Jurnal Kedokteran Universitas Palangka Raya ISSN 2355-0015 EISSN 2723-5890

## ANALISIS KADAR FLAVONOID TOTAL DAN AKTIVITAS
ANTIOKSIDAN EKSTRAK JAMBU AIR ( Syzygium aqueum ) , JAMBU BOL ( Syzygium malaccense ) , DAN JAMBLANG ( Syzygium cumini )
ANALYSIS OF TOTAL FLAVONOIDS AND ANTIOXIDANT ACTIVITY EKSTRACT WATER ROSEAPPLE (Syzygium aqueum), RED-JAMBO Syzygium malaccense, AND JAVA PLUM (Syzygium cumini)
Devie Maulani Zaen 1 , Meiliza Ekayanti 1 *
1 Program Studi Farmasi, STIKes Prima Indonesia, Babelan, Jawa Barat, Indonesia,
* email: deviezaen226@gmail.com
( Naskah diterima: 13 September 2022. Disetujui: 28 Oktober 2022)
Abstrak. Genus  Syzygium  family  myrtaceae  merupakan  salah  satu  genus  terbesar  di  Indonesia,  diantaranya dengan  spesies  yang  berasal  dari  jambu-jambuan  adalah  jambu  air  ( Syzygium  aqueum) ,  jambu  bol  ( Syzygium malaccense) ,  dan  jamblang  ( Syzygium  cumini) memiliki  aktivitas  antioksidan  alami.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  kadar  flavonoid  total  dan  aktivitas  antioksidan  dari  spesies  genus  jambu-jambuan.  Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstraksi dingin berupa maserasi dengan pemilihan pelarut yaitu  etanol  96%.  Uji  kadar  flavonoid  total  dilakukan  dengan  metode  kolorimetri  sedangkan  uji  daya antioksidan  menggunakan  metode  DPPH  ( 1,1-diphenyl-2-picridhidrazil ).  Hasil  kadar  flavonoid  total  terhadap ekstrak  etanol  daun  jambu  air,  daun  jambu  bol  dan  daun  jamblang  adalah  sebesar  156.897  ±  76.929  mgQE/g, 227.241± 107.882 mgQE/g, dan 239.425± 121.562 mgQE/g. Hasil nilai IC 50 terhadap ekstrak etanol daun jambu air, daun jambu bol dan daun jamblang adalah  sebesar  5.416± 2.588 µg/mL, 3.297± 2.595 µg/mL dan 2.416± 1.543  µg/mL.  Kesimpulan  penelitian  adalah  bahwa  ekstrak  dari  daun  jamblang  terhadap  kadar  flavonoid  total dan uji daya antioksidan memperoleh aktivitas antioksidan tertinggi.
Kata Kunci: Spesies jambu-jambuan, antioksidan, DPPH, flavonoid.
Abstract. The  genus  Syzygium  family  myrtaceae  is  one  of  Indonesia,  of  which  species  from  guavas  are Syzygium  aqueum , Syzygium  malaccense ,  and Syzygium  cumini which  have  natural  antioxidant  activity.  This study to determine the total flavonoid content and antioxidant activity of species the guava genus. The extraction method used research is cold extraction form maceration with solvent ethanol 96%. The total flavonoid content test  was  using  the  colorimetric  method  while  the  antioxidant  power  test  used  the  DPPH  (1,1-diphenyl-2- picridhydrazil)  method.  The  results  of  total  flavonoid  extract  ethanol  in  water  roseapple,  red-jambo,  and  java plum  is 156.897 ± 76.929 mgQE/g, 227.241± 107.882 mgQE/g and 239.425± 121.562 mgQE/g. The result of IC 50 value extract ethanol in water roseapple, red-jambo, and java plum is 5.416 ± 2,588 µg/mL, 3.297± 2.595 µg/mL  and  2.416±  1.543  µg/mL.  it  can  be  concluded  that  jamblang  leaf  extract  on  total  flavonoid  levels  and antioxidant test data obtained the highest antioxidant activity.
Keywords: Species from guava, antioxidant, DPPH, flavonoid

## PENDAHULUAN
Radikal bebas merupakan atom atau gugus dengan elektron  tidak  berpasangan  dan  umumnya  tidak  stabil dan  sangat  reaktif.  Radikal  bebas  yang  paling  umum adalah  spesies  yang  reaktif  terhadap  oksigen,  seperti hidrogen peroksida, radikal karboksil, radikal hidroksil, radikal superoksida yang memiliki signifikasi  biologis  terbesar.  Spesies  reaktif  oksigen yang dihasilkan dalam tubuh manusia dapat
menyebabkan  kerusakan  oksidatif  yang  terkait kerusakan  membran,  penuaan,  penyakit  jantung  dan kanker 1 .  Antioksidan  dapat  menangkal  radikal  bebas, antioksidan alami  memiliki efek samping  yang relatif kecil  dibandingkan  dengan  antioksidan  sintetik  yang cenderung  bersifat  karsinogenik,  Oleh  karena  itu, diperlukan  antioksidan  yang  berasal  dari  luar  tubuh 2 . Salah  satu  sumber  antioksidan  alami  adalah  bahan alam.  Indonesia  merupakan  salah  satu  Negara  yang kaya akan bahan alam. Sekitar 30.000 jenis tumbuhan
di  Indonesia  dan  7000  diantaranya  dapat  digunakan sebagai bahan obat 2 . Genus Syzygium famili Myrtaceae merupakan salah  satu  genus  terbesar  di  Indonesia,  diantaranya dengan  spesies  yang  berasal  dari  jambu-jambuan adalah  jambu  air  ( Syzygium  aqueum), jamblang ( Syzygium  cumini) dan jambu  bol  ( Syzygium malaccense) .  Spesies  dari  genus Syzygium memiliki aktivitas  farmakologis  yang  dibuktikan  dari  beberapa penelitian  yaitu  di  antaranya  sebagai  antibakteri, antijamur,  antidabetik,  antikolesterol,  antiinflamasi, antioksidan,  antikanker  dan  aktivitas  kardiovaskuler 3 . Senyawa polifenol seperti flavonoid, asam fenolat dan tanin  dianggap  sebagai  penyumbang  utama  aktivitas antioksidan dalam tumbuhan obat, buah dan sayuran 4 . Mekanisme  senyawa  dari  flavonoid  sebagai antioksidan  dapat  secara  langsung  maupun  tidak langsung.  Flavonoid  sebagai  antioksidan  secara langsung  yaitu  dengan  mendonorkan  ion  hidrogen sehingga  dapat  menetralisir  efek  toksik  dari  radikal bebas.  Mekanisme  flavonoid  secara  tidak  langsung adalah  dengan  meningkatkan  sensitifitas  antioksidan endogen. Berdasarkan mekanisme kerja tersebut maka dapat  dikatakan  bahwa  senyawa  fenol  bekerja  dengan mekanisme  kerja  antioksidan  sekunder  berperan sebagai antioksidan alami pada tumbuhan 5 .
Berdasarkan penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh  Primadiastri et  al., mengenai  perbandingan kandungan  flavonoid  total  dan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etanol  daun  jambu  bol  dan  jambu  air  yang menggunakan  metode  DPPH  didapatkan  hasil  IC 50 fraksi  ekstrak  etanol  daun  jambu  bol  adalah  138,3315 ppm  dan  daun  jambu  air  adalah  117,6745  ppm 6 . Adapun  hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Priya et al., yang  menggunakan  metode  DPPH  diperoleh  nilai IC 50 fraksi  ekstrak  daun  jamblang  adalah  6,2  µg/mL 7 . Berdasarkan uraian tersebut perlu dilakukan penetapan flavonoid  total  terhadap  spesies  jambu-jambuan  yaitu daun  jambu  air,  daun  jambu  bol  dan  daun  jamblang untuk  mengetahui  pengaruh  kadar  flavonoid  total terhadap aktivitas antioksidannya.

## METODE PENELITIAN
Desain  penelitian  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  eksperimental  laboratorium. Penelitian  ini  dimulai  dengan  cara  ekstraksi  daun Syzygium  aqueum ,  daun Syzygium  cumini dan  daun Syzygium  malaccense menggunakan  metode  maserasi etanol  96%,  Pengujian  analisis  kualitatif  flavonoid daun Syzygium  aqueum,  Syzygium  cumini dan Syzygium  malaccense menggunakan  Kromatografi Lapis  Tipis  (KLT).  Tahap  selanjutnya  analisis kuantitatif  menggunakan  Spektrofotometri  Uv-Vis, yang  keduanya  didukung  dengan  literatur  dan  pustaka yang  sesuai  dengan  judul,  pada  pengujian  kuantitatif kadar  flavonoid  total  menggunakan  AlCl 3 dan  uji aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode  DPPH ( Diphenyl Picryl Hydrazil ).
Tanaman  sudah  di  determinasi  pada  Pusat  riset Biosistematika  dan  Evolusi,  Badan  Riset  dan  Inovasi Nasional  (BRIN):  Jambu  Air  (Syzygium  aqueum (Burm.f.)) Alston suku Myrtaceae Jamblang (Syzygium  cumini  (L.)  Skeels  suku  Myrtaceae  Jambu Bol  (Syzygium  malaccense  (L.)  Merr.  &  L.M.Perry suku Myrtaceae.
Sebanyak  500  gram  simplisia  ditimbang kemudian  dimasukkan  kedalam  bejana  maserasi secara  perlahan  dituang  pelarut  etanol  96%  sebanyak 2  L  kedalam  bejana  maserasi  yang  berisi  serbuk simplisia.  Setelah  itu  dibiarkan  cairan  penyari merendam  seluruh  serbuk  simplisia  selama  3  hari sambil  diaduk  secara  periodik.  Campuran  kemudian disaring  dan  ampasnya  direndam  lagi  dengan  cairan penyari  yang  baru.  Proses  penyarian  selanjutnya dilakukan  sebanyak  2  kali  dengan  etanol  96%  setiap kali  sebanyak  1  L.  ekstrak  cair  dikumpulkan kemudian  dipekatkan  dengan  menggunakan  alat rotavapor ( rotary evaporator vacuum ) hingga diperoleh ekstrak kental etanol 8 . Konsentrasi masing-masing ekstrak yang berbeda diencerkan dengan 150 µL etanol. Selanjutnya  ditambahkan  10  µL  larutan  aluminium klorida  10%  dan  1  M  kalium  asetat  (10  µL)  dan ditambahkan  akuades  hingga  280  µL.  Larutan dicampur  dan  diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  40 menit. Absorbansi diukur pada 415 nm menggunakan Spektrofotometri  UV-Vis 7 .  Quercetin  digunakan sebagai  larutan  standar,  ditimbang  sebanyak  10  mg kuersetin dan dilarutkan dengan 10 mL etanol sebagai larutan  standar  kuersetin  1000  ppm.  Selanjutnya dibuat larutan standar kuersetin dengan konsentrasi 20 ppm, 30 ppm 40 ppm, 50 ppm dan 60 ppm.
Sebanyak  1  mL  larutan  DPPH  0,1  mM  dalam metanol  dicampur  dengan  1  mL  masing-masing sampel  pada  konsentrasi  yang  berbeda-beda.  Sampel kosong  yang  sesuai  disiapkan.  Sebanyak  1  mL metanol  dan  1  mL  larutan  DPPH  digunakan  sebagai kontrol.  Campuran  dikocok  dengan  baik  dan diinkubasi  selama  30  menit  dalam  gelap.  Reaksi dilakukan  dalam  rangkap  tiga  dan  penurunan absorbansi  diukur  pada  517  nm  setelah  inkubasi. Aktivitas  pengambatan  dinyatakan  sebagai  IC 50 (µg/mL) 7 .  Persentase  penghambatan  dihitung  dengan menggunakan rumus:
IC 50 =
Analisis  data  diambil  dengan  melakukan observasi  langsung  terhadap  ekstrak  daun Syzygium aqueum, Syzygium cumini L. dan Syzygium malaccense dalam  konsentrasi  1000  ppm  dan  larutan kontrolnya  yang  dibuat  oleh  peneliti.  Penelitian  ini menghitung  dan  menganalisis  kadar  flavonoid  total, nilai  IC 50 yang  didapatkan  dari  persamaan  regresi linear menggunakan statistik microsoft excel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  pada  metode  maserasi  menggunakan pelarut etanol 96% yang dilakukan selama 120 jam (5 hari).  Ekstraksi  dilakukan  untuk  menarik  komponen kimia  yang  terdapat  dalam  suatu  bahan  simplisia. Ekstrak  kental  yang  diperoleh  masing-masing  dari daun jambu - jambuan berwarna hijau tua mendapatkan  hasil  rendemen  pada  daun  jambu  air yaitu  18.556%,  daun  jambu  bol  yaitu  23.756%  dan daun  jamblang  yaitu  24.38%  perhitungan  rendemen dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil ekstraksi etanol 96% dengan maserasi
Simplisia Berat (g) Ekstrak Berat (g) Hasil % Daun Jambu Air 500 92.78 18.556 Daun Jambu Bol 500 118.78 23.756 Daun Jamblang 500 121.90 24.380
Hasil penelitian menunjukkan Ekstrak mengandung flavonoid total yang dikonfirmasi dengan kontrol  positif  yaitu  kuersetin.  Kurva  kalibrasi  dibuat berdasarkan  absorbansi  yang  didapat  pada  lima konsentasi  dengan  nilai  r 2 mendekati  1  seperti  pada gambar  1.  Persamaan  linier  dari  kurva  kalibrasi kuersetin digunakan untuk menghitung kadar flavonoid total.

## Gambar 1. Hasil kurva standar quersetin
Berdasarkan  persamaan  linier  pada  kurva kalibrasi  pada  gambar  2  didapatkan  hasil  kadar flavonoid  total  pada  ketiga  genus  jambu-jambuan  ini berada  di 156,897  ±  76,929  mgQE/g  ekstrak  daun jambu  air,  227,241  ±  107,882  mgQE/g  ekstrak  daun jambu  bol  dan  239,425  ±  121,562  mgQE/g  ekstak daun  jamblang  dapat  dilihat  pada  gambar  IV.4  hasil berbeda  dengan  penelitian  Primadiastri et  al., (6) Kandungan  flavonoid  total  pada  ekstrak  etanol  daun jambu  bol  memiliki  rata-rata  sebesar  9,1613  mgQE/g dan daun jambu air kancing sebesar 16,5893 mgQE/g. Hasil  penelitian  Priya et  al., (7)  kandungan  flavonoid total pada ekstrak daun jamblang memiliki rata-rata
233,8  ±  5,5  mg  QE/g.  hal  ini  disebabkan  karena adanya perbedaan dalam pelarut yang digunakan .
Gambar 2. Kadar flavonoid total pada (1) daun jambu air, (2) daun jambu bol dan (3) daun jamblang
Proses  Pengujian  aktivitas  antioksidan  pada pada  ekstrak  etanol  96% pada  daun  jambu  air ( Sygzygium  aqueum ),  jamblang  ( Syzygium  cumini  L .) dan  jambu  bol  ( Syzygium  malaccense )  dilakukan dengan  metode  DPPH.  DPPH  berfungsi  sebagai radikal yang  akan  bereaksi  dengan  antioksidan. Metode  ini  digunakan  karena  DPPH  merupakan radikal yang banyak digunakan dalam uji pendahuluan antioksidan  pada  tanaman 9 .  Kontrol  yang  digunakan pada  pengukuran aktivitas  antioksidan  yaitu  larutan DPPH dilarutkan pada pelarut metanol. Radikal DPPH juga  memiliki  kepekaan  yang  tinggi  terhadap  pelarut polar, terutama terhadap pelarut metanol dan etanol 10 . Persentase aktivitas antioksidan (Hambatan)
merupakan parameter yang menunjukkan kemampuan suatu antioksidan dalam menghambat radikal bebas. Semakin tinggi nilai hasil persentase hambatan yang didapatkan maka atom hidrogen semakin banyak yang  diberikan  kepada  senyawa  aktif  kepada radikal DPPH  yang  akan  tereduksi  menjadi  DPPH- H 11 .
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  semua ekstrak  memiliki  aktivitas  antioksidan.  Nilai  IC 50 untuk  ekstrak  yang  diperoleh  dari  daun  jambu  air 5.416±  2.588  µg/mL,  daun  jambu  bol  3.297±  2.595 µg/mL, dan daun jamblang 2.416± 1.543 µg/mL dapat dilihat  pada  Gambar  4.  data  ini  menunjukkan  semua ekstrak memiliki IC50 kurang dari 100 µg/mL artinya semua ekstrak aktif sebagai antioksidan karena kurang dari  50  ppm 12 .  Kategori  tingkat  kekuatan  aktivitas antioksidan  sangat  kuat  (<50  ppm),  kuat  (51-100 ppm),  kurang  kuat  (101-1000  ppm)  dan  tidak  kuat (>1000 ppm) 13 .
Berdasarkan  penelitian  Primadiastri  et  al., didapatkan  hasil  Ekstrak  etanol  daun  jambu  bol memiliki  rata-rata  138,3315  ±  2,9634  ppm  memiliki intensitas  sedang  dan  ekstrak  etanol  daun  jambu  air kancing memiliki rata-rata 117,6745 ± 3,5666 ppm
memiliki  intensitas  sedang 6 .  Hasil  penelitian  Priya et al. ,  didapatkan  hasil  fraksi  ekstrak  daun  jamblang ( Syzygium  cumini )  adalah  6,2  µg/mL 7 .  Aktivitas antioksidan dipengaruhi oleh kandungan senyawa aktif yang ada didalam ekstrak seperti flavonoid. Flavonoid akan  mendonorkan  hidrogen  atau  elektronnya  kepada radikal  bebas  menstabilkan  senyawa  radikal,  sehingga semakin  tinggi  kandungan  flavonoid  dalam  ekstrak, aktivitas antioksidannya juga akan semakin tinggi 14 .
Gambar 3. Aktivitas  Antioksidan nilai IC 50 pada daun jambu air, daun jambu bol dan daun jamblang
Gambar  4.    Aktivitas  Antioksidan  %  Inhibisi  pada daun jambu air, daun jambu bol dan daun jamblang

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil yang diperoleh dari penetapan  kadar  Flavonoid  total  dan  aktivitas antioksidan  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  dari daun  jamblang  terhadap  kadar  flavonoid  total  dan  uji daya  antioksidan  memperoleh  aktivitas  antioksidan tertinggi  sebesar  239.425±  121.562  mgQE/g  dan 2.416± 1.543 µg/mL, dapat dilihat pada Gambar 2 dan Gambar  3.  Saran  untuk  penelitian  selanjutnya  perlu dilakukan  analisis  uji  aktivitas  antibakteri  terhadap tanaman  daun  jambu  air,  daun  jambu  bol  dan  daun jamblang.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Liu,  X.,  Jia,  J.,  Jing,  X.,  Li,  G.  Antioxidant Activities  of  Extracts  from  Sarcocarp  of Cotoneaster multiflorus.
J Chemistry.
2018;18(1):1–7. doi: 10.1155/2018/4619768.
2. Yamin,  Ruslin,  Mistriyani,  Sabarudin,  Ihsan,  S., Armadany,  F.  I.,  Sahumena,  M.  H.,  Fatimah,  W. O.  N.  Determination  of  total  phenolic  and flavonoid  contents  of  Jackfruit  peel  and  in  vitro antiradical  test.  Food  Research.  2021;5(1):84–90. doi: 10.26656/fr.2017.5(1).350
3. Hidayah,  H.,  Ridwanuloh,  D.,  Fatia,  Z.,  Amal,  S. Aktivitas  Farmakologi  Tumbuhan  Jamblang (Syzygium Cumini L.): Literature Review Article. Jurnal  Ilmiah  Indonesia.  2021;1(5):530–536.  doi: 10.36418/cerdika. vli5.86.
4. Fauziah,  N.,  Noviyanti,  N.,  Musthapa,  I. Pemanfaatan  kayu  batang  jambu  bol  (Syzygium malaccense  (L).  Merr.  &  Perry)  sebagai  sumber antioksidan  baru.  Jurnal  Ilmiah  Farmako  Bahari. 2019;10(1):33–41. doi: 10.52434/jfb.v10i1.522
5. Maulida,  W.,  Fadraersada,  J.,  Rijai,  L.  Isolasi Senyawa  Antioksidan  Daun  Pila-Pila  (Mallotus paniculatus).  Farmaka.  2016;2(1):  1–30.  doi: 10.25026/mpc.v4i1.209.
6. Primadiastri,  I.  Z.,  Wulansari,  E.  D.,  Suharsanti, R. Perbandingan kandungan fenolik total, flavonoid  total  dan  aktivitas  antioksidan  ekstrak etanol  daun  jambu  bol  (Syzigium  malaccense  L.) dan  daun  jambu  air  kancing  (Syzigium  aqueum). Media Farmasi Indonesia. 2021;16(2):1670–1676. doi: 10.53359/mfi.v16i2.180.
7. Priya,  S.  H.,  Prakasan,  N.,  Purushothaman,  J. Antioxidant  activity,  phenolic-flavonoid  content and  high-performance  liquid  chromatography profiling  of  three  different  variants  of  Syzygium cumini  seeds:  A  comparative  study.  Journal Intercult  Ethnopharmacol.  2017;6(1):107–14.  doi: 10.5455/jice.20161229055555.
8. Wahyulianingsih,  W.,  Handayani,  S.,  Malik,  A. Penetapan  kadar  flavonoid  total  ekstrak  daun cengkeh  (Syzygium  aromaticum  (L.)  Merr  & Perry).
Jurnal
Fitofarmaka Indonesia. 2016;3(2):188–93. doi: 10.33096/jffi.v3i2.221
9. Ikhrar,  M.  S.,  Yudistira,  A.,  Wewengkang,  D.  S. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Stylissa  Sp.  Dengan Metode DPPH. Jurnal Pharmacon. 2019;8(4):961- 967. doi: 10.35799/pha.8. 2019.29376.
10. Zubaydah,  W.  O.  S.,  Sahumena,  M.  H.,  Fatimah, W.  O.  N.,  Sabarudin,  Arba,  M.,  Yamin. Determination of antiradical activity and phenolic and flavonoid contents of extracts and fractions of jackfruit  (Artocarpus  heterophyllus  lamk)  seeds. Food Research. 2021;5(3):36–43. doi:
10.26656/fr.2017.5(3).563.