## INTRODUKSI FORMULA RIZOBAKTERIA
Bacillusthuringiensis pv . toumanoffi PADA TANAMAN KEDELAI UNTUK PENINGKATAN KETAHANAN TERHADAP  PENYAKIT PUSTUL  BAKTERI ( Xanthomonas axonopodis pv glycines ) DI LAPANGAN
(Introduction of Bacillus thuringiensis pv. toumanoffi Formula to Increase Soybean Resistance Against Bacteria Pustul Disease (Xanthomonas axonopodis pv. glycines))
Julio Eiffelt Rossaffelt Rumbiak 1 , Trimurti Habazar 2 , Yulmira Yanti 2
1 Staf Pengajar JurusanAgroekoteknologi Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa
2 Staf Pengajar Program Studi Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Andalas
Jl. Raya Jakarta KM 04, Pakupatan, Serang, Banten Telp. 0254-280330, Fax. 0254-281254, e-mail: julio.eiffelt@untirta.com

## ABSTRACT
Bacillus  thuringiensis  srv.toumanoffi is  an  indigenous  endophytic  rizobacteria from  healthy  soybean  rizosphere  capable  of  controlling  bacterial  pustule  disease ( Xanthomonas  axonopodis pv glycines ).  Rhizobacteria  needs  to  be  formulated  to remain  effective  in  storage  and  application.  The  aimed  of  this  research  was  to obtain  a  stable  bacterial  formula  in  controlling  bacterial  pustule  disease  in soybeans.  This  research  was  designed  in  factorial  in  a  randomized  group consisting of 13 treatments with 3 replications. The Treatment  was a combination of  carrier  material  (peat,  tapioca  and  coconut  water+1%  palm  oil)  and  storage time  (0,  2,  4,  and  6  weeks).  Soybean  seeds  were  introduced  with  each Bacillus thuringiensis srv. toumanoffi formula before planting. The results showed that the formula Bacillus  thuringiensissrv . toumanofi was relatively stable in  suppressing the  incidence  and  severity  of  bacterial  pustule  disease  in  soybean  leaf.  The  best formula  for  controlling  bacterial  pustules    was Bacillus  thuringiensis  srv. toumanoffi in peat, coconut water + palm oil and tapioca each 2 weeks storage.
Keywords: Bacillus  thuringiensis  srv.  toumanoffi ,  Formulation,  Soybean, Xanthomonas axonopodispvglycines

## PENDAHULUAN
Pustul  bakteri  adalah  salah satu penyakit utama yang disebabkan oleh Xanthomonas  axonopodis  pv. glycines ( Xag ) pada tanaman kedelai.
Xag dapat menurunkan produktivitas kedelai mencapai 57,61% pada inang yang  rentan  dan  kondisi  lingkungan yang  mendukung  (Kaewnum et  al. ,
2005).  Pengendalian  penyakit  pustul
bakteri yang dianjurkan yaitu menggunakan bakterisida (Singh dan Jain,  1988)  dan  varietas  tahan  (Kim et  al. ,  2011).  Bakterisida  berbahaya terhadap  lingkungan  dan  organisme bukan sasaran. Bakterisida
mengandung  molekul  tidak  bisa terurai  di  dalam  tanah  dan  bersifat racun  terhadap  organisme  bukan sasaran  serta  timbulnya  bakteri  yang
resisten terhadap bakterisida (Agrios, 2005). Xanthomonas  axonopodis  pv.
glycines memiliki  genotip  yang beragam sehingga penggunaan varietas tahan tidak efektif (Rukayadi, 1995) dan tingkat virulensi  yang  berbeda  (Khaeruni et al .,  2008).  Alternatif  pengendalian penyakit  pustul  bakteri  yang  aman adalah  dengan  memanfaatkan  agens hayati  yaitu  dengan  menggunakan bakteri  endofit  indigenus  yaitu Btt . Bakteri  tersebut adalah  kelompok rizobakteri  telah  banyak  dilaporkan mampu mengendalikan penyakit yang disebabkan oleh bakteri (Habazar et  al. ,  2012).  Beberapa hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa penggunaan rizobakteri dapat mengendalikan penyakit pustul bakteri pada kedelai (Prathuangwong dan Buensanteai, 2007). Umumnya aplikasi rizobakteri  masih  dalam  bentuk suspensi  sel.  Pada  kondisi  tersebut menyebabkan populasi bakteri menurun  dengan  cepat  sehingga tidak  efektif  dalam  mengendalikan penyakit  tanaman.  Bakteri  tersebut juga bersaing terhadap mikroorganisme  lain  yang  memiliki daya  adaptasi  yang  lebih  baik.  Oleh karena itu, rizobakteri perlu diformulasi  agar  kepadatan  populasi dapat  dipertahankan  sehingga  efektif dalam  mengendalikan  penyakit  dan memudahkan dalam penggunaan dan pemasaran  (Nakkeeran et  al. ,  2006).
Bahan  pembawa  dalam  formulasi antara  lain  tanah  gambut,  tepung tapioka,  arang,  tanah  liat,  bahan anorganik  (Bashan et  al., 2014)  dan limbah organik pertanian dan industri (Vandamme, 2009).
Viabilitas  rizobakteri  juga
dipengaruhi  oleh  lamanya  formula disimpan  (Dutta  dan  Podile,  2010).
Beberapa  penelitian  menunjukkan bahwa  kepadatan  populasi  bakteri bertahan  menurun  seiring  dengan lamanya penyimpanan. Hal ini terjadi  karena  bakteri  aktif  dan  terus berkembang  selama  nutrisi  dan kondisi lingkungan yang mendukung (Bashan et  al .,  2014).  Rizobakteria mampu  bertahan  selama  8  bulan tetapi,  kepadatan  populasi  menurun pada  formula  tepung  tapioka  dan tanah gambut setelah penyimpanan 1 bulan (Vidhyasekaran dan Muthamilan,  1995).  Oleh  karena  itu sangat  penting  untuk  menentukan waktu  penyimpanan  formula  yang tepat  sehingga  kemampuannya  stabil dalam mengendalikan penyakit pustul bakteri. Formula  bakteri  antagonis digunakan  telah  dilaporkan  mampu mengendalikan patogen tanaman antara  lain,  hawar  daun  bakteri  pada padi yang disebabkan oleh
Xanthomonas  oryzae  pv.  oryzae (Jambhulkar  dan  Sharma,  2014). Pantoea  agglomerans EH  24  dalam tepung tapioka mampu mengendalikan  penyakit  hawar  daun bakteri yang disebabkan oleh
Erwinia amylovora pada pear (Özaktan dan Bora, 2004). Staphylococcus epidermidis dan Bacillus  subtilis dalam  formula  cair dan tepung tapioka dapat menurunkan  penyakit  layu  bakteri yang  disebabkan  oleh Ralstonia solanacearum pada tomat (Nawangsih et al. , 2015). Penelitian tentang pemanfaatan Bacillus spp.  yang diformulasi semakin meningkat terutama B.  thuringiensis dalam pengendalian biologis pada serangga, tetapi  terbatasnya  penelitian  spesifik pada  formulasi B.  thuringiensis
dalam mengendalikan patogen tanaman  (Schisler et  al., 2004).
Untuk  itu,  diperlukan  informasi mengenai penggunaan bahan pembawa  untuk  formulasi  isolat rizobakteri  dan  lama  penyimpanan yang  stabil  untuk  pengendalian penyakit pustul bakteri pada tanaman kedelai.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  memperoleh  formula  isolat rizobakteri  yang  efektif  dan  stabil dalam mengendalikan penyakit pustul bakteri, serta mampu meningkatkan  pertumbuhan  tanaman kedelai di lapangan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilakukan  di
Laboratorium  Mikrobiologi  Jurusan Hama  dan  Penyakit  Tumbuhan (HPT)  dan  Korong  Kampung  Baru, Nagari Pungguang Kasiak, Kecamatan  Lubuk  Alung,  Sumatera Barat,  mulai  oktober  2012  -  Januari 2013. Percobaan ini dirancang secara faktorial dalam acak kelompok  yang  terdiri  atas  tiga faktor  dan  dua  ulangan.  Faktor pertama  adalah  tiga  jenis  bahan formula:  tanah  gambut  (GB),  tepung tapioka (TP) dan air kelapa + minyak sawit 1% (AK + MS 1%) dikombinasikan dengan lama penyimpanan:  0,  2,  4  dan  6  minggu dan  kontrol.  Perlakuan  diaplikasikan pada benih kedelai sebelum ditanam.
Data  dianalisis  dengan  uji Turkey pada taraf nyata  5%.
Perbanyakan  Bacillus  thuringiensis srv. toumanoffi. Isolat sp berasal dari penelitian  (Habazar et  al. ,  2015) yang dikoleksi di laboratorium Bakteriologi  Jurusan  Hama  dan Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Andalas, Padang.  Bakteri  diremajakan  dengan metode  gores  pada  medium  Nutrient Agar  (NA)  dan  diinkubasi  2×24  jam (Gambar 1b). Perbanyakan Btt terdiri dari  dua  tahap:  Pertama,  untuk preculture 1  koloni Btt dimasukkan ke  dalam  50  ml  medium  Nutrient Broth  (NB)  dan  diinkubasi  pada shaker horizontal  1 × 24  jam  dengan kecepatan  150  rpm  (Gambar  1c). Kedua,  untuk mainculture 1  ml biakan preculture dipindahkan  ke dalam  99  ml  air  kelapa  dalam  labu Erlenmeyer (volume  250  ml)  dan diinkubasi  dengan  cara  yang  sama selama  2×24  jam  (Gambar  1d). Kepadatan  populasi  pada  suspensi Btt dari mainculture ditentukan dengan  membandingkan  kekeruhan suspensi  bakteri  dengan  larutan McFarland skala 8. Jika kekeruhannya  sama  maka  kepadatan populasi bakteri tersebut diperkirakan 10 8 sel ml -1 .
Gambar 1. Peremajaan dan perbanyakan Btt . (a) penyimpanan Btt dalam microtube, (b) koloni Btt ,
(c) preculture dan (d) mainculture Btt
Formulasi  Bacillus  thuringiensis srv. toumanoffi.
Formulasi bakteri  dibuat  3
macam  yaitu  dua  padatan  dan  1 cairan.  formula  padat  (gambut, tapioka  masing-masingnya  47,5  g dimasukkan ke dalam kantong plastik tahan panas dan ditambahkan
2,5  g  sukrosa.  Formula  cair  bahan pembawanya terdiri dari air kelapa, 1 ml  minyak sawit, 98  ml  dan sukrosa
5  g.  Campuran  bahan  tersebut
dimasukkan  ke  dalam  dalam  labu Erlenmeyer .  Formula  padat  dan  cair disterilkan  dengan  outoklaf  pada temperatur  121 o C  selama  15  menit dan  didinginkan.  Selanjutnya  ke dalam bahan formula (padat dan cair) ditambahkan 1 ml suspensi mainculture  Btt (kepadatan  10 8 sel ml -1 )  dan.  Masing-masing  formulasi disimpan  (0,  2,  4,  6  minggu)  pada suhu kira-kira 20 o C (Gambar 2).
Gambar 2. Formula isolat B. thhuringiensis srv. toumanffi; (a) gambut, (b) tapioka (c) air kelapa+minyak sawit 1%
Populasi Btt dari  masing- masing  formula  diuji  viabilitasnya pada beberapa pengenceran. Sebanyak  10  g  formula  kering  dan 10  ml  formula  cair  diambil  dan diencerkan  secara  seri  (10 -1 -10 -6 ) dalam  tabung  reaksi  steril.  1  ml  dari pengenceran  10 -6 dipindahkan  ke media  NA  dan  diinkubasi  selama 2×24  jam.  Jumlah  koloni  yang tumbuh  dan  kepadatan  populasinya dihitung menggunakan rumus:
JB = A X C
JB,  kepadatan populasi  (CFU ml -1 g - 1 );  A,  Jumlah  koloni;  C,  tingkat pengenceran.
Introduksi Formula Btt dan Penanaman Kedelai Benih kedelai yang digunakan  yaitu  varietas  Wilis  yang berasal dari Institut Pertanian Bogor, Bogor, Jawa Barat, Indonesia. Permukaan  benih  kedelai  dicuci dengan akuades steril dan disterilisasi  dengan  larutan  NaOCl 1%  selama  3  menit,  selanjutnya dibilas  dua  kali  dengan  akuades steril.  Selanjutnya,  benih  kedelai a b c
diintroduksi  dengan  formula  bakteri dan  benih  ditanam  pada  bedengan dengan  jarak  tanam  pada  30x30  cm. Benih kedelai ditanam sedalam 1 cm dan ditutup dengan selapis tanah.

## Peubah yang diamati
Viabilitas Btt dalam  formula, Perkembangan penyakit pustul bakteri  (masa  inkubasi,  persentase dan  intensitas  serangan  pada  daun dan polong).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Viabilitas Btt
Viabilitas Btt dalam  berbagai formula (tepung tapioka, gambut dan air  kelapa+minyak  sawit  1%)  relatif stabil dan cendrung menurun setelah disimpan  sampai  6  minggu  (Gambar 3).  Kepadatan  populasi Btt dalam formula  air  kelapa  +  minyak  sawit
1%  tanpa  penyimpanan  mencapai 10 8 CFU  m -1 dan  pada  penyimpanan 4  dan  6  minggu  kepadatan  populasi menurun  (10 7 CFU  ml -1 ).  Hal  yang sama  terlihat  pada  formula  gambut penyimpanan  4  minggu  dan  tapioka penyimpanan  2  minggu  mencapai 10 7 CFU  ml -1 dan  menurun  setelah disimpan sampai 6 minggu (10 6 CFU
ml -1 ).
Gambar 3.  Kepadatan populasi Bacilllus sp. pada berbagai formula setelah disimpan + minyak sawit 1% Perkembangan Penyakit Pustul Bakteri Formula Btt dengan  berbagai bahan  pembawa  yang  disimpan sampai 8 minggu dan diintroduksikan  pada  benih  kedelai menunjukkan kemampuan yang relatif  stabil  dalam  memperlambat masa inkubasi penyakit pustul bakteri (Tabel 1). Umumnya formula isolat Btt yang  diintroduksi  pada tanaman kedelai mampu menghambat perkembangan penyakit pustul bakteri. Masa  inkubasi Xag lebih lambat pada  tanaman  kedelai  yang
diintroduksikan  dengan  formula Btt (24,50-26,25 HST) dibanding kontrol (24,27  hsHST)  dengan  efektifitas 0,97-8,18%. Masa inkubasi Xag yang paling  lama  yaitu  pada  tanaman kedelai  yang  diintroduksi  dengan formula  gambut  tanpa  penyimpanan (26,25 HST)
Insidensi  dan  severitas  pustul daun  bakteri  relatif  bervariasi  pada tanaman  kedelai  yang  diintroduksi formula Btt .  Insidensi  pustul  bakteri berkisar antara 28,89-35,43% dengan efektifitas 1,86-19,97%. Dua formula Btt terbaik  yaitu  formula  gambut penyimpanan  2  minggu  (insidensi
0 5 10 0 2 4 6 K ep ad at an p op u lasi
L og CF U gr -1 aau m L -1 Lama Penyimpanan (minggu) TP GB AK+MS
28,89%  dengan  efektivitas  19,97%) dan  tapioka  penyimpanan  2  minggu (insidensi  29,73% dengan  efektivitas
16,34%) dibanding kontrol (insidensi 36,10%). Severitas  pustul  daun  bakteri pada tanaman kedelai yang diintroduksi  dengan  formula Btt bervariasi  dibanding  kontrol  dan meningkatkan  ketahanan  tanaman dari  agak  tahan  sampai  tahan. Severitas  penyakit  pustul  bakteri berkisar 8,48-10,00% dibanding kontrol  (10,16%).  Formula  terbaik yang  mampu  menurunkan  severitas Xag yaitu  gambut  penyimpanan  2 minggu (severitas 8,48% dan efektivitas 15,54%), air kelapa+minyak sawit 1% penyimpanan  2  minggu  (severitas
8,77%  dan  efektivitas  13,68%)  dan tapioka  penyimpanan  2  minggu (severitas  9,06%  dan  efektivitas 10,83%).  Perkembangan  insidensi dan severitas serangan pustul bakteri pada  kedelai  yang  diberi  perlakuan ini  cendrung  meningkat  diakhir pengamatan.  Demikian  juga  halnya dengan  severitas  serangan  pustul bakteri,  namun  terdapat  dua  formula tapioka (tidak disimpan dan disimpan  6  minggu),  dua  formula gambut (tidak disimpan dan
disimpan 4 minggu) dan satu formula air  kelapa+minyak  sawit  1%  (tidak disimpan). Grafik perkembangan insidensi  dan  severitas Xag pada kedelai  yang  diintroduksi  dengan formula Btt dapat  dilihat  pada Gambar  3.  Hampir  semua  formula Btt mampu  menekan  insidensi  dan severitas Xag dibanding  kontrol. Insidensi dan severitas serangan Xag terlihat  setelah  kedelai  berumur  21 HST kecuali empat formula (Gambut penyimpanan  6  minggu,  tapioka penyimpanan  0  dan  4  minggu,  dan air  kelapa+minyak  sawit  1%  tanpa penyimpanan)  yang  menunjukkan serangan  pada  umur  14  HST. Serangan Xag cendrung  meningkat seiring  bertambahnya  umur  tanaman yang  diamati  sampai  35  HST (Gambar 4).
Menunjukkan  kecendrungan perkembangan  insidensi  penyakit pustul bakteri lebih rendah dibanding kontrol,  kecuali  formula  gambut yang  tidak  disimpan,  insidensi  daun terserang Xag meningkat  pada  21 HST.  Peningkatan  insidensi  dan severitas  daun  terserang Xag terjadi pada 24 HST.
Tabel  1.  Perkembangan  penyakit  pustul  bakteri  pada  daun  kedelai  yang dintroduksi formula B . thuringiensis srv. toumanoffi Formula Lama Penyim panan (Mingg u) Masa Inkubasi Insidensi Severitas Reaksi Ketahanan c) HST Efektivitas %
Efektivitas
% Efektivitas (%) a)
(%) b)
(%) b) TP 0 25,20 3,85 36,75 ab -1,16 10,28 ab -1,18 Agak tahan TP 2 25,20 3,85 29,73 ab 16,34 9,06   ab 10,83 Tahan TP 4 24,50 0,97 29,15 ab 11,39 9,25   ab 8,96 Tahan TP 6 25,03 3,13 31,58 ab 7,56 9,73   ab 4,23 Tahan GB 0 26,25 8,18 36,93 ab -0,58 10,00 ab 1,57 Tahan GB 2 25,67 5,79 28,89 b 19,97 8,48     b 16,54 Tahan GB 4 25,90 6,74 34,45 ab 2,69 9,94   ab 2,17 Tahan GB 6 24,50 0,97 39,84 a -2,74 10,77 a -6,00 Agak tahan AK+MS 0 25,20 3,85 35,36 ab 7,37 9,77   ab 3,84 Tahan AK+MS 2 24,85 2,41 31,94 ab 10,75 8,77   ab 13,68 Tahan AK+MS 4 26,25 8,18 35,43 ab 1,86 10,65 a -4,82 Agak tahan AK+MS 6 26,25 8,18 34,47 ab 4,52 9,22   ab 9,25 Tahan Kontrol - 24,27 0,00 36,10 ab 0,00 10,16 ab 0,00 - KK = 4,57 % KK = 5,58 %  KK = 5.04 %
Keterangan: a) Efektivitas = (K-P/K) x 100%, K=Kontrol dan P=Perlakuan.
b) Efektivitas=(P-K/K) x 100 %, c) Sivan & Chet (1986). Huruf  yang sama di belakang angka menunjukkan tidak berbeda nyata menurut uji Duncan pada α=0,05
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 14 21 28 35 P er sen tase Dau n T er ser an g ( %) Hari Setelah Tanam (Minggu) GB-0 GB-2 GB-4 GB-6 TP-0 TP-2
TP-4 TP-6
AK+MS-0 AK+MS-2 AK+MS-4 AK+MS-6 A
Gambar 3. Perkembangan penyakit pustul bakteri pada daun kedelai yang diintroduksi formula Btt di lapangan. (A) Insidensi dan, (B) severitas
Pembahasan Umum Viabilitas Formula Rizobakteri Viabilitas Rizobakteri dipengaruhi  oleh  bahan  pembawa (Nakkeeran et  al. ,  2005). Btt yang diformulasi  dalam  bahan  pembawa cair  dapat  menginduksi bakteri dalam  bentuk  inaktif  sel  sehingga terbentuknya spora sehingga kepadatan  populasi  lebih  stabil. Menurut  Schisler et  al., 2004,
formulasi Btt difokuskan  dalam bentuk spora agar kepadatan populasi relatif stabil selama penyimpananan  dan  mudah  dalam formulasi  dan  aplikasi.  Menurut Singleton et al. , 2002 bahan pembawa  cair  memiliki  keuntungan yaitu,  dapat  ditambahkan  zat  aditif (sukrosa  dan  gliserol)  melindungi dan meningkatkan kemampuan bakteri  di  lapang.  Bahan  pembawa cair  dengan  penambahan  gliserol memiliki  viabilitas P.  fluorescens dapat  ditingkatkan  dalam  formula cair  dan  dapat  disimpan  6  bulan (Taurian et  al. ,  2010).  Dengan demikian Btt bahan  formula  air
kelapa+minyak  sawit  1%  lebih  baik dibandingkan tapioka dan gambut.
Formula Btt dengan  3  jenis bahan  pembawa  (tapioka,  gambut dan  air  kelapa  +  minyak  sawit  1%) yang  disimpan  sampai  6  minggu, kemudian  diintroduksi  pada  benih kedelai menurunkan severitas penyakit pustul bakteri. Enterobacter agglomerans dalam  formula  cair dapat  menurunkan  tingkat  serangan blast yang disebabkan oleh
Pyricularia  oryzae (Suprapta et  al. ,
2014).  Sebagian  besar  formula Btt mampu  menurunkan  severitas Xag dibanding kontrol dan mampu meningkatkan  ketahanan  tanaman dari  agak  tahan  sampai  tahan (formula  gambut  yang  disimpan  2 dan 6 minggu, tapioka yang disimpan 2 dan 4 minggu, air kelapa + minyak sawit 1% yang disimpan 2,
4  dan  6  minggu)  dan  agak  rentan sampai  agak  tahan  (formula  air kelapa+minyak  sawit  1%  tanpa penyimpanan).
0 2 4 6 8 10 12 14 21 28 35 In ten sitas Dau n T er ser an g ( %) Hari Setelah Tanam (Minggu) GB-0 GB-2 GB-4 GB-6 TP-0 TP-2 TP-4 TP-6 AK+MS-0 AK+MS-2 AK+MS-4 AK+MS-6 B
Perkembangan Penyakit Pustul bakteri Formula Btt yang yang diformulasi  dan  disimpan  pada berbagai bahan pembawa dan disimpan  sampai  8  minggu  serta diintroduksi  pada  benih  kedelai menunjukkan kemampuan yang stabil dalam menekan perkembangan penyakit  pustul  bakteri  (Tabel  1). Masa  inkubasi Xag dapat  ditekan pada tanaman kedelai yang diintroduksi  dengan  formula Btt (24,50-26,25 HST) dibanding dengan kontrol (24,27 HST) dengan efektifitas  berkisar  antara  0,97-
8,18%.  Masa  inkubasi  yang  paling lama  adalah  pada  tanaman  kedelai yang  diintroduksi  formula  air  kelapa penyimpanan  4  dan  6  minggu gambut  tanpa  penyimpanan  dengan efektifitas (8,18%). Severitas serangan  penyakit  pustul  bakteri pada  kedelai  dapat  ditekan  pada tanaman  kedelai  yang  diintroduksi dengan  formula Btt berkisar  antara 8,48-10,00% dengan efektivitas 2,17-16,54%. Hasil penelitian ini menunjukkan  bahwa  formula Btt mampu mengendalikan perkembangan Xag pada kedelai. Btt termasuk ke dalam kelompok bakteri yang  dapat  mengendalikan  patogen dan  memacu  pertumbuhan  dan  hasil tanaman  ( Plant  Growth  Promoting Rhizobacteria ,  PGPR).  Yang et  al .,
2012  melaporkan B.  megaterium
B1301  dalam  tepung  jagung  dapat menurunkan  severitas  penyakit  layu bakteri yang disebabkan oleh Ralstonia  solanacearum pada  jahe dengan efektivitas 73,68%. Perlakuan  benih  tomat  dengan B.
subtilis AUBS-1  dengan  formula tapioka  mempu  mengendalikan P.
aphanider- matum , penyebab
penyakit  rebah  kecambah  (Jayaraj et
al .,  2005), P.  fluorencens strain  Pf1 dalam formula cair dengan penambahan  gliserol  dapat  disimpan selama 6 bulan dan mampu menurunkan  insidensi  penyakit  layu fusarium pada tomat (Manikandan et al ., 2010). Formula bakteri  antagonis telah dilaporkan mampu mengendalikan  patogen  tanaman.
Bakteri  endofit Ralstonia  pickettii TT47  dalam  formula  tapioka  yang disimpan  sampai  6  minggu  dapat menurunkan  populasi Xanthomonas oryzae  pv  oryzae penyebab  penyakit hawar  daun  bakteri  pada  padi (Krisnandika et  al. ,  2016). P. agglomerans EH  24  dalam  formula tepung  tapioka  telah  digunakan dalam  mengendalikan  hawar  api yang disebabkan oleh Erwinia amylovora pada pear dengan
efektivitas  76%  (Ozaktan  dan  Bora,
2004).  Perlakuan  benih  dengan B. subtilis strain  2500  dan  2508  dapat menekan perkembangan botrytis cinerea penyebab  penyakit  bercak coklat  pada  buncis  (Ongena et  al .,
2007) dan Serratia marcescens galur 90-166  dapat  melindungi  serangan
Erwinia tracheiphila penyebab
penyakit layu bakteri pada mentimun (Zehnder et al ., 2001).

## KESIMPULAN
Viabilitas Btt yang diformulasi  dalam  berbagai  bahan pembawa  (tapioka,  gambut  dan  air kelapa+minyak  sawit)  relatif  lebih stabil  stelah  disimpan  sampai  6 minggu.  Hampir  semua  formula Btt dengan  berbagai  bahan  pembawa yang  disimpan  sampai  6  minggu menunjukkan kemampuan yang relatif stabil dalam menekan perkembangan penyakit pustul
bakteri  dengan  formula  terbaik  yaitu gambut dan air kelapa+minyak sawit
1%  dan  tapiokan  penyimpanan  2 minggu.

## DAFTAR PUSTAKA
Bashan, Y., de-Bashan, L.E., Prabhu,
S.R.,  dan  Hernandez,  J.P. 2014.  Advances  in  Plant Growth-Promoting  Bacterial Inoculant Technology: Formulations  and  Practical Perspectives (1998-2013). Plant  and  soil,  378  (1-2):  1- 33. Dutta,  S.,  dan  Podile,  A.R.  2010. Plant Growth Promoting Rhizobacteria  (PGPR):  the Bugs  to  Debug  the  Root Zone.  Critical  Reviews  in Microbiology,  36  (3):  232- 244. Habazar,  T.,  Resti,  Z.,  Yanti,  Y., Trisno,  J.,  dan  Diana,  A. 2012. Penapisan Bakteri Endofit  Akar  Kedelai  secara in Planta untuk Mengendalikan Penyakit Pustul Bakteri. Jurnal Fitopatologi  Indonesia,  8  (4): 103. ,  Resti,  Z.,  Yanti,  Y., Sutoyo,  S.,  dan  Imelda,  I. 2015. Formulasi Bakteri Endofit  Akar  Kedelai  untuk Pengendalian  Pustul  Bakteri. Jurnal Fitopatologi Indonesia,
11 (2): 51.
Jayaraj,  J.,  Radhakrishnan,  N.V., Kannan,  R.,  Sakthivel,  K.,
Suganya,  D.,  Venkatesan,  S., dan  Velazhahan,  R.  2005. Development of New Formulations of Bacillus Subtilis  for  Management  of Tomato Damping-Off Caused by Pythium aphanidermatum. Biocontrol Science and Technology, 15 (1): 55-65. Jambhulkar,  P.P.,  dan  Sharma,  P. 2014. Development of Bioformulation  and  Delivery System of Pseudomonas Fluorescens Against Bacterial Leaf Blight of Rice ( Xanthomonas oryzae pv. oryzae). Journal of Environmental  Biology,  35 (5): 843. Kaewnum,  S.,  Prathuangwong,  S., dan Burr, T. J. 2005. Aggressiveness of Xanthomonas  axonopodis  pv. Glycines Isolates  to  Soybean and Hypersensitivity Responses  by  Other  Plants. Plant  Pathology,  54 (3):  409- 415. Khaeruni, A., Suwanto, A., Tjahjono, B  dan  Sinaga,  S.M.  2007. Deteksi Cepat Penyakit Pustul  Bakteri  pada  Kedelai menggunakan  Teknik  PCR dengan Primer Spesifik. Hayati  J  Biosciences 14  (2):
76-80. Krisnandika,  A.A.K.,  Widajati,  E., Hermawan,  W.,  dan  Giyanto, G. 2016. Pelet Bakteri Probiotik  untuk  Biokontrol Xanthomonas oryzae pv. Oryzae  dan  Viabilitas  Benih Padi. Jurnal Fitopatologi Indonesia, 12 (1): 27-33. Nakkeeran,  S.,  Fernando,  W.G.D., Siddiqui,  Z.A.  2005.  Plant Growth Promoting Rhizobacteria Formulation and Its Scope in
Commercialization  for  the Management  of  Pest  and Disease. Siddiqui, Z.A (Editor).  PGPR  :  Biocontrol and Biofertilization. Springer:
Dordrecht,  the  Netherland. Hal 257-296. Nawangsih,  A.A.,  Wijayanti, E.,  dan Kartika, J.G. 2014. Pengembangan Formulasi Biopestisida  Berbahan  Aktif Bakteri Staphylococcus Epidermidis dan Bacillus Subtilis untuk Mengendalikan Penyakit  Layu  Bakteri  oleh Ralstonia  solanacearum pada Tomat.  Prosiding  Seminar Perlindungan  Tanaman  II. Bogor, 13 November 2014.
Manikandan, R., Saravanakumar, D.,
Rajendran,  L.,  Raguchander, T., dan Samiyappan, R. 2010. Standardization  of Liquid Formulation  of Pseudomonas fluorescens Pf1 for its Efficacy  Against  Fusarium Wilt  of  Tomato.  Biological Control, 54 (2): 83-89. Ongena,  M.,  Jourdan,  E.,  Adam,  A., Paquot,  M.,  Brans,  A.,  Joris, B., Arpigny, J.L. and Thonart,  P.,  2007.  Surfactin and Fengycin Lipopeptides of Bacillus  Subtilis  as  Elicitors of Induced Systemic Resistance in Plants. Environmental  Microbiology, 9 (4): pp.1084-1090. Özaktan,  H.,  dan  Bora,  T.  2004.
Biological  Control  of  Fire Blight  in  Pear  Orchards  with a  Formulation  of Pantoea agglomerans strain  Eh  24. Brazilian Journal of
Microbiology,  35  (3):  224- 229.
Schisler, D.A., Slininger, P.J., Behle,
R.  W.,  dan  Jackson,  M.A. 2004.  Formulation  of Btt p. for  Biological  Control  of Plant Diseases. Phytopathology 94:1267- 1271. Singh,  R.B.,  dan  Jain,  J.P.  1988. Chemical Control of Bacterial
Pustule  in  Soybean.  Journal of  Turkish  Phytopathology, 17 (1): 31-36. Suprapta,  D.N.,  Quontao,  V.,  dan Khalini, K. 2014. Effectiveness of Rhizobacteria to Reduce Rice Blast Disease Intensity. Journal of Biology, Agriculture  and  Healthcare. Vol.4, No 3. Taurian, T., Anzuay, M.S., Angelini, J.G.,  Tonelli,  M.L.,  Ludueña, L., Pena, D., Ibáñez, F. Fabra, A. 2010. Phosphate- Solubilizing Peanut Associated Bacteria: Screening for Plant Growthpromoting  Activities. Plant Soil 329:421-431.
Vandamme,  E.  J.  2009.  Agro- industrial  residue  utilization for  industrial  biotechnology products.  In Biotechnology for  Agro-Industrial  Residues Utilisation (pp. 3-11). Springer Netherlands. Vidhyasekaran,  P.,  dan  Muthamilan, M.  1995.  Development  of Formulations of Pseudomonas  fluerescens for
Control  of  Chickpea  Wilt. Plant Dis. 79: 782-786.
Yang,  W.,  Liu,  H.,  Wang,  Y.,  Luo, Y.,  Yang,  H.,  dan  Guo,  J. 2012. Effects of Two Different  Soil  Amendments on the Biocontrol  Efficacy  of Biological  Control  Agents (BCA) Against Ralstonia wilt on Ginger. African Journal of Biotechnology, 11 (39): 9383-9390. Zehnder, G.W., Murphy, J.F., Sikora, E.J., & Kloepper, J.W. (2001). Application of Rhizobacteria  for  Induced Resistance.  European  Journal of  Plant  Pathology,  107  (1):
39-50.