## Arwana Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan
Inventarisasi  ektoparasit  dan  identifikasi  molekuler  bakteri  patogen  ikan nilem ( Osteochilus vittatus ) yang dibudidayakan di Kabupaten Banyumas [Inventory  of  ectoparasites  and  molecular  identification  of  pathogenic bacteria  on  bonylip  barb  ( Osteochilus  vittatus )  cultivated  in  Banyumas District]
Anandita Ekasanti 1* , Hamdan Syakuri 1 , Dewi Nugrayani 1 , Emyliana Listiowati 1 , Muhammad Nurhafid 1 , Alvin Maulana 1
1 Prodi Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Jenderal Soedirman. Jl. Dr Soeparno, Komplek GOR Soesilo Soedarman, Karangwangkal, Karang Bawang, Grendeng, Kec. Purwokerto Utara, Kabupaten Banyumas, Jawa Tengah 53122
ABSTRACT ú The  aims  were  to  do  an  ectoparasite  and  pathogenic  bacteria  inventory  of  Bonylip  barb  reared  in Banyumas district. Total of 118 fish were randomly taken from Singasari (30 individual), Pabuaran (30 individual), Beji (30 individual) and Jipang (28 individual) villages. This work observed ectoparasite species, prevalence, and intensity as well as pathogenic bacteria species. Ectoparasites were identified based on morphological characteristics observed microscopically and their prevalence and intensity were calculated. Bacterial pathogen was isolated from fish samples showing  symptoms  of  bacterial  disease  and  identified  molecularly  based  on  16s  rDNA  sequence  using  BLAST  dan phylogenetic  analysis.  Results  showed Trichodina  sp.  and  Monogeneans  were  found  infected  fish  samples  from  all location with prevalence was 70-100%. Ichthyophthirius multifiliis was found from all location except Singasari village. Some  of  fish  samples  showed  fin  necrosis  and  five  bacterial  isolates  were  obtained.  16s  rDNA  marked  gene  was successfully amplified and sequenced. Based on sequence analysis, five isolates could be clustered into two groups, the first was found only in Singasari village and the second was found in Singasari and Beji villages.  Similarity value of 16s rDNA gene sequence these two groups was 99,8%. Result of BLAST and phylogenetic analysis showed that the bacterial pathogens were identified as group of Aeromonas hydrophila complex.
Key words ú ectoparasite; molekuler identification; pathogenic bacteria; Osteochillus vittatus
ABSTRAK ú Tujuan  penelitian  adalah  melakukan  inventarisasi  ektoparasit  dan  bakteri  patogen  ikan  Nilem  yang dibudidayakan di Kabupaten Banyumas. Total 118 ikan diambil secara acak dari Desa Singasari (30 individu), Desa Pabuaran (30 individu), Desa Beji (30 individu), dan Desa Jipang (28 individu). Parameter yang dikaji adalah jenis, prevalensi, dan intensitas ektoparasit serta jenis bakteri patogen. Ektoparasit diidentifikasi berdasarkan karakteristik morfologi yang diamati secara mikroskopik dan dihitung nilai prevalensi dan intensitas. Bakteri patogen diisolasi dari sampel ikan yang menunjukkan gejala penyakit bakterial dan diidentifikasi secara molekuler berdasarkan sekuen 16s rDNA  menggunakan  analisis  BLAST  dan  analisis  filogenetik.  Hasil  menunjukkan Trichodina  sp.  dan  Monogenea ditemukan  menginfeksi  ikan  dari  seluruh  lokasi  sampling  dengan  prevalensi  70-100%. Ichthyophthirius  multifiliis ditemukan dari seluruh lokasi kecuali dari Desa Singasari. Beberapa sampel ikan menunjukkan nekrosis pada sirip dan  sebanyak  lima  isolat  bakteri  dapat  diperoleh  dari  sampel  ikan  tersebut.  Gen  pengkode  16s  rRNA  berhasil diamplifikasi dan disekuensing. Berdasarkan hasil analisis sekuen, kelima isolat dapat dikelompokkan menjadi dua grup, pertama hanya ditemukan dari Desa Singasari dan kedua ditemukan di Desa Singasari dan Desa Beji. Nilai similaritas  sekuen  gen  16s  rDNA  antar  kedua  kelompok  sebesar  99,8%.  Hasil  analisis  BLAST  dan  filogenetik menunjukkan  bahwa  kelompok  bakteri  patogen  yang  ditemukan  teridentifikasi  sebagai  bagian  dari Aeromonas hydrophila kompleks.
Kata kunci ú ektoparasit; identifikasi molekuler; bakteri patogen; Osteochillus vittatus
Received ú 22 Februari 2023, Accepted ú 20 Maret 2023, Published ú 2 Mei 2023. *Koresponden ú Anandita Ekasanti, Prodi Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Jenderal Soedirman.  Jl.  Dr  Soeparno,  Komplek  GOR  Soesilo  Soedarman,  Karangwangkal,  Karang  Bawang,  Grendeng,  Kec. Purwokerto Utara, Kabupaten Banyumas, Jawa Tengah 53122. Email: anandita.ekasanti@unsoed.ac.id Kutipan ú Ekasanti, A., Syakuri, H., Nugrayani, D., Listiowati, E., Nurhafid, M.,  Maulana, A. (2023). Inventarisasi ektoparasit  dan  identifikasi  molekuler  bakteri  patogen  ikan  nilem  ( Osteochilus  vittatus)  yang  dibudidayakan  di Kabupaten Banyumas. Arwana: Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan, 5(1), 22-32.
p-ISSN (Media Cetak) ú 2657-0254 e-ISSN (Media Online) ú 2797-3530
© 2023 Oleh authors. Arwana: Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan . Artikel ini bersifat open access yang  didistribusikan  di  bawah  syarat  dan  ketentuan Creative  Commons  Attribution-ShareAlike  4.0  International License .
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32

## PENDAHULUAN
Serangan  penyakit  dapat  menyebabkan  berbagai dampak  negatif  bagi  usaha  perikanan  budidaya, antara  lain  pertumbuhan  ikan  terganggu,  periode pemeliharaan lebih lama, tingginya tingkat konversi pakan,  dan  bahkan  kematian.  Berbagai  dampak tersebut mengakibatkan usaha budidaya mengalami kerugian  ekonomis  dalam  tingkat  tertentu,  bahkan dapat secara total menyebabkan gagal panen ( Fira et al.,  2021;  Hakim  et  al.,  2019;  Tuwitri  et  al.,  2021; Yuliani et  al.,  2023 ).  Perkembangan  penyakit  pada ikan  adalah  suatu  proses  yang  dinamis  dan merupakan  interaksi  antara  inang,  jasad  pathogen dan  lingkungan.  Kondisi  ikan  yang  lemah  akibat berbagai stressor, patogen yang virulen, dan kualitas lingkungan  yang  kurang  optimal  merupakan kombinasi  terjadinya  penyakit  ( Rasmi et  al.,  2020) (Nurbaiti & Herlina, 2022 ).
Pada  budidaya  ikan  nilem,  ektoparasit  dan  bakteri patogen  adalah  dua  golongan  patogen  yang  umum menyebabkan  penyakit.  Ikan  nilem  ( Osteochillus vittatus)  adalah  ikan  air  tawar  ekonomis  penting yang banyak dibudidayakan di Kabupaten Banyumas,  yaitu  di  18  dari  27    kecamatan.      Jenis ektoparasit  yang  dapat  mengancam  budidaya  ikan nilem  adalah Trichodina  sp.,  Ichthyopthirius multifiliis,  Dactylogyrus  sp.,  Gyrodactylus  sp., Argulus  sp.,  Learnea  sp.,  Camallanus  sp., Tetrahymena,  Microsporidians,  dan  Pallisentis  sp. ( Adamimawar et al., 2019; Fira et al., 2021; Ghassani et al., 2016; Hernawati, 2015; Mulyana & Mumpuni, 2015; Riwidiharso et al., 2019; Sitompul et al., 2019; Ulkhaq, 2019 ).  Bakteri patogen yang diketahui dapat menginfeksi  ikan  air    tawar    antara    lain  adalah Aeromonas hydrophila,
Enterobacteria sp.,
Corynebacterium sp., Listeria sp., Pseudomonas sp., Plesiomonas  sp.,  Edwardsiella  sp.,  Vibrio  spp.  dan Kurthia sp. ( Arief et al., 2018; Manurung & Susantie, 2017; Pardamean et al., 2021; Rahayuningsih et al.,
2023; Sinubu et al., 2022; Mulyana et al., 2018 ).
Pendataan  maupun  pelaporan  secara  berkala  pada ikan air tawar yang dibudidayakan merupakan acuan untuk  mendeteksi  secara  dini  kejadian  penyakit sehingga dapat mencegah terjadinya wabah penyakit ( Jasmanindar,  2011 ).  Monitoring  dilakukan  dengan mengumpulkan  data  mengenai  keberadaan  ekto- parasit  dan  bakteri  patogen  pada  ikan.  Informasi terkait adanya parasit dan bakteri patogen pada  ikan yang  diperoleh  dari  kegiatan  monitoring  dapat menjadi bahan acuan untuk menyusun strategi dan
tindakan  yang  tepat  dalam  upaya  pencegahan  dan pengendalian  terhadap  munculnya  suatu  kasus penyakit ikan ( Sitompul et al., 2019 ).  Keberhasilan budidaya  ikan  nilem  bergantung  pada  upaya pencegahan  dan  pengendalian  terhadap  penyakit yang  disebabkan  oleh  infeksi  parasit  dan  bakteri patogen.  Oleh  karena  itu  inventarisasi  ektoparasit dan  bakteri  patogen    pada  ikan  nilem  perlu dilakukan.  Tujuan  penelitian  untuk  menginven- tarisasi  ektoparasit  dan  bakteri  patogen  yang menyerang nilem yang dibudidayakan di Kabupaten Banyumas.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini menggunakan metode eksploratif dan hasilnya  dianalisis  secara  deskriptif  untuk menjelaskan  hasil  pengamatan.  Penelitian  ini diawali dengan pengambilan sampel ikan nilem yang dibudidayakan  di  Kabupaten  Banyumas.  Lokasi pengambilan sampel meliputi unit budidaya ikan di instansi  pemerintah  (Balai  Benih  Ikan/BBI Singasari) dan di pembudidaya (Desa Pabuaran, Desa Beji dan Desa Jipang). Gejala penyakit yang diamati meliputi  gejala  eksternal  (Gambar  2)  dan  internal. Pengamatan organisme penyebab penyakit dilakukan  untuk  mengetahui  jenis  dan  tingkat infeksi  ektoparasit  dan  bakteri.    Jenis  ektoparasit ditentukan secara morfologis berdasarkan pengamatan mikroskopis dan jenis  bakteri ditentukan secara molekuler.

## Pengambilan Sampel
Pengambilan  sampel  dilakukan  sebanyak  3  kali untuk setiap lokasi pada bulan Juli 2020. Total 118 ikan  diambil  secara  acak  dari  BBI  Singasari  (30 individu), Desa Pabuaran (30 individu), Desa Beji (30 individu), dan Desa Jipang (28 individu). Sampel ikan dibawa  ke  Laboratorium  Penelitian  Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Universitas  Jenderal Soedirman dengan transportasi basah menggunakan kantong plastik baru yang diberi oksigen dan diisi air yang  berasal  dari  kolam  pemeliharaan.  Wadah transportasi  tidak  mungkin  menyebabkan  konta- minasi patogen. Di laboratorium, sampel ikan beserta airnya ditampung dalam kontainer plastik yang sudah dibersihkan  menggunakan  deterjen  hingga  dilakukan pengamatan.  Sampel  ikan  diukur  panjang  tubuhnya menggunakan penggaris (± 1 mm) dan ditimbang berat badannya  menggunakan  timbangan  digital  (±  0,1  g). Sebelum  pengamatan,  sampel  ikan  dimatikan  dengan menusuk batang otak ( Blessing et al ., 2010 ).
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32

## Pengamatan Ektoparasit
Pengamatan ektoparasit dilakukan dengan membuat preparat mukus yang diambil dari permukaan tubuh dan insang dengan cara scrapping dan mengamatinya dengan mikroskop. Scrapping mukus dilakukan  dengan  melakukan  pengerokan  mukus pada  permukaan  tubuh  dan  insang  menggunakan cover  slide.  Mukus  yang  didapatkan  kemudian diletakkan  pada  obyek  glass,  ditetesi  dengan akuades,  dan  ditutup  dengan cover  slide.  Preparat mukus insang dibuat dari satu lembar insang dari sisi kiri tiap sampel ikan. Insang yang telah diambil lalu diletakkan  pada  obyek  glass,  ditetesi  akuades, diambil  mukusnya  dan  ditutup  dengan  cover  glass. Selanjutnya  preparat  diamati  dengan  mikroskop perbesaran  40X  sampai  100X.  Parasit  yang ditemukan  diambil  gambarnya  dengan  kamera digital  dan  selanjutnya  diindentifikasi  berdasarkan kemiripan  morfologi  parasit  dengan  gambar  parasit yang sudah terpublikasi ( Kabata, 1985 ). Jumlah ikan terinfeksi  dan  jumlah  parasit  dihitung  untuk menentukan  prevalensi  dan  intensitas  berdasarkan rumus yang umum digunakan ( Kabata, 1985 ):

## Pengamatan Bakteri Patogen
Isolasi  bakteri  dilakukan  dari  sampel  ikan  yang menunjukkan  gejala  penyakit  bakterial    seperti bercak  merah,  sirip  geripis,  nekrosis,  dan  perut gembung.  Sampel  bakteri  diambil  secara  aseptis dengan  menggunakan  jarum  ose  dan  ditumbuhkan pada media TSA ( Trypticase Soy Agar). Isolasi bakteri dilakukan dari ginjal hingga diperoleh kultur murni dari  bakteri  yang  tumbuh  dominan  dengan  metode yang  umum  digunakan  ( Tiwari et  al.,  2009;  Tóth, 2013 ). Isolat bakteri patogen kemudian diidentifikasi secara molekuler berdasarkan sekuen gen pengkode ribosomal RNA ( Marchesi et al., 1998 ).
Sampel  DNA  diisolasi  dari  bakteri  patogen  dengan menggunakan  DNA  genomic  isolation  kit  (Geneaid) dengan mengikuti protokol yang meliputi tahap lisis jaringan, DNA binding, tahap pencucian, dan tahap elusi  DNA.  Gen  pengkode  ribosomal  DNA diamplifikasi  menggunakan  primer  UnibacfD1 (5`AGA  GTTT  GAT  CCT  GGC  TCA  G3`)  dan UnibacrP1 (5`ACG GTT ACC TTG TTA CGA CTT3`) ( Panangala et  al.,  2007 ).      Hasil      amplifikasi
kemudian  disekuensing  menggunakan  jasa  sekuen- sing dari First BASE Laboratories Sdn Bhd melalui PT.  Genetika  Science.  Penentuan  spesies  isolat bakteri dilakukan berdasarkan sekuen gen tersebut dengan  menggunakan  analisis  BLAST  ( Altschul et al.,  1990 )  dan  analisis  filogenetik  menggunakan aplikasi di http://www.phylogeny.fr/  ( Dereeper et al., 2008 ).

## Analisis Data
Data  jenis-jenis  ektoparasit,  nilai  prevalensi,  dan nilai  intensitas  dianalisis  secara  deskriptif.  Jenis ektoparasit  disajikan  dalam  bentuk  gambar  dan dibandingkan  dengan  gambar  ektoparasit  yang sudah  dipublikasikan  sebelumnya  ( Adamimawar et al., 2019; Handayani, 2020; Kabata, 1985; Maulana et al.,  2017;  Sari  et  al.,  2019 ).  Nilai  prevalensi  dan intensitas  disajikan  dalam  bentuk  tabel  dan digunakan  untuk  menentukan  tingkat  infeksi. Tingkat  infeksi  setiap  jenis  ektoparasit  ditentukan berdasarkan nilai prevalensi dan intensitasnya, dan diklasifikasikan menjadi beberapa kriteria mengacu ketentuan  yang  umum  digunakan  ( Yuliani et  al., 2023 ) dengan modifikasi .  Sebaran wilayah dan jenis ektoparasit  berdasarkan  nilai  prevalensi  dianalisis menggunakan  matriks  similaritas  Bray-curtis ( Lablack et al., 2022 ). Tabel hasil analisis BLAST dan gambar filogenetik bakteri pathogen dianalisis secara deskriptif  menggunakan  literatur  yang  sesuai ( Nurhafid et al., 2021 ).

## HASIL
Pengamatan terhadap organisme penyebab penyakit menunjukkan  bahwa  pada  118  ekor  sampel  ikan nilem  yang  diperoleh  dari  BBI  Singasari,  Desa Pabuaran,  Desa  Beji,  dan  Desa  Jipang  ditemukan adanya    ektoparasit.  Total  ditemukan  enam  jenis ektoparasit,  yaitu Trichodina  sp.,  Monogenea, Ichthyophthirius  multifiliis,  Epistylis  sp,  Oodinium sp., dan Argulus sp (Gambar 1 dan Tabel 1).
Jenis  ektoparasit  yang  ditemukan  pada  ikan  nilem dari BBI Singasari relatif lebih sedikit dibandingkan ikan nilem dari Desa Pabuaran, Desa Beji dan Desa Jipang.  Jenis  ektoparasit  yang  menginfeksi permukaan  tubuh  relatif  lebih  beragam  dibanding pada  insang.  Ektoparasit  dari  jenis Trichodina  sp. dan Monogenea.  adalah  dua  jenis  ektoparasit  yang selalu ditemukan pada ikan nilem dari semua lokasi pengambilan  sampel.  Kedua  jenis  ektoparasit tersebut  juga  selalu  ditemukan  baik  di  permukaan
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
tubuh  maupun  insang. Ichthyophthirius  multifiliis tidak  ditemukan  di  BBI  Singasari. Epistylis  sp. ditemukan  di  Desa  Pabuaran  dan  Desa  Beji. Oodinium sp. ditemukan di Desa Pabuaran dan Desa Jipang.  Sedangkan Argulus sp. hanya ditemukan di Desa Beji. Nilai prevalensi tertinggi di BBI Singasari, Desa  Pabuaran  dan  Desa  Beji  adalah  dari  jenis Monogenea  (70-100%),  sedangkan  nilai  prevalensi tertinggi di Desa Jipang berasal dari Trichodina sp.
(92,86%).  Tingkat  infeksi  yang  disebabkan  oleh ektoparasit dari jenis Monogenea dan Trichodina sp. yang menyerang ikan nilem budidaya di Kabupaten Banyumas  termasuk  dalam  kriteria  parah.  Jenis lainnya yang juga menginfeksi ikan nilem budidaya di Kabupaten Banyumas namun tidak banyak adalah Epistylis sp., Oodinium sp., dan Argulus sp.  Tingkat infeksi dari tiga jenis ektoparasit tersebut termasuk dalam kriteria infeksi rendah dan sedang.
Gambar 1. Jenis-jenis ektoparasit yang ditemukan (A) Trichodina sp.; (B) Ichthyophthirius multifiliis; (C) Monogenea ; (D) Epistylis sp.;
(E) Oodinium sp.; dan (F) Argulus sp .
Tabel  1 .  Prevalensi  dan  intensitas  ektoparasit  pada  permukaan  tubuh  dan  insang  yang  ditemukan  pada  empat  lokasi  budidaya  di Kabupaten Banyumas
Lokasi Pengambilan Sampel Jumlah Ikan Diperiksa (ekor) Jenis Parasit Ditemukan Lokasi Parasit Ditemukan Jumlah Ikan Terinfeksi (ekor) Prevalensi (%) Intensitas (ind/ekor) BBI Singasari 30 Trichodina sp . Permukaan tubuh, sirip 14 46,67 1,50 Insang 10 33,33 7,30 Monogenea Insang 22 73,33 2,59 Desa Pabuaran 30 Trichodina sp . Permukaan tubuh, sirip 18 60,00 1,61 Insang 2 6,67 1,00 Monogenea Permukaan tubuh, sirip 6 20,00 1,00 Insang 30 100,00 9,93 Ichthyophthirius multifiliis Permukaan tubuh, sirip 6 20,00 1,17 Insang 2 6,67 1,50 Epistylis sp . Permukaan tubuh, sirip 2 6,67 1,50 Oodinium sp . Insang 1 3,33 1,00 Desa Beji 30 Trichodina sp . Permukaan tubuh, sirip 13 43,33 33,31 Insang 11 36,67 11,91 Monogenea Permukaan tubuh, sirip 5 16,67 2,00 Insang 21 70,00 6,43
A B
C
D E
F
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
Lokasi Pengambilan Sampel Jumlah Ikan Diperiksa (ekor) Jenis Parasit Ditemukan Lokasi Parasit Ditemukan Jumlah Ikan Terinfeksi (ekor) Prevalensi (%) Intensitas (ind/ekor) Ichthyophthirius multifiliis Permukaan tubuh, sirip 19 63,33 21,58 Insang 17 56,67 9,35 Epistylis sp . Permukaan tubuh, sirip 1 6,67 1,00 Argulus sp. Permukaan tubuh, sirip 2 3,33 16,00 Desa Jipang 28 Trichodina sp . Permukaan tubuh, sirip 8 28,57 1,63 Insang 26 92,86 98,38 Monogenea Permukaan tubuh, sirip 1 3,57 1,00 Insang 23 82,14 5,78 Ichthyophthirius multifiliis Permukaan tubuh, sirip 11 39,29 2,00 Insang 8 28,57 1,63 Oodinium sp . Permukaan tubuh, sirip 2 7,14 4,00 Keterangan: Kriteria Prevalensi dan Intensitas Infeksi rendah Infeksi sedang Infeksi parah
Gambar 2 .  Hasil analisis kluster jenis ektoparasit ikan nilem di empat lokasi sampling menggunakan matriks similaritas Bray-curtis berdasarkan prevalensi ektoparasit, mengikuti lokasi (A) dan jenis ektoparasit (B).
Hasil analisis kluster dengan menggunakan matriks similaritas  Bray-curtis  berdasarkan  prevalensi ektoparasit  tersaji  pada  Gambar  2.  Keempat  lokasi sampling terbagi menjadi 2 grup yaitu grup pertama terdiri atas Desa Beji dan Desa Jipang dengan nilai similaritas 85%, sedangkan grup kedua adalah Desa Pabuaran dan BBI Singasari dengan nilai similaritas sekitar  80%.  Kedua  grup  tersebut  memiliki similaritas  yang  cukup  tinggi  yaitu  sekitar  75% (Gambar  2A). Monogenea  dan  Trichodina  sp.
membentuk satu sub kluster dan memiliki similaritas yang  paling  tinggi  yaitu  lebih  dari  80%. Dibandingkan sub kluster tersebut, Ichthyophthirius multifiliis  memiliki  similaritas  lebih  dari  60%. Epistylis  sp.  dan  Argulus  sp.  membentuk  satu  sub kluster  dengan  nilai  similaritas  lebih  dari  45%, sedangkan Oodinium sp. memiliki similaritas sangat rendah  yaitu  sekitar  15%  dibandingkan  sub  kluster ini (Gambar 2B).
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
Gambar 3. Sampel ikan nilem dari Desa Beji dan BBI Singasari yang menunjukkan gejala berupa sirip ekor geripis (A) dan sedikit luka di permukaan tubuh (B).
Tabel 2 . Isolat bakteri, lokasi sampel dan grup pengelompokkan. Isolat Lokasi (desa, jaringan) Grup Hasil Analisis BLAST (100%) SG0607 Singasari, ginjal I Aeromonas hydrophila (MT730008.1) Aeromonas veronii (MT345040.1) Aeromonas allosaccharophila (MK548513.1) SG0608 Singasari, ginjal I BH2212 Beji, hati II Aeromonas hydrophila (AY966887.1) Aeromonas diversa (KY867528.1) Aeromonas sobria (KY683201.1) BH2209 Beji, hati
II
SG0602 Singasari, ginjal II
Gambar 4. Hasil analisis filogenetik isolat bakteri
Bakteri  patogen  diisolasi  dari  hati  dan  ginjal  ikan yang menunjukkan gejala penyakit bakterial berupa sirip  geripis  dan  adanya  luka  di  tubuh  (Gambar  3). Ikan yang menunjukkan gejala tersebut berjumlah 3 ekor (1 ekor dari BBI Singasari dan 2 ekor dari Desa Beji)  dari  total  60  ekor  ikan  yang  diperiksa.    Ikan dengan gejala penyakit bakterial tidak ditemukan di Desa Pabuaran dan Desa Jipang. Lima isolat bakteri patogen berhasil diisolasi dan diidentifikasi.  Kelima isolat  dikelompokkan  menjadi  2  grup  berdasarkan nilai similaritas sekuen rDNA (100%).  Grup I hanya ditemukan  di  Desa  Singasari  sedangkan  grup  II ditemukan  di  Desa  Singasari  dan  Beji  (Tabel  2). Kedua  grup  berbagi  nilai  similaritas  sekuen  gen
rDNA  sebesar  99,8%.  Tabel  2  menunjukkan  2  grup tersebut memiliki similaritas 100% dengan beberapa sekuen  yang  ada  di  Gene  Bank.  Hasil  identifikasi berdasarkan  analisis  BLAST  dan  Filogenetik menunjukkan bahwa isolat bakteri pada kedua grup termasuk  anggota  dari Aeromonas  hydrophila kompleks  (Gambar  4). Aeromonas  hydrophila kompleks  terdiri  dari Aeromonas  hydrophila, Aeromonas caviae, dan Aeromonas veronii.

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  ini  menggambarkan  kondisi budidaya  ikan  nilem  di  Kabupaten  Banyumas  yang berkaitan  dengan  infeksi  ektoparasit  dan  bakteri
A
B
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
http://www.journal.umuslim.ac.id/index.php/jipsbp
pathogen.  Informasi  mengenai  tingkat  infeksi patogen  mengindikasikan  perlunya  upaya  untuk memperhatikan kondisi kualitas air kolam budidaya seperti  suhu  dan  oksigen  terlarut  ( Rahman  & Handayani,  2022;  Tuwitri et  al.,  2021 ).  Ektoparasit dan  bakteri  patogen  dapat  berkembang  ketika kualitas  air  di  bawah  optimum,  serta  terjadi akumulasi kotoran dan sisa pakan ( Sari et al., 2019 ). Pemantauan organisme patogen pada ikan budidaya perlu  dilakukan  secara  rutin  dan  terus  menerus ( Alimuddin et al., 2022 ).
Trichodina  sp.  dan  Monogenea  adalah  dua  jenis parasit  yang  menginfeksi  ikan  nilem  budidaya  di semua  lokasi  sampling  dalam  penelitian  ini.  Kedua jenis  ektoparasit  ini  juga  ditemukan  menginfeksi ikan  nilem  yang  dibudidayakan  di  Danau  Buyan, Buleleng, Bali ( Sitompul et al., 2019 ). Trichodina sp. dan Dactylogyrus  juga  menginfeksi  ikan  nilem budidaya  di  daerah  Sukabumi,  Jawa  Barat  ( Fira et al., 2021 ).  Penelitian  ( Riwidiharso et al., 2019 )  juga menemukan  bahwa Trichodina  sp.  menginfeksi bagian permukaan tubuh dan insang ikan nilem yang dibudidayakan  di  kolam  milik  BBI  Kutasari  di Kabupaten  Purbalingga. Trichodina  sp.  memiliki adhesive disc yang berfungsi untuk menempel pada tubuh  ikan  yang  menjadi  inangnya  ( Yuliani et  al., 2023 ).  Parasit  ini  juga  dilengkapi  dengan  silia  di seluruh  permukaan  tubuh  dan  gigi  di  dalam  untuk menyerang  jaringan  epitel  inang  ( Fira et  al.,  2021 ). Selain Trichodina sp., Dactylogyrus adalah salah satu jenis Monogenea yang juga banyak menginfeksi dan berkembang pada insang.  Keberadaan Trichodina sp. selalu  diikuti  dengan  adanya Dactylogyrus  ( Fira et al., 2021 ).
Jenis  ektoparasit  pada  ikan  nilem  dalam  penelitian ini  dengan  kriteria  tingkat  infeksi  parah  yaitu Trichodina  sp.  dan  Monogenea.  Kedua  jenis ektoparasit ini juga memiliki pola sebaran yang mirip berdasarkan matriks similaritas.  Tingginya tingkat infeksi Trichodina  sp.  dalam  penelitian  ini  sama seperti  pada  ikan  nilem  yang  dibudidayakan  di Sukabumi,  Jawa  Barat,  yaitu  86,67%  dengan intensitas 7,69 ind/ikan ( Fira et al., 2021 ). Hasil yang berbeda diperoleh dari pengamatan pada ikan Nilem di  Bali  yaitu  prevalensi  berkisar  4,29-7,14% ( Sitompul et  al.,  2019 ).  Untuk Monogenea,  tingkat infeksi  pada  penelitian  ini  lebih  tinggi  yaitu prevalensi  berkisar  70-100%  dibandingkan  hasil penelitian pada ikan nilem di Sukabumi yaitu 6,67% ( Fira et al., 2021 ) dan Bali yaitu 4,29-8,57% ( Sitompul et al., 2019 ).
Keempat  lokasi  sampling  memiliki  nilai  similaritas yang  cukup  tinggi  sekitar  75%  berdasarkan prevalensi.  Hasil  ini  menunjukkan  ikan  nilem  dari keempat  lokasi  memiliki  nilai  tingkat  serangan ektoparasit yang  mirip.  Similaritas yang tinggi ini dipengaruhi  oleh  prevalensi Trichodina  sp.  dan Monogenea jauh melebihi prevalensi jenis ektoparasit lain. Selain itu, jenis parasit yang ditemukan dalam penelitian  ini  adalah  jenis  yang  umum  ditemukan pada kegiatan budidaya ikan air tawar ( Adamimawar et al., 2019; Fira et al., 2021; Ghassani et al., 2016; Hernawati,  2015;  Mulyana  &  Mumpuni,  2015; Riwidiharso et  al.,  2019;  Sitompul  et  al.,  2019; Ulkhaq, 2019 ). Faktor lain yang mempengaruhi hasil ini  adalah  letak,  kualitas  air,  dan  ukuran  ikan. Keempat  lokasi  sampling  berada  di  Kabupaten Banyumas  dan  memiliki  jarak  antara  lokasi  yang tidak terlalu jauh yaitu sekitar 2-11 km. Kualitas air pemeliharaan dan praktik budidaya ikan nilem yang diterapkan juga relatif sama.  Selain itu, ukuran ikan nilem  yang  dibudidayakan  juga  pada  kisaran  yang seragam yaitu berat 40-60 g dan panjang 11-15 cm.
Pada  penelitian  ini,  jumlah  jenis  ektoparasit  pada ikan  nilem  yang  dibudidayakan  oleh  instansi pemerintah  yaitu  BBI  Singasari  (2  jenis)  jauh  lebih sedikit dibandingkan dari ikan yang dibudidayakan oleh pembudidaya umum di Desa Pabuaran (5 jenis), Desa Beji (5 jenis), dan Desa Jipang (4 jenis). Selain itu, jenis ektoparasit yang berbahaya juga ditemukan pada  ikan  nilem  di  pembudidaya  umum  yaitu Ichthyophthirius multifiliis. Infeksi parasit ini dapat mematikan  benih  ikan  hingga  90%  ( Affandi et  al., 2019 ).  Hasil  ini  mengindikasikan  bahwa  kualitas pemeliharaan ikan nilem di BBI Singasari lebih baik daripada  kualitas  pemeliharaan  di  pembudidaya umum.  Keberadaan  parasit  dan  kemampuannya menginfeksi  ikan  akan  meningkat  ketika  kualitas pemeliharaan  menurun  ( Fitriani et  al.,  2019; Haribowo et al., 2019; Tuwitri et al., 2021; Yuliani et al.,  2023;  Yulianti  et  al.,  2019 ).  Hanya  saja  dalam penelitian  ini,  perbedaan  kualitas  pemeliharaan antara instansi pemerintah dan pembudidaya umum belum dikaji lebih lanjut.
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan Aeromonas hydrophila  kompleks  dapat  menjadi  ancaman  pada budidaya  ikan  nilem  di  Kabupaten  Banyumas khususnya  di  BBI  Singasari  dan  Desa  Beji. Kelompok  bakteri Aeromonas  kompleks  umum ditemukan menginfeksi ikan budidaya air tawar dan terdiri  atas A.  hydrophila, A.  caviae,  dan  A.  veronii ( Fernández-Bravo & Figueras, 2020; Janda & Abbott,
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
2010;  Pardamean et  al.,  2021;  Sinubu  et  al.,  2022; Mulyana et  al.,  2018 ).  Upaya  yang  bisa  dilakukan untuk mencegah terjadinya penyakit pada ikan yang disebabkan  oleh  bakteri  patogen A.  hydrophila kompleks  adalah  dengan  menjaga  kualitas  air pemeliharaan.    Monitoring  kualitas  air  dan  padat tebar yang optimal adalah beberapa faktor yang perlu diperhatikan  untuk  mencegah  timbulnya  penyakit ( Sinubu et al., 2022 ).
Dalam  penelitian  ini,  identifikasi  bakteri  patogen dilakukan secara molekuler berdasarkan sekuen gen 16S  rDNA.    Tiga  ekor  ikan  dalam  penelitian  ini terinfeksi dua grup isolat yang teridentifikasi sebagai bagian dari Aeromonas hydrophila kompleks. Hal ini ditunjukkan  dengan  hasil  analisis  BLAST  dan analisis  Filogenetik.    Metode  identifikasi  bakteri menggunakan  analisis  BLAST  dan  analisis Filogenetik  sudah  umum  dilakukan.    Selain  dalam penelitian  ini,  metode  ini  telah  banyak    digunakan untuk mengidentifikasi Aeromonas hydrophila pada ikan,  seperti Oreochromis  niloticus  ( Abdel-Latif  & Khafaga,  2020 ), Cyprinus  carpio  dan  Oncorhynchus mykiss ( Orozova et al., 2018 ), Myxocyprinus asiatus ( Li et  al.,  2019 ),  dan Mugil  cephalus  ( El-Son et  al., 2021 ).  Metode  ini  masih  sulit  dilakukan  untuk mengidentifikasi  jenis  ektoparasit  yang  ditemukan dalam penelitian ini.  Penerapan metode identifikasi secara  molekuler  untuk  protozoa  dan monogenea memerlukan  sampel  spesies  tunggal  atau  primer spesifik ( Lablack et al., 2022; Wang et al., 2022 ).
Hasil  penelitian  ini    menunjukkan  bahwa  perlu dilakukan  upaya  untuk  mengendalikan  ektoparasit dan Aeromonas hydrophila kompleks pada budidaya ikan  di  Kabupaten  Banyumas,  khususnya  budidaya ikan  nilem.  Penggunaan  garam  menjadi  salah  satu cara yang mudah dan murah untuk mengendalikan ektoparasit  secara  umum  khususnya  dari  golongan protozoa  dan Monogenea  yang  ditemukan  dalam penelitian ini ( Salsabila Putri et al., 2021; Tarmizi et al.,  2016 ).  Pengendalian  infeksi  akibat  bakteri pathogen pada ikan dilakukan dengan cara vaksinasi ( Sugiani  et  al.,  2013 ),  pemberian  imunostimulan ( Abdel-tawwab et  al.,  2008;  Barman  &  Nen,  2013; Maryani  &  Rosdiana,  2020;  Muahiddah  & Diamahesa,  2022;  Nafiqoh et  al.,  2021;  Song  et  al., 2014; Talpur et al., 2013; Yogeshwari et al., 2015 ) dan menjaga kualitas air pemeliharaan pada kondisi yang baik agar ikan tidak stres ( Barreto et al., 2022 ).

## KESIMPULAN
Sebanyak enam jenis ektoparasit berhasil diidentifikasi  dari  ikan  nilem  budidaya  yaitu Trichodina  sp.,  Monogenean,  Ichthyopthtirius multifiliis, Epistylis sp., Oodinium sp. dan Argulus sp. Trichodina  sp.  dan  Monogenean  ditemukan menginfeksi  ikan  nilem  yang  dibudidayakan  di Kabupaten Banyumas dan termasuk dalam kriteria infeksi parah. Tiga individu dari total 118 ikan nilem yang  diteliti  terinfeksi  bakteri  yang  termasuk Aeromonas  hydrophila  kompleks,  yaitu  sampel  dari BBI  Singasari  dan  Desa  Beji.  Marka  molekuler diperlukan  untuk  membedakan  antar  anggota Aeromonas hydrophila kompleks tersebut.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami  berterima  kasih  untuk  bantuan  teknis  dari Mochammad  Agung  Septian,  Reksi  Nur  Lintang Sakti, Tesya Lintang Cahya Gemilang, BBI Singasari dan FPIK Unsoed.  Penelitian ini didanai dari hibah BLU  skim  Riset  Peningkatan  Kompetensi  LPPM Unsoed  berdasarkan  SK  No:  Kept./121/UN23.18 /PT.01.05/2020  dan  perjanjian  Kontrak  No: T/605/UN23.18/PT.01.03/2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Latif, H. M. R., & Khafaga, A. F. (2020). Natural Co- infection  of  Cultured  Nile  Tilapia Oreochromis niloticus  with  Aeromonas  hydrophila  and Gyrodactylus  cichlidarum  Experiencing  High Mortality  During  Summer. Aquaculture  Research, 51(5), 1880–1892. doi: 10.1111/are.14538 Abdel-tawwab, M., Abdel-rahman, A. M., & Ismael, N. E. M. (2008).  Evaluation  of  Commercial  Live  Bakers  ’ Yeast , Saccharomyces cerevisiae As A Growth and Immunity  Promoter  for  Fry  Nile  Tilapia  , Oreochromis niloticus ( L .) Challenged In Situ With Aeromonas hydrophila. Aquaculture. 280, 185–189. doi: 10.1016/j.aquaculture.2008.03.055
Adamimawar,  C.  N.  I.,  Setiawan,  F.  B.,  &  Yosinta  Sri Prananti.  (2019).  Identifikasi  Ektoparasit  Ikan  Di Sungai  Elo  Magelang,  Jawa  Tengah. Prosiding Seminar Nasional MIPA 2019, 186. Affandi, S., Risamasu, F. J. L., & Jasmanindar, Y. (2019). Studi  Prevalensi  dan  Intensitas  Ektoparasit  Pada Beberapa Jenis Ikan Air Tawar di Balai Benih Ikan Sentral  (  BBIS  )  Noekele  ,  Nusa  Tenggara  Timur. Jurnal Aquatik, 2(2), 81–88.
Alimuddin, A., Yusuf, A., & Nursidi, M. (2022). Identifikasi Ektoparasit Pada Ikan Nila ( Oreochromis niloticus) di  Kolam  Pembesaran  Ikan  Air  Tawar  Politani Pangkep. Multifunctional  Agriculture  for  Food, Renewable  Energy,  Water,  and  Air  Security, 3(September), 130–137.
Altschul, S. F., Gish, W., Miller, W., Myers, E. W., & Lipman, D.  J.  (1990).  Basic  Local  Alignment  Search  Tool.
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
Journal  of  Molecular  Biology,  215(3),  403–410. doi: 10.1016/S0022-2836(05)80360-2
Arief, H., Rosidah, R., Subhan, U., & Suryadi, I. B. . (2018). Hematology  Parameters  of  Nilem  Padjadjaran Strain  ( Osteochilus  sp.)  Infected  by  Aeromonas hydrophila. Global Scientific Journal, 6(7), 322–329.
Barman,  D.,  &  Nen,  P.  (2013).  Immunostimulants  for Aquaculture Health Management. Journal of Marine Science:  Research  &  Development,  03(03). doi: 10.4172/2155-9910.1000134
Barreto, M. O., Rey Planellas, S., Yang, Y., Phillips, C., & Descovich,  K.  (2022).  Emerging  Indicators  of  Fish Welfare  In  Aquaculture. Reviews  in  Aquaculture, 14(1), 343–361. doi: 10.1111/raq.12601
Blessing, J. J., Marshall, J. C., & Balcombe, S. R. (2010).
Humane Killing of Fishes for Scientific Research: A Comparison of Two Methods. Journal of Fish Biology, 76(10), 2571–2577. doi: 10.1111/j.1095- 8649.2010.02633.x Dereeper, A., Guignon, V., Blanc, G., Audic, S., Buffet, S., Chevenet, F., Dufayard, J.-F., Guindon, S., Lefort, V., Lescot,  M.,  Claverie,  J.-M.,  &  Gascuel,  O.  (2008). Phylogeny.fr:  Robust  Phylogenetic Analysis  for  The Non-Specialist. Nucleic  Acids  Research,  36(Web Server issue), W465--9. doi: 10.1093/nar/gkn180 El-Son,  M.  A.  M.,  Nofal,  M.  I.,  &  Abdel-Latif,  H.  M.  R. (2021).  Co-infection  of Aeromonas  hydrophila  and Vibrio  parahaemolyticus  Isolated  From  Diseased Farmed Striped Mullet ( Mugil cephalus) in Manzala,
Egypt  –  A  Case  Report. Aquaculture,  530,  735738. doi: 10.1016/j.aquaculture.2020.735738 Fernández-Bravo, A., & Figueras, M. J. (2020). An Update On The Genus Aeromonas: Taxonomy, Epidemiology, and Pathogenicity. In Microorganisms (Vol. 8, Issue 1). doi: 10.3390/microorganisms8010129 Fira,  D.,  Wiradana,  P.  A.,  Ansori,  A.  N.,  Susilo,  R.  J.,  & Sabdoningrum, E. K. (2021). Ectoparasite Inventorisation of Nilem Fish ( Osteochilus hasselti) Fingerlings  Cultured  on  Ponds  in  Sukabumi,  West Java,  Indonesia. Iraqi  Journal  of  Veterinary Sciences, 35(3), 605–609. doi: 10.33899/ijvs.2020.127031.1440 Fitriani,  E.  N.,  Rozi,  Arief,  M.,  &  Suprapto,  H.  (2019). Prevalence and Intensity of Ectoparasites in Gabus
Fish  ( Channa  striata)  at  Cangkringan  Fishery Cultivation  Technology  Development  Center,
Sleman,  Yogyakarta. IOP  Conference  Series:  Earth and Environmental Science, 236(1). doi:
10.1088/1755-1315/236/1/012095
Ghassani,  S.,  Hidayati,  D.,  &  Abdulgani,  N.  (2016). Prevalensi  dan  Intensitas  Endoparasit  pada  Ikan Gabus  ( Channa  striata)  dari  Budidaya  dan  Alam. Jurnal  Sains  Dan  Seni,  5(2),  2337–3520. doi: 10.12962/j23373520.v5i2.20683
Hakim,  L.  N.,  Irawan,  H.,  &  Wulandari,  R.  (2019). Identifikasi  Intensitas  dan  Prevalensi  Endoparasit pada  Ikan  Bawal  Bintang Trachinotus  blochii  di Lokasi  Budidaya  Kota  Tanjungpinang. Intek Akuakultur, 3(1), 45–55. doi: 10.31629/intek.v3i1.1005 Handayani,  L.  (2020).  Identifikasi  dan  Prevalensi Ektoparasit pada Ikan Nila ( Oreochromis niloticus) yang  Dipelihara  di  Keramba  Jaring  Apung. Jurnal Ilmu Hewani Tropika, 9(1), 35–42.
Haribowo,  D.  R.,  Annisa,  S.,  Kholidah,  N.,  Izza,  N.  D., Zahrah,  P.  A.,  Pamungkas,  A.  P.,  Ramadhan,  F.,
Rijaluddin,  A.  F.,  &  Assuyuti,  Y.  M.  (2019).  Kimia Fisik Perairan dan Ektoparasit Ikan Nila dan Patin. Marine  And  Aquatic  Sciences,  5(2),  203–210. doi: 10.24843/jmas.2019.v05.i02.p06
Hernawati, R. D. (2015). Inventarisasi Patogen Pada Ikan Botia  ( Chromobotia  macracanthus  Bleeker)  di Stasiun Karantina Ikan Kelas I Supadio , Pontianak. Jurnal Sain Veteriner, 33(1), 103–109.
Janda, J. M., & Abbott, S. L. (2010). The Genus Aeromonas: Taxonomy,  Pathogenicity,  and  Infection. Clinical Microbiology Reviews, 23(1), 35–73. doi: 10.1128/CMR.00039-09
Jasmanindar,  Y.  (2011).  Prevalensi  Parasit  Dan  Penyakit Ikan  Air  Tawar  Yang  Dibudidayakan  Di  Kota/ Kabupaten  Kupang. Jurnal  Ilmu-Ilmu  Hayati  Dan Fisik, 13(1), 25–30. Kabata, Z. (1985). Parasites and Disease of Fish Cultured in The Tropic. Pacific. Biological Station.
Lablack,  L.,  Rima,  M.,  Georgieva,  S.,  Marzoug,  D.,  &
Kostadinova,  A.  (2022).  Novel  Molecular  Data  for Monogenean  Parasites  of  Sparid  Fishes  in  the Mediterranean  and  A  Molecular  Phylogeny  of  The Microcotylidae Taschenberg, 1879. Current Research in  Parasitology  and  Vector-Borne  Diseases, 2(November 2021), 100069. doi: 10.1016/j.crpvbd.2021.100069 Li,  F.,  Wu,  D.,  Gu,  H.-R.,  Yin,  M.,  Ge,  H.-L.,  Liu,  X.-H., Huang,  J.,  Zhang,  Y.-G.,  &  Wang,  Z.-J.  (2019).
Aeromonas hydrophila and Aeromonas veronii Cause Motile  Aeromonas  Septicaemia  In  The  Cultured Chinese sucker, Myxocyprinus asiatus. Aquaculture Research, 50(5), 1515–1526. doi: 10.1111/are.14028 Manurung,  U.  N.,  &  Susantie,  D.  (2017).  Identifikasi Bakteri  Patogen  Pada  Ikan  Nila  ( Oreochromis niloticus)  di  Lokasi  Budidaya  Ikan  Air  Tawar Kabupaten Kepulauan Sangihe. E-Journal Budidaya Perairan, 5(3), 186–193. doi: 10.35800/bdp.5.3.2017.17609
Marchesi, J. R., Sato, T., Weightman, A. J., Martin, T. A., Fry, J. C., Hiom, S. J., & Wade, W. G. (1998). Design and  Evaluation  of  Useful  Bacterium-Specific  PCR Primers that Amplify Genes Coding for Bacterial 16S rRNA. Applied  and  Environmental  Microbiology,
64(2), 795–799. doi:.1128/aem.64.2.795-799.1998 Maryani,  M.,  &  Rosdiana,  R.  (2020).  Peranan Imunostimulan  Akar  Kuning Arcangelisia  flava Merr  Pada  Gambaran  Aktivasi  Sistem  Imun  Ikan Mas  ( Cyprinus carpio L). Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia, 8(1), 22–36. doi: 10.36706/jari.v8i1.10328 Maulana,  D.  M.,  Muchlisin,  Z.  A.,  &  Sugito,  S.  (2017).
Intensitas dan Prevalensi Parasit Pada Ikan Betok ( Anabas testudineus) dari Perairan Umum Daratan Aceh  Bagian  Utara. Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa Kelautan Dan Perikanan Unsyiah, 2(1), 1–11.
Muahiddah,  N.,  &  Diamahesa,  W.  A.  (2022).  Pengaruh Imunostimulan dari Bahan-Bahan Alami pada Ikan dalam  Meningkatkan  Imun  Non-Spesifik  untuk Melawan Penyakit (Review). Jurnal Ilmu Perikanan Air Tawar (Clarias), 3(2), 37–44. doi: 10.56869/clarias.v3i2.397
Mulyana,  &  Mumpuni,  F.  (2015).  Ektoparasit  pada  Benih Ikan  Nilem. Jurnal  Pertanian,  6(2),  83–87. doi: 10.30997/jp.v6i2.541
Mulyana, M., Sukandar, A. F., & Mumpuni, F. . (2018). The Blood  Picture  of  Hard-Lipped  Barb  ( Osteochilus hasselti CV) That Infected By Aeromonas hydrophila
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
Bacteria. Jurnal  Pertanian,  9(2),  78–85. doi:
10.30997/jp.v9i2.1479 Nafiqoh,  N.,  Andriyanto,  S.,  Novita,  H.,  Sugiani,  D.,  &
Taukhid,  T.  (2021).  Kombinasi  Sirih  dan  Kipahit sebagai Imunostimulan Terhadap Penyakit Streptococcosis  Pada  Ikan  Nila  ( Oreochromis niloticus).  Jurnal  Riset  Akuakultur,  16(1),  39. doi: 10.15578/jra.16.1.2021.39-47
Nurbaiti,  I.,  &  Herlina,  S.  (2022).  Deteksi  Keberadaan Parasit  Pada  Ikan  Papuyu  ( Anabas  testudineus) yang  Dipelihara  di  Hapa  Pada  Kolam  Ekstensif. Jurnal Penelitian Balida Indonesia, 2(1), 21–30.
Nurhafid,  M.,  Syakuri,  H.,  Oedjijono,  O.,  Listiowati,  E., Ekasanti, A., Nugrayani, D., & Pramono, H. (2021). Isolasi  dan  Identifikasi  Molekuler  Bakteri Proteolitik  dari  Saluran  Pencernaan  Ikan  Nila ( Oreochromis  niloticus)  yang  Dibudidayakan  di Kabupaten Banyumas. Jurnal Perikanan Universitas  Gadjah  Mada,  23(2),  95. doi: 10.22146/jfs.64072
Orozova, P., Sirakov, I., Austin, D. A., & Austin, B. (2018).
Recovery  of Bacillus  mycoides,  B.  pseudomycoides and Aeromonas  hydrophila  from  Common  Carp
( Cyprinus carpio) and Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss) with Gill Disease. Journal of Fish Diseases, 41(1), 125–129. doi: 10.1111/jfd.12686
Panangala,  V.  S.,  Shoemaker,  C.  A.,  Van  Santen,  V.  L.,
Dybvig, K., & Klesius, P. H. (2007). Multiplex-PCR for  Simultaneous  Detection  of  3  Bacterial  Fish Pathogens, Flavobacterium columnare, Edwardsiella  ictaluri,  and  Aeromonas  hydrophila. Diseases of Aquatic Organisms, 74(3), 199–208. doi: 10.3354/dao074199
Pardamean,  E.  S.,  Syawal,  H.,  &  Riauwaty,  M.  (2021). Identifikasi  Bakteri  Patogen  pada  Ikan  Mas ( Cyprinus  carpio)  yang  Dipelihara  dalam  Keramba Jaring  Apung. Jurnal  Perikanan  Dan  Kelautan, 26(1), 26–32. Rahayuningsih,  S.  R.,  Patimah,  S.  S.,  Mayanti,  T.,  & Rustama,  M.  M.  (2023).  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  n  -Heksana  Daun  Mangrove (Rhizospora stylosa Griff) Terhadap Bakteri Patogen Pada Ikan Nila (Oreochromis  niloticus).  Journal  of  Marine Research. 12(1), 1–6. doi: 10.14710/jmr.v12i1.35657 Rahman,  M.  G.,  &  Handayani,  L.  (2022).  Studi  Kasus : Identifikasi Ektoparasit Pada Ikan Nila ( Oreochromis  niloticus  )  yang  Dipelihara  Pada Keramba  Jaring  Apung. e-Journal  Budidaya Perairan, 10(2), 157–165. doi: 10.35800/bdp.10.2.2022.37623 Rasmi, K. A., Ayu, A., Dewi, Y., Putu, N., & Artini, R. (2020). Identifikasi Parasit Pada Ikan Mujair ( Oreochromis mossambicus) di Daerah Taman Pancing Denpasar Selatan. Bali International Scientific Forum (BISF), 1(1), 12–17. Riwidiharso, E., Alfarisi, B., & Rokhmani. (2019). Morfologi dan  Intensitas Trichodina  spp.  Pada  Benih  Ikan Nilem ( Osteochilus hasselti) Milik Balai Benih Ikan Kutasari  Purbalingga,  Jawa  Tengah. Prosiding Seminar  Nasional  Masyarakat  Biodiv  Indonesia, 5(2), 316–323. doi: 10.13057/psnmbi/m050231
Salsabila  Putri,  A.,  Sasmita,  R.,  &  Rahmawati,  I.  (2021).
Ikan  Hias  Gunung  Sari  Surabaya. Jurnal  Vitek Bidang  Kedokteran  Hewan,  11(2),  20–25. doi: 10.30742/jv.v11i2.80
Sari, A. I., Idris, M., & Nur, I. (2019). Inventarisasi Parasit
Ikan Nila ( Oreochromis niloticus) yang Hidup pada Kolam  Bekas  Galian  Penambangan  Emas  Rakyat Desa  Watu-watu  Kecamatan  Lantari  Jaya Kabupaten  Bombana. Media  Akuatika,  4(3),  118– 124.
Sinubu,  W.,  Tumbol,  R.,  Undap,  S.,  Manoppo,  H.,  & Kreckhoff, R. . (2022). Identifikasi Bakteri Patogen Aeromonas  sp.  pada  Ikan  Nila  (Oreochromis niloticus) di Desa Matungkas, Kecamatan Dimembe, Kabupaten  Minahasa  Utara. Budidaya  Perairan, 10(2), 109–120. doi: 10.14341/conf05-08.09.22-191 Sitompul,  R.,  Suryani,  S.  A.  M.  P.,  &  Arya,  I.  W.  (2019). Kesehatan  Ikan,  Identifikasi,  dan  Analisis Prevalensi Parasit Ikan di Danau Buyan, Buleleng Bali. Gema  Agro,  24(2005),  120–128. doi:
10.22225/ga.24.2.1709.120~128 Song, S. K., Beck, B. R., Kim, D., Park, J., Kim, J., Kim, H. D., & Ringo, E. (2014). Prebiotics as Immunostimulants in Aquaculture: A Review. Fish & Shellfish Immunology, 40(1), 40–48. doi: 10.1016/j.fsi.2014.06.016 Sugiani,  D.,  Sukenda,  S.,  Harris,  E.,  &  Lusiastuti,  A.  M. (2013).  Vaksinasi  Ikan  Tilapia  ( Oreochromis niloticus)  Menggunakan  Vaksin  Monovalen  dan Bivalen  Untuk  Pencegahan  Penyakit Motile Aeromonas  Septicemia  dan  Streptococcosis.  Jurnal Riset Akuakultur, 8(2), 230. doi: 10.15578/jra.8.2.2013.230-239 Talpur,  A.  D.,  Ikhwanuddin,  M.,  &  Ambok  Bolong,  A.-M. (2013).  Nutritional  Effects  of  Ginger  ( Zingiber officinale Roscoe) on Immune Response of Asian Sea Bass, Lates calcarifer (Bloch) and Disease Resistance Against Vibrio  harveyi.  Aquaculture,  400–401,  46– 52. doi: 10.1016/j.aquaculture.2013.02.043
Tarmizi,  T.,  Karina,  S.,  &  Aliza,  D.  (2016).  Pengendalian Infestasi  Ektoparasit Dactylogyrus  sp.  Pada  Benih Ikan  Patin  ( Pangasius  sp.)  Dengan  Penambahan Garam  Dapur. Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa  Kelautan Perikanan Unsyiah, 1(2).
Tiwari,  R.,  Hoondal,  G.,  &  Tewari,  R.  (2009). Laboratory Techniques  in  Microbiology  and  Biotechnology.
Chandigarh (India). : Abhishek. Tóth, E. M. et al. (2013). Practical Microbiology: Based on The Hungarian Practical Notes Entitled "Mikrobiológiai Laboratóriumi Gyakorlatok ‟ . Eötvös Loránd University, Hungary. In Practical Microbiology.
Tuwitri,  R.,  Irwanto,  R.,  &  Kurniawan,  A.  (2021). Identifikasi Parasit Pada Ikan Lele ( Clarias sp.) di Kolam  Budidaya  Ikan  Kabupaten  Bangka. Jurnal Teknologi Perikanan Dan Kelautan, 11(2), 189–198. doi: 10.24319/jtpk.11.189-198
Ulkhaq,  M.  F.  (2019).  Penggunaan  Bubuk  Abate  Untuk Menurunkan Derajat Infestasi dan Merusak Organ Parasit  Argulus  yang  Menginfestasi  Ikan  Mas ( Cyprinus carpio). Journal of Aquaculture and Fish Health, 8(1), 15. doi: 10.20473/jafh.v8i1.11751 Wang, Z., Liu, M., Ma, H., Lu, B., Shen, Z., Mu, C., Alfarraj, S.  A.,  El-Serehy,  H.  A.,  &  Warren,  A.  (2022). Redescription  and  Molecular  Characterization  of Two  Trichodina  Species  (Ciliophora,  Peritrichia, Mobilida)  from  Freshwater  Fish  in  China. Parasitology  International,  86,  102470. doi: 10.1016/j.parint.2021.102470
Yogeshwari, G., Jagruthi, C., Anbazahan, S. M., Mari, L. S. S., Selvanathan, J., Arockiaraj, J., Dhayanithi, N. B.,
Ekasanti et al. (2023)|Arwana ú Jurnal Ilmiah Program Studi Perairan ú 5(1), 22-32
Ajithkumar, T. T., Balasundaram, C., & Ramasamy, H. (2015). Herbal Supplementation Diet on Immune
Response  in Labeo  rohita  Against  Aphanomyces invadans.  Aquaculture,  437,  351–359. doi: 10.1016/j.aquaculture.2014.12.024
Yuliani, I., Pratiwi, R. H., & Yulistiana, Y. (2023). Analisis Tingkat  Serangan  Parasit  Pada  Ikan  Nila ( Oreochromis  niloticus  )  dan  Ikan  Lele  (Clarias gariepinus  )  di  Balai  Benih  Ikan  (  BBI  )  Ciganjur.
Biota: Jurnal Ilmiah Ilmu-Ilmu Hayati, 8(1), 68–80. doi: 10.24002/biota.v8i1.5502
Yulianti,  I.  E.,  Restu,  I.  W.,  Hermawati,  A.,  &  Sari,  W. (2019).  Prevalensi  dan  Intensitas  Ektoparasit  Ikan Bawal  Air  Tawar  ( Colossoma  macropomum  )  pada Usaha Perikanan Rakyat ( UPR ) di Desa Sepanjang, Kecamatan Glenmore, Banyuwangi. Current Trends in Aquatic Science, 2(1), 85–92.