## Uji In Silico Aktivitas Senyawa Kumarin Turunannya Terhadap Enzim Alfa Glukosidase Antidiabetes
Syifa Prahayati, Bertha Rusdi *
Prodi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Bandung, Indonesia

## A R T I C L E   I N F O
Article history : Received  : 8/6/2023 Revised : 4/7/2023
Published  : 20/7/2023 Creative Commons Attribution- NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
Volume : 3
No. : 1
Halaman  : 9-16 Terbitan  : Juli 2023

## A B S T R A K
Enzim  alfa  glukosidase  adalah  salah  satu  target  pengobatan  diabetes  mellitus. Senyawa  Kumarin  yang  terkandung  dalam  tanaman  alpukat  ( Persea  americana Mill .). diketahuo memiliki efek antidiabetes secara in vitro. Peneltian ini bertujuan untuk  mengetahui  parameter  fisikokimia,  afinitas,  dan  toksisitas  senyawa  yang paling berpotensi sebagai antidiabetes. Parameter yang dilakukan mengidentifikasi sifat  fisikokimia  senyawa  uji  menggunakan  software SwissADME dan Scibio- iitd.res.in. kemudian  dilakukan  Preparasi  makromolekul  menggunakan  software BIOVIA Discovery Studio 2021 . Pada parameter fisiko kimia menunjukan bahwa lipofilisitas, berat molekul, reaktivitas molar, dan ikatan hidrogen bahwa senyawa kumarin dan turunanya memenuhi persyaratan Lipinski’s Rule of Five yang artinya senyawa tersebut diprediksi dapat diabsorpsi dan dapat berikatan dengan reseptor target.  Hasil  penambatan  molekular  dari  senyawa  kumarin  dan  turunannya memiliki  afinitas  terhadap  reseptor  alfa  glukosidase.  Senyawa  yang  memiliki afinitas paling baik yaitu senyawa edgeworoside c dengan nilai energi bebas ikatan -8,91  kkal/mol  dan  konstanta  inhibisi  0,29255  μmolar.  Hasil  toksisitas  yang diperoleh adalah seluruh senyawa uji termasuk ke dalam toksisitas kelas III yang artinya  pada  konsentrasi  yang  tinggi  tidak  dijamin  keamanan  dalam penggunaannya.  Kemudian  seluruh  senyawa  uji  kumarin  dan  turunnya  tidak bersifat karsinogenik maupun mutagenik.
Kata Kunci: Diabetes mellitus, Coumarin, Avocado (Persea americana Mill.)

## ABSTRACT
Alpha  glucosidase  enzyme  is  one  of  the  treatment  targets  for  diabetes  mellitus. Coumarin compounds contained in the avocado plant ( Persea americana Mill. ). known  to  have  antidiabetic  effects  in  vitro  This  study  aims  to  determine  the physicochemical  parameters,  affinity,  and  toxicity  of  compounds  with  the  most potential  as  antidiabetics.  Parameters  carried  out  identified  the  physicochemical properties of the test compounds using SwissADME software and Scibio-iitd.res.in . Then  macromolecular  preparation  was  carried  out  using  the BIOVIA  Discovery Studio 2021 software. The toxicity test was carried out using Toxtree version 3.1.0. The  physico-chemical  parameters  show  that  the  lipophilicity,  molecular  weight, molar reactivity, and  hydrogen bonds show that  coumarin  compounds  and  their derivatives meet the requirements of Lipinski's Rule of Five , which means that these compounds are predicted to be absorbed and can bind to target receptors. The results of molecular docking of coumarin compounds and their derivatives have an affinity for alpha  glucosidase receptors.  The  compound  that  has  the  best  affinity  is edgeworoside c with a bond free energy value of -8.91 kcal/mol and an inhibition constant of 0.29255 μmolar. The toxicity results obtained were that all the tested compounds  were  included  in  the  toxicity  class  III,  which  means  that  at  high concentrations safety in use is not guaranteed. Then all coumarin test compounds and their derivatives were neither carcinogenic nor mutagenic.
Keywords : Diabetes mellitus, Coumarin, Avocado (Persea americana Mill.)
@ 2023 Jurnal Riset Ekonomi Syariah Unisba Press. All rights reserved.

## A. Pendahuluan
Diabetes  mellitus  (DM)  merupakan  penyakit  gangguan  metabolik  yang  ditandai  dengan  kondisi hiperglikemia, dimana hal tersebut dikaitkan akibat terjadi abnormalitas metabolisme, karbohidrat, lemak dan protein didalam tubuh. Abnormalitas ini dapat terjadi dikarenakan akibat adanya penurunan sekresi insulin, kerja insulin pada sel target (resistensi insulin) ataupun keduannya (Sunarti, 2017).
Strategi target obat yang dapat menurunkan kadar gula darah adalah golongan obat alfa-glukosidase (Liu et  al ,  2011).  Alfa  glukosidase  merupakan  enzim  yang  yang  berperan  dalam  proses  metabolisme karbohidrat yang terdapat pada bagian tepi permukaan sel usus halus dan juga sebagai proses  pembentukan glikoprotein  dan  glikolipid  yang  dimana  alfa  glukosidase  akan  bekerja  memecah  oligosakarida  atau polisakarida menjadi monosakrida yang dapat di serap di usus halus (Gholamhoeinian et al. , 2008). Adapun salah satu obat antidiabetes yang dapat bekerja menghambat alfa glukosidase yaitu akarbosa (Soegondo, 2011). Akarbosa juga merupakan oligosakarida kompleks yang berfungsi untuk menghambat alfa glukosidase di usus halus  yang  dimana  akarbosa  bekerja  diusus  halus  dengan  mengurangi  absorpsi  glukosa,  sehingga  dapat menurunkan  kadar  glukosa  dalam  darah.  Sehingga  dengan  menghambat  reseptor  enzim  glukosidase  maka dapat mencegah dan menunda perkembangan DM tipe 2 (Van der larr et al, 2015). Namun pada obat akarbosa terdapat efek samping pada penggunanya seperti kembung dan flatuensi (Perkeni, 2011). Untuk meminimalisir efek  samping  tersebut  maka  penggunaan  bahan  obat  tradisional  dapat  dijadikan  sebagai  alternatif  terapi pengobatan diabetes dengan efek samping yang lebih rendah (Widywati, 2017).
Salah  satu  tanaman  yang  dapat  berfungsi  sebagai  obat  tradisional  adalah  alpukat  ( Persea  Amercana Mill.)  yang  dimana  alpukat  mempunyai  efek  farmakologi  yaitu  seperti  hipertensi,  penyakit  ginja  kencing manis,  antipiretik,  antioksidan,  dan  diabetes  (Lima et  al ., 2012).   Pada  suatu  penelitian  menunjukan  bahwa pemberian  sampel  uji  ekstrak  etanol  daun  alpukat  mampu  menurunkan  kadar  gula  darah  pada  tikus  jantan (Sujana et  al .,  2019).  Adapun  terjadi  efek  penurunan  kadar  gula  darah  ini  dikarenakan  adanya  senyawa kumarin yang terkandung pada ekstrak etanol daun alpukat (Mamadou et al ., 2016). Senyawa kumarin tersebut terdapat golongan yang mampu menurunkan kadar gula darah yaitu golongan senyawa kumarin sederhana dan turunannya  (umbelliferone,  scoparon,  scopaletin,  fraxetin,  esculin,  dan  osthole)  senyawa  furanokumarin (psoralen dan rutamarin), prianokumarin (decursinol dan decursidin), kemudian senayawa bis-kumarin yaitu (edgeworin,  daphnoretin,  dan  edgeworoside  c)  (Hanbing et  a l.,  2017).  Beberapa  penelitian  juga  telah membuktikan bahwa kumarin sintetik dan alami dapat menghambat penurunan kadar glukosa darah secara in vitro (Ranđelović et al ., 2021; dan Xu et al ., 2020).
Pada  data  penambahan  informasi  obat  baru  yang  berpotensi  sebagai  kandidat  obat  antidiabetes  maka pendekatan  secara  in  silico  dapat  dilakukan  dengan  cara  menggunakan  perangkat  lunak  komputer  melalui simulasi  penambatan  molekul  (molecular  docking).  Molecular  docking  ini  membantu  untuk  mempelajari tentang obat atau ligan, dan interaksi reseptor atau protein dengan menggunakan situs aktif yang cocok, serta berikutnya  akan  mendapatkan  hasil  geometri  yang  terbaik  dari  ligan  kompleks  reseptor,  serta  menghitung energi  interaksi  pada  ligan  yang  berbeda  untuk  merancang  ligan  yang  lebih  efektif  (Mukesh  et  al.,  2011). Berdasarkan latar belakang tersebut maka pada penelitian ini dimaksudkan untuk menguji aktivitas senyawa kumarin dan turunanya terhadap enzim alfa glukosidase sebagai antidiabetes secara in silico dengan metode molecular docking dan untuk mengetahui interaksi senyawa yang lebih baik dibandingkan dengan akarbosa. Rumusan  masalah  dari  penelitian  ini  yaitu  apakah  senyawa  sifat  fisikokima  dari  senyawa  kumarin  dan turunannya telah memenuhi aturan hukum lipinski’s Rule of Five, apakah kumarin dan turunannya memiliki interaksi yang lebih baik dibandingkan dengan akarbosa, bagaimana afinitas terhadap enzim alfa glukosidase dan toksisias kumarin dan turunannya. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui senyawa yang paling berpotensi sebagai antidiabetes dengan melihat afinitas dan toksisitas senyawa kumarin terhadap enzim alfa glukosidase secara in silico dengan metode molecular docking. Hasil dari penelitian ini maka diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai kemungkinan efek mekanisme kerja antidiabtes dari senyawa kumarin dan turunannya dapat dimanfaatkan sebagai penunjang pengobatan antidiabetes.

## B. Metode Penelitian
Pada penelitian ini dilakukan studi in silico interaksi antara enzim alfa glikosidase dengan ligan alami (akarbosa), serta senyawa kumarin dan turunannya yaitu umbelliferone, scoparon, scopaletin, fraxetin, esculin, osthole, psoralen, rutamarin, decursinol, decursidin, edgeworin, daphnoretin, dan edgeworoside c. Senyawa aktivitas  biologis  yang  akan  digunakan  pertama  dicari  memlalui  website Google  Schoolar dan Pubmed , kemudian dilakukan penggambaran senyawa 2D dan 3D yang  diambil dari website pubchem atau digambar dengan menggunakan software ChemBioDraw 16.0 dan Chembio3D Ultra 16.0. setelah itu dilakukan penetuan parameter sifat fisiko kimia menggunakan SwissADME dan Scibio-iitd.res.in . optimasi geometri dialakukan menggunakan software GaussView versi 5.0.8 dan software Gaussian 09 dengan metode DFT basis set 3-21G. Pengunduhan  alfa  glukosidase  dilakukan  melalui  website Protein  Data  Bank (www.rcsb.org)  dengan  kode PDB  3W37.  Selanjutnya,  penghapusan  molekul  air  untuk  memisahkan  antara  ligan  alami  dan  protein menggunakan software BIOVIA Discovery Studio 2021. Tahap berikutnya, Validasi metode molecular docking dengan  cara  melihat  nilai  parameter  RMSD  ≤  2.0  Å.  Selanjutnya  dilakukan docking antara  reseptor  alfa glukosidase dengan senyawa uji kumarin dan turunanya menggunakan software MGLTools versi 1.5.6 yang telah dilengkapi dengan Autodock Tools versi 4.2 dan dilakukan analisis hasil docking menggunakan software BIOVIA Discovery Studio 2021. Terakhir dilakukan prediksi toksisitas menggunakan software Toxtree versi 3.1.0.

## C. Hasil dan Pembahasan

## Pencarian Data Aktivitas Biologi
Pada  tahap  pertama,  dilakukan  pencarian  data  aktivitas  biologi  senyawa  kumarin  melalui    jurnal penelitian yang dilakukan oleh Sujana et al (2019) yang dimana telah  ditemukan bahwa ekstrak etanol daun alpukat  memiliki  aktivitas  antidiabetes  pada  tikus  jantan.  Aktivitas  antidiabetes  tersebut  salah  satunya mengandung  senyawa  kumarin,  senyawa  ini  juga  dibuktikan  pada  salah  satu  jurnal  penelitian  lainnya  oleh Hanbing  et  al,  (2017)  bahwa  kumarin  diklasifikasikan  berdasarkan  golongan  yang  terdiri  dari  senyawa umbelliferone,  scopoletin,  scoparon,  fraxetin,  esculin,  dan  osthole,  psoralen,  dan  rutamarin,  dekursinol  dan dekursidin, menjadi edgeworin, daphnoretin, dan edgeworoside c.

## Penggambaran Struktur
Penggambaran  struktur  senyawa  umbelliferone,  scopaletin,  scoparone,  fraxetin,  esculin,  osthole, psoralen,  rutamarin,  decursinol,  decursidin,  edgeworin,  daphnoretin,  edgeworoside  c,  dan  ligan  alami (akarbosa) menggunakan ChemDraw 16.0

## Penentuan Parameter Sifat FisioKimia
Penentuan parameter sifat fisikomia dilihat berdasarkan atur hukum Lipinski rule of five yang meliputi lipofilisitas tidak lebih dari 5, nilai molar refractivity (MR) dalam rentang 40-130, bobot molekul tidak lebih dari  500  g/mol,  ikatan  hidrogen  tidak  lebih  dari  5,  dan  donor  ikatan  akseptor  tidak  lebih  dari  10  ( Lipinski , 2001).
Tabel 1 . Parameter FisikoKimia Nama Senyawa ClogP
MR
BM (g/mol) Jumlah Donor Ikatan  Hidrogen Jumlah Akseptor Ikatan Hidrogen Kumarin 1,75 42,48 146,14 0 2 Umbelliferone 1,44 44,51 162,14 1 3 Scopoletin 1,86 51 192,17 1 4 Scoparon 2,23 55,47 206,19 0 4 Fraxetin 1,52 53,02 208,17 2 5 Esculin 1,33 78,65 340,28 5 9 Osthole 2,93 72,7 244,29 0 3 Psoralen 2,01 52,26 186,17 0 3 Rutamarin 3,69 100,79 356,41 0 5 Decursinol 2,36 67,45 246,26 1 4 Decursidin 3,74 115,98 426,46 0 7 Edgeworin 2,39 87,07 322,27 1 6 Daphnoretin 2,87 93,56 352,29 1 7 Edgeworiside C 2,14 118,97 468,41 4 10 Akarbosa (ligan alami) 2,13 93,56 645,00
14
18
Berdasarkan  data  Tabel  1.  Ke-14  senyawa  kumarin  dan  turunannya,  serta  akarbosa  (ligan  Alami) menunjukkan bahwa lipofilisitas (ClogP) memenuhi aturan yaitu kurang dari 5 yang artinya nilai dari senyawa tersebut dapat dikatakan baik dan dapat diperkirakan akan terabsorpsi didalam tubuh. Nilai Molar Refractivity (MR) pada senyawa kumarin dan turunannya, serta akarbosa memenuhi aturan hukum Lipinski’s rule of five dimana  memiliki  nilai  rentang  40-130  yang  artinya  senyawa  tersebut  akan  memiliki  sifat  sterik  yang  baik. Kemudian  pada  bobot  molekul  dari  senyawa  kumarin  dan  turunanya  sudah  memenuhi  aturan  yang  dimana bobot molekul kurang dari 500 dalton, sedangkan dibandingkan dengan ligan alami (akarbosa) tidak memenuhi aturan karena memiliki nilai yang lebih besar yaitu 645,00 dimana ligan alami (akarbosa) tersebut akan cukup sulit  untuk  berdifusi  menembus  membrane  sel.  Terakhir  yaitu  jumlah  donor  ikatan  hidrogen  dan  jumlah akseptor ikatan hidrogen yang dimana dari ke-14 senyawa tersebut telah memnuhi  aturan Lipinski’s rule of five sedangkan pada ligan alami (akarbosa) memiliki nilai rentang yang lebih besar dibandingkan dengan ke- 14  senyawa  tersebut  yang  menandakan  bahwa  dari  ke-14  senyawa  tersebut  memiliki  kestabilan  koformasi dengan protein target dibandingkan ligan alami (akarbosa).

## Optimasi Geometri
Optimasi  geometri  dilakukan  terhadap  ke-14  senyawa,  yaitu  umbelliferone,  scopoletin,  scoparone, fraxetin,  esculin,  osthole,  psoralen,  rutamarin,  decursinol,  decursidin,  anomalin,  edgeworin,  daphnoretin, edgeworoside c, serta ligan alami (akarbosa), dilakukannya optimasi geometri ini bertujuan untuk memperoleh konformasi yang paling stabil dan struktur terbaik yang didapat berdasarkan nilai energi total (Darusman and Fakih, 2022)
Tabel 2. Energi Total Nama Senyawa Energi Total (kJ/mol) Kumarin -494,2581786 Umbelliferone -569,0844928 Scopoletin -628,2967027 Scoparon -722,076911 Fraxetin -757,7607469 Esculin -1251,275351 Osthole -802,4581773 Psoralen -644,8682507 Rutamarin -1184,296593 Decursinol -838,1949536 Decursidin -1448,819555 Edgeworin -1136,973714 Daphnoretin -1250,87408 Edgeworiside C -1288,749179 Akarbosa (ligan alami) -2374,09477534
Berdasarkan tabel 2. Energi total dari ke-l4 senyawa kumarin dan turunanya dan ligan alami (akarbosa) yang memiliki energi total terendah yaitu Decursidin karena memiliki nilai terkecil yang menunjukkan bahwa semakin  rendah  nilai  energi  total  suatu  senyawa  maka  memiliki  konformasi  paling  stabil.  Dimana  nilai konformasi optimasi ini juga akan digunakan untuk tahap selanjutnya yaitu simulasi docking. (Bi et al., 2014).

## Pengunduhan dan Preparasi Struktur Makromolekul
Pengunduhan struktur molekul atau reseptor alfa-glukosidase dilakukan melalui laman Protein Data Bank  dengan  kode  PDB  3W37  yang  nantinya  akan  digunakan  untuk  tahap  selanjutnya  yaitu  pada  proses validasi metode molecular docking. Setelah dilakukan pengunduhan reseptor, lalu makromolekul di dibuka dengan menggunakan software  BIOVIA Discovery  Studio Visualizer 2019 untuk menghapus molekul  air, yang dimana pada saat pengunduhan struktur molekul dari situs Protein Data Bank masih terdapat banyak molekul air yang nantinya bisa mengganggu pada proses metode molecular docking.

## Validasi Molecular Docking
Validasi metode Molecular Docking dilakukan untuk memastikan bahwa metode yang akan digunakan tersebut sudah valid dengan cara melakukan docking ulang antara ligan alami (akarbosa) dengan emzim alfa glukosidase yang  sudah dipreparasi. Parameter yang dilihat pada metode ini yaitu  nilai RMSD (Root Mean Square Deviation) yang dihasilkan dari penambatan antara ligan dengan reseptornya. RMSD yaitu merupakan parameter yang menggambarkan seberapa besar perubahan interaksi protein dengan ligan pada struktur kristal sebelum  dan  sesudah  yang  stabil  dan  memiliki  energi  potensial  terendah  (Lestari,  2015).  Nilai  RMSD  ini ditunjukkan  dengan  jarak  yang  dihasilkan  oleh  interaksi  ligan  alami  dengan  reseptornya  dan  metode dinyatakan  valid  apabila  memiliki  nilai  RMSD  <2Å,  (Purnomo,  2013).  Ukuran  grid  box  yang  digunakan adalah 36 x 48 x 36 , sedangkan ukuran grid center x = 0,699, y = 1,87, z = -23,212 dengan spacing 0,375 Å.
Gambar V.3. Visualisasi Ligand Alami  (Akarbosa) Sebelum (hitam) dan Sesudah Dilakukan
Tabel 3. Tabel RMSD
Rank Sub-Rank Run Biding Energy Reference RMSD Grep Patern 1 1 8 -8,70 0,86 Ranking
Berdasarkan  gambar  1.  Menunjukkan  bahwa  ligan  alami  (akarbosa)  sebelum  dan  sesudah  dilakukan validasi docking memiliki kemiripan yang mendekati ligan alami (akarbosa). Kemudian pada tabel 3. RMSD yang  diperoleh  yaitu  sebesar  0,86  Å,  yang  artinya  validasi  metode  docking  dinyatakan  valid  karena  hasil RMSD <2Å sehingga dapat digunakan untuk tahap selanjutnya yaitu simulasi docking senyawa uji.

## Simulasi Molecular Docking
Dilakukan simulasi metode molecular docking antara senyawa uji kuramarin dan turunannyan dengan enzim  alfa  glukosidase.  Parameter  yang  dilihat  dari  hasil  simulasi  metode  molecular  docking  adalah  nilai energi bebas ikatan dan  konstanta inhibisi,  yang dimana nilai tersebut berkaitan dengan afinitas pengikatan antara ligan dan reseptor yang berinteraksi.

## Tabel 4. Energi Bebas Ikatan dan Konstanta Inhibisi
Nama Senyawa Energi Ikatan (Kcal/mol) Konstanta Inhibisi (μM) Kumarin -6,31 23,67 Umbelliferone -6,55 15,74 Scopoletin -6,25 26,01 Scoparon -5,59 80,24 Fraxetin -6,68 12,63 Esculin -6,90 8,68 Osthole -8,79 0,36283 Psoralen -6,97 7,75 Rutamarin -7,77 2,00 Decursinol -7,83 1,82 Decursidin -7,21 5,16 Edgeworin -7,04 6,96 Daphnoretin -7,98 1,42 Edgeworiside C -8,92 0,29255 Akarbosa (ligan alami) -8,70 6,86
Berdasarkan  Tabel  4.  Menunjukkan  bahwa  dari  ke-14  senyawa  kumarin  dan  turnannya,  serta  ligan alami, yang memiliki energi bebas ikatan  yang lebih baik  adalah edgeworoside c dengan  nilai energi bebas ikatan  -8,92  kkal/mol,  karena  semakin  rendah  energi  bebas  memiliki  konstanta  inihibisi  yang  paling  kecil dibandingkan senyawa lainnya, artinya apabila semakin rendah nilai konstanta inhibisi maka semakin efektif
aktivitas  penghambatan  atau  dalam  konsentrasi  sedikit  saja  senyawa  Edgeworoside  C  sudah  dapat menghambat  reseptor.  Oleh  karena  itu,  senyawa  yang  memiliki  afinitas  yang  paling  baik  adalah  senyawa edgeworoside C (Herman, 2019).

## Analisis Hasil Molecular Docking
Analisis hasil docking ini meliputi pengamatan interaksi residu asam amino pada ligan alami dan ikatan maka  semakin  baik  afinitas  pengikatan  senyawa  terhadap  reseptor  dan  semakin  stabil,  yang  dimana  bahwa senyawa edgeworoside c memiliki potensi berinteraksi dengan enzim alfa glukosidase. Kemudian jika dilihat dari konstanta inhibisi, Edgeworoside C senyawa uji kumarin, umbelliferone, scopoletin, scoparone, fraxetin, psoralen, rutamarin, decursinol, edgeworin, daphnoretin, osthole, esculin, decursidin, edgeworoside c, dengan melakukan visualisasi terhadap ikatan pada ligan alami dengan ke-14 senyawa tersebut dengan reseptor alfa- glukosidase.  Parameter  hasil  yang  diamati  yaitu  meliputi  ada  atau  tidaknya  residu  asam  amino  yaitu  ikatan hidrogen, ikatan elektrostatik, dan interaksi hidrofobik. Berikut adalah hasil visualisasi dari ligan alami dan senyawa uji.
(a) (b) (c)
(d)
(e)
(f) (g) (h)
(i) (j)
(k) (l) (m) (n) (o) Gambar 1 . (a) Ligan alami (Akarbosa), (b) Kumarin, (c) Umbelliferone, (d) Scopaletin, (e) Scoparon, (f) Fraxetin, (g) Osthole, (h) Esculin, (i) Psoralen, (j) Rutamarin, (k) Decursinol, (l) Edgeworin, (m), Daphnoretin, (n) Decursidin), (o)

## Edgeworoside C
Dari hasil interaksi tersebut menunjukkan  bahwa terdapat interaksi yang sama antara ligan alami dengan ke-14 senyawa yaitu membuktikan ikatan hidrogen dengan residu asamk amino TRP329, ASP 357, HIS 626, TRP432, ARG 552, ASP 568, ASN 237, ASP232, ALA 234, dan HIS 626, serta membentuk ikatan hidrofobik
dengan TRP 329 dan PHE 601. Dari hasil interakasi yang didapat dari ke-14 senyawa, diprediksi asam amino yang berada pada senyawa kumarin dan turunannya dapat berperan sebagai penyusun sisi aktif dari reseptor alfa-glukosidase sebagai makromolekular target.

## Prediksi Toksisitas Senyawa Uji
Prediksi  toksisitas  senyawa uji merupakan proses untuk memprediksi sifat toksik dari suatu senyawa yang nantinya akan digunakan sebagai kandidat obat. Prediksi toksisitas ini dilakukan dengan menggunakan software Toxtree versi 2.6.0, parameter yang digunakan untuk mengetahui prediksi toksisitas yaitu meliputi Cramer  Rules , Benigni ,  dan Kroes  TCC. Beradasarkan  Prediksi  toksisitas  dari  parameter Cramer  Rules senyawa  kumarin,  umbelliferone,  scopaletin,  scoparone,  fraxetin,  esculin,  osthole,  psoralen,  rutamarin, decursinol,  decursidin,  edgeworin,  daphnoretin,  edgeworoside  c,  termasuk  toksisitas  kelas  III,  yang  dimana konsentrasinya  tinggi  dari  senyawa  tersebut  tidak  dijamin  keamanan  pada  penggunaanya.  Kemudian  jika dilihat dari parameter Kroes TTC , ke-14 senyawa yang diuji tidak mengandung asupan yang melebihi ambang batas  paparan  pada  manusia.  Sedangkan  untuk  parameter Benigni/Bossa  Rulebase ,  ke-14  senyawa  uji diprediksi  tidak  menimbulkan  karsinogenitas  dan  mutagenitas,  sedangkan  pada  ligan  alami  (akarbosa) menunjukan adanya peringatan senyawa untuk menyebabkan karsinogenisitas menunjukan senyawa tersebut dapat menyebabkan munculnya sel kanker dan negatif untuk mutagenisitas.

## D. Kesimpulan
Pada hasil penelitian ini, maka dapat disimpulkan bahwa senyawa kumarin, umbelliferone, scopoletin, scoparone, fraxetin, esculin, osthole, psoralen, rutamarin, decursinol, decursidin, edgeworin, daphnoretin, dan edgeworoside c telah memenuhi aturan Lipinski’s Rule of Five yaitu   parameter C log p, reaktivitas molar, bobot  molekul,  jumlah  donor  ikatan  hidrogen,  jumlah  akseptor  ikatan  hidrogen  yang  menunjukkan  bahwa senyawa tersebut diprediksi dapat diabsorpsi yang baik dan memiliki afinitas dengan reseptor alfa-glukosidase. Sedangkan pada ligan alami akabosa pada parameter bobot molekul tidak memenuhi Lipinski’s Rule of Five . Berdasarkan  hasil  simulasi  docking  antara  reseptor  alfa  glukosidase  dengan  keempat  belas  senyawa  uji golongan kumarin menunjukkan bahwa senyawa edgeworoside c memiliki afinitas dan kekuatan ikatan paling baik  terhadap  reseptor  alfa  glukosidase  dibandingkan  senyawa  uji  lainnya.  Edgeworoside  c  memiliki  nilai konstanta dan energi bebas ikatan paling rendah, yaitu nilai energi bebas ikatan tersebut -8.91 kkal/mol dan nilai  konstanta  inhibisinya  yaitu  0.29255 μ M,  nilai  konstanta  inhibisi  senyawa  ini  jauh  lebih  kecil dibandingkan ligan alami (akarbosa) yang nilai konstanta inhibisinya  6,86 μ M. Toksisitas senyawa kumarin berserta  turunanya  yang  diuji  pada  penelitian  ini  berada  pada  kelas  III,  yang  artinya  pada konsentrasi  yang tinggi tidak menjamin keamanan dalam penggunaanya dan tidak bersifat karsinogenik maupun mutagenik.

## Daftar Pustaka
[1] Bi  H.M.,  J.  P.  Hu,  F.  Y.  You,  M.  M.  Gao,  C.  H.  Dong,  (2014),  QSAR  Studies  of Biological Activity with Phenylpropyl Aldehyde Thiosemicarbazone Compounds, Asian Journal of Chemistry, 26, 18, 5947-5950.
[2] Darusman, F., & Fakih, T. M. (2020). Studi Interaksi Senyawa Turunan Saponin  dari  Daun Bidara Arab (Ziziphus spina-christi L.) sebagai Antiseptik Alami  secara  In  Silico.  Jurnal Sains Farmasi & Klinis, 7(3): 229−235.
[3] Gholamhoseinian, A., Hosein F., Fariba, S., & Mansour, M. (2008). T he Inhibitor effect of some  Iranian plants extract on the alpha glucosidase . Iran. J. Of Basic Med Scie., 11(1), 1- 9.
[4] Hanbing Li, Yuanfa Yao, Linghuan Li., (2017). Coumarins as potential antidiabetic agents. Royal Pharmaceutical. Journal Of Pharmacy and Pharmacology, Volume 69: 101253- 1264, doi.org:10.1111/jphp/12774.
[5] Herman, L. L., Padala S. A., Ahmed I., Bashir K. (2021). Angiotensin converting  enzyme inhibitors (ACEI) . Treasure Island: StatPearls Publishing.
[6] Lestari,  Tresna.  (2015).  Jurnal  Farmasi  Indonesia.  STIKes  Bakti  Tunas  Husada.
Taksimalaya, 7(3).
[7] Lima, C. R., Vasconcelos, C. F. B., Costa Silva, J. H., Maranhão, C. A., Costa, J., Batista, T. M., Wanderley, A. G. (2012). Anti-diabetic activity of extract from Persea americana Mill. leaf via the activation of protein kinase B (PKB/Akt) in streptozotocin-induced diabetic rats. Journal of Ethnopharmacology, 141(1), 517–525. https://doi.org/10.1016/j.jep.2012.03. 026.
[8] Lipinski  C  A,  Lombardo  F,  Dominy  B  W,  Feeney  P  J.  (2001).  Experimental  and computational approaches to estimate solubility and permeability in drug  discovery and development settings. Advance Drug Delivery Reviews. Rev.23, 3-25
[9] Liu,  L.,  Deseo,  M.A.,  Morris,  C.,  Winter,  K.M.,  Leach,  D.N.,  2011 .  Investigation  of  a- glucosidase inhibitory activity of wheat bran and germ . Food Chem. 126 (2), 553–561.
[10] Mamadou, K., N’Goran, M. K., Eugene, K., Amani, B. K., Koffi, C.,  N’Guessan, A.  R.  Y., Henri, M. D.-K. (2016). Acute toxicity and hypoglycaemic activity  of  the  leaf  extracts  of Persea americana Mill. (Lauraceae) in Wistar rats . African  Journal  of  Pharmacy  and
Pharmacology, 10(33), 690–698. https://doi.org/10.5897/ajpp2016.461
[11] Mukesh,  B.,  Rakesh,  K.  (2001).  Molecular  Docking:  a  Review.  International  Journal  of Research In Ayurveda & Pharmacy, 2(6): 1746-1751.
[12] Pangribowo,  Supriyono.  (2020).  Infodatin  Diabetes  Melitus:  Pusat  Data  dan  Informasi Kementerian Kesehatan RI. Jakarta: Kementerian Kesehatan RI.
[13] Perkeni.  (2015).  Pengolahan  dan  Pencegahan  Diabetes  Melitus  Tipe  2  di  Indonesia. Perkumpulan endikronologi Indonesia.
[14] Soegondo, S. 2011. Prinsip penanganan diabetes, insulin dan obat hipoglikemik  oral. Balai penerbit FKUI. Jakarta.
[15] Sunarti. (2017). Serat Pangan Dalam Penanganan Sindrom Metabolik . Yogyakarta: Gadjah Mada  University  Press.  Van  de  Laar,  F.A.,  Lucassen,  P.L.,  Akkermans,  R.P.,  Van Weel, C. (2005). α.-Glucosidase inhibitors for patients with type 2 diabetes . Diabetes Care, 28(1): 16.
[16] Sujana, D., Nurul, Hasbi Taobah R . (2019). Jurnal Review Aktivitas Antidiabetes  dan Kandungan Senyawa Kimia dari Berbagai Bagian Tanaman Alpukat (Persea Americana) . Jurnal Medika Cendikia 6(01):76-81.
[17] Widyawati,  T.  (2017).  Aspek  Farmakologi  Sambiloto  (Andrographis  Paniculata  Nees). Majalah Kedokteran Nusantara, 40(3):216-222.
[18] Xu  Xue-Tao  ,  Xu-Yang  Deng,  Jie  Chen,  Qi-Ming  Liang,    Kun  Zhang,  Dong-Li  Li, Pan-Pan Wu, Xi Zheng, Ren-Ping Zhou, Zheng-Yun Jiang, Ai-Jun Ma, Wen-Hua  Chen, Shao-Hua Wang. (2019). Synthesis and biological  evaluation of coumarin derivatives as α- glucosidase inhibitors. European
Journal of Medicinal Chemistry 189.
doi:10.1016/j.ejmech.2019.112013.