ISSN: 2541-4208
AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK RIMPANG JERINGAU ( Acorus calamus ) TERHADAP
PERTUMBUHAN Candida albicans

## Nurlaili Susanti
Fakultas Sains dan Teknologi

## UIN Maulana Malik Ibrahim Malang
Diterima : 15 Juni 2016  Ditinjau : 18 Oktober 2016  Disetujui : 07 November 2016
Abstrak. Infertilitas  adalah  ketidakmampuan  seorang  wanita  berusia  lebih  dari  35  tahun  untuk hamil setelah mencoba kurang lebih selama 6 bulan, dengan hubungan seksual yang normal dan tanpa  menggunakan  kontrasepsi.  WHO  memperkirakan  bahwa  8-12%  dari  pasangan  di  seluruh dunia  memiliki  masalah  dalam  kehamilan.  Baru-baru  ini,  manajemen  infertilitas  dengan  cara operasi,  obat-obatan,  dibantu  teknologi  reproduksi  (fertilisasi  in-vitro  /  IVF)  selain  mahal,  tidak selalu berhasil. Saat ini, banyak orang menggunakan herbal dalam pengobatan berbagai penyakit. Madura dikenal sebagai salah satu etnis yang memiliki pengetahuan tentang obat tradisional atau "herbal"  terutama  yang  berkaitan  dengan  keharmonisan  perkawinan.  Rimpang  Jeringau  (Acorus Calamus)  adalah  salah  satu  bahan  baku  "Jamu  Subur  Kandungan"  yang  mengatasi  masalah infertilitas  perempuan.  Penelitian  ini  menguji  aktivitas  antimikroba  Jeringau  Rimpang  (Acorus Calamus)  untuk  menghambat  pertumbuhan  Candida  albicans.  Hasil  penelitian  ini  diharapkan menjadi dasar untuk standardisasi dan saintification dari "Jamu Subur Kandungan". Uji aktivitas antimikroba  dari  ekstrak  Jeringau  Rimpang  (Acorus  Calamus)  menunjukkan  penghambatan pertumbuhan Candida albicans dengan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) sebesar 0,5%. Abstrak : Acorus calamus, Antimicrobial activity, Candida albicans
Abstract. Infertility is the inability of a woman over 35 years to pregnant after trying for at least 6 months, with normal sexual intercourse and without use birth control. WHO estimates that 8-12% of  couples  worldwide  have  problems  in  pregnancy.  Recently,  management  of  infertility  with surgery,  medicine,  assisted  reproductive  technology  (in-vitro  fertilization/IVF)  in  addition  to expensive,  not  always  successfully.  Currently,  many  people  use  herbs  in  the  treatment  of  various diseases.  Madura  is  known  as  one  of  the  ethnic  that  have  knowledge  of  traditional  medicine  or "herbal" especially related to marital harmony. Rhizome of Jeringau (Acorus Calamus) is one of the raw materials of "Jamu Subur Kandungan" which overcome the problem of female infertility. This study examined the antimicrobial activity of Jeringau Rhizomes (Acorus Calamus) to inhibit the  growth  of  Candida  albicans.  The  results  of  this  study  are  expected  to  be  the  basic  for standardization  and  saintification  of  "Jamu  Subur  Kandungan".  Antimicrobial  activity  test  of Jeringau  Rhizome  Extract  (Acorus  Calamus)  showed inhibition  of  Candida  albicans  growth  with Minimum Inhibitory Concentration (MIC) at 0.5%.
Key words : Acorus calamus, Antimicrobial activity, Candida albicans

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara yang  kaya  akan  keanekaragaman  hayati. Sebanyak  940  jenis  tumbuhan  telah  terdaftar sebagai penyedia bahan ramuan untuk keperluan pengobatan secara tradisional (Rifa’i, 2000). Menurut Zuhud (2003), kurang lebih 400 kelompok etnis masyarakat Indonesia  memiliki  hubungan  yang  erat
dengan tumbuhan obat,  diantaranya kelompok etnis  Madura.  Madura  dikenal  sebagai  salah satu etnik yang memiliki kekayaan pengetahuan  tradisional  dalam  bidang  obat tradisional  atau  “jamu”  khususnya  yang berkaitan  dengan  keharmonisan  suami  istri (Handayani  dan  Sukirno,  2000).  Kekayaan etnik  Madura  dalam  bidang  pengobatan  tidak hanya terbatas dalam upaya menjaga kesehatan  reproduksi.  Pengetahuan  penting
lainnya dalam  pengobatan tradisional  meliputi pengetahuan  tentang  klasifikasi  penyakit  dan sifat tanaman obat, cara-cara pengobatan, cara perawatan  tubuh,  jenis-jenis  tanaman  obat, bahkan jamu untuk sapi (Purwanti, 2001).
Salah  satu  jamu  Madura  yang  banyak digunakan  adalah  Jamu  Subur  Kandungan. Jamu  ini  berkhasiat  mengatasi  masalah infertilitas  wanita.  Rimpang  jeringau  ( Acorus calamus )  merupakan  salah  satu  bahan  baku Jamu  Subur  Kandungan.  Tanaman  terna  ini berbentuk  mirip  rumput,  batangnya  tinggi, daun  dan  rimpangnya  memiliki  aroma  yang kuat. Rimpang Jeringau tumbuh liar sepanjang tahun  di  pinggir  sungai,  hutan,  rawa-rawa maupun  lahan  yang  tergenang  air.  Tanaman herbal  ini secara empiris telah digunakan oleh masyarakat  dalam mengobati berbagai  macam penyakit  diantaranya  diare,  disentri,  dan cacingan  (Gholkar,  2012  ;  Atsiri  Indonesia, 2006).
Rhizoma  Rimpang  Jeringau  memiliki kandungan  zat  aktif  β-asarone,  α-asarone, Sequesterpenes,  β-daucosterol,  triterpenoid, dan polisakarida larut air (Nandakumar, 2013). Penelitian  Sihite  (2009)  menunjukkan  adanya kandungan  minyak  atsiri  pada  rimpang jeringau,  yang  diketahui  memiliki  aktivitas antimikroba terhadap Pseudomonas aeruginosa , Candida albicans, dan Penicillium marneffei .  Penelitian  ini  menguji  aktivitas antimikroba Rimpang Jeringau ( Acorus calamus )  dalam  menghambat  pertumbuhan Candida albicans . Hasil penelitian ini diharapkan  dapat  menjadi  dasar  dalam standarisasi  dan  saintifikasi  ”Jamu  Subur Kandungan”.

## METODE PENELITIAN
Ekstraksi Rimpang Jeringau ( Acorus calamus )
Prosedur pertama yang dilakukan adalah membuat  ekstrak  Rimpang  Jeringau  ( Acorus calamus ).  Rimpang  jeringau  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  didapat  dari  Herba Medika Malang. Sampel tanaman dicuci bersih dan  dikeringanginkan.  Selanjutnya  sampel dipotong  kecil-kecil  dengan  gunting  dan dikeringkan dengan oven pada suhu  30–37 o C selama  1–2  jam.  Kemudian  sampel  kering
dihaluskan  dengan  blender  sampai  menjadi serbuk dan diayak dengan ayakan 60 mesh.
Serbuk yang diperoleh dilakukan ekstraksi dengan metode maserasi menggunakan  pelarut  etanol  70%.  Sebanyak 60  g  serbuk  direndam  dalam  300  mL  pelarut etanol  selama  24  jam,  kemudian  dishaker selama  3  jam.  Rendaman  disaring  dan  ampas yang  diperoleh  dimaserasi  kembali  dengan pelarut  yang  sama.  Proses  ini  dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan sampai filtratnya berwarna  bening.  Selanjutnya  disaring  dan ampasnya dikeringkan pada suhu ruang hingga terbebas  dari  pelarut  etanol.  Ekstrak  yang diperoleh dipekatkan dengan rotary
evaporator .
Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Rimpang Jeringau terhadap Candida albicans
Candida albicans yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  isolat  41-SV  yang diperoleh  dari  Laboratorium  Mikrobiologi Fakultas  Kedokteran  Universitas  Brawijaya Malang.  Identifikasi  ulang  dilakukan  sebelum dan  setelah  dipakai  sebagai  materi  penelitian. Identifikasi dilakukan dengan menanam koloni jamur  pada  media Saboroud  Dextrose  Agar (SDA), pewarnaan gram dan germinating tube test . Standar kepadatan jamur  yang digunakan adalah 10 6 CFU/ml. Uji aktivitas antimikroba ekstrak Rimpang  Jeringau  dilakukan  dengan  metode Tube Dilution Test . Ekstrak Rimpang Jeringau yang  diperoleh  dibuat  suspensi  dengan  media Saboroud Dextrose Broth (SDB) dalam tabung reaksi dengan konsentrasi 4% (kontrol bahan), 2%,  1%,  0,5%,  dan  0%  (kontrol  jamur). Konsentrasi  tersebut  dibuat  dengan  memakai rumus  pengenceran  secara  serial.  Ke  dalam masing-masing  tabung  dimasukkan  10  µl larutan Candida albicans yang telah diencerkan  dalam Phosphate  Buffer  Saline (PBS).  Kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 o C selama  48  jam  dan  diamati  perubahan kekeruhannya. Pada tabung dengan konsentrasi tertentu dimana dijumpai kekeruhan  yang  mulai  menghilang  ditentukan sebagai  Kadar  Hambat  Minimal  (KHM)  yaitu kadar minimal ekstrak yang mampu menghambat  pertumbuhan  jamur Candida albicans .

## HASIL PENELITIAN
Penanaman  jamur Candida  albicans pada  media Saboroud  Dextrose  Agar (SDA) didapatkan  gambaran  koloni  yang  merupakan ciri  khas Candida  albicans ,  yaitu  koloni berwarna putih kekuningan, pekat, berdiameter antara  1-2  mm,  dan  beraroma  ragi  (gambar 1a).  Dengan  pewarnaan  Gram  tampak  sel dengan sifat Gram positif, berbentuk oval, dan terdapat budding (gambar 1b).
Gambar 1. Candida albicans (a) Koloni Candida albicans (b) Bentukan budding
Hasil  pengujian  aktivitas  ekstrak  etanol Rimpang  Jeringau  ( Acorus  calamus )  dengan metode Tube  Dilution  Test menunjukkan kemampuannya dalam menghambat pertumbuhan  jamur Candida  albicans .  Dari kelima  konsentrasi  yaitu  4%  (kontrol  bahan), 2%, 1%, 0,5%, dan 0% (kontrol jamur), dapat diamati  bahwa  kekeruhan  mulai  menghilang pada konsentrasi 0,5%. Oleh karena itu, Kadar Hambat  Minimal  (KHM)  ekstrak  Rimpang Jeringau  ( Acorus  calamus )  dapat  ditentukan yaitu pada konsentrasi 0,5%.
Gambar 2. Hasil Uji Aktivitas Ekstrak Rimpang Jeringau ( Acorus calamus ) terhadap Candida albicans

## PEMBAHASAN
Pengujian ekstrak etanol Rimpang
Jeringau  ( Acorus  calamus )  menunjukkan adanya  aktivitas  penghambatan  terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans . Aktivitas  penghambatan  ini  dapat  dilihat  dari hilangnya kekeruhan pada tabung reaksi mulai konsentrasi  ekstrak  0,5%.  Adanya  aktivitas antimikroba ekstrak Rimpang Jeringau
( Acorus  calamus )  diduga  karena  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  yang  berperan sebagai  antimikroba.  Berdasarkan  penelitian sebelumnya, Rimpang Jeringau ( Acorus calamus ) memiliki kandungan fitokimia diantaranya  steroid,  fenol,  tannin,  flavonoid, glikosida,  diterpen,  triterpen  dan  alkaloid (Barua, et al , 2014).
Flavonoid  merupakan  senyawa  fenol yang  bekerja  dengan  cara  mendenaturasi protein  yang  dapat  menyebabkan  aktifitas metabolisme sel jamur berhenti, karena semua aktifitas metabolisme sel dikatalisis oleh suatu enzim  yang  merupakan  protein.  Aktivitas antimikroba  dari  flavonoid  terjadi  karena kemampuannya untuk berikatan dengan adhesin, polipeptida dinding sel dan membrane-bound  enzymes ,  karena  flavonoid memiliki  kemampuan  untuk  membentuk kompleks dengan protein ekstraseluler terlarut dan dengan dinding sel, sehingga mikroorganisme  tidak  dapat  melekat  dan menginvasi sel (Harborne, 1996).
Tanin  dan  alkaloid  terdapat  pada  kadar yang  lebih  rendah  dalam  ekstrak  Rimpang Jeringau  ( Acorus  calamus )  (Barua, et  al ,
a
b
2014).  Tanin  merupakan  senyawa  metabolit sekunder pada tumbuhan yang bersifat sebagai antimikroba  dengan  membentuk  ikatan  yang stabil dengan protein sehingga terjadi koagulasi protoplasma mikroba. Daya antimikroba  tannin  sangat  toksik  terhadap filamentous  fungi  dan  bakteri  (Harborne, 1996). Alkaloid memiliki kemampuan sebagai antimikroba, dengan cara mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada  sel mikroba, sehingga lapisan dinding sel mikroba tidak  terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan kematian sel (Robinson, 1995).
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa  Ekstrak  Rimpang  Jeringau  ( Acorus calamus )  secara  in  vitro  memiliki  daya antifungal  terhadap  pertumbuhan Candida albicans .  Perlunya  penelitian  lebih  lanjut mengenai  kandungan  bahan-bahan  aktif  yang terdapat  dalam  ekstrak  Rimpang  Jeringau ( Acorus calamus ) maupun penggunaan metode lain seperti spektrofotometri.

## DAFTAR PUSTAKA
Atsiri Indonesia. 2006. Atsiri. Online . http://atsiriindonesia.com//tanaman.php
/id&//detail_news1/desknews=deskripsiba littro. diakses 21 Agustus 2014
Dalimarta,  S.  1998.  Atlas  Tumbuhan  Obat
Indonesia  Jilid  I.  Jakarta  :  Trubus Agriwidya Press.
Gholkar  MS,  Mulik  MB,  Laddha  KS.  2012.
Fate  of  β-asarone  in  Ayurvedic  Sodhana process  of  Vacha. J  Ayurveda  Integr Med.Reid,  T.  Traditional  Chinese  Herbal Medicine , 28 (1).
Handayani, L dan S. Sukirno. 2000.
Pemanfaatan  Jamu  Rapat  dan  Keputihan
serta  Tradisi  yang  Menyertai  Pada Masyarakat  Madura.  Dalam:  Purwanto dan  Walujo,  E.B.  (eds). Prosiding Seminar  Lokakarya  Nasional  Etnobotani III Denpasar Bali.
Harborne,  JB,  1996.  Metode  fitokimia;
Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan  Edisi  ke-2.  Bandung  :  ITB Press.
Nandakumar S, Menon S, Shailajan S. 2013. A rapid  HPLC-ESI-MS/MS  method  for determination  of  β-asarone,  a  potential anti-epileptic  agent,  in  plasma  after  oral administration  of  Acorus  calamus  extract to rats. Biomed Chromatogr , 15 (1). Purwanti, U. 2001. Pengembangan Tumbuhan Obat  Berbasis  Masyarakat  di  Pulau Madura .  Program  Warta  KEHATI  Edisi Januari.
Rifa’i,  M.A.  2000.  Pingit,  Pijet  dan  Pepahit:
Peran Tumbuhan dalam Kosmetik Tradisional Indonesia seperti Dicerminkan di Daerah Madura. Online . http://dbp.gov.my/mab2000/Penerbitan/Ra mpak/rspijet21.pdf.  diakses  22  Agustus 2014 .
Robinson,  T.  1995.  Kandungan  organik tumbuhan tinggi Edisi Kedua, Penerjemah; Kokasih Padmawinata.
Bandung : ITB Press. Sihite,  DF,  2009.  Karakteristik  minyak  atsiri jeringau ( Acorus calamus ). Skripsi Fakultas  Pertanian  Universitas  Sumatra Utara. USU Repository , Sumatra.
Zuhud,  A.  2003.  Pengembangan  Tumbuhan
Obat Berbasis Konsep Bioregional (contoh kasus di kawasan meru betiri jawa timur).  Makalah  Filsafat  Sains  Program Pascasarjana. Bogor : IPB Press.