Analysis of Pesticide Thiametoxam Pesticide Residu Cabbage in Vegetables (Brassica oleracea var. Capitata L)
Yuli Pratiwi Muslim 1) , Fatimawali 1) , WidyaAstuty Lolo 1)
1) Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT, MANADO

## ABSTRACT
Thiamethoxam is a dangerous chemical and toxic that added to vegetables for kill all kinds of  insects  and  pests.  The  purposes  of  this  study  were  to  identify  pesticide  residues  of tiamethoxam  in  vegetables  cabbage  and  determine  the  levels  of  thiamethoxam  pesticide residues  which  contained  in  cabbage.  Sampling  locations  were  Bahu  market,  Karombasan market,  Bersehati  market  and  Rurukan  village.  Thiamethoxam  pesticide  residue  level  was identified  and  determined  using  High  Performance  Liquid  Chromatography  HPLC.  HPLC parameters  which  used  in  analysis  were  mobile  phase  of  methanol-water  (60:40  v/v),  flow rate 1 mL/min, temperature  33ºC and wavelength of 253 nm. The result shows that sample of  Rurukan  village  and  Karombasan  market  contains  residue  pesticide  of  thiamethoxam  by 5.66 mL/minutes.
Key words :Thiamethoxam, cabbage and HPLC, Manado

## ABSTRAK
Tiametoksam  adalah  senyawa  kimia  berbahaya  dan  beracun  yang  biasa  digunakan  pada sayuran  untuk  mematikan  segala  jenis  serangga  dan  hama.  Tujuan  penelitian  yaitu  untuk mengidentifikasi  residu  pestisida  pada  sayur  kubis  dan  menentukan  kadar  residu  pestisida tiametoksan  yang  terkandung  dalam  sayur  kubis.  Lokasi  pengambilan  sampel  sayur  kubis ialah  pasar  Bahu,  pasar  Karombasan,  pasar  Bersehati  dan  desa  Rurukan.  Residu  pestisida tiametoksam  diidentifikasi  dan  ditetapkan  kadar  menggunakan  Kromatografi  Cair  Kinerja Tinggi KCKT. Parameter HPLC yang digunakan yaitu fasa gerak air : metanol (60:40 v/v), lajualir  1  mL/menit  dengan  suhu  33ºC  dan  panjang  gelombang  253  nm.  Hasil  penelitian menunjukan  bahwa  sampel  dari  desa  rurukan  dan  pasar  karombasan  positif  mengandung residu pestisida tiametoksam dengan kadar 5,66 mL/menit.
Kata kunci: Tiametoksam, Kubis, KCKT, Manado

## PENDAHULUAN
Penggunaan pestisida khususnya pada sayuran akan meninggalkan residu pada sayur tersebut, bahkan untuk pestisida tertentu masih dapat ditemukan sampai saat  dikonsumsi.  Besarnya  residu pestisida  yang  tertinggal  pada  sayuran tergantung  pada  dosis,  banyaknya  dan interval aplikasi, faktor-faktor lingkungan  fisik  yang  mempengaruhi pengurangan  residu,  jenis  bahan  aktif dan  presistensinya  serta  saat  aplikasi terakhir  sebelum  sayuran  dipanen (Sudarmo,  1998).  Residu  pestisida juga  dipengaruhi  oleh  berbagai  faktor seperti  jenis  pestisida,  teknik  aplikasi pestisida,  iklim  dan  cuaca.  Pencucian oleh hujan bisa mengakibatkan berkurangnya  residu  pestisida.  Selain itu  kemungkinan  yang  terjadi  setelah pestisida  disemprotkan  yaitu  adanya penguapan dan reaksi kimia (Musfiandidkk, 2013) Dampak aplikasi suatu
pestisida dapat berupa keracunan akut
ataupun  keracunan  kronis.  Menurut laporan  dari  WHO  (World  Health Organization), di seluruh dunia terdapat  lebih  dari  26  juta  manusia
keracunan  pestisida  dengan  sekitar 220  ribu  kematian  per  tahun.  Di Amerika  Serikat,  terdapat  67  ribu manusia per tahun keracunan pestisida,  sedangkan  di  Cina  terdapat 0,5  juta  manusia  keracunan  pestisida dengan  0,1  juta  kematian  per  tahun (Itadkk, 2013).
Penggunaan pestisida khususnya  pada  sayuran  kubis  akan meninggalkan  residu  pada  daun  kubis tersebut.  Secara  tidak  langsung  residu pestisida  menyebabkan  efek  tidak langsung, residu pestisida dalam sayuran  memang  sulit  dihilangkan. Dalam jangka pendek, residu pestisida tidak  meninggalkan  dampak  negatif terhadap manusia, tetapi  dalam jangka panjang dapat  menimbulkan gangguan kesehatan  seperti  gangguan  syaraf, kerusakan  ginjal,  metabolisme  enzim,
serta efek karsinogenik
(Sudibyaningsih 1990). Sehingga peneliti  tertarik  untuk  melakukan penelitian ini.

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat-alat  yang  digunakan  pada penelitian  ini  yaitu  seperangkat  HPLC
(Shimadzu),  spektrofotometer  UV- VIS, shimadzu 1800 untuk
menentukan panjang gelombang, neraca  analitik,  sentrifus,  pipet  takar, labu ukur dan gelas ukur.
Bahan-bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  yaitu  sampel sayuran  kubis,  pestisida  golongan triazol  (tiametoksam),  metanol  for liquid  chromatography  yang  diperoleh dari darmstad Germany Merck.

## Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  sayuran  kubis yang  berasal    dari  Desa  Rurukan, kemudian  diambil  dari  3  pasar  yang ada  di  kota  Manado  dan  selanjutnya dibawa ke Laboratorium untuk diteliti.

## Identifikasi Sampel
Identifikasi  sampel  dilakukan di Laboratorium Taksonomi Tumbuhan  Program  Studi    Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam Ratulangi,  Manado  dan  disesuaikan dengan Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Pembuatan  Larutan  Tiametoksam
10 mg/L
Dipipet larutan tiametoksam sebanyak 0,1 mg/l kemudian dilarutkan  dalam  labu  ukur  25  mL dengan  metanol  40%.  Kemudian larutan tiametoksam tersebut di encerkan menjadi  10 mg/L (Gebi,  dkk 2013).
Penentuan Panjang Gelombang

## Serapan Maksimum Tiametoksam
Larutan  tiametoksam  konsentrasi 10  mg/L  dimasukkan  kedalam  kuvet yang  telah  disediakan  dan  ditentukan panjang gelombang serapan maksimumnya dengan alat spektrofotometer  UV-VIS.  Panjang gelombangnya  yang  diukur  berkisar 200- 400 nm (Gebi, dkk 2013).
Penentuan  Waktu  Retensi  Masing- Masing  Komponen  Komposisi  fasa gerak
Larutan  fasa  gerak  air:  metanol (60:40,  v/v),  dialirkan  terus  dengan kecepatan  alir  1  mL/menit  kemudian diinjeksikan larutan standar tiametoksam  yang  konsentrasinya  10 mg/L (Gebi, dkk 2013).
Pembuatan Kurva Standar Kurva standar tiametoksam dibuat berdasarkan  pengukuran  pada  panjang
gelombang  serapan  yang  telah  didapat yaitu  253  nm,  komposisi  fasa  gerak air: metanol (60:40, v/v) dan kecepatan alir fasa gerak 1mL/menit. Konsentrasi residu tiametoksam (10,20,40,60,80,100) mg /L (Gebi, dkk 2013). Penentuan Tiametoksam dalam
Sampel kubis Pengambilan Sampel Sampel  diambil  secara  acak  di  Pasar bersehati, Pasar Bahu, Pasar Karombasan dan Desa Rurukan.
Sampel  dimasukkan  kedalam  plastik kemudian  disimpan  dalam  pendingin (Gebi, dkk 2013).
Persiapan Sampel Sampel  sebanyak  10  g  dimasukkan  ke dalam  ultrasonic  bath  yang  berisi  100 ml  air  selama  40  menit.  Sampel disaring  menggunakan  kertas  saring Whatman  no.  1.  Filtrat  kemudian digenapkan  sampai  tanda  tera  pada labu  takar  50  mL.  Sampel  yang  akan digunakan  harus  disaring  dengan kertas  saring  ultra  0,20  µm  sebelum dianalisis  dengan  HPLC  (Gebi,  dkk 2013)
Penentuan  Konsentrasi  Komponen
Aktif Pestisida dalam Larutan Sampel
Ekstrak  air  yang  diperoleh  dari sampel dianalisis dalam HPLC (shimadzu  LC-6AD)  dengan  detektor UV-Vis  pada  panjang  gelombang  254 nm. Laju alir penyuntikan 1 mL/menit. Elusi  dilakukan  menggunakan  air: metanol (60:40, v/v) (Gebi, dkk 2013)

## Penetapan Kadar
Sampel diijeksikan kedalam system  KCKT  pada  kondisi  optimal. Data  rasio  luas  area  sampel  terhadap luas  area  internal  standar  (internal standar  tiametoksam  digunakan  pada percobaan  ini)  dimasukkan  kedalam persamaan  regresi  linear  dan  kadar tiametoksam  dapat  dihitung  sebagai berikut :
a. Konsentrasi tiametoksam yang diinjeksi
y = a + bx keterangan:
y  :  ratio  luas  area  tiametoksam terhadap internal standar
x  :  konsentrasi  tiametoksam  yang diinjeksi (C regresi )
b :  slope
PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT  Vol. 4 No. 1 Februari 2015 ISSN 2302 - 2493
x : intercept
HASIL DAN PEMBAHASAN Panjang Gelombang Serapan Maksimum Komponen Aktif Pestisida Pengukuran panjang gelombang  serapan  maksimum  dari komponen aktif pestisida
tiametoksam  dibaca  pada  panjang gelombang  200  nm  –  400  nm dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer  UV-VIS.  Dari  hasil pengukuran didapatkan panjang
gelombang serapan maksimum tiametoksam  adalah  253  nm  seperti pada gambar 1.
.
Gambar 1.  Hasil analisis serapan maksimum tiametoksam
Gambar  1  menunjukkan kromatogram hasil analisis tiametoksam menggunakan fase gerak
air  :  Metanol  (60:40,  v/v),  dengan panjang  gelombang  253  nm  dan  laju
alir  1mL/menit.  Kondisi  optimal  ini digunakan untuk menganalisis kandungan  tiametoksam  dalam  sayur kubis karena memberikan hasil kromatogram  yang  baik.  Fase  gerak yang digunakan meminimalkan intervensi  dari  zat-zat  lain  dalam sampel.

## Analisis Kualitatif Tiametoksam
Dalam  suatu  larutan  tersusun dari  beberapa  senyawa,  sehingga banyak pengotor yang dapat mengganggu  proses  analisis.  Oleh sebab itu untuk menguji tiametoksam, larutan pestisida yang telah mengandung  tiametoksam  disuntikan dengan  tujuan  untuk  melihat  bahwa pada waktu retensi tiametoksam tidak terdapat faktor pengganggu. sampel  yang  ditambahkan  dengan tiametoksam.
Identifikasi kandungan tiametoksam  diperoleh  dari  sampel yang  disuntikan  menggunakan  HPLC dengan  kolom  Shimadzu  LC-20AD. Perbandingan  fase  gerak  air  dan metanol  adalah  60:40  v/v.  Volume penyuntikan  20  mL,  kecepatan  alir (flow  rate)  1  mL/menit,  detector  UV-
Vis  pada  panjang  gelombang  253  nm ini menghasilkan waktu tambat sampel seperti yang terlihat pada tabel 2.
Keterangan  :  Data  diperoleh  dari  dua  kali ulangan  pengujian,  dilengkapi  dengan  standar deviasi.
Tabel 2 menunjukkan waktu  tambat  yang  dihasilkan  oleh setiap  sampel.  Waktu  tambat  yang diperoleh  tidak  berselisih  jauh  satu dengan  lainnya.  Waktu  tambat  yang dihasilkan oleh tiametoksam 100 ppm yaitu  5,66  menit.  Waktu  tambat  yang diperoleh setiap larutan sampel berdekatan  dengan  waktu  tambat tiametoksam. Meskipun waktu tambat yang  dihasilkan  tidak  sama  persis namun  puncak  yang  diamati  dalam kromatogram  sampel  dapat  diterima sebagai  puncak  tiametoksam.  Hasil
ini  menunjukkan  bahwa  jenis  sampel kubis  teridentifikasi  dengan  kadar tiametoksam.
Penelitian  ini  dilakukan sebanyak  dua  kali  pengulangan. Sampel  yang  diambil  dari  masing- masing  pasar  sebanyak  2  sampel kubis  pada  penjual  yang  sama.
Berdasarkan  hasil  pengujian,  sampel rurukan 1 dinyatakan positif mengandung  tiametoksam  dengan waktu  tambat  5,66,  sampel  rurukan  2 negatif mengandung tiametoksam dengan waktu tambat 5,29.
Sedangkan  sampel  karombasan  1 dinyatakan positif mengandung tiametoksam  dengan  waktu  tambat 5,66  dan  sampel  karombasan  2 negatif  mengandung  tiametoksam dengan  waktu  tambat  yaitu  4,63. Sampel bahu  1 dan sampel  bahu 2  di nyatakan negatif mengandung tiametoksam  dengan  waktu  tambat
No Sampel Waktu tambat Keterangan 1 Sampel + Tiametoksam 5,66 Pembanding 2  Rurukan 1 5,66 Positif 3  Rurukan 2 5,29 Negatif 4  Karombasan 1 5,66 Positif 5  Karombasan 2 4,63 Negatif 6 Bahu 1 5,73 Negatif 7 Bahu 2 5,68 Negatif 8  Bersehati 1 5,06 Negatif 9  Bersehati 2 4,68 Negatif
5,73  dan  5,68.  Begitu  juga  dengan sampel  bersehati  1  dan  sampel bersehati 2 dinyatakan negative mengandung  tiametoksam  dengan waktu tambat 5,06 dan 4,68. Pengujian  dari  hasil  penelitian  ini dinyatakan  positif  karena  waktu tambatnya  sama  dengan  pembanding yaitu 5,66 sesuai dengan hasil spiked, sedangkan  hasil  pengujian  yang dinyatakan negatif dikarenakan waktu tambatnya tidak sesuai dengan pembanding atau hasil spiked.
Menurut  (Quijano,  1999), dampak  tiametoksam  bagi  kesehatan apabila pengguna terkontaminasi secara langsung dapat mengakibatkan keracunan  baik  akut  maupun  kronis.
Keracunan  akut  dapat  menimbulkan gejala  sakit  kepala,  pusing,  mual, muntah  dan  sebagainya.  Keracunan pestisida  yang  akut  berat  dapat menyebabkan penderita tidak sadarkan  diri,  kejang-kejang  bahkan meninggal dunia. Sedangkan keracunan  kronis  lebih  sulit  dideteksi karena  tidak  segera  terasa,  tetapi dalam jangka panjang dapat menimbulkan gangguan system syaraf  atau  kanker  yang  sering  kali orang tidak menyadari bahwa penyakit mereka mungkin disebabkan oleh pestisida.
Kurva  kalibrasi  larutan  tiametoksam dapat  dilihat  pada  gambar  di  bawah ini.
Gambar 7.KurvaKalibrasi y = 34589x - 92925 R² = 0.969 0 10,000,000 20,000,000 30,000,000 40,000,000 0 50 100 150 Lu as ar e a Konsentrasi (ppm)
Kurva kalibrasi tersebut memiliki nilai koefisien korelasi, r = 0,969. Dari hasil perhitungan, diperoleh persamaan
garis regresi Y = 34589x – 92925.
Persamaan  tersebut  digunakan  untuk menentukan  kadar  tiametoksam  pada sayur kubis.
Tabel 4. Kadar Tiametoksam dalam Sayur Kubis
Tabel.4  menunjukkan  kadar  pestisida tiametoksam terdapat pada sampel rurukan  1  sebesar  492  µg/kg  dan  sampel Karombasan  1  sebesar  467  µg/kg. Sampel Rurukan 2, Karombasan 2, Bahu 1,  Bahu  2,  Bersehati  1  dan  Bersehati  2 tidak  mengandung  tiametoksam.  Kadar Tiametoksam  yang  lebih  rendah  pada sampel Karombasan 1 diduga disebabkan karena  sampel  tersebut  telah  mengalami pencucian  selama  proses  perjalanan  dari Rurukan  yang  merupakan  sumber  kubis tersebut.
KESIMPULAN

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian,  maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Analisis tiametoksam menggunakan  High  Performance  Liquid Chromatography  (HPLC)  menghasilkan kandungan residu pestisida yang terdapat pada sayur kubis di Desa Rurukan,  Pasar Karombasan  dan  Pasar  Bahu.  Sedangkan Pasar  Bersehati  tidak  terdeteksi  adanya sayur  kubis  yang  mengandung  residu tiametoksam.
2. Kadar  tiametoksam  yang  terdapat
dalam  sayur  kubis  dari  Rurukan,  Pasar
No Sampel Kadar Tiametoksam (µg/10g sampel)* Kadar Tiametoksam (µg/kg sampel) 1 Rurukan 1 4,92 492 2 Rurukan 2 - - 3 Karombasan 1 4,67 467 4 Karombasan 2 - - 5 Bahu 1 - - 6 Bahu 2 - - 7 Bersehati 1 - - 8 Bersehati 2 - -
Karombasan,  Pasar  Bahu  dan  Pasar Bersehati  yaitu  sebesar  4,67  –  4,92 µg/kg.

## DAFTAR PUSTAKA
Gebi  Efiyatni,  Umiati  Loekman  dan Yefrida.  2013. Penentuan  Residu Pestisida Sipermetrin dan Deltametrin Dalam Sayuran Sawi Secara HPLC (journal). Universitas Andalas : Padang. Irnawati, 2011. Perilaku Residu Insektisida  Tiametoksam  Pada Tanah  Pertanian  Jeruk  Desa Bayan Kecamatan Bayan Kabupaten Purworejo . Universitas Gadjah Mada :
Yogyakarta
Ita  Purnama,  Anwar  Daud,  Agus  Bintara Birawida . Identifikasi Residu Pestisida  Lindane  Dalam  Tomat Buah  Dan  Tomat  Biasa  Dipasar Terong  dan  lotte  mart  kota
Makassar (journal): Makassar.
Musfiandi  Taqwin,  Anwar  Daud,  Agus B.  Birawida.  2013. Identifikasi Residu  Pestisida  Dieldrin  dalam
beras  lokal  dan  beras  impor dipasar terong dan lotte mart kota
Makassar (journal).  Universitas
Hassanudin. Makassar.
Sudibyaningsih. E. 1990. Residu Pestisida  Diazinon  Dalam  Daun Kubis  dari  Saat  Panen  Sampai Penanganan Sebelum Dikonsumsi.Majalah Ilmiah UNSOED XVI (5):105-112.