## AKTIVITAS ANALGESIK INFUSA DAN DEKOKTA DAUN PULUTAN (Urena lobata)
ANALGESIC ACTIVITY OF INFUSA AND DECOCTA OF PULUTAN (Urena lobata) LEAF
Yudi Purnomo 1 , Andri Tilaqza 2*
1,2 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Islam Malang
Info Artikel Abstrak Sejarah Artikel : Submitted: 2022-07- 14 Accepted : 2022-08-08 Publish Online : 2022- 08-09
Latar  belakang: Pulutan  ( Urena  lobata )  merupakan  tanaman  obat  yang digunakan secara tradisional untuk pengobatan radang, infeksi dan rematik. Studi in  silico menunjukkan potensi  anti  inflamasi  dan  analgetik  dengan  menghambat siklooksigenase-2  (COX-2)  tetapi  penelitian  secara in  vivo belum  banyak dilaporkan. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi analgesik infusa  dan  dekokta  daun U.lobata pada  tikus. Metode: Desain  penelitian  ini control  group post  test  design menggunakan  tikus  wistar  jantan  yang  dibagi menjadi  5  kelompok.  Simplisia  daun U.  lobata dilakukan  penyarian  dengan metode  infudasi  dan  dekoktasi.  Dosis  infusa  dan  dekokta U.  lobata yang digunakan  masing-masing  250,  500  dan  1000  mg/kg  BB.  Pengujian  aktivitas analgesik menggunakan analgesimeter beban geser selama 4 jam. Data dianalisa menggunakan one way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji LSD (p<0.05). Hasil: Pemberian  infusa U.  lobata 250,  500  dan  1000  mg/kg  BB  meningkatkan Area Under  Curve  (AUC) ambang  nyeri  berturut-turut  sekitar  8  %,  10  %  dan  12  % dibandingkan  kelompok  kontrol  (p<0.05),  sementara  bentuk  dekokta meningkatkan kurang lebih 1 %, 3 % dan 3 % (p> 0.05). Simpulan: Infusa daun U. lobata memiliki aktifitas analgesik lebih kuat dibandingkan dekokta U.lobata
Kata Kunci: Analgesik, dekokta, infusa, Urena lobata
Keywords:
Analgesic, decotion, infusion, Urena lobata

## Abstract
Background: Pulutan (Urena lobata) is medicinal plant have been used to treat inflammation, infection and rheumatic traditionally. In silico study showed anti- inflammatory and analgesic effect through inhibition of Cycloxygenase-2 (COX- 2) activity. However, the  research using animal model are limited and  have not been  reported.  Objective:  The  objective  of  this  study  was  to  evaluate  the analgesic  activities  of  infusion  and  decoction  of  U.  lobata  in  rat.  Method:  This study control group post test design with male wistar rats which is divided into 5 groups. U. lobata leaf was extracted using infusion and decoction methods. Three test  doses  (250,  500,  1000  mg/kg  bw)  of  the  infusion  and  decoction  were administered  orally  1  hours  before  testing.  Analgesic  activity  was  examined  by paw  pressure  analgesiometer  for  4  hours.  The  results  was  analyzed  using  one way  ANOVA  test  and  continued  with  LSD  test  (p  <  0.05).  Results:  The  oral administration  infusion  of  U.lobata  250,  500,  1000  mg/kg  bw  were  able  to increase Area Under Curve (AUC) of threshold pain about 8 %,10  % and 12 % respectively  compared  to  control  group  (p<0.05),  meanwhile  the  decoction inhibit  more  and  less  1  %,  3  %  and  3  %  (p>0.05).  Conclusions:  Analgesic activity of U. lobata infusion stronger compare to it’s decoction
Yudi Purnomo | Aktivitas Analgesik Infusa Dan Dekokta Daun ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 1 Tahun 2022

## PENDAHULUAN
Nyeri  adalah  pengalaman  sensorik  dan  emosional  yang  tidak  menyenangkan  akibat kerusakan  jaringan,  baik  aktual  maupun  potensial  atau  yang  digambarkan  dalam  bentuk kerusakan tersebut ( Treede, 2018). Rasa nyeri yang timbul akan mengaktifkan respon imunitas tubuh untuk mengatasi kerusakan yang terjadi pada jaringan ( Baral et al ., 2019). Pada sisi lain nyeri merupakan mekanisme pertahanan tubuh sehingga individu memindahkan stimulus nyeri untuk mencegah kerusakan jaringan yang lebih parah. Namun rasa nyeri yang tidak terkendali dan  berlangsung  lama  akan  mengganggu  aktifitas  serta  produktifitas  individu  sehinggga  perlu dilakukan  terapi  secara  farmakologi  (Tansumri,  2007).  Pemberian  obat  golongan  analgesik merupakan  penatalaksanaan  secara  simptomatis  untuk  mengatasi  nyeri.  Analgesik  opioid digunakan untuk mengatasi nyeri kategori sedang hingga berat dan bekerja di sentral. Sementara analgesic non-opioid bekerja di perifer untuk nyeri ringan hingga sedang. Pemberian analgesik jangka  panjang  dan  tidak  tepat  akan  meningkatkan  resiko  efek  samping  serta  toksisitas  obat tersebut.  Beberapa  obat  analgesik memiliki  efek  samping  yang merugikan  seperti  mual,  tukak lambung, sedasi dan adiksi (Katzung, 2010), sehingga perlu dilakukan upaya pencarian sumber alternative bahan obat dari bahan alam.
Pulutan  ( Urena  lobata )  merupakan  tanaman  yang  berkhasiat  sebagai  obat.  Secara empiris, Urena  lobata digunakan  sebagai  obat  radang  seperti  rheumatoid  arthritis,  bronkitis, gingivitis  dan  atherosklerosis  ( Adewale et  al .,  2007;  Babu et  al .,  2016 ).  Data  uji  preklinik menunjukkan  bahwa Urena  lobata  (U.lobata) memiliki  aktifitas  anti-inflamasi  yang dikendalikan  senyawa quercetin dan mangiferin (Babu et  al .,  2016).  Metode  penyarian  herbal secara  infudasi  dan  dekoktasi  dengan  pelarut  air  banyak  digunakan  di  masyarakat  karena praktis,  ekonomis  dan  aman.  Penelitian  tentang  aktivitas  analgetik  daun Urena  lobata hingga saat  ini  belum  pernah  dilakukan  dan  dilaporkan.  Berdasarkan  latar  belakang  ini,  maka  perlu dilakukan  pengujian  efek  analgetik  infusa  dan  dekokta  daun U.  lobata secara in  vivo dengan menggunakan hewan coba tikus.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode eksperimental laboratorium secara in vivo dengan control group post test only design . Penelitian ini telah mendapat persetujuan etik dari komite etik  penelitian  Universitas  Brawijaya  dengan  nomor  No.  028-KEP  UB  tahun  2020.  Penelitian dilakukan  di  Laboratorium  Riset  Terpadu  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Islam  Malang. Penelitian ini menggunakan 40 ekor hewan coba tikus jantan galur wistar , usia tikus 6-8 minggu dengan berat badan sekitar 180-200 gram dan dibagi menjadi 8 kelompok.

## Pembuatan Infusa dan Dekokta Daun U.lobata
Simplisia  serbuk  daun U.  lobata didapatkan  dari  Balai  Materia  Medika  Batu  dengan nomor  sertifikat  074/027/101.8/2019.  Penyarian  simplisia U.  lobata dilakukan  dengan  metode infudasi  dan  dekoktasi  masing-masing  menggunakan  pelarut  air  dengan  rasio  1  :  20  (10  gram simplisia dalam 200 ml air). Simplisia dimasukan dalam air yang telah dipanaskan hingga 90°C dalam panci infus sambil sesekali diaduk dengan lama pemanasan 15 menit untuk infusa dan 30 menit  untuk  dekokta.  Setelah  dingin  dilakukan  penyaringan,  filtrat  ditampung  dan  ampas dibuang. Dosis infusa dan dekokta U. lobata yang digunakan masing-masing ada 3 dosis yaitu 250, 500 dan 1000 mg/kg BB.
Yudi Purnomo | Aktivitas Analgesik Infusa Dan Dekokta Daun ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 1 Tahun 2022

## Pengujian aktivitas analgesik
Ekstrak  daun U.lobata masing-masing  bentuk  infusa  dan  dekokta  diberikan  per  oral menggunakan  sonde  sebelum  pengujian.  Aktifitas  analgesic  dilakukan  pengujian  dengan instrumen  analgesimeter  beban  geser  dan  dilakukan  pengamatan  pada  jam  ke  1  hingga  ke  4. Ibuprofen  dosis  20  mg/kg  berat  badan  digunakan  sebagai  obat  pembanding.  Ambang  nyeri dinyatakan  dalam Area  Under  Curve (AUC)  dan  dihitung  dengan  rumus  trapezoid  kemudian inhibisi sensasi nyeri dihitung dalam bentuk prosentase.
AUC 0-t = X n-1 + X n (t n- t n-1 )
2 X n = ambang nyeri waktu ke-n X n-1 = ambang nyeri 1 jam sebelum waktu ke-n t n = waktu ke-n t n-1 = waktu 1 jam sebelum ke-n
Prosen inhibisi nyeri = B – A  x 100

## B
A = AUC ambang nyeri kontrol B = AUC ambang nyeri perlakuan

## Analisa data
Data yang diperoleh dilakukan uji normalitas dan homogenitas, kemudian dilakukan uji beda  menggunakan one  way ANOVA  dan  dilanjutkan  uji Least  Significance  Different (LSD) untuk mengetahui perbandingan antar kelompok perlakuan. Hasil dinyatakan bermakna apabila nilai p<0,05. Analisa data dilakukan dengan memakai software statistik SPSS.

## HASIL PENELITIAN
Aktifitas analgesik infusa dan dekokta daun U. lobata dapat dilihat pada gambar 1, 2 dan 3.  AUC  pada  kelompok  kontrol  paling  rendah  sedangkan  kelompok  ibuprofen  paling  tinggi dengan  efek  maksimum  pada  jam  ke  2  untuk  kelompok  kontrol  maupun  kelompok  uji. Pemberian  infusa  daun U.lobata dosis  250,  500  dan  1000  mg/kg  BB  meningkatkan  AUC ambang  nyeri  berturut-turut  sekitar    8  %,  10  %  dan  12  %  dibandingkan  kelompok  kontrol (p<0.05), sementara dekokta meningkatkan  1 %, 3 % dan 3 % (p>0.05). Infusa daun U.lobata dosis  250,  500  dan  1000  mg/kg  bb  menghambat  sensasi  nyeri  berturut-turut  sekitar  7  %,  8  % dan  10  %  dibandingkan  kelompok  kontrol  (p<0.05),  sementara  bentuk  dekokta  menghambat kurang lebih 1 %, 3 % dan 3 % (p> 0.05). Ibuprofen meningkatkan AUC ambang nyeri sekitar 20  %  dan  menghambat  sensasi  nyeri  kurang  lebih  16  %  dibandingkan  kelompok  kontrol (p<0.05).  Penggunaan  infusa  daun U.lobata dosis  250  dan  500  mg/kg  BB  tidak  berbeda signifikan dalam meningkatkan AUC ambang nyeri (p>0.05), sedangkan dosis 1000 mg/kg BB menghasilkan efek paling kuat dibandingkan dua dosis sebelumnya (p<0.05). Peningkatan dosis dekokta  daun U.  lobata tidak  menunjukan  perbedaan  efek  dan  tidak  berbeda  aktifitasnya dibandingkan  kelompok  kontrol  (p>0.05).  Aktifitas  analgesik  dekokta U.lobata lebih  rendah dibandingkan dengan infusa daun U.lobata.
Yudi Purnomo | Aktivitas Analgesik Infusa Dan Dekokta Daun ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 1 Tahun 2022
Gambar 1. Grafik AUC ambang nyeri pemberian infusa dan dekokta daun U.lobata
a b c c d a b a a a 7500 8000 8500 9000 9500 10000 10500 kontrol ibuprofen U.lobata 250
mg/kgBB U.lobata 500 mg/kgBB U.lobata
1000 mg/kgBB m g.j am Kelompok (n=5) infusa dekokta
Gambar 2. Histogram AUC ambang nyeri pemberian infusa dan dekokta daun U.lobata ; a,b,c huruf berbeda menujukkan perbedaan potensi (p<0.05, LSD test)
Yudi Purnomo | Aktivitas Analgesik Infusa Dan Dekokta Daun ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 1 Tahun 2022
a b b c a b b b 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 ibuprofen U.lobata 250 mg/kgBB U.lobata 500 mg/kgBB U.lobata 1000 mg/kgBB
% i n h ibi si Kelompok  (n=5) infusa dekokta
Gambar 3. Histogram prosentase inhibisi nyeri pemberian infusa dan dekokta daun U.lobata; a,b huruf berbeda menujukkan perbedaan potensi (p<0.05, LSD test)

## PEMBAHASAN
Infusa daun U. lobata meningkatkan AUC ambang nyeri secara signifikan dibandingkan kelompok kontrol. Efek tersebut dikendalikan oleh senyawa aktif dalam U.lobata yang bekerja menghambat  mediator  nyeri  seperti  prostaglandin,  bradikinin  and  histamin  (Goodman  and Gilman, 2006; Ricciotti and Fitzgerald, 2011). Mediator tersebut akan mengaktifkan nosiseptor yang merangsang timbulnya rasa nyeri. β-sitosterol and mangiferin adalah senyawa aktif dalam daun U.lobata yang  diprediksi  memiliki  aktifitas  analgesik.  Studi  tentang  mangiferin menunjukkan  potensi  anti-nosiseptif  baik  pada  perifer  maupu  sentral  (Dar et  al .,  2005) . Penghambatan  beberapa  neuroreseptor  seperti  reseptor  opioids,  alpha-adrenergik,  kolinergik and  cannabinoid  diprediksi  mewakili  target  kerja  obat  golongan  analgesik  (Sawynok,  2003; Imran et al ., 2017). Keterlibatan senyawa mangiferin dan β-sitosterol pada reseptor opioid tidak dapat  diabaikan  (Dar et  al .,  2005;  Dighe et  al .,  2016).  β-sitosterol  menunjukkan  aksi  anti- nosiseptif  di  sentral,  sehingga  menghasilkan  efek  melalui  reseptor  opioid  sentral  atau meningkatkan pelepasan peptide opioid endogen (Dighe et al ., 2016).
Mangiferin dan β-sitosterol mengurangi kadar COX-2 yang berperan menghambat sintesa prostaglandin (PGE2) dan prostacyclin (PGI2) sebagai mediator nyeri (Bhatia et al ., 2008; Lee et  al .,  2012).  Beberapa  mediator  nyeri  tersebut  merangsang  reseptor  nyeri  atau  nosiseptor bagian  serabut  afferent  nosiseptif  yang  mentransmisikan  sensasi  nyeri  ke  sentral  (Dar et  al ., 2005). Stigmasterol, β-sitosterol dan mangiferin dalam U.lobata berdasarkan studi penambatan molekul  mampu  menghambat  aktifitas  COX-2  sehingga  berpotensi  sebagai  anti-nosiseptif (Wahyuningsih et al ., 2022)
Ibuprofen  sebagai  obat  pembanding  golongan  NSAID  memiliki  potensi  analgesik  lebih kuat  dibandingkan  infusa dan  dekokta  daun U.  lobata .  Ibuprofen merupakan  senyawa  tunggal atau single compound dengan kemurnian dan dosis tertentu serta bekerja pada reseptor tertentu sehingga  diprediksi  aktifitasnya  lebih  potent  dibandingkan  herbal.  Sedangkan  infusa  dan
Yudi Purnomo | Aktivitas Analgesik Infusa Dan Dekokta Daun ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 1 Tahun 2022
dekokta daun U. lobata terdiri dari beberapa komponen aktif yang saling berinteraksi satu sama lain  sehingga  beresiko menurunkan  aktifitasnya  bila  berinteraksi antagonis. Jumlah  komponen aktif  yang  beragam  dan  kompleks  dalam  infusa  daun U.lobata memberikan  kemungkinan bekerja  lebih  dari  satu  reseptor  sehingga  dapat  meningkatkan  atau  menurunkan  aktifitas biologisnya  ( Caesar  and  Cech,  2019 ).  Selain  itu  konsentrasi  metabolit  sekunder  yang  rendah dalam herbal seperti daun U. lobata belum mampu mengaktifkan reseptor untuk menghasilkan efek analgesic yang diharapkan.
Dekokta daun U. lobata memiliki potensi analgesik lebih rendah dibandingkan bentuk infusa bahkan hampir tidak ada aktifitas. Kemungkinan hal ini terjadi akibat proses pemanasan pada dekoktasi yang lebih lama dibandingkan infudasi sehingga meningkatkan resiko kerusakan senyawa  aktifnya.  Kerusakan  senyawa  aktif  tersebut  berpotensi  menurunkan  aktifitasnya sebagai  analgesik.  Penyarian  senyawa  aktif  pada  simplisia  daun  yang  memiliki  jaringan  lebih lunak  dibandingkan  kulit  batang  cukup  menggunakan  pemanasan  singkat  untuk  mengurangi resiko  kerusakannya.  Penyarian  dengan  pemanasan  memiliki  beberapa  keunggulan  seperti meningkatkan kecepatan pengambilan senyawa aktif dan menghilangkan senyawa yang bersifat toksik tetapi harus diperhatikan suhu serta lama pemanasan untuk mencegah kerusakan senyawa yang bersifat termolabil ( Rudraswamy et al ., 2021).

## SIMPULAN
Infusa  daun U.  lobata memiliki  aktifitas  analgesik  lebih  kuat  dibandingkan  dengan dekokta U.lobata.

## SARAN
Perlu penelitian lebih lanjut dengan menggunakan optimasi suhu dan lama pemanasan pada saat penyarian daun U.lobata.

## REFERENSI
Adewale, A.O., David, A.A., and Abiodun, O.O., 2007. Studies on anti-microbial, antioxidant and phytochemical analysis of Urena lobate leaf extract. J Phys Nat Sci , 1 , 12–20.
Babu,  S.S.,  Madhuri,  B.D.,  and  Reddy,  S.D.,  2016.  Anxiolytic  Antidepressant  and  Anti- Inflammatory Activity of Ethanolic Extract of Urena Lobata Leaf. International Journal of Pharma Research and Health Sciences , 4 (4), 1284–1290.
Baral,  P.,  Udit,  S.  and  Chiu,  I.M.,  2019.  Pain  and  immunity:  implications  for  host defence. Nature Reviews Immunology , 19 (7), 433-447.
Bhatia, H.S., Candelario-Jalil, E., de Oliveira, A.C.P., Olajide, O.A., Martínez-Sánchez, G. and Fiebich,  B.L.,  2008.  Mangiferin  inhibits  cyclooxygenase-2  expression  and prostaglandin  E2  production  in  activated  rat  microglial  cells. Archives  of biochemistry and biophysics , 477 (2), 253-258.
Caesar, L.K. and Cech, N.B., 2019. Synergy and antagonism in natural product extracts: when 1+ 1 does not equal 2. Natural product reports , 36 (6), 869-888.
Dar, A., Faizi, S., Naqvi, S., Roome, T., Sadia, Z.R., Ali, M., Firdous, S., and Moin, S.T., 2005. Analgesic  and  Antioxidant  Activity  of  Mangiferin  and  Its  Derivatives :  the Structure Activity Relationship. Biol. Pharm. Bull. , 28 (4), 596–600.
Yudi Purnomo | Aktivitas Analgesik Infusa Dan Dekokta Daun ….. Jurnal Wiyata, Vol. 9 No. 1 Tahun 2022
Dighe,  S.B.,  Kuchekar,  B.S.  and  Wankhede,  S.B.,  2016.  Analgesic  and  anti-inflammatory activity of β-sitosterol isolated from leaves of Oxalis corniculata. Int J of Pharmc Res , 6 (3), pp.109-113.
Du, S., Liu, H., Lei, T., Xie, X., Wang, H., He, X., Tong, R. and Wang, Y., 2018. Mangiferin: An  effective  therapeutic  agent  against  several  disorders. Molecular  medicine reports , 18 (6), 4775-4786.
Goodman  LS,  and  Gilman  A.  2006. Goodman  &  Gilman’s  the  pharmacological  basis  of therapeutics . McGraw-Hill. New York.
Imran,  M.,  Arshad,  M.S.,  Butt,  M.S.,  Kwon,  J.H.,  Arshad,  M.U.  and  Sultan,  M.T.,  2017. Mangiferin:  a  natural  miracle  bioactive  compound  against  lifestyle  related disorders. Lipids in health and disease , 16 (1), 1-17.
Katzung,  B.G.,  Masters,  S.B.  and  Trevor,  A.J.,  2010.  Basic  and  Clinical  Pharmacology (11thedn.) McGraw-Hill. New York.
Lee,  I.A.,  Kim,  E.J.  and  Kim,  D.H.,  2012.  Inhibitory  effect  of  β-sitosterol  on  TNBS-induced colitis in mice. Planta medica , 78 (09), 896-898.
Ricciotti,  E.  and  FitzGerald,  G.A.,  2011.  Prostaglandins  and  inflammation. Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology , 31 (5), 986-1000.
Rudraswamy,  S.,  Godhi,  B.S.,  Shankar,  H.P.J.,  Kenganora,  M.  and  Sumana,  M.N.,  2021. Detailed  understanding  of  different  extraction  methods  for  the  research  on medicinal plants. Indian Journal of Oral Health and Research , 7 (1), p.14.
Sawynok, J., 2003. Topical and peripherally acting analgesics. Pharmacological reviews , 55 (1),
1-20.
Silbernagi, S. and Lang, F., 2010. Color atlas of pathophysiology . Thieme. New York
Tamsuri, A., 2007. Konsep dan penatalaksanaan nyeri. EGC. Jakarta
Treede,  R.D.,  2018.  The  International  Association  for  the  Study  of  Pain  definition  of  pain:  as valid  in  2018  as  in  1979,  but  in  need  of  regularly  updated  footnotes. Pain reports , 3 (2).
Wahyuningsih,  D.,  Purnomo,  Y.  and  Tilaqza,  A.,  2022.  In  Silico  Study  of  Pulutan  (Urena lobata) Leaf Extract as Anti Inflammation and their ADME Prediction. Journal of Tropical Pharmacy and Chemistry , 6 (1), 30-37.