## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Publisher : LP3M STIKES dr. Soebandi Jember

## UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK KUNCI PEPET
( Kaempferia rotunda
L.)
Dina Trianggaluh Fauziah 1,2* , Rina Herowati 1 , Gunawan Pamudji Widodo 1
1) Fakultas Farmasi; Universitas Setia Budi; Surakarta
2) Prodi Farmasi; STIKES dr. Soebandi; Jember
Email:dynathreea32@gmail.com

## 3. ABSTRACT
Introduction: Kunci Pepet Rhizome is a medicinal plant  from  ginger family which contains many secondary metabolites including  essential  oils, flavonoids  and  terpenoids,  which can act as therapy for dysentery, diarrhea, and also for body slim treatment. Objective: This study aims  to  determine  the  content  of  secondary  metabolite  compounds  in  pepet  keys. Methods: The extraction method that was used in this research is fractionated solvent extraction using n-hexane,  dichloromethane  and  ethanol.  Those  fractions  were  tested  for  its  antimicrobial activities using  agar diffusion  method. Identification of the qualitative  content of secondary metabolites is carried out by TLC. Results: The rendemen  extract (1.56%), n-hexane fraction (7.12%), dichloromethane  fraction (8.35%) and aqueous fraction (9.79%). Inhibition zones of ethanol  extract,  n-hexane,  dichloromethane  and  aqueous  fraction  against  Escherichia  coli, Staphylococcus aureus and Candida albicans were 2.08cm, 1.37cm, 1.47cm, 1.27cm, 2.13cm,
1.30cm, 1.30cm, 1.57cm, 1.82cm, 1.27cm, 1.50cm, 1.33cm, respectively. The inhibition zones of the crude extract, fractions of n-hexane, dichloromethane and aqueous fraction are 1.82cm, 1,27cm,  1.50cm,  1.33cm.  GCMS  analysis  of  the  extract  showed  that  it  contains  contains benzoic acid  (8.97%), hexadecane (28.84% and 33.50%), benzyl benzoate (89.21%, 14.71%, 7.23% and 19.88%), 2-hydroxy benzoic acid ester phenilmethil (0.90%), heksadekanoat  acid (0.92%,  10.10%,  7.04%  and  11.71%),  benzyl  alcohol  (12.30%),  pentadekana  (7.22%), octadecanoic  methyl  ester  (5.43%). Conclusion: The  extraction  method  showed  positive Inhibition for antimicrobial activities.

## ABSTRAK
Latar belakang: Kunci pepet  merupakan tanaman obat dari  famili  jahe-jahean  yang dikenal memiliki kandungan minyak atsiri, flavonoid, terpenoid yang berfungsi sebagai obat disentri, obat diare dan pelangsing. Tujuan: Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui kandungan senyawa metabolit  sekunder  dalam  kunci  pepet. Metode: Metode  ekstraksi  yang  digunakan  adalah maserasi  bertingkat dengan pelarut n-heksana, diklorometana dan etanol. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan difusi agar. Identifikasi  kualitatif kandungan metabolit sekunder dilakukan dengan kromatografi lapis tipis. Hasil: Rendemen ekstrak (1,56%), fraksi n-heksan (7,12%),  fraksi  diklorometan  (8,35%)  dan  fraksi  berair  (9,79%).  Daya  hambat  pengujian antibakteri Escherichia  coli pada  ekstrak,  fraksi  n-heksan,  diklorometan  dan  fraksi  berair (2,08cm,  1,37cm,  1,47cm,  1,27cm), Staphylococcus  aureus pada  ekstrak,  fraksi  n-heksana, diklorometana  dan  fraksi  berair  (2,13cm,  1,30cm,  1,30cm,  1,57cm), Candida  albicans pada ekstrak, fraksi n-heksan, diklorometan dan  fraksi  berair  (1,82cm,  1,27cm, 1,50cm, 1,33cm).
Analisa  GCMS  menunjukkan  bahwa  komponen  senyawa  volatil  dalam  minyak  atsiri  kunci pepet  adalah  asam  benzoat  (8,97%),  heksadekana  (28,84%  dan  33,50%),  benzil  benzoat (89,21%, 14,71%, 7,23%, 19,88%), asam benzoat 2-hidroksi phenilmethil ester (0,90%), asam heksadekanoat  (0,92%,  10,10%,  7,04%  dan  11,71%),  asam  9,12  oktadekadienoat  (9,22%), asam  1,2  benzene  dikarboksilat  (7,11%),  asam  1,2  benzene  dikarboksilat  bis  (2  etilheksil) ester  (41,40%),  benzil  alkohol  (12,30%),  pentadekana  (7,22%),  bis  (2-etilheksil)ftalat (6,31%), metil ester oktadekanoat (5,43%). Kesimpulan: Metode ekstraksi menunjukkan hambatan positif terhadap antimikroba.
Submission : 09-09-2020
Revised : 25-09-2020
Accepted : 07-10-2020
Kata  Kunci : Kunci Pepet, Fraksinasi, GCMS
Keywords  : Kunci  pepet, Fractination, GCMS

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Publisher : LP3M STIKES dr. Soebandi Jember
Pendahuluan:
Rimpang kunci pepet banyak ditemukan  tumbuh  di  wilayah  Jawa, Indonesia, dibeberapa bagian Thailand dan India.  Seperti  tanaman  pada  umumnya, tanaman  ini  mengandung  minyak  atsiri, flavonoid, terpenoid yang dapat digunakan sebagai  obat  disentri,  obat  diare  dan pelangsing tubuh.
Berdasarkan  penelitian  sebelumnya mengenai rimpang kunci pepet mengandung n -pentadekana,  camphene, kamfor  dan  bornil  format  (Woerdenbag  et al.,  2004).  Sedangkan  menurut  hasil penelitian  lainnya  kunci  pepet  juga mengandung senyawa terpenoid, glikosida dan  polifenol  (Sukari  et  al.,  2008); (Madaka & Tewtrakul, 2011); (Tang et al., 2014); (Pancharoen et al., 1989).
Rimpang  jahe-jahean  ini,  yaitu  kunci pepet,  sudah  lama  sering  dikonsumsi secara konvensional oleh penduduk sekitar, namun penelitian mendalam mengenai  sifat-sifat  aktivitas  biologisnya belum  banyak  dilaporkan.  Sehingga  pada penelitian ini, penulis melakukan maserasi kunci  pepet,  yang  kemudian  dilanjutkan dengan  fraksinasi  menggunakan  corong pisah. Ekstrak dan fraksi diuji antimikroba terhadap Escherichia  coli , Staphylococcus aureus dan Candida albicans . Selanjutnya dianalisa kandungan senyawa kimia menggunakan GCMS.
. Metode: Sampel yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  rimpang  kunci  pepet, diperoleh  dari  pegunungan  Argopuro Kabupaten  Jember.  Pemisahan  senyawa ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi  menggunakan  pelarut  etanol. Selanjutnya  dilakukan  fraksinasi  dengan menggunakan corong pisah dengan pelarut n-heksan dan diklorometan.
Identifikasi kualitatif dilakukan
menggunakan  kromatografi  lapis  tipis terhadap  ekstrak,  fraksi  n-heksan,  fraksi diklorometan dan fraksi berair diidentifikasi  berdasarkan  noda  warna pada  plat  KLT  diantaranya  alkaloid
(reagen  Dragendorf),  flavonoid  (reagen Sitroborat),  tanin  (reagen  FeCl 3 ),  saponin (reagen  Liberman  Bourchat),  terpenoid (reagen Anisaldehid asam sulfat).
Pengujian aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus ,  serta  antijamur terhadap Candida albicans dengan menggunakan  metode  difusi  agar,  dimana aktivitas  diukur  dari  besarnya  daerah hambatan  pertumbuhan  bakteri  dalam media padat oleh ekstrak dan ketiga fraksi yang berada dalam kertas cakram. Ekstrak dan  fraksi  yang  paling  aktif  dianalisa menggunakan  GCMS  untuk  mengetahui komponen senyawa .
Hasil : T abel  1.  Hasil  identifikasi  kandungan kimia
(a) (b) (c) Sampel Kandungan kimia
Alkaloi d Flavonoi d Tani n Saponi n Terpenoi d Ekstrak (+) (+) (+) (+) (+) Fraksi n - heksan (+) (+) (-) (+) (+) Fraksi dikloro metan (+) (+) (+) (+) (+) Fraksi berair (-) (-) (-) (+) (+)

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Publisher : LP3M STIKES dr. Soebandi Jember
(d)
(e)
Gambar  1.  Identifikasi  kualitatif  dengan KLT  (a)  alkaloid,  (b)  flavonoid,  (c)  tanin, (d) saponin, (e) terpenoid
Tabel 2. Hasil uji aktivitas antimikroba rimpang kunci pepet
Sampel Daya hambat (cm) Escherichia coli Staphylococcu s aureus Candida albicans Ekstrak 2,08±0,35 2,13±0,44 1,82±0,31 Fraksi n -heksan 1,37±0,21 1,30±0,20 1,27±0,21 Fraksi diklorometan 1,47±0,25 1,30±0,30 1,50±0,30 Fraksi berair 1,27±0,31 1,57±0,31 1,33±0,31
(a) (b)
(c)
Gambar  2.  Uji  aktivitas  antibakteri  (a) Escherichia  coli ,  (b) Staphylococcus aureus , (c) Candida albicans
Tabel 3. Hasil data komponen senyawa
Komponen senyawa Luas area (%) Ekstra k Fraksi n- heksa n Fraksi diklorometa n Fraks i berair Asam benzoat 8,97 - - - Heksadekana 28,84 - 33,50 Benzil benzoat 89,21 14,71 7,23 19,88 asam benzoat, 2-hidroksi phenilmethil ester 0,90 - - - Asam heksadekanoat 0,92 10,10 7,04 11,71 Asam 9,12- oktadekadienoa t - 3,55 0,59 2,95 Asam 1,2- benzena dikarboksilat - 7,11 - - Ester bis (2 etilheksil), 1,2- benzena dikarboksilat - - 41,40 - Benzil alkohol - - 12,30 - Pentadekana - 0,47 7,22 3,80 Bis (2- etilheksil) ftalat - - - 6,31 Ester metil oktadekanoat - 1,50 - 5,43
Diskusi :
Pada pembuatan ekstrak etanol rimpang  kunci  pepet  dengan  metode maserasi,  dimana  serbuk  400  gram diperoleh  rendemen  ekstrak  1,56%,  fraksi n-heksan 7,12%, diklorometan 8,35%, dan fraksi  berair  9,79%.  Hasil  identifikasi ekstrak, fraksi heksan, fraksi diklorometan dan fraksi berair dapat dilihat pada tabel 1 Hasil identifikasi kandungan kimia.
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  pada gambar 2 menunjukkan bahwa ekstrak dan ketiga fraksi positif memiliki daya hambat terhadap Escherichia  coli , Staphylococcus

## Jurnal Kesehatan dr. Soebandi
Publisher : LP3M STIKES dr. Soebandi Jember
aureus dan Candida albicans . Selanjutnya ekstrak  dan  ketiga  fraksi  aktif  dianalisa menggunakan  GCMS,  dapat  dilihat  hasil data komponen senyawa pada tabel 3.

## Kesimpulan:
Ekspresi  emosi  yang  dimiliki  oleh pasien  memiliki  rata-rata  15,90  (rendah), sedangkan gejala yang muncul pada pasien rata-ratanya=36,63.  Hasil  penelitian  ini menyatakan  bahwa  tidak  ada  hubungan antara ekspresi emosi pasien dengan gejala yang  muncul  pada  pasien  gagal  jantung. Identifikasi  kualitatif  dengan  KLT  pada ekstrak  dan  ketiga  fraksi  menunjukkan hasil positif terpenoid dan saponin.
Ekstrak, fraksi n -heksan, fraksi diklorometan,  dan  fraksi  berair,  positif menunjukkan daya hambat terhadap bakteri Escherichia  coli , Staphylococcus aureus dan jamur Candida albicans .
Kandungan  senyawa  mayor  yang muncul  dari  ekstrak  dan  ketiga  fraksi adalah benzil benzoat dan asam heksadekanoat.  Ditambahkan  pula,  jenis senyawa  lainnya  yang  juga  muncul  dalam fraksi  kunci  pepet  ini  adalah  zeylenol, epoksida dan krotepoksida.

## Daftar pustaka:
Madaka, F., & Tewtrakul, S. (2011). Anti- allergic  activity  of  some  selected plants in the genus Boesenbergia and Kaempferia. Songklanakarin Journal of Science and Technology .
Pancharoen,  O.,  Tuntiwachwuttikul,  P.,  & Taylor,  W.  C.  (1989).  Cyclohexane oxide  derivatives  from  Kaempferia angustifolia and Kaempferia species. Phytochemistry . https://doi.org/10.1016/0031- 9422(89)80198-0
Sukari,  M.  A.,  Sharif,  N.  W.  M.,  Yap,  A. L.  C.,  Tang,  S.  W.,  Neoh,  B.  K.,
Rahmani,  M.,  Ee,  G.  C.  L.,  Taufiq- Yap,  Y.  H.,  &  Yusof,  U.  K.  (2008).
CHEMICAL CONSTITUENTS VARIATIONS  OF  ESSENTIAL OILS FROM

## RHIZOMES OF

## FOUR ZINGIBERACEAE
SPECIES. The Malaysian Journal of Analytical Sciences .
Tang,  S.  W.,  Sukari,  M.  A.,  Neoh,  B.  K., Yeap,  Y.  S.  Y.,  Abdul,  A.  B.,  Kifli, N.,  &  Cheng  Lian  Ee,  G.  (2014). Phytochemicals  from  kaempferia angustifolia Rosc. and their cytotoxic and antimicrobial activities. BioMed Research International .
https://doi.org/10.1155/2014/417674
Woerdenbag,  H. J.,  Windono, T.,  Bos, R., Riswan,  S.,  &  Quax,  W.  J.  (2004). Composition  of  the  essential  oils  of Kaempferia rotunda L and Kaempferia angustifolia Roscoe rhizomes  from  Indonesia. Flavour and Fragrance Journal . https://doi.org/10.1002/ffj.1284