## KECERNAAN PROTEIN BIJI KAPUK (Ceiba petandra G) SECARA IN VITRO UNTUK PAKAN IKAN
Fitry Primadona 1) , Supriyono Eko Wardoyo 2)* , dan O. D. Subhakti Hasan 1)
1) Sekolah Tinggi Perikanan Cikaret Bogor Jalan Cikaret No.2 Bogor Selatan Bogor, 16001
2) Prodi Biologi FMIPA Universitas Nusa Bangsa Bogor Jl. KH Soleh Iskandar KM 4 Cimanggu Tanah Sareal, Bogor 16166 *email : supriyono.wardoyo@yahoo.com

## ABSTRACT

## Protein Digestibility of Kapok Seeds in Vitro for Fish Feed
Kapok seeds is a by-product of agricultural industry having potential to be used as raw material for fish feed as a source of protein and essential fats. The content of the protein in the kapok seed  flour is 28 – 34 % that is  an  overwhelming  amount to  be  a  great  source  of  protein  for  fish  feed.  Feasibility  studies  are needed, however, the use of kapok seed based on the digestibility of the protein. Pepsin with concentrations of 0.02;  0.2;  and  2 % (in  0.075  N  HCl  solution) kapok seed  flour  added  in three  repetitions  to  test  the digestibility  of  kapok  seed  invitro.  Undigested  protein  was  then  analyzed  using  the  kjeldahl  method. Determination  optimal  concentration  of  pepsin was  calculated  based  on  the  remaining  undigested  proteins (pepsin indigest) and compared the amount of protein digestibility of proteins obtained before (pepsin digest). The  research  results  revealed  that to digestibility  of  protein  on  concentration  of  0.02;  0,20  and  2,0  %  was 64,43; 68,42; 65,33%. Statistical test Anova revealed any significant differences of treatment respectively of protein digestibility. Test of Least Square Difference (LSD) stated that each treatment significantly different. Concentration optimum of enzyme that givethe best digestibility value was 0.20 % digestibility values 68,43% in the level of error 0.05.
Keywords : Kapok seed flour, protein, pepsin, invitro, optimum digestibility,proximate analysis

## ABSTRAK
Biji  kapuk  merupakan  hasil  samping  industri  pertanian  yang  berpotensi  untuk  dijadikan  bahan baku  pakan  ikan  sebagai  sumber  protein dan  sumber  lemak  esensial.  Komposisi  protein  pada  tepung  biji kapuk sebesar 28-34% adalah jumlah yang sangat potensial untuk dijadikan sumber protein bagi pakan ikan. Akan tetapi diperlukan kajian kelayakan penggunaan biji kapuk berdasarkan kecernaan protein.Pepsin dengan konsentrasi 0,02; 0,2; dan 2%(larutan dalam HCl 0,075 N) ditambahkan pada tepung biji kapuk dengan tiga kali  pengulangan  untuk  menguji  kecernaan  biji  kapuk  secara  invitro.  Protein  yang  tercerna kemudian dianalisis menggunakan metode kjeldahl. Penentukan konsentrasi  pepsin optimal dihitung berdasarkan sisa protein  yang  tidak  tercerna(pepsin  indigest) dan  dibandingkan  jumlah  protein  awal  sehingga  didapatkan kecernaan  protein  (pepsin digest).Hasil  penelitian menyatakan  kecernaan  protein  pada    konsentrasi 0,02;0,2%;dan  2%    berturut  turut  64,43; 68,42; 65,33%. Uji  statistik  Anova  menyatakan  setiap  perlakuan memberikan  perbedaan  yang  signifikan  terhadap  kecernaan  protein.  Uji  Least  Square  Difference  (LSD) menyatakan  setiap  perbandingan  perlakuan  berbeda.  Konsentrasi  enzim  optimum  yang  memberikan  nilai kecernaan terbaik adalah 0,20% (68,43%) pada tingkat kesalahan 0,05.
Kata kunci: Tepung biji kapuk, protein, pepsin, invitro, kecernaan optimum, proksimat

## PENDAHULUAN
Kebutuhan masyarakat dunia terhadap  protein  hewani  ikan  terus meningkat  seiring  dengan  peningkatan populasi  penduduk  dunia.  Sejak  tahun
1990-an,  produksi  perikanan  tangkap
mengalami stagnasi dan cenderung menurun  akibat  kerusakan  lingkungan laut dan upaya penangkapan ikan illegal. Oleh  karena  itu  pemenuhan  konsumsi ikan  dunia  hanya  diharapkan  dari  usaha budidaya ikan.
Berdasarkan  penjelasan  di  atas, maka  perlu  dicari  bahan  baku  alternatif terutama  yang  memanfaatkan  bahan pakan  lokal.  Bahan  pakan  tersebut  harus memenuhi  beberapa  kriteria  diantaranya ketersediaan  yang  melimpah,  harga relatif  murah,  mudah  dicerna  oleh  ikan, mempunyai  kandungan  nutrisi  yang  baik dan  tidak  berkompetisi  dengan  manusia (Suprayudi,  2010).  Sumber  bahan  baku pakan  yang  dapat  memenuhi  kriteria tersebut  diantaranya  bahan-bahan  hasil samping dari kegiatan agroindustri seperti biji karet, kulit singkong, bungkil kelapa, Palm  Kernel  Meal (PKM),  dan biji kapuk.
Untuk tumbuh dan berkembang ikan membutuhkan  nutrien  yang  cukup  dan berimbang.    Kebutuhan  nutrien  tersebut disuplai  melalui  pakan  buatan.    Hingga saat  ini  bahan  baku  penyusun  pakan hampir  85%  diimpor.    Hal  itu  yang menjadi  salah  satu  sebab  harga  pakan meningkat  drastis  selama  1  dekade  ini. Oleh  karena  itu  perlu  dicari  alternatif bahan baku dengan persyaratan
kualifikasi  berbasis lokal,  berkualitas, berbasis  industri  dan  harga  kompetitif. Biji kapuk merupakan salah satu kandidat yang dipilih karena memenuhi kualifikasi bahan  baku  pakan  ikan(Lampiran 1). Oleh karena itu diharapkan pada penelitian  ini  bisa  mendapatkan  hasil kecernaan  protein  yang  optimal  dan dijadikan  model  untuk  pengkajian  bahan baku lokal lainnya.
Biji  kapuk  merupakan  salah  satu kandidat  yang  dipilih  karena  memenuhi kualifikasi  bahan  baku  pakan  ikan. Selain  itu,  biji  kapuk  merupakan  bahan baku sebagai sumber protein nabati yang mudah  diperoleh,  harga  murah  dan nutrien  sesuai  kebutuhan  ikan,  sehingga dapat meningkatkan produksi ikan secara efisien.
Tepung biji kapuk yang berasal dari buah kapuk merupakan hasil ikutan yang penting  karena  dua  pertiga  bagian  berat buah  kapuk  adalah  biji.    Biji  kapuk merupakan  hasil  sampingan  pertanian yang cukup banyak di Indonesia terutama di  Pulau  jawa  dan  Sulawesi  dengan potensi  sekitar  114  ribu  ton/tahun.    Biji
kapuk mengandung protein kasar 28-34%,  lemak  22-40%  dan  bahan ekstrak tanpa nitrogen 25-35% (Lubis,1998) Minyak biji kapuk mengandung  asam  oleat  sekitar  50%,
asam  linoleat  30%,  asam  palmitat  15%, dan  asam  lemak  linolenat  sebesar  5% (Allen et  al.,2002).Berdasarkan  karak- teristik  bahan  tersebut  maka  biji  kapuk dapat  dijadikan  bahan  baku  pakan sebagai sumber protein dan asam lemak.
Jika  makromolekul  protein  dihidro- lisis  secara  terkendali,  maka  akan dihasilkan suatu peptida sebagai submakromolekul. Yang kemudian berikutnya  akan  dihasilkan  asam  amino sebagai unit molekul. Enzim utama yang digunakan  untuk  menghidrolisis  makro- molekul  protein  adalah  pepsin  (Hawab, 2004). Pepsin  adalah  enzim  yang berperan  dalam  pencernaan  protein, umumnya  memiliki  tingkat  keaktifan
1:10.000 (AOAC 971,1995)
Informasi  kajian  ilmiah  peman- faatan  biji  kapuk  pada  hewan  akuatik masih  sangat  jarang. Di  Belitung, Sumatra  Selatan, Suprayudi (2010) melaporkan  bahwa  ikan  bawal  tawar (Colossoma macropomum) yang
memiliki  lambung  dapat  hidup  dan tumbuh  dengan  diberi  pakan  100%  biji kapuk  atau  kombinasi  antara  biji kapuk dan  pelet  masing-masing  sebesar  93% dan 7%, atau 72% dan 28%.  Ikan dengan bobot rata-rata awal 10 – 12,5 g menjadi
100 – 125 g/ekor  setelah  dipelihara selama 2 – 3bulan dengan konversi pakan
berkisar 2,5 – 3,5.
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  me- ngetahui  daya  cerna  protein  biji  kapuk yang  memiliki  kandungan  protein  yang tinggi  dengan  pepsin  pada  lambung ikan(Lampiran 3)yang  dilakukan  secara invitro. Pepsin merupakan enzim protiolitik,  salah  satu  enzim  utama pemecah  ikatan  polipeptida  (protein komplek), yang memecah protein
menjadi  bentuk  yang  dapat  digunakan oleh ikan(Lampiran 3). Ikatan  dari protein  kompleks  tersebut  akan  dipecah sebagian  menjadi  peptida  dan  sebagian lagi  menjadi  asam  amino(Lampiran 2).Disamping  itu  mengetahui  kandungan
proksimat  (karbohidrat,  protein,  lemak, serat kasar, air dan abu) dari biji kapuk.

## BAHAN DAN METODA
Penelitian ini dilaksanakan selama 3 bulan  dari  bulan  Oktober – Januaridi Laboratorium  Kimia  Sekolah  Tinggi Perikanan  Jalan  Cikaret  No.2  Po.Box 155,  Kelurahan  Cikaret,  Kecamatan Bogor Selatan, Kota Bogor 16001.

## Alat
Alat-alat yang digunakan adalah alat agitasi/pengocok (dengan kecepatan rendah  15  rotasi  permenit,  diputar terbalik  dan  alat  dioprasikan  dalam inkubator  pada  suhu  45±  2 0 C), timbangan  analitik  (Mettler Toledo XS205 DU), labu Kjeldahl, , oven merek Binder  tipe  BD  240,  Tanur  merek carbolite  tipe  AAF/  11/  3/  PID  301, Blender  merek  Sharp,  corong  Buchner,
water bath,stevens LRFATexture Analyzer,desicator, incubator,  soxhlet, magnetic  stirrer, batu  didih, pendingin tegak, hot plate, labu penyaring.

## Bahan
Bahan-bahan yang digunakan adalah biji  kapuk Ceiba  petandra yang  berasal dari  Bogor,enzim  pepsin (porcine  gastric mucosa,  type  P7000  unit/mg protein,
SIGMA) berbentuk tepung yang kemudian  dijadikan  larutan  dengan konsentrasi 0,02%; 0,2%; 2% menggunakan  HCL  0.075  N,  CaO  pro analis dari Merck, NaOH pro analisa dari
Merck, HCl pro analisa dari Merck, NaCl pro  analisa  dari  Merck,  Polietilen  Glikol (PEG) 6000 teknis, asam borak, indikator campuran  (brom  cresolgreen :  metil merah), akuades, larutan Luff, Petroleum Eter  pro  analisa  dari  Merck,  BaCl 2 pro analisa  dari  Merck,  KCl  pro  analisa  dari Merck, Na-tiosulfat, KIO 3 , KI pro analisa dari  Merck  ,  H 2 SO 4 pro  analisa  dari Merck,  H 2 O 2 pro  analisa  dari  Merck , BaCl 2 pro  analisa  dari  Merck,  amilum teknis, aseton pro analisa dari Merck, dan Selenium.

## Metode Penelitian
Contoh  biji  kapuk  bebas  lemak dicerna  secara  invitro  dengan  meng- gunakan  larutan  pepsin  (hangat)  dengan proses agitasi (pengocokan) secara konstan.  Residu  yang    tidak  dapat  larut diisolasi  dengan  menggunakan  proses penyaringan,pencucian,pengeringan, kemudian dilakukan analisis kadar protein. Metode  yang  digunakan  untuk protein  nabati  tapi  tidak  untuk  pakan campuran.  Hal  ini  dikarenakan  bahan- bahan  yang  mengandung  pakan  cam- puran  mengandung  karbohidrat  kom- pleks dan campuran lain yang tidak dapat dicerna oleh pepsin. Penelitian dilakukan melalui tahap untuk me-nentukan konsentrasi pepsin optimal dan menentukan tingkat kecernaan biji kapuk menggunakan pepsin secara invitro.
Analisis  kadar  protein biji  kapuk awal  dilakukan  dengan  menggunakan metode  mikro  Kjeldahl  (protein biji kapuk kompleks  yang  masih  mengan- dung  lemak  dan  kandungan  lain). Kemudian  dilakukan  kadar  protein  sisa setelah  terlebih  dahulu  sampel  di- ekstraksi  hingga  diperoleh  bebas  lemak, ditambahkan  dengan  larutan  pepsin dengan konsentrasi tertentu, lalu
diinkubasi  selama  16  jam.Selanjutnya hasil  inkubasi  disaring  menggunakan kertas  saring  dan  residu  yang  tersisa kemudian  dianalisis  proteinnya  sebagai kadar  protein  sisa  (protein  akhir).  Dari protein  awal  dan  akhir  yang  diperoleh, dihitung pepsin  indigest (jumlah  protein yang  tidak  tercerna)  untuk  mendapatkan hasil  pepsin digest/PD  (jumlah  protein yang tercerna) yang optimum.

## Perbandingan  Perlakuan  dan Ulangan Biji Kapuk
Biji  kapuk  dengan  perlakuan  yaitu penambahan  pepsin  dengan  konsentrasi tertentu,  masing-masing  0%; 0,02%;
0,2%,  2%  (pepsin  dilarutkan  dengan menggunakan  larutan  HCl  0,075  N). Ulangan  yang  dilakukan  pada  analisis tersebut  adalah  sebanyak tiga kali.
Konsentrasi  penambahan  pepsin  tersebut
di  atas  berdasarkan  analisis  tingkat kecernaan  bahan  baku  protein nabati. Parameter  yang  akan  diukur  adalah tingkat  kecernaan  protein  biji  kapuk dengan  menggunakan  pepsin  secara invitro,  yang  kemudian  dianalisis  ber- dasarkan metode AOAC 971,1995.

## Ekstraksi Lemak dari Biji Kapuk
Biji  kapuk kering yang  diperoleh, dibersihkan  dari  kapuknya,dan  kotoran lainnya,  setelah  itu  dilakukan peng- halusan menjadi  tepung biji kapuk, setelah  itu  ditimbang    sebanyak  1  gram sampel  dimasukkan  dalam  kertas  saring bebas  lemak  yang  telah  dibuat  selong- song.  Selongsong  yang  berisi  sampel dimasukkan  ke  dalam  alat  soxhlet  dan diberi  pelarut  petroleum  eter  sebanyak 150  ml  ditampung  ke  dalam  labu penyaring  yang  telah  diberi  beberapa batu  didih  yang  telah  dikeringkan  dan diketahui  bobotnya,  lalu  diekstraksi. Ekstraksi dilakukan selama 4 jam.
Setelah  diekstraksi,  labu  penyaring dikeringkan  dalam  oven  pada  105  °C selama  1  jam.  Kemudian  didinginkan dalam  eksikator  selama  15  menit  lalu ditimbang dan dicatat.Kadar lemak kasar dihitung.Sampel yang telah dipakai untuk ekstraksi  kemudian  dikeringkan  untuk menghilangkan  sisa  pelarut,  setelah dikeringkan  kemudian  ditimbang  residu yang  bebas  lemak,  kemudian  dilakukan kecernaan  protein    pepsin  HCl (AOAC 971,1995 ).

## Kecernaan  Protein  Pepsin  HCl  (AOAC
971, 1995 )
Contoh  tepung biji kapuk  yang sudah  bebas  lemak  tersebut  kemudian dimasukan  kedalam  botol  dengan  tutup berulir.  Kemudian  kedalam    botol  yang berisi  contoh,  dimasukan  150  ml  larutan pepsin  dengan  konsentrasi  0%;  0,02%; 0,2%;  2%  yang  telah  dihangatkan sebelumnya hingga suhu 42-45 o C, larutan pepsin  dituangkan  perlahan-lahan  dan dipastikan  agar  seluruh  contoh  telah dibasahi oleh larutan tersebut. Setelah itu botol  ditutup,kemudian  diletakan  di
dalam  alat  agitator.  Lalu  botol  berisi contoh  tersebut  dikocok/ diaduk  dengan kecepatan  15  rpm  secara  konstan  selama 16  jam  pada  suhu  45±  2 0 C.  Botol
kemudian dipindahkan dari alat penyangga  dan  diletakan  pada  suatu  rak dengan  kemiringan  45  derajat,  lalu  tutup botol  tersebut  dikendurkan,  dan  residu dibiarkan  mengendap    selama  15  menit. Partikel  contoh  yang  menempel  pada tutup  botol  dibilas  dengan  sedikit  air, kemudian larutan dalam botol dituangkan ke saringan secara perlahan-lahan. Setelah seluruh isi dalam botol  tersaring, botol  tersebut  dicuci/dibilas  dan  kertas saringnya  dibilas  dengan  menggunakan air  hangat.  Proses  pembilasan  ini dilakukan  berulang  hingga  residu  bebas asam  (minimal  peng-ulangan  pencucian sebanyak 2-3 kali), kemudian dilanjutkan dengan  meng-gunakan  15  ml  aseton. Kemudian  kertas  saring  berisi  residu dikeringkan dalam oven, dan
didinginkan.  Setelah  itu  kertas  saring yang  berisi  residu  tersebut  kemudian dimasukan ke dalam labu kjeldahl, untuk selanjutnya  dilakukan  penetapan  protein yang    tidak  tercerna  oleh  pepsin  (kadar protein sisa). Penetapan contoh dilakukan dengan  kertas  saring  kosong  dengan meng-gunakan kertas saring tanpa residu. Dan  hasil  yang  diperoleh  dikurangi dengan  hasil  dari  penetapan  contoh masing-masing, untuk mendapatkan kadar protein sisa yang sebenarnya.

## Perhitungan dalam Analisis Pepsin
Perhitungan Kadar Protein Kasar (crude protein )
Perhitungan  kadar  protein  sisa  (  hasil analisis  protein  setelah  penambahan pepsin )
Perhitungan kadar protein yang tidak tercerna oleh pepsin ( pepsin indigest)
Kadar Protein yang tercerna oleh pepsin ( pepsin digest )
Kecernaan Protein =  100% - kadar  pepsin indigest

## Analisis Proksimat
Penentuan Kadar Air Metoda Gravimetri (AOAC 1995)
Sampel sebanyak  1  gram dimasuk- kan ke dalam cawan yang telah diketahui bobotnya, kemudian cawan berisi sampel dimasukkan  ke  dalam  oven  pada  suhu 105  °C  hingga  mencapai  bobot  yang konstan.  Setelah  itu  cawan  diangkat dengan  penjepit,  dan  dimasukkan  dalam esikator  ditunggu  hingga  dingin,  contoh ditimbang  dan  bobot  yang  hilang  adalah bobot air.
Perhitungan kadar air (%)
% 100    sampel awal berat n pengeringa akhir awal selisih berat
Penentuan Kadar Abu Metoda Gravimetri (AOAC 1995)
Sampel ditimbang sebanyak 1 gram, dimasukkan  dalam  cawan  yang  telah diketahui  bobotnya.  Lalu  dipanaskan dengan  pembakar  bunsen  sampai  tidak berasap  lagi.  Kemudian  cawan  yang berisi  sampel  tadi  dimasukkan  ke  dalam tanur dengan suhu 600 °C selama 5 jam. Setelah  itu  didinginkan  dalam  eksikator
selama  30  menit,  kemudian  ditimbang dan dicatat.
Perhitungan kadar abu (%)
% 100   sampel awal berat abu berat

## Penentuan Kadar Lemak Kasar Metoda
Soxhlet (AOAC 1995) Sampel ditimbang sebanyak 1 gram, dimasukkan  dalam  kertas  saring  bebas lemak  yang  telah  dibuat  selongsong. Selongsong yang berisi sampel dimasukkan  ke  dalam  alat  soxhlet  dan diberi  pelarut  Petroleum  Eter  sebanyak
150  ml  ditampung  ke  dalam  labu penyaring  yang  telah  diberi  beberapa batu  didih  yang  telah  dikeringkan  dan diketahui  bobotnya,  lalu  diekstraksi.
Ekstraksi  dilakukan  selama  4  jam. Setelah diekstraksi, labu penyaring dikeringkan  dalam  oven  pada  105  °C selama  1  jam.  Kemudian  di-dinginkan dalam  eksikator  selama  15  menit  lalu ditimbang dan dicatat.Kadar lemak kasar dihitung.
Perhitungan kadar lemak (%)
% 100   sampel awal berat n pengeringa setelah berat

## Penentuan Kadar Protein Kasar Metoda
Kyeldhal (AOAC 1995).
Sampel ditimbang sebanyak 1 gram, dimasukkan  ke  dalam  labu  Kjeldahl, ditambahkan 0,65 gram Selenium dan 25 ml  H 2 SO 4 pekat.  Semua  bahan  dalam labu  dipanaskan  dalam  lemari  asam sampai  cairan  berhenti  berasap.  Setelah tidak  berasap,  pemanasan  diteruskan dengan  api  besar  sampai  mendidih  dan larutan menjadi jernih, kemudian didinginkan.  Larutan  diencerkan  dengan menambahkan  10  ml  akuades.  Larutan dipindahkan  ke  dalam  alat  destilasi  dan dibilas  dua  atau  tiga  kali  dengan  3  ml akuades,  lalu  ditambahkan  10  ml NaOH 40%.Uap  air  dialirkan  melewati  alat
destilasi dan destilat ditampung ke dalam erlenmeyer yang berisi 10 ml asam borat dan  2-3  tetes  indikator  BCG/MM  (1:1) atau  Mengsel,  waktu  destilasi  ditentukan selama  5  menit  (stopwatch).  Erlenmeyer yang  berisi  sulingan  dititar  dengan  HCl 0,1  N  sampai  titik  akhir  yang  di- tunjukkan oleh alat makro kjeldahl.
Perhitungan kadar protein (%)
% 100 ) ( 25 , 6 007 , 14 ) (      mg sampel berat HCl V N
Penentuan  Kadar  Karbohidrat Metoda Luff and Schoorl (AOAC 1995)
Sampel ditimbang sebanyak 1 gram, ditambahkan  25  ml  H 2 SO 4 1,25%  dan direfluks  selama  2  jam.  Kemudian didinginkan  dan  diatur  pH  sampai  netral dengan  larutan  NaOH  3,25%.  Se- lanjutnya  larutan    dimasukkan  ke  dalam labu  ukur  100  ml  dan  ditepatkan  dengan akuades.  Larutan  disaring  dengan  kertas saring,  ditampung  dalam  gelas  piala. Larutan  dipipet  10  ml  dimasukkan  ke dalam  erlenmeyer  250  mL.  Ditambah- kan 25 ml larutan luff dan 15 ml akuades, kemudian  direfluks  selama  10  menit. Didinginkan,  larutan  ditambah  10  ml  KI 30%  dan  25  ml  H 2 SO 4 25%.  Dititrasi dengan  Na 2 SO 3 0,1  N  (yang telah distandardisasi).
Titrasi dihentikan sampai  kuning  muda  seulas  dan  di- tambahkan  indikator  pati  hingga  larutan berwarna  biru  dan  titrasi  dilanjutkan hingga  larutan  berwarna  putih  susu. Dilakukan penetapan blanko.
Kadar karbohidrat (%)
contoh mg glukosa mg n pengencera Faktor % 100 90 , 0    

## Penentuan Kadar Serat kasar Metoda Gravimetri (AOAC 1995)
Prinsip  analisis  kadar  serat  kasar adalah  menghidrolisis  sampel  dalam asam  kuat  encer  dan  basa  kuat  encer, sehingga karbohidrat dan protein juga zat – zat  lain  terhidrolisis  dan  larut.  Serat
kasar yang tidak larut dipisahkan dengan penyaringan.  Serat  kasar  yang  tertinggal pada  kertas  serat  saring  dikeringkan  dan ditimbang sampai berat konstan.
Ditimbang  1  gram  sampel,  ditambahkan 50 ml H 2 SO 4 1,25%. Dipanaskan dengan refluks selama 30 menit. Ditambahkan 50 ml NaOH 3,25% dan direfluks selama 30 menit. Disaring, dicuci dengan etanol dan dikeringkan pada suhu 105 o C.
Didinginkan  dan  ditimbang  sampai  berat konstan.
Perhitungan kadar serat kasar (%)
% 100   sampel awal berat n pengeringa setelah berat

## HASILDAN PEMBAHASAN

## Tingkat Kecernaan Protein
Kecernaan  protein  adalah  hasil  per- hitungan dari :
1. Sisa  perhitungan  yang  tidak  tercerna oleh pepsin
2. Kadar protein sisa
3. Protein kasar biji kapuk (28,78%)
Kecernaan  protein  0,2%  didapatkan dari  100%  dikurangi  sisa  protein  yang tidak  tercerna oleh  pepsin.  Sisa  protein yang  tidak  tercerna  oleh  pepsin  didapat dari  presentasi  kadar  pepsin  sisa  dari protein kasar (28,78%). Kecernaan protein=  100% - 31.58%  =  68.43%  Sisa protein  yang  tidak  tercerna  oleh  pepsin (31,58%) didapat dari :    9,09    x 100% =  31.57  %, kadar  protein  sisa  (9,09%) didapat  dari  hasil  analisis  kadar  protein kasar(28,78%). Hasil uji protein sisa pada
konsentrasi  pepsin  0%  adalah  26,52% (Gambar.1)  masih  terjadi  proses  pen- cernaan  protein  oleh  pepsin.  Hasil  ini terjadi  karena  proses  pemutusan  ikatan kompleks protein pada biji kapuk melalui proses hidrolisis sehingga terjadi pelepasan  protein  sederhana  yang  larut dalam  HCl  0,075N.  Saat  dilakukan penyaringan,  protein  terlarut  ini  akan terpisah  dari  tepung  biji  kapuk  dan
menyebabkan terjadinya pencernaan
protein tanpa adanya enzim pepsin.
Hasil  protein  yang  tidak  tercerna terendah  (pepsin  indigest)  pada Gambar 1,yaitu  sampel  dengan  penambahan enzim,  terjadi  pada  perlakukan  0.2% adalah  31,57%.  Hal  ini  membuktikan kerja enzim hanya terjadi pada konsentrasi  optimum,  bukan  konsentrasi maksimum. Peningkatan konsentrasi enzim  secara  terus  menerus  tidak  akan menyebabkan  peningkatan  kecernaan
protein  oleh  enzim.  Kecernaan  tertinggi diperoleh  pada  perlakuan  konsentrasi enzim  0,2%.  Jika  dibandingkan  dengan literatur (AOAC 971,1995) keadaan yang diperoleh adalah sama yaitu 0,2%.
Pengolahan  data  secara  statistik inferen menggunakan Analysis of Varian, kemudian  dilakukan  untuk  menyatakan secara  statistik,  apakah  hasil  yang didapatkan  dengan  perbedaan  perlakuan menunjukkan perbedaan hasil yang nyata yang ditampilkan pada Tabel.1: Tabel 1. Hasil Uji Anova (Analysis of Varian) Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 0.02% 3 193.2245 64.40815 0.000402 0.20% 3 205.2814 68.42715 0.00161 2,00% 3 196.0042 65.33472 0.000402 ANOVA Source of Variation SS df MS F F crit Between Groups 26.57394 2 13.28697 16508.17 5.143253 Within Groups 0.004829 6 0.000805 Total 26.57877 8
Gambar 1. Grafik Kecernaan Protein ( Digest )
Tabel 2. Hasil Uji LSD (Least Square Difference) LSD = 0,056757 KS 0,02 KS 0,20 KS 2,00 64,42 68,38 65,32 64,42 68,45 65,32 64,38 68,45 65,36 64,41 68,43 65,33 Diff 2-1 4,02 > 0,13901 Diff 3-2 3,07 > 0,13901 Diff 3-1 0,93 > 0,13901
Nilai  F  hitung  yang  dihasilkan 16.508,17>5,14.  Hipotesis  yang  me- nyatakan  tidak  terdapat  perbedaan  hasil untuk setiap perlakuan akan ditolak. Dan dinyatakan  perlakuan  dengan  perbedaan konsentrasi  enzim  memberikan  hasil yang berbeda signifikan.
Untuk  menyatakan  perlakuan  mana yang memberikan hasil berbeda, diguna- kan  metode Least  Square  Difference (LSD), seperti ditampilkan pada tabel 2.
Pengujian menggunakan Least Square  Difference  (LSD)  menunjukan baik semua perlakuan berbeda satu sama lain  secara  signifikan  karena  perbedaan hasil untuk masing-masing metode lebih besar dari 0,056757
Keadaan  optimum  menurut  variasi perlakuan  konsentrasi  enzim  disim- pulkan  terjadi  pada  konsentrasi  penam- bahan  enzim  0,2%.  Kecernaan  yang diperoleh  adalah 68,43%  yang  dinyata- kan  berbeda  nyata  secara  statistik menurut  pengujian Anova Single  Factor dan Least Square Difference (LSD).

## Analisa Proksimat
Analisis proksimat merupakan kunci untuk  menetapkan  pemanfaatan  bahan tercerna atau energi metabolik makanan, bukan  untuk  mendefinisikan  kandungan zat  makanan (Gambar.2).  Dari  hasil analisis  proksimat  dapat  dipergunakan untuk mengetahui nilai gizi suatu pakan (Suprayudi,2010).
Analisis  proksimat  pada  umumnya dipergunakan  untuk  mengetahui kan- dungan  air,  protein, lemak, karbohidrat, serat  kasar  dan  abu.  Menurut Muchtadi (2002), analisis  proksimata dalah  pe- ngujian  laboratorium  bahan  pakan  yang akan  diformulasi  dan  diolah  menjadi ransum  pelet, crumble, atau mash. Analisis  proksimat dilakukan  di  awal sebelum  penelitian,  dan  parameter  yang diananalisis meliputi  parameter  kadar air,  protein,  lemak,  serat  kasar, dan abu.Hasil  analisis  proksimat  bisa  dilihat di Tabel 3.

## Kadar Air
Kadar  air  merupakan  karakteristik yang sangat berpengaruh terhadap pakan,  terutama  terhadap  penampakan dan tekstur. Kadar air yang tinggi meng- akibatkan  bakteri,  kapang  dan  khamir mudah  tumbuh,  sehingga  akan  terjadi perubahan.  Air  sering  dikurangi  dengan cara penguapan atau pengeringan.
Pada  Tabel  3 menunjukkan  kadar air  yang  diperoleh dari    biji  kapuk  jenis C.petandra sekitar  11%  dan  13%,  dari hasil  penelitian  ini  kadar  air  sebanyak 10,72% menunjukkan  umur simpan dan daya  tahan  tepung  biji  kapuk.  Semakin sedikit  kandungan  air  dalam  pakan, kemungkinan  rusaknya  pakan  oleh mikroba  semakin  kecil.  Kandungan  air dalam  pakan  mempengaruhi  daya  tahan bahan  terhadap  serangan  mikroba. Agar dalam  proses  penyimpanan  bisa  ber-
tahan  lama sebaiknya disimpan  di tempat yang kering (Watanabe,1998).

## Kadar Abu
Abu  merupakan  unsur  mineral  zat anorganik  yang  tidak  mudah  menguap dan  merupakan  sisa  yang  tertinggal setelah  contoh  dibakar  dan  dipijarkan sampai bebas karbon dan air. Kadar abu dalam pakan  ditetapkan dengan menim- bang  sisa  mineral  sebagai  hasil  pemba- karan bahan organik (Watanabe,1998).
Pada  Tabel  3  menunjukkan  biji kapuk C.petandrapada  hasil  penelitian ini  didapat  kandung  abunya  sebesar 5,86%,  yang  tidak  jauh  berbeda  dengan hasil Ariani(1999) sebanyak  6%.

## Kadar Lemak
Lemak merupakan salah satu makronutrien  penting  bagi  ikan  sebagai sumber  energi,  juga  menyediakan  asam lemak  essensial  yang  tidak  dapat disintesis  oleh  tubuh  ikan.    Sebagai sumber energi, lemak mendukung fungsi protein  bagi  pertumbuhan  ikan  dan kelangsungan hidup ikan. Sumber steroid  untuk  menjaga  sistem  membran, transport  lemak,  dan  sebagai  prekusor hormon steroid.  Lemak juga membantu dalam  penyerapan  vitamin  yang  larut lemak (vitamin A,D,E,K) (Millamena et
al.,2002).
Tabel 3. Analisis Proksimat Dibandingkan Terhadap Komposisi  Biji Kapuk Parameter * Biji kapuk (%) **Biji Kapuk (%) Hasil Penel. ini ( %) Protein kasar 25,58 29 28,79 Lemak 23,13 22-34 20,44 Abu 6,0 6,0 5,86 Serat kasar 18,0 20 17,66 Karbohidrat 16,0 20 16,98 Air 11,0 13,0 10,72 *Hasan,2012)
**(Ariani,1999)
Gambar 2. Grafik Hasil Analisis Kadar Proksimat
Pada  Tabel  3 menunjukkan  kadar lemak  pada  hasil  ekstraksi    berkisar antara  20,44%.  Jika  dibandingkan  de- ngan  hasil  kadar  lemak  menurut  Hasan (2012) adalah 23,13%, tidak terlalu jauh bedanya. Kelebihan  kandungan  lemak pada pakan dapat menyebabkan kerusakan  liver  yang  berakibat  penyakit dan  kematian,  karena  ikan  mengalami kesulitan dalam mencerna lemak. Kandungan  lemak  jenuh  sangat  ber- bahaya bagi ikan, akan tetapi tetapi kan- dungan  lemak  pada  biji  kapuk  memiliki kadar  lemak  tidak  jenuh  71,95% (Wahyudi, 2005).  Hal  cukup    aman  dan diperlukan oleh ikan.

## Kadar Protein Kasar
Protein  diperlukan  ikan  untuk pertumbuhan, memperbaiki dan memba- ngun  jaringan  tubuh,  pembentukan enzim,  hormon,  dan  antibodi  dalam tubuh. Protein merupakan suatu molekul kompleks  yang terdiri  dari  asam  amino esensial  dan  nonesensial.    Asam  amino esensial  harus  diberikan  dari  luar  tubuh ikan  melalui  pakan  karena  tubuh  ikan tidak  dapat  mensintesis  sendiri,  sedang- kan  asam  amino  nonesensial  dapat disintesis  oleh  tubuh  ikan.    Kandungan kedua  asam  amino  tersebut  akan mendukung  pertumbuhan  ikan  secara maksimal (Watanabe,1998).
Jumlah dan kebutuhan protein yang cukup sangat penting  dalam pakan ikan budidaya,    pada  umumnya  ikan  sangat membutuhkan protein untuk tumbuh dan berkembang.  Pada tabel 3 menunjukkan kadar  protein  pada  biji  kapuk  adalah 28,79%. Jika dibandingkan dengan hasil penelitian  Ariani(1999)    29%  protein, hasil penelitian ini tidak berbeda jauh.
Kadar  protein  bervariasi  antara setiap  jenis  ikan.  Tetapi  protein  adalah komponen  penting  dalam  pakan,  dan diperlukan  untuk  pertumbuhan  dan kesehatan  ikan.  Ikan  herbivora  butuh protein  sekitar  15% - 25%dalam  kan- dungan pakan, sedangkan ikan karnivora butuh  sedikitnya    kandungan  28% (Muskita, 2012). Kadar protein pada biji
kapuk pada penelitian ini sesuai kebutuhan ikan.

## Kadar Karbohidrat
Karbohidrat  mempunyai  peranan penting  dalam  menentukan  karakteristik bahan  pakan, warna  dan  tekstur. Kebanyakan  karbohidrat  yang  ditemu- kan  di  alam  terdapat  sebagai  poli- sakarida  dengan  berat  molekul  yang tinggi (Parakkasi, 1996).
Karbohidrat  terbentuk  dari  kom- ponen  yang  mengandung  unsur C,  H, dan O.  Karbohidrat tersediaberlimpahdi alam dan bersumber dari tumbuhan yang biasa  menyimpan  energinya  pada  biji, akar,  dan  umbi (Nabib, 2003). Karbo- hidrat  merupakan  sumber  energi  yang murah  dan  dapat  menggantikan  sumber energi yang mahal dari protein. Protein sparring  effect dari  karbohidrat  menjadi sumber  energi  yang  ekonomis,  banyak karbohidrat  yang  dapat  dicerna, digu- nakan  dalam  formulasi  pakan  ikan. Sumber karbohidrat  seperti  pati  dapat digunakan  sebagai  perekat  dalam  pakan ikan  dan  udang  untuk  meningkatkan ketahanan  pakan  di  air  (Millamena et al.,2002).
Pada tabel 3 terlihat hasil penetapan uji  kadar  karbohidrat sekitar  16,98% kurang  lebih  sama  jika  dibandingkan dengan  kadar  karbohidrat  penelitian
Hasan (2012) sebesar 16,30%. Banyak penelitian melaporkan bahwa pakan yang mengandung karbohidrat tinggi berdampak rendahnya pertumbuhan ikan dan  efisiensi  pakan ikan.    Terdapat  kesulitan  untuk  menen- tukan tingkat karbohidrat yang optimum bagi  ikan  karena  protein  dan  lemak mendahului  fungsi  karbohidrat  sebagai sumber  energi  (Watanabe,1998)  dan kegunaan karbohidrat kemungkinan dipengaruhi  oleh  tingkat  protein  dan lemak.
Ikan  menggunakan  karbohidarat sebagai  sumber  energi.  Studi  mengenai pemanfaatan  karbohidrat  pada  ikan cukup banyak dilakukan. Informasi yang didapatkan  bahwa  kemampuan  ikan dalam  memanfaatkan  karbohidrat  lebih
rendah  dibandingkan  hewan  darat,  dan setiap  jenis  ikan  berbeda  pula  dalam kemampuan  memanfaatkannya.  Karbo- hidrat  merupakan  sumber  energi  yang murah  dan  berlimpah  di  alam,  sehingga banyak bahan alam untuk dikembangkan sebagai pakan ikan (Ariaty,2003).
Metode yang  digunakan  pada  uji kadar  karbohidrat menggunakn  metode Luffand Scoorl yaitu merupakan metode yang  menghidrolisis  karbohidrat  men- jadi  gula  pereduksi  untuk  dapat  me- reduksi  CuO,  seperti  pada  Gambar 3. Kelebihan  CuO  akan  direduksi  dengan KI  yang  melepaskan  I 2 yang  bebas dalam  keadaan  asam,  kemudian  I 2 akan dititrasi oleh Na 2 S 2 O 3 .

## Kadar Serat Kasar
Serat pada pakan merupakan bagian dari  bahan  yang  tahan  terhadap  proses
hidrolisis enzim-enzim pencernaan dalam  lambung ikan.  Serat  kasar  (crude fiber)  yang  biasa  digunakan  dalam analisis  proksimat  bahan pakan meru- pakan  bagian  serat pakan yang  tidak dapat dihidrolisis oleh H 2 SO 4 dan NaOH pada  penentuan  serat  kasar.  Hanya sekitar  seperlima  sampai  setengah  dari keseluruhan  serat  kasar  yang  benar- benar berfungsi sebagai serat kasar.
Hasil analisis kadar serat kasar pada biji  kapuk  diperoleh  sebesar  17,66% tidak  berbeda  dengan  kadar  serat  kasar pada  biji  kapuk  menurut Hasan  (2012) 18%. Serat  kasar  ini  merupakan  hasil akhir dari proses pencernaan atau pakan yang tidak  dapat  di  cerna  oleh  ikan. Semakin  sedikit  persentase  serat  kasar maka  penyerapan  akan  kandungan  gizi pada  pakan  akan  semakin  baik (Nabib,
2003).
Gambar 3. Reaksi Antara Aldehid dengan Larutan Luff
Gambar  4. Struktur Senyawa  Asam Lemak Siklopropenoat (ALS) (Halver  &
Hardy,2002)
Gambar 5. Struktur Gossypol (Polyphenol) (Cai et al.,  2004) Struktur senyawa siklopropenoat (Halver and Hardy, 2002) dan Struktur gossypol (polyphenol) (Cai et al., 2004)
Biji  kapuk  mengandung  protein kasar 28-34%, lemak 22-40% dan bahan ekstrak tanpa nitrogen 25-35% (Lubis,1998). Namun demikian,  biji kapuk  juga  mengandung  zat  anti  nutrisi yakni gossypol (FG)  dan  asam  lemak siklopropenoat  (ALS). FG  merupakan nama  umum  dari  polyphenol  yang terdapat  dalam  jaringan  tanaman  ber- genus Gossypium dan  beberapa  family Malvaceae seperti  pada  tanaman  kapas dan  kapuk.    Asam-asam Fenolik yang terdapat  dalam  gossypol  dapat  mem- bentuk senyawa komplek dengan protein serta  menghambat  kerja  enzim  pro- teolitik  seperti  tripsin  dan  pepsin (Morgan, 2000;  Cai et  al., 2004).  ALS pada  konsentrtasi  yang  berlebih dapat menyebabkan  nekrosis  pada  organ  dan penurunan pertumbuhan (Muskita, 2012; Li  dan  Robinson, 2006;  Yildirim et al.,2004)  Asam  lemak  siklopropenoat adalah  asam  lemak  tidak  jenuh  yang mempunyai  gugus  siklis  yaitu  gugus siklopropena.    Dikenal  2  senyawa  di- mana  tergantung  jumlah  karbonnya yaitu  asam  malvalat  dan  asam  sterkulat. asam  sterkulat  adalah  asam  8 – (2-oktil – 1-siklopropenil)  heptanoat(Phelps et  al., 1995; Halver  &  Hardy,  2002),  (Gambar 4 dan Gambar 5).
Asam  lemak  siklopropenoat  dapat dinonaktifkan  sehingga  dapat  mengu- rangi bahkan menghilangkan sifat toksiknya  yaitu  dengan  hidrogenasi, penambahan  dengan  polimerasi,  halo- genasi,  substitusi  atom  hidrogen  secara kimia  pada  cincin  siklopropenat.  Di samping itu dapat juga dilakukan dengan pemanasan,  pengasaman  dan  sulfitasi
yang  akan  merubah  struktur  gugus cincin  siklopropenat  sehingga  tidak bersifat racun lagi bagi ternak (Thalib et al., 1998).  Zahirma (2012) menyatakan bahwa  reaksi  oksidasi  asam  sterkulat dengan  kalium  permanganat  (KMnO4) dalam  aseton  dan  hidrogenasi  dengan paladium kalsium karbonat (Pd-CaCO3) dalam  etanol  mempunyai  arti  penting dalam  upaya  menekan  sifat  toksik  asam siklopropenoat, karena  reaksi  ini  dapat memecahkan  gugus  cincin  siklo. Se- dangkan  gossypol  merupakan  subtansi senyawa phenol berwarna kuning, mempunyai  struktur  kimia  siklik  yang berikatan dengan OH,mempunyai rumus molekul  C30H30O8  dengan  bobot molekul  518,54 Penelitian  Yildirim et al.    (2004)  menunjukkan  bahwa  yang mengandung  gossypol  dengan  level lebih  dari  800  mg/kg,  tidak  menun- jukkan  pengaruh  yang  berlawanan terhadap bobot dan konsumsi pakan.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh dapat disimpulkan bahwa :
1. Nilai  kecernaan  protein  biji  kapuk secara in  vitro pada  konsentrasi penambahan enzim 0,02; 0,20; dan 2,00% berturut-turut  64,42;68,42; dan 65,32%.
2. Kecernaan  protein tertinggi pada biji kapuk didapatkan dengan  perlakuan penambahan pepsin konsentrasi pepsin 0.2%.
3. Pada  hasil  proksimat  meliputikadar protein kasar, lemak, abu, serat kasar, karbohidrat,  dan  kadar  air  tidak  jauh berbeda  dengan  penelitian  sebe- lumnya.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai anti  nutrisi  yang  menghambat kecernaan  protein  pada  biji  kapuk berupa  gossypol  dan asam  lemak
siklopropenoat untuk mendapatkan kecernaan  protein yang  diperoleh  lebih baik (Gambar 4 dan Gambar 5.).

## DAFTAR PUSTAKA
Association of Official Analytical Chemists [AOAC], 1995. Official  methods  of  analysis. 16th  edn.  AOAC,  Arlington. 1094 p. Allen, P.G.,  L.W. Botsford,  A.M.
Schuur, and W.E. Johnston, 2002. Bioeconomics  of  aqua-
culture.  Elsevier, Amsterdam.
Ariani,E., 1999. Uji banding biji kapuk
(Ceiba  petandra,  GAERTN) terhadap dedak, bungkil kelapa  dan bungkil kedelai sebagai sumber protein lemak ruminansia. Skripsi.Fakultas Peternakan,  Institut  Pertanian
Bogor .
Ariaty,L.,2003. Morfologi darah ikan mas  (Cyprinus  carpio), nila merah  (Oreochromis  sp)  dan lele dumbo (Clarias gariepinus)  dari  Sukabumi.
Skripsi. FPIK.  IPB.  Bogor.
Cai, Y., H. Zhang, Y. Zeng, J. Mo, I. Bao, C. Miao,  Bai  I, F.Yann, and F.Chen, 2004. An optimazed gossypol high- performance  liquid  chroma- tography assay and its
application  in  evaluation  of
different  gland  genotypes  of cotton. Journal  Bio. Sci.,  29:
67-71. Cane,S., 1995. Certificate chemistry  3. England: Chorley & Pickersgill Ltd. Leeds. Hawab,M., 2004. Buku ajar biokimia umum. Universitas  Nusa Bangsa. Bogor
Halver, J.E., R.W. Hardy,2002. Fish nutrition (3 rd ed).New  York –
London Academi Press. Hasan,O.D.S., 2012. Evaluasi biji kapuk (Ceiba petandra Gaertn) berdasar kecernaan, enzim- atik, gambaran darah, histologi  dan kinerja pertum- buhan sebagai alternatif bahan baku pakan ikan mas (Cyprinus carpio L.). Disertasi.  Ilmu  Akuakultur. IPB. Bogor. Lubis,  D.A.,  1998. Ilmu  makanan ternak.    P.T.  Pembangunan, Jakarta. Millamena, O.M., R.M. Coloso, and F.P. Pascual,  2002. Nutrition  in tropical aquaculture. SEAFDEC,Tigbauanm  llo-ilo, Philippines. 221p. Morgan, S.E.,  2000.  Gossypol  as  a toxicant  in  livestock.pp: 251- 263.  In: G.E. Burrows  (eds).
The  Veterinary clinics  of North  America  : Food  Animal Practice.  Philadelphia
Muchtadi, D., 2002. Evaluasi nilai gizi pangan. Petunjuk Labora- torium, PAU Pangan dan Gizi. IPB Muskita, W.H., 2012. Substitusi  tepung
bungkil  kedele,  Glycine  max., dengan tepung  bungkil  biji kapuk,  Ceiba  petandra,  dalam
pakan  juvenil  udang  vaname, Litopenaeus vannamei : Kajian  histologi,  enzimatik, dan  komposisi  asam  lemak tubuh. Disertasi. Sekolah Pascasarjana  Institut  Pertanian Bogor.  Bogor.  120 hal.
Nabib,  R.,  2003. Kandungan  gizi  dan penyakit  ikan.  Pusat  Antar Institut Pertanian Bogor.
Ochse,  J.J.,  M.J.  Soule  Jr.,  M.J.
Dijkman, C.  Wehlberg,1997.
Tropical and subtropical agriculture.    Vol.    II.    The McMillan Company, New York. Parakkasi, A.,  1996. Ilmu gizi dan makanan ternak monogastrik. Angkasa. Bandung Phelps, R.A., F.S.Shenstone, A.R. Kemmerer, R.J. Evans, 1995. A  Review  of  cyclopropenoid compounds: biological effectof some derivatives. Poultry Sci., 44: 358 - 394. Rosmawati, 2005. Hidrolisis pakan buatan  oleh  enzim pepsin  dan pankreatin  untuk meningkat- kan daya cerna  dan pertum- buhan benih ikan gurami (Osphronemus  gourami  Lac.). [Tesis]. Program Pascasarjana.
IPB, Bogor.
Setiadi,  2008. Bertanam Kapuk  Randu. PT Penerbit Swadaya. Jakarta.
Sihombing, D.T.H., dan S.  Simamora,
2009. Penelitian  Biji  Kapuk untuk  Makanan  Ternak  Babi. Prosiding. Seminar  Penunjang Pengembangan Peternakan
Lembaga  Penelitian  Peternak- an.  Badan  Penelitian  dan Pengembangan Pertanian. Departemen Pertanian. Suprayudi, A., 2010.  Pengembangan penggunaan bahan baku lokal biji kapuk  untuk pakan ikan  : Status Terkini dan Prospeknya. Semiloka Nutrisi dan Teknologi Pakan Ikan. Ispikani.  Bogor.  25 hal. Thalib, A., S. Irawan, S. Dadang, dan S. Ernie, 1998. Perbaikan kualitas bungkil  biji  kapuk  dengan proses  sulfitasi. Hasil-hasil Penelitian  Tahun  Anggaran 1997-1998. Balai  Penelitian Ternak, Ciawi. Bogor.
Wahyudi, I., 2005. Tranferifikasi minyak jelantah  menjadi  bahan  bakar alternatif.ITS.Surabaya.
Watanabe, T., 1998. Fish nutrition and mariculturc.    Departement  of
Aquatic
Biosciences.Tokyo
University of Fisheries.
Yildirim, M., C. Lim, P. Wan, and P.H. Klesius, 2004. Effect of natural free  gossypol  and  gossypol- acetic acid on growth performance  and  resistance  of channel catfish (Ictalurus puncatutus)  to Edwardsiella ictaluri. Aquaculture Nutrition. X: 153-165 pp Zahirma, U.,  2012. Analisa  asam siklopropenoat  dari  bungkil biji  kapuk  dengan  tehnik kromatografi  gas. Skripsi. FMIPA, Universitas Indonesia. Jakarta. 43 hal.
Lampiran 1.Foto Kapuk Ceiba petandra.G (Anonim 2005)

## Fotokapuk Ceiba petandra.G (Anonim 2005)
Pohon  kapuk  (Ceiba  petandra Gaertn)  termasuk  famili  Bombaceae  mudah  tumbuh  di  daerah tropis  dan  tumbuh  dengan  baik  pada  ketinggian  100-800  m  di  atas  permukaan laut,  tahan  terhadap kekurangan  air,  sehingga  dapat  ditanam  di  tegalan,  pematang  sawah,  atau  tepi  jalan  (Setiadi  2008). Klasifikasi Ceiba petandra.G menurut Setiadi. (2008) sebagai berikut :
Kerajaan :  Plantae Divisi :  Magnoliophyta Kelas :  Magnoliopsida Ordo :  Malvales Famili :  Malvaceae (Bombacaceae) Genus : Ceiba Spesies : pentandra
Pohon kapuk dapat berproduksi sampai umurnya mencapai 50-60 tahun (Ochse et al. 1997). Setiap  pohon  kapuk  dapat  menghasilkan  antara  4000-5000  buah  per  tahun,sehingga pohon  kapuk dewasa  dapat  menghasilkan  sekitar  100-200 kg  biji  kapuk  per  tahun  (Sihombing &Simamora 2009). Biji  kapuk  merupakan  hasil  samping  pertanian  yang  cukup  banyak  di  Indonesia  terutama  di Pulau Jawa dan Sulawesi dengan potensi sekitar 114 ribu ton/tahun (BPTRO 2006).

## Lampiran 2. Pemecahan Polipeptida Menjadi Asam Amino dengan Penambahan Enzim

## Pemecahan Polipeptida Menjadi Asam Amino dengan Penambahan Enzim
Kehidupan hewan bersifat “heterotrofik”, dimana kebutuhan asam amino un tuk sintesis protein tubuhnya  harus  diperoleh  dari  makhluk  lain.  Perpaduan  protein  nabati  dan  protein  hewani  dalam makanan  dapat  memberikan  efek  komplementer  yang  sangat  menguntungkan  dan  menaikkan  nilai protein  makanan  pada  tingkat  yang  terbaik.  (Hawab,2004).Hidrolisis  protein  menggunakan  enzim pepsin, yaitu enzim proteolitik yang aktif pada pH asam. Oleh karena itu, pada lambung ikan pepsin berperan  dalampencernaan  protein  tahap  awal  yang  menghasilkan  asam  amino  dan  polipeptida (Cane,1995). Rantai  protein dapat  terbentuk  dengan  adanya  reaksi  antara  kepala  dari  satu  molekul asam amino dengan buntut asam amino yang  lain dengan melepaskan air
Ikatan diatas disebut juga dengan ikatan peptide (Cane, 1973).
Lampiran 3. Sistem Pencernaan ikan dan Pepsin Bentuk Aktif
H+, dari HCl lambung
Pepsinogen                                               Pepsin bentuk inaktif                                           bentuk aktif

## Sistem Pencernaan Ikan dan Pepsin Bentuk Aktif
Protein makanan dapat digunakan dengan memutuskan ikatan polipeptida dari protein menjadi asam-asam  amino.  Proses  pencernaan  ini  melibatkan  enzim  pencernaan  sebagai  katalisator  biologis. Pencernaan  pakan  adalah  penyederhanaan  pakan  yang  awalnya  berupa  molekul  komplek  menjadi molekul  sederhana.  Nutrien  yang  berbentuk  sederhana  inilah  yang  dapat  diserap  dan  diedarkan  ke seluruh  tubuh.  Selama  dalam  saluran  pencernaan,  pakan  dicerna  oleh  bermacam-macam  enzim menjadi  bentuk  yang  dapat  dicerna  oleh  dinding  usus  dan  masuk  ke  dalam  peredaran  darah (Rosmawati, 2005).Lambung berfungsi sebagai penampung makanan dan mencerna makanan (Halver, 2002).    Selanjutnya  dikatakan  bahwa  dalam  lambung  dilengkapi  dengan  kelenjar  lambung  yang berfungsi  untuk  mensekresikan  enzim  pencernaan.Sel-sel  kelenjar  eksokrin  pada  segmen  lambung ikan  sekaligus  mensekresikan  pepsin  dan  asam  khlorida  (HCl).    HCl  secara  langsung  berperan melunakan  makanan  sehingga  menjadi  bentuk  bubur  (hyme)  dan  menurunkan  pH  isi  lambung  yang menyebabkan aktivitas enzim proteolitik terutama pepsin meningkat.