SINTESIS SENYAWA 4-HIDROKSI-3-METOKSI-5-(FENILDIAZENIL) BENZALDEHIDA DAN UJI AKTIFITAS ANTIOKSIDANNYA TERHADAP DPPH

## A. Ghanaim Fasya, A. Hanapi, Riza Ayu Putri Ningseh
UIN Maulana Malik Ibrahim Malang Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi,

## ABSTRACT
Some  of  natural  materials,  such  as  vanillin,  sinamaldehide  and  eugenol,  are  very  potential  as  starting materian  in  synthesis  of  long  conjugated  system  compounds  wich  can  use  as  antioxidants,  sun  block  active compounds and acid-base indicators. This research aims are were to know the result of 4-hydroxy-3-methoxy-5- (phenyldiazenil) benzaldehide compound and to know it’s antioxidant activity to DPPH. Synthesis of 4-hydroxy- 3-methoxy-5-(phenyldiazenil)  benzaldehide  was  done  by  react  benzenadiazonium  chloride  salt  with  vanillin  at temperature 0-5 °C. The result purity was tested by determine it’s melting point and the antioxdidant activity was determine at  concentration of  25, 50, 100, 200,  and 500  ppm. The research result showed that coupling diazo reaction between vanillin and benzenaiazonium ion resulted brown-black solid with melting point of 100 0 C and rendemen  of  88.54  %  that  indicated  as  4-hydroxy-3-methoxy-5-(phenyldiazenil)  benzaldehide  compound. Antioxidant  activity  of  the  result  was  not  strong  enough  because  of  the  purity,  so  need  to  be  purified  and separated.
Keywords : Vanilin, diazo coupling, antioxidant, DPPH.

## ABSTRAK
Beberapa bahan alam seperti vanilin, sinamaldehida dan eugenol sangat berpotensi sebagai bahan dasar sintesis senyawa dengan sistem terkonjugasi panjang yang dapat dimanfaatkan sebagai antioksidan, bahan aktif tabir surya dan indikator titrasi asam-basa. Penelitian ini bertujuan  untuk  mengetahui  hasil sintesis  senyawa 4- hidroksi-3-metoksi-5-(fenildiazenil) serta mengetahui aktivitas antioksidan dari senyawa 4-hidroksi-3-metoksi-5- (fenildiazenil)  benzaldehida  terhadap  DPPH.  Sintesis  senyawa  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan  dilakukan dengan pembuatan garam benzenadiazonium klorida. Garam benzenadiazonium selanjutnya direaksikan dengan vanilin  pada  suhu  0-5  °C.  Senyawa  hasil  sintesis  diuji  kemurniannya  dengan  mengukur  titik  lelehnya.  Uji aktivitas  antioksidan  terhadap  DPPH  dengan  variasi  konsentrasi  (K)  yaitu:  25,  50,  100,  200,  dan  500    ppm. Reaksi kopling diazo antara senyawa vanilin dengan ion benzenadiazonium menghasilkan senyawa 4-hidroksi-3- metoksi-5-(fenildiazenil)benzaldehida  yang  masih  belum  murni.  Senyawa  produk  sintesis  berupa  padatan berwarna  coklat  kehitaman  dengan  rendemen  88,54%  dan  titik  lebur  100°C.  Senyawa  hasil  sintesis  memiliki aktivitas  antioksidan.  Aktivitas  antioksidan  senyawa  hasil  sintesis  masih  tergolong  sangat  lemah  karena  masih berupa campuran dan masih memerlukan proses optimalisasi dan pemisahan.
Kata kunci : Vanilin, kopling diazo, antioksidan, DPPH

## I. PENDAHULUAN
Tumbuhan vanilla merupakan tumbuhan  yang  banyak  dibudidayakan  di Indonesia.  Tumbuhan  vanilla  mengandung senyawa  fenolik  berupa  vanilin  yang memiliki  aktivitas  antioksidan.  Hal  ini sebagai  salah  satu  nikmat  yang  diberikan Allah  SWT  kepada  manusia.  Manusia patut  mengingat  akan  kekuasaan  Allah dengan bersyukur, mempelajari dan memanfaatkan  sebaik-baiknya  apa  yang
telah  diberikan  Allah  kepada  kita.  Allah berfirman dalam surat asy Syu’araa’ ayat 7
: “Dan apakah mereka tidak memperhatikan bumi, berapakah banyaknya  Kami  tumbuhkan  di  bumi  itu berbagai  macam  pasangan  (tumbuh- tumbuhan)  yang  baik?” (QS. asy Syu’araa’:7).
Firman  Allah  dalam  surat  asy Syu’araa’  ayat  7  tersebut  terdapat  kata  ىَلِإ yang mengandung makna batas akhir yang berfungsi  memperluas  arah  pandangan hingga batas akhir. Perluasan arah pandang ini mengundang manusia untuk mengarahkan  pandangannya  hingga  batas kemampuannya,  dengan  aneka  tanah  dan aneka  keajaiban  yang  terhampar  pada tumbuh-tumbuhan. Kata ٍ جْوَز  berarti pasangan. Pasangan  yang  dimaksud  ayat ini  adalah  tumbuh-tumbuhan.  Hal  ini mengisyaratkan  bahwa  tumbuh-tumbuhan memiliki pasangan (benang sari dan putik) guna  pertumbuhan  dan  perkembangannya serta  kesetabilannya.  Kata  ٍ مْيِرَك  juga digunakan  untuk  menggambarkan  segala sesuatu  yang  baik  bagi  objek  yang disifatinya. Menurut Shihab (2002), tumbuhan  yang  baik  dalam  hal  ini  adalah tumbuhan  yang  bermanfaat  bagi  makhluk hidup.
Mengacu  pada  penelitian  yang dilakukan  oleh  Shyamala  dkk.  (2007), melaporkan  bahwa  untuk  menetralkan radikal  bebas  dibutuhkan  vanilin  dengan konsentrasi yang tinggi. Modifikasi struktur  vanilin  perlu  dilakukan  agar kemampuan  antioksidannya  meningkat, misalnya  dengan  memperpanjang  sistem terkonjugasi dari vanilin.
Menurut  penelitian  Naik  (2012), mekanisme  pembentukan  senyawa  4- metoksi-2-asetilbenzofuran  melibatkan, o- alkylation  o-vanillin dengan  asam  kloro asetat  dengan  adanya  DBU  sebagai  basa organik dilengkapi o-alkylated salicyaldehyde yang kemudian
menghasilkan  anion  enolat  melalui  reaksi cyclocondensation intramolekul.  Senyawa hasil  sintesisini  memberikan  aktivitas antioksidan  yang  tinggi  sebesar  9±0,14 dibandingkan  dengan o-alkylation  o- vanillin (61 ± 0,24),asam kloro asetat (64 ± 0,21),  DBU(25  ±  0,52), o-alkylated salicyaldehyde (13 ± 0,93),anion enolat (15
± 0,11) dan juga  lebih dari standar (BHA) 12±0,10.Hal  ini  menunjukkan  bahwa
senyawa dengan ikatan rangkap terkonjugasi  memberi  potensi  aktivitas antioksidan  yang  tinggi.  Radikal  bebas yang terbentuk dari senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan inicenderung  stabil  oleh  penataan  ulang molekul  diena  terkonjugasi  (Jadhav  dkk., 1996). Penelitian  Purwono  dkk.  (2013) menghasilkan senyawa 4-hidroksi-3- metoksi-5-(fenildiazenil)-benzaldehida melalui  reaksi  antara  vanilin  dan  garam benzenadiazonium  dengan  perbandingan mol  yang  sama.  Namun  nilai  rendemen yang  didapat  relatif  rendah  yaitu  37,04%, dari  sisa  vanilin  berdasarkan  data  GC masih  cukup  besar.  Peningkatkan  nilai rendemen dapat diperoleh dari perbandingan mol reaktan, misalnya membuat  mol  garam  benzenadiazonium klorida  yang  lebih  tinggi  dibanding  mol vanilin.
Oleh  karenanya,  dalam  penelitian ini akan disintesis senyawa turunan vanilin dengan  memanfaatkan  posisi orto dari gugus  ‒OH  pada  vanilin.  Menurut penelitian  Purwono  dkk.  (2013),  subtituen berupa ion benzene diazonium akan terikat pada  posisi orto melalui  reaksi  kopling diazo  menghasilkan  turunan  senyawa  azo yaitu 4-hidroksi-3-metoksi-5- (fenildiazenil)benzaldehida sebagai indikator titrasi asam basa dengan rendemen 37,04%. Gugus azo (N═N) akan memperpanjang delokalisasi elektron keluar cincin aromatis sehingga diharapkan senyawa  hasil  sintesis  ini  akan  memiliki aktivitas  sebagai  antioksidan  yang  lebih tinggi dari vanilin.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mensintesis senyawa 4-hidroksi-3-metoksi- 5-(fenildiazenil)  dan  mengetahui  aktivitas antioksidannya terhadap DPPH.

## II. METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan pada  bulan  Mei  –  Oktober  2014  di Laboratorium  Kimia  Organik  Jurusan

## ALCHEMY , Vol. 3 No. 2 Oktober 2014, hal 101-107

## Kimia  Universitas  Islam  Negeri  (UIN)
Maulana Malik Ibrahim Malang.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah seperangkat alat gelas, neraca  analitik,  penangas  es,  termometer, rotary evaporator, desikator, inkubator, alat penentu  titik  lebur,  spektrofotometer  UV- Vis,  spektrofotometer  IR,  spektrometer GC-MSdan 1 H-NMR.
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  vanilin  p.a  (Merck), anilina  p.a  (Merck),  HCL  37%  b/v  p.a (Merck),  NaOH  p.a  (Merck),  NaNO 2 p.a (Merck), CHCl 3 p.a (Merck), NaHCO 3 p.a (Merck),  Na 2 SO 4 anhidrat,  p.a  (Merck), akuades, etanol dan larutan DPPH.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  melalui pengujian  eksperimental  di  laboratorium. Sintesis  senyawa  yang  memiliki  aktivitas antioksidan  dilakukan  dengan  pembuatan garam  benzenadiazonium  klorida.  Garam benzenadiazonium  selanjutnya  direaksikan dengan vanilin pada suhu 0-5 °C. Senyawa hasil  sintesis  diuji  kemurniannya  dengan mengukur  titik  lelehnya.  Uji  aktivitas antioksidan terhadap DPPH dengan variasi konsentrasi (K) yaitu: 25, 50, 100, 200, dan 500  ppm.

## Cara Kerja
Sintesis  Senyawa  4-hidroksi-3-metoksi- 5(fenildiazenil)benzaldehida
Sebanyak  24  mmol  anilina  (2,235 g)  anilina  dilarutkan  dalam  campuran  72 mmol  HCl  37%  b/b  (6  mL)  dan  6mL akuades  dalam  gelas  beaker  250  mL. Larutan  didinginkan  dalam  penangas  es sampai  suhu  0-5  °C. Sebanyak  26,4  mmol NaNO 2 (1,822g) dilarutkan ke dalam 9 mL akuades  dan  didinginkan  dalam  penangas es.  Larutan  NaNO 2 ditambahkan  sedikit demi  sedikit  ke  dalam  larutan  anilina-HCl sambil  diaduk  dan  suhu  dijaga  0-5  °C sehingga dihasilkan larutan garam
benzenadiazonium  klorida.  Larutan  ini selanjutnya  didiamkan  beberapa  menit dengan suhu tetap dijaga 0-5 °C (Purwono dkk., 2013).
Selanjutnya  sebanyak  16  mmol vanilin  (2,434  g)  dilarutkan  ke  dalam  7,5 mL  larutan  NaOH  10%  (b/v).  Larutan didinginkan  dalam  penangas  es  sampai suhu  0-5  °C.  Larutan  dingin  garam benzenadiazonium  klorida  ditambahkan kedalam  larutan  natrium  vanilat  secara perlahan-lahan sambil terus diaduk sampai terbentuk  gel.  Gel  dipisahkan  dengan  cara ekstraksi menggunakan kloroform sebanyak  3  x  25  mL  dan  dinetralkan dengan larutan NaHCO 3 . Ekstraktan kemudian  dikeringkan  dengan  Na 2 SO 4 anhidrat.  Kloroform  diuapkan  dengan rotary  evaporator  dan  dikeringkan  dalam desikator.  Senyawa  hasil  sintesis  diuji kemurniannya  dengan  mengukur  titik lelehnya. Senyawa murni tersebut ditentukan  struktur  senyawanya  dengan spektrometer  IR,  KG-SM  dan 1 H-NMR (Purwono dkk., 2013).
Uji  Aktivitas  Antioksidan  Senyawa  4- hidroksi-3-metoksi-5(fenildiazenil) benzaldehida Menggunakan Metode

## DPPH
Cara  pembuatan  kontrol:  Larutan DPPH dengan konsentrasi 0,2 mM diambil sebanyak  2,25  mL,  kemudian  dimasukkan dalam  tabung  reaksi,  ditambahkan  pelarut etanol  sebanyak  6,75  mL.  Tabung  reaksi ditutup  dengan  tisue,  lalu  diinkubasi  pada suhu  37 o C  selama  waktu  kestabilan  yang telah  didapatkan  pada  tahap  sebelumnya. Setelah  itu  diukur  absorbansinya  dengan menggunakan  UV-Vis  pada  λ maks yang didapatkan pada tahap sebelumnya.
Masing-masing  sampel  senyawa  4- hidroksi-3-metoksi-5(fenildiazenil)- benzaldehida  dilarutkan  dalam  pelarut etanol dengan konsentrasi  10, 25, 50, 100, 200  dan  500  ppm.  Kemudian  disiapkan lima  tabung  reaksi  untuk  masing-masing konsentrasi.  Tiap  tabung  reaksi  diisi
dengan  6,75  mL  larutan  sampel  dan ditambahkan DPPH 0,2 mM sebanyak 2,25 mL.  Setelah  itu  larutan  ditutup  dengan tisue  dan  diinkubasi  dengan  suhu  37 o C pada waktu kestabilan yang diperoleh pada proses  sebelumnya,  kemudian  diukur absorbansinya
menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  pada  λ maks yang
telah didapatkan sebelumnya. Data absorbansinya  yang  diperoleh  dari  tiap konsentrasi masing-masing ekstrak
dihitung nilai persen (%) aktivitas antioksidannya.  Nilai  tersebut  diperoleh dengan persamaan:
% 𝐴𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝑎𝑛𝑡𝑖𝑜𝑘𝑠𝑖𝑑𝑎𝑛 = 𝐴𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 − 𝐴𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 × 100% Setelah  didapatkan  persen  (%) aktivitas
antioksidanya, selanjutnya masing-masing  sampel  dihitung  nilai  EC 50 nya  dengan  menggunakan  persamaan regresi.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Sintesis 4-hidroksi- 3-metoksi- 5(fenildiazenil) benzaldehida Senyawa 4-hidroksi-3-metoksi- 5(fenildiazenil)  benzaldehida  disintesis melalui  modifikasi  sintesis  dari  Purwono dkk.  (2013)  dengan  perbandingan  antara garam  benzenadiazonium  klorida  dan vanilin adalah 1,5:1.
Reaksi pembentukan senyawa produk  sintesis  dimulai  dari  pembuatan garam  benzenadiazonium  klorida  dari campuran  anilina,  natrium  nitrit  dan  HCl pada  suhu  0-5  °C.  Anilina  yang  bereaksi dengan  asam  nitrit  dingin  dalam  larutan
HCl menghasilkan
garam
benzenadiazonium  klorida.  Asam  nitrit dibuat in  situ oleh  reaksi  natrium  nitrit dengan  HCl.  Garam  diazonium  dapat reaktif  sehingga  campuran  reaksi  harus didinginkan (0-5 °C).
Garam  benzenadiazonium  klorida yang terbentuk selanjutnya ditambahkan ke dalam  natrium  vanilat  yang  berupa
campuran vanilin dan NaOH 10 % suhu 0- 5  °C.  Garam  benzenadiazonium  klorida bereaksi  dengan  cincin  aromatik  yang teraktivasi kuat (natrium vanilat) menghasilkan senyawa Azo. Reaksi
substitusi aromatik elektrofilik ini dinamakan  penggandengan  diazo  (diazo coupling),  sebab  di  dalam  produknya  dua cincin  aromatik  tergandeng  oleh  azo  atau gugus  -N=N-.  Penggandengan  para  lebih disukai,  tetapi  jika  posisi  para  dihalangi oleh  substituen  lain  maka  penggandengan orto  dapat terjadi.
Produk  yang  dihasilkan  berupa padatan berwarna coklat kehitaman dengan rendemen  88,54  %  dan  titik  lebur  100  °C.
Titik  lebur  yang  rendah  ini  dapat diasumsikan bahwa padatan produk
sintesis  masih  mengandung  air  sehingga mempengaruhi hasil pembacaan titik lebur.
Terdapat  tiga  tahap  mekanisme reaksi pembentukan senyawa 4-hidroksi-3- metoksi-5-(fenildiazenil) benzaldehida dari ion  benzenadiazonium  dan  vanilin  melalui reaksi  kopling  diazo.  Mekanisme  reaksi tahap  I  adalah  reaksi  pembentukan  ion vanilat  dari  vanilin  menggunakan  katalis basa.  Mekanisme  reaksi  tahap  II  adalah adalah reaksi pengikatan gugus azo (-N=N- )  padaion  benzenadiazonium  dengan  ion vanilat. Mekanisme reaksi tahap III adalah reaksi pengikatan intermolekul antara atom H  pada  cincin    non  aromatis  dengan  atom O  karbonil  membentuk  senyawa  4- hidroksi-3-metoksi-5-fenildiazenil) benzaldehida yang aromatis.
Mekanisme reaksi tahap I H O OCH 3 C O H OH O OCH 3 C O H vanilin ion vanilat + H 2 O
Mekanisme reaksi tahap II O OCH 3 C O H ion vanilat N N + ion benzenadiazonium N N OCH 3 O C O H Mekanisme reaksi tahap III N N OCH 3 O C O H H N N OCH 3 OH C O H
Pada  tahap  I,  Pasangan  elektron bebas  pada  atom  oksigen  yang  bermuatan negatif  dari  katalis  basa  menyerang  atom hidrogen dari  gugus  hidroksil  pada vanilin membentuk H 2 O. Vanilin yang melepaskan H + pada  suasana  basa  membentuk  ion vanilat yang teraktivasi kuat. Pada tahap II, Ion  vanilat  sebagai  cincin  aromatik menyerang  ion  benzenadiazonium  yang termasuk  elektrofili  lemah  melalui  reaksi kopling diazo. Tahap ini
menghasilkancincin  non  aromatis  dari  ion vanilat yang berikatan dengan gugus azo (- N=N-)  padaposisi orto yang  masih  kosong dari  gugus  hidroksi.  Dan  pada  tahap  III, Pasangan  elektron  bebas  atom  O  karbonil mengikat  atom  hidrogenpada  cincin  untuk mengembalikan  aromatisitas  cincin.Ikatan C-H  pada  cincin  putus  membentuk  ikatan rangkap (C = C)yang diikuti
dengan pembentukan  ikatan  C-OH  pada  atom  C karbonil.
Keberhasilan sintesis dipantau secara  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) dengan  fase  diam  pelat  silika  gel  dan pengembang  kloroform  5  mL  dengan pembanding vanilin.Plat KLT yang digunakan  berukuran  10x4  cm.  Penotolan dilakukan  sekali.  Kromatogram  produk sintesis  (Gambar  4.2)  menunjukkan  telah
terbentuk  senyawa  baru  yang  lebih  non polar daripada reaktan.
Gambar 2. Kromatogram Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dengan fase diam silika gel, pengembang kloroform Vanilin (1)
dan Produk sintesis (2).
Berdasarkan  kromatogram  KLT, terdapat  beberapa  spot  yang  menunjukkan adanya  sisa  reaktan  dan  produk  hasil sintesis.  Dua  spot  berwarna  kecoklatan dengan niali Rf berdekatan yang dimungkinkan  merupakan  produk  dari sintesis.  Hasil  sintesis  memiliki  Rf  yang lebih tinggi atau lebih non polar dibandingkan  dengan  reaktan.  Untuk memastikan  dugaan  terbentuknya  produk dan mengetahui kadarnya dilakukan identifkasi  dengan  Kromatrografi  Gas  - Spektrofotometer Massa dan diuji  aktifitas antioksidannya terhadap DPPH.

## Uji  Aktivitas  Antioksidan  Hasil  Sintesis Terhadap DPPH
Uji  kuantitatif  potensi  antioksidan pada  penelitian  ini  dilakukan  dengan  uji DPPH secara spekrofotometri sinar tampak.  Metode  ini  didasarkan  pada perubahan warna radikal DPPH. Perubahan warna  tersebut  disebabkan  oleh  reaksi antara  radikal  bebas  DPPH  dengan  satu atom  hidrogen  yang  dilepaskan  senyawa yang  terkandung  dalam  bahan  uji  untuk membentuk senyawa
1,1-diphenyl-2- picrylhydrazin yang  berwarna  kuning.
1   2
Pada  metode  ini  absorbansi  yang  diukur adalah  absorbansi  larutan  DPPH  sisa  yang tidak bereaksi dengan senyawa antioksidan (Josephy, 1997).
Pengujian  aktivitas  antioksidan  ini dilakukan  pada  variasi  konsentrasi  10,  25, 50,  100,  200,  dan  500  ppm,  selanjutnya diukur serapannya pada panjang gelombang  518,0  nm  dengan  rentang waktu yang telah didapatkan pada penentuan  waktu  kestabilan.  Pengukuran aktivitas antioksidan pada sampel menggunakan  larutan  kontrol  DPPH  0,2 mM.  Larutan  DPPH  kontrol  digunakan untuk  memberikan  kestabilan  pada  saat pengukuran  aktivitas  antioksidan  pada sampel (Arindah, 2010). Menurut
Molyneux  (2003),  nilai  absorbansi  kontrol dapat  berkurang  dari  hari  ke  hari dikarenakan  kehilangan  aktivitasnya  saat dalam  stok  larutan  DPPH,  tetapi  nilai absorbansi kontrol tetap dapat memberikan baseline untuk pengukuran saat itu.
Larutan DPPH mengalami
perubahan warna setelah dicampur dengan sampel  dan  diinkubasi.  Terjadi  perubahan warna  dari  ungu  tua  menjadi  ungu  pudar dan  kuning  setelah  inkubasi  60  menit. Perubahan  warna  ini  menandakan  bahwa sampel  memiliki  kemampuan  sebagai antioksidan.  Pengurangan  intensitas  warna yang  terjadi  berhubungan  dengan  jumlah elektron  DPPH  yang  menangkap  atom hidrogen dari senyawa antioksidan. Pengurangan intensitas warna mengindikasikan  peningkatan  kemampuan antioksidan  untuk  menangkap  radikal bebas (Prakash, 2001).
Parameter  yang  digunakan  untuk mengetahui  potensi  antioksidan  dalam sampel yaitu persen (%) aktivitas antioksidan dan nilai EC 50 . Persen aktivitas antioksidan menunjukkan kemampuan suatu  antioksidan  dalam  menghambat radikal  bebas  (dalam  bentuk  %).  Persen aktivitas antioksidan
menunjukkan banyaknya  atom  hidrogen  dari  senyawa antioksidan yang menangkap radikal
DPPH  sehingga  tereduksi  menjadi  DPPH- H( 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyn )  (Rahayu et  al. ,  2010).  Persen  (%)  aktivitas antioksidan  dari  sampel  hasil  sintesis ditunjukkan dalam Tabel 1.
Tabel  1 Persen  aktivitas  antioksidan sampel hasil sintesis No Konsentrasi sampel (ppm) % aktivitas antioksidan 1 10 1.0165 2 25 6.2571 3 50 11.8365 4 100 19.8554 5 200 26.1577 6 500 28.4391
Hasil  pengukuran  persen  aktivitas antioksidan  pada  Tabel  4.2  menunjukkan bahwa  senyawa  hasil  sintesis  dapat berpotensi  sebagai  antioksidan.  Parameter selanjutnya  untuk  mengetahui  potensi antioksidan  dalam  sampel  adalah  nilai EC 50 ( effective  concentration ).  EC 50 dapat didefinisikan  sebagai  konsentrasi  larutan sampel  yang  akan  menyebabkan  reduksi terhadap  aktivitas  DPPH  sebesar  50  %. Semakin  kecil  nilai  EC 50 maka  aktivitas antioksidannya semakin  tinggi  (Molyneux, 2004).  Suatu  senyawa  dikatakan  sebagai antioksidan  sangat  kuat  jika  nilai  EC 50 bernilai  kurang  dari  50  ppm,  kuat  jika bernilai 50 – 100 ppm, sedang jika bernilai 100  –  150  ppm,  dan  lemah  jika  bernilai 150 – 200 ppm (Putra, 2012).
Berdasarkan hasil analisa diperoleh nilai  EC 50 senyawa  hasil  sintesis  adalah 800,26  ppm.  Aktivitas  antioksidan  sampel tergolong sangat lemah. Hal ini dimungkinkan karena sampel masih berupa campuran  dan  belum  merupakan  produk murni.  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan optimasi  reaksi  sintesis  dan  pemurnian senyawa hasil sintesis.

## IV. KESIMPULAN
Reaksi kopling diazo antara senyawa vanilin dengan ion benzenadiazonium  menghasilkan  senyawa 4-hidroksi-3-metoksi-5-
(fenildiazenil)benzaldehida yang esih belum  murni.  Senyawa  produk  sintesis berupa padatan berwarna coklat kehitaman dengan  rendemen  88,54%  dan  titik  lebur 100°C.
Senyawa  hasil  sintesis  memiliki aktivitas antioksidan. Aktivitas antioksidan senyawa  hasil  sintesis  masih  tergolong sangat lemah karena masih berupa campuran  dan  masih  memerlukan  proses optimalisasi dan pemisahan.

## V. DAFTAR PUSTAKA
Arindah, D. 2010. Fraksinasi dan
Identifikasi Golongan Senyawa
Antioksidan  pada  Daging  Buah Pepino (Solonum  Muricatum  aiton) yang Berpotensi sebagai Antioksidan. Skripsi Tidak  Diterbitkan.  Malang: Jurusan  Kimia  Fakultas  Sains  dan Teknologi  UIN  Maulana  Malik Ibrahim Malang. Josephy, P.D. 1997. Molecular Toxicology .
New York: Oxford University Press. Molyneux, P.. 2003. The Use of The Stable Free  Radical  Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH),  for  Estimating  Antioxidant Activity . Science  and  Technology,
XXVI (2) : 211-219. Naik,  N.,  Kumar,  V.H.,  Dias,  S.M.,  and Swami, R.J. 2013. Novel 4-Methoxy- 2-Acetyl Benzofuran Based Chalcones:  A  New  Perceptivity  Into Their Antioxidant Potentials. International  Journal  of  Pharmacy and  Pharmaceutical  Sciences. Vol  5, Issue 1, page 242 – 247. Prakash,  A..  2001. Antioxidant  Activity.
Analytical Chemistry
Medallion Laboratories: Analytical Progress , X
(2) . Purwono,  B.,  Anwar,  C.,  and  Hanapi,  A., 2013, Syntheses of Azo-imine
Derivatives from Vanillin as an Acid Base Indicator, Indo. J. Chem., 13, 1, 1-6.
Purwono,  B.,  and  Mahardiani,  C.,  2009,
Synthesis of Azo Compounds
Derivative  from  Eugenol  and  Its Application  as  a  Titration  Indicator, Indo. J. Chem., 9, 1, 95-98. Putra, D.A.D.. 2012. Identifikasi
Komponen  Kimia  Minyak  Atsiri Daun  Bunga  Tahi  Ayam  ( Tagetes Erecta L.)  serta  Uji  Aktivitas Antibakteri  dan  Antioksidan. Skripsi Tidak Diterbitkan. Universitas Sumatera Utara.
Rahayu,  D.S,  dkk.  2010.  Penentuan Aktivitas  Antioksidan  dari  Ekstrak Etanol  Daun  Ketapang  ( Terminalia catappa L) dengan Metode 1,1 difenil 2  Pikrilhidrazil ( DPPH ).  Semarang:
Jurusan  Kimia  FMIPA  Universitas Diponegoro.
Shihab,  M.Q.  2002. Tafsir  Al-Mishbah: Pesan,  Kesan  dan  Keserasian  Al- Quran  Volume  7 .  Jakarta:  Lentera Hati.
Shyamala, B. N., Naidu, M.,
Sulochanamma,  G.  S.,  dan  Srivinas,
P.  2007.  Studies  on  the  antioxidant activities  of  natural  vanilla  extract and its constituent compounds through  in  vitro  models. Journal  of Agricultural  and Food Chemistry (55) 7738-7743.