## AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK ETIL ASETAT JAMUR LAUT YANG DIISOLASI DARI KARANG LUNAK Sarcophyton sp. DARI PERAIRAN

## DESA TUMBAK KECAMATAN PUSOMAEN
Englin Meiva Paat 1) , Defny S. Wewengkang 1) , Henki Rotinsulu 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Soft coral is one type of Coelenterata that lives at sea, namely coral reef  waters. Soft Coral acts as one of the constituent animals of coral reef ecosystems and is the largest supplier of growth compounds, such as carbonate compounds in which 50% of the bioactive compounds found in these invertebrates are toxic. This study aims to determine the antimicrobial activity of marine fungi associated with soft coral Sarcophyton sp., which was obtained from Tumbak Village,  Posumaen  Sub-district,  Southeast  Minahasa  Regency,  North  Sulawesi.  The antimicrobial  testing  uses  diffusion  methods  to  determine  the  inhibitory  activity  against Staphylococcus  aureus  (Gram  positive  bacteria),  Escherichia  coli  (Gram  negative  bacteria) and  Candida  albicans  (fungi).  The  results  showed  that  the  antimicrobial  activity  of  fungal extracts  isolated  from  soft  coral  Sarcophyton  sp.,  against  bacteria,  Escherechia  coli,  and Candida  albicans  by measuring the inhibitory activity is  the formation  of clear zones which categorize as medium, whereas for Staphylococcus aureus bacteria do not have antimicrobial activity.
Keywords : Antimicrobial, Soft Coral (Sarcophyton sp.), Staphylococcus aureus, Eschrichia coli, Candida albicans

## ABSTRAK
Karang  Lunak  merupakan salah  satu jenis  Coelenterata  yang  hidupnya  dilaut  yaitu  perairan  terumbu karang.  Karang  Lunak  berperan  sebagai  salah  satu  hewan  penyusun  ekosistem  terumbu  karang  dan pemasok  senyawa  pertumbuhan  terbesar  yaitu  senyawa  karbonat  yang  dimana  sebanyak  50  % senyawa  bioaktif  yang  terdapat  pada  invetebrata  ini  bersifat  toksik.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  adanya  aktivitas  antimikroba  dari  jamur  laut  yang  berasosisasi  dengan  karang  lunak Sarcophyton sp.,  yang  diperoleh  dari  desa  Tumbak  Kecamatan  Posumaen  Minahasa  Tenggara Sulawesi Utara. Pengujian daya antimikroba menggunakan metode difusi untuk mengetahui aktivitas penghambatan  yang  diuji  terhadap Staphylococcus  aureus (bakteri  Gram  positif), Eschrichia  coli (bakteri  Gram  negatif)  dan Candida  albicans (jamur).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  adanya aktivitas antimikroba ekstrak jamur yang diisolasi dari karang lunak Sarcophyton sp., terhadap bakteri, Escherechia coli,  dan  jamur Candida  albicans dengan  pengukuran  daya  hambat  yaitu  terbentuknya zona  bening  yang  ada  dalam  kategori  sedang,  sedangkan  untuk  bakteri Staphylococcus  aureus tidak memiliki aktivitas antimikroba.
Kata Kunci: Antimikroba, Karang Lunak ( Sarcophyton sp.), Staphylococcus aureus , Eschrichia coli , Candida albicans

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan Negera
kepulauan terbesar di dunia yang mempunyai  panjang  pantai  81.000  km yang  kaya  akan  terumbu  karang  dan  biota laut  lainnya  (Van  Soest,  1989).  Hampir seluruh  perairan  yang  berada  di  Indonesia terdapat  karang  lunak  dengan  tingkat keanekaragamannya  yang  tinggi  (Mahaza, 2003). Karang lunak (soft coral) merupakan  bagian  dari  ekosistem  terumbu karang yang penting (Benayahu, 1985) dan termasuk komponen terbesar setelah karang batu (Manuputty, 1996).
Karang lunak berperan sebagai salah satu  hewan  penyusun  ekosistem  terumbu karang serta pemasok senyawa pertumbuhan terbesar bagi terumbu karang yaitu senyawa karbonat,  hal ini dibuktikan dengan  penemuan  sejumlah  besar  spikula berkapur  di  dalam  jaringan  tubuhnya  dan ini  tidak  ditemukan  pada  hewan-hewan lain  yang  hidup  sekalipun  diterumbu karang yang sama.
Sarcophyton sp.,  merupakan  salah satu jenis karang lunak yang memproduksi senyawa  kimia  alami  dan  dikenal  dengan istilah produk alami. Senyawa kimia alami tersebut  berpotensi  sebagai  sumber  obat alami.  Senyawa  kimia  aktif  yang  terdapat pada  karang  lunak Sarcophyton sp., menunjukkan  aktivitas  sebagai  antibakteri, antifungi, antitumor, neurotoksik, dan anti- inflamantori yang bermanfaat bagi industry farmasi (Badria et al, 1998) dan (Sawant et al, 2006).
Sekarang ini perkembangan resistensi terhadap antimikroba dan munculnya  patogen  multiresisten  telah membangkitkan kepedulian kalangan medis  di  dunia.  Hal  ini  telah  menjadi
permasalahan  yang  sangat  penting  untuk diselesaikan. Karena itu diperlukan penemuan dan pengembangan jenis antibiotik  baru  yang  dapat  melawan mekanisme resistensi. Resistensi mikroorganisme  terhadap  obat-obat  yang beredar  menyebabkan  banyak  peneliti berusaha  mencari  bahan-bahan  antibiotik baru.  Informasi  mengenai  kandungan antibiotik dari jamur simbion karang lunak masih  kurang  sehingga  penelitian  tentang mikroorganisme yang bersimbiosis dengan karang lunak dari perairan Sulawesi Utara, khususnya  di  perairan  Desa  Tumbak, Kecamatan Posumea, Kabupaten Minahasa Tenggara sangat di perlukan.

## METODOLOGI PENELITIAN Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Oktober  2019  –  November  2019  di Laboratorium  Farmasi  Lanjut  Fakultas Matematika  dan  Imu  Pengetahuan  Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Bentuk Penelitian
Penelitian
ini merupakan eksperimental  laboratorium  yang  akan menguji  aktivitas  antimikroba  jamur  dan bakteri  yang  diisolasi  dari  karang  lunak Sarcophyton Sp.

## Alat dan Bahan Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini  yaitu masker, sarung tangan, gunting,  tabung  oksigen,  snorkel,  fins, kantong  plastik,  kamera    bawah  laut, wadah  kaca,  pisau,  Erlenmeyer,  corong, rotary  evaporator, timbangan  analitik, corong  pisah,  gelas  ukur,  gelas  kimia, cawan  petri,  autoklaf,  pinset,  pembakar spritus, magnetic stirrer , pipet tetes, mikro
tub,  batang  pengaduk, Laminar  air  flow, rak  tabung  reaksi,  tabung  reaksi,  lemari pendingin,  vial,  jangka  sorong,  jarum  ose inkubator, cakram ( paper
disc) ,
mikropipet, jas lab.
Bahan
Bahan-bahan  yang digunakan  yaitu Karang  lunak Sarcophyton sp.,  bakteri  uji Staphylococcus  aureus ATCC  25923, Escherichia  coli ATCC  25922,  Jamur  Uji Candida  albicans ATCC  1231,  etanol, aquadest,  etil  asetat,  aseton, Potato Dextros  Agar , Nutrient  Agar ,  Glukosa, Polypeptone, MgSO 4 .7H 2 O, Yeast Extract , KH 2 PO 4 ,  Sukrosa, Starch , Malt  Extract ,
Ebios ,  kloramfenikol  paperdisc,  label, spidol  permanen, tissue,  aluminium  foil , kertas saring, kapas.

## Prosedur Kerja Pengambilan Sampel
Sampel  karang  lunak  diambil  di
Desa  Tumbak,  Kecamatan  Pusomaen, Kabupaten Minahasa Tenggara.
menggunakan  alat  bantu    ( Scuba  Diving ).
Sampel  difoto  dengan  kamera  bawah  laut dan  diambil  lalu  dimasukkan  ke  dalam ziper bag dan disimpan dalam cooling box berisi es batu untuk dibawa ke
Laboratorium  Lanjutan  Program  Studi Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Imu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Determinasi Karang Lunak
Determinasi karang lunak
dilakukan  dilakukan  di  Laboratorium Lanjut  Program  Studi  Farmasi  Universitas
Sam  Ratulangi  Manado.  Tujuan  dilakukan determinasi yaitu untuk mengetahui sampel yang diambil, dari hasil determinasi  ini  menunjukan  karang  lunak
Sarcophyton sp.,  yang  digunakan  dalam penelitian ini.

## Kultur Cair
Kultur  cair  dibuat  dengan  cara biarkan  jamur  murni  yang  telah  diperoleh diinokulasikan  ke  dalam  labu  Erlenmeyer yang  berisi  (2  gram  glukosa,  0,5  gram polypeptone ,  0,05  gram  MgSO 4 .7H 2 O,  0,2 gram yeast  extract , 0,1  gram  KH 2 PO 4 , 0,1 gram  agar  dilarutkan  dalam  100  ml aquades).  Labu  tersebut  kemudian  diaduk menggunakan  alat  shaker  pada  suhu  27 0 C dengan  kecepatan  120  rpm  selama  3x24 jam  untuk  memperoleh  bibit  kultur. Setelah  didapat  bibit  kultur,  kemudian dipindahkan  sebanyak  3  ml  ke  media produksi yang berisi (4,5 gram sukrosa, 4,5 gram  starch,  1,5  gram extract  Malt ,  0,45 gram ebios ,  0,75  KH 2 PO 4 ,  0,075  gram MgSO 4. 7H 2 O  dilarutkan  dalam  150  ml aquades).  Labu  tersebut  kemudian  diaduk menggunakan  alat  shaker  pada  suhu  27 0 C dengan  kecepatan  120  rpm  selama  14x24 jam (Yamazaki et al ., 2012).

## Isolasi  dan  Purifikasi  Jamur  yang Berasosiasi dengan Karang Lunak
Isolasi  jamur  dilakukan  dengan cara  sampel  dibersihkan  dengan  aquades kemudian dipotong kecil-kecil seperti dadu menggunakan  gunting  dan  pinset  dan dimasukkan  ke  dalam  media  PDA  yang telah  disediakan.  Sampel  ditanam  di  atas media  PDA  dengan  tiga  titik  pusat  yang berbentuk segitiga. Cawan petri yang berisi sampel ditutup dan direkatkan menggunakan parafilm, kemudian
diinkubasi pada suhu ruangan selama 7x24 jam.  Setelah  didapatkan  isolat  jamur, dilakukan  pemurnian  dengan  cara  isolat. jamur  diinokulasikan  ke  media  PDA  yang
baru,  kemudian  di  inkubasi  pada  suhu ruangan  selama  14x24  jam.  Selanjutnya diidentifikasi
morfologi secara makroskopik  untuk  menghasilkan  isolat jamur murni.

## Ekstraksi dan Fraksinasi
Pada  akhir  hari  ke  empat  belas setelah proses fermentasi, dilakukan ekstraksi  pada  campuran  miselium  jamur dan  broth  dengan  menggunakan  200  ml aseton. Ekstraksi dilakukan dengan menggunakan  shaker  pada  suhu  ruangan dengan kecepatan 150 rpm selama 5 menit. Selanjutnya  dipisahkan  antara  fase  air  dan aseton  menggunakan  corong  pisah  dan kertas saring. Setelah didaptkan filtrat dari hasil  penyaringan  kemudian  diuapkan dengan rotary evaporator untuk menguapkan  pelarut  dan  memperoleh senyawa  hasil  ekstraksi  yang  diinginkan. Dari  proses  ini  didapatkan  ekstrak  cair, kemudian  ekstrak  cair  dimasukkan  ke dalam  corong  pisah  untuk  dilakukan fraksinasi.  Fraksinasi  yang  dilakukan menggunakan  pelarut  etil  asetat  sebanyak 200  ml  setelah  itu  dikocok  dalam  corong pisah  sampai  homogen.  Dibiarkan  sampai terbentuk  dua  lapisan.  Masing-masing lapisan  ditampung  pada  wadah  yang berbeda. Lapisan H 2 O kemudian difraksinasi  lagi  menggunakan  pelarut  etil asetat  sebanyak  200  ml.  Hal  ini  dilakukan sebanyak  tiga  kali.  Selanjutnya  fraksi  etil asetat  dikumpulkan  kemudian  pelarut diuapkan  menggunakan  rotary  evaporator sampai  diperoleh  ekstrak  kasar  yang  akan digunakan untuk uji aktivitas antimikroba.

## Pengujian aktivitas antimikroba
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu metode difusi agar (disc
diffusion  Kirby  and  Bauer).  Aktivitas penghambatannya diuji terhadap Staphylococcus  aureus ATCC  25923 (bakteri  Gram  positif), Eschrichia  coli ATCC  25922  (bakteri  Gram  negatif)  dan Candida  albicans ATCC  1231  (jamur), yang  digunakan  sebagai  mikroorganisme uji.  Pada  pengujian  aktivitas  antimikroba ini,  cakram  (paper  disc)  yang  digunakan berukuran  6  mm.  Suspensi  mikroba kemudian  diinokulasikan  ke  dalam  media dan dihomogenkan. Kemudian media yang telah  diinokulasi  mikroba  dituangkan  ke dalam  cawan  petri  dan  tunggu  sampai media  memadat.  Masing-masing  cawan petri  diberi  label  dan  nomor  sampel  yang sesuai.  Sampel  yang  telah  ditentukkan konsentrasinya  (250μg/50μl)  ditotolkan pada masing-masing cakram dengan menggunakan  mikropipet.  Letakkan  kertas cakram  yang  telah  ditotolkan  sampel  uji dengan  pinset  kedalam  cawan  petri  lalu diinkubasi  selama  1  x  24  jam  (Ortez, 2005).

## Pengamatan  dan  Pengukuran  Zona Hambat
Pengamatan dilakukan setelah 1x24 jam masa inkubasi. Zona bening merupakan  petunjuk  kepekaan  mikroba terhadap bahan antimikroba yang digunakan sebagai bahan uji yang dinyatakan  dengan  lebar  diameter  zona hambat (Vandepitte et  al , 2011). Diameter zona hambat diukur kemudian dikategorikan kekuatan daya antimikrobanya berdasarkan penggolongan
Davis dan Stout (1971).

## Pengolahan dan Analisis Data
Teknik  pengolahan  data  dilakukan dengan  model  penyajian  dalam  bentuk
tabel  dan  gambar.  Aktivitas  antibakteri diukur dengan menggunakan jangka sorong dijital skala millimeter berdasarkan zona  hambat  yang  terbentuk,  kemudian dirata-ratakan dari tiga kali pengujian.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Uji Aktivitas Antimikroba
Uji aktivitas antimikroba dari jamur yang  berasosiasi  dengan  karang  lunak Sarcophyton sp.,  terhadap  mikroba  uji
Staphylococus aureus ATCC 25923 mewakili  bakteri  Gram  positif, E.  coli ATCC  25922  mewakili  bakteri  Gram negatif, dan Candida albicans ATCC 1231 mewakili golongan jamur. Tujuan penggunaan mikroba uji ini untuk mengetahui  apakah  ekstrak  kasar  dari jamur  yang  berasosiasi  memiliki  aktivitas sebagai antimikroba serta apakah mempunyai  spektrum  luas  yaitu  dapat membunuh  bakteri  Gram  positif,  Gram negatif  dan  jamur  atau  mempunyai spektrum yang sempit yang hanya membunuh  salah  satu  dari  bakteri  Gram positif,  Gram  nrgatif  atau  jamur.  Ketiga mikroba  uji  ini  ada  dalam  tubuh  manusia. S.  aureus umumnya  ditemukan  pada  kulit,
E.  coli umumnya  ditemukan  di  usus,  dan C.  albicans ditemukan  di  mulut  dan  area kelamin.
Pada pengujian aktivitas antimikroba dilakukan dengan menggunakan  metode  difusi  agar.  Metode difusi  agar  adalah  metode  yang  dilakukan dengan pengukuran dan pengamatan diameter  zona  bening  yang  terbentuk disekitar cakram yang berisi zat antimikroba  yang  diletakkan  pada  media agar  yang  telah  diinokulasi  mikroba (Lalamentik,  2017).  Tujuan  menggunakan metode  difusi  agar  ini  untuk  melihat sensitivitas berbagai jenis mikroba terhadap  antimikroba  pada  konsentrasi tertentu  (Akhyar,  2010).    Pengujian antimikroba ini dilakukan dengan pengukuran zona hambat yang terbentuk di
area cakram yang bertujuan untuk mengetahui  apakah  terdapat  aktivitas antimikroba dari jamur laut yang berasosiasi dengan karang lunak Sarcophyton sp . Dalam  pengujian  ini, diperoleh  hasil  yaitu  terbentuknya  zona hambat  disekeliling  cakram  yang  ditandai dengan  adanya  area  bening.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  adanya  aktivitas  anti mikroba  terhadap  ekstrak  jamur  yang diisolasi dari karang lunak Sarcophyton sp . Dalam  pengujian  ini  digunakan  kontrol positif  dan  negatif.  Penggunaan  kontrol positif  berfungsi  sebagai  kontrol  dari  zat uji,  dengan  membandingkan  diameter daerah hambat yang terbentuk (Dwijendra, 2014).  Sedangkan  tujuan  penggunaan kontrol negatif yaitu untuk mengetahui ada tidaknya pengaruh pelarut terhadap pertumbuhan  mikroba  uji,  sehingga  dapat dipastikan bahwa aktivitas yang ditunjukkan  oleh  ekstrak  ialah  senyawa yang  terkandung  dalam  sampel  bukan berasal  dari  pelarut  yang  digunakan. Dalam  penelitian  ini,  kontrol  negatif  yang digunakan adalah pelarut metanol.

## Tabel 1. Hasil pengukuran rata-rata diameter zona hambat
Hasil  tersebut  diatas  berdasarkan pengukuran  zona  bening  yang  terbentuk disekitaran  kertas  cakram.  Pengukuran zona  hambat  dilakukan  dengan  cara mengukur  jarak  zona  bening  secara
Perlakua
n Rata – Rata Diameter Total (mm) Staphylococu s aureus Escherichi a coli Candi da albica ns Ekstrak Etil Asetat 0 7,19 7,49 Kontrol Positif 26,05 21,65 23,8 Kontrol Negatif 0 0 0
horizontal  dan  vertikal  menggunakan  alat jangka  sorong  (ketelitian  0,01  mm)  pada beberapa  sisi  kertas  cakram,  lalu  dirata- ratakan.  Berdasarkan  kriteria  Davis  and Stout (1971) kategori lemah kurang dari 5 mm,  kategori  sedang  5  mm  -  10  mm, kategori  kuat  10  mm  -  20  mm,  kategori sangat  kuat  lebih  dari  20  mm.  Dari pengukuran rata-rata diameter zona hambatnya  (Tabel  1.)  dapat  dilihat  bahwa daya antimikroba dari sampel karang lunak Sarcophyton sp., pada bakteri uji S. aureus ATCC 25923 tidak ditemukan zona bening hal ini  menunjukkan bahwa sampel karang lunak Sarcophyton sp  tidak  memiliki aktivitas  antimikroba  terhadap  bakteri  uji Staphylococcus aureus . Hal ini menunjukkan  tidak  ada  kepekaan  mikroba terhadap sampel karang lunak Sarcophyton sp. Sedangkan untuk bakteri E. coli ATCC 25922  terbentuk  diameter  zona  bening sebesar  7,19  mm  termasuk  dalam  kategori sedang,  dan  untuk  jamur C.  albicans ATCC  1231  terbentuk  diameter  zona bening  sebesar  7,49  mm  termasuk  dalam kategori  sedang.  Pengamatan  pada  zona hambat  ini  dilakukan  setelah  24  jam  masa inkubasi. Berdasarkan hasil yang diperoleh,  untuk  bakteri Staphylococcus aureus tidak  ditemukan  daya  hambat,  hal ini  dapat  dipengaruhi  oleh  senyawa bioaktif  yang  terdapat  pada  karang  lunak
Sarcophyton sp.
Karang lunak Sarcophyton sp.,  memiliki  kandungan senyawa bioaktif steroid, flavonoid, benedict  (Romansyah,  2011).  Dari  hasil yang  diperoleh  dapat  disimpulkan  bahwa jamur  yang  berasosiasi  dengan  karang lunak Sarcophyton sp.,  dari  perairan  desa Tumbak  kecamatan  Pusomaen  Minahasa Tenggara memiliki spektrum sempit sehingga  tidak  dapat  membunuh  bakteri
gram  positif.  Pada  penelitian  sebelumnya yang  di  teliti  oleh  (Fatimawati,  2015)  dan (Mokodongan, 2019), menunjukkan bahwa terdapat aktivitas antimikroba yang berbeda-beda  pada  bakteri Staphylococcus aureus dibuktikan  dengan  terbentuknya diameter  zona  hambat.  Selanjutnya  untuk bakteri E.  Coli terdapat  aktivitas antimikroba  dengan  zona  hambat  sebesar 7,19  mm.  Pada  penelitian  sebelumnya yang  diteliti  oleh  (Hardiningtyas,  2009) dan  (mokodongan,  2019)  menunjukkan daya  hambat  yang  diperoleh  lebih  kecil. Selanjutnya untuk jamur Candida albicans terdapat aktivitas antimikroba dengan zona hambat  sebesar  7,49  mm.  Pada  penelitian sebelumnya yang diteliti oleh (mokodongan,  2019)  menunjukkan  bahwa tidak ada zona hambat yang terbentuk. Hal ini    dipegaruhi  oleh  lingkungan  atau tempat  pengambilan  sampel  dan  beberapa faktor  lainnya  seperti  PH,  suhu,arus  dan cahaya.
Spesimen  yang  berada  dilingkungan terbuka  dan  berombak  besar  cenderung pendek pertumbuhannya atau juga merambat,  sebaliknya  spesimen  dari  jenis yang sama pada lingkungan yang terlindung  dari  perairan  yang  lebih  dalam dan  berarus  tenang,  pertumbuhannya cenderung  tegak  dan  tinggi  sehingga  hal ini  juga  yang  dapat  mempengaruhi  hasil yang di dapat (de Voogd,2005). Sedangkan suhu  juga  ikut  berpengaruh  pada  senyawa kimia  yang  terkandung  didalam  karang lunak Sarcophyton sp.,  suhu  yang  terlalu tinggi  dapat  merusak  senyawa  kimia  yang terdapat pada sampel (Sundari et al , 2015).
Pada  penelitian  ini  menggunakan kontrol  positif  antibiotik  kloramfenikol paper  disc ,  karena  kloramfenikol  adalah antibiotik  yang  memiliki  spektrum  yang
luas  yang  mampu  menghambat  bakteri Gram positif, Gram negatif dan juga dapat menghambat  jamur.  Kloramfenikol  dapat digunakan  untuk  melawan  infeksi  yang disebabkan  oleh  bakteri  Gram  positif  dan bakteri  Gram  negatif.  Kloramfenikol mempunyai  khasiat  bakterisid  (Sumardjo, 2009). Penggunaan kontrol positif berfungsi  sebagai  kontrol  dari  zat  uji dengan  membandingkan  diameter  hambat yang  terbentuk.  Dari  hasil  yang  di  dapat menunjukan  bahwa  diameter  zona  hambat dari kontrol positif pada bakteri Staphylococcus  aureus ATCC  2592  26,05 mm  termasuk  dalam  kategori  sangat  kuat, Escherichia  coli ATCC  25922  21,65  mm termasuk  dalam  kategori  sangat  kuat,  dan untuk jamur Candida albicans ATCC 1231 23,8  mm  termasuk  dalam  kategori  sangat kuat.
Kontrol  negatif  yang  digunakan  pada penelitian  ini  yaitu  metanol,  hal  ini dikarenakan  metanol  merupakan  pelarut yang  digunakan  untuk  melarutkan  sampel. Jika kontrol  negatif  memiliki daya hambat kemungkinan  daya  hambat  yang  diperoleh bisa  berasal  dari  pelarut  yang  digunakan yaitu metanol. Tetapi, hasil yang diperoleh menunjukkan kontrol negatif menunjukkan tidak  adanya  zona  hambat  pada  pengujian terhadap bakteri S. aureus ATCC 2592, E. coli ATCC  25922,  dan  jamur C.  albicans ATCC  1231.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa kontrol  negatif  yang  digunakan  tidak berpengaruh  pada  uji  antimikroba.  Daya hambat  yang  terbentuk  tidak  dipengaruhi oleh  pelarut  melainkan  karena  aktivitas senyawa  yang  ada  pada  karang  lunak Sarcophyton sp.  Penggunaan  metanol sebagai  kontrol  negatif  diperkuat  dengan penelitian  oleh  Ginting  (2010),  yang menyatakan bahwa kontrol negatif
methanol  pada  uji  antibakteri  tidak menunjukan  adanya  aktivitas  sehingga dapat  dipastikan  bahwa  metanol  tidak berpengaruh terhadap aktivitas yang terbentuk.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa, jamur laut  yang  berasosiasi  dengan  karang  lunka Sarcophyton sp.,  yang diperoleh dari Desa Tumbak, Kecamatan Pusomaen, Kabupaten  Minahasa  Tenggara  memiliki aktivitas  antimikroba  terhadap  bakteri, Eschericia  coli, dan  jamur Candida albicans yang dikategorikan sedang, sedangkan  untuk  bakteri Staphylococcus aureus tidak memiliki aktivitas antimikroba.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut uji aktivitas antimikroba menggunakan metode dilusi untuk mengetahui  nilai  KHM    dan  KBM  dari karang lunak Sarcophyton sp.
Perlu  dilakukan penelitian pada uji aktivitas yang lain seperti uji antioksidan.

## DAFTAR PUSTAKA
Akhyar.  2010.  Uji  Daya  Hambat  dan Analisis  KLT  Bioautografi  Ekstrak Akar dan Buah Bakau ( Rhizophora stylosa Griff.)  Terhadap  Vibrio Harveyi [skripsi]. Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin, Makassar.
Badria  FA,  Guirguis  AN,  Perovic  S, Steffen  R,  Muller  WEG,  dan Schroder HC. 1998. Sarcophytolide: a new
neuroprotective  compound  from
Soft  coral Sarcophyton  glaucum . Toxicology, 131 (3) : 133-143.
Benayahu,    Y.    1985.    Faunistic compotition  and  pattern    in    the distribution of softcoral
(Octocorallia    Alcyonacea) along the  coral    reefs  of  Sinai  Peninsula. Proc.  5th  Int.  Coral  Reef  Symp. Tahiti . 6 : 255-260.
Davis,  W.  W.,  Stout,  T.  R.  1971.  Disc Plate  Method  of  Microbiological Assay. Journal  of  Microbiology . 22 : 659-665.
De Voogd, N.J. 2005. Indonesian Sponges:
Biodiversity and Mariculture Potential, PhD-thesis, University of Amsterdam, the Netherlands. Dwijendra, I. M. 2014. Aktivitas
Antibakteri dan Karakterisasi Senyawa Fraksi Spons Lamellodysidea herbacea yang Diperoleh  dari  Teluk  Manado
[skripsi].  Program  Studi  Farmasi FMIPA Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Fatmawati, A. 2015.  Uji  Aktivitas Ekstrak Karang  Lunak  Sarcophyton  sp terhadap  staphylococcus  aureus. Jurnal kimia. 3 (1)
Ginting,  E.  L.,  Warouw,  V.,  Suleman,  R.
W. 2010. Aktivitas Antibakteri Dari Ekstrak Kasar Bakteri Yang Berasosiasi Dengan Sponge Acanthostrongylophora sp. [skripsi] . Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan  Universitas  Sam Ratulangi, Manado.
Hardiningtyas,  S.  D.  2009.  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Karang  Lunak Sarcophyton sp. yang Difragmentasi dan Tidak Difragmentasi  Di  Perairan  Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu
[skripsi]. FMIPA IPB, Bogor.
Lalamentik, G. 2017. Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Karang  Lunak Klyxum  sp.
Yang Diperoleh dari Teluk Manado [skripsi].  Fakultas  Matematika  dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi, Manado. Mahaza,  N.S.  2003.  Kajian  kerusakan ekosistem  terumbu  karang  akibat penangkapan ikan hias dan pengambilan  bunga  karang  di kelurahan Pulau Panggang Kepulauan Seribu [Skripsi]. Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan,  Institut  Pertanian  Bogor, Bogor.
Manuputty,  A.  E.  W.  1996.  Zooxanthelae pada  Karang  dan  Hubungannya dengan  Karakteristik  Lingkungan Perairan  di  Terumbu  Karang  Pulau Pari,  Pulau-pulau  Seribu  [tesis]. Program Pascasarjana IPB, Bogor.
Mokodongan, T., Simbala, H. E.,
Rotinsulu,  H.  2019.  Aktivitas Antimikroba  dari  Ekstrak  dan Fraksi  Karang  Lunak  Sarcophyton sp.,  dari  Perairan  Ponteng  Desa Tumbak Minahasa Tenggara Terhadap Mikroba Patogen Staphylococcus aureus , Escherichia coli,  dan  Candida  albicans. Jurnal Pharm. 8 (4)
Ortez, J. H. 2005. Disk Diffusion testing in manual of antimicrobial
susceptibility  testing.  Marie  B.
Coyle  (Coord.  Ed).  American society for Microbiology, America.
Romansyah, Y., 2011., Kandungan Senyawa Bioaktif Antioksidan Karang  Lunak Sarcophyton  Sp .
Alami Dan Transplantasi Di
Perairan Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu [Skripsi]. Departemen  Ilmu  Dan  Teknologi Kelautan  Fakultas  Perikanan  Dan Ilmu  Kelautan  Institut  Pertanian
Bogor, Bogor.
Sawant  S,  Youssef  D,  Mayer  A,  Sylvester
P,  Wall  V,  Arant  M,  El-Sayed  K. 2006. Anticancer And Anti- Inflamantory Sulphur-Containing Semisynthetic Derivatives of
Sarcophine, Chem,  Pharm  Bull.
54(8) : 1119-1123.
Sumardjo, D. 2009. Pengantar Kimia Buku
Panduan Kuliah Mahasiswa Kedokteran  dan  Program  Strata1 Fakultas Bioeksakta. EGC, Jakarta.
Sundari  ,  D.,  Almasyhuri  dan  Astuti Lamid.  2015.  Pengaruh  Proses Pemasakan  Terhadap  Komposisi Zat  Gizi  Bahan  Pangan  Sumber Protein.
Van  Soest  R.W.M.  1989.  The  Indonesian Sponges  Fauna:  A  Status  Report. Ne&. J. Sea Res . 23 (2) . 223-30.
Vandepitte,  J;  Verhaegen,  J;  Engbaek,  K; Rohner,  P;  Piot,  P;  Heuck,  C.C. 2011. Prosedur Laboratorium Dasar untuk  Bakteriologi  Klinis.  Edisi  2. Penerbit  Buku  Kedokteran  EGC, Jakarta.
Yamazaki,  H.,  Rotinsulu,  H.,  Kaneko,  T., Murakami,  K.,  Fujiwara,  H.,  Ukai, K.,  Namikoshi,  M.  2012.  A  New Dibenz [b,e] oxepine Derivative, 1-
Hydroxy-10-Methoxy  dibenz  [b,e] oxepin-6,11-dione,  from  a  Marine- Derived Fungus, Beauveria
bassiana  TPU942. Journal  Marine
Drug.