## Original Article
DOI : 10.35311/jmpi.v10i1.464
Uji  Stabilitas  Warna  dari  Ekstrak  Bunga  Kiacret  ( Spathodea  campanulata P.

## Beauv) Sebagai Sumber Alternatif Eksipien Farmasi
Bratandari Hana Candrakanti*, Hifdzur Rashif Rija’i, Islamudin Ahmad Fakultas Farmasi, Universitas Mulawarman

## ABSTRAK
Kiacret ( Spathodea campanulata P. Beauv.) merupakan l salah satu l tanaman tropis yang l terdapat di l Indonesia. Pada l bagian bunga dari tanaman kiacret mengandung pigmen warna antosianin. Oleh karena itu, dengan memanfaatkan bunga kiacret sebagai pewarna alami dapat meningkatkan nilai guna  terhadap  bunga  kiacret.  Penelitian l ini  bertujuan l untuk  mengetahui l perbedaan  jumlah rendemen, kadar l total l antosianin, dan l stabilitas zat l warna ekstrak l etanol 70% l dan l 96% bunga kiacret terhadap l pengaruh pH (3–6), suhu (40  C–80  C), dan waktu penyimpanan selama 5 hari. Penelitian l ini menggunakan l metode eksperimen laboratorium melalui proses l ekstraksi sampel dengan l metode l maserasi,  uji  kadar  antosianin,  dan  uji  stabilitas  ekstrak.  Hasil l penelitian menunjukkan l bahwa ekstrak l etanol l 70% bunga kiacret memperoleh nilai l rendemen 42,02%, dan kadar antosianin 8,908 mg/L, sedangkan ekstrak etanol 96% bunga kiacret memperoleh rendemen 35,72%, dan kadar antosianin 10,949 mg/L. Ekstrak bunga kiacret stabil pada pH 3–4, suhu l 40  C, dan l penyimpanan  selama l satu l hari.  Hasil l stabilitas  terbaik  diperoleh  pada  ekstraksi  bunga kiacret  dengan  pelarut  etanol  96%  yang  dapat  dilihat  pada  absorbansi  tiap  perlakuan  yang diperoleh lebih tinggi dibandingkan dengan pelarut etanol 70%.
Kata Kunci: Spathodea campanulata P. Beauv., Bunga Kiacret, Antosianin, Stabilitas Zat Warna

## ABSTRACT
Kiacret ( Spathodea campanulata P. Beauv.) is l one of l the tropical plants l found in l Indonesia. The l part  of  kiacret  flower  contains  an  anthocyanin  pigment.  Therefore,  by  using  kiacret  flower  as natural  color  pigment  can  increase  use  values  for  kiacret  flower.  The  purpose  of  study  to  see differences in yields, total anthocyanin levels, and pigment stability of the 70% and 96% ethanol extract of the kiacret flowers consist the effect of pH (3–6), temperature (40  C–80  C), and storage time for 5 days. This research is a laboratory experiment with an sample extraction process using the maceration method, anthocyanin level test, and extract stability test. The l result showed l that the l 70% ethanol l extract kiacret flowers obtained the l yield of 42,02%, and anthocyanin level of 8,908  mg/L,  while  the  96%  ethanol  extract  kiacret  flowers  obtained  thee  yield  of  35,72%,  and anthocyanin level of 10,949 mg/L. The extract of kiacret flower stable at pH 3–4, temperature 40  C, and storage for one day. The best result of stability obtained from the extraction kiacret flower with 96%  ethanol  solvent  that  can  be  seen  at  higher  absorbance  per  treatment  compared  to  the  70% ethanol solvent.
Keywords: Spathodea campanulata P. Beauv., Kiacret Flower, Anthocyanin, Pigment Stability

## PENDAHULUAN
Seiring  dengan  perkembangan  industri farmasi  khususnya  industri  pembuatan  obat  dan l terbatasnya  jumlah l serta  kualitas l zat  pewarna l alami  menyebabkan l peningkatan  pemakaian l zat pewarna  sintetis l sebagai  eksipien  farmasi.  Namun penggunaan  zat  pewarna  sintetis  sebagai  eksipien obat  kurang  aman  untuk  konsumen  karena beberapa  zat  pewarna  sintetis  terdapat  kandungan logam l berat  yang l berbahaya  bagi l kesehatan.  Zat pewarna  alami  dari  tumbuhan  dapat l digunakan sebagai l pengganti pewarna l sintetis untuk mengurangi  efek-efek  negatif  dari  penggunaan  zat pewarna sintetis (Hidayah et al., 2014).
Bunga  pada  tanaman  kiacret  ( Spathodea campanulata P. Beauv.) memiliki warna merah-jingga yang  dapat  berpotensi  sebagai  pewarna  alami. Bunga  kiacret  mengandung  flavonoid,  alkaloid, terpenoid,  tanin  (Jafar  et  al.,  2020),  dan  antosianin
(Wagh  &  Butle,  2018).  Bunga  kiacret  mengandung antosianin  dan  telah  dibuktikan  bahwa  ekstrak etanol bunga kiacret memiliki aktivitas antioksidan pada  peroksidasi  lipid  mikrosom  hati  yang diinduksi oleh Fe 3+ -asam askorbat (Heim et al., 2012). Aktivitas  antioksidan  yang  terdapat  pada  bunga kiacret disebabkan oleh adanya kandungan senyawa flavonoid dan antosianin yang terkandung didalamnya (Jafar et al., 2020).
Pemanfaatan bahan alam seperti penggunaan bunga kiacret sebagai eksipien farmasi khususnya  pewarna  menjadi  salah  satu  alternatif untuk  mengurangi  penggunaan  pewarna  sintetis. Namun,  masalah  utama  yang  dihadapi  dalam penggunaan  pewarna  dari  bahan  alam  sebagai pearna  pada  sediaan  farmasi  adalah  kestabilan warna  yang  dihasilkan.  Stabilitas  warna  dari pigmen l antosianin  dipengaruhi l oleh  beberapa l faktor seperti l pH, l suhu, dan waktu penyimpanan l
Sitasi: Candrakanti, B. H., Rija’i, H. R., & Ahmad, I. (2024). Uji Stabilitas Warna dari Ekstrak Bunga Kiacret (Spathodea campanulata P. Beauv) Sebagai Sumber Alternatif Eksipien Farmasi. Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, 10(1), 10-18. https://doi.org/10.35311/jmpi.v10i 1.464
Submitted: 02 Februari 2024 Accepted: 25 April 2024 Published: 30 Juni 2024

## *Penulis Korespondensi:
Bratandari Hana Candrakanti Email:
bratandarihana@gmail.com
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License
(Khoo  et  al.,  2017).  Hingga  saat  ini  belum  ada penelitian  mengenai  stabilitas  zat  warna  ekstrak bunga  kiacret.  Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan kajian  mengenai  stabilitas  warna  antosanin  dari ekstrak  bunga  kiacret  sebagai  sumber  alternatif eksipien farmasi khususnya pewarna.
Pemilihan  pelarut  dan  konsentrasi  pelarut untuk mengekstraksi suatu senyawa akan berpengaruh terhadap kadar senyawa bioaktif yang diperoleh (Riwanti et al., 2020). Antosianin l bersifat polar l sehingga antosianin akan larut pada l pelarut polar l seperti etanol l (Nasrullah et al., 2020). Pelarut l etanol  dengan  konsentrasi l 70%  dan l 96% merupakan l pelarut  yang l biasa  digunakan l untuk mengekstraksi l senyawa fenolik termasuk antosianin.  Penggunaan  pelarut  etanol l 70%  dapat l menarik senyawa l lebih banyak karena l etanol l 70% bersifat  lebih  polar  dibanding  etanol  96%. Berdasarkan  penelitian l yang  dilakukan l oleh (Agustin  &  Ismiyati,  2015)  mengenai l pengaruh konsentrasi l pelarut  etanol l 60%, l 70%, l 80%,  90% l dan l 96% terhadap kadar antosianin ekstrak bunga kembang  sepatu  menunjukkan  bahwa  kadar antosianin  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak  etanol 96%.  Hingga  saat  ini  belum  ditemukan  data mengenai  konsentrasi  pelarut  etanol  yang  tepat dalam  ekstraksi  bunga  kiacret  dengan  metode maserasi.
Dalam  penelitian l ini  akan l dilakukan ekstraksi l menggunakan metode l maserasi dengan l variasi  konsentrasi  pelarut l etanol  yaitu  pelarut l etanol  70% l dan l 96%  yang  bertujuan l untuk mengetahui  perbedaan  jumlah l rendemen,  dan l kadar  total l antosianin  ekstrak  dari l ekstrak  etanol 70% l dan l 96%  bunga  kiacret,  serta  mengetahui stabilitas  zat  warna  dari l ekstrak  etanol l 70%  dan l 96%  bunga  kiacret  terhadap l pengaruh  pH,  suhu, dan waktu penyimpanan sehingga dapat dimanfaatkan sebagai sumber alternatif eksipien

## METODE PENELITIAN
Penelitian l ini  menggunakan l metode eksperimen l laboratorium yang l terdiri atas l empat tahapan  yakni  preparasi  sampel,  ekstraksi  sampel, uji  antosianin,  uji  kadar l antosianin,  dan l uji stabilitas l ekstrak  terhadap l pengaruh  pH, l suhu, dan l waktu penyimpanan.
Alat Alat l yang  digunakan l pada  penelitian l ini adalah l batang l pengaduk, l blender,  botol l coklat, corong  kaca,  gelas l kimia,  gelas l ukur,  kaca l arloji, kuvet,  labu l alas  bulat,  mangkok  kaca,  penjepit tabung reaksi,  pH meter digital,  pipet ukur 10 mL,
pipet l tetes, l propipet,  rak l tabung l reaksi, rotary l evaporator , sendok l tanduk, spatel l besi, spektrofotometer UV-Vis, tabung reaksi, timbangan analitik, toples kaca, vial, dan l waterbath .
Bahan
Bahan l yang digunakan l pada penelitian l ini adalah l aquades, asam sitrat, bunga kiacret, etanol l 70%, etanol l 96%, HCl, KCl, kertas l saring, natrium sitrat, NaOH.

## Preparasi Sampel
Bunga  kiacret  dikumpulkan  dan  disortasi basah  dengan  memisahkan  bagian  bunga  dari tangkai  bunga,  lalu  dibersihkan  dan  dicuci. Kemudian  dikeringkan  ditempat  terlindung  dari cahaya matahari. Setelah itu, bunga kiacret disortasi kering  dan  dihaluskan  dengan  blender  sehingga didapatkan serbuk bunga kiacret (Ayu et al., 2022).

## Ekstraksi Sampel
Ekstraksi l dilakukan menggunakan metode l maserasi dengan variasi konsentrasi pelarut l etanol (70% dan 96%). Serbuk l bunga kiacret sebanyak 250 gram l dimasukkan  ke l dalam  masing-masing wadah l maserasi  (toples  kaca)  dan  ditambahkan l pelarut  etanol l 70%  dan  96%.  Sampel  kemudian diletakkan  pada l suhu  kamar l ( l 25-30  C)  selama l 2x24 jam l sambil sesekali diaduk. Kemudian maserat disaring  untuk  memisahkan  ampas  dengan  filtrat, lalu  dipekatkan l menggunakan rotary l evaporator sehingga l didapatkan ekstrak l kental bunga kiacret. Selanjutnya dilakukan perhitungan persen rendemen (Ayu et al., 2022).

## Uji Antosianin
Larutan  ekstrak  bunga  kiacret  sebanyak  1 mL l ke  dalam l masing-masing l tabung  reaksi l kemudian ditambahkan HCl l 2M sebanyak l 3 tetes l dan NaOH 2M tetes l demi tetes l ke dalam l masing- masing l tabung l reaksi.  Tabung  reaksi  yang l ditambahkan  HCl  2M  kemudian  dipanaskan selama l 2  menit l pada  suhu l 100  C.  Pada penambahan l HCl  2M,  larutan l yang  positif mengandung l antosianin  akan l terbentuk  warna l merah  dan  tidak  berubah.  Sedangkan  pada penambahan  NaOH  2M,  larutan  yang  positif mengandung  antosianin  akan  berubah  warna l dari warna  merah l menjadi  hijau l kebiruan  dan l perlahan-lahan l memudar (Herfayati et al., 2020).
Uji Kadar Antosianin Penentuan kadar l total antosianin l dilakukan  menggunakan l metode  pH l differensial. Ekstrak  bunga  kiacret  dilarutkan l dengan  dua l variasi buffer l yaitu buffer l pH 1 l dan buffer l pH l 4,5. Sebanyak  1  mL  larutan  ekstrak  bunga  kiacret  5000
ppm dilarutkan dalam 9 l mL buffer pH l 1.  Hal l yang sama l juga  dilakukan l untuk  pH l 4,5.  Kemudian larutan l tersebut diinkubasi l selama 15 l menit pada l suhu ruang l (suhu 20  C-25  C). l Selanjutnya, diukur l absorbansinya menggunakan l spektrofotometri l UV-Vis l pada panjang l gelombang 510 dan 700 nm l (Octaviani et al., 2016).
Kadar total antosianin dalam ekstrak bunga kiacret  ( Spathodea  campanulata P.  Beauv.)  diperoleh dengan menggunakan rumus sebagai berikut: Perhitungan absorbansi antosianin:
A = (A 𝜆 510-A 𝜆 700)pH 1,0 – (A 𝜆 510-A 𝜆 700)pH 4,5
Keterangan:
A = Absorbansi 𝜆 510 = Panjang l gelombang 510 l nm 𝜆 700 = Panjang l gelombang 700 l nm
Perhitungan kadar total l antosianin:
Antosianin (mg/L) = 𝐴 𝑥 𝐵𝑀 𝑥 𝐹𝑃 𝑥 1000
 𝑥 𝑙
Keterangan:
A = Absorbansi BM l
=  Berat l molekul  Antosianidin- l 3-glikosida (449,2 g/mol)
FP l = Faktor l pengenceran  l =  Absortivitas  molar l Antosianidin- l 3- glikosida ( l 26.900 l L/mol l cm) 𝑙 l = Lebar l kuvet (1 l cm) Uji Stabilitas Ekstrak 1. Pengaruh pH
Ekstrak bunga kiacret 5000 ppm sebanyak 2 mL  untuk  setiap  masing-masing  kelompok. Kemudian dari masing-masing kelompok ditambahkan  buffer  sitrat  hingga  10  mL  sesuai dengan variasi pH yaitu pH 3, 4, 5, dan 6. Larutan l tersebut diinkubasi l selama 1 l jam pada l suhu ruang (suhu
20  C-25  C). Selanjutnya, diukur l absorbansinya  dengan l spektrofotometeri l UV-Vis l pada  panjang l gelombang l maksimum,  kemudian dihitung persen
perubahan absorbansi
menggunakan rumus persentase perubahan absorbansi (Fauziah et al., 2016).
2. Pengaruh Suhu
Ekstrak bunga kiacret 5000 ppm sebanyak 10 mL  untuk  setiap  masing-masing  kelompok.  Lalu dipanaskan  diatas water  bath sesuai  dengan  variasi suhu  yaitu l 40  C, l 50  C, l 60  C, l 70  C,  dan l 80  C selama l 1 l jam.  Selanjutnya,  diukur l absorbansinya dengan  spektrofotometeri l UV-Vis l pada  panjang l gelombang l maksimum, kemudian dihitung l persen perubahan absorbansi menggunakan l rumus
persentase  perubahan  absorbansi  (Fauziah  et  al., 2016).
3. Pengaruh Waktu Penyimpanan
Ekstrak bunga kiacret 5000 ppm sebanyak 10 mL untuk setiap masing-masing kelompok. Larutan tersebut  disimpan  didalam  desikator  pada  suhu ruang  (suhu  20  C-25  C).  Selanjutnya,  larutan tersebut diukur absorbansinya l pada hari l ke- l 0, l ke- l 1, l ke-2, l ke-3, l ke-4,  dan l ke-5  dengan l spektrofotometeri l UV-Vis l pada panjang l gelombang  maksimum,  kemudian  dihitung  persen perubahan absorbansi menggunakan rumus persentase  perubahan  absorbansi  (Fauziah  et  al., 2016).
Data  absorbansi  yang  diperoleh  dari  setiap perlakuan  pH,  suhu,  dan  waktu  penyimpanan, kemudian dihitung persentase perubahan absorbansi  dengan  menggunakan  rumus  sebagai berikut:
% Perubahan Absorbansi = 𝐴1−𝐴0 𝐴0 x 100%
Keterangan: A0 l = Absorbansi l sebelum perlakuan A1 l = Absorbansi l setelah perlakuan l

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Bunga  kiacret  diekstraksi  menggunakan metode  ekstraksi  dengan l pelarut  etanol l dengan berbagai  konsentrasi l (70%  dan l 96%).  Perbedaan jenis pelarut l berpengaruh signifikan pada rendemen hasil ekstraksi. Terdapat beberapa faktor yang  mempengaruhi  jumlah  rendemen  yaitu metode l ekstraksi,  lama l waktu l ekstraksi,  ukuran l simplisia,  dan l jenis  pelarut l (Sayuti,  2017). Penggunaan pelarut l etanol 70% l mampu menghasilkan l jumlah rendemen l yang lebih l besar dibandingkan l pelarut  etanol l 96%.  Pelarut l etanol 70%  mengandung  gugus  OH - lebih  banyak dibanding  pelarut  etanol  96%  sehingga  lebih  polar dan  dapat  menarik  senyawa  yang  lebih  banyak (Shofi et al., 2020).
Gambar 1. Bunga dari Tanaman Kiacret ( Spathodea campanulata P. beauv)
Rendemen  yang l dihasilkan  dari l ekstraksi bunga l kiacret  menggunakan l pelarut  etanol l berbagai konsentrasi (70% dan 96%) dengan masing-
masing  menggunakan  250  gram  berat  simplisia ditujukkan pada l Tabel l 1. Nilai l rendemen ekstrak l etanol 70% bunga kiacret sebesar 42,02%, sedangkan nilai  rendemen  ekstrak  etanol  96%  bunga  kiacret sebesar  36,72%.  Nilai  rendemen  yang  dihasilkan memiliki  perbedaan  yang  signifikan  dikarenakan penggunaan konsentrasi pelarut yang berbeda pada proses ekstraksi. Semakin l tinggi konsentrasi l etanol
yang l digunakan maka l akan sedikit l ekstrak yang l dihasilkan.  Hal l ini  dikarenakan l etanol  yang l terkandung pada l pelarut, semakin l besar konsentrasi  etanol  maka l akan  semakin l banyak yang l menguap  ketika l di  uapkan l dengan rotary l evaporator sehingga l volume ekstrak l yang dihasilkan semakin l sedikit (Agustin & Ismiyati, 2015).
Tabel 1. Rendemen Ekstrak Bunga Kiacret
No. Pelarut l Berat l Simplisia Rendemen l 1 Etanol l 70% 250 gram 42,02% 2 Etanol 96% 250 gram 35,72%

## Uji Antosianin
Uji  antosianin  ekstrak  bunga  kiacret bertujuan sebagai uji pendahuluan untuk mengetahui keberadaan pigmen antosianin dengan l melihat  perubahan l warna  yang l terjadi  setelah l diberikan  atau l ditetesi  pereaksi l pada  ekstrak l bunga  kiacret.  Hasil  uji  antosianin  yang  diperoleh dari kedua sampel ekstrak bunga kiacret ditunjukkan pada Tabel 2. Diketahui bahwa ekstrak l etanol  70% l dan  96% l bunga  kiacret  menunjukkan
hasil  positif  pada  uji  antosianin.  Hal l ini  ditandai l dengan  perubahan l warna  yang l terjadi,  ketika ditambahan HCl l 2M terbentuk l warna l merah, dan l ketika  ditambahan  NaOH l 2M  terjadi  perubahan warna l ekstrak menjadi l hijau l kebiruan. Perubahan l warna  ekstrak l bunga  kiacret  dari l merah  oranye dalam kondisi l asam menjadi l hijau kebiruan l dalam kondisi l basa  memperlihatkan l adanya  senyawa antosianin l yang terkandung dalam l ekstrak bunga kiacret (Widyawati et al., 2020).
Tabel 2. Hasil Uji Antosianin
No. Uji Hasil Keterangan Etanol 70% Etanol 96%
1 Penambahan  3  tetes  HCl
2M dan dipanaskan selama  2  menit  pada suhu 100  C Terbentuk warna merah dan tidak berubah Terbentuk  warna merah  dan  tidak berubah + 2 Penambahan  NaOH  2M tetes demi tetes Warna berubah menjadi hijau kebiruan Warna  berubah menjadi hijau kebiruan +

## Uji Kadar Antosianin
Uji  kuantitatif  antosianin  bertujuan l untuk mengetahui l kadar  total  senyawa l antosianin  yang l terkandung dalam l ekstrak bunga kiacret. Penentuan  kadar l total  antosianin l dilakukan dengan l metode  pH l differensial  menggunakan l buffer  pH l 1,0  dan l pH l 4,5  dengan l instrumen spektrofotometer l UV-Vis l pada panjang l gelombang  510 l dan  710  nm l (Giusti  &  Wrolstad, 2001). Hasil uji antosianin yang diperoleh dari kedua sampel  ekstrak  bunga  kiacret  ditunjukkan  pada Tabel  3.  Ekstrak  etanol  70%  bunga  kiacret memperoleh  kadar  total  antosinanin  sebesar  8,908 mg/L  dan  ekstrak  etanol  96%  bunga  kiacret memperoleh kadar total antosinanin sebesar 10,949
mg/L. Perbedaan kadar total antosianin dari  kedua ekstrak  etanol  bunga  kiacret  tersebut  dipengaruhi l oleh konsentrasi l pelarut yang l digunakan. Semakin l tinggi  konsentrasi l pelarut  etanol  (proporsi  etanol tinggi  dan  proporsi l air  rendah)  yang l digunakan maka  dapat l meningkatkan  kadar  antosianin l yang dihasilkan l (Winarti  et  al.,  2008).  Serta,  konsentrasi etanol l yang  semakin l rendah  akan l menyebabkan pigmen l antosianin  yang l diperoleh  semakin l rendah.  Hal l ini  terjadi l akibat  polaritas l pelarut etanol l yang  menjadi l lebih  tinggi l karena mengandung l banyak  air l (Meilianti,  2018). Didukung  oleh  teori  bahwa l kelarutan  suatu l senyawa  dalam l suatu  pelarut l didasari  oleh l kecocokan sifat l atau kesamaan polaritas antara l zat
terlarut l dan zat l pelarut yaitu l berdasarkan sifat l like dissolve l like (Harbone, 1987).
Tabel 3. Hasil Uji Kadar Antosianin No. Pelarut Berat Simplisia Berat Ekstrak Kadar Total Antosianin 1 Etanol 70% 250 g 105,04 g 8,908 mg/L 2 Etanol 96% 250 g 89,3 g 10,949 mg/L
Hasil  uji  kadar  antosianin  yang  diperoleh dari kedua ekstrak dalam penelitian ini menunjukkan  bahwa  kadar  antosianin  tertinggi yaitu  sebesar  10,949  mg/L  diperoleh  dari  ekstrak etanol  96%  bunga  kiacret.  Hasil  yang  diperoleh dalam penelitian ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan (Agustin & Ismiyati, 2015) menunjukkan bahwa  hasil  pelarut  terbaik  dalam  memperoleh kadar  antosianin  tertinggi  dari  ekstrak  bunga kembang  sepatu  yaitu  dengan  pelarut  etanol  96% sebesar 48,260 mg/25 gram dibandingkan kadar total antosianin dari ekstrak etanol 70% bunga kembang sepatu  dengan  pelarut  etanol  96%  hanya  sebesar 45,788  mg/25  gram.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  etanol  maka  semakin baik  pula  pelarut  tersebut  dalam  mengekstraksi antosianin.

## Uji Stabilitas Ekstrak
Warna  dari  pigmen  antosianin  sebagai pewarna  alami  akan  mengalami  perubahan  jika terjadi  perubahan  pada  struktur  antosianin. Stabilitas pigmen antosianin dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti pH, dan waktu penyimpanan  Uji  stabilitas  zat  warna  ekstrak antosianin  bertujuan  untuk  mengetahui  stabilitas optimum  zat  warna  antosianin  yang  terkandung
dalam  ekstrak  bunga  kiacret  terhadap  beberapa kondisi  lingkungan  yaitu  pH,  suhu,  dan  waktu penyimpanan  (Khoo  et  al.,  2017).  Uji  stabilitas  zat warna  ekstrak  antosianin  dilakukan  dengan menganalisa  persentase  perubahan  absorbansi larutan  ekstrak  bunga  kiacret  sebelum  dan  setelah perlakuan.

## Pengaruh pH
Hasil  penelitian  uji  stabilitas  ekstrak terhadap  pengaruh  pH  yang  diperoleh  dari  kedua sampel  ekstrak  bunga  kiacret  dapat  dilihat  pada Tabel 4. Diketahui bahwa ekstrak etanol 70% bunga kiacret  pada  pH  3  mengalami  peningkatan absorbansi  sebesar  5,09%  dari  absorbansi  kontrol 0,747  menjadi  0,785,  kemudian  terjadi  penurunan absorbansi  pada  pH  4,  5,  dan  6  sebesar  9,50%, 23,56%,  dan  62,25%  dari  absorbansi  kontrol  0,747 menjadi 0,676; 0,571; dan 0,282. Begitu pula dengan ekstrak  etanol  96%  bunga  kiacret  pada  pH  3  juga mengalami  peningkatan  absorbansi  sebesar  8,60% dari  absorbansi  kontrol  0,779  menjadi  0,846, kemudian terjadi penurunan absorbansi pada pH 4, 5,  dan  6  sebesar  6,42%,  22,72%,  dan  57,25%  dari absorbansi  kontrol  0,779  menjadi  0,728;  0,602;  dan 0,333.
Tabel 4. Hasil Uji Stabilitas Ekstrak Bunga Kiacret Terhadap Pengaruh pH
No. Pelarut pH Absorbansi ± SD % Perubahan Absorbansi 1 Etanol 70% 3 0,785 ± 0,0006 5,09% 4 0,676 ± 0,003 -9,50% 5 0,571 ± 0,004 -23,56% 6 0,282 ± 0,0006 -62,25% 2 Etanol 96% 3 0,846 ± 0,002 8,60% 4 0,728 ± 0,0006 -6,42% 5 0,602 ± 0,007 -22,72% 6 0,333 ± 0,002 -57,25%
Hasil  uji  stabilitas  terhadap  pengaruh  pH dari kedua ekstrak tersebut yang ditunjukkan pada Gambar  2  menunjukkan  bahwa  pada  pH  3  terjadi peningkatan  absorbansi,  dan  pada  pH  4  dan  pH  5 terjadi  penurunan  absorbansi  yang  tidak  berbeda jauh, serta pada pH 6 terjadi penurunan absorbansi
yang  lebih  besar  sehingga  dapat  dikatakan antosianin  paling  tidak  stabil  pada  pH  6 dibandingkan  dengan  kondisi  pH  3  –  5.  Hasil penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang dilakukan oleh Hidayah dkk (2020), bahwa ekstrak kulit buah naga pada pH 6 menunjukkan penurunan
absorbansi yang lebih besar atau paling tidak stabil dibandingkan dengan kondisi pH dibawah yaitu pH 2  –  5.  Hal  ini  disebabkan  stuktur  antosianin  pada kondisi  asam  akan  membentuk  kation  flavilium berwarna dan pada pH tinggi terjadi deprotonisasi
yang  mengakibatkan  struktur  antosianin  menjadi karbinol tidak berwarna. Sehingga peningkatan pH menyebabkan  senyawa  antosianin  semakin  tidak stabil  atau  semakin  tinggi  kerusakan  pigmennya (Khairuddin et al., 2020).
Gambar 2. Hasil Penelitian dari Uji Stabilitas Terhadap Pengaruh pH
Hasil penelitian ini menandakan bahwa pH 3 merupakan pH yang paling stabil untuk senyawa antosianin  yang  terdapat  pada  ekstrak  bunga kiacret.  Pada  pH  4  menunjukkan  nilai  persen perubahan  absorbansi  yang  paling  rendah  pada masing-masing  ekstrak  etanol  70%  dan  96%  bunga kiacret  yaitu  9,50%  dan  6,42%  sehingga  antosianin dalam  bunga  kiacret  pada  pH  4  dapat  dikatakan stabil.  Dengan  demikian,  ekstrak  bunga  kiacret dikatakan  stabil  pada  rentang  pH  3  –  4  sehingga dengan  melihat  rentang  pH  stabil  ekstrak  tersebut dapat  digunakan  pada  sediaan  farmasi  sesuai dengan  syarat  rentang  pH  sediaan.  Ekstrak  bunga kiacret  dapat  direkomendasikan  sebagai  pewarna alami pada sediaan farmasi yaitu sediaan kosmetik seperti lip cream (sesuai rentang pH bibir yaitu pH 3,8 –  4,7)  (Sainath  et  al.,  2016)  maupun  obat-obatan seperti obat minum (sesuai rentang pH saluran cerna yaitu pH 1,5 – 8) dan obat topikal (sesuai rentang pH kulit yaitu pH 4 – 6) (Isadiartuti et al., 2021).
Pengaruh Suhu
Hasil  penelitian  uji  stabilitas  ekstrak terhadap pengaruh suhu yang diperoleh dari kedua sampel  ekstrak  bunga  kiacret  dapat  dilihat  pada Tabel 5. Diketahui bahwa ekstrak etanol 70% bunga kiacret  mengalami  penurunan  absorbansi  pada setiap perlakuan suhu dengan penurunan absorbansi terkecil pada suhu 40  C yaitu 3,06% dari absorbansi  kontrol  0,751  menjadi  0,728,  pada  suhu 50  C  yaitu  11,32%  dari  absorbansi  kontrol  0,751 menjadi  0,666,  dan  terjadi  perubahan  absorbansi terbesar  pada  suhu  60  C,  70  C,  dan  80  C  sebesar 42,08%, 59,79%, dan 79,23% dari absorbansi kontrol 0,751  menjadi  0,435;  0,302;  dan  0,156.  Begitu  pula ekstrak  etanol  96%  bunga  kiacret  juga  mengalami penurunan  absorbansi  pada  setiap  perlakuan  suhu dengan  penurunan  absorbansi  terkecil  pada  suhu 40  C  yaitu  8,81%  dari  absorbansi  kontrol  0,817 menjadi  0,745,  pada  suhu  50  C  yaitu  15,30%  dari absorbansi  kontrol  0,817  menjadi  0,692,  dan  terjadi perubahan  absorbansi  terbesar  pada  suhu  60  C, 70  C, dan 80  C sebesar 41,37%, 60,95%, dan 64,50% dari  absorbansi  kontrol  0,817  menjadi  0,479;  0,319; dan 0,290.
Tabel 5. Hasil Uji Stabilitas Ekstrak Bunga Kiacret Terhadap Pengaruh Suhu
No. Pelarut Suhu Absorbansi ± SD % Perubahan Absorbansi 1 Etanol 70% 40  C 0,728 ± 0,0006 -3,06% 50  C 0,666 ± 0,002 -11,32% 60  C 0,435 ± 0,001 -42,08% 70  C 0,302 ± 0,001 -59,79% 80  C 0,156 ± 0,0006 -79,23% 2 Etanol 96% 40  C 0,745 ± 0,003 -8,81% 50  C 0,692 ± 0,002 -15,30% 60  C 0,479 ± 0,003 -41,37% 70  C 0,319 ± 0,0006 -60,95% 80  C 0,290 ± 0,002 -64,50% 0 0,747 0,785 0,676 0,571
0,282
0 0,779 0,846 0,728 0,602 0,333 0 0,5 1 Kontrol pH 3 pH 4 pH 5 pH 6 Abs orbansi Uji Stabilitas Terhadap Pengaruh pH Ekstrak Etanol 70% Bunga Kiacret
Ekstrak Etanol 96% Bunga Kiacret
Gambar 3. Hasil Penelitian dari Uji Stabilitas Terhadap Pengaruh Suhu
Hasil uji stabilitas terhadap pengaruh suhu dari kedua ekstrak tersebut yang ditunjukkan pada Gambar  3  menunjukkan  bahwa  seiring  dengan meningkatnya suhu pemanasan menyebabkan nilai absorbansi akan semakin menurun. Hasil penelitian ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya  uji stabilitas  ekstrak  zat  warna  kulir  buah  naga  yang dilakukan  oleh  Hidayah  dkk  (2014),  bahwa  pada suhu 80  C terjadi penurunan absorbansi lebih tinggi dibanding variasi suhu yang lain (30  C, 40  C, 50  C, 60  C,  70  C).  Penurunan  nilai  absorbansi  zat  warna antosianin pada suhu tinggi disebabkan karena telah terjadi dekomposisi antosianin dari bentuk  aglikon menjadi  kalkon  tidak  berwarna  dan  akhirnya membentuk alfa diketon yang berwarna coklat. Suhu yang tinggi menyebabkan hilangnya gugus glikosil pada  antosianin  karena  hidrolisis  ikatan  glikosidik sehingga aglikon yang dihasilkan kurang stabil dan menyebabkan  hilangnya  warna  pada  antosianin (Hayati  et  al.,  2012).  Oleh  karena  itu,  suhu pemanasan yang terbaik untuk kedua ekstrak adalah pada suhu 40  C yang memiliki nilai absorbansinya
paling  tinggi  dibanding  suhu  lainnya  yang ditunjukkan pada Gambar 2.

## Pengaruh Waktu Penyimpanan
Hasil  penelitian  uji  stabilitas  ekstrak terhadap  pengaruh  waktu  penyimpanan  yang diperoleh dari kedua sampel ekstrak bunga kiacret dapat dilihat pada Tabel 6. Diketahui bahwa ekstrak etanol  70%  bunga  kiacret  mengalami  penurunan absorbansi seiring dengan lamanya waktu penyimpanan.  Pada  hari  ke  0  absorbansi  ekstrak bunga kiacret sebesar 0,660, absorbansi ekstrak terus menurun pada hari ke 1, 2, 3, 4, dan 5 menjadi 0,577; 0,371;  0,269;  0,199;  118.  Kadar  antosianin  terus menurun seiring dengan lamanya waktu penyimpanan (12,58% - 82,12%). Begitu pula dengan ekstrak  etanol  96%  bunga  kiacret  juga  mengalami penurunan  absorbansi  seiring  dengan  lamanya waktu  penyimpanan.  Pada  hari  ke  0  absorbansi ekstrak  bunga  kiacret  sebesar  0,739,  absorbansi ekstrak terus menurun pada hari ke 1, 2, 3, 4, dan 5 menjadi  0,617;  0,424;  0,375;  0,224;  167.  Kadar antosianin  terus  menurun  seiring  dengan  lamanya waktu penyimpanan (16,51% - 77,40%).
Tabel 6. Hasil Uji Stabilitas Ekstrak Bunga Kiacret Terhadap Pengaruh Waktu Penyimpanan No. Pelarut Waktu Penyimpanan Absorbansi ± SD % Perubahan Absorbansi 1 Etanol 70% Hari ke-1 0,577 ± 0,002 -12,58% Hari ke-2 0,371 ± 0,0006 -43,79% Hari ke-3 0,269 ± 0,002 -59,24% Hari ke-4 0,199 ± 0,002 -69,85% Hari ke-5 0,118 ± 0,0006 -82,12% 2 Etanol 96% Hari ke-1 0,617 ± 0,002 -16,51% Hari ke-2 0,424 ± 0,002 -42,63% Hari ke-3 0,375 ± 0,001 -49,26% Hari ke-4 0,224 ± 0,0006 -69,69% Hari ke-5 0,167 ± 0,001 -77,40%
0 0,751 0,728 0,666 0,435 0,302 0,156 0 0,817 0,745 0,692 0,479 0,319 0,29 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 Kontrol 40°C 50°C 60°C 70°C 80°C Abs orbansi Uji Stabilitas Terhadap Pengaruh Suhu
Ekstrak Etanol 70% Bunga Kiacret Ekstrak Etanol 96% Bunga Kiacret

## Gambar 4. Hasil Penelitian dari Uji Stabilitas Terhadap Pengaruh Waktu Penyimpanan
Hasil uji stabilitas terhadap pengaruh waktu penyimpanan  dari  kedua  ekstrak  tersebut  yang ditunjukkan  pada  Gambar  4  menunjukkan  bahwa seiring  dengan  bertambahnya  waktu  penyimpanan menyebabkan  penurunan  absorbansi  secara  terus menerus.  Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Meilianti  (2018), bahwa  terjadi  penurunan  nilai  absorbansi  setelah penyimpanan  selama  2  minggu  pada  suhu  ruang. Kadar zat antosianin dapat menurun akibat adanya peningkatan lama waktu penyimpanan.
Penyimpanan  yang  dilakukan  pada  suhu  ruang akan  menyebabkan  kenaikan  degradasi  yang menandakan  tidak  stabilnya  pigmen  antosianin (Wiyono  et  al.,  2022).  Seiring  dengan  semakin lamanya  waktu  penyimpanan  mengakibatkan terjadi  perubahan  struktur  pigmen  sehingga  nilai absorbansinya menurun (Wiraningtyas et al., 2020). Perubahan  absorbansi  warna  selama  penyimpanan disebabkan  oleh  reaksi  kopigmentasi  dan  ekstrak masih  mengandung  enzim  polifenolase  yang mengkatalisis  reaksi  perubahan  warna  menjadi coklat (Wiyono et al., 2022).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  telah  dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa terdapat perbedaan jumlah rendemen dan kadar antosianin dari kedua ekstrak yang dipengruhi oleh penggunaan konsentrasi  pelarut  yang  berbeda.  Hasil  rendemen pada  ekstrak  etanol  70%  bunga  kiacret  lebih  besar dibandingkan  ekstrak  etanol  96%  bunga  kiacret. Sedangkan  hasil  kadar  antosianin  pada  ekstrak etanol 70% lebih kecil  dibandingkan ekstrak etanol 96%  bunga  kiacret.  Ekstrak  bunga  kiacret  dengan pelarut etanol 70% dan 96% stabil pada pH 3–4, suhu 40  C,  dan  penyimpanan  selama  satu  hari.  Namun ekstrak  bunga  kiacret  dengan  pelarut  etanol  96% memiliki  stabilitas  terbaik  yang  dapat  dilihat  pada
absorbansi  tiap  perlakuan  (pH,  suhu,  waktu penyimpanan)  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan pelarut etanol 70%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Fakultas  Farmasi, Universitas  Mulawarman,  yang  telah  membantu peneliti dalam menyelesaikan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustin,  D.,  &  Ismiyati.  (2015).  Pengaruh Konsentrasi  Pelarut  Pada  Proses  Ekstraksi Antosianin  dari  Bunga  Kembang  Sepatu. Jurnal Konversi , 4 (2), 9–16.
Ayu,  K.,  Asriza,  R.  O.,  &  Nurhadini.  (2022).  Studi
Fotostabilitas Ekstrak Bunga Kiacret (Spathodea campanulata) Dengan
Penambahan  Kaolin  Teraktivasi  Asam. Al- Kimiya:  Jurnal  Ilmu  Kimia  Dan  Terapan , 9 (1),
42–47.
Fauziah, N. A., Saleh, C., & Erwin. (2016). Ekstraksi dan Uji Stabilitas Zat Warna Dari Kulit Buah Alpukat (Persea americana) Dengan Metode Spektroskopi UV-Vis. Jurnal Atomik , 1 (1), 23–
27.
Giusti,  M.  M.,  &  Wrolstad,  R.  E.  (2001).
Characterization  and  Measurement  of Anthocyanins  by  UV-Visible  Spectroscopy. Current Protocols in Food Analytical Chemistry , 00 (1).
Harbone, J. B. (1987). Phytochemical Methods: A Guide to  Modern  Techniques  of  Plants  Analysis (Second Edition). Chapman and Hall Ltd.
Hayati,  E.  K.,  Budi,  U.  S.,  &  Hermawan,  R.  (2012).
Konsentrasi  Total  Senyawa  Antosianin Ekstrak  Kelopak  Bunga  Rosella  (Hibiscus sabdariffa  L.):  Pengaruh  Temperatur  dan pH. Jurnal Kimia , 6 (2), 138–147.
0 0,66 0,577 0,371 0,269 0,199 0,118 0 0,739 0,617 0,424 0,375 0,224 0,167 0 0,2 0,4 0,6 0,8 Kontrol Hari 1 Hari 2 Hari 3 Hari 4 Hari 5 Abs orbansi Uji Stabilitas Terhadap Pengaruh Waktu Penyimpanan
Ekstrak Etanol 70% Bunga Kiacret
Ekstrak Etanol 96% Bunga Kiacret
Heim,  S.  C.,  Guarnier,  F.  A.,  Ferreira,  D.  T.,  Braz- Filho,  R.,  Cecchini,  R.,  &  Cecchini,  A.  L.
(2012).  Antioxidant  Activity  of  Spathodea campanulata  (Bignoneaceae)  Extracts. Rev Bras Plants Med , 14 (2), 287–292.
Herfayati,  P.,  Pandia,  S.,  &  Nasution,  H.  (2020). Karakteristik  Antosianin  dari  Kulit  Buah Nipah  (Nypa  frutican)  sebagai  Pewarna Alami  dengan  Metode  Soxhletasi. Jurnal Teknik Kimia USU , 9 (1), 26–33.
Hidayah, T.,  Pratjojo, W., & Widiarti, N. (2014). Uji Stabilitas  Pigmen  dan Antioksidan  Ekstrak Zat  Warna  Alami  Kulit  Buah  Naga. Indonesian  Journal  of  Chemical  Science , 3 (2), 135–140.
Isadiartuti,  D.,  Rosita,  N.,  Hendradi,  E.,  Putri,  F.  F.
D.,  &  Magdalena,  F.  (2021).  Solubility  and Partition  Coefficient  of  Salicylamide  in Variou  pH  Buffer  Solutions. Indonesiana Journal of Chemistry , 21 (5), 1263–1270.
Jafar,  W.,  Masriany,  &  Sukmawaty,  E.  (2020).  Uji Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Bunga  Pohon Hujan  (Spatodhea  campanulata)  Secara  In Vitro. Prosiding Seminar Nasional Biotik , 8 (1),
328–334.
Khairuddin,  Baciang,  J.  N.,  Indriani,  &  Inda,  N.  I.
(2020).  Ekstraksi  dan  Uji  Stabilitas  Zat Warna Alami dari Bayam Merah (Alternanthera  amoena  Voss). Jurnal  Riset Kimia , 6 (3), 212–217.
Khoo,  H.  E.,  Azlan,  A.,  Tang,  S.  T.,  &  Lim,  S.  M.
(2017).  Anthocyanidins  and  Anthocyanins: Colored  Pigments  as  Food,  Pharmaceutical Ingredients,  and  The  Potential  Health Benefits. Food & Nutrition Research , 61 , 1–21.
Meilianti.  (2018).  Isolasi  Zat  Warna  (Antosianin)
Alami dari Buah Senduduk Akar
(Melastoma  Malabthricum  L.)  Dengan Metode  Ekstraksi  Menggunkan  Pelarut
Etanol. Distilasi , 3 (1), 8–15.
Nasrullah,  Husain,  H.,  &  Syahrir,  M.  (2020). Pengaruh  Suhu  dan  Waktu  Pemanasan Terhadap  Stabilitas  Pigmen  Antosianin Ekstrak Asam Sitrat Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus  polyrizus)  dan  Aplikasi  Pada
Bahan  Pangan. Jurnal  Chemica , 21 (2),  150–
162.
Octaviani,  D.  Y.,  Nugroho,  T.  T.,  &  Dahliaty,  A.
(2016). Penentuan Total Konsentrasi
Antosianin  Dari  Ubi  jalar  Ungu  (Ipomoea
batatas  L.)  Dengan  Metode  pH  Diferensial
Spektrofotometri. Repository Universitas
Riau , 1–11.
Riwanti, P., Izazih, F., & Amaliyah. (2020). Pengaruh Perbedaan  Konsentrasi  Etanol  Pada  Kadar Flavonoid  Total  Estraksi  Etanol  50,  70,dan 96%  Sargassum  polycystum  dari  Madura. Journal of Pharmaceutical Care Anwar Medika ,
2 (2), 82–95.
Sainath,  M.,  Kumar,  K.  S.,  &  Babu,  K.  A.  (2016).
Formulation  and  Evaluation  of  Herbal Lipstic. International  Journal  of  Advanced Research in Medical & Pharmaceutical Sciences ,
1 (1), 14–19.
Sayuti,  M.  (2017).  Pengaruh  Perbedaan  Metode Ekstraksi, Bagian dan Jenis Pelarut Terhadap Rendemen dan  Aktifitas  Antioksidan Bambu  Laut  (Isis  hippuris). Technology Science and Engineering Journal , 1 (3).
Shofi,  M.,  Suwitasari,  F.,  &  Istiqomah,  N.  (2020).
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Kamboja  Jepang  (Adenium  obesum)  dan Kamboja  Putih  (Plumeria  acuminata). Al- Kauniyah: Jurnal Biologi , 13 (2), 167–178.
Wagh,  A.  S.,  &  Butle,  S.  (2018).  Plant  Profile, Phytochemistry  and  Pharmacology  of
Spathodea campanulata P. Beauvais (African Tulip Free): A Review.
Internationala  Journal  of  Pharmacy  and Pharmaceutical Sciences , 10 (5), 1–6.
Widyawati, J., Masriany, & Sukmawaty, E. (2020). Uji Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Bunga  Pohon Hujan  (Spathodea  cumpanulata)  Secara  In Vitro. Prosiding Seminar Nasional Biotik , 8 (2),
328–334.
Winarti,  S.,  Sarofa,  U.,  &  Anggrahini,  D.  (2008). Ekstraksi  dan  Stabilitas  Warna  Ubi  Jalar Ungu (Ipomoea batatas L.) Sebagai Pewarna Alami. Jurnal Teknik Kimia , 3 (1), 207–214.
Wiraningtyas, A., Ruslan, Qubra, H., & Agustina, S. (2020). Uji Kestabilan Penyimpanan Ekstrak Zat  Warna  Alami  dari  Rumput  Laut Sargassum  Sp. Jurnal  Redoks :  Jurnal Pendidikan Kimia Dan Terapan , 3 (1), 1–7.
Wiyono, A. E., Runteka, O. W., Choiron, M., Ruriani, E.,  &  Belgis,  M.  (2022).  Stabilitas  Serbuk Pewarna  Alami  Berbasis  Antosianin  Buah Naga Merah Apkir Tervariasi Pelarut Asam dalam  Berbagai  Kondisi  Eksternal. Jurnal Agritechno , 15 (2), 74–84.