Keanekaragaman Koloni Bakteri Endofit Pada Daun dan Batang Tanaman Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.)
Nelan Kurniasih (1), Husnarika Febriani ( 2), Rasyidah (3)
Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Sumatera Utara
nelankurniasih891@gmail.com (1), husnarikafebriani@uinsu.co.id (2), rasyidah0990@gmail.com (3)

## ABSTRAK
Bakteri  endofit  merupakan  bakteri  yang  hidup  didalam  jaringan  tanaman  inangnya,  tanpa  menimbulkan gejala penyakit tertentu. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keanekaragaman dan genus koloni bakteri endofit  pada  batang  dan  daun  tanaman  Nampu  ( Homalomena  javanica V.A.V.R.).  Penelitian  ini  dilakukan dengan 3 tahap yaitu isolasi, karakterisasi dan uji biokimia. Berdasarkan hasil isolasi diperoleh sebanyak 20 isolat  bakteri  endofit  yaitu  10  isolat  bakteri  dari  batang  Nampu  dan  10  isolat  bakteri  dari  daun  Nampu. Keanekaragaman  isolat  bakteri  endofit  pada  batang  dan  daun  tanaman  Nampu  ( Homalomena  javanica V.A.V.R.) yaitu 0,15 termasuk rendah. Sedangkan hasil karakterisasi bentuk sel batang Nampu Coccus dan daun Nampu Bacil termasuk golongan bakteri Gram positif berwarna ungu atau kristal violet. Dari hasil uji biokimia  isolat  bakteri  endofit  diperoleh  dari  batang  Nampu  yaitu  Genus Staphylococcus dan  daun  Nampu yaitu Genus Bacillus.
Kata Kunci : Bakteri Endofit, keanekaragaman, Tanaman Nampu

## ABSTRACT
Endophytic  bacteria  are  bacteria  that  live  in  the  tissues  of  their  host  plants,  without  causing  symptoms  of certain diseases. This study aims to determine the diversity and genus of endophytic bacterial colonies on the stems  and  leaves  of  the  Nampu  plant  ( Homalomena  javanica V.A.V.R).  This  research  was  conducted  in  3 stages,  namely  isolation,  characterization  and  biochemical  tests.  Based  on  the  isolation  results  obtained  as many  as  20  endophytic  bacterial  isolates,  namely  10  bacterial  isolates  from  Nampu  stems  and  10  bacterial isolates  from  Nampu  leaves.  The  diversity  of  endophytic  bacterial  isolates  on  the  stems  and  leaves  of  the Nampu plant ( Homalomena javanica V.A.V.R) was 0.15 which was low. while the results of characterization of  the  Nampu  cells Coccus and  Nampu  leaves Bacil which  belong  to  the  Gram-positive  bacteria  class  are purple  or  crystal  violet.  From  the  results  of  the  biochemical  test  of  endophytic  bacterial  isolates  obtained from the Nampu stem, namely the Genus Staphylococcus and the Nampu leaf, namely the Genus Bacillus .
Keywords : Endophytic Bacteria, diversity, Nampu plant
Kurniasih  N,  Febriani  H,  Rasyidah,,  :  Keanekaragaman  Koloni  Bakteri  Endofit  Pada  Daun  dan Batang Tanaman Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.)

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Indonesia  merupakan  negara  tropis  yang  terkenal  dengan  berbagai  macam keanekaragaman  tumbuhan  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  obat-obatan  (Arum et  al ., 2012). Bahkan hingga saat ini menurut perkiraan Badan Kesehatan Dunia (WHO) terdapat 80% penduduk dunia yang masih menggunakan pengobatan secara tradisional yang berasal dari  tanaman  (Radji,  2005).  Tumbuhan  adalah  sumber  daya  alam  yang  sangat  penting dalam  upaya  untuk  merawat  dan  menjaga  kesehatan  masyarakat.  Bagian  tanaman  yang dapat digunakan sebagai obat dari bagian tanaman seperti akar, daun, kulit pohon, batang, biji  dan  buah  (Ghalib,  2009).    Menurut  Viogenta  dan  Ahmad,  (2017)  menyatakan  bahwa penggunaan obat herbal itu relatif lebih aman, karena efek samping obat herbal relatif kecil jika  digunakan  dengan  benar.  Tumbuhan  yang  dimanfaatkan  sebagai  obat-obatan tradisonal  yaitu  tanaman  Nampu  ( Homalomena javanica V.A.V.R.).  Nampu  memiliki kemampuan untuk menyembuhkan berbagai penyakit seperti rheumatoid arthritis , sebagai antiinflamasi  dan  sakit  perut.  Tumbuhan  Nampu  termasuk  dalam  kelompok Araceae memiliki  berbagai  senyawa  metabolit  sekunder  yang  bermanfaat  sebagai  obat-obatan (Siregar,  2018).Nampu  dimanfaatkan  sebagai  antibakteri  karena  mengandung  senyawa fenolik,  steroid  dan  saponin  dihasilkan  dari  tanaman  tersebut.  Hal  ini  telah  diuji  oleh penelitian  Siregar  (2018)  hasil  uji  fitokimia  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  daun Nampu  memiliki  aktivitas  antibakteri  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan intensitas  yang  lemah  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli . Keanekaragaman bakteri endofit adalah sumber daya genetik yang diterapkan di berbagai bidang terutama bidang kedokteran dan pertanian. Sehingga bakteri endofit disebut sebagai mikroba  yang  hidup  pada  jaringan  tanaman  hidup  tanpa  menimbulkan  efek  negatif (Leiwakabessy dan Yunita, 2013). Menurut penelitian Sulistiyani dan Puspita, 2016 bahwa keragaman  bakteri  endofit  pada  tumbuhan  lain  terdapat  pada Curcuma  heyneana yang berasal dari genus Bacillus, Pseudomonas dan Enterobacter . Aktivitas antibakteri tanaman Nampu  diduga  karena  adanya  bakteri  endofit.  Bakteri  endofit  merupakan  bakteri  yang hidup secara berklonisasi di dalam jaringan tanaman inangnya, tanpa menimbulkan gejala penyakit  tertentu  (Purwanto et  al ,  2014).  Siklus  hidup  bakteri  endofit  masuk  ke  jaringan tanaman  yang  umumnya  melalui  akar,  tetapi  bagian  tanaman  yang  terkena  udara  secara langsung  seperti  bunga,  kotiledon  dan  batang  menjadi  jalur  masuknya  bakteri  endofit. Sehingga  mikroorganisme  tersebut  dapat  hidup  di  pembuluh  vaskular  atau  di  ruang intersel,  batang,  akar,  buah  dan  daun.  Menurut  Puspita et  al ,  2014  menyatakan  bahwa bakteri  endofit  memiliki  manfaat  sebagai  agens  pengendali  hayati  dengan  meningkatkan pertumbuhan  pada  tanaman,  menyediakan  berbagai  nutrisi  dan  memproduksi  hormon pertumbuhan  serta  menginduksi  ketahanan  tanaman.  Berdasarkan  penjelasan  diatas, penulis  tertarik  untuk  melakukan  pengujian  dan  penelitian  terhadap  keanekaragaman bakteri  endofit  yang  terdapat  pada  daun  dan  batang  tanaman  Nampu  ( Homalomena javanica V.A.V.R.).

## 2. Perumusan Masalah
Adapun  yang  menjadi  rumusan  masalah  dalam  penelitian  ini  yaitu  bagaimana keanekaragaman  bakteri  endofit  yang  terdapat  pada  daun  dan  batang  tanaman  Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.), apa saja genus koloni bakteri endofit berhasil diisolasi pada daun dan batang tanaman Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.).

## 3. Tujuan Program
Adapun  tujuan  dalam  penelitian  yaitu  untuk  mengetahui  keanekaragaman  bakteri  endofit terdapat  pada  daun  dan  batang  tanaman  nampu  ( Homalomena javanica V.A.V.R.),  untuk
mengetahui genus koloni bakteri endofit berhasil diisolasi pada daun dan batang tanaman nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.) .

## 4. Manfaat Program
Dari hasil penelitian ini dapat memberikan manfaat untuk meningkatkan sumber informasi bagi  masyarakat  tentang  bakteri  endofit  yang  terdapat  pada  daun  dan  batang  tanaman Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.) serta mampu untuk meningkatkan pertumbuhan pada tumbuhan.

## II. METODE Tempat dan Waktu
Penelitian  ini  telah  dilaksanakan  pada  bulan  Desember  2020  sampai  dengan  bulan  Maret 2021  diLaboratorium  Mikrobiologi  UPT.  Laboratorium  Kesehatan  Provinsi  Sumatera Utara Medan. Jalan Willem Iskandar Pasar V Barat-1 No.4 Medan.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sarung tangan, cawan petri dengan ukuran diameter 15 cm, Laminar air-flow , mikroskop, autoklaf, inkubator, jarum ose ujung bulat, jarum ose runcing, bunsen, plastik warp , botol, semprot untuk alkohol, objek glass, cover glass ,  mortal,  tabung  reaksi,  tisu  steril,  kertas  saring,  kertas  label,  gelas  ukur,  pipet  tetes, timbangan  analitik,  gunting  dan  pisau.  Bahan  dasar  yang  digunakan  dalam  penelitian terdiri  dari  batang  dan  daun  tanaman  Nampu  ( Homalomena  javanica V.A.V.R.),  media Nutrient Agar (NA), Natrium hipoklorit (NaOCl), aquades steril, alkohol 70%, pewarnaan gram  ( Lugol,  Kristal  violet,  Safranin ),  Serta  bahan  pengujian  aktivitas  biokimia  (uji Fermentasi  gula,  uji  Katalase,  uji Methyl  Red ,  uji  Sitrat , dan  uji  Motilitas  dengan  media SIM).

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  metode  eksploratif-deskriptif.  Penelitian  eksploratif bertujuan  untuk  mendapatkan  data  dasar  yang  diperlukan  penelitian  lebih  lanjut  dengan tidak  menggunakan  hipotesis  penelitian.  Sedangkan  metode  deskriptif  yaitu  untuk menggambarkan atau menganalisis suatu hasil penelitian (Fatchiyah, 2017).

## III. HASIL

## 1. Keanekaragaman Isolat Bakteri Endofit
Berdasarkan  hasil  penelitian  pada  tabel  1.  Jumlah  isolat  bakteri  endofit  yang  dihasilkan yaitu 20 isolat bakteri yang terdiri dari batang Nampu 10 dan daun Nampu 10. Sedangkan dilihat  dari  hasil  pemurnian  bakteri  endofit  diperoleh  4  isolat  bakteri  murni  yang  terdiri dari  batang  Nampu  1  isolat  bakteri  murni  dan  daun  Nampu  3  isolat  bakteri  murni. Sehingga  jumlah  isolat  bakteri  endofit  pada  batang  dan  daun  Nampu  dilihat  dari  indeks keanekaragaman  bakteri  endofit  diperoleh  0,15  menunjukkan  keanekaragaman  jumlah isolat  bakteri  endofit  rendah.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  kelimpahan  populasi  jumlah isolat bakteri endofit adanya pengaruh terhadap media tumbuh, jenis tanaman dan kondisi pertumbuhan  pada  tanaman  Nampu  itu  sendiri.  Hal  ini  dibuktikan  oleh  penelitian  Wati (2018) mengatakan bahwa jumlah isolat bakteri endofit pada tangkai daun tanaman tojang ( Colocasia  esculenta )  rendah  yang  satu  famili Aracea dengan  tanaman  Nampu ( Homalomena  javanica V.A.V.R.).  Menurut  penelitian  Sulistiyani  dan  Puspita  (2016) populasi bakteri endofit secara umum yang paling banyak terdapat pada akar atau rimpang, Sedangkan bagian jaringan tanaman lain seperti daun dan batang memiliki  populasi  yang rendah, karena akar adalah tempat awal masuknya bakteri endofit pada jaringan tanaman.
Kurniasih  N,  Febriani  H,  Rasyidah,,  :  Keanekaragaman  Koloni  Bakteri  Endofit  Pada  Daun  dan Batang Tanaman Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.)
Tabel  1 .  Jumlah  Isolat  Bakteri  Endofit  Pada  Batang  dan  Daun  Tanaman  Nampu  ( Homalomena javanica V.A.V.R.).
Sampel Penelitian Jumlah Isolat Bakteri Jumlah Bakteri Murni Pengulangan 1 Pengulangan 2 Batang Nampu 10 1 6 4 Daun Nampu 10 3 3 2 3 2 Nilai Indeks Keanekaragaman Isolat 0,15 0,15

## 2. Karakterisasi Makroskopis Isolat Bakteri endofit
Pengamatan  secara  smakroskopis  isolat  bakteri  endofit  dilakukan  dengan  mengamati morfologi  isolat  bakteri  yang  terdiri  dari  bentuk,  tepian,  elevasi,  permukaan  dan  warna isolat bakteri endofit.
Tabel  2 Karakterisasi  secara  makroskopis  isolat  bakteri  bagian  batang  dan  daun  Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.).
Jumlah Isolat Pada Batang Karakterisasi Makroskopis Bentuk Isolat Tepian Isolat Elevasi Isolat Permukaan Isolat Warna Isolat I.BN1 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN2 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN3 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN4 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN5 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN6 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN7 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN8 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN9 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.BN10 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Kekuningan Jumlah Isolat Pada Daun Karakterisasi Makroskopis Bentuk Isolat Tepian Isolat Elevasi Isolat Permukaan Isolat Warna Isolat I.DN1 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.DN2 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.DN3 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Kekuningan I.DN4 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Susu I.DN5 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Susu I.DN6 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Susu I.DN7 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Susu I.DN8 Circular Entire Raised Mengkilap Putih Susu I.DN9 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Susu I.DN10 Circular Lobate Raised Mengkilap Putih Susu
Keterangan: I.BN (Isolat Batang Nampu I.DN (Isolat Daun Nampu)

## 3. Karakterisasi Mikroskopis Isolat Bakteri endofit
Pengamatan mikroskopis isolat bakteri endofit dilakukan dengan mengamati isolat bakteri yang terdiri dari bentuk sel, warna sel dan sifat Gram.
Kurniasih  N,  Febriani  H,  Rasyidah,,  :  Keanekaragaman  Koloni  Bakteri  Endofit  Pada  Daun  dan Batang Tanaman Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.)
Tabel 3 . Karakterisasi secara mikroskopis isolat bakteri pada bagian batang dan daun tanaman Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.).
Jumlah Isolat Pada Batang Karakterisasi Mikroskopis Jumlah Isolat Pada Daun Karakterisasi Mikroskopis Bentuk Sel Warna Sel Sifat Gram Bentuk Sel Warna Sel Sifat Gram I.BN1 Coccus Ungu Positif I.DN1 Basil Ungu Positif I.BN2 Coccus Ungu Positif I.DN2 Basil Ungu Positif I.BN3 Coccus Ungu Positif I.DN3 Basil Ungu Positif I.BN4 Coccus Ungu Positif I.DN4 Basil Ungu Positif I.BN5 Coccus Ungu Positif I.DN5 Basil Ungu Positif I.BN6 Coccus Ungu Positif I.DN6 Basil Ungu Positif I.BN7 Coccus Ungu Positif I.DN7 Basil Ungu Positif I.BN8 Coccus Ungu Positif I.DN8 Basil Ungu Positif I.BN9 Coccus Ungu Positif I.DN9 Basil Ungu Positif I.BN10 Coccus Ungu Positif I.DN10 Basil Ungu Positif
Karakterisasi secara mikroskopis bakteri endofit memiiki peran memilah bakteri termasuk kelompok  Gram  positif  dan  Gram  negatif  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  bentuk  sel, warna  sel  dan  sifat  sel  dari  isolat  bakteri  pada  batang  dan  daun  tanaman  Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.).
Karakterisasi Mikroskopis Isolat
Karakterisasi Mikroskopis Isolat Batang Tanama Nampu Daun Tanaman Nampu
Berdasarkan  dari  hasil  pengamatan  karakterisasi  secara  mikroskopis  dapat  dilihat  pada tabel  3.  hanya  dijumpai  1  isolat  bakteri  endofit  murni  di  bagian  jaringan  batang  Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.) diperoleh 10 isolat bakteri dengan kode sampel I.BN1, I.BN2,  I.BN3,  I.BN4,  I.BN5,  I.BN6,  I.BN7,  I.BN8,  I.BN9,  I.BN10  keseluruhan  isolat bakteri  endofit  memiliki  pewarnaan  Gram  yang  sama.  Dimana  selnya Coccus berwarna ungu atau Kristal violet bersifat Gram positif.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  bakteri  endofit  yang  berasal  dari  tanaman  Nampu ( Homalomena  javanica V.A.V.R.)  diperoleh  sebanyak  20  isolat  bakteri  endofit  yaitu  10 isolat dari jaringan batang Nampu dan 10 isolat dari jaringan daun Nampu. Sehingga nilai indeks  keanekaragaman  terhadap  jumlah  isolat  bakteri  endofit  pada  batang  dan  daun tanaman  Nampu  ( Homalomena  javanica V.A.V.R.)  yaitu  0,15  itu  menunjukkan  bahwa keragaman jumlah isolat bakteri endofit rendah. hasil dari karakterisasi secara makroskopis dan  mikroskopis  diperoleh  genus  pada  bagian  batang  nampu  yaitu Staphylococcus dan bagian daun nampu yaitu Bacillus .

## DAFTAR PUSTAKA
Aji,  O.  R  dan  Iva,  D.  2020.  Bakteri  Endofit  Tanaman  Jeruk  Nipis  ( Citrus  aurantifolia) Penghasil Asam Indol Asetat (AIA). Jurnal Biologi , 13(2): 180-191.
Arum,  Yp.,  Supartono  dan  Sudarmin.  2012.  Isolasi  Dan  Uji  Daya  Antimikroba  Ekstrak Daun Kersen (Muntingia calabura) . Jurnal MIPA , 35(2): 165-174.
Fatchiyah,  A.  2017. Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri  Endofit  Mangrove  Api-Api  Putih (Avecennia  marina)  Penghasil  Enzim  L-Asparaginase .  Skripsi.  Universitas Brawijaya. Brawijaya.
Ghalib,  D.  2009.  Daya  Hambat  Ekstrak  Kencur (Kaempferia  galanga  L.) Terhadap Trichophyton  mentagrophytes  dan  Cryptococcus  neoformans Jamur  Penyebab Penyakit Kurap Pada Kulit dan Penyakit Paru. Jurnal Bul. Littro ., 20(1): 59-67.
Leiwakabessy,  C  dan  Yunita,  L.  2013.  Eksplorasi  Bakteri  Endofit  Sebagai  Agens  Hayati Pada Tanaman Kersen ( Muntingia calabura L). Jurnal Budidaya Pertanian , 4(1):16- 21.
Pujiyanto,  S.,  Sunarno  dan  Annisa,  W.  2015.  Isolasi  dan  Karakterisasi  Bakteri  Endofit Penghasin  Inhibitor  α- Glukosidase Dari  Tanaman  Pare  ( Momordica  charantia L). Jurnal Prosiding SNST, 4(1): 65-71.
Purwanto, U., Fachriyan, H dan Maria, B. 2014. Isolasi Bakteri Endofit dari Tanaman Sirih Hijau (Piper  betle  L.) dan  Potensinya  Sebagai  Penghasil  Senyawa  Antibakteri. Jurnal Current Biochemistry , 1(1): 51-57.
Puspita, F., Sukemi, I. S., dan Jenny, M. 2018. Uji Beberapa Konsentrasi Bakteri Bacillus sp Endofit  untuk  Meningkatkan  Pertumbuhan  Bibit  Kakao (Theobroma  cacao  L.) . Jurnal Agron Indonesia , 46(3): 322-327. Radji, M. 2005. Peranan Bioteknologi Dan Mikroba Endofit Dalam Pengembangan Obat Herbal. Jurnal ilmu kefarmasian, Vol. II (3): 113-126. Siregar,  E.  2018. Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Metanol  Daun  Nampu ( Homalomena javanica V.A.V.R.). Skripsi. Universitas Sumatera Utara. Medan. Sulistiyani, T.R dan Puspita, L. 2016. Keragaman Bakteri Endofit Pada Tanaman Curcuma heyneana dan Potensi Dalam Menambat Nitrogen. Jurnal widyariset , 2(2):106-117.
Viogenta,  P  dan  Ahmad,  F.  2017.  Fraksi  Kloroform  Ekstrak  Buah  Mentimun (Cucumis sativus  L.) Sebagai  Anti  Bakteri  Terhadap Staphylococcus  epidermidis. Jurnal Kesehatan , Vol.VIII(2): 165-169. Wati,  R.  2018. Isolasi  dan  Karakterisasi  Mikroba  Endofit  Pada  Tangkai  Daun  Tanaman Tujang ( Colocasia  esculenta) dan  Aktivitas  Antibakteri  Terhadap  Pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus  epidermidis .  Skripsi.  Universitas  Mataram. Mataram
Accepted Date Revised Date Decided Date Accepted to Publish 24 April 2022 28 April 2022 29 April 2022 Ya