Accredited by Ministry of Research, Technology                                 DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v22i2.40091 and Higher Education No: 105/E/KPT/2022                Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/jis
Phytochemical Screening, Relationship of Total Phenolic with Antioxidant Activity Of Ethanol and Methanol Extracts of Kesambi (Schleichera oleosa (Lour.) Oken) Bark
Nur Alim 1*) , Tahirah Hasan 2) , Rusman 1) , Jasmiadi 1) , Zulfitri 1)
1) Prodi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Islam Makassar, Makassar, Indonesia
2) Prodi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Islam Makassar, Makassar, Indonesia *Corresponding author : nuralim1983@yahoo.com

## ABSTRACT
Phenolic content has a role in antioxidant activity. The higher the phenolic content of a test sample, the higher the antioxidant activity, which is indicated by a smaller IC50 value. Methanol and 70% ethanol  are  solvents  that  have  been  proven  to  be  widely  used  to  extract  total  plant  phenolic compounds. This study aims to determine the phytochemical content and the relationship of total phenolic  content  with  antioxidant  activity  of ethanol  and  methanol  extract  of  Schleichera  oleosa (Lour.)  Oken)  bark  using  UV-Vis  spectrophotometry. Schleichera  oleosa (Lour.)  Oken  was extracted  by  maceration  using  70%  ethanol  and  methanol  as  solvent.  Qualitative  analysis  of phytochemical  compounds  using  specific  reagents,  analysis  of  total  phenolic  content,  and antioxidant activity test using the DPPH method using UV-Vis spectrophotometry at 764 nm and 515 nm, respectively. The results of the qualitative test showed that the ethanol and the methanol extract  was  positive  for  alkaloids,  flavonoids,  and  phenolics.  The  results  of  the  analysis  of  total phenolic content and antioxidant activity showed that the 70% ethanol extract had a total phenolic content of 7.6829 mg gallic acid equivalent/g with IC 50 28.5240 ppm and the methanol extract had a total phenolic content of  9.2057 mg gallic acid equivalent/g with IC 50 1.6191 ppm. From these results,  it  was  concluded  that  the  higher  the  total  phenolic  content,  the  higher  the  antioxidant activity.
Keywords: Antioxidant; Schlechera oleosa (Lour.) Oken.; total phenolic
Skrining Fitokimia dan Hubungan Kadar Fenolik Total dengan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol dan Metanol Kulit Batang Kesambi (Schleichera oleosa (Lour.) Oken)

## ABSTRAK
Kadar fenolik memiliki peran terhadap  aktivitas  antioksidan. Semakin tinggi kadar  fenolik suatu sampel uji maka aktivitas antioksidannya juga semakin tinggi, yang ditunjukkan dengan nilai IC 50 yang  lebih  kecil.  Pelarut  metanol  dan  etanol 70%  merupakan  pelarut  yang  telah  terbukti  banyak digunakan  untuk  menarik  senyawa  fenolik  total  tanaman.    Penelitian  ini  bertujuan  untuk menentukan  kandungan  fitokimia,  hubungan  kadar  fenolik  total  dengan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etanol  dan  ekstrak  metanol  kulit  batang  kesambi  ( Schleichera  oleosa (Lour.)  Oken) menggunakan spektrofotometri UV-Vis. Kulit batang kesambi ( Schleichera oleosa (Lour.) Oken) diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 70% dan pelarut metanol. Analisis kualitatif  senyawa  fitokimia  menggunakan  pereaksi  spesifik,  analisis  kadar  fenolik  total  dan  uji aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis  masing- masing  pada  panjang  gelombang  764  nm  dan  515  nm.  Hasil  uji  kualitatif  menunjukkan  bahwa ekstrak etanol dan ekstrak metanol kulit batang kesambi ( Schleichera oleosa (Lour.) Oken) positif mengandung  alkaloid,  flavonoid  dan  fenolik.  Hasil  analisis  kadar  fenolik  total  dan  uji  aktivitas antioksidan menunjukkan bahwa ekstrak etanol 70% memiliki kadar fenolik total sebesar  7,6829 mgGAE/g  ekstrak dengan  nilai  IC 50 sebesar  28,5240  ppm  dan  esktrak  metanol  memiliki  kadar fenolik  total  sebesar  9,2057  mgGAE/g  ekstrak  dengan  nilai  IC 50 sebesar  1,6191  ppm.  Dari  hal
tersebut disimpulkan bahwa semakin tinggi kadar fenolik total maka semakin tinggi pula aktivitas antioksidannya.
Kata kunci: Antioksidan; fenolik total; Schlechera oleosa (Lour.) Oken.
(Article History:  Received 11-04-2022; Accepted 08-09-2022; Published 16-09-2022)

## PENDAHULUAN
Senyawa fenolik merupakan kelompok senyawa  terbesar  yang  berperan  sebagai antioksidan alami pada tumbuhan (Dhurhania & Novianto, 2019) dengan berbagai aktivitas farmakologi (Oliver & Villem, 2017).
Kesambi  ( Schleichera  oleosa (Lour.) Oken)  merupakan  salah  satu  tumbuhan  yang dapatdimanfaatkan  dalam  bidang  pengobatan yaitu sebagai antioksidan (Anjum et al ., 2021; Wood et al. , 2020), antibakteri ( Streptococcus aureus dan Escherichia  coli ),  anti  inflamasi dan  analgesik  (Khan et  al. ,  2017)  (Anjum et al .,  2021),  antijamur,  penyakit  kulit,  dan antihipertensi  (Dandapat et  al .,  2019). Aktivitas  tersebut  di  hasilkan  dari  senyawa yang  terkandung  di  dalamnya  yaitu  senyawa fenolik.
Penelitian  uji  fitokimia  dan  aktivitas antioksidan  ekstrak  biji,  kulit  buah  dan  daun kesambi  (Schleichera  oleosa  (Lour.)  Oken) dengan  pelarut  metanol  menunjukkan  bahwa ekstrak  daun,  biji  dan  kulit  buah  kesambi sama-sama memiliki kandungan tanin, saponin  dan  fenolik.  Hasil  uji  kadar  fenolik total  yang  diperoleh  yaitu  ekstrak  daun kesambi sebesar 4,3660 mg GAE/g, kulit buah kesambi  sebesar  4,0527  mg  GAE/g  dan  biji kesambi sebesar 3,5379 mg GAE/g. Hasil uji aktivitas antioksidan diperoleh nilai IC50 pada ekstrak  daun  sebesar  16,12  μg/ml  (sangat kuat), ekstrak biji sebesar 48,34 μg/ml (sangat kuat) dan ekstrak kulit buah kesambi sebesar 78,08  μg/ml  (kuat)  (Wood et  al .,  2020), sehingga dalam penelitian ini  akan dilakukan terhadap kulit batang (klika) kesambi. Telah  dilakukan  penelitian  skrining fitokimia  dan  uji  aktivitas  antioksidan  kulit batang  kesambi  menggunakan  pelarut  n- heksan,  etil  asetat  dan  etanol  96%  yang diekstraksi  secara  bertingkat.  Disimpulkan bahwa  ekstrak  etanol  96%  mengandung flavonoid,  alkaloid,  tanin,  antrakuinon  dan terpenoid dengan IC 50 sebesar 87,52 ppm yang dikategorikan  antioksidan  kuat  (Istiqomah et al .,  2021).  Namun,  penelitian  kulit  batang kesambi  menggunakan  pelarut  metanol  dan etanol  70%  secara  langsung  belum  pernah
dilakukan sehingga perlu dilakukan penelitian.
Alasan  pemilihan  pelarut  metanol dalam penelitian ini karena beberapa penelitian menunjukkan bahwa pelarut metanol  memiliki  daya  ekstrak  yang  kuat dalam menarik senyawa fenolik dalam sampel tanaman  dan  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  sangat  kuat.  (Padmawati et  al. ,  2020; Verdiana et  al. ,  2018).  Etanol  yang  dipilih dalam  penelitian  ini  adalah  etanol  dengan konsentrasi 70% karena berdasarkan penelitian  menyatakan  bahwa  etanol  70% lebih baik menarik senyawa fenolik total  dan memiliki  rendamen  ekstrak  yang  tinggi dibanding  konsentrasi  40%,50%,  60%,  80% dan  90%  (Noviyanti,  2016;  Suhendra et  al. , 2019) .
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan  kandungan  fitokimia,  hubungan kadar fenolik total dengan aktivitas antioksidan  ekstrak  etanol  dan  ekstrak metanol  kulit  batang  kesambi  ( Schleichera oleosa
(Lour.) Oken) menggunakan spektrofotometri UV-Vis.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Prodi Farmasi Fakultas  MIPA  Universitas  Islam  Makassar dan  Laboratorium  Biokimia  Departemen Kimia Fakultas
MIPA Universitas Hasanuddin pada bulan September 2021.
Bahan  yang  digunakan  adalah  kulit batang  kesambi,  akuades,  metanol  (CH 3 OH) p.a, etanol (C 2 H 5 OH) p.a, kloroform p.a, asam asetat  anhidrat  p.a,  asam  galat  (Merk)  asam sulfat pekat  (H 2 SO 4 )p.a, bismutsubnitrat p.a, FeCl 3, reagen Folin-Ciocalteu p.a,  natrium karbonat  (Na 2 CO 3 )  p.a,  aluminium  klorida (AlCl 3 ) p.a, vanilin, asam klorida pekat (HCl) p.a,  kalium  iodida  p.a,  larutan  logam ammonium  besi(III)  sulfat  dodekahidrat (NH 4 Fe(SO 4 ) 2 ∙12H 2 O)  p.a,  larutan  logam ammonium besi(II)sulfat heksahidrat ((NH 4 ) 2 Fe(SO 4 )2∙6H 2 O p.a, dan 2,2’ bipiridin 0.07%, raksa (II) klorida , serbuk Mg.

## Prosedur Kerja Penelitian
1. Pengambilan Sampel
Sampel  penelitian  yang  digunakan adalah  kulit  batang  kesambi  ( Schleichera oleosa (Lour.)  Oken)  yang  tumbuh di  Dusun Kaluppang,  Desa  Poleonro,  Kecamatan Libureng, Kabupaten Bone, Provinsi Sulawesi Selatan  (S)  4°48’37 o S  Bujur  Timur  (E) 120 o 01 ’ 05 o . 2. Pengolahan Sampel
Sampel kulit batang kesambi dibersihkan    dengan  air  yang  mengalir, dipotong-potong kecil lalu dikeringkan dengan  cara  diangin-anginkan  selama  7  hari. Selanjutnya kulit batang kesambi diserbukkan hingga didapatkan serbuk simplisia, kemudian diayak  dengan  40  mesh    lalu  dimasukkan  ke dalam wadah maserasi.
3. Pembuatan Ekstrak
a. Pembuatan Ekstrak Etanol 70% Serbuk  simplisia  kulit  batang  kesambi ditimbang  seberat  350  gram,  dimasukkan dalam  wadah  maserasi  lalu  dibasahi  dengan etanol  70%  terlebih  dahulu,  ditambahkan sedikit demi sedikit sampai volume     500 mL dan  serbuk  simplisia  terendam,  ditutup  dan dibiarkan selama 3 x 24 jam pada temperatur kamar  sambil  sesekali  diaduk,  diulang sebanyak  2  kali.  Disaring  dan  cairan  penyari diuapkan  menggunakan rotary  evaporator sampai dihasilkan ekstrak kental dan ditimbang untuk mengetahui rendamen.
b. Pembuatan Ekstrak Metanol
Serbuk  simplisia  kulit  batang  kesambi ditimbang  seberat  350  gram,  dimasukkan dalam  wadah  maserasi  lalu  dibasahi  dengan metanol  terlebih dahulu, ditambahkan sedikit demi  sedikit  sampai  volume          500  mL  dan serbuk  simplisia  terendam,  ditutup  dan dibiarkan selama 3 x 24 jam pada temperatur kamar  sambil  sesekali  diaduk,  diulang sebanyak  2  kali.  Disaring  dan  cairan  penyari diuapkan  menggunakan rotary  evaporator sampai dihasilkan ekstrak kental dan ditimbang untuk mengetahui rendamen.
4. Analisis Kualitatif
a. Pembuatan Pereaksi Pereaksi Dragendroff
Pereaksi Dragendroff dibuat dalam dua larutan  yaitu:  Larutan  (I)  0,85  gram bismutsubnitrat  dilarutkan  dalam  40  mL  air dan 10 mL asam asetat sedangkan larutan (II) 8,0  gram  kalium  iodida  dilarutkan  dalam  20 mL  air.  Setiap  5  mL  larutan  (I)  dan  (II)
dicampur 20 mL asam asetat dan dicukupkan dengan aquadest hingga 100 mL  (Autherhoff & Kovar, 2002).

## Pereaksi Mayer
Ditimbang  1,35  g  raksa  (II)  klorida dilarutkan  dalam  100  mL  larutan  kalium iodida 5% (Autherhoff & Kovar, 2002).

## b. Skrining Fitokimia Uji Alkaloid
Ditimbang  100  mg  ekstrak  dilarutkan dengan  5  mL  HCL  2  N.  Larutan  yang diperoleh  dibagi  ke  dalam  2  tabung  reaksi. Tabung pertama ditambahkan 3 tetes pereaksi Dragendroff dan tabung kedua ditambahkan 3 tetes  pereaksi  Mayer.Terbentuk  endapan jingga  pada  tabung  pertama  dan  endapan kuning  pada  tabung  kedua  menunjukkan adanya alkaloid (Fransworth, 1995).
Uji Flavanoid
Ditimbang  100  mg  ditambahkan  2  mL etanol lalu kocok hingga homogen ditambahkan  kemudian  ditambahkan  serbuk Mg  dan  5  tetes  HCl  pekat.  Bila  terbentuk warna  merah,  kuning  atau  jingga  ini menunjukan  adanya  flavanoid  (Harborne, 1987).

## Uji Saponin
Ditimbang  100  mg  ekstrak  dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambahkan 2 mL air panas,  lalu  kocok  selama  10  detik.  Jika terbentuk  buih  yang  stabil  selama  10  menit setinggi 1-2 cm (Ciulei, 1984).

## Uji Terpenoid
Sebanyak  100  mg  ekstrak  dimasukkan dalam  tabung  reaksi  lalu  ditambahkan  2  mL etanol  70%  dan  diaduk.  Ditambahkan  1  mL kloroform dalam tabung reaksi lalu ditambahkan  1  mL  asam  asetat  anhidrat, didinginkan  lalu  ditambahkan  asam  sulfat pekat  melalui  dinding  tabung.  Reaksi  positif jika hasil menunjukan adanya cincin kecoklatan  atau  violet  pada  perbatasan  dua pelarut  maka  ekstrak  dinyatakan  positif mengandung terpenoid (Ciulei, 1984).

## Uji Tanin
Ditimbang  100 mg  ekstrak  ditambahkan 2 mL air lalu diaduk dan ditambahkan 3 tetes FeCl3.  Adanya  tanin  ditandai  dengan perubahan  warna  biru  atau  hijau  kehitaman (Fransworth, 1995).
Uji Fenolik
- Ekstrak etanol 70%
Ditimbang seberat 1 mg ekstrak, dilarutkan dengan  etanol  70%  sampai  volume  2  mL,
kemudian  ditambahkan  pereaksi  FeCl 3 1% sebanyak  3  tetes,  sehingga  terjadi  perubahan warna  dari  hijau  muda  menjadi  kehitaman menunjukkan  hasil  positif  mengandung senyawa fenolik.
- Ekstrak Metanol
Ditimbang seberat 1 mg, dilarutkan dengan metanol  96% sampai volume 2 mL, kemudian ditambahkan  pereaksi  FeCl 3 1%  sebanyak  3 tetes,  sehingga  terjadi  perubahan  warna  dari hijau  muda  menjadi kehitaman  menunjukkan hasil positif mengandung senyawa fenolik.
5. Analisis Kuantitatif Senyawa Fenolik
a. Pembuatan  dan  Pengukuran  Deret Larutan Standar Asam Galat
Larutan  standar  asam  galat  1000  ppm dibuat  dengan  menimbang  asam  galat sebanyak   10  mg,  dilarutkan dengan  metanol p.a  hingga  10  mL  sehingga  dihasilkan konsentrasi  1000  ppm. Dari  Larutan  standar asam  galat  1000 ppm  dipipet  0,01  mL;   0,02 mL;  0,04  mL;  0,08  mL  dan  0,16  mL dimasukkan  kedalam  labu  ukur  sampai volume  10  mL  dan  ditambahkan  dengan  0,4 mL  reagen Folin-Ciocalteu dan  didiamkan selama  4-8  menit.  Selanjutnya  ditambahakan Na 2 CO 3 7% 4  mL dan dicukupkan volumenya dengan  air  suling  hingga  10  mL  dan didiamkan  selama  kurang  lebih  2  jam  pada suhu  ruangan  sehingga  diperoleh  konsentrasi 1 ppm, 2 ppm,   4 ppm, 8 ppm, dan 16 ppm. Diukur  absorbansinya  dengan  menggunakan spketrofotometer visibel pada panjang gelombang  maksimum  764  nm.  Diperoleh persamaan  regresi    y  =  0,0486x  -  0,0137 dengan R² = 0,9989 b. Penetapan Panjang Gelombang

## Maksimum
Diambil  salah  satu  konsentrasi  dari larutan  standar  asam  galat.  Kemudian  diukur absorbansinya dengan rentang panjang gelombang  600-800  nm.  Nilai  serapan tertinggi  yang  diperoleh  yaitu  764  nm  yang ditetapkan sebagai panjang gelombang maksimum  karena  memberikan  absorbansi tertinggi.
c. Pengukuran Kadar Senyawa Fenolik
- Ekstrak Etanol Kulit Batang Kesambi Ekstrak  etanol  kulit  batang  kesambi ditimbang seberat 0,05 g kemudian dilarutkan hingga  10  mL  metanol  p.a  untuk  5000  ppm.
Selanjutnya dipipet 1 mL dari larutan tersebut untuk
2 replikasi, masing-masing
ditambahkan pereaksi Folin-Ciocalteu 0,4 mL
dan  didiamkan  selama  8  menit.  Selanjutnya ditambahkan Na 2 CO 3 7% 4 mL kocok hingga homogen lalu dicukupkan volumenya dengan air suling hingga 10 mL dan didiamkan selama kurang lebih 2 jam pada suhu ruangan. Diukur absorbansinya dengan spektofotometer visible pada  panjang  gelombang  maksimum 764 nm (Kesehatan, 2017).
- Ekstrak Metanol Kulit batang Kesambi
Ekstrak  metanol  kulit  batang  kesambi ditimbang seberat 0,05 g kemudian dilarutkan hingga  10  mL  metanol  p.a  untuk  5000  ppm. Selanjutnya dipipet 1 mL dari larutan tersebut untuk 2 replikasi, masing-masing ditambahkan pereaksi Folin-Ciocalteu 0,4 mL dan  didiamkan  selama  8  menit.  Selanjutnya ditambahkan Na 2 CO 3 7% 4 mL kocok hingga homogen lalu dicukupkan volumenya dengan air suling hingga 10 mL dan didiamkan selama kurang lebih 2 jam pada suhu ruangan. Diukur absorbansinya dengan spektofotometer visible pada  panjang  gelombang  maksimum 764 nm (Kesehatan, 2017).
6. Uji Aktivitas Antioksidan dengan metode DPPH
a. Pembuatan Larutan Difenil-

## Pikrilhidrazil (DPPH)
Larutan  DPPH  0,4  mM  dibuat  dengan cara menimbang DPPH sebanyak 0,0157 gram dilarutkan  dalam  labu  tentukur  100  mL menggunakan metanol p.a hingga tanda batas. b. Pengukuran Aktivitas Radikal Bebas DPPH
DPPH  0,4  mM  dibuat  dengan  cara dipipet  1  mL  larutan  DPPH  dan  dimasukkan dalam labu takar 5 mL yang dibungkus dengan aluminium foil kemudian dicukupkan volumenya  dengan  metanol  p.a  hingga  5  mL lalu  didiamkan  selama  30  menit. Selanjutnya diukur absorbansinya
menggunakan spektrofotometri visibel pada panjang gelombang  maksimum  515  nm  (Molyneux, 2004).
c. Pembuatan  Larutan  Baku  Ekstrak Kulit batang Kesambi 1000 ppm
Ditimbang  10  mg  ekstrak,  dilarutkan dengan pelarut metanol p.a sambil dihomogenkan lalu dimasukkan ke dalam labu takar  dan  dicukupkan  volumenya  dengan metanol  p.a  hingga  10  mL,  sebagai  larutan stok 1000 ppm.
d. Pengukuran Aktivitas Antioksidan
Ekstrak  kulit  batang  Kesambi  dengan Metode DPPH Pengujian aktivitas ekstrak kulit batang kesambi sebagai antioksidan dilakukan dengan  memipet  larutan  stock  1000  ppm masing-masing  0,1  mL,  0,2  mL,  0,4  mL, 0,8mL, dan 1,6 mL dimasukkan ke dalam labu tentukur  5  mLyang  dibungkus  dengan aluminium  foil  lalu  ditambahkan  1,0  mL DPPH  0,4  mM  dan  dicukupkan  volumenya dengan  metanol  p.a  hingga  5  mL,  diperoleh konsentrasi 20 ppm, 40 ppm, 80 ppm, 160 ppm dan  320  ppm.  Didiamkan  selama  30  menit, selanjutnya serapannya diukur dengan spektrofotometri visibel pada panjang gelombang  maksimum  515  nm  (Alim  et  al., 2021).
e. Pembuatan  dan  Pengukuran  Aktivitas Antioksidan Larutan Pembanding

## Vitamin C
Larutan  Vitamin  C  1000  ppm  dibuat dengan  cara  menimbang  sebanyak  10  mg vitamin  C  dilarutkan  dengan  metanol  p.a sambil  dihomogenkan,  lalu  dicukupkan volumenya dengan metanol p.a hingga 10 mL. Larutan  1000  ppm  kemudian  diencerkan menjadi  100  ppm.  Untuk  pengujian  aktivitas antioksidanlarutan  vitamin  C  dilakukan dengan  memipet  larutan  stock  100  ppm masing-masing 0,05 mL, 0,1 mL, 0,15 mL, 0,2 mL, dan 0,25 mL lalu ditambahkan DPPH 0,4 mM  1  mL,  dicukupkan  volumenya  sampai  5 mL  dengan  metanol  p.a  dalam  labu  tentukur yang  dibungkus  dengan  aluminium  foil, sehingga diperoleh konsentrasi 1 ppm, 2 ppm, 3  ppm,  4  ppm  dan  5  ppm.  Ditutup  dan didiamkan  selama  30  menit.  Selanjutnya serapannya diukur dengan
alat spektrofotometri visibel pada panjang gelombang  maksimum  515  nm  (Alim  et  al., 2021).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk menentukan  kandungan  fitokimia,  hubungan kadar fenolik total dengan aktivitas
antioksidan  ekstrak  etanol  dan  ekstrak metanol  kulit  batang  kesambi  ( Schleichera oleosa (Lour.) Oken) menggunakan spektrofotometri UV-Vis Sampel kulit batang kesambi  diekstraksi  dengan  cara  maserasi menggunakan  pelarut  etanol  70%  dan metanol.    Proses  ekstraksi  senyawa  kimia dalam  sel  tanaman  yaitu  pelarut  dapat
menembus  dinding  sel  dan  masuk  ke  dalam rongga  sel  yang  mengandung  zat  aktif,  zat aktif akan larut dalam pelarut organik di dalam sel,  kemudian  larutan  pekat  akan  berdifusi keluar  sel.  Proses  ini  akan  terulang  sampai terjadi  keseimbangan  antara  konsentrasi cairan  zat  aktif  di  dalam  dan  di  luar  sel (Harborne,1987).
Pelarut  yang  digunakan  yaitu  pelarut etanol  70%  karena  sifatnya  yang  mampu melarutkan zat yang bersifat polar dan pelarut metanol  merupakan  pelarut  yang  banyak digunakan  dalam  proses  isolasi  senyawa organik bahan alam yang memiliki kelebihan dapat melarutkan seluruh golongan metabolit sekunder  baik  polar  maupun  non  polar (bersifat universal). Fenolik yang akan ditarik bersifat  polar  karena  gugus  hidroksil  (-OH) terikat  pada  cincin  aromatik        (Harbone, 1987).  Hasil  ekstraksi  menggunakan  pelarut etanol  70%  dan  metanol  diperoleh  rendamen seperti terlihat pada Tabel 1.
Tabel 1 . Rendemen Ekstrak Kulit batang Kesambi pada Masing-masing Pelarut Ekstrak Berat Sampel (g) Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) Metanol 350 19,07 5,44 Etanol 70% 350 16,12 4,60
Tabel  2. Hasil  Pengukuran  Absorbansi  Kurva Standar  Asam  Galat  pada  Panjang
Gelombang Maksimum 764 nm Konsentrasi Asam Galat (µg/mL) Absorbansi (A) (λ = 764 nm) 1 0,042 2 0,087 4 0,178 8 0,359 16 0,771
Gambar  1. Kurva  Standar  Asam  Galat  pada Pengukuran  Kadar  Fenolik  Total Ekstrak  Etanol  dan  Metanol  Kulit Batang  Kesambi  ( Schleichera  oleosa (Lour.) Oken)
Tabel  3. Hasil  Pengukuran  Kadar  Fenolik  Total Ekstrak  Etanol  dan  Metanol  Kulit Batang  Kesambi  ( Schleichera  oleosa (Lour.) Oken) Jenis Sampel Fenolik terukur (µg/mL) mg ekivalen asam  galat/g sampel Kadar Fenolik (% b/b) Ekstrak Etanol 70% 46,028807 9,20576 0,920576 Ekstrak Metanol 38,415638 7,68313 0,768313
Pengukuran  kadar  fenolik  total  ekstrak etanol  70%  dan  ekstrak  metanol  kulit  batang kesambi menggunakan spektrofotometri visibel  pada  panjang  gelombang  764  nm. Penentuan  kandungan  senyawa  fenolik  total menggunakan asam galat sebagai pembanding yang  direaksikan  dengan Folin-Ciocalteau . Penggunaan  asam  galat  sebagai  larutan pembanding  karena  asam  galat  merupakan turunan asam hidroksi benzoat yang tergolong senyawa  fenolik  sederhana  dan  juga  sebagai standar  substansi  yang  stabil.  Asam  galat bereaksi  dengan  reagen Folin-Ciocalteu menghasilkan  warna  kuning  menandakan bahwa mengandung senyawa fenolik. Penggunaan Na 2 CO 3 berfungsi sebagai pemberi  suasana  basa  sehingga  senyawa fenolik  yang  terdapat  dalam  sampel  bereaksi dengan reagen Folin-Ciocalteu yang menghasilkan perubahan warna menjadi biru. Hal  ini  disebabkan  karena  terbentuknya kompleks    dari  fosfomolibdat  fosfotungstat pada  reagen  yang  direduksi  oleh  aromatis
senyawa fenolik menjadi molybdenum (Lee et al ., 2003).
Hasil analisis kadar fenolik total ekstrak etanol  70%  dan  ekstrak  metanol  kulit  batang kesambi  dengan  nilai  rata-rata  kadar  fenolik total dari ekstak etanol 70% yaitu 7,68313 mg GAE/g atau 0,768313% b/b  dan untuk ekstrak metanol  yaitu  9,2057  mg  GAE/g  atau 0,920576%  b/b.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kadar fenolik total ekstrak metanol dan etanol 70%  kulit  batang  kesambi  lebih  tinggi dibandingkan    daun  kesambi  sebesar  4,3660 mg GAE/g, kulit buah kesambi sebesar 4,0527 mg  GAE/g  dan  biji  kesambi  sebesar  3,5379 mg GAE/g (Wood et al. , 2020).
Hasil uji aktivitas antioksidan menggunakan  spektrofotometer  visibel  pada panjang  gelombang  515    nm  dengan  baku pembanding  asam  askorbat  diperoleh  nilai IC 50 ekstrak etanol 70% sebesar 28,5240 ppm dan  ekstrak  metanol  sebesar  1,6191  28,5240 ppm. Hal ini tidak jauh berbeda  pada ekstrak daun  sebesar  16,12  μg/ml  (sangat  kuat), ekstrak biji sebesar 48,34 μg/ml (sangat kuat) dan ekstrak kulit buah kesambi sebesar 78,08 μg/ml (kuat) (Wood et al ., 2020).

## KESIMPULAN
Semakin tinggi kadar fenolik total maka semakin  tinggi pula  aktivitas  antioksidannya. Dengan potensi antioksidan yang sangat kuat maka  perlu  di  lakukan  penelitian  analisis kadar  flavonoid  total  dan  tanin  sehingga kedepannya  dapat  pula  dilakukan  elusidasi struktur.

## DAFTAR PUSTAKA
Alim,  N.,  Jummah,  N.,  Pratama,  A.S.,  & Nurdiyanti, N. 2021. Skirining fitokimia  ekstrak  etanol  kulit  buah sirsak  ( Annona  muricata Linn) dan  uji aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH. Sasambo Journal of Pharmacy, 2(2): 60-64.  https://doi.org/10.29303/ sjp.v2i2.40.
Anjum,  N.,  Hossain,  M.J.,  Haque,  M.R., Chowdhury,  A.,  Rashid,  M.A.,  & Kuddus,  M.R.  2021.  Phytochemical Investigation  of Schleichera  oleosa (Lour.) Oken Leaf. Bangladesh Pharmaceutical  Journal,  24(1): 33-36. https://doi.org/10.3329/bpj.v24i1.5163
3.
y = 0.0486x - 0.0137 R² = 0.9989 0.000 0.200 0.400 0.600 0.800 1.000 0 5 10 15 20 Abs or b an si
Konsentrasi Asam Galat (µg/mL)
Autherhoff, H., & Kovar, K. 2002. Identifikasi Obat (N.C. Sugiarso, Trans) . Bandung:
ITB Press. Ciulei, J.  1984. Methodology for Analysis of Vegetables  Drugs.  Bucharest:  Faculty of Pharmacy Rumania. http://www.download.portal.garuda.or g.pdf.
Dandapat,  S.,  Jose,  S.,  &  Prasad  Sinha,  M. 2019.  Anti-hypertensive  activity  of aqueous  and  methanolic  leaf  extracts of Schleichera  oleosa (Lour.)  Merr.
Journal of Analytical & Pharmaceutical Research, 8(3): 94-97. https://doi.org/ 10.15406/japlr.2019.08.00320.
Dhurhania,  C.E.,  &  Novianto,  A.    2019.  Uji
Kandungan Fenolik Total dan Pengaruhnya terhadap Aktivitas Antioksidan  dari  Berbagai  Bentuk Sediaan  Sarang  Semut (Myrmecodia
pendens) . Jurnal  Farmasi  dan  Ilmu Kefarmasian  Indonesia,  5(2): 62-68. https://doi.org/10.20473/jfiki.v5i22018 .62-68.
Fransworth,  N.R.  1995.  Biological  and Phytochemical  Screening  of  Plants. Journal  of  Pharmaceutical  Science, 55(3): 225-276.
Harborne,  J.B.  1987.  Metode  Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan, diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata  dan  Iwang  Soediro. Penerbit ITB, Bandung . Istiqomah, Yahdi, & Dewi, Y.K.  2021. SPIN Berdasarkan data World Health Berdasarkan penelitian Ni Made. Kimia
&  Pendidikan  Kimia , 3(1): 22–31.
https://doi.org/10.20414/spin.v3i1.302
0.
Kesehatan,  D.J.K.    2017.  Farmakope  Herbal Indonesia  Edisi  II  Tahun  2017.  In Farmakope  Herbal  Indonesia  Edisi  II Tahun 2017.
Khan, M.J., Saraf, S.,  & Saraf, S. 2017. Anti- inflammatory  and  associated  analgesic activities of HPLC standardized alcoholic  extract  of  known  ayurvedic plant Schleichera  oleosa . Journal  of Ethnopharmacology,  197: 257-265. https://doi.org/10.1016/j.jep.2016.08.0 21.
Molyneux,  P.    2004.  The  Use  of  the  Stable Free  Radical  Diphenylpicryl-hydrazyl (DPPH)  for  Estimating  Antioxidant Activity. Songklanakarin  Journal  of Science  and  Technology,  26(2): 211-
219. https://doi.org/10.1287/ isre.6.2.144.
Noviyanti.  2016.  Pengaruh  kepolaran  pelarut terhadap  aktivitas  antioksidan  ekstrak etanol daun jambu brazil batu ( Psidium guineense L. )  dengan  metode  DPPH. Jurnal Farmako Bahari , 7(1): 29–35.
Oliver,  P.,  &  Villem,  A.  2017.  Phenolic compounds:  Structure,  uses  and  health benefits.  In Phenolic  Compounds:
Structure, Uses and Health Benefits .
Padmawati, I.A.G., Suter, I.K., & Arihantana,
N.M.I.H. 2020. Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap Aktivitas Antioksidan
Ekstrak  Eceng  Padi  ( Monochoria vaginalis Burm  F.  C.  Presel.). Jurnal Ilmu  Dan  Teknologi  Pangan  (ITEPA) , 9(1): 81-87. https://doi.org/10.24843/itepa.2020.v0 9.i01.p10. Suhendra, C.P., Widarta, I.W.R., &
Wiadnyani,  A.A.I.S.    2019.  Pengaruh konsentrasi  etanol  terhadap  aktivitas antioksidan  ekstrak  rimpang  ilalang ( Imperata  cylindrica (L)  Beauv.)  pada ekstraksi  menggunakan  gelombang ultrasonik  (The  Effect  of  Ethanol Concentration  on  Antioxidant  Activity of  Cogon  grass  Rhizome    Impera. Jurnal  Ilmu  Dan  Teknologi  Pangan (ITEPA) , 8(1): 27–35.
Verdiana,  M.,  Widarta,  I.W.R.,  &  Permana,
I.D.G.M.  2018. Pengaruh Jenis Pelarut Pada Ekstraksi Menggunakan Gelombang Ultrasonik Terhadap Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Kulit
Buah  Lemon (Citrus  limon (Linn.) Burm  F.). Jurnal  Ilmu  Dan  Teknologi
Pangan (ITEPA) , 7(4): 213-222. https://doi.org/
10.24843/itepa.2018.v07.i04.p08.
Wood, W., Cialdini, R., Groves, R.M., Chan,
D.K.C.,  Zhang,  C.Q.,  &  Josefsson, K.W. 2020. Uji Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kesambi ( Schleichera  oleosa (Lour.)  Oken) dengan Pelarut Metanol.