## STUDI PELEPASAN TERKONTROL TERHADAP NANOENKAPSULASI DIMETOKSI AMINO CALKON SEBAGAI DESAIN KANDIDAT SENYAWA ANTI KANKER YANG EFEKTIF
Mochamad Zakki Fahmi * , Hery Suwito, Shofi Yasmin Nurain, Yogi Putra Hidayatullah
Departemen Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Airlangga
* email: m.zakki.fahmi@fst.unair.ac.id
Received 8 August 2016
Accepted 30 November 2016

## Abstrak
Enkapsulasi  merupakan  sebuah  proses  dimana  partikel  kecil  dikemas  dalam  sebuah partikel  yang  lebih  besar  sehingga  membentuk  kapsul.  Metode  tersebut  akan  digunakan untuk  memodifikasi  calkon,  senyawa  anti  kanker  yang  memiliki  kelarutan  dalam  air sangat  rendah,  dengan  menggunakan bovine  serum  albumin (BSA)  sebagai  enkapsulan. Modifikasi  senyawa  calkon  ini  dilakukan  dengan  mencampurkan  larutan  BSA  dalam  air dan  larutan  calkon  dalam  kloroform  kemudian  diultrasonikasi.  Senyawa  hasil  sonikasi tersebut  disebut  produk  nanoenkapsulan  BSA-calkon.  Produk  selanjutnya  diuji ketahanannya  terhadap  perubahan  pH,  penambahan  garam  dan  suhu.  Produk  kemudian dikarakterisasi  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis,  FTIR  dan  DLS.  Proses nanoenkapsulasi  dapat  dikatakan  berhasil  dilakukan,  ditunjukkan  dengan  produk nanoenkapsulan BSA-calkon yang dapat larut dalam air. Hasil karakterisasi menggunakan DLS menunjukkan bahwa produk nanoenkapsulan BSA-amino calkon memiliki rata-rata diameter  partikel  sebesar  457,5  nm  dan  201,0  nm  untuk  produk  nanoenkapsulan  BSA- dimetoksi  amino  calkon.  Hasil  FTIR  dari  nanoenkapsulan  BSA-amino  calkon memunculkan serapan gugus amida pada 1639,55 cm -1 . Sedangkan pada nanoenkapsulan BSA-dimetoksi amino calkon, gugus amida muncul pada serapan 1635,69 cm -1 .
Kata kunci : nanoenkapsulasi, calkon, bovine serum albumin dan anti kanker

## Abstract
Encapsulation  is  a  process  where  a  small  particles  packaged  in  a  larger  particles  and  it forms  into  a  capsule.  This  method  intends  to  modify  chalcone,  an  anticancer  compound that  have  very  low  solubility  in  water.  So  it  can’t  be  applied  into  human  bodies.  This chalcone  will  be  encapsulated  by  Bovine  Serum  Albumin.  Modification  of  chalcone  is carried out by mixing a BSA solution in water and chalcone solution in chloroform by an ultrasonication process. The product will be tested for the resistance of pH, salt addition and  temperature.  The  products  also  characterized  using  UV-Vis,  FTIR  and  DLS instruments.  Nanoencapsulation  process  was  successfully  do,  it’s  indicated  by  the nanoencapsulan  product  that  has  a  high  solubility  in  water.  The  results  of  DLS  indicate that products have an average particle size is 457,5 nm for BSA-amine chalcone and 201,0 nm for BSA-dimethoxy amine chalcone. FTIR results shows that nanoencapsulation BSA- chalcone has amide groups, it showed by the absorption peak which raises at 1639,55 cm -1 for amine chalcone, and 1635,69 cm -1 for dimethoxy amine chalcone.
Keywords : nanoencapsulation, chalcone, bovine serum albumin and anti-cancer.

## Pendahuluan
Kanker  adalah  suatu  penyakit  yang disebabkan  oleh  pertumbuhan  sel-sel jaringan  tubuh  secara  tidak  normal (Mangan,  2009).  Survey  WHO  pada tahun  2013  menyatakan,  penyakit  kanker sebagai penyebab kematian nomor dua di dunia  sebesar  13%  setelah  penyakit kardiovaskular  (Kementerian  Kesehatan Republik  Indonesia,  2014).  Berdasarkan Riset  Kesehatan  Dasar  (Riskesdas)  tahun 2013,  prevalensi  tumor  atau  kanker  di Indonesia adalah 1,4 per 1000 penduduk. Dari  riset  juga  diketahui  bahwa  kanker menduduki  urutan  ke  tujuh  sebagai penyebab  kematian  akibat  penyakit  di Indonesia  setelah  stroke,  tuberklosis, hipertensi,  cedera,  perinatal  dan  diabetes melitus.
Sejauh ini, pengobatan kanker terutama  di  Indonesia  memiliki  banyak kendala  seperti  besarnya  biaya  yang dibutuhkan, efek samping dari pengobatan, dan jumlah obat kanker yang terbatas.  Beberapa  penderita  kanker memilih  pengobatan  kemoterapi.  Obat kemoterapi  umumnya  berupa  kombinasi dari  beberapa  obat  yang  diberikan  secara bersamaan  dengan  jadwal  yang  telah ditentukan.  Selain  membunuh  sel  kanker, obat kemoterapi juga berefek pada sel-sel sehat  yang  normal,  terutama  yang  cepat membelah  atau  cepat  tumbuh  seperti rambut, lapisan mukosa usus dan sumsum tulang (Susanti dan Mula, 2010).
Sebelumnya,
senyawa derivat dimetoksi  amino  calkon,  yakni  2,3- dimetoksi-4-aminocalkon,  2,4-dimetoksi- 4-aminocalkon,
2,5-dimetoksi-4- aminocalkon  telah  dilaporkan  berhasil disintesis  oleh  Suwito  et  al,.  (2014). Dalam penelitian tersebut telah dijabarkan juga  hasil  uji  sitotoksisitas  senyawa  hasil sintesisnya,  dimana  menunjukkan  angka IC50  yang  berarti  bahwa  senyawa tersebut  memiliki  potensi  anti  kanker yang  rendah.  Kelemahan  yang  dimiliki senyawa  tersebut  sama  dengan  senyawa- senyawa anti kanker yang telah ada yaitu
memiliki  kepolaran  yang  rendah.  Di dalam  tubuh,  senyawa  non  polar  lebih sulit  berdifusi  ke  dalam  sitoplasma melalui dinding sel menuju protein target dibandingkan  senyawa  polar.  Akibatnya aktivitas  biologis  dari  senyawa  tersebut tidak  optimal  (Campbell  dan  Norman, 2012).
Beberapa tahun terakhir, peneliti mulai mengembangkan  aplikasi  nanopartikel dalam bidang kesehatan, terutama aplikasinya  sebagai  pembawa  obat  ( drug delivery )  (Hans  dan  Lowman,  2002). Salah  satu  cara  yang  digunakan  adalah menggunakan  proses  nanoenkapsulasi, yaitu  mengemas  obat  dalam  sebuah polimer  dan  dibuat  dalam  ukuran  nano. Kelebihan  dari  nanoenkapsulasi  antara lain  dapat  meningkatkan  stabilitas  obat, mengkontrol  pelepasan  obat  dan  dapat meningkatkan  bioavailibilitas  obat  dalam tubuh  karena  ukurannya  nano  sehingga lebih mudah melalui membran permeabel pada sel (Pandey et al., 2005).
Dalam  penelitian  ini,  akan  dilakukan modifikasi  senyawa  dimetoksi  amino calkon  ini  dengan  mengemasnya  dalam nanoenkapsulasi  BSA  (bovine  serum albumin)  sebagai  nanocarrier  supaya memiliki  kepolaran  yang  lebih  tinggi. Selanjutnya  juga  dilakukan  uji  kestabilan produk terhadap pengaruh pH, garam dan suhu, serta karakterisasi produk enkapsulan.

## Metode Penelitian

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian antara  lain:  gelas  ukur,  gelas  beaker, termometer,  pengaduk  magnetik,  botol semprot,  corong,  spatula,  kaca  arloji, ultrasonikator Ultrasonic  Homogenizer JY  92-IIDN,  timbangan  analisis  Metler AE  200.  Alat  karakterisasi  yang digunakan adalah spektrofotometer Shimadzu UV-Vis 1800, spektrofotometer (FTIR)  Shimadzu  dan Dynamic  Light Scattering (DLS)  Malvern  Zetasizer Nano.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  bovine  serum albumin  (BSA),  suksinat  anhidrat,  2,3- dimetoksi-4-aminocalkon,  2,4-dimetoksi- 4-aminocalkon, 2,5-dimetoksi-4- aminocalkon, amino calkon, NaOH, HCl, NaCl, aquades, membran dialisis (MWCO 1 kDa) dan kloroform.

## Prosedur Penelitian
Proses  nanoenkapsulasi  calkon  ke dalam  BSA  dilakukan  dengan  cara mencampurkan  larutan  BSA,  anhidrida suksinat  (0,00026  mmol)  dalam  aquades, dan larutan calkon dalam kloroform. Tiga larutan tersebut kemudian diaduk menggunakan  ultrasonikator  selama  satu menit tanpa jeda.
Hasil  sonikasi  selanjutnya  diuji ketahananya  terhadap  perubahan  pH, adanya penambahan garam dan perubahan suhu.  Uji  ketahanan  terhadap  pH dilakukan  pada  rentang  pH  3  hingga  12. Pengaturan pH dilakukan dengan menambahkan  sejumlah  HCl  dan  NaOH hingga  pH  yang  diinginkan  tercapai.
Larutan  yang  telah  memiliki  pH  3  –  12 tersebut  selanjutnya  diamati  pada  6  jam dan 24 jam setelah perubahan pH. Produk nanoenkapsulan  juga  diuji  kestabilannya terhadap  adanya  penambahn  garam. Garam NaCl ditambahkan ke dalam 3 mL larutan nanoenkapsulan BSA-calkon dengan  variasi  konsentrasi  garam  yaitu 0,15, 0,3 dan 0,5 M. Tiga larutan tersebut dibandingkan dengan larutan BSA-calkon tanpa  garam  pada  6  dan  24  jam  setelah penambahan  garam  ke  larutan.  Untuk pengujian  kestabilan  produk  terhadap perubahan  suhu,  larutan  dipanaskan hingga  suhu  mencapai  30 o ,  40 o ,  50 o dan 60 o C dan dilakukan selama 10 menit. Uji pelepasan calkon dilakukan dengan menempatkan  larutan  nanoenkapsulan BSA-calkon  ke  membran  dialisis  1  kDa. Perlakuan  tersebut  dilakukan  dalam  tiga variasi  pH,  yaitu  pH  4  (asam),  pH  7  dan pH  10  (basa).  Pada  uji  pelepasan  calkon dari  nanoenkapsulan  BSA,  pengambilan sampel dilakukan setiap 30 menit, 1 jam,
2,5 jam, 4 jam, 7 jam dan 24 jam sambil larutan diluar membran diaduk menggunakan  pengaduk  magnet  selama 24 jam. Sampel selanjutnya diidentifikasi masing-masing  konsentrasi  per  jamnya menggunakan instrumen spektrofotometer UV-Vis  menggunakan  lamda  maksimal masing-masing  calkon  dan  berdasarkan kurva  kalibrasi  calkon  yang  telah  dibuat sebelumnya   Konsentrasi  calkon  yang keluar  dari  membran  dapat  dihitung berdasarkan  persamaan  1.  Dengan Ct’ adalah nilai konsentrasi calkon keluar dari membran  yang  sebenarnya  pada  saat  t waktu, Ct adalah  rata-rata  konsentrasi calkon  yg  diambil  saat  t  waktu, v adalah jumlah  larutan  yang  diambil  (3  mL),  dan V adalah  volume  total  dari  aquades  dan buffer  (200  mL).  Nilai Ct’ yang  telah didapatkan  selanjutnya  dibuat  grafiknya dengan  konsentrasi  calkon  sebenarnya (Ct’)  sebagai  sumbu  x  dan  waktu pengambilan  sebagai  sumbu  y  (Fahmi., (2014)
0 ' i t Ct Ct Ct V ν − = + ∑ (1)

## Hasil dan Pembahasan

## Sintesis nanoenkapsulasi BSA-calkon
Sintesis  nanoenkapsulasi  BSA-calkon dilakukan  dengan  cara  mencampurkan larutan  BSA,  larutan  anhidrida  suksinat dan  larutan  calkon.  Campuran  larutan tersebut  membentuk  dua  fasa  yang  tidak saling  campur  antara  kloroform  dan  air. Selanjutnya  campuran  disonikasi  selama satu  menit  tanpa  jeda.  Hasil  dari  proses sonikasi berupa larutan berbusa berwarna putih kekuningan dan hanya ada satu fasa larutan.  Larutan  didiamkan  seharian hingga busa menghilang dan akan tampak larutan kuning bening yang larut air.
Seperti  yang  telah  dijelaskan  oleh Soares  et  al.  (2007)  dalam  penelitiannya bahwa  BSA  memiliki  beberapa  gugus asam amino yang bersifat nonpolar seperti prolin  dan  histidin.  Huang  et  al.  (2004)
juga mengemukakan bahwa pada struktur tiga  dimensi  BSA  terdapat  beberapa  sisi nonpolar  di  dalamnya.  Dalam  penelitian- penelitian  yang  telah  ada,  disebutkan bahwa interaksi BSA dengan nanopartikel atau  senyawa  aktif  dapat  dipercepat menggunakan gelombang ultrasonik dengan  metode  transfer  fasa,  yaitu  untuk menyatukan  senyawa  aktif  yang  terlarut di  kloroform  (tidak  larut  dalam  air)  ke dalam  molekul  BSA  dengan  cara berikatan  pada  sisi  nonpolar  pada  BSA (Fahmi, 2014).
. Gambar  1 .  Nanoenkapsulan  BSA-amino calkon pH 3 – 12 saat a) 0 jam, b) 6 jam dan c) 24 jam

## Uji kestabilan terhadap pH
Data  hasil  uji  kestabilan  produk nanoenkapsulan  BSA-calkon  terhadap perubahan pH dapat diamati pada Gambar 1.  Gambar  1  menunjukkan  bahwa  Pada waktu 6 jam, nanoenkapsulan BSA-amino calkon  tampak  mengalami  perubahan warna pada larutan dengan pH 3. Pada 24 jam, perubahan warna pada nanoenkapsulan BSA-amino calkon dengan  pH  3  semakin  tampak  jelas.
Larutan  yang  mulanya  berwarna  kuning pudar berubah menjadi tidak berwarna.
Pada  nanoenkapsulan  BSA-dimetoksi amino  calkon  terdapat  perubahan  warna pada  pH  3  setelah  6  jam  (Gambar  2). Warna  kuning  pada  larutan  sedikit menghilang.  Setelah  24  jam,  warna kuning  pada  larutan  semakin  pudar hingga membentuk larutan tidak berwarna.  Warna  kuning  pada  larutan terbentuk  karena  adanya  senyawa  calkon yang  pada  dasarnya  memang  berwarna kuning.  Pada  saat  pH  3  (asam)  warna kuning  menghilang  dikarenakan  adanya perubahan  struktur  pada  calkon.  Turunan calkon  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  senyawa  amino  calkon.  Gugus amina primer (NH2) pada calkon bersifat basa.  Jika  senyawa  dengan  gugus  amina direaksikan  dengan  asam  kuat  (HCl) maka akan menghasilkan garam ammonium (Brewster dan Eliel., 1953).
Gambar  2. Nanoenkapsulan  BSA- dimetoksi amino calkon pH 3 – 12 saat a) 0 jam, b) 6 jam dan c) 24 jam

## Uji  kestabilan  nanoenkapsulan  BSA- calkon terhadap garam
Nanoenkapsulan  diuji  ketahanannya terhadap  penambahan  konsentrasi  garam. Keempat  larutan,  0,  0,15,  0,3  dan  0,5  M didiamkan  selama  24  jam  dan  diamati pada  6  dan  24  jam  setelah  penambahan garam. Pada 6 jam pertama, nanoenkapsulan BSA-amino calkon
terjadi perubahan pada konsentrasi 0,5 M muncul endapan putih. Pada saat 24 jam, nanoenkapsulan  dengan  kadar  garam  0,5 M  semakin  keruh  dan  terdapat  semakin banyak  endapan.  Pada  senyawa  BSA- dimetoksi amino calkon saat 6 jam belum ada  perubahan  apapun.  Namun  pada  saat mencapai  waktu  24  jam,  pada  larutan dengan  konsentrasi  garam  sebesar  0,5  M terdapat sedikit sekali endapan, sedangkan  pada  larutan  lainnya  masih tetap jernih.
Gambar  3 .  Foto  nanoenkapsulan  BSA- amino  calkon  dengan  konsentrasi  garam (1) 0 M, (2) 0,15 M, (3) 0,3 M, (4) 0,5 M pada a) 0 jam, b) 6 jam dan c) 24 jam
Peningkatan konsentrasi
garam mengakibatkan  diameter  dari  BSA semakin  mengecil  (Gao.,  et  al,  2007). Keberadaan  garam  menjadi  salah  satu faktor  kerusakan  struktur  pada  BSA.  Hal ini  disebabkan  karena  ketika  garam ditambahkan,  maka  garam  tersebut  akan bersaing  dengan  protein  dalam  mengikat air. Namun karena garam anorganik dapat lebih  kuat  menarik  air,  maka  jumlah
molekul air yang dapat diikat oleh protein akan  semakin  berkurang.  Sehingga protein akan mengendap (Winarno, 2002).

## Uji  kestabilan  nanoenkapsulan  BSA- calkon terhadap suhu
Pada  analisa  kestabilan  suhu  terhadap nanoenkapsulan  dengan  memanaskan nanoenkapsulan BSA-amino calkon sampai mencapai suhu 30˚, 40˚ dan 50˚ C selama  10  menit.  Hasil  analisa  ini ditunjukkan pada Gambar 4. Pada larutan BSA-amino calkon tidak terjadi
perubahan  apapun  pada  suhu  30˚  hingga 50˚  C.  Begitu  pula  pada  larutan  BSA- dimetoksi  amino  calkon,  tidak  terjadi perubahan apapun.
Gambar  4. Foto  nanoenkapsulan  BSA- dimetoksi amino calkon dengan pemanasan  hingga  suhu  (1)  30˚C,  (2)  40 ˚C, (3) 50 ˚C, (4) 60 ˚C pada sebelum a) dan setelah pemanasan b).
Salah  satu  faktor  denaturasi  protein adalah suhu. Panas dapat memecah ikatan hidrogen  pada  protein.  Protein  biasanya akan  rusak  dan  mengendap  jika dipanaskan  pada  suhu  diatas  60˚C  (Alais dan Linden., 1991). Pada hasil penelitian, pemanasan  hingga  suhu  60  ˚C  tidak mengakibatkan  perubahan  apapun.  Dapat disimpulkan bahwa nanoenkapsulan dapat
bertahan dalam suhu tubuh manusia yang normalnya 36 - 37 ˚C.

## Uji  pelepasan  nanoenkapsulan  BSA- calkon
Dari  penentuan  lamda  maksimum menggunakan  spektrofotometer  uv-vis, didapatkan  lamda  maks  dari  senyawa amino calkon adalah 312 nm. Selanjutnya lamda  maks  digunakan  untuk  mencari absorbansi  larutan  standar,  dihasilkan kurva kalibrasi dengan persamaan regresi yaitu y =  1916,6 x +  0,0038  yang digunakan  dalam  penentuan  konsentrasi dari  calkon.  Hasil  uji  pelepasan  amino calkon  dari  nanoenkapsulan  BSA  dapat dilihat dari Gambar 5.
0 5 10 15 20 25 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 Ko ns en tr as i ( nM ) W a ktu (ja m)
Gambar  5. Grafik  uji  pelepasan  amino calkon pada pH 4 (hitam), 7 (merah), dan 10 (biru).
Nanoenkapsulan BSA-dimetoksi amino  calkon  juga  dibuat  kurva standarnya  dengan  konsentrasi  larutan standar  sebesar  konsentrasi  3.10 -6 ,  5.10 -6 , 10 -5 , 3.10 -5 dan 5.10 -5 M. Dari absorbansi
larutan  standar  tersebut,  didapatkan persamaan regresi dengan kurva kalibrasi yaitu y =  16282 x –  0,0291.  Hasil  uji pelepasan  dimetoksi  amino  calkon  dari nanoenkapsulan  BSA  dapat  dilihat  dari Gambar 6.
Jika  dilihat  pada  hasil  pengamatan  uji pelepasan  kedua  senyawa  calkon  di  atas, dapat  diketahui  bahwa  uji  pelepasan calkon  paling  maksimal  terjadi  saat  pada pH  4,  selanjutnya  pH  7  dan  terakhir  pH 10.  Hal  tersebut  dapat  terjadi  di  karena pada  saat  pH  4  (asam)  struktur  klaster pada  BSA  mengembang,  sehingga menimbulkan adanya rongga-rongga yang dapat  dilewati  oleh  calkon.  Pada  saat  pH 10 (basa), struktur klaster pada BSA akan semakin menyempit sehingga calkon yang terenkapsulasi  dalam  BSA  sulit  untuk keluar dari enkapsulasi BSA (Fahmi et al.,
2014). 0.00E+00 1.00E-06 2.00E-06 3.00E-06 4.00E-06 5.00E-06 6.00E-06 7.00E-06 0 5 10 15 20 25 30 kon se nt ra si ( m M ) waktu (jam)
Gambar  6. Grafik  uji  pelepasan dimetoksi  amino  calkon  pada  pH  4 (merah), 7 (biru), dan 10 (hijau).
Karakterisasi nanoenkapsulan
BSA- calkon  menggunakan  dynamic  light scattering (DLS)
Karakterisasi  menggunakan  DLS  ini bertujuan  untuk  mengukur  diameter partikel yang terbentuk. Berdasarkan hasil karakterisasi senyawa menggunakan DLS ini  didapat  grafik  intensitas  ukuran partikel (Gambar 7). Terdapat tiga puncak utama dari hasil pengukuran menggunakan DLS di atas. Peak pertama dan  yang  paling  tinggi  menunjukkan adanya  partikel  berukuran  1176  nm  yang memiliki  intensitas  sebesar  72,2%. Puncak kedua menunjukkan partikel yang memiliki  ukuran  diameter  sekitar  266,4
nm  sebanyak  23,6%.    Puncak  terakhir menunjukkan  partikel  berukuran  75,96 nm  dengan  intensitas  4,2%.  Dari  ketiga puncak  tersebut,  didapatkan  rata-rata ukuran  partikel  nanoenkapsulan  BSA- amino calkon ini adalah 457,5 nm.
Gambar  DLS  untuk  BSA-dimetoksi amino  calkon  dapat  dilihat  pada  Gambar 8.  Dari  spektra  tersebut  dapat  kita  lihat bahwa  ada  tiga  peak  yang  Nampak. Pertama  yaitu  peak  yang  menunjukkan ukuran diameter partikel 246,8 nm dengan intensitas 94,6 %. Peak kedua menunjukkan  banyaknya  particle  yang berukuran  42,39  nm  memiliki  intensitas sebanyak  3,1%.  Dan  peak  yang  terakhir
Gambar 7. Spektra hasil analisa DLS nanoenkapsulan BSA-amino calkon
Gambar 8. Spektra hasil analisa DLS nanoenkapsulan BSA-dimetoksi amino calkon
memunjukkan  ada  2,3%  partikel  yang berukuran  cukup  besar  yaitu  4978  nm. Jika dirata-rata, maka didapatkan diameter rata-rata partikel nanoenkapsulan  BSA-dimetoksi  amino calkon sebesar 201 nm. Dalam penelitian Fahmi  et  al.,  (2014)  disebutkan  bahwa perbandingan  konsentrasi  BSA  dengan senyawa  aktif  mempengaruhi  ukuran partikel  yang  terbentuk.  Semakin  besar konsentrasi  BSA  yang  digunakan  dalam campuran,  semakin  kecil  pulan  ukuran nanopartikel yang terbentuk.
Karakterisasi nanoenkapsulan BSA- calkon menggunakan FTIR Berdasarkan hasil
karakterisasi menggunakan  FTIR,  didapatkan  gugus amida pada kedua senyawa. Gugus amida yang  terdeteksi  dapat  muncul  akibat adanya  ikatan  antara  gugus  fungsi  BSA dengan  anhidrida  suksinat.Terbentuknya gugus  amida  dibuktikan  oleh  spektra FTIR  pada  serapan  1639,55  cm-1  pada senyawa  nanoenkapsulasi  BSA-amino calkon  dan  pad  aserapan  1635,69  cm-1. Gugus amida sendiri menandakan adanya ikatan  antara  anhidrida  suksinat  sebagai agen penaut silang dengan BSA.

## Kesimpulan
Nanoenkapsulasi  calkon  ke  dalam BSA  dapat  dilakukan  melalui  proses sonikasi  larutan  BSA  dan  anhidrida suksinat serta larutan calkon. Hal tersebut dibuktikan  oleh  adanya  calkon  yang terlarut  dalam  air  setelah  proses  transfer fasa.Nanoenkapsulan  BSA-calkon  dapat tahan pada pH 5 – 12, penambahan garam hingga 0,3 M dan pemanasan hingga suhu 60˚C. Berhasilnya proses nanoenkapsulasi BSA-calkon  juga  didukung  oleh  adanya gugus  amida  yang  teridentifikasi  dalam spektra FTIR. Pada puncak serapan gugus amida  pada  1639,55  cm -1 .  Sedangkan nanoenkapsulan  BSA-dimetoksi  amino calkon  muncul  pada  1635,69  cm -1 . Ukuran partikel rata-rata pada nanoenkapsulan  BSA-calkon  juga  sudah mencapai diameter 457,5 nm untuk amino calkon  dan  201,0  nm  untuk  dimetoksi amino  calkon.  Dari  hasil  uji  pelepasan terkontol, dapat diketahui bahwa pada pH 4,  calkon  dalam  BSA  dapat  lebih  efektif keluar  dari  enkapsulan  dibandingkan  jika dalam keadaan basa ataupun netral.
Nanoenkapsulasi  calkon  ke  dalam BSA  dapat  dilakukan  melalui  proses sonikasi  larutan  BSA  dan  anhidrida suksinat serta larutan calkon. Hal tersebut
Gambar 9. Spektra hasil analisa DLS nanoenkapsulan BSA-dimetoksi amino calkon
dibuktikan  oleh  adanya  calkon  yang
terlarut  dalam  air  setelah  proses  transfer fasa.  Nanoenkapsulan  BSA-calkon  dapat tahan pada pH 5 – 12, penambahan garam hingga 0,3 M dan pemanasan hingga suhu 60˚C. Berhasilnya proses nanoenkapsulasi BSA-calkon  juga  didukung  oleh  adanya gugus  amida  yang  teridentifikasi  dalam spektra FTIR. pada puncak serapan gugus amida  pada  1639,55  cm -1 .  Sedangkan nanoenkapsulan  BSA-dimetoksi  amino calkon  muncul  pada  1635,69  cm -1 . Ukuran
partikel rata-rata pada
nanoenkapsulan  BSA-calkon  juga  sudah mencapai diameter 457,5 nm untuk amino calkon  dan  201,0  nm  untuk  dimetoksi amino  calkon.  Dari  hasil  uji  pelepasan terkontol, dapat diketahui bahwa pada pH 4,  calkon  dalam  BSA  dapat  lebih  efektif keluar  dari  enkapsulan  dibandingkan  jika dalam keadaan basa ataupun netral.

## Daftar Pustaka
Brewster,  J.  H.,  &  Eliel,  E.  L.  (1953)
Carbon - Carbon  Alkylations  with Amines and Ammonium Salts . Organic Reactions . Campbell, G.S., Norman, J.M. (2012) An introduction to environmental biophysics, Springer  Science  & Business Media.
Fahmi, M. Z., Ou, K. L., Chen, J. K., Ho, M. H., Tzing, S. H., and Chang, J. Y. (2014) Development of bovine serum albumin-modified hybrid nanoclusters for magnetofluorescence imaging  and  drug  delivery, RSC Adv , 4 (62), 32762-32772.
Hans, M., Lowman, A. (2002)
Biodegradable nanoparticles for drug delivery  and  targeting, Current
Opinion in Solid State and Materials Science, 6 (4), 319-327.
Huang,  B.  X.,  Kim,  H.  Y.,  &  Dass,  C.
(2004)  Probing  three-dimensional structure of bovine serum albumin by chemical  cross-linking  and  mass spectrometry, J.  Am.  Soc.  Mass Spectrom , 15 (8), 1237-1247.
Mangan,  Y.  (2009) Solusi  Sehat
Mencegah  &  Mengatasi  Kanker : AgroMedia, 1-4. Pandey,  R.,  Ahmad,  Z.,  Sharma,  S., Khuller, G. (2005) Nano-
encapsulation  of  azole  antifungals: potential applications to improve oral drug  delivery, Int.  J.  Pharm,  301 (1),
268-276.
Soares, S., Mateus, N., and De Freitas, V. (2007)  Interaction  of  different polyphenols  with  bovine  serum albumin  (BSA)  and  human  salivary α -amylase  (HSA)  by  fluorescence quenching, J.  Agric.  Food  Chem ,
55 (16), 6726-6735.
Susanti, L., Mula, T. (2010) Karakteristik Mual  Dan  Muntah  Serta  Upaya Penanggulangan  Oleh  Penderita Kanker  Yang  Menjalani  Kemoterapi. Fakultas Keperawatan: USU.
Suwito,  H.,  Pudjiastuti,  P.,  Fanani,  M.Z., Kimata-Ariga,  Y.,  Katahira,  R., Kawakami,  T.,  Puspaningsih,  N.N.T. (2014)  Design  and  Synthesis  of Chalcone Derivatives as Inhibitors of the  Ferredoxin—Ferredoxin-NADP+ Reductase Interaction of Plasmodium falciparum:
Pursuing New Antimalarial  Agents, Molecules, 19 (12), 21473-21488.