Formulasi  Sediaan  Hidrogel  Ekstrak  Etil  Asetat Bunga  Kecombrang  (Nicolaia  speciosa)  Dengan Basis  HPMC  dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Terhadap

## Staphylococcus aureus
Hydrogel Formulation of Ethyl Acetate Extract of Kecombrang (Nicolaia speciosa) Using HPMC As a Base and Antibacterial Activity Against Staphylococcus aureus
Inas Khairani, Nuryanti, Sunarto*
Jur usan Farmasi, Fakultas Ilmu-ilmu Kesehatan, Universitas Jenderal Soedirman Purwokerto * E-mail: nartosoetomo@gmail.com
2018

## Abstrak
Bunga kecombrang (Nicolaia speciosa) memiliki kandungan kimia alkaloid, triterpenoid, steroid,  flavonoid,  dan  polifenol  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri.  Penelitian  ini bertujuan untuk memformulasikan ekstrak  etil  asetat  bunga kecombrang  dengan  basis HPMC  menjadi  sediaan  hidrogel  yang  stabil  secara  fisik  dan  melihat  aktivitasnya terhadap  bakteri  Staphylococcus  aureus.  Bunga  kecombrang  diekstraksi  secara maserasi  bertingkat menggunakan pelarut n-heksan dan etil asetat.  Gel ekstrak bunga kecombrang  dibuat  dengan  variasi  konsentrasi  HPMC  3%,  5%,  8%,  dan  10%  b/b. Formula terbaik  yang  memenuhi  syarat  evaluasi  uji  sifat  fisik  dan  stabil kemudian diuji aktivitas  antibakterinya  terhadap  Staphylococcus  aureus  menggunakan  metode  difusi sumuran.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  perbedaan  konsentrasi  HPMC  dapat mempengaruhi  sifat  fisik  dan  kestabilan  hidrogel.  Formula  1  adalah  terbaik  yang memenuhi  syarat  sifat  fisik  dan  stabilitas  sediaan  dengan  pH  5,  viskositas  265.900- 383.400  cps,  daya  sebar  4,67-5,20  cm,  dan  daya  lekat  4,01-11,31  detik.  Formula  1 menunjukkan aktivitas antibakteri dengan zona hambat sebesar 3,89 mm.
Kata kunci: Nicolaia speciosa, hidrogel, HPMC

## Abstract
Kecombrang  flowers  (Nicolaia  speciosa)  contains  alkaloid,  triterpenoid,  steroids, flavonoid, and polyphenol that have antibacterial  activity.  This  study  aims to prepare  a hydrogel  formulation  of  ethyl  acetate  extract  of  kecombrang  flowers  with  the  base HPMC  and  to  perform  antibacterial  activity  against  Staphylococcus  aureus. Kecombrang were extracted in n-hexane and ethyl acetate. Gel extract of kecombrang was prepared with the variation of concentration HPMC 3%, 5%, 8%, and 10% b/b. The best  formula  then  was  tested  for  antibacterial  activity  of  Staphylococcus  aureus  using the  diffusion  method.    The  results  showed  that  the  differences  in  the  concentration  of HPMC affected the physical properties and stability of the gel preparation. Formula 1 is the optimum formula with a pH of 5, a viscosity of 265900-383400ps, dispersive power

## Artikel Penelitian
of  4,67-5,20  cm,  and  adhesion  power  of  4,01-  11,31  second.  Formula  1  showed  the antibacterial activity with inhibition zone of 3,89 mm.
Keywords: Nicolaia speciosa, hydrogel, HPMC

## PENDAHULUAN
Jerawat  merupakan  gangguan  kulit  yang  umumnya  terjadi  pada  usia  15-25  tahun. Jerawat dapat timbul pada wajah (99%), punggung (60%), dan dada (15%) (Khan et al., 2012). Jerawat terjadi karena adanya penyumbatan folikel pilosebaseus yang disebabkan oleh  penimbunan  sebum  pada  infundibulum  rambut  yang  dipicu  oleh  sekresi  berlebih kelenjar sebaseus dan hiperkeratosis pada infundibulum rambut sehingga dapat memicu pertumbuhan bakteri penyebab jerawat seperti Propionibacterium acnes, S. aureus, dan S.  epidermidis  (Goodman  dan Gilman,  2001).  Infeksi  S.  aureus  menimbulkan  masalah dengan  tanda-tanda  khas  diantaranya  peradangan,  infeksi  folikel  rambut,  nekrosis,  dan pembentukan abses atau jerawat (Razak et al., 2013). Indonesia merupakan negara yang tinggi  keanekaragaman  hayatinya.  Salah  satu  tanaman  yang  banyak  ditemukan  di Indonesia adalah bunga kecombrang. Kecombrang diketahui memiliki aktivitas sebagai antibakteri  karena  memiliki  kandungan  kimia  seperti  alkaloid,  flavonoid,  polofenol, steroid,  triterpenoid,  dan  minyak  atsiri  sehingga  berpotensi  untuk  mengatasi  masalah jerawat (Naufalin et al., 2005).
Sediaan topikal yang sering digunakan untuk pengobatan jerawat adalah bentuk sediaan gel. Hidroxypropyl methylcellulose (HPMC) adalah gelling agent semi sintetik turunan selulosa  yang  tahan  terhadap  fenol  dan  stabil  pada  pH  3-11.  HPMC  dapat  membentuk gel  yang  jernih  dan  bersifat  netral  serta  memiliki  viskositas  yang  stabil  (Rowe  et  al., 2009).  Selain  itu  HPMC  mengembang  dengan  baik  dalam  air  sehingga  merupakan bahan pembentuk hidrogel yang baik. Hidrogel cocok digunakan sebagai sediaan topikal dengan  fungsi  kelenjar  sebaseus  berlebih  yang  merupakan  salah  satu  faktor  penyebab jerawat (Voigt, 1994). Variasi konsentrasi HPMC  yang digunakan  dapat  menghasilkan viskositas yang berbeda sehingga dapat mempengaruhi sifat fisik dan stabilitas hidrogel. Berdasarkan  uraian  tersebut,  maka  peneliti  melakukan  penelitian  mengenai  optimasi formulasi  hidrogel  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang  dengan  basis  HPMC  dan  uji aktivitasnya terhadap S.aureus.

## METODE PENELITIAN

## Determinasi dan pembuatan ekstrak N. speciosa
Determinasi  bunga  kecombrang  (N.  speciosa)  dilakukan  di  Laboratorium  Taksonomi Tumbuhan  Fakultas  Biologi  Universitas  Jenderal  Soedirman  Purwokerto.  Bunga kecombrang  sebanyak  11  kg  disortir,  lalu  dicuci  dengan  air  mengalir  sampai  bersih. Kemudian  diiris  dan  dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari  dengan  ditutup  kain  hitam. Setelah  kering,  bunga  kecombrang  di-blender  dan  didapatkan  serbuk  sebanyak  700 gram. Serbuk kecombrang diekstraksi secara maserasi dengan n-heksan (non polar) dan etil asetat (semi polar). Pertama serbuk bunga kecombrang 700 g dimaserasi dengan n- heksan 2,8 liter selama 3x24 jam, lalu disaring dengan corong Buchner. Residu ekstraksi n-heksan  diangin  keringkan,  lalu  dimaserasi  menggunakan  penyari  etil  asetat  2,8  liter selama 3x24 jam. Setelah itu filtrat etil asetat bunga kecombrang disaring menggunakan corong  Buchner  dan  diuapkan  dengan  rotary  evaporator  pada  suhu  60  ˚C,  kemudian dipekatkan dengan watherbath.
Formulasi hidrogel
Pembuatan  hidrogel  dilakukan  dengan  mendispersikan  ekstrak  etil  asetat  bunga kecombrang,  metil  paraben,  dan  propil  paraben  ke  dalam  propilen  glikol  dengan
pengadukan  menggunakan  stirrer  kecepatan  20  rpm  pada  suhu  30˚C  selama  5  menit. Lalu dimasukkan HPMC  yang sudah dikembangkan  dalam  akuades. Campuran  diaduk secara konstan dengan menggunakan stirrer pada kecepatan dan suhu yang sama selama 10  menit hingga  homogen.  Campuran  didiamkan  selama  24  jam  pada suhu  ruang agar gel mengembang (Hasyim et al., 2011; Arikumalasari et al., 2013).
Tabel 1. Formula hidrogel ekstrak etil asetat bunga kecombrang
Komposisi Formula (g) F1 F2 F3 F4 Ekstrak bunga kecombrang 3 3 3 3 HPMC 3 5 8 10 Propilen glikol 15 15 15 15 Metil paraben 0,18 0,18 0,18 0,18 Propil paraben 0,02 0,02 0,02 0,02 Akuades ad 100 100 100 100
Sumber: (Arikumalasari et al., 2013; Rowe et al., 2009; Naufalin et al., 2008)

## Evaluasi sifat fisik sediaan hidrogel
Evaluasi sifat fisik sediaan hidrogel meliputi pengujian organoleptis, homogenitas, pH, viskositas,  daya  sebar,  dan  daya  lekat.  Pengamatan  organoleptis  dilakukan  dengan mengamati  konsistensi  dan  warna  hidrogel  (Ansel,  1989).  Pada  uji  homogenitas,  0,1  g sampel gel ditimbang, lalu dioleskan pada sekeping kaca datar dan ditutup dengan kaca datar lainnya. Homogenitas diamati, sediaan harus menunjukkan susunan yang homogen dan  tidak  terlihat  adanya  butiran  kasar  (Astuti  et.al.,  2012;  Kumesan  et  al.,  2013). Pengujian  pH  dengan  mencelupkan  stick  pH  ke  dalam  sampel  hidrogel.  Perubahan warna  stick  pH  dicocokkan  dengan  standar  warna  pada  kemasan  pH  universal.  pH hidrogel harus sesuai dengan pH kulit yaitu 4,5– 6,5 (Tranggono dan Latifah, 2007).
Pengujian  viskositas  menggunakan  viskometer  Brookfield  DV-E  yang  dioperasikan dengan spindel 64 dan kecepatan 0,3-5 rpm. Viskositas hidrogel yang diuji akan terbaca pada viskometer dalam skala cps. Nilai viskositas sediaan topikal yang baik yaitu 6000- 50000 cps (Garg et al., 2002). Pada uji daya sebar, 0,5 g sampel hidrogel ditimbang dan diletakkan di tengah kaca arloji berdiameter 15 cm. Lalu ditutup dengan kaca arloji yang lainnya  dan  ditambahkan  50  g  beban  di  atas  kaca  arloji.  Beban  didiamkan  selama  1 menit lalu diukur diameter sebar dengan penggaris (Astuti et al., 2010). Daya sebar 5-7 cm menunjukkan konsistensi semisolid yang nyaman dalam aplikasi (Garg et al., 2002).
Pada  uji  daya  lekat,  1  mg  gel  ditimbang,  lalu  dioleskan  pada  sebuah  plat  kaca.  Kedua plat  ditempelkan  sampai  kedua  plat  menyatu  dan  ditekan  dengan  beban  seberat  1  kg selama  5  menit.  Beban  diambil  dan  plat  kaca  diletakkan  pada  alat  uji.  Waktu  dicatat sampai kedua plat saling lepas. Daya lekat dari sediaan gel sebaiknya adalah lebih dari satu detik (Zats dan Kushla, 1996).

## Evaluasi stabilitas fisik sediaan hidrogel
Formula terbaik ditentukan dari data uji stabilitas fisik sediaan hidrogel yang dilakukan dengan  mengamati  perubahan  sifat  fisik  sediaan  hidrogel  yang  meliputi  organoleptik (bentuk  dan  warna),  homogenitas,  pH,  viskositas,  daya  sebar,  dan  daya  lekat  selama penyimpanan 28 hari. Pengamatan uji stabilitas dilakukan pada hari ke- 1-7, hari ke-14, 21, dan 28 selama penyimpanan.
Uji aktivitas antibakteri dengan difusi sumuran
Formula  terbaik  yang  memenuhi  persyaratan  evaluasi  stabilitas  fisik  sediaan  hidrogel diuji  aktivitas  antibakterinya  terhadap  S.  aureus.  Satu  mL  suspensi  bakteri  S.  aureus diambil  lalu  dituangkan  ke  dalam  cawan  petri.  Media  TSA  yang  sudah  cair  (suhu  45-
50 o C)  dituangkan  ke  cawan  petri  tersebut.  Kemudian  media  dihomogenkan  dengan menggerakkan  cawan  seperti  membentuk  angka  delapan.  Setelah  media  mengeras, dibuat dua lubang berdiameter 5 mm, diisi dengan formula hidrogel terbaik dan formula hidrogel terbaik tanpa ekstrak (kontrol negatif). Gel klindamisin (kontrol positif) di buat dalam cawan petri yang berbeda. Media diinkubasikan selama 24 jam pada suhu 37˚C. Diameter  hambat  pertumbuhan  bakteri  uji  diukur  dengan  melihat  terbentuknya  zona jernih di sekitar sumuran. Pengukuran dilakukan dengan jangka sorong dan dilakukan 3 kali untuk setiap formula. Rerata efek antibakteri setiap formula dihitung (Anggraini et al.,  2013).

## Analisis data
Data hasil evaluasi stabilitas fisik  gel meliputi data organoleptis, homogenitas,  dan pH disajikan  secara  deskriptif.  Data  hasil  evaluasi  stabilitas  fisik  gel  meliputi  viskositas, daya  sebar,  dan  daya  lekat  dianalisis  dengan  uji  One  Way  ANOVA  dan  dilanjutkan dengan  uji  Dunnet  T3.  Zona  hambat  dalam  uji  aktivitas  antibakteri  dianalisis menggunakan uji T independen.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini  rendemen  yang  diperoleh  sebesar  9,14%  (64  gram  dari  700  gram sebuk  simplisia)  dengan  presentase  bobot  susut  pengeringan  84,7%  (1,53  kg  bobot simplisia  dari  10  kg  bunga  kecombrang  basah).  Ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang yang  diperoleh  berwarna  coklat,  memiliki  konsistensi  yang  tidak  kental,  dan  memiliki bau khas bunga kecombrang.

## Evaluasi fisik sediaan hidrogel
Hasil pengamatan warna pada evaluasi organoleptik sediaan hidrogel ekstrak etil asetat bunga kecombrang menunjukkan Formula 1 berwarna kuning muda transparan, Formula 2 berwarna kuning, sedangkan Formula 3 dan 4 berwarna kuning tua. Warna sediaan ini tidak mengalami perubahan selama uji stabilitas 28 hari.
Perbedaan  warna  yang  dihasilkan  pada  setiap  formula  disebabkan  oleh  perbedaan konsentrasi HPMC. Menurut Rowe et al. (2009), konsentrasi HPMC lebih dari 7% akan menghasilkan  basis  gel  yang  kaku  dan  kurang  transparan  atau  cenderung  buram.  Oleh karena itu, warna kuning sediaan  gel  Formula 3  dan 4 cenderung lebih tua dan buram. Hal  ini  diperkuat  oleh  penelitian  Afianti  dan  Murrukmihadi  (2015)  dan  Zaen  (2015) yang  menyatakan  penambahan  konsentrasi  HPMC  pada  sediaan  gel  memberikan pengaruh  pada  wujud  dan  intensitas  warna  gel  dengan  warna  gel  lebih  tua  pada peningkatan konsentrasi HPMC.
Pengamatan  konsistensi  sediaan  hidrogel  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang  dapat dilihat  pada  Tabel  2.  Konsistensi  yang  dihasilkan  pada  sediaan  hidrogel  ekstrak  etil asetat  bunga  kecombrang  menunjukkan  adanya  perbedaan  bentuk  kekentalan  setiap formulanya  karena  dipengaruhi  oleh  variasi  konsentrasi  HPMC.  Semakin  tinggi konsentrasi  HPMC,  maka  semakin  kaku  sediaan  hidrogel  yang  dihasilkan.  Menurut penelitian  yang dilakukan  Purnomo  et  al.  (2012)  dan  Zaen  (2015),  konsentrasi  HPMC kurang  dari  3%  akan  membuat  gel  yang  lunak  dan  konsentrasi  lebih  dari  7%  akan membentuk  bentuk  gel  yang  kaku.  Selama  penyimpanan,  hanya  terjadi  perubahan konsistensi  pada  Formula  2.  Hasil  pemeriksaan  homogenitas  menunjukkan  bahwa keempat formula hidrogel homogen yang ditandai dengan warna yang merata dan tidak adanya butir-butir kasar pada plat kaca saat pengujian. Hasil uji stabilitas menunjukkan bahwa semua formula tetap stabil dan homogen selama 28 hari penyimpanan.
Tabel 2. Hasil pengamatan konsistensi hidrogel ekstrak bunga kecombrang
Lama penyimpanan (hari ke-) Stabilitas konsistensi F1 F2 F3 F4 0 + ++ +++ ++++ 1 + ++ +++ ++++ 2 + ++ +++ ++++ 3 + ++ +++ ++++ 4 + ++ +++ ++++ 5 + ++ +++ ++++ 6 + ++ +++ ++++ 7 + ++ +++ ++++ 14 + + +++ ++++ 21 + + +++ ++++ 28 + + +++ ++++
Hasil  pengukuran  pH  sediaan  hidrogel  menunjukkan  bahwa  seluruh  formula  sediaan hidrogel ekstrak etil asetat bunga kecombrang memiliki pH 5. Nilai pH sediaan tersebut masih  masuk  dalam  rentang  pH  normal  kulit  manusia,  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa  gel  yang  dibuat  aman  apabila  diaplikasikan  di  kulit.  Sediaan  yang  terlalu  basa akan  menyebabkan  kulit  menjadi  bersisik,  sedangkan  sediaan  yang  terlalu  asam  dapat menimbulkan  iritasi  kulit  (Tranggono  dan  Latifah,  2007).  Hasil  uji  stabilitas menunjukkan bahwa pH semua formula tetap stabil selama 28 hari penyimpanan.
Hasil  pengukuran  rata-rata  viskositas  hari  ke-0  sampai  28  adalah  Formula  1  sebesar 270.266,67 - 381.233,33 cps; Formula 2 sebesar 359.733,33 - 503.733,33 cps; Formula 3 sebesar 726.943,33 - 914.366,67  cps; dan Formula 4 sebesar 1.332.300  - 1.528.7767 cps.  Menurut  Garg  et  al.  (2002),  nilai  viskositas  sediaan  gel  yang  baik  yaitu  sebesar 6.000  -  50.000  cps.  Hasil  pengamatan  viskositas  sediaan  hidrogel  ekstrak  etil  asetat bunga  kecombrang  menunjukkan  viskositas  ke-empat  formula  sangat  tinggi  sehingga tidak masuk dalam rentang viskositas yang baik.
Penelitian Amalia (2015) mengenai formulasi gel ekstrak etil asetat bunga kecombrang dengan basis karbopol dan konsentrasi ekstrak yang digunakan sama menunjukkan nilai vikositas yang hampir sama dengan penelitian ini (229.600 - 1.740.000 cps). Penelitian Zaen  (2015)  tentang  formulasi  gel  ekstrak  etanolik  batang  brotowali  dengan  basis HPMC  pada  konsentrasi  yang  sama  menunjukkan  sediaan  gel  dengan  konsentrasi HPMC 3%b/b dan 5%b/b menghasilkan viskositas dalam rentang viskositas yang baik, sedangkan  pada  penelitian  ini  viskositas  yang  dihasilkan  sangat  tinggi.  Dari perbandingan dengan hasil penelitian terdahulu dapat disimpulkan bahwa ekstrak sangat berpengaruh terhadap viskositas sediaan yang dihasilkan.
Hasil  pengujian  viskositas  menunjukkan  perbedaan  konsentrasi  HPMC  memberikan perbedaan  viskositas  yang  signifikan  karena  HPMC  termasuk  turunan  selulosa.  Pada dispersi  polimer  turunan  selulosa,  molekul  primer  masuk  ke  dalam  rongga  yang dibentuk  oleh molekul air, sehingga terjadi ikatan  hidrogen antara  gugus hidroksil dari polimer  dengan  molekul  air.  Ikatan  hidrogen  ini  yang  berperan  dalam  hidrasi  pada proses  pengembangan  suatu  polimer  sehingga  dengan  peningkatan  kadar  HPMC menyebabkan gugus hidroksi semakin banyak dan viskositasnya semakin tinggi (Kibbe, 2004).
Data  viskositas  terhadap  lama  penyimpanan  dianalisis  menggunakan  regresi  linier  dan didapatkan  nilai  slope  yang  menunjukkan  laju  perubahan  terhadap  lama  penyimpanan sehingga  digunakan  untuk  menentukan  stabilitas  formula.  Formula  1  memiliki  nilai slope  yang  paling  mendekati  nol  yaitu  (-8475,77)  sehingga  perubahan  yang  terjadi selama penyimpanan adalah yang terkecil.
Hasil pengujian daya sebar hidrogel ekstrak etil asetat bunga kecombrang menunjukkan Formula  1  memiliki  rentang  rerata  diameter  sebar  sebesar  4,67-5,20  cm;  Formula  2 sebesar  2,80-3,57  cm;  Formula  3  sebesar  2,30-3,30  cm;  dan  Formula  4  sebesar  1,37- 2,83  cm.  Hasil  uji  statistik  ANOVA  menunjukkan  bahwa  konsentrasi  HPMC memberikan pengaruh signifikan terhadap daya sebar  sediaan hidrogel. Semakin  tinggi konsentrasi HPMC, semakin kecil daya sebar sediaan.
Lama  penyimpanan  juga  berpengaruh  pada  daya  sebar  hidrogel.  Berdasarkan  hasil pengamatan selama 28 hari menunjukkan nilai daya sebar relatif stabil. Namun, semakin lama  penyimpanan,  ada  kecenderungan  peningkatan  daya  sebar.  Kenaikan  daya  sebar ke-empat  formula  dikarenakan  penurunan  nilai  viskositas  sehingga  sediaan  mudah mengalir  dan  menghasilkan  diameter  penyebaran  yang  lebih  besar.  Hasil  uji  stabilitas daya sebar hidrogel ekstral etil asetat bunga kecombrang dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar  1.  Kurva  hubungan  lama  penyimpanan  dengan  daya  sebar  hidrogel.  Pengujian  daya sebar  setiap  waktu  penyimpanan  menggunakan  sampel  uji  sebanyak  0,5  g  dengan  pendiaman beban  50  g  selama  1  menit.  Diameter  sebar  diukur  setelah  pendiaman  beban.  Pengujian dilakukan selama waktu penyimpanan 28 hari.
Hasil  pengujian  daya  lekat  hidrogel  ekstrak  bunga  kecombrang  menunjukkan  bahwa rata-rata daya lekat Formula 1 sebesar 4,54-10,77 detik; Formula 2 sebesar 10,44-20,36 detik;  Formula  3  sebesar  12,83-38,9  detik;  dan  Formula  4  sebesar  47,26-73,66  detik. Semua  formula  sediaan  gel  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang  memenuhi  syarat  uji daya lekat, yaitu lebih dari satu detik.
Hasil  pengujian  daya  lekat  hidrogel  menunjukkan  semakin  tinggi  konsentrasi  HPMC, waktu  lekat  hidrogel  akan  semakin  lama  karena  HPMC  mampu  membentuk  koloid. Semakin tinggi kadar HPMC, koloid yang terbentuk akan semakin banyak dan mampu meningkatkan  daya  lekatnya  (Rowe  et  al.,  2009).  Lama  penyimpanan  juga mempengaruhi  daya  lekat  sediaan.  Keempat  formula mengalami  penurunan  daya  lekat selama penyimpanan 28 hari ditunjukan pada Gambar 2.
Gambar 2. Kurva hubungan lama penyimpanan dengan daya lekat hidrogel. Pengujian daya lekat setiap waktu penyimpanan menggunakan sampel uji sebanyak 1 mg dengan pendiaman beban 1 Kg  selama  5  menit.  Waktu  kedua  plat  saling  lepas  dihitung  sebagai  waktu  lekat  sediaan. Pengujian dilakukan selama waktu penyimpanan 28 hari.

## Gel ekstrak Formulasi 1 beraktivitas antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  sediaan  hidrogel  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang dilakukan  menggunakan  hidrogel  yang  telah  memenuhi  syarat  evaluasi  sifat  fisik  dan stabilitas  fisik,  yaitu  Formula  1.  Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  hidrogel ekstrak etil asetat bunga kecombrang Formula 1 dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar  3.  Diameter zona hambat formula 1. Pengujian antibakteri menggunakan metode difusi. Sediaan tanpa ekstrak (A), sediaan hidrogel mengandung ekstrak dengan formula 1 (B), dan gel klindamisin  (C)  dimasukkan  ke  dalam  lubang  pada  plat  agar  mengandung  bakteri  S.  aureus. Diameter hambat diamati setelah 24 jam. Gambar tiap kolom merupakan foto replikasi 1, 2, dan 3.
Tabel 3. Hasil pengukuran diameter zona hambat formula terbaik
Sediaan uji Diameter zona hambat (mm) Rerata (mm) Persen penghambatan (%) 1 2 3 Kontrol negatif 0,00 0,00 0,00 0,00±0,00 0 Gel klindamisin 9,1 9,05 8,6 8,92±0,27 56,03 Formula 1 2,87 3,60 5,20 3,89±1,19 35,72
Hasil  pengamatan  diameter  zona  hambat  menunjukkan  bahwa  gel  ekstrak  etil  asetat bunga  kecombrang  Formula  1  mempunyai  kemampuan  menghambat  pertumbuhan bakteri S. aureus yang ditandai dengan adanya zona hambat yang terbentuk di sekeliling sumuran.  Namun  zona  hambat  yang  terbentuk  lebih  kecil  bila  dibandingkan  dengan kontrol  positif  yaitu  gel  klindamisin.  Sedangkan  kontrol  negatif  tidak  memiliki  zona hambat.
Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  sediaan  hidrogel  ekstrak  etil  asetat  bunga kecombrang (Tabel 3) menunjukkan bahwa Formula 1 dapat menghambat pertumbuhan bakteri  S.  aureus  sebesar  35,72%,  kontrol  positif  56,03%,  dan  kontrol  negatif  0%. Berdasar klasifikasi zona hambat menurut Davis dan Stout (1971), Formula 1 memiliki daya hambat yang lemah, sedangkan kontrol positif yaitu gel klindamisin memiliki daya hambat  yang  sedang  terhadap  S.  aureus.  Kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah Formula 1 tanpa penambahan ekstrak etil asetat bunga kecombrang, tidak menunjukkan adanya zona hambat.
Mekanisme  kerja  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang  terhadap  S.  aureus  adalah dengan merusak dinding sel bakteri. Ekstrak etil asetat bunga kecombrang menimbulkan kebocoran  asam  nukleat  dan  protein  dari  sel  bakteri  S.  aureus  (Naufalin  et  al.,  2008). Pengeluaran  senyawa dalam sitoplasma tersebut terjadi karenan dinding sel mengalami kerusakan.  Zat  aktif  yang  terkandung  dalam  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang adalah zat yang memiliki aktivitas antibakteri.
Naufalin  et  al.  (2005)  melaporkan  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang  dengan  kadar 30  mg/mL  menunjukkan  zona  hambat  sebesar  14  mm  pada  bakteri  S.  aureus.  Zona hambat  ini  termasuk dalam  kriteria zona hambat yang kuat. Sementara pada penelitian ini, ekstrak etil asetat bunga kecombrang dengan kadar 30 mg/mL yang diformulasikan menjadi  sediaan  hidrogel  menggunakan  basis  HPMC  menghasilkan  zona  hambat sebesar  3,89  mm  yang  termasuk  kriteria  zona  hambat  lemah.  Perbedaan  daya  hambat kemungkinan  dikarenakan  ekstrak  etil  asetat  bunga  kecombrang  terjerat  dalam  matriks gel dan sulit dilepaskan dari sediaan sehingga aktivitas antibakteri tidak optimal.

## KESIMPULAN
Penambahan  konsentrasi  HPMC  sebagai  basis  berpengaruh  secara  signifikan  terhadap sifat  fisik  dan  stabilitas  sediaan  hidrogel.  Semakin  tinggi  konsentrasi  HPMC,  semakin tinggi  nilai  viskositas  dan  daya  lekat,  sedangkan  nilai  daya  sebar  semakin  rendah. Formulasi terbaik sediaan gel ekstrak etil asetat terdapat pada Formula 1 dengan HPMC sebesar  3  %b/b,  nilai viskositas  antara 265.900-383.400  cps,  daya  sebar  4,37-5,37  cm, dan  daya  lekat  4,01-11,31  detik.  Formula  1  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap S.aureus dengan zona hambat sebesar 3,89 mm atau masuk dalam kategori lemah.

## REFERENSI
Afianti,  H.P.,  dan  Murrukmihadi,  M.,  2015, Pengaruh  Variasi  Kadar  Gelling  Agent  HPMC  terhadap  Sifat Fisik dan Aktivitas Antibakteri Sediaan Gel Ekstrak Etanolik Daun Kemangi (Ocimum basilicum L. forma citratum Back.), Majalah Farmaseutik, 11 (2): 307-314. doi: 10.22146/farmaseutik.v11i2.24121
Amalia  N., 2015, Formulasi Gel Anti Jerawat Ekstrak  Etil  Asetat Bunga Kecombrang (Nicolaia speciosa) dengan  Basis  Carbopol  940  dan  Uji  Aktivitasnya  terhadap  Staphylococcus  aureus,  Skripsi,  Universitas Jenderal Soedirman, Puwokerto.
Anggraini,  D.,  Rahmawati,  N.,  dan  Hafsah,  S.,  2013,  Formulasi  Gel  Antijerawat  dari  Ekstrak  Etil  Asetat Gambir, Jurnal Penelitan Farmasi Indonesia, 1 (2): 62-66.
Ansel, H., 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi Keempat, Jakarta : UI Press.
Arikumalasari, J.,  Dewantara,  I.G.N.A., dan Wijayanti,  N.P.A.D., 2013,  Optimasi  HPMC Sebagai  Gelling Agent  dalam  Formula  Gel  Ekstrak  Kulit  Buah  Manggis  (Garcinia  mangostana  L.),  Jurnal  Farmasi Udayana, 2 (3): 145- 152.
Astuti, I.Y., Hartanti, D., dan Aminiati, A., 2012, Peningkatan Aktivitas Antijamur Candida albicans Salep Minyak  Atsiri  Daun  Sirih  (Piper  Bettle  Linn.)  melalui  Pembentukan  Kompleks  Inklusi  dengan  β- siklodekstrin, Majalah Obat Tradisional, 15 (3): 94 - 99. 10.22146/tradmedj.8132
Davis  WW,  Stout  TR.  1971, Disc plate method  of  microbiological  antibiotic  assay.  I.  Factors  influencing variability and error. Appl Microbiol. 22(4):659-65.
Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., dan Sigla, A.K., 2002, Spreading of Semisolid Formulation: An Update. Pharmaceutical Tecnology : 84-102.
Goodman dan Gilman, 2001,  The Pharmacological  Basis of Therapeutics, 10th  ed.,  New  York: McGraw- Hill, 1809-1813.
Hasyim, N., Faradiba,  dan Baharuddin, G,A, 2011, Formulasi  Gel Sari Buah Belimbing Wuluh  (Averrhoa Bilimbi L.), Majalah Farmasi dan Farmakologi, 15 (1): 5-9.
Khan,  N.,  Karodi,  R.,  Siddiqui,  A.,  Thube,S.,  dan  Rub,  R.,  2012,  Development  of  Anti-acne  Gel Formulation  of  Anthraquinones  Rich  Fraction  from  Rubiacordifolia (Rubiaceae),  International  Journal  of Applied Research in Natural Products, 4(4): 28- 36.
Kibbe, A. H., 2004, Handbook of Pharmaceutical Excipients, Third Edition, London: Pharmaceutical Press.
Kumesan, Y.M.N., Yamlean, P.V.Y., dan Supriati, H.S., 2013, Formulasi dan Uji Aktivitas Gel Antijerawat Ekstrak Umbi Bakung (Criumasiaticum L.) terhadap bakteri Staphylococcuss aureus, PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi UNSRAT, 2 (2): 2302 –2493.
Naufalin, R., Jenie, B.S.L., Kusnandar, F., Sudarwamto, M., dan Rukmini, H.S., 2005, Aktivitas Antibakteri Ekstrak Bunga Kecombrang terhadap Bakteri Patogen dan Perusak Pangan, Jurnal Teknologi dan Industri Pangan, 16 (2); 119-125.
Naufalin,  R.,Herastuti,  S.R.,dan  Yanto,  T.,  2008,  Aktivitas  dan  Mekanisme  Kerja  Antibakteri  Ekstrak Bunga Kecombrang (Nicolaia speciosa Horan), Seminar Nasional Pencapaian Ketahanan Pangan, Bogor.
Purnomo,  H.,  Salman,  dan  Rustini,  2012,  Formulasi  Obat  Jerawat  Gel  Minyak  Atsiri  Daun  Jeruk  Purut (Citrus  hystrix  D.C)  dan  Uji  Aktivitasnya  terhadap  Propionibacterium  acne  secara  In  Vitro,  Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Andalas, Padang.
Razak,  A.,  Djamal,  A.,  dan  Revilla,  G.,  2013,  Uji  Daya  Hambat  Air  Perasan  Buah  Jeruk  Nipis  (Citrus aurantifolia)  terhadap  Pertumbuhan  Staphylococcus  aureus  secara  In  Vitro,  Jurnal  Kesehatan  Andalas.  2 (1): 5-8. doi: 10.25077/jka.v2i1.54
Rowe, C.R., Sheskey, J.P., dan Weller, J.P., 2009, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th ed, London: American Pharmaceutical Association.
Tranggono,  R.I.,  dan  Latifah,  F.,  2007,  Buku  Pegangan  Ilmu  Pengetahuan  Kosmetik,  Jakarta  :  PT. Gramedia Pustaka Utama.
Voigt,  R,  1994,  Buku  Pelajaran  Teknologi  Farmasi  edisi  5,  Yogyakarta:  Gadjah  Mada  University  Press, 170.
Zaen, F.R., 2015, Formulasi Sediaan Gel Ekstrak Etanolik Batang Brotowali (T. crispa (L.) Miers) dengan Basis  HPMC  dan  Uji  Aktivitasnya  terhadap  Staphylococcus  aureus.  Skripsi,  Universitas  Jenderal Soedirman, Puwokerto.
Zath,  J.  L.,  dan  Kushla,  G.  P.,  1996,  Gels,  in  Lieberman,  H.  A.,  Lachman,  L.,  and  Schwatz,  J.  B. Pharmaceutical Dosage Form: Dysperse System Vol. 2. 2nd Ed,: 399- 417. New York: Marcell Dekker, Inc.
© The Author(s) 2019