## ANTIHYPERURICEMIA ACTIVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT OF KUMIS KUCING LEAVES (Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.) ON MALE WHITE RAT (Rattus norvegicus)

## UJI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA EKSTRAK ETANOL DAUN KUMIS KUCING
( Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.) PADA TIKUS PUTIH JANTAN
( Rattus Norvegicus )
Frinsia Rutly Mokalu 1) , Widdhi Bodhi 1) , Julianri Sari Lebang 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *frinsiarutlymokalu@gmail.com

## ABSTRACT
Kumis  Kucing  Leaves  (Orthosiphon  aristatus (Blume)  Miq.) contains  flavonoid  compounds  that  has antioxidants activity that inhibits the action of the enzyme xanthine oxidase with reduced uric acid as result. This  research  is  done  to  find  out  the  effects  antihyperuricemia  ethanol  extract  of  Kumis  Kucing  leaves  on male  white  rat  (Rattus  norvegicus).  15  rats  were  used  in  this  research  and  there  were  5  treatment  groups that  is  negative  control  (NACMC  1%),  positive  control  (Allopurinol)  1,8  mg,  and  Kumis  Kucing  leaves extract group with dosage of 4,5 mg, 9 mg, 18 mg. The result of this research showed a decrease on uric acid value after ethanol extract of Kumis Kucing leave were given. The next result of this research used ANOVA test and LSD test, that showed the ethanol extract of Kumis Kucing leave had Antihyperuricemia activity on male white rat.
Keywords :  Orthosiphon aristatus (Blume.) Miq., Antihyperuricemia, Rattus norvegicus.

## ABSTRAK
Daun kumis kucing ( Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.) mengandung senyawa flavonoid yang mempunyai aktivitas antioksidan yang dapat menghambat kerja enzim xantin oksidase sehingga pembentukan asam urat berkurang.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  efek  antihiperurisemia  ekstrak  etanol  daun  kumis kucing,  terhadap  tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus ) . Penelitian  ini  menggunakan  15  ekor  tikus  dan terdapat 5 kelompok perlakuan yaitu kontrol negatif (NaCMC 1%), kontrol positif (Allopurinol) 1,8 mg, dan kelompok ekstrak daun kumis kucing dengan dosis 4,5 mg, 9 mg, 18 mg. Hasil penelitian menunjukkan nilai asam  urat  mengalami  penurunan  setelah  diberikan  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing.  Hasil penelitian selanjutnya  dianalisis  menggunakan  uji  ANOVA  dan  uji  LSD,  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun kumis kucing memiliki aktivitas antihiperurisemia terhadap tikus putih jantan.
Kata kunci : Orthosiphon aristatus (Blume.) Miq . , Antihiperurisemia, Rattus norvegicus .

## PENDAHULUAN
Hiperurisemia  adalah  peningkatan  kadar asam urat diatas nilai normal. Hal ini dapat terjadi karena  meningkatnya  sintesis  asam  urat  dan penurunan  ekskresi  asam  urat  pada  ginjal (Hawkins dan Daniel 2005). Asam urat hasil dari metabolisme  akhir  dari  purin,  salah  satu komponen  asam  nukleat  yang  terdapat  dalam  inti sel  tubuh.  Penyakit  peradangan  pada  daerah persendian akibat pengendapan asam urat dikenal sebagai  gout.  Penyakit  ini  disebabkan  oleh deoposit kristal natrium pada jaringan atau akibat kelebihan asam urat di dalam cairan ekstra seluler (Dira, et,al, 2014).
Produksi  berlebih  ekskresi  asam  urat dalam  tubuh  dapat  menyebabkan  hiperurisemia sebagai  faktor  resiko  utama  untuk  penyakit  gout. Xantin  oksidase  merupakan  enzim  yang  berperan dalam  mengkatalisis  oksidasi  hipoxantin  dan xantin  menjadi  asam  urat.  Penghambatan  xantin oksidase dapat menghalangi biosintesis asam urat dalam  tubuh  yang  menjadi  salah  satu  pendekatan terapeutik untuk pengobatan hiperurisemia (Mahendra, 2005).
Penyebab lain timbul hiperurisemia adalah pembuangan  asam  urat  yang  berkurang,  adanya gangguan  metabolisme  purin  bawaan  (penyakit keturunan),  mengkonsumsi  makanan  berkadar purin  tinggi,  makanan  yang  mengandung  lemak tinggi,  akan  menyebabkan  lemak  tertimbun  di dalam  tubuh,  pembakaran  lemak  menjadi  kalori akan  meningkatkan  keton  darah  ketosis  akan menghambat  pembuangan  asam  urat  melalui  urin sehingga  menyebabkan  kadar  asam  urat  dalam darah  meningkat,  adanya  penyakit  kanker  atau pengobatan (kemoterapi) (Soekanto, 2012).
Allopurinol  merupakan  salah  satu  obat asam  urat,  meskipun  tergolong  sangat  efektif, allopurinol  memiliki  efek  samping  yang  tidak diinginkan  seperti  mual,  diare,  kulit  kemerahan yang  disertai  gatal,  banyak  efek  samping  yang membahayakan  dari  obat  modern,  untuk  itu sebagai  alternatif  yang  lebih  baik  dengan mengembangkan  penggunaan  obat  tradisional untuk  menangani  penyakit  asam  urat  (Kemila, 2016).
Pemanfaatan  tumbuhan  sebagai  obat tradisional masih banyak digunakan masyarakat di Indonesia yang memiliki keanekaragaman tumbuhan. Selain murah dan mudah didapat, obat tradisional  yang  berasal  dari  tumbuhan  pun memiliki  efek  samping  yang  lebih  rendah dibandingkan obat-obatan kimia (Utami, 2002).
Daun  kumis  kucing  merupakan  salah  satu tanaman yang memiliki khasiat untuk pengobatan penyakit,  berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan oleh  Fauzan  (2017),  tentang  Uji  Ekstrak  etanol 70%  daun  Kumis  Kucing,  terhadap  Kadar Glukosa  Darah  pada  Tikus  Galur  Wistar  yang diinduksi  aloksan    memiliki  efek  terhadap penurunan  glukosa  darah,  dengan  dosis  yang paling efektif 4,5 mg/200 gram berat badan tikus, dan  menurut  Prayoga  (2008)  daun  kumis  kucing, mempunyai  efek  antiinflamasi  pada  Tikus  Wistar ( Rattus  norvegicus ),  dengan  dosis  yang  paling efektif 8,82 mg/ 200 gram berat badan tikus.
Berdasarkan  beberapa  penelitian  yang dilakukan tentang khasiat daun kumis kucing yang dapat mengobati  penyakit, peneliti tertarik untuk melakukan  penelitian  tentang  Uji  Aktivitas Antihiperurisemia  Ekstrak  Etanol  Daun  Kumis Kucing  pada  Tikus  Putih  Jantan,  karena  daun kumis kucing merupakan salah satu tanaman obat tradisional yang secara empiris digunakan sebagai obat pada penyakit gout dan rematik, juga karena daun  kumis  kucing mengandung  senyawa flavonoid  yang  mempunyai  aktivitas  antioksidan yang  dapat  menghambat  kerja  enzim  xantin oksidase  sehingga  pembentukan  asam  urat berkurang (Lukas, 2006).

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Lanjutan  Program  Studi  Farmasi,  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  yang  dimulai pada Maret – Juli 2020.

## Rancangan Penelitian
Jenis  penelitian  ini  ialah  eksperimen laboratorium  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL),  dengan  5  macam  perlakuan masing-masing  perlakuan  dengan  3  ulangan. Kelompok  1  sebagai  kontrol  negatif  diberi NaCMC  1%  dan  induksi  kalium  oksonat, kelompok  2  sebagai  kontrol  positif  diberi Allopurinol  dan  kalium  oksonat.  Kelompok  3-5 diberi perlakuan ekstrak etanol daun kumis kucing dengan  dosis  yang  berbeda-beda  yaitu  4,5  mg,  9 mg dan 18 mg/200gram berat badan tikus dengan induksi kalium oksonat.

## Alat dan Bahan Alat
Alat  yang  digunakan  :  Syringe  1ml,  alat ukur  asam  urat  (Nesco),  strip  asam  urat  (Nesco),
ayakan,  oven,  sonifikator,  sonde  oral,  batang pengaduk,  timbangan  analitik  (ADAM,  KERN), gelas  ukur  (Pyrex),  beker  gelas  (Pyrex),  kertas saring, botol sampel, gunting, blender, cawan petri (Pyrex), kandang.

## Bahan
Bahan yang digunakan: Tikus putih jantan 15  ekor,  daun  kumis  kucing,  NaCMC  1% (carboxymethylcellulose),  aquades,  etanol  96%, pakan  tikus  putih  jantan  berupa  beras  jagung, allopurinol, kalium oksonat dan strip asam urat.

## Prosedur Penelitian
Penyiapan dan Pengambilan Sampel Tahap awal dilakukan dengan pengumpulan  bahan  baku  daun  kumis  kucing yang  diambil  di  Kelurahan  Kakaskasen  3, Lingkungan  7,  Kota  Tomohon,  Sulawesi  Utara. Daun  kumis  kucing  dicuci  bersih  dengan  air mengalir, ditiriskan dan ditimbang berat basahnya.  Daun  kumis  kucing  yang  telah dibersihkan  diangin-anginkan  di  dalam  ruangan selama  5  hari,  daun  yang  telah  kering  dihaluskan dan diayak menggunakan ayakan.
Pembuatan  Ekstrak  Daun  Kumis  kucing ( Orthosiphon aristatus (Blume) Miq.)
Daun  Kumis  Kucing  yang  diambil  dicuci bersih  sebanyak  2,5  kg,  kemudian  dikeringkan dengan  cara  di  angin-anginkan  hingga  daunnya mengering  dihaluskan  dengan  menggunakan blender,  serbuk  simplisia  daun  Kumis  kucing yang  diperoleh  200  gram,  di  maserasi  dengan pelarut  etanol  96%  sebanyak  1000  ml,  dan remaserasi dengan menggunakan etanol sebanyak 600  ml.  Sampel  dioven  pada  suhu  40°C  dan menghasilkan ekstrak kental daun Kumis kucing.

## Pembuatan Larutan Na CMC 1%
Larutan  Na  CMC  1%  dibuat  dengan menimbang  serbuk  Na  CMC  sebanyak  1  gram kemudian  dicampurkan  dengan  100  ml  aquades dihomogenkan dengan cara pemanasan menggunakan  hot  plate,  kemudian  didinginkan. Perbandingan  aquades  dengan  Na  CMC  1% adalah  1  gram  Na  CMC  1%  dalam  100  ml aquades.

## Pembuatan Sediaan Uji
Pembuatan Sediaan diawali dengan menimbang ekstrak kental daun kumis kemudian, ekstrak  yang  telah  ditimbang  dimasukkan  dalam labu  ukur  dicampurkan  dengan  larutan  Na  CMC
1%  sebanyak  10  ml  dan  disonifikasi  sampai homogen  selama  30  menit.  Setelah  homogen, masing-masing dosis ekstrak dimasukkan kedalam botol  sampel  dan  diberi  label.  P1  untuk  ekstrak etanol  daun  kumis  kucing  dengan  dosis  I,  P2 untuk  ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  dengan dosis  II,  dan  P3  untuk  ekstrak  etanol  daun  kumis kucing dengan dosis III.

## Pembuatan Larutan Allopurinol
Larutan allopurinol dibuat dengan menimbang  allopurinol  sebanyak  35,1  mg dicampurkan  dengan  larutan  Na  CMC  1% sebanyak  10  ml  didalam  labu  ukur,  kemudian dihomogenkan dengan sonifikator selama 5 menit. Setelah  homogen  disimpan  dalam  wadah  dan diberi  tanda.  Dosis  Allopurinol  untuk  manusia 100  mg  dikonversikan  dalam  dosis  tikus  0,018 didapat 1,8 mg. Menurut Farmakope Indonesia uji keseragaman bobot dilakukan dengan menimbang berat  20  tablet  dan  dibagi  dengan  jumlah  tablet tersebut.

## Pembuatan Larutan Kalium Oksonat
Larutan    kalium  oksonat  dibuat  dengan menimbang  kalium  oksonat  sebanyak  112,5  mg yang dicampurkan dengan aquades steril sebanyak 25  ml  di  dalam  labu  ukur,  kemudian  disonikasi dengan  sonifikator  selama  30  menit  hingga  larut, setelah  dilihat  cukup  larut  dimasukan  dalam wadah dan diberi tanda.

## Pengujian Aktivitas Antihiperurisemia
Penelitian  ini  menggunakan  tikus  jantan sebagai  hewan  uji  yang  terbagi  atas  5  kelompok dimana masing-masing menggunakan 3 hewan uji tikus  putih  jantan.  Semua  hewan  uji  terlebih dahulu  dibuat  hiperurisemia  dengan  menginduksi kalium  oksonat  secara  intraperitoneal,  kemudian ekstrak etanol daun kumis kucing diberikan sesuai dosis  perlakuan  secara  oral  dengan  pensuspensi Na  CMC  1%  sebanyak  1  ml  menggunakan  alat penyekok  oral  (Sonde)  dengan  dispo.  Kelompok tikus  diberikan  Na  CMC  1%  sebagai  kontrol negatif,  kelompok  2  tikus  diberikan  allopurinol 1,8 mg sebagai kontrol positif, kelompok 3 Tikus diberikan  dosis  1  ekstrak  etanol  daun  kumis  4,5 mg/200gram  berat  badan  hewan,  kelompok  4 tikus diberikan dosis 2 ekstrak etanol daun kumis 9  mg/200gram  berat  badan  hewan,  kelompok  5 tikus diberikan dosis 3 ekstrak etanol daun kumis menjadi 18 mg/200 gram berat badan hewan.

## Pengambilan Sampel Darah
Hewan  uji  dipuasakan  terlebih  dahulu selama  18  jam  sebelum  diambil  darahnya. Pengambilan  darah  untuk    pengujian  kadar  asam urat    dilakukan  sebanyak  5  kali  yaitu  setelah dipuasakan,  setelah  1  jam  diinduksi  kalium oksonat,  setelah  2  jam  diinduksi  kalium  oksonat, dimana  sudah  termasuk  1  jam  diberikan  sediaan secara oral, diukur kadar asam urat, setelah 4 jam dan 6 jam diinduksi  kalium oksonat, diukur kadar asam uratnya, Sampel darah diambil melalui vena ekor tikus putih jantan, kemudian dianalisis kadar asam  uratnya  pada  strip  Nesco,  untuk  pemberian dosis ekstrak, apabila pemberian dilakukan secara berulang, maka interval waktu tidak kurang dari 3 jam (BPOM, 2014).

## Analisis Data
Data kuantitatif yang diperoleh   dianalisis menggunakan Analysis  of  Variance (ANOVA)
untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  etanol  daun kumis kucing  terhadap kadar asam urat pada tikus putih  jantan  dan  menggunakan Least  Significant Difference (LSD)  untuk  menguji  signifikansi  dari perbedaan rata-rata antar kelompok perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek  antihiperurisemia  ekstrak  etanol  daun  kumis kucing dari hewan uji yang digunakan yaitu tikus putih  jantan.  Pengujian  antihiperurisemia  pada tikus putih jantan, dilakukan dengan menginduksi kalium  oksonat  untuk  meningkatkan  kadar  asam urat,  (Suhendi,  2011). Kalium  Oksonat  akan mengalami pembersihan dalam tubuh dan kembali ke  keadaan  normal  setelah  8  jam  pemberian dengan  waktu  puncak  pada  2  jam  setelah pemberian  melalui  intraperitoneal  (Huang et  al ., 2008).
Tabel 1 . Hasil rata-rata penurunan kadar asam urat tikus sebelum dan sesudah pemberian bahan uji
Perlakuan Rata-rata Pengukuran Kadar Asam Urat (mg/dl) T0 T1 T2 T4 T6 Kontrol  - 8,33 14,50 18,30 11,80 13,80 Kontrol + 9,03 12,2 7,6 5,3 3,57 Dosis 1 6,77 12,8 5,73 4,57 3,37 Dosis 2 3,37 11,67 8,53 5,43 3,3 Dosis 3 7,23 13,73 9 5,56 3,33
*Keterangan  :  Kontrol  -  :  Kelompok  kontrol  negatif  Kontrol  +  :  Kelompok  kontrol  positif,  Dosis  1  :  Kelompok perlakuan ekstrak daun kumis kucing  4,5 mg,  Dosis 2 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kumis kucing 9 mg, Dosis 3 : Kelompok perlakuan ekstrak daun kumis kucing 18 mg, T0 : Sebelum pembelian Kalium Oksonat, T1 :1 jam setelah diinduksi  Kalium  Oksonat,T2  :  2  Jam  setelah  diinduksi  Kalium  Oksonat,  dimana  sudah  termasuk  1  jam  diberikan ekstrak secara oral, T4 : setelah 4 jam diinduksi Kalium Oksonat dan diberikan ekstrak  secara oral, T6  : setelah  6 jam diinduksi Kalium Oksonat dan diberikan ekstrak secara oral.
Hasil rata- rata penurunan kadar asam urat pada  lima  kelompok  perlakuan,  kelompok  negatif yang diberikan yaitu suspensi Na CMC 1%, kadar asam  urat  meningkat  pada  jam  ke-2  setelah diinduksi  kalium  oksonat,  setelah  itu  mengalami penurunan  kadar  asam  urat  pada  jam  ke-4  dan kembali  naik  kadar  asam  urat  tikus  putih  jantan, pada jam  ke-6,  kenaikan kadar asam urat tertinggi pada  kontrol  negatif  pada  jam  ke-2  setelah diinduksi  kalium  oksonat    karena  menurut  Huang et  al (2008),  puncak  tertinggi  efektivitas  kalium oksonat  di  jam  ke-  2  setelah  pemberian  kalium oksonat  melalui  intraperitoneal.  Pada  Kontrol negatif  menunjukkan  tidak  ada  penurunan  yang
signifikan  terhadap  kadar  asam  urat  pada  tikus putih  jantan,  yang  berarti  pada  kontrol  negatif sediaan  yang  digunakan  tidak  mengandung  zat yang  dapat  menurunkan  kadar  asam  urat,  pada kontrol  negatif  hewan  mendapatkan  bahan  yang tidak mengandung obat atau senyawa yang sedang diteliti,  bermanfaat  sebagai base  line atau pembanding (Hakim, 2002).
Pada kontrol positif menggunakan suspensi allopurinol yang efektif untuk menormalkan  kadar asam urat dalam darah (Tjay dan Rahardja, 2002). Pada  kelompok  kontrol  positif,  mengalami penurunan  kadar  asam  urat  dimulai  pada  jam kedua sampai jam keenam, itu terjadi karena pada kontrol  positif  hewan  uji  mendapat  obat  yang sudah  diketahui  efek  farmakologisnya,  bertujuan untuk mengonfirmasi validase metode dan prosedur  penelitian  sehingga  dapat  ditentukan potensi relatif obat tersebut (Hakim, 2002).
Efektivitas penurunan kadar asam urat pada kelompok  dosis  pertama  dengan  kandungan ekstrak daun kumis kucing, menunjukkan penurunan  kadar  asam  urat  pada  saat  pemberian ekstrak  dimulai  pada  jam  ke-2  sampai  jam  ke-6, hal  ini  menunjukkan  dosis  4,5  mg  ekstrak  etanol daun  kumis  kucing    efektif  dalam  menurunkan kadar  asam  urat  lebih  baik  dari  kelompok  kontrol positif,  untuk  dosis  kedua  diberi  ekstrak  etanol daun  kumis  kucing,  sebanyak  9  mg  menunjukkan adanya  penurunan  kadar  asam  urat  yang  lebih signifikan  dibanding  dosis  pertama,  dan  untuk dosis  ketiga    diberi  ekstrak  etanol  daun  kumis kucing  sebanyak  18  mg  dosis  juga  mengalami penurunan  kadar  asam  urat  dari  jam  ke-2  sampai ke-6,  penurunan  kadar  asam  urat  disebabkan karena  daun  kumis  kucing  mengandung  senyawa flavonoid  yang  mempunyai  aktivitas  antioksidan yang  dapat  menghambat  kerja  enzim  xantin oksidase  sehingga pembentukan asam urat berkurang (Yulianto, 2009).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  menunjukkan ekstrak  etanol  daun  kumis  kucing  ( Orthosiphon aristatus (Blume)  Miq.),  memiliki  aktivitas antihiperurisemia  yang  dapat  menurunkan  kadar asam  urat  pada  tikus  putih  jantan  ( Rattus norvegious) pada  dosis,  4,5  mg,  9  mg,  18  mg/200 gram berat badan tikus.

## SARAN
Disarankan  untuk  dilakukan  pengujian  in vitro ekstrak etanol daun kumis kucing ( Orthosiphon  aristatus (Blume)  Miq.),  terhadap
enzim  yang  berperan  dalam  pembentukan  asam urat.

## DAFTAR PUSTAKA
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan.  2014.
Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik, Jakarta. Dira,  I.  2014.  Uji  Aktifitas  Antihiperurisemia Ekstrak Etanol Daun Sambiloto (Andrographis panciculata
Ness) .  Seminar  Nasional  dan  Worksop Perkembangan  Teknisi  Sains  Farmasi Klinis  ke  IV.  Sekolah  Tinggi  Farmasi Indonesia  Yayasan  Perintis  Padang.  Hal. 134-140.
Fauzan,  I.  2017.  Uji  Efek  Ekstrak  Etanol  70%
Daun Kumis Kucing (Orthosiphon aristatus  (Blume.)  Miq) Terhadap  Kadar
Glukosa  Darah  Tikus  Tutih  Galur  Wistar yang Diinduksi Aloksan. [Skripsi]. Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadya, Surakarta.
Hawkins.,  B.G.  dan  Daniel  W.Rahn.  2005. Pharmacotheraphy:  A  Phatophysiological Approach Edision 3 . Black Well Scientific Publication. London.
Huang,  Z.  2008.  Hypouricemic  Effects  of Phenylpropanoid  Glycosides  Acteoside  of Scrophularia  ningpoensis  on  Serum  Uric Acid  Levels  in  Potassium  Oxonate Pretreated Mice. The  American  Journal  of Chinese Medicine. 36 (1 ): 149-157.
Hakim, L. 2002. Uji Farmakologi dan Toksikologi Obat Alam pada Hewan Coba. Universitas Muhammadyah, Pruwokerto.
Kemila,  M.  2016.  Asam  Urat  dan  Cara  Bijak
Minum Allopurinol. Klinik Fakultas
Farmasi UGM, Yogyakarta.
Lukas,  T.  2006.  Tanaman  Obat  dan  Jus  Untuk
Asam Urat dan Rematik, Jakarta. Agromedia.
Mahendra.,  dan  Fausi.  2005.  Kumis  Kucing, Penebar Swadaya, Jakarta.
Prayoga,  S.  2008.  Efek  inflamasi  Ekstrak  Etanol Daun  Kumis  Kucing  kucing (Orthosiphon
aristatus  (Blume.)  Miq) pada  Tikus  Putih Jantan Galur Wistar. [Skripsi]. Universitas Muhammadya, Surakarta.
Soekanto, 2012. Asam Urat, Penebar Plus, Jakarta.
Suhendi,  N,  M,  dan  Sutrisna.  2011.  Aktivitas Antihiperurisemia  Ekstrak  Air  Jinten Hitam  ( Coleus  ambonicus  Lour )  pada
Mencit Jantan Galur Wistar dan Standarisasinya. Jurnal Farmasi. 22
(2): 77-84
Tjay,  T,  H,  dan  Rahardja,  K.  2002.  Obat-Obat Penting,  Khasiat,  Penggunaan  dan  Efek
Sampingnya. Edisi V. Komputindo, Jakarta.
Utami,  2002.  Tanaman  Obat  Untuk  Mengatasi Rematik  dan  Asam  Urat,  Argomedia Pustaka, Jakarta.
Yulianto, D. 2009. Inhibisi Xantin Oksidase Secara In  vitro  oleh  Estrak  Rosela  ( Hibiscus
Sabdariffa ) dan Ciplukan ( Physalis angulate ).  [Skripsi].  Fakultas  Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam IPB, Bogor.