Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 5 Nomor 3, 2023
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i3.24109

## Isolasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Minyak Atsiri
Daging Buah Pala ( Myristica fragrans)
Muh. Nasir 1 , Eri Marwati 2*
1,2 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Khairun, Jl. Jusuf Abdurrahman Kampus II Gambesi Kota Ternate 97719, Indonesia
*Penulis Korespodensi. Email: erimarwati@unkhair.ac.id

## ABSTRAK
Pala  dianggap  sebagai  bahan  penting  dari  berbagai  aplikasi  industri  mulai  dari  makanan hingga  kosmetik.  Produk  farmasinya  juga  penting  karena  sifat  antioksidan  dan antimikrobanya. Penelitian lebih  lanjut diperlukan untuk mengisolasi dan  mengidentifikasi senyawa  bioaktif Myristica  fragrans. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengisolasi  dan mengetahui aktivitas antioksidan minyak atsiri daging buah pala ( Myristica fragrans ). Sampel yang  digunakan  adalah  daging  buah  pala  ( Myristica  fragrans )  di  ambil  dari  Pulau  Ternate, Maluku Utara. Minyak atsiri daging buah pala di isolasi menggunakan destilasi uap air dan aktivitas  antioksidan  diuji  dengan  metode  DPPH.  Semua  data  disajikan  sebagai  rata-rata  ± standar deviasi (SD) dan dilakukan tiga ulangan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa isolasi minyak  atsiri  daging  buah  pala  yang  diperoleh  dengan  randemen  sebesar  0,32%.  Secara organoleptis  minyak  atsiri  daging  buah  pala  yang  diperoleh  dari  proses  destilasi  uap  air memiliki kualitas yang memenuhi SNI, berupa cairan bening pucat sampai kekuningan dan memiliki  bau  khas.  Uji  fitokimia  diperoleh  minyak  atsiri  daging  buah  pala  mengandung alkaloid,  flavonoid  dan  steroid,  serta  tidak  mengandung  polifenol  dan  saponin.  Semakin meningkatnya konsentrasi minyak atsiri maka nilai absorbansi dan persen inhibisi semakin meningkat sehingga diperoleh rata-rata nilai IC 50 49,34 ppm. Minyak atsiri daging buah pala dengan destilasi uap air diperoleh randeman 0,32 % dan memiliki aktivitas antioksidan yang tergolong antioksidan kuat.

## Kata Kunci:
Isolasi; Antioksidan; Minyak Atsiri; Daging Buah Pala
Diterima: 12-08-2023 Disetujui: 26-11-2023 Online: 31-12-2023

## ABSTRACT
Nutmeg is considered an important ingredient of various industrial applications ranging from food to cosmetics. The pharmaceutical product is also important for its antioxidant and antimicrobial properties. Further research is needed to isolate and identify the bioactive compounds of Myristica fragrans. The aim of this research was to isolate and determine the antioxidant activity of the essential oil of nutmeg flesh (Myristica fragrans). The sample used was nutmeg flesh (Myristica fragrans) taken from Ternate Island, North Maluku. The essential oil of nutmeg flesh was isolated using water vapor distillation and the antioxidant activity was tested using the DPPH method. All data are presented as mean ± standard deviation (SD) and were carried out in triplicate. The results of the research showed that the isolation of nutmeg essential oil obtained with a yield of 0,32%. Organoleptically, the essential oil of nutmeg flesh obtained from the steam distillation process has quality that meets SNI, in the form of a clear to rusty liquid and has a distinctive odor. Phytochemical tests obtained that the essential oil of  nutmeg  flesh contains  alkaloids,  flavonoids  and  steroids,  and  does  not  contain  polyphenols  and  saponins.  The
concentration of essential oil increases, the absorption value and percent inhibition increase so that an average  IC 50 value  of  49,34  ppm  is  obtained.  The  essential  oil  of  nutmeg  flesh  by  steam  distillation obtained a yield of 0,32% and has antioxidant activity which is classified as a strong antioxidant.
Copyright © 2023 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Isolation; Antoxidant; Essential Oil; Nutmeg Flesh
Received: 2023 -08-12 Accepted: 2023 -11-26 Online: 2023 -12-31

## 1. Pendahuluan
Pala dianggap sebagai bahan penting dari berbagai aplikasi industri mulai dari makanan  hingga  kosmetik.  Produk  farmasinya  juga  penting  karena  sifat  antioksidan dan  antimikrobanya  [1] . Minyak  atsiri  daging  buah  pala  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  gram  positif  dan  negatif  [2].  Penelitian  yang  dilakukan sebelumnya oleh Muh. Nasir (2022) menunjukkan bahwa ekstrak etanol daging buah pala  memiliki  diameter  hambat  paling  besar  terhadap Candida  albicans [3] . Pala  juga berguna sebagai stimulan dan antiinflamasi [4]. Dapat dipertimbangkan sebagai obat alternatif.  Penelitian  lebih  lanjut  diperlukan  untuk  mengisolasi  dan  mengidentifikasi senyawa  bioaktif Myristica  fragrans dan  kemampuannya  untuk  dijadikan  obat  dalam waktu dekat [5] . Manfaat pala menjadi pusat perhatian untuk dikembangkan menjadi bahan baku obat tradisional.
Komponen  minyak  atsiri  pala  bervariasi  menurut  asalnya:  Indonesia  (32 senyawa)  [6].  Terdapat  27 – 38  kandungan  kimia  yang  terdeteksi  pada  berbagai konsentrasi [7]. Senyawa kimia utama minyak pala adalah alfa pinene, sabinene, beta pinene, 3-carene, limonene, gamma terpinene, 4-terpineol, safrole, myiristicine, eugenol, metil  eugenol,  isoeugenol,  dan  elimicine  dengan  senyawa  yang  berbeda  komposisi untuk setiap jenis pala [8]. Minyak atsiri daun pala mengandung 7 komponen senyawa utama yaitu Limonene (25,73%), Diisooctyl Adipate (15,63%), α -Terpinolene (11,44%), delta.  3-Carene  (10,79%),  1,3-Benzodioxole  (8,06%),  3-Cyclohexene-1-ol  (7,94%)  dan Sabinene  (7,70%) [9]. Komponen  senyawa  yang dominan  pada  daging  buah  dan  fuli yaitu miristisin,  sabinen,  α - pinen,  β -pinen   yang berkontribusi  bagi  aroma  khas  pada pala  [10].  Uji  fitokimia  ekstrak  daging  buah  tanaman  pala  diperoleh  bahwa  ekstrak daging buah pala mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, saponin dan tannin [11]. Komponen  kimia  bagian  tanaman  pala  sangat  beragam  yang  dipengaruhi  banyak faktor, termasuk tempat tumbuhnya.
Isolasi dan penelitian aktivitas antioksidan telah banyak dilakukan. Minyak pala yang diperoleh rendemen hasil penyulingan masing-masing sebesar 2,41% dan 3,66% untuk biji dan fuli [12] . Isolasi trimiristin diperoleh kristal putih dengan hasil sebesar 80,02% dan kemurnian mencapai 99,35% [13]. Aktivitas antioksidan minyak atsiri fuli diperiksa menggunakan uji radikal bebas (21,95 μg/mL), β -karoten dalam asam linoleat dan  persen  penghambatan  dalam  sistem  asam  linoleat  (67,9%)  [14] . Aktivitas antioksidan hasil minyak atsiri bunga pala dan buah mempunyai nilai IC 50 lebih kuat dibandingkan  bagian  pala  lainnya  seperti  biji,  akar  dan  kulit  pohon  [15].  Korelasi aktivitas penangkapan radikal DPPH dengan kandungan total fenolik ekstrak daging M.  fragrans masing-masing  sebesar  95,91%  [16].  Aktivitas  antioksidan  pada  bagian tanaman  pala  memiliki  aktivitas  yang  beragam.  Banyak  faktor  yang  mempengaruhi aktivitas  antioksidan  termasuk  bagian  tanaman  dan  tempat  tumbuh  tanaman  pala. Penelitian  ini  merupakan  penelitian  lanjutan  yaitu  dengan  mengisolasi  minyak  atsiri daging  buah  pala  yang  di  Kota  Ternate  yang  memiliki  beragam  khasiat  termasuk
melakukan  mengujian  aktivitas  antioksidannya.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengisolasi  dan  mengetahui  aktivitas  antioksidan  minyak  atsiri  daging  buah  pala ( Myristica fragrans ).

## 2.  Metode
Sampel yang digunakan adalah daging buah pala ( Myristica fragrans ) di ambil dari  Pulau  Ternate,  Maluku  Utara.  Sampel  dimasukkan  dalam  kantong  plastik  dan dibawa ke Laboratorium Fakultas Kedokteran Universitas Khairun.

## Bahan
Akuades  (Pure  water,  Indonesia),  amoniak  (Katalis  Datase  Prima,  Indonesia), arang aktif (Eagle Indo Pharma, Indonesia), asam asetat (Merck, Indonesia), asam sulfat (Merck, Indonesia), asam klorida (Merck, Indonesia), asetat anhidrat (Merck, Indonesia), besi  (III)  klorida  (Katalis  Datase  Prima,  Indonesia),  bismuth  sub  nitrat  (Merck, Indonesia),  DPPH  (Sigma  Aldrich,  Indonesia),  daging  buah  pala  (Kota  Ternate, Indonesia), iodium (Katalis Datase Prima, Indonesia), kalium iodide (Merck, Indonesia), kloroform (Merck, Indonesia), magnesium (Merck, Indonesia), merkuri klorida (Merck, Indonesia),  metanol  p.a  (Merck,  Indonesia),  natrium  sulfat anhidrat  (Katalis  Datase Prima, Indonesia), dan vitamin C (Merck, Indonesia).

## Isolasi Minyak Atsiri
Sebanyak 500 g sampel pala dimasukkan ke dalam labu destilasi, ditambahkan akuades  sebanyak  1000  ml  hingga  seluruh  daging  buah  pala  terendam  kemudian dirangkai alat destilasi (peralatan Stahl) dan suhu minyak 120 o C. Destilasi selama 3 jam dihitung setelah air mendidih, minyak yang diperoleh ditampung ke dalam erlemeyer [17].  Ekstraksi  minyak  pala  dipisahkan  dari  akuades  menggunakan  natrium  sulfat anhidrat  (Na 2 SO 4 )  kemudian  disaring  untuk  mendapatkan  minyak  atsiri  pala  murni [18].

## Penentuan Karakteristik Minyak Atsiri
Analisis  warna  minyak  dilakukan  secara  empiris,  yaitu  dengan  mengamati kenampakan  fisik  minyak  yang  diperoleh  melalui  penyulingan.  Minyak  atsiri  yang diperoleh diamati secara organoleptis dengan mengamati bentuk, warna, dan aroma. Dihitung persen randemen.
% Randemen = 𝑀𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 𝑎𝑡𝑠𝑖𝑟𝑖 (𝑔𝑟𝑎𝑚) 𝑆𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 (𝑔𝑟𝑎𝑚) 𝑥 100% [19].

## Uji Fitokimia

## Alkaloid
Sampel dicampur dengan 5 ml kloroform dan 5 ml amoniak kemudian dikocok, dan dipisahkan. Ditambahkan 5 tetes asam sulfat 2 N pada masing-masing larutan, dan didiamkan,  kemudian  masing  masing  larutan  ditambahkan  dengan  pereaksi  Mayer, Wagner,  dan  Dragendorf.  Terbentuknya  endapan  jingga,  cokelat,  dan  putih menunjukkan adanya alkaloid [20].

## Flavonoid
Sampel tambahkan 2 tetes HCl pekat, kocok kuat-kuat, dan tambahkan bubuk magnesium.  Sampel  positif  Flavonoid  apabila  terdapat  buih  yang  pekat  dan  warna berubah menjadi jingga [20].

## Polifenol
Sampel  direaksikan  dengan  beberapa  tetes  larutan  Fe  (III)  klorida  10%.  Bila terbentuk warna biru tua, biru kehitaman atau hitam kehijauan menandakan adanya senyawa polifenol [21].

## Saponin
Sampel  diekstraksi  dengan  air  panas,  dikocok  kuat  dan  dibiarkan  selama  2 menit.  Ditambahkan  2  tetes  HCl  2  N,  kocok  kuat-kuat  dan  amati  apakah  busa  yang terbentuk  bertahan  selama  10  menit.  Sampel  positif  mengandung  saponin  apabila terdapat buih yang pekat dan konsisten selama 10 menit [20].

## Triterpenoid dan Steroid
Sampel  ditambahkan  5  mL  kloroform  dan  5  mL  akuades.  Dikocok  dan didiamkan  beberapa  menit  sampai  terbentuk  lapisan.  Lapisan  kloroform  dilewatkan pada  arang  aktif  dan  digunakan  untuk  pemeriksaan  terpenoid  dan  steroid  dengan menambahkan  asetat  anhidrat  dan  asam  sulfat  pekat.  Sampel  positif  mengandung terpenoid (triterpenoid) jika warnanya berubah menjadi merah atau coklat. Jika warna yang terbentuk biru, ungu atau hijau, sampel mengandung steroid [20].

## Uji Aktivitas Antioksidan Total
Sebanyak  4  mL  larutan  DPPH  0,1  mM  dimasukkan  ke  dalam  masing-masing tabung  berisi  50  µL  pembanding  dan  larutan  uji,  divortex  selama  5  detik.  Setelah  30 menit, larutan dibaca serapannya dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang  gelombang  517  nm.  Dihitung  nilai  persen  inhibisi  dan  IC 50 .  Vitamin  C digunakan sebagai pembanding (larutan standar).
% inhibisi = ((AB − AE)/AB) × 100, dimana AB dan AE adalah absorbansi  blanko dan  sampel  uji  dan  pembanding  [20].  Nilai  IC 50 diperoleh  dari  regresi  linier  dengan mengganti nilai y dengan 50 dari persamaan y= a + bx [23].

## Analisis Data
Semua data disajikan sebagai rata-rata ± standar deviasi (SD) dan dilakukan tiga ulangan.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Buah pala ( Myristica fragrans ) yang diambil di kebun Pala Kota Ternate dirajang terlebih  dahulu,  dipisahkan  daging  buah  dengan  biji  dan  fulinya.  Daging  buah  pala selanjutnya dibuat dalam bentuk simplisia sebelum diisolasi minyak atsirinya. Hal ini dilakukan  agar  penarikan  minyak  atsiri  daging  buah  pala  lebih  mudah  dan  optimal dibandingkan dalam kondisi segar yang banyak mengandung air.
Gambar 1. Minyak atsiri daging buah pala berwarna kuning (a) dan bening (b)
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  isolasi  minyak  atsiri  daging  buah  pala yang diperoleh dengan randemen sebesar 0,32% (tabel 1). Secara organoleptis minyak atsiri daging buah pala yang diperoleh dari proses destilasi uap air memiliki kualitas yang memenuhi SNI, berupa cairan bening pucat sampai kekuningan dan memiliki bau khas (gambar 1). Aroma khas minyak atsiri daging buah pala karena komponen kimia yang  terkandung  didalamnya.  Untuk  menjaga  kompenen  kimia  tersebut  dilakukan metode isolasi yang cocok agar tidak terjadi kerusakan selama proses isolasi.
Tabel 1. Karakteristik Minyak Atsiri Daging Buah Pala Parameter Hasil Organoleptis Cairan  bening  tidak  berwarna  sampai  dengan kuning pucat, bau khas aromatik Berat minyak 4,78 g Randemen  (rata-rata ± SD) 0,32 % b/b ± 0,06
Minyak  atsiri  daging  buah  pala  mempunyai  aroma  minyak  pala  yang  khas, sehingga secara umum memenuhi baku mutu minyak pala berdasarkan SNI 06-2388- 2006 [24]. Minyak daging buah pala memiliki kandungan miristisin yang diatas standar mutu minyak pala dan walaupun jumlah minyak pala yang terdapat dalam daging buah pala yang sedikit [25]. Myristicin merupakan senyawa fenil propanoid yang ada dalam minyak  atsiri  dari  pala  [26].  Senyawa  yang  khas  dan  menjadi  indikator  dalam karakteristik  aroma  dari  produk  minyak  yang  bersumber  dari  pala  [27].  Destilasi tekanan  rendah  adalah metode  yang  digunakan  untuk  mengisolasi  miristisin.  Untuk menghindari  kerusakan  senyawa  akibat  pemanasan  tinggi  maka  dilakukan pengurangan  tekanan  digunakan  agar  suhu  pemanasan  tidak  terlalu  tinggi  [28]. Destilasi uap air menghasilkan yield tertinggi [14].

## Uji Fitokimia
Pengujian  fitokimia  menunjukkan  minyak  atsiri  daging  buah  pala  positif mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  (tabel  2 ) .  Diperoleh  minyak  atsiri  daging buah  pala  mengandung  alkaloid,  flavonoid,  dan  steroid,  serta  tidak  mengandung polifenol dan saponin.
Tabel 2. Hasil uji fitokimia minyak atsiri daging buah pala
Uji fitokimia Pereaksi Hasil uji Alkaloid Mayer (+) Wagner (+) Dragendorf (+) Flavonoid Etanol 95% + Serbuk Mg + HCl pekat (+) Polifenol FeCl 3 10% (-) Saponin H 2 O (-) Steroid dan terpenoid CHCl 3 + CH 3 COOH + H 2 SO 4 pekat (+) Steroid
Alkaloid dan vitamin C merupakan unsur kimia dalam daging buah pala yang berfungsi  sebagai  antioksidan  [29].  Terpenoid  merupakan  senyawa  yang  bersifat sebagai antioksidan [30] .

## Aktivitas Antioksidan Total
Pengukuran absorbansi sampel diukur menggunakan spektrofotometer UV-Vis, kemudian  dilakukan  perhitungan  persen  peredaman  (inhibisi).  Besarnya  aktivitas antioksidan pada minyak atsiri ditentukan dari nilai inhibitor concentration 50% (IC 50 ). Hasil  pengukuran  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  penangkal  radikal  bebas dengan  DPPH  menunjukkan  bahwa  minyak  yang  berasal  dari  daging  buah  pala memiliki  aktivitas  antioksidan.  Pada  tabel  3  menunjukkan  bahwa  semakin meningkatnya  konsentrasi  minyak  atsiri  maka  nilai  absorbansi  dan  persen  inhibisi semakin  meningkat  sehingga  diperoleh  rata-rata  nilai  IC 50 49,34  ppm.  Nilai  IC 50 menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri  daging  buah  pala  tergolong  antioksidan  kuat. Aktivitas antioksidan ini menandakan terdapatnya komponen kimia yang terkandung dalam minyak atsiri berkhasiat sebagai antioksidan diantaranya kandungan myristicin.
Tabel 3. Aktivitas antioksidan minyak atsiri daging buah pala Pengulangan Ke- Konsentrasi (ppm) Absorbansi Kontrol DPPH Absorbansi % Inhibisi lC 50 (ppm) Rata- Rata ± SD
1 60 0,809 0,701 13,35 49,31 49,34 ± 0,06 80 0,701 13,35 100 0,708 12,48 120 0,709 12,36 140 0,721 10,88 2
60 0,737
0,617 16,28
49,41 80 0,630 14,52 100 0,639 13,30 120 0,645 12,48 140 0,659 10,58 3 60 0,819
0,715 12,70
49,30 80 0,723 11,72 100 0,725 11,48 120 0,726 11,35 140 0,736 10,13
Vitamin  C  digunakan  sebagai  pembanding  karena  vitamin  C  merupakan antioksidan.  Berdasarkan  tabel  4  diperoleh  rata-rata  nilai  IC 50 30,14  ppm  yang menunjukkan  bahwa  vitamin  C  tergolong  antioksidan  kuat.  Nilai  IC 50 pembanding vitamin C inilah menunjukkan bahwa minyak atsiri daging buah pala memiliki aktivitas penangkal  radikal  bebas  DPPH  yang  hampir  mendekati  vitamin  C.  Berbeda  dengan minyak  atsiri  yang  nilai  absorbansinya  menurun  seiring  dengan  peningkatan konsentrasi, pada pengujian vitamin C terdapat pula nilai absorbansi yang tidak linear pada pengulangan pertama. Nilai absorbansi yang berbeda disetiap pengulangan bisa saja dipengaruhi oleh pH larutan, suhu, atau zat-zat pengganggu.
Tabel 4. Aktivitas antioksidan vitamin C Pengulangan Ke- Konsentrasi (ppm) Absorbansi Kontrol DPPH Absorbansi % Inhibisi lC 50 (ppm) Rata- Rata ± SD 1 5
0,637 0,546 14,29 49,45
30,14 ± 17,23
10
0,557 12,56 15 0,553 13,19 20 0,567 10,99 25 0,559 12,24 2
5 0,806
0,786 2,48
24,61 10 0,787 2,36 15 0,805 0,12 20 0,815 -1,12 25 0,816 -1,24 3
5 0,801 0,710 11,36
16,35 10 0,718 10,36 15 0,728 9,11 20 0,759 5,24 25 0,770 3,87
Aktivitas  antioksidan  merupakan  hasil  dari  beberapa  kandungan  senyawa fitokimia  yang  terdapat  pada  buah  dan  efek  sinergisnya  [31].  Metode  uji  aktivitas antioksidan dalam menangkal radikal DPPH ditemukan paling efektif dan efisien [32]. Suatu sampel dikatakan baik sebagai antioksidan apabila dengan konsentrasi yang kecil sampel  tersebut  sudah  dapat  menghambat  radikal  bebas  [33].  Menurunnya  nilai absorbansi dapat dilihat secara visual dengan terjadinya perubahan warna dari warna ungu hingga terbentuk warna kuning [27]. Nilai IC 50 yang lebih kecil mengindikasikan aktivitas antioksidan yang kuat [34]. Dalam hal ini miristisin dengan CH 2 yang terikat pada  sistem  aromatik  dapat  melepaskan  H  (asam)  sehingga  dapat  bereaksi  dengan DPPH.  Kemampuan  myristicin  dalam  melepaskan  H  (asam),  memberikan  pengaruh terhadap kekuatan myristicin sebagai antioksidan [35]. Minyak atsiri daging buah pala berfungsi  sebagai  reduktor  dalam  proses  oksidasi  dan  memiliki  aktivitas  yang  baik sebagai penangkal radikal bebas DPPH [36].

## 4.  Kesimpulan
Minyak  atsiri  daging  buah  pala  dengan  destilasi  uap  air  diperoleh  randeman 0,32%  dan  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  tergolong  antioksidan  kuat.  Perlu
dilakukan  penelitian  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  lain  untuk  dijadikan pembanding.

## Ucapan Terima Kasih
Terima  kasih  kepada  LPPM  Universitas  Khairun  sebagai  penyandang  dana penelitian melalui skema PKUPT tahun 2023.

## Referensi
[1].   Naeem  N,  Rehman  R,  Mushtaq  A,  Ghania  B.  Nutmeg:  A  review  on  uses  and biological properties. IJCBS. 2016;9:107 – 10. Available from: www.iscientific.org/Journal.html
[2].   Agaus  LR,  Agaus  VR.  Manfaat  Kesehatan  Tanaman  Pala  ( Myristica  fragrans ) (Health Benefits of Nutmeg ( Myristica fragrans )). Medula. 2019;6.
[3].   Nasir M, Marwati E. Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol Daging Buah dan Daun  Pala  ( Myristica  fragrans ).  Jurnal  Sains  dan  Kesehatan.  2022;4(SE-1):67 – 76. https://doi.org/10.25026/jsk.v4iSE-1.1691
[4].   Nurjanah S, Putri IL, Sugiarti DP. Antibacterial Activity of Nutmeg Oil. KnE Life Sciences. 2017;2(6):563. https://doi.org/10.18502/kls.v2i6.1076
[5].   Chakraborty  P,  Abraham  J.  Bioactivity  of Myristica  fragrans Metanol  Extract. Abraham  et  al  World  Journal  of  Pharmaceutical  Research.  2015;4(9):1145 – 57.
Available from: www.wjpr.net
[6].   Periasamy G, Karim A, Gibrelibanos M, Gebremedhin G, Gilani A ul H. Nutmeg ( Myristica fragrans Houtt.) Oils. In: Essential Oils in Food Preservation, Flavor and Safety.  Elsevier;  2015.  p.  607 – 16.  https://doi.org/10.1016/B978-0-12-416641-
7.00069-9
[7].   Warsito  MF.  A  Review  on  Chemical  Composition,  Bioactivity,  and  Toxicity  of Myristica  fragrans  Houtt.  Essential  Oil.  Indonesian  Journal  of  Pharmacy. 2020;32(3):304 – 13.
[8].   Saputro  MA,  Andarwulan  N,  Nur  Faridah  D.  Physical  characterization  and essential oil properties of West Sumatra mace and nutmeg seed ( Myristica fragrans Houtt) at different ages at harvest. J Pharmacogn Phytochem. 2016;5(6):371 – 6.
[9].   Ginting  B,  Mustanir  M,  Helwati  H,  Desiyana  LS,  Eralisa  E,  Mujahid  R. Antioxidant  Activity  of  N-Hexane  Extract  of  Nutmeg  Plants  from  South  Aceh Province. Jurnal Natural. 2017;17(1):39. https://doi.org/10.24815/jn.v17i1.6969
[10].   Puspa  OE,  Syahbanu  I, Wibowo  MA,  Nawawi H. Uji  Fitokimia  dan  Toksisitas Minyak Atsiri Daun Pala ( Myristica fragans Houtt) dari Pulau Lemukutan. Jurnal Kimia Khatulistiwa. 2017;6(2):1 – 6.
[11].   Sirait  SM,  Enriyani  R.  Skrining  Fitokimia  dan  Pengaruh  Cara  Pengeringan Terhadap Kualitas Ekstrak Etanol Daging Buah Pala ( Myristica fragrans Houtt). WARTA AKAB. 2021;45(2):17 – 23.
[12].   Rahardiyan D, Poluakan M, Moko EM. Physico-chemical Properties of Nutmeg ( Myristica fragrans houtt) of North Sulawesi Nutmeg. Fullerene Journ Of Chem. 2020;5(1):23 – 31.
[13].   Idrus S, Kaimudin M, Torry RF, Biantoro R. Isolasi Trimiristin Minyak Pala Banda Serta  Pemanfaatannya  Sebagai  Bahan  Aktif  Sabun.  Jurnal  Riset  Industri. 2014;8(1):23 – 31.
[14].   Sari  L,  Lesmana  D.  Estraksi  Minyak  Atsiri  Dari  Daging  Buah  Pala  (Tinjauan Pengaruh Metode Destilasi dan Kadar Air Bahan). In: Seminar Nasiona Sains dan Teknologi. 2018
[15].   Ginting B, Maira R, . M, Helwati H, Desiyana LS, Mujahid R. Isolation of Essensial Oil  of  Nutmeg  ( Myristica  fragrans Houtt)  and  Antioxidant  Activity  Test  With DPPH. Jurnal Natural. 2018;18(1):11 – 7. https://doi.org/10.24815/jn.v18i1.6604
[16].   Antasionasti I, Datu OS, Lestari US, Abdullah SS, Jayanto I. Correlation Analysis of  Antioxidant  Activities  with  Tannin,  Total  Flavonoid,  and  Total  Phenolic Contents of Nutmeg ( Myristica fragrans Houtt) Fruit Precipitated by Egg white. Borneo Journal of Pharmacy. 2021;4(4):301 – 10.
https://doi.org/10.33084/bjop.v4i4.2497
[17].   Ansory  HM,  Putri  PKK,  Hidayah  NA,  Nilawati  A.  Analisis  Senyawa  Minyak Atsiri Biji Pala Secara GC-MS dan Uji Aktivitas Antibakteri Terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus . In: Prosiding SNST  ke-9. 2018. p. 19 – 25.
[18].   Dareda  CT,  Suryanto  E,  Momuat  LI.  Karakterisasi  dan  Aktivitas  Antioksidan Serat  Pangan  dari  Daging  Buah  Pala  ( Myristica  fragrans Houtt).  CHEMISTRY PROGRESS. 2020;13(1). https://doi.org/10.35799/cp.13.1.2020.29661
[19].   Taharuddin,  Yusuf  M,  Dewi  KF.  Pengaruh  Penggunaan  Microwave  Sebagai Pretreatment Daging Buah Pala Pada Penyulingan Minyak Atsiri Dengan Metode Distilasi Uap Air. Journal of Chemical Process Engineering. 2020;5(1):69 – 75.
[20].   Assa JR, Widjanarko SB, Kusnadi J, Berhimpon S. Antioxidant Potential of Flesh, Seed  and  Mace  of  Nutmeg  ( Myristica  fragrans Houtt).  International  Journal  of ChemTech Research CODEN (USA. 2014;6(4):2460 – 8.
[21].   Widjanarko SB, Kusnadi J, Berhimpon  S, Assa JR, Widjanarko SB. Antioxidant potential  of  flesh,  seed  and  mace  of  nutmeg  ( Myristica  fragrans Houtt).  Int  J Chemtech Res. 2014;6(4):2460 – 8. Available from: https://www.researchgate.net/publication/267035680
[22].   Martinez-Morales F, Alonso-Castro AJ, Zapata-Morales JR, Carranza-Álvarez C,
Aragon-Martinez OH. Use of standardized units for a correct interpretation of IC50  values  obtained  from  the  inhibition  of  the  DPPH  radical  by  natural antioxidants. Chemical Papers. 2020;74(10):3325 – 34. https://doi.org/10.1007/s11696-020-01161-x
[23].   Martiningsih  NW,  Widana  GAB,  Kristiyanti  PLP.  Skrining  Fitokimia  dan  Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun  Matoa  ( Pometia  pinnata )  Dengan Metode DPPH. In: Prosiding Seminar Nasional MIPA. 2016. p. 332 – 8.
[24].   Sipahelut  SG,  Patty  JA,  Patty  Z,  Kastanja  AY,  Natalie  V,  Lekahena  J.  The antibacterial  and  antifungal  activity  of  essential  oil  derived  from  the  flesh  of nutmeg fruit. Vol. 13, EurAsian Journal of BioSciences Eurasia J Biosci. 2019.
[25].   Ansory HM, Sastrohamidjojo H, Purwono B. Perbandingan Kualitas Minyak Pala
Hasil Isolasi dari Bagian-Bagian Buah Pala Berdasarkan Kadar Miristisin. Jurnal Farmasi Indonesia. 2015;12(2):127 – 36. Available from: http://farmasiindonesia.setiabudi.ac.id/
[26].   Guntur G, Harlia H, Sapar A. Identifikasi Komponen Minyak Atsiri Daging Buah Pala  ( Myristica  Fragrans Houtt.)  Asal  Pulau  Lemukutan  dan  Uji  Aktivitas Antiinflamasi Menggunakan Metode Stabilisasi Menbran RBCs (Red Blood Cells).
Al-Kimia. 2019;7(2). https://doi.org/10.24252/al-kimia.v7i2.11276
[27].   Liunokas AB, Karwur FF. Isolasi dan Identifikasi Komponen Kimia Minyak Asiri Daging Buah dan Fuli Berdasarkan Umur Buah Pala ( Myristica fragrans Houtt). Jurnal Biologi Tropis. 2020;20(1):69 – 77. https://doi.org/10.29303/jbt.v20i1.1651
[28].   Ansory  HM,  Fitriani  IN.  Efek  Reaksi  Isomerisasi  Pada  Miristisin  Terhadap Potensinya  Sebagai  Tabir  Surya  Secara  in-vitro.  Jurnal  Farmasi  Indonesia. 2021;18(1):48 – 54.
[29].   Suloi  AF,  Nur  A,  Suloi  F.  Bioaktivitas  Pala  ( Myristica  fragrans Houtt) :  Ulasan Ilmiah. Jurnal  Teknologi  Pengolahan Pertanian. 2021;3(1):11 – 8. Available  from: www.google.com
[30].   Abdulkadir WS, Djuwarno N, Ramadani D, Papeo P, Marhaba Z. Potensi Ekstrak Biji Pala ( Myristica fragrans L) Terhadap Penyembuhan Luka Bakar pada Mencit ( Mus musculus ). Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR). 2023;5(1). https://doi.org/10.37311/jsscr.v5i1.18996
[31].   Nuansa MF, Agustini TW, Susanto E. Characteristic and Antioxidant Activity of Edible film from Refined carrageenan with The Addition of Essential Oil. J Peng
& Biotek. 2017;6(1):54 – 62. Available from: http://www.ejournal-
s1.undip.ac.id/index.php/
[32].   Maesaroh  K,  Kurnia  D,  Al  Anshori  J.  Perbandingan  Metode  Uji  Aktivitas Antioksidan DPPH, FRAP dan FIC Terhadap Asam Askorbat, Asam Galat dan Kuersetin. Chimica et Natura Acta. 2018;6(2):93. https://doi.org/10.24198/cna.v6.n2.19049
[33].   Selonni F. The Effect of Drying Method on The Antioxidant Activity of The Flesh of  Nutmeg.  Indo  J  Pharm  Res.  2021;1(1):1 – 6.  Available  from: www.jurnal.umsb.ac.id/index.php/IJPR
[34].   Abdullah SS, Antasionasti I, Rundengan G, Abdullah RPI. Aktivitas Antioksidan Ekstrak  Etanol  Biji  dan  Daging  Buah  Pala  ( Myristica  fragrans )  Dengan  Metode DPPH. CHEMISTRY PROGRESS. 2022;15(2):70 – 5.
https://doi.org/10.35799/cp.15.2.2022.44489
[35].   Ansory  HM,  Sari  EN,  Nilawati  A,  Handayani  S,  Aznam  N.  Sunscreen  and Antioxidant Potential of Myristicin in Nutmeg Essential Oils ( Myristica fragrans ). Advances in Health Sciences Research. 2020;26:138 – 42.
[36].   Sipahelut SG, Kastanja AY, Patty Z. Antioxidant activity of nutmeg fruit flesh- derived  essential  oil  obtained  through  multiple  drying  methods.  EurAsian Journal of BioSciences Eurasia J Biosci. 2020;14:21 – 6.