## Perbandingan  Basis  Salep  Hidrokarbon  dan  Absorpsi  Terhadap  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kasar Bromelin Dari Bonggol Nanas
(Comparison of Hydrocarbon Ointment Bases and Absorpsion on the Antibacterial Activity of Bromelin Crude Extract from Pineapple Tuber)
Barmi Hartesi 1* , Desi Sagita 2 , Helsa Raudatul Qalbi 1
1 Jurusan Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan (STIKES) Harapan Ibu Jambi, Indonesia.
2 Jurusan Farmasi, Universitas Adiwangsa, Jambi, Indonesia. *E-mail: barmi.hartesi@gmail.com
Article Info: Received: 1 Mei 2020 in revised form: 11 Mei 2020 Accepted: 28 September 2020
Available  Online:  30  September 2020

## ABSTRACT
The pineapple tuber contains bromelain enzyme which is able to inhibit the growth  of Staphylococcus  aureus and Pseudomonas  aeruginosa causing skin  infections.  The  topical  preparation  that  good  for  treating  skin infections  is  ointments.  Ointments  have  two  type  of  bases  such  as hydrocarbon  and  absorption  base.  This  study  aims  to  compare  the comparison  of  ointment  bases  having  antibacterial  activity  of Staphylococcus  aureus and Pseudomonas  aeruginosa .  This  research  used experimental  methods.  The  bromelain  enzyme  was  extracted  and  purified with  ammonium  sulfate  and  then  dialyzed.  The  bromelain  enzyme  with  a concentration of 4% was formulated into ointment  preparation with  a base of  hydrocarbons  (F1,  F2)  and  absorption  base  (F3, F4). Each formula  was evaluated  for  organoleptic,  homogenity,  pH,  spreadability,  irritation  test, stability and antibacterial activity. The results showed that all formulas with hydrocarbon  base  and  absorbent  base  types  met  good  topical  preparation requirements, that are semi-solid, homogeneous, having a pH range of 4.5 - 6.5, stable during storage and not irritating on the skin. However, ointments based on hydrocarbons have the best  antibacterial activity when compared to absorption base ointments. Formula 2 with a base of hydrocarbons have strong antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa which is the best among the other formulas.
Keywords : Antibacterial
Ointment Base Pineapple Stems Bromelain .
Corresponding Author: Barmi Hartesi Jurusan Farmasi
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Harapan Ibu Jambi 36132 Indonesia email: barmi.hartesi@gmail.com
Copyright © 2019 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Hartesi,  B.,  Sagita,  D.,  Qalbi,  H.  R.  (2020).  Perbandingan  Basis  Salep  Terhadap  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kasar Bromelin  Dari  Bonggol  Nanas. Jurnal  Farmasi  Galenika  :Galenika  Journal  of  Pharmacy  (e-Journal), 6 (2),  269-279. doi:10.22487/j24428744.2020.v6.i2.15092
Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) (e-Journal) 2020; 6(2): 269 – 279 ISSN : 2442-8744 (electronic); 2442-7284 (printed) Journal Homepage: https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/Galenika DOI: 10.22487/j24428744.2020.v6.i2.15092

## ABSTRAK
Bonggol  nanas  mengandung  enzim  bromelin  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa penyebab infeksi kulit. Sediaan topikal yang baik untuk mengobati infeksi kulit adalah salep. Salep memiliki beberapa tipe basis seperti basis hidrokarbon dan basis absorpsi. Penelitian ini bertujuan  untuk  mendapatkan  perbandingan  basis  salep  hidrokarbon  dan  absorpsi  yang memiliki  aktivitas antibakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa .  Penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimental.  Enzim  bromelin  di  ekstraksi  dan  dimurnikan  dengan  amonium  sulfat  dan  di  dialisis.  Enzim bromelin  dengan  konsentrasi  4%  tersebut  diformulasikan  menjadi  sediaan  salep  dengan  basis  hidrokarbon (F1),(F2)  dan  basis  absorpsi  (F3),(F4).  Setiap  formula  salep  dievalusi  (Organoleptis,  homogenitas,  pH,  daya sebar,  uji  iritasi,  stabilitas  dan  aktivitas  antibakteri).  Hasil  penelitian  menunjukkan  semua  formula dengan  tipe basis hidrokarbon dan basis absorpsi memenuhi persyaratan sediaan topikal yang baik yaitu berbentuk setengah padat, homogen, memiliki pH dengan rentang 4,5 – 6,5, stabil selama penyimpanan dan tidak mengiritasi kulit. Akan tetapi sediaan salep dengan basis hidrokarbon yang paling baik aktivitas antibaketerinya jika dibandingkan dengan  sediaan  salep  basis  absorpsi.  Formula  2  dengan  basis  hidrokarbon  memiliki  aktivitas  antibakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa . yang paling baik diantara formula lainnya dengan kategori kuat.
Kata kunci: Antibakteri, Basis Salep, Bonggol Nanas, Bromelin.

## PENDAHULUAN
Tanaman  Nanas  ( Ananas  comosus L.  Merr)  merupakan  salah  satu  tanaman  yang  banyak  tumbuh  di Indonesia  khususnya  di  Provinsi  Jambi  yang  mencapai  144.896  ton  pada  tahun  2014  (Ibrahim  & Mutia,  2015).  Salah  satu  kandungan  dalam  buah  nanas  adalah  bromelin  yang  merupakan  enzim proteolitik  golongan  sufrihidil.  Bromelin  memiliki  aktivitas  untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri gram  positif  maupun  gram  negatif  (Masri,  2014). Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri yang banyak terdapat pada kulit.
Penelitian  terdahulu  menyatakan  ekstrak  dari  nanas  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan konsentrasi  1000  µg/ml  terhadap bakteri Pseudomonas  aeruginosa dengan  diameter  zona  hambat 20 mm dan Staphylococcus aureus 23 mm (Ashik Ahamed et al. , 2016). Bentuk sediaan antibakteri untuk kulit yang baik adalah salep.Salep terdiri dari basis salep yang bersifat inert dan tidak mempengaruhi efek  terapi  dari  zat  aktif.  Basis  salep  yang  biasa  digunakan  adalah  basis  hidrokarbon  dan  basis absorpsi(Naibaho  et  al.,  2013).Penelitian  lainnya  mengenai  formulasi  salep  dengan  menggunakan berbagai  tipe  basis  yang  berbeda  pada  ekstrak acalyphaIndica (tanaman  akar  kucing)menjelaskan bahwa tipe basis serap memiliki sifat dan karakteristik yang lebih baik dibandingkan salep dengan tipe basis  hidrokarbon.  Hal  ini  dikarena  basis  hidrokarbon  yang  mengandung  ekstrak acalyphaIndica kurang stabil selama penyimpanan (Nagajyothi et al ., 2014)
Penelitian  lain  yang  dilakukan  untuk  melihat  pengaruh  tipe  basis  salep  dari  ekstrak  daun  kemangi terhadap  infeksi  bakteri Staphylococcus  aureus, menjelaskan  bahwa  salep  dengan  basis  hidrokarbon memiliki  daya  antibakteri  lebih  besar  dibandingkan  dengan  basis  lainnya  yang  dilihat  dari penyembuhan  infeksi  pada  kulit  kelinci.  Hal  ini  dikarenakan  terjadinya  efek  hidrasi  kulit  yang dapat mempengaruhi  absorpsi  obat  pada  kulit.  Basis  hidrokarbon  memiliki  efek  dalam  menghidrasi  kulit sehingga  dapat  meningkatkan  absorpsi  bahan  obat  pada  sediaan  salep.  Sedangkan  pada  basis absorpsitidak memiliki derajat penutupan pada kulit sebaik basis hidrokarbon sehingga absorpsi obat tidak  begitu  cepat  (Naibaho et  al .,  2013).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  perbandingan basis  salep  hidrokarbon  dan  absorpsi  terhadap  aktivitas  antibakteri  ekstrak  kasar  bromelin  dari bonggol nanas ( Ananas comosus L. Merr).

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  yaitu  timbangan  analitik  (Shimadzu®),  blender  (Miyako®),  magnetic stirrer(Ika®),  sentrifuse(Hettich®),  membrane  semipermiabel  (Sigma  Aldrich®)  alat-alat  gelas (Pyrex®),  autoklaf  (HIRAYAMA®),  Laminar  Air  Flow  (KOJAIR®),  inkubator  (Memmert®),  oven (Memmert®),  spektrofotometer,  vortex  (Thermo®),  lemari  pendingin  (LG®),  hot  plate (MITSEDA®),  dan  pipet  mikro  (Eppendorf  Research  plus®).  Bahan-bahan  yang  dipakai  dalam penelitian  ini  yaitu  bonggol  buah  nanas  muda,  dapar  fosfat  pH  7,0,  larutan  NaCl  fisiologis, aquadestilata, ammonium sulfat, media Nutrient Broth (Oxoid), media Nutrient Agar (Oxoid), cakram kloramfenikol  0,3  %  (Oxoid),  vaselin  album  (Brataco),  paraffin  padat  (Brataco),  paraffin  cair (Brataco),  cera  alba  (Brataco),  cetyl  alkohol  (Brataco),  adepslanae  (Brataco),  lanolin,  EDTA,NaOH, KH 2 PO 4 , TCA dan Natrium Karbonat.

## Metode
Penelitian  ini  merupakanpenelitian  eksperimental.  Dimulai  dari  penyiapan  alat,  pengambilan  sampel, proses  ekstraksi  dan  purifikasi  enzim,  penetapan  kadar  enzim  bromelin,  proses  pembuatan  sediaan salep  dan  evaluasi  sediaan  yang  telah  di  buat.  Evaluasi  sediaan  meliputi  uji  organoleptik, uji  pH,  uji daya sebar, uji homogenitas, uji iritasi, uji antibakteri dan uji stabilitas

## Pengambilan Sampel
Buah  nanas  yang  diperlukan  dalam  penelitian  sebanyak  5  kg  yang  di  ambil  dari  desa  Tangkit kabupaten Muaro Jambi, Jambi. Proses ekstraksi dimulai dengan menimbang 5 kg bonggol buah nanas kemudian  di  rajang.  Setelah  itu  bonggol  buah  nanas  di  tambahkan  dapar  fosfat  pH  7,0  kemudian  di blender.  Hasil  dari  proses  blender  di  saring  dan  di  dapat  suatu  fitrat.  Filtrat  tersebut  di  sentrifugasi dengan  kecepatan  4000  rpm  selama  10  menit.  Supernatan  dari  proses  sentrifugasi  kemudian  di timbang yang merupakan ekstrak kasar dari bromelin(Masri, 2014).

## Proses Pemurnian
Proses  pemurnian  sebagian  ( parsial  purified )  dari  ekstrak  kasar  bromelin  dilakukan  dengan menambahkan  ammonium  sulfat  sedikit  demi  sedikit  pada  suhu  4°C  selama  24  jam  sambil  diaduk menggunakan magnetic  stirrer .  Larutan  yang  diperoleh  selanjutnya  disentrifugasi  menggunakan kecepatan  4000  rpm  selama  10  menit  sehingga  di  dapat  endapan  berupa  enzim  bromelin.  Endapan tersebut  didialisis  dengan  membran  dialisa  selama  16  jam,  hasil  dialisis  disentrifugasi  kembali sehingga didapat endapan ekstrak kasar bromelin yang dimurnikan sebagian ( parsial purified )(Masri, 2014).

## Penentuan Unit Aktivitas
Penentuan  unit  aktivitas  enzim  bromelin  dalam  bonggol  buah  nanas  menggunakan  substrat  kasein yang  terdiri  dari  2%  kasein  dalam  dapar  posfat  0,1  M  dengan  pH  7,5.  Sebanyak  50µL  sampel  di sentrifugasi  dengan  larutan  buffer  kasein  sebanyak  0,625  ml  dan  di  diamkan  selama  10  menit. Tambahkan TCA  ( Trichloroacetic  acid )  1  M  sebanyak  1,25  ml.  Lakukan proses  inkubasi  selama  10 menit  dengan  suhu  25◦C  selanjutnya  di  sentarifugasi  selama  20  menit  dengan  kecepatan  4000  rpm untuk  mendapatkan  filtrat  dari  campuran  tersebut.  1  ml  dari  filtarat  di  encerkan  menggunakan  dapar fosfat pH 7,5 sebanyak 5 ml. Untuk menentukan kurva standar tirosin, digunakan 5 konsentrasi yang berbeda yaitu 100ppm, 80 ppm, 60 ppm, 40 ppm dan 20 ppm. Ukur absorbansi dengan menggunakan tirosin  sebagai  pembanding  yang  memiliki  panjang  gelombang  280  nm  menggunakan Spektrofotometer UV(Soares et al., 2012).

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kasar Bromelin
Uji  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  sumur.  Media Nutrient  Agar yang  telah  steril dituangkedalam  24  cawan  petri.  Masing  -  masing  cawan  petri  dimasukkan  media  ±  20  ml  dan dibiarkan dingin serta memadat. Suspensi bakteri Staphylococcusaureus dan Pseudomonas aeruginosa yang  diinokulasikan  pada  seluruh  permukaan media  dengan  menggunakan batang  L.  Pada  masing- masing media tersebut dibuat 4 sumur secara aseptis dengan pipa pelubang untuk uji antibakteri salep ekstrak  kasar  bromelin  yang  dimurnikan  sebagian  dari  bonggol  buah  nanas.  Untuk  uji  aktivitas antibakteri ekstrak kasar bromelin yang dimurnikan sebagian konsentrasi 3%, 4%, kontrol positif (+) yaitu cakram kloramfenikol, dan kontrol negatif (-) yaitu dapar fosfat.

## Formulasi Basis Salep
Formulasi  basis  salep  dimulai  dengan  menimbang  semua  basis  salep  sesuai  dengan  formula  yang terdapat pada tabel 1.

## Basis salep hidrokarbon
Formula  1  :Cera  alba,  parafin  padat,  dan  cetil  alkohol  di  lebur  pada  suhu  50°C  dengan  waterbath. Setelah  melebur  sempurna,  di  masukkan  kedalam  lumpang  panas.  Kedalam  lumpang  tersebut  di tambahkan vaselin album dan digerus perlahan hingga dingin dan homogen.
Formula  2  :Parafin  padat  di  lebur  pada  suhu  50°C  dengan  waterbath.  Setelah  melebur  sempurna,  di masukkan  kedalam  lumpang  panas.  Kedalam  lumpang  tersebut  di  tambahkan  vaselin  album  dan parafin cair dan digerus perlahan hingga basis salep dingin dan homogen.

## Basis salep absorpsi
Formula  3  :Parafin  padat  dan  cetyl  alkohol  di  lebur  pada  suhu  50°C  dengan  waterbath.  Setelah melebur  sempurna,  di  masukkan  kedalam  lumpang  panas.  Kedalam  lumpang  tersebut  ditambahkan vaselin album dan lanolin dan digerus perlahan hingga basis salep dingin dan homogen.
Formula  4  :  Lanolin  dimasukkan  kedalam  lumpang  dan  ditambahkan  aquadest  sedikit  demi  sedikit perlahan hingga basis homogen.
Tabel 1. Formula Basis Salep
Nama Bahan Basis Hidrokarbon Basis Absorpsi F1 F2 F3 F4 Cera alba (g) 2 - - - Parafin padat (g) 3 5 2 - Cetyl alkohol (g) 5 - 5 - Vaselin album 90 55 85 - Parafin cair (g) - 40 - - Lanolin (g) - - 8 70 Aquadest (g) - - - 30 Berat Total (g) 100 100 100 100

## Pembuatan Salep
Ekstrak kasar bromelin yang dimurnikan sebagian di pilih sesuai dengan konsentrasi yang paling kuat memiliki  aktivitas  antibakterinya  antara  kosentrasi  3%  atau  4  %  (Tabel  2).  Basis  salep  di  masukkan sedikit  demi  sedikit  kedalam  lumpang.  Ekstrak  dan  BHT  ( Butylated  Hydroxytoluene ) di  tambahkan
sedikit demi sedikit selanjtnya digerus hingga homogen. Salep dimasukkan ke dalam pot salep untuk di evaluasi.
Tabel 2. Formula Salep Zat F1 (% b/b) F2 (% b/b) F3 (% b/b) F4 (% b/b) A B A B A B A B Ekstrak Kasar Bromelin 0 X 0 X 0 X 0 X BHT 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Basis Salep Dicukupkan Hingga 100 100 100 100 100 100 100 100 Keterangan :
X= Kosentrasi yang terbaik A = Formula Basis Salep B = Formula Salep dengan zat aktif ( Ekstrak Kasar Bromelin )

## Evaluasi Salep
Uji Organoleptis Uji organoleptis yaitu melihat bentuk, warna dan bau dari sediaan salep secara visual  (Naibaho et al ., 2013).
Uji Homogenitas Uji homogenitas dilakukan dengan cara meletakkan salep secukupnya pada dua objec glass kemudian dilihat apakah terdapat gumpalan pada salep (Naibaho et al ., 2013).

## Uji pH
Uji pH menggunakan alat pH meter. Proses pengujian pH di mulai dengan mengkalibrasi pH terlebih dahulu  dengan  cara  mencelupkan  elektroda  pH  dan  stik  temperatur  kedalam  larutan buffer fosfat  pH 7.01  dan buffer fosfat  pH  4.01.  1  gram  salep  di  timbang dan  diencerkan  dengan  10  ml  aquadest. Elektroda pH dan stik temperatur kemudian dimasukkan kedalam sediaan salep yang sudah diencerkan dan dibaca pH pada bagian monitor (Naibaho et al ., 2013).
Uji Daya Sebar
Uji  daya  sebar  salep  dilakukan  dengan  cara  menimbang  1  gram  sedian  salep  dan  diletakkan  diatas plastik  kaca.  Kemudian  di  berikan  beban  bertahap  secara  bergantian  yaitu  2  g,  4g  dan  6g.  Ukur diameter penyebaran yang terbentuk (Hasyim et al ., 2012).

## Uji Iritasi
Uji  iritasi  menggunakan  30  responden  dengan  syarat  yaitu  tidak  sedang  menggunakan  obat.  Usia sukarelawan  sukarelawan  terdiri  dari  anak-anak  (5  –  11  tahun)  sebanyak  10  orang,  remaja  (12  –  25 tahun)  sebanyak  10  orang,  dan  dewasa  (26  –  45  tahun)  sebanyak  10  orang  dengan menggunakan metode  tempel  tertutup.  Pengujian  ini  dilakukan  dengan  mengoleskan 0,1  gram salep  pada  lengan bagian  dalam  dan  ditutup  dengan  kain  kasa  selama  24  jam.  Amati  gejala  iritasi  yang  timbul (Rahim,Farida., Aria,Mimi., Aji, 2011).

## Uji Stabilitas
Uji stabilitas di lakukan dengan cara meyimpan salep selama 28 hari pada kondisi suhu yang berbeda yaitu 4º C, suhu ruangan dan 40°C. Lihat perubahan organoleptik, pH sediaan, daya sebar dan aktivitas antibakteri (Nagajyothi et al ., 2014).
Uji Aktivitas Antibakteri Salep Salep dimasukkan kedalam sumuran pada media sebanyak 10 mg formula basis salep (F1a, F1b, F2a, F2b, F3a, F3b, F4a dan F4b), kontrol positif (+) yaitu salep yang berada dipasaran, dan kontrol negatif (-) merupakan basis salep. Inkubasi cawan petri selama 24 jam pada suhu 37 ºC. Lakukan pengukuran zona hambat dari ekstrak kasarbromelin dan salep antibakteri yang dimurnikan sebagian dari bonggol buah nanas.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sampel  yang  digunakan  adalah  bonggol  nanas  mentah  karena  bonggol  nanas  memiliki  kandungan enzim  bromelin  yang  lebih  banyak  dibandingkan  pada  kulit  nanas  (Masri,  2013).  Ekstrak  bromelin dimurnikan  sebagian  yang  didapat  dari  serangkaian  proses  ekstraksi  dan  pemurnian  sebanyak  21  ml atau 49.07 gram yang diperoleh dari 5 kg bonggol buah nanas mentah. Hasil pengukuran unit aktivitas bromelin dari bonggol nanas dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil Pengukuran Unit Aktivitas Bromelin Bonggol Nanas
Persamaan Regresi Rata-rata Absorban Unit Aktivitas Bromelin U/ mL y = 0,0072x – 0,0175 0, 74203 210,9804 U/mL
Enzim  bromelin  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa. Pengujian  aktivitas  antibakteri  untuk  konsentrasi  enzim  3%  dan  4%. Kontrol  (+)  yang  digunakan  adalah  kloramfenikol  0,3%  dan  kontrol  (-)  berupa  dapar  fosfat, dikarenakan  dapar  fosfar  merupakan  pelarut  yang digunakan  untuk  pemurnian  ekstrak  bonggol  buah nanas.  Bromelin  merupakan  enzim  yang  bersifat  proteolitik  sehingga  mampu  menghidrolisis  rantai protein  pada  bakteri(Ashik  Ahamed et  al. ,  2016).  Jika  dilihat  pada  Gambar  1,  Konsentrasi  ekstrak bromelin 4% memiliki aktivitas yang lebih tinggi dibandingkan konsentrasi 3%, sehingga konsentrasi yang  dipilih  untuk  dibuat  sediaan  salep  adalah  konsentrasi  4%.  Konsentrasi  4%  mimiliki  aktivitas antibakteri dengan kategori kuat.
Gambar 1. Daya Hambat Antibakteri dari Ekstrak Kasar Bromelin
Keterangan :  K(+) = Kloramfenikol 1%, K(-) = Dapar Fosfat, E3= Ekstrak 3%, E4= Ekstrak 4%
0 5 10 15 20 25 K(+) K(-) E3% E4% D ia m et er Z o n a B en in g (m m ) Sampel Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus
Sediaan salep ekstrak kasar bromelin dibuat menggunakan kosentrasi 4 % yang selanjutnya  dilakukan evaluasi.  Berdasarkan  evaluasi  sediaan  salep  pada  Tabel  4, uji  organoleptis  semua  salep  dari  basis hidrokarbon (F1B& F2B) maupun salep dari basis  Absorpsi( F3B & F4B) berbentuk setengah padat, memiliki  bau  khas  nanas,  dan  memiliki  warna  yang  berbeda  tergantung  dari  basis  yang  digunakan. Jika  dilihat  dari  uji  homogenitas,semua  sediaan  salep  homogen.  Uji  homogenitas  dilakukan  untuk melihat bahwa dosis dari obat telah tersebar merata dalam sediaan.
Tabel 4. Hasil Evaluasi Sediaan Salep (Organoleptis, Homogenitas, pH dan Iritasi)
Formula Organoleptis Homogenitas pH ± SD Iritasi Bentuk Warna Bau F1A Setengah padat Putih Khas Homogen 6,3 Tidak Iritasi F1B Setengah padat Putih Khas Homogen 6,16 ± 0,05 Tidak Iritasi F2A Setengah padat Putih Khas Homogen 6,2 ± 0,1 Tidak Iritasi F2B Setengah padat Putih Khas Homogen 5,96 ± 0,05 Tidak Iritasi F3A Setengah padat Putih Kekuningan Khas Homogen 6,13 ± 0,05 Tidak Iritasi F3B Setengah padat Putih Kekuningan Khas Homogen 6,03 ± 0,05 Tidak Iritasi F4A Setengah padat Kuning Khas Homogen 6,13 ± 0,05 Tidak Iritasi F4B Setengah padat Kuning Khas Homogen 5,83 ± 0,05 Tidak Iritasi Fp Setengah padat Putih Khas Homogen 6,33 ± 0,05 Tidak Iritasi Keterangan : F1A = Basis Formula 1 F3B = Formula 3 F1B = Formula 1 F4A = Basis Formula F2A = Basis Formula 2 F4B = Formula 4 F2B = Formula 2 Fp = Salep Pembanding
F3A = Basis Formula 3
Uji  pH  dilakukan  pada  tiap  formula  salep,  diketahui  salep  yang  mengandung  enzim  bromelin  dari bonggol nanasmenggunakan basis hidrokarbon (F1B& F2B) memiliki pH dengan rentang 5,96 – 6,3. Sedangkan  salep  dari  basis  Absorpsi(  F3B&  F4B)  memiliki  pH  5,83  –  6,13.  Akan  tetapi  formula pembanding  (sediaan  salep  yang  berredar  dipasaran  dengan  kandungan  zat  aktif  kloramfenikol  1%) memiliki pH yang lebih tinggi yaitu 6,33. Jika dilihat dari hasil pengujian pH tersebut dapat dikatakan perbedaan basis salep hidrokarbon dan absorpsi tidak mempengaruhi dari nilai pH sedian salep ekstrak kasar bromelin. Semua sediaan salep telah memenuhi syarat pH sediaan topikal yang baik, yaitu sama dengan pH kulit (4,5 – 6,5). pH suatu sediaan topikal harus sesuai dengan pH kulit untuk memperkecil kemungkinan  terjadinya  iritasi  (Naibaho et  al .,  2013).  Enzim  bromelin  memberikan  aktivitas antibakteri pada pH 4,5 – 9.8 (Abdulrahman Ali, 2015)
Gambar 2. Hasil Pengujian Daya Sebar Formula Salep Ekstrak Kasar Bromelin menggunakan Beban (2 gram, 4 gram dan 6 gram)
Uji daya sebar untuk setiap salep dengan basis hidrokarbon (F1B & F2B) dan basis Absorpsi (F3B& F4B) dilakukan  untuk  melihat  kemampuan penyebaran  salep  di  kulit.  Penyebaran  salep  berpengaruh terhadap  proses  dan  kecepatan  difusi  zat  aktif  melewati  membran.  Semakin  besar  daya  sebar  suatu sediaan  maka  semakin  baik  dikarenakan  semakin  luas  membran  tempat  sediaan  menyebar  yang menyebabkan difusi obat semakin meningkat (Hasyim et al ., 2012). Daya sebar salep yang paling baik yaitu  pada  formula  4  dengan  basis  absorpsi.  Dari  pengujian  terhadap  daya  sebar,  dapat  dilihat  dan dibandingkan  dengan  viskositas  nya.  Daya  sebar  suatu  sediaan  akan  berbanding  terbalik  dengan viskositas karena semakin besar daya sebar maka akan semakin rendah viskositasnya. Sehingga dari 4 formula  basis  salep,  yang  memiliki  viskositas  yang  paling  rendah  dan  daya  sebar  yang  paling  besar adalah formula 4 dengan basis absorpsi (Gambar 2). Hal ini dikarenakan pada formula 4 mengandung basis dengan jumlah air yang lebih banyak dari basis lainnya. Tabel 5. Hasil Uji Stabilitas hari ke 28
Suhu Formula Pengamatan Bentuk Warna Bau Homogenitas 4◦C F1B Setengah Padat Putih Khas Homogen F2B Setengah Padat Putih Khas Homogen F3B Setengah Padat Putih Kekuningan Khas Homogen F4B Setengah Padat Putih Khas Homogen FP Setengah Padat Putih Khas Homogen Ruangan F1B Setengah Padat Putih Khas Homogen F2B Setengah Padat Putih Khas Homogen F3B Setengah Padat Putih Kekuningan Khas Homogen F4B Setengah Padat Putih Khas Homogen FP Setengah Padat Putih Khas Homogen 40◦C F1B Terbentuk Dua Fasa Putih Tidak Berbau Tidak Homogen F2B Terbentuk Dua Fasa Putih Kekuningan Tidak Berbau Tidak Homogen F3B Terbentuk Dua Fasa Putih Kekuningan Tidak Berbau Tidak Homogen F4B Terbentuk Dua Fasa Putih Tidak Berbau Tidak Homogen FP Terbentuk Dua Fasa Putih Tidak Berbau Tidak Homogen
0 5 10 15 20 25 30 F1A F1B F2A F2B F3A F3B F4A F4B Fp D ia m et er D ay a S eb ar ( m m ) Formula 0 gram 2 gram 4 gram 6 gram
Selama  uji  stabilitas  yang  dilakukan  28  hari,  salep  dengan  tipe  basis  hidrokarbon  (F1B  &  F2B)dan basis  Absorpsi  (  F3B&  F4B)  di  simpan  di  tiga  suhu  yang  berbeda.  Jika  dilihat  pada  Tabel  5,  untuk salep yang disimpan di suhu 4 ◦ C dan suhu ruangan dikatakan stabil karena tidak terjadinya perubahan bentuk dari sediaan. Sedangkan semua salep yang disimpan di suhu 40 ◦ C tidak stabil karena terbentuk dua fasa.
Gambar 3. Daya Hambat Salep Antibakteri Pseudomonas aeruginosa pada suhu 4◦C
Gambar 4. Daya Hambat Salep Antibakteri Staphylococcus aureus pada suhu 4◦C
Gambar 5. Daya Hambat Salep Antibakteri Pseudomonas aeruginosa pada suhu ruangan 0 5 10 15 20 25 1 2 3 4 5 D ia m e te r Z o n a B e n in g ( m m ) Minggu  ke- K(+) F1B F2B F3B F4B 0 1 2 3 4 0 5 10 15 20 25 1 2 3 4 5 Dia m e te r Z o n a Ben in g ( m m ) Minggu ke- K(+) F1B F2B F3B F4B 0 1 2 3 4 0 5 10 15 20 25 1 2 3 4 5 Dia m te r Z o n a Ben in g ( m m ) Minggu ke- K(+) F1B F2B F3B F4B 0 1 2 3 4
Gambar 6. Daya Hambat Salep Antibakteri Staphylococcus aureus pada suhu ruangan
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  basis  hidrokarbon  (F1B  &  F2B)  memiliki  aktivitas  antibakteri yang  lebih  baik  dibandingkan  dengan  basis  Absorpsi  (F3  &  F4)  (Gambar  3-6).  Basis  hidrokarbon merupakan  basis  yang  baik  digunakan  untuk  sediaan  dengan  aktivitas  sebagai  antibakteri  karena mengandung  komponen  air  yang  lebih  sedikit,  sedangkan  pada  basis  Absorpsi(  F3B  &  F4B)  yang mengandung  komponen  air  yang  lebih  banyak  sehingga  memberikan  aktivitas  antibakteri  yang  lebih kecil jika dibandingkan dengan basis hidrokarbon. Hal tersebut dikarenakan air merupakan salah satu media pertumbuhan bakteri. (Yanhendri & Satya, 2012). Kemampuan aktivitas antibakteri dari enzim bromelin  bisa  merusak  peptidoglikan  dari  membran  bakteri dan  mampu  mendenaturasi  protein  yang ada di mebran sehingga bakteri menjadi lisis. (Liliany et al ., 2018)
Jika  dilihat  dari  pengaruh  suhu  nya,  salep  yang disimpan  di  suhu 4◦C  memiliki  aktivitas  yang  lebih baik dibandingkan pada suhu ruangan. Hal ini dikarenakan sifat enzim yang lebih baik jika disimpan disuhu  dingin,  semakin  tinggi  suhu  maka  resiko  terjadinya  denaturasi  enzim  juga  semakin  besar (Noviyanti et al ., 2012). Basis pada salep tidak dapat membawa zat aktif enzim bromelin jika terjadi denaturasi  pada  enzim  tersebut.  Jika  dibandingkan  antara  uji  aktivitas  ekstrak  enzim  bromelin  dan sediaan  salep  yang  memiliki  aktivitas  yang  lebih  baik  adalah  ektstrak  enzim  bromelin  yang dimurnikan sebagian karena dalam sediaan salep mengandung bahan-bahan tambahan selain zat aktif sehingga memberikan aktivitas antibakteri yang berbeda (Naibaho et al. , 2013)

## KESIMPULAN
Basis  yang  lebih  baik  digunakan  untuk  sediaan  salep  dengan  zat  aktif  ekstrak  kasar  bromelin  dari bonggol  nanas  adalah  basis  hidrokarbon  (F1B  &  F2B).  Diantara  ke  2  formula  salep  yang menggunakan  basis  hidrokarbon  yang  paling  baik pada  formula  2B  karena  formula  tersebut memberikan  aktivitas  antibakteri  yang  lebih  baik  terhadap Staphylococcus  aureus dan  bakteri Pseudomonas aeruginosa.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdulrahman  Ali,  A.  (2015).  Antimicrobial  Effects  Of  Crude  Bromelain  Extracted  From  Pineapple Fruit ( Ananas Comosus (Linn.) Merr.). Advances In Biochemistry , 3 (1), 1. Https://Doi.Org/10.11648/J.Ab.20150301.11
Ashik  Ahamed,  A.,  Vishnu  Priya,  V.,  Gayathri,  R.,  &  Geetha,  R.  V.  (2016).  Evaluation  Of  Anti Microbial  Activity  Of  Pineapple  Extract  Against  Selected  Microbes. International  Journal  Of Pharmaceutical Sciences Review And Research , 39 (1), 277–278.
Hasyim,  N.,  Pare,  K.  L.,  Farmasi,  F.,  Hasanuddin,  U.,  &  Timur,  U.  I.  (2012).  Formulasi  Dan  Uji Efektifitas  Ekstrak  Daun  Cocor  Bebek  Pada  Kelinci. Medical  Journal  Of  Hasanuddin University , 16 (2), 89–94.
0 5 10 15 20 25 1 2 3 4 5 Dia m e te r Z o n a Ben in g ( m m ) Minggu ke- K(+) F1B F2B F3B F4B 0 1 2 3 4
Ibrahim,  W.,  &  Mutia,  R.  (2015). Penggunaan  Kulit  Nanas  Fermentasi  Dalam  Ransum  Yang Mengandung  Gulma  Berkhasiat  Obat  Terhadap  Lemak  Dan  Kolesterol  Ayam  Broiler . 15 (1), 20–27.
Liliany,  D.,  Widyarman,  A.,  Erfan,  E.,  Sudiono,  J.,  &  Djamil,  M.  (2018). Enzymatic  Activity  Of Bromelain  Isolated  Pineapple  ( Ananas  Comosus )  Hump  And  Its  Antibacterial  Effect  On Enterococcus Faecalis Scientific Dental Journal , 2 (2), 39.
Https://Doi.Org/10.26912/Sdj.V2i2.2540
Masri,  M.  (2014).  Isolasi  Dan  Pengukuran  Aktivitas  Enzim  Bromelin  Dari  Ekstrak  Kasar  Bonggol Nanas ( Ananas Comosus ) Pada Variasi Suhu Dan Ph. Biogenesis , 2 (2), 119–125.
Masri, M., & Biologi, D. J. (2013). Jurnal Biology Science & Education 2013 Mashuri M .
Nagajyothi,  A.,  Gorantla,  N.,  A,  R.  P.,  H,  A.  A.,  &  Sreedhar,  V.  (2014). International  Journal  Of Chemistry And Formulation And Evaluation Of Herbal Ointments Containing Aqueous Extract Of Acalyphaindica Using Different Types Of Ointment Bases . 2 (11), 1276–1280.
Naibaho, O. H., Yamlean, P. V. Y., & Wiyono, W. (2013). Pengaruh Basis Salep Terhadap Formulasi Sediaan  Salep  Ekstrak  Daun  Kemangi  (Ocimum  Sanctum L. )  Pada  Kulit  Punggung  Kelinci Yang Dibuat Infeksi Staphylococcus aureus . 2 (02), 27–34.
Noviyanti,  T.,  Ardiningsih,  P.,  &  Rahmalia,  W.  (2012). Pengaruh  Temperatur  Terhadap  Aktivitas Enzim Protease Dari Daun Sansakng (Pycnarrhena Cauliflora Diels ) . 1 (1), 31–34.
Rahim,Farida., Aria,Mimi., Aji, N. Purnama. (2011). Formulasi Krim Ekstrak Etanol Daun Ubi Jalar (Ipomoeae Batatas L. ) Untuk Pengobatan Luka Bakar . 21–26.
Soares, P. A. G., Vaz, A. F. M., Correia, M. T. S., Pessoa, A., & Carneiro-Da-Cunha, M. G. (2012). Purification  Of  Bromelain  From  Pineapple  Wastes  By  Ethanol  Precipitation. Separation  And Purification Technology , 98 , 389–395. Https://Doi.Org/10.1016/J.Seppur.2012.06.042
Yanhendri,  &  Satya, W. Y.  (2012).  Berbagai  Bentuk Sediaan  Topikal  Dalam  Dermatologi. Cdk-194 , 39 (6), 423–430.