DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.21595

## JBIO: JURNAL BIOSAINS (The Journal of Biosciences)
http://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php/biosains email : jbiosains@unimed.ac.id
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN RUKAM ( Flacourtia rukam Zoll. & Moritzi) TERHADAP Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli
Henri, Rahmad Lingga
Program Studi Biologi, Fakultas Pertanian, Perikanan dan Biologi, Universitas Bangka Belitung email korespondensi: biology.henry@gmail.com
Diterima:  Desember 2020; Direvisi: April 2021; Disetujui: Agustus 2021

## ABSTRAK
Obat-obatan  herbal  tradisional  saat  ini  menarik  perhatian  yang  signifikan  sebagai  dasar pengobatan  modern , termasuk  tumbuhan  rukam  ( Flacourtia  rukam )  dari  famili  Flacourtiaceae  yang dikenal masyarakat sebagai obat. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi aktivitas antibakteri dari  tumbuham  rukam  ( F.  rukam )  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .  Metode penelitian ini terlebih  dahulu melakukan pengujian kandungan metabolit sekunder tumbuhan F. rukam dengan menggunakan empat pelarut. Aktivitas antibakteri ekstrak daun F. rukam diuji terhadap bakteri S. aureus dan E. coli . Aktivitas antibakteri dilakukan pada konsentrasi yang meliputi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100% dengan metode difusi cakram. Hasil uji fitokimia seperti fenolik, flavonoid, saponin, steroid dan alkaloid merupakan metabolit sekunder dari tumbuhan F. rukam .  Zona hambat tertinggi terdapat  pada konsentrasi  60%  yang  menggunakan  pelarut  metanol  yaitu  rata-rata  sebesar  8,95  ±  1,84    pada  isolat bakteri S.  aures ,  sedangkan  pada  isolat  bakteri E.  coli memiliki  rata-rata  sebesar  9,03  ±  0,95.  Hasil  ini berbeda  dengan  menggunakan  pelarut  etanol  dimana  zona  hambat  tertinggi  pada  konsentrasi  20% masing-masing 7,73 ± 2,79 pada isolat bakteri S. aureus dan 6,61 ± 2,18 pada isolat bakteri E. coli . Khasiat antibakteri yang ditunjukkan oleh tanaman F. rukam ini memberikan dasar ilmiah dan dengan demikian memvalidasi penggunaan secara tradisional.
Kata Kunci : Aktivitas antibakteri, Escherichia coli , Flacourtia rukam , Staphylococcus aureus
ANTIBACTERIAL ACTIVITIES OF RUKAM LEAVES ( Flacourtia rukam Zoll. & Moritzi) AGAINST Staphylococcus aureus AND Escherichia coli

## ABSTRACT
Traditional herbal medicines are now attracted significant attention used as the basis for modern medicines, including the plant of rukam ( Flacourtia rukam ) from the Flacourtiaceae family which is known by the public as medicine. This research aimed to explore the potential antibacterial activity for the plant of rukam ( F.rukam) against bacterial Staphylococcus aureus and Escherichia coli . This research method was to first test the secondary metabolite content of F. rukam by using four solvents. The antibacterial activity extract from leaves of F. rukam was examined against S. aureus and E. coli . The antibacterial activity was assessed  in  the  concentration  include  20%,  40%,  60%,  80%,  and  100%  by  disc  diffusion  method. Phytochemical test results such as phenolics, flavonoids, saponins, steroids, and alkaloids are secondary metabolites  of  the F.  rukam plant.  The  highest  zone  of  inhibition  is  at  a  concentration  of  60%  using methanol solvent, which is an average of 8.95 ± 1.84 in S. aures isolates, while the E. coli bacterial isolates have an average of 9.03 ± 0.95 . This result was different from using ethanol solvent where the highest inhibition zone was at a concentration of 20%, respectively 7.73 ± 2.79 in S. aureus isolates and 6.61 ± 2.18 in E. coli bacteria isolates. Antibacterial efficacy shown by this plant F. rukam provides a scientific basis and thus validates traditional use.
Keywords: Antibacterial activity, Escherichia coli , Flacourtia rukam , Staphylococcus aureus
Pendahuluan Tumbuhan Flacourtia rukam Zoll. & Mor., secara  lokal  dikenal  dengan  sebutan  rukem  atau rukam merupakan merupakan  salah  satu spesies dari  famili  Flacourtiaceae.  Habitat F.  rukam di hutan terdapat pada ketinggian rendah dan sedang (Lim,  2012).  Persebaran F.  rukam didistribusikan secara  luas  di  Jepang,  Filipina,  Thailand,  Malaysia dan Indonesia (Christin, 2015). Tumbuhan rukam dibeberapa  daerah  di  Indonesia  juga  masih ditemukan  di    Kalimantan  Timur  (Karmilasanti  & Supartini,  2011),  Bali  (Martini  et  al.,  2015). Sumatera  Barat  (Putri  et  al.,  2019),  dan  Pulau Bangka (Fadiyah et al., 2020)
Tumbuhan ini termasuk kedalam kelompok buah-buahan liar yang dapat dikonsumsi pada  saat  sumber  makanan  langka  (Rasingam, 2012). Hal ini dilihat banyak buah-buahan liar yang dimakan di seluruh dunia. Namun, konsumsi buah- buahan  liar  secara  bertahap  menurun  karena pengenalan buah-buahan eksotis dan juga banyak dijadikan  obat  tradisional  oleh  masyarakat (Deshmukh  et  al.,  2011).  Tanaman  obat  saat  ini banyak  diaplikasikan  untuk  pengobatan  berbagai penyakit  di  seluruh  dunia.  Tanaman  obat mengandung  berbagai  rentang  molekul  kimia dengan  aplikasi  farmakologis  (Appapalam  & Panchamoorthy,  2017).  Secara  umum,  senyawa bioaktif dalam obat-obatan herbal adalah metabolit sekunder  yang  bertindak  pada  berbagai  sifat farmakologis  (Neelamkavil  &  Thoppil,  2016). Ekstrak  tumbuhan  menyediakan  sumber  penting untuk  zat  obat  baru  (Arasu  et  al.,  2019)  dan memiliki  potensi  untuk  penemuan  senyawa  yang berguna (Hassan et al., 2014).
Tumbuhan obat memiliki aktivitas sebagai antibakteri  diperlukan  untuk  mengobati  berbagai jenis  penyakit  dan  tanpa  efek  samping (Mahalakshmi et al., 2016). Ekstrak yang terbukti berpotensi  efektif  dapat  digunakan  sebagai pencegahan alternatif alami untuk mengendalikan penyakit  dari  aplikasi  agen  antibakteri  patogen (Mostafa et al., 2018). Peningkatan infeksi bakteri yang  disebabkan  oleh  strain  bakteri  resisten umumnya cenderung lebih sulit untuk diobati dan sekitar  1,6  kali  lipat  lebih  mahal  dibandingkan dengan infeksi yang disebabkan oleh strain bakteri yang  rentan  (Spellberg  et  al.,  2011).  Antibiotik sintetis  dan  alami  memberikan  pengobatan pertama untuk infeksi bakteri resisten obat (Perry et  al.,  2009). Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus merupakan bersifat patogen sehingga dapat mengakibtakan  berbagai  jenis  penyakit  infeksi pada manusia (Parija, 2012).
Staphylococcus  aureus yang  resisten terhadap  metisilin,  strain  khusus S.  aureus , diketahui  telah  mengembangkan  resistensi te rhadap  antibiotik  β -laktam  (Pendleton  et  al., 2013). Bakteri Escherichia coli mengembangkan β -
laktam  yang  digunakan  secara  ekstensif  melawan sebagian besar infeksi secara kompleks (Shaikh et al., 2015).
Tumbuhan  rukam  ( F.  rukam )  memiliki kandungan fitokimia antara lain flavonoid, saponin, tanin, dan alkaloid sehingga tumbuhan ini memiliki manfaat  sebagai  antibakteri  (Putri  et  al.,  2019). Penelitian  yang  khusus  menganalisis  senyawa metabolit sekunder dan antibakteri dari tumbuhan F.  rukam beberapa  telah  dilakukan  penelitian. Ekstrak daun F. rukam memiliki zona hambatnya 7- 10  mm  dan  masuk  kategori  sedang  dengan menggunakan  isolat  bakteri Escherichia  coli , Shigella  dysenteriae , Staphylococcus  aureus dan Bacillus  subtilis (Mahanisa,  2019),  sedangkan menggunkan  ekstrak  kulit  batang F.  rukam didapatkan  bahwa  zona  hambat  antibakteri  yang didapat  tergolong  rendah  pada  bakteri  gram negatif (Candella, 2020).
Pengujian antibakteri menggunakan ekstrak  daun F.  rukam sangat  diperlukan  dengan menggunakan  berbagai  jenis  pelarut  dan konsentrasi  daya  hambat  sehingga  perlunya dilakukan  penelitian  menggunakan  tumbuhan  ini untuk  melihat  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri S. aureus dan E.coli .

## Bahan dan Metode
Waktu dan Tempat
Penelitian  dilaksanakan  dari  bulan  Juli sampai Oktober 2020, bertempat di Laboratorium Biologi  dan  Laboratorium  Dasar  Universitas Bangka Belitung.
Koleksi Sampel Sampel daun tumbuhan
rukam ( Flacourtium  rukam ) diperoleh  dari kawasan  kampung  reklamasi,  Air  Jangkang, Kecamatan Merawang, Kabupaten Bangka. Sampel dicuci  dan  dibilas  dengan  air  suling  dan dikeringkan  serta  dihancurkan  menggunakan mortar alu untuk direduksi menjadi partikel halus. Sampel yang sudah kering dilakukan penyimpanan dalam botol tertutup yang kedap udara selama dua hari sebelum digunakan untuk analisis.

## Mikroorganisme
Referensi  strain  bakteri  diperoleh  dari Laboratorium  Mikrobiologi,  Universitas  Bangka Belitung, yang meliputi Staphylococcus aureus dan Escherichia coli (Isolat klinis). Strain disimpan pada suhu 4°C pada agar miring dan dikultur pada  suhu 37°C selama 24  jam pada agar nutrien  sebelum uji kerentanan.
Analisis fitokimia Analisis  fitokimia  dari  semua  sampel ditentukan sebagai berikut:

## Uji alkaloid
100  mg  sampel  bubuk  dilarutkan  dalam 5  ml  metanol  dan  kemudian  disaring. Kemudian 2  ml  filtrat  dicampur  dengan  5 ml  HCl  berair 1%. Satu  mililiter  campuran  diambil  secara terpisah  dalam  dua  tabung  reaksi. Beberapa  tetes reagen Dragendorff ditambahkan  dalam  satu tabung  dan  terjadinya  endapan  oranye-merah dianggap positif. Ke tabung kedua pereaksi Mayer ditambahkan  dan  penampilan  endapan  berwarna buff diambil sebagai tes positif untuk keberadaan alkaloid (Sofowora, 1993).
Liebermann-Burchard test untuk steroid 200  mg  sampel  bubuk  dilarutkan  dalam 2 ml asam asetat secara terpisah; solusi didinginkan  diikuti dengan penambahan beberapa tetes   H 2 SO 4 . Perkembangan  warna dari  ungu  ke biru  atau  hijau  kebiruan  diambil  sebagai  cincin steroid tes positif (Sofowora, 1993).
Tes untuk saponin 1 g sampel bubuk direbus dalam 10  ml air suling  dan  kemudian  disaring. 3  ml  air  suling ditambahkan  ke  filtrat  dan  dikocok  kuat-kuat selama sekitar 5 menit. Pembentukan busa setelah pengocokan  diambil  sebagai  konfirmasi  untuk keberadaan saponin (Sofowora, 1993).

## Tes Shinoda untuk flavonoid
Lima  ratus  miligram  sampel  dilarutkan dalam  5 ml  etanol,  sedikit  dihangatkan  dan kemudian dilakukan proses penyaringan.
Beberapa keping magnesium ditambahkan ke  filtrat  diikuti  dengan  penambahan  beberapa tetes  HCl. Hasil  dari  kehadiran  flavonoid  ditandai dengan warna pink, oranye, atau merah keunguan (Trease & Evans, 2002).

## Tes untuk tanin
500  mg  sampel  bubuk  dicampur  dengan 10 ml  air  suling  dan  kemudian  disaring  diikuti dengan penambahan beberapa tetes larutan besi klorida 1% . Terjadinya  endapan biru-hitam,  hijau  atau  biru-hijau  menunjukkan adanya tanin (Trease & Evans, 2002).
Uji Aktivitas Antibakteri Aktivitas antibakteri diuji dengan metode difusi cakram. Semua strain bakteri yang semalam tumbuh dalam kaldu  disesuaikan ke inokulum  ini kepadatan 100  ml : 0.1 yang mengandung 3,2 × 10 8 koloni forming unit. Selanjutnya, 20  μl disebarkan ke  20  ml  pelat  agar  steril  dengan  menggunakan cotton  swab  steril .  Permukaan  media  dibiarkan kering  selama  sekitar  3  menit.  Cakram  kertas saring steril (berdiameter 5 mm) diresapi dengan 100  μl  ekstrak  uji  yang  berbeda  (40  mg/cakram) kemudian diletakkan di permukaan pelat  agar ini. Uji  aktivitas  antibakteri  ini  dilakukan  dengan membandingkan pada konsentrasi pengujian 20%; 40%;  60%;  80%  dan  100%.  Kanamycin  (30 μg/disc)  digunakan  sebagai  kontrol  positif.  Pelat kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24 jam untuk bakteri setelah itu pertumbuhan bakteri ditentukan  dengan  mengukur  diameter  zona hambat  (mm)  menggunakan  skala  transparan. Setiap ekstrak dianalisis dengan menggunakan dua kali  ulangan,  nilai  rata-rata  disajikan. Kanamycin disc
(30
μg/disc) digunakan untuk membandingkan bioassay.

## Hasil  dan Pembahasan
Berdasarkan  hasil  penelitian  pada  grafik (Gambar 1), menunjukkan bahwa rendemen yang didapatkan merupakan hasil bobot  suatu ekstraksi terhadap bobot bahan baku yang digunakan dalam peroses  ekstraksi.  Hasil  penelitian  menujukkan bahwa rendemen tertinggi yaitu pada jenis pelarut metanol  yaitu  sebesar  13,7%  dan  terendah  pada pelarut n- heksana  sebesar  5,3%.  Hal  ini dikarenakan metanol termasuk pelarut polar sama halnya dengan etanol, yang kedua-duanya sebagai pelarut polar-protik yang dapat memberikan suatu ion OH ˉ sehingga menyebabkan lebih mudah dalam proses berinteraksi dengan gugus fungsional yang polar  (Marnoto  et  al.,  2012).  Metanol  dan  etanol merupakan jenis pelarut yang umumnya digunakan untuk  mengekstrak  senyawa  fitokimia  dalam jumlah yang lebih banyak dan hampir untuk semua senyawa  dengan  berat  molekul  rendah.  Jenis pelarut  pengektraksi  akan  mempengaruhi  hasil rendemen  yang  dihasilkan,  hal  ini  sesuai  dengan konsep like  disolve  like ,  dimana  senyawa  polar hanya  akan  larut  pada  pelarut  polar  dan sebalikanya  senyawa  non  polar  hanya  akan  larut dalam pelarut non polar juga (Mariana et al., 2013).
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.21595
Gambar 1. Hasil rendemen ekstrak F. rukam pada berbagai jenis pelarut
Uji fitokimia yang dilakukan ini berfungsi untuk mengetahui senyawa aktif yang terkandung pada daun tumbuhan F. rukam . Berdasarkan hasil penelitian  yang  telah  dilakukan  diketahui  bahwa senyawa fitokimia (Tabel 1) yang terkandung pada daun  tumbuhan F.  Rukam .  Konstituen  fitokimia seperti  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  fenol,  saponin, dan  beberapa  senyawa  aromatik  lainnya merupakan  metabolit  sekunder  dari  tumbuhan yang  berfungsi  sebagai  mekanisme  pertahanan terhadap  invasi  oleh  beberapa  mikroorganisme, serangga  dan  herbivora  lainnya  (Bonjar  et  al.,
2004).  Hasil  uji  fenolik  menujukkan  bahwa terdapat  pada  semua  jenis  pelarut.  Hasil  ekstrak kasar  daun  tumbuhan F.  rukam yang  direaksikan dengan  FeCl 3 menunjukkan  hasil  positif  yang ditandai  dengan  terjadinya  perubahan  warna menjadi  hitam  pekat.  Hasil  tersebut  disebabkan oleh adanya reaksi senyawa fenolik terhadap FeCl3 yang  menyebabkan  terjadinya  perubahan  warna. Hasil  uji  fenolik  bereaksi  dengan  FeCl 3 1% membentuk  warna  merah,  ungu,  biru,  atau  hitam yang pekat karena FeCl 3 bereaksi dengan gugus – OH aromatis (Haryati et al.,, 2015).
Tabel 1 . Hasil uji fitomikia esktrak daun F. rukam pada berbagai jenis pelarut Uji fitokimia Jenis pelarut ekstrak Metanol n -heksan Kloroform Etanol Fenolik + - + + Tanin - - - - Flavonoid + - + - Saponin + - - + Steroid - + + + Terpenoid - - - - Alkaloid ·     Dragendorff - - - - ·     Mayer - - - + ·     Wagner - - - -
Hasil  uji  flavonoid  terdapat  pada  pelarut metanol dan kloroform. Berdasarkan hasil tersebut diketahui  bahwa  terjadi  perubahan  warna,  yaitu warna  kuning  dengan  permukaan  larutan berwarna merah muda. Hasil tersebut menunjukkan  hasil  positif  adanya  flavonoid. Perubahan  warna  tersebut  disebabkan  adanya reaksi  oksidasi,  dimana  senyawa  flavonoid  akan dioksidasi  oleh  Mg2+  dengan  membentuk kompleks dengan ion magnesium Hasil uji saponin terdapat  pada  pelarut  metanol  dan  etanol (Setiabudi & Tukiran, 2017).
Saponin merupakan senyawa bioaktif yang diproduksi terutama oleh tanaman, tetapi juga oleh beberapa  organisme  laut  dan  serangga.  Secara kimia,  saponin  umumnya  terbentuk  sebagai glikosida steroid atau triterpen polisiklik. Saponin bersifat    lyobipolar,  sehingga  saponin  dapat berinteraksi dengan membran sel dan juga mampu mengurangi  tegangan  permukaan  larutan  berair (Thakur  et  al.,  2011).  Selain  itu  pada  senyawa steroid terdapat pada pelarut n-heksan , kloroform dan etanol. Uji alkaloid hanya terdapat pada pelarut etanol  saja  pada  pereaksi  Mayer,  hal  ini  nitrogen
13,7 7,4 6,5 5,3 0 4 8 12 16 Metanol Etanol Klorofom n-heksana R en de me n (%) Jenis pelarut ekstrak
pada alkaloid akan bereaksi dengan ion logam K+ dari  kalium  tetraiodomerkurat  (II)  membentuk kompleks  kalium-alkaloid  yang  mengendap  atau endapan putih (Marliana et al., 2005).
Hasil
penelitian (Tabel 2) ini, menunjukkan  bahwa  bakteri  gram  positif
( Staphylococcus  aureus )  dan  gram  negatif ( Escherichia coli ) rentan terhadap ekstrak F. rukam . Pemilihan  pelarut  metanol  dan  etanol  pada pengujian aktivitas antibakteri didasarkan keterwakilan  pelarut  dari  hasil  rendemen  dan  uji fitokimia yang dilakukan sebelumnya.
Tabel 2 . Hasil uji aktivitas antibakteri daun F. rukam terhadap isolat bakteri E. coli da S. aureus No.  Pelarut Isolat Rata-rata Zona Hambat (mm) ± SD 20% 40% 60% 80% 100% 1 Metanol S. aureus 0 ± 0 4,51 ± 2,16 8,95 ± 1,84 4,08 ± 5,77 1,43 ± 2,02 E. coli 4,36 ± 0,56 5,48 ± 0,45 9,03 ± 0,95 7,65 ± 0,90 2,67 ± 0,63 2 Etanol S. aureus 7,73 ± 2,79 7,45 ± 2,74 5,68 ± 3,76 6,85 ± 2,56 6,19 ± 3,11 E. coli 6,61 ± 2,18 6,04 ± 1,15 5,40 ± 2,38 4,62 ± 1,46 5,82 ± 1,61
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa hampir  semua  ekstrak  tumbuhan  efektif  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan berbagai  efek  penghambatan  seperti  yang dijabarkan  pada  Tabel  2.  Zona  hambat  tertinggi terdapat pada konsentrasi 60% yang menggunakan pelarut metanol yaitu rata-rata sebesar 8,95 ± 1,84 pada isolat bakteri S. aures , sedangkan pada isolat bakteri E.coli memiliki rata-rata sebesar 9,03 ± 0,95 .  Hasil  ini  berbeda  dengan  menggunakan  pelarut etanol  dimana  zona  hambat  tertinggi  pada konsentrasi 20% masing-masing 7,73 ± 2,79 pada isolat bakteri S. aureus dan 6,61 ± 2,18 pada isolat bakteri E.  Coli .  Kemampuan  ekstrak  tumbuhan rukam ( F. rukam ) untuk menghambat pertumbuhan bakteri gram positif dan gram negatif terlepas  dari  pelarut  yang  digunakan  untuk ekstraksi.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Dike- Ndudim  et  al.  (2016),  menyatakan  bahwa penghambatan  bakteri  oleh  ekstrak  tumbuhan dapat  berfungsi  sebagai  sumber  antibiotik  dan membenarkan  manfaat  penggunaan  tumbuhan tradisional ini untuk tujuan terapeutik.
Ekstrak  metanol F.  rukam tidak  memiliki aktivitas  penghambatan  terhadap S.  aureus pada konsentrasi 20%. Menurut De Zoysa et al. (2019), bahawa kehadiran jumlah yang tidak memadai dari konstituen  aktif  atau  konstituen  dalam  ekstrak untuk  menunjukkan  aktivitas  antimikroba  dapat menjadi  alasan  untuk  hasil  negatif.  Tidak  adanya aktivitas  antimikroba  bukan  berarti  senyawa bioaktif  tidak  terdapat  pada  tumbuhan  atau tumbuhan  tidak  memiliki  aktivitas  antimikroba terhadap mikroorganisme. Penelitian ini menunjukkan  bahwa  aktivitas  antimikroba bergantung  pada  dosis  dan  pengaruh  pelarut terhadap  ekstraksi  metabolit  yang  diperlukan untuk aktivitas antibakteri, sehingga ketersediaan ekstrak  kasar F.  rukam tergantung  pada  jenis pelarut  yang  digunakan  untuk  ekstraksi  dan konsentrasi F. rukam tersebut. Zona hambat yang
terbentuk pada penelitian ini tergolong dalam dua kategori yaitu: kategori lemah dan kategori sedang. Senyawa antibakteri berdasarkan kategori kekuatan  diameter  penghambatannya  terbagi menjadi  4  kategori,  yaitu  sangat  kuat  (>20  mm), kuat  (11-20  mm),  sedang  (6-10  mm),  dan  lemah (<5 mm) (Susanto et al., 2012).
Ekstrak  dari  pelarut  etanol  dan  metanol merupakan ekstrak yang paling umum digunakan dan  menunjukkan  sifat  antimikroba  tertinggi.  Uji antimikroba seperti difusi cakram dilakukan dalam menentukan konsentrasi hambat minimum untuk menguji  keefektifan  ekstrak  dalam  galur  bakteri Nilai daya hambat dari ekstrak pelarut yang sama bervariasi  meskipun  semua  ekstrak  memiliki khasiat  antibakteri  yang  sama.  Ini  terlihat  karena aktivitas penghambatan bakteri sangat bergantung pada senyawa bioaktif yang ada dalam ekstrak. Jadi, perbedaan  konsentrasi  hambat  minimum  antara dua  ekstrak  tumbuhan  dapat  dikaitkan  dengan adanya  senyawa  bioaktif  yang  berbeda  atau konsentrasi  yang  berbeda  dari  senyawa  bioaktif yang  sama.  Senyawa  bioaktif  ini  pada  dasarnya adalah fitokimia seperti flavonoid, tanin, kumarin, triterpen,  alkaloid,  fenilpropanoid,  sterol  dan terpenoid (Bhatia et al., 2021).
Aktivitas  antibakteri  pada  bakteri  gram positif ( S. aureus ) dan bakteri gram negatif ( E. coli ) menunjukkan hasil yang berbeda tergantung jenis pelarut  yang  digunakan.  Perbedaan  ini  juga diakibatkan  konstituen  morfologi  antara  bakteri gram  positif  dan  gram  negatif  mungkin  menjadi alasan perbedaan sensitivitas antibakteri. Komponen  struktur  lipopolisakarida  dalam membran  fosfolipid  luar  bakteri  gram  negatif menyebabkan  dinding  sel  tidak  dapat  ditembus oleh  zat  kimia  antimikroba.  Bakteri  gram  positif memiliki lapisan luar peptidoglikan, yang membuat dinding  sel  lebih  permeabel  terhadap  zat antimikroba  daripada  lapisan  lipopolisakarida. Oleh  karena  itu,  kompleksitas  dinding  sel  bakteri
gram  negatif  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan bakteri gram positif. Selain itu, bakteri gram negatif kurang  rentan  terhadap  zat  kimia  antimikroba dibandingkan bakteri gram positif (Tan et al., 2014) Efek  antimikroba  yang  diamati  dari ekstrak F.  rukam dianggap  berasal  dari  induksi fitokimia  sebagai  ekstrak  yang  mengandung senyawa bioaktif yang diketahui memiliki aktivitas antibakteri. Kehadiran beberapa fitokimia dengan aktivitas antibakteri dalam ekstrak mungkin telah berkontribusi  pada  kerusakan  sinergis  bakteri (Farasat et al., 2014). Bakteri gram negatif memiliki resistensi  terhadap  aktivitas  antimikroba  dari ekstrak  tumbuhan  (Biswas  et  al.,  2013).  Senyawa fitokimia  berinteraksi  dengan  cara  mengganggu membran sel fosfolipid, mengakibatkan peningkatan permeabilitas sel, yang menyebabkan penipisan komponen sel. Pada sel bakteri, fitokimia menyebabkan  koagulasi  kandungan  sel  dan  juga menonaktifkan deoxyribonucleic  acid  ( DNA)  yang dimanifestasikan sebagai gangguan proses pertumbuhan bakteri (Godstime et al., 2014).
Hasil didapatkan bahwa F. rukam sebagai salah  satu  tumbuhan  obat  potensial  yang  dapat digunakan untuk melawan berbagai patogen dalam bentuk  mentah  dan  sebagai  ekstrak.  Hal  ini diketahui dengan baik bahwa sebagian besar obat sintetis berasal dari produk nabati (Kalaiselvi et al., 2013).  Fitokimia  yang  ada  dalam  tanaman menunjukkan  bioaktivitas  yang  bermanfaat  bagi kesehatan  salah  satunya  sebagai  aktivitas antimikroba  (Mahmud &  Khan, 2018).  Tumbuhan pada  umumnya  mempunyai  kandungan  fitokimia yang beragam tergantung dari jenis tumbuhannya. Fitokimia adalah senyawa turunan alami yang telah digunakan untuk mengobati berbagai penyakit (Ng et  al.,  2018).  Tumbuhan  mengandung  berbagai macam  metabolit  sekunder  termasuk  tanin, terpenoid,  alkaloid,  dan  flavonoid  yang  telah terbukti memiliki aktivitas antimikroba, antioksidan,  antitumor,  dan  aktivitas  biologis lainnya dan dapat sangat penting dalam kesehatan (Al-Saleem et al., 2018).
Kesimpulan Senyawa metabolit sekunder dari ekstrak tumbuhan  daun  rukam  ( Flacoutia  rukam )  terdiri dari:  fenolik,  flavonoid,  saponin,  steroid  dan alkaloid.  Pelarut  metanol  mampu  menghambat aktivitas  antibakteri  tertinggi  pada  konsentrasi 60%,  sedangkan  ektraks  yang  menggunakan pelarut etanol  memiliki zona hambat tertingginya pada  konsentrasi  20%.    Zona  hambat  yang terbentuk pada penelitian ini tergolong dalam dua kategori yaitu: kategori lemah dan kategori sedang

## Ucapan Terimakasih
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  atas bantuan  dari  Program  Penelitian  Kompetitif
Nasional  skema  Penelitian  Dosen  Pemula  (PDP) dari Kemenristek-BRIN berdasarkan Surat Keputusan  Nomor  7.15/UN50/PG/IV/2020  dan Perjanjian atau Kontrak Nomor 035/SP2H/LT/DRPM/2020.

## Daftar Pustaka
Al-Saleem,  M.  S.,  Awaad,  A.  S.,  Alothman,  M.  R.,  & Alqasoumi,  S.  I.  2018.  Phytochemical standardization  and  biological  activities  of certain desert plants growing in Saudi Arabia.
Saudi  Pharmaceutical  Journal , 26 (2),  198 – 204. Appapalam, S. T., & Panchamoorthy, R. 2017. Aerva lanata mediated  phytofabrication  of  silver nanoparticles  and  evaluation  of  their antibacterial activity against wound associated  bacteria. Journal  of  the  Taiwan Institute of Chemical Engineers , 78 , 539 – 551. Arasu,  M.  V.,  Arokiyaraj,  S.,  Viayaraghavan,  P.,
Kumar, T. S. J., Duraipandiyan, V., Al-Dhabi, N. A.,  &  Kaviyarasu,  K.  2019.  One  step  green synthesis of larvicidal, and azo dye degrading antibacterial  nanoparticles  by  response surface methodology. Journal
of Photochemistry  and  Photobiology  B:  Biology ,
190 , 154 – 162. Bhatia,  P.,  Sharma,  A.,  George,  A.  J.,  Anvitha,  D., Kumar,  P.,  Dwivedi,  V.  P.,  &  Chandra,  N.  S. 2021.  Antibacterial  activity  of  medicinal plants  against  ESKAPE:  An  update. Heliyon ,
7 (2), e06310. Biswas, B., Rogers, K., McLaughlin, F., Daniels, D., & Yadav, A. 2013. Antimicrobial activities of leaf extracts of guava ( Psidium guajava L.) on two gram-negative  and  gram-positive  bacteria.
International Journal of Microbiology , 1 – 7.
Bonjar,  G.  H.  S.,  Aghighi,  S.,  &  Nik,  A.  K.  2004. Antibacterial and Antifungal Survey in Plants used in Indigenous Herbal-Medicine of South East  Regions  of  Iran. Journal  of  Biological Sciences , 4 (3), 405 – 412. Candella, F. 2020. Analisis Total Fenolik, Flavonoid dan  Aktivitas  Antioksidan  serta  Antibakteri dari Ekstrak Kulit Batang Rukam (Flacourtia rukam). [skripsi].  Jurusan  Kimia,  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam: Universitas Sriwijaya.
Christin,  M.  2015.  Buah  rukam  atau  rukem. https://www.biodiversitywarriors.org.
De Zoysa, M. H. N., Rathnayake, H., Hewawasam, R. P., & Wijayaratne, W. M. 2019. Determination of  in  Vitro  Antimicrobial  Activity  of  Five  Sri Lankan  Medicinal  Plants  against  Selected Human  Pathogenic  Bacteria. International Journal of Microbiology , 1 – 8.
Deshmukh,  B.  S.,  Waghmode,  A.,  &  Arts,  A.  2011. Role of wild edible fruits as a food resource: Traditional knowledge. International Journal
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v7i3.21595
of Pharmacy & Life Sciences , 2 (7), 919 – 924.
Dike-Ndudim,  J.  .,  Anyanwu,  G.  .,  Egbuobi,  R.  ., Okorie, H. ., Udujih, H. ., Nwosu, D. ., & Okolie, N. J. . 2016. Anti-bacteria and phytochemical potential of Moringa oleifera leaf extracts on some wound and enteric pathogenic bacteria. European  Journal  of  Botany,  Plant  Sciences and Phytology , 3 (1), 50 – 60. Fadiyah,  I.,  Lestari,  I.,  &  Mahardika,  R.  G.  2020.
Kapasitas  Antioksidan  Ekstrak  Buah  Rukam ( Flacourtia  rukam )  Menggunakan  Metode Microwave Assisted Extraction (MAE). Indo. J. Chem. Res. , 7 (2), 107 – 113. Farasat, M., Khavari-Nejad, R. A., Nabavi, S. M. B., & Namjooyan,  F.  2014.  Antioxidant  activity, total  phenolics  and  flavonoid  contents  of some  edible  green  seaweeds  from  northern coasts of the  Persian gulf. Iranian Journal  of Pharmaceutical Research , 13 (1), 163 – 170. Godstime, O., Felix, E., Augustina, J., & Christopher, E. 2014. Mechanisms of Antimicrobial Actions of Phytochemicals against Enteric Pathogens -  A  Review. Journal  of  Pharmaceutical,
Chemical and Biological Sciences , 2 (2), 77 – 85. Haryati, N., Saleh, C., & Erwin. 2015. Uji Toksisitas dan  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Merah  Tanaman  Pucuk  Merah  ( Syzygium Myrtifolium Walp.) Terhadap Bakteri S taphylococcus  Aureus dan Escherichia  Coli . Jurnal Kimia Mulawarman , 13 (1), 35 – 40.
Hassan,  H.  U.,  Murad,  W.,  Tariq,  A.,  &  Ahmad,  A. 2014.  Ethnoveterinary  study  of  medicinal plants  in  Malakand  Valley,  District  Dir (Lower),  Khyber  Pakhtunkhwa,  Pakistan. Irish Veterinary Journal , 67 (1), 1 – 6.
Kalaiselvi,  M.,  Subbaiya,  R.,  &  Selvam,  M.  2013. Synthesis  and  characterization  of  silver nanoparticles from leaf extract of Parthenium hysterophorus and  its  anti-bacterial  and antioxidant  activity. International  Journal  of Current  Microbiology  and  Applied  Sciences ,
2 (6), 220 – 227. Karmilasanti, K., & Supartini, S. 2011. Keanekaragaman  Jenis  Tumbuhan  Obat  Dan Pemanfaatannya d i Kawasan Tane’ Olen Desa Setulang  Malinau,  Kalimantan  Timur. Jurnal Penelitian Dipterokarpa , 5 (1), 23 – 38. Lim, T. K. 2012. Flacoutia rukam. Edible Medicinal and Non-Medicinal Plants , 5 , 776 – 779.
Mahalakshmi,  N.,  Dhanasekaran,  S.,  Ravi,  C.,  & Lingathurai,  S.  2016 .  In‐vitro  antimicrobial activities of Pongamia glabra and Phyllanthus niruri . South  Indian  Journal  Of  Biological Sciences , 2 (2), 236 – 244. Mahanisa,  A.  S.  2019. Flavonoid  apigenin  dari ekstrak  daun  tumbuhan  rukam  (Flacourtia rukam)  serta  uji  aktivitas  antioksidan  dan antibakteri . [skripsi]. Jurusan Kimia, Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam:
Universitas Sriwijaya.
Mahmud, J., & Khan, R. A. 2018. Characterization of Natural  Antimicrobials  in  Food  System. Advances in Microbiology , 8 (11), 894 – 916. Mariana,  L.,  Andayani,  Y.,  &  Gunawan,  R.  2013. Analisis Senyawa Flavonoid Hasil Fraksinasi Ekstrak  Diklorometana  Daun  Keluwih. Chemistry Progress , 6 (2), 50 – 55.
Marliana,  S.  D.,  Suryanti,  V.,  &  Suyono.  2005. Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam ( Sechium edule Jacq . Swartz .) dalam Ekstrak Etanol. Biofarmasi , 3 (1), 26 – 31.
Marnoto, T., Haryono, G., Gustinah, D., & Putra, F. A. 2012.  Ekstraksi  Tannin  Sebagai  Bahan Pewarna  Alami  Dari  Tanaman  Putrimalu ( Mimosa  Pudica )  Menggunakan  Pelarut Organik. Reaktor , 14 (1), 39 – 45.
Martini, N. L., Dwiyani, R., & Pradnyawathi, N. L. M. 2015.  Identifikasi  dan  Karakterisasi  Sumber Daya  Genetik  Buah-buahan  di  Kabupaten Bangli. Agrotrop:  Journal  on  Agriculture Science , 5 (2), 179 – 186.
Mostafa,  A.  A.,  Al-Askar,  A.  A.,  Almaary,  K.  S., Dawoud, T. M., Sholkamy, E. N., & Bakri, M. M. 2018.  Antimicrobial  activity  of  some  plant extracts against bacterial strains causing food poisoning diseases. Saudi Journal of Biological Sciences , 25 (2), 361 – 366. Neelamkavil, S. V., & Thoppil, J. E. 2016. Evaluation of the Anticancer Potential of the Traditional Medicinal  Herb. South  Indian  Journal  of Biological Sciences , 2 (1), 41 – 45.
Ng,  C.  Y.,  Yen,  H.,  Hsiao,  H.  Y.,  &  Su,  S.  C.  2018.
Phytochemicals in skin cancer prevention and treatment: An updated review. International Journal of Molecular Sciences , 19 (4), 1 – 24.
Parija,  S.  C.  (2012). Textbook  of  Microbiology  & Immunology 2 nd Edition . Pudhucerry, India: Elsevier.
Pendleton, J. N., Gorman, S. P., & Gilmore, B. F. 2013. Clinical relevance of the ESKAPE  pathogens. Expert Review of Anti-Infective Therapy , 11 (3), 297 – 308. Perry,  C.  C.,  Weatherly,  M.,  Beale,  T.,  & Randriamahefa, A. 2009. Atomic forcemicroscopy  study  of  the  antimicrobial activity  of  aqueous  garlic  versus  ampicillin against Escherichia  coli and Staphylococcus aureus . Journal  of  the  Science  of  Food  and Agriculture , 89 (6), 958 – 964.
Putri, D. V., Lestari, F., & Widiya, M. 2019. Uji Daya Antibakteri Sari Pati Daun Rukam ( Flacourtia rukam )  terhadap  Zona  Hambat Escherichia coli . Jurnal Biosilampari : Jurnal Biologi , 2 (1), 23 – 28. Rasingam,  L.  2012.  Ethnobotanical  studies  on  the wild  edible  plants  of  Irula  tribes  of  Pillur Valley, Coimbatore district, Tamil Nadu, India.
Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine , 2 (3), 1493 – 1497.
Setiabudi,  D.  .,  &  Tukiran.  2017.  Uji  Skrining
Fitokimia  Ekstrak  Metanol  Kulit  Batang Tumbuhan Klampok  Watu  ( Syzygium litorale ). UNESA  Journal  of  Chemistry , 6 (3), 155 – 160.
Shaikh,  S.,  Fatima,  J.,  Shakil,  S.,  Rizvi,  S.  M.  D.,  & Kamal,  M.  A.  2015. Antibiotic  resistance  and extended  spectrum  beta-lactamases:  Types, epidemiology and treatment . Saudi Journal of Biological Sciences, 22 (1), 90-101..
Sofowora,  A.  1993. Screening  plants  for  bioactive agents. In medicinal plants and traditional in Africa (2nd  ed.).  Ibadan,  Nigeria:  pectrum Books Ltd., Sunshine House.
Spellberg, B., Blaser, M., Guidos, R. J., Boucher, H. W., Bradley, J. S., Eisenstein, B. I., & Gilbert, D. N.
2011.  Combating  antimicrobial  resistance: Policy recommendations to save lives. Clinical Infectious Diseases , 52 (5), 397 – 428. Susanto,  Sudrajat,  D.,  &  Ruga,  R.  2012.  Studi kandungan  bahan  aktif  tumbuhan  meranti merah ( Shorea leprosula Miq) sebagai sumber senyawa antibakteri. Mulawarmnan
Scientific , 11 (2), 181 – 190.
Tan,  S.  L.,  Lee,  H.  Y.,  &  Mahyudin,  N.  A.  2014. Antimicrobial  resistance  of Escherichia  coli and Staphylococcus aureus isolated from food handler’s han ds. Food Control , 44 , 203 – 207. Thakur, M., Melzig, M. F., Fuchs, H., & Weng, A. 2011.
Chemistry  and  pharmacology  of  saponins: special  focus  on  cytotoxic  properties. Botanics: Targets and Therapy , 19 – 29. Trease, G. ., & Evans, W. 2002. Farmakognosi (15th ed.). Berlin: Springer.