisahkan  dengan menggunakan  pelarut  metanol,  kloroform  dan aseton.

## 3.2 Fraksinasi Fosfolipid
Proses fraksinasi bertujuan untuk mendapatkan  fraksi-fraksi  berdasarkan  kelarutan pada  pelarut  yang  berbeda  derajat  polaritasnya. Menurut  Colbert  (1998)  komponen  spesifik fosfolipid  dari  lesitin  dapat  diisolasi  dengan
menggunakan  ekstraksi  alkohol.  Isolat  fosfolipid menunjukkan  sifat  fungsional  berbeda  yang  dapat meningkatkan  penggunaan  pada  proses  dan produk selektif. Tabel 2. Fraksinasi Pelarut Etanol dan Aseton pada 10 g Fosfolipid Kasar dan Kemurnian Fosfolipid Fraksi Fosfolipid Jumlah (g) Proporsi (%) Kadar Fosfolipid (%) Fosfolipid Kasar Tidak larut etanol Larut etanol Tidak larut aseton-larut etanol Larut aseton larut etanol 10 3,4 6,6 4,7 1,9 7,0 72 1,2 7,0 80,07 65,78 84,44 69,06 68,49
Fraksi  larut  etanol  diperoleh  paling  banyak (72%)  dibandingkan  jumlah  fraksi  fosfolipid  yang lain  dengan  kemurnian  terbaik  (84,44%) dibandingkan fraksi lain. Hal ini menunjukkan fraksi yang  larut  dalam  etanol  diperoleh  lebih  banyak dibandingkan  fraksi  yang  tidak  larut  dalam  etanol sehingga  lebih  memungkinkan  untuk  dilanjutkan proses  fraksinasi  selanjutnya  dengan  aseton. Tingginya kadar fosfolipid dalam fraksi larut etanol diduga  karena  banyak  kandungan  fosfolipid  polar dalam total lipid sehingga menyebabkan komponen lipid banyak terlarut dalam etanol disamping masih banyaknya  kandungan  pelarut  metanol  dalam fosfolipid  kasar.  Menurut  Schneider  (1989) fraksinasi  menggunakan  etanol  pada  lesitin tumbuhan  akan  memberikan  distribusi  paling spesifik  dari  banyak  komponen  fosfolipid,  baik komponen  yang  larut  maupun  tidak  larut. Komponen fosfolipid kedelai yang larut etanol lebih banyak  dari  pada  tidak  larut  etanol.Komponen pengotor fraksi fosfolipid adalah ALB (asam lemak bebas) dan NL (netral lipid).

## 3.3 Karakterisasi Fraksi Fosfolipid
A. Kandungan Fosfatidilkolin (PC) Pemisahan fosfatidilkolin dengan kromatografi lapis tipis dapat dilihat pada Gambar 1 dan  kadar  komponen  PC  pada  setiap  fraksi  dapat dilihat pada Tabel 3.
Gambar 1. Separasi PC pada Fraksi Fosfolipid menggunakan kromatografi lapis tipis Keterangan : A. Fraksi fosfolipid Kasar B. Fraksi larut etanol, C. Fraksi tidak larut etanol, D. Fraksi larut etanol tidak larut aseton, E. Fraksi larut etanol- larut aseton.
Lipid netral merupakan komponen pengotor dalam  fraksi  fosfolipid  sehingga  menurunkan kemurnian fosfatidilkolin yang didapatkan. Komponen  fosfolipid  tertinggi  pada  biji  nyamplung
antara  lain  Fosfatidiletanolamin  (PE),  fosfatidilkolin (PC) dan asam fosfatidat (PA) yaitu sebesar 46,3%, 33,8%  dan  8,1%  (Hermavanthy,  1990).  Lesitin kasar  (fosfolipid  kedelai)  bentuknya  kental  dan mengandung komponen fosfolipid sebesar 60-70% (Meeren  et  al.,  1996)  dengan  kandungan fosfatidilkolin  (PC)  sebesar  27,1%  (Nzai  and Proctor, 1998).
Komponen PC tertinggi terdapat pada fraksi larut  etanol,  sedangkan  komponen    PC  terendah terdapat pada fraksi tidak larut etanol. Menurut Wu dan  Wang    (2004),  ekstraksi  dengan  etanol menghasilkan  fraksi  kaya  PC.  Pada  penelitian  ini, pengayaan PC setelah fraksinasi etanol sebesar 2 kali. Tingkat kemurnian fosfatidilkolin berkisar 0,30- 12,01  %.  Hal  ini  karena  fosfolipid  kasar  yang digunakan  dalam  proses  fraksinasi  memiliki kemurnian    relatif  rendah  (5,96  %)  sehingga  hasil fraksinasi  pelarut  etanol  dan  aseton  didapatkan kemurnian rendah dengan peningkatan PC sebesar 2 kali (Tabel 3).
Tabel  3. Data  Perbandingan  Fosfatidilkolin  pada Fraksi Fosfolipid Fraksi Fosfolipid Kadar Fosfatidilkolin (%) (terhadap gram fraksi fosfolipid) Fosfolipid Kasar 6,16 Larut Etanol 12,01 Tidak Larut Etanol 0,30 Larut Etanol-Aseton 0,77 Larut Etanol- Tidak Larut Aseton 5,96 Larut  Etanol  pada Serat Sawit (Choo et al, 2014) 2,16 Presentase  PC  dalam  fosfolipid  kasar  yang digunakan  sebagai  sampel  dalam  penelitian  ini memiliki  kadar  6,16  %  (Tabel  2).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstraksi  menggunakan pelarut kloroform dan metanol dengan perbandingan  1:2  (v/v)  selama  1  jam  diduga merupakan  kombinasi  pelarut  dan  lama  waktu ekstraksi optimal yang dapat dijadikan pilihan untuk menghasilkan  kadar  fosfolipid  yang  lebih  banyak dibandingkan  dengan  menggunakan  pelarut  lain seperti heksan dan etanol. Choo et al. (2004) dalam penelitiannya  serat  sawit  yang  diekstrak  dengan menggunakan  heksan  dan  etanol  mendapatkan kadar  PC  dalam  fosfolipid  kasar  ekstraksi  pelarut etanol sebesar 2,16%.

## B. Bilangan Peroksida

## Gambar 1. Bilangan peroksida fraksi Fosfolipid
Tingginya  bilangan  peroksida  pada  fraksi larut etanol menunjukkan tingginya proses oksidasi dibandingkan  fraksi  lainnya.  Hal  ini  dimungkinkan karena fraksi larut etanol memiliki asam lemak tidak jenuh oleat (4,269 mg/ml) dan asam lemak linoleat (0,965  mg/ml)  paling  tinggi  sehingga  fraksi  larut etanol relatif mudah teroksidasi dibandingkan fraksi fosfolipid lainnya. Asam lemak tidak jenuh memiliki ikatan  rangkap  yang  lebih  mudah  teroksidasi  baik autoksidasi maupun adanya katalis.

## C. Viskositas Emulsi
Fosfolipid  merupakan  bahan  pengemulsi untuk  menyatukan  fase  minyak  dan  air.Kenaikan viskositas  emulsi  disebabkan  karena  semakin tingginya  luas  permukaan  yang  dapat  distabilkan oleh fosfolipid dengan dinyatakan sebagai nilai EAI. Disamping  itu,  viskositas  memiliki  kaitan  dengan stabilitas  emulsi,  dimana  dengan  semakin meningkatnya  stabilitas  emulsi  maka  akan  diikuti dengan  peningkatan viskositas  emulsi.  Fraksi  larut larut  etanol  dan  fraksi  larut  etanol-aseton  memiliki nilai  EAI  dan  ASI  relatif  tinggi  sehingga menyebabkan peningkatan viskositas emulsi.
Nilai  rerata  viskositas  fraksi  larut  etanol memiliki  nilai  tertinggi  yaitu  47  cps,  sedangkan fraksi tidak larut etanol menunjukkan nilai terendah yaitu 33 cps. Hal ini karena fraksi tidak larut etanol memiliki  kandungan  PC  relatif  rendah  (0,30  %). Dalam  fraksinasi  etanol,  fraksi  tidak  larut  etanol banyak  mengadung  PI  dimana  pengemulsi fosfolipid yang banyak mengandung gugus inositol lebih  sesuai  digunakan  dalam  emulsi  air  dalam minyak  dari  pada  ketika  dipakai  dalam  emulsi minyak dalam air (Wu and Wang,
2004).Ketidaksesuaian  penggunaan  pengemulsi dapat menurunkan stabilitas emulsi yang berakibat penurunan viskositas pengemulsi.Schnaider (1989) menyatakan  bahwa  fraksi  larut  etanol  dari  hasil fraksinasi lesitin banyak mengandung fosfatidilkolin yang sangat sesuai digunakan dalam sistem emulsi minyak dalam air.

## D. Warna
Pengukuran  warna  dilakukan  dengan menggunakan color reader hingga diperoleh nilai L, a dan b. Warna L menyatakan tingkat gelap terang, warna  a  menyatakan  tingkat hijau-merah,  warna  b menyatakan tingkat biru-kuning. Fraksi larut etanol memiliki kecerahan warna dan  kecenderungan  warna  kuning  dan  merah paling  rendah  dibandingkan  fraksi  lainnya.Hal  ini karena  fraksi  larut  etanol  relatif  terjadi  kerusakan lebih  tinggi  yang  disebabkan  tingginya  kandungan asam lemak tidak jenuh. Kerusakan fosfolipid dapat diamati  dari  bilangan  peroksida  yang  relatif  tinggi (5,00 mek/kg) (Gambar 1) sehingga kecenderungan warna  lipid  menjadi  gelap.  Schnaider  (1989) menyebutkan  bahwa  penampakan  lesitin  akibat oksidasi  kemungkinan  menjadi  lebih  kental  dan produk bubuk berwarna coklat. Kecerahan  warna  dan    kecenderungan warna  merah  dan  kuning  tertinggi  terdapat  pada fraksi larut etanol - tidak larut aseton. Hal ini karena pengaruh kemampuan fosfolipid untuk menurunkan proses  oksidasi  yang  mengakibatkan  kerusakan fosfolipid  sehingga  warna  lipid  lebih  cerah. Kemampuan  penghambatan  oksidasi  disebabkan kadar  PC  dalam  fraksi  larut  etanol  -  tidak  larut aseton relatif tinggi (6,16%) dibanding fraksi lainnya
(Tabel  1).    Menurut  Saito  dan  Ishihara  (1997), aktivitas  antioksidan  fosfolipid  diperankan  oleh gugus  fungsinya,  kolin  dan  etanolamin  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  setara  dengan antioksidan komersial BHA dan BHT.Gugus amino pada  PC,  PS,  PE  dan  gugus  gula  pada  PI menunjukkan  sifat  pengkelat  logam;  fosfolipid sebagai  penghalang  oksigen  ketika  terdispersi diantara permukaan minyak/air sehingga mencegah lipid kontak dengan oksigen (Judde, et al., 2003).

## 4. Kesimpulan
Ekstraksi  fosfolipid  biji  nyamplung  dengan kloroform:metanol didapatkan kadar fosfolipid 88,07 %  dan  rendemen  dalam  sampel  2,02  %.  Fraksi fosfolipid  hasil  fraksinasi  kandungan  PC  tertinggi terdapat  pada  fraksi  larut  etanol  (12,01%).  Fraksi fosfolipid  hasil  fraksinasi  diperoleh  bilangan peroksida  terendah  (4,08  mek/kg)  pada  fosfolipid kasar,  viskositas  emulsi  (44  cps)  dan  warna  (L 28,83  ;  a  3  ;  b  7,7).  Fraksi  fosfolipid  yang  sesuai digunakan  sebagai  pengemulsi  minyak  dalam  air adalah  fraksi  larut  etanol,  dan  fraksi  tidak  larut etanol sebagai pengemulsi air dalam minyak

## DAFTAR PUSTAKA
Bustomi  Sofwan,  2008.  Nyamplung  (Calophyllum inophyllum  L)  Sumber  Energi  Biofuel  yang potensial.Dephut Balitbanghut, Jakarta Choo, Y. M., S.C. Bong, A.N. Ma, and C.H. Chuah.
2004.  Phospholipids  from  Palm-ressed  Fiber. JAOCS , 81 (5) : 471-475
Colbert,  L.B.  1998.  Lecithins  Tailored  to  Your
Emulsification Needs. American Association of Cereal Chemistry, Inc. Illinois.
Hara, S., Hasuo, H., Nakasato, M., Higaki, Y., and Totani,  Y.,  2002.Modification  of  Soybean Phospholipids by Enzymatic Transacylation.J. OleoSci . 51(6): 417-421
Hermavathy,  Jand  J.V.  Prabhakar.  1990.Lipid Composition  of  Calophyllum  inophylum Kernel. Journal of The American Oil Chemists Society . Vol.67, no.12 Meeren,  P.V.,  J.  Vanderdeelen,  L.  Baert.  1996.
Phospholipids.  dalam  Nollet,  L.M.L.  1996. Book  of  Food  Analysis.  Marcel  Dekker,  Inc. New York.
Nzai,  J.M.  dan  A.  Proctor.  1998.  Phospholipids Determination In Vegetable Oil By Thin-Layer Chromatography  And  Imaging  Densitometry.
J. Food Chemistry vol. 63, No.4, pp:571-576. Palacios,  L.E.  dan  T.  Wang. 2005.  Egg  Yolk  Lipid Fractionation  and  Lecithin  Characterization. Journal of The American Oil Chemists Society . Vol.82, no.8 Schneider,  M.  1989.  Fractionation  and  Purification of Lecithin.dalam Szuhaj, B.F. 1989. Lecithins:
Sources,  Manufacture  and  Uses.  The American  Oil  Chemists  society  Champaign.
Illinois.
Wu, Y. dan T. Wang. 2004. Fractionation of Crude Soybean  Lecithin  with  Aqueous  Ethanol. JAOCS, vol.81, no.7
Yunoki,  K.,  O.  Kukino,  Y.  Nadachi,  T.  Fujino.  M. Ohnishi.  2008.  Separation  and  Determination of  Functional  Complex  Lipids  from  Chicken Skin. JAOCS ,85: 427-433