________________________________________________________________

## Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 70% dan 96% Buah Parijoto Asal Bandungan dan Profil Kromatografinya
Ranu Putra Adi Surya 1 , Fania Putri Luhurningtyas 1* 1 Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Kesehatan, Universitas Ngudi Waluyo, Jl. Diponegoro No.186, Ungaran, Jawa Tengah, 50512

## *Corresponding author: faniaputri@unw.ac.id
Received: 10 October 2021; Accepted: 26 November 2021
Abstract: Flavonoid compounds in parijoto fruit ( Medinilla speciosa B.) are known to prevent oxidative stress. The amount of these compounds can be optimized by extraction using a suitable solvent. The purpose of this study was to analyze the antioxidant  activity  of  parijoto  fruit  extract  with  different  concentrations  of  ethanol  solvent.  The  study  started  from  the extraction stage with the maceration method with 70% and 96% ethanol as solvents. Phytochemical test using mobile phase n-hexane:  ethyl  acetate  (8:2).  Antioxidant  activity  test  using  FRAP  (Ferric  Reducing  Antioxidant  Power)  method  and  test parameters  based  on  IC 50 value.  The  results  of  the  identification  of  secondary  metabolites  showed  that  they  contained flavonoids (light blue spots) and anthocyanins (red spots). The IC 50 values of Parijoto fruit extract with 70% and 96% ethanol solvents were 35.46 ppm and 40.17 ppm, respectively. The conclusion in this study was that the extract of parijoto fruit with 70%  ethanol  solvent  had  stronger  antioxidant  activity  than  96%  ethanol  extract.  Based  on  the  chromatogram  profile,  the antioxidant activity was determined by the presence of secondary metabolites of flavonoids and anthocyanins.
Keywords: antioxidant, parijoto fruit, extract 70%, extract 96%, chromatogram
Abstrak : Senyawa flavonoid pada buah parijoto ( Medinilla speciosa B.) diketahui dapat menangkal stress oksidatif.  Jumlah kandungan  senyawa  tersebut  dapat  dioptimalkan dengan  ekstraksi  menggunakan pelarut  yang  sesuai.  Tujuan  penelitian  ini untuk menganalisis aktivitas antioksidan pada ekstrak buah parijoto dengan perbedaan konsentrasi pelarut etanol.  Penelitian dimulai  dari  tahapan  ekstraksi  dengan  metode  maserasi  dengan  pelarut  pelarut  etanol  70%  dan  96%.  Uji  fitokimia menggunakan  fase  gerak  n-heksana:etil  asetat  (8:2).  Uji  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  FRAP  ( Ferric  Reducing Antioxidant Power ) dan parameter uji berdasarkan nilai IC 50 . Hasil penelitian identifikasi metabolit sekunder, menunjukkan positif  mengandung  flavonoid  (bercak  biru  muda)  dan  antosianin  (bercak  merah).  Nilai  IC 50 ekstrak  buah  Parijoto  dengan pelarut  etanol  70% dan 96% berturut-turut  yaitu  sebesar  35,46  ppm  dan  40,17 ppm.  Simpulan  dalam  penelitian  ini  adalah ekstrak buah parijoto dengan pelarut etanol 70% mempunyai aktivitas antioksidan lebih kuat dibandingkan ekstrak etanol 96%. Berdasarkan profil kromatogram menunjukkan aktivitas antioksidan tersebut dipengaruhi karena adanya metabolit sekunder flavonoid dan antosianin.
Kata kunci: antioksidan, buah parijoto, ekstrak 70%, ekstrak 96%, kromatogram

## 1. PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang kaya tanaman obat, terutama  obat  tradisional.  Selama  ini  buah  parijoto dikenal  masyarakat  sebagai  obat  sariawan  dan antiradang.  Tanaman  parijoto  merupakan  jenis tanaman  endemik  yang  banyak  tumbuh  di  lereng Gunung  Muria,  Kabupaten  Kudus,  Jawa  Tengah (Sugiarti, 2017).
Di  Kecamatan  Bandungan,  Kabupaten  Semarang, Jawa  Tengah,  juga  banyak  ditemukan  budidaya tanaman  parijoto.  Buah  parijoto  telah  digunakan
secara  empiris  pada  ibu  hamil,  karena  masyarakat setempat  percaya  bahwa  buah  parijoto  yang dikonsumsi  ibu hamil  akan  membuat bayi yang  lahir menjadi  cantik  dan  tampan.  (Pertiwi,  et  al  2018). Fraksi  etanol  buah  parijoto  dapat  menurunkan  kadar glukosa  secara  optimal  dengan  konsentrasi  30  ppm dengan  persen  penurunan  kadar  sebesar  83,43% (Wilantika,  2018).  Kandungan  fenol  buah  parijoto yang  berumur  3  bulan  (saat  penyerbukan)  sebesar 266,79 mg GAE/g. Aktivitas antioksidan ekstrak kasar buah  parijoto  dengan  nilai  IC 50 sebesar  48,24  μg/ml. Saat buah Parijoto matang berumur 3 bulan nilai IC 50

## Pharmaceutical and Biomedical Sciences Journal
Volume 3 (1), 2021, 39-44
mencapai 30,51 μg/ml.(Wachidah, 2013).
Senyawa flavonoid pada buah parijoto bersifat polar, sehingga  perlu  pelarut  pengekstraksi  yang  bersifat polar. Keefektifitasan proses ekstraksi selain bergantung  pada  metode  ekstraksi,  juga  dipengaruhi dari pemilihan pelarut pengekstraksi yang digunakan. Prinsipnya penarikan metabolit sekunder berdasarkan dari kelarutan senyawa tersebut di dalam pelarut yang digunakan, atau sesuai dengan prinsip like dissolve like (Agati et al, 2012).
Pelarut  etanol  konsentrasi  70  dan  96%  merupakan pelarut  yang  paling  banyak  digunakan  untuk mengekstraksi metabolit sekunder pada buah parijoto. Penggunaan  etanol  sebagai  pelarut  memiliki  banyak keuntungan antara lain, kepolaran etanol sangat tinggi, sehingga  asam  lemak,  resin,  minyak,  karbohidrat maupun senyawa organik lain mampu tertarik, etanol tidak  berbahaya  dan  beracun,  titik  didih  etanol cenderung  rendah.  Etanol  juga  dapat  bekerja meningkatkan efektivitas dan efisiensi proses ekstraksi bahan  aktif  berbagai  herbal  dari  rempah-rempah maupun  buah-buahan  (Lugina  et  al,  2018).  Namun belum ditemukan konsentrasi pelarut etanol yang tepat untuk  mendapatkan  aktivitas  antioksidan  tertinggi pada  buah  parijoto.  Perlu  dilakukan  penelitian  agar didapatkan  pelarut  yang  sesuai  untuk  menarik metabolit  sekunder  pada  buah  parijoto  yang memberikan  aktivitas  antioksidan  terbaik.  Sehingga dapat meningkatkan pemanfaatan tanaman parijoto di daerah Bandungan dalam perkembangan bidang obat herbal.

## 2. METODE PENELITIAN

## 2.1 Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  untuk  maserasi,  penyaring, rotavapor (RE 100-Pro), waterbath (Memmert), oven (Binder), Alat sentrifugasi, timbangan
analitik(Fujitsu®).  Alat  untuk  analisa  IC 50 meliputi spektrofotometri UV-Vis (Shimadzu UV Mini 1240), Alat  untuk  menguji  antioksidan  adalah  labu  ukur (Pyrex®), mikro pipet (nesco), (Pyrex®), oven (J. P. Selecta),  pH-meter.  Bahan  kimia  yang  digunakan yakni:  ekstrak  etanol  buah  parijoto  70%  dan  96%, asam  oksalat  1%,  asam  trikloroasetat  (TCA), FeCl 3 . 6 H2O (Merck®), dapar fosfat, kalium ferrisianida,  vitamin  C  (Emsure®),  etanol  96%  p.a (Brataco®  ),  etanol  96%,  aquades,  n-Heksan,  etil asetat, kuersetin (CV. Bratachem® ).
2.2 Identifikasi Flavonoid dengan Metode
Kromatografi Lapis Tipis
Kromatografi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  kromatografi  lapis  tipis.  Fase  diam  yang digunakan adalah silika gel GF 254 dengan fase gerak n-heksana:etil asetat (8:2), dan pembanding kuersetin 0,1%.  Apabila  terbentuknya  noda  berwarna  kuning, biru  muda,  merah,  coklat  pada  pengamatan  sinar tampak  pada  UV  366  nm  dan  254  nm  menegaskan adanya kandungan flavonoid (Harborne, 1987).

## 2.3 Pembuatan Larutan Standar Asam Askorbat
Konsentrasi larutan standar asam askorbat yang dibuat adalah 1,2,3,4, dan 5 ppm. Asam askorbat dilarutkan dengan  asam  oksalat  1%  hingga  10  ml  dan dihomogenkan.

## 2.4 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Larutan standar asam askorbat 20 ppm yang dilarutkan dengan asam oksalat 1% hingga 10 ml, diambil 1 ml kemudian  larutan  dicampurkan  dengan  1  ml  dapar fosfat  0,2  M  (pH  6,6)  dan  1  ml  dapar  kalium ferrisianida  1%.  Campuran  larutan  diinkubasi  pada 50°C  selama  20  menit.  Setelah  campuran  selesai diinkubasi,  ditambahkan  1  ml  larutan  asam trikloroasetat, selanjutnya disentrifugasi dan diambil 1
ml supernatan ditambahkan dengan 0,5 ml FeCl3 0,1% lalu ditambahkan dengan larutan asam oksalat hingga 10  ml.  Pengujian  panjang  gelombang  diukur  nilai absorbansinya pada setiap panjang gelombang dalam kisaran 400-800 nm dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## 2.5 Uji Aktivitas Antioksidan
Ekstrak buah parijoto ditimbang sebanyak 50 mg dan dilarutkan dalam 50 ml etanol p.a pada labu takar 50 ml  hingga  mencapai  batas  sehingga  diperoleh konsentrasi 1000 ppm. Larutan stok tersebut kemudian dipipet  masing-  masing  100µl;  200µl;  300µl;  400µl, 500µl  ad 10ml, dari  larutan  stok  ke  dalam  labu  ukur hingga  diperoleh  konsentrasi  10,  20,  30,  40,  dan  50 ppm. Dan masing-masing konsentrasi ditambahkan 1 ml  dapar  fosfat  0,2  N  (pH  6,6)  dan  1  ml  K 3 Fe(CN) 6
1%.  Selanjutnya  diinkubasi  selama  20  menit  dengan suhu  50°C.  Setelah  campuran  larutan  diinkubasi ditambahkan 1 ml larutan TCA 10% dan disentrifuge dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit. Setelah disentrifuge,  pipet  bagian  atas  (  apabila  terdapat endapan),  masukan  ke  dalam  labu  takar  10  ml, kemudian  ditambahkan  0,5  ml  FeCl 3 ,tambahkan etanol p.a ad 10ml, kemudian diukur dengan panjang gelompang  maksimum.  Labu  ukur  terlebih  dahulu dilapisi aluminium foil. (Julisah, 2019).

## 2.6 Analisa Data
Untuk  aktivitas  antioksidan  dinyatakan  dengan inhibition  concentration  50%  atau  IC 50 yaitu konsentrasi  sampel  yang  dapat  mereduksi  ion  Fe sebanyak  50%.  Rumus  menghitung  %  aktivitas mereduksi  ion  Fe:  Persen  mereduksi  Fe 3+ =1- ((Absorbansi Vitamin C) - (Absorbansi Sampel))/(Absorbansi  Vitamin  C)×  100%  Hasil persentase  inhibisi  dari  masing-masing  konsentrasi, dilanjutkan  dengan  perhitungan  secara  regresi  linier
(x,y) untuk mendapatkan nilai IC 50 dimana x sebagai konsentrasi (μg/ml) dan y sebagai persentase aktivitas (%).  IC 50 sampel  dan  pembanding  diperoleh  dengan rumus y = Bx + A. Nilai IC 50 didapatkan dari x setelah mengganti  y  dengan  50  (Wachidah,  2013;  Magfira, 2018).  Nilai  IC 50 yang  semakin  kecil,  menunjukkan semakin  tinggi  aktivitas  antioksidan  dari  sampel tersebut (Magfira, 2018).

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Karakteristik dan Organoleptis Ekstrak
Data  pada  tabel  1  menunjukkan  bahwa  ekstraksi dengan  pelarut  etanol  70%  menghasilkan  persentase rendemen tertinggi dibandingkan ekstraksi menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Tidak  ada perbedaan  bentuk,  warna,  dan  bau  ekstrak  buah parijoto  menggunakan  pelarut  70%  dan  96%  ( Tabel 1 ).

## Tabel 1. Karakteristik dan Organoleptis Ekstrak
Pelarut Etanol Bobot Ekstrak (gr) Rendemen (%) Karakteristik B W Ba 70% 28.8 14,425 Kental Coklat Khas 96% 13.2 6,645 Kental Coklat Khas
Keterangan: B : bentuk; W: warna, Ba: bau

## 3.2 Identifikasi flavonoid
Identifikasi  senyawa  flavonoid  pada  buah  parijoto dilakukan  menggunakan  metode  kromatografi  lapis tipis (KLT), fase diam dan fase gerak yang digunakan berturut-turut  adalah  Silika  GF  dan  fase  gerak  n- heksan:  etil  asetat  (8:2).  Menurut  Harborne  (1987), apabila  terdapat  bercak  yang  berwarna  kuning,  biru muda, coklat pada KLT menandakan adanya flavonoid pada ekstrak tersebut. Bercak warna merah atau merah lembayung menandakan adanya kandungan antosianin.
Gambar 1. Profil Kromatogram Ekstrak Buah Parijoto. Keterangan: a. Pembanding kuersetin, b. Ekstrak etanol 70%, c. Ekstrak etanol 96%
Ekstrak  buah  parijoto  menghasilkan  2  noda  yang menghasilkan  warna  kuning  dan  merah.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  buah  parijoto  positif mengandung  flavonoid  dan  flavonoid  golongan antosianin. Nilai Rf yang diperoleh berkisar antara 0,2- 0,8. Hal tersebut dapat digunakan untuk mengidentifikasi  kepolaran  senyawa  pada  buah parijoto. Senyawa yang lebih polar akan tertahan kuat pada  fase  diam,  dan  menghasilkan  nilai  Rf  yang rendah. Berdasarkan nilai Rf yang diperoleh, senyawa flavonoid  pada  ekstrak  buah  parijoto  bersifat  polar sampai non polar.

## 3.3 Aktivitas Antioksidan
Penentuan panjang gelombang maksimum berdasarkan  hasil  pengukuran  absorbansi  yang diperoleh  dari  larutan  standar  vitamin  C  pada konsentrasi  20  ppm,  dengan  kisaran  rentang  panjang gelombang 400-800 nm. Dalam penelitian ini panjang gelombang maksimum 418 ppm didapatkan absorbansi  sebesar  1,182.  Penentuan operating  time vitamin C  dengan menggunakan spektrofotometer uv vis pada  menit  ke  0-30,  dan dihitung  absorbansi  tiap menit. Pengukuran absorbansi  menggunakan panjang gelombang  418  nm  sampai  diperoleh  serapan  yang stabil.  Rentang operating  time ditunjukan  dengan adanya serapan yang stabil karena hal ini disebabkan setelah operating time kompleks warna yang terbentuk telah stabil.
Prinsip  pengujian  dalam  metode  FRAP  adalah kemampuan suatu senyawa untuk mereduksi ion Fe 3+ menjadi  ion  Fe 2+ .Pada  percobaan  ini  warna  kuning berubah  menjadi  warna  hijau  pucat  sampai  biru tergantung  pada  kadar  antioksidan  yang  ada  pada sampel. Semakin tinggi konsentrasi maka akan timbul warna  semakin  pekat  dan  konsentrasi  sampel.  Uji aktivitas  antioksidan  metode  FRAP  mengikuti prosedur  yang  dilakukan  Pratama  et  al  (2018)  dan Tahir  et  al  (2016),  menggunakan  kompleks  kalium ferisianida  sebagai  radikal  bebas.  Daya  untuk mereduksi setiap sampel yang mengandung antioksidan  (reduktor)  merupakan  indikator  potensi senyawa  antioksidan.  Daya  reduksi  dalam  hal  ini didasarkan  reduksi  Fe 3+ pada  (K 3 Fe  (CN) 6 )  menjadi Fe 2+ (bentuk besi) (Maryam et al., 2015).
Pengujian  aktivitas  antioksidan  menggunakan  tiga kelompok  yaitu  vitamin  C,  ekstrak  buah  parijoto pelarut etanol 70%, ekstrak buah parijoto pelarut 96%. Setiap  sampel  dilakukan  pengujian  dengan  metode antioksidan  FRAP (Ferric  Reducing  Antioxidant Power). Pada  tabel  2  merupakan  persen  mereduksi vitamin C yang digunakan sebagai pembanding untuk menentukan daya reduksi sampel ekstrak etanol 96 % dan  ekstrak  etanol  70%.  Absorbansi  kontrol  yang digunakan  pada  pengukuran  konsentrasi  vitamin  C adalah 1,182.

## Tabel 2. Aktivitas Antioksidan Kontrol Vitamin C
Konsentrasi (ppm) Rerata Abs ± SD Rerata mereduksi Fe 2+ ± SD Rerata IC 50 1 0,312 ± 0,002 26,424 ± 0,195 3,659 ppm Antioksida n sangat kuat 2 0,412 ± 0,002 34,856 ± 0,169 3 0,513 ± 0,004 43,429 ± 0,297 4 0,620 ± 0,003 52,453 ± 0,293 5 0,744 ± 0,003 62,972 ± 0,213
a       b c a       b c
Dari tabel diatas menunjukan bahwa nilai IC 50 vitamin C  yang  didapatkan  adalah  2,523  termasuk    kategori sangat kuat < 50 ppm.
Tabel  3.  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  70%  Buah Parijoto
Konsentrasi (ppm) Rerata Abs ± SD Rerata mereduksi Fe 2+ ± SD Rerata IC50 10 0,320 ± 0,004 27,073 ± 0,305 35,460 ppm Antioksidan Kuat 20 0,421 ± 0,002 35,646 ± 0,176 30 0,533 ± 0,003 45,093 ± 0,224 40 0,642 ± 0,002 54,343 ± 0,129 50 0,746 ± 0,007 63,085 ± 0,550
Tabel  4.  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  96%  Buah Parijoto Konsentrasi (ppm) Rerata Abs ± SD Rerata Mereduksi ± SD Rerata IC 50 10 0,212 ± 0,002 17,908 ± 0,129 40,172 ppm Antioksidan Kuat 20 0,321 ± 0,005 27,157 ± 0,423 30 0,453 ± 0,002 38,353 ± 0,195 40 0,601 ± 0,002 50,846 ± 0,169 50 0,714 ± 0,004 60,434 ± 0,297
Dari  tabel  diatas  (Tabel  3  dan  Tabel  4)  menunjukan bahwa  kadar  rata-rata  aktivitas  antioksidan  buah parijoto  dengan  pelarut  etanol  70%  didapatkan  nilai IC 50 sebesar 35,460 ppm, termasuk di dalam kategori sangat kuat. Uji aktivitas buah parijoto dengan pelarut etanol  96%  didapatkan  nilai  IC 50 adalah  40,172  ppm termasuk kategori sangat kuat (IC 50 <50ppm).
Ekstrak etanol 70% buah parijoto lebih kuat aktivitas antioksidannya  dibandingkan  ekstrak  etanol  96%, dapat  dilihat  berdasarkan  nilai  IC 50 yang  terkecil. Namun  aktivitas  antioksidan  kedua  ekstrak  tersebut masih  lebih  rendah  dibandingkan  kontrol  positifnya, yaitu vitamin C. Hal ini juga sejalan dengan besarnya rendemen  ekstrak  buah  parijoto  yang  ditarik
menggunakan  pelarut  etanol  70%.  Pelarut  tersebut mampu menarik senyawa lebih baik, karena kesamaan sifat  kepolaran  senyawa  yang  berperan  sebagai antioksidan  pada  parijoto  terhadap  pelarutnya. Semakin besar metabolit sekunder yang tertarik, maka aktivitas  farmakologinya  pun  juga  semakin  baik. Senyawa  flavonoid  yang  diduga  berperan  sebagai antioksidan terdiri dari beberapa jenis dan mempunyai kepolaran  berbeda  tergantung  dari  letak  posisi  dan jumlah  gugus  hidroksil  (Plaza et  al, 2014).  Hal  ini tentu  mempengaruhi  kelarutan  flavonoid  pada pelarutnya.
Penelitian  ini  sejalan  dengan  hasil  Suhendra et  al (2019), bahwa ekstraksi rimpang ilalang menggunakan  pelarut  etanol  konsentrasi  70% menghasilkan aktivitas antioksidan terbaik. Perbedaan konsentrasi  etanol  mempengaruhi  kelarutan  senyawa flavonoidnya. Semakin tinggi konsentrasi etanol maka semakin  rendah  tingkat  kepolaran  pelarutnya.  Suatu zat  dapat  tertarik  dan  terlarut,  apabila  pelarut  yang digunakan  mempunyai  tingkat  kepolaran  yang  sama (Chew et al , 2011).

## 4. KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  etanol  70% buah  parijoto  menghasilkan  aktivitas  antioksidan terkuat dengan nilai IC 50 sebesar  35,46 ppm (kategori sangat  kuat).  Hasil  profil  kromatogram  diketahui bahwa  ekstrak  buah  parijoto  mengandung  metabolit sekunder  flavonoid  dan  antosianin  yang  diduga berperan sebagai antioksidan.

## 5. UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terimakasih Penulis sampaikan kepada Dosen Pembimbing Skripsi Program Studi Farmasi Universitas  Ngudi  Waluyo,  yang  telah  memberikan arahan  serta  bimbinganya  sehingga  Penulis  dapat
menyelesaikan penelitian sampai dengan publikasi ini dengan baik.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Agati, G., Azzarello, E., Pollastri, S., & Tattini, M. (2012). Flavonoids as antioxidants in plants: location and functional significance. Plant science , 196 , 67-76.
Burhan, M. (2017) ‘Uji Aktivitas Antioksidan Hasil Fraksi Etil  Asetat  Kulit  Batang  Kemiri  (Aleurites  moluccana (L.)Willd.)  Dengan  Metode  DPPH  (2,2-  difenil-1- pikrilhidrazil)’, Skripsi : Universitas Islam Negeri Alauddin. Makassar, 6.
Chew, K. K., Khoo, M. Z., Ng, S. Y., Thoo, Y. Y., Aida, W. W.,  &  Ho,  C.  W.  (2011).  Effect  of  ethanol  concentration, extraction  time  and  extraction temperature  on the  recovery of  phenolic  compounds  and  antioxidant  capacity  of Orthosiphon  stamineus  extracts. International  Food Research Journal , 18 (4), 1427.
Halliwell, B. and Whiteman, M., 2004, Measuring reactive species and oxidative damage in vivo and in cell culture: how should  you  do  it  and  what  do  the  results  mean,  Br  J Pharmacol, 142,55-231.
Harborne,  A.  J.  (1998). Phytochemical  methods a guide  to modern  techniques  of  plant  analysis .  springer  science  & business media.
Hermawan,  A.  (2018)  ‘Hubungan  Kekuatan  Antioksidan Ekstrak  Herbal  dengan  Ciri  Nanopartikel  Perak  dan  Sifat Antibakterinya’, Skripsi . Institut Pertanian Bogor.
Julisah, T. L. 2019. Uji Aktivitas Antioksidan Nano Kitosan Ekstrak  Buah  Parijoto  (Medinilla  speciosa  Reinw.  ex Blume),  Menggunakan  Metode  FRAP  (Ferric  Reducing Antioxidant Power) . Universitas Ngudi Waluyo, Semarang.
Luginda, R. A., Lahita, B. and Indriani, L. (2018) ‘Pengaruh Variasi  Konsentrasi  Pelarut  Etanol  Terhadap  Kadar Flavonoid  Total  Daun  Beluntas  (Pluchea  indica  (L.)Less) Dengan Metode Microwave – Assisted Extraction (MAE)’, pp. 1-9.
Magfira  (2018)  ‘Analisis  Penghambatan  Ekstrak  Etanol Batang  Kembang  Bulan  (Tithonia  ediversifolia  )  Terhadap Reaksi Oksidasi dari Radikal Bebas Dengan Metode DPPH ABTS  dan  FRAP’,  Skripsi:  Universitas  Hasanuddin. Makassar.
Maryam,  S.,  Baits,  M.  and  Nadia,  A.  (2015)  ‘Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Kelor (Moringa Oleifera Lam.) Menggunakan Metode Frap (Ferric Reducing Antioxidant Power)’, Jurnal Fitofarmaka Indonesia, 2(2), pp. 115–118.
Mulyono,  H.  (2008)  Membuat  Reagen  Kimia  di Laboratorium. Jakarta: Bumi Aksa Juliantara. Muntsiroh, A. Q. (2010) ‘Isolasi dan IdentIfikasi Komponen Kimia Fraksi Teraktif Buah Merah ( Pandanus conoideus Lam . ) Hasil Uji Toksisitas  Secara  Brine  Shrimp  Lethality  Test’,  Skripsi: Universitas Sebelas Maret.
Plaza, M., Pozzo, T., Liu, J., Gulshan Ara, K. Z., Turner, C., &  Nordberg  Karlsson,  E.  (2014).  Substituent  effects  on  in vitro  antioxidizing  properties,  stability,  and  solubility  in flavonoids. Journal  of  agricultural  and  food  chemistry , 62 (15), 3321-3333.
Suhendra, C. P., Widarta, I. W. R., & Wiadnyani, A. A. I. S. (2019).  Pengaruh  konsentrasi  etanol  terhadap  aktivitas antioksidan ekstrak rimpang ilalang (Imperata cylindrica (L) Beauv.) pada ekstraksi menggunakan gelombang ultrasonik. Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan , 8 (1), 27-35.
Wachidah,  L.  N.  2013.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  serta Penentuan  Kandungan  Fenolat  dan  Flavonoid  Total  dari Buah  Parijoto  (Medinilla  speciosa  Blume).  UIN  Syarif Hidayatullah Jakarta.
Winarti, Sri. 2010. Makanan Fungsional. Yogyakarta: Graha Ilmu  Winarsi,  H.  (2007)  ‘Antioksidan  Alami  &  Radikal Bebas’,  Yogyakarta:  Kanisuis.  doi:  D)  Localizado  en  la bibliografia  del  articulo  ‘exclusión  social  y  exclusión educativa como fracasos’.
Sadikin,  M.  2001.  Pelacakan  Dampak  Radikal  Bebas terhadap Makromolekul.
Kumpulan Makalah Pelatihan:Radikal Bebas dan Antioksidan dalam Kesehatan. Fakultas Kedokteran UI. Jakarta
Setiawan,  F.,  Yunita,  O.  and  Kurniawan,  A.  (2018)  ‘Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Kayu  Secang (Caesalpinia sappan) Menggunakan Metode DPPH, ABTS, dan FRAP’, 2(2), pp. 82–89.
Tahir, M., H., A. C. and Widiastuti, H. (2016) ‘Uji Aktivitas Antioksidan  Buah  Semangka  (Citrullus  lanatus)  dengan Metode FRAP’, As-syifaa, 08(01), pp. 31–38.
Underwood,  A.  L.  (2001)  Analisis  Kimia  Kuantitatif  Edisi ke  Enam.  Erlangga,  Jakarta.  Vijayalakshmi,  M.  and Ruckmani,  K.  (2016)  ‘Ferric  reducing  anti-oxidant  power assay in plant extract’, Bangladesh Journal of Pharmacology, 11(3), pp