Rekayasa , 2021; 14(2): 144-151 ISSN: 0216-9495 (Print) ISSN: 2502-5325 (Online)

## Efektivitas Isolat-Isolat Bacillus sebagai Pengendali Penyakit Bulai dan Pemacu Pertumbuhan Tanaman Jagung pada Kondisi Terkontrol
Syaiful Khoiri 1* , Kaswan Badami 1 , Gita Pawana 1 , Ciwuk Sri Utami 1
1 Prodi Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Trunojoyo Madura Jl. Raya Telang No 02 Kamal Bangkalan Madura 69162 Jawa Timur
* syaiful.khoiri@trunojoyo.ac.id DOI: https://doi.org/10.21107/rekayasa.v14i2.10270

## ABSTRACT
The main disease in maize is downy mildew caused by the fungus Peronosclerospora spp.. This pathogen can cause yield losses of up to 100%. Therefore, efforts to control this disease are continuously carried out, including technical culture, assembly of resistant plants, and use of synthetic fungicides. At the farm level, the use of metalaxyl, synthetic fungicides is the most common practice. On the other hand, it has been reported that some  Peronosclerospora groups are starting to become resistant to metalaxyl. These problems lead to the need for alternative controls, for example with biological agents. Biological agents from bacterial groups have been developed to control plant disease, but for downy mildew is still limited. The purpose of this study is to screen and test Bacillus spp. ability to suppress downy mildew and promote the growth of maize. The assay was carried out on seeds by invitro to investigate growth-promoting reactions and also testing under controlled conditions in greenhouses to investigate the suppression ability of downy mildew disease development. The results showed  B. polymyxa strain BP18, Bacillus subtilis strain BS41, Bacillus sp. strain BT1, and Bacillus sp. strains can stimulate the growth of corn seedlings and suppress downy mildew. The best isolate in suppressing downy mildew was Bacillus sp. strain BT1 with the smallest AUDPC value (3.94) and the highest protection index (82.71%). It is hoped that these results will find potential isolates and have the potential to be developed into biopesticides and biofertilizers.
Keywords : biopesticide, growth promotion, index protection, maize, peronosclerospora

## PENDAHULUAN
Jagung merupakan salah satu komoditas utama yang  menjadi  perhatian  Pemerintah.    Kementrian Pertanian  telah  melakukan  berbagai  upaya  dalam peningkatan produksi selama 3 tahun terakhir dan menghasilkan  capaian  yang  menggembirakan. Berdasarkan  data  tahun  2016,  produksi  jagung Indonesia  sekitar  23,58  juta  ton  atau  meningkat 20,22% dari produksi tahun 2015 sebesar 19,61 juta ton.    Produksi  tahun  2017  kembali  meningkat 10,39%  menjadi  26,03  juta  ton  (Badan  Pusat Statistik (BPS), 2018). Di Madura, jagung merupakan komoditas  utama  yang  banyak  ditanam  dengan luasan 301.725 hektar atau 30% luas area jagung di Jawa  Timur.  Produksi  jagung  di  Indonesia  pada tahun  2018  mencapai  30,05  juta  ton  dengan produksi  di  Jawa  Timur  6,03  juta  ton  atau  setara
dengan  20%  produksi  nasional  (Kementerian Pertanian, 2019).
Upaya-upaya  peningkatan  produksi  terus dilakukan,  namun  ada  beberapa  faktor  pembatas yang dapat berpengaruh terhadap produksi jagung. Salah  satu permasalahan yang dapat menurunkan produksi  jagung  adalah  adanya  organisme pengganggu  tanaman  (OPT).  OPT  utama  pada tanaman  jagung  adalah  penyakit  bulai.  Penyakit bulai  dapat  disebabkan  oleh  Peronosclerospora maydis, P. sorghi, atau P. philipinensis. Penyakit bulai yang  disebabkan  cendawan  Peronoslerospora merupakan penyakit penting yang telah dilaporkan diseluruh  dunia  yang  menyerang  jagung  dan

## REKAYASA
Journal of Science and Technology https://journal.trunojoyo.ac.id/rekayasa
Article History: Received: March, 30 th 2021;  Accepted: June, 27 th 2021 Rekayasa ISSN: 2502-5325 has been Accredited by Ristekdikti (Arjuna) Decree: No. 23/E/KPT/2019 August 8th, 2019 effective until 2023
Cite this as: Khoiri, S., Badami, K., Pawana, G & Utami, C.S. (2021). Efektifitas Isolat-Isolat  Bacillus  sebagai  Pengendali  Bulai  dan  Pemacu Pertumbuhan  Tanaman  Jagung  pada  Kondisi  Terkontrol. Rekayasa 14 (2). 144-151. doi: https://doi.org/10.21107/rekayasa.v14i2.10270.
© 2021 Syaiful Khoiri, Kaswan Badami, Gita Pawana & Ciwuk Sri Utami
sorgum. Cendawan patogen ini dapat menginfeksi secara lokal dan sistemik pada kedua inang tersebut (Bonman, Paisooksantivatana, & Pitipornchai, 1983) dan  menyebabkan  perunuran  produksi  yang signifikan. Laporan kehilangan hasil akibat penyakit ini  berkisar  50-80%  di  beberapa  wilayah  sentra pengembangan  jagung  seperti  Jawa  Timur, Sulawesi  Selatan  dan  Kalimantan  Barat  (Amran, Suriany,  &  Nurnina,  2018;  Pakki,  2017;  Rustiani, Sinaga, Hidayat, & Wiyono, 2015).
Pengendalian  penyakit  bulai  ini  umumnya menggunakan  perlakuan  benih  dengan  fungisida sistemik,  metalaksil  (Anahosur,  1980),  namun penggunakan  fungisida  sintetik  ini  dapat menyebabkan penceramaran pada lingkungan dan ekosistem,  Sehingga  pengendalian  dengan menggunakan fungisida ini tidak dapat mengendalikan  dalam  jangka  waktu  yang  lama. Selain  itu,  Isakeit  dan  Jaster  (2005)  melaporkan bahwa  P.  sorghi  telah  tahan  terhadap  fungisida. Teknik  pengendalian  lain  dengan  varietas  yang tahan juga terus dikembangkan namun belum ada varietas  yang  dilaporkan  sangat  tahan  terhadap serangan  bulai  (Rashid,  Zaidi,  Vinayan,  Sharma,  & Setty,  2013).  Sehingga  perlu  dikembangkan metode-metode pengendalian lain seperti pemanfaatan bakteri agens hayati.
Agens hayati Bacillus sublilis G1 telah dilaporkan dapat  menekan  kejadian  penyakit  hingga  50%, selain  itu  B.  subtilis  G1  tersebut  mampu meningkatkan  persentase  perkecambahan  dan memperbaiki  vigor  tanaman  jagung  (Sireesha  & Velazhahan,  2016).  Namun,  di  Indonesia pengembangan agens hayati untuk penyakit bulai sekaligus sebagai pupuk hayati ini masih terbatas. Sehingga  perlu  dilakukan  pengujian  isolat-isolat bakteri yang berpotensi sebagai agens hayati dan pupuk  hayati.  Harapannya  dapat  ditemukan alternatif  pengendalian  penyakit  bulai  pada tanaman  jagung  menggunakan  bakteri  yang bermanfaat.

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilakukan  mulai  bulan  Juli  2020 sampai  dengan  Desember  2020.  Penelitian dilakukan  di  Laboratorium  Proteksi  Tanaman  dan Rumah  Kaca  Program  Studi  Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  laminar  air  flow  cabinet,  cawan  petri, autoklaf,  pipet  mikro,  tabung  erlenmeyer,  tabung reaksi,  lup  inokulasi,  sprayer,  ember,  polybag, penggaris,  dan  kamera.  Sedangkan  bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah isolat- isolat bakteri koleksi (Tabel 3), media Nutrient broth (NB),  agar,  aquades,  kertas  saring,  benih  jagung varietas  Madura-3,  kertas  serap,  tanah,  pasir,  dan kompos.

## Peremajaan Isolat-isolat Bakteri
Stok  isolat-isolat  bakteri  potensial  diremajakan dengan  cara  ditumbuhkan  pada  media  NB  agar (NA)  yang  telah  dituang  dalam  cawan  petri. Inokulasi dilakukan dengan metode gores kuadran. Selanjutnya,  isolat-isolat  diinkubasi  pada  suhu ruang  selama  48  jam.  Isolat  yang  tumbuh diremajakan tiap 48 jam pada media NA.

## Pengujian Keefektifan Isolat Bakteri
Pengujian  pengaruh  isolat  bakteri  pada  benih jagung
Penapisan  awal  terhadap  isolat-isolat  potensial koleksi Laboratorium Proteksi Tanaman,
Agroekoteknologi,  Fakultas  Pertanian,  Universitas Trunojoyo  Madura  adalah  dengan  menguji terhadap perkecambahan benih. Perlakuan bakteri pada benih dilakukan dengan cara merendam benih jagung sebanyak 20 gram dalam 100 mL suspensi bakteri dan diinkubasi selama 6 jam dengan tujuan supaya  bakteri  menempel  pada  benih.  Benih kemudian  dikeringanginkan  selama  2  jam. Pengujian daya kecambah benih dilakukan dengan rolled  test  pada  kertas  serap.  Benih  yang  telah ditanam  dalam  kertas  gulung  (roller)  diinkubasi pada  suhu  ruang  25±2°C  selama  satu  minggu. Perlakuan  sama  untuk  masing-masing  isolat  dan kontrol (Sireesha & Velazhahan, 2016).

## Penyiapan sumber inokulum Peronosclerospora spp.
Sumber inokulum penyakit bulai didapatkan dari daun  tanaman  jagung  yang  terinfeksi  bulai  di lapangan.  Daun  diambil  pada  sore  hari  kemudian diletakkan  ke  dalam  kantong  plastik  klip.  Daun jagung  kemudian  dicuci  menggunakan  air  bersih dengan tujuan menghilangkan kotoran yang tersisa seperti  spora  yang  telah  rusak,  kemudian dikeringanginkan.  Selanjutnya  pangkal  daun
direndam menggunakan larutan gula 2% setinggi 3 cm dan disungkup menggunakan plastik klip untuk menjaga  kelembabannya,  Daun  diinkubasi  gelap sampai  pukul  04.00  WIB.  Pukul  04.00  WIB  daun dicuci dengan aquades untuk dipanen konidia yang tercuci bersama air. Inokulasi dilakukan pada pagi hari sekitar jam 05.00-06.00 atau sebelum matahari terbit  dengan  cara  menyemprotkan  suspensi Peronosclerospora spp. pada setiap bagian tanaman jagung  dan  titik  tumbuh  sebanyak  10  mL  (Adhi, Widiantini,  &  Yulia,  2019).  Tanaman  jagung  yang sudah terinfeksi bulai sekitar 70% dari total sumber infeksi  kemudian  diletakkan  diantara  tanaman  uji sebagai  sumber  infeksi  alami.  Identifikasi Peronosclerospora spp. mengikuti metode Rustiani et al., (2015).
Pengujian  pengaruh  isolat  bakteri  terhadap penyakit bulai di rumah kaca
Pengujian  kemampuan  isolat  bakteri  dalam menekan  penyakit  bulai  dilakukan  pada  kondisi lingkungan  terkontrol  dirumah  kaca  atau  kebun percobaan.  Formulasi  bakteri  disiapkan  dengan mencampurkan 400 mL suspensi bakteri (kerapatan 9x10 8 CFU  mL -1 )  dengan  1  kg  talk  ditambah  10  g CMC secara aseptik (Vidhyasekaran & Muthamilan, 1995).  Benih  jagung  yang  telah  disterilisasi permukaan diberi perlakuan formulasi 10 g kg -1 dan ditanam pada polibag diameter 30 cm yang berisi tanah  dan  pasir  (2:1).  Perlakuan  kontrol  dilakukan dengan  menambahkan  formula  talk+CMC  tanpa bakteri. Masing-masing pot berisi satu benih. Tiap lima  tanaman  dianggap  1  ulangan.  Perlakuan diulang dengan empat ulangan. Pengamatan tinggi tanaman,  kejadian,  dan  keparahan  penyakit dilakukan setiap minggu selama 5 minggu.

## Parameter Pengamatan
Aktivitas pemacu pertumbuhan bakteri terhadap benih  jagung  dilakukan  dengan  cara  pengamatan vigor benih berdasarkan standar International Seed testing  Association  (ISTA,  2017).  Pengamatan  daya kecambah,  panjang  akar,  dan  tinggi  tanaman dilakukan  setelah  inkubasi  7  hari  pada  pengujian rolled  test.  Sedangkan  parameter  penyakit  bulai dilakukan perhitungan skoring penyakit mengikuti skala  yang  dilakukan  oleh  Matruti  et  al.,  (2018). Kejadian  penyakit  (KJP)  dihitung  menggunakan Formula 1. Sedangkan penilaian penyakit (skoring) mengikuti  skala  kerusakan  penyakit  bulai  tersaji pada  Tabel  1.  Keparahan  penyakit  dihitung mengikuti formula yang digunakan oleh Ulhaq dan
Masnilah  (2019)  pada  Formula  2.  Penentuan kategori  ketahanan  penyakit  bulai  mengikuti Daryono et al. (2018) yang tersaji pada Tabel 2. Nilai luas  area  dibawah  kurva  perkembangan  penyakit (area under disease progress curve/AUDPC) dihitung menggunakan  Formula  3.  Sedangkan  laju perkembangan  penyakit  ®  dihitung  dengan Formula  4  (Plank  1963;  Ginting  et  al.,  2020). Berdasarkan  nilai  AUDPC  dihitung  nilai  indeks proteksi dengan menggunakan Formula 5 (Caulier et al., 2018).
𝐾𝐽𝑃  = 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑡𝑎𝑛𝑎𝑚𝑎𝑛 𝑏𝑒𝑟𝑔𝑒𝑗𝑎𝑙𝑎 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑒𝑙𝑢𝑟𝑢ℎ 𝑡𝑎𝑛𝑎𝑚𝑎𝑛 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑎𝑚𝑎𝑡𝑖 𝑥100 … … … (1) Tabel 1. Penilaian penyakit bulai Skala kerusakan Deskripsi gejala 0 Tidak ada gejala 1 Luas gejala pada daun 1-25% 2 Luas gejala pada daun 26-50% 3 Luas gejala pada daun 51-75% 4 Luas gejala pada daun 75-100% Tabel 2. Kategori ketahanan penyakit bulai Intensitas serangan Kategori ketahanan 0 Sangat tahan 0<x≤25 Tahan 25<x≤50  Agak tahan 50<x≤75  Tidak tahan x>75
Sangat tidak tahan
𝐾𝑃 = ⅀(𝑛 𝑖 + 𝑣 𝑖 ) 𝑉. 𝑍 100% … … … … … … . (2)
Keterangan:
KP  = Keparahan penyakit n i = jumlah daun sakit kategori skala ke-i v i = nilai skala (0-4) tanaman ke-i
V  = Nilai skala tertinggi Z = Total tanaman diamati
𝐴𝑈𝐷𝑃𝐶 = ∑ ( 𝑦𝑖+𝑦𝑖+1 2 𝑛−1 𝑖=1 )(𝑡 𝑖+1 − 𝑡 𝑖 ) ...........(3) Keterangan: AUDPC =  Luas  area  di  bawah  kurva perkembangan penyakit
y i = nilai keparahan ke-i t i = waktu pengamatan ke-i
𝑟 = 1 𝑡 2 − 𝑡 1 (− ln(− ln(𝑋 2 )) + ln(− ln(𝑋 2 ) … … (4)
Keterangan:
r = laju perkembangan keparahan penyakit per hari X 1i =  Nilai  keparahan  penyakit  pada  pengamatan ke-1
X 2 = Nilai keparahan penyakit pada pengamatan ke-2
t 1i = waktu pengamatan ke-1
t 2 = waktu pengamatan ke-2
Indeks proteksi = [(1 − AUDPC perlakuan
AUDPC kontrol ) ∗ 100] .........(5)

## HASIL DAN PEMBAHASAN Peremajaan Isolat-Isolat Uji
Hasil  peremajaan  isolat-isolat  potensial  koleksi Laboratorium  Proteksi  Tanaman  menunjukkan bahwa  beberapa  isolat  tidak  dapat  ditumbuhkan. Adapun  isolat-isolat  yang  berhasil  diremajakan yaitu isolat BS09, BP18, BS41, BT1, BT2, BT3, dan BT4 yang  tersaji  pada  Tabel  3.  Isolat  yang  tumbuh menunjukkan  kemampuan  atau  ketahanan  dalam masa penyimpanan. Ketahanan dalam penyimpanan  atau  disebut  periode  simpan  yang lama  merupakan  salah  satu  kriteria  agens  hayati yang  baik  untuk  di  kembangkan.  Periode  simpan juga  sangat  dipengaruhi  oleh  bahan-bahan  yang digunakan  untuk  menyimpan  (Kusumanigtyas, 2015) Tabel  3.  Isolat-Isolat  Koleksi  Laboratorium  yang Digunakan dalam Penelitian & Hasil Peremajaannya Pada Media NA
No. Kode Isolat Nama Isolat Asal isolat Keterangan 1 BT2 Bacillus thuringiensis BT2 Bogor Tidak tumbuh 2 BS1 Bacillus subtilis BS1 Bogor Tidak tumbuh 3 BB6 Brevibacillus brevis BB6 Bogor Tidak tumbuh 4 BS09 Bacillus sp. BS09 Pamekasan Tumbuh 5 BPs7 Paenibacillus polymixa BPs7 Bogor Tidak tumbuh 6 BS34 Bacillus subtilis BS34 Bogor Tidak tumbuh 7 BA5 Bacillus amyloliquifaciens BA5 Bogor Tidak tumbuh 8 BP18 Bacillus polymixa BP18 Pamekasan Tumbuh 9 BS41 Bacillus subtilis BS41 Pamekasan Tumbuh 10 BT1 Bacillus sp. BT1 Bangkalan Tumbuh 11 BT2 Bacillus sp. BT2 Bangkalan Tumbuh 12 BT3 Bacillus sp. BT3 Bangkalan Tumbuh 13 BT4 Bacillus sp. BT4 Bangkalan Tumbuh

## Pengaruh Bacillus spp. terhadap Pertumbuhan
Benih Jagung
Salah satu langkah penapisan dan seleksi isolat pemacu  pertumbuhan  dapat  dilakukan  dengan
melihat  pengaruh  pertumbuhan  pada  awal perkecambahan.  Hasil  pengujian  menunjukkan bahwa  isolat-isolat  yang  diuji  memiliki  pengaruh yang  berbeda-beda.  Berdasarkan  data  persentase perkecambahan,  isolat  tidak  mempengaruhi perkecambahan, bahkan isolat BS41, BT3, dan BT4 menunjukkan  persentase  perkecambahan  benih 100%.  Sedangkan  dari  parameter  pertumbuhan tajuk  dan  akar  jagung  menunjukkan  isolat  B. polymyxa  strain  BP18,  Bacillus  subtilis  strain  BS41, Bacillus  sp.  strain  BT1,  dan  Bacillus  sp.  strain  BT2 menunjukkan  pengaruh  pertumbuhan  yang  lebih baik  dibandingkan  dengan  kontrol  (Tabel  4, Gambar 1).
Tabel 4. Pengaruh Perlakuan Isolat Bakteri Terhadap Pertumbuhan Benih pada Uji Roller Test
Perlakuan Parameter pengamatan* Persentase perkecambahan benih (%) Panjang akar (cm) Tinggi tanaman (cm) Tinggi total (cm) BS09 94,56 ab 8,08 c 4,03 d 12,12 c BP18 97,22      a 10,98 a 6,04 b 17,03 a BS41 100,00    a 11,76 a 6,80 a 18,56 a BT1 94,44 ab 9,06 b 5,72 b 14,79 b BT2 89,11 b 11,94 a 5,61 b 17,55 a BT3 100,00    a 6,03 d 4,91 c 10,94 c BT4 100,00 a 3,87 e 2,52 e 6,401 d Kontrol 96,67 ab 9,19 b 2,52 e 11,72 c

## Gambar 1. Pengaruh perlakuan isolat-isolat Bacillus terhadap perkecambahan jagung
Kemampuan  bakteri  dalam  meningkatkan pertumbuhan tanaman dipengaruhi oleh beberapa faktor. Diantaranya  pengaruh  isolat  dalam penambatan nitrogen, pelarut fosfat, siderofor, dan fitohormon  (Rahni,  2012;  Zainudin,  Abadi,  &  Aini, 2014). Berdasarkan hasil uji terhadap benih jagung tersebut,  selanjutnya  empat  isolat  terbaik  dipilih untuk  pengujian  terhadap  penekanan  penyakit
bulai  dan  pertumbuhan  jagung  di  rumah  kaca, yakni: isolat B. polymyxa strain BP18, Bacillus subtilis strain BS41, Bacillus sp. strain BT1, dan Bacillus sp. strain BT2.

## Pengaruh  Perlakuan  Isolat-Isolat  Bacillus Terhadap Pertumbuhan Tanaman Jagung
Perlakuan  isolat  B.  polymyxa  strain  BP18, Bacillus subtilis strain BS41, Bacillus sp. strain BT1, dan  Bacillus  sp.  strain  BT2  menujukkan  pengaruh yang berbeda dan lebih baik dibandingkan kontrol. Perlakuan  isolat  bakteri  BP18,  BT1,  dan  BT2 memberikan  pengaruh  yang  signifikan  terhadap pertumbuhan tanaman jagung pada 28 HST (Tabel 5).  Isolat-isolat  Bacillus  mampu  meningkatkan tinggi  tanaman  hingga  32.7%  dibanding  kontrol yang ditunjukkan oleh perlakuan isolat Bacillus sp. strain  BT1.  Hal  ini  disebabkan  karena  Bacillus memiliki kemampuan sebagai pemacu pertumbuhan  atau  dikenal  sebagai  plant-growth promoting rhizobacteria (PGPR). Bacillus spp. telah dilaporkan  mampu  memproduksi  prekursor fitohormon,  seperti:  indole  acetic  acid  (IAA), melarutkan  fosfat,  dan  memproduksi  siderofor (Kashyap  et  al.,  2019;  Sivasakthi,  Usharani,  & Saranraj, 2014). Bahkan media kompos dari limbah organik yang difermentasi dengan Bacillus sp. tetap dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman jagung (Khoiri & Mualim, 2018)
Tabel 5. Pengaruh Perlakuan Isolat Bakteri Terhadap Tinggi Tanaman Jagung
Perlakuan Rata-rata tinggii tanaman (cm) 7 HST 14 HST 21 HST 28 HST BP18 28,83 ab 42,14 a 63,11 a 80,03 b BS41 27,08 ab 39,64 a 58,48 a 69,09 ab BT1 30,09 bc 42,62 a 63,92 a 81,68 b BT2 32,57 c 46,38 a 67,88 a 76,67 b Kontrol 26.03 a 45,25 a 56,85 a 61,14 a
Keterangan:  *angka yang  diikuti huruf  yang  sama  pada kolom yang sama tidak menunjukkan perbedaan nyata pada uji Duncan dengan taraf nyata (α) 5%; HST=hari setelah tanam
Pengaruh  Perlakuan  Isolat-Isolat  Bacillus Terhadap Kejadian & Keparahan Penyakit Bulai
Pengujian  penekanan  penyakit  bulai  dilakukan pada  kondisi  terkontrol  di  rumah  kaca.  Sebelum melakukan pengujian penekanan penyakit, diperlukan  isolat  bulai  yang  akan  digunakan sebagai  inokulum.  Inokulum  diperoleh  dari lapangan  dengan  gejala  yang  khas  kekuningan seperti  pada  Gambar  2.  Berdasarkan  pengamatan mikroskopik  bentuk  konidia  cendawan  penyebab
bulai  tersebut  menunjukkan  bahwa  konidia berbentuk  bulat,  berdiding  tipis,  dan  pecabangan konidiofor  3-4  cabang  teridentifikasi  sebagai  P. maydis sama seperti yang telah dilaporkan Rustiani et al. (2015).
Gambar 2. Sumber inokulum bulai pada tanaman jagung di lahan (A) dan hasil pengamatan konidia secara mikroskopik pada perbesaran 400 kali (B)
Infeksi  patogen  dapat  ditunjukkan  dengan gejala yang muncul. Aplikasi mikroba agens hayati dapat mempengaruhi virulensi patogen. Berdasarkan pengamatan pada percobaan, isolat B. polymixa  strain  BP18  dapat  menghambat munculnya  gejala  penyakit  bulai  tiga  hari  lebih lambat dari pada kontrol (Tabel 3).  Meningkatnya umur  tanaman  dapat  menyebabkan  resistensi jagung  terhadap  bulai  (Zainudin  et  al.,  2014). Gejala-gejala  penyakit  yang  teramati  pada perlakuan  bervariasi,  mulai  dari  ringan,  sedang, hingga  berat  (Gambar  3).  Perbedaan  keparahan gejala  yang  ditimbulkan  dijadikan  sebagai  dasar skoring. Menurut Ahuja dan Payak  (1983), skoring bulai diklasifikasikan berdasarkan persentase gejala dengan skala 1 hingga skala 5.
Tabel 6. Pengaruh Perlakuan Isolat Bakteri Terhadap Periode Inkubasi
Perlakuan Rerata periode inkubasi (HST) BP18 14,11 BS41 13,73 BT1 12,63 BT2 11,46 Kontrol 11,28
Perlakuan  isolat  bakteri  dapat  memberikan pengaruh  terhadap  kejadian  dan  keparahan penyakit,  laju  infeksi,  nilai  area  di  bawah  kurva perkembangan  penyakit  (AUDPC),  dan  indeks proteksi.  Berdasarkan pengamatan selama 35 HST secara umum seluruh isolat memberikan pengaruh
terhadap  kejadian  penyakit.  Isolat-isolat  Bacillus spp.  mampu  menekan  kejadian  penyakit  bulai berkisar  antara  60.16  hingga  80,85%.  Penekanan terbaik  terhadap  kejadian  penyakit  bulai ditunjukkan  oleh  Isolat  B.  polymixa  strain  BP18 (Gambar 4).
Gambar 3 Gejala-gejala yang teramati pada tanaman jagung di rumah kaca (A=gejala ringan, B=gejala sedang, C=gejala berat)
Gambar 4. Grafik pengaruh perlakuan isolat terhadap kejadian penyakit bulai pada tanaman jagung Berdasarkan  data  keparahan  penyakit,  Isolat- isolat  Bacillus  spp.  yang  diuji  mampu  menekan perkembangan  keparahan  penyakit.  Penekanan perkembangan  penyakit  bulai  terbaik  ditunjukkan oleh  isolat  Bacillus  sp.  strain  BT1  (Gambar  5). Perlakuan  isolat-isolat  Bacillus  spp.  juga  mampu menekan laju perkembangan penyakit (r) dan nilai luas  area  kurva  perkembangan  penyakit.    Laju perkembanagn penyakit adalah tingkat perubahan kejadian  dan  keparahan  penyakit  dari  waktu  ke waktu,  Laju  perkembangan  penyakit  terkecil ditunjukkan  isolat  Bacillus  sp.  strain  BT2  dengan nilai  0,052  (Tabel  7).  Hal  ini  menunjukkan perkembangan penyakit pada perlakuan Bacillus sp. strain  BT2  adalah  paling  lambat  dibandingkan
dengan perlakuan lainnya. Perlakuan menggunakan  isolat  lain  juga  menunjukkan  laju perkembangan  penyakit  yang  lebih  rendah dibandingkan  dengan  kontrol.  Secara  total, penilaian  keparahan  penyakit  berdasarkan  nilai AUDPC  menunjukkan  isolat  Bacillus  sp.  strain  BT1 memiliki nilai paling rendah yakni 3,94 dan memiliki nilai  indeks  proteksi  tertinggi  yakni  mencapai 82,71% (Tabel 7).
Gambar 5. Grafik perkembangan keparahan penyakit bulai pada tanaman jagung
Tabel 7. Pengaruh perlakuan Bacillus spp. terhadap nilai  laju  perkembangan  penyakit  (r),  luas  area dibawah  kurva  perkembangan  penyakit  (AUDPC), dan indeks proteksi.
Perlakuan Laju perkembangan penyakit (r) AUDPC Indeks proteksi (%) BP18 0,062 5,09 77,50 BS41 0,053 6,90 69,50 BT1 0,053 3,94 82,71 BT2 0,052 6,51 71,22 Kontrol 0,069 22,62 -
Kemampuan  Bacillus  spp. sebagai PGPR dalam memacu  pertumbuhan  dan  mengendalikan penyakit  tumbuhan  dapat  terjadi  dengan  dua mekanisme,  yaitu:  langsung  dan  tidak  langsung. Mekanisme secara langsung dengan menghasilkan fitohormon, pelarut fosfat, ammonia, dan siderofor. Sedangkan  mekanisme  tidak  langsung  melalui kompetisi nutrisi dan ruang dengan cara antibiosis, enzim pelisis patogen, dan senyawa volatil (Kashyap et al., 2019). Beberapa agens hayati lain juga telah dilaporkan  mampu  mengurangi  keparahan penyakit  bulai,  seperti:  Pseudomonas  sp., Trichoderma  spp.  (Jatnika,  Abadi,  &  Aini,  2014; Sutama, Ratih, Maryono, & Ginting, 2015).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  dapat disimpulkan  bahwa  isolat  BS09,  BP18,  BS41,  BT1, BT2, BT3, dan BT4 bersifat nonpatogenik terhadap jagung.  Isolat  BP18,  BS41,  BT1,  dan  BT2  dapat memacu  pertumbuhan  bibit  jagung.  Dalam  uji penekanan penyakit bulai yang disebabkan oleh P. maydis  dirumah  kaca  menunjukkan  isolat  B. polymyxa  strain  BP18,  Bacillus  subtilis  strain  BS41, Bacillus  sp.  strain  BT1,  dan  Bacillus  sp.  strain  BT2 dapat  menekan  kejadian,  keparahan,  dan  laju perkembangan  penyakit.  Isolat  terbaik  yang mampu  menekan  penyakitbulai  berdasarkan percobaan tersebut adalah isolat Bacillus sp. strain BT1 dengan nilai AUDPC terkecil (3,94) dan indeks proteksi tertinggi (82,71%).

## Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap mekanisme penghambatan dan pemacu pertumbuhan  yang  dimiliki  oleh  isolat-isolat koleksi,  serta  pengujian  pada  lingkungan sebenarnya.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  menyampaikan  ucapan  terima  kasih kepada  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian kepada Masyarakat, Universitas Trunojoyo Madura yang  telah  membiayai  sebagian  penelitian  ini melalui  Hibah  Penelitian  Mandiri  Universitas Trunojoyo Madura pada  Skema  Penelitian  Pemula Tahun 2020

## DAFTAR PUSTAKA
Adhi,  S.  R.,  Widiantini,  F.,  &  Yulia,  D.  E.  (2019). Metode inokulasi buatan untuk menguji infeksi Peronosclerospora  maydis  penyebab  penyakit bulai tanaman jagung. Jurnal Agro, 6(1), 77–86.
Ahuja, S. C., & Payak, M. M. (1983). A rating scale for banded leaf and sheath blight of maize. Indian Phytopathology (India).
Amran,  M.,  Suriany,  K.  S.,  &  Nurnina,  N.  (2018). Penyakit  Bulai  pada  Tanaman  Jagung. Balitsereal.
Anahosur,  K.  H.  (1980).  Chemical  Control  of Sorghum Downy Mildew in India. Plant Disease, 64(11),  1004.  https://doi.org/10.1094/pd-64- 1004
Badan  Pusat  Statistik  (BPS).  (2018).  Produktivitas
Jagung Nasional. Retrieved from http://bps.go.id Bonman,  J.  M.,  Paisooksantivatana,  Y.,  & Pitipornchai,  P.  (1983).  Host  range  of Peronosclerospora  sorghi  in  Thailand.  Plant Disease, 67(6), 630–632.
Caulier, S., Gillis, A., Colau, G., Licciardi, F., Liépin, M., Desoignies,  N.,  …  Bragard,  C.  (2018).  Versatile Antagonistic Activities of Soil-Borne Bacillus spp. and  Pseudomonas  spp.  against  Phytophthora infestans  and  Other  Potato  Pathogens      . Frontiers  in  Microbiology    ,  Vol.  9,  p.  143.
Retrieved from
https://www.frontiersin.org/article/10.3389/fmic b.2018.00143
Daryono, B. S., Parazulfa, A., & Purnomo, P. (2018). Uji ketahanan tujuh kultivar jagung (Zea mays L.) terhadap  penyakit  bulai  (Peronosclerospora spp.). Biogenesis: Jurnal Ilmiah Biologi, 6(1), 11– 17.
Isakeit,  T.,  &  Jaster,  J.  (2005).  Texas  has  a  new pathotype  of  Peronosclerospora  sorghi,  the cause of sorghum downy mildew. Plant Disease, 89(5), 529.
ISTA.  (2017).  International  Rules  for  Seed  Testing. https://doi.org/10.15258/istarules.2017.02
Jatnika,  W.,  Abadi,  A.  L.,  &  Aini,  L.  Q.  (2014). Pengaruh aplikasi Bacillus sp. dan Pseudomonas sp. terhadap perkembangan penyakit bulai yang disebabkan oleh jamur patogen
Peronosclerospora  maydis  pada  tanaman jagung.  Jurnal  Hama  Dan  Penyakit  Tumbuhan, 1(4), pp-19.
Kashyap, B. K., Solanki, M. K., Pandey, A. K., Prabha, S.,  Kumar,  P.,  &  Kumari,  B.  (2019).  Bacillus  as plant growth promoting rhizobacteria (PGPR): a promising green agriculture technology. In Plant health under biotic stress (pp. 219–236). Springer.
Kementerian  Pertanian.  (2019).  Data  lima  tahun terakhir  sub-sektor  tanaman  pangan.  Retrieved from
https://www.pertanian.go.id/Data5tahun/TPATA
P-2017(pdf)/23-ProdJagung.pdf Khoiri, S., & Mualim, M. (2018). Fermentasi Limbah Jagung dan Pengaruhnya terhadap Pertumbuhan  Jagung  Ungu  Introduksi  di Madura.  Agrovigor:  Jurnal  Agroekoteknologi,
11(2), 96–100.
Kusumanigtyas,  R.  (2015).  Efektivitas  formulasi bakteri  berbahan  aktif  Pseudomonas  diminuta, Pseudomonas mallei, dan Bacillus mycoides pada berbagai bahan pembawa seabagai bionematisida  untuk  mengendalikan  nematoga sista kentang (Globodera
rostochiensis).
Universitas Jember.
Matruti,  A.  E.,  Kalay,  A.  M.,  &  Uruilal,  C.  (2018). Serangan Perenosclerospora spp Pada Tanaman Jagung  Di  Desa  Rumahtiga,  Kecamatan  Teluk Ambon Baguala Kota Ambon. Agrologia, 2(2).
Pakki,  S.  (2017).  Kelestarian  ketahanan  varietas unggul  jagung  terhadap  penyakit  bulai Peronosclerospora  maydis.  Jurnal  Penelitian Pertanian Tanaman Pangan, 1(1), 37–44.
Rahni,  N.  M.  (2012).  Efek  Fitohormon  PGPR terhadap  pertumbuhan  tanaman  jagung  (Zea mays).
CEFARS: Jurnal Agribisnis Dan Pengembangan Wilayah, 3(2), 27–35.
Rashid, Z., Zaidi, P. H., Vinayan, M. T., Sharma, S. S.,
& Setty, T. A. S. (2013). Downy mildew resistance in maize (Zea mays L.) across Peronosclerospora species in lowland tropical Asia. Crop Protection, 43, 183–191.
Rustiani,  U.  S.,  Sinaga,  M.  S.,  Hidayat,  S.  H.,  & Wiyono, S. (2015). Tiga spesies
Peronosclerospora  penyebab  penyakit  bulai jagung di Indonesia. Berita Biologi, 14(1), 29–37.
Sireesha,  Y.,  &  Velazhahan,  R.  (2016).  Biological control  of  downy  mildew  of  maize  caused  by Peronosclerospora sorghi under
environmentally  controlled  conditions.  Journal of  Applied  and  Natural  Science,  8(1),  279–283.
https://doi.org/10.31018/jans.v8i1.786
Sivasakthi,  S.,  Usharani,  G.,  &  Saranraj,  P.  (2014). Biocontrol  potentiality  of  plant  growth promoting bacteria (PGPR)-Pseudomonas fluorescens and Bacillus subtilis: a review. African Journal  of  Agricultural  Research,  9(16),  1265– 1277.
Sutama,  K.,  Ratih,  S.,  Maryono,  T.,  &  Ginting,  C.
(2015). Pengaruh bakteri Paenibacillus polymyxa dan  jamur  Trichoderma  sp.  terhadap  penyakit bulai  (Peronosclerospora  maydis  (Rac.)  Shaw) pada  tanaman  jagung.  Jurnal  Agrotek  Tropika, 3(2), 199–203.
Ulhaq,  M.  A.,  &  Masnilah,  R.  (2019).  Pengaruh Penggunaan  Beberapa  Varietas  dan  Aplikasi Pseudomonas fluorescens untuk Mengendalikan Penyakit Bulai (Peronosclerospora maydis) pada Tanaman  Jagung  (Zea  mays  L.).  Jurnal Pengendalian Hayati, 2(1), 1–9.
Vidhyasekaran,  P.,  &  Muthamilan,  M.  (1995).
Development  of  formulations  of  Pseudomonas fluorescens  for  control  of  chickpea  wilt.  Plant Disease (USA).
Zainudin,  Z.,  Abadi,  A.  L.,  &  Aini,  L.  Q.  (2014). Pengaruh  pemberian  Plant  Growth  Promoting Rhizobacteria (Bacillus subtilis dan
Pseudomonas  fluorescens)  terhadap  penyakit bulai pada tanaman jagung (Zea mays L.). Jurnal Hama Dan Penyakit Tumbuhan, 2(1), pp-11.