## EVALUATION OF BIOACTIVE COMPOUNDS EXTRACT OF BLACKBOARD TREE BARK
( Alstonia scholaris (L.) R. Br) AS ANTIMALARIA CANDIDATE USING MOLECULAR DOCKING
EVALUASI SENYAWA BIOAKTIF EKSTRAK KULIT BATANG KAYU TELOR ( Alstonia scholaris (L.) R. Br) SEBAGAI KANDIDAT ANTIMALARIA MENGGUNAKAN PENAMBATAN MOLEKULER
Tri Hebber 1) , Fatimawali 1) , Irma Antasionasti 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *17101105038@student.unsrat.ac.id

## ABSTRACT
Blackboard tree (Alstonia scholaris (L.) R. Br) is a type of forest wood that is often used by the people of North Sulawesi for the treatment of various diseases including malaria. According to previous in vitro studies, the extract of Blackboard tree bark had a high inhibitory value against Plasmodium falciparum. This study aims to determine the bioactive compounds extracted from Blackboard tree bark  and  to  analyze  their  potential  for  the  enzymes  Dihydroorotat  Dehydrogenase,  Enoyl  Acyl Carrier Protein Reductase and Dihydrofolate Reductase with molecular  docking.  The dry powder extract of Blackboard tree bark was dissolved using ethanol and chloroform by maceration process then analyzed using GC-MS (Gas Chromatography-Mass Spectrometer) to determine the content of the  compounds  in  the  Blackboard  tree  bark  extract.  The  analysis  results  obtained  that  there  are probably  9  compounds  in  the  ethanol  extract  and  60  compounds  in  the  chloroform  extract  of Blackboard tree bark
Keywords : Alstonia scholaris, Antimalaria, GC-MS, Molecular Docking

## ABSTRAK
Kayu Telor  ( Alstonia scholaris (L.) R. Br) merupakan jenis kayu hutan yang sering digunakan  masyarakat Sulawesi  Utara  untuk  pengobatan  berbagai  penyakit  termasuk  malaria.  Menurut  penelitian  yang  dilakukan secara in vitro sebelumnya, ekstrak kulit batang kayu Telor memiliki nilai penghambatan yang tinggi terhadap Plasmodium falciparum . Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui senyawa-senyawa bioaktif yang diekstrak dari kulit batang kayu Telor dan menganalisis potensinya terhadap enzim Dihidroorotat Dehidrogenase, Enoyl Acyl Carrier Protein Reductase dan Dihidrofolat Reduktase dengan penambatan molekuler. Ekstrak serbuk kering kulit batang kayu Telor dilarutkan menggunakan etanol dan klorofom dengan proses maserasi kemudian dianalisis  menggunakan GC-MS ( Gas  Cromatography-Mass  Spectrometer )  untuk  mengetahui kandungan senyawa dalam  ekstrak kulit  batang kayu  Telor. Hasil analisis  yang diperoleh terdapat kemungkinan 9 senyawa pada ekstrak etanol dan 60 senyawa pada ekstrak kloroform kulit batang kayu Telor.
Kata Kunci : Alstonia scholaris, Antimalaria, GC-MS , Penambatan Molekuler

## PENDAHULUAN
Malaria adalah penyakit menular yang disebabkan  oleh Plasmodium  falciparum,  P. vivax,  P.  malariae,  P.  ovale dan P.  knowlesi. Sebuah  parasit  yang  hidup  dan  berkembang biak di dalam sel darah manusia dan ditularkan melalui  gigitan  nyamuk Anopheles betina (Depkes  RI,  2008).  Indonesia  merupakan daerah  endemis  malaria,  walaupun  telah dilakukan program pelaksanaan dan pemberantasan  penyakit  malaria  sejak  tahun 1959,  namun  hingga  saat  ini  angka  kesakitan dan  kematian  masih  cukup  tinggi.  Salah  satu penyebabnya adalah resistensi terhadap Plasmodium falciparum. Hal tersebut memicu pencarian kandidat obat antimalaria baru yang efektif terutama berbasis bahan alam (Shadrack, 2016).
Senyawa-senyawa  bioaktif  ekstrak etanol dan kloroform  kulit  batang kayu Telor diperoleh  dari  hasil  analisis  kromatografi  gas dan  spektrometri  masa.  Etanol  merupakan jenis pelarut  yang memiliki tingkat kepolaran yang  sangat  tinggi  serta  kloroform  sendiri merupakan  pelarut  jenis  non-polar  yang bersifat  stabil,  tidak  mudah  bereaksi  dengan komponen lain dan dapat melarutkan senyawa organik (Susanti, 2012). Tujuan penelitian ini adalah  untuk  mengidentifikasi  senyawa- senyawa bioaktif dari ekstrak kulit batang kayu Telor dari hasil GC-MS yang memiliki potensi sebagai antimalaria.

## METODOLOGI PENELITIAN Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan di Universitas Gadjah Mada  Yogyakarta  untuk  uji GC-MS dan  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas  Sam  Ratulangi  Manado  untuk  proses penambatan molekuler selama bulan Oktober 2020 hingga Maret 2021.

## Bahan dan Cara Kerja
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  antara  lain  kulit  batang  kayu  Telor, etanol  dan  kloroform.  Struktur  tiga  dimensi  dari enzim  Dihidroorotat  dehidrogenase, Enoyl  Acyl Carrier  Protein  Reductase dan  Dihidrofolat reduktase dari situs Protein
Data Bank
(http://www.rscb.org/pdb/) PDB  ID  : 3I65,  3LT0,
4DP3. Struktur tiga dimensi dari senyawa-senyawa
bioaktif  hasil GC-MS ekstrak  kulit  batang  kayu Telor  yang  diunduh  dari  situs PubChem (http://PubChem.ncbi.nlm.nih.gov).

## Prosedur
Sampel  yang  digunakan  diperoleh  dari Desa Klabat Kec. Dimembe Kab. Minahasa Utara, Sulawesi  Utara.  Sampel  yang  diambil  kemudain dicuci  dan  dikeringkan  dalam  lemari  pengering pada  suhu  40-50°C.  Sampel  kering  kemudian dihaluskan  dan  diayak  menggunakan  pengayak nomor 40.
Pembuatan ekstrak kulit batang kayu Telor menggunakan metode maserasi. Sampel dimasukkan  ke  dalam  masing-masing micro  tube yang berisi 5 gr serbuk serta 30 ml pelarut etanol dan  kloroform  yang  terbentuk  dilanjutkan  untuk pengujian GC-MS . Waktu diatur selama 60 menit dengan  suhu  injektor  260°C,  detektor  250°,  dan kolom 325°C. Gas pembawa yang digunakan yaitu gas helium dengan laju aliran konstan 1 ml/menit. Proses  identifikasi  menggunakan  alat GC-MS menghasilkan  senyawa-senyawa  bioaktif  yang dapat  dilihat  dari  puncak  kromatogram  sebagai identifikasi data hasil kromatografi dan spektrometri  massa  dilihat  dari  spektrum  massa dengan  masing-masing  berat  molekul  senyawa bioaktif. Analisis data menggunakan aplikasi PyRx dan Autodock vina.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Analisis GC-MS
Kromatografi gas spektrometri massa ialah teknik  analisis  yang  menggabungkan  dua  metode analisis  yaitu  kromatografi  gas  dan  spektrometri massa.  Kromatografi  gas  mampu  membaca senyawa  dengan  konsentrasi  terendah  sehingga metabolit sekunder dalam tanaman dapat teridentifikasi  dengan  hasil  berupa  kromatogram dan spektrum massa (Rubiyanto, 2017). Hasil yang diperoleh terdapat sekitar 9 senyawa yang terdapat dalam  ekstrak  etanol  kulit batang  kayu  Telor  dan 60 senyawa yang terdapat dalam ekstrak kloroform kulit  batang  kayu  Telor  dengan Similarity  Index ( SI ) yang berbeda-beda.
Gambar 1. Hasil Kromatogram Ekstrak Etanol Kulit Batang Kayu Telor
Gambar 2. Hasil Kromatogram Ekstrak Kloroform Kulit Batang Kayu Telor
Tabel 1. Senyawa-senyawa bioaktif hasil identifikasi menggunakan analisis GC-MS ekstrak etanol kulit batang kayu Telor
Peak RT Nama Senyawa Hit#1 Nama Senyawa Hit#2 Nama Senyawa Hit#3 Retent ion Area (%) 1 4,00 715 2-Amino-4- dimethylaminomethyle nepentanedinitrile dl-Allo-cystathionine Benzeneethanamine, 2,5- difluoro-ß,3,4-trihydroxy- N-methyl- 11,7217 83 2 9,61 212 83 Cyclohexene, 4- ethenyl-1,4-dimethyl- Cyclohexene, 1-methyl- 5-(1-methylethenyl)-, (R)- D-Limonene 33,2270 5065 3 22,2 709 45 a-Bulnesene Azulene, 1,2,3,5,6,7,8,8a- octahydro-1,4-dimethyl- 7-(1-methylethenyl)-,[1S- (1a,7a,8aß)]- cis-a-Bisabolene 55,0511 6636
Tabel 2. Senyawa-senyawa bioaktif hasil identifikasi menggunakan analisis GC-MS ekstrak kloroform kulit batang kayu Telor Peak RT Nama Senyawa Hit#1 Nama Senyawa Hit#2 Nama Senyawa Hit#3 Retent ion Area (%) 1 4,017725  Trichloromethane Methane, oxybis[dichloro- Methane, dichloronitro- 0,062043301 2 4,1197583  Trichloromethane Methane, oxybis[dichloro- Methane, dichloronitro- 0,037536895 3 4,2592017  Trichloromethane Methane, oxybis[dichloro- Methane, dichloronitro- 0,171773618 4 4,66393  Trichloromethane Methane, oxybis[dichloro- Methane, dichloronitro- 0,039297634 5 4,78977  Trichloromethane Methane, oxybis[dichloro- Methane, dichloronitro- 0,021922873 6 5,153685  Trichloromethane Methane, oxybis[dichloro- Methane, dichloronitro- 0,058426516 7 9,6056983  D-Limonene Cyclohexene, 1-methyl- 4-(1-methylethenyl)-, (S)- Cyclohexene, 1- methyl-5-(1- methylethenyl)-, (R)- 0,193973794 8 10,445765  Decane, 2,4,6- trimethyl- Octadecane, 6-methyl- Sulfurous acid, hexyl octyl ester 0,19292469 9 10,602213  Pyrrolidine, 1- (1,6- dioxooctadecyl)- Octadecane, 3-ethyl-5- (2-ethylbutyl)- Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- 0,039830079 10 11,540912  7-[ß-d- Ribofuranosyl]imi dazo[4,5- d][1,2,3]-triazin- 4-one (2- azainosine) Pyrrolidine, 1-(1,6- dioxooctadecyl)- 3- Cyclopropylcarbo nyloxytridecane 0,037127198 11 11,751778  Decane, 2,4,6- trimethyl- Sulfurous acid, hexyl octyl ester Hydroxylamine, O-decyl- 0,106622115 12 11,91163  1-Hexadecanol, 2- methyl- Hexadecane, 1,1- bis(dodecyloxy)- 4-Octadecenal 0,054037244 13 16,363642  2-Vinyl-9-[3- deoxy-ß-d- ribofuranosyl]hyp oxanthine l-Gala-l-ido-octose tert- Hexadecanethiol 0,026258243 14 16,802382  Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- Dodecane, 2,7,10- trimethyl- Heptadecane, 2,6,10,15- tetramethyl- 0,230530885 15 17,030253  2-Myristynoyl pantetheine 2-Vinyl-9-[3-deoxy-ß-d- ribofuranosyl]hypoxanthi ne Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- 0,032526184 16 17,186703  2-Myristynoyl pantetheine Octadecane, 3-ethyl-5- (2-ethylbutyl)- Pyrrolidine, 1- (1,6- dioxooctadecyl)- 0,03221254 17 17,506405  3- Trifluoroacetoxyd odecane 2- Trifluoroacetoxypentade cane 3- Trifluoroacetoxyp entadecane 0,027727929
18 17,877122  2-Myristynoyl pantetheine Ethanol, 2- (octadecyloxy)- Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- 0,027786945 19 17,968952  2- Trifluoroacetoxyp entadecane 1-Hexadecanol, 2- methyl- tert- Hexadecanethiol 0,016906684 20 18,043775  Heptadecane, 2,6,10,14- tetramethyl- Heptadecane, 2,6,10,15- tetramethyl- Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- 0,156487407 21 18,298857  Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- Octadecane, 3-ethyl-5- (2-ethylbutyl)- 2-Myristynoyl pantetheine 0,059505271 22 22,179488  2-Myristynoyl pantetheine Tetradecane, 2,6,10- trimethyl- Ethanol, 2- (octadecyloxy)- 0,031182734 23 22,264515  1,4-Dimethyl-7- (prop-1-en-2- yl)decahydroazule n-4-ol Naphthalene, decahydro- 4a-methyl-1-methylene- 7-(1-methylethenyl)-, [4aR-(4aa,7a,8aß)]- a-acorenol 0,310154655 24 22,383552  Heptadecane, 2,6,10,15- tetramethyl- Tetradecane, 2,6,10- trimethyl- Hexadecane 0,337569138 25 22,488987  2H-Pyran, 2-(7- heptadecynyloxy) tetrahydro- 1-Heptatriacotanol Ethyl iso- allocholate 0,056914757 26 22,618227  2-Myristynoyl pantetheine Aspidospermidin-17-ol, 1-acetyl-19,21-epoxy- 15,16-dimethoxy- Pterin-6- carboxylic acid 0,045612913 27 23,060367  Aspidospermidin- 17-ol, 1-acetyl- 19,21-epoxy- 15,16-dimethoxy- 2-Myristynoyl pantetheine 3- Trifluoroacetoxyp entadecane 0,034999391 28 23,369865  2-Myristynoyl pantetheine Octadecane, 6-methyl- 1-Hexadecanol, 2- methyl- 0,02829011 29 23,468497  Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- Heptadecane, 2,6,10,15- tetramethyl- Decane, 2,3,5,8- tetramethyl- 0,236534908 30 23,713375  2-Myristynoyl pantetheine Octadecane, 3-ethyl-5- (2-ethylbutyl)- Methoxyacetic acid, 2-tridecyl ester 0,072925695 31 23,92084  Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- 2-Myristynoyl pantetheine 1-Hexadecanol, 2- methyl- 0,068713617 32 25,662193  2-Myristynoyl pantetheine Octadecane, 6-methyl- Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- 0,045309892 33 27,250497  Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- Tetradecane, 2,6,10- trimethyl- Ethanol, 2- (octadecyloxy)- 0,021774672 34 27,328722  Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- Hexadecane Heptadecane, 9- octyl- 0,325851288 35 27,508978  2-Myristynoyl pantetheine Ethanol, 2- (octadecyloxy)- tert- Hexadecanethiol 0,04775466 36 28,26742  Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- Octadecane, 6-methyl- Heptadecane, 2,6,10,15- tetramethyl- 0,213235458 37 28,45788  2-Myristynoyl pantetheine Ethanol, 2- (octadecyloxy)- Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- 0,024878666 38 31,763728  Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- Heptadecane, 9-hexyl- Heptadecane, 9- octyl- 0,328342188
39 32,58679  Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- Tetradecane, 2,6,10- trimethyl- Heptadecane, 9- hexyl- 0,208657082 40 32,736438  Ethyl iso- allocholate 2-Myristynoyl pantetheine 10-Octadecenal 0,020556705 41 33,671735  Octadecanal, 2- bromo- Ethanol, 2-(9- octadecenyloxy)-, (Z)- Ethyl iso- allocholate 0,14066582 42 35,16821  Ethyl iso- allocholate Cyclopropanedodecanoic acid, 2-octyl-, methyl ester 9-Octadecenoic acid (Z)-, 2- hydroxy-1- (hydroxymethyl)e thyl ester 0,10346403 43 35,260038  Ethyl iso- allocholate E,E,Z-1,3,12- Nonadecatriene-5,14-diol Pregan-20-one, 2- hydroxy-5,6- epoxy-15-methyl- 0,034481188 44 35,763398  Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- Ethyl iso-allocholate Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- 0,155858719 45 36,511635  Octadecane, 3- ethyl-5-(2- ethylbutyl)- Ethyl iso-allocholate Oleic acid, 3- (octadecyloxy)pro pyl ester 0,127779237 46 39,42296  Ethyl iso- allocholate Oleic acid, 3- (octadecyloxy)propyl ester Cholestan-3-one, cyclic 1,2- ethanediyl aetal, (5ß)- 0,070578577 47 39,997742  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- 1-Heptatriacotanol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 2,631292335 48 40,222213  Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- a-Amyrin 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- 3,704671868 49 40,392267  Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- Urs-12-en-24-oic acid, 3-oxo-, methyl ester, (+)- 5,885874293 50 40,450085  12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- Urs-12-en-24-oic acid, 3-oxo-, methyl ester, (+)- 3,343410794 51 40,548717  Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- a-Amyrin 5,648086006 52 40,579327  Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- 24-Norursa-3,12-diene 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- 2,738335732 53 40,62014  a-Amyrin Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- 2,419259663 54 40,657552  Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- a-Amyrin 2,972474766 55 40,735777  a-Amyrin 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- Urs-12-en-24-oic acid, 3-oxo-, methyl ester, (+)- 3,568181066 56 40,8106  Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- a-Amyrin 8,673897651 57 40,990857  a-Amyrin 24-Norursa-3,12-diene Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)- 5,367190998 58 41,56564  Ethyl iso- allocholate 1-Heptatriacotanol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 0,22790012 59 42,218647  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- 9,19-Cyclolanost-24-en- 3-ol, acetate, (3ß)- Lupeol 4,882281943 60 42,337685  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 6,797852475
61 42,41591  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 3,831559558 62 42,470327  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 5,126342715 63 42,51114  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 2,877453852 64 42,558755  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 1,955832899 65 42,592765  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- 9,19-Cyclolanost-24-en- 3-ol, acetate, (3ß)- Lupeol 1,978626461 66 42,619973  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 1,957028103 67 42,64038  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 1,909620639 68 42,653985  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- 9,19-Cyclolanost-24-en- 3-ol, acetate, (3ß)- Lupeol 5,648246315 69 42,745813  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- 9,19-Cyclolanost-24-en- 3-ol, acetate, (3ß)- Lupeol 0,76996567 70 42,779825  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- 9,19-Cyclolanost-24-en- 3-ol, acetate, (3ß)- Lupeol 3,391570819 71 42,841043  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- Lupeol 9,19-Cyclolanost- 24-en-3-ol, acetate, (3ß)- 6,760658358 72 43,381815  Ethyl iso- allocholate 1-Heptatriacotanol Spirost-8-en-11- one, 3-hydroxy-, (3ß,5a,14ß,20ß,22 ß,25R)- 0,148306387 73 59,30907  Lup-20(29)-en-3- ol, acetate, (3ß)- 9,19-Cyclolanost-24-en- 3-ol, acetate, (3ß)- Ethyl iso- allocholate 0,06653437 Tabel  1 dan Tabel  2 menunjukan hasil GC-MS ekstrak  etanol  dan  kloroform dari  kulit  batang  kayu  Telor  dalam  bentuk Kromatogram.    Berdasarkan  hasil  yang diperoleh dari analisis dengan instrumen GC- MS ,  ada  sekitar  9  komponen  senyawa  yang berhasil diekstraksi dari pelarut etanol dan 60 komponen  senyawa  dari  pelarut  kloroform.
Komponen  senyawa  yang  paling  banyak terdapat  dalam  simplisia  kulit  batang  kayu Telor  ekstrak  etanol  berada  pada  puncak ( peak) 3  dengan  presentase  kadar  ( retention area) sebesar  55,05116636%  dengan a-
Bulnesene, Azulene,1,2,3,5,6,7,8,8a- octahydro-1,4-dimethyl-7-(1-methylethenyl)- ,[1S-(1a,7a,8aß)]-, dan cis-a-Bisabolene sebagai  senyawa  yang  berada  pada peak tersebut. Ekstrak kloroform kulit batang kayu
Telor memiliki komponen senyawa terbanyak pada peak 56  dengan retention  area sebesar 8,673897651%  dengan Olean-12-en-3-ol, acetate, (3ß)-, 12-Oleanen-3-yl acetate, (3a)- dan a-Amyrin sebagai  senyawa  yang  berada dalam peak tersebut.  Senyawa-senyawa bioaktif  hasil  analisis GC-MS ini  kemudian digunakan  menjadi  ligan  untuk  ditambatkan pada enzim target. Berdasarkan hasil GC-MS terdapat  6  senyawa  yang  memiliki  potensi menjadi  kandidat  antimalaria  yaitu 7-[ß-d- Ribofuranosyl]imidazo[4,5-d][1,2,3]-triazin- 4-one (2-azainosine), Spirost-8-en-11-one, 3- hydroxy-,  (3ß,5a,14ß,20ß,22ß,25R)-,  9,19- Cyclolanost-24-en-3-ol, acetate, (3beta),
Olean-12-en-3-ol,  acetate,  (3ß)-,  Urs-12-en- 24-oic  acid,  3-oxo-,  methyl  ester dan a- Amyrin .

## KESIMPULAN
Terdapat  kemungkinan  9  komponen senyawa  yang  berhasil  diekstrak  dari  pelarut etanol dan 60 senyawa yang berhasil diekstrak dari  pelarut  kloroform  yang  memiliki Similarity  Index  (SI) yang  berbeda  dengan  6 senyawa  bioaktif  yang  berpotensi  sebagai kandidat obat antimalaria.

## SARAN
Perlu  adanya  penelitian  menggunakan beragam  aplikasi  penambat  molekuler  lain agar  bisa  divalidasi  kembali  kemudian dibandingkan  hasilnya  serta  perlu  adanya  uji in  vitro dan in  vivo untuk  mengetahui  lebih lanjut aktivitas dari senyawa-senyawa bioaktif tersebut sebagai kandidat obat anti malaria.

## DAFTAR PUSTAKA
Depkes RI. 2008. Pedoman Penatalaksanaan Kasus
Malaria di Indonesia . Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Rubiyanto,  D.  2017. Metode  Kromatografi . CV. Budi Utama, Yogyakarta.
Shadrack,  Daniel  M.  2016. In  Silico Evaluation  of  Anti-Malarial  Agents from Hoslundia opposita as Inhibitors of Plasmodium  falciparum Lactate Dehydrogenase (PfLDH)  Enzyme. Journal of Scientific Research Publishing . 1(6) : 23-32.
Susanti,  Alfian  R.  2012.  Penetapan  Kadar
Fenolik Total Ekstrak Metanol Kelopak Bunga Rosella Merah ( Hibiscus  sabdariffa Linn)  dengan Variasi  Tempat  Tumbuh  Secara Spektrofotometri. Jurnal Ilmiah Kefarmasian . 2(1) : 73-80.