## Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Rimpang Jeringau Merah ( Acorus Sp. ) terhadap Radang Kaki Tikus Jantan Galur Wistar yang Diinduksi Karagenan

## Nina Safrina, Ressi Susanti, Rafika Sari
Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura, Pontianak, Indonesia

## ABSTRAK
Jeringau Merah ( Acorus sp.) telah digunakan secara empiris oleh masyarakat suku Dayak Kalimantan Barat untuk menyembuhkan penyakit. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antiinflamasi dan dosis optimum ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah pada tikus jantan galur Wistar. Perlakuan pada lima kelompok, yaitu kelompok kontrol positif diberi natrium diklofenak, kontrol negatif diberi CMC-Na 1%, dan kelompok uji diberi ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah 225 mg/kgBB, 450 mg/kgBB, dan 675 mg/kgBB. Pengujian dengan metode rat hindpaw edema pada telapak kaki kiri tikus jantan galur Wistar dengan induksi karagenan 2%. Nilai AUC digunakan untuk menghitung besarnya daya antiinflamasi tiap kelompok perlakuan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif. Data dianalisis dengan uji ANOVA dan uji LSD. Hasil menunjukkan ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah mempunyai aktivitas antiinflamasi dengan dosis optimum ekstrak 450 mg/kgBB dan daya antiinflamasi sebesar 34,20%.
Kata kunci : Antiinflamasi, jeringau merah ( Acorus sp.), karagenan

## ABSTRACT
Red Jeringau ( Acorus sp.) has been used empirically to cure diseases in West Kalimantan. This study aims to examine the antiinflammatory effects and optimum dose of ethanol extract of Red Jeringau rhizomes in Wistar male rats. The samples were divided into five groups, positive control group was given diclofenac sodium, negative control group was given CMC-Na 1%, and the extract groups were given 225 mg/bw, 450 mg/ bw and 675 mg/bw ethanol extract of red Jeringau rhizomes. The test was on artificial inflammation in left foot of Wistar male rats induced with carrageenan 2%. AUC values were used calculate the antiinflammatory effects on each group compared to control group. Data were analyzed by one-way ANOVA and LSD test. The results showed that ethanol extract of Red Jeringau rhizomes has antiinflammatory activity and the optimum dose was 450 mg/kgBB with antiinflammatory percentage 34,20%. Nina Safrina, Ressi Susanti, Rafika Sari . Antiinflammatory Activities of Acorus Sp. Rhizome Ethanol Extract on Carageeenan-induced Inflammation in Wistar Male Rats
Keywords : Antiinflammatory, carrageenan, red jeringau ( Acorus sp.),

## PENDAHULUAN
Inflamasi  merupakan  respons  terhadap kerusakan jaringan akibat berbagai rangsangan yang merugikan, baik rangsangan kimia,  mekanis,  infeksi,  maupun  benda  asing seperti bakteri dan virus. 1 Tanda-tanda proses inflamasi antara lain rubor, calor, tumor, dolor , dan functio laesa . 2 Rubor, calor , dan tumor pada inflamasi akut terjadi karena peningkatan aliran darah  dan  edema. 3 Obat  untuk  mengatasi inflamasi  biasanya  golongan  anti-inflamasi non-steroid  (AINS)  dan  steroid.  Namun, kedua  golongan  obat  tersebut  berpotensi menimbulkan  efek  samping;  antiinflamasi golongan  steroid  dapat  menyebabkan  ulkus peptikum, penurunan imunitas, osteoporosis,
atrofi otot dan jaringan lemak, meningkatkan tekanan  intraokuler,  serta  bersifat  diabetik. 4 Sedangkan antiinflamasi golongan nonsteroid dapat  menyebabkan  tukak  lambung  hingga perdarahan, gangguan ginjal, dan anemia. 5
Salah  satu  tanaman  berkhasiat  yang  dapat dijadikan  obat  antiinflamasi  adalah  Jeringau Merah ( Acorus sp.). Jeringau Merah dari famili Acoraceae merupakan tumbuhan endemik di Kalimantan  Barat  yang  secara  empiris  telah digunakan  oleh  masyarakat  pedalaman  suku Dayak  untuk  mengobati  berbagai  penyakit. 6 Hasil skrining fitokimia menunjukkan adanya  senyawa  flavonoid  dalam  rimpang Jeringau  Merah  ( Acorus sp.)  yang  mampu
menaikkan  trombosit  darah  pada  hewan uji. 7 Rimpang  Jeringau  Merah  ( Acorus sp.) mengandung  alkaloid,  minyak  atsiri,  tanin, flavonoid,  dan  saponin. 8 Senyawa-senyawa tersebut  berdasarkan  penelitian  diduga berkhasiat  sebagai  antiinflamasi.  Rimpang Jeringau  ( Acorus calamus )  memiliki  aktivitas antiinflamasi dan antipiretik pada tikus putih, senyawa  yang  berefek  antiinflamasi  diduga dari  kandungan  minyak  atsiri  atau  minyak esensialnya. 9 Kumar, et al, mengatakan bahwa ekstrak  etanol  80%  daun  Jeringau  ( Acorus calamus )  memiliki  aktivitas  antiinflamasi pada  tikus  albino;  diduga  senyawa  yang berkhasiat  adalah  golongan  flavonoid  dan terpenoid. 10 Sedangkan menurut Tiwari, et al,
ninasafrina04@gmail.com
HbA 1 C ≤ 7%
Synergy for Aggressive Control
Mekanisme kerja Metformin
0 4 8 12   16   20   24   28   32   36   40   44   48 1200.00 1000.00 800.00 600.00 400.00 200.00 0.00 Waktu (jam) Konsen tr asi P lasma (mg/mL) T R 0 4 8 12   16   20   24   28   32   36   40   44   48 3000.00 2500.00 2000.00 1500.00 1000.00 500.00 0.00 Waktu (jam) Konsen tr asi P lasma (mg/mL) Garis vertikal menunjukkan standar deviasi *AUC dan C max PIONIX-M ® versus produk referensi tidak berbeda bermakna (P>0,05)
Uji Bioekuivalensi PIONIX-M ® Versus Produk Referensi 1)
Pioglitazone dan Metformin memiliki mekanisme kerja yang berbeda sebagai insulin sensitizer, sehingga sinergi antara Pioglitazone dan Metformin dalam PIONIX-M ® dapat menghasilkan kontrol gula darah yang lebih agresif 2) Hati Jaringan Adiposa Otot Rangka
Ambilan Glukosa Ambilan Asam Lemak Lipogenesis Ambilan Glukosa Glukoneogenesis Kadar asam lemak bebas Pioglitazone Hiperglikemia Adiposegenesis Key: FFA = free fatty acids Mekanisme kerja Pioglitazone T : PIONIX-M ® R : Produk Referensi T R T : PIONIX-M ® R : Produk Referensi Gambar AUC dan C max Pioglitazone pada PIONIX-M R Versus Produk Referensi Gambar AUC dan C max Metformin pada PIONIX-M R Versus Produk Referensi
Kombinasi  Pioglitazone dan Metformin Dalam PIONIX-M ® Secara Bermakna Memperbaiki Profil Lipid Melalui Penurunan Kadar Trigliserida dan Peningkatan Kolesterol HDL (High Density Lipoprotein) dibandingkan
Kombinasi Pioglitazone dan Metformin dalam PIONIX-M ® Memperbaiki
Kontrol Gula Darah Secara Signifikan 3) *p<0,05 vs plasebo Perubahan H bA 1 C (%) 0.6 0.2 -0.2 -0.6 -1
Plasebo + Metformin Pioglitazone 30 mg + Metformin *p<0,05 vs plasebo 0 -10 -20 -30 -40 -50 Plasebo + Metformin Pioglitazone 30 mg + Metformin
Perubahan Gula Dar ah P uasa (mg/dL) n: 153 n: 161 n: 157 n: 165 -0,83% -37,7 mg/dL Tambahan Penurunan HbA 1 C Tambahan Penurunan Glukosa Darah Puasa 30 20 10 0 -10 -20 -30 Perubahan dar i nilai a w al (%)
22 7 -7 -23 p<0,001 p<0,001 Trigliserida Kolesterol HDL mmol/L mmol/L
Pioglitazone Gliclazide Pioglitazone Gliclazide Nilai Awal 2,90 2,78 1,10 1,09
Minggu ke - 104 2,16 2,58 1,35 1,17 95%CI -0,73 -0,35
0,13 0,20 Nilai p <0,001 <0,001
Pioglitazone 30 mg + Metformin Sulfonylurea + Metformin
Kaplet salut selaput pioglitazone HCl 15 mg + Metformin HCl 500 mg & 850 mg
HbA 1 C ≤ 7% Synergy for Aggressive Control
Referensi:
1.  Setiawati A, Christine M,  Santoso KH, Setiawan S,  Widhyastuti R. Bioequivalence study of amazone IR tablet produced by PT dankos farma in comparison with actoplus met tablet produced takeda pharmaceutical, co,ltd,Japan. Bioequivalence study report;2008:1-31.
2.  Campbell IW. The role of metformin and pioglitazone in early combination treatment of type 2 diabetes mellitus. BrJ Diabetes Vasc Dis. 2006;6(5):207-15.
3. Einhorn D, Rendell M, Rosenzweid J, Egan JW, Mathise AL, Schneider RL. Pioglitazone hydrochloride in combination with metformin in the treatment of type 2 diabetes mellitus: A Randomized, placebo-controlled study, Clin Thlr 2000; 22: 1395-409.
4.  Charbonnel B, Schernthaner G, Brunetti P, Matthews DR, Urquhant R, Tan MH, et al. Long-term efficacy and tolerability of add-on pioglitazone
therapy to failing monotherapy compared with addition of gliclazide or metformin in patients with type 2 diabetes. Diabetologia 2005;48:1093-104.
Kombinasi Sulfonylurea dan Metformin 4) Otot Rangka Hati Usus Laktat Metabolisme
Glukosa Anaerob
Glukoneogenesis
Glikogenolisis Oksidasi Asam Lemak Ambilan nyata
Glukosa Glikogenesis Oksidasi Asam Lemak Hiperglikemia

## HASIL PENELITIAN
daun Jeringau ( Acorus calamus ) memiliki efek antiinflamasi  dari  senyawa  terkandung,  yaitu saponin, steroid, dan triterpenoid. 11 Penelitian efek  antiinflamasi  rimpang  Jeringau  Merah ( Acorus sp.) belum pernah dilakukan.
Peneliti melakukan
penelitian efek antiinflamasi ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah  ( Acorus sp.)  dengan  metode  radang buatan yang diinduksi karagenan.

## METODE

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah rotary evaporator ,  penangas  air, timbangan analitik, timbangan hewan, batang pengaduk,  erlenmeyer,  tabung  reaksi,  rak tabung,  pipet  volume,  pipet  ukur, ball filler , gelas beaker ,  labu  ukur,  gelas  ukur,  corong, sonde  oral,  oven,  seperangkat  alat  gelas, blender, alumunium foil ,  cawan  penguap, chamber KLT, desikator, kertas milimeter blok, porselen  krusibel,  lampu  UV 254 dan  UV 366 , magnetic stirrer , mortir dan stemper, penjepit tabung  reaksi,  pipa  kapiler,  pletismograf, sendok stainless steel ,  wadah  kaca, syringe intraplantar, syringe 1 mL.
Bahan-bahan  untuk  penelitian  ini  adalah rimpang  Jeringau  Merah  ( Acorus sp.),  etanol 96%  (teknis),  amoniak,  etil  asetat,  butanol, aquades,  asam  asetat,  larutan  AlCl 3 ,  CMC-Na ( Sodium-Carboxymethyl Cellulose )  1%,  larutan basa amonia, magnesium, asam asetat glasial, KI,  HgCl 3 ,  HCL  2  N,  karagenan  2%,  kloroform, larutan H 2 SO 4 pekat, NaCl, NaCl fisiologis 0,9%, natrium  diklofenak  50  mg,  pereaksi Meyer , pereaksi Dragendroff ,  pereaksi Lieberman Burchard ,  gelatin  1%,  larutan  FeCl 3 ,  vanilin asam  sulfat,  kertas  saring,  aquades,  plat  KLT (silica gel GF 254 ).

## Hewan Uji
Hewan percobaan pada penelitian ini adalah tikus  jantan  galur  Wistar  berumur  2-3  bulan dan  berat  badan  150-300  gram.  Hewan diaklimatisasi  dalam  kandang  di  sekitar lingkungan  laboratorium  selama  7  hari sebelum pengujian.

## Sampel
Sampel  penelitian  ini  berupa  rimpang Jeringau  Merah  ( Acorus sp.)  diperoleh  dari Desa  Parit  Surabaya,  Kecamatan  Sungai Ambawang,  Kabupaten  Kubu  Raya,  Provinsi Kalimantan Barat.

## Proses Pembuatan Simplisia dan Ekstrak
Rimpang  Jeringau  Merah  ( Acorus sp.) dengan  berat  basah  4  kg,  disortasi  basah, dan  kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir. Setelah  itu  dirajang  kemudian  ditiriskan,  lalu dikeringkan  dengan  bantuan  sinar  matahari. Rimpang  yang  telah  kering  disortasi  kering, kemudian ditimbang berat keringnya. Setelah itu rimpang dihaluskan menggunakan blender dan diayak menjadi serbuk.
Simplisia  rimpang  Jeringau  Merah  ( Acorus sp.)  yang  telah  dihaluskan  sebanyak  866,14 gram  dimasukkan  ke  dalam  bejana  maserasi, kemudian  diekstraksi  menggunakan  metode maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96% selama  tiga  hari.  Pelarut  diganti  tiap  24  jam. Total  volume  pelarut  selama  penelitian  ini adalah  5,5  liter.  Hasil  maserasi  (maserat) disaring  dan  ditampung  dalam  wadah  kaca, kemudian  dipekatkan  menggunakan rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental.

## Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  ekstrak  Jeringau  Merah dilakukan  terhadap  golongan  senyawa alkaloid,  minyak  atsiri,  saponin,  flavonoid, fenolik, tanin, dan triterpenoid/steroid.

## Analisis Profil KLT
Uji profil KLT (kromatografi lapis tipis) dilakukan pada senyawa yang diduga memiliki aktivitas antiinflamasi,  yaitu  golongan  senyawa flavonoid  dan  terpenoid  (minyak  atsiri).  Pada lempeng silika gel GF 254 ukuran 7 cm dan lebar 1 cm ditotolkan ekstrak yang telah dilarutkan dengan etanol 96% pada jarak 1 cm. Kemudian dielusi dengan fase gerak butanol : asam asetat : air (B : A : A) (6 : 1 : 3) untuk golongan senyawa terpenoid  (minyak  atsiri),  untuk  golongan senyawa  flavonoid  menggunakan  fase  gerak kloroform  :  etil  asetat  (6  :  4).  Noda  yang terbentuk pada permukaan lempeng KLT silika gel GF 254 diperiksa di bawah sinar UV panjang gelombang 254 nm dan 366 nm. Setelah itu, lempeng  silika  gel  disemprot  pereaksi  AlCl 3 untuk  golongan  senyawa  flavonoid  (noda kuning)  dan  pereaksi  semprot  vanilin  H 2 SO 4 untuk  golongan  senyawa  terpenoid  (minyak atsiri) (noda merah-violet). 8,12

## Penentuan Dosis Uji
Pemilihan  dosis  rimpang  Jeringau  Merah ( Acorus sp.)  berdasarkan  hasil  penelitian Sa’roni, et al, pada  rimpang  Jeringau  ( Acorus calamus )  dengan  dosis  45  mg/100  gBB
memberikan efek antiinflamasi pada kaki tikus yang tidak berbeda dari fenilbutazon sebagai kontrol positif. Dengan demikian, dipilih dosis 45 mg/100 gBB sebagai dosis tengah, variasi dosis  225  mg/kgBB,  450  mg/kgBB,  dan  675 mg/kgBB. 9

## Sediaan Uji Pembuatan Suspensi CMC-Na 1%
Suspensi  CMC-Na  1%  dibuat  dengan  cara mendispersikan  1  gram  CMC-Na,  kemudian dilarutkan  menggunakan  aquades  hangat hingga  volume  100  mL  dan  aduk  hingga didapatkan  larutan  homogen.  Larutan  CMC- Na  digunakan  sebagai  pelarut  ekstrak  etanol rimpang Jeringau Merah ( Acorus sp).

## Pembuatan Suspensi Natrium Diklofenak
(4,5 mg/kgBB)
Sebanyak  2-5  tablet  Na-diklofenak  (50  mg) digerus  sampai  halus,  kemudian  diayak. Sebanyak  0,0225  gram  serbuk  Na-diklofenak ini disuspensikan ke dalam CMC-Na 1% hingga 100 mL, digerus hingga homogen.
Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Rimpang Jeringau Merah ( Acorus sp.) Sebanyak  2,25  gram,  4,5  gram,  dan  6,75 gram ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah ( Acorus sp).  masing-masing  digerus  dengan penambahan  suspensi  CMC-Na  1%  sampai homogen,  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur 100  mL,  dicukupkan  dengan  suspensi  CMC- Na 1% sampai garis tanda.

## Penyiapan Induktor Radang (Karagenan 2%)
Ditimbang  sebanyak  200  mg  lambda karagenan, lalu dilarutkan dalam larutan NaCl fisiologis 0,9% hingga volume 10 mL sampai garis tanda batas. 12

## Uji Efek Antiinflamasi
Sebelum uji, tikus dipuasakan selama 18 jam dengan  tetap  diberi  air  minum.  Tikus  dibagi ke dalam 5 kelompok, masing-masing 5 ekor tikus. Selanjutnya, masing-masing tikus diberi suspensi bahan uji secara oral :
 Kelompok  negatif  :  diberi  suspensi  CMC- Na 1%
 Kelompok positif : diberi suspensi natrium diklofenak 4,5 mg/kgBB
 Kelompok dosis 1 : diberi suspensi ekstrak dosis 225 mg/kg/BB
 Kelompok dosis 2 : diberi suspensi ekstrak dosis 450 mg/kgBB
 Kelompok dosis 3 : diberi suspensi ekstrak
dosis 675 mg/kgBB
Satu  jam  kemudian,  masing-masing  telapak kaki  tikus  disuntik  intraplantar  dengan 0,1  mL  larutan  karagenan  2%.  Setelah  30 menit,  dilakukan  pengukuran  dengan cara  mencelupkan  kaki  tikus  ke  dalam  sel pletismometer  berisi  cairan  air  raksa  sampai larutan mencapai garis batas atas, pengukuran dilakukan setiap 30 menit selama 360 menit (6 jam) dan 30 menit setelah 6 jam.

## Analisis Data
Data  dianalisis  menggunakan  SPSS  dengan nilai  kemaknaan p-value >  0,05  untuk data  terdistribusi  normal  dan  homogen. Selanjutnya  dilakukan  uji one way ANOVA dan  uji post hoc LSD  dengan p-value <  0,05 dengan  taraf  kepercayaan  95%  bila  analisis menunjukkan  perbedaan  bermakna  antar kelompok uji.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pembuatan Simplisia dan Ekstrak
Bobot rimpang Jeringau Merah basah adalah 4 kg setelah dikeringkan dan didapat simplisia dengan bobot 918 gram. Setelah diserbukkan dan diayak diperoleh simplisia dengan bobot 866,14  gram.  Simplisia  diekstraksi  dengan pelarut  etanol  96%,  diperoleh  153,02  gram ekstrak kental dan nilai rendemen 17,66%.

## Skrining Fitokimia dan Analisis Profil KLT
Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  rimpang Jeringau Merah positif mengandung golongan  senyawa  alkaloid,  minyak  atsiri, fenol, tanin, flavonoid, dan saponin ( Tabel 1 ).
Analisis  profil  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) dilakukan untuk penegasan kembali golongan senyawa  yang  diduga  memiliki  aktivitas
antiinflamasi, yaitu minyak atsiri dan flavonoid. Hasil analisis ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah  mengandung  golongan  senyawa flavonoid  ditandai  bercak  berwarna  kuning pada  plat  silika  gel  GF 254 setelah  disemprot pereaksi bercak AlCl 3 ; ekstrak etanol Jeringau Merah juga mengandung golongan senyawa minyak  atsiri  ditandai  bercak  ungu  setelah disemprot  pereaksi  bercak  vanilin  H 2 SO 4 . 14
( Gambar 1 ).
Uji Flavonoid
a b c d e f
Gambar 1 . Hasil uji profil KLT ekstrak etanol rimpang jeringau merah Keterangan  :  a.  Hasil  pengamatan  pada  panjang gelombang  366  nm;  b.  Hasil  pengamatan  pada panjang  gelombang  254  nm;  c.  Plat  KLT  setelah disemprot  Vanilin-H2SO4  (minyak  atsiri);  d.  Hasil pengamatan pada panjang gelombang 366 nm; e. Hasil  pengamatan  pada  panjang  gelombang  254 nm; f. Plat KLT setelah disemprot AlCl3 (Flavonoid)

## Efek Antiinflamasi
Pengujian antiinflamasi menggunakan metode pembuatan edema buatan pada kaki hewan uji ( rat hindpaw edema ) menggunakan lambda  karagenan.  Metode  pengujian  ini sederhana, mudah, dan sering dipakai. Selain
itu, pembentukan radang oleh karagenan tidak merusak  jaringan.  Kemampuan/efektivitas ekstrak  etanol  rimpang  Jeringau  Merah  oral dalam mengurangi pembengkakan kaki tikus akibat  diinduksi  karagenan  diukur  melalui pengukuran  volume  radang  kaki  tikus.  Pada 6  jam  (360  menit)  pengamatan,  semua kelompok  perlakuan  mengalami  penurunan edema.  Hasil  pengukuran  volume  edema pada kaki tikus dapat dilihat pada gambar 2.
Grafik  pada  gambar  2  menunjukkan  volume tertinggi  adalah  di  kelompok  kontrol  negatif (CMC-Na),  diikuti  kelompok  dosis  225  mg/ kgBB,  kontrol  positif  (natrium  diklofenak), dosis 450 mg/kgBB, serta dosis 675 mg/kgBB; menghasilkan  edema  lokal  yang  meningkat cepat pada menit ke-30 dan terus meningkat hingga menit ke-300. Volume radang negatif pada kelompok kontrol.
Karagenan  akan  menginduksi  cedera  sel, sehingga melepaskan mediator yang mengawali proses inflamasi. Setelah inflamasi, terjadi edema yang mampu bertahan selama 6  jam  dan  berangsur-angsur  berkurang dalam  24  jam  setelah  injeksi. 1 Edema  yang disebabkan  oleh  injeksi  karagenan  diperkuat oleh  mediator  inflamasi,  terutama  PGE 1 dan PGE 2, dengan cara menurunkan permeabilitas vaskular,  sehingga  protein-protein  plasma menuju  ke  jaringan  terluka  dan  membentuk edema. 15
Pada  kelompok  positif,  edema  meningkat pada  menit  ke-30-120  dan  mulai  menurun pada menit ke-150. Sedangkan pada kelompok dosis  225  mg/kgBB,  edema  meningkat  pada menit  ke-30-210  dan  mulai  menurun  pada menit ke-240. Pada dosis kelompok 450 mg/ kgBB  dan  675  mg/kgBB,  edema  meningkat pada  menit  ke-30-180  dan  mulai  menurun pada menit ke-210.
Peningkatan  radang  juga  dapat  dilihat  dari rata-rata hasil pengukuran persentase radang. Rata-rata  persentase  radang  dapat  dilihat pada gambar 3.
Persentase  radang  tertinggi  pada  kelompok kontrol  negatif  dengan  hasil  persentase selama 6 jam, yaitu 96,67%, diikuti persentase radang pada dosis 225 mg/kgBB sebesar 65%. Persentase  radang  terendah  pada  kelompok kontrol  positif,  dosis  450  mg/kgBB  serta  675 mg/kgBB, yaitu sebesar 45%.
Tabel 1. Hasil skrining fitokimia ekstrak rimpang Jeringau Merah
Metabolit Sekunder Pereaksi Pengamatan Keterangan Alkaloid Mayer Endapan putih + Wagner Endapan kecoklatan/ merah bata + Dragendroff Endapan kecoklatan/ merah bata - Flavonoid Pita Mg dan HCl Pekat Jingga-merah bata + Saponin Aquades Busa yang konsisten + Fenol FeCl 3 Biru kehitaman + Tanin Gelatin Endapan putih + Minyak Atsiri Etanol dan ekstrak Bau aromatis + Steroid dan Triterpenoid Lieberman-Burchard Steroid: terbentuk cincin hijau - Triterpenoid: terbentuk lapisan kecoklatan/ violet pada batas larutan -
Keterangan: (+) mengandung senyawa uji, (-) tidak mengandung senyawa uji

## HASIL PENELITIAN
Nilai AUC ( area under curve ) dihitung dari rata- rata volume radang ( Tabel 2 ). Nilai AUC dapat memberikan informasi potensi ekstrak etanol rimpang  Jeringau  Merah  untuk  menurunkan
radang yang dinduksi karagenan.
Nilai AUC terbesar dan mempunyai penurunan radang  yang  kecil  dimiliki  oleh  kelompok kontrol  negatif  (CMC-Na),  sedangkan  nilai AUC  yang  kecil  dan  mempunyai  penurunan radang  yang  besar  dimiliki  kelompok  dosis uji  dan  kelompok  kontrol  positif  (natrium diklofenak);  urutan  nilai  AUC  terbesar  ke terkecil  yaitu  dosis  ekstrak  225  mg/kgBB  > kelompok kontrol positif (natrium diklofenak) >  dosis  ekstrak  675  mg/kgBB  >  dosis  ekstrak 450  mg/kgBB.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  rimpang  Jeringau  Merah berpotensi antiinflamasi.
Hasil  analisis  statistik  data  nilai  AUC menunjukkan  varian  data  bersifat  homogen dan terdistribusi normal (P>0,05). Berdasarkan uji  LSD  dengan  taraf  kepercayaan  95%,  nilai AUC 3 kelompok dosis uji berbeda bermakna terhadap  kontrol  negatif,  artinya  ketiga  dosis uji  ekstrak  etanol  rimpang  Jeringau  Merah memiliki efek antiinflamasi, dapat mengurangi radang  lebih  besar  dibandingkan  kontrol negatif.
Data  AUC  digunakan  untuk  mengetahui persentase  daya  antiinflamasi  (DAI)  dari 5  kelompok  perlakuan.  Persentase  DAI menunjukkan  bahwa  makin  besar  nilai persentase  maka  makin  besar  pula  efek penghambatan  radang,  sebaliknya  makin kecil  nilai  persentase  maka  makin  kecil efek  penghambatan  radangnya. 16 Hasil perhitungan persentase uji daya antiinflamasi dapat dilihat pada tabel 3.
Nilai  persentase  terbesar  pada  kelompok dosis  ekstrak  450  mg/kgBB  (34,20%),  diikuti kelompok  dosis  ekstrak  675  mg/kgBB (33,62%),  kelompok  kontrol  positif  (natrium diklofenak)  (32,46%)  serta  dosis  ekstrak  225 mg/kgBB  (29,27%).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  dosis  ekstrak  450  mg/kgBB  paling optimal  menghambat  radang;  ekstrak  etanol rimpang  Jeringau  Merah  memiliki  potensi antiinflamasi.
Senyawa  yang  diduga  memiliki  aktivitas antiinflamasi  pada  ekstrak  etanol  rimpang Jeringau Merah adalah flavonoid. Mekanisme kerja flavonoid yaitu menghambat pelepasan asam  arakidonat  dan  sekresi  lisosom  serta menghambat fase proliferasi dan fase eksudasi dari proses inflamasi. 17 Senyawa flavonoid juga
Tabel 2. Hasil perhitungan nilai AUC total
Kelompok Perlakuan Dosis (mg/kgBB) Nilai AUC Total CMC-Na 1% 103,50 Natrium diklofenak 4,5 69,90 (*) Ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah 225 73,20 (*) Ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah 450 68,10 (*) Ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah 675 68,70 (*)
Keterangan:  (*):  kelompok  dosis  uji  dan  kelompok  pembanding  memiliki  perbedaan  bermakna  terhadap kontrol negatif (CMC-Na) (p<0,05)

## Tabel 3. Hasil perhitungan persentase uji daya antiinflamasi
Kelompok Perlakuan Dosis (mg/kgBB) % Daya Antiinflamasi CMC-Na 1% 0,00 Natrium diklofenak 4,5 32,46 Ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah 225 29,27 Ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah 450 34,20 Ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah 675 33,62
Gambar 2. Grafik rata-rata perubahan volume radang hewan uji
menghambat  enzim  siklooksigenase  (COX) dan  lipooksigenase. 17 Enzim  siklooksigenase merupakan  enzim  yang  mengkatalisis pembentukan  prostaglandin  dan  produk metabolisme  asam  arakidonat,  sedangkan enzim  lipooksigenase  yang  membentuk leukotrin  yang  berperan  dalam  proses peradangan dan alergi pada asma. 17 Dengan demikian,  apabila  kedua  enzim  tersebut dihambat  maka  pemicu  inflamasi  tidak akan  terbentuk  dan  proses  inflamasi  dapat berkurang. 17
Senyawa  golongan  lain  pada  ekstrak  etanol rimpang  Jeringau  Merah  yang  diduga memiliki efek antiinflamasi, yaitu minyak atsiri (terpenoid)  dan  saponin;  senyawa  golongan terpenoid  dapat  menghambat  produksi TNF- α ( tumor necrosis factor ) yang merupakan sitokin  proinflamasi, 12 selain  itu  terpen  juga dapat  menghambat  enzim  siklooksigenase (COX)  yang  merupakan  pemicu  inflamasi. 12 Sedangkan  senyawa  golongan  saponin menghambat inflamasi dengan cara menghambat  pembentukan  eksudat  dan
kenaikan  permeabilitas  vaskular  pembuluh darah. 12

## SIMPULAN
Ekstrak  etanol  rimpang  Jeringau  Merah ( Acorus sp.)  memiliki  aktivitas  antiinflamasi pada tikus jantan galur Wistar. Dosis optimum ekstrak etanol rimpang Jeringau Merah yang dapat  memberikan  efek  antiinflamasi  adalah 450 mg/kgBB.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Hidayati, Nur Annis, Shanti Listyawati, Ahmad Dwi Setyawan. Kandungan kimia dan uji antiinflamasi ekstrak etanol Lantana camara L . Pada tikus putih ( Rattus norvegicus l.) Jantan. Surakarta: Jurusan Biologi FMIPA Universitas Sebelas Maret (UNS). Bioteknologi .2008;5(1);10-7. 2.  Tanu I, Syarif A, Estuningtyas A, Setiawati A, Muchtar H.A, Arif A. Farmakologi dan terapi. Jakarta: FKUI; 2002 .p. 216- 7.
3.  Kumar V, Abbas AK., Fausto N, Mitchell RN. Robbins basic pathology. Philadelphia: Saunders Elsevier; 2007;37-41:53-5.
4.  Suherman SK, Ascobat P. Farmakologi dan terapi. 5 th Ed. Jakarta: Gaya Baru; 2007.
5.  Dugowson EC, Gnanashanmugam P. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs. Physical Med Rehabilit. 2006;1;347-54.
6.  Purwaningsih. Budidaya dan pengembangan Jeringau Merah ( Acorus sp.) endemik Kalimantan Barat sebagai fitofarmaka imunostimulan. Laporan Penelitian Dana DIPA. Pontianak: Universitas Tanjungpura; 2009.
7.  Pratiwi A, Kurniawan H, Helmi H, Ropiqa M, Rahmawati S. Pengembangan Jeringau Merah ( Acorus sp.) endemik Kalimantan Barat sebagai herbal terstandar untuk meningkatkan trombosit pada pasien demam berdarah. Pontianak: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Tanjungpura; 2010.
8.  Helmi, Hermawan. Pengaruh penambahan gliserin terhadap stabilitas sediaan eliksir dari ekstrak rimpang Jeringau Merah ( Acorus sp.) [Skripsi]. Pontianak: Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Program Studi Farmasi, Universitas Tanjungpura; 2010 .p. 41-5.
9.  Sa’roni, Adjirni. Penelitian antiinflamasi dan antipiretik ekstrak etanol rimpang dringo ( Acorus calamus ) pada tikus putih. Media Litbang Kesehatan. 2003;8(4):14.
10.  Kumar, Jain D, Gupta S, Jain R, Jain N. Anti-inflammatory activity of 80% ethanolic exctract of Acorus calamus Linn. Leaves in albino rats. Res J Pharmacy Technol. 2010;3(3):882-4.
11.  Tiwari N, Anil C, Ashutosh M, Ganesh B. Anti-inflammatory effects of the saponins obtained from the leaves of Acorus calamus . Pharmacology online. Siddhartha Institute of Pharmacy. India: Uttarakhand; 2010 .p. 2.
12.  Novadyanti. Uji aktivitas antiinflamasi dan antipiretik ekstrak etanol daun petai ( Parkia speciosa Hassk) pada tikus putih jantan galur Wistar [Skripsi]. Pontianak: Program Studi Farmasi. Fakultas Kedokteran. Universitas Tanjungpura; 2015 .p. 3(1).
13.  Lumbanraja, Bastian L. Skrining fitokimia dan uji efek antiinflamasi ekstrak etanol daun tempuyung ( Sonchus arvensis L.) terhadap radang pada tikus. [Skripsi]. Medan: Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara; 2009.
14.  Saifudin, Azis, Viesa Rahayu, Hilwan Yuda Teruna. Standarisasi bahan obat alam. Yogyakarta: Graha Ilmu; 2011 .p. 70.
15.  Fridiana, Destyka. Uji antiinflamasi ekstrak umbi rumput teki ( Cyperus rotundus L) pada kaki tikus Wistar jantan yang diinduksi karagen [Skripsi]. Jember: Bagian Biomedik Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember; 2012.
16.  Sutrisna EM, Widyasari DF, Suprapto. Uji efek anti inflamasi ekstrak etil asetat buah semu jambu mete ( Anacardium occidentale L.) terhadap edema pada telapak kaki tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan galur Wistar yang diinduksi karagenin. Biomedika. 2010;2(1);33-7. 17.  Zukhrullah, Mukhtasyam, Muhammad Aswad, Subehan. Kajian beberapa senyawa antiinflamasi: Docking terhadap siklooksigenase-2 secara in silico . Maj Farmasi Farmakol. Makasar: Fakultas Farmasi. Universitas Hasanuddin; 2012 .p. 16(1).