## Perbandingan Aktivitas Anti Bakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Dan Daun Jeruk Purut (Citrus hystrix DC) Terhadap Bakteri Gram Negatif
Escherichia coli
Comparison of Anti Bacterial Activity of Ethanol Extract of Kaffir Lime (Citrus hystrix DC) Pell and Leaves Against Gram Negative Bacteria

## Escherichia coli
Hanin Azkia 1 , Periskila Dina Kali Kulla 1* , Zulwanis 2 , Kesumawati 3 , Syarifah Yanti Astryna 4 1,3,4 Program Studi S-1 Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Ubudiyah Indonesia Banda Aceh, Aceh, Indonesia
2 Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Syiah Kuala
* Koresponding Penulis: periskila@uui.ac.id

## Abstrak
Jeruk purut ( Citrus  hystrix  DC )  merupakan  tanaman  herbal  yang  banyak  dimanfaatkan  oleh  masyarakat dalam kehidupan sehari-hari. Kulit buah dan daun Jeruk purut mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tannin,  serta  saponin  yang  terkenal  sebagai  senyawa  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbandingan aktivitas ekstrak etanol kulit buah dan daun jeruk purut dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli . Metode penelitian yang digunakan adalah eksperimental laboratorium, dengan besar konsentrasi untuk masing-masing ekstrak yaitu 15%, 20%, 25% dan 25%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit buah jeruk purut menghasilkan rata-rata diameter zona hambat dari konsentrasi rendah ke tinggi sebesar 15.6 mm, 18.3 mm, 18.6 mm dan 19.3 mm. Sementara  itu,  ekstrak etanol daun menunjukkan rata-rata diameter  zona  hambat yang terbentuk sebesar 13.6 mm, 14 mm, 15.3 mm dan 16.3 mm. Diameter zona hambat yang terbentuk dari kedua ekstrak masuk dalam kategori kuat. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol kulit buah dan daun  jeruk  purut  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang digunakan maka semakin besar diameter zona hambat yang terbentuk. Konsentrasi ekstrak etanol kulit buah dan  daun  jeruk  purut  sebesar  30%  merupakan  dosis  terbaik  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri. Ekstrak etanol kulit buah jeruk purut memiliki sifat anti  bakteri lebih kuat dibandingkan dengan ekstrak etanol daun (berdasarkan luas diameter zona hambat yang terbentuk)
Kata kunci : Jeruk purut ( Citrus hystrix DC ),  Aktivitas anti bakteri, Escherichia coli

## Abstract
Kaffir lime (Citrus hystrix DC) is an herbal plant that is widely used by people in daily needs. Kaffir lime peel  and  leaves  contain  alkaloids,  flavonoids,  tannins,  and  saponins  which  are  known  that  compounds potentially to  inhibit  bacterial  growth.  This study  aims to  compare  the  activity  of  the  ethanol  extract  of kaffir lime peels and  leaves  in  inhibiting  the  growth  of Escherichia coli.  The  research  method  used  was laboratory  experimental,  with  various  doses  of  concentration  is  15%,  20%,  25%  and  25%.  The  results showed that the ethanol extract of kaffir lime peel with average diameter of the inhibition zone from low to high concentrations is 15.6 mm, 18.3 mm, 18.6 mm and  19.3 mm. Meanwhile, the ethanol extract of the leaves showed an average diameter of the inhibition zone formed of 13.6 mm, 14 mm, 15.3 mm and 16.3
Journal of Healtcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 2 Oktober 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
mm.  The  diameter  of  the  inhibition  zone  from  the  two  extracts  included  in  the  strong  category  of
Journal of Healtcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 2 Oktober 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
antibacterial activity. Based on the results of the study it can be concluded that the ethanol extract of kaffir lime peels and leaves is able to inhibit bacterial growth. The higher the concentration of the extract used, the larger the diameter of the inhibition zone formed. Concentration of 30% ethanol extract of kaffir lime peel and leaves are the optimum dose for inhibiting bacterial growth. The ethanol extract of kaffir lime peel has stronger anti-bacterial activities than the ethanol extract of the leaves (based on the diameter of the inhibition zone)
Keyword : Kaffir lime (Citrus hystrix DC), Anti bacterial activity, Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang kaya akan berbagai jenis tanaman herbal. Salah satu tanaman  herbal  yang  banyak  digunakan  masyarakat  dalam  kehidupan  sehari-hari  adalah  jeruk purut (Citrus hystrix DC ) . Tanaman jeruk purut terkenal memiliki segudang manfaat. Menurut Suhaeni (2017) jeruk purut banyak dimanfaatkan dalam industri makanan dan minuman, industri farmasi, sebagai penguat rasa masakan serta pewarna alami  makanan. Selain digunakan untuk kebutuhan industri tersebut, tanaman jeruk purut juga diketahui memiliki aktivitas anti bakteri.
Tanaman jeruk purut mengandung zat aktif flavonoid, tannin, alkaloid serta saponin dan minyak  atsiri yang diketahui dapat bersifat sebagai  anti bakteri (Arfania, 2018). Senyawa  anti bakteri yang di miliki oleh tanaman jeruk purut tersebar pada beberapa bagian tanaman. Mulyanti, et al . (2020)  menyatakan bahwa senyawa anti bakteri yang terdapat pada  tanaman jeruk purut tersebar pada bagian daun, kulit buah, dan ranting. penelitian yang dilakukan oleh Sreepian, et al . (2019) yang menyatakan bahwa penggunaan minyak atsiri dari kulit buah jeruk purut sebesar 0.9 gr/ml mampu membentuk zona hambat kategori kuat (> 20 mm) untuk pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Proteus vulgaris, namun menghasilkan zona hambat kategori lemah (6 mm-12 mm) untuk pertumbuhan bakteri Escherichia coli .
Selain  penggunaan  ekstrak  kulit  buah  jerut  purut,  daunnya  juga  diketahui  memiliki potensi sebagai anti bakteri. Menurut Maimunah, et al . (2020), ekstrak daun jeruk purut memiliki aktivitas anti bakteri terhadap Staphylococcus aureus pada konsentrasi 5% (6,7 mm), 10% (7,2 mm), 15% (7,3 mm), dan 20% (8,3 mm). Sementara itu, penelitian yang dilakukan oleh Melani (2020) menyatakan bahwa daun jeruk purut pada konsentrasi 30%, 25%, 20%, 15%, 10% dan 5% memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Shigella dysenteriae . Sementara pada bakteri Escherichia coli ekstrak daun jeruk purut diketahui mampu menghambat pertumbuhan dengan konsentrasi tinggi yakni 100% (Siregar, et al ., 2020)
Berdasarkan latar belakang tersebut, terlihat perbedaan hasil antara ekstrak kulit buah jeruk  purut  dan  ekstrak  daun  jeruk  purut  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli . Perbedaan  tersebut  menjadikan  peneliti  tertarik  lebih  lanjut  menguji  bagaimana  perbandingan aktivitas anti bakteri ekstrak etanol kulit buah dan daun jeruk purut terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli . Sehingga diharapkan nantinya terlihat perbandingan hasil dengan menentukan besarnya  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  dari  kedua  ekstrak  tersebut  terhadap pertumbuhan bakteri.

## METODE PENELITIAN
Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimental laboratorium. Sementara itu,  untuk  mengetahui  besar  daya  hambat  ekstra  etanol  kulit  buah  dan  daun  jeruk  purut  ( Citrus hystrix DC) terhadap pertumbuhan Bakteri Escherichia coli digunakan metode diffusion disk (difusi cakram). Tujuan Penelitian ini untuk mengetahui bagaimana perbandingan aktivitas anti bakteri ekstrak etanol kulit buah dan daun jeruk purut terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli pada Konsentrasi yang ditetapkan. Populasi dalam penelitian ini adalah kulit buah dan daun jeruk purut yang diperoleh dari desa Lhong raya Kecamatan banda raya, Banda Aceh. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah kulit buah dan daun jeruk purut yang diperoleh dari desa lhong raya dengan menggunakan teknik purposive sampling serta isolat bakteri E. coli yang diperoleh dari Fakultas Kedokteran Universitas Syiah Kuala.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1.    Hasil Penelitian
Tabel 1 Persentasi Nilai Rendemen Ekstrak Etanol Daun dan Kulit Buah  Jeruk Purut Ekstrak Berat Simplisia (gr) Berat ekstrak (gr) Hasil Rendemen (%) Daun 1000 232 23,2 Kulit Buah 1000 57,9 5,79
Pada  tabel  1  di  atas  menunjukkan  bahwa  nilai  rendemen  yag  diperoleh  untuk  ekstrak etanol daun jeruk purut sebesar 23,2%. Sementara itu, nilai rendemen untuk ekstrak etanol kulit buah jeruk purut yakni sebesar 5,79%.
Tabel 2 Hasil Analisis Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Daun dan Kulit Buah Jeruk Purut
No Komponen Senyawa Daun Jeruk Purut Kulit Buah Jeruk Purut 1 Alkaloid + + 2 Flavonoid + + 3 Steroid/triterpenoid - - 4 Saponin + - 5 Tannin + + 6 Glikodida - -
Pada  Tabel  2  terlihat  bahwa  ekstrak  etanol  daun  jeruk  purut  mengandung  komponen senyawa aktif meliputi alkaloid, flavonoid, saponin dan tanin. Sementara itu, hasil uji fitokimia terhadap ekstrak etanol kulit buah jeruk purut memperlihatkan bahwa ekstrak etanol kulit jeruk mengandung senyawa aktif seperti alkaloid, flavonoid dan tannin.
Journal of Healtcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 2 Oktober 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Tabel 3 Hasil Uji Aktivitas Anti Bakteri Ekstrak Etanol Diameter Zona Bening (mm) Rata- rata (mm) Konsentrasi Simplo Duplo Triplo Kontrol Negatif ( Aquadest ) - - - - Kontrol Positif ( Amoxycillin ) 15 18 18 17 Daun 15% 13 14 14 13.6 20% 14 14 14 14 25% 15 15 16 15.3 30% 17 15 17 16.3 Kontrol Negatif ( Aquadest ) - - - - Kontrol Positif ( Amoxycillin ) 19 23 20 20.6 Kulit buah 15% 15 16 16 15.6 20% 18 18 19 18.3 25% 19 19 18 18.6 30% 19 20 19 19.3
Pada Tabel 3 di atas hasil uji aktivitas anti bakteri untuk ekstrak etanol daun jeruk purut pada kontrol positif (antibiotik Amoxicilyn ) diperoleh rata-rata diameter zona hambat sebesar 17 mm, sedangkan untuk konsentrasi 15%, 20%, 25% dan 30% menunjukkan nilai rata-rata diameter zona hambat sebesar 13.6 mm, 14 mm, 15.3 mm dan 16.3 mm. Dan Hasil uji aktivitas anti bakteri ekstrak etanol kulit buah jeruk purut berdasarkan tabel terlihat pada kontrol positif diperoleh rata- rata  diameter  zona  hambat  sebesar  20.6.  Sementara  itu,  ekstrak  etanol  kulit  buah  jeruk  purut dengan konsentrasi 15%, 20%, 25% dan 30% menunjukkan rata-rata diameter zona bening sebesar 15.6 mm, 18.3 mm. 18.6 mm dan 19.3 mm.

## PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil penelitian untuk ekstrak etanol daun jeruk, kontrol positif (antibiotik amoxycillin ) membentuk zona hambat sebesar 17 mm, sedangkan kontrol negatif ( aquadest ) tidak membentuk zona hambat. Antibiotik amoxycillin dipakai sebagai kontrol positif sebab menurut Khairani, et al . (2017) amoxycillin termasuk golongan antibiotik penisilin dengan spektrum luas, sehingga  baik  digunakan  untuk  menghambat  bakteri  baik  gram  negatif  maupun  gram  positif. Sementara  itu,  ekstrak  etanol  daun  jeruk  purut  dengan  konsentrasi  15%,  20%,  25%  dan  30%
memperoleh nilai rata-rata untuk diameter zona hambat sebesar 13.6 mm, 14 mm, 15.3 mm dan 16.3  mm.  Efektivitas  zat  anti  bakteri  ekstrak  etanol  daun  jeruk  purut  menurut  Sreepian, et  al. (2019) termasuk ke dalam kategori kuat (10-20 mm). Berdasarkan besar diameter  zona hambat yang terbentuk juga dapat dikatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi  ekstrak yang digunakan maka semakin besar daya hambat yang dihasilkan terhadap pertumbuhan bakteri. Hasil penelitian ini didukung dengan penelitian sebelumnya, dimana penelitian yang dilakukan oleh Siregar, et al . (2020) menunjukkan hasil bahwa ekstrak daun jeruk purut memiliki efektivitas anti bakteri dengan kategori  kuat  (diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  sebesar  14.4  mm)  untuk  menghambat pertumbuhan  bakteri E.coli .  Sementara  itu,  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Melani  (2020)  juga menunjukkan  bahwa  penggunaan  ekstrak  daun  jeruk  purut  dengan  konsentrasi  30%  terbukti mampu menghambat pertumbuhan bakteri.
Kemampuan  ekstrak  etanol  daun  jeruk  purut  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.coli tentunya  tidak  terlepas  dari  kandungan  zat  aktif  yang  terdapat  pada  ekstrak  tersebut. Diketahui  berdasarkan  perhitungan  nilai  rendemen,  diperoleh  persen  rendemen  untuk  ekstrak etanol daun jeruk purut sebesar 23.2%. Nilai rendemen yang diperoleh untuk hasil ekstrak etanol daun  jeruk  purut  pada  penelitian  ini  lebih  tinggi  jika  dibandingkan  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Qonital, et  al .  (2022)  yang  memperoleh  nilai  rendemen  sebesar  15.40%.  Nilai rendemen berkaitan erat dengan kandungan senyawa bioaktif yang terkandung pada suatu ekstrak (Dewatisari, et  al .  2017).  Semakin  tinggi  nilai  rendemen  maka  besar  kemungkinan  kandungan senyawa bioaktif yang terdapat pada suatu ekstrak semakin banyak, kandungan senyawa bioaktif inilah yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri. Pada penelitian ini, uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa bioaktif yang terdapat pada ekstrak etanol daun jeruk purut. Dari hasil pengujian diperoleh hasil bahwa ekstrak etanol daun jeruk purut positif mengandung zat aktif berupa alkaloid, flavonoid, saponin dan tannin
Uji  aktivitas  anti  bakteri  ekstrak  etanol  daun  jeruk  purut,  berdasarkan  hasil  penelitian diketahui  juga  memiliki  kemampuan  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.coli .  Kontrol positif  pada  uji  ini  menghasilkan  diameter  zona  hambat  sebesar  20.6  mm,  sedangkan  kontrol negatif tidak terbentuk zona hambat. Sementara itu, Penggunaan konsentrasi ekstrak etanol kulit buah jeruk purut sebesar 15%, 20%, 25% dan 30% mampu menghasilkan rata-rata diameter zona hambat  yakni  sebesar  15.6  mm,  18.3  mm.  18.6  mm  dan  19.3  mm.  Efektivitas  zat  anti  bakteri ekstrak etanol kulit buah jeruk purut menurut Sreepian, et al . (2019) termasuk ke dalam kategori kuat (10-20 mm).  Sama halnya seperti ekstrak daun, ekstrak kulit buah pun menunjukkan bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  maka  semakin  besar  daya  hambat  yang dihasilkan  terhadap  pertumbuhan  bakteri.  Hal  ini  didukung  oleh  penelitian  terdahulu,  dimana Elmitra (2021) melaporkan bahwa penggunaan ekstrak kulit buah jeruk purut dengan konsentrasi 18%  menghasilkan  zona  hambat  sebesar  12.73  mm  (kategori  kuat)  untuk  pertumbuhan  bakteri. Penelitian  lainnya  yang  dilakukan  oleh  Screepian, et  al .  (2019)  menyatakan  bahwa  bahwa penggunaan ekstrak kulit buah jeruk purut memiliki potensi yang baik sebagai agen anti bakteri
Journal of Healtcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 2 Oktober 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Besaran konsentrasi yang sama ekstrak kulit buah jeruk purut menunjukkan pembentukan diameter  zona  hambat  yang  lebih  besar  jika  dibandingkan  dengan  ekstrak  etanol  daun.  Ini menunjukkan  bahwa  penggunaan  ekstrak  etanol  kulit  buah  jeruk  purut  lebih  efektif  dalam menghambat pertumbuhan bakteri E.coli . Hal ini dikarenakan selain ekstrak etanol kulit buah jeruk purut mengandung senyawa aktif seperti alkaloid, flavonoid serta tanin, ternyata kulit buah jeruk purut juga mengandung senyawa kumarin. Kumarin merupakan salah satu hasil senyawa metabolit sekunder  yang  dihasilkan  oleh  kulit  buah  jeruk  purut.  Kumarin  bekerja  dengan  cara  merusak struktur dinding sel bakteri sehingga terjadi perubahan bentuk dinding sel. Hal ini mengakibatkan terjadinya kebocoran sitoplasma sel yang berakibat menyusut sel dan terjadi kematian sel (Tivani dan Perwitasari, 2021 )

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan:
1. Ekstrak etanol daun dan kulit buah jeruk purut ( Citrus hystrix DC ) memiliki kemampuan dengan  efektivitas  kategori  kuat  (diameter  zona  hambat  10-20  mm)  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri  gram  negatif Escherichia  coli. Pada  ekstrak  daun  jeruk  purut konsentarsi 15%, 20%, 25%, dan 30% diperoleh diameter rata-rata zona hambat 13,6 mm, 14 mm, 15,3 mm, dan 16,3 sedangkan pada kulit jeruk purut diperoleh diameter rata-rata zona hambat 15,5 mm, 18,3 mm, 18,6 mm, dan 19,3 mm
2. Konsentrasi  terbaik  untuk  ekstrak  daun  etanol  jeruk  purut  yakni  30%  dengan  besar diameter zona hambat yaitu 16.3 mm, sedangkan aktivitas anti bakteri terbaik untuk ekstrak etanol kulit buah terdapat pada konsentrasi 30% dengan besar diameter zona hambat yang terbentuk yakni 19.3 mm.
3. Ekstrak etanol kulit buah jeruk purut memiliki sifat anti bakteri lebih kuat dengan diameter zona hambat yang terbentuk 19,3 mm jika dibandingkan dengan ekstrak etanol daun jeruk purut (berdasarkan perbandingan luas diameter zona hambat yang terbentuk)

## SARAN
Untuk  penelitian  selanjutnya  diharapkan  dapat  mengembangkan  penelitian  ini  dengan menggunakan bakteri gram positif untuk melihat efektifitas anti bakteri ekstrak jeruk purut dalam menghambat pertumbuhan bakteri gram positif

## DAFTAR PUSTAKA
Arfania,  M.  2018.  Telaah  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun  Jeruk  Purut  ( Citrus  hystrix DC)  Di Kabupaten Kerawang. PharmaXplore, Jurnal Ilmiah Farmasi , 2(2), pp.131–135
Dewatisar, W. F., Rumiyanti, L., Rachmawati, S. 2017. Rendemen dan Skrinning Fitokimia pada Ekstrak Daun Sanseviera sp. Jurnal Penelitian Pertanian Terapan . Vol 17(3), 197-202.
Journal of Healtcare Technology and Medicine Vol. 9 No. 2 Oktober 2023 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Khairani,  K.,  Busman.,  Edrizal.  2017.  Uji  Aktivitas  Anti  Bakteri  Ekstrak  Jamur  tiram  Putih (Pleurotus ostreatus) terhadap bakteri Streptococcus mutans Penyebab Karies Gigi. Jurnal B-Dent . Vol 4(2), 110-116
Maimunah, S., Rayhana, R., dan Silalahi, Y. C. E. 2020. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Jeruk  Purut  (Citrus  hystrix  DC)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus . Jurnal Pembelajaran dan Biologi Nukleus .
Melani,  I.  2020.  Potensi  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Jeruk  Purut  (Citrus  hystrix)  terhadap Pertumbuhan Bakteri Shigella dysenteriae secara In Vitro. [Tesis]. Malang: Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim
Mulyanti, V., Astuti, T. D., ST, S., Novalina, D. 2020. Systematic Review: Aktivitas Antibakteri Jeruk  Purut  ( Citrus  hystrix )  Terhadap  bakteri  patogen.  Skripsi.  Universitas  Aisyiyah Yogyakarta
Qonitah, F., Ariastuti, R., Pratiwi Maharani, N. A. W. 2022. Skrinning Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Jeruk Purut ( Citrus hystrix ) Dari Kabupaten Klaten. GEMA , 34 (01), 47-51
Siregar,  S.,  Indriani,  I.,Rizky,  V.  V.  A.,  Krisdianilo,V.  V.  dan  Marbun,  R.  A.  T.  2020. Perbandingan Aktivitas Antibakteri Infusa Daun Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) dan Daun Jeruk Purut (Citrus hystrix) terhadap Bakteri Escherichia coli. Jurnal
Sreepian,  A.,  Sreepian,  P.  M.,  Chanthong,  C.,  Mingkhwancheep,  T.,  &  Prathit,  P.  2019.
Antibacterial Activity of Essential Oil Extracted from Citrus hystrix (Kaffir Lime) Peels: An in Vitro Study. Jurnal Tropical Biomedicine, 36(2), 531-541
Suhaini, N. 2017. Petunjuk Praktis Menanam Jeruk. Bandung, Nuansa Cendekia
Tivani, I., Sari, M. P. 2021. Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Nanas Madu dan Kulit Buah  Pepaya  terhadap  Staphylococcus  aureus. PHARMACY:  Jurnal  Farmasi  Indonesia (Pharmaceutical Journal of Indonesia) , 18 (1), 45-53