## Sains Aku a kultur Tropis D e p a r t e m e n A k u a k u l t u r
Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan - Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang 50275
Telp. (024) 7474698, Fax.: (024) 7474698 Email: sainsakuakulturtropis@gmail.com , sainsakuakulturtropis@undip.ac.id
PENAMBAHAN EKSOGEN ENZIM PENCERNAAN DALAM PAKAN BUATAN UNTUK MENINGKATKAN PERTUMBUHAN DAN EFESIENSI PEMANFAATAN PAKAN IKAN BANDENG ( Chanos chanos )
Exogeneus Digestibility Enzymes Addition in Artificial Diet for Growth and Feed Utilization Efficiency of Milk Fish  (Chanos chanos)
Taufiq Susanto, Agung Sudaryono*, Pinandoyo
Program Studi Budidaya Perairan Jurusan Perikanan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Semarang. Jawa Tengah – 50275, Telp/Fax. +6224 7474698

## ABSTRAK
Ikan bandeng ( Chanos chanos ) adalah salah satu ikan air payau yang memiliki nilai ekonomi tinggi dan berpotensi  untuk  terus  dikembangkan,  pada  kegiatan  budidaya  biaya  pakan  mencapai  60-70%  dari  total  biaya produksi.  Pakan yang dikonsumsi ikan sebaiknya memiliki nutrisi yang mudah dicerna dan diserap dengan baik oleh  ikan,  sehingga  pakan  tersebut  dapat  dimanfaatkan  secara  optimal  oleh  ikan.    Pemanfaatan  pakan  dapat dicapai dengan penambahan eksogen enzim pencernaan pada pakan.  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh dan dosis terbaik penambahan eksogen enzim pencernaan dengan merek dagang BioEnzyme terhadap pertumbuhan, efesiensi pemanfaatan pakan dan kelulushidupan ikan bandeng ( C. chanos ). Metode  penelitian  adalah  eksperimen  dengan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  4 perlakuan  dan  3  kali  ulangan.    Hewan  uji  adalah  ikan  bandeng  ( C.  chanos )  dengan  bobot  2,68±0,24  g/ekor, dengan  padat  tebar  10  ekor/20  L.  Pakan  diberikan  3  kali  sehari  pada  jam  08:00,  12:00  dan  16:00,  secara at  satiation selama  42  hari.    Perlakuan  adalah  penambahan  eksogen  enzim  pencernaan  dengan  dosis  0%  (A); 0,05%  (B);  0,1%  (C)  dan  0,15%  (D).    Data  yang  diamati  meliputi: Protein  Effeciency  Ratio (PER),  Efesiensi Pemanfaatan  Pakan  (EPP), Specific  Growth  Rate (SGR), Survival  Rate (SR)  dan  kualitas  air.    Penambahan eksogen enzim pencernaan dalam pakan buatan memberikan pengaruh sangat nyata (P < 0,01) terhadap Protein Effeciency  Ratio (PER)  dan Specific  Growth  Rate (SGR),  berpengaruh  nyata  (P  <  0,05)  terhadap  Efesiensi Pemanfaatan  Pakan  (EPP),  tidak  berpengaruh  nyata  (P  >  0,05)  terhadap Survival  Rate  ( SR)  dan  tidak mempengaruhi kualitas air.  Dosis eksogen enzim pencernaan terbaik ditemukan pada ikan bandeng ( C. chanos ) yang  diberi  pakan  dengan  kandungan  enzim  pencernaan  0,05%  (B)  dan  mampu  menghasilkan  nilai  PER 1,69±0,03%,  EPP  68,66±1,40%,  SGR  2,46±0,18%/hari  dan  SR  100%.  Kualitas  air  pemeliharaan  masih  dalam kisaran baik untuk kehidupan ikan bandeng ( C. chanos ). Kata kunci: Pertumbuhan; ikan bandeng ( C. chanos ); eksogen enzim pencernaan

## ABSTRACT
Milkfish (Chanos chanos) is one of the brackish water fish that has high economic value and potential to be developed.  In fact, the has cost of feed for aquaculture reaches 60-70% of the total cost of the production. The feeds consumed fish should have the nutrients easily digested and absorbed by fish, with result that the feeds can be optimally used by the fish.  The feed utilization can be achieved with the addition of exogenous digestive enzymes in feed. This study was conducted to evaluate the effects of exogenous digestive enzymes (trademark is BioEnzyme) addition on growth, feed utilization efficiency and the survival of milk fish (C. chanos).
In  this  study  used  the  a  completely  randomized  design  with  4  treatments  and  3  replications.  The experimental fish were milk fish (C. chanos) of weight 2,68±0.24 g/fish, and stocked at a density of 10 fish/20 L. The feeds were given with an avarage initial 3 times a day at 08:00, 12:00 and 16:00, at satiation for 42 days. The treatments were addition of exogenous digestive enzymes with different doses 0% (A); 0,5% (B); 1% (C) and 1,5% (D).  Data parameters analysed were Protein Effeciency Ratio (PER), Feed Ultilization Efficiency (FUE), Specific Growth Rate (SGR), Survival Rate (SR) and water quality.  Addition of exogenous digestive enzymes in artificial  diets  resulfed  in  highly  significant  effects  (P  <  0,01)on  Protein  Effeciency  Ratio  (PER) and Specific
Growth  Rate  (SGR) , a  significant  effects  (P  <  0.05)  on  Feed  Utilization  Efficiency  (FUE),but  it  had  no significant  effects  (P  >  0.05)  on  Survival  Rate  (SR)  and  water  quality.  The  best  exogenous  digestive  enzymes dose  was  0.5%  (B)  which  produced  PER  of  1,69±0.03%,  FUE  68,66±1.40%,  SGR  2,46±0.18%/day  and  SR 100%. Water quality during the experiment was still within a good range for the life of milk fish (C. chanos). Keywords : Growth; milk fish (C. chanos.); exogenous digestive enzymes * Corresponding author (Email:agungsoed@yahoo.co.id)

## PENDAHULUAN
Ikan bandeng ( Chanos chanos ) merupakan makanan yang sangat digemari dikawasan Indonesia-Pasifik dan dibudidayakan secara ekstensif dibeberapa negara terutama Filiphina, Indonesia dan Taiwan (Borlongan dan Coloso,  1992).  Jaikumar et  al. (2013)  menambahkan  bahwa  ikan  bandeng  ( C.  chanos )  adalah  makanan  yang memiliki kualitas nutrisi yang tinggi.  Menurut Riko et al . (2012), ikan bandeng  ( C. chanos ) adalah salah satu ikan  air  payau  yang  memiliki  nilai  ekonomi  tinggi  dan  berpotensi  untuk  terus  dikembangkan.    Keunggulan ikan bandeng ( C. chanos ) diantaranya: dapat beradaptasi terhadap perubahan suhu, pH, kekeruhan air, serangan penyakit dan dapat mentolerir salinitas perairan yang luas ( eurihalin ).  Menurut Bagarinao (1991), ikan bandeng stadia larva dapat mentolerir salinitas kisaran 4-38 ppt dan pada stadia nener kisaran 0-70 ppt.
Menurut Rangka dan Asaad (2010), budidaya  ikan bandeng ( C. chanos ) secara intensif yang dilakukan di  tambak  maupun  di  Keramba  Jaring  Apung  (KJA)  membutuhkan  input    pakan.    Azwar  dan  Melati  (2010) menerangkan  bahwa  pada  kegiatan  budidaya,  konstribusi  biaya  pakan  dapat  mencapai  60-70%  dari  total  biaya produksi.    Menurut  Ghomi et  al. (2012),  manipulasi  pakan  dapat  menjadi  strategi  untuk  mengoptimalkan pertumbuhan,  sedangkan  menurut  Khodijah et  al. (2015),  pakan  yang  dikonsumsi  ikan  sebaiknya  memiliki nutrisi  yang  mudah  dicerna  dan  diserap  dengan  baik  oleh  ikan,  sehingga  pakan  tersebut  dapat  dimanfaatkan secara  optimal  oleh  ikan.    Pemanfaatan  pakan  dapat  dicapai  dengan  penambahan  eksogen  enzim  pencernaan pada  pakan,  hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Yildirim  dan  Turan  (2010)  bahwa  ikan  lele (Clarias  gariespinus ) yang diberi enzim eksogen kompleks dengan  dosis 0,75 g/kg memiliki nilai Specific Growth Rate (SGR), Food Convertion Ratio (FCR), Protein Effeciency Ratio (PER) dan Apperent Net Protein Utilization (ANPU) terbaik sebesar 1,23±0,01%/hari; 2,13±0,01; 0,97±0,01% dan 30,53±0,76%, bila dibandingkan  dengan dosis 0,25 g/kg dan 0,5 g/kg.  Penelitian lain dilakukan oleh Zamini et al. (2012) yang menyimpulkan bahwa pakan ikan caspian salmon ( Salmo trutta caspius ) yang diberi enzim kompleks dengan merek dagang Natuzyme  (protease, lipase, fitase,  α  amilase,  cellulase,  amiloglucosidase,  β-glucanase,  pentosonase,  hemicellulase,  xylanase,  pectinase, asam  phosphatase  dan  asam  phytase)  dan  Hemicell  (endo-β-mannanase,  amylase,  xylanase,  cellulose  dan α-galactosydase) menghasilkan nilai SGR dan FCR lebih baik bila dibanding dengan pakan tanpa penambahan enzim  dengan  nilai  sebesar  1,01±0,01%/hari  dan  0,64±0,01.    Pengaruh  positif  dihasilkan  terutama  pada perlakuan  yang  ditambahkan  kombinasi    enzim  Natuzyme  sebanyak  0,5  g/kg  dan  enzim  Hemicell  sebanyak 0,5  g/kg,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  penggunaan  multi-enzim  secara  bersama-sama  lebih  efektif,  bila dibandingkan dengan penggunaannya secara individu.
Penelitian diatas menunjukkan bahwa penambahan eksogen enzim pencernaan pada pakan buatan ikan memiliki  dampak  positif  pada  ikan  lele  ( C.  gariepinus )  dan  caspian  salmon  ( S.  trutta  caspius ).    Penggunaan eksogen  enzim  pencernaan  pada  ikan  bandeng  ( C.  chanos ) belum  dilakukan  penelitian,  maka  perlu  adanya penelitian penggunaan eksogen enzim pencernaan dalam pakan buatan untuk ikan bandeng ( C. chanos ).

## MATERI DAN METODE Materi
Wadah  pemeliharaan  yang  digunakan    dalam  penelitian  ini  adalah  ember  bervolume  total  25  L sebanyak  12  buah.    Sebelum  digunakan  ember  dibersihkan  terlebih  dahulu  menggunakan  disenfektan.    Ember yang sudah bersih diisi air sebanyak 20 L, setelah diisi air ember diberi peralatan aerasi (batu aerasi, selang dan aerator)  dan  ditutup  dengan  plastik  transparan.    Sistem  yang  digunakan  selama  pemeliharaan  adalah  sistem resirkulasi.    Air  secara  kontinu  tersirkulasi  dengan  pemfilteran.    Media  pemeliharaan  menggunakan  air  payau yang memiliki kondisi optimum untuk pertumbuhan ikan bandeng ( C. chanos ) stadia gelondongan muda, selama penelitian salinitas dipertahankan 20 ppt.
Ikan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah ikan bandeng ( C. chanos ) stadia gelondongan muda dengan berat 2,68±0,24 g. Ditebar dengan kepadatan 10 ekor/20 L.  Menurut Erzaneti (2011), ikan bandeng ( C. chanos ) ukuran 3-5 g dengan panjang 7-8 cm dapat ditebar dengan kepadatan 10 ekor/ 20 L.
Pakan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah  pakan pelet apung yang didapat secara komersil dengan nilai nutrisi yang dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.  Kandungan Nutrisi Pakan Komersil Bermerek Dagang FF-999 Kandungan Nutrisi Bobot Basah (%) Bobot Kering (%) Energi (kkal) E/P Referensi (%) Kadar air 9,77** 0 0 - - Protein 36,65** 40,62 142,17 40 (Benitez, 1984) BETN* 42,97** 47,63 119,08 - 30,40 (Marzuqi, 2015) Lemak 8,17** 9,06 73,35 - 7-10 (Borlongan dan Coloso, 1992) Kadar abu 2,56** 2,69 0 - - Total 100** 100 334,6*** 8,23 - * Bahan Ekstrak Tanpa Nitrogen
** Hasil uji laboratorium Ilmu Gizi dan Teknologi Pangan Universitas Muhammadiah Semarang
*** Dihitung berdasarkan pendapat Wilson (1982) untuk 1% prot 3,5 kkal, 1% karbohidrat 2,5 kkal dan 1% lemak 8,1 kkal.
Bahan  uji  adalah  eksogen  enzim  pencernaan  yang  didapatkan  secara  komersil  dengan  merek  dagang BioEnzym  yang  berupa  ekstrak  buah  pepaya,  dan  setelah  melalui  uji  aktivitas  protease,  lipase  dan  amilase didapatkan hasil yang dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2.  Aktivitas Enzim Pencernaan pada Bahan Uji
Nama Uji Aktivitas (μg/mL) Protease 87,615* Amilase 54,12* Lipase 29,595*
* Hasil uji laboratorium Ilmu Gizi dan Teknologi Pangan Universitas Muhammadiah Semarang

## Prosedur Penelitian
Prosedur  penelitian  meliputi:  persiapan  pakan  uji,  persiapan  wadah  dan  sistem  pemeliharaan, pemeliharaan ikan uji dan pengukuran variabel penelitian.  Pakan uji didapat secara komersil dengan kandungan nutrisi yang dapat dilihat pada Tabel 1.  Sebelum digunakan pakan uji disemprot  terlebih dahulu dengan bahan uji.    Bahan  uji  yang  akan  digunakan  diencerkan  terlebih  dahulu  dengan  pengenceran  0,05  g  serbuk  enzim dilarutkan  kedalam  5  mL  air  yang  disemprotkan  ke  pakan  100  g  untuk  dosis  0,05  %;  0,1  g  serbuk  enzim dilarutkan  kedalam  5  mL  air  yang  disemprotkan  ke  pakan  100  g  untuk  dosis  0,1%    dan  0,15  g  serbuk  enzim dilarutkan kedalam 5 mL air yang disemprotkan ke pakan 100 g untuk dosis 0,15%.
Persiapan  wadah  pemeliharaan  dilakukan  dengan  membersihkan  ember  menggunakan  disenfektan. Setelah  ember  bersih  kemudian  diisi  dengan  air  sebanyak  20  L,  selanjutnya  ember  diberi  peralatan  aerasi  dan ditutup dengan plastik transparan.  Penelitian ini menggunakan sistem resirkulasi yang mana air secara kontinu tersirkulasi dengan pemfilteran.
Pemeliharaan  ikan  uji  dilakukan  selama  42  hari.    Selama  pemeliharaan  ikan  uji  diberikan  pakan  uji dengan  metode at  satiation, frekuensi  pemberian  pakan  uji  sebanyak  3  kali/hari  pada  jam  08:00,  12:00  dan 17:30.  Selama pemeliharaan media uji dikondisikan pada keadaan optimum untuk ikan uji dengan melakuakan penyiponan dan pergantian air.
Data yang diambil selama penelitian meliputi: jumlah pakan yang diberikan (g), jumlah ikan mati dan ikan hidup (ekor dan g), berat ikan uji pada awal dan akhir penelitian (g) dan mengukur kualitas air.  Variabel kualitas  air  yang  diukur  adalah  suhu  ( o C),  salinitas  (ppt),  DO  (mg/l),  pH  dan  amonia  (mg/l).    Variabel    suhu diukur setiap pagi, siang dan sore.  Salinitas diukur saat pembuatan media stok, sedangkan DO dan pH dilakukan setiap  minggu.    Pengukuran  amonia  dilakukan  diawal  dan  diakhir  penelitian.    Pengukuran  suhu  menggunakan termometer, DO diukur menggunakan DO meter, pH diukur menggunakan pH papper dan pengukuran amonia dilakukan di Laboratorium Fisika Kimia Lingkungan BBPBAP (Balai Besar Perikanan Air Payau), Jepara.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  metode  eksperimental.    Metode  eksperimental  menurut  Setyanto  (2005) adalah  suatu  metode  penelitian  yang  mana  penelitian  tersebut  memanipulasi  dan  mengontrol  satu  atau  lebih variabel  bebas.      Disamping  mengontrol  variabel  bebas  juga  dilakukan  pengamatan  terhadap  variabel-variabel terikat  untuk  menemukan  variasi  yang  muncul  bersamaan  dengan  manipulasi  terhadap  variabel  bebas  yang dimanipulasi.
Rancangan  penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  RAL  merupakan  jenis rancangan,  dimana  perlakuan  diberikan  secara  acak  kepada  seluruh  unit  percobaan.    Perlakuan  dilakukan demikian  karena  lingkungan  tempat  percobaan  dilakukan  dianggap  homogen  sehingga  media  atau  tempat percobaan tidak memberikan pengaruh pada respon yang diamati (Sastrosupadi, 2000).  Perlakuan terdiri dari 4 perlakuan, dan setiap perlakuannya diulang sabanyak 3 kali.
Perlakuan yang diujicobakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:
Perlakuan A : Eksogen enzim pencernaan 0% ; Perlakuan B : Eksogen enzim pencernaan 0,05% ; Perlakuan C
: Eksogen enzim pencernaan 0,1%; dan
Perlakuan D
: Eksogen enzim pencernaan 0,15%.

## Pengumpulan Data
Data  yang  dikumpulkan  meliputi:  bobot  ikan    uji    awal  dan  akhir  penelitian  untuk  perhitungan  nilai PER, EPP dan SGR,  jumlah  ikan  mati dan ikan hidup selama penelitian  untuk  menghitung  nilai SR, dan data kualitas air.
Protein Effeciency Ratio (PER) Menurut Tacon (1987), perhitungan nilai PER adalah  sebagai berikut:
t
i
Keterangan
:
PER = Protein effeciency ratio (%); Wt = Bobot total hewan uji pada akhir penelitian (g); W 0 = Bobot total hewan  uji pada  awal penelitian (g); dan Pi = Jumlah kandungan protein pakan yang dikonsumsi (%).

## Efesiensi Pemanfaatan Pakan (EPP)
Menurut Tacon (1987), perhitungan nilai EPP adalah sebagai berikut:
t
Keterangan
:
EPP = Efesiensi pemanfaatan pakan (%); Wt = Bobot total hewan uji pada akhir penelitian (g); W 0 = Bobot total hewan  uji pada  awal penelitian (g); dan F = Jumlah pakan ikan yang dikonsumsi selama penelitian (g).
Specific Growth Rate (SGR) Menurut Takeuchi (1988), perhitungan nilai SGR adalah sebagai  berikut:
L   t L
t
Keterangan :
SGR = Specific growth rate (%); Wt = Bobot total hewan uji pada akhir penelitian (g); W 0 = Bobot total hewan  uji pada  awal penelitian (g); dan t = lama waktu pemeliharaan (hari)
Survival Rate (SR) Berdasarkan rumus Effendi (1997), perhitungan nilai SR adalah sebagai berikut: t
Keterangan :
SR = Survival rate (%); Nt = Jumlah ikan  yang hidup pada akhir penelitian (ekor); dan N 0 = Jumlah ikan  pada awal penelitian (ekor).

## HASIL
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  penambahan  eksogen  enzim  pencernaan  dalam  pakan  buatan memberikan  pengaruh  sangat  nyata  (P<0,01)  terhadap  PER  dan  SGR,  memberikan  pengaruh  nyata  (P<0,05) terhadap  EPP,  tidak  berpengaruh  nyata  (P>0,05)  terhadap  SR  dan  tidak  mempengaruhi  kualitas  air  media pemeliharaan.    Hasil  penelitian  nilai  PER,  EPP,  SGR  dan  SR  melalui  penambahan  eksogen  enzim  pencernaan dalam  pakan  buatan  ikan  bandeng  ( C.  chanos ) dapat  dilihat  pada  Tabel  3,  dan  secara  histogram  terdapat  pada Gambar 1, untuk hasil kualitas air dapat dilihat Tabel 4.
Tabel 3.  Nilai Rata-Rata Nilai PER, EPP, SGR dan SR ikan bandeng ( C. chanos ) selama Penelitian Variabel Perlakuan A B C D PER (%) 1,46±0,12 b 1,69±0,03 a 1,40±0,08 c 1,18±0,1 d EPP (%) 59,31±4,86 b 68,66±1,40 a 56,72±3,10 b 48,13±4,22 c SGR (%) 2,03±0,19 b 2,46±0,18 a 2,08±0,11 b 1,84±0,10 c SR (%) 100,00±0,00 a 100,00±0,00 a 100,00±0,00 a 100,00±0,00 a
Keterangan: Nilai dengan Supercript yang sama pada kolom menunjukkan tidak adanya perbedaan yang nyata.
(a) (b) (c) (d)
Gambar 1.  Histogram PER (a), EPP (b), SGR (b) dan SR.
Tabel 4. Hasil Pengukuran Parameter Kualitas Air Media Pemeliharaan Ikan Bandeng ( C. chanos ) Selama  Penelitian
Perlakuan Kisaran Nilai Parameter Kualitas Air Suhu ( 0 C) pH DO (mg/l) NH 3 (mg/l) Salinitas (ppt) A 27–32 7–7,5 4,47–5,66 0,03–0,05 20 B 27–32 7–7,5 4,52–5,57 0,03–0,05 20 C 27–32 7– 7,5 4,72–5,42 0,03–0,05 20 D 27–32 7–7,5 4,66–5,42 0,03–0,05 20 Referensi 28–32* 7–8,5* > 5*/> 3 ** <1*** 5-35 *
Keterangan:
* SNI (1999)
** Bagarinao (1991)
*** Robinette (1976)
1,46±0,12 1,69±0,03 1,4±0,08 1,18±0,1 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 A B C D PER (% ) Perlakuan 59,31±4,86 68,66±1,40 56,72±3,1 48,13±4,22 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 A B C D E P P ( %) Perlakuan 2,03±0,19 2,46±0,18 2,08±0,11 1,84±0,1 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 A B C D S GR ( % ) Perlakuan 100,00±0,00  100,00±0,00 100,00±0,00 100,00±0,00 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00 A B C D S R ( % ) Perlakuan
Dosis penambahan eksogen enzim pencernaan terbaik pada pakan buatan adalah perlakuan B (0,05%) dengan  nilai  PER  1,69±0,03%;  EPP  68,66±1,40%;  SGR  2,46±0,18%  dan  SR  100%.    Dosis    penambahan eksogen enzim pencernaan terburuk pada pakan buatan adalah perlakuan D (1,5%) yang menghasilkan nilai PER sebesar 1,18±0,1%; EPP 48,13±4,22%; SGR 1,84±0,10%/hari dan SR 100,00±0,00%.

## PEMBAHASAN

## Protein Effeciency Protein (PER)
Niali  PER  perlakuan  B  (0,05%)  terbaik  bila  dibandingkan  dengan  perlakuan  yang  lain  dengan  nilai sebesar 1,69±0,03%.  Tingginya nilai PER perlakuan B diduga karena mengandung dosis yang tepat untuk ikan bandeng  ( C.  chanos )  stadia  gelondongan  muda  (2,68±0,24  g).    Enzim  protease  berperan  dalam  proses pemecahan  protein  pakan  yang  akan  meningkatkan  nilai  PER,  yang  secara  langsung  akan  mempengaruhi pertumbuhan.  Hal ini sesuai dengan pendapat Sing et al. (2011) yang menyatakan bahwa pakan yang ditambah enzim  papain  menghasilkan  daya  cerna  protein  yang  lebih  tinggi  jika  dibandingkan  dengan  pakan  tanpa penambahan enzim papain, hal ini karena penambahan enzim papain dapat meningkatkan kandungan protein dan enzim protease yang berasal dari pakan.  Menurut Khati et al. (2015), enzim papain adalah enzim protease yang menghidrolisis  protein,  yang  merupakan  faktor  kunci  untuk  meningkatkan  daya  cerna  protein  dan penyerapannya,  yang  pada  akhirnya  mempengaruhi  pertumbuhan.    Enzim  papain  bertindak  sebagai  katalis biologis yang dapat meningkatkan daya cerna pakan kualitas rendah, sehingga biaya pakan dapat ditekan.  Enzim papain  dapat  mengurangi  faktor  negatif  dari  asam  fitat  yang  berasal  dari  bahan  dasar  nabati  pakan.    Menurut Winarno  (1986),  hidrolisis  protein  yang  sempurna  akan  menghasilkan  asam  amino  yang  tinggi,  sehingga semakin  banyak  yang  dapat  diserap  oleh  tubuh.    Menurut    Kim et  al. (1991),  protein  yang  diserap  dari  pakan akan  dimanfaatkan  sebagai  energi,  dan  selebihnya  dimanfaatkan  untuk  pertumbuhan.    Kemampuan  ini dipengaruhi  oleh  pemanfaatan  protein.    Dimana  semakin  tinggi  protein  yang  dimanfaatkan  oleh  tubuh  maka penggunaan protein akan semakin efesien.  Menurut  Widyanti (2009), rasio efesiensi protein dan pertumbuhan ikan  berkorelasi  positif  dengan  daya  cerna  pakan,  dimana  semakin  rendah  daya  cerna  pakan  maka  semakin rendah  rasio  efesiensi  proteinnya.    Pakan  yang  ditambahkan  enzim  papain  mudah  dicerna  ikan  maka  dapat dikatakan bahwa pakan tersebut memiliki efesiensi protein yang baik.
Perlakuan A (0%) dalam penilitian ini menghasilkan niali PER yang lebih tinggi daripada perlakuan C (0,1%)  dan  D  (0,15%) dengan  nilai  1,46±0,12%,  diduga  karna  pakan  yang  digunakan  memiiki  protein  sebesar 40,62%  hanya  membutuhkan  penambahan  enzim  dalam  dosis  yang  kecil  (perlakuan  B)  dan  bila  berlebih  akan berdampak negatif.  Zamini et al. (2012) menerangkan bahwa pemanfaatan enzim tergantung pada bahan baku pakan yang digunakan.  Hal ini dijelaskan lebih lanjut oleh pendapat Adeoye et al. (2016) bahwa enzim protease lebih  efektif  bekerja  pada  pakan  yang  memiliki  nilai  protein  lebih  rendah  bila  dibandingkan  dengan  pakan berprotein tinggi.  Perlakuan C dan D mengalami penurunan nilai PER diduga karena pada perlakuan C dan D protein  yang  dihidrolisis  oleh  enzim  protease  melebihi  kebutuhan  ikan  bandeng  ( C.  chanos )  sehingga penambahan enzim berdampak  negatif  terhadap nilai PER.   Dampak negatif penambahan enzim protease  yang melebihi  kebutuhan  ikan  diungkapkan  oleh  Infantea  dan  Cahua  (2007)  yang  menyatakan  bahwa  jika penambahan  protein  hasil  hidrolisis  berlebihan  dapat  berdampak  negatif  pada  pertumbuhan  dan  kelangsungan hidup  larva,  hal  ini  diduga  karena  kandungan  yang  terlalu  tinggi  mempengaruhi  regulasi  sintesis  dan  sekresi tripsin.    Hal  ini  juga  terjadi  pada  penambahan  enzim  xilanase  yang  berlebihan.    Menurut  Bedforda  dan Cowiesonb (2012), pemberian  enzim xilanase dapat bersifat positif terhadap  mikroba tetapi juga dapat bersifat negatif.    Pemberian  xilanase  berdampak  negatif  terhadap  mikroba  dapat  dikaitkan  dengan  efek  kegagalan xilanase untuk dapat dimanfaatkan secara optimal oleh mikroba, namun mekanisme ini belum diketahui.

## Efesiensi pemanfaatan pakan (EPP)
Perlakuan B memiliki nilai EPP terbaik dengan nilai 68,66±1,40%, diduga karena penambahan eksogen enzim  pencernaan  dengan  dosis  0,05%  dapat  memperbaiki  nilai  EPP  pakan.    Enzim  pada  dasarnya mempengaruhi sistem pencernaan ikan, yang berpengaruh langsung terhadap pemanfaatan pakan.  Hal ini sesuai dengan  pendapat  Khattak et  al. (2006)  bahwa  enzim  terlibat  dalam  semua  jalur  anabolik  dan  katabolik pencernaan  dan  metabolisme.    Hasil  ini  sesuai  dengan  penelitian    Zamini et  al. (2012)  yang  menyimpulkan bahwa  penggunaan  pakan  caspian  salmon  ( Salmo  trutta  caspius )  yang  diberi  enzim  kompleks  Natuzyme (protease,  lipase,  fitase,  α  amilase,  cellulase,  amiloglucosidase,  β  gluca ase,  pe toso ase,  hemicellulase, xylanase, pectinase, asam phosphatase dan asam phytase) dan Hemicell (endo-β-mannanase, amylase, xylanase, cellulose da  α-galactosydase) menghasilkan nilai SGR dan FCR lebih baik bila dibanding dengan pakan tanpa penambahan enzim yaitu sebesar 1,01±0,01%/hari dan 0,64±0,01, terlebih pada perlakuan  kombinasi Natuzyme 0,5 g/kg dan Hemicell 0,5 g/kg, hal ini menunjukkan bahwa penggunaan multi-enzim secara bersama-sama lebih efektif, bila dibandingkan dengan penggunaannya secara individu.  Penggunaan eksogen enzim pada pakan dapat
digunakan  untuk  melengkapi  produksi  enzim  endogen  yang  diproduksi  oleh  ikan  termasuk  amilase  untuk meningkatkan daya cerna pati, protease untuk meningkatkan daya cerna protein dan lipase untuk meningkatkan daya cerna lipid.
Menurut  Akter et  al. (2016),  peningkatan  respon  pertumbuhan  dan  aktivitas  enzim  pencernaan  dapat dijelaskan  oleh  pengaruh  positif  dari  prebiotik  pada  morfologi  usus  ikan.    Morfologi  usus  ikan  yang  baik berdampak  positif  pada  pemanfaatan  pakan  dan  kesehatan  ikan.    Analisis  mikroskopis  menunjukkan  bahwa panjang villus (anterior dan posterior usus) dan panjang microvillus meningkat secara signifikan pada ikan yang diberi enzim MOS dengan dosis 0,6 dan 0,8%, akan tetapi struktur usus seperti lebar villus tidak berubah secara signifikan dengan meningkatnya dosis penambahan enzim MOS.  Hasil ini dapat dikaitkan dengan pemanfaatan nutrisi  yang  lebih  baik.    Penambahan  enzim  menjadikan  pencernaan  lebih  baik  yang  secara  tidak  langsung menyediakan  lingkungan  kondusif  untuk  mikroba  baik.    Hal  ini  dapat  dilihat  dari  jumlah  mikroba  baik  yang meningkat seiring dengan peningkatan dosis enzim.
Nilai  EPP terendah adalah perlakuan D sebesar  48,13±4,22%, diduga karena pada dosis tersebut ikan bandeng  ( C.  chanos )  tidak  bisa  lagi  memanfaatkan  hasil  penguraian  oleh  enzim  dengan  baik,  hal  ini  didukung oleh  pendapat  Kazerani  dan  Shahsavani  (2011),  yang  menerangkan  dampak  negatif  penambahan  enzim pencernaan  yang  melebihi  kebutuhan  ikan.    Penambahan  enzim  dengan  merek  dagang  Endofeed  W  yang me ga du g  yla ase (≥  2   U/g), β-gluca ase (≥ 44  U/g), cellulase da  hemicellulase kedalam paka  buata dengan  dosis      0,25  g/kg  tidak  menunjukkan  pengaruh  signifikan  pada  berat  akhir  ikan  mas  ( C.  carpio ),  dan mengalami  penurunan  yang  tidak  signifikan  bila  dosis  dinaikkan  (2-3  g/kg).    Pemberian  enzim  dengan  dosis berlebihan  dapat  membebaskan  monosakarida  secara  berlebihan,  dan  produksi  monosakarida  yang  berlebihan dapat  menghambat  pertumuhan  dan  mengganggu  kesehatan  ikan.    Kelebihan  monosakarida  juga  dapat mendorong  terjadinya  hiperglikemia.    Menurut  Putri  (2013),  hiperglikemia  adalah  kondisi  kadar  gula  darah (glukosa)  yang  tinggi.    Hiperglikemia  sendiri  dapat  melemahkan  sekresi  insulin  dan  menambah  berat  retensi insulin  sehingga  membentuk  lingkaran  dimana  hiperglikemia  bertambah  berat  dan  produksi  insulin  semakin sedikit.
Penambahan  enzim  pencernaan  secara  berlebihan  berdampak  negatif  untuk  ikan,  hal  ini  diterangkan oleh Akter et al. (2016) bahwa peningkatan aktivitas enzim pada pakan yang ditambahkan enzim MOS memiliki batas  optimum.    Dilaporkan  oleh  Akter et  al (2016),  penambahan  enzim  MOS  dengan  dosis  0,8%  tidak menyebabkan  peningkatan  lebih  lanjut  aktivitas  enzim  pencernaan,  hal  ini  terlihat  pada  data Apparent  Protein Digestibility (APD) dan Apparent Dry Matter Digestibility (ADM) yang mengalami penurunan, dan sampai saat ini  mekanisme  pengaruh  ini  belum  diketahui.    Mekanisme  pengaruh  ini  secara  tidak  langsung  dijelaskan  oleh Khattak et al. (2006) yang  menjelaskan  mekanisme dasar kerja enzim.  Enzim  mengkatalis  secara spesifik dan bertindak  pada  satu  substrat.    Pernyataan  tersebut  menyimpulkan  bahwa  ketika  tidak  tersedia  substrat  untuk enzim,  maka tidak ada aktivitas enzim.  Hal ini terjadi pada perlakuan  yang penambahan enzimnya berlebihan namun  substratnya  terbatas.    Penambahan  enzim  secara  berlebihan  dengan  substrat  terbatas  tidak  dapat meningkatkan  aktivitas  enzim,  karena  aktivitas  enzim  terhenti  saat  substrat  habis.    Hal  ini  sependapat  dengan Adugna et  al. (2004),  meningkatkan  konsentrasi  subtrat  dapat  meningkatkan  aktivitas  enzim  sampai  batas maksimum tercapai.  Kondisi tersebut menunjukkan bahwa molekul substrat dan molekul enzim akan bergabung pada  sisi  aktif  sampai  semua  sisi  aktif  terpakai,  pada  keadaan  tersebut  enzim  dikatakan  dalam  keadaan maksimum.

## Pertumbuhan
Laju  pertumbuhan  yang  tinggi  berkaitan  dengan  nilai  EPP  yang  tinggi  pula.    Nilai  EPP  yang  tinggi menunjukkan  bahwa  sedikit  zat  makanan  yang  dirombak  untuk  memenuhi  kebutuhan  energi  dan  selebihnya untuk  pertumbuhan  (Huet,  1970).    Pendapat  tersebut  sesuai  dengan  hasil  penelitian  ini,  yang  menunjukkan bahwa  nilai  SGR  perlakuan  terbaik  (perlakuan  B)  berbanding  lurus  dengan  nilai  EPP  perlakuan  terbaik (perlakuan B).  Dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi nilai EPP maka semakin tinggi pula nilai SGR.
Tingginya  nilai  SGR  pada  perlakuan  B  sebesar  2,46±0,18%/hari  diduga  karena  pada  perlakuan  B memiliki  dosis  yang  tepat  untuk  ikan  bandeng  ( C.  chanos ).    Hasil  penelitian  ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian Ghomi et  al. (2012)  yang  menyimpulkan  bahwa  ikan  sturgeon  ( Huso  huso )  yang  diberi  pakan  buatan  dengan penambahan  enzim  kompleks  (phytase,  lipase,  xylanase,  protease,  beta-glucanase,  alpha-amylase,  pentosanase, hemicellulase,  cellulase  dan  pectinase)  dengan  dosis  0,025-0,05%  dapat  meningkatkan  pertumbuhan.    Hasil tersebut diperkuat oleh pernyataan Dalsgaard et al. (2012) bahwa penambahan enzim dapat meningkatkan daya cerna lemak.
Dampak  kekurangan  enzim  pencernaan  diterangkan  oleh  Kazerani  dan  Shahsavani  (2011)  yang menjelaskan  bahwa  jika  kuantitas  enzim  terlalu  rendah  menyebabkan  viskositas  pencernaan  meningkat. Meningkatnya viskositas pencernaan non-pati polisakarida yang berasal dari karbohidrat yang tidak larut,  dapat mengurangi  daya  cerna  dan  penyerapan  nutrisi  pakan.    Penggunaan  enzim  tambahan  dapat  mengakibatkan
pembebasan  galaktosa  dan  xilosa  dari  polisakarida  non-pati.    Menurut  Akter et  al. (2016),    dampak  positif penambahan  enzim  terkait  dengan  pemanfaatan  nutrisi  yang  lebih  baik.    Penambahan  enzim  menjadikan pencernaan lebih baik  yang secara tidak langsung  menyediakan lingkungan  kondusif untuk  mikroba baik.  Hal ini  dapat  dilihat  dari  jumlah  mikroba  baik  yang  meningkat  seiring  dengan  peningkatan  dosis. Yildirim dan Turan (2010) menyimpulkan bahwa nilai FCR, PER dan Apperent Net Protein Utilization (ANPU) ikan  lele (Clarias  gariespinus ) yang  diberi  eksogen  enzim  kompleks  dengan  dosis  0,25;  0,5  dan  0,75  g/kg menghasilkan  nilai  berbeda  nyata  (P  <  0,05)  bila  dibandingkan  dengan  kontrol.    Penambahan  eksogen  enzim dapat menaikkan produksi endogen enzim seperti amilase untuk memecah karbohidrat, protease untuk memecah protein  dan  lipase  untuk  memecah  lemak,  untuk  mendukung  produksi  endogen  enzim  pencernaan  ikan.    Jenis endogen  enzim  pencernaan  yang  diproduksi  oleh  ikan  diterangkan  oleh  Arafat et  al. (2015)  yang  menyatakan bahwa usus ikan bertipe herbivora dapat mensekresikan enzim-enzim yang dapat mempercepat reaksi hidrolisis karbohidrat, lemak dan protein.
Hasil nilai SGR perlakuan B ke C mengalami penurunan begitupun dari perlakuan C ke D.  Nilai SGR terendah  adalah  perlakuan  D  dengan  nilai  sebesar  1,84±0,10%/hari.    Penurunan  nilai  SGR  diduga  dikarenakan enzim  yang  diberikan  melebihi  kebutuhan  ikan  bandeng  ( C.  chanos ).    Menurunya  nilai  SGR  menurut  Infantea dan  Cahua  (2007)  terjadi  karena  jika  penambahan  protein  hasil  hidrolisis  berlebihan  dapat  berdampak  negatif pada  pertumbuhan  dan  kelangsungan  hidup  larva,  hal  ini  diduga  karena  kandungan  yang  terlalu  tinggi mempengaruhi regulasi sintesis dan sekresi tripsin.  Menurut Fujaya dan Sudaryono (2015), tripsin termasuk ke dalam  enzim  yang  berperan  sebagai  katalisator  dalam  menghidrolisis  rantai  peptid  bagian  tengah  dan  rantai peptid yang sangat spesifik (endopeptidase).  Tripsin disekresikan oleh pankreas eksokrin yang berperan dalam menghidrolisi protein menjadi pepton, peptides dan asam amino dalam usus.  Menurut Kazerani dan Shahsavani (2011),  enzim  dengan  dosis  berlebihan  dapat  membebaskan  monosakarida  secara  berlebihan  dan  mendorong terjadinya  hiperglikemia  yang  dapat  menghambat  pertumuhan.  Menurut  Putri  (2013),  hiperglikemia  adalah kondisi kadar gula darah yang tinggi.  Hiperglikemia sendiri dapat melemahkan sekresi insulin dan menambah berat retensi insulin.
Survival Rate (SR)
Menurut  Khati et  al. (2015),  kelulushidupan  dan  kesehatan  ikan  menentukan  keberhasilan  dan kegagalan kegiatan budidaya ikan.  Nilai SR pada semua perlakuan sebesar 100%, dan menurut hasil uji ragam nilai  SR  setiap perlakuan tidak berbeda nyata (P > 0,05).  Hal ini  menunjukkan bahwa  perlakuan penambahan eksogen enzim tidak berpengaruh pada nilai SR ikan bandeng ( C. chanos ) selama penelitian.  Menurut  Siregar dan  Adelina  (2009),  kelulushidupan  dapat  dipengaruhi  oleh  faktor  biotik  dan  abiotik.  Faktor  biotik  terdiri  dari umur dan kemampuan ikan dalam menyesuaikan diri dengan lingkungan.  Faktor abiotik antara lain ketersediaan makanan dan kualitas media hidup.  Ketersediaan makanan dalam penelitian ini diduga cukup untuk memenuhi kebutuhan ikan dalam mempertahankan diri.

## Parameter kualitas air
Kualitas air selama penelitian dalam kondisi baik untuk kehidupan ikan bandeng ( C. chanos ).  Hal ini menunjukkan bahwa penggunaan eksogen enzim pencernaan tidak mempengaruhi kualias air. Hal ini sependapat dengan  Khati et  al. (2015)  yang  menyatakan  bahwa  enzim  papain  ramah  lingkungan  dan  tidak  memiliki pengaruh pada kualitas air (suhu, pH, oksigen terlarut, karbon dioksida dan alkalinitas).  Data kualitas air dapat dilihat pada Tabel 4.
.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Kesimpulan dari penelitian adalah sebagai berikut:
1. Penambahan  eksogen  enzim  pencernaan  dengan  merek  dagang  BioEnzyme  berpengaruh  sangat  nyata (P  <  0,01)  terhadap  nilai Protein  Effeciency  Ratio (PER)  dan Specific  Growth  Rate (SGR),  berpengaruh nyata (P < 0,05) terhadap nilai Efesiensi Pemanfaatan Pakan (EPP); tidak berpengaruh (P > 0,05) terhadap nilai Survival Rate (SR); dan
2. Dosis  terbaik  eksogen  enzim  pencernaan  yang  ditambahkan  kedalam  pakan  adalah  perlakuan  B  (0,05%), dengan nilai PER, EPP dan SGR sebesar 1,69±0,03%; 68,66±1,40% dan 2,46±0,18%/hari.

## Saran
Saran yang dapat diberikan dari penelitian adalah sebagai berikut:
1. Disarankan  melakukan penelitian lebih lanjut untuk stadia ikan bandeng ( C. chanos ) dengan ukuran  yang lebih besar; dan
2. Disarankan melakukan penelitian dengan fokus pada salah satu enzim pencernaan baik itu amilase, protease maupun lipase untuk ikan bandeng  ( C. chanos ).

## DAFTAR PUSTAKA
Adeoyea,  A.A.,  A.J.  Torresa,  S.W.  Foxb,  D.L.  Merrifielda  and  S.J.  Daviesca.    2016.    Supplementation  of Formulated  Diets  for  Tilapia  ( Oreochromis  niloticus )  with  Selected  Exogenous  Enzymes:  Overall Performance  and  Effects  on  Intestinal  Histology  and  Microbiota.  Joernal  Animal  Feed  Science  and Technology, 15: 1-10.
Adugna,  S.,  L.A.M.  Alemu,  T.  Kelemu,  H.  Tekola,  B.  Kibret  and  S.  Genet.    2004.    Medical  Biochemistry. Gondar  University;  Jimma  University  and  Debub  University,  In  collaboration  with  the  Ethiopia  Public Health Training Initiative; The Carter Center; The Ethiopia Ministry of Health, and The Ethiopia Ministry of Education, 264 p.
Arafat, M.Y., N. Abdulgani dan R.D. Devianto.  2015.  Pengaruh Penambahan Enzim pada Pakan Ikan Terhadap Pertumbuhan Ikan Nila     ( Oreochromis niloticus ). Jurnal Sains dan Seni ITS, 4 (1): 2337-3520.
Akter,  N.,  A.  Sutriana,  A.D.  Talpur  and  R.  Hashim.    2016.    Dietary  Supplementation  with  Mannan Oligosaccharide  Influences  Growth,  Digestive  Enzymes,  Gut  Morphology,  and  Microbiota  in  Juvenile Striped Catfish ( Pangasianodon hypophthalmus ).  Aquatic Int, 24:127-144 . Azwar,  Z.I.  dan  I.  Melati.    2010.    Peningkatan  Kualitas  Tepung  Magot  Melalui  Penggunaan  Mikroba ( Aspergillus  niger )  dan  Pemanfaatannya  dalam  Pakan  Ikan  Lele  Dumbo  ( Clarias  gariepinus). [Prosiding].  Forum Inovasi Teknologi Akuakultur,  Bogor,  703-713 hlm.
Bedforda, M.R.  and A.J. Cowiesonb.  2012.  Exogenous Enzymes and Their Effects on Intestinal Microbiology. Animal Feed Science and Technology, 173: 76-85.
Borlongan,  I.G.  and  A.M.  Coloso.    1992.    Nutrient  Requirements  and  Interactions  Requirements  of  Juvenile Milkfish  ( Chanos  chanos Forsskal)  for  Essential  Amino  Acids.    Aquaculture  Department,  Southeast Asian Fisheries Development Center, Tigbauan, Lioilo, Philippines, pp. 125-133.
Dalsgaarda, J., V. Verlhacb, N.H. Hjermitslevc, K.S. Ekmannc, M. Fischerd, M. Klausend and P.B. Pedersena.
2012.    Effects  of  Exogenous  Enzymes  on  Apparent  Nutrient  Digestibility  in  Rainbow  Trout ( Oncorhynchus  mykiss )  Fed  Diets  with  High  Inclusion  of  Plant  Based  Protein.    Joernal  Animal  Feed Science and Technology, 171:181-191.
Effendi,  H.    1997.    Telaah  Kualitas  Air  Bagi  Pengolahan  Sumberdaya  dan  Lingkungan  Perairan.    Kanisius,
Yogyakarta, 17 hlm.
Erzaneti, R.  2011.  Peran Salinitas Terhadap Toksisitas Merkuri dan Pengaruhnya Terhadap Kondisi Fisiologis Ikan Bandeng ( Chanos chanos Forsskal).  [Tesis].  Institut Pertanian Bogor, Bogor.   98 hlm.
Fujaya,  Y.  dan  A.  Sudaryono.    2015.    Fisiologi  Ikan  dan  Aplikasinya  pada  Perikanan.    Pustaka  Al-Zikra, Makasar dan Yogyakarta, 309 hlm.
Ghomi, M.R., R. Shahriari, H.F.  Langroudi,  M. Nikoo and E.V. Elert.  2012.    Effects of Exogenous Dietary Enzyme  on  Growth,  Body  Composition,  and  Fatty  Acid  Profiles  of  Cultured  Great  Sturgeon ( Huso huso ) Fingerlings.  Aquacult Int,  20: 249–254.
Huet, M. 1970. Texbook of Fish Culture. Fishing News (Book Ltd.), London, 436 p.
Infantea,  J.L.Z.  and  C.L.  Cahua.    2007.    Dietary  Modulation  of  Some  Digestive  Enzymes  and  Metabolic Processes in Developing Marine Fish: Applications to Diet Formulation.  Aquaculture,  268: 1-14.
Jaikumar, M., C.S. Kumar, R.S. Robi, P. Karthikeya and  A.  Nagarjuna.  2013.  Milkfish Culture: Alternative Revenue for Mandapam Fisherfolk, Palk Bay, Southeast Coast of India.  International Journal of Fisheries and Aquaculture Sciences, 3(1): 31-43.
Khati, A., M. Danish, K.S. Mehta and N.N. Pandey.  2015. Estimation of Growth Parameters in Fingerlings of Labeo rohita Fed with Exogenous Nutrizyme in Tarai Region of Uttarakhand, India.  African Journal of Agricultural Research, 10(30):3000-3007.
Khattak, F.M., T.N. Pasha, Z. Hayat and A. Mahmud.  2006.  Enzymes in Poultry Nutrition.  Joernal Anim. Pl. Sci, 16:1-2.
Khodijah,  D.,  D.  Rachmawati  dan  Pinandoyo.    2015.    Performa  Pertumbuhan  Benih  Ikan  Lele  Sangkuriang ( Clarias  gariepinus )  Melalui  Penambahan  Enzim  Papain  dalam  Pakan  Buatan.  Journal  of  Aquaculture Management and Technology.  4(2): 35-43.
Kim, K., T.B. Kayes and C.H. Amundson.  1991.  Purified Diet Development and Reevaluation of the Dietary Protein  Requirement  of  Fingerling  Rainbow  Trout  ( Oncorhyncus  mykiss ).    Aquaculture, 96: 57-67 pp.
Putri,  A.A.    2013.    Pengaruh  Maserat  Lidah  Buaya  ( Aloe  vera )  Terhadap  Kadar  Gula  Darah  Mencit ( Mus  musculus L.)  Jantan  Hiperglikemi  dengan  Induksi  Aloksan.    [Skripsi].    Universitas  Pendidikan Indonesia,  Bandung, 50 hlm.
Rangka,  N.A.  dan  A.I.J.  Asaad.    2010.    Teknologi  Budidaya  Ikan  Bandeng  di  Sulawesi  Selatan.    [Prosiding]. Balai Riset Perikanan Budidaya Air Payau, Maros, Sulawesi Selatan,  187-203 hlm.
Riko,  Y.A.,  Rosidah  dan  T.  Herawati.    2012.    Intensitas  dan  Prevalensi  Ektoparasit  pada  Ikan  Bandeng ( Chanos chanos ) dalam Karamba Jaring  Apung (KJA) di Waduk Cirata Kabupaten Cianjur Jawa Barat. Jurnal Perikanan dan Kelautan, 3(4): 231-241.
Robinette,  H.R.    1976.    Effect  of  Sublethal  Level  of  Ammonia  on  The  Growth  of  Channel  Catfish ( Ictalarus punctatus R.) Frog. Fish Culture, 38(1): 26-29 pp.
Sastrosupadi, A.  2000.  Rancangan Percobaan Praktis Bidang Pertanian. Kanisius, Yogyakarta, 276 hlm.
Setyanto,  A.E.  2005.  Memperkenalkan  Kembali  Metode  Eksperimen  dalam  Kajian  Komunikasi.  Jurnal  Ilmu Komunikasi, 3(1):37-48.
Siregar,  Y.I.  dan  Adelina.  2009.  Pengaruh  Vitamin  C  Terhadap  Peningkatan  Hemoglobin  (Hb)  Darah  dan Kelulushidupan Benih Ikan Kerapu Bebek ( Cromileptes alvitelis ). Jurnal Natur Indonesia, 1: 75-81. Singh,  P.,  S.  Maqsood,  M.H.  Samoon,  V.  Phulia,  M.  Danish,  Ramesh  and  S.  Chalal.    2011.    Exogenous Supplementation of Papain as Growth Promoter in Diet of Fingerlings of Cyprinus carpio. International Aquatic Research, 3: 1-9.
SNI.    01-  6150  –  1999.    Produksi  Benih  Ikan  Bandeng  ( Chanos  chanos Forskal)  Kelas  Benih  Sebar.    Badan Standarisasi Nasional Indonesia, 12 hlm.
Tacon, A.G.J.  1987.  The Nutrition and Feeding of Farmed Fish and Shrimp A Training Manual The Essential Nutrients. Food and Agriculture Organization of The United Nations Brasilia, Brazil, pp. 106-109.
Takeuchi,  T.    1988.    Laboratory  Work  Chemical  Evaluation  of  Dietary  Nutrient.    (Eds.)  Fish  Nutrition  and Marine Culture. JICA, Tokyo University,     pp. 179-229.
Widyanti,  W.    2009.    Kinerja  Pertumbuhan  Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus )  yang  Diberi  Berbagai  Dosis Enzim  Cairan  Rumen  pada  Pakan  Berbasis  Daun  Lamtoroagung  ( Leucaena  leucocephala ).  [Skripsi]. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB, 35 hlm.
Wilson,  R.P.    1982.    Energy  Relationship  in  Catfish  Diet.  (Eds.)  Nutrition  and  Feeding  of  Chennel  Catfish.
Southerm Coorperative Series, pp. 25-31.
Winarno, F.G. 1986. Enzim Pangan. PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta, 109 hlm. Yidirim, Y.B. and F. Tutran.  2010.  Effec Exogeneus Enzyme  Supplementastion in Diet on Growth and Feed Utilization in Afrika Catifish ( Clarias gariepinus ) . Joernal of Animal and Veterinary Advances,         9 (2); 327-331.
Zamini,  A.A.,  H.G.  Kanani,  A.A.  Esmaeili,  S.  Ramezani  and  S.J.  Zoriezahra.    2012.  Effects  of  Two  Dietary Exogenous  Multi-enzyme  Supplementation,  Natuzyme®  and  Beta-mannanase  (Hemicell®),  on  Growth and Blood Parameters of Caspian Salmon ( Salmo trutta caspius ).  Comp Clin Patrol,  23:187-194.