http://e-journal.unair.ac.id/javest

## Study of Laboratory Diagnosis of Colibasilosis Infection In Local Hen In Surabaya
Case Study

## Kajian Diagnosis Laboratorium Infeksi Kolibasilosis Pada Ayam Lokal di Surabaya
* Laboratory of Pathology and Histology, Faculty of Veterinary Medicine, Wijaya Kusuma University, Surabaya-Indonesia

## ABSTRACT

## ARTICLE INFO
Received: 3 January 2023 Revised: 17 February 2023 Accepted: 3 April 2023
Online: 30 April 2023
On November 18, 2022, euthanasia and hen necropsy were conducted (protocol number A-164) in the veterinary pathology laboratory, Faculty of Veterinary Medicine, Wijaya Kusuma University Surabaya. The hen belongs to a local farmer located at Sawahan, Surabaya. Based on the anamnesis, it is known that the hen was four months old and weighed 1.4 kg. The population consists of eight birds, and one of them was sick, never treated or vaccinated, in a cage made of bamboo, corn fodder, rice bran, and drinking water from tap water. Clinical symptoms show a decreased appetite for the last day, watery eyes, runny nose, lethargy, and diarrhea with feces green mixed with white colors. The initial diagnosis of the chicken was infected with Salmonella sp. with a differential diagnosis of Escherichia coli .
To
diagnose disease in local hen.
This study used a pathological examination, parasitological examination, microbiological isolation, and clinical pathology to diagnose.
The results of the anatomic pathology examination showed that the chickens had hemorrhagic tracheitis, hemorrhagic necrot- ic pneumonia, hemorrhagic necrotic enteritis, hemorrhagic necrotic hepatitis, and hemorrhage in the proventriculus. Parasite identification was found in Raillietina sp. and Ornithonyssus sylviarum . Isolation of bacteria was found in Escherichia coli from the duodenum organ. The chickens had hypoproteinemia, poikilo- cytosis teardrop and rouleaux, leukocytosis with heterophilia, and monocytosis.
Based on the examination associated with the results of anamnesis and examination of clinical symptoms, the chickens were diagnosed with Escherichia coli infection together with Raillietina sp. and Ornithonyssus sylviarum infestations

## ABSTRAK
Pada tanggal 18 November 2022 di laboratorium patologi Universitas Wijaya Kusuma Surabaya telah dilakukan euthanasia dan nekropsi ayam dengan nomor protokol A-164 milik peternak Sawahan, Surabaya. Berdasarkan anamnesa diketahui ayam berjenis kelamin betina dengan umur 4 bulan, serta memiliki berat badan 1,4 kg. Ayam tersebut dipelihara dengan populasi delapan ekor, dengan 1 ekor diantaranya sakit. Ayam tersebut belum pernah diobati dan vaksinasi sebelumnya. Kandang pemeliharaan terbuat dari bambu¸ pakan berupa jagung, dedak, air minum air PDAM. Gejala klinis menunjukkan nafsu makan berkurang satu hari terakhir, mata berair, hidung berair, lesu, diare dengan feses berwarna hijau dan putih. Diagnosa awal ayam tersebut terinfeksi Salmonella sp. dengan diagnosa banding Escherichia coli. Untuk mendiagnosis penyakit pada ayam lokal.
Pada studi kasus ini menggunakan pemer- iksaan patologi, parasitologi, isolasi bakteri dan patologi klinik.
Pemeriksaan patologi anatomi menun- jukkan ayam mengalami tracheitis hemoragika, pneumonia nekrotik hemoragika, enteritis nekrotik hemor- agika, hepatitis nekrotik hemoragika, dan hemoragi pada proventrikulus. Identifikasi parasit ditemukan cacing Raillietina sp., dan tungau Ornithonyssus sylviarum . Pada isolasi bakteri ditemukan Escherichia coli dari duodenum. Ayam juga mengalami hipoproteinemia, poikilocytosis tear drop dan rouleaux, leukositosis dengan heterofilia, dan monositosis.
Berdasarkan hasil pemeriksaan yang dihubungkan dengan hasil anamnesa serta pemeriksaan gejala klinik ayam didiagnosa menderita Infeksi Escherichia coli dan Infestasi cacing Raillietina sp. serta tungau Ornithonyssus sylviarum .
Keywords: Diagnosis, Anamnesa, Local hen, Colibacilosis
Kata kunci: Diagnosis, Anamnesis, Ayam Local, Kolibasilosis
* Correspondence: Rondius Solfaine E-mail: rondius@uwks.ac.id
Cite This Article:
   ­

## Rondius Solfaine  , Indra Rahmawati  , Kurnia Desiandura  , Yuriska
Hasil anamnesa yang dilakukan, diketahui ayam yang dinekropsi berjenis kelamin betina dengan umur 4 bulan, serta memiliki berat badan 1,4 kg. Ayam tersebut dipelihara dengan populasi delapan ekor, dengan 1 ekor diantaranya sakit. Ayam tersebut belum pernah diobati dan vaksinasi sebelumnya. Kandang pemeliharaan terbuat dari bambu¸

## PENDAHULUAN
Pada tanggal 18 November 2022 di laboratorium patologi Universitas Wijaya Kusuma Surabaya telah melakukan nekropsi ayam dengan nomor protokol A-164 milik peternak Sawahan, Surabaya. Gejala klinis menunjukkan nafsu makan berkurang satu hari terakhir, mata berair, hidung berair, lesu, diare dengan feses berwarna hijau dan putih. Diagnosa awal ayam tersebut terinfeksi Salmonella sp. dengan diagnosa banding Escherichia coli. Ayam kampung merupakan salah satu ternak unggas yang sangat berperan dalam meningkat- kan ketahanan pangan nasional yaitu sebagai sumber gizi masyarakat khususnya sebagai sumber protein hewani baik dari telur maupun dagingnya (Astuti, 2012) . Penyakit bakteri- al yang sering menyerang unggas terutama pada ayam diantaranya adalah Coryza (Snot), Pullorum (berak kapur), Kolera (berak hijau), CRD, dan Kolibasilosis. Kolibasilosis pada ayam adalah penyakit lokal atau sistemik yang disebab- kan oleh bakteri Escherichia coli . Masalah yang ditimbulkan berupa infeksi akut dengan kematian yang tiba-tiba. Infeksi dapat terjadi pada saluran pernapasan, septicemia, atau enteritis karena infeksi pada gastrointestinal.
Escherichia coli umumnya merupakan flora normal yang berada pada usus halus (Towoliu, 2013) . Escherichia coli tersebut akan menjadi patogen apabila perkembangannya melebihi batas normal. Dampak yang dapat terjadi antara lain adalah: turunnya berat badan dan kondisi tubuh, terhambat- nya pertumbuhan, serta menyebabkan kematian (Darsana e t al. 2012 ; Wresdiyati et al. 2013) menjelaskan dalam peneliti- annya bahwa Escherichia coli dapat menyebabkan kerusakan vili duodenum. Semakin besar volume infeksi Escherichia coli maka derajat keparahan kerusakan mukosa usus secara fisik juga semakin meningkat dan menunjukkan kondisi patologis yang semakin parah (Andiarsa et al. 2014) .
Pengendalian penyakit ayam merupakan salah satu kunci keberhasilan dalam usaha budidaya agar tidak mengakibat- kan kerugian bagi peternak ayam. Untuk pengendalian penyakit ayam perlu dilakukan peninjauan lebih lanjut mengenai agen-agen penyebab penyakit pada ayam. Hal ini dapat dilakukan melalui pendalaman uji diagnosa laboratorik secara patologi anatomi, mikrobiologi, parasitologi dan patologi klinis pada ayam yang terserang penyakit. Tujuan dari identifikasi adalah untuk menganalisis penyebab penya- kit pada ayam dengan melakukan pemeriksaan di laboratori- um. Hasil dari pemeriksaan ini diharapkan dapat memberi- kan informasi pada peternak atau pemilik ayam kampung dan segala pihak yang terlibat mengenai penyakit pada ayam kampung yang dibudidayakan, sehingga dapat dilakukan tindakan pencegahan, penanganan dan pengobatan.

## ANALISA KASUS
Pemeriksaan makroskopis pada organ paru-paru ayam A-146 terdapat adanya hemoragi, salah satu lobus paru membesar, serta ada perubahan warna pucat merah muda. Pemeriksaan mikroskopis ditemukan perubahan berupa ruptur jaringan, ruptur septa parabronchus, hemoragi, infiltrasi sel radang, emfisema parabronchus, serta atelektasis parabronchus.
Ayam yang terserang Escherichia coli pada organ paru-paru mengalami perubahan berupa hemoragi, infiltrasi sel radang, dan piknosis (Yanti et al. 2019) . Paru-paru unggas yang terinfeksi Escherichia coli akan terlihat adanya hemoragi. Hemoragi adalah keluarnya darah dari pembuluh darah yang secara patologis ditandai adanya sel darah merah diluar pembuluh darah atau dalam jaringan (Sudira et al. 2019) . Pendarahan disebabkan oleh efek enterotoksin Escherichia coli yang menyebabkan peningkatan permeabilitas pembuluh darah. Penyebab lesi pada histologi paru, dalam situasi ini darah dapat tersumbat di paru-paru. Jika keadaan ini berlangsung lama maka akan mengakibatkan perdarahan (Yanti et al. 2019) .
pakan berupa jagung, dedak, air minum air PDAM. Gejala klinis menunjukkan nafsu makan berkurang satu hari terakhir, mata berair, hidung berair, lesu, diare dengan feses berwarna hijau dan putih. Proses pemeriksaan laboratorium yang dilakukan terdiri dari pemeriksaan patologi, mikrobi- ologi, parasitologi dan patologi klinik. Pencatatan berupa pendataan hewan dan menduga penyakit berdasarkan data signalemen, anamnesa, dan gejala klinis yang teramati. Koleksi darah dari vena brachialis dan dimasukkan pada tabung EDTA, kemudian dilakukan koleksi ektoparasit dan feses. Dislokasi tulang serviks dilakukan sebelum ayam dinekropsi.
Pemeriksaan patologi untuk analisis perubahan makroskopis organ dilakukan dengan diagnosa morfologisnya dan dilan- jutkan pembuatan preparat histopatologi. Pemeriksaan mikrobiologi dilakukan secara makroskopis dengan kultur bakteri, dan mikroskopis dengan pewarnaan gram, dan uji biokimia. Sampel yang digunakan adalah gerusan organ duodenum yang ditanam pada media Salmonella Shigella Agar (SSA). Pewarnaan dilakukan dengan menambahkan kristal violet, lugol, alkohol aceton 95% dan safranin (counter stain) . Kemudian dilanjutkan dengan pemeriksaaan uji biokimia meliputi uji Triple Sugar Iron Agar (TSIA), Methyl Red (MR) dan Voges Proskauer (VP). Interpretasi diawali dengan pemberian reagen Kovac pada uji SIM, reagen Methyl Red pada uji MR dan reagen alpha naftol dan KOH 10% pada uji VP. Pemeriksan parasitologi meliputi hapusan darah, pemeriksaan feses metode natif, identifikasi ektoparasit dan endoparasit. Pewarnaan endoparasit dengan larutan AFA (Alcohol Formalin Acid) serta alkohol bertingkat (50%, 70%, 80%, 90%). Pemeriksaan patologi klinik dilakukan dengan perhitungan differential counting pada hapusan darah. Pewarnaan ulas darah menggunakan metilen dan eosin.

## PEMBAHASAN
Pada pemeriksaan histopatologi juga ditemukan adanya emfisema. Emfisema didefinisikan menjadi pelebaran abnor- mal menetap ruang udara (alveoli distal terhadap bronkiolus terminal) disertai kerusakan dindingnya tanpa fibrosis yang nyata. Pelebaran menetap disertai kerusakan alveoli dapat mengurangi aliran udara ekspirasi maksimal akibat daya rekoil elastik paru berkurang (Jonathan et al. 2019) . Organ-organ yang mengalami infilterasi sel radang terdapat pada saluran pencernaan, hepar dan paru-paru yang merupakan organ yang awal kontak dengan agen infeksi bakteri Escherichia coli sehingga sebagai bentuk respons pertahanan tubuh sel-sel limfosit, heterofil dan makrofag melakukan infiltrasi ke dalam jaringan organ-organ tersebut (Suryani et al. 2014).
Journal of Applied Veterinary Science and Technology: 04(1). 2023.33-40 10.20473/javest.V4.I1.2023.33-40
Pada pemeriksaan makroskopis pada organ hepar ayam A-146 terdapat adanya lesi kekuningan (gambar 1). Pada pemeriksaan mikroskopis preparat histopatologi organ hepar ditemukan adanya perubahan berupa hemoragi, degenerasi melemak, infiltrasi sel radang, piknosis, karioreksis, karioli- sis, dan ruptur jaringan. Ayam yang terserang Escherichia coli pada organ hepar mengalami perubahan berupa hemoragi, infiltrasi sel radang, serta nekrosis. Pada pemeriksaan histo- patologi hepar ayam A-146 ditemukan adanya piknosis, karioreksis, serta kariolisis (gambar 2). Menurut Surasa et al.
(2014) kerusakan sel hati berupa nekrosis ditandai dengan perubahan inti sel (inti piknotik, kariolisis, karioreksis), dan pelebaran sinusoid (gambar 2).
Hepar adalah organ yang berperan dalam metabolisme berbagai macam nutrient yang diserap dari saluran cerna. Hepar juga berperan optimal dalam menampung, mengubah dan mengeluarkan substansi toksik. Hal ini bisa dikarenakan hepar sebagai organ yang berpotensi terkena jejas bahan kimia, toksin dan bahan lain karena hepar merupakan organ pertama setelah saluran cerna yang terpapar oleh agen ini (Suryani et al. 2014) .
Infeksi yang masuk ke dalam darah dapat mengakibatkan terjadinya nekrosis. Beberapa jenis kerusakan hati yang dapat terjadi akibat infeksi Escherichia coli adalah nekrosis hepatos- it, degenerasi hepatosit dan portal inflamasi. Nekrosis yang merupakan keadaan yang diawali oleh kerusakan sel, terjadi gangguan integritas membran plasma, keluarnya isi sel dan
Pemeriksaan Makroskopis Hepar
Pemeriksaan makroskopis pada organ paru-paru ayam A-146 terdapat adanya hemoragi, salah satu lobus paru membesar, serta ada perubahan warna pucat merah muda. Pemeriksaan mikroskopis ditemukan perubahan berupa ruptur jaringan, ruptur septa parabronchus, hemoragi, infiltrasi sel radang, emfisema parabronchus, serta atelektasis parabronchus.
Ayam yang terserang Escherichia coli pada organ paru-paru mengalami perubahan berupa hemoragi, infiltrasi sel radang, dan piknosis (Yanti et al. 2019) . Paru-paru unggas yang terinfeksi Escherichia coli akan terlihat adanya hemoragi. Hemoragi adalah keluarnya darah dari pembuluh darah yang secara patologis ditandai adanya sel darah merah diluar pembuluh darah atau dalam jaringan (Sudira et al. 2019) . Pendarahan disebabkan oleh efek enterotoksin Escherichia coli yang menyebabkan peningkatan permeabilitas pembuluh darah. Penyebab lesi pada histologi paru, dalam situasi ini darah dapat tersumbat di paru-paru. Jika keadaan ini berlangsung lama maka akan mengakibatkan perdarahan (Yanti et al. 2019) .
Pada pemeriksaan makroskopis pada organ duodenum ayam A-146 (gambar 1), terdapat adanya hemoragi ekimosa. Pada pemeriksaan mikroskopis preparat histopatologi duodenum terdapat perubahan berupa ruptur jaringan pada musculus eksterna dan epitel vili, hemoragi, infiltrasi sel radang, pikno- sis, karioreksis, serta kariolisis (gambar 2). Ayam yang terserang Escherichia coli pada duodenumnya mengalami perubahan berupa kerusakan vili, atrofi vili, serta nekrosis (Daud et al. 2019) . Hewan yang terinfeksi Escherichia coli mengalami perubahan berupa piknosis pada duodenumnya (Purnama et al. 2014) .
Hemoragi dapat disebabkan karena adanya proses inflamasi. Pelebaran sel endotel pada proses inflamasi akan meningkat- kan volume darah dalam pembuluh. Volume darah yang meningkat di jaringan dapat menimbulkan perdarahan (Baratawidjaja and Rengganis, 2012) . Adanya lesi histopa- tologi berupa peradangan dan perdarahan atau hemoragi pada usus disebabkan karena Escherichia coli menempel pada usus, menyebabkan perlekatan dan proliferasi mengeluarkan enterotoksin (Meha et al. 2016) .
Pada pemeriksaan histopatologi juga ditemukan adanya emfisema. Emfisema didefinisikan menjadi pelebaran abnor- mal menetap ruang udara (alveoli distal terhadap bronkiolus terminal) disertai kerusakan dindingnya tanpa fibrosis yang nyata. Pelebaran menetap disertai kerusakan alveoli dapat mengurangi aliran udara ekspirasi maksimal akibat daya rekoil elastik paru berkurang (Jonathan et al. 2019) . Organ-organ yang mengalami infilterasi sel radang terdapat pada saluran pencernaan, hepar dan paru-paru yang merupakan organ yang awal kontak dengan agen infeksi bakteri Escherichia coli sehingga sebagai bentuk respons pertahanan tubuh sel-sel limfosit, heterofil dan makrofag melakukan infiltrasi ke dalam jaringan organ-organ tersebut (Suryani et al. 2014).

## Pemeriksaan Makroskopis Duodenum

## Pemeriksaan Makroskopis Colon
Pada pemeriksaan makroskopis pada organ colon ayam A-146 (gambar 1) terdapat adanya hemoragi ptekie. Pemerik- saan mikroskopis pada preparat histopat organ colon menun- jukkan adanya perubahan berupa ruptur jaringan pada epitel vili, hemoragi, infiltrasi sel radang, piknosis, karioreksis, serta kariolisis (gambar 2). Hewan ayam yang terserang Escherichia coli memiliki perubahan pada colon berupa adanya hemora- gi, erosi vili, serta infiltrasi sel radang (Indra et al. 2022) .
Hewan yang terinfeksi Escherichia coli ditemukan adanya perubahan histopatologi berupa nekrosis (Meha et al. 2016) . Nekrosis merupakan perubahan sel yang mengarah kepada kematian sel, yang diakibatkan oleh zat toksik yang masuk bersamaan dengan aliran darah menuju organ. Ciri dari
Gambar 1. Patologi anatomi pada organ ayam A-146 yang terduga terinfeksi Escherichia coli, pada paru-paru terlihat adanya hemoragi ekimosa pada lobus dexter (panah kuning), lobus sinister pulmo membesar (panah hitam), serta ada perubahan warna pucat merah muda (panah biru), serta nekrosis (panah kuning) (A). Pada organ hepar ayam terlihat adanya lesi kekuningan yang bersifat multifocal (B).Pada organ duodenum ayam terlihat adanya hemoragi ekimosa pada mukosa duodenum (C). Pada organ colon ayam terlihat adanya hemoragi ptekie pada mukosa colon (D).
timbulnya respon inflamasi. Respon ini meningkatkan proses penyakit dan mengakibatkan bertambahnya jumlah sel yang mati. Kerusakan hepar dapat bersifat irreversible dan reversible, perubahan degenerasi merupakan perubahan yang bersifat sementara atau reversibel, degenerasi yang terjadi secara terus menerus dapat mengakibatkan kematian
nekrosis atau kematian sel dijumpai adanya perubahan pada organel, pembengkakan sel dengan hilangnya membran plasma, dan perubahan inti disertai dengan hipokromik. Nekrosis salah satunya disebabkan oleh adanya zat kimia yang bersifat toksin (Sudira et al. 2019) .
Journal of Applied Veterinary Science and Technology: 04(1). 2023.33-40 10.20473/javest.V4.I1.2023.33-40
Pada pemeriksaan makroskopis pada organ colon ayam A-146 (gambar 1) terdapat adanya hemoragi ptekie. Pemerik- saan mikroskopis pada preparat histopat organ colon menun- jukkan adanya perubahan berupa ruptur jaringan pada epitel vili, hemoragi, infiltrasi sel radang, piknosis, karioreksis, serta kariolisis (gambar 2). Hewan ayam yang terserang Escherichia coli memiliki perubahan pada colon berupa adanya hemora- gi, erosi vili, serta infiltrasi sel radang (Indra et al. 2022) .
Hewan yang terinfeksi Escherichia coli ditemukan adanya perubahan histopatologi berupa nekrosis (Meha et al. 2016) . Nekrosis merupakan perubahan sel yang mengarah kepada kematian sel, yang diakibatkan oleh zat toksik yang masuk bersamaan dengan aliran darah menuju organ. Ciri dari
nekrosis atau kematian sel dijumpai adanya perubahan pada organel, pembengkakan sel dengan hilangnya membran plasma, dan perubahan inti disertai dengan hipokromik. Nekrosis salah satunya disebabkan oleh adanya zat kimia yang bersifat toksin (Sudira et al. 2019) .

## Pemeriksaan Parasitologi
Hasil pemeriksaan parasitologi ayam yang dilakukan pemer- iksaan terinfeksi parasit cacing Raillietina sp. dan Tungau Ornithonyssus sylviarum (gambar 3).

## Pemeriksaan Isolasi Bakteri
Hasil penanaman bakteri tumbuh koloni terpisah berbentuk bulat, berukuran sedang, dan permukaan mengkilat dengan pigmentasi warna merah muda (pink) (gambar 3). Pada media SSA Salmonella sp. akan tumbuh membentuk koloni transparan dengan bintik hitam (Fatiqin et al. 2019) . Esche- richia coli juga dapat tumbuh pada media SSA dengan koloni berwarna merah muda karena mampu memfermentasi lakto- sa. Namun tidak menghasilkan gas H 2 S sehingga tidak mem- bentuk endapan hitam (Aini et al. 2021) . Hasil pemeriksaan menunjukkan gram negatif berwarna merah berbentuk cocobacil dengan susunan menyebar. Menurut Ummamie et Gambar 3. Hasil pembiakan bakteri pada media SSA (Salmonella Shigella Agar) (A) dan hasil pemeriksaan mikroskopis dengan pewarnaan gram (B).
al. ( 2017) Escherichia coli merupakan gram negatif berwarna pink atau merah, berbentuk coccobacil atau batang pendek, dan  kedua  ujungnya membulat.
Uji TSIA menunjukkan hasil asam, gas (+), H 2 S (-). Bagian slat (lereng) berwarna kuning artinya bakteri memfermentasi sukrosa dan laktosa, dan bagian butt (dasar) berwarna kuning artinya bakteri memfermentasi glukosa (gambar 4). Warna kuning menunjukan reaksi asam (Kosasi et al. 2019) . Escherichia coli menghasilkan produk akhir bersifat asam kuat (Fatiqin et al. 2019) .
Uji Simmons Citrate Agar menunjukkan hasil negatif ditandai dengan tidak adanya perubahan warna pada media menjadi biru (tetap hijau) (gambar 5), karena bakteri tidak menggu- nakan sitrat sebagai sumber carbon. Bakteri Escherichia coli menunjukan hasil negatif tidak dapat menggunakan sitrat sebagai sumber karbon sehingga pada media tetap berwarna hijau (Ummamie et al. 2017) . Uji Urease menunjukkan hasil negatif (gambar 5). Tidak terdapat perubahan warna pada media menjadi merah jambu baik bagian slant maupun bagian butt , karena bakteri tidak memecah urea menjadi amonia. Menurut Prasiddhanti and Wahyuni, (2015) , Escherichia coli didapati hasil negatif pada uji urease, hal ini dikarenakan Escherichia coli tidak memiliki enzim urease.
Uji SIM menunjukkan hasil Sulfid (-), Indol (+), Motil (+) setelah diteteskan reagen Kovac (gambar 5). Bakteri yang mempunyai enzim triptofanase akan menghidrolisis asam amino triptofan yang memiliki gugus samping indol dalam media SIM. Indol dan reagen kovach akan bereaksi meng- hasilkan senyawa aminobenzaldehid dan membentuk warna merah pada permukaan media SIM (Mahon et al. 2015) .
Escherichia coli mampu memfermentasi asam amino trypto- phan menjadi asam piruvat, amonia, dan memproduksi indol yang dapat dilihat dari terbentuk cincin berwarna merah.
Menurut (Widiyastutik et al. 2013) Escherichia coli pada media SIM menunjukan hasil motil.
Uji MR menunjukkan hasil positif (+) (gambar 4). Terdapat perubahan warna menjadi merah setelah diteteskan dengan reagen Methyl Red 1%. Beberapa bakteri dapat memfermen- tasikan glukosa dan menghasilkan produk asam sehingga menurunkan pH medianya hingga <5,0. Pada akhir pengamatan indikator Methyl Red akan menunjukan peruba- han pH menjadi asam dan media menjadi berwarna merah apabila hasil uji menunjukan hasil positif ( Mahon et al.
2015) . Escherichia coli  menunjukkan hasil positif pada uji MR (Ummamie et al. 2017) . Uji VP menunjukkan hasil negatif, tidak ada perubahan warna menjadi merah setelah diberi reagen Alpha naphtol 5% dan KOH 40% (Gambar 5). Escherichia coli menunjukkan hasil negati pada uji VP
(Ummamie et al. 2017) . Hasil negatif karena Escherichia coli memfermentasi karbohidrat menjadi produk asam sehingga hasil yang terlihat berwarna kuning (Rahayu and Gumilar,
2017) . Berdasarkan hasil pemeriksaan mikrobiologi dari
Gambar 2. Histopatologi pada ayam A-146 yang terduga terinfeksi Escherichia coli perbesaran 400x dengan pewarnaan H.E. (I) Pada organ pulmo terdapat perubahan ruptur septa parabronkhus (A), infiltrasi sel radang septa parabronchus (B), hemoragi (C),  emfisema parabronkhus (D), dan atelektasis penyempitan parabronkhus (E). (II) Pada organ hepar terdapat perubahankariolisis sel hepatosit (A), karioreksis sel hepatosit (B), piknosis sel hepatosit (C), ruptur jaringan (D), degenerasi melemak sel hepatosit (E), hemoragi (F), infiltrasi sel radang (G). (III) Pada organ duodenum terdapat perubahan  ruptur jaringan pada epitel vili serta sel goblet (A), hemoragi vili (B), infiltrasi sel radang pada vili (C), piknosis enterosit (D), karioreksis enterosit (E), serta kariolisis enterosit (F). (IV) Pada organ colon terdapat perubahan ruptur jaringan pada epitel vili (A), piknosis enterosit (B), hemoragi pada vili (C), infiltrasi sel radang pada vili (E), kariolisis enterosit (E), karioreksis enterosit (F).
sampel duodenum pada ayam kampung dengan nomor protokol A-146 terisolasi dan teridentifikasi Escherichia coli .
Hasil penanaman bakteri tumbuh koloni terpisah berbentuk bulat, berukuran sedang, dan permukaan mengkilat dengan pigmentasi warna merah muda (pink) (gambar 3). Pada media SSA Salmonella sp. akan tumbuh membentuk koloni transparan dengan bintik hitam (Fatiqin et al. 2019) . Esche- richia coli juga dapat tumbuh pada media SSA dengan koloni berwarna merah muda karena mampu memfermentasi lakto- sa. Namun tidak menghasilkan gas H 2 S sehingga tidak mem- bentuk endapan hitam (Aini et al. 2021) . Hasil pemeriksaan menunjukkan gram negatif berwarna merah berbentuk cocobacil dengan susunan menyebar. Menurut Ummamie et al. ( 2017) Escherichia coli merupakan gram negatif berwarna pink atau merah, berbentuk coccobacil atau batang pendek, dan  kedua  ujungnya membulat.
Uji TSIA menunjukkan hasil asam, gas (+), H 2 S (-). Bagian slat (lereng) berwarna kuning artinya bakteri memfermentasi sukrosa dan laktosa, dan bagian butt (dasar) berwarna kuning artinya bakteri memfermentasi glukosa (gambar 4). Warna kuning menunjukan reaksi asam (Kosasi et al. 2019) .
Escherichia coli menghasilkan produk akhir bersifat asam kuat (Fatiqin et al. 2019) .
Uji Simmons Citrate Agar menunjukkan hasil negatif ditandai dengan tidak adanya perubahan warna pada media menjadi biru (tetap hijau) (gambar 5), karena bakteri tidak menggu- nakan sitrat sebagai sumber carbon. Bakteri Escherichia coli menunjukan hasil negatif tidak dapat menggunakan sitrat sebagai sumber karbon sehingga pada media tetap berwarna hijau (Ummamie et al. 2017) .
Uji Urease menunjukkan hasil negatif (gambar 5). Tidak terdapat perubahan warna pada media menjadi merah jambu baik bagian slant maupun bagian butt , karena bakteri tidak memecah urea menjadi amonia. Menurut Prasiddhanti and Wahyuni, (2015) , Escherichia coli didapati hasil negatif pada uji urease, hal ini dikarenakan Escherichia coli tidak memiliki enzim urease.
Uji SIM menunjukkan hasil Sulfid (-), Indol (+), Motil (+) setelah diteteskan reagen Kovac (gambar 5). Bakteri yang mempunyai enzim triptofanase akan menghidrolisis asam amino triptofan yang memiliki gugus samping indol dalam media SIM. Indol dan reagen kovach akan bereaksi meng- hasilkan senyawa aminobenzaldehid dan membentuk warna merah pada permukaan media SIM (Mahon et al. 2015) . Escherichia coli mampu memfermentasi asam amino trypto- phan menjadi asam piruvat, amonia, dan memproduksi indol yang dapat dilihat dari terbentuk cincin berwarna merah. Menurut (Widiyastutik et al. 2013) Escherichia coli pada media SIM menunjukan hasil motil.
Uji MR menunjukkan hasil positif (+) (gambar 4). Terdapat perubahan warna menjadi merah setelah diteteskan dengan reagen Methyl Red 1%. Beberapa bakteri dapat memfermen- tasikan glukosa dan menghasilkan produk asam sehingga menurunkan pH medianya hingga <5,0. Pada akhir pengamatan indikator Methyl Red akan menunjukan peruba- han pH menjadi asam dan media menjadi berwarna merah apabila hasil uji menunjukan hasil positif ( Mahon et al.
2015) . Escherichia coli  menunjukkan hasil positif pada uji
MR (Ummamie et al. 2017) . Uji VP menunjukkan hasil negatif, tidak ada perubahan warna menjadi merah setelah diberi reagen Alpha naphtol 5% dan KOH 40% (Gambar 5). Escherichia coli menunjukkan hasil negati pada uji VP (Ummamie et al. 2017) . Hasil negatif karena Escherichia coli memfermentasi karbohidrat menjadi produk asam sehingga hasil yang terlihat berwarna kuning (Rahayu and Gumilar,
2017) . Berdasarkan hasil pemeriksaan mikrobiologi dari
Gambar 5. Uji Biokimia terdiri atas  uji TSIA (A), uji SCA (B), Uji Urease (C), Uji  SIM (D), Uji MR (E) dan Uji VP (F)

## Pemeriksaan Komponen Darah
Berdasarkan pemeriksaan, ayam dengan kode protokol A – 146 menunjukkan kondisi Hipoproteinemia, Leukositosis, Hetero- filia, Monositosis. Pada pemeriksaan ulas darah atau hematolo- gi terdapat kelainan abnormalitas eritrosit poikilositik seperti tear drop, serta adanya rouleaux (gambar 5). Kelainan eritrosit pada ayam A-146 terdapat kelainan bentuk poikilocytosis dimana istilah untuk sel darah merah yang berbentuk tidak normal dalam darah. Kelainan ini biasa disebabkan bukan karena agen infeksi, tetapi oleh faktor lain misalnya keracunan timbal, kualitas pakan yang rendah terutama kandungan protein dan mineral seperti zat besi (Sari et al. 2021) . Pada ayam A-146 terdapat kelainan tersebut kemungkinan karena kurangnya kualitas pakan yang mengandung protein mineral dan zat besi.
Jumlah leukosit pada Ayam A-146 mengalami peningkatan. Hasil perhitungan leukosit pada ayam A-146 menunjukkan nilai 36,45 x103/L, sedangkan normalnya 12-30 x103/L (Odun- itan-Wayas et al. 2018) . Menurut (Gita and Mardiana, 2019) kekurangan leukosit disebut leukopenia dan kelebihan jumlah leukosit dari kadar normal disebut leukositosis. Peningkatan jumlah leukosit menunjukkan adanya proses infeksi atau radang akut. Terjadinya leukositosis terutama disebabkan oleh peningkatan jumlah neutrofil (neutrofillia) dan juga monosit (monositosis).
Leukosit merupakan unit aktif dari sel darah yang berperan dalam sistem pertahanan tubuh dari serangan penyakit yang dapat digunakan sebagai indikator tingkat kesehatan dan status fisiologis. Fungsi leukosit sendiri yaitu menjaga tubuh
Gambar 6. Tampak abnormalitas dari sel darah merah berupa Poikilo- cytosis, Rouleaux (A),  dan Teardrop (B).
sampel duodenum pada ayam kampung dengan nomor protokol A-146 terisolasi dan teridentifikasi Escherichia coli .
dari patogen dengan cara fagositosis dan menghasilkan antibodi. Faktor yang menentukan jumlah leukosit antara lain aktivitas biologis, kondisi lingkungan, umur dan pakan. Peningkatan dan penurunan leukosit dalam darah merupa- kan mekanisme respon tubuh terhadap patogen yang menyerang peningkatan jumlah leukosit menggambarkan adanya penyakit dalam tubuh atau adanya kemampuan pertahanan tubuh (Nurhajah et al. 2016) . Hal ini dibuktikan dengan differential count dengan adanya peningkatan monosit dan heterofil. Yang mana heterofil adalah bagian dari leukosit yang termasuk kedalam kelompok granulosit dan berada pada garis depan (first line) yang berfungsi sebagai pertahanan awal terhadap penyakit yang dapat mengakibat- kan infeksi atau peradangan. Sistem kerja heterofil yaitu menghancurkan patogen melalui jalur oksigen independen (lisosom, enzim proteolitik dan protein kationik) dan oksigen dependen. Selain itu, heterofil mengandung zat antimikroba yang berhubungan dengan resistensi penyakit pada tubuh dan dipengaruhi oleh kontrol genetik (Nurhajah et al. 2016) .
Jumlah heterofil pada Ayam A-146 mengalami peningkatan. Hasil perhitungan heterofil pada ayam A-146 menunjukkan nilai 14,21 sel/mm 3 , sedangkan normalnya 3-6 sel/mm 3 (Sutrisno et al. 2019) . Hetrofilia sering diamati dalam hubun- gannya dengan kerusakan jaringan yang disebabkan oleh peradangan atau infeksi bakteri termasuk Escherichia coli. Heterofil adalah bagian dari leukosit yang termasuk kedalam kelompok granulosit dan berada pada garis depan (first line) yang berfungsi sebagai pertahanan awal terhadap penyakit yang dapat mengakibatkan infeksi atau peradangan. Heterofil mempunyai aktivitas amuboid dan sifat fagositosis untuk mempertahankan tubuh melawan infeksi benda asing seperti bakteri dan partikel lain (Saputra et al. 2016) . Hasil ini sejalan dengan penelitian (Suryani et al. 2014) bahwa unggas yang terinfeksi Escherichia coli akan mengalami peningkatan heterofil, karena heterofil akan muncul dalam jumlah besar pada saat peradangan yang disebabkan mikroorganisme. Peningkatan heterofil menunjukkan adanya aktivitas fagosit- osis terhadap agen infeksi Escherichia coli .
Hasil pemeriksaan monosit pada Ayam A-146 mengalami peningkatan (monositosis). Jumlah heterofil pada Ayam A-146 mengalami peningkatan. Hasil perhitungan heterofil pada ayam A-146 menunjukkan nilai 5,83 sel/mm 3 , sedang- kan normalnya 0-5 sel/mm 3 (Fahreza and Sugiharto, 2020) .
Monosit adalah prekursor makrofag dalam darah sirkulasi. Begitu ada infeksi agen patogen, maka monosit akan segera bermigrasi ke jaringan yang mengalami peradangan, dan berubah menjadi sel makrofag (Ulupi and Ihwantoro, 2017) . Makrofag adalah satu komponen sistem fagosit mononuklear yang berasal dari sumsum tulang kemudian berkembang sebagai monosit di darah. Monosit bermigrasi ke berbagai tempat dan berdiferensiasi menjadi makrofag dan dapat bertahan hidup selama beberapa bulan atau beberapa tahun. Monosit mulai bermigrasi sangat cepat ke dalam ekstravasku- lar jaringan pada saat awal peradangan akut dan dalam 48 jam mereka menjadi sel yang dominan. Makrofag akan segera mengeliminasi berbagai agen yang berbahaya, contohnya mikroba, dan memulai proses perbaikan serta bertanggung-
jawab atas kerusakan jaringan pada peradangan kronik serta membersihkan debris dan kerusakan jaringan pada daerah inflamasi (Harlim, 2018) .

## DAFTAR PUSTAKA
Aini, M., Rahayuni, S., Mardina, V., Quranayati, Q., and Asiah, N., 2021. Bakteri Lactobacillus spp. dan Peranannya Bagi Kehidupan. Jurnal Jeumpa, 8 (2), 614–624. Andiarsa, D., Hidayat, S., Setyaningtyas, D.E., and Sudar- mawan, S., 2014. Gambaran Kerusakan Mukosa Usus
Mencit (Mus musculus) pada Infeksi Escherichia coli.
Jurnal Vektor Penyakit, 8 (2), 53–60.
Astuti, N., 2012. Kinerja Ayam Kampung Dengan Ransum Berbasis Konsentrat Broiler. Jurnal AgriSains, 4 (5), 51–58. Bambang, A.G., Fatimawali, F., and Kojong, N.S., 2014. Anal- isa Cemaran Bakteri Coliform dan Identifikasi E. coli pada Air Isi Ulang dari Depot di Kota Manado. Pharmacon, 3 (3), 325–334.
Baratawidjaja, K.G. and Rengganis, I., 2012. Imunologi
Dasar. 10th ed. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universi- tas Indonesia. Darsana, I.G.O., Besung, I.N.K., and Mahatmi, H., 2012. Potensi Daun Binahong (Anredera Cordifolia (Tenore)
Steenis) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli secara In Vitro. Indonesia Medicus
Veterinus, 1 (3), 337–351.
Solfaine, et.al. 2023. Study of Laboratory Diagnosis of Colibasilosis Infection In Local Hen In Surabaya
Berdasarkan pemeriksaan, ayam dengan kode protokol A – 146 menunjukkan kondisi Hipoproteinemia, Leukositosis, Hetero- filia, Monositosis. Pada pemeriksaan ulas darah atau hematolo- gi terdapat kelainan abnormalitas eritrosit poikilositik seperti tear drop, serta adanya rouleaux (gambar 5). Kelainan eritrosit pada ayam A-146 terdapat kelainan bentuk poikilocytosis dimana istilah untuk sel darah merah yang berbentuk tidak normal dalam darah. Kelainan ini biasa disebabkan bukan karena agen infeksi, tetapi oleh faktor lain misalnya keracunan timbal, kualitas pakan yang rendah terutama kandungan protein dan mineral seperti zat besi (Sari et al. 2021) . Pada ayam A-146 terdapat kelainan tersebut kemungkinan karena kurangnya kualitas pakan yang mengandung protein mineral dan zat besi.
Jumlah leukosit pada Ayam A-146 mengalami peningkatan. Hasil perhitungan leukosit pada ayam A-146 menunjukkan nilai 36,45 x103/L, sedangkan normalnya 12-30 x103/L (Odun- itan-Wayas et al. 2018) . Menurut (Gita and Mardiana, 2019) kekurangan leukosit disebut leukopenia dan kelebihan jumlah leukosit dari kadar normal disebut leukositosis. Peningkatan jumlah leukosit menunjukkan adanya proses infeksi atau radang akut. Terjadinya leukositosis terutama disebabkan oleh peningkatan jumlah neutrofil (neutrofillia) dan juga monosit (monositosis).
Leukosit merupakan unit aktif dari sel darah yang berperan dalam sistem pertahanan tubuh dari serangan penyakit yang dapat digunakan sebagai indikator tingkat kesehatan dan status fisiologis. Fungsi leukosit sendiri yaitu menjaga tubuh

## KESIMPULAN

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada seluruh pihak yang telah berkontribusi pada semua tahap pelaksanaan studi kasus ini.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis  menyatakan  tidak  ada  konflik  kepentingan  dengan pihak-pihak yang terkait dalam pengamatan ini.

## SUMBER PEMBIAYAAN
Kajian ini dilakukan dengan pembiayaan dana riset internal Lembaga Penelitian dan Pengabdian Kepada Masyarakat tahun 2022/2023 Universitas Wijaya Kusuma Surabaya.

## PERSETUJUAN ETIK
Pelaksanaan kegiatan ini tidak memerlukan uji etik.
Daud, M., Yaman, M.A., and Zulfan, Z., 2019. Gambaran Histopatologi dan Populasi Bakteri Asam Laktat pada Duodenum Ayam Pedaging yang Diberi Sinbiotik dan Diinfeksi Escherichia coli. Jurnal Veteriner, 20 (3), 307. Fahreza, R.A. and Sugiharto, S., 2020. Perbandingan Total Leukosit dan Leukosit Diferensial Ayam Broiler Pada Dataran Tinggi dan Rendah. Journal of Animal Research Applied Sciences, 2 (1), 22–28. Fatiqin, A., Novita, R., and Apriani, I., 2019. Pengujian Salmo- nella dengan Menggunakan Media SSA dan E.coli Menggunakan Media EMBA pada Bahan Pangan. Jurnal Indobiosains, 1 (1), 22–29. Gita, C.R.N. and Mardiana, V., 2019. Pemeriksaan Jumlah Leukosit, Laju Endap Darah Dan Bakteri Tahan Asam (Bta) Pada Pasien Penyakit Tuberculosis Paru Di Rsud Langsa. Jurnal Biologica Samudra, 1 (2), 6–15. Harlim, A., 2018. Buku Ajar Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin: Imunologi Inflamasi. 1st ed. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Indonesia. Indra, R., Kardena, I.M., and Suarjana, I.G.K., 2022. Identifi- cation and Pathological Finding of Colisepticemia in Broiler. J urnal Riset Veteriner Indonesia (Journal of The Indonesian Veterinary Research), 6 (1), 23-31. Jonathan, S., Damayanti, T., and Antariksa, B., 2019. Patho- physiology of Emphysema. Jurnal Respirologi Indonesia, 39 (1), 60–69. Kosasi, C., Lolo, W.A., and Sudewi, S., 2019. Isolasi dan Uji Aktivitas Antibakteri dari Bakteri yang Berasosiasi dengan Alga Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh serta Identifikasi secara Biokimia. Pharmacon, 8 (2), 351. Luhung, Y.G.A., Suarjana, I.G.K., and Gelgel, K.T.P., 2017. Sensitivitas Isolat E. coli Patogen dari Organ Ayam Pedaging Terinfeksi Koliseptikemia terhadap Oksitetrasiklin, Ampisilin dan Sulfametoksazol. Buletin Veteriner, 9 (1), 60–66. Mahon, C.R., Lehman, D.C., and Manuselis, G., eds., 2015. Textbook of Diagnostic Microbiology. 5th ed. Maryland Heights, Missouri: Elsevier. Meha, H.K.M., Berata, I.K., and Kardena, I.M., 2016. Derajat Keparahan Patologi Usus Dan Paru Babi Penderita Kolibasilosis. Indonesia Medicus Veterinus; 5 (1), 13-22. Nurhajah, A., Purnomoadi, A., and Harjanti, D.W., 2016. Hubungan Antara Konsumsi Serat Kasar dan Lemak Kasar dengan Kadar Total Solid dan Lemak Susu Kambing Peranakan Ettawa. Jurnal Agripet, 16 (1), 1-8. Odunitan-Wayas, F., Kolanisi, U., and Chimonyo, M., 2018. Haematological and Serum Biochemical Responses of Ovambo Chickens Fed Provitamin A Biofortified Maize. Brazilian Journal of Poultry Science, 20 (3), 425–434. Prasiddhanti, L. and Wahyuni, A.E.T.H., 2015. Karakter Permukaan E. coli yang Diisolasi dari Susu Kambing Peranakan Ettawah yang Berperan terhadap Kemam- puan Adesi pada Sel Epitelium Ambing. J urnal Sains Veteriner, 33 (1), 29–41. Purnama, M.T.E., Widjaja, N.M.R., and Plumeriastuti, H., 2014. The Effect of Borax to Duodenal Histopathologi- cal Changes in Rats (Rattus norvegicus). Journal of Basic Medical Veterinary, 3 (1), 56–62.
Rahayu, S.A. and Gumilar, M.H.,
2017. Uji Cemaran Air
Minum Masyarakat Sekitar Margahayu Raya Bandung Dengan Identifikasi Bakteri Escherichia coli . Indone- sian Journal of Pharmaceutical Science and Technology, 4 (2), 50-56. Saputra, B.E.S., Sutrisna, R., Santosa, P.E., and Fathul, F., 2016. Pengaruh Ransum Yang Berbeda Pada Itik Jantan Terhadap Jumlah Leukosit Dan Differensial Leukosit. Jurnal Ilmiah Peternakan Terpadu, 4 (3), 176–181. Sari, K.I.K., Sudatri, N.W., and Suartini, N.M., 2021. Preva- lence Of Leucocytozoonosis And Plasmodiosis In Duck (Anas platyrhynchos) That Are Maintained In The Household Scale. Metamorfosa: Journal of Biologi- cal Sciences, 8 (1), 65. Sudira, W., Merdana, M., Winaya, I.B.O., and Parnayasa, I.K., 2019. Perubahan Histopatologi Ginjal Tikus Putih yang diberikan Ekstrak Sarang Semut diinduksi Parasetamol Dosis Toksik. Buletin Veteriner Udayana, 136-142. Surasa, N.J., Utami, N.R., and Isnaeni, W., 2014. Struktur Mikroanatomi Hati dan Kadar Kolesterol Total Plasma Darah Tikus Putih Strain Wistar Pasca Suplementasi Minyak Lemuru dan Minyak Sawit. Biosaintifika: Journal of Biology & Biology Education , 6 (2), 141–151. Suryani, A.E., Karimy, M.F., Istiqomah, L., Sofyan, A., Herd- ian, H., and Wibowo, M.H., 2014. Prevalensi Kolibasi- losis pada Ayam Broiler yang Diinfeksi E.coli dengan Pemberian Bioaditif, Probiotik, dan Antibiotik. Widy- ariset, 17 (2), 233–244. Suryani, H., Zain, M., Jamarun, N., and Ningrat, R.W.S.,
2015. Peran Direct Fed Microbials (DFM) Saccharo- myces cerevisiae dan Aspergillus oryzae terhadap Produktivitas Ternak Ruminansia: Review. Jurnal Peternakan Indonesia (Indonesian Journal of Animal Science), 17 (1), 27-37. Sutrisno, B., Wasito, R., Kurniasih, K., Widyarini, S., Kristianingrum, Y.P., and Sugiyono, S., 2019. Studi In-Vivo Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis) sebagai Alternatif anti Bakteri Eschericia Coli pada Ayam Broiler. Jurnal Sain Veteriner, 37 (2), 172. Towoliu, S., 2013. Pengaruh Pemberian Lactobacillus Terha- dap Gambaran Mikroskopis Mukosa Usus Halus Tikus Wistar (Rattus norvegicus) Yang Diinfeksi dengan Escherichia coli. Jurnal E-Biomedik,
1 (2), 930–934. Ulupi, N. and Ihwantoro, T.T., 2017. Gambaran Darah Ayam Kampung dan Ayam Petelur Komersial pada Kandang Terbuka di Daerah Tropis. Jurnal Ilmu Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan, 2 (1), 219–223. Ummamie, L., Rastin, R., and Erina, E., 2017. Isolasi Dan Identifikasi E.coli Dan Staphylococcus aureus Pada Keumamah Di Pasar Tradisional Lambaro, Aceh Besar. Jurnal Ilmiah Mahasiswa Veteriner, 1 (3), 574– 583. Widiyastutik, V.S., Wurlina, M., and Budiarto, B., 2013. Kepekaan E. coli dari Susu Kambing Peranakan Etawa terhadap Antibiotika. Veterinaria Medika, 6 (2), 103–106.
Berdasarkan pemeriksaan patologi anatomi diketahui bahwa ayam dengan nomor protokol A-146 mengalami tracheitis hemoragika, pneumonia nekrotik hemoragika, hemoragi proventriculus, enteritis nekrotik hemoragika, serta hepatitis nekrotik hemoragika. Berdasarkan pemeriksaan parasitologi terinfeksi Raillietina sp. dan Ornithonyssus sylviarum . Berdasarkan pemeriksaan mikrobiologi teridentifiasi bakteri Escherichia coli Berdasarkan pemeriksaan patologi klinik mengalami hipoproteinemia, leukositosis, neutrofilia, monositosis, serta poikilocytosis berupa tear drop dan rouleaux.
dari patogen dengan cara fagositosis dan menghasilkan antibodi. Faktor yang menentukan jumlah leukosit antara lain aktivitas biologis, kondisi lingkungan, umur dan pakan. Peningkatan dan penurunan leukosit dalam darah merupa- kan mekanisme respon tubuh terhadap patogen yang menyerang peningkatan jumlah leukosit menggambarkan adanya penyakit dalam tubuh atau adanya kemampuan pertahanan tubuh (Nurhajah et al. 2016) . Hal ini dibuktikan dengan differential count dengan adanya peningkatan monosit dan heterofil. Yang mana heterofil adalah bagian dari leukosit yang termasuk kedalam kelompok granulosit dan berada pada garis depan (first line) yang berfungsi sebagai pertahanan awal terhadap penyakit yang dapat mengakibat- kan infeksi atau peradangan. Sistem kerja heterofil yaitu menghancurkan patogen melalui jalur oksigen independen (lisosom, enzim proteolitik dan protein kationik) dan oksigen dependen. Selain itu, heterofil mengandung zat antimikroba yang berhubungan dengan resistensi penyakit pada tubuh dan dipengaruhi oleh kontrol genetik (Nurhajah et al. 2016) .
Jumlah heterofil pada Ayam A-146 mengalami peningkatan. Hasil perhitungan heterofil pada ayam A-146 menunjukkan nilai 14,21 sel/mm 3 , sedangkan normalnya 3-6 sel/mm 3 (Sutrisno et al. 2019) . Hetrofilia sering diamati dalam hubun- gannya dengan kerusakan jaringan yang disebabkan oleh peradangan atau infeksi bakteri termasuk Escherichia coli. Heterofil adalah bagian dari leukosit yang termasuk kedalam kelompok granulosit dan berada pada garis depan (first line) yang berfungsi sebagai pertahanan awal terhadap penyakit yang dapat mengakibatkan infeksi atau peradangan. Heterofil mempunyai aktivitas amuboid dan sifat fagositosis untuk mempertahankan tubuh melawan infeksi benda asing seperti bakteri dan partikel lain (Saputra et al. 2016) . Hasil ini sejalan dengan penelitian (Suryani et al. 2014) bahwa unggas yang terinfeksi Escherichia coli akan mengalami peningkatan heterofil, karena heterofil akan muncul dalam jumlah besar pada saat peradangan yang disebabkan mikroorganisme. Peningkatan heterofil menunjukkan adanya aktivitas fagosit- osis terhadap agen infeksi Escherichia coli .
Hasil pemeriksaan monosit pada Ayam A-146 mengalami peningkatan (monositosis). Jumlah heterofil pada Ayam A-146 mengalami peningkatan. Hasil perhitungan heterofil pada ayam A-146 menunjukkan nilai 5,83 sel/mm 3 , sedang- kan normalnya 0-5 sel/mm 3 (Fahreza and Sugiharto, 2020) . Monosit adalah prekursor makrofag dalam darah sirkulasi. Begitu ada infeksi agen patogen, maka monosit akan segera bermigrasi ke jaringan yang mengalami peradangan, dan berubah menjadi sel makrofag (Ulupi and Ihwantoro, 2017) . Makrofag adalah satu komponen sistem fagosit mononuklear yang berasal dari sumsum tulang kemudian berkembang sebagai monosit di darah. Monosit bermigrasi ke berbagai tempat dan berdiferensiasi menjadi makrofag dan dapat bertahan hidup selama beberapa bulan atau beberapa tahun. Monosit mulai bermigrasi sangat cepat ke dalam ekstravasku- lar jaringan pada saat awal peradangan akut dan dalam 48 jam mereka menjadi sel yang dominan. Makrofag akan segera mengeliminasi berbagai agen yang berbahaya, contohnya mikroba, dan memulai proses perbaikan serta bertanggung-
jawab atas kerusakan jaringan pada peradangan kronik serta membersihkan debris dan kerusakan jaringan pada daerah inflamasi (Harlim, 2018) . Wresdiyati, T., Laila, S.R., Setiorini, Y., Arief Irma Isnafia, and Astawan, M., 2013. Probiotik Indigenus Mening- katkan Profil Kesehatan Usus Halus Tikus yang Diinfeksi Enteropathogenic E.coli. Majalah Kedokter- an Bandung (Bandung Medical Journal), 45 (2), 78–85. Yanti, K.A.T., Setyawati, I., and Astiti, N.P.A., 2019. Lung Histopathology of Laying Hens Infected by Colibacil- losis in the Animal Cages Experiments of the Disease Investigation Center 6, Denpasar, Bali. Advances in Tropical Biodiversity and Environmental Sciences, 3 (2), 25-28.
Aini, M., Rahayuni, S., Mardina, V., Quranayati, Q., and Asiah, N., 2021. Bakteri Lactobacillus spp. dan Peranannya Bagi Kehidupan. Jurnal Jeumpa, 8 (2),
614–624.
Andiarsa, D., Hidayat, S., Setyaningtyas, D.E., and Sudar- mawan, S., 2014. Gambaran Kerusakan Mukosa Usus Mencit (Mus musculus) pada Infeksi Escherichia coli. Jurnal Vektor Penyakit, 8 (2), 53–60. Astuti, N., 2012. Kinerja Ayam Kampung Dengan Ransum Berbasis Konsentrat Broiler. Jurnal AgriSains, 4 (5),
51–58.
Bambang, A.G., Fatimawali, F., and Kojong, N.S., 2014. Anal- isa Cemaran Bakteri Coliform dan Identifikasi E. coli pada Air Isi Ulang dari Depot di Kota Manado. Pharmacon, 3 (3), 325–334. Baratawidjaja, K.G. and Rengganis, I., 2012. Imunologi Dasar. 10th ed. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universi- tas Indonesia.
Darsana, I.G.O., Besung, I.N.K., and Mahatmi, H., 2012. Potensi Daun Binahong (Anredera Cordifolia (Tenore) Steenis) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli secara In Vitro. Indonesia Medicus Veterinus, 1 (3), 337–351.
Daud, M., Yaman, M.A., and Zulfan, Z., 2019. Gambaran Histopatologi dan Populasi Bakteri Asam Laktat pada Duodenum Ayam Pedaging yang Diberi Sinbiotik dan Diinfeksi Escherichia coli. Jurnal Veteriner, 20 (3), 307.
Fahreza, R.A. and Sugiharto, S., 2020. Perbandingan Total Leukosit dan Leukosit Diferensial Ayam Broiler Pada Dataran Tinggi dan Rendah. Journal of Animal Research Applied Sciences, 2 (1), 22–28. Fatiqin, A., Novita, R., and Apriani, I., 2019. Pengujian Salmo- nella dengan Menggunakan Media SSA dan E.coli Menggunakan Media EMBA pada Bahan Pangan. Jurnal Indobiosains, 1 (1), 22–29. Gita, C.R.N. and Mardiana, V., 2019. Pemeriksaan Jumlah Leukosit, Laju Endap Darah Dan Bakteri Tahan Asam (Bta) Pada Pasien Penyakit Tuberculosis Paru Di Rsud Langsa. Jurnal Biologica Samudra, 1 (2), 6–15. Harlim, A., 2018. Buku Ajar Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin: Imunologi Inflamasi. 1st ed. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Indonesia.
Indra, R., Kardena, I.M., and Suarjana, I.G.K., 2022. Identifi- cation and Pathological Finding of Colisepticemia in Broiler. J urnal Riset Veteriner Indonesia (Journal of The Indonesian Veterinary Research), 6 (1), 23-31. Jonathan, S., Damayanti, T., and Antariksa, B., 2019. Patho- physiology of Emphysema. Jurnal Respirologi Indonesia,
39 (1), 60–69.
Kosasi, C., Lolo, W.A., and Sudewi, S., 2019. Isolasi dan Uji Aktivitas Antibakteri dari Bakteri yang Berasosiasi dengan Alga Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh serta Identifikasi secara Biokimia. Pharmacon, 8 (2), 351. Luhung, Y.G.A., Suarjana, I.G.K., and Gelgel, K.T.P., 2017. Sensitivitas Isolat E. coli Patogen dari Organ Ayam Pedaging Terinfeksi Koliseptikemia terhadap Oksitetrasiklin, Ampisilin dan Sulfametoksazol. Buletin Veteriner, 9 (1), 60–66.
Mahon, C.R., Lehman, D.C., and Manuselis, G., eds., 2015. Textbook of Diagnostic Microbiology. 5th ed. Maryland Heights, Missouri: Elsevier.
Meha, H.K.M., Berata, I.K., and Kardena, I.M., 2016. Derajat Keparahan Patologi Usus Dan Paru Babi Penderita Kolibasilosis. Indonesia Medicus Veterinus; 5 (1), 13-22. Nurhajah, A., Purnomoadi, A., and Harjanti, D.W., 2016. Hubungan Antara Konsumsi Serat Kasar dan Lemak Kasar dengan Kadar Total Solid dan Lemak Susu Kambing Peranakan Ettawa. Jurnal Agripet, 16 (1), 1-8. Odunitan-Wayas, F., Kolanisi, U., and Chimonyo, M., 2018. Haematological and Serum Biochemical Responses of Ovambo Chickens Fed Provitamin A Biofortified Maize. Brazilian Journal of Poultry Science, 20 (3), 425–434. Prasiddhanti, L. and Wahyuni, A.E.T.H., 2015. Karakter Permukaan E. coli yang Diisolasi dari Susu Kambing Peranakan Ettawah yang Berperan terhadap Kemam- puan Adesi pada Sel Epitelium Ambing. J urnal Sains Veteriner, 33 (1), 29–41.
Purnama, M.T.E., Widjaja, N.M.R., and Plumeriastuti, H.,
2014. The Effect of Borax to Duodenal Histopathologi- cal Changes in Rats (Rattus norvegicus). Journal of Basic Medical Veterinary, 3 (1), 56–62.
Rahayu, S.A. and Gumilar, M.H., 2017. Uji Cemaran Air Minum Masyarakat Sekitar Margahayu Raya Bandung Dengan Identifikasi Bakteri Escherichia coli . Indone- sian Journal of Pharmaceutical Science and Technology,
4 (2), 50-56.
Saputra, B.E.S., Sutrisna, R., Santosa, P.E., and Fathul, F., 2016. Pengaruh Ransum Yang Berbeda Pada Itik Jantan Terhadap Jumlah Leukosit Dan Differensial Leukosit. Jurnal Ilmiah Peternakan Terpadu, 4 (3), 176–181. Sari, K.I.K., Sudatri, N.W., and Suartini, N.M., 2021. Preva- lence Of Leucocytozoonosis And Plasmodiosis In Duck (Anas platyrhynchos) That Are Maintained In The Household Scale. Metamorfosa: Journal of Biologi- cal Sciences, 8 (1), 65. Sudira, W., Merdana, M., Winaya, I.B.O., and Parnayasa, I.K., 2019. Perubahan Histopatologi Ginjal Tikus Putih yang diberikan Ekstrak Sarang Semut diinduksi Parasetamol Dosis Toksik. Buletin Veteriner Udayana, 136-142. Surasa, N.J., Utami, N.R., and Isnaeni, W., 2014. Struktur Mikroanatomi Hati dan Kadar Kolesterol Total Plasma Darah Tikus Putih Strain Wistar Pasca Suplementasi Minyak Lemuru dan Minyak Sawit. Biosaintifika: Journal of Biology & Biology Education , 6 (2), 141–151. Suryani, A.E., Karimy, M.F., Istiqomah, L., Sofyan, A., Herd- ian, H., and Wibowo, M.H., 2014. Prevalensi Kolibasi- losis pada Ayam Broiler yang Diinfeksi E.coli dengan Pemberian Bioaditif, Probiotik, dan Antibiotik. Widy- ariset, 17 (2), 233–244. Suryani, H., Zain, M., Jamarun, N., and Ningrat, R.W.S., 2015. Peran Direct Fed Microbials (DFM) Saccharo- myces cerevisiae dan Aspergillus oryzae terhadap Produktivitas Ternak Ruminansia: Review. Jurnal Peternakan Indonesia (Indonesian Journal of Animal Science), 17 (1), 27-37.
Sutrisno, B., Wasito, R., Kurniasih, K., Widyarini, S., Kristianingrum, Y.P., and Sugiyono, S., 2019. Studi In-Vivo Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis) sebagai Alternatif anti Bakteri Eschericia Coli pada Ayam Broiler. Jurnal Sain Veteriner, 37 (2), 172. Towoliu, S., 2013. Pengaruh Pemberian Lactobacillus Terha- dap Gambaran Mikroskopis Mukosa Usus Halus Tikus Wistar (Rattus norvegicus) Yang Diinfeksi dengan Escherichia coli. Jurnal E-Biomedik, 1 (2), 930–934. Ulupi, N. and Ihwantoro, T.T., 2017. Gambaran Darah Ayam Kampung dan Ayam Petelur Komersial pada Kandang Terbuka di Daerah Tropis. Jurnal Ilmu Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan, 2 (1), 219–223. Ummamie, L., Rastin, R., and Erina, E., 2017. Isolasi Dan Identifikasi E.coli Dan Staphylococcus aureus Pada Keumamah Di Pasar Tradisional Lambaro, Aceh Besar. Jurnal Ilmiah Mahasiswa Veteriner, 1 (3), 574– 583.
Widiyastutik, V.S., Wurlina, M., and Budiarto, B., 2013. Kepekaan E. coli dari Susu Kambing Peranakan Etawa terhadap Antibiotika. Veterinaria Medika, 6 (2),
103–106.
Wresdiyati, T., Laila, S.R., Setiorini, Y., Arief Irma Isnafia, and Astawan, M., 2013. Probiotik Indigenus Mening- katkan Profil Kesehatan Usus Halus Tikus yang Diinfeksi Enteropathogenic E.coli. Majalah Kedokter- an Bandung (Bandung Medical Journal), 45 (2), 78–85. Yanti, K.A.T., Setyawati, I., and Astiti, N.P.A., 2019. Lung Histopathology of Laying Hens Infected by Colibacil- losis in the Animal Cages Experiments of the Disease Investigation Center 6, Denpasar, Bali. Advances in Tropical Biodiversity and Environmental Sciences, 3 (2), 25-28.
Aini, M., Rahayuni, S., Mardina, V., Quranayati, Q., and Asiah, N., 2021. Bakteri Lactobacillus spp. dan Peranannya Bagi Kehidupan. Jurnal Jeumpa, 8 (2), 614–624.
Andiarsa, D., Hidayat, S., Setyaningtyas, D.E., and Sudar- mawan, S., 2014. Gambaran Kerusakan Mukosa Usus Mencit (Mus musculus) pada Infeksi Escherichia coli. Jurnal Vektor Penyakit, 8 (2), 53–60. Astuti, N., 2012. Kinerja Ayam Kampung Dengan Ransum Berbasis Konsentrat Broiler. Jurnal AgriSains, 4 (5), 51–58. Bambang, A.G., Fatimawali, F., and Kojong, N.S., 2014. Anal- isa Cemaran Bakteri Coliform dan Identifikasi E. coli pada Air Isi Ulang dari Depot di Kota Manado. Pharmacon, 3 (3), 325–334. Baratawidjaja, K.G. and Rengganis, I., 2012. Imunologi Dasar. 10th ed. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universi- tas Indonesia.
Darsana, I.G.O., Besung, I.N.K., and Mahatmi, H., 2012. Potensi Daun Binahong (Anredera Cordifolia (Tenore) Steenis) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli secara In Vitro. Indonesia Medicus Veterinus, 1 (3), 337–351.
Daud, M., Yaman, M.A., and Zulfan, Z., 2019. Gambaran Histopatologi dan Populasi Bakteri Asam Laktat pada Duodenum Ayam Pedaging yang Diberi Sinbiotik dan Diinfeksi Escherichia coli. Jurnal Veteriner, 20 (3), 307. Fahreza, R.A. and Sugiharto, S., 2020. Perbandingan Total Leukosit dan Leukosit Diferensial Ayam Broiler Pada Dataran Tinggi dan Rendah. Journal of Animal Research Applied Sciences, 2 (1), 22–28. Fatiqin, A., Novita, R., and Apriani, I., 2019. Pengujian Salmo- nella dengan Menggunakan Media SSA dan E.coli Menggunakan Media EMBA pada Bahan Pangan. Jurnal Indobiosains, 1 (1), 22–29. Gita, C.R.N. and Mardiana, V., 2019. Pemeriksaan Jumlah Leukosit, Laju Endap Darah Dan Bakteri Tahan Asam (Bta) Pada Pasien Penyakit Tuberculosis Paru Di Rsud Langsa. Jurnal Biologica Samudra, 1 (2), 6–15. Harlim, A., 2018. Buku Ajar Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin: Imunologi Inflamasi. 1st ed. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Indonesia. Indra, R., Kardena, I.M., and Suarjana, I.G.K., 2022. Identifi- cation and Pathological Finding of Colisepticemia in Broiler. J urnal Riset Veteriner Indonesia (Journal of The Indonesian Veterinary Research), 6 (1), 23-31. Jonathan, S., Damayanti, T., and Antariksa, B., 2019. Patho- physiology of Emphysema. Jurnal Respirologi Indonesia, 39 (1), 60–69. Kosasi, C., Lolo, W.A., and Sudewi, S., 2019. Isolasi dan Uji Aktivitas Antibakteri dari Bakteri yang Berasosiasi dengan Alga Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh serta Identifikasi secara Biokimia. Pharmacon, 8 (2), 351. Luhung, Y.G.A., Suarjana, I.G.K., and Gelgel, K.T.P., 2017. Sensitivitas Isolat E. coli Patogen dari Organ Ayam Pedaging Terinfeksi Koliseptikemia terhadap Oksitetrasiklin, Ampisilin dan Sulfametoksazol. Buletin Veteriner, 9 (1), 60–66. Mahon, C.R., Lehman, D.C., and Manuselis, G., eds., 2015. Textbook of Diagnostic Microbiology. 5th ed. Maryland Heights, Missouri: Elsevier. Meha, H.K.M., Berata, I.K., and Kardena, I.M., 2016. Derajat Keparahan Patologi Usus Dan Paru Babi Penderita Kolibasilosis. Indonesia Medicus Veterinus; 5 (1), 13-22. Nurhajah, A., Purnomoadi, A., and Harjanti, D.W., 2016. Hubungan Antara Konsumsi Serat Kasar dan Lemak Kasar dengan Kadar Total Solid dan Lemak Susu Kambing Peranakan Ettawa. Jurnal Agripet, 16 (1), 1-8. Odunitan-Wayas, F., Kolanisi, U., and Chimonyo, M., 2018. Haematological and Serum Biochemical Responses of Ovambo Chickens Fed Provitamin A Biofortified Maize. Brazilian Journal of Poultry Science, 20 (3), 425–434. Prasiddhanti, L. and Wahyuni, A.E.T.H., 2015. Karakter Permukaan E. coli yang Diisolasi dari Susu Kambing Peranakan Ettawah yang Berperan terhadap Kemam- puan Adesi pada Sel Epitelium Ambing. J urnal Sains Veteriner, 33 (1), 29–41. Purnama, M.T.E., Widjaja, N.M.R., and Plumeriastuti, H., 2014. The Effect of Borax to Duodenal Histopathologi- cal Changes in Rats (Rattus norvegicus). Journal of Basic Medical Veterinary, 3 (1), 56–62.
Rahayu, S.A. and Gumilar, M.H., 2017. Uji Cemaran Air Minum Masyarakat Sekitar Margahayu Raya Bandung Dengan Identifikasi Bakteri Escherichia coli . Indone- sian Journal of Pharmaceutical Science and Technology, 4 (2), 50-56.
Saputra, B.E.S., Sutrisna, R., Santosa, P.E., and Fathul, F., 2016. Pengaruh Ransum Yang Berbeda Pada Itik Jantan Terhadap Jumlah Leukosit Dan Differensial Leukosit. Jurnal Ilmiah Peternakan Terpadu, 4 (3), 176–181. Sari, K.I.K., Sudatri, N.W., and Suartini, N.M., 2021. Preva- lence Of Leucocytozoonosis And Plasmodiosis In Duck (Anas platyrhynchos) That Are Maintained In The Household Scale. Metamorfosa: Journal of Biologi- cal Sciences, 8 (1), 65. Sudira, W., Merdana, M., Winaya, I.B.O., and Parnayasa, I.K., 2019. Perubahan Histopatologi Ginjal Tikus Putih yang diberikan Ekstrak Sarang Semut diinduksi Parasetamol Dosis Toksik. Buletin Veteriner Udayana, 136-142. Surasa, N.J., Utami, N.R., and Isnaeni, W., 2014. Struktur Mikroanatomi Hati dan Kadar Kolesterol Total Plasma Darah Tikus Putih Strain Wistar Pasca Suplementasi Minyak Lemuru dan Minyak Sawit. Biosaintifika: Journal of Biology & Biology Education , 6 (2), 141–151. Suryani, A.E., Karimy, M.F., Istiqomah, L., Sofyan, A., Herd- ian, H., and Wibowo, M.H., 2014. Prevalensi Kolibasi- losis pada Ayam Broiler yang Diinfeksi E.coli dengan Pemberian Bioaditif, Probiotik, dan Antibiotik. Widy- ariset, 17 (2), 233–244. Suryani, H., Zain, M., Jamarun, N., and Ningrat, R.W.S., 2015. Peran Direct Fed Microbials (DFM) Saccharo- myces cerevisiae dan Aspergillus oryzae terhadap Produktivitas Ternak Ruminansia: Review. Jurnal Peternakan Indonesia (Indonesian Journal of Animal Science), 17 (1), 27-37. Sutrisno, B., Wasito, R., Kurniasih, K., Widyarini, S., Kristianingrum, Y.P., and Sugiyono, S., 2019. Studi In-Vivo Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis) sebagai Alternatif anti Bakteri Eschericia Coli pada Ayam Broiler. Jurnal Sain Veteriner, 37 (2), 172. Towoliu, S., 2013. Pengaruh Pemberian Lactobacillus Terha- dap Gambaran Mikroskopis Mukosa Usus Halus Tikus Wistar (Rattus norvegicus) Yang Diinfeksi dengan Escherichia coli. Jurnal E-Biomedik, 1 (2), 930–934. Ulupi, N. and Ihwantoro, T.T., 2017. Gambaran Darah Ayam Kampung dan Ayam Petelur Komersial pada Kandang Terbuka di Daerah Tropis. Jurnal Ilmu Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan, 2 (1), 219–223. Ummamie, L., Rastin, R., and Erina, E., 2017. Isolasi Dan Identifikasi E.coli Dan Staphylococcus aureus Pada Keumamah Di Pasar Tradisional Lambaro, Aceh Besar. Jurnal Ilmiah Mahasiswa Veteriner, 1 (3), 574– 583. Widiyastutik, V.S., Wurlina, M., and Budiarto, B., 2013. Kepekaan E. coli dari Susu Kambing Peranakan Etawa terhadap Antibiotika. Veterinaria Medika, 6 (2), 103–106.
Wresdiyati, T., Laila, S.R., Setiorini, Y., Arief Irma Isnafia, and Astawan, M., 2013. Probiotik Indigenus Mening- katkan Profil Kesehatan Usus Halus Tikus yang Diinfeksi Enteropathogenic E.coli. Majalah Kedokter- an Bandung (Bandung Medical Journal), 45 (2),
78–85. Yanti, K.A.T., Setyawati, I., and Astiti, N.P.A., 2019. Lung Histopathology of Laying Hens Infected by Colibacil- losis in the Animal Cages Experiments of the Disease Investigation Center 6, Denpasar, Bali. Advances in Tropical Biodiversity and Environmental Sciences, 3 (2), 25-28.