Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia , 1 (1) (2019) 14-19

## Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia
Website: https://journal.ubb.ac.id/index.php/stannum doi:
Research paper
Antioxidant Activity Test for Rukam Fruit ( Flacourtia rukam ) Of Maseration Extract
Uji Aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Maserasi Buah Rukam ( Flacourtia Rukam )
I. Fadiyah 1 , I. Lestari 1,a , S. Victory 1 , R. G. Mahardika 1
1) *Department of Chemistry, Faculty of Engineering, University of Bangka Belitung Gg. IV No. 1, balunijuk, Merawang, Kabupaten Bangka, Kepulauan Bangka Belitung, 33172
a) email korespondensi: inasfadiyah28@gmail.com

## ABSTRAK
Rukam  fruit  ( Flacourtia  rukam )  is  one  of  the  wild  plants  that  are  widely  distributed  in Indonesia, especially on the island of Bangka. The results of previous studies stated that rukam fruit has a phenolic content of 40 mg GAE / 100 grams. Phenolic compounds have major benefits as antioxidants, where antioxidants have the ability to inhibit the work of free  radicals.  Therefore  a  study  was  conducted  to  assess  the  content  of  secondary metabolites  and  the  antioxidant  bioactivity  of  the  Flacourtia  rukam  species  using maceration method.  Rukam  fruit  extract  was  obtained  using  the  Maceration  method.  As for the antioxidant test using the DPPH method. The results of the antioxidant activity test of rukam extract with ethanol solvent obtained IC 50 value 236,169 µg / mL and in rukam extract  with  acetone  solvent  obtained  IC 50 276,443  µg  /  mL  which  showed  that  the antioxidant properties of this rukam were moderate.
Kata kunci : Flacoutia rukam, antioksidan, maserasi, fitokimia dan DPPH

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  kepulauan yang    terletak  di  kawasan  tropis  antara  dua benua  (Asia  dan  Australia)  dan  dua  Samudera (Samudera Hindia dan Samudera Pasifik) yang terdiri  atas  sekitar  17.500  pulau  dengan panjang  garis  pantai  sekitar  95.181  km. Wilayah Indonesia  luasnya sekitar 9 juta km 2 (2 juta  2 Km daratan, dan 7 juta km 2  lautan). Luas wilayah  Indonesia ini hanya sekitar 1,3% dari  luas  bumi,  namun  mempunyai  tingkat keberagaman  kehidupan  yang  sangat  tinggi. Untuk  tumbuhan,  Indonesia  diperkirakan memiliki 25% dari spesies tumbuhan berbunga yang  ada  di  dunia  atau  merupakan  urutan negara terbesar ketujuh dengan jumlah spesies mencapai  20.000  spesies,  40%  merupakan
tumbuhan  endemik  atau  asli  Indonesia (whitemore,  Sidiyasa,  &  Whitemore,  1987). Pesebaran  tumbuhan  di  Indonesia  bergantung pada  kondisi  geografis  daerah  masing-masing. Tiap  wilayah  di  Indonesia  memiliki  satu  atau beberapa  tumbuhan  yang  bersifat  endemik, menandakan  tiap  spesies  tumbuhan  memiliki syarat habitat tertentu sebagai tempat tumbuh yang ideal.
Tumbuhan  rukam  (Flacourtia  rukam) merupakan  salah  satu  jenis  tumbuhan  yang tumbuh  di  wilayah  tertentu  termasuk  Pulau Bangka.  Secara  fisik,  buah  ini  memiliki  ciri seperti  buah  anggur  namun  dengan  bentuk yang lebih kecil dengan rasa asam. Selama ini, buah  rukam diolah secara konvensional untuk digunakan  sebagai  obat  tradisional.  Buah rukam  juga  digunakan  dalam  pembuatan  kue
dan  selai,  sedangkan  pada  daerah  pedesaan batangnya digunakna untuk konstruksi bangunan.
Hasil  penelitian  sebelumnya  menyatakan bahwa  buah  rukam  memiliki  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  fenolik  lebih tinggi  dibandingkan  dengan    jambu  batu (Psidium  guajava).  Senyawa  fenolik  diketahui sangat berperan terhadap aktivitas antioksidan, semakin besar kandungan senyawa  golongan  fenolnya  maka  semakin besar  aktivitas  antioksidannya    (Kiessoun,  et al., 2010;Shahwar, et al 2010). Sekarang ini, antioksidan semakin mendapat  perhatian  dalam  bidang  penelitian. Hal ini beralasankan banyaknya penyakit pada manusia  yang  disebabkan  oleh  radikal  bebas. Radikal  bebas  merupakan  senyawa  yang memiliki  satu  atau  lebih  elektron  bebas bersifat  radikal  apabilia  terpapar  tubuh  dapat menyebabkan  berbagai  penyakit  seperti kanker  dengan  menimbulkan  proses  oksidasi dalam tubuh.
Antioksidan
memiliki
kemampuan mendonorkan  elektron  dan  dapat  berfungsi sebagai  agen  pereduksi  sehingga  dapat mengkhelat ion metal dan mengurangi potensi radikal  dalam  tubuh  (Vaya  &  Aviram,  2001). Senyawa  antioksidan  merupakan  senyawa yang  akan  menghambat  atau  menunda  proses oksidasi  substrat  pada  konsentrasi  rendah. Secara umum, antioksidan mengurangi kecepatan  reaksi  inisiasi  pada  reaksi  berantai pembentukan radikal bebas dalam konsentrasi yang  sangat  kecil,  yaitu  0,01%  atau  bahkan kurang  (Pratimasari, 2009)
Cara  lain  yang  dapat  digunakan  untuk menghentikan  proses  oksidasi  adalah  dengan penambahan zat aditif.  Penambahan zat aditif seperti  antioksidan  dapat  digunakan  untuk menghambat  proses  oksidasi.  Mekanisme penghambatan tergantung pada struktur kimia, dalam  mekanisme  ini  yang  paling  penting adalah reaksi dengan radikal bebas lipid, yang akan membentuk produk non-aktif  (Gordon, N, & M, 2001) Komponen bioaktif pada buah rukam dapat diperoleh  dengan  melakukan  ekstraksi.  Ada banyak  metode  ekstaksi yang  dapat  dilakukan seperti  maserasi.Maserasi  merupakan  salah satu  metode  yang  sederhana  dan  hsnys memerlukan  sedikit  sampel.  List  pada  1989 mengungkapkan  bahwa  Maserasi  adalah ekstraksi  suatu  bahan  menggunakan  pelarut dengan  pengadukan  pada  suhu  ruang.  Pada maserasi  sebagian  pelarut  digunakan  untuk
maserasi  lalu  setelah  penyaringan,  residu digunakan  lagi  untuk  kedua  kalinya  dengan sisa pelarut yang ada dan disaring kembali, lalu kedua filtrat digabungkan pada tahap akhir.
Berdasrkan  latar  belakang  tersebut  maka penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji menegenai  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  serta  bioaktivitas  antioksidan  dari spesies
Flacourtia rukam dengan menggunakan  metode maserasi.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Buah rukam yang diperoleh dari desa Parit Tiga.  Bahan  kimia  yang  digunakan  adalah metanol,  etanol,  aseton,  akuadestilat,  pereaksi Mayer,  pereaksi  Wagner,  Asam  Sulfat  2N, kloroform,  asam  asetat  glasian,  serbuk magnesium,  Amil  alkohol,  asam  klorida  2N, alkohol, pereaksi FeCl 2 , 2,2-diphenil-1- picrylhydarzyl (DPPH).

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  blender, botol  kaca , rotary  evaporator, corong,  botol sampel,  hotplate,  tabung  reaksi,  gelas  kimia, pipet volum, labu ukur, inkubator, spektrofotometer UV-Vis.

## Prosedur Kerja

## Preparasi Sampel
Sampel  penelitian  yang  digunakan  adalah buah  rukam  (Flacourtia  rukam)  yang  berasal dari  Desa  Parit  Tiga,  Kabupaten  Bangka. Sampel  yang  digunakan  berupa  buah  rukam yang  masih  segar  dan  basah  maupun  kering. Selanjutnya  sampel  tersebut  dikeringkan dibawah  sinar  matahari.  Sampel  yang  telah kering kemudian dihaluskan dengan menggunakan  blender  hingga  menjadi  serbuk. Kemudian  sampel  tersebut  diayak  dengan menggunakan  ayakan  mesh  60  untuk mendapatkan  bubuk  halus  buah  rukam. Selanjutnya  disimpan  kedalam  wadah  kedap udara.

## Ekstraksi Dengan Metode Maserasi
Serbuk  kering  buah  rukam  (Flacourtia rukam)  diambil  sebanyak  kurang  lebih  10 gram  dan  dimasukkan  kedalam  botol  kaca. Selanjutnya  direndam  dengan  penambahan pelarut  sebanyak  100  mL.  Pelarut  yang digunakan  adalah  etanol  dan  aseton.  Serbuk direndam  selama  satu  hari  dan  diulangi sebanyak  3  kali.  Setelah  itu  dipisahkan  antara filtrat dengan residu menggunakan corong dan kertas saring. Filtrat yang diperoleh,
dievaporasi  dengan rotary  vacum  evaporator hingga  diperoleh  ekstrak  buah  rukam  yang pekat. buah rukam yang pekat.
Uji  Fitokimia (Uji  Senyawa  Metabolit Sekunder)
Uji  fitokimia  ini  dilakukan  di  Laboratorium MIPA  FPPB  Universitas  Bangka  Belitung  yang bertujuan  untuk  meneliti  serta  mengetahui senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat pada  ekstrak  buah  rukam  ( Flacourtia  rukam ). Uji  fitokimia  ini  dilakukan  dengan  beberapa metode uji yang meliputi:
Uji Alkaloid Pengujian  dilakukan  dengan  mengambil masing-masing sekitar 2ml sampel buah rukam yang telah diekstraksi menjadi ekstraksi etanol. Selanjutnya ekstraksi etanol dan fraksi lainnya ditambahkan beberapa tetes pereaksi Mayer.

## Uji Flavonoid
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  sampel buah  rukam  dimasukkan  kedalam  tabung reaksi  lalu  ditambahkan  serbuk  magnesium dan amil alkohol sambil dikocok-kocok.

## Uji Fenol Hidrokuinon
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  sampel buah  rukam  yang  telah  diekstraksi  menjadi ekstraksi etanol dan fraksi lainnya ditempatkan padaplat tetes. Kemudian ditambahkan 2 tetes pereaksi FeCl3 1%.
Uji Saponin
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  sampel buah  rukam  yang  telah  diekstraksi  menjadi ekstraksi etanol dan fraksi lainnya, ditempatkan  ke  dalam  tabung  reaksi.  Lalu ditambahkan
akuades pada tabung tersebut.Kemudian  tabung  reaksi  tersebut dikocok.  Apabila  terbentuk  busa  yang  stabil tidak  kurang  dari  10  menit,  menunjukkan    uji positif adanya senyawa saponin.

## Uji Steroid
Pengujian  dilakukan  dengan  cara  sampel buah  rukam  yang  telah  diekstraksi  menjadi ekstrak etanol atau fraksi lainnya, ditempatkan kedalam  tabung  reaksi.  Lalu  ditambahkan kloroform, asam asetat glasial dan ditambahkan asam sulfat pekat Uji aktivitas antioksidan Uji aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan metode dpph yang
pengukurannya
menggunakan spektrofotometer.  Dengan  cara  sebanyak  1  ml larutan sampel dengan konsentrasi 10; 20; 30; dan 80 ppm dicampurkan dengan 2 ml larutan DPPH  0,15  mm.  Selanjutnya  larutan  tersebut dihomogenkan dan didiamkan selama 15 menit pada  suhu  ruang  (sekitar  25 o C).  Kemudian absorbansinya  diukur  pada  λmaks  515  nm dengan  spektrofotometer  uv-vis.  Kemudian masing-masing blanko dan kontrol negatif yang digunakan adalah 2 ml pereaksi dpph 0,15 mm. Lalu  ditambahkan  1  ml  masing-masing pelarutnya kemudian diukur dengan spektrofotometer  uv-vis    (Fitri,  A,  Waldani, Noviyani, & S., 2016)
Analisis data Aktivitas  antioksidan  pada  buah  rukam (flacourtia  rukam  zoll.  &  mor)  dianalisis berdasarkan  kekuatan  inhibisinya.  Kekuatan inhibisinya dihitung menggunakan rumus :
Rumus % Inhibisi = {Absorbansi kontrol – ( ) X 100%}
Aktivitas peredaman radikal bebas biasanya dinyatakan sebagai presentase peredaman dari dpph  dan  dapat  juga  dinyatakan  dengan  IC 50 . Persamaan  garis  yang  diperoleh  kemudian digunakan untuk mencari nilai IC 50 (konsentrasi yang diperlukan untuk menginhibisi 50% radikal bebas.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak Buah Rukam Ekstrak  buah  rukam  diperoleh  dengan mengguanakan metode maserasi selama 3 hari pada  suhu  ruang  (tiga  kali  penggantian pelarut).  Pada  ekstraksi  dengan  metode maserasi  dilakukan  dengan  perbandingan pelarut  dan  sampel  1  :  10  .Pelarut  yang digunakan  adalah  etanol  dan  aseton.  Hasil ekstraksi kemudian disaring untuk memisahkan  residu  dengan  filtratnya.  Filtrat yang  diperoleh  kemudian  dievaporasi  untuk didapatkan ekstrak buah rukam.
Tabel  1. Hasil  Ekstraksi  Buah  Rukam Menggunakan Metode Maserasi Pelarut Suhu ( o C) Waktu (hari) Rendemen Hasil Ekstrak Etanol 25 3 28,6 % Aseton 25 3 19,1 %
Berdasarkan  hasil  penelitian  pada  Tabel  1 dapat  dilihat  bahwa  menggunakan  pelarut yang  berbeda  dapat  mempengaruhi  kelarutan senyawa aktif yang akan diekstraksi. Penelitian ini  menunjukkan  bahwa  kepolaran  senyawa aktif dalam buah rukam mempunyai kepolaran yang  hampir  sama  dengan    kepolaran  pelarut etanol    dibandingkan  dengan  pelarut  aseton, sehingga  dapat  terskstrak  lebih  tinggi  dengan pelarut etanol.

## Uji Fitokimia
Pengujian  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder. Hasil  pengujian  fitokimia  menunjukkan  tidak ada perbedaan dalam hasil uji fitokimia ekstrak menggunakan  metode  MAE  dengan  pelarut etanol  maupun  aseton.  Semua  ekstrak  positif mengandung  alkaloid,  fenol  hidrokuinon  dan flavonoid. Tetapi negatif mengandung senyawa saponin dan steroid.
Gambar 1. Uji fitokimia
Tabel 2 . Hasil Uji Fitokimia pada Ekstrak Buah Rukam Golongan Senyawa Ekstrak buah rukam etanol Ekstrak buah rukam aseton Alkaloid : + + Fenol Hidrokuinon : + + Flavonoid : + + Saponin : _ _ Steroid : _ _
Pada  uji  alkaloid  akan  dipeoleh  hasil  yang positif  jika  ditambah  pereaksi    Mayer  akan terbentuk endapan bewarna putih kekuningan, dan  jika  ditambah  pereaksi  Wagner  akan terbentuk  endapan  bewarna  coklat.  Endapan tersebut  tmerupakan  senyawa  kompleks kalium-alkaloidyang  merupakan  hasil  dari  ion K+ yang akan berikatan kovelen koordinatdengan  nitogen  pada  alkaloid
(Marlindaa, Meiske, Sangia, & Audy, 2010)
Gambar  2. Uji  Alkaloid  dengan  Pereaksi Wagner
Hasil  positif  pada  uji  fenol  hidrokuinon adalah  apabila  pada  sampel  terbentuk  larutan bewarna hijau atau hijau biru.
Flavonoid  merupakan  suatu  senyawa  yang memiliki  inti  α-benzopyron.  Pada  uji  ini penambahan  asam  klorida  pekat  memiliki fungsi  agar  terjadinya  protonasi  flavonoid sehingga  terbentuk  garam  flavonoid.  Sampel positif mengandung senyawa flavonoid apabila terbentuk  warna  merah,  kuning  atau  jingga pada  lapisan  amil  alcohol.  Hasil  reaksinya adalah  garam  flavilium  yang  berwarna  merah tua (Marlindaa, Meiske, Sangia, & Audy, 2010).
Gambar 3 . Uji Flavonoid
Uji  saponin  dilakukan  dengan  penambahan air  panas  pada  sampel  yang  telah  diekstraksi atau  sampel  yang  telah  menjadi  ekstrak.
Sampel  positif  terdapat  saponin  apabila terbentuk busa. Pada  uji  steroid  menunjukkan  hasil  positif mengandung steroid jika pada saat penambahan  kloroform dan  asam  sulfat  pekat akan    terbentuk  warna  merah  pada  larutan pertama kali berubah menjadi biru dan hijau.

## Gambar 4 . Uji Steroid
Uji Aktivitas Antioksidan Pada  uji  aktivitas  antioksidan  dilakukan dengan  menggunakan  metode  DPPH.  Metode DPPH  dilakukan  dengan  penambahan  larutan DPPH  pada  ekstrak  buah  rukam  yang sebelumnya  telah  dilarutkan  dengan  pelarut metanol.  Senyawa  aktif  antioksidan  akan bereaksi  dengan  radikal  pada  DPPH  melalui mekanisme  donasi  atom  hidrogen  dan menyebabkan  adanya  perubahan  warna  ungu menjadi warna yang lebih terang (Molyneux,2004).
Gambar  2 .  Hasil  Aktivitas  Antioksida  Metode DPPH
Hasil uji aktivitas antioksidan metode DPPH selanjutnya  diukur  absorbansinya  dengan menggunakan  spektroskopi  UV-Vis  pada panjang  gelombang  maksimal  515  nm.  Nilai absorbansi  yang  diperoleh  digunakan  untuk mencari  serta  mendapatkan  nilai  inhibisi ekstrak buah rukam.
Gambar  3.  Nilai  Inhibisi  Ekstrak  Etanol  Buah Rukam
Gambar  4.  Nilai  Inhibisi  Ekstrak  Aseton  Buah Rukam
Berdasarkan  gambar  3  dan  gambar  4 diperoleh  nilai  r  ekstrak  etanol  buah  rukam adalah  0,9754  dan  nilai  r  ekstrak  aseton  buah rukam  adalah  0,9947.  Data  nilai  r  yang diperoleh  tersebut  menunjukkan  bahwa  data probit dari ekstrak buah rukam pelarut etanol maupun  aseton  hampir  mendekati  1  yang artinya  nilai  tersebut  sangat  baik.  Nilai  r  yang mendekati  +1  (bernilai  positif)  menunjukkan bahwa  dengan  meningkatnya  konsentrasi ekstrak  maka  semakin  besar  aktivitas antioksidannya. Aktivitas antioksidan biasanya dinyatakan sebagai presentase peredaman dari
DPPH dan dapat juga dinyatakan dengan IC50. Persamaan garis yang diperoleh ini digunakan untuk mendapatkan nilai IC50.
Tabel 3. Nilai IC 50 Ekstrak Buah Rukam No. Pelarut IC 50 (μg/mL) Keterangan 1 Etanol 236,169 100-500 μg/mL (Sedang ) 2 Aseton 276,443 100-500 μg/mL (Sedang )
Suatu  senyawa  dinyatakan  aktivitas antioksidannya sangat kuat jika memiliki Nilai IC50 < 50 μg/ml,  kuat jika memiliki nilai IC50 sekitar  50-100  μg/mL,  sedang  jika  nilai  IC50 sekitar  100-500  μg/mL  dan  lemah  jika memiliki nilai IC50 lebih dari 500 μg/mL. Pada hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  dan  aseton  buah  rukam memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sedang atau termasuk kategori sedang.

## KESIMPULAN
Pada  penelitian  ini  diperoleh  persentasi rendemen  hasil  ekstrak  buah  rukam  dengan pelarut etanol adalah 28,6% dan ekstrak buah rukam  dengan  pelarut  aseton  adalah  19,1%. Hasil skrining fitokimia diperoleh buah rukam ( Flacourtia  rukam )  positif  mengandung senyawa  flavonoid,  alkaloid  dan  fenol hidrokuinon. Hasil pengujian aktivitas antioksidan  menggunakan  metode  dpph dengan pengukuran menggunakan spektrofotometer  uv-vis    pada  ekstrak  buah rukam  dengan  pelarut  etanol  dan  aseton diperoleh  IC 50 236,169  µg/mL  dan  276,443 µg/mL  yang  menunjukkan  bahwa  sifat antioksidan  buah rukam ini sedang
.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti berterima kasih kepada kementrian riset,  teknologi,  dan  pendidikan  tinggi Direktorat Jendral Pembelajaran dan Kemahasiswaan  yang  telah  memberikan bantuan  dana  penelitian  berdasarkan  sk  no. 1020/b3.1/km/2018

## REFERENSI
Fitri, N., A, U., Waldani, I., Noviyani, S., & S., A. (2016).  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Daun  Rukam (Flacourtia  rukam)  dengan  Metode  DPPH
(1,1-Difenil-2-Piknihidrazil). Prisiding Seminar  Nasional  Kimia (pp.  109-123). Lombok: Mataram-Lombok.
Gordon, M. J., N, Y., & M, G. (2001). Antioxidants in Food . New York: CRC Press. Kiessoun,  K.,  Souza,  A.,  Meda,  N.,  Coulibali,  A., Kiendrebeogo,  m.,  Lamien-Meda,  A.,  et  al. (2010).  Polyphenol  Contens,  Antioxidant and  Anti-Inflamatory  Activities  of  Six Malvaceae  Spesies  Traditionally  used  to Treat Hepatitis B in Burkina Faso. European Journal of Scientific Research , 570-580. List PH dan Schmidt PC. 1989. Phytopharmaceutical    Technology.  CRC Press Inc. Boston.
Mandal  V,  Yogesh  MH.  2007.  Microwave assisted  Extraction  –  An  Innovative  and Promising  Extraction  Tool  for  Medicinal Plant Research. Pharmacognosy Rev 1: 7-18. National Plant Data Center, NRCS, USDA. Baton Rouge,  LA  70874-4490  USA.  2000. http://plants.usda.gov.
Panovska,  T.K.,  Kulevanova,  S.,  Stefova  (2005) In  Vitro  Antioxidant    Activity  of  Some Teucrium Spesies (Lamiaceae). Acta Pharm . 55 : 207-214 Pratimasari, D. (2009). Uji Aktivitas Penangkapan Radikal Buah Carica papaya L. dengan  Metode  DPPH  dan  Penetapan  Kadar Fenolik serta Flavonoid Totalnya. Surakarta: Universitas Muhamadyah Surakarta.
Ragasa, C. Y., Reyes, J. M. A., Tabin, T. J., Tan, m. C.  S.,  Chiong,  I.  D.,  Brkljaca,  R.,    Urban,  S. 2016.  Chemical  Constituents  of  Flacourtia rukam  Zoli.  &  Moritzi  Fruit. International Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical Research , 8(12): 1625-1628 Rohman,  A.;  Riyanto  S.;  Yuniarti  N.;  Saputra W.R.;  Utami  R.;  Mulatsih  W.  2010. Antioxidant  Activity,  Total  Phenolic  and Total  Flavaonoid  of  Extracts  and  Fractions of  Red  Fruit  (Padanus  conoideus  Lam). International  Food  Research  Journal .  2010. 17 : 97-106.
Sabel  W  dan  Warren  JDF.  1973.  Theory  and Practise  of  Oleoresin  Extraction.  Di  dalam Proceeding of The Conference of Spice , 10th- 14th April 1972. Trop. Prod. Inst, London. Shahwar,  d.,  Shafiq-ur-Rehman,  Ahmad,  N.,
Ullah,  S.,  &  Raza,  M.  (2010).  Antioxidant Activities  of  the  Selected  Plants  from  the Family Euphorbiaceae, Lauraceace, Malvaceae  and  Balsaminaceae. African Journal of Biotechnology , 1086-1096.
Vaya,  J.,  &  Aviram,  m.  (2001).  Nutritional Antioxidants  :  Mechanisms  of  Action, Analyses  of  Activities  and  Medical Applications. Curr.  Med.  Chem-Imm,  Endoc. and Metab , 1. Whitemore,  T.,  Sidiyasa,  K.,  &  Whitemore,  T. (1987).  Tree  species  enumeration  of  0.5 hectare  on  Halmahera. Gardens  Bulletin Singapore , 31-34.