Investigasi Jenis Mikrofungi Epifit pada Udang dan Rajungan dari Kawasan Budidaya Kota Tanjungpinang
Rika Wulandari 1
1 Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji
INFO NASKAH
ABSTRAK Kata Kunci:
Kesehatan Ikan, Furunculosis, Musa balbisiana. Penyakit  pada  ikan  laut  budidaya  merupakan  masalah  yang  dapat  menurunkan hasil  produksi  budidaya.  Penanganan  penyakit  infeksi  pada  ikan  ini  hanya terbatas  pada  pengaplikasian  antibiotik  sintetik  yang  rentan  akan  resiko  seperti resistensi dan  residu. Pemanfaatan bahan lokal sebagai sumber senyawa herbal aktif subtitusi obat sintetik merupakan hal yang menarik untuk dikaji. Salah satu jenis tanaman dengan kapasitas limbah yang tinggi di Tanjungpinang adalah kulit Pisang  Kepok  ( Musa  balbisiana ).  Pemanfaatan  bahan  limbah  tersebut  perlu dilakukan untuk menjaga daya dukung lingkungan. Penelitian ini bertujuan untuk menskrining potensi bahan baku lokal sebagai bahan herbal subtitusi antibiotik sintetik.  Penelitian  ini  meliputi  skrining  senyawa  herbal  aktif  dengan  metode ekstraksi  menggunakan  pelarut  etanol,  karakterisasi  fitokimia  simplisia,  serta pengujian aktivitas antibakteri ekstrak terhadap bakteri Aeromonas salmonicida dengan  metode  difusi  agar.  Konsentrasi  ekstrak  dimulai  dengan  10.000  ppm,
30.000 ppm dan 50.000 ppm. Untuk melihat pengaruh  ekstrak terhadap bakteri uji,  data  zona  hambat  diukur  secara  kuantitatif  dan  dianalisis  menggunakan metode One Way ANOVA kemudian diuji lanjut menggunakan Uji Tukey. Hasil penelitian mendapatkan ekstrak kental dari setiap 500 gr sampel sebanyak 11.29 gr dengan persen rendemen sebanyak 2,26% yang positif mengandung senyawa Steroid  dan  Triterpenoid.  Zona  hambat  rata-rata  ekstrak  kulit  pisang  kepok kuning terhadap bakteri uji Aeromonas salmonicida pada konsentrasi 10.000 ppm sebesar  12,33  mm,  30.000  ppm  sebesar  39,33  mm  dan  50.000  ppm  sebesar  11 mm. Penelitian menyimpulkan ekstrak  etanol kulit pisang kepok kuning  ( Musa balbisiana )  berpotensi  sebagai  bahan  herbal  aktif  yang  menghambat perkembangan bakteri Aeromonas salmonicida penyebab furunculosis pada ikan.
Gedung FIKP Lt. II Jl. Politeknik Senggarang, 29115, Tanjungpinang, Telp : (0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: rika.wulandaridwan@umrah.ac.id
The  Epiphyte  Microfungal  Investigation  on  Shrimp  and  Sea  Crab  From Tanjungpinang’s Mariculture Area
Rika Wulandari 1
1 Aquaculture Department, Faculty of Marine Science and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University
ARTICLE INFO
ABSTRACK Keywords:
Fish Health, Furunculosis, Musa balbisiana The diseases in aquaculture is a problem that reduce aquaculture production. The  handling  of  infectious  disease  on  fish  using  synthetic  antibiotics  are susceptible  for resistance and residues. using local ingredients as a source  of active herbal compounds for synthetic drug’s substitution is an interesting thing to study. The plant with high waste in Tanjungpinang is Musa balbisiana ’s peel. The  use  of  waste  material  needs  to  maintain  the  carrying  capacity  of environment. This study aims to screen the potential of local raw materials as herbal ingredients for synthetic antibiotic substitution. This study included the screening of active herbal compounds with the extraction method using ethanol, characterization  of  phytochemical,  and  testing  of  antibacterial  activity  of extract  against Aeromonas  salmonicida using  agar  diffusion  method.  The concentration of extract starts with 10.000 ppm, 30.000 ppm and 50.000 ppm. To  see  the  extract  effect  on  the  test,  the  inhibition  zone  was  measured quantitatively and being analyzed using One Way ANOVA and Tukey Test. The results of this study are the extracts from every 500 g of sample is 11.29 g with a  yield percentage is 2.26% and positively  contains Steroid and  Triterpenoid compounds. The average inhibition zone of extract against A salmonicida at the concentration of 10,000 ppm is 12.33 mm, 30,000 ppm is 39.33 mm and 50,000 ppm  is  11  mm.  The  conclusion  of  this  study  is  the  ethanol  extract  of M balbisiana ’s peel has the potential as an active herbal ingredient that inhibits A salmonicida bacteria, the causal of furunculosis on fish.
Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp: (0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: rika.wulandaridwan@umrah.ac.id

## PENDAHULUAN
Sebagai negara maritim, Indonesia memiliki cita-cita mengoptimalkan potensi laut  yang  dimiliki,  salah  satunya  adalah  potensi  perikanan  budidaya  laut. Pembangunan  budidaya  ikan  laut  merupakan  prospek  pembangunan  ekonomi  yang penting di Indonesia karena didasari oleh fakta bahwa kondisi sumberdaya perikanan khususnya  perikanan  tangkap  mengalami  kondisi over  fishing .  Untuk  memperkuat kapasitas dan meningkatkan produksi budidaya laut, pemerintah melakukan program revitalisasi budidaya melalui kegiatan pengembangan kawasan minapolitan.
Ikan laut dan udang sangat populer sebagai makanan laut baik dalam skala lokal maupun internasional. Hasil produksi perikanan ini secara bertahap meningkat seiring dengan  meningkatnya  permintaan.  Namun,  industri  ini  sering  menghadapi  masalah serius akibat penyakit infeksi menular.
Hal  tersebut  menjadi  hambatan  utama  yang  dihadapi  para  pembudidaya  laut. Selain  itu  kematian  ikan  yang  diakibatkan  oleh  infeksi  mikroorganisme  patogen, secara global juga mempengaruhi keberlanjutan kegiatan budidaya. Penyakit infeksi tersebut  salah satunya  adalah  penyakit  mikotik  yang diakibatkan oleh jenis  parasit mikrofungi.  Kajian mengenai  virulensi mikrofungi tentunya dipengaruhi  oleh  peran host dalam lingkungan. Penelitian ini akan mengkaji beberapa jenis mikrofungi yang hidup  menempel  pada  ikan  laut  sehat  populer Indonesia,  yakni  udang dan  rajungan dengan asumsi mikrofungi epifit memanfaatkan anggota dari filum krustasea sebagai inang  sejati.  Identifikasi  mikrofungi  yang  akurat  diperlukan  dalam  penelitian  yang dirancang untuk meningkatkan tingkat produksi.

## BAHAN DAN METODE
Bahan  yang digunakan dalam penelitian ini berupa ikan laut jenis Penaeus sp., Portunus sp., alkohol 70%, akuades steril, dan Potato Dextrose Agar (PDA). Penelitian ini dilakukan pada bulan Mei hingga Juni 2018 di Laboratorium Biologi, Fakultas  Ilmu Kelautan  dan  Perikanan,  Universitas  Maritim  Raja  Ali Haji. Sampel terdiri dari tiga jenis biota laut yakni Udang ( Penaeus sp), Rajungan ( Portunus sp.), dan Ikan kerapu. Udang diambil dari perairan kelurahan Dompak, Rajungan  dan  Ikan  Kerapu  diambil dari  kawasan  budidaya  kelurahan  Madong, kota Tanjungpinang.
Kegiatan isolasi didahului oleh kegiatan observasi sampel. Ketiga jenis sampel diobservasi  kondisi  morfologi  dan  tingkah  lakunya  untuk  memastikan  kondisi  ikan sehat saat diteliti. Kegiatan observasi dilakukan selama 24 jam.
Setelah kegiatan pendahuluan tersebut, ketiga jenis ikan diambil lapisan kulitnya secara  aseptis.  Rangkaian  kegiatan  penelitian  dilakukan  di  dalam laminar  air  flow . Sampel  berupa  kulit  dipotong  dengan  ukuran  1  cm  x  1  cm.  Potongan  dari  masing- masing sampel tersebut ditempatkan secara terpisah pada wadah kemudian disterilisasi dengan alkohol 70% selama 1 menit. Potongan bagian sampel kemudian dibilas dengan akuades steril. Kegiatan tersebut diulang sebanyak  3  kali  kemudian  sampel  ditiriskan hingga  kering.  Isolasi  jamur  epifit dilakukan  dengan  teknik direct  planting ,  yaitu dengan meletakkan bagian sampel yang sudah kering di atas permukaan medium agar PDA  (Potato  Dextrose  Agar).  Seluruh  medium  yang  telah  diinokulasi  kemudian
Intek Akuakultur. Volume 2. Nomor 1. Tahun 2018. E-ISSN 2579-6291. Halaman 46-53
diinkubasi pada suhu ruang (27-28 o C). Morfologi koloni yang penampilan, warna dan ukurannya  sama  dianggap  isolat  yang  sama,  dan  setiap  koloni  representatif dipisahkan  menjadi  isolat-isolat tersendiri.
Pemurnian  isolat  dilakukan  dengan  cara  isolasi  spora  tunggal  dengan  cara menumbuhkan  jamur  pada  medium  PDA.  Dengan  bantuan  mikroskop,  hifa  tunggal dari jamur ditransfer ke medium tumbuh PDA.
Identifikasi  mikrofungi  dilakukan  secara  manual  mengacu  pada  Buku identifikasi  dari  Domsch et  al .  (1980)  dan  Nakagiri et  al .  (2005)  untuk mengidentifikasi  mikrofungi  epifit  secara  morfologi  meliputi  pengamatan makroskopis dan mikroskopis.

## HASIL
Penelitian ini berhasil mendapatkan dua  jenis mikrofungi  yang hidup dominan menempel pada lapisan epidermis biota laut jenis Penaeus sp., dan Portunus sp., yakni Fusarium sp. dan Candida sp. Kedua jenis mikrofungi tersebut diisolasi dari lapisan kulit  biota  sehat  dengan  memperhatikan  kondisi  fisik  dan  tingkah  laku  sebagai pendahuluan,  untuk  memperkuat  asumsi  bahwa  terdapat  korelasi  antara  jenis host , kondisi biota, dan patogenitas jamur.

## PEMBAHASAN
Fusarium sp . Fusarium sp.  adalah  jamur berfilamen  yang  dapat  ditemukan  baik pada tanah, tanaman, udara, air tawar bahkan air laut (Roilides et al. 2007, Palmero et al . 2009). Secara  historis,  spesies  Fusarium  telah  dilaporkan  sebagai  agen  etiologi  yang bertanggung  jawab  pada  sebagian  besar  kejadian  fusariosis,  terutama  pada  hewan akuatik jenis krustasea dan tumbuhan air.
Gambar 1. Fusarium sp diisolasi dari Pennaeus sp., perairan pulau Dompak, Kepulauan Riau
Selain itu, infeksi Fusarium juga telah diidentifikasi pada sejumlah besar spesies laut,  meskipun  beberapa  famili  lebih  sering  terinfeksi.  Fusariosis  pada  famili Pomacanthidae  ( angelfish ),  kelompok  ikan French  angelﬁsh ( Pomacanthus  paru ), gray  angelﬁsh ( Pomacanthus  arcuatus ), blue  angelﬁsh ( Holocanthus  bermudensis ), dan queen angelﬁsh ( Holacanthus ciliaris ) telah terdata rentan akan infeksi. Spesies
Intek Akuakultur. Volume 2. Nomor 1. Tahun 2018. E-ISSN 2579-6291. Halaman 46-53
yang  rentan  juga  meliputi  kelompok  Scaridae  (ikan  parrot)  termasuk  jenis Scarus coelestinus dan Scarus  guacamaia .  Jenis  ikan  yang  rentan  juga  termasuk  kelompok Sphyrnidae  (hiu  martil)  seperti  hiu bonnethead ( Sphyrna  tiburo )  dan  hiu  martil berkerut ( Sphyrna lewini ) (Yanong, 2003). Genus Fusarium ini  umumnya  memiliki  tubuh  buah  atau  bantalan  stromatik (sporodochium)  dengan  konidia  hymenium  pada  permukaannya.  Konidia  soliter, agregat, sederhana maupun bercabang, dan mengandung sel konidiogenik apikal. Sel- sel koniogen (fialida) pendek, silindris seperti penusuk, membentuk satu atau dua tipe konidia.    Makrokonidia  melengkung  berbentuk  kano,  dengan  terkadang  menonjol seperti  kaki  tambahan  pada  sel  basal,  dengan  satu  atau  lebih  septa  melintang. Mikrokonidia berbentuk bulat telur seperti silinder, memproduksi lender, serta sel-sel konidiogen berbentuk bulat.
Genus Fusarium merupakan  penghasil  mikotoksin  dan  merupakan  patogen oportunistik pada inang vertebrata dan avertebrata yang mengalami kondisi penurunan sistem imun oleh stres atau penyakit konkuren (Noga, 2010). Laporan infeksi fusarium termasuk mikosis akan menjadi epidemi pada organisme yang mengalami penurunan sistem imun (Dignani & Anaissie 2004), keratitis (Dignani &  Anaissie  2004,  Chang et  al .  2006,  O'Donnell et al .  2008),  dermatitis  pada penyu laut dan mamalia laut (Perpinan et al . 2010), kematian embrio pada penyu laut (Sarmiento - Ramirez et al . 2010), dan penyakit insang hitam pada kultur udang Penaeus  japonicus dan Penaeus monodon (Khoa  et  al.  2004).  Fusarium juga dapat menyebabkan penyakit yang lebih invasif atau sistemik, dan sering dikaitkan dengan perubahan faktor lingkungan seperti suhu  dan  salinitas.  Infeksi fusarial  pada ikan laut  akan mengakibatkan  mikosis  pada jaringan,  lesi  pada  mata  dan  kulit,  ulserasi  yang  mematikan  dan  dermatitis nekrohemoragik (Yanong 2003, Noga 2010).

## Candida sp.
Candida sp.  merupakan  jamur  dimorfik  karena  kemampuannya  untuk  tumbuh dalam dua bentuk yang berbeda yaitu sebagai sel tunas yang akan berkembang menjadi blastospora  dan  menghasilkan  kecambah  yang  akan  membentuk  hifa  semu.  Jamur Candida memperbanyak  diri  dengan  membentu tunas yang akan terus memanjang membentuk hifa semu. Jamur ini merupakan organisme anaerob fakultatif yang mampu melakukan  metabolisme  sel,  baik  dalam  suasana  anaerob  maupun  aerob.  Menurut Chamilos et al . (2007), proses peragian (fermentasi) pada jamur ini dilakukan dalam suasana  aerob  dan  anaerob.  Karbohidrat  yang  tersedia  dalam  larutan  dapat dimanfaatkan  untuk  melakukan  metabolisme  sel  dengan  cara mengubah  karbohidrat menjadi CO 2 dan H 2 O dalam suasana aerob, sedangkan dalam suasana anaerob hasil fermentasi  berupa  asam laktat atau etanol dan CO 2 . Proses akhir fermentasi anaerob menghasilkan  persediaan  bahan  bakar  yang  diperlukan  untuk  proses  oksidasi  dan pernapasan.
Candida sp  juga  merupakan  patogen  oportunistik  yang  umumnya  ditemukan menginfeksi organisme terrestrial maupun akuatik. Jamur ini bisa berubah invasif dan menyebabkan infeksi yang mengancam makhluk hidup ( immunocompromised ) (Odds,
Intek Akuakultur. Volume 2. Nomor 1. Tahun 2018. E-ISSN 2579-6291. Halaman 46-53
1988).  Menurut  Berman  &  Sudbery  (2002),  jamur Candida resisten  terhadap  obat- obatan,  dan  kini  menjadi  perhatian  serius  dalam  ilmu  pengobatan.  Diperlukan pemahaman  yang  komprehensif  mengenai  patogenesis  jamur  ini  serta  penularannya. Hingga  saat  ini,  organisme  model  seperti  kelompok  avertebrata  jenis  rajungan  telah diketahui menjadi host jenis jamur ini dan kini organisme tersebut  digunakan untuk dipelajari mekanisme infeksinya (Cotter et al ., 2000, Alarco et al ., 2004, Pukkila et al ., 2009).  Rajungan  sebagai minihosts sederhana,  memiliki  beberapa  kelebihan,  seperti kekebalan bawaan dan lebih ekonomis (Mylonakis et al ., 2007). Sejumlah penelitian diketahui  telah  menggunakan minihosts ini  untuk  menguraikan  mekanisme virulensi infeksi jamur Candida (Chamilos et al . 2007., Mylonakis et al ., 2007). Sebagai contoh, organisme  tersebut  digunakan  untuk  mengkaji  virulensi  atau  transisi  antara  ragi terhadap  bentuk  hifa  jamur Candida , penelitian  skala  besar gen yang terlibat dalam patogenesis infeksi jamur Candida , dan skrining in-vivo aktivitas antijamur (Breger et al .,  2007,  Chamilos et  al .  2009).  Namun, minihosts ini  juga  diketahui  memiliki kelemahan yakni kurangnya sistem kekebalan adaptif.
Gambar 1. Candida sp diisolasi dari Portunus sp., perairan Madong, Kepulauan Riau Selain rajungan sebagai minihost jamur Candida , kandidiasis telah dilaporkan menginfeksi  beberapa  spesies  ikan  laut  seperti  ikan  sturgeon  di  Teluk  Meksiko ( Acipenser  oxyrhynchus  desotoi ),  salmon  amago,  dan  ikan  belanak  (Noga  1996, Francis et al ., 1999). Adapun faktor  yang menyebabkan infeksi pada jenis ikan laut diantaranya  perubahan  dalam  komposisi  diet  atau ketidakseimbangan nutrisi, pakan yang  terkontaminasi,  kebiasaan bergerombol ikan, dan suhu air.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian memperoleh dua jenis mikrofungi yang hidup menempel pada filum krustasea jenis Penaeus sp yaitu Fusarium sp., dan Portunus sp, yaitu Candida sp.  Kedua  jenis  jamur  tersebut  merupakan  patogen  oportunistik  yang  secara  fatal berujung pada kondisi immunocompromised pada organisme terinfeksi. Kedua jenis
Intek Akuakultur. Volume 2. Nomor 1. Tahun 2018. E-ISSN 2579-6291. Halaman 46-53
jamur  tersebut  juga  diketahui  sering  memanfaatkan  kelompok  avertebrata  sebagai minihost dalam siklus hidupnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Alarco,  A.  M.,  A.  Marcil,  J.  Chen,  B.  Suter,  D.  Thomas,  and  M.  Whiteway.  2004. Immune-deficient Drosophila  melanogaster :  a  model  for  the  innate  immune response to human fungal pathogens. J. Immunol. 172:5622-5628.
Berman, J., and P. E. Sudbery. 2002. Candida albicans : a  molecular revolution built on lessons from budding yeast. Nat. Rev. Genet. 3:918-930.
Breger,  J.,  B.  B.  Fuchs,  G.  Aperis,  T.  I.  Moy,  F.  M.  Ausubel,  E.  Mylonakis.  2007. Antifungal  chemical  compounds  identified  using  a C.  elegans pathogenicity assay. PLoS Pathog. 3:e18
Chamilos,  G.,  C.  J.  Nobile,  V.  M.  Bruno,  R.  E.  Lewis,  A.  P.  Mitchell,  and  D.  P. Kontoyiannis. 2009. Candida albicans Cas5, a regulator of cell wall integrity, is required  for  virulence  in  murine  and  toll  mutant  fly  models.  J.  Infect.  Dis. 200:152-157.
Chamilos,  G.,  M.  S.  Lionakis,  R.  E.  Lewis,  and  D.  P.  Kontoyiannis.  2007.  Role  of mini-host models in the study of medically important fungi. Lancet Infect. Dis. 7:42-55.
Chang  DC,  Grant  GB,  O’Donnell  K,  Wannemuehler  KA,  Noble-Wang,  Rao  CY, Jacobson  LM,  Crowell  CS,  Sneed  RS,  Lewis  FMT,  Schaffzin  JK,  Kainer MA,  Genese  CA,  Alfonso  EC,  Jones  DB,  Srinivasan  A,  Fridkin  SK,  Park BJ. 2006. Multistate outbreak of Fusarium keratitis associated with use of a contact lens solution. J Am Med Assoc 296:953–963.
Cotter, G., S. Doyle, and K. Kavanagh. 2000. Development of an insect model for the in vivo pathogenicity testing of yeasts. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 27:163- 169.
Dignani  MC,  Anaissie  EJ.  2004.  Human  fusariosis.  Clin  Microbiol  Infect  10:67–75 Francis-Floyd  R,  Klinger  RE,  Reed P,  et  al.  Mycotic  enteritis in  gulf sturgeon (Acipenser  oxyrhynchus  desotoi)  fry.  In:  Arkush  KD,  editor.  International Association  for  Aquatic  Animal  Medicine  proceedings.  Volume  30.  Boston; 1999. p. 109–110
Domsch KH, Gams W, Anderson T. 1980. Compedium of soil fungi Vol l. Academic Press, London
Khoa, L.V.; Hatai, K.; Aoki, T. (2004). Fusarium incarnatum isolated from black tiger shrimp, Penaeus  monodon Fabricius,  with  black  gill  disease  cultured  in Vietnam. J. Fish. Disease. 27, 507-515.
Mylonakis, E., A. Casadevall, and F. M. Ausubel. 2007. Exploiting amoeboid and non- vertebrate  animal  model  systems  to  study  the  virulence  of  human  pathogenic fungi. PLoS Pathog. 3: e101
Nakagiri  A,  Okane  I,  Ito  T,  Kramadibrata  K,  Suciatmih,  Retnowati  A.  2005.  A Guidebook to identification of fungi inhabiting mangrove and surrounding area in Indonesia. A report of GTI pilot study on fungal taxonomy
Noga EJ. 1996. Fish disease: diagnosis and treatment. St. Louis: Mosby .2010. Fish disease: diagnosis and treatment, 2 edn. Wiley-Blackwell, Ames, IA Odds,  F.  C. 1988. Candida and  candidosis:  a  review  and  bibliography.Bailliere Tindal, London, United Kingdom.
Palmero D,  Iglesias  C,  de  Cara  M,  Lomas  T,  Santos  M, Tello JC (2009)  Species of Fusarium  isolated  from  river  and  sea  water  of  southeastern  Spain  and pathogenicity on four plant species. Plant Dis 93: 377−385
Perpinan, D.,  J. G. Trupkiewicz, A. L., D. M. Geiser, S. Armstrong, M. M.Garner, and D.  L.  Armstrong.  2010.  Dermatitis  in  captive  Wyoming  toads ( Bufo  baxteri ) associated  with Fusarium spp . Journal  of  Wildlife  Diseases 46:1185-1195.
Pukkila-Worley,  R.,  A.  Y.  Peleg,  E.  Tampakakis,  and  E.  Mylonakis.  2009 Candida albicans hyphal  formation  and  virulence  assessed  using  a Caenorhabditis elegans infection model. Eukaryot. Cell 8:1750-1758.
Roilides  E,  Dotis  J,  Katragkou  A  (2007)  Fusarium  and  Scedosporium:    emerging fungal  pathogens.  In:    Kavanagh  K  (ed)  New  insights  in  medical  mycology. Springer, Dordrecht, p 267–286
Roy  P.E.  Yanong.  2003.  Fungal  diseases  of  ﬁsh.  Vet  Clin  Exot  Anim  6  (2003) 377–400
Sarmiento-Ramírez  JM, Abella E, Martín MP, Tellería MT, López-Jurado LF, Marco A, Diéguez-Uribeondo J. Fusarium solani is responsible for mass mortalities in nests of loggerhead sea turtle, Caretta caretta, in Boavista,  Cape  Verde.  FEMS Microbiol Lett. 2010
Nov;312(2):192-200. doi: 10.1111/j.1574-
6968.2010.02116.x. Epub 2010 Sep 28.
Sutton DA, Fothergill A, McCarthy D, Rinaldi MG, Brandt ME, Zhang N, Geiser DM. 2008. Molecular phylogenetic diversity, multilocus haplotype nomenclature, and in vitro antifungal resistance within the Fusarium solani species complex. J Clin Microbiol 46:2477–2490.