Copyright © 2021 Jurnal Fitofarmaka Indonesia. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License

## Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Salam
[Syzygium polyanthum (Wight) Walp.] Dan Studi In Silico

## Senyawa Kimia Penghambat Enzim α-Glukosidase
Rakhmat Ramdhani Alwie 1,2* , Esti Mumpuni 2 , Lilik Sulastri 1,2 , Partomuan Simanjuntak 2,3 1 Sekolah Tinggi Teknologi Industri dan Farmasi Bogor (STTIF), Bogor
2 Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila, Jakarta Selatan
3 Puslit Kimia, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Serpong Tangerang Selatan
Article info Abstract History
Submission : 25-02-2021
Review : 19-05-2021 Accepted : 24-07-2021
* Email: rakhmat2980@gmail.com
DOI: 10.33096/jffi.v8i2.750

## Keywords:
Syzygium polyanthum (Wight) Walp; inhibitor α-glukosidase;
akarbosa; delphinidin Diabetes  Mellitus  (DM)  is  a  degenerative  disease  that  can  cause  various complications  such  as  cardiovascular,  stroke,  and  hypertension.
Antidiabetic drugs that are commonly circulated in the market, have side effects  that  can  harm  other  organs  such  as  the  liver,  kidneys  and  other organs. Bay leaves (Syzygium Polyanthum (Wight) Walp .) have properties as inhibitors of enzim-glucosidase enzymes in vitro and in vivo. The aim of This  study  was  to  determine  the  activity  and  mechanism  of  action  of compounds  in  ethanolic  extract  of  bay  leaves  by  ultrasonic  extraction method in inhibiting the enzim-glucosidase  enzyme in vitro and in silico. Bay leaves were extracted using 70% and 96% ethanol by ultrasonic method for 1 hour. The extracts obtained were tested for phytochemical content and α-glucosidase  inhibitory  activity  in  vitro  and  their  compounds  were analyzed by LCMS/MS and in silico. The extract with the best IC 50 value was then separated using column chromatography (SiO2, dichloromethane, methanol 10:1 – 1:1) and produced 7 fractions and tested for -glucosidase enzyme  inhibition.  The  best  fraction,  fraction  6,  was  analyzed  by  Liquid Chromatography  Mas  Spectra  (LCMS/MS).  The  results  showed  that  bay leaf extract containing alkaloids, flavonoids, tannins, steroids, phenols, and fraction-6 had the best IC 50 of 30.82 ppm. Chemical compounds that act as inhibitors of the α-glucosidase enzyme are delphinidin (m/z 303), malvidin (m/z 331), flavan-3-ol (m/z 457), and have a rerank score -76.11 Kcal/mol, -73.46  Kcal;/mol,  -92.12  Kcal/mol.  in  silico  test  results  using  PLANTS docking software.

## I. Pendahuluan
Diabetes  melitus  (DM)  di  Indonesia dikenal  sebagai  penyakit  kencing  manis  yang merupakan  kelainan  metabolisme  yang  disebabkan oleh  terjadinya  kerusakan  pada  sel  β  pankreas. Penyakit ini ditemukan pada setiap populasi di dunia atau semua wilayah, termasuk daerah pedesaan atau negara  berpenghasilan  rendah  dan  berpenghasilan menengah. Jumlah penderita diabetes terus meningkat,  menurut  perkiraan  WHO  ada  422  juta orang dewasa dengan diabetes di seluruh dunia pada tahun 2014. Prevalensi disesuaikan usia pada orang dewasa  meningkat  dari  4,7%  pada  tahun  1980 menjadi  8,5%  pada  tahun  2014,  dengan  kenaikan terbesar di negara-negara berpenghasilan rendah dan menengah dibandingkan dengan negara berpenghasilan  tinggi  (Kazi  and  Blonde,  2001). Selain  itu,  perkiraan Internasional Diabetes Federasi (IDF)  bahwa  1,1  juta  anak  dan  remaja berusia  14-19  tahun  menderita  T1DM.  Tanpa
intervensi untuk menghentikan peningkatan diabetes,  setidaknya  akan  ada  629  juta  orang  yang hidup dengan diabetes pada tahun 2045 (Prianti and Ellin, 2013; Hakim, 2015).
Pemanfaatan  rempah  sebagai  obat  herbal semakin  meluas  karena  mudah  diperoleh  dan harganya relatif murah sebagai bahan baku produksi obat  herbal.  Salah  satu  tanaman  rempah  yang melimpah di Indonesia adalah daun salam ( Syzygium polyanthum (Wight)  Walp.)  (Harismah  and Chuniatun,  2016).  Daun  salam  mengandung senyawa  yang  berkhasiat  diantaranya  dapat membantu menurunkan diabetes melitus, menurunkan  kolesterol,  hipertensi,  dan  diare (Hakim,  2015).    Kandungan  senyawa  aktif  daun salam adalah tannin, flavonoid, minyak atsiri, sitral, eugenol, triterpenoid, steroid, saponin dan beberapa vitamin,  yaitu  vitamin  C,  vitamin  A,  thiamin, riboplavin, serta B12. Secara signifikan daun salam memberikan  efek  penurunan  kadar  gula  darah
karena  diketahui  mengandung  flavonoid  glikosida yang dapat menurunkan kadar gula darah (Parisa et al. , 2016).
Penelitian  secara in  vitro oleh  Elya et  al ,
(2015), melaporkan bahwa ekstrak etanol 70% daun salam menggunakan metode refluks dapat menghambat  aktivitas  enzim  α-glukosidase  pada konsentrasi  19,06  µg/ml  (Elya et  al. ,  2015). Penelitian  lain  Saraswaty  (2010)  bahwa  ekstrak etanol  70%  memberikan  aktivitas  enzim  α- glukosidase  dengan  IC 50 sebesar  8,71  ppm  pada spesies lainnya Syzygium cumini (Saraswaty, 2010). Sedangkan menurut Berawi (2017) ekstrak metanol daun salam memberikan nilai IC 50 sebesar 376 ppm terhadap  penghambatan  enzim  α-glukosidase (Berawi et al. , 2017).
Penelitian lain secara in silico menggunakan software  Molegro  Virtual  Docking menurut Sulastri et al , (2020) bahwa senyawa asam kafeat dan asam gallat yang terdapat dalam ekstrak daun salam memiliki nilai energi bebas Gibs sebesar -66,49  Kkal/mol  dan  -71,39  Kkal/mol  yang menunjukkan  senyawa  aktif  dari  daun  salam memiliki  potensi  efektif  dan  stabil  berinteraksi dengan  enzim  α-glukosidase  dengan  kode  protein 3L4W (Sulastri et al. , 2020).

## II. Metode Penelitian

## II.1 Bahan
Bahan  penelitian  yang  digunakan  adalah simplisia  daun  salam  berasal  dari  Balitro.  Bahan kima  yang  digunakan  adalah  pelarut  etanol  96%, etanol 70%, buffer phospat pH 6,8, PNPG, Enzim α- glukosidase, DMSO, Na 2 CO 3 , akarbosa, plat KLT, silika  gel  GF 254, Na 2 HPO 4 ,  NaH 2 PO 4 dan  akuades struktur  senyawa  aktif  daun  salam  dari  pubchem, protein target dari PDB.

## II.2 Alat
Alat yang digunakan adalah Ultrasonikator, Rotary  vacum  evaporator (Stuart),  timbangan Analtik  (Precisa  240),  Spektrofotometer  UV-Vis (Simadzu 1240), Elisa Reader, Waterbath (Memmert).  Aplikasi  (Plants,  Yasara,  Marvin
Sketch,  Data  Base  PDB,    Ligpuls) Laptop Asus (A44H)  dengan  spesifikasi  Intel  Core  i3-  CPU 2330M  @  2,2  GHz,  RAM  ( Random  Access Memory )  4,0 gigabyte ,  kartu  grafis(  Intel(R)  HD Graphics), windows 7 ultimate,  terhubung AC/DC Adapter dan terkoneksi internet.

## II.3. Ekstraksi Daun Salam
Serbuk  daun  salam  kering  ditimbang  2  x 100 gram, masing-masing diekstraksi dalam pelarut etanol  96%  dan  70%  dengan  menggunakan  alat ultrasonik  selama  15 menit dengan pengulangan 4 kali.  Hasil  ekstraksi  disaring  dan  diuapkan menggunakan rotary  vacum  evaporator pada  suhu 50 0 C.  Ekstrak  kental  yang  diperoleh  dihitung rendemen  ekstrak  total  (Manapode,  Yamlean  and Sudewi, 2016)

## II.3. Penapisan Fitokimia
Ekstrak  sebanyak  1  gram  dilakukan penapisan  fitokimia  seperti  golongan    senyawa kimia  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tannin, terpenoid/triterpenoid dengan menggunakan metode Materia medika dan Harborne (Harbone, 1998).

## II.4 Uji Penghambatan α-glukosidase
Sebanyak 50 µL larutan ekstrak ditambahkan dengan 13 µL dapar fosfat pH 6,8 dan 10 µL larutan substrat p -nitrofenil-ɑ-D- glukopiranosida  (PNP-G)  10  mM,  dipra-inkubasi selama  5  menit  pada  suhu  37  °C.  Kemudian ditambahkan 25 µL larutan enzim 0,015 U/mL, dan diinkubasi  kembali  pada  suhu  37  °C  selama  30 menit.  Setelah  masa  inkubasi  selesai,  ditambahkan 100  µL  Na 2 CO 3 10  mM.  Larutan  diukur absorbansinya dengan microplate reader pada λ 405 nm (Elya et al. , 2015). Persentase  penghambatan  aktivitas  α- glukosidase dapat dihitung melalui persamaan 1.
% inhibisi= ((Ao-Ai)-(A1-Ai) (Ao-Ai) Keterangan:  Ao:  Absorbansi  kontrol  negative;  Ai: Absorbansi  Blanko;  A1:  Absorbansi  Sampel (Pembanding /ekstrak)
Melalui  persamaan  regresi  linier,  y  =  a  + bx, dimana sumbu x adalah konsentrasi sampel dan sumbu  y  adalah  %  inhibisi,  maka  nilai  IC 50 dapat dihitung menggunakan rumus 2.
IC 50 = 50-a b II.5 Isolasi dan pemisahan senyawa kimia dengan Kromatografi Kolom Ekstrak 10 gram
dihomogenkan menggunakan cellite  545 ,  kemudian  dimasukkan kedalam kolom yang sudah diisi dengan bubur silica gel  dan  eluen.  Eluasi  dilakukan  dengan  pelarut diklorometana  dan  metanol  hingga  diperoleh  130 fraksi. Fraksi diuji pada plat KLT dan yang memiliki spot yang sama dilakukan penggabungan.

## II.6 Identifikasi Senyawa
Fraksi yang memiliki aktivitas dengan nilai IC 50 terbaik dilakukan analisa LCMS/MS.
II.7 Molekular Docking
II.7.1 Periapan Struktur Protein Target
Struktur  komplek  protein  didapat  melalui website http://rcsb.org/ .  Kemudian  dipreparasi kembali  untuk  menghilangkan  pelarut  dan  ligan yang  tidak  diperlukan  dengan  menggunakan program  YASARA.  Salah  satunya  penghilangan molekul  air  dan  penambahan  hidrogen.  Hasil kemudian disimpan dalam format file *.mol2.
II.7.2 Periapan Struktur Ligan Struktur Ligan Native disiapkan menggunakan  program  Yasara,  ligan  pembanding dan  ligan  Uji  disiapkan  menggunakan  Marvin Sketch dan disimpan dalam format file *.mrv yaitu
(1)
(2)
ligand_2D.mrv.  dan  lakukan  konformasi  struktur sebagai ligan dengan format file *.mol2

## II.7.3 Optimasi Protein dan nilai RMSD
Untuk  menentukan  nilai  RMSD  maka native  ligan  dioptimasi  menggunakan  program PLANTS dengan memasukkan native ligan kedalam reseptor kemudian hasil validasi dengan nilai score terbaik  dan  nilai  RMSD  dibawah  2  Å  dilakukan virtual screening menggunakan program YASARA

## II.7.4 Docking
Docking dilakukan  pada  sistem  operasi windows dimana  Ligan  pembanding  dan  Ligan  uji yang  diperoleh  pada  preparasi  protein  ligan dilakukan docking masing-masing  menggunakan Program  PLANTS  kemudian  ditentukan score terbaik  untuk  dibandingkan  hasilnya  dengan senyawa induk atau pembanding
II.7.5 Visualisasi ligan dan Reseptor Hasil docking dapat  dilihat  pada  output dengan format notepad. Penentuan konformasi hasil
docking dengan  memilih  konformasi  yang  nilai energi bebasnya paling rendah. Ligan senyawa uji, senyawa induk, Native Ligan setelah docking di load kedalam  Aplikasi  Lig  Plot  kemudian  divisualisasi interaksi asam amino

## III. Hasil dan Pembahasan
Rendemen  yang  diperoleh  menggunakan pelarut etanol 96% lebih banyak dari rendemen yang diekstraksi  menggunakan  pelarut  etanol  70%. Pelarut  etanol  merupakan  pelarut  universal  yang dapat menarik senyawa mulai dari non polar hingga polar.  Senyawa  yang  dapat  menghambat  aktivitas enzim α-glukosidase merupakan senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid dan fenol (Yin et al. , 2014), rendemen yang dihasilkan dari proses ekstraksi menggunakan etanol 96% dan 70% dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Rendemen ekstrak daun salam
No Pelarut Berat Simplisia (g) Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) 1. Etanol 96% 100 15,57 15,57 2. Etanol 70% 100 12,89 12,89
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  rendemen ekstrak  etanol  96%  lebih  besar  dibanding  ekstrak etanol  70%  dikarenakan  pelarut  etanol  96% memiliki kemampuan untuk lebih banyak  menarik senyawa  mulai  dari  non  polar,  semi  polar  hingga polar,  sedangkan  etanol  70%  hanya  menarik senyawa yang bersifat semi polar dan sangat polar saja. Hal tersebut juga sesuai dengan hasil penelitian Lim,  2019  (Lim et  al. ,  2019)  yang  menyatakan
bahwa  rasio  pelarut  terhadap  jumlah  simplisia, metode ekstraksi dan kepolaran pelarut berpengaruh terhadap jumlah rendemen yang dihasilkan. Hasil skrining fitokimia pada ekstrak etanol 70% dan 96 % daun salam dapat dilihat pada Tabel 2. Tabel 2 menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% mengandung  alkaloid,  hal  ini  berarti  bahwa  etanol 96%  mampu  menarik  lebih  banyak  senyawa dibandingkan etanol 70%.
Tabel 2. Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol 70% dan 96% daun salam.
No Uji Ekstrak etanol 70% Ekstrak etanol 96% 1. Alkaloid - + 2. Flavonoid + + 3. Saponin - - 4. Tannin + + 5. Steroid + + 6. Terpenoid - - 7. Fenol +
+
Tabel 3. Persen inhibisi da IC 50 ekstrak etanol 70% dan etanol 96% daun salam
No.
Ekstrak daun salam Inhibisi (%) IC 50 (ppm) 1. Etanol 70 % 41,36 86,29 2. Etanol 96 % 54,83 51,54
Hasil  uji  penghambatan  enzim  α- glukosidase  Tabel  3  menunjukkan  aktivitas penghambatan enzim α-glukosidase  ekstrak etanol 96%  memiliki  persen  inhibisi  lebih  besar  dengan nilai  54,83% dan memiliki nilai IC 50 51,54 ppm.
Ekstrak  etanol  yang  memiliki  aktivitas terbaik  dilakukan  pemisahan  menggunakan  teknik kromatografi kolom dengan fase diam silika gel, dan fase  gerak  eluen  diklorometana  :  metanol  dengan sistem gradien mulai dari 10:1, 8:1, 5:1, 2:1, 1:1 dan
metanol. Fraksi yang dihasilkan setelah di KLT dan penggabungan diperoleh 7 fraksi.
Semua fraksi yang diperoleh diuji aktivitas penghambatan enzim  α-glukosidase. Fraksi terbaik
terdapat  pada  fraksi  6  dengan  nilai  persen  hambat 57,39% (Tabel 4) dan IC 50 sebesar 30,82 ppm. Nilai persen hambat dan IC 50 dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 4. Bobot dan persen inhibisi fraksi ekstrak etanol 96% daun salam.
No Fraksi gabungan Bobot (g) Persen inhibisi (%) 1. Fraksi 1 0,12 32,98 2. Fraksi 2 0,04 22,19 3. Fraksi 3 0,02 36,31 4. Fraksi 4 0,17 49,49 5. Fraksi 5 0,17 40,83 6. Fraksi 6 0,36 57,39 7. Fraksi 7 0,10 19,09
Tabel 5. Nilai IC 50 fraksi 6 hasil kromatografi etanol 96% daun salam.
No Konsentrasi (ppm) Persen inhibisi (%) IC 50 (ppm) 1 5 42,08 30,82 2 10 43,54 3 20 47,54 4 40 49,31 5 80 67,82
Nilai IC 50 yang diperoleh dari ekstak etanol 96%  berbeda  dengan  penelitian  Dewijanti,  2020 (Dewijanti et  al. ,  2020)  hal  tersebut  karena perbedaan  pelarut  dan  metode  ekstraksi  yang digunakan. Dewijayanti melaporkan bahwa ekstrak air  daun  salam  yang  diperoleh  dari  jawa  barat memiliki nilai IC 50 63,20 ppm. Ekstrak air dilakukan dengan pemanasan, sehingga hanya mampu menarik senyawa yang tidak tahan terhadap panas, sehingga
senyawa  yang  berperan  lebih  sedikit  dibanding ekstrak etanol yang tanpa pemanasan.
Hasil identifikasi LCMS/MS untuk fraksi 6 menunjukkan bahwa ada 3 kandidat senyawa kimia dengan  bobot  molekul  m/z  303  (delphinidin),  m/z 331  (malvidin),  dan  m/z  457  (flavan-3-ol). Kromatogram  dan  spektrumnya  dapat  dilihat  pada Gambar 1.
Gambar 1. Kromatogram kandidat delphinidin, malvidin dan flavan-3-Ol
Kandidat  ke-1  senyawa  Delphinidin merupakan  senyawa  turunan  flavonoid  yang memiliki nama 3,3ˊ,4ˊ,5,5ˊ, 7-
Heksahydroxyflavylium  dengan  aktivitas  sebagai antioksidan  dan    antiinflamasi  (Masheta  and  Al- Azzawi, 2018). Delpinidin juga merupakan turunan antosianin  yang  memiliki  aktivitas  penghambat
enzim  α-gukosidase,  α-amilase  dan  sebagai  agen terapetik dalam pengobatan diabetes (Oliveira et al. , 2020).
Struktur  delphinidin  diuji  aktivitasnya secara in  silico dengan  metode dockin g menggunakan  protein  target  2QMJ.  Protein  2QMJ yang diperoleh dari PDB memiliki interaksi dengan
ligan  akarbosa,  resolusi  1,9Å  dan  sudah  melalui X_Ray diffractions .  Protein  2QMJ  adalah  enzim maltase-glukoamilase yang berperan untuk mengkatalisis  pelepasan  glukosa  dalam  pati  pada saluran pencernaan, dan terjadi dalam sel epitel  usus kecil. Hasil validasi protein 2QMJ memberikan nilai
RMSD  1,576Å  dan  hasil  docking  memiliki  nilai energi  bebas  gibs  sebesar  -76,11  Kkal/mol,  yang cukup stabil dan berpotensi sebagai inhibitor enzim α-glukosidase.  Struktur  protein  dan  hasil  validasi dapat dilihat pada Gambar 2.
(a)                                         (b)                                               (c)
Gambar 2. Protein 2QMJ (a), Akarbosa (b) dan Validasi 2QMJ (c)
Kandidat  ke-2  senyawa  molekul m/z 331 yaitu  malvidin merupakan  senyawa  turunan delpinidin  yang  ditemukan  pada  tanaman  genus syzygium namun  spesies syzygium  cumini dan memiliki  naman  lain  3,4′,5,7-Tetrahydroxy  -3′,5′- dimethoxyflavylium (Lestario et al. , 2017). Menurut Kahkonen,  2003  bahwa  Malvidin  merupakan senyawa grup antosianin yang ditemukan banyak di alam sebagai pigmen warna dan  memiliki aktivitas sebagai  antioksidan  yang  kuat,  antimikroba  dan antiinflamasi (Kähkönen et al. , 2003) dan memiliki rerank score -73,46 Kkal/mol . Kandidat  ke-3,  Senyawa  dengan  bobot molekul  457  yaitu Flavan-3-ol yang  merupakan
senyawa  turunan  flavanol  dalam  bentuk  dimer, oligimer  dan  trimer    yang  memiliki  aktivitas penghambat enzim α-glukosidase adan antioksidan yang  memiliki  efek  yang  baik    bagi  penderita diabetes (Ma et al. , 2010). Flavan-3-ol juga memilki aktivitas  dalam  mengurangi  efek  penyakit kadiovaskular  akibat  dari  komplikasi  diabetes (Raman et  al. ,  2019)  dan  memiliki rerank  score - 92,12 Kkal/mol
Interaksi  kadidat  senyawa  aktif  hasil LCMS/MS  dengan  asam  amino  setelah  docking dengan
protein
2QMJ
divisualisasikan menggunakan  aplikasi  Ligplot.  Hasil  visualisasi dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 3 . Interaksi ligan dengan asam amino pada protein 2QMJ
Gambar  3  Menunjukkan  bahwa  kandidat senyawa  dari  daun  salam  (ligan  uji)  dapat berinteraksi  dengan  protein  2QMJ  membentuk ikatan  hidrogen  sehingga  memberikan  aktivitas
yang  baik  terhadap  reaksi  enzimatis  dalam penghambatan  enzim α -glukosidase,  dimana  asam amino yang terlibat ditunjukkan pada Tabel 6.
Tabel 6. Interaksi ligan dengan residu asam amino No Ligan Residu asam amino yang terlibat 1. Delphinidin Leu562, Phe563, Asn561, Pro566, Met567 dan Ala536 2. Malvidin Pro566, Val568, Met567, Asn561, Ile565, dan Gln217 3. Flavan-3-ol Phe560, Glu559, Gly569, Pro566, dan Gly564

## IV. Kesimpulan
Fraksi  6  dari  ekstrak  etanol  96%  daun salam  memiliki  aktivitas    menghambat  enzim  α- glukosidase  dengan  nilai  IC 50 30,82  ppm  dengan kandidat kandungan senyawa m/z 303 (delphinidin), m/z 331 (malvidin), dan m/z 457 (flavan-3ol) yang memiliki  nilai  energi  bebas  gibs  berturut-turut sebesar  -76,11  Kkal/mol,  -73,46  Kkal/mol,  dan - 92,12 Kkal/mol.

## Daftar Pustaka
Berawi,  K.  N. et  al. (2017)  ‘Comparison effectiveness of antidiabetic activity extract herbal  mixture  of  soursop  leaves(annona muricata), bay leaves(syzygium polyanthum)  and  pegagan  leaves(centella asiatica)’, Biomedical  and  Pharmacology Journal ,  10(3),  pp.  1481–1488.  doi: 10.13005/bpj/1256.
Dewijanti,  I. et  al. (2020)  ‘Short  Communication:
Effects  of  the  Various  Source  Areas  of Indonesian  Bay  Leaves  (Syzygium polyanthum)  on  Chemical  Content  and
Antidiabetic Activity’, Biodiversitas Journal of Biological Diversity , 21(3), pp.
1190–1195.
doi:
10.13057/biodiv/d210345.
Elya,  B. et  al. (2015)  ‘Antidiabetic  activity  and phytochemical  screening  of  extracts  from
indonesian  plants  by  inhibition  of  alpha amylase, alpha glucosidase and dipeptidyl peptidase  IV’, Pakistan  Journal  of Biological  Sciences ,  18(6),  pp.  273–278. doi: 10.3923/pjbs.2015.279.284. Hakim,  L.  (2015) Rempah  &  Herba  Kebun- Pekarangan Rumah Masyarakat . Harbone,  jeffrey B. (1998) Phytochemical Methods . Third  edit, Chapman  &  Hall .  Third  edit. London New York: Chapman & hall. Harismah,  K.  and  Chuniatun  (2016)  ‘Pemanfaatan Daun  Salam  (Eugenia  polyantha)  Sebagai Obat  Herbal  Dan  Rempah  Penyedap Makanan’, Warta  LPM ,  19(2),  pp.  110– 118.
Kähkönen, M. P. et al. (2003) ‘Berry anthocyanins: Isolation,  identification  and  antioxidant activities’, Journal of the Science of Food and  Agriculture ,  83(14),  pp.  1403–1411. doi: 10.1002/jsfa.1511.
Kazi, A. A. and Blonde, L. (2001) Classification of diabetes  mellitus , Clinics  in  Laboratory Medicine .
doi:
10.5005/jp/books/12855_84.
Lestario,  L.  N. et  al. (2017)  ‘Changes  in polyphenolics  during  maturation  of  Java plum  (Syzygium  cumini  Lam.)’, Food
Research International . Elsevier, 100(March), pp. 385–391. doi: 10.1016/j.foodres.2017.04.023.
Lim,  Y.  P. et  al. (2019)  ‘Correlation  between  the extraction  yield  of  mangiferin  to  the antioxidant activity, total phenolic and total flavonoid  content  of  Phaleria  macrocarpa fruits’, Journal  of  Applied  Research  on Medicinal
and Aromatic Plants , 14(August). doi:
10.1016/j.jarmap.2019.100224. Ma, C. M. et al. (2010) ‘Flavan-3-ol contents, anti- oxidative  and  α-glucosidase  inhibitory activities  of  Cynomorium  songaricum’, Food Chemistry . Elsevier Ltd, 118(1), pp.
116–119. doi: 10.1016/j.foodchem.2009.04.083. Manapode, Y. Y., Yamlean, P. V. Y. and Sudewi, S. (2016)  ‘Uji  Efektivitas  Sediaan  Krim Ekstrak Daun Lamtoro (Laucaena Glauca) Terhadap  Luka  Bakar  Pada  Kelinci (Orytolagus Cuniculus)’, Pharmacon , 5(4), pp. 280–283. doi:
10.35799/pha.5.2016.14051.
Masheta,  D.  Q.  and  Al-Azzawi,  S.  K.  (2018) ‘Antioxidant and
Anti-Inflammatory Effects  of  Delphinidin  on  Glial  Cells  and Lack of Effect on Secretase Enzyme’, IOP
Conference Series: Materials Science and Engineering ,  454(1).  doi:  10.1088/1757- 899X/454/1/012061. Oliveira,  H. et  al. (2020)  ‘Anthocyanins  as antidiabetic  agents—in  vitro  and  in  silico approaches  of  preventive  and  therapeutic effects’, Molecules , 25(17), pp. 1–30. doi: 10.3390/molecules25173813. Parisa, N. et al. (2016) ‘Efek Ekstrak Daun Salam pada  Kadar  Glukosa  Darah  The  Effect  of Bay Leaves on Blood Glucose Levels’, 1, pp. 404–408. Raman, G. et al. (2019) ‘Dietary intakes of flavan-
3-ols and cardiometabolic health: Systematic  review  and  meta-analysis  of randomized  trials  and  prospective  cohort studies’, American  Journal  of  Clinical Nutrition . Oxford University Press, 110(5), pp. 1067–1078. doi: 10.1093/ajcn/nqz178.
Saraswaty, V. (2010) ‘Alpha Glucosidase Inhibitory activity  from  Syzygium  sp.’, Jurnal
Teknologi Indonesia , 33(1), pp. 33–37. Sulastri, L. et al. (2020) ‘Prediction of toxicity and inhibition  activities  of  a-glucosidase enzyme  of  the  chemical  compounds isolated  from Indonesian  medicinal  plants using molegro virtual docking’, Interntonal Journal of Chemical Science , 4(2), pp. 1–7. Yin,  Z. et  al. (2014)  ‘α-Glucosidase  inhibitors isolated  from  medicinal  plants’, Food Science  and  Human  Wellness .  Beijing Academy  of  Food  Sciences.,  3(3–4),  pp. 136–174. doi: 10.1016/j.fshw.2014.11.003.