## Aktivitas Biosurfaktan
Serratia Marcescens strain MBC1 dalam Mengemulsikan Solar dengan Variasi pH dan Media
Biosurfactant Activity of Serratia Marcescens strain MBC1 in Dissolving Diesel Fuel with pH and Media Variation
Cindy Lukyta Ratih Riyanto 1 , Sumardi 1 , Salman Farisi 1 , Christina Nugroho Ekowati 1 , Achmad Arifiyanto 1*
1 Jurusan Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Lampung, Jl. Prof. Dr. Ir. Sumantri Brodjonegoro, Rajabasa Bandar Lampung 35141, Indonesia
*Email korespondensi : achmad.arifiyanto@fmipa.unila.ac.id

## ABSTRAK
Resiko pencemaran lingkungan akibat tumpahan solar meningkat tiap tahunnya, oleh karena itu diperlukan  upaya  ramah  lingkungan  dengan  biaya  produksi  rendah.  Penelitian  ini menggunakan  bakteri Serratia  marcescens strain  MBC1  dengan  tujuan  menguji  aktivitas biosurfaktan  yang  dihasilkan  dalam  melarutkan  solar.  Bakteri  ini  ditumbuhkan  pada  media produksi Trypton Water , limbah cair produksi tepung tapioka, dan limbah cair produksi  tepung maizena  yang  masing-masing  telah  diberi  variasi  pH  yaitu  6,  7,  dan  8  kemudian  diinkubasi selama 7 hari. Biosurfaktan dari media produksi dipanen dengan sentrifuse dan diuji aktivitas biosurfaktan dengan 3 parameter uji yaitu uji drop collapse, uji oil displacement , dan uji emulsifikasi. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  biosurfaktan  yang  dihasilkan  dari  ketiga  jenis  media produksi mampu melarutkan solar. Biosurfaktan hasil produksi dari media limbah cair produksi tepung maizena pH 7 menunjukkan aktivitas melarutkan solar paling optimum dengan indeks emulsifikasi sebesar 63.88%.
Kata kunci:  biosurfaktan, Serratia marcescens strain MBC1, solar

## ABSTRACT
The risk of environmentall pollution due to diesel fuel spills increases every year therefore it takes an effort that is safe for the environment with low production costs. These bacteria are grown in the media productions that are Tryptone Water, cornstarch wastewater and tapioca wastewater each  of  them  had  been  given  pH  variation  that  are  6,  7,  and  8  then  incubated  for  7  days. Biosurfactants from media productions were harvested by centrifuge and tested for biosurfactant activity  with  3  test  parameter  there  are  drop  collapse  test,  oil  displacement  test,  and emulsification test. The result showed that the biosurfactants produced from the three types of media  production  were  able  to  dissolve  diesel  fuel.  Biosurfactant  produced  from  cornstarch wastewater pH 7 showed the most optimum dissolving of diesel fuel with emulsification index is 63.88%
Keywords:  biosurfactant, Serratia marcescens strain MBC1, diesel fuel

## PENDAHULUAN
Kebutuhan  energi  meningkat  seiring dengan peningkatan jumlah penduduk dan pertumbuhan  ekonomi.  Energi  dari  bahan bakar hidrokarbon menjadi kebutuhan yang
cukup  tinggi  di  Indonesia,  salah  satunya solar.  Menurut  data  dari  Badan  Pengelola Hilir  Minyak  dan  Gas  Bumi  (2019), penggunaan  solar  mencapai  7.56  juta kiloliter  (kL).  Penggunaan  solar  dalam jumlah yang berlebih sering kali berdampak
pada  perubahan  kualitas  lingkungan. Human  error dan  lemahnya  pengawasan menjadi  salah  satu  faktor  meningkatnya resiko  pencemaran.  Toksisitas  yang  tinggi pada  solar  akibat  panjangnya  rantai hidrokarbon  berpotensi  mencemari  air tanah,  mengubah  struktur  tanah,  dan berakibat pada kematian mikroorganisme di habitat  tersebut  karena  tidak  mampu  lagi untuk beradaptasi (Jagtap et al., 2014). Upaya  penanganan  cemaran  bahan bakar  khususnya  solar  menjadi  sebuah kebutuhan.
Penanganan cemaran lingkungan akibat
solar seringkali dilakukan  dengan  pengaplikasian  metode kimia.  Sayangnya,  biaya  dan  toksisitas senyawa  yang  digunakan  cukup  tinggi, selain  itu  resistensi  senyawa  kimia  sulit dipecah secara biologis sehingga berpotensi menimbulkan  pencemaran  baru  (Yasmin dan  Ria,  2018).  Munculnya  dampak  buruk yang  ditimbulkan  mendorong  eksplorasi bahan  alam  yang  lebih  ramah  lingkungan dengan  biaya  produksi  yang  terbilang murah.  Penggunaan  mikroorganisme  dari golongan bakteri pada metode bioremediasi menjadi  alternatif.  Salah  satu  bakteri  yang berpotensi  menghasilkan  senyawa  yang dapat melarutkan hidrokarbon berasal dari genus Serratia . Serratia sp.  merupakan  genus  bakteri potensial  dalam  mengatasi  permasalahan ini.  Genus  bakteri  ini  digunakan  karena mampu  mensintesis  senyawa  metabolit sekunder  biosurfaktan  berupa  serrawettin yang memiliki kemampuan dalam mengemulsi  dan  menurunkan  tegangan permukaan hidrokarbon. Selain itu, Serratia sp.  mampu  tumbuh  diberbagai  kondisi lingkungan dengan rentang pH yang cukup luas.  Untuk  menekan  biaya  produksi  yang tinggi,  maka  digunakan  media  alternatif. Pada  penelitian  ini  dilakukan  pengujian aktivitas  biosurfaktan  dari  bakteri Serratia marcescens
strain MBC1 koleksi Laboratorium Mikrobiologi FMIPA
Universitas  Lampung  dalam  melarutkan solar  menggunakan  media  limbah  cair tepung  tapioka,  limbah  cair  tepung maizena,  dan Tryptone  Water dengan masing-masing variasi pH 6, 7, dan 8 untuk mengetahui aktivitas optimum biosurfaktan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan menggunakan Tween 80  sebagai  kontrol  positif  dan akuades sebagai kontrol negatif. Data yang diperoleh  dianalisis  menggunakan  uji  non parametrik Friedman .  Tahap  perlakuan terdiri  atas  pembuatan starter ,  pembuatan media  produksi,  produksi  biosurfaktan diberbagai media, pemanenan biosurfaktan dari berbagai media, dan pengujian aktivitas biosurfaktan.
Pembuatan Starter Pembuatan starter dilakukan  dengan menambahkan  5  mL  inokulum  bakteri dengan kerapatan sel 10 8 sel.mL -1 ke dalam 100  mL  media Tryptone  Water kemudian diinkubasi  pada incubator  shaker selama  24 jam.

## Pembuatan Media Produksi
Media produksi yang digunakan antara lain Tryptone Water , limbah cair produksi tepung tapioka  dan  limbah  cair  produksi  tepung maizena.  Media Tryptone  Water dibuat dengan  melarutkan  5  g.L -1 sodium  klorida dan  10  g.L -1 tryptic  hydrolysate  of  casein ke dalam 1000 mL akuades. Media limbah cair produksi tepung maizena dan tapioka diberi penambahan  gula  dan  garam  masing- masing  sebanyak  0.5%.  Ketiga  media tersebut diatur variasi pH menjadi 6, 7, dan 8.  Penambahan  gula  berfungsi  sebagai co- substrate yang dapat meningkatkan pertumbuhan  bakteri,  sehingga  produksi biosurfaktan  yang  dihasilkan  semakin banyak. Hal ini akan mempengaruhi emulsi atau kelarutan pada solar (Putri, 2014).

## Produksi Biosurfaktan di Berbagai Media
Starter yang telah diinkubasi selama 24 jam ditambahkan  sebanyak  1  mL  ke  dalam  40 mL  masing-masing  media  produksi. Produksi  biosurfaktan  dilakukan  selama  7 hari pada incubator shaker.
Pemanenan Crude Biosurfaktan  dari Berbagai Media
Hasil produksi yang telah diinkubasi selama 7  hari  dimasukkan  ke  dalam  botol  valkon
dan  disentrifuse  selama  30  menit  dengan kecepatan  6000  rpm.  Supernatan  yang dihasilkan  dipisahkan  dari  pelet  untuk selanjutnya  digunakan  pada  pengujian aktivitas biosurfaktan.

## Pengujian Aktivitas Biosurfaktan
Pengujian  aktivitas  biosurfaktan  menurut Walter,  Syldatk,  dan  Hausmann  (2010), meliputi uji drop collapse , oil displacement , dan emulsifikasi. Ketiga pengujian
ini
menggunakan Tween 80  sebagai  kontrol positif dan akuades sebagai kontrol negatif. a. Uji drop collapse
Pengujian ini dilakukan dengan meneteskan 20 µL solar di atas parafilm, kemudian diteteskan 10 µL supernatan di atas  permukaan  solar.  Setelah  ditetesi supernatan,  diamati  perubahan  bentuk permukaan droplet atau tetesan.
b. Uji oil displacement Pengujian ini dilakukan dengan menuangkan  20  mL  akuades  ke  dalam cawan  Petri.  Pada  permukaan  akuades tersebut ditetesi 20 µL solar. Sebanyak 10 µL  supernatan  diteteskan  di  atas permukaan  solar.  Kemudian  diamati zona  jernih  yang  terbentuk  pada permukaan  solar.  Rumus  perhitungan zona jernih dapat dilihat pada Persamaan 1 dan Gambar 1.
Rumus pengukuran zona jernih:
aa ab+cd+ef 3 ………..............……………...(1)
Keterangan: ab  = diameter vertikal zona jernih cd    = diameter horizontal zona jernih ef      = diameter diagonal zona jernih
Gambar 1. Rumus Pengukuran Zona Jernih
c. Uji emulsifikasi
Uji  emulsifikasi  dilakukan  dengan mencampurkan supernatan dengan solar pada tabung reaksi dengan perbandingan 1:1 kemudian dihomogenkan  menggunakan vortex selama 3 menit dan diinkubasi selama 24 jam.  Setelah  itu  diamati  emulsi  yang terbentuk.  Rumus  perhitungan  indeks emulsifikasi  terdapata  pada  Persamaan 2.
E24 (%) = Tinggi lapisan emulsi Tinggi lapisan total x 100%........(2)
Keterangan: E24= Indeks emulsifikasi setelah 24 jam

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian  aktivitas  biosurfaktan  dilakukan dengan tiga parameter uji yaitu drop collapse , oil  displacement ,  dan  emulsifikasi  (Walter et al ., 2010). Pengujian
drop collapse menunjukkan  destabilisasi  bentuk droplet menjadi  datar  akibat  penurunan  tegangan permukaan  yang  diakibatkan  oleh  tetesan supernatan
yang
mengandung biosurfaktan.  Analisis  kualitatif  dilakukan dengan  mengamati  bentuk droplet pada masing-masing media dan variasi pH.
Pada  pengujian  ini  ketiga  jenis  media produksi dengan masing-masing variasi pH menunjukkan droplet berbentuk  datar,  hal ini  menunjukkan  indikator  positif  yaitu terdapat  kemampuan  biosurfaktan  dalam menurunkan  tegangan  permukaan  solar. Pada  pengujian  ini Tween 80  digunakan sebagai kontrol positif dan akuades sebagai kontrol  negatif  yang  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1. Bentuk droplet hasil pengujian drop collapse
Media pH Bentuk droplet Tryptone Water 6 Datar 7 Datar 8 Datar Limbah cair jagung 6 Datar 7 Datar 8 Datar Limbah cair singkong Kontrol Positif Kontrol Negatif 6 Datar 7 Datar 8 Datar Datar Cembung
Hasil pengujian drop collapse didapatkan dari  mengamati  perubahan  bentuk droplet , namun  tidak  dilakukan  pengukuran  tinggi ataupun  waktu  yang  dibutuhkan droplet untuk  berubah  bentuk.  Hasil  yang  didapat dibandingkan  dengan  bentuk droplet pada kontrol positif dan negatif. Hasil perlakuan menunjukkan  bentuk  yang  hampir  sama dengan kontrol positif (Gambar 2, 3, dan 4).
Gambar  2. Droplet yang  terbentuk  oleh biosurfaktan dari media Tryptone Water pH 6 (a), 7 (b), dan  8 (c).
Gambar  3. Droplet yang  terbentuk  oleh biosurfaktan  dari  media  limbah  cair  produksi tepung maizena pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c)
Gambar  4. Droplet yang  terbentuk  oleh biosurfaktan  dari  media  limbah  cair  produksi tepung tapioka pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c).
Pada pengujian ini, diameter zona jernih yang  paling  besar  dihasilkan  oleh biosurfaktan  yang  dihasilkan  dari  media produksi Tryptone  Water pH  7  sebesar  5.31 cm,  sedangkan  diameter  zona  jernih  yang paling  kecil  dihasilkan  oleh  biosurfaktan yang  dihasilkan  dari  media  limbah  cair produksi tepung tapioka pH 8 sebesar 2.93 cm  yang  terdapat  pada  Tabel  2.  Diameter zona  jernih  yang  dihasilkan  lebih  kecil dibandingkan dengan diameter zona jernih
kontrol  positif  yang  dapat  dilihat  pada Gambar 5, 6, dan 7.
Tabel 2. Diameter Zona Jernih Dari Pengujian Oil Displacement Media pH Diameter Zona (cm) Tryptone Water 6 4.46 7 5.31 8 5.20 Limbah Cair Tepung Maizena 6 3.46 7 5.27 8 4.00 Limbah Cair Tepung Tapioka Kontrol Positif Kontrol Negatif 6 2.70 7 5.03 8 2.93 6.93 0
Gambar    5.  Diameter  zona  jernih  oleh biosurfaktan dari media Tryptone Water pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c).
Gambar 6. Diameter zona jernih oleh biosurfaktan dari media limbah cair produksi tepung maizena pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c)
Gambar 7. Diameter zona jernih oleh biosurfaktan dari media limbah cair produksi tepung tapioka pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c).
Pada  pengujian  ini,  ketiga  jenis  media dan  variasi  pH  mampu  menghasilkan
diameter zona jernih. Diameter zona jernih paling  optimum  dihasilkan  pada  pH  7. Biosurfaktan  yang  dihasilkan  dari  ketiga jenis media produksi menghasilkan diameter  zona  jernih  berturut-turut  dari yang  paling  besar  adalah Tryptone  Water , dilanjutkan  dengan  media  limbah  cair produksi  tepung  maizena  dan  limbah  cair produksi tepung tapioka.
Pada  pengujian  ini  indeks  emulsifikasi paling  besar  dihasilkan  oleh  biosufaktan hasil  produksi  dari  media  limbah  cair produksi  tepung  maizena  dengan  pH  7 sebesar 63.88% sedangkan indeks emulsifikasi  paling  kecil  terbentuk  dari biosurfaktan  hasil  produksi  dari  media limbah cair produksi tepung tapioka dengan pH  8  sebesar  9.52%.  Indeks  emulsifikasi yang  dihasilkan  lebih  kecil  dibandingkan dengan  indeks  emulsifikasi  kontrol  positif. Seluruh  data  indeks  emulsifikasi  dapat dilihat pada Tabel 3 dan Gambar 8, 9, dan 10 menunjukkan emulsi yang terbentuk.
Tabel 3. Indeks Emulsifikasi Dari Pengujian Emulsifikasi  oleh Serratia  marcescens Strain MBC1
Media pH Indeks Emulsifikasi (%) Tryptone Water 6 37.06 7 47.49 8 19.36 Limbah cair Tepung Maizena 6 36.82 7 63.88 8 40.09 Limbah cair Tepung Tapioka Kontrol Positif Kontrol Negatif 6 13.92 7 28.46 8 9.52 91.45 0 Gambar  8.  Emulsi  yang  terbentuk  oleh biosurfaktan dari media Tryptone Water pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c).
Gambar  9.  Emulsi  yang  terbentuk  oleh biosurfaktan  dari  media  limbah  cair  produksi tepung maizena pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c).
Gambar  10.  Emulsi  yang  terbentuk  oleh biosurfaktan  dari  media  limbah  cair  produksi tepung tapioka pH 6 (a), 7 (b), dan 8 (c)
Pada  pengujian  ini,  ketiga  jenis  media dan  variasi  pH  mampu  menghasilkan emulsi.  Emulsi  paling  optimum  terbentuk pada  pH  7.  Biosurfaktan  hasil  dari  media produksi menghasilkan indeks emulsifikasi berturut-turut dari yang paling besar adalah limbah  cair  produksi  tepung  maizena, dilanjutkan  dengan  media Tryptone  Water dan  limbah  cair  produksi  tepung  tapioka. Emulsi  yang  terbentuk  berwarna  putih kekuningan di antara solar dan supernatan.
Penelitian ini dilakukan untuk
mengetahui kemampuan biosurfaktan yang disintesis  oleh  bakteri Serratia  marcescens strain  MBC1  dalam  melarutkan  solar.
Biosurfaktan bekerja dengan cara
menurunkan  tegangan  permukaan  solar. Pada Serratia  marcescens strain  MBC1 senyawa  biosurfaktan  yang  dihasilkan berupa serrawettin. Serrawettin merupakan golongan  biosurfaktan  lipopeptida  dengan berat  molekul  514.7  g.mol -1 .  Produksi biosurfaktan  dalam  hal  ini  serrawettin dipengaruhi  oleh  beberapa  hal,  antara  lain substrat pertumbuhan, sumber nutrisi, pH, salinitas, dan pertumbuhan bakteri (Araujo et al ., 2019). Pengujian aktivitas
biosurfaktan dilakukan  dengan  tiga  parameter  uji  yaitu drop
collapse , oil displacement , dan emulsifikasi  (Walter et  al .,  2010).  Media produksi yang digunakan dalam penelitian ini antara lain Tryptone Water dan dua jenis low cost medium yaitu  limbah cair produksi tepung meizena dan tapioka. Selain mampu menekan  biaya  produksi,  limbah  cair tersebut masih memiliki
beberapa kandungan yang dapat memacu
pertumbuhan bakteri dan produksi biosurfaktannya.  Limbah  cair  produksi tepung  maizena  masih  mengandung karbohidrat,  mineral,  dan  fosfat  (Furqani, 2018),  sementara  limbah  cair  produksi tepung tapioka masih mengandung karbohidrat,  mineral,  fosfat,  dan  nitrogen (Suryanti et al ., 2014).
Media  produksi  yang  digunakan  diberi variasi  pH  dengan  tujuan  mengetahui  pH optimum  biosurfaktan  dalam  melarutkan solar.  Variasi  pH  yang  dipilih  adalah  6,  7, dan  8.  Beberapa  hal  yang  mendasari pemilihan  variasi  pH  antara  lain  pH  6,  7, dan  8  mewakili  suasana  asam,  netral,  dan basa.  Selain  itu,  kebanyakan  bakteri khususnya  genus Serratia mampu  tumbuh pada kisaran pH 5-9 yang mana pH 5 dan 9 adalah  pH  minimum  dan  maksimum bakteri tersebut untuk tumbuh. Ciccyliona et al .  (2012)  melakukan  pengujian  aktivitas biosurfaktan pada pH 6, 7, dan 8. Ketiganya menunjukkan terbentuknya indikator positif pada masing-masing uji. Oleh karena itu  diduga  pH optimum  aktivitas biosurfaktan berkisar antara 6, 7, dan 8. Pengujian drop collapse adalah salah satu pengujian  kualiatif  untuk  mendeteksi adanya kandungan biosurfaktan pada suatu mikroba.  Indikator  pengujian  ditentukan oleh  destabilisasi  bentuk  dari droplet atau tetesan  supernatan  di  atas  minyak.  Hasil
tetesan  yang  berbentuk  datar  menandakan adanya  kandungan  biosurfaktan  di  dalam supernatan.
Gambar  11.  Ilustrasi  Mekanisme  Gaya Kohesi  dan  Adhesi  Dalam  Mempengaruhi Bentuk Droplet
Biosurfaktan  memiliki  dua  kepolaran sekaligus  yaitu  hidrofilik  dan  hidrofobik. Pada  kontrol  negatif,  bentuk droplet cembung  karena  sifat  minyak  yang hidrofobik  tidak  dapat  menarik  sifat hidrofilik  pada  parafilm.  Pada  kondisi  ini, gaya kohesi atau gaya tarik menarik partikel yang  sejenis  lebih  besar  dari  pada  gaya adhesi,  sehingga  tidak  terjadi  penurunan tegangan  permukaan.  Setelah  minyak ditetesi  supernatan  yang  mengandung biosurfaktan,  maka  daerah  hidrofilik supernatan  akan  berikatan  dengan  daerah hidrofilik  parafilm,  dan  daerah  hidrofobik supernatan  akan  berikatan  dengan  daerah hidrofobik  minyak,  hal  ini  menyebabkan gaya adhesi dan kohesi menjadi sama besar. Akibatnya  terjadi  penurunan  tegangan permukaan  yang  ditandai  dengan  bentuk datar  pada droplet (Rodriguez et  al .,  2015). Pengujian  ini  tidak  terlalu  sensitif  karena bentuk  tetesan  tidak  memiliki  perbedaan yang signifikan pada masing-masing media dan variasi pH. Namun destabilisasi droplet ini tetap bisa digunakan untuk deteksi awal adanya senyawa biosurfaktan.
Pengujian kedua yang dilakukan adalah oil  displacement yaitu  metode  yang digunakan  untuk  mengetahui  aktivitas biosurfaktan  dengan  indikator  positif
berupa  terbentuknya  zona  jernih  pada permukaan  minyak.  Pengukuran  zona jernih  dilakukan  menggunakan  jangka sorong  berdasarkan  rumus  perhitungan diameter  zona  jernih.  Perhitungan  dengan rumus tersebut karena zona yang terbentuk pada  pengujian oil  displacement tidak berbentuk  bulat  sempurna,  sehingga diperlukan  pengukuran  dari  tiga  sisi berbeda.
Pengujian oil displacement adalah metode yang  mudah  dan  cepat  dalam  mendeteksi aktivitas  biosurfaktan,  dilakukan  dengan melihat  zona  perpindahan  yang  terbentuk di  atas  permukaan  minyak  seperti  pada gambar.  Zona  jernih  menandakan  adanya biosurfaktan  yang  terkandung  dalam supernatan.  Zona  jernih  membentuk  misel akibat  bagian  hidrofobik  dan  hidrofilik supernatan  menyatu  dan  menyebabkan terjadinya tekanan yang membuat tegangan permukaan  solar  menurun,  sehingga terbentuk  zona  jernih  pada  bagian  yang ditetesi supernatan (Gozan et al ., 2014). Berdasarkan hasil yang didapat, diameter  zona  jernih  pada  media Tryptone Water paling  besar  dibandingkan  dengan media produksi lain. Hal ini karena Tryptone Water adalah  media  awal  pertumbuhan Serratia marcescens strain MBC1 yang paling optimum
dibandingkan media pertumbuhan  lain.  Media  ini  sangat  cocok digunakan untuk produksi family enterobacteriaceae.  Selain  itu,  produksi biosurfaktan  akan  meningkat  seiring dengan  pemberian  sumber  nitrogen  yang tinggi  (Yuliana et  al .,  2019),  hal  ini  sesuai dengan  komposisi Tryptone  Water yang terdiri  atas Tryptone sebagai  sumber nitrogen.  Media Tryptone  Water memiliki kisaran  pH  7.0-7.5.  Hal  ini  menjadi  salah satu  alasan  aktivitas  biosurfaktan  paling tinggi  terbentuk pada  pH  7,  karena  pH  ini sangat  sesuai  dengan  pH  pertumbuhan genus Serratia .
Pengujian ketiga yang dilakukan adalah uji  emulsifikasi.  Indikator  positif  ditandai dengan terbentuknya emulsi. Terbentuknya emulsi  menandakan  adanya  aktivitas biosurfaktan.  Emulsi  yang  terbentuk dihitung indeks emulsifikasi menggunakan jangka  sorong  dengan  rumus  persentase indeks  emulsifikasi  setelah  24  jam  karena
pada waktu tersebut emulsi yang terbentuk paling stabil.
Biosurfaktan  memiliki  daerah  dengan dua kepolaran yang berbeda yaitu hidrofilik dan  hidrofobik.  Daerah  yang  bersifat hidrofilik
akan
berikatan dengan supernatan  dan  daerah  yang  bersifat hidrofobik  akan  berikatan  dengan  minyak. Kondisi ini menyebabkan biosurfaktan yang terkandung  dalam  supernatan  mampu menjembatani  penyatuan  minyak  dengan supernatan  sehingga  terbentuk  emulsi (Reningtyas, 2015).
Berdasarkan  hasil  yang  didapat,  indeks emulsifikasi  yang  paling  tinggi  terbentuk dari  biosurfaktan  yang  dihasilkan  dari media limbah cair produksi tepung maizena dengan pH 7,
sedangkan indeks emulsifikasi  paling  rendah  terbentuk  dari biosurfaktan  yang  dihasilkan  dari  media limbah  cair  produksi  tepung  tapioka dengan  pH  8.  Media  limbah  cair  produksi tepung  maizena  memiliki  kandungan  gula dan  protein  yang  cukup  tinggi,  hal  ini digunakan  bakteri  sebagai  sumber  karbon dalam  proses  produksi.  Hasil  penelitian Rodriguez et  al. (2015)  melaporkan  bahwa medium  limbah  cair  produksi  tepung maizena  mampu  meningkatkan  produksi biosurafktan  yang  dihasilkan  oleh Serratia marcescens.
Penelitian Ciccyliona et al. (2012) terkait produksi biosurfaktan dengan variasi pH 6, 7,  dan  8  menunjukkan  bahwa  ketiga  pH tersebut mampu memacu produksi biosurfaktan, hanya saja memiliki kemampuan yang berbeda. Perbedaan hasil dapat terjadi akibat pertumbuhan optimum jenis mikroba yang berbeda-beda. Komarawidjaja  (2009)  melaporkan  bahwa bakteri  yang  mensintesis  biosurfaktan masih mendegradasi hidrokarbon pada pH 5.5-8.0.  Namun,  aktivitas  optimum  terjadi pada pH netral sampai sedikit asam. Hal ini mendukung  hasil  penelitian  yang  didapat dalam penelitian ini.
Faktor  selain  pH  adalah  jenis  substrat atau  media  yang  digunakan.  Pada penelitian ini Tryptone Water dan limbah cair produksi  tepung  maizena  menunjukkan aktivitas  yang  lebih  baik  dari  pada  limbah cair produksi tepung tapioka. Hal ini terjadi karena  adanya  perbedaan  lama  masa penyimpanan,  proses  pemasakan,  tingkat
kematangan,  dan  kandungan  nutrisi  dari masing-masing  media. Tryptone  Water mengandung  10  g.L -1 protein  dan  5  g.L -1 garam,  sementara  dalam  100  g  jagung kandungan  protein  sebesar  3.4  g,  garam  1 mg, dan lemak 1.5 g. Dalam 100 g singkong kandungan  protein  hanya  1.0  g  dan  lemak 0.3  g  (Direktorat  Gizi  Depkes  RI,  1981). Menurut  Cooper et  al. (1981),  mikroba membutuhkan  protein  dan  garam  yang tinggi  untuk  tumbuh  dan  membentuk biosurfaktan.  Dalam  hal  ini  limbah  cair produksi tepung tapioka memiliki komposisi  yang  jumlahnya  lebih  rendah dari  media  produksi  lain,  tentunya berdampak  pada  rendahnya  aktivitas biosurfaktan yang dihasilkan.
Dari  penelitian  ini  disimpulkan  bahwa variasi  pH  dan  media  mempengaruhi kemampuan  biosurfaktan  yang  dihasilkan oleh Serratia marcescens strain MBC1 dalam melarutkan solar. Hal ini dibuktikan dengan terbentuknya  hasil  positif  pada  ketiga parameter  uji  dengan  nilai  yang  berbeda- beda.  Biosurfaktan  paling  baik  dihasilkan dari  media  limbah  cair  produksi  tepung maizena pH 7 dengan aktivitas melarutkan solar  paling  optimum  yang  ditunjukkan oleh indeks emulsifikasi sebesar 63.88%.

## DAFTAR PUSTAKA
Araujo,  H.  W.  C.,  Andrade,  R.  F.  S., Rodriguez,  D.  M.,  Ribeaux,  D.  R., Silva,  C.  A.  A.,  &  Takaki,  G.  M.  C. (2019). Sustainable biosurfactant produce  by Serratia  marcescens UCP
1549 and its suitability for agricultural and marine bioremediation application. Microbial  Cell  factories , 18(2),  1-13.  Doi:  10.1186/s12934-018- 1046-0
Ciccyliona,  D.  Y.,  dan  Nawfa,  R.  (2012). Pengaruh  pH  terhadap  produksi biosurfaktan oleh bakteri Pseudomonas aeruginosa lokal. Jurnal Sains dan Seni Pomits , 1(1), 1-6.
Cooper,  D.  D.  G  &  Paddock,  D.  A.  (1984). Production  of  a  biosurfactans  from torulopsis
bombicola. Applied Environmental Microbiology , 47, 173-176.
Direktorat  Gizi  Departemen  Kesehatan  RI.
(1981). Daftar Komposisi Bahan
Makanan .  Penerbit  Bhratara  Karya Aksara. Jakarta. Furqani, L. H. (2018). Pemanfaatan air rebusan biji dan tongkol jagung sebagai substrat produksi bakteri Bacillus pumilus UAAC 21623 dan uji aktivitas antibakterinya [skripsi, Universitas Andalas]. Digital Library. Gozan,  M.,  Fatimah,  I.  N.,  Nanda,  C.,  dan
Haris, A. (2014). Produksi biosurfaktan Pseudomonas  aeruginosa dengan  substrat  limbah  biodiesel terozonasi untuk
peningkatan perolehan  minyak  bumi. Journal  of Agro-based Industry, 31(2), 39-44. Jagtap, S. S., Woo, M., Kim, T. S., Dhiman, S. S.,  Kim,  D.,  &  Lee,  J.  K.  (2014).
Phytoremediation of diesel contaminated soil and
saccharification  of  the  resulting biomass. Fuel , 116, 292-298. Komarawidjaja, W. (2009). Karakteristik dan pertumbuhan  konsorsium  mikroba lokal  dalam  media  mengandung minyak bumi. Jurnal Teknik
Lingkungan , 10(1), 114-119. Putri,  L.  K.  (2014).  Pengaruh  penambahan glukosa  sebagai  co-substrat  dalam pengolahan  limbah  minyak  solar menggunakan sistem High Rate Alga Reactor  (HRAR)  [skripsi,  Institut Teknologi Sepuluh November]. Digital Library.
Reningtyas  dan  Mahreni,  R.  (2015).
Biosurfaktan. Eksergi , 12(2), 12-22. Rodriguez, D. M., Andrade, R. F. S., Ribeiro, D.  L.  R.,  Ribeaux,  D.  R.,  Lima,  R.  A., Araujo,  H.  W.  J.  &  Takaki,  G.  M.  C. (2015).  Bioremediation  of  petroleum derivative using biosurfactant produced  by Serratia  marcescens UCP/WFCC  1549  in  low  cost medium. International  Journal  of Current  Microbiology  and  Applied Science , 4(7), 550-562. Suryanti,  Y.,  Hastuti,  S.,  Handayani,  D.  S., dan  Windrawati.  (2014).  Biosintesis biosurfaktan oleh
Pseudomonas aeruginosa menggunakan  limbah  cair industri  tapioka  sebagai  media. ALCHEMY  jurnal  penelitian  kimia ,
10(1), 22-30.
Walter,  V.,  Syldatk,  C.,  Hausmann,  R.  (2010).
Screening  concepts  for  the  isolation  of biosurfactant  producing  microorganisms.
Adv  Exp  Med  Biol .,  672,  1-13.  Doi: 10.1007/978-1-4419-5979-9_1
Yasmin,  Z.,  Wulansarie,  R.  (2018).  Review perbandingan pencemaran minyak di perairan dengan proses bioremediasi menggunakan  metode  biostimulus
dan bioaugmentasi. Jurnal Reka Buana , 3(1), 67-72. Doi: 10.33366/rekabuana.v3i1.943 Yuliana, C., Hertadi, R., dan Wahyuningrum,  D.  (2019).  Produksi dan  optimasi  biosurfaktan  dari bakteri  halofilik Chromohalobacter japonicas BK-AB18. CHEESA: Chemical Engineering  Research  Article ,  2(2),  56- 65. Doi: 10.25273/cheesa.v2i2.5410