© 2021 Penulis. Dibawah lisensi CC BY-SA 4.0. Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan Creative Commons Attribution (CC BY), yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa  batas  dalam  media  apa  pun,  selama  penulis  dan sumber  aslinya  disebutkan.  Tidak  diperlukan izin  dari penulis atau penerbit.

## Journal of Experimental and Clinical Pharmacy (JECP)
2024, 4(1), 43-61
Research Article
.
Tumbuhan  sirsak  ( Annona  muricata Linn.)  memiliki  aktivitas  sebagai  antikanker dan  antiinflamasi.  Bahan  baku  ekstrak  daun  sirsak  yang  akan  dikembangkan menjadi  obat  modern  Indonesia  asli  harus  terstandardisasi  untuk  menjaga  mutu ekstrak  yang  dapat  dipengaruhi  oleh  tempat  tumbuh.  Penelitian  ini  bertujuan melakukan  standarisasi  ekstrak  daun  sirsak  asal  daerah  Gowa  dan  Takalar. Masing-masing  ekstrak  daun  sirsak  dilakukan  standarisasi  dengan  parameter spesifik  dan  non  spesifik.  Hasil  penelitian  diperoleh  data  untuk  pengujian parameter  spesifik  berupa  uji  organoleptik  ekstrak  yaitu  bentuk  kental,  warna coklat kehitaman, dan berbau khas. Kadar senyawa larut air dan etanol  sebesar 7, 560% dan 13,94%untuk Gowa, sedangkan Takalar sebesar 6,64% dan 10,1%. Hasil uji parameter non spesifik untuk daerah Gowa dan Takalar sebagai berikut, susut pengeringan 0,289% dan 0,293%, bobot jenis 0,814 g/mL dan 0,818 g/mL, kadar air 4,488% dan 7,436%, kadar abu total 4,467% dan 6,560%, kadar abu tidak larut asam 0,499%  dan  0,248%,  cemaran  mikroba  <  1,0  x  101  koloni/g,  cemaran  logam  berat cadmium < 0,0001 µg/g,  cemaran logam timbal sebesar 0,0390 µg/g dan < 0,0471 μg/g,  residu  pestisida  <  0,001  mg/kg.  Penelitian  ini  menunjukkan  ekstrak  daun sirsak asal daerah Gowa dapat digunakan menjadi sumber bahan baku daun sirsak.
Kata  kunci: Daun  sirsak  ( Annona  muricata Linn.);  standarisasi  ekstrak;  Gowa;

## Takalar
Annona  muricata  Linn.  has  anticancer  and  anti-inflammatory  activity.  The  raw  material for soursop leaf extract, which will be developed into authentic modern Indonesian medicine, must be standardized to maintain the quality of the extract, which can be influenced by the place of growth. This research aims to standardize soursop leaf extract from the Gowa and Takalar  areas.  Each  soursop  leaf  extract  was  standardized  with  specific  and  non-specific parameters. The results of the research obtained data for testing specific parameters in the form  of  an  organoleptic  test  of  the  extract,  namely  thick  form,  blackish  brown  color,  and distinctive  smell.  The  levels  of  water-soluble  compounds  and  ethanol  were  7,560%  and 13.94% for Gowa, while for Takalar they were 6.64% and 10.1%. The results of non-specific parameter  tests  for  the  Gowa  and  Takalar  areas  are  as  follows:  drying  loss  0.289%  and 0.293%, specific gravity 0.814 g/mL and 0.818 g/mL, water content 4.488% and 7.436%, total  ash  content  4.467%  and  6.560%,  acid  insoluble  ash  content  0.499%  and  0.248%, microbial  contamination  <  1.0  x  101  colonies/g,  heavy  metal  cadmium  contamination  < 0.0001 µg/g, lead metal contamination 0.0390 µg/g and < 0.0471 μg/g, pesticide residue < 0.001 mg/kg. This research shows that soursop leaf extract from the Gowa area can be used as a source of raw material for soursop leaves.
Keyword: Annona muricata Linn. leaves; standardization of extracts; Gowa; Takalar

## ABSTRAK
Standarisasi  Ekstrak  Etanol  Daun  Sirsak  ( Annona  muricata Linn.) Asal Daerah Gowa dan Takalar
Asni  Amin 1 ,  Faradiba  Abdul  Rasyid 1* ,  Rezki  Amriati  Syarif 1 ,  Sinta  Faradilla  A.M 1 ,  Dicka Saputri 1 , dan Sukmawati 2
1 Program Studi Sarjana Farmasi, Universitas Muslim Indonesia , Indonesia. 2 Laboratorium Farmakologi, Universitas Muslim Indonesia, Indonesia

## INFO ARTIKEL
Submit : 18.Jan.2024 Revisi : 27.Feb.2024
Diterima : 09.Mar.2024
*Corresponding Author: Faradiba, Program Studi Sarjana Farmasi, Program Studi Farmasi,
Universitas Muslim
Indonesia, Indonesia, Email: faradiba.faradiba@umi.ac.i d

## PENDAHULUAN
Variasi  tumbuhan  yang  dapat  digunakan  sebagai  obat  tradisional  sangat melimpah di Indonesia sehingga ada kemudahan mendapatkan obat tradisional, maka penggunaan bahan alami dalam pengobatan tradisional semakin diminati. Indonesia  memiliki  kekayaan  komponen  obat  alami  yang  dapat  membantu penggunaan  obat  tradisional  oleh  masyarakat  semakin  meluas  dan  menyebar (Putri,  Sudimartini,  dan  Dharmayudha  2020).  Salah  satu  tumbuhan  yang digunakan sebagai obat tradisional adalah tumbuhan sirsak.
Tumbuhan  sirsak  ( Annona  muricata L.)  secara  empiris  bagian  daunnya digunakan sebagai pengobatan yang memiliki sifat farmakologis penting seperti antikanker,  antibakteri,  antiparasit,  antidiabetes,  obat  untuk  wasir,  nyeri kandung  kemih,  diare  pada  bayi  dan  disentri  (Sapada,  Asmalinda,  dan  Eka Mariana  2022;  Djunarko  et  al.  2022).  Berbagai  senyawa  termasuk  flavonoid, fitosterol, kalsium oksalat, alkaloid murisin, dan minyak atsiri dapat ditemukan dalam  daun  sirsak.  Molekul  flavonoid  memiliki  khasiat  sebagai  antidiabetes, antikanker,  antimikroba,  dan  antivirus.  Selain  flavonoid,  tanin  juga  memiliki khasiat sebagai anti diabetes (Iyos dan Astuti 2017). Flavonoid yang terkandung dalam  daun  sirsak  juga  memiliki  aktivitas  antioksidan.  Selain  itu,  senyawa acetogenin juga terdapat dalam daun sirsak yang dapat membunuh 12 jenis sel kanker yang berbeda (Irmawati 2018).
Hasil  penelitian  sebelumnya  terkait  daun  sirsak  diketahui  bahwa perbedaan  tempat  tumbuh  dapat  menyebabkan  terjadinya  perbedaan kandungan  kimia  dan  aktivitas  farmakologi.  Selain  itu,  aktivitas  antioksidan yang  diuji  dari  beberapa  daerah  yaitu  Mamuju,  Makassar  dan  Jeneponto menunjukkan nilai yang berbeda-beda. Aktivitas antioksidan pada sampel daun sirsak di wilayah Makassar mempunyai tingkat dan potensi aktivitas antioksidan yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kuersetin  sebagai  pembanding  karena nilai  IC 50 yang  diperoleh  lebih  rendah.  Hal  tersebut  menunjukkan  terdapat pengaruh  daerah  tumbuh  dengan  aktivitas  ataupun  senyawa  daun  sirsak (Aminah 2016). Penelitian yang  telah dilakukan oleh (Rasyid et al. 2023), tentang penetapan kadar fenolik, flavonoid, aktivitas toksisitas dan aktivitas antioksidan dari  3  daerah  yaitu  Gowa,  Takalar  dan Pinrang.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa daun sirsak yang berasal dari daerah Gowa memiliki kadar total fenolik dan flavonoid tertinggi berturut sebesar 3,7588  mg GAE/g dan 7,4684 mg QE/g. Aktivitas  antioksidan  daun  sirsak  dari  Gowa  memiliki  nilai  IC 50 sebesar  70,509 µg/mL  merupakan  antioksidan  kuat  (Faradiba,  Amin  et  al.  2023).  Menurut (Rasyid  et  al.  2023),  hasil  uji  sitotoksik  dari  ekstrak  daun  sirsak  asal  daerah Takalar  memiliki  nilai  LC 50 yaitu  70,95  μg/mL  yang  termasuk  kategori  toksik kuat  dan  berpotensi  sebagai  antikanker. Hasil  uji  BSLT  ekstrak  kloroform  kulit batang  sirsak  yaitu  247,86  ppm  (Salempa,  2016).  Hasil  uji  BSLT  ekstrak  daun sirsak  memiliki  nilai  LC 50 yaitu  86,45  ppm  (ekstrak  etanol  96%),  92,81  ppm
(ekstrak  etil  asetat)  dan  37.601,05  ppm  (ekstrak n-heksan)  (Sumiati,  2016).  Nilai LC 50 dari  ekstrak  daun  sirsak  gunung  yaitu  366,24  ppm  (Foudubun,  2019). Berdasarkan penelitian tersebut, tumbuhan sirsak asal daerah Gowa dan Takalar mempunyai  potensi  sebagai  bahan  obat  yang  digunakan  masyarakat  dan dikembangkan menjadi obat tradisional.
Berdasarkan  Keputusan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia  Nomor: 55/Menkes/SK/1/2000,  obat  tradisional  yang  beredar  di  Indonesia  harus memenuhi persyaratan mutu, keamanan dan kemanfaatannya (Depkes RI 2000). Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan  suatu  penelitian  untuk  mengukur  parameter spesifik (identitas ekstrak, organoleptik, uji kandungan kimia, kadar sari larut air dan larut etanol) dan non spesifik (susut pengeringan, kadar abu total, kadar abu tidak larut asam, kadar air, bobot jenis, cemaran logam berat, cemaran mikroba dan residu pestisida) pada ekstrak etanol daun sirsak untuk mengetahui secara ilmiah  identitas,  keamanan  dan  kemanfaatannya  (Maryam,  Taebe,  dan  Toding 2020).  Penelitian  standardisasi  ekstrak  etanol  daun  sirsak  bertujuan  untuk mengidentifikasi  dan  menentukan  nilai  parameter  spesifik  dan  non  spesifik ekstrak tersebut sehingga dapat menambah informasi ilmiah. Informasi tersebut dapat  menjamin  suatu  produk  akhir  sediaan  obat  tradisonal  sehingga penggunaannya dapat diterima sebagai   salah satu tumbuhan asli Indonesia yang dapat  digunakan  masyarakat  sebagai  bahan  obat  dan  dikembangkan  menjadi obat  tradisional.  Parameter  standarisasi  meliputi  parameter  spesifik  dan parameter non spesifik.
Menurut Setyorini et al. (2016), standarisasi ekstrak daun sirsak dari daerah Tawangmangu,  Pasuruan  dan  Bogor  memperoleh  hasil  yang  telah  memenuhi persyaratan standar ekstrak berdasarkan pengujian parameter spesifik untuk uji kadar sari larut air dan etanol, kandungan senyawa dan identitas ekstrak. Untuk parameter non spesifik hanya pengujian kadar air, kadar sisa pelarut, kadar abu total,  cemaran  logam  berat,  cemaran  aflatoksin  dan  cemaran  mikroba  yang memenuhi syarat.
Berdasarkan  uraian  tersebut  dan  penelitian  sebelumnya  bahwa  daerah Gowa  dan  Takalar  yang  merupakan  daerah  penghasil  sirsak  yang  terbesar memiliki  kandungan fenol  dan  aktivitas  sitotoksik  yang  poten  maka  dilakukan standarisasi  ekstrak  etanol  daun  sirsak  yang  berasal  dari  daerah  Gowa  dan Takalar. Keterbaharuan dari penelitian ini diperoleh data hasil standarisasi daun sirsak  asal  daerah  Gowa  dan  Takalar,  sehingga  daerah  tersebut  potensial dijadikan  sumber  bahan  baku  untuk  pengembangan  daun  sirsak  sebagai  obat modern asli Indonesia. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan data ilmiah mengenai  nilai  penetapan  data  identitas  ekstrak  (parameter  spesifik)  dan kemananan ekstrak (parameter non spesifik) daun sirsak asal daerah Gowa dan Takalar.

## MATERIAL DAN METODE

## Material
Alat-alat  gelas  ( Pyrex ),  cawan  porselin,  cawan  petri,  chamber,  deksikator, Erlenmeyer  bertutup,  inkubator  ( Memmert ),  oven  ( Memmert ),  piknometer ( Yanaco ), rotary  evaporator ( Ika ® RV  10  basic ),  spektrofotometer  serapan  atom ( Biobase ),  tanur  ( B-ONE ),  timbangan  analitik  ( Kern  ABJ-NM )  dan waterbath ( Memmert ).
Aquadest,  daun  sirsak  ( Annona  muricata Linn.)  asal  daerah  Gowa  dan Takalar, dimetil sulfoksida ( Merck, Indonesia ) etanol 96%, besi (III) klorida (FeCl 3 ), asam  klorida  (HCl)  2  N,  asam  sulfat  (H 2 SO 4 ),  asam  klorida  (HCl)  pekat,  kertas saring, lempeng silika GF 254 , medium NA ( Nutrient Agar ), medium PDA ( Potato Dextrosa  Agar ), nitrogen P, pereaksi Liebermann-Burchard, pereaksi Mayer dan pereaksi Dragendorff, serbuk Mg.

## Metode

## Pengambilan dan Pengolahan Sampel
Sampel  daun  sirsak  diambil  dari  dua  daerah  yaitu  di  Kabupaten  Gowa dengan koordinat lokasi 5°33' - 5°34' Lintang Selatan dan 120°38' - 120°33' Bujur Timur  serta  di  Kabupaten  Takalar  terletak  pada  5°031'  sampai  5°0381'  Lintang Selatan  dan  antara  199°0221'  sampai  199°0391'  Bujur  Timur  Sulawesi  Selatan. Sampel daun sirsak kemudian dicuci dan dilakukan sortasi basah. Dikeringkan dengan  cara  diangin-anginkan  tanpa  terkena  paparan  sinar  matahari  langsung. Setelah  kering  simplisia  diserbukkan,  kemudian  simplisia  sebanyak  300  g diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96% sebanyak 2,5  liter.  Ekstrak  kental  daun  sirsak  dibuat  dengan  metode  maserasi  yang dilakukan  selama  3x24  jam  dengan  remaserasi  atau  pergantian  pelarut  baru setiap 1x24 jam dan diuapkan menggunakan rotavapor pada suhu 40°C.

## Parameter Spesifik

## Organoleptik
Parameter organoleptik dilakukan dengan medeskripsikan bentuk, warna, bau  dan  rasa  pada  ekstrak  tanaman  menggunakan  panca  indera  (Depkes  RI 2000).

## Kadar Senyawa yang Larut dalam Air
Ditimbang  5  gram  ekstrak  lalu  direndam  dengan  100  mL  air  jenuh kloroform  dengan  menggunakan  labu  bersumbat  sambil  berkali-kali  dikocok selama  6  jam  pertama  kemudian  dibiarkan  selama  18  jam.  Disaring  dan diuapkan 20 mL filtrat hingga kering dalam cawan dangkai berdasar rata yang
telah ditara, panaskan residu pada suhu 105°C hingga bobot tetap. Perhitungan persentase kandungan senyawa  larut  air dihitung dari ekstrak awal (Depkes RI 2000).
Rumus:
Kadar senyawa yang larut dalam air = W 2 -W 0
W 1 x 100%
Keterangan: W 0 = bobot cawan kosong (konstan) W 1 = bobot ekstrak yang ditimbang W 2 = bobot cawan + residu setelah pemanasan (konstan)

## Kadar Senyawa yang Larut dalam Etanol
Ditimbang  5  gram  ekstrak  lalu  direndam  dengan  dengan  100  mL  etanol (95%)  menggunakan  labu  bersumbat  sambil  berkali-kali  dikocok  selama  6  jam pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam. Disaring dan diuapkan 20 mL filtrat  hingga  kering  dalam  cawan  dangkal  berdasar  rata  yang  telah  ditara, dipanaskan residu pada suhu 105°C hingga bobot tetap. Perhitungan persentase kandungan senyawa  larut  etanol (95%) dihitung dari ekstrak awal (Depkes RI 2000).
Rumus:
Kadar senyawa yang larut dalam air etanol = W 2 -W 0 W 1 x 100%
Keterangan: W 0 = bobot cawan kosong (konstan) W 1 = bobot ekstrak yang ditimbang W 2 = bobot cawan + residu setelah pemanasan (konstan)

## Uji Kandungan Kimia Ekstrak

## Alkaloid
Sebanyak  1  mL  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan dengan HCl 2N. Reagen Mayer ditambahkan pada tabung pertama dan  reagen  Dragendorf  pada  tabung  kedua.  Kriteria  positif  jika  terbentuk endapan  putih  pada  tabung  pertama  dan  endapan  jingga  di  tabung  kedua (Handayani, Kurniawati, dan Rasyid 2020).

## Flavonoid
Larutan  uji  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  kemudian  ditambahkan serbuk  Mg  +  HCl  pekat.  Kriteria  positif  jika  terjadi  perubahan  warna  kuning, jingga atau merah (Handayani, Kurniawati, dan Rasyid 2020).

## Tannin
Larutan  uji  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi,  kemudian  ditambahkan beberapa  tetes  larutan  FeCl 3 .  Kriteria  positif  Tanin  jika  terbentuk  warna hijau/biru kehitaman (Handayani, Kurniawati, dan Rasyid 2020).

## Saponin
Sebanyak  1  mL  ekstrak  dmasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  lalu ditambahkan 10 mL aquades panas. Campuran dikocok sampai muncul buih dan didiamkan selama 1 menit. Kemudian ditambahkan 2 tetes HCl 2 N dan dikocok lagi  sampai  terbentuk  buih.  Adanya  senyawa  saponin  ditandai  dengan terbentuknya buih dengan tinggi 3 cm yang stabil selama 10 menit (Handayani, Kurniawati, dan Rasyid 2020).

## Steroid
Larutan  uji  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi  dan  ditambahkan  dengan pereaksi  Lieberman-Burchard  beberapa  tetes.  Positif  jika  terbentuk  cincin kecoklatan atau violet pada perbatasan larutan menunjukkan adanya terpenoid. Sedangkan  muncul  cincin  biru  jika  menunjukkan  adanya  steroid  (Novriyanti, Putri, dan Rijai 2022).

## Parameter Non-spesifik

## Susut Pengeringan
Susut pengeringan adalah hilangnya berat suatu bahan setelah dikeringkan dengan  cara  yang  telah  ditentukan.  Kecuali  dinyatakan  lain  dalam  masing- masing  monografi,  simplisia  harus  dalam  bentuk  serbuk  dengan  derajat  halus nomor  8,  suhu  pengeringan  105°C  dan  susut  pengeringan  ditentukan  sebagai berikut: ditimbang 1 sampai 2 g simplisia dalam botol timbang dangkal bertutup yang  sudah  dipanaskan  terlebuh  dahulu  pada  suhu  penetapan  dan  ditara. Diratakan  bahan  dalam  botol  timbang  dengan  menggoyangkan  botol,  hingga terbentuk  lapisan  setebal  5  sampai  10  mm,  lalu  dimasukkan  dalam  ruang pengering,  dibuka  tutupnya,  dikeringkan  pada  suhu  penetapan  hingga  bobot tetap. Sebelum dikeringkan, botol ditutup rapat hingga dingin  dalam desikator pada suhu kamar (Ditjen POM 2017).
Rumus:
Susut pengeringan = W 2 -W 1 W 1 x 100%
Keterangan: W 1 = bobot botol timbang + ekstrak yang ditimbang (konstan) W 2 = bobot botol timbang + ekstrak setelah pemanasan (konstan)

## Bobot Jenis
Bobot  jenis  ekstrak  ditetapkan  dengan  menggunakan  hasil  pengenceran ekstrak  cair  dengan  pelarut  etanol  96%  dengan  konsentrasi  1%.  Digunakan piknometer  yang  bersih,  kering,  dan  terkalibrasi,  diukur  berat  piknometer  dan berat  air  yang  sudah  didihkan  pada  suhu  25°C.  Dimasukkan  ekstrak  ke  dalam piknometer  dan  didinginkan  hingga  suhu  25°C,  dibuang  sisa  ekstrak  cair,  dan ditimbang. Dihitung bobot jenis dengan rumus (Depkes RI 2000).
Rumus:
Bobot jenis = W 3 -W 1 W 2 -W 1 Keterangan: W 1 = berat bobot piknometer kosong W 2 = berat bobot piknometer + air W 3 = berat bobot piknometer + ekstrak

## Kadar Air
Sebanyak 10 gram ekstrak dikeringkan pada suhu 105°C selama 5 jam dan ditimbang.  Dilanjutkan  pengeringan  dan  penimbangan  dengan  interval  1  jam hingga  perbedaan  antara  dua  penimbangan  berturut-turut  adalah  0,25%  atau kurang.  Penetapan  kadar  dengan  metode  ini  tidak  sesuai  untuk  ekstrak  yang mempunyai kandungan minyak atsiri tinggi (Depkes RI 2000).
Rumus:
Kadar air = W 1 -W 2 W 1 x 100%
Keterangan: W 1 = bobot ekstrak + bobot cawan konstan W 2 = bobot cawan + ekstrak setelah pemanasan (konstan)

## Kadar Abu Total
Lebih  kurang  2  g  sampal  3  g  ekstrak  yang  telah  digerus  dan  ditimbang saksama, dimasukkan ke dalam krus silikat yang telah dipijarkan dan ditara lalu pijarkan perlahan-lahan hingga arang habis, dinginkan dan ditimbang. Jika cara ini  arang  tidak  dapat  dihilangkan,  ditambahkan  air  panas,  disaring  melalui kertas saring bebas abu. Dipijarkan sisa kertas dan kertas saring dalam krus yang sama.  Dimasukkan  filtrat  ke  dalam  krus,  diuapkan,  dipijarkan  hingga  bobot tetap,  lalu  ditimbang.  Dihitung  kadar  abu  terhadap  bahan  yang  telah dikeringkan di udara (Depkes RI 2000).
Rumus:
Kadar abu total = W 2 -W 0 W 1 x 100%
Keterangan: W 0 = bobot cawan kosong (konstan) W 1 = bobot ekstrak yang ditimbang W 2 = bobot cawan + ekstrak setelah pengabuan (konstan)

## Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu yang diperoleh pada pengukuran kadar abu didihkan selama 5 menit dengan 25 mL asam sulfat encer, bagian yang tidak larut asam dikumpulkan dan disaring  menggunakan  kertas  saring  bebas  abu,  dicuci  dengan  air  panas,  lalu dipijarkan  hingga  bobot  tetap  lalu  ditimbang.  Dihitung  kadar  abu  yang  tidak larut dalam asam menggunakan rumus (Depkes RI 2000).
Rumus:
Kadar abu tidak larut asam = W 2 -W 0 W 1 x 100%
Keterangan: W 0 = bobot kertas saring kosong (konstan) W 1 = bobot ekstrak yang ditimbang W 2 = bobot kertas saring + residu (konstan)

## Cemaran Mikroba
Uji Angka Lempeng Total (ALT) dilakukan dengan cara sebanyak 1 gram ekstrak dilarutkan dalam 10 mL pelarut dan dikocok hingga homogen sehingga diperoleh pengenceran 10 -1 . Kemudian diambil 1 mL dari pengenceran 10 -1 dan ditambahkan  pelarut  sebanyak  9  mL  sehingga  diperoleh  pengenceran  10 -2 , kemudian dilanjutkan dengan pengenceran 10 -3 dan masing masing pengenceran dilakukan  replikasi  sebanyak  2  kali.  Tiap  pengenceran  sebanyak  1  mL diisolasikan  dalam  10  mL  medium Nutrient  Agar (NA)  menggunakan  metode tuang. Cawan petri diletakkan dengan posisi terbalik kemudian dimasukkan ke dalam  incubator  pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Dihitung  jumlah  koloni  yang tumbuh.  Perhitungan  dilakukan  dengan  cara  dipilih  cawan  petri  dari  satu pengenceran  yang  menunjukkan  jumlah  koloni  30-300  (Depkes  RI  2000).  Nilai Angka  Lempeng  Total  memenuhi  persyaratan  yang  ditentukan  oleh  BPOM (2019),  untuk  bentuk  sediaan  obat  dalam  yaitu  ≤10 5 koloni/gr  dan  memenuhi persyaratan obat luar semi padat yaitu ≤10 7 koloni/gr  (Syarif, Handayani, dan Angraeni 2022).
Uji Angka Kapang Khamir (AKK) dilakukan dengan cara diisolasikan tiap pengenceran sebanyak 1 mL menggunakan 10 mL medium Potato Dextrosa Agar (PDA)  menggunakan  metode  tuang.  Cawan  petri  diletakkan  dengan  posisi terbalik  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  inkubator  pada  suhu  25 °C  selama  3 hari, diamati dan dihitung jumlah koloni  yang tumbuh. Perhitungan dilakukan dengan  menggunakan  lempeng  agar  yang  memiliki  40–60  koloni kapang/khamir  (Depkes  RI  2000).  Nilai  Angka  Kapang  Khamir  memenuhi persyaratan  sediaan  obat  dalam  (≤103  koloni/gr)  dan  memenuhi  persyaratan sediaan obat luar semipadat (≤104 koloni/gr) (Syarif, Handayani, and Angraeni 2022).

## Cemaran Logam Berat
Preparasi  sampel  dilakukan  dengan  cara  abu sampel  yang  diperoleh  dari susut  pengeringan  dimasukkan  ke  dalam  beaker glass dan  ditambahkan  9  mL asam  klorida  pekat  dan  3  mL  asam  nitrat  pekat.  Mulut  beaker  ditutup  dengan kaca arloji, lalu dipanaskan selama 30 menit dalam lemari asam hingga larutan asam menguap dan mengering. Ditambahkan 1 mL asam nitrat pekat ke dalam larutan  kemudian  didinginkan.  Setelah  dingin,  ditambahkan  aquadest  sedikit demi sedikit dan dipindahkan ke dalam labu ukur 25 ml menggunakan corong kaca yang dilapisi kertas saring dan dicukupkan dengan aquades sampai volume larutan tepat 25 mL.
Larutan standar baku dibuat dengan menggunakan larutan stok logam Cd menggunakan larutan stok dengan kandungan Cd 1000 μg/mL. Larutan standar dengan  kandungan  Cd  10  μg/mL  dibuat  dengan  cara  dipipet  1,0  mL  larutan standar  stok  1000  μg/mL  dan  dituangkan  ke  dalam  labu  takar  100  mL. Kemudian asam nitrat ditambahkan sampai tanda batas. Dari larutan baku Cd 10 μg/mL  dipipet  sebanyak  0,5  mL;  1,0  mL;  2,0  mL;  4,0  mL;  8,0mL  dan ditambahkan  asam  nitrat  ditambahkan  ke  dalam  masing-masing  labu  takar  50 mL  sampai  garis  yang  ditandai.  Kandungan  Cd  yang  terdapat  dalam  larutan tersebut  dianalisa  menggunakan  alat  Spektrofotometer  Serapan  Atom  (SSA). Selanjutnya  dilakukan  penentuan  kadmium  (Cd)  dalam  sampel  dengan diukur menggunakan spektrofotometri serapan atom pada panjang gelombang 228,8 nm (Syarif, Handayani, dan Angraeni 2022).
Kurva kalibrasi untuk logam Cd dibuat dengan cara dipipet larutan baku 10 ppm sebanyak  0,25 mL; 0,5 mL; 2,5 mL; 5,0 mL; 10 mL; dan 25mL ke dalam labu takar 50ml lalu ditambahkan asam nitrat 2% sampai  tanda batas sehingga diperoleh  rangkaian  larutan  kerja  dengan  konsentrasi  0,05  ppm;  0,1  ppm;  0,5 ppm; 1 ppm; 2 ppm; dan 5 ppm. Kemudian diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometri serapan atom.
Dibuat  larutan  stok  Pb  1000  mg/L  lalu  dibuat  Pb  10  mg/L  dengan  cara dipindahkan  2  mL  larutan  baku  1000  mg/L  ke  dalam  labu  ukur  200  mL kemudian diencerkan sampai tanda batas. Larutan standar Pb 0,5 mg/L; 1 mg/L; dan 5 mg/L dibuat dengan cara memindahkan 2,5 mL; 5 mL; dan 25 mL larutan baku  10  mg/L  ke  dalam  labu  ukur  50  mL  kemudian  diencerkan  sampai  tanda batas.  Selanjutnya  larutan  tersebut  dianalisis  dengan  spektrofotometri  serapan atom  bersamaan  dengan  sampel  yang  telah  didestruksi  untuk  mengetahui konsentrasi logam Pb dalam sampel pada panjang gelombang 283,3 nm .

## Residu Pestisida
Metode  pengujian  residu  pestisida  dalam  hasil  pertanian  dari  Komisi Pestisida  Departemen  Pertanian  1997  (Lampiran  4)  dengan  modifikasi  sebagai berikut :
a. Jika kandungan bahan kimia yang mengganggu analisis yang bersifat non polar relatif rendah misalnya kurang dari 20% dalam ekstrak yang disaring dengan  air atau etanol, metode kromatografi lapis tipis dapat digunakan untuk  melakukan  analisis,  dan  dapat  dilakukan  secara  semi-kuantitatif. Memurnikan  secara  langsung  tanpa  melalui  tahap  pemurnian  terlebih dahulu  atau  menggunakan  kromatografi  gas.  Apabila  tidak  mengandung bahan  kimia  yang  mengandung  unsur  N  seperti  klorofil,  alkaloid,  dan amina non polar lainnya.
b. Ekstrak yang diperoleh dalam pelarut etanol bebas senyawa nitrogen non- polar  dapat  diperiksa  secara  langsung  tanpa  pemurnian  menggunakan metode  kromatografi  tipis  atau  kromatografi  gas.  Jika  hal  ini  tidak memungkinkan  karena  gangguan  kimia  yang  kuat,  pengujian  harus dilakukan  dengan  menggunakan  metode  standar.  Angka  dan  rincian analisis  diadaptasi  dari  buku  aslinya  Depkes  RI  (2000),  untuk memudahkan pelacakan apabila terjadi permasalahan pada analisis.

## HASIL

## Hasil Determinasi
Berdasarkan hasil determinasi dengan voucher specimen nomor  0018 yang menyatakan  bahwa  tanaman  yang  digunakan  adalah  benar  tanaman  sirsak dengan nama latin sirsak Annona muricata Linn.

## Rendemen Ekstrak Etanol Daun Sirsak
Nilai rendemen ekstrak yang diperoleh ditampilkan  pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Rendemen Daun Sirsak Asal Daerah Gowa dan Takalar Asal Simplisia Berat Awal (g)  Hasil Ekstrak (g) Rendemen Ekstrak (%) Gowa 300 37,001 12,333 Takalar 300 65,461 21,820

## Skrinning Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Sirsak
Semua  jenis  golongan  senyawa  kimia  yang  diuji  terdapat  pada  hasil identifikasi  ekstrak  etanol  daun  sirsak,  seperti  yang  ditunjukkan  oleh  hasil perubahan warna dan endapan pada Tabel 2.
Tabel  2. Hasil  Skrinning  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun  Sirsak  Asal  Daerah  Gowa  dan Takalar
Senyawa Kimia Ekstrak Etanol Daun Sirsak Gowa Takalar Alkaloid : Mayer - - Dragendorf + + Bouchardat - + Tanin + + Saponin + + Steroid + + Flavonoid + +

## Uji Standarisasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak
Hasil uji standarisai ekstrak etanol daun sirsak dari 2 tempat tumbuh yaitu Gowa dan Takalar terdapat pada Tabel 3 .
Tabel  3. Hasil  Penetapan  Parameter  Spesifik  dan  Non  Spesifik  Ekstrak  Etanol  Daun Sirsak asal daerah Gowa dan Takalar
Jenis Pemeriksaan Hasil Persyaratan Ekstrak Daun Gowa Ekstrak Daun Takalar Parameter Spesifik Identitas Ekstrak: - - Nama ekstrak Ekstrak Etanol Daun Sirsak - - Bagian tumbuhan yang digunakan Daun - - Nama latin tumbuhan Annona muricata Linn. - - Nama Indonesia Daun Sirsak - Organoleptik: - Bentuk Kental Kental - Warna Cokelat kehitaman Coklat kehitaman - Bau Bau khas Bau khas Kadar Senyawa Terlarut dalam Pelarut Tertentu: - Kadar senyawa yang larut dalam air 7, 560% 6,64% ≥ 19,5% - Kadar senyawa yang larut dalam etanol 13,94% 10,1% ≥ 14,5% Parameter Non Spesifik Susut Pengeringan 0,289% 0,293% < 10% Bobot Jenis 0,814 g/mL 0,818 g/mL - Kadar Air 4,488% 7,436% < 10% Abu Total 4,467% 6,560% < 6,1% Abu Tidak Larut Asam 0,499% 0,248% < 1,1 Cemaran Mikroba: - Angka Lempeng Total < 1,0 x 10 1 koloni/g  < 1,0 x 10 1 koloni/g < 10 koloni/g - Angka Kapang < 1,0 x 10 1 koloni/g  < 1,0 x 10 1 koloni/g < 10 koloni/g - Angka Khamir < 1,0 x 10 1 koloni/g  < 1,0 x 10 1 koloni/g < 10 koloni/g Cemaran Logam Berat: - Cadmium (Cd) < 0,0001 µg/g < 0,00001 μg/g < 10 µg/g - Timbal (Pb) 0,0390 µg/g < 0,0471 μg/g < 10 µg/g Residu Pestisida: - Organoklor < 0,001 mg/kg < 0,001 mg/kg < 1 mg/kg - Organofosfor < 0,001 mg/kg < 0,001 mg/kg < 1 mg/kg

## PEMBAHASAN
Standarisasi  dilakukan  untuk  menjaga  stabilitas,  keamanan,  dan keseragaman  dalam  komposisi  senyawa  simplisia  dan  ekstrak  yang  memenuhi standar  Kementerian  Kesehatan  (Materia  Medika  Indonesia)  dalam  buku Farmakope  Herbal  Indonesia  (Mewar  2023).  Determinasi  tanaman  merupakan langkah pertama yang dilakukan dalam penelitian ini. Tujuan dari  determinasi adalah untuk mengidentifikasi spesimen tanaman yang diteliti dengan tepat dan untuk  mencegah  kesalahan  saat  mengumpulkan  bahan  utama  penelitian (Indratmoko, Fadilla, dan Setiyabudi 2021).
Penelitian  ini  menggunakan  daun  sirsak  ( Annona  muricata Linn.)  yang diambil  dari  daerah  Kabupaten  Gowa  dan  Takalar.  Pengambilan  sampel dilakukan dengan cara mengambil daun sirsak yang masih segar secara manual di pekarangan rumah warga, kemudian dilakukan pembuatan serbuk simplisia daun sirsak untuk mempermudah proses ekstrasi. Serbuk simplisia daun sirsak kemudian  diekstrasi  dengan  metode  maserasi.  Maserasi  dipilih  karena  cara pengerjaan  dan  peralatannya  yang  sederhana,  tidak  menggunakan  suhu  tinggi sehingga  senyawa  yang  mudah  rusak  karena  suhu  tinggi  akan  tetap  terjaga dengan baik (Saidi, Ginting, dan Murnia 2018). Adapun pelarut yang digunakan pada  proses  maserasi  yaitu  etanol  96%.  Etanol  96%  dipilih  karena  bersifat universal,  polar,  mudah  didapat,  selektif,  tidak  toksik,  absorbsinya  baik  dan kemampuan  penyariannya  yang  tinggi  sehingga  dapat  menyari  senyawa  yang bersifat  non-polar,  semi  polar  dan  polar  (Wendersteyt,  Wewengkang,  dan Abdullah 2021).
Dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  diperoleh  data  bahwa  rendemen ekstrak  daun  sirsak  asal  daerah  Gowa  adalah  12,333%  dan  Takalar  adalah 21,820%  (tabel  1).  Menurut  Ditjen  POM  (2017),  rendemen  ekstrak  kental  daun sirsak tidak kurang dari 11,4%, sehingga ekstrak daun sirsak asal daerah Gowa dan Takalar memenuhi persyaratan mutu ekstrak.
Penetapan  parameter  spesifik  yang  dilakukan  diawali  oleh  pemeriksaan organoleptik.  Pemeriksaan  organoleptik  dilakukan  untuk  pengenalan  awal secara  fisik  dengan  menggunakan  panca  indera.  Pemeriksaan  ini  meliputi bentuk,  warna,  bau  dan  rasa  (Maryam,  Taebe,  dan  Toding  2020).  Hasil pengamatan  ekstrak  etanol  daun  sirsak  asal  daerah  Gowa  dan  Takalar menunjukkan bahwa ekstrak yang diidentifikasi merupakan ekstrak etanol daun sirsak yang merujuk pada buku Farmakope Herbal Indonesia.
Parameter  kadar  sari  larut  air  dan  etanol  dilakukan  untuk  memberikan gambaran awal jumlah senyawa yang terkandung pada sampel. Kadar sari larut air menunjukkan senyawa yang bersifat polar karena air bersifat polar sehingga menarik  senyawa  yang  bersifat  polar.  Sedangkan  kadar  sari  larut  etanol memperlihatkan  jumlah  senyawa  yang  bersifat  kurang  polar  (semi  polar  -  non polar), karena etanol dapat menari senyawa tersebut (Depkes RI 2000). Dari tabel
3  dapat  dilihat  bahwa  senyawa  yang  terdapat  pada  daun  sirsak  lebih  banyak bersifat  kurang  polar.  Tetapi  jika  dilihat  perbandingan  asal  daerah  Gowa  lebih banyak terdapat kandungan senyawa larut air dan etanol dibandingkan daerah Takalar.  Kadar  sari  larut  air  dan  etanol  ini  merupakan  gambaran  kandungan senyawa  kimia  yang  terkandung  di  dalam  simplisia  yang  diduga  berpotensi memberikan aktivitas farmakologi sesuai senyawa tersebut.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji  fitokimia  yang  bertujuan  untuk mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak  etanol daun  sirsak  asal  daerah  Gowa  dan  Takalar.  Berdasarkan  data  hasil  skrining fitokimia metabolit sekunder ekstrak etanol daun sirsak dapat diketahui bahwa ekstrak etanol daun sirsak mengandung flavonoid, tanin, saponin, dan steroid. Setelah  dilakukan  skrining  fitokimia,  kemudian  dilakukan  uji  KLT  untuk mempertegas  hasil  positif  yang  diperoleh  dari  skrining  fitokimia.  Pengujian flavonoid  diperoleh  hasil  ekstrak  positif  mengandung  flavonoid  ditandai perubahan  warna  kuning  pada  noda  dibawah  lampu  366  nm.  Apabila  terjadi perubahan  warna  kuning  pada  noda  di  permukaan  lempeng  dengan  latar belakang  ungu,  maka  ekstrak  positif  mengandung  senyawa  flavonoid  (Syarif, Handayani,  dan  Angraeni  2022).  Penampak  bercak  yang  digunakan  adalah sitroborat.
Penetapan  parameter  non  spesifik  diawali  dengan  penetapan  susut pengeringan. Parameter susut pengeringan dilakukan untuk menentukan jumlah bahan  yang  tertinggal  setelah  pengeringan.  Nilai  susut  pengeringan  dapat memberikan  informasi  senyawa  yang  hilang  setelah  proses  pengeringan (Maryam,  Taebe,  dan  Toding  2020).  Hasil  pengukuran  susut  pengeringan simplisia  daun  sirsak  asal  daerah  Gowa  yang  diperoleh  adalah  0,289%  dan Takalar  adalah  0,293%. Hasil  tersebut  memenuhi  persyaratan  maksimum  susut pengeringan yaitu kurang dari 10% (Ditjen POM 2017).
Penentuan  bobot  jenis  juga  bertujuan  untuk  memberikan  gambaran kandungan kimia yang terlarut pada suatu ekstrak menggunakan perbandingan bobot volume ekstrak dengan massa air pada suhu dan volume yang sama yang diukur  menggunakan  piknometer.  Semakin  besar  nilai  bobot  jenis  maka komponen yang terkandung dalam ekstrak semakin banyak (Hanif, Widyasanti, and  Putri  2021).  Hasil  pengukuran  bobot  jenis  ekstrak  etanol  daun  sirsak  asal daerah Gowa yang diperoleh adalah 0,814 g/mL dan Takalar 0,818 g/mL.
Parameter  penetapan  kadar  air  dilakukan  untuk  memberikan  batasan minimal  atau  rentang  besarnya  air  dalam  sampel  (Depkes  RI  2000).  Semakin besar kadar air pada ekstrak maka semakin beresiko untuk ditumbuhi mikroba yang  dapat  menurunkan  aktivitas  biologi  ekstrak  (Syarif,  Handayani,  and Angraeni  2022).  Hasil  pengukuran  kadar  air  ekstrak  etanol  daun  sirsak  asal daerah  Gowa  yang  diperoleh  adalah  4,488%  dan  Takalar  adalah  7,436%.  Hasil yang diperoleh memenuhi persyaratan kadar air yang terkandung dalam suatu ekstrak yaitu < 10 % (Ditjen POM 2017).
Parameter penetapan kadar abu total dilakukan melalui  pemanasan pada temperatur  800  ±  25°C  dimana  senyawa  organik  dan  turunannya  terdestruksi dan  menguap.  Sehingga  unsur  yang  tertinggal  adalah  mineral  anorganik (Depkes  RI  2000).  Semakin  tinggi  kadar  abu  total  yang  diperoleh  maka kandungan  mineral  dalam  ekstrak  juga  semakin  tinggi.  Material  yang  tersisa setelah pemijaran meliputi abu fisiologis yang berasal dari tanamannnya sendiri maupun  abu  nonfisiologis  yang  merupakan  residu  dari  material  asing  yang menempel  pada  permukaan  tanaman  misalnya  pasir  dan  tanah  (Rosidah  et  al. 2020). Hasil pengukuran kadar abu total ekstrak etanol daun sirsak asal daerah Gowa  yang  diperoleh  adalah  4,467%  dan  Takalar  adalah  6,560%.  Hasil  yang diperoleh  yaitu  ekstrak  etanol  asal  daerah  Gowa  memenuhi  persyaratan  kadar abu yang terkandung dalam ekstrak kental daun sirsak yaitu < 6,1%, sedangkan Takalar tidak memenuhi persyaratan (Ditjen POM 2017).
Parameter  penetapan  kadar  abu  tidak  larut  asam  diperoleh  setelah mendidihkan abu total dengan HCl encer (Depkes RI 2000). Material yang tersisa setelah  pemijaran  dan  pendidihan  menggunakan  asam  meliputi  abu  fisiologis yang  berasal  dari  tanamannnya  sendiri  maupun  abu  nonfisiologis  yang merupakan residu dari material asing yang menempel pada permukaan tanaman misalnya  tanah  atau  pasir,  tanah  dan  unsur  logam  perak,  timbal  dan  merkuri (Rosidah  et  al.  2020;  Irhamnah  et  al.  2021).  Hasil  pengukuran  kadar  abu  tidak larut asam ekstrak etanol daun sirsak asal daerah Gowa yang diperoleh adalah 0,499% dan Takalar adalah 0,248%. Hasil yang diperoleh memenuhi persyaratan kadar abu tidak larut asam yang terkandung dalam ekstrak kental daun sirsak yaitu < 1,1% (Ditjen POM 2017).
Parameter penetapan cemaran mikroba dilakukan untuk untuk menjamin bahwa tidak ada bakteri patogen maupun non-patogen yang ada dalam ekstrak yang  melebihi  tingkat  yang  telah  ditentukan.  Pemeriksaan  kontaminasi mikrobiologis  dilakukan  dengan  menghitung  angka  lempeng  total  dan  angka kapang  khamir  (Rosidah  et  al.  2020).  Hasil  pengukuran  angka  kapang,  khamir dan angka lempeng total ekstrak daun sirsak dari Gowa dan Takalar adalah < 10 koloni/g. Hasil yang diperoleh memenuhi persyaratan menurut buku Monografi Ekstrak  Tumbuhan  Obat  atas  maksimum  kontaminasi  mikroba  yang  telah ditetapkan adalah 10 4 koloni/g, dan untuk kapang adalah 10 3 koloni/g (Depkes RI 2006).
Parameter  penetapan  cemaran  logam  berat  dilakukan  untuk  memberikan jaminan bahwa ekstrak tidak mengandung logam berat tertentu (Pb, Cd dan lain- lain)  melebihi  nilai  yang  ditetapkan  karena  berbahaya (toksik)  bagi  kesehatan (Depkes RI 2000). Kerja enzim dihambat oleh toksisitas logam berat yang terikat pada tubuh, yang menghentikan aktivitas metabolisme tubuh. Selain itu, logam berat  ini  akan  menyebabkan  teratogen,  alergi,  mutagen,  atau  kanker  pada manusia. Setelah terserap ke dalam tubuh, logam berat tidak dapat dihilangkan. Sebaliknya,  logam  berat  akan  tetap  berada  disana  hingga  akhirnya  dibuang
melalui  ekskresi.  Hasil  pengukuran  cemaran  logam  berat  ekstrak  etanol  daun sirsak asal Gowa dan Takalar berturut-turut untuk kadmium  sebanyak < 0,0001 μg/g  dan  timbal  sebanyak  0,0390  dan  0,0471  μg/g.  Hasil  yang  diperoleh memenuhi persyaratan dalam monografi tumbuhan obat indonesia bahwa batas maksimum cemaran timbal (10 mg/kg), kadmium (0,3 mg/kg) (Fridayanti et al. 2017).
Parameter  penetapan  residu  pestisida  dilakukan  untuk  memberikan jaminan  bahwa  ekstrak  tidak  mengandung  pestisida  melebihi  nilai  yang ditetapkan  karena  berbahaya  (toksik)  bagi  kesehatan  (Depkes  RI  2000).  Hasil pengukuran residu pestisida ekstrak daun sirsak dari Gowa dan Takalar adalah < 0,001 mg/kg. Hasil yang diperoleh memenuhi persyaratan menurut Peraturan Menteri Pertaninan No. 24 Tentang Syarat dan Tata Cara Pendaftaran Pestisida yaitu < 1 mg/kg (Peraturan Menteri Pertanian RI 2011).

## KESIMPULAN
Hasil standarisasi pada ekstrak daun sirsak asal daerah  Gowa dan Takalar, diperoleh  hasil  yaitu  untuk  pengujian  parameter  nonspesifik  berupa  uji organoleptik  ekstrak  bentuk  kental,  warna  coklat  dan  kehitaman,  berbau  khas. Kadar  senyawa  larut  air  dan  etanol    sebesar  7,560%  dan  13,94%  untuk  Gowa, sedangkan  Takalar  sebesar  6,64%  dan  10,1%.  Hasil  uji  parameter  nonspesifik untuk daerah Gowa dan Takalar sebagai berikut, susut pengeringan 0,289% dan 0,293%, bobot jenis sebesar 0,814 g/mL dan 0,818 g/mL, kadar air sebesar 4,488% dan  7,436%,  kadar  abu  total  sebesar  4,467%  dan  6,560%,  kadar  abu  tidak  larut asam sebesar 0,499% dan 0,248%, cemaran mikroba < 1,0 x 10 1 koloni/g, cemaran logam berat kadmium < 0,0001 µg/g,  cemaran logam timbal sebesar 0,0390 µg/g dan < 0,0471 μg/g, residu pestisida < 0,001 mg/kg. Penelitian ini menunjukkan ekstrak  daun  sirsak  asal  daerah  Gowa  lebih  baik  digunakan  sebagai  sumber bahan  baku  untuk  pengembangan  daun  sirsak  sebagai  obat  modern  asli Indonesia.

## DAFTAR PUSTAKA
Aminah,  Aminah,  St  Maryam,  Muzakkir  Baits,  and  Ummi  Kalsum.  2016. “Perbandingan Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Daun  Sirsak  ( Annona muricata L.)  Berdasarkan  Tempat  Tumbuh  dengan  Metode  Peredaman DPPH.” Jurnal Fitofarmaka Indonesia 3 (1): 146–50. https://doi.org/10.33096/jffi.v3i1.175.
BPOM.  2019. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Republik  Indonesia  Nomor  32
Tahun 2019 Tentang Persyaratan Keamanan dan Mutu Obat Tradisional . Jakarta: Balai Pengawasan Obat dan Makanan.
Depkes  Republik  Indonesia.  2006. Monografi  Ekstrak  Tumbuhan  Obat  Indonesia . Jakarta: BPOM Republik Indonesia.
Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . 1st ed. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Ditjen  POM.  2017. Farmakope  Herbal  Indonesia  Edisi  II .  Jakarta:  Kementrian Kesehatan RI.
Faradiba,  Amin,  Asni,  Cindy  Artikasari  Achmad,  Ratu  Hilda  Ananda,  Dicka Saputri, Nur Adnin, and Sinta Faradilla. 2023. “Determination of Flavonoid Content and Antioxidant Activity of Soursop Leaves from Three Regions in South Sulawesi Province , Indonesia.” 2nd Makassar International Conference on Pharmaceutical Sciences (MICPS 2023) , 2023.
Fridayanti,  Aditya,  Yurika  Sastyarina,  Agung  Rahmadani,  Ganjar  Firmansyah, Tri Woro Widyati, Yuspian Nur, Hadi Kuncoro, and Enggar Wijayanti. 2017. “Standarisasi  Ekstrak  Umbi  Bawang  Tiwai  ( Eleutherine  americana (Aubl.) Merr.)  Asal  Kalimantan  Timur.” Proceeding  of  the  6 th Mulawarman Pharmaceuticals Conferences , 7–8.
Handayani,  Selpida,  Ida  Kurniawati,  and  Faradiba  Abdul  Rasyid.  2020.  “Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Karet  Kebo  ( Ficus  elastica )  dengan Metode  Peredaman  Radikal  Bebas  DPPH  (1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazil).” Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) (e-Journal) 6 (1): 141–50. https://doi.org/10.22487/j24428744.2020.v6.i1.15022.
Hanif, Abdurrahman, Asri Widyasanti, and Selly Harnesa Putri. 2021. “Optimasi Kondisi  Proses  Ekstraksi  Berbantu  Gelombang.” Agrointek 15  (4):  1084–98. https://doi.org/10.21107/agrointek.v15i4.10175.
Indratmoko, Septiana, Vegga Dwi Fadilla, and Lulu Setiyabudi. 2021. “Optimasi Formula Self Nanoemulsifying Drug Delivery System (SNEDDS) Ekstrak Etanol Daun  Salam  ( Syzygium  polyanthum )  sebagai  Antibakteri Staphylococcus aureus. ” Pharmaqueous :  Jurnal  Ilmiah  Kefarmasian 3  (1):  46–56. https://doi.org/10.36760/jp.v3i1.269.
Irmawati. n.d. “Uji Aktifitas Antibakteri Ekstrak Daun Sirsak ( Annona muricata ) terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus Secara In  Vitro .” Jurnal  Teknosains 12(1): 19-26. https://doi.org/10.24252/teknosains.v12i1.7865
Ipang Djunarko, Felysiana Dasilva Anggal, Esteria Ayu, Wulandari Sugianto, et al.  2022.  “Daun  Sirsak Annona  muricata L.  sebagai  Antihiperglikemik.” Jurnal Farmasetis 11(1): 7-22.
Maryam,  Fadillah.,  Burhanuddin  Taebe,  and  Deby  Putrianti  Toding.  2020. “Pengukuran  Parameter  Spesifik  dan  Non  Spesifik  Ekstrak  Etanol  Daun Matoa ( Pometia pinnata J.R & G.Forst).” Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6 (1): 1–12. https://doi.org/10.35311/jmpi.v6i01.39
Menteri  Pertanian  RI.  2011. Peraturan  Menteri  Pertanian  Nomor  24  Tahun  2011
Tentang  Syarat  dan  Tatacara  Pendaftaran  Pestisida  dengan  Rahmat  Tuhan  yang Maha Esa Menteri Pertanian . Jakarta: Kementerian Pertanian RI.
Mewar,  Djulkifli.  2023.  “Standarisasi  Parameter  Spesifik  dan  Non  Spesifik Ekstrak Etanol Daun Gatal ( Laportea decumana (Roxb.) Wedd) sebagai Bahan Baku  Obat  Herbal  Terstandar.” Jurnal  Penelitian  Kesehatan  Suara  Forikes 14 (April): 266–70. http://dx.doi.org/10.33846/sf14206
Nova Iyos, Rekha, and Putri Dhea Astuti. 2017. “Pengaruh Ekstrak Daun Sirsak ( Annona muricata L.) terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Majority.”
Jurnal Kedokteran Univeritas Lampung 6(2)
Novriyanti,  Ririn,  Novita  Eka  Kartab  Putri,  and  Laode  Rijai.  2022.  “Skrining Fitokimia  dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Kulit  Jeruk  Nipis ( Citrus aurantifolia ) Menggunakan Metode DPPH.” Proceeding of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences 15 (May): 165–70. https://doi.org/10.25026/mpc.v15i1.637.
Nurdin  Saidi,  Binawati  Ginting,  Murnia,  Mustanir.  2018. Analisis  Metabolit
Sekunder . Banda Aceh.
Syarifah  Irhamnah,  Novita  Eka,  Kartab  Putri,  and  Hadi  Kuncoro.  n.d. “Proceeding of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences,” no. April 2021: 192–98.
Putri, Adelia, Luh Made Sudimartini, and Anak Agung Gde Oka Dharmayudha. 2020.  “Standarisasi  Cemaran  Mikrob  Daun  Sirsak  ( Annona  muricata L.) sebagai Bahan Baku Sediaan Obat Tradisional.” Indonesia Medicus Veterinus 9
(3): 305–13. https://doi.org/10.19087/imv.2020.9.3.305.
Rasyid,  Faradiba  Abdul,  Asni  Amin,  Sukmawati  Sukmawati,  Kurnia  Putri Djakariani,  Riska  Riska,  Moch.  Rayhan  Aliansyah,  and  Cindy  Artika  Sari. 2023. “Toxicity Activity and Total Phenolic Content of Soursop Leaves from Three  Regions  in  South  Sulawesi,  Indonesia.” Journal  of  Experimental  and Clinical Pharmacy (JECP) 3 (2): 116. https://doi.org/10.52365/jecp.v3i2.674.
Rosidah, Idah, Zainuddin Zainuddin, Kurnia Agustini, Olivia Bunga, and Lestari Pudjiastuti.  2020.  “Standardisasi  Ekstrak  Etanol  70%  Buah  Labu  Siam ( Sechium edule (Jacq.) Sw.).” Farmasains : Jurnal Ilmiah Ilmu Kefarmasian 7 (1): 13–20. https://doi.org/10.22236/farmasains.v7i1.4175.
Sapada,  Edy,  Wita  Asmalinda,  and  Fatimah  Eka  Mariana.  2022.  “The  Activity Test  of  Soursop  Fruit  Juice  ( Annona  muricata L)  on  Decreasing  Cholesterol Levels in Male Mice ( Mus musculus ).” Jurnal Aisyah : Jurnal Ilmu Kesehatan 7
(2): 589–96. https://doi.org/10.30604/jika.v7i2.945.
Setyorini,  Herni  Asih,  Arifayu  Addiena  Kurniatri,  Rosa  Adelina,  and  Adelina Adelina.  2016.  “Karakterisasi  Mutu  Ekstrak  Daun  Sirsak  ( Annona  muricata L.)  dari  Tiga  Tempat  Tumbuh.” Buletin  Penelitian  Kesehatan 44  (4):  279–86.
https://doi.org/10.22435/bpk.v44i4.5184.279-286.
Syarif,  Rezki  Amriati,  Virsa  Handayani,  and  Alfirah  Angraeni.  2022.
“Standarisasi Ekstrak Etanol Buah Bintaro ( Cerbera odollam Gaertn.) sebagai Obat Tradisional.” Jurnal Fitofarmaka Indonesia 9 (2): 7–13. https://doi.org/10.33096/jffi.v9i2.592.
Wendersteyt,  Novira  Vita,  Defny  S.  Wewengkang,  and  Surya  Sumantri Abdullah. 2021. “Uji Aktivitas Antimikroba dari Ekstrak dan Fraksi Ascidian Herdmania  momus dari  Perairan  Pulau  Bangka  Likupang  terhadap Pertumbuhan  Mikroba Staphylococcus  aureus , Salmonella  typhimurium dan Candida albicans .” Pharmacon 10 (1): 706. https://doi.org/10.35799/pha.10.2021.32758.