e-issn: 2716-4608 p-issn: 2655-366X

## EFFECTS OF BIOFLOC AND PHOTOPERIOD MANIPULATION COMBINATION ON BLOOD STRUCTURE OF

## Pangasianodon hypophthalmus
Yuli Anggreani Putri Br Surbakti 1 ,  Windarti 1 *, Eddiwan 1
1 Department of  Aquatic Resources Management, Faculty of Fisheries and Marine, Universitas Riau Kampus Bina Widya KM. 12,5, Simpang Baru, Kec. Tampan, Kota Pekanbaru, Riau 28293
* windarti@lecturer.unri.ac.id

## ABSTRACT
Pangasianodon  hypopthalmus can  be  reared  under  biofloc  system  and  short photoperiod.  To  understand  the  effect  of  biofloc  system  and  photoperiod  manipulation  to wards blood structure of P. hypopthalmus a study was conducted on September to December 2020 . This experiment using a factorial CRD design with 2 level for B factor (biofloc and no biofloc),  3  level  for  P  factor  (Natural,  18  hours  dark,  24  hours  dark),  3  repetition.  The  fish was reared in 110L tank, 30 fishes/tank, fed with fish pellet (FF-999, Provit 781-1 and Provit 781-2).  Parameters  measured  were  the  number  of  erythrocytes,  leukocytes,  the  level  of hematocrit and leukocrite and leukocyte types. The blood was collected using syringe wetted with EDTA 10%. The number of blood cells was calculated using haemocytometer , while the white  blood  cells  were  stained  using  Giemsa  solution  and  checked  under  a  binocular microscope. Results shown that there is no different blood structure in fish of all treatments. Total  erythrocytes  are  1,681,111-2,647,777  cell/mm 3 ,  total  leukocytes  are  55.031-55.655 cell/mm 3 ,  hematocrit  20.33-38.11%  and  leukocrite  20.33-38.11%.  White  corpuscle  are basophil  00-3.89%,  eosinophils  0-3.67%,  lymphocytes  26.67-73.89%,  trombosit  1-48.89%, monocytes  13.33-30.22%  and  neutrophill  0.00-9.22%.  Based  on  data  obtained,  it  can  be concluded  that  the  biofloc  system  and  photoperiod  manipulation  combination  do  not negatively affects the fish hematology.
Keywords: Erythrocytes, Hematocrite, Leukocytes, Leukocrite

## I. PENDAHULUAN
Ikan patin merupakan salah satu jenis ikan  konsumsi  air  tawar  yang  banyak digemari  oleh  masyarakat  Indonesia.  Ikan patin  memiliki  nilai  ekonomis  yang  tinggi dikarenakan  harga  jual  yang  sangat menjanjikan  dan  melampaui  harga  jual rata-rata  ikan  konsumsi  jenis  lainnya sehingga dikenal sebagai komoditi berprospek cerah [1].
Ikan  patin  juga  merupakan  ikan nokturnal yang  akif  bergerak  dan  mencari makan  di  malam  hari,  sehingga  ikan  patin cocok dipelihara dengan manipulasi
fotoperiod/  fotoperiod  pendek.  Fotoperiod adalah  durasi  cahaya  atau  panjang  siang dan  malam.  Namun  kelemahan  fotoperiod pendek adalah kondisi air yang kurang baik dikarenakan pada kondisi gelap fitoplankton tidak bertumbuh, sehingga sisa metabolisme tidak
dimanfaatkan seluruhnya  oleh  fitoplankton.  Akibatnya materi organik di dalam air menjadi tinggi. Hal ini berdampak negatif pada ikan, maka dari  itu  untuk  mengatasi  hal  tersebut digunakan dengan sistem bioflok.
Sistem  bioflok  adalah  suatu  teknik budidaya melalui rekayasa lingkungan yang
e-issn: 2716-4608 p-issn: 2655-366X mengandalkan pasokan oksigen dan pemanfaat  mikroorganisme  yang  secara langsung dapat meningkatkan nilai kecernaan pakan [2]. Mikroorganisme pada EM4 yang digunakan dalam sistem bioflok adalah Lactobacillus casei dan
Saccharomyces  cerevisiae yang  tetap  aktif pada  kondisi  gelap.  Ikan nokturnal seperti ikan patin dilakukan dengan sistem bioflok dan manipulasi fotoperiod untuk mempengaruhi tingkah laku makan. Teknik sistem bioflok dan manipulasi fotoperiod  sangat  mudah  dilakukan  ramah lingkungan serta tidak menimbulkan dampak  negatif,  baik  terhadap  ikan, terhadap manusia yang mengkonsumsi ikan serta terhadap lingkungan. Untuk mengetahui dampak kombinasi bioflok dan manipulasi  fotoperiod  dapat  dilihat  pada struktur darah ikan patin.

## 2. METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  September  –  Desember  2020,
Pengambilan  sampel  ikan  berasal  dari  BBI Sei Tibun Kampar Pekanbaru. Pemeliharaan  ikan  patin  dengan  sistem bioflok dan manipulasi fotoperiod dilakukan  di  Komplek  Wadya  Graha  1 Perumdam  Blok  MM  No.  11.  Pengamatan dan  analisis  struktur  darah  ikan  patin  di Laboratorium  Biologi  Perairan,  Fakultas Perikanan dan Kelautan, Universitas Riau.

## Metode Penelitian
Metode yang digunakan pada penelitian  ini  adalah  metode  eksperimen dengan  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap Faktorial 2x2x3, yaitu yang terdiri dari 2 taraf untuk faktor B (Bioflok dan non bioflok), 3 taraf untuk faktor F (Natural, 18 jam  gelap  dan  24  jam  gelap)  dan  3  kali ulangan.  Dalam  eksperimen  ini  rancangan dasar  nya  adalah  RAL  dengan  pola Faktorial dengan dua faktor yaitu :
1. Faktor Media air, yang terdiri dari 2 taraf yaitu B-1 (media air
menggunakan  bioflok)  dan  B-2 (media air non bioflok).
2. Faktor  Fotoperiod  dengan  3  taraf yang terdiri dari T-1 (Ikan dipelihara  dengan  fotoperiod  alam, menyinarkan  selama  18  jam),  T-2 (Ikan  dipelihara  pada  kondisi  gelap total,  penyinaran  selama  24  jam), dan  T-3  (Ikan  dipelihara  pada periodisasi kondisi gelap).

## Prosedur Penelitian Persiapan Wadah Penelitian
Wadah  penelitian  berupa  ember plastik  bulat  dengan  volume  air  110  liter, diisi  air  100  L.  Ember  wadah  diperlukan sebanyak  18  buah  ember.  Wadah-wadah penelitian  ditempatkan  di  ruangan  beratap dengan  sisi  terbuka.  Pada  penelitian  ini, sudah dibentuk 2 grup wadah pemeliharaan, yaitu grup wadah pemeliharaan  dengan  sistem  bioflok  dan grup  tanpa  sistem  bioflok.  Pada  perlakuan bioflok,  bahan  untuk  pembuatan  bioflok disiapkan yaitu
EM4 ( Effective Microorganisms) 4  dari  PT.  Songgolangit Persada  untuk  perikanan  dan  tambak  serta molase.
Persiapan wadah dengan sistem tanpa bioflok,  ember  diisi  dengan  air  dari  sumur bor  menggunakan  selang  sebanyak  100  L dan  dipasangi  pompa  sirkulasi  yang dilengkapi  dengan  filter.  Pada  perlakuan G2, ember ditutup dengan tenda terpal biru tua  sepanjang  hari.  Tanpa  terpapar  sinar matahari  sedangkan  untuk  perlakuan  G1, ember      ditutup  dengan  tenda  terpal  hitam selama  18  jam  kemudian  dibuka  selama enam  jam,  yaitu  dari  pukul  07.00-13.00 WIB.  Sedangkan  untuk  ember  pada perlakuan  fotoperiod  natural,  wadah  tidak ditutup  dengan  tenda  terpal  hitam,  tetapi ditutup  dengan  tenda  plastik  bening. Setelah  media  air  selesai  disiapkan,  tahap selanjutnya adalah memasukkan benih ikan patin kedalam wadah pemeliharaan.
Untuk  lebih  jelasnya  gambar  desain wadah  pemeliharaan  ikan  patin  dengan
manipulasi  fotoperiod  dapat  dilihat  pada
Gambar 1.
Gambar  1. Desain  Wadah  Pemeliharaan  Ikan  Patin  dengan  Sistem  bioflok  dan  Manipulasi Fotoperiod

## Pengamatan Darah Ikan
Pengambilan  sampel  darah  ikan, pertama-tama jarum suntik dibasahi EDTA guna  mencegah  terjadinya  pembekuan darah.  Jarum  suntik  di  suntikkan  pada bagian vena  caudalis ,  kemudian  spuit ditarik  secara  perlahan-lahan  sampai  darah masuk  kedalam  spuit,  setelah  itu  sampel darah  ikan  dimasukkan  ke  dalam  tabung eppendorf  yang  telah  dibasahi  EDTA  dan diberi label.

## Analisis Data
Data hasil penelitian tersebut dianalisis  menggunakan  analisis  variansi (ANOVA).  Dari  hasil  analisis  variansi  ini akan diketahui perbedaan pengaruh perlakuan terhadap unit eksperimen, apakah  berbeda  nyata  atau  tidak  berbeda nyata. Jika terdapat beda nyata, maka untuk melihat  pengaruh  mana  antara  taraf  yang digunakan  yang  memberikan  pengaruh terhadap  perubahan  struktur  darah  ikan patin,  maka  akan  dilanjutkan  analisis  nya menggunakan uji lanjut LSD.
3.  HASIL DAN PEMBAHASAN Struktur Darah Ikan Patin
( P.hypophthalmus )
Darah merupakan salah satu indikator dalam menentukan  status  kesehatan      ikan. Darah  memiliki  peran  yang  sangat  penting dalam tubuh dalam tubuh ikan, sebagai alat transport  oksigen  di  mana  oksigen  penting bagi  ikan,  karena  ikan  memperoleh  gas vital ini secara langsung dari via insang [3]. Maka  dari  itu  pengamatan  struktur  darah ikan  patin  yang  dipelihara  dengan  sistem bioflok dan manipulasi fotoperiod dilakukan  untuk  mengetahui  bagaimana darah  berpengaruh  langsung  terhadap kesehatan ikan.
Struktur  darah  ikan  patin  yang diamati  pada  penelitian  adalah  jumlah eritrosit,  leukosit,  kadar  hematokrit,  kadar leukokrit  dan  jenis-jenis  leukosit  (basofil, eosinofil,  limfosit,  trombosit,  monosit  dan neutrofil) Hasil yang didapat dari penelitian ikan yang dipelihara dengan sistem bioflok dan  manipulasi  fotoperiod  yaitu  24  jam gelap,  18  jam  gelap  dan  natural  dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Parameter Darah Ikan Patin ( P. hypophthalmus )

## Perhitungan Eritrosit
Eritrosit  merupakan  sel  darah  yang memiliki jumlah paling banyak dibandingkan  dengan  sel  lainnya,  dalam keadaan  normal  dapat  mencapai  hampir separuh dari volume darah. Jumlah eritrosit yang  dipelihara  dengan  sistem  bioflok  dan manipulasi fotoperiod selama pemeliharaan berkisar 1.681.111-2.647.777 sel/mm 3
jumlah  eritrosit  tersebut  masih  dalam kondisi normal.

## Perhitungan Leukosit
Leukosit  merupakan  unit  sistem pertahanan  tubuh  paling  aktif,  dan  beredar di  dalam  sirkulasi  darah  dalam  berbagai tipe. Jumlah leukosit lebih sedikit dibandingkan  dengan  sel  darah  merah. Jumlah  leukosit  yang  dipelihara  dengan sistem  bioflok  dan  manipulasi  fotoperiod selama  pemeliharaan  berkisar  54.402- 55.655 sel/mm 3 . Persentase leukosit tersebut  menunjukkan  bahwa  jumlah  sel darah putih pada ikan dalam keadaan baik.

## Perhitungan Hematokrit dan Leukokrit
Hematokrit  merupakan  persentase volume eritrosit dalam darah ikan. Menurut [4].  Hematokrit  erat  kaitannya  dengan  sel darah merah. Nilai hematokrit yang rendah akan  menyebabkan  rendahnya  kadar  sel darah  merah  pada  ikan  sehingga  dapat menentukan  kondisi  kesehatan  ikan  patin [5].  Kadar  hematokrit  yang  dipelihara dengan  sistem  bioflok  dan  manipulasi fotoperiod  selama  pemeliharaan  berkisar 20,33%-38,11%. Persentase hematokrit tubuh  ikan  patin  sehat  selama  masa pemeliharaan baik yang diperlakuan bioflok maupun tanpa bioflok.
Kadar leukokrit merupakan persentase sel darah putih pada darah ikan. Kadar  leukokrit  yang  dipelihara  dengan sistem  bioflok  dan  manipulasi  fotoperiod selama  pemeliharaan  berkisar  1,26-2,10%. Persentase  leukokrit tubuh  ikan  patin  sehat selama  masa  pemeliharaan  baik  yang diperlakuan  bioflok  maupun  tanpa  bioflok.
Pada  perlakuan  sistem  bioflok  maupun tanpa  sistem  bioflok  itu  tidak  ada organisme yang memicu leukokrit bertambah  banyak.  Jumlah  kadar  leukokrit ikan tersebut yang dipelihara dengan sistem bioflok  dan  tanpa  sistem  bioflok  dalam keadaan  yang  normal,  baik  pada  perlakuan fotoperiod  maupun  perlakuan  bioflok  tidak mempengaruhi  jumlah  leukokrit  yang menandakan  bahwa  tidak  ada  infeksi  pada ikan  di  semua  perlakuan.  Hal  tersebut menunjukkan  ikan  dalam  kondisi  yang sehat dengan fisiologi ikan yang baik.
Leukosit atau sel darah putih merupakan  komponen  sel  darah  yang mengandung inti. leukosit berperan penting dalam  pertahanan  tubuh  dari  infeksi patogen.  Leukosit  pada  ikan  dibedakan menjadi  dua  macam  berdasarkan  ada  atau tidaknya  butir-butir  (granula)  di  dalam  sel yaitu granulosit dan agranulosit. Granulosit terdiri  atas  neutrofil,  eosinofil  dan  basofil. Sedangkan  agranulosit  terdiri  dari  monosit dan limfosit. Nilai persentase limfosit yang dipelihara  dengan  sistem  bioflok  dan manipulasi  fotoperiod  berkisar  antara 26,67-73,80%. Hasil pengamatan
memperoleh  jumlah  neutrofil  berkisar antara  0,00-9,10%, monosit berkisar antara 15,87-30,23%,  basofil  yang  didapatkan pada penelitian berkisar antara 0,10-3,88%, eosinofil  0-3,63%,  trombosit  1-48,86%. Diketahui  bahwa  perlakuan  bioflok  dan fotoperiod  tidak  mempengaruhi  struktur darah  putih  ikan P.  hypopthalmus secara umum.
Setiap kelompok ikan yang dipelihara dengan manipulasi fotoperiod tidak menunjukkan  perbedaan  gambaran  darah yang signifikan atau rata-rata menunjukkan nilai yang hampir sama.  Limfosit, monosit, neutrofil,  eosinofil,  basofil,  dan  trombosit pada ikan dari semua perlakuan menunjukkan  bahwa  ikan  tampak  sehat dengan  menunjukkan  tingkah  laku  yang berenang aktif dan aktif dalam menghampiri makanan.

## Perhitungan Jenis – Jenis Leukosit
Pemeriksaan  jenis-jenis  leukosit  juga dilakukan  pada  penelitian  ini,  bertujuan untuk  mengetahui  jumlah  dan  jenis-jenis leukosit  di  dalam  darah  ikan,  memberikan petunjuk kesehatan ikan dan dapat
membantu  menentukan  ke  abnormalan pada tubuh ikan.
Hasil pengamatan jenis-jenis
leukokrit  menunjukkan  bahwa  komponen sel darah putih P. hypopthalmus terdiri dari basofil,  eosinofil,  limfosit,  trombosit, monosit  dan  neutrofil.  Persentase  jenis leukosit  dapat  dijadikan  petunjuk  keadaan fisiologi ikan. Hasil pengamatan jenis-jenis leukosit  lebih  jelasnya  dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2. Diferensiasi Leukosit Ikan Patin ( P.hypophthalmus )
Gambar 2. Jenis – Jenis Leukosit

## 4.      KESIMPULAN DAN SARAN
Data  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa  sistem  bioflok  dengan  manipulasi fotoperiod  tidak  berpengaruh  pada  struktur darah ikan ikan patin. Jumlah eritrosit ikan dari  semua  perlakuan  masih  dalam  kisaran normal, berkisar antara 1.681.111- 2.647.777 sel/mm 3 , jumlah leukosit 54.402-
55.655  sel/mm 3 .  kadar  hematokrit  20,33%- 38,11% dan leukokrit 1,26-2,10%, menunjukkan  bahwa  ikan  normal.  Proporsi setiap  jenis  leukosit  juga  menunjukkan bahwa ikan sehat yaitu  basofil 0,10-3,88%, eosinofil  0-3,63%,  limfosit  26,64-73,80%, trombosit 1-48,86%, monosit 15,87- 30,23%, dan neutrofil 0,00-9,10%.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Sunarma,  A.  (2007).  Panduan  singkat  teknik  pembenihan  ikan  patin Pangasius hypophthalmus .  Balai Besar Perikanan Budidaya Air Tawar Sukabumi.
2. Suprapto, Samtafsir SL. (2013). Biofloc 165 Rahasia Sukses Teknologi Budidaya Lele . Depok: AGRO 165.
3. Najiah,  M.,  Nadirah  M.,  Marina  H.,  Lee,  S.  W.,  Nazaha  W.H.  (2008).  Quantitative comparisons  of  erythrocyte  morphology  in  healthy  freshwater  fish  species  from Malaysia. Res. J. of Fisheries and Hydrobiology, 3(1): 32-35
4. Prasetio,  E.,  Fakhrudin,  M.,  Hasan,  H.  (2017).  Pengaruh  Serbuk  Lidah  Buaya  ( Aloe vera )  Terhadap  Hematologi  Ikan  Jelawat  ( Leptobarbus  hoevenii )  yang  Diuji  Tantang Bakteri Aeromonas hydrophila. Jurnal Ruaya , 5(2): 44-54.
5. Riantono,  F.,  Kismiyati,  L.  Sulmartiwi.  (2016).  Perubahan  Hematologi  Ikan  Mas Komet  ( Carassius  auratus )  Akibat  Infestasi Argulus  japonicus Jantan  dan Argulus japonicus Betina. Journal of Aquaculture and Fish Health, 5(2): 49