## JBIO: JURNAL BIOSAINS
(The Journal of Biosciences)
http://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php/biosains email : jbiosains@unimed.ac.id
UJI EFEKTIVITAS EKSTRAKDAUN PETAI CINA ( Leucaena leucocephala )

## UNTUK MENGHAMBAT PERTUMBUHAN Staphylococcus aureus
Axel Valerian, Ermi Girsang, Sri Lestari Rahamdhani Nasution, Sri Wahyuni Nasution Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran, Universitas Prima Indonesia, Medan Email korespondensi: axelvalerian@yahoo.com
Diterima:  Maret 2019; Direvisi: Juli 2019; Disetujui: Agustus 2019

## ABSTRAK
Staphylococcus  aureus merupakan  penyebab  infeksi  tersering  pada  manusia.  Hampir  setiap  orang mengalami  infeksi Staphylococcus  aureus semasa  hidupnya.  Resistensi Staphylococcus  aureus terhadap antibiotik  telah  banyak  dilaporkan.  Penggunaan  antibiotik  β-lactam  seperti  methicillin,  oxacillin,  dan amoxicillin  yang  berlebihan  pada  decade  terakhir  menyebabkan  munculnya methicillin  resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Resistensi ini menyebabkan gangguan pengobatan sehingga diperlukan usaha untuk mengembangkan pengobatan tradisional.   Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk  mengetahui  efektivitas ekstrak  daun  petai  cina  ( Leucaena  leucocephala )  dalam  menghambat  pertumbuhan Staphylococcus  aureus . Penelitian  ini  menggunakan  desain  eksperimental  laboratorik  dengan  metode disc  diffusion .  Ekstraksi dilakukan  dengan  cara  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Konsentrasi  yang  diuji  pada Staphylococcus aureus dengan menggunakan ekstrak daun petai cina ( Leucaena leucocephala ) sebesar 25%, 50%,  75%,  dan  100%.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  petai  cina  ( Leucaena leucocephala )  menghasilkan  zona  hambat  seluas  10.525  mm,  11.475  mm,  12.725  mm,  dan  16.85  mm padakonsentrasi 25%, 50%, 75%, dan 100%.Ekstrak daun petai cina ( Leucaena leucocephala ) efektif dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus .  Zona  hambat  yang  terbesar  pada  konsentrasi murni yaitu 16,85 mm dan zona hambat yang terbentuk termasuk dalam kategori sedang.
Kata Kunci : Staphylococcus aureus , Daun Petai Cina, Antibiotik, Disc diffusion , Zona hambat
EFFECTIVENESS TEST OF CHINESE PETAI LEAF EXTRACT ( Leucaena leucocephala )

## TO INHIBIT THE GROWTH OF Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Staphylococcus  aureus is  the  most  common  cause  of  infection  in  humans.  Almost  everyone  has  a Staphylococcus aureus infection during his lifetime. Staphylococcus aureus resistance to antibiotics has been widely reported. The use of excessive β-lactam antibiotics such as methicillin, oxacillin, and amoxicillin in the last decade has led to the emergence of methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA). This resistance causes a disruption of treatment so that efforts to develop traditional medicine are needed. The purpose of this  study  was  to  determine  the  effectiveness  of  Chinese  petai  leaf  extract  ( Leucaena  leucocephala )  in inhibiting the growth of Staphylococcus aureus . This research uses laboratory experimental design with disc diffusion method. Extraction was done by maceration using 96% ethanol. The concentration was tested on Staphylococcus  aureus  using  Chinese  petai  leaf  extract (Leucaena  leucocephala )  by  25%,  50%,  75%,  and 100%.  The  results  of  this  study  indicate  that  Chinese  petai  leaf  extract  ( Leucaena  leucocephala )  produces inhibitory zones of 10,525 mm, 11,475 mm, 12,725 mm, and 16.85 mm at concentrations of 25%, 50%, 75%, and  100%.  Chinese  petai  leaf  extract  ( Leucaena  leucocephala )  is  effective  in  inhibiting  the  growth  of
Staphylococcus  aureus bacteria.  The  biggest  inhibition  zone  at  pure  concentration  is  16.85  mm  and  the inhibitory zone formed distinguished as intermediate category.
Keywords: Staphylococcus aureus, Chinese Petai Leaf, Antibiotic, Disc diffusion, Inhibitory zone
Pendahuluan
Penyakit  infeksi  adalah  penyakit  yang disebabkan  oleh  mikroba  dan  merupakan masalah  kesehatan  di  seluruh  dunia  termasuk Indonesia.  Terdapat  beberapa  mikroba  yang dapat  menimbulkan  penyakit  infeksi  termasuk virus,  bakteri,  fungi,  dan  protozoa.  Salah  satu bakteri  yang  sering  menginfeksi  manusia  yaitu Staphylococcus aureus . Staphylococcus merupakan bakteri gram positif dengan sel yang berbentuk  sferis  dan  membentuk  kelompok irregular seperti  anggur.  Beberapa  dari  bakteri tersebut merupakan flora normal pada kulit dan membran  mukosa  pada  manusia.  Tetapi terdapat  beberapa  dari  bakteri Staphylococcus yang  menyebabkan  supurasi,  formasi  abses, berbagai  infeksi  piogenik,  dan  bahkan septicemia. Staphylococcus  aureus merupakan penyebab  infeksi  tersering  pada  manusia. Hampir  setiap  orang  mengalami  infeksi Staphylococcus  aureus semasa  hidupnya. Staphylococcus  aureus juga  menghasilkan enterotoxin yang menyebabkan terjadinya food poisoning dan toxic shock syndrome . Jika bakteri Staphylococcus  aureus  berdiseminata,  maka dapat  menyebabkan  terjadinya  osteomyelitis, endocarditis,  pneumonia,  dan  infeksi  saluran kemih (Jawetz et all, 2016;Dennis et all , 2016).
Resistensi Staphylococcus aureus terhadap  antibiotik  telah  banyak  dilaporkan. Penggunaan antibiotik β-lactam seperti methicillin,  oxacillin,  dan  amoxicillin  yang berlebihan  pada  decade  terakhir  menyebabkan munculnya methicillin  resistant  Staphylococcus aureus (MRSA).  Resistensi  ini  menyebabkan gangguan  pengobatan  sehingga  diperlukan usaha  untuk  mengembangkan  pengobatan tradisional (Richard et all , 2013).
Berbagai  spesies  tumbuhan  obat  telah lama  digunakan  oleh  para  peneliti  untuk membuktikan  aktivitas  antibakteri  melalui pengujian  terhadap  berbagai  strain  bakteri secara  in  vitro.  Banyak  dari  spesies  tumbuhan obat tersebut yang aktif melawan bakteri gram
positif  dan  negative,  namun  masih  sedikit spesies  tumbuhan  yang  aktif  melawan  bakteri resisten (Kamalakannan,2011; Pulungan, 2017).
Petai  cina  merupakan  tumbuhan  yang mengandung  senyawa  metabolit  sekunder. Senyawa  metabolit  sekunder  berfungsi  untuk menjaga  dirinya  di  tempat  dia  berada  (Sri  A, 2010).  Masyarakat  Indonesia  memanfaatkan daun petai cina sebagai obat luka dan bengkak. Pemanfaatannya  dengan  cara  dikunyah  atau diremas  kemudian  ditempelkan  pada  bagian yang bengkak (Wahyuni, 2006). Daun petai cina ( Leucaena  leucocephala )  juga  mengandung  zat aktif  flavonoid,  lektin,  alkaloid,  saponin,  dan tannin  (Rohmah et  all ,  2016).  Tumbuhan  petai cina  diketahui  memiliki  potensial  untuk dikembangkan  lebih  lanjut  pada  penyakit infeksi (Bussmann et all , 2010).
Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh Saudi  Fitri  Susanti  dan  Angga  Dwi  Saputra (2016)  untuk  menguji  daya  hambat  perasan daun  petai  cina  terhadap  pertumbuhan Staphylococcus  aureus didapatkan  bahwa perasan  daun  petai  cina  menghambat  bahkan membunuh  kuman  tersebut.  Selain  itu, didapatkan  bahwa  pada  tabung  pengenceran konsentrasi  50%  sampai  konsentrasi  6,25% dapat membunuh kuman, sedangkan konsentrasi 3,125% sampai konsentrasi 0,0975
% dapat menghambat pertumbuhan kuman.

## Bahan dan Metode
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah Rotary  evaporator, Inkubator,  Oven, Autoklaf,  Neraca  digital,  Gelas  ukur,  Tabung reaksi,  Raktabung,  Cawan  petri,  Erlenmeyer, Pipet  tetes,  Bunsen,  Aluminium  foil,  Sarung tangan,  Jangka  sorong,  Kapas,  Oven,  Blender, Penyaring,  Kapas  lidi,  Pinset,  Hot  plate  Stirrer Semua  alat  dicuci  hingga  bersih  kemudian dikeringkan. Setelah itu semua alat dimasukkan kedalam  autoklaf  pada  suhu  121˚C  selama  15 menit, termasuk media yang akan di pakai.
Jurnal Biosains Vol. 5 No. 2 Agustus 2019                                                                         ISSN 2443-1230 (cetak) DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v5i2.12777
ISSN 2460-6804 (online)
Pembuatan ekstrak Sampel yang digunakan dalam penelitian  adalah  daun  petai  cina  ( Leucaena leucocephala )  yang  diperoleh  di  daerah Marindal,  Kabupaten  Deli  Serdang.  Daun  petai cina
( Leucaena leucocephala )dicuci menggunakan  air  bersih.Kemudian  daun dikeringkan  dengan  oven  pada  suhu  50˚C sampai  kering.Setelah  kering,  kedua  daun dihaluskan  menggunakan  blender  sampai menjadi  serbuk.Kemudian  serbuk  kedua  daun di  maserasi  dengan  larutan  etanol  dan  diambil filtratnya dengan penyaringan.Hasil penyaringan kemudian diuapkan menggunakan rotary vacuum evaporator pada suhu 40˚C.Ekstrak  dari  daun  petai  cina  ( Leucaena leucocephala )diencerkan dengan aquades untuk membuat  ekstrak  dengan  konsentrasi  25%, 50%,  75%,  dan  100%.Kemudian  varian konsentrasi ekstrak di vortex dan dituangkan ke cawan  petri  yang  telah  diberi  disk  steril. Rendam  sampai  jenuh,  lalu  pindahkan  kertas disk  ke  cawan  petri  yang  steril  sesuai konsentrasi (Kumar et all ,2004).

## Pembuatan media Mueller Hinton Agar (MHA)
Sebanyak  34  g  serbuk  Mueller  Hinton Agar  agar  ditimbang,  kemudian  disuspensikan ke  dalam  air  suling  sebanyak  1000ml,  lalu dipanaskan  sampai  bahan  larut  sempurna menggunakan Hot plate Stirrer, lalu disterilkan di  dalam  autoklaf  pada  suhu  121˚C  selama  15 menit  dengan  tekanan  1,5kg/cm 2 ( Kumaret et all, 2004).
Pengujian Sensitivitas Pertama  mencelupkan  kapas  lidi  steril ke  dalam  suspense  bakteri  dengan  gerakan memutar  dan  menekan  pada  dinding  tabung.
Kemudian kapas lidi diusapkan pada permukaan Mueller  Hinton  Agar (MHA)  secara merata dan didiamkan selama 3-5
menit.Letakkan  kertas  cakram  yang  telah direndam  dengan  varian  konsentrasi  ekstrak daun  petai  cina  ( Leucaena  leucocephala )  di permukaan  agar  dengan  menggunakan  pinset dan  dilakukan  sedikit  penekanan  supaya cakram  dapat  melekat  dengan  baik.  Kemudian, sediaan  cakram  antibiotik  diletakkan  di  atas
media  agar,  dengan  menggunakan  pinset  dan dilakukan  sedikit  penekanan  supaya  cakram melekat  dengan  baik.  Cawan  petri  kemudian ditutup  rapat  dengan  aluminium  foil.Cawan petri  disimpan  di  dalam  inkubator  pada  suhu 37˚C  selama  36-48  jam  dalam  keadan terbalik.Setelah 36-48 jam, dilakukan pengukuran  zona  hambat  di  sekitar  kertas cakram  dengan  menggunakan  jangka  sorong ( Kumar et all ,2004).

## Hasil dan Pembahasan
Metode  yang  digunakan  dalam  menguji daun  petai cina  ( Leucaena  leucocephala ) dalam menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus adalah metode difusi cakram untuk mendapatkan  zona  hambat  di  sekitar  kertas cakram.  Pengulangan  dilakukan  sebanyak  dua kali. Kemudian zona hambat diukur diameternya menggunakan jangka sorong. Hasil uji  laboratorium  dengan  menggunakan  ekstrak konsentrasi  25%,  50%,  75%,  100%,  kontrol positif dan negatif tertera pada tabel berikut.
Tabel 1 Hasil  pengukuran  zona  hambat  berbagai konsentrasi  ekstrak  daun  petai  cina ( Leucaena leucocephala ) terhadap Staphylococcus aureus Perlakuan Diameter Zona hambat (mm) Staphyloccus aureus Rata-rata diameter zona hambat I II 25% 9,7 11,35 10,525 50% 11,35 11,6 11,475 75% 12,25 13,2 12,725 100% 19 14,7 16,85 Ciprofloxacin 27,2
Gambar 1 Grafik  Hasil  pengukuran  zona  hambat berbagai  konsentrasi  ekstrak  daun  petai cina  ( Leucaena  leucocephala )  terhadap Staphylococcus aureus.
Jurnal Biosains Vol. 5 No. 2 Agustus 2019                                                                         ISSN 2443-1230 (cetak) DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v5i2.12777
Tabel  2 Klasifikasi  zona  hambat  berdasarkan Greenwood Diameter zona hambat Daya hambat pertumbuhan bakteri <10 mm Tidak ada 10-15 mm Lemah 16-19 mm Sedang >20 mm Kuat
Berdasarkan  tabel  dan  diagram  di  atas didapatkan  bahwa  dengan  konsentrasi  ekstrak daun  petai  cina  ( Leucaena  leucocephala )  25%, 50%, 75%, dan 100%, didapatkan zona hambat dengan  diameter  rata-rata10,525mm  :  11,475 mm  :  12,725mm  :  16,85mm.  Sementara  zona hambat  yang  didapat  dari  kontrol  (+)  dengan ciprofloxacin  sebesar  27,2mm  dan  pada kontrol(-) didapatkan sebesar 0 mm. Zonahambat  yang  terbesar  didapatkan  pada konsentrasi  murni,  yaitu  16,85.  Berdasarkan klasifikasi  Greenwood,  zona  hambat  yang terbentuk termasuk dalam kategori sedang.
Dari diagram di atas didapatkan bahwa dengan berbagai konsentrasi ekstrak daun petai cina  ( Leucaena  leucocephala )  yang  berbeda akan  dihasilkan  rata-rata  zona  hambat  yang berbeda.  Selain  itu  juga  didapatkan  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  daun  petai cina  ( Leucaena  leucocephala ),  maka  semakin besar luas zona hambat yang dihasilkan.
Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh Raden Wahid Hanafi ,dkk (2016) untuk menguji daya hambat ekstrak daun petai cina ( Leucaena leucocephala ) terhadap pertumbuhan Staphylococcus  epidermidis didapatkan  bahwa ekstrak daun petai cina cina
( Leucaenaleucocephala )    menghambat  kuman tersebut.  Zona  hambat  yang  terbentuk  pada konsentrasi murni adalah sebesar 14mm.
Sementara  pada  penelitian  yang dilakukan oleh Shendi Suryana, Yen Yen Ade Nuraeni,  Tina  Rostinawati  (2017),  dilakukan pengujian  daya  hambat  ekstrak  daun  petai cina  ( Leucaena  leucocephala )  terhadap Staphylococcus  epidermis dengan  metode difusi  agar.  Hasil  yang  didapatkan  adalah terbentuknya zona hambat sebesar 17,33mm
pada  konsentrasi  murni  ekstrak  daun  petai cina ( Leucaenaleucocephala ).
(a) (b) (c) Gambar 2. (a)Ekstrak  PC  1,  (b)Ekstrak  PC  2, (c)Kontrol PC
Kesimpulan Ekstrak  daun  petai  cina  ( Leucaena leucocephala )  efektif  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus . Zonahambat  yang  terbesar  pada  konsentrasi murniyaitu  16,85  mm.  Berdasarkan  klasifikasi Greenwood,  zonahambat  yang  terbentuk termasuk dalam category sedang.
Pada perbandingan dengan menggunakan  antibiotik  Ciprofloxacin  sebagai control  positif  menghasilkan  zona  hambat terbesar yaitu 27,2 mm. Berdasarkan klasifikasi Greenwood,  zona  hambat  yang  terbentuk termasuk dalam kategori kuat.

## Daftar Pustaka
Bussmann,  R.W.,  Glenn, A., Meyer, K., Kuhlman,
A., Townesmith, A. 2010. Herbal mixtures in traditional medicine in Northern Peru. Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine, 6(10):1-11. Cornelissen,  C.  N.,  Fisher,  B.  D.,  &  Harvey,  R.  A. 2013. Microbiology (3rd ed.). Philadelphia:  Lippincott  Williams  & Wilkins.
Dorland,  W.    2012.  KamusKedokteran  Dorland. Jakarta: BukuKedokteran EGC.
Jawet,  M.  d.  2016.  Jawetz,  Melnick&Adelberg's medical  microbiology  (27th  edition). New  York  :  London:  McGraw-Hill Medical.
ISSN 2460-6804 (online)
Kamalakannan  P,  Kavitha  R,  Elamathi  R,  Deepa T, Sridhar S. Study Of Phytochemical And Antimicrobial Potential Of Methanol And Aqueous  Extracts  Of  Aerial  Parts  Of ElepanthopusScaber. 2011: 4(1): 18-21. Kumar,  S.  S.,  Perumal,  P.,  &  Suresh,  B.  2004. Antibacterial  Studies  on  leaf  Extract  of ElephantopusScaber Linn. (3): 6–8. Kumar,  S.,  2016.  Essentials  of  Microbiology. New  Delhi:  Jaypee  Brothers  Medical Publishers.
Nonci,  F.  Y.,  Atqiyah,  A.,  Farmasi,  J.,  Ilmu,  F., Islam,  U.,  Alauddin,  N.,  &Patogen,  M. 2014.  Antimikroba  Ekstrak  Etanol  Daun Tapak  Liman  (Elephanto  pusscaber  L  .) Dengan  Menggunakan  Metode  KLT Bioautografi, 2(4): 144–148.
Permadi  A,  2008.  Membuat  Kebun  Tanaman Obat, Jakarta :Pustaka Bunda. Pulungan,  A.S.S.  and  Brata,  W.W.W.,  2017. Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun  Talas  Terhadap  Bakteri  Patogen. Jurnal Saintika, 17(1), pp.76-79.
Rohmah,   S.N.,Dina,   Z.F.,   &Pria,   W.R.G. 2016. Effectiveness  of  Petai  Cina  Leaves (Leucaenaleucocephala)  and  JarakPagar Leaves  (Jatrophacurcas)  on  the  Healing Process of  Grade  II  Burns  in  White  Mice (Rattusnorvegicus). Jurnal Ilmu Keperawatan. Vol.4 (1):20-33. Suryana, S., Yen, Y., Nuraeni, A., Rostinawati, T., Farmasi,  F.,  Padjadjaran,  U.,  &  Barat,  J.
2017.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Dari  Lima  Tanaman  Terhadap Bakteri  Staphylococcus  Epidermidis Dengan  Metode  Mikrodilusi  M7  – Antibacterial  Activity  Of  Five  Plant Ethanol  Extract  Against  Staphylococcus Epidermidis Bacteria With Microdilution M7 - A6CLSI Method, 4 , 2–10. Susanti, S. F. &Saputra, A. D., 2016. Daya Hambat Perasan Daun Muda Petai Cina (Leucaenaglauca, Benth) Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  Staphylococcus aureus. Jurnal Sains, 6(12), pp. 28-32.
Wahyuni.  2006.  Antiinflammatory  Effects  of petaicina Leaves Infusion on Male Wistar strain  Mice.  Essay.  Faculty  of  Pharmacy UMS. Surakarta.
Hanafi,  R.  W.,  Widiani,  N.,  Khikmatunnaiz,  M., &Belakang,  L.  2011.  Uji  Potensi  Ekstrak Daun  Petai  Cina  ( Leucaena  leucocephala) Sebagai  Anti  Bakteri  Staphylococcus Epidermidis  dan  EfekPenyembuhan  Luka Eksisi Pada Mencit BALB / C, 17–25.