## OPTIMASI KONDISI SUHU DAN KELEMBABAN SERTA PENGARUH MEDIA TANAM TERHADAP KEBERHASILAN AKLIMATISASI TANAMAN KARET ASAL EMBRIOGENESIS SOMATIK
Optimization of Temperature and Humidity Condition as well as Effect of Media Composition to the Successful of Rubber Plants Originated from Somatic Embryogenesis Acclimatization
1
1
2
Fetrina OKTAVIA *, Charlos Togi STEVANUS , dan Florence DESSAILLY
1) Pusat Penelitian Karet
Jalan Raya Palembang – Pangkalan Balai KM 29 Sembawa, Banyuasin 30953, Sumatera Selatan *Email : fetrina_oktavia@yahoo.com
2) Agricultural Research for Development (CIRAD) 389 Avenue d'Agropolis –  TA A-108/03 34 398 Montpellier Cedex 5, 34398 France
Diterima : 30 April 2020 / Disetujui : 21 Desember 2020

## Abstract
Acclimatization  is  a  critical  period  in the  multiplication  of  plants  through  tissue culture.  Plantlet  mortality  due  to  changes  of the environmental condition from in vitro to ex vitro oftenly occur during this period, so effort is  needed  to  manipulate  the  environmental condition  to    obtain  optimum  condition.  The research  was  aimed  to  optimize  the temperature and humidity conditions and to observe  the  effect  of  planting  media composition  which  was  suitable  for acclimatization  stage  of  rubber  planting m a t e r i a l   o r i g i n a t e d   f r o m   s o m a t i c embryogenesis  in  the  greenhouse.  Climate optimization in plastic tunnel was carried out by using the fogging system. Experiment used 210  plantlets  of  PB  260  clones  originating from CIRAD , France. Plantlets were planted in seven combination of grow media by using a Completely  Randomized  Design  with  three replications, and each replication consisted of ten  plants.  Observations  were  made  on  the percentage  of  survival  plants,  height, diameter  and  number  of  leaves  during acclimatization.  Optimization  of  temperature and  humidity  in  plastic  tunnel  were successfully  carried  out  under  conditions  of o temperature below 30 C and humidity above 90%.  Results  showed  that  type  of  media influenced the survival ability of plants. The highest survival rate reached 90% which was resulted by soil and mixture of cocofibre, peat moss and zeolite media. Type of media did not
give  a  significant  effect  to  height,  diameter and number of leaves of the plants during two months acclimatization. The significant effect of media type resulted on height of plants on three  months  after  acclimatization.  In  the limitations  conditions  of  top  soil  availability, the mixture of cocofibre, peat moss and zeolite could be used as an alternative of substitute planting media for rubber plant.
Keywords:  Hevea  brasiliensis ; juvenility; p l a n t i n g   m e d i a ;   r u b b e r seedlings; tissue culture

## Abstrak
Aklimatisasi  merupakan  periode kritis dalam perbanyakan tanaman melalui kultur  jaringan.  Kematian  planlet  akibat terjadinya  perubahan  kondisi  lingkungan dari in  vitro ke ex  vitro sering  terjadi  pada periode  tersebut,  sehingga  perlu  dilakukan upaya  memanipulasi  kondisi  lingkungan untuk  memperoleh  kondisi  yang  optimum. Penelitian  bertujuan  untuk  mengoptimasi kondisi suhu dan kelembaban serta melihat pengaruh  komposisi  media  tanam  yang sesuai untuk proses aklimatisasi bibit karet asal embriogenesis somatik di rumah kaca. Optimasi  iklim  dalam  sungkup  plastik dilakukan  dengan  menggunakan  alat fogging  system .  Penelitian  menggunakan 210  planlet  klon  PB  260  yang  berasal  dari CIRAD, Perancis. Planlet ditanam pada tujuh
Jurnal Penelitian Karet, 2020, 38 (1) : 1 - 16 Indonesian  J.  Nat. Rubb. Res. 2020, 38 (1) : 1 - 16 https://doi.org/10.22302/ppk.jpk.v38i1.677
kombinasi  media  tumbuh  menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAK) dengan tiga ulangan  dan  setiap  ulangan  terdiri  dari sepuluh  tanaman.  Pengamatan  dilakukan terhadap persentase tanaman hidup, tinggi, diameter dan jumlah daun tanaman selama a k l i m a t i s a s i .   O p t i m a s i   s u h u   d a n kelembaban dalam sungkup plastik berhasil o dilakukan pada kondisi suhu di bawah 30 C dan  kelembaban  di  atas  90%.  Pengamatan m e n u n j u k k a n   b a h w a   j e n i s   m e d i a b e r p e n g a r u h   t e r h a d a p   k e m a m p u a n tanaman  bertahan  hidup.  Persentase tanaman  bertahan  hidup  mencapai  90% ditemukan pada media tanah dan campuran cocofiber ,  gambut  dan  zeolit.    Jenis  media tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  tinggi, diameter dan jumlah daun tanaman selama dua  bulan  aklimatisasi.  Pengaruh  nyata jenis  media  tanam  hanya  ditemukan terhadap pertumbuhan tinggi tanaman tiga bulan  setelah  aklimatisasi.  Dalam  kondisi keterbatasan  ketersediaan top  soil , campuran  media cocofiber ,  gambut  dan zeolit  dapat  digunakan  sebagai  alternatif media  tanam  pengganti  untuk  tanaman karet.
Kata kunci : Bibit karet; Hevea brasiliensis; juvenilitas ; kultur  jaringan; media tanam

## PENDAHULUAN
Penggunaan  bahan  tanam  karet unggul  merupakan  salah  satu  komponen utama terpenting dalam upaya peningkatan produktivitas  perkebunan  karet.  Hingga saat ini perbanyakan tanaman karet secara konvensional  yang  paling  efektif  adalah secara  vegetatif  menggunakan  metode okulasi,  dimana  pada  teknik  tersebut dibutuhkan batang bawah dan batang atas (entres). Meskipun sudah sukses digunakan dalam  perbanyakan  bahan  tanam  karet secara  komersial,  aplikasi  teknik  okulasi masih menghadapi berbagai kendala seperti keterbatasan  ketersediaan  entres  sebagai batang atas, batang bawah, tenaga okulasi terampil,  waktu  persiapan  yang  lama, adanya  ketidaksesuaian  batang  atas  dan batang  bawah  serta  juvenilitas  entres  yang r e n d a h   y a n g   d a p a t   m e m p e n g a r u h i pertumbuhan dan produktivitas tanaman.
Pengaruh  negatif  batang  bawah terhadap  pertumbuhan  dan  produksi tanaman karet hasil okulasi sudah banyak dilaporkan  (Goncalves  &  Martins,  2002; Cardinal et  al .,  2007) . Ketidaksesuaian antara batang atas dan batang bawah dapat menyebabkan  terjadinya  pembengkakan dan nekrosis pada kulit batang dipertautan okulasi.  Hal  ini  terjadi  akibat  timbulnya ketidakseimbangan  antara  produksi senyawa  sianogenik  dengan  kemampuan detoksifikasi  antara  batang  bawah  dan batang  atas.  Adanya  variabilitas  genetik batang  bawah  (Clément-Demange et  al ., 2007)  dan  ketidaksesuaian  batang  bawah dan  batang  atas  dapat  menghambat p e r t u m b u h a n   t a n a m a n   k a r e t   d a n menyebabkan  penurunan  produksi  lateks mencapai 40%.
Ketersediaan  biji  sebagai  sumber b a t a n g   b a w a h   y a n g   t e r b a t a s   j u g a merupakan  masalah  yang  cukup  penting yang dihadapi dalam perbanyakan tanaman karet secara okulasi pada saat ini. Dengan berkembangnya ilmu pengetahuan di bidang bioteknologi  membuka  peluang  untuk m e n g a t a s i   h a l   t e r s e b u t   d e n g a n menggunakan  teknik  kultur  jaringan melalui embriogenesis somatik (SE). Dengan teknik ini diharapkan bibit karet klon-klon unggul dapat dihasilkan secara massal dan seragam  dalam  waktu  cepat  serta  kualitas bibit yang lebih terjamin.
Embriogenesis  somatik  merupakan teknologi  kunci  dalam  penyiapan  bahan tanam  karet  di  masa  depan  (Mignon  & Werbrouck, 2018). Bibit yang dihasilkan dari SE disebut juga dengan self-rooting juvenile clones karena  memiliki  perakaran  sendiri sehingga  terbebas  dari  ketidasesuaian batang  bawah  dan  batang  atas  serta memiliki tingkat juvenilitas yang tinggi. Hal ini  akan  memberikan  pengaruh  positif terhadap pertumbuhan dan produksi lateks tanaman  ( Gireesh et  al .,  2012).  Dibi et  al. ( 2 0 1 0 )   m e n y a t a k a n   b a h w a   t e r j a d i peningkatan  lilit  batang  tanaman  asal  SE sebesar 16,8% dan produksi lateks sebesar 32,3% dibandingkan tanaman asal okulasi. Analisis transkriptom gen-gen yang terlibat dalam  mekanisme  produksi  lateks  melalui sekuensing  metode  Ilumina  terlihat  bahwa terdapat  peningkatan  ekspresi  gen-gen

## Oktavia, Stevanus, dan Dessailly
regenerasi  dan  durasi  aliran  lateks  pada tanaman  asal  SE  dibandingkan  dengan tanaman  yang  diperbanyak  secara  okulasi (Li et al ., 2016).
Keberhasilan  sistem  perbanyakan bahan  tanam  karet  melalui  embriogenesis somatik sudah banyak dilaporkan. Berbagai jenis  eksplan  telah  berhasil  digunakan dalam  induksi  kalus  dan  embrio  somatik yaitu  eksplan  anther  (Wan et  al .,  1982; Tahardi,  1998;  Jayasree et  al .,  1999), dinding  integumen  dalam  dari  biji  karet muda (Carron & Enjarlic, 1985 ; Montoro et al ., 2000), akar (Zhou et al ., 2010), kotiledon (Dickson et al ., 2011), ovul (Jayashree et al ., 2011)  serta  nodus  (Sanguansermsri et  al ., 2015),  tunas  aksilar  dan  apikal  (Mayati  & Jamnah,  2014).  Dari  semua  jenis  eksplan yang  sudah  digunakan,  jaringan  dinding integumen  dalam  dan  anther  merupakan eksplan  yang  paling  responsif  terhadap induksi kalus dan embrio somatik tanaman karet (Mignon & Werbrouck, 2018). Karena eksplan  integumen  dalam  berasal  dari jaringan muda maka secara ontogeni tingkat juvenilitasnya sangat tinggi sehingga dapat meningkatkan  kualitas  juvenilitas  planlet yang  dihasilkan  (Lardet et  al .,  2009  ; Monteuuis,  2016).  Kedua  sumber  eksplan tersebut  saat  ini  banyak  digunakan  pada pengembangan embriogenesis somatik pada berbagai klon karet.
Keberhasilan  proses  embriogenesis somatik yang menghasilkan planlet secara in vitro harus  diikuti  dengan  keberhasilan p r o s e s   a k l i m a t i s a s i .   A k l i m a t i s a s i merupakan  tahapan  paling  kritis  yang menentukan  keberhasilan  perbanyakan bahan  tanam  melalui  kultur  jaringan (Hazarika,  2003;  Hazarika et  al .,  2006; Aronen, 2016; Singh, 2018). Kondisi in vitro s e r i n g k a l i   m e n y e b a b k a n   t e r j a d i n y a perubahan  morfologi,  anatomi  dan  fisiologi pada planlet (Chandra et al , 2010), sehingga p a d a   t a h a p a n   a k l i m a t i s a s i   p l a n l e t memerlukan  usaha  yang  besar  untuk menghadapi  perubahan  tersebut.  Pada kondisi in  vitro di  dalam  tabung  kultur planlet  berada  pada  kondisi  ketersediaan nutrisi yang mudah diserap tanaman serta kondisi  lingkungan  yang  optimal  seperti suhu,  kelembapan,  intensitas  cahaya  dan aseptik,  pada  saat  dipindah  ke  kondisi ex vitro di  lingkungan  luar  tanaman  harus mampu  menyerap  dan  memproses  air  dan mineral  serta  beradaptasi  dengan  kondisi
lingkungan luar yang jauh berbeda dengan kondisi in  vitro .  Pada  kondisi in  vitro tanaman  tumbuh  di  bawah  intensitas cahaya  rendah  (1200  -  3000  lux)  dengan
o suhu  di  bawah  25 C,  sedangkan  saat ditransfer  ke ex  vitro tanaman  akan langsung menerima  intensitas cahaya yang tinggi (4000 - 12000 lux) dengan suhu yang
o bisa  mencapai  35 C,  sehingga  terjadi p e n i n g k a t a n   e v a p o t r a n s p i r a s i   y a n g mengakibatkan  tanaman  menjadi  layu (Lavanya et al ., 2009). Persentase kematian tanaman  asal  kultur  jaringan  yang  cukup tinggi  seringkali  ditemukan  pada  tahap  ini akibat  stres  pada  tanaman  karena  organ- organ  tanaman  yang  belum  berfungsi dengan  baik.  Selain  kondisi  iklim lingkungan, penggunaan jenis media tanam yang  sesuai  juga  akan  mempengaruhi keberhasilan aklimatisasi (Kaur et al ., 2011; El-Zeiny et al ., 2013; Barpete et al ., 2014).
Untuk  mengurangi  stres  pada tanaman maka pada tahap awal aklimatisasi perlu  diupayakan  lingkungan ex  vitro yang menyerupai lingkungan in vitro . Manipulasi kondisi  lingkungan ex  vitro tersebut diharapkan  mampu  mengurangi  cekaman terhadap tanaman sehingga tanaman dapat bertahan  hidup  dan  tumbuh  dengan  baik. Keterbatasan  ketersediaan top  soil dan tingginya  kontaminasi  patogen  penyebab penyakit  akar  pada  media  tanah  perlu menjadi  pertimbangan  utama  dalam pemilihan  media  aklimatisasi  tanaman karet.  Standar  operasional  prosedur  (SOP) aklimatisasi  bibit  karet  asal  embriogenesis somatik  (SE)  di  daerah  subtropis  sudah d i l a p o r k a n   o l e h   C I R A D ,   P e r a n c i s (komunikasi  pribadi),  namun  prosedur tersebut  masih  perlu  disesuaikan  dengan kondisi iklim tropis di Indonesia. Penelitian bertujuan  untuk  mengoptimasi  kondisi suhu  dan  kelembapan  udara  serta  melihat pengaruh berbagai komposisi media tanam terhadap  keberhasilan  proses  aklimatisasi bibit tanaman karet asal SE di iklim tropis.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilakukan di Rumah Kaca P u s a t   P e n e l i t i a n   K a r e t ,   S e m b a w a , Banyuasin,  Sumatera  Selatan  pada  bulan Januari  hingga  Juni  2019. Percobaan dilakukan  dengan  menggunakan  bibit tanaman  karet  asal  SE  klon  PB  260. Embriogenesis somatik (SE) di induksi dari
Optimasi Kondisi Suhu dan Kelembaban serta Pengaruh Media Tanam Terhadap

## Keberhasilan Aklimatisasi Tanaman Karet Asal Embriogenesis Somatik
ekpslan  jaringan  integumen  dalam  yang diambil dari buah muda klon PB 260. Proses perbanyakan dan penyiapan planlet melalui metode  embriogenesis  somatik  sekunder tidak  langsung  ( indirect  Secondary  Somatic Embryogenesis /SSE)  (Lardet et  al .,  2009) dilakukan  di  Laboratorium  BIOS  CIRAD, Perancis  dan  pengiriman  ke  Indonesia dilakukan pada tanggal 9 Februari 2019.
Penelitian terdiri dari dua tahap yaitu optimasi  kondisi  iklim  dalam  sungkup plastik di rumah kaca dan melihat pengaruh k o m p o s i s i   m e d i a   t a n a m   t e r h a d a p keberhasilan aklimatisasi bibit karet asal SE di rumah kaca.

## Optimasi  Kondisi  Iklim  dalam  Sungkup Plastik dan Rumah Kaca
Optimasi  kondisi  iklim  lingkungan pertumbuhan  dilakukan  dengan  cara pencatatan  data  suhu  dan  kelembapan udara  di  dalam  rumah  kaca  dan  di  luar rumah  kaca  setiap  jam  dari  pukul  08.00  - 1 9 . 0 0   W I B   s e l a m a   s a t u   m i n g g u menggunakan  alat temperature  hygrometer digital (merek BIO APA). Berdasarkan rata- rata  suhu  dan  kelembapan  tersebut d i l a k u k a n   p e n g a t u r a n   s u h u   d a n kelembapan di dalam sungkup plastik untuk mendapatkan  suhu  dan  kelembapan optimal untuk aklimatisasi tahap awal bibit karet  asal  SE.  Pengaturan  suhu  dan kelembaban  di  dalam  sungkup  dilakukan dengan  cara  penyemprotan  air  dengan fogging system menggunakan alat automatic fogging  system (merek  Rain  Bird@France) ukuran noozle 2 µm pada berbagai interval waktu sehingga diperoleh suhu yang kurang o dari 30 C dan kelembapan di atas 90%. Alat bekerja  secara  otomatis  mengeluarkan kabut air untuk meningkatkan kelembaban udara  dan  menurunkan  suhu  dalam sungkup  plastik.  Pengaturan  suhu  dan kelembaban  udara  juga  dibantu  dengan manual  mist  system dan  sirkulasi  udara menggunakan blower di  luar  sungkup plastik  serta  penurunan  intensitas  cahaya menggunakan  paranet  50%  dalam  rumah kaca.  Perlakuan  interval  waktu fogging system pada penelitian ini adalah :
1.  Kontrol  (K)  :  kondisi  kelembaban  dan suhu  di  dalam  rumah  kaca  ( condition  of air  humidity  and  temperature  in  green house)
2.  FS1  :  1  menit fogging  system setiap  30 menit ( 1 minute fogging system every 30 minute)
3.  FS  2  :  5  menit fogging  system setiap  30 menit ( 5 minute fogging system every 30 minute)
4.  FS 3 : 10 menit fogging system setiap 30 menit ( 10 minute fogging system every 30 minute)
5.  FS 4 : 10 menit fogging system setiap 60 menit + paranet ( 10 minute fogging system every 60 minute + paranet)
6.  FS 5 : 10 menit fogging system setiap 30 menit + paranet ( 10 minute fogging system every 30 minute + paranet)
Pengaruh  Komposisi  Media  terhadap Aklimatisasi  Bibit  Karet  Asal  SE  dalam Sungkup Plastik di Rumah Kaca
Percobaan dilakukan pada 210 bibit tanaman  karet  asal  SE  menggunakan rancangan  acak  lengkap  (RAL)  yang  terdiri dari  tujuh  perlakuan  media  dengan  tiga ulangan. Perlakuan komposisi media tanam ditunjukkan pada Tabel 1. Setiap perlakuan terdiri  dari  sepuluh  tanaman  dan  tiga ulangan sehingga total tanaman pada setiap perlakuan adalah tiga puluh. Gambut yang digunakan dalam penelitian ini merupakan gambut  yang  berasal  dari  Desa  Sungei Rengit, Banyuasin, Sumatera Selatan. Tabel 2  menunjukan  hasil  analisis  sifat  kimia gambut  yang  digunakan  (Saputra et  al ., 2018) .
Penanaman bibit asal SE dilakukan pada pagi hari untuk mengurangi terjadinya stres  akibat  suhu  yang  tinggi.  Untuk mengurangi  kontaminasi  patogen,  media tanam  diperlakukan  dengan  penyiraman 100  ml  larutan  fungisida  Dithane  5  g/L (Mancozeb 80%) ke setiap polybag dan akar bibit  tanaman  dicelup  ke  dalam  larutan fungisida  Bayleton  5  mL/L  (5%)  sebelum ditanam.  Tanaman  ditempatkan  dalam sungkup plastik dengan kelembaban udara o di atas 90% dan suhu di bawah 30 C melalui p e n g a t u r a n a u t o m a t i c   m i s t   s y s t e m berdasarkan hasil percobaan optimasi iklim s e b e l u m n y a .   P e m e l i h a r a a n   s a n i t a s i l i n g k u n g a n   d i l a k u k a n   d e n g a n penyemprotan  Anvil  2%  setiap  minggu dalam  sungkup  plastik  dan  Dithane  5%  di luar  sungkup  plastik.  Tanaman  dipelihara dalam  sungkup  plastik  selama  2  bulan, selanjutnya  sungkup  plastik  akan  dibuka

## Oktavia, Stevanus, dan Dessailly
secara  bertahap  selama  1  bulan  sebelum tanaman  dikeluarkan  sepenuhnya  dari sungkup  plastik.  Parameter  yang  akan diamati  selama  tanaman  dipelihara  dalam sungkup plastik adalah persentase tanaman bertahan hidup, tinggi, diameter dan jumlah daun tanaman.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Optimasi  Kondisi  Iklim  pada  Sungkup Plastik dan Rumah Kaca
Aklimatisasi  merupakan  periode kritis  dalam  perbanyakan  bibit  tanaman secara  kultur  jaringan.  Kegagalan  akibat kematian  pada  periode  tersebut  sering mengakibatkan kehilangan terbesar planlet dalam  proses  penyiapan  bibit  kultur jaringan.  Hal  ini  menyebabkan  kesulitan dalam  proses  aklimatisasi  sering  kali menjadi  kendala  utama  perbanyakan
massal  bahan  tanam  melalui  kultur jaringan,  terutama  pada  spesies  tanaman berkayu termasuk tanaman karet (Le Conte & Carron, 1988).
Gambar  1  menunjukkan  rata-rata kelembaban  udara  dan  suhu  harian  yang diukur setiap jam dari pukul 08.00 - 19.00 WIB di dalam rumah kaca dan di luar rumah kaca Pusat Penelitian Karet, Sembawa pada bulan Februari 2019. Kelembaban di dalam dan  di  luar  rumah  kaca  berkisar  69  -  88% dan 60,9 - 88% dengan tingkat kelembaban di bawah 80% pada pukul 09.00 - 16.00 WIB (Gambar  1A).  Suhu  di  dalam  rumah  kaca o berkisar 26 - 35,4 C dan di luar rumah kaca o
o
26 - 40,7 C dengan suhu di atas 30 C pada pukul  09.00-16.00  WIB  (Gambar  1B). Berdasarkan kondisi kelembaban dan suhu harian  tersebut  dimana  kelembaban  di
o bawah  80%  dan  suhu  diatas  30 C  maka diketahui  bahwa  periode  kritis  iklim terhadap  proses  aklimatisasi  pada  bulan

## Tabel 1. Komposisi media tanam (MT) yang digunakan pada tahap aklimatisasi bibit tanaman karet asal SE di rumah kaca
Table  1.  Composition  of  planting  media  (PM)  was  used  on  acclimatization  stage  of  rubber planting material originated from SE in the green house
Perlakuan Treatment Cocofiber Cocopeat Zeolit Zeolite Gambut Peat Moss Tanah Soil (% v/v) Kontrol 100 MT 1 60 - 10 30 - MT 2 50 - 10 40 - MT 3 40 - 10 50 - MT4 60 30 10 - - MT 5 50 40 10 - - MT 6 40 50 10 - -

## Tabel 2. Analisis sifat kimia gambut asal Desa Sungei Rengit
Table 2. Chemical properties analysis result of peat at the study site (Sungei Rengit Village)
Parameter Parameter Hasil analisis Analysis results Kriteria Criteria pH H 2 O 4,17 Sangat masam C-Organik (%) 13,74 Sangat tinggi N (%) 0,64 Tinggi P 2 O 5 (ppm) 1,28 Sangat rendah K (me/100 gr) 0,018 Sangat rendah Ca (me/100 gr) 0,35 Rendah Mg (me/100 gr) 0,796 Sedang KTK (me/100 gr) 87,69 Sangat tinggi
Optimasi Kondisi Suhu dan Kelembaban serta Pengaruh Media Tanam Terhadap Keberhasilan Aklimatisasi Tanaman Karet Asal Embriogenesis Somatik
Februari  2019  adalah  pada  pukul  09.00  - 16.00  WIB.  Informasi  tersebut  digunakan sebagai dasar dalam optimasi fogging system untuk  meningkatkan  kelembaban  dan menurunkan  suhu  terutama  pada  waktu- waktu kritis tersebut.
G a m b a r   2   m e n u n j u k k a n peningkatan  kelembaban  udara  dan penurunan  suhu  dalam  sungkup  plastik pada  berbagai  pengaturan  interval  waktu a l a t f o g g i n g s y s t e m . P e n i n g k a t a n kelembaban  udara  terjadi  pada  semua perlakuan fogging  system. Kelembaban optimal diatas 90% dicapai pada perlakuan FS 4 dan FS 5 yaitu dengan penyemprotan kabut  air selama 10  menit setiap 30  menit dan  10  menit  setiap  1  jam  dan  di  atas s u n g k u p   p l a s t i k   d i t u t u p   d e n g a n menggunakan  paranet  (Gambar  2A). Sedangkan  penurunan  suhu  terjadi  pada perlakuan FS 2. FS 4 dan FS 5 dimana suhu o turun  dari  rata-rata  di  atas  30 C  pada kondisi  tanpa fogging  system menjadi  di o bawah  30 C  dengan  menggunakan  alat fogging system (Gambar 2B). Pada perlakuan FS  1  terlihat  bahwa  terjadi  peningkatan kelembaban udara dan suhu dibandingkan dengan kontrol. Hal ini dapat terjadi karena penyemprotan  kabut  air  selama  1  menit setiap 30 menit telah mampu meningkatkan kadar  air  di  udara  namun  belum  mampu menurunkan suhu. Karena posisi sungkup plastik yang rapat maka terjadi peningkatan suhu dalam sungkup melebihi suhu udara di luar sungkup plastik. Pada perlakuan FS
5  meskipun  menghasilkan  peningkatan kelembaban  udara  dan  penurunan  suhu tertinggi,  namun  terjadi  kejenuhan  tingkat kelembaban di dalam sungkup plastik yang ditandai  dengan  terjadinya  penempelan  air pada plastik penutup. Menurut Leconte dan Carron  (1988)  kelembaban  yang  tinggi mendekati  100%  diperlukan  dalam aklimatisasi  bibit  karet  asal microcutting , namun untuk daerah tropis hal ini menjadi suatu    kendala  utama  aklimatisasi  yaitu dapat  meningkatkan  timbulnya  resiko serangan  patogen  penyebab  penyakit tanaman karet.
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh pada perlakuan optimasi alat fogging system t e r s e b u t   m a k a   s e l a n j u t n y a   u n t u k p e n g a t u r a n   k e l e m b a b a n   d a n   s u h u aklimatisasi  bibit  tanaman  karet  asal  SE dalam  sungkup  plastik  di  rumah  kaca  di pilih  perlakuan  FS  4  yaitu  pengabutan selama  10  menit  setiap  1  jam  dan  di  atas sungkup plastik di bawah atap rumah kaca di tutup dengan paranet untuk mengurangi intensitas  cahaya  sehingga  kelembaban o udara di atas 90% dan suhu di bawah 30 C dapat  tercapai.  Keadaan  kelembaban  yang tinggi dan hampir jenuh air dan suhu yang tidak  terlalu  tinggi  dalam  sungkup  plastik tersebut  diperlukan  agar  laju  transpirasi dapat ditekan sehingga kehilangan air lewat daun dapat dihindari sebelum akar planlet m a m p u   m e n y e r a p   a i r   d a r i   m e d i a pertumbuhan.   Hal ini sesuai dengan yang dijelaskan  oleh  Pospısilova et  al .  (1999)
Gambar 1. Rata-rata kelembaban udara (A) dan suhu (B) di dalam dan di luar rumah kaca (RK) Pusat Penelitian Karet, Sembawa dari pukul 08.00 - 19.00 WIB
Figure 1. Average of air humidity (A) and temperature (B) inside and outside of the green house (GH) at Indonesian Rubber Research Institute, Sembawa from 8 am – 7 pm   (Western Indonesian Time)

## Oktavia, Stevanus, dan Dessailly
bahwa pada kondisi in vitro , lapisan kutikula pada jaringan epidermis dan fungsi stomata tanaman  kurang  berkembang,  sehingga pada  saat  dipindah  ke  lingkungan ex  vitro terjadi  peningkatan  transpirasi  daun  yang dapat  mengakibatkan  kelayuan  dan kematian tanaman. Untuk menghindari hal tersebut,  diperlukan  pengaturan  kondisi iklim  terutama  intensitas  cahaya  rendah, kelembaban  udara  tinggi  dan  suhu  rendah yang akan membantu tanaman beradaptasi dengan  lingkungan  luar  secara  perlahan- lahan. Pada kondisi tersebut kutikula akan berkembang  secara  bertahap  dan  stomata akan meregulasi kehilangan air secara lebih efektif.
Pada  tahap  aklimatisasi,  sistem perakaran  dan  koneksi  jaringan  floem  dan xilem antara akar dengan batang juga belum dapat  berfungsi  secara  sempurna  sehingga meskipun  ketersediaan  air  di  media  tanam cukup,  namun  belum  dapat  dimanfaatkan secara  optimal  oleh  tanaman  (Filia et  al ., 1998).  Ketersediaan  air  yang  berlebihan  di media tanam dalam kondisi seperti itu dapat menjadi  ancaman  bagi  tanaman  akibat terjadinya  penyerapan  air  yang  tidak sempurna sehingga terbentuk rongga udara di  jaringan  xilem  yang  mengakibatkan terjadinya embolism (Montoro,  komunikasi
pribadi).  Hal  ini  dapat  diatasi  dengan peningkatan kelembaban udara yang tinggi yang  akan  membantu  meningkatkan potensial  air  di  tanaman.  Pengontrolan terhadap transpirasi daun dan batang pada tahap awal tranfer tanaman dari in vitro ke ex vitro merupakan kunci utama keberhasilan tahap aklimatisasi (Seon et al ., 2012).
Pengaruh  Komposisi  Media  Tanam terhadap Aklimatisasi Bibit Karet Asal SE dalam Sungkup Plastik di Rumah Kaca

## Kemampuan Tanaman Bertahan Hidup
Gambar  3  menunjukkan  kondisi tanaman  pada  saat  penanaman.  Tanaman dalam  keadaan  segar  setelah  1  minggu perjalanan pengiriman dari CIRAD, Perancis (Gambar  3A)  ke  Pusat  Penelitian  Karet, Indonesia dan pertumbuhan tanaman relatif seragam  pada  saat  penanaman  (Gambar 3B).
Pemeliharaan  bibit  tanaman  karet dalam sungkup plastik dilakukan selama 2 bulan.  Hal  ini  dilakukan  berdasarkan  SOP aklimatisasi  bibit  tanaman  karet  asal  SE yang  dilakukan  di  CIRAD,  Perancis (Dessaily, komunikasi pribadi) dan berbagai
Gambar  2.  Kelembaban  udara  (A)  dan  suhu  (B)  di  dalam  sungkup  plastik  di  rumah  kaca Pusat Penelitian Karet, Sembawa dari pukul 09.00 - 16.00 WIB pada berbagai perlakuan interval waktu fogging system .
Figure 2. Air humidity (A) and temperature (B) in plastic tunnel at green house of Indonesian Rubber Research Institute, Sembawa from 9 am – 4 pm (Western Indonesian Time)  on several interval of time of fogging system.
Optimasi Kondisi Suhu dan Kelembaban serta Pengaruh Media Tanam Terhadap

## Keberhasilan Aklimatisasi Tanaman Karet Asal Embriogenesis Somatik
referensi  aklimatisasi  tanaman  karet  yang sudah  dipublikasikan.  Sumaryono et  al. (2012)  melaporkan  bahwa  persentase tertinggi  bibit  karet  asal microcutting bertahan  hidup  pada  tahap  aklimatisasi yaitu  diperoleh  pada  kondisi  pemeliharaan dalam  sungkup  plastik  selama  1,5  bulan pada  kondisi  kelembaban  70%  dan  suhu
0 berkisar  23-32 C.  Hasil  penelitian  tersebut m e n u n j u k k a n   b a h w a   t e r d a p a t kecenderungan  peningkatan  persentase bertahan  hidup  tanaman  seiring  dengan penambahan  waktu  penyungkupan. Berdasarkan informasi tersebut maka pada penelitian  ini  dilakukan  penyungkupan selama dua bulan dengan harapan tanaman dapat lebih beradaptasi dengan kondisi luar sehingga  persentase  tanaman  bertahan hidup lebih tinggi.
Pengamatan selama dua bulan tahap aklimatisasi  dimana  tanaman  dipelihara  di dalam  sungkup  plastik  dengan  kondisi kelembaban yang dikendalikan di atas 90%
o dan  suhu  di  bawah  30 C  (Perlakuan  FS  4) menunjukkan bahwa rata-rata kemampuan bibit  tanaman  bertahan  hidup  adalah sebesar  83,8%.  Tingkat  keberhasilan bertahan hidup ini lebih baik dibandingkan dengan  kemampuan  bertahan  hidup  bibit karet  asal microcutting selama  1,5  bulan dalam  sungkup  plastik  seperti  yang dilaporkan oleh Sumaryono et al . (2012) dan Sinta et  al (2013)  yaitu  sebesar  73,3%  dan 80%.  Demikian  juga  dengan  hasil  yang dilaporkan oleh Sanguansermsri et al . (2015) bahwa  keberhasilan  hidup  aklimatisasi planlet asal perbanyakan dari eksplan tunas nodular    mencapai  80%.  Hal  ini  diduga karena kondisi bibit tanaman yang berbeda,
dimana  bibit  asal  SE  pada  penelitian  ini memiliki  perakaran  yang  lebih  baik dibandingkan dengan bibit asal microcutting . Selain  itu  perbaikan  terhadap  proses pengaturan  suhu  dan  kelembaban  dalam sungkup  plastik  juga  sudah  dilakukan sehingga  kondisi  iklim  di  dalam  sungkup plastik relatif stabil.
Chandra et  al .  (2010)  menjelaskan bahwa  selain  manipulasi  kondisi  iklim lingkungan ex  vitro ,  tingkat  keberhasilan tanaman  bertahan  hidup  pada  tahap aklimatisasi  juga  dapat  dilakukan  dengan melakukan  pra  aklimatisasi  secara in  vitro sebelum  tanaman  ditansfer  ke  lingkungan ex vitro yang bertujuan agar tanaman dapat tumbuh  secara photoautotrophic .  Upaya tersebut dilakukan dengan cara memelihara tanaman  pada  media  buatan  bebas  gula d e n g a n   m e m b e r i   v e n t i l a s i   u d a r a , peningkatan  kandungan  CO ,  peningkatan 2 intensitas  cahaya  dan  pengurangan  unsur makro  pada  media  tumbuh.  Dengan demikian  terjadi  peningkatan  adaptasi fisiologi  dan  morfologi  tanaman  seperti perkembangan akar, perlindungan terhadap kehilangan  air  melalui  fungsi  stomata (memperlambat  kecepatan  transpirasi), peningkatan  asimilasi  CO   (meningkatkan 2 kecepatan fotosintesis), pembentukan daun baru,  memperluas  permukaan  daun  dan peningkatan biomassa daun dan akar (Xiao et al ., 2011; Hoang et al ., 2017; Tisarum et al ., 2018).
Tabel  3  menunjukkan  bahwa k o m p o s i s i   m e d i a   m e m p e n g a r u h i kemampuan bertahan hidup bibit tanaman karet asal SE selama 2 bulan dalam sungkup
Gambar 3. Kondisi kesegaran (A) dan keseragaman pertumbuhan bibit tanaman karet asal ES pada saat penanaman dengan berbagai komposisi media tanam (B)
Figure 3. Freshness (A) and growth uniformity of rubber planting material originating from SE  on planting periode used several composition of planting media (B)
plastik.  Media  tanah  sebagai  kontrol pembanding menunjukkan hasil persentase tertinggi  tanaman  bertahan  hidup.  Hal u t a m a   y a n g   d i k h a w a t i r k a n   d a l a m penggunaan  tanah  sebagai  media  tumbuh aklimatisasi bibit karet asal kultur jaringan adalah  ketersediaan top  soil yang  sudah terbatas dan tingginya kontaminasi patogen dalam  media  terutama  patogen  penyebab penyakit  jamur  akar  putih.  Berdasarkan hasil yang diperoleh terlihat bahwa dengan penanganan yang baik seperti menghindari penggunaan media tanah yang berasal dari perkebunan  karet  dan  penggunaan fungisida  sebelum  media  digunakan  dapat membantu  pencegahan  terhadap  serangan patogen.
Selain itu campuran media cocofiber , gambut  dan  zeolit  juga  memberikan persentase  tanaman  bertahan  hidup  yang sama dan tidak berbeda nyata dengan media tanah.  Hasil  tersebut  kemungkinan disebabkan  kemampuan  campuran  media untuk memberikan kelembaban dan aerasi yang cukup pada tanaman yang membantu meningkatkan  pertumbuhan  dan  fungsi akar dengan baik. Hasil yang diperoleh pada penelitian  ini  sesuai  dengan  SOP  yang disarankan oleh CIRAD bahwa penggunaan campuran  60% cocofiber ,  30%  gambut  dan 10% zeolit merupakan media terbaik untuk aklimatisasi  bibit  tanaman  karet  asal  SE. Hasil  tersebut  dapat  dijadikan  sebagai bahan  pertimbangan  bahwa  pada  kondisi
yang  sulit  untuk  mendapatkan top  soil , penggunaan  media  campuran cocofiber , gambut  dan  zeolit  dapat  menjadi  alternatif pengganti media tanah.
Gambar  4  menunjukkan  jumlah bibit  karet  asal  SE  yang  bertahan  hidup selama tahap aklimatisasi, dua bulan dalam sungkup  plastik  dan  satu  bulan  setelah sungkup  plastik  dibuka  secara  bertahap pada  berbagai  komposisi  media  tumbuh. Kemampuan tanaman bertahan hidup pada bulan  pertama  cukup  tinggi  dengan  rata- rata kematian tanaman hanya berkisar 4,5% dan meningkat menjadi 20,95% pada bulan kedua.  Berdasarkan  hasil  tersebut  tahap aklimatisasi bibit karet asal SE ini dianggap c u k u p   b e r h a s i l   k a r e n a   m a m p u mempertahankan  tanaman  tetap  tumbuh dengan  baik.  Peningkatan  kematian  yang cukup tingggi mencapai 32,38% terjadi pada bulan  ketiga  saat  sungkup  plastik  mulai dibuka secara bertahap setiap minggu yaitu selama  1  jam,  3  jam,  5  jam  dan  dibuka seluruhnya pada satu bagian sisi penutup. Hal  ini  kemungkinan  disebabkan  karena terjadinya  perubahan  kondisi  lingkungan yang  cukup  besar  dari  kondisi  lingkungan suhu  dan  kelembaban  terkontrol  pada kondisi  yang  tidak  terkontrol  yang mengakibatkan  tanaman mengalami stress . Menurut  Sumaryono et  al (2012)  waktu terbaik memelihara bibit tanaman karet asal microcutting dalam sungkup plastik adalah 6 minggu  dengan  daya  hidup  planlet  yang

## Perlakuan
Treatment Komposisi media tanam Composition of planting media Persentase hidup Percentage of survival (%) Kontrol 100 % tanah 90,00 a MT 1 cf 60% + gambut 30% + zeolit 10% 90,00 a MT 2 cf 50% + gambut 40% + zeolit 10% 90,00 a MT 3 cf 40 % + gambut 50 % + zeolit 10 % 86,67ab MT 4 cf 60 % + cp 30 % + zeolit 10 % 83,33 ab MT 5 cf 50 % + cp 40 % + zeolit 10 % 70,00 b MT 6 cf 40% + cp 50 % + zeolit 10 % 76,67 b
Gambar 3. Kondisi kesegaran (A) dan keseragaman pertumbuhan bibit tanaman karet asal ES pada saat penanaman dengan berbagai komposisi media tanam (B)
Figure 3. Freshness (A) and growth uniformity of rubber planting material originating from SE  on planting periode using several composition of planting media (B)
Keterangan ( Remarks ) : cf = cocofiber ; cp = cocopeat
Optimasi Kondisi Suhu dan Kelembaban serta Pengaruh Media Tanam Terhadap Keberhasilan Aklimatisasi Tanaman Karet Asal Embriogenesis Somatik
m e n c a p a i   7 3 , 3 % .   H a l   i n i   d e n g a n pertimbangan bahwa setelah 6 minggu tidak diperlukan  lagi  penyungkupan  karena tanaman  telah  mampu  menyerap  air  dan hara  dari  media  tumbuh  yang  ditandai dengan  tumbuhnya  daun  baru.  Berbeda dengan penelitian tersebut, pada penelitian ini  tanaman  mengalami  pengguguran hampir seluruh daunnya pada saat sungkup plastik dibuka dan sebagian besar tanaman tidak mampu bertahan hidup pada kondisi tersebut.  Berdasarkan  kondisi  tersebut diduga  pada  saat  kelembaban  udara menurun tanaman harus menyerap air dari media,  sedangkan  tanaman  belum  mampu untuk  melakukan  hal  tersebut  sehingga terjadilah embollism yang  mengakibatkan kematian pada tanaman.

## Pertumbuhan  Tinggi,  Diameter  dan Jumlah Daun Tanaman
Pertumbuhan  bibit  tanaman  karet asal SE selama aklimatisasi dalam sungkup plastik di rumah kaca terlihat pada Gambar 5.  Pengukuran  pertumbuhan  berdasarkan parameter tinggi, diameter dan jumlah daun seluruh  tanaman  dilakukan  setelah tanaman  dipelihara  selama  2  bulan  dalam sungkup  plastik  dan  1  bulan  setelah s u n g k u p   p l a s t i k   d i b u k a   b e r t a h a p , sedangkan tinggi, diameter dan jumlah daun
awal  tanaman  saat  penanaman  hanya dihitung  pada  10  sampel  yang  diambil secara  acak  untuk  menghindari  terjadinya kerusakan dan stres pada tanaman, dimana rata-rata tinggi, diameter dan jumlah daun awal tanaman ditanam adalah 58 cm, 1,29 cm dan 5,2. Berdasarkan pengamatan visual y a n g   d i l a k u k a n   t e r l i h a t   b a h w a pertumbuhan  tanaman  selama  2  bulan dalam sungkup plastik tidak terlalu berbeda dibandingkan  dengan  rata-rata  tinggi, diameter  dan  jumlah  daun  tanaman  pada saat penanaman. Diduga selama dua bulan tahap aklimatisasi tersebut tanaman masih dalam  tahap  adaptasi,  belum  sepenuhnya kearah  pertumbuhan.  Selama  dua  bulan tersebut  terlihat  tanaman  dalam  keadaan segar dan secara umum jumlah daun masih tetap  seperti  diawal  tanam.  Perubahan kondisi  tanaman  mulai  terlihat  pada  saat masuk  bulan  ketiga  setelah  tanam  disaat sungkup  plastik  mulai  dibuka  secara bertahap.  Pada  minggu  pertama  sungkup plastik  dibuka,  sebagian  besar  daun  mulai menguning dan gugur. Namun diakhir bulan ketiga daun-daun baru mulai tumbuh.
Penggunaan  berbagai  komposisi media  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap pertumbuhan  tinggi,  diameter  batang  dan jumlah  daun  tanaman  selama  dua  bulan dalam  sungkup  plastik.  Pengaruh  media

## Gambar 4. Pengaruh komposisi media tanam terhadap jumlah tanaman bertahan hidup pada
tahap aklimatisasi di dalam sungkup plastik di rumah kaca
Figure 4. Effect of composition of planting media to number of plants survive at acclimatization stage in plastic tunnel at green house

## Oktavia, Stevanus, dan Dessailly
Gambar 5. Pertumbuhan tinggi (A), diameter (B) dan jumlah daun (C) bibit tanaman karet asal SE pada berbagai media tanam selama tahap aklimatisasi dalam sungkup plastik di rumah kaca
Figure  5.  Growth  of  height  (A),  diameter  (B)  ad  number  of  leafs  of  rubber  planting  material originated from SE in several media composition at acclimatization stage in   plastic tunnel at green house
Perlakuan Treatment Tinggi Height (cm) Diameter Diameter (cm) Jumlah daun Number of leaves 2 BST 2 MAP 3 BST 3 MAP 2 BST 2 MAP 3 BST 3 MAP 2 BST 2 MAP 3 BST 3 MAP Kontrol MT 1 MT 2 MT 3 MT 4 MT 5 MT 6 7,92 tn 6,50 5,83 6,17 5,14 5,92 5,59 8,95a 6,88ab 6,23b 6,73ab 5,44b 6,02b 6,06b 1,38tn 1,27 1,26 1,35 1,35 1,30 1,22 1,42 tn 1,40 1,43 1,37 1,39 1,33 1,23 7,50tn 4,20 5,85 4,89 7,00 5,50 5,26 7,50 tn 3,20 5,35 4,89 4,75 4,83 4,91

## Tabel 4. Pengaruh berbagai komposisi media terhadap pertumbuhan tinggi, diameter dan jumlah daun tanaman pada tahap aklimatisasi di rumah kaca
Table  4.  Effect  of  media  composition  to  high,  diameter  and  number  of  leave  of  planlets  on acclimatization stage at green house
Keterangan ( Remaks ) : tn=tidak berbeda nyata ( not significantly different) BST : bulan setelah aklimatisasi (MAP : month after acclimatization)
Optimasi Kondisi Suhu dan Kelembaban serta Pengaruh Media Tanam Terhadap

## Keberhasilan Aklimatisasi Tanaman Karet Asal Embriogenesis Somatik
Gambar  6.  Pertumbuhan  planlet  karet  asal  SE  pada  awal  penanaman  (A)  dan  tiga  bulan setelah aklimatisasi (B)
Figure  6.  Growth  of  plantlets  origined  from  SE  on  early  planting  (A)  and  three  months  after acclimatization (B)
terhadap pertumbuhan tinggi tanaman baru terlihat setelah satu bulan sungkup plastik dibuka  secara  bertahap  (Tabel  4).  Hal tersebut  kemungkinan  terjadi  karena  akar tanaman  SE  belum  tumbuh  sehingga komposisi  media  tidak  berpengaruh  nyata terhadap  pertumbuhan  tanaman  selama dua  bulan.  Secara  umum  pertumbuhan tanaman  pada  media  kontrol  yang menggunakan  tanah  100%  lebih  baik dibandingkan  dengan  pertumbuhan tanaman  pada  media  lainnya.  Penggunaan campuran  media cocofiber ,  gambut  dan zeolit  secara  umum  memberikan  pengaruh terhadap pertumbuhan tinggi dan diameter tanaman  yang  lebih  baik  dibandingkan campuran  media cocofiber , cocopeat dan zeolite.  Hal  tersebut  karena  gambut mempunyai  sifat  fisik,  kimia,  dan  biologi yang  baik  untuk  tanaman  (Gruda,  2012) sehingga cocok sebagai media tanam. Hasil analisis  sifat  kimia  gambut  berdasarkan penelitian  tersebut  menunjukkan  bahwa gambut memiliki kadar C-organik, Nitrogen dan  Kapasitas  Tukar  Kation  (KTK)  yang tinggi  (Tabel  2).  Sementara cocopeat dan cocofiber merupakan produk sampingan dari i n d u s t r i   p e n g o l a h a n   k e l a p a   y a n g mempunyai  sifat  fisik  tanah  yang  baik namun kandungan unsur hara yang rendah (Cahyo et al ., 2016).
Selama  proses  aklimatisasi  terlihat bahwa  pertumbuhan  tinggi  dan  diameter b a t a n g   t a n a m a n   m a s i h   r e n d a h . Pertumbuhan  daun  baru  juga  terlihat lambat.  Hal  ini  terlihat  pada  Tabel  4  dan Gambar  6,  dimana  jumlah  daun  tanaman tiga bulan setelah aklimatisasi lebih sedikit dibanding di awal penanaman.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan  yang  dapat  ditarik berdasarkan hasil percobaan adalah sebagai berikut :
1.  P e n g a t u r a n   k o n d i s i   s u h u   d a n kelembaban udara lingkungan tumbuh telah berhasil dilakukan dengan kondisi
o suhu di bawah 30 C dan kelembaban di atas 90%.
2.  Komposisi media tumbuh berpengaruh terhadap  kemampuan  bertahan  hidup bibit  karet  asal  SE  selama  dua  bulan d a l a m   s u n g k u p   p l a s t i k .   T a n a h merupakan  media  terbaik  untuk aklimatisasi  bibit  karet  asal  SE  dan diikuti  oleh  campuran  media cocofiber , gambut  dan  zeolit  dengan  persentase tanaman hidup mencapai 90%.
3.  Penggunaan  berbagai  komposisi  media tidak  berpengaruh  nyata  terhadap pertumbuhan  tinggi,  diameter  batang dan jumlah daun tanaman selama dua bulan tanaman dalam sungkup plastik. Pengaruh  media  terhadap  tinggi tanaman  terlihat  setelah  1  bulan sungkup  plastik  dibuka  secara bertahap.
4.  Media alternatif pengganti terbaik pada kondisi  ketersediaan top  soil yang terbatas  untuk  digunakan  dalam aklimatisasi bibit karet asal SE adalah campuran  50-60% cocofiber ,  30-40% gambut dan 10% zeolit.

## Oktavia, Stevanus, dan Dessailly
Saran  yang  dapat  diungkapan  penulis untuk  kegiatan  riset  berikutnya  adalah perlu  dilakukan  optimasi  metode  terkait dengan waktu pembukaan sungkup plastik setelah 2 bulan aklimatisasi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  diucapkan  kepada  Dr. Pascal  Montoro,  CIRAD,  Perancis  atas diskusi dan masukan yang diberikan kepada Penulis  selama  pelaksanaan  kegiatan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Aronen, T. (2016). From Laboratory to Field – C u r r e n t   S t a t e   o f   S o m a t i c Embryogenesis in Scot Pine. In: Park Y. S.,  J.  M.  Bonga  &  H.  K.  Moon (eds). Vegetative  Propagation  of  Forest Trees. South Korea : National Institute of Forest Science.
Barpete,  S.,  Khawar,  K.M.,  &  Özcan,  S.
(2014).  Differential  competence  for  in vitro  adventitous  rooting  of  grass  pea ( Lathyrus sativus L.). Plant Cell, Tissue and  Organ  Culture ,  119(1),  39-50. https://doi.org/10.1007/s11240- 014-0512-6
Cahyo, A.N., Saputra, J., Stevanus, C.T., & Sahuri.  (2016).  Penggunaan root t r a i n e r u n t u k   m e n i n g k a t k a n pertumbuhan  bibit  karet. Jurnal P e n e l i t i a n   d a n   P e n g e m b a n g a n P e r t a n i a n , 3 5 ( 1 ) ,   1 7 - 2 4 . https://doi.org/10.21082/jp3.v35n1. 2016.p17-24
Cardinal, Á.B.B, Gonçalves, P.S., & Martins, A.L.M. (2007). Stock-scion interactions on  growth  and  rubber  yield  of Hevea brasiliensis . Scientia  Agricola ,  64(3), 235-240.  https://doi.org/10.1590 /S0103-90162007000300004
Chandra, S., Bandopadhyay, R., Kumar, V., & Chandra, R. (2010). Acclimatization of  tissue  cultured  plantlets:  from laboratory  to  land. Biotechnology L e t t e r ,   3 2 ,   1 1 9 9 – 1 2 0 5 . https://doi.org/10.1007/s10529- 010-0290-0
Carron, M.P., & Enjarlic, F. (1985). Somatic embryogenesis from inner integument of  the  seed  of Hevea  brassiliensis Muell. Arg. CR. Academic Science, 300, 653-658.
Clément-Demange,  A.,  Priyadarshan,  P.M., Tran,  T.T.H.,  &  Venkatachalam  P. (2007).  Hevea  Rubber  Breeding  and Genetics. Plant  Breeding  Reviews
Volume  29.  Ed.  Janick,  J.  Hoboken, New  Jersey:  John  Wiley  &  Sons. https://doi.org/10.1002/978047016 8035.ch4
Dibi,  K.,  Boko,  C.,  Obouayeba,  S.M.,  Dea G.B.,  Carron,  M.P.,  &  Anno,  A.P. (2010). Field growth and rubber yield of in  vitro  micropropagated  plants  of clones PR 107, IRCA 18 and RRIM 600 of Hevea  brasiliensis (Müll.-Arg.). Agriculture and Biology Journal of North A m e r i c a ,   1 ( 6 ) ,   1 2 9 1 - 1 2 9 8 . https://doi.org/10.5251/abjna.2010. 1.6.1291.1298
Dickson, I., Okere, A., Elizabeth, J., Mary, O., Olatunde, F., & Abiodun, S. (2011). In vitro culture  of Hevea  brasiliensis (rubber tree) embryo. Journal of Plant Breeding and Crop Science , 3(9), 185- 189.
El-Zeiny,  O.A.H.,  El-Behairy,  U.A.,  Zocchi, G., & Rashwan, M. (2013). Commercial production of globe artichoke ( Cynara scolymus L.) in vitro. Egyptian Journal of  Agriculture  Research ,  91(3),  993- 1007.
Optimasi Kondisi Suhu dan Kelembaban serta Pengaruh Media Tanam Terhadap Keberhasilan Aklimatisasi Tanaman Karet Asal Embriogenesis Somatik
Gireesh,  T.,  Varghese,  Y.A.,  Woeste,  K.E., Mercykutty,  V.C.,  &  Marattukalam, J.G.   (2012). Effect of monoclonal and assorted  seedling  rootstocks  on  long term growth and yield of Hevea clones.
S i l v a e   G e n e t i c a , 6 1 ( 1 ) ,   5 2 - 5 7 . https://doi.org/10.1515/sg-2012- 0007
Goncalves,  P.S.,  &  Martins,  A.L.M.  (2002). Combining  ability  effect  of  clonal rootstock  and  scions  in  rubber  trees ( Hevea brasiliensis ). Crop Breeding and Applied  Biotechnology, 2(3),  445-452. https://doi.org/10.12702/1984- 7033.v02n03a16
Gruda,  N.  (2012).  Current  and  future perspective  of  growing  media  in Europe. Acta  Horticulturae ,  960, 37–43.  https://doi.org/10.17660 /ActaHortic.2012.960.3
Hazarika,  B.N.  (2003).  Acclimatization  of tissue-cultured  plants. Current
Science, 85(12), 1704-1712.
Hazarika,  B.N.,  Jaime,  A.,  Teixeira,  S.,  & Talukdar, A. (2006). Acclimatization of in  vitro  cultured  plants:  methods, physiology  and  genetics. Floriculture, Ornamental and Plant Biotechnology , 2, 427-438.
Hoang, N.N., Kitaya, Y., Morishita, T., Endo, R., & Shibuya, T. (2017). A comparative study  on  growth  and  morphology  of wasabi plantlets under the influence of the  micro-environment  in  shoot  and root  zones  during  photoautotrophic a n d   p h o t o m i x o t r o p h i c micripropagation. Plant  Cell,  Tissue and  Organ  Culture, 130,  255-263. https://doi.org/10.1007/s11240- 017-1219-2
Jayasree,  P.K.,  Asohan,  M.P.,  Sobha,  S., Ammal,  S.,  Rekha,  K.,  Kala,  R.G., Jayasree,  R.,  &  Thulasepdharan,  A. (1999).  Somatic  embryogenesis  and plant  regeneration  from  immature anthers of Hevea brassiliensis (Muell.) Current Science , 76(9), 122 - 1245.
Jayashree, R., Rekha, K., Sushamakumari, S.,  Sobha,  S.,  &  Thulaseedharan,  A. (2011). Unfertilized ovule - a potential explant  for  somatic  embryogenesis  in Hevea  brasiliensis .  Proceedings  of I R R D B   I n t e r n a t i o n a l   R u b b e r Conference.  Chiang  Mai,  Thailand: IRRDB
Kaur,  H.A.,  &  Goyal,  M.D.  (2011). Optimization  of  potting  mixture  for hardening  of  in  vitro  raised  plants  of Tylophora  indica to  ensure  high survival  percentage. International Journal  Medical  Aromatic  Plants ,  1(2), 83-88.
Lardet,  L.,  Dessailly,  F.,  Carron,  M.P.,  Rio, M., Ferrière, N., & Montoro, P. (2009). Secondary  somatic  embryogenesis  in Hevea  brasiliensis (Müll.  Arg.):  An alternative  process  for  long-term somatic  embryogenesis. Journal  of Rubber Research , 12(4), 215-227.
Lavanya,  M.,  Venkateshwarlu,  B.,  &  Devi, B.P.  (2009).  Acclimatization  of  neem microshoots  adaptable  to  semi-sterile c o n d i t i o n s . I n d i a n   J o u r n a l   o f Biotechnology, 8, 218–222.
Leconte,  A.,  &  Carron,  M.P.  (1988). Acclimatization  of  microcuttings  from rubber  ( Hevea  brasiliensis ):  problem and  perspective.  In  J.L.  Jacob  &  J.C. Prevot  (eds). Compte-Rendu  du Colloque  Exploitation-Physiologie  et Amelioration de Hevea . Colloque Hevea IRRDB.  IRCA/CIRAD  (p.  499-503). Paris, France: CIRAD.
Li, H.L, Guo, D., Zhu, J.H., Wang, Y., Chen, X.T., & Peng, S.Q. (2016). Comparative transcriptome analysis of latex reveals molecular  mechanisms  underlying increased  rubber  yield  in Hevea brasiliensis self-rooting  juvenile clones. Frontier Plant Science, 7, 1204. https://doi.org/10.3389/fpls.2016.0 1204

## Oktavia, Stevanus, dan Dessailly
Mayati,  N.C.H.,  &  Jamnah,  A.R.  (2014). Induction  of  shoots  and  roots  from vegetative  tissue  culture Hevea brasiliensis RRIM  2000. Journal Tropical Plant Physiology, 6, 1-9.
Montoro,  P.,  Teinseree,  N.,  Rattana,  W., Kongsawadworakul,  P.,  &  Michaux- Ferriere, N. (2000). Effect of exogenous c a l c i u m   o n   A g r o b a c t e r i u m tumefaciens-mediated gene transfer in Hevea  brassiliensis (rubber  tree) friable  calli. Plant  Cell  Report, 19(9), 851-855.  https://doi.org/10.1007 /s002990000208
Monteuuis, O. (2016). Micropropagation and production  of  forest  trees.  In: Vegetative  propagation  of  forest  trees . Part  1:  Development  and  trends  in vegetative  propagation  of  forest  trees, Eds  Y.  S.  Park,  J.  M.  Bonga,  H.  K. Moon. South Korea: NIFOS.
Mignon, E., & Werbrouck S. (2018) Somatic embryogenesis  as  key  technology  for shaping the rubber tree of the future. Frontier  in  Plant  Science ,  9,  1804. https://doi.org/10.3389/fpls.2018.0 1804
Posp ısilova ,  J.,  Ticha,  I.,  &  Kadlecek,  P. ( 1 9 9 9 ) .   A c c l i m a t i z a t i o n   o f micropropagated  plants  to  ex  vitro conditions. Biology Plant, 42, 481–497. https://doi.org/10.1023/A:10026882 08758
Sanguansermsri,  M.,  Khamthup,  P., Meechana,  K.,  Wongsawad,  M.,  & Buddharaksa,  P.  (2015).  In  vitro embryo  culture. Naresuan  Phayao Journal , 8, 155–158.
Saputra,  J.,  Stevanus,  C.  T.,  Ardika,  R.,  & Wijaya, T. (2018). Pengujian beberapa alternatif teknik penanaman tanaman karet  di  lahan  gambut. Jurnal
Penelitian  Karet , 36 (2),  117–126. https://doi.org/10.22302/ppk.jpk.v3 6i2.595
Seon,  J.,  Cui,  Y.,  Kozai,  T.,  &  Paek,  K.Y. (2012).  Influence  of  in  vitro  growth c o n d i t i o n s   o n   p h o t o s y n t h e t i c competence  and  survival  rate  of Rehmannia  glutinosa plantlets  during acclimatization  period. Plant  Cell Tissue  and  Organ  Culture, 61,  135- 1 4 2 .   h t t p s : / / d o i . o r g / 1 0 . 1 0 2 3 /A:1006473223286
Singh, C.R. (2018). Review on problems and its  remedy  in  plant  tissue  culture. Asian Journal of Biology Science , 11(4), 165-172.  https://doi.org/10.3923 /ajbs.2018.165.172
Sinta, M.M., Haris, N., & Sumaryono. (2013). Pengaruh  periode  pra-kondisi  dan penutupan  sungkup  terhadap  daya h i d u p   p l a n l e t   k a r e t . M e n a r a P e r k e b u n a n , 8 1 ( 1 ) ,   1 6 - 2 2 . http://dx.doi.org/10.22302/iribb.jur. mp.v81i1.47
Sumaryono., Sinta, M.M., & Hars, N. (2012). Daya hidup planlet karet asal in  vitro microcutting pada  berbagai  periode penutupan  sungkup  plastik  dan komposisi  media  tumbuh. Menara P e r k e b u n a n , 8 0 ( 1 ) ,   2 5 - 3 1 . http://dx.doi.org/10.22302/iribb.jur. mp.v80i1.46
Tahardi,  J.S.  (1998).  Plant  regeneration  in Hevea  brasiliensis via  somatic embryogenesis. Menara  Perkebunan, 66(1), 1-8.
T i s a r u m ,   R . ,   S a m p h u m p h u n g ,   T . , Theerawitaya,  C.,  Prommee,  W.,  & C h a - u m ,   S .   ( 2 0 1 8 ) .   I n   v i t r o photoautotrophic  acclimatization, direct  transplantation  and  ex  vitro adaptation  of  rubber  tree  ( Hevea brasiliensis ). Plant  Cell,  Tissue  and O r g a n   C u l t u r e ,   1 3 3 ,   2 1 5 - 2 2 3 . http://dx.doi.org/10.1007/s11240- 017-1374-5
Optimasi Kondisi Suhu dan Kelembaban serta Pengaruh Media Tanam Terhadap Keberhasilan Aklimatisasi Tanaman Karet Asal Embriogenesis Somatik
Wan, A.R., Gandhimathi, H., Rohani, O., & P a r a n j o t h y ,   K .   ( 1 9 8 2 ) . R e c e n t development in tissue culture of Hevea . Singapore : COSTED.
Xiao,  Y.,  Niu,  G.,  &  Kozai,  T.  (2011). Development  and  application  of photoautotrophic  micropropagation plant  system. Plant  Cell,  Tissue  and Organ  Culture ,  105,  149 158. https://doi.org/10.1007/s11240- 010-9863-9
Zhou,  Q.N.,  Jiang,  Z.H.,  Huang,  T.D.,  Li, W.G.,  Sun,  A.H.,  Dai,  X.M.,  &  Li,  Z. (2010). Plant regeneration via somatic embryogenesis  from  root  explants  of Hevea  brasiliensis.  African  Journal  of Biotechnology, 9(48),  8168-8173. http://dx.doi.org/10.5897/AJB10.96 9

## Oktavia, Stevanus, dan Dessailly