## Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik (JIFFK)
PERBANDINGAN KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTAL EKSTRAK METANOL UMBI WORTEL ( Daucus carota L.) PADA BERBAGAI METODE EKSTRAKSI
Widya Novita Sari 1) , Anita Dwi Puspitasari 2*)
1 Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Wahid Hasyim
2 Departemen Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Wahid Hasyim *Email: anita@unwahas.ac.id

## INTISARI
Umbi  wortel  ( Daucus  carota L.)  mengandung  senyawa  golongan  fenolik  dan  flavonoid  yang memiliki  berbagai  aktivitas  farmakologis.  Senyawa  golongan  fenolik  dan  flavonoid  dapat diekstraksi  dengan  berbagai  metode  ekstraksi.  Perbedaan  metode  ekstraksi  dapat  menghasilkan kadar  fenolik  dan  flavonoid  yang  berbeda.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membandingkan  kadar fenolik  dan  flavonoid  total  ekstrak  metanol  umbi  wortel  dari  berbagai  macam  metode  ekstraksi. Umbi  wortel  diekstraksi  dengan  metode  perkolasi,  maserasi,  soklet,  dan  refluks  menggunakan pelarut  metanol  sehingga  diperoleh  ekstrak  metanol  umbi  wortel.  Penetapan  kadar  fenolik  dan flavonoid total dilakukan menggunakan spektrofotometer UV-VIS dengan pembanding asam galat dan kuersetin. Kadar fenolik total dari empat metode ekstraksi dianalisis statistik menggunakan uji One  Way  Anova  sedangkan  kadar  flavonoid  total  menggunakan  uji  Kruskal  Wallis  kemudian dilanjutkan  Mann-whitney  pada  taraf  kepercayaan  95%.  Hasil  penelitian  menunjukkan  kadar fenolik  total  ekstrak  metanol  umbi  wortel  dengan  metode  perkolasi,  maserasi,  soklet,  dan  refluks berturut-turut  40,423;  33,311;  45,164;  dan  41,663  mgGAE/gram  ekstrak  sedangkan  kadar flavonoid total secara berturut-turut 14,348; 6,065; 11,861; dan 4,704 mgQE/gram ekstrak. Analisis statistik menunjukkan ada perbedaan kadar fenolik dan flavonoid total ekstrak metanol umbi wortel hasil  ekstraksi  menggunakan  metode  perkolasi,  maserasi,  soklet,  dan  refluks.  Kadar  fenolik  total tertinggi  diperoleh  dengan  metode  soklet  sedangkan  flavonoid  total  tertinggi  diperoleh  dengan metode perkolasi.
Kata kunci : Daucus carota L., ekstraksi, fenolik, flavonoid, wortel

## ABSTRACT
Carrots (Daucus carota L .) are plants that contain phenolic and flavonoid compounds which have various pharmacological activities. Phenolic and flavonoid compounds can be extracted by various extraction  methods.  Different  extraction  methods  can  produce  different  levels  of  phenolic  and flavonoid compounds. This study aimed to compare the phenolic and flavonoid total levels of carrot methanol  extract  from  various  extraction  methods.  Carrot  was  extracted  by  percolation, maceration,  soxhlet,  and  reflux  methods  using  methanol  to  obtain  carrot  methanol  extract. Determination of phenolic and flavonoid levels was carried out using a UV-Vis spectrometer with gallic acid and quercetin as a comparison. The phenolic content of the four extraction methods was statistically  analyzed  by  one-way  ANOVA  test  and  the  total  flavonoids  were  analyzed  by  the Kruskal  Wallis  test  followed  by  Mann-Whitney  at  95%  confidence  level.  The  results  showed  the total  phenolic  content  using  percolation,  maceration,  soxhlet,  and  reflux  methods  were  40.423; 33.311; 45.164; and 41.663 mgGAE/gram extract and total flavonoid content were 14.348; 6.065; 11,861;  and  4.704  mgQE/gram  extract  respectively.  Statistical  results  showed  that  there  were differences in the total phenolic and flavonoid levels of carrot methanol extract in the percolation, maceration,  soxhlet,  and  reflux  extraction  methods.  The  highest  total  phenolic  content  was
obtained by the Soxhlet method while the highest total flavonoids were obtained by the percolation method.
Keywords : Daucus carota L ., extraction, phenolics, flavonoids, carrots
Nama : Anita Dwi Puspitasari Institusi : Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim
Alamat institusi  : Kampus II Unwahas, Jl. Raya Manyaran-Gunungpati KM 15, Nongkosawit, Semarang E-mail : anita@unwahas.ac.id

## PENDAHULUAN
Umbi  wortel  dapat  dimanfaatkan  untuk  mengobati  berbagai  macam  penyakit.  Umbi  wortel memiliki berbagai bioaktivitas diantaranya inhibitor asetilkolinesterase,  antipiretik  dan antibakteri (Nuria  dkk.,  2019;  Sundari.,  2017  dan  Sirait  dkk.,  2016).  Umbi  wortel  yang  diekstraksi  dengan berbagai pelarut yaitu air, etanol, metanol, dan n-heksan menghasilkan kadar fenolik tertinggi pada pelarut metanol sebesar 9,02 mgGAE/gram berat kering (Nguyen dan Scarlett, 2016). Umbi wortel yang  diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  95%  dihasilkan  kadar senyawa flavonoid yang lebih banyak dibandingkan senyawa fenolik (Nuria dkk., 2019).
Ekstraksi  simplisia  dapat  dilakukan  dengan  berbagai  metode  ekstraksi  baik  cara  dingin maupun  panas.  Perbedaan  metode  ekstraksi  yang  digunakan  untuk  mengekstraksi  simplisia  dapat berpengaruh terhadap rendemen ekstrak dan kadar senyawa dalam ekstrak (Hasnaeni dkk., 2019). Ekstrak  etanol  Bunga  telang  ( Clitoria  ternatea L.)  yang  diekstraksi  dengan  berbagai  metode ekstraksi  menghasilkan  rendemen  ekstrak  yang  berbeda-beda  pula  (Fauziah  dkk.,  2022).    Ekstrak etanol rimpang kencur ( Kaempferia galanga L.) yang diekstraksi dengan berbagai macam metode ekstraksi  diperoleh  kadar  fenolik  paling  tinggi  yaitu  pada  metode  perkolasi  (Khotimah,  2020). Penelitian Safitri, 2018 melaporkan bahwa ekstrak metanol daun beluntas ( Pluchea indica L.) yang diekstraksi  dengan  berbagai  metode  ekstraksi  menghasilkan  kadar  flavonoid  dan  fenolik  total tertinggi  pada  metode  perkolasi  dibandingkan  maserasi,  soklet,  dan  refluks.  Perbedaan  metode ekstraksi  dapat  menghasilkan  perbedaan  kadar  fenolik  dan  flavonoid  yang  dihasilkan  sehingga pemilihan metode ekstraksi yang tepat sangat diperlukan untuk menghasilkan ekstrak dengan kadar fenolik dan flavonoid tinggi.
Penetapan kadar fenolik dan flavonoid total dalam ekstrak metanol umbi wortel dari berbagai macam  metode  ekstraksi  belum  pernah  dilaporkan  sebelumnya.  Berdasarkan  latar  belakang tersebut,  maka  penulis  melakukan  penelitian  mengenai  pengaruh  perbedaan  metode  ekstraksi terhadap kadar fenolik dan flavonoid total pada ekstrak metanol umbi wortel.

## METODE PENELITIAN
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu umbi wortel dengan karakteristik berwarna kuning  kemerahan  yang  diambil  dari  tempat  budidaya  di  Kabupaten  Magelang,  Jawa  Tengah. Pelarut  yang  digunakan  terdiri  dari  metanol  teknis,  metanol  p.a  (Merck),  dan aquades .  Adapun bahan  lain  yang  digunakan  adalah  kuersetin  (Sigma),  pereaksi  AlCl 3 (Merck),  kalium  asetat (Merck), reagen folin-ciocalteu, asam galat (Sigma), dan Na 2 CO 3 .
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  seperangkat  alat  ekstraksi  terdiri  dari maserasi,  perkolasi,  soklet,  refluks  dan  seperangkat  alat  gelas  (Pyrex).  Alat  lainnya  adalah spektrofotometer  UV-Vis  1800  (Shimadzu),  timbangan  elektrik  (Ohaus),  penguap  vakum  putar (Heidolph), dan mikropipet (Socorex).

## Determinasi Tumbuhan
Determinasi  dilakukan  untuk  mengetahui  identitas  tumbuhan  yang  digunakan  dalam penelitian,  yaitu  tumbuhan  wortel.  Determinasi  dilakukan  di  Laboratorium  Ekologi  dan Biosistematika Jurusan Biologi Fakultas MIPA Universitas Diponegoro di Semarang. Determinasi dilakukan  dengan  mencocokkan  ciri-ciri  morfologi  tumbuhan  wortel  terhadap  kunci-kunci determinan pada buku Flora of Java, Volume II (Backer dan Brink., 1986).

## Pembuatan Serbuk Simplisia Umbi Wortel
Umbi  wortel  dipilih  yang  masih  segar,  tidak  busuk  dan  siap  untuk  dipanen.  Umbi  wortel disortasi  basah,  dipisahkan  dari  bahan  pengotor  lain  yang  tidak  digunakan.  Umbi  wortel  segar ditimbang sebanyak 20 kg, dicuci dengan air bersih yang mengalir untuk menghilangkan pengotor yang menempel, kemudian ditiriskan, dirajang tipis-tipis dan diangin-anginkan. Umbi wortel yang sudah  dirajang  dikeringkan  menggunakan  oven  pada  suhu  40°C.  Umbi  wortel  yang  sudah  kering dibuat dalam bentuk serbuk menggunakan alat penyerbuk, diayak menggunakan ayakan ukuran 40 mesh  dan  dicek  kadar  airnya  menggunakan  alat moisture  balance .  Persyaratan  kadar  air  pada simplisia  yaitu  kurang  dari  10%.  Serbuk  simplisia  umbi  wortel  disimpan  di  tempat  kering,  tidak terkena sinar matahari untuk menghindari terjadinya dekomposisi kandungan senyawa (Depkes RI., 1986).

## Pembuatan Ekstrak Metanol Umbi Wortel
Pembuatan  ekstrak  metanol  umbi  wortel  menggunakan  4  jenis  metode  ekstraksi  yaitu perkolasi, maserasi, soklet dan refluks.
a. Metode Perkolasi
Serbuk  simplisia  umbi  wortel  sebanyak  100  gram  dimasukkan  ke  dalam  beker  glass, ditambahkan  200  mL  metanol  sehingga  simplisia  menjadi  basah.  Simplisia  tersebut dimasukkan  dalam  perkolator  yang  sudah  diberi  pembatas  kertas  saring  ditambahkan  pelarut sampai  batas  atas.  Pelarut  dikeluarkan  dari  perkolator  tiap  3  jam  sekali.  Perkolasi  dilakukan sampai  pelarut  yang  keluar  dari  perkolator  jernih.  Perkolat  ditampung  dalam  erlenmeyer  dan dipekatkan  menggunakan  penguap  vakum  putar  pada  suhu  60ºC  sampai  diperoleh  ekstrak kental.
b. Metode Maserasi
Serbuk  simplisia  umbi  wortel  sebanyak  100  gram  dimasukkan  ke  dalam  bejana  maserasi,  lalu ditambahkan  750  mL  pelarut  metanol.  Proses  perendaman  selama  3  hari  sambil  diaduk  2  kali sehari.  Setelah  3  hari,  campuran  disaring  sehingga  diperoleh  maserat  (1).  Ampas  direndam kembali dengan 250 mL metanol selama 2 hari. Remaserasi disaring dan diperoleh maserat (2). Maserat  (1)  dan  (2)  diendapkan  semalam  kemudian  dipisahkan  dari  residu  dan  dipekatkan menggunakan penguap vakum putar pada suhu 60ºC sampai diperoleh ekstrak kental.
c. Metode Soklet Alat  soklet  dipasang,  kemudian  serbuk  umbi  wortel  sebanyak  100  gram  dibungkus  dengan kertas saring yang kedua ujungnya diikat dengan benang dan dimasukkan ke dalam timbal dari alat soklet. Pelarut metanol sebanyak 600 mL dimasukkan ke dalam labu alas bulat pada soklet. Proses ekstraksi dilakukan pada suhu 64,70ºC sampai tetesan siklus tidak berwarna lagi. Ekstrak cair yang diperoleh kemudian dipekatkan menggunakan penguap vakum putar pada suhu 60ºC sampai diperoleh ekstrak kental.
d. Metode Refluks
Serbuk  simplisia  umbi  wortel  sebanyak  100  gram  dimasukkan  ke  dalam  labu  alas  bulat, kemudian  ditambahkan  500  mL  pelarut  metanol.  Proses  refluks  dilakukan  sebanyak  3  kali, masing-masing  selama  2  jam.  Hasil  ekstrak  disaring,  kemudian  dipekatkan  menggunakan penguap vakum putar pada suhu 60℃ sampai diperoleh ekstrak kental.
Hasil  rendemen  ekstrak  metanol  umbi  wortel  dari  keempat  metode  ekstraksi  dihitung  dengan rumus:

## Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Metanol Umbi Wortel
Ekstrak metanol umbi wortel ditimbang 100 mg kemudian ditambahkan 5 mL metanol p.a, dimasukkan  dalam  labu  takar  10  mL  dan  ditambahkan  metanol  p.a  hingga  tanda  batas  sehingga diperoleh konsentrasi sebesar 10.000 μg/mL.
Penetapan Kadar Fenolik Total
a. Pembuatan seri konsentrasi asam galat
Seri  konsentrasi  asam  galat  yang  dibuat  yaitu  10,  20,  30,  40  dan  50  ppm.  Larutan  seri konsentrasi  tersebut  dibuat  dari  larutan  induk  asam  galat  konsentrasi  1000  µg/mL.
Larutan  induk  asam  galat  diambil  sebanyak  100,  200,  300,  400  dan  500  μL  dimasukkan  ke dalam  labu  takar  10  ml  kemudian  ditambahkan  metanol  p.a  hingga  tanda  batas  dan  digojog hingga homogen.
b. Pengukuran panjang gelombang maksimum
Larutan asam galat konsentrasi 30 ppm diambil sebanyak 200 μL dimasukkan labu ukur 5 mL, kemudian ditambahkan 400 μL folin-ciocalteu, didiamkan selama 8 menit, ditambahkan 4 mL Na₂CO₃  7%  dan  dicukupkan  dengan  metanol  p.a  hingga  tanda  batas.  Larutan  dimasukkan kuvet kemudian dibaca absorbansinya menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan rentang panjang gelombang 500-800 nm.
c. Penentuan operating time
Larutan  langkah  (b)  dimasukkan  kuvet  kemudian  dibaca  absorbansinya  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  dalam  rentang  waktu  0-120  menit  pada  panjang  gelombang maksimal sehingga diperoleh waktu serapan yang stabil.
d. Pembuatan kurva baku asam galat
Seri  konsentrasi  asam  galat  pada  masing-masing  konsentrasi  (10,  20,  30,  40,  dan  50  ppm) diambil  sebanyak  200  μL  dan  dimasukkan  kedalam  labu  ukur  5  mL  kemudian  ditambahkan dengan 400 μL reagen folin-ciocalteau, didiamkan selama 8 menit, ditambahkan 4 mL Na 2 CO 3 7%  dan  dicukupkan  dengan  metanol  p.a  sampai  tanda  batas  kemudian  didiamkan  selama operating  time .  Larutan  dimasukkan  kuvet  kemudian  dibaca  absorbansinya  dengan spektrofotometer  UV-vis  pada  panjang  gelombang  maksimal.  Perlakuan  dilakukan  replikasi sebanyak 3 kali.
e. Penetapan kadar fenolik total ekstrak metanol umbi wortel Larutan uji ekstrak metanol umbi wortel diambil sebanyak 200 μL dan dimasukkan ke dalam labu  ukur  5  mL  kemudian  ditambahkan  400  μL  reagen  folin-ciocalteu,  didiamkan  selama  8 menit, ditambahkan 4 mL Na₂CO₃ 7% dan dicukupkan dengan etanol p.a sampai tanda batas kemudian  didiamkan  selama operating  time .  Larutan  dimasukkan  kuvet  kemudian  dibaca absorbansinya  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimal. Perlakuan dilakukan replikasi 3 kali.
Penetapan Kadar Flavonoid Total
a. Pembuatan seri konsentrasi kuersetin
Seri  konsentrasi  kuersetin  yang  dibuat  yaitu  5,  10,  15,  20,  dan  25  ppm.  Larutan  seri konsentrasi  tersebut  dibuat  dari  larutan  induk  kuersetin  konsentrasi  1000  µg/mL.  Larutan induk  kuersetin  diambil  sebanyak  50,  100,  150,  200  dan  250  μL  dimasukkan  ke  dalam  labu takar  10  ml  kemudian  ditambahkan  metanol  p.a  hingga  tanda  batas  dan  digojog  hingga homogen.
b. Pengukuran panjang gelombang maksimum
Larutan kuersetin konsentrasi 15 ppm diambil sebanyak 1000 μL dimasukkan labu ukur 5 mL, kemudian ditambahkan AlCl 3 10% sebanyak 200 μL, dan kalium asetat 1 M sebanyak 200 μL dicukupkan  dengan  metanol  p.a  sampai  tanda  batas.  Larutan  dimasukkan  kuvet  kemudian dibaca  absorbansinya  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  dengan  rentang  panjang gelombang 400-500 nm.
c. Penentuan operating time
Larutan  langkah  (b)  dimasukkan  kuvet  kemudian  dibaca  absorbansinya  menggunakan spektrofotometer UV-Vis dalam rentang waktu 0-60 menit pada panjang gelombang maksimal sehingga diperoleh waktu serapan yang stabil.
d. Pembuatan kurva baku kuersetin
Seri  konsentrasi  kuersetin  pada  masing-masing  konsentrasi  (5,  10,  15,  20,  dan  25  ppm) diambil sebanyak 1000 μL dan dimasukkan kedalam labu ukur 5 mL kemudian ditambahkan AlCl 3 10%  sebanyak  200  μL,  dan  kalium  asetat  1  M  sebanyak  200  μL  dicukupkan  dengan metanol  p.a  sampai  tanda  batas  kemudian  didiamkan  selama operating  time .  Larutan dimasukkan  kuvet  kemudian  dibaca  absorbansinya  dengan  spektrofotometer  UV-vis  pada panjang gelombang maksimal. Perlakuan dilakukan replikasi sebanyak 3 kali.
e. Penetapan kadar flavonoid total ekstrak metanol umbi wortel Larutan uji ekstrak metanol umbi wortel diambil sebanyak 1000 μL dan dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL kemudian ditambahkan AlCl 3 10% sebanyak 200 μL, dan kalium asetat 1 M
sebanyak  200  μL  dicukupkan  dengan  metanol  p.a  sampai  tanda  batas  kemudian  didiamkan selama operating  time .  Larutan  dimasukkan  kuvet  kemudian  dibaca  absorbansinya menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimal.  Perlakuan dilakukan replikasi 3 kali.

## Analisis Data
Data absorbansi  dari  seri  konsentrasi  asam  galat  dan  kuersetin  kemudian  dibuat  persamaan kurva baku. Persamaan kurva baku adalah y= bx + a dengan y = absorbansi, x= kadar asam galat atau kuersetin dalam μg/mL. Nilai absorbansi larutan uji ekstrak metanol umbi wortel dari beberapa metode  ekstraksi  dimasukkan  ke  dalam  persamaan  kurva  baku  asam  galat  dan  kurva  baku kuersetin, sehingga didapatkan kesetaraan fenolik dan flavonoid total umbi wortel (μg/mL). Kadar fenolik dan flavonoid total dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Keterangan:         C  = Konsentrasi sampel
V  = Volume ekstrak yang digunakan (mL) fp  = Faktor pengenceran g   = Berat sampel yang digunakan (g)
Kadar  fenolik  dan  flavonoid  yang  diperoleh  dari  berbagai  metode  ekstraksi  kemudian dianalisis  menggunakan  uji  Shapiro-Wilk/Kolmogorov  Smirnov  dengan  taraf  kepercayaan  95% untuk  melihat  normalitasnya  sedangkan  uji  Levene  test  untuk  melihat  homogenitasnya.  Data terdistribusi normal dan homogen maka diuji dengan uji One way anova dengan uji bonferroni dan apabila  data  tidak  terdistribusi  normal  atau  tidak  homogen  maka  dilanjutkan  uji  Kruskal  Wallis untuk  melihat  signifikansinya.  Uji  lanjutan  Mann-Whitney  untuk  mengetahui  perbedaan  antara beberapa metode ekstraksi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi tanaman dilakukan untuk menunjukkan bahwa identitas tanaman tersebut benar- benar wortel, agar terhindar dari kesalahan dalam proses pengumpulan bahan yang akan digunakan dalam penelitian. Hasil determinasi menyatakan kunci determinasi sebagai berikut : 1-b-2b-3b-4b- 6b-7b-9b-10b-11b-12b-13b-14b-16a- (Gol 8. Tumbuhan daun tunggal tersebar)- 109b-119b-120b- 129b-135b-139b-140b-142b-143b-146a-147a-146a- (Familia 98 Umbelifereae ( Apiaceae ) – ( Genus Daucus ) – ( Daucus carota ).
Umbi  wortel  segar  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  2  kg  dan  setelah  dikeringkan dihasilkan  simplisia  sebanyak  1,18  kg  dengan  rendemen  simplisia  sebesar  59%.  Serbuk  umbi wortel  yang  diperoleh  sebanyak  800  gram  dengan  kadar  air  sebesar  7,8%.  Hasil  pengeringan simplisia  sudah  memenuhi  standar  karena  kadar  air  yang  dihasilkan  kurang  dari  10%  sehingga mutu simplisia terjamin. Kadar air yang rendah maka simplisia lebih awet pada saat penyimpanan jangka panjang.
Serbuk  simplisia  umbi  wortel  sebanyak  400  gram  diekstraksi  dengan  4  metode  masing- masing  sebanyak  100  gram.  Perhitungan  hasil  rendemen  ekstrak  metanol  umbi  wortel  dilakukan dengan  membandingkan  bobot  ekstrak  yang  diperoleh  dengan  bobot  simplisia  awal  (Depkes  RI., 2000).  Nilai  rendemen  dihitung  untuk  mengetahui  jumlah  kuantitatif  metabolit  sekunder  yang terbawa  oleh  pelarut  (Ukieyanna,  2012).  Hasil  rendemen  ekstrak  metanol  umbi  wortel  dengan  4 metode dapat dilihat pada Tabel I.

## Tabel I. Hasil rendemen ekstrak metanol umbi wortel
Metode ekstraksi Bobot simplisia (gram) Bobot ekstrak (gram) Rendemen ekstrak (%) Perkolasi 100 25,4 25,4 Maserasi 100 22,6 22,6 Soklet 100 34,1 34,1 Refluks 100 52,8 52,8
Berdasarkan  Tabel  I,  metode  refluks  menghasilkan  rendemen  ekstrak  paling  tinggi  dibandingkan metode  ekstraksi  lainnya.  Hal  ini  disebabkan  metode  refluks  dilakukan  dengan  perendaman simplisia  bersamaan  dengan  pelarut  serta  dilakukan  pemanasan.  Semakin  tinggi  suhu  ekstraksi maka  pelarut  lebih  mudah  menarik  senyawa  yang  terkandung  dalam  sampel  dan  semakin  banyak zat aktif yang tersari. Kiswandono (2011) melaporkan, perbandingan metode ekstraksi pada ekstrak biji kelor ( Moringa oleifera L.) menghasilkan rendemen ekstrak tertinggi pada metode refluks. Hasil  pengukuran  panjang  gelombang  maksimum  antara  asam  galat  dengan  reagen  folin- ciocalteu dan Na 2 CO 3 7% yaitu 743 nm sedangkan operating time pada menit ke-120.   Sementara itu,  hasil  pengukuran  panjang  gelombang  maksimum  senyawa  kompleks  kuersetin  AlCl 3 yaitu 428,50  nm  sedangkan operating  time pada  menit  ke-30.  Grafik  kurva  baku  asam  galat  dan kuersetin dapat dilihat pada Gambar 1.
(a)                                                                          (b)
Gambar 1. Kurva baku (a) Asam galat, (b) Kuersetin
Hasil  persamaan  regresi  linier  pada  Gambar  1  digunakan  untuk  menghitung  kadar  fenolik dan  flavonoid  total  dalam  ekstrak  metanol  umbi  wortel  yang  diperoleh  dari  4  metode  ekstraksi. Penetapan  kadar fenolik  dan  flavonoid total  ekstrak  metanol  umbi  wortel  dari  4 metode  ekstraksi dapat dilihat pada Tabel II.

## Tabel II. Kadar fenolik dan flavonoid total ekstrak metanol umbi wortel
Metode ekstraksi Kadar Fenolik Total (mgGAE/g ekstrak) Kadar Flavonoid Total (mgQE/g ekstrak) Perkolasi 40,42±2,17 14,35±0,71 Maserasi 33,31±0,55 6,07±0,03 Soklet 45,16±0,99 11,86±0,39 Refluks 41,66±1,76 4,70±0,12
Berdasarkan  Tabel  II,  kadar  fenolik  total  ekstrak  metanol  umbi  wortel  yang  diekstraksi dengan metode soklet lebih tinggi dibandingkan metode perkolasi, maserasi, dan refluks.  Hasil uji statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna pada metode maserasi dan soklet dikarenakan  nilai  signifikansinya  <  0,05  sedangkan  pada  metode  ekstraksi  lainnya  tidak  terdapat perbedaan  bermakna  karena  nilai  signifikansinya  >  0,05.Tiveron  dkk.  (2012)  melaporkan  bahwa beberapa  senyawa  fenolik  yang  terkandung  dalam  umbi  wortel  yaitu 3-hydroxybenzoic  acid,  p- coumaric  acid,  caffeic  acid, dan isovanillic  acid tahan  pemanasan  karena  memiliki  titik  lebur  > 100°C.  Hal  ini  dapat  diindikasikan  bahwa  senyawa  fenolik  yang  terkandung  dalam  umbi  wortel tidak  rusak  akibat  pemanasan  dan  dapat  tertarik  dengan  sempurna  menggunakan  metode  soklet. Zhang  dkk.  (2018)  melaporkan,  suhu  lebih  tinggi  pada  proses  ekstraksi  dapat  meningkatkan kelarutan dan difusi pelarut pada sel sehingga senyawa fenolik lebih banyak tersari. Puspitasari dan Prayogo  (2017)  melaporkan,  perbandingan  metode  ekstraksi  pada  ekstrak  etanol  daun  kersen ( Muntingia calabura L.) menghasilkan kadar fenolik tertinggi pada metode soklet.
Urutan  kadar  flavonoid  total  dari  terbesar  ke  terkecil  yaitu  perkolasi,  soklet,  maserasi,  dan refluks.    Hasil  uji  statistik  menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang  bermakna  pada  semua metode ekstraksi dengan nilai signifikansinya < 0,05. Perkolasi merupakan ekstraksi dingin dengan cara  pergantian  pelarut  baru  secara  terus  menerus  sehingga  tidak  terjadi  kejenuhan  pelarut  dan
waktu  ekstraksi  perkolasi  yang  berlangsung  lama  (5  hari)  sehingga  penyarian  senyawa  flavonoid lebih sempurna. Prayogo (2017) melaporkan, perbandingan metode ekstraksi pada ekstrak metanol daun  kersen  ( Muntingia  calabura L.)  menghasilkan  kadar  flavonoid  tertinggi  pada  metode perkolasi.
Soklet merupakan ekstraksi cara panas yang kontinyu  yaitu sampel terekstraksi oleh pelarut murni hasil kondensasi sehingga menghasilkan sirkulasi yang menyebabkan pelarut pada akhirnya menjadi bening lagi. Metode soklet menghasilkan kadar flavonoid total lebih rendah dibandingkan perkolasi dikarenakan ada senyawa flavonoid yang tidak tahan dengan pemanasan sehingga rusak pada  saat  proses  pemanasan.  Maserasi  termasuk  dalam  metode  cara  dingin  dengan  proses perendaman  simplisia  sehingga  terdapat  kejenuhan  pelarut.  Hal  inilah  yang  menyebabkan  kadar flavonoid total dengan metode maserasi jauh lebih kecil dibandingkan perkolasi dan soklet. Metode refluks merupakan metode ekstraksi cara panas dengan proses pemanasan secara langsung sehingga dimungkinkan  adanya  kejenuhan  pelarut  dan  diduga  ada  senyawa  flavonoid  yang  tidak  tahan dengan pemanasan menyebabkan rusaknya senyawa-senyawa pada saat proses ekstraksi. Hal inilah yang  menyebabkan  kadar  flavonoid  total  pada  metode  refluks  paling  kecil.  Khotimah  (2020) melaporkan,  perbandingan  metode  ekstraksi  pada  ekstrak  etanol  rimpang  kencur  ( Kaempferia galanga L.)  menghasilkan  kadar  flavonoid  terkecil  pada  metode  refluks  dibandingkan  dengan metode maserasi, perkolasi dan soklet.

## KESIMPULAN
Kadar  fenolik  total  tertinggi  pada  ekstrak  metanol  umbi  wortel  diperoleh  dengan  metode soklet sedangkan uji statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna pada metode maserasi  dan  soklet.  Kadar  flavonoid  total  tertinggi  pada  ekstrak  metanol  umbi  wortel  diperoleh dengan  metode  perkolasi  sedangkan  uji  statistik  menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  yang bermakna pada semua metode ekstraksi.

## DAFTAR PUSTAKA
Backer,  C.A.,  dan  Brink,  B.V.D.,  (1968)  ‘Flora  of  Java  Vol.  I  dan  Vol.  II’,  Noordhoff  N.V.
Groningen, The Netherlands.
Departemen Kesehatan R.I., 1(986) ‘Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik Indonesia’,
Jakarta, 20-30.
Departemen  Kesehatan  R.I,  (2000)  ‘Parameter  Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat  Cetakan Pertama’, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, 1-11.
Fauziah,  R.,  Widyasanti,  A.,  dan  Rosalinda,  S.,  (2022)  ‘Perbedaan  Metode  Ekstraksi  terhadap Kadar  Sisa  Pelarut  dan  Rendemen  Total  Ekstrak  Bunga  Telang  ( Clitoria  ternatea L.)  ’, Kimia Padjadjaran, 1, 18-25.
Hasnaeni, Wisdayati, dan Usman, S., (2019) ‘Pengaruh Metode Ekstraksi terhadap Rendemen dan Kadar Fenolik Ekstrak Tanaman Kayu Beta-Beta ( Lunasia amara Blanco) ’, Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy), 5(2): 175-182.
Khotimah,  (2020)  ‘Perbandingan  Metode  Ekstraksi  Terhadap  Kadar  Flavonoid  dan  Fenolik  Total Ekstrak  Etanol  Rimpang  Kencur  ( Kaempferia  galanga L.)  ’,  Skripsi,  Universitas  Wahid Hasyim, Semarang.
Nuria,  M.C.,  Sukandar,  E.Y.,  Suganda,  A.G.,  dan  Insanu,  M.,  (2019)  ‘Aktivitas  Inhibisi Asetilkolinesterase Empat Jenis Sayuran Secara In Vitro ’, Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik, 16(1); 43 – 50.
Kiswandono,  (2011)  ‘Skrining  Senyawa  Kimia  dan  Pengaruh Metode  Maserasi dan  Refluks  pada Biji  Kelor  ( Moringa  oleifera Lamk)  terhadap  Rendemen  Ekstrak  yang  Dihasilkan’,  Jurnal Sains Natural Universitas Nusa Bangsa, 1(2): 126-134.
Nguyen,  V.T  dan  Scarlett,  C.J.,  (2016)  ‘Mass  Proportion,  Bioactive  Compounds  and  Antioxidant Capacity of Carrot Peel as Affected by Various Solvents’, Technologies, 4(36): 1-13.
Prayogo,  L.S.,  (2017)  ‘Perbandingan  Metode  Ekstraksi  terhadap  Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak Metanol  daun  Kersen  ( Muntingia  calabura L.)’,  Skripsi,  Universitas  Wahid  Hasyim, Semarang.
Puspitasari,  A.D.,  dan  Prayogo,  L.S.,  (2017)  ‘Perbandingan  Metode  Ekstraksi  Maserasi  dan Sokletasi  terhadap  Kadar  Fenolik  Total  Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen  ( Muntingia  calabura L.)’, Cendekia Eksakta, 2(1): 1-8.
Safitri, I., Nuria, M.C, dan Puspitasari, A. D., (2018) ‘Perbandingan Kadar Flavonoid dan Fenolik Total Ekstrak Metanol Daun Beluntas ( Pluchea indica L.) pada Berbagai Metode Ekstraksi’, Inovasi Teknik Kimia, 3(1):31-36.
Sirait,  A.Y.,  Pelealu,  N.C,  dan  Yamlean,  P.V.Y.,  (2016)  ‘Uji  Daya  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Umbi  Wortel  ( Daucus  carota L.)  terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli Secara In Vitro ’, Jurnal Ilmiah Farmasi, 5(4); 149. Sundari,  (2017)  ‘Uji  Efek  Antipiretik  Ekstrak  Etanol  Umbi  Wortel  ( Daucus  carota L.)  terhadap Mencit Jantan Putih Galur Swiss Webster’, Skripsi, Universitas Al-Ghifari, Bandung.
Tiveron, A.P., Priscilla, S.M., Keityane, B.B., dan Thais, M.F.S.V., (2012) ‘Antioxidant Activity of Brazilian  Vegetables  and  Its  Relation  with  Phenolic  Composition’,  International  Journal  of Molecular Sciences, 13, 8943-8957.
Ukieyanna,  E.,  (2012)  ‘Aktivitas  Antioksidan,  Kadar  Fenolik  dan  Flavonoid  Total  Tumbuhan Suruhan  ( Poperomia  pellucida L.  Kunth)’,  Skripsi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.
Zhang, Q.W., Lin, L.G., dan Ye, W.C., (2018) ‘Techniques for Extraction and Isolation of Natural Product: A Comprehensive Review’, Chinese Medicine, 13(1):20.