## ANALISIS KORELASI ANTARA KANDUNGAN FENOL TOTAL DENGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAN FRAKSI
Abelmoschus manihot L. TERHADAP Escherichia coli
Bella Jessica Magdalena Kambey 1) , Sri Sudewi 1) , Imam Jayanto 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
This study  aims to  determine  the total  phenol  content  and Minimum  Bactericidal  Concentration  (MBC) and the correlation of antibacterial activity with the total phonel content of the extract and the fraction of Abemoschus  manihot  L.  against  Escherichia  coli.  Gallic  acid  was  used  as  a  comparison  standard  in measuring the total phenol content using a UV-Vis spectrophotometer. The total phenolic conten of gedi leaf extract and fraction from Southeast Minahasa were ethanol extract 230.23 ± 0.008 µg GAE / g, n- hexane  fraction  238.37  ±  0,024  µg  GAE  /  g,  ethyl  acetade  fraction  269.77  ±  0.016  µg  GAE  /  g,  and ethanol  fraction  221.51  µg  GAE  /  g.  The  extracts  and  fractions  were  tested  for  antibacterial  activity against  E.  coli    by  dilution  method  using  Nutrient  Broth  (NB)  media  at  concentrations  of  1000  µg  / mL,500 µg / mL, and 250 µg / mL. MBC test data (Minimum Bactericidal Concentration) were analyzed using Kolmogrov-smirnov, then continued with pearson correlation test. The result of the normality test showed that the extract and the A.manihot fraction had significantly distributed normal vlue (p> 0.05). Analysis Correlation of Pearson of extracts and fraction of A. manihot with antibacterial activity against E.coli  showed  significant  result  (p  <0.05).  71%  of  antibacterial  activity  is  influenced  by  total  phenolic and the rest is contribution of other compounds that have the potential as antibacterial.
Keywords: Phenol Total, Correlation, Escherichia coli, Green Gedi

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan  fenol  total  dan  Kadar  Bunuh  Minimum  (KBM) serta korelasi aktivitas antibakteri dengan kandungan fenol total ekstrak dan fraksi Abelmoschus manihot L.  terhadap Escherichia  coli .  Asam  galat  digunakan  sebagai  standar  pembanding  dalam  mengukur kandungan fenol total menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Kandungan total fenolik pada ekstrak dan fraksi  daun  gedi  hijau  dari  Minahasa  Tenggara  yaitu  ekstrak  etanol  sebesar  230,23  ±  0,008  µg  GAE/g, fraksi n-heksan 238,37 ± 0,024 µg GAE/g, fraksi etil asetat 269,77 ± 0,016 µg GAE/g, dan fraksi etanol 221,51  µg  GAE/g.  Ekstrak  dan  fraksi  diuji  aktivitas  antibakteri  terhadap E.coli dengan  metode  dilusi menggunakan  media Nutrient  Broth (NB)  pada  konsentrasi  1000  µg/mL,  500  µg/mL,  dan  250  µg/mL. Data  uji  KBM  (Konsentrasi  Bunuh  Minimum)  dianalisis  menggunakan  Kolmogrov-smirnov,  kemudian dilanjutkan  dengan  uji  korelasi  pearson.  Hasil  uji  normalitas  menunjukkan  bahwa  ekstrak  dan  fraksi A.manihot memiliki nilai signifikan terdistribusi normal (p > 0,05). Analisis korelasi pearson ekstrak dan fraksi A.manihot dengan  aktivitas  antibakteri  terhadap E.coli menunjukkan  hasil  signifikan  (p  <0,05). 71% aktivitas antibakteri dipengaruhi oleh fenolik total dan sisanya merupakan kontribusi senyawa lain yang berpotensi sebagai antibakteri.
Kata kunci : Fenol Total, Korelasi, Escherichia coli, Gedi Hijau

## PENDAHULUAN
Abelmoschus  manihot L.  atau  yang dikenal  dengan  nama  daerah  gedi  adalah salah  satu  tumbuhan  dari  suku  Malvaceae. Daun  gedi  mudah  tumbuh  dengan  cara  stek batang  pada  tanah  gembur.  Di  Sulawesi Utara  masyarakat  mengenal  dua  jenis Abelmoschus  manihot L.  yaitu  gedi  merah dan  gedi  hijau.  Daun  gedi  hijau  dapat dimanfaatkan  oleh  masyarakat  Manado sebagai  bahan  makanan  yang  dikenal sebagai Bubur Manado (Tinutuan), sedangkan untuk daun gedi merah digunakan  masyarakat  untuk  mengobati penyakit(Mamahit dan Soekarno, 2010).
Senyawa  Fenolik  adalah  senyawa senyawa  yang  memiliki  gugus  hidroksil yang  menempel  pada  cincin  aromatik (Vermerris  dan  Nicholson,  2006).  Fenol telah  dipelajari  secara  ekstensif  sebagai desinfektan  yang  mempunyai  aktivitas antibakteri berspektrum luas terhadap bakteri  Gram  positif  dan  Gram  negative. Dalam  konsentrasi  tinggi,  kandungan  fenol menembus  dan  mengganggu  dinding  sel bakteri dan mempresipitasi protein dalam sel bakteri.  Dalam  konsentrasi  yang  lebih rendah,  fenol  menginaktifkan  sistem  enzim penting  dalam  sel  bakteri  (Oliver  dkk, 2001).  Jain  dan  Bari  (2010)  menyatakan bahwa  batang  dan  tanaman  gedi  memiliki aktivitas anti-inflamatori dan antibakteri.
Salah  satu  cara  pengendalian  terhadap Escherichia coli dapat menggunakan tanaman  yang  memiliki  kandungan  kimia alami  sebagai  antibakteri  sehingga  di harapkan  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri E.coli (Sutarmi S,1993).
Berdasarkan  perihal  di  atas  untuk mengoptimalkan tanaman  Indonesia sebagai
antibakteri,  maka  penulis  tertarik  untuk melakukan  penelitian  yang  berjudul  analisis korelasi antara kandungan fenol total dengan aktivitas  antibakteri  ekstrak  dan  fraksi Abelmoschus manihot L. terhadap Escherichia coli .

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat  dan Bahan
a. Alat Alat-alat ukur analitis yang digunakan  untuk penelitian  ini  ialah spektrofotometer  uv-vis  (Shimadzu  00780), Komputer  pengolah  data  (Acer  Aspie  ES 11),  Alat-alat  gelas  ,  Vortex  (Mixer Hwashin),  Autoklaf  ,  Inkubator  (Ecocell), Alumunium Foil, Mikropipet, Neraca analitik,  Waterbath  (Julabo),  Corong  pisah, LAF, Blender (Philips).
b. Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah daun gedi dari MITRA, dan  Bahan-bahan  lain  yang  digunakan antara  lain  :  N-Heksana  teknis,  Etil  asetat teknis,  Etanol  teknis,  Nutrien  Broth, Aquades,  Escherichia  coli  yang  diperoleh dari  Laboratorium  Farmasi  Unsrat,  Asam galat,  Nutrient  Broth  (NB),  Nutrient  Agar (NA), Antibiotik Ciprofloxacin (Merk Ciprofloxacin),  Larutan  standar  McFarland, NaCl  0,9%,  DMSO  10%,  Follin  ciocalteu, Natrium karbonat.

## Ekstraksi
Sebanyak  250  g  simplisia  dimasukkan  ke dalam wadah toples dan kemudian ditambahkan etanol 96%. Ekstraksi
dilakukan  dengan  cara  maserasi  selama  3 hari  dengan  beberapa  kali  pengocokan. Ekstrak hasil maserasi kemudian dipekatkan
dengan  rotary  evaporator  hingga  terbentuk ekstrak kental.

## Fraksinasi
Sebanyak  10  g  ekstrak  etanol Abelmoschus manihot L. dimasukkan kedalam  Erlenmeyer  dan  dilarutkan  dengan pelarut  etanol  sebanyak  100  mL. Setelah sampel  larut,  sampel  dimasukan  ke  dalam corong  pisah  dan  ditambahkan  pelarut  n- heksan sebanyak 100 mL. Sampel kemudian dikocok dalam corong pisah hingga homogen.  Sampel  dibiarkan  selama  10-15 menit  hingga  terdapat  dua  lapisan  air  (air pada  lapisan  bawah  dan  n-heksan  pada lapisan  atas).  Masing-masing  kedua  lapisan air  dan  n-heksan  ditampung  dalam  wadah yang berbeda. Lapisan n-heksan selanjutnya dievaporasi menggunakan rotary evaporator hingga  kering  lalu  ditimbang  dengan timbangan  analitik  dan  diperoleh  fraksinat. Perlakuan  yang  sama  terhadap  pelarut  etil asetat dan etanol.

## Dilusi
Metode  dilusi  cair  dilakukan  dengan menyiapkan  beberapa  tabung  reaksi  yang sudah  steril,  larutan  uji  dan  bakteri  uji sebagai  control  negative,  larutan  antibiotic pembanding  (Ciprofloxacin)  dan  bakteri  uji sebagai control positif. Selanjutnya tiap-tiap tabung  diisi  dengan  1,4  mL  medium Nutrient Broth . Selanjutnya ditambahkan 0,5 mL larutan uji pada tabung reaksi di vortex .
Kemudian
masing-masing
tabung
ditambahkan  0,1  mL  suspensi  bakteri e.coli dan  di vortex. Sebelum  diinkubasi,  setiap tabung  dilusi  diamati  seksama  dan  diukur absorbansi  pada  spektrofotometer  UV-VIS panjang  gelombang  600  nm.  Kemudian
seluruh  tabung  diinkubasi  pada  suhu  37°C selama  24  jam.  Setelah  inkubasi,  setiap tabung  dilusi  diamati  seksama  dan  diukur absorbansi  kembali  pada  spektrofotometer UV-VIS  pada  panjang  gelombang  600  nm. Dibandingkan  hasil  pengamatan  kekeruhan antara  sebelum  dan  sesudah  inkubasi  serta dibandingkan  nilai  absorbansi  sebelum  dan sesudah inkubasi, bertambahnya nilai absorbansi  setelah  inkubasi  menunjukan adanya pertumbuhan sel bakteri yang hidup, sedangkan  konstan  dan  berkurangnya  nilai absorbansi  setelah  inkubasi  menunjukan tidak  adanya  pertumbuhan  sel  bakteri  yang hidup  sehingga  dapat  disimpulkan  titik konsentrasi  ini  adalah  KHM  (Konsentrasi Hambat  Minimal)  yang  dapat  menghambat pertumbuhan. Selanjutnya untuk membuktikan  apakah  sampel  memiliki kemampuan  membunuh,  maka  dilakukan penentuan KBM (Konsentrasi Bunuh Minimal)  yaitu  dengan  mengambil  1  ose dari masing-masing tabung kemudian diinokulasi  pada  media Nutrient  Agar dalam cawan petri dan diinkubasi selama 24 jam  pada  suhu  37 o C.  Replikasi  dilakukan sebanyak  3  kali.  Setelah  24  jam  diamati adanya  pertumbuhan  bakteri  berarti  sampel bersifat  bakteriostatik,  sedangkan  apabila tidak  ada  pertumbuhan  bakteri  berarti sampel bersifat bakterisidal.
Penentuan Kandungan Fenol Total
Ekstrak dan Fraksi Abelmoschus manihot L.
a. Penentuan Operating Time
Sebanyak  300  µL  larutan  asam  galat konsentrasi  30  µg/mL  ditambah  1,5  mL reagen  Folin  Ciocalteu  25  %,  kemudian digojog  dan  didiamkan  selama  3  menit.  Ke
dalam  larutan  tersebut  ditambahkan  1,2  mL larutan  Natrium  Karbonat  (Na 2 CO 3 )  5    %, digojog homogen, dan diukur absorbansinya dalam  rentang  waktu  0-90  menit  pada panjang  gelombang  750  nm  (Thesalonika dkk, 2018).
b. Penentuan panjang gelombang absorbansi maksimum
Sebanyak  300  µL  larutan  asam  galat konsentrasi  30  µg/mL  ditambah  1,5  mL reagen  Folin-Ciocalteau  25  %,  kemudian digojog  dan  didiamkan  selama  3  menit.  Ke dalam  larutan  tersebut  ditambah  1,2  mL larutan  Natrium  karbonat  5  %,  digojog homogen,  dan  didiamkan  pada  suhu  kamar pada  range operating  time, kemudian absorbansinya diukur pada panjang gelombang  700-800  nm  (Thesalonika  dkk, 2018).
c. Pembuatan kurva baku asam galat
Sebanyak  300  µL  larutan  asam  galat konsentrasi  20,  30,  40,  50,  dan  60  µg/mL masing-masing dimasukkan ke dalam tabung,  kemudian  ditambah  1,5  mL  reagen Folin  Ciocalteau  25  %  dan  digojog.  Setelah didiamkan  selama  3  menit,  masing-masing larutan  ditambah  1,2  mL  larutan  Natrium Karbonat  2  %,  digojog  homogen  dan didiamkan  pada  range operating  time pada suhu kamar. Semua larutan diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang absorbansi  maksimum,  kemudian  di  buat kurva kalibrasi hubungan antara konsentrasi asam  galat  (µg/mL)  dengan  absorbansi (Thesalonika termodifikasi, 2019).
d. Penentuan kandungan total fenolik ekstrak daun gedi hijau
Sebanyak  10,0  mg  fraksi  dari  masing- masing  fraksi  daun  gedi  hijau  dilarutkan sampai  volume  10,0  mL  akuades.  Larutan fraksi  yang  diperoleh  dipipet  sebanyak  300 µL,  dan  ditambah  reagen  1,5  mL  Folin- Ciocalteau  25  %  dan  digojog,  didiamkan selama  3  menit,  ditambah  1,2  mL  pelarut Natrium  Karbonat  (Na 2 CO 3 )  5  %  dan didiamkan  lagi  pada  range  operating  time pada suhu kamar. Absorbansi ekstrak diukur pada panjang gelombang maksimum. Perhitungan kandungan fenolik total menggunakan rumus berikut:
TPC =
Keterangan: c  = konsentrasi fenolik (nilai x) v  = volume ekstrak yang digunakan (mL) fp = faktor pengenceran g  = berat sampel yang digunakan (g)

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi dan Fraksinasi
Sebanyak  250 gram daun gedi hijau maka  diketahui  jumlah  rendemen  dari Minahasa  Tenggara  sebesar  7,23%.  Proses fraksinasi  pada  penelitian  ini  dilakukan dengan  metode  partisi  dengan  alat  yang digunakan  adalah  alat  yang  sederhana  yaitu corong  pisah  maka  diketahui  jumlah rendemen    masing-masing  fraksi  n-heksan sebesar  8,42  %,  fraksi  etil  asetat  sebesar 15,12 %, dan fraksi etanol sebesar 32,47%.

## Operating time
Berdasarkan  hasil  pengukuran  yang diperoleh, absorbansi yang stabil pada menit ke-30 sehingga dapat disimpulkan Operating  time untuk  penetapan  kandungan total  fenolik  ekstrak  daun  gedi  hijau  adalah
0.443 0.4 0.42 0.44 0.46 650 700 750 800 A b sor b an si Panjang gelombang (nm) 0 100 200 300 Ekstrak etanol Fraksi n- heksan Fraksi etil asetat Fraksi etanol K an d u n gan t o tal fen o l
(µ g G A E/ g) Sampel y = 0.0086x + 0.1615 R² = 0.995 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 0 50 100 A b sor b ansi konsentrasi (µg/mL)
30  menit.  Penetapan Operating  time bertujuan untuk mendapatkan waktu pengukuran  pada  saat  reaksi  telah  berjalan optimal  yang  ditandai  dari  absorbansi  yang stabil,  sehingga  dapat  memaksimalkan pengukuran (Pangestuty, 2016).
Gambar 1. Panjang Gelombang Maksimum
Hasil  panjang  gelombang  maksimum  pada konsentrasi  30  µg/mL  asam  galat  diperoleh panjang  gelombang  maksimum  750  nm dengan hasil absorbansi 0,443.

## Penentuan Kurva Baku dan Linearitas
Hasil  pengukuran  persamaan  regresi linear  dari  kurva  kalibrasi  yang  diperoleh adalah  y  =  0.0086x  +  0.1615  dengan koefisien  korelasi  R²  =  0.995.  persamaan kurva  kalibrasi  merupakan  hubungan  antara sumbu x  dan  sumbu  y.  sumbu x  dinyatakan dengan konsentrasi yang diperoleh
sedangkan  sumbu  y  merupakan  absorbansi atau serapan yang diperoleh. Harga koefisien  korelasi  menyatakan  hubungan yang  linier  antara  konsentrasi  dengan serapan  yang  dihasilkan.  Berdasarkan  hasil r 2 yang  diperoleh  bahwa  koefisien  korelasi memberikan  hasil  yang  linear  karena memenuhi kriteria yang dapat diterima yaitu 0,99 (Miller, 2005).

## Penentuan  Kandungan  Total  Fenolik Ekstrak dan Fraksi Daun Gedi Hijau
Perhitungan  kandungan  total  fenolik yang  diperoleh  dari  masing-masing  ekstrak dan  fraksi  daun  gedi  hijau  menunjukkan bahwa  fraksi  etil  asetat  memiliki  nilai absorbansi tertinggi yaitu 269,77 µg GAE/g; fraksi n-heksan yaitu 238,37 µg GAE/g; dan ekstrak  etanol  yaitu  230,23  µg  GAE/g  dan terkecil fraksi etanol yaitu 221,51 µg GAE/g . Berdasarkan hasil yang diperoleh,
membuktikan  bahwa  pelarut  etil  asetat paling efektif dalam mengikat senyawa aktif yang terdapat pada ekstrak daun Abelmoschus  manihot L.  dan  senyawa  yang terkandung  dalam  gedi  lebih  mudah  larut dalam pelarut etil asetat.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Hasil  perhitungan  nilai  ∆OD,  nilai negative ∆OD yang terkecil yaitu fraksi etil
asetat  yaitu  sebesar  -0.029,  fraksi  n-heksan sebesar  -0.155,  dan  untuk  nilai  positif  yaitu pada  ekstrak  etanol  sebesar  0.082  yang terletak  pada  konsentrasi  1000  µg/mL  dan pada  fraksi  etanol  sebesar  0.097.  Ini menunjukkan  bahwa  terjadi  penurunan  nilai OD  sebelum  inkubasi  dan  sesudah  inkubasi pada  setiap  perlakuan  yang  telah  diberi ekstrak    dan  fraksi  daun Abelmoschus manihot L.  dan  pada  perlakuan  control positif  dibandingkan  dengan  perlakuan control  negative.  Dalam  perlakuan  control negative tanpa pemberian ekstrak dan fraksi Abelmoschus manihot L. mengalami peningkatan nilai OD artinya pada perlakuan control negative terjadi peningkatan pertumbuhan bakteri E.coli.
Hasil  pengujian  MBC  (Konsentrasi bunuh  minimum)    menunjukkan  bahwa jumlah  rata-rata  koloni  paling  banyak terdapat  pada  perlakuan  control  negative (tanpa  pemberian  ekstrak Abelmoschus manihot L.)  yaitu  sebanyak  334  koloni sedangkan  jumlah  rata-rata  koloni  paling sedikit  terdapat  pada  konsentrasi  1000 µg/mL  dan  control  positif  yaitu  sebanyak  0 koloni.  Penurunan  jumlah  koloni  bakteri  ini dikarenakan  pada  konsentrasi  yang  semakin tinggi  mengandung  senyawa  antibakteri yang lebih banyak sehingga semakin banyak senyawa  ajyntibakteri  yang  diserap  koloni bakteri  dan  menyebabkan  pertumbuhan koloni bakteri menjadi terhambat (Noorhamdani et al , 2011).
Korelasi  Antara  Kandungan  Fenol  Total dengan Aktivitas Antibakteri
Hasil  data  uji  kbm  dianalisis  dengan uji  Kolmogrov  -  smirnov,  dan  dilanjutkan dengan uji Korelasi Pearson serta uji Regresi
Linier  Sederhana.  Uji  kolmogrov  smirnov data  hasil  uji  KBM  ekstrak  dan  fraksi Abelmoschus  manihot L  bertujuan  untuk mengetahui apakah nilai residual berdistribusi  normal  atau  tidak.  Model regresi  yang  baik  adalah  memiliki  nilai residual  yang  berdistribusi  normal  jika  nilai signifikasi  >  0,05.  Hasil  uji  kolmogrov smirnov  yaitu  ekstrak  etanol  sebesar  0,761, fraksi  n-heksan  sebesar  0,287,  fraksi  etil asetat  sebesar  0,547,  fraksi  etanol  sebesar 0,569 memiliki nilai signifikasi > 0,05 yang berarti  nilai  residual  berdistribusi  normal  . Hal  ini  berarti  data  hasil  uji  KBM  yang ditunjukkan  dengan  jumlah  pertumbuhan koloni  bakteri E.coli pada  setiap  perlakuan signifikan normal sehingga dapat dilanjutkan  dengan  uji  Korelasi  Pearson dengan  taraf  kepercayaan  5%.  Hasil  uji korelasi pearson menunjukkan nilai korelasi terbesar  yaitu  fraksi  etil  asetat  signifikasi yaitu  0,003  (p  <0.05),  fraksi  n-heksan signifikansi  0,004  (p  <0,05),  ekstrak  etanol signifikansi  0,006  (p<0,05),  fraksi  etanol signifikasi  0,009  yang  berarti  terdapat hubungan  antara  peningkatan  konsentrasi ekstrak dan fraksi Abelmoschus manihot L. dengan  penurunan  jumlah  koloni E.coli. Besar  koefisien  korelasi  pearson  antara konsentrasi  dengan  jumlah  koloni  bakteri yaitu  ekstrak  etanol  sebesar  R=  -0,673, fraksi n-heksan sebesar R= -0,695, fraksi etil asetat  sebesar  R=  -0,714,  fraksi  etanol sebesar  R=  -0,651  .  Tanda  negative menunjukkan  hubungan  yang  terbalik  yang berarti  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak Abelmoschus  manihot L.  yang  diberikan maka  semakin  sedikit  jumlah  koloni  bakteri E.coli yang  tumbuh.  Dengan  kata  lain semakin  besar  kandungan  fenolik  totalnya,
semakin  tinggi  aktivitas  antibakterinya. Berdasarkan hasil korelasi pearson diketahui bahwa nilai korelasi Fraksi n-heksan sebesar 0,695  yang  berarti  bahwa  peran  kontribusi senyawa fenolik terhadap aktivitas antibakteri  sebesar  69  %,  Fraksi  etil  asetat sebesar  0,714  yang  berarti  bahwa  peran kontribusi senyawa fenolik terhadap aktivitas  antibakteri  sebesar  71  %,  Ekstrak etanol  sebesar  0,673  yang  berarti  peran kontribusi senyawa fenolik terhadap aktivitas  antibakteri  sebesar  67  %  Fraksi etanol  sebesar  0,651  yang  berarti  bahwa peran  kontribusi  senyawa  fenolik  terhadap aktivitas  antibakteri  sebesar  65  %.  Hal  ini membuktikkan bahwa kandungan fenol total ekstrak  dan  fraksi Abelmoschus  manihot L. memiliki  aktivitas  antibakteri.  Menurut Pelczar  dan  Chan  (2008),  menyatakan bahwa  fenol  bekerja  melalui  koagulasi protein dan perusak membrane sel. Persenyawaan fenol dapat bersifat bakteriosidal  dan  bakteriostatis  tergantung dengan konsentrasi yang digunakan. Berdasarkan hasil yang diperoleh menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat menunjukkan  hasil  terbaik,  hal  ini  diduga etil  asetat  memiliki  sifat  hidrofilik  dan lipofilik sehingga polaritas menjadi optimum dan zat antimikroba yang diperoleh  menjadi  maksimal  (Harborne, 1987).

## KESIMPULAN
1. Kandungan  fenolik  total  ekstrak  dan fraksi Abelmoschus manihot L. memperoleh  hasil  untuk  ekstrak  etanol sebesar 230,23 ± 0,008 µg GAE/g, fraksi n-heksan  sebesar  238,37  ±  0,024  µg GAE/g, fraksi etil asetat sebesar 269,77 ±
0,016 µg GAE/g dan fraksi etanol sebesar 221,51 ± 0,001 µg GAE/g.
2. Berdasarkan hasil uji dilusi menunjukkan bahwa  jumlah  rata-rata  koloni  paling sedikit  terdapat  pada  fraksi  etil  asetat pada konsentrasi 1000 µg/mL.
3. Korelasi  antara  aktivitas  antibakteri dengan kandungan fenol total ekstrak dan fraksi Abelmoschus  manihot L.  terhadap Echerichia  coli menunjukkan  hasil  uji kolmogrov  smirnov  data  hasil  uji  kbm memiliki  nilai  signifikasi  terdistribusi normal  atau  (p>0.05)  yang  berarti signifikan  dan  dapat  dilanjutkan  dengan uji  Korelasi  Pearson  dengan  taraf kepercayaan  5%  dan  memperoleh  hasil signifikan  0,003  (p  <0,05).  Kandungan fenolik  total  mempengaruhi  besarnya aktivitas  antibakteri  yaitu  ekstrak  etanol sebesar  67  %  aktivitas  antibakteri dipengaruhi  oleh  fenolik  total,  fraksi  n- heksan sebesar 69 % aktivitas antibakteri dipengaruhi  oleh  fenolik  total,  fraksi  etil asetat  sebesar  71  %  aktivitas  antibakteri dipengaruhi  oleh  fenolik  total,  dan  fraksi etanol  sebesar  65  %  aktivitas  antibakteri dipengaruhi fenolik total.

## SARAN
Disarankan
untuk melakukan penelitian  lebih  lanjut  tentang  korelasi antara  kandungan  total  fenol  ekstrak  dan fraksi  daun  gedi  hijau  ( Abelmoschus manihot L.). terhadap bakteri yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Harborne,  J.B.  2006. Metode  Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan .  ITB Press, Bandung
Jain,  P.  S.,  S.  B.  Bari.  2010.  Anti- inflammatory Activity of Abelmoschus manihot Extracts. International Journal of Pharmacology . 6 (4): 505-509
Mamahit  L.P.  Soekarno,N.H.,  2010.  Satu Senyawa  Organic  yang  Diisolasidari Daun Gedi ( Albemoschus manihot L.
Medik) Asal Sulawesi Utara.
Chemistry Progress , 3 (1) : 45.
Noorhamdani,  A.  S.,  Chielwin,  I.  G.  2010.
Uji  Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak
Etanol Bawang Putih ( Allium sativum ) Terhadap Pertumbuhan Streptoccocus mutans Penyebab Karies  Secara  In  Vitro.  Universitas Brawijaya, Malang
Oliver, S. P., B. E. Gillespie, M. J. Lewis, S. J. Ivey, R. A. Almeida, D. A. Luther, D.  L.  Johnson,  K.  C.  Lamar,  H.  D. Moorehead  and  H.  H.Dowlen.  2001. Efficacy  Of  A  New  Premilking  Teat Disinfectant  Containing  A  Phenolic Combination  For  The  Prevention  Of Mastitis. J. Dairy Sci . 84 (3) : 1545- 1549.
Pangestuty, A. 2016. Uji Aktivitas
Antioksidan  dan  Penentapan  Kadar
Fenolik  Total  Fraksi  Etil  Asetat Ekstrak  Buah  Buni  dengan  Metode 2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil  (DPPH) dan Metode Folin-Ciocalteu [skripsi]. Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Pelczar, M. J., Chan, E. C. S., 2008. Dasar- Dasar  Mikrobiologi  2. UI  Press, Jakarta
Rohman,  A.  2007. Kimia  Farmasi  Analisis . Pustaka Pelajar, Yogyakarta
Sutarmi,  S.  1993. Botani  Umum .  Angkasa Bandung, Bandung
Thesalonika,  G.  A.,  Sudewi,  S.,  Rorong,  J. A.  2018.  Optimasi  dan  Validasi
Metode  Analisis  dalam  Penentuan Kandungan  Total  Fenolik  pada Ekstrak Daun Gedi Hijau ( Abelmoschus  manihot L.)  yang
Diukur dengan Spektrofotometer UV-Vis. Jurnal  Ilmiah  Farmasi .7 (3)
: 14-21
Vermerris,  W.  and  Nicholson,  R.  2006.
Phenolic  Compound  Biochemistry ,
Springer, The Netherlands.