## PEMANFAATAN LIMBAH KRUSTASEA DALAM PEMBUATAN GLUKOSAMIN HIDROKLORIDA DENGAN METODE AUTOKLAF

## UTILIZATION OF CRUSTASEAN SHELL WASTE FOR PRODUCTION OF GLUCOSAMINE HYDROCHLORIDE BY USING AUTOCLAVING METHOD
Pipih Suptijah 1 , Bustami Ibrahim 1 , Ernawati 1 1 Departemen Teknologi Hasil Perairan Fakultas Perikanan dan Kelautan, Institut Pertanian Bogor Korespondensi : suptijah@yahoo.com

## ABSTRACT
Utilization of  crustacean shell waste to produce chitosan can continue by derivatisation to produced glucosamine. GlcN HCl is one of  the nutraceuticals product widely consumed for reducing osteoarthritis symptoms. The minimum local production of  glucosamine itself encourages a proper glucosamine production technology. The purpose of this study was to obtain optimum production technique of  glucosamine hydrochloride. Production of  glucosamine hydrochloride used presured hydrolysis method by pressured treatment (autoclaving), heating time (hours), and acid (% v/v). Characteristic of  glucosamine hydrochloride was determined for solubility parameters, appearance, yields, value loss on drying (LOD), the melting point temperature and FTIR absorption. The quality standard of  hydrolyzed glucosamine refers to the standard of  United State Pharmacopeia. The results showed that the optimum techniques of  glucosamine hydrochloride production were using HCl (8%) (v/v) and 1 atm pressure for 1 hour. Hydrolyzed glucosamine hydrochloride was completely dissolved in water, yellowish-white powder appearance with (69.80%) of yield, LOD value was 0.92%, and the melting point temperature was 190-193 °C. FTIR spectrum showed functional group of  OH at 300-3263 cm -1 and amida group at 1566 cm -1 , wassimilar absorption band patterns with hydrolyzed glucosamine hydrochloride of  standard.
Keywords: glucosamine hydrochloride, hydrolysis, osteoarthritis, pressured hydrolysis

## ABSTRAK
Limbah industri pengolahan udang dan rajungan yang mencapai lebih dari 50% berat awalnya, dapat dimanfaatkan sebagai bahan baku pembuatan kitosan. Kitosan sebagai polimer alami yang banyak manfaatnya diberbagai bidang, juga dapat diderivatisasi menjadi glukosamin. GlcN HCl merupakan salah satu suplemen alami yang banyak dikonsumsi masyarakat dunia saat ini terutama dalam fungsinya mengatasi gejala penyakit osteoarthritis. Rendahnya produksi glukosamin dalam negeri menuntut adanya suatu teknologi produksi glukosamin yang tepat. Tujuan penelitian ini adalah untuk memperoleh teknik produksi glukosamin hidroklorida yang optimum. Metode penelitian yang digunakan adalah metode hidrolisis kimiawi dengan variabel bebas yakni perlakuan hidrolisis bertekanan (autoclaving), waktu pemanasan (jam), dan konsentrasi asam (% v/v). Karakteristik glukosamin hidroklorida terbaik dilihat dari parameter kelarutan, penampakan, rendemen, nilai loss on drying (LoD), titik leleh, dan serapan gugus fungsi FTIR. Standar mutu glukosamin hidrolisis mengacu pada standar United State Pharmacopeia. Teknik hidrolisis glukosamin terbaik diperoleh pada penggunaan HCl (8%) (v/v) dengan tekanan maksimum 1 atm selama 1 jam. Glukosamin hidroklorida hasil hidrolisis memiliki karakteristik yakni larut sempurna dalam air, berbentuk serbuk berwarna putih kekuningan, memiliki LoD (0,92%), titik leleh 190-193 O C, dan rendemen (69.80%). Spektrum FTIR menunjukkan pola pita serapan OH pada bilangan gelombang 3000-3263 cm -1 dan pita serapan amida pada bilangan gelombang 1566 cm -1 yang sesuai dengan GlcN HCl dengan standar.
Kata kunci: glukosamin hidroklorida, hidrolisis, osteoarthritis, hidrolisis bertekanan

## PENDAHULUAN
Limbah industri krustasea (udang dan rajungan) dapat mencapai 50% lebih dari total bobot awalnya. Limbah tersebut sudah dimanfaatkan sebagai bahan tambahan pada pakan ternak, tetapi apabila tidak ditangani dengan bijak akan menimbulkan pencemaran lingkungan. Suatu alternatif yang ramah lingkungan adalah mengolah limbah menjadi kitosan yang banyak manfaatnya diberbagai bidang, serta melanjutkan ke proses derivatisasi menjadi glukosamin, yang akhir akhir ini sedang trendi dalam mengantisipasi osteoarthritis . Osteoarthritis (OA) merupakan salah satu penyakit radang sendi yang ditandai dengan kerusakan progresif pada tulang rawan yang diiringi dengan perubahan tulang subkondral (Zamli & Sharif 2011). Setidaknya sekitar 68% lansia di Amerika berusia di atas 55 tahun telah terbukti memiliki riwayat OA dengan 85% diantaranya berusia 75 tahun. Jumlah ini diperkirakan akan terus meningkat setiap tahunnya (Wang et al . 2007). Glukosamin merupakan salah satu senyawa gula amino yang ditemukan secara luas pada tulang rawan dan memiliki peranan yang sangat penting untuk kesehatan dan kelenturan sendi (EFSA 2009). Pentingnya glukosamin terhadap kesehatan sendi diantaranya konsumsi glukosamin hidroklorida dan atau glukosamin sulfat terhadap pasien penderita OA (tingkat sedang) berpengaruh nyata terhadap pengurangan rasa nyeri pada sendi (Kulkarni et al . 2012), mampu mengurangi nyeri sendi pada pasien yang memiliki penyakit osteoarthritis berikut mekanismenya seperti membantu menghilangkan rasa nyeri sendi (Usha & Naidu 2004), serta membantu perbaikan sendi dan membantu untuk melindungi kerusakan tulang rawan (Clegg et al . 2006 & Cibere et al. 2004). White & Stegemann (2001) menguraikan alas an meningkatnya konsumsi glukosamin diantaranya karena persepsi masyarakat mengenai pemakaian produk alami yang aman. Metode pembuatan glukosamin dengan asam pekat baik secara pemanasan langsung ataupun dengan autoklaf, menghasilkan rendemen dan kualitas yang belum memenuhi syarat diantaranya warna yang masih kecoklatan, titik leleh masih di bawah standar, kelarutan belum sempurna serta spectrum Infra merah yang belum
bersih masih banyak noise (Afridiana 2011 & Rismawan 2012) Pada penelitian ini dilakukan pengembangan metode dari penelitian terdahulu untuk memperoleh kondisi optimum sintesis glukosamin dari kitosan, melalui  modifikasi  metode  hidrolisis bertekanan menggunakan autoklaf dalam suasana asam yang lebih rendah konsentrasi, sehingga lebih aman, sederhana  dan  efisien.  Kondisi  optimum glukosamin akan ditentukan dari kelarutan, penampakan, warna, titik leleh ( melting point temperature ), pita serapan infra merah (uji FTIR), dan nilai rendemen glukosamin. Tujuan penelitian ini adalah memperoleh teknik produksi glukosamin hidroklorida yang praktis dan efisien melalui penggunaan teknologi hidrolisis bertekanan sehingga diperoleh produk glukosamin dengan rendemen dan karakter mutu yang baik. Metode pembuatan glukosamin dengan metode hidrolisis bertekanan dengan autoklaf dalam asam encer, diharapkan dapat lebih aman, dengan hasil berkualitas standar, efisien dan siap diuji in vivo .

## METODE PENELITIAN
Bahan yang digunakan adalah  kitosan dari PT Biotech Surindo Cirebon, HCl 12 N (teknis), Isoprophyl Alcohol / IPA (teknis), dan akuades. Alat-alat yang digunakan adalah labu Erlenmeyer 250 mL, autoklaf bertekanan 2 atm, pH meter, FTIR ( Perkin Elmer Spektrum One ), pemanas listrik titik leleh (MelTemp), gelas piala 100 mL, pipet morr 10 mL, gelas ukur 50 mL, oven (DV- 41), kertas pH, kertas saring, dan timbangan digital (Sartorius TE 1502 S).

## Prosedur penelitian
Proses pembuatan glukosamin dilakukan dengan metode hidrolisis bertekanan menggunakan autoklaf dengan perlakuan variasi konsentrasi asam klorida, tekanan dan waktu proses. Metode yang digunakan merupakan pengembangan metode penelitian Rismawan (2012). Proses diawali dengan penimbangan kitosan kemudian dimasukkan ke dalam larutan HCl dengan rasio sampel: HCl=1:9. Perlakuan konsentrasi HCl 0-22% (v/v) dengan interval konsentrasi 2%.  Waktu pemanasan yang diberikan adalah 30, 60, 90, dan 120 menit pada tekanan vakum 0.50 dan 1 atm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Metode hidrolisis bertekanan dengan autoklaf
Produksi glukosamin dengan metode hidrolisis bertekanan dalam autoklaf, pada dasarnya merupakan sistem kerja yang menggabungkan fungsi tekanan dan pereaksi asam yang menimbulkan reaksi hidrolisis yang lebih aman. Tekanan berperan penting dalam pemotongan ikatan polimer menjadi unit-unit yang lebih kecil. Berdasarkan Hukum Rault bahwa fraksi mol suatu campuran mempunyai tekanan uap tertentu, peningkatan fraksi campuran akan meningkatkan tekanan uap campuran sehingga meningkatkan pergerakan molekul yang menimbulkan peningkatan reaksi. Mustamin dan Manjang (2010) menyatakan bahwa perbedaan tekanan parsial antara  bahan  dan  atmosfir/lingkungan memungkinkan penetrasi larutan ke dalam bahan/polimer, ditunjang oleh Kralovec dan Barrow (2008) yang menyatakan bahwa kadar asam yang rendah menyebabkan terjadinya hidrolisis yang tidak sempurna, oleh karena itu penggunaan asam encer perlu  dimodifikasi  dengan  tekanan  agar hidrolisis menjadi sempurna.
Mekanisme kinerja asam dan tekanan terhadap sampel dapat dijelaskan sebagai berikut: bahwa asam klorida dibantu dengan tekanan berperan dalam hidrolisis ikatan polimer kitosan (2000-3000 monomer) menjadi unit unit yang lebih kecil dan ionisasi gugus amin –NH 2 sehingga gugus amin dapat berikatan dengan gugus klorida membentuk glukosamin hidroklorida. Glukosamin hidroklorida dapat larut dalam air karena adanya gugus –OH dan NH 3 Cl pada unit unit polimer yang sudah menjadi lebih kecil, jadi fungsi tekanan pada autoklaf membantu proses pemotongan rantai polimer kitosan menjadi lebih pendek yang menyebabkan glukosamin larut dalam air.

## Pembuatan glukosamin hidroklorida dari kitosan
Peubah yang diragamkan pada penelitian meliputi konsentrasi asam, yang berkisar antara 0-22% (v/v) dengan interval (2%), disertai tekanan 1 atm dan waktu pemanasan 1 jam. Karakteristik glukosamin yang dihasilkan disajikan pada Tabel 1. Semua sampel (kecuali kontrol) dari setiap perlakuan bersifat larut sempurna dalam air. Kelarutan ini merupakan indikasi awal
yang menunjukkan bahwa sampel kitosan telah terhidrolisis menjadi glukosamin hidroklorida, dari pengamatan langsung secara visual glukosamin yang palig baik kelarutannya dengan warna paling cerah adalah perlakuan konsentrasi asam 8%. Rismawan (2012) telah membuat glukosamin hidroklorida dari kitosan dengan perlakuan terbaik yakni penggunaan HCl 22% (v/v) dan waktu pemanasan selama 2 jam pada autoklaf bertekanan 1 atm.
Parameter yang dilihat selanjutnya setelah kelarutan ialah warna, penampakan derajat putih, konsentrasi HCl, dan nilai rendemen glukosamin.Perlakuan hidrolisis dengan asam 8% ditetapkan sebagai perlakuan terbaik glukosamin yang kemudian dikarakterisasi lebih lanjut. Sampel terbaik dilengkapi uji lanjutan meliputi uji pengurangan bobot loss on drying LoD, uji titik leleh, dan uji serapan FTIR.

## Kelarutan glukosamin hidroklorida (GlcN HCl)
Uji kelarutan glukosamin hidroklorida dilakukan menggunakan air bersuhu 27 O C. Pada uji lanjutan, kelarutan dilakukan kembali menggunakan air bersuhu 20 O C. Semakin tinggi suhu pelarut yang digunakan maka kelarutan zat akan terjadi lebih cepat. Kelarutan cenderung lambat dalam pelarut bersuhu rendah. Suatu zat yang larut dengan mudah pada pelarut bersuhu rendah mengindikasikan bahwa zat terlarut memiliki tingkat kelarutan yang baik.
Kitosan telah kehilangan gugus asetilnya karena adanya mekanisme pemotongan (deasetilasi) oleh basa kuat (Azhar et al . 2010). Tekanan pada autoklaf tidak lagi memutus gugus asetil pada sampel melainkan hanya memotong polimer kitosan menjadi unit yang lebih kecil sehingga ion Cl - dari HCl lebih mudah berikatan dengan dengan gugus amin kitosan membentuk NH 3 Cl. Adanya gugus hidroksil  O-H dan gugus NH 3 Cl ini menyebabkan glukosamin hidroklorida bersifat larut dalam air.
Standar United States Pharmacopeia (USP) menyatakan bahwa penampakan glukosamin secara visual adalah putih. Ketika glukosamin dilarutkan dalam air, larutan akan cenderung jernih dan tidak berwarna. Berbeda dengan warna glukosamin yang dihasilkan (Gambar 1). Glukosamin hasil hidrolisis berwarna jernih kekuningan setelah dilarutkan. Hal ini diduga karena warna asal sampel
(kitosan) yang masih mengandung sedikit pigmen atau sedikit protein pengotor, tetapi sesungguhnya hampir semua pengotor dan produk sampingan dari proses pembuatan glukosamin dapat dibersihkan dengan pencucian yang intensif, sehingga pencucian perlu lebih ditingkatkan sampai netral agar dapat mengeliminasi pengotor berupa warna dan hasil sampingan yang terbentuk.

## Penampakan, warna, dan derajat putih Glukosamin Hidroklorida (GlcN HCl)
Kriteria penampakan glukosamin terbaik  dilihat  dari  tekstur  glukosamin setelah dikeringkan dan dihaluskan. Penampakan dinilai baik jika sampel berbentuk serbuk halus setelah penghalusan. Warna dan derajat putih glukosamin dianggap baik jika sesuai atau mendekati warna dan derajat putih glukosamin standar (Gambar 1 c).
Parameter visual yang meliputi penampakan, warna, dan derajat putih glukosamin hidrolisis sudah sesuai dengan glukosamin standar. Glukosamin yang dihasilkan memiliki tekstur serbuk berukuran sekitar 60 mesh. Glukosamin yang dibuat dari kitosan sangat mudah dihaluskan, hal ini diduga dapat terjadi karena ikatan monomer pada kitosan telah terurai sempurna selama proses hidrolisis menjadi glukosamin. Kitosan telah terurai menjadi molekul-molekul glukosamin yang lebih pendek dan bersifat polar (terdapat gugus O-H) sehingga larut baik dalam air. Molekul yang memiliki banyak gugus polar mudah dilarutkan dalam air. Gugus hidroksil O-H yang terikat pada atom karbon suatu molekul merupakan tapak untuk interaksi dwikutub dengan molekul air. Tarikan ini menggantikan interaksi zat-zat terlarut sehingga setiap molekul glukosamin yang digabungkan dengan air akan terlarut menjadi larutan.
Loss on Drying (LoD)
Uji pengurangan bobot didesain untuk mengukur jumlah air dan komponen volatil yang mungkin masih terkandung dalam sampel ketika dikeringkan pada kondisi tertentu. Glukosamin dengan bobot tertentu dipanaskan dalam oven pada suhu 105 O C selama 2 jam. Uji LoD pada penelitian ini dilakukan secara duplo. Sesuai dengan kriteria mutu USP, nilai LoD glukosamin hidroklorida tidak lebih dari 1% (Tabel 2). Rata-rata hasil uji menunjukkan bahwa
nilai pengurangan bobot glukosamin setelah pemanasan 105 O C selama 2 jam tidak lebih dari 1% yakni hanya mencapai 0.92%. Nilai LoD ini telah sesuai dengan standar yang disyaratkan oleh USP.

## Rendemen Glukosamin Hidroklorida (GlcN HCl)
Nilai rendemen dihitung dengan membandingkan jumlah bobot sampel akhir dengan sampel awal kitosan. Rendemen terbesar glukosamin dengan warna dan penampakan terbaik dihasilkan pada perlakuan asam 8% yakni 69.80%. Nilai rendemen glukosamin pada penelitian ini lebih besar jika dibandingkan dengan nilai rendemen Rismawan (2012) yang hanya mencapai 51.04% dengan penggunaan asam lebih pekat.
Perbedaan nilai rendemen glukosamin ini diduga dipengaruhi oleh faktor suhu, konsentrasi asam, waktu pemanasan, dan tekanan yang diberikan. Mojarrad et al . (2007) menyatakan bahwa perbandingan antara waktu hidrolisis dan konsentrasi asam merupakan faktor yang menentukan nilai rendemen glukosamin. Nilai rendemen GlcN yang dihasilkan menurun seiring dengan peningkatan konsentrasi asam dan waktu reaksi (Tabel 3). Penurunan rendemen diduga terjadi karena adanya reaksi yang belum optimum sehingga sebagian kitosan belum menjadi glukosamin atau adanya reaksi samping yang terbentuk dari zat pengotor yang dapat menurunkan nilai rendemen GlcN yang dihasilkan (Gambar 2). Afridiana (2011) dan Rismawan (2012) berturut-turut menggunakan HCl dengan konsentrasi 37% dan 22% (v/v) untuk memperoleh glukosamin dengan karakteristik terbaik. Akan tetapi, pada penelitian ini konsentrasi asam 8% telah mampu menghidrolisis glukosamin dengan karakter yang cukup baik. Hal ini terjadi karena adanya faktor tekanan yang diberikan saat hidrolisis. Kombinasi perlakuan antara tekanan dan suhu mempercepat proses depolimerisasi kitosan menjadi glukosamin sehingga waktu pemanasan menjadi lebih singkat dengan konsentrasi asam yang cukup rendah.

## Titik leleh Glukosamin Hidroklorida (GlcN HCl)
Hasil analisis Mel Temp menunjukkan bahwa titik leleh GlcN berkisar pada 190-193 O C (Tabel 3). Hal ini menunjukkan bahwa
GlcN yang dihasilkan lebih bersih. Semakin banyak pengotor atau zat asing yang terkandung dalam glukosamin maka titik leleh akan semakin menurun, kisaran nilai titik leleh glukosamin hidrolisis (Gambar 3) sesuai dengan penelitian Kralovec dan Barrow (2008) yakni 190-194 O C. Titik leleh GlcN yang dihasilkan juga lebih baik dari penelitian pembanding yang berkisar antara 187-189 O C pada penggunaan asam (37%). Mojarrad et al . (2007) membuat glukosamin hidroklorida (Gambar 3) dengan titik leleh 190-192 O C pada penggunaan konsentrasi asam 32%.

## Spektrum Glukosamin Hidroklorida (GlcN
HCl)
Hasil pengukuran spektrum FTIR menunjukkan bahwa spektrum GlcN HCl pembanding (Gambar 5) memperlihatkan gugus O-H yang dominan dengan garis lebar dan kuat pada bilangan gelombang 3066 cm-1, sedangkan pada GlcN HCl hasil hidrolisis bertekanan (Gambar 4) menunjukkan gugus O-H yang dominan pada bilangan gelombang 3000-3263 cm -1 . Brugnerotto (2001) menambahkan bahw GlcN HCl akan menunjukkan gugus O-H pada bilangan gelombang 3350 cm -1 sedangkan jika sampel berbentuk polimer maka gugus O-H semakin mendekati 3450 cm-1.Gugus amina N-H pada glukosamin hasil hidrolisis adalah 3333 cm -1 , mirip dengan hasil Mojarrad et al . (2007) yaitu 3333-3380 cm -1 . Pita serapan gugus N-H amida primer ditunjukkan pada 1635 cm -1 sedangkan pita serapan amida sekunder berada pada 1566 cm -1 . Pita serapan ini mirip dengan hasil penelitian Mojarradet et al . (2007) yakni 1535-1583cm -1 . Pita serapan gugus khas pada GlcN hasil hidrolisis secara keseluruhan menunjukkan kesesuaian dengan GlcN HCl standar dan hasil penelitian lainnya,
Terdapat selisih/perbedaan nilai serapan tapi masih dalam rentang standar, hal ini terjadi justru karena perbadaan kemurnian hasil di mana serapan pengotor dapat mengganggu  nilai serapan gelombang setiap gugus fungsi. Perbedaan serapan gelombang pada standar dan sampel dianggap normal apabila bilangan gelombang yang diserap sampel masih berada dalam kisaran bilangan gelombang gugus fungsi standar.

## Keunggulan pembuatan GlcN HCl dengan autoklaf
Produksi GlcN HCl dengan metode autoklaf memiliki beberapa keunggulan dari segi keamanan, proses produksi, waktu, dan biaya produksi. Sampel tidak memerlukan proses pengadukan langsung cukup dimasukkan ke dalam Erlenmeyer kemudian ditutup dengan alufoil kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf, dan diatur pada tekanan maksimum 1 atm selama selang waktu tertentu. Cara ini mudah dan lebih aman dilakukan jika dibandingkan dengan proses pengadukan secara langsung. Pembuatan GlcN HCl dengan cara pemanasan langsung, menggunakan asam pekat 30% - 80% dan memerlukan proses pengadukan kontinu dengan waktu pemanasan selama 4 jam, sedangkan pembuatan GlcN dengan autoklaf memerlukan waktu lebih singkat yakni 1 jam. Pembuatan GlcN dengan metode  hidrolisis bertekanan dalam autoklaf, menggunakan asam encer sehingga menjadi   lebih efisien karena perlakuan terbaik dapat diperoleh menggunakan bahan kimia teknis (HCl dan Isoprohyl Alcohol ) pada konsentrasi rendah yakni 8%, diperlukan pencucian (netralisasi) yang lebih irit. Pembuatan glukosamin hidroklorida dengan metode autoklaf dapat diproduksi dalam jumlah yang besar ( scale up ) dengan mudah.
Tabel 1. Karakteristik glukosamin dari kitosan pada perlakuan asam yang berbeda
HCl (%) Penampakan Warna Derajat putih Kelarutan Rendemen gram % 0 Serpihan ++ Tidak 2.50 100 2 Butiran kasar Kekuningan Coklat jernih ++ Larut Larut 2.34 93.80 4 Butiran kasar Hitam + Larut 2.05 82.00 6 Serbuk Kecoklatan +++ Larut 2.02 80.92 8 Serbuk Putih Kekuningan ++++ Larut 1.74 69.80
Tabel 1 (lanjutan) HCl (%) Penampakan Warna Derajat putih Kelarutan Rendemen gram % 10 Serbuk Abu kecoklatan +++ Larut 1.83 73.20 12 Serbuk Abu kecoklatan +++ Larut 1.52 60.80 14 Serbuk Putih keabuan ++++ Larut 1.42 56.80 16 Serbuk Putih keabuan ++++ Larut 1.26 50.40 18 Serbuk Hitam + Larut 1.21 48.56 20 Serbuk Hitam + Larut 1.23 49.44 22 Serbuk Hitam + Larut 1.30 51.88
(a)
(b) (c) Gambar 1. Glukosamin terbaik (HCl 8%) setelah dilarutkan (a) 2%, (b) 1%, (c) puder Tabel 2. Pengurangan bobot glukosamin hidroklorida setelah pemanasan Cawan Bobot GlcN awal (g) Bobot GlcN akhir (g) LoD (%) 1 0.3 0.27 1 2 0.3 0.275 0.83 Rata-rata 0.92 Hitam +
Gambar 3. Penampakan glukosamin hidroklorida
Tabel 3. Kisaran suhu titik leleh glukosamin hidroklorida Tabung kapiler Kisaran suhu ( O C) 1 190-192 2 190-192 3 191-193 Rata-rata 191.3
Gambar 4. Spektrum FTIR GlcN HCl hasil hidrolisis HCl 8% (450-4000 cm -1 )

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Glukosamin hidroklorida (GlcN HCl) dapat dibuat dengan teknik hidrolisis bertekanan yakni dengan penggunaan autoklaf. Pembuatan GlcN HCl dengan metode autoklaf lebih unggul dari segi keamanan kerja, proses produksi, waktu, dan biaya produksi. Perlakuan terbaik GlcN diperoleh pada penggunaan asam 8% dengan tekanan 1 atm selama 1 jam. GlcN HCl hasil hidrolisis memiliki beberapa karakteristik yakni larut sempurna dalam air, berbentuk serbuk berwarna putih kekuningan, nilai LoD (0.92%), titik leleh 190-192 O C, rendemen (69.80%), dan memiliki pola pita serapan FTIR yang mirip dengan GlcN HCl standar.

## Saran
Jika masyarakat ingin memanfaatkan dan mengelola sumber daya kelautan dan perikanan, maka perlu diperhatikan daya dukung lingkungan perairan agar tidak mengurangikan daya dukung lingkungan terhadap kegiatan budidaya di Perairan Pulau Semak Daun berdasarkan penghitungan beban limbah N.

## DAFTAR PUSTAKA
Afridiana N. 2011. Recovery glukosamin hidroklorida dari cangkang udang melalui hidrolisis kimiawi sebagai bahan sediaan suplemen osteoartritis [Skripsi]. Bogor: Institut Pertanian Bogor. Azhar M, Efendi J, Syofyeni E, Lesi RM, Novalina S. 2010. Pengaruh konsentrasi NaOH dan KOH terhadap derajat deasetilasi kitin dari limbah kulit udang. Eksakta. VOL 1:1-8.
Kralovec JA, Barrow JC. 2008. Marine Neutraceticals and Functional Foods. London. New York: CRC Press. Brugnerotto J. 2001. An infrared investigation inrealtion with chitin and chitosan characterization. Polymer. Vol 42: 3569-3580.
Cibere J, Kopec  JA,  Thorne A, Singer J, Canvin J, Robinson DB, Pope J, Hong P, Grant E, Esdaile JM. 2004. Randomized, double-blind, placebo-controlled glucosamine discontinuation trial in knee osteoarthritis. Journal of Arthritis
and Rheumatism. VOL 51: 738-745. Clegg RDJ, Harris CL, Klein MA, O’Dell JR, Hooper MM, Bradley JD, Bingham CO, Weisman MH, Jackson CG, Lane NE et al .  2006.  Glucosamine,  chondroitin sulfate,  and  the  two  in combination for  painful  knee  osteoarthritis. New England Journal of Medicine. VOL 354:
795-808.
[EFSA] European  Food  Safety  Authority.
2009.    Scientific    opinion    on the substantiation  of  a  health claim  related  to  glucosamine hydrochloride  and reduced rate of cartilage degeneration and reduced risk of development of osteoarthritis pursuant. European Food Safety
Authority . VOL 7(10): 1358. Kulkarni C, Leena A, Lohit K, Mishra D, Saji MJ. 2012. A randomized comparative study  of  safety  and  efficacy  between immediate release glucosamine HCL and glucosamine HCL sustained release formulation in the treatment of knee osteoarthritis: A proof of concept study. Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics . VOL 1:1-10. Mojarrad  JS, Mahboob  N,  Valizadeh  H, Ansarin  M, Bourbour  S.  2007. Preparation  of  glucosamine  from exoskeleton  of  shrimp  and  predicting production by  response  surface metodhology. Journal of  Agricultural and Chemistry. VOL 55:2246-2250. Mustamin, Manjang S. 2010. Karakterisasi isolator polimer tegangan tinggi di bawah penuaan tekanan iklim tropis buatan yang dipercepat. Media
Elektrik . VOL 5 (2): 2. Rismawan. 2012. Rendemen glukosamin dari kitin udang [Skripsi]. Bogor : Institut Pertanian Bogor
Usha PR, Naidu MUR.  2004.  Randomised, double-blind,  parallel,  placebo- controlled  study  of  oral  glucosamine, methylsulfonylmethane  and  their combination in osteoarthritis. Clinical
Drug Investigation . VOL 24: 353-363. Wang SX, Laverty S, Dimitriu M, Plaas A, Grynpas MD. 2007. The effects of glucosamine hydrochloride onsubchondral bone changes in ananimal model of osteoarthritis. Journal of Arthritis and Rheumatism VOL (5): 1537-1548. White T, Stegemann JA. 2001. Environmentally preferred materials. Advance in Environmental Materials. Material Research Society: Singapore2: