Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
UJI KEPEKAAN KULIT BATANG CEREMAI ( Phyllanthus acidus L.) TERHADAP PERTUMBUHAN Escherichia coli
Sernita 1* , Anggriani Fusvita 1 , Andri Lina Sumarni 1
1 Akademi Analis Kesehatan Kendari *Corresponding author : Sernita, e-mail: sernitaseren@yahoo.co.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kepekaan  kulit  batang  ceremai ( phyllanthus  acidus L.)  dan  untuk  mengukur  diameter  zona  hambat  kulit  batang ceremai    terhadap  pertumbuhan Escherichia  coli ATCC  35218.  Sampel  dalam penelitian ini adalah kulit batang ceremai yang diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan  etanol  96%.  Dibuat  pengenceran  dengan  konsentrasi  20%,  40%, 60%,  80%  dan  100%.  Pengujian  kepekaan  menggunakan  media  NA  dengan metode cawan kertas. Biakan bakteri dari media NB dicampur dengan media agar, kemudian cawan kertas diletakkan di atas media agar. Diinkubasi pada suhu 37 o C selama 48 jam. Diukur zona hambat menggunakan jangka sorong. Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  kulit  batang  ceremai  konsentrasi  20%  tidak  dapat menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli. Pada konsentrasi 40% rata-rata diameter  zona  hambat  4,03  mm.  Pada  konsentrasi  60%  rata-rata  diameter  zona hambat 4,36 mm. Pada konsentrasi 80% rata-rata diameter zona hambat 5,56 mm. Dan  pada  konsentrasi  100%  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli secara optimal dengan rata-rata diameter zona hambat 7,03 mm.
Kata Kunci : Escherichia coli, ceremai, Nutrient Agar

## ABSTRACT
This study aims to determine the sensitivity of the bark ceremai ( Phyllanthus acidus L.)  and  to  measure  the  diameter  of  inhibition  zone  ceremai  bark  on  the  growth  of Escherichia  coli ATCC  35218.  The  sample  in  this  study  is  the  bark  ceremai extracted  by  maceration  method  using  ethanol  96%.  Created  dilution  with  a concentration  of  20%,  40%,  60%,  80%  and  100%.  NA  sensitivity  testing  using media  with  paper  plate  method.  NB  bacterial  culture  media  mixed  with  agar medium, then the paper cup is placed on an agar medium. Incubated at 37 ° C for 48 hours. Inhibition zone was measured using a caliper. The results show that the research  is  conducted  bark  ceremai  concentration  of  20%  could  not  inhibit  the growth  of  bacteria Escherichia  coli .  At  a  concentration  of  40%  average  inhibition zone  diameter  of  4.03  mm.  At  a  concentration  of  60%  average  inhibition  zone diameter of 4.36 mm. At a concentration of 80% average inhibition zone diameter of 5.56  mm.  And  at  100%  concentration  to  inhibit  the  growth  of  bacteria Escherichia coli optimally with an average diameter of 7.03 mm zone of inhibition.
Keywords : Escherichia coli, ceremai, Nutrient Agar
Sernita, et al., Biowallacea, Vol. 3 (2), Hal : 455-466,  Oktober, 2016

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang memiliki keanekaragaman hayati dan menduduki urutan terkaya kedua di dunia setelah Brazil. Jumlah tumbuhan diperkirakan sekitar 40.000  spesies  diantaranya  9.600 spesies tersebut
berkhasiat sebagai  obat  dan  kurang  lebih  300
spesies  telah  digunakan  sebagai
bahan  obat  oleh  industri  obat
tradisional (Depkes, 2007). Masyarakat  pada  zaman  dahulu secara empiris menggunakan
tanaman sebagai penyembuh penyakit,  hal  ini  dikarenakan  obat tradisional  memiliki  efek  samping yang  relatif  kecil,  tingkat  toksisitas yang cukup rendah, mudah
diperoleh  serta  harganya  yang relatif lebih
murah jika dibandingkan  dengan  obat  kimia (sintesis).  Salah  satu  tanaman yang  secara  empiris  digunakan untuk  pengobatan  adalah  ceremai ( Phyllanthus  acidus L . ) (Muhlisah, 2005). Ceremai ( Phyllanthus acidus L . )  merupakan  suku
Euphoorbiaceae ,  pohon  ini  berasal dari  India,  dapat  tumbuh  pada tanah
kekurangan sampai
kelebihan  air.  Ceremai  banyak ditanam  orang  di  halaman  rumah.
Tanaman ceremai mempunyai banyak  khasiat  diantaranya  daun ceremai  berkhasiat  untuk  obat
batuk berdahak, menguruskan badan, mual, kanker dan sariawan.
Kulit  batang  dan  akar    untuk  obat asma  dan  sakit  kulit.  Selain  itu, bijinya digunakan untuk obat
sembelit  dan  mual  akibat  perut
kotor (Raina, 2011). Ceremai merupakan bahan alternatif yang dapat digunakan sebagai pengganti antibiotik. Ceremai bersifat antiinflamasi dan antibakteri karena memiliki kandungan zat aktif seperti tanin, flavonoid, dan saponin
(Pratiwi et  al ,  2013,  Hidayat et  al,
dan  Diding et  al, 2010).  Flavonoid menghambat  pertumbuhan  bakteri dengan  cara  merusak  dinding  sel, menonaktifkan  kerja  enzim,  dan merusak  membran  sel.  Saponin bekerja sebagai antibakteri dengan cara  meningkatkan  permeabilitas
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
Sernita, et al., Biowallacea, Vol. 3 (2), Hal : 455-466,  Oktober, 2016
membran  sel  (Hassan,  2008).
Tanin  yang  merupakan  golongan polifenol  juga  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  cara yang mirip dengan flavonoid. Tanin bekerja  dengan  merusak  membran sel.  Tanin  dapat  berikatan  dengan besi dimana besi dibutuhkan bakteri untuk metabolismenya.
Ketiadaan besi mangakibatkan kematian  bakteri  (Akiyama et  al ,
2001).
Secara klinis penyebab diare  dapat  dikelompokkan  dalam lima golongan yaitu infeksi (bakteri, virus,  dan  parasit),  malabsorbsi,
alergi, keracunan
dan imunisasi/difisiensi. Salah satu bakteri  yang  menjadi  pemicu  diare adalah  bakteri Escherchia  coli
(Sinthamurniwati,  2006).  Bakteri  ini akan  merugikan  jika  bertambah atau  meningkatnya  jumlah  bakteri
sehingga dapat mengganggu metabolisme tubuh, terutama dalam saluran
pencernaan
(Adyanastri,  2012).  Hasil  penelitian
yang telah dilakukan oleh Hamdani (2012) menunjukkan
bahwa
perasan daun ceremai ( Phyllanthus acidus L.) dapat menghambat
pertumbuhan Escherchia coli. Oleh karena itu, peneliti tertarik menggunakan kulit batang
ceremai sebagai bahan uji untuk m engetahui  kepekaan  kulit  batang ceremai  ( Phyllanthus  acidus L . )

## dalam  menghambat  pertumbuhan
Escherchia coli.
Eschericia coli merupakan  bakteri  oportunis  yang banyak  ditemukan  di  dalam  usus besar manusia sebagai flora normal. Eschericia  coli berbentuk batang  pendek  (kokobasil),  gram negatif,  ukuran  0,4-0,7  µm  x  1,4 µm, sebagian besar dapat bergerak dan  beberapa  strain  mempunyai kapsul  (Pelczar,  2006).  Sifatnya unik  karena  dapat  menyebabkan infeksi  primer  pada  usus  misalnya diare pada anak dan orang dewasa.  Diare  adalah  penurunan konsentrasi  dari  tinja  (menjadi lunak  atau  cair)  dalam  waktu  24 jam.  Gambaran  secara  klinis  diare adalah  dengan  frekuensi  tiga  kali atau lebih dan menyebabkan badan  lesu  dan  lemas,  tidak  nafsu makan,  dan  seringkali  juga  di
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
Sernita, et al., Biowallacea, Vol. 3 (2), Hal : 455-466,  Oktober, 2016
dahului
dengan muntah (Adyanastri, 2012).

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan adalah  aquadest,  etanol  96  %, kertas  pH  Universal,  kulit  batang ceremai  ( Phyllantus  acidus L.), Nutrient  Agar (NA), Nutrient  Broth
(NB)  dan Paper  disk .  Alat  yang
digunakan adalah penghalus (blender), autoclave , batang pengaduk, cawan petri,
erlenmeyer,  gelas  kimia,  gelas ukur, hot  plate ,  jangka  sorong,
karet penghisap, kain flannel, inkubator, lampu spritus, oven, ose bulat,  pH  meter,  pingset,  rotavafor, sendok  tanduk,  timbangan  analitik dan wadah maserasi
Pembuatan  ekstrak  kulit  batang ceremai ( Phyllantus acidus L . )
Pengambilan
batang
ceremai,  kemudian  di  potong  kecil agar  mudah  dibersihkan.  Dikupas kulitnya,  kemudian  dikeringkan  di bawah  sinar  matahari  langsung dengan  ditutup  menggunakan  kain
berwarna hitam. Kulit batang ceremai  yang  telah  kering  di blender  hingga  menjadi  serbuk. Sampel  yang  sudah  di  serbuk ditimbang  sebanyak  300  gram,
Dimasukkan kedalam wadah maserasi  kemudian  ditambahkan etanol  96%,  Ditutup  dan  dibiarkan selama  5  hari  pada  suhu  kamar terlindung  dari  cahaya  matahari sambil diaduk menggunakan batang  pengaduk  setiap  24  jam agar  semua  sampel  terendam secara  sempurna,  Setelah  5  hari,
disaring kedalam wadah penampungan dengan menggunakan kain flannel,
Diamkan  selama  2  hari  dalam keadaan  tertutup  dan  disimpan dalam  tempat  yang  terlindung cahaya,  Selanjutnya  hasil  yang telah  diperoleh  dirotavafor  sampai menjadi ekstrak kental.
Pembiakkan  Bakteri Escherichia coli pada  media Nutrient  Broth
(NB)
Disiapkan alat dan bahan, Diambil satu ose bakteri Escherichia  coli ATCC  35218. Diinokulasi pada media NB
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
( Nutrient  Broth ).  Diinkubasi  selama
1 x 24 jam pada suhu 37 o C
Pembuatan  media nutrient  agar
(NA)
Disiapkan alat dan bahan.
Ditimbang  2,8  gram  media  NA,
dilarutkan dengan
aquadest
sebanyak  100  mL.  Diukur  pH larutan dengan menggunakan kertas  pH  universal.  Untuk  media NA  ketentuan  pH  berkisar  7,4  ±
0,2. Dihomogenkan
dalam
waterbath, kemudian  disterilkan  ke
dalam autoclave selama  15  menit pada  suhu  121 o C.  Didinginkan kemudian  dituang  ke  dalam  cawan petri dan biarkan hingga memadat.
Pembuatan pengenceran ekstrak kulit batang ceremai
1. Pengenceran ekstrak kulit batang ceremai 20% sebanyak 5 mL Dipipet  1  mL  ekstrak kulit batang ceremai, Dimasukkan kedalam labu tentukur  5  mL,  Dicukupkan volume dengan aquadest sampai tanda batas, Dihomogenkan, kemudian diberi label 2. Pengenceran ekstrak kulit batang ceremai 40% sebanyak 5 mL Dipipet  2  mL  ekstrak kulit batang ceremai, Dimasukkan kedalam labu tentukur  5  mL,  Dicukupkan volume dengan aquadest sampai tanda batas, Dihomogenkan, kemudian diberi label 3. Pengenceran ekstrak kulit batang ceremai 60% sebanyak 5 mL Dipipet  3  mL  ekstrak kulit batang ceremai, Dimasukkan kedalam labu tentukur  5  mL,  Dicukupkan volume dengan aquadest sampai tanda batas, Dihomogenkan, kemudian diberi label 4. Pengenceran ekstrak kulit batang ceremai 80% sebanyak 5 mL Dipipet  4  mL  ekstrak kulit batang ceremai, Dimasukkan kedalam labu
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
Sernita, et al., Biowallacea, Vol. 3 (2), Hal : 455-466,  Oktober, 2016
tentukur  5  mL,  Dicukupkan volume dengan aquadest sampai tanda batas, Dihomogenkan, kemudian diberi label Pengujian kepekaan dengan mengukur  zona  hambat  pada ekstrak  kulit  batang  ceremai metode cawan kertas atau metode paper disk Dipipet biakan bakteri aktif dari media NB.
Dimasukkan  ke  dalam erlenmeyer  yang  berisi  100  mL larutan NA. Dihomogenkan kemudian  dituang  kedalam  cawan pertri dan dibiarkan hingga memadat.  Dipipet  ekstrak  kulit batang  ceremai  pada  masing- masing  konsentrasi  menggunakan mikropipet  kemudian  diteteskan pada paper  disk .  Diletakkan paper
disk pada  media  NA.  Diinkubasi selama  48  jam  pada  suhu  37 0
Diamati  dan  diukur  zona  hambat menggunakan jangka sorong.
Dicatat hasil diameter zona hambat yang terjadi

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil pengujian kepekaan
dengan  mengukur  diameter  zona
hambat  pada  ekstrak  kulit  batang ceremai terhadap pertumbuhan
Escherichia coli ATCC 35218 dapat dilihat pada tabel 1. berikut ini:
Tabel 1. Hasil uji kepekaan ekstrak kulit batang ceremai terhadap    pertumbuhan Escherichia coli. No  Perlakuan Diameter zona hambat (mm) Rata- rata Ulangan I II III 1 A 0 0 0 0 2 B 4 4,1 4 4,03 3 C 5,1 4 4 4,36 4 D 5,6 5,6 5,5 5,56 5 E 7 7,1 7 7,03 6 Kontrol (+) 11,9 11,9 11,9 11,9 Keterangan : A = Konsentrasi kulit batang ceremai 20% ; B = Konsentrasi kulit batang ceremai 40% ; C = Konsentrasi kulit batang ceremai 60% ; D = Konsentrasi kulit batang ceremai 80% ; E = Konsentrasi kulit batang ceremai  100%  ;  F  =  Kontrol positif (+) (amoxycilin)
Tabel  1.  menunjukkan bahwa  hasil  pengukuran  zona
hambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dengan  3  kali pengulangan, pada konsentrasi
100%  memiliki  zona  hambat  yang paling  tinggi  dengan  rata-rata  7,03 mm.  Kemudian  pada  konsentarasi 80% memiliki zona hambat dengan
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
Sernita, et al., Biowallacea, Vol. 3 (2), Hal : 455-466,  Oktober, 2016
rata-rata 5,56
mm. Pada konsentrasi  60%  memiliki  zona hambat  dengan  rata-rata  4,36  mm.
Pada  konsentrasi  40%  memiliki zona hambat dengan rata-rata 4,03 mm.  Sedangkan  pada  konsentrasi 20  %  tidak  memiliki  zona  hambat.
Untuk kontrol diperoleh zona hambat  dengan  rata-rata  11,9  mm seperti  yang  tertera  pada  Gambar 1.  Hasil  pengujian  kepekaan  kulit
batang
ceremai terhadap
Escherichia  coli menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi kulit batang ceremai maka semakin besar  diameter  zona  hambat  yang terbentuk.
Gambar  1.  A  =  Konsentrasi  kulit batang  ceremai  20%  ; B  =  Konsentrasi  kulit batang  ceremai  40%  ; C  =  Konsentrasi  kulit batang  ceremai  60%  ; D  =  Konsentrasi  kulit batang  ceremai  80%  ; E  =  Konsentrasi  kulit
batang  ceremai  100%  ; F  =  Kontrol  positif  (+) (amoxycilin)
Ceremai  merupakan  bahan
alternatif  yang  digunakan  sebagai
pengganti antibiotik. Ceremai mempunyai banyak khasiat diantaranya daun ceremai berkhasiat untuk obat batuk berdahak,  menguruskan  badan, mual,  kanker  dan  sariawan.  Kulit batang  dan  akar  untuk  obat  asma dan  sakit  kulit.  Ceremai  bersifat antiinflamasi dan antibakteri karena memiliki kandungan zat aktif seperti tanin, flavonoid dan saponin.
Escherichia  coli merupakan famili enterobactericeae
yang
merupakan  bakteri  patogen  dan penyebab  diare  pada  manusia.
Escherichia  coli berbentuk  batang pendek  (kokobasil),  gram  negatif, ukuran 0,4-0,7 µn x 1,4 µm. Bakteri
ini termasuk kedalam bakteri anaerobik  fakultatif  yang  artinya bakteri  ini  secara  terbatas  dapat hidup  dalam  keadaan  aerobik ataupun anaerobik.
Sampel  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  ekstrak kulit  batang  ceremai  ( Phyllanthus
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
acidus ) yang diekstraksi menggunakan  metode  maserasi dengan  cairan  penyari  (etanol 96%). Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui  kepekaan  kulit  batang
ceremai ( Phyllanthus acidus ) terhadap  pertumbuhan Escherichia coli dengan menggunakan konsentrasi  20%,  40%,  60%,  80% dan 100%. Pengujian kepekaan menggunakan  media  NA  (Nutrient Agar) dengan metode cawan kertas ( Paper Disc Method ), dimana  biakan  bakteri  dari  media NB  dicampur  dengan  media  agar.
Kemudian  cawan  kertas  ( Paper Disk )  yang  berisi  anti  bakteri
dengan konsentrasi tertentu diletakkan diatas media agar tersebut.  Daya  antibakteri  dapat dilihat  dari  lebar  diameter  daerah
hambatan pertumbuhan bakteri
yang terjadi. Hasil pengamatan dengan  tiga  kali  pengulangan, menunjukkan bahwa kepekaan
kulit batang ceremai dalam konsentrasi yang berbeda memberikan  zona  hambat  yang
berbeda  terhadap  pertumbuhan bakteri Escherichia  coli .  Hal  ini terlihat  jelas  dari  hasil  pengukuran zona  hambat.  Pada  konsentrasi 20%  ekstrak  kulit  batang  ceremai
tidak dapat menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia coli . Pada konsentrasi 40% ekstrak kulit batang ceremai dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri
Escherichia  coli dengan  rata-rata zona  hambat  4,03  mm.  Pada konsentrasi 60% ekstrak kulit batang ceremai dapat menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia coli dengan  rata-rata  zona  hambat
4,36  mm.  Pada  konsentrasi  80%
ekstrak  kulit  batang  ceremai  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri
Escherichia  coli dengan  rata-rata zona  hambat  5,56  mm.  Pada konsentrasi  100%  ekstrak  kulit batang ceremai dapat menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia coli dengan  rata-rata  zona  hambat
7,03 mm. Amoxicillin sebagai
antibiotik  sekaligus  sebagai  kontrol positif  memberikan  zona  hambat dengan diameter 11,9 mm.
Berdasarkan penelitian ini
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
Sernita, et al., Biowallacea, Vol. 3 (2), Hal : 455-466,  Oktober, 2016
terbukti  bahwa  ekstrak  kulit  batang ceremai  ( Phyllanthus  acidus L.) dapat  menghambat  pertumbuhan
Escherichia  coli pada  konsentrasi
40  %,  60%,  80  %  dan  100  %.  Hal ini    berbeda  dengan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Hamdani (2012)  yang  membuktikan  bahwa
air perasan daun ceremai ( Phyllanthus acidus L.) pada kosentrasi 100% dinyatakan sensitif sedangkan kosentrasi 80%,
60%,  40%  dan  20%  (negatif)
dinyatakan resisten terhadap
pertumbuhan Escherichia coli .
Menurut  Madigan  dkk.
(2000)  Berdasarkan  sifat  toksisitas selektifnya,  ada  antibakteri  yang bersifat  menghambat  pertumbuhan bakteri, dikenal sebagai
bakteriostatik ,  ada  yang  bersifat membunuh bakteri, dikenal sebagai bakterisidal .  Dalam  hal  ini  ekstrak
kulit batang ceremai bersifat bakteriostatik, akan tetapi zat antibakteri dapat bersifat bakteriostatik pada konsentrasi
80%,  60%  dan  40%  namun  yang
bersifat bakterisidal pada
konsentrasi  100%.  Kulit  batang
ceremai  ( Phyllanthus  acidus L) mengandung  zat-zat  yang  bersifat bakteriostatik diantaranya mengandung  polifenol,  saponon dan flavonoid dan tanin.
Standar  nilai  resistensi (Cappucino  dan  Sherman,  1983) dalam  (Tokan,  2006)  adalah  bila diameter  zona  hambat  <  14  mm maka resistensi, bila diameter zona hambat  antara  15-18  mm  maka resistensi sedang, dan bila diameter  zona  hambat  >  19  mm maka sensitive.

## KESIMPULAN
1. Ekstrak  kulit  batang  ceremai dapat menghambat pertumbuhan bakteri

## Escherichia coli
2. Pada  konsentrasi  20%  tidak dapat menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli, pada konsentrasi  40%,  60%,  80% dapat menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia  coli ,  dan  pada
konsentrasi 100% ekstrak kulit
batang  ceremai  menghambat pertumbuhan bakteri
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
Escherichia
coli secara optimal.

## SARAN
Agar  dilakukan  penelitian lebih  lanjut  mengenai  uji  kepekaan kulit  batang  ceremai  terhadap bakteri lain dan menggunakan cara ekstrak yang berbeda.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan
terimakasih  kepada  pihak  Yayasan
Bina  Husada  Kendari  yang  telah memberi
fasilitas, sehingga penelitian ini berjalan lancar.

## DAFTAR PUSTAKA
Akiyama, H. et al ., (2001).
Antibacterial Action of Several  Tannin  Against stphylococcus aureus,
Journal  of  Antimicrobial Chemotherapy. Al-Henhena,  N,  Mahmood,  A,  Al- Magrami,
A, Nor Syuhada,  ABN,  Zahra,
AA,  Summaya,  MD,  Suzi, SM  &  Salmah,  (2011), Histological Study Of
Wound  Healing  Potential by Ethanol Leaf Extract of Strobilanthes  cripus  in Rats , (Journal of Medicinal Plants
Research, vol.5, pp.3660- 3666) Arisman  MB,  (2012). Buku  Ajar Ilmu Gizi Keracunn Makanan. Jakarta: Kedokteran EGC Brooks, Butel JS, Morse SA.,(2008), Medical Microbiology , 24.th edition, McGraw-Hill Companies  inc.,  USA.pp 601-604 Cappucino  ,  J.G.,  Sherman,  N. (1983). Microbiology Laboratory Manual . (Seventh Edition). London : Camridge University Press Christy Priskila, Kairupan Fatimawali  dan  Widya  A. Lolo,  (2014)., Uji  Daya Hambat  Ekstrak  Etanol Daun  Kembang  Sepatu
(Hibiscus rosa-sinensis L)
Terhadap
Pertumbuhan bakteri  Escherichia  coli .
(Jurnal  Ilmiah  Farmasi- UNSRAT  vol.  3  no.  2) hal:2 Depkes.R.  I.  (2007). Kebijakan Obat Tradisional Nasional
( KONTRANAS ). Jakarta. Dwidjoseputro. (2005). Dasar- Dasar Mikrobiologi . Jakarta : Penerbit Djambatan. Diding  HP., et  al (2010). Pengaruh Ekstrak  Daun  Ceremai (Phyllanthus  acidus  L.) terhadap  Ekspresi  CD4 + Bronkus pada Mencit
Modelasma Alergi . Jurnal. 7 (2):82-86
Eren  Harryana et  al, (2005). Daun Ampuh  Basmi  Berbagai
Penyakit .  Nusa  Creativa  : Jogjakarta Erwiyani  R.  (2009), Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Buah Ceremai (Phyllanthus  acidus (L.) Skeels terhadap Candida Fras Korompis, Heedy Tjitrosantoson  dan  Lily Ranti  Goenawi,  (2013)., Studi  Penggunaan  Obat Pada Penderita Diare
Akut  Di  Instalasi  Rawat Inap  Blu  RSUP  Prof.  DR. R.  D.  Kandou  Manado Periode Januari-Juni 2012. (Jurnal Ilmiah Farmasi-UNSRAT  vol.  2 no. 01)
Gani, A. (2003)., Metode Diagnostik
Bakteriologi III , Makassar, Balai Labortorium Kesehatan.
Hassan, Sherif Mohammed, (2008), Antimicrobial  Activity  of Saponin-Rich  Guar  Meal Extract, Texas  A  &  M University Hidayat, et  al .  (2006), Mikrobiologi Industri . C.V Andi Offset :
Yogyakarta Hutapea,  (1991), Aneka  Tanaman
Obat , Penebar Swadaya :
Jakarta
Indy  Ainun  Hakimah,  (2010), 81
Macam  Buah  Berkhasiat Istimewa ,  Syura  Media Utama : Jawa Tengah Jawetz, Melnick, Adelberg`s, Geo.F.Brooks, Janet S.Butel, Stephen A.Morse. 2005. Mikrobiologi  Kedokteran ,
Jakarta: Selemba Medika,
Jawetz et  al, (2005), Mikrobiologi Kedokteran (Medical Microbiology) , Terjemahan  oleh  Eddy
Mudihardi  dkk.  Jakarta: Salemba Medika
Madigan, M. T., Matinko, J. M., dan Parker,  J.  2000. Brock Biology of Mikroorganisme . Ninth Edition.  Prentice-Hall  Inc. New Jersey Muhlisah, F. (2005), Tanaman Obat Keluarga, Penebar Swadaya, Jakarta
Notoatmodjo, S. (2002). Metodologi Penelitian  Kesehatan .  PT Rineka Cipta : Jakarta Pelczar, M.J., Chan, E.C.S. (2007). Dasar-dasar  mikrobiologi.
Jilid ke-1.
Pelczar,  M.  J  dan  E.C.S.  Chan. (2006).
Dasar-dasar Mikrobiologi .  Universitas Indonesia Press: Jakarta Pratiwi, Y.C. et al , (2013). Efektivitas  Ekstrak  Daun Ceremai (Phyllanthus acidus L.) Terhadap Mortalitas  Larva  Aedes aegypti . Universitas Negeri Surabaya : Surabaya Radji,  Maksum.  (2011), Buku  Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa  Farmasi  dan Kedokteran. Buku Kedokteran EGC: Jakarta Raina  MH.  (2011), Enslikopedi Tanaman Obat Untuk Kesehatan . Absolut : Yogyakarta Raynaldi.http://raynaldy skanel.blog
spot.com/2013/06/ bakteri ecoli escherichia-coli .html
Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli
Sernita, et al., Biowallacea, Vol. 3 (2), Hal : 455-466,  Oktober, 2016
Sastrohamidjojo, H., Pranowo, H.D. (2009), Sintesis  Senyawa
Organik,  Edisi  Pertama , Penerbit Erlangga , Jakarta Sintamurniwati,  (2006)., Faktor- Faktor  Risiko  Kejadian
Diare  Akut  Pada  Balita . [Tesis].  UNDIP.
Semarang. Suardana IW. Swacita IBN. (2009). Higiene Makanan . Udayana University Press : Bali Tom Elliott et al, (2013)., Mikrobiologi  Kedokteran dan Infeksi. Edisi 4. Buku Kedokteran EGC: Jakarta Utami, Prapti. Buku Pinter Tanaman  Obat , Jakarta :Agromedia pustaka, (2008). World Health Organization, (2005)., Penyakit Bawaan Makanan . Fokus Pendidikan Kesehatan, EGC : Jakarta.