## PERBANDINGAN KADAR POLIFENOL DAN FLAVANOID PADA EKSTRAK DAUN KERSEN (Muntingia Calabura L.) SEGAR DAN KERING DENGAN  SPEKTROFOTOMETER UV-VIS
Comparison of Polyphenol and Flavanoid Concentration on Fresh and Dried Kersen Leaf (Muntingia calabura L.) Extract Using UV-Visible Spectrophotometric Method
Youstiana Dwi Rusita 1*) , M. Rafi’Uddin 1 , Susilo Yulianto 1
Poltekkes Kemenkes Surakarta, Surakarta,Jawa Tengah, Indonesia *email : josicanme@gmail.com

## ABSTRAK
Daun  kersen  mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin,  polifenol  dan  tanin  sehingga  dapat digunakan sebagai antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar polifenol dan flavonoid  pada  ekstrak  daun  kersen (Muntingia  calabura  L.) segar  dan  kering.  Metode penelitian  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  true  eksperimental.  Analisis  data menggunakan  analisis  bivariat  dengan  uji independet  sample  t-test .  Hasil  kadar  polifenol ekstrak daun kersen kering sebesar 3,295±0,128 mg GAE/g sampel  dan untuk ekstrak daun kersen  segar  sebesar  3,398±0,0673  mg  GAE/g  sampel.  Hasil  kadar  flavonoid  ekstrak  daun kersen  kering  sebesar  0,288±0,0157  mg  QE/g  sampel  dan  untuk  ekstrak  daun  kersen  besar sebesar  0,535±0,0423  mg  QE/g  sampel.  Data  yang  diperoleh  dilakukan  uji  statistik  dan dilanjutkan  uji  t-  Test  dan  menghasilkan  masing-masing  perlakuan  dengan  nilai  signifikansi 0,001 < 0,05 dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan adanya perbedaan yang  signifikan  pada  kadar  polifenol  pada  daun  segar  dan  daun  kering  dan  kadar  flavonoid pada daun kersen (Muntingia calabura L.) segar dan daun kering
Kata Kunci : Kersen, Daun Segar dan Kering, Kadar polifenol, flavonoid, Spektrofotometer Uv Vis.

## ABSTRACT
Kersen leaves  contain flavonoids, saponins, polyphenols  and tannins so that  can be used as antioxidants. The research purpose to know the content of polyphenol and flavonoids in fresh and dry kersen leaf extract. The research method used in this research is true experimental. Data analysis used bivariate analysis with T-Test. Polyphenol content of fresh kersen leaves extract  3,295±0,128  mg  GAE/g  sample  and  for  dry  kersen  leaf  extract  3,398±0,0673  mg GAE/g sample. Flavonoids content of fresh kersen leaf extract 0,288±0,0157 mg QE/g sample and  for  dry  kersen  leaf  extract  0,535±0,0423  mg  QE/g  sample.  The  data  obtained  were statistically  tested  and  continued  with  the  t-test  and  resulted  with  a  significance  value  of 0.001  less  than  0.05  with  a  95%  confidence  level.  Which  means  that  there  is  a  significant difference between polyphenol levels and flavonoid levels in fresh and dried leaves.
Keywords:  kersen,  dried  leaves  and  fresh  leaves,  polyphenol  concentration,  flavonoid,  spe ctrophotometer UV-Vis

## PENDAHULUAN
Penggunaan tanaman obat saat ini sebagai alternatif pengobatan di masyarakat semakin meningkat,  namun  penggunaan  tersebut  tetap  harus  memperhatikan  indikasi,  dosis  dan  efek samping.  Penggunaan  produk-produk  bahan  alam  dari  tumbuhan  ini  masih  menggunakan cara-cara  tradisional,  yaitu  diseduh,  dihaluskan,  diambil  sarinya  dan  sebagainya  yang semuanya  itu  sulit  untuk  menentukan  keseragaman  dosis  dari  produk  yang  digunakan. Demikian juga bentuk sediaan obat tradisional yang beredar di masyarakat bermacam-macam, baik asal bahan mentah, proses pengolahan dan bentuk sediaannya, sehingga dapat dipastikan kemungkinan  betapa  besarnya  ketidakseragaman  komposisi  senyawa  yang  terdapat  pada produk  jadinya.  Hal  tersebut  mendorong  adanya  pengolahan  tanaman  obat  menjadi  bentuk sediaan  yang  mudah  digunakan  serta  mempunyai  dosis  penggunaan  yang  tepat  sehingga menjamin keamanan sediaan tersebut (Sa’adah & Nurhasnawati, 2017).
Kersen  ( Muntingia  calabura  L.) banyak  tumbuh  di  pinggir  jalan,  tumbuh  di  tengah retakan rumah, di tepi saluran pembuangan air dan tempat-tempat yang kurang kondusif untuk hidup  karena  kersen  mempunyai  kemampuan  beradaptasi  yang  baik  (Dwi  &  Syam,  2017). Daun  kersen  mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin,  polifenol  dan  tanin  sehingga  dapat digunakan  sebagai  antioksidan  (Kuntorini  et  al.,  2013).  Komposisi  aktif  dari  daun  kersen dapat diperoleh dengan cara ekstraksi. Proses ekstraksi dapat dilakukan menggunakan pelarut yang  sesuai.  Berbagai  teknik  ekstraksi  telah  berkembang  dengan  didukung  alat-alat  yang modern,  namun  teknik  ekstraksi  sederhana  dengan  menggunakan  pelarut  air  masih  sering dilakukan  terutama  oleh  masyarakat  umum  seperti  merebus  tanaman  obat  (Supriyati  & Sholikhah,  2010).  Penggunaan  ekstraksi  infundasi  dan  dekoktasi  merupakan  cara  ekstraksi sederhana  dengan  pelarut  air.  Rasio  berat  bahan  dan  air  adalah  1:10.  Infusa  adalah  sediaan cair  yang  dibuat  dengan  cara  mengekstraksi  simplisia  nabati  dengan  air  pada  suhu  90°C selama  15  menit.  Pembuatan  infus  merupakan  cara  yang  paling  sederhana  untuk  membuat sediaan  herbal  dari  bahan  lunak  seperti  daun  dan  bunga  (BPOM  RI,  2010).  Pada  penelitian ini,  aquades  digunakan  sebagai  pelarut  karena  akuades  bersifat  universal  sehingga  dapat menarik  senyawa  polifenol.  Metode  penetapan  kadar  polifenol,  dan  flavonoid  sudah  banyak dilakukan.  Salah  satu  metode  yang  dapat  digunakan  untuk  penetapan  kadar  polifenol,  dan flavonoid,  yaitu  metode  spektrofotometer  UV-vis.  Metode  spektrofotometer  UV-vis merupakan  cara  yang  paling  sederhana  untuk  menetapkan  kuantitas  zat  yang  sangat  kecil, selain itu mudah, cepat, serta memiliki ketelitian yang tinggi.
Pengeringan bahan pangan seringkali dilakukan agar suatu bahan dapat disimpan lebih lama,  namun  proses  pengeringan  dapat  menyebabkan  kerusakan  senyawa-senyawa  di dalamnya,  termasuk  senyawa  antioksidan  alami.    Pengeringan  disebutkan  sebagai  salah  satu penyebab  terjadinya  oksidasi  asam  askorbat  dan  degradasi  senyawa  antioksidan  oleh  panas (Guerzoni et al., 1997)
Berdasarkan  latar  belakang  diatas  tujuan  Penelitian  ini  untuk  mengetahui  adanya perbedaan kadar  polifenol dan flavonoid pada ekstrak daun kersen ( Muntingia calabura L.) segar  dan  daun  kering.  Manfaat  Penelitian  ini  agar  memberikan  informasi  dalam  mengolah pemanfaatan daun kersen terutama untuk masyarakat dengan metode yang sederhana.

## METODE
Penelitian  merupakan  penelitian true  eksperimental dengan  objek  penelitian  adalah kadar  polifenol  dan  flavonoid  pada  ekstrak  daun  kersen (Muntingia  calabura  L.) segar  dan kering  dengan  spektrofotometer  Uv-Vis.  Data  dianalisis  dengan  uji  statistik independent sample t-test menggunakan SPSS versi 24.
a. Alat : Panci  infusa,  batang  pengaduk,  timbangan  analitik,  kompor  listrik,  thermometer,  krus, oven,  desikator,  tabung  reaksi,  pipet  tetes,  gelas  ukur  ,Spektrofotometer  UV-vis, Erlenmeyer, kuvet, mikropipet dan labu ukur,
b. Bahan :
Daun  kersen  segar  dan  kering,  10  mg  serbuk  Mg,  FeCl 3 1%  ,  HCl  37%,  etanol  96%, aquades, asam galat, reagen Folin-Ciocalteau ,Na 2 CO 3 7,5%, CH 3 COONa, AlCl 3 Tahap Penelitian :
a. Persiapan Ekstrak infundasi daun kersen segar dan kering Menimbang  5  gram  masing-masing  daun  kersen  segar  dan  daun  kersen  kering  dan dibersihkan, kemudian selanjutnya untuk daun segar tersebut dirajang-rajang dimasukkan ke  panci  infus  dan  ditambahkan  aquadest  sebanyak  50  ml.  Pada  daun  kersen  kering  di haluskan  (di  blender)  terlebh  dahulu  kemudian  dimasukkan  ke  panci  infus  dan ditambahkan  aquadest  sebanyak  50  ml.  Masing-masing  di  panaskan  selama  15  menit, dihitung mulai suhu dalam panci mencapai 90°C sambil diaduk.
b. Identifikasi Senyawa Polifenol Hasil  ekstraksi  infundasi  diambil  sebanyak  5  ml  kemudian  disaring  dan  diambil filtratnya.  Filtrat  selanjutnya  ditambahkan  FeCl 3 1%  sebanyak  5  tetes  dan  diamati perubahan  warna  yang  terjadi.  Perubahan  warna  menjadin  hijau  biru  hingga  hitam menunjukkan adanya senyawa polifenol (Prameswari & Widjanarko, 2014)
c. Identifikasi Senyawa Flavanoid Hasil  ekstraksi  infundasi  diambil  sebanyak  2  ml  dan  ditambahkan  sedikit  serbuk  Mg. kemudian  ditambahkan  5  tetes  HCl  37%  dan  etanol  95%  dengan  volume  yang  sama kemudian dikocok. Apabila timbul warna merah, kuning atau jinga, maka ekstrak positif mengandung flavonoid (Lathifah, 2008).
d. Penentuan kadar polifenol menggunakan metode spektrofotometer UV-vis
1) Pembuatan  larutan  asam  galat  Ditimbang  10  mg  asam  galat  ,dilarutkan  dengan akuabides  10  ml  hingga  diperoleh  konsentrasi  larutan  induk  1000  ppm,  kemudian larutan 1000 ppm diencerkan dengan pelarut akuabides hingga diperoleh konsentrasi 10, 20, 30, 40, dan 50 ppm.
2) Pembuatan kurva kalibrasi
Sebanyak 1 ml larutan standar dimasukkan dalam labu ukur 10 ml, ditambahkan 0,5 ml pereaksi Folin Ciocalteau dan 1 ml Na 2 CO 3 7,5%, dicampurkan secara perlahan. Selanjutnya  ditambahkan  akuabides  hingga  tanda  batas.  Larutan    dipindahkan  ke dalam  tabung  reaksi  dan  ditutup  dengan  lembar  alumunium,  dipanaskan  di  dalam penangas  air  pada  suhu  50°C  selama  5  menit.  Dinginkan  dan  ukur  absorbansinya pada panjang gelombang 700-800 nm.
3) Pembuatan larutan sampel dan pengamatan absorbansi sampel Hasil infusa diambil sebanyak 2,0 ml diencerkan dengan metanol p.a sampai 10 ml. pipet 1,0 ml larutan sampel dan masukkan ke dalam labu takar 10 ml yang berisi 7,5 ml  akuabides,  tambahkan 0,5 ml pereaksi  Folin Ciocalteau dan 1 ml Na 2 CO 3 7,5%, campurkan secara perlahan. Selanjutnya ditambahkan akuabides hingga tanda batas. Larutan  dipindahkan ke dalam tabung reaksi dan ditutup dengan lembar alumunium, dipanaskan di dalam penangas air pada suhu 50°C selama 5 menit. Didinginkan dan diukur  absorbansinya  pada  panjang  gelombang  700-800  nm  dengan  interval  5  nm. Dilakukan tiga kali pengulangan. Dilakukan analisis regresi linier untuk mengetahui kadar  polifenol  total  dengan  memasukkan  nilai  absorbansi  yang  diperoleh  kedalam persamaan y = a+bx.
4) Hasil  dinyatakan  sebagai  mg  GAE  (ekuivalensi  asam  galat)  dalam  /  g  simplisia. Rumus yang digunakan :
Keterangan : C = konsetrasi (nilai x) V = volume ekstrak yang digunakan (ml) Fp = Faktor pengenceran g = Berat sampel yang digunakan (g) (Samin et al., 1386)
e. Penentuan kadar polifenol menggunakan metode spektrofotometer UV-vis
1) Pembuatan larutan asam galat Ditimbang  10  mg  asam  galat  ,dilarutkan  dengan  akuabides  10  ml  hingga  diperoleh konsentrasi larutan induk 1000 ppm, kemudian larutan 1000 ppm diencerkan dengan pelarut akuabides hingga diperoleh konsentrasi 10, 20, 30, 40, dan 50 ppm.
2) Pembuatan kurva kalibrasi Sebanyak 1 ml larutan standar dimasukkan dalam labu ukur 10 ml, ditambahkan 0,5 ml pereaksi Folin Ciocalteau dan 1 ml Na2CO3 7,5%, dicampurkan secara perlahan. Selanjutnya  ditambahkan  akuabides  hingga  tanda  batas.  Larutan    dipindahkan  ke dalam  tabung  reaksi  dan  ditutup  dengan  lembar  alumunium,  dipanaskan  di  dalam penangas  air  pada  suhu  50°C  selama  5  menit.  Dinginkan  dan  ukur  absorbansinya pada panjang gelombang 700-800 nm.
3) Pembuatan larutan sampel dan pengamatan absorbansi sampel Hasil infusa diambil  sebanyak 2,0 ml diencerkan dengan metanol  p.a sampai 10 ml. pipet 1,0 ml larutan sampel dan masukkan ke dalam labu takar 10 ml yang berisi 7,5 ml akuabides, tambahkan 0,5 ml pereaksi Folin Ciocalteau dan 1 ml Na2CO3 7,5%, campurkan  secara  perlahan.  Selanjutnya  ditambahkan  akuabides  hingga  tanda  batas. Larutan  dipindahkan ke dalam tabung reaksi dan ditutup dengan lembar alumunium, dipanaskan di dalam penangas air pada suhu 50°C selama 5 menit. Didinginkan dan diukur  absorbansinya  pada  panjang  gelombang  700-800  nm  dengan  interval  5  nm. Dilakukan tiga kali pengulangan. Dilakukan  analisis regresi  linier untuk  mengetahui kadar  polifenol  total  dengan  memasukkan  nilai  absorbansi  yang  diperoleh  kedalam persamaan y = a+bx.
4) Hasil  dinyatakan  sebagai  mg  GAE  (ekuivalensi  asam  galat)  dalam  /  g  simplisia. Rumus yang digunakan :
Keterangan : C = konsetrasi (nilai x) V = volume ekstrak yang digunakan (ml) Fp = Faktor pengenceran g = Berat sampel yang digunakan (g) (Samin et al., 1386)
f. Analisis  data  pada  penelitian  ini  menggunakan  analisis  bivariate.  Data  yang  diperoleh terdistribusi normal, maka dilakukan uji Independent Sample T-Test .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
a. Skrining fitokimia
Hasil skrining fitokimia senyawa polifenol dan flavonoid pada ekstrak daun kersen segar dan kering, dapat dilihat pada tabel di bawah ini.
Tabel 1. Hasil Skrining Polifenol dan Flavanoid
Skrining Fitokimia Hasil Daun Kersen Segar Daun Kersen Kering Standar Polifenol Biru kehitaman Biru kehitaman Bewarna  hijau  biru  sampai hitam Flavonoid Warna kuning pucat Warna kuning Bewarna  merah,  kuning hingga jingga
Berdasarkan  tabel  1,  Uji  pendahuluan  senyawa  polifenol  dan  flavonoid  pada ekstrak  daun  kersen  segar  dan  kering  menunjukkan  hasil  yang  positif  mengandung senyawa  polifenol,  flavonoid  dan  tanin.  Hasil  uji  pendahuluan  senyawa  polifenol  pada ekstrak daun kersen segar dan ekstrak daun kersen kering dengan penambahan FeCl3 1% pada  penelitian  ini  menunjukkan  adanya  perubahan  warna  dari  kuning  menjadi  biru kehitaman.  Identifikasi  flavonoid  ekstrak  daun  kersen  segar  dan  ekstrak  daun  kersen kering  dengan  penambahan  HCl  37%  dan  serbuk  Mg  stabil  dengan  warna  kuning. Identifikasi tanin ekstrak daun kersen segar dan ekstrak daun kersen kering ditambahkan dengan  gelatin  terdapat  endapan,  ekstrak  daun  kersen  segar  dan  ekstrak  daun  kersen kering  dengan  penambahan  pereaksi  FeCl3  1%  terjadi  perubahan  warna  dari  kuning menjadi biru kehitaman.
b. Penentuan Kadar Polifenol dengan Spektrofotometer UV-Vis Penentuan  kadar  polifenol  dengan  Spektrofotometer  UV-Vis  dilakukan  dengan pembuatan  larutan  standar  yaitu  menggunakan  larutan  standar    asam  galat  dengan konsentrasi  10,  20,  30,  40  dan  50  ppm  pada  panjang  gelombang  745  nm,  panjang gelombang  tersebut  didapatkan  dari  pengukuran  panjang  gelombang  maksimum  pada panjang  gelombang  700-800  nm.  Hasil  pengukuran  absorbansi  standar  asam  galat  pada panjang gelombang 745 nm dapat diperoleh data sebagai berikut :
Tabel 2. Hasil Pengukuran Nilai Absorbansi Standar asam galat pada panjang
gelombang 745 nm No. Konsentrasi (ppm) Absorbansi 1. 10 0,260 2. 20 0,286 3. 30 0,360 4. 40 0,536 5. 50 0,546
Berdasarkan  hasil tabel  2,  hasil pengukuran nilai absorbansi  larutan standar asam  galat pada berbagai konsentrasi didapatkan kurva regresi linear larutan standar senyawa asam galat dengan persamaan y= 0,0082x + 0,151, y yaitu absorbansi dan x yaitu  konsentrasi asam galat (ppm), ditunjukkan pada gambar 1.

## Gambar 1. Grafik Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Asam Galat
Berdasarkan hasil pengukuran didapatkan konsentrasi pada ekstrak daun kersen segar dan kering sebagai berikut :
Tabel 3. Hasil Pengukuran Absorbansi,Konsentrasi, Dan Kadar Total Polifenol Pada Sampel Ekstrak Daun
Kersen Segar Dan Kering. No Sampel Absorbansi Konsentrasi (ppm) Kadar Total Polifenol (mg GAE/g sampel) 1. Ekstrak  daun  kersen kering 0,686 65,24 3,262±0,128 2. Ekstrak  daun  kersen segar 0,714 68,62 3,431±0,0673
Absorbansi  pada  pengukuran  sampel  kemudian  dikalibrasi  dengan  persamaan regresi  linear  kurva  baku  y=  a  +  bx  untuk  mendapatkan  konsentrasi  polifenol  pada sampel  ekstrak  daun  kersen  segar  dan  kering.  Berdasarkan  tabel  3,  kadar  polifenol ekstrak  daun  kersen  kering  sebesar  3,262±0,128  mg  GAE/g  sampel  dan  kadar  polifenol pada ekstrak daun kersen segar sebesar 3,431±0,0673 mg GAE/g sampel.
c. Penentuan Kadar Flavonoid dengan Spektrofotometer UV-Vis Penentuan  kadar  flavonoid  dengan  Spektrofotometer  UV-Vis  dilakukan  denan pembuatan larutan standar yaitu menggunakan larutan standar flavonoid kuersetin dengan konsentrasi  20,  40,  60,  80  dan  100  ppm  pada  panjang  gelombang  430  nm,  panjang gelombang  tersebut  didapatkan  dari  pengukuran  panjang  gelombang  maksimum  pada panjang  gelombang  400-500  nm.  Hasil  pengukuran  absorbansi  standar  flavonoid kuersetin pada panjang gelombang 430 nm dapat diperoleh data sebagai berikut :
Tabel 4. Hasil Pengukuran Nilai Absorbansi Standar Flavonoid Kuersetin pada panjang gelombang 430 nm
No. Konsentrasi (ppm) Absorbansi 1. 20 0,193 2. 40 0,333 3. 60 0,516 4. 80 0,698 5. 100 0,834
Berdasarkan  hasil  tabel  4,  Hasil  pengukuran  nilai  absorbansi  larutan  standar flavonoid  kuersetin  pada  berbagai  konsentrasi  didapatkan  kurva  regresi  linear  larutan
standar senyawa flavonoid  kuersetin diperoleh persamaan y= 0,0082x  + 0,0207, y yaitu absorbansi  dan x yaitu konsentrasi  flavonoid  kuersetin (ppm), ditunjukkan pada gambar 2.
Gambar 2. Grafik Hasil Pengukuran Absorbansi Larutan Standar Flavonoid Kuersetin
Berdasarkan hasil pengukuran pada ekstrak dauk kersen segar dan kering diperoleh data sebagai berikut :
Tabel 5. Hasil Pengukuran Absorbansi,Konsentrasi, Dan Kadar Flavanoid Pada Sampel Ekstrak Daun
Kersen Segar dan Kering No Sampel Absorbansi Konsentrasi (ppm) Kadar Flavanoid (mg GAE/g sampel) 1. Ekstrak  daun  kersen kering 0,494 57,68 0,288±0,0157 2. Ekstrak  daun  kersen segar 0,898 107,03 0,535±0,0423
Berdasarkan  hasil  tabel  5  hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  absorbansi ekstrak  daun  kersen  kering  dan  segar  sebesar  0,494  dan  0,898.  Absorbansi  pada pengukuran sampel kemudian dikalibrasi dengan persamaan regresi linear kurva baku y= a + bx untuk mendapatkan konsentrasi flavonoid pada sampel ekstrak daun kersen segar dan kering. Kadar flavonoid ekstrak daun kersen  kering sebesar 0,288±0,0157 mg QE/g sampel  dan  kadar  flavonoid  ekstrak  daun  kersen  segar  sebesar  0,535±0,0423  mg  QE/g sampel.
d. Analisis Statistika Kadar polifenol dan flavonoid pada ekstrak daun kersen segar dan kering dengan Uji Independent Sample T-Test.
Tabel 6. Hasil Uji Independent Sample T-Test No Sampel Sig two tailed 1. Ekstrak daun kersen segar < 0.001 2. Ekstrak daun kersen kering < 0.001
y = 0,0082x + 0,0207 R² = 0,9971 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 0 20 40 60 80 100 120 A b so rb an si Konsentrasi Kadar Flavonoid
Terlihat  nilai  signifikansi  2  arah  (t-tailed)  pada  masing-masing  perlakuan  yaitu  daun segar dan daun kering terhadap kadar polifenol dan kadar flavonoid yaitu 0.001 <  0.05. Hasil ini menunjukkan terdapat perbedaan yang berarti antara Kadar polifenol pada Daun Segar dan Daun Kering dan Kadar flavonoid pada Daun Segar dan Daun Kering.
Skrining fitokimia pada penelitian ini meliputi uji polifenol, dan flavonoid menggunakan uji  tabung.  Hasil  identifikasi  polifenol  pada  ekstrak  daun  kersen  segar  dan  kering  positif mengandung  polifenol  yang  menunjukan  perubahan  warna  dari  kuning  menjadi  biru kehitaman.  Penelitian  ini  sesuai  dengan  penelitian  (Prameswari  &  Widjanarko,  2014) dikatakan  positif  mengandung  polifenol  jika  berwarna  hijau  biru  hingga  hitam  yang menunjukkan  adanya  senyawa  polifenol.  Hasil  identifikasi  flavonoid  pada  ekstrak  daun kersen  segar  dan  kering  positif  mengandung  flavonoid  yang  menunjukan  stabil  bewarna kuning  .  Penelitian  ini  sesuai  dengan  penelitian  Lathifah  (Lathifah,  2008)  apabila  terdapat senyawa  flavonoid  akan  timbul  warna  merah,  kuning  atau  jingga,  maka  ekstrak  tersebut positif  mengandung  flavonoid.  Terjadinya  perubahan  warna  pada  larutan  sampel  karena sampel  mengandung  flavonoid  yang  berjenis  auron  yang  memberikan  warna  kuning  pada larutan sampel menurut Markham (1998).
Hasil  dari  penentuan  kadar  polifenol  pada  daun  kersen  kering  sebesar  3,262±0,128  mg GAE/g sampel dan kadar polifenol pada ekstrak daun kersen segar sebesar 3,431±0,0673 mg GAE/g sampel. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kadar polifenol ekstrak daun kersen kering lebih besar dari pada ekstrak daun kersen segar, hal ini serupa dengan penelitian yang telah  dilakukan  oleh  Pamungkas  dkk  (Pamungkas  et  al.,  2016)  dari  hasil  penelitiannya menunjukkan  kadar  polifenol/fenol  ekstrak  daun  kersen  kering  sebanyak  14  mg  GAE/g sampel  dan  untuk  ekstrak  daun  kersen  segar  sebanyak  6  mg  GAE/g  sampel.  Dari  hasil penelitian ini kadar polifenol ekstrak daun kersen segar dan ekstrak daun kersen kering lebih sedikit  dibandingkan  dengan  penelitian  Pamungkas  dkk  (Pamungkas  et  al.,  2016)  hal  ini disebabkan  oleh  cara  ekstraksi  yang  berbeda  pada  penelitian  ini  menggunakan  ekstraksi infundasi  dan  pada  penelitian  Pamungkas  dkk  (2016)  menggunakan  ekstraksi  maserasi. Berdasarkan penelitian putri 2018, simplisia daun tin (segar dan kering) mempengaruhi kadar fenolik  total  dan  kadar  flavonoid  total  seduhan  daun  tin  secara  signifikan.  Pada  daun  katuk segar dan kering yang di ekstraksi dengan atanol 70% menunjukan bahwa kadar fenolik dan flavonoid  total  serta  aktivitas  antioksidan  yang  paling  tinggi  yaitu  pada  ekstraksi  maserasi dengan sampel daun segar (Hikmawanti & Fatmawati, 2020)
Hasil penentuan kadar flavonoid pada ekstrak daun kersen segar dan ekstrak daun kersen kering  didapatkan  kadar  flavonoid  untuk  ekstrak  daun  kersen  kering  sebesar  0,288±0,0157 mg QE/g sampel dan untuk ekstrak daun kersen segar sebesar 0,535±0,0423 mg QE/g sampel. Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  Putri  (Putri,  2018),  menyatakan  penggunaan  air  mendidih tidak  menghilangkan  kandungan  senyawa  fenolik  dan  flavonoid  pada  seduhan  daun  tin. Penyeduhan  dengan  air  mendidih  pada  daun  tin  segar  menghasilkan  kadar  fenolik  total  dan kadar flavonoid total tertinggi dibandingkan dengan daun tin kering. Pada penelitian Selawa dkk (Selawa et al., 2013) kadar flavonoid ekstrak daun kersen segar dan ekstrak daun kersen kering  lebih  kecil  karena  peningkatan  suhu  pada  ekstraksi  infundasi  menyebabkan  reduksi senyawa  flavonoid,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  senyawa  aktif  yang  ada  bersifat  tidak  tahan panas.
Hasil  pengujian  statistika  menggunakan  Uji  beda  yaitu Uji  Independent  Sample  T-Test. Berdasarkan  hasil  uji  statistic  menunjukkan  bahwa  jenis  daun  yang  digunakan  yaitu  daun segar  dan  daun  kering  berpengaruh  terhadap  kadar  polifenol  dan  flavonoid,  hal  ini ditunjukkan  masing-masing  kelompok  dengan  nilai  sig  0,001  lebih  kecil  dari  0,05  dengan taraf  kepercayaan  95%,  yang  berarti  bahwa  terdapat  perbedaan  signifikan  antara  kadar polifenol dan kadar flavanoid pada daun segar dan daun kering.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  uji independent  t-test menunjukkan  adanya  perbedaan  yang signifikan  pada  kadar  polifenol  pada  daun  segar  dan  daun  kering  dan  kadar  flavonoid  pada daun  segar  dan  daun  kering.    Hasil  kadar  polifenol  ekstrak  daun  kersen  kering  sebesar 3,295±0,128  mg  GAE/g sampel  dan untuk  ekstrak daun kersen  segar  sebesar 3,398±0,0673 mg  GAE/g  sampel.  Hasil  kadar  flavonoid  ekstrak  daun  kersen  kering  sebesar  0,288±0,0157 mg QE/g sampel dan untuk ekstrak daun kersen besar sebesar 0,535±0,0423 mg QE/g sampel.

## DAFTAR PUSTAKA
BPOM RI. (2010). Acuan Sediaan Herbal Volume Kelima. In Acuan Sediaan Herbal .
Dwi,  A.,  &  Syam,  L.  (2017).  Kadar  Fenolik  Total  Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen  (Muntingia Calabura). Jurnal Ilmiah Cendekia Eksakta , 1–8.
Guerzoni, M. E., Nicoli, M. C., Massini, R., & Lerici, C. R. (1997). Ethanol vapour pressure as  a  control  factor  during  alcoholic  fermentation. World  Journal  of  Microbiology  and Biotechnology , 13 (1), 11–16. https://doi.org/10.1007/BF02770800 Hikmawanti,  N.  P.  E.,  &  Fatmawati,  S.  (2020). Uji  Variasi  Metode  Ekstraksi  Untuk Optimalisasi  Perolehan  Senyawa  Antioksidan  Daun  Katuk  (Sauropus  Androgynus  L. Merr) .
Kuntorini, E. M., Fitriana, S., & Astuti, M. D. A. (2013). Struktur Anatomi Dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Daun Kersen (Muntingia (Muntingia calabura) . 291–296. Lathifah,  Q.  A.  (2008). Uji  Efektifitas  Ekstrak  Kasar  Senyawa  Antibakteri  Pada  Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa Bilimbi L.) Dengan Variasi Pelarut . Markham,  K.R.,  1988, Cara  Mengidentifikasi  Flavonoid, diterjemahkan  oleh  Kosasih Padmawinata, 15, Penerbit ITB, Bandung.
Pamungkas,  D.  D.  A.,  Batubara,  I.,  &  Suparto,  H.  (2016). Fraksi  Alkaloid  Daun  Ubi  Jalar Ungu ( Ipomoea batatas var Ayumurasaki ) Sebagai Inhibitor α  -Glukosidase Alkaloid Fraction of Purple Sweet Potato ( Ipomoea batatas var Ayumurasaki ) as α -Glucosidase Inhibitor . 16–21.
Prameswari, O. M.,  &  Widjanarko, S. B. (2014). Uji  Efek Ekstrak Air  Daun Pandan Wangi Terhadap  Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah  dan  Histopatologi  Tikus  Diabetes  Melitus. Jurnal Pangan Dan Agroindustri , 2 (2), 16–27.
Putri, O. (2018). Kadar Fenolik Total dan Flavonoid Total Seduhan Daun Tin (Ficus carica) Segar  dan  Kering  dengan  Air  Mendidih. JC-T  (Journal  Cis-Trans):  Jurnal  Kimia  Dan Terapannya , 2 (2), 7–12. https://doi.org/10.17977/um026v2i22018p007
Sa’adah,  H.,  &  Nurhasnawati,  H.  (2017).  Perbandingan  Pelarut  Etanol  Dan  Air  Pada Pembuatan  Ekstrak  Umbi  Bawang  Tiwai  (Eleutherine  Americana  Merr)  Menggunakan Metode Maserasi.
Jurnal
Ilmiah Manuntung , 1 (2), 149. https://doi.org/10.51352/jim.v1i2.27
Samin, A. A., Bialangi, N., & Salimi, Y. K. (1386). Penentuan Kandungan Fenolik Total Dan Aktivitasantioksidandari Rambut Jagung (Zea Mays L.)Yang Tumbuh Di Daerahgorontalo Adi . 283.
Selawa, W., Revolta, M., Runtuwene, J., Citraningtyas, G., Studi, P., Fmipa, F., & Manado, U. (2013). Kandungan Flavonoid Dan Kapasitas Antioksidan Total Ekstrak Etanol Daun Binahong [Anredera Cordifolia(Ten.)Steenis.]. Pharmacon , 2 (1), 18–23. https://doi.org/10.35799/pha.2.2013.1018
Supriyati,  N.,  &  Sholikhah,  I.  Y.  M.  (2010).  Pengaruh  Cara  Ekstraksi  Terhadap  Kadar  Sari Dan  Kadar  Sylimarin  Dalam  Biji  Silybum  Marianum  (L.)  Gaertn.  Abstrak. Ekstraksi , 98–101.