## ANALISIS FRAGMENTASI GC-MS SENYAWA AKTIF ANTIKANKER LEUKEMIA FRAKSI KLOROFORM UMBI
BAWANG TIWAI (Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb)
Submitted: 2 Agustus 2018 Edited: 15 Mei 2019 Accepted: 25Mei 2019
Dwi Lestari 1 , Rudi Kartika 1 , Eva Marliana 1 , Eka Siswanto Syamsul 2
1 Program Studi S2 Kimia Jurusan Kimia FMIPA Universitas Mulawarman 2 Akademi Farmasi Samarinda Email : rieka4827@gmail.com

## ABSTRACT
Tiwai  Onion  (Eleutherine  bulbosa (Mill.)  Urb.)  is  an  Iridaceae  tribe  which  is  a  typical plant  of  Borneo.  Its used  by  the  Dayak  community,  among  others,  for  colon  cancer,  breast cancer,  diabetes  mellitus,  hypertension,  lowering cholesterol,  strokes,  boils,  anti-bleeding  and abdominal  pain.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  components  of  anticancer compounds of chloroform fraction by GC-MS method. The results of GC-MS spectrum analysis based on the base peak equation of the chloroform fraction contain 9,12-Octadecadienoic Acid, and 1- (2,3,5,6-Tetramethyl phenyl) Ethanone which has the potential as an anticancer.
Keywords : Eleutherine bulbosa, anticancer, chloroform fraction, linoleic acid.

## PENDAHULUAN
Leukemia merupakan proliferasi yang terjadi  secara  tidak  teratur  atau  terjadinya akumulasi  pada  sel  darah  putih  di  dalam sumsum  tulang  sehingga  elemen  pada sumsum tulang normal terganti. Sel-sel yang tua akan mati kemudian digantikan oleh sel- sel yang baru, akan tetapi proses yang terjadi secara  teratur  ini  tidak  berjalan  dengan seharusnya, yakni dimana terjadinya desakkan dari sel-sel lain akibat pertumbuhan yang tidak wajar dari sel darah putih (1) .
Lestari  dkk  (2019)  Fraksi  kloroform umbi  bawang  tiwai  merupakan  fraksi  aktif yang  terpilih  yang  memiliki  nilai  toksisitas akut  metode  in  vivo  LD50  182,81-187,068 mg  (kategori  sedang) (2) .  Nilai  aktivitas antikanker  terhadap  sel  Leukemia  L1210 sebesar  9,56  ppm  (kategori  sangat  kuat).
Lestari  dkk  (2018), bawang  tiwai  juga memiliki aktivitas antibakteri potensi sedang terhadap  bakteri  Escherichia  coli,  sebagai antioksidan  dengan  kategori  kuat  dan memiliki  potensi  sebagai  agen  antidiabetik yang  bermanfaat  dalam  pencegahan  dan perlindungan  terhadap  penyakit  diabetes mellitus (3,4,5,6) .
Kandungan  kimia  umbi  bawang  tiwai memiliki  potensi  sebagai  tanaman  obat antikanker.  Saat  ini  penggunaan  bawang tiwai sebagai bahan tambahan pada masakan juga semakin terkenal akan tetapi penelitian tentang  umbi  bawang  tiwai  ini  belum banyak dilakukan, terutama tentang khasiatnya  sebagai  anti  kanker  darah  atau leukemia.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  profil  senyawa  kimia  dari  GC- MS  fraksi  aktif  umbi  bawang  tiwai  yang berpotensi sebagai antikanker.
Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia Umbi Bawang Tiwai (3)
No. Uji Senyawa Hasil Uji Etanol n-Heksana Kloroform Air 1 Alkaloid - - + - + + + + + + + + 2 Flavonoid + + + + 3 Tanin + + - - 4 Saponin - - - - 5 Terpenoid - - - - 6 Kuinon + - + - METODE PENELITIAN Prosedur Penelitian Pembuatan Ekstrak Bawang Tiwai Pembuatan ekstrak dilakukan
dengan  cara maserasi.  Simplisia  umbi bawang  tiwai  yang  sudah  dihaluskan sebanyak  500  g  dimasukkan  ke  dalam toples, kemudian dimaserasi dengan etanol selama  24  jam,  disaring,  dan  dipekatkan filtratnya.  Setelah  itu  dimaserasi  kembali umbi  bawang  tiwai  tersebut  sebanyak dua kali.  Hasil  remaserasi  dicampur  menjadi satu, semua filtrat hasil pemekatan disebut dengan ekstrak etanol.
Partisi ekstrak etanol dengan n- heksana : metanol : air
Ekstrak  etanol  dipartisi  dengan n- heksana  :  metanol  :  air  (5:9:1)  menggunakan corong  pisah  sampai  terbentuk  2  lapisan,  lalu masing-masing  bagian  dipekatkan  dengan rotary evaporator sehingga diperoleh fraksi n- heksana dan fraksi metanol - air.
Partisi  fraksi  metanol  :  air  dengan Kloroform : air
Ekstrak  dari  fraksi  metanol  :  air dipartisi  dengan  kloroform  :  air  (1:1) menggunakan corong pisah sampai terbentuk 2 lapisan,  lalu  masing-masing bagian dipekatkan dengan rotary evaporator sehingga  diperoleh  fraksi kloroform dan fraksi air. Fraksi kloroform sebagai fraksi yang aktif sebagai senyawa antikanker dilakukan  identifikasi  profil  senyawa- senyawa  yang  terkandung  dalam  fraksi aktif dengan menggunakan GC-MS.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian  GC-MS  Fraksi  Kloroform Umbi Bawang Tiwai
Profil kimia senyawa fraksi kloroform  umbi  bawang  tiwai  dapat diketahui dengan pengujian GC-MS,
dalam penelitian ini menunjukkan terdapat
dua  senyawa  yang  mirip base  peak nya yaitu  pada  gambar  1  dan  3,  jika dibandingkan  dengan  senyawa  yang  ada pada database GC - MS,  karena base  peak berfungsi  sebagai  penanda  atau  ciri  khas
suatu  senyawa.  Senyawa - senyawa  yang dimaksud yaitu 9,12 - Octadecadienoic Acid ,  dan 1 - (2,3,5,6 - Tetramethylphenyl) Ethanone .
Gambar 1. Struktur kimia fraksi kloroform umbi bawang tiwai pada pengujian dengan GC-MS
( 9,12-Octadecadienoic Acid (C 18 H 31 O 2 ))
Gambar 2. Pola Fragmentasi senyawa 9,12-Octadecadienoic Acid (C 18 H 31 O 2 )
OH O e -2e OH O m/z =280 -C2H5 OH O m/z =251 OH O H CH 3 C OH O - m/z =220 m/z =220 M-C2H4O2 CH 2 m/z =151 - CH 2 m/z =179 m/z = 123 - CH 2 CH CH 2
Gambar 3 . Struktur kimia fraksi kloroform umbi bawang tiwai pada pengujian dengan GC - MS ( 1 - (2,3,5,6 - Tetramethylphenyl) Ethanone (C 12 H 16 O))
Gambar 4. Pola Fragmentasi senyawa 1-(2,3,5,6-Tetramethylphenyl) Ethanone
Kedua senyawa tersebut memiliki aktivitas  antioksidan karena  adanya  ikatan rangkap  terkonjugasi  pada  senyawa  tersebut. Beberapa literatur mengatakan bahwa senyawa 9,12-Octadecadienoic  Acid (C 18 H 31 O 2 )  atau biasa  dikenal  dengan Linoleic  Acid berpotensi sebagai  antikanker. Conjugated  Linoleic  Acid (CLA)  dan  asam  lemak  n-3  poly- tidak  jenuh panjang yang ditunjukkan secara in vivo dan in vitro dapat  mengurangi  pertumbuhan  kanker. Pertumbuhan  kanker  yang  terjadi  dapat diperlambat  atau  dihentikan  replikasi  sel  nya yaitu  dengan  mengganggu  transisi  melalui siklus  sel,  meningkatkan  kematian  sel  melalui nekrosis  dan  atau  apoptosis,  atau  keduanya. Efek  antikanker  dari  asam  lemak,  yang ditunjukkan  secara in  vivo,  juga  dapat dimediasi oleh efek pada sistem imun host (7,8) .
Adapun  penelitian  lain  yang  pernah
dilakukan yaitu adanya dua jenis asam hidroksi yaitu (10E, 12Z) -9-hydroxy-10,12-
octadecadienoic acid (A) dan        (9Z, 11E) -
13-hydroxy-9,11-octadecadienoic acid (B) yang  merupakan  senyawa  sitotoksik  dari ekstrak air dedak padi (rice bran). Sitotoksisitas asam  (A)  lebih  kuat  daripada  asam  (B)  secara in  vitro melawan  sel-sel  P 388 leukemia  tikus.
Asam  (A)  sedikit  menghambat  pertumbuhan sel  fibroblast  tikus  3T3  (3T3),  tetapi  sangat menghambat  sel  virus  (SV-T2).  Injeksi
Intraperitoneal asam (A) efektif
memperpanjang  waktu  kelangsungan  hidup tikus  setelah  transplantasi intraperitoneal sel kanker mammary MM46 (9) .
Senyawa 1-( 2,3,5,6-Tetra methylphenyl) Ethanone berpotensi sebagai antikanker karena posisi  ikatan  rangkap  dan  geometri  memiliki pengaruh  terhadap  bioaktivitasnya  selain kemampuannya dalam menghambat sel kanker dan toksisitas juga dapat meningkatan aktivitas antioksidan (10) . Senyawa 9,12-Octadecadienoic Acid (C 18 H 31 O 2 )  atau Linoleic  Acid dan 1- (2,3,5,6-Tetramethylphenyl) Ethanone berpotensi  sebagai  antikanker,  adapun  pola fragmentasinya dapat  dilihat  pada  gambar  2 dan gambar 4 (10) .
Hasil  uji  BSLT  fraksi  kloroform memiliki nilai LC 50 yang kategori toksisitasnya paling  rendah  dan  dari  hasil  toksisitas  akut dengan  metode in  vivo memiliki  nilai  LD 50 dengan  kategori  sedang.  Pengujian  aktivitas antikanker fraksi kloroform umbi bawang tiwai pada  sel  leukemia  L 1210 dalam  penelitian  ini menunjukkan  nilai  rata-rata  IC 50 9,56  ppm
termasuk kategori sangat kuat (3) . Profil senyawa kimia  dari  GC-MS  fraksi  kloroform  umbi bawang tiwai yang berpotensi sebagai antikanker adalah senyawa 9,12- Octadecadienoic Acid (C 18 H 31 O 2 ) atau Linoleic Acid dan
1-(2,3,5,6-Tetramethylphenyl)
Ethanone. Aktivitas  juga  ditunjukkan  karena kandungan  Flavonoid  nya  dari  skrining fitokimia.

## SIMPULAN
Profil senyawa kimia dari GC-MS fraksi kloroform umbi bawang tiwai  yang  berpotensi sebagai  antikanker  adalah  senyawa  9,12- Octadecadienoic Acid (C 18 H 31 O 2 ) atau Linoleic
Acid dan 1-(2,3,5,6-Tetramethylphenyl)
Ethanone.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Smeltzer,  2001.  Buku Ajar  Keperawatan Medikal Bedah Brunner & Suddarth. Alih bahasa  Agung  Waluyo,  dkk.  Editor Monica Ester, dkk. Ed. 8. Jakarta : EGC.
2. Lestari,  D,  Kartika,  R.,  dan  Marliana,  E., 2019, Uji Brine  Shimp  Lethality  Test (BSLT) Umbi Bawang Tiwai (Eleutherine bulbosa (Mill.)  Urb) dan  Uji  Toksisitas
Akut Fraksi Aktif, Jurnal Riset Kefarmasian  Indonesia,  Vol.  1  No.1. Asosiasi  Pendidikan  Diploma  Farmasi Indonesia (APDFI), Jakarta
3. Lestari,  D,  Kartika,  R.,  dan  Marliana,  E., 2018, Anticancer Activity From Eleutherine  bulbosa (Mill.)  Urb  On Leukemia Cells L 1210. Proceeding International Conference on Mathematics, Science,  and  Computer  Science. FMIPA
Universitas Mulawarman, Samarinda.
4. Amanda,  F.  R.  2014.”Efektivitas  Ekstrak Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia L.
Merr)  dalam  Menghambat  Pertumbuhan
Bakteri Escherichia coli”. Laporan Penelitian.  Jakarta:  Fakultas  Kedokteran dan  Ilmu  Kesehatan  Universitas  Islam Negeri Syarif Hidayatullah. Hal: 7
5. Kuntorini, E. M., Astuti, M. D., Nugroho, L.  H.  2010.”Struktur  Anatomi  da n Aktivitas  Antioksidan  Bulbus  Bawang Dayak (Eleutherine americana Merr) Dari Daerah  Kalimantan  Selatan”. Penelitian Hayati. (16): 1-7.
6. Febrinda, A. E., Astawan, M., Wresdiyati, T.,  Yuliana,  N.  D.  2013.”Kapasitas Antioksidan dan Inhibitor Alfa Glukosidase Ekstrak  Umbi  Bawang Dayak”. Jurnal  Teknologi  dan  Industri
Pangan. 24(2). Hal: 161 7. Tangyueyengwatana,  P.  dan Gritsanapan, W,  2015,  Standardization  of  Prasaplai,  a Thai traditional preparation for antidysmenorrhea, Dove  Press  journal: Botanics: Targets and Therapy.
8. Wang, H., Cui, Y., Zhao, C.
2010.”Flavonoids  of  The  Genus  Iris (Iridaceae)”. Mini-Rev  Med  Chem.  (10):
643-661.
9. Hayshi, Y., Nishikawa,  Y., Mori,  H.,
Matsushita, Y.I, Matsui,  T., 1998,
Antitumor  activity  of  (10E,  12Z)-9- hydroxy-10,12- octadecadienoic acid from rice  bran, Journal  of  Fermentation  and Bioengineering, Volume 86, Issue 2, Pages 149-153
10. Shibuya,  H., Fukushima, T., Ohashi,  K., Nakamura,  A., Riswan,  S., Kitagawa,  I., 1997, Indonesian  Medicinal  Plants.  XX. Chemical Structures of Eleuthosides A, B, and  C,  Three  New  Aromatic  Glucosides from  the  Bulbs  of  Eleutherine  palmifolia (Iridaceae), Chemical and Pharmaceutical and Pharmaceutical Bulletin.
11. Field CJ, and Schley PD, 2004, Evidence for potential mechanisms for the effect of conjugated  linoleic  acid  on  tumor metabolism and immune function: lessons  from  n-3  fatty  acids. Am  J  Clin Nutr. 2004 Jun;79(6 Suppl):1190S -1198S.