## PENYALUTAN BAKTERI ASAM LAKTAT MENGGUNAKAN NANOPARTIKEL KITOSAN
Gabriella Nathalie Sumeisey 1) , Stella Deiby Umboh 1) , Trina Ekawati Tallei 1)
1) Program Studi Biologi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
The  lactic  acid  bacteria  (LAB)  are  bacteria  which  have  large  contribution  to  provide functional  benefits  for  the  human  body  as  a  probiotic.  One  of  the  conditions  needed  for  a bacterium  to  be  catagorized  as  probiotic,  is  to  be  tolerant  to  low  pH.  The  encapsulation approach  using  chitosan  nanoparticles  is  one  of  the  methods  to  prevent  damage  and  the amount  of  probiotic  bacteria  reduction  when  they  are  exposed  to  low  pH.  Chitosan  is  a natural  polymer,  biocompatible,  biodegradable,  and  not  toxic  substance,  and  can  form microencapsulation with cross-bonding with  tripolyphosphate. Therefor,  chitosan is  suitable for encapsulation of lactic acid bacteria.
Keywords : Lactitc acid bacteria, chitosan, microencapsulation, viability, pH low

## ABSTRAK
Bakteri  asam  laktat  merupakan  bakteri  yang  memiliki  kontribusi  besar  dalam  memberikan manfaat fungsional bagi tubuh manusia sebagai probiotik. Salah satu syarat yang dibutuhkan agar  suatu  bakteri  dinyatakan  sebagai  probiotik  yaitu  toleransi  terhadap  pH  rendah. Pendekatan penyalutan (enkapsulasi) nanopartikel kitosan merupakan salah satu metode untuk mencegah  kerusakan  dan  berkurangnya  jumlah  bakteri  probiotik  ketikan  terpapar  pada  pH rendah. Kitosan merupakan polimer alami, biokompatibel, biodegradable, tidak beracun, dan dapat  membentuk  ikatan  silang  dengan  tripolifosfat,  sehingga  kitosan  dapat  digunakan sebagai matriks pada mikroenkapsulasi (penyalutan mikro) bakteri asam laktat.
Kata kunci : bakteri asam laktat, kitosan, mikroenkapsulasi,

## PENDAHULUAN
Bakteri asam laktat (BAL) merupakan  jenis  bakteri  Gram  negatif, tidak  membentuk  spora,  dan  berbentuk kokus,  cocobacilli,  atau  basil  (Rembulan 2015). Bakteri-bakteri ini mampu menghasilkan  asam  laktat,  hidrogen peroksida,
dan beberapa
hasil metabolisme  berupa  asam-asam  organik yang  bermanfaat  bagi  kesehatan  yang dihasilkan  dari  fermentasi  karbohidrat (Indriyati, 2010; Bawole et al ., 2018). Bakteri  asam  laktat  berkontribusi besar  memberikan  manfaat  fungsional bagi  tubuh  manusia  sebagai  bakteri probiotik  (Halim  dan  Zubaidah,  2013). Bakteri-bakteri  ini  ada  yang  dapat dikembangkan menjadi probiotik. Bakteri probiotik  merupakan  BAL  yang hidup  di dalam usus, bersimbiosis dengan mikroflora  usus  yang  mampu  melawan bakteri  patogen  di  dalam  usus,  oleh karena  itu  pemberian  probiotik  dapat berpengaruh menguntungkan
bagi kesehatan (Agus, 2016). Manfaat terapeutik  yang  dimiliki  oleh  probiotik membantu pengobatan intoleraansi laktosa,  mencegah  kanker  usus  besar, menurunkan  jumlah  kolesterol  dalam darah (Halim dan Zubaidah, 2013).
Menurut  Harjuni  dan  Mulyadi (2016),  beberapa  syarat  yang  diperlukan untuk  suatu  bakteri  dapat  dikatakan probiotik adalah antagonismenya terhadap  bakteri  patogen  dan  toleransi terhadap  pH  rendah.    Bakteri  calon probiotik  harus  mampu  hidup  pada kondisi  asam,  karena  probiotik  efektif jika  sudah  terseleksi  terhadap  asam. Kebanyakan  bakteri  asam  laktat  tidak hanya  tumbuh  lebih  lambat  pada  pH rendah, tetapi mungkin mengalami kerusakan  dan  hilangnya  viabilitas. Enkapsulasi merupakan salah satu metode  untuk  mencegah  kerusakan  dan berkurangnya  jumlah  bakteri  probiotik dan  dapat  membuat  probiotik  untuk
bertahan  pada  pH  rendah.  Penelitian  ini berupa  kajian  pustaka  yang  bertujuan untuk memaparkan pendekatan enkapsulasi  untuk  melindungi  BAL dengan menggunakan nanopartikel kitosan.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  kajian pustaka  yang  dilakukan  selama  2  bulan dari  bulan  Juli  sampai  dengan  Agustus. Kajian  pustaka  adalah  kegiatan  yang melibatkan  pencairan  dan  penelaahan artikel-artikel  ilmiah  sebagai  bahan pustaka yang memuat hasil-hasil penelitian  terdahulu.  Kajian  pustaka dilakukan  untuk  membangun  konsep yang menjadi dasar dalam tulisan ini.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Enkapsulasi
Enkapsulasi (penyalutan) merupakan proses  pembentukan  salut  dari  suatu partikel  untuk  mencapai  efek  tertentu yang  diinginkan,  seperti  imobilitas  atau isolasi  perlindungan  atau  stabilisasi, pelepasan terkontrol, dan perubahan sifat fisik  (Chan et  al., 2011),  proses pembentukan  lapisan  dengan  matrik hingga bagian dalam terlapisi seluruhnya, dan  terbentuk  dinding  kapsul  (Junaidi, 2018). Enkapsulasi probiotik telah diteliti untuk  meningkatkan  kelangsungan  hidup mereka  dalam  produk  makanan  dan saluran usus (Kholiso, 2016).
Enkapsulasi ditunjukkan untuk
menstabilkan sel, berpotensi untuk meningkatakan kelangsungan dan stabilitas mereka selama produksi, penyimpanan  dan  penanganan  (Gbassi dan Vandamme, 2012). Bahan inti dalam proses enkapsulasi dapat berupa senyawa atau  BAL.  Produk  yang  dihasilkan  dari proses mikroenkapsulasi dinamakan mikrokapsul  (Poshadri  dan  Aparna, 2010).  Enkapsulasi  dapat  meningkatkan
viabilitas  bakteri  probiotik  dibandingkan dengan  sel  bebas  tanpa  enkapsulasi. (Chandra-mouli et al., 2003). Banyak faktor yang mempengaruhi keberhasilan proses enkapsulasi  seperti  sifat  fisikokimia bahan  inti  dan  bahan  penyalut,  serta tahapan  dalam  enkapsulasi  (Marzuki, 2012).  Enkapsulasi  dikatakan  berhasil jika  bahan  yang  dienkapsulasi  memiliki viabilitas sel yang relatif tinggi dan sifat- sifat  fisiologis  yang  relatif  sama  dengan sebelum dienkapsulasi (Master, 1997).
Bahan  penyalut  yang  digunakan untuk enkapsulasi harus mampu memberikan  suatu  lapisan  tipis  yang kohesif dengan bahan inti, dapat bercampur  secara  kimia  dan  tidak bereaksi  dengan  bahan  inti.  Menurut Ningsih et  al. (2017),  enkapsulasi berbasis nanopartikel merupakan pendekatan yang efektif dalam memasukkan  senyawa  bioaktif  dalam bahan  pangan.  Kitosan  telah  terbukti dapat  dijadikan  sebagai  penyalut  karena memiliki  keunggulan,  seperti  bersifat non-toksik, baik dalam pengantaran obat, biodegradable ,  dan biocompatible ,  serta memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri (Amaliyah et al., 2018).

## Nanopartikel Kitosan
Aplikasi  nanoteknologi  bertujuan untuk  menghasilkan  material  berskala nanometer, mengeksplorasi, dan merekayasa karakteristik material tersebut,  serta  mendesain  ulang  material tersebut  ke  dalam  bentuk,  ukuran,  dan fungsi  yang  diinginkan  (Irianto  dan Muljanah, 2011). Nanopartikel merupakan  partikel  koloid  padat  dengan diameter  1-1000  nm  yang  mengandung makromolekuler  material  dan  dapat digunakan  untuk  pengobatan  sebagai penghantar  bat  yang  senyawa  aktifnya telah  terlarut,  terjerat,  dan  tersalut (Kurniasari dan Sri, 2017).
Polimer  yang  memudahkan  dalam penyiapan  nanopartikel  dapat  dipilih berupa polimer yang larut air (Irianto dan Muljanah, 2011), misalnya kitosan (Harahap, 2012), Nanokitosan merupakan kitosan  yang  memiliki  pertikel  yang berbentuk padat dengan ukuran sekitar 10 –  1000  nm  yang  terlarut  dan  terdispersi (Luntungan et  al., 2018).  Nanopartikel dari  bahan  polimer  yang biodegradable dan  biokompatibel  merupakan  salah  satu bahan  yang  baik  untuk  penghantar  obat karena  mudah  terserap  secara  utuh  di dalam  sistem  pencernaan  setelah  masuk ke  dalam  tubuh  (Wahyono  2010).  Hasil penelitian memperlihatkan bahwa kitosan memiliki  kemampuan  untuk  membuka secara  sementara  kait  antar  sel (tight junction) pada  membran  usus  (Bhardwaj dan Kumar, 2006; Martien et al ., 2008). Kitosan  merupakan  biopoli  amino sakarida linear alami  yang diperoleh dari deasetilasi  kitin  (Mardy et  al., 2016), mempunyai  rantai  tidak  linier  dengan rumus  (C 6 H 11 NO 4 )n,  tidak  berbau,  dan berwarna  putih  (Rachmania,  2011). Kitosan  merupakan  partikel  akhir  yang terbentuk  yang  dipengaruhi  oleh  derajat deasetilasi,  derajat  substitusi,  dan  berat molekul dari karbosimetil kitosan tersebut (Jayakumar et al., 2010).
Menurut  Ningsih et  al., (2017), pendekatan  efektif  dalam  memasukkan senyawa  bioaktif  dalam  bahan  pangan yaitu dengan enkapsulasi berbasi nanopartikel.  Menurut  Ahmad et  al.,
(2012), enkapsulasi nanopartikel bertujuan  untuk  meningkatkan  kelarutan karena  luas  permukaannya  yang  besar, mengontrol  pelepasan  zat  bioaktif  dalam tubuh,  dan  melindungi  dari  interaksi dengan zat lain dalam bahan pangan.
Salah  satu  material  atau  bahan penyalut  yang mendapat perhatian dalam nanoteknologi karena memiliki sifat yang khas  yaitu  kitosan  (Talu’mu,  2011). Kitosan  merupakan  polisakarida  yang dapat  diperoleh  dari  deasetilasi  kitin
(Ayumi,  2018).  Kitosan  mempunyai beberapa  sifat  yang  menguntungkan seperti  anti  mikroba, wound  healing , tidak  beracun,  murah, biokompatibel , biodegradable, dan  larut  dalam  air. Dalam bentuk mikro/nanopartikel kitosan mempunyai  banyak  keunggulan  yakni tidak toksik dan stabil selama penggunaan (Mannuela, 2016).
Beberapa metode telah digunakan untuk membuat sistem partikulat kitosan. Penentuan metode yang digunakan tergantung  faktor-faktor  seperti  ukuran partikel  yang  diinginkan,  stabilitas  kimia dan panas dari bahan aktif, reprodusibilitas  profil  kinetic  pelepasan produk  akhir  dan  toksisitas  residu  yang terkait dengan produk akhir (Agnihotri et al. , 2004). Nanopartikel terdiri dari bahan makromolekul  dan  dapat  digunakan untuk terapi sebagai pembantu ( adjuvant ) vaksin  atau  pembawa  obat,  yaitu  dengan melarutkan,
memerangkap,
mengenkapsulasi, menyerap atau menempelkan  bahan  aktif  secara  kimia. Polimer yang digunakan
untuk membentuk  nanopartikel  dapat  berupa polimer  sintetik  dan  alami  (Irianto  dan Muljanah, 2011).
Bakteri Asam Laktat Sebagai Probiotik Menurut FAO ( Food and Agriculture Organization) (2002), probiotik
didefinisikan sebagai mikroorganisme hidup yang bila diberikan dalam jumlah yang cukup akan memberikan  manfaat  kesehatan  pada inangnya.  Beberapa  manfaat  positif probiotik  terhadap  kesehatan  antara  lain dapat  meningkatkan  ketahanan  terhadap penyakit terutama infeksi usus dan diare, meningkatkan  imunitas  tubuh  membantu dalam pencernaan, mencegah kanker usus besar (Masood et al ., 2011), menurunkan gula  darah  (Iqbal et  al .,  2014),  dan
menurunkan  kolesterol  (Kumar et  al ., 2012).
Beberapa  spesies  BAL  setelah diteliti mempunyai potensi sebagai probiotik (Maunatin, 2012). Bakteri asam laktat  dapat  ditemukan  dalam  bahan pangan  (Wikandari et  al., 2012),  serta saluran  gastrointestinal  dan  urogenital manusia dan hewan.
Strain  BAL  probiotik  harus  dapat bertahan  melewati  saluran  pencernaan dan  dapat  mengkolonisasi  usus  untuk waktu  yang  lama  sampai  mendapatkan suatu  efek  bagi  kesehatan  (Tambunan, 2016).  Kebanyakan  BAL  tidak  hanya tumbuh  lebih  lambat  pada  pH  rendah, tetapi mungkin mengalami kerusakan dan hilangnya  viabilitas  jika  selnya  berada pada  kondisi  pH  yang  rendah.  Kondisi yang  sangat  asam  dapat  mengakibatkan kerusakan membran dan lepasnya komponen  intraseluler  dan  menyebabkan kematian  bakteri  (Harjuni  dan  Mulyadi, 2016).

## Enkapsulasi Probiotik
Salah  satu  cara  meningkatkan viabilitas  bakteri  probiotik  adalah  dengan proses  enkapsulasi.  Metode  enkapsulasi yang  digunakan  adalah  metode  ekstruksi untuk  menghindari  suhu  ekstrim  saat proses  enkapsulasi  yang  dapat  megurangi jumlah  maupun  viabilitas  bakteri.  Metode enkapsulasi  probiotik  yang  dipilih  yaitu metode  ekstrusi  dan  metode  gelasi  ionik. Metode  ekstrusi  dipilih  karena  selain menggunakan  alat  sederhana  berupa  jarum suntik,  metode  ini  juga  dipilih  dengan tujuan untuk menghindari suhu dan tekanan yang  ekstrim  pada  metode spray  drying (Anal  dan  Singh,  2007).  Metode  gelasi ionik dikarenakan prosesnya yang sederhana,  tidak  menggunakan  pelarut organik, dan dapat dikontrol dengan mudah (Mardliyati et al ., 2012).
Beberapa
penelitian telah membuktikan  bahwa  bakteri  probiotik dapat  bertahan  hidup  setelah  dienkapsulasi menggunakan nanopartikel kotosan. Hal ini
disebabkan  karena  efisiensi  enkapsulasi meningkat secara signifikan dengan
meningkatnya konsentrasi biopolimer (Castilla et  al .,  2010).  Viabilitas  probiotik terenkapsulasi  nanokitosan  masih  tinggi walaupun  setelah  diinkubasi  pada  pH rendah  meskipun  jumlah  populasinya cenderung  mengalami  sedikit  penurunan. Penurunan jumlah bakteri yang terjadi pada simulasi cairan asam lambung dikarenakan pH  lambung  yang  sangat  asam  yang  akan mempengaruhi  kekuatan  polimer  natrium alginat-kitosan sebagai matriks enkapsulasi bakteri asam laktat. (Ardianto, 2011)

## KESIMPULAN
Bakteri asam laktat dapat dienkapsulasi  dengan  nanopartikel  kitosan dengan metode ekstrusi yang akan menghasilkan mikrokapsul.

## SARAN
Perlu  adanya  penelitian  lanjut mengenai  berbagai  metode  enkapsulasi probiotik.

## DAFTAR PUSTAKA
Agnihotri,  S.A.,  Mallikarjuna,  N.N.  and Aminabhavi,  T.M.  2004.  Recent advances on chitosan-based micro- and nanoparticles in drug
delivery. Journal of controlled release. 100 (1) :5-28.
Agus,  A.  2016.  Kemampuan  Tumbuh Isolat  Bakteri  Asam  Laktat  Asal Saluran  Pencernaan  Broiler  Umur Tiga  Hari  Pada  Berbagi  Uji Probiotik  [skripsi].  FMIPA  UINA,
Makasar.
Anal,  A.K.  dan  Singh,  H.  2007.  Recent advances  in  microencapsulation  of probiotics for industrial applications  and  targeted  delivery. Trends in Food Science &
Technology . 18 , 240-251.
Amaliyah,  N.  2016.  Enkapsulasi  Asam
Sinamat dalam Nanopartikel Kitosan Sebagai Antibakteri. Prosiding  Seminar  Nasional  Sains dan  Enterpreneurship  III  Tahun 2016; Semarang, 20 Agustus 2016. Reorientasi Bioteknologi dan Pembelajarannya Untuk Menyiapkan  Generasi  Indonesia Emas Berlandaskan Entrepreneurship. Hlm 552-559. Ardianto A. 2011. Enkapsulasi
Lactobacillus  acidophilus  casei Dengan  Teknik  Ekstruksi  Sebagai Starter  Untuk  Pembuatan  Dadih
Susu Sapi . IPB. 1
Ayumi,  D.  2018.  Pembuatan  Dan Karakterisasi Nanopartikel Ekstrak  Etanol  Daun  Ekor  Naga ( Rhaphidophora  pinnata (L.f.)
Schott)  Menggunakan  Metode Gelasi  Ionik  [skripsi].  Fakultas Farmasi USU, Medan.
Bawole,  K.V.,  Umboh.  S.D.,  and  Tallei. T.E. 2018. Uji  Ketahanan Bakteri Asam  Laktat  Hasil  Fermentasi Kubis  Merah  (Brassica  oleracea L.)  Pada  pH  3. Jurnal  Mipa Unsrat Online . 7 (2): 20-23.
Castilla,  O.S.,  Calleros  C.L.,  Galindo, H,S,G., Ramirez. J.A. and Carter. 2010.  Textural  properties  of alginate-pectin MLN and survivability  of  entrapped  Lb. Casei in simulated gastrointestinal condition  and  in  yoghurt. Food Research International . 111-117.
Chandra  mouli,  V.,  Kailasapathy,  K.,
Peiris, P. and Jones, M., 2003. An improved method of microencapsulation and its evaluation to protect Lactobacillus  spp.  in  simulated gastric conditions. Journal of
microbiological  methods , 56 (1): 27-35.
Chan,  E.S.,  Wong.  S.L.,  Lee.  P.P.,  Lee. J.S., Ti. T.B., Zhang. Z., Poncelet. D.,  Ravindra.  P.,  Phan.  S.H.,  and Yim. Z.H. 2011. Effects of starch filler on the physical properties of lyophilized calcium–alginate
beads and the viability of
encapsulated  cells. Carbohydrate Polymers . 83 (1): 225-232.
Gbassi,  G.K.,  and  Vandamme.  T.,  2012.
Probiotic encapsulation technology: from microencapsulation to release into the gut. Pharmaceutics . 4 (1): 149- 163.
Halim,  C.N.,  dan  Zubaidah.  E.  2013. Studi kemampuan probiotik isolat bakteri  asam  laktat  penghasil eksopolisakarida  tinggi  asal  sawi asin (Brassica juncea). Jurnal Pangan  dan  Agroindustri . 1 (1): 129-137.
Harahap, Y. 2012. Preparasi dan
Karakterisasi Nanopartikel Kitosan  Dengan  Variasi  Asam.
[skripsi].  Fakultas  Teknik  UI,
Depok.
Harjuni,  F.,  and  Mulyadi.  A.  2016. Tolerance  of  Probiotic  Bacterial Candidate  From  Kakap  Putih  on Ph  and  Bile  Salt. Jurnal  Online Mahasiswa  Fakultas  Perikanan dan  Ilmu  Kelautan  Universitas Riau . 3 (2): 1-10.
Indriyati,  A.S.  2010.  Isolasi  Dan
Karakterisasi Bakteri Asam Laktat  (BAL)  Dari  Susu  Formula Balita Yang Berpotensi Menghasilkan Substansi Antimikroba  [skripsi].  Falkutas
Sains  dan  Teknologi  UINSK, Yogyakarta.
Iqbal,  M.Z.,  Qadir.  M.I.,  Hussain.  T., Janbaz.  K.H.,  Khan.  Y.H.,  and Ahmad.  B.  2014.  Probiotics  and their  beneficial  effects  against various diseases.
Pak. J.Pharm.Sci. 27 (2):405-415.
Irianto,  H.E.,  dan  Muljanah.  I.  2011.
Proses  dan  aplikasi  nanopartikel kitosan sebagai penghantar obat. Squalen: Buletin Pascapanen dan Bioteknologi
Kelautan  dan  Perikanan . 6 (1):  1- 8. Fakultas Farmasi USU, Medan.
Jayakumar. R., Prabaharam. M.,
Naair.S.V.,  Tokura.  S.,  Tamura. H.,  Selvamurugan.  N.  2010. Novel  carboxymethyl  derivatives of  chitin  and  hitosan  materials antheir  biomedical  applications. Progress in Material Science . 55 : 675-709.
Junaidi, M. 2018. Uji Viabilitas Mikroenkapsulasi Lactobacillus acidophilus Menggunakan Polimer  Natrium  Alginat-Kitosan Terhadap  Simulasi  Cairan  Asam Lambung [tesis]. Fakultas Farmasi USU, Medan.
Kholisoh,  G.  2016.  Uji  Viabilitas Enkapsulasi Lactobacillus  casei Menggunakan Matriks Kappa
Karagenan  Terhadap  Simulasi Cairan  Asam  Lambung  [skripsi]. Fakultas  Kedoktersan  Dan  Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Kurniasari,  D.,  dan  Atun.  S.,  2017.
Pembuatan dan Karakterisasi Nanopartikel Ekstrak Etanol Temu Kunci (Boesenbergia pandurata)  pada  Berbagai  Variasi
Komposisi  Kitosan. Jurnal  Sains
Dasar . 6 (1): 31-35.
Luntungan, A.H., Mandey. L.C., Rumengan.  I.F.,  and  Suptijah,  P. 2018. The Effects of Nanochitosan Coating to Phenolic Compounds of Basil Leaf (Ocimum basilicum L) Extracts. Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan . 5 (2): 20-25.
Mardliyati,  E.,  Muttaqien.  S.E.,  dan
Setyawati.  D.R.  2012.  Sintesis Nanopartikel Kitosan-Trypoly Phosphate  dengan  Metode  Gelasi Ionik:  Pengaruh  Konsentrasi  dan Rasio Volume Terhadap Karakteristik  Partikel. Prosiding Pertemuan Ilmiah Ilmu Pengetahuan dan Teknologi Bahan;  Serpong, 3 Oktober 2012. Hlm 90-93. Mardy,  D.C.,  Sudjari.  S.,  dan  Rahayu. S.I. 2016. Perbandingan Efektivitas Kitosan (2-Acetamido- 2-Deoxy-D-Glucopyranose)  dan Nano Kitosan terhadap Pertumbuhan Bakteri Enterococcus  faecalis  secara  In Vitro. Majalah Kesehatan FKUB . 2 (4) : 229-240.
Martien,  R.,  Loretz.  B.,  Sandbichler. A.M., BernkopSchnűrch. A. 2008.
Thiolated  chitosan  nanoparticles: transfection  study  in  the  Caco-2 differentiated cell culture. Nanotech ., 19 : 1-9.
Marzuki, Ismail. 2012. Pelepasan Terkendali Kalium Klorida dalam Mikrosfer Kitosan dengan Metode
Tautan  Silang  [skripsi].  FT  UI, Depok.
Master,  K.,  1997.  Spray  drier. Baker,
CGJ Industrial Drying for Foods.
1st  ed.  London:  Academic  and Profesional .
Masood, M. I., Qadir. M. I., Shirazi. J.H.,
and  Khan,  I.U.  2011.  Beneficial effects of Lactic Acid Bacteria on human beings. Critical Rev.Microb . 37 (1): 91–98. Maunatin, A., dan Khanifa. K. 2013. UJI POTENSI PROBIOTIK Lactobacillus Plantarium SECARA IN VITRO. Alchemy. 2 (1): 26-34.
Ningsih,  N.,  S.  Yasni.,  S.  Yuliani.  2017.
Sintesis Nanopartikel Ekstrak Kulit  Manggis  Merah  dan  Kajian Sifat Fungsional Produk Enkapsulasinya. J.Teknol.  dan
Industri Pangan . 28 (1): 27-35.
Poshadri,  A.,  dan  Aparna  Kuna.  2010. Microencapsulation Technolog: A Review. J.Res.  Angrau. 38 (1):86- 102.
Rachmania,  D.  2011.  Karakteristik  Nano
Kitosan Cangkang Udang Vannamei ( Litopenaeus vannamei ) Dengan Metode Gelasi Ionik [skripsi]. FPIK ITB, Bogor.
Rembulan,  G.  D.,  Sunarti.  T.  C.,  and
Meryandini. A. 2015. Penambahan Bakteri Asam Laktat Terenkapsulasi  Untuk  Menekan Pertumbuhan Bakteri Patogen Pada Proses Produksi Tapioka. Jurnal  Teknologi  dan
Industri Pangan. 26 (1): 34-43.
Talu’mu,  M.  D.  2016.  Sintesis  Kitosan
Nanopartikel dengan Metode
Sonokimia, Gelasi Ionotropik, dan Kompleks Polielektrolit. Jurnal Progres  Kimia  Sains , 1 (2):  130- 137.
Tambunan, A. 2016. Karakteristik Probiotik  Berbagai  Jenis  Bakteri Asam Laktat (Bal) Pada Minuman Fermentasi  Laktat  Sari  Buah Nanas [skripsi]. Fakultas Pertanian  Universitas  Lampung, Bandar Lampung.
Wahyono,  D.  2010.  Ciri  nanopartikel kitosan  dan  pengaruhnya  pada ukuran  partikel  dan  efisiensi penyaluran ketoprofen [tesis]. Program Pascasarjana IPB, Bogor.
Wikandari,  P.  R.,  Marsono.  Y.,  and Rahayu,  E.S.,  2012.  Karakterisasi bakteri  asam  laktat  proteolitik pada bekasam. Jurnal Natur
Indonesia . 14 (02): 120-125.