## UJI EFEK ANTELMINTIK EKSTRAK ETANOL BIJI PINANG (ARECA CATECHU) TERHADAP CACING ASCARIS LUMBRICOIDES DAN ASCARIDIA GALLI SECARA IN VITRO
Debra Tiwow, Widdhi Bodhi, Novel S.Kojong Program Studi Farmasi Fakultas MIPA UNSRAT Manado

## ABSTRACT
Betel  nut  (Areca  catechu)  known  as  folks  medicine  that  possess  anthelmintic  activity. Anthelmintic were used to reduce or eliminate the worm in human or animal body. The aims of this research were to  find out anthelmintic activity of  ethanol  extract of betel nut against Ascaris lumbricoides and Ascaridia galli, and to determine efective concentration of ethanol extract  of  betel  nut  as  an  anthelmintic.  This  assay  using  ethanol  extracts  of  betel  nut  with concentration  of  10%,  20%,  and  30%.  Mortality  and  paralysis  percent  of  worms  observed every hour for 12 hours. Obtained data were analyzed by ANOVA. Regression analysis was conducted  to  determine  PC 50 and  LC 50 .  The  result  show  that  ethanol  extract  of  betel  nut possess an in vitro anthelmintic against Ascaris lumbricoides and Ascaridia galli. PC 50 values obtained  in  Ascaris  lumbricoides  was  27.12%,  and  LC 50 values  obtained  in  Ascaridia  galli was 27.11% on worm for 12 hours.
Keywords : Anthelmintic, ethanol extract of betel nut (Areca catechu), Ascaris lumbricoides, Ascaridia galli

## ABSTRAK
Biji  pinang  dikenal  sebagai  obat  tradisional  yang  berkhasiat  sebagai  antelmintik.  Obat antelmintik digunakan untuk mengurangi atau membunuh cacing dalam tubuh  manusia atau hewan.  Ekstrak  etanol  biji  pinang  mengandung  senyawa  tanin  yang  mampu  menghambat enzim  dan  merusak  membran  sel.  Penelitian  ini  digunakan  untuk  mengetahui  daya antelmintik  ekstrak  etanol  biji  pinang  terhadap  cacing  Ascaris  lumbricoides  dan  Ascaridia galli, serta mengetahui konsentrasi efektif dari ekstrak etanol biji pinang sebagai antelmintik. Penelitian  ini  bersifat  eksperimental  in  vitro.  Pengujian  menggunakan  ekstrak  etanol  biji pinang  dengan  konsentrasi  10%,  20%,  dan  30%.  Persentasi  kematian  dan  paralisis  cacing dinilai setiap jam sampai batas waktu penelitian dan selanjutnya data dianalisis menggunakan ANOVA.  Analisis  regresi  dilakukan  untuk  mengetahui  PC 50 dan  LC 50 .    Hasil  pengujian menunjukkan ekstrak etanol biji pinang mempunyai daya antelmintik terhadap cacing Ascaris lumbricoides  dan  Ascaridia  galli  secara  in  vitro.  Dari  hasil  pengujian  didapatkan  nilai  PC 50 pada cacing Ascaris lumbricoides sebesar 27,12 %.   dan LC 50 sebesar 27,11 %  pada cacing Ascaridia galli selama 12 jam.
Kata Kunci : Antelmintik, Ekstrak etanol biji pinang, Ascaris lumbricoides, Ascaridia galli

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  salah satu  penyakit  yang  menjadi  permasalahan utama  di  negara-  negara  berkembang seperti  di  Indonesia.  Salah  satu  infeksi yang  paling  umum  tersebar  di  dunia  yaitu infeksi cacing. Penyakit cacing merupakan salah  satu  penyakit  rakyat  umum  dan diperkirakan  lebih  dari  60%  menyerang anak-anak di Indonesia (Tjay dan
Rahardja,  2002).  Cacing  yang  termasuk dalam
kelompok soil-transmitted helminths  yang  banyak  ditemukan  pada masyarakat  antara  lain  cacing  gelang (Ascaris  lumbricoides),  cacing  cambuk (Trichuris  trichiura),  dan  cacing  tambang (Necator  americanus),  dan  Ancylostoma duodenale.
Laporan terakhir memperkirakan infeksi Ascaris
lumbricoides  sebesar  1,221  miliar  , Trichuris  trichiura  795  juta  dan  cacing tambang  740  juta.  (De  silva  NR  et  al., 2003)
Prevalensi  infeksi  cacing  yang tinggi  berdampak  buruk  bagi  kesehatan. Walaupun  jarang  menyebabkan  kematian, namun  infeksi  cacing  berdampak  terhadap gizi,  pertumbuhan  fisik,  mental,  kognitif dan  kemunduran  intelektual,  khususnya bagi anak-anak. (Crompton DW, 1999)
Uji efek antelmintik secara in vitro ini menggunakan cacing Ascaris lumbricoides  dan  Ascaridia galli. Ascaris lumbricoides    merupakan  parasit  yang sering  dijumpai  pada  manusia.  Sedangkan Ascaridia  galli  merupakan  parasit  yang sering  dijumpai  pada  ayam.  Walau  jarang menyerang  manusia,  namun  kemungkinan terinfeksi telur cacing ini dapat terjadi saat manusia  mengkonsumsi  daging  ayam sebagai  salah  satu  kebutuhan  protein hewani  yang merupakan inang dari cacing ini.
Pengobatan  dengan  menggunakan tanaman  berkhasiat  obat  merupakan  salah satu alternatif yang dipilih untuk memperkecil  adanya  efek  samping  karena pemberian  obat  sintetis.  Telah  banyak diketahui  tanaman  obat  yang  berkhasiat
sebagai  anti  cacing  /  antelmintik  yang pernah  dan  masih  digunakan  hingga  saat ini.  Dari  beberapa  penelitian  yang  telah dilakukan, diperoleh tanaman yang mempunyai khasiat antelmintik diantaranya  pepaya,  pare,  temu  giring  dan temu  hitam  .  Dari  hal  tersebut  penulis tertarik  untuk  meneliti  tanaman  lain  yang dapat berpotensi sebagai antelmintik dalam hal ini biji pinang (Areca catechu ).

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat  yang  digunakan  adalah  alat- alat  gelas  (gelas  piala,  gelas  ukur,  labu Erlenmeyer),  batang  pengaduk,  oven, kertas saring, rotary evaporator, timbangan,  hot  plate,  cawan  petri,  dan pengaduk.
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  antara  lain  2  kg  biji  pinang (Areca  catechu  L.),  aquades  steril,  etanol 95  %,  kapas,  kain  kasa  streril,  aluminium foil,  cacing  Ascaris  lumbricoides,  cacing Ascaridia galli, NaCl 0,9%, dan Aquades.

## Pengambilan dan Preparasi Sampel
Sampel yang digunakan adalah biji pinang  sebanyak  2  kg  (berat  basah)    yang diambil  dari  perkebunan  pinang  di  daerah Mapanget  Manado.  Sampel  kemudian dibersihkan  dari  kotoran  dan  daging  buah yang  menempel  (sortasi  basah),  dicuci dengan  air  mengalir  sampai  bersih, kemudian ditiriskan. Selanjutnya dikeringkan  dalam  oven  dengan  suhu  50 0 C  sampai  kering.  Tahap  selanjutnya simplisia kering digrinder sehingga menjadi  simplisia  serbuk  dan  diayak, kemudian  disimpan  dalam  wadah  bersih dan tertutup rapat.
Ekstraksi
Serbuk dimaserasi dengan menggunakan pelarut etanol 95%.
Sebanyak 500 g serbuk simplisia dimasukkan  ke  dalam  bejana  kemudian dituangi  dengan  75  bagian  penyari  yaitu etanol  95% (4,2 L), ditutup dan dibiarkan selama  3  hari  terlindung  dari  cahaya, sambil  berulang-ulang  diaduk.  Setelah  3
hari  sari  diserkai,  ampas  diperas.  Ampas ditambah  25  bagian  cairan  penyari  1,3  L (etanol  95%)  lalu  diaduk  dan  diserkai, sehingga  diperoleh  seluruh  sari  sebanyak 100  bagian.  Bejana  ditutup,  dibiarkan ditempat  sejuk  dan  terlindung  dari  cahaya selama 2 hari. Endapan kemudian dipisahkan  dan  diperoleh  ekstrak  cair. Setelah  itu,  ekstrak  yang  diperoleh dievaporasi  dengan  menggunakan    rotary evaporator  pada  suhu  30 0 C  -  40 0 C  lalu dipekatkan  lagi  dengan  menggunakan waterbath  hingga  diperoleh  ekstrak  kental biji pinang.
Pengambilan dan Penyiapan Hewan Uji
Cacing Ascaris Lumbricoides diperoleh  dari  usus  babi  di  tempat penyembelihan  babi  di  kampung  tubir, kecamatan  Tikala.  Sedangkan    cacing Ascaridia  galli  dikumpulkan  dari  usus ayam  di  tempat  pemotongan  ayam  di sebuah  pasar  tradisional.  Kedua  cacing dimasukkan  dalam  2  termos  yang  terpisah ,yang  berisi  larutan  NaCl  fisiologis. Cacing  yang  diperoleh  dicuci  dan  dibilas berulang-ulang  hingga  bersih  dengan larutan NaCl fisiologis.

## Uji Aktivitas Antelmintik secara in vitro
Sampel  dibagi  dalam  4  kelompok yaitu : Kelompok a ( Ascaris lumbricoides +  ekstrak  etanol  biji  pinang  dengan konsentrasi   10%, 20% ,30%),  kelompok b    (Ascaridia  galli  +  ekstrak  etanol  biji pinang dengan konsentrasi 10%, 20%,30%)  ,  kelompok  c  (larutan  pirantel pamoat  0,5%  sebagai  kontrol  positif), kelompok  d  (  larutan  NaCl  0,9%  sebagai kelompok kontrol negatif). Prosedur pelaksanaannya adalah sebagai berikut :
1.  Cawan petri disiapkan, masing-masing berisi  ektrak  etanol  biji  pinang  dan larutan pirantel pamoat sesuai konsentrasi masing-masing serta larutan NaCl 0,9%.
2.  Cacing  Ascaris  lumbricoides  dan Ascaridia  galli  sebanyak  3  ekor dimasukkan  ke  dalam  masing-masing cawan  petri  ,  kemudian  diinkubasi pada suhu 37 0 C.
3.  Untuk  mengetahui  apakah  cacing lisis/mati, paralisis, atau masih normal setelah diinkubasi, cacing-cacing tersebut diusik dengan batang pengaduk. Jika cacing diam, dipindahkan  ke  dalam  air  panas dengan  suhu  50 0 C,  apabila  dengan cara  ini  cacing  tetap  diam,  berarti cacing  tersebut  telah  lisis,  tetapi  jika bergerak,  berarti  cacing  itu  hanya paralisis.
4.  Hasil  yang  diperoleh  dicatat.  Batasan lisis  dalam  percobaan  ini  adalah  bila cacing mati atau cacing tidak bergerak bila  dimasukkan  ke  dalam  air  panas dengan suhu 50 0 C.
Analisis Data Data yang diperoleh dalam penelitian  ini  adalah  data  deskriptif  yang didapat  dari  jumlah  cacing  yang  lisis/mati dan  jumlah  cacing  yang  paralisis  tiap  jam pada  tiap  kelompok  uji.  Selanjutnya analisis  dilanjutkan  dengan  menggunakan metode ANOVA. Analisis regresi digunakan  untuk  mengetahui  LC 50 (Lethal Concentration  50%) dan  PC 50 (Paralisis Concentration  50%) dari  ekstrak  etanol biji pinang.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  aktivitas  antelmintik cacing Ascaris lumbricoides dalam kelompok  perlakuan  ekstrak  etanol  biji pinang  dan  kelompok  kontrol  positif memiliki  perbedaan  terhadap  kontrol negatif  larutan  NaCl  0,9  %.  Hasil  analisis menggunakan    ANOVA  pada  p engujian Ascaris  lumbricoides  terhadap  rata-rata waktu  paralisis  cacing  antar  konsentrasi ekstrak  etanol  biji  pinang  menunjukkan hasil  yang  berbeda  bermakna  (p<0,05) sehingga  terbukti  adanya  perbedaan  efek kecepatan  paralisis  cacing  pada  tiap konsentrasi  tersebut.  Pada  kelompok ekstrak  etanol  biji  pinang    yang  tidak berbeda  bermakna  (p>0,05)  didapatkan pada perbandingan antara rata-rata paralisis cacing Ascaris lumbricoides pada konsentrasi  20%  dan  30%  sehingga  dapat
dijelaskan bahwa tidak ada perbedaan efek yang  signifikan  antara  masing-masing konsentrasi tersebut.
Dari  hasil  analisis  regresi  dapat dilihat hubungan berbagai tingkat konsentrasi  ekstrak  dengan  presentase paralisis  cacing  yang  dihasilkan.  Data untuk  analisis  diambil  dari  data  jumlah paralisis  cacing  pada  tiap  konsentrasi  saat konsentrasi tertinggi 30 % telah menghasilkan keadaan paralisis dari semua cacing.  Dari  analisis  regresi  diperoleh persamaan regresi untuk ekstrak etanol biji pinang  adalah  y  =  1,205x  –  0,0293. Persamaan regresi tersebut dapat diketahui bahwa nilai PC 50 ekstrak etanol biji pinang sebesar 27,1206, artinya konsentrasi efektif dari ekstrak etanol biji pinang yang dapat  menyebabkan  paralisis  pada  50%, cacing Ascaris lumbricoides sebesar  27,12 %.
Dari  hasil  analisis  menggunakan ANOVA  pada  pengujian    terhadap  rata- rata waktu kematian cacing antar konsentrasi pada ekstrak etanol biji pinang menunjukkan hasil yang berbeda bermakna  (p<0,05)  sehingga  terbukti adanya perbedaan efek kecepatan kematian cacing pada tiap konsentrasi tersebut. Pada kelompok ekstrak  etanol biji pinang   yang berbeda  bermakna  (p>0,05)  didapatkan pada perbandingan antara rata-rata paralisis cacing Ascaris lumbricoides pada konsentrasi  10%,  20%  dan  30%  sehingga dapat dijelaskan bahwa ada perbedaan efek yang  signifikan  antara  masing-masing konsentrasi  tersebut  dengan  kelompok kontrol positif maupun kontrol negatif.
Dari  hasil  analisis  regresi  dapat dilihat hubungan berbagai tingkat konsentrasi  dengan  presentase  kematian cacing yang dihasilkan. Data untuk analisis diambil  dari  data  jumlah  kematian  cacing pada  tiap  konsentrasi  saat  konsentrasi tertinggi 30 % telah menghasilkan kematian  dari  semua  cacing.  Dari  analisis regresi diperoleh persamaan  regresi untuk ekstrak  etanol  biji  pinang  adalah  y  = 39,791x  –  7,0295.  Persamaan  regresi
tersebut  dapat  diketahui  bahwa  nilai  LC 50 ekstrak  etanol  biji  pinang  sebesar  27,116, artinya  konsentrasi  efektif  dari  ekstrak etanol biji pinang yang dapat menyebabkan  paralisis  pada  50%,  cacing Ascaridia galli sebesar  27,11 %.
Aktivitas Antelmintik
Dalam  pengujian    ini,  PC 50 (Paralysis Concentration) dan LC 50 (Lethal Concentration)  digunakan  sebagai  standar untuk  penelitian.  PC 50 digunakan  dalam pengujian  Ascaris  lumbricoides  untuk menghitung konsentrasi kelompok perlakuan  yang  menyebabkan  paralisis cacing  sebanyak  50%.  Sedangkan  pada Ascaridia  galli  digunakan  LC 50 untuk menghitung konsentrasi yang menyebabkan  kematian  cacing  sebanyak 100%.  Terdapat  perbedaan  parameter analisa  dari  kedua  cacing  ini  diakibatkan hasil  pengujian  yang  berbeda  namun  tetap memperlihatkan  efek  antelmintik.    Pada cacing Ascaris lumbricoides, cacing mengalami  paralisis  selama  pengujian, sedangkan pada Ascaridia galli mengalami paralisis  hingga  lisis.  Hal  ini  mungkin disebabkan  oleh  morfologi  dari  kedua cacing yang berbeda.
Pirantel pamoat menimbulkan depolarisasi pada otot cacing dan meningkatkan  frekuensi  impuls,  sehingga cacing lisis dalam keadaan spastis. Pirantel pamoat  juga  berefek  menghambat  enzim kolinesterase, terbukti pada askaris meningkatkan  kontraksi  ototnya.  Daya antelmintik  pada  pirantel  pamoat  yang lebih  baik  dari  ekstrak  etanol  biji  pinang kemungkinan  disebabkan  konsentrasi  dari kelompok perlakuan yang terlalu kecil. Kemampuan  daya  antelmintik  ini berkaitan  dengan  kandungan    senyawa tanin  dari  ekstrak  etanol  biji  pinang  yang mampu  menghambat  enzim,dan  merusak membran    (Shahidi  &  Naczk,  1995). Terhambatnya kerja enzim dapat menyebabkan proses metabolisme pencernaan  terganggu  sehingga  cacing akan  kekurangan  nutrisi  pada  akhirnya cacing  akan  mati  karena  kekurangan
tenaga.  Membran  cacing  yang  rusak karena tanin menyebabkan cacing paralisis yang  akhirnya  mati.  Tanin  umumnya berasal  dari  senyawa  polifenol  yang memiliki kemampuan untuk mengendapkan protein dengan membentuk koopolimer  yang  tidak  larut  dalam  air (Harborne,  1987).  Tanin  juga  memiliki aktivitas  ovisidal,  yang  dapat  mengikat telur cacing  yang  lapisan  luarnya  terdiri atas  protein  sehingga  pembelahan  sel  di dalam  telur  tidak  akan  berlangsung  pada akhirnya  larva  tidak  terbentuk.  Sesuai dengan  Molan  et  al.  (2000)  yang menyatakan  bahwa  ekstrak  tanin  dari tanaman  L.  cuneata  dapat  mengurangi perkembangan  larva cacing nematoda (L 3 ) sampai  91%,  mengurangi  jumlah  telur yang menetas sampai 34% dan menurunkan motilitas dari larva L
3 sampai
30%. Pada penelitian Min dan Hart (2003) menunjukkan bahwa kambing yang mengkonsumsi L. cuneata yang mengandung  tanin  signifikan  menurunkan jumlah  telur  cacing  dibandingkan  dengan kambing yang mengkonsumsi pakan kontrol  yang  tidak  mengandung  tanin. Didapat  dari  hasil  penelitian  tersebut, bahwa  tanaman  yang  mengandung  5% ekstrak tanin dapat mengurangi kontaminasi  larva  dan  dapat  digunakan sebagai anthelmintika.

## KESIMPULAN
Dari  pengujian  secara  in  vitro, ekstrak etanol biji pinang konsentrasi 10 % mampu membuat cacing Ascaris lumbricoides paralisis dan pada konsentrasi 20 % mampu membuat cacing Ascaridia  galli  menjadi  lisis/mati. Ekstrak etanol  biji  pinang  pada  konsentrasi  30% lebih  efektif  daya  antelmintiknya  terhadap cacing Ascaris  lumbricoides  dan cacing Ascaridia galli.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut dari hasil yang didapat seperti isolasi senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam ekstrak etanol biji pinang (Areca catechu).

## DAFTAR PUSTAKA
Crompton,  D.W.  1999.  “How  much helminthiasis  is  there  in  the world?”. J Parasitol 1999. 85: 397- 403.
De  Silva  N.R.,  Brooker  S.,  Hotez  P., Montresor  A.,  Engles  D.  and Savioli  L.  2003.  “Soil-transmitted helminth  infections:  Updating  the global  picture”.  Trends  Parasitol. 19: 547–51.
Harborne. 1987. Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Terjemahan:  K.  Padmawinata,  I. Sudiro. Institut Teknologi Bandung, Bandung. Molan,  A.  L.,  G.  C.  Waghorn,  B.  R.  Min, and  W.  C.  McNabb.  2000.  The effect  of  condensed  tanin  from seven herbages
on Trichostrongylus colubriformis larval  migration  in  vitro.  Folia Parasitol. 47:39–44.
Shahidi,  F  and  M.  Naczk.  1995.  Food Phenolics. Technomic Inc, Basel. Tjay, T. H. Dan K. Rahardja. 2002. Obat- Obat Penting Khasiat, Penggunaan dan  Efek-Efek    Sampingnya.  Edisi Keempat.
PT. Elex Media
Komputindo  Kelompok  Gramedia, Jakarta Wang,  C.K.,  and  Lee,  W.H.  1996. Separation,  Characteristics,  and Biological  Activities  of  Phenolics in  Areca  Fruit.  J.  Agric.  Food Chem. 44: 2014 -2019
Filename: 14 Directory: C:\Documents and Settings\User\My Documents Template: C:\Documents and Settings\User\Application Data\Microsoft\Templates\Normal.dotm Title: Subject:
Author:
ismail - [2010] Keywords: Comments: Creation Date: 5/11/2013 2:54:00 PM Change Number: 21 Last Saved On: 5/13/2013 1:17:00 PM Last Saved By: User Total Editing Time: 376 Minutes Last Printed On: 5/13/2013 1:17:00 PM As of Last Complete Printing Number of Pages:  5 Number of Words:  2,367 (approx.) Number of Characters:
13,498 (approx.)