## Jurnal Agrica Ekstensia
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493

## PEMANFAATAN JAMUR METHARIZIUM ANISOPLIAE BERASAL DARI ISOLAT BRONTISPA LONGISSIMA MENGENDALIKAN LARVA ( ORYCTES RHINOCEROS ) SECARA INVITRO
Lita Nasution 1 , Abdul Rahman Cemda 2 , Soni Isnaini 3 ,  Muhammad Afrillah 4 , Pindi Filsa 5
1 Dosen Agroteknologi, Fakultas Pertanian, UMSU, Medan, Indonesia.
2 Dosen Agribisnis, Fakultas Pertanian, UMSU, Medan, Indonesia.
3 Dosen STIPER Dharma Wacana Metro, Kota Metro, Bandar Lampung, Indonesia.
4 Dosen Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat Meulaboh, Indonesia
5 Alumni Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Al-Azhar, Medan, Indonesia.
Koresponden Email: litanasution@umsu.ac.id

## Abstrak
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  virulensi  jamur  entomopatogen Metharizium  anisopliae isolat Brontispa  longissima dengan  konsentrasi  yang  berbeda  untuk  mengendalikan  larva  hama  kumbang  tanduk O. rhinoceros pada tanaman kelapa sawit. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Penyakit Tanaman, Fakultas Pertanian, USU pada Oktober 2020. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) Non Faktorial yang terdiri dari 4 perlakuan dengan 5 ulangan. Adapun  perlakuannya sebagai berikut : M 0 (Tanpa pemberian jamur),  M 1 (Jamur M.  anisopliae dengan  konsentrasi  20  gr  x  100 -1 ml aqua  pro  injection ) , M 2 (Jamur M. anisopliae dengan konsentrasi 40 gr x 100 -1 ml aqua pro injection ), M 3 (Jamur M. anisopliae dengan konsentrasi 60  gr  x  100 -1 ml aqua  pro  injection .).  Parameter  yang  diamati  meliputi  persentase mortalitas  larva kumbang tanduk O. rhinoceros , jumlah kerapatan konidia M. anisopliae , gejala kematian larva O. rhinoceros secara visual, dan  waktu kematian larva O.  rhinoceros. Hasil analisis  sidik ragam menunjukkan  bahwa  persentase mortalitas larva hama O. rhinoceros terhadap perlakuan berbeda tidak nyata pada 1-5 Hari Setelah Aplikasi (HSA), berbeda nyata  pada  6  Hari  Setelah  Aplikasi  (HSA)  dan  berbeda  sangat  nyata  pada  7-14  Hari  Setelah  Aplikasi  (HSA). Persentase mortalitas larva Oryctes rhinoceros tertinggi terdapat pada perlakuan M 1 , M 2 dan M 3 sebesar 100% terlihat  pada hari  ke-13 dan ke-14  sedangkan persentase  mortalitas  terendah  terdapat  pada  perlakuan  M 0 yaitu 24%, jumlah kerapatan konidia tertinggi terlihat pada jamur M. anisopliae dengan konsentrasi 60 gr x 100 -1 ml aqua  pro  injection dengan  pengenceran  10 2 dengan  kerapatan  konidia  sebanyak  6,05  x  10 8 .  Gejala  kematian larva O.  rhinoceros yang  terinfeksi  jamur M.  anisopliae yaitu  larva  mengeras  dan  akan  muncul  koloni  jamur berwarna hijau tua disekitar tubuh larva dan waktu yang dibutuhkan  jamur M. anisopliae untuk menyebabkan kematian awal adalah 2 hari setelah aplikasi (HSA) yaitu pada perlakuan M 2 dan M 3 . Setelah itu kematian 4 hari setelah aplikasi (HSA) pada perlakuan M 1 . Kedua Jamur Fusarium sp dan Trichophyton sp efektif dimanfaatkan sebagai pengendali serangan larva O. rhinoceros skala laboratorium/invitro.
Kata Kunci : Jamur Metharizium Anisopliae, Asal Isolat Brontispa Longissima, Larva Oryctes Rhinoceros,  In-vitro

## Abstract
This  study  aimed  to  determine  the  virulence  of  entomopathogenic  fungus  M.  anisopliae  using  Brontispa longissima isolates with different concentrations to control larvae of the horn beetle O. Rhinoceros by invitro. This research was conducted at the Plant Disease Laboratory, Faculty of Agriculture, USU in October 2020. This study used a non-factorial completely randomized design (CRD) consisting of four treatments with five replications. The treatments  were  as  follows:  M0  (without  M.  anisopliae  mushroom),  M 1 (M.  anisopliae  mushroom  with  a concentration of 20 gr x 100 -1 ml aqua pro injection), M 2 (M. anisopliae mushroom with a concentration of 40 gr x 100 -1 ml aqua pro injection). The result of analysis of variance showed that the mortality percentage of O. rhinoceros was not significantly different at 1-5 Days After Application (HSA), significantly different at 6 Days After  Application  (HSA)  and  very  significantly  different  at  7-14  Days  After  Application.  (HSA).  The  highest mortality percentage of O. rhinoceros larvae was found in the M1, M 2 and M 3 treatments on the 13 th and 14 th days while the lowest mortality percentage was found in the M 0 treatment, which was 24%, the highest conidia density was seen in the fungus M. anisopliae with concentration of 60 gr x 100 -1 ml aqua pro injection with a dilution of 10 2 with a conidia density of 6.05 x 10 8 . Symptoms of the death from O. rhinoceros larvae which infected with M. anisopliae fungus are hardened larvae and have dark green fungal colonies will appear around the body larvae, and time required for M. anisopliae fungus to cause early death was 2 days after application (HSA) in M 2

## Jurnal Agrica Ekstensia
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493
and M 3 treatments. After that death 4 days after application (HSA) in the M1 treatment. Both Fusarium sp and Trichophyton sp fungi were effectively used to control the larval attack of O. rhinoceros in laboratory/in vitro scale.
Keywords: Entomopathogenous fungus Fusarium sp, Trichophyton sp, Oryctes rhinoceros larvae, by in-vitro

## PENDAHULUAN
Pertanian merupakan salah satu sektor utama dalam  perekonomian  masyarakat  Indonesia. Kelapa  sawit  ( Elaeis  guineensis )  sebagai tanaman  dengan  produk  utama  minyak  sawit/ Crude Palm Oil (CPO). Tanaman kelapa sawit menduduki  posisi  penting  di  sektor  pertanian umumnya,  dan  sektor  perkebunan  khususnya, karena menghasilkan nilai ekonomi terbesar per hektarnya di dunia [1].
Salah  satu  permasalahan  dalam  budidaya tanaman  kelapa  sawit  adalah  serangan  hama yang dapat merusak tanaman sehingga produksi menurun.  Hama  dapat  menyerang  kelapa sawit sejak  tanaman  belum  menghasilkan  (TBM) hingga  tanaman  menghasilkan  (TM)  [2].
Kumbang tanduk (Oryctes rhinoceros) merupakan hama penggerek pucuk kelapa sawit yang menjadi hama utama tanaman kelapa sawit yang  mengakibatkan  rusaknya  titik  tumbuh, sehingga  mematikan  tanaman  dan  produksi tandan  buah  segar  mengalami  penurunan produksi [3].
Serangan  kumbang  tanduk  terjadi  karena tersedianya  bahan  makanan  bagi  kumbang tanduk,  yaitu  bahan  organik  yang  terdapat  di lahan  perkebunan seperti  pengaplikasian mulsa tandan  kosong  kelapa  sawit  yang  berlebihan pada  tanaman  menghasilkan  (TM)  dan  sisa tanaman  replanting  merupakan  bahan  organik yang disukai oleh kumbang tanduk [4].
Upaya  pengendalian  kumbang  tanduk  telah banyak dilakukan untuk menekan populasi hama menggunakan  cara  mekanik,  kimiawi  maupun pengendalian  hayati,  namun  demikian  belum berhasil  menekan  populasi  [5].  Pengendalian kumbang  tanduk  sebagian  besar  dilakukan menggunakan  insektisida  kimia  sintetik  yang dianggap  sebagai  pengendalian  utama  karena dapat  mengendalikan  hama  secara  cepat  dan praktis.  Namun  penggunaan  insektisida  kimia sintetik  dapat  menimbulkan  dampak  negatif seperti  meracuni  organisme  non  target, resistensi, dan resurjensi hama [3]. Penggunaan insektisida  memiliki  dampak  negatif  terhadap lingkungan karena mengandung residu insektisida Dichloro  Diphenyl  Trichloroethane (DDT) yang akan meningkatkan bahaya
akumulasi residu kimia sintetik pada lahan dan hasil  produksi  tanaman  sehingga  dapat meningkatkan resiko kerusakan lingkungan [6].
Pemanfaatan  agens  hayati  seperti  virus, cendawan,  bakteri,  nematoda  dan  protozoa sebagai bioinsektisida mempunyai prospek yang baik  dalam  menggendalikan  populasi  hama tanaman  karena  memiliki  patogenisitas  yang tinggi  terhadap  hama  sasaran,  selain  itu  dapat digunakan  dalam  jangka  waktu  yang  panjang, relatif  murah  dan  ramah  lingkungan  [7]. Metarhizium  anisopliae  merupakan  salah  satu cendawan patogen pada serangga karena potensi sebagai pengendali alami untuk mengendalikan hama serangga pada berbagai komoditi tanaman. Karakteristik  serangan  jamur  entomopatogen dapat   mempengaruhi  pertumbuhan  larva kumbang tanduk di perkebunan kelapa sawit [8]. Hasil penelitian menunjukkan bahwa  jamur M.  anisopliae (diaplikasikan  jamur M. anisopliae pada  20  gr  media  jagung)  dapa mematikan larva kumbang tanduk sebesar 100% [9]. Berdasarkan uraian diatas, tujuan penelitian adalah  untuk  mengkaji  pengaruh  konsentrasi Metarhizium  anisopliae yang  diisolasi  dari Brontispa  longissima terhadap  mortalitas  dan waktu kematian larva kumbang tanduk instar III yang berasal dari tanaman kelapa sawit secara in vitro.

## METODE PENELITIAN
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian telah dilaksanakan
di Laboratorium  Penyakit  Tanaman,  Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara (FP USU) pada Bulan Oktober 2020.

## Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  larva  hama  kumbang tanduk  yang  berasal  dari  PT.  Perkebunan Nusantara III (Persero) kebun Tanah Raja, jamur Metarhizium  anisopliae yang  diisolasi  dari Brontispa longissima pada pertanaman kelapa di kecamatan  Percut  Sei  Tuan  kabupaten  Deli Serdang ,  aqua  pro  injection ,  beras, Potato Dextrose Agar (PDA), dan alkohol 96%.

## Jurnal Agrica Ekstensia
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  cawan  petri  pyrex, tabung  reaksi  pyrex, rak tabung reaksi pyrex, bunsen pyrex, laminar air flow (LAF), thermo scientific 1300 series B2, plastik  putih  tahan  panas  mahkota  obor, timbangan  elektrik  gf-400,  mikroskop zeiss primo star , perangkat digital mikroskop optilab, object  glass  one  lab  7101,  haemocytometer nesco, shaker denley reciprocal mixer , autoclave tomy  sx-700,  hand  sprayer  ideal SlL-001 kapasitas  1  liter, test  tube ,  stoples,  kain  kassa, karet gelang, label nama, sarung tangan, masker, cling  wrap klin  pak,  alumunium  foil  klin  pak, beaker glass pyrex, erlemeyer pyrex, gelas ukur pyrex, mikro pipet pyrex, jarum ose, kamera, dan alat tulis.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL) Non Faktorial yang terdiri dari 4 perlakuan, yaitu:
M 0 : Tanpa Pemberian Jamur M 1 :  Jamur Metarhizium  anisopliae dengan konsentrasi  20  gr  x  100 -1 ml aqua  pro injection aplikasi pada larva dan media . M 2 :  Jamur Metarhizium.  anisopliae dengan konsentrasi  40  gr  x  100 -1 ml aqua  pro injection aplikasi pada larva dan media. M 3 : Jamur  Metarhizium.  anisopliae dengan konsentrasi  60  gr  x  100 -1 ml aqua  pro injection aplikasi pada larva dan media.
Berdasarkan  perlakuan  yang  dilakukan, maka  jumlah  ulangan  dapat  ditentukan  dengan rumus sebagai berikut:
𝑡(𝑟 − 1) ≥ 15 … 𝑃𝑒𝑟𝑠 (1)
Dimana: t  = jumlah perlakuan r = jumlah ulangan
maka didapatkan r = 5
Berdasarkan uraian diatas dapat disusun unit perlakuan sebagai berikut :
Jumlah Perlakuan : 4 perlakuan Jumlah ulangan perlakuan : 5 ulangan Jumlah unit penelitian : 20 unit Jumlah larva per stoples : 5 ekor Jumlah larva yang diuji : 100 ekor Jarak antar stoples : 30 cm Jarak antar ulangan : 30 cm
Jumlah stoples jamur Metarhizium anisopliae : 16 stoples Jumlah stoples control : 4 stoples Jumlah stoples seluruhnya : 20 stoples
Model  matematika  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap Non Faktorial sebagai berikut:
𝑌 𝑖𝑗 = 𝜇 + 𝑁 𝑖 +  +𝜀 𝑖𝑗 … 𝑃𝑒𝑟𝑠 (2)
dimana: Y ij : Hasil pengamatan dari perlakuan pemberian jamur M.anisopliae dengan metode aplikasi semprot pada larva dan media ke-i dan ulangan ke-j
𝜇 : Pengaruh nilai tengah
𝑁 𝑖 : Pengaruh dari perlakuan pemberian jamur Metarhizium anisopliae pada  taraf  ke-i
∑ 𝑖𝑗 : Pengaruh galat dari perlakuan pemberian jamur Metarhizium anisopliae dengan metode semprot pada larva dan media ke- i dan  ulangan ke-j
Terhadap  faktor  yang  berpengaruh  nyata dilakukan  uji  lanjut  dengan  menggunakan  uji Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf 5% dan 1%.

## Pelaksanaan Penelitian

## Penyedian larva kumbang tanduk
Larva  kumbang  tanduk  dipelihara  dalam stoples  yang  diberi tutup  kain  kassa  dan  diberi makan  serasah  pohon  kelapa  sawit.  Larva dipelihara  di  Laboratorium  Penyakit  Tanaman FP  USU.  Larva  dipelihara  agar  bertumbuh dengan  baik.  Kemudian  diambil  yang  ukuran dan  besarnya  sama  untuk  dijadikan  bahan pengujian.  Larva  yang  akan  diuji  adalah  larva instar III yang aktif dan sehat.

## Sterilisasi alat pendukung penelitian
Alat  yang  digunakan  terlebih  dahulu disterilisasi dari patogen yang tidak diinginkan, dicuci  bersih  terlebih  dahulu  menggunakan alkohol  96%  dan Clorox 1%.  Kemudian dimasukkan dalam autoclave pada suhu 120° C dengan tekanan 1 atm selama 15 menit.

## Penyediaan jamur Metarhizium anisopliae
Jamur  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah Metarhizium  anisopliae yang  diisolasi dari Brontispa  longissima yang  berasal  dari kebun kelapa miliki Balai Besar Perbenihan dan

## Jurnal Agrica Ekstensia
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493
Proteksi  Tanaman  Perkebunan  (BBPPTP)  di kecamatan  Percut  Sei  Tuan  kabupaten  Deli Serdang yang dalam bentuk biakan murni. Untuk mengantisipasi kekurangan dari jamur yang akan digunakan  maka  jamur  diperbanyak  dengan ditumbuhkan di media beras yang berisi 100 gr per  bungkus  dan  diinkubasi  pada  suhu  ruang selama 30 hari. Pemindahan jamur ini dilakukan di  dalam laminar  air  flow (LAF)  untuk menghindari terjadinya kontaminasi. Jika terjadi kontaminasi,  maka  dilakukan  pemurnian kembali  dengan  mengambil  bagian  jamur
Metarhizium
anisopliae yang tidak terkontaminasi  untuk  ditumbuhkan  pada  media beras sampai didapatkan jamur yang benar-benar murni dan tidak terkontaminasi.

## Persiapan media perlakuan
Wadah  yang  digunakan  adalah  stoples dengan diameter 15 cm dan tinggi 15 cm sebagai tempat  hidup  larva  selama  penelitian.  Dicuci bersih  kemudian  dikeringkan.  Stoples  diisi dengan makanan larva kumbang tanduk berupa serasah  kelapa  sawit  yang  diambil  dari  PT. Perkebunan  Nusantara  III  kebun  Tanah  Raja dengan berat 200 gr per stoples. Media tersebut disediakan sebanyak 20 stoples. Kemudian larva kumbang  tanduk  dimasukkan  ke  dalam  stoples masing-masing  5  ekor.  Masing  masing  stoples kemudian  ditutup  dengan  kain  kasa  dan  diikat dengan karet gelang.

## Aplikasi jamur Metarhizium anisopliae
Pengaplikasian  dilakukan  hanya  sekali dengan cara menyemprotkan jamur entomopatogen Metarhizium  anisopliae sesuai perlakuan  pada  larva kumbang  tanduk dan media.  Aplikasi  jamur Metarhizium  anisopliae menggunakan hand  sprayer dengan  20  ml  per stoples  bersaman  dengan  inokulasi  larva. Aplikasi pada kontrol hanya dengan menyemprotkan aqua  pro  injection saja  pada larva.  Selanjutnya  diamati  setiap  hari  jumlah larva yang mati.

## Parameter Pengamatan

## Persentase mortalitas
Pengamatan mortalitas larva mulai dilakukan satu hari setelah aplikasi hingga 14 Hari Setelah Aplikasi (HSA).  Persentase  mortalitas  dihitung dengan rumus:
𝑎 𝑃 = 𝑥 100% … 𝑃𝑒𝑟𝑠 (3) 𝑏
Dimana: P  = Persentase mortalitas kumbang tanduk (%) a = Jumlah kumbang tanduk yang mati b = Jumlah kumbang tanduk  yang diamati

## Kerapatan konidia jamur
Jumlah kerapatan konidia jamur entomopatogen  dihitung  sebelum  aplikasi dilakukan.  Perhitungan  kerapatan  konidia dilakukan dengan cara suspensi masing-masing perlakuan dituang ke dalam tabung reaksi kecil, kemudian diambil 1 ml dan dicampurkan dalam 9 ml aqua pro injection . Kemudian divortex atau dishaker selama  ±  10  menit  hingga  suspensi homogen.  Selanjutnya  dilakukan  pengenceran sebanyak  2  kali,  lalu  hitung  konidia  pada pengenceran  10 2 .  Kemudian  suspensi  tersebut diambil  sebanyak  0,1  ml  dan  diteteskan  pada haemocytometer lalu  diamati  di  bawah mikroskop  binokuler  dengan  perbesaran  400x dengan menggunakan rumus sebagai berikut:
𝑡 𝑥 𝑑 𝐾 = (𝑛 𝑥 0,25)  ×  10 𝑏 … 𝑃𝑒𝑟𝑠 (4)
Dimana: K  : Kerapatan konidia t : Jumlah total konidia d : Tingkat pengenceran
n : Jumlah sampel yang diamati
0,25 : Faktor koreksi penggunaan kotak sampel skala kecil pada haemocytometer.
Gejala kematian larva kumbang tanduk secara visual Pengamatan gejala kematian larva
kumbang  tanduk  yang  terinfeksi  jamur entomopatogen Metarhizium anisopliae dilakukan setiap hari setelah jamur diaplikasikan pada  larva  dan  media.  Pengamatan  dilakukan dengan mengamati perubahan yang terjadi pada larva, yaitu berupa perubahan warna dari larva.

## Waktu kematian larva kumbang tanduk
Waktu  kematian  larva  kumbang  tanduk diamati  dari awal  hingga  benar-benar  mati  dan dicatat waktunya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Persentase Mortalitas Larva Kumbang Tanduk Untuk menganalisis pengaruh pengaplikasian jamur Metarhizium anisopliae terhadap persentase mortalitas larva kumbang tanduk,
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493
telah dilakukan pengolahan data secara statistik, seperti disajikan pada Tabel 1.
Berdasarkan  Tabel  1  dapat  dilihat,  bahwa pengamatan pada 1-5 hari setelah aplikasi (HSA) jamur Metarhizium  anisopliae menghasilkan persentase  mortalitas  tidak  berbeda  nyata terhadap seluruh perlakuan. Persentase mortalitas  pengamatan  pada  1-5  HSA  tertinggi adalah pada perlakuan M 2 (4-16%). Sedangkan
persentase terendah terdapat pada perlakuan M 0 (0%).
Selanjutnya  pengamatan  pada  6  HSA persentase  mortalitas  tertinggi  adalah  pada perlakuan  M 3 (40%),  sedangkan  persentase terendah pada perlakuan M 0 (0%).  Pengamatan pada  6  HSA,  terlihat  bahwa  perlakuan  M 3 berbeda tidak nyata dengan perlakuan M 2 dan M 1 tetapi berbeda nyata dengan perlakuan M 0
Tabel 1. Rata-Rata Persentase Mortalitas Larva Kumbang Tanduk Akibat Pengaplikasian Jamur Metarhizium anisopliae
Hari Pengamatan ke % (HSA) Perlak uan 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Mo 0 0 0 0 0 0b ocC 4bB 8bB 8bB 20bB 24cC 24bB 24bB
M1 0 0 0 4 8 24a  48bB  80aA 88a 92aA 96aA 96bB  100aA  100aA M2 0 4 4 8  16  24a  68aA  92aA  96aA  100aA  100aA  100aA  100aA  100aA M3 0 4 4 4 8 40a  72aA  92aA  96aA  100aA  100aA  100aA  100aA  100aA Keterangan : Angka yang diikuti huruf tidak sama besar dan kecil pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata pada taraf 5% dan sangat nyata pada taraf 1% menurut uji DMRT
Pengamatan  pada  7  HSA  persentase mortalitas tertinggi terdapat pada perlakuan M 3 yaitu  sebesar  (72%).  Sedangkan  persentase terendah  terdapat  pada  perlakuan  M 0 (0%). Perlakuan  M 3 berbeda  tidak  nyata  dengan perlakuan  M 2 ,  tetapi  berbeda  sangat  nyata dengan perlakuan M 1 dan M 0 .
Pada  pengamatan  8  HSA  persentase mortalitas tertinggi terdapat pada perlakuan M 3 dan  M 2 (92%).  Sedangkan  persentase  terendah terdapat pada perlakuan M 0 (4%). Perlakuan M 3 berbeda tidak nyata terhadap M 2 dan M 1 , tetapi berbeda sangat nyata pada perlakuan M 0 . Pengamatan  pada  9  HSA  persentase mortalitas  tertinggi  terdapat  pada  M 3 dan  M 2 (96%). Sedangkan persentase terendah terdapat pada perlakuan M 0 (8%). Perlakuan M 3 berbeda tidak  nyata  teradap  M 2 dan  M 1 ,  tetapi  berbeda sangat nyata pada perlakuan M 0 .
Pengamatan  pada  10  HSA  persentase mortalitas  tertinggi  terdapat  pada  M 2 dan  M 3
(100%). Sedangkan persentase terendah terdapat pada perlakuan M 0 (8%). Perlakuan M 3 berbeda tidak  nyata  teradap  M 2 dan  M 1 ,  tetapi  berbeda sangat nyata pada perlakuan M 0 .
Setelah pengamatan pada 10 – 14 HSA, pada perlakuan  M 2 dan  M 3 larva  sudah  mati  seratus persen  (semua  larva  sudah  mati).  Sedangkan untuk  perlakuan  M 1 ,  kematian  larva  tercapai setelah 13 HSA. Sementara untuk perlakuan M 0 ,
persentase mortalitas larva stagnan pada 12 - 14 HSA  sebesar  24%.  Artinya  ada  sebanyak  76% larva yang masih hidup hingga 14 HSA.
Untuk lebih jelasnya mortalitas larva Oryctes rhinoceros dapat  dilihat  pada  Gambar  1.  Pada Gambar  1,  dapat  dilihat  bahwa pada  perlakuan M 1 ,  M 2 dan  M 3 terjadi  kematian  larva  sebesar 100% atau semua larva mati. Pada perlakuan M 2 dan  M 3 ,  kondisi  kematian  larva  100%  tercapai pada  10  HSA,  sedangkan  pada  perlakuan  M 1 tercapai  pada  13  HSA.  Untuk  perlakuan  M 0 , persentase kematian larva hanya 24% hingga 14 HSA. Kematian larva pada perlakuan M 0 dapat disebabkan oleh karena larva tidak dapat untuk menyesuaikan diri dengan keadaan yang baru.

## Kerapatan Konidia
Dari  analisis  secara  statistik  maka  dapat diketahui  bahwa  kerapatan  konidia  jamur dengan pengenceran 10 2 menunjukkan perbedaan  pada  setiap  konsentrasi,  seperti disajikan pada Tabel 2.
Dari Tabel 2 menunjukkan bahwa kerapatan konidia  jamur Metarhizium  anispliae tertinggi adalah pada konsentrasi 60 gr x 100 -1 aqua pro injection yaitu sebanyak 6,05 x 10 8 konidia ml -1 dan jumlah konidia terendah pada konsentrasi 20 gr x 100 -1 aqua pro injection yaitu sebanyak 2,75 x 10 8 konidia ml -1 .
100 80 60 40 20 0 M0 Perla M1
M2 M3
kuan Metarhizium anisopliae
6HSA  7HSA  8HSA  9HSA  10HSA  11HSA  12HSA  13HSA  14HSA
Gambar 1. Pengamatan Persentase Mortalitas Larva Kumbang Tanduk pada Jamur

## Metarhizium anisopliae
Tabel 2. Kerapatan konidia Metarhizium Anisopliae Dengan Berbagai Konsentrasi Per ml Aqua Pro Injection Jamur Konsentrasi Kerapatan Konidia (Konidia ml -1 ) Pengenceran 10 2 20 gr x 100 -1 ml 2,75 x 10 8 Metarhizium anisopliae 40 gr x 100 -1 ml 4,80 x 10 8 60 gr x 100 -1 ml 6,05 x 10 8
Gejala  Kematian  Larva  Oryctes  rhinoceros

## Secara Visual
Dari hasil pengamatan yang dilakukan jamur Metarhizium  anisopliae menyebabkan  larva kumbang  tanduk  mati  dan  terinfeksi.  Gejala kematian larva kumbang tanduk baik secara fisik maupun  perilaku  terjadi  pada  2  hari  setelah aplikasi. Dari hasil pengamatan larva kumbang tanduk  yang  terinfeksi  awalnya  masih  aktif. Ketika laju infeksi mulai meningkat, pergerakan larva mulai melambat, nafsu makan berkurang, warna  hijau  pucat,  terjadi  paralisis  secara  total dan lama kelamaan menjadi diam dan mati, hal ini diikuti dengan mengerasnya dan mengeringnya  tubuh  larva,  kutikula  berwarna pucat  merata  pada  seluruh  tubuh  dan  larva  uji akan  mati  dengan  keadaan  posterior  mengecil. Ciri-ciri perubahan bentuk dan warna pada larva kumbang  tanduk  yang  mati  akibat  terinfeksi
jamur Metarhizium anisopliae dapat dilihat pada gambar 10 dan Gambar 2.

## Waktu Kematian Larva Kumbang Tanduk
Data  pengamatan  waktu  kematian  larva Kumbang  tanduk  akibat  aplikasi  jamur entomopatogen Metarhizium  anisoliae dapat dilihat pada Tabel 3.
Gambar 2. Larva Kumbang Tanduk Yang Terinfeksi Metarhizium anisopliae

## Tabel 3. Data Pengamatan Waktu Kematian Larva Kumbang Tanduk
Perlakuan Waktu Kematian Larva (HSA) M 0 8 M 1 4 M 2 2 M 3 2
Dari  Tabel  3  dapat  diketahui  bahwa  waktu yang   dibutuhkan  jamur Metarhizium anisopliae untuk  menyebabkan  kematian  awal adalah 2 HSA pada perlakuan M 2 dan M 3 . Dan 4
P er se nt as e M or ta lit as
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493

## Jurnal Agrica Ekstensia
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493
HSA pada perlakuan M 1 . Selanjutnya kematian 8 HSA pada perlakuan M 0 . Aplikasi jamur entomopatogen Metarhizium  anisopliae dengan  perlakuan  M 2 dan  M 3 lebih  cepat  mematikan  larva  kumbang tanduk yaitu selama 2 hari. Hal ini karena pada perlakuan M 2 dan M 3 memiliki konsentrasi yang tinggi.  Semakin  tinggi  konsentrasi  yang diberikan  maka  semakin  banyak  pula  konidia yang  kontak  dengan  tubuh  larva.  Sehinga semakin banyak konidia yang berkecambah dan melakukan penetrasi ke dalam tubuh larva.
Ketika  terjadi  kontak  antara  konidia cendawan dengan kutikula serangga yang peka, konidia  tersebut  akan  berkembang  dan  masuk sampai  bagian  dalam  dari  tubuh  serangga tersebut.  Pada  saat  jamur Metarhizium anisopliae berada dalam tubuh larva, cendawan akan  mengeluarkan  toksin  yang  dapat  merusak jaringan  yang  terinfeksi  secara  menyeluruh sehingga  dapat  mengakibatkan  kematian  pada serangga.
Berdasarkan hasil penelitian dapat dijelaskan dengan  pemberian  jamur  entomopatogen Metarhizium  anisopliae pada  pengamatan  1-14 HSA dapat dilihat bahwa pada setiap perlakuan mengalami  peningkatan  mortalitas  setiap  hari. Hal ini karena jamur membutuhkan waktu untuk melakukan  infeksi  dan  berkembang  di  dalam tubuh larva dengan menyerap cairan tubuh larva dan mengakibatkan semakin banyak larva yang mati setiap hari. Larva yang masih bertahan lama kelamaan  akan  melemah  hingga  mengalami kematian.
Terjadinya  fluktuasi mortalitas  harian untuk setiap perlakuan hal ini karena konsentrasi jamur Metarhizium  anisopliae yang  diaplikasikan berbeda-beda sehingga tingkat virulensinya juga berbeda.  Pada  pengamatan 1-5  HSA berpengaruh  tidak  nyata  terhadap  persentase mortalitas larva. Rendahnya mortalitas dikarenakan  cara  kerja  jamur Metarhizium anisopliae yang bersifat sistemik dan membutuhkan  waktu  untuk  melakukan  infeksi dan  berkembang  di  dalam  tubuh      larva dengan  menyerap  cairan  tubuh  larva  kemudian mengakibatkan kematian pada larva [8]. Jamur
entomopatogen Metarhizium anisopliae bersifat  spesifik  inang.  Maksudnya jamur  tersebut  akan  lebih  efektif  dalam mengendalikan hama jika hama itu adalah inang sasarannya.  Menurut  [9]  jamur Metarhizium anisopliae spesifik  inang  terhadap  hama  dari ordo coleoptera terutama kumbang tanduk. Pada
6 HSA persentase mortalitas berpengaruh nyata terhadap larva dan pada pengamatan 7-14 HSA berpengaruh  sangat  nyata  terhadap  persentase mortalitas larva.
Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa jamur Metarhizium  anisopliae ,  efektif  dalam mengendalikan  larva  kumbang  tanduk.  Hal  ini sesuai dengan pernyataan [10], bahwa cendawan entomopatogen  dapat  dikatakan  efektif  apabila agens  tersebut  mampu  menyebabkan  kematian serangga  uji  mencapai  60-100%.  Pada pengamatan 10 HSA persentase mortalitas sudah mencapai (100%). Hal ini menunjukkan bahwa pada  10  HSA  konidia  jamur Metarhizium anisopliae yang masuk melakukan infeksi dalam tubuh larva
Kumbang Tanduk sudah menunjukkan aktivitas yang sangat baik, karena bila  ditinjau  dari  mulai  jamur  masuk  ke  dalam tubuh  larva  sampai  menunjukkan  gejala kematian paling lama 10 hari.
Dari  hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa semua perlakuan jamur Metarhizium anisopliae mampu membunuh serangga uji larva kumbang tanduk.  Kematian  larva  disebabkan  oleh  jamur Metarhizium anisopliae yang mampu menghasilkan  toksin  yang  mengakibatkan gangguan  fungsi  hemolimfa,  terganggunya sistem  pencernaan,  gangguan  inti  sel  serangga inang,  dan  hilang  kesadaran  serta  kerusakan jaringan  tubuh  menyeluruh  dalam  tubuh  larva. Sesuai  dengan  pernyataan  [11]  pertumbuhan spora  dalam  tubuh  larva  akan  mengganggu seluruh  aktivitas  organ  dan  berakibat  kematian pada larva.
Perlakuan  yang  paling  efektif  dalam mengendalikan larva adalah M2 dan M3 dengan persentase  mortalitas  sebesar  100%  telah tercapai  pada  10  HSA.  Tingginya  mortalitas larva  pada  perlakuan  ini  disebabkan  konidia yang  diaplikasikan  langsung  ke  tubuh  larva dapat segera masuk atau melakukan infeksi pada tubuh  larva  sehinga  mempercepat  proses kematian larva. Selain itu jumlah  konidia yang diaplikasikan juga tinggi. Hal ini sesuai dengan yang  dinyatakan  [12]  dan  [13]  bahwa  semakin tinggi jumlah konidia yang diaplikasikan maka konidia yang  menempel  pada  tubuh larva  akan semakin banyak sehingga mempercepat kematian larva.
Pada  perlakuan  M 0 juga  terjadi  mortalias larva,  hal  ini  karena  larva  tidak  dapat  untuk menyesuaikan  diri  dengan  keadaan  yang  baru. Hal  ini  sesuai  dengan  yang  dinyatakan  [6], bahwa serangga uji yang  tidak mampu

## Jurnal Agrica Ekstensia
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493
beradaptasi dengan lingkungan yang baru akan mati  sedangkan  yang  mampu  beradaptasi  akan bertahan  hidup.  Konsentrasi  konidia  dalam biakkan Metarhizium  anisopliae yang  baik adalah  mengandung  500  juta  (5  x  10 8 )  konidia atau lebih dalam setiap gram.
Menurut  [14],  hasil  pengamatan  mortalitas larva Kumbang Tanduk akibat infeksi jamur M.  anisopliae  dengan  kerapatan  spora  10 7 konidium  per  ml  belum  mampu  menyebabkan mortalitas larva instar III kumbang tanduk.
Jamur Metarhizium anisopliae yang dibiakkan pada media beras memiliki kerapatan konidia dan viabilitas konidia yang tinggi, hal ini disebabkan  karena  kandungan  gizi,  seperti karbohidrat  (sekitar  80-85%),  protein,  vitamin dan  mineral  yang  dapat  digunakan  oleh  jamur Metarhizium  anisopliae untuk  tumbuh  dan berkecambah  [2].  Tinggi  rendahnya  kerapatan konidia  jamur  selain  ditentukan  oleh  faktor genetik juga dipengaruhi faktor luar, antara lain suhu, pH, dan lamanya masa inkubasi. Suhu dan pH  yang  ideal  untuk  perbanyakan  kondia M. anisopliae adalah 25-30°C dan pH 7 [15]. Pembentukan konidia jamur dipengaruhi oleh kandungan  protein  dalam  media.  Jamur entomopatogen  membutuhkan  oksigen,  air  dan sumber  organik  karbon  dan  energi.  Sumber nitrogen  organik  maupun  anorganik  dan  bahan tambahan  lainnya  berupa  mineral  maupun pemacu tumbuh juga diperlukan. Sumber karbon yang digunakan sebagai media adalah dektrosa namun dapat diganti dengan polisakarida seperti tajin atau lipid.
Nitrogen dalam bentuk nitrat, ammonia atau bahan organik seperti asam amino atau protein. Makronutrisi penting yang lain adalah phosphor (dalam bentuk phospat), potassium, magnesium dan sulfur (yang disediakan dalam bentuk sulfat maupun  dalam  bentuk  organik,  cystein  atau methionine). Mikronutrisi penting yang dibutuhkan  oleh  jamur  entomopatogen  adalah kalsium,  besi,  tembaga, mangan,  molybdenum, zink dan vitamin B komplek, khususnya biothine dan  thiamine.  Semua  mikronutrisi  ini  biasanya terdapat dalam bahan mentah, akan tetapi dapat dipenuhi  dalam  bentuk  protein  hidrolisat  atau ekstrak yeast [16].
Konidia Metarhizium  anisopliae akan berkecambah  pada  kutikula  inang  ketika menginfeksi  serangga,  melakukan  penetrasi dengan  senyawa  hidrolisis  (peptidase  dan kitinase), lalu dengan bantuan tekanan mekanis, enzim tersebut menghancurkan kulit dengan cara
lisis. Enam enzim yang dihasilkan oleh jamur M. anisopliae , diantaranya enzim lipase, kithinase, amylase,  proteinase,  pospatase,  dan  esterase [17].  Setelah  jamur  masuk,  konidianya  dengan cepat  memperbanyak  diri  sehingga blatospora segera meliputi tubuh inang.
Kematian  inang  disebabkan  oleh  kolonisasi miselia  yang  ekstensif  sehingga  menyebabkan starvasi atau melalui racun yang dilepaskan pada saat penyerangan. Desifikasi cadaver digunakan sebagai nutrisi dan air oleh hifa. Hifa memecah kutikula  setelah  serangga  mati.  Konidia  bebas berkembang  meneruskan  siklus  infeksi  [7]. Semakin  banyak  konidia  yang  melakukan penetrasi  menyebabkan  semakin  banyak  enzim dan toksin yang dikeluarkan oleh cendawan.
Dengan  demikian,  pada  kondisi  formulasi cair  jamur  entomopatogen  membunuh  dengan dua lini, yaitu lini pertama karena pertumbuhan spora jamur, sedangkan pada lini kedua adalah mikotoksin yang ada dalam formulasi. Menurut [9]  dan  [1]  mekanisme  infeksi Metarhizium anisopliae dapat  digolongkan  menjadi  empat tahapan  etiologi  penyakit  serangga  yang disebabkan oleh jamur.
Tahap pertama adalah inokulasi, yaitu kontak antara  propagul  jamur  dengan  tubuh  serangga. Tahap  kedua  adalah  proses  penempelan  dan perkecambahan propagul jamur pada integument serangga.  Tahap  ketiga  yaitu  penetrasi  dan invasi,  yaitu  menembus  integument  dapat membentuk  tabung  kecambah  (appresorium). Tahap  keempat  yaitu  destruksi  pada  titik penetrasi  dan  terbentuknya blatspora yang kemudian  beredar  ke  dalam  hemolimfa  dan membentuk  hifa  sekunder  untuk  menyerang jaringan lainnya.
Kontak  antara  larva  yang  telah  terinfeksi dengan  larva  yang  masih  sehat  akan  membuat jamur  menempel  pada  tubuh  larva  lainnya. Penularan  konidia  dari  larva  yang  terinfeksi kepada  larva  yang  sehat  disebabkan  adanya interaksi  antar  individu,  seperti  tingkah  laku larva  yang  saling  menyuapi  ( trophallaxis )  dan saling  bersentuhan  ( grooming )  [1].  Sebagai serangga  sosial  tingkah  laku  larva  selalu berhubungan  dengan  anggota  yang  lain  dalam koloninya.
Berdasarkan  pengamatan  yang  dilakukan, terlihat  bahwa  larva  yang  mati  akibat  aplikasi jamur  entomopatogen Metarhizium  anisopliae ini  akan  berada  pada  bagian  atas  media makan larva.  Hal  ini  termasuk  salah  satu  ciri  sesuai dengan  larva  yang  mati  akibat  pengaplikasian

## Jurnal Agrica Ekstensia
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493
jamur entomopatogen. Setelah larva mati tubuh larva kaku dan muncul hifa berwarna putih pada hari  ke  2  setelah  mati,  terutama  pada  bagian anterior  dan  posterior.  Pada  hari  ketiga  setelah mati, cendawan berporulasi warna hijau.
Tubuh  larva  yang  telah  mati  tertutup cendawan  berwarna  hijau  pada  hari  ke  5-10 setelah  mati.  Pada  awal  infeksi  mulai  muncul hifa  jamur  Metarhizium  anisopliae  berwarna putih  dan  akhirnya  seluruh  tubuh  larva  akan ditumbuhi hifa berwarna hijau. Selain mengeras tubuh  larva  juga  berubah  menjadi  hitam. Perubahan warna hitam yang terjadi pada tubuh larva  disebabkan  oleh  melanisasi  yang merupakan  suatu  bentuk  pertahanan  tubuh serangga untuk melawan patogen [1].
Perubahan  warna  hitam  atau  melanisasi tersebut akibat dari aktifitas enzim phenoloksidase.  Enzim  ini  diketahui  berperan dalam  proses  penyembuhan  luka,  sklerotisasi kutikula. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa mortalitas  lebih  cepat  dari  pada  munculnya koloni  jamur  pada  larva.  Hal  ini  diakibatkan karena  jamur  memerlukan  waktu  yang  lebih lama  untuk  memunculkan  hifanya  disekitar tubuh  inang  karena  harus  melalui  tahapan infeksi.
Setelah  serangga  mati,  jamur  akan  terus melanjutkan  siklus  hidup  dengan  membentuk koloni  di  sekitar  tubuh  inang.  Semua  jaringan dalam  tubuh  serangga  dan  cairan  tubuh  habis digunakan  oleh  jamur,  sehingga  serangga  akan mati dengan tubuh mengeras seperti mumi, hal ini  dikarenakan  larva  diselimuti  oleh  miselium jamur [1].

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa:
a. Persentase mortalitas larva kumbang tanduk sebesar 100% dapat tercapai pada perlakuan M 1 ,  M 2 dan  M 3 ,  sedangkan  pada  perlakuan M 0 hanya 24%
b. Waktu  yang  dibutuhkan  jamur Metarhizium anisopliae untuk  menyebabkan  kematian larva  100%  pada  perlakuan  M 2 dan  M 3 , adalah  10  HSA  dan  perlakuan  M 0 adalah pada 13 HSA. Sementara perlakuan M 0 hanya menyebabkan kematian sebanyak 24%.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai cara aplikasi jamur Metarhizium
anisopliae terhadap larva kumbang tanduk langsung di pertanaman kelapa sawit.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Khairunnisa, S, Pinem, MI dan Zahara, F. 2014.  Uji  Efektifitas  Nematoda Entomopatogen  sebagai  Pengendali Penggerek  Pucuk  Kelapa  Sawit ( Oryctes  rhinoceros L.)  ( Coleoptera:
Scarabaidae ) Di Laboratorium. Agroekoteknologi . 2 (2): 607-620. [2] Manurung,  EM,  Tobing,  MC,  Lubis,  L,
Priwiratama, H. 2012. Efikasi Beberapa  Formulasi Metarhizium anisopliae Terhadap  Larva Oryctes rhinoceros L. (Coleoptera: Scarabaeidae) di Insektarium. Agroekoteknologi . 1 (1).
[3] Salbiah,  D.,  Laoh,  J.H.,  dan  Nurmayani. 2013.  Uji  Beberapa  Dosis Beauveria bassiana  vuillemin terhadap  Larva
Hama  Kumbang  Tanduk Oryctes rhinoceros ( Coleoptera: Scarabaeidae )  Pada  Kelapa  Sawit.
Jurnal  Ilmiah  Sains  Terapan .  4  (2):
137-142.
[4] Fauzana, H, Sutikno, A, Salbiah, D. 2018. Population  Fluctuation  of Oryctes rhinoceros L. Beetle in Plant Oil Palm ( Elaeis guineensis jacq.) Given.
[5] Nuriyanti, DD, Widhiono, I, Suyanto, A.
2016.  Faktor-  Faktor  Ekologis  Yang Berpengaruh Terhadap Struktur Populasi Kumbang Badak ( Oryctes  rhinoceros L.). Biosfera . 33(1)
[6] Nasution, L, Bakti, D. 2018. Identification of  Fungi  Originated  From  Soil Polluted  by  Dichloro Diphenil Trichloroethane (DDT). International Conference on Agribussines, Food and
Agro-Technology . Sci.205012021. Doi:10.1088/1755-315/205/1/012021.
[7] Sihombing,  RH,  Oemry,  S,  Lubis,  L.
2014. Uji Efektifitas beberapa Entomopatogen        Pada        Larva Oryctes Rhinoceros L. ( Coleoptera:Scaraebidae ) di Laboratorium. Agroekoteknologi .    2 (4): 1300-1309.
[8] Nasution,  L,  Anggraeni,  N,  Siregar,  AZ
Nuraida. 2017. Patogenicity Aspergillus sp And Metarhizium
Info Artikel Received : 16 November 2021 Vol. 15  No. 2  Tahun 2021 Revised : 27 Desember 2021 p-ISSN : 1978-5054 Accepted : 28 Desember 2021 e-ISSN : 2715-9493 anisopliae  On  Larva  Of  Oryctes rhinoceros On Palm Oil Plant (Elaeis guineensis Jacq ) In Vitro . International  Journal  Of  Trend  In Research And Develovment . 4(4)
[9] Marheni, Hasanuddin, Pinde dan Suziani, W.  2012.  Patogenisitas Metarhizium anisopliae dan C.  militalis Terhadap Penggerek  Pucuk  Kelapa  Sawit. Agroteknologi . 32 (39)
[10] Ou,  SH.  1972. Rice  Disease.  Plant Phathology.  The  International  Rice Institute . Los Banos, Philippines: p. 45
[11] Nunilahwati,  H.  2012.  Eksplorasi  Isolasi dan  Seleksi  Jamur  Entomopatogen Plutella  xylostella ( Lepidoptera  : Yponomeutidae )  Pada  Pertanaman Caisin ( Brassica chinensis ) di
Sumatera  Selatan. Jurnal  HPT
Tropika . 12 (9)
[12] Erixon M, H., Oemry, Syahrial dan Zahra, F.  2015.  Uji  Efektifitas  Suspensi Baculovirus  oryctes dan Metarhizium anisopliae (Metch)  Sorokin  Terhadap Brontispa longissima Gestro. ( Coleoptera: Chrysomelidae ) di
Laboratorium. Agroteknologi .  3  (1): 124-128
[13] Mardiana, Y, Salbiah, D, Laoh, H. 2015. Penggunaan  Beberapa  Konsentrasi
Beauveria  bassiana Vuillemin  Lokal Untuk  Mengendalikan Maruca
testulatis Geyer pada tanaman Kacang Panjang  ( Vigna  sinensis L.). JOM Faperta . 2(1): 22-32. [14] Bintang,  AS,  Wibowo,  A,  Harjaka,  T. 2015. Genetic Diversity of Metarhizium anisopliae And Virulence toward  Larvae  Of  Rhinoceros  Beetle ( Oryctes rhinoceros ). Jurnal Perlindungan  tanaman  Indonesia .  19
(1): 12-18
[15] Thalib,  R,  Fernando,  R,  Khodijah., Meidalima,  D,  Herlinda,  S.  2013. Patogenisitas Isolat Beauveria
bassiana dan Metarhizium  anisopliae Asal  Tanah  Lebak  dan  Pasang  Surut Sumatera Selatan Untuk Agens Hayati Scirpophaga incertulas . Jurnal  Hama dan  Penyakit  Tanaman  Tropika .  13
(1):10-18
[16] Humairoh, D, Hidayat, MT, Prayogo, Y.
2013.  Pengaruh  Kombinasi  Jenis Jamur Entomopatogen Dengan Kerapatan Konidia Terhadap Intensitas  Serangan  Ulat  Grayak. Lentera  Berkala Ilmiah  Biologi .  2(1):
19-23
[17] Ulya,  LN.,  Himawan,  T,  Mudjiono,  G.
2016. Uji Patogenisitas Jamur Entomopatogen Metarhizium anisopliae (Moniliales:  Moniliaceae) Terhadap Hama Uret Lepidiota stigma