EFEKTIVITAS EKSTRAK TUMBUHAN MENGELIMINASI Clavibacter michiganensis Saubsp. Michiganensis DAN MEMPERTAHANKAN MUTU FISIOLOGIS BENIH TOMAT
Effectiveness of Plant Extracts to Eleminate Claibacter Saubsp. Michiganensis sp. Michiganensis Physiological and Maintaining Quality of Tomato Seed
Aprizal Zainal 1 , Aswaldi Anwar 1 , Sudarsono 2 , Satriyas Ilyas 2 , Giyanto 3
1 Staf Pengajar Program Studi Agroekoteknologi, Universitas Andalas Padang, Indonesia
2 Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor (Bogor Agricultural University), Jl. Meranti Kampus IPB Darmaga 16680, Indonesia
3 Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor (Bogor Agricultural University), Jl. Kamper, Kampus IPB Darmaga 16680, Indonesia
Fax. 0751-72702, e-mail: ap_zainal@yahoo.com

## ABSTRACT
The  objectives  of  the  experiment  were  to  evaluate  effectiveness  of  seed  treatments  to  eliminate Cmm of  infected  tomato  seed  lot,  evaluate  physiological quality  of Cmm infected  tomato  seed  lot  after treatments with plant extracts. The research used curcuma rhizomes, betel vine leaf extract, cinnamon and clove oil to eliminate Cmm in tomato seed. Part of the seeds were dipped in either suspension of curcuma rhizomes,  betel  vine  leaf  extract,  cinnamon  and  clove  oil  for  20  minutes  and  the  others  were matriconditioned  using  a  mixture  of  burned  rice  hull  (at  22 0 C  and  RH  60-70%) plus  either  of  plant extracts  or  oils. Elimination  of Cmm from  infected  seeds  was  observed  10  days  after  treatments,  and physiological  seed  qualities  were  evaluated  before  and  after  seed  treatments.  Results  of  the  experiment indicated,  dipping  infected  seeds  in  either  5%  of  curcuma,  betel  vine  extract, cinnamon  oil  or  0.5%  of clove oil suspension or matriconditioning plus either these extracts, eliminated 99% of infected Cmm on tomato  seeds.  Seed  treatments  using  plant  extracts  for  elimination  of Cmm did  not  reduce  seed germination, germination rate, vigor index, and did not increase time to reach 50% total germination (T 50 ) of  infected  tomato  seed  except  the  seed  treatment  by  using  5%  cinnamon  oil  with  or  without matriconditioning.
Key words: plant extracts, physiological quality, seed viability, vigor

## PENDAHULUAN
Clavibacter  michiganensis saubsp. michiganensis ( Cmm )  adalah  bakteri  gram positif  dan  merupakan  patogen  tular  benih ( seedborne pathogen ) pada
tomat.
Pengendalian  patogen  terbawa  benih  dapat dilakukan dengan perlakuan benih menggunakan  ekstrak  tumbuhan  (pestisida nabati).  Perlakuan  dengan  minyak  cengkeh 0,5 % dapat mengeliminasi 99 % Cmm pada benih  tomat  terinfeksi  secara  buatan  tanpa menurunkan mutu fisiologis benih (Anwar et
al .,  2004).  Efektivitas  perlakuan  benih dengan  minyak  dan  ekstrak  tumbuhan  untuk mengeliminasi Cmm tanpa  menurunkan kualitas benih tomat belum banyak dilaporkan. Belakangan banyak
dikembangkan  teknik  pengendalian  patogen terbawa  benih  secara  biologi  (Vasudevan et al .,  2002)  dan  atau  bahan  nabati  ( plant extracts )  seperti  minyak  atsiri  (Park et  al ., 2003; Pino et al ., 2004; Bowers et al ., 2004; Paul and Sharma, 2002).
Pengendalian  patogen  terbawa  benih
hendaknya juga meningkatkan mutu fisiologis  benih,  umumnya  benih  yang terserang patogen akan mengalami kemunduran mutu yang lebih cepat. Peningkatan  mutu  fisiologis  dapat  dilakukan dengan  cara  invigorasi.  Invigorasi  adalah proses peningkatan vigor benih secara buatan melalui proses metabolisme terkendali dengan  memperbaiki  kerusakan  sub  seluler dalam benih. Salah satu perlakuan invigorasi benih adalah matriconditioning , beberapa bahan yang digunakan sebagai media seperti arang sekam dan serbuk gergaji (Ilyas et al .,  2002).  Perlakuan benih seperti matriconditoning , coating, atau
pelleting telah digunakan untuk meningkatkan perkecambahan
atau melindungi benih dari infeksi patogen (Ilyas, 2006).
Media yang digunakan untuk matriconditioning harus
mempunyai potensial  matrik  rendah  dan  potensial osmotik  yang  dapat  diabaikan,  daya  larut rendah,  tetap  utuh  selama  perlakuan ,  inert, tidak  beracun,  dan  daya  pegang  air  tinggi. Selain  itu  matrik  mampu  mengalirkan  air yang  tinggi,  memiliki  luas  permukaan  yang besar,  berat  jenis  rendah,  dan  mampu melekat pada kulit benih (Khan et al ., 1992). Bahan-bahan yang digunakan untuk matriconditioning di antaranya adalah karbon aktif,  arang  sekam,  serbuk  gergaji,  abu gosok,  zeolit,  vermikulit  dan micro-Cel  E (Yunitasari dan Ilyas, 1994).
Matriconditioning efektif meningkatkan  perkecambahan  berbagai  jenis benih.    Perlakuan  ini  dapat  diintegrasikan dengan  zat  pengatur  tumbuh,  pestisida sintetis  atau  nabati,  atau  mikroba  yang berfungsi  sebagai  agen  biokontrol.  Perlakuan matriconditioning plus Bacillus subtilis pada benih padi  menghasilkan  pertumbuhan    bibit  dan penurunan  persentase X. oryzae pv. oryzae yang lebih  baik  dari  pada  perlakuan  lain  yang  diuji. Perlakuan matriconditioning plus  minyak  sereh wangi  1  %  menghasilkan  daya  berkecambah tertinggi,  meningkatkan  indeks  vigor,  dan menurunkan  tingkat  infeksi X.  oryzae pv. oryzae (Ilyas et al ., 2008). Pengendalian Cmm mulai dari tahapan  persiapan  benih  diharapkan  mampu memperbaiki mutu kesehatan benih dan perlakuan
invigorasi  diharapkan  dapat  memperbaiki  mutu fisiologis benih.
Tujuan penelitian adalah (1) mengevaluasi  efektivitas  berbagai  perlakuan benih  untuk  mengeliminasi Cmm dari  lot benih  tomat  terinfeksi,  (2)  mengevaluasi mutu  fisiologis  benih  tomat  terinfeksi Cmm akibat perlakuan benih menggunakan minyak kulit kayu manis, ekstrak rizoma temulawak, ekstrak  daun  sirih  hutan,  dan  minyak cengkeh dengan atau tanpa matriconditioning menggunakan bubuk arang sekam.

## BAHAN DAN METODE
Percobaan dilakukan di Laboratorium Bakteriologi  dan  Teknologi  Benih  Fakultas Pertanian  Universitas  Andalas  Padang  dari bulan September hingga Desember 2009.

## Minyak  dan  Ekstrak  Tumbuhan  sebagai
Bakterisida Nabati .
Minyak  dan  ekstrak  tumbuhan  yang digunakan adalah minyak cengkeh ( Syzygium aromaticum ),  minyak  kulit  kayu  manis ( Cinnamomum burmannii ), ekstrak daun sirih hutan  ( Piper  aduncum ),  ekstrak  rizoma temulawak  ( Curcuma  xanthorrhiza )  dengan konsentrasi  yang  efektif  menghambat Cmm pada  benih  tomat  terinfeksi.  Minyak  dan ekstrak  tumbuhan  tersebut  diperoleh  dari Laboratorium  Kimia  Bahan  Alam  FMIPA Universitas Andalas Padang.

## Benih Tomat Terinfeksi Buatan
Benih  tomat  yang  digunakan  adalah cv.  Marta  nomor  lot  6107516024.  Benih tomat  yang  terinfeksi Cmm secara  alami tidak  tersedia,  maka  lot  benih  tomat terinfeksi berat oleh Cmm didapatkan dengan perlakuan inokulasi buatan ( artificial inoculation ).    Inokulasi  buatan  dilakukan dengan  merendam  benih  tomat  di  dalam suspensi  isolat Cmm SLK-11  yang  diisolasi dari  buah  tomat  yang  bergejala bird’s  eye spot berasal  dari  Danau  Kembar,  Solok (Zainal et  al ., 2008)  dengan  konsentrasi  3  x 10 8 cfu  ml -1 dan  dikocok  di  atas shaker dengan kecepatan 300 rpm selama 30 menit.
Benih  yang  telah  diinokulasi  dikeringkan dengan  tiupan  udara  hangat,  berasal  dari pengering  rambut  ( hair  drier )  yang  diatur pada  suhu  sekitar  36 0 C,  selama  45  menit kecepatan  angin  40  km/jam.    Jarak  antara pengering rambut dengan benih diatur sekitar 20 cm. Pengeringan benih dilakukan sehingga  kadar  air  benih  setelah  perlakuan mendekati  kadar  air  benih  awal  sebelum perlakuan  (7-8  %).  Benih  disimpan  dalam wadah  plastik  kedap  udara  selama  satu minggu sebelum digunakan dalam percobaan berikutnya.
Penentuan  Efektivitas  Eliminasi Cmm dengan  Minyak  dan  Ekstrak  Tumbuhan dari Lot Benih Tomat Terinfeksi
Efektivitas  eliminasi Cmm dari  lot benih  tomat  terinfeksi  dievaluasi  dengan menggunakan  empat  jenis  minyak  dan ekstrak  tumbuhan  dengan  konsentrasi  yang efektif  menghambat Cmm berdasarkan  uji daya  hambat  minyak  dan  ekstrak  tumbuhan terhadap Cmm pada  benih terinfeksi. Eliminasi Cmm dari  lot  benih  terinfeksi menggunakan minyak dan ekstrak tumbuhan tanpa  atau  dengan  diinkorporasikan  dalam matriconditioning menggunakan bubuk arang sekam.
Percobaan  disusun  dalam  rancangan acak  lengkap  (RAL)  dengan  sepuluh  macam perlakuan  benih.  Masing-masing  perlakuan diulang tiga kali sehingga terdapat 30 satuan percobaan.  Setiap  perlakuan  disiapkan  tiga kantong  benih  tomat  terinfeksi  buatan Cmm (14  g).    Perlakuan  benih  terdiri  atas  (1) perendaman  dalam  minyak  kulit  kayu  manis 5  %  selama  20  menit,  (2) matriconditioning plus  minyak  kulit  kayu  manis  5  %,  (3) perendaman  dalam  minyak  cengkeh  0,5  % selama  20  menit,  (4) matriconditioning plus minyak  cengkeh  0,5  %,  (5)  perendaman dalam  ekstrak  daun  sirih  hutan  5  %  selama 20  menit,  (6) matriconditioning plus  ekstrak daun sirih hutan 5 %, (7) perendaman dalam ekstrak  rizoma  temulawak  5  %  selama  20 menit,  (8) matriconditioning plus  ekstrak rizoma temulawak 5 %, (9)
matriconditioning saja,  dan  (10)  benih
terinfeksi Cmm tanpa  perlakuan  benih sebagai kontrol.
Benih  tomat  terinfeksi Cmm 14  g direndam  selama  20  menit  dalam  90  ml larutan  minyak  dan  ekstrak  tumbuhan  sesuai dengan  perlakuan  benih  tersebut  di  atas, dengan  penambahan  5  tetes Tween 80  steril. Matriconditioning dilakukan dengan
menyatukan  benih  terinfeksi Cmm dalam satuan gram terhadap masing-masing minyak atau  ekstrak  tumbuhan  sesuai  dengan perlakuan  benih  tersebut  di  atas  dalam milliliter  ke  dalam  botol  kultur  250  ml  dan terakhir  menambahkan  bubuk  arang  sekam sebagai carrier (ukuran  ∞  210  µ/65 mesh ) dalam  satuan  gram  kemudian  diaduk  rata. Perbandingan  antara  benih,  bubuk  arang sekam dan ekstrak tumbuhan adalah 2 : 1 : 1. Perlakuan matriconditioning tanpa  ekstrak tumbuhan  digantikan  dengan  akuades  steril. Benih  tomat  terinfeksi  yang  tidak  diberi perlakuan, langsung diekstraksi untuk menentukan jumlah koloni bakteri.
Matriconditioning dilakukan  pada suhu 22 0 C dan RH 60-70 % di bawah cahaya lampu  diinkubasi  selama  4  hari.    Selama waktu tersebut benih yang sedang diconditioning diaduk  beberapa  kali.  Setelah perlakuan,  benih  dibilas  satu  kali  dengan akuades  steril  dan  dikeringkan  kembali dengan hair  drier sebagaimana  yang  telah diuraikan  sebelumnya.  Benih  terinfeksi  yang telah diberi perlakuan masing-masing sejumlah 6 g diekstraksi menggunakan buffer PBT  dan  cairan  hasil  ekstraksi  benih diencerkan  hingga  100  kali.  Ekstrak  benih yang telah diencerkan  (0,5 ml)  ditumbuhkan dalam  media  SCM  dalam  ruang  bersuhu  26- 28 0 C.    Jumlah  koloni Cmm dan  bakteri saprofit  lainnya  yang  tumbuh  dalam  media SCM  dihitung  pada  10  hari  setelah dilution plating .
Evaluasi  Mutu  Fisiologis  Benih  Tomat Terinfeksi  setelah  Eliminasi Cmm dengan Minyak dan Ekstrak Tumbuhan
Pengaruh  terhadap  mutu  fisiologis benih  tomat  terinfeksi  dievaluasi  setelah perlakuan  eliminasi Cmm. Benih  terinfeksi yang  telah  diberi  perlakuan  masing-masing
sejumlah 6 g digunakan untuk evaluasi mutu fisiologis  benih.  Benih  terinfeksi  yang  telah diperlakukan  dibilas  satu  kali  dengan akuades  steril  dan  dikeringkan  kembali dengan hair  drier sebagaimana  yang  telah diuraikan sebelumnya. Benih terinfeksi Cmm yang  tidak  diberi  perlakuan  langsung digunakan  untuk  evaluasi  mutu  fisiologis benih.
Benih terinfeksi yang telah diperlakukan dikecambahkan dalam bak/wadah  plastik  berisi  substrat  pasir  steril dan dengan metode top of paper .  Bak/wadah plastik  berukuran  20  x  35  x  7,5  cm  (lebar  x panjang  x  tinggi)  diisi  dengan  pasir  steril sekitar  dua  per  tiganya,  dilembabkan, kemudian  benih  tomat  ditanamkan  di  pasir tersebut.    Bak/wadah  plastik  tersebut ditempatkan  di  rumah kaca.   Pengujian pada metode top  of  paper kertas  yang  digunakan terdiri atas dua lembar kertas merang sebagai alas  dan  tiga  lembar  kertas  tisu  yang ditempatkan  di  atas  kertas  merang.    Substrat kertas ini ditempatkan di dalam kotak plastik. Benih dikecambahkan di atas kertas tisu yang sebelumnya telah dilembabkan. Kotak plastik berisi  benih  tersebut  kemudian  ditutup dengan  kaca  transparan  dan  ditempatkan pada  ruang  inkubasi  pada  suhu  kira-kira  23 0 C.
Unit  percobaan  terdiri  atas  satu
wadah  plastik  berisi  pasir  steril  tempat penanaman benih atau metode top of paper di dalam kotak plastik, masing-masing perlakuan  ditanam  100  benih  tomat  dan masing-masing  perlakuan  terdiri  atas  tiga ulangan.  Pengamatan  dilakukan  terhadap parameter  viabilitas  dan  vigor  benih  yang meliputi  daya  berkecambah  (DB),  kecepatan tumbuh (K CT ), indeks vigor (IV), waktu yang dibutuhkan  untuk  mencapai  50  %  total pemunculan kecambah (T 50 ).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Efektivitas Eliminasi
Cmm dengan Minyak  dan  Ekstrak  Tumbuhan  dari  Lot Benih Tomat Terinfeksi
Benih  tomat  terinfeksi  yang  diberi perlakuan matriconditioning plus  minyak cengkeh 0,5 %, ekstrak daun sirih hutan 5 %, ekstrak rizoma temulawak 5 %, minyak kulit manis  5  %, atau  yang  direndam  dalam minyak  cengkeh  0,5  %  selama  20  menit dapat  mengeliminasi  tingkat  infeksi Cmm lebih  99  %.    Perlakuan  perendaman  benih tomat  terinfeksi  di  dalam  ekstrak  rizoma temulawak,  ekstrak  daun  sirih  hutan,  atau minyak  kulit  kayu  manis  5  %  tanpa matriconditioning bisa  menurunkan  tingkat infeksi Cmm hingga 98 % (Tabel 1).
Tabel 1.  Tingkat infeksi Cmm isolat SLK-11 dan bakteri saprofit selain Cmm pada benih tomat sebelum dan sesudah perlakuan benih  serta persentase eliminasi Cmm oleh perlakuan benih
Perlakuan pada benih tomat terinfeksi Cmm
Bakteri patogen Cmm Infeksi bakteri saprofit (cfu/ml) Tingkat infeksi (cfu/ml) Persentase eliminasi * Tanpa perlakuan benih 373,7 x 10 2 a 0 4,3 x 10 2 a Temulawak 5 %, 20’ 5,0 x 10 2 b 98 2,7 x 10 2 ab Sirih hutan 5 %, 20’ 5,0 x 10 2 b 98 2,7 x 10 2 ab Kulit manis 5 %, 20’ 4,0 x 10 2 b 98 3,0 x 10 2 a Minyak cengkeh 0,5 %, 20’ 3,7 x 10 2 b 99 3,7 x 10 2 a Matriconditioning 365,0 x 10 2 a 2 4,7 x 10 2 a Matriconditioning plus sirih hutan 5% 3,0 x 10 2 b 99 3,3 x 10 2 a Matriconditioning plus temulawak 5% 3,3 x 10 2 b 99 2,3 x 10 2 ab
Matriconditioning plus kulit manis 5% 2,3 x 10 2 b 99 2,7 x 10 2 ab
Matriconditioning plus minyak cengkeh 0,5% 0,7 x 10 2 b 99 1,3 x 10 2 b
Keterangan: Data pada kolom dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNJ pada  taraf  nyata  5  %.  *Dihitung  dengan  rumus    =    ([T 0 -T S ]/T 0 )  x  100  %;  T 0 = tingkat infeksi Cmm tanpa perlakuan benih dan T S = tingkat infeksi Cmm dengan perlakuan benih
Hasil  percobaan  juga  menunjukkan tidak  terdapat  perbedaan  penurunan  jumlah populasi  bakteri  saprofit,  kecuali  pada perlakuan matriconditioning plus  minyak cengkeh  0,5  %. Matriconditioning plus minyak
cengkeh 0,5 % mampu
mengeliminasi  bakteri Cmm dan  saprofit selain Cmm yang  menginfeksi  benih  tomat. Fokus  penelitian  yang  dilakukan  adalah menguji  efektivitas  minyak  dan  ekstrak tumbuhan  untuk  mengeliminasi Cmm dari benih tomat.
Pengaruh Mutu Fisiologis Benih Tomat Terinfeksi setelah Eliminasi Cmm dengan Minyak dan Ekstrak Tumbuhan
Gambar 1. Performan pengecambahan benih tomat pada berbagai  perlakuan benih : (a) sebelum benih diinokulasi buatan dengan Cmm di substrat pasir daya berkecambahnya 80 %,
(b)  benih  terinfeksi Cmm diberi  perlakuan matriconditioning plus  minyak  cengkeh 0,5  %  di  substrat  pasir  daya  berkecambahnya  98  %,  (c)  benih  terinfeksi Cmm perlakuan matriconditioning plus minyak kulit kayu manis 5 % di substrat pasir daya berkecambahnya  51  %,  dan  (d)  pengecambahan  benih  di  substrat  kertas.  Setiap perlakuan  terdiri  atas  100  benih  tomat  yang  dikecambahkan  di  substrat  pasir  dan substrat kertas tissu
Daya  berkecambah  benih  awal  sebelum diinokulasi buatan dengan Cmm adalah 80 % pada  substrat  pasir  dan  82  %  pada  substrat kertas  (Gambar  1a).    Daya  berkecambah benih di substrat pasir menunjukkan berbeda nyata  dengan  yang  tidak  diberi  perlakuan benih,  daya  berkecambah  benih  di  substrat kertas tidak berbeda nyata dengan yang tidak diberi perlakuan benih kecuali
matriconditioning plus  minyak  kulit  kayu manis 5 %. Daya berkecambah benih dengan matriconditioning plus  minyak  kulit  kayu manis  5  %  hanya  51  %  (Gambar  1c),  angka tersebut  berbeda  nyata  dengan  yang  tidak diberi  perlakuan  benih  dan  perlakuan  benih lain  pada  kedua  substrat  perkecambahan (Tabel 2).
Tabel  2.    Pengaruh  berbagai  perlakuan  benih  menggunakan  ekstrak  uji  terhadap  daya berkecambah benih tomat yang terinfeksi Cmm pada dua substrat perkecambahan
Perlakuan pada benih tomat terinfeksi Cmm Daya berkecambah benih (%) Substrat pasir  Substrat kertas Tanpa perlakuan benih 79  c 90 a Temulawak 5%, 20’ 97  a 97 a Sirih hutan 5%, 20’ 98  a 98 a Kulit kayu manis 5%, 20’ 85  bc 84 a Minyak cengkeh 0,5%, 20’ 98  a 97 a Matriconditioning 98  a 97 a Matriconditioning plus sirih hutan 5% 97  a 98 a Matriconditioning plus temulawak 5% 94  ab 81 a Matriconditioning plus kulit kayu manis 5% 51 d 51 b Matriconditioning plus minyak cengkeh 0,5% 98  a 91 a
Keterangan:    Data  pada  kolom  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama,  tidak  berbeda  nyata berdasarkan uji BNJ pada taraf nyata 5 %.  Daya berkecambah awal benih tomat sebelum  inokulasi  buatan  dengan Cmm pada  Substrat  pasir  dan  Substrat  kertas masing-masing 80 % dan 82 %
Pola  yang  sama  pada  Tabel  3 menunjukkan  kecepatan  tumbuh  benih  di substrat  pasir  berbeda  nyata  dengan  yang tidak diberi perlakuan benih kecuali perendaman  dalam  minyak  kulit  kayu  manis 5  %.  Kecepatan  tumbuh  benih  dengan matriconditioning plus  minyak  kulit  kayu manis  5  %  dan matriconditioning plus
minyak cengkeh 0.5 % berbeda nyata dengan yang tidak diberi perlakuan benih di substrat kertas.  Kecepatan  tumbuh  benih  dengan matriconditioning plus  minyak  kulit  kayu manis 5 % hanya sekitar 8 % hari -1 yang jauh lebih rendah dibandingkan dengan perlakuan benih  yang  lain  atau  tanpa  perlakuan  benih (Tabel 3).
Tabel  3.    Pengaruh  berbagai  perlakuan  benih  menggunakan  ekstrak  uji  terhadap  kecepatan tumbuh benih tomat yang terinfeksi Cmm pada dua substrat perkecambahan Perlakuan pada benih tomat terinfeksi Cmm Kecepatan tumbuh (%/hari) Substrat pasir Substrat kertas Tanpa perlakuan benih 14  c 20  bc Temulawak 5 %, 20’ 28  a 20  bc Sirih hutan 5 %, 20’ 26  a 21  b Kulit kayu manis 5 %, 20’ 15  c 14  c Minyak cengkeh 0.5 %, 20’ 26  a 24  b Matriconditioning 19  b 25  ab Matriconditioning plus sirih hutan 5 % 19  b 21  b Matriconditioning plus temulawak 5 % 19  b 19  bc Matriconditioning plus kulit kayu manis 5 % 7  d 8  d Matriconditioning plus minyak cengkeh 0.5 % 25  a 31  a
Catatan:    Data  pada  kolom  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama,  tidak  berbeda  nyata berdasarkan  uji  BNJ  pada  taraf  nyata  5  %,    Kecepatan  tumbuh  benih  tomat  sebelum inokulasi  buatan  dengan Cmm (benih  awal)  pada  substrat  pasir  dan  substrat  kertas masing-masing 16 dan 22 % hari -1 .
Indeks  vigor  benih  di  substrat  pasir berbeda  nyata  dengan  yang  tidak  diberi perlakuan  benih  kecuali  perendaman  dalam minyak  kulit  kayu  manis  5  %.  Indeks  vigor benih  pada  substrat  kertas  tidak  berbeda
nyata kecuali matriconditioning plus  minyak kulit kayu manis 5 %. Matriconditioning plus minyak  kulit  kayu  manis  5  %  menunjukkan indeks  vigor  yang  nyata  lebih  rendah  yakni mencapai 22 % dan 25 % (Tabel 4).
Tabel  4.    Pengaruh  berbagai  perlakuan  benih  menggunakan  ekstrak  uji  terhadap  indeks  vigor (IV) benih tomat yang terinfeksi Cmm pada dua substrat perkecambahan.
Perlakuan pada benih tomat terinfeksi Cmm Indeks vigor (%) Substrat pasir  Substrat kertas Tanpa perlakuan benih 66  b 77  a Temulawak 5%, 20’ 97  a 92  a Sirih hutan 5%, 20’ 98  a 98  a Kulit kayu manis 5%, 20’ 59  b 59  ab Minyak cengkeh 0.5%, 20’ 96  a 95  a Matriconditioning 91  a 88  a Matriconditioning plus sirih hutan 5% 91  a 78  a Matriconditioning plus temulawak 5% 92  a 72  a Matriconditioning plus kulit kayu manis 5% 22  c 25  b Matriconditioning plus minyak cengkeh 0.5% 98  a 89  a
Keterangan:  Angka-angka  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama,  tidak  berbeda  nyata berdasarkan  uji  BNJ  pada  taraf  nyata  5  %,    Indeks  vigor  benih  tomat  sebelum inokulasi  buatan dengan Cmm (benih  awal) pada  substrat  pasir dan  substrat kertas masing-masing 66 % dan 77 %.
Waktu  yang  dibutuhkan  untuk mencapai  50  %  benih  berkecambah  akibat berbagai  perlakuan  benih  pada  substrat  pasir dan  kertas tidak berpengaruh  kecuali matriconditioning plus  minyak  kulit  kayu manis 5 %. Waktu yang dibutuhkan untuk 50 %  benih  berkecambah  sekitar  3-6  hari  yang
tidak  berbeda  nyata  dengan  tanpa  perlakuan benih,  sedangkan matriconditioning plus minyak  kulit  kayu  manis  5%  membutuhkan waktu nyata lebih lama mencapai 50 % benih berkecambah  yaitu    11.0  hari  pada  substrat kertas  atau  13.3  hari  pada  substrat  pasir (Tabel  5).
.
Tabel  5.    Pengaruh  berbagai  perlakuan  benih  menggunakan  ekstrak  uji  terhadap  waktu  yang dibutuhkan untuk berkecambah 50 % (T 50 ) benih tomat  yang terinfeksi Cmm pada dua substrat perkecambahan.
Perlakuan pada benih tomat terinfeksi Cmm T 50 (hari) Substrat pasir  Substrat kertas Tanpa perlakuan benih 5.2  bc 4.5   bc Temulawak 5%, 20’ 3.0 d 4.7   bc Sirih hutan 5%, 20’ 3.3 cd 4.5   bc Kulit kayu manis 5%, 20’ 6.3  b 6.6   bc Minyak cengkeh 0.5%, 20’ 3.4 cd 5.0   bc Matriconditioning 4.7  bcd 3.5   bc Matriconditioning plus sirih hutan 5% 4.5 bcd 5.3   bc Matriconditioning plus temulawak 5% 4.7 bcd 6.7  b Matriconditioning plus kulit kayu manis 5% 13.3 a 11.0  a Matriconditioning plus minyak cengkeh 0.5%              3.6 cd 2.6  c
Keterangan:  Data  pada  kolom  yang  diikuti  dengan  huruf  yang  sama,  tidak  berbeda  nyata berdasarkan  uji  BNJ  pada  taraf  nyata  5  %,    T 50 benih  tomat  sebelum  inokulasi buatan dengan Cmm (benih awal) pada substrat pasir dan substrat kertas

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Perlakuan  minyak  cengkeh  0.5  % tanpa  atau  dengan  diinkorporasikan  dalam matriconditioning mengeliminasi 99 % Cmm dari  benih  terinfeksi.  Ketidakmampuan perlakuan benih menggunakan minyak cengkeh 0.5 % tersebut untuk mengeliminasi Cmm secara  total,  diduga  karena  minyak cengkeh  tidak  dapat  menjangkau Cmm yang ada  di  bagian  dalam  benih  tomat  atau konsentrasi Cmm pada  benih  tomat  hasil inokulasi buatan sangat tinggi. Jika perlakuan yang  sama  digunakan  untuk  mengeliminasi Cmm dari benih tomat terinfeksi secara alami yang  tingkat  infeksinya  jauh  lebih  rendah dibandingkan  dengan  inokulasi  buatan, perlakuan  minyak  cengkeh  0.5  %  tanpa  atau dengan
diinkorporasikan
dalam matriconditioning diduga dapat
mengeliminasi Cmm hingga  100  %  seperti yang  sudah  dilakukan  oleh  (Anwar et  al ., 2004).
Perlakuan  benih  dengan  ekstrak rizoma  temulawak  5  %,  ekstrak  daun  sirih hutan 5 %, atau minyak cengkeh 0.5 % tanpa
atau dengan diinkorporasikan dalam matriconditioning tidak  berpengaruh  negatif terhadap  perkecambahan  benih,  kecepatan tumbuh,  indeks  vigor,  dan  T 50 dari  benih tomat terinfeksi Cmm . Bahan aktif xanthorizol pada temulawak (Rukayadi et al ., 2006),  eugenol  pada  minyak  cengkeh (Nurdin et  al .,    2001),    2’,6’- dihydroxy - 4’ methoxychalcone pada sirih  hutan (Torres- Santos et  al .  1999;  Rali et  al. 2007)  tidak menghambat daya berkecambah benih tomat.
Ekstrak  rizoma  temulawak,  ekstrak daun  sirih  hutan,  dan  minyak  cengkeh  dapat dimanfaatkan  untuk  perlakuan  benih  karena selain eliminasi Cmm pada benih, penampilan  perkecambahan  yang  baik  dan laju  perkecambahan  serta  keseragaman tumbuh  yang  tinggi  tetap  terjaga  setelah benih  diberi  perlakuan.  Ekstrak  rizoma temulawak  dan  ekstrak  daun  sirih  hutan memerlukan  konsentrasi  yang  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  minyak  cengkeh,  hal ini  tidak  efektif  bila  dikembangkan  secara komersial  karena  tingginya  konsentrasi menuntut  penyediaan  estrak  tumbuhan  yang
lebih  banyak.  Penggunaan  minyak  dan ekstrak  tumbuhan  untuk  dapat  diterima  oleh industri benih, disyaratkan bahwa penampilan  perkecambahan  yang  baik  dan laju  perkecambahan  serta  keseragaman tumbuh  yang  tinggi  tetap  terjaga  setelah benih diberi perlakuan.
Ekstrak  rizoma  temulawak,  ekstrak daun  sirih  hutan,  dan  minyak  cengkeh  dapat diterapkan  langsung  oleh  petani  dengan jumlah  benih  yang  relatif  sedikit  sebelum persemaian. Jika perlakuan ini akan diterapkan  pada  skala  produsen  benih komersial  perlu  dikaji  terlebih  dahulu terutama  pengembangan  formulasi  minyak dan ekstrak tumbuhan untuk tujuan perlakuan benih  atau penyimpanan benih  dalam  jangka waktu  tertentu.  Kajian  viabilitas  dan  vigor benih menggunakan substrat pasir lebih dapat membedakan efek perlakuan benih dibandingkan substrat kertas.
Minyak  cengkeh  0.5  %  tanpa  atau dengan diinkorporasikan dalam matriconditioning lebih efektif dalam eliminasi Cmm dan perbaikan mutu fisiologis benih  tomat  dibandingkan  dengan  ekstrak daun  sirih  hutan  dan  ekstrak  rizoma temulawak tanpa atau dengan diinkorporasikan dalam matriconditioning .
Perlakuan matriconditioning plus minyak  kulit  kayu  manis  5%  menurunkan daya berkecambah, kecepatan tumbuh, indeks  vigor,  atau  T 50 benih  tomat  terinfeksi dibanding  tanpa  perlakuan  benih.  Minyak kulit kayu manis tidak memenuhi syarat bagi perlakuan  benih  untuk  dapat  diterima  oleh industri  benih.  Bahan  aktif  kulit  kayu  manis cinnamaldehyde (Maidment et  al .,  2006) diduga  menghambat  daya  berkecambah benih tomat.

## SIMPULAN DAN SARAN
Hasil  penelitian  ini  disimpulkan bahwa  perlakuan  eliminasi Cmm pada  benih dengan  ekstrak  rizoma  temulawak  5  %, ekstrak  daun  sirih  hutan  5  %,  minyak  kulit kayu manis 5 %, dan minyak cengkeh 0.5 % tanpa atau diinkorporasikan dalam matriconditioning menggunakan bubuk arang
sekam,  mampu  menurunkan  tingkat  infeksi Cmm hingga  99  %.  Eliminasi Cmm pada benih  akibat  perlakuan  dengan  minyak  dan ekstrak tumbuhan tersebut tidak menurunkan daya berkecambah, kecepatan tumbuh, indeks  vigor,  atau  waktu  yang  dibutuhkan untuk  mencapai  50  %  total  pemunculan kecambah  (T 50 )  benih  kecuali  perlakuan dengan  minyak  kulit  kayu  manis  5  %  tanpa atau diinkorporasikan dalam matriconditioning .

## ACKNOWLEDGMENT
Part of this research was supported by Competitive  Grant  ( Hibah  Bersaing )  XIV, entitled:  Management  of  New  Tomato Disease  (Bacterial  Wilt  and  Bacterial Canker) in Indonesia, Contract No.
005/SP3/PP/DP2M/II/2006,  February  01, 2006,  from  the  Department  of  National Education,
Republic of Indonesia, coordinated by AA. The authors acknowledge  Dr  Giyanto  as  part  of  AZ’s PhD advisory committee.  AZ was supported by  BPPS  from  Department  of  National Education,  Republic  of  Indonesia  to  pursue PhD degree at Bogor Agricultural University, Indonesia.

## DAFTAR PUSTAKA
Anwar,  A.,  van  der  Zouwen,  P.S.,  lIyas,  S., van  der  Wolf,  J.M.  2004.  Bacterial Canker (Clavibacter  michiganensis subsp. michiganensis) of  Tomato  in Commercial Seed Produced in Indonesia. Plant Disease. 88:680.
Bowers,  J.H.,  Locke,  J.C.  2004.  Effect  of Formulated Plant Extracts  and Oil on Population  Density  of Phytophthora nicotiana in  Soil  and  Control  of Phytophthora blight
in the
Greenhouse. Plant Disease. 88:11-16.
Ilyas,  S.  2006.    Seed  Treatments  Using
Matriconditioning to Improve
Vegetable  Seed  Quality. Buletin Agronomi Vol. 34 (2): 124-132.
Ilyas,  S.,  Amiyarsi, T.S.  Kadir.   2008.  Metode Uji  dan  Teknik  Peningkatan  Kesehatan Benih Padi [Makalah] dalam Sinkronisasi Pengembangan Mutu Benih.  Balai Besar Pengembangan  Pengujian  Mutu  Benih Tanaman  Pangan  dan  Hortikultura; Banten,  26-28  Agustus  2008.    Hal  1-16 (tidak dipublikasikan).
Ilyas,  S.,  G.A.K.  Sutariati,  F.C.  Suwarno, Sudarsono.  2002.  Matriconditioning Improves  the  Quality  and  Protein Level  of  Medium  Vigor  Hot  Pepper Seed. J. Seed Technology 24 (1): 66- 75.
Khan,    A.A.,  Maquire,  J.D.,  Abawi,  G.S., Ilyas, S.  1992.  Matriconditioning of Vegetable  Seeds  to  Improve  Stand Establisment in Early Field Plantings.
J.  Amer.  Soc.  Hort.  Sci .  117  (1):  41- 47.
Maidment, C., Dyson, A., Hayson,  L.   2006.
A  Study  Into  the  Antimicrobial
Effects Of Cloves ( Syzgium aromaticum )
and Cinnamon ( Cinnamomum  zeylanicum )  Using Disc-Diffusion Assay. J . Nutrition &
Food Science Vol. 36 (4):  225-230.
Nurdin,  A.,  Mulyana,  A.,  Suratno,  H. 2001.
Isolation  Eugenol  dari  Minyak  Daun Cengkeh  Skala  Pilot  Plant. J.  Sains dan  Teknologi  Indonesia Vol  3  (9): 58-62.
Park,  J.H.,    Kim,  M.J.,  Park,  K.K.,  Kim, H.O., Hwang, J.K. 2003. Chemopreventive Effect of Xanthorhizol from Curcuma xanthorrhiza . Journal  of  Korean Association  of  Canker    Prevention Vol. 8 (2): 91-97.
Paul,  P.K., Sharma, P.D.  2002. Azadirachta indica Leaf Extract Induces Resistance  in  Barley  Against  Leaf Stripe  Disease. Physiological  and Molecular  Plant  Pathology Vol.  61  :
3-13.
Pino, J.A., R. Marbot, A. Bello, A. Urquiola.
2004.  Essential Oils of Piper peltata (L.) Miq and Piper aduncum L . from
Cuba. J.  Essent.  Oil  Res .  Vol.  16. 124-126.
Rali T, Wossa, S.T., Leach, D.N., Waterman, P.G.  2007.    Volatile  Chemical Constituents of Piper aduncum L. and Piper
gibbilimbum
C. DC ( Piperaceae ) from Papua New
Guinea. Molecules Vol.  12  :  389- 394.
Rukayadi,  Y., Yong,  D., Hwang, J.K. 2006. In  Vitro Anticandidal  Activity  of Xanthorrhizol Isolated from Curcuma xanthorrhiza Roxb. Journal of Antimicrobial Chemotherapy Vol.  57 : 1231-1234.
Torres-Santos,  E.C.,  Moreira,  D.L.,  Kapan,
M.A.C.,  Mierelles,  M.N.,  Rossi- Bergmann,  M.N.  1999.  Selective Effect
of 2’,6’-Dehydroxy- 4’Methoxychalcone  Isolated  from Piper aduncum on Leishmania amazonensis .    Antimicrob.  Agents.
Chemother Vol.  43 : 1234-1241.
Vasudevan,  P.,  Reddy,  M.S.  2002.  Role  of Preparation  in  Enhancement  of  Rice Seedling  Growth  and  Grain  Yields. Centre  for  Advanced  Studies  in Botany  University  of  Madras  Guindy Campus.  Chenna.  India. Current Science Vol 83 (9).
Yunitasari,  M.,  Ilyas,  S.  1994.  Possible  Use of Several Solid Carriers for Matriconditioning of Pepper
( Capsicum  annuum L.). Keluarga Benih Vol. 5 (2): 29-34.
Zainal,  A.,  Anwar,  A.,  Khairul,  U., Sudarsono.    2008.    Distribution  of Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis in  Various  Tomato Production  Centers  in  Sumatera  and Java. Microbiology Indonesia Vol. 2 (2): 63-68.