## KOMPONEN FITOKIMIA DAN TOKSISITAS SENYAWA BIOAKTIF DARI LAMUN ENHALUS ACOROIDES DAN THALASSIA HEMPRICHII DARI PULAU PRAMUKA, DKI JAKARTA

## ( PHYTOCHEMICAL COMPOUND AND TOXICITY OF SEAGRASS ENHALUS ACOROIDES AND THALASSIA HEMPRICHII FROM PRAMUKA ISLAND, DKI JAKARTA)
Citra S.U. Dewi 1,2 , Dedi Soedharma 3 , Mujizat Kawaroe 3 1 Corresponding author
2 Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Brawijaya, Jl. Veteran No 1. Malang. 65145. Indonesia E-mail: satryacitra@gmail.com
3 Departemen Ilmu dan Teknologi Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor

## ABSTRACT
Some of marine bioactive research has been done using seagrass, such as Enhalus  acoroides and Thalassia hemprichii. Respect to the bioactive compound in Enhalus acoroides and Thalassia hemprichii as medicine, and other pharmaceuticals, it is necessary  to  observations  phytochemical  components  and  toxicity  level.  This  study  informs  the  toxicity  level and  phytochemical compounds which is contained in Enhalus acoroides and Thalassia hemprichii from Pramuka Island, Jakarta. Phytochemical test of Enhalus acoroides and Thalassia hemprichii showed that there are containing flavonoids, alkaloids, and steroids. Toxicity test wich is conducted with Brain Shrimp Lethal Toxic (BSLT) method showed that methanol extract of Enhalus acoroides is highly  toxic  with  LC 50 =  5.74  ppm,  while  the  n-hexane  extract  of  Enhalus  acoroides  is  not  toxic,  indicated  by  LC 50 = 1309.42 ppm.
Keywords: Enhalus acoroides, Thalassia hemprichii, phytochemicals, toxicity

## ABSTRAK
Beberapa penelitian mengenai kandungan bioaktif  telah dilakukan dengan menggunakan bahan dasar lamun. Sehubungan dengan kandungan senyawa bioaktif yang terkandung dalam Enhalus acoroides dan Thalassia hemprichii yang  kaya  dan  potensial  sebagai  bahan  kecantikan,  obat,  dan  bidang  farmasi  lain,  maka  perlu dilakukan  observasi  mengenai  komponen  fitokimia  dan  tingkat  toksisitasnya.    Penelitian  ini  melaporkan golongan senyawa kimia yang terkandung dalam Enhalus acoroides dan Thalassia hemprichii dari Pulau Pramuka, DKI  Jakarta  serta  tingkat  toksisitasnya.  Uji  fitokimia  yang  dilakukan  menunjukkan  ekstrak Enhalus  acoroides dan Thalassia hemprichii mengandung senyawa bioaktif dari jenis flavonoid, alkaloid, dan steroid. Uji toksisitas dengan  metode  BSLT  yang  dilakukan  menunjukkan  ekstrak  metanol Enhalus  acoroides bersifat  sangat  toksik dengan nilai LC 50 5,74 ppm, sedangkan ekstrak n-heksana Enhalus acoroides bersifat tidak toksik ditunjukkan dengan nilai LC 50 1309,42 ppm.
Kata kunci: Perubahan garis pantai, Model MIKE DHI, citra Landsat, abrasi, sedimentasi

## I. PENDAHULUAN
Keragaman jenis lamun di Indonesia  cukup  tinggi,  lamun  yang telah  ditemukan  hingga  saat  ini  ada  12 jenis  yang  termasuk  ke  dalam  tujuh marga yaitu: Enhalus, Halophila, Thalassia, Cymodocea, Halodule,
Syringodium , dan Thalassodendron (Tomascik et  al .,  1997). Enhalus acoroides dan Thalassia  hemprichii merupakan  jenis  lamun  yang  umum dijumpai  di  perairan  Indonesia.    Kedua jenis lamun tersebut dapat ditemukan di
Teluk Lampung (Pratiwi,
2010),
Kepulauan  Seribu  (Mardesyawati  & Anggraeni,  2009),  Teluk  Gilimanuk,  Bali (Al-Hakim & Wahyuni 2009), dan Pantai Molas,  Manado  (Maabuat et  al., 2012). Beberapa  penelitian  mengenai kandungan  bioaktif    telah  dilakukan dengan  menggunakan  bahan  dasar lamun.  Elfahmi  (1997)  melaporkan bahwa Enhalus  acoroides mengandung senyawa  golongan  triterpenoid,  steroid, tannin,  dan  flavonoid.    Selain  itu, ekstrak n-heksan dari Enhalus acoroides mengandung  senyawa stigmasta-3,5- diena-7-on atau  sakarostenon  yang bercampur  dengan  asam  palminat,
ekstrak etil asetat dari Enhalus acoroides mengandung  senyawa stigmat,5-22-dien- 3-ol, dan  ekstrak methanol  dari Enhalus acoroides mengandung  senyawa 5,7,3,4- tetrahidroksi  glikosida  flavon  dan  5,7,3- trihidroksiglikosida flavon
(Elfahmi,
1997).    Qi et  al., 2008  memaparkan bahwa Enhalus  acoroides mengandung 11 senyawa murni yang tergolong dalam golongan
flavonoid dan steroid. Beberapa senyawa murni yang tergolong kedalam  golongan  flavonoid  tersebut terbukti  toksik  bagi  larva-larva  biota penempel, Bugula  neritina (Qi et  al ., 2008).
Enhalus acoroides juga dilaporkan mengandung senyawa bioaktif golongan fenolik yang cenderung potensial  sebagai  antioksidan  (Raja- Kannan et al., 2010).
Thalassia
hemprichii yang dikoleksi  dari  Pamban,  Tamil  Madu, India  diketahui  mengandung  senyawa bioaktif  potensial  sebagai  antibakteri, antifungi, antiprotozoa, antiviral, antifertility , dan bahan obat-obatan yang berpengaruh  pada  sistem cardiovascular (Laksmi et al., 2006).  Raja-Kannan et al.
(2010) memaparkan Thalassia hemprichii juga  memiliki  potensi  bioaktif  sebagai antioksidan  dan  mengandung  senyawa golongan fenolik.
Sehubungan  dengan  kandungan senyawa bioaktif yang terkandung dalam
Enhalus acoroides
dan Thalassia hemprichii yang  kaya  dan  potensial sebagai  bahan  kecantikan,  obat,  dan bidang  farmasi  lain,  maka  perlu dilakukan observasi mengenai
komponen
fitokimia
dan tingkat toksisitasnya.  Metode prediksi toksisitas Brain  Shrimp  Lethal  Toxic (BSLT)  umum dilakukan  sebagai  uji  pendahuluan dalam  penelitian  penapisan  aktivitas pada  ekstrak  bahan  alam.    BSLT  juga umum  dilakukan  pada  uji  pendahuluan pada  senyawa  bioaktif  yang  diduga berpotensi  sebagai  anti  tumor,  sebelum melangkah pada uji in-vitro menggunakan  sel  tumor.  Penelitian  ini melaporkan  golongan  senyawa  kimia yang terkandung dalam Enhalus acoroides dan Thalassia  hemprichii dari Pulau  Pramuka,  DKI  Jakarta  serta tingkat toksisitasnya.

## II. METODOLOGI  PENELITIAN

## 2.1. Waktu dan tempat penelitian
Penelitian  dilakukan  pada  bulan Maret  –  April  2011,  meliputi  koleksi contoh Enhalus  acoroides dan Thalassia hemprichii dari  Pulau  Pramuka,  DKI Jakarta  (Gambar  1),  persiapan  ekstrak kasar Enhalus  acoroides dan Thalassia hemprichii , uji fitokimia, dan uji toksisitas.
2.2. Preparasi ekstrak kasar lamun
Contoh Enhalus  acoroides dan
Thalassia hemprichii dibersihkan, dikeringkan,  dan  diekstrak  dengan pelarut polar (metanol) dan non-polar (n- heksana)  dengan  perbandingan  1:2. Proses berikutnya adalah maserasi, yang dilakukan  dengan  menggunakan shaker bath selama 24 jam, dilanjutkan dengan proses  filtrasi  menggunakan  kertas saring  whattman  no  1.    Fraksi  metanol dan  n-heksana  dari  kedua  jenis  lamun kemudian  dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator yang  diaplikasikan pada  suhu  50  –  60 o C,  sehingga diperoleh  ekstrak  dalam  bentuk  pasta. Pasta yang diperoleh
kemudian ditimbang beratnya.

## 2.3. Uji Fitokimia
Teknik  melakukan  uji  fitokimia adalah  dengan  cara  mengencerkan ekstrak  secukupnya,  kemudian  ditetesi senyawa  kimia  untuk  uji  Alkaloid, Steroid,  Flavonoid,  Saponin,  Molisch, Benedict, Biuret, dan  Ninhidrin (Mani et al., 2012 (a); Mani et al ., 2012 (b)).

## 2.4. Uji toksisitas metode BSLT
Uji  toksisitas  ini  dilakukan dengan  mengadopsi  dan  memodifikasi metode uji toksisitas Brain Shrimp Lethal Toxic (BSLT) dengan menggunakan larva Artemia  salina (Meyer et  al .,  1982; McLaughlin  &  Rogers,  1998;  Tamat et al., 2007;  Manilal et  al., 2009  ).    Larva Artemia  salina dipelihara  pada  air  laut yang  telah  difilter  selama  24  jam  pada suhu  28 0 C,  kemudian  setiap  10  larva dipindahkan  ke  dalam  masing-masing wadah  uji  yang  telah  diisi  air  laut  hasil filtrasi  sebanyak  2  ml.    Uji  toksisitas ekstrak kasar lamun diencerkan
menggunakan air steril ( aquades ) hingga konsentrasi 10 ppm, 100 ppm, 500 ppm, dan  1000  ppm,  kemudian  diteteskan kedalam  masing  masing  wadah  uji  yang
telah  diisi Artemia  salina .    Pengamatan dilakukan  setelah  24  jam  inkubasi, dengan  melihat  jumlah Artemia  salina yang  mati  pada  setiap  wadah  uji. Perhitungan nilai LC 50 dilakukan menggunakan analisis probit dan program  Microsoft  Excel  2007,  pada selang kepercayaan 95%.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Berat  basah  contoh Enhalus acoroides yang digunakan dalam penelitian  menyusut  hingga  31,6  ± 0,04%, dan Thalassia hemprichii menyusut  hingga  95,5  ±  0,016%. Jumlah  rendemen  ekstrak  kedua  jenis lamun  yang  diekstraksi  dengan  pelarut metanol  lebih  tinggi  jika  dibandingkan dengan  yang  diekstraksi  dengan  pelarut n-heksana  (Gambar  2).    Rendemen ekstrak  kasar  lamun  jenis Enhalus acoroides ,  dengan  pelarut  n-heksana adalah 0,32%, sedangkan dengan pelarut metanol adalah 2,71%.
Rendemen  ekstrak  kasar  lamun  jenis Thalassia  hemprichii dengan  pelarut  n- heksana  adalah  0,32%,  sementara dengan  pelarut  metanol  adalah  2,99%. Hal  ini  menunjukkan Enhalus  acoroides dan Thalassia  hemprichii yang  dikoleksi dari  Pulau  Pramuka,  Kepulauan  Seribu, DKI  Jakarta  mengandung  senyawa bioaktif  bersifat  polar  lebih  banyak daripada yang bersifat non polar.
Ekstrak Enhalus  acoroides dan Thalassia  hemprichii dengan  pelarut  n- heksana  dan  metanol  memperlihatkan respon  positif  terhadap  uji  benedict  dan uji  flavonoid  (Tabel  1).    Hal  ini menunjukkan seluruh ekstrak
mengandung gula pereduksi dan senyawa bioaktif golongan flavonoid.  Uji fitokimia  menunjukan  bahwa  ekstrak Thalassia  hemprichii dengan  pelarut  n- heksana  dan  metanol  mengandung senyawa  bioaktif  golongan  alkaloid  dan steroid (Tabel 1).
Senyawa flavonoid juga
ditemukan  dalam  ekstrak
Thalassia testudiunum (Jensen et  al., 1998).  Qi et al. (2008)  berhasil  mengisolasi  empat senyawa  flavonoid  dan  lima  senyawa steroid  dari  ekstrak Enhalus  acoroides . Ekstrak Syringodium
isoetifolium dilaporkan  mengandung  senyawa  kimia golongan  fenol  dan  alkaloid  (Mani et  al., 2012  (a)),  dan  ekstrak Cymodocea
rotundata mengandung  senyawa  kimia golongan alkaloid (Mani et al., 2012 (b)).
Keberadaan senyawa kimia golongan  flavonoid,  alkaloid  dan  steroid dalam  ekstrak  kasar Enhalus  acoroides dan Thalassia hemprichii pada penelitian ini  menunjukkan  bahwa  kedua  jenis lamun tersebut memiliki potensi sebagai bahan kimia alami antifouling,
antibakteri,  antifungi ,  serta  bahan  baku farmasi lainnya (Robinson, 1995; Cowan, 1999;  Qi et  al., 2008).    Robinson  (1995) memaparkan  senyawa  golongan  alkaloid potensial
dimanfaatkan
sebagai antibakteri  dan  bahan  obat  obatan analgesik.    Senyawa  pada  golongan  ini diduga  mampu  mengganggu  komponen penyusun peptidoglikan, sehingga dinding  sel  bakteri  tidak  tersusun dengan  utuh,  kemudian  menyebabkan kematian.    Ekstrak  yang  mengandung senyawa  golongan  steroid  diketahui memiliki potensi sebagai antibakteri dan antifungi,  dengan  mekanisme  merusak membran sel bakteri, sehingga menghambat pertumbuhan bakteri
(Cowan,  1999).  Senyawa  kimia  golongan flavonoid  dilaporkan  berperan  aktif sebagai antifouling , karena isolat senyawa flavonoid dari Enhalus acoroides terhadap penempelan organisme (Qi et al., 2008). Hasil uji toksisitas yang dilakukan  terhadap  hewan  uji Artemia salina menunjukkan hasil yang beragam tingkat toksisitasnya. Data log konsentrasi ekstrak lamun dan mortalitas probit A. salina yang diperoleh kemudian  dihubungkan  dan  dilihat korelasinya dengan grafik regresi (Gambar  3).    Melalui  persamaan  dari grafik  regresi  yang  terbentuk,  diperoleh nilai  toksisitas  LC 50 (Tabel  2).    Nilai toksisitas  LC 50 tertinggi  diperoleh  dari ekstrak  n-heksana Enhalus  acoroides , yaitu  1309,42  ppm,  sementara  nilai terendah  diperoleh  dari  ekstrak  metanol Enhalus  acoroides ,  yaitu  5,74  ppm.  Hal ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  n- heksana Enhalus acoroides bersifat tidak toksik,  sementara  ekstrak  metanol Enhalus  acoroides bersifat  sangat  toksik (Meyer et al ., 1982). Persamaan  yang  terbentuk  dari hubungan  log  konsentrasi  ekstrak lamun dengan mortalitas probit menghasilkan dua nilai koefisien korelasi  (R 2 )  yang  hampir  mendekati  1, yaitu  0,947  untuk  ekstrak  n-heksana
Enhalus  acoroides dan  0,975  untuk ekstrak  metanol Thalassia  hemprichii , artinya  konsentrasi  kedua  ekstrak tersebut    dengan  nilai  mortalitas A. salina mempunyai  hubungan  yang sangat  erat,  dimana  semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  yang  diberikan semakin  besar  pula  jumlah A.  salina yang mengalami kematian.
Thalassia
hemprichii
yang diekstrak  dengan  pelarut  methanol  dan n-heksana, serta Enhalus acoroides yang diekstrak  dengan  pelarut  methanol diketahui  masuk  dalam  kategori  toksik dan  sangat  toksik.    Data  tersebut menunjukkan  adanya  korelasi  positif dengan hasil uji fitokimia, yang menunjukkan  bahwa  didalam  ketiga ekstrak  kasar  tersebut  terkandung  tiga golongan  senyawa  bioaktif  yang  dapat bersifat  toksik  bagi  sel  organisme,  yaitu flavonoid, steroid, dan alkaloid.
Ekstrak Enhalus  acoroides dan Thalassia  hemprichii dengan  pelarut  n- heksana  hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  ekstrak  tersebut  relatif  lebih toksik jika dibandingkan dengan ekstrak n-heksana  dari Ulfa  reticulata .    Ini ditunjukan  dengan  nilai  LC 50 ekstrak  n- heksana Ulfa  reticulata ,  adalah  6367,95 ppm (Tamat et al. 2007), nilai ini berada jauh  diatas  nilai  LC 50 dari  Ekstrak  n- heksana Enhalus acoroides (707,22 ppm) dan Thalassia hemprichii (1309,42 ppm). Komponen toksik yang terkandung dalam contoh-contoh ekstrak  lamun,  jika  diberikan  pada Artemia  salina sebagai  hewan  uji  dapat menyebabkan  kematian.    Kematian tersebut  terjadi  karena Artemia  salina merupakan  hewan  yang  mengkonsumsi bahan-bahan  organik,  sehingga  seluruh komponen  dari  ekstrak  lamun  akan dikonsumsi  dan  terakumulasi  didalam tubuhnya.    Loomis  (1978)  menyebutkan bahwa  akumulasi  komponen  toksik  di dalam  tubuh Artemia  salina akan  terus meningkat  seiring  pertambahan  waktu, sehingga menyebabkan kematian.

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan  dari  hasil  penelitian ini adalah: 1) Ekstrak Enhalus acoroides dan Thalassia  hemprichii menunjukkan adanya kandungan senyawa bioaktif dari jenis  flavonoid,  alkaloid,  dan  steroid;  2) Hasil  iji  toksisitas  menunjukan  bahwa
ekstrak  metanol Enhalus  acoroides bersifat  sangat  toksik  dengan  nilai  LC 50 5,74 ppm, sedangkan ekstrak n-heksana Enhalus  acoroides bersifat  tidak  toksik ditunjukkan  dengan  nilai  LC 50 1309,42 ppm.

## Ucapan Terima Kasih
Sebagian dari kegiatan ini dibiayai  oleh  Bagian  Hidrobiologi  Laut, Departemen Ilmu dan
Teknologi Kelautan, FPIK – IPB.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Hakim  III  dan  Wahyuni  PS.  2009. Populasi suku syllidae (polychaeta) di  padang  lamun  perairan  Teluk Gilimanuk. OLDI ,  Vol.  35(1):  29  – 45.
Cowan  MM.  1999.  Plant  products  as antimicrobial  agents. Clin  microbio Reviews , Vol 2(4); 69 – 72.
Elfahmi,  Sodiro  I,  Ruslan  K.  1997. Telaah  fitokimia  dan  uji  hayati pendahuluan lamun Enhalus accorides (L.  F.)  Royle.  [tesis]. Bandung: Sekolah Farmasi, Institut Teknologi Bandung. Jensen PR, Jenlins KM, Porter D, Fenical W.  1998.  Evidence  that  a  new antibiotic flavone glycoside chemically  defends  the  seagrass Thalassia testudinum
against zoosporic  fungi. AEM ,  Vol  64(4);
1490 – 1496.
Lakshmi  V,  Goel  AK,  Srivastava  MN,
Kulshreshta  DK,  Raghubir  R.
2006. Bioactivity of marine organism:  part  IX  –  screening  of some  marine  flora  from  Indian Coasts. IJEB , Vol 44; 137 – 141.
Loomis TA. 1978. Essential of Toxicology . London: Henry Kimpton Publisher.
Maabuat PV, Sampekalo J, Simbala HEI. 2012.  Keanekaragaman  lamun  di pesisir  Pantai  Molas,  Kecamatan Bunaken,  Kota  Manado. J.  Bios Logos . Vol 2(1): 20 – 27.
Mani  AE,  Aiyamperumal  V,  Petterson  J.
2012. Phytochemical of the seagrass  Syringodium  isoetifolium and its antibacterial
and
insecticidal  activities. EJBS ,  Vol. 4(3): 63 – 67.
Mani AE, Bharathi V, Patterson J. 2012.
Antibacterial activity and preliminary phytochemical analysis of  seagrass Cymodocea  rotundata . IJMR , Vol. 2(2): 99 – 103.
Mardesyawati  A,  Anggraeni  K.  2009. Persen  Penutupan  dan  Jenis Lamun  di  kepulauan  Seribu.  Di dalam  Estradivari,  Setyawan  E,
Yusri  S,  editor. Terumbu  Karang Jakarta: Pengamatan Jangka Panjang Terumbu Karang Kepulauan  Seribu  (2003  –  2007) . Jakarta. Yayasan TERANGI. Meyer  BN,  Ferigni  NR,  Putnam  JE, Jacobsen LB, Nicholas DE, Laughlin JL. 1982. Brine shrimp: a convenient  general  bioassay  for active  plant  constituents. Planta medica , Vol 45(3); 31 – 34.
McLaughlin  JL,  Rogers  LL.  1998.  The use of biological assays to evaluate botanicals. Drug Information Journal, Vol. 32: 513 – 524.
Tamat SR, Wikanta T, Maulina LS. 2007. Aktivitas antioksidan dan toksisitas  senyawa  bioaktif  dari ekstrak  rumput  laut  hijau Ulfa reticulata Forsskal. Jurnal  Ilmu Kefarmasian Indonesia , Vol 5(1): 31
– 36.
Manilal  A,  Sujith  S,  Seghal-Kiran  G,
Selvin J, Shakir C. 2009. Cytotoxic potential  red  alga, Laurancia brandenii collected from The Indian Coast. Global Journal of Pharmacology , Vol 3(2): 90 – 94. Markham KR. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid . Kosasih P,  penerjemah.  Bandung:  Institut Teknologi Bandung.
Pratiwi  R.  2010.  Asosiasi  Krustasea  di ekosistem  padang  lamun  Perairan Teluk  Lampung. Ilmu  Kelautan , Vol. 15(2); 66- 76.
Qi  Shi-Hua,  Si  Zhang,  Pei-Yuan  Qian, Bin-Gui  Wang.  2008.  Antifeedant, antibacterial,
and antilarval compounds  from  the  South  China
Seagrass Enhalus  acoroides .  In Press. Botanica Marina , Vol 51.
Raja-Kannan
RR, Arumugam
R,
Meenakhshi  S,  Anantharaman  P.
2010.  Thin  layer  chromatography analysis of antioxidant
constituents  from  seagrasses  of Gulf  of  mannar  biosphere  reserve, South  India. IJCRGG .  Vol  (2)3; 1526 – 1530.
Robinson  T.  1995.  Kandungan  Organik Tumbuhan  Tinggi.  Bandung:  ITB Press.
Tomascik  T,  Mah  AJ,  Nontji  A,  Moosa MK.  1997. The  Ecology  of  the Indonesian  Seas .  Part  II.  Chapter
13 – 23. Periplus Edition (HK) Ltd.