## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL RIMPANG TEMU GIRING (CURCUMA HEY NEANA VAL.) TERHADAP PERTUMBUHAN ESCHERICHIA COLI SECARA IN VITRO
Submitted : 20 April 2015 Edited : 10 Mei 2015 Accepted : 20 Mei 2015
Aditya Maulana Perdana Putra, Rustifah, Muhammad Arsyad Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin E-mail : aditya.maulana.pp@mail.ugm.ac.id

## ABSTRACT
Infection is a major problem that the world's attention. Infectious diseases have caused the death of over  13  million  people  worldwide  every  year,  particularly  in  the  developing  countries  such  as  Indonesia. One  of  the  species  of  bacteria  that  cause  infections  are  Escherichia  coli.  Curcuma  heyneana  rhizome (Curcuma heyneana Val.) is a plant that is often used as a traditional medicine to antibacterial. This study was  intended  to  determine  the  antibacterial  inhibition  activity,  and  minimum  inhibitory  concentrations (MIC) from the usage of an ethanol extract in the curcuma heyneana rhizome (Curcuma heyneana Val.) for the growth of an Escherchia coli by in vitro.
Curcuma  heyneana  rhizome  (Curcuma  heyneana  Val.)  was  extracted  using  maseration  method with solvent ethanol. Each extracts identified the active compounds group consisting of flavonoids, saponins, curcumin, volatile oil, and tannins. This study was an experimental laboratoric by using the diffusion method with discs blank with 10  treatment groups concentration which are 100%, 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,12%, 1,56%, 0,78%, positive control and negative control with three repetitions.
The  phytochemical  screenings  analysis  showed  curcuma  heyneana  rhizome  (Curcuma  heyneana Val.) of ethanol extract containing flavonoids, saponins, curcumin, volatile oil, and tannins. Ethanol extract in the curcuma heyneana rhizome (Curcuma heyneana Val.) had an effectiveness in inhibiting the growth of an Escherchia  coli by in  vitro. Minimum  inhibitory  concentrations  (MIC)  from the  usage  of  an  ethanol extract in the curcuma heyneana rhizome (Curcuma heyneana Val.) for the growth of an Escherchia coli by in vitro is 12,5% with average inhibition zone 9,77 mm. The results showed that the ethanol extract curcuma heyneana rhizome (Curcuma heyneana Val.) had an effectiveness in inhibiting the growth of an Escherchia coli, it showed inhibition zone diameter due to higher concentrations of the resistance is increasing. Analysis of  the  test  data  with  Kruskal-Wallis  (sig)  =  0,001  which is smaller than  α  < 0,05.  It  means that  there  are significant  differences  in  the  average  diameter  of  an  each  concentration  of  ethanol  extract  of  curcuma heyneana rhizome in inhibiting (Curcuma heyneana Val.) the growth of Escherchia coli by in vitro.
K eywords : Antibacterial,  Curcuma  heyneana  rhizome  (Curcuma  heyneana  Val.),  Minimum  inhibitory concentrations.

## PENDAHULUAN
Infeksi  merupakan  masalah  besar  yang menyedot  perhatian  dunia.  Penyakit  infeksi  telah menyebabkan  kematian  sebesar  13  juta  orang  di seluruh  dunia  setiap  tahun,  terutama  di  negara- negara yang sedang berkembang seperti
Indonesia. Salah  satu  dari  spesies  bakteri penyebab infeksi adalah
Escherichiacoli.Escherichia coli merupakan bagian  dari  flora  saluran  cerna  yang  normal  pada manusia,  tetapi  juga  merupakan  penyebab  umum infeksi  saluran  kemih,  diare,  dan  penyakit lainnya 1 . Sebuah penelitian di India
mengemukakan  bahwa  sejumlah  obat  antibakteri
yang  mulai  resisten  terhadap  jenis  bakteri  ini. Menurut  Okoli 2 melakukan  penelitian  resistensi bakteri Escherichia coli pada beberapa antibakteri, dengan cara memberi antibakteri pada ayam  yang  diinfeksi  oleh Escherichiacoli. Hasilnya  menunjukkan  bahwa  bakteri  ini  sudah cukup resisten terhadap ampicillin, cotrimoxazole, dan nalidixic acid. Beda lagi menurut Olson dkk. 3 yang meneliti resistensi antibakteri pada Escherichiacoli yang diisolasi dari urin. Mahasiswi  dengan  riwayat  infeksi  saluran  kemih 11,8%  resistensi  terhadap  ciprofloxacin  dan sebanyak 1.8% yang resisten terhadap
ciprofloxacin  tanpa  riwayat    infeksi  saluran kemih.
Temu  giring  (Curcuma  heyneana Val.) banyak  ditemukan  tumbuh liar  di  hutan-hutan kecil  atau  peladangan  dekat  rumah  penduduk, terutama di kawasan Jawa Timur 4 . Rimpang temu giring  (Curcuma  heyneanaVal.)  mengandung senyawa  kurkumin  yang  dapat  memberi  warna kuning,  minyak  atsiri  0,8-3%,  amilum,  damar, lemak, tanin, saponin dan flavonoid 5 . Berdasarkan hasil  penelitian  Meilisa 6 formulasi  dalam  sediaan kapsul  dari  ekstrak  etanol rimpang  temu  lawak (Curcuma  xanthorrhiza, Roxb.)  yang  memiliki suku  yang  sama  dengan rimpang  temu  giring (Curcuma  heyneana Val.)  yaitu Zingiberaceae
mengadung  senyawa  diantaranya  kurkumin, saponin,  flavonoid  dan  minyak  atsiri  yang berkhasiat menghambat pertumbuhan Escherichia coli.Berdasarkan  uraian  di  atas  peneliti  tertarik untuk  melakukan  penelitian  uji  daya  hambat ekstrak  etanol  rimpang  temu  giring  (Curcuma heyneana Val.) terhadap pertumbuhan Escherichia coli. Rumusan masalah pada penelitian  ini  yaitu  “ Apakah  ekstrak  etanol rimpang  temu  giring (Curcuma  heyneana Val.) memiliki aktivitas daya hambat terhadap pertumbuhan Escherichia  coli ?” dan  “Berapa Konsentrasi  Hambat  Minimum    (KHM)  ekstrak etanol  rimpang  temu  giring (Curcuma  heyneana Val.) terhadap pertumbuhan Escherichia coli ?”

## BAHAN DAN METODE

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  bejana  untuk  maserasi, Paper  disc/ Cakram,  inkubator,  pipet  volume,  jarum  ose, lampu  bunsen,  autoklaf,  cawan  petri,  gelas  ukur, timbangan  analitik,  pinset, pelekat  label,  pisau, tabung  reaksi,  mikro  pipet,  waterbath,hot  plat, luminary air flow.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah rimpang  temu  giring,  aquades  steril, media  mueller  hinton,  eEtanol  96  %,  biakan Esherichia  coli,  paper  disk  kosong,  seftriakson, HCl pekat, serbuk Mg, FeCl 3 , H 2 SO 4 pekat, asam borat, kalium bikromat.

## Jenis Penelitian
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimental. Penelitian  ini  dimulai  pada  bulan Maret  sampai  Juni  2014.Penelitian  ini  dilakukan di Laboratorium  Farmakognosi  dan  Biologi Akademi
Farmasi ISFI Banjarmasin, Laboratorium  FKIP  MIPA  Universitas  Lambung Mangkurat Banjarmasin, Laboratorium Farmakognosi  dan  Fitokimia  FMIPA  Universitas Lambung Mangkurat Banjarbaru dan Laboratorium Bakteriologi Balai Veteriner Banjarbaru.

## Metode Pengumpulan Sampel
Temu  giring  (Curcuma  heyneana Val.) yang diambil dari Desa Pengaron dideterminasi di Laboratorium  Biologi  FKIP  MIPA  Universitas Lambung Mangkurat Banjarmasin.

## Ekstraksi Rimpang Temu Giring
Temu  giring  yang  sudah  di  ambil kemudian  di  keringkan.  Temu  giring  yang  sudah
kering  tersebut  kemudian  diekstraksi  dengan metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%. Merendam  serbuk  simplisia  rimpang  temu  giring selama 6 jam pertama sambil sekali-sekali diaduk, kemudian diamkan selama 18 jam.Lakukan proses penyaringan  menggunakan  kertas  saring  untuk memisahkan  maserat  dengan  ampas.Mengulangi proses penyarian sampai sekurang-kurangnya dua kali  dengan  jenis  dan  jumlah  pelarut  yang  sama hingga kandungan pada simplisia tertarik semua.Proses  penyarian  dikatakan  selesai  jika warna  pelarut  yang  digunakan  kembali  seperti semula.Mengumpulkan  semua  maserat  kemudian menguapkannya  dengan  menggunakan vacum rotary  evaporator.  Setelah  maserat  diuapkan dengan vacum  rotary  evaporator,  diuapkan kembali  dengan water  bath untuk  memperoleh ekstrak kental rimpang temu giring.

## Skrining Fitokimia
Sebelum  dilakukan  pengambilan  data penelitian,  dilakukan skrining  fitokimia. Skrining fitokimia yang dilakukan yaitu skrining flavonoid, saponin, tanin, kurkumin, dan minyak atsiri.

## Pembuatan Media Mueller Hinton
Timbang Mueller Hinton Agar sebanyak 34  gram,  kemudian  campurkan  dengan  aquadest sampai  1000  ml  dalam  beker  glass,  aduk  sampai larut.  Larutan  tersebut  kemudian  disterilkan  di autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit 7 .
Pembuatan  ekstrak  etanol  Rimpang  Temu iring
Konsentrasi  ekstrak  etanol  rimpang temu  giring yang  digunakan yaitu  100%,  50%, 25%,  12,5%,  6,25%,  3,12%,  1,56,  dan  0,78%. Kontrol positifyaitu seftriakson  dengan  dosis  200 mg yang  dilarutkan  dalam  200  ml  aquades  steril. Kontrol negatif yaitu aquades steril.

## Prosedur Uji Daya Hambat
Masukkan  15  mL  media  ke  dalam cawan  petri  bersama  1  mL  suspensi E.coli. Homogenkan biakan bakteri dengan cara memutar ke  kanan  dan  ke  kiri  lalu  diamkan  sampai  padat. Kertas  cakram  di  celupkan  ke  dalam  berbagai ekstrak etanol rimpang temu giring, kontrol positif dan  kontrol  negatif.  Letakkan  cakram  di  atas media  agar.  Kemudia  inkubasi  selama  24  jam pada  suhu  37 o C.  Setelah  24  jam  amati  dan  ukur diameter zona hambat. Lakukan replikasi 3 kali. Analisis Data
Data  yang  diperoleh  diameter  zona hambat  yang  didapat  dari berbagai  perlakuan dan di  sajikan  dalam  bentuk  tabel.  Data tersebut  diuji untuk  melihat  diameter  data  terdistribusi  normal dan  homogen  dengan uji  Normality  dan  Uji Homogeinity. Jika data yang diperoleh terdistribusi  normal  dan  homogen  di  uji  dengan uji  parametrik  One  Way  Anova  dilanjutkan dengan  Post-Hoc  Analysis.  Jika  data  yang diperoleh  salah  satunya  tidak  terdistribusi  normal dan  homogen  di  uji  dengan  uji  Non  parametrik Kruskal  Wallis  dilanjutkan  denganuji  Mann Whitney.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Rimpang  Temu Giring
Bahan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  temu  giring (Curcuma heyneana Val.). Bagian tanaman temu giring yang digunakan  adalah  bagian  rimpangnya  yang  sudah tua  atau  berumur  8-10  bulan 8 ,  dimana  proses metabolisme telah sempurna sehingga diharapkan kandungan zat aktifnya juga maksimal. Pembuatan  ekstrak  etanol  rimpang  temu  giring dilakukan  dengan  metode  maserasi.  Pemilihan metode  maserasi  karena  dapat  menarik  senyawa- senyawa  yang  berkhasiat,  baik  yang  tahan pemanasan  maupun  yang  tidak  tahan  pemanasan. Selain  itu  pengerjaan  dan  peralatan  yang digunakan dalam metode maserasi  sederhana dan
mudah diusahakan.Hasil ekstraksi maserasi menunjukkan  bahwa  tanaman  rimpang  temu giring dengan berat simplisia 1000g menghasilkan ekstrak  kental  dengan  rendemen  sebesar  11,04%. Hal  tersebut  sesuai  dengan  teori  bahwa  rimpang temu  giring  menghasilkan  ekstrak  dengan rendemen lebih dari 8% 9 .
Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Rimpang Temu Giring
Skrining fitokimia merupakan uji kualitatif  untuk  mengetahui  adanya senyawa flavonoid,  saponin,  tanin,  kurkumin  dan  minyak atsiri  dalam  ekstrak  kental  rimpang  temu  giring. Hasil skrining fitokimia untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada tabel 1 di bawah.
Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia No. Pengujian Hasil Keterangan 1. Flavonoid Sampel + HCl pekat + serbuk Mg + Jingga dan Hijau 10 2. Saponin Sampel + aquadest kocok selama 10 menit + HCl 2 N + Buih setinggi 3 cm + HCl 2 N, buih tidak hilang 11 3. Tanin
Sampel + FeCl 3 0,5 M + H 2 SO 4 pekat +
Biru kehitaman, + H 2 SO 4 pekat endapan
coklat 12 4. Kurkumin Sampel + asam borat + Kompleks warna merah 13 5. Minyak Atsiri Sampel diuapkan sampai kering + etanol uapkan lagi sampai kering + Berbau khas 14 Selain skrining fitokimia juga dilakukan identifikasi keberadaan etanol, karena dikhawatirkan ekstrak kental rimpang temu giring masih mengandung etanol yang dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  sehingga  akan mempengaruhi hasil uji.Pada identifikasi keberadaan  etanol  dalam  ekstrak,  tidak  tercium aroma  etanol  yang  spesifik,  hanya  tercium  bau rimpang  temu  giring.    Penambahan  kalium bikromat dan asam sulfat pekat akan memberikan
warna  hijau  menunjukkan  hasil  positif.  Reaksi oksidasi  alkohol  dengan  kalium  bikromat  dan asam sulfat pekat akan menghasilkan warna hijau dari  ion  Cr 3+ 15 .  Ekstrak  yang  telah  ditambahkan kalium  bikromat  dan  asam  sulfat  pekat  tidak memberikan  warna  hijau  (ekstrak  tetap  berwarna kuning  jingga),  hal  ini  menunjukkan bahwa ekstrak  kental  rimpang  temu  giring  sudah  tidak mengandung etanol.

## Uji Daya Hambat Antibakteri
Pengujian  daya  hambat  antibakteri  pada Esherichia  coli secara in  vitro dilakukan  dengan metode  difusi  cakram  yaitu  penentuan  daya hambat  antibakteri  dilihat  berdasarkan  diameter zona  hambat  yang  muncul  disekitar  cakram  yang berisi zat antibakteri. Setelah diinkubasi, diameter zona hambat jernih yang mengelilingi cakramdiukur sebagai nilai kekuatan hambat obat terhadap  bakteri  uji.  Artinya  semakin  luas  zona hambat  yang  terbentuk  menunjukkan  semakin efektif zat tersebut sebagai antibakteri.
Uji  daya  hambat  ini  dilakukan  pada  10 kelompok  uji  yang  terdiri  dari  ekstrak  rimpang temu  giring  dengan  berbagai  konsentrasi  (100%, 50%,  25%,  12,5%,  6,25%,  3,12%,  1,56%  dan 0,78%),  kontrol  positif  (seftriakson  30µg)  dan kontrol  negatif  (aquadest).Pada  penelitian  ini replikasi dilakukan sebanyak 3 kali, sehingga data yang  diperoleh  sebanyak  30  data  diameter  zona hambatan.Hasil  uji  daya  hambatekstrak  dengan variasi konsentrasi dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Dengan Berbagai Konsentrasi
Konsentrasi Ekstrak %b/v Diameter Zona Hambat (mm) Disk 1 Disk 2 Disk 3 Rata-rata 100% 14,4 15,0 15,5 14,97 50% 14,0 14,1 14,1 14,07 25% 12,5 12,4 12,5 12,47 12,5% 9,8 9,8 9,7 9,77 6,25% 8 8 8 8 3,12% 8 8 8 8 1,56% 8 8 8 8 0,78% 8 8 8 8 Kontrol Positif (Seftriakson) 31,3 31,1 31,5 31,3 Kontrol Negatif (Aquadest) 8 8 8 8
Hasil uji daya hambat antibakteri ekstrak rimpang  temu  giring  terhadap Escherichia  coli (Tabel 2) menunjukkan bahwa konsentrasi 100%, 50%, 25% dan 12,5% memberikan diameter zona hambat,  sedangkan  konsentrasi  6,25%,  3,12%, 1,56% dan 0,78% tidak memberikan zona hambat disekitar paper disk.. Tabel diatas memperlihatkan bahwa  diameter  zona  hambat  tertinggi  diperoleh pada  konsentrasi  100%.  Kenaikan  diameter  zona hambat  berbanding  lurus  dengan  konsentrasi. Semakin  besar  konsentrasi  maka  diameter  zona hambat  yang  dihasilkan  juga  semakin  besar.  Hal ini  disebabkan  karena  kuantitas  komponen  aktif yang  bersifat sebagai  antibakteri  semakin  banyak dengan  semakin  tingginya  konsentrasi  ekstrak, sehingga  kemampuannya  dalam  menghambat pertumbuhan Escherichia coli juga semakin besar.
Menurut  Kurniawan 16 dalam Hidayati 17 menyatakan  bahwa  bila  kecepatan  daya  hambat antibakteri  dari  sampel  ke  dalam  medium  lebih rendah  dari  pada  kecepatan  pertumbuhan  bakteri, maka peningkatan konsentrasi tidak akan
meningkatkan  penghambatan  pada  pertumbuhan. Saat  tingkat  konsentrasi  ekstrak  rimpang  temu giring  tinggi,  ekstrak  tersebut  akan  menjadi kental, membuat laju difusi senyawa aktif menjadi berkurang. Oleh karena itu pada konsentrasi 100% dan  50%  diameter  zona  hambat  rata-rata  yang diperoleh memiliki perbedaan yang sangat sedikit dibandingkan dengan konsentrasi 50% dan 25%.

## Analisis Data
Data  diameter  zona  hambat  yang diperoleh  dari  berbagai  kelompok  perlakuan dilakukan  analisis  normalitas  dan  homogenitas untuk  menentukan  uji  yang  digunakan  apakah parametrik  atau  non  parametrik.Uji  normalitas data dilakukan dengan uji Shapiro-Wilk karena uji Shapiro-Wilk  digunakan  untuk    sampel  yang jumlahnya  sedikit  (kurang  atau  sama  dengan  50) (Dahlan, 2013). Pada uji Shapiro-Wilk didapatkan signifikansi  <  0,05  maka  diambil  kesimpulan bahwa  distribusi  data  tidak  normal.  Hasil  uji normalitas bisa dilihat pada tabel 3 di bawah.
Tabel 3. Uji Normalitas Konsentrasi Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Diameter Zona Hambat 100% 0,997 3 0,900 50% 0,750 3 0,000 25% 0,750 3 0,000 12,5% 0,750 3 0,000 Kontrol Positif 1,000 3 1,000
Selanjutnya  data  diuji  homogenitasnya dengan menggunakan Levene Test, diperoleh nilai signifikansi  <  0,05  (0,005)  yang  menyatakan bahwa  distribusi  data  tidak  homogen.Menurut Dahlan  (2013) syarat  melakukan  uji  ANOVA untuk  >2  kelompok  tidak  berpasangan    adalah distribusi  data  harus  normal  dan  varians  data harus sama. Sedangkan data yang diperoleh tidak terdistribusi  normal  dan  tidak  homogen.  Jika variabel  hasil  tidak  terdistribusi  normal  atau varians  tidak  sama,  maka  alternatifnya  dipilih Kruskal-Wallis.
Data  diuji  dengan  Kruskal-Wallis  untuk mengetahui  apakah  terdapat  perbedaan  antara kelompok perlakuan. Uji Kruskal-Wallis diperoleh nilai < 0,05 (0,001) sehingga H 0 ditolak dan  H 1 diterima  (Lampiran  15),  yang  berarti terdapat  aktivitas  daya  hambat  ekstrak  etanol rimpang temu giring (Curcuma heyneana Val.)terhadap  pertumbuhan Escherichia  coli. Maka  dapat  diambil  kesimpulan  bahwa  terdapat perbedaan  diameter  zona  hambat  diantara  10 kelompok perlakuan. Ringkasan hasil uji Kruskal-
Wallis dapat dilihat pada tabel 4. Tabel 4. Ringkasan Hasil Uji Kruskal-Wallis Diameter Zona Hambat Chi-Square 28.875 Df 9 Asymp.Sig. 0,001
Menurut  Dahlan  (2013)  Mann-Whitney  U Analysis  digunakan  untuk  menentukan  pada kelompok mana terdapat perbedaan yang bermakna  antar  kelompok  perlakuan  dari  uji  non parametrik.  Berikut  ringkasaan  hasil  Mann- Whitney U Analysis : Tabel 5. Ringkasan Hasil Analisis Mann-Whitney U
K el om pok U ji
Nilai Signifikansi 100 % 50% 25% 12,5 % 6,25 % 3,12 % 1,56 % 0,78 % Kontrol Positif Kontro l Negati f 100% - 0,046 0,046 0,046 0,037 0,037 0,037 0,037 0,050 0,037 50% 0,04 6 - 0,043 0,043 0,034 0,034 0,034 0,034 0,046 0,034 25% 0,04 6 0,043 - 0,043 0,034 0,034 0,034 0,034 0,046 0,034 12,5% 0,04 6 0,043 0,043 - 0,034 0,034 0,034 0,034 0,046 0,034 6,25% 0,03 7 0,034 0,034 0,034 - 1,00 1,00 1,00 0,037 1,00 3,12% 0,03 7 0,034 0,034 0,034 1,00 - 1,00 1,00 0,037 1,00 1,56% 0,03 7 0,034 0,034 0,034 1,00 1,00 - 1,00 0,037 1,00 0,78% 0,03 7 0,034 0,034 0,034 1,00 1,00 1,00 - 0,037 1,00 Kontro l Positif 0,05 0 0,046 0,046 0,046 0,037 0,037 0,037 0,037 - 0,037 Kontro l Negatif 0,03 7 0,034 0,034 0,034 1,00 1,00 1,00 1,00 0,037 - Data  diuji  dengan  Kruskal-Wallis  untuk mengetahui  apakah  terdapat  perbedaan  antara kelompok perlakuan. Uji Kruskal-Wallis diperoleh nilai < 0,05 (0,001) sehingga H 0 ditolak
dan  H 1 diterima,  yang  berarti  terdapat  aktivitas daya  hambat  ekstrak  etanol  rimpang  temu  giring (Curcuma  heyneana Val.)terhadap  pertumbuhan Escherichia coli. Maka dapat diambil kesimpulan
bahwa  terdapat  perbedaan  diameter  zona  hambat diantara  10  kelompok  perlakuan.  Ringkasan  hasil uji Kruskal-Wallis dapat dilihat pada tabel 6.
Tabel 6. Ringkasan Hasil Uji Kruskal-Wallis Diameter Zona Hambat Chi-Square 28.875 Df 9 Asymp.Sig. 0,001
Menurut  Dahlan 18 Mann-Whitney  U  Analysis digunakan  untuk  menentukan  pada  kelompok mana  terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antar
kelompok  perlakuan  dari  uji  non  parametrik.
Berikut ringkasaan  hasil  Mann-Whitney  U Analysis : Tabel 7. Ringkasan Hasil Analisis Mann-Whitney U
K el om pok U ji Nilai Signifikansi
100 % 50% 25% 12,5 % 6,25 % 3,12 % 1,56 % 0,78 % Kontrol Positif Kontro l Negati f 100% - 0,046 0,046 0,046 0,037 0,037 0,037 0,037 0,050 0,037 50% 0,0 46 - 0,043 0,043 0,034 0,034 0,034 0,034 0,046 0,034 25% 0,0 46 0,043 - 0,043 0,034 0,034 0,034 0,034 0,046 0,034 12,5% 0,0 46 0,043 0,043 - 0,034 0,034 0,034 0,034 0,046 0,034 6,25% 0,0 37 0,034 0,034 0,034 - 1,00 1,00 1,00 0,037 1,00 3,12% 0,0 37 0,034 0,034 0,034 1,00 - 1,00 1,00 0,037 1,00 1,56% 0,0 37 0,034 0,034 0,034 1,00 1,00 - 1,00 0,037 1,00 0,78% 0,0 37 0,034 0,034 0,034 1,00 1,00 1,00 - 0,037 1,00 Kontrol Positif 0,0 50 0,046 0,046 0,046 0,037 0,037 0,037 0,037 - 0,037 Kontrol Negatif 0,0 37 0,034 0,034 0,034 1,00 1,00 1,00 1,00 0,037 -

## SIMPULAN
Kesimpulan dari penelitian ini yaitu: 1. Ekstrak  etanol  rimpang  temu  giring (Curcuma heyneana Val.)  mempunyai  daya  hambat terhadap  pertumbuhan Escherichia  coli pada konsentrasi  100%,  50%,  25%  dan  12,5% dengan  rata-rata  diameter  zona  hambat 14,97 mm, 14,07 mm,  12,47 mm, dan 9,77 mm
2. Konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  ekstrak etanol rimpang temu giring (Curcuma heyneana Val.) terhadap pertumbuhan Escherichia  coli yaitu  12,5%  dengan  rata-rata diameter zona hambat sebesar 9,77 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Brooks, G.F., Carroll, K.C., Butel, J.S., Morse, S.A., Mietzner, T.A., 2012, Jawetz, Melnick & Adelberg Mikrobiologi Kedokteran Edisi 25, diterjemahkan dari Bahasa Inggris oleh Nugroho, A.W., dkk, EGC, Jakarta, Indonesia.
2. Okoli,  C,  2005,  ‘ Anti  Microbial  Resistence Profile  of  E.  coli  Isolates  from  Tropical  Free  Range Chicken’ ,Online Journal of Health and Allied Sciences, 4 (3): 2, viewed 30 March 2014, Available from: http://www.ojhas.org/issue15/2005-3-3.htm
3. Olson, R.P., Harrel, L.J., Kaye, K.S., 2009, ‘Antibiotic Resistance in Urinary Isolates of Escherichia coli from College Women with Urinary Tract Infections’ American Society For Microbiology, 53 (3): 1285- 1286, viewed 4 March 2014.Available from: http://aac.asm.org/content/53/3/1285.long
4. Muhlisah, F., 2000, Temu-temuan dan Empon-empon Budi Daya dan Manfaatnya, Kinisius, Yogyakarta, Indonesia.
5. Santoso, H.B. 2008, Ragam dan Khasiat Tanaman Obat, Agro Media, Yogyakarta, Indonesia.
6. Meilisa.  2009. Uji  Aktivitas  Antibakteri  dan  Formulasi  Dalam  Sediaan  Kapsul  Dari  Ekstra  Etanol Rimpang  Tumbuhan  Temulawak  (Curcuma  Xanthorrhiza,  roxb)  Terhadap  Beberapa  Bakteri. Medan. Universitas Sumatera Utara.
7. Rahmatillah, M., 2014, ‘ Uji Daya Hambat Perasan Buah Jeruk Siam Banjar (Citrus Reticulata) Terhadap Pertumbuhan’ Karya Tulis Ilmiah, Akademi Farmasi Isfi Banjarmasin.
8. Herawati,  D.,  Nraida,L.,  dan  Sumarno, Cara  Produksi  Simplisia  yang  Baik,  ITB  dan  Seafast  Center, Indonesia.
9. Depkes  RI,  2009, Keputusan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia  Nomor  261/MENKES/SK/IV/2009 tentang  Farmakope  Herbal  Indonesia  Edisi  Pertama,  Jakarta,  Kementerian  Kesehatan  Republik Indonesia.
10. Kristanti,  A.N.,  Aminah,  N.S.,  Tanjung,  M.,  Kurniadi,  B.,  2006, Buku  Ajar  Fitokimia,  Airlangga University Press, Surabaya, Indonesia.
11. Depkes  RI,  1977, Materia  Medika  Indonesia  Jilid  1-4,  Jakarta,  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia.
12. Sulastri,  T.  2009,  Analisis  Kadar  Tanin  Ekstrak  Air  dan  Ekstrak  Etanol pada  Biji  Pinang  Sirih  (Areca cathecu L), Jurnal Chemica, 10: 59-63.
13. Sirait, M. 2007, Penuntun Fitokimia dalam Farmasi, ITB, Bandung, Indonesia.
14. Indriyani,  L.,  Soetjipto,  H.,  Sihasale,  L.,  2006,  ‘Skrining  Fitokimia  dan  Uji  Toksisitas  Ekstrak  Daun Pecut Kuda (Stachytarpheta jamaicensis L. vahl) Terhadap Larva Udang Artemia Salina leach’, Salatiga, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Kristen Satya Wacana.
15. Sulistyawati,  2011, Pemanfaatan  Limbah  Bonggol  Pisang  sebagai  Bahan  Baku  Pembuatan  Bioetanol sebagai Alternatif Energi Terbaru, Yogyakarta, Universitas Negeri Yogyakarta.
16. Kurniawan,  A.,  2006, Pengujian  Aktivitas  Antibakteri  dan  Antioksidan  secara  In  Vitro  pada  Ekstrak Herba  Pegagan  (Centella  asiatica)  Segar,  Ekstrak  Bubuk  Kering  dan  Effervescent  Pegagan,  Skripsi, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya Malang cit.
17. Hidayati, N., 2009, ‘Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kasar Daun Teh ( Camelia Sinesis L, v. assamica) Tua  Hasil  Ekstraksi  Menggunakan  Pelarut  Akuadest  dan  Etanol’,  Skripsi, Universitas  Islam  Negeri Malang, Malang.
18. Dahlan, M., S.,2013, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Salemba Medika, Jakarta.