Efektivitas Penambahan Bahan Pengencer Sperma yang Berbeda,...Ninis Triyani & Siti Fikriyah.

## EFEKTIVITAS PENAMBAHAN BAHAN PENGENCER SPERMA YANG BERBEDA TERHADAP TINGKAT KEBERHASILAN GINOGENESIS IKAN
MAS PUNTEN (Cyprinus carpio L.)
The Efectiveness of Adding Different Sperm Threatening Materials on The Successful Gynogen esis of Punten Gold Fish (Cyprinus carpio L.)
Siti Fikriyah 1* , Ninis Trisyani 1
1 Program Studi Ilmu Perikanan, Fakultas Teknik dan Ilmu Kelautan, Universitas Hang Tuah Surabaya
* corresponding author : fikriyah.siti@hangtuah.ac.id

## ABSTRAK
Ginogenesis merupakan proses terbentuknya zigot dari gamet betina tanpa kontribusi dari  gamet  jantan.  Manfaat  melakukan  ginogenesis  adalah  dapat  mempercepat  proses pemurnian, membuat populasi klon hanya dalam dua generasi, membuat populasi tunggal kelamin  betina,  mempercepat  proses  dan  mendeterminasi  genotip  jenis  kelamin  betina. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas penambahan bahan pengencer sperma yang berbeda terhadap tingkat keberhasilan ginogenesis ikan mas punten ( Cyprinus carpio L.). Pada penelitian ini menggunakan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri dari 4 perlakuan dengan 3 pengulangan, yaitu Sperma + 100% NaCl; Sperma + 50% madu + 50% NaCl; Sperma + 50% Air Kelapa Muda + 50% NaCl; Sperma + 50% Sari Tebu + 50% NaCl. Perlakuan terbaik yang dihasilkan  dalam penelitian ini adalah sperma yang ditambahkan dengan air kelapa muda dan NaCl dengan  nilai motilitas 83,33%, FR 48%, HR 40,5%, SRe 95,82%, SR-7 91,74%, dan SR-21 85,55%.
Kata Kunci: Ikan Mas Punten ( Cyprinus carpio L.), Motilitas, Fertilization Rate, Hatching Rate, Survival Rate.

## ABSTRACT
Gynogenesis  is  the  process  of  forming  a  zygote  from  female  gametes  without  the contribution  of  male  gametes.  The  benefits  of  gynogenesis  are  that  it  can  speed  up  the purification  process,  create  a  clone  population  in  only  two  generations,  create  a  single female population, speed up the process and determine the genotype of the female sex. This study aimed to determine the effectiveness of adding different sperm diluents to the success rate of gynogenesis of punten carp (Cyprinus carpio L.). The method used  in this study is an experimental research method using a completely randomized design (CRD) consisting of  4  treatments  with  3  repetitions,  namely  P1:  Sperm  +  100%  NaCl,  P2:  Sperm  +  50% honey + 50% NaCl, P3: Sperm + 50% Young Coconut Water + 50% NaCl, P4 : Sperm + 50% Sugarcane Juice + 50% NaCl. The results obtained in this study were sperm dilution which significantly affected motility, fertilization rate, hatching rate, embryo Survival Rate, Survival Rate – 7 days, and Survival Rate – 21 days. The addition of young coconut water became  the  best  treatment  with  motility  value  of  83.33%,  FR:  48%,  HR:  40.5%,  Sre: 95.82%, SR-7: 91.74%, and SR-21: 85, 55%.
Jurnal Ilmu-ilmu Perikanan dan Budidaya Perairan Volume 18, Nomor 2, Desember 2023: 113-118 https://jurnal.univpgri-palembang.ac.id/index.php/ikan
Keywords: Gold Fish of Punten (Cyprinus carpio L.), Motility, Fertilization Rate, Hatching Rate, Survival Rate.

## PENDAHULUAN
Ikan  mas  merupakan  salah  satu komoditas  ikan  air  tawar  yang  memiliki potensi  besar  untuk  dikembangkan  guna memenuhi  gizi  masyarakat  (Pratama, et al., 2020).  Ikan mas punten pertama kali dikembangkan  pada  tahun  1993  didesa punten. Tubuh dari ikan mas punten relatif lebih pendek dibandingkan ikan mas jenis lainnya.  Ikan  mas  punten  saat  ini  masih dikembangkan  dan  dicari  kemurniannya di  Instalasi  Perikanan  Budidaya  (IPB) Punten,  Kota  Batu  dengan  menggunaan teknik  pemijahan  buatan  yaitu  teknik ginogenesis. Ginogenesis merupakan proses  terbentuknya  zigot  dari  gamet ebtina tanpa kontribusi dari gamet jantan. Gamet  jantan  pada  proses  ginogenesis hanya  berfungsi  sebagai  perangsang perkembangan  telur,  sehingga  sifat-sifat genetisnya  tidak  diturunkan  (Rustidja, 2002).  Pada  ginogenesis  yang  dilakukan pada  ikan  mas  punten  terdapat  tahap pengenceran  sperma.  Pemberian  larutan infus  sebagai  bahan  pengencer  berguna memenuhi kebutuhan sperma guna proses pembuahan  telur  ikan.  Menurut  Prama (2014),  salah  satu  permasalahan  yang sering terjadi pada budidaya air tawar ikan mas  adalah  rendahnya  tingkat  fertilisasi dari  spermatozoa  di  dalam  air  yang menyebabkan  banyaknya  sel  telur  yang tidak terbuahi secara sempurna.
Permasalahan  tersebut  dapat  disebabkan oleh  daya  hidup  sperma  yang  terlalu singkat.  Untuk  mengatasi  permasalahan tersebut,  sperma  membutuhkan  energi tambahan  yang  dapat  diberikan  saat dilakukan pengenceran sperma, sehingga saat pengenceran sperma yang dicampurkan dengan larutan infus (NaCl) juga ditambahkan dengan bahan pengencer yang dapat memenuhi kebutuhan  energi  sperma  ikan  mas. Sperma membutuhkan energi berupa gula
sederhana (monosakarida) seperti fruktosa dan glukosa yang berguna untuk mendukung  daya  hidup  sperma  pasca pengenceran.
Hasil  penelitian  dari  Isnan, Et  al (2013) menghasilkan bahwa penambahan air kelapa dan gliserol pada penyimpanan sperma  berpengaruh  nyata  terhadap fertilitas  spermatozoa  ikan  mas  dan spermatozoa masih bertahan hidup selama 4  hari.  Air  kelapa  mengandung  glukosa dan fruktosa yang juga terkandung dalam sperma.  Selain  itu  dari  penelitian Tumanung, et  al (2015)  menghasilkan kesimpulan  berupa  penambahan  madu pada  pengenceran  sperma  berpengaruh nyata  terhadap  motilitas  spermatozoa, fertilisasi  dan  daya  tetas  telur  ikan  mas. Hasil  penelitian  tersebut  juga  didukung oleh penelitian Rahardhianto, et al (2012) yang  menunjukan  bahwa  penggunaan larutan NaCl fisiologis dan madu sebagai bahan  pengencer  dalam  penyimpanan sperma  ikan  patin  berpengaruh  terhadap pergerakan  (motilitas)  dan  ketahanan hidup (viabilitas) spermatozoa ikan patin.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh  penambahan  bahan  pengencer berupa  air  kelapa,  madu,  dan  sari  tebu terhadap tingkat keberhasilan ginogenesis ikan mas punten ( Cyprinus carpio L).

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  di Ruang  Karantina  Instalasi  Perikanan Budidaya  (IPB)  Punten,  Kota  Batu, Provinsi Jawa Timur. Pelaksanaan penelitian dimulai pada bulan Juni sampai dengan Juli 2022.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah bak mika berdiameter  29  cm  dan  tinggi  30  cm,
kakaban,  alat  suntik  10  ml  dan  5  ml, tissue, mesin radiasi, bulu ayam, thermometer,  aerator,  dan  mangkok. Kemudian  bahan  utama  yang  digunakan adalah  induk  ikan  mas  punten,  sperma, telur,  NaCl,  madu,  air  kelapa,  dan  sari tebu.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  dengan metode eksperimen menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  yang terdiri dari 4 perlakuan dan 3
pengulangan,  yaitu  P1  :  sperma  +  100% NaCl,  P2  :  sperma  +  50%  madu  +  5-% NaCl, P3 : sperma + 50% air kelapa muda +  NaCl,  P4  :  sperma  +  50%  sari  tebu  + 50% NaCl.

## Prosedur Kerja
Penelitian  ini  menggunakan  wadah bak  plastik  berdiameter  29  cm  dengan tinggi  30  cm  sebanyak  12  unit  dengan tinggi  air  20  cm  dan  alat  pendukung lainnya.  Kemudian  dilanjutkan  dengan menyiapkan  induk  yang  melalui  seleksi induk.  Induk  betina  yang  telah  diseleksi diberi  cairan  ovaprim  dengan  cara disuntikkan dibagian punggungnya. Pemberian cairan ovaprim berguna untuk mempercepat  matang  gonad  pada  induk betina.  Induk  yang  telah  matang  gonad diangkat  dan  dibawa  ke  ruang  karantina. Induk jantan dan betina di stripping untuk diambil  sperma  dan  telurnya. Stripping dilakukan  dengan  cara  menekan  perut ikan menuju kearah anus secara perlahan. Sperma  yang  didapat  dicampur  dengan bahan pengencer sesuai dengan perlakuan.  Sperma  yang  sudah  diberi bahan  pengencer  dimasukan  kedalam mesin radiasi UV selama 9 menit. Setelah diradiasi,  sperma  dicampur  dengan  telur dan  dilakukan  proses  fertilisasi  selama  3 menit.  Selanjutnya  telur  pada  kakaban diberikan  kejutan  suhu  panas  sebesar 40°C  selama  1,5  menit  (Nedris, et  al.,
2014).  Suhu  minimum  yang  digunakan
untuk  ginogenesis  adalah  38°C  dan maksimal 40°C (Hollebecq, 1986). Telur yang  telah  diberi  kejutan  suhu  panas dimasukan kedalam wadah sesuai dengan perlakuannya.

## Analisis Data
Analisis data berupa fertilisasi rate , hatching rate , Survival  Rate embrio, Survival Rate – 7 hari, dan Survival Rate –  21  hari.  Parameter  kualitas  air  yang diukur  adalah  suhu,  pH,  dan  oksigen terlarut.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan motilitas sperma dari setiap perlakuan dapat dilihat pada tabel 1. Pemberian bahan pengencer yang berbeda berpengaruh  pada  hasil  nilai  presentase motilitas sperma. Hasil terbaik didapatkan pada  perlakuan  P3  sebesar  83,33%, kemudian  urutan  kedua  pada  perlakuan P1 sebesar 63,33%, urutan ketiga pada P4 sebesar  56,66%,  dan  yang  terkecil  pada P2  sebesar  50%.  Sperma  pada  P3 menunjukan  pergerakan  sperma  yang sangat aktif. Pergerakan tersebut disebabkan  oleh  kandungan  air  kelapa muda  pada  sperma.  Kandungan  tersebut adalah  glukosa,  fruktosa,  dan isotonic (Sudirman,  2015).  Kandungan  pada  air kelapa muda menjadi sumber energi bagi sperma  yang  membuat  sperma  dapat bertahan  hidup  saat  terpapar  radiasi (Toelihere, 1981). Bahan pengencer yang baik  bagi  sperma  adalah  yang  dapat mensuplay  nutrisi  dan  bersifat  isotonik sehingga dapat mempertahankan osmotik dan  keseimbangan  elektrolit  yang  sesuai bagi sperma (Yudi, et al., 2013).
Pada perlakuan P2 menjadi perlakuan dengan hasil terkecil dibandingan perlakuan lainnya. Penyebab kecilnya  hasil  tersebut  adalah  sperma yang  didukung  oleh  kandungan  madu tidak  dapat  meningkatkan  daya  tahan sperma  saat  terpapar  radiasi  UV.  Selain itu  hasil  tersebut  juga  dapat  disebabkan
oleh kurangnya sumber energi dari madu bagi sperma. Perbandingan bahan pengencer  dengan  sperma  dapat  menjadi faktor  menurunnya  motilitas  sperma.
Semakin  banyak  volume  semen  maka konsentrasi  sperma  semakin  sedikit (Tumanung, 2015).

## Tabel 1 . Nilai presentase motilitas sperma
Hasil perhitungan fertilization rate dari  setiap  perlakuan  dapat  dilihat  pada gambar 1. Pada gambar tersebut menunjukan  bahwa  rata-rata  fertilization rate  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  P3 sebesar 48% dan perlakuan terendah pada perlakuan  P2  sebesar  0%.  Hasil  analisis ragam  yang  telah  dilakukan  menunjukan bahwa  perbedaan  perlakuan memberikan pengaruh yang nyata terhadap perbedaan presentase  fertilisasi  telur  ikan  mas punten  dengan  nilai  signifikan  sebesar 0,00.  Hasil  fertilization  rate  rendah  ini disebabkan oleh rendahnya nilai motilitas yang didapat pada perlakuan P2. Motilitas yang semakin menurun
mengakibatkan    tingkat  membuahi  sel telur  menjadi  lemah  (Adipu,  2011). Perlakuan  P2  (  Sperma  +  madu) mengalami  fertilisasi  terendah  (0%) diduga  dosis  bahan  pengencer  yang digunakan  dalam    sperma  tidak  sesuai. Sperma  membutuhkan  bahan  pengencer yang sesuai untuk mendukung daya tahan hidup  sperma.  Dosis  yang  tidak  sesuai justru  akan  menurunkan  kemampuan sperma.      Proses  adaptasi  sel  sperma terhadap  konsentrasi  bahan  pengencer yang  digunakan  dapat  menyebabkan gangguan permeabilitas membran, menurunkan aktivitas metabolisme,
kerusakan sel dan menurunkan motilitas.
Gambar 1. Nilai presentase FR, HR, SRe, SR-7, SR-21.
0 20 40 60 80 100 120 P1 P2 P3 P4 P re se nt as e Perlakuan Presentase FR, HR, SRe, SR-7, SR-21 Fertilization Rate Hatching Rate Survival Rate Survival Rate - 7
Survival Rate - 21
Ulangan Perlakuan P1 P2 P3 P4 1 60 50 90 60 2 70 50 80 60 3 60 50 80 50 Total 190 150 250 170 Rata-rata 63.33 50 83.33 56.66
Hasil  perhitungan Hatching  Rate dari  setiap  perlakuan  dapat  dilihat  pada gambar 1 diatas. Hasil rata-rata Hatching Rate tertinggi didapatkan pada perlakuan P3 sebesar 40,5%, kemudian urutan kedua pada P1 sebesar 23,33%, urutan ketiga P4 sebesar  11,66%,  dan  yang  terakhir  pada perlakuan  P2  sebesar  0%.  Penyebab  P2 mendapatkan hasil 0% dikarenakan bahan pengencer yang digunakan pada P2 tidak dapat  mendukung  daya  pembuahan  dan daya  tetas  telur  sehingga  menyebabkan nihilnya  hasil  pada  P2.  Hasil  analisis ragam  menunjukan  bahwa  perbedaan pemberian bahan pengencer memberikan pengaruh  nyata  terhadap  presentase Hatching  Rate dengan  nilai  signifikan yang  didapat  sebesar  0,00.  Pada  fase penetasan  telur,  P3  menjadi  perlakuan terbaik. Hasil penetasan yang tinggi juga berkaitan dengan presentase motilitas dan fertilisasi  yang  tinggi  (Tumanung, et  al.,
2015).  Faktor  internal  yang  dapat mempengaruhi  daya  tetas  telur  adalah perkembangan  embrio  yang  terhambat karena  kualitas  sperma  dan  telur  yang kurang baik (Syandri, 1993).
Penambahan  air  kelapa  muda  sebagai bahan pengencer sperma terbukti berpengaruh  terhadap  tingkat  produksi telur yang menetas. Hasil ini juga didapat pada  penelitian  Prama, et  al., (2014) dimana  penambahan  air  kelapa  muda sebagai bahan pengencer sperma berhasil meningkatkan  daya  tetas  telur  sebesar 36.74%.
Pada  hasil Survival  Rate ,  P3 merupakan perlakuan yang memiliki rata- rata tertinggi dengan nilai signifikant pada SRe  sebesar  0,041,  SR-7  sebesar  0,028, dan  SR-21  sebesar  0,133.  Hasil  tersebut disebabkan  baiknya  kualitas  sperma  dan telur yang digunakan. Pemberian perlakuan  diawal  proses  ginogenesis sangat  berpengaruh  pada  kelangsungan hidup telur hingga menjadi larva. P1, P3, dan  P4  menjadi  perlakuan  yang  berhasil
memproduksi  larva  ikan  mas.  Hanya  P2 saja yang tidak dapat menghasilkan larva ikan  mas  punten.  Keberhasilan  pada  P1, P3, dan P4 juga didorong oleh kandungan NaCl  yang  menjadi  media  isotonik  dan berperan  dalam  mengatur  keseimbangan asam  basa  dan  mempertahankan  tekanan osmotic cairan sel (Anggeni, et al., 2013). Larutan  NaCl  dapat  memberikan  ruang gerak yang baik pada sperma (Wibowo, et al., 2022).  Selain  itu  tingkat  kekentalan bahan  pengencer  juga  berpengaruh  bagi hasil ginogenesis. Campuran sperma yang encer mengandung potasium yang rendah sehingga sperma lebih aktif dan motilitasnya  tinggi  (Numan,  1998). Pemberian NaCl sebagai bahan pengencer juga harus didasarkan dengan dosis yang tepat. Karena pemberian dosis tinggi pada sperma  akan  meningkatkan  konsentrasi sperma  dan  menyebabkan  persaingan antar sperma (Wibowo, et al ., 2022).
Selain  faktor  internal,  faktor eksternal juga berpengaruh bagi keberhasilan ginogenesis. Dalam penelitian ini kejutan suhu yang digunakan  adalah  kejutan  suhu  panas bersuhu  40˚C  (Nedris, et  al., 2014). Pemberian  radiasi  pada  sperma  selama  9 menit.  Suhu  minimum  yang  digunakan pada  kejutan  suhu  adalah  berkisar  38˚C sampai  40˚C  (Hollbecq, et  al .,  1986).
Durasi pemberian kejutan suhu selama 1.5 menit. Sehingga proses ginogenesis yang dilakukan  telah  sesuai.  Selain  itu parameter  kualitas  air  yang  digunakan juga  telah  sesuai  dengan  standart  SNI. Kualitas air  yang  didapat  sebesar,  suhu  : 25˚C - 29˚C, pH : 8.22 – 8.79, dan DO :
5.28 – 6.14 mg/l.

## SIMPULAN
Penambahan  bahan  pengencer yang  berbeda  pada  sperma  berpengaruh nyata pada tingkat keberhasilan ginogenesis. Hasil pada motilitas sperma, fertilitas  rate , hatching  rate , Survival
Rate  embrio,  Survival  Rate –  7  hari, Survival  Rate –  21  hari  yang  terbaik diperoleh pada perlakuan penambahan air kelapa  muda  dengan  NaCl  yaitu  sebesar motilitas : 83.33%, FR : 48%, HR : 40.5%, SRe : 95.82%, SR-7 : 91.74%, dan SR-21 : 85.55%.

## SARAN
Ginogenesis merupakan salah satu cara untuk melestarikan ikan mas punten yang merupakan ikan mas asli kota Batu, maka  dalam  melakukan  ginogenesis diharapkan  menggunakan  penambahan bahan  pengencer  air  kelapa  muda  guna meningkatkan hasil ginogenesis.

## DAFTAR PUSTAKA
Adipu,  Y.  H.  Sinjal  &  J.  Watung.  2011.
Ratio Pengenceran Sperma Terhadap  Motilitas  Spermatozoa, Fertilisasi dan Daya Tetas Ikan Lele ( Clarias sp).  Jurnal  Perikanan  dan Kelautan Tropis, Vol. 7. No. 1.
Anggeni  Prawita,  Sadikin  Amir,  Nanda Diniarti.  2013.  Pengaruh  Dosis Natrium  Chlorida  (NaCl)  yang Berbeda  Sebagai  Media  Penetasan Telur dan Sintasan Larva Bawal Air Tawar  ( Colossoma  macropomum ).
Jurnal Perikanan Unram. Vol. 3 No.
2.
Hollebecq,  M.  G.,  D.  Chourrout,  G. Wohlfarth, R. Billard. 1986.
Diploid  Gynogenesis  Inuced  by Heat  Shocksnafter  Activation  with
UV-Irradiated  Sperm  in  Common Carp.
Nendris  Selfi  R.  S.  &  Rukoyah.  2014. Pengaruh  Pemberian  Lama  Waktu
Kejutan  Suhu  Terhadap  Tingkat Keberhasilan Ginogenesis Ikan Koi ( Cyprinus carpio ). Jurnal
Agroscience. Vol 7. No. 1.
Prama.  H,  M.  Nur,  E.  Ayuzar.  2014.
Pengaruh Penambahan Bahan Pengencer Sperma Terhadap
Fertilitas  Spermatozoa  Ikan  Lele Dumbo  ( Clarias  gariepinus ).  Acta Aquatica. Vol. 1. No. 1. Hal. 46-52.
Pratama Fevi Adi, Helmi Harris, Syaeful Anar.  2020.  Pengaruh  Perbedaan Media  Filter  Dalam  Resirkulasi Terhadap Kualitas Air, Pertumbuhan  dan  Kelangsungan
Hidup  Benih  Ikan  Mas  ( Cyprinus carpio ). Jurnal Ilmu-Ilmu Perikanan dan Budidaya Perairan. Vol. 15 (2). Hal 95-104.
Rahardhianto Arsetyo, Nurlita Abdulgani, Ninis  Trisyani.  2012.  Pengaruh
Larutan Madu Dalam Nacl
Fisiologis  Terhadap  Viabilitas  Dan Motilitas  Spermatozoa  Ikan  Patin ( pangasius pangasius ) selama Masa Penyimpanan.  Jurnal  Sains  Dan Seni ITS. Vol.1. No.1.
Ramadhan  Rizqi  &  Luthfiana  A.  2018. Teknik  Pembenihan  Ikan  Mas ( Cyprinus carpio ) Secara Alami Di Unit Pelaksanaan Teknis Pengembangan Budidaya Air Tawar  (UPT  PBAT)  Umbulan, Pasuruan. Journal  of  Aqaculture and Fish Health. 7(3):124. Rustidja.  2000.  Prospek  Pembekuan Sperma. Fakultas Perikanan
Universitas Brawijaya.
Suhartojo, H. 1995. Ilmu Kemajiran Pada Ternak. Airlangga University Press. Surabaya.
Syandri H. 1993. Berbagai Dosis Ekstrak
Hipofisasi dan Pengaruhnya
Terhadap  Mani  dan  Daya  Tetas
Telur  Ikan  Mas  ( Cyprinus  carpio.
L).  Jurnal  Terubuk.  XIX.  No.  55.
Fakultas Perikanan Universitas
Bung Hatta. Padang.
Toelihere, M. R. 1981. Inseminasi Buatan Pada  ternak.  Angkasa,  Bandung, 290 hlm. Tumanung  Sudirman,  Hengky  J.  Sinjal, Juliaan Ch, Watung. 2015. Penambahan Madu Dalam Pengenceran Sperma Untuk Meningkatkan  Motilitas,  Fertilisasi Dan  Daya  Tetas  Telur  Ikan  Mas ( Cyprinus carpio
L.). Jurnal
Budidaya  Perairan.  Vol.  3.  No.  1. Hal 51-58.
Wibowo  Trio,  Netti  Aryani,  Nuraini. 2022.  Konsentrasi  Larutan  NaCl pada  semen  Terhadap  Fertilisasi dan  Penetasan  Telur  Ikan  Lele
Sangkuriang  ( Clarias  gariepinus var  Sangkuriang ).  Jurnal  Ilmu Perairan ( aquatic Science ). Vol. 10 No. 1. Hal 42-47.
Yudi  Isnan  K,  F.  Basuki,  T.  Susilowati. 2013. Penambahan Air Kelapa Dan Gliserol Pada Penyimpanan Sperma Terhadap  Motilitas  Dan  Fertilitas Spermatozoa  Ikan  Mas  ( Cyprinus carpio L.). Journal  of  aquaculture management and technology. Vol.2. No.1. Hal 51-65.
Yusrizal.  2004.  Ginogenesis  Ikan  Mas
Sumatra ( Puntius tetrazona,
Bleeker)  dengan  Umur  Zigot  yang Berbeda  Pada  Saat  Kejutan  Suhu Panas.