## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI KITOSAN DARI CANGKANG KERANG BULU

## ( Anadara antiquata )
Isolation And Identification Of Chitosan From Seashell  (Anadara antiquata )
Penulis / Author (s) Dewi Rizki 1 1,2,3 Universitas Muslim Nusantara Al Washliyah, Medan Ridwanto 2* *e-mail korespondensi: rid.fillah66@gmail.com Zulmai Rani 3
DOI: https://doi.org/ 10.32382/mf.v19i2.174 ARTICLE INFO ABSTRACT Keywords: Chitosan is a polysaccharide formed via deacetylation of chitin. In general,  chitosan  is  made  from  waste  products  from  the  fishing industry, such as shrimp, crabs, shells of feather clams, snails, and so on. The chitosan comes from the head, skin, and carapace. The development of chitosan applications has great potential because the production of shrimp, crab, and feather clam shells continues to increase. Chitosan is a bioactive substance with use in the fishing industry.  This  research  aims  to  isolate  and  characterize  chitosan from  feather  clam  shells  (Anadara  antiquata)  to  convert  feather clam  shells  into  chitin  and  deacetylate  it  into  chitosan  then  to determine  the  functional  groups  and  characteristics  of  chitosan using  Fourier  infrared  (FTIR).  The  isolation  methods  used  were deproteination using 4% NaOH solvent, demineralization with a 1:5 ratio  of  2N  HCl  solvent,  depigmentation  with  a  1:10  ratio  of  4% NaOCl solvent and deacetylation with a 1:20 ratio of 50% NaOH solvent.  and  chitosan  characterization.  According  to  the  study's findings, the degree of deacetylation obtained in the form of a white powder was 75%, odorless fine powder. Chitosan dissolves in acetic acid,  according  to  the  solubility  test.  The  obtained  water  content was 3.81% and the ash content obtained was 0.7%. Feather clam shell  waste  is  declared  to  be  well  isolated  and  meets  the requirements by SNI with a degree of deacetylation value of 75%.
chitosan feather shells isolation FT-IR Kata Kunci Kitosan kerang bulu isolasi FTIR
Poltekkes Kemenkes
Makassar

## Media Farmasi
https://ojs3.poltekkes-mks.ac.id/index.php/medfar/

## Open access article

## ABSTRAK
Kitosan  merupakan  polisakarida  dari  deasetilasi  kitin;  biasanya dibuat  dari  limbah  produk  industri  perikanan  seperti  bekicot, kepiting, udang, bulu kerang, dan cangkang kerang. Kitosan berasal dari  kulit,  karapas,  dan  bagian  kepala.  Karena  produksi  udang, kepiting,  dan  cangkang  kerang  bulu  yang  terus  meningkat, pengembangan  aplikasi  kitosan  sangat  potensial.  Kitosan merupakan  bahan  bioaktif  memiliki  manfaat  untuk  industri perikanan.  Tujuan  studi  ini  adalah  untuk  mengidentifikasi, menggambarkan  kitosan  yang  ditemukan  dalam  cangkang  kerang bulu  ( Anadara  antiquata )  agar  merubah  cangkang  kerang  bulu menjadi  kitin  dan  di  deasetilasi  menjadi  kitosan  kemudian  untuk mengetahui  gugus  fungsi  dan  karakteristik  kitosan  menggunakan fourier  infrared  (FTIR).  Metode  isolasi  yang  dilakukan  yaitu deproteinasi  menggunakan  pelarut  NaOH  4%,  demineralisasi menggunakan  pelarut  HCl  2N  dengan  perbandingan  1:5, depigmentasi  menggunakan  pelarut  NaOCl  4%  (1:10),  deasetilasi dengan pelarut NaOH 50% (1:20) dan karakterisasi kitosan. Hasil penelitian  menunjukkan  derajat  deasetilasi  yang  di  peroleh  yaitu 75%  berbentuk  serbuk  halus  berwarna  putih  dan    tidak  berbau. Menurut uji kelarutan, kitosan larut dalam asam asetat. Kadar air yang diperoleh 3,81% dan kadar abu yang diperoleh 0,7%. Limbah cangkang kerang bulu dinyatakan terisolasi dengan baik dan telah memenuhi syarat sesuai dengan SNI dengan nilai derajat deasetilasi sebesar 75%.

## PENDAHULUAN
Kerang  bulu  dengan  nama  latin ( Anadara  antiquata )  merupakan  jenis  yang banyak di temukan di bagian Asia Tenggara dan Asia  Timur.  Kerang  bulu  ini  memiliki palupa- palupa yang terdapat di bagian mulut kerang dan memiliki bulu. Kerang ini hidup di perairan yang dangkal  dan  berpasir  ( Ariyanti  et  al.,  2020) . Cangkang  kerang  bulu  banyak  diperoleh  dari konsumsi  rumah.  Cangkang  kerang  bulu  ini biasanya  dibuang  begitu  saja  di  halaman belakang rumah warga terutama di daerah Pantai Cermin,  Kec.  Perbaungan,  Kab.  Serdang Bedagai.
Kerang  ini  banyak  dikonsumsi  oleh masyarakat, sehingga kulit kerang ini juga sangat banyak  dan  akhirnya  menjadi  limbah.  Apabila limbah  tidak  di  olah  dengan  baik  dan  dibuang terus-menerus  akan  merusak  keseimbangan lingkungan,  seperti  lingkungan  tidak  berfungsi semestinya jika di artikan tidak ada kesejahteraan dan keselamatan hayati ( Mardiana, 2021 ). Maka dari itu agar dapat menambah nilai ekonomis dari cangkang  kerang  bulu  dan  bermanfaat  bagi warga  sekitar  yaitu  dilakukan  dengan  cara mengisolasi  cangkang  kerang  bulu  menjadi kitosan  ( Yuza  et  al.,  2023 ).  Dimana  kitosan  ini memiliki  banyak  manfaat  seperti  pengawet makanan,  bahan  antibakteri  dalam  bentuk formulasi  membran  pembalut  luka,  sebagai pengisi  dalam  pembuatan  sabun  transparan  dan
memiliki  kemampuan  untuk  mempercepat penyembuhan  luka  karena  sifatnya  yang  dapat meningkatkan proliferasi fibroblast.
Kitosan  dapat  dibuat  secara  alami  dari cangkang hewan seperti udang, kepiting, bekicot, kerang,  atau  bahkan  beberapa  jamur (Ridwanto et  al.,  2023 ). Kitosan  merupakan    turunan  dari kitin yang dihasilkan melalui proses deasetilasi. Kitosan  juga  merupakan  polimer  alam  dengan jumlah  terbanyak  kedua  setelah  selulosa  yang mengulang unit kitin dan kitosan. (Nurhayati et al., 2022 ). Beberapa  penelitian  meneliti    kitosan dari cangkang kerang bulu ( Anadara antiquata ) mendapatkan  kadar  deasetilasi  yang  memenuhi syarat  SNI  menggunakan  proses  deproteinasi, demineralisasi,  depigmentasi,  dan  deasetilasi yaitu  peneliti (Sepvina  et  al.,  2022 ) menghasilkan kitosan dengan derajat deasetilasi sebesar  90%,  dan  peneliti (Baharuddin  & Isnaeni,  2020) menghasilkan  derajat  deasetilasi sebesar 81,06%.
Berdasarkan latar belakang di atas, peneliti ingin mengidentifikasi  dan  mengkarakterisasi  kitosan dari  cangkang  kerang  bulu  serta  menemukan gugus  fungsi  melalui  penggunaan  fourier infrared (FTIR).

## METODE Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  : beaker  glass ,  gelas  ukur,  batang  pengaduk,
timbangan  analitik  ( mettler  toledo ), magnetic stirrer , hot  plate  (termosentific),  oven (memmert), tanur (magma therm ), pH universal, cawan porselin ,  kertas  saring,  corong,  gunting, cawan krus , ayakan mesh 40, FTIR ( shimadzu ). Bahan Penelitian  ini  menggunakan  bahan- bahan  berikut  :  limbah  cangkang  kerang  bulu (Anadara  antiquata),  larutan  NaOH  (merck), NaOCl  4%  (merck)  ,  larutan  HCl  (smartlab)  , aquadest teknis.

## Pengolahan Sampel
Limbah cangkang kerang bulu diperoleh dari daerah Pantai Cermin, Kabupaten Serdang Bedagai. Bagian yang digunakan yaitu 5 kg  cangkang  kerang  bulu  kemudian  limbah dicuci  untuk  menghilangkan  zat  pengotor  dari cangkang  kerang.  Setelah  itu,  cangkang  kerang dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari  sampai kering.  Kemudian  sampel  dihaluskan  dengan mesin  penggiling  bumbu,  setelah  halus  lalu diayak dengan ayakan 40 mesh hingga memiliki tekstur seperti serbuk ( Rani et al., 2023 ). Proses Isolasi Kitosan Cangkang Kerang Bulu Deproteinasi
Untuk  deproteinasi,  4%  basa  NaOH ditambahkan  ke  dalam  beaker  1:10  (b/v). Dipanaskan 1 jam menggunakan stirer pada suhu 100°C,  lalu  didinginkan.  Setelah  itu,  serbuk cangkang  disaring  menggunakan  kertas  saring dan  dicampur  dengan  aquades.  Setelah  itu, dikeringkan selama empat jam dalam oven pada suhu  60°C.  Kotoran  yang  tersisa  setelah dikeringkan didinginkan dan ditimbang (Windari et al., 2019 ).

## Demineralisasi
Selama  satu  jam  pada  suhu  100°C, serbuk  cangkang  yang  telah  dideproteinasi direaksikan  dengan  HCl  2  N  1:5  (b/v).  Setelah itu,  kertas  saring  digunakan  untuk  menyaring serbuk  cangkang  dan  aquades  digunakan  untuk menjernihkannya.  Selama  4  jam,  padatan  yang dihasilkan  dikeringkan  dalam oven pada  suhu 40°C. Sisa ditimbang setelah kering (Windari et al., 2019 ).

## Depigmentasi
Dalam  gelas  beaker,  serbuk  cangkang yang  telah  didemineralisasi  direaksikan  dengan 4%  NaOCl  1:10  (b/v)  selama  1  jam  pada  suhu ruang.  Selanjutnya,  kertas  saring  digunakan untuk menyaring serbuk cangkang dan akuades digunakan  untuk  menjernihkannya.  Selama  4 jam, hasil padatan dikeringkan di oven pada suhu 60°C. Residu yang dikumpulkan didinginkan dan ditimbang ( Windari et al., 2019 ). Deasetilasi Kitin Menjadi Kitosan
Serbuk cangkang yang telah depigmentasi  direaksikan  dengan  50%  NaOH 1:20  (b/v)  selama  1  jam  pada  suhu  100°C. Setelah  itu  disaring  dan  dineutralkan  dengan akuades.  Selanjutnya,  padatan  yang  dihasilkan dikeringkan  dalam  oven  selama  80  menit  pada suhu 100°C hingga menjadi serbuk. Residu yang dikumpulkan  setelah  kering  didinginkan  dan ditimbang ( Windari et al., 2019 ). Karakterisasi Kitosan

## Organoleptis
Serbuk  yang  telah  melewati  proses demineralisasi,  deproteinasi,  depigmentasi    dan proses  deasetilasi  dilihat  teksturnya  dan warnanya  apakah  memenuhi  nilai  dari  standar internasional .
Rendemen
Persentase berat
kitosan yang dihasilkan  dibagi  dengan  berat  kitosan  yang diperoleh  dapat  digunakan  untuk  menghitung rendemen  transformasi  kitin  menjadi  kitosan ( Agustina et al., 2015 ).

## Kadar Air
Sebanyak 0,5 g kitosan dimasukkan ke dalam  cawan  porselen.  Setelah  itu,  kitosan disimpan selama 2 jam di oven pada suhu 105°C. Dimasukkan  dalam  desikator  selama  30  menit dan ditimbang ( Masindi & Herdyastuti, 2017 ).

## Kadar Abu
Sebanyak 0,5 g kitosan dimasukkan ke dalam  cawan  krus  yang  berat  kosongnya  telah diketahui. Kemudian kitosan dipijarkan di tanur pada  suhu  500°C  hingga  4  jam  sampai  benar- benar menjadi abu. Kitosan yang telah diabukan dimasukkan  ke  dalam  desikator  kemudian ditimbang beratnya ( Ridwanto et al., 2023 ).

## Kelarutan Kitosan
Kitosan  dapat  dilarutkan  dalam  asam asetat  dengan  konsentrasi  2%  sambil  diaduk sampai homogen (Agustina & Kurniasih, 2013 ).

## Derajat Deasetilasi
Kitosan  yang  telah  diperoleh  diuji dengan  spektroskopi  FTIR.  Peak  yang dihasilkannya dibandingkan dengan peak kitosan komersial.  Kemudian,  dengan  membandingkan absorbansi  gugus  amida  (1650-1500)  cm -1 (A1655)  dan  absorbansi  gugus  amina  (3750- 3000)  cm -1 (A3450),  derajat  deasetilisasi dihitung..  Persamaan  berikut  dapat  digunakan untuk menentukan tingkat deasetilasi kitosan: DD = 1- [ A1655 × 1 ]x 100 % 𝐴 3450 1,33 Keterangan : A 1655 =  Absorbansi  pada  panjang  gelombang
1655
A 3450 =  Absorbansi  pada  panjang  gelombang
3450
1,33 = Nilai dari A 1655 /A 3450 untuk kitosan yang
terdeasetilasi  sempurna (Andini  et  al.,
2021 ) Fourier Transforms Infrared (FTIR) Adanya bentuk kitin dan kitosan dapat dibuktikan  dengan  identifikasi  FT-IR  ( Fourier
Transform  Infra  Red ).  Hasil  isolasi  dapat dievaluasi  dengan  membuat  pallet  dengan  KBr dan kemudian melihat spektrum infra merahnya dengan FT-IR.

## HASIL Isolasi Kitin menjadi Kitosan
Hasil isolasi kitin menjadi kitosan dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Isolasi Kitosan
Hasil isolasi Kitosan Kerang Bulu Menggunakan FT-IR Hasil isolasi kitosan kerang bulu dengan analisis FT-IR dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1 . Spektrum Kitosan Kerang Bulu Perbandingan spektra inframerah kitosan  isolasi  dan  baku  menunjukkan  bahwa gugus fungsi tidak jauh berbeda dengan standar pada  masing-masing  bilangan  gelombang,
sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  senyawa yang  dihasilkan  dari  cangkang  kerang  bulu menghasilkan kitin dan kitosan yang memenuhi standar dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2 . Kitosan Baku dan Kitosan Isolasi
Jenis vibrasi Bilangan gelombang (cm⁻¹) Kitosan baku Kitosan isolasi baku ( Rani et al., 2023 ) Vibrasi pembengkokan O-H tumpang tindih vibrasi peregangan N-H 3421.72 3404.36 Vibrasi peregangan simetris C-H alifatik 2881.65 2970.38 Vibrasi peregangan C=O 1651.07 1788.01 Vibrasi peregangan C-H 1423.47 1479.40 Vibrasi peregangan C-O 1253.73 - Vibrasi peregangan simetris C-N 1145.72 - Vibrasi peregangan C-O-C 1068.56 1078.21 Vibrasi ulur β-1,4-glikosidik 898.83 867.97 Isolasi Kitosan Berat Sampel Penurunan Bobot Deproteinasi 90,26 gram 90,26 % Demineralisasi 35,47 gram 39,29 % Depigmentasi 32,49 gram 91,59 % Deasetilasi 27,93 gram 85,96 %

## Hasil Karakterisasi Kitosan
Hasil pengujian karakterisasi kitosan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3 . Hasil Karakterisasi Kitosan Isolasi dan Perbandingan dengan SNI Spesifikasi Hasil isolasi kerang bulu ( Anadara antiquata) Standar Nasional Indonesia (SNI) Organoleptis: -Warna - Tekstur -putih -serbuk halus - Coklat muda sampai putih - Serpihan dan serbuk halus Bau Tidak berbau Tidak berbau Kadar air 3,81% ≤ 12 % Kadar abu 0,7% ≤ 5 % Kelarutan kitosan dalam asam Larut Larut Derajat Deasetilasi 75% Minimal 75 %

## PEMBAHASAN
Cangkang  Kerang  Bulu  ( Anadara atiquata )  yang  diperoleh  dari  Daerah  Pantai Cermin, Kec. Perbaungan, Kab. Serdang Bedagai melalui proses pemurnian kitin ada 4 tahap yaitu deproteinasi  menggunakan  pelarut  NaOH  4%, demineralisasi  menggunakan  pelarut  HCl  2N, depigmentasi  menggunakan  pelarut  NaOCl  4% dan  mengubah  kitin  menjadi  kitosan  dengan menggunakan  pelarut  NaOH  sebesar  50%. Kerang  bulu  yang  dihasilkan  dari  proses pengayakan yaitu 100 g. Hasil dari deproteinasi menunjukkan  penurunan  bobot  sampel  dan  di dapatkan hasil akhir yaitu 90,26 g dan diperoleh rendemen sebesar 90,26%.
Kerang  bulu  dari  hasil  proses demineralisasi  diperoleh  berat  sampel  sebesar 35,47  g.  Hasil  dari  proses  demineralisasi menunjukkan  terjadinya  penurunan  bobot sampel sebesar 39,29% dari berat sampel setelah deproteinasi.  Hal  tersebut  menunjukkan  telah terjadinya  degradasi  kadar  mineral  yang terkandung dalam sampel.
Hasil  depigmentasi  kerang  bulu, terlepasnya  pigmen  warna,  ditandai  dengan warna serbuk cangkang kerang bulu berubah dari abu-abu  menjadi  putih.  Dari  hasil  proses depigmentasi  diperoleh  berat  sampel  sebesar 32,49  g  menunjukkan  terjadinya  penurunan bobot sampel sebesar 91,59 % dari berat sampel setelah demineralisasi.
Proses deasetilasi kitin menjadi kitosan diperoleh  berat  sampel  sebesar  27,93  g menunjukkan  terjadinya  penurunan  bobot  pada sampel sebesar 85,96 % dari berat sampel setelah proses depigmentasi. Untuk menentukan apakah kitosan yang diperoleh dari proses isolasi secara bertahap  selanjutnya  memenuhi  persyaratan yang  telah  ditetapkan,  hasil  kitosan  yang
diperoleh  dari  proses  isolasi  secara  bertahap selanjutnya  dikarakterisasi  dengan  beberapa spesifik. Karakteristik kitosan meliputi organoleptik (tekstur, warna, dan bau), rendemen kitin  menjadi  kitosan,  kadar  air,  kadar  abu, tingkat kelarutan, dan derajat deasetilasi. Uji Organoleptik Pada  fase  organoleptik  ini,  hasilnya adalah  kitosan  berwarna  putih,  yang  memenuhi SNI  dan  memiliki  warna  yang  baik  dari  putih keabu-abuan hingga putih. Tekstur kitosan juga seperti serpihan dan tidak berbau. Kitosan yang diisolasi memenuhi SNI.
Untuk
menghitung rendemen transformasi  kitin  menjadi  kitosan,  persentase berat kitosan yang dihasilkan dibagi dengan berat kitosan yang diperoleh. Rendemen transformasi kitosan menjadi kitosan adalah 86,04%.
SNI  Produk  Perikanan  menetapkan standar  mutu  kadar  air  kitosan  tidak  lebih  dari 12%.  Tabel  2  menunjukkan  hasil  karakterisasi kadar  air  kitosan  yang  diisolasi;  kadar  air  pada kitosan  cangkang  kerang  bulu  adalah  3,81%. Hasil ini menunjukkan bahwa kadar air kitosan hasil  isolasi  dapat  memenuhi  syarat  dan  tidak melebihi batas maksimum standar mutu kitosan. Kadar  air  kitosan  dipengaruhi  oleh  berbagai faktor,  termasuk  proses  pengeringan,  durasi pengeringan,  jumlah  sampel  yang  dikeringkan, dan luas permukaan tempat kitosan dikeringkan.
Hasil  karakterisasi  kadar  abu  kitosan yang diisolasi ditunjukkan dalam Tabel 2. Kadar abu  kitosan  yang  dihasilkan  dari  isolasi  tidak melebihi batas maksimum standar mutu kitosan, seperti yang ditunjukkan oleh tabel dengan kadar abu kerang bulu 0,7%, yang menunjukkan bahwa kadar  abu  kitosan  yang  dihasilkan  dari  isolasi memenuhi persyaratan dan tidak melebihi batas maksimum  yang  ditetapkan  oleh  SNI  produk
perikanan.
Salah  satu  parameter  penting  dalam menilai  kualitas  kitosan  adalah  kemampuan kitosan untuk larut dalam asam asetat 2%, seperti yang ditunjukkan oleh temuan penelitian ini. Ada ikatan  antara  gugus  karboksil  dan  gugus  amina kitosan yang memungkinkan kitosan larut dalam asam lemah ini. Selain itu, lama perendaman dan suhu  juga  memengaruhi  kelarutan  kitosan. Seiring  dengan  peningkatan  kelarutan  kitosan pada  asam  asetat  2%,  kualitas  kitosan  yang dihasilkan meningkat ( Dompeipen et al., 2016)
Derajat  deasetilasi  adalah  metrik  utama  yang digunakan  untuk  mengukur  tingkat  kemurnian kitosan.  Derajat  deasetilasi  menunjukkan seberapa  mudah  gugus  asetil  dapat  dihilangkan dari  kitin,  menghasilkan  kitosan.  Derajat deasetilasi  yang  tinggi  menunjukkan  bahwa gugus  asetil  yang  terkandung  dalam  kitosan rendah,  yang  berarti  proses  deasetilasi  kitin menjadi  kitosan  telah  berakhir.  Menurut  SNI Produk  Perikanan  (2018),  derajat  deasetilasi kitosan  kerang  bulu  dapat  mencapai  75%, menurut  tabel.  Ini  menunjukkan  bahwa  derajat deasetilasi  kitosan  cangkang  kerang  bulu  dapat mencapai 75%. Temuan ini menunjukkan bahwa derajat  deasetilasi  kitosan  dari  hasil  isolasi memenuhi persyaratan SNI.

## KESIMPULAN
Limbah cangkang kerang bulu dinyatakan  terisolasi  dengan  baik  dan    telah memenuhi  syarat  sesuai  dengan  SNI  yaitu  nilai derajat deasetilasinya 75%. Kadar air dan kadar abu yang didapatkan masing-masing 3,81% dan 0,7%,  dan  hasil  dari  menentukan  gugus  fungsi pada kitosan cangkang kerrang bulu menggunakan FTIR hasil yang didapatkan yaitu: gugus  O-H  tumpang  tindih  vibrasi  peregangan N-H  pada  rentang  3404.36,  gugua  C=O  pada rentang 1788.01. Diharapkan peneliti selanjutnya untuk melanjutkan penelitian ini dengan menguji aktivitas  antibakteri  kitosan  cangkang  kerang bulu dan melanjutkan dengan aplikasi membuat sediaan membran pembalut luka.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina, S., & Kurniasih, Y. (2013). Pembuatan kitosan  dari  cangkang  udang  dan aplikasinya  sebagai  adsorben  untuk menurunkan kadar logam Cu . Prosiding Seminar Nasional MIPA. Agustina, S., Swantara, I. M. D., & Suartha, I. N.
(2015). Isolasi kitin, karakterisasi, dan sintesis kitosan dari kulit udang . Jurnal Kimia, 9(2), 271–278.
Andini,  A.,  Prayekti,  E.,  Triasmoro,  F.,  &
Kamaliyah,  I.  N.  (2021). Pengaruh Penggunaan  Jenis  Pelarut  dalam  Uji Sitotoksistas  Metode  Brine  Shrimp Lethality  Test  (BSLT)  pada  Wound Dressing Kolagen-Kitosan . Al-Kimiya: Jurnal  Ilmu  Kimia  Dan  Terapan,  8(1),
15–20.
Ariyanti, A., Masruriati, E., Imadahidayah, T., & Sulistianingsih, E. N. (2020).
Pemanfaatan  kitosan  dari  cangkang kerang  bulu  (Anadara  antiquata) sebagai  pengawet  ikan  pari  (Dasyatis sp.)  dan  udang  vaname  (Litopenaeus vannamei) .  Riset  Informasi  Kesehatan, 9(1), 12–21.
Baharuddin, S., & Isnaeni, D. (2020). Isolasi dan uji  aktivitas  kitosan  cangkang  kerang bulu (Anadara inflata) sebagai antibakteri  terhadap  Staphylococcus epidermidis dan Escherichia coli . MPI (Media  Pharmaceutica  Indonesiana), 3(2), 60–69.
Dompeipen, E. J., Kaimudin, M., & Dewa, R. P. (2016). Isolasi  kitin  dan  kitosan  dari limbah  kulit  udang .  Majalah  Biam, 12(1), 32–39.
Mardiana, U. (2021). Isolasi Dan Karakterisasi Kitosan Pada Kerang Darah (Anadara granosa) .  Journal  of  BTH  Medical
Laboratory Technology, 1(1). Masindi,  T.,  &  Herdyastuti,  N.  (2017). Karakterisasi  Kitosan  dari  Cangkang Kerang Darah (Anadara Granosa)[Characterization  Chitosan from  the  Shells  of  Blood  Clams (Anadara  Granosa) ].  J.  Chem,  6(3), 137–142.
Nurhayati,  N.,  Ridwanto,  R.,  Daulay,  A.  S.,
Syahputra,  R.  A.,  &  Rani,  Z.  (2022). Utilization  Of  Chitosan  As  A  Natural Preservative Against Catfish . International  Journal  of  Science, Technology  &  Management,  3(5),
1396–1401.
Rani, Z., Nasution, H. M., Kaban, V. E., Nasri, N., & Karo, N. B. (2023). Antibacterial activity  of  freshwater  lobster  (Cherax quadricarinatus)  shell  chitosan  gel preparation  against  Escherichia  coli and  Staphylococcus  aureus .  Journal  of Applied Pharmaceutical Science, 13(2),
146–153.
Ridwanto,  R.,  Pratiwi,  A.,  &  Rani,  Z.  (2023). Isolation and Toxicity Test of Chitosan from  Green  Mussels  (Perna  viridis  L.) With  Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT)  Method .  Jurnal  Sains  Dan Kesehatan, 5(5), 759–765.
Sepvina, N. I., Ridwanto, R., & Rani, Z. (2022). Uji  Toksisitas  Kitosan  Cangkang Kerang  Bulu  (Anadara  antiquata) Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test  (BSLT) .  Jurnal  Ilmiah  Ibnu  Sina, 7(2), 380–389.
Windari, N. N. R., Fauziah, S. I., Juniar, A. E., & Purnomo,  T.  (2019). Biobakterisida Kitosan  Cangkang  Kerang  Darah sebagai Anti Bakteri Ralstonia solanacearum. Proceeding  Biology Education Conference: Biology, Science,  Enviromental,  and  Learning, 16(1), 280–284. Yuza,  M.,  Ridwanto,  R.,  &  Rani,  Z.  (2023). Determination  Of  Total  Flavonoid Content Of Yellow Wood (Arcangelisia Flava  (L.)  Merr)  Extract  And Antibacterial Activity Against Staphylococcus  aureus .  Journal  of Agromedicine  and  Medical  Sciences,
9(3), 140–145.
Open Access This article is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0  International  License,  which  permits  use,  sharing,  adaptation, distribution, and reproduction in any medium or format, as long as you give appropriate credit to the original author(s) and the source, provide a link
to the Creative Commons license, and indicate if changes were made. The images or other third-party material in this article are included in the article’s Creative Commons license unless indicated otherwise in a credit line to the material. If material is not included in the article’s Creative Commons license and your intended use is not permitted by statutory regulation or exceeds the permitted use, you will need to obtain permission directly from the copyright holder. To view a copy of this license, visit http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.