## Research Articles
Actinomycetes yang diisolat dari mangrove Rhizophora apiculata di perairan Tanjung Api-api, Sumatera Selatan
Tika Gustiana, Rozirwan * , T. Zia Ulqodry
Jurusan Ilmu Kelautan FMIPA Universitas Sriwijaya, Indralaya, Sumatera Selatan, Indonesia
Received 27 Mei 2021; Accepted 15 Agustus 2021; Published 22 September 2021
Keywords: Actinomycetes; Identification; Isolation;
Mangrove Rhizophora apiculata ;
Tanjung Api-api
ABSTRACT: Actinomycetes  is  one  type  of  endophytic  bacteria  that  lives  in  the mangrove plant tissues. Bioactive compound which form Actinomycetes can be use as potential medicine in medic industry and pharmacy sector. This study aimed to isolate and identify the kinds of the Actinomycetes bacteria at mangrove Rhizophora apiculata from  Tanjung  Api-api  waters,  South  Sumatera.  This  research  method  included measurement  of  environmental  parameters,  mangrove  sampling,  isolation, characterization  and  identification  of  bacteria.  The  result  of  research  found  two isolates of Actinomycetes in the  lower roots (AB T4) and leaf (Leaf T2). The isolates code AB T4 had characteristics of moderate  colony size, circular shape, entire edge, convex  elevation,  white  colony  color,  had  hyphae,  rod-shaped  cells,  non  motile, aerobic, gram positive, negative for oxidase, indole and gelatin, positive for catalase, citrate, urea, ornithine, aesculin, galactose, glucose and trehalose, OF oxidative and fermentative. While the isolates code Leaf T2 had characteristics of moderate colony size, irregular shape, undulate edge, raised elevation, creamy white colony color, had hyphae,  gram  positive,  rod-shaped  cells,  non  motile,  aerobic,  positive  for  catalase, ornithine,  aesculin,  celobiosa,  glucose,  lactose,  melibiosa,  sorbitol  and  trehalose, negative for oxidase, citrate, urea, gelatin and indole, OF oxidative and fermentative. Both  isolates  AB  T4  and  Leaf    T2  were  identified  as Nocardia genus  in  lower  root samples (AB T4) and Actinomadura genus in leaf samples (Leaf T2).@2021 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University
Kata Kunci:
Actinomycetes; Identifikasi;
Isolasi;
Mangrove Rhizophora apiculata; Tanjung Api-api ABSTRAK: Actinomycetes merupakan salah satu jenis bakteri endofit yang hidupnya di dalam  jaringan  tumbuhan  mangrove.  Senyawa  bioaktif  yang  berasal  dari Actinomycetes  dapat  digunakan  sebagai  obat  yang  potensial  dalam  bidang  industri medis  dan  farmasi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi jenis  bakteri  Actinomycetes  pada  mangrove Rhizophora  apiculata yang  berasal  dari Perairan  Tanjung  Api-api,  Sumatera  Selatan.  Metode  penelitian  ini  meliputi pengukuran  parameter  lingkungan,  pengambilan  sampel  mangrove,  isolasi, karakterisasi dan identifikasi bakteri. Hasil penelitian  menemukan dua isolat bakteri Actinomycetes  pada  akar  bawah  (AB  T4)  dan  daun  (Daun  T2).  Kode  isolat  AB  T4 memiliki karakteristik ukuran koloni moderate , bentuk circular , tepian entire , elevasi convex ,  warna  koloni  putih,  memiliki  hifa,  sel  berbentuk  batang,  non  motil,  bersifat aerob,  gram  positif,  negatif  pada  oksidase,  indol  dan  gelatin,  positif  pada  katalase, sitrat,  urea, ornithine ,  aesculin,  galaktosa,  glukosa  dan  trehalosa,  OF  oksidatif  dan fermentatif. Sedangkan kode isolat Daun T2 memiliki karakteristik ukuran moderate , bentuk irregular ,  tepian undulate ,  elevasi raised ,  warna  koloni  putih  krem,  memiliki hifa,  gram  positif,  sel  berbentuk  batang,  non  motil,  bersifat  aerob,  positif  pada katalase, ornithine ,  aesculin,  celobiosa,    glukosa,  laktosa,  melibiosa,  sorbitol  dan trehalosa,  negatif  pada  oksidase,  sitrat,  urea,  gelatin  dan  indol,  OF  oksidatif  dan fermentatif.  Kedua  isolat  AB  T4 dan  Daun  T2  teridentifikasi  sebagai  genus Nocardia pada sampel akar bawah (AB T4) dan genus Actinomadura pada sampel daun (Daun T2).  @2021  Published  by  UP2M,  Faculty  of  Mathematics  and  Natural  Sciences, Sriwijaya University

## Jurnal Penelitian Sains
Journal Home Page: http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index
∗ Corresponding author. E-mail address: rozirwan@unsri.ac.id
2597-7059 Online, 1410-7058 print/ @2021 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University

## PENDAHULUAN
Salah satu tanaman yang memiliki kandungan senyawa  bioaktif  yang  potensial  adalah  mangrove. Mangrove sudah banyak digunakan sebagai pengobatan  tradisional,  terutama  oleh  masyarakat pesisir.  Salah  satu  ekosistem  mangrove  yang  dapat ditemukan di Sumatera Selatan yaitu Tanjung Api-api. Ekosistem  mangrove  Tanjung  Api-api  adalah  bagian dari  ekosistem  pesisir  yang  terletak  di  bagian  timur Sumatera Selatan (Ulqodry et al. 2010; Mukhlis et al . 2018).
Menurut Purwiyanto (2013) keberadaan hutan mangrove  pada  wilayah  Tanjung  Api-api  cukup  luas, sehingga  menjadikan  perairan  tersebut  sebagai ekosistem  yang  unik  dan  salah  satu  jenis  mangrove yang  dapat  ditemukan  pada  wilayah  ini  yaitu Rhizophora  sp .  Bandaranayake  (1998)  menyatakan bahwa tanaman mangrove Rhizophora apiculata pada bagian  kulit  batang  dapat  digunakan  dalam penyembuhan penyakit antiemetik, antiseptik, diare, hemostatik, pendarahan dan tipus, sedangkan untuk penyakit hepatitis meliputi bagian kulit batang, bunga, buah dan daun. Menurut Purnobasuki (2004) tanaman mangrove  banyak  mengandung  senyawa  bioaktif, diantaranya  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  steroid, saponin dan tanin.
Salah  satu  jenis  bakteri  endofit  adalah Actinomycetes.  Actinomycetes  merupakan  bakteri yang  memiliki  filamen  bercabang  dan  dapat berkembang menyerupai fungi pada waktu tertentu, akan  tetapi  selnya  tetap  prokariota  (Subandi,  2010). Actinomycetes  dapat  berasal  dari  berbagai  sumber termasuk  tanah  dan  lautan  (Azman et  al. 2015; Rozirwan et al. 2020).
Bakteri endofit yang hidup pada suatu tanaman dapat  menghasilkan  senyawa  bioaktif  yang  sama seperti yang terkandung pada tanaman inangnya, hal tersebut  dikarenakan  adanya  rekombinasi  genetik yang  terjadi  antara  tanaman  inang  dengan  bakteri endofit  pada  waktu  evolusi  (Tan  dan  Zou,  2001; Heirina et  al. 2020).  Banyak  senyawa  baru  yang ditemukan dari Actinomycetes telah terbukti sebagai obat baru yang potensial dalam bidang industri medis dan farmasi seperti antibiotik, antimikroba, antibakteri,  antikanker  dan  antijamur  (Butler,  2004; Rozirwan et al. 2020).
Sejauh  ini  telah  banyak  ditemukan  penelitian mengenai  jenis  bakteri  Actinomycetes  yang  berasal dari tumbuhan darat, sedimen dan tanah. Akan tetapi
penelitian  mengenai  bakteri  endofit  Actinomycetes yang berasal dari tumbuhan pesisir dan lautan, seperti mangrove  khususnya  yang  terletak  di  Tanjung Api-api  Sumatera  Selatan,  masih  sangat  minim  dan terbatas.
Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi  jenis  bakteri  Actinomycetes  pada mangrove R.apiculata yang  berasal  dari  Perairan Tanjung  Api-api,  Sumatera  Selatan.  Penelitian  ini diharapkan  dapat  memberikan  informasi  dan pengetahuan  mengenai  jumlah  dan  jenis  bakteri Actinomycetes  yang  terdapat  pada  jenis  mangrove R.apiculata yang berasal dari Perairan Tanjung Api-api, Sumatera Selatan.

## BAHAN DAN METODE

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  Bulan November  -  Desember  2018.  Sampel R.apiculata diambil  di  kawasan  Tanjung  Api-Api,  Sumatera Selatan.  Peta  lokasi  penelitian  ini  disajikan  pada (Gambar 1). Isolasi dan identifikasi bakteri dilakukan di Stasiun  Karantina  Ikan  Pengendalian  Mutu  dan Keamanan Hasil Perikanan (SKIPM) Palembang.

## Gambar 1. Peta Lokasi Pelitian

## Prosedur Penelitian
Prosedur pada penelitian ini dilakukan melalui beberapa  tahapan,  baik  di  lapangan  maupun  di laboratorium.  Penelitian  di  lapangan  diantaranya meliputi pengukuran parameter lingkungan ekosistem mangrove  dan  pengambilan  sampel.  Kemudian dilanjutkan  penelitian  di  laboratorium  diantaranya meliputi, preparasi sampel dan isolasi bakteri endofit, karakterisasi  makroskopis  dan  pemurnian  bakteri endofit,  pengujian  gram  KOH  3%,  pewarnaan  gram dan  karakterisasi  mikroskopis,  uji  fisiologi  biokimia dan identifikasi jenis bakteri endofit.
Pengukuran parameter lingkungan dan pengambilan sampel
Pengukuran  parameter  lingkungan  ekosistem mangrove yang dilakukan yaitu meliputi pengukuran pH,  suhu  dan  DO  ( Dissolved  Oxygen )  bersamaan dengan  pengambilan  sampel  pada  titik  lokasi penelitian.

## Preparasi sampel dan isolasi bakteri endofit
Preparasi  sampel  dan  isolasi  bakteri  endofit dilakukan  dengan  menimbang  sampel  mangrove R.apiculata bagian  daun,  batang  dan  akar  (pangkal dan  didalam  sedimen)  masing-masing  sebanyak  10 gram.  Kemudian  sampel  dilakukan  sterilisasi permukaan,  dengan  cara  mencelupkan  sampel kedalam air suling steril, lalu alkohol 70% selama 3-5 detik,  dan  dicelupkan  lagi  kedalam  air  suling  steril. Setelahnya sampel dipotong kecil-kecil dan dimasukkan  kedalam  air  suling  steril  dengan perbandingan  1:9  (g/v)  10  gram  sampel  :  90  mL  air suling  steril  diamkan  selama  ±  20  menit,  serta diencerkan hingga 10 -3 . Kemudian ambil 1 ml pada 10 - 1 -  10 -3 masukkan  ke  cawan  petri  dan  tambahkan media Starch Casein Agar dengan metode Pour Plate . Inkubasi  pada  suhu  30  °C  selama  ±  4  hari  dalam inkubator (Krishnakumar, 2005 dalam Ravikumar et al. 2011).
Karakterisasi makroskopis dan pemurnian bakteri Tahapan karakterisasi makroskopis dan pemurnian  bakteri  menurut  Sulistyani  dan  Akbar (2014)  yaitu  melakukan  pengamatan  makroskopis pada  morfologi  koloni  yang  diduga  sebagai Actinomycetes  dan  dianggap  berbeda,  dengan melihat  ciri-ciri  dari  bentuk  koloni,  bentuk  tepian, elevasi,  permukaan  koloni,  warna  koloni  dan penampakan  warna  yang  meliputi  hifa  aerial,  hifa substrat  dan  ada  tidaknya  warna  pigmen  yang terdifusi  ke  medium  serta  memproduksi  spora. Selanjutnya  inokulasi-kan  1  ose  koloni  bakteri    ke media  SCA yang  baru menggunakan  metode streak zig-zag , inkubasi pada suhu 30 ºC selama ± 7 hari.
Uji gram KOH 3%
Uji gram pada penelitian dilakukan menggunakan  larutan  KOH  3%,  bertujuan  untuk mengetahui jenis gram pada  dinding sel bakteri yaitu gram positif atau gram negatif yang ditandai dengan adanya  lendir  pada  bakteri  gram  negatif  dan  tidak terdapat lendir pada bakteri gram positif.

## Pewarnaan gram dan karakterisasi mikroskopis
Pewarnaan gram dan karakterisasi mikroskopis pada  penelitian  ini  bertujuan  untuk    mengetahui morfologi    sel      bakteri  saja  yaitu  berbentuk  batang atau  bulat.  Pewarnaan  gram  pada  penelitian  ini merujuk  pada  Cappucino  dan  Sherman  (2014) meliputi 4 larutan pewarna yaitu kristal violet, lugol, alkohol 95% dan safranin kemudian diamati di bawah mikroskop untuk mengamati  bentuk  sel.

## Karakterisasi  fisiologi  biokimia
Karakterisasi    fisiologi    biokimia  bertujuan untuk  mengetahui  sifat  bakteri berdasarkan reaksi enzimatik  dari  uji-uji  biokimia.  Uji  biokimia  yang dilakukan  diantaranya  uji  katalase,  oksidase, kebutuhan O 2 , sitrat, urea, gelatin, pepton, Ornithine , OF  dan  fermentasi  karbohidrat  (maltosa,  laktosa, arabinosa,  inositol,  rhamnosa,  aesculin,  adonitol, celobiose,  fruktosa,  glukosa,  galaktosa,  melibiose, raffinosa,  xylose,  mannitol,  sorbitol,  trehalose  dan salicin).

## Identifikasi bakteri
Identifikasi bakteri dilakukan untuk mengetahui  jenis  bakteri  yang  terdapat  pada mangrove jenis R.apiculata . Identifikasi bakteri dapat dilakukan berdasarkan hasil pengujian yang diperoleh dari  pengamatan  makroskopis  (morfologi  koloni bakteri), sifat gram, pengamatan mikroskopis (bentuk sel  bakteri)  dan  pengamatan  fisiologi  biokimia  (sifat fisiologi bakteri dari hasil uji-uji biokimia). Identifikasi jenis bakteri dilakukan dengan menggunakan bantuan buku  identifikasi Bergey’s  Manual  of  Determinative Bacteriology edisi  ke-9  dan Bergey’s  Manual  of Systematic Bacteriology edisi ke-2.

## Analisis Data
Analisis data yang digunakan dalam penelitian ini  yaitu  menggunakan  analisis  deskriptif  yang memberikan  data  berupa  uraian  dan  gambaran mengenai  isolasi  bakteri  endofit,  karakterisasi makroskopis,  sifat  gram,  karakterisasi  mikroskopis, karakterisasi fisiologi biokimia dan jenis-jenis bakteri endofit  yang  diperoleh  dari  mangrove R.apiculata yang berasal dari  perairan  Tanjung  Api-Api, Sumatera Selatan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengukuran  parameter  lingkungan  seperti suhu, pH dan dissolved oxygen (DO)  pada ekosistem
mangrove  dilakukan  pada  saat  surut  bersamaan dengan  pengambilan  sampel  mangrove.  Hasil pengukuran parameter lingkungan ekosistem mangrove dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Pengukuran Parameter Lingkungan Ekosistem Mangrove
Pengukuran  parameter  lingkungan  ekosistem mangrove  bertujuan  untuk  mengetahui  faktor lingkungan  yang  dapat  mempengaruhi  distribusi mangrove,  proses  pertumbuhan  dan  perkembangan mangrove  serta  mempengaruhi  penyebaran  suatu organisme  khususnya  bakteri.  Sehingga  sangat diperlukan  pengukuran  parameter  lingkungan  pada lokasi penelitian guna menyamakan kondisi pada saat di laboratorium. Suhu yang diperoleh pada penelitian ini sebesar 27,8 o C,  suhu tersebut masih dalam kisaran yang  baik  untuk    petumbuhan    mangrove    maupun bakteri.
Suhu yang  baik untuk  pertumbuhan mangrove tidak  kurang  dari  20 o C.    (Kolehmainen et  al. 1974 dalam Schaduw, 2018). Salah  satu  faktor yang dapat mempengaruhi  pertumbuhan  bakteri    adalah  suhu. Suhu  merupakan  parameter  fisika  yang  dapat mempengaruhi  sifat  fisiologi  mikroorganisme.  Setiap mikroor-ganisme  khususnya  bakteri  memiliki  nilai kisaran  suhu  yang  berbeda-beda  dalam  proses pertumbuhannya.
Suhu  sangat  berpengaruh  terhadap  kerja enzim,  semakin  tinggi  suhu  maka  kerja  enzim  akan semakin cepat karena peningkatan suhu menyebabkan  peningkatan  energi  kinetik  reaktan. Pada  dasarnya  pertumbuh-an  adalah  hasil  dari metabolisme  suatu  reaksi  kimia  yang  berlangsung  di dalam  sel  yang  dikatalisis  oleh  enzim.  Maka peningkatan  suhu  akan  menyebabkan  peningkatan
pertumbuhan. Menurut Rao (1994) suhu yang cocok untuk  pertumbuhan  Actinomycetes  berkisar  antara 25-30 o C.
Derajat  keasaman  (pH)  pada  ekosistem mangrove  Tanjung  Api-api  Sumatera  Selatan diperoleh  sebesar  7  (netral)  dapat  dilihat  pada Gambar  2.  Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan tersebut, maka nilai pH masih dalam kisaran yang baik untuk  pertumbuhan  bakteri  maupun  mangrove. Umumnya  pH  yang  optimum  bagi  mangrove  adalah 6,2 - 8 (Arksomkoae, 1993 dalam Arizona dan Sunarto, 2009). Sedangkan bakteri mempunyai kisaran nilai pH pertumbuhan antara 6,5 - 7,5 (Kurniawan, 2012).
Selain  suhu,  pH  (derajat  keasaman)  juga merupakan  faktor  lingkungan  yang  berpengaruh terhadap  pertumbuhan  dan  aktivitas  bakteri.  pH dapat  mempengaruhi  kerja  enzim  dan  permeabilitas sel,  sehingga  transpor  nutrien  ke  dalam  sel  akan terganggu.  Hal  tersebut  akan  berdampak    pada metabolisme      sekaligus  pertumbuhan  terhadap  sel bakteri.
DO   atau  oksigen   terlarut    yang didapatkan pada penelitian sebesar 1.81 mg/L dapat dilihat pada Gambar  2.  Kandungan  oksigen  terlarut  yang didapatkan  pada  lokasi  penelitian  termasuk  cukup rendah.  Rendahnya  kandungan  oksigen  terlarut, diasumsikan  karena  adanya  proses  penguraian serasah oleh bakteri yang cenderung tinggi sehingga membutuhkan oksigen yang cukup besar juga. Selain itu semakin banyak bahan organik  yang  tersedia di dalam sedimen, maka semakin  tinggi   pula  oksigen yang  dibutuhkan      bakteri    untuk    merombaknya. Oksigen    salah    satu    faktor    penting    dalam  Proses pertumbuhan    bakteri.  Bakteri  aerob  merupakan bakteri yang membutuhkan O 2 untuk pertumbuhannya.
Isolat  bakteri  yang  diperoleh  pada penelitian sebanyak  14  isolat  (Tabel  1).  Karakterisasi maksroskopis digunakan untuk memisahkan mikroorganisme  menjadi  kelompok  taksonomi berdasarkan karakteristiknya masing-masing. Pengamatan makroskopis yang dilakukan pada isolat Actinomycetes  diantaranya  meliputi  pengamatan warna  miselium  aerial,  warna  miselium  substrat, bentuk koloni, tepi koloni,  elevasi  koloni,  permukaan koloni dan ukuran koloni (Rozirwan et al. 2014; Akbar et al. 2017).
Tabel 1. Karakteristik Makroskopis Bakteri Isolat Ukuran Bentuk Tepian Elevasi Warna HU HS AB T1 Large Circular Entire Raised Putih - - AB T2 Large Crcular Entire Raised Krem kekuningan - - AB T3 Small Irregular Lobate Raised Kuning oranye - - AB T4 Moderate Circular Entire Convex Putih + + AA T1 Moderate Circular Entire Convex Kuning - - AA T2 Moderate Circular Entire Convex Putih - - AA T3 Small Circular Entire Raised Kuning - - AA T4 Small Circular Entire Raised Putih bening - - Batang T1 Moderate Circular Entire Convex Putih keruh - - Batang T2 Moderate Circular Entire Convex Krem kekuningan - - Batang T3 Moderate Circular Entire Convex Putih - - Batang T4 Small Circular Entire Raised Putih mengkilat - - Daun T1 Small Circular Entire Flat Abu-abu - - Daun T2 Moderate Irregular Undulate Raised Putih krem + + Keterangan : AB: Akar Bawah         HU: Hifa Udara +: Ada AA: Akar Atas HS : Hifa Substrat - : Tidak Ada
Pengujian gram dengan KOH 3% merupakan uji dasar  yang  dilakukan  untuk  mengetahui  sifat  gram bakteri  secara  makroskopis,  sifat  gram  tersebut terbagi  menjadi  dua  kelompok  berdasarkan  dinding selnya  yaitu  bakteri  gram  positif  dan  bakteri  gram negatif.  Hasil  pengujian  gram    dapat      dilihat      pada Tabel  2. Hasil pengujian   gram   menggunakan  KOH 3% dari 14  isolat   bakteri  didapatkan 2  isolat bakteri termasuk  ke  dalam  kelompok  bakteri  gram  positif yaitu AB T4 dan Daun T2, sedangkan 12 isolat lainnya termasuk ke dalam kelompok bakteri gram negatif.
Menurut  Cappuccino  dan  Sherman  (2014) dinding  sel  bakteri  gram  positif  memiliki  lapisan peptidoglikan yang lebih tebal dan lipid yang rendah, sedangkan lapisan peptidoglikan yang terdapat dalam dinding sel bakteri gram negatif  jauh lebih tipis dan dikelilingi  oleh  lapisan  luar  yang  mengandung  lipid yang lebih tebal.
Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan,  maka kedua isolat bakteri gram positif  AB T4 dan Daun T2 akan  dilakukan  tahapan  uji  lanjutan  sampai identifikasi bakteri  dan 12 isolat bakteri gram negatif lainnya tidak dilakukan tahapan uji lanjutan.
Tabel 2.  Hasil Pengujian Gram Bakteri
Isolat AB T1 AB T2 AB T3 AB T4 AA T1 AA T2 AA T3 AA T4 B T1 B T2 B T3 B T4 D T1 D T2 Uji Gram - - - + - - - - - - - - - +
Keterangan :
+ : Gram Positif          AB : Akar Bawah B : Batang -  : Gram Negatif AA : Akar Atas
D : Daun
Hal tersebut dikarenakan bakteri
Actinomycetes  merupakan  bakteri  yang  termasuk
kedalam  kelompok  bakteri  gram  positif,  sehingga penelitian ini hanya dibatasi pada bakteri gram positif
saja.  Procop et  al. (2017)    menyatakan  bahwa Actinomycetes  memiliki  karakteristik  bakteri  gram positif yang memiliki bentuk sel cocci (bulat) dan basil (batang).
Karakterisasi  mikroskopis  Bakteri  bertujuan untuk  mengetahui  morfologi  sel  bakteri.  Hasil karakterisasi  mikroskopis  bakteri  dapat  dilihat  pada Gambar  3.  Hasil  yang  didapatkan  dari  kedua  isolat bakteri yaitu morfologi sel berbentuk batang (basil).
Armaida  dan  Khotimah  (2016)  mendapatkan hasil  morfologi  sel  berbentuk  batang  pada  bakteri Actinomycetes  dari  Porifera.  Sulistyani  dan  Akbar (2014)  mendapatkan  4  isolat  bakteri  Actinomycetes dari Eucheuma cottonii , berdasarkan hasil pewarnaan gram  yaitu  termasuk  dalam  kelompok  bakteri  gram positif dan mempunyai morfologi sel batang berwarna ungu.
Gambar 3. Mikroskopis Bakteri, A) Isolat Bakteri Daun T2; B) Isolat Bakteri AB T4
Berdasarkan hasil karakerisasi dan ujibiokimia bakteri  yang  didapatkan  pada  Tabel  3,  maka  hasil identifikasi  dari2  isolat  bakteri  AB  T4  dan  Daun  T2 yaitu, 1 isolat teridentifikasi sebagai kelompok bakteri Actinomycetes dari genus Nocardia pada   isolat  AB T4  dan  1    isolat    teridentifikasi    sebagai    genus Actinomadura pada kode isolat Daun T2.
Berdasarkan  hasil  identifikasi  yang  merujuk pada  Holt et  al. (1994)  pada  kode  isolat  Daun  T2 termasuk ke dalam genus Actinomadura dikarenakan memiliki  karakteristik  yaitu  bakteri  gram  positif,  sel berbentuk batang, bersifat non motil, bersifat aerobik, katalase dan ornithin bereaksi positif, oksidase, indol dan sitrat bereaksi negatif, memfermentasi beberapa karbohidrat,  memiliki  hifa  vegetatif  transparan  dan hifa udara berwarna putih.
Menurut  Barrow  dan  Feltham  (1993)  genus Actinomadura merupakan bakteri gram positif batang, non  motil,  aerobik,  urea  negatif,  tidak  cepat  asam pada  pengujian  karbohidrat.  He et  al. (2012) mendapatkan genus Actinomadura dengan karakteristik  bersifat  aerobik,  gram  positif,  hifa substrat  bercabang,  hifa  udara  berwarna  putih,
katalase positif dan tidak dapat menghidrolisis gelatin. Ara et  al. (2008)  mendapatkan  genus Actinomadura dengan  karakteristik  gram  positif,  bersifat  aerobik, non  motil,  terdapat  miselium  substrat  dan  miselium udara dan dapat memfermentasi  beberapa  gula-gula.
Hong et  al. (2009)  mendapatkan  hasil penelitian  berupa  isolat  bakteri  Actinomycetes  yang berasal dari tumbuhan mangrove dan sedimen, yaitu genus Actinomadura yang  merupakan  keluarga  dari
Thermomonosporaceae dan suborder Streptosporangineae. Berdasarkan bioaktivitas
metabolitnya diidentifikasi meng-gunakan kemotaksonomi (adanya isomer asam diaminopimelic dan gula diagnostik seluruh organisme) dan penanda morfologis (mikroskop cahaya), dan  data urutan  gen 16S rRNA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolat yang  diuji  menunjukkan  aktivitas    sebagai  sel antitumor. Actinomycetes yang diisolasi dari  habitat bakau adalah  sumber  yang  sangat  berpotensi  untuk penemuan  senyawa    antiinfeksi  dan  antitumor  serta agen untuk mengobati penyakit neurodegeneratif dan diabetes.
A B
Tabel 3. Hasil karakterisasi dan uji biokimia  isolat bakteri endofit mangrove R.apiculata Karakteristik Kode Isolat Isolat Akar Bawah (Dalam Sedimen) Isolat Daun AB T4 Daun T2 Ukuran Moderate Moderate Bentuk Circular Irregular Tepian Entire Undulate Elevasi Convex Raised Warna Putih Putih krem Hifa Udara + + Hifa Substrat + + Gram + + Bentuk Sel, Motilitas Basil, Non motil Basil, Non motil Kebutuhan Oksigen Aerob Aerob Katalase + + Oksidase - - OF Oksidatif /  fermentatif Oksidatif / fermentatif Sitrat + - Urea + - Ornithine + + Gelatin - - Indol - - Adonitol - - Aesculin + + Arabinosa - - Celobiosa - + Fruktosa + - Galaktosa + - Glukosa + + Inositol - - Laktosa - + Maltosa - - Mannitol - - Melibiosa - + Raffinosa - - Rhamnosa - - Salicin - - Sorbitol - + Trehalosa + + Xylosa - - Genus Nocardia Actinomadura Keterangan : + : Uji Positif -  : Uji Negatif
Berdasarkan  hasil  identifikasi  yang  merujuk pada  Holt et  al. (1994)  kode  isolat  AB  T4  termasuk kedalam  genus Nocardia .  Genus  ini  memiliki karakteristik sifat gram positif, aerobik, sel berbentuk
batang,  indol  dan  oksidase  negatif,  koloni  berwarna putih  halus  dan  butiran  atau  beludru,  mampu menghasilkan  pigmen  merah  kecoklatan  yang  tidak teratur, berkerut dan menumpuk. Menghasilkan hifa
udara  berwarna  putih  dan  hifa  substrat  transparan. Mampu  memfermentasikan  beberapa  gula-gula seperti  aesculin,  galaktosa,  trehalosa,  fruktosa  dan glukosa,  sedangkan  untuk  arabinosa,  maltosa, rhamnosa,  xylosa,  adonitol,  manitol,  inositol, celobiosa,  melibiosa,  raffinosa,  lactosa,  salicin  dan sorbitol negatif.
Menurut Barrow dan Feltham (1993)
karakteristik yang dimiliki genus Nocardia yaitu tidak mampu  memfermentasikan  atau  reaksi  negatif terhadap  jenis  karbohidrat  arabinosa,  maltosa, rhamnosa,  xylosa,  adonitol,  manitol  dan  inositol. Bersifat non motil, katalase positif dan urea positif.
Breed et al. (1957) menyatakan genus Nocardia merupakan bakteri yang bersifat gram positif, aerobik, non  motil,  tidak  ada  pencairan  atau  negatif  pada gelatin, sel berbentuk batang dan ada juga yang bulat, menghasilkan  hifa  aerial  dan hifa substrat.
Menurut Austin dan Austin (2007) karakteristik yang dimiliki genus Nocardia yaitu fruktosa, trehalosa dan  glukosa  positif,  adonitol,  arabinosa,  celobiosa, inositol, laktosa, salicin, sorbitol, maltosa, rhamnosa, manitol dan xylosa negatif, katalase positif, oksidase negatif, gram positif, sel berbentuk batang dan bulat, hifa aerial dan substrat positif, non motil, urea positif, gelatin dan indol negatif.
Berdasarkan penelitan Pujiati (2014) ditemukan  jenis  bakteri  Actinomycetes  yang  berasal dari genus Nocardia .  Karakteristik dari genus ini yaitu organisme  unisel  (prokariot),  memiliki tekstur  koloni seperti  beludru  jika  bersporulasi  yang  merupakan miselium-nya,  warna  koloni  pada  bagian  bawahnya merah,  sedangkan  tekstur  koloni  yang  belum bersporulasi  mengkerut-kerut  pada  bagian  tengah koloni.
Armaida  dan  Khotimah  (2016)  mendapatkan genus Nocardia dengan karakteristik gram positif, sel berbentuk batang, bersifat aerob, non motil, katalase, sitrat,  ornithin  dan  urea  bereaksi  positif,  OF terfermentasi baik secara oksidatif ataupun fermentatif.  Maltosa  bereaksi  negatif,  glukosa  dan galaktosa bereaksi positif.
Berdasarkan    penelitian    Nofu et  al. (2014) mendapatkan hasil yang sama yaitu ornithin bereaksi positif,  uji  OF  terfermentasi  baik  secara  oksidatif ataupun fermentatif, urea dan sitrat bereaksi positif, bersifat  aerob,sel  berbentuk  batang,  bersifat  gram positif,  non  motil  dan  indol  bereaksi  negatif.  Genus Nocardia aktif  dalam  mendegradasi  selulosa  dan
melarutkan  fosfat,  tersebar  melimpah  pada  tanah yang  bersifat  obligat  aerob  dan  beberapa  ada  yang bersifat patogen pada hewan dan manusia.
Bedasarkan  hasil  identifikasi  bakteri  yang didapatkan  pada    penelitian,  maka  klasifikasi    dari genus Actinomadura dan Nocardia sebagai  berikut (Goodfellow et al. 2012) :

## Klasifikasi Actinomadura
Kingdom : Bacteria Phylum : Actinobacteria Class : Actinobacteria Ordo : Streptosporangiales Family : Thermomonosporaceae Genus : Actinomadura Klasifikasi Nocardia Kingdom : Bacteria Phylum : Actinobacteria Class : Actinobacteria Ordo : Corynebacteriales Family : Nocardiaceae Genus : Nocardia

## KESIMPULAN
Kesimpulan   penelitian  ini  sebagai berikut,
1. Berdasarkan  14  isolat  bakteri  yang  berhasil ditumbuhkan  dari  sampel  mangrove Rhizophora apiculata yang berasal dari perairan Tanjung Api- api  Sumatera  Selatan,  ditemukan  2  isolat Actinomycetes  masing-masing  dari  bagian  akar bawah (AB T4) dan daun (Daun T2).
2. Isolat  Actinomycetes  pada  mangrove  Rhizophora apiculata  teridentifikasi  sebagai  genus Nocardia pada  sampel  akar  bawah  (AB  T4)  dan Actinomadura pada isolat daun (Daun T2).

## REFERENSI
[1] Akbar  RA,  Ryandini  D  dan  Kusharyati  DF.  2017. Potensi  Aktinomisetes  asal  tanah  perakaran Mangrove  Segara  Anakan  Cilacap  sebagai penghasil Anti-fungi terhadap Candida albicans . Journal of Tropical Biodiversity and Biotechnology . Vol. 2 : 39-44.
[2] Ara I, Matsumoto A, Bakir MA, Kudo T, Omura S and Takahashi Y. 2008. Actinomadura maheskhaliensis sp. Nov. , a novel Actinomycete isolated  from  mangrove  rhizosphere  soil  of
Maheshkhall, Bangladesh. J.Gen Appl Microbiol . Vol. 54 : 335-342
[3] Arizona  M  dan  Sunarto.  2009.  Kerusakan ekosistem  mangrove  akibat  konversi  lahan  di kampung  Tobati  dan  kampung  Nafri,  Jayapura. Majalah Geografi Indonesia . Vol. 23 (3) : 18-39.
[4] Armaida  E  dan  Khotimah  S.  2016.  Karakterisasi Actinomycetes yang berasosiasi dengan Porifera ( Axinella  spp .)  dari  Perairan  Pulau  Lemukutan
Kalimantan Barat. Protobiont . Vol. 5 (1) : 68-73.
[5] Austin  B  and  Austin    DA.    2007. Bacterial  Fish Pathogens  Diseases  of  Farmed  and  Wild  Fish Fourth Edition . UK : Praxis Publishing.
[6] Azman AS, Othman I, Velu SS, Chan KG and Lee LH.  2015.  Mangrove  rare  actinobacteria: taxonomy, natural compound, and discovery of bioactivity. Frontiers in Microbiology . Vol. 6 : 1-5.
[7] Bandaranayake  W.M.  1998.  Traditional  and medicinal  uses  of  mangroves. Mangroves  and Salt Marshes. Vol. 2 : 133 – 148.
[8] Barrow GI and Feltham RKA.  1993. Cowan and Steel's  manual  for  the  Identification  of  Medical Bacteria . New York : Cambridge University Press.
[9] Breed  RS,  Murray  EGD  and  Smith  NR.  1957. Bergey’s  Manual  of  Determinative  Bacteriology Seventh Edition . USA : Baltimore The William and Wilkins Company.
[10] Butler  MS.  2004.  The  role  of  natural  product chemistry  in  drug  discovery. Journal  of  Natural Products. Vol. 67 (12) : 2141-2153.
[11] Cappuccino  JG  dan  Sherman  N.  2014. Microbiology : A   Laboratory   Manual. United States of America : Pearson. 554 hal.
[12] Goodfellow M,  Kampfer P,  Busse HJ, Trujillo ME, Suzuki  K,    Ludwig  W  and  Whitman  WB.  2012.
Bergey’s  Manual  Of  Systematic  Bacteriology Second Edition, Volume Five The Actinobacteria . New  York  Dordrecht  Heidelberg  London  : Springer.
[13] He J, Xu Y, Sahu MK, Tian X, Nie G, Xie Q, Zhang S,  Sivakumar  K  and  Li  W.  2012. Actinomadura sediminis  sp.  nov .,  a  marine  actinomycete isolated from mangrove sediment. International
Journal  of  Systematic  and  Evolutionary
Microbiology . Vol, 62 : 1110 – 1116
[14] Heirina A, Rozirwan, Hendri M. 2020. Isolasi dan aktivitas  antibakteri  jamur  endofit  pada mangrove Sonneratia  alba dari  Tanjung  Carat Kabupaten  Banyuasin  Sumatera  Selatan. Jurnal Penelitian Sains Vol. 22(1): 16-24
[15] Holt  JG,  Krieg  NR,  Sneath  PHA,  Staley  JT  and Williams  ST.  1994. Bergey’s  Manual  of Determinative Bacteriology, Ninth edition . USA : Williams and willkins.
[16] Hong K, Yu H, Gao A, Xie Q, Gao H, Zhuang L, Lin H, Li J, Yao X, Goodfellow M and Ruan J.  2009. Actinomycetes  for  marine  drug  discovery isolated from mangrove soils and plants in China. Marine Drugs . Vol. 7 : 22-44
[17] Kurniawan  A.    2012. Penyakit  Akuatik .  Bangka Belitung : UBB Press. 197 hal.
[18] Mukhlis  DK,  Rozirwan,  Hendri  M.  2018.  Isolasi dan  aktivitas  antibakteri  jamur  endofit  pada mangrove Rhizophora  apiculata dari  kawasan mangrove Tanjung Api-Api Kabupaten Banyuasin Sumatera  Selatan. Maspari  Jurnal Vol.  10(2): 151-160.
[19] Nofu  K,  Khotimah  S,  Lovadi  I.  2014.  Isolasi  dan Karakteristik Bakteri Pendegradasi Selulosa pada Ampas Tebu Kuning (Bagasse). Protobiont . Vol. 3 (1) : 25-33
[20] Procop  GW,  Church  DL,  Hall  GS,  Janda  WM, Koneman EW, Schreckenberger PC. Dan Woods GL. 2017. Koneman’s Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology 8th edition . Philadelphia: Wolters Kluwer Health.
[21] Pujiati.  2014.  Isolasi  Actinomycetes  dari  tanah kebun  sebagai  bahan  petunjuk  praktikum mikrobiologi. Jurnal Florea . Vol.1 (2) : (42-46)
[22] Purnobasuki H. 2004. Potensi Mangrove sebagai tanaman obat. Biota . Vol. IX (2).
[23] Purwiyanto AIS. 2013. Daya serap akar dan daun mangrove  terhadap  logam  tembaga  (Cu)  di Tanjung  Api-Api,  Sumatera  Selatan. Maspari Journal . Vol. 5 (1) : 1-5
[24] Rao    NSS.    1994. Mikroorganisme    Tanah  dan Pertumbuhan  Tanaman .  Jakarta  :  UI-Press.  353 hal.
[25] Ravikumar  S,  Inbaneson  SJ,  Uthiraselvam  M, Priya  SR,  Ramu  A  and  Banerjee  MB.  2011. Diversity  of  endophytic  actinomycetes  from
Karangkadu  mangrove  ecosystem  and  its antibacterial potential against bacterial pathogens Journal  of  Pharmacy Research,  Vol. 4(1) : 294-296.
[26] Rozirwan,  Bengen  DG,  Zamani  NP,  Effendi  H. 2015. Bacterial symbiont bioactive compound of soft coral Sinularia flexibilis and S. polydactyla .
Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis. 7(2).
[27] Rozirwan,  Muda  HI,  Ulqodry  TZ.  2020. Antibacterial potential of Actinomycetes isolated from  mangrove  sediment  in  Tanjung  Api-Api, South  Sumatra,  Indonesia. Biodiversitas  Journal of Biological Diversity Vol. 21(12): 5723-5728.
[28] Schaduw    JNW.    2018.    Distribusi      dan karakteristik      kualitas    perairan      ekosistem mangrove Pulau Kecil Taman Nasional Bunaken. Majalah Geografi Indonesia. Vol. 32 (1) : 40 – 49.
[29] Sulistyani N dan Akbar AN. 2014. Aktivitas Isolat Actinomycetes  dari  Rumput  Laut  ( Eucheuma
cottonii )  sebagai  Penghasil  Antibiotik  terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli . Jurnal ilmu kefarmasian Indonesia. Vol. 12 (1) : 1- 9.
[30] Tan  RX  and  Zou  WX.  2001.  Endophytes:  a  rich source of functional metabolites. Nat. Prod. Rep . Vol. 18 : 448 – 459.
[31] Ulqodry  TZ,  Bengen  DG,  Kaswadji  RF.  2010. Karakteristik  perairan  mangrove  Tanjung  Api-api Sumatera Selatan berdasarkan sebaran parameter lingkungan perairan dengan menggunakan analisis komponen utama (PCA). Maspari Journal . Vol. 1 (1)
: 16-21. Vol 13 (1) : 793-799.
[32] Anggraini, R.R., Hendri, M., Rozirwan, R., 2018. Potensi  larutan  bubuk  daun  mangrove  Bruguiera gymnorrhiza  sebagai  pengawet  alami,  Maspari Journal. 10(1), 51-62.