(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2022, 5 (1), 79-82

## SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN BENALU PADA KERSEN Dendrophtoe pentandra (L.) DENGAN METODE 2,2- DIPHENYL -1- PICRYLHYDRAZYL (DPPH)
Monica S.S. Tamunu 1* , Douglas N. Pareta 1 , Hariyadi 2 , Ferdy A.Karauwan 3
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen IndonesiaTomohon
2 ProgramStudiBiologi,FakultasMIPA,UniversitasKristenIndonesiaTomohon
* Penulis Korespondensi; Monicatamunu16@gmail.com Diterima ; 18 April 2022  Disetujui : 28 April 2022

## ABSTRAK
Antioksidan adalah suatu senyawa yang  menghambat/menunda oksidasi suatu molekul dengan cara mengakhiri reaksi berantai inisiasi dan propagasi. Benalu merupakan tumbuhan parasit yang memiliki banyak  aktivitas  biologis  seperti  antioksidan,  antikanker,  antidiabetes  dan  hipertensi.  Daun  benalu kersen  merupakan  jenis  benalu  bersifat  parasit  yang  menyerang  berbagai  jenis  tumbuhan  inang, semak, maupun pohon. Prosedur pegujian dilakukan dengan dibuat beberapa larutan sampel dengan konsentrasi 20,40, 60, 80, dan 100 ppm. Sampel dipipet dan ditambahkan larutan DPPH (200 ppm) dengan  perbandingan  1:4  ke  dalam  96  – well  clear  polystyrene  microplate lalu  dihomogenkan. Campuran diinkubasi selama 30 menit pada suhu 37 C, kemudian serapan diukur dengan microplate reader pada panjang gelombang 520 nm. Hasil uji aktivitas antioksidan dilakukan untuk mengetahui nilai IC 50 dari sampel benalu kersen. Berdasarkan hasil penelitian antioksidan benalu kersen dengan menggunakan metode DPPH menunjukkan esktrak benalu kersen mempunyai nilai IC 50 sebesar 21,70 µg/ml.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  tersebut  mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang  kuat karena mempunyai nilai IC 50 kurang dari 200 µg/ml. Kata kunci: antioksidan, daun benalu kersen .

## ABSTRACT
Antioxidant is a compound that inhibits or delay the oxidation of a molecule by a chain reaction of initiation  and  propagation.  Parasite  is  a  parasitic  plant  that  has  many  biological  activities  such  as antioxidant, anticancer, antidiabetic, and hypertension. Kersen parasite a type of parasitic that attacks various types  of  host plants shrubs, and trees the test procedure  was carried  out by  making several sample solutions with concentrations of 20, 40, 60,80, and 100 ppm. Sample is pipetted and add DPPH solution (200ppm) with a ratio of 1:4 into 96- well clear polystyrene microplate then homogenized. The mixture was incubated for 30 minutes at 37 C 0 , then the absorbance was measured at a wavelengt of 520 nm. The result of the antioxidant actiity test were carried  out to determine the  value of IC 50 and parasitic kersen. Based on the result of research on the antioxidant parasite kersen using the DPPH method. It shows that the parasite kersen  extract has an IC 50 value 21,70 µg/ml. This indicates that the extract has strong antioxidant activity because it has an IC 50 value of less than 200 µg/ml. Keywords:Antioxidant, kersen parasite.

## 1. PENDAHULUAN
WHO juga telah mengakui pengobatan secara  tradisional  dapat  mengobati  berbagai jenis  penyakit  infeksi,  penyakit  akut  dan penyakit kronis (Yuningsih 2012). Oleh karena itu banyak perhatian dan penelitian yang tertuju kepada  bahan  alam  sebagai  antioksidan  yang
berasal  dari  tumbuh-tumbuhan  karena  aman bagi tubuh(Rinidar,2014). Antioksidan adalah suatu senyawa yang menghambat/menunda oksidasi suatu
molekul  dengan  cara  mengakhiri  reaksi berantai  inisiasi  dan  propagasi.  Antioksidan diperlukan  karena  tubuh  manusia  tidak memiliki sistem pertahanan antioksidan yang

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2022, 5 (1), 79-82
cukup, sehingga apabila terjadi paparan radikal berlebihan, maka tubuh membutuhkan antioksidan eksogen.
Benalu  telah  dimanfaatkan  untuk mengobati penyakit hipertensi, diabetes, batuk, kanker, deuretik, tukak lambung, cacar, infeksi dikulit dan perawatan setelah bersalin (Mustarichie,  2015). Salah  satu  senyawa  yang berpotensi sebagai antioksidan adalah senyawa flavonoid.  Struktur  dan  reaktivitas  senyawa flavonoid memungkinkan untuk bekerja sebagai  agen  antioksidan  dan  phytoestrogen, modulator  sinyal  estrogen  dan  metabolisme untuk menginduksi respon keseluruhan antiproliferasi (Carlos, 2014).

## 2. METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Sarung tangan, masker, beker gelas, labu erlenmeyer,   kertas    saring, batang pengaduk,  toples,  aqua  1  liter,  labu  destilasi 1000 ml, timbangan analitik, rotary evaporator, corong, pipet, kapas 25 gr, aluminium foil, buret, klem, statif, pompa udara aquarium, sapu lidi,  botol  vial,  gelas,  mikropipet,  penggaris, gunting,  pensil,  label,  kuvet,  cawan  petri,  Uv
Vis Spektrofotometer
UV –    1800. Sampel daun
benalu      kersen Dendrophthoe  pentandra  (L.)  sebanyak  500 gram, etanol 96%, es batu, air aqua, 30 gr ODS (oktadesil silika), dan methanol.

## Metode Penelitian
Penelitian  yang  dilakukan  merupakan penelitian eksperimental di Laboratorium.

## Prosedur Penelitian
1. Pengambilan Sampel Sampel yang digunakan ialah daun benalu kersen yang  diambil di Desa Paguyaman, Provinsi Gorontalo
2. Pembuatan Ekstraksi
Sampel  yang  telah  dipotong  dan ditimbang sebanyak 500 gram dimasukan kedalam toples kaca
kemudian dimaserasi  dengan  pelaut  etanol  96% sampel terendam seluruhnya dan disimpan  1x24  jam  dan  sesekali  diaduk.
Proses ini dilakukan selama 3 hari dam difiltrasi  menggunakan  kertas  saring. Filtrat  yng  diperoleh  kemudian  di evaporator  dengan  suhu  40 o c  hingga dapat ekstrak kental.
3. Skrinning Fitokimia
Identifikasi  flavanoid  dilakukan  dengan cara dilakukan dengan cara ditambahkan serbuk Mg dan 2 ml HCl 2N pada 2 ml larutan ekstrak. Senyawa flavanoid akan menunjukkan  warna  jingga  sampai merah.
4. Uji aktivitas antioksidan
Prosedur  pengujian  dilakukan  dengan dibuat  beberapa  larutan  sampel  dengan konsentrasi 20,40,60,80,100 ppm. Sampel dipipet dan ditambahkan larutan DPPH (200ppm) dengan pembandingan 1:4  ke  dalam  96  well  clear  polystyrene microplate lalu dihomogenkan.
Campuran  diinkubasi  selama  30  menit pada  suhu  37 O C,  kemudian  sarapan diukur  dengan  microplate  reade  pada panjang gelombang 520 nm

## Analisis Data
Pengujian antioksidan menggunakan metode DPPH (2,2-diphenyl -1- picrylhydrazyl)  dianalisis  dengan  melihat perubahan  warna  masing–masing  sampel setelah  diinkubasi  bersama  DPPH.  Jika semua  elektron  DPPH  berpasangan  dengan elektron  pada  sampel  ekstrak  maka  akan terjadi perubahan warna sampel dimulai dari warna  ungu  tua  yang  menjadi  warna  kuning terang.  Setelah  itu  larutan  di  hitung  nilai absorbansinya menggunakan spektrofotometer  UV  –  Vis  dengan  panjang gelombang 517 nm.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  dari  proses  maserasi  berupa maserat yang diperoleh sebanyak 5 liter dari 6 liter pelarut etanol. Maserat yang diperoleh berwarna hijau, kemudian dipekatkan sehingga  diperoleh  ekstrak  kental  sebanyak 23.4 gram untuk keperluan penelitian.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2022, 5 (1), 79-82
Hasil  ekstrak  kental  yang  diperoleh kemudian dilakukan pengujian skrining fitokimia  senyawa  flavonoid,  triterpenoid, saponin  dan  alkaloid.  Skrining  fitokimia ekstrak  dilakukan  dengan  menggunakan  uji tabung.

## Hasil Uji Skrining Fitokimia
Hasil  dari  proses  maserasi  berupa maserasi  yang  diperoleh  sebanyak  6  liter pelarut. sehingga di peroleh eksrak kental 0,05 gram  untuk  keperluan  penelitian.  Pengujian fitokimia pada peelitian ini dilakukan
menggunakan teknik pengujian menurut
Harborne  (1996).  Hasil  uji  ini  menunjukan bahwa  Ektrak  daun  benalu  kersen  memiliki komponen aktif di dalamnya kecuali tripertenoid. Hasil  eksrak  kental  yang  diperoleh kemudian dilakukan pengujian skrining fitokimia senyawa Alkaloid, flavonoid, Saponin,  tanin.  Skrining  fitokimia  ekstrak dilakukan degan menggunakan uji tabung yaitu mereaksikan  sampel  dengan  larutan  pereaksi spesifik untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder yang ada dalam tumbuhan.
Hasil Uji Antioksidan
menunjukan  bahwa  nilai  %  inhibisi antioksidan sampel ekstrak pada konsentrasi 20 ppm  memiliki  nilai  antioksidan  48,92%, konsentrasi 40 ppm memiliki nilai antioksidan 59,11%, konsentrasi 60 ppm memiliki nilai antioksidan  68,70%,  konsentrasi  80  ppm memiliki  nilai  antioksidan  77,34  %  dan  pada konsentrasi 100 ppm memiliki nilai antioksidan sebesar 100 %. Nilai IC50 ekstrak etanol daun benalu  kersen  yang  diperoleh  yaitu  21.70696 ppm/mL. Grafik konsentrasi dan % inhibisi.
Nilai  IC50  semakin  kecil  berarti semakin  kuat  daya  antioksidannya.  Menurut Widyasanti  (2016)  suatu  senyawa  dikatakan memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat jika nilai  IC50  <50  ppm.  Berdasarkan  hasil  nilai IC50  tersebut  maka  dapat  dikatakan  bahwa ekstak  daun  benalu  kersen  memiliki  aktivitas antioksidan  sangat  kuat.  Hasil  penelitian  pada Tabel  3 menunjukkan  bahwa  besarnya
konsentrasi  sampel  yang  dapat  menghambat 50%  absorbansi  DPPH  (IC50)  adalah 21.70696  ppm/mL  untuk  ekstrak  daun benalu kersen
Hasil uji aktivitas antioksidan dilakukan  untuk  mengetahui  nilai  IC50  dari sampel  benalu  kersen.  Berdasarkan  hasil penelitian  antioksidan  benalu  kersen  dengan menggunakan  metode  DPPH  menunjukkan esktrak benaku kersen mempunyai nilai IC50 sebesar  21,70  µg/ml.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  tersebut  mempunyai  aktivitas antioksidan  yang  kuat  karena  mempunyai nilai  IC50  kurang  dari  200  µg/ml.  Metode DPPH  dipilih  karena  sederhana,  mudah, cepat  dan  peka  serta  hanya  memerlukan sedikit sampel

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  terhadap Skrining  Fitokimia  dan  Uji  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Daun  Benalu  Pada Kersen.  Dengan  Metode 2,2  –  Diphenyl-1 Picrylhydrazyl ( DPPH) maka dapat di ambil kesimpulan bahwa komponen senyawa yang aktif  terdapat  pada  daun  benalu  kersen memiliki senyawa metabolit sekunder jenis ; alkaloid, sapanin, tanin, dan steroid. Ekstrak daun  benalu  kersen  dikatakan  memiliki aktivitas  sangat  kuat  sebagai  antioksidan pada nilai IC 50 21,70696 μg/mL.
5. DAFTAR PUSTAKA
1. Carlos.  2014.  Novel  Flavonoid  As  Anti- Cancer  Agent:  Mechanisms  Of  Action And Promise For Their Potential Application In Breast Cancer. Biochemical Society Transaction. 4(42):1017-1023.
2. Rinidar,  Armansyah.  T.  Dan  Putri.  T.  A. 2014.  Potensi  Ekstrak  Air  Daun  Sernai (Wedelia biflora) sebagai Antipiretik pada Mencit  (Mus  musculus)  Dibandingkan Para  Amino  Fenol  dan  Asam  Salisilat. Fakultas  kedokteran  hewan  Universitas Syiah  Kuala  Banda  Aceh.  Banda  Aceh, Hal : 147

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2022, 5 (1), 79-82
3. Yuningsih R. 2012. Pengobatan Tradisional di  Unit  Pelayanan  Kesehatan.  Info  Singkat
Kesejahteraan Sosial. Hal. 4(5):9-12.