## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI GOLONGAN KIMIA AKTIF ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU METE (Anacardium occidentale L.)
A. Amaliah Dahlia 1 , Hasnawati Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Universitas Muslim Indonesia
1 dahliaamalia@yahoo.co.id

## ABSTRACT
Has  been  carried  out  isolation  and  identification  of  active  chemical  groups  ethanol  extract antioxidant Cashew Leaves (Anacardium occidentale L.) in aims is determine the class of the active antioxidant  compounds  from  ethanol  extract  of  Cashew Leaves  (Anacardium  occidentale L.). Sample  of  400  grams  of  macerated  with  ethanol  produces  dry  extract  20.087  grams.  Dry  done profile TLC plate and then eluted with eluent n-hexane: ethyl acetate (6:4), and then sprayed DPPH to  determine  antioxidant  compounds.  Ethanol  extracts  was  than  isolated  using  vacum  liquid chromatography column with n-exane, eluent ratio of n-hexane: ethyl acetate (9:1,8:2,7:3, 6:4, 5:5, 4:6, 3: 7, 2:8, 1:9) and ethyl acetate. XI fractions obtained, then sprayed with DPPH fraction VI showed the most intense antioxidant activity. Results isolates obtained were then identified using uv-vis  spectroscopy  showed  maximum  absorption  at  a  wavelength  of  424.50  nm,  Infrared spectroscopy showed absorbance at wave number 3393.18 cm-1 shows possibility the O-H group reinforced the wave number 1102.20 which indicates the possibility of a C-O group, te wave number 2923,44 cm -1 shows possibility the C-H (aromatic), the wave number 1555.13 cm-1 which indicates the possibility of a cluster C = C, as well as identification by using specific reagents. From the above observations indicate that isolates classes of flavonoids suspected.
Keywords : Isolation, Cashew Leaves (Anacardium occidentale L.), Antioxidant, 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl.

## I. PENDAHULUAN Latar Belakang
Antioksidan adalah zat penghambat reaksi  oksidasi  akibat  radikal  bebas  yang dapat  menyebabkan  kerusakan  asam  lemak tak  jenuh  sehingga  menimbulkan  penyakit. Senyawa antioksidan ini dapat diperoleh dari bahan  alami,  seperti  Daun  Jambu  Mete (DJM). Antioksidan
alami mampu melindungi  tubuh  terhadap  kerusakan  yang disebabkan  spesies  oksigen  reaktif,  mampu menghambat terjadinya penyakit degeneratif serta  mampu  menghambat  peroksida  lipid pada makanan (Subeki, 1998).
Daun Jambu Mete memiliki beberapa  khasiat  diantaranya  sebagai  obat luka  bakar,  diare,  penyakit  kulit,  hipertensi dan  diabetes  melitus  (Sugeng,  2009).  Daun Jambu Mete mengandung senyawa golongan tanin jenis katekin dan pirokatekol, flavonoid jenis  kuersetin  3-ramnosida  (kuersitrosida), kuersetin 3-glukosida (isokuersitrosida), dan kuersetin  3-galloil-glukosida  (Paris et  al., 1977).  Penelitian  lain  melaporkan  daun
Jambu Mete
mengandung steroid/triterpenoid, flavonoid, tanin, kuinon, dan saponin (Syaharuddin dkk, 1996).
Flavonoid  dan  fenolik  tersebar  luas dalam tanaman dan mempunyai efek biologis yang  beragam.  Hasil  penelitian  (Nugroho et al., 2013) menunjukkan bahwa kadar fenolik total  ekstrak  terpurifikasi  daun  Jambu  Mete adalah 19,78±0,62 %, yang berarti setiap 100 g  berat  kering  ekstrak  daun  Jambu  Mete mengandung  fenolik  total  setara  asam  galat sebesar 19,78±0,62 g. Sedangkan
(Andarwulan et al., 2012) melaporkan kadar fenolik  total  daun  Jambu  Mete  segar  setara asam  galat  hanya  847,41±15,05  mg/100  g berat  basah  atau  0,85  g/100  g  berat  basah. Namun,  kadar  fenolik  total  ekstrak  daun Jambu  Mete  lebih  rendah  dibanding  hasil penelitian  (Razali et  al,. 2008)  ekstrak metanolik  pucuk/tunas  daun  Jambu  Mete setara asam galat yaitu 307,3±0,11 mg/g atau 30,73  g/100  g  berat  kering.  Hal  ini  dapat dipengaruhi karena ekstrak daun Jambu Mete menggunakan  daun  yang  lebih  tua  yang
kemungkinan  mempunyai  senyawa  tanin yang sudah berkurang.
Hasil  penelitian  (Nugroho et  al., 2013)  menunjukkan  bahwa  kadar  flavonoid total  ekstrak  daun  Jambu  Mete  rata-rata adalah 1,970±0,006% yang berarti setiap 100 g  berat  kering  ekstrak  daun  Jambu  Mete mengandung  flavonoid  total  1,970±0,006  g. Hasil ini lebih besar jika dibandingkan hasil penelitian  (Sulaiman et  al.,  2011)  yang menggunakan  ekstrak  daun  Jambu  Mete dengan  kandungan  flavonoid  total  setara kuersetin hanya 9,3±0,6% mg/g berat kering ekstrak  atau  0,93 g/100  g  berat  kering ekstrak.
Sehubungan  dengan  hal  tersebut, maka  dalam  penelitian  ini  akan  dilakukan isolasi  dan  identifikasi  untuk  mengetahui golongan kimia yang aktif sebagai antioksidan  dari  ekstrak  etanol  daun  Jambu Mete (EEDJM).

## II. METODE PENELITIAN A. Pengambilan dan pengolahan sampel
Sampel  daun  Jambu  Mete  diambil dari  Dusun  Cilellang  Palanro,  Kabupaten Barru  Provinsi  Sulawesi  Selatan.  Sampel daun  Jambu  Mete  yang  telah  dikumpulkan, dicuci  bersih  menggunakan  air  mengalir, setelah  itu  dilakukan  perajangan  atau  di potong – potong
kecil. Selanjutnya dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan tanpa paparan sinar matahari langsung.

## B. Ekstraksi sampel
1. Maserasi dengan pelarut etanol Daun Jambu Mete ditimbang sebanyak  400  gram,  dimasukkan  ke  dalam wadah  maserasi,  dan  ditambahkan  pelarut etanol  sebanyak  4000  mL  hingga  simplisia tersebut  terendam,  dibiarkan  selama  3 hari dalam  bejana  tertutup  sambil  diaduk  secara periodik.  Setelah  3  x  24  jam  dilakukan penyaringan  dan  diperoleh  ekstrak  etanol cair.  Proses  maserasi  diulang  sampai  3  kali. Hasil  penyarian  yang  diperoleh  kemudian diuapkan  dengan  menggunakan  rotavapor sehingga  akan  diperoleh  ekstrak  kental. Ekstrak  etanol  kental  diuapkan  lagi  hingga diperoleh  ekstrak  etanol  kering  sebanyak 20,087 gram.

## 2. Uji antioksidan
Ekstrak  etanol  daun  Jambu  Mete yang diperoleh diambil secukupnya,
dimasukkan  dalam  vial  kemudian  ditambah dengan  pelarut  etanol.  Selanjutnya  ditotol pada lempeng KLT yang berukuran 1 x 7 cm dan dielusi dengan eluen n-heksan : etil asetat (6  :  4).  Dilihat  di  UV  254  dan  366  nm  dan diperoleh  5  noda,  selanjutnya  disemprot dengan  DPPH  sebagai  langkah  awal  untuk mengetahui  adanya  senyawa  yang  aktif antioksidan,  dari  hasil  semprot  tersebut ekstrak etanol daun Jambu Mete mempunyai aktivitas antioksidan.
C. Isolasi dan pemurnian senyawa kimia a. Isolasi  dengan  metode  kromatografi
kolom cair vakum

## 1. Penyiapan kolom
Kolom kromatografi  berdiameter  6  cm dan panjang 30 cm dibersihkan dengan etanol kemudian  disumbat  bagian  bawah  kolom dengan  kapas  agar  silika  gel  dapat memisahkan komponen kimia.  Sebanyak 25 gram adsorben  silika  gel  60  (0,2-0,5  mm) berbanding 5 gram silika gel 60 GF 254 (Merck Germany) dicampurkan  dengan  eluen  n- heksan  :  etil  asetat  (6:4)  yang  digunakan, kemudian  dimasukkan  kedalam  kolom  dan dimampatkan  secara  perlahan  sehingga diperoleh kerapatan kolom yang seragam.

## 2. Isolasi sampel
Ekstrak  etanol  daun  Jambu  Mete ditimbang  sebanyak  1  gram,  kemudian diletakkan  diatas  permukaan  adsorben  yang sebelumnya telah dimasukkan dalam kolom, diatas  ekstrak  tersebut  diletakkan  kertas saring.  Setelah  itu  dimasukkan  n-heksan, eluen n-heksan : etil asetat (9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9) dan etil asetat, dialirkan dengan  kecepatan  1  ml/menit.  Fraksi  yang keluar ditampung dalam wadah dan diperoleh sebanyak  11  fraksi.  Fraksi  yang  diperoleh diidentifikasi  dengan  KLT  untuk  melihat profil  kromatogram.  Dimana  fraksi  tersebut dilarutkan  dengan  pelarut  etanol,  kemudian ditotol pada lempeng KLT silica gel 60 F 254 (Merck  Germany)  berukuran  1  x  7  cm menggunakan pipa kapiler dan dielusi dengan eluen  n-heksan:etil  asetat  (6:4).  Setelah  itu, dilihat  di  UV  254  dan  366  selanjutnya disemprot  dengan  DPPH  untuk  mengetahui senyawa  yang  aktif  antioksidan,  dari  hasil semprot  tersebut,  fraksi  VI  menunjukkan aktivitas  antioksidan  paling  intens  yang
ditunjukkan  dari  perubahan  warna  ungu menjadi kuning (Sarker et al., 2006).

## b. Identifikasi dengan KLT preparatif
Berdasarkan  profil  kromatogram, fraksi yang mempunyai aktivitas antioksidan paling  intens  yaitu  fraksi  VI.  Sebelumnya fraksi  dilarutkan  dengan  pelarut  etanol kemudian  ditotolkan  pada    lempeng  KLT (Merck Germany) dengan ukuran yang lebih besar yaitu 10 x 10 cm dengan menggunakan eluen n-heksan : etil asetat (6:4) dalam suatu bejana KLTP, setelah itu dideteksi menggunakan sinar UV 254 dan 366 nm dan diperoleh 7 pita. Lempeng yang telah diamati diberi  tanda  dan  dikeruk.  Hasil  kerukan tersebut ditambahkan pelarut metanol kemudian  disentrifuge, filtrat  ditampung kemudian  diuapkan  hingga  didapatkan  isolat. Selanjutnya  isolat  yang  diperoleh  ditotol  pada lempeng  KLT  (Merck  Germany)  dengan menggunakan eluen n-heksan : etil asetat (6:4), hasilnya  disemprot  dengan  DPPH dan  yang menunjukkan  aktivitas  antioksidan  terdapat pada pita II.
c. Uji kemurnian isolat aktif
1. Elusi sistem dua dimensi Isolat  yang  diperoleh  dilarutkan dengan  etanol  kemudian  ditotolkan  pada lempeng KLT (Merck Germany) lalu dielusi dengan eluen n-heksan : etil asetat (7:3) arah pertama dan eluen n-heksan : etil asetat (8:2) untuk arah kedua, Selain itu juga digunakan eluen  n-heksan  :  etil  asetat  (7:3)  untuk  arah pertama  dan  eluen  n-heksan  :  aseton  (7:3) untuk  arah  kedua.  Proses  elusi  yang  kedua dilakukan dengan  cara  memutar  lempeng berlawanan dengan arah jarum jam sehingga hasil  elusi  yang  pertama  menjadi  titik  awal pengelusian  yang  kedua.  Dari  proses  elusi yang dilakukan terdapat satu bercak tunggal, maka  dapat  diduga  bahwa  isolat  tersebut adalah komponen kimia yang tunggal.
2. Elusi sistem multi eluen
Uji  kemurnian isolat dilakukan dengan  menggunakan  beberapa  variasi  eluen yaitu n-heksan : etil asetat  (7:3), n-heksan  : aseton (9:1),  dan kloroform  :  metanol (1:1). Penampakan  bercak  tunggal  menandakan bahwa golongan  senyawa  dari  bercak yang didapat  merupakan  golongan senyawa kimia yang tunggal.
D. Identifikasi sampel
1. Identifikasi dengan pereaksi kimia
Senyawa  murni  yang  diperoleh, ditotolkan  pada  lempeng  KLT  dan  di  elusi. Hasil  pengelusian  kemudian  disemprotkan dengan  penampak  bercak  yaitu  pereaksi sitroborat  (flavonoid),  aluminium  klorida (flavonoid),  FeCl 3 (flavonoid  dan  tanin), Libermann-Bouchardat  (tanin,  flavonoid, steroid dan saponin).

## 2. Identifikasi spektroskopi uv-vis
Kristal  murni  yang  diperoleh, diidentifikasi  dengan  spektroskopi  UV-Vis. Senyawa dilarutkan dengan metanol kemudian  cuplikan  ditempatkan  diantara monokromator  dan  detector. Spektrum  yang dihasilkan direkam pada alat pencatat.
3. Identifikasi spektroskopi infra merah
Kristal murni yang diperoleh diidentifikasi  dengan  spektroskopi  infra merah  dengan  cara  menempatkan  cuplikan sebagai  film  yang  tipis  diantara  dua  lapisan natrium  klorida  yang  transparan,  kemudian ditempatkan  pada  celah  sinar  infra  merah. Hasil direkam pada alat pencatat.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN A. HASIL PENELITIAN
Sampel daun Jambu Mete sebanyak 400  gram    diekstraksi  secara  maserasi  yaitu menggunakan  pelarut  etanol  sebanyak  4000 mL,  menghasilkan  ekstrak  etanol  kental 20,087 gram.
Hasil  profil  ekstrak etanol secara kromatografi lapis tipis dengan menggunakan cairan pengelusi n-heksan :etil asetat (6:4), menunjukkan 1 bercak pada sinar UV 254 nm, 4 bercak pada sinar  UV 366 nm, hasilnya  disemprot  dengan  menggunakan DPPH untuk melihat senyawa yang mempunyai  aktivitas  antioksidan.  Senyawa yang  aktif  antioksidan  adalah  noda  dengan nilai  Rf  0,54  yang  menunjukkan  perubahan warna  dari  ungu  menjadi  kuning  (Sarker et al., 2006)
Ekstrak  etanol  daun  Jambu  Mete sebanyak 1 gram diisolasi secara kromatografi kolom cair vakum menggunakan  campuran  adsorben  silika  gel 60 (0,2-0,5 mm) sebanyak 25 gram dan silika gel  60  GF 254 sebanyak  5  gram    dengan menggunakan cairan pengelusi n-heksan, etil asetat,  eluen  n-heksan  :  etil  asetat  (9:1,  8:2,
7:3, 6:4, 5:5, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9) menghasilkan 11 fraksi.
Dari hasil fraksi yang menunjukkan aktivitas  antioksidan  paling  intens  terdapat pada  fraksi  VI  yang  ditunjukkan  dengan perubahan  warna  dari  ungu  menjadi  kuning (Sarker et al., 2006).
Selanjutnya
fraksi
VI dari kromatografi  kolom cair vakum ini diisolasi lagi secara kromatografi lapis tipis preparatif menggunakan eluen n-heksan:etil asetat (6:4) menghasilkan  7  pita.  Profil  kromatografi hasil  KLT-Preparatif disemprot  dengan menggunakan  DPPH  dan  menunjukkan aktivitas  antioksidan  pada  pita  II,  sehingga pita  II yang  kemudian  dilanjutkan  untuk  uji kemurnian.
Isolat  yang  diperoleh  dilarutkan kemudian ditotolkan pada lempeng silika gel 60 F 254 (Merck Germany) dengan ukuran 5 x 5  cm.  Lalu  dielusi  dengan  eluen  n-heksan  : etil  asetat  (7:3)  untuk  arah  pertama,  dan  n- heksan  :  etil  asetat  (8:2)  untuk  proses  elusi yang  kedua,  selain  itu  juga  digunakan  eluen n-heksan : etil asetat (7:3) untuk arah pertama dan n-heksan : aseton (7:3) untuk arah kedua, dilakukan  dengan  cara  memutar  lempeng berlawanan dengan arah jarum  jam sehingga hasil  elusi  yang  pertama  menjadi  titik  awal pengelusian  untuk  yang  kedua,  dari  proses elusi  tersebut  diperoleh  satu  bercak  tunggal, maka dapat dikatakan bahwa isolat  tersebut adalah  komponen  kimia  yang  tunggal.  Uji kemurnian  isolat  juga  dilakukan dengan menggunakan  beberapa  variasi  eluen  yaitu kloroform  :  metanol  (1:1),  n-heksan:etil asetat (7:3) dan n-heksan:aseton (9:1). Hasil elusi  tersebut  menampakkan  noda  tunggal pada UV 366 nm.
Data spektroskopi ultraviolet- visibel isolat  pita  II  menunjukkan serapan maksimum  pada  panjang  gelombang 424,50 nm.  Menurut  Farmakope  Herbal  Indonesia (2008)  serapan  flavonoid  yaitu  425  nm, sedangkan  Markham  (2006)  menjelaskan bahwa panjang gelombang flavanoid berkisar 400-500  nm. Sedangkan  data  spektroskopi infra merah isolat  pita  II  dengan  data spektrum  yaitu    pada  bilangan  gelombang 3393,18 cm -1 menunjukkan adanya gugus O- H yang diperkuat dengan bilangan gelombang 1102,20 cm -1 yang  menunjukkan adanya gugus C-O, pada bilangan gelombang 2923,44  cm- 1 menunjukkan    adanya  gugus C-H  (aromatik)    yang  diperkuat  dengan
bilangan  gelombang  1456,07  cm- 1 yang menunjukkan  adanya  gugus  C-C,  pada bilangan gelombang 1555,13 cm -1 menunjukkan adanya gugus C=C. Sedangkan menurut  Asih  (2008)  golongan  flavonoid pada spektrum infra merah akan menunjukkan adanya gugus O-H, C-H, C=C.
Bilangan Gelombang Prediksi Gugus Isolat pita II Pustaka Peak 3393,18 3000-3700 Kuat, Melebar O-H 2923,44 2791,48 2800-3000 2750-2850 Kuat Puncak lemah C-H 1555,13 1456,07 1102,20 1500-1900 1450-1600 900-1300 Kuat Kuat C=C C-C C-O Selanjutnya adalah identifikasi secara reaksi kimia yaitu dengan menggunakan pereaksi Liberman Bouchardat memberikan  warna  hitam  (negatif  untuk golongan  steroid),    pereaksi  Sitroborat memberikan  warna  kuning  kehijauan  pada sinar  tampak,  berfluoresensi  pada  UV 366 (positif  untuk  golongan  flavonoid),  peraksi FeCl 3 memberikan warna hijau (positif untuk golongan  fenolik),  dan  pereaksi  aluminium klorida memberikan warna kuning pada sinar tampak (positif untuk golongan flavonoid).

## B. PEMBAHASAN
Penelitian  ini  menggunakan  daun Jambu  Mete  (DJM)  dengan  nama  simplisia Anacardii  Occidentalis  Folium  (Depkes  RI, 2008)  yang  diambil  dari  Dusun  Palanro Kabupaten  Barru  Sulawesi  Selatan.  Daun Jambu  Mete  dalam  keadaan  segar  langsung dideterminasi di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia  Fakultas  Farmasi UMI. Determinasi sampel penelitian dilakukan  untuk  memastikan  kebenaran bahan tanaman yang digunakan dan merupakan salah satu tahapan penting dalam proses selanjutnya. Hasil identifikasi tanaman menunjukkan bahwa sampel tersebut adalah jenis Anacardium occidentale L., dari suku Anacardiaceae (hasil identifikasi  dapat  dilihat  pada  lampiran).
Berdasarkan hasil determinasi tersebut, maka sampel  tanaman  yang  digunakan  adalah benar yaitu jambu mete, dalam bahasa inggris disebut cashew.  Dengan  adanya  kepastian identitas  sampel,  maka  daun  Jambu  Mete diambil  dalam  jumlah  yang  lebih  banyak kemudian  dikeringkan  dan  diserbukkan untuk pengujian selanjutnya.
Simplisia  daun  Jambu  Mete  kering diekstraksi  dalam  bentuk  serbuk  untuk memudahkan proses penarikan senyawa aktif oleh  pelarut  dari  dalam  jaringan  tumbuhan. Bentuk  serbuk  lebih  mudah  tersari  karena luas  kontak  antara  permukaan  jaringan  sel dengan  pelarut  lebih  besar.  Pelarut  yang digunakan  yaitu  etanol  96  %  (Konan et  al., 2010;  Depkes  RI,  2008).  Pelarut  ini  disebut juga  pelarut  universal  yang  baik  untuk ekstraksi  pendahuluan  karena  kemampuan melarutkan  senyawa-senyawa  organik  baik polar  maupun  nonpolar  (Seidel,  2006; Harborne, 1987).
Metode ekstraksi daun Jambu Mete yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah maserasi  (Depkes  RI,  2008)  karena  lebih sederhana,  mudah  dan  tanpa  pemanasan. Maserasi  daun  Jambu  Mete  menggunakan etanol  96%  dilakukan  selama  24  jam kemudian  diremaserasi  lagi  dengan  pelarut yang sama untuk menarik senyawa aktif agar diperoleh  ekstrak  yang  lebih  banyak. Menurut  Depkes  RI  (2008),  maserasi  daun Jambu  Mete  sekurang-kurangnya  2  kali dengan  jenis  dan  pelarut  yang  sama.  Hasil maserasi diuapkan dengan rotavapor sampai diperoleh  ekstrak  agak  kental.  Penguapan ekstrak  cair  daun  Jambu  Mete  dengan menggunakan rotavapor dapat menimbulkan floating mengingat adanya kandungan saponin  dalam  daun  Jambu  Mete,  sehingga tekanan,  putaran  rotor  dan  suhu  harus  tetap terjaga.  Hasil  penguapan  dengan  rotavapor belum menunjukkan konsistensi yang kental, sehingga  dilanjutkan  dengan  penguapan diatas  tangas  air  sampai  diperoleh  ekstrak kental.  Hasil  ekstraksi  diperoleh  ekstrak etanol sebesar 20,087 gram dari berat serbuk kering daun Jambu Mete sebanyak 400 gram.
Dilakukan  uji  pendahuluan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol daun Jambu Mete dengan penyemprotan  DPPH.  Pada  penelitian  ini metode  yang  digunakan  yaitu  kromatografi kolom  cair  vakum  karena  metode  ini  dalam pengerjaan  dan  alat  yang  digunakan  lebih
sederhana,  proses  pengelusiannya  cepat karena dibantu dengan pompa vakum, selain itu menggunakan tekanan yang rendah untuk meningkatkan  laju  aliran  dari  fase  gerak (Hostmeen, 1995).
Senyawa  yang  lebih  polar  akan terikat  kuat  pada  silika  gel  sedangkan senyawa  yang  nonpolar  akan  terelusi  jauh oleh  sistem  pelarut  seperti  n-heksan  :  etil asetat  (Oniszczuk  dan  Wojciak-Kosior, 2008). Penelitian ini menggunakan fase gerak n-heksan  :  etil  asetat  (6:4)  modifikasi  dari Oniszczuk  dan  Wojciak-Kosior  (2008), karena  dengan  perbandingan  tersebut  telah mampu mengelusi senyawa sampai mendeteksi batas garis atas.
Senyawa yang mempunyai aktivitas antioksidan  akan  bereaksi  dengan  radikal DPPH  yang  berwarna  ungu  dan  berubah menjadi  senyawa  yang  lebih  stabil  menjadi warna  kuning (Sarker et  al.,  2006).  Sifat antioksidan  dari  flavonoid  berasal  dari kemampuannya  untuk  mentransfer  sebuah elektron  ke  senyawa  radikal  bebas  dan  juga membentuk kompleks dengan logam, sehingga kedua mekanisme tersebut membuat  flavonoid  memiliki  beberapa efek, diantaranya  menghambat  peroksidasi  lipid, menekan  kerusakan  jaringan  oleh  radikal bebas  dan  menghambat  aktivitas  beberapa enzim ( Pietta, 2000).
Hasil  yang  diperoleh  berdasarkan pengukuran  menggunakan  spektrofotometer uv-vis  pada  panjang  gelombang  424,50  nm, pada panjang  gelombang  inilah  didapatkan nilai absorbansi terbesar yaitu 0,227. Hal ini sesuai  dengan  literatur  Farmakope  Herbal Indonesia (2008),  bahwa panjang gelombang 425 nm adalah golongan flavonoid, sedangkan menurut Markham (2006), serapan  flavonoid  berkisar  400-500  nm. Sedangkan  data  spektroskopi  infra  merah isolat  pita  II  pada  bilangan  gelombang 3393,18 cm -1 menunjukkan adanya gugus O- H yang diperkuat dengan bilangan gelombang 1102,20 cm -1 yang  menunjukkan adanya gugus C-O, pada bilangan gelombang 2923,44 cm- 1 menunjukkan adanya gugus C- H  (aromatik),  yang  diperkuat  dengan bilangan  gelombang  1456,07 cm -1 yang menunjukkan  adanya  gugus  C-C,  pada bilangan gelombang 1555,13
cm -1 menunjukkan adanya gugus C=C. Berdasarkan profil KLT dan identifikasi  diatas, maka  dapat  disimpulkan
bahwa  ekstrak  etanol  daun  Jambu  Mete adalah  senyawa  golongan  flavonoid.  Salah satu  reagen  spesifik  untuk  flavonoid  adalah penampak bercak  sitroborat  yang digunakan untuk  mendeteksi  senyawa  flavonoid  dalam ekstrak etanol daun Jambu Mete dengan ciri berflouresensi pada UV 366 (Depkes RI, 2008). Hasil  ini  mendukung  penelitian bahwa  daun  Jambu  Mete  mengandung senyawa-senyawa  fenolik  dan  polifenol (Syaharuddin  dkk,  1996;  Sulaiman et  al., 2011;  Depkes  RI,  2008;  Andarwulan et  al., 2012). Paris et al.,(1977) melaporkan adanya senyawa  flavonoid  dalam  ekstrak  daun Jambu  Mete  jenis  kuersetin  3-ramnosida, kuersetin-glukosida,  dan  kuersetin  3-galloil- glukosida.  Konan et  al.,(2010)  menemukan flavonoid jenis agatisflavon.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil  penelitian  yang telah  dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan bahwa:
1. Senyawa aktif antioksidan dapat diisolasi dari  ekstrak  etanol  daun  Jambu  Mete (Anacardium occidentale L.)
2. Golongan  kimia  yang  aktif  sebagai antioksidan  berdasarkan  data  diatas adalah golongan flavonoid.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Andarwulan, N., Kurniasih, D., Apriady, R.A.,  Rahmat,  H.,  Rotoc,  A.V.,  and Bolling,  B.W.,  2012,  “ Polyphenols, Carotenoids,  and  Ascorbic  Acid  in Underutilized  Medicinal  Vegetables” , ISNFF, Article in Press.
2. Depkes  RI.  2008.  “Farmakope  Herbal Indonesia Edisi 1”. Jakarta
3. Harborne, J.B.,1987, “Metode Fitokimia Penuntun  Cara  Modern  Mengekstraksi Tumbuhan”,  terjemahan  Padmawinata, K, Penerbit ITB : Bandung.
4. Hostettman,  K.  and  Wolfender,  J.L., 2011, “Aplication of Liquid Chromatography/UV/MS”., Bioactive Compounds from Natural Source Isolation,  Taylor  &  Francis,  London, UK.
5. Konan,  N.A.,  Lincopan,  N.,  2010, “ Citotoxicity  of  Cashew  Flavanoid”
Towards Cell Lines, ESTP.
6. Markham,  R.  Andersen.  M.,  2006. “Flavanoids  C hemistry,  Biochemistry and Applications. London. New York.
7. Nugroho, A.E., Suhardjono, D.,
Mulyono,  S.A,  Malik,  A.,  2013  “Total Flavanoid  and  Fenolik  Contents  and  in Vitro  Antyhipertention  Activity  of Indonesia  Cashew  Leaves Anacardium occidentale L.  Fakultas  Farmasi.  UGM. Yogyakarta.
8. Paris, R., Plat, M., Barber, P.G., Linhard, J.,  and  Laurens,  A.,  1977,  Receherce Chimique  et  Pharmacologique  sur  les Feuilles  d’ Anacardium  occidentale L. (Anacardiaceae), Bull. Soc. Med. Afr
9. Pietta,
P.G. 2000. “Journal Natura l“.Product”. http://nfscfaculty.tam u.edu/talcott/Food Chem 605/Class Presentation Papers/Review Flavonoids as AOX.pdf. Y. Porat, A. Abramowitz.
10. Sarker.,  Zahid  Latif.,  Alexander  Gray., 2006,  Natural  Product  Isolation  2 nd Humana Press Inc, Totowa, NJ.
11. Seidel,  V.  2006.  “Initial  and  Bulk Extraction, In Sarker, S.D., Latif, Z. And Gray, A. I., Natural Product Isolation, 2 nd edition,  Humana Press  Inc.,  Totowa, New Jersey.
12. Subeki,  1998.  “ Antioksidan  Alami Terhadap  Tumbuhan . ”  Kanisius  :
Yogyakarta. 13. Sugeng, H., 2009. “ Ensiklopedia Tanaman Obat Indonesia ”.Yogyakarta.
14. Sulaiman, S.F., Sajak and S eow, E.M., 2011,  Effect  of  Solvent  in  Extracting Polyphenola and Antioxidants of Selected. Food Compos. Anal.
15. Syaharuddin,  Padmawinata,  K.,  dan Soetarno,  S.,  1996,  “ Isolasi  dan Penentuan  Struktur  Beberapa  Senyawa
Kimia  dalam  Daun  Jambu  Mete (Anacardium occidentale L., Anacardiaceae)”, ITB Bandung.
16. Wojciak-Kosior, M. And Oniszczuk, A.
2008.  Ample  Preparation  and  TLC
Analysis of Phenolic
Acids, In Waksumundzka, Hajnos. M., Sherma, J., Kowalska, T., Thin Layer Chromatography in Phytocemistry, CRC Press  Taylor  and  Prancis  Group  Boca
Raton.