## OPTIMIZATION OF SOLVENT FOR EXTRACTION TEMPLATE
FROM MIP ( MOLECULAR IMPRINTED POLYMER ) FENILBUTAZON WITH METHACRYLIC ACID MONOMER
Dang Soni, Shendi Suryana, Helva Kris Herdianty
Fakultas MIPA Universitas Garut, Jl. Jati no 42B, Tarogong Kaler, Garut
Corresponding author: Dang Soni ( dang@uniga.ac.id )

## ARTICLE HISTORY
Received: 2 March 2020                           Revised: 25 July 20                        Accepted: 28 July 2020

## Abstract
Phenylbutazone  is  a Drug’  chemical  substance that  is  added  to  many  traditional medicines. The use of medicinal chemicals in herbal medicinal is prohibited because it violates Law No.23 of 1992 concerning Health and Law No. 8 of 1999 concerning Consumer Protection. In general, phenylbutazone in herbal preparations is identified by using the UV spectral spectrophotometric tandemTLC  method, but this method is considered  to  lack  high  sensitivity.  Currently,  a  new  method  that  has  a  higher sensitivity is being developed, namely Molecularly Imprinted Polymer (MIP). MIP is a method  used  to  extract  phenylbutazone  from  herbal  medication.  Phenylbutazone from the polymer is extracted using the soxhletation method. Phenylbutazone will be extracted  into  the  solvent.  But  there  is  a  problem  that  is  the  difficulty  of  extracted polymers. So this study aims to optimize the MIP phenylbutazone extraction solvent. This optimization aims to get the best solvent in extracting phenylbutazone from the polymer.  Research  is  carried  out  by  the  synthesis  step  of  the  method  of polymerization  of  broth  with  methacrylic  acid  as  a  monomer,  phenylbutazone  as  a template,  Ethylene  glycol  dimethacrylate  as  a  cross-linker,  then  the  results  of  the optimization  of  the  best  solvent  in  extracting  phenylbutazone  from  the  polymer, phenylbutazone  as  a  template,  Ethylene  glycol  dimethacrylate  as  a  cross-linker, then the results of the optimization of the best solvent in extracting phenylbutazone from  the  polymer  (99:  1)  chloroform-acetic  acid  solvent  which  can  extract phenylbutazone from the polymer for 24 hours.
Keywords : Molecularly Imprinted, Phenylbutazone, Optimization
OPTIMASI PELARUT PENGEKSTRAKSI TEMPLAT E MIP ( MOLECULAR  IMPRINTED POLIMER ) FENILBUTAZON

## DENGAN MONOMER ASAM METAKRILAT

## Abstrak
Fenilbutazon merupakan salah satu bahan kimia obat yang banyak ditambahkan ke dalam obat tradisional. Pemakaian bahan kimia obat di dalam sediaan jamu dilarang karena  melanggar  UU  No.23  tahun  1992  tentang  Kesehatan  dan  Undang-Undang No.  8  tahun  1999  tentang  Perlindungan  Konsumen.  Secara  umum  fenilbutazon dalam sediaan jamu di indentifikasi kandungannya menggunakan metode KLT yang dikombinasi  dengan    Spektrofotmometri  UV,  namun  metode  ini  dianggap  kurang memiliki  sensitifitas  yang  tinggi.  Saat  ini  dikembangan  suatu  metode  baru  yang
memiliki  sensitifitas  lebih  tinggi  yaitu Molecularly  Imprinted  Polymer (MIP).  MIP adalah  suatu  metode  yang  sensitiv  dan  selektif  digunakan  untuk  mengekstraksi fenilbutazon  dari  sediaan  obat  tradisional.  Fenilbutazon  dari  dalam  polymer  di ekstraksi menggunakan metode soxhletasi. Fenilbutazon akan terekstraksi ke dalam pelarut.  Namun  terdapat  suatu  masalah  yaitu  sulit  nya  polimer  terekstraksi.  Maka penelitian  ini  bertujuan  untuk  melakukan  optimasi  pelarut  pengekstraksi  MIP fenilbutazon.  Optimasi  ini  bertujuan  untuk  mendapatkan  pelarut  terbaik  dalam mengekstraksi  fenilbutazon  dari  dalam  polimer.  Penelitian  dilakukan  dengan tahapan  sintesis  metode  polimerisasi  ruah  dengan  asam  metakrilat  sebagai monomer,  fenilbutazon  sebagai template ,  etilenglikoldimetakrilat  sebagai cross- linke r,  selanjutnya  hasil  optimasi  pelarut  yang  terbaik  dalam  mengekstrasi fenilbutazon  dari  dalam  polimer  adalah  pelarut  kloroform-asam  asetat  dengan perbandingan  (99:1)  yang  dapat  mengekstraksi  fenilbutazon  dari  dalam  polimer selama 24 jam.
Kata Kunci : Molecularly Imprinted , Fenilbutazon, Optimasi . Pendahuluan
Tingginya harapan masyarakat pada tingkat kesembuhan setelah mengkonsumsi  obat  tradisonal  menyebabkan  kecurangan  pihak  produsen  untuk menambahkan  bahan  kimia  obat  (BKO)  dengan  tujuan  untuk  mempercepat  efek penyembuhan,  obat  tradisional  yang  bagus  adalah  yang  memberikan  reaksi  cepat terhadap penyakit yang diderita dengan harga yang terjangkau.
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  (BPOM)  mengeluarkan public  warning No.HM.03.03.1.431.11.16.4010 tanggal 22 November 2016 tentang obat tradisional mengandung  bahan  kimia  obat,  ditemukan  43  obat  tradisional  yang  mengandung bahan kimia obat (BKO). BKO yang terkadung, antara lain; fenilbutason, allopurinol, deksametason.  Selain  itu  juga  dilaporkan  sebanyak  50  obat  tradisional  dan suplemen  kesehatan  mengandung  bahan  kimia  obat  dan  bahan  yang  dilarang. Berdasarkan  pemberitahuan    tersebut,  diketahui  bahwa  obat  tradisional  yang dicampur  dengan  bahan  kimia  obat  didominasi  oleh  jamu  penghilang  rasa  sakit (pegel linu, rematik) dan herbal penambah stamina (obat kuat). 2
Fenilbutazon  termasuk  salah  satu  bahan  kimia  obat  yang  sering  ditambahan kedalam sediaan obat tradisional. Fenilbutazon adalah suatu turunan pirazolon yang merupakan  obat  golongan Non  Steroid  Anti  Inflamasi  Drug (NSAID).  Obat  ini mempunyai  sifat  antiinflamasi  yang  kuat  dan  efektif  dalam  pengobatan  serangan gout  akut.  Obat  golongan  NSAID  merupakan  salah  satu  pengobatan  terhadap penyakit rematik atau rheumatoid arthritis (RA). 3
Secara  umum  fenilbutazon  dalam  obat  tradisional  dapat  dianalisis  secara kuantitatif  dengan  KLT  tandem  spektrofotometri  UV-Vis. 7,5 Akan  tetapi  metode tersebut  memiliki  kekurangan  diantaranya  waktu  analisis  yang  lama  dan  tahapan analisis  yang  panjang.  Hal  ini  disebabkan  karena kerumitan matriks  dalam sampel obat  tradisional,  sehingga  fenilbutazon  harus  dipisahkan  terlebih  dahulu  dari senyawa  lain  yang  dapat  mengintervensi  pada  proses  analisis.  Teknik  pemisahan yang  dapat  dilakukan  diantaranya  dengan  kromatografi  dan  ekstraksi.  Metode pemisahan yang dipilih disarankan memiliki selektivitas dan sensitivitas yang tinggi. Sehingga kekurangan analisis pada saat proses pemisahan tidak boleh besar.
Pemanfaatan  material  yang  selektif  terhadap  senyawa  target  tertentu  yang dikenal  dengan Molecularly  Imprinted  Polymer (MIP)  berkembang  pesat  karena biaya  sintesisny  amurah,  relative  tidak  terlalu  rumit  dan  memungkinkan  untukt ersedia sebagai alat analisis senyawa tertentu dari matriks yang kompleks. Namun ada  satu  masalah  dalam  pengembangan  MIP  ini  yaitu  sulitnya  molekul  cetakan
sebagai  target untuk  terlepas  dari  polimer  yang  disintesis  sehingga  perlu  optimasi pelarut  pengekstraski  molekul  tersebut.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui pelarut pengekstraksi template MIP fenilbutazon dengan monomer asam metakrilat

## Metode

## Alat
Alat  yang  dignakan  dalam  penelitian  ini  oven  (Memmert),  spektrofotometri  UV-Vis (Genesys  10S  UV-Vis),  soxhlet,  timbangan  digital  (Amstech),  gelas  kimia,  mesh 100,  pipet  tetes,  kuvet,  kertas  perkamen,  spatula  dan  alat-alat  yang  digunakan  di Laboratorium.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan pada penelitian  ini  Fenilbutazon,  asam metaklirat  (Aldrich), 2-2-Azobis-isobutiro-nitril  (AIBN)  (Aldrich),  etilenglikol  dimetaklirat  (EGDMA) (Aldrich).  Papaverine  (Sigma  Aldrich),  kloroform  (Merck),  methanol  (Fisher),  asam asetat (Merck). Bahan yang digunakan kecuali dikatakan lain adalah pro analisis.

## Sintesis MIP
Penelitian ini dilakukan  dengan  metode eksperimental yang  dilakukan dilaboratorium,  tahapan  pertama  yang  dilakukan  ialah  sintesis  MIP-Fenilbutazon dengan  metode  ruah,  dengan  menyiapkan  seluruh  bahan  yang  digunakan,  yaitu Fenilbutazon  sebagai template ,  Asam  Metakrilat  (MAA)  sebagai  monomer, kloroform sebagai porogen, 2-2-Azobis-isobutiro-mnitril (AIBN) sebagai inisiator dan etilen glikol  dimetakrilat (EDGMA) sebagai cross-linker . Sintesis dilakukan dengan cara  mencampurkan  semua  bahan  hingga  terlarut  sempurna,  lalu  disonikasi, selanjutnya bahan yang telah dimasukkan ke dalam vial diletakkan ke dalam  oven. Kemudian hasil MIP- Fenilbutazon digerus hingga halus dan di ayak menggunakan mesh  100.  Sintesis  dilakukan  untuk  pembuatan  MIP.Tahap  terakhir  yaitu  tahap ekstraksi  template  dari  MIP  dengan  menggunakan  metode  soxhletasi.  Ekstraksi disini  menggunakan  6  pelarut  yang  berbeda,  MIP-Fenilbutazon 1 menggunakan pelarut  klorofom,    MIP-  Fenilbutazon  menggunakan  pelarut  metanol,  MIP- Fenilbutazon menggunakan  pelarut  etanol,  Fenilbutazon menggunakan  pelarut klorofom-asam  asetat  (99:1),    MIP-Fenilbutazon  menggunakan  pelarut  metanol- asam  asetat  (99:1),  MIP-Fenilbutazon  menggunakan  pelarut  etanol-asam  asetat (99:1).  MIP  yang  telah  di  soxhletasi  kemudian  di  evaluasi  menggunakan spektrofotometri UV-Visible dengan panjang gelombang 265 nm.

## Hasil
Tabel  1. Hasil  Absorbansi  Ekstraksi template dari  MIP  Fenilbutazon  dengan Porogen Kloroform Waktu (24 jam ke- Absorban dalam pelarut Metanol Etanol Kloroform 1 3.671 3.564 1.323 2 2.942 2.865 0.989 3 0.781 1.003 0.013 4 0.523 1.562 -0.086 5 -0.086 0.434 6 0.138 7 -0.021
Tabel  2. Hasil  Absorbansi  Ekstraksi template dari  MIP  Fenilbutazon  dengan Porogen Metanol Waktu (24 Jam ke- Absorban dalam pelarut Metanol Etanol Kloroform 1 3.292 3.771 0.548 2 2.212 1.281 0.333 3 1.193 0.760 0.205 4 0.592 0.620 0.006 5 0.229 0.255 6 0.131 0.408 7 0.087 0.128 8 0.102 0.093 9 -0.038 0.101 10 0.033 11 -0.09
Tabel  3. Hasil  Absorbansi  Ekstraksi template dari  MIP  Fenilbutazon  dengan
Porogen  kloroform,  menggunakan  Pelarut  dengan  Tambahan  Sedikit Asam (Waktu 24 jam ke- Absorban dalam pelarut Metanol Etanol Kloroform 1 0.151 -0.040 0.081 2 0.072
Tabel  4. Hasil  Absorbansi  Ekstraksi template dari  MIP  Fenilbutazon  dengan
PorogenMetanol,  menggunakan  Pelarut  dengan  Tambahan  Sedikit Asam Waktu(24 Jam ke- Absorban dalam pelarut Metanol Etanol Kloroform 1 0.134 0.116 0.071 2 0.052 0.031

## Pembahasan
Ekstraksi dilakukan sampai template fenilbutazon benar - benar hilang dari MIP, dimana  setiap  24  jam  dilakukan  monitoring  pengukuran template dengan menggunakan spektrofotometer UV dengan panjang gelombang 272 nm.
Berdasarkan  hasil  soxhletasi  menggunakan  tiga  pelarut  yang  berbeda,  pelarut yang paling cepat mengekstraksi template fenilbutazon yaitu pelarut kloroform tetapi waktu  yang  diperlukan  cukup  lama  yaitu  sekitar  96  jam,  dengan  pelarut  metanol diperlukan  120  jam  dan  menggunakan  pelarut  etanol  diperlukan  168  jam  untuk porogen kloroform dapat dilihat pada tabel 1. Porogen methanol merupakan pelarut yang  paling  cepat  mengekstraksi template fenilbutazon  yaitu  pelarut  kloroform dengan  waktu  yaitu  sekitar  96  jam,  sedangkan  dengan  pelarut  metanol  diperlukan 216  jam  dan  menggunakan  pelarut  etanol  diperlukan  264  jam  dapat  dilihat  pada tabel 2.
Langkah selanjutnya yang dilakukan yaitu dengan menambahkan asam asetat 3% sebanyak 1 mL pada pelarut pengekstraksi, karena jangka waktu ekstraksi yang telah  disebutkan  di  atas  masih  terlalu  lama  untuk  melakukan  proses  ekstraksi, sehingga  diperlukan  pelarut  lain  yang  dapat  mengekstraksi template lebih  cepat.
Pelarut  pengekstraksi  yang  selanjutnya  digunakan  sama  dengan  pelarut  awal, hanya  pada  pelarut  kali  ini  ditambahkan  sedikit  asam,  sehingga  proses  ekstraksi dimulai  dari  awal  lagi,  untuk  dapat    membandingkan  hasil  yang  didapat  dengan pelarut  tanpa  penambahan  asam.  Hasil  ekstraksi template fenilbutazon    dari  MIP menggunakan pelarut yang diasamkan dapat dilihat pada, tabel 3 dan tabel 4.
Setelah  ditambahkan  asam  ternyata  proses  pengekstraksi  terjadi  lebih  cepat, dimana penambahan asam ini dapat meningkatkan efisiensi ekstraksi, hal ini dapat terjadi  karena  pada  lingkungan  asam  ikatan  antara  template  dan  sisi  pengenal dapat  mudah  diputus  dan  lingkungan  asam  memudahkan  pelarut  untuk  mencapai pori-pori yang berikatan kuat dengan template . 17
Hasil  yang didapatkan dengan penambahan asam pada berbagai pelarut yaitu Etanol  -  Asam,  Metanol  -  Asam  dan  Kloroform  -  Asam  yaitu  penyempitan  waktu ekstraksi  dimana  pada  semulanya  proses  pengekstrasian  fenilbutazon  dengan porogen Kloroform menggunakan pelarut Etanol dari 168 jam dengan penambahan asam  asetat  3%  sebanyak  1  mL  menjadi  sekitar  24  jam,  pelarut  Metanol  dari  120 jam menjadi 48 jam, dan pelarut Klorofom dari 96 jam menjadi 24 jam dapat dilihat pada tabel 3, sedangkan untuk porogen Metanol menggunakan pelarut Etanol dari 264  jam  dengan  penambahan  asam  menjadi  sekitar  48  jam,  pelarut  Metanol  dari 216  jam  menjadi  48  jam,  dan  pelarut  Klorofom  dari  96  jam  menjadi  24  jam  dapat dilihat pada tabel 4.

## Simpulan
Berdasarkan penelitian  yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa pelarut kloroform  dengan  penambahan  asam  asetat  3%  sebanyak  1mL,  dapat  digunakan untuk pelarut pengekstraksi template fenilbutazon dari MIP dengan proses ekstraksi selama sekitar 24 jam.

## Daftar Pustaka
1.  Kementrian Kesehatan RI. KEPMENKES 381-2007 Kebijakan Obat Tradisional. 2007; 1 –27p.
2.  Wahyu  M-S,  dan  Ira  R-O.  Edukasi  Bahaya  Bahan  Kimia  Obat  Yang  Terdapat Didalam Obat Tradisional. Pengabdi Masy 2018; 1: 1 –92p.
3.  Katzung BG, Masters SB, Trevor A. Farmakologi Dasar dan Klinik . 2013.
4.  Singh  JA,  Saag  KG,  Jr  SLB,  et  al.  2015  American  College  of  Rheumatology Guideline for the Treatment of Rheumatoid Arthritis. 2016; 68: 1 –25p.
5.  Nurkhayati  S.  Analisis  Fenilbutazon  dengan  Reagen  Spesifik  dalam  Sediaan Jamu  yang  Beredar  di  Daerah  Tangerang  Selatan  Menggunakan  Metode Analisis Spektrofotometri Ultraviolet- Visible. 2017; 56p.
6.  Bina  DD,  Komunitas  F,  Klinik  DAN,  et  al.  Pharmaceutical  Care  Untuk  Pasien Penyakit Arthritis Rematik. 2006; 1 –68p.
7.  Annisa N et al. Identifikasi Fenilbutazon Dalam Jamu Rematik Yang Beredar Di Kota  Manado  Dengan  Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis. Media  Farm  Indones Vol 12 No 1 Media Farm Indones Vol 12 No 1 2016; 12: 1150 –1155p.
8.  Vasapollo  G,  Sole  R  Del,  Mergola  L,  et  al.  Molecularly  imprinted  polymers: Present  and  future  prospective. International  Journal  of  Molecular  Sciences 2011; 5909 –5944p.9.  Yan  H,  Row  KH.  Characteristic  and  Synthetic  Approach of Molecularly Imprinted Polymer. Int J Mol Sci 2006; 7: 155 –178p.
9.  Depkes RI. In: Farmakope Indonesia Edisi V . 2014. Epub ahead of print 2014. DOI: 10.1590/S1984-82502011000100002.
10.  Bakarbessy W.H.A,  Wullur  A.C,  Lolo  W.A.  “Uji  Efek  Analgesik  Ekstrak
EtHardjosaputra  P,  Listyawati  P,  Tresni  K,  et  al. Data  Obat  Indonesia .  Pt. Nuantara Lestari Ceriapratama, 2008.
11.  Turiel  E,  Martín-Esteban  A.  Molecularly  imprinted  polymers  for  sample preparation: A review. Anal Chim Acta 2010; 668: 87 –99p.
12.  Pardo  A,  Mespouille  L,  Dubois  P,  et  al.  Targeted  extraction  of  active compounds from natural products by molecularly imprinted polymers. Cent Eur J Chem 2012; 10: 751 –765p.
13.  Beltran  A,  Borrull  F,  Marce  RM.  Molecularly- imprinted  polymers :  useful sorbents  for  selective  extractions.  29.  Epub  ahead  of  print  2010.  DOI: 10.1016/j.trac.2010.07.020.
14.  Chen  L,  Wang  X,  Lu  W,  et  al.  Molecular  imprinting:  Perspectives  and applications. Chem Soc Rev 2016; 45: 2137 –2211p.
15.  Abdul  R,  Gandjar  I-G. Spektroskopi  Molecular  Untuk  Analisis  Farmasi .  Gadjah Mada University Press, 2015
16.  Peng-Ju  W,  Jun  Y,  Qing-De  S,  et  al.  Rapid  Removal  of  Template  from Molecularly  Imprinted  Polymers  by  Accelerated  Solvent  Extraction. Chinese  J Anal Chem 2007; 35: 484 –488p.
17.  Sibrian-Vazquez M, Spivak* DA. Molecular Imprinting Made Easy. 2004; 7827 – 7833p.
18.  Yi  LX,  Fang  R,  Chen  GH.  Molecularly  imprinted  solid-phase  extraction  in  the analysis of agrochemicals. J Chromatogr Sci 2013; 51: 608 –618p.
19.  Piletsky  S. Molecular  Imprinting  of  Polymers .  2018. Epub ahead of  print  2018. DOI: 10.1201/9781498713542.
20.  Meier F, Schott B, Riedel D, et al. Computational and experimental study on the influence of the porogen on the selectivity of 4-nitrophenol molecularly imprinted polymers. Anal Chim Acta 2012; 744: 68 –74p.
21.  Rachel  W.  Development  and  characterisation  of  molecularly  imprinted suspension polymers. 2010; 1 –267p.
22.  Peyrovi  M,  Hadjmohammadi  M.  Synthesis  of  molecularly  imprinted  polypyrrole as an adsorbent for solid-phase extraction of warfarin from human plasma and urine. Biomed Chromatogr 2015; 29: 1623 –1628p.
23.  Gao  B,  Zhang  Y,  Chen  T.  Designing  and  preparing  of  quercetin  surface- imprinted  material  and  its  molecular  recognition  characteristics. J  Appl  Polym Sci 2014; 131: 1 –9p.
24.  Luque De  Castro  MD.  Ultrasound:  A  powerful  tool  for  leaching. TrAC  - Trends Anal Chem 2003; 22: 41 –47p.