AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI n -HEKSAN, KLOROFORM, ETIL ASETAT BUNGA KAMBOJA ( Plumeria alba ) TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus DAN Salmonella typhi
[Antibacterial activity of n -Hexane, Chloroform, Ethyl Acetate Frangipani ( Plumeria alba) Fraction to Staphylococcus aureus and Salmonella typhi ]
Ni Nyoman Rupiniasih 1* , Indriani 1 , Syamsuddin 1 , Abd Rahman Razak 1
1) Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
*)Coresponding author: rupini_asih@yahoo.co.id (082259471268)
Diterima 24 April 2019, Disetujui 14 Juni 2019

## ABSTRACT
Tests on the inhibition extract of n -hexane fraction, extract of chloroform fraction and extract of ethyl acetate fraction of frangipani flower ( Plumeria alba ) on Staphylococcus aureus and Salmonella typhi has been done. This study aims to determine the activity of frangipani flower extract on the growth of S.  aureus and S.  typhi bacteria.  Frangipani  flowers  was  macerated  using  methanol  solvents.  The obtained  methanol  extract  was  partitioned  with n -hexane,  chloroform  and  ethyl  acetate  solvents, respectively. The three extracts were tested for antibacterial activity at a concentration of 10% using the  diffusion  well  method.  The  test  results  showed  that  the n -hexane,  chloroform  and  ethyl  acetate fractions showed an inhibition zone of 9.77 mm, 20.89 mm and 19.44 against S. aureus whereas S. typhi showed an inhibition zone of 15.86 mm, 27.69 mm and 21.74 mm.
Keywords: Antibacterial, extract of frangipani flower, Staphylococcus aureus , Salmonella typhi .

## ABSTRAK
Telah dilakukan pengujian daya hambat ekstrak fraksi n- heksan, ekstrak fraksi kloroform dan ekstrak fraksi  etil  asetat  bunga  kamboja (Plumeria  alba) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Salmonella typhi . Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas ekstrak bunga kamboja terhadap pertumbuhan  bakteri S.  aureus dan S.  typhi .  Bunga  kamboja  dimaserasi  menggunakan  pelarut metanol. Ekstrak metanol yang diperoleh dipartisi dengan  pelarut n- heksan, kloroform dan etil asetat secara berturut-turut. Ketiga ekstrak tersebut dilakukkan uji aktivitas antibakteri pada konsentrasi 10% menggunakan  metode  sumur  difusi.  Hasil  uji  menunjukan  bahwa  fraksi n -heksan,  kloroform  dan  etil asetat  memperlihatkan  zona  hambat  sebesar  9,77  mm,  20,89  mm  dan  19,44  terhadap  bakteri S. aureus sedangkan terhadap bakteri S. typhi memperlihatkan  zona hambat sebesar 15,86 mm, 27,69 mm dan 21,74 mm.
Kata Kunci: Antibakteri, ekstrak etil asetat bunga kamboja, Staphylococcus aureus, Salmonella typhi.

## LATAR BELAKANG
Obat  tradisional  menjadi  pilihan masyarakat  karena  lebih  murah  dan mudah didapat dengan efek samping yang ditimbulkan  terhadap  kesehatan  relative kecil  (Cahyadi,  2009).  Tanaman  kamboja secara  etnofarmakologi adalah  salah  satu jenis tanaman yang dimanfaatkan sebagai obat  tradisional.  Air  rebusan  bunga kamboja kering berkhasiat untuk menurunkan  demam,  sebagai  obat  batuk, membantu melancarkan pencernaan, mengobati  kudis  dan  sakit  kulit  (Wrasiati et  al. ,  2011).  Bunga  kamboja  juga berkhasiat untuk menyembuhkan sembelit dan menghentikan disentri. Penyakit disentri  yang  umumnya  disebabkan  oleh bakteri Escherchia coli dan Staphylococcus  aureus (Husni et  al. , 2013).
Selain  disentri  dan  infeksi  penyakit yang juga sering di derita oleh masyarakat Indonesia  adalah  demam  tifoid.  Demam tifoid  adalah  suatu  infeksi  yang  terjadi pada  usus  halus  yang  disebabkan  oleh bakteri Salmonella  typhi (Pramitasari, 2013) . Penanganan penyakit demam tifoid secara medis masih menggunakan prinsip trilogi yaitu istirahat, diet dan antimikroba.
Obat yang digunakan sebagai pilihan  pertama  demam  tifoid  adalah antibiotik  kloramfenikol,  namun  demikian telah dilaporkan adanya resistensi Salmonella typhi terhadap antibiotik kloramfenikol  (Trisharyanti  dan  Febriani, 2017) . Oleh  karena  itu,  pengobatan  dari bahan-bahan  alami  yang  berasal  dari
tumbuhan, seperti bunga kamboja diperlukan  sebagai  solusi  pengobatan penyakit yang disebabkan oleh bakteri.
Kamboja putih ( Plumeria alba ) mengandung  senyawa  agoniadin,  asam plumerat, lupeol, asam serotinat, plumierid,  flavonoid,  keloid  dan  polifenol. Tumbuhan ini juga mengandung fulvoplumierin  yang  terindikasi  dapat digunakan  sebagai  zat  antibakteri.  Selain itu Plumeria  alba mengandung  minyak atsiri  antara  lain  geraniol,  farsenol, eugenol,  sitronelol,  fenetilalkohol  dan linalool  (Nurcahyo dan Purgiyanti, 2017).
Berdasarkan  hasil  penelitian  Sari et al. (2015)  bahwa  ekstrak  etanol  bunga kamboja  putih  ( Plumeria  alba) dengan konsentrasi 5%, 2,5%, dan 1,25% memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri E.
coli dengan  zona  hambat    yaitu  8,2  mm,
7,2 mm dan 6,3 mm secara berturut-turut. Sementara hasil penelitian yang dilakukan oleh  Husni et  al. (2013)  menunjukan bahwa  ekstrak n- heksan  bunga  kamboja merah  ( Plumeria  rocea) pada  konsentrasi 5% tidak menunjukan aktivitas antimikrobial  terhadap  bakteri Eschercia coli .  Namun  demikian  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus menunjukan aktivitas antimikrobial dengan zona hambat 8 mm. Penelitian tentang pengujian aktivitas antibakteri dari berbagai fraksi belum banyak dilakukan.
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka dilakukan  penelitian    untuk  mengetahui aktivitas  antibakteri  ekstrak  fraksi n - heksan,  ekstrak  fraksi  kloroform  dan
ekstrak  fraksi  etil  asetat  bunga  kamboja ( Plumeria  alba )  terhadap Staphylococcus aureus dan Salmonella  typhi .

## METODE PENELITIAN

## Bahan Dan Peralatan
Bahan  yang  digunakan  yaitu  bunga kamboja.  Bahan  lainnya  yaitu  pelarut metanol,  n-heksan,  kloroform,  etil  asetat, DMSO,  Nutrien  Agar  (NA),  antibiotic amoxicillin,  tissue,  aluminium  foil,  kertas saring,  alkohol, staphylococcus  aureus dan Salmonella typhi.
Alat  -  alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu perangkat rotary vacum evaporator, blender,  ayakan  60  mesh, cawan  petri,  autoklaf,  jangka  sorong,  tip blue,  jarum  ose,  timbangan  neraca analitik,  corong  buchner,  dan  corong pisah.

## Prosedur Penelitian
Ekstraksi Bunga Kamboja
Bunga kamboja dibersihkan, dipotong-potong  kecil  kemudian  dikering anginkan  lalu  dihaluskan  dengan  cara diblender  dan  diayak  dengan  ayakan  60 mesh untuk mendapatkan bunga kamboja dalam  bentuk  serbuk.  Ekstraksi  dilakukan dengan  menggunakan  metode  maserasi menggunakan  pelarut  metanol  dengan cara  menimbang  serbuk  bunga  kamboja sebanyak 500 gram, kemudian dimasukan kedalam erlenmeyer 1000 ml lalu ditambahkan  dengan  pelarut  metanol. Campuran  disiman  selama  3  x  24  jam sambil sesekali dikocok kemudian campuran  disaring  dengan  menggunakan
penyaring  vakum.  Filtrat  yang  diperoleh dipisahkan  pelarutnya  dengan  rotary vakum  evaporator  sehingga  diperoleh ekstrak bunga kamboja.
Partisi Ekstrak Bunga Kamboja
(Modifikasi  Metode Fatisa (2013))
Ekstrak  metanol  bunga  kamboja
( Plumeria  alba) yang  telah  dievaporasi diambil  sebanyak  20  gram  kemudian dimasukkan kedalam corong pisah setelah itu  ditambahkan  dengan  10  mL  pelarut metanol  dan  60  mL n -heksan  dikocok- kocok  sampai  tercampur.  Didiamkan selama  beberapa  menit  sampai  terdapat dua  lapisan.  Setelah  itu  lapisan n -heksan diambil  dan  ditampung  dalam  Erlenmeyer 250  mL  sehingga  diperoleh  fraksi n - heksan.  Setelah  itu  ekstrak  ditambahkan dengan  60  mL  kloroform  lalu  dikocok  lagi sampai tercampur dan didiamkan beberapa  menit  sampai  membentuk  dua lapisan  lalu  lapisan  kloroform  diambil  dan ditampung  dalam  Erlenmeyer  250  mL. Selanjutnya  ekstrak  ditambahkan  dengan 60 mL etil asetat kemudian dikocok-kocok sampai  tercampur.  Didiamkam  beberapa menit sampai membentuk lagi dua lapisan setelah  itu  lapisan  etil  asetat  diambil  dan ditampung  dalam  Erlenmeyer  250  mL. Kemudian fraksi n -heksan, fraksi kloroform  dan  fraksi  etil  asetat  di evaporasi.

## Uji Antibakteri
1.  Persiapan Bahan Uji Antibakteri
Sebanyak  28  gram  nutrien  agar (NA)  dilarutkan  dalam  1000  ml  aquades,
kemudian  di  sterilkan  kedalam  autoclave pada  suhu  121 o C  dengan  tekanan  1  atm selama 15 menit.
2.  Pembuatan    Suspensi  Bakteri  Uji
(Fitrial, 2009)
Bakteri uji dibiakkan pada media NA miring  selama  24  jam  pada  suhu  37 o C, kemudian diambil sebanyak 1 ose dengan sengkelit  dan  disuspensikan  dengan  cara dimasukkan ke  dalam  tabung reaksi  yang berisi  10  mL  larutan  NaCl  fisiologis  steril. Suspensi  yang  terbentuk  disetarakan dengan  larutan  standar  0,5  Mc.  Farland yang menunjukan kepadatan jumlah koloni bakteri sebanyak 1,5 x 10 5 CFU/mL (Fatisa, 2013).

## 3.  Pembuatan Konsentrasi Uji
Pada  penelitian  ini  ekstrak  yang digunakan  yaitu  ekstrak  fraksi n -heksan, ekstrak fraksi kloroform dan ekstrak fraksi etil  asetat  bunga  kamboja  dengan  seri konsentrasi (% b/v) 10% dengan menggunakan  pelarut  dimetilsulfoksida (DMSO)  100%.  Pembuatan  konsentrasi ekstrak  dilakukan  dengn  cara  melarutkan ekstrak  dengan  menggunakan  5  mL pelarut DMSO.
4.  Pengujian Aktivitas Antibakteri Dengan Metode Sumur Difusi
Modifikasi (Kusumawati et al. , 2015)
Pada pengujian zona hambat bakteri digunakan  metode  sumur  difusi.  Media Nutrien  Agar  (NA)  padatan  dicampur dengan suspensi bakteri uji ( staphylococcus  aureus  dan  salmonella typhi ) yang sudah diinkubasi dengan cara digoreskan  secara  merata  lalu  didiamkan
selama  5  menit.  Setelah  itu  dibuat  sumur yang  berdiameter  ±  6  mm  dengan menggunakan  tip  blue  yang  sudah disterilkan. Cawan pertama berisi 2 lubang atau sumur (lubang pertama untuk kontrol positif  berupa  amoxicillin  dan  lubang kedua  untuk  kontrol  negatif  berupa DMSO)  dan  cawan  kedua  berisi  3  lubang atau sumur (lubang pertama untuk ekstrak fraksi n -heksan  10%,  lubang  kedua  untuk ekstrak  fraksi  kloroform  10%  dan  lubang ketiga  untuk  ekstrak  fraksi  etil  asetat 10%),  setiap  sumur  diisi  ekstrak  dengan kontrol  sebanyak  30  µL,  kemudian diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu 37 o C,  selanjutnya  diamati  dan  diukur diameter zona hambat dengan menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstrak dan Fraksi Bunga Kamboja
Hasil  ekstraksi  menunjukan  bahwa bunga  kamboja  menghasilkan  ekstrak sebanyak  46,51  gram  dengan  rendemen 9,30  %.  Ekstrak  total  bunga  kamboja diperoleh melalui proses ekstraksi maserasi.  Tujuan  ekstraksi  adalah  untuk menarik  komponen  kimia    yang  terdapat pada  bahan  alam  seperti  senyawa antimikroba dan antioksidan.
Fraksinasi merupakan metode ekstraksi  cair-cair    yaitu  pemisahan komponen  kimia  antara  dua  lapisan pelarut  yang  tidak  saling  bercampur  lalu dikocok  dan  didiamkan  sampai  terbentuk lapisan  berupa  fraksi  polar  dan  nonpolar. Fraksinasi  bertujuan  untuk  memisahkan
senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak total berdasarkan kepolaran pelarut organik.
Tabel  1  Berat  dari  masing-  masing  fraksi bunga kamboja Jenis ekstrak Berat (gram) Rendemen (%) Ekstrak Fraksi n -heksana 1,90 9,5 Ekstrak Fraksi kloroform 0,63 3,15 Ekstrak Fraksi etil asetat 2,41 12,05
Jenis  pelarut  berpengaruh  terhadap hasil  ekstraksi  dan  rendemen  (Tabel  1). Nilai  ekstrak  dan  rendemen  tertinggi terdapat  pada  ekstrak  fraksi  etil  asetat karena  etil  asetat  merupakan  pelarut semipolar,  sehingga  dapat  mengekstrak senyawa  dengan kepolaran  yang  sedang. Hasil  penelitian  Hidayah et  al. (2016) menunjukan bahwa ekstrak dengan pelarut  etil  asetat  memiliki  berat  ekstrak yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan pelarut n -heksan.  Hal  ini  menunjukan bahwa  senyawa  yang  terkandung  pada ekstrak  kental  metanol lebih besar
senyawa semi polar yaitu dengan rendemen  12,05%.  Untuk  fraksi n -heksan dan  kloroform  menghasilkan  rendemen yang sedikit karena n -heksan dan kloroform  merupakan  pelarut  non  polar sehingga  hanya  mengekstrak  senyawa dengan  dengan  kepolaran  yang  rendah dan  kemungkinan  besar  senyawa  non polar  yang  terkandung  dalam  bunga kamboja sangat sedikit. Menurut (Wahyuni dan  Widjanarko,  2015),  bahwa  semakin
banyak  senyawa  yang  diekstrak  maka ekstrak  dan  rendemen  ekstrak  semakin meningkat.

## Aktivitas  Antibakteri  dan  Daya  Hambat Ekstrak Bunga Kamboja
Uji  aktivitas  ekstrak  bunga  kamboja terhadap pertumbuhan bakteri gram positif ( Staphylococcus aureus ) dan bakteri gram negatif ( Salmonella typhi ) ditandai dengan terbentuknya  zona  bening  di  sekitar sumuran.  Antibiotik  amoxicillin  digunakan sebagai kontrol positif dan pelarut dimetilsulfoksida (DMSO) digunakan sebagai kontrol negatif.
Tabel 2.  Hasil  zona  hambat  bakteri  gram positif Staphylococcus  aureus dan bakteri gram negatif Salmonella typhi Ekstrak (konsentrasi 10%) Rata- rata diamener zona hambat (mm) Staphylococcus aureus Salmonella typhi n - heksan 9,77 15,86 Kloroform 20,89 27,69 Etil asetat 19,44 21,74 Kontrol negative n - heksan 0 0 Kloroform 0 0 Etil asetat 0 0
Ekstrak  fraksi n -heksan,  ekstrak fraksi  kloroform  dan  ekstrak  fraksi  etil asetat bunga kamboja dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Salmonella  typhi (Tabel  2)
karena  memiliki  beberapa  senyawa  kimia yang  bersifat  antibakteri  yaitu  terpenoid, saponin, tanin dan flavonoid.
Senyawa  terpenoid  yang  memiliki aktivitas sebagai antimikroba yaitu monoterpenoid  linalool,  diterpenoid  phytol
dan triterpenoid saponin (Gunawan, 2008).  Mekanisme  terpenoid  sebagai antibakteri dengan cara merusak membran  sel  bakteri  (Cowan,  1999). Kerusakan  membran  sel  dapat  terjadi ketika  senyawa  aktif  antibakteri  bereaksi dengan  sisi  aktif  dari  membran  atau dengan  melarutkan  konstituen  lipid  dan meningkatkan permeabilitasnya. Membran sel  bakteri  terdiri  dari  fosfolipid  dan molekul  protein.  Adanya  peningkatan permeabilitas  maka  senyawa  antibakteri dapat  masuk  ke  dalam  sel  dan  dapat melisis  membran  sel  atau  mengkoagulasi sitoplasma dari sel bakteri (Mayanti et  al. , 2011).
Sementara   senyawa  saponin  dapat bekerja  sebagai  antimikroba  dengan  cara menurunkan  tegangan  permukaan  pada dinding sel mikroba sehingga mengganggu permeabilitas sel.
Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri yaitu dengan cara
menyebabkan  kebocoran  protein  dan enzim dari dalam sel bakteri (Madduluri et al. ,  2011).  Apabila  saponin  berinteraksi dengan  sel  bakteri  maka  bakteri  tersebut akan  pecah  atau  lisis  (Poeloengan  dan Praptiwi, 2012).
Ekstrak kloroform yang mengandung  senyawa  tanin  memberikan zona  hambat  terhadap  semua  bakteri  uji, meskipun diameter zona hambatnya berbeda-beda.  Hal  ini  sesuai  dengan (Parekh et  al. ,  2005)  yg juga  menemukan bahwa  aktivitas  antibakteri  dipengaruhi oleh  polaritas  senyawa  yang  diekstraksi
oleh masing-masing pelarut dengan kemampuan  zat  tersebut  untuk  menyebar pada  media  yang  digunakan  dalam pengujian  aktivitas  antibakteri.  Tanin memiliki  sifat  antimikroba  karena  memiliki senyawa astringen yang dapat mengganggu  aktivitas  dinding  sel  dan membran sel mikroba. Mekanisme antibakteri senyawa fenol dalam membunuh  mikroorganisme  yaitu  dengan mendenaturasi protein sel. Ikatan hidrogen  yang  terbentuk  antara  fenol  dan protein  mengakibatkan  struktur  protein menjadi  rusak.  Ikatan  hidrogen  tersebut akan mempengaruhi permeabilitas dinding sel  dan  membran  sitoplasma  karena keduanya tersusun atas protein.
Permeabilitas  dinding  sel  dan  membran sitoplasma yang terganggu dapat menyebabkan ketidakseimbangan makromolekul dan ion dalam sel sehingga sel  menjadi  lisis  (Palczar  dan  Chan, 1988).
Pada  aktivitas  antibakteri,  senyawa polifenol dengan konsentrasi rendah dapat merusak membran sitoplasma sel, sedangkan pada konsentrasi tinggi senyawa fenol berkoagulasi dengan protein seluler. Menurut (Volk dan Wheller,  1984)  aktivitas  tersebut  sangat efektif saat bakteri dalam tahap pembelahan  dimana  lapisan  fosfolipid  di sekeliling  sel  sedang  dalam  kondisi  yang sangat  tipis  sehingga  polifenol  mudah merusak isi sel. Flavonoid adalah golongan  dari  senyawa  fenol  yang  dapat merusak  sel  mikroba  dengan  melakukan
penetrasi ke dalam membran sel sehingga menyebabkan terkoagulasinya protein pada  membran  sel  yang  mengakibatkan struktur protein rusak.
Efektivitas  saponin,  terpenoid,  tanin dan flavonoid dalam menghambat pertumbuhan bakteri didukung oleh penelitian  (Sari et  al., 2015)  yang menggunakan  ekstrak  bunga  kamboja putih  sebagai  uji  aktivitas  antimikroba terhadap  bakteri Escherchia  coli dengan menggunakan  metode  cakram.  Sari et  al.
(2015)  menjelaskan  bahwa  tanaman kamboja  putih  mengandung  beberapa jenis  senyawa  metabolit  sekunder  seperti flavonoid, terpenoid dan saponin.
Dari  hasil  uji  aktivitas  antibakteri bunga kamboja ( Plumeria alba) , menunjukan  bahwa  senyawa  antibakteri yang terkandung di dalam fraksi n -heksan, fraksi  kloroform  dan  fraksi  etil  asetat memiliki  sifat  berspektrum  luas. Ini  berarti ekstrak tersebut memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus  aureus (gram  positif)  dan Salmonella  typhi (gram  negatif),  sama seperti  antibiotik  amoxicillin.  Amoxicillin yang digunakan merupakan jenis antibiotik yang mempunyai sifat spektrum kerja luas dan  sering  digunakan  karena  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  Gram positif  dan  bakteri  Gram  negatif.  Hal  ini ditunjukkan dengan terbentuknya diameter zona  bening  amoxicillin  terhadap  aktivitas antibakteri  untuk  kedua  bakteri  masing- masing  sebesar  26,52  mm  pada  bakteri Staphylococcus  aureus dan  35,44  mm
pada bakteri Salmonella typhi . Mekanisme kerja amoxicillin yaitu menghambat petumbuhan  bakteri  dan  menghambat biosintesis  (pembentukan)  dinding  sel pada bakteri.
Kontrol negatif berupa pelarut DMSO merupakan pelarut yang digunakan  untuk  melarutkan  ketiga  jenis pelarut  tidak  menghasilkan  zona  hambat terhadap S.  aureus  dan  S.  typhi. Dimetil sulfoksida (DMSO) adalah senyawa organosulfur yang dapat melarutkan senyawa polar dan nonpolar dan juga larut dalam  berbagai  pelarut  organik  maupun air  (Pratiwi,  2008).  Tidak  adanya  zona hambat  tersebut  membuktikan  bahwa zona hambat yang terbentuk tidak dipengaruhi  oleh  jenis  pelarut  melainkan karena  aktivitas  senyawa  aktif  yang  ada pada  ekstrak  bunga  kamboja  ( Plumeria alba ) sebagai antibakteri.
Kekuatan  antibakteri  suatu  ekastrak ditentukan  oleh  besarnya  zona  hambat yang  terbentuk.  Kekuatan  antibakteri digolongkan  menjadi  empat  kategori  yaitu kategori  sangat  kuat,  kuat,  sedang  dan lemah.    Ekstrak  dikatakan  memiliki  daya hambat  dengan  kategori  sangat  kuat apabila  diameter  daya  hambat  yang dihasilkan  lebih  dari  20  mm.  Ekstrak dikatakan  memiliki  daya  hambat  dengan kategori  kuat  apabila  diameter  daya hambat yang dihasilkan berkisar antara 10 mm  -  20  mm.  Ekstrak  dikatakan  memiliki diameter  daya  hambat  katergori  sedang apabila  daya  hambat  yang  dihasilkan berkisar  5  mm  -  10  mm.  Dan  ekstrak
dikatakan  memiliki  diameter  daya  hambat kategori  lemah  apabila  diameter  daya hambat yang dihasilkan kurang dari 5 mm (Davis and Stout, 1971).
Berdasarkan penggolongan
kekuatan antibakteri tersebut, maka dapat dikatakan  bahwa  fraksi n -heksan  dari bunga  kamboja  ( Plumeria  alba )  dengan konsentrasi 10% memiliki kekuatan
menghambat pertumbuhan bakteri kategori sedang untuk bakteri Staphylococcus  aureus dan  kategori  kuat untuk  bakteri Salmonella  typhi .  Fraksi kloroform  konsentrasi  10%    memiliki kekuatan menghambat pertumbuhan bakteri   kategori  sangat kuat  untuk kedua bakteri dan fraksi etil asetat 10%  memiliki kekuatan menghambat pertumbuhan bakteri kategori kuat untuk Staphylococcus aureus dan  kategori sangat  kuat  untuk    bakteri Salmonella typhi.

## KESIMPULAN
Ekstrak  fraksi n -heksan,  kloroform dan etil asetat bunga kamboja mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dan Salmonella typhi .  Zona  hambat  yang  dihasilkan fraksi n -heksan, kloroform dan etil asetat secara berturut-  turut  9,77  mm,  20,89  mm  dan 19,44  mm  terhadap  bakteri S.  aureus sedangkan  terhadap  bakteri S.  typhi menghasilkan zona hambat sebesar 15,86 mm,  27,69  mm  dan  21,74  mm.  Fraksi kloroform  dari  ekstrak  bunga  kamboja memiliki daya antibakteri tertinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
Cahyadi,  W.  2009.    Analisis  &  Aspek
Kesehatan Bahan Tambahan Pangan.  Edisi  Kedua.  Jakarta:
Bumi Aksara. Halaman 134.
Cowan,  MM.  2011.  Plant  Products  As Antimicrobial  Agents. Clin  micobiol rev. 12(4): 564-582.
Davis & Stout. 1971. Disc Plate Method of Microbiological  Antibiotic  Essay. Journal of Microbiology , 22(4).
Fatisa,  Y.  2013.  Daya  Antibakteri  Estrak Kulit  Dan  Biji  Buah  Pulasan ( Nephelium  mutabile )  Terhadap Staphylococcus
aureus Dan Escherichia  coli Secara  In  Vitro. Jurnal Peternakan , 10(1): 31 - 38.
Fitrial,  Y.  2009.  Analisis  Potensi  Biji  dan
Umbi Teratai (Nymphae pubescens  Willd) untuk  Pangan Fungsional Prebiotik dan Antibakteri Escherichia
coli
Enteropatogenik  K  1.1 .  Tesis . Bogor:    Pasca  Sarjana  Institut Pertanian Bogor.
Gunawan,  S.G.  2008. Farmakologi  dan Terapi Edisi ke-5 . Jakarta: FKUI.
Hidayah, N. Hisan, A.K, Solikin, A. Irawati.
Mustikaningtyas,  D.  2016.  Uji
Efektivitas Ekstrak Sargassum muticum Sebagai  Alternatif  obat Bisul Akibat Aktivitas Staphylococcus  aureus . Journal  of Creativity Students, 1(2): 1-9.
Husni,  M.  A.,  Murniana.,  Helwati,  H  dan Nuraini. 2013. Antimicrobial Activity Of  n-Hexane  Extracts  Of  Red Frangipani (Plumeria rocea) . Jurnal Natural, 13(1).
Kusumawati,  E.  Supriningrum,  R  dan Rosadi  R.  2015.  Uji  aktivitas antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Kecombrang Etlingera elatior (Jack) R.M.Sm Terhadap Salmonella  typhi . Jurnal  Ilmiah Manuntung, 1(1).
Madduluri,  S.  Rao  KB.  Sitaram,  B.  2011. In  Vitro  Evaluation  Of  Antibacterial Activity  Of  Five  Indigenous  Plants
Extract  Against  Five  Bacterial Pathogens Of Human. International Journal Of Pharmacy And Pharmaceutical  Science 5(4):  26- 37.
Mayanti  T.  Julaeha  E  dan  Putri  Y.  2011. Isolasi  Dan  Karakteristik  Senyawa Antibakteri  Dari  Fraksi  Etil  Asetat Kulit  Batang Lansium  domesticum
Corr.  Cv  kokossan.  (diunduh  di http://pustaka.unpad.ac.id/wp- content/uploads/2010/11/isolasi_da n_karakterisasi_senyawa_antibakt eri.pdf , tanggal 30 Mei 2019).
Nurcahyo,  H.,  dan  Purgiyanti.  2017.
Pemanfaatan Bunga Kamboja (Plumeria alba) Sebagai Aromaterapi  Pengusir  Nyamuk.
Parapemikir, 6(1).
Palczar,  M.J.  dan  Chan,  E.C.S.  1988.
Dasar- dasar Mikrobiologi 2.
Jakarta: Penerbit UI Press.
Parekh,  J.,  Darshana,  T.,  Jadeja,  R  dan
Sumitra,  C.  2005.  Efficacy  Of Aqueous And Methanol Extracts Of Some Medicinal Plants For
Potential Antibacterial Activity. Turk J Boil, 29: 203-210.
Poeloengan,  M  dan  Praptiwi,  P.  2012.  Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kulit Buah Manggis ( Garcinia Mangostana  Linn ). Media  Litbang Kesehatan, 20(2): 65-9.
Pramitasari,  O.  P.  2013.  Faktor  Risiko Kejadian  Demam  Tifoid  Pada Penderita  Yang  Dirawat  Di  Rumah Sakit  Umum  Daerah  Ungaran.
Jurnal Kesehatan Masyarakat
Universitas Diponegoro , 2(1).
Pratiwi,  S.T.  2008. Mikrobiologi  Farmasi.
Jakarta: Erlangga.
Sari,  F.  Resti,  D.,  Sari,  L.  R.  2015.  Uji
Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol Bunga Kamboja Putih
( Plumeria  alba )  Terhadap  Bakteri Escherchia Coli Dengan Menggunakan  Metode  Cakram. Prosiding Seminar Nasional Farmasi(SNIFA) UNJANI . Hlm. 215-219. Trisharyanti,  I.  dan  Febriani,  R.  2017. Skrining Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Etanol  Daun  Terhadap Salmonella Typhi Resistensi Kloramfenikol. JPSCR, 2(2).
Volk,  W.A.,  dan  Wheller,  M.F.  1984.
Mikrobiologi Dasar. Markham, Penerjemah: Adisoemarto S. Jakarta: Erlangga. Wahyuni, D.T. dan Widjanarko, S.B. 2015. Pengaruh  Jenis  Pelarut Dan  Lama Ekstraksi Terhadap Ekstrak Karotenoid  Labu  Kuning  Dengan Metode Gelombang Ultrasonik. Jurnal  Pangan  dan  Agroindustri, 3(2).
Wrasiati, L,P., Hartati, A dan Yuarini, D, A, A.  2011.  Kandungan  Senyawa Bioaktif  Dan  Karakteristik  Sensoris Ekstrak  Simplisia  Bunga  Kamboja (Plumeria sp) . Jurnal Biologi Udayana, 15(2).