Pengaruh Pemberian Campuran Madu dan Kuning Telur  dalam Ransum Terhadap Kualitas Spermtozoa, Fertilitas dan DayaTetas Ayam Sentul
( The Effect of Addition of Honey and Egg Yolk Mixture in Ration on the Quality of Spermatozoa, Fertility and Hatchability of Sentul Chicken)
A.Yustiti, Husmaini*, dan Jaswandi

## Intisari
Madu  dan  kuning  telur  merupakan  salah  satu feed  suplement yang  mengandung  antioksidan sangat  tinggi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  Kualitas  Spermatozoa  ayam  jantan Sentul  yang  diberi  madu  dan  kuning  telur  sebelum  Inseminasi  Buatan  terhadap  kualitas spermatozoa,  fertilitas,  dan  daya  tetas  telur.Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan  metode Rancangan  Acak  Lengkap  Pola  Faktorial  dengan  3  kali  ulangan.Faktor  A  pemberian  madu pada ayam jantan Sentul dengan 4 level yaitu 0 ml (kontrol),3 ml madu,5 ml madu, dan 7 ml madu.Faktor  B  pemberian  kuning  telur  pada  ayam  jantan  Sentul  dengan  4  level  yaitu  0  ml kuning  telur  (kontrol),  3  ml  kuning  telur,  5  ml  kuning  telur,  dan  7  ml  kuning  telur.Hasil penelitian  menunjukkan  analisis  statistik  terdapat  interaksi  sangat  nyata  (P<  0,01)  antara kombinasi  perlakuan  yaitu  pemberian  madu  dan  kuning  telur  terhadap  volume  semen (0,85ml),  konsentrasi  spermatozoa  (3,92  x  10 9), motilitas  spermatozoa  (90,00%),  abnormalitas spermatozoa  (5,00%),  fertilitas  telur  (91,67%),  mortalitas  embrio  (7%),  dan  daya  tetas  telur (93%). Dari hasil penelitian  dapat disimpulkan bahwa pemberian 5 ml madu dan 5 ml kuning telur yang terbaik.
Kata kunci:madu,kuning telur,kualitas spermatozoa,ayam jantan sentul

## Abstract
Honey and egg yolk are one of the food supplements that contain antioxidants very high.This study aims to determine the quality of sentul male spermatozoa fed honey and egg yolk before artificial insemination on the quality of spermatozoa fertility hacchability of hacching eggs.This research  was  conducted  by  a  Completely  Randomized Design in  factorial  arranggement  with factor  A  including  4  levels  of  honey:  0  ml  honey  (control),  3  ml  honey,5  ml  honey  and  7  ml honey, Factor B including 0 ml egg yolk (control), 3 ml egg yolk,5 ml egg yolk, end 7 ml egg yolk.The results of the study showed that based on statistical analysis it was a very significant interaction between the combination of treatment levels of honey and egg yolk administraton on semen volume (0,85%), spermatozoa motility concentration (3,92x10 9) , motility Spermatozoa (90,00%)  spermatozoa  abnormalities(5,00%),  spermatozoa  fertility  eggs  (91,67%),  embryo mortality (7%), and egg hatchability (93%). From the results of the study it can be conluded that the administration of 5 ml honey and 5 ml egg yolk significantly gives the best results. Keywords: honey, egg yolk, spermatozoa quality, sentul roosters .

## Pendahuluan
Ayam Sentul  adalah ayam lokal Indonesia  yang  berkembang    dida erah  Ciamis  Jawa  Barat.  Ayam Sentul  mempunyai  keunggulan  sal ah satunya pertumbuhan yang cepat produksi  telur  yang  tinggi.  Dengan keunggulan  tersebut  ayam  Sentul memungkinkan  dijadikannya  komo
ditas  industri  kerakyatan  atau dikembangkan  menjadi  ayam  lokal unggul.  Untuk  mengembangkan  ay am  Sentul  perlu digali  potensinya disamping  populasinya  yang  semakin berkurang  dan  merupakan  plasma nutfah  ayam  lokal  Indonesia. Efisiensi  pemeliharaan    dapat  dilak
ukan dengan penggunaan Insemina si Buatan (IB).
Teknologi  Inseminasi  Buatan dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor salah  satunya  kualitas  spermatozoa dari  seekor  pejantan  yang  nantinya akan  mempengaruhi  fertilitas  dan daya  tetas  telur.  Kualitas  semen yang  baik  dipengaruhi  oleh  pakan yang  dikonsumsi  pejantan,  untuk meningkatkan kualitas pakan dapat ditambahakan  dengan  pemberian feed supplement (Anggorodi,1985).
Menurut Cheah and Yang (2011) dalam  proses  pembentukan  sperma togenesis yang baik  memb utuhkan asam  amino  methionine,  sistin, arginine,  asam  lemak  linoleat, vitamin A, C, dan E serta mineral Se dan Zn dan semua ini terdapat pada madu  dan  kuning  telur.  Tujuan penelitian  ini  untuk  mengetahui pengaruh  pemberian  campuran madu  dan  kuning  telur  pada  ayam jantan  Sentul  sebelum  perkawinan atau  Inseminasi  Buatan  (IB)  untuk menngkatkan kualitas spermatozoa, fertilitas  dan  daya  tetas  telur  ayam Sentul

## Metode Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  selama  9  minggu  yait u mulai tanggal 13 Maret sampai 11 Mei 2020 yang dilaksanakan di UPT Unggas Simpang Empat.

## Bahan dan Alat
Adapun bahan yang digun akan pada  penelitian  ini  yaitu  1)  madu hutan  2)  kuning  telur  ayam kampung,  3)  ayam  jantan  Sentul sebanyak  16  ekor  umur  ±2  tahun dan  ayam  betina  periode  bertelur sebanyak  96  ekor  umur  ±1  tahun.4)
perbandingan bagian konsentrat 124 PT.  Charoen  Phophand,  jagung, Dedak  yaitu  1  :  2  :  1  (adlibitum,  5) air  minum  6)  eosin  2%  7)  NaCl fisiologis  0,9%  8)  desinfektan.  Seda ngkan  alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu kandang baterai 50 cm x 50 cm x 60 cm sebanyak 16 baterai  setiap  baterai  terdiri  dari  6 ekor  betina,  spuit,  mikroskop  objek glass,  gelas  ukur,  tabung  reaksi berskala,  mesin  tetas  otomatis, gunting,  tissu,  penam  pung  semen unggas, candling, dan kamar hitung Neubauer
Metode Penelitian Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen dengan memnggunakan
Rancangan  Acak  Lengkap  pola Faktorial dengan faktor A meliputi 4 level  madu  yaitu  0  ml  madu,  3  ml madu,  5  ml  madu,  7  ml  madu  dan faktor B dengan 4 level kuning telur yaitu 0 ml kuning telur, 3 ml kuning telur, 5 ml kuning telur, 7 ml kuning telur.  Penelitian  ini  terdiri  dari  16 perlakuan  dengan  3  kali  ulangan sehingga terdapat 48 perlakukan.

## Parameter yang Diamati
1. Volume Semen
Volume  semen  ditampung  den gan  menggunakan    tabung  reaksi berskala  dalam  souit  3  ml  setiap ejakulasi.
2.Konsentrasi Spermatozoa (%)
Konsentrasi  spermatozoa  dihit ung  menggunakan  kamar    hitung Neubaur. Semen diencerkan dengan NaCl  fisiologis  500  kali  semen dalam  (2  µL  semen  dalam  (2  µL semen dalam 998 µl NaCl fisiologis) Penghitungan  konsentrasi  berda
sarkan  rumus:  Konsentrasi  sperma tozoa  per  ml  semen  =  jumlah spermatozoa terhitung x 25 x 10 9.
3. Motilitas  Spermatozoa (%)
Pengamatan  motilitas  sperma dengan  cara  mengambil  0,05  ml sperma dengan menggunakan pipet dari setiap perlakuan dan diletakan pada obyek  glass .  Selanjutnya  dilaku kan  pengamatan  mengguna  kan  mi kroskop dengan pembesaran 400x .
4.Abnormalitas Spermatozoa (%)
Abnormalitas
spermatozoa diperoleh  dengan  cara  meneteskan satu  tetes  semen  diteteskan  8  –  10 tetes  eosin  (eosin  2%)  dengan jumlah  sel  >  200  sel    dan  dimati dibawah mikroskop dengan
pembesaran  10  x  40.  Menurut Khaeruddin et  al .,  (2015)  sperma tozoa  hidup  ditandai  warna  terang dibagian  kepala  dan  spermatozoa mati  ditandai  warna  merah  ungu setelah  diberi  pewarna  eosin.  Cara penghitungan abnor
malitas spermatozoa  dipe    roleh  dengan menghitung  jumlah  sperma  tozoa yang  abnormal  dibagi  jumlah spermatozoa  yang dilihat  dikalikan seratus  persen.  Menurut  Ridwan (2002)  abnomalitas  spermatozoa diperoleh menggunakan rumus:
Abnormalitas = Spermatozoa abnormal    x !00% Total spermatozoa diamati
5.FertilitasTelur (%)
Untuk  melihat  telur  yang  fertil masing  -  masing  telur  dari  induk setiap  perlakuan  dilakukan  penero pongan  telur  sebelum  penetasan    4 hari  penetasan,  14  hari  penetasan dan 18 hari penetasan dengan meng gunakan  peneropong  telur.Fertilitas dapat  dihitung  dengan  mengguna kan rumus:
Fertilitas = ∑ fertile  x 100% ∑ ditetaskan

## 6. Mortalitas Embrio
Mortalitas  embrio  diperoleh dari  embrio  yang  mati  sebelum menetas dibagi telur inkubasi dikali seratus persen. Penghitungan morta litas  embrio  dilakukan  dengan  men ggunakan rumus sebagai berikut :

## MortalitasEmbrio = Jumlah embrio mati  x100%
Jumlah telur inkubasi

## Prosedur Percobaan
1.Kandang
Sebelum  kandang  digunakan terlebih dahulu dibersihkan dengan melakukan  pengapuran,  penyem protan  dengan  desinfektan  (form ades).  Persiapan  paralon  sebagai tempat  pakan  dan  minum  sebelum ayam masuk.

## 2.Persiapan  ayam  Sentul  didalam kandang
Dalam  penelitian  ini  digunakan ayam  jantan  Sentul  (sudah  pernah kawin)  sebanyak  16  ekor  umur  ±2 tahun  dengan  berat  badan  ±2 kg.Ayam  betina  Sentul  (periode bertelur) sebanyak 96 ekor umur ± 1 tahun  dengan  berat  ±1,8  kg.  Unit kandang  yang  digunakan  sebanyak 16  unit  untuk  pejantan  masing- masing  unit 1 ekor pejantan dan 16 unit  untuk  betina  masing-masing unit 6 ekor betina.
3.Pemberian madu dan kuningtelur Sebelum diberi perlakuan ayam jantan  dan  betina  sudah  dpisah selama 2 minggu. Madu dan kuning telur  diberikan  dua  kali  seminggu pada  masing  –  masing  ayam  jantan sesuai  dengan  level  perlakuan selama 4 minggu.
4.Penampungan Semen Unggas Setelah  4  minggu  pemberian madu  dan  kuning  telur,  kemudian dilakukan. Penampungan semen un ggas  dengan  menggunakan  metode pemancing  atau  betina  pemancing (teaser  famale).  Langkah  –  langkah nya adalah sebagai berikut:
1)Membersihkan kloaka ,mencukur bulu  yang  ada  disekitar  kloaka  , membersihkan  kotoran  yang menenpel  pada  kloaka  dengan tissu yang dibasahi alkohol 70%.
2)  Pemasangan  tabung  penampung (artificial    cloaca)  pada    pejantan dengan  mengikatkan  tali  keba gian punggung dan ekor
3)  Pejantan  didekatkan  ke  betina dalam  beberapa  detik    ejakulasi akan terjadi
4) Untuk mengetahui volume semen tali  dilepas  dan  semen  yang tertampung  dimasukkan  keda lam spuit 3 ml
5.Pengenceran semen unggas dengan  NaCl fisiologis 0.9%
Semen  yang  diperoleh  dience rkan  dengan  NaCl  fisiologis  0.9%. Penambahan pengencer disesuaikan dengan dosis dosis bahan pengencer sperma disesuaikan dengan volume sperma  dengan  menggunakan  rum us:
Vt = V0 x M xK      dan  Vp = Vt – V0

## 0.1
Keterangan: Vt = volume total pengencer (ml) V0 = Volume sperma awal (ml) M = motilitas spermatozoa
K = konsentrasi spermatozoa 0.1= dosis IB yang diinginkan
6.Inseminasi Buatan Pada Ayam Ayam  betina  diinseminasikan dengan  menggunakan  semen  yang telah diencerkan. Inseminasi Buatan dilakukan  dengan  interval  3  hari dan  4  hari  dengan  dosis  0.1  ml  per ekor. Ayam betina diinseminasi den gan  metode  intravagina  dengan mendeposisiskan  semen  3-4  cm kedalam  vagina.  Inseminasi  Buatan sebaiknya  dilakukan  sore  pukul 16.00  WIB,  ini  sesuai  dengan  pen dapat  Dononghue  and  Wishart: 2000 Gethachew, 2016).
7.Pengumpulan telur tetas hasil IB
Pengumpulan  telur  tetas  dilak ukan  hari  ke  dua  sampai  hari  ke enam  setelah  IB.  Telur  yang  terku mpul  difumigasi  diberi  kode  sesuai perlakukan.  Sebelum  dilaku  kan penetasan  mesin  tetas  difumi  gasi menggunakan desin fektan, upenero pongan  telur  untuk  menen  tukan fertilitas telur dan mortalitas embrio dilakukan can dling (penero pongan telur).
8.Daya Tetas Telur (%)
Setelah  21  hari  dilihat  berapa telur yang menetas.

## Analisis Data
Data  diolah  secara  statistik menggunakan analisis ragam Ranca ngan  Acak  Lengkap  Pola  Faktorial (RALF)  .Untuk  mengetahui  penga ruh  perlakukan  yang  diamati,  data yang  diperoleh  dilakukan  uji  lanjut DMRT.
Hasil Dan Pembahasan Volume Semen (ml)
Volume semen merupakan parameter  yang  menunjukkan  jum lah  spermatozoa  setiap  ejakulasi. Hasil perhitungan diper oleh bahwa rataan tertinggi pada interaksi L5K5
dan  rataan  terendah  pada  interaksi L0K0 (Kontrol), untuk lebih jelasnya dapa tdilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.Rataan volume semen (ml)ayamjantansentul yang diberimadu dan kuningtelur
Madu KuningTelur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 0.31 a 0.33 ab 0.37 abc 0.40 abcd 0.35 A L3 0.33 ab 0.43 bcd 0.67 f 0.67 f 0.53 B L5 0.37 abc 0.67 f 0.85 g 0.77 fg 0.66 C L7 0.37 abc 0.67 f 0.77 fg 0.77 fg 0.64 C Rataan 0.34 A 0.53 B 0.66 C 0.65 C SE 0.032 0.016
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Hasil  analisis  ragam  menun jukkan bahwa pemberian madu dan kuning  telur  serta  interaksi  kedua nya berpengaruh yang sangat nyata (P<  0.01)  terhadap  volume  semen ayam  Sentul.  Berdasarkan  hasil DMRT  (Duncan’s  Multiple  Range Test)  diketahui  bahwa  ayam  jantan Sentul  yang  diberi  madu  menun jukkan  rata  -rata  volume  semen tertinggi  terdapat  pada  perlakuan L5  (0.66  ml)  dan  terendah  pada perlakuan  L0  /tidak  diberi  madu (kontrol)  (0.35  ml).  Perlakuan  L5 berbeda  sangat  nyata  dengan perlakuan  L3,L0  (P<0.01).Perlakuan L5  menunjukkan  tidak  berbeda nyata  dengan  perlakuan  L7  (P >0.05).
Ayam jantan Sentul yang diberi kuning telur menunjukkan rata-rata volume  semen  tertinggi  pada perlakukan  K5  (0,66  ml)  dan terendah  pada  perlakukan  K0  (0,34 ml).Tabel  1  Perlakuan  K5  berbeda
sangat  nyata  dengan  perlakukan K3,k0  (P<  0,01).Perlakuan  K5  tidak berbeda nyata dengan perlakuan K7
(P> 0,05).Interraksi pemberian madu dan kuning telur memberikan volume  semen  tertinggi  (0,85ml) dan  terendah  L0K0  (kontrol)  yaitu 0,31  ml.Interaksi  L5K5  berbeda sangat  nyata  dengan  L3K0,  L5K0, L7K0,  L0K3,  L0k5,  L0K7,  L3K3, L3K7,  L5K3  dan  L7K3  (P<0,01) tetapi  tidak  berbeda  berbeda  nyata dengan  L7K5,L5K7  dan  L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian pemberian  madu  campur  kuning telur  dan  interaksi  keduanya memberikan  pengaruh  yang  sangat nyata  (P<0,01)  terhadap  jumlah spermatozoa  ayam  Sentul.  Pening katan jumlah spermatozoa.
Disebabkan  karena    peningkat an  nilai  ransum  yang  telah  diberi madu dan kuning telur sebagai feed supplement,  disamping  itu  keleng
kapan  zat  zat  makanan  yang dibutuhkan  ayam  sudah  terpenuhi dan  membantu  berlangsungnya proses  spermatogenesis  sehingga diperoleh hasil yang maksimum.
Menurut  Salisbury  and  Van Denmark  (1985)  ransum  yang mempunyai  energi  ,protein,mineral dan  vitamin  yang  cukup  sangat penting  untuk  pertumbuhan  dan perkembangan ternak jantan muda.

## Konsentrasi Spermatozoa (%)
Untuk  menentukan  konsentrasi spermatozoa  dengan  menggunakan kamar  hitung  Neubaur  chamber dengan  cara  menghitung  jumlah spermatozoa  pada  5  kotak  dan diulangi  5  kali  dari  setiap  lapang pandang  yang  berbeda.  Hasil pengamatan  terdapat    rataan  terti nggi   dan rataan terendah (kontrol).
Tabel 2.  Rataan konsentrasi spermatozoa ( x10 9 ) ayam jantan Sentulyang diberi madu dan kuning telu
Madu KuningTelur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 2.84 a 2.88 ab 2.96 abc 3.00 abcd 2.92 A L3 2.88 ab 3.17 cde 3.58 f 3.58 f 3.30 B L5 2.96 abc 3.58 f 3.92 g 3.83 fg 3.57 C L7 2.96 abc 3.58 f 3.83 fg 3.83 fg 3.55 C Rataan 2.91 A 3.30 B 3.57 C 3.56 C SE 0.082 0.041
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Hasil  analisis  ragam  menun jukkan bahwa pemberian madu dan kuning  telur  serta  interaksi  kedu anya  berpengaruh  sangat  nyata (P<0.01)  terhadap  konsentrasi  sper matozoa ayam Sentul. Berdasar kan hasil  DMRT  (Duncan’s  Multiple Range  Test)  diketahui  bahwa  ayam jantan  Sentul  yang  diberi  madu menunjukkan  rata-rata  konsentrasi spermatozoa    tertinggi  pada  perla kuan  L5  (3.57  x  10 9 )  dan  terendah pada  perlakuan  L0/tidak  diber imadu  (kontrol)  (2.92  x  10 9 ). Perlakuan  L5  berbeda  sangat  nyata dengan  perlakuan  L0,L3  (P<0.01). Perlakuan  L5  tidak  berbeda  nyata dengan perlakuan L7 (P >0.05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi kuning  telur  merupakan  rata-rata konsentrasi  spermatozoa  tertinggi terdapat  pada  perlakuan  K5(3,57x 10 9 )  dan  terendah  pada  perlakuan K0 (2,91 x 10 9 ) (Tabel 2 ). Perlakuan K5  berbeda  sangat  nyata  dengan perlakuan  L0,  L3  (P<  0,01). Perlakuan  L5  tidak  berbeda  nyata dengan perlakuan L7 (P> 0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian pemberian  madu  dicampur  kuning telur  dan  interaksinya  memberikan pengaruh  sangat  nyata  (P<0,01) terhadap  konsentrasi  spermatozoa ayam jantan Sentul.Peningkatan kon sntrasi  spermatozoa  ayam  jantan Sentul dengan pemberian madu dan kuning  telur,  disebabkan  kan
dungan  mikronutrien  seng  (Zn) yang  terdapat  yang  mempunyai fungsi dalam pematangan sperma.
Menurut  Hidiroglou  knipfel (1984)  seng  (Zn)  berfungsi  dalam pengembangan  anatomi  dan  repro duksi  jantan  dan  dapat  mening katkan  spermatogenesis  dan  pema tangan spermatozoa.
Selain  itu  peningkatan  konsen trasi  spermatozoa  disebabkan  kare na vitamin C, vitamin A, vitamin E, dan  selenium  yang  terdapat  pada madu    dan  kuning  telur  bertindak sebagai  antioksidan  mampu  mela wan  dan  melindungi  spermatozoa dari  radikal  bebas.  Hal  ini  terjadi karena  antioksidan  melindungi kerusakan  spermatozoa  yang  diseb abkan  stres oksidatif karena adanya reaktive  oxygen  species  (ROS). Menurut  Begum et  al. ,  (2009)  asam askorbat  yang  terdapat  dalam
vitamin C mening katkan kesuburan karena  adanya  cairan  epididymis dan  plasma  seminalis.  Pemberian vita  min  C  dapat  meningkatkan volume semen

## Motilitas Spermatozoa (%)
Motilitas  merupakan  kualitas semen  yang  dapat  dilihat  dari pergerakan spermatozoa yang motil progresif dengan pembesaran mikroskop 400 x.
Hasil  analisis  ragam  menunjuk kan  pemberian  madu  dan  kuning telur  serta  interaksi  keduanya berpengaruh  sangat  nyata  (P<0,01) terhadap  motilitas  spermatozoa ayam  Sentul.  Hasil  DMRT  (Dunca n’s  Multiple  Range  Test)  diketahui bahwa  ayam  jantan  Sentul  yang diberi madu menunjukkan rata -rata motilitas  spermatozoa    tertinggi pada  perlakuan  L5  (79.17  %)  dan terendah p (control) (58.33%).
Tabel 3.Rataan motilitas spermatozoa (%) ayam jantan Sentul yang diberi madu dan Kuning telur
Madu KuningTelur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 53.33 a 56.67 ab 60.00 abc 63.33 abcd 58.33 A L3 56.67 ab 70.00 de 80.00 f 80.00 f 71.67 B L5 60.00 abc 80.00 f 90.00 g 86.67 fg 79.17 C L7 60.00 abc 80.00 f 86.67 fg 86.67 fg 78.33 C Rataan 57.50 A 71.67 B 79.17 C 79.17 C SE 2.357 1.102 Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Perlakuan  L5  berbeda  sangat nyata  dengan  perlakuan  L0,  L3  (P< 0.01).  Perlakuan  L5  tidak  berbeda nyata  dengan  perlakuan  L7  (P >0.05).
Ayam  jantan  Sentul  yang diberi  kuning  telur  menunjukan rata-rata  motilitas  spermatozoa tertinggi  terdapat  pada  perlakuan
K5 (79,17%) dan terendah perlakuan K0  (57,50%).  Perlakuan  K5  berbeda
sangat  nyata  terhadap  perlakuan K0,K3  (P<  0,01).  Perlakuan  K0 berbeda  tidak  nyata  dengan  K7 (P>0,05)  (Tabel  3)  Interaksi  L5K5 memiliki  motilitas  spermatozoa tertinggi  yaitu  90%  dan  terendah pada  interaksi  L0K0  (kontrol)  yaitu 53,33%.  Interaksi    L5K5  berbeda sangat  nyata  dengan  L3K0,  L5K0, L7K0,  L0K3,  L0K5,  L0K7,  L3K3, L3K5,  L3K7,  L5K3,  dan  L7K3 (P<0,01) tetapi tidak  berbeda nyata dengan  L7K5  ,L5K7,  dan  L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian pemberian  madu  dan  kuning  telur serta  interaksi  keduanya  berpeng aruh  sangata nyata (P<0,01). Pening katan  motilitas  spermatozoa  ayam jantan Sentul  yang diberi madu dan kuning  telur  disebabkan  karena adanya  glikosa  danfruktosa  sebagai sumber  energi bagi spermatozoa.
Menurut Soeparna (1980) spermatozoa  bergerak  memerlukan energi  sama  halnya  dengan  sel  sel hidup  yang  lain.  Energi  sperma tozoa diperoleh dari gula sederhana seperti  fruktosa  dan  glukosa. Menurut Sexton and  Fewlass (1978) plasma  semen  merupakan  pergera kan  spermatozoa  dalam  melakukan aktivitasnya,  kekurangan  energi akan mengaki batkan berkurangnya moti litas spermatozoa.
Peningkatan  motilitas  sperma tozoa  ayam  Sentul  kareana  kandun gan  antioksidan  dalam  madu  dan kuning  telur  dapat  m elindungi sitoplasma yang ada di kepala sehingga dapat mempertahankan  gerakan sitoplas  ma  menjadi  progresif (Nugraheni  et  al.,  2013)  kandungan oksidan  pada  madu  dan  kuning telur  juga  diduga  mampu  memper lambat  reaksi  peroksidasi  lipid mampu  menangkap  radikal  bebas dan  memutus    rantai  peroksidasi didalam sel sehingga proses peroksidasi  lipid  yang  merusak dapat dihentikan (Almatsier, 2002).

## Abnormalitas Spermatozoa (%)
Abnormal  pada  spermatozoa merupakan  indikator  kualitas  sper matozoa  dan  menyebabkan  gang guan  dan  hambatan  saat  fertilisasi Hasil  analisis  ragam  menun  jukkan pemberian  madu  dan  kuning  telur serta interaksi kedua nya berpengaruh  sangat  nyata  (P<0  ,01) terhadap  abnormalitas    uji  lanjut DMRT  (Duncan’s  Multiple  Range
Test)  diketahui  bahwa  ayam  jantan
Sentul yang diberi madu menunjukkan rata-rata abnormalitas spermatozoa tertinggi pada perlaku an  L0/tidak  diberi  madu  (kontrol) (8,33%) dan tererndah pada perlaku an L5 (6,00%). Perlakuan L0 berbeda sangat nyata terhadap L5,L7 (P<0,01).  Perlakuan  L0  berbeda  tid ak  nyata  dengan  L3  (P>0,05)
Tabel 4. Rataan abnormalitas  spermatozoa (%) ayam jantan sentul yang diberi madu dan kuning tel
Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 9.00 f 8.67 ef 8.00 e 7.67 d 8.33 C L3 8.67 ef 7.00 de 5.67 abc 5.67 abc 6.75 B L5 8.00 e 5.67 abc 5.00 a 5.33 ab 6.00 A L7 8.00 e 5.67 abc 5.33 ab 5.33 ab 6.08 A Rataan 8.42 C 6.75 B 6.00 A 6.00 A SE 0.265 0.132
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Ayam  janatan  Sentul  yang diberi  kuning  telur  menunjukkan rata-rata  abnormalitas  spermatozoa tertinggi pada perlakuan K0 (8,42%) dan  terendah  pada  K5  (6,00%). Perlakuan K0 berbeda nyata dengan K5  dan  K7  (P<0,01).  Perlakuan  L0 berbeda tidak nyata dengan perlakuan  K3  (P>  0,05).  Interaksi L0K0  (kontrol)  memiliki  abnor malitas  spermatozoa  tetinggi  yaitu 9%  dan  terendah  pada  interaksi L5K5  yaitu  5%.  Interaksi  L5K5 berbeda sangat nyata dengan L3K0, L5K0,  L7K0,  L0K3,  L0K5,  L0K7, L3K3, L3K5, L3K7,  L5K3, dan L7K3 (P<0,01)  tetapi  tidak  berbeda  nyata dengan  L7K5,  L5K7,  dan  L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian pemberian  madu  dan  kuning  telur serta  interaksi  keduanya  berpe ngaruh  sangat  nyata  (P<0,01). Penurunkan  abnormalitas  sperma tozoa  ayam  jantan  Sentul  yang diberi  madu  dan  kuning  telur disebabkan proses sperma togenesis yang  sempurna  mampu  meng hasilkan  ±  90%  normal.  Menurut Faradis  (2010)  jika  terjadi  kelainan
kelainan  ditubuli  seminiferi,    maka spermatozoa akan mengalami abnor malitas  primer,  bila  terkontaminasi dengan  air,  urine,  dan  antiseptik spermatozoa  mengalami  abnorma litas sekunder.
Penurunan abnormalitas sperma tozoa  ayam  jantan  Sentul  dengan pemberian    madu  dan  kuning  telur disebabkan  karena  adanya    kand ungan  vitamin  B9  dan  B12  yang dapat  memperbaiki  sel  sperma tozoa. Menurut Abdu (2008) bahwa vitamin  B9  dapat  mening  katkan spermatozoa  dan  perkem  bangan tubulus  seminiferus  pada  proses spermatogenesis serta  vita min B12 dapat  melibatkan  RNA  dan  sintesis DNA.
Abnormalitas sprematozoa dap at diturunkan dengan tekoferol dan fenol  yang  berfungsi  sebagai  anti oksidan yang mampu memper baiki spermatogenesisi  saat  ejakulasi.  Me nurut  Harahap  (2017)  anti  oksidan dapat  mencegah  radikal  bebas sehingga  spermatozoa  menjadi  nor mal.  Tokoferol,  β  karoten,  asam askorbat memberikan perlin dungan terhadap spermatozoa.
Fertilitas Telur (%) Fertilitas  telur  dihitung  telur fertile  dibagi  telur  inkubasi  dikali 100%.(Madupe, at al , 2013).
Tabel 5.  Rataan fertilitas  telur (%)
Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 66.67 a 68.33 ab 70.00 abc 71.67 abcd 69.17 A L3 68.33 ab 75.00 de 85.00 f 85.00 f 78.33 B L5 70.00 abc 85.00 f 91.67 g 88.33 fg 83.75 C L7 70.00 abc 85.00 f 88.33 fg 88.33 fg 82.92 C Rataan 68.75 A 78.33 B 83.75 C 83.33 C SE 1.103 0.59
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Analisis  ragam  menunjukkan pemberian  madu  dan  kuning  telur serta  interaksi  keduanya  berpeng aruh  nyata  (P<  0,01)  terhadap fertilitas ayam sentul. Hasil DMRT ( Duncan’s  Multiple  Range  Test) diketahuibahwa ayam jantan Sentul diberi madu menu njukkan rata-rata fertilitas telur tertinggi pada perlakuanL5  (83,75%)  dan  terendah pada  perlakuan  L0/tidak  diberi madu (kontrol) ( 69,17%). Perlakuan L5  berbeda  sangat  nyata  terhadap perlakuan  L0,L3  (P<0,01).Perlakuan L5  berbeda  tidak  nyata  dengan perlakuan L7 (P>0,05).
Ayam jantan Sentul yang diberi kuning telur menunjukkan rata-rata fertilitas telur tertinggi pada
perlakuan K5 (83,75%) dan terendah perlakuan  K0  (68,75%).  Perlakuan K5 berbeda sangat nyata dengan K3, K0 (P<0,01). Perlakukan K5 berbeda tidak  nyata  dengan  K7  (P>  0,05) (Tabel  5).  Interaksi  L5K5  memiliki fertilisasi  telur  tertinggi  yaitu 91,67% dan terendah pada interaksi
L0K0  (kontrol)  yaitu  66,67%.  Inter aksi  L5K5  berbeda  sangat  nyata dengan  L3K0  ,L5K0  ,L7K0,  L0K3, L0K5,  L0K7  ,L3K3,  L3K5,  L3K7, L5K3 dan L7K3 (P<0,01) tetapi tidak berbeda  nyata  dengan  L7K5,  L5K7 dan L7K7 (P>0,01).
Berdasarkan hasil penelitian pemberian  madu  dan  kuning  telur dan intraksinya
memberikan pengaruh  sangat  nyata  (P<0,01). Peningkatan  fertilitas  telur  dengan pemberian  madu  dan  kuning  telur pada ayam jantan sentul disebabkan karena  didalam  madu  dan  kuning telur  dan  interaksinya  memberikan pengaruh  sangat  nyata  (P<0,01). Peningkatan  fertilitas  telur  dengan pemberian  madu  dan  kuning  telur pada ayam jantan Sentul disebabkan karena  didalam  madu  dan  kuning telur  terkandung  Vitamin  E  dan mineral bersamaan meningkatkan fertilitas  telur.Menurut  Suharyati (2006)  menyatakan  pemberian  vita min E dan mineral Zn menghasilkan
fertilitas  telur    dan  daya  tetas  telur kalkun  lokal yang tinggi.

## Mortalitas Embrio (%)
Motilitas  merupakan  salah  satu kriteria  penentuan  kualitas  semen
yang dilihat dari banyaknya sperma tozoa  yang  motil  progresif  diban dingkan  dengan  seluruh  sperma tozoa yang ada dalam satu pandang mikroskop.
Tabel 6. Rerata Mortalitas Embrio  Ayam (%)
Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 37 f 34 ef 31 def 30 de 33 C L3 34 ef 25 d 18 bc 18 bc 24 B L5 31 def 18 bc 7 a 13 b 18 A L7 31 def 18 bc 13 b 13 b 19 A rataan 34 C 24 B 18 A 19 A SE 1.977 0.989
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Berdasarkan  analisis  ragam pemberian  madu  dan  kuning  telur berpengaruh  sangat  nyata  (P<  0,01) serta  interaksi  keduanya    berpen garuh  nyata  (P<0,05)  terhadap  mor talitas  embrio  Sentul.  Hasil  DMRT (Duncan’s  Multiple  Range  Test) diketahui bahwa ayam jantan Sentul yang  diberi  madu  menunjukkan rata-rata mortalitas  embrio tertinggi pada  perlakuan  L0/tidak  diberi madu  (kontrol)  (33%)  dan  terendah pada perlakuan L5 (18%). Perlakuan L0  berbeda  sangat  nyata    dengan L5,L7  (P<0,01).  Perlakuan  L0 berbeda  tidak  nyata  dengan  L3 (P>0,05).
Ayam  jantan  Sentul  yang  diberi kuning telur  menunjukkan rata-rata mortalitas  embrio  tertinggi  pada perlekuan  K0  (34%)  dan  terendah pada perlakukan K5(18%). Perlakuan  K0  berbeda  sangat  nyata dengan  K5,  K7  (P<0,01).  Perlakuan K0  berbeda  tidak  nyata  dengan
K3(P>0,05) (Tabel 6). Interaksi  L0K0 memiliki  mortalitas    embrio  terting gi  yaitu  37%  dan  terendah  pada interaksi  L5K5  yaitu7  %.  Interaksi L5K5  berbeda  sangat  nyata  dengan L3K0,  L5K0,  L7K0,  L0K3,  L0K5, L0K7,  L3K3,  L3K5,  L3K7,  L5K3, L7K3,  L7K5,  L5K7  dan  L7K7 (P>0,01). Berdasarkan  hasil  pengamatan pemberian  madu  dan  kuning  telur dan  interaksinya    berpengaruh sangat  nyata  (P<0,01).Penurunan mortalitas  embrio,  disebabkan  kar ena didalam madu dan kuning telur terdapat  vitamin  A  dan  E  yang berfungsi melindungi embrio dalam proses  penetasan.  Menurut  Sulis tyaningrum  et  al,.  (2019)  mortalitas embrio  terjadi  karena  ketidak mampuan  dalam    penyerapan albumin  dan  yolk  (kuning  telur). Ditambahakan  oleh  Kusumasari et al,. (2013) pemberian vitamin A dan vitamin  E  bersaamaan  dapat  berfu
ngsi sebagai antioksidan untuk men angkal radikal bebas yang berfungsi
melindungi  embrio  sampai  akhir penetasan. Daya Tetas Telur (%) Tabel 7. Rataan  daya tetas  telur (%) Madu Kuning Telur Rataan K0 K3 K5 K7 L0 65 a 66 ab 69 abc 70 abcd 67 A L3 66 ab 75 cde 82 f 82 f 76 B L5 69 abc 82 f 93 g 87 fg 83 C L7 69 abc 82 f 87 fg 87 fg 81 C Rataan 67 A 76 B 83 C 81 C SE 2.038 1.019
Keterangan: 1.Superskrip yang diikuti huruf yang  berbeda menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P> 0.01)   SE = Standar Error
Berdasarkan analisis keragaman menunjukkan pemberian madu dan kuning  telur  serta  interaksi  kedua nya berpengaruh sangat nyata (P<0, 01)  terhadap  daya  tetas  telur. Berdasarkan  uji  lanjut  DMRT  (Dun can’s Multiple Ranga Test) diketahui bahwa ayam jantan Sentul yang  diberi  madu  menunjukkan daya  tetas  telur  tertinggi  pada  L5 (83%) dan terendah  L0/tidak diberi madu (kontrol) (67%). Perlakuan  L5 berbeda sangat nyata dengan L3, L0 (P<0,01).Perlakuan L5 berbeda tidak nyata dengan L7 (P>0,05).
Ayam jantan Sentul yang diberi kuning telur menunjukkan rata-rata daya  tetas  tertinggi  pada  K5  (83%). Dan  terendah  pada  K0  (67%). Perlakuan  K5  berbeda  sangat  nyata dengan  K7  (P>0,05)  (Tabel  7) Interaksi L5K5 memiliki daya  tetas telur  tertinggi  yaitu  93%    dan  teren dah  pada  interaksi  L0K0  (kontrol) yaitu  65%.  Interaksi  L5K5  berbeda sangat  nyata  dengan  L3K0  ,L5K0,
L7K0,  L0K3,  L0K5,  L0K7,  L3K3, L3K5,  L3K7,  L5K3  dan  L7K3 (P<0,01)  tetapi  tidak  berbeda  nyata dengan  L7K5,  L5K7  dan  L7K7 (P>0,05).
Berdasarkan  hasil  penelitian pemberian  madu  dan  kuning  telur serta    interaksi  pemberian  madu dan  kuning  telur  berpengaruh sangat  nyata  (  P<  0,01)    terhadap interaksi  pemberian  madu  dan kuning  telur  berpengaruh  sangat nyata  (  P<  0,01).  Peningkatan  daya tetas telur dengan pemberian madu dan  kuning  telur  pada  ayam  jantan disebabkan  karenaVitamin  A  dan E yang  masih  ada  dalam  cadangan makanan  berfungsi  sebagai  antiok sidan  yang nantinya membantu da ya  hidup  DOC.  Menurut  Pattison (1993)  bahwa  kandungan  nutrisi berfungsi  menjaga  anak  ayam setelah menetas.

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  diambil kesimpulan  bahwa  pemberian  ma du  dicampur  kuning  telur  pada  ay am  jantan  Sentul  memberikan  peng aruh  yang  sangat  nyata  (P<0,01) terhadap  volume  semen,  konsen trasi  spermatozoa,  motilitas  sperma tozoa,  abnormalitas  sperma  tozoa, fertilitas  spermatozoa,  morta  litas embrio,  dan  daya    tetas  telur. Pemberian  madu  dan  kuning  telur yang  terbaik  pada  penelitian  ini adalah  5  ml  madu  +  5  ml  kuning telur .

## Daftar Pustaka
Abdu, S.B. 2008.Effect of Vitamins    Def iciencies  on  the  Histological Structure  of  the  Test  of  Albino Mice  Mus  Musculus.  SaudiJournal of      Biologi cal  Sciences,  15,  269- 278.
Anggorodi,  R.  1985  Kemajuan Mutakhir  dalam Ilmu Makanan Ternak  Unggas.  PT.  Gramedia,
Jakarta.
Almatsier  S,  2002.  Prinsip  Dasar IlmuGizi. Jakarta. PT. Gramedia. Pustaka Utama. Begum,  H.,  A.  B.  M.  Moniruddin dan  K.  Nahar.  2009.  Enviro nmental  and  Nutritional  Aspe cin  Male  Infer  tility. Journal  of Medicine , 10, 16-19.
Cheah,  Y  and    W.  Yang.    2011.  Func tions  of  essential  nutrition  for high  quality  Spermatogenesis. Advances  in    Bioscience  and Biotechnology  (2):  182-197DOI:  10. 423 /abb. 2011. 24029 Donoghue.  A.M.,  and    G.J.  Wishart 2016.  Storage    of    poultry  semen . Animal Reproductive    Science ,  62: 213-232.
Feradis. 2010. Bioteknologi Reproduksi
pada Ternak . Alfabeta. Bandung.
Harahap,  E.  W.  S  Normalinadan Winarto 2017. Pengaruh   Pemb erian  Anti  oksida  Vitamin  C Dan  E  Terhadap  Konsentrasi Sprmtozoa  Mencit  (Mus  Mus culus) Yang Dipapar https://www.researchgate.net/ publication/323117716_Pengaru h_Pemberian_AntioksidanVita min_C_Dan_E_Terhadap_Kons entrasi_Spermatozoa_Mencit_M us_Musculus_Yang_Dipapar_A sap_ Rokok.  (Diunduh  05  Juli 2018).
Hidiroglou,  M.  dan  J.  E.  Knipfel. 1984.  Zinc  in  Mammalian  Spe rm.  Journal    of    Dairy  Science,
67 (6): 1147-56.
Khaeruddin,  Sumantri    C,  S  Darwati  , R.  I.    Arifiantinin.  2015.  Penggun aan minyak zaitun ekstra virgin ke dalam        bahan  pengencer    semen terhadap   kualitas spermatozoa ay am    lokal. Jurnal  Ilmu  Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan 3 (1) : 46 - 51.
Kusumasari,  D.P.,  I.  Mangisah,  dan I. Estiningdriati. 2013. Pengaruh penambahan  vitamin  A  dan  E dalam  ransum  terhadap  bobot telur    dan mortalitas    embrio ayam kedu hitam  Anim. Agric. J. 2(1): 191-  200.
Modupe,O, A. C Livinus and N.B. Ifean
2013.Semen  Quality  Characteristic and        Effect  of  Mating  Ratio  on Reproductive Performance of Hubbarrd Broille Bredders. Journal of  Agriculture  Science.  5(1)  154-
159.
Nugraheni.T, P. Aokid .dan W.Tetri 2013.  Pengaruh  Vitamin  C Terhadap  Perbaikan  Spermato genesis  dan  Kualitas  Sperma tozoa  Menci  (Mus  musculus  L.)
Setelah  Pemberian  Ekstrak  Tem bakau. Biofarmasi 1 (1) : 13-19. Pattison,  M.  1993.  The  Health  of Poultry.  Longman    Scientific and Technical. Philadelphia. Ridwan.  2002.  Fertil  Life  dan Periode   fertil Spermatozoa  Ay am   Buras Pasca Inseminasi Bua tan. Tesis. Program pasca sarjan Universitas Padjajaran. Bangung Salisbury,  G.W.  dan  N.I  Van Denmark,  1985.  Fisiologi  Repr oduksi dan Inseminasi   Buatan pada    Sapi.  Gadjah    Mada University  Press.  Yogyakarta. (Diterjemahka oleh   R.Djanuar). Sexton, T.J., and T.A. Fewlass. 1978. A New Poultry SemenExtenders : 2. Effectof  Diluent Component on the  Fertilizing   Capacity on the    Chicken  Semen  Storage  at 5o  C Poultry   Science 57 : 277 – 284. Suharyati, S. 2006. Pengaruh penam bahan vitamin e dan mineral zn terhadap  kualitas  semen  serta frtilitas  dan  daya  tetas  telur kalkun  lokal  J.  Indo.  Trop. Anim. Agric. 31 (3). Sulistyaningrum, A.D, Mudawamah dan  Sunaryo.  2019.  Evaluasi Performans  Penetasan  Berdas arkan    Umur  Indukdi  Hatchery PT.  Intertama  Trikencana  Bersi nar  Deli    Serdang  Sumatra  Uta ra. J. Rekasatwa Peternakan 1 (1) : 59-63.
Soeparna.  1980.  Pengantar  Sperma tologi,  Masalah  Khusus.  Fakul tas Perikanan IPB. Bogor .