Evaluasi Serbuk Kulit Nenas Sebagai Sumber Antioksidan Dalam Ransum Kambing Perah Peranakan Etawah Secara In-Vitro .

## Mardalena
Fakultas Peternakan Universitas Jambi, Kampus Pinang Masak, Jl. Raya Jambi – Ma. Bulian Km 15. Ma. Jambi 36136 Jambi E-mail : lenadjamas@yahoo.co.id

## Intisari
Penelitian  yang  dilakukan  adalah  penggunaan  pakan  suplemen  (PS)  yang  mengandung serbuk kulit nenas SKN) yang ditambah mineral Zn sebanyak 25 ppm dan mineral Cu sebanyak 10 ppm sebagai sumber antioksidan untuk meningkat kecernaan secara in vitro. Dalam penelitian ini menggunakan  kambing  perah  peranakan  etawah  laktasi  kedua  dengan  produksi  susu  rata-rata 0,467  liter/ekor/hari.  Pakan  yang  diberikan  adalah  rumput  gajah  ( Pennisetum  purpureum )  dan konsentrat  komersial  yang  mengandung  protein  kasar    12,6%  (500  g/e/hr).  Rancangan  pada penelitian in  vitro ini  mengggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap    dengan  5  perlakuan  dan  4 ulangan yang terdiri dari:  R0 : rumput gajah + konsentrat (kontrol), R1 : R0 + PS (SKN 3,6%),  R2 : R0 + PS (SKN 4,8%) R3: R0 + PS (SKN 3,6 + Mineral Zn dan Cu), R4 : R0 + PS (SKN 4,8% + Mineral Zn dan Cu). Parameter yang diamati adalah pH, NH 3 , KcBK dan KcBO, VFA Total, VFA Parsial (asam asetat, asam propionat dan asam butirat) cairan rumen kambing perah. Hasil penelitian in vitro menunjukan  bahwa  pakan  suplemen  mampu  meningkatkan  kecernaan  bahan  kering  dan bahan organik, VFA total dan parsial cairan rumen kambing perah peranakan Etawah Key word : serbuk kulit nenas, antioksidan, in-vitro kambing perah

## Abstract
A study of in vitro on the utilization of feed supplement (FS) containing pineapples rind (PR) + 25 ppm Zn and 10 (Min) ppm Cu minerals as antioxidant source  for  increasing the digestibility. An Etawah dairy goats in the second lactation with an average milk production of 0.467 liters head -1 day -1 was used in this experiment. The diets fed to the animals were elephant grass ( pennisetum purpureum ) and the commercial concentrate containing 12.6% crude protein (500 g head -1 day -1 ). The experimental design was a Completely Randomized  Design with 5 treatments and 4 replications . Treatments  were elephant grass + concentrate as control (R0), C + FS containing 3.6% PR (R1), C + FS containing 4.8% PR (R2), C + FS containing 3.6 PR +Min Zn and Cu (R3) and C + FS containing 4.8% PR + Min Zn and Cu (R4).  The parameters measured were pH, NH3, digestibility of dry matter and organic matter, the total amount of  VFA, acetic acid, propionic acis and butiric acis of dairy goats rumen fluid.  The result of this research showed that feed suplement could improve the digestibility of dry matter, organic matter, total dan partial VFA content in rumen fluid  of dairy goats.
Keywords : Pineapple rind,  antioxidant, in-vitro, dairy goats

## Pendahuluan
Berbagai  industri  pengolahan bahan  baku  primer  asal  pertanian menghasilkan  biomasa  berupa  limbah atau  hasil  sisa  yang  memiliki  potensi efisiensi  ekonomis  yang  tinggi  untuk ruminansia.  Industri  pengolahan  buah
nenas  ( Ananas  comosus L.  Merr) menghasilkan limbah berupa kulit buah. Nenas    selain  dikonsumsi  sebagai  buah segar,  juga  banyak  digunakan  sebagai bahan  baku  industri  pertanian  untuk diolah menjadi berbagai produk seperti selai,  manisan,  sirup,  dan  dodol  nenas
dan  didapatkan  kulit  yang  cukup banyak sebagai hasil sampingan (Mardalena,  2012).  Potensi  penggunaan kulit nenas sebagai bahan pakan dilihat dari  potensi  energi  dan  protein  pada kambing telah diteliti oleh Ginting et al. (2005).  Potensi pemanfaatan kulit nenas sebagai  sumber  antioksidan  dalam pakan  ternak  ruminansia,  informasinya masih minim. Buah nenas mengandung senyawa fenolik dan β-karoten (Gardner, et  al .,  2000;  Charoensiri et  al .,
2009).  Ditambahkan  Kongsuwan et al. (2009) komponen bioaktif buah nenas terdiri dari  kandungan vitamin C   (6,45 – 18,88 mg/100 g), β-karoten (1,41 – 3,35 μg/100  g) dan  total  fenol  (20,28  –  26,20 mg GAE/100g). Winarsi (2007) menambahkan  bahwa  kulit  buah- buahan  mengandung antioksidan yang tinggi  dibanding  dengan  jaringan  yang lebih dalam sehingga kulit buah-buahan dapat  dimanfaatkan  sebagai  sumber antioksidan.  Kulit  buah  nenas  yang sudah  dikeringkan  mengandung  total antioksidan  sebesar  38,95  mg/100  g dengan  kandungan  komponen  bioaktif berupa vitamin C sebesar 24,40 mg/100, beta  karoten  59,98  ppm,  total  flavonoid 3,47%, kuersetin 1,48%, total fenol 32,69 ppm dan saponin 5,29% %) (Mardalena et al ., 2011). Hasil analisis komposisi zat makanan serbuk kulit nenas menunjukkan bahwa kandungan bahan kering  (78,82%),  lemak  (1,72%)  protein kasar  (4,81%),  BETN  (57,74%),  selulosa (11,43%)  dan  hemiselulosa  (23,11%) (Mardalena,  2012). Wina et  al .  (2005) melaporkan  bahwa  saponin  memiliki potensi  untuk  menekan    pertumbuhan protozoa  dan  mengubah  fermentasi dalam    sistem  rumen.  Saponin  mampu meningkatkan kecernaan pakan, sehingga akan meningkatkan kandungan  total  VFA  total  dan  parsial (asam asetat, asam  propionat dan  asam
butirat), yang merupakan sumber energi bagi ternak.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengevaluasi potensi serbuk kulit nenas sebagai  pakan  suplemen  kambing  perah peranakan  Etawah  melalui  peubah fermentabilitas  rumen  dan  kecernaan ransum in vitro.
Materi  dan Metode
Penelitian in-vitro dilakukan untuk mengevaluasi penggunaan  serbuk kulit nenas ditambah mineral Zn dan Cu sebagai  pakan  suplemen  dan  melihat pengaruhnya  terhadap    karakteristik cairan  rumen  kambing  perah  peranakan Etawah.    Rancangan  yang  digunakan adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan  5  perlakuan  dan  4  ulangan. Perlakuan  terdiri  dari  R0    :    hijauan  + konsentrat, R1  : R0 + PS (SKN 3,6%), R2 : R0 +  PS (SKN 4,8%), R3  : R0 +  PS (SKN 3,6% + mineral Zn dan Cu), R4  : R0 + PS (SKN  4,8%  +  Mineral  Zn  dan  Cu). Peubah  yang  diamati    terdiri  dari  pH, NH3,  kecernaan  bahan  kering  dan kecernaan  bahan  organik,  VFA  total, asam  asetat,  asam  propionat  dan  asam butirat  cairan  rumen  kambing  perah peranakan etawah.

## Analisis Data
Data  dianalisis  dengan  Anova satu arah dengan menggunakan program  SAS  9.1.3.  (SAS  Institute  Inc. North  Caroline,  2007).  Perbedaan  antar perlakuan  diuji  menggunakan  uji  lanjut Duncan Multiple Range Test (DMRT).
Hasil dan Pembahasan
1. pH dan NH3 Cairan Rumen.
Konsentrasi NH3 dan pH merupakan dua faktor yang mempengaruhi  fermentasi  rumen.      pH dalam rumen merupakan faktor lingkungan  yang  sangat  penting  dalam rumen,  sebab  pH  yang  optimal  akan
menciptakan  lingkungan  yang  sesuai bagi  mikroba  rumen  untuk  melakukan aktivitas fermentasi. Hasil analisis keragaman memperlihatkan bahwa pemberian pakan  suplemen  tidak  nyata  (P>  0,05) mempengaruhi  pH  cairan  rumen  (Tabel 1.).  Nilai  pH  cairan  rumen  berkisar antara  6,69  -  6,86.  Nilai  pH  yang  netral ini  didapatkan  karena  penggunaan saliva  buatan  sebagai  buffer  masih mampu  menjaga  kestabilan  kondisi rumen dari pengaruh aktifitas fermentasi.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Church  dan  Pond  (1988) bahwa  saliva  berperan  sebagai  buffer untuk  menjaga  kestabilan  cairan  rumen.
Selain  itu  nilai  ini  juga  disebabkan adanya keseimbangan produk fermentasi  yaitu  VFA  dan  NH3.  Tinggi rendahnya  pH  cairan  rumen  ditentukan oleh jenis makanan, waktu yang tersedia bagi  mikroba  rumen  untuk  melakukan fermentasi  bahan  makanan,  kapasitas sistem buffer, kadar NH3 dan VFA total cairan rumen. Nagaraja dan Titgemeyert (2007)  melaporkan  bahwa  pH  rumen umumnya  lebih  tinggi  dari  5,5  dan sering  dalam  kisaran  5,8-6,5  pada  sapi. Oleh  karena  itu  dapat  disimpulkan bahwa pH diperoleh dalam penelitian ini masih  dalam  kisaran  normal  dan
menunjukkan
terjadinya proses fermentasi  secara  optimal.    pH  normal merupakan faktor penting  dalam berfungsinya rumen karena berpengaruh terhadap populasi mikroba, fermentasi  produk dan   fungsi  fisiologis dalam rumen.
Perlakuan    pemberian  pakan suplemen  yang mengandung  komponen bioaktif tidak nyata (P>0.05) mempengaruhi  produksi  NH 3 rumen, namun cenderung mengalami
penurunan sampai taraf R4 (SKN 4,8% + mineral  Zn  dan  Cu)  (Tabel  1.).  Menurut Madigan et al. (2003) konsentrasi amonia dalam  rumen  merupakan keseimbangan antara produksi NH 3 dalam ransum dan penggunaan  NH 3 untuk  pertumbuhan mikroba.  Konsentrasi  NH 3 diperoleh dalam  penelitian  ini  bervariasi  pada 30,23 - 31,43 mg/100 ml.
Hasil  penelitian  yang  didapat  tidak terlepas  dari  pengaruh  pakan  suplemen yang  diberikan  yang    mengandung saponin  sebesar  5,29%.    Menurut Benchaar et  al. (2008)  saponin  dapat mengurangi  sebagian  populasi  protozoa karena  berpotensi  menekan  pertum- buhan  mikroba  dan  mengubah  pola fermentasi  dalam    rumen.  Lila et  al . (2005)  menambahkan  bahwa  pemberian
Tabel 1.  Karakteristik cairan rumen in vitro kambing perah PE Diet Item MSE          F- Value R0          R1         R2          R3          R4 pH                                                  6,69         6,86       6,87        6,82        6,86 0,066       0,33 NH3 (mg/100 ml) 31,43      30,91     30,79      30,84       30,23 1,975       0,22 Kecernaan Bahan Kering (%)   70,66 c 73,48 b 73,59 b 74,88 ab 76,34 a 0,960      18,32 Kecernaan Bahan Organik(%)  71,33 c 73,68 b 73,72 b 75,12 ab 76,47 a 2,636        5.54 VFA total (mM)                          63,84 d 83,99 c 126,52 b 136,28 ab 148,96 a 9.656      56.52 Asam Asetat (mM)                     38,61 d 56,11 c 76,25 b 85,64 a 90,45 a 5.725      57.29 Asam Propionat (mM)              11,67 d 16,79 c 23,84 b 25,49 b 29,72 a 2.266     40.46 Asam Butirat (mM)                     7,03 c 8,27 c 12,63 b 12,81 b 15,19 a 1.293     27.80
saponin  dapat  menurunkan  konsentrasi NH3  serta  meningkatkan  produksi  VFA total  baik  secara in  vitro maupun in  vivo pada  sapi.  Hasil  penelitian  Istiqomah et al. (2010) menunjukan bahwa pemberian daun  waru  sebagai  sumber  saponin meningkatkan konsentrasi amonia sampai  pemberian  15  %  BK  namun pemberian 20 % BK menurunkan NH3.

## 2. Kecernaan Bahan Kering dan Bahan Organik Cairan Rumen
Kecernaan adalah indikasi awal ketersediaan nutrien yang terkandung dalam bahan pakan tertentu bagi ternak yang mengkonsumsinya. Sebaliknya kualitas nutrien ditentukan oleh tingkat kecernaan zat makanan yaitu banyaknya zat makanan yang diserap dalam saluran pencernaan ternak. Percobaan in vitro adalah salah satu cara untuk menguji kualitas ransum yang digunakan Hasil  analisis  ragam  memper- lihatkan  bahwa  perlakuan  sangat  nyata (P<0.01)  meningkatkan  KcBK  dan  KcBO in vitro dan dibanding kontrol dan dapat meningkatkan  KcBK  sebesar  3,99  – 8,04%,  dan  KcBO  sebesar  3,29  –  7,21% (Tabel 1.).  Peningkatan KcBK dan KcBO dipengaruhi  oleh  komponen  bioaktif yang  dikandung  SKN  dalam  pakan suplemen  yaitu  flavonoid,  quercetin, polifenol  dan  saponin  serta  mineral  Zn dan Cu. Hasil uji lanjut memperlihatkan bahwa  KcBK  dan  KcBO  perlakuan    R3 dan  R4    sangat  nyata  lebih  tinggi (P<0,01) dibanding  perlakuan R1 dan R2 maupun  R0.  Hal  ini  disebabkan konsentrasi  komponen  bioaktif  pada perlakuan  R3  dan  R4  lebih  tinggi disamping  adanya  mineral  Zn  dan  Cu. Menurut Yaghoubi et al (2010) flavonoid
adalah komponen bioaktif pada tanaman berpigmen  yang  terdiri  dari  senyawa polifenol  yang  mempunyai  aktivitas sebagai  antioksidan.  Potensi  flavonoid dapat  memanipulasi  fermen-tasi  rumen dan produk-produknya. F lavonoid dapat menurunkan  produksi  NH 3 ,  produksi gas  total,  dan  jumlah  protozoa  dalam rumen tapi dapat meningkatkan kecernaan in  vitro hijauan  dalam makanan,  sementara  Mineral  Zn  dapat memicu  pertumbuhan  mikroba  (Putra, 1999)  sehingga  akan  meningkat-kan efisiensi  fermentasi  dalam  rumen.  Pada gambar 1. terlihat bahwa semakin tinggi kandungan  pakan  suplemen  sampai taraf R4, semakin tinggi kecernaan bahan kering dan bahan organik cairan rumen. Hal ini disebabkan konsentrasi komponen  bioaktif  yang  dikandung pakan  suplemen  diantaranya  saponin, flavonoid semakin tinggi dengan tingginya  taraf  SKN  serta  adanya mineral  Zn  dan  Cu  pada  perlakuan  R3 dan  R4  yang  mampu  meningkatkan kecernaan
Saponin  merupakan  salah  satu komponen  fitokimia  dalam  tanaman yang  berfungsi  sebagai  antioksidan namun  jika  terdapat  dalam  konsentrasi yang  tinggi  akan  merupakan  zat  anti nutrisi.  Menurut  Jouany  (1996)  saponin memiliki  aktifitas  sebagai  anti  protozoa yang  kuat.    Dengan  menurunnya populasi  protozoa  dalam  rumen  akan meningkatkan efisiensi fermentasi dalam rumen.  Ditambahkan  Supriyati et  al. (1999)  bahwa  suplementasi  mineral  Zn, Cu  dan  Mo  dapat  meningkatkan kecernaan  bahan  kering,  bahan  organik dan menurunkan kadar NH3.
.
Gambar 1. Grafik kecernaan bahan kering dan organik cairan rumen.
3. VFA Total dan Parsial Cairan Rumen Pada Tabel 1. menunjukan rataan produksi  VFA  total  berkisar  antara 63,835  –  148,96  mM.    Kandungan  VFA parsial  berupa  asetat,  propionat  dan butirat  cenderung  meningkat  sejalan dengan  meningkatnya  level  pakan suplemen.  Hal  ini  disebabkan  karena dalam pakan suplemen terdapat komponen antioksidan berupa flavonoid,  triterpenoid  dan  saponin. Saponin  dapat  meningkatkan  jumlah bakteri  rumen,  VFA  total,  jumlah  asam asetat,  asam  propionat  dan  NH3
(Nurdin, 2004).
Pemberian pakan suplemen sangat  nyata  (P<0,01)  meningkatkan kadar VFA total sebesar 31,56 – 133,33%, asetat sebesar 45,32 – 134,26%, propionat sebesar  43,87  –  154,67%  dan  butirat sebesar  17,64  –  116,07%.  Produksi  VFA total  dan  parsial  cukup  tinggi.  Hal  ini diduga  karena  meningkatnya  KcBK  dan KcBO  sehingga  ketersediaan  substrat lebih  banyak  untuk  bakteri  dalam memproduksi  VFA.  Terlihat  bahwa
proporsi  kenaikan  asam  propionat  lebih tinggi dibanding asam asetat dan butirat. Hal  ini  disebabkan  pakan  suplemen mengandung  komponen  antioksidan berupa saponin. Menurut Benchaar et al. (2008)  saponin  dapat  mengurangi sebagian  populasi  protozoa  karena berpotensi menekan pertumbuhan mikroba yang merugikan dan mengubah pola fermentasi dalam rumen.
Ditambahkan  oleh  Lila et  al .  (2005) bahwa pemberian saponin dapat menurunkan  konsentrasi  NH3  serta meningkatkan  produksi  VFA  total  baik secara in vitro maupun in vivo pada sapi. Hasil  uji  lanjut  menunjukan bahwa  VFA  total  dan  VFA  parsial  pada perlakuan R3 dan R4  nyata lebih tinggi (P<0,01) dibanding perlakuan R2, R1 dan R0.  Hal  ini  disebabkan  pada  perlakuan R3  dan  R4  taraf  SKN  yang  diberikan semakin  tinggi  sehingga  konsentrasi komponen  bioaktif  juga  akan  semakin tinggi  serta  adanya  mineral  Zn  dan  Cu dalam  ransum.  Dalam  ransum  Zn  dan Cu  diberikan  dalam  bentuk  ZnSO4  dan Cu  SO4.  Menurut  Yaghoubi et  al (2010)
67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 R0 R1 R2 R3 R4 K e cer n aa n Ba h an K e ri n g d an O rg an ik (g /1 0 0 g) Perlakuan Pakan Suplemen KcBK KcBO
flavonoid  adalah  komponen  bioaktif pada  tanaman  berpigmen  yang  terdiri dari senyawa polifenol yang mempunyai aktivitas  sebagai  antibakteri.  Potensi flavonoid dapat memanipulasi fermentasi rumen dan produk- produknya. F lavonoid dapat
menurunkan  produksi  NH 3 ,  produksi gas  total,  dan  jumlah  protozoa  dalam rumen sehingga meningkatkan
kecernaan in  vitro hijauan  dalam  pakan. Lourenço et al (2008) menyatakan bahwa pemberian  quercetin  dan  saponin  dapat
meningkatkan      konsentrasi  VFA  total dan    aktivitas  mikroba  rumen.  Hasil penelitian  ini  berbeda  dengan  hasil penelitian  Malecky et  al (2009)  bahwa ransum  kambing  perah  yang  diberi pakan  yang  mengandung  komponen bioaktif  berupa  monoterpene  sampai 0,43  g  /  kg  bahan  kering  dihasilkan bioproses  fermentasi  rumen  tetap  tidak berubah. Rata-rata konsentrasi VFA total adalah  89,0  mM  dan  proporsi  asetat, propionat  dan  butirat  adalah  66,4,  21,1 dan 10,1 mM.
Gambar 2. Grafik VFA total dan parsial cairan rumen.
Penelitian  lain  menyatakan  bahwa kisaran VFA dalam rumen adalah 60 mM asam  asetat,  20  mM  propionat  dan butirat  10  mM  (Madigan et  al. 2003).Meningkatnya kandungan saponin akan  meningkatkan  konsentrasi  VFA. Suplementasi  buah  Sapindus  saponaria yang  mengandung 120 g saponin dapat meningkatkan  profil  mikroba  rumen, efisiensi VFA  dan aliran protein mikroba pada  duodenum  domba  (Abreu et  al ., 2004).
Dari  Gambar  3.  terlihat  bahwa grafik  VFA  total  dan  parsial  meningkat sejalan  meningkatnya  taraf  pemberian pakan suplemen. Hal yang menyebabkan  meningkatnya  VFA  total dan    parsial  adalah  kandungan antioksidan  terutama  saponin  dalam pakan suplemen dan terjadinya peningkatan  proporsi  asam  propionat lebih tinggi dari asetat. Menurut Wina et al .  (2005)  saponin  diketahui  dapat meningkatkan konsentrasi propionat dan ratio  relatifnya  terhadap  VFA  total dalam  rumen.  Propionat  merupakan sumber    energi  utama  bagi  ternak melalui proses glukoneogenesis (Murray et  al., 2006)  sehingga  peningkatan
0 20 40 60 80 100 120 140 160 R0 R1 R2 R3 R4 V FA T ot al d an P ar si al C ai ra n R u m e n (m M ) Perlakuan Pakan Suplemen VFA Total Asetat Propionat Butirat
produksi  propionat  akan  memperbaiki efisiensi penggunaan pakan oleh ternak.

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  pakan  suplemen yang  mengandung  serbuk  kulit  nenas sampai  taraf  4,8%  sebagai  sumber sntioksidan  dan  ditambah  mineral  Zn dan  Cu,  dapat  meningkatkan  kecernaan bahan  kering  dan  organik  serta  VFA total  dan  parsial secara  in-vitro dalam cairan  rumen  kambing  perah  peranakan Etawah.

## Daftar  Pustaka
Abreu, A., J.E. Carulla, C.E. Lascano, T.E. Diaz,  M.  Kreuzer  and  D.H.  Hess. 2004.  Effects  of Sapindus  saponaria fruits on ruminal fermentation and duodenal  nitrogen  flow  of  sheep fed  a  tropica  grass  diet  with  and without  legume.  J.  Anim.  Sci.  82: 1392-1400.
Benchaar  C,  T.A.  McAllister  dan  P.Y. Choulnard. 2008. Digestion, ruminal fermentation, ciliate protozoal  populations  and  milk production  from  dairy  cows  fed cinnamaldehyde, quebracho condensed  tannin  or Yucca schidigera saponin  extracts.  J.
Dairy Sci. 91: 4786-4777.
Charoensiri,  R.,  Kongkachuichai,  R.,
Suknicom  S.  and  Sungpuag,  P. 2009. Betacarotene, lycopene, and alpha-tocopherol contents of selected Thai fruits. Food Chemistry. 113, 202-207. Church, D.C. and W.G. Pond. 1988. Basic Animal Nutrition and Feeding. 3 th
Ed.  Jhon  Wiley  and  Sons.  New York.
Gardner,  P.T.,  White,  T.A.C.,  McPhail, D.B. and Duthie, G.G. 2000. The relative contributions of vitamin C,  carotenoids  and  phenolics  to the antioxidant potential of fruit juices.  Food  Chemistry.  68,  471- 474.
Ginting, S.P., R. Krisnan dan A. Tarigan. 2005. The Substitution of Forages with Pineapple Wastes in Complete Feed for Goats. Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner.
Istiqomah.  L.,    H.  Herdian    A. Febrisantosa  and D. Putra. Leaf ( Hibiscus  tiliaceus )  as  saponin source  on  in  vitro  ruminal fermentation characteristic J.Indonesian Trop.Anim.Agric. 36(1.)
Jouany,  J.  P.  1996.  Effect  of  Rumen Protozoa  on  Nitrogen  Utilization by Ruminants. J. Nutr. 126: 1335- 1346.
Kongsuwan, P. Suthiluk, T. Theppakorn,
V.  Srilaong  and  S.  Setha.  2009. Bioactive
compounds and antioxidant  capacities  of phulae and nanglae pineapple As.  J.  Food Ag-Ind. Special Issue, S44-S50. Lila,  Z.A.,  N.  Mohammed,  S.  Kanda,  T. Kamada  and  H.  Itabashi.  2005. Effect  of  sarsaponin  on  ruminal fermentation  with  particular reference to methane production in  vitro .  J.  Dairy  Sci.  86:  3330  – 3336.
Lourenço,  M.,  P.  W.  Cardozo,  S. Calsamiglia and  V.  Fieve.  2008. Effects  of  saponins,  quercetin, eugenol,  and  cinnamaldehyde on  fatty  acid  biohydrogenation of  forage  polyunsaturated  fatty acids  in  dual-flow  continuous culture  fermenters.  J.  Anim  Sci. 86:3045-3053.
Madigan,  M.T.,  J.M.  Martinko  and  J.
Parker.  2003.  Brock  Biology  of Microorganisms. Southern Illinois  University  Carbondale. 10 th ed. Pearson Education, Inc.
Malecky,  M.,  L.P.  Broudiscon  and  P. Schmidely. 2009. Effects of  two levels  of  monoterpene  blend  on rumen  fermentation,  terpene and  nutrient  flows  in  the duodenum  and  and  milk production  in  dairy  goats. Anim. Feed Sci. Technol. 154: 24 – 35.
Mardalena,  L.  Warly,  E.  Nurdin,  R.W.R. Ningrat  and  Farizal.  2011.  Milk Quality  of  Dairy  Goat  after
Giving  Feed  Supplement  as Antioxidant Source. J. Ind. Trop. Animal Agric. 36 (3): 205-211. Mardalena. 2012. Evalusi Pakan Suplemen Sebagai Sumber Antioksidan  dan  Pengaruhnya Terhadap Respon Fisiologis dan Produktifitas  Kambing  Perah Peranakan  Etawah.  Disertasi  S3 Unand. Murray  R.K.,  D.K.  Granner  and  V.W. Rodwell. 2006. Harper’s Illustrated  Biochemistry.  27 th Ed.
The  McGraw-Hill  Companies, USA.
Nagaraja,  T.G.  and  E.C.  Titgemeyert. 2007.  Ruminal  acidosis  in  beef cattle: the current microbiological and  nutritional  outlook.  J.  Dairy. Sci. 90: 17-38.
Nurdin,  E.  2004.  Pemberian  Bioplus-Sc dan  receplatum  bunga  matahari terhadap  ekologi  rumen  sapi
perah  Fries  Hollad  penderita mastitis subklinis. Jurnal Peternakan  dan  Lingkungan. 1(02):58-63. Putra,  S.  1999.  Peningkatan  performans sapi Bali melalui perbaikan mutu pakan  dan  suplementasi  seng asetat. Disertasi. Program Pascasarjana  Institut  Pertanian Bogor, Bogor. SAS  9.1.3.  Portable.  2007.  SAS/STAT User’s  Guide.  SAS  Institute Incorporation Cary. North Carolina. Supriyati,  D,  Yulistiani,  Wina  dan  B. Haryanto.  1999.  Suplementasi mineral  mikro  dalam  upaya peningkatan produktifitas
domba.  Jurnal  Ilmu  Ternak  dan Veteriner. Hal : 11 – 30. Yaghoubi,  S.M.J.,  G.R.  Ghorbani,  H.R. Rahmani,  A.  Nikkhah.  2010. Flavonoids Manipulation of Rumen Fermentation: An Alternative for Monensin?. Agricultural Segment: 1(1) AGS/1508. Wina, E., S. Muetzel, E. Hoffmann, H.P.S.
Makkar  and  K.  Becker.  2005. Saponins  containing  methanol extract  of Sapindus  rarak affect microbial  fermentation,  microbial activity and microbial community structure in vitro . Anim. Feed Sci. Tech. 121: 159-174.
Winarsi, H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal  Bebas.  Potensi  dan aplikasinya  dalam  kesehatan. Penerbit Kanisius.