PENGARUH CARA EKSTRAKSI TERHADAP KADAR SARI DAN KADAR SYLIMARIN DALAM BIJI Silybum marianum (L.) GAERTN.
Nita Supriyati, Ika Yanti M. Sholikhah Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional Badan Litbang Kesehatan, Kementerian Kesehatan Jl. Raya Lawu No. 11 Tawangmangu, Karanganyar nita_supriyati@yahoo.com

## ABSTRAK
Silybum marianum (L.) Gaertn.atau dikenal dengan nama milk thistle digunakan dalam pengobatan hepatitis kronik dan akut serta sirosis yang disebabkan alkohol, obat- obatan maupun racun. Komponen aktif yang terdapat dalam marianum adalah silymarin. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  cara  ekstraksi  yang  tepat  dari  biji marianum dengan  berbagai  metode  ekstraksi  sederhana.  Serbuk  biji marianum diekstraksi  dengan cara seduh, maserasi, infusa, dan dekokta dengan pelarut air kemudian dihitung kadar sari dan  kadar  silymarin.  Dari  hasil  penelitian  diketahui  bahwa  cara  ekstraksi  tidak berpengaruh  terhadap  kadar  sari  yang  diperoleh,  namun  berpengaruh  terhadap  kadar silymarin  dari  ekstrak  biji marianum (L.)  Gaertn.  Kadar  silymarin  tertinggi  diperoleh dengan cara dekokta yaitu 0,44 ± 0,05%.
Kata kunci : Silybum marianum (L.) Gaertn, cara ekstraksi, silymarin, kadar sari.

## PENDAHULUAN
Silybum  marianum atau  silibum  merupakan  salah  satu  tanaman  tertua  untuk pengobatan  penyakit  hati.  Tanaman  dari  famili  Asteraceae  ini  telah  digunakan  selama berabad-abad  sebagai  obat  alami  untuk  mengatasi  berbagai  penyakit  hati  dan  saluran empedu,  terutama  sirosis, jaundice ,  dan  hepatitis.  Silibum  dapat  digunakan  untuk melindungi  dan  membersihkan  hati  dari  senyawa-senyawa  toksik  seperti  alkohol,  obat, merkuri, logam berat, dan pestisida (Pradhan and Girish, 2006; Negi, et al. , 2008, Sidana, et al ., 2011).
Komponen aktif dari Silybum marianum paling banyak diperoleh dari biji kering yang  mengandung  70-80%  silymarin  dan  20-30%  polimer  serta  polifenol  teroksidasi. Silymarin  merupakan  campuran  kompleks  dari  4  isomer  flavolignan  yang  terdiri  dari silibin,  isosilibin,  silidianin,  dan  silikristin  (Dixit, et  al .,  2007;Ghosh, et  al .,  2010). Berbagai penelitian menunjukkan bahwa silymarin memiliki aktivitas sebagai antioksidan untuk  mencegah  kerusakan  hati,  antikarsinogenesis,  antiinflamasi,  antifibrosis,  dan immunomodulator  (Dixit et  al .,  2007;  Radko  and  Cybulski,  2007;  Shaker, et  al .,  2010; Ghosh, et  al .,  2010).  Secara  klinis,  silymarin  sudah  digunakan  sebagai  terapi  untuk berbagai  macam  kelainan  hati  meliputi  hepatitis,  sirosis,  penyakit  hati  karena  obat  dan alkohol,  psorias,  serta  keracunan jamur  Amanita  (Radko  and  Cybulski,  2007;  Ghosh, et al .,  2010).  Silymarin  dilaporkan  memiliki  profil  keamanan  yang  sangat  bagus.  Uji  pada hewan maupun manusia menunjukkan bahwa silymarin tidak toksik meskipun diberikan pada dosis tinggi yaitu lebih dari 1500 mg/hari (Ghosh, et al ., 2010).
Proses  ekstraksi  bertujuan  untuk  memperoleh  kandungan  aktif  dari  suatu  bahan alam  dengan  menggunakan  pelarut  yang  sesuai.  Berbagai  teknik  ekstraksi  telah berkembang  dengan  didukung  alat-alat  yang  modern.  Namun  demikian  teknik  ekstraksi
sederhana  masih  sering  dilakukan  terutama  oleh  masyarakat  umum  seperti  menyeduh atau  merebus  tanaman  obat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  cara penyiapan  biji  silibum  dengan  teknik  ekstraksi  sederhana  yaitu  cara  seduh,  maserasi, infusa,  dan  dekokta  terhadap  kadar  sari  dan  kadar  silymarin.  Pelarut  yang  digunakan adalah air, mengacu pada penggunaan umum di masyarakat.
Gambar 1. Silybum marianum, biji (A), tanaman (B)

## METODOLOGI

## Bahan dan Jalannya Penelitian
Penelitian dilakukan pada bulan Juni – Juli 2011 di Balai Besar Litbang Tanaman Obat  dan  Obat  Tradisional.  Biji Silybum  marianum diperoleh  dari  kebun  koleksi B2P2TO2T Tawangmangu yang terletak di ketinggian ± 1200 m di atas permukaan laut. Biji Silybum  marianum yang  telah  kering  dihaluskan  menggunakan  blender  hingga menjadi serbuk halus, lalu diayak menggunakan ayakan dengan ukuran 40 mesh.
Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara  seduh,  maserasi,  infusa,  dan  dekokta menggunakan  pelarut  air  dengan  perbandingan  berat  serbuk  dan  pelarut  adalah  1:10. Penyeduhan dilakukan dengan menambahkan air mendidih ke dalam gelas beker berisi 5 g serbuk biji silibum disertai pegadukan. Setelah dingin seduhan disaring ke dalam labu takar  dan  ditambahkan  akuades  hingga  volume  50  ml.  Maserasi  dilakukan  semalam  24 jam  dengan  pengadukan  secara  berkala.  Sediaan  infusa  diperoleh  dengan  cara memanaskan  serbuk  biji  silibum  dan  akuades  dalam  panci  infusa  selama  15  menit dihitung sejak air yang ada dalam panci luar mendidih. Sediaan dekokta diperoleh dengan cara seperti pada sediaan infusa namun dengan waktu pemanasan selama 30 menit.
Masing-masing  sediaan  yang  diperoleh  kemudian  diuapkan  hingga  kering kemudian  dimasukkan  oven  suhu  105°  C  hingga  bobot  tetap  (Materia  Medika,  1979). Penetapan kadar sari ditentukan dengan rumus berikut:
%  kadar  sari  larut  air  =
,  dimana  w2 adalah  berat
cawan ditambah ekstrak, w1 adalah berat cawan kering, dan A adalah berat sampel dalam satuan gram.
Penetapan  kadar  silymarin  dilakukan  menggunakan  metode  KLT-densitometri dengan pelat TLC GF 254 (Merck). Standar silymarin yang digunakan diperoleh dari Sigma Aldrich, dilarutkan dalam pelarut etanol. Eluen yang digunakan adalah kloroform:aseton:asam  format  (9:2:1).  Analisis  densitometri  dilakukan  pada  panjang gelombang 290 nm. Kadar silymarin dalam ekstrak ditentukan dengan menginterpolasikan  luas  area  bercak  pada  persamaan  kurva  regresi  silymarin  standar. Persentase kadar silymarin dihitung dengan persamaan berikut:

## A                                                          B
, dimana S adalah kadar silymarin terukur, V1 adalah volume penotolan, V2 adalah volume total ekstrak, dan w adalah berat serbuk biji Silybum marianum .
Perbedaan  kadar  sari  dan  kadar  silymarin  dianalisis  secara  statistik  dengan  uji analisis  varian  (ANOVA)  satu  jalan  dengan  program  komputer.  Taraf  signifikansi ditentukan sebesar 95% CI (p < 0,05).

## HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Penentuan  kadar  sari  larut  air  atau  rendemen  ekstrak  air  dilakukan  untuk mengetahui berapa banyak senyawa yang larut dalam pelarut air yang dinyatakan dalam persen. Hasil penentuan kadar sari serbuk biji Silybum marianum dengan berbagai macam metode ekstraksi ditunjukkan pada gambar 2.
Gambar 2.  Persentase  kadar sari biji Silybum marianum dengan berbagai  macam  metode ekstraksi.
Dari grafik pada gambar tersebut diketahui bahwa persentase kadar sari larut air tertinggi diperoleh dengan metode ekstraksi dekokta yaitu 16,379 ± 0,847 %. Namun dari hasil  analisis  statistik  diketahui  bahwa  tidak  ada  perbedaan  bermakna  antar  kelompok ekstraksi.  Dari  data  tersebut  diketahui  bahwa  adanya  proses  pemanasan  pada  teknik ekstraksi  (dekokta  dan  infusa)  tidak  berpengaruh  terhadap  rendemen  kadar  sari  yang dihasilkan.
Penentuan  kadar  silymarin  dalam  ekstrak  biji Silybum  marianum dilakukan dengan  metode  KLT-densitometri.  Hasil  penetapan  kadar  silymarin  dengan  berbagai macam metode ekstraksi ditunjukkan pada gambar 3.
Gambar 3.  Persentase  kadar  silymarin  dalam  ekstrak  biji Silybum  marianum dengan berbagai macam metode ekstraksi.
Seduh Infusa
Dekokta Maserasi 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 16.611 15.012 16.379 15.825 Metode ekstraksi % ka da r sa ri Seduh Infusa Dekokta Maserasi 0.000 0.100 0.200 0.300 0.400 0.500 0.157 0.420 0.437 0.057 Metode ekstraksi % ka da r si lym ar in
Berdasarkan  grafik  pada  gambar  3  di  atas,  diketahui  bahwa  kadar  silymarin tertinggi  diperoleh  dengan  metode  ekstraksi  dekokta  yaitu  0,437  ±  0,05%.  Hasil  uji ANOVA  satu  jalan  menunjukkan    bahwa  kadar  silymarin  dari  berbagai  kelompok ekstraksi memiliki perbedaan yang bermakna (p< 0,05). Hasil uji post hoc menunjukkan bahwa  perbedaan  bermakna  nampak  pada  semua  kelompok  perlakuan,  kecuali  antara kelompok  ekstraksi  dekokta  dan  infusa.  Dari  data  yangdiperoleh  tampak  bahwa  adanya pemanasan berpengaruh pada kadar silymarin yang diperoleh. Pada penelitian ini, kadar silymarin  dari  hasil  ekstraksi  dekokta  dan  infusa  relatif  sama  karena  kedua  metode ekstraksi tersebut menggunakan suhu yang sama namun dengan waktu pemanasan yang berbeda.  Dari  penelitian  ini  dapat  diinformasikan  bahwa  penerapan  teknik  ekstraksi sederhana  dapat  digunakan  untuk  mendapatkan  ekstrak  yang  mengandung  silymarin. Penggunaan  air  dalam  ekstraksi  sylimarin  juga  dilakukan  oleh  Duan et  al (2004). Penelitian  tersebut  mengeksplorasi  penggunaan  air  panas  sebagai  pelarut  pada  suhu  di atas 100°C. Dari hasil penelitian tersebut diketahui bahwa kadar silymarin dan  taxifolin tidak  meningkat  seiring  dengan  naiknya  suhu.  Hal  ini  diduga  karena  adanya  degradasi dari komponen tersebut. Degradasi komponen silymarin dan kinetika degradasi orde satu dapat diamati pada suhu 140°C.

## KESIMPULAN
1. Cara ekstraksi tidak berpengaruh terhadap kadar sari dalam ekstrak air biji Silybum marianum
2. Cara ekstraksi berpengaruh terhadap kadar silymarin dalam ekstrak air biji Silybum marianum.

## DAFTAR PUSTAKA
Materia Medika Jilid III. 1979. Departemen Kesehatan RI. Jakarta Duan, L ., DJ Carrier , EC Clausen. 2004. Silymarin extraction from milk thistle using hot water. Appl Biochem Biotechnol . 113-116:559-68.
Dixit, N., S. Baboota, K. Kohli, S. Ahmad, J. Ali. 2007. Silymarin: A Review of Pharmacological Aspects and Bioavailability Enhancement Approaches. Indian J Pharmacol 39(4): 172- 179.
Ghosh,  A.,  T.  Ghosh,  and  S.  Jain.  2010.  Silymarin-A  Review  on  The  Pharmacodynamics  and Bioavailability  Enhancement  Approaches. Journal  of  Pharmaceutical  Science  and Technology 2 (10):348-355.
Negi,  A.S., J.K. Kumar, S. Luqman, K. Shanker, M.M. Gupta and S.P.S. Khanuja. 2008. Recent Advances in Planthepatoprotectives: a chemical and Biological Profile of Some Important Leads. Medicinal Research Reviews 28(5):746-772.
Pradhan S.C. and Girish C. 2006. Review Article: Hepatoprotective Herbal Drug, Silymarin From Experimental Pharmacology To Clinical Medicine. Indian J Med Res 124:491-504. Radko  L.  and  Cybulski  W.  2007.  Application  of  Silymarin  in  Human  and  Animal  Medicine.
Journal Of Pre-Clinical and Clinical Research l 1(1):022-026. Shaker,  E.,  H.  Mahmoud,  S.  Mnaa.  2010.  Silymarin,  The  Antioxidant  Component  and Silybum marianum Extracts Prevent Liver Damage. Food and Chemical Toxicology 48:803–806. Sidana,  J.,  G.  Deswal,  P.  Nain,  K.  Arora.  2011.  Liver  Toxicity  And  Hepatoprotective  Herbs International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research 9(1):116-121.