## IDENTIFIKASI RHODAMIN B PADA SAUS TOMAT YANG BEREDAR DI PASAR PAGI SAMARINDA
Eka Siswanto Syamsul, Reny Nur Mulyani, Siti Jubaidah
Akademi Farmasi Samarinda Email: eka8382@gmail.com

## ABSTRAK
Rhodamin B merupakan suatu pewarna sintetik berbentuk serbuk berwarna hijau  yang  digunakan  sebagai  pewarna  tekstil  dan  sering  digunakan  untuk mewarnai  suatu  produk  makanan,  khususnya  saus  tomat.  Saus  tomat  yang dijadikan  sampel di  Pasar  Pagi  Samarinda sebanyak  5  sampel.  Penelitian  ini menggunakan  uji  reaksi  warna  dan  metode  KLT. Hasil  penelitian  menggunakan uji reaksi warna menunjukkan bahwa sampel tidak mengandung pewarna sintetik rhodamin B. Hasil identifikasi dengan kromatografi lapis tipis diperoleh  nilai Rf sampel  A  0,46,  sampel  B  0,46,  sampel  C  0,4,  sampel  D  0,5  dan  sampel  E  0,78, nilai  Rf  baku  rhodamin  B  0,8.  Dari  nilai  Rf  tersebut  sampel  E  mengandung rhodamin  B  karena  warna  bercak  sampel  dan  rhodamin  B  sama  yaitu  berwarna merah muda dan selisih nilai Rf berada dikisaran ± 0,02 dari Rf baku,
Kata kunci: rhodamin B, saus tomat, uji reaksi warna, KLT

## ABSTRACT
Rhodamin  B  is  a  green  powder  synthetic  dye  used  as  a  textile  dye  and  is  often used to color a food product, especially tomato sauce. Tomato sauce sampled in Samarinda Morning Market for 5 samples. This research used color reaction test and TLC method. The result of the research using color reaction test showed that the sample did not contain rhodamine synthetic dye B. The result of identification with  thin  layer  chromatography  obtained  Rf  value  of  A  sample  0,46,  sample  B 0,46,  sample  C  0,4,  sample  D  0,5  and sample  E  0.78,  the  value  of  Rf  standard rhodamin  B  0.8.  From  the  value  of  Rf,  the  sample  E  contains  rhodamine  B because the color of the sample spots and rhodamin B are the same pink and the difference of Rf value is in the range ± 0.02 of the standard Rf,
Keywords: rhodamin B, tomato sauce, color reaction test, TLC

## PENDAHULUAN
Di Indonesia peraturan mengenai  bahan  tambahan  pangan yaitu  penggunaan  zat  pewarna  yang diizinkan  dan  dilarang  untuk  pangan diatur  melalui  Peraturan  Menteri Kesehatan RI Nomor 033 Tahun 2012 Tentang  Bahan  Tambahan  Pangan.
Sering kali produsen menyalahgunakan pemakaian zat pewarna untuk bahan pangan misalnya  zat  pewarna  untuk  tekstil dan  kulit  dipakai  untuk  mewarnai bahan  pangan.  Hal  ini  jelas  sangat berbahaya  bagi  kesehatan  karena adanya  residu  logam  berat  pada  zat pewarna tersebut.
Timbulnya
penyalahgunaan tersebut  antara  lain disebabkan oleh ketidaktahuan masyarakat  mengenai  zat  pewarna untuk pangan dan disamping itu harga zat  pewarna  untuk  industri  jauh  lebih murah dibandingkan dengan harga zat pewarna  untuk  pangan,selain  itu warna  dari  zat  pewarna  tekstil  atau kulit biasanya lebih menarik (Cahyadi, 2006).
Badan  Pemeriksaan  Obat dan  Makanan  (BPOM)  memeriksa beberapa  jenis  makanan  dan  ternyata masih ada makanan yang
mengandung bahan berbahaya seperti rhodamin  B,  methanyl  yellow  dan auramin. Pemakaian ini sangat berbahaya karena bisa memicu terjadinya kanker serta merusak ginjal dan hati yang disebabkan oleh bahan- bahan yang ditambahkan pada jajanan untuk  anak-anak  seperti  es  sirup  atau cendol, minuman ringan, kue, gorengan,  kerupuk  dan  saus  tomat maupun  saus  sambal (Eka,  2013). Hasil  penelitian  oleh  Rohma  (2013) mengenai  Kajian  Keamanan  Pangan Pentol  Cilok  di  Desa  Blawirejo Kecamatan  Kedungpring  Lamongan, menunjukkan bahwa beberapa sampel saus  tomat  pentol  cilok  positif mengandung rhodamin B.
Rhodamin  B  merupakan  zat pewarna  tambahan  yang  dilarang penggunaannya dalam produk-produk pangan. Rhodamin
B dapat menyebabkan iritasi
saluran pernafasan,  iritasi  kulit,  iritasi  pada mata, iritasi pada saluran pencernaan, keracunan,  gangguan  hati  dan  dapat menyebabkan kanker (Yuliarti, 2007). Produk  makanan  yang  paling  sering ditambahkan  salah  satunya  adalah saus  tomat. Saus  tomat  adalah    saus
yang  dibuat  dari  buah  tomat  yang sudah  masak  ditambah  gula,  garam, cuka  dan  rempah-rempah  seperti cengkeh  dan  kayu manis.  Saus  tomat dipilih  karena  banyak  digemari  oleh kalangan masyarakat yang  digunakan sebagai    pelengkap  dalam  menyantap makanan seperti bakso, aneka gorengan, mie ayam dan lain sebagainya.  Penambahan  rhodamin  B pada saus tomat dalam jumlah sedikit sudah memberikan warna merah yang cerah  pada  saus  tomat.  Penggunaan rhodamin  B  pada  makanan  dalam waktu yang lama akan dapat mengakibatkan  gangguan  fungsi  hati maupun  kanker.  Namun  demikian bila  terpapar  rhodamin  B  dalam jumlah  besar  dalam  waktu  singkat akan terjadi  gejala  akut  keracunan rhodamin B.
Pemilihan lokasi dalam pengambilan  sampel  ini  adalah  pasar pagi.  Pasar  pagi  dipilih  karena merupakan  salah  satu  pasar  yanga cukup  besar  di  Samarinda  yang menjual  aneka  macam  kebutuhan salah satunya adalah saus tomat. saus tomat  yang  digunakan  adalah  saus tomat yang memiliki nomor registrasi BPOM  (Badan  Pengawas  Obat  dan
Makanan)  dan  nomor  registrasi  PIRT (Pangan  Industri  Rumah  Tangga). Tidak  menutup  kemungkinan  bahwa saus  tomat  yang  sudah  memiliki nomor  registrasi  BPOM  dan  Dinas Kesehatan  yaitu  PIRT  aman  dari  zat warna berbahaya seperti rhodamin  B. Maka sangat penting dilakukan penelitian  ini  untuk  mengetahui  ada atau  tidaknya  pewarna  rhodamin  B, mengingat  rhodamin  B  merupakan pewarna  tekstil  yang  tidak  boleh dicampurkan pada produk pangan.
METODE PENELITIAN 1. Alat dan Bahan
a. Alat penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  aluminium foil,  batang  pengaduk,  beaker glass,  cawan  porselin,  corong, chamber, erlenmeyer, gelas ukur  10  ml,  gelas  ukur  50  ml, gelas  ukur  100  ml,  hot  plate, kertas saring, lempeng silika gel GF 254 , pipa kapiler, rak tabung, spatel, tabung reaksi dan timbangan analitik.
b. Bahan penelitian
Bahan-bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah aquades,  asam  klorida  pekat
(HCl), asam sulfat pekat
(H 2 SO 4 ), asam asetat (CH 3 COOH), ammoniak (NH 4 OH) 10%, ammoniak
(NH 4 OH) 2%, etil asetat, etanol
96%,  etanol  70%,  natrium hidroksida  (NaOH)  10%,  N- butanol, rhodamin B dan sampel saus tomat.
2. Prosedur Penelitian
Pembuatan Ekstrak Sampel
a) Ditimbang
10 g sampel
ditambahkan  10  ml  ammoniak (NH 4 OH)  2%  (yang  dilarutkan dalam  etanol  70%)    dikocok  lalu diamkan selama 30 menit.
b) Disaring  larutan  menggunakan kertas saring, hasil filtrat
dituangkan kedalam cawan kemudian  dipanaskan  diatas  hot plate.
c) Dilarutkan  hasil  residu  dalam  10 ml  air  yang  mengandumg  asam. Larutan  asam  dibuat  dengan mencampurkan 10 ml air ditambahkan  5  ml  asam  asetat 10%.
d) Dimasukkan benang wol kedalam larutan asam dan didihkan hingga 10 menit.
e) Diangkat  benang  wol,  kemudian dibilas dengan  ammoniak  2%
sebanyak 10 ml dan memanaskan hingga warna tertarik pada benang  wool.  Larutan  ini  yang digunakan untuk uji reaksi warna dan  kromatografi  lapis  tipis (Rusmalina dan Metha, 2015).
Pembuatan Baku Pembanding
a) Ditimbang  25  mg  rhodamin  B, kemudian  masukkan  ke  dalam erlenmeyer.
b) Ditambahkan  25  ml  etanol    96% dikocok hingga homogen. Ditutup dengan aluminium foil.
Identifikasi Sampel
a. Uji reaksi warna
a) Dimasukkan  sampel  sebanyak  1 ml kedalam 4 tabung reaksi.
b) Dimasukkan  baku  pembanding rhodamin  B  kedalam  tabung reaksi yang berbeda sebagai baku pembanding.
c) Ditambahkan pereaksi HCl pekat,
H 2 SO 4 pekat,  NaOH  10%,  dan NH 4 OH  10%  kedalam  masing- masing  tabung,  amati  perubahan warna yang terjadi dan disesuaikan  dengan  warna  baku pembandingnya  yaitu  rhodamin
B (Cahyadi, 2006).
b. Uji kromatografi lapis tipis
a) Disiapkan  pelat  silika  gel  GF 254
dengan ukuran 2x10 cm, kemudian  diberi  batas  pada masing-masing  bagian.  Bagian bawah  1,5  cm  dan  atas  0,5  cm dan  jarak  1  cm  untuk  penotolan sampel.
b) Plat  diaktivasi terlebih  dahulu
didalam  oven  pada  suhu  100 o C selama 30 menit (Sastrohamidjojo, 2002).
c) Disiapkan eluen  sebanyak 20 ml yaitu campuran antara etil asetat : N-butanol  :  ammoniak  10% dengan  perbandingan  (20  :  55  : 25).
d) Dimasukkan eluen kedalam chamber, kemudian lakukan penjenuhan  didalam chamber menggunakan kertas saring tunggu  hingga  eluen  mencapai batas atas kertas saring.
e) Ditotolkan sampel uji
menggunakan  pipa  kapiler  pada plat  silika  gel  GF 254 ,  kemudian masukkan  plat  kedalam  chamber yang  telah  dijenuhkan.  Tunggu hingga eluen mencapai batas atas pada plat silika gel.
f) Dikeluarkan  plat  dari  dalam chamber lalu dikeringkan dengan cara  diangin-anginkan,  diamati dibawah  sinar  UV  pada  panjang gelombang 254 nm dan 366 nm.
g) Dihitung  nilai  Rf  pada  bercak sampel.

## Analisis Data
Analisis data yang
digunakan  bersifat  deskriptif.  Pada penelitian, identifikasi warna
menggunakan reagen yang menghasilkan  warna  sesuai  dengan standar  (rhodamin  B)    dan  nilai  Rf yang  dibandingkan  dengan  nilai  Rf standar (rhodamin B).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  termasuk  jenis penelitian noneksperimental yang pengambilan  sampelnya  dilakukan dengan  cara Purvosive  sampling dimana pengambilan sampel berdasarkan  pertimbangan  tertentu dari  peneliti.  Total  sampel  yang digunakan pada penelitian ini sebanyak 5 sampel yaitu 4 saus tomat yang memiliki nomor registrasi PIRT dan  1  saus  tomat  yang  memiliki nomor  registrasi  BPOM  yang  semua sampel  diperoleh  di  Pasar  Pagi
Samarinda. Penelitian ini
menggunakan  dua  metode  dalam
mengidentifikasi  sampel  yaitu  uji
reaksi  warna  dan  kromatografi  lapis tipis. Tabel 1. Hasil identifikasi rhodamin B dengan uji reaksi warna Nama sampel NaOH 10% NH 4 OH 10% H 2 SO 4 pekat HCl pekat Keterangan Kontrol Positif Merah berpendar Merah berpendar Merah Merah Positif Kontrol Negatif Bening Bening Bening Bening Negatif A Bening Jingga lemah Merah pekat Merah Negatif B Kuning Jingga Kecoklatan Merah Negatif C Jingga lemah Jingga lemah Jingga lemah Jingga lemah Negatif D Jingga lemah Jingga lemah Jingga lemah Jingga lemah Negatif E Kuning Kuning Kuning Kuning kehijauan Negatif Berdasarkan  hasil  uji  reaksi warna  sampel  A,  B,  C,  D  dan  E menunjukkan  bahwa  sampel  tidak mengandung  rhodamin  B.  Hasil  ini akan dipertegas lagi dengan menggunakan  metode  kromatografi lapis tipis, identifikasi dengan metode kromatografi lapis tipis (KLT)
merupakan salah satu teknik pemisahan  senyawa  dengan  prinsip kerja yaitu  memisahkan  sampel berdasarkan perbedaan kepolaran antara  sampel  dengan  eluen  yang digunakan.  Semakin  dekat  kepolaran antara  sampel  dengan  eluen  maka
sampel  akan  semakin  terbawa  oleh eluen.
Pada pengerjaan kromatografi  lapis  tipis  fase  gerak yang  digunakan  yaitu  etil  asetat  :  N- butanol : ammoniak dengan perbandingan  (20:55:25)  dan  fase diam yang digunakan plat KLT (silica gel  F 254 )  yang  berukuran  2  x  10  cm. Plat  KLT  diaktifkan  terlebih  dahulu pada  suhu  100 0 C  selama  30  menit didalam  oven  untuk  mengaktifkan padatan penyerap dan untuk mengurangi molekul-molekul air dalam plat silika gel.
Chamber  dijenuhkan  dengan menggunakan  kertas  saring,  proses penjenuhan  bertujuan  agar  uap  dari larutan eluen terdistribusi merata pada seluruh  bagian  chamber  sehingga proses pergerakan bercak dapat berlangsung optimal. Plat KLT (silica gel  F 254 )  yang  telah  diaktifkan dilakukan penotolan dengan menggunakan  pipa  kapiler  jarak sampel  1  cm  tunggu  hingga  bercak
penotolannya  kering,  kemudian  plat dimasukkan  kedalam  chamber  yang telah  dijenuhkan  tutup  rapat  chamber dan  biarkan  hingga  eluen  mencapai batas  atas  plat.  Warna  bercak  pada plat  KLT  dilihat  secara  visual, menggunakan  sinar  UV  254  nm  dan sinar  UV  366  nm.  Setelah  itu dilakukan  perhitungan  nilai  Rf  dari masing-masing sampel.
Tabel 2. Hasil identifikasi sampel dengan metode  kromatografi lapis tipis
Sampel Warna bercak Nilai Rf Keterangan Rhodamin B Merah muda 0,8 - A Merah tua 0,46 Negatif B Merah tua 0,46 Negatif C Merah tua 0,4 Negatif D Merah tua 0,5 Negatif E Merah muda 0,78 Positif Hasil identifikasi menggunakan kromatografi lapis tipis yang  telah  diamati  dan  dihitung  nilai
Rf  dari  kelima  sampel  yang  diuji terdapat  satu  sampel  yang  dicurigai mengandung pewarna sintetik rhodamin B  yaitu pada sampel E, hal ini  dapat  dilihat  dari  warna bercak pada  sinar  UV  254  nm  berwarna merah  muda  mirip  dengan  warna bercak  pada  baku  rhodamin  B  yang berwarna  merah  muda.  Nilai  Rf  pada sampel  E  setelah  dihitung  memiliki
nilai  Rf  yang  sama  dengan  kontrol positifnya  yaitu  rhodamin  B  dan mempunyai  nilai  Rf  ± 0,02  dari  nilai Rf  rhodamin  B.  Hasil  penelitian  oleh Ari  (2008)  mengenai  identifikasi rhodamin B pada sirup yang dijual di pasar  besar  Seruyan  mengatakan bahwa sampel dapat dikatakan positif apabila  mempunyai  nilai  Rf  ±  0,02 dari  Rf  baku,  artinya  selisih nilai  Rf masih  dianggap  sama  di  antara kisaran  ±  0,02  dari  nilai  Rf  baku. Sedangkan  pada  sampel  A,  B,  C  dan
D tidak mengandung pewarna sintetik rhodamin  B  hal  ini  dapat  diketahui warna  bercak  sampel  yang  diperoleh tidak sama dengan warna bercak baku rhodamin  B  dan  nilai  Rf  sampel dengan baku rhodamin B tidak sama.
Berdasarkan  hasil  penelitian identifikasi  rhodamin  B  pada  saus tomat  menunjukkan  dari  kelima sampel  hanya  satu  sampel  yang dicurigai mengandung pewarna
sintetik  rhodamin  B,  hal  ini  berbeda dengan hasil identifikasi
menggunakan  uji  reaksi  warna  yang menunjukkan  kelima  sampel  tidak mengandung  rhodamin  B  sedangkan uji kromatografi lapis
tipis
menunjukkan  satu  sampel yaitu sampel E positif mengandung rhodamin  B.  Terjadinya  perbedaan hasil  pada  uji  reaksi  warna  dan kromatografi  lapis  tipis  dikarenakan pada  uji  reaksi  warna  ini  sampel masih terdapat senyawa lain sehingga tidak  dapat  terdeteksi.  Hasil  tersebut dipertegas  dengan  uji  kromatografi lapis  tipis,  dimana  kromatografi  lapis tipis  mempunyai  kemampuan  sangat baik  dalam  memisahkan  senyawa berdasarkan tingkat kepolarannya.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan  dari  lima  sampel  (A,  B, C, D dan E) saus tomat  yang beredar di  Pasar  Pagi  Samarinda  dengan nomor  registrasi  PIRT  dan  BPOM hanya sampel E yang diduga mengandung pewarna sintetik rhodamin B.

## DAFTAR PUSTAKA
Cahyadi,  W.  2006.  Bahan  Tambahan Pangan.  Jakarta:  PT  Bumi Aksara.
Eka,  R.  2013.  Rahasia  Mengetahui Makanan  Berbahaya.  Jakarta:
Titik Media Publisher.
Peraturan  Menteri  Kesehatan  RI  No.
033 Tahun 2012 Tentang Bahan Tambahan Pangan. Jakarta: Permenkes RI. Rohma,  N.K.,  dan  Handayani  S. 2013.”Kajian Keamanan Pangan  Pentol  Cilok  Di  Desa Blawirejo Kecamatan Kedungpring Lamongan”. Skripsi.  Surabaya: Universitas
Negeri Surabaya. Hal: 58.
Rusmalina  S,  dan  Metha,  A.A. 2013."Identifikasi  Rhodamin  B Dalam  Saus  Sambal  Yang Beredar  Di  Kota  Pekalongan”.
Skripsi. Pekalongan: Universitas Pekalongan. Hal: 43 Sastrohamidjojo, H. 2002. Kromatografi  Ed.  II  Cet.  III, Yogyakarta: Liberty Yogyakarta. Hal: 34-37. Yuliarti,  N.  2007.  Awas  Bahaya  di Balik Lezatnya Makanan. Yogyakarta: Penerbit Andi.