## Korelasi Antara Kadar Serum Leptin, Zinc, dan IgE pada Obesitas
Mulyono*, Wistiani*, Dewi Ratih*, Saekhol Bakri **
Latar  belakang  : Telah  diketahui  bahwa  kadar  serum  zinc berhubungan  dengan  kadar  serum  leptin  pada  obesitas.  Di  sisi lain, penelitian terdahulu menunjukkan hubungan antara obesitas dengan  IgE,  sebagai  penanda  atopi,  masih  inkonsisten.  Belum terdapat  penelitian  yang  menilai  signifikansi  korelasi  obesitas dengan  serum  leptin,  zinc,  and  IgE  di  Indonesia.  Penelitian  ini bertujuan untuk menilai korelasi antara kadar serum leptin, zinc, dan IgE pada anak obesitas.
Metode  : Penelitian  ini  merupakan  penelitian  belah  lintang, dilakukan  di  Semarang,  melibatkan  80  anak  obesitas,  laki-laki ( n =40) dan perempuan ( n =40), berusia 13–14 tahun, dari Januari hingga Desember 2013, dengan kriteria inklusi anak obesitas dan menyetujui informed consent . Riwayat atopi dinilai menggunakan kuesioner International  Study  of  Asthma  and  Allergies  in Childhood (ISAAC). Pemilihan subyek secara consecutive sampling . Sampel  darah  diambil  untuk  pemeriksaan  kadar  zinc  serum menggunakan metode AAS,  leptin dan IgE  serum menggunakan ELISA. Analisis statistik menggunakan Pearson's correlation test . Hasil  : Dari  80  subyek,  rata-rata  kadar  serum  leptin  adalah 10443,15 (SD=4288,76) pg/ml, kadar serum zinc 83,29 (SD=15,56) ng/dl,  kadar  serum  IgE  103,48  (SD=108,36)  IU/ml,  secara berturutan. Pengujian statistik dengan Pearson's correlation test , secara statistik tidak terdapat hubungan antara kadar serum leptin dan  kadar  serum  zinc,  tidak  terdapat  hubungan  antara  kadar serum leptin dan kadar  serum IgE, dan tidak terdapat hubungan antara kadar serum zinc dan kadar serum IgE dengan nilai r = 0,137, ( p =0,227); r = -0,380, ( p =0,741); dan r = -0,146 ( p =0,195), secara berurutan.
Simpulan : Tidak terdapat hubungan antara kadar serum leptin, zinc dan IgE pada anak obesitas.
Kata kunci : anak obesitas, leptin, zinc, IgE, korelasi
*Departemen Ilmu Kesehatan Anak, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang **Bagian Ilmu Kesehatan Masyarakat, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang

## Abstrak
Background : It has been observed that serum zinc levels directly associated  with  serum  leptin  levels  in  obesity.  In  otherwise, previous study showed the correlation between obesity and IgE, as a marker of atopy, has been inconsistent. There's a few data have reported the correlation between serum leptin, zinc, and IgE in Indonesia.  The  objectives  of  this  study  was  to  assess  the correlations between serum leptin, zinc, and IgE levels in obese children.
Methods : We performed a cross-sectional study in the several junior high school in Semarang, involving 80 obese children, male ( n =40)  and  female  ( n =40),  aged  13–14  years,  from  January  to December 2014, and who met the inclusion criteria. Subjects were chosen by consecutive sampling. Atopic disease was ascertained by  using  the  International  Study  of  Asthma  and  Allergies  in Childhood (ISAAC) validated questionnaire. Blood specimens were collected to examine serum zinc levels by AAS methode, serum leptin and IgE levels by ELISA. Statistical analyze used Pearson's correlation test.
Results  : From  80  subjects,  the  mean  of  serum  leptin  levels 10443.15 (SD=4288.76) pg/ml, serum zinc levels 83.29 (SD=15.56) ng/dl,  serum  IgE  levels  103.48  (SD=108.36)  IU/ml,  respectively. Pearson's  correlation  test  revealed  no  correlations  between serum  leptin  and  serum  zinc  levels,  no  correlations  between serum  leptin and  serum  IgE  levels,  and  no  correlation between serum zinc and serum IgE levels with r = 0.137, ( p =0.227); r = -0.380, ( p =0.741); and r = -0.146, ( p =0.195), respectively. Conclusion : There was no correlation between serum leptin, zinc, and IgE levels in obese children.
Keywords : obese children, leptin, zinc, IgE, correlations

## Abstract
Correlations between serum leptin, zinc, and IgE in obesity

## Original Article
Med Hosp 2015; vol 3 (1) : 42–46

## Medica Hospitalia

## PENDAHULUAN
Obesitas  telah  dikaitkan  dengan  berbagai  masalah kesehatan  termasuk  hipertensi,  dislipidemia,  penyakit kardiovaskular,  diabetes  melitus,  kerentanan  terhadap 1 infeksi.   Hassin  dkk.  (2008)  menemukan  bahwa  kadar serum  leptin,  senyawa  adiponektin  yang  berkaitan dengan keinginan makan, lebih tinggi pada anak obesitas dibandingkan  normal  ( p =0.000).  Hal  ini  mungkin berhubungan dengan kondisi pada orang obes memiliki jaringan adiposit yang memproduksi leptin beberapa kali
2 lipat dibanding normal.  Apandi (2011) mengemukakan kemungkinan  bahwa  obesitas  merupakan  faktor predisposisi   atau secara umum merupakan faktor yang
3 menyebabkan seorang anak obesitas mengalami atopi. Manifestasi  klinis  atopi  berupa  rinitis  alergi  dan  asma,
4,5 dermatitis atopi, dan gastroenteropati.
Hubungan antara obesitas dengan kejadian atopi masih kontroversi. Chen dkk tidak menemukan adanya perbedaan  kejadian  atopi  antara  anak  obesitas  dengan 6 normal.   Visness  melaporkan  dalam  hasil  Survei Pemeriksaan  Kesehatan  dan  Gizi  di  Amerika  Serikat bahwa terdapat hubungan antara obesitas dengan kadar 7 IgE total, atopi dan sensitisasi makanan.  Kualitas makan makanan  yang  buruk  akan  mempengaruhi  status mikronutrien  pada  penderita  obesitas,  salah  satunya adalah  zinc.  Marrreiro,  dkk.  (2001)  menemukan konsentrasi  plasma  zinc  pada  penderita  obesitas kadarnya lebih rendah secara signifikan daripada orang normal.  Apabila  terjadi  kekurangan  zinc,  maka k e s e i m b a n g a n   T h - 1 / T h - 2   t e r g a n g g u ,   y a n g
8 mengakibatkan  pengurangan  produksi  sitokin  Th-1. Sesuai  dengan  latar  belakang  tersebut,  penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui korelasi antara kadar serum leptin, zinc, dan IgE pada anak obesitas.

## METODE
Penelitian ini adalah penelitian belah lintang, merupakan bagian  dari  penelitian  Pengaruh  Suplementasi  Zinc terhadap Respon Imun Penderita Obesitas, dilakukan di Semarang, pada bulan Januari–Desember 2013, dan telah mendapat persetujuan Komisi Etik Penelitian Kesehatan Fakultas  Kedokteran  Universitas  Diponegoro/RSUP Dr. Kariadi Semarang No.320/EC/FK/RSDK/2013.
Kriteria  inklusi  adalah  anak  sekolah  berusia 11–14  tahun  yang  mengalami  obesitas  berdasarkan kriteria International Obesitasity Task Force (IOTF) IMT ≥ P 95%,  orangtua/wali bersedia menjadi peserta penelitian. Kriteria eksklusi adalah menderita penyakit metabolik/ kronik seperti   diabetes,   gangguan pencernaan kronik (kolestasis, IBS), menderita penyakit hati.
P e m e r i k s a a n   y a n g   d i l a k u k a n   m e l i p u t i pengukuran antropometri dan sampel darah vena untuk pemeriksaan  kadar  serum  leptin,  zinc  dan  IgE. Pengukuran tinggi badan (TB) menggunakan microtoise;
berat badan (BB) menggunakan timbangan berat badan SECA® 878. Pada saat pengukuran antropometri, subyek memakai  baju  olah  raga  berupa  kaos  tipis  dan  celana pendek tanpa alas kaki. Kriteria obesitas didasarkan pada IOTF  yaitu  seorang  anak  dikategorikan  mengalami obesitas bila indeks massa tubuh (IMT) menurut kurva
9 CDC  2000  >persentil  ke–95.   Seluruh  subyek  dalam penelitian ini memiliki IMT > persentil 95.

## Pengambilan sampel darah
Satu hari sebelum pengambilan sampel darah, anak-anak berpuasa 12 jam. Segera setelah mereka tiba di sekolah diambil  sampel  darah  vena  puasa  (6  mL  dari  masing- masing anak) diambil oleh petugas  mengenakan sarung tangan polietilen steril sekali pakai, bebas dari bedak atau pelapis  lainnya,  menggunakan  jarum  baja stainless vacutainer dengan penggunaan minimal torniket. Darah diambil  dalam  tabung  bebas trace  element yang  telah didemineralisasi  dengan  asam  nitrat  30%  satu  hari sebelumnya,  dan  dibilas  dengan  aqua  yang  telah didemineralisasi  untuk  menghindari  kontaminasi mineral  lain,  tabung  dievakuasi  tanpa  anti-koagulan, menggunakan sumbat silicon. Darah ditempatkan pada es  sampai  pemisahan  dalam  waktu  dua  jam  dan dipisahkan  antara  plasma  dan  serum  aliquoted  dalam tabung  reaksi  Eppendorf.  Semua  parameter  darah dianalisis  sesuai  dengan  protokol  standar  dan  semua peralatan  yang  digunakan  (tidak  termasuk  barang- barang  sekali  pakai)  didekontaminasi  sebelum digunakan.  Semua  sampel  darah  diproses  di laboratorium GAKY Universitas Diponegoro.

## Pemeriksaan serum leptin
Pemeriksaan  serum  leptin  menggunakan Quantikine® Human  Leptin  Immunoassay ,  Katalog  Nomor  DLP00 berdasarkan  teknik  ELISA.  Sebanyak  10  µl  serum diencerkan  100  kali  lipat  dengan  kalibrator  pengencer RD5P.  Sensitivitas  :  dosis  terdeteksi  minimum  serum leptin biasanya kurang dari 7.8 pg/ml. Spesifitas : 50 ng/mL. Nilai normal : 4.760-20.676 pg/ml.

## Pemeriksaan serum zinc
Kadar  serum  zinc  ditentukan  dengan  metode atomic absorption spectroscopy (AAS). Metode ini menggunakan serum  yang  diencerkan  lima  kali  lipat  dan  kalibrator dalam matriks gliserol 5%. Konsentrasi zinc ditentukan dengan  membandingkan  sinyal  dari  serum  yang diencerkan  dengan  sinyal  dari  kalibrator  berair,  yang disiapkan  dalam  matriks  gliserol  dilusian  (5mL/dL) untuk  mensimulasikan  viskositas  serum  yang diencerkan. Koefisien variasi (sd/berarti x 100%) untuk serum  zinc  adalah  15  mg/dL.  Sampel  yang  digunakan adalah  serum  sebanyak  1  cc  uuntuk  pemeriksaan  zinc.
imun  terhadap  paparan  alergen  alami  dengan memproduksi antibodi IgE.
Pada  penelitian  ini  disebutkan  laki-laki  obes (36,25%)  memiliki  frekuensi  lebih  sering  mengalami kejadian  atopi  dibandingkan  perempuan.  Hasil penelitian  ini  berlawanan  dengan  penelitian  Vieria  13 yang menyebutkan perempuan lebih sering mengalami asma dan atopi.
Hassin  dkk.  meneliti  77  anak  berusia  11,3  tahun yang  memiliki  BMI  >  persentil  ke–95,  mendapatkan kadar  serum  lebih  tinggi  pada  anak  obes  dibanding
Nilai normal adalah 80–120 ng/dl.

## Pemeriksaan serum IgE
Sebanyak  20  µL  serum  darah  digunakan  untuk pemeriksaan IgE menggunakan reagen Total Human IgE Assay Cat Ref # 1801Z berdasarkan teknik ELISA. Kadar Ig-E  yang  terdeteksi  :  0-800  IU/ml.  Spesifitas  N/A, sensitifitas 5 IU/mL. Nilai normal : < 100 IU/ml.

## Analisis data
Analisis data menggunakan program SPSS for Windows versi 15.0 dengan uji korelasi Pearson's .

## HASIL
Dari  80  subyek  yang  diikutsertakan  dalam  penelitian, terbagi  menjadi  40  subyek  laki-laki  dan  40  subyek perempuan.  Rerata  usia  subyek  yang  mengikuti penelitian  adalah  13,5  tahun.  Terdapat  49  subyek  yang memliki riwayat atopi dalam keluarga, terbagi menjadi : 24  subyek  (30%)  memiliki  riwayat  dermatitis  atopi, 16 subyek (20%) memiliki riwayat rinitis alergi, dan 9  subyek  (11,3%)  memiliki  riwayat  asthma  (Tabel  1). Rerata  kadar  serum  leptin  =  10443,15  (SB  :  4288,76) pg/ml, rerata kadar serum zinc = 83,29 ( SB : 15,56) ng/dl, rerata  kadar  serum  IgE  =  103,48  (SB  :  108,36)  IU/ml (Tabel 2).
Tabel  3  menunjukkan  adanya  korelasi  positif lemah antara kadar serum leptin dan kadar serum zinc yang secara statistik tidak bermakna ( r : 0,137, p : 0,227), korelasi  negatif  sedang  antara  kadar  serum  leptin  dan kadar serum IgE yang secara statistik tidak bermakna ( r :  -0,380,  p  :  0,741),  dan  korelasi  negatif  lemah  antara kadar  serum  zinc  dan  kadar  IgE  yang  secara  statistik tidak bermakna  (r : -0,146, p : 0,195), secara berurutan.

## PEMBAHASAN
Obesitas merupakan faktor predisposisi  atau atau secara 2 umum  merupakan  faktor  yang  menyebabkan  atopi. Terjadinya resistensi leptin pada orang obesitas mungkin merupakan salah satu penyebabnya. Penyebab resistensi leptin  pada  obesitas  belum  jelas,  tetapi  beberapa hipotesis  menyebutkan  adanya  reseptor  defektif, polimorfisme reseptor, ketidakseimbangan leptin bebas dan leptin terikat, dan terhambatnya pensinyalan leptin. Resitensi  leptin  akan  meningkatkan  supresi  terhadap sitokin Th1, disisi lain meningkatkan sekresi sitokin Th2 seperti  IL-4,  IL-5,  dan  IL-13.  Sekresi  IL-4  menyebabkan limfosit B memproduksi IgE, suatu penanda atopi.1,10,11 Atopi  merupakan  suatu  kecenderungan  untuk membentuk  antibodi  imunoglobulin  E  (IgE)  sebagai 12 respon terhadap paparan alergen dosis rendah.  Atopi secara  genetik  diturunkan  untuk  memberikan  respon

## TABEL 1 Karakteristik  subyek
Variabel Usia Laki-laki n (%) Perempuan n (%) 13 tahun 14 tahun Rerata Usia (tahun) Riwayat atopi Tidak ada riwayat atopi* Dermatitis atopik Rinitis alergi Asthma 22 (27,5) 18 (22,5) 13,5 23 (28,75) 14 (17,5) 10 (12,5) 5 (6,25) 28 (35) 12 (15) 13,5 8 (10) 10 (12,5) 6 (7,5) 4 (5,0)
*Sebanyak 31 subyek tidak memiliki riwayat atopi dalam keluarga, diperkirakan mempengaruhi hasil pemeriksaan kadar serum leptin, zinc, dan IgE

## TABEL 2

## Rerata hasil pemeriksaan laboratorium

## Parameter
Kadar serum leptin  (pg/ml) Rerata (SB) Kadar serum zinc  (ng/dl) Kadar serum Ig-E  (IU/ml) 83,29 (15,56) ** 103,48 (108,36) ***
Keterangan : Nilai normal : *serum leptin : 476–20676 pg/ml, **serum zinc 80-120 ng/dl, ***serum IgE <100 IU/ml
10443,15 (4288,76) *

## TABEL 3
Korelasi antara kadar serum leptin, zinc, dan IgE pada anak obesitas
Variabel Kadar serum leptin-serum zinc Koefisien korelasi (r) Kadar serum leptin-serum IgE Kadar serum zinc-kadar IgE -0,380 -0,146 * Pearson's correlation test 0,137
p 0,741*
0,195*
0,227*

## Medica Hospitalia | Vol. 3, No. 1, Mei 2015
normal (38.6 ± 21 ng/ml vs 7.8 ± 6.5 ng/ml). Nolan dkk. dalam penelitiannya memperlihatkan kadar serum leptin lebih tinggi pada anak obesitas dibanding normal (22,89 ±
2 6,4 ng/ml vs 11,13 ± 7,48, p < 0,05).  Hasil penelitian kami menunjukkan  kadar  serum  leptin  10,.443  pg/ml,  tidak dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Penderita  obesitas  memiliki  kebiasaan  makan makanan yang tinggi karbohidrat dan lemak yang akan mempengaruhi status mikronutrien zinc. Tascilar (2011) dalam penelitiannya terhadap 34 anak obesitas dengan usia  10,59  ±  2,90  tahun  yang  dibandingkan  dengan  33 anak normal usia 10,71 ± 2,07 tahun, mendapati bahwa kadar zinc dalam plasma 67,45 ± 18,42 ng/dl vs 74,45 ± 14 18,42  ng/dl  dengan p =0,186.   Marrreiro,  dkk.  (2001) menemukan  konsentrasi  zinc  plasma  pada  penderita obesitas  kadarnya  lebih  rendah  secara  signifikan
15 daripada orang normal.  Sedangkan pada penelitian ini, sebanyak  80  subyek  penelitian  memiliki  kadar  zinc serum  normal  rendah  (83,29  ±  15,56)  ng/dl.  Zinc merupakan trace  element yang  berperan  dalam 16 pembelahan, diferensiasi dan pertumbuhan sel.  Secara umum respon proliferasi menjadi terbatas setelah terjadi defisiensi  zinc.  Aspek  lain  yang  terpengaruh  adalah polarisasi sel T helper naive menjadi sel limfosit Th1 dan Th2.
Pada  penelitian  ini  didapatkan  korelasi  positif lemah  antara  kadar  serum  leptin  dan  zinc,  namun nilainya  tidak  bermakna  secara  statistik  ( p >0,05).  Chen (2000) mendapatkan kelompok obesitas memiliki kadar leptin yang lebih tinggi pada setiap pengambilan sampel dibandingkan  kelompok  normal.  Terdapat  korelasi negatif antara kadar leptin dan zinc dalam plasma ( r : - 0.51, p :  0,012),  sehingga  disimpulkan  bahwa  zinc memegang  peran  pada  produksi  leptin  di  jaringan 17 adipose subkutan.
Morgan  dalam  penelitiannya  menyebutkan bahwa individu dengan atopi memiliki kadar IgE lebih tinggi  daripada  orang  normal  sebagai  respon  terhadap 18 alergen.   Eldin dkk. dalam penelitiannya mendapatkan rerata kadar serum leptin pada penderita obesitas 510,476 ±  366,407  IU/ml.  Dalam  penelitiannya  tersebut,  kadar serum leptin memiliki korelasi negatif terhadap IgE yang
2 bermakna  secara  statistik  ( r =-0,289, p =0,049).   Pada penelitian  ini  ditemukan  kadar  IgE  ditemukan  lebih tinggi  dibanding  nilai  normal  (103,48  ±  108,36  IU/ml). Terdapat korelasi negatif yang lemah antara kadar serum zinc dengan kadar serum IgE, meskipun secara statistik tidak  bermakna  ( r :  -0,146, p :  0,195).  Hal  ini  mungkin dipengaruhi oleh jumlah individu yang memiliki riwayat atopi  sebanyak  49  (61,25  %),  sehingga  mempengaruhi rerata kadar serum IgE sebagai marker atopi pada subyek penelitian ini.
Kelemahan penelitian ini adalah desain penelitian belah  lintang  tidak  menjawab  kausalitas  hasil pengukuran  variabel  penelitian.  Dibutuhkan  jumlah sampel  yang  banyak  untuk  memahami  sebab  dan
konsekuensi  kadar  zinc  yang  rendah  pada  penderita obes.  Pada  penelitian  ini  tidak  semua  subyek menunjukkan klinis atopi sehingga mempengaruhi hasil pemeriksaan laboratorium.

## SIMPULAN
Tidak  terdapat  korelasi  yang  bermakna  antara  kadar leptin, zinc, dan IgE pada anak obesitas yang diperiksa. Penelitian ke depan  lebih difokuskan untuk memeriksa penyebab  kadar  zinc  yang  rendah  dan  korelasi  antara kadar zinc yang rendah dengan manifestasi atopi pada penderita  obesitas.  Perlu  penelitian  lebih  lanjut  untuk membedakan  respon  imun  pada  kejadian  atopi  antara penderita obesitas dengan normal.

## Ucapan terima kasih
Penelitian  ini  mendapatkan  dana  dari  Proyek  Risbin Iptekdok  2013  dengan  No.SK  HK.02.04/I.1/1088/2013, No.DIPA  024.11.1.416151/2013.  Pada  kesempatan  ini kami  menyampaikan  terimakasih  kepada  Badan Penelitian  dan  Pengembangan  Kementerian  Kesehatan Republik  Indonesia,  Laboratorium  GAKY  FK  UNDIP, dan seluruh pihak yang telah membantu terlaksananya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Kral  JG.Morbidity  of  severe  obesity.Surg  Clin  North  Am. 2001;8:1039-61.
2. Eldin  LB,  Algamal  HA,  El-Dory  GF,  Rashad  M,  El-Arab SE,Allella  NAA,  et.al.Relation  between  obesity,  lipid  profile, leptin and atopic disorders in children. Egypt J Pediatr Allergy Immunol.2008; 6(1) : 27-34.
3. Apandi  PR,Setiabudiawan  B,  Sukadi  A.Correlation  between obesity  with  atopy  and  family  history  of  atopy  in children.Paediatrica indonesiana. 2011;51:227-33
4. Matarese G, Moschos S, Mantzoros CS. Leptin in immunology.J Immunol. 2005;174:3137-42
5. Yiannakouris N, Yannakoulia M, Melistas L, Chan JL, Klismis- Zacas D, Mantzoros CS.The Q223R polymorphism of the leptin receptor  gene  is  significantly  associated  with  obesity  and predicts  a  small  percentage  of  body  weight  and  body composition variability. Clin Endoc Metab. 2001;86:4434-9
6. Chen Y, Rennie D, Cormier Y, Dosman J. Association between Obesity  and  Atopy  in  Adults.  Int  Arch  Allergy  Immunol. 2010;153:372-7.
7. Visness CM, Kaufman JS, Liu, London SJ, Daniels JL, Yeatts B, Siega-Riz  M.Association  of  obesity  with  age  and  allergy symptoms in children and adolescents: results from NHANES 20052006. J Allergy Clin Immunol. 2009;123:11639
8. Marreiro  D,Fisberg  M,Cozzolino  S.Zinc  Nutritional  Status  in Obesitas Children and Adolescents. Biological Trace Element Reseach. 2002;107-22
9. Barlow  SE,  The  Expert  Commitee.  Expert  committee recommendation  regarding  the  prevention,  assessment,  and treatment of child and adolescent overweight and obesitasity: summary report. Pediatrics. 2007;120:S164-92.
10. Matarese G, Moschos S, Mantzoros CS. Leptin in immunology.J Immunol. 2005;174:3137-42.
11. Yiannakouris N, Yannakoulia M, Melistas L, Chan JL, Klismis- Zacas D, Mantzoros CS.The Q223R polymorphism of the leptin receptor  gene  is  significantly  associated  with  obesity  and predicts  a  small  percentage  of  body  weight  and  body composition variability. Clin Endoc Metab. 2001;86:4434-9.
12. Kay  AB.  Allergy  and  allergic  diseases.  N  Engl  J  Med. 2001;344:30-7
13. Viera VJ, Ronan AM, Windt MR, Tagliaferro AR.Elevated atopy in healthy obesitas women.Am J Clin Nutr. 2005;82:504-9
14. Tascilar  ME,  Ozgen  IT,  Abaci  A,  Serdar  M,  Aykut  O.  Trace element  in  obesitas  Turkish  children.  Biol  Trace  Elem  Res.
2011;143:188-195
15. Marreiro  D,Fisberg  M,Cozzolino  S.Zinc  Nutritional  Status  in Obesitas Children and Adolescents. Biological Trace Element Reseach. 2002;107-22
16. Maret  W,  Sandstead  HH.  Zinc  Requirements  And  The  Risks And Benefits Of Zinc Supplementation. J Trace Elem Med Biol. 2006;20:3-18.
17. Chen MD, Song YM, Lin PY.Zinc may be a mediator of leptin production in humans.Life Science. 2000; 66:2143-9.
18. Morgan et al. Correlation between zinc and immunoglobulin E.Journal of Inflammation 2011, 8:36