http://jurnal.utu.ac.id/
P-ISSN: 2579-4752, E-ISSN: 2620-7397
1 Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar Korespondensi: Jurusan  Akuakultur,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Universitas  Teuku  Umar,
Kampus UTU Meulaboh, Alue Peunyareng 23615, Telp: +62 8116800980, email: yusranibrahim@utu.ac.id
OPTIMALISASI KONSENTRASI HORMON 17α -METILTESTOSTERON TERHADAP PERUBAHAN NISBAH KELAMIN JANTAN IKAN LELE
SANGKURIANG (Clarias sp.)
OPTIMAL CONCENTRATION DOSE OF HORMONE 17α -Metiltestosterone TO MASKULINIZATION MALE CATFISH (Clarias sp)
Yusran Ibrahim 1*) , Uswatun Hasanah 1) , Erlita 2)
1 Jurusan Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat
2 Sekolah Menengah Kejuruan Negeri 1 Meureubo, Kabupaten Aceh Barat *Korespondensi: yusranibrahim@utu.ac.id

## ABSTRAK
Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui dosis hormon 17α -metiltestoteron yang optimal untuk pembentukan kelamin jantan ikan lele sangkuriang (Clarias sp). Metode penelitian eksperimental menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 3 ulangan. Pada benih lele sangkuriang yang berumur 20 hari direndam dengan hormon 17α -metiltestoteron dengan dosis 0, 4, 6  dan  8  mg/l  air  selama  8  jam.  Wadah  penelitian  adalah  stoples  dengan volume  15  liter  air sebanyak 12 unit yang dilengkapi dengan heater dan aerasi. Jumlah benih yang direndam sebanyak 30  ekor  per  perlakuan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  P3  (dosis  8  mg/l)  mendapatkan persentase  jantan  tertinggi  yaitu  sebesar  71,11%  dan uji  statistik  menunjukkan  perbedaan  yang nyata (F hitung > F tabel  0,05 ), kelangsungan hidup tertinggi pada P0 (kontrol) yaitu sebesar 82,22%, uji statistik  menunnjukkan  perbedaan  yang  sangat  nyata  (F hitung >  F tabel  0,01 )  dan  pertumbuhan  bobot harian tertinggi pada P0 (kontrol) yaitu sebesar 1,928%, uji statistik juga menunjukkan perbedaan yang nyata (F hitung > F tabel 0,05 ).
Kata kunci: Sex reversal, 17α -metiltestosteron, Clarias sp.

## ABSTRACT
This study  aimed  to  determine  optimal dose  of  hormone 17α -metiltestoteron  for the formation of male  sex  of  catfish  sangkuriang  (Clarias  sp).  Experimental  research  method  using  Completely Randomized Design (CRD) with 4 treatments and 3 replications. In 20 days old sangkuriang catfish seeds were soaked with the hormone 17 α -metiltestoteron with doses 0, 4, 6 and 8 mg/L of water for 8  hours.  The  research  container  is  a  jar  with  15  liters  of  water  volume, 12  units  equipped  with heater and aeration. The number of seeds soaked as many as 30 individu for treatment. The results showed that P3 (dose 8 mg/L) obtained the highest percentage of males (71.11%) and the statistical test showed a significant difference (Fcount> Ftabel 0.05), highest survival on P0 (control) of 82, 22%, the statistical test showed a very significant difference (Fcount> 0.01) and the highest daily weight  gain  in  P0  (control)  was  1.928%,  the  statistical  test  also  showed  significant  difference (Fcount> Ftable 0.05).
Keywords: Sex reversal, 17α -Methyltestosterone, Clarias sp.

## PENDAHULUAN
Lele sangkuriang merupakan  hasil silang balik induk betina lele dumbo generasi kedua  (F2)  dengan  induk  jantan  lele  dumbo generasi keenam (F6). Kehadiran lele sangkuriang  sangat  menguntungkan  karena memiliki  fekunditas  dan  laju  pertumbuhan yang tinggi.
Secara  alami  rasio sex  betina  lebih tinggi berbanding jantan, dilain pihak ketersediaan  induk  jantan  sangat  diperlukan dalam  pemijahan  buatan  ikan  lele,  karena diperlukan  induk  jantan  harus  dikorbankan untuk mendapatkan sperma, hal ini disebabkan karena golongan lele-lele (Catfish) pengeluaran spermamya tidak dapat dilakukan secara  pengerutan  perut (Stripping).  Oleh karena itu, diperlukan  suatu  metode  untuk menghasilkan  ikan  lele  jantan  yang  lebih banyak  sebagai  donor  dalam  pemijahan buatan.
Sex reversal merupakan cara pembalikan  arah  perkembangan  kelamin  ikan yang  seharusnya  berkelamin betina diarahkan perkembangan  gonadnya  menjadi jantan atau sebaliknya.  Teknik  ini  dilakukan  pada  saat belum  terdiferensiasinya  gonad  ikan  secara jelas  antara  jantan  dan  betina  pada  waktu menetas.  Sex  reversal  merubah  fenotip ikan tetapi tidak merubah genotipnya.
Sex  reversal  dapat  dilakukan  melalui terapi  hormon  (cara  langsung)  dan  melalui rekayasa  kromosom  (cara  tidak  langsung). Pada  terapi  langsung  hormon  androgen  dan estrogen  mempengaruhi  fenotif  tetapi  tidak mempengaruhi  genotif.  Metode  langsung dapat  diterapkan  pada  semua  jenis  ikan apapun  sex kromosomnya.  Cara  langsung dapat  meminimalkan  jumlah  kematian  ikan. Kelemahan dari cara ini adalah hasilnya tidak bisa  seragam  dikarenakan  perbandingan alamiah kelamin yang tidak selalu sama.
Hormon metiltestosteron (MT) adalah satu  hormon  yang  dapat  diaplikasikan  untuk menghasilkan  benih  ikan  berkelamin  jantan. Steroid  seks  yang  berfungsi  mengubah  jenis kelamin  adalah  androgen  (testosterone  dan
metiltestosteron)  yang  memberikan  efek maskulinitas,  estrogen  (estron  dan  estrodiol) yang memberikan pengaruh feminitas.
Androgen  dihasilkan  oleh  testis,  korteks adrenal  dan  ovari.  Hormon  androgen  sintesis memiliki efektifitas lebih tinggi berbandingkan  hormon  androgen  yang  alami kecuali hormon testosteron propionate. Hal ini terjadi  karena  hormon  17α -metiltestosteron dapat  bereaksi  lebih  lama  pada  target  sel dibanding  dengan  androgen  alami  dan metiltestosteron  dieliminasi  lebih  lambat daripada  testoteron  (Piferrer  dan  Donaldson, 1992).
Dalam  teknik  sex  reversal,  hormon dapat  diberikan  melalui  dua  cara  yaitu perendaman  dan  melalui  pakan  buatan  (oral). Pemberian  melalui  oral  memiliki  kelemahan yaitu  keterbatasan  benih  ikan  yang  dapat menerima  pakan  buatan  dan  pemberian hormon  melalui  oral  maka  pakan  akan melewati  saluran  pencernaan  sehingga  ada kemungkinan  terjadi  degradasi  hormon  oleh enzim  pencernaan  sehingga  hormon  menjadi rusak sebelum bekerja (Zairin, 2002).
Benih  yang  baru  menetas  umumnya berukuran  kecil  dan  kurang  menyukai  pakan buatan.  Metode  perendaman  adalah  metode alternatif  untuk  mengatasi  kelemahan  yang terdapat pada pemberian hormon melalui oral. Dengan  metode  perendaman,  diharapkan hormon  akan  masuk kedalam  tubuh  ikan melalui  proses  difusi  (Zairin,  2002).  Metode ini  sudah  digunakan  pada  beberapa  spesies ikan air tawar seperti ikan nila, ikan mas, ikan gurami  (Zairin et  al,  2002).  Ikan  tetra  kongo (Arfah et  al,  2002),  ikan  pelangi  Irian (Haryani dan Sulawesty, 2003).
Namun peredaran beberapa jenis hormon  mulai  dibatasi  karena  bersifat karsinogenik dan limbahnya berpotensi menimbulkan polusi pada lingkungan.
Penelitian  ini belum  pernah dilakukan pada lele  sangkuriang,  tetapi  mengingat  pada proses  pemijahan  buatan  membutuhkan  stok induk jantan yang banyak maka penelitian ini penting untuk dilakukan.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini dilaksanakan  pada  bulan Juli hingga  Agustus 2013 bertempat  di Laboratorium Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan Universitas Teuku Umar Meulaboh.

## Prosedur Penelitian
Populasi dan teknik pengambilan sampel Hewan  yang  diuji  adalah  benih  ikan lele  sangkuriang,  selanjutnya  diambil  secara acak  dalam  bak pemeliharaan  dan  jumlah masing-masing  media  perendaman  adalah 30 ekor.
Ikan  sampel  adalah  benih ikan  lele sangkuriang  yang  berumur  23 hari,  jumlah sampel  per  media  perendaman  sebanyak 30 ekor  ikan  lele  sangkuriang  dan  total keseluruhannya adalah 360 ekor untuk semua wadah penelitian.
Proses pengambilan sampel hewan uji adalah  dengan cara  penggambilan  dalam  bak secara  acak  dan  diberok  terlebih  dahulu. Selanjutnya hewan uji diaklimatisasi ditempat penelitian  sebelum  digunakan  untuk  proses perendaman dengan hormon.

## Persiapan Wadah
Wadah  perendaman  digunakan  adalah stoples plastik volume  15 liter  sebanyak 12 buah,  dan  digunakan  wadah  pemeliharaan adalah stoples dengan ukuran volume 15 liter sebanyak 12 buah.  Semua  wadah  penelitian sebelum  digunakan  telebih  dahulu  disuci hamakan  dengan  cara  dicuci dan dijemur dibawah sinar matahari selama 24 jam.
Wadah untuk  perendaman diisi air sebanyak  masing-masing  1 liter,  sedangkan wadah  pemeliharaan  diisi  air  sebanyak  10 liter.  Semua  wadah  yang  telah  berisi  air dilengkapi  dengan  aerasi  untuk  mensuplai oksigen di dalam  air dan  heater  untuk menjaga agar suhu tetap stabil.
Air  yang  digunakan  untuk  perendaman hormon  dan  pemeliharaan  benih  adalah  air tawar  yang  telah diendapkan  selama  48  jam, kemudian dimasukkan kedalam media percobaan tersebut.
Persiapan Larutan Hormon Serbuk  hormon 17  - metiltestosteron ditimbang  dengan  masing-masing 4, 6 dan 8 mg dengan  menggunakan  timbangan  analitik, lalu  dilarutkan  kedalam  0,5  ml  alkohol  70%. Kemudian dimasukkan kedalam media perendaman  yang  telah  diisi  air  bersih  1  liter sehingga  dihasilkan  konsentrasi  masing- masing sebagai  berikut:  P0:  0  ppm  (kontrol), P1: 4 ppm, P2: 6 ppm dan P3: 8 ppm.
Proses Perendaman
Setelah  diaklimatisasi,  masing-masing sebanyak 30 ekor  benih  diambil  secara  acak dan ditimbang beratnya.
Selanjutnya dimasukkan  dalam  larutan  hormon  sesuai dengan  perlakuan,  benih  dibiarkan  selama 8 jam.
Proses Pemeliharaan
Setelah direndam sesuai dengan perlakuan,  benih  dikeluarkan  dari  larutan  dan selanjutnya dimasukkan dalam wadah pemeliharaan dan dipelihara selama 3 minggu atau  sampai  kelaminnya bisa  dilihat.  Selama pemeliharaan  diberi  makan pakan merk CP 901.  Pakan  diberi secara  adlibitum dengan frekuensi  pemberian  2x  sehari  pada  pukul 08.00 WIB dan 17.00 WIIB.

## Parameter Uji
Parameter yang diukur adalah persentase  kelamin  jantan, kelangsungan hidup,  dan  laju  pertumbuhan  bobot  harian. Identifikasi  jenis  kelamin  dilakukan  dengan pengamatan  morfologi  yaitu  dindentifikasi langsung  jenis  kelamin  pada  ikan  lele sangkuriang.  Ikan  lele  sangkuriang  pada jantan dapat dibedakan dari alat kelamin yang menonjol  dan  panjang  yang  terletak  dibagian anus.  Jika papilla  genital belum  terlihat  jelas maka  dilakukan  pembedahan  untuk  melihat keberadaan  gonad,  ovari (betina)  atau  testis (jantan).
Untuk mendapatkan data kelangsungan hidup ikan, maka dihitung ikan saat awal  penelitian  dan  ikan  yang  masih hidup pada akhir penelitian. Untuk
pertumbuhan dihitung  berat  ikan  masing- masing  perlakuan  dengan  cara  menimbang setiap ikan pada media pemeliharaan.
Parameter yang diukur dalam penelitian ini  adalah  persentase  ikan  kelamin  jantan, dengan menggunakan rumus:
Tingkat kelangsungan hidup:
Laju pertumbuhan harian:
Penghitungan laju pertumbuhan bobot harian  menggunakan  rumus  Busacker et  al. (1990):
α = [ (lnWt - lnWo)/t) ] x 100%
Keterangan: α : Laju pertumbuhan harian (%)
W 0 : Bobot rata-rata ikan pada saat awal (gr)
Wt : Bobot rata-rata ikan pada saat akhir (gr) t : Lama pemeliharaan (hari)

## Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan
rancangan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL), masing-masing dengan empat taraf perlakuan, yaitu Perlakuan (Faktor perbedaan konsenterasi  hormon): 0,  4, 6  dan 8 mg/l. Setiap  perlakuan  dilakukan tiga kali  ulangan, sehingga dihasilkan 12 unit percobaan.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  adalah  data persentase  jumlah  ikan  jantan, tingkat kelangsungan  hidup, laju  pertumbuhan  bobot harian  ikan  dan  data  pengukuran  kualitas  air. Data  yang  diperoleh  selanjutnya  dianalisis ragam  dengan  menggunakan  Analysis  Of Varience (ANOVA) untuk mengetahui pengaruh  perlakuan  yang  diberikan  terhadap persentase  jumlah  ikan  jantan,  tingkat kelangsungan  hidup, laju  pertumbuhan  bobot harian. Data-data  tersebut  disajikan  dalam bentuk  grafik dan  tabel.  Jika  dari  analisis
ragam diketahui bahwa perlakuan menunjukkan  pengaruh  yang  berbeda  nyata atau  berbeda  sangat  nyata  maka  untuk menentukan perbedaan antar perlakuan dilanjutkan  dengan  Uji  Beda  Nyata  Terkecil (BNT) (Rochiman, 1989).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Persentase Kelamin Jantan
Perendaman  dengan  hormon  17α - metiltestosteron  berpengaruh  nyata  terhadap persentase jumlah ikan jantan yang dihasilkan.  Hal  ini  dilihat  dari  hasil  uji statistik yang menunjukkan bahwa pada taraf kepercayaan  95%  (F tabel 0,05)  lebih  kecil daripada  F hitung ,  sehingga  harus  dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil dengan hasil P3  berbeda  sangat  nyata  dengan  P2,  P1  dan P0.
Perlakuan terbaik untuk menghasilkan tingkat persentase jantan yang tinggi yaitu P3 dengan  dosis  8  mg  mendapatkan  rata-rata 71,11%,  diikuti  P2  dengan  dosis  6  mg  yang mendapatkan rata-rata 62,22% selanjutnya P1 dengan  dosis 4  mg  yaitu  51,11%  dan  tanpa perlakuan (kontrol) sebesar 40%.
Uji  BNT  menunjukkan  bahwa  antar perlakuan  terdapat  perbedaan  nyata  dan perbedaan  yang  sangat  nyata.  P0  (kontrol) berbeda  nyata  terhadap  P2  dengan  selisih 22,22,  P0  berbeda  sangat  nyata  terhadap  P3 dengan  selisih  31,11  dan  P1  yang  berbeda nyara terhadap P3 dengan selisih 20.
Tingkat keberhasilan  teknik alih kelamin akan sangat  ditentukan oleh jumlah hormon yang diberikan, lama waktu perlakuan, dan frekuensi perlakuan baik melalui pemberian hormon melalui pakan maupun  dengan teknik  perendaman  (Piferrer,
2001; Devlin dan Nagahama, 2002).
Secara genetik dalam keadaan normal ikan akan menghasilkan  keturunan  dengan rasio seks jantan dan betina 50% : 50% (Tave, 1993; Pandian  1999).  Rasio  seks  tersebut dapat  diarahkan  menjadi mayoritas  jantan maupun betina sesuai  kepentingan    dengan teknik alih  kelamin  (Tave, 1993; Bearmore
100% x penelitian awal ikan jumlah penelitian akhir hidup yang ikan jumlah (%) SR 
100% x sampel jumlah jantan ikan jumlah (%)
J 
et    al., 2000; Preferrer,  2001; Zairin, 2003; Desprez et al., 2003). Persentase  ikan  jantan yang  lebih tinggi merupakan indikator
keberhasilan dari teknik maskulinisasi pada ikan nila (Zairin, 2003).
Berdasarkan hasil  penelitian  Rubianti (2006)  persentase  jantan  tertinggi  ikan  Nila diperoleh  pada  dosis  6  mg  yaitu  sebesar 90,35%. Arafah (2005) mengatakan pada ikan Guppy  perangsangan  diferensiasi  kelamin embrio  dari  betina  menjadi  jantan  paling efektif dilakukan dengan perendaman hormon 17a-Metiltestosteron    sebanyak  1  mg/L  pada temperatur  27ºC. Maskulinisasi  ikan  tidak harus menggunakan hormon
17α - metiltestosteron,  beberapa bahan lainnya juga bisa  digunakan.  Ekstrak  tepung  testis  sapi juga bisa digunakan dalam maskulinisasi ikan.
Irmasari
(2012) mengatakan bahwa
perendaman  dengan  menggunakan  tepung testis  sapi  menghasilkan  ikan  nila  merah berkelamin  jantan  sebesar  69,07%.  Bahan selanjutnya  adalah  madu  yang  juga  dapat berperan dalam proses maskulinisasi ikan.
Syarifuddin  (2004)  telah  berhasil menghasilkan benih ikan nila GIFT
(Oreochromis  niloticus)  monosex  jantan sebesar  93,33%  dengan  memberikan  dosis madu 200 ml/kg pakan. Sedangkan Soelistiyowati et. al. (2007) telah mengarahkan  kelamin  jantan  pada anak  ikan gapi  yang  dihasilkan  sampai  59,5%  dengan peningkatan  dosis  madu  sampai  60  ml/l  yang diberikan  melalui  perendaman  induk  selama 10 jam. Selanjutnya Safrizal (2011)
mengatakan  bahwa  jantanisasi  ikan  juga  bisa menggunakan ekstrak Purwoceng (Pimpinella alpina),  persentase  jantan  ikan  nila  yang dihasilkan adalah sebesar 73,3% dengan dosis 20 ml/l dan lama perendaman 8 jam.
Gambar  1.  Persentase  rata-rata  jenis  kelamin  benih  lele  sangkuriang (Clarias  sp) dengan  perendaman hormon 17α -metiltestosteron pada konsenterasi yang berbeda.

## Tingkat Kelangsungan Hidup
Perendaman  dengan  hormon  17α - metiltestosteron  berpengaruh  sangat  nyata terhadap  kelangsungan hidup  benih  lele sangkuriang,  hal  ini  dilihat  dari  hasil  uji statistik  yang  menunjukkan  bahwa  pada  taraf kepercayaan  99%  (F tabel 0,01)  lebih  kecil daripada F hitung .
Berdasarkan Gambar 2 dapat  kita lihat  bahwa  kelangsungan  hidup  tertinggi terdapat  pada  P0  (kontrol)  yaitu  86,67%, selanjutnya berturut-turut P1 53,33%, P2 50% dan  P3  46,67%.  Rubianti  (2006)  mengatakan bahwa  daya  tahan  hidup  tertinggi  benih  ikan gurame  terdapat  pada  perlakuan  kontrol  yaitu sebesar 41%.
Uji  BNT  menunjukkan  bahwa  antar perlakuan  terdapat  perbedaan  nyata  dan perbedaan  yang  sangat  nyata.  P3  berbeda sangat nyata terhadap P0 dengan selisih 33,33, P2  berbeda  sangat  nyata  dengan  P0  dengan selisih  28,89  dan  P1  yang  berbeda  nyara dengan P0 dengan selisih 17,78.
Kematian  benih  ikan  sebagian  besar terjadi  pada  saat  perendaman,  benih  ikan  lele sangkuriang diduga tidak dapat menyesuaikan diri  dengan  larutan  hormon,  sehingga  banyak benih  yang  tidak  dapat  bertahan  dan  mati. Semakin  besar  dosis  hormon  yang  diberikan maka tingkat kematiannya semakin tinggi, hal ini dapat kita lihat pada P1 (4 mg) dengan
angka  bertahan  hidup  sebesar  53,33%,  P2  (6 mg) memproleh angka sebesar 50% dan P3 (8 mg) yang bertahan hidup hanya 46,67%.

## Laju Pertumbuhan Bobot Harian
Bobot  ikan  bertambah  pada  semua perlakuan  jika  dibandingkan  dengan  berat awal.  Tingginya  pertumbuhan  pada  P0 (kontrol)  daripada  P1,  P2  dan  P3  diduga karena ikan mengalami stres pada saat
perendaman  dan mengkibatkan  ikan  kurang nafsu  makan.  Selain  itu,  media  penelitian stoples  yang  sempit  juga  menjadi  salah  satu faktor yang mempengaruhi pertumbuhan.
Uji  BNT  menunjukkan  bahwa  antar perlakuan  terdapat  perbedaan  nyata  dan perbedaan  yang  sangat  nyata.  P3  berbeda nyata  terhadap  P0  dengan  selisih  0,706,  P2 berbeda  sangat  nyata  dengan  P0  dengan selisih 1,062 dan begitu juga dengan P2 yang berbeda  sangat  nyara  dengan  P0  dengan selisih 1,064.

## KESIMPULAN
Pengarahan kelamin benih ikan lele sangkuriang  (Clarias  sp) dengan  perendaman menggunakan  hormon  17α -metiltestosteron memberikan  pengaruh  yang  nyata  terhadap perubahan  kelamin  jantan  benih  ikan  lele sangkuriang.  Hasil  terbaik  diperoleh  pada  P3 (8  mg/liter)  dengan  persentase  jantan  sebesar 71,11%.

## Gambar 2. Persentase rata-rata kelangsungan hidup benih lele sangkuriang (Clarias sp)

## DAFTAR PUSTAKA
Andre, H. (2006). Upaya Maskulinisasi Induk Ikan Lele Dumbo Yang Telah Divarietomi  Paarsial  Dengan  Metode Implamantasi Hormone 17 α - Metiltestosteron. Program  Studi  Dan Teknologi Manajemen Akuakultur.
Fakultas  Perikanan  Dan  Ilmu  Kelautan Institute Pertanian Bogor.
Arafah.  H.  (2005). Efek  Manipulasi  Hormon 17a-Metiltestosteron  pada  Berbagai Variasi Temperatur Air terhadap Rasio Kelamin  Ikan  Gapi  (Poecilia  reticulata Peters). Jurnal  Akuakultur  Indonesia, 4(1) 37-40. Bogor
Arfah,  H  et  al.  (2002). Seks  Reversal Pada Ikan  Tetra  Kongo  Stadia  Benih. Jurnal Akuakultur Indonesia. 69-79
Darwisito,  S.  (2002). Stretegi  Reproduksi Pada  Ikan  Kerapu. http://www.  iptek. net.id/ind/warintek/Budidaya_perikana n_idx.php?doc=3a2. diakses pada tanggal 15 April 2005.
De Silva, S.S., and Anderson, A. (1995). Fish Nutrition  in  Aquaculture,  (The  First Series) Chapman  and  Hall.  London.
319 pp.
Hardinata,  F.  (2012). Pembenihan  Dan Perbaikan  Genetika  Iken  Lele  Dumbo (Clarias  garipinus)  Dengan  Metode Silang  Balik  (back  cross)  Menjadi  Lele Sangkuriang  (Clarias sp). Dibalai
Besar  pengembangan  Budidaya  Air Tawar  (BBPBAT)  Sukabumi  provinsi Jawa Barat.
Irmasari.  (2012). Pengaruh  Ekstrak  Tepung Testis  Sapi  dengan  Konsentrasi  yang Berbeda Terhadap Keberhasilan Maskulinisasi Ikan Nila Merah (Orechromis niloticus). Jurnal Perikanan dan Kelautan. Unpad Khairuman, dan Amri K., (2008). Pembenihan  dan  Pembesaran  Gurami Secara Intensif. PT. AgroMedia Pustaka. Jakarta. Lukito. (2002). Budidaya Ikan Lele Sangkuriang (Clarias, sp). Jakarta
Piferrer  F.  and  Donaldson,  EM.    (1990). Dosage-dependent  differensces  in  the effect of aromatizable and nonaromatizable andogens on resulting phenotype of coho salmon (Oncorhynchus kisuthch. Fish physiology and biochemistry` Prihartono, P.E., (2004). Permasalahan Gurami dan Solusinya. Penebar Swadaya. Jakarta Rindhira,H.  (2011). Pengaruh  Perendaman Dengan Hormon Metiltestosteron Pada Ikan Nila Dengan Umur Yang Berbeda. Prosiding  Seminar  hasil  Penelitian Budidaya Perairan. Universitas Almuslim Bireun Rubianti. (2006). Pengaruh Pemberian Hormon Metiltestosteron terhadap Deferensiasi  Kelamin  Benih  Ikan  Nila (Oreochromis  niloticus). Pasca  Sarjana Universitas Muhammadiyah Malang Santoso,  E.,  (2004). Pengaruh  Hormon Metiltestosteron Pada Perendaman Benih  Lau  Han  (Cichlasoma sp.) Dengan Dosis Yang Berbeda Terhadap Keberhasilan Pembentukan Jenis Kelamin  Jantan. Perikanan  Fakultas Peternakan-Perikanan Universitas Muhammadiyah Malang. Safrizal,  P.  (2011). Maskulinisasi  Ikan  Nila (Oreochromis niloticus) Melalui Perendaman Dalam Ekstrak Purwoceng (Pimpinella alpine). Sekolah  Pascasarjana  Intitute  Pertanian Bogor, Bogor Zairin,  M.Jr.  (2002). Sex  Reversal. Penebar Swadaya. Jakarta Zairin, M Jr, A.Yuniati, r.R.S.P.S. Sumantadinata.  K.  (2002). Pengaruh Lama Waktu Perendaman Induk Didalam  Larutan  Hormone 17 α - Metiltestosteron Terhadap Nisbah Kelamin  Anak  Ikan  Gapi. Jurnal Akuakultur Indonesia, 1 : 31-35.
Zairin, M. Jr dan Summantadinata. K. (1998).
Pengaruh  Dosis  Larutan  Hormon 17 α -Metiltestosteron  Padada  Perendaman Telur  fase  bintik  Mata  Terhadap
Nisbah  Kelamin  Ikan  Cupang  (Betta Splendens regan). Prosiding Simposium dan Kongres 111 Perhimpunan Ilmu Pemuliaan Indonesia
(PERIPI), Bandung. P:281-285.