Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Volume 19, Nomor 2, Oktober 2019, Hal.65-72
https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia
e-ISSN: 2686-4894 ; p-ISSN: 1411-9447

## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN IDENTIFIKASI SENYAWA EKSTRAK JAMUR
LINGZHI ( Ganoderma lucidum ) DENGAN LIQUID CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY (LC-MS)
Farida Nuraeni 1* , Septi Bernadetha Br Sembiring 1
1 Program Studi Kimia FMIPA Universitas Pakuan, Bogor
* e-mail: nuraeni.farida@yahoo.com
diterima: 23 Juli 2019; direvisi: 20 Agustus 2019; disetujui: 05 September 2019

## ABSTRAK
Jamur lingzhi banyak digunakan sebagai pengobatan alternatif untuk menurunkan tekanan darah dan  kadar  gula  dalam  darah,  untuk  memaksimalkan  potensi  dari  jamur  lingzhi  dilakukan  uji antioksidan.  Penelitian  ini  bertujuan  menentukan  potensi  aktivitas  antioksidan  ekstrak  air  dan ekstrak etanol 70% dari jamur lingzhi dengan variasi lama waktu ekstraksi secara maserasi serta identifikasi  senyawa  dengan Liquid  Chromatography  Mass  Spectrometry (LC-MS).  Penelitian ini diawali dengan determinasi dari jamur lingzhi yang masih segar kemudian dibuat simplisia dan  diekstrak  secara  maserasi  dengan  variasi  waktu  lama  perendaman  24  jam,  48  jam  dan  72 jam  masing-masing  dengan  2  pelarut  yaitu  air  dan  etanol  70%.  Ekstrak  diuji  fitokimia dilanjutkan dengan pengujian aktivitas antioksidan ekstrak jamur lingzhi dengan metode DPPH. Kemudian  dilakukan  identifikasi senyawa  dengan Liquid  Chromatography-Mass  Spectrometry (LC-MS).  Berdasarkan  hasil  Penelitian  bahwa  maserasi  selama  1  jam  (1  hari)  jamur  lingzhi dengan  ekstraksi  etanol  70  %  berpotensi  sebagai  antioksidan  dengan  nilai  IC50  94,83  ppm. Hasil  identifikasi  dengan  LC-MS  pada  ekstrak  etanol  70  %  sebagai  senyawa  yang  berpotensi sebagai  antioksidan  adalah  senyawa Bisphenol  M ,  dan 1-{[2-(3,4-  Dimethoxyphenyl) ethyl]amino}-3-methyl-2-octylpyrido[1,2-a]benzimidazole-4-carbonitrile .
Kata Kunci: Jamur lingzhi, radikal bebas, antioksidan, LCMS

## ANTIOXIDANT ACTIVITY AND IDENTIFICATION of LINGZHI
MUSHROOM EXTRACT (Ganoderma lucidum) WITH LIQUID CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY (LC-MS)

## ABSTRACT
Lingzhi  mushroom  is  widely  used  as  an  alternative  treatment  to  reduce  blood  pressure  and blood sugar levels, to maximize the potential of the Lingzhi fungus antioxidant tests are carried out.  This  study  aims  to  determine  the  potential  antioxidant  activity  of  water  extract  and  70% ethanol  extract  of  Lingzhi  mushroom  with  maceration  extraction  time  variation  and identification  of  compounds  with  Liquid  Chromatography  Mass  Spectrometry  (LC-MS).  This research  begins  with  the  determination  of  fresh  lingzhi  mushrooms  then  made  simplicia  and extracted  by  maceration  with  time  variation  with  soaking  time  of  24  hours,  48  hours  and  72 hours  each  with  2  solvents  namely  water  and  70%  ethanol.  The  extract  was  tested  by phytochemistry  followed  by  testing  the  antioxidant  activity  of  Lingzhi  mushroom  extract (ganoderma  lucidum)  by  DPPH  method.  Then  the  compounds  were  identified  by  Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS). Based on the results of research that maceration for  1  hour  (1  day)  Lingzhi  mushroom  with  70%  ethanol  extraction  has  the  potential  as  an antioxidant with an IC50 value of 94.83 ppm. The results of identification with LC-MS in 70% ethanol extract as a compound that has potential as an antioxidant are Bisphenol M compounds, and 1- - [[2- (3,4-Dimethoxyphenyl) amino]} -3-methyl-2-octylpyrido [1 , 2-a] benzimidazole- 4-carbonitrile.
Keywords: Lingzhi mushrooms, free radicals, antioxidants, LCMS

## PENDAHULUAN
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang dapat  menghambat  oksigen  reaktif  dan radikal bebas dalam tubuh. Senywa antioksidan  ini  akan  menyerahkan  satu  atau lebih elektron kepada radikal bebas sehingga  menjadi  bentuk  molekul  yang normal  kembali  dan menghentikan berbagai kerusakan  yang  ditimbulkan  (Sasikumar, 2009).  Antioksidan  mampu  melindungi tubuh  terhadap  kerusakan  yang  disebabkan senyawa oksigen reaktif, mampu menghambat terjadinya penyakit degeneratif seperti diabetes, kanker, inflasi jaringan dan penuaan dini (Middleton, 2000).
Jamur  lingzhi  ( Ganoderma  lucidum ) merupakan salah satu simplisia yang banyak digunakan oleh masyarakat sebagai pengobatan  alternatif  untuk  menurunkan tekanan  darah  dan  kadar  gula  dalam  darah. Khasiat  tanaman  tersebut  disebabkan  oleh adanya  senyawa  kimia  yang  dikandungnya. Menurut  Jaelani  (2008)  bahwa  zat  utama yang terkandung dalam jamur lingzhi adalah ganodermin,  ganoderan,  asam  ganodermin, triterpenoid, adenosin, peptidaglukan, germanium dan polisakarida (betaglukan).
Kandungan lain dari jamur lingzhi yaitu thiamin,  riboflavin,  niasin,  dan  biotin  juga beberapa mineral antara lain seperti kalium, fosfor,  kalsium,  natrium,  tembaga  dan magnesium.  Sebagai  salah  satu  untuk mengoptimalkan  pemanfaatan  dari  jamur lingzhi  bagi  kesehatan  bagi  manusia  maka dilakukan  penelitian  menguji  aktivitas antioksidan ekstrak etanol 70%. dan ekstrak air dengan perbandingan waktu perendaman maserasi  selain  itu  dilakukan  juga  uji fitokimia  dalam  jamur  lingzhi.  Uji  aktivitas antioksidan  ekstrak  jamur  lingzhi  dengan menggunakan  metode  DPPH  (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil)  dengan  pelarut  air  dan  etanol 70%.    Identifikasi  senyawa  hasil  dari aktivitas  antioksidan  dengan  menggunakan instrumen  Liquid  Chromatography  Mass Spectrometry (LC-MS).

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini diawali dengan determinasi  dari  jamur  lingzhi  yang  masih
segar.  Kemudian  jamur  lingzhi  diayak dengan  ayakan  mesh  no  40  menghasilkan simplisia jamur lingzhi. Setelah itu dilakukan  analisis  kadar  air  dan  ekstraksi maserasi. Ekstraksi maserasi tersebut dengan variasi waktu dengan lama perendaman  24  jam,  48  jam  dan  72  jam masing-masing  dengan  2  pelarut  yaitu  air dan  etanol  70%.  Ekstrak  tersebut  dilakukan pengujian  melalui  analisa  kimia  yaitu  uji fitokimia  antara  lain  alkaloid,  flavonoid, saponin,  tanin  dan  terpenoid.  Dilanjutkan dengan analisis aktivitas antioksidan dengan ekstrak  etanol  70  %  dan  ekstrak  air  jamur lingzhi  dengan  Spektrofotometer  UV/VIS. Kemudian  diidentifikasi  senyawa  dengan Liquid Chromatography Mass  Spectrometry (LC-MS)

## Determinasi Tanaman
Sampel  yang  digunakan  adalah  jamur lingzhi  yang  diperoleh  dari  daerah  Solo, Jawa  Tengah.  Jamur  lingzhi  tersebut dilakukan uji determinasi di pusat penelitian biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Cibinong-Bogor.

## Pembuatan Simplisia
Ditimbang jamur lingzhi sebanyak 2000 gram,  dicuci  dengan  air  yang  mengalir sampai bersih, kemudian ditiriskan selanjutnya  pengecilan  ukuran  dengan  40 mesh  dan  pengeringan  selama  4  jam. Setelah kering, simplisia diserbukkan dengan lumpang, kemudian disimpan dalam wadah  bersih  dan  tertutup  rapat,  yang selanjutnya akan digunakan dalam pengujian berikutnya.
Analisa  Kadar  Air  Simplisia  Jamur Lingzi (DepKes RI, 2000)
Cawan  aluminium  kosong  dikeringkan dalam oven selama 15 menit dan didinginkan  dalam  desikator  selama  10 menit, kemudian ditimbang (W0). Sebanyak 2  gram  (W1)  dimasukkan  kedalam  cawan. Cawan  berisi  sampel  dikeringkan  dalam oven  suhu  105 0 C  selama  3  jam.  Cawan dipindahkan  ke  dalam  desikator  dan didinginkan selama 15 menit, lalu ditimbang
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
kembali (W2). Penimbangan diulang hingga diperoleh  bobot  tetap.  Kadar  air  contoh dihitung dengan persamaan berikut:
Kadar air (% b/b) = Keterangan :
W0 = Bobot awan Kosong (gram)
W1 = Bobot Sampel (gram)
W2
= Bobot Cawan + Sampel akhir (gram)

## Ekstraksi Jamur Lingzhi
(dengan Pelarut Air dan Etanol 70%)
Serbuk  simplisia  jamur  lingzhi  masing- masing  sebanyak  20  gram  diekstrak  dengan menggunakan 1 liter etanol  70% dan 1 liter air  di  dalam  maserator  1  hari  (24  jam),  2 hari  (48  jam)  dan  3  hari  (72  jam)  dengan sesekali  dikocok,  kemudian  dipekatkan ekstraknya  dengan Rotary  evaporator dan diuapkan  dengan  oven  lalu  ditimbang bobotnya.  Kemudian  dihitung  rendemen dengan persamaan berikut :

## Rendemen =

## Pengujian Fitokimia
Meliputi  uji  alkaloid,uji  flavonoid,uji Saponin,  uji  Tanin  dan  uji  Triterpenoid dansSteroid (DepKes RI, 1985)
Analisis  Antioksidan  dengan  1,1-  difenil- 2-pikrilhidrazil  (DPPH) (Chow, 2003) a. Pembuatan Larutan DPPH 1 mM
Lebih  kurang  19,716  mg  DPPH  (BM 394,32)  ditimbang,  lalu  dilarutkan  dengan metanol pro analis hingga 100 ml, kemudian ditempatkan dalam botol gelap.

## b. Penentuan
Panjang Gelombang Maksimum Penentuan panjang gelombang
maksimum  dimulai  dengan  dipipet  1  ml larutan  DPPH  1mM  kemudian  dimasukkan kedalam labu ukur 5 ml yang seluruh bagian labu ukurnya telah ditutup dengan alumunium  foil  dan  ditambahkan  metanol p.a  sampai  tanda  batas,  lalu  dihomogenkan dan diinkubasi terlabih dahulu selama waktu optimum  pada  suhu  37 0 C,  setelah  itu serapanya  diukur  pada  panjang  gelombang
400  nm  sampai  dengan  600  nm  dengan menggunakan Spektrofotometri  UV-VIS.

## c. Penentuan Waktu Inkubasi Optimum
Larutan DPPH 1mM dipipet sejumlah 1 ml  ke  dalam  labu  ukur  5  ml  yang  seluruh bagiannya  telah ditutup  dengan  alumunium foil,  ditambahkan  metanol  p.a  sampai  tanda batas,  lalu  dihomogenkan.  Serapan  diukur pada panjang gelombang maksimum tiap 10, 20, 30, 40, 50 dan 60 menit, serta ditentukan waktu  optimum  (waktu  inkubasi  yang memberikan serapan cukup stabil).

## d. Pembuatan Larutan Blanko
Larutan  DPPH  (0,2  mM)  dipipet  1  ml ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah  ditara  5 ml, lalu ditambahkan metanol pro analis dan dihomogenkan  selanjutnya  inkubasi  pada suhu  37 o C  selama  waktu  optimum.  Serapan diukur  menggunakan  spektrofotometri  UV- VIS pada panjang gelombang maksimum.

## e. Pembuatan Deret Standar Vitamin C (kontrol positif)
Sebanyak  50  mg  vitamin  C  ditimbang lalu dilarutkan dalam metanol di dalam labu ukur  sampai  50  ml  sehingga  diperoleh larutan standar vitamin C dengan konsentrasi  1000  ppm  (larutan  induk). Kemudian  larutan  vitamin  C  dibuat  dalam beberapa konsentrasi yaitu 5 , 10, 15, 20 dan 25  ppm  dengan  cara  memipet  sebanyak  25, 50, 75, 100 dan 125 µl larutan induk vitamin C  kemudian  ditambahkan  1  ml  larutan DPPH 1 mM dan metanol p.a kedalam labu takar 5 ml sampai tanda batas.

## f. Pembuatan Larutan Uji
Ekstrak  etanol  70%  dan  ekstrak  air ditimbang  sebanyak  50  mg  dimasukkan kedalam  labu  ukur  50  ml  kemudian dilarutkan  dengan  metanol  sampai  tanda batas,  ini  merupakan  larutan  induk  (1000 ppm).  Larutan  uji  dibuat  dalam  beberapa konsentrasi  yaitu  100,  200,  300,  400  dan 500  ppm,  dengan  cara  memipet  sebanyak 500,  1000,  1500,  2000  dan  2500  µl  larutan uji (1000 ppm) kemudian ditambahkan 1 ml larutan  DPPH  1mM  dan  metanol  pro  analis
Farida Nuraeni, Dkk:Aktivitas Antioksidan dan Identifikasi Senyawa Ekstrak Jamur.....
kedalam labu takar 5 ml sampai tanda batas, dihomogenkan  dan  labu  ditutup  dengan alumunium foil.

## g. Uji  Antioksidan  dengan  1,1-difenil-2- pikrilhidrazil (DPPH)
Larutan uji, larutan blanko dan larutan vitamin C (kontrol positif) kemudian segera diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  waktu optimum.  Setelah  itu,  diukur  serapannya dengan  Spektrofotometri    pada  panjang gelombang maksimum yang sudah ditentukan.  Penentuan  dilakukan  secara duplo.  Pengukuran  presentase  hambatan terhadap DPPH dihitung dengan menggunakan rumus:
Hambatan(%) = 100 h. Nilai % IC 50 (Inhibition
Concentration 50)
Menentukan  nilai  IC 50 diperoleh  garis anatara  50%  daya  hambat  dengan  sumbu konsentrasi,  dengan  persamaan  y  =  ax  +  b, dimana  y  =  50  dan  x  adalah  konsentrasi larutan  uji  yang  mampu  menghambat  50% larutan radikal bebas 1,1-difenil-2- pikrilhidrazil (IC 50 ).
Gambar 1. Penentuan Nilai % IC 50
Identifikasi Senyawa Aktif Ekstrak dengan LC-MS Identifikasi senyawa menggunakan Liquid Chromatography-Mass  Spectrometry (LC-MS) dilakukan  pada  ekstraksi  jamur lingzhi  dari  pelarut  etanol  70%  yang memiliki nilai aktivitas antioksidan tertinggi.  Sebanyak  0,5  gram  ekstrak  etanol 70%.  dilarutkan  dalam  50  mL  metanol  pro analis.  Larutan  disaring  menggunakan  filter syringe  0,22  mikron,  dimasukkan  ke  dalam
vial  2  mL,  dan  diinjeksikan  ke  sistem  LC- MS.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil determinasi di Herbarium  Bogoriens  bidang  Botani  Pusat Penelitian  Biologi LIPI  Cibinong,  Bogor menyatakan  bahwa sampel atau bahan yang digunakan  dalam  penelitian  adalah  Jamur Lingzhi  ( Ganoderma  lucidum (Curtis)  P. Karst) dengan suku Ganodermataceae . Hasil pengukuran kadar air menunjukkan bahwa simplisia jamur lingzhi memiliki kadar air yaitu 7,9021 %. Menurut (Menkes, 1994)  parameter standar kadar air adalah  tidak  lebih  dari  10%.  Uji  fitokimia yang  terdapat  di  dalam  ekstrak  air  dan etanol  70%,  digunakan  untuk  mendeteksi awal  senyawa  fitokimia  yang  terkandung dalam  jamur  lingzhi.  Hasil  uji  fitokimia ekstrak  air  dan  etanol  70%  dapat  dilihat pada Tabel 3.
Tabel    3 . Hasil  Uji  Fitokimia  Ekstrak  Air  dan Etanol 70%
Uji Ekstrak Air Etanol 70% Flavonoid - - Alkaloid 1. Wagner + + 2. Meyer + + 3. Dragendorf + + Tanin - - Saponin + + Triterpenoid - - Steroid - -
Berdasarkan  pada  hasil  uji  fitokimia menunjukkan  bahwa  pada  ekstrak  air  dan etanol 70% hasilnya sama dalam keberadaan golongan senyawa kimianya terhadap jamur lingzhi. Berdasarkan pada Tabel 3 menunjukkan  bahwa  golongan  senyawa kimia  yang  menunjukkan  positif  terdapat didalam  jamur  lingzhi  adalah  alkaloid  dan saponin, sementara flavonoid, tanin, triterpenoid  dan  steroid  memberikan  respon yang negatif.
Hasil  analisis  diketahui  bahwa  sampel jamur  lingzhi  positif  menggandung  saponin yang  ditandai  dengan  terbentuknya  busa setelah pengocokan. Busa yang ditimbulkan
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
saponin  karena  adanya  kombinasi  struktur senyawa penyusunnya yaitu rantai sapogenin  non-polar  dan  rantai  samping polar  yang  larut  dalam  air  (Kristianingsih, 2005).  Saponin  adalah  glikosida  dalam tanaman  dan  terdiri  atas  gugus  sapogenin, heksosa,  pentosa,  atau  unsur  asam  uronat (Winarno, 2004). Menurut Robinson, (1995) adanya  saponin  dalam  tanaman  dapat bekerja  sebagai  antimikroba  dan  dapat digunakan  sebagai  bahan  baku  sintesis hormon  steroid  yang  digunakan  dalam bidang  kesehatan.  Golongan  flavonoid, tanin, triterpenoid dan steroid tidak teridentifikasi  pada  ekstrak  air  dan  etanol 70%  pada jamur lingzhi.

## Rendemen Ekstrak Jamur Lingzhi Pada Berbagai Variasi Waktu  Maserasi
Ekstraksi  jamur  lingzhi  dilakukan metode  maserasi  dengan  membandingkan  2 pelarut  yaitu  sebanyak  masing-masing  20  g simplisia  jamur  lingzhi  dimaserasi  dengan pelarut air dan pelarut etanol 70% sebanyak 1000  ml . Ekstraksi  dilakukan  dengan membandingkan  lama  perendaman  yaitu maserasi 1 hari (24 jam), maserasi 2 hari (48 jam)  dan  maserasi  3  hari  (72  jam). Perbandingan  lama  ektrasksi  bertujuan untuk menentuan potensi aktivitas antioksidan terhadap lamanya maserasi.
Metode  maserasi  ini  digunakan  karena ekstraksi cara dingin sehingga tidak menggunakan  suhu  tinggi  yang  dapat merusak  senyawa-senyawa  yang  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  terdapat  dalam sampel jamur lingzhi.  Keuntungan maserasi yaitu bahan yang sudah halus memungkinkan  untuk  direndam  dalam pelarut  sampai  meresap  dan  melunakkan susunan  sel  sehingga  zat-zat  yang  mudah larut akan terlarut (Febriani, 2015). Masing- masing  dari  hasil  maserasi  berupa  maserat yang  berwarna  coklat  tua  dengan  pelarut etanol  70%  dan  coklat  muda  menggunakan pelarut  air.  Pengentalan  ekstrak  dilakukan menggunakan  rotary  evaporator  untuk menghilangkan  pelarut  yang  masih  berada di  dalam  ekstrak  sehingga  diharapkan ekstrak yang diperoleh merupakan
komponen  zat  aktif  yang  terdapat  pada jamur  lingzhi  (Budiarti,  2014).  Maserat dipekatkan  dengan rotary  evaporator yang dilengkapi  pompa  vacum.  Pompa  vacum pada rotari evaporator berfungsi penguapan pelarut  dapat  dilakukan  dibawah  titik  didih pelarut  dan  proses  dapat  berlangsung  lebih cepat.  Penguapan  pelarut  etanol  70%  dapat dilakukan di bawah titik didihnya yaitu pada suhu  45 ° C.  Proses  ini  dilakukan  pada  suhu tersebut  untuk  menjaga  senyawa  aktif  yang terkandung  tidak  rusak  karena pemanasan. Prinsip  kerja  dari rotary  evaporator yaitu proses  pemisahan  ekstrak  dari  cairan penyarinya dengan pemanasan yang dipercepat oleh labu.
Tabel  4. Rendemen Ekstrak Air dan Etanol
70 % dengan Variasi Waktu Maserasi Pelarut Rendemen (%)   Ekstrak 1 hari (24 jam) 2 hari (48 jam) 3 hari (72 jam) Air 4,60 4,78 4,98 Etanol 70% 3,48 3,22 3,70 Tingginya  rendemen  yang  diperoleh dengan pelarut air yang mampu mengekstrak lebih banyak komponen bioaktif  yang  memiliki    kepolaran  yang lebih  tinggi.  Hasil  penelitian  menunjukkan kandungan  senyawa  pada  jamur  lingzhi yaitu Proscillaridin Proscillaridin merupakan salah satu senyawa dalam jamur lingzhi yang bersifat  polar  sehingga  pada  proses  ekstraksi lebih banyak larut dalam air dari pada etanol 70  %.  Hal  tersebut  menunjukkan  pelarut memiliki  peranan  penting  dalam  proses ekstraksi.  Berikut  struktur  dari Proscillaridin hasil dari penelitian.
Gambar 2. Stuktur Proscillaridin
Farida Nuraeni, Dkk:Aktivitas Antioksidan dan Identifikasi Senyawa Ekstrak Jamur.....
Uji  Aktivitas  Antioksidan  dengan 1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) Penelitian  menggunakan  Vitamin  C sebagai  standar  karena  masyarakat  biasa mengkonsumsi  vitamin  sebagai  penengkap radikal  bebas  dalam  hal  ini  Gambaran tentang aktivitas antioksidan bila dibandingkan  vitamin  C  yang  sering digunakan. Penelitian melakukan pembuatan induk  sampel  dari  ekstrak  etanol  70%  juga ekstrak  air  pada  masing-masing  lamanya perendaman,  larutan  sampel  induk  yang dibuat  kemudian  diencerkan  dengan  deret standar.  Tujuan  dari  pembuatan  variasi kadar ini bertujuan untuk memberi gambaran  mengenai  aktivitas  antioksidan dari senyawa uji.
Aktivitas  antioksidan  ditentukan  dari kemampuan  senyawa  yang  terdapat  dalam ekstrak  yang  menurunkan  intensitas  warna ungu radikal DPPH pada panjang gelombang maksimum. Penurunan intensitas ungu DPPH ini disebabkan oleh berkurangnya kromofor  atau ikatan rangkap terkonjugasi  pada  senyawa  DPPH,  yang disebabkan  oleh  adanya  ekstrak  sebagai penangkap  radikal  akan  mendonorkan  atom H  pada  DPPH  menjadi  DPPH-H  tereduksi yang menjadi warna kuning (Huang, 2005).
Warna kuning terbentuk setelah ditambah  DPPH  disebabkan  oleh  adanya senyawa  yang  dapat  mendonorkan  atom hidrogen  di  dalam  ekstrak  kloroform  jamur lingzhi,  sehingga  dapat  mengakibatkan molekul  DPPH  tereduksi  yang  diikuti dengan  menghilangnya  warna  ungu  dari larutan  DPPH.  Struktur  DPPH  dan  DPPH tereduksi  hasil  reaksi  dengan  antioksidan dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar  3 . Reduksi DPPH dari Senyawa Antioksidan (Prakash, 2001)
Berdasarkan  hasil  pengukuran  vitamin C diperoleh nilai IC 50 yaitu  sebesar 11,0872 μg/ml.  Nilai  tersebut  menunjukkan  bahwa vitamin  C  memiliki  aktivitas  antioksidan yang sangat  kuat  karena  memiliki nilai  IC 50 kurang  dari  50  μg/mL.  Pengujian  aktivitas antioksidan  Vitamin  C  ini  menghasilkan hubungan  antara  konsentrasi  Vitamin  C yang  digunakan  dengan  persen  inhibisinya, dapat dilihat pada  Gambar 4.
Gambar  4. Grafik Hubungan Konsentrasi Vitamin C dengan persen Inhibisi

## Identifikasi senyawa antioksidan dengan Liquid Chromatography Mass Spectrometry (LC-MS)
Identifikasi  ekstrak  etanol  70  %  jamur lingzhi  yang  berpotensi  sebagai  antioksidan dalam  penelitian  menggunakan  metode Liquid  Chromatograph-Mass  Spectrometry (LC-MS).    Berikut  kromatogram  hasil identifikasi  ekstrak  etanol  70%  jamur lingzhi.  Hasil  Kromatogram  dari  MS  dapat dilihat pada Gambar 5.
Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan dalam ekstrak ekstrak etanol 70% menggandung fenolik dan alkaloid. Senyawa  Bisphenol  M  diduga  merupakan senyawa  golongan  fenolik  (Gambar  6). Menurut  Gagola,  (2004)  bahwa  senyawa fenolik memiliki aktivitas antioksidan. Sifat antioksidan  senyawa  ini  berkaitan  dengan keberadaan  gugus  fenolik  yang  dapat mendonorkan  atom  hidrogen  pada  suatu radikal  bebas  sehingga  radikal  tersebut menjadi  tidak  reaktif  lagi  sedangkan senyawa 1-{[2-(3,4- Dimethoxyphenyl)ethyl]amino}-3  methyl  - 2-octylpyrido[1,2-a]benzimidazole-4- carbonitrile diduga termasuk dalam
golongan  alkaloid.  Menurut  Hanani,  (2015) .Hasil yang sesuai pada uji Fitokimia bahwa ekstrak  etanol  jamur  lingzhi  menggandung alkaloid.  Alkaloid  dapat  berfungsi  sebangai zat antioksidan
Gambar  5. Kromatogram Hasil Identifikasi Ekstrak etanol 70% dengan LC- MS
Tabel 5. Identifikasi senyawa dalam ekstrak etanol 70% menggunakan database pada aplikasi Chemspider
Larutan Lama waktu masersi (Jam) Konsentrasi (ppm) Serapan sampel Hambatan (%) IC 50 Air 24 100 0,554 34,74 220,664
200 0,416 51,001
300
0,387 54,416 400 0,214 74,793
500 0,150 82,332 48 100 0,627 26,14 482,24
200 0,594 30,03
300 0,532
37,33 400 0,483 43,10 500 0,400 52,88 72 100 0,813 4,240 521,4 200 0,707 16,48
300 0,646 23,91 400 0,583 31,33
500 0,408 51,94 Etanol 70% 24 100 0,424 50,058 94,83
200 0,356 58,068 300 0,350 58,775 400 0,238 71,96
500 0,225 73,49 48 100 0,527 37,92 287,57
200 0,449 47,14 300
0,409 51,82 400 0,360 57,59 500 0,350 58,77 72 100 0,723 14,84 509,670 200 0,612 27,91 300
0,519 39,88 400 0,488 42,52 500 0,463 45,46
Blangko 0 0,849
Gambar 6. Kromatogram Senyawa Bisphenol M
Gambar 7. Kromatogram Senyawa 1-{[2- (3,4Dimethoxyphenyl) ethyl] amino}-3-methyl-2-octylpyrido[1,2- a]benzimidazole-4-carbonitrile
Hasil dari kromatogram Senyawa Bisphenol M dengan bobot molekul 346.462 dengan  waktu  retensi  7,189  menit.
Kromatogram Senyawa 1-{[2-(3,4- Dimethoxyphenyl)  ethyl]  amino}-3-methyl-2- octylpyrido [1,2a]benzimidazole -4 - carbonitrile dengan  bobot  molekul  498.659 dengan waktu retensi 8,138 menit.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  Penelitian  dapat disimpulkan bahwa potensi aktivitas antioksidan  yaitu  hari  maserasi  24  jam  (1 hari)  dengan  nilai  IC 50 94,83  ppm  dengan ekstrak  etanol  70  %  .Hasil  identifikasi menggunakan  LC-MS  menunjukkan  bahwa ekstrak  jamur  lingzhi  dengan  pelarut  etanol 70%  mengandung    senyawa  murni  yaitu golongan  fenolik  :  Bisphenol  M    dan golongan
alkaloid
1-{[2-(3,4-
Dimethoxyphenyl)ethyl]amino}-3-methyl-2-
ATIP Padang
Time 5.20 5.40 5.60 5.80 6.00 6.20 6.40 6.60 6.80 7.00 7.20 7.40 7.60 7.80 8.00 8.20 8.40 8.60 8.80 9.00 9.20 9.40 9.60 % 0 100 Septi  sample Jamu B F ACN Air 2: TOF MS ES+ BPI 4.31e4 8.14 7.26 7.19 6.56 6.31 5.91 5.18 6.74 7.81 8.79
Farida Nuraeni, Dkk:Aktivitas Antioksidan dan Identifikasi Senyawa Ekstrak Jamur.....
octylpyrido[1,2-a]benzimidazole-4- carbonitrile .

## DAFTAR PUSTAKA
Budiarti,  Mellia  dan  Rina  Sri  Kasiamdari. (2014).  Pengaruh  Modifikasi  Media Budaya Jamur Tiram ( pleurotus Ostreatus  Jacq.  Ex  Fr.  Kummer )
Terhadap  Morfologi,  Pertumbuhan,
dan  Kandungan  Protein. Skripsi . Universitas Gadjah Mada : Yogyakarta Chow  ST.  WW  Chaw  and  Chung.  (2003) Antiokxidant activity and safety of 50
%
ethanolic  red  bean  extract  ( Phascolus raditus L Var Aurea ). Journal of Food Science . Vol.  68(1); 21-25 Depkes  RI.  (2000).  Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat. Jakarta:  Departemen  Kesehatan  RI. hal 5-11.
Febriani  D,  Dina  M  dan  Endah  R.  (2015).
Karakteristik  Simplisia  Dan  Ekstrak Etanol  70  %    Daun  Sirsak  ( Annona muricata Linn).  Prosiding  Penelitian SPeSIA Unisba : ISSN 2460-6472.
Gagola, C et al. (2004). Aktivitas Antioksidan  dari  Ekstrak  Fenolik
Cortex Umbi kayu ( Manihot esculenta )  Daging  putih  dan  daging kuning  yang  diambil  dari  kota melonguane kabupaten kepulauan talaud. Jurnal ilmiah farmasi pharmacon .  Vol  3  (2).  ISSN  2302- 2493.
Hanani et  al .  (2015).  Identifikasi  Senyawa Antioksidan dalam Spon Callyspongia SP  dari  Kepulauan  Seribu.  Majalah
Ilmu  Kefarmasian  II.  (3),  Halaman
130. Huang,  D  and  Prior  R.L.  2005.  The Chemistry Behind Antioxidan Capacity Assays. Journal Of
Agricultural  And  Food  Chemistry . 53:1841-1856.
Jaelani.  (2008). Jamur  Berkhasiat  Obat. Jakarta:  Pustaka  Obor  Populer.  Hal: 61-70.
Kristianingsih.
(2005). Isolasi dan Identifikasi  Senyawa  Terpenoid  dari Akar  Tanaman  Kedondong.  Skripsi. Institut Pertanian Bogor. Menkes. (1994). Persyaratan Obat tradisional. Jakarta : Mentri kesehatan.
Middleton  E,  C  Kandaswami  &  TC Theoharides.  (2000).  The  effects  of plant  flavonoids on mammalian cells: implications  for  inflammation,  heart disease,  and  cancer.  Pharmacological Reviews. 52. 673– 751.
Prakash, A., Rigelhof, F., Miller, E. (2001).
Antioxidant Activity. Journal
Medalliaon  Laboratories  Analitycal Progress : Vol 10(2).
Robinson,  T.,  (1995).  Kandungan  organik Tumbuhan Tinggi, Edisi VI, Hal. 191- 216,  Diterjemahkan  oleh  Kosasih Padnawinata, ITB, Bandung.
Sasikumar,  J.  M.,  U.  Jinu  and  R.  Shamna. (2009).  Antioxidant  Activity  and HPTLC Analysis of Pandanus odoratissimus L.  Root. European Journal  of  Biological  Sciences Vol.
1(2): 17 – 22.
Winarno F.G. (2004). Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama