## Efek Ekstrak Daun Kembang Bulan ( Tithonia diversifolia
) terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar ( Rattus norvegicus ) yang Diinduksi Alloxan
Fithri Wening Sasmita 1 , Eko Susetyarini 1 , Husamah 1, dan Yuni Pantiwati 1
1 Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Muhammadiyah Malang Email : fitri.sasmita23@yahoo.com

## Abstract
Diabetes  Mellitus  is  a  metabolic  disease  marked  increase  in  blood  sugar  or  hyperglycemia.  Hyperglycemia  occurs due  to  abnormalities  in  insulin  secretion  or  insulin  action.  Alloxan  induced  diabetes  with  damaging  cells  of  the pancreas and initiate the occurrence of hyperglycemia. One of the plants that have medicinal potential to decreasing of blood glucose its a Tithonia diversifolia leaves, which contains flavonoids and sesquiterpenes. The purpose of this research  are  (1)  Analyzing  the  effect  of Tithonia  diversifolia leaves  extract  to  decreasing  blood  glucose  Wistar  rats induced  with  alloxan;  (2)  Determining  the  effective  dose  of Tithonia  diversifolia leaves  extract  in  decreasing  blood glucose  Wistar  rats.  This  is  a True  Experimental-Post  Test  Only  Control  Group  Design referenced  to  Sambrook  & Russel.  The  samples  used  were  twenty-five  Wistar  rats  divided  into  5  groups  and  5  repetitions  ie  P1  (control),  P2 (alloxan only), P3 (alloxan and dose of 1.28 ml/200g BW), P4 (alloxan and dose of 2,57 ml/200g BB) and P5 (alloxan and  dose  of  5.14  ml/200g  BB).  The  data  analysis  technique  used One-way  ANOVA followed  by  Duncan  test.The research showed that there was an effect  of Tithonia diversifolia leaves extract to decrease blood glucose levels of Wistar rats. It is concluded that Tithonia diversifolia leaves extract at dose 5,14 ml/200g BB has antidiabetic effect.
Key Words : diabetes mellitus, tithonia, alloxan, flavonoid

## Abstrak
Diabetes  Mellitus  merupakan  penyakit  metabolik  yang  ditandai  kenaikan  kadar  gula  darah  atau  hiperglikemia  yang terjadi karena kelainan sekresi insulin atau kerja insulin. Alloxan menginduksi diabetes dengan merusak sel pankreas dan  mengawali  terjadinya  hiperglikemia.  Salah  satu  tumbuhan  yang  memiliki  potensi  penurunan  glukosa  darah adalah  daun Tithonia  diversifolia karena  mengandung  senyawa  flavonoid  dan  seskuiterpen.  Tujuan  penelitian  ini adalah  (1)  menganalisis  efek  ekstrak  daun  kembang  bulan  terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar; dan (2) menentukan pemberian ekstrak daun kembang bulan yang memiliki pengaruh efektif dalam penurunan kadar glukosa  darah  tikus  Wistar.  Rancangan  yang  digunakan  adalah True  Experimental-Post  Test  Only  Control  Group Design mengacu  pada  Sambrook  &  Russel.  Sampel  yang  digunakan  adalah  tikus  Wistar  sebanyak  25  ekor  yang terbagi dalam 5 kelompok perlakuan dan 5 kali pengulangan yaitu P1 (kontrol), P2 (hanya alloxan), P3 (alloxan dan dosis  1,28  ml/200g  BB),  P4  (aloxan  dan  dosis  2,57  ml/200g  BB),  dan  P5  (alloxan  dan  dosis  5,14  ml/200g  BB). Analisis data menggunakan One-way ANOVA yang dilanjutkan uji Duncan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ada efek  ekstrak  daun  kembang  bulan  terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar.  Daun  kembang  bulan memiliki efek antidiabetes atau berperan sebagai antihiperglikemik pada pemberian dosis sebesar 5,14 ml/200g BB.
Kata kunci : diabetes mellitus, tithonia, alloxan, flavonoid

## Pendahuluan
Diabetes Mellitus (DM) merupakan penyakit metabolik  yang  ditandai  kenaikan  kadar  gula darah  atau  hiperglikemia  kronik  (Powers,  2001). Hiperglikemia  terjadi  karena  kelainan  sekresi insulin, kerja insulin atau keduanya (Purnamasari, 2009).
WHO  menggolongkan  DM  ke  dalam kelompok  penyakit  kronis  tidak  menular  dan diidap  melalui  gaya  hidup  (Putri  &  Isfandiari, 2013).  DM  dapat  menyerang  segala  umur  dan sosial ekonomi. Perubahan gaya hidup mempengaruhi kebiasan dan pola makan masyarakat  (Wild  et  al.,  2004).  DM  menjadi penyakit  global  endemik  (Shaw  et  al.,  2010)  dan masalah  kesehatan  utama  dunia  (Gheith  et  al., 2016).  Indonesia  menduduki  posisi  keempat dalam  jumlah  penderita  DM  terbanyak  di  dunia setelah  India,  Cina  dan  Amerika  Serikat  (Wild  et al ., 2004).  Hasil  Riset  Kesehatan  Dasar  tahun 2013 menunjukkan jumlah absolut, yaitu penderita
DM  sekitar  12.191.564  orang  (Depkes  RI,  2014). Hal  ini  menunjukkan  besarnya  jumlah  penderita DM  yang  bila  tak  tertangani  dapat  mengurangi kualitas sumber daya manusia Indonesia (Indariani, 2011).
Penggunaan  obat-obat  hipoglikemik  dapat menyebabkan  beberapaefek  samping.  Berbagai efek samping obat kimia sintetik dan memerlukan biaya yang relatif mahal menyebabkan pengobatan tradisional mendapat tempat dimasyarakat  dan  menjadi  alternatif  pengobatan. Fenomena saat ini menunjukkan semakin banyak konsumen yang kembali ke alam termasuk dalam penggunaan obat antidiabetes.
Salah satu tumbuhan yang memiliki potensi obat  adalah  tanaman  kembang  bulan  ( Tithonia diversifolia A.  Gray)  (Hanum & van  der  Masen, 2002). T. diversifolia secara tradisional digunakan sebagai obat sakit perut, kembung, diare, dan anti radang  atau  antiinflamasi  (Dalimartha,  2000). Bagian tanaman T. diversifolia yang dimanfaatkan
sebagai  sumber  zat  kimia  adalah  daun,  akar, batang,  buah,  dan  biji  (Verawati  et  al ., 2011). Daun T.  diversifolia mengandung  senyawa alkaloid,  terpenoid,  flavonoid,  saponin,  tanin, polifenol,  dan  golongan  seskuiterpen  (Jamal  & Agusta, 1999). T. diversifolia merupakan tanaman yang digunakan masyarakat China untuk antidiabetes (Zhao et al ., 2012). Dosis penggunaan  daun T.  diversifolia oleh  masyarakat adalah 5 lembar setara 2 g.
Pembuktian  apakah  ekstrak  daun T. diversifolia dapat  menurunkan  kadar  glukosa darah  sangat  penting,  maka  perlu  dilakukan  uji pada  tikus  yang  diinduksi  Alloxan.  Alloxan menyebabkan  kerusakan  dan  kematian  sel  islet pankreas  dalam  hewan  percobaan,  diabetes  dan menurunkan  atau  menghentikan  sekresi  insulin. Kerja  sitotoksik  Alloxan  ini  diperantarai  oleh Reactive Oxygen Species (ROS), dimana Alloxan dan  produk  reduksinya  memasuki  siklus  redoks, dan membentuk produk samping radikal superoksida.  Radikal  ini  mengalami  dismutasi menjadi  H 2 O 2 menjadi  radikal  hidroksil  yang sangat  reaktif  yang  terbentuk  melalui  reaksi Fenton. Kerja ROS simultan dengan meningkatnya kadar kalsium sitosol yang menyebabkan  cepat  rusaknya  sel  β  pankreas (Winarsi et al., 2013).
Berdasarkan  berbagai  uraian  di  atas  maka perlu kiranya dilakukan penelitian untuk membuktikan  adanya  efek  ekstrak  daun T. diversifolia terhadap  kadar  glukosa  darah  tikus Wistar ( Rattus norvegicus ) yang diinduksi alloxan.Tujuan penelitian ini adalah(1) menganalisis ekstrak daun T. diversifolia terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar ( Rattus  norvegicus );  (2)  Menentukan  pada pemberian ekstrak daun T. diversifolia berapakah yang  memiliki  pengaruh  efektif  dalam  penurunan kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar  ( Rattus norvegicus ).

## Metode

## Jenis Penelitian
Jenis  penelitian  ini  adalah  eksperimental sesungguhnya  secara in  vivo yang  dilakukan  di laboratorium.  Rancangan  yang  digunakan  adalah True  Experimental-Post  Test  Only  Control  Group Design mengacu  pada  Sambrook  &  Russel (2001).

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  pada  tanggal  14 Maret  sampai  11  Juni  2016  bertempat  di  UPT Materai  Medica  Batu  (ekstraksi  terstandar)  dan Laboratorium  Kimia  Universitas  Muhammadiyah Malang  (pemberian  perlakuan  dan  uji  glukosa darah).

## Populasi dan Sampel
Populasi  penelitian  ini  adalah  tikus  Wistar ( Rattus norvegicus) berumur  ±2  bulan  dengan berat  badan  100-200  gr.  Sampel  penelitian  ini adalah  tikus  jantan  yang  berumur  ±2  bulan sebanyak 25 ekor.

## Populasi dan Sampel
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  dengan  5  perlakuan  (4  perlakuan uji  dan  1  perlakuan  kontrol)  dan  5  kali  ulangan sebagai  berikut:  (1)  Kelompok  I  (P1):  Tanpa perlakuan  (kontrol).  (2)  Kelompok  II  (P2): Perlakuan  hanya  diinduksi  alloxan  2  ml.  (3) Kelompok  III  (P3):  Perlakuan  diinduksi  alloxan  2 ml  dan  ekstrak  daun  kembang  bulan  dosis  1,28 ml/200g  BB.  (4)  Kelompok  IV  (P4):  Perlakuan diinduksi alloxan 2 ml dan ekstrak daun kembang bulan  dosis  2,57  ml/200g  BB.  (5)  Kelompok  V (P5): Perlakuan diinduksi alloxan 2 ml dan ekstrak daun kembang bulan dosis 5,14 ml/200g BB.

## Prosedur Penelitian
1.  Tahap Persiapan Alat dan Bahan
Alat - alat yang digunakan dalam pemeliharaan  adalah  bak  (50x40cm),  kawat penutup,  tempat  makan  dan  minum.  Alat-alat untuk  membuat  ekstrak  daun  kembang  bulan adalah  toples  tertutup,  corong  gelas,  timbangan analitik,  gelas  ukur,  botol Schott ,  erlenmeyer, rotary  evaporator , beaker  glass ,  alkoholmeter, dan shaker digital. Alat-alat untuk menginduksikan alloxan  pada  tikus  adalah  spuit  insulin  1  cc/ml, dan  sarung  tangan.  Alat-alat  untuk  memberikan ekstrak  pada  tikus  adalah  sonde  dan  suntikan  3 ml.  Alat-alat  untuk  menganalisis  kadar  glukosa darah adalah pisau bedah, glukometer tipe Digital GlucoDr TM , dan GlucoDr TM Strip.
Bahan  dalam  pemeliharaan  adalah  pakan tikus  BR-1,  air  minum,  dan  sekam.  Bahan  untuk membuat  ekstrak  adalah  daun  kembang  bulan, etanol  96%,  dan  kertas  saring.  Bahan  untuk perlakuan  adalah  ekstrak  daun  kembang  bulan, dan  Alloxan.  Bahan  untuk  analisis  glukosa  darah adalah serum darah tikus.

## 2.  Tahap Pelaksanaan
Tahap  pelaksanaan  penelitian  ini  antara  lain (1)  Tahap  pemeliharaan  (Aklimatisasi  selama  7 hari)  yaitu  tikus  dimasukkan  ke  kandang,  diberi makan  sebanyak  10  gr/200  gr  BB  tikus  dan minum sebanyak 20 ml/200 gr BB tikus setiap hari dan  melakukan  pembersihan  dan  perawatan kandang  dengan  cara  mengganti  sekam  setiap  2 hari  sekali;  (2)  Tahap  membuat  tikus  Wistar hiperglikemia  dengan  cara  diinduksi  larutan alloxan  1,6%  sebanyak  2  ml/hari/ekor  tikus selama  14  hari  berturut-turut  mulai  hari  ke-8 setelah  aklimatisasi  sampai  hari  ke-21.  Untuk mengetahui tikus telah hiperglikemia dan
mengetahui  acuan  mengukur  penurunan  kadar glukosa  darah,  maka  dilakukan  pengukuran menggunakan  glukometer.  (3)  Tahap  perlakuan dan  pemberian  ekstrak  yaitu  ekstrak  daun kembang  bulan  diberikan  sesuai  frekuensi pemberian  dosis  selama  21  hari  mulai  hari  ke-22 setelah  aklimatisasi  hingga  hari  ke-42.  Menurut Sinaga et al . ( 2014) volume cairan maksimal yang dapat  diberikan  per  oral  pada  tikus  adalah  5  ml. Faktor konversi dosis dari manusia Eropa dengan berat  badan  70  kg  terhadap  hewan  uji  (tikus) dengan  berat  badan  200  gr  adalah  0,018.  Berat badan rata-rata orang Indonesia adalah 50 kg.
Menurut  Hidayat  &  Napitupulu  (2015)  dosis penggunaan  daun T.  diversifolia sebagai  obat tradisional  bagi  masyarakat  adalah  2  g.  Dosis konversi tikus = 2000 mg x (70kg/50kg) x 0,018 = 25,7  mg/200g  BB/hari.  Dalam  penelitian  ini digunakan  dosis  ekstrak  daun  kembang  bulan yang  bertingkat  sebagaimana  dijelaskan  pada rancangan percobaan.

## 3.  Tahap Pengamatan
Tahap pengukuran kadar glukosa darah tikus Wistar sesudah perlakuan pemberian ektrak daun kembang  bulan:  (1)  Kadar  glukosa  darah  di tentukan  dengan  menggunakan  alat  glukometer tipe  GlukoDr TM ;  (2)  Mengambil  darah  dari  bagian ekor tikus, dengan cara ekor tikus dibersihkan lalu dipijat  atau  diurut  perlahan-lahan,  kemudian bagian  ujung  ditusuk  dengan  jarum  (lancet);  (3) Menempelkan  darah  yang  keluar  pada  strip glukometer; (4) Kadar glukosa darah akan terukur dan  nampak  pada  layar  glukometer  setelah  5 detik, dinyatakan dalam mg/dl.

## Teknik Pengumpulan Data
Teknik yang digunakan untuk pengumpulan data  dalam  penelitian  ini  adalah  teknik  observasi yaitu  teknik  pengambilan  data  secara  langsung dengan  prosedur  berencana  yang  melibatkan kegiatan  melihat  dan  mencatat  aktivitas  tertentu. Observasi  dilakukan  terhadap  penurunan  kadar glukosa  darah  setelah  diberi  berbagai  dosis ekstrak  daun  kembang  bulan.  Untuk memperoleh data penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar dengan  menggunakan  alat  digital  GlukoDr TM . Selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  tabel  kadar glukosa darah tikus Wistar.

## Teknik Analisis Data
Teknik analisis data yang digunakan adalah One-way ANOVA yang bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya pengaruh dari perlakuan yang  diberikan.  Untuk  melihat  perlakuan  yang paling  efektif  maka  digunakan  uji  Duncan. sebelum  uji ANOVA dan  uji  Duncan  semua  data yang diperoleh terlebih dahulu diuji prasyarat yaitu uji normalitas dan uji homogenitas. Semua proses analisis data dilakukan dengan bantuan SPSS 23 for Windows.

## Hasil dan Pembahasan
Penelitian
untuk mengetahui efek pemberian  dosis  ekstrak  daun T.  diversifolia terhadap  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar  yang diinduksi  dengan  alloxan  secara in  vivo telah dilakukan  di  laboratorium  yang  menggunakan kelompok perlakuan.
Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  kadar  glukosa  darah  tikus pada  masing-masing  perlakuan  berbeda-beda, sebagaimana ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1.   Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar pada Berbagai Perlakuan (Pengukuran hari ke-21 setelah perlakuan)
Perlakuan Ulangan (mg/dl) Total Rerata 1 2 3 4 5 P1: Kelompok I (tanpa perlakukan/kontrol) 126 113 119 124 129 611 122,2* P2: Kelompok II (perlakuan hanya diinduksi alloxan) 573 591 541 550 562 2817 563,4 P3: Kelompok III (Perlakuan diinduksi alloxan dan ekstrak 1,28 ml/200g BB) 234 250 294 284 273 1335 267,0 P4: Kelompk IV (Perlakuan diinduksi alloxan dan ekstrak 2,57 ml/200g BB) 207 179 167 208 200 961 192,2 P5: Kelompok V ((Perlakuan diinduksi alloxan dan ekstrak 5,14 ml/200g BB) 148 102 130 141 163 684 136,8*
Berdasarkan Tabel 1 tentang kadar glukosa darah tikus Wistar pada berbagai perlakuan dapat diketahui  bahwa  kadar  glukosa  darah  dengan rerata  tertinggi  adalah  pada  kelompok  II  yaitu 563,4 mg/dl dan terendah adalah kelompok I yaitu 122,2  mg/dl  (normal).  Perlakuan  yang  memiliki
rerata  terendah  atau  mendekati  normal  adalah Kelompok  V  yaitu  136,8  mg/dl.  Data  hasil penelitian  kadar  glukosa  darah  tikus  yang  telah diperoleh  selanjutnya  diuji  normalitas  untuk melihat  apakah  data  berdistribusi  normal  atau tidak.  Apabila  data  telah  memenuhi  syarat
normalitas  maka  selanjutnya  diuji  homogenitas untuk  melihat  varian  data  homogen  atau  tidak, lalu kemudian dilanjutkan pada analisis varian.

## Hasil Analisis Data Penelitian
Hasil  uji  normalitas  menunjukkan  bahwa keseluruhan  nilai  probabilitas  baik  menggunakan statistika  Kolmogorov-Smirnov  (nilai  Sig  0,200) maupun  Shapiro-Wilk  (nilai  Sig  antara  0,0243 sampai  0,926)  lebih  besar  dari  tingkat  signifikasi 5%.  Dengan  demikian  asumsi  kenormalan dipenuhi  atau  data  berdistribusi  normal. Hasil  uji homogenitas me nunjukkan bahwa nilai probabilitas  (nilai  Sig.  sebesar  0,169)  lebih  besar dari  tingkat  signifikasi  5%,  sehingga  dapat dikatakan  bahwa  asumsi  homogenitas  varian dipenuhi  (memiliki  varian  data  yang  sama  atau homogen).
Pengujian  hipotesis  menggunakan One- Way  ANOVA .  Adapun  hipotesis  yang  akan  diuji, yaitu 1) Ada pengaruh ekstrak daun T. diversifolia terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus
Wistar  ( Rattus  norvegicus ),  dan  2)  Pemberian dosis ekstrak daun T. diversifolia sebesar 5,14 ml memiliki pengaruh paling efektif dalam penurunan kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar.  Hasil  uji One- Way  ANOVA ditunjukkan  pada  Tabel  2.  Tabel  2 menunjukkan bahwa nila i sig p = 0,000 < α (0,05) yang berarti ada perbedaan sangat signifikan nilai rata-rata  kadar  glukosa  darah  diantara  kelima kelompok perlakuan atau  dengan kata  lain  varian populasi  adalah  tidak  sama.  Oleh  karena  itu, hipotesis  nol  (H 0 )  ditolak  yang  berarti  ada pengaruh  ekstrak  daun T.  diversifolia terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar. Setelah  diketahui  bahwa  ada  pengaruh,  maka dilanjutkan  dengan  Uji  Duncan ’s.  Uji  Duncan’s dilakukan  untuk  mengetahui  tingkat  perlakuan atau  dosis  yang  paling  efektif  dalam menurunkan kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar,  hasil  uji Duncan’s ditunjukkan pada Tabel 3.

## Tabel 2. Hasil Uji One Way ANOVA
Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 653983.840 4 163495.960 432.895 0,000 Within Groups 7553.600 20 377.680 Total 661537.440 24
Catatan:  F hitung >  F tabel ,  maka  Ho  ditolak  dan  Hi  diterima,  artinya  rata-rata  populasi  adalah  tidak  identik  (sekurang- kurangnya satu rata-rata tidak sama)
Tabel 3. Hasil Uji Duncan
Perlakuan N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 4 P1: Kelompok I (tanpa perlakukan/kontrol) 5 (a) P5: Kelompok V ((Perlakuan diinduksi Alloxan dan ekstrak 5,14 ml/200g BB) 5 (a) P4: Kelompk IV (Perlakuan diinduksi alloxan dan ekstrak 2,57 ml/200g BB) 5 (b) P3: Kelompok III (Perlakuan diinduksi alloxan dan ekstrak 1,28 ml/200g BB) 5 (c) P2: Kelompok II (perlakuan hanya diinduksi alloxan) 5 (d)
Keterangan :  (a) : rata-rata P1 < P5 (122,20 < 136,80) = tidak berbeda nyata
(b) : rata-rata P4 > P5 (192,20 > 136,80) = berbeda nyata (c)  : rata-rata P3 > P5 (267,00 > 136,80) = berbeda nyata
(d) : rata-rata P2 > P5 (192,20) > 136,80) = berbeda nyata
Tabel  3 tentang  hasil  uji  Duncan’s menunjukkan  bahwa  rata-rata  penurunan  kadar glukosa darah tikus Wistar dengan glukosa darah mendekati  normal  adalah  perlakuan  P5,  yaitu perlakuan Alloxan dan ekstrak daun T. diversifolia dengan  dosis  5,14  ml  dengan  nilai  rata-rata 136,80  mg/dl.  Pada  perlakuan  P1  (kontrol) dengan rata-rata 122,20 mg/dl dan P5 (dosis 5,14 ml) dengan rata-rata 136,80 mg/dl keduanya tidak berbeda  nyata,  rata-rata  kadar  glukosa  darah keduanya  menunjukkan  nilai  yang  signifikan apabila  dibandingkan  dengan  perlakuan  P2 (hanya  alloxan)  dengan  rata-rata  536,40  mg/dl.
Perlakuan  P5  (dosis  5,14  ml)  dengan  rata-rata 136,80  berbeda  nyata  dibandingkan  dengan perlakuan  P3  (dosis  1,28  ml)  dengan  rata-rata 267,00 mg/dl dan P4 (dosis 2,57 ml) dengan rata- rata 192,20 mg/dl karena kadar glukosa darahnya masih  tinggi  dibandingkan  dengan  perlakuan  P1 (kontrol)  dengan  rata-rata  122,20  ml/dg.  Dengan demikian  pemberian  dosis  ekstrak  daun T. diversifolia sebesar  5,14  ml  memiliki  pengaruh paling  efektif  dalam  penurunan  kadar  glukosa darah tikus Wistar.
Pengaruh  Ekstrak  Daun  Kembang  Bulan Terhadap  Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah Tikus Wistar Berdasarkan analisis terhadap hasil
penelitian yang dilakukan oleh peneliti menggunakan  one-way  ANOVA  menunjukan bahwa  ada  pengaruh  ekstrak  daun T.  diversifolia terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus Wistar.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  daun T. diversifolia memiliki  efek  antidiabetes  atau berperan  sebagai  antihiperglikemik.  Menurut Chon  et  al.  (2000) T.  diversifolia memang mengandung dua komponen utama yang memiliki peran  antidiabetik  atau  antihiperglikemik  yaitu flavonoid  dan  seskuiterpen.  Komponen  flavonoid dan  seskuiterpen  paling  banyak  pada  bagian daun.
Flavonoid diketahui memiliki aktifitas antioksidan  yang  berkaitan  dengan  aktifitas antidiabetes  (Jagtap  &  Bapat,  2010).  Flavonoid diketahui  memiliki  aktifitas  antioksidan  yang diyakini  mampu  melindungi  tubuh  terhadap kerusakan  yang  disebabkan  spesies  oksigen reaktif,  sehingga  mampu  menghambat  terjadinya penyakit  degeneratif  seperti  DM  (Marianne  et  al., 2011). Terkait mekanisme penyembuhan penyakit diabetes,  flavonoid  diduga  berperan  secara signifikan meningkatkan aktivitas enzim antioksidan  dan  mampu  meregenerasi  sel- sel  β pankreas  yang  rusak  sehingga  defisiensi  insulin dapat  diatasi.  Flavonoid  yang  terkandung  di dalam  tumbuhan  diduga  juga  dapat  memperbaiki sensitifitas  reseptor  insulin.  Sehingga  adanya flavonoid  memberikan  efek  yang  menguntungkan pada keadaan DM (Abdelmoaty et al.,2010).
Flavonoid dapat menurunkan kadar glukosa darah  dengan  kemampuannya  sebagai  zat antioksidan.  Flavonoid  bersifat  protektif  terhadap kerusakan  sel β  sebagai  penghasil  insulin  serta dapat mengembalikan sensitivitas reseptor insulin pada  sel  dan  bahkan  meningkatkan  sensitivitas insulin  (Winarsi  et  al.,2012).  Antioksidan  dapat menekan  apoptosis  sel  β  tanpa  mengubah proliferasi  sel  β  pankreas.  Antioksidan  dapat mengikat  radikal  bebas  yang  telah  dibuktikan dalam  beberapa  penelitian,  sehingga  dapat mengurangi resistensi  insulin (Ruhe &  McDonald, 2001).
Flavonoid  yang  diekstrak  secara  etanolik berpotensi  menurunkan  kadar  glukosa  darah pada tikus DM tipe 1 yang diinduksi Streptozotocin  (STZ)  dimana  aktivitas  enzim hepatik  glukosa-6-fosfatase  menurun  secara nyata,  ini  membuktikan  bahwa  efek  penurunan glukosa berhubungan dengan peningkatan metabolisme  glukosa  pada  kelompok  tikus  yang diberikan flavonoid selama 21 hari (Zhang & Tan, 2000;  Syamsul  et  al.,  2011).  Tikus  yang  diberi perlakuan  alloxan  akan mengalami kerusakan sel pankreas dan menyebabkan hiperglikemia persisten.  Sehubungan  dengan  itu  menurut
Winarsi  et  al.  (2012)  flavonoid  bekerja  di  luar pankreas.  Flavonoid  menstimulisai  pemanfaatan glukosa  perifer,  dengan  cara  meningkatkan  jalur glikolitik  dan  glikogenik,  yang  secara  simultan menekan jalur glikogenolisis dan glukoneogenesis. Melalui mekanisme itu flavonoid dapat  mengendalikan  glukosa  darah,  sehingga kadar  glukosa  darah  tikus  menurun.  Menurut Panjuantiningrum (2010) antioksidan pada flavonoid  dapat  menyumbangkan  atom  hidrogen. Flavonoid  akan  teroksidasi  dan  berikatan  dengan radikal  bebas  sehingga  radikal  bebas  menjadi senyawa lebih stabil.
Aktivitas antioksidan ini mampu menurunkan stress
oksidatif sehingga mengurangi  ROS  ( Reactive  Oxygen  Spesies ). Menurut  Widowati  (2008)  sumber  stress  oksidasi diabetes terjadi akibat perpindahan keseimbangan  reaksi  redoks  karena  perubahan metabolisme  karbohidrat  dan  lipid  yang  akan meningkatkan  pembentukan  ROS  dari  reaksi glikasi  dan  oksidasi  lipid,  sehingga  dapat menurunkan sistem pertahanan antioksidan.
Flavonoid  mampu  meregenerasi  sel  beta pankreas  dan  membantu  merangsang  sekresi insulin  (Dheer  &  Bhatnagar,  2010).  Mekanisme lain  dari  flavonoid  yang  menunjukkan  efek hipoglikemik yaitu mengurangi penyerapan glukosa  dan  mengatur  aktivitas  ekspresi  enzim yang  terlibat  dalam  metabolisme  karbohidrat (Brahmachari,  2011).  Ada  beberapa  mekanisme kerja  obat  hipoglikemik  oral,  yaitu  meningkatkan sekresi insulin (golongan sulfonilurea), meningkatkan kepekaan reseptor insulin sehingga absorpsi  glukosa  di  jaringan  perifer  meningkat, meningkatkan  kepekaan  insulin  jaringan  otot, jaringan  lemak  dan  hati,  serta  menghambat penguraian  polisakarida  menjadi  monosakarida. Flavonoid  mempunyai  mekanisme  sama  dengan obat  hipoglikemik  oral  golongan  sulfonilurea dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah  tikus dengan  cara  meningkatkan  sekresi  insulin  pada organ pankreas (Oktaria, 2013).
Flavonoid dapat mencegah komplikasi atau progresifitas  DM  dengan  cara  membersihkan radikal  bebas  yang  berlebihan,  memutuskan rantai  reaksi  radikal  bebas,  mengikat  ion  logam ( chelating )  dan  memblokade  jalur  poliol  dengan menghambat  enzim  aldose  reduktase.  Flavonoid juga memiliki efek penghambatan terhadap enzim α-gukosidase  melalui  ikatan  hidroksilasi  dan substitusi pada cincin β. Prinsip penghambatan ini serupa  dengan  acarbose  yang  selama  ini digunakan  sebagai  obat  untuk  penanganan diabetes  mellitus,  yaitu  dengan  menghasilkan penundaan  hidrolisis  karbohidrat,  disakarida  dan absorpsi glukosa serta menghambat metabolisme sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa (Ridwan  et al ., 2012;  Taufiqurohman,  2015).  Flavonoid merupakan  senyawa  inhibitor  yang  kuat  terhadap enzim α-amilase yang berfungsi untuk
pemecahan  karbohidrat.  Daya  inhibisi  enzim  ini menyebabkan  proses  pemecahan  dan  absorbsi karbohidrat  akan  terganggu,  sehingga  kadar  gula darah dapat diturunkan (Yulianty et al ., 2015). T. diversifolia juga memiliki komponen yang disebut  seskuiterpen  yang  berfungsi  mengurangi ketidaksensitifan  terhadap  insulin  (Miura  et  al., 2002).  Seskuiterpen  secara  signifikan  mampu meningkatkan  metabolisme  glukosa  tanpa  efek toksik  pada  adiposit  (Zhao  et  al.,  2012). Seskuiterpen  dapat  menghambat  faktor  inflamasi pada  sel  mesangial  ginjal  manusia  dalam  kondisi hiperglikemik (Wang et al., 2010).
Seskuiterpen  yang  diisolasi  dari  ekstrak daun T.  diversifolia dilaporkan  memiliki  daya sebagai agen fitoterapetik melawan infeksi bakteri pada  organ  (Pradeep  et  al ., 2010).  Seskuiterpen yang diisolasi dari tanaman menunjukkan aktivitas penghambat α-glukosidase yang signifikan (Choudhary,  2001).  Seskuiterpen  juga  bisa menghambat ekspresi induksi glukosa tinggi pada inflamasi sitokinin pada sel mesangial manusia.
Mekanisme  kerja  seskuiterpen  yang  kedua adalah  terkait  dengan  kemampuannya  dalam menghambat ( Inhibit ) Advanced Oxidation Protein Product-Induced MCP-1 Expression in Podocytes. Advanced  oxidation  protein  products (AOPPs) pertama  kali  ditemukan  dan  dilaporkan  sebagai racun uremik oleh Witko-SARSAT dan  ditemukan hubungannya  dengan  diabetes  (Piwowar  et  al ., 2009).  AOPPs  adalah  produk  protein  yang mengandung  dityrosine  dan  terbentuk  selama stres  oksidatif  oleh  reaksi  protein  serum  dengan oksidan  diklorinasi  (Witko-Sarsat,  1998).  Studi terbaru  menemukan  bahwa  akumulasi  kronis AOPPs menyebabkan peradangan di kedua ginjal pada penderita diabetes dan nondiabetes dengan meningkatkan  secara  signifikan  dan  berlebih infiltrasi  makrofag  (Li  et  al . ,  2007).  AOPPs  juga dapat menurunkan ekspresi nefrin dan podocin di podocytes,  sehingga  terjadi  podocyte  apoptosis dan penghapusan (Yanget al . , 2010).
Seskuiterpen telah dilaporkan menunjukkan efek  anti-inflamasi  dengan  menghambat  IKK  dan IκBα  fosforilasi  dan  mempengaruhi  kemampuan mengikat  DNA  (Saadane  et  al.,  2007).  Penelitian lain  telah  menunjukkan  bahwa  seskuiterpen melakukanblok  MCP-1  mRNA  dan  ekspresi protein  dengan  menghambat  aktivitas  NF-kB dalam  glomerulonefritis  eksperimental  dan  sel mesangial  ginjal  manusia  serta  di  podocytes (Sanchez-Niño  et al.,  2013).  Seskuiterpen  secara efektif dapat menipiskan dan mengaktivasi AOPP- diinduksi  NF- kB,  degradasi  IκBα,  dan  ekspresi MCP-1  yang  dirangsang  tinggi  glukosa  pada  sel mesangial tikus (Wang et al ., 2013).
Berdasarkan  berbagai  uraian  di  atas  dapat dikatakan  bahwa T.  diversivolia memiliki  efek terhadap  metabolisme  glukosa  melalui  berbagai mekanisme  termasuk  dalam  fungsinya  yang seperti  subtansi  insulin,  menghambat  aktivitas
insulinase,  meningkatkan  sekresi  insulin  dari  sel β-pankreas  atau  dari  sumber  insulin,  dan memungkinkan peningkatan regenerasi sel pankreas.  Menurut  Thongsom  et  al.  (2013) T. diversivolia memang merupakan sumber antioksidan,  dapat  meningkatkan  metabolisme glukosa, dan mampu mereduksi elevasi profil lipid dan peroksidasi lipid.

## Dosis  Ekstrak  Daun  Kembang  Bulan  yang Memiliki Pengaruh Paling Efektif
Hasil  analisis  menggunakan  uji  Duncan’s menunjukkan  bahwa  pemberian  dosis  ekstrak daun kembang bulan ( T. diversifolia ) sebesar 5,14 ml  memiliki  pengaruh  paling  efektif  dalam penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar. Perlakuan  dengan  dosis  5,14  ml  memiliki  nilai rata-rata  136,80  mg/dl  atau    tidak  berbeda  nyata dengan  perlakuan  kontrol  negatif  atau  normal dengan  rata-rata  122,20  mg/dl.  Dosis  ekstrak daun kembang bulan sebesar 5,14 ml merupakan dosis  yang  berpotensi  untuk  direkomendasikan karena mendekati normal.
Suatu  dosis  yang  memiliki  efek  mendekati normal  menunjukkan  bahwa  senyawa  aktif  yang terkandung  di  dalamnya  terkonsentrasi  efektif optimum,  sedangkan  pada  dosis  lain  masih kurang  sehingga  mempunyai  efek  yang  kurang efektif  dan  tidak  memadai,  sehingga  efek antihiperglikemik yang muncul lebih kecil (Fidrianny et al., 2003). Telah diketahui sebelumnya  bahwa  pada  beberapa  penelitian menunjukkan  hasil  semakin  tinggi  dosis  ekstrak yang  diberikan  maka  efek  yang  ditimbulkan  juga semakin  besar.  Hal  ini  disebabkan  karena tingginya dosis yang diberikan sehingga konsentrasi  senyawa  aktif  pada  ekstrak  juga semakin  tinggi  dan  menyebabkan  kemampuan untuk  menekan  atau  daya  anti  semakin  kuat (Purwaningdyah et al ., 2015).
Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan  hasil penelitian  Beu et  al (2014)  tentang  uji  efektivitas ekstrak  etanol  tunas  pisang  goroho  ( Musa acuminate L.)  terhadap  penurunan  kadar  gula darah  tikus  putih.  Hasil  penelitian  tersebut menunjukkan  penurunan  kadar  glukosa  darah yang  sangat  signifikan  dari  ekstrak  etanol  tunas pisang  goroho  dosis  0,22  g/kgBB  disebabkan karena  dosis  ini  merupakan  varian  dosis  yang paling  tinggi  sehingga  efek  penurunannya  paling besar  dibandingkan  dosis  0,55  g/kg  BB  dan  0,11 g/kgBB.  Bahkan  efek  penurunan  kadar  glukosa darah tikus pada pemberian ekstrak etanol pisang goroho  dosis  0,22  g/kgBB  lebih  besar  dari  efek penurunan  kadar  glukosa  darah  pada  kontrol positif  (glibenklamid).  Akan  tetapi  perbedaan  ini tidak  memberikan  perbedaan  nyata  secara signifikansi  antara  ekstrak  etanol  tunas  pisang goroho dan glibenklamid, sehingga dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  tunas  pisang
goroho  memberikan  efek  antihiperglikemik  yang sama dengan glibenklamid.
Hal  ini  juga  sesuai  dengan  hasil  penelitian Nugroho  (2002)  bahwa  pemberian  ekstrak  air buah ketumbar dengan dosis terendah yaitu 0.014 b/v  tidak  menurunkan  secara  bermakna  kadar gula  darah  mencit  ( P>0.05) .  Dilain  pihak, pemberian  dosis  tertinggi  yaitu  0.035  b/v  mampu menurunkan  secara  bermakna  ( P<0.05) kadar gula  darah  mencit  yang  dibebani  glukosa. Meskipun demikian efek hipoglikemiknya masih di bawah  tolbutamid.  Sementara  itu  pada  penelitian Yulianty  et  al  (2015)  berdasarkan  uji  statistika pemberian  ekstrak  biji  ketumbar  dosis  tertinggi mempunyai  efek  menurunkan  kadar  gula  darah mencit  yang  diinduksi  aloksan  secara  bermakna P<0.05 hingga kadar gula darah menjadi normal. Penelitian  yang  dilakukan  Rini  et  al  (2013) juga  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  dosis ekstrak  putri  malu  yang  diberikan  maka  semakin rendah  kadar  BUN  dan  kreatinin.  Dari  hasil penelitian  yang  dilakukan,  terlihat  bahwa  dosis 800  mg/kg  BB  adalah  dosis  yang  paling mendekati  kontrol  positif  sehingga  kadar  BUN lebih  rendah  dibanding  dosis  400  mg/kg  BB  dan dosis 600 mg/kg BB, sedangkan dosis 400 mg/kg BB adalah dosis yang mendekati kontrol.
Meski  demikian,  menurut  Fidrianny  et  al . (2003)  bukan  berarti  semakin  tinggi  dosis  juga akan semakin efektif, karena bisa jadi pada dosis tinggi  terdapat  zat  lain  yang  mempunyai  efek berlawanan  dalam  jumlah  efektif  yang  memadai, sehingga  efek  yang  muncul  lebih  kecil.  Hal sejalan dengan Kurniawan et al (2014) bahwa hal tersebut diduga  terkait dengan banyaknya kandungan  senyawa  dan  bahan  aktif  yang  ada pada  ekstrak  daun  yang  kompleks,  yang  masing- masing  bekerja  secara  tidak  spesifik.  Hal  ini sering dijumpai pada aktivitas ekstrak bahan alam yang merupakan campuran multikomponen, dimana  komponen-komponen  tersebut  dapat saling  sinergis  atau  antagonis.  Kemungkinan pada dosis lebih besar, ekstrak dapat memperparah atau tidak berpengaruh.
Sehubungan  dengan  itu,  maka  menurut Lusiana  et  al  (2013)  dalam  mengkonsumsi  obat, jamu,  dan  sejenisnya  hendaklah  sesuai  dengan
dosis  karena  jika  berlebih  akibatnya  akan  dapat merugikan diri kita sendiri. Pemberian kadar dosis yang  berlebih  dapat  menyebabkan  senyawa  aktif bisa jadi merugikan. Sesuai dengan pernyataan di atas dosis tertentu ternyata dapat bersifat sebagai racun dan dapat pula bersifat sebagai obat.
Tikus  memiliki  peran  yang  sangat  penting dalam  percobaan  medis,  menurut Foundation  for Biomedical Research (FBR) 95% hewan laboratorium  adalah  tikus.  Ilmuwan  dan  peneliti bergantung  pada  tikus  karena  beberapa  alasan salah  satunya  adalah  sebagian  besar  tikus percobaan  medis  hampir  identik  secara  anatomi, fisiologi, genetik, karakteristik biologi dan perilakunya  sangat  mirip  manusia  serta  banyak gejala  kondisi  manusia  dapat  direplikasi  pada tikus.  Tikus  mempunyai  kemampuan  metabolik yang  relatif  cepat  sehingga  lebih  sensitif  bila digunakan  dalam  penelitian  yang  berhubungan dengan  metabolik  tubuh  yang  didasarkan  pada patogenesis  penyakit  tersebut  pada  manusia (Kram, 2001).
Pemilihan  tikus  penelitian  idealnya  harus dipilih  semirip  mungkin  dengan  kondisi  manusia, utamanya dalam hal absorpsi, distribusi, metabolisme,  dan  ekskresi  terhadap  senyawa yang ada di T. diversifolia . Hal ini dilakukan untuk memperkecil  perubahan  respon  antarjenis  dan dalam  satu  jenis  tikus  terhadap  efek  senyawa yang ada di T. diversifolia (Monica, 2012).

## Simpulan
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  maka dapat  ditarik  kesimpulan  sebagai  berikut.  1)  Ada pengaruh  ekstrak  daun T.  diversifolia terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  tikus  Wistar ( Rattus  norvegicus ).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa daun T.  diversifolia memiliki  efek  antidiabetes atau  berperan  sebagai  antihiperglikemik.  2) Pemberian  dosis  ekstrak  daun T.  diversifolia sebesar  5,14  ml/200g  BB  memiliki  pengaruh paling  efektif  dalam  penurunan  kadar  glukosa darah  tikus  Wistar  ( Rattus  norvegicus )  dengan nilai  rata-rata  136,80  mg/dl  atau    tidak  berbeda nyata  dengan  perlakuan  kontrol  negatif  atau normal dengan rata-rata 122,20 mg/dl.

## Daftar  Referensi
Abdelmoaty,  M.A.,  Ibrahim,  M.A.,  Ahmed,  N.S.,
and Abdelaziz, M. A. 2010. Confirmatory  Studies  on  the  Antioxidant and  Antidiabetic  Effect  of  Quercetin  in Rats. Indian Journal of Clinical
Biochemistry , 25(2) pp.188-192. Brahmachari,  G.  2011.  Bio-Flavonoids  With Promising  Antidiabetic  Potentials:  A Critical Survey. Research Signpost, pp.187-212.
Chon,  H.,  Peng,  L.Y.,  Jiang,  B.,  Hon,  A.J.,  Lia,
Z.W.  and  Sun,  H.D.  2000.  Chemical constituents  from  Tithonia  diversifolia. Yannan Zhiwu Yanjiu , 22 pp.361-364.
Choudhary,  M. I.  2001.  New  α-glukosidase inhibitors  from  the  Mongolian  medicinal plant Ferula mongolica. Helvecita Chimica Acta , 84(8) pp.2409-2416.
Dalimartha,  S.  2000. Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia . Jakarta: Trubus Agriwidya.
Depkes  RI.  2014. Situasi  dan  Analisis  Diabetes.
Jakarta:  InfoDATIN,  Pusat  Data  dan Informasi Kementerian Kesehatan RI.
Dheer, R. and Bhatnagar, P. 2010, A study of the Antidiabetic  Activity  of  Barleria  prionitis Linn. Indian  Journal  of  Pharmacology , 42(2) pp.70-73.
Fidrianny,  I.,  Padmawinata,  K.,  Soetarno,  S.  and Yulinah,  E.  2003.  Efek  Antihipertensi dan  Hipotensi  beberapa  Fraksi  dari Ekstrak Etanol Umbi Lapis Kucai ( Allium schoenoprasum L.,  Lliliaceae). Jurnal Matematika dan Sains , 8(4) pp.147-150.
Gheith,  O.,  Farouk,  N.,  Nampoory,  N.,  Halim, M.A.,  and  Al-Otaibi,  T.  2016.  Diabetic kidney disease: world  wide difference of prevalence  and  risk  factors. Journal  of Nephropharmacology, 5(1) pp 49-56.
Hanum,  I.F.  and  van  der  Masen,  L.I.  G.  2002. Auxiliary Plants. J.Nat.Prod, 2002 pp.297-298.
Hidayat,  S.  and  Napitupulu,  R.M.  2015. Kitab Tumbuhan Obat . Jakarta: Agriflo. Indariani, S. 2011. Aktivitas AntihiperglikemikMinuman Fungsional Berbasis  EkstrakDaun  Kumis  Kucing (Orthosiphon aristatus BI.Miq)pada Mencit Hiperglikemikyang Diinduksi Dengan Streptozotocin. Tesis tidak diterbitkan. Bogor: Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
Jagtap, U.B. and Bapat, V.A. 2010. Artocarpus: A review of its traditional uses,
phytochemistry and pharmacology.
Journal  of  Ethnopharmacology ,  129 (2010) pp.142 –166.
Jamal,  Y.  and  Agusta,  A.  1999. Komponen  Kimia Dan  Uji  Daya  Antibakteri  EkstrakDaun Kirinyu  (Tithonia  diversifolia) .  Bogor: Laboratorium  Treub,Puslitbang  Biologi- LIPI.
Kram,  D.J.  and  Keller,  K.A.  (Eds).  2001.  Use  of laboratory  animals  in  toxicology  studies. In:  Toxicology  testing  handbook. New York, USA: Marcel Dekker.
Kurniawan,  B.,  Carolia,  N.,  Sukohar,  A.  and Thamrin,  A.P.Y.  2014. Antiinflammatory Effectiveness of Binahong Leaves Extracts(Anredera cordifolia (Ten.) Steenis)  in  Male  Sprague  Dawley  Rats Induced byCarrageenan. Naskah
Publikasi.  Bandar  Lampung:  Fakultas Kedokteran UNILA.
Li,  H.Y.,  Hou,  F.F.,  Zhang,  X.,  2007.  Advanced oxidation  protein  products  accelerate renal fibrosis in a remnant kidney model. Journal  of  the  American  Society  of Nephrology , 18(2) pp.528 –538.
Lusiana,  Dhafir,  F. and  Masrianih.  2013. Pengeruh  Pemberian  Ekstrak  Daun Pegagan  ( Centella  Asiatica )  Terhadap MotilitasSpermatozoa Mencit ( Mus Musculus ) Galur Ddy. e-Jipbiol , 2 pp.24- 29.
Marianne, Yuandani and Rosnani. 2011. Antidiabetic Activity From Ethanol Extract  Of  Kluwih’s  Leaf  ( Artocarpus camansi ). Jurnal  Natural ,  11(2)  pp.64- 68.
Monica, P.W. 2012. Efek Sitotoksik Ekstrak Etanol T.  diversifolia  (Hemsley)  A.  Gray. Terhadap  Sel  WiDR  Dibandingkan  5- Fluorouracil .  Skripsi  tidak  diterbitkan. Yogyakarta: Fakultas Kedokteran
Universitas Gadjah Mada.
Oktaria,  Y.E.  2013. Uji  Aktivitas  Antidiabetes Ekstrak  Etanol  Biji  Alpukat  (Persea americana  Mill.)  Terhadap  Tikus  Galur Wistar yang Diinduksi Aloksan. Makalah. Surakarta: Fakultas Farmasi  Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Panjuantiningrum,  F.  2010. Pengaruh  pemberian buah naga merah (H.Polyrhizus) terhadap  kadar  glukosa  darah  tikus putih  yang  diinduksi  aloksan. Skripsi tidak  diterbitkan.  Surakarta:  Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret.
Piwowar,  A.,  Knapik-Kordecka,  M.  and  Warwas, M.  2009.  Markers  of  oxidative  protein damage  in  plasma  and  urine  of  type  2 diabetic  patients. British  Journal  of Biomedical Science , 66 (4) pp.194 –199.
Powers,  A.  2001. Dibetes  Mellitus. Dalam
Braunwald,  E.,  Fauci,  A.,  Kasper,  D., Hauser,  S.,  Longo,  D.  &  Jameson,  J. Harrison’s Principles of Internal Medicine.  15 th Edition.  New  York:
McGraw-Hill.
Pradeep,  K.  R.,  Sujatha,  D.,  Saleem,  T.  S.  T, Chetty,  C.  M.  and  Ranganayakulu,  D. 2010. Potential hypoglycemic & hypolipidemic effect of Morus Indica and Asystasia  gangetica  in  Alloxan  induced diabetes  mellitus. Int.  J.  Res.  Pharm. Sci., 1 pp.51-56.
Purnamasari,  D.  2009. Diagnosis  dan  Klasifikasi Diabete  Mellitus .  Dalam:  Sudoyo,  A.W, Setiyohadi,  B.,  Alwi,  I.,  Marcellus,  S.  K., &  Setiati,  S.  (Eds).  Buku  Ajar  Ilmu
Penyakit  Dalam.  Jld  3  Ed.  5.  Jakarta: Interna Pub.
Purwaningdyah,  Y.  G.,  Widyaningsih,  T.  D.  and Wijayanti,  N.  2015.Efektivitas  Ekstrak Biji  Pepaya  ( Carica  papaya L.)  Sebagai Antidiare  pada  Mencit  yang  Diinduksi Salmonella  typhimurium.  Jurnal  Pangan dan Agroindustri, 3(4) pp . 1283-1293.
Putri,  N.  H.  K.  and  Isfandiari,  M.  A.  2013. Hubungan  Empat  Pilar  Pengendalian DM  Tipe  2  dengan  Rerata  Kadar  Gula Darah. Jurnal Berkala Epidemiologi, 1(2) pp.234 –243.
Ridwan,  A.,  Astrian,  R.  T.  and  Barlian,  A.  2012. Pengukuran  efek  antidiabetes  polifenol (polyphenon  60)  berdasarkan  kadar glukosa  darah  dan  histologi  pankreas mencit ( Mus musculus ) s.w. jantan yang dikondisikan  diabetes  mellitus. Jurnal Matematika dan Sains , 17(2) pp.78-82.
Rini,  A.  S.,  Hairuddin    and  Sugiyanta.  2013. Efektivitas  Ekstrak  Putri  Malu  ( Mimosa pudica Linn.)  sebagai  Nefroprotektor
pada  Tikus  Wistar  yang  Diinduksi Parasetamol Dosis Toksik. Jurnal Pustaka Kesehatan, 1(1) pp.15-19.
Ruhe,  R.  C.  and  McDonald,  R.  B.  2001.  Use  of antioxidant  nutrient  in  the  prevention and treatment of type 2 diabetes. J. Am.
Coll. Nutr ., 20(5) pp.363-369.
Saadane, A., Masters, S., Di Donato, J., Li, J. and Berger,  M.  2007.  Parthenolide  inhibits I κ B  kinase,  NF- κ B  activation,  and inflammatory  response  in  cystic  fibrosis cells  and  mice. American  Journal  of Respiratory  Cell  and  Molecular  Biology , 36(6) pp.728 –736.
Sanbrook,  J.  and  Russell,  D.  2001.  Molucelar Cloning:  a  Laboratory  Manual.  3rd Edition.  New  York:  Cold  Spring  Harbor Laboratory.
Shaw,  J.E.,  Sicre,  R.A.  and  Zimmet,  P.Z.  2010. Global  estimates  of  the  prevalence  of diabetes  for  2010  to  2030. Diabetes Research  and  Clinical  Practice ,  87 (2010) pp.4-14.
Sinaga,  A.F.,  Bodh,  W.  &  Lolo,  W.  A.  2014.  Uji Efek  Ekstrak  Etanol  Daun  Salam ( Syzygium  polyanthum (Wight.)  Walp) Terhadap  Penurunan  Kadar  Asam  Urat Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar  ( Rattus novergicus L.)  yang  Diinduksi  Potasium Oksonat. PHARMACON    Jurnal  Ilmiah Farmasi, 3(2) pp.141-145.
Syamsul,  E.  S.,  Nugroho,  A.E.  and  Pramono,  S.
2011.  Aktivitas  Antidiabetes  Kombinasi
Ekstrak  Terpurifikasi  Herba  Sambiloto (Andrographis paniculata (Burn.F.) NESS.)  dan  Metformin  Pada  Tikus  DM
Tipe  2  Resisten  Insulin. Majalah  Obat Tradisional, 16(3) pp.124 – 131.
Taufiqurohman.  2015.  Indonesian  Bay  Leaves  as
Antidiabetic for Type 2 Diabetes Mellitus. J. MAJORITY , 4(3) pp.101-108.
Thongsom, M., Chunglok, W., Kuanchuea, R. and Tangpong,  J.  2013.Antioxidant  and Hypoglycemic Effects of Tithonia diversifolia Aqueous  Leaves  Extract  in Alloxan-induced Diabetic Mice. Advances in Environmental Biology , 7(9) pp.2116-2125.
Chou, Aria, M., and Novicaresa, M. 2011. Aktifitas Anti  Inflamasi  Ekstrak  Etanol  Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia. A. Gray)  Terhadap  Mencit  Putih  Betina. SCIENTIA, 1(1) pp.47-52.
Wang, J. C., Zhao, Y. & Chen, S. J. 2013. AOPPs induce  MCP-1  expression  by  increasing ROS-mediated  activation  of  the  NF- kappaB  pathway  in  rat  mesangial  cells: inhibition  by  sesquiterpene  lactones. Cellular  Physiology  and  Biochemistry , 32(6) pp.1867 –1877.
Widowati,  W.  2008.  Potensi  Antioksidan  sebagai Antidiabetes. Jurnal Kedokteran
Marantana, 7(2).
Wild,  S.,  Roglic,  G.,  Green,  A.,  Sicree,  R.  and King,  H.  2004.  Global  prevalence  of diabetes:  estimates  for  the  year  2000 and  projections  for  2030. Diabetic  Care , 27(2004) pp.1047-1053.
Winarsi,  H.,  Sasongko,  N.  D.,  Purwanto,  A.  and Nuraeni, I. 2013. Ekstrak Daun Kapulaga Menurunkan Indeks Atherogenik  dan  Kadar  Gula  Darah Tikus Diabetes Induksi Alloxan.
AGRITECH , 33(3) pp.273-280.
Winarsi,  H.,  Sasongko,  N.  D.,  Purwanto,  A., Arinton,  I.  G.  and  Nuraeni,  I.  2012. In vitro antioxidant activity of the stem  and leaves Amomum cardamomum extracts.
International  Conference  on  Medicinal Plants. Purwokerto, 11-13 October.
Witko-Sarsat, V., Friedlander, M., and Khoa, T. N. 1998. Advanced oxidation protein products as novel mediators of inflammation and monocyte activation in chronic  renal  failure. The  Journal  of Immunology , 161(5) pp.2524 –2532.
Yang, L., Liang, M., and Zhou, Q. 2010. Advanced oxidation  protein  products  decrease expression  of  nephrin  and  podocin  in
podocytes via ROS-dependent activation  of  p38  MAPK. Science  China
Life Sciences , 53(1) pp.68 –77.
Yulianty, O., Sudiastuti, and Nugroho, R. A. 2015. Efek  Ekstrak  Biji  Ketumbar  (Coriandrum sativum  L.) terhadap Histologi  Pankreas Mencit  (Mus  musculus  L.)  Diabetik Aloksan. Prosiding Seminar Tugas Akhir
FMIPA UNMUL 2015 Periode Juni 2015,
Samarinda. Zhang, X.F., and Tan, B.K. 2000. Antihyperglycemic and anti-oxidant properties  of  Andrographis  paniculata  in normal  and  diabetic  rats. J.  Clin.  Exp. Pharmacol. J. Physiol, 27(3) pp.58-63.
Zhao, G., Li, X., Chen, W., Xi, Z., and Sun, L.
2012. Three new sesquiterpenes from
Tithonia diversifolia and their anti- hyperglycemic activity. Fitoterapia , 83
pp.1590 –1597