ISSN: 1412-4718, eISSN: 2581-138x
Rahmadi, A. ∙ N. Wicaksana ∙ B. Nurhadi ∙ E. Suminar ∙ S.R.T. Pakki ∙ S. Mubarok
Optimasi teknik sterilisasi dan induksi tunas tanaman durian ( Durio zibethinus Murr) ‘Kamajaya’ lokal Cimahi Secara in vitro
Sari. Durian ‘Kamajaya’ merupakan salah satu jenis durian lokal yang keberadaanya hampir punah sehingga perlu dilakukan konservasi, salah satunya yaitu dengan perbanyakan menggunakan kultur jaringan. Permasalahan yang muncul dalam kultur jaringan durian ini salah satunya adalah metode sterilisasi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  memperoleh  metode  sterilisasi  yang  tepat  untuk perbanyakan tanaman durian ‘Kamajaya’ secara in vitro . Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Teknologi Benih, Fakultas Pertanian, Universitas Padjadjaran, sejak bulan Mei sampai September tahun 2019. Eksplan yang digunakan adalah tunas muda dari tanaman durian ‘Kamajaya’ yang  berasal  dari  Cimahi.  Sterilisasi  untuk  inisiasi  dengan  teknik  kultur  jaringan  menggunakan kombinasi  air  mengalir,  detergen,  fungisida,  bakterisida,  alkohol  70%,  antiseptik  PCMX  10%, surfaktan polysorbate 3 tetes per liter, antiseptik povidone-iodine, clorox (10% dan 20%)  dan HgCl 2 0,1%.  Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  Sterilisasi  tunas  muda  durian  ‘Kamajaya’  dengan menggunakan  air  mengalir,  perendaman  dalam  detergen  selama  10  menit,  perendaman  dalam fungisida  selama  10  menit,  perendaman  dalam  clorox  20%  +  surfaktan  polysorbate  3  tetes  per  L selama  20  menit,  perendaman  dalam  clorox  10%  selama  10  menit,  serta  perendaman  dalam  HgCl 2 0,1%  selama  1  menit  memiliki  presentase  kontaminasi  terendah  yaitu  20  %  dan  presentasi  hidup tertinggi yaitu 80 %.
Kata kunci: Durian ‘Kamajaya’ ∙ Kultur jaringan ∙ Sterilisasi
Optimization of sterilization techniques and shoot induction of durian ( Durio zibethinus ) ‘Kamajaya’ originated from Cimahi by in vitro technique
Abstract. Durian 'Kamajaya' is a type of local durian that is almost extinct. Tissue culture is one of the methods  that  can  be  used  as  a  plant  conservation.  However,  many  problems  arise  in  Durian  tissue culture,  one  of  which  is  the  sterilization  method.  The  objective  of  this  study  was  to  obtain  an appropriate in vitro sterilization method for the multiplication of Durian 'Kamajaya'. The research was conducted at the Laboratory of Tissue Culture, Faculty of Agriculture, Padjadjaran University, from May  to  September  2019.  The  durian  buds  were  used  as  plant  explant  sterilized  for  initiation  with tissue culture techniques using different sterilization methods as following running water, detergent, fungicides    ,  bactericide,  alcohol  70%  ,  PCMX  antiseptic  10%,  polysorbate  surfactant  3  drops  per  L, clorox (10% and 20%), and  HgCl 2 0.1%. The results showed that the sterilization of Durian 'Kamajaya' using water flow + soaking in detergent for 10 minutes +  fungicide for 10 minutes + Clorox 20% and polysorbate surfactant 3 drops per L for 20 minutes + Clorox 10% for 10  minutes + HgCl 2 0.1% for 1 minute gave the lowest percentage of contamination (20%) and the highest life presentation(80%).
Keywords: Durian 'Kamajaya' ∙ Tissue culture ∙ Sterilization
Diterima : 19 November 2019, Disetujui : 28 Maret 2020, Dipublikasikan : 31 Maret 2020 doi: https://doi.org/10.24198/kultivasi.v19i1.24559
Rahmadi, A. 1 ∙ N. Wicaksana 2 ∙ B. Nurhadi 3 ∙ E. Suminar 2 ∙ S.R.T. Pakki 4 ∙ S. Mubarok 2 1 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Sunan Gunung Djati 2 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Padjadjaran 3 Departemen Teknologi Industri Pangan, Fakultas Teknologi Industri Pertanian, Universitas Padjadjaran 4 Dinas Pangan dan Pertanian, Kota Cimahi Korespondensi: syariful.mubarok@unpad.ac.id

## Pendahuluan
Wilayah  Asia  Tenggara  khususnya  Indonesia kaya  akan  keanekaragaman  spesies  buah  tropis yang  sangat  penting  untuk  kesejahteraan populasi  di  wilayah  tersebut,  diantaranya adalah  buah  durian  (Anupunt et  a l.,  2003). Durian  memiliki  prospek  yang  bagus  karena pemasaran  buah  durian  dari  tahun  ke  tahun terus  mengalami  peningkatan  permintaan karena  memiliki  nilai  ekonomis  yang  tinggi (Sugiyarto  dan  Kuswandi,  2013).  Buah  ini memiliki potensi untuk dikembangkan, khususnya  bagi  durian  lokal  unggul  yang sekarang mulai langka (Supangkat et al ., 2005). Berdasarkan  data  BPS  tahun  2013  –  2017, produksi  durian  lokal  Indonesia  berfluktuatif dari  tahun  2013  sebesar  759.005  ton,  kemudian meningkat pada tahun 2014 menjadi 859.118 ton dan  pada  tahun  2015  mengalami  peningkatan pesat  menjadi  995.729  ton.  Produksi  mengalami penurunan pada tahun 2016 menjadi 735.419 ton dan tahun 2017 sebesar 795.200 ton. (BPS, 2017). Neraca  perdagangan  buah  durian  lokal Indonesia  pada  tahun  2018  menjadi  surplus sedangkan  ekspor  durian  tercatat  1.087  ton sementara  impor  351  ton  sehingga  surplus  700 ton  (Kementan,  2019).  Jumlah  tersebut  dapat ditingkatkan  mengingat  permintaan  akan  buah durian terus meningkat, akan tetapi produksinya  belum  memenuhi  kebutuhan (Supangkat et al ., 2005).
Salah  satu  durian  lokal  unggul  yang dibudidayakan  di  Indonesia,  khususnya  Jawa Barat, adalah buah durian Kamajaya asal Cimahi yang memiliki tingkat kemanisan tinggi dengan kadar  gula  total  15,27  %,  biji  dengan  ukuran kecil,  dan  daging  buahnya  tebal.  Durian Kamajaya  memiliki  keunggulan  dibandingkan durian  Petruk  yang  memiliki  kadar  gula  total 7,96  %.  Keunggulan  utama  terdapat  pada kandungan  nutrisi  pada  buah  durian  tersebut, sehingga memiliki potensi  untuk dikomersilkan dan  dijadikan  buah  khas  Kota  Cimahi (DIKPLHD Kota Cimahi, 2019).
Tanaman  durian  dapat  diperbanyak dengan  cara  generatif  (biji)  atau  vegetatif (okulasi  maupun  sambung  pucuk)  (Ding et  al ., 2015). Perbanyakan tanaman secara konvensional  seringkali  tidak  efektif  karena dapat  merusak  pohon  induk.  Oleh  karena  itu, cara  yang  terbaik  untuk  memperbanyak tanaman  durian  dapat  dilakukan  dengan  cara lain,  yaitu  dengan  kultur  jaringan,  untuk
konservasi  plasma  nutfah  buah-buahan  lokal khususnya  durian  lokal  Cimahi  yang  sudah mulai  langka  (Kusumawati et  al .,  2018).  Durian Kamajaya  selama  ini  hanya  diperbanyak menggunakan  pengambilan  entres  dan  okulasi. Perbanyakan menggunakan biji jarang dilakukan  karena  pohon  durian  varietas  ini jarang  berbuah  dan  tersisa  satu-satunya  telah berusia kurang lebih 120 tahun. (DIKPLHD Kota Cimahi, 2019).
Perbanyakan  tanaman  durian  melalui kultur  jaringan  belum  banyak  dilaporkan. Namun demikian, ada beberapa penelitian yang telah  dilakukan  dengan  menggunakan  tunas, daun,  dan  bunga  durian  sebagai  eksplan.  Tapi pada  kenyataannya  bahwa  pertumbuhan tanaman  durian  secara in  vitro masih  belum memuaskan, jika dilihat dari presentase eksplan yang  menjadi  tanaman  utuh  atau  planlet. Hasilnya hanya sebatas pada optimasi sterilisasi, inisiasi  kalus,  dan  embriogenik  kalus.  Sampai saat  ini  perbanyakan  tanaman  durian  secara in vitro masih belum mencapai kemajuan.
Salah  satu  masalah  yang  sering  muncul adalah  tingkat  keberhasilan  sterilisasi  eksplan sehingga  harus  menemukan  cara  sterilisasi eksplan  yang  baik  dan  benar  serta  masalah induksi  tunas  sehingga  harus  mencari  media yang  tepat  untuk  penanaman  tersebut.  Ini merupakan  langkah  awal  dalam  perbanyakan tanaman  durian  dan  penyelamatan  plasma nutfah  durian  Kamajaya  dalam  membantu meningkatkan  potensi  varietas  lokal  durian  ini, khususnya  Cimahi  dan  umumnya  komoditas hortikultura di Indonesia.
Salah  satu  penentu  keberhasilan  dalam kultur  jaringan  adalah  sterilisasi  bahan,  alat, maupun  eksplan.  Menurut  Gunawan  (1988), keberhasilan  metode  kultur  jaringan  sangat tergantung  pada  media  yang  digunakan  dan eksplan  yang  digunakan,  karena  tanaman mempunyai  tingkat  kontaminasi  yang  berbeda dari setiap jenis tanaman, bagian tanaman yang digunakan,  umur  tanaman,  musim  waktu pengambilan  eksplan,  dan  kondisi  tanaman  itu sendiri.
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui metode  sterilisasi  tunas  durian  terbaik  dengan menggunakan  beberapa  macam  sterilan.  Pene- litian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  metode sterilisasi  untuk  tunas  pada  tanaman  durian ( Durio  zibenthinus Murr)  Kamajaya  secara in vitro.
ISSN: 1412-4718, eISSN: 2581-138x

## Bahan dan Metode
Penelitian  ini  telah  dilakukan  di  Laboratorium Kultur  Jaringan  Tanaman,  Fakultas  Pertanian, Universitas  Padjadjaran  Jatinangor  dari  bulan Mei  sampai  September  2019.  Bahan  yang digunakan  adalah  tunas  muda  durian  varietas lokal  asal  Cimahi  yaitu  varietas  ‘Kamajaya’, fungisida (Dithane ® M-45), bakterisida (Agrept ® 20  WP),  antiseptik  PCMX  (Dettol ® ),  surfaktan polysorbate  (Tween ® 80),  clorox,  HgCl 2 ,  dan antiseptik povidone-iodine (Betadine ® ).
Penelitian  ini  menggunakan  metode deskriptif  eksplanatif  untuk  menggambarkan dan  menjelaskan  bagaimana  kontaminasi  tunas setelah  diberi  perlakuan  sterilan.  Tunas disterilisasi  menggunakan  beberapa  perlakuan yaitu:
s 0 =  air  mengalir,  detergen  selama  30  menit, fungisida    +  bakterisida    selama  60  menit, alkohol 70% selama 5  menit, antiseptik PCMX 20%  +  surfaktan  polysorbate  3  tetes  per  L selama  10  menit,  antiseptik  PCMX  10%  + surfaktan  polysorbate  3  tetes  per  L  selama  5 menit, dan antiseptik povidone-iodine 10 menit s 1 = air mengalir, detergen 10 menit, fungisida 10 menit,  clorox  20%  +  surfaktan  polysorbate  3 tetes  per  L  selama  20  menit,  clorox  10% selama  10  menit,  dan  alkohol  75%  selama  5 menit
s 2 =  air  mengalir,  detergen  selama  10  menit, fungisida  selama  10  menit,  clorox  20%  + surfaktan  polysorbate  3  tetes  selama  20 menit,  clorox  10%  selama  10  menit,  dan merkuri klorida (HgCl 2 ) 0,1% selama 1 menit s 3 =  air  mengalir,  detergen  selama  15  menit, fungisida  +  bakterisida  selama  30  menit, alkohol  70%  selama  5  menit,  clorox  20%  + surfaktan polysorbate 3 tetes per L selama 20 menit, clorox 10% selama 10 menit, antiseptik PCMX  20%  +  surfaktan  polysorbate  3  tetes selama 10 menit.
s 4 =  air  mengalir,  detergen  selama  20  menit, fungisida    selama  60  menit,  clorox  20%  + surfaktan  polysorbate  3  tetes  per  L  selama 10menit,  clorox  10%  selama  20  menit,  dan antiseptik povidone-iodine selama 10 menit. s 5 =  air  mengalir,  detergen  selama  25  menit, fungisida  selama  30  menit,  alkohol  70% selama  5  menit,  antiseptik  PCMX  10%  + surfaktan polysorbate 3 tetes per L selama 10 menit,  dan  antiseptik  povidone-iodine selama 10 menit.
s 6 =  air  mengalir,  detergen  selama  30  menit, fungisida  +  bakterisida    selama  60  menit, alkohol  70%  selama  10  menit,  antiseptik PCMX  20%  +  surfaktan  polysorbate  3  tetes per L selama 10 menit, antiseptik PCMX 10% +  surfaktan  polysorbate  3  tetes  selama  10 menit,  dan  antiseptik  povidone-iodine selama 10 menit.
Perlakuan s0 merupakan perlakuan kontrol yang  dicoba  sebelumnya  oleh  Kusuma et  al ., (2016).
Setelah  eksplan  disterilisasi,  eksplan durian  lalu  ditanam  di  dalam  media  MS. Penanaman  dilakukan  di  ruangan laminar  air flow (LAF).  Eksplan  durian  yang  steril  diambil dari tunas lalu dipotong kecil-kecil hingga 1 cm lalu ditanam dalam botol-botol steril yang berisi medium.  Setelah  itu,  botol  ditutup  dengan plastik  atau  aluminium  foil  dan  diikat  dengan karet  gelang  lalu  disimpan  di  rak-rak  kultur dengan  suhu  rata-rata  20  -  27  C,  kelembaban rata-rata  80%  dan  lama  penyinaran  16  jam. Selama penyimpanan diamati persentase ekplan hidup,  persentase  ekplan  terkontaminasi,  dan waktu terkontaminasi setelah penanaman.
Semua  kegiatan  dilakukan  secara  aseptik, baik  bahan  maupun  alat  yang  digunakan. Sterilisasi alat-alat dilakukan dengan membersihkan atau mencuci alat-alat yang akan dipakai,  kemudian  semua  alat  tersebut  dioven pada  suhu  100 0 C  atau  lebih,  sedangkan  untuk media disterilisasikan dalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 15 menit. Untuk sterilisasi ruangan dilakukan  dengan  cara  membersihkan  ruangan laboratorium.

## Hasil dan Pembahasan
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  hanya  pada perlakuan S 2 dengan menggunakan air mengalir, perendaman  dalam  detergen  selama  10  menit, perendaman  dalam  fungisida  10  menit, perendaman  dalam  clorox  20%  +  surfaktan polysorbate  3  tetes  selama  20  menit, perendaman dalam clorox 10% selama 10 menit serta  perendaman  dalam  HgCl 2 0,1%  selama  1 menit memiliki presentase kontaminasi terendah yaitu  20  %  dan  presentasi  hidup  tertinggi  yaitu 80  %  dibandingkan  dengan  perlakuan  lain. Dalam  penelitian  ini  kontaminasi  eksplan diakibatkan karena kontaminasi yang diakibatkan oleh jamur dan bakteri (Gambar 1). Secara umum kontaminasi yang terjadi pada
( Durio zibethinus Murr) ‘Kamajaya’ lokal Cimahi cecara i n vitro
Gambar 1. Kontaminasi pada eksplan. A) kontaminasi jamur; B) kontaminasi bakteri dan C) eksplan tidak terkontaminasi.
Tabel 1. Pengaruh perlakuan sterilisasi tunas Durian ‘Kamajaya’ terhadap persentase kontaminasi dan ekplan hidup sampai 8 minggu setelah kultur.
Perlakuan Sterilisasi Kontaminasi (%) Eksplan Persentase Hidup pada Minggu Ke (%) Bakteri Jamur 1 2 3 4 5 6 7 8 S 0 0 100 80 60 40 0 x x x x S 1 0 100 40 0 x x x x x x S 2 0 20 100 100 100 80 80 80 80 80 S 3 0 100 40 0 x x x x x x S 4 0 100 20 0 x x x x x x S 5 20 100 0 x x x x x x x S 6 0 100 80 20 0 x x x x
x Keterangan : (x) eksplan tidak ada yang hidup.
kultur  jaringan  durian  Kamajaya  adalah diakibatkan oleh kontaminasi jamur, hanya 20% kultur  yang  terkontaminasi  oleh  bakteri  yaitu dari perlakuan S 5 (Tabel 1). Pada perlakuan sterilisasi dengan menggunakan  HgCl 2 0,1%  menunjukan  tingkat kontaminasi  yang  lebih  rendah  dibandingkan dengan  yang  tidak  menggunakan    HgCl 2 0,1%. Menurut Zulkarnain (2009), penggunaan   HgCl 2 telah  terbukti  efektif  untuk  sterilisasi  bahan tanaman  dari  yang  berasal  dari  lapangan. Penggunaan  HgCl 2 merupakan  bahan  terakhir yang  digunakan  apabila  bahan-bahan    lain ternyata  tidak  mampu  untuk  membunuh mikroorganisme seperti bakteri dan jamur yang menginfeksi  bahan  tanaman.  Penelitian  dengan menggunakan  HgCl 2 telah  dilaporkan  oleh Zulkarnain  (2009)  bahwa  dengan  HgCl 2 0,5% sebagai bahan sterilisasi eksplan nodus tanaman nangka  dengan  hasil  yang  maksimal  serta penggunaan  HgCl 2 0,05%  untuk  sterilisasi eksplan nodus tanaman lada dengan hasil yang baik.
Merkuri  klorida    bersifat  antiseptik  karena mampu  berkombinasi  dengan  protein  selular dan  mendenaturasikannya  (Sandra,  2013). Penggunaan  HgCl 2 membutuhkan  waktu  yang lebih  sedikit  karena  bersifat  racun  sedangkan
sterilisasi  menggunakan  bahan  HgCl 2 yang terlalu  lama  dapat  menyebabkan  kerusakan pada  eksplan  sehingga  eksplan  tidak  akan mampu  tumbuh  (Hendaryono  dan  Wijayani, 1994
Perlakuan  sterilisasi  S 2 yang  memiliki presentase kontaminasi terendah, yaitu 20% dan presentase  eksplan  hidup  tertinggi  yaitu  80% sampai  minggu  ke  8  dibandingkan  dengan perlakuan  lainnya,  sedangkan  perlakuan  S 2 kontaminasi terjadi oleh jamur pada minggu ke 4.  Perlakuan  sterilisasi  S 0 dari  penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Kusuma et al ., (2016),  yang  dijadikan  sebagai  kontrol  dalam penelitian  ini,  belum  mampu  mengatasi kontaminasi  yang  disebabkan  oleh  jamur dengan  persentase  kontaminasi  mencapai  100% berturut-turut  pada  minggu  ke  1,  2,  dan  4 mencapai 20%; serta minggu ke 3 mencapai 40%. Hal  ini  disebabkan  pada  penelitiannya menggunakan eksplan dari embrio durian serta dilakukan pada durian yang berbeda spesiesnya,  yaitu  dari  spesies Durio  kutejensis asal Kalimantan, dengan  keberhasilan  sterilisasi mencapai  96%  eksplan  hidup  (Kusuma et  al ., 2016).
Pada  perlakuan  S 1 dan  S 3 belum  mampu mengatasi  kontaminasi  yang  disebabkan  oleh
ISSN: 1412-4718, eISSN: 2581-138x
jamur,  dengan  kontaminasi  masing-masing mencapai  presentase  100%,  berturut-turut  pada minggu  ke  1  mencapai  60%  dan  minggu  ke  2 mencapai  40%.  Perlakuan  S 4 menghasilkan kontaminasi  dengan  presentase  100%,  berturut- turut  pada  minggu  ke  1  mencapai  80%  dan minggu  ke  2  mencapai  20%,  meskipun  terdapat perbedaan  pada  cara  sterilisasi  diantaranya  pada waktu  perendaman dan penambahan  konsentrasi pada  eksplan  dengan  menggunakan  detergen, fungisida, bakterisida, surfaktan, clorox, antiseptik PCMX dan antiseptik povidone-iodine. Perlakuan S 5 belum  mampu  mengatasi  kontaminasi  yang disebabkan  oleh  jamur,  dengan  persentase kontaminasi mencapai 80%  dan  bakteri  mencapai 20%  pada  minggu  1.  Perlakuan  S 6 belum  mampu mengatasi  kontaminasi  yang  disebabkan  oleh jamur  dengan  kontaminasi  masing-masing mencapai  presentase  100  %,  berturut-turut  pada minggu ke 1 dan 2 mencapai 40% dan minggu ke 3 mencapai 20%.
Kontaminasi  disebabkan  oleh  jamur yang  ditandai  oleh  hifa-hifa  berwarna  putih keabu-abuan  menyerang  bagian  pangkal  atas eksplan  tunas  muda  durian  (Gambar  1A). Gambar  1B    memperlihatkan  kontaminasi disebabkan  oleh  bakteri  yang  ditandai  dengan munculnya  cairan  berupa  lendir  lengket berwarna putih kekuningan pada bagian bawah pangkal  eksplan  tunas  muda  durian  dan kemudian  menyebar  di  permukaan  media, sedangkan gambar 1C memperlihatkan eksplan tidak mengalami terkontaminasi.
Gejala-gejala  terjadinya  kontaminasi  yang disebabkan  oleh  fungi  ditandai  dengan  koloni- koloni  jamur  yang  dapat  menyebabkan  media tanam  eksplan  berwarna  putih,  abu-abu,  hijau, merah  muda  maupun  hitam.  Selain  itu, kontaminasi  ditandai  dengan  munculnya  cairan berwarna putih kekuningan yang disebabkan oleh bakteri.  Jumlah  kontaminasi  pada  percobaan  ini disebabkan  oleh  bakteri  dengan  presentase  3% dan  oleh  jamur  dengan  presentase  hampir  85%. Jamur dapat muncul pada eksplan atau dari spora yang  ada  di  udara.  jamur  ini  dikenali  dengan struktur berhifa dengan warna bervariasi (Mastuti, 2017).
Kontaminasi  yang  disebabkan  oleh  bakteri akan  menyebabkan  eksplan  tanaman  menjadi basah  karena  adanya  cairan  berupa  lendir sedangkan kontaminasi jamur eksplan tanaman akan  lebih  kering  dan  akan  muncul  hifa  jamur pada  tanaman  yang  terserang  dan  biasanya dapat  dicirikan  dengan  garis-garis  seperti
benang  yang  berwarna  putih  sampai  abu-abu (Asni et al ., 2018).
Menurut Dwiyani (2015), sumber kontaminasi  dapat  berasal  secara  eksternal  dari lingkungan  kerja  yang  kurang  baik  sedangkan kontaminasi  internal  dari  jaringan  eksplan diakibatkan oleh prosedur sterilisasi permukaan eksplan  kurang  sempurna  sehingga  eksplan tidak terbebas dari mikroorganisme. Kontaminasi  internal  juga  bisa  bersifat endogenous  berada  di  dalam  jaringan  eksplan sehingga tidak dapat dihilangkan hanya dengan sterilisasi permukaan.

## Kesimpulan
Sterilisasi  tunas  muda  durian  Kamajaya  pada perlakuan  S 2 dengan  menggunakan  air mengalir,  perendaman  dalam  detergen  selama 10  menit,  perendaman  dalam  fungisida  selama 10  menit,    perendaman  dalam  clorox  20%  + surfaktan  poly-sorbate  3  tetes  per  L  selama  20 menit, perendaman dalam clorox 10% selama 10 menit,  serta  perendaman  dalam  HgCl 2 0,1% selama 1 menit memiliki presentase kontaminasi terendah  yaitu  20  %  dan  presentasi  hidup tertinggi yaitu 80 %.

## Daftar Pustaka
Anupunt,  P.,  Somsri,  S.,  Chaikiattiyos,  S., Kumcha,  U.  2003.  Native  tropical  asian fruits.Acta
Horticulturae. 620: 151–
159.https://doi.org/10.17660/ActaHortic.2 003.620.15
Asni  Setiani,  N.,  Nurwinda,  F.,  &  Astriany,  D. (2018).  Pengaruh  Desinfektan  dan  Lama Perendaman pada Sterilisasi Eksplan Daun Sukun  (Artocarpus  altilis  (Parkinson  ex. F.A  Zorn)  Fosberg). Biotropika  -  Journal  of Tropical  Biology , 6 (3),  78–82.  https://doi. org/10.21776/ ub.biotropika.2018.006.03.01 BPS.  2017.  Statistik  Tanaman  Buah-buahan  dan Sayuran  Tahunan.  Badan  Pusat  Statistik, 99.
DIKPLHD  Kota  Cimahi.  2019.  Buku  II  Laporan Utama.  Kementerian  Lingkungan  Hidup Dan Kehutanan. [internet]. [diunduh 18 Juli 2019]. Tersedia pada: https://cimahikota.go.id/ uploads/data/buku-1.pdf.
Ding,  T.,  Sutejo,  H.,  Patah,  A.  2015.  Pengaruh Berat  Benih  Dan  Media  Tanam  Terhadap
( Durio zibethinus Murr) ‘Kamajaya’ lokal Cimahi cecara i n vitro
Pertumbuhan Vegetatif Bibit Durian ( Durio zibethinus Murr) Agrifor , 2015, 14.2: 261-2 Dwiyani,  R.  2015. Kultur  Jaringan  Tanaman .
Denpasar:  Pelawa Sari.
Kementan.  (2019).  Ketua  YDN:  Kebijakan  Ekspor Amran  Sukses Angkat Pamor  Durian Lokal, Neraca  Perdagangan  Durian  Surplus. [internet].  [diunduh  18  Juli  2019].Tersedia pada:  Direktorat  Jenderal  Hortikultura Kementrian Pertanian website:http:// hortikultura.pertanian.go.id/?p=3708
Kusuma  R.,    Kustiawan  W.,  Sukartiningsih,
Ruchaemi  A.  2016.  Sterilization  Method  For In  Vitro  Propagation  Explant  Embryo  Of Durio  Kutejensis (Hassk.)  and  Becc  From Kalimantan. International Journal of Scientific and Technology Research. 5(10): 179-184.
Kusumawati,  A.,  Putri,  E,  N.,  Azhar,  O,  N.,  &
Swasti,  E.  (2018).  Karakterisasi  Plasma Nutfah  Buah  Lokal  Di  Kabupaten  Lima
Puluh  Kota  Dan  Kota  Solok. Jurnal Agrosains dan Teknologi , 3 (1). Mastuti,  R.  (2017). Dasar-Dasar  Kultur  Jaringan Tumbuhan . Malang: UB Press. Sandra,  E.  2013. Cara  Mudah  Memahami  dan Menguasai  Kultur  Jaringan  Skala  Rumah Tangga . Bogor: IPB Press.
Sugiyarto,  L.,  Kuswandi,  P.  C.  2013.  Eksplorasi Metode  Sterilisasi  dan  Macam  Media Untuk Perbanyakan Durian ( Durio zibethinus ,  L.)  Secara  In  Vitro.  Sains  Dasar. 2(1): 20–24.
Supangkat, G., Rineksane, I. A., Pamuji, K. 2005. Sterilisasi dan Induksi Daun Muda Durian ( Durio  zibethinus )  Dalam  Medium  MS Dengan  Penambahan  Kinetin  dan  IAA Secara In Vitro. Planta Tropika. 1: 34–38.
Zulkarnain. 2009. Kultur Jaringan Tanaman : Solusi Perbanyakan  Tanaman  Budi  Daya .  Jakarta: Bumi Aksara.