## JURNAL KESEHATAN
Vol   17  No  1  Tahun
JUMLAH TROMBOSIT MENGGUNAKAN METODE AMONIUM OKSALAT 1% DAN METODE AUTOMATIK
Rony Puasa 1 🖂 , Aan Yulianingsih Anwar 2 , Ananda Putri 3
1,2,3 Jurusan Teknologi Laboratorium Medis, Poltekkes Kemenkes Ternate, Indonesia
1 rony_yani@yahoo.co.id / 0813 5616 9XXX

## Abstrak
L atar  Belakang: Pemeriksaan  hitung  jumlah  trombosit  merupakan  pemeriksaan  yang  sering digunakan untuk menunjang diagnosa gangguan perdarahan. Jumlah trombosit dapat diperiksa secara manual atau otomatis menggunakan berbagai teknik. Meskipun pendekatan otomatis menggunakan alat analisa hematologi, metode manual dapat dilakukan baik secara langsung maupun tidak langsung. Metode langsung menggunakan ruang hitung, dan metode tidak langsung menggunakan apusan darah. Meskipun  penggunaan  alat  otomatis  lebih  akurat  dan  hemat  waktu,  tidak  semua  fasilitas  medis memiliki akses terhadap alat semacam ini. Pendekatan manual masih menjadi standar, terutama untuk laboratorium tanpa peralatan atau dengan dana terbatas untuk membeli peralatan otomatis. Tujuan : diketahuinya  perbedaan  antara  hasil  pemeriksaan  hitung  jumlah  trombosit  menggunakan  metode ammonium oksalat 1% dengan alat automatik.. Metode: Penelitian menggunakan desain komparatif yaitu  membandingkan  hasil  jumlah  trombosit  menggunakan  ammonium  oksalat  1%  dengan automatic.  Sampel  penelitian  menggunakan  metode  purposive  sampling  dimana  jumlah  sampel sebanyak  33  siswa. Hasil: didapatkan  nilai  rerata  hitung  jumlah  trombosit  menggunakan  metode Ammonium Oksalat 1% yaitu 212.775/mm3 lebih kecil dari metode otomatik dengan nilai rata – rata 263.636/mm3. Hasil uji T didapatkan sebaran nilai sebesar -4.953 dengan nilai p<0.001. Kesimpulan: terdapat  perbedaan  hasil  jumlah  trombosit  menggunakan  metode  ammonium  oksalat  1%  dengan metode automatik.

## PLATEL COUNT USING 1% AMMONIUM OXALATE METHOD WITH AUTOMATIC METHOD: COMPARATIVE RESEARCH

## Abstract
Background : Platelet count examination is an examination that is often used to support the diagnosis of bleeding disorders. Platelet counts can be checked manually or automatically using a variety of techniques. While the automatic approach makes use of a hematological analyzer, the manual method can be performed both directly and indirectly. The direct method uses a counting chamber, and the indirect method uses a blood smear. While using automatic tools is more accurate and time-efficient, not all medical facilities have access to these kinds of tools. The manual approach is still the standard, particularly  for  labs  without  equipment  or  with  limited  funds  for  buying  automated  equipment.. Objective : to find out the difference between the results of platelet count examinations using the 1% ammonium oxalate method and an automatic tool. Method: The research uses a comparative design, namely  comparing  the  results  of  platelet  counts  using  1%  ammonium  oxalate  with  automatic. The research sample used a purposive sampling method where the total sample was 33 students. Results : The mean value of platelet count using the 1% Ammonium Oxalate method was 212,775/mm3, which was smaller than the automatic method with an average value of 263,636/mm3. The results of the T test showed a distribution of values of -4.953 with a p value <0.001. Conclusion : there is a difference in the results of platelet counts using the 1% ammonium oxalate method and the automatic method
🖂 Alamat korespondensi:
Jln. Cempaka Kel. Tanah Tinggi Barat - West Maluku Utara , Indonesia
ISSN 2597-7520
Email: rony_yani@tahoo.co.id

## Info Artikel
Sejarah Artikel:
Diterima : April 2024
Disetujui : April 2024 Di Publikasi : Mei 2024
Keywords: Amonium oksalat 1%, Automatik, Trombosit
DOI : 10.32763/7af84a30

## Pendahuluan
Pemeriksaan laboratorium bidang  hematologi masih merupakan standar yang dibutuhkan  dokter untuk  membantu  menegakan  diagnosis  suatu penyakit atau berat ringannya suatu penyakit, oleh karena  itu  hasil  pemeriksaan  laboratorium    harus tepat  dan  akurat  dengan  waktu  yang  cepat. Diantara parameter pemeriksaan bidang hematologi,  pemeriksaan  trombosit  merupakan salah  indikatornya    yang  sering  digunakan, (Nurseha, 2021).
Trombosit  merupakan  jenis  sel  darah  yang berperan  penting  dalam  proses  hemostasis  atau system  pembekuan  darah,  (Aan  Yulianingsih Anwar  &  Rony  Puasa,  2021).  Komponen  darah yakni  trombosit    sering  diminta  untuk  menunjang diagnosa  gangguan  perdarahan  atau  pemeriksaan hemostasis, (Wardhana et al., 2022).
Nama  lain  trombosit  adalah  platelet  atau keping  darah.    Trombosit  adalah  bagian  terkecil dari sitoplasma sel darah megakariosit. Ukurannya kecil berbentuk seperti cakram dengan sitoplasma berwarna  biru  .  Struktur  trombosit  terdiri  dari membran trombosit yang kaya akan fosfolipid dan mengandung beberapa zat pembekuan didalamnya, (Alma et al., 2022). Trombosit  normal  dalam  darah  manusia 150.000  –  400.000/  mikro  liter  darah.  Untuk menghitung jumlah trombosit agak sulit menemukan hasil yang konstan, hal ini disebabkan oleh  sifat  trombosit  yang  mudah  rusak,  sulit dibedakan dengan kotoran dan sering menggumpal, (Maharani et al., 2017) Jumlah trombosit dapat diperiksa dengan cara manual  dan  automatik  menggunakan  beberapa teknik.  Jumlah  trombosit  yang  diperiksa  secara manual  dapat  dihitung  langsung  menggunakan metode Brecher-Cronkite dengan larutan Amonium Oksalat 1%, Rees Ecker dengan larutan BCB  ( Brilliant  Cresyl  Blue ),  membuat  sediaan apus  darah  kemudian  diwarnai  dengan  larutan Giemsa  untuk  cara  tidak  langsung  (fonio). Sedangkan  otomatik  menggunakan  hematologi analizer, (Iverson & Dervan, n.d.) Dari segi waktu dan keakuratan  alat otomatik lebih diandalkan di laboratorium, namun dari segi biaya  lebih  mahal  dibandingkan  manual.  Metode manual  dengan  menggunakan  hemositometer masih  diandalkan  disarana  kesehatan  seperti puskesmas terutama sarana kesehatan yang berada didaerah terpencil, (Yani et al., 2018). Hasil penelitian yang dilakukan oleh Raga & Gustiarni  R,  (2022),  untuk  melihat  hasil penggunaan reagen pengencer yang berbeda yakni Rees  Ecker  dengan    Amonium  Oxalate  dengan menggunakan  standar  bakunya  adalah  alat flow cytometry tidak  ditemukan  perbedaan  yang bermakna dari kedua reagen tersebut. Penelitian  Yareva  Sarah  Mustika,  Anita Oktari,  2022  dengan  judul    Perbandingan  Hasil
Hitung  Jumlah Tromboosit Menggunakan Metode Manual  Dan  otomatik   Di   Klinik  dr.  Fakhrurrozi Depok,  dengan  membandingkan  metode  manual Ress  Ecker  dengan  metoode  otomatic.  Hasilnya tidak ditemukan perbedaan yang signifikan antara kedua  metode.  Worung  et  al.,  2020,  melakukan penelitian  dengan  membandingkan  metode  Fonio dan  otomatis  juga  tidak  menemukan  perbedaan antara kedua metode tersebut.
Hal ini mengisyaratkan bahwa metode manual masih  dapat  digunakan,  dengan  selalu  menjaga ketelitian saat menghitung pada bilik hitung. Kotak yang menjadi  tempat untuk menghitung  trombosit yakni  5  kotak  kecil  sebagai  tempat  untuk menghitung  eritrosit dengan  diameter kotak yakni 0,20 mm, (Fajar Bakti Kurniawan, 2018).
Untuk menghitung jumlah trombosit menggunakan  pengenceran  darah  pada  cara langsung untuk menghitung jumlah trombosit dapat menggunakan alat bantu  pipet thoma atau tabung. Bila dilihat dari tingkat kesulitan, maka menggunakan  pipet  thoma  agak  sulit  untuk ketepatan  volume,  sehingga  sekarang  lebih dikembangkan  penggunaan  tabung,  dengan  tetap menggunakan  pengenceran,  (Rukman  Kiswari, 2014).
Perhitungan  trombosit                      secara  otomatis memiliki  kelebihan  yakni  seorang  ATLM  akan menghemat  waktu  bekerja,  terutama  dengan layanan  pasien  yang  banyak.  Namun  memiliki kelemahan dari segi teknis dimana trombosit yang menempel  tidak  dapat  dibaca  sehingga  dapat menyebabkan  hasil  pasien  menjadi  rendah  palsu, (Umar & Aulya, 2016)
Dengan  mencermati  uraian  yang  telah  di utarakan penulis, maka penulis berkeinginan untuk melakukan      penelitian  dengan  cara  yang  belum dilakukan oleh peneliti sebelumnya yakni membandingkan antara metode manual menggunakan larutan pengencer Amonium Oksalat 1%    dengan    cara  otomatik  menggunakan  sampel darah dari Siswa SMK Putra Bahari Kota Ternate.

## Metode
Penelitian ini menggunakan metode penelitian komparatif yaitu penelitian yang bersifat membandingkan, (Prof. Dr. Sugiyono, 2016) yakni untuk  melihat  perbedaan  hasil  pemeriksaan trombosit  menggunakan  Ammonium  Oksalat  1% dan Automatik. Populasi adalah sekelompok orang yang mempunyai karakteristik tertentu yang dapat dipilih  oleh  peneliti  (Dr.  Siti  Fadjarajani,  MT, 2020).  Populasi  dalam  penelitian  ini  sebanyak  50 responden  dan  sampel  penelitian  sebanyak  33 respoden  yang  diambil  dengan  menggunakan Teknik purposive sampling.
Kriteria  inklusi  responden  penelitian  adalah siswa  kelas  10  s/d  12  SMK  Bahari  Berkesan Jurusan  TLM,  responden  tidak  sedang  dalam
keadaan sakit dan tidak mengkonsumsi obat-obatan yang dapat mempengaruji jumlah trombosit.
Sebelum  pengambilan  darah  dilakukan, responden diberi informed concent dan penjelasan terkait  prosedur  penelitian  yang  akan  dilakukan. Darah  responden  diambil  lalu  diperiksa  dengan menggunakan  2  metode  yaitu  metode  manual dengan  menggunakan  reagen  ammonium  oksalat 1%  dan  metode  automatic  dengan  menggunakan alat hematology analizer.
Analisis data menggunakan uji T berpasangan. Analisis ini digunakan untuk melihat nilai rerata dari dua variabel yang akan diteliti dan untuk melihat nilai p nya. Penelitian ini juga telah sesuai  dengan  kaidah  penelitian  dan  dibuktikan dengan  mendapatkan  surat  lolos  layak  etik  No. UM.02.03/6/313/2023  yang  dikeluarkan  oleh Komisi  Etik  Poltekkes  Kemenkes  Ternate  pada tanggal 30 Mei 2023.

## Hasil dan Pembahasan
Jumlah  responden  pada  penelitian  ini sebanyak  33  responden  dari  jumlah  populasi sebanyak  50  responden.  Responden  berasal  dari kelas  X  s/d  XII.  Responden  yang  terpilih  pada penelitian  ini  sebanyak  7  repsonden  berjenis kelamin  laki-laki  dan  26  responden  berjenis kelamin perempuan.
Tabel  1  Nilai  Rata  –  Rata  (Mean)  Trombosit Menggunakan Brecher-Cronkite dengan Larutan Pengencer Ammonium  Oksalat  1%  dan  Metode Automatik Tahun 2023. Jumlah Sampel Mean Ammonium Oksalat 1% (/mm3 ) Otomatik (mm3 ) 33 212.775 263.636 Sumber : Data Primer 2023 Berdasarkan tabel 4.1 diatas hasil pemeriksaan
hitung jumlah trombosit menggunakan  metode  Ammonium  Oksalat  1% didapat  nilai  rata  -  rata  212.775/mm3  lebih  kecil dari  metode  otomatik  dengan  nilai  rata  –  rata 263.636/mm3 .

## Tabel 2 Uji Statistik T test
Hasil Pemeriksa an T Signifikan p Satu Sisi p dua Sisi Sebaran nilai  rata- rata  yang - 4.9 53 <.001 <.0 01
diperkirak an Sebaran nilai  rata- rata  yang tidak diperkirak an - 4.9 53 <.001 <.0 01

## Sumber : Data Primer 2023
Hasil  tabel  2  menggambarkan  pemeriksaan trombosit  menggunakan  metode  Brecher-Cronkite dengan larutan pengencer Ammonium Oksalat 1 % dan  metode  otomatik  melalui  T  test  menghasil sebaran  nilai  -4.953  karena  terdapat  nilai  rentang yang  cukup  jauh  antara  variabel  dependen  dan independent. Nilai p satu sisi dan p dua sisi meniliki nilai yang sama yakni < 0.001 yang berarti bahwa Ho ditolak dan terdapat perdedaan bermakna antara hitung  jumlah  trombosit  menggunakan  metode manual ammonium oksalat 1% dan automatik.
Trombosit  merupakan  salah  sel  darah  yang agak  sulit  untuk  dihitung  karena  memiliki karakteristik  atau  sifat:  sangat  mudah  rusak  atau mengalami  desintegrasi  sehingga  sulit  dibedakan dengan kotoran kecil dan juga mudah menggumpal.
Untuk  menghitung  jumlah  trombosit  pada penelitian  ini,  peneliti  menggunakan  metode Brecher-Cronkite dengan  larutan  Ammonium oksalat  1%,  sebagai  pengencer  dan  alat  otomatik yang digunakan adalah hematology analyzer. Hasil perhitungan trombosit dari kedua metode menunjukan terdapat perbedaan yang signifikan.
Hasil analisis statistik dengan menggunakan T test  menunjukan  nilai  rata  –  rata  ( mean ) perhitungan  pada  Amonium  oxalate  1%  yakni 212.775, sedangkan pada alat otomatik  lebih tinggi yakni ; 263.636, hal ini dapat terjadi karena proses analitik yakni saat pemipetan yang kurang tepat dan juga  ketelitian  dari  peneliti  saat  menghitung sehingga ada sel trombosit yang kemungkinan tidak terbaca.  Secara  umum  bila  kita  bekerja  dengan volume yang kecil maka sumber kesalahan makin besar,  pada  penelitian  sampel  darah  yang digunakan untuk Amonium oxalate 1% sangat kecil yakni 5 µl.
Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian yang  dilakukan  oleh  Raga  &  Gustiarni  R,  2022 tentang Perbandingan Pemeriksaan Trombosit Cara Rees  Ecker  dan  Amonium  Oxalate  dengan perhitungan Gold Standard menggunakan Hematology  Analyzer menunjukkan  terdapat perbedaan  yang  signifikan,  namun  menggunakan Amonium  oxalate  lebih  dekat  dengan  nilai Gold Standard dibandingkan metode Rees Ecker.
Dua  metode  yang  digunakan  ini  memiliki kelebihan dan kekurangan masing-masing.
Hematology  analyzer,  memiliki  kelebihan  dimana keakuratan  hasil  yang  lebih  tinggi  dibandingkan menggunakan  ammonium  oksalat  1%,  lebih
menghemat  waktu  jika  melakukan  pemeriksaan dalam jumlah yang banyak. Sedangkan kelemahannya  tidak  dapat  menghitung  trombosit berukuran  besar  (giant  trombosit)  dan    trombosit yang menggumpal menyebabkan jumlah trombosit menjadi lebih sedikit (Ramadhani & Astuti, 2022). Hal ini disebabkan karena alat hematologi analyzer menggunakan  prinsip impedans dimana  sel  akan terbaca  berdasarkan  ukuran  selnya  selain  itu  alat hematology analyzer juga memerlukan ruang yang suhunya  terkontrol  serta  penghomogean  sampel harus  merata  agar  tidak  terjadi  bekuan  dan pelekatan (Fitrianti et al., 2019)..
Metode Brecher-Cronkite dengan  larutan Ammonium oksalat 1%, juga memiliki kekurangan yang bisa dirasakan oleh peneliti yang mana makin lama  kita  menghitung  jumlah  menyebabkan kelelahan  dari  mata  untuk  melihat  secara  akurat, baik garis kotak bilik hitung dan jumlah trombosit. Pastinya  setiap  metode  ada  kelebihan  dan kekurangannya. Disamping itu trombosit memiliki sifat  adhesi  atau  dapat  melengket  pada  trombosit yang lain juga dapat menyebabkan tidak terhitung oleh peneliti, oleh sebab itu perhitungan trombosit manual sebaiknya dalam waktu yang cepat setelah pengambilan sampel darah, (Fitrianti et al., 2019). Selain  itu,  terdapat  perbedaan  prinsip  dari  kedua metode  tersebut  Dimana  metode  automatik menggunakan metode impedans sedangkan metode manual  menggunakan  prinsip  latar  belakang  dan dapat  mewarnai  trombosit.  Hal  inilah  yang memungkinkan  terjadinya  perbedaan  hasil  dari perhitungan jumlah trombosit dengan menggunakan  metode  manual  dan  automatik, (Praptomo, 2016)

## Kesimpulan
Terdapat  perbedaan  hasil  jumlah  trombosit menggunakan  metode  ammonium  oksalat  1% dengan  metode  automatik.  Walaupun  terdapat perbedaan  tetapi  metode  ammonium  oksalat  1% masih dapat digunakan untuk menghitung trombosit dengan memperhatikan waktu pemeriksaan.

## Daftar Pustaka
Aan  Yulianingsih  Anwar,  S.  S.  M.  K.,  &  Rony Puasa,  SKM,  M.  K.  (2021). Hematologi Dasar (S. K. Yusrin Aswad (ed.)). CV. Mitra
Keluarga Sehat. Alma,  B.,  Nuraeni,  M.,  &  Mariadi,  P.  D.  (2022). Perbedan Jumlah Trombosit Yang Dihomogenisasi  Sekunder  Manual  Teknik Inversi  10  Kali  Dengan  Homogenisasi Otomatis  Teknik  Rolling  1  Menit  Dan  2 Menit. Prosiding  Rapat  Kerja  Nasional Asosiasi Institusi Perguruan Tinggi
Teknologi  Laboratorium  Medik  Indonesia , 198–207.
Dr.  Siti  Fadjarajani,  MT,    dkk.  (2020). Metode Penelitian Pendekatan Multidisipliner (S. S. I. M. P. Prof, Dr. Abdul Rahmat (ed.)). Ideas Publishing.
Fajar  Bakti  Kurniawan,  S.ST,  M.  S.  (2018). Hematologi Praktikum Analis Kesehatan (E. A. Mardela (ed.)).
Fitrianti,  N.  R.,  Handayati,  A.,  &  Rahayuningsih, C. K. (2019). Perbandingan Hasil
Pemeriksaan Trombosit Homogenasi  Secara Manual  dan  Blood  Roller  Mixer  Pada  Alat Hematology Analyzer. Jurnal Analis
Kesehatan Sains , 8 (1), p.
Iverson,  B.  L.,  &  Dervan,  P.  B.  (n.d.). No Covariance  structure  analysis  of  health- related  indicators  in  home-bound  elderly people focusing on subjective sense of health. Title . d , 7823–7830.
Maharani,  D.  R.,  Anggraini,  H.,  &  Isworo,  J.  T.
(2017). Perbedaan Hitung Jumlah Trombosit Metode  Impedansi,  Langsung  dan  Barbara Brown. Laboratorium  Patologi  Klinik, Fakultas Ilmu Keperawatan  Dan Kesehatan Universitas  Muhammadiyah , September ,
675–678.
Nurseha.  (2021).  Platelet  Count  That  Were Checked  At  Delay.  20  Minutes  and  40 Minutes. Health Sains , 2 (1), 9–13.
Praptomo,  A.  J.  (2016).  Perbandingan  Hasil Pemeriksaan  Hitung  Jumlah  Trombosit Metode  Langsung  (Rees  Ecker),Metode Tidak  Langsung  (Fonio),  dan  Metode Automatik  (Hematology  Analyzer). Jurnal Medika , 1–13.
Prof.  Dr.  Sugiyono.  (2016). Metode  Penelitian Kuantitatif,  Kualitatif  dan  R&D (24th  ed.).
Alfabet.
Raga, E., & Gustiarni R, D. (2022). Perbandingan Pemeriksaan Trombosit Cara Rees Ecker dan Amonium  Oxalate  dengan  Gold  Standard Hematology  Analyzer. Cerdika:  Jurnal Ilmiah Indonesia , 2 (3), 358–364.
https://doi.org/10.36418/cerdika.v2i3.351
Ramadhani, I. S., & Astuti, T. D. (2022). Literature
Review: Perbandingan Hasil Jumlah Trombosit Dengan Metode Hematologyanalyzerberdasarkan Jenis Antikoagulan Dan Volume Spesimen.
Borneo  Journal  of  Medical  Laboratory Technology , 5 (1), 319–325. https://doi.org/10.33084/bjmlt.v5i1.4429
Rukman  Kiswari.  (2014). Hematologi  dan Transfusi (S.  Carolina  &  R.  Astikawati (eds.)). Erlangga.
Umar,  A.,  &  Aulya,  M.  S.  (2016).  Perbedaan
Jumlah  Trombosit  Metode  Automatic  Dan Metode  Tak  Langsung. Jurnal  Analis Kesehatan Kendari , 1 (1), 1–7.
Wardhana, I. M. W., Somayana, G., Mariadi, I. K., & Wibawa, I. D. N. (2022). Hitung trombosit sebagai uji tapis kecurigaan hipertensi portal pada  penderita  sirosis  hepatis. Jurnal
Penyakit  Dalam  Udayana , 6 (1),  1–5. https://doi.org/10.36216/jpd.v6i1.85
Worung,  I.  M.,  Mahartini,  N.  N.,  &  Herawati,  S.
(2020).  Hitung  trombosit  metode  otomatis dikonfirmasi  dengan  Hapusan  Darah  Tepi (HDT)  tanpa  pewarnaan  dan  dengan pewarnaan  giemsa  di  RSUP  Sanglah,  Bali, Indonesia. Intisari Sains Medis , 11 (3), 1387–
1391.
https://doi.org/10.15562/ism.v11i3.799
Yani,  N.,  DIV  Analis  Kesehatan,  P.,  &  Perintis Padang, Stik.  (2018). Validasi Hasil Pemeriksaan  Jumlah  Trombosit  Secara Autoanalyzer  Dan  Manual  Menggunakan
Amonium  Oksalat  1%. Prosiding  Seminar Kesehatan Perintis E , 1 (1), 2622–2256.
Yareva Sarah Mustika, Anita Oktari, D. M. (2022).
Perbandingan Hasil Hitung Jumlah Trombosit  Menggunakan  Metode  Manual Dan  Automatic  Di  Klinik  Dr.  Fakhrurrozi
Depok. Jurnal Analisis Biologi , 06 (02), 1–5.