J. Kartika Kimia , Mei 2021, 4, (1) 28-32 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Aktivitas Antioksidan Fraksi Metanol Ekstrak Batang Merung (Coptosapelta tomentosa (Blume) Valenton ex K. Heyne)

## Antioxidant Activities Methanol Fraction of Merung Stem Extract (Coptosapelta tomentosa (Blume) Valenton Ex K. Heyne)
Agustina Rahayu Magdaleni 1 , Daniel 2,*
1 Laboratorium Fisiologi, Fakultas Kedokteran Universitas Mulawarman Samarinda, Kalimantan Timur, Indonesia
2 Laboratorium Kimia Organik Jurusan Kimia FMIPA Universitas Mulawarman Samarinda, Kalimantan Timur, Indonesia
*E-mail: daniel_trg08@yahoo.com
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v4i1.59
Received : 30 Oct 2020, Revised : 30 May 2021., Accepted : 30 May 2021, O nline : 31 May 2021

## Abstrak
Penelitian aktivitas antioksidan dari  batang merung ( Coptosapelta   tomentosa (Blume) Valenton ex K.      Heyne)  telah  dilakukan.  Ekstraksi  dari  batang  merung  dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut yaitu  metanol,  n-heksana  dan  etil  asetat.  Hasil  dari  uji  fitokimia  pada  ekstrak  kasar  batang  merung mengandung  senyawa  fenolik,  steroid  dan  flavonoid. Fraksi metanol mengandung  senyawa  fenolik. Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  dengan  penambahan  DPPH  (1,1- diphenyl -2- picrylhidrazyl ) menunjukkan   pada fraksi  metanol  memiliki  nilai  IC 50 masing-masing  sebesar 163,25 ppm. Analisis GC-MS dari fraksi metanol batang merung terdapat senyawa yaitu 4H-Pyran-4-one, 2,3- dihydro-3,5- dhydroxy-6-methyl- (13,73).
Kata Kunci: Aktivitas Antioksidan, Batang Merung, Uji Fitokimia

## Abstract
Research of antioxidant activity of the merung stem (Coptosapelta tomentosa (Blume) Valenton ex K. Heyne) has been carried out. Extraction from the stem of the merung was carried out using solvents namely methanol, n-hexane and ethyl acetate. The results of the phytochemical test on crude extracts of the stem of the merung stem contains phenolic compounds, steroids and flavonoids. The  methanol fraction contains  phenolic  compounds.  Antioxidant activity test results with the  addition of DPPH (1,1- diphenyl-2-picrylhidrazyl)  showed in methanol fraction had an  IC50  value  of  163.25  ppm.  The GC-MS analysis of the methanol fraction of merung stem contained compounds namely 4H-Pyran-4- one, 2,3-dihydro-3,5-dhydroxy-6-methyl (13.73).
Keywords:  Antioxidant  Activity Test, Merung  Stem,  Phytochemical  Test

## 1 Pendahuluan
Tumbuhan  yang  berkhasiat  sebagai  bahan obat  merupakan  bagian  penting  dari  kehidupan masyarakat, terutama sebagai sumber kehidupan. Banyak masyarakat yang tinggal di sekitar daerah hutan mempunyai kemampuan dalam pemanfaatan tanaman hutan, salah satunya yaitu
untuk  pengobatan  tradisional,  dilakukan  sejak dari  zaman nenek    moyang kemudian diwariskan  secara  tidak langsung [1]. Tumbuhan yang  dimanfaatkan  sebagai  obat    tradisional adalah  tumbuhan merung salah satu spesies dari Coptosapelta  tomentosa (Blume)  Valeton  ex  K. Heyne  yang  merupakan  tumbuhan  dengan  arah
tumbuh  memanjat  dan  jenis  batang  berkayu berwarna hijau  yang banyak tumbuh di wilayah Kalimantan  Timur.  Selain  itu,  tumbuhan  ini telah  banyak  digunakan oleh masyarakat sebagai obat tradisional [2].
Berdasarkan  penelitian    yang    telah dilakukan  Arnida,  (2017)  memaparkan adanya aktivitas    antiplasmodium in    vitro ekstrak etanol    dari    batang    merung    ( C.  tomentosa (Blume) Valeton ex K. Heyne) yang dinyatakan tergolong aktif atau potensial   dengan nilai IC 50 45,864  ±  0,76  μg/mL,  berdasarkan  uji fitokimianya terdapat senyawa flavonoid, terpenoid,  saponin  dan  antrakuinon.  Menurut Karolina (2018) ekstrak batang merung menyatakan terdapat senyawa senyawa berpotensi  yang  dapat  dikembangkan  sebagai obat.  Berdasarkan  hasil  skrining  fitokimia  yang mengandung  senyawa  steroid,  fenolik  dan flavonoid [3,4].
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  maka perlu  dilakukannya  penelitian  lebih  lanjut terhadap  tumbuhan  merung  khususnya  batang tanaman  merung. Dalam penelitian ini  yang diuji dari  batang  tanaman  merung  ( C.  tomentosa (Blume)  Valeton  ex  K.  Heyne)  adalah  fraksi metanol. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan  nilai  aktivitas  antioksidan  yang terdapat  dalam  fraksi    metanol    dari    batang merung  berdasarkan  nilai  IC 50 dan  diharapkan bermanfaat untuk memberikan informasi mengenai    jenis-jenis        senyawa    metabolit sekunder  yang  terkandung  di  dalam  fraksi metanol  dari  batang  merung  ( C.  tomentosa (Blume) Valeton ex K. Heyne) [5,6].
2 Metode Penelitian
2.1 Ekstraksi dan fraksinasi
Sampel batang merung ( C. tomentosa ) yang telah  dihaluskan  kemudian  ditimbang  dan dimaserasi dengan menggunakan pelarut metanol selama  48  jam  dengan  sesekali  dikocok  dan disimpan  pada  suhu  ruang  agar  pada  proses maserasi, senyawa kimia yang terkandung  tidak mengalami  kerusakan  akibat  suhu  tinggi Kemudian sampel hasil maserasi disaring dengan menggunakan  kertas  saring  hingga  diperoleh filtrat.  Lalu  filtrat  yang  dihasilkan  diuapkan pelarutnya  dengan  menggunakan  alat rotary evaporator sehingga  diperoleh  ekstrak  kasar.
Selanjutnya,  dilakukan      ke      tahap      fraksinasi yang      didasarkan      pada  perbedaan  kepolaran dari  pelarut  yang  digunakan.  Pertama-tama, ekstrak  kasar  dari    sampel    batang    merung difraksinasi dengan pelarut n-heksana, etil asetat dan  metanol  sehingga  pada  akhir  fraksinasi diperoleh  fraksi  metanol  dan  diuji  fitokimia untuk  menentukan  senyawa  metabolit  sekunder [7].

## 2.2 Uji  Aktivitas  Antioksidan  pada  fraksi metanol
Uji  aktivitas  antioksidan    dilakukan  pada fraksi  serta  kuersetin  sebagai  kontrol  positif dengan menggunakan metode peredaman radikal bebas  dengan      1,1- diphenyl -2- picrylhidrazyl (DPPH).   Uji   aktivitas   antioksidan ini dilakukan dengan  cara  mengambil  sebanyak  3  mL masing-masing  konsentrasi  yaitu  50  ppm,  100 ppm, 150 ppm, 200 ppm dan 250 ppm kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi.  Selanjutnya ditambahkan 1 mL DPPH 100 ppm pada masing- masing konsentrasi dan dihomogenkan. Campuran  tersebut  selanjutnya  diinkubasi  pada suhu 37 o C selama 30 menit dan diukur serapannya menggunakan  spektrofotometer  visibel  pada panjang  gelombang  517  nm.  Dan  perhitungan aktivitas  anti  oksidan  dinyatakan  dalam  % inhibisi. Analisa senyawa dengan Gas Kromatografi  Mass  Spektrometri  (GC-MS) dilakukan  dengan  bantuan  komputer  dengan membandingkan  spektra  massa  dari  suatu senyawa  dengan mass  spectra  library koleksi NIST  ( National  Institute  of  Standard  and Technology ) USA [8,9].
3 Hasil dan Diskusi/ Result and Discussion
3.1 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan (DPPH)
Uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan  pada  ekstrak kasar dari fraksi metanol pada batang merung  ( C. tomentosa ) serta kuersetin sebagai kontrol positif. Pada  uji  aktivitas  antioksidan  digunakan  dengan variasi konsentrasi dari masing-masing larutan uji yaitu  sebesar  50,  100,  150,  200  dan  250  ppm, Kuersetin  sebagai  kontrol  positif  menggunakan variasi konsentrasi masing-masing sebesar 0,5, 1, 2,  3  dan  4  ppm.  Adapun  data  uji  aktivitas antioksidan  pada  sampel  ekstrak  dari  fraksi metanol  serta  kuersetin  sebagai    kontrol  positif seperti pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil uji aktivitas antioksidan fraksi metanol batang merung serta kuersetin (kontrol positif)
Jenis Ekstrak Konsentrasi (ppm) Nilai IC 50 (ppm) 50 100 150 200 250 Fraksi Metanol 1,73 % 26,61 % 45,03 % 65,19% 80,94 % 163,25 Kontrol Positif Konsentrasi (ppm) Nilai IC 50 (ppm) 0.5 1 2 3 4 Kuersetin 11,50 % 20,20 % 39,64 % 53,96 % 74,68 % 2,66
Berdasarkan  dari  literatur  tentang  aktivitas antioksidan  [8]  menunjukkan  bahwa  kuersetin sebagai  kontrol  positif  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  paling  kuat  dibandingkan dengan fraksi metanol, dimana kuersetin merupakan senyawa flavonoid. Dari uji fitokimia fraksi metanol menunjukkan aktivitas antioksidan karena  mengandung  senyawa  fenolik.  Senyawa tersebut  merupakan  senyawa  yang  umum berpotensi  sebagai  antioksidan. Menurut Rezaeizadeh  (2011)    [10]  senyawa    fenolik merupakan  senyawa    yang    memiliki    cincin aromatik  dengan  satu  atau  lebih  gugus  hidroksil yang  terikat  pada  atom  karbon  dari  cincin aromatik    tersebut.    Gugus    hidroksil    dalam senyawa    fenolik    ini    yang  mempengaruhi senyawa  fenolik  memiliki  aktivitas  sebagai antioksidan  dalam  penangkapan  radikal  bebas, karena gugus hidroksil dari senyawa fenolik dapat mendonorkan  atom  hidrogen  sehingga  dapat menstabilkan senyawa radikal bebas.
Kuersetin  yang  digunakan  sebagai  kontrol positif  termasuk  dalam  golongan  senyawa flavonoid  yang  memiliki  tingkat  antioksidan yang  kuat  dan  memiliki  4  gugus  hidroksil sehingga  mempunyai  kemampuan  yang  lebih untuk  mendonorkan  proton    dalam    meredam radikal    bebas.    Oleh    karena    itu,    kuersetin digunakan  sebagai      kontrol      positif      pada pengujian      aktivitas      antioksidan      ini  untuk menunjukkan bahwa adanya aktivitas antioksidan  yang  ditunjukkan  oleh  senyawa flavonoid  yang  umumnya  terkandung  dalam sampel  yang  diuji.  Uji  aktivitas  antioksidan dilakukan  dengan  metode  peredaman  radikal bebas DPPH, dilakukan dengan melihat perubahan  warna  pada  masing-masing  sampel setelah  diinkubasi  dengan  DPPH.  Jika  semua elektron  DPPH  berpasangan  dengan  elektron pada  sampel  ekstrak  batang  merung      ( C. tomentosa )  maka  akan  terjadi  perubahan  warna
dari ungu tua menjadi kuning terang. Setelah itu sampel  akan  diukur  nilai  absorbansinya  dengan menggunakan  instrumen  spektrofotometer  UV- Visible pada panjang gelombang yaitu  517  nm. Senyawa  DPPH  adalah  senyawa  radikal bebas.  Dimana  elektron  bebas  dari  DPPH  akan berikatan dengan atom hidrogen yang dilepaskan oleh senyawa yang    memiliki    aktivitas antioksidan    sehingga DPPH  radikal  yang awalnya  berwarna  ungu  akan  berubah  menjadi DPPH  stabil  berwarna  kuning.  Kuat  atau lemahnya  tingkat  aktivitas  antioksidan  pada setiap  fraksi  dapat  dipengaruhi  oleh  beberapa faktor  diantaranya  yaitu  perbedaan  konsentrasi dan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam setiap fraksi, serta kemurnian dari    senyawa    yang    berpotensi    sebagai antioksidan    dalam    menangkal    radikal  bebas [10,11].
Komponen  yang  terkandung  dalam  fraksi metanol  batang  merung  dilakukan  analisis menggunakan GC-MS hasil analisis seperti  pada Gambar 1.
Dari    spektrum    Gas    Kromatografi    Mass Spektrometri    (GC-MS)  menunjukkan  bahwa dalam  fraksi  metanol  batang  terdapat  17 komponen senyawa,  hal ini membuktikan bahwa isolat  yang  diperoleh  belum  murni  seperti  pada Tabel 2.
Berdasarkan  Tabel  2  dapat  diketahui  bahwa senyawa 1,3,4,5 tetrahydroxycyclohe xanecarbocylic acid (22,27%), 2-
furancarboxaldehyde,
5-(hydroxymethyl)- (14,45%)  dan  4H-Pyran-4-one,  2,3-dihydro-3,5- dhydroxy-6-methyl-(13,73%)
merupakan senyawa kimia dominan yang terdapat pada fraksi metanol.
Gambar  1 . Kromatogram GC fraksi metanol batang merung
Tabel 2 Karakterisasi Senyawa Fraksi Metanol dari Batang Merung ( C. tomentosa (Blume) Valenton ex K. Heyne) menggunakan GC-MS.
No Jenis/Kode Sampel RT Senyawa Kandungan (%) 1 Fraksi Metanol Batang Merung 4,604 1-(aminocarbonyl)-1-methyl-2- oxohydrazine 3,57 4,804 2-furan methanol 7,92 8,789 2,3-dihydro-5-hydroxy-6-methyl-4h-pyran- 40one 7,09 11,017 4H-Pyran-4-one, 2,3-dihydro-3,5- dhydroxy-6- methyl- 13,73 11,092 2,3-dihydro-5-hydroxy-6-methyl-4h-pyran- 40one 5,45 14,312  2-furancarboxaldehyde, 5-(hydroxymethyl)- 14,45 14,354  2-furancarboxaldehyde, 5-(hydroxymethyl)- 2,08 14,388  2-furancarboxaldehyde, 5- (hydroxymethyl)- 3,95 18,105 Phenol, 2,6-dimethoxy- 3,32 27,503 1-butyl-1h-pyrrole 4,05 28,207 1r-acetamido-2,3c-epoxy-4c-formyloxy- cyclohexane 2,22 28,255  Heptafluorobutyric acid, 4-methylpentyl ester 2,94 29,055 1,3,4,5 tetrahydroxycyclohe xanecarbocylic acid 1,02 29,482 1,3,4,5 tetrahydroxycyclohe xanecarbocylic acid 3,18 30,123 1,3,4,5 tetrahydroxycyclohe xanecarbocylic acid 22,27 32,199 2,4 Dinitrophenylhdrazo ne-acetone 1,23
4 Kesimpulan Besarnya aktivitas antioksidan  ekstrak batang  merung  ( C. tomentosa (Blume) Valenton ex  K.    Heyne)  diperoleh  nilai  IC 50 pada  fraksi metanol  sebesar  163.25  ppm.  Kandungan senyawa  kimia  fraksi  paling  aktif  batang merung  ( C. tomentosa (Blume)  Valenton  ex  K. Heyne) yaitu pada fraksi metanol dengan analisis GC-MS  terdapat  senyawa  yang  dominan  yaitu 1,3,4,5 tetrahydroxycyclohe xanecarbocylic acid (22,27%), 2-furancarboxaldehyde, 5-
(hydroxymethyl)-  (14,45%)  dan  4H-Pyran-4- one,2,3-dihydro-3.5-dhyroxy-6-methyl yang memiliki kandungan sebanyak (13,73 %).

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  kepada  Staf  pengajar pada Laboratorium Kimia Organik FMIPA Unmul atas  selesainya  Penelitian  ini  dan    uji  Aktivitas antioksidan  di  Laboratorium  Kedokteran  FK Unmul  dan  semua  Pihak  yang  telah  membantu dalam penyelesaian artikel ini.

## Daftar Pustaka
[1]   Erviana  L,  Malik  A,  Najib  A.  Uji  Aktivitas Antiradikal  Bebas  Ekstrak  Etanol  Daun Kemangi  ( Ocimum  basilicum L.)  Dengan Menggunakan Metode DPPH. J Fitofarmaka Indones . 2016. 3(2):164–8. http://dx.doi.org/10.33096/jffi.v3i2.217
[2]   Rezeky  FC.  Aktivitas  Afrodisiaka  Ekstrak Metanol  Akar  Manuran  Pada  Mencit  Putih Jantan.  Universitas  Lambung  Mangkurat; 2009.
[3]   Karolina.  Uji  Toksisitas  dan  aktivitas antioksidan dari ekstrak kasar batang sikkam (Bischofia  javanica  Blume)  serta  fraksinya. Universitas Mulawarman; 2018.
[4]   Arnida, Sahi ER, Sutomo. Aktivitas
Antiplasmodium  in  Vitro  dan  Identifikasi
Golongan  Senyawa  dari  Ekstrak  Etanol
Batang  Manuran  (Coptosapelta  tomentosa
Valeton  ex  K.  Heyne)  Asal  Kalimantan
Selatan. J Ilm Ibnu Sina . 2017. 2(2):270–8.
[5]   Rao A. Study On Antioxidant And Cytotoxic Properties  of  Olea  Dioica  Roxb.  Crude Extract  And  Its  Pure  Compound  Collected From Western Ghats, Karnataka, India. Asian J  Pharm  Clin  Res .  2017.  10(2):356. http://dx.doi.org/10.22159/ajpcr.2017.v10i2. 15727
[6]   Atun  S.  Metode  Isolasi  dan  Identifikasi Struktural Senyawa Organik Bahan Alam. J Konserv  Cagar  Budaya .  2014.  8(2):53–61. http://dx.doi.org/10.33374/jurnalkonservasic agarbudaya.v8i2.132
[7]   Cahyani  AI.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  dari Ekstrak  Kulit  Batang  Kayu  Jawa  (Lannea coromandelica)  dengan  Metode  DPPH  (2,2- Difenil-1-Pikrilhidrazil) [Internet]. UIN Syarif Hidayatullah Jakarta; 2017. http://repository.uinjkt.ac.id/dspace/handle/1 23456789/35894 [8]   Proestos  C,  Boziaris  IS,  Kapsokefalou  M,
Komaitis M. Natural Antioxidant Constituents  from  Selected  Aromatic  Plants and  Their  Antimicrobial  Activity  Against Selected  Pathogenic  Microorganisms. Food Technol Biotechnol . 2008. 46(2):151–6.
[9]   Kandaswami C, Middleton E. Flavonoids as Antioxidant,  In  F.  Shahidi  (Ed).  Natural Antioxidant  Chemistry,  Health  Effects  and Applications.  Champaign  Illions:  AOCS Press; 1997.
[10]  Rezaeizadeh  A,  Zuki  ABZ,  Abdollahi  M, Goh  YM,  Noordin  MM,  Hamid  M,  et  al. Determination  of  antioxidant  activity  in methanolic  and  chloroformic  extracts  of Momordica  charantia. African  J  Biotechnol . 2011. 10(24):4932–40.
[11]  Meyer B, Ferrigni N, Putnam J, Jacobsen L, Nichols  D,  McLaughlin  J.  Brine  Shrimp:  A Convenient  General  Bioassay  for  Active Plant  Constituents. Planta  Med .  1982. 45(05):31–4. http://dx.doi.org/10.1055/s- 2007-971236