## Original Article
Received December 2023 / Revised January 2024 / Accepted January 2024

## Spizaetus: Jurnal Biologi dan Pendidikan Biologi
p-ISSN: 2716-151X
e-ISSN: 2722-869X
Bioremediasi Merkuri (Hg) Dengan Pemanfaatan Bakteri Indigenous dari  Kawasan  Sungai  Tercemar  Limbah  Pertambangan  Emas Batangtoru

## Bioremediation  of  Mercury  (Hg)  Using  Indigenous  Bacteria  from River Areas Polluted by Batangtoru Gold Mining Waste

## Annisa Amalia*, Ulfayani Mayasari, Rizki Amelia Nasution
Program Studi Biologi, UIN Sumatera Utara, Deli Serdang, 20353, Indonesia *Corresponding author: 18annisaamalia@gmail.com
Abstrak. Aktivitas penambangan emas bisa menghasilkan peningkatan kerusakan lingkungan akibat pembuangan  limbah  dengan  konsentrasi  dan  kualitas  tertentu.  Salah  satu  contoh  dari  limbah pertambangan emas yaitu adanya logam berat yaitu merkuri (Hg) pada limbah. Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui  kemampuan  isolat  bakteri  dalam  menurunkan  kadar  logam  merkuri  (Hg)  dari kawasan  sungai  tercemar  limbah  pertambangan  emas  Batangtoru.  Penelitian  ini  menggunakan metode  eksperimental  laboratorium  dengan  pendekatan  deskriptif  kuantitatif  meliputi  prosedur penelitian pembuatan media NA ( Nutrient Agar ) dan NB ( Nutrient Brooth ), uji biokimia, isolasi bakteri, identifikasi  bakteri,  uji  resistensi  serta  uji  reduksi  kadar  merkuri.  Hasil  penelitian  didapatkan  5  isolat yang berasal dari kawasan sungai tercemar limbah pertambangan emas Batangtoru. Parameter yang diamati berupa makroskopis dan mikroskopis serta uji resistensi bakteri dengan konsentrasi merkuri 100  ppm.  Hasil  uji  penurunan  kadar  logam  dilakukan  menggunakan  alat  AAS  ( Atomic  Absorption Spectrophoto-meter ) di mana terdapat 3 isolat bakteri yang mampu menurunkan kadar merkuri yaitu Bacillus dengan persentase penurunan 89, 02%, Micrococcus dengan persentase penurunan 90,56%, Clostridium  dengan  persentase  penurunan  94,44%.  Penelitian  dapat  dijadikan  referensi  untuk  ke depannya  agar  dapat  mengurangi  cemaran  limbah  pertambangan  emas  terutama  di  Batangtoru dengan memanfaatkan bakteri indigenos.
Kata Kunci : Bakteri Resistensi, Bioremediasi, Limbah Tambang, Logam Berat Hg
DOI: https://dx.doi.org/10.55241/spibio.v5i1.350

## 1.  Pendahuluan
Limbah merupakan hasil suatu produksi,  industri,  dan  rumah  tangga. Di sekitar masyarakat, terdapat berbagai jenis limbah dengan konsentrasi  yang  tinggi  dan  jumlah tertentu,  Keberadaan  limbah  dapat memberikan  dampak  negatif  terhadap lingkungan terutama kesehatan manusia,  sehingga  perlu  adanya
penanganan  sampah.  Karakteristik Limbah  menentukan  tingkat  bahaya suatu limbah[1]. Contoh limbah berbahaya  yaitu  limbah  pertambangan emas  yang  mengandung  logam  berat seperti  merkuri  (Hg).  Merkuri  bisa mengakibatkan  gangguan  terhadap kesehatan  manusia  baik  dalam  dosis besar  maupun  dosis  kecil  seperti
gangguan pada ginjal, sistem pernapasan,  sistem  pencernaan,  serta sistem reproduksi[2].
Salah  satu  dari  pertambangan  yang ada  di  Indonesia  yaitu  pertambangan emas  Batang  Toru.  Perusahaan tambang  emas  Batang  Toru  yaitu merupakan perusahaan pertambangan emas yang beroperasi di Batang Toru, Kabupaten  Tapanuli  Selatan,  Provinsi Sumatera  Utara  dengan  luas  wilayah 1.639 km 2 . Adapun lokasinya berada di sekitar  sungai  Batang  Toru.  Dimulai pada  tahun  1997  dengan  eksplorasi emas  sebanyak  6,3  ton  per  tahun selama  10  tahun.  Dampak  negatif terhadap lingkungan yang berasal dari penggunaan  bahan  peledak,  serta pembuangan limbah ke sungai.
Bioremediasi  merupakan  kemampuan mengurai polutan dengan menggunakan  mikroorganisme  seperti bakteri  sehingga  tidak  menimbulkan pencemaran  lebih  lanjut  Penelitian mengenai  penurunan  kadar  logam merkuri  (Hg)  dengan  menggunakan bakteri  sudah  banyak  dilakukan. Bioremediasi cukup banyak yang telah menghasilkan  hasil  positif  di  bakteri mampu  memecah  senyawa  ini  zat berbahaya  diubah  menjadi  senyawa yang lebih sederhana, oleh karena itu, polutan yang terkandung bisa mengurangi sampah[3]. Namun penelitian  bioremediasi  merkuri  (Hg) dengan pemanfaatan bakteri indigenos dari kawasan sungai sekitar pembuangan  limbah  pertambangan emas  Batangtoru  belum  dilakukan. Dilakukannya  penelitian  ini  yaitu bermanfaat
untuk mengetahui
kemampuan  isolat  bakteri  dalam menurunkan  kadar  logam  khususnya merkuri  (Hg).  Bakteri  indigenos merupakan bakteri yang hidup di alam bebas[4].  Merkuri  merupakan  logam berat  yang  unik  karena  tidak  dapati terdegradasi  secara  biologis  atau kimiawi,  sehingga  efeknya  dapat bertahan  lama.  Logam  dapat  diubah untuk  meningkatkan  mobilitas  dan toksisitasnya. Hal ini perlu diperhatikan karena  memiliki  potensi  sebagai pencemar  pada  tanah  dan  air  tanah, serta  dapat  menyebar  ke  lingkungan sekitarnya melalui air, penyerapan oleh tanaman,  dan  akumulasi  dalam  rantai makanan[5].
Merkuri  (Hg)  dapat  ditemukan  dalam limbah,  terutama  dalam  perairan,  dan akan  mengalami  transformasi  oleh aktivitas mikroorganisme menjadi metil-merkuri  (Me-Hg).  Metil-merkuri memiliki  sifat  racun,  daya  ikat  yang kuat, dan tingkat kelarutan yang tinggi, terutama dalam tubuh hewan air[6].
Terdapat  penelitian  sebelumnya  yang telah dilakukan mengenai Bioremediasi merkuri  telah  dilakukan  di  mana bakteri  dengan  jenis Morganella morganii mampu mereduksi kandungan  logam  merkuri  sebesar 92,46% [7].
Hasil  penelitian  yang  terdahulu  dapat menjadi  acuan  untuk  melakukan penelitian bagi peneliti dalam pengetahuan penurunan kadar merkuri dengan  menggunakan  bakteri  dan dapat  sebagai  rujukan  bagi  peneliti selanjutnya.

## 2.  Metode
Waktu dan Tempat Penelitian Tempat  penelitian  dilakukan  di sungai pembuangan limbah
pertambangan emas Batangtoru, Kabupaten  Tapanuli  Selatan  Propinsi Sumatera  Utara  dengan  titik  koordinat dan  Pengujian  dilakukan  Universitas Sumatera  Utara  dan  Laboratorium BTKLPP  Kelas  1  Medan  pada  bulan Juli sampai Agustus 2023.
Gambar 1. Peta Lokasi Pengambilan Sampel

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu Laminar  Air  Flow ,  autoklaf, cawan  petri,  tabung  reaksi,  inkubator, pipet  ukur,  lemari  es,  jarum  ose, neraca  digital,  beaker  glass,  spatula, Erlenmeyer,  gelas  ukur,  labu  ukur. Satu  set  peralatan  AAS  ( Atomic Absorption  Spectrophotometer ),  kaca preparat,  bunsen,  dan  kit  microbact. Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  sampel  air  sungai yang tercemar oleh limbah pertambangan  di  Batang  Toru,  tisu, kapas,  plastik  wrap,  aluminium  foil, masker, sarung tangan, spidol marker, larutan  standar  merkuri, aquadest , spirtus,  alkohol  70%,  plastik  tebal perekat,  HCL,  NaOH,  dan  berbagai media seperti Luria Bertani (LB), agar, glukosa,  sukrosa,  pepton,  NaCl,  serta HgCl 2 .

## Rancangan Percobaan
Pada penelitian ini metode yang digunakan yaitu deskriptif
eksperimental
kuantitatif. Alasan
metode ini digunakan karena
dilaksanakannya  dengan  melakukan pengujian berbasis Laboratorium. Eksperimen  digunakan  untuk  melihat apakah  bakteri  yang  dapat  menjadi sebuah  agen  bioremediasi  mampu menurunkan kadar merkuri.

## Pengambilan Sampel
Sampel  air  sungai  diambil  di kawasan  sungai  tercemar  limbah pertambangan emas Batangtoru
dengan  2  titik.  Titik  pertama  berasal dari aliran langsung pipa pembuangan dan titik kedua dari sungai.

## Pembuatan Media NA dan NB
Media  NA  di  buat  dengan menimbang  NA  sebanyak  11,2  gr dimasukkan  ke  dalam  Erlenmeyer  lalu ditambahkan aquadest sebanyak  400 ml  kemudian  media  NB  di  dibuat dengan  menimbang  NB  sebanyak  12 gr  lalu  di  masukkan  ke  dalam Erlenmeyer  dan  ditambahkan  NaCl sebanyak  1liter.  Setelah  itu  masing- masing  di  panaskan  di  atas hotplate dan  di  aduk  sampai  homogen  dan  di sterilkan menggunakan autoklaf.

## Pembuatan Media Uji Biokimia
Media  dalam  uji  biokimia  terdiri atas,  SIM,  Simmons  sitrat,  dan  TSIA. SIM  di  timbang  sebanyak  3gr, Simmons  sitrat  sebanyak  12  gr  dan TSIA  sebanyak  6,5  gr.  Masing  di masukkan ke dalam Erlenmeyer dan di tambahkan aquadest sebanyak 100 ml dan  di  panaskan  di  atas hotplate kemudian  di  aduk  sampai  homogen kemudian di sterilkan di autoklaf.

## Isolasi Bakteri
Tahap  pertama  dalam  isolasi yaitu  pengenceran  yang  di  lakukan dari  10 1 sampai  dengan  10 6 .  Setelah pengenceran,  kemudian  diambil  dari seri 10 4 sampai 10 5 sebanyak 5 ml dan dilanjutkan  dengan  menyuspensikan
bakteri  ke  dalam  cawan  petri  yang sudah  berisi  media  NA+merkuri dengan  metode  pelat  sebar.  Setelah itu  di  inkubasi  selama  24  jam  dengan suhu  37 0 C.  Lalu  keesokan  harinya  di lakukan  pengamatan  dan  pemurnian bakteri  di  mana  terdapat  5  isolat bakteri  dengan  kode  BAH  1,  BAH  2, BAH 3, BAH 4, BAH 5. Dan di lanjutkan pewarnaan gram serta uji biokimia.

## Identifikasi Bakteri
Bakteri  diidentifikasi  dilakukan dengan  melihat  mikroskopis  dan makroskopis  bakteri.  Hal  ini  dibuat setelah  melakukan  pewarnaan  gram dan uji biokimia kemudian diidentifikasi menggunakan  buku  Bergey’s  Manual of Determination Bacteriology 9th.

## Uji Resistensi
Ketahanan  bakteri  dilakukan dengan  uji  resistensi  di  mana  untuk mengetahui  ketahanan  bakteri  yang hidup  di  media  NB  ( Nutrient  Brooth ) yang sudah di campurkan logam berat merkuri dengan masa inkubasi 24 jam pada  media  .Uji  resistensi  dilihat  dari optical density di mana semakin keruh media yang sudah di tambahkan maka OD bakteri semakin tinggi dikarenakan bakteri  semakin  banyak.  Uji  resistensi menggunakan spektrofotometri dengan  panjang  gelombang  600  nm. Konsentrasi  merkuri  yang  digunakan pada uji resistensi yaitu 100 ppm. Hasil
nilai  OD  yang  tertinggi  selanjutnya akan dilakukan uji reduksi.

## Uji Reduksi Kadar Merkuri
Uji  reduksi  kadar  merkuri  dilakukan dengan  menggunakan  AAS  ( Atomic Absorption
Spectrophotometry ) sebanyak  3  ose  isolat  bakteri  uji  dari media  Nutrient  Agar  diinokulasikan pada  100  mL  medium  cair  Nutrient Broth  (NB)  dengan  konsentrasi  HgCl 2 sebesar  10  ppb,  kemudian  diinkubasi pada incubator shaker dengan kecepatan 100 rpm selama 1 x 24 jam pada suhu kamar. Kultur di sentrifugasi pada  kecepatan  5000  rpm  selama  5 menit  untuk  memisahkan  bakteri dengan media NB. Supernatan dianalisis  dengan Atomic  Absorption Spectrophoto-meter (AAS) untuk menentukan  konsentrasi  logam  yang tereduksi.  Analisis  merkuri  dilakukan sesuai  metode  SNI  06-2462-1991. Dengan  melihat  bakteri  yang  memiliki nilai  OD  tertinggi  pada  uji  resistensi sebelumnya. Kemudian dilakukan perhitungan  persentase  penurunan kadar logam merkuri dengan rumus:
Keterangan :
D : Daya penurunan kadar Hg
C(a)  : Kandungan Awal Hg(ppm) C(b)  : Kandungan Akhir Hg(ppm)

## 3.  Hasil dan Pembahasan Isolasi Bakteri Logam Merkuri (Hg)
Bakteri  hasil  isolasi  yang menggunakan  air  limbah  sungai pertambangan  emas  batang  toru dengan menambahkan 100 ppm logam Hg  di  dapatkan  sebanyak  5  isolat bakteri  yang  telah  dimurnikan  dengan menggunakan metode goresan
kuadran  (Gambar  1).  Pemurnian dilakukan  untuk  mendapatkan  hasil isolasi  bakteri  yang  lebih  jelas  dari pada  sebelumnya  dan  melihat  bentuk koloni. Masing-masing hasil pemurnian diberi  kode  BAH  1,  BAH  2,  BAH  3, BAH 4, dan BAH 5.
Gambar 2. Hasil Isolasi Bakteri pada Media NA ditambahkan Merkuri 100 ppm
Proses  isolasi  merupakan  suatu  cara yang  digunakan  untuk  memindahkan mikroba  dari  lingkungannya  (habitat aslinya) ke media yang telah disediakan  sehingga  diperoleh  kultur yang  murni[8].  Penambahan  Hg dengan  konsentrasi  100  ppm  pada media  dilakukan  untuk  mengetahui resistensi  bakteri  terhadap  logam merkuri.
Karakterisasi Isolat Bakteri
Karakterisasi isolat bakteri dilihat  berdasarkan  makroskopis  dan mikroskopisnya.  Makroskopis  bakteri di  tentukan  dengan  melihat  margin, bentuk,  elevasi  dan  warna  pada masing-masing koloni bakteri. Sedangkan  untuk  mikroskopis  dilihat melalui  pewarnaan  gram  dan  uji biokimia.
Tabel 1. Karakterisasi Morfologi Koloni Bakteri
Kode Bentuk Margin Elevasi Warna BAH 1 Irreguler Undulate Convex Putih BAH 2 Filamentous Filamentous Convex Putih BAH 3 Irreguler Lobate Convex Putih BAH 4 Rizoid Rizoid Convex Putih BAH 5 Circular Entire Flat Putih
Dari  tabel  1,  ditemukan  satu  warna pada  kelima  isolat  bakteri  yaitu berwarna  putih.  Untuk  hasil  bentuk koloni  bakteri  terdapat  masing-masing perbendaan bentuk yang di mana BAH 1 dan BAH 3 dengan bentuk irreguler, BAH  2  dengan  bentuk  filamentous, BAH 4 dengan bentuk Rizoid dan BAH 5  dengan  bentuk  circular.  Pada  hasil
pengamatan  margin  koloni  bakteri terdapat perbedaan yang di mana BAH 1 memiliki margin undulate,
BAH  2  memiliki  margin  filamentous, BAH  3  memiliki  mergin  lobate,  BAH  4 memiliki  margin  rizoid  dan  BAH  5 memiliki  margin  entire.  Hasil  elevasi koloni  bakteri  ditemukan  4  bakteri yang  memiliki  elevasi  sama  yaitu
BAH4 BAH1 BAH2 BAH3 BAH4 BAH5
convex  dengan  isolate  BAH  1  sampai dengan  BAH  4,  dan  BAH  5  memiliki elevasi flat.
Pada  hasil  pengamatan  mikroskopis dilakukan  pewarnaan  gram  dan  uji biokimia. Tujuan dari pewarnaan gram
yaitu untuk mengetahui bentuk sel dari bakteri  serta  kelompok  koloni  bakteri yang sudah terisolasi.
Tabel 2. Hasil Pewarnaan Gram Kode Isolat Pewarnaan Bentuk Sel BAH 1 + Monobasil BAH 2 + Monobasil BAH 3 + Diplobasil BAH 4 - Monobasil BAH 5 + Monococcus
Dari tabel 2 ditemukan bahwa terdapat 4 isolat bersifat gram positif yaitu BAH 1, BAH 2, BAH 3, BAH 5 dan terdapat 1 isolat bersifat gram negatif yaitu BAH 4.  Perbedaan  sifat  antar  bakteri  di mana  bakteri  gram  positif  apabila dilakukan  pewarnaan/  pengecatan
bakteri  akan  menghasilkan  berwarna ungu  ini  karena  bakteri  gram  positif dinding  sel  yang  dari  peptidoglikan lebih  tebal  di  banding  gram  negatif. Peptidoglikan  yang  tebal  mampu menahan warna yang diberikan berupa Kristal violet dan tidak luntur[9].

## Monobasil                Monobasil             Diplobasil               Monobasil

## Monococcus
Gambar 3 . Hasil Pewarnaan Gram pada Masing-Masing Bakteri
Pewarnaan gram isolat bakteri menggunakan  larutan  iodium,  kristal
violet,  etanol  96%  dan  safranin. Pewarna  yodium  menghasilkan  ikatan
CV (mg-Ribonucleid acid-Crystal Violet)  sehingga  bakteri  positif  akan membentuk  CV  indinrinocleate  pada dinding  selnya.  Kristal  violet  berfungsi mewarnai  seluruh  permukaan  sel. Etanol  merupakan  asam  yang  dapat menyebabkan  Pori-pori  pada  dinding sel  bakteri  banyak  terdapat  lipid sehingga  ikatan  CV  iodin  ribonukleat akan  terpisah  dari  permukaan  sel bakteri  gram  negatif  dan  warna  sel bakteri menjadi kekuningan, sedangkan  pada  bakteri  gram  positif ikatan  CV  akan  terjadi.  tetap  melekat pada dinding sel. Lebih lanjut, safranin berfungsi sebagai kontras saat mewarnai  sel  bakteri[10].  Terdapat  3 isolat  berbentuk  monobasil  yaitu  BAH
1,  BAH  2,  BAH  4,  1  berbentuk diplobasil yaitu BAH 3 dan 1 berbentuk monococcus. Pengamatan mikroskopis selanjutnya yaitu Uji Biokimia.
Pengujian
Biokimia dibuat agar mengetahui sifat fisiologis pada bakteri seperti metabolisme bakteri. Pengujian ini  dilakukan  karena  pengamatan bakteri  hanya  terlihat  dari  luar  dan serupa sehingga tidak dapat dibedakan. Dengan demikian dilakukan uji  biokimia,  sehingga  agar  dapat mengetahui sifat dan menentukan jenis bakterinya.  [11].  Proses  uji  biokimia digunakan  uji  TSIA  ( Triple  Sugar  Iron Agar ),  uji  sitrat,  motilitas,  gelatin, katalase dan indol.
Tabel 3. Hasil Uji Biokimia
Kode TSIA Sitrat Motilitas Gelatin Indol Katalase BAH 1 K/K Gas (+) H2S (-) - + + - + BAH 2 A/K Gas (-) H2S (-) + + + - + BAH 3 A/K Gas (+) H2S (-) - + - - - BAH 4 A/K Gas (-) H2S (-) - + - + + BAH 5 K/A Gas (+) H2S (-) - - + - -
Keterangan: K: Alkalis/basa (warna merah), A: Asam (Warna Kuning), +: terjadi perubahan, -: tidak terjadi perubahan
Berdasarkan  hasil  uji  TSIA  pada penelitian  ini  menunjukkan  bahwa isolat  dengan  kode  BAH  1  berwarna kuning  yang  berarti  bakteri  dapat memfermentasi  glukosa  dan  terjadi produksi gas.  Sedangkan  isolat dengan  kode  BAH2,  BAH3,  BAH4, BAH5  memiliki  medium  berwarna merah yang berarti bakteri tidak dapat memfermentasi  glukosa.  BAH  3
berproduksi  gas  dan  BAH  2,  BAH  4, BAH 5 tidak berproduksi gas. Dan hasil H2S  untuk  seluruh  isolat  tidak ditemukan karena tidak terjadi perubahan warna. Uji TSIA dibuat agar mengetahui  ketahanan  bakteri  ketika memfermentasi  Karbohidrat  seperti glukosa, laktosa, sukrosa. Selain itu, uji TSIA  juga  digunakan  untuk  melihat
apakah  terjadi  pembentukan  gas  dan pembentukan H2S[12].
Berdasarkan  hasil  uji  biokimia sitrat.  Kode  BAH2  menunjukkan  hasil yang  bagus  yaitu  positif  di  mana terdapat  perubahan  warna  pada medium  menjadi  biru.  Hasil  yang negatif adalah isolat dengan kode BAH 1,  BAH  3, BAH  4, BAH  5  karena  tidak terjadi perubahan warna. Uji sitrat yang positif  berarti  terjadi  perubahan  dari media hijau pada kondisi asam menjadi media  biru  pada  kondisi  basa,  hal  ini disebabkan bakteri menggunakan natrium  sitrat  sebagai  sumber  karbon untuk pertumbuhannya[13].
Hasil  Uji  motilitas  isolat  BAH1, BAH2,  BAH3,  BAH4  positif  dan  isolat BAH  5  negatif.  Isolat  dengan  hasil positif dimana bakteri dapat berpindah karena  adanya  flagela  yang  tumbuh pada  membran  sel.  Uji  motilitas digunakan  untuk  melihat  pergerakan bakteri  pada  media  pertumbuhan. Untuk hasil uji motilitas terlihat adanya pertumbuhan  pada  permukaan  media dan  tidak  ada  bekas  tusukan  atau penyebaran (positif) sedangkan bakteri menunjukkan  media  tumbuh  pada tsukan yang artinya negatif[14]. Dari  hasil  uji  indol  ditemukan  isolat BAH  2  dan  BAH  5  menunjukkan  hasil positif  yang  ditandai  dengan  bentuk media padat. sedangkan isolat BAH 1, BAH  3,  BAH  4  menunjukkan  hasil negatif, hal ini terlihat dari cairan agar- agar  yang  setelah  dikeluarkan  dari lemari  es  masih  tetap  meleleh.  Ciri isolat  dari  hasil  uji  indol  tidak terbentuknya  cincin  merah  setelah ditambahkan  reagen Kovac yang menunjukkan  hasil  negatif.  Dari penelitian  tersebut,  bakteri  dengan kode  isolat  BAH  1,  BAH  2,  BAH  4 ditandai dengan hasil positif, sedangkan  isolat  dengan  kode  BAH
dan  BAH  5  diberi  hasil  negatif.  Jika hasilnya positif, akan terbentuk gelembung-gelembung  yang  dapat memecah  hidrogen  peroksida  yang dihasilkan bakteri.

## Identifikasi Bakteri
Setelah
dilakukan
Uji Pewarnaan  Gram  dan  Uji  Biokimia, hasilnya  diidentifikasi  menggunakan panduan Bergey’s Manual of Determination  Bacteriology  ke-9 untuk menentukan  isolat  bakteri  hingga tingkat  genus.  Melalui  hasil  Uji Biokimia, telah diidentifikasi isolat BAH 1  dari  genus  Vibrio,  isolat  BAH  2  dari genus  Bacillus,  dan  isolat  BAH  3  dari genus  Clostridium,  isolat  BAH  4  dari genus  Echerichia,  isolat  BAH  5  dari Micrococcus. Bakteri asli yang diisolasi pada  daerah  yang  terkontaminasi logam berat Hg mempunyai ketahanan terhadap  logam  berat  Hg.  Hasil identifikasi di atas menunjukkan bahwa 5  isolat  bakteri  yang  berasal  dari  air sungai sekitar TPA limbah pertambangan  berasal  dari  genera yang  berbeda  yaitu  genus  Vibrio, Bacillus, Clostridium, Echerichia danMicrococcus.

## Resistensi  Isolat  Bakteri  Pada Logam Merkuri (Hg)
Uji  ketahanan  dilakukan  untuk mengetahui kelangsungan hidup bakteri  pada  media  yang  telah ditambahkan  logam  atau  mengandung logam  berat  merkuri  (Hg)  dengan konsentrasi  100  ppm.  Kelangsungan hidup  bakteri  dapat  dilihat  melalui kepadatan  optik  (OD)  menggunakan spektrofotometer  dengan  panjang gelombang 600 nm.
Gambar 4 . Hasil Uji Resistensi Terhadap Logam Merkuri (Hg).
Berdasarkan  data  yang  terdapat  pada Gambar  4. memperlihatkan  bahwa  ke- 5  Isolat  Bakteri  air  sungai  yang  dari pembuangan  limbah  mempunyai  nilai OD  tidak  sama.  Adanya  perbedaan nilai  OD  ini  menunjukkan  perbedaan tingkat kerapatan sel. Apabila nilai OD tinggi  ditunjukkan maka  kepadatan  sel bakteri  tinggi  dan  tahan  terhadap merkuri.  Pada  penelitian  ini  isolat bakteri  yang  mempunyai  nilai  OD tertinggi  di  karakterisasi  dengan meningkatnya  konsentrasi  Hg  yang terakumulasi pada tiap isolat yaitu dari genus  Bacillus.  Kemudian  tertinggi kedua  dari  genus  Micrococcus, tertinggi ketiga dari genus Clostridium. Bakteri  yang  mempunyai  nilai  OD
terendah berasal dari genus Vibrio dan Escherichia. Penurunan hasil resistensi tersebut  terlihat  hasil  yang  semakin tinggi  konsentrasi  Hg  yang  diberikan maka nilai OD akan semakin rendah[15].

## Reduksi  Isolat  Bakteri  Pada  Logam Merkuri (Hg)
Uji  reduksi  isolat  bakteri  pada logam  merkuri  dilakukan  dengan melihat dari hasil uji resistensi. Hasil uji resistensi  3  yang  paling  tinggi dilakukan untuk uji reduksi logam oleh bakteri.  Hasil  dari  3  isolat  yang tertinggi dari uji resistensi yaitu BAH 2, BAH  3,  BAH  5.  Kemudian  dilakukan dengan menguji menggunakan AAS.
Tabel 3. Hasil Uji Reduksi Kadar Merkuri (Hg) Isolat Genus Bakteri Kadar Hg Awal (ppm) Kadar Hg Akhir (ppm) Persentase Penurunan BAH 2 Bacillus 100 ppm 10,975 ppm 89,02 % BAH 3 Clostridium 100 ppm 5,558 ppm 94,44 % BAH 5 Micrococcus 100 ppm 9,435ppm 90,56%
Berdasarkan tabel data di atas, terlihat bahwa pada saat pengujian penurunan kadar  Hg  oleh  bakteri  ditambahkan logam  Hg  dengan  konsentrasi  sama yaitu  100  ppm.  Setelah  24  jam, terdapat perbedaan signifikan kandungan Hg yang berhasil
diakumulasikan  oleh  sel  bakteri.  Hasil Hg diketahui dari perhitungan Hg pada saat analisis supernatan menggunakan analisis AAS.
Kadar Hg yang penurunannya tertinggi adalah Clostridium .  Terlihat  dari  Hg yang  ditambahkan  ke  dalam  media
Isolat Bakteri
Nilai OD
yaitu  100  ppm  sehingga  kadar  Hg mengalami  penurunan  menjadi  5,558 ppm  dengan  persentase  penurunan sebesar 94,44%. Penelitian oleh Thalib (2020)  mencatat  bahwa  Bacillus mampu  menurunkan  dan  menyerap kadar  merkuri  dengan  persentase sebesar 72,34%. Hal ini dapat terjadi di mana peningkatan sel bakteri menyebabkan  kadar  logam  menurun. Hal  ini  dapat  terjadi  dikarenakan banyaknya sel sehingga mempercepat degradasi  lebih  cepat  karena  bakteri melakukan  bioakumulasi  dan  biosorb logam  serta  beradaptasi  dengan lingkungan[16]. Bakteri  selanjutnya  yang  mampu menurunkan nilai
Hg adalah
Micrococcus,  menurunkan  logam  Hg
pada  media  yaitu  100  ppm  menjadi 9,435 ppm dengan persentase penurunan  sebesar  90,56%.  Bakteri yang mampu menurunkan kadar logam Hg  selanjutnya  adalah  Bacillus  yang selnya  mampu  mengakumulasi  logam Hg sebanyak 100 ppm sehingga kadar Hg turun sebesar 10,975 ppm dengan persentase penurunan sebesar 89,02%.  Bakteri  mampu  menurunkan kadar  logam  karena  di  dalam  sel bakteri  terdapat  Enzim  Katalase  yang dapat    mengubah  zat  berbahaya  yang terakumulasi ke dalam bakteri. [16]

## 4.  Simpulan
Terdapat  5  isolat  bakteri  yang resisten  terhadap  merkuri  (Hg)  dari genus Bacillus , Clostridium, Micrococcus . Bakteri
Bacillus menurunkan kadar Hg dengan persentase sebesar 89,02%, Micrococcus dengan persentase penurunan sebesar 90,56%, Clostridium dengan persentase penurunan sebesar 94,44 %. Penelitian dapat dijadikan referensi  untuk  ke  depannya  agar dapat  mengurangi  cemaran  limbah pertambangan  emas  terutama  di Batangtoru  dengan  memanfaatkan bakteriIndegenous.

## Daftar Pustaka
[1] A. Anggraeni dan H. Triajie, “Uji Kem ampuan Bakteri (Pseudomonas aeruginosa) Dalam Proses Biodegradasi Pencemaran Logam Berat Timbal (Pb), Di Perairan Timur Kamal Kabupaten  Bangkalan,” Juv.  J.  Ilm.  Kelaut.  Dan  Perikan. ,  vol.  2,  no.  3,  hlm.  176 – 185, 2021.
[2] M. Bagia, O. Setiani, dan M. Rahardjo, “Dampak Paparan Merkuri Terhadap Gangguan Kesehatan  Penambang  Emas  Skala  Kecil,” J.  Ilmu  Kesehat. ,  vol.  16,  no.  3,  hlm.  392 – 401, 2022.
[3] M. C. Hadi, “Bahaya Merkuri Di Lingkungan Kita,” J. Skala Husada , vol. 10, no. 2, hlm. 175 – 183, 2013.
[4]  E.  R. S.  Dewi,  “Bioremediasi  Mikroorganisme  Sebagai  Fungi  Bioremediasi  Pada Perairan Tercemar,” Semarang Press , vol. 21, no. 1, 2020.
[5] C.  A.  Pratiwi  dan  H.  D.  Ariesyady,  “Analisis  Risiko  Pencemaran  Merkuri  Te rhadap Kesehatan  Manusia  Yang  Mengonsumsi  Beras  Di  Sekitar  Kegiatan  Tambang  Emas Tradisional (Studi Kasus: Desa Lebaksitu, Kecamatan Lebakgedong, Kabupaten Lebak, Banten),” J. Teh. Lingkung. , vol. 18, no. 2, hlm. 106 – 114, 2012.
[6] N.  I.  Ishak,  “Analisis  Risiko  Lingkungan  Logam  Berat  Merkuri  Pada  Risk  Anal ysis  of Heavy Metal Weight Mercury in Sea Sediment in,” J. Kesehat. Masy. , vol. 7, no. 2, hlm. 88 – 92, 2017.
[7] S. R. Lutfi, “Bioremediasi Limbah Cair Mengandung Merkuri Menggunakan Bioreaktor Sederhana,” Universitas Brawijaya, Malang, 2017.
[8] F.  Fatimawali,  F.  Badaruddin,  dan  I.  Yusuf,  “Isolasi  Dan  Identifikasi  Bakteri  Resisten Merkuri  Dari  Muara  Sungai  Sario  Yang  Dapat  Digunakan  Untuk  Detoksifikasi  Limbah Merkuri,” J. Sains Ilm. , vol. 15, no. 1, hlm. 282, 2011.
[9] L. Fitri dan Y. Yasmin, “Isolasi Dan Pengamatan Morfologi Koloni bakteri Kitinolitik,” J. Ilm. Pendidik. Biol. Biol. Edukasi , vol. 3, no. 2, hlm. 20 – 25, 2011.
[10] C. Kosasi, W. A. Lolo, dan S. Sedewi, “Isolasi Dan Uji Aktivitas Antibakteri Da ri Bakteri Yang  Bersasosiasi  Dengan  Alga  Turbinaria  ornata  (Turner)  J.  Agard  Serta  Identifikasi Secara Biokimia,” J. Pharmacon , vol. 8, no. 2, hlm. 351 – 359, 2019.
[11]  S. L ewaru, I. Riyantini, dan Y. Mulyani, “Identifikasi Bakteri Indigenous Pereduksi Logam Berat Cr (VI) dengan Metode Molekuler di Sungai C ikijing Rancaekek, Jawa Barat,” J. Perikan. Dan Kelaut. , vol. 3, no. 4, hlm. 81 – 92, 2013.
[12] R.  Mangesa  dan  K.  Kasmawati,  “Isolasi  Bakteri  Resistensi  Merkuri  Dari  Limbah Penambangan Emas Kabupaten Buru, Maluku,” J. Mns. Dan Lingkung. , vol. 27, no. 1, hlm. 33, 2020.
[13] F.  J.  Panjaitan,  T.  Bachtiar,  I.  Arsyad,  O.  K.  Lele,  dan  W.  Indriyani,  “Karakterisasi Mikroskopis  dan  Uji  Biokimia  Bakteri  Pelarut  Fosfat  (BPF)  dari  Rhizosfer  Tanaman Jagung Fase Vegetatif,” J. Ilmu Pertan. Dan Lingkung. , vol. 1, no. 1, hlm. 9 – 17, 2020.
[14] W. Rahmatullah, E. Novianti, dan A. D. L. Sari, “Identifikasi Bakteri Udara Menggunakan Teknik   Pewarnaan Gram,” J. Ilmu Kesehat. Bhakti Setya Med. , vol. 6, no. 2, hlm. 84 – 92, 2021.
[15] Y.  Suyono,  “Identifikasi  dan  Karakterisasi  Bakteri  Pseudomonas  Pada  Tanah  Yang Terinduksi Terkontaminasi Logam,” J. Biopropal Ind. , vol. 02, no. 01, hlm. 8 – 13, 2011.
[16] W.  Uno  dan  R.  Thalib,  “Penyerapan  Logam  Berat  Merkuri  (Hg)  Oleh  Bakteri  Bacillus subtillis Pada SEdimen Danau Limboto,” Jambura Edu Biosf. J. , vol. 2, no. 1, hlm. 2656 – 0526, 2020.