## KANDUNGAN FLAVONOID EKSTRAK METANOL DAN EKSTRAK ETIL
ASETAT DAUN SUKUN (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg)

## DAN AKTIVITASNYA TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA SECARA IN VITRO
Sri Wardatun, Ike Yulia, Aditya Aprizayansyah Program Studi Farmasi, FMIPA, Universitas Pakuan
Email: sri.wardatun@unpak.ac.id

## ABSTRAK
Daun dan kulit pohon sukun atau Artocarpus altilis (Park.) Fosberg dikenal oleh masyarakat  di  beberapa  daerah  sebagai  bahan  obat  untuk  mengobati  penyakit  diabetes secara  alami.  Hasil-hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  daun  dan  kulit  pohon  sukun mengandung  senyawa-senyawa  golongan  flavonoid  yang  tinggi,  yang  diyakini  mampu menurunkan  kadar  glukosa  dalam  darah  sehingga  dapat  dikembangkan  sebagai  obat antidiabetes.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  ekstrak  daun  sukun terhadap penurunan kadar glukosa dan korelasinya dengan kandungan flavonoid. Kadar glukosa diukur secara in vitro menggunakan metode Nelson Somogyi dengan acuan nilai penurunan  50%  kadar  glukosa  baku.  Ekstraksi  daun  sukun  dilakukan  dengan  cara maserasi  bertingkat  menggunakan  pelarut  non  polar  ( n -heksan),  semi  polar  (etilasetat) dan polar (metanol). Penentuan kadar flavonoid dilakukan secara spektrofotometri pada panjang  gelombang  430  nm    natrium  asetat  dan  alumunium  klorida  (AlCl 3 ).  Hasil penelitian menunjukan kadar flavonoid total ekstrak etil asetat dan ekstrak metanol adalah masing-masing  sebesar  0.5554%  dan  0.3727%  berat  sampel.  Penurunan    50%  kadar gukosa terjadi pada perlakuan 36.1114 ppm ekstrak etil asetat  dan  39,448 ppm ekstrak metanol.  Hasil  uji  korelasi  menunjukkan  bahwa  ada  hubungan  yang  nyata  antara penurunan kadar glukosa dengan kadar flavonoid.
Kata kunci: Diabetes mellitus, kadar gula darah, flavonoid, sirsak, Artocarpus altilis

## THE ACTIVITY OF Artocarpus altilis (Park.) Fosberg  LEAF EXTRACT TO DECREASE THE  THE GLUCOSE LEVEL IN VITRO AND IT’S CORRELATION TO THE FLAVONOID CONTENT

## ABSTRACT
The bark and  leaf of bread  fruit tree  ( Artocarpus altilis (Park.) have  long been used  as  a  natural  antidiabetic  medicinal  preparations  in  a  many  regions  of  Indonesia. According to the recent studies, flavonoids group found to be most abundant compounds in bread fruit tree in which the flavonoids was expected to  has a potent to decrease the blood glucose level. The aim of present study was to determine the activity of flavonoids compounds   in decreasing the glucose level in vitro and it’s correlation to the flavonoids content.  Glucose  level  was  measured in  vitro according  to  Nelson  Somogyi  methods where  50%  decrease  of  glucose  level  was  set  as  a  standard.  Extract  was  prepared  by gradual  maceration  methods  consecutively  using  polar  ( n -hexane),  semi  polar  (ethyl acetate)  dan  polar  (methanol)  solvents.  Flavonoids  content  was  determined  using spectrophotometer at  wavelength 430 nm using sodium acetate and aluminum chloride as a reagents.  Data from present results revealed that the total  flavonoids content from total  ethyl  acetate  and  methanol  extracts    were  respectively  0.5554%  and  0.3727%  of sample weight.  The 50% decrease of glucose level occurred at addition of 36.1114 ppm
ethyl  acetate  and  39.448  ppm  ekstrak  metanol.  The  present  results  also  indicate  the significant correlation between the total flavonoids content and the decrease of glucose level.
Key words: Diabetes mellitus, glucose level, flavonoid, bread fruit, Artocarpus altilis

## PENDAHULUAN
Diabetes  mellitus atau  penyakit kencing manis adalah kelainan metabolik yang  disebabkan  oleh  banyak faktor seperti kurangnya insulin atau ketidakmampuan tubuh untuk memanfaatkan insulin ( insulin resistance ), dengan simtoma berupa hiperglikemia kro nis dan gangguan metabolisme karbohidrat, lemak dan prote in, sebagai akibat
defisiensi sekresi hormon insulin, aktivitas insulin,  atau  keduanya  (Kitabchi et  al., 2009).  Diabetes  mellitus  mengakibatkan sindrom  metabolik  yang  ditandai  dengan peningkatan  kadar  glukosa  dalam  darah atau  hiperglikemia  disertai  abnormalitas lipid, karbohidrat, protein serta peningkatan  resiko  komplikasi  penyakit pembuluh darah; mikrovaskular, makrovaskular  dan  neuropati  (Azrifitria dan Awalia, 2013). Diabetes terbagi dalam diabetes  tipe  1  yang  disebabkan  oleh rusaknya pankreas yang berakibat turunnya produksi insulin dan diabetes tipe 2  yang  disebabkan  resistensi  insulin terhadap  glukosa.  Pilihan  terapi  untuk semua    diabetes  tipe  1  hanya  satu  yaitu pemberian  insulin  secara  intravena  atau intramuscular  jika  diperlukan  sedangkan diabetes tipe 2 dapat  diobati dengan obat- obat hipoglikemik oral golongan sulfonilurea, meglitinid, biguanid, penghambat α-glukosidase
dan tiazolidindion (Laakso, 2010).
Pohon  sukun  ( Artocarpus  altilis (Park.)  Fosberg.)  adalah  pohon  yang mudah  dijumpai  diberbagai  daerah  di Indonesia. Masyarakat di beberapa daerah biasa memanfaatkan daun dan kulit pohon sukun  sebagai  bahan  ramuan  obat  untuk mengobati macam-macam penyakit seperti penyakit  liver,  hepatitis,  sakit  gigi,  gatal-
gatal, pembengkakan limpa, jantung, asam urat  dan  ginjal  (Anonim,  2012).    Hasil penelitian Yuswantina (2010) menunjukan bahwa  ekstrak  etanol  daun  sukun  dapat meningkatkan  imun  non  spesifik  pada mencit  dan  memiliki  aktivitas  penangkap radikal bebas.
Menurut  Suryanto  dan  Wehantouw (2009),  daun  sukun  kaya  akan  senyawa fenolik, flavonid dan tanin. Zat-zat tersebut mampu mengatasi peradangan, menurunkan kolesterol, mengobati penyakit hati, inflamasi, jantung, ginjal dan pembuluh  darah  (Maharani et  al., 2009). Flavonoid  diduga  merupakan  senyawa yang  bertanggung  jawab  dalam  aktivitas penurunan  kadar  glukosa  daun  sukun. Flavonoid  alam  ditemukan  dalam  bentuk glikosida,  yaitu  suatu  bentuk  kombinasi antara  gula  dan  alkohol.  Senyawa  ini merupakan  kandungan  khas  tumbuhan hijau,  terdapat  pada  semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kulit kayu, tepung  sari,  nektar,  bunga,  buah,  dan  biji. Menurut  perkiraan,  kira-kira  2%  dari seluruh  karbon  yang  difotosintesis  oleh tumbuhan (atau kira-kira 1x 10 9 ton/tahun) diubah  menjadi  flavonoid  (Markham, 1988).
Menurut  Kurniawan  (2013)  ekstrak etanol dan isolat flavonoid dari daun sukun dapat menurunkan kadar glukosa secara in vitro dengan  metode  Nelson  Somogyi, sedangkan  aktivitas  penurunan  kadar glukosa  dari  eks  trak  pelarut  lain  belum diketahui. Berdasarkan  hal tersebut, maka tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  aktivitas  penurunan  kadar glukosa ekstrak daun sukun dengan pelarut metanol  dan  etil  asetat,  serta  mempelajari bagaimana korelasi antara kadar flavonoid dengan aktivitas penurunan kadar glukosa dari ekstrak daun sukun secara in vitro .

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  April  sampai  Desember    2015,
bertempat di Laboratorium Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Pakuan, Bogor. Bahan dan Alat Bahan-bahan  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah daun sukun
( Artocarpus altilis , daun sukun
( Artocarpus  altilis ) yang  diperoleh  dari kebun  wisata  ilmiah di  Balai  Penelitian Tanaman  Obat  dan  Aromatik  (Balittro) Cimanggu – Bogor  dan  dideterminasi  di Herbarium  Bogoriense  Bidang  Botani Pusat  Penelitian  Biologi-LIPI,  akuades, metanol,  etil  asetat,  n-heksan,  baku  D- glukosa,  reagen  Nelson-Somogyi,  reagen arsenomolibdat, kloroform, ammonia, pereaksi (Dragendorff, Mayer & Wagner), serbuk  magnesium  (Mg),  asam  klorida (HCl)  pekat,  amil  alkohol,  asam  asetat anhidrat,  asam  sulfat  (H 2 SO 4 )  pekat  dan besi(III) klorida (FeCl 3 ) 1%.
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah rotary  evaporator , corong  pisah,  peralatan  gelas  lainnya  dan spektrofotometer UV-Vis.

## Metode Penelitian Pembuatan Serbuk Simplisia
Daun sukun dibersihkan dari pengotor yang menempel kemudian dicuci bersih  dan  dikeringkan  dengan  oven sampai beratnya konstan kemudian digiling dan diayak.
Penetapan Kadar Air Prosedur penentuan kadar air simplisia  dilakukan  dengan  menggunakan alat moisture balance .

## Penetapan Kadar Abu
Sebanyak  2  g  serbuk  simplisia dimasukkan  kedalam  krus  silikat  yang telah  ditimbang  dan  dipijarkan.  Krus kemudian dipijarkan perlahan-lahan hingga  arang  habis,  didinginkan  dan ditimbang.  Kadar  abu  dihitung  dengan menggunakan persamaan (1) (DepKes RI,
2000).
Kadar abu ( % ) = ( bobot krus + abu simplisia ) - bobot krus kosong Bobot sampel serbuk simplisia × 100% (1)

## Ekstraksi Simplisia
Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode maserasi  bertingkat  menggunakan  pelarut dengan  kepolaran  meningkat  yaitu  n- heksana,  etilasetat,  dan  metanol.  Metode maserasi  merupakan  metode  pemisahan senyawa  yang  dilakukan  dengan  cara merendam  serbuk  simplisia  dalam  larutan penyari    metode  tanpa  pemanasan. Keuntungan utama dari ekstraksi ini adalah caranya  yang  mudah dan dapat mencegah terjadinya  kerusakan  atau  penguraian komponen  bahan  alam  yang  tidak  tahan panas (Heinrich et al., 2005).
Sebanyak 500 gram serbuk simplisia dimaserasi menggunakan masing-masing 5 liter pelarut  (1:10) secara bertahap. Tahap
pertama  serbuk  simplisia  dimaserasi dengan  75  bagian  pelarut  n-heksan  (3500 mL)  selama  24  jam  sambil  sesekali dikocok, setelah 24 jam filtrat dipisahkan, residu dimaserasi dengan 25 bagian (1500 mL)  n-heksan  selama  24  jam  sambil sesekali dikocok. Setelah maserasi dengan n-heksana  selesai,  simplisia  dikeringkan kemudian dimaserasi etil asetat dilanjutkan maserasi  dengan  metanol  menggunakan prosedur yang sama. Filtrat yang diperoleh dari  masing-masing  pelarut      disimpan dalam wadah tertutup, di tempat sejuk dan terlindung  dari  cahaya  selama  24  jam, kemudian  filtrat  dipekatkan  dalam rotary evaporator sampai  didapatkan  ekstrak
kental. Rendemen dihitung dengan menggunakan persamaan (2). Ekstrak kental etilasetat dan metanol dari  daun  sukun  yang  didapat  kemudian
digunakan  dalam  tahap  uji  selanjutnya yaitu  uji  fitokimia,  uji  penurunan  kadar glukosa  secara in  vitro dan  uji  kadar flavonoid total.
Rendemen ekstrak = Berat ekstrak yang diperoleh Berat awal daun × 100% (2)

## Analisis Fitokimia
Analisis  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui    senyawa-senyawa  yang terkandung  dalam  ekstrak.  Uji  Fitokimia pada ekstrak meliputi identifikasi saponin, tanin,  flavonoid  dan  alkaloid  secara kualitatif.
Pembuatan  Larutan  Baku  Glukosa  80 ppm
Sebanyak 50 mg D-glukosa anhidrat dilarutkan dalam 50 mL akuades sehingga didapatkan konsentrasi 1000 ppm. Sebanyak  8,0  mL  dari  larutan  tersebut dipipet  dan  dimasukkan  ke  dalam  labu takar  100  mL  kemudian  ditambahkan akuades sampai tanda batas dan dihomogenkan  sehingga  diperoleh  larutan standar D-glukosa 80 ppm.
Pembuatan Pereaksi Nelson Somogyi a. Larutan Nelson A
Dilarutkan  12,5  g  natrium  karbonat anhidrat,  12,5  g  kalium  natrium  tatrat, 10  g  natrium  bikarbonat,  dan  100  g natrium  sulfat  anhidrat  dalam  350  ml akuadest. Kemudian diencerkan sampai 500 ml.
b. Larutan Nelson B Dilarutkan  7,5  g  tembaga  (II)  sulfat penta  hidrat  (CuSO 4 5  H 2 O)  dalam  50 ml  akuades  dan  ditambahkan  1  tetes asam sulfat (pekat).
c. Pereaksi  Nelson  dibuat  dengan  cara mencampurkan  25  ml  bagian  larutan Nelson  A  dan  1  mL  bagian  larutan Nelson B. Pencampuran dilakukan pada setiap hari akan digunakan.
Pembuatan Larutan Arsenomolybdat.
Sebanyak 25 g ammonium molybdat dilarutkan  dalam  450  ml  akuadest  dan ditambahkan  25  mL  asam  sulfat  pekat. Pada  tempat  lain  dilarutkan  3  g  natrium arsenat  hepta  hidrat  (Na 2 H 2 SO 4 .7  H 2 O) dalam  25  mL  akuades.  Larutan  kedua dituangkan kedalam larutan yang pertama, disimpan  dalam  botol  berwarna  cokelat, Selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  37 0 C selama  24  jam  (hingga  larutan  berwarna kuning).
Penentuan Panjang Gelombang

## Maksimum Glukosa
Dipipet  5  mL  larutan  baku  glukosa 80 ppm dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL, lalu diencerkan sampai batas. Dipipet 1 mL dari  larutan tersebut dimasukkan ke dalam  tabung  reaksi  lalu  ditambahkan  1 mL  reagen  nelson  dan  ditutup  dengan kapas  kemudian  dipanaskan  di  atas  air mendidih  selama  10  menit.  Larutan didinginkan  selama  5  menit  kemudian dipindahkan  ke  dalam  labu  ukur  10  mL, ditambahkan 1 mL reagen arsenomolibdat kemudian  diencerkan  dengan  akuades sampai  batas,  dikocok  dan  didiamkan selama  waktu  inkubasi.  Hasilnya  dibaca dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang gelombang 700-780 nm.

## Penentuan  Waktu  Inkubasi  Optimum Glukosa
Dipipet  5  mL  larutan  baku  glukosa 80 ppm dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL, lalu diencerkan sampai batas. Dipipet 1 mL dari larutan tersebut ke dalam tabung reaksi  lalu  ditambahkan  1  mL  reagen nelson,  ditutup  dengan  kapas  kemudian dipanaskan di atas air mendidih selama 10 menit. Larutan didinginkan selama 5 menit
kemudian dipindahkan kendalam labu ukur
10  mL  kemudian  ditambahkan  1  mL reagen arsenomolibdat kemudian diencerkan  dengan  akuades  sampai  batas dan dikocok. Serapan diukur pada panjang gelombang maksimum pada 5, 10, 15, 20, 25  dan  menit,  sehingga  didapat  waktu optimum yang stabil.

## Penentuan Kadar Glukosa
Metode  Nelson  Somogyi  digunakan untuk  menguji  kadar  glukosa  pada penelitian  ini  karena    bahan-bahan  yang digunakan lebih mudah diperoleh dan tidak memerlukan  perlakuan  khusus  pada  saat pengujian.  Kekurangan  dari  metode  ini adalah  kurang  spesifik  untuk  mengukur kadar glukosa karena metode ini dapat juga mengikat  gula  pereduksi  lain  yaitu senyawa gula yang memiliki gugus aldehid dan keton.
Ekstrak  metanol  dan  ekstrak  etil asetat  daun  sukun  masing-masing  dibuat seri konsentrasi 60, 80, 100, 120, 140, 160 dan  180  ppm.  Dari  masing-masing
konsentrasi dipipet 5 mL ke dalam tabung reaksi,  ditambahkan  5  mL  baku  glukosa dengan  konsentrasi  80  ppm.  Dari  larutan tersebut  dipipet  1  mL  ke  dalam  tabung reaksi,  ditambah  1  mL  reagen  nelson ditutup dengan kapas kemudian dipanaskan di atas air mendidih selama 10 menit. Larutan didinginkan selama 5 menit lalu  dipindahkan  ke  dalam  labu  ukur  10 mL, ditambah 1 mL reagen arsenomolibdat kemudian  diencerkan  dengan  akuades sampai tanda batas, dikocok dan didiamkan selama waktu inkubasi. Hasilnya  dibaca  dengan  spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang maksimal.
Absorbansi  yang  diperoleh  dari pengukuran  sampel  ekstrak  etanol  dan isolat  flavonoid  daun  sukun  dikurangi dengan  absorbansi  blanko.  Nilai  absorban kemudian  dimasukkan  ke  dalam  regresi linier  deret  baku  untuk  mengetahui  kadar glukosa.  Selanjutnya  dihitung  persentase penurunan  kadar  glukosa  menggunakan persamaan (3).
% Penurunan Kadar Glukosa = 𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑏𝑎𝑘𝑢−𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑏𝑎𝑘𝑢 × 100% (3)
Penentuan Kadar Flavonoid Ekstrak Kadar  flavonoid  ekstrak  daun sukun dihitung berdasarkan standar senyawa    kuersetin.  Sebelum  kadar flavonoid  diukur,  ditentukan  terlebih  dulu kurva  standar  kuersetin.  Kurva  kalibrasi kuersetin  diperoleh  dengan  melakukan pembuatan deret konsentrasi kuersetin 2, 4, 6,  8,  10  ppm  dan  melakukan  pengukuran absorbansi  dari  deret  sehingga  didpatkan persamaan  linieritas  antara  absorbansi dengan konsentrasi.  Setelah didapat kurva standar  kuersetin  kadar  flavonoid  ekstrak daun  sukun  diukur  dengan  cara  50  mg
ekstrak  daun  sukun  dilarutkan  dengan metanol  sampai  50  mL.  Dipipet  sebanyak 10  mL  dari  masing-masing  ekstrak  ke dalam  labu  ukur  50  mL  lalu  ditambahkan akuades kira-kira 20 mL, 1 mL almunium klorida 10%, 1 mL natrium asetat 1 M dan air suling sampai batas. Dikocok homogen lalu dibiarkan selama waktu optimum, lalu serapan  diukur  pada  panjang  gelombang maksimal.  Absorban  yang  dihasilkan dimasukkan  kedalam  persamaan  regresi dari  kurva  standar  kuersetin.  Kemudian dihitung flavonoid total dengan menggunakan persamaan (4).
% kadar flavonoid = ppm x volume x fp x 10 -6
gram bobot simlpisia x 100 %
(4)

## HASIL PENELITIAN

## Karakteristik  Serbuk  Simplisia  Daun Sukun
Serbuk  simplisia  daun  sukun  yang diperoleh memiliki warna hijau kecoklatan dengan aroma khas dan memiliki rasa agak pahit.  Serbuk  simplisia  daun  sukun  dapat dilihat  pada  Gambar  1.  Rendemen simplisia yang diperoleh sebesar 17,23%.
Gambar 1. Serbuk Simplisia Daun Sukun
Kadar  air  serbuk  simplisia  yang diperoleh  sebesar  4,47%.  Hasil  ini memenuhi  syarat  dari  DepKes  RI  (1979) yang  menyatakan  bahwa  syarat  kadar  air simplisisa  secara  umum  tidak  lebih  dari 5%.  Kadar  air  merupakan  salah  satu parameter penting dalam standarisasi suatu simplisia      karena  dengan  kadar  air  yang terlalu tinggi akan memungkinkan pertumbuhan mikroba yang akan mempengaruhi mutu dari simplisia tersebut.
Kadar  abu  yang  terdapat  dalam simplisia  adalah  sebesar  9,6825%,  sesuai dengan  standar  maksimal  kadar  abu  total dalam  simplisia  menurut  DepKes  RI (2000)  tidak  lebih  dari  15%.  Kadar  abu simplisia perlu ditentukan untuk
mengetahui atau mengidentifikasi banyaknya zat anorganik dan mineral yang biasa  ditemukan  dalam  serbuk  simplisia. Kadar  abu  yang  diperoleh  dari  suatu simplisia
menunjukkan banyaknya kandungan  unsur-unsur  logam  dalam simplisia.

## Hasil Ekstraksi Daun Sukun
Serbuk  simplisia  yang  digunakan dalam  maserasi  ini  sebanyak  500  gram.
Hasil  rendemen  ekstrak  etil  asetat  dan metanol yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 1. Rendemen  yang  dihasilkan  dari ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak  metanol sebesar  5,55  %  dan  9,575%.  Rendemen ekstrak  menunjukkan  banyaknya  jumlah senyawa  aktif  yang  terekstraksi  oleh pelarut  yang  digunakan  dan  berdasarkan hasil rendemen senyawa aktif lebih banyak terdapat  pada  ekstrak  metanol,  dengan demikian maka metanol merupakan pelarut yang  paling  baik  untuk  mengekstraksi senyawa aktif dalam simplisia daun sukun.

## Hasil  Uji  Fitokimia  Ekstrak  Daun Sukun
Hasil  uji  fitokimia  dari  ekstrak  etil asetat dan metanol daun sukun dapat dilihat pada Tabel 2.
Hasil uji fitokimia ini sejalan dengan hasil-hasil  penelitian  sebelumnya  yang menunjukan bahwa daun sukun kaya akan senyawa-senyawa fenolik terutama golongan  flavonid      Selain  senyawa- senyawa  flavonoid,  daun  sukun  juga terbukti  mengandung  senyawa  metabolit sekunder lainnya seperti tanin, saponin dan alkaloid (Riasari et al., 2015).
Tabel 1. Rendemen Ekstrak Etil Asetat dan Metanol
Pelarut Bobot simplisia (gram) Bobot Ekstrak (gram) Rendemen ekstrak kental daun sukun Etil Asetat 500 27,75 5,55% Metanol 500 48,85 9,57% Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Daun Sukun Sampel Golongan Senyawa Kimia Alkaloid Flavonoid Saponin Tanin Etil asetat + + + + Metanol + + + +
Keterangan: (+) terdeteksi, (-) tidak terdeteksi

## Waktu Inkubasi Optimum
Penentuan waktu inkubasi dilakukan untuk  mengetaui  waktu  yang  dibutuhkan suatu  zat  agar  dapat  bereaksi  dengan maksimal  dan  stabil.  Waktu  inkubasi optimum  glukosa    didapatkan  pada  menit ke 25 seperti terlihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Waktu Inkubasi Optimum
Glukosa
Gambar  3. Kurva Kalibrasi Larutan
Standar Glukosa
Persamaan  linier  yang  didapat  dari  kurva kalibrasi  adalah  y  =  0,01932x  +  0,036 dengan  nilai  koefisien  relasi  R 2 =  0,9998. Nilai  R 2 menunjukkan  adanya  korelasi antara  absorbansi  dengan  konsentrasi. Persamaan kurva kalibrasi standar glukosa dapat dilihat pada Gambar 3.

## Penurunan Kadar Glukosa
Pengujian  kadar  glukosa  dilakukan untuk  mengetahui  aktivitas  ekstrak  etil asetat  dan  ekstrak  metanol  daun  sukun terhadap penurunan kadar glukosa.
Penghitungan  dilakukan      menggunakan persamaan linier dari  kurva kalibrasi kadar glukosa  yang dapat dilihat pada Gambar 4 dan Gambar 5. Persentase penurunan kadar glukosa dapat dilihat pada Tabel 3.
Pengujian aktivitas penurunan kadar glukosa menunjukkan adanya pengaruh  penambahan  ekstrak  kental  etil asetat  dan  metanol  terhadap  kadar  baku glukosa.  Ekstrak  etil  asetat  dan  metanol daun  sukun  menunjukkan  kemampuan penurunan  kadar  glukosa  yang  berbeda. Ekstrak  metanol  daun  sukun  mampu menurunkan 50% kadar glukosa baku pada konsentrasi 39,448 ppm sedangkan ekstrak etil  asetat  daun  sukun  pada  konsentrasi 36,1114  ppm.  Nilai  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  etil  asetat  lebih  efektif menurunkan  50%  kadar  baku  glukosa. Semakin kecil konsentrasi yang diperlukan untuk  menurunkan  50%  kadar  glukosa
0.74 0.76 0.78 0.8 0.82 0.84 0.86 0.88 0.9 0.92 5 10 15 20 25 30 A b so r b an si (A ) Waktu (menit) y = 0.1932x + 0.036 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 20 40 60 80 100 A b so r b an si (A )
Konsentrasi Glukosa (ppm)
maka  semakin  besar  aktivitas  penurunan kadar glukosa.
Penurunan  kadar  glukosa  setelah ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak  metanol ditambahkan    kemungkinan  disebabkan larutan glukosa akan membentuk kompleks  glukosa  dengan  flavonoid. Gugus OH yang terletak dinomor 3’ dan 4’ pada  flavonoid  diduga  mampu  mengikat glukosa yang membuat kadar glukosa yang ada pada larutan baku akan berkurang. Sisa
glukosa  yang  tidak  terikat  oleh  flavonoid akan  bereaksi  dengan  reagen  Nelson  dan membentuk endapan merah bata kemudian penambahan reagen arsenomolibdat menghasilkan  molibdine  yang  berwarna biru  kehijauan,  lalu  diukur  serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis
(Kurniawan, 2013).
Gambar 4. Grafik Penurunan Kadar Glukosa Setelah Pemberian
Ekstrak Etil Asetat Daun Sukun
Gambar 5. Grafik Penurunan Kadar Glukosa Setelah Pemberian Ekstrak Metanol Daun Sukun
0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 P e n u r u n an K ad ar G lu k o sa (% ) Konsentrasi Ekstrak Etil Asetat (ppm) 0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30
40 50
P e n u r u n an K ad ar G lu k o sa (% ) Konsentrasi Ekstrak Metanol (ppm) y = 1,0299x + 9,3725 y = 0,5007x + 31,919
Tabel 3. Persentase Penurunan Kadar Glukosa Ekstrak Etil Asetat dan Metanol Daun Sukun
Konsentrasi (ppm) Penurunan Kadar Glukosa Ekstrak Etil Asetat Ekstrak Metanol 5 34,1356% 16,7962% 10 37,1125% 21,9720% 15 38,9235% 23,0072% 20 43,5817% 31,9360% 25 46,0405% 33,1005% 30 47,4637% 38,9235% 35 48,8875% 45,7817% 40 51,3457% 53,4162% 45 54,1927% 56,9100% 50 56,5217% 57,2982%

## Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak  Daun Sukun
Prinsip  penetapan  flavonoid  dengan metode ini adalah pembentukan kompleks antara AlCl 3 dengan gugus keto pada atom C-4 dan  juga dengan gugus  hidroksi pada atom  C-3  atau  C-4  yang  bertetangga  dari flavon dan flavonol. Penggunaan kuersetin sebagai  pembanding  karena  kuersetin merupakan  flavonoid  golongan  flavonol yang mempunyai gugus hidroksi pada C-4 dan memiliki gugus hidroksi pada atom C- 3  atau  C-5  yang  bertetangga  dari  flavon dan flavonol (Chang et al., 2002). Panjang gelombang  maksimum  yang  dihasilkan dari pengukuran kuersetin adalah 430 nm. Panjang gelombang maksimal yang dihasilkan  mendekati  dengan  literatur, menurut Selawa (2013) panjang
gelombang  maksimal  dari  kuersetin  415 nm.
Optimasi  waktu  inkubasi  dilakukan pada beberapa titik waktu yaitu 5, 10, 15, 20,  25  dan  30  menit.  Optimasi  waktu inkubasi  dilakukan  untuk  mengetahui waktu  penyimpanan  yang  memberikan serapan  stabil  dan  juga  untuk  mengetahui waktu  yang  dibutuhkan  suatu  zat  agar dapat  bereaksi  dengan  maksimal.  Hasil pengujian  menunjukkan  bahwa  waktu inkubasi  yang  optimum  didapat  pada
waktu  20  menit.  Grafik    waktu  inkubasi kuersetin dapat dilihat pada Gambar 6.
Persamaan  linier  yang  didapat  y  = 0,08485 x + 0,1075 dengan nilai koefisien korelasi r=0,9998 menunjukkan bahwa ada korelasi  antara  nilai  absorbansi  dengan konsentrasi.  Kurva  kalibrasi  kuersetin dapat dilihat pada Gambar 7.
Dari hasil penghitungan kadar flavonoid  menggunakan  kurva  kalibrasi didapat  rata-rata  kadar  flavonoid  total ekstrak  etil  asetat  daun  sukun  sebesar 0,5554% dan kadar flavonoid total ekstrak metanol  daun  sukun  sebesar  0,3727%. Kadar  flavonoid  ekstrak  etil  asetat  65% lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kadar flavonoid ekstrak metanol.
.
Gambar 6: Grafik Waktu Inkubasi
Kuersetin 0.256 0.258 0.26 0.262 0.264 0.266 0.268 0.27 0.272 0.274 0 10 20 30 40 A b so r b an si
Waktu Inkubasi (menit)
Gambar 7. Kurva Kalibrasi Kuersetin

## Korelasi Antara Kadar Flavonoid Total dan Penurunan Kadar Glukosa
Analisis  korelasi  antara  kadar flavonoid  total  dan  penurunan  kadar glukosa dilakukan dengan metode pearson correlation menggunakan  aplikasi  SPSS. Hasil uji korelasi dapat dilihat pada Tabel 4.
Nilai korelasi antara persentase penurunan kadar  glukosa  ekstrak  etil  asetat  daun sukun dengan kadar flavonoid total ekstrak
etil  asetat  adalah  0,918  sedangkan  nilai korelasi antara persentase penurunan kadar glukosa  ekstrak  metanol  dengan  kadar flavonoid total dari ekstrak metanol adalah 0,987.  Nilai  korelasi  keduanya  mendekati angka 1 sehingga dapat dinyatakan bahwa terdapat korelasi atau hubungan yang nyata antara  kadar  flavonoid  dengan  aktivitas penurunan  kadar  glukosa  secara invitro dengan  metode  Nelson  Somogyi.  Namun nilai  korelasi  yang  lebih  baik  diantara kedua  ekstrak  ditunjukkkan  oleh  ekstrak metanol  karena  nilai  korelasinya  lebih mendekati  angka  1.  Semakin  besar  kadar flavonoid maka nilai penurunan 50% kadar glukosa  akan  semakin  kecil  yang  berarti aktivitas penurunan kadar glukosa semakin baik.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat dan metanol daun sukun  dapat  menurunkan  kadar  glukosa secara in  vitro, sejalan  dengan  penelitian Mu’nisa  (2012)  yang  telah  membuktikan bahwa ektrak daun sukun dapat menurunkan kadar glukosa dan malondialdehida pada mencit yang diinduksi aloksan.
Tabel 4. Hasil Analisis Korelasi . Variabel (% Penurunan Kadar Glukosa ~ Flavonoid Total) Nilai Korelasi Etil Asetat 0,918 Metanol 0,987 y = 0.0849x + 0.1075 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0 5 10 15 A b so sb an si Konsentrasi (ppm)

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Dari  hsil-hasil  yang  didapatkan  dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak  etil  asetat  menurunkan  50% kadar  glukosa  pada  konsentrasi 36,1114  ppm  dan  ekstrak  metanol pada konsentrasi 39,448 ppm .
2. Kadar  flavonoid  ekstrak  etil  asetat adalah 0,5554% dari berat sampel dan kadar  flavonoid  ekstrak  metanol adalah  0,3727% dari berat sampel.
3. Terdapat korelasi antara kadar flavonoid pada ekstrak etil asetat dan metanol  daun  sukun  dan  persentase penurunan  kadar  glukosa  secara in vitro . Semakin tinggi kadar flavonoid maka semakin besar aktivitas
penurunan kadar glukosa.
Saran Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut untuk mengetahui aktivitas antidiabetes  ekstrak  etil  asetat  dan  metanol daun  sukun  secara in  vivo dengan  metode penghambatan  enzim  α-glukosidase  dan penentuan  kadar  flavonoid  dengan  metode 2,4-dinitrofenilfidrazin (DNPH) dengan pembanding naringenin.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  2012. Kandungan  dan  Manfaat
Daun Sukun . Diunduh dari http://daunsukun.com . [15  November 2014].
Chang, C.C., M.H. Yang, H.M. Wen dan J.C. Chernn.  2002.  Estimation  of  Total
Flavonoid Content in Propolis by Two Complementary Colorimetric Methods, Journal  of  Food  and  Drug
Analysis. 10 (3): 178- 182.
DepKes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Jakarta. Heinrich M., J. Barnes, S. Gibbons dan E.M.
Williamson. 2005. Farmakognosi dan
Fitoterapi . Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta Kitabchi,  A.E.,  G.E.  Umpierrez,  J.M.  Miles dan J.N. Fisher. 2009. Hyperglycemic crises  in  adult  patients  with  diabetes. Diabetes Care . 32 (7): 1335-1343. Kurniawan,  A.N.R.  2013.  Pengaruh  Ekstrak
Etanol  dan  Isolat  Flavonoid  Daun Sukun  (Artocarpus  altilis  (Park.) Fosberg) Terhadap Aktivitas Penurunan  Kadar  Glukosa  Secara  In Vitro. Artikel .  Sekolah  Tinggi  Ilmu Farmasi ”Yayasan Pharmasi”.
Semarang.
Laakso, M. 2010. Cardiovaskular dissease in type  2  diabetes  from  population  to man  to  mechanisms. Diabetes  Care.
33 (2): 442-449.
Maharani E.T.W., A.H. Mukaroma dan M.F. Farabi.  2009. Uji  Fitokimia  Daun
Sukun  Kering  (Artocarpus  altilis) . Fakultas  Ilmu  Keperawatan  dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah. Semarang. Markham  K.R. 1988. Cara mengidentifikasi flavonoid . Diterjemahkan oleh
Padmawinata. ITB, Bandung.
Mu’nisa, A.  M.,   dan A.  Farida.  2012.  Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun Sukun  Terhadap  Kadar  Glukosa Darah  dan  Malondialdehid  (MDA) pada Mencit ( Mus musculus ). Penelitian Disajikan
(Oral)  dalam  Simposium  Nasional Kimia  Bahan  Alam  ke-XX.  UIN, Jakarta.
Riasari H, M. Ulfah, D. Prayugo D and N.A
Komariah.  2017.  Antibacterial  and antifungal  activities  of  various  bread fruit leaves ( Artocarpus altilis (Parkinson)  fosberg).  Int  J Pharm Sci Res. 8(3): 1066-1073.
Selawa,  W.,  M.R.J.  Runtuwene  dan  G.
Citraningtyas. 2013. Kandungan Flavonoid dan Kapasitas Antioksidan Total Ekstrak Etanol Daun Binahong
(Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis. Jurnal Ilmiah Farmasi Pharmacon . 2 (1). Suryanto,  E.  dan  F.  Wehantouw.  2009. Aktivitas  Penangkap  Radikal  Bebas Dari  Ekstrak  Fenolik  Daun  Sukun (Artocarpus altilis F.) . Chem. Prog. 2 (1): 1-7. Tjay, T.H. dan K. Rahardja. 2007. Obat-Obat Penting,  Khasiat,  Penggunaan  dan Efek-efek Sampingnya. Edisi VI. Elex Media Komputindo: Jakarta. Yuswantina, R., A.R. Erwiyani dan Prihati. 2013. Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Sukun (Artocarpus altilis (Park.) Fosberg) Terhadap respon Imun Non Spesifik Pada mencit Jantan Galur BALB/C. Jurnal Farmasi dan Obat Alam. 2 (2):