## UJI AKTIVITAS ANTIHIPERLIPIDEMIA EKSTRAK ETANOL BUAH
PINANG YAKI ( Areca vestiaria) PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus ) YANG DIINDUKSI PAKAN HIPERLIPIDEMIA
Steleynes J. J. Sagay 1) , Herny E. Simbala 1) , Edwin de Queljoe 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Jurusan Biologi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Pinang  Yaki  (Areca  vestiaria)  is  a  plan  originating  from  the  North  Sulawesi  region.  Pinang  Yaki  nut containds  flavonoide  which  can  act  as  anti-hyperlipidemia.  The  study  aims  to  identify  the  anti- hyperlipidemic  actibity  of  ethanol  extract  of  Pinang  Yaki  (Areca  vestiaria)    fruit  on  wistar  strain  rats induced  by  hyperlipidemic.  Total  cholesterol  level  is  a  parameter  on  this  study.  The  method  used  was laboratory experimental with a completely randomized design. The result of the study were obtained from 2 stagxes of measuring blood cholesterol, namely pre and post. The treatment was started by giving high-fat feed for 28 days. On the 29 th day pre measurementswere taken. Furthermore, treatment was given to each group, namely CMC in the negative control group, simvastatin in the positive control groups, and ethanol extract of Pinang Yaki Fruit with doses of each group of PS2 (200 mg), PS4 (400 mg), and PS8 (800 mg). Post  measurement  are  cerried  out  after  2  hours  of  administration.  Data  were  analyzed  by  Paired  T-test. Statistical  results  indicate  a  significant  difference  between  the  pre  and  post  groups.  From  the  percentage point  of  view,  the  dose  of  400  mg  ethanol  extract  of  Pinang  Yaki  Fruit gives  the  best  reduction  in  blood cholesterol level
Keywords: Pinang Yaki Fruit, Antihyperlipidemia, Male White Rat.

## ABSTRAK
Pinang  Yaki  ( Areca  vesitaria )  merupakan  tanaman  yang  berasal  dari  daerah  Sulawesi  Utara.  Buah  Pinang Yaki mengandung flavonoid yang dapat berperan sebagai antihiperlipidemia. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi  aktifitas  antihiperlipidemia  Ekstrak  etanol  buah  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria )  terhadap tikus  galur  wistar  yang  diinduksi  hiperlipidemia.  Kadar  kolesterol  total  merupakan  parameter  dalam penelitian  ini.  Metode  yang  digunakan  eksperimental  laboratorium  dengan  rancangan  acak  lengkap.  Hasil penelitian diperoleh dari 2 tahap pengukuran kolesterol darah, yaitu pre dan post . Perlakuan dimulai dengan memberi  pakan  tinggi  lemak  selama  28  hari.  Pada  hari  ke  29  dilakukan  pengukuran pre .  Selanjutnya diberikan  perlakuan  pada  tiap  kelompok,  yaitu  CMC  pada  kelompok  Kontrol  negatif,  simvastatin  pada kelompok Kontrol positif, dan ekstrak etanol buah pinang yaki dengan dosis masing-masing kelompok PS2 (200  mg),  PS4  (400  mg),  dan  PS8  (800  mg).  Pengukuran Post dilakukan  setelah  2  jam  pemberian.  Data dianalisis  dengan Paired  T-test .  Hasil  statistika  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan  antara kelompok pre dan post. dilihat dari presentase, dosis ekstrak etanol buah pinang yaki 400 mg  memberikan penurunan kadar kolesterol darah terbaik.
Kata kunci : Buah Pinang Yaki, Antihiperlipidemia, Tikus Putih Jantan

## PENDAHULUAN
Penyakit
kardiovaskuler akibat aterosklerosis  yaitu  plak  pada  pembuluh  arteri koroner  jantung  yang  disebabkan  oleh  kadar kolesterol  yang  tinggi,  serta  merupakan penyebab  utama  kematian  di  dunia.  Salah satunya adalah penyakit jantung koroner (PJK). Banyak  hal  yang  berperan  dalam  PJK, diantaranya  adalah  hiperlipidemia.  (Septianggi, 2013).
Hiperlipidemia  adalah  gangguan  pada sistem  metabolisme  lemak  yang  menyebabkan peningkatan  kadar  kolesterol  total,  LDL, trigliserida  darah  dan  penurunan      HDL.  Pada umumnya  hiperlipidemia  dikendalikan  dengan diet, olahraga dan terapi obat-obatan dalam hal ini adalah obat sintetik salah satunya simvastatin, yang telah diketahui memiliki efek samping bagi tubuh. seperti miopati, hepatotoksik,  neuropati  perifer  pusing,  diare dan alergi (Anwar, 2004).
Pinang  yaki  merupakan  salah  satu tumbuhan  endemik  Sulawesi.  Di  Sulawesi Utara  tanaman  tersebut  selain  tumbuh  di kawasan Taman Nasional Bogani Nani
Wartabone,  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria G.) juga  tumbuh  di  cagar  alam  gunung  Ambang kabupaten  Bolaang  Mongondow,  cagar  alam gunung  Tangkoko  dua  saudara,  di  lereng  G. Soputan  dan  G.  Mahawu  kabupaten  Minahasa. Tanaman pinang  yaki  tersebut  oleh masyarakat di Bolaang Mongondow yang tinggal dikawasan  Taman  Nasional  Bogani  Nani Wartabone  digunakan  sebagai  obat  untuk penyakit diabetes dan juga dipakai sebagai obat kontrasepsi.  Buah  pinang  yaki  mengandung senyawa-senyawa  metabolit  sekunder  seperti alkaloid,  flavonoid,  triterpenoid,  steroid,  dan tanin  yang  memiliki  efek  sebagai  antifertilisasi (Simbala, 2017). Golongan senyawa  flavonoid, saponin,    polifenol    dan    terpenoid    yang
terkandung    di    dalam    tanaman    mampu mengatasi    obesitas    sebab    senyawa    tersebut berkontribusi    dalam    inhibisi    enzim    lipase pankreatik,    sehingga    absorbsi    trigliserida dalam    tubuh    akan    terhambat    (Yamamoto dkk., 2000).

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini telah dilaksanakan selama  6  bulan  yaitu  di  mulai  dari    bulan Oktober  sampai  bulan  April  Tahun  2019  di Laboratorium Penelitian Program Studi Farmasi dan Laboratorium Farmakologi Jurusan Biologi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi, Manado.

## Alat
Timbangan  analitik,  timbangan  hewan uji, sudip, cawan petri, ayakan 200 mesh, oven, labu  ukur  100  mL,  gelas  beker,  pipet,  batang pengaduk,  lumpang  dan  alu, hot  plate ,  kertas saring, sarung tangan lateks merek sensi gloves, masker  merek  sensi  mask,    sonde  oral,  kapas, kandang  tikus  putih  galur  wistar , lemari pendingin  atau  kulkas,  alat  ukur  kolesterol  dan strip kolesterol merek AUTOCHECK.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan:  Tikus  putih jantan galur wistar ( Rattus novergicus ) 15 ekor, ekstrak  etanol  buah  pinang  yaki  ( Areca vestiaria ), CMC ( carboxymethylcellulose ), aquades,  etanol  96  %,  beras  jagung,  kuning telur  ayam,  simvastatin  10  mg,  aquades, propiltiourasil (PTU) 100 mg.

## Prosedur Penelitian Penyiapan Hewan Uji
Penelitian ini menggunakan Tikus  putih jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus )  sebagai hewan  uji  yang  dibagi  secara  acak  menjadi  5 kelompok  dimana  masing-masing  kelompok terdiri  atas  3  ekor.  Tikus  diaklimatisasikan terlebih  dahulu  selama  7  hari,  agar  terbiasa dengan  kondisi  laboratorium.  Selama  masa aklimatisasi, tikus diberikan pakan beras jagung dan air minum ad libitium .

## Penyiapan Pakan Hiperlipidemia
Makanan  hiperlipidemia  menggunakan kuning  telur  ayam  mentah  dan  larutan  PTU.
Terlebih  dahulu  dipisahkan  kuning  telur  dari bagian  putih  telur,  dan  kemudian  dikocok sampai  kuning  telur  menjadi  lebih  encer. Volume administrasi oral yang diberikan adalah 1 mL/tikus/hari.
Dosis  rentang PTU untuk  orang dewasa adalah  500-2.000  mg.  Dosis  yang  digunakan dalam penelitian ini ialah 2.000 mg. Dosis yang digunakan pada tikus dengan berat rata-rata 180 g yaitu: 180 / 50.000 x 2.000 = 7 mg/tikus/hari. PTU  dibuat  dalam  bentuk  larutan  dengan  cara melarutkan  satu  tablet  100  mg  PTU  dalam  14 mL  pelarut  (akuades),  sehingga  dalam  1  ml larutan terkandung 7 mg PTU (Suhendra,2016)

## Pemberian  Pakan  Hiperlipidemia  pada Hewan Uji
Hewan  uji  dipegang  dengan  cara menempatkan  tangan  di  sekitar  dada  bagian atas,  ibu  jari  ditempatkan  di  bawah  rahang hewan  tetapi  tidak  memberikan  tekanan  pada tenggorokan. Pakan diberikan melalui rute oral. Sonde  oral  dimasukan  pada  langit-langit  mulut atas tikus, kemudian perlahan-lahan dimasukan sampai ke esofagus dan pakan diinduksi secara perlahan (Harini, 2009).

## Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Buah  Pinang Yaki
Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode ekstraksi  dingin  yaitu  maserasi  mengguanakan pelarut  etanol  96%.  Buah  Pinang  Yaki  yang telah  menjadi  serbuk  simplisia  ditimbang  dan dimasukkan  ke  dalam  beker  gelas  kemudian diekstraksi  dengan  cara  serbuk  simplisia direndam  dalam  pelarut  etanol  96%,  dan dibiarkan  selama  5  hari,  kemudian  disaring menggunakan  kertas  saring.  Filtrat  yang diperoleh,  dipekatkan  dengan  menggunakan oven  pada  suhu  40 ℃ sampai  diperoleh  ekstrak kental

## Pembuatan Larutan CMC 1%
Larutan  stok  CMC  1%  dibuat  dengan menimbang  serbuk  CMC  sebanyak  1  g kemudian  dicampurkan  dengan  100  mL aquades dihomogenkan dengan cara pemanasan menggunakan hot plate , kemudian didinginkan. Perbandingan  aquades  dengan  CMC  adalah 100:1 artinya didalam 100 mL aquades terdapat 1 g CMC.

## Pembuatan Larutan Uji
Dosis  pemakaian  buah  Pinang  yaki ( Areca  vestiaria )  dengan  faktor  konversi  dosis dari  manusia  (70  kg)  ke  hewan  uji  (200g) dengan  dikalikan  0,018  yaitu  3,6  mg,  7,2  mg, dan 14,4 mg. Ekstrak buah  Pinang yaki ( Areca vestiaria ) ditimbang sesuai dengan dosis (3,6 g, 7,2 g, dan 14,4 g) disuspensikan dengan larutan CMC  1  %  sampai  10  mL  dalam  gelas  ukur kemudian  diaduk  hingga  homogen.  Menurut Deldago  (1982),  penggunaan  CMC  tidak  akan berpengaruh terhadap perubahan kadar kolesterol total darah karena CMC tidak dicerna dan  diabsorpsi  oleh  tubuh.  Setelah  homogen, masing-masing  dosis  ekstrak  di  masukkan  ke dalam botol sampel dan diberi label. PS2 untuk
ekstrak buah pinang  yaki dengan dosis 3,6 mg;
PS4 untuk ekstrak dosis 7,2 mg; dan PS8 untuk ekstrak  dosis 14,4 mg.
Pembuatan dan Pemberian
Larutan

## Simvastatin
Simvastatin  10  mg  dilarutkan  dengan larutan  CMC  1%  sampai  10  mL.  Volume administrasi  oral  yang  diberikan  sebanyak  1 mL/tikus.  Dosis  Simvastatin  untuk  manusia adalah 10 mg, dikonversikan dalam dosis tikus 0,018  didapat  0,18  mg.  Penentuan  dosis Simvastatin adalah sebagai berikut :
/tikus
Jadi, dalam larutan stok 10 mL, mengandung 36,4 mg simvastatin, dan setiap 1 mL mengandung 3,636 mg simvastatin
Pengukuran  Kadar  Kolesterol  Total  Plasma

## Darah
Hewan uji yang telah dikelompokkan dan menerima  perlakuan,  dilakukan  pengamatan berat  badan  dengan  cara  menimbang  semua hewan  uji  pada  setiap  kelompok,  dilakukan perminggu  yaitu  pada  hari  ke-0,  7,  14,  21,  28. 29. Tikus dipuasakan selama 12 jam, kemudian dibersihkan  dengan  kapas  alcohol  pada  bagian ekor  sehingga  kotoran  yang  terdapat  pada  ekor tikus  dapat  dibersihkan  (sterilisasi  ekor  tikus). Selanjutnya  darah  diambil  beberapa  tetes  pada ekor  yang  telah  dilukai.  Pengukuran  kadar kolesterol  total  tikus  setiam  minggu  selama  28 hari + 1 hari perlakuan, menggunakan alat ukur kolesterol  (AUTOCHECK)  dengan  kisaran pemeriksaan 100-400 mg/dL.

## Teknik Analisa Data
Data disajikan secara deskriptif komparatif  dengan  menilai  hasil  pemeriksaan kadar  kolesterol  total  antara  kelompok  K-,  K+, PS2, PS4, dan PS8, serta dianalisis menggunakan  program  SPSS  v.20  dengan  uji Paired T-test untuk melihat perubahan (penurunan) kadar kolesterol darah sebelum dan sesudah perlakuan dengan p<0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh  Pakan  Hiperlipidemia  Terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus
Berikut merupakan tabel rerata
pengamatan pre dan post pemberian  pakan hiperlipidemia pada hari ke 0, 7, 14, 21, dan 28.
Tabel  1.  Rerata  kadar  kolesterol  tikus  pada hari ke 0, 7, 14, 21, dan 28.
Berdasarkan  tabel  di  atas,  adanya peningkatan kadar kolesterol total pada ke lima kelompok perlakuan selama 28 hari pemberian. Pemberian  PTU  dapat  meningkatkan  profil lipid  dalam  darah  lebih  cepat  jika  ditambah pakan tinggi lemak, dan tidak tampak efek yang besar  pada  kelompok  kontrol  negatif  (tanpa penambahan  pakan  hiperlipidemia).  Adapun peningkatan  tersebut,  dapat  disebabkan  karena adanya  pemberian  pakan  hiperlipidemia  secara terus  menerus  pada  tikus  sehingga  mampu mempengaruhi kadar awal kolesterol. Peningkatan  yang  disebabkan  oleh  PTU  juga
sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Posangi,  et  al.  (2012),  dimana  pemberian  PTU dapat  menyebabkan  terjadinya  hipotiroid  pada tikus. Pada keadaan hipotiroid terjadi penurunan jumlah reseptor LDL di hati. Hal ini menyebabkan  terjadinya  peningkatan  kadar LDL  plasma  yang  turut  meningkatkan  kadar kolesterol total.
Pengamatan Pre dan Post Penelitian Hasil penelitian diperoleh dari data hasil dua  tahap  pengukuran  kadar  kolesterol  darah tikus  putih  jantan  yaitu Pre (hari  ke-28)  dan Post (2  jam  setelah  pemberian  perlakuan  pada hari ke-29).
Tabel 2. Perbandingan kadar kolesterol total tikus sebelum dan sesudah perlakuan
Gambar  1.Grafik  perubahan  rataan  kadar kolesterol  darah  tiap  kelompok perlakuan
Pada  tiap  kelompok,  dapat  dilihat  bahwa terjadi  penurunan  kadar  kolesterol  sesudah perlakuan.  Berdasarkan  tabel  rerata  kadar kolesterol tikus, terlihat bahwa pada hari ke 29, setiap  kelompok  mengalami  penurunan  kadar kolesterol  dengan  angka  yang  berbeda.  Untuk kontrol negatif, walaupun tidak diberi perlakuan tetap mengalami penurunan kolesterol, peneliti berasumsi bahwa penurunan tersebut  disebabkan  oleh  co-inducer  (PTU) yang  tidak  lagi  diberikan. Kelompok  kontrol positif berfungsi sebagai pembanding. Berdasarkan grafik, penurunan kadar kolesterol K+ berada di angka terendah  yaitu 103 mg/dL. Hal  ini  berkaitan  dengan  mekanisme  kerja  dari simvastatin  menurut  PERKI  (2013),  dimana simvastatin  yang  merupakan  obat  golongan statin yang digunakan untuk menurunkan kadar kolesterol yang paling efektif digunakan. Statin bekerja  dengan  cara  menghambat  sintesis kolesterol  dalam  hati,  dengan  menghambat enzim  HMG-CoA  reduktase.  Selanjutnya,  jika dilihat  pada  kelompok  pemberian  ekstrak  PS2 (200mg),  PS4  (400  mg),  dan  PS8  (800  mg), masing-masing  kelompok  menunjukan  adanya efek  penurunan  kadar  kolesterol  pada  tikus. Akan  tetapi,  nilai  rerata  penurunan  kadar kolesterol  total  yang  paling  besar  adalah  pada kelompok  PS4  yaitu  menurunkan  kadar kolesterol dari 120 mg/dL menjadi 104 mg/dL.

## Aktifitas  Farmakologi  Kandungan  Kimia Buah Pinang Yaki
Pinang  yaki  mengandung  senyawa tanin, triterpenoida, flavonoid dan saponin yang kemungkinan  besar  mengandung  senyawa potensi  bioaktif  (Simbala,  2007).  Aktivitas ekstrak  etanol  buah  pinang  yaki  dalam menurunkan  kadar  kolesterol  total,  disebabkan oleh  adanya  kandungan  senyawa  flavonoid, tannin, dan saponin. Flavonoid dapat
menurunkan  kadar  kolesterol  total.  (Gross, 2004).  Senyawa  lain    dalam  buah  pinang  yaki yang  juga  diduga  berpengaruh  pada  penurunan kadar kolesterol tikus adalah tanin. Senyawa ini berperan lewat aktivitasnya sebagai antioksidan (Kurniawati,  2015).    Tanin  dalam  buah  pinang yaki  dimungkinkan  juga  bekerja  dengan mengikat lipid  di  saluran pencernaan, sehingga mengganggu  absorbs  lipid  di  dalam  usus, Saponin,  pada  penelitian  terdahulu  yang dilakukan  oleh  Francis et  al., (2002),  saponin bekerja  dengan  mengendapkan  kolesterol. Mekanisme pengikatan saponin-kolesterol dapat  menurunkan  kadar  trigliserida  dengan menghambat pancreatic lipoprotein lipase .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan yang telah dijelaskan, maka peneliti menyimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  buah pinang
yaki memiliki
aktivitas antihiperlipidemia.  Ekstrak  etanol  buah  pinang yaki ( Areca vestiaria ) yang memiliki penurunan  kadar  kolesterol  total  tikus  putih jantan  galur  wistar  ( Rattus  novergicus L.) terbaik, yakni pada konsentrasi 400 mg (PS4).

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk  parameter  yang  lain,  seperti  kadar  LDL, HDL, dan Trigliserida, serta penelitian terhadap kandungan dari ekstrak buah pinang yaki untuk mengetahui  komponen  zat  aktif  yang  paling berperan  atau  berpengaruh  pada  penurunan kadar kolesterol total.

## DAFTAR PUSTAKA
Anwar,  T.B.  2004. Dislipidemia  Sebagai Faktor Resiko Penyakit Jantung
Koroner [Tesis].  Fakultas  Kedokteran Universitas Sumatera Utara, Medan.
Francis, G., Z. Kerem, P.S., Harider. 2002. The Ciological  Action  Of  Saponins  in Animal  Systems:  A  Review. British Journal Of Nutriion. (88) :587-605.
Gross, Myron. 2004. Flavonoid and
Cardiovascular Disease. Pharmaceutical
Biology. 21-35. Kurniawati, A. 2015. Uji Efek
Antihiperlipidemia Ekstrak Etanol Buah Parijoto  (Medinilla  speciosa  Blume) Terhadap Kolesterol Total, Trigliserida, dan  VLDL  pada  Tikus  Putih  Jantan. [Skripsi]  UIN  Syarif  Hidayatullah, Jakarta.
Septianggi,F.N.,Mulyati,T.,Sulistya,H.2013.Hu bungan  Asupan  Lemak  dan  Asupan Kolesterol  Dengan  Kadar  Kolesterol Total  Pada  Penderita  Jantung  Koroner Rawat  Jalan  Di  RSUD  Tugurejo Semarang. Jurnal  Gizi  Unimu . 2(2) :13- 20.
Simbala,H.E.I.2007. Uji Toksisitas dan Uji Pre Klinik  Areca  vestiaria/Pinang  Yaki Sebagai  Antifertilitas .  Universitas  Sam
Ratulangi, Manado. Simbala,H.E.I.2017. Proses Produksi Dan Formulasi Produk Ekstrak Buah Pinang
Yaki  Areca  vestiaria  Sebagai  Bahan Aktif  Produk  Fitofarmaka  Antikanker .
Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Suhendra,  T.,A,  Awaloei,  H.,  Wuisan,  J.  2016.
Uji  Efek  Ekstrak  Biji  Alpukat  ( Persea americana Mill. ) Terhadap Kadar Kolesterol  Total  pada  Tikus  Wistar ( Rattus  norvegicus ). Jurnal  e-Biomedik (eBm) . 4(1) : 1-7.
Yamamoto,  M.  2000.  Anti  Obesity  E ﬀ ects  Of Lipase  Inhibitor  CT-II,  An  Extract  Of Edible  Herbs,  Nomame  Herba,  On  Rat Fed  On  A  High  Fat  Diet. International Journal of Obesity . 24(6) : 758–764.
Perki.2013 Pedoman Tatalaksana Dislipidemia .
Centra Communications, Jakarta.
Posangi,  I., J., Posangi,  J., Wuisan. 2012. Efek Ekstrak  Daun  Sirsak  ( Annona  muricata
L. )  Pada  Kadar  Kolesterol  Total  Tikus
Wistar. Jurnal Biomedik . 4(1) : 37-42.