Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X

## Pembuatan Kitosan Dari Kitin Dari
Limbah Tulang Dalam Cumi-Cumi

## Making Chitosan from Chitin From Bone Waste in Squid
Yulianis* 1 , MukhlisSanuddin 2 , Nur Annisaq 3
1 Jalan Tarmizi Kadir Pakuan baru, Jambi and 36126, Indonesia
2 Jalan Tarmizi Kadir Pakuan Baru, Jambi and 36126, Indonesia
3 Jalan Yusuf Mukti, Bungo and 32711, Indonesia STIKES HARAPAN IBU JAMBI
* Koresponding Penulis: 1 yulianissaljazira@yahoo.com 2 mukhlissanuddinmsc@gmail.com 3 nurannisaq96@gmail.com

## Abstrak
Cumi-cumi merupakan salah satu komoditas perikanan  yang  cukup penting.  Belum banyak masyarakat mengetahui bahwa hewan ini memiliki tulang dalam cumi-cumi yang  dibuang pada saat pengolahan daging cumi-cumi. Tulang dalam cumi-cumi dapat dimanfaatkan sebagai sumber bahan  obat salah  satunya  kitosan. Kitin diperoleh dengan pemurnian menggunakan serbuk tulang dalam cumi-cumi untuk dilakukan  proses  deproteinasi dengan NaOH3,5%,  dan demineralisasi dengan HCl  1N.  Kitosan diperoleh dari  proses  deasetilasi kitin menggunakan variasi pelarut NaOH  50%  dan  NaOH  60%.  Hasil penelitian diperoleh kitosan dari metoda deasetilasi dengan NaOH 60% dengan derajat deasetilasi 73% sedangkan dengan NaOH 50% tidak menghasilkan kitosan.

## Kata Kunci :Tulang dalam cumi-cumi, Kitin, Kitosan, Derajat Deasetilasi

## Abstract
Squid is one of the fisheries commodities that is quite important. There are many people who do not know that these animals have bones that are usually discarded when processing squid meat. Bone  in  squid  can  be  used  as  a  source  of  medicinal  ingredients,  one  of  which  is chitosan Chitin was obtained by  purification using bone powder in squid  for deproteination process  with  3.5%  NaOH,  and  demineralization  with  1N  HCl.  Chitosan  was  obtained  from the  chitin  deacetylation  process  using  a  variation  of  50%  NaOH  and  60%  NaOH. The research results obtained chitosan from the method of deacetylation with 60% NaOH with a degree of deacetylation 73% while with 50% NaOH did not produce chitosan.
Keywords: Bone in squid, Chitin, Chitosan, Degree of Deacetylation
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X

## PENDAHULUAN
Cumi-cumi (Loligo sp) merupakan salah satu hasil laut yang sangat penting di dunia. Di Indonesia, masyarakat mengolah moluska laut ini sebagai berbagai macam  masakan. Cumi- cumi adalah jenis cepalopoda yang dikenal dalam dunia.
perdangangan  disamping  sotong,  ikan  dan  jugagurita. Namun  masih  belum  banyak masyarakat  yang mengetahui  bahwa  hewan  ini  memiliki  tulang  dalam  cumi-cumi  yang biasanya dibuang pada saat pengolahan daging cumi-cumi. Tulang dalam cumi-cumi dapat di manfaatkan sebagai sumber bahan obat.
Beberapa sumber kitin yang telah diuji mengenai isolasi kitin dan kitosan dari beberapa sumber  yaitu  cangkang  bekicot  dengan  derajat  deasetilasi  sebesar  74,78 – 77,99  %,  kitosan kulit  udang  dengar  derajat  deasetilasi  79,57% serta  cangkang  kepting  laut  dengan  derajat deasetilasi sebesar 40,90% (Agustina et al., 2015)..
Proses  pembuatan  kitosan  dari  kitin  dilakukan  dengan  beberapa  proses  yaitu deproteinisasi, demineralisasi dan deasetilasi. Berdasarkan uraian diatas maka peneliti tertarik untuk  melakukan  penelitian  pembuatan  kitosan  dari  kitin  dari  limbah  tulang  dalam  cumi- cumi,  menggunakan  variasi  NaOH  50%  dan  NaOH  60%  dengan  dua  variasi  pada  proses deasetilasi untuk mendapatkan derajat deasetilasi yang optimal.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di laboratorium  Stikes  Harapan  Ibu  Jambi,  serta  untuk  uji FTIR dilakukan  di  Universitas Negeri  Padang  (UNP).  Sampel di  teliti dan  di  determinasi adalah tulang dalam cumi – cumi yang diperoleh dari hasil limbah restoran seafood yang ada dikota  jambi.  Tulang  dalam  cumi – cumi  dicuci,  dikeringkan  dibawah  sinar  matahari  tidak terpapar langsung, dihaluskan dengan menggunakan  grinding dan diayak dengan  ayakan 60 Mesh.
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Determinasi
Hasil  determinasi  yang  dilakukan  di  Universitas  Andalas  laboratorium  patologi anatomik Fakultas Kedokteran Universitas Andalas menunjukan bahwa tulang dalam cumi – cumi termasuk dalam golongan loligo sp.
Uji Identifikasi
Hasil  dari  uji  kualitatif  kitin  menunjukan,  bahwa  tulang  dalam  cumi – cumi  positif mengandung kitin setelah dilakukan uji kualitatif kitin dengan I 2 dalam KI didapatkan warna merah jingga.

## Randemen Kitin dan Kitosan
Hasil randemen kitin dari tulang dalam cumi – cumi yang diperoleh sebesar 29,970% sedangkan  randemen  non  kitosan  dari  kitin  dengan  deasetilasi  NaOH  50%  sebesar  87,54%, dan hasil randemen kitosan dari kitin dengan deasetilasi NaOH 60% didapatkan hasil sebesar 88,15%.

## Uji Karakterisasi Kitosan
Hasil  uji  karakterisasi  diperoleh  hasil  kitosan  dalam  bentuk  serbuk,  berwarna  agak putih dan tidak berbau adapun hasil uji susut pengeringan kitosan yang diperoleh dari derajat deasetilasi  dengan  NaOH  50%  sebesar  10% sedangkan NaOH  60%  sebesar  80%.  Hasil  uji kelarutan  kitosan  menunjukan  bahwa  kitosan  larut  dalam  asam  asetat  10%.  Hasil  uji  kadar abu deasetilasi NaOH 60% sebesar 10%. Hasil dari derajat deasetilasi kitosan yang diperoleh dari hasil variasi NaOH 60% didapatkan hasil sebesar 73%.
Tabel 1. Hasil uji FTIR dari kitosan  proses deasetilasi dengan NaOH
No Bilangan gelombang (cm -1 ) (Literatur) Literarur kitosan Gugus fungsi literartur Hasil analisan gugus fungsi Non kitosan derajat deasetilasi NaOH 50% Kitosan deraja deastilasi NaOH 60% 1 2 3 4 1375,40 (medium) 1639,89 (strong) 3269,00 (weight) - 1373,89 (medium) 1644,41 (strong) 3348,21 (weight) 2260,61 (medium) 1470-1430 1650-1560 3800-2700 2700-2250 CH 2 dan CH 2 N-H O-H dan N-H NH 2 C-H N-H O-H NH 2
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Gambar 1. Hasil Analisa hasil deasetilasi kitosan dengan NaOH 50%
Gambar 2. Hasil Analisa deasetilasi kitosan dengan NaOH 60%
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X

## PEMBAHASAN
Pada  proses  pembuatan  kitin  dari  limbah  tulang  dalam  cumi-cumi  sampel  dibersihkan kemudian dikeringkan dan selanjutnya dihaluskan dengan menggunakan grinding dan diayak dengan ayakan 60 mesh sehingga diperoleh serbuk berwarna putih. Hasil sampel yang telah diayak digunakan untuk memproleh kitin dengan proses deproteinisasi dengan menggunakan NaOH  3,5%  yang  bertujuan  untuk  memisahkan  atau  melepaskan  ikatan  protein  yang terkadung  dalam  tulang  dalam  cumi-cumi  larut  dalam  basa  sehingga  protein  yang  terikat secara  kovalen  pada  gugus  fungsi  kitin  akan  terpisah,  maka  hasil  dari  deproteinisasi berbentuk serbuk berwarna putih (Agustina et al., 2015).
Proses  demineralisasi  ini  bertujuan  untuk  menghilangkan  kandungan  mineral  yang terdapat pada tulang dalam cumi-cumi. Kandungan mineral tulang dalam cumi-cumi adalah CaCO 3 , mineral yang terkandung dalam tulang dalam cumi-cumi ini lebih mudah dipisahkan dibandingkan  protein  karena  mineral  hanya  terikat  secara  fisik.  Pada  proses  demineralisasi hasil  dari  deproteinisasi  direaksikan  kembali  dengan  asam  klorida  (HCl)  dengan  persamaan reaksi
CaCO 3 + 2HCl  CaCl 2 + H 2 O + CO 2
Proses  yang    terjadi  pada  tahap  demineralisasi  adalah  mineral  yang  terkandung  dalam limbah  tulang  dalam  cumi-cumi  bereaksi  dengan  HCl  sehingga  akan  terjadi  pemisahan mineral dari limbah tulang dalam cumi-cumi. Proses pemisahan mineral ditunjukkan dengan adanya  gas  CO 2 berupa  gelembung  udara  pada  saat  larutan  HCl  ditambhkan  dalam  sampel sehingga  penambahan  dilakukansecara  perlahan  agar  sampel  tidak  meluap (Agustina et  al., 2015).
Uji identifikasi kitin yang mengasilkan warna merah jingga menunjukkan bahwa sampel positif  mengandung  kitin,seperti  penelitian  yang  dilakukan  oleh (Artiningsih,  Noor,  & Natsir, 2003) yang mengatakan bahwa hasil identifikasi kitinnya berwarna merah jingga.
Hasil  rendemen  kitin  adalah  berat  kitin  yang  dihasilkan  setelahmelewati  proses deproteinisasi,  dan  demineralisasi  dalam  penelitan  ini  maka  dihasilkan  rendemen  kitin sebesar  29,970%  sedangakan  pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh (Wahyuni,  Ridhay,  & Nurakhirawati,  2018) diperoleh  hasil  rendemen  kitin  sebesar  34,63%  penenlitian  yang lainnya  dengan  hasil  rendemen  yang  berbeda  didapatkan  hasil  rendemen  sebesar  16% menurut (Dompeipen et al., 2016) sementara didapat lagi hasil rendemen yang berbeda dari (Sukma & Lusiana, 2014) didapat hasil rendemen sebesar 89,71%. Perbedaan nilai rendemen ini  diduga  karena  lamanya  waktu  proses  deproteinisasi  dan  demineralisasi.  Semakin  lama
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
proses  akan  menyebabkan  semakin  banyaknya  mineral  dan  protein  yang  tereliminasi sehingga menyebabkan berat kitin yang dihasilkan semakin kecil.
Proses  kitin  menjadi  kitosan  melalui  proses  deasetilasi.  Proses  deasetilasi  merupakan proses  penghilangan  gugus  asetil  (-COCH 3 )  dari  kitin  dengan  menggunakan  larutan  alkali agar  berubah  menjadi  gugus  (NH 2 ) . Proses  deasetilasi  menggunakan  natriun  hidroksida (NaOH) dengan variasi konsentrasi NaOH 50% dan NaOH 60% pada suhu 90-100 o C selama waktu 2 jam. Penggunaan larutan alkali tinggi dengan suhu tinggi selama proses deasetilasi mempengaruhi  besarnya derajat  deasetilasi  yang  dihasilkan.  Pada  penelitian  ini  dilakukan dengan  memvariasikan  NaOH  50%  dan  NaOH  60%  untuk  menentukan  derajat  deasetilasi (Agustina et al., 2015).
Rendemen  kiosan  diperoleh  dari  hasil  deasetilasi  (penghilangan  gugus  asetil)  kitin. Rendemen kitosan berdasarkan berat kitosan yang dihasilkan dibagi dengan berat kitin yang diperoleh dalam penelitian dihasilkan rendemen dengan variasi NaOH 50% sebesar 87,53%, pada  hasil  deasetilasi  kitin  menggunakan  NaOH  60%    dihasilkan  rendemen  kitosan  sebesar 88,14%, dan pada penelitian yang dilakukan oleh(Dompeipen et al., 2016) diperoleh kitosan sebesar  63%,  dan  menyatakan  bahwa  ada  kaitan  antara  berat  molekul  dengan  rendemen. Rendemen  kitosan  menurun  sejalan  dengan  meningkatnya  konsentrasi  larutan  natrium hidroksida dan suhu.
Uji  karakterisasi  kitosan  diperoleh  untuk  mengetahui  mutu  kitosan  yang  dihasilkan. Karakterisasi yang dilakukan meliputi perhitungan rendemen, uji susut pengeringan, uji kadar abu uji kelarutan dan derajat deasetilasi.
Susut  pengeringan  dan  kadar  abu  merupakan  parameter  yang  dijadikan  standar  mutu kitosan.  Susut  pengeringan  yang  tinggi  menyebabkan  kesegaran  dan  daya  simpan  kitosan menjadi lebih pendek. Kadar abu menunjukkan tingkat keberhasilan demineralisasi, sehingga rendahnya    kadar  abu    menunjukkan  kemurnian  suatu  kitosan (Masindin  &  Herdyastuti, 2017).
Karakterisasi  kitosan  menunjukan  bahwa  kitosan  memiliki  susut  pengeringan  yang rendah pada variasi deasetilasi NaOH 50% diperoleh sebesar 10% sedangkan dengan NaOH 60% sebesar 8% pada spesifikasi kitosan yang menyatakan bahwa susut pengeringan kitosan <10%.  Udara  dan  tempat  penyimpanan  mempengaruhi  susut  pengeringan  kitosan  karena kitosan  bersifat  higroskopi.  Susut  pengeringan  dapat  mempengaruhi  kadar  air  kitosan  yang berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  mikroorganisme (Dompeipen et  al.,  2016).  Sedangkan kadar abu  yang diperoleh dari memvariasikan NaOH 50% sebesar 12% dan kadar abu  yang
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
diperoleh  dari  variasi  NaOH  60%  sebesar  10%,  sedangkan  kadar  abu  yang  diperoleh  dari hasil  penelitian  dari  (Agustina,  2015)  sebesar 0,17%  pada  spesifikasi  kitosan  menyatakan bahwa  kadar  abu    <2%.  Hal  ini  dapat  disebabkan  oleh  proses  demineralisasi  yang  kurang sempurna.
Kelarutan  kitosan  dalam  asam  asetat  adalah  salah  satu  parameter  utama  dalam  standar penilaian  mutu  kitosan.  Menurut  (Rochima et  al.2004  ;  Prisiska  2012),  semakin  tinggi kelarutan  kitosan  dalam  asam  asetat  10%  menunjukkan  mutu  kitosan  yang  dihasilkan semakin baik. Kitosan yang dihasilkan memiliki kelarutan yang sempurna dalam asam aseatat 10%.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kelarutan kitosan dalam asam asetat 10% dapat larut dengan sempurna. Kelarutan kitosan dalam larutan asam  asetat dipengaruhi oleh suhu dan lamanya perendaman dalam larutan NaOH.
Analisa  kitosan  dilakukan  dengan  menggunakan  spektrofotometer  FTIR untuk mengetahui gugus fungsi yang terdapat dalam sampel penelitian  yang digunakan. Dari hasil pengujian  menggunakan  FTIR,  pada  percobaan  dengan  variasiNaOH  50%  menunjukkan bahwa  sampel  tidak  menjadi  kitosan  dengan  sempurna,  hal  ini  dikarenakan  hasil spektrofotometer  FTIR  menunjukkan  bahwa  tidak  didapatkan  gugus  fungsi – NH  pada sampel, dimana pita serapan bilangan gelombang fungsi – NH berkisar antara 1650-1560 cm - 1 . Pada variasi NaOH 60% dengan absorbansi bilangan gelombang gugus amida 1644,41 cm -1 dengan nilai absorbansi bilangan gelombang gugus hidroksil – OH 3348,21 cm -1 sebesar 73%, sedangkan penelitian yang telah dilakukan oleh (Mohadi, Kurniawan, Yuliasari, & Hidayati, 2014) dengan sampel tulang cumi diperoleh derajat deasetilasi sebesar 70,42% dan (Hossain & Iqbal, 2014) kitosan kulit udang dengan derajat deasetilasi 79,57% serta cangkang kepiting laut dengan derajatd easetilasi sebesar 40,90% (Murniati, 2013).
Dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  maka  didapatkan  hasil  kitosan  dengan  derajat deasetilasi  yang  paling  baik  73%  dari  variasi  NaOH  60%,  hal  ini  sesuai  dengan  penelitian yang  telah  dilakukan oleh (Wahyuni et  al.,  2018) dan (Murniati,  2013) yang  menyatakan derajat deasetilasi >60% disebut sebagai kitosan.
Journal of Healthcare Technology and Medicine Vol. 6 No. 1 April 2020 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X

## KESIMPULAN
Berdasarkan  dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  Kitosan  yang dihasilkan dari deasetilasidengan NaOH 60% merupakan derajat deasetilasi yang optimal yaitu 73%, sedangkan pada NaOH 50% tidak menghasilkan kitosan.

## SARAN
Disarankan  pada  peneliti  selanjutnya  untuk  melakukan  penelitian  mengenai  pembuatan kitosan  dari  sampel  tulang  dalam  cumi – cumi  dapat  mengakplikasikannya  dalam  bidang farmasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina,  S.,  Swantara,  M.  D.,  &  Suartha,  I.  N.  (2015).  Isolasi  Kitin,Karakterisasi,dan Sintesis Kitosan dari Kulit Udang. Jurnal Kimia, 271 – 278.
Artiningsih,  A.,  Noor,  A.,  &  Natsir,  H.  (2003).  Usaha  Biokonversi  Kitin  Asal  Kepiting Rajungan Menjadi Khitosan, 4 No 1, 9 – 12.
Dompeipen,  E.  J.,  Kaimudin,  M.,  Dewa,  R.  P.,  Riset,  B.,  Ambon,  I.,  Cengkeh,  J.  K.,  & Ambon, B. M. (2016). Isolasi kitin dan kitosan dari limbah kulit udang, 92.
Hossain,  S.  M.,  &  Iqbal.  (2014). Production  and  characterization  of  chitosan  from  shrimp waste. J, Bangladesg Agril. I2 (1). 153-160.
Masindin, T., & Herdyastuti, N. (2017). Karakterisasi Kitosandari CangkangKerang Darah (Anadara granosa) .Journal of chemistry. Universitas Surabaya
Murniati, D. (2013). Isolasi Kitin dari Cangkang Kepiting Laut ( Portunus pelagicus Linn ). serta  Pemanfaatannya  untuk  Adsorpsi  Fe  dengan  Pengompleks  1,  10 -Fenatrolin,  3(1) 15-22.
Rochima,  E.,  Sugiyono,  D.S,  Suhartono,  M.T.  2004.  Dearajat  Deasetilasi  Kitosan  hasil Reaksi  enzimatiskitin  deasetilasi  isolat.J.Ilmiah.Seminar Nasional  dan  Kongres Perhimpunan Ahli Teknologi Pangan Indonesia, Bandung.
Sukma,  S.,  &  Lusiana,  S.  E.  (2014).  Kitosan  dari  Rajungan  Lokal  Portunus  Pelagicus  Asal Probolinggo, Indonesia. KIMIA.STUDENTJOURNAL, 2(2), 506 – 512.
Wahyuni,  Ridhay,  A.,  &  Nurakhirawati.  (2018).  Pengaruh  Waktu  Proses  Deasetilasi  Kitin Dari Cangkang Bekicot Achatina fulica Terhadap Derajat Deasetilasi.