## PENINGKATAN BIOAVAIBILITAS PAKAN IKAN BERBASIS NABATI DENGAN AGEN FERMENTASI
Marlyn Kallau 1
1 Jurusan Perikanan dan Kelautan, Politeknik Pertanian Negeri Kupang

## ABSTRACT
Integration of simple biotechnology practice into conventional feed manufacturing methods is expected to improve the quality of artificial feed. Fermentation technology can be used as an alternative way to increase digestibility or bioavailability of artificial feed. The fermentation agent used is the starter of Lactic  Acid  Bacteria  (LAB),  Saccharomyces  cerevisiae  (Sc)  and  Rhizopus  oligosporus  (Ro).  This experiment  used  Completely  Randomized  Design  (CRD)  with  four  treatments  (F1;  without fermentation agents, F2; BAL, F3; Sc and F4; Ro) and three replications so that the total experimental units were 12 experimental units. The variables measured included the physical and chemical quality of feed, the level of feed consumption and the growth parameters of tilapia. Fermented feed produced significant  fish  growth  (P  <0.05)  even  with  the  same  feed  consumption  level  compared  with  the control. Breakdown of the nutrient content as a result of the fermentation process causes a far more efficient utilization.
Kata kunci : plant based diet, bioavaibility,  biotechnology, fermentation

## PENDAHULUAN
Produk  budidaya  perairan  seperti  ikan,  kerang-kerangan,  udang  dan tanaman  air  berkontribusi  sebagai  sumber  pangan  alternatif  untuk  manusia. Produksi  perikanan  budidaya  global  mencapai  73,8  juta  ton  pada  tahun  2014 dibandingkan  dengan  tahun  1950  yang  berkisar  584.387  ton  (FAO,  2016). Pertumbuhan  yang  cepat  mengindikasikan  adanya  potensi  sektor  perikanan budidaya  dalam  memenuhi  permintaan  pasar.  Pertumbuhan  ini  didukung  oleh pengembangan  metode  pemeliharaan,  teknologi  pakan  dan  kesadaran masyarakat terhadap isu perikanan berkelanjutan ( sustainable fisheries ).
Kegiatan  budidaya  ikan  yang  utama  mencakup  pembenihan  dan pembesaran.  Salah  satu  faktor  penentu  yang  menjadi  ujung  tombak  dalam mendukung keberhasilan budidaya adalah pakan  (Mudjiman, 2011). Pemberian pakan  yang  tepat  sesuai  dengan  umur  dan  jenis  ikan  merupakan  kunci keberhasilan dalam meningkatkan tingkat kelulushidupan ( survival rate ). Pakan ikan haruslah memperhatikan beberapa faktor seperti jenis ikan dan preferensi makanannya,  bentuk,  ukuran,  keras  dan  lunak,  bau,  rasa  serta  kandungan gizinya (Halver, 2013). Dalam lingkungan budidaya, ikan diberi pakan alami dan buatan. Pakan alami berapa plankton (fitoplankton dan zooplankton) sedangkan
pakan  buatan  berupa  pelet  yang  berasal  dari  bahan  nabati,  hewani  maupun limbah.
Pakan  buatan  dikenal  masyarakat  luas,  khususnya  petani  ikan,  dalam bentuk  tepung  ( crumble )  dan  pelet. Crumble adalah  pakan  yang  berbentuk tepung  dengan  diameter  mencapai  0,5-0,8  mm  sedangkan  diameter  pelet berkisar antara 1-1,5 mm. Setengah dari estimasi produksi perikanan budidaya mengandalkan  produktivitas  alam  di  air  sementara  sisanya  bergantung  pada penggunaan  pakan  tambahan  berupa  bahan  pakan  tunggal,  pakan  buatan petani  dan  industri  (FAO,  2013).  Bahan  baku  pakan  buatan  adalah  bahan- bahan  nabati  dan  hewani.  Bahan  baku  nabati  berasal  dari  hasil  pertanian seperti  biji-bijian  sedangkan  bahan  baku  hewani  berasal  dari  ikan  dan  limbah rumah potong hewan (darah, tulang, dll).
Seiring dengan perkembangan budidaya, kebutuhan untuk memformulasi pakan  ikan  berkualitas  tinggi  yang  sesuai  dengan  kebutuhan  ikan  meningkat. Elemen  dasar  dari  pakan  ikan  berasal  dari  ikan  hasil  tangkapan  yang  bernilai rendah atau lazimnya dikenal sebagai ikan rucah (ikan teri, makarel dan sarden) maupun  produk  olahan  (tepung  dan  minyak  ikan).  Tepung  ikan  memberikan kontribusi  sebagai  sumber  protein  penting  karena  kandungan  protein  yang tinggi,  profil  asam  amino  yang  sesuai  kebutuhan  ikan,  kecernaan  nutrisi  yang tinggi  dan  kurangnya antinutrients sementara  minyak  ikan  berfungsi  sebagai sumber energi (Gatlin III et al , 2007).
Meskipun  tepung  ikan  dan  minyak  ikan  memiliki  fungsi  penting  untuk ikan,  tren  penggunaan  keduanya  menurun  dalam  beberapa  tahun  terakhir. Beberapa kendala yang dianggap sebagai penyebab dari fakta ini  antara lain 1) pengurangan pasokan stok ikan secara global yang diperuntukan bagi produksi tepung dan minyak ikan, 2) meningkatnya fishing cost dan tingginya permintaan pasar  baik  untuk  konsumsi  manusia  langsung  ataupun  pakan  ternak  lainnya yang  mengakibatkan  tingginya  harga  ikan  rucah,  3)  meningkatkan  biaya operasional untuk pembuatan pakan ikan, minyak ikan dan transportasi dan 4) meningkatkan kesadaran masyarakat terhadap masalah perikanan berkelanjutan (Klinkhardt di FAO, 2007; Tacon dan Metian, 2008).
Karena  beberapa  kendala  yang  disebutkan  di  atas,  upaya  untuk menemukan  pengganti  yang  sesuai  untuk  tepung  ikan  maupun  minyak  ikan harus dilakukan. Pengganti kedua bahan tersebut haruslah memenuhi beberapa syarat  seperti  harga  yang  kompetitif,  ketersediaan  secara  global,  penanganan
mudah dan mempunyai profil nutrien yang menyerupai tepung ikan dan minyak ikan.
Bahan  baku  pakan  nabati  seperti  minyak  biji-bijian,  kacang-kacangan dan biji-bijian sereal banyak digunakan dalam formulasi pakan ternak termasuk ikan.  Sebagai  produk  pertanian,  bahan  baku  pakan  nabati  tersebut  dapat ditemukan  di  seluruh  dunia.  Hal  ini  juga  menjadi  alasan  utama,  bahan  baku tersebut  dipergunakan  sebagai  alternatif  untuk  menggantikan  tepung  ikan dalam  pakan  buatan.  Dalam  lingkungan  budidaya,  masuknya  bahan  baku pakan  berbasis  nabati  sudah  dilakukan  terutama  untuk  pakan  ikan  herbivora dan  omnivora.  Jenis  ikan  tersebut  terbukti  lebih  sesuai  dengan  jenis  pakan berbasis  nabati  bila  dibandingkan  dengan  ikan  karnivora  dan  udang  (FAO, 2013).
Meningkatnya penggunaan bahan baku nabati yang berasal dari tanaman sering  mengakibatkan  beberapa  perubahan.  Perubahan  profil  nutrisi, penurunan  palatabilitas  dan  adanya  faktor  anti  nutrien  (ANFs)  merupakan alasan dibalik pengurangan pemakaian produk tanaman.  Nutrisi makro seperti protein,  karbohidrat  dan  lipid  ditemukan  dengan  kuantitas  dan  kualitas  yang sedikit  berbeda  bila  dibandingkan  dengan  tepung  ikan.  Secara  umum,  nutrisi yang  terkandung  dalam  tepung  ikan  relatif  lebih  tinggi  dibandingkan  bahan baku  nabati  lainnya  (Gatlin  III et  al ,  2007).  Schneider et  al (2007)  juga menemukan hasil yang sama dengan ekstrak kedelai, bungkil kedelai dan gluten gandum  di  mana  tingkat  abu  adalah  42,6,  60,2  dan  7,2  g/kg  berat  basah  bila dibandingkan dengan tepung ikan yaitu 142,9 g/kg berat basah.
Keuntungan  dan  kerugian  dari  bahan  yang  berasal  tanaman  telah dipertimbangkan  oleh  ahli  pakan  ketika  pakan  ikan  hendak  diformulasi. Bioavailabilitas  dari  pakan  sangat  penting.  Kualitas  pakan  ditentukan  oleh komposisi  nutrisi  yang  seimbang,  daya  cerna  yang  tinggi  dan  penyerapan  (De Silva,  1995).  Dalam  rangka  mengurangi  efek  ANFs,  metode  pengolahan  yang umum (misalnya, pemanasan kering dan basah, ekstraksi dengan air, fermentasi dan  penambahan  suplemen  pakan)  dapat  digunakan  untuk  mengurangi  efek negatif  dari  ANFs  (Francis,  2001).  Kesimpulannya,  bahan  baku  pakan  nabati dapat  menjadi  bahan  potensial  yang  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  untuk pengganti  tepung  ikan.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mendapatkan formulasi  pakan  berbasis  nabati  dengan  daya  cerna  yang  tinggi  lewat  integrasi
bioteknologi  sederhana  berupa  agen  fermentasi  yaitu  bakteri  asam  laktat,  ragi dan jamur.

## METODE PENELITIAN

## Deskripsi Umum
Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap  (RAL)  dengan  empat  perlakuan  meliputi  F1  :  Kontrol  (Pakan  buatan tanpa  agen  fermentasi),  F2  :  Pakan  buatan+Bakteri  Asam  Laktat  (BAL),  F3  : Pakan  buatan+ Saccharomyces  cerevisiae ,  F4  :  Pakan  buatan+ Rhizopus oligosporus .  Kombinasi  perlakuan  yang  terbentuk  adalah  4  perlakuan  dengan tiga ulangan sehingga total unit percobaan berjumlah 12 unit percobaan.
Hewan  uji  yang  dipergunakan  dalam  eksperimen  adalah  ikan  nila ( Oreochromis  niloticus )  yang  berasal  dari  hasil  pembenihan  di  Balai  Benih  Ikan Sentral (BBIS) Noekele, Kupang. Total jumlah ikan yang dipergunakan sebanyak 120  ekor  yang  didistribusikan  secara  merata  ke  12  unit  wadah  pemeliharaan. Rataan berat awal ikan nila yang dipergunakan adalah 29,5 ± 4,9 g per ekor dan berat total sebesar 3.543 g.
Bahan  baku  pakan  nabati  yang  dipergunakan  adalah  97%  berasal  dari tumbuhan maupun limbah pertanian dengan tambahan minyak ikan sebanyak 3%. Ada 4 jenis pakan yang diujicobakan yaitu pakan nabati yang difermentasi dengan  BAL  (F2), Saccharomyces  cerevisiae (F3), Rhizopus  oligosporus (F4)  dan kontrol  (pakan  nabati  tanpa  fermentasi/F1).  Bahan  baku  pakan  buatan  yang dipergunakan  adalah  tepung  kedelai,  tepung  jagung,  dedak  padi,  minyak  ikan, premix, kaldu, garam, tepung terigu.
Komposisi dasar bahan baku pakan buatan adalah  identik untuk semua perlakuan.  Yang  membedakan  keempat  jenis  pakan  adalah  penambahan  agen fermentasi  yang  berbeda  ke  tiga  perlakuan  pakan  sedangkan  yang  sisanya adalah  pakan  kontrol  tanpa  penambahan  agen  fermentasi.  Adapun  agen fermentasi yang dipergunakan adalah starter dari masing-masing mikroorganisme  yaitu  starter  BAL, Saccharomyces  cerevisiae dan Rhizopus oligosporus . Penambahan starter atau inokulum mikroorganisme ini disesuaikan dengan  dosis  yang  telah  ditentukan.  Perlakuan  F1  adalah  perlakuan  tanpa pemberian  starter  mikroorganisme  sedangkan  F2  adalah  pakan  nabati  yang difermentasikan  dengan  30  ml  starter  BAL.  Dua  perlakuan  lainnya  yaitu
perlakuan  F3  ditambahkan  sebanyak  18,18  g  starter Saccharomyces  cerevisiae dan perlakuan F4 sebanyak 18,18 g starter Rhizopus oligosporus .
Ikan nila dipelihara dalam wadah pemeliharaan berupa akuarium dengan sistem resirkulasi dimana air dipompa keluar ke filter mekanis dan dimasukkan kembali ke dalam akuarium. Akuarium yang dipergunakan berukuran 60 cm x 30 cm x 40 cm dengan jumlah total sebanyak 12 unit. Masing-masing akuarium diperlengkapi dengan pompa, aerator dan filter mekanis.
Tahapan  dalam  penelitian  meliputi  tiga  tahapan  utama  yaitu  periode aklimatisasi, pemberian pakan dan  pengukuran  kualitas air. Lokasi  dan  media pemeliharaan  yang  akan  dipergunakan  dibersihkan  terlebih  dahulu  dengan cairan  pembersih  dan  antiseptik.  Sanitasi  ini  dilakukan  untuk  mencegah masuknya  parasit  maupun  bibit  penyakit  lainnya  ke  wadah  pemeliharaan. Setelah  sanitasi, setting  up media  pemeliharaan  dapat  dilakukan.  Wadah pemeliharaan ikan berupa akuarium. Konstruksi akuarium dirancang mengikuti prinsip resirkulasi air sehingga aliran air akan mengalir dari akuarium menuju filter dan dari filter menuju kembali ke akuarium. Sebelum ikan dimasukkan, air tawar dimasukan terlebih dahulu ke dalam media pemeliharaan dan diendapkan selama 2  minggu.
Benih ikan nila yang didatangkan haruslah terlebih dahulu diadaptasikan dengan  kondisi  lingkungan  pemeliharaan.  Ikan  dipelihara  dalam  media pemeliharaan  selama  2  minggu.  Selama  aklimatisasi,  benih  diberi  pakan komersial  dengan  frekuensi  pemberian  pakan  dua  kali  yaitu  pada  pagi  (07.00- .08.00  WITA)  dan  sore  hari  (16.00-17.00  WITA).  Pola  pemberian  pakan  ikan adalah ad libitum (tidak terbatas hingga ikan tidak mau makan lagi).
Selama  masa  pemeliharaan, ikan diberi pakan dua  kali sehari secara ad libitum (tidak  terbatas  hingga  ikan  tidak  mau  makan  lagi).  Pakan  diberikan setiap  pagi  (Pukul  07.00-08.00  WITA)  dan  sore  (Pukul  16.00-17.00  WITA). Periode  pemberian  pakan  pada  ikan  dilakukan  selama  satu  bulan.  Setelah periode  pemberian  pakan  berakhir,  ikan  nila  ditimbang  kembali  untuk mengetahui  berat  akhir.  Pengukuran  kualitas  air  dilakukan  setiap  hari  untuk memastikan kadar oksigen terlarut, pH dan kadar ammonia tetap terkontrol.

## Variabel yang Diukur
Variabel  yang  diukur  meliputi  parameter  pertumbuhan  dan  tingkat kelulushidupan  ikan  nila  serta  kandungan  nutrisi  pakan  (analisis  proksimat).
Parameter pertumbuhan ikan yang diukur meliputi jumlah konsumsi pakan per hari  (g/hari/ikan),  tingkat  kelulushidupan  (%),  pertumbuhan  (g),  laju pertumbuhan (%/hari), mean metabolic body weight (kg 0.8 ), metabolic feed intake (g/  kg 0.8 /hari), relative  growth  rate  per  metabolic  weight (g/kg 0.8 /hari), relative feeding  rate (%BW/hari), relative  feeding  rate  per  metabolic  weight (g/kg 0.8 )  dan konversi  pakan.  Berikut  perhitungan  parameter  pertumbuhan  ikan  dijabarkan dengan lebih mendetail :
1. Jumlah konsumsi pakan per hari (g/hari/ikan) = (F pagi + F sore ) / T/ N fin F = Jumlah total pakan (g) T = Jumlah total hari pemberian pakan (hari) N fin = Jumlah total ikan di akhir penelitian
2. Tingkat kelulushidupan/ Survival (S) (%) = (N initial -N dead )/N initial * 100 %
N initial = Jumlah awal ikan (ekor)
N dead =Jumlah ikan yang mati (ekor)
3. Pertumbuhan/ Growth (G) (g) = BW final – BW initial
BW final = berat ikan di akhir penelitian (g)
BW initial = berat ikan di awal penelitian (g)
4. Specific growth rate (SGR) (%/day) = 100 * (ln BW final -ln BW initial )/T
5. Mean metabolic body weight (MBW) (kg 0.8 ) = Exp ((lnBWfinal+lnBWinitial)/2) /1000) 0.8
6. Metabolic feed intake (g/kg 0.8 /day) = FI/MBW FI = rata-rata konsumsi pakan yang dihabiskan ikan/hari (g/hari)
7. Relative growth rate per metabolic weight (RGRm) (g/kg 0.8 /day) = G/MBW
8. Relative feeding rate (RFR) (%BW/d) = F intake /Exp ((lnBWfinal+lnBWinitial)/2) * 100 F intake = Jumlah pakan yang dikonsumsi ikan per hari (g/fish/day)
9. Relative feeding rate per metabolic weight (RFRm) (g/kg 0.8 ) = F intake /MBW 10. Konversi pakan/ Feed conversion ration (FCR) = F intake /G
Untuk  mengetahui  kandungan  nutrisi  pada  pakan  maka  dilakukan analisis  proksimat  yang  mencakup  kadar  protein,  karbohidrat,  lemak,  serat, kadar  abu  dan  kadar  air  pakan.  Metode  pengukuran  dan  peralatan  yang dipergunakan pada analisis proksimat dapat dilihat di Tabel 1. Analisis tersebut dilakukan di Lab THP Prodi TPG Politeknik Pertanian Negeri Kupang.

## Tabel 1. Metode dan Alat Pengukuran pada Analisis Proksimat
No Parameter Metode pengukuran Alat 1 Protein Lowly Spektometer 2 Karbohidrat Perhitungan ( by difference ) - 3 Lemak Soxlet Automatic Soxtherm 4 Kadar abu Gravimetri Nabertherm Furnace Type B 5 Kadar air Gravimetri Oven Memmert
Data hasil penelitian diolah terlebih dahulu dengan Microsoft Excel 2011 dan selanjutnya dianalisa dengan analisis ragam (ANOVA) dengan menggunakan software pengolah data (IBM SPSS Statistics 24).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kualitas Fisik dan Kimiawi Pakan
Produk  pakan  ikan  yang  dihasilkan  adalah  pakan  yang  berasal  dari bahan baku nabati sebanyak 97%. Dari 4 tipe pakan yang diproduksi, tiga tipe merupakan  pakan  yang  diperkaya  dengan  agen  fermentasi  dan  satu  pakan tanpa  penambahan  agen  fermentasi.  Pakan  yang  difermentasi  mempunyai tekstur  dan  bau  yang  khas  bila  dibandingkan  dengan  pakan  non  fermentasi. Proses  pembuatan  pakan  dimulai  dari  proses  penepungan  semua  bahan  baku dengan  menggunakan grinder . Grinder berfungsi  untuk  menghaluskan  bahan baku  pakan. Mesh  size atau  ukuran  saringan  grinder  dapat  dibongkar  pasang hingga  memenuhi  kebutuhan  pemesan.  Untuk  produksi  pakan  ikan,  saringan dengan ukuran partikel terkecil dipilih (< 1 mm). Hasil yang didapatkan berupa bahan baku yang berbentuk tepung.
Bahan  baku  yang  sudah  berbentuk  tepung  di  ayak  terlebih  dahulu.  Hal ini bertujuan agar pelet yang dihasilkan tidak mudah pecah dan hancur dalam air.  Jika  bahan  baku  pelet  masih  berukuran  tidak  seragam  dan  langsung dicampur, pelet yang dihasilkan akan mudah hancur dalam waktu singkat. Hal tersebut akan berpengaruh pada kualitas air media pemeliharaan ikan. Air akan mudah  menjadi  keruh  dan  dapat  mengganggu  kesehatan  ikan.  Setelah  itu, bahan baku kemudian ditimbang dan selanjutnya dicampur. Pakan F1 langsung dicetak  dan  dijemur  sedangkan  pakan  F2,  F3  dan  F4  difermentasi  terlebih dahulu selama 3 hari baru dicetak (Gambar 1a).
a.
b. c.
Gambar 1. Fermentasi Pakan Ikan Berbasis Nabati (a. Fermentasi hari pertama,
b. Pakan F3 dan c. Pakan F4)
Tekstur  pakan  yang  difermentasi  lebih  lunak  bila  dibandingkan  pakan yang  tidak  difermentasi.  Titik-titik  air  bermunculan  semenjak  hari  pertama fermentasi  pada  permukaan  plastik  penutup  wadah.  Pakan  tersebut  juga mengeluarkan bau yang khas dan pada pakan F4, permukaan bahan ditumbuhi selaput  putih  tipis  (miselium)  yang  merupakan  pertanda  tumbuhnya  jamur Rhizopus oligosporus (Gambar 1c). Respon ikan nila terhadap pakan buatan baik pakan itu fermentasi dan non fermentasi sangat baik. Ikan nila  akan langsung merespon dan mengambil pakan yang diberikan.
Selain  kualitas  fisik,  kandungan  nutrisi  pakan  dapat  diketahui  melalui analisis  proksimat.  Analisis  proksimat  yang  dianalisis  meliputi  kadar  protein kasar ( crude protein ), karbohidrat kasar ( crude fiber ), lemak kasar ( crude fat ), abu ( crude ash ) dan kadar air. Hasil dari analisis proksimat dengan duplikasi dapat dilihat pada Tabel 2. Kandungan protein kasar tertinggi didapati pada pakan F2 sedangkan  kandungan  terendah  pada  F3.  Dari  hasil  ini  dapat  disimpulkan bahwa  proses  fermentasi  dengan  menggunakan  starter Rhizopus  oligosporus menghasilkan kandungan protein kasar yang rendah pada pakan ikan berbasis nabati bila  dibandingkan dengan BAL dan Saccharomyces cerevisiae . Pakan F1 mempunyai  kandungan  lemak,  serat  kasar  yang  relatif  lebih  tinggi  bila dibandingkan  dengan  tiga  jenis  pakan  lainnya.  Sedangkan  pakan  yang difermentasi  mempunyai  kandungan  air  yang  lebih  tinggi  bila  dibandingkan dengan pakan yang tidak difermentasi.
Tabel 2. Hasil Analisis Proksimat Pakan Berbasis Nabati
Perlakuan Protein kasar (%) Lemak kasar (%) Serat kasar (%) Abu kasar (%) Air (%) F1 38.92 14.12 23.02 11.24 12.71 F2 39.38 13.71 21.43 10.74 14.75 F3 36.82 13.64 24.12 12.36 12.72 F4 38.60 13.01 23.02 10.92 14.46
Gatlin III et al (2007) merekomendasikan kandungan protein kasar, lemak kasar,  serat  kasar  dan  abu  kasar  pakan  berbasis  nabati  berturut-turut  adalah 48-80%,  2-20%,  <  6%,  4-8%.  Dari  hasil  analisis  proksimat  pakan  (Tabel  2) didapati  bahwa  persentasi  protein  kasar,  serat  kasar  dan  abu  kasar  masih  di bawah rekomendasi yang disarankan oleh Gatlin III et al . Formulasi pakan dasar berbasis nabati yang dipergunakan dalam diet ikan nila ternyata belum berada pada  level  yang  diinginkan.  Inklusi  bahan  baku  nabati  sumber  protein  dalam
formulasi  bahan  dasar  adalah  45%.  Jumlah  tersebut  ternyata  belum memberikan hasil yang maksimum walaupun dengan adanya proses fermentasi.
Fermentasi  bahan  baku  paku  pakan  ikan  seperti  kedelai  dapat meningkatkan daya  cerna dan kandungan nutrisi terutama  kalsium, vitamin A dan vitamin B (Kim et al dalam Zhou, 2011). Berkurangnya konsentrasi trypsin inhibitor  dan  meningkatnya  konsentrasi  molekul  peptida  sederhana  adalah salah  satu  kelebihan  proses  fermentasi  (Hong et  al ,  2004).  Dari  hasil  analisis proksimat, hanya perlakuan F2 yaitu fermentasi dengan BAL yang menunjukkan kandungan  protein  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  F1.  Inklusi  bahan baku sumber protein yang masih di bawah range dan proses pengolahan bahan baku  yang  masih  relatif  sederhana  merupakan  dua  faktor  utama  penyebab kurang maksimalnya hasil proses fermentasi pakan berbasis nabati.
Pada  pengolahan  tempe  tradisional,  proses  pengolahan  kedelai  dimulai dari  perendaman  dan  perebusan.  Setelah  melewati  kedua  proses  pengolahan tersebut, kedelai difermentasi dengan Rhizopus oligosporus selama minimal dua hari.  Pada  proses  fermentasi  tersebut,  enzim  akan  menghidrolisis  protein  pada kedelai sehingga akan menghasilkan tekstur, flavour dan bau yang khas (Azeke et  al , 2007). Tidak adanya  pengolahan bahan baku sebelum proses pembuatan pakan  berbasis  nabati  akan  menyebabkan  proses  fermentasi  yang  kurang sempurna sehingga breakdown nutrisi tidak akan berjalan sempurna dan dapat terhambat.

## Pertumbuhan Ikan
Pemberian pakan dilaksanakan selama 30 hari. Pakan diberikan dua kali sehari hingga ikan kenyang yaitu pada pagi dan sore hari. Beberapa parameter pertumbuhan ikan seperti tingkat kelulushidupan (%), jumlah konsumsi pakan per  hari  (g/hari/ikan),  konversi  pakan,    pertumbuhan  (g),  laju  pertumbuhan (%/hari), mean metabolic body weight (kg 0.8 ), metabolic feed intake (g/ kg 0.8 /hari), dan relative growth rate per metabolic weight (g/kg 0.8 /hari) dipergunakan untuk menganalisa pertumbuhan ikan nila.
Data  hasil  percobaan  dapat  dilihat  pada  Tabel  3.  Data  tersebut menunjukkan  bahwa  ada  pengaruh  nyata  perlakuan  terhadap  pertumbuhan ikan  nila  (g/hari/individu)  (P  >  0.05).  Berat  akhir  ikan  menunjukkan  adanya perbedaan yang signifikan. Rerata perlakuan F2 dan F3 berbeda dengan kontrol atau  F1.Walaupun  demikian,  konsumsi  pakan  dan  parameter  pertumbuhan lainnya menunjukkan tidak ada pengaruh nyata (P < 0.05).
Ikan  yang  diberi  pakan  yang  telah  difermentasi  menunjukkan pertumbuhan dan efisiensi pemanfaatan pakan yang lebih baik (Ramachandran, 2007). Pakan ikan berbasis nabati dengan kandungan protein 42,4 – 48,9% baik dalam  bentuk  konsentrat  maupun  tepung  menghasilkan  pertumbuhan  ikan yang  baik  namun  juga  menyebabkan  munculnya  beberapa  faktor  pembatas (Barrows et al , 2007). Ikan yang diberi makan dengan pakan nabati mempunyai pertumbuhan  yang  10%  lebih  lambat  dari  pakan  dengan  tepung  ikan.  Hal  ini disebabkan oleh pakan berbasis nabati kekurangan beberapa kandungan nutrisi penting bagi pertumbuhan ikan dan zat anti nutrisi.
Tabel 3. Parameter Pertumbuhan Ikan Nila
Parameter Perlakuan p-value F1 F2 F3 F4 Periode Pemeliharaan (hari) 30 30 30 30 Jumlah wadah pemeliharaan 12 12 12 12 Jumlah ikan 10 10 10 10 Tingkat kelulushidupan (%) 100 100 100 100 Berat awal (g) 27.6 ± 4.8 29.6 ± 2.8 32.0 ± 2.5 28.9 ± 5.4 0.64 Berat akhir (g) 62.4 ±4.5 a 73.2 ±2.7 b 71.7 ±2.6 b 69.1 ±5.7 ab 0.05* Konsumsi Pakan Total konsumsi pakan (g) 460.2± 49.2 508 ± 28.2 447.6± 40.3 535 ± 92.9 Konsumsi pakan (g/hari) 15.3 ± 1.6 16.9 ± 0.9 14.9 ± 1.3 17.8 ± 3.1 Konsumsi pakan (g/hari/ikan) 1.53 ±0.16 1.69 ±0.09 1.49 ±0.13 1.78 ±0.31 0.29 Konversi pakan 1.3 ± 0.15 1.2 ± 0.06 1.1 ± 0.10 1.3 ± 0.23 0.30 Pertumbuhan Pertumbuhan (kg) 0.35±0.0 0.44±0.0 0.40±0.0 0.40±0.0 Pertumbuhan (g/hari) 11.6±0.1 14.5±0.1 13.2±0.0 13.4±0.1 Pertumbuhan (g/hari/ind) 1.2±0.01 a 1.5±0.01 c 1.3±0.0 b 1.3±0.01 b 0.00* SGR (%/hari) 2.74±0.32 3.03±0.19 2.70±0.15 2.94±0.38 0.46 MBW (kg 0.8 ) 0.08±0.01 0.09±0.0 0.09±0.0 0.08±0.01 0.38 RGRm (g/kg 0.8 /hari) 14.9±1.51 17.0±0.94 15.1±0.7 16.3±1.77 0.25 Pemanfaatan pakan berbasis nabati yang telah difermentasi menunjukkan  pertumbuhan  ikan  nila  yang  berbeda  nyata  dalam  taraf  α  0.05 walaupun nilai SGR, MBW dan RGRm tidak berbeda nyata. Dari hasil konsumsi pakan,  ikan  nila  dapat  memanfaatkan  nutrisi  dengan  baik  pada  pakan  yang telah  difermentasi  sehingga  menyebabkan  berat  akhir  ikan  yang  relatif  lebih tinggi dari pakan non fermentasi.
Breakdown kandungan  nutrisi  sebagai  hasil  proses  fermentasi menyebabkan  pemanfaatan  yang  jauh  lebih  efisien  walaupun  belum  optimal dikarenakan  penanganan  awal  bahan  baku  yang  masih  sederhana.  Jika penanganan  awal  bahan  baku  lebih  baik  maka  efisiensi  pakan  akan  jauh optimal dan dapat berimbas positif bagi pertumbuhan ikan nila. Yamamoto et al (2010)  menjabarkan  bahwa  fermentasi  kedelai  dengan  pemanasan  awal  hingga
suhu  80  C  dan  kultur  starter  agen  fermentasi  kurang  lebih  10  jam menghasilkan  pertumbuhan  dan  daya  cerna  ikan  yang  baik  sama  seperti  hasil yang diperoleh dari pemberian pakan dengan tepung ikan. Adanya penanganan awal yang baik dapat mengurangi zat anti nutrisi dalam pakan.

## Kualitas air
Manajemen  kualitas  air  tetap  diperhatikan  selama  proses  pemberian pakan  berlangsung. Parameter kualitas air diukur secara harian dan mingguan (Tabel  4).  Parameter  yang  diukur  adalah  oksigen,  amonia,  nitrit,  nitrat, konduktivitas dan suhu. Kisaran air masih berada dalam batas toleransi untuk pemeliharaan  ikan  nila  dalam  sistem  resirkulasi  (Simuchimba dalam Mohammed Ramli, 2008)
Tabel 4. Parameter Kualitas Air
Parameters Mean ± SD Min - Max O 2 5.20  ±  0.47 4.2 - 6.2 mg/L NH 4+ 0.23  ±  0.25 0.0 - 0.8 mg/L NO 2- 0.19  ±  0.23 0.1 - 0.8 mg/L NO 3- 176.19  ±  92.36 50 - 350 mg/L Konduktivitas 1.41  ±  0.71 0.7 - 3.1 µS/cm pH 7.15  ±  0.28 6.3 - 7.7 - Suhu 28.73  ±  0.22 27.8 - 29.0 ºC

## KESIMPULAN
Pakan  ikan  berbasis  nabati  adalah  salah  satu  jenis  pakan  yang  dapat dijadikan  alternatif  pengganti  pakan  berbasis  tepung  ikan.  Bahan  baku  nabati mudah dijumpai dengan harga yang jauh lebih murah bila dibandingkan dengan tepung  ikan.  Salah  satu  kelemahan  dari  jenis  pakan  ini  adalah  kurang lengkapnya  komposisi  nutrisi  bagi  ikan  dan  keberadaan  zat  anti  nutrisi  yang menghalangi  penyerapan  nutrisi  (bioavaibilitas).  Untuk  meningkatkan bioavaibilitas  pakan,  proses  fermentasi  dapat  dipergunakan.  Dari  keempat pakan  yang  diujicobakan,  pakan  yang  telah  difermentasi  menghasilkan pertumbuhan  ikan  yang  signifikan  walaupun  dengan  tingkat  konsumsi  pakan yang  sama. Breakdown kandungan  nutrisi  sebagai  hasil  proses  fermentasi menyebabkan pemanfaatan yang jauh lebih efisien.

## DAFTAR PUSTAKA
Azeke,  M.  A.,  B.  Fretzdorff,  H.  Buening-Pfaue,  T.  Betsche.  2007.  Comparative Effect  of  Boiling  and  Solid  Substrate  Fermentation  Using  the  Tempeh Fungus  ( Rhizopus  oligosporus )  on  the  Flatulence  Potential  of  African Yambean ( Sphenostylis stenocarpa L.) Seeds. Food Chemistry . 103 : 1420- 1425.
Barrows, F. T., T. G. Gaylord, D. A. J. Stone, C. E. Smith. 2007. Effect of Protein Source and Nutrient  Density on Growth Efficiency, Histology and Plasma Amino  Acid  Concentration  of  Rainbow  Trout .  Aquaculture  research . 38:1747-1758.
De  Silva,  S.S.,  T.  A.  Anderson.  1995. Fish  nutrition  in  aquaculture .  Edisi  6. Chapman and Hall, London.
FAO. 2007. Global Trade Conference on Aquaculture. FAO Fisheries Proceeding 9 in Qingdao, Cina, 2007. FAO, Roma, pp 271.
FAO.  2013. The  state  of  World  Fisheries  and  Aquaculture  2013 .  FAO  Fisheries And Aquaculture Department, Roma.
FAO.  2016.  The  State  of  World  Fisheries  and  Aquaculture.  FAO  Fisheries  And Aquaculture Department, Roma.
Francis, G., H.P.S. Makkar, K. Becker. 2001. Antinutritional Factors Present  in Plant-Derived  Alternate  Fish  Feed  Ingredients  and  Their  Effects  in  Fish. Aquaculture . 199: 197-227.
Gatlin III, D.M., Mackenzie, D.S., Craig, S.R., Neill, W.H.. 2007. Effects of Dietary Sodium Chloride on Red Drum Juveniles in Waters of Various Salinities. The Progressive Fish-Culturist . 54: 220-227.
Gatlin  III,  D.  M.,  F.  T.  Barrows,  P.  Brown,  K.  Dabrowski,  T.  G.  Gaylord,  R.  W. Hardy, E.Herman, G. Hu, A. Krogdahl, R. Nelson, K. Overturf, M. Rust, W. Sealey, D. Skonberg, E. J. Souza, D. Stone, R. Wilson, E. Wurtele. 2007. Expanding  the  Utilization  Of  Sustainable  Plant  Products  In  Aquafeeds:  A Review. Aquaculture Research . 38: 551-579.
Halver, J. 2013. Fish Nutrition. Edisi 3. Academic Press, San Diego.
Hong,  K.  J.,  C.  H.  Lee,  S.  W.  Kim.  2004. Aspergillus  oryzae 3.042GB-107 Fermentation  Improves  Nutritional  Quality  Of  Food  Soybeans  And  Feed Soybean Meals. Journal of Medicinal Food . 7 : 430- 434.
Mohamed  Ramli,  N.  2008. The  Effect  Of  C/N  Ratio  In  The  Feed  On  The Performance  Of  The  Denitrification  Reactor .  Thesis.  Aquaculture  and Fisheries Group, Wageningen.
Mudjiman, A. 2011. Makanan Ikan. Penebar Swadaya, Jakarta.
Ramachandran, S., A. K. Ray. 2007. Nutritional Evaluation of Fermented Black Gram  ( Phaseolus  mungo )  Seed  Meal  in  Compound  Diets  for  Rohu, Labeo rohita (Hamilton), Fingerlings. Journal Applied Ichtyology . 23 : 74-79.
Schneider, O., A. K. Amirkolaie, J. Vera-Cartas, , E. H. Eding, J. W. Schrama, J. A.  J.  Verreth.  2007.  Digestibility,  Faeces  Recovery,  And  Related  Carbon, Nitrogen And Phosphorus Balances Of Five Feed Ingredients Evaluated As Fishmeal Alternatives In Nile Tilapia ( Oreochromis niloticus L.). Aquaculture Research . 35: 1370-1379.
Yamamoto, T., Y. Iwashita, H. Matsunari, T. Sugita, H. Furuita, A. Akimoto, K. Okamatsu,  N.  Suzuki.  2010.  Influence  Of  Fermentation  Conditions  For Soybean Meal In  A Non Fish Meal Diet  On The Growth Performance And Physiological  Condition  Of  Rainbow Trout  Oncorhynchus  mykiss . Aquaculture. 309: 173-180.
Zhou, F., W. Song, Q. Shao, X. Peng, J. Xiao, Y. Hua, B. N. Owari. 2011. Partial Replacement of Fish Meal by Fermented Soybean meal in Diets for Black Sea  Bream, Acanthopagrus  schlegelii ,  Juveniles. Journal  of  The  World Aquaculture Society . 42 (2) : 184 – 196.