PENGEMBANGAN HERBAL CAIR KOMBINASI DAUN SALAM [ Syzygium polyanthum (Wight) Walp.] DAN KELOPAK BUNGA ROSELLA
( Hibiscus Sabdariffa L.) DENGAN BERBAGAI VARIASI PEMANIS
Lusi Indriani * , Ike Yulia Wiendarlina, Erni Rustiani Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Pakuan Bogor Email: lusi.apoteker@gmail.com

## ABSTRAK
Daun salam [ Syzygium polyanthum (Wight) Walp] dan kelopak bunga rosella ( Hibiscus sabdariffa L.)  merupakantanaman  yang  berkhasiat  untuk  mengobati  diabetes  mellitus. Kandungan  kimia  yang  terdapat  dalam  daun  salam  adalah  minyak  atsiri  sitral,  eugenol, tanindan flavonoid. Kandungan kimia yang pentingdari kelopak bunga rosella adalah flavonoid antosianin.  Penelitian  ini  bertujuan  menghasilkan  sediaan  herbal  cair  yang  dapat  digunakan untuk  mengobati  diabetes  dengan berbagai  variasi  pemanis  yang dapat  diterima panelis dan stabil selama penyimpanan pada 3 tingkatan suhu. Sediaan dibuat dalam 3 formula. Formula A,  B  dan  C  mengandung  30  mg  sukralosa,  375  mg  stevia,  dan  40  g  madu.  Berdasarkan pengujian  mutu,  herbal  cair  memiliki  warna  coklat  (Formula  A  dan  B)  dan  coklat  merah (Formula C). Masing-masing sediaan memiliki aroma yang khas dan rasa yang manis. Sediaan herbal cair memiliki pH (2,89-3,12), viskositas (10,00-10,40) dan bobot jenis (1,0353-1,0382). Hasil pengujian dengan metode uji Friedman menunjukkan bahwa formula C dengan pemanis madu  lebih  disukai  panelis  dengan  parameter  warna,  aroma  dan  rasa.  Sediaan  herbal  cair formula C lebih stabil disimpan pada suhu sejuk (5-15°C) dibandingkan pada suhu kamar (15- 30°C) dan suhu panas (40-45°C).
Kata kunci: Daun Salam, Kelopak Bunga Rosella, Pemanis, Herbal Cair.
DEVELOPMENT OF LIQUID HERBAL COMBINATION Syzygium polyanthum (Wight) Walp. AND Hibiscus Sabdariffa L. FLOWER PETALS WITH SWEETENERS VARIATION

## ABSTRACT
Syzygium  polyanthum leaves  and Hibiscus  sabdariffa flower  petals  have  benefits  in tre ating diabetes mellitus. The chemical constituents of Syzygium polyanthum leaves are the volatile  oil  containing  citral  and  eugenol,  tannins  and  flavonoids.  An  important  chemical constituent of Hibiscus sabdariffa flower petals is flavonoid antocyanin. This study aimed to make  liquid  herbal  preparations  for  diabetic  treatment  with  variations  of  sweeteners  which could be accepted by panelists and stable during stored in 3 temperature levels. Preparations were made in 3 formulas. Formula A, B and C contained 30 mg sucralose, 375 mg stevia, and 40 g honey. Based on quality testing, liquid herbal preparations had brown color (Formula A and B) and red-brown color (Formula C). Each of these stocks had a distinctive aroma and a sweet taste. Liquid herbal preparations had pH (2.89 to 3.12), viscosity (10.00 to 10.40) and the specific gravity (1.0353 to 1.0382). The test results with Friedman test method showed that formula C with honey sweetener was preferred by panelist with the parameters of color, aroma and flavor. Liquid herbal preparations formula Cwhich stored at cool temperatures (5-15°C) were more stable than stored at room temperature (15-30°C) or at warm temperature (40-45°C).
Keywords: Syzygium polyanthum leaves, Hibiscus sabdariffa flower petals, sweetener, liquid herbal preparation.

## PENDAHULUAN
Daun  salam  [ Syzygium  polyanthum (Wight)  Walp . ]  dan  Kelopak  bunga  rosella ( Hibiscus  sabdariffa L.)  memiliki  khasiat untuk  menyembuhkan  penyakit  diabetes mellitus.  Dosis  1,36  mg/kg  BB  ekstrak  air daun  salam  dilaporkan  mempunyai  efek penurun  kadar  gula  darah  pada  tikus  yang diinduksi  dengan  glukosa  sebesar  5,582% (Musyrifah,  Bekti,  dan  Fauzia,  2012). Kandungan  kimia  yang  terdapat  dalam  daun salam  adalah  minyak  atsiri  (0,05%)  yang mengandung  sitral,  dan  eugenol,  sertatanin dan  flavonoid.  Infusa  kelopak  bunga  rosella memiliki  aktifitas  menurunkan  kadar  gula darah  tikus  dengan  dosis  63,5mg/200g  BB (Hanik,  Ratih,  dan  Wulandari,  2011). Kandungan kimia  yang penting dari kelopak bunga  rosella  adalah  flavonoid  antosianin yang bermanfaat sebagai antioksidan.
Pada penelitian ini akan dibuat formula kombinasi  dari  kedua  bahan  tersebut  untuk dijadikan sediaan herbal cair yang belum ada di pasaran. Pemilihan bentuk sediaan cair ini adalah  karena  sediaan  cair  memiliki  daya absorpsi  yang  cepat  dibandingkan  dengan bentuk  sediaan  lain,  tetapi  karena  pada umumnya  sediaan  herbal  cair  mempunyai rasa  yang  kurang  enak  maka  diperlukan penambahan  variasi  pemanis.  Pemanis  yang digunakan  memiliki  indeks  glikemik  yang rendah  yaitu  sukralosa,  stevia  dan  madu (Adji,  2004;  Mousumi,  2008;  Wijayadan Mulyono, 2010).
Sediaan  herbal  cair  kombinasi  daun salam dan kelopak bunga rosella yang disukai panelis akan diuji stabilitasnya pada 3 kondisi suhu  penyimpanan.  Pengujian  stabilitas meliputi  pengujian  secara  fisika,  kimia  dan mikrobiologi.  Penggunaan  kombinasi  daun salam dan kelopak bunga rosella diharapkan menghasilkan  kadar  flavonoid  yang  tinggi dalam herbal cair, karena flavonoid merupakan senyawa metabolit sekunder yang berperan  dalam  menurunkan  kadar  gula darah.

## METODE PENELITIAN Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah simplisia kelopak bunga rosella  yang  diperoleh  dari  Laboratorium Farmasi FMIPA UniversitasPakuan, dan daun salam  yang  diperoleh  dari  Balai  Penelitian Tanaman  Obat  dan  Aromatik  (BALITTRO), yang telahdideterminasi di Herbarium Bidang Botani  Pusat  Penelitian  Biologi,  Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Cibinong,  Bogor.Sukralosa,  stevia,  madu merk  dagang  (x),  Natrium  benzoat.  Pelarut dan pereaksi yang digunakan pada penelitian ini meliputi air, akuades, amil alkohol, asam klorida 2 N, gelatin  1%, Natrium asetat 1M, metanol,  asam  klorida  encer,  asam  klorida 0,1%,  serbuk  Magnesium,  asam  klorida, pereaksi Mayer, Bouchardat, dan Dragendorff,  kuersetin,  Alumunium  klorida 10%,  buffer  potasium  klorida,  dapar  sodium asetat, natrium agar.

## Alat
Alat-alat yang digunakan adalah dalam penelitian  ini  antara  lain  timbangan  analitik (AND  G-120 ® ),  oven  (Memert ® ),  autoklaf (Memert ® ), Silent  Crusher (Heidolph), Moisture Balance (AND MX 50 ® ) , tanur, pH meter,  spektrofotometer  UV-Vis  (Optizen ® ), Vaccum  dry (Ogawa ® ), lemari  pendingin, viskometer Brookfield ® dan alat gelas.

## Cara Kerja
Pembuatan Serbuk Simplisia Daun Salam Pembuatan simplisia daun salam dilakukan  sesuai  dengan  prosedur  standar pembuatan simplisia dengan proses pengeringan menggunakan oven 50 0 C hingga dihasilkan  simplisia  serbuk  ukuran mesh 40. Simplisia yang diperoleh kemudian ditimbang  dan  disimpan  dalam  wadah  yang kering dan bersih (Departemen Kesehatan RI, 1990 dan 1992).
Karakterisasi  Serbuk  Simplisia  Daun Salam dan Kelopak Bunga Rosella
a) Penetapan Kadar Air
Penentuan  kadar  air  simplisia  dilakukan menggunakan alat moisture balance.
b) Penetapan Kadar Abu
Sebanyak  2-3  g  simplisia  ditimbang dengan  seksama  dimasukkan  ke  dalam krus platina atau silika yang sudah ditara, kemudian  dipijarkan  dalam  tanur  hingga arangnya habis, lalu didinginkan dan sisa abu ditimbang (DepartemenKesehatan RI, 2000).

## Pembuatan Ekstrak Kental Daun Salam
Ekstraksi  simplisia  dilakukan  dengan metode  infundasi  menggunakan  50  g simplisia dalam 200 ml air. Kemudian ekstrak cair daun salam dipekatkan hingga diperoleh ekstrak  kental  dan  ditimbang  bobotnya (Musyrifah, Bekti, dan Fauzia, 2012).

## Uji Fitokimia
Uji  fitokimia  yang  dilakukan  meliputi uji  saponin,  tannin,  flavonoid,  dan  alkaloid. Uji saponin, flavonoid, dan alkaloid dilakukan  sesuai  dengan  prosedur  yang tercantum  dalam  Materia  Medika  Indonesia jilid  III  dan  VI  (Departemen  Kesehatan  RI, 1995;  Sangi,  Runtuwene,  Simbala,  dan Makang,  2008).  Uji  tannin  dilakukan  sesuai dengan  prosedur  Fransworth  (Fransworth, 1996).
Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Salam (Metode Chang) ( Chang et al ., 2002).
Penetapan kadar flavonoid total ekstrak daun salam dilakukan dengan terlebih dahulu menentukan  panjang  gelombang  maksimal kuersetin  dengan  spektrofotometer  pada panjang  gelombang  380-780  nm.  Lalu ditentukan  waktu  inkubasi  optimum  dan dibuat  kurva  standar  kuersetin  antara konsentrasi  larutan  standar  kuersetin  dengan nilai  absorban  yang  diperoleh  dan  akan dihasilkan  persamaan  regresi  linier  (y  = bx+a). Persamaan regresi ini digunakan untuk menghitung  kadar  ekstrak  (ppm)  dengan memasukkan absorban ekstrak sebagai nilai y ke  dalam  persamaan.  Kadar  flavonoid  total ditentukan  menggunakan  persamaan  regresi dari  kurva  standar  kuersetin  (Saifudin, Rahayu, dan Teruna, 2011).
% kadar= ppm x volume .10 -3 x fp x 10 -3
gram bobot simlpisia x 100 %
Penetapan  Kadar  Antosianin  Simplisia Kelopak  Bunga  Rosella  (Metode pH differential ) ( Giusti and Wrolstad, 2001). Larutan  uji  dibuat  dari  35  g  serbuk simplisia rosella yang dibungkus dengan kain batis, direbus dalam air 100 ml pada suhu 70- 80°C selama 15 menit, setelah itu ditambahkan air hingga 250ml dan didiamkan sampai larutan sampel dingin. Hasil preparasi dari  beberapa  sampel  (filtrat)  akan  diukur absorbansinya pada λ maks 700 nm (Endang, Agus, dan Noegrohati, 2013).
Nilai  absorbansi  sampel  dihitung  dengan menggunakan persamaan : A = [(A 516 -A 700 ) pH1 -(A 516 -A 700 ) pH4,5 ]
Konsentrasi Antosianin ( mg L) ⁄ = (A×BM×FP×1000) (Ƹ×1)

## Formulasi Herbal Cair Daun Salam dan Kelopak Bunga Rosella
Sebanyak  0,15  g  ekstrak  kental  daun salam dilarutkan dalam air panas (100°C) 100 mL  hingga  larut  lalu  disaring  (larutan  1). Sebanyak  35  g  simplisia  kelopak  bunga rosella  direbus  dalam  kain  batis  dengan  air sebanyak  100  mL  pada  suhu  (70-80°C) selama  15  menit  (larutan  2).  Kemudian disiapkan  pemanis  dengan  cara  melarutkan (sukralosa,  stevia  dan  madu)  masing-masing didalam air panas (100°C) 25mL hingga larut (larutan 3), kemudian saring dan masukkan ke dalam  tangki  pencampur.  Na  benzoat dilarutkan didalam air panas sebanyak 25 ml (larutan  4).  Larutan  3  dicampur  dengan larutan 1 dan 2, lalu larutan 4 diaduk hingga homogen. Strawberry essence dilarutkandidalam  air  hangat  5  ml  hingga larut kemudian dicampur dengan larutan 1, 2, 3,  dan  4.  Ditambahkan  air  mendidih  hingga volume 250 mL kemudian diaduk menggunakan  alat Silent  Crusher .  Larutan didinginkan, dimasukkan dalam wadah botol kaca  yang  sudah  disterilkan  sebelumnya. Kemudian  dilakukan pasteurisasi pada  suhu 70°C selama 15 menit menggunakan autoklaf.
Uji  Mutu  Sediaan  Herbal  CairPenetapan Kadar  Flavonoid  Total  dan  Antosianin Herbal  Cair  Daun  Salam  dan  Kelopak Bunga Rosella.
Penentuan  kadar  flavonoid  total  herbal cair  dilakukan  dengancarayang  sama  seperti penentuankadar  flavonoid  total  pada  ekstrak
daun  salam (Syzygium  polyanthum  (Wight) Walp. )  dengan  metode  Chang ( Chang et  al ., 2002) .  Penentuan  kadar  antosianinpada herbal  cairdilakukandengancara  yang  sama seperti  penentuan  kadar  antosianin  simplisia kelopak  bunga  rosella (Hibiscus  safdariffa) dengan metode pH differential.

## Tabel 1. Formulasi Herbal Cair Daun Salam dan Kelopak Bunga Rosella
Bahan Formula A (%) Formula B (%) Formula C (%) Ekstrak Kental Daun Salam 0,06% 0,06% 0,06% Serbuk Simplisia Kelopak Bunga Rosella 14% 14% 14% Sukralosa 0,012% - - Stevia - 0,15% - Madu Merk Dagang (x) - - 16% Natrium benzoat 0,24% 0,24% 0,24% Strawberry Essence q.s q.s q.s Air ditambahkan ad 100% 100% 100%
Keterangan : Setiap formula dibuat sebanyak 250 ml @ 25 ml sekali minum

## Uji Organoleptik.
Uji  ini  meliputi  penilaian  terhadap karakteristik sediaan herbal cair yang meliputi warna, aroma dan rasa kombinasi daun salam dan kelopak bunga rosella.

## Uji pH.
Pengukuran  nilai  pH  bertujuan  untuk mengetahui nilai  herbal  cair  daun salam dan kelopak bunga rosella, pengukuran menggunakan alat pH meter.

## Uji Viskositas.
Pengukuran  sediaan  dilakukan  dengan menggunakan viskometer Brookfield dengan kecepatan dan nomor spindle tertentu hingga mencapai torsi 100% pada suhu kamar.

## Uji Bobot Jenis.
Penetapan bobot jenis dilakukan dengan menggunakan piknometer.
Uji Cemaran Mikroba.
Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui  seberapa  besar  cemaran  bakteri pada  sediaan  herbal  cair  daun  salam  dan kelopak bunga rosella pada minggu ke-0 dan minggu ke-8. Metode yang digunakan adalah uji angka lempeng total, dengan menghitung koloni  bakteri  pada  serial  pengenceran
formula herbal cair. Hasil pengujian dibandingkan  dengan  standar  uji  cemaran mikroba (Badan Standarisasi Nasional, 2009).

## Uji Hedonik.
Uji  hedonik  dilakukan  terhadap  20 orang  panelis  dengan  kriteriausia>35  tahun dan sebelumnya para panelis tidak mengkonsumsi makanan atau minuman yang dapat  mempengaruhi  penilaian.  Para  panelis diminta  mencicipi  dan  menilai  warna,  rasa dan  aroma  dari  sampel  sediaan  herbal  cair. Para panelis diharapkan untuk mengisi kertas kuisioner  yang  telah  disediakan.  Waktu selang  untuk  mencicipi  formula  1  dengan yang  lain  kurang  lebih  1  menit  dan  setelah mencicipi  sediaan  herbal  cair  diharapkan panelis  minum  air  putih  atau  berkumur sebelum mencicipi formula lainnya.
Parameter  uji  hedonik  diuji  meliputi rasa,  warna  dan  aroma  yang  masing-masing akan mendapat penilaian 1: sangat tidak suka, 2: tidak suka, 3: cukup suka, 4: suka, 5: sangat suka. Hasil uji hedonik dianalisis menggunakan  SPSS.17  dengan  rancangan RAL  (Rancangan  Acak  Lengkap)  (Santoso, 2009).

## Uji Stabilita
Evaluasi  kestabilan  sediaan  herbal  cair dilakukan dalambotolkaca untuk mengetahui kualitas  sediaan  herbal  cair  berdasarkan parameter  secara  fisika  (organoleptik,  pH, viskositas dan bobot jenis), secara kimia (uji kadar  flavonoid  total  dan  kadar  antosianin), dan  secara  mikrobiologi  (uji  cemaran mikroba).  Uji  stabilita  dilakukan  untuk sediaan  sirup  yang  terpilih  berdasarkan  uji hedonik. Evaluasi dilakukan pada 3 tingkatan suhu, yaitu 15°-30°C (suhu kamar), 5°-15°C (suhu  sejuk)  dan  40°-45°C  (suhu  panas) selama delapan minggu dengan pengambilan sampel  untuk  uji  setiap  2  minggu.  Jumlah botol  yang  digunakan  adalah  5  kali  3  botol sehingga  total  jumlah  botol  yang  diperlukan adalah 15 botol.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  identifikasi  tumbuhan  yang dilakukan  di  Herbarium  Bogoriense  Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI, Cibinong, Bogor menunjukkan bahwa identitas  tumbuhan  salam  adalah Syzygium polyanthum (Wight)  Walp.  suku Myrtaceae dan  tumbuhan  rosella  adalah Hibiscus sabdariffa L. Suku Malvaceae. Karakteristik serbuk simplisia daun salam adalah berwarna hijau  terang,  aroma  khas,  dan  rasa  agak sedikit ketir dan pedas. Sedangkan karakteristik serbuk simplisia kelopak bunga rosella adalah berwarna merah, aroma sangat khas,  dan  rasa  asam.  Rendemen  serbuk simplisia  daun  salam  yang  diperoleh  adalah sebesar 15,43% (Mardiah dkk., 2009).
Penentuan  kadar  air  bertujuan  untuk memperkecil  pertumbuhan  mikroorganisme dalam serbuk simplisia. Hal ini terkait dengan kemurnian  dan  adanya  kontaminan  dalam simplisia tersebut. Dengan demikian, penghilangan kadar air hingga jumlah tertentu berguna  untuk  memperpanjang  daya  tahan bahan  selama  penyimpanan.  Pada  umumnya syarat  kadar  air  simplisia  kurang  dari  5%. Dari hasil yang diperoleh penentuan kadar air menggunakan  metode moisture  balance , kadar air simplisia daun salam adalah sebesar 3,87% dan kadar air serbuk simplisia kelopak bunga  rosella  adalah  sebesar  4,215%.  Hasil
ini menunjukan bahwa serbuk simplisia daun salam  dan  kelopak  bunga  rosella  telah memenuhi  syarat  yaitu  kurang  dari  10% (Mardiah  dkk.,  2009).  Penentuan  kadar  abu bertujuan untuk mengetahui atau mengidentifikasi  kadar  zat  anorganik  dan mineral dalam simplisia. Parameter kadar abu merupakan  pernyataan  dari  jumlah  abu fisiologik bila simplisia dipijar hingga seluruh unsur  organik  hilang.  Prinsipnya  adalah bahan  dipanaskan  pada  temperatur  800ºC dimana  senyawa  organik  dan  turunanya terdekstrusi dan menguap hingga tersisa unsur mineral  organik.  Pengujian  kadar  abu  pada serbuk simplisia daun salam sebesar 3,125%, persyaratan kadar abu serbuk simplisia daun salam berdasarkan Materia Medika Indonesia adalah  tidak  lebih  dari  5%  (Departemen Kesehatan  RI,  1980).  Pengujian  kadar  abu pada  serbuk  simplisia  kelopak  bunga  rosella sebesar  7,515%.  Hasil  yang  diperoleh memenuhi  syarat  yaitu  tidak  lebih  dari  11% (Mardiah dkk., 2009).

## Ekstrak Kental Daun Salam dan Rebusan Kelopak Bunga Rosella
Ekstrak  kental  daun  salam  diperoleh melalui  metode  infundasi  yaitu  dengancara mengekstraksi  sebanyak  400  g  serbuk simplisia  dalam  1600  ml  air.  Ekstrak  cair kemudian  dipekatkan  menggunakan  alat vaccum  dry ,  diperoleh  ekstrak  kental sebanyak  42,96  g  sehingga  diperoleh rendemen ekstrak sebesar 10,74 % (Departemen  KesehatanRI,  1980).  Sebanyak 35 g simplisia kelopak bunga rosella direbus dalam kain batis dengan air sebanyak 100 ml pada  suhu  (70-80°C)  selama  15  menit. Penggunaan  kain  batis  bertujuan  agar antosianin  yang  terkandung  dalam  kelopak bunga  rosella  tidak  rusak,  karena  antosianin tidak stabil pada suhu tinggi.
Penentuan  konsentrasi  bahan  aktif adalah  berdasarkan  penelitian  sebelumnya dimana  dosis  efektif  ekstrak  kental  daun salam sebagai antidiabetes pada tikus adalah 1,36mg/kgBB (Musyrifah, Bekti dan Fauzia, 2012),  setelah  dikonversi  ke  dosis  manusia adalah 0.06%. Sedangkan dosis efektif infusa kelopak  bunga  rosella  sebagai  antidiabetes
pada  tikus  adalah  62,5  mg/200gBB  (Hanik, Ratih dan Wulandari, 2011), setelah dikonversi ke dosis manusia adalah 14%.

## Hasil Pengujian Fitokimia
Pengujian  fitokimia  dilakukan  secara kualitatif  untuk  menentukan  kandungan metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam sampel.  Hasil  pengujian  fitokimia  terhadap serbuk  simplisia  daun  salam  dan  kelopak bunga rosellaadalah positifmengandung alkaloid, flavonoid, saponin dan tanin.
Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Salam
Penentuan jumlah flavonoid dari ekstrak  daun  salam  dilakukan  menggunakan metode  Chang  secara  kolorimetri  yang mempunyai  prinsip  pengukuran  berdasarkan pembentukan  warna  ( Chang et  al .,  2002) . Prinsip  penetapan  flavonoid  dengan  metode kolorimeter  AlCl 3 adalah  pembentukan kompleks  antara  AlCl 3 dengan  gugus  keto pada  atom  C-4  dan  juga  dengan  gugus hidroksi  pada  atom  C-3  atau  C-4  yang bertentangga  dari  flavon  dan  flavonol. Sehingga  metode  ini  dapat  digunakan  untuk menentukan  jumlah  flavonoid  golongan flavon dan flavonol.
Pada  tahap  awal  pengukuran  flavonoid diawali dengan menentukan panjang gelombang  maksimum  untuk  mendapatkan serapan  maksimum  dari  larutan.  Panjang gelombang untuk penentuan kadar flavonoid berkisar  380  -  780  nm.  Panjang  gelombang maksimum  yang diperoleh setelah pengujian adalah  430  nm.  Penentuan  waktu  inkubasi optimum dilakukan pada beberapa titik waktu yaitu  5,  10,  15,  20,  25,  30  menit  (Tabel  2). Penentuan waktu inkubasi optimum dilakukan untuk mengetahui waktu penyimpanan yang akan memberikan serapan stabil sehingga suatu zat agar dapat bereaksi secara  maksimal.  Setelah  pengujian  waktu inkubasi  optimum  yang  diperoleh  adalah menit ke-25 dengan nilai absorbansi 0,391.
Pengukuran  kurva  kalibrasi  dibuat dengan  deret  konsentrasi  2,  4,  6,  8,  10  ppm untuk  mendapatkan  persamaan  linearitas antara absorbansi dan konsentrasi. Persamaan linearitas  y  =  0,082  x  +  0,038  dengan  nilai koefesien  relasi  r  =  0,999  yang  berarti  ada korelasi  antara  nilai  absorbansi  dengan konsentrasi (Gambar 1). Berdasarkan perhitungan  kadar  flavonoid  total  untuk ekstrak kental daun salam yaitu sebesar pada ulangan  (I)  0,1418%  dan  pada  ulangan  (II)
0,1432% dengan rata-rata 0,1425%.
Tabel 2. Optimasi Waktu Inkubasi Kuersetin
Waktu (menit) Absorbansi 5 0,183 10 0,191 15 0,225 20 0,396 25 0,391 30 0,388

## Penetapan  Kadar  Antosianin  Serbuk Simplisia Kelopak Bunga Rosella
Penentuan  kadar  antosianin  serbuk simplisia  kelopak  bunga  rosella  dilakukan dengan metode perbedaan pH (pH
Differential ) (Giusti  and  Wrolstad,  2001) yaitu pada pH 1,0 dan pH 4,5. Sampel  yang digunakan  adalah  hasil  rebusan  kelopak bunga  rosella  dengan  pelarut  air,  digunakan pelarut  air  karena  antoasianin  merupakan senyawa polar. Penetapan konsetrasi antosianin  dengan  metode  ini  dikarenakan pada pH 1,0 antosianin membentuk senyawa oxonium  (kation  flavilium)  yang  berwarna dan  pada  pH  4,5  membentuk  karbinol  tak berwarna  (Saifudin,  Rahayu,  dan  Teruna, 2011).  Sampel  diuji  dengan  menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang  516  nm  dan  700  nm.  Hasil penetapan  kadar  antosianin  yang  diperoleh adalah sebesar 9,257 mg/kg.

## Gambar 1. Kurva Linieritas

## Hasil Uji Kesukaan
Uji hedonik atau uji kesukaan bertujuan untuk menilai suatu produk secara organanoleptik  yaitu  meliputi  warna,  aroma dan  rasa.  Dalam  uji  hedonik  panelis  diminta tanggapan  pribadinya  mengenaik  kesukaan atau  ketidaksukaan.  Uji  hedonik  dilakukan pada  ketiga  formula  dengan  variasi  pemanis yang  berbeda.  Formula  A  dengan  pemanis sukralosa, Formula B dengan pemanis stevia dan  Formula  C  dengan  pemanis  madu. Pemanis  yang  digunakan  adalah  pemanis yang  mempunyai  nilai  indeks  glikemik rendah.
Panelis  yang  dapat  mencoba  adalah panelis yang memiliki kriteria umur diatas 35 tahun.  Hasil  uji  kesukaan  dianalisis  dengan SPSS.17 dengan metode friedman test dimana parameter  warna  dan  rasa  memberikan pengaruh  yang  nyata  pada  setiap  formula, sedangkan parameter aroma tidak memberikan  pengaruh  pada  setiap  formula. Dapat  disimpulkan  bahwa  panelis  menyukai formula C dengan pemanis madu (Tabel 3 dan 4).
Tabel 3. Output SPSS. 17 Uji Hedonik
Formula Warna Aroma Rasa A sukralosa 1.60 1.88 1.80 B stevia 1.68 1.95 1.63 C madu 2.73 2.18 2.58
Tabel 4. Hasil Uji Mutu Herbal Cair Parameter Formula A Formula B Formula C Rasa Manis Manis Manis Aroma Khas Khas Khas Warna Coklat Coklat Coklat Kemerahan pH 3,12 3,09 2,89 Viskositas (cps) 10,00 10,20 10,40 Bobot jenis (g/ml) 1,0353 1,0382 1,0361

## Hasil Uji Stabilita
Pengujian  ini  bertujuan  untuk  melihat stabilitas  fisik  dari  sediaan  herbal  cair  pada kondisi  penyimpanan  dengan  suhu  yang berbeda.  Pengujian  stabilitas  fisik  dilakukan dengan  menyimpan  herbal  cair  pada  suhu yang berbeda yaitu, suhu sejuk (5-15°C), suhu kamar  (15-30ºC),  dan  suhu  panas  (40-45°C) selama 8 minggu. Uji stabilita dilakukan pada formula  C  dengan  pemanis  madu.  Selama pengujian  stabilitas  dilakukan  pengujian untuk  parameter  fisika dan  kimia. Parameter fisika  yang  dilakukan  antara  lain  uji organoleptik,  uji  pH,  uji  viskositas,  uji  berat jenis  dan  uji  cemaran  mikroba.  Parameter kimia  yang  dilakukan  adalah  uji  kadar flavonoid  total  ekstrak  daun  salamdanherbal cair,  uji  kadar  antosianin  serbuk  simplisia kelopak bunga roselladan herbal cair.

## Hasil Uji Stabilita Parameter Organoleptik
Pengujian organoleptik adalah pengujian  yang  didasarkan  pada  proses pengindraan.  Pada  pengujian  parameter organoleptik meliputi warna, aroma dan rasa. Pengujian  organoleptik  dilakukan  setiap  2 minggu sekali selama 8 minggu.
y = 0.0829x + 0.0386 R² = 0.9996 0 0.5 1 0 2 4 6 8 10 12 A b sor b an si Konsentrasi (ppm)

## Grafik Kurva Kalibrasi
Penampilan  fisik  dari  sediaan  herbal cair  menunjukan  perubahan  fisik  pada minggu  ke-6  pada  suhu  kamar  dan  suhu panas,  hal  ini  disebabkan  adanya  degradasi dari  antosianin  yang  terkandung  dalam kelopak bunga rosella. Sedangkan pada suhu sejuk  lebih  stabil  dari  minggu  ke-0  sampai minggu ke-8.

## Hasil Uji Stabilita Parameter pH
Pada  pengujian  parameter  pH  sediaan herbal cair selama stabilitas. Selama stabilitas sediaan herbal  cair mengalami  kenaikan pH. Akan  tetapi  pada  penyimpanan  suhu  sejuk relatif  stabil.  Kenaikan  pH  pada  sediaan herbal  cair  karena  diakibatkan  oleh  adanya reaksi-reaksi  enzimatis  yang  terjadi  dalam sediaan selama penyimpanan.
Berdasarkan  hasil  uji  herbal  cair  nilai pH yang diperoleh adalah asam kuat, nilai pH asam kuat dihasilkan dari kandungan vitamin C yang terdapat dalam kelopak bunga rosella. Berdasarkan  nilai  SD  perubahan  pH  pada suhu  sejuk  tidak  terlalu  besar  dibandingkan dengan suhu kamar dan suhu panas.

## Hasil Uji Stabilita Parameter Viskositas
Viskositas  adalah  ukuran  suatu  ukuran yang  menyatakan  berapa  daya  tahan  dari aliran  yang  diberikan  oleh  suatu  cairan. Pengujian parameter viskositas menggunakan alat  brookfield  dengan  spindle  2  dengan kecepatan 50 RPM. Dipilih spindle 2 karena diperoleh  nilai  torsi  yang  cukup  baik.  Pada viskositas dipengaruhi dengan berat jenis dan temperatur.  Viskositas  berbanding  lurus dengan  berat  jenis  dan  berbanding  terbalik dengan  temperatur  artinya  semakin  tinggi temperatur  maka  nilai  viskositas  akan menurun  begitupun  sebaliknya.  Berdasarkan SD  nilai  viskositas  pada  suhu  sejuk  tidak terlalu  tinggi  dibandingkan  dengan  suhu kamar  dan  suhu  panas,  hal  ini  menunjukan bahwa  pada  suhu  sejuk  nilai  viskositasnya relatif lebih stabil.

## Hasil Uji Stabilita Parameter Bobot Jenis
Bobot  jenis  adalah  suatu  besaran  yang menyatakan  perbandingan  anatara  massa (gram)  dengan  volume  (ml).  Pada  pengujian
bobot  jenis  menggunakan  alat  piknometer dimana  prinsipnya  yaitu  penentuan  masssa cairan dan penentuan ruangan yang ditempati cairan  tersebut.  Berat  jenis  dipengaruhi  oleh besar  kecilnya  nilai  kerapatan  suatu  cairan, dimana  semakin  besar  kerapatan  maka  akan semakin besar nilai berat jenisnya. Berdasarkan  hasil  SD  nilai  bobot  jenis  dari minggu  ke-0  sampai  ke-8  tidak  menunjukan pengaruh  yang  nyata  pada  setiap  kondisi penyimpanan.

## Hasil  Uji  Stabilita  Parameter  Cemaran Mikroba
Pada  pengujian  ini  diketahui  seberapa besar  cemaran  mikroba  pada  sediaan  herbal cair. Metode yang digunakan adalah uji angka lempeng  total,  dengan  menghitung  koloni bakteri  pada  serial  pengenceran  formula herbal  cair.  Hasil  pengujian  ini  akan dibandingkan  dengan  standar  uji  cemaran mikroba (Badan Standarisasi Nasional, 2009).
Berdasarkan  hasil  pengujian  pada minggu  ke-0  hasil  yang  diperoleh  masih memenuhi syarat Standar Nasional Indonesia. Pada  minggu  ke-8  pada  penyimpanan  suhu panas menunjukan jumlah angka kontaminasi mikroba  yang  masih  diambang  batas persyaratan.  Menurut  Badan  Standarisasi Nasional (SNI 7388:2009) persyaratan untuk sirup  yang  berkhasiat  yaitu  sebesar  <1x10 4 koloni/ml.  Terjadinya  peningkatan  angka lempeng  total  yang  tidak  memenuhi  standar batas  cemaran  mikroba  pada  herbal  diduga karena kurangnya konsentrasi bahan pengawet natrium benzoat yang digunakan.

## Hasil  Uji  Flavonoid  Total  dan  Antosianin Herbal Cair
Kadar  flavonoid  total  dan  antosianin ditentukan  dengan  melihat  nilai  absorbansi dari masing-masing herbal cair yang disimpan pada  kondisi  suhu  penyimpanan  yang berbeda.  Berdasarkan  hasil  pengujian  kadar flavonoid  total  yang  terdapat  dalam  herbal cair mengalami penurunan di setiap pengujian, dimana pengujian dilakukan pada minggu ke-0, minggu ke-4 dan minggu ke-8 (Tabel 5). Adanya penurunan kadar disebabkan  adanya  proses  pemanasan  pada
saat proses pasteurisasi dan proses penyimpanan.  Dilihat  dari  hasil  pengujian kadar  flavonoid  pada  kondisi  penyimpanan suhu sejuk relatif stabil.
Pada pengujian antosianin herbal cair dilakukan  sama  seperti  simplisia  kelopak bunga  rosella.  Berdasarkan  hasil  uji  kadar antosianin yang  diperoleh  setiap  kali pengujian  mengalami  penurunan.  Suhu memiliki  peranan  dan  pengaruh  yang  sangat penting  terhdap  kestabilan  antosianin.  Suhu penyimpanan maupun suhu proses pengolahan  dapat  mempengaruhi  proses
degradasi antosianin (Hendry and Houghton, 1996).  Semakin  meningkatnya  suhu  dapat menyebabkan hilangnya glikosil pada antosianin dengan hidrolisis ikatan glikosidik. Aglikon  yang  dihasilkan  kurang  stabil  dan menyebabkan hilangnya warna pada antosianin. Berdasarkan hasil Standar Deviasi (SD)  kadar  flavonoid  total  pada  setiap  suhu penyimpanan  tidak  memberikan  pengaruh yang terlalu signifikan. Berdasarkan hasil SD kadar  antosianin,  nilai  SD  pada  suhu  sejuk lebih kecil dibandingkan dengan suhu kamar dan suhu lebih tinggi.
Tabel 5. Hasil Uji Flavonoid Total dan Antosianin Herbal Cair
Suhu Flavonoid Total (%) SD Antosianin (mg/L) SD 0 4 8 0 4 8 Suhu sejuk (5°-15°C), (suhu nyata 5°C) 0,5533 0,5436 0,5346 ± 0,00935 5,9132 5,4362 4,8562 ± 0,5293 Suhu kamar (15°-30°C), (suhu nyata 27°C) 0,5533 0,5105 0,4773 ± 0,0381 5,9132 5,3114 4,7044 ± 0,6044 Suhupanas (40°-45°C), (suhu nyata 40°C) 0,5533 0,3972 0,3792 ± 0,0957 5,9132 4,2491 2,1245 ± 1,8990

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Ekstrak  daun  salam  dan  kelopak bunga  rosella  dapat  dibuat  sediaan  herbal cair.  Formula  C  dengan  pemanis  madu yang  paling  disukai  panelis  dengan parameter warna, aroma dan rasa. Sediaan herbal cair Formula C lebih stabil disimpan pada suhu sejuk  (5°C-15°C)  dibandingkan pada  suhu  kamar(15°C-30°C)  dan  suhu panas (40°C-45°C).

## Saran
Saran  untuk  penelitian  selanjutnya adalah  agar  dilakukan  penggantian  jenis pengawet yang dapat mencegah pertumbuhan mikroba, danuji invivo untuk herbal  cair  pada  hewan  coba  sebagai alternatif pengobatan diabetes.

## DAFTAR PUSTAKA
Adji, S. 2004. Khasiat dan Manfaat Madu Herbal .  Agromedia  Pustaka,  hal.
10.Jakarta.
BadanStandarisasiNasional.  2009.  Batas maksimum cemaran mikroba dalam pangan.
BadanStandarisasiNasional. http://sisni.bsn.go.id/index.php/sni _main/sni/detail_sni/9806
Departemen  Kesehatan  RI.  1990. Cara Pembuatan Simplisia . Jakarta.
Chang,  C,  M.  Yan,  H.  Wen  dan  J.  Chern. 2002. Estimation of total content in propolis  by  two  complementary colorimetric  methods.  Journal  of food and drug analysis. 10 (3)179. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.  1980. Materia  Medika
Indonesia , Jilid IV. Jakarta.
__________________________________ .1992 Cara  Pembuatan  Obat Tradisional Yang Baik . Jakarta.
__________________________________ _. 1995. Materia Medika Indonesia , Jilid VI. Jakarta.
__________________________________ _. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Jakarta. Endang, L. Agus, dan S. Noegrohati. 2013.
Pengembangan  Sediaan  Eksfolian
dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan Kelopak  Bunga  Rosella  Dalam
Upaya  Melawan  Radikal  Bebas. Prosiding Seminar Nasional Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan KlinikIII 2013 . ISSN:
2239-2592.
Fransworth,  N.R.  1996.  Biological  and Phytochemical Screening of Plants.
Journal of Pharmaceutical Science , 1996 55 (3).
Giusti,  M.  M.  And  R.E.  Wrolstad.  2001. Characterization  and  Measurement of  Anthocyanins  by  UV-Visible Spectroscopy, Journal  of  Current protocols in food Analytical.
Hanik, A., Ratih, dan Wulandari. 2011. Uji Antidiabetik Infusa Kelopak Bunga
Rosella  (Hibiscus  sabdariffa  L.) pada  Tikus  Putih  Jantan  Galur Wistar yang Diinduksi Glukosa .Universitas
Muhamadiyah. Semarang.
Hendry,  G.  A.  F.  and  J.D.  Houghton.
1996. Natural  Food  Colorant2nd Edition .  Blackie  Academic  and Professional. London.
Mardiah,  Sawarni,  W.  Ashadi,  dan  A. Rahayu.  2009. Budidaya  dan pengolahan rosella simerah
segudang manfaat. Agromedia Pustaka, Jakarta. Hal 77-83.
Mousumi, D. 2008. Clonal propagation and antimicrobial activity of an endemic medicinal  plant  Stevia  rebaudiana. Journal of Medicinal Plants Research . 2(2): 045-051.
Musyrifah, S., Bekti, dan Fauzia.
2012. Pastiles Daun Salam (Eugenia Polyantha W.) . Universitas Gajah Mada.
Yogyakarta.
Saifudin, A., V. Rahayu, dan H.Y. Teruna. 2011. Standarisasi  Bahan  Obat Alam . Yogyakarta.Graha Ilmu. Sangi,  M.,  M.R.J.  Runtuwene,  H.E.I.
Simbala, V. Makang. 2008. Analisis
Fitokimia  Tumbuhan  Obat  di
Kabupaten Minahasa Utara .
Chemistry Progress.
Santoso, S.2009. Panduan lengkap menguasai  statistik  dengan  SPSS
17 .  PT.  Elex  Media  Komputindo.
Jakarta.
Wijaya,H.C. dan N. Mulyono. 2010. Bahan Tambahan Pangan”Pemanis”. IPB Press
.