DOI 10.33323/indigenous.v3i1.73 Volume 3(1) 2020 (24-31)
KANDUNGAN PIGMEN PADA LAMUN Enhalus acoroides DI PERAIRAN PANTAI AMADOKE DESA AKLE KECAMATAN SEMAU SELATAN KABUPATEN KUPANG (The Pigment Contens of Enhalus acoroides Seagrass at the Coastal Waters of Akle Village, South Semau Sub-district, District of Kupang)
Ivin A. Bayang 1), Andriani Rafael 2) , Alfret G.O.Kase 3)
Program Studi Pendidikan Biologi, FKIP, Universitas Kristen Artha Wacana

## Corresponding Author: ivinbayang19@gmail.com

## ABSTRAK
Ekosistem lamun merupakan salah satu ekosistem di laut dangkal yang mempunyai peranan penting dalam  kehidupan  biota  laut  dan  merupakan  salah  satu  ekosistem  bahari  yang  paling  produktif,  sehingga mampu mendukung potensi sumber daya yang tinggi pula. Fungsi ekologis ekosistem lamun adalah sebagai produsen, pendaur unsur hara, penstabil substrat, penangkap sedimen, habitat dan makanan, serta tempat berlindung organisme laut lainnya. Salah satu faktor yang mendukung peran dari lamun adalah kemampuan fotosintesis yang dibantu oleh pigmen hijau daun salah satunya yakni klorofil. Tujuan dari penelitian ini adalah, untuk  mengidentifikasi  pigmen  dan  mengetahui  kandungan  pigmen  yang  terdeteksi  pada  lamun Enhalus acoroides di Perairan Pantai Amadoke, Desa Akle Kecamatan Semau Selatan Kabupaten Kupang. Metode yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  survei,  kromotografi  lapis  tipis,  dan  metode spektrofotometer.  Lamun  ini  mengandung  pigmen  yang  terlihat  pada  hasil  analisis  spektrofotometer  pada ekstrak pigmen total lamun dan pemisahan pigmen lewat uji Kromotografi Lapis  Tipis (KLT). Dalam proses ekstraksi  digunakan  pelarut  aseton  untuk  penggerusan  dan  perendaman.  Untuk  uji  spektrofotometer kandungan klorofil a menggunakan panjang gelombang 645 nm dengan pigmen total 226,85 µg/mL, klorofil b 664  nm  dengan  pigmen  total  368,69  µg/mL  dan  karotenoid  470  nm  dengan  pigmen  total.  2.923,70  µg/mL. Pada pengujian pigmen melalui KLT terdapat sembilan noda yaitu, klorofil a dengan nilai Rf (0,78, 0,84 dan 0,08) klorofil b dengan nilai Rf (0,04),  klorofil c dengan nilai Rf  (0,12), feofitin dengan nilai Rf (0,22 dan 0,88), fukosantin dengan nilai Rf (0,48) dan karotenoid dengan nilai Rf (1,00).
Kata kunci : Enhalus acoroides , pigmen, klorofil, KLT

## ABSTRACT
Seagress ecosystem is one of the shallow marine ecosystem that has an important role in the life of marine and is one of the most productive marine ecosystem, so that it can support the high potential of high resources as well. The ecological function of seagress ecosystem is as a producer, nutrient recycler, substrat stabilizer, sedimen capture, food and shelter of other organisme. The purpose of the research was to identify the pigment and  determine the pigment content in Enhalus acoroides (Linnaeus f.) seagress in Amadoke waters beach Akle  of  village,  South  Semau.The    research  use  survey  method,  thin  layer  chromotographic  and spectrophotometer  methods.  This  seagress  contains  pigment,  seen  in  the  result  of  spectrophotometric analysis  in  total  seagress  extract  and  pigment  separation  through  thin  layer  chromotography  test.  In  the pisment used acetone for steaming and soaking. The spectrophotometric test for the content of chlorophyll a (λ 645 nm), chrolophyll b (λ 664 nm) and carotenoid (λ 470 nm), respectivelly are 226,85 µg/mL, 368,69 µg/mL and 2923,70 µg/mL. Nine pigments found based on the Rf valuef of TLC analisis are chrolophyll a (Rf 0,78, 0,84, 0,08), chrolophyll b (Rf 0,04), chrolophyll c (Rf 0,12), feofitin (Rf 0,22 dan 0,88) and carotenoid (Rf 1,00)
Keywords: Enhalus acoroides , pigment, chlorophyll, TLC

## Indigenous Biologi
Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 3(1) 2020

## PENDAHULUAN
Indonesia  dikenal  sebagai  negara  dengan  keanekaragaman  hayati  yang  tinggi, termasuk keanekaragaman lautnya. Salah satu keanekaragaman laut yang banyak dijumpai di  sekitar  daerah  pesisir  dan  lingkungan  laut  wilayah  tropis  adalah  ekosistem  lamun. Ekosistem lamun merupakan salah satu ekosistem di laut dangkal yang mempunyai peranan penting dalam kehidupan biota laut dan merupakan salah satu ekosistem bahari yang paling produktif, sehingga mampu mendukung potensi sumber daya yang tinggi pula (Hartati dkk., 2012).  Fungsi  ekologis  ekosistem  lamun  adalah  sebagai  produsen,  pendaur  unsur  hara, penstabil  substrat,  penangkap  sedimen,  habitat  dan  makanan,  serta  tempat  berlindung organisme laut lainnya (Hernawan dkk., 2017).
Lamun di dunia berjumlah 60 jenis, yang terdiri atas 2 suku dan 12 marga (Hernawan dkk., 2017). Di perairan Indonesia terdapat 15 jenis, yang terdiri atas 2 suku dan 7 marga. Salah  satu jenis  lamun yang  dapat  dijumpai  adalah Enhalus  acoroides (Linnaeus f.)  lamun Enhalus acoroides (Linnaeus f.) biasanya tumbuh di sepanjang pantai terlindung di perairan dangkal  sampai  kedalaman  4  meter.  Substrat  yang  disukai  adalah  dasar  berpasir  atau berlumpur pada cekungan  kecil  atau  rataan  pasang  surut (Wagey, 2013).
Lamun  sangat  berperan  penting  dalam  lingkungan  perairan  maka  salah  satu  faktor yang mendukung peran dari lamun adalah kemampuan fotosintesis yang dibantu oleh pigmen hijau daun salah satunya yakni klorofil. Klorofil merupakan suatu pigmen yang memiliki warna hijau atau biasa disebut dengan zat warna hijau yang terdapat pada daun tanaman. Fungsi utama klorofil dalam proses fotosintesis yaitu, memanfaatkan energi matahari, memicu fiksasi CO 2 dan menyediakan energi bagi ekosistem secara keseluruhan (Bahri, 2010).
Desa  Akle  merupakan  sebuah  desa  pesisir  yang  terletak  di  Kecamatan  Semau Selatan Kabupaten Kupang. Desa Akle memiliki wilayah pesisir yang selama ini dimanfaatkan oleh masyarakat sekitar guna memenuhi kebutuhan, salah satu perairan pantai yang berada di Desa Akle adalah pantai Amadoke, dan potensi wilayah pesisir yang menopang kehidupan organisme serta memiliki jasa bagi lingkungan perairan di sekitar adalah ekosistem lamun. Kawasan ini terdiri atas wilayah mangrove yang mana merupakan salah satu tempat hidupnya lamun.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Rahmawati  dkk.,  (2014)  yang  menyatakan  bahwa ekosistem  lamun  di  Indonesia  biasanya  terletak  diantara  ekosistem  mangrove  dan  karang, atau terletak di dekat pantai berpasir dan hutan pantai.
Pada penelitian tentang kandungan pigmen pada lamun Enhalus acoroides di perairan pantai  Amadoke  Desa  Akle  Kecamatan  Semau  Selatan  Kabupaten  Kupang,  peneliti  dapat menghitung  kandungan  pigmen  pada  ekosistem  lamun  terkhususnya  pada  lamun Enhalus acoroides .  Untuk  mengetahui  kandungan  pigmen yang  merupakan  suatu  ukuran  bagi biomassa tumbuhan yang terdapat dalam air laut di sekitar perairan Pantai Amadoke Desa Akle maka perlu dilakukan tahap KLT dan tahap analisis spektrofotometer.
Tahapan  penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  pigmen  pada  lamun tersebut.  Mengingat  hasil  penjajakan  ataupun  penelitian kandungan  pigmen  pada  lamun  di perairan pantai Amadoke Desa Akle Kecamatan Semau Selatan terdahulu belum ada, maka belum tersedia pula informasi yang lebih jelas tentang keberadaan kandungan pigmen pada Enhalus acoroides di perairan pantai Amadoke Desa Akle. Tujuan dari penelitian ini adalah, untuk  mengidentifikasi  pigmen  dan  mengetahui  kandungan  pigmen  yang  terdeteksi  pada lamun E.  acoroides di  perairan  pantai  Amadoke  Desa  Akle  Kecamatan  Semau  Selatan Kabupaten Kupang.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian telah dilaksanakan pada bulan Juni sampai dengan 12 agustus 2019 dan tempat  penelitian  telah  dilaksanakan  di  perairan  pantai  Amadoke  Desa  Akle  Kecamatan Semau  Selatan  Kabupaten  Kupang  untuk  pengambilan  sampel E.acoroides dan  di Laboratorium  Biologi,  Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu  Pendidikan  Universitas  Kristen  Artha Wacana Kupang untuk tahap analisis kandungan pigmen pada lamun E.acoroides .

## Alat dan bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah: aluminium foil, ziper plastik, kertas label, kotak pendingin, neraca analitik ( Ohaus Cl series ), mortal dan pastel, pipet ukur, gelas ukur, kertas saring woodman piper no 42, botol sampel, chamber dan penutup chamber , plat KLT,  lampu  UV,  spektrofotometer  ( Thermo  scientific  genesys  10  s  series  uv-visible spectrophotometers ), alat tulis dan kamera digital (Nikon CoolPix 8.0). Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sampel Lamun E. acoroides yang diperoleh dari perairan pantai Amadoke  Desa  Akle  Kecamatan  Semau  Selatan  Kabupaten  Kupang  dan  pelarut  yang berkualitas teknis seperti, aseton, petroleum eter, dan heksan.

## Prosedur Penelitian
Tahap Pengambilan Sampel Sampel E.acoroides diambil  dengan  cara  dicabut  hingga  pada  akarnya,  kemudian spesimen dibungkus dengan aluminium foil dan dimasukan dalam zipper plastik yang telah diberi  label.  Sampel  yang  diambil,  dipilih  agar  seragam  berdasarkan  ukuran  morfologinya. Spesimen  yang  telah  diberi  label  selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  kotak  pendingin  dan dipindahkan ke laboratorium Universitas Kristen Artha Wacana Kupang untuk penelitian lebih lanjut.

## Tahap Proses Ekstraksi Klorofil
Dalam  proses  ekstraksi,  sampel  ditimbang  sebanyak  3  gr  dengan  menggunakan timbangan analitik ( Ohaus Cl series ), Sampel hasil penimbangan kemudian digerus  hingga halus dan dihomogenasi dengan 10 ml aceton dingin 80%. Homogenat dibiarkan selama 2 x 24  jam,  sehingga  memperoleh  supernatan.  Absorban  pigmen  dalam  supernatan  diukur dengan spektrofotometer ( Thermo scientific genesys 10 s series uv-visible spectrophotometers ) pada panjang gelombang 645 nm untuk pengukuran klorofil a , 664 nm klorofil b dan 470 nm karotenoid. Larutan blanko menggunakan aseton 80% (Wagey, 2013).

## Analisis jenis pigmen menggunakan KLT (Kromotografi Lapis Tipis)
Penyediaan  pelat  silika  gel  sebagai  fase  tetap,  pembuatan  kromotogram,  bagian bawah dan bagian atas pelat dibuat garis horizontal dengan jarak 1 cm dari ujung bawah dan 1 cm dari ujung atas. Pada garis awal dibuat spot dan ditotolkan larutan pigmen yang akan dianalisis  menggunakan  pipet  kapiler,  pelat  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  bejana  yang berisi eluen. Eluen yang digunakan adalah Heksan : Petroleum Eter : Aseton (3 : 1 : 3), setelah eluen  naik  sampai  batas  yang  ditetapkan,  pelat  silika  diangkat  dari  bejana,  spot-spot  yang terlihat ditentukan nilai  Rf (Wagey, 2013).
Penentuan nilai Rf dilakukan dengan membagi jarak yang ditempuh oleh senyawa dari titik asal  dengan  jarak  yang  ditempuh  pelarut  dari  titik  asal  (Sastrohamidjojo,  1990). Perhitungannya adalah sebagai berikut:
Rf  = Jarak yang ditempuh oleh senyawa Jarak yang ditempuh oleh pelarut
1) Persamaan pengukuran kandungan pigmen
Pengukuran kandungan klorofil a , b dan karotenoid secara spektrofotometer dihitung mengikuti rumus Lichtenthaler dan Wellburn (1983) : C klorofil 𝑎 ( mg. ml −1 ) = 12.21 ( A 664 ) – 2.81 ( A 645 ) ( C klorofil 𝑏 ) = 20.13(( A 645 )) – 5.03 ( A 664 ) ( C karotenoid ) = ( 1000A 470− 3.27 [Klo a ] – 104 [Klo b ])/227 Kandungan pigmen ( mg. g −1 ) = C ( mg. g −1 ) × V (ml)/BS (g) C = hasil penghitungan absorban ; V = volume larutan; BS = berat segar sampel
Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 3(1) 2020

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Deskripsi Lokasi
Lokasi  pengambilan  sampel  di  perairan  Pantai  Amadoke,  Desa  Akle,  Kecamatan Semau Selatan, Kabupaten Kupang. Spesies E.acoroides yang terdapat di Pantai Amadoke ini tumbuh di perairan dangkal sampai kedalaman 3 meter. Substrat dari lokasi pengambilan sampel  yang  ditumbuhi  oleh E.acoroides ini  adalah  berpasir,  berlumpur  dan  pada  dataran pasang  surut  dekat  hutan  bakau  ( mangrove ).  Berdasarkan  pengamatan,  lamun  jenis E.acoroides ini membentuk padang lamun monospesifik  yang padat, dengan morfologinya memiliki  rhizoma  yang  tebal,  berbentuk  pita  panjang  dengan  jumlah  2  sampai  dengan  5 helaian  daun,  pada  setiap  rhizoma  (rimpang)  terdapat  banyak  akar  dengan  rambut-rambut kaku berwarna hitam.
Gambar 1. Morfologi Lamun E.acoroides (Linnaeus f.)

## Kandungan Pigmen
Noda 9 Rf:1,00 Noda 8 Rf:0,88 Noda 7 Rf:0,84 Noda 6 Rf:0,08 Noda 5 Rf:0,78
Noda 4 Rf:0,48 Noda 3 Rf:0,22 Noda 2 Rf:0,12 Noda 1 Rf:0,04
Gambar 2 : Profil KLT Ekstrak Kasar E.acoroides
Identifikasi pigmen menggunakan KLT kemudian dilanjutkan dengan membandingkan nilai Rf sampel yang diperoleh dengan nilai Rf referensi. Hasil perhitungan nilai Rf pada noda- noda yang nampak pada plat  KLT, menunjukkan bahwa ekstrak kasar pigmen E.acoroides memiliki nilai Rf dengan kisaran 0,04 sampai dengan 1,00.
Analisis menunjukkan bahwa pada KLT dengan silica gel sebagai fase diam dan fase gerak berupa pelarut Heksan : Petroleum Eter : Aseton, memiliki kemampuan memisahkan senyawa-senyawa  pada  sampel.  Klorofil  merupakan  suatu  pigmen  yang  dapat  menyerap cahaya yang berupa sinar elektromagnetik. Pengekstraksian klorofil pada daun menggunakan larutan nonpolar karena pigmen pada klorofil memiliki sifat nonpolar (Singh, 2012).
Senyawa-senyawa yang bersifat polar dan non polar akan terpisah dan terbentuk noda pada  plat  KLT.  Hal  ini  disebabkan  sifat  pelarut  itu  sendiri  dan  karakter  dari  plat  silica  yang digunakan. Menurut Riyono (2007) Klorofil a , b , c dan karotenoid tidak  dapat larut dalam air, tetapi dapat larut dalam pelarut organik. Klorofil a mudah larut dalam ethyl-alkohol, ethyl ether, aseton, chloroform dan carbon-bisulfide. Klorofil b , c dan karotenoid dapat larut dalam pelarut yang sama atau pelarut semipolar meskipun tidak semudah klorofil.
Pigmen-pigmen yang teridentifikasi berdasarkan nilai Rf adalah klorofil a (Rf 0,78, 0,84 dan 0,08), klorofil b (Rf 0,04 dan 0,08), klorofil c (Rf 0,12), feofitin (Rf 0,22 dan 0,88), fukosantin (Rf  0,48),  dan karotenoid  (Rf  1,00).  Hasil  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh (Arifah dkk., 2019) di mana pigmen klorofil a memiliki nilai Rf berkisar antara 0,08 dan 0,76 sampai  dengan  0,88,  klorofil b dengan  nilai  Rf    berkisar  antara  0,01  sampai  dengan  0,20 (Heriyanto  dan  Limantara,  2006),  klorofil c dengan  nilai    Rf    berkisar  antara  0,01  sampai dengan 0,20 (Arifah dkk, 2019), feofitin dengan nilai Rf  berkisar antara 0,01 sampai dengan 0,20  dan  0,84  sampai  dengan  0,89 (Arifah  dkk, 2019)  dan karotenoid  dengan  nilai  Rf  0,87 sampai  dengan  1,00  (Heriyanto  dan  Limantara,  2006).Pada  noda  ketiga  dan  kedelapan dengan nilai Rf 0,07 sampai dengan 0,33 dan 0,84 sampai dengan 0,89 (Arifah dkk., 2019), merupakan jenis pigmen feofitin.
Pigmen  atau  zat  warna  adalah  zat  yang  mengubah  warna  cahaya  tampak  sebagai akibat proses absorbsi selektif terhadap panjang gelombang pada kisaran tertentu. Pigmen pada tumbuhan terdiri dari dua kelompok besar yaitu kelompok pigmen klorofil dan karotenoid. Pigmen  pada  daun  berasal  dari  proplastida  yaitu  plastida  yang  belum  dewasa,  kecil  dan hampir tidak berwarna dan sedikit atau tanpa membran dalam (Salisbury dan Ross, 2010).
Klorofil penting untuk tumbuhan untuk melaksanakan fotosintesis dan menghasilkan energi. Klorofil merupakan pigmen kloroplas yang terdapat dalam plastid. Plastid merupakan struktur khusus diselimuti oleh sistem membran rangkap ditemui hanya pada tumbuhan dan beberapa protista. Plastid mengandung  ribosom yang terbenam (bersama membran) dalam cair yang disebut stroma (Prastyo dan Lailly, 2015).
Peran klorofil a dalam fotosintesis yaitu mengubah energi radiasi menjadi energi kimia dan  mengangkut  energi  ke  pusat  reaksi  molekul.  Klorofil b menyerap  energi  radiasi  dan meneruskan  ke  klorofil a .  Peningkatan  klorofil  dapat  dihubungkan  dengan  bertambahnya kompleks  pemanenan  cahaya  dan  membesarnya  antena  pada  fotosistem  II  yang menyebabkan tingkat efisiensi penangkapan cahaya meningkat (Wiartana, 2014).
Dalam  jaringan  tumbuhan,  karotenoid  berperan  sebagai  pigmen  aksesoris  dan fotoprotektor.  Sebagai  pigmen  aksesoris,  karotenoid  berfungsi  untuk  menangkap  energi cahaya  dengan  panjang  gelombang  yang  tidak  dapat  ditangkap  oleh  klorofil,  kemudian ditransfer  ke  klorofil,  dan  digunakan  untuk  fotosintesis  (Cazzonelli,  2011).  Sebagai fotoprotektor, karotenoid berperan untuk memadamkan singlet oksigen yang terbentuk karena fotosensitasi dari klorofil. Singlet oksigen merupakan radikal bebas yang sangat berbahaya karena  memiliki  energi  yang  besar.  Karotenoid  akan  mengubah  singlet  oksigen  tersebut menjadi  triplet  oksigen  yang  lebih  stabil.  Pada  tumbuhan,  sintesis  karotenoid  terjadi  di kloroplas (Shumskaya dkk., 2012).
Pigmen  karotenoid  juga  dapat  mengalami  oksidasi  namun  selama  terdapat  pigmen klorofil maka pigmen karotenoid tetap terlindungi. Pigmen karotenoid yang ada pada sampel menunjukkan  bahwa  peran  karotenoid  sebagai  pigmen  pertahanan  diri  terhadap  kondisi lingkungan yang ekstrim selalu muncul setelah klorofil mengalami degradasi. Energi diserap oleh karotenoid dan disalurkan ke klorofil hingga akhirnya sampai pada pusat reaksi, efisiensi transfer  energi  karotenoid  ke  klorofil  tergantung  pada  struktur  karotenoid  serta  jarak  dan posisinya terhadap klorofil.
Pada  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  kasar E.acoroides (Linnaeus  f.) sangat didominasi oleh pigmen klorofil, hal ini sesuai dengan ciri fisik yang dimiliki oleh lamun E.acoroides (Linnaeus f.) yang berwarna hijau, klorofil memiliki peranan yang sangat penting dalam proses fotosintesis. Cahaya yang mengenai daun akan diserap oleh pigmen ini untuk mengubah gas karbondioksida dan air menjadi glukosa dan oksigen. Selain pigmen klorofil, terdapat  juga  pigmen  aksesoris  lainnya  yaitu  feofitin,  fukosantin  dan  karotenoid,  dari

## Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi
3(1) 2020 perbedaan  warna  yang  terjadi  bagian  daun  yang  berbeda  warna  disebabkan  oleh  faktor kurangnya  cahaya  matahari,  sehingga  daun  tersebut  tidak  dapat  melaksanakan  fungsi fisiologisnya  secara  sempurna.  Dengan  kata  lain,  secara  umum  fotosintesis  hanya  dapat berlangsung jika ada cahaya matahari yang cukup mengenai permukaan daun yang ditandai dengan adanya amilum pada daun.

## Analisis Konsentrasi dan Kuantitas Pigmen
Hasil ekstrak kasar E.acoroides (Linnaeus f.) yang dimaserasi, kemudian disaring dan memperoleh warna hijau tua. Selanjutnya dianalisis dengan spektrofotometer dengan panjang gelombang 645 nm untuk  pengujian klorofil a , klorofil b dengan panjang gelombang 664 nm dan  karotenoid  dengan  panjang  gelombang  470  nm.  Penentuan  konsentrasi  pigmen dilakukan dengan sampel ekstrak kasar E.acoroides (Linnaeus f.) sebanyak 5 mL, dan larutan blanko berupa aseton. Blanko aseton digunakan dengan tujuan untuk mengetahui besarnya absorbansi terhadap larutan.
Gambar 3. Nilai absorbansi kandungan pigmen
Pada  Gambar  3  di  atas dapat menunjukkan  adanya  perbedaan  nilai  hasil  pengujian kandungan klorofil pada E.acoroides (Linnaeus f.) dengan menggunakan panjang gelombang yang  berbeda  untuk  klorofil a ,  klorofil b ,  dan  karotenoid.  Nilai  transmitan  pelarut  diatur absorbansinya  menunjukkan  nilai  nol  sehingga  nilai  absorbansi  yang  dihasilkan  saat pengukuran hanya ditentukan oleh klorofil sebagai zat terlarutnya (Prastyo dan Lailly, 2015). Dalam hal ini, digunakan pelarut berupa aseton 80%.
Tabel 1. Hasil Perhitungan Klorofil a , b dan Karotenoid pada E. acoroides (Linnaeus f.) Kandungan Pigmen Kandungan pigmen (µg/mL) Total kandungan pigmen (µg/mL) Klorofil a 68,05      µg/Ml 226,85    µg/Ml Klorofil b 110,61    µg/Ml 368,69    µg/Ml Karotenoid 877,11    µg/mL 2.923,70 µg/mL
2.41 2.54 2.97 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 klorofil a klorofil b karotenoit
Nilai Absorbansi Kandungan Pigmen
Klorofil a dan klorofil b berada dalam absorbsi spektrum cahaya, sehingga membuat kedua  pigmen  tersebut  mempunyai  warna  berbeda.  Klorofil a mengabsorbsi  cahaya gelombang panjang dan sedikit gelombang pendek, sedangkan klorofil b hanya mengabsorbsi gelombang  pendek. Klorofil a berwarna hijau biru, sementara klorofil b berwarna hijau kuning (Atmanegara dan Sukojo, 3013).
Struktur  klorofil a dan b berbeda  pada  letak  dan  jumlah  H  dan  O.  Klorofil a (C55H72O5N4Mg), dan klorofil b (C55H70O6N4Mg), klorofil bertindak sebagai pengabsorbsi energi  dari  matahari  sehingga  berubah  menjadi  molekul  berenergi  tinggi  (Ai  dan  Banyo., 2011). Gambar 4. merupakan struktur dari klorofil a dan b.
Gambar 4. Struktur Klorofil a (kiri) dan Klorofil b (kanan) Sumber      : (Ai dan Banyo., 2011).
Berdasarkan hasil penelitian menunjukkan bahwa pigmen karotenoid yang merupakan pigmen  aksesoris,  ditemukan  dalam  jumlah  yang  banyak  (2.923,70  µg/mL)  diikuti  dengan klorofil b (368,69  µg/mL)  dan  klorofil a (226,85  µg/mL).  Hal  ini  diduga  peran  karotenoid sebagai  pigmen  pertahanan  diri  terhadap  kondisi  lingkungan  yang  ekstrim  selalu  muncul setelah  klorofil  mengalami  degradasi.  Karotenoid  juga  mempunyai  peran  untuk  membantu mengapsorpsi  cahaya  sehingga  spektrum  matahari  dapat  dimanfaatkan  dengan  lebih  baik. Energi  yang  diserap  karotenoid  diteruskan  pada  klorofil a untuk  kemudian  diserap  dan digunakan dalam proses fotosintesis demikian pula dengan klorofil b .
Pada  proses  fotosintesis  banyak  diperlukan  senyawa  kimia  yang  penting  dalam mengubah cahaya menjadi energi kimia pada tumbuhan tingkat tinggi, adalah pigmen yang terdapat didalam kloroplas, melalui pigmen inilah cahaya memulai proses fotosintesis. Pigmen tersebut dalam kloroplas yaitu pada membran internal yang disebut tilakoid. Pigmen tersebut adalah klorofil a , klorofil b , dan karetonoid (Sasmitamihardjo dan Siregar 1990).
Pada  penelitian  ini  memiliki  distribusi  pigmen  klorofil  yang  tidak  sebanding  dengan distribusi pigmen karotenoid. Sifat klorofil adalah menerima dan memantulkan sinar dengan menyerap sinar pada panjang gelombang antara 400 sampai dengan 700 nm, terutama sinar merah  dan  biru.  Klorofil  yang  tidak  stabil  akan  mengalami  perubahan  menjadi  senyawa derivatnya sehingga terdegradasi (Atmanegara dan Sukojo, 2013).  Hal ini disebabkan oleh sifat kimia dari klorofil yang mudah rusak atau teroksidasi, kerusakan atau hilangnya pigmen klorofil pada sampel diduga kemungkinan terjadi pada saat pengambilan sampel dan proses ekstraksi. Pigmen karotenoid juga bisa mengalami oksidasi namun selama terdapat pigmen klorofil maka pigmen karotenoid tetap terlindungi.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian disimpulkan bahwa pada lamun E.acoroides (Linnaeus f.) yang tumbuh di perairan pantai Amadoke Desa Akle Kecamatan Semau Selatan Kabupaten Kupang mengandung jenis pigmen klorofil. Data hasil penelitian menunjukkan terdapat 9 noda

## Indigenous Biologi
Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 3(1) 2020 yang terkandung pada sampel, terdiri dari pigmen  klorofil a , klorofil b , c , feofitin, fukosantin dan karotenoid serta memiliki konsentrasi pigmen total yang berbeda, dimana  pigmen total pada karotenoid adalah 2.923,70 µg/mL, diikuti dengan klorofil b dengan nilai 368,69 µg/mL dan klorofil a dengan nilai 226,85 µg/mL.

## Saran
Peneliti  menyarankan  bagi  peneliti  selanjutnya  segera  melakukan  identifikasi  pigmen  pada lamun menggunakan Kromotografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT), serta disarankan bagi peneliti selanjutnya dilakukan uji anti bakteri dan antioksidan. Perlunya penelitian lainnya yang dapat memperbaharui metode ekstraksi dan maserasi pigmen agar dapat meminimalisir rusaknya pigmen yang telah di-ekstraksi.

## DAFTAR PUSTAKA
Ai,  N.S.,  dan  Banyo,  T.  2011.  Konsentrasi  Klorofil  Daun  Sebagai  Indikator  Kekurangan  Air Pada
Tanaman. Jurnal Ilmiah Sains 11(2): 167- 173.
DOI: https://doi.org/10.35799/jis.11.2.2011.202 Atmanegara, P., dan Sukojo, B.M. 2013. Comparison Analysis Of Chlorophyll Content Using Vegetation  Index  And  Hymap  Data  (Study  Area  :  Karawang  Regency,  West  Java). Skripsi. Institut Teknologi Sepuluh November. Surabaya.
Arifah,  U.R.,  Sedjati,  S.,  Supriyantni,  E.,  dan  Ridlo,  A.  2019.  Kandungan  Klorofil  dan Fukosantin Serta Pertumbuhan Skeletonema costatum Pada Pemberian Spektrum  Cahaya  yang  Berbeda. Buletin  Oseanografi  Marina 8(1)  :  25- 32. https://doi.org/10.14710/buloma.v8i1.19986
Bahri, S. 2010. Klorofil. Diklat Kuliah Kapita Selekta Kimia Organik. Universitas Lampung. Cazzonelli  C.I.  (2011).  Goldacre  review:  carotenoids  in  nature:  insights  from plants and beyond. Functional Plant
Biology 38(11) : 833-847
https://doi.org/10.1071/FP11192
Heriyanto,  dan  L.  Limnatara.  2006.  Komposisi  dan  Kandungan  Pigmen  Utama  Tumbuhan Taliputri Cuscuta australis r.br. danCassytha filiformis L.Jurnal sains, Vol. 10 (2): 69- 75.
Hartati, R., Djunaidi, A., Hariyadi., dan Mujiyanto. 2012. Struktur Komunitas Padang  Lamun di Perairan Pulau Kumbang Kepulauan Karimunjawa. ILMU KELAUTAN: Indonesian
Journal of Marine Sciences 17 (4) : 217- 225 .
DOI: https://doi.org/10.14710/ik.ijms.17.4.217-225 Hernawan, E. U., Anggraini, K., Iswari, Y, M., Soyarso., Spriyadi, H, I., dan Sjafrie,M, D, N. 2017. Status Padang Lamun Indonesia . Pusat penelitian Oseonografi. LIPI. Jakarta.
Prastyo, A.K., dan Lailly, N.A. 2015. Uji Konsentrasi Klorofil Daun Temu mangga ( Corcuma mangga  val. ),  Temulawak  ( Curcuma  xanthorrhiza )  dan  Temu  Hitam  ( Curcuma aeruginosa ) Dengan Tipe Kertas Saring Yang Berbeda Menggunakan Spektofotometer. Seminar Nasional Konservasi dan Pemanfaatan Sumber Daya Alam : 188-191. Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Sebelas Maret Rahmawati,  S.,  Supriyadi,  H.I.,  Irawan,  A.,  dan  Azkab,  M.H.  2014. Panduan  Monitoring Padang Lamun. Coremap CTI LIPI. Jakarta.
Riyono, H.S. 2007. Beberapa Sifat Umum Dari Klorofil Fitoplankton . Oseana 17 (1) : 23-31 Salisbury, F., dan Ross, W., 2010. Fisiologi Tumbuhan Jilid 2 Edisi Revisi . ITB. Bandung. Sasmitamiharjdo,  D.,  dan  Siregar,  A.H.  1990. Dasar-dasar  Fisiologi  Tumbuhan . Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. ITB. Bandung.
Shumskaya  M,  Bradbury  LM,  Monaco  RR,  Wurtzel  ET.  Plastid  localization  of  the  key carotenoid  enzyme  phytoene  synthase  is  altered  by  isozyme,  allelic  variation,  and activity. Plant Cell. 2012 Sep;24(9):3725-41. doi: 10.1105/tpc.112.104174.
Singh,  S.  2012.  Isolation  and  Identification  of  Pigment  Molecules  from  Leaves Prosopis Juliflora . International Research Journal of Pharmacy 3 (4) : 150-152.
Wagey, B, T. 2013. Hilamun (seagrass) . Unsrat Press. Manado.
Wiartana, A. 2014. Induksi Variasi Cabai Merah (Capsicum annuum L) Dengan Ethyl Methane Sulfonate  Pada  Berbagai  Tingkat  Waktu  Perendaman).  Tesis.  Program  Studi  Ilmu Biologi Universitas Udayana. Denpasar.