Efektivitas Guci (Yogurt Ciplukan) Sebagai Sumber Minuman Kaya Antioksidan Alami
(Effectiveness of Guci (Yogurt Ciplukan) as A Source of Beverage of Natural Antioxidant)

## Alwi Agil, Dita Ademulani, A.K. Putri, B.R. Dewi Wulandari
Laboratorium Teknologi dan Hasil Ikutan Ternak Fakultas Peternakan Universitas Mataram Jl. Majapahit No. 62, Mataram 83125, NTB, Indonesia Telepon (0370) 633603. Fax (0370) 640592 e-mail: alwiagil13@gmail.com
Diterima : 4 April 2019/Disetujui : 25 Mei 2019

## ABSTRAK
Physalis  angulata  L. telah  diketahui  memiliki  flavonoid.  Flavonoid  pada  tanaman  dikenal karena aktivitas antioksidannya dan kemampuannya untuk Angiotensin Converting Enzyme I-inhibitor. Penelitian ini dimulai dengan membuat jus menggunakan buah Physalis angulata L. untuk mendapatkan profil senyawa fenolik dalam buah Physalis angulata L. asam galat, flavonol  (kuersetin  dan  rutin),  flavanol  (katekin),  dan  flavanon.  Proses  pembuatan  yogurt dengan penambahan jus buah Physalis angulata L. selama proses penyimpanan. Tujuan dari penelitian  ini  adalah  untuk  mempelajari  kemampuan  aktivitas  antioksidan  dan  inhibitor yoghurt Igiotensin Converting Enzyme I dengan jus buah Physalis angulata L. selama waktu penyimpanan (1, 7, 14, 21 dan 28 hari) pada suhu 4 o C. Aktivitas antioksidan tertinggi terjadi pada periode penyimpanan 14 hari. Yogurt dengan jus buah Physalis angulata L. dapat secara fungsional minum banyak antioksidan.
Kata kunci : Physalis angulata L , Yogurt, Antioksidan

## ABSTRACT
Physalis angulata L. has been known to have flavonoids. Flavonoids in plants are known for their  antioxidant  activity  and  their  ability  to  Angiotensin  Converting  Enzyme  I-inhibitors. This study began with juicing using the fruit juice Physalis angulata L. to obtain a profile of phenolic compounds in the fruit of Physalis angulata L. gallic acid, flavonol (quercetin and routine), flavanol (catechins), and flavanone). The process of making yogurt with the addition of Physalis angulata L. fruit juice during the storage process. The purpose of this study was to  study  the  ability  of  antioxidant  activity  and  inhibitors  of  yoghurt  Igiotensin  Converting Enzyme I with Physalis angulata L. fruit juice during storage time (1, 7, 14, 21 and 28 days) at  4 o C.  The  highest  antioxidant  activity  occurs  in  the  14  day  storage  period.  Yogurt  with Physalis angulata L. fruit juice be able to functional drink a lot antioxidant.
Keyword : Physalis angulata L , Yogurt, Antioxidant

## PENDAHULUAN
Potensi  produksi  susu  kerbau  di Indonesia mencapai 0,5 – 2,25
liter/ekor/hari  pada  kondisi  pemeliharaan suboptimal. Kandungan lemak dan protein susu kerbau lebih baik daripada susu sapi, kaya  akan  kandungan  mineral  penting
seperti kalsium, besi, dan fosfor, kolesterol rendah, dan vitamin A tinggi. Susu kerbau merupakan makanan sehat karena mengandung  zat  bioprotektif  antara  lain imunoglobulin,
laktoferin, lisozim,
laktoperoksidase, dan bifidogenik (Matondang dkk .,  2015).  Kerbau  adalah
ternak penghasil susu paling penting kedua di dunia setelah sapi perah (Coroian dkk ., 2013)  dan  menghasilkan  susu  berkualitas tinggi  (Senosy dkk .,  2013).  Susu  kerbau juga  lebih  kaya  akan  kandungan  mineral penting,  yaitu  Ca  92%,  Fe  38%,  dan  P 118%,  kandungan  kolesterol  lebih  rendah (0,65 mg/g) daripada susu sapi (3,14 mg/g) serta  kandungan  vitamin  A  lebih  tinggi (Febrina, 2010).
Produk  olahan  susu  kerbau  yang umumnya  dikenal  di  Indonesia  adalah dadih yang  berasal  dari  Sumatra  Barat (Wirdahayati,  2007), gula  puan , sagun puan dan minyak samin yang berasal dari Sumatra Selatan (Wirdahayati dkk ., 2003).
Selama  ini  produk  olahan  susu kerbau  dengan  penambahan  sumber  daya alam  lokal  berupa  tanaman,  buah,  daun, maupun  herbal  belum  banyak  diteliti. Salah  satu  penelitian  mengenai  produk olahan  berbasis  susu  kerbau  dengan penambahan  buah  adalah  hasil  penelitian dari  (Wulandani dkk .,  2018)  yaitu  yogurt susu  kerbau  dengan  penambahan  jus blewah  ( Cucumis  melo ).  Penambahan  jus blewah  yang  dilakukan  pada  yogurt  susu kerbau  ternyata  mampu  meningkatkan aktivitas  antioksidan  pada  produk  yogurt yang  dihasilkan  dengan  nilai  IC 50 sebesar 509,413±1,679 pada hari ke-7 penyimpanan  pada  suhu  4 o C.  Disisi  lain terdapat  suatu  buah  lokal  yang  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  cukup  tinggi, yaitu buah ciplukan ( Physalis angulata L. ) dengan  aktivitas  antioksidan  sebesar  84% (pada  konsentrasi  300  μg/ml)  (Lailatul dkk .,  2016).  Buah  ciplukan  sangat  banyak ditemui  diarea  persawahan  maupun  hutan dan  tumbuh  secara  liar.  Selama  ini  buah ciplukan ( Physalis angulata L. ) digunakan masyarakat sebagai obat antidiabetes. Efek antidiabetes  buah  ciplukan  disebabkan karena pada buah ini memiliki kandungan
senyawa  flavonoid  yang  merupakan  salah satu  senyawa  antioksidan  yang  berfungsi mengatasi atau menghambat radikal bebas sehingga  mampu  mencegah  kerusakan  sel tubuh dan timbulnya penyakit degeneratif. Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  dirasa perlu untuk mengkaji mengenai efektivitas yogurt  susu  kerbau  dengan  penambahan buah  ciplukan  sebagai  sumber  minuman kaya antioksidan alami.
Gambar 1. Buah Ciplukan (Sumber: pribadi)

## MATERI DAN METODE
Materi dan Alat- alat Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam  penelitian  ini  berupa  susu  kerbau, ciplukan (Physalis  angulata  L.), 0.1N
Natrium hidroksida (NaOH), 0.1%
phenolphthalein,  Gallic  acid,  Methanol (CH 3 OH),  Ethanol  (C 2 H 5 OH),  Reagent Folin-Ciocalteu, natrium karbonat (Na 2 CO 3 ) 5%, 1,1-Diphenyl-2- Picrylhydrazyl (DPPH), Ethanol (C 2 H 5 OH atau  C 2 H 6 O), Lactobacillus  bulgaricus (FNCC
0041) dan Streptococcus thermophilus (FNCC 0015), Lactobacillus acidophilus,  Bifidobacterium, air, skim bubuk,  gula,  krim  susu,penstabil  nabati, tissue, kertas wrap.
Alat  -  alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  berupa  lemari  es,  botol (berwarna gelap), tabung reaksi, inkubator, wadah  plastik, waterbath , centrifuge , freezer ,  cawan  petri,  tabung  falcon,  gelas piala,  labu  ukur,  pH  meter  digital, spektrofotometer UV-Vis, dan juicer.

## Metode Penelitian
Pembuatan Jus Ciplukan ( Physalis angulata L. ) Proses pembuatan  jus  ciplukan (Physalis  angulata  L.) berdasarkan prosedur kerja El-Karmany dkk ., (2013).
1. Mencuci  dan  mengupas  bagian  kulit ciplukan
2. Memotong-motong  bagian  isi  ( flesh ) ciplukan menjadi bagian-bagian kecil.
3. Memasukkan  potongan-potongan  isi ( flesh )  ciplukan  kedalam  juicer  untuk memperoleh jus yang akan ditambahkan kedalam yoghurt.

## Proses Pembuatan Yogurt
Proses pembuatan yogurt
didasarkan  pada  prosedur  kerja  menurut El-Karmany dkk ., (2013) dengan beberapa kombinasi.  Plain  yogurt  (yogurt  tanpa penambahan  jus  ciplukan)  dan  yogurt dengan penambahan jus ciplukan disiapkan pada hari yang sama. Yogurt dengan penambahan jus ciplukan :
Catatan :
Dosis jus ciplukan yang
ditambahkan  adalah  didasarkan  hasil penelitian  Wulandari dkk .,  (2017)  yang menambahkan  ekstrak  buah  dan  daun Ficus  glomerata Roxb  dalam  proses pembuatan yogurt :
1. Jus  ciplukan  (100  mL)  ditambahkan pada susu kerbau yang telah dipasteurisasi  sebelumnya  (820  mL) dan  susu  skim  (30  mL),  sedangkan untuk plain yogurt 100 mL jus ciplukan di gantikan dengan 100 mL air destilasi (dH 2 O).
2. Penambahan plain yogurt yang mengandung Lactobacillus  bulgaricus (FNCC 0041), Streptococcus thermophilus (FNCC 0015), Lactobacillus acidophilus,
Bifidobacterium , air, skim bubuk, gula, krim  susu,  penstabil  nabati,  kultur bakteri.
Yogurt  kemudian  difermentasi didalam  water  bath  (43 o C)  hingga  pH mencapai 4.5 diikuti dengan penyimpanan didalam  refrigerator  untuk  penyimpanan selama 1; 7; 14; 21 dan 28 hari.

## pH dan TTA
Perubahan  pH  selama  fermentasi yogurt  dilakukan  mulai  jam  ke-0  dengan interval  pengamatan  adalah  setiap  1  jam sekali selama proses fermentasi berlangsung (dan dengan interval pengamatan  setiap  7  hari  selama  proses penyimpanan  berlangsung.  Sampel  (3  ml) dicampurkan  dengan  3  ml  dH 2 O  untuk pengukuran pH, sedangkan untuk perhitungan  TTA  ( Total  Titratable  Acid )
selama proses fermentasi yogurt ditentukan dengan titrasi menggunakan 0,1
N  NaOH,  yaitu  dengan  cara:  Sebanyak  1 ml  yogurt  dimasukkan  kedalam  tabung Erlenmeyer  yang  telah  terisi  9  ml  dH 2 O. 3–5 tetes 0.1% phenolphthalein ditambahkan  sebagai  pH  indikator.  NaOH (0,1  N)  dititrasi  kedalam  larutan  dan larutan  dicampur  seluruhnya.  Proses diulang hingga terjadi perubahan indikator menjadi warna merah jambu yang konstan. Setelah  1  ml  0,1  NaOH  dinetralisasi dengan  0.009  g  asam,  jumlah  asam  yang dihasilkan  selama  fermentasi  dapat ditentukan, yaitu dengan :
Persentase  asam  laktat  =  faktor  dilusi (10)* V NaOH* 0,1 N* 0.009* 100%

## Total Phenolic Content (TPC)
Satu  mililiter  ekstrak  yogurt  (yang diperoleh  pada  setiap  1  jam  fermentasi atau  setiap  interval  7  hari  penyimpanan) yang  diperoleh  pada  setiap  dipindahkan kedalam tabung uji yang memiliki penutup
dan  dicampurkan  dengan  1  ml  ethanol 95%  dan  5  ml  dH 2 O  dan  ditambahkan serta  dicampurkan  0.5  ml  50%  (v/v) reagent  Folin-  Ciocalteu  (1:1  dengan  air destilasi) selama 5 menit pada suhu ruang. Satu  ml  5%  Na 2 CO 3 ditambahkan  dan dibiarkan  selama  60  menit.  Absorbansi dibaca  pada  725  nm.  Nilai  absorbansi dikonversi  untuk  TPC  dan  ditunjukkan dalam  mikrogram  equivalent  gallic  acid per  milliliter  sampel.  Kurva  standart ditentukan dengan menggunakan beberapa konsentrasi  gallic  acid  (5–60  μg/ml) ethanol 95%.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Metode
penentuan aktivitas antioksidan  menggunakan  1-Diphenyl-2- Picrylhydrazyl  (DPPH)  radical  inhibition assay  melibatkan  reaksi  antioksidan dengan  DPPH  yang  stabil  dalam  95% ethanol.  Ekstrak  sampel  (250  µl) ditambahkan  kedalam  3.8  mL  60  mmol/L DPPH (Sigma-Adrich, Germany)/L methanol  95%.  Penurunan  absorbansi dimonitor pada 517 nm hingga pembacaan konstan diperoleh.
Asam  gallat  digunakan  sebagai kontrol  untuk  sampel  jus  ciplukan.  Hasil pembacaan konstan untuk sampel) digunakan untuk menghitung % penghambatan oksidasi DPPH, dimana : Persentase  penghambatan  DPPH  =
!.#$%&'$( *+,-!..#/&'0# *+, !.#$%&'$( *+, 𝑥 100
Dimana  A  adalah  absorbansi kontrol  (DPPH  dan  ethanol)  sedangkan  B adalah  absorbansi  sampel  (DPPH,  ethanol dan  sampel).  Korelasi  antara  setiap konsentrasi  dan  persentase  penangkapan radikal  bebas  di  plot  dan  nilai  IC 50 dihitung  dengan  interpolasi.  Aktivitas antioksidan  diekspresikan  dengan  IC 50 yakni  konsentrasi  efektif  setiap  ekstrak
untuk  menangkap  50%  radikal  bebas DPPH.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Efek  pemberian  jus  buah  ciplukan Physalis  angulata  L. terhadap pH  dan TTA yogurt
Hasil  yang  diperoleh  terhadap  pH pada saat proses penyimpananan menunjukkan  bahwa  baik  yogurt  kontrol dan  yogurt  yang  ditambahkan  jus  buah ciplukan Physalis angulata L.
menunjukkan  nilai    pH  awal  (hari  ke-1) yang  sama,  masing-masing  yaitu    5,1  ± 0,28 (pada yogurt kontrol) dan 4,75 ± 0,07
(pada  yogurt  dengan  jus  buah Physalis angulata  L. )  dan  nilai  pH  pada  akhir penyimpanan masing- masing adalah  4,55 ± 0,07 (yogurt kontrol)  dan   4,2   ± 0,00 (yogurt dengan jus buah Physalis angulata L.) yang dicapai pada proses penyimpanan dan  berdasarkan  hasil  analisis  ragam (ANOVA)  menunjukkan  bahwa  pada masing-masing  perlakuan  yogurt  tidak menunjukkan perbedaan yang nyata.

## Gambar 2.  Nilai pH selama penyimpanan
Hasil  tersebut  sejalan  dengan  nilai Total Titratable Acid (TTA) pada hari ke-1 penyimpanan  adalah  0,85  ±  0,06  % (yogurt kontrol) dan 2,1 ± 0,25 % (yogurt dengan jus buah Physalis angulata L.) dan nilai  TTA  pada  hari  ke  28  penyimpanan menunjukkan masing-masing adalah:  1,89
3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 1 7 14 21 28 pH Waktu penyimpanan (hari) Kontrol Ciplukan
± 0,25 % (yogurt kontrol atau yogurt tanpa penambahan jus Physalis angulata L. ) dan 2,4  ±  0,00  %  (yogurt  dengan  jus  buah Physalis  angulata  L.). Namun  tidak menunjukkan perbedaan yang nyata.
Gambar 3.  Nilai TTA selama penyimpanan
Penurunan nilai pH terus berlangsung  hingga  hari  terakhir  (hari  ke- 28)  penyimpanan  untuk  masing-masing perlakuan.  Hasil  pH  pada  hari  terakhir penyimpanan  adalah  4,55  ±  0.07  (yogurt kontrol) dan 4,2 ± 0,00 (yogurt dengan jus buah  ciplukan Physalis  angulata  L. ) dengan  nilai  TTA  adalah  1,89  ±  0,25  % (pada  yogurt  kontrol)  dan  2,4  ±  0,00  % (yogurt dengan jus buah Physalis angulata L. Menurut  Vedamuthu  (1982)  bahwa perpanjangan  waktu  penyimpanan  yogurt menjadi  28  hari  yang  menyebabkan penurunan  pH  (4,2–4,4)  kemungkinan terjadi  akibat  akumulasi  asam  asetat, asetaldehida,  asam  formiat  dan  asam laktat.  Asam  organik  selama  fermentasi dan penyimpanan yang diproduksi didalam yogurt  (asam  laktat,  asam  sitrat,  asam formiat,  asam  asetat,  dan  asam  butirat (Ostlie dkk ,  2005)  memiliki  hubungan linier dengan akumulasi TTA (Billard dkk , 2007).

## Total Phenolic Content
Hasil yang diperoleh terhadap nilai total  phenolic  content selama  proses
penyimpanan menunjukkan adanya peningkatan secara gradual selama fermentasi  baik  pada  plain  yogurt  (yogurt tanpa jus buah Physalis angulata L. ). Nilai Total  Phenolic  Content pada  plain  yogurt dicerminkan  dengan  senyawa  phenolik yang  terkait  dengan  pemecahan  protein susu (Damin dkk , 2009).
Gambar 4. Nilai TPC selama penyimpanan
Total phenolic content (TPC) pada yogurt  kontrol  dan  yogurt  dengan penambahan jus buah Physalis angulata L. masing – masing adalah: 25,55 ± 0,18 µg GAE/ml  dan  21,55  ±  0,44 µg  GAE/ml pada  hari  ke-1  penyimpanan  dan  masing- masing  mengalami  peningkatan,  dengan nilai  TPC  masing-  masing  adalah  23,01  ± 0,13µg  GAE/ml  dan  20,88  ±  0,17  µg GAE/ml  pada  hari  ke-7  penyimpanan yogurt didalam refrigerator dan menunjukkan  hasil  yang  berbeda  nyata (P<0,05).  Kenaikan Total  Phenolic Content terus  menunjukkan  peningkatan selama  minggu  pertama  dan  minggu  ke-2 penyimpanan  yogurt  dan  peningkatan terjadi  secara  konstan  pada  minggu  ke-3 penyimpanan.  Nilai  TPC  pada  yogurt kontrol  dicerminkan  dengan  senyawa fenolik  yang  terkait  dengan  pemecahan protein  susu  (Damin dkk ,  2009).  Asam amino  tyrosin  misalnya,  memiliki  rantai samping  fenolik  (Shah,  2000)  yang menimbulkan pembacaan adanya senyawa
-0,5 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 1 7 14 21 28 TTA Waktu penyimpanan (hari) Kontrol Ciplukan 0 5 10 15 20 25 30 35 1 7 14 21 28 TPC Waktu penyimpanan (hari) Kontrol Ciplukan
fenolik  pada  saat  pembacaan  absorbansi spektrofotometer.
Kemungkinan lainnya adalah bakteri  asam  laktat  memanfaatkan  asam fenolat  seperti  asam  ferulat  dan  asam  p- kaumarat  selama  proses  fermentasi  dan pasca asidifikasi yang menghasilkan asam fenolat  lainnya  seperti  asam  vanilat  dan asam  p-hidroksibenzoat  sebelum  struktur cincin  aromatik  diurai  (Blum,  1998).  Hal ini  terjadi  kemungkinan  karena  peran bakteri  asam  laktat  terhadap  senyawa phenolik yang terdapat baik didalam buah maupun buah Physalis angulata L. selama proses penyimpanan. Menurut Amirdivani dan Baba (2015) bahwa fermentasi yogurt mempengaruhi  komponen  bioaktif  yang terdapat  didalam  herbal.  Maka  dapat diasumsikan bahwa peningkatan nilai TPC berkonstribusi  terhadap  pemecahan  lebih lanjut  senyawa-senyawa  phenolik  selama fermentasi  sebagai  hasil  dari  aktivitas metabolik  mikrobia.  Selain  itu,  ikatan phenolik  kemungkinan  dilepaskan  oleh aktivitas  enzimatis  mikrobia.  Peningkatan dan  penurunan  terhadap Total  Phenolic Content didalam yogurt dikarenakan peran bakteri  asam  laktat  selama  proses penyimpanan  didalam  refrigerator  yang mampu  memecah  lebih  lanjut  polimer senyawa  phenolik.  Polifenol  diketahui memiliki  afinitas  yang  kuat  untuk mengikat  protein  yang  mengarahkan  pada pembentukan  kompleks  protein-polifenol (Dalling,  1986  ;  Papadopoulou  dan Frazier, 2004).

## Aktivitas antioksidan
Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa  selama  proses  fermentasi  maupun selama  periode  penyimpanan  didalam refrigerator (28 hari) diperoleh hasil bahwa yogurt dengan jus buah Physalis angulata L. memiliki  aktivitas  antioksidan  yang
lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  plain yogurt. Aktivitas antioksidan pada penyimpanan  hari  ke-  1  pada  masing- masing  perlakuan  yogurt  kontrol  dan yogurt dengan jus buah Physalis angulata L. adalah  49,81 ± 3,97 % dan 59,46 ± 0,13 %.

## Gambar 5. Nilai aktivitas Antioksidan selama penyimpanan
Aktivitas  antioksidan  mencapai maksimal  pada  plain  yogurt  adalah  pada hari  ke-21  penyimpanan,  yaitu  53,18  ± 1,85  %,  sedangkan  untuk  yogurt  dengan penambahan jus buah Physalis angulata L. memiliki  aktivitas  antioksidan  maksimal pada  hari  ke-14  penyimpanan  yaitu  69,57 ±  2,78  %.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa aktivitas  antioksidan  yang  lebih  tinggi pada  buah Physalis  angulata  L .  yogurt kemungkinan besar merupakan konstribusi masing-masing  senyawa  fitokimia  dan sebagai  hasil  dari  aktivitas  metabolik mikrobia (bakteri asam laktat).
Tingginya  penghambatan  DPPH pada  hari  ke-14  penyimpanan  didalam refrigerator  dapat  dikaitkan  dengan aktivitas  bakteri  yogurt  yang  aktif  secara metabolik  bahkan  pada  suhu  rendah. Pertumbuhan  bakteria  yang  terus  terjadi selama  penyimpanan  yogurt  didalam refrigerator  kemungkinan  telah  mengubah sebagian  dari  senyawa  fenolik  sehingga dapat  merubah  aktivitas  antioksidan (Blum, 1998). Adanya bakteri asam laktat
0 20 40 60 80 1 7 14 21 28 Ant iok si dan Waktu penyimpanan (hari) Kontrol
dalam  fermentasi  berkonstribusi  terhadap konversi phenolik sederhana dan depolimerisasi  senyawa  phenolik  dengan berat molekul tinggi (Othman dkk,, 2009).

## KESIMPULAN
Yogurt  dengan  tambahan  jus  buah Physalis  angulata  L. memiliki  aktivitas antioksidan  tertinggi  pada  hari  ke-14 penyimpanan didalam refrigerator.
Aktivitas  antioksidan  pada  yogurt  dengan penambahan jus buah Physalis angulata L. didalam  yogurt  dapat  dijadikan  minuman fungsional yang kaya akan antioksidan.

## DAFTAR PUSTAKA
Amirdivani,  S.  dan  Baba,  A.S.  (2011). Changes  in  yoghurt  fermentation characteristics,  and  antioxidant potential  and  in  vitro  inhibition  of angiotensin-1  converting  enzyme upon  the  inclusion  of  peppermint, dill  and  basil. Jounal  of  LWT  - Food Science and Technology 44 : 1458 -1464.
Billard,  I.,  Mekki,  S.,  Ouadi,  A.  dan
Gaillard, C. (2007). TTA solvation kinetics in theionic liquid BumimTf2N. Comptes  Rendus Chimie 10: 1117-1121.
Blum,  U.  1998.  Effects  of  microbial utilization  of  phenolic  acids  and their  phenolic  acid  breakdown products on allelpathic interactions. Journal  of  Chemical  Ecology 24  :
685-708.
Coroian,  A.,  S.  Erler,  C.T.  Matea,  V. Miresan,  C.  Raducu,  C.  Bele,  and C.O.  Coroian.  2013.  Seasonal changes  of  buffalo  colostrum: physicochemical  parameters,  fatty acids  and  cholesterol  variation. Chem. Central J. 7: 2–9.
Dalling,  M.J.  (1986).  Plant  Proteolytic Enzymes. Volume.  I  dan  II. CRC Press, Boca Raton, Florida.
Damin,  M.R.,  Alcântara,  M.R.,  Nunes, A.P.  dan  Oliveira,  M.N.  (2009). Effects  of  milksupplementation with  skim  milk  powder,  whey protein  concentrate  andsodium caseinate  on  acidification  kinetics, rheological properties and structure of non fat stirred yogurt. Journal of LWT-Food Science and Technology 17 :1744 -1750.
El-Karmany,  A.M.M.,  Abol-Ela,  M.F., Hassanein, A.M., 2013. Production of  A  New  Yoghurt-  Like  Products Fortified With Some Legumes and Sweet,  Cereal  Crops  and  Its Evaluation  of  Fungal  Load. Journal  of  Food  and  Dairy Sciences ,  4(4):  133-148.  Mansoura University.
Febrina,  L.  2010.  Analisis  usaha  ternak kerbau  pada  ketinggian  tempat yang berbeda di Provinsi Sumatera Barat.  Tesis  Program  Pascasarjana Universitas Andalas, Padang.
Lailatul. Fitri Nur., Susetyarini Roro Eko., Lud  Waluyo.  2016 . Pengaruh Ekstrak  Buah  Ciplukan  ( Physalis Angulata L.) Terhadap Kadar Sgpt Dan  Sgot  Mencit  Putih  Jantan ( Mus  Musculus )  Hiperglikemia
Yang  Diinduksi  Aloksan  Sebagai Sumber Belajar Biologi. Universitas Muhammadiyah Malang. Malang Matondang,  Rasali  Hakim  dan    Chalid Talib  .  2015.  Pemanfaatan  Ternak Kerbau Untuk Mendukung Peningkatan  Produksi  Susu.  Pusat Penelitian dan Pengembangan Peternakan. Bogor. Ostlie, H.M., Treimo, J. dan Narvhus, J.A. (2005).  Effect  of  temperature  on growth and metabolism of probiotic bacteria in milk.
International  Dairy  Journal 15  : 989–997.
Othman,  N.B.,  Roblain,  D.,  Chammen, N.,  Thonart,  P.  dan  Hamdi,  M. (2009). Antioxidant phenolic compounds loss during the fermentation of Chétouiolives. Food Chemistry 116(3): 662–669.
Papadopoulou,  A.,  Frazier,  R.A.  (2004).
Characterization of protein– polyphenol interactions. Trends in
Food  Science  &  Technology 15:
186–190.
Senosy,  W.  and  H.A.  Hussein.  2013.
Association  among  energy  status, subclinical endometritis postpartum and subsequent reproductive performance in Egyptian buffaloes. Anim. Reprod.Sci. 140: 40–46.
Shah,  N.P.  (2000).  Effect  of  milk-derived
bioactives:  an  overview. British Journal of Nutrition , 84 (1): 3-10.
Wirdahayati,  R.B.,  S.Y.  Pramudiyati  Dan A. Bamualim. 2003.   Usaha ternak kerbau  pampangan  dan  upaya peningkatan  produktivitasnya  di Sumatera  Selatan.  Pros.  Seminar Lokakarya  Nasional  Pembangunan Pertanian  Berkelanjutan  dalam  Era Otonomi  Daerah  dan  Globalisasi.
1: IA.1 – 11. Wirdahayati, R.B. 2007. Upaya Peningkatan Produksi Susu Kerbau Untuk  Kelestarian  Produk  Dadih Di  Sumatera  Barat.  Balai  Besar Pengkajian  dan  Pengembangan
Teknologi Pertanian. Bogor.
Wulandani, B.R.D., Rahayu, E.S., Marsono,  Y.,  Utami,  T.,  2017. Aktivitas Antioksidan dan Angiotensin  Coverting  Enzyme Inhibitor  oleh  Yoghurt  dengan
Ekstrak  Daun Ficus  glomerata Roxb. Agritech. Fakultas  Ilmu  dan Teknologi Pertanian. UGM. Yogyakarta 37(3): 246-255. Wulandari, B.R.D., Rahayu, E.S., Marsono,  Y.,  Utami,  T.,  2017. Aktivitas Antioksidan dan Angiotensin  Coverting  Enzyme Inhibitor  oleh  Yoghurt  dengan
Ekstrak  Daun Ficus  glomerata Roxb. Agritech. Fakultas  Ilmu  dan Teknologi Pertanian. UGM. Yogyakarta 37(3): 246-255. Vedamuthu,  E.R.  (1982).  Fermented milks. Dalam :  Rose,A.H.  (Ed.). Economic Microbiology: Fermented Foods , 199–225. Academic Press, London.