## PEMANFAATAN ASAM SITRAT SEBAGAI ACIDIFIER DALAM PAKAN STEPDOWN PROTEIN TERHADAP PERKEMBANGAN USUS HALUS DAN PERTUMBUHAN BROILER

## UTILIZATION OF CITRIC ACID AS ACIDIFIER IN DIETARY PROTEIN STEPDOWN ON DEVELOPMENT OF SMALL INTESTINE AND GROWTH OF BROILER
Imam, S., L. D. Mahfudz dan N. Suthama
Fakultas Peternakan dan Pertanian Universitas Diponegoro Jl. Drh. R. Soejono Koesoemowardojo, Tembalang, Semarang E-mail: shokhirulimam@gmail.com Diterima: 17 Juni 2015, Direvisi: 27 Juli 2015, Disetujui: 5 Agustus 2015

## ABSTRAK
Penelitian  bertujuan  untuk  mengkaji  pemanfaatan  asam  sitrat  sebagai  acidifier dalam pakan stepdown (SDN) protein periode starter dan finisher terhadap perkembangan usus halus dan pertumbuhan broiler. Perlakuan dimulai pada saat broiler berumur 8 hari dengan  bobot  badan  rata-rata  186,23±0,68  g.  Sumber  acidifier  terdiri  dari  asam  sitrat sintetik  (ASS)  dan  asam  sitrat  jeruk  nipis  (ASJN).  Pakan  periode  starter  masing-masing mengandung protein kasar dan energi metabolis 21,41% dan 2.856,91 kkal/kg untuk pakan kontrol  dan  19,25%  dan  2.884,12  kkal/kg  untuk  pakan  SDN,  sedangkan  periode  finisher masing-masing mengandung protein kasar dan energi metabolis sama dengan pakan SDN periode starter, untuk pakan kontrol, dan 17,37% dan 2.882,13 kkal/kg untuk pakan SDN. Perlakuan terdiri dari T 0 (kontrol tanpa SDN dan AS), T 1 (SDN tanpa AS), T 2 (SDN+0,8% ASJN), T 3 (SDN+0,4% ASS), T 4 (SDN+0,8% ASS), T 5 (SDN+1,2% ASS) dan T 6 (SDN+1,6% ASS).  Parameter  penelitian  meliputi  perkembangan  usus  halus  (bobot  dan  panjang)  dan bobot  badan  akhir  broiler.  Penelitian  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  (RAL) dengan 7 perlakuan dan 4 ulangan (masing-masing 6 ekor). Hasil penelitian menunjukkan bahwa  pemanfaatan  asam  sitrat  sebagai  acidifier  dalam  pakan  stepdown  protein  periode starter  dan  finisher  nyata  (p<0,05)  meningkatkan  bobot  dan  panjang  usus  halus (duodenum, jejunum and ileum) dengan nilai tertinggi pada T4 (16,72; 32,52; dan 26,98 g dan 36,22; 83,62; dan 78,95 cm) dan T5 (15,28; 29,70; dan 22,95 g dan 35,38; 79,88; dan 77,10 cm), sedangkan terendah pada T1 (11,00; 22,85; dan 16,60 g and 31,50; 70,95; dan 65,05 cm), serta bobot badan akhir broiler dengan nilai tertinggi pada T5 (1048,97 g) dan T6  (1074,36  g),  sedangkan  terendah  pada  T1  (938,43  g).  Simpulan  penelitian  adalah pemanfaatan  asam  sitrat  sebagai  acidifier  dalam  pakan  stepdown  protein  periode  starter dan  finisher  pada  taraf  0,8  sampai  1,2%  efektif  meningkatkan  bobot  dan  panjang  usus halus, khususnya duodenum, dan bobot badan akhir broiler.
Kata kunci: stepdown protein, acidifier, perkembangan usus halus, pertumbuhan broiler

## ABSTRACT
The  study  aimed  to  evaluate  the  utilization  of  citric  acid  (CA)  as  an  acidifiers  in dietary  protein  stepdown  (SDN)  on  the  development  of  small  intestine  and  growth  of broiler. Dietary treatment was initiated when the broiler was 8-day-old with an initial body weight  was  186.23±0.68  g.  Sources  of  acidifier were  synthetic  citric  acid  (SCA)  and  lime citric  acid  (LCA).  Protein  and  metabolizable  energy  contents  of  starter  period  feed  was
21.41%  and  2856.91  kcal/kg,  respectively,  for  control,  and  19.25%  and  2884.12  kcal/kg, for SDN, while those of finisher period was similar to those of SDN feed of starter period, for  control,  and  17.37%  and  2882.13  kcal/kg,  respectively,  for  SDN.  The  treatment consisted  of  T0  (control  without  SDN  and  CA),  T1  (SDN  without  CA),  T2  (SDN+0.8% LCA),  T3  (SDN+  0.4%  SCA),  T4  (SDN+0.8%  SCA),  T5  (SDN+1.2%  SCA)  and  T6 (SDN+1.6%  SCA).  Parameters  observed  were  development  of  the  small  intestine  (weight and  length)  and  final  body  weights.  The  study  was  assigned  in  a  completely  randomized design  (CRD)  with  7  treatments  and  4  replicates  (6  birds  each).  The  results  showed  that inclusion of citric acid as an acidifiers in dietary protein  stepdown of starter and finisher periods  significantly  (p<0.05)  increased  the  weight  and  length  of  the  small  intestine (duodenum, jejunum and ileum) with the highest value were T4 (16,72; 32,52; and 26,98 g and 36,22; 83,62; and 78,95 cm) and T5 (15,28; 29,70; and 22,95 g and 35,38; 79,88; and 77,10 cm), while the lowest was T1 (11,00; 22,85; and 16,60 g and 31,50; 70,95; and 65,05 cm) and the highest final body weights were T5 (1048,97 g) and T6 (1074,36 g), while the lowest was T1 (938,43 g). The conclusion of the study is that dietary inclusion of citric acid as  an  acidifiers  in  protein  stepdown  for  starter  and  finisher  periods  at  the  level  of  0.8  to 1.2%  effectively  increase  weight  and  length  of  small  intestine,  especially  duodenum  and final body weight of broilers.
Keywords: protein stepdown, acidifiers, development of small intestine, growth broilers.

## PENDAHULUAN
Ayam  broiler  merupakan  unggas yang  dapat  tumbuh  cepat  dan  menghasil- kan  daging  dalam  waktu  relatif  singkat. Potensi  genetik  tersebut  dapat  tercapai apabila  ayam  broiler  mendapatkan  pakan dengan kandungan nutrien tinggi, terutama protein.  Namun,  harga  pakan  menjadi mahal dan linier dengan naiknya kandungan  protein  pakan.  Kondisi  ini mempunyai  konsekuensi  secara  ekonomis kurang menguntungkan bagi ternak maupun  usaha  peternakan  ayam  broiler  di daerah tropis. Fenomena tersebut diperparah  dengan  bahan  pakan  sumber protein  umumnya  impor,  sehingga  harga pakan  bertambah  mahal.  Upaya  untuk meningkatkan  efisiensi  produksi  dapat dilakukan dengan menurunkan kandungan protein  pakan  ( stepdown protein)  agar dapat  menekan  biaya. Stepdown protein dapat  dilakukan  pada  1  fase  atau  2  fase pemeliharaan  broiler,  pada  penelitian  ini diterapkan  2  fase Stepdown protein,  yaitu periode starter dan finisher.
Penurunan  protein  pakan  dapat mengakibatkan  kekurangan  protein  dan berdampak pada terganggunya pertumbuh- an  broiler.  Pemberian feed  additive yang berhubungan dengan kesehatan usus halus dan  penyerapan  nutrien  perlu  dilakukan dalam  upaya  untuk  mempertahankan pertumbuhan broiler sesuai dengan kapasitas  genetiknya. Feed  additive yang dapat  digunakan  adalah  asam  sitrat,  baik sintetik  maupun  alami  yang  murah  dan mudah  didapat,  serta  bersifat  sangat  larut dalam  air  dan  tidak  bersifat  korosif,  yang berfungsi  sebagai acidifier (Gauthier, 2002). Acidifier dapat  membantu  mening- katkan penyerapan nutrien melalui mekanisme pengaturan keseimbangan mikrobia  di  dalam  saluran  pencernaan (Jamilah et  al., 2013  dan  Imam et  al.,  in press ).  Namun,  di  sisi  lain  perlu diperhatikan  bahwa  pemberian acidifier terlalu  tinggi  menyebabkan  kerja  enzim pencernaan  terganggu  dan  produktivitas menurun  (Nourmohammadi et  al., 2010). Pemberian acidifier dengan  dosis  yang
tepat memberikan dampak positif terhadap kesehatan  usus,  sehingga  dapat  memper- baiki  pencernaan  dan  penyerapan  nutrien, terutama protein.  Kondisi  ini dapat  dilihat dari  penurunan  pH  usus  halus  yang berkaitan  dengan  peningkatan  pertumbuh- an  bakteri  asam  laktat,  disatu  sisi,  dan menekan Escherichia  coli sebagai  bakteri patogen, disisi lain (Imam et al., in press ).
Meskipun broiler diberikan pakan
stepdown protein,  berhubung  dikombinasi dengan  pemberian  asam  sitrat  sebagai acidifier berdampak  pada  pertumbuhan dan  perkembangan  saluran  cerna  dilihat dari  bobot  dan  panjang  usus  halus.  Usus halus  sebagaimana  diketahui  merupakan pusat penggunaan nutrien (protein) melalui proses pencernaan dan penyerapan yang memberikan kontribusi pada peningkatan produktivitas broiler, khususnya  bobot  akhir  (Gauthier,  2002). Pemberian  asam  sitrat  sintetik  sebagai acidifier dalam  pakan stepdown protein diharapkan dapat meningkatkan pertumbuhan  dan  perkembangan  usus halus  sehingga  masih  dalam  katagori efisiensi produksi yang normal.

## MATERI DAN METODE
Ayam yang digunakan pada penelitian  adalah  ayam  broiler  strain Lohmann MB  202  umur  8  hari  sebanyak 168  ekor  yang  terdiri  dari  84  ekor  jantan dan  84  ekor  betina  dengan  bobot  badan 186,23  ±  0,68  g  (CV꞊6,04%).  Ayam broiler  dipelihara  sistem litter yang berjumlah  28  unit  dengan  ukuran  1  x  1  x 0,6  m,  setiap  unit  kandang  berisi  3  ekor ayam  jantan  dan  3  ekor  ayam  betina. Bahan  pakan  terdiri  dari  jagung,  bekatul, tepung  ikan,  bungkil  kedelai,  minyak nabati  dan  CaCO 3 Bahan acidifier terdiri dari asam sitrat sintetik dan jeruk nipis.
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian adalah timbangan digital kapasitas 5 kg dengan ketelitian 1 g untuk menimbang bahan penyusun pakan,
jumlah  pemberian  dan  sisa  pakan  serta bobot badan ayam. Peralatan lain meliputi nampan  untuk  mencampur  bahan  pakan, wadah untuk  menempatkan pakan, tempat minum  sebagai  tempat  air  minum  ayam, brooder sebagai  penghangat  utama  DOC, thermometer untuk  mengukur  suhu  dalam dan  luar  kandang  dan hygrometer untuk mengukur kelembaban.
Saat ayam umur 1–7 hari dipelihara dalam kandang brooder dengan suhu  34°C.  Mulai  umur  8–35  hari  ayam dipelihara  pada  kandang  koloni  dengan suhu  alami  lingkungan  dan  dimasukkan dalam  unit  kandang  sesuai  dengan perlakuan. Pakan dan air minum diberikan ad libitum dan sisa pakan ditimbang setiap hari.  Ayam  diberi  vaksin  ND  I  sebelum perlakuan  pada  umur  3  hari,  selanjutnya vaksin  gumboro  diberikan  pada  umur  14 hari dan ND II pada umur 21 hari
Parameter  penelitian  yang  diamati adalah  kondisi  fisik  usus  halus  yang meliputi  panjang  dan  bobot  usus  halus diukur  pada  akhir  masa  perlakuan  yaitu ayam  umur  35  hari.  Bobot  dan  panjang usus  meliputi  duodenum  (dari  pangkal usus  yang menempel pada gizzard sampai ujung duodenal loop ), jejunum (dari ujung duodenal loop sampai Meckel’s diventriculum )  dan  ileum  (dari Meckel’s diventriculum sampai  pertemuan  dengan sekum  atau ileo-caecal  junction )  yang diambil  dari  28  sampel  (masing-masing unit  percobaan  terdiri  1  sampel).  Bobot dan  panjang  usus  halus  diukur  setelah terlebih  dahulu  dipisahkan  dari  organ dalam  yang  menempel.  Usus  halus  yang telah  dibersihkan  dipotong  pada  bagian duodenum,  jejunum  dan  ileum  untuk diukur  panjang  masing-masing  bagian menggunakan  penggaris  dengan  ketelitian 1  mm,  dan  ditimbang  dengan  timbangan analitik  dengan  ketelitian  1  mg  untuk mengukur  bobot.  Bobot  badan  akhir didapat  dengan  mencatat  bobot  badan broiler di akhir masa perlakuan.
Penelitian menggunakan rancangan acak  lengkap  (RAL)  dengan  7  perlakuan dan 4 ulangan. Perlakuan dalam penelitian adalah  pakan stepdown protein  yang diterapkan  pada  fase starter dan finisher yang  dikombinasikan  dengan  asam  sitrat sintetik  dan  jerun  nipis  sebagai acidifier . Data  dianalisis  ragam  menggunakan  uji  F (ANOVA) dengan  α=5%  dan  jika pengaruh perlakuan nyata (P<0,05), dilanjutkan  dengan  uji  Wilayah  Berganda Duncan (Steel dan Torrie, 1995).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Perkembangan Usus Halus Hasil penelitian menunjukkan rerata bobot dan panjang usus halus bagian duodenum  tertinggi  dicapai  oleh  T4 (pakan stepdown +  0,8%  asam  sitrat sintetik),  T2  (pakan stepdown +  0,8% asam sitrat dari jeruk nipis) dan T5 (pakan stepdown +  1,2%  asam  sitrat  sintetik), sedangkan  terendah  pada  T1  (pakan stepdown )  dan  T6  (pakan stepdown + 1,6%  asam  sitrat  sintetik).  Bobot  bagian jejunum dan ileum juga menunjukkan pola yang  sama  dengan  nilai  tertinggi  pada  T4 (pakan stepdown +  0,8%  asam  sitrat sintetik)  dan  T2  (pakan stepdown +  0,8% asam  sitrat  dari  jeruk  nipis),  sedangkan terendah  pada  T1  (pakan stepdown )  dan T6  (pakan stepdown +  1,6%  asam  sitrat sintetik).  Selanjutnya  panjang  usus  halus bagian  jejunum  dan  ileum,  meskipun secara statistik tidak nyata (p>0,05), tetapi secara  nominal  menunjukkan  sedikit peningkatan  panjang  pada  T4  (pakan stepdown +  0,8% asam  sitrat  sintetik)  dan T2  (pakan stepdown +  0,8%  asam  sitrat dari  jeruk  nipis)  yang  diikuti  oleh  T5 (pakan stepdown +  1,2%  asam  sitrat sintetik),  dengan  nilai  terendah  terdapat pada T1 (pakan stepdown ) (Tabel 3).
Perubahan  karakteristik  fisik  usus halus  yang  meliputi  bobot  dan  panjang, terutama  duodenum  dan  jejunum  yang menunjukkan  nilai  lebih  tinggi  didukung
oleh  rendahnya  pH  dan Escherichia  coli ( E.  coli )  serta  tingginya  jumlah  bakteri asam  laktat  (BAL).  Faktor  perubahan  pH dan  bakteri,  baik  BAL  maupun E.  coli secara  tidak  langsung  mempengaruhi bobot  dan  panjang  usus  halus. Acidifier dari  asam  sitrat  sintetik  maupun  alami dapat  menurunkan  nilai  pH  merupakan kondisi  yang  baik  untuk  perkembangan BAL  sebagai  bakteri  bermanfaat  dan sebaliknya  menekan  pertumbuhan  bakteri E.  coli (bakteri  patogen)  (Imam et  al ., in press ).  Kondisi  ini  menjadikan  usus  halus lebih  sehat,  terutama  kaitannya  dengan perkembangan sel epitel karena BAL yang tumbuh  dengan  baik  di  dalam  usus  halus mampu  memblokir  masuknya  patogen  ke dalam  sel  epitel  dengan  memberikan penghalang  fisik  yang  disebut  resistensi kolonisasi.  Selain  itu,  BAL  menciptakan penghalang lendir melalui pelepasan lendir dari sel goblet, menjaga permeabilitas usus dengan meningkatkan integritas antar tight junction ,  menghasilkan  zat  antimikroba, dan  merangsang  sistem  kekebalan  tubuh inang (Kongo, 2013). Mekanisme tersebut didukung  oleh  Saputra  (2014)  yang  yang melaporkan  bahwa  pemberian  asam  sitrat sintetik  maupun  alami  meningkatkan kesehatan  pada  ayam  dilihat  dari  bobot bursa  dan  limpa  serta  rasio  H/L. Fenomena ketahanan tubuh sangat berkaitan  dengan  kondisi  usus  halus  yang lebih  sehat  dan  akibatnya  penyerapan nutrien menjadi lebih baik.
Secara  umum,  terjadi  peningkatan penyerapan nutrien akibat dari pertumbuh- an  usus  halus  yang  lebih  baik,  terutama perkembangan  vili.  Perkembangan  vili dalam  penelitian  ini,  meskipun  tidak diukur,  peningkatan  bobot  dan  panjang usus  halus  yang  lebih  baik,  dapat diasumsikan  berkaitan  dengan  panjang vili. Penelitian sebelumnya (Jamilah et al. , 2014)  menunjukkan  bahwa  asam  sitrat sintetik  maupun  alami  meningkatkan panjang  vili  usus  halus.  Demikian  pula
Nourmohammadi dan Afzali (2013) menunjukkan  bahwa  penambahan  asam sitrat sintetik sebagai acidifier meningkat- kan  panjang  dan  lebar  vili,  kedalaman kripta,  ketebalan  epitel  dan  jumlah  sel goblet  pada  usus  halus  (duodenum, jejunum, dan ileum) dibandingkan dengan tanpa acidifier .  Asam  sitrat  sebagai acidifier dapat  meningkatkan  populasi BAL  sehingga  menghasilkan  produk fermentasi  yang  bermanfaat  bagi  usus halus.  Menurut  Matur  dan  Eraslan  (2012) bahwa  bakteri  asam  laktat  dalam  usus menghasilkan  produk  fermentasi  yang mengakibatkan proliferasi, migrasi, jumlah  dan  apoptosis  dari  sel  usus. Proliferasi yang terjadi pada sel epitel usus juga  disebabkan  oleh  BAL  yang  meng- induksi  peningkatan  asam  lemak  rantai pendek.  Tingginya  asam  lemak  rantai pendek  juga  mengakibatkan  peningkatan tinggi  vili  dan  lebar  vili  (Harimurti  dan Rahayu, 2009). Asam lemak rantai pendek mempunyai  peranan  yang  beragam  dalam pengaturan  biologis,  khususnya  dalam pengendalian pertumbuhan mukosa, proliferasi  sel  epitel,  apoptosis  dan regulasi  protein  transkripsi  (Mroz,  2006). Proses tersebut menjadikan vili usus halus semakin panjang, sehingga luas
permukaan  usus  semakin  meningkat  dan berdampak  pada  pertumbuhan  fisik  usus halus secara umum.
Pertumbuhan  dan  perkembangan usus  halus,  termasuk  vili,  pada  broiler terjadi  awal  kehidupan  dan  tergantung pada  asupan  nutrien  pada  umur  awal  dan merupakan  hubungan  sebab  akibat  antara asupan  protein  dan  perkembangan  vili. Sebaliknya,  semakin  panjang  vili  mem- pengaruhi  penyerapan  nutrien  terutama protein  yang  juga  semakin  meningkat. Fenomena  ini  sangat mempengaruhi pertumbuhan  dan  perkembangan  saluran pencernaan  broiler,  terutama  usus  halus, pada  periode  berikutnya.  Noy  dan  Sklan (1997)  menyatakan  bahwa  organ  yang
paling  pertama  dan  utama  mengalami perkembangan  adalah  saluran  pencernaan terutama  usus  halus  dibandingkan  dengan organ  yang  lain.  Usus  halus  merupakan organ yang sangat kompleks yang menye- diakan  nutrien  untuk  proses  metabolisme, pertumbuhan kerangka, mendukung imunitas,  sistem  syaraf  dan  pertumbuhan secara  keseluruhan  (Gauthier,  2002). Penjelasan mengenai hubungan pemberian acidifier dengan  pertumbuhan  fisik  usus halus  (bobot  dan  panjang)  pada  penelitian ini  sangat  konsisten  dengan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Nourmohammadi et al. (2010)  bahwa  suplementasi acidifier meningkatkan  morfologi  usus  halus  baik berat  maupun  panjangnya,  sebagai  akibat dari  perubahan  dimensi  vili.  Penggunaan acidifier berupa  asam  asetat,  asam  sitrat maupun  asam  laktat  dilaporkan  dapat meningkatkan panjang, bobot dan densitas vili  usus  (Abdel-Fattah et  al., 2008). Semua  penemuan  tersebut  sangat  sejalan dengan  hasil  penelitian  ini,  yaitu  bobot dan panjang usus halus semakin meningkat  dengan  suplementasi  asam sitrat  sintetik  (T4  dan  T5)  mapun  asam sitrat  alami  (T2)  sebagai acidifier dengan dosis yang tepat.
Bobot Badan Akhir Bobot badan akhir broiler menunjukkan  nilai  tertinggi  pada  T0 (pakan normal), sama tingginya dengan T5
(pakan stepdown +  1,2%  asam  sitrat sintetik)  dan  T6  (pakan stepdown +  1,6% asam  sitrat  sintetik),  diikuti  oleh  T4 (pakan stepdown +  0,8%  asam  sitrat sintetik)  dan  T2  (pakan stepdown +  0,8% asam  sitrat  jeruk  nipis),  sedangkan terendah pada T1 (pakan stepdown ). Hasil ini  memberikan  indikasi  bahwa  meskipun protein  pakan  diturunkan  (perlakuan  T2, T4,  T5  dan  T6),  tetapi  bobot  badan  akhir masih  mampu  menyamai  dengan  yang mendapat  pakan  normal  (T0).  Sebaliknya, perlakuan  yang  hanya  dengan  protein pakan diturunkan ( stepdown ) tanpa
ditambah acidifier (T1)  menghasilkan bobot badan akhir terendah.
Fenomena  tersebut  di  atas  berawal dari  proses  yang  terjadi  di  dalam  usus halus yaitu meliputi perubahan pH, bakteri dan  akhirnya  pencernaan  dan  penyerapan nutrien. Imam et al. ( in press ) menyatakan bahwa  asam  sitrat  sintetik  maupun  alami sebagai acidifier menyebabkan  pH  usus halus  lebih  asam  dibandingkan  tanpa acidifier (antara  5,58-5,95  vs.  6,13) sehingga  kondisi  di  dalam  usus  menjadi lebih kondusif bagi perkembangan bakteri asam  laktat  (BAL)  sebagai  bakteri bermanfaat  untuk  dapat  tumbuh  dengan baik  (populasi  antara  3,75-7,25  x  10 4 vs. 3,00  x  10 4 )  dan  sebaliknya  bakteri Escherichia  coli ( E.  coli )  tidak  dapat berkembang  dengan  baik  (populasi  antara 1,75-6,50 x 10 2 vs. 7,00 x 10 2 ). Fenomena fisiologis  saluran  pencernaan  tersebut menyebabkan broiler lebih sehat, khususnya berkaitan dengan organ limfoid terutama  bobot  limpa  (bobot  antara  0,22- 0,32%)  lebih  kecil  dibandingkan    T0 (0,37%) dan rasio heterofil/limfosit (antara 0,59-0,63  vs.  0,79)  (Saputra,  2014).  Hasil penelitian  sebelumnya  (Jamilah,  2013) menunjukkan  bahwa  asam  sitrat  sintetik maupun  alami  sebagai acidifier juga mendukung  hasil  penelitian  ini  yaitu kesehatan  broiler  lebih  baik  dibandingkan tanpa acidifier dilihat dari bobot bursa dan rasio H/L meningkat. Kondisi broiler yang lebih  sehat,  terutama  usus  halus,  dapat meningkatkan  pertumbuhan  vili  karena bakteri E.  coli tertekan  pertumbuhannya oleh BAL. Lee et al. (2000) dan Dicks dan Botes  (2010)  melaporkan  bahwa  BAL menghasilkan  bakteriosin  untuk  menekan pertumbuhan  bakteri  patogen E.  coli dalam  kompetisi  penempelan  di  mukosa usus halus ( competitive exclusion ), sehingga  meningkatkan  kesehatan  usus halus  dan  pertumbuhan  vili  semakin panjang  (Jamilah et  al. ,  2014).  Semakin panjang  vili  usus  halus,  maka  semakin
luas permukaan serap, sehingga penyerap- an  nutrien  semakin  meningkat.  Menurut pernyataan Adil et al. (2010) bahwa asam organik berdampak positif terhadap perkembangan  vili  usus  halus  yang menyebabkan penyerapan nutrien mening- kat.  Peningkatan  penyerapan  nutrien tersebut mengakibatkan pertumbuhan ayam  broiler  juga  semakin  baik,  terutama bobot badan akhir yang semakin tinggi. Asam sitrat yang digunakan sebagai acidifier, baik  sintetik  pada perlakuan  T4,  T5  dan  T6  maupun  asam sitrat  alami  pada  perlakuan  T2,  dapat membantu meningkatkan penyerapan nutrien  terutama  protein  (antara  73,88- 74,65%  vs  68,50%)  (Putra,  data  belum dipublikasikan)  sehingga  menghasilkan bobot  badan  akhir  yang  lebih  tinggi. Sebaliknya,  pada  perlakuan  T1  yang protein  pakan  diturunkan  tanpa acidifier mempunyai  nilai  bobot  badan  akhir terendah karena kekurangan asupan protein,  ditandai  dengan  nilai  kercernaan protein 64,86% (Putra, data belum dipubli- kasikan).  Berdasarkan  hasil  penelitian Abdel-Fattah et al. (2008) bahwa pertambahan  bobot  badan  broiler  linier dengan  peningkatan  penyerapan  nutrien sebagai  akibat  dari  penambahan  asam sitrat,  asam  laktat  maupun  asam  asetat. Hasil  yang  sama  juga  dilaporkan  oleh Nourmohammadi et  al. (2010)  bahwa asam organik mampu memberikan dampak  terhadap  peningkatan  kecernaan nutrien sehingga berimbas pada peningkatan performa broiler. Bobot  badan  akhir  merupakan akumulasi deposisi dari penyerapan nutrien,  terutama  protein.  Penyerapan nutrien, khususnya protein pada penelitian ini, mempunyai nilai yang lebih baik pada perlakuan stepdown ditambah acidifier alami  (T2)  maupun  sintetik  (T3,  T4,  T5 dan  T6)  apabila  dibandingkan  dengan hanya  perlakuan stepdown (T1)  seperti dibahas sebelumnya. Protein yang
dideposisikan  ke  dalam  daging  semakin meningkat  seiring  dengan  peningkatan penyerapan  nutrien  (protein).  Protein daging  atau  masa  protein  daging  adalah indikator  keberhasilan  pertumbuhan  pada broiler dalam hal kualitas, yang dipengaruhi  oleh  perbedaan  banyaknya protein  yang  disintesis  dengan  yang didegradasi  (Suthama,  2010).  Saputra et al. (2014)  melaporkan  bahwa  pemberian asam  sitrat  pada  perlakuan stepdown protein dapat meningkatkan massa protein daging  antara  108,69-118,57  g/kg  dan lebih tinggi dibandingkan  perlakuan tanpa acidifier (antara  83,26-  87,73  g/kg).  Oleh sebab  itu,  performa  produksi  broiler  pada penelitian  ini  dalam  bentuk  bobot  badan akhir  sangat  erat  kaitannya  dengan  masa protein  daging.  Bobot  badan  akhir  broiler yang  tinggi  merupakan  satu  indikator tercapainya produktivitas yang baik. Asam sitrat sebagai acidifier secara umum dapat meningkatkan  produktivitas  broiler  dilihat dari  bobot  badan  akhir,  meskipun  diberi protein  pakan  rendah  ( stepdown )  masih lebih  baik  dibandingkan  dengan  tanpa acidifier dengan  protein  yang  sama
( stepdown ).
Penelitian sebelumnya (Jamilah et  al ,  2013  dan  Saputra et  al , 2014)  sangat  mendukung  penelitian  ini, bahwa acidifier meningkatkan masa protein daging dan performa pertumbuhan broiler.  Jadi,  hasil  penelitian  ini  sangat ditunjang oleh perubahan pH, keseimbangan BAL dan E. coli usus halus, sehingga  pertumbuhan  vili,  panjang  dan bobot  usus  halus  semakin  meningkat. Kondisi saluran pencernaan seperti tersebut diatas dapat meningkatkan kecernaan  nutrien  terutama  protein,  dan akhirnya  mampu  memperbaiki  performa broiler,  yang  sangat  terkait  dengan  masa protein daging, pada akhirnya menghasilkan  bobot  badan  akhir  broiler yang lebih tinggi.

## SIMPULAN
Penggunaan  asam  sitrat  sintetik pada  taraf  0,8  sampai  1,2%  sebagai acidifier pada  pakan stepdown periode starter dan finisher efektif  meningkatkan bobot  dan  panjang  usus  halus,  terutama duodenum dan bobot badan akhir broiler.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Fattah,  S.A.,  M.H.  El-Sanhoury, N.M.  El-Mednay  and  F.  Abdel- Azeem.  2008.  Thyroid  activity, some  blood  constituents,  organs morphology  and  performance  of broiler  chicks  fed  supplemental organic acids.  Int. J. Poultry Sci. 7 (3): 215-222.
Adil, S., T. Banday, G.A. Bhat, M.S. Mir, and  M.  Rehman.  2010.  Effect  of dietary supplementation of organic acids  on  performance,  intestinal histomorphology, and serum
biochemistry  of  broiler  chicken. Vet. Med. Int. 10 : 1-7.
Amrullah,  I.K.  2004.  Nutrisi  Ayam Broiler.  Lembaga  Satu  Gunung Budi, Bogor.
Badan Standarisasi Nasional (BSN). 2006.
Pakan  anak  ayam  ras  pedaging (ayam  broiler starter ).  Standar Nasional Indonesia (SNI) 01-3930- 2006, Jakarta.
Badan Standarisasi Nasional (BSN). 2006.
Pakan  anak  ayam  ras  pedaging (ayam  broiler grower ).  Standar Nasional Indonesia (SNI) 01-3931- 2006, Jakarta.
Dicks,  L.M.T.  and  M.  Botes.  2010.
Probiotic lactic acid bacteria in the gastro-intestinal tract: health benefits,  safety  and  mode  of action.  Beneficial  Microb. 1 (1):
11-29.
Gauthier,  R.  2002.  Intestinal  Health,  The Key  to  Productivity  (The  Case  of Organic Acid). XXVII Convention ANECA-WPDC, Puerto Vallarta. Harimurti,  S.  dan  E.S.  Rahayu.  2009.
Morfologi  usus  ayam  broiler  yang disuplementasi  dengan  probiotik strain  tunggal  dan  campuran. Agritech 29 (3): 179-183.
Imam, S., L.D. Mahfudz dan N. Suthama.
In  press. Perkembangan  mikrobia usus  ayam  broiler  yang  diberi pakan stepdown protein  dengan penambahan  asam  sitrat  sebagai acidifier. J. Litbang. Jateng. 13 (2).
Jamilah.  2013.  Perkembangan  Organ Pencernaan,  Ketahanan  Tubuh dan Produktivitas  Broiler  yang  diberi Pakan Stepdown dengan Penambahan  Jeruk  Nipis  sebagai Acidifier .  Magister  Ilmu  Ternak Fakultas  Peternakan  dan  Pertanian Universitas Diponegoro, Semarang. (Tesis Magister). Jamilah,  N.  Suthama  dan  L.  D.  Mahfudz. 2013.  Performa  produksi  dan ketahanan  tubuh  broiler  yang diberi  pakan stepdown dengan penambahan  asam  sitrat  sebagai acidifier . JITV 18 : 251-257.
Jamilah,  N.  Suthama  dan  L.  D.  Mahfudz. 2014.  Pengaruh  penambahan  jeruk nipis  sebagai acidifier pada  pakan stepdown terhadap  kondisi  usus halus  ayam  pedaging.  JITP. 3 (2): 90-95.
Kongo,  M.  2013.  Lactic  Acid  Bacteria:  R &  D  for  Food,  Health  and Livestock Purposes. InTech,
Rijeka.
Lee,  Y.K.,  C.Y.  Lim,  W.L.  Teng,  A.C. Ouwehand,  E.M.  Tuomola,  and  S. Salminen. 2000. Quantitative approach  in  the  study  of  adhesion of  lactic  acid  bacteria  to  intestinal cells  and  their  competition  with enterobacteria. Appl. Environment.
Microbiol. 66 (9): 3692–3697.
Matur,  E.  and  E.  Eraslan.  2012.  The
Impact  of  Probiotics  on  the Gastrointestinal  Physiology,  New Advances in the Basic and Clinical Gastroenterology, Tomasz Brzozowski Ed. InTech, Rijeka. Mroz.  Z.  2006.  Organic  acids  as  potential alternatives  to  antibiotic  growth promoters  for  pigs.  Advances  in Pork Production 16 : 169-182.
Murwani,  R.  2010.  Broiler  Modern.  Edisi Pertama. Widya Karya, Semarang. Nourmohammadi,  R.,  S.M.  Hosseini  and
H.  Farhangfar.  2010.  Effect  of dietary acidification on some blood parameters and weekly performance of broiler chickens. J. Anim.  Vet.  Adv. 9 (24):  3092-
3097.
Nourmohammadi, R. dan N. Afzali. 2013. Effect  of  citric  acid  and  microbial phytase on small intestinal
morphology  in  broiler  chicken. Ital. J. Anim. Sci. 12 (7): 44-47.
Noy,  Y  and  D.  Sklan.  1997.  Posthatch development  in  poultry.  J.  Appl. Poultry Res. 6 : 344-354.
Saputra,  W.Y.  2014.  Efektivitas  Asam Sitrat  dalam  Pakan Stepdown
Hubungannya  dengan  Ketahanan Tubuh  dan  Produktivitas  Broiler. Magister  Ilmu  Ternak  Fakultas Peternakan dan Pertanian Universitas Diponegoro, Semarang. (Tesis Magister). Saputra,  W.Y.,  N.  Suthama  dan  L.D. Mahfudz.  2014.  Deposisi  protein dan  kalsium  daging  pada  broiler yang  diberi  kombinasi  pakan
stepdown protein  dan  asam  sitrat. Prosiding Seminar Nasional Teknologi dan Agribisnis Peternakan untuk Akselerasi Pemenuhan  Pangan  Hewani  (Seri II), Purwokerto, 14 Juni 2014. Hal. 132-138. Steel,  R.G.D  dan  J.H.  Torrie.  1995.
Prinsip  dan  Prosedur  Statistika.
Gramedia Pustaka, Jakarta. (Diterjemahkan oleh Bambang Sumantri).
Suthama,  N.  2010.  Pakan  spesifik  lokal dan  kualitas  pertumbuhan  untuk produk ayam lokal organik (Pidato Pengukuhan  Guru  Besar).  Badan Penerbit  Universitas  Diponegoro, Semarang.
Tabel 1. Komposisi dan Kandungan Nutrien Pakan Perlakuan
Bahan Baku Pakan Pakan Perlakuan Starter Finisher Normal (P 0 ) Step Down (P 1 ) Step Down (P 2 ) Jagung 48,00 53,00 53,50 Bekatul 14,00 16,00 21,50 Minyak Nabati 2,00 1,00 0,50 Bungkil Kedelai 28,00 22,00 16,50 Tepung Ikan 6,50 6,50 6,50 CaCO 3 0,50 0,50 0,50 Tepung Kulit Kerang 1,00 1,00 1,00 TOTAL 100,00 100,00 100,00 Kandungan Nutrien (%)* Energi Metabolis (kkal/kg)** 2.856,91 2.884,12 2.882,13 Protein Kasar 21,41 19,25 17,37 Serat Kasar 5,09 5,18 5,75 Lemak Kasar 6,04 6,33 6,37 Ca 1,00 0,98 0,95 P 0,41 0,43 0,45 Lisin*** 1,41 1,23 1,09 Metionin*** 0,43 0,40 0,37 Arginin*** 1,53 1,34 1,17 Komposisi dan kandungan nutrien starter step down sama dengan finisher normal *Dianalisis  di  Laboratorium  Ilmu  Nutrisi  dan  Pakan,  Fakultas  Peternakan  dan  Pertanian, Universitas Diponegoro (2013)
**EM  (kkal/kg)  =  40,81  [0,87  (  PK  +  2,25  x  LK  +  BETN)  +  k]  (Balton,  1967)  dalam Murwani (2010)
***Berdasarkan Tabel Kandungan Nutrisi Bahan Pakan (Amrullah, 2004)

## Tabel 2. Perlakuan
Starter Finisher T 0 : P 0 T 0 : P 1 T 1 : P 1 T 1 : P 2
T 2 : P 1 + 0,8% asam sitrat dari jeruk nipis T 2 : P 2 + 0,8% asam sitrat dari jeruk nipis T 3 : P 1 + 0,4% asam sitrat sintetik T 3 : P 2 + 0,4% asam sitrat sintetik T 4 : P 1 + 0,8% asam sitrat sintetik T 4 : P 2 + 0,8% asam sitrat sintetik T 5 : P 1 + 1,2% asam sitrat sintetik
T 5 : P 2 + 1,2% asam sitrat sintetik T 6 : P 1 + 1,6% asam sitrat sintetik
T 6 : P 2 + 1,6% asam sitrat sintetik T 0 -T 6 : Kode Perlakuan P 0 ,  P 1 dan  P 2 masing-masing  merupakan  pakan  normal starter,  stepdown  starter dan stepdown finisher seperti pada Tabel 1.
Tabel 3. Rerata Bobot dan Panjang Usus Halus serta Bobot Badan Akhir Broiler
Perlakuan Parameter Bobot Usus Halus (g) Panjang Usus Halus (cm) Bobot Badan Akhir (g) Duodenum Jejunum Ileum Duodenum Jejunum Ileum T0 12,72±0,81 bc 23,65±1,89 bc 20,08±1,99 b 32,72±1,17 ab 71,92±4,62 68,05±3,74 1059,96±55,13 a T1 11,00±0,81 c 22,85±1,89 c 16,60±1,99 b 31,50±1,17 b 70,95±4,62 65,05±3,74 938,43±55,13 c T2 15,02±0,81 a 30,05±1,89 a 23,28±1,99 ab 35,45±1,17 a 81,40±4,62 77,10±3,74 946,47±63,96 ab T3 13,78±0,81 ab 29,05±1,89 ab 22,70±1,99 ab 33,78±1,17 ab 78,58±4,62 68,68±3,74 972,04±55,13 bc T4 16,72±0,81 a 32,52±2,18 a 26,98±2,30 a 36,22±1,17 a 83,62±4,62 78,95±3,74 1016,42±55,13 ab T5 15,28±0,81 a 29,70±1,89 ab 22,95±1,99 ab 35,38±1,17 a 79,88±4,62 77,10±3,74 1048,97±55,13 a T6 11,60±0,81 bc 26,45±1,89 abc 18,85±1,99 b 30,65±1,17 b 71,70±4,62 69,30±3,74 1074,36±55,13 a
ab Superskrip  pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan nyata P<0,05.