## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI FLAVONOID DARI
DAUN DEWANDARU ( Eugenia uniflora L.)

## ISOLATION AND IDENTIFICATION OF FLAVONOIDS FROM
DEWANDARU ( Eugenia uniflora L.) LEAF
Andi Suhendi * , Landyyun Rahmawan Sjahid, Dedi Hanwar Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta andfa@yahoo.com

## ABSTRAK
Dewandaru  ( Eugenia  uniflora L.)  secara  tradisional  digunakan  sebagai  penurun  panas  dan sakit perut. Penelitian membuktikan aktivitas biologis dewandaru sebagai antibakteri, antidiabetes, dan  antioksidan.  Senyawa  yang  diduga  bertanggungjawab  adalah  flavonoid.  Penelitian  ini dilakukan  untuk  mengetahui  jenis  senyawa  flavonoid  yang  terdapat  dalam  daun  dewandaru ( Eugenia  uniflora L.).  Ekstraksi  dilakukan  dua  tahap  yaitu  tahap  penghilangan  lemak  dengan metode sokletasi menggunakan pelarut kloroform dan tahap kedua maserasi dengan etanol 70%. Ekstrak  difraksinasi  dengan  etil  asetat  dan  air,  kemudian  fraksinya  diperiksa  dengan  KLT menggunakan  fase  gerak  asam  asetat  15%  dan  BAW.  Fraksi  etil  asetat  diisolasi  dengan  KLT preparatif. Bercak pita yang memiliki harga Rf dan warna yang sama dengan deteksi awal diambil dan  disari.  Kemudian  dianalisis  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis,  pereaksi  diagnostic NaOH, NaOAc, H 3 BO 3 , AlCl 3 , HCl, KLT dua dimensi, hidrolisis isolat fraksi etil asetat. Berdasarkan pergeseran  panjang  gelombang  spektra  UV-Vis  dengan  dan  tanpa  pereaksi      diagnostik  serta  uji KLT didapatkan struktur parsial yang diduga kuat 5,7,3’,4’-tetra hidroksi flavonol atau kuersetin.
Kata Kunci : dewandaru ( Eugenia uniflora L.), flavonoid, KLT, spektrofotometer UV-Vis.

## ABSTRACT
Dewandaru  ( Eugenia  uniflora L.)  traditionally  used  as  antipyretic  and  stomachache.  Based on  research  it  is  also  has  the  effect  as  antibacterial,  anti  diabetic,  and  antioxidant.  The  chemical compounds  which  responsible  are  flavonoids.  This  research  is  conducted  to  know  flavonoid compound  in  dewandaru  (Eugenia  uniflora  L.)  leaf.  Dewandaru  ( Eugenia  uniflora L.)  leaf  dust  be defatted by chloroform then be macerated by ethanol 70%. Extract thick in fractionation with ethyl acetate  and  water,  and  flavonoids  examined  using  TLC  by  acetic  acid  15%  and  BAW  as  mobile phase. An ethyl acetate fraction was separated in BAW with Rf  0.75 is yellow gloomy fluorescence under  UV 366 nm  before  steam  of  ammonia  and  become  yellow  after  steam  of  ammonia  was selected. Ethyl acetate fraction isolated with preparative thin layer chromatography. Spot have the same  value  of  Rf  and  colour  with  early  detection  taken.  The  spot  dissolved  by  methanol  and analyzed with two dimensional TLC and determined by spectrophotometer and diagnostic reagent NaOH,  NaOAc,  H 3 BO 3 ,  AlCl 3 ,  dan  HCl.  Based  on  spectra  profile  with  and  without  diagnostic reagent and TLC assay the partial structure of isolate is strongly suspected 5,7,3’,4’-tetra hydroxyl flavonol or quercetin.
Key Word : dewandaru ( Eugenia uniflora L.), flavonoids, TLC, UV-Vis spectrophotometer.

## PENDAHULUAN
Daun  dan  buah  dewandaru  secara empiris digunakan sebagai obat penurun panas dan  sakit  perut  (Morton,  1987).  Aktivitas biologis  ekstrak  dewandaru  diantaranya  adalah antibakteri  (Khotimah,  2004)  dan    antioksidan (Einbond et  al ,  2004).  Daun  dewandaru  dapat berfungsi  sebagai  antiradikal  yang  disebabkan karena  adanya  senyawa  flavonoid  (Reynertson and  Kennelly,  2001;  Utami,  dkk.,  2005). Kandungan  kimia  dewandaru  adalah  saponin, tannin, vitamin C, senyawa atsiri seperti sineol, sitronela, sesquiterpen, flavonoid, dan
antosianin (Einbond et al ,   2004; Hutapea, 91). Kandungan  yang  lebih  spesifik  adalah  miristin, kuersetin  (Schmeda-Hirschmann et  al ,  1987; Haron et al , 1992) dan kaemferol (Haron et al. , 1992)
Isolasi  dilakukan  untuk  mendapatkan isolat-isolat  suatu  senyawa  atau  sehingga dapat mempermudah untuk melakukan identifikasi  senyawa-senyawa  yang  terdapat dalam  simplisia.  Identifikasi  terhadap  isolate diperlukan  untuk  mengetahui  jenis  senyawa flavonoid.
METODE PENELITIAN Alat  : perangkat  penyari  soxhlet, heating mantel, vacuum  dryer,  rotary  evaporator (Hunderbolt  co.),  corong  buchner,  cawan porselen,  perangkat  KLT,  spektrofotometer  UV mini 1240 Shimadzu (Shimadzu co.), mini spin, corong pisah, alat-alat gelas.
Bahan : serbuk daun dewandaru, kloroform p.a (E.  Merck),  etanol  70  %  p.a  (Bratachem), metanol  p.a  (E.  Merck), aquadest ,  pereaksi sitroborat,  etil  asetat  p.a  (E.  Merck),  asam asetat  15% v / v p.a.  (E.  Merck),  BAW  (Butanol- Asam  asetat-Air,  4:1:5  lapisan  atas),  uap ammonia, natrium  asetat  (NaOAc)  p.a  (Merck), natrium  hidroksida  (NaOH)  2N,  alumunium klorida  (AlCl 3 )  p.a.  (Sigma  co.),  asam  klorida (HCl)  2N,  asam  borat  (H 3 BO 3 )  p.a  (E.  Merck), kertas saring, alumunium foil, tabung effendorf.

## Jalan Penelitian
Sebanyak  50  gram  serbuk  daun dewandaru ditimbang, diawalemakkan menggunakan  alat  soxhlet  dengan  penyari kloroform  paling  sedikit  2x  sirkulasi  dan ditambah  batu  didih  untuk  meratakan  panas. Penyarian  dilakukan  hingga  penyari  yang terkumpul  di  tampungan  (sifon)  tidak  berwarna lagi. Serbuk diambil dan dikeringkan.
Serbuk  dimaserasi  dengan  etanol  70%  selama 3 hari dan dilakukan remaserasi hingga penyari jernih.  Ekstrak  disaring  dan  diuapkan  dengan rotary  evaporator dan vacuum  dryer hingga menjadi kental.
Ekstrak  kental  ditambah  15  mL  air  dan dipartisi  dengan  15  mL  etil  asetat.  Fraksi dilakukan  beberapa  kali,  fraksi  air  dan  etil asetat  dipisahkan  dan  dikumpulkan  menjadi satu.
Masing-masing fraksi ditotolkan pada plat KLT  fase  diam  selulosa  dan  dielusi  dengan asam  asetat  15% v / v dan  BAW  (Butanol:Asam asetat  glasial:Air,  4:1:5  lapisan  atas).  Fase gerak  yang  baik  untuk  pemisahan  flavonoid digunakan  untuk  langkah  berikutnya.  Deteksi awal  adanya  flavonoid  dilakukan  di  bawah UV 366 nm  sebelum  dan  sesudah  diuapi ammonia.  Setelah  uap  ammonia  hilang, kemudian disemprot dengan pereaksi sitroborat dan  dipanaskan  pada  110 o C  selama  5  menit, dilihat dibawah UV 366 nm.
Fraksi  yang  terdeteksi  bercak  flavonoid dilanjutkan isolasi dengan KLT  preparatif, yaitu KLT yang penotolannya berbentuk pita, dengan fase  gerak  BAW.  Bercak  yang  berfluoresensi kuning  redup  pada  UV 366 nm dan  berwarna kuning saat diuapi ammonia, dikerok, dikumpulkan  kemudian  diekstraksi  dengan pelarut metanol. Kemudian disentrifugasi dengan  3500  rpm  selama  10  menit  untuk memisahkan isolat dengan serbuk selulosa.
Kemurnian isolat flavonoid yang diperoleh, diperiksa menggunakan kromatografi lapis  tipis  dua  dimensi.  Isolat  ditotolkan  pada salah  satu  ujung  plat  KLT  fase  diam  selulosa dengan  jarak  elusi  10x10  cm  dan  dielusi dengan  fase  gerak  asam  asetat  15%  dan dilanjutkan dengan BAW (4:1:5 v / v lapisan atas). Adanya  bercak  tunggal  menunjukkan  bahwa isolat telah murni.
Identifikasi  Isolat  Flavonoid (Mabry et  al , 1970; Markham, 1988)

## Tahap I
Larutan  isolat  dalam  metanol  dituang  ke  kuvet (2-3  ml  larutan  sampel)  direkam  spektranya pada λ 200-500 nm.
Tahap II :
Larutan  isolat  dalam  metanol  ditambah  3  tetes larutan NaOH 2N, dicampur, direkam spektranya. Setelah 5 menit dilakukan perekaman kembali untuk mengetahui kemungkinan terjadinya dekomposisi flavonoid. Tahap III :
Larutan isolat flavonoid dalam metanol ditambah  3  tetes  AlCl 3 ,  dicampur,  direkam spektranya.
Tahap IV : Larutan  tahap  III  ditambah  3  tetes  HCl, dicampur, direkam spektranya.
Tahap V :
Larutan isolat dalam metanol ditambah NaOAc, dicampur, direkam spektranya.
Tahap VI : Larutan tahap V ditambah asam borat (H 3 BO 3 ), dicampur, direkam spektranya.
Larutan  isolat  dalam  metanol  diuapkan hingga volume 2 ml dan dihidrolisis dengan HCl 2N,  direfluks  pada  suhu  100 o C  selama  1  jam. Setelah  dingin,  difraksinasi  dengan  etil  asetat. Hasil  fraksinasi  diuapkan,  dilarutkan  dalam metanol  dan  digunakan  untuk  uji  aglikon dengan  ditotolkan  pada  plat  KLT  fase  diam selulosa  dan  dilakukan  kromatografi  dengan fase  gerak  BAW  disamping  larutan  isolat  yang belum dihidrolisis. Selanjutnya bercak dideteksi menggunakan UV 366 nm sebelum dan sesudah diuapi ammonia (Markham, 1988).
Data berupa Rf, warna bercak kromatografi  lapis  tipis  dan  spektra  pergeseran panjang  gelombang  dengan  spektrofotometer UV-Vis dianalisis berdasarkan pustaka acuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  isolasi  suatu  senyawa  tertentu dipengaruhi  oleh  tahap  ekstraksi.  Ekstrak  yang dihasilkan dari proses awal harus menghasilkan kelompok  senyawa  yang  dituju,  dalam  hal  ini senyawa-senyawa  polar.  Oleh  Karena  itu proses  ekstraksi  dilakukan  dua  tahap  yaitu penghilangan  senyawa  yang  tidak  diharapkan
adalah  senyawa  non  polar,  eliminasi  dilakukan dengan sokletasi menggunakan pelarut kloroform. Tahap kedua ekstraksi yang ditujukan  untuk  mengambil  senyawa  polar dengan  optimal  dan  etanol  70%  merupakan pelarut  yang  polar  akan  menyari  dengan  baik senyawa yang diharapkan.
Fraksinasi  merupakan  tahap  kedua dalam proses isolasi. Fraksinasi yang
sederhana  dan  mudah  adalah  metode  partisi. Pelarut  etil  asetat  digunakan  untuk  menarik senyawa flavonoid semi polar dan air digunakan  untuk  menarik  senyawa  polar.  Uji kualitatif  terhadap  fraksi  menunjukkan  bahwa fraksi air tidak terdeteksi flavonoid dan fraksi etil asetat  mengandung  flavonoid  yang  ditandai dengan  adanya  spot  kuning  redup  yang brfluoresensi kuning lemah (Gambar 1).
UV 366 nm NH 4 OH + UV 366 nm
Keterangan : A : Fraksi Air B : Fraksi Etil Asetat
Fg : As.Aset 15%
Fg : BAW Fg : As.Aset 15% Fg : BAW
Gambar1 - Kromatogram Uji Kualitatif
Berdasarkan  Gambar  1,  didapatkan pemisahan  yang  baik  dengan  fase  gerak  BAW (4:1:5 lapisan atas). Hal ini terlihat dari Rf hasil pemisahan  flavonoid  dengan  fase  gerak  BAW
(Rf  0,75)  lebih  tinggi  dibandingkan  pemisahan dengan  fase  gerak  asam  asetat  15%  (Rf 0,125).

## Gambar2- Kromatogram Preparatif Setelah Diuapi Ammonia
Hasil  elusi  fraksi  etil  asetat  denganKLT preparatif didapatkan dua bercak yang memiliki flavonoid  positif  Rf  0,75  dan  Rf  0,625  (Gambar 2).  Intensitas  warna  yang  lebih  kuat  adalah bercak  dengan  Rf  0,75,  sehingga  bercak  ini dilanjutkan  untuk  proses  berikutnya.  Bercak pada  Rf  0,75  dievaluasi  kemurniannya  dengan menggunakan  KLT  dua  dimensi.  Hasil  yang diperoleh  menunjukkan  adanya  bercak  tunggal menunjukkan bahwa  isolat  telah murni.
Identifikasi Isolat Flavonoid
Identifikasi
dilakukan dengan pengamatan  perubahan  panjang  gelombang pada spektra flavonoid menggunakan spektrofotometer  UV-Vis.  Spektra  flavonoid terdiri  dari  dua  absorbsi  maksimal  yaitu  pada range 240-285 nm (pita I) dan pada range 300- 550  nm  (pita  II).  Sedangkan  untuk  mengetahui adanya  gugus  tambahan  yang  melekat  pada gugus  utama  flavonoid  digunakan  pereaksi diagnostik yang memiliki reaksi khusus sehingga  dapat  diketahui  berdasar  pergeseran panjang gelombang ( λ) maksimalnya.
Gambar 3- Spektra Awal Isolat Flavonoid
Berdasarkan  Gambar  3,  didapatkan bahwa  isolat  flavonoid  memperlihatkan  spektra awal yang terletak pada 344 nm (pita I) dan 264 nm  (pita  II)  yang  menunjukkan  gugus  utama berupa flavon atau flavonol 3-OH tersubstitusi.
Keberadaan  gugus  hidroksi  dikonfirmasi dengan  pereaksi  diagnostik  NaOH  2N.  Pada
umumnya  senyawa  flavonol  akan  mengalami pergeseran  batokromik  karena  memiliki  gugus hidroksil.  NaOH  bereaksi  dengan  mengionisasi semua  gugus  hidroksil  bebas  yang  terdapat dalam senyawa flavonoid.
Gambar 4- Spektra Pergeseran λ Setelah Penambahan NaOH 2N
Berdasarkan  Gambar  4,  terbukti  terjadi pergeseran  batokromik  pada  semua  pita. Namun  letak  gugus  hidroksil  pada  posisi dimana belum dapat dipastikan karena pergeseran yang terjadi belum mencapai range yang  ditentukan.  Tetapi  dari  hasil  tersebut dapat diperkirakan adanya gugus hidroksil yang
cukup kuat pada cincin A yang ditunjukkan oleh pergeseran  batokromik  yang  cukup  besar  (43 nm)  pada  pita  II  dan  terdapat  pula  gugus hidroksil  pada  cincin  B  yang  ditunjukkan  oleh pergeseran  batokromik  walaupun  tidak  terlalu besar.
340 nm 1.076 A
307 nm 1.072 A 351 nm 1.039 A
264 nm 1.662 A 344 nm 0.907 A
Reaksi isolat dengan pereaksi diagnostic NaOH  ditunggu  selama  5  menit  untuk  untuk mengetahui  adanya  dekomposisi  flavonoid yang ditunjukkan dengan penurunan absorbansi.  Tetapi  dari  spectra  yang  tampak pada  Gambar  5,  tidak  dapat  diketahui  hasilnya karena pita II tidak teramati.
Pereaksi  diagnostik  lainnya  adalah  AlCl 3 yang  akan  membentuk  kompleks  dengan  orto dihidroksi  maupun  hidroksi  keton.  Sedangkan
pada penambahan HCl akan mengurai kembali kompleks  karena  Al  tak  stabil  yang  terbentuk pada o-di OH. Spektra (gambar 6)
memperlihatkan  bahwa  terjadi  pergeseran batokromik  pita  I  sebesar  65  nm  pada penambahan  AlCl 3 yang  menunjukkan  adanya kompleks  yang  terbentuk  dari  hidroksi keton (3-OH  dengan atau tanpa 5-OH) dan atau o-di OH.
Gambar 6- Spektra Pergeseran λ Setelah Penambahan AlCl 3
Gambar 7- Spektra Pergeseran λ Setelah Penambahan AlCl 3 /HCl
Sedangkan  pada  reaksi  penambahan HCl  terjadi  pergeseran  hipsokromik  pita  I sebesar  21  nm  dari  penambahan  AlCl 3 , menunjukkan  adanya  kompleks  yang  terurai. Hasil tersebut menunjukkan adanya gugus o-di OH.  Dari  hasil  tersebut  juga  dapat  diketahui bahwa  di  dalam  struktur  terdapat    gugus  3-OH dan  atau  5-OH  yang  ditunjukkan  pergeseran batokromik pada penambahan AlCl 3 /HCl dibandingkan  dengan  spektra  awal  sebesar  44 nm pada Gambar 7.
Pereaksi  diagnostik  selanjutnya  adalah NaOAc yang hanya bereaksi dengan mengionisasi  gugus  hidroksil  flavonoid  yang paling tahan asam yaitu gugus 7-OH.  Gugus 7- OH    akan  terionisasi    menjadi    7-ONa  dan menyebabkan terjadinya
pergeseran
batokromik.
388 nm 0.719 A 272 nm 1.960 A 409 nm 0.703 A 273 nm 1.870 A
Gambar 8- Spektra Pergeseran λ Setelah Penambahan NaOAc
Berdasarkan  spektra  yang  tampak  pada Gambar  8  dapat  diketahui  bahwa  terjadi pergeseran  batokromik  pada  pita  II  sebesar  5 nm  yang  menunjukkan  adanya  gugus  7-OH. Spektra  yang  direkam  setelah  lima  menit
penambahan NaOAc untuk mengetahui adanya gugus  peka  basa,  yaitu  gugus  o-diOH  yang terletak  jauh  dari  gugus  karbonil  (gugus  keton pada  cincin  C)  jika  kekuatan  absorbansi berkurang.
Gambar 9- Spektra Pergeseran λ Setelah Penambahan NaOAc, 5’
Diketahui  dari  spektra  pada  Gambar  9  bahwa tidak  ada  penurunan  absorbansi,  berarti  tidak terdapat  gugus  peka  basa.  Namun  hasil  ini kurang spesifik karena peran asam borat dalam
membentuk kompleks lebih kuat untuk mendeteksi adanya gugus o-diOH, seperti yang dijelaskan pada Gambar10.
Gambar 10- Mekanisme Reaksi Pereaksi diagnostik NaOAc, H 3 BO 3 , AlCl 3 (Nikolovska- Čoleska, Ž., et all , 1995) 366 nm 0.791 A 315 nm 1.021 A 269 nm 1.739 A 365 nm 0.790 A 269 nm
1.739 A
313 nm 1.012 A
Penambahan    H 3 BO 3 (asam  borat)  akan menjembatani    kedua    gugus    hidroksil    pada gugus  o-diOH  sehingga  terbentuk  kompleks borat.  Spektra  gambar  10  tampak  pergeseran batokromik  pita  I  sebesar  28  nm  menunjukkan
adanya gugus o-diOH pada cincin B. Penambahan  asam  borat  dilakukan  setelah penambahan  natrium  asetat  karena  reaksinya lebih  kuat  sehingga  dapat  lebih  memantapkan ada/tidaknya dan letak gugus o-diOH.
Gambar 11- Spektra Pergeseran λ Setelah Penambahan NaOAc/H 3 BO 3
Isolat  dihidrolisis  untuk  memastikan apakah  flavonoidnya  terikat  gula  atau  tidak. Hasil  elusi  pada  Gambar  12,  walaupun  terjadi perubahan  harga  Rf  isolat  terhidrolisis  (Rf  1,0) lebih  tinggi  daripada  isolat  yang  belum
dihidrolisis  pada  UV 366 nm  (Rf  0,75)  baik sebelum  maupun  setelah  diuapi  ammonia, namun  tidak  dapat  dipastikan  adanya  gugus gula  dalam  isolat  karena  selisih  harga  Rf  yang kecil.
UV 366 NH 4 OH + UV 366
Keterangan : A : isolat belum dihidrolisis
B : isolat terhidrolisis
Gambar 12- Kromatogram Uji Aglikon
372 nm 0.942 A 262 nm 1.625 A
Hasil ini ditetapkan berdasarkan kepolaran  dan  kelarutan  isolat  terhadap  fase gerak,  dimana  suatu  aglikon  jauh  lebih  non polar  daripada  glikosidanya  sehingga  akan terelusi lebih cepat dengan perbedaan harga Rf yang  sangat  jauh.  Rekapitulasi  perubahan λ tersaji pada tabel 1.
Berdasarkan  hasil  spektra  UV  dan kromatogram  tersebut  di  atas,  dapat  diduga kuat  bahwa  salah  satu  jenis  flavonoid  yang terdapat dalam daun dewandaru yaitu 5,7,3’,4’- tetra  hidroksi  flavonol  atau  kuersetin  (Gambar 13).  Hasil  ini  sejalan  dengan  penelitian Rattmann et al (2012) yang menyatakan bahwa ekstrak  etanol  70%  mengandung  glikosida myrcetine dan quercetine . O O HO OH OH OH OH
Gambar  13. Struktur  dari  5,7,3’,4’-Tetra  Hidroksi  Flavonol atau Kuersetin
Tabel 1- Rekapitulasi Perubahan λ Beserta Perkiraan Gugus pada Struktur Flavonoid dengan Pereaksi diagnostik
Larutan metanol λ maks (nm) Absorbansi Pergeseran λ Perkiraan Gugus (Marby et al ,1970; Markham, 1998) Pita I Pita II Pita I Pita II Isolat Flavonoid 344 0.907 264 1.662 Flavonol 3-OH tersubstitusi atau Flavon + NaOH 2N 351 1.039 307 1.072 +7 +43 Ada OH + NaOH 2N (5’) 340 1.076 - -4 - - + NaOAc 365 0.790 269 1.739 +21 +5 7-OH + NaOAc (5’) 366 0.791 269 1.739 +22 +5 Tidak terdapat gugus peka basa (6,7 atau 7,8 atau 3,4’- diOH) + NaOAc/H 3 BO 3 372 0.942 262 1.625 +28 -2 o -di OH pada cincin B + AlCl 3 409 0.703 273 1.870 +65 +9 Ada o -di OH + AlCl 3 /HCl 388 0.719 272 1.960 +44 +8 3-OH dengan atau tanpa 5-OH

## KESIMPULAN
Salah  satu  senyawa  flavonoid  yang terdapat  dalam  daun  dewandaru  ( Eugenia uniflora L.)  adalah  5,7,3’,4’-tetra  hidroksi flavonol atau kuersetin.

## DAFTAR PUSTAKA
Einbond,  L.S.,  Reynertson,  K.A.,  Luo,  X.,  Basile,  M.J.,  dan  Kennelly,  E.J.,  2004,  Anthocyanin Antioxidant from Edible Fruits, Food Chem , 23-28.
Haron,  N.W.,  Moore,  D.M.,  Harborne,  J.B.,  1992 , Distribution  and  Taxonomic  Significance  of Flavonoids  in  The  Genus Eugenia (Myrtaceae), Biochemical  Systematics  and  Ecology ,  20,  226- 268 cit :  Reynertson,  K.A.,  2007,  Phytochemical  Analysis  of  Bioactive  Constituents  From  Edible Myrtaceae Fruits, Dissertation , The City University of New York.
Hutapea, J.R., 1991, Inventaris Tanaman Obat Indonesia III , 45, Depkes RI, Jakarta.
Khotimah, K.D.S., 2004, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kloroform dan Metanol Daun Dewandaru ( Eugenia  uniflora L.)  Terhadap Staphylococcus  aereus , Shigella dysentriae,  dan Eschericia  coli , Skripsi , Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Mabry, T.J., Markham, K.R., dan Thomas, M.B., 1970, The Systematic Identification of Flavonoid, 3-56, 165-171, Spinger-Verlag, New York, Heidelberg, Berlin.
Markham, K.R., 1988, Cara Mengidentifikasi Flavonoid , diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, 19-21, 31, 41-47, 65-75, Penerbit ITB, Bandung.
Morton,  J.F.,  1987,  Surinam  cherry,  (online), http://www.hort.purdue.edu/ n ewcrop/default.html , diakses tanggal 16 Maret 2007.
Nikolovska- Čoleska, Ž., Dorevski, K., Klisarova, L., Šuturkova-Milošević, L., 1995, Identification of Phenolic  Constituents  Isolate  from  Macedonian  Propolis, Bulletin  of  the  Chemists  and Technologists of Macedonia , Vol. 14, No. 1, 13 -17.
Reynertson, K.A. and Kennelly, E.J., 2001, Antioxidant Polyphenols from Fruits of the Myrtaceae: A Chemotaxonomic  and  Ethnomedical  Approach  to  Discovery,  Building Bridges  with  Traditional Knowledge  II,  The  Society  for  Economic  Botany,  42 nd Annual  Meeting  and  The  International Society for Ethnopharmacology , Honolulu.
Schmeda-Hirschmann,  G.,  Theoduloz,  C.,  Franco,  L.,  Ferro,  E.,  Rojas  de  Arias,  A.,  1987, Preliminary  Pharmacological  Studies  on Eugenia  uniflora Leaves:  Xanthine  Oxidase  Inhibitory Activity. Journal  of  Ethnopharmacology ,  21,  183-186 cit :  Reynertson,  K.A.,  2007,  Phytochemical Analysis of Bioactive Constituents From Edible Myrtaceae Fruits, Dissertation , The City University of New York.
Utami, W., Da’I, M., dan Sofiana., 2005, Aktivitas Penangkap Radikal dengan Metode DPPH serta Penetapan Kandungan Fenol dan Flavonoid dalam Ekstrak Kloroform, Ekstrak Etil Asetat, Ekstrak Etanol Daun Dewandaru ( Eugenia uniflora L.), Pharmacon , Vol 6, No.1, 5-9