BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 3 Nomor 4 (2021):  228-234 E-ISSN: 2714-8564

## Optimasi Konsentrasi Glukosa dan Waktu Inkubasi terhadap Bobot Β-Glukan Jamur Schizophyllum commune

## Tri Rahayu Apriyani, Nuraeni Ekowati*, Nuniek Ina Ratnaningtyas
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Jl. dr. Suparno 63, Purwokerto, 53122 *Email : nuraeni.ekowati@unsoed.ac.id
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 27/07/2021 Disetujui  : 14/06/2022

## Abstract
Schizophyllum commune is a fungus that grows wild in nature which contains β-glucan which has the potential to develop drugs for several diseases and human health. The main purpose of this study was to determine the effect glucose concentration and incubation time on the growth of fungus S. commune and its β-glucan production. The research was conducted by experimental method of completely randomized factorial design (CRD factorial) with two factors carried out in three repetitions. The treatments provided included variations in glucose concentration (G) with three variations, namely 10 g/L (G1), 20 g/L (G2), and 30 g/L (G3), and variations in three different  incubation  times  (W),  such  as  20 days  (I1).  ,  incubation  time  of  25  days  (I2),  and incubation  time  of  30  days  (I3).  Variables  which  used  in  this  research  independent  and dependent  variables.  The  independent  variables  were  glucose  concentration  and  incubation time, while the dependent variables  were fungal mycelium growth and β-glucan production. The  main  parameter  observed  was  β-glucan  weight.  The  supporting  parameters  were  dry biomass weight and  the final pH medium. Data analysis was performed by Analysis of Variance (ANOVA) at 95% accuracy levels, followed by Duncan's test ( Ducan Multiple Range Test ). The results showed that glucose concentration and incubation time were significantly affected to the growth and production of β-glucan fungus S. commune . Glucose concentration of 30 g/L and incubation time of 25 days was the optimum condition for the growth of S. commune and its β-glucan production with an average dry weight of betaglucan is 0.363 g/L.
Key words : β-glucan, glucose concentration, Schizophyllum commune, incubation time.

## Abstrak
Schizophyllum commune merupakan jamur yang tumbuh liar di alam yang memiliki kandungan β-glukan yang berpotensi dalam pengembangan obat untuk beberapa penyakit dan kesehatan manusia.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  interaksi  antara  konsentrasi glukosa dan waktu inkubasi terhadap pertumbuhan jamur S. commune dan bobot β-glukan juga untuk  mengetahui  konsentrasi  glukosa  dan  waktu  inkubasi  yang  terbaik  untuk  pertumbuhan jamur S. commune dan produksi β-glukan. Penelitian dilakukan dengan metode eksperimental rancangan acak lengkap pola faktorial (RAL Faktorial) dengan dua faktor yang dilakukan dalam tiga  kali  pengulangan.  Perlakuan  yang  diberikan  meliputi  variasi  konsentrasi  glukosa  (G) dengan tiga taraf yaitu  10 g/L (G1),  20 g/L (G2), dan 30 g/L (G3), dan variasi waktu inkubasi (W) dengan tiga taraf yaitu waktu inkubasi 20 hari (I1), waktu inkubasi 25 hari (I2), dan waktu inkubasi 30 hari (I3). Variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah variabel bebas dan terikat. Variabel bebas yaitu konsentrasi glukosa dan waktu inkubasi, sedangkan variabel terikat yaitu  pertumbuhan  miselium  jamur  dan  produksi  β-glukan.  Parameter  utama  yang  diamati adalah bobot β-glukan. Parameter pendukungnya adalah bobot biomasa kering dan pH akhir medium. Analisis data dilakukan dengan Analysis of Variance (ANOVA) pada tingkat ketelitian 95%,  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan  ( Ducan  Multiple  Range  Test ).  Hasil  yang  diperoleh menunjukkan  bahwa  konsentrasi  glukosa  dan  waktu  inkubasi  berpengaruh  terhadap pertumbuhan dan produksi β-glukan jamur S. commune . Konsentrasi glukosa 30 g/L dan waktu inkubasi 25 hari merupakan konsentrasi glukosa dan waktu inkubasi yang optimum terhadap pertumbuhan jamur S. commune dan produksi β- glukan jamur S. commune dengan rata-rata bobot kering β- glukan sebesar 0,363 g/L.
Kata Kunci: β-glukan, konsentrasi glukosa,  Schizophyllum commune, waktu inkubasi.

## PENDAHULUAN
Jamur  telah  banyak  digunakan  di  berbagai negara sebagai bahan obat. Hal ini disebabkan jamur memiliki  sumber  komponen  bioaktif  yang  dapat diproduksi  dalam  medium  cair.  Optimasi  produksi senyawa tersebut dapat dilakukan melalui modifikasi kandungan  nutrisi  dalam  medium  pertumbuhannya (Rahmawati,  2015).  Jamur  yang  berkhasiat  obat  di antaranya adalah
Ganoderma
lucidum , Schizophyllum commune , Hygrocybe
sp. Microphorus sp., Polyphorus sp.,  dan Trametes sp. (Harahap et al ., 2017). Jamur S . commune merupakan jamur  makroskopis  yang  tumbuh  liar  di  alam  dan termasuk kelas Basidiomycetes. Jamur ini mengandung  zat-zat  di  antaranya  adalah  lemak, karbohidrat, enzim, vitamin, dan mineral (Komariyah,  2018).  Jamur  ini  juga  telah  digunakan sebagai  bahan  obat  ( medicinal  mushroom )  yang menghasilkan  metabolit  primer  dan  sekunder. Senyawa  metabolit  primer  yang  dihasilkan  di antaranya adalah β-glukan (Hobbs, 2005). β-glukan merupakan polimer yang tersusun dari glukosa  yang  dapat  diperoleh  dengan  cara  ekstraksi miselium  atau  dari  tubuh  buah  jamur S . commune . Menurut Kusmiati et al . (2011), konsentrasi glukosa medium  dapat  mempengaruhi  produksi  biomassa miselium dan produksi β-glukan. Glukosa merupakan bentuk  paling  sederhana  dari  karbohidrat  sehingga mudah diserap oleh jamur yang dimanfaatkan untuk pertumbuhan  dan  perkembangan  jamur  sehingga berpengaruh  terhadap  produksi  β-glukan  yang dihasilkan.  Konsentrasi  glukosa  yang  umum digunakan dalam medium biakan adalah 20 g/L (Fang & Zhong, 2002).
Pertumbuhan miselium dipengaruhi oleh beberapa faktor, salah satunya yaitu waktu inkubasi. Masa  inkubasi  merupakan  masa  penumbuhan miselium jamur. Semakin lama waktu inkubasi maka semakin  banyak  miselium  yang  dihasilkan  sehingga bobot miselium yang didapatkan tinggi (Irawati et al ., 2019).  Lama  waktu  inkubasi  kurang  lebih  40  hari yang didukung oleh beberapa faktor lain di antaranya adalah  suhu,  kelembapan  serta  nutrisi  yang mendukung  medium  pertumbuhan  (Safitriana et  al ., 2019).
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  untuk mengekstraksi  β-glukan  adalah  metode  Yap  &  Ng (2001). Ekstraksi β-glukan yang didapat dari ekstrak tubuh jamur diharapkan semakin optimal jumlah dan kadar β-glukannya. Metode Yap & Ng (2001) lebih efisien untuk melakukan ekstraksi β-glukan. β-glukan diisolasi melalui presipitasi etanol atau menggunakan air.  Metode  Yap  &  Ng  (2001)  lebih  hemat  waktu, efisien  dan  relatif  lebih  rendah  biaya  dibanding metode asli Chihara et al . (1987) dan metode Mizuno (1999) (Widyastuti et al ., 2011). Metode Yap & Ng (2001) membutuhkan waktu untuk ekstraksi β-glukan yaitu selama 5 hari dan metode Chihara et al . (1987) dalam  mengekstrasi  β-glukan  membutuhkan  waktu
selama 14 hari. Metode Chihara et al . (1987) bahan kimia  yang  digunakan  yaitu  air  destilasi,  etanol, gunakan asam asetat dan horic acid . Metode Yap & Ng (2001) bahan yang digunakan dalam ekstrasi yaitu menggunakan air destilasi dan etanol (Noor, 2010).
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  menentukan konsentrasi glukosa dan waktu inkubasi terbaik untuk pertumbuhan  jamur S.  commune dan produksi  β- glukan. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi  ilmiah  mengenai  konsentrasi  glukosa dalam  medium  dan  waktu  inkubasi  yang  optimal untuk pertumbuhan dan produksi β-glukan jamur S . commune.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilakukan  dengan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  pola  faktorial  dengan  dua  faktor. Faktor  pertama  adalah  konsentrasi  glukosa  dengan tiga taraf, yaitu konsentrasi glukosa 10 g/L (G1), 20 g/L  (G1Gdan  30  g/L  (G3).  Faktor  ke  dua  adalah waktu  inkubasi  (I)  dengan  tiga  taraf  yaitu  waktu inkubasi 20 hari (I1), waktu inkubasi 25  hari (I2), dan waktu  inkubasi 30 hari (I3). Variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah variabel bebas dan terikat. Variabel bebas yaitu  konsentrasi glukosa dan  waktu inkubasi, sedangkan variabel terikat yaitu pertumbuhan miselium jamur dan produksi β-glukan. Parameter  utama  yang  diamati  adalah  bobot  β- glukan.  Parameter  pendukungnya  adalah  bobot biomasa  kering  dan  pH  akhir  medium.  Penelitian dilaksanakan dari bulan Januari-Mei 2021.
Bahan-bahan  yang digunakan dalam penelitian adalah  isolat  jamur S.  commune ,  medium Potato Dextrose Agar (PDA) instan, alkohol 70%, glukosa, pepton,  ekstrak  yeast,  KH 2 PO 4 ,  M g SO 4 .7H 2 O, K 2 HPO 4 ,  NaOH,  HCL,  air  destilasi,  etanol  95%, etanol absolut, kapas, korek api, kertas saring, plastik wrapper , alumunium foil , label, masker, kertas tissue dan sarung tangan.
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  adalah  bor gabus,  jarum  ose,  pipet  tetes,  corong,  labu Erlenmeyer  250  mL,  cawan  petri  10  cm  x  2  cm, tabung  reaksi  15  mL,  botol  vial  10  mL,  botol  selai, lampu  spiritus, beaker  glass volume  1000  ml,  alat tulis,  kamera,  mortar  dan pestle , hot  plate , stirrer, autoklaf, pH meter, shaker resiprokal, pompa vakum, timbangan  digital,  sentrifugator, water  bath , oven , dan Laminar Air Flow (LAF).

## Persiapan Medium Kulitvasi Cair
Pembuatan  medium  kultivasi  cair  yaitu  bahan yang digunakan adalah glukosa 10 g, 20 g dan 30 g, ekstrak  malt  10  g,  pepton  2  g,  ekstrak  yeast  2  g, KH 2 PO 4 2 g, MgSO 4 .7H 2 O 1 g dan air destilasi 1 L. Bahan  yang  digunakan  dilarutkan  menggunakan  air destilasi  hingga  mencapai  volume  1  L  dan dihomogenkan menggunakan hot plate dan magnetic stirrer .  pH  awal  diatur  menjadi  6,0  Jika  medium terlalu  asam  ditambahkan  NaOH  10%  dan  jika medium terlalu basa ditambahkan HCl 5%. Medium
dituang sebanyak 100 mL ke dalam labu Erlenmeyer volume  250  mL  dan  disumbat  menggunakan  kapas. Medium  di  sterilisasi  dengan  autoklaf  suhu  121 0 C, tekanan  2  atm  selama  15  menit  (Tien  dan  Kirk, 1988).Kultivasi  miselium  jamur S.  commune yaitu pada  miselium  jamur  yang  tumbuh  pada  medium PDA  berumur  5  hari  dipotong  dengan  bor  gabus ukuran 0,5 cm, kemudian diinokulasikan sebanyak 5 plug ke dalam labu Erlenmeyer 250 mL  yang berisi 100  mL  medium  kultivasi  cair  dengan  konsentrasi glukosa  berbeda  yaitu  1  g,  2  g  dan  3  g.  Selama kultivasi  dilakukan  inkubasi  dengan  bantuan shaker pada suhu ruang selama 20, 25 dan 30 hari. Setelah inkubasi, pH akhir medium diukur menggunakan pH meter (Ekowati et al ., 2016).
Pengukuran Biomassa S. commune Berat  basah  dan  berat  kering  miselium S. commune diukur dengan cara disaring terlebih dahulu menggunakan  kertas  saring  dengan  corong Buchner dan menggunakan pompa vakum untuk mempercepat penyaringan. Miselium diletakkan di atas aluminium foil kemudian ditimbang. Bobot yang diperoleh pada tahap  ini  dicatat  sebagai  berat  basah  miselium. Setelah itu miselium dikeringkan menggunakan oven dengan  suhu  60 0 C  sampai  bobot  kering  konstan. Bobot pada tahap ini disebut bobot kering miselium (Sulistyaningtyas & Suprihadi, 2017).
Ekstrasi β-glukan dari miselium S. commune Biomassa miselium kering dihaluskan menggunakan mortar & pastle .  Serbuk  biomassa miselium diekstrak di dalam water bath berisi100 mL air destilasi panas (98-100 0 C) dan didiamkan selama 5 jam, kemudian disentrifugasi pada 7500 rpm selama 15  menit,  selanjutnya  pelet  dan  supernatan dipisahkan.  Pelet  diekstrak  kembali  menggunakan 100  mL  air  panas  (98-100 0 C)  selama  5  jam  dalam water  bath, disentrifugasi  kembali  dengan  kondisi yang sama, natan dan supernatan dipisahkan. Semua supernatan yang dihasilkan disatukan dan dipekatkan hingga  volume  5  mL,  kemudian  diendapkan menggunakan  5  mL  etanol  95%  dan  disimpan  satu
malam pada suhu 4 ℃ . Campuran tersebut selanjutnya disentrifugasi  selama  15  menit  dengan  kecepatan 7500 rpm. Supernatan diendapkan kembali menggunakan etanol 95% dan disimpan satu malam pada suhu 4 0 C, pelet dari ketiga ekstrak disatukan dan dicuci  menggunakan  etanol  100%.  pelet  tersebut merupakan β-glukan dan dikeringkan  menggunakan hotplate .  β-glukan  yang  didapatkan  diukur menggunakan timbangan digital (Yap & Ng, 2001).
Ekstrasi β-glukan dari filtrat kultur S. commune Ekstraksi β-glukan dari filtrat kultur yaitu pada filtrat  kultur  dipekatkan  menggunakan water  bath hingga  volume  5  mL,  kemudian  diendapkan menggunakan  5  mL  etanol  95%  dan  disimpan  satu malam  pada  suhu  4 0 C.  Natan  dipisahkan  dengan sentrifugasi  selama  15  menit  kecepatan  7500  rpm. Supernatan  diendapkan  kembali  dengan  etanol  95% dan  disimpan  satu  malam  pada  suhu  4 0 C.  Natan dipisahkan  dengan  sentrifugasi  selama  15  menit kecepatan  7500  rpm.  Natan  yang  terbentuk  dibilas dengan 5 mL etanol absolut dan di simpan satu malam pada  suhu  4 0 C. Natan tersebut  merupakan β-glukan dan  dikeringkan  menggunakan hotplate .  β-glukan yang didapatkan ditimbang menggunakan timbangan digital (Yap & Ng, 2001).
Data  yang  diperoleh  dianalisis  menggunakan analisis ragam atau Analysis of Variance (ANOVA). Hasil  analisis  ragam  dilanjutkan  dengan  uji  lanjut Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT)  pada  taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jamur S.  commune pada  penelitian  ini ditumbuhkan  pada  medium  kultivasi  medium  cair dengan konsentrasi glukosa yang berbeda yaitu 10, 20  dan  30  g/L  serta  lama  waktu  inkubasi  yang berbeda  yaitu  20,  25  dan  30  hari  menunjukkan pertumbuhan  yang  berbeda  pula.  Pertumbuhan tersebut    dapat  dilihat  dari  rata-rata  bobot  bobot kering miselium yang dihasilkan. Grafik pertumbuhan S.  commune dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 1. Pertumbuhan Jamur S . commune pada Konsentrasi Glukosa dan Waktu Inkubasi yang Berbeda
0 1 2 3 4 5 0 2 0 2 5 3 0 B O B O T M IS EL IU M K ER IN G ( M G /1 0 0 M L ) WAKTU INKUBASI (HARI) Konsentrasi Glukosa 30 g/L Konsentrasi Glukosa
20 g/L
Konsentrasi Glukosa 10 g/L
Berdasarkan Gambar 1. Pertumbuhan miselium pada jamur S . commune pada konsentrasi glukosa dan waktu  inkubasi  yang  berbeda  menghasilkan  bobot basah miselium dan bobot kering miselium jamur S . commune yang berbeda. Bobot kering miselium pada waktu  inkubasi  20  dan  25  hari  menunjukkan pertumbuhan  miselium  yang  meningkat  pada konsentrasi  glukosa  10,  20  dan  30  g/L.  Waktu inkubasi 30 hari pada konsentrasi glukosa 20 dan 30 g/L menunjukkan penurunan pertumbuhan miselium sedangkan  pada  konsentrasi  glukosa  10  g/L menunjukkan  peningkatan  pertumbuhan  miselium. Semakin tinggi konsentrasi glukosa  yang digunakan maka  semakin  tinggi  biomassa  miselium  yang dihasilkan. Menurut Saskiawan et al . (2016), sumber karbon  seperti  glukosa  dan  sukrosa  merupakan sumber  karbon  yang  baik  dalam  petumbuhan miselium dan pembentukan biomassa sel sehingga sel tersebut  akan  memproduksi  β-glukan  secara optimum. Sitompul et al . (2017) menyatakan bahwa konsentrasi  glukosa  yang  optimum  dalam  medium tumbuh jamur dapat menambah kandungan karbohidrat  yang  digunakan  sebagai  sumber  energi dan  nutrisi  untuk  pertumbuhan  dan  perkembangan miselium. Waktu inkubasi juga faktor penting dalam medium  pertumbuhan.  Menurut  Syarifah et  al . (2021),  jamur  akan  membutuhkan  waktu  tertentu untuk  memecah  sumber  nutrisi  yang  tersedia  dalam medium  untuk  pertumbuhan  dan  memproduksi senyawa  metabolit.  Semakin  lama  waktu  inkubasi maka pertumbuhan miselium meningkat sampai batas waktu  tertentu  selama  inkubasi  sehingga  produksi senyawa metabolit juga akan meningkat.
Menurut  penelitian  yang  dilakukan  Maulida et al .  (2014),  glukosa  di  dalam  medium  berpengaruh terhadap  pertumbuhan  jamur.  Hal  ini  disebabkan glukosa  merupakan  sumber  karbon  dan  energi  yang dimanfaatkan  dalam  pembentukan  dinding  sel miselium.  Menurut  penelitian  dari  Debnath et  al . (2017)  pertumbuhan  jamur S . commune dengan berdasarkan waktu inkubasi yang berbeda yaitu pada hari  ke-7,  14,  21,  28  dan  35  hari  menggunakan medium  PDA  ( Potato  Dextrose  Agar )  dan konsentrasi  glukosa  30  g/L  dengan  pH  6.  Waktu inkubasi  terbaik  yang  memperoleh  bobot  kering miselium S . commune yaitu  hari  ke-21  hari  dengan bobot  15,50g/L.  Menurut  Kurniawan et  al .  (2021), umumnya  pemanenan  miselium  jamur  dilakukan pada  waktu  inkubasi  di  bawah  30  hari  setelah inokulasi  untuk  menghindari  fase  kematian  yang ditandai dengan jumlah jamur yang mati lebih banyak daripada jamur yang mengalami pertumbuhan.
Data  bobot  kering  β-glukan  dari  filtrat  kultur jamur S . commune dianalisis  menggunakan  analisis ragam  atau Analysis  of  Variance (ANOVA)  yang menunjukan  perlakuan  berpengaruh  nyata  pada tingkat ketelitian 95%.  Hasil analisis ragam bobot β- glukan dari filtrat kultur pada konsentrasi glukosa dan waktu  inkubasi  yang  berbeda  menunjukkan  hasil yang  signifikan.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa
konsentrasi glukosa dan waktu inkubasi berpengaruh nyata  terhadap hasil produksi bobot β-glukan jamur S . commune . Hasil analisis ragam juga menunjukkan adanya  interaksi  antara  keduanya  yaitu  konsentrasi glukosa  dan  waktu  inkubasi  dengan  hasil  yang signifikan.  Analisis  data  ini  dilanjutkan  dengan melakukan  uji Duncan’s  Multiple  Range (DMRT) (Tabel 1).
Tabel  1. Hasil  Uji Duncan’s Multiple Range (DMRT)  β- glukan  dari  Filtrat  Kultur  Jamur S.  commune pada
Konsentrasi Glukosa dan Waktu Inkubasi Perlakuan Bobot β-glukan (g/L) G1I1 0,227 d G1I2 0,220 d G1I3 0,310 b G2I1 0,247 cd G2I2 0,253 cd G2I3 0,287 bc G3I1 0,257 cd G3I2 0,363 a G3I3 0,307 b
Keterangan:  (G1I1)  Konsentrasi  Glukosa  10  g/L  dengan Waktu  Inkubasi  20  Hari.  (G1I2)  Konsentrasi  Glukosa  10 g/L  dengan  Waktu  Inkubasi  25  Hari.  (G1I3)  Konsentrasi Glukosa  10  g/L  dengan  Waktu  Inkubasi  30  Hari.  (G2I1) Konsentrasi Glukosa 20 g dengan Waktu Inkubasi 20 Hari. (G2I2) Konsentrasi Glukosa 20 g/L dengan Waktu Inkubasi 25 Hari. (G2I3) Konsentrasi Glukosa 20 g/L dengan Waktu Inkubasi  30  Hari.  (G3I1)  Konsentrasi  Glukosa  30  g/L dengan  Waktu  Inkubasi  20  Hari.  (G3I2)  Konsentrasi Glukosa  30  g/L  dengan  Waktu  Inkubasi  25  Hari.  (G3I3) Konsentrasi Glukosa 30 g/L dengan Waktu
Inkubasi 30 Hari
Hasil uji Duncan (Tabel 1) pada bobot β-glukan dari  filtrat  kultur  jamur S . commune menghasilkan rata-rata  bobot  β-glukan  yang  bervariasi.  Bobot  β- glukan  kering  tertinggi  pada  G3I2  yaitu  pada konsentrasi glukosa 30 g/L dengan waktu inkubasi 25 hari  dengan  rata-rata  0,363  g/L.  Bobot  β-glukan kering  yang  terendah  pada  G1I2  dengan  rata-  rata 0,220  g/L.  Menurut  Mahapatra  &  Banerjee  (2013), semakin  lama waktu  inkubasi maka  bobot eksopolisakarida  yang  dihasilkan  dari  jamur  akan menurun.  Hal  ini  disebabkan  β-glukan  yang dikeluarkan  ke  lingkungannya  digunakan  kembali oleh  jamur  tersebut  untuk  sumber  nutrisi  dalam medium pertumbuhannya. Menurut Saskiawan et al . (2016), waktu inkubasi yang optimum untuk produksi eksopolisakarida  yaitu  jamur  masuk  pada  fase stasioner.  Fase  stasioner  merupakan  fase  yang ditandai  dengan  tidak  adanya  kenaikan  populasi karena jamur mulai berhenti tumbuh dan metabolisme  yang  dihasilkan  sedikit  atau  rendah sehingga menghasilkan produksi biomassa miselium dan senyawa metabolit yang meningkat. Jamur sangat membutuhkan  energi  yang  sangat  cukup  untuk produksi  eksopolisakarida  sehingga  sumber  karbon dan  nitrogen  dalam  medium  tumbuh  sangat berpengaruh yang memiliki fungsi sebagai komponen pembentuk  sel  dan  untuk  produksi  polisakarida
ekstraseluler (eksopolisakarida).
Konsentrasi glukosa pada medium pertumbuhan tidak  boleh  terlalu  tinggi  atau  rendah  sebab  akan berpengaruh  terhadap  produksi  miselium  dan  bobot β-glukan.  Menurut  Ekowati et  al .  (2016),  telah melakukan  penelitian  terhadap  hasil  ekstraksi  bobot β-glukan  pada  jamur Trametes  versicolor dan Russula sp. menggunakan konsentrasi glukosa 40 g/L mengalami  penurunan  bobot  β-glukan.  Hal  ini disebabkan β-glukan yang dihasilkan oleh jamur yang telah dikeluarkan ke lingkungannya akan digunakan kembali sehingga produksi bobot β-glukan menurun. Menurut  penelitian  dari  Rangkhawong et  al .  (2014) melakukan penelitian terhadap hasil ekstrasi β-glukan dari filtrat kultur atau eksopolisakarida pada jamur S . commune sebesar 1, 52 ± 0,05 g/L.
Produksi  β-glukan  dari  miselium  jamur S . commune menghasilkan  data  bobot  yang  bervariasi. Data bobot β-glukan dianalisis menggunakan analisis ragam  untuk  mengetahui  pengaruh  konsentrasi glukosa,  waktu  inkubasi  dan  interaksi  antara konsentrasi  glukosa  dan  waktu  inkubasi.  Hasil analisis ragam bobot β-glukan dari miselium jamur S . commune menunjukkan  hasil  bahwa  konsentrasi glukosa dan  waktu  inkubasi  berpengaruh  nyata terhadap  produksi  bobot  β-glukan  dari  miselium jamur S . commune dengan  nilai  probabilitas signifikan (p<0,05). Hasil analisis ragam menunjukkan  tidak  adanya  interaksi  keduanya  yaitu antara konsentrasi glukosa dan  waktu inkubasi pada bobot β-glukan. Analisis data ini dilanjutkan dengan melakukan  uji Duncan’s  Multiple  Range (DMRT) (Tabel 2).
Tabel  2. Hasil  Uji Duncan’s Multiple Range (DMRT)  β- glukan dari Miselium Jamur S. commune pada Konsentrasi Glukosa dan Waktu Inkubasi.
Perlakuan (Konsentrasi Glukosa) Bobot β- glukan (g/L) Perlakuan (Waktu Inkubasi) Bobot β-glukan (g/L) G1 0,190 b I1 0,182 b G2 0,210 ab I2 0,230 a G3 0,232 a I3 0,220 a
Keterangan:    Konsentrasi  Glkuosa  10  g/L  (G1); Konsentrasi Glukosa 20 g/L (G2); Konsentrasi Glukosa 30 g/L (G3). Waktu Inkubasi 20 Hari (I1); Waktu Inkubasi 25 Hari  (I2);  Waktu  Inkubasi  30  Hari  (I3).Hasil  uji  DMRT menunjukan bahwa konsentrasi glukosa terbaik pada bobot β-glukan dari miselium jamur S . commune yaitu konsentrasi glukosa 30 g/L (G3) menghasilkan rata-rata sebesar 0,232 g/L dan G3 tidak berbeda nyata dengan G2. Waktu inkubasi yang  terbaik  yaitu  hari  ke-25  (I2)  dengan  rata-rata  0,230 g/L,  sedangkan  waktu  inkubasi  yang  menghasilkan  bobot β-glukan  yang  rendah  pada  20  hari  (I1)  dengan  rata-rata 0,182 g/L .
Menurut  Sitompul et  al .  (2017)  menyatakan bahwa  konsentrasi  glukosa  yang  optimum  pada medium  tumbuh  akan  meningkatkan  pertumbuhan sehingga  menghasilkan  biomassa  miselium  dan senyawa metabolit yang tinggi. Konsentrasi glukosa dalam  medium  tumbuh  yang  berlebihan  akan menghambat  pertumbuhan  miselium.  Hal  ini disebabkan  miselium  tidak  dapat  menyerap  bahan organik  di  dalam  medium  yang  digunakan  sebagai sumber nutrisinya. Menurut penelitia dari Rangkhawong et al . (2014) terhadap hasil ekstrasi β- glukan dari miselium pada jamur S . commune sebesar 0,53 ± 0,01 g/L.
Masa inkubasi 25 hari dan 30 hari pada jamur S . commune adalah waktu inkubasi yang optimal dalam menghasilkan  bobot  kering  miselium.  Menurut Mahapatra  &  Banerjee  (2013),  jamur  memerlukan batas  waktu  inkubasi  tertentu  untuk  menghasilkan senyawa metabolit. Masa inkubasi yang optimal pada jamur S . commune yaitu pada akhir fase eksponensial dan awal fase stasioner dimana penurunan biomassa miselium  yang  tidak  signifikan  dan  nutrisi  pada medium  pertumbuhan  berkurang  sehingga  produksi biomassa miselium meningkat dan senyawa metabolit yang dihasilkan akan tinggi.
Proses  inkubasi  semakin  lama  menghasilkan biomassa  miselium  yang  tinggi  seiring  dengan terjadinya  perubahan  pH  akhir  medium  yang menurun.  Menurut  Ekowati et  al .  (2018),  selama proses  waktu  inkubasi  pada  jamur  akan  terjadinya perubahan  pH.  Hal  ini  disebabkan  oleh  aktivitas metabolit  jamur  selama  dalam  pertumbuhan  dan perkembangan  jamur.  Nilai  pH  dalam  medium pertumbuhan berpengaruh terhadap pertumbuhan dan perkembangan miselium dan senyawa metabolit yang dihasilkan.  Menurut  Wahyudi et  al .  (2016),  jamur yang termasuk ke dalam filum Basidiomycota dapat tumbuh dalam pH optimum 5,5-7,5 atau berada dalam pH  asam  yang  akan  menghasilkan  miselium  dan senyawa metabolit tinggi.
Medium  pertumbuhan  dalam  penelitian  ini menggunakan  pH  awal  6,0.  Setelah  itu  dilakukan pemanenan pada miselium jamur S . commune dan pH akhir  medium  diukur.  pH  tersebut  mengalami penurunan  pH  sehingga  didapat  hasil  rata-rata  pH akhir (Tabel 3) dalam penelitian ini berada pH kisaran 5,13 hingga 5,47. Menurut penelitian dari Aminah et al .  (2020),  jamur S . commune yang  diinokulasikan pada medium Malt Extract Broth (MEB) pada suhu 30 o dengan  pH  yang  berbeda  yaitu  pada  pH  5 menghasilkan  bobot  kering  miselium  4,84  g/L sedangkan  pada  pH  6  menghasilkan  bobot  kering miselium 4,87 g/L.
Tabel  3. Rata-Rata  pH  Awal  dan  pH  Akhir  Jamur S . commune
Perlakuan Rata-rata pH awal pH akhir G1I1 6,0 5,37 G1I2 6,0 5,27 G1I3 6,0 5,23 G2I1 6,0 5,47 G2I2 6,0 5,13 G2I3 6,0 5,17 G3I1 6,0 5,33 G3I2 6,0 5,23 G3I3 6,0 5,43
Keterangan:  (G1I1)  Konsentrasi  Glukosa  10  g  dengan Waktu Inkubasi 20 Hari. (G1I2) Konsentrasi Glukosa 10 g dengan  Waktu  Inkubasi  25  Hari.  (G1I3)  Konsentrasi Glukosa  10  g  dengan  Waktu  Inkubasi  30  Hari.  (G2I1) Konsentrasi Glukosa 20 g dengan Waktu Inkubasi 20 Hari. (G2I2) Konsentrasi Glukosa 20 g dengan Waktu Inkubasi 25  Hari.  (G2I3)  Konsentrasi  Glukosa  20  g  dengan  Waktu Inkubasi 30 Hari. (G3I1) Konsentrasi Glukosa 30 g dengan Waktu Inkubasi 20 Hari. (G3I2) Konsentrasi Glukosa 30 g dengan  Waktu  Inkubasi  25  Hari.  (G3I3)  Konsentrasi Glukosa 30 g dengan Waktu Inkubasi 30 Hari .
Menurut Kusumaningrum et al . (2017), semakin lama  waktu  inkubasi  menyebabkan  pH  dalam medium semakin menurun. Hal ini disebabkan jamur memproduksi asam-asam organik ke dalam medium sehingga  pH  akhir  menurun.  Penurunan  pH disebabkan  juga  meningkatnya  konsentrasi  ion  H + pada  medium  sehingga  pH  medium  menjadi  asam. Menurut  Ekowati et  al .  (2018),  lamanya  inkubasi akan menyebabkan perubahan pH dalam medium ini disebabkan oleh aktivitas metabolit selama pertumbuhan  jamur.  Perubahan  pH  akhir  medium disebabkan  terbatasnya  kandungan  glukosa  didalam medium  dan  rendahnya  penyerapan  glukosa  karena konsentrasi glukosa dalam medium rendah.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan adanya  interaksi  konsentrasi  glukosa  dan  waktu inkubasi  terhadap  pertumbuhan  jamur S . commune dan  produksi  β-glukan  dari  filtrat  kultur  dan miselium.  Konsentrasi  glukosa  dan  waktu  inkubasi yang  terbaik  untuk  pertumbuhan  miselium  jamur S . commune dan  produksi  β-glukan  dari  miselium  dan filtrat  kultur  yaitu  pada  konsentrasi  glukosa  30  g/L dengan waktu inkubasi 25 hari dengan rata-rata bobot kering β-glukan sebesar 0,363 g/L.

## DAFTAR REFERENSI
Aminah,  M.H.S.,  Sam,  S.T.  &  Zakaria,  Z.,  2020. Influence of pH and Temperature on in Vitro Mycelial Growth Performance of Wild Edible
Schizophyllum commune of Northern Malaysia. In  AIP  Conference  Proceedings , 2291(1), pp. 20100-20106.
Bakri, S., 2020. Pengaruh Pemberian Pupuk Organik Cair  Buah  Maja  ( Aegle  marmelos )  Terhadap Produktivitas  Jamur  Tiram  Putih  ( Pleurotus ostreatus ). Binomial , 3(1), pp.26-38.
Debnath, S., Saha, A.K. & Das, P., 2017. Biological Activities  of Schizophyllum  commune Fr.:  A Wild Edible Mushroom of Tripura, North East India. Journal Mycopathol Res , 54(4), pp.469-
475 .
Ekowati,  N.,  Maharning,  A.R.,  Ratnaningtyas,  N.I.,
Mumpuni,  A.  &  Izzah,  W.,  2018.  Eksplorasi dan  Pola  Pertumbuhan  Fase  Vegetatif Beberapa  Jamur  Liar  pada  Medium  Cair. Lembaga
Penelitian dan Pengabdian Masyarakat . Universitas Jenderal Soedirman.
Ekowati,  N.,  Ratnaningtyas,  N.I.  &  Mumpuni,  A., 2016. Potensi Jamur Trametes versicolor dan Russula sp.  dalam  Menghasilkan  β-glukan Melalui Proses Fermentasi. Seminar Nasional
Pendidikan dan
Saintek . Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Fang, Q.H. & Zhong, J.J., 2002. Effect of Initial pH of  Production  of  Ganoderic  Acid  and Polysaccharides  by  Submarged  Fermentaion of Ganoderma lucidum . Process Biochem , 37, pp. 769-774.
Harahap,  L.C.,  Syamsi,  F.  &  Efendi,  Y.,  2017.
Inventarisasi Jamur Tingkat Tinggi
(Basidiomycetes)  Di  Taman  Wisata  Alam Muka Kuning Batam. SIMBIOSA , 6(2), pp.74- 84.
Hobbs, C., 2005. The Chemistry, Nutritional Value, Immunopharmacology,  and  Safety  of  The Traditional  Food  of  Medicinal  Split-Gill
Fugus Schizophyllum commune Fr.:
Fr.(Schizophyllaceae). International  Journal of Medicinal Mushrooms , 7(1), pp. 127-139.
Iramayana,  I.,  Taskirawati,  I.  &  Arif,  A.,  2019.
Keragaman  Jamur  Pada  Log  dan  Kayu Gergajian  Nyatoh  ( Palaquium sp). Jurnal Perennial , 15(1), pp.8-15.
Irawati, D., Nircela, N. ., Margareta, R. ., & Sutapa, J.G.S.G.,  2019.  Optimasi  Produksi  Badan Buah  Tiga  Jenis  Jamur  Kayu  dengan  Inovasi Perlakuan  pada  Waktu  Inkubasi  dan  Jumlah Penyobekan  pada  Baglog. Jurnal  Ilmu Kehutanan , 13(1), pp.87-97.
Kim, S.W, Hwang, H.J., Park, J.P., Cho, Y. J., Song, C.H. & Yun, J.W., 2002. Mycelial Growth and Eko-biopolymer  Production  by  Submarged Culture  of  Various  Edible  Mushroom  under Different  Medium. Letters  in  Applied Microbiology , 34, pp. 55-61.
Komariyah, S., 2018. Penetapan Kadar Protein pada Jamur  Grigit  ( Schizophyllum  commune )
Dengan  Metode  Kjeldahl. Jurnal  Analis Farmasi, 3 ( 4), pp.280-285.
Kurniawan,  C.,  Widodo,  I.  &  Abbas,  B.,  2021.
Pertumbuhan dan Perkembangan Jamur Tiram Putih  ( Pleurotus  ostreatus )  pada  Media Ampas Sagu. Cassowary , 4(1), pp.28-38.
Kusmiati, K., Thontowi, A. & Nuswantara, S., 2011. Efek  Sumber  Karbon  Berbeda  terhadap Produksi  β-Glukan  oleh Saccharomyces Cerevisiae pada  Fermentor  Air  Lift. Jurnal Natur Indonesia , 13(2), pp.138-145.
Kusrinah. & Kasiamdari, R.S., 2015. Morphological Characteristics  and  Kinship  Relationship  of Mushroom Schizophyllum  commune Fr. J. Nat. Scien.   & Math. Res , 1(2), pp. 65-71.
Kusumaningrum, I.K., Zakia, N. & Nilasari, C., 2017. Pengaruh  Derajat  Keasaman  (pH)  Media Tanam  dan  Waktu  Panen  pada  Fortifikasi Selenium  Jamur  Tiram  Putih  ( Pleurotus ostreatus ). Jurnal  Kimia  dan  Terapannya , 1(1), pp. 30-34.
Mahapatra,  S.  &  Banerjee,  D.,  2013.  Fungal Exopolysaccharide:  Production,  Composition and  Applications. Microbiology  insights ,  6, pp1-16.
Maharani, M.M., Ratnaningtyas, N.I. & Priyanto, S., 2014. Penggunaan Beberapa Medium Semisintetik untuk Produksi Miselium Jamur Maitake  ( Grifola  frondosa (Dickson:  Fr.)  SF Gray) Isolat Cianjur Dan Ekstrak
Kasarnya. Scripta Biologica , 1(1), pp.22-27.
Maulida,  R.,  Ratnaningtyas,  N.I.  &  Priyanto,  S., 2014.  Produksi  Miselium Grifola  Frondosa (Dickson:  Fries) Gray Isolat  Cianjur  Dan Bobot  Ekstraknya  pada  Medium  MYPB dengan  Penambahan  Biji  Bunga  Matahari ( Helianthus  Annuus L.). Scripta  Biologica , 1(1), pp.28-31.
Noor, I., 2010. Isolasi dan Karakterisasi β-glukan dari
Tubuh  Buah  Jamur  Tiram  Putih  ( Pleurotus ostreatus )  dengan  Metode  Spektroskopi  UV- Visibel dan FTIR. Skripsi . Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Syarif Hidayatullah.
Rangkhawong, P., Issaranuwat, P. & Gaensakoo, R.,
2014.  Mycelial  Fermentation  in  Submerged Culture  of Schizophyllum  Commune and  its Properties. Journal of Science and Technology Mahasarakham  University ,  33(5),  pp.420- 420.
Safitriana,  N.,  Umrah.  &  Lambui,  O.,  2019. Pengamatan  Pertumbuhan  Miselium  Jamur Tiram  Putih  ( Pleurotus  ostreatus )  (Jacq)  (P.
Kumm) Sumber Inokulum Padat dan Cair. Biocelebes , 13(3), pp. 279-287.
Saskiawan,  I.,  Munir,  M.  &  Achmadi,  S.  S.,  2017.
Optimasi  Produksi  serta  Analisis  Aktivitas Antioksidan  dan  Antimikroba  Senyawa Eksopolisakarida  dari  Jamur  Tiram  Putih ( Pleurotus Ostreatus ) pada Media Cair. Berita Biologi , 15(2), pp. 133-140.
Sitompul,  F.T.,  Zuhry,  E.  &  Armaini,  A.,  2017. Pengaruh  Berbagai  Media  Tumbuh  dan Penambahan Gula (Sukrosa) terhadap Pertumbuhan  Jamur  Tiram  Putih  ( Pleurotus us ). Jurnal Online  Mahasiswa Faperta , 4(2), pp. 1-15.
Sulistyaningtas,  A.R.  &  Suprihadi,  A.,  2017.
Produksi Miselium Jamur Ling Zhi ( Ganoderma  lucidum )  dalam  Medium  Air Kelapa Tua dan Tauge Extract Broth dengan Metode  Kultur  Terendam  Teragitai. Bioma , 19(1), pp. 58-61.
Syarifah,  N.D.T.,  Ekowati,  N.,  Mumpuni,  A.  & Saskiawan,  I.,  2021.  Detection  of  Secondary Metabolite  of Mycena pelianthina Growth  in Various Liquid Medium. Journal of Functional  Food  and  Nutraceutical .  2(2) pp.89-97.
Tien,  M.  &  Kirk,  T.K.,  1988.  Lignin  Peroxidase  of Phanerochaete  chrysosporium . Methods  in Enzymology , 161, pp. 238-249.
Wahyudi,  T.R.,  Rahayu,  S.  &  Azwin,  A.,  2016.
Keanekaragaman  Jamur  Basidiomycota  di Hutan  Tropis  Dataran  Rendah  Sumatera, Indonesia (Studi Kasus di Arboretum Fakultas Kehutanan  Universitas  Lancang  Kuning Pekanbaru). Jurnal Kehutanan , 11(2), pp. 98- 111.
Widyastuti,  N.,  Baruji,  T.,  Giarni,  R.,  Isnawan,  H., Wahyudi,  P.  &  Donowati.,  2011.  Analisa kandungan  Beta-Glukan  Larut  Air  dan  Larut Alkali  Dari  Tubuh  Buah  Jamur  Tiram ( Pleurotus  ostreatus )  dan  shiitake  ( Lentinus edodes ). Jurnal sains dan teknologi indonesia , 13(3), pp. 182-191.
Yap, T. & Ng, M. I. M., 2001. An Improved Methods for The  Isolation  of  Lentinan  from Lentinula edodes (Berk)  Sing  (Agaricomycetidae).
International  Journal  of  Medical  Mushroom , 3, pp. 6-19.