## TINJAUAN KINETIKA KIMIA DAYA HAMBAT MINYAK DAUN CENGKEH (Syzygium aromaticum) DAN HASIL MIKROENKAPSULASINYA TERHADAP Eschericia coli
Chemical Kinetics Inhibition Clove Leaves Oil (Syzygium aromaticum) and It’s Microencapsulat Against Escherichia Coli
Laily Nurliana 1* , Desi Kurniawati 1 , Rustam Musta 2 , Laode Abdul Kadir 1 , Siti Nurjana 2 , Fitria Dewi 1
1 Chemistry Department, Mathematic and Nature Science Faculty, Halu Oleo University, Kendari
2 Chemistry Department, Teacher Training dan Education Faculty, Halu Oleo University, Kendari
*Corresponding author, e-mail: laylinurliana@gmail.com
Received: Sep. 2019 Published: Jan. 2020

## ABSTRACT
The  secondary  metabolite  compounds  contained  in  clove  leaves  oil  have  the  potential  to  be  antibacterial Escherichia coli . The kinetic analysis is based on the inhibition zone formed as a result of the inhibition of clove leaves oil and the results of microencapsulation on E. coli bacteria. The determination of the inhibition zone uses the disk diffusion method by using amoxicillin as a positive control and tween oil as a negative control. The kinetic review is intended to find out the antibacterial inhibitory reaction process by determining the reaction order (n), rate constant (k) as well as the A t -A o -t relationship of clove leaves oil and the results of its microencapsulation. Based on the research results obtained by the reaction order (n) of clove oil as an antibacterial E. coli is n = 0.1913; with the rate constant k = 5.7679. The reaction order (n) results of microencapsulation as antibacterial E. coli are 0.5039;  with  the  rate  constant  k  =  4.7323.  The  relationship  of  A t -A o -t  for  the  reaction  of  clove  leaves  oil  as antibacterial E. coli is A t = (A 0 0,8 − 5t) 1,25 . The relationship of A t -A o -t for the reaction of clove leaves oil as a result  of  microencapsulation  as  antibacterial E.  coli is ( 1 A t 0,5 − 1 A o 0,5 ) = 2,35t . The  minimum  effective consentration equal to the positive control inhibition will be obtained if 8.57% for clove oil or a coating of 1: 3481 for microencapsulated clove oil is used.
Keywords: Kinetics, clove leaves oil, microencapsulation, E. coli.

## PENDAHULUAN
Cengkeh (Syzygium aromaticum) merupakan tumbuhan  yang  menghasilkan  minyak  atsiri dengan  banyak  potensi  dan  telah  banyak  diteliti misalnya  potensi  antibakteri  (Hosaain.  Dkk., 2014),  efek  antioksidan  Gulcin  (2012)  dan antifungi  (Eman-Abdeen  and  El-Diasty,  2015). Minyak  daun  cengkeh  dapat  diperoleh  dengan metode  destilasi  uap,  mempunyai  komponen utama  eugenol  dengan  kadarnya  sekitar  74,24% dan  β-kariofilen  12,79%  (Amelia,  dkk.,  2017). Kandungan  eugenol  yang  merupakan  metabolit sekunder  golongan  fenilpropanoid  tersebut  yang berpotensi  sebagai  antibakteri  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  yaitu  bekerja dengan  meracuni  sitoplasma,  merusak  dan menembus  dinding  serta  mengendapkan  protein sel bakteri (Devi, dkk., 2010)
Minyak atsiri mempunyai kelemahan  antara lain  mudah  teroksidasi  dan  mudah  menguap (volatil).  Hal  tersebut  dapat  diatasi  dengan menggunakan metode mikroenkapsulasi (Nurliana,  dkk.,  2016;  Risnawati,  dkk.,  2017). Mikroenkapsulasi adalah metode yang umumnya digunakan  untuk  menangani  minyak  dalam bentuk cairan, sehingga perubahan bentuk cairan minyak  menjadi  serbuk  akan  lebih  mudah ditangani  alam  penanganannya  (Soliman,  dkk., 2013).
Penelitian  tentang  aktifitas  antibakteri minyak  atsiri  juga  telah  banyak  dilakukan  d iantaranya  dilaporkan  oleh  Li,  dkk.  (2014) meninjau  aktivitas  antibakteri  minyak Litsea cubeba pada Escherichia coli dengan teknik Toxic Food dan  melaporkan  bahwa  MIC  dan  MBC sebesar  0,125%  dan  melaporkan  pula  bahwa
dengan  pendekatan  kinetic  diperoleh  bahwa konsentrasi  0,0625%  sudah  dapat  memberikan efek  yang  sama  walaupun  dengan  proses  yang lebih  lama.  Cortes-Rojas  (2014)  melaporkan bahwa minyak cengkeh sudah menunjukkan daya hambat  yang  baik  pada  konsentrasi  1%  untuk bakteri-bakteri E.  coli,  Staphylococcus  aureus dan Bacilus  cereus dan  akan  patogen  pada konsentrasi 3%.
Hasil  penelitian  tersebut  menunjukkan hubungan antibakteri dengan aktivitasnya. Namun  demikian  belum  dilaporkan  tinjauan kinetikanya,  guna  melihat  proses  kerja  reaksi penghambatan  oleh  antibakteri  dari  sudut pandang  tahapan  kinetika  kimia.  Pengetahuan akan  orde  reaksi  (n)  tetapan  laju  (k)  serta hubungan  A t -A o -t  sangat  baik  digunakan  untuk memahami  mekanisme  kerja  suatu  antibakteri. Hal ini penting melengkapi pengetahuan tentang aktivitas antibakteri secara keseluruhan termasuk menentukan konsentrasi minimum yang dianjurkan  untuk  digunakan  sebagai  antibakteri dengan menggunakan metode kinetika kimia.
Penelitian sebelumnya tentang kinetika telah dilakukan  penentuan  konsentrasi  minimum efektif minyak daun cengkeh pada penghambatan jamur Candida  albicans yaitu  sebesar  17,6% (Musta  dan  Nurliana,  2019).    Berdasarkan  latar belakang  tersebut  maka  dalam  penelitian  ini ditinjau  metode  kinetika  kimia  untuk  penentuan konsentrasi minimum minyak daun cengkeh yang efektif  untuk  antibakteri E.  coli yang  dilengkapi dengan penentuan orde reaksi (n) tetapan laju (k) serta  hubungan  A t -A o -t  pada  tahap-tahap mekanisme kerja antibakteri tersebut.

## METODOLOGI

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah inkubator, neraca analitik (Acis), autoklaf ( Wisecclave ), waterbath (HWS24), lemari pendingin  (SHARP),  pipet  mikro  (DRAGON ONEMED), laminar  air  flow  cabinet,  shaker incubator (Ratex),  lampu  UV, hot  plate, mistar, spidol, tabung eppendorf, kawat ose, cawan petri ( Pyrex ), gelas ukur ( Pyrex ), gelas kimia ( Pyrex ), erlenmeyer  ( Pyrex ),  corong ( Pyrex ), corong pisa ( Pyrex ),  spatula, vortex ,  pipet  ukur,  oven,  pipet tetes, botol vial, kertas label dan kapas steril.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  minyak  daun  cengkeh  dan  hasil
mikroenkapsulasi  minyak  daun  cengkeh  dari penelitian  sebelumnya  (Nurliana,  dkk.,  2019), Escherichia  coli  ATCC  35219 ,  amoxicillin, pepton  2%,  agar  4%,  NaCI  1%,  minyak  tween, dan akuades.

## Prosedur Kerja

## Sterilisasi alat dan bahan
Seluruh  alat  dicuci  bersih  dan  dikeringkan. Botol vial, tabung reaksi, Erlenmeyer, cawan petri dibungkus  dengan  kertas.  Kemudian  semuanya disterilkan  dengan  autoklaf  pada  suhu  121ᵒC selama 15 menit. Pengerjaan aseptis dilakukan di dalam laminar  air  flow yang  sebelumnya  telah dibersihkan  dengan  larutan  alkohol  70%  lalu disterilkan  dengan  lampu  UV  yang  dinyalakan selama  kurang  lebih  1  jam  sebelum  digunakan dalam proses antibakteri (Nurliana, 2016).

## Peremajaan Mikroorganisme
Bakteri E. coli diremajakan dengan mentransfer  1  atau  2  ose  dari  bakteri,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  berisi 10  mL  media  cair  steril  (2%  pepton,  1,5%  yet ekstrak dan 4% NaCl) dan diinkubasi selama 24 jam (Sultana, 2015).

## Uji Aktivitas
Media  NA  sebanyak  20  mL,  kemudian dimasukkan  dalam  efendorf  50  mL  dan ditambahkan 10 µL inokulum bakteri E. coli dan dihomogenkan.  Setelah  homogen  dituang  dalam cawan  petri  dengan  gerakan  melingkar  sampai media  merapat  pada  permukaan  cawan  petri, kemudian  didiamkan  beberapa  menit  sampai padat.  Kemudian  ditempatkan  kertas  cakram (berdiameter 0,5 cm) yang telah direndam dalam larutan  uji  minyak  daun  cengkeh  (100%,  75%, 50%,  25%  dan  larutan  standar)  pada  permukaan media padat. Setelah itu cawan petri ditutup rapat dan  dibungkus  dengan  plastik  wrap.  Kemudian diinkubasi selama 1 x 24 jam di suhu ruang dan diukur zona hambat yang terbentuk (Kumar, dkk., 2014).  Perlakuan  yang  sama  untuk  uji  aktivitas pada  sampel  mikrokapsul  minyak  daun  cengkeh (Nurliana, dkk., 2019).
Kinetika  Penentuan  Konsentrasi  Minyak Atsiri Cengkeh yang Efektif untuk Antibakteri
E. coli
Dybkov (2013) menyatakan bahwa persamaan laju dapat dinyatakan:
r=k[A] n ……………………………... (1)
Dengan  :  r  =  Laju  reaksi,  k  =  Konstanta  laju reaksi,  [A]  =  Konsentrasi  zat,  n  =  Orde  reaksi. Laju  reaksi  (r)  dapat  dipandang  sebagai bertambahnya  hasil  reaksi  atau  berkurangnya reaktan  setiap  satuan waktu  (Petrucci  1992). Disisi  lain,  reaksi  suatu  antibakteri  terhadap bakteri  uji  tertentu  dapat  lihat  dari  zona hambatnya.  Mawan  dkk.  (2018)  menyatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi maka semakin luas zona hambat yang terbentuk. Senada dengan itu, Uddhav and Sivagurunathan (2016) menyatakan  bahwa  diameter  zona  hambat berbanding  langsung  dengan  kepekatan  isolat. (Saeed,  dkk.,  2013)  melaporkan  bahwa  dapat dibuktikan  diameter  zona  bening  meningkat secara  signifikan  sebagai  akibat  peningkatan konsentrasi  ekstrak.  Hal  ini  mengindikasikan bahwa  zona  bening  yang  terbentuk  merupakan fungsi  konsentrasi.  Oleh  karena  itu,  laju  laju reaksi dapat dipelajari dari laju pembentukan zona beningnya .  Besarnya  laju  pembentukan  zona bening secara rata-rata dapat ditentukan dengan:
r zb = D zb t = k[A] n …………………... (2)
Dengan : r zb = laju pembentukan zona bening, D zb = diameter zona bening, t = masa inkubasi. Waktu (t) dalam penelitian ini sama untuk setiap variasi konsentrasi uji karena merupakan masa inkubasi maka  laju  pembentuan  zona  bening  sebenarnya hanya  semata-mata  ditentukan  oleh  variasi konsentrasi  dan untuk  keperluan  analisis penentuan orde dan konstanta laju menggunakan metode  ini,  variable  waktu  merupakan  variabel konstan, sehingga:
r zb ≈D zb =k[A] n .……………………….. (3)
Dengan demikian akan berlaku:
D zb = k [A] n .
Keterangan : D zb = Diameter zona bening k   = Konstanta laju [A] = Kosentrasi n   = Orde reaksi.
Dengan menghitung nilai ln-nya maka akan diperoleh bentuk persamaan: ln D zb = ln k + n ln [A]    suatu  bentuk persamaan  regresi  linear  yang bentuk umumnya: y = a+bx hal ini berarti bahwa
jika dibuat plot hubungan ln [A] terhadap ln D zb maka akan diperoleh:
a  (intersep)  =  ln  k,  yang  berarti  bahwa  k  =  e a dimana  b  (slope)  =  n  =  orde.  Berdasarkan  orde reaksi (n) dan tetapan laju (k) yang telah diketahui akan  ditentukan  hubungan  A t -A o -t  setelah menyelesaikan persamaan dengan bentuk umum:
− ∂A ∂t = kA n

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Uji Aktifitas Antibakteri
Aktivitas  antibakteri  minyak  daun  cengkeh menggunakan  metode  difusi  cakram  steril. Pengujian menggunakan amoxilin sebagai kontrol positif dan minyak tween sebagai kontrol negatif. Penggunaan  amoxilin  sebagai  kontrol  positif dikarenakan  amoxilin  adalah  antibakteri  yang sangat baik digunakan untuk mengobati berbagai macam infeksi bakteri (Kaur, dkk., 2011). Minyak tween  sebagai  kontrol  negatif  berperan  sebagai emulgator antara minyak daun cengkeh dan media Nutrien Agar (NA). Minyak Tween adalah suatu pengemulsi  agar  air  dan  minyak  menjadi homogen. Tween 80 merupakan ester asam lemak polioksietilen  sorbitan,  dengan  nama  kimia polioksietilen 80 sorbitan monooleat ( C 64 H 124 O 26 ) (Prijatmoko, dkk., 2018).
Hasil analisis uji aktivitas antibakteri minyak daun  cengkeh  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri E.  coli dilihat  pada  Tabel  1. Tabel  1 menunjukkan  bahwa  tiap  variasi  konsentrasi minyak  daun  cengkeh  berbeda-beda  nilai  zona bening yang diperoleh tergantung pada konsentrasi masing-masing. Data tersebut menunjukkan bahwa diameter ditiap-tiap konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan  100%  yaitu secara  berturut-turut  11,2;  11,4;  12,3  dan  15,2 mm.  Berdasarkan  hasil  tersebut  menunjukkan bahwa  semakin  besar  konsentrasi  minyak  daun cengkeh maka makin besar pula nilai zona bening yang  diperoleh. Kumar  (2014)  menjelaskan bahwa kriteria kekuatan daya hambat antibakteri dapat  dibedakan  berdasarkan  parameter  sebagai berikut: diameter zona hambat <7mm dikategorikan tidak ada aktivitas antibakteri, zona hambat 7-12 mm dikategorikan sedang, dan zona hambat >12 mm dikategorikan kuat. Berdasarkan hasil penelitian konsentrasi minyak daun cengkeh tergolong  ke  dalam  zona  hambat  sedang  pada konsentrasi  25%  dan  50% dan  pada  konsentrasi 75%, dan 100% tergolong kategori kuat.
1
Tabel 1. Hasil uji aktivitas antibakteri minyak daun cengkeh Sampel Zone bening (mm) 100% 15,2 ± 0,7 75% 12,3 ± 0,3 50% 11,4 ± 0,2 25% 11,2 ± 0,2 (-) control 0,0 ± 0,0 (+) control 8,7 ± 0,6 Tabel 2. Hasil uji aktivitas antibakteri mikrokapsul minyak daun cengkeh (Nurliana, dkk., 2019) Sampel Zona bening (mm) minyak : maltodekstrin : 1:4 9.9 minyak: maltodekstrin : 1:6 11.3 minyak : maltodekstrin :1:8 12.9 minyak: maltodekstrin :1:10 14.8 minyak : maltodekstrin :1:12 17.5 (-) control 0,0 (+) control 15,2
Adapun  hasil  uji  aktivitas  antibakteri  pada mikrokapsul  minyak  daun  cengkeh  (Tabel  2.) merujuk  pada  Nurliana  (2019).  Terlihat  bahwa pada perbandingan minyak : maltodektrin 1:4 dan 1:6  diperoleh  daya  hambat  dengan  aktifitas sedang. Sementara itu, untuk perbanding 1:8; 1:10 dan 1: 12 termasuk dalam kategori kuat (Nurliana, 2019).  Bahan  yang  dimikrokapsul  merupakan minyak murni atau 100%.
Kandungan  senyawa  metabolit  sekunder pada minyak daun cengkeh seperti eugenol yang termasuk  golongan  fenilpropanoid  dan  β- karyofilen yang termasuk golongan seskuiterpen, diduga  mempunyai  potensi  untuk  memberikan efek  toksik  pada  sel  bakteri.  Sifat  hidrofobik senyawa eugenol membuatnya lebih mudah untuk memasuki bagian lipopolisakarida dari membran sel  bakteri,  terutama  bakteri  gram  negatif  dan mengubah  struktur  dinding  sel,  menyebabkan kebocoran pada bagian intraseluler sel bakteri dan menyebabkan kematian (Devi, dkk., 2010 and Xu, dkk., 2016).
Kinetika  Minyak  daun  cengkeh  (Syzigium Aromaticum)  dan  Hasil  Mikroenkapsulasinya sebagai Antibakteri E. coli
Analisis  kinetika  kimia  minyak  daun cengkeh  sebagai  antibakteri E.  coli ditentukan dengan  menggunakan  persaamaan  regresi  linear yang  diturunkan  dari  persamaan  kinetika  kimia. Analisis  mengunakan  regresi  linear  tersebut menghasilkan  grafik  sebagai  mana  ditunjukkan pada  Gambar  1.  Gambar  1.  memperlihatkan persamaan regresi dengan bentuk y= 0,1913x+1,7523. Persamaan regresi ini memperlihatkan  bahwa  orde  reaksi  (n)  minyak minyak  daun  cengkeh  terhadap  bakteri E.  coli adalah 0,1913 dengan tetapan laju e 1,7523 = 5,7679, yang  juga  berlaku  untuk  masa  inkubasi pengukuran  zona  bening  dalam  penelitian  ini yakni  24  jam.  Orde  reaksi  sebesar  0,1913 memperlihatkan  nilai  orde  yang  berada  diantara nilai  0  dan  1.  Triyono,  dkk.  (1998)  menyatakan bahwa  jika  reaksi  berorde  nol  maka  laju  tidak ditentukan oleh reaktannya, sementara itu Dogra (1990) menyatakan bahwa bila reaksi berorde satu maka  laju  reaksi  berbanding  lurus  dengan konsentrasinya.
Gambar 1. Plot ln [A] vs ln zona bening
Hal  ini  berarti  bahwa  ada  pengaruh konsentrasi  minyak  minyak  daun  cengkeh terhadap zona bening yang terbentuk namun tidak terlalu  besar.  Nilai  k  =  5,7679  menunjukkan pengaruh  tetapan  laju  yang  besar  terhadap  zona bening  yang  terbentuk.  Dogra  and  Dogra  (1990) menyatakan  bahwa  tetapan  laju  merupakan  laju reaksi  bila  konsentrasi  adalah  1.  Hal  ini  dapat diartikan  5.7679  mm  merupakan  zona  bening yang akan terbentuk bila konsentrasi minyak daun cengkeh adalah 1%.
1
Persamaan regresi yang diperoleh
memperlihatkan  nilai  r 2 =  0,6734  yang  berarti bahwa  korelasi  dua  variable  yang  tentukan memiliki hubungan dalam kategori kuat (Sudijono., 2015).
Gambar 2. Plot ln [A] vs ln zona bening
Hasil  perhitungan  yang  diperoleh  dari persamaan  regresi  kemudian  dapat  dituliskan dalam bentuk persamaan:
Zb = 5,7679[C] 0.1913
Hubungan A t -A o -t dapat ditentukan setelah k dan n diketahui sebagai berikut:
− ∂A ∂t = kA n − ∂A A n = k. ∂t − ∫ ∂A A 0,1913 =   ∫ k. ∂t - ∫ 1 A 0,1913 ∂A =   ∫ k. ∂t − ∫ A −0,1913 ∂A =  k. t
−( 1 −0,1913 + 1 A −0,1913+1 ∫ )   = kt A t A 0 −( 1 0,8087 A 0,8087 ∫ )   = kt A t A 0 −( 1 0,8087 A t 0,8087 − 1 0,8087 A 0 0,8087 ) = kt 1 0,8087 A 0 0,8087 − 1 0,8087 A t 0,8087 = kt
1 0,8087 ( A 0 0,8087 − A t 0,8087 ) = kt A 0 0,8087 − A t 0,8087 = 0,8087kt A 0 0,8087 − A t 0,8087 = 0,8087x5,7679t.
A 0 0,8087 − A t 0,8087 = 4,6644t A t 0,8087 = A 0 0,8087 − 4,6644t
Jika  0,8087  ≈  0,8  dan  4,6644  ≈  5  maka  dapat diperoleh hubungan yang lebih sederhana:
A t 0,8 = A 0 0,8 − 5t
A t = (A 0 0,8 − 5t) 1,25
Adapun analisis kinetika kimia minyak daun cengkeh hasil mikroenkapsulasi sebagai antibakteri E.  coli juga ditentukan  dengan menggunakan  persamaan  regresi  linear  yang sama dengan menganggap [A] adalah perbandingan  penyalut  yang  digunakan  dan hasilnya ditunjukkan pada Gambar 2. Gambar 2. memperlihatkan  persamaan  regresi  dengan bentuk  y  =  0,5037x+1,5544  dengan  r 2 =0,9591. Persamaan  regresi  ini  memperlihatkan  bahwa orde  reaksi  (n)  minyak  minyak  daun  cengkeh terhadap  bakteri E.  coli adalah  0,5037  dengan tetapan  laju  e 1,5544 =  4,7323  yang  juga  berlaku untuk  masa  inkubasi  pengukuran  zona  bening dalam penelitian ini yakni 24 jam.
Orde reaksi sebesar 0,5037 memperlihatkan besarnya  pengaruh  konsentrasi  terhadap  zona bening  yang  terbentuk,  yang  dapat  diartikan bahwa  setiap  peningkatan  bahan  penyalut  1 satuan  akan  meningkatkan  zona  bening  sebesar bilangan  pangkat  0,5037.  Triyono,  dkk.  (1998) menyatakan  bahwa  orde  reaksi  dapat  dipandang sebagai  komponen  aktif  secara  kinetika  yang besarnya  dapat  berupa  bilangan  bulangan  tetapi dapat  pula  berupa  pecahan  bahkan  dapat  pula bernilai  negatif.  Adapun  nilai  k  =  4,7323 memperlihatkan  pengaruh  tetapan  laju  terhadap zona  bening  yang  terbentuk.  Dogra  and  Dogra (1990) menyatakan bahwa tetapan laju merupakan  laju  reaksi  bila  konsentrasi  adalah  1. Hal ini dapat diartikan bahwa 4,7323 merupakan zona bening yang akan terbentuk bila konsentrasi perbandingan  penyalut  yang  digunakan  adalah 1:1. Persamaan regresi yang diperoleh memperlihatkan  nilai  r 2 =  0,9591  yang  berarti bahwa  korelasi  dua  variable  yang  tentukan memiliki  hubungan  dalam  kategori  sangat  kuat (Sudijono, 2015).
Hasil  perhitungan  yang  diperoleh  dari persamaan  regresi  kemudian  dapat  dituliskan dalam bentuk persamaan:
Zb = 4,7323[C] 0,5037
Hubungan A t -A o -t dapat ditentukan setelah k dan n diketahui sebagai berikut:
− ∂A ∂t = kA n − ∂A A n = k. ∂t
− ∫ ∂A A 0,5037 =   ∫ k. ∂t - ∫ 1 A 0,5037 ∂A =   ∫ k. ∂t
− ∫ A −0,5037 ∂A =  k. t
−( 1 −0,5037 + 1 A −0,5037+1 ∫ )   = kt A t
A 0 ( 1 0,4963 A 0,4963 ∫ )   = kt A t A 0 ( 1 0,4963𝐴 𝑡 0,4963 − 1 0,4963𝐴 𝑜 0,4963 ) = kt 1 0,4963 ( 1 𝐴 𝑡 0,4963 − 1 𝐴 𝑜 0,4963 ) = kt ( 1 𝐴 𝑡 0,0,4963 − 1 𝐴 𝑜 0,0,4963 = 0,4963kt ( 1 𝐴 𝑡 0,4963 − 1 𝐴 𝑜 0,4963 = 0,4963x4,7323t ( 1 𝐴 𝑡 0,4963 − 1 𝐴 𝑜 0,4963 ) = 2,3486t
Jika 0,4963 ≈ 0,5 dan 2,3486 ≈ 2,35 maka dapat diperoleh hubungan yang lebih sederhana:
( 1 𝐴 𝑡 0,5 − 1 𝐴 𝑜 0,5 ) = 2,35t
Hasil  analisis  dalam  penentuan  orde  reaksi dan tetapan laju untuk minyak daun cengkeh cair dan  hasil  mikroenkapsulasinya  terhadap  zona bening  yang  terbentuk  menunjukkan  perbedaan berturut-turut  n  =  0,1913;  k  =  5,7679  dan  n  = 0,5037; k =4,7323. Hasil ini memperlihatkan nilai yang berbeda dimana pada minyak daun cengkeh hasil  mikroenkapsulasi  reaksinya  berorde  (n)  = 0,5037  memiliki  orde  yang  lebih  besar dibanidngkan  dengan  minyak  daun  cengkeh dengan  orde  reaksi  yang  hanya  sebesar  (n)  = 0,1913. Namun demikian untuk minyak cengkeh tetapan  laju  reaksi  (k)  =  5,7679  lebih  besar  dari minyak  daun  cengkeh  hasil  mikroenkapsulasi dengan tetapan lajunya k = 4,7323. Perbedaan ini dapat  dijelaskan  dengan  melihat  bahwa  tetapan laju  (k)  dipengaruhi  oleh  temperatur  dan  energi aktivasi  (Triyono,  dkk.,  1998).  Bila  dua  reaksi dilakukan  pada  temperatur  yang  sama  maka perbedaan nilai k ditentukan oleh energi aktivasi. Menurut Sukardjo (2013) agar terjadi reaksi maka molekul-molekul  harus  saling  bertumbukan  dan mempunyai  tenaga  hingga  molekul-molekul menjadi  aktif.  Keenan,  dkk.  (1996)  menyatakan selama  reaksi  terjadi,  molekul-molekul  harus bertabrakan. Hal ini dapat menjelaskan perbedaan nilai k pada dua antibakteri yang digunakan yakni minyak daun engkeh dan hasil
mikroenkapsulasinya.
Pada minyak daun cengkeh k = 5,7679, lebih rendah dibandingkan dengan hasil mikroenkapsulasi  yakni  k  =  4,7323;  yang menunjukkan bahwa pada minyak daun cengkeh murni  dimana  hanya  terjadi  interaksi  partikel minyak daun  cengkeh dan bakteri E.  coli terjadi interaksinya lebih lebih cepat, sementara itu pada hasil  mikroenkapsulasi  terjadi  interaksi  selain partikel minyak daun cengkeh dengan bakteri E. coli juga  ada  partikel  maltodekstrin  sebagai penyalut  yang  juga  berinteraksi  dengan  minyak daun  cengkeh  maupun  bakteri E.  coli ,  hal  ini menyebabkan interaksi menjadi lebih lambat.
Adapun  orde  reaksi  menunjukkan  bahwa untuk  antibakteri  menggunakan  minyak  daun cengkeh dengan (n) = 0,1913 lebih kecil dari pada hasil  mikroenkapsulasi  dengan  (n)  =0,5039. Keenan,  dkk.  (1996)  menyatakan  bahwa  orde reaksi  adalah  harga  eksponen  reaktan.  Dengan demikian kedua nilai orde yang diperoleh tersebut menunjukkan  nilai  pangkat  dari  minyak  daun cengkeh  dan  hasil  mikroenkapsulasi  dalam mempengaruhi  zona  bening  yang  terbentuk. Perbedaan orde dapat dijelaskan dengan memperhatikan  bahwa  minyak  daun  cengkeh akan langsung berinteraksi dengan bakteri E. coli sehingga  penambahan  minyak  tidak  akan memberikan  efek  besar  terhadap  interaksi  yang sudah terjadi untuk pembentukan zona bening.
Sementara  itu  adanya  penyalut  pada  hasil mikroenkapsulasi, menyebabkan interaksi minyak  daun  cengkeh  terhadap  pembentukan zona bening yang sebenarnya dibutuhkan menjadi kecil dan karenanya penambahan sedikit partikel minyak  akan  sangat  mempengaruhi  interaksi dengan  bakteri E.  coli .  Namun  demikian  secara keseluruhan, zona bening yang terbentuk sebagai akibat  pengaruh  simultan  tetapan  laju  (k)  dan konsentrasi  [A]  kedua  perlakuan  memberikan zona bening yang diameternya berkisar antara 9- 18 mm.
Konsentrasi minimum minyak cengkeh yang efektif sebagai anti bakteri E. coli dapat dihitung: 8,7 = 5,7679 [A] 0,1913
[A] 0,1913 = 8,7/5,7679
[A] = (1,5083) (1/0,1913)
[A] min = 8,57
Adapun  perbandingan  penyalut  minimum yang  efektif  sebagai  anti  bakteri E.  coli dapat dihitung:
8,7 = 4,7323 [A] 0,5039
[A] 0,5039 = 8,7/4,7323
[A] = (1, 8384) (1/0,5039)
[A] min = 3,3481
Dengan  demikian  maka  dapat  diketahui bahwa  agar  diperoleh  daya  hambat  yang  sama dengan  kontrol  positif  maka  harus  digunakan konsentrasi sebesar 8,57% untuk minyak cengkeh atau  digunakan  penyalut  dengan  komposisi 1:3481 untuk minyak cengkeh yang dimikroenkapsulasi.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil peneitian dapat disimpulkan bahwa orde reaksi (n) minyak daun cengkeh  sebagai  antibakteri E.  coli adalah  n  = 0,1913; dengan tetapan laju k = 5,7679. Adapun orde  reaksi  (n)  hasil  mikroenkapsulasi  sebagai antibakteri E. coli adalah 0,5039; dengan tetapan laju  k  =4,7323.  Hubungan  A t -A o -t  untuk  reaksi minyak daun cengkeh sebagai antibakteri E. coli adalah A t = (A 0 0,8 − 5t) 1,25 . Adapun  untuk reaksi minyak daun cengkeh hasil mikroenkapsulasi  adalah ( 1 𝐴 𝑡 0,5 − 1 𝐴 𝑜 0,5 ) = 2,35t .
Konsentrasi  minyak  cengkeh  sebesar  8,57% dan perbandingan minyak cengkeh terhadap maltodektrin sebesar 1:3481 merupakan konsentrasi  minyak  cengkeh  minimum  dan perbandingan  penyalut  minimum  agar  diperoleh daya hambat yang sama dengan kontrol positif.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada pihak  LPPM  UHO  yang  telah  memberikan bantuan dana pada skim Penelitian Dosen Pemula Internal UHO.

## DAFTAR PUSTAKA
Mawan  A.  R.,  Indriwati  S.E,  Suhadi,  2018,
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol Buah Syzygium
polyanthum terhadap Pertumbuhan  Bakteri Escherchia  coli , Bioeksperimen , 4(1), 64-68.
Amelia,  B.,  Saepudin,  E.,  Cahyana,  A.H., Rahayu, D.U., Sulistyoningrum, A.S., Haib, J.,  2017,  GC-MS  Analysis  of  Clove ( Syzygium  aromaticum )  Bud  Essential  Oil from  Java  and  Manado, ISCPMS, 1862,
030082-1-030082-9.
Cortes-Rojas,  D.F.,  Fernandes,  C.R.  deS.,
Oliveira,  W.P.,  2014,  Clove  ( Syzygium
aromaticum ): A Preciuos Spice , Asian Pac.
J. Trop. Biomed, 4(2), 90-96. Devi,  K.P.,  Nisha,  S.A.,  Sakhtivel,  R.,  Pandian S.K.,  2010,  Eugenol  (An  Essential  Oil  of Clove)  Acts  as  An  Antibacterial  Agent
Against  Salmonella  Typhi By  Distrupting The Cellular Membrane, J. Ethnopharmacol, 130, 107-15.
Dogra,  S.K.,  Dogra,  S.,  1990, Kimia  Fisik  dan Soal-soal , UI Press, Jakarta
Dybkov,  V.I.,  2013, Chemical  Kinetics ,  IPMS
Publications, Kyiv, Ukraine
Eman-Abdeen,  E.,  and  El-Diasty,  E.M.,  2015, Antifungal  Activity  of  Clove  Oil  on Dermatophytes and Other Fungi, Int. J. Adv.
Res, 12, 1299-1305.
Gulcin,  I.,  Elmastas,  M.,  Alboun-Enein,  H.Y.,
2012, Antioxidant Activity of Clove Oil–A Powerful  Antioxidant  Source, Arabian  J. Chemistry , 5, 489-499.
Hossain, M.A., Al-Harbi, S.R., Weli, A.M., Al- Riyami, Q., Al-Sabahi, J.N., 2014,
Comparison  of  Chemical  Constituents  and Antimicrobial Activities of Three Essential Oils  from  Three  Different  Brands  Clove Samples Collected from Gulf Region, Asian Pac J Trop Dis, 4(4), 262-268.
Kaur,  S.P.,  Rao,  R.,  Nanda,  S.,  2011, Amoxicillin: A Broad-Spectrum Antibiotic.
Int. J. Pharm. Sci ., 3(3), 30-37
Keenan,  C.W.,  Kleinfelter,  D.C.,  Wood,  J.H., 1996, Kimia untuk Universitas , ed. ke-6 jilid 1 alih bahasa Pudjaatmaka, A.H., Erlangga, Jakarta
Kumar, Y., Agarwal, S., Srivastava, A., Kumar,
S.,  Agarwal,  G.,  Khan,  M.Z.A.,  2014, Antibacterial  Activity  of  Clove  ( Syzygium aromaticum ) and garlic ( Allium sativum ) on Different  Pathogenic  Bacteria ,  Int.  J.  Pure App Biosci ., 2(3), 305-311.
Li, W-R., Shi, Q-S., Liang, Q., Xie, X-B., Huang,
X-M.,  Chen,  Y-B.,  2014,  Antibacterial Activity  and  Kinetics  of Litsea  cubeba Oil on Escherichia coli, Plos One , 9(11), 1-6 Musta, R., dan Nurliana, L., 2019, Studi Kinetika
Efektifitas Minyak Daun Cengkeh ( Syzygium  aromaticum )  sebagai  Antijamur Candida albicans, Indo. J. Chem. Res., 6(2), 107-111.
Nurliana, L., Kurniawati, D., Kadir, L.A., Dewi, F.,  Musta,  R.,  Nurjannah,  2019,  The Effectiveness  of  Maltodextrin  as  An Adhesive  in  Microencapsulation  of  Clove Leaf  Oil  ( Syzygium  aromaticum )  For
1
Antibacterial  Applications, Submit  IOP Proceeding. 2 nd ITAPS.
Nurliana,  L.,  Musta,  R.,  Rudi,  L.,  2016, Microencapsulation  of  Essential  Oil  from Rogo  Plant  ( Premna  serratifolia L.)  as antibactery Escherichia  coli,  Inter.J.  Eng.
Sci. & Res. Tech , 7(8), 314-323. Petrucci,  R.H.,  1992, Kimia  Dasar  Prinsip  dan Terapan Modern . Alih bahasa: Suminar A. Edisi Ke-Empat, Jilid 2, Erlangga, Jakarta
Prijatmoko, D., Syafira, N.L., Lestari P.E., 2018, Antibacterial  Activity  of  Essential  Oil Extracts  from Curcuma  xanthorrhiza  roxb . Rhizomes  Against  Bacteria  Causing  Pulp Necrosis, J.  Dentomaxilloficial  Sci. 3(3), 144-148.
Risnawati,  Nurliana  L.,  Kurniawati  D.,  2017, Mikroenkapsulasi  Minyak  Atsiri  dari Tanaman Nilam ( Pogostemon cablin Benth) sebagai  antijamur Candida  albicans,  Indo.
J. Chem. Res. 4(2), 386-393.
Saeed M, Nadeem M, Khan M.R, Shabbir M.A,
Shehzad A, Amir R.M., 2013, Antimicrobial Actifity of Syzygium aromaticum Extracts Against Food Spoilage Bacterial. African J. Microbiology
Research, 7(41), 4848-4856.
Soliman EA, El-Moghazy AY, El-din MSM and Massoud MA., 2013, Microencapsulation of Essential Oils Within Alginate: Formulation and  In  Vitro  Evaluation  of  Antifungal Activity, J.  Encapsulation  and  Adsorption Sciences, 3(1), 48-55. Sudijono, A., 2015, Pengantar Statistik
Pendidikan , Rajagrafindo Persada. Jakarta.
Sukardjo,  2013, Kimia  Fisik ,  Rineka  Cipta.
Jakarta.
Sultana  S,  Shahidullah  A.S.M,  Islam  M.dM.,
Wasey A.F.S.A. Nahar S., 2015,
Antibacterial  effect  of  Aqueous  Neem ( Azadirachta  indica) leaf  extract,  crude neem  leaf  paste,  and  Ceftriaxone  against Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli and Pseudomonas  aeruginosa,  Malays.  J. Med.Bio.Res, 2(2), 89-100. Triyono, Bambang S., Iqmal T., 1998, Buku Ajar Kinetika  Kimia .  Jurusan  Kimia  FMIPA
UGM. Yogyakarta
Uddhav,  Sivagurunathan,  2016,  Antibiotic
Susceptibility  Testing:  A  Review  on Current  Practices, Int.  J.  Pharm .  6(3),  11- 17.
Xu  J-G,  Liu  T,  Hu  Q-P.,  Cao  X-M,  2016,
Chemical Composition, Antibacterial Properties  and  Mechanism  of  Action  of Essential Oil Clove Bud against Staphylococcus aureus, Molecules 21:1194