ejournal2.undip.ac.id/index.php/baf/index
Pertambahan Berat Badan Mencit ( Mus musculus L. ) Setelah Perlakuan Ekstrak Air Biji Pepaya ( Carica papaya Linn.) Secara Oral Selama 21 Hari
Weight Gain Mice ( Mus musculus L. ) after Treatment Water Seed Extract Papaya ( Carica papaya Linn . ) by Oral For 21 Days
Siti Muflichatun Mardiati*, Agung Janika Sitasiwi Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH, Tembalang, Telp/Fax (024) 76480923 Email: sm.mardiati@yahoo.com
Diterima 1 Juli 2016 / Disetujui 20 Agustus 2016

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  efek  ekstrak  air  biji  pepaya  terhadap  reproduksi  mencit  betina ditinjau dari aspek pertambahan berat badan. Mencit strain Swiss Webster betina digunakan sebagai hewan uji. Hewan uji dibagi dalam 5 kelompok perlakuan, yaitu K(-), bahan perlakuan berupa akuades; K(+), bahan perlakuan sediaan pil kontrasepsi merk X dengan dosis ; P1, bahan perlakuan ekstrak air biji pepaya dengan dosis 1,4 mg/ekor/hari; P2, bahan perlakuan ekstrak air biji pepaya dengan dosis 3,5 mg/ekor/hari; P3, bahan perlakuan ekstrak air biji pepaya dengan dosis 1,4 mg/ekor/hari. Masing-masing kelompok perlakuan diulang 7 kali. Biji pepaya diperoleh dari pohon pepaya lokal diJawa Tengah. Pemberian bahan perlakuan secara oral selama  21  hari  berturut-turut.Pemberian  pakan  dan  minum  dilakukan  secara ad  libitum .  Parameter  yang diamati  adalah  pertambahan  berat  badan,  konsumsi  pakan,  dan  konsumsi  minum.  Data  yang  diperoleh dianalisis dengan menggunakan analisis variansi dengan taraf kepercayaan 95% dan uji lanjut Duncan.Hasil penelitian  menunjukkan  tidak  terdapat  perbedaan  nyata  terhadap  pertambahan  berat  badan  (P>0,05) padasemua kelompok hewan, terdapat perbedaan nyata pada konsumsi pakan (P<0,05) antara K(+) dan P1dan terdapat  perbedaan  nyata  pada  konsumsi  minum  (P<0,05)  antara  P2  dengan  K(+)  dan  P1.  Kesimpulan penelitian adalah pemberian biji pepaya dengan paparan kronis tidak mempengaruhi pertambahan berat badan mencit.
Kata kunci : Mencit, biji pepaya, pertumbuhan, berat badan

## ABSTRACT
The aim of this experiment was to evaluate the effect of Carica papaya Linn aquoeus seeds extract on mice growth. Swiss Webster female mice ( Mus musculus L.) were used as animal model. The animal model were divided into five treatment groups. The K- group was treated by aquadest, K+ group was treated by hormonal contraceptives  pills,  C.  papaya  extract  dosage1.4  (P1),  3.5  (P2)  and  7  (P3)  mg/animal/day.  Each  treatment group were repeated 7 times. Treatment was given during 21 days orally. The parametres that were obtained are  body  weight,  feed  comsumption  and  drink  comsumption.This  experiment  showed  that  there  was  not significant difference on growth body weight (P>0,05) in all animal model groups but there were significant difference beetwen P2 and K(+)on feed comsumption (P<0,05) ; beetwen P2 and P1, P2 and K(+) on drink consumption (P<0,05). It concluded that the aquoeus extract of Carica papaya L. seeds in cronic dosage not influenced on mice growth.
Keywords: Mice,C. Papaya seed, growth, body weight

## PENDAHULUAN
Salah  satu  metode  pengaturan  fertilitas dalam  Program  Keluarga  Berencana  adalah pemakaian  sediaan  hormon.  Hasil  riset  beberapa
peneliti  menunjukkan  bahwa  metode  pengaturan fertilitas  secara  hormonal  menimbulkan  efek samping  yang  cukup  merugikan  kesehatan penggunanya.  Penggunaan  sediaan  hormon reproduksi menyebabkan efek samping
obesitas/kegemukan  (Lee,  et  al,  2009  ; Setyaningsih  dkk.,  2010;  Ratnawati  dkk.,  2011). Hasil  yang  berbeda  ditunjukkan  oleh  penelitian Hasan  dkk.  (2013)  yang  menyimpulkan  bahwa Tidak  terdapat  hubungan  antara  penggunaan kontrasepsi  hormonal  dengan  obesitas.  Hal  ini mungkin  karena  dipengaruhi  oleh  tingkat pendidikan yang cukup tinggi dan pekerjaan dalam hal ini sebagai ibu rumah tangga yang beraktivitas fisik cukup tinggi.
Kontrasepsi  steroid  yang  mengandung progestin  di  dalam  tubuh  dapatberpengaruh terhadap  metabolisme  nutrisi,  sedangkan  estrogen menyebabkandeposisi  dari  sejumlah  besar  lemak pada  jaringan  subkutan  dan  dapatmenyebabkan terjadinya  retensi  natrium  dan  air  oleh  tubulus ginjal,  efek  tersebutnormalnya  ringan  dan  jarang bermakna (Guyton, 2008). Kontrasepsi oralberpengaruh  terhadap  kebutuhan  vitamin  dan mineral  pada  wanita.  Pertambahanberat  badan disebabkan oleh hormon estrogen dan progesteron yang  ada  dalam  pildalam  penggunaan  jangka waktu tertentu. Progesteron juga dapat menyebabkanpertambahan berat  pada  penggunaan jangka panjang akibat terjadinyaperubahan anabolik  dan  stimulasi  nafsu  makan  (Ganong, 2003).
Kaur et  al .  (2011)  menyatakan  bahwa Organisasi Kesehatan Dunia(WHO) telah memulai program  untuk  mengembangkan  pengetahuan medis  tradisional.Penelitian  juga  dilakukan  untuk pengembangan  agensia  antifertilitas  herbal  yang secara  sosialdan  budaya  dapat  diterima,  memiliki kompatibilitas  yang  lebih  baik  dengan  manusia, efek  samping  yang  lebih  rendah  danlebih  efektif dari senyawa kimia (Bala et al ., 2014).
Pohon  pepaya  ( Carica  papaya Linn.),  di Indonesia  tersebar hampir pada  semua  kepulauan. Sebagian  penduduk  Indonesia  telah  terbiasa menggunakan  daun  papaya  sebagai  jamu tradisional  untuk  mengatasi  beberapa  masalah kesehatan, di antaranya sebagai bahan antifertilitas.  Efek  antifertilitas  ekstrak  tanaman telah  dibuktikan  oleh  Gupta et  al .  (1990),  Biji pepaya diduga bekerja dengan cara mempengaruhi sekresi hormon reproduksi (Udoh et al ., 2005).Raji et  al .  (2005)  menyatakan  bahwa  esktrak  biji
pepaya  mempengaruhi  sekresi  hormon  estrogen sehingga menyebabkan antifertilitas.
Studi  fitokimia  telah  menunjukkan C. papaya mengandung  alkaloid,  carpain,  nikotin, flavonol,  tanin,  dan  terpene  serta  enzim  seperti papain  dan  chymopapain  (Adeneye et  al. , 2009).Bahan  aktif  pepaya  yaitu  triterpenoid merupakan salah satu turunan steroid, bahan aktif steroid dan triterpenoid diduga sebagai bahan aktif yang  bekerja  sebagai  faktor  antifertilitas.  Kedua bahan aktif tersebut diduga mampu mengakibatkan gangguan  pada  jalur  hipotalamus  hipofise  yang selanjutnya  mengakibatkan  gangguan  sekresi GnRH yang kemudian akan berpengaruh terhadap pembentukan,  perkembangan  dan  pematangan folikel(Borrow et  al .,  2001  ;  Garor et  al., 2009).Naggayi et  al .  (2015)  menyatakan  bahwa senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak  air  biji pepaya  adalah  saponin,  tanin,  flavonol,  glikosida, terpeoid,  alkaloid,  pereduksi  gula,  asam  amino, lemak,  protein,  fenol,  vitamin,  sterol  dan triterpene.  Senyawa  golongan  saponin,  tanin, flavonoid,  terpenoid,  alkaloid,  sterol  serta triterpene dapat menekan tingkat fertilitas  dengan cara  mengganggu  fungsi  ovarium,  uterus  atau vagina (Setyowati dkk., 2015).
Penelitian  ini  merupakan  bagian  dari penelitian  tentangefek  biji  pepaya  terhadap fertilitas  mencit  betina.Pertambahan  berat  badan mencit  dalam  hal  ini  diamati  karena  hormon steroid  mempunyai  pengaruh  meningkatkan metabolisme tubuh.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  tentang  pengaruh  perlakuan ekstrak  air  biji  pepaya  dengan  dosis  kronis terhadap  pertumbuhan  mencit  ( Mus  musculus ) dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Struktur  dan Fungsi  Hewan,  Departemen  Biologi,  FSM- UNDIP.  Penelitian  dilakukan  dengan  Rancangan Acak Lengkap, 5 perlakuan dan 5 ulangan.Paparan hewan  uji  diberikan  selama  21  hari.  Kelompok perlakuan terdiri dari Kontrol Negatif (K-) berupa perlakuan  dengan  pelarut  bahan  uji  (air),  Kontrol Positif  (K+)  berupaperlakuan  dengan  sediaan kontrasepsi sintetis (pil kontrasepsi merk “X”), P1 adalah  kelompok  perlakuan  dengan  bahan  uji
Pertambahan Berat Badan Mencit (Mus musculus L.) Setelah Perlakuan Ekstrak Air Biji Pepaya (Carica papaya Linn.) Secara Oral Selama 21 Hari
konsentrasi  1.4  mg/ekor/hari,  P2  yaitu  kelompok perlakuan  dengan  bahan  uji  konsentrasi  3,5 mg/ekor/hari,  dan  P3  yaitu  kelompok  perlakuan dengan bahan uji konsentrasi 7 mg/ekor/hari.
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  mencit galur Swiss Webster betina berumur 2.5 – 3 bulan dengan  rataan  bobot  badan  25-30  gram,  tanpa cacat  anatomis,  diperoleh  dari  Laboratorium Pemeliharaan  Hewan  Jurusan  Biologi  FMIPA Universitas  Negeri  Semarang.  Hewan  uji dipelihara  dengan  kepadatan  3  ekor  hewan  per kandang,  setelah  diaklimasikan  dalam  kondisi laboratorium  selama  1  minggu.  Pemberian  pakan dan  minum  dilakukan  secara ad  libitum .  Pakan yang diberikan adalah pakan standard dengan kode 594.Pemeliharaan  hewan  uji  dilakukan  sesuai metode Sitasiwi dan Djaelani (2011).

## Persiapan Bahan Uji
Bahan  uji  yang  diberikan  adalah  serbuk biji  pepaya.  Serbuk  biji  pepaya  diperoleh  dari beberapa  pohon  pepaya  dengan  jenis  yang  sama, ditanam  di  daerah  Gedawang,  Banyumanik Semarang.  Ekstrak  biji C.  papaya yang  diperoleh dengan  cara  mencuci  biji  pepaya  dengan  air mengalir,  kemudian  dikeringkan  menggunakan oven  pada  suhu  40 o C  selama  10  hari.  Biji C. papaya yang  telah  kering,  dibuat  tepung  dengan cara  dihancurkan  dengan  blender,  kemudian diayak.  Tepung  biji C.  papaya disiapkan  sebagai bahan  uji  sesuai  dengan  dosis  yang  diberikan, dilarutkan  dengan  cara  melarutkan  tepung  biji pepaya  menggunakan  air  mendidih.  Pemberian bahan  uji  dilakukan  saat  air  seduhan  biji  pepaya telah mencapai suhu ruang.
Kelompok perlakuan kontrol positif diberi sediaan kontrasepsi sintetis berupa pil kontrasepsi merk  “X”  (mengandung ethinylestradiol 0.03  mg dan levonorgestrel 0.15  mg),  dengan  dosis  harian sesuai  dosis  harian  pada  manusia.  Pil  KB dihancurkan  menggunakan  grinder  dan  dilarutkan menggunakan air hangat.

## Perlakuan dan Pengambilan Data
Pemberian  bahan  perlakuan  diberikan secara  oral  menggunakan  jarum  “ gavage ”  dengan
volume  0,5  mL/hewan  uji,  pada  sore  hari  (15.00- 16.00  WIB),  selama  21  hari  berturut-turut. Pengukuran  berat  badan  mencit  dilakukan  setiap minggu  sekali.  Pengukuran  konsumsi  pakan  dan konsumsi minum dilakukan setiap hari.
Data konsumsi pakan dihitung dengan cara menimbang  pakan  yang  diberikan  dikurangi  sisa pakan    (g/hari).  Data  konsumsi  minum  dihitung dengan  cara  menakar  air  minum  yang  diberikan dikurangi sisa air minum (ml/hari).

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisa  dengan analisis  varian  (ANOVA).  Perbedaan  antar perlakuan diuji dengan DuncanTest .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Analysis  Of  Varians (ANOVA)  dan uji  lanjut  Duncan  pada  penelitian  mengenai  efek antifertilitas  biji  pepaya  pada  pertambahan  berat badan  menit  ditunjukkan  pada  tabel  1.  Tabel  1 menunjukkan  bahwa  pertambahan  berat  badan mencit  tidak  berbeda  nyata  antara    semua kelompok hewan uji. Hal ini menunjukkan bahwa perlakuan  pemberian  biji  pepaya  maupun  pil  KB dengan  dosis  kronis  pada  mencit  tidak menyebabkan  pertambahan  berat  badan.  Hal  ini sesuai dengan hasil penelitian Lohiya et.al. (2000) yang menyatakan bahwa pemberian ekstrak air biji pepaya  dengan  paparan  kronis  (35  hari)  tidak mempengaruhi  berat  badan  pada  kelinci  jantan. Penelitian  Siburian  dkk.  (2008)  menyatakan pemberian ekstrak biji pepaya dengan dosis 50, 75 dan  10  mg/kg  BB  pada  mencit  betina  selama  10 hari  pada  tahap  pracopulasi  tidak  berpengaruh nyata terhadap berat badan.
Pertambahan  berat  badan  pada  suatu individu dipengaruhi antara lain oleh faktor nutrisi. Nutrisi pada dasarnya adalah nutrien atau zat gizi yang  terdapat dalam  pakan  yang  masuk  ke  dalam tubuh individu sebagai konsumsi pakan.
Konsumsi  pakan  mencit  pada  penelitian ini (Tabel 1) tampak bahwa antara K(+), K(-), P2 dan  P3  tidak  berbeda  nyata.  Perbedaan  nyata hanya  terdapat  antara  P1  dengan  K(+).  Konsumsi pakan  P2  sebesar  4,23  g/ekor/hari  sedang  K(+)
sebesar 5,36 g/ekor/hari. Konsumsi pakan P1 lebih kecil  daripada  K(+).  Hal  ini  diduga  pengaruh senyawa  antifertilitas  dalam  biji  pepaya  pada  P1 (dosis  1,4  mg/ekor/hari)  terhadap  metabolisme nutrisi,  perubahan  anabolik  maupun  nafsu  makan
tidak  sekuat  yang  ditimbulkan  oleh  sediaan hormon  sintetik  pada  K(+).  Sesuai  dengan pernyataan Bala (2014) bahwa potensi kontrasepsi herbal lebih rendah dibandingkan kontrasepsi yang berasal dari obat sintetis
Tabel 1. Rerata Pertambahan Berat Badan, Konsumsi Pakan Harian dan Konsumsi Minum Harian Mencit Setelah Perlakuan Ekstrak Air Biji Pepaya Secara Oral Selama 21 Hari
K(-) K(+) P1 P2 P3 Pertumbuhan berat badan (g/ekor 0,75 a ±0,473  1,18ª±0,474 1,37ª±0,946 1,03ª±0,899  0,70ª±0,572 Konsumsi pakan harian (g/ekor) 4,43 ab ±0,909  5,36 b ±1,069  5,07 ab ±0,214 4,23 a ±0,535 4,87 ab ±1,336 Konsumsi minum harian (ml/ekor) 6,16 ab ±0,695  5,43 a ±0,160 5,67 a ±1,336 7,13 b ±1,657  6,74 ab ±1,176
Keterangan:
Angka  yang  diikuti  dengan  superskrip  yang  sama  pada  baris  yang  sama  menunjukkan  perbedaan  tidak  nyata.  K(-): kelompok perlakuan dengan pelarut bahan uji (air), K(+) :  kelompok perlakuan dengan sediaan pil kontrasepsi sintetis, P1  :  kelompok  perlakuan  dengan  bahan  uji  konsentrasi  1.4  mg/ekor/hari,  P2  :  kelompok  perlakuan  dengan  bahan  uji konsentrasi 3,5 mg/ekor/hari, dan P3 : kelompok perlakuan dengan bahan uji konsentrasi 7 mg/ekor/hari.
Senyawa  antifertilitas  dalam  ekstrak  air biji  pepaya  adalah  saponin,  tanin,  flavonol, glikosida, terpeoid, alkaloid, pereduksi gula, asam amino,  lemak,  protein,  fenol,  vitamin,  sterol  dan triterpene  (Naggayi et  al .,  2015).  Senyawa golongan  saponin,  tanin,  flavonoid,  terpenoid, alkaloid,  sterol  serta  triterpene  dapat  menekan tingkat  fertilitas   dengan  cara  mengganggu  fungsi ovarium,  uterus  atau  vagina  (Setyowati  dkk., 2015).
Pil konrasepsi yang diberikan pada hewan uji  kelompok  K+  mengandung ethynil  estradiol dan levonorgestrel .  Ganong  (2003)  menyatakan bahwa ethynil  estradiol merupakan  estrogen sintetik  yang  memiliki  potensi  yang  sama  dengan estrogen.  Hormon  ini  relatif  aktif  jika  diberikan per  oral  karena  resisten  terhadap  metabolisme hepatik. Aktivitas alami hormon ini relatif rendah dalam  tubuh  ketika  diberikan  lewat  jalur  digesti karena  vena  porta    intestinum  akan  membawa  ke hepar,  dimana  hormon  tersebut  diinaktivasi sebelum  masuk  sistem  sirkulasi.  Efek  selektif estrogen sintetis ditentukan oleh selective estrogen receptor  modification (SERMs)  dan  berkaitan dengan  perbedaan  cara  kompleks  reseptor-ligan untuk  berikatan  pada  DNA.  Ganong  (2003)  juga menyatakan  bahwa levonorgestrel merupakan
progesteron  sintetik,  memiliki  efektivitas  yang tinggi  dan  dapat  diteloransi  dengan  baik  oleh tubuh.
Bahan  perlakuan  berupa  biji pepaya salah satu  komponennya  adalah  alkaloid  yang  bersifat toksik.  Eliminasi  senyawa  toksik  melalui  reaksi biotransformasi  (metabolisme)  dan  ekskresi.  Jalur eliminasi  yang  paling  penting  adalah  eliminasi melalui  hati  (reaksi  metabolisme)  dan  eksresi melalui  ginjal.  Ginjal  sangat  memegang  peranan penting  dalam  mengekskresi  baik  senyawa eksogen  (xenobiotika)  maupun  senyawa  endogen, yang  pada  umumnya  tidak  diperlukan  lagi  oleh tubuh  (Wirasuta  dan  Niruri,  2006).  Pembuangan lewat  ginjal  membutuhkan  banyak  air.  Konsumsi minum  semua  kelompok  perlakuan  tidak  berbeda nyata  dengan  K(-),  yang  berbeda  nyata  adalah antara  P2  dengan  P1  dan  P2  dengan  K(+). Konsumsi  minum  pada  perlakuan  terlihat kecenderungan  semakin  tinggi  daripada  K+. Diduga  hal  ini  berhubungan  dengan  semakin tingginya  kadar  alkaloid  dalam  bahan  perlakuan, sehingga  membutuhkan  lebih  banyak  air  untuk membuang  zat  yang  bersifat  toksik  dari  dalam tubuh.
Tidak  adanya  perbedaan  nyata  pada konsumsi  minum  antara  semua  kelompok
Pertambahan Berat Badan Mencit (Mus musculus L.) Setelah Perlakuan Ekstrak Air Biji Pepaya (Carica papaya Linn.) Secara Oral Selama 21 Hari
perlakuan  dengan  K(-)  menunjukkan  bahwa kandungan zat toksik dalam ekstrak air biji pepaya dengan  dosis  penelitian  ini    tidak  mempengaruhi metabolisme  tubuh  mencit.  Konsumsi  minum paling  tinggi  adalah  P2  yaitu  sebesar  7,13ml/hari berbeda  tidak  nyata  dengan  P3  yaitu  sebesar 6,74ml/hari.

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  membuktikan  bahwa pemberian biji pepaya dengan paparan kronis tidak mempengaruhi pertambahan berat badan mencit.

## DAFTAR PUSTAKA
Adeneye,  A.A.  and  J.A.  Olagunju,  2009.
Preliminary Hypoglycemic and
Hypolypidemic  Activities  of  the  Aqueous Seeds  Extract  of  Carica  papaya  Linn,  in Wistar Rat. Biology and Medicine 1(1): 1- 10.
Bala, K., M. Arya, and D.P. Katare, 2014. Herbal Contraceptive:  An  Overview.  World Journal  of  Pharmacy  and  Pharmaceutical Science. 3(8): 1309-1326.
Burrow  ME,  Bone  SM,  Coelin  BM,  Meinik  LI, Duana  BN,  Canter  SW,  Wiese  TE, Cleveland TE and Mc. Lachlan JA. 2001. Phytochemical  Gliceolins  Isolated  from Soy  Medicine  Antihormonal  Effect Through  Estrogen  Receptor  Alpha  and Beta.  J.  Clin.  Endocrinol.  Metab.  Apr.  86 (4) : 1750-1758.
Chinoy, N.J., T. Dilip, and J. Harsha, 1995. Effect of  Carica  papaya  Seed  Extract  on  Female Rat  Ovaries  and  Uteri.  Phytotherapy Research. 9(3): 169-175.
Ganong,  W.F.,  2003.  Review  of  Medical Physiology.  International  Ed.  Boston.  Pp. 443- 446.
Garor R, Abir R, Erman A, Felz C, Nitke and Fish B. 2009. Effect of Basic Fibroblast Grotwh Factor on In Vitro Development of Human Ovarian Primordial Follicles. Fertility and Sterility 91(5): 1967-1975.
Guyton,  A.C.,  and  Hall,  J.E.  (2008).    Buku  Ajar Fisiologi  Kedokteran.  Edisi  11.  Jakarta: EGC.
Gupta,  R.S.  and  R.  Sharma,  2006.  A  Review  of Medicinal  Plants  Exhibiting  Antifertility Activity  in  Males.  Natural  Product Radiance. 5(5): 389-410. Hasan.M., Nelly,M., and Shirley,K.,2013. Hubungan Penggunaan Kontrasepsi
Hormonal  dengan  Obesitas  pada  Wanita Usia  Subur  (WUS)  di  Puskesmas Wawonasa  Kecamatan  Singkil  Manado. Jurnal e-Biomedik (e BM). 1(2) : 946-950.
Kaur,  R.,  R.  Sharma,  and R.  Kharb,  2011.  Rising Trends  towards  Herbal  Contraceptives. Scholars  Research  Library.  J.  Nat.Pord. Plant Resour. 1(4): 5 -12.
Lee  YC,  Rahman  M,  and  Berenson  AB.  2009. Early  Weight  Gain  Predicting  Hater Weight  Gain    among  Depot  Medroxy Progesterone  Acetate  Users.  Obstet Gynecol 14(2):279-84
Lohiya,  K.N,  N.  Pathak,  P.K.  Mishra  and  B
Manivannan, 2000. Contraceptive
Evaluation  and  Toxicological  Study  of Aquaeus  Ekstract  of  The  Seeds  of  Carica papaya  in  Male  Rabbits.  Jurnal  of Ethnopharmacology, 1(17) : Abstract
Naggayi,  M.,  N.Mukiibi,  E.  Iliya,  2015.  The Protective  Effects  of  Aqueous  Extract  of Carica  papaya    Seeds  in  Paracetamol Induced  Nephrotoxicity  in  Male  Wistar Rats.  African  Health  Sciences.  15(2):604- 605
Raji,  Y.,  A.O.  Morakinyo,  A.K.  Oloyo, O.S.Akinsomisoye, Olufadekemi, T. Kunle-Alabi,  P.R.C.  Esegbue-Peters,  and F.O  Awobajo,  2005.  Impact  of  the Chloroform Extract of Carica papaya Seed on  Oestrous  cycle and  Fertility  in  Female Albino Rats.J.Med. Sci. 5(4): 337-343.
Ratnawati  S,  Isfentiani  D,  dan  Widiasti  S.,  2011. Hubungan  Penggunaan  KB  Implant dengan  Peningkatan  Berat  Badan  pada Peserta  Implant  di  RB  Kartini  Surabaya.
Jurnal Penelitian Kesehatan Suara Forikes. 2(1):164-165
Setyaningsih,  Wineh  R,  dan  Teresia  RP.,  2010. Dampak  Kenaikan  Berat  Badan  pada Akseptor KB Suntik DMPA terhadap Citra Tubuh di Polindes Sekar Arum kecamatan Grabagan  Kabupaten    Tuban.  Jurnal Keperawatan. 3(1) :85
Setyowati, E. A. W., A.D. R. Sri, Ashadi, dan M.
Bakti, H. Arif, 2015. Aktivitas Antifertilitas  Kontrasepsi  Kulit  Durian
(Durio  zibethinus  Murr.)  varietas  Petruk. PS  Pendidikan  Kimia.  Jurusan  PMIPA FKIP UNS. Surakarta.
Sitasiwi, A.J. dan M.A. Djaelani, 2011. Studi awal upaya
eksplorasi agensia imunokontrasepsi  untuk  regulasi  fertilitas hewan  liar:  Profil  protein  selama  proses implantasi  embrio  mencit  (Mus  musculus L.) BALB/c. BIOMA.13(1): 39 – 45.
Siburian, J. Marlina dan A. Johari. 2008. Pengaruh Ekstrak  Biji  pepaya  (Carica  papaya,  L) pada  Tahap  Pra  copulasi  terhadap  Fungsi Reproduksi  Mencit  (Mus  musculus,  L) Swiss Webster Betina. Laporan Penelitian. PS Pendidikan Biologi Jurusan Pendidikan MPA FKIP Universitas Jambi.
Udoh, P., I. Essien, and F. Udoh, 2005. Effects of Carica papaya (paw paw) Seeds Extract on the  Morphology  of  Pituitary–Gonadal Axis  of  Male  Wistar  Rats.  Phytotherapy Research. 19(12):1065–1068.