## JIUBJ
Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi, 22(2), Juli 2022, 1045-1053 Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat universitas Batanghari Jambi
ISSN 1411-8939 (Online), ISSN 2549-4236 (Print) DOI 10.33087/jiubj.v22i2.2263

## Uji Sinergitas Rendaman Tembakau (Nicotiana tabacum L.) dengan Jamur
Trichoderma spp. Secara In Vitro dan Potensinya Sebagai

## Gabungan Biopestisida Alami

## Nura Khabita, Indah Sulistiyawati*, Ari Dwi Nurasih
Universitas Nahdlatul Ulama Purwokerto *Correspondence email: indahsulistiyawati.s2@gmail.com
Abstrak. Pengelolaan  hama  dan  penyakit  tanaman  dapat  mencegah  kegagalan  panen  komoditas  pertanian.  Jamur Trichoderma spp. merupakan salah satu jenis jamur pengendali hayati. Tembakau dapat digunakan sebagai pestisida nabati. Namun, sinergitas tembakau  dan Trichoderma spp.  ketika  diaplikasikan  bersamaan  dalam  mengendalikan  patogen  belum  diketahui,  mengingat kandungan senyawa aktif nikotin pada tembakau yang memiliki sifat antifungi maka perlu dilakukan penelitian ini dengan tujuan untuk mengetahui pengaruh rendaman tembakau terhadap pertumbuhan jamur Trichoderma spp. dan bila tidak ada penghambatan maka  keduanya  akan  berpotensi  sebagai  kombinasi  biopestisida  alami.  Penelitian  ini  menggunakan  rancangan  acak  lengkap (RAL). Perlakuan yang dicoba yaitu perbedaan konsentrasi rendaman tembakau yang dicampur dengan media PDA sebagai media biakan jamur Trichoderma spp. Konsentrasi yang dicoba adalah 0% (T0, kontrol positif), 5% (T1), 10% (T2), 15% (T3), dan 20% (T4). Kontrol negatif menggunakan fungisida berbahan aktif mankozeb. Masing-masing perlakuan diulang 3 kali. Data ketebalan dan  warna  koloni  diamati  secara  visual  dengan  metode  deskriptif.  Sedangkan  data  diameter  koloni,  jumlah  spora,  berat  kering miselium dianalisis dengan uji F, apabila berbeda nyata dilanjutkan dengan uji DMRT dengan taraf kepercayaan 5%. Berdasarkan penelitian  yang  telah  dilaksanakan  dari  bulan  Juli  -  Agustus  2021  maka  diperoleh  hasil  pada  media  PDA  dengan  kandungan rendaman  tembakau  konsentrasi  0%  (K+),  5%  (T1),  10%  (T2),  15%  (T3),  20%  (T4)  dapat  ditumbuhi Trichoderma spp., sedangkan  pada  media  dengan  penambahan  fungisida  sintetis  berbahan  mankozeb  tidak  ditumbuhi.  Perbedaan  konsentrasi menunjukkan  hasil  pertumbuhan  yang  berbeda  dan  konsentrasi  yang  efektif  untuk  pertumbuhan Trichoderma spp.  dalam penelitian ini adalah 15%, karena pada konsentrasi 20% terjadi penurunan angka kepadatan spora dan berat kering miselium. .
Kata kunci : Biopestisida; Tembakau; Trichoderma.
Abstract.  Management  of plant pests  and  diseases  can  prevent  crop failure  of  agricultural  commodities. Trichoderma  spp. is  a type  of  biological  control  fungus.  Tobacco  can  be  used  as  a  vegetable  pesticide.  However,  the  synergy  of  tobacco  and Trichoderma  spp.  when  applied simultaneously  in  controlling pathogens  is  not  yet  known, considering  the content of  the  active compound nicotine in tobacco which has antifungal properties, it is necessary to conduct this study with the aim of knowing the effect  of tobacco immersion  on  the growth  of  the  fungus Trichoderma spp. and  if  there  is  no inhibition  then both  will  have the potential as a combination of natural biopesticides. This study used a completely randomized design (CRD). The treatment tried was  different  concentrations  of  tobacco  soak  mixed  with  PDA  as  a  culture  medium  for  Trichoderma  spp.  The  concentrations tested were 0% (T0, positive control), 5% (T1), 10% (T2), 15% (T3), and 20% (T4). The negative control used a fungicide with the active  ingredient  mankozeb.  Each  treatment  was  repeated  3  times.  Colony  thickness  and  color  data  were  observed  visually  by descriptive method. Meanwhile, data on colony diameter, number of spores, dry weight of mycelium were analyzed by F test, if significantly  different,  then followed  by  DMRT  test  with  a confidence  level of 5%.  Based on  research  that  has been carried  out from  July-August  2021,  the  results  obtained  on  PDA  media  with  tobacco  soaking  content  with  concentrations  of  0%  (K+),  5% (T1),  10%  (T2),  15%  (T3),  20%  (T4  )  can  be  grown  with  Trichoderma  spp.,  while  the  media  with  the  addition  of  synthetic fungicides made from mankozeb  is  not grown. The  difference  in concentration  showed  different growth  results  and the effective concentration in this research was 15%, because at 20% concentration there was a decrease in spore density and mycelium dry weight.
. Keywords: Biopesticides; Tobacco; Trichoderma.

## PENDAHULUAN
Indonesia  adalah  negara  agraris  dengan  sektor pertanian menjadi mata pencaharian utama penduduknya.  Serangan  hama  dan  penyakit  menjadi kendala  dalam  usaha  budidaya  pertanian  yang  dapat menurunkan  hasil  panen  30-40%,  serta  mengakibatkan gagal  panen.  Pada  tanaman  hortikultura,  biaya  produksi untuk  pengendalian  hama  dapat  mencapai  40%,  bahkan bisa  lebih  (Suhartini et  al. ,  2017).  Penurunan produktivitas  dapat  dicegah  dengan  penanganan  hama dan  patogen  secara  serius  (Sudewi et  al., 2020).  Petani
menggunakan pestisida kimia untuk menangani serangan hama  dan  patogen  tanaman.  Penggunaan  pestisida  yang berlebihan banyak menimbulkan dampak negatif seperti: terjadinya  pencemaran  lingkungan  yang  mengakibatkan terganggunya  keseimbangan  ekologi;  residu  pestisida pada  tanah,  air,  dan  tanaman;  resistensi  dan  resurgensi pada  hama  sasaran;  terbunuhnya  musuh  alami  dan serangga  bukan  sasaran;  keracunan  dan  menyebabkan penyakit  kanker  pada  manusia.  Berdasarkan  dampak negatif  tersebut  maka  pengendalian  hama  dan  penyakit tanaman  mengarah  kepada  pengendalian  yang  ramah
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
lingkungan seperti penggunaan pestisida nabati (Kardinan,  2011)  dan  pengendalian  hayati  (Soesanto, 2013).
Pestisida nabati adalah pestisida yang terbuat dari sari  bagian  tanaman  yang  mengandung  senyawa metabolit sekunder tertentu. Bagian tanaman yang dapat digunakan yaitu bunga, buah, biji, kulit batang, daun dan akar.  Tembakau  dan  daun  paitan  ( Tithonia  diversifolia ) merupakan contoh tanaman pestisida nabati (Rachmawati,  2013).  Pestisida  nabati  tidak  hanya mengandung  satu  jenis  bahan  aktif  ( single  active ingredient ),  tetapi  beberapa  jenis  bahan  aktif  ( multiple active  ingredient ).  Hasil  penelitian  Kardinan  (2011) menunjukkan  bahwa  beberapa  jenis  pestisida  nabati cukup  efektif  terhadap  hama  yang  ditemukan  di lapangan,  rumah  tangga  (nyamuk  dan  lalat),  maupun  di gudang.  Tembakau  merupakan  salah  satu  bahan  yang potensial  digunakan  sebagai  pestisida  nabati.  Tembakau mengandung mengandung bahan aktif golongan alkaloid seperti  anobarin,  anatobine,  myosine,  nicotinoid, nicotelline,  nicotyrine,  norcotine  dan  pirolidin  (Siamtuti et  al .,  2017).  Esktrak  tembakau  diketahui  dapat digunakan  sebagai  insektisida  (Tigauw et  al. ,  2015), moluksida  (Emiliani et  al. ,  2017)  dan  fungisida (Oktarina et al. , 2017).
Pengendalian  hayati  digunakan  sebagai  alternatif dalam  pengelolaan  hama  dan  penyakit  tanaman. Pengendalian hayati adalah aktivitas yang memanfaatkan musuh  alami  untuk  mengatur  populasi  hama  sehingga populasinya lebih rendah dibandingkan dengan tidak ada musuh  alami  (Herlinda,  2020).  Pengendali  hayati  dapat berupa  jamur,  bakteri,  parasit,  parasitoid,  dan  predator. Jamur Trichoderma spp.  merupakan  salah  satu  jenis jamur  pengendali  hayati  (Soesanto,  2013).  Jamur Trichodema spp. dapat  digunakan  untuk  mengendalikan penyakit  lanas  (Agustina et  al. ,  2013).  Penggunaan pestisida hayati Pseudomonas fluorescens dan Trichoderma spp.  mampu  meningkatkan  pertumbuhan tanaman  tembakau  dan  menurunkan  intensitas  penyakit layu  bakteri  dan  layu  fusarium  sebesar  40-50% (Mugiastuti et  al. ,  2018).  Pestisida  nabati  dapat digunakan  bersamaan  dengan  pengendalian  hayati (Indiati  dan  Marwoto,  2017).  Teknik  ini  dapat mengurangi  intensitas  serangan  hama  maupun  penyakit secara  bersamaan.  Pengaruh  negatif  penggunaan pestisida  nabati  rendaman  tembakau  terhadap  jamur Trichoderma spp.  belum  diketahui,  ketika  diaplikasikan bersamaan  dalam  mengendalikan  patogen.  Mengingat kandungan  senyawa  aktif  nikotin  yang  ada  pada tembakau dan memiliki sifat antifungi, maka berdasarkan  hal  tersebut  perlu  dilakukan  penelitian tentang pengaruh rendaman tembakau terhadap pertumbuhan jamur Trichoderma spp.

## METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  IPA Dasar  Fakultas  Sains  dan  Teknologi  Universitas
Nahdlatul  Ulama  Purwokerto.  Penelitian  dilaksanakan selama 2 bulan, mulai Bulan Juli – Agustus 2021. Bahan yang  akan  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara  lain  : ekstrak  daun  tembakau,  isolat  jamur Trichoderma spp., media  PDA  ( Potato Dextrose Agar ),  HCl  1%  dan  air steril.  Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara lain:  cawan  petri, erlenmeyer, hemositometer,  lampu bunsen,  pisau scalpel ,  blender, autoclave ,  mikroskop, tabung  reaksi,  kertas  saring,  alat  dapur,  alat  tulis  dan aluminium  foil.  Penelitian  ini  menggunakan  rancangan acak  lengkap  (RAL)  (Emiliani et  al., 2017).  Perlakuan yang dicoba yaitu: menginokulasikan jamur Trichoderma spp.  pada  PDA  yang  ditambahkan rendaman  tembakau  dengan  perbedaan  konsentrasi. Konsentrasi  yang  dicoba  adalah  0%  (  kontrol  positif), 5%  (T1),  10%  (T2),  15%  (T3),  dan  20%  (T4).  Kontrol negatif menggunakan fungisida berbahan aktif mankozeb  (Febriyono  dan  Djatmiko,  2019).  Masing- masing perlakuan diulang 3 kali. (Putriana, 2018).
Variabel  pengamatan  yang  digunakan  pada penelitian ini antara lain:
1. Variabel  Bebas.  Variabel  bebas  pada  penelitian  ini adalah  konsentrasi  rendaman  tembakau.  Konsentrasi yang digunakan adalah 0%, 5%, 10%, 15% dan 20%.
2. Variabel Terikat. Variabel terikat dalam penelitian ini antara lain:
a. Diameter koloni. Diameter koloni diamati dengan cara  membuat  garis  horizontal  dan  vertikal  pada koloni  jamur  yang  tumbuh.  Masing  masing  garis diukur  dari  ujung  satu  ke  ujung  yang  lain  di seberangnya.
b. Ketebalan  dan  warna  koloni.  Ketebalan  koloni diamati  secara  visual,  tebal  atau  tipis,  seperti kapas  atau  tidak.  Warna  koloni  diamati  secara visual, dengan metode deskriptif.
c. Jumlah spora. Jumlah spora diamati menggunakan hemositometer.
d. Berat  kering  miselium.  Miselium  disiram  dengan HCl  setelah  dipanaskan  dengan  penangas  lalu ditiriskan  pada  kertas  saring,  dioven  agar bobotnya konstan, lalu ditimbang.
Data  ketebalan  dan  warna  koloni  diamati  secara visual  dengan  metode  deskriptif.  Sedangakan  data diameter  koloni,  jumlah  spora,  berat  kering  miselium dianalisis dengan uji F menggunakan Ms. Excel, apabila berbeda  nyata  dilanjutkan  dengan  uji  DMRT  dengan taraf kepercayaan 5% (Febriyono dan Djatmiko, 2019).

## Garis Besar Pelaksanaan Penelitian
1. Pengadaan Jamur Trichoderma spp. Jamur
Trichoderma spp  diperoleh  dari  Laboratorium Pengamatan  Hama  dan  Penyakit  Jatilawang.  Isolat Trichoderma spp.  diremajakan  dan  diperbanyak menggunakan  media  PDA  di  Laboratorium  IPA Dasar  Fakultas  Sains  dan  Teknologi  Universitas Nahdlatul Ulama Purwokerto.
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In

## Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
2. Pembuatan  Media  PDA.  Media  PDA  dibuat  dengan bahan  kentang  sebanyak  200  gr,  agar  15  gr,  gula  20 gr,  dan  1000  ml  air  steril  (Arifah,  2019).  Kentang dicuci,  kemudian  dipotong  dadu  dengan  ukuran kurang  lebih  1  cm.  lalu  direbus  dengan  500  ml  air steril  sampai  matang.  Setelah  matang  disaring, diambil airnya. Gula dan agar direbus dengan 500 ml air  steril  sampai  mendidih.  Ekstrak  kentang  dan larutan agar dicampur, diaduk hingga merata. Setelah merata  ditambahkan  air  agar  volume  akhir  menjadi 1000 ml. Selanjutnya media dimasukkan  kedalam 10 buah  erlenmeyer  100  ml.  kemudian  Erlenmeyer ditutup  dengan  aluminium  foil  lalu  disterilkan menggunakan  autoclave  dengan  suhu  121 0 C  dengan tekanan 2 ATM selama 15 menit.
3. Sterilisasi  Alat.  Alat  yang  akan  digunakan  dalam penelitian  disterilkan  terlebih  dahulu.  Cawan  petri dicuci lalu dibungkus  kertas HVS, erlenmeyer dicuci lalu  ditutup  dengan  aluminium  foil,  pisau scalpel dicuci  lalu  dibungkus  kertas  kemudian  dibungkus dengan  kertas  HVS.  Seluruh  alat  yang  akan disterilkan  dimasukkan  kedalam autoclave lalu disterilkan  dengan  suhu  121 0 C pada  tekanan  2  ATM selama 15 menit.
4. Pembuatan Rendaman Tembakau. Pembuatan rendaman  tembakau  merujuk  pada  metode  ekstraksi yang  paling  sederhana  murah,  efisien,  dan  mudah dilaksanakan  adalah  dengan  menggunakan  pelarut air.  Proses  rendaman  diawali  dengan  tembakau dicacah  halus  kemudian  direndam  di  dalam  air bersuhu  60 o C  selama  24  jam.  Hasil  rendaman selanjutnya  diperas,  airnya  disaring  lalu  disimpan dalam  ember  plastik  dan  siap  diformulasi  menjadi pestisida  nabati  (Wiratno et  al., 2013).  Dalam penelitian  ini  digunakan  100  g  daun  tembakau diblender  menggunakan  air  steril  sebanyak  100  ml. kemudian  larutan  direndam  semalam.  Selanjutnya larutan  rendaman  tembakau  disaring.  Larutan  0% pestisida merupakan PDA tanpa rendaman tembakau. Larutan  5%  adalah  rendaman  tembakau  5  ml ditambahkan  95  ml  PDA.  Larutan  10%  adalah rendaman tembakau 10 ml ditambahkan 90 ml PDA. Larutan  15%  adalah  rendaman  tembakau  15  ml ditambahkan  85  ml  PDA.  Larutan  20%  adalah rendaman tembakau 20 ml ditambahkan 80 ml PDA. 5. Inokulasi  Jamur Trichoderma spp.  Media  PDA dicairkan dengan cara direbus, setelah mencair semua media  didinginkan.  Setelah  mencapai  hangat  kuku, media  ditambah  dengan  ekstrak  tembakau  sesuai dengan konsentrasi perlakuan. Lalu media dituangkan ke  cawan  petri  steril  kurang  lebih  10  ml.  media ditunggu  sampai  memadat.  Setelah  media  memadat, bibit  jamur Trichoderma spp.  ditanam.  Pengamatan dilakukan  sampai  spora  jamur  mencapai  tepi  cawan petri.
6. Penghitungan  kepadatan  spora.  Sebelum  dilakukan penghitungan  kepdatan  spora,  dilakukan  persiapan
pengenceran terlebih dahulu. Tabung reaksi disiapkan dengan  ir  10  ml  dan  tiga  tabuang  lainnya  diisi  air  9 ml. Kemudian miselium jamur Trichoderma spp. dari masing-masing  cawan  dikerok  menggunakan  spatula lalu dimasukkn ke dalam tabung reaksi dengan air 10 ml  dan  diaduk  sampai  homogen.  Selanjutnya, dilakukan pengenceran sampai 10 -3 , diambil 1 ml lalu dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dengan  air  9  ml dan seterusnya. Setelah pengenceran 3 kali, diambil 1 ml  dari  tabung  pengenceran  10 -3 menggunakan  pipet lalu  diteteskaan  pada  alat kamar  hitung  ( hemositometer), kemudian ditutup dengan coverglass lalu  diamati  dibawah  mikroskop  dengan  perbesaran 100x. Setelah nampak pada lensa okuler jumlah spora dapat  dihitung.  Penghitungan  dilakukan  dengan metode  yang  dikembangkan  oleh  Doni et  al .  (2014) dengan rumus kepadatan spora sebagai berikut :
Kepadatan spora (cfu/ml) =
Jumlah konidia x 5 x Faktor Pengenceran

## Volume Hemositometer
7. Penghitungan  berat  kering  miselium/  Larutan  HCl 1%  ditambahkan  ke  dalam  cawn  petri  hingga menutupi miselium jamur Trichoderma spp. kemuadian  ditutup.  Cawan  petri  diletakkan  di  atas penangas air kemudan ditunggu sampai seluruh PDA mencir.  Cawan  petri  diangkat  kemudian  didinginkan dan  miselium  jamur Trichoderma spp.  diangkat  lalu ditiriskan  diatas  kertas  saring.  Setelah  cukup mengering,  dilakukan  pengovenan  kertas  saring dengan  miseliumnya.  Masing-masing  kertas  saring sebelumnya  sudah  ditimbanng  tanpa  miselium. Setelah  dioven,  kertas  dan  miselium  ditimbang  lalu hasilnya dikurangi berat kertas tanpa miselium. Hasil pengurangan  menunjukkan  berat  kering  miselium (gram).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilaksanakan, diperoleh  hasil  pada  media  PDA  dengan  tambahan fungisida  sintetik  berbahan  mankozeb  sebagai  kontrol negatif  (K-)  tidak  ditumbuhi  oleh  jamur Trichoderma spp.  (Gambar  1).  Menurut  Manalu  (2019)  mankozeb adalah  kelompok  fungisida  ditiokarbamat  yang  paling banyak  digunakan  di  lapangan.  Mankozeb  menghambat kerja  enzim  pertumbuhan  jamur  (Kusumadewi et  al. , 2014).
Perlakuan  kontrol  positif  (K+)  dengan  perlakuan media  PDA  tanpa  ada  tambahan  apapun  diperoleh  hasil bahwa  jamur Trichoderma spp.  dapat  tumbuh.  Pada gambar  1  dapat  dilihat  bahwa  warna  miselium  pada tengah cawan a berwarna hijau muda ke tua, pada cawan b  miselium  berwarna  hijau  tua,  dan  pada  cawan  c miselium  berwarna  hijau  muda  tumbuh  dengan  warna miselium  di  tengah  tampak  agak  tebal  dengan  warna bervariasi hijau muda hingga tua dengan tepian miselum muda berwarna putih tipis.
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
Pada perlakuan PDA dengan kandungan rendaman  tembakau  konsentrasi  5%  (T1)  (Gambar  2), dapat  ditumbuhi Trichoderma spp.  Dapat  dilihat  pada gambar  di  masing-masing  cawan  a,  b,  dan  c  semua berwarna  hijau  tua  dan  memiliki  tepian  miselium  muda berwarna putih namun tampak lebih tebal dari Gambar 1.
Sumber: olahan peneliti Gambar 1. Perlakuan dengan fungisida berbahan mankozeb (K-) a. K- I, b. K- II, c. K- III
Sumber: olahan peneliti Gambar 2. Perlakuan pada media murni PDA (K+), a. K+ I, b. K+ II, c. K+ III
Sumber: olahan peneliti
Gambar 3. Perlakuan T2 (10%), a. T2 I, b. T2 II, c. T2 III
Gambar  3  menunjukkan  hasil  perlakuan  T2  yaitu media PDA dengan tambahan rendaman tembakau 10%. Pada  gambar  tersebut  dapat  dilihat  pada  cawan  a miselium  berwarna  hijau  tua  hampir  menutupi  seluruh permukaan  PDA  dalam  cawan.  Pada  cawan  b  tidak tertutup  seluruhnya  oleh  miselium,  namun  miselium tampak  tebal  dan  memiliki  tepian  putih  tebal,  pada cawan  c  juga  berwarna  hijau  tua  dan  tepian  putih
menutupi  tepian  cawan.  Hasil  perlakuan  T3  dengan media  PDA  yang  dicampur  dengan  rendaman  tembakau 15%  dengan  tampilan  Trichoderma  pada  cawan  a memiliki  miselium  hijau  tua  menutupi  seluruh permukaan  PDA,  pada  cawan  b  ada  gradasi  warna miselium  dari  tengah  hijau  tua  dan  memudar  menjadi putih  ke  tepian,  ditengah  tebal  dan  di  tepi  tipis,  begitu juga  dengan  cawan  c.  Perlakuan  T4  yaitu  media  PDA yang  dicampur  rendaman  tembakau  20%.  Miselium berwarna  hijau  tua  baik  a,  b,  maupun  c  dengan  tepian miselium  muda  berwarna  putih  namun  secara  umum tampak tipis, jika dibandingkan dengan perlakuan T3.
Tabel  1  menyajikan  hasil  analisis  data  penelitian menggunakan  uji  F  utuk  mengetahui  pengaruh  variabel bebas  (perbedaan  konsentrasi)  terhadap  variabel  terikat secara bersamaan. Hasil analisis untuk variabel diameter koloni,  kepadatan  spora,  dan  berat  kering  miselium adalah  berbeda  sangat  nyata  karena  nilai  F  hitung  yang tertera  dalam  tabel  lebih  besar  dari  pada  F  Tabel  5%. Kemudian dilanjutkan dengan uji DMRT karena hasil uji F  berbeda  sangat  nyata,  tujuannya  adalah  mengetahui lebih  rinci  sejauh  mana  pengaruh  masing-masing variabel bebas terhadap variabel terikat.
Tabel 1. Hasil analisis data penelitian
Keterangan :  ** = berbeda sangat nyata pada uji F 5% Sumber: olahan data
Hasil  pengujian  DMRT  ( Duncan  Multiple  Range Test )  atau  uji  jarak  berganda  Duncan  untuk  mengetahui pengaruh  perbedaan  konsentrasi  rendaman  tembakau terhadap diameter koloni Trichoderma spp. dapat dilihat pada Tabel 2 berikut:
Tabel 2. Diameter koloni jamur Trichoderma spp. (cm) No Perlakuan Diameter Koloni 1 K- 0.000 a 2 K+ 8.667 bc 3 T1 8.333 c 4 T2 8.433 bc 5 T3 8.767 c 6 T4 8.911 c
Keterangan  :  angka  yang  diikuti  huruf  yang  berbeda menujukkan perbedaan hasil analisis DMRT 5%
Sumber: olahan data
Hasil analisis DMRT untuk pengaruh penambahan rendaman termbakau terhadap diameter koloni Trichoderma spp.  menunjukkan  perlakuan  K-  dengan K+  ,T1,  T2,  T3  dan  T4  secara  umum  berbeda  sangat nyata,  dikarenakan  pada  K-  penggunaan  campuran fungisida  sintetik  berbahan  mankozeb  mampu  menekan pertumbuhan Trichoderma spp.  Kusumadewi et  al . (2014)  menyebutkan  senyawa  aktif  mankozeb  memiliki mekanisme  kerja  yang  hampir  sama  dengan  golongan
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
senyawa  fenolik  yaitu  menghambat  kerja  enzim  yang berperan  dalam  pertumbuhan  jamur.  Hal  tersebut didukung oleh hasil penelitian Lestari et al . (2018) yang menyaatakan  adanya  penurunan  koloni  populasi  jamur tanah  akibat  penyemprotan  fungisida  mankozeb  yang sudah  berlangsung  lama  dilakukan  petani  dilahan pertanaman  kubis,  mengingat  residunya  bersifat  racun terhadap mikroorganisme, khususnya jamur tanah.
Jamur Trichoderma spp.  tetap  dapat  tumbuh dalam  media  PDA  dengan  tambahan  rendaman tembakau  karena  jamur  tersebut  memiliki  kemampuan mendegradasi  bahan  organik.  Hal  itu  sesuai  dengan pendapat  Strakova et  al .  (2011)  bahwa Trichoderma harzianum dapat  mempercepat  penguraian  bahan organik  karena  mengandung  enzim  selubiohidrolase yang  aktif  merombak  selulosa,  enzim  endoglukonase aktif merombak selulosa terlarut, dan enzim glukosidase yang  aktif  menghidrolisis  unit  selubiosa  menjadi molekul  glukosa.  Ketiga  enzim  ini  bekerja  sinergis sehingga  penguraian  bahan  organik  lebih  cepat  dan aktivitas enzim meningkat seiring dengan meningkatnya kandungan  karbon  (Widyastuti,  2019). Trichoderma viride mampu  mendegradasi  selulosa  dan  hemiselulosa pada  substrat,  ditunjukkan  dengan  adanya  aktivitas enzim  selulase  dan  xilanase  serta  adanya  penurunan kadar  selulosa  dan  hemiselulosa  (Normasari et  al ., 2020).  Jamur Trichoderma sp.  mampu  mengomposkan gulma  siam  dengan  lebih  cepat,  serta  menghasilkan kompos  yang  lebih  baik  dibandingkan  kompos  tanpa Trichoderma sp. (Febriyono et al ., 2018).
Pengaruh  penambahan  rendaman  tembakau  pada media PDA terhadap kepadatan spora dapat dilihat pada tabel 3 menunjukkan perlakuan K+ dan T2 tidak berbeda nyata  dengan  K-,  namun  secara  umum  perlakuan  T berbeda  nyata  dengan  K-.  tampak  angka  tertinggi kepadatan spora adalah pada perlakuan T3 yaitu 135,667 x  10 -3 cfu/ml  dibandingkan  dengan  T4  yang  hanya  84, 333 x 10 -3 cfu/ml.
Tabel 3. Kepadatan spora jamur Trichoderma spp. (cfu/ml) No Perlakuan Kepadatan Spora 1 K- 0.000 a 2 K+ 60.000 ab 3 T1 76.667 b 4 T2 52.333 ab 5 T3 135.667 b 6 T4 84.333 b
Keterangan  :  angka  yang  diikuti  huruf  yang  berbeda menujukkan perbedaan hasil analisis DMRT 5%. Sumber: olahan data
Adanya  penurunan  angka  kepadatan  spora dikarenakan  pada  kondisi in  vitro ,  kandungan  N  yang rendah  mendorong  produksi  konidium,  sedangkan konsentrasi  N  yang  tinggi  dapat  menurunkan  produksi (Soesanto,  2013).  Nitrogen  itu  berasal  dari  nikotin  yang terkandung  dalam  tembakau  merujuk  pada  pernyataan
Cowan,  (1999)  bahwa  daun  tembakau  mengandung senyawa  bioaktif  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid  dan steroid.  Alkaloid  utama  pada  daun  tembakau  adalah nikotin  (Schneider et  al .,  2008).  Alkaloid  yang  dapat berfungsi  sebagai  antifungi  merupakan  senyawa  kimia bersifat  basa  nitrogen  yang  mengandung  satu  atau  lebih atom  N.  Secara  umum  alkaloid  tidak  berwarna  dan berwarna  apabila  memiliki  struktur  kompleks  dan bercincin  aromatik  (Cushnie  &  Lamb,  2005).  Selain alkaloid,  flavonoid  juga  berfungsi  dalam  menghambat pembentukan  spora  jamur  patogen  (Alka et  al .,  2012). Senyawa  flavonoid  di  dalam  daun  tembakau  memiliki potensi  sebagai  antibakteri  dan  antifungi  (Putri et  al ., 2016).
Pengaruh  penambahan  rendaman  tembakau  pada media  PDA  terhadap  berat  kering  miselium  jamur Trichoderma spp.  disajikan  pada  tabel  4.  Huruf disamping  angka  yang  tertera  dalam  tabel  menunjukkan bahwa  ada  perbedaan  sangat  nyata  antara  K-  dengan perlakuan dengan T1, T2, T3, T4 secara umum. Namun, dijumpai  adanya  penurunan  angka  dari  T1  ke  T4.  Hal tersebut  dikarenakan  peningkatan  kadar  N  dapat menurunkan  produksi  konidium  sesuai  pendapat Soesanto (2013).
Tabel 4. Berat kering miselium jamur Trichoderma spp. (g) No Perlakuan Berat Kering Miselium 1 K- 0.000 a 2 K+ 0.021 ab 3 T1 0.060 c 4 T2 0.054 bc 5 T3 0.042 bc 6 T4 0.029 b
Keterangan  :  angka  yang  diikuti  huruf  yang  berbeda menujukkan perbedaan hasil analisis DMRT 5%.
Sumber: olahan data
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  telah membuktikan  bahwa  penambahan  rendaman  tembakau di  dalam  media  PDA  ternyata  tidak  berpengaruh  dalam pertumbuhan Trichoderma spp.,  dalam  hal  ini  tidak terjadi  penghambatan  meskipun  tembakau  memiliki senyawa  aktif  antifungi.  Sesuai  dengan  pernyataan Charisma et al . (2012) bahwa Trichoderma spp. mampu menguraikan  bahan  organik  yang  berbentuk  senyawa kompleks  yang  mengandung  beberapa  komponen  zat seperti  Nitrogen  (N),  Fosfor  (P),  Magnesium  (Mg), Sulfur (S) dan unsur hara lain. Trichoderma spp. mampu memanfaatkan berbagai substrat, memproduksi senyawa antimikroba,  dan  bersifat  oportunis  dalam  lingkungan. Ketersediaan  pati  yang  terkandung  dalam  rendaman tembakau  menjadi  sumber  karbon  bagi  pertumbuhan jamur Trichoderma sejalan  dengan  pendapat  Soesanto (2013)  bahwa  kebanyakan  gula  menjadi  sumber  C  bagi Trichoderma  viride ,  pembusukan  pati  dan  produksi amilase  menjadi  sangat  baik. Trichoderma juga  toleran terhadap  berbagai  polutan  berbahaya  termasuk  logam
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
berat,  pestisida,  dan  hidrokarbon  aromatik  polisiklik (PAH)  (Tripathi et  al .,  2013) Beberapa  spesies Trichoderma spp. juga dikaitkan dengan kemampuannya memetabolisme berbagai hidrokarbon aromatik polisiklik  (PAH)  dengan  berat  molekul  tinggi  maupun rendah seperti naftalena, fenantrena, krisena, pirena, dan benzo[a]piren.  Spesies  pendegradasi  PAH  termasuk T. hamatum, T. harzianum, T. reesei, T. koningii, T. viride, T.  virens,  dan  T.  asperellum. (Zafra et  al .,  2015). Trichoderma dapat  menguraikan  bahan  organik  yang mengandung  selulosa  dan  sebagai  biofungisida,  yang ramah lingkungan karena tidak menimbulkan pencemaran  atau  dampak  negatif  terhadap  lingkungan. (Junita et al ., 2017).
Genus Trichoderma selain  berfungi  sebagai organisme  pengurai/  dekomposer,  dapat  difungsikan sebagai  agen  pengendali  hayati.  Jamur Trichoderma merupakan  mikroorganisme  tanah  bersifat  saprofit  yang secara  alami  menyerang  jamur  patogen  dan  bersifat menguntungkan  bagi  tanaman. Trichoderma dalam peranannya  sebagai  agensia  hayati  bekerja  berdasarkan mekanisme  antagonis  yang  dimilikinya. Trichoderma juga mampu mendekomposisi lignin, selulosa, dan kithin dari bahan organik menjadi unsur hara yang siap diserap tanaman. Kemampuan masing-masing spesies Trichoderma spp.  dalam  mengendalikan  cendawan patogen berbeda-beda, hal ini dikarenakan morfologi dan fisiologinya
berbeda-beda. Beberapa spesies Trichoderma sp.telah  dilaporkan  sebagai  agensia  hayati adalah T.  harzianum,  T.  viridae, dan T.  koningii yang tersebar luas pada berbagai tanaman budidaya. Dominasi Trichoderma spp.  dari  dalam  tanah  akan  membuat lingkungan  dan  ekologi  sekitar  tanah  menjadi  lebih tahan terhadap perkembangbiakan patogen (Prasetiyo et. al. ,  2018).  Mekanisme  antagonis  yang  dilakukan Trichoderma spp.  dalam  menghambat  pertumbuhan patogen  antara  lain  kompetisi,  parasitisme,  antibiosis, dan  lisis.  Mekanisme  antagonisme Trichoderma spp. terhadap cendawan patogen dilakukan dengan mengeluarkan  toksin  berupa  enzim  β-1,3  glukanase, kitinase,  dan  selulase  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bahkan  dapat  membunuh  patogen.  Sifat antagonis Trichoderma spp. dapat dimanfaatkan  sebagai alternatif  dalam  pengendalian  patogen  yang  bersifat ramah  lingkungan  (Dwiastuti et  a l.,  2016).  Jamur Trichoderma spp. berpotensi  menghasilkan  racun (antibiotik)  yang  dapat  membunuh  mikroba  lain  pada konsentrasi  rendah.  Keragaman  antibiotik  ini  telah menunjukkan berbagai aktivitas melawan prokariota dan eukariota (Saxena, 2015).
Trichoderma spp. dan metabolit sekundernya yang dilepaskan  di  rizosfer  mungkin  memiliki  efek  pada pertumbuhan  dan  nutrisi  tanaman,  induksi  resistensi sistemik  dan  biokontrol  mikroorganisme  patogen.  Di dalam  tanah,  efek Trichoderma spp. pada  sistem  akar tidak terlihat. Namun, efek langsung dari jamur ini dapat diamati  pada  studi in  vitro (Narrasawati et  al. ,  2017).
Hasanah et al. (2016) telah melakukan  kajian penelitian mengenai  pemanfaatan  campuran  jamur Trichoderma spp dan  ekstrak  fungisida  nabati dalam  menekan  jamur Fusarium  oxysporum  f.sp.  capsici penyebab  penyakit layu pada tanaman cabai (Capsicum annum). Campuran tersebut  bersifat antagonis terhadap  jamur  F .oxysporum f.sp. capsici pada tanaman cabai dengan uji semi in vivo , mampu  menurunkan  infeksi Fusarium  oxysporum  f.sp. capsici sebesar 60,05%.
Fajrin (2019) telah melakukan penelitian kompatibilias  penggunaan  pengendali  hayati  dan pestisida  nabati  dan  diperoleh  hasil  yang  kompatibel antara Ekstrak Daun Paitan / EDP ( Tithonia diversifolia ) dengan  jamur Lecanicillium  lecanii karena  kandungan senyawa  alkaloid  yang  terdapat  pada  EDP  bekerja dengan cara mendukung pertumbuhan dan perkembangan  jamur L.  lecanii juga  diketahui  bahwa formulasi  campuran  bio-insektisida L.  lecanii dengan EDP  mampu  meningkatkan  mortalitas  nimfa hama pengisap  polong  Riptortus  linearis dibandingkan aplikasi  secara  tunggal.  Senyawa  alkaloid  pada  EDP bersifat  sinergis  dengan  zat  toksin  ( dipicolinic  acid, hydroxycarboxylic acid dan cyclosporin ) yang dihasilkan oleh L. lecanii dalam mematikan inang/serangga.

## SIMPULAN
Hasil penelitian ini mengungkapkan bahwa:
1. Rendaman tembakau yang dicampurkan dalam media PDA tidak mempengaruhi pertumbuhan Trichoderma spp.
2. Perbedaan konsentrasi rendaman tembakau mempengaruhi pertumbuhan Trichoderma spp. 3. Konsentrasi  rendaman  tembakau  yang  efektif terhadap  pertumbuhan  dengan Trichoderma spp adalah 15%.
4. Rendaman  tembakau  dan  jamur Trichoderma spp. berpotensi digunankan sebagaai gabungan biopestisida alami.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina,  I.,  Pinem,  M.  I.,  &  Zahara,  F.  2013.  Uji efektivitas  jamur  antagonis  Trichoderma  sp.  dan Gliocladium  sp.  untuk  mengendalikan  penyakit lanas  (Phytophthora  nicotianae)  pada  tanaman tembakau  deli (Nicotiana  Tabaccum L.). Jurnal Agroekoteknologi  Universitas  Sumatera  Utara , 1 (4), 95809.
Alka J, Padma K, Chitra J., 2012, Antifungal activity of flavonoids of Sida acuta Burm f. against Candida albicans. Int J Drug Dev Res.; 4(3), 92-6
Aji,  A., Maulinda, L., & Amin, S. 2015. Isolasi Nikotin dari  Puntung  Rokok  Sebagai  Insektisida. Jurnal Teknologi Kimia Unimal , 4 (1), 100–120.
Alexopoulus  C.J.  dan  Mims  C.W.  1979. Introductory Micology . New York: John Wiley & Son’s.
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In

## Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
Amaria, W., Ferry, Y., Samsudin, S., & Harni, R. 2016.
Pengaruh  Penambahan  Gliserol  pada  Media Perbanyakan  terhadap  Daya  Simpan  Biofungisida Trichoderma. Jurnal  Tanaman  Industri  Dan Penyegar , 3 (3), 159.
Amaria,  W.,  Soesanthy,  F.,  &  Ferry,  Y.  2016.
Keefektifan Biofungisida Trichoderma sp. dengan Tiga  Jenis  Bahan  Pembawa  terhadap  Jamur  Akar 37-44.  Putih  Rigidoporus  microporus. Jurnal Tanaman Industri dan Penyegar, 3(1),
Arifah, A. 2019. Gula Pasir Sebagai Pengganti Dektrosa Pada  Komposisi  Pda  Untuk  Efisiensi  Biaya Praktikum  Dan  Penelitian  Di  Laboratorium Fitopatologi.  Jurnal  Temapela,  2(1),  28-32. https://doi.org/10.25077/temapela.2.1.28-32.2019 Assagaf,  M.  K.,  &  Masrikhan.  2018.  Tombi  (waste  of tobacco  stem  as  multi-biopesticide  and  blue industry):  Studi  Kelayakan  Limbah  Batang Tembakau  Sebagai  Multi-pestisida  Nabati  dan Blue Industry di Kabupaten Temanggung Sebagai Wujud  Manifestasi  Surat  Ali  Imron:  190-191. Prosiding Konferensi Integrasi Interkoneksi Islam Dan Sains , 1 , 129–138.
Bariroh,  A.  2014.  Pengaruh  suhu  terhadap  aktivitas enzim protease dari Peniclillium sp., Trichoderma sp. dan campuran Penicillium sp. dan Trichoderma Sp.  dalam  media  limbah  cair  tahu dan  dedak, Doctoral  dissertation ,  Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang. Chalimatus,  H.  2013.  Efektifitas  Jamur Trichoderma Harzianum Dan  Mikroba  Kotoran  Sapi  Pada Pengomposan  Limbah  Sludge  Pabrik  Kertas. Skripsi . Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Negeri Semarang
Charisma,  A.M.,  Rahayu,  Y.S.,  &  Isnawati.  2012.
Pengaruh  kombinasi  kompos  Trichoderma  dan Mikoriza  Vesikular  Arbuskular  (MVA)  terhadap pertumbuhan  tanaman  kedelai  ( Glycine  max (L.) Merill) pada media tanam tanah kapur. LenteraBio:  Berkala  Ilmiah  Biologi,  1 (3),  111–
116.
Cushnie  TP,  2005,  Lamb  AJ.  Antimicrobial  activity  of flavonoids. Int.  J. Antimicrobial Agents . 26, 343– 5.
Cowan  MM.  1999,  Plant  products  as  antimicrobial agents. Clin Microbiol Rev. 12, 564–82
Dendang,  B.  2015.  Uji  antagonisme Trichoderma spp.
terhadap Ganoderma sp.  yang  menyerang tanaman  sengon  secara in vitro. Jurnal Penelitian Kehutanan Wallacea, 4(2), 147-156.
Dwiastuti, M.E, Fajri, M.N, dan Yunimar. 2015. Potensi Trichoderma spp.  sebagai  Agens  Pengendali Fusarium spp.  Penyebab  Penyakit  Layu  pada Tanaman  Stroberi  ( Fragaria x ananassa Dutch.). J. Hort . 25(4), 331-339
Elfina  S,  Y.,  Ali,  M.,  &  Venita,  Y.  2014.  Penggunaan Formulasi  Biofungisida  dan  Pestisida  Nabati
menggunakan Bahan Lokal  untuk Mengendalikan Penyakit Tanaman.
Emiliani,  N.,  Djufri,  &  S,  M.  A.  2017.  Pemanfaatan
Ekstrak Tanaman Tembakau ( Nicotianae
Tabacum L  )  Sebagai  Pestisida  Organik  Untuk Pengendalian  Hama  Keong  Mas  ( Pomaceace Canaliculata L.)  Di  Kawasan  Persawahan Gampong  Tungkop,  Aceh  Besar. Jurnal  Ilmiah Mahasiswa Fakultas Keguruan Dan Ilmu Pendidikan Unsyiah , 2 (2), 58–71.
Fajriani, N., Jamaluddin, A. W., & Ris, A. 2019. Ekstrak Daun  Tembakau  ( Nicotiana  tabacum )  Sebagai Akarisida  Pada  Caplak  ( Boophilus  microplus) . Parapemikir: Jurnal Ilmiah Farmasi , 8 (2), 33-35. Fajrin, I. 2019. Kombinasi Bio-insektisida Lecanicillium lecanii  (Zimm.)  dan  Ekstrak  Daun  Paitan ( Tithonia  diversifolia) untuk  Mengendalikan Hama  Pengisap  Polong Riptortus  linearis , Doctoral dissertation , Universitas Brawijaya. Fatiah,  R.  B.  2019.  Identifikasi  Serangga  Hama Penyerang  Daun  Pada  Tanaman  Tembakau ( Nicotina  Tabacum  L )  Kiara  Payung  Sumedang Jawa Barat, Doctoral Dissertation , Fkip Unpas. Febriyono,  W.,  &  Soesanto,  L.  2018.  Potensi Trichoderma sp.  dalam  Pengomposan  Gulma Siam  Dan  Pengaruhnya  Terhadap  Hasil  Tanaman Pakcoi  Dan  Sifat  Kimia  Tanah  Ultisol. Jurnal Ilmiah Media Agrosains , 4(1), 48-54.
Febriyono,  W.,  &  Djatmiko,  H.  A.  2019.  Pengaruh Empat  Minyak  Atsiri  terhadap  Jamur  Agens Pengendali  Hayati. Biofarm :  Jurnal  Ilmiah Pertanian , 15 (2). 71-79
Hasan,  F.,  &  Darwanto,  D.  H.  2017.  Prospek  Dan Tantangan  Usahatani  Tembakau  Madura. SEPA: Jurnal Sosial Ekonomi Pertanian Dan Agribisnis , 10 (1), 63-70
Hasanah,  U.,  Ernawati,  N.  M.  L.,  &  Sudantha,  I.  2017. Uji  Campuran Trichoderma Spp.  dengan  Ekstrak Fungisida  (Kunyit  dan  Daun  Sirih)  Terhadap Jamur Fusarium  Oxysporum f.  Sp.  Capsici Penyebab  Penyakit  Layu  Pada  Tanaman  Cabai.
Jurnal Ekosains , 8 (3), 91-100.
Herlinda,  S.  2020.  Pemanfaatan  Musuh  Alami  untuk Pengendalian  Hayati  Hama  Tanaman  Pangan  dan Sayuran Guna Mendukung Keberhasilan Pertanian Organik. Prosiding  Seminar  Nasional  Lahan Suboptimal  ke-8  Tahun  2020 ,  Palembang  20 Oktober 2020. 39-46.
Isman  Duila,  M.  2017.  Ekstrak  Tembakau  ( Nicotiana tabacum  L .)  sebagai  Fungisida  Nabati  pada Antraknosa  Cabai  Merah  yang  disebabkan  Jamur Colletotrichum sp.  secara In  Vitro , Doctoral Dissertation , Unmuh Jember.
Junita,  Y.,  Suryantini,  R.,  &  Wulandari,  R.  S.  2017. Potensi Trichoderma Isolat Lokal sebagai Dekomposer  Serasah  Akasia  ( Acacia  mangium ). Jurnal Hutan Lestari , 5 (2).
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In

## Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
Kardinan, A. 2011. Penggunaan Pestisida Nabati sebagai Kearifan  Lokal  dalam  Pengendalian  Hama Tanaman  Menuju  Sistem  Pertanian  Organik. Pengembangan Inovasi Pertanian , 4 (4), 262–278. Kristiawan,  A.,  Suharto  dan  Wildan,  J.  2019.  Uji Efektivitas  Insektisida  Nabati  Berbahan  Biji Mimba  (Azadiractha  indica  A.  Juss)  dan  Limbah Daun  Tembakau  ( Nicotiana  tabacum L.)  untuk Mengendalikan Spodoptera  litura F. Berkala Ilmiah Pertanian . 2(2):30-33
Kusumadewi,  T.,  Khotimah,  S.,  &  Yanti,  A.  H.  2014. Ekstrak  Metanol  Buah Sonneratia  alba JE  Sm sebagai Penghambat Pertumbuhan
Helminthosporium sp.  yang  diisolasi  dari  Daun Jagung. Jurnal Protobiont, 3(2).
Lestari, I., Umboh, S. D., & Pelealu, J. J. 2018. Tingkat Populasi Jamur Tanah akibat Perlakuan Fungisida Mankozeb  di  Pertanaman  Sayur  Kubis  ( Brassica oleracea  var.  capitata )  Kecamatan  Modoinding, Kabupaten  Minahasa  Selatan,  Sulawesi  Utara (The  Population  Level  of  Soil  Fungi  under Mankozeb Fungicides Application in the Cabbage ( Brassica  oleracea  var.  capitata )  Plantation  of Modoinding  Subdistrict, South Minahasa District, North Sulawesi). Jurnal Bios Logos , 8(1).
Limbongan,  A.  A.  2012.  Hasil  Kajian  Beberapa  Jenis Tembakau  di  Indonesia. AgroSainT , 3 (1),243-243 https://doi.org/https://doi.org/10.47178/agro.v3i1. 620
Manalu,  J.  N.  2019.  Potensi  Cendawan Dark  Septate Endophyte sebagai  Agens  Bioremediasi  Residu Fungisida  Berbahan  Aktif  Mankozeb, Doctoral dissertation , IPB (Bogor Agricultural University). Mugiastuti,  E.,  Soesanto,  L.,  &  Manan,  A.  2018.
Penerapan  Teknologi  Pengendalian  Penyakit Tanaman Implementation  of  Environmentally Friendly  Plant  Disease . Jurnal  Pengabdian  Dan Pemberdayaan Masyarakat , 2 (2), 175–184.
Narasswati,  N.,  Oktavia,  R.,  Nenci,  N.,  Eryanti,  Y.,  &
Nugroho, T. T. 2017. Potensi Metabolit Sekunder dari Trichoderma sp.  LBKURCC22  Tanah Gambut  Hutan  Sekunder  Sebagai  Antibiotik. Chimica et Natura Acta , 5 (2), 85–89.
Normasari,  F.  L.  2020. Biodegradasi  Batang  Tembakau Menggunakan Trichoderma  viride. Doctoral dissertation ,  Program  Studi  Teknologi  Hasil Pertanian Fakultas Teknologi Pertanian.
Obongoya  BO,  Wagai  SO,  Odhiambo  G.  2010,
Phytotoxic  effect  of  selected  crude  plant  extracts on  soil-borne  fungi  of  common  bean. African Crop Sci J. , 18(1), 15–22.
Oktarina, Bagus T., dan Wheni N. Rohmah. 2017. Daya Hambat Biorasional Ekstrak Sirih Dan  Tembakau Pada  Colletotrichum  Capsici  Penyebab  Penyakit Antraknosa Cabai. Agritrop , 15(2), 194-202.
Putra, B. S. 2017. Pengaruh Mutagen Kimia EMS (Ethyl
Methane Sulphonate) Terhadap Kualitas Fisiologis  Benih  dan  Morfologi  Bibit  Tanaman Tembakau (Nicotiana tabacum) Varietas Marakot, Doctoral  dissertation ,  Institut  Teknologi  Sepuluh Nopember.
Putri, R. H., Barid, I., & Kusumawardani, B. 2016. Daya hambat ekstrak daun tembakau terhadap pertumbuhan mikroba rongga mulut. Stomatognatic-Jurnal Kedokteran Gigi , 11(2), 27- 31.
Putriana,  A.  2018.  Ekstrak  Buah  Belimbing  Wuluh ( Averrhoa  Bilimbi L.)  Sebagai  Ovisida  Keong Mas ( Pomacea Canaliculata L.) (Sebagai Alternatif  Sumber  Belajar  Biologi  Sma  Kelas  X Materi Pencemaran Lingkungan), Doctoral Dissertation , UIN Raden Intan Lampung.
Prasetiyo,  H.,  Purwati,  P.,  &  Arsensi,  I.  2018. Pemanfaatan  Jamur Trichoderma sp.  sebagai Antagonis  Patogen  Busuk  Sulur  Tanaman  Buah Naga  Merah  ( Hylocereus  polyrhizus )  secara In Vitro .
Agrifarm: Jurnal Ilmu Pertanian , 7 (1), 19-27.
Rofiansyah,  R.,  Sopialena,  S.,  &  Sila,  S.  2017.
Inventarisasi  cendawan  mikro  serta  potensinya sebagai biofertilizer dan agensia pengendali hayati pada  lahan  reklamasi  tambang  batu  bara  Di Samarinda. Jurnal Agrifor .
Sari,  M.  P.,  Lukmayani,  Y.,  &  Syafnir,  L.  2017.  Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid pada Tangkai Daun Tembakau (Nicotiana tabacum L.).
Saxena,  A.,  Raghuwanshi,  R.,  &  Singh,  H.  B.  2015. Trichoderma species mediated differential tolerance  against  biotic  stress  of  phytopathogens in Cicer  arietinum L. Journal  of  basic microbiology , 55 (2), 195-206.
Schneider  S,  Diederich  N,  Appenzeller  B,  Schartz,
Lorang  C,  Wennig  R.  2008,  Internet  Suicide Guidelines:  Report  of  A  Life  Threatening Poisoning Using Tobacco Extract. 75(3): 134-136 Siamtuti  W.S.,  Renika  A.,  Zulvika  K.W.,  Nanang  A., dan  Indra  V.H.  2017.  Potensi  Tannin  Pada Ramuan Nginang Sebagai  Insektisida  Nabati Yang  Ramah  Lingkungan. Bioeksperimen ,  3(2),
83-93.
Soesanto,  L.  2013. Pengantar  Pengendalian  Hayati Penyakit  Tanaman .  Rajawali  Press.  Jakarta.  456 hal.
Soesanto,  L.,  Mugiastuti,  E.,  Rahayuniati,  R.  F.,  & Dewi,  R.  S.  2013.  Uji  kesesuaian  empat  isolat Trichoderma  spp.  dan  daya  hambat in  vitro terhadap beberapa patogen tanaman. Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika , 13 (2), 117-123. Steenis,  C.G.G.J.  2005. Flora .  PT.  Pradnya  Paramita, Jakarta.
Strakova,  P.,  R.  M.  Niemi,  C.  Freeman,  K.  Peltoniemi, H.Toberman,  I.  Heiskanen,  H.  Fritze,  R.  Laiho.
Nura  Khabita  et  al.,  Uji  Sinergitas  Rendaman  Tembakau  (Nicotiana  tabacum  L.)  dengan  Jamur  Trichoderma  spp.  Secara  In Vitro dan Potensinya Sebagai Gabungan Biopestisida Alami
2011.  Litter  type  affect  the  activity  of  aerobic decomposition  boreal  peat  land  more  than  site nutrient  and  water  table  regimes.  Biogeosciences 8:2741-2755.
Sudewi,  S.,  Ambo  A.,  Baharudin,  dan  M.  Farid.  2020. Keragaman  Organisme  Pengganggu  Tanaman (OPT)  pada  Tanaman  Padi  Varietas  Unggul  Baru (VUB)  dan  Varietas  Lokal  pada  Percobaan  Semi Lapangan. Jurnal Agrikultura, 31 (1 ), 15 - 24. Sudjak, Sunarto, D. A., & Diana, N. E. 2015. Toksisitas
Beberapa Hasil Ekstrak Daun Tembakau Terhadap Myzus persicae (Homoptera;
Aphididae). Agrovigor , 8 (1), 37–42.
Suhartini,  S.,  Suryadarma,  P.,  &  Budiwati,  B.  2017. Pemanfaatan  Pestisida  Nabati  Pada  Pengendalian Hama Plutella Xylostella Tanaman Sawi (Brassica Juncea L.) Menuju Pertanian Ramah Lingkungan. Jurnal Sains Dasar , 6 (1), 36-43 Tigauw,  S.  M.  I.,  Salaki,  C.  L.,  &  Manueke,  J.  2015. Efektivitas Ekstrak Bawang Putih Dan  Tembakau Terhadap Kutu Daun (Myzus persicae Sulz.) Pada Tanaman  Cabai  (Capsicum  sp.). Eugenia , 21 (3),
135–141.
Tripathi,  P.,  Singh,  P.C.,  Mishra,  A. et  al. ,  2013, Trichoderma :  a  potential  bioremediator  for environmental  clean  up. Clean  Techn  Environ Policy 15 , 541–550
https://doi.org/10.1007/s10098-012-0553-7
Widyastuti, R. 2019. Identifikasi dan Potensi Cendawan Indigenous untuk Pelapukan Batang Kelapa Sawit di  Bogor,  Indonesia. Jurnal  Agronomi  Indonesia (Indonesian  Journal  of  Agronomy) , 47 (3),  312-
317.
Willis,  M.,  &  Wahyono,  T.  E.  2014.  Kompatibilitas Strain  Jamur  Entomopatogen  dan  Insektisida Nabati  untuk  Pengendalian Helopeltis  antonii ,  In Prosiding  Seminar  Nasional  Pertanian  Organik Bogor, 18(19).
Wiratno,  W.,  Siswanto,  S.,  &  Trisawa,  I.  M.  2013. Perkembangan penelitian, formulasi, dan pemanfaatan  pestisida  nabati. Jurnal  Penelitian dan  PengembanganPertanian , 32 (4),  150-155. doi: 10.21082/jp3.v32n4.2013.p150-155 .
Zafra,  G.,  Cortés-Espinosa,  D.V.  2015,  Biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbons by Trichoderma species:  a  mini  review. Environ  Sci Pollut Res 22 , 19426–19433.
https://doi.org/10.1007/s11356-015-5602-4