Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia, 5 (1) (2023) 43-50
Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia
Website: https://journal.ubb.ac.id/index.php/stannum doi: 10.33019/jstk.v5i1.3797 Research paper
Antioxidant Activity Testing Combination of Moringa Leaf ( Moringa oleifera L.) and Bambian ( Ocimum sanctum L.) Leaves Extract Using DPPH Method
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Kelor ( Moringa oleifera L.) dan Ekstrak Daun Bambian ( Ocimum sanctum L.) Menggunakan Metode DPPH
Endah Dwijayanti 1 *, Masli Nurcahya Zoraida 1 , dan Siti Rahayu Kurnianingsih 2
1) Program Studi Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Islam Makassar, Jl. Perintis Kemerdekaan km.9 No. 29 Makassar, Indonesia 90245
2) Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Islam Makassar, Perintis Kemerdekaan km.9 No. 29 Makassar, Indonesia 90245
* Corresponding author: endahdwijayanti.dty@uim-makassar.ac.id
Received: April 11, 2023  Accepted: May 8, 2023  Published: May 30, 2023

## ABSTRACT
Research on the antioxidant activity combination of the ethanol extract of Moringa ( Moringa oleifera L.)  and  basil  ( Ocimim  sanctum L.) leaves  has  been  carried  out.  The  purpose  of  this  study  was  to identify the content of secondary metabolites and measure the value of antioxidant activity as well as the maximum ratio of the combination of ethanol extract of moringa leaves and basil leaves. The research  methods  include  maceration  extraction  using  70%  ethanol  as  a  solvent,  phytochemical screening using specific reagents and antioxidant activity testing using the DPPH method. The results of  the  phytochemical  screening  test  for  Moringa  leaf  extract  and  basil  leaves  were  positive  for containing chemical compounds of the flavonoid and tannin groups. The antioxidant activity test of Moringa leaf ethanol extract obtained IC 50 results of 69.474 ppm which was categorized as a strong antioxidant,  while  basil  leaves  of  34.663  ppm  which  was  categorized  as  very  strong  antioxidant, while the results of the combined study of antioxidant activity test of Moringa leaf ethanol extract and basil leaves obtained IC 50 results at the ratio of 25:25 mg is 51.589 ppm and the ratio of 35:15 mg is 57.009 ppm which was categorized as a strong antioxidant, while at 15:35 mg is the optimum ratio because the IC50 result is 42.714 ppm which was categorized as very strong.
Keywords: Antioxidant, Moringa oleifera L., Ocimum sanctum L., DPPH, Phytochemical screening
PENDAHULUAN
Antioksidan  adalah  senyawa  yang  dapat memberikan  molekulnya  kepada  molekul radikal bebas dan  berguna menghentikan atau memutuskan reaksi berantai dari radikal bebas yang  terdapat  secara  alami  di  dalam  tubuh, sedangan  radikal  bebas  merupakan    oksidan bersifat reaktif, karena terdapat satu atau lebih elektron  tidak  berpasangan  pada  orbital
luarnya dan selalu berusaha untuk menyerang komponen seluler seperti protein, karbohidrat, serta  DNA  maupun  RNA  (Sayuti  dan  Yenrina, 2015).
Terdapat  tiga  macam  antioksidan,  yaitu antioksidan  endogen  yang  berupa  enzim, antioksidan alami yang berasal dari hewan atau tumbuhan  yang  mengandung  vitamin  C,  E, senyawa flavonoid dan fenolik serta
antioksidan  sintetik  yang  berasal  dari  bahan- bahan kimia seperti BHT (butilhidroksitoluena) dan  BHA  (butilhidroksianisol)  yang  sangat efektif dalam menekan oksidasi minyak lemak. Akan  tetapi,  penggunaan  senyawa  sintetis memiliki efek samping yang menjadi perhatian sehingga  para  ahli  mencari  alternatif antioksidan  alami  yang  berasal  dari  bahan nabati (Santoso, 2021)
Tanaman  dapat  memiliki  peran  sebagai antioksidan  alami  diantaranya  tanaman  kelor ( Moringa  oleifera L).  Penelitian  terhadap ekstrak  daun  kelor  menunjukkan  adanya aktivitas  antioksidan  yang  tinggi  serta mengandung  senyawa  mineral,  vitamin, protein, flavonoid dan fenolik (Khor dkk., 2018).
Tanaman  kelor  dikenal  sebagai the  miracle tree karena  bagian  tanaman  mulai  dari  buah, bunga,  daun,  batang  hingga  akar  dapat dimanfaatkan  untuk  pangan  dan  sebagai  obat tradisional yang dapat meningkatkan imunitas atau kekebalan tubuh (Toripah dkk., 2014). Tumbuhan  lain  selain  kelor  yang  memiliki kandungan  asam  fenolik,  hidroksisinamat  dan flavonoid  dan  berpotensi  sebagai  antioksidan adalah  kemangi.  Tanaman  kemangi  ( Ocimum sanctum L.)  memiliki  ketersediaan  yang melimpah di Indonesia, biasanya dimanfaatkan sebagai  tambahan  masakan  memberikan  cita rasa  pada  makanan  dan  lalap,  dapat  pula digunakan sebagai obat tradisional yaitu pereda migrain,  stress,  demam,  diare,  mengobati sariawan,  dan  pereda  masuk  angin  (Pandey, 2012).
Antioksidan dapat diuji aktivitasnya menggunakan  beberapa  macam  metode diantaranya1,1- difenil -2- pikrilhidrazil (DPPH),
Cupric  Ion  Reducing  Antioxidant  Capacity (CUPRAC), Ferric  Reducing  Antioxidant  Powe r (FRAP).  Maka  DPPH  merupakan  metode  yang sering  digunakan  karena  metode  ini  paling sederhana,  cepat,  mudah  digunakan  dan memberikan  hasil  yang  akurat  serta  sensitif terhadap sampel dengan konsentrasi yang kecil namun  pengujian  menggunakan  DPPH  hanya dapat  dilarutkan  dalam  pelarut  organik sehingga  agak  sulit  untuk  menganalisis senyawa  yang  bersifat  hidrofilik  (Karadag, 2009; Langi, dkk., 2020). Metode  DPPH  akan  memberikan  hasil potensi  antioksidan  berdasarkan  nilai  IC 50 ( inhibition  concentration )  yaitu  konsentrasi ekstrak yang dapat menghambat 50 % oksidasi atau radikal bebas. Senyawa dinyatakan sebagai antioksidan  kuat  jika  nilai  IC 50 berada  pada rentang  konsentrasi  50  ppm – 100  ppm  dan
antioksidan sangat kuat jika nilai IC 50 < 50 ppm (Tristantini dkk, 2016). Penelitian  yang  dilakukan  Alimsyah  dkk., (2020)  untuk  menguji  aktivitas  antioksidan ekstrak daun kelor dengan DPPH menunjukkan konsentrasi  IC 50 sebesar  79  ppm  yang dikategorikan  antioksidan  kuat,  selain  itu ekstrak  daun  kelor  mengandung  senyawa flavonoid  yang  memiliki  atom  H  untuk didonorkan agar menetralkan oksidan sehingga memberikan aktivitas antioksidan yang tinggi.
Penelitian terkait antioksidan juga dilakukan oleh  Ikhlas  (2013)  dengan  menggunakan sampel ekstrak etanol daun kemangi. Hasil yang diperoleh menunjukkan nilai nilai IC 50 sebesar 21,8989  μg/mL  sehingga  dikategorikan antioksidan  kuat.  Selain  itu  beberapa  hasil penelitian lainnya menunjukkan kombinasi dari dua  atau  lebih  ektrak  tanaman  menghasilkan potensi  antioksidan  yang  lebih  tinggi  (Lingga, 2012).

## METODOLOGI Alat dan Bahan
Peralatan yang digunakan pada penelitian ini diantaranya bejana maserasi, gelas ukur, cawan porselin,  gelas  erlenmeyer,  gelas  kimia,  labu tentukur,  mikro  pipet,  pipet  tetes,  cawan porselin,  kertas  saring,  aluminium  foil, rotary evaporator , spektrofotometri UV-Vis (Thermo), stopwatch dan neraca analitik. Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  daun  kelor  ( Moringa oleifera L.), daun kemangi ( Ocimum sanctum L.), aquades,  asam  askorbat,  DPPH  ,  etanol  70  %, metanol p.a.
Ekstraksi  Daun  Kelor  dan  Daun  Kemangi (Bimakra dkk., 2011)
Simplisia  daun  kelor  dan  daun  kemangi masing-masing  ditimbang  sebanyak  300  g  di masukkan  ke  dalam  bejana  maserasi.  Lalu ditambahkan  etanol  70  %  ke  dalam  masing – masing  bejana  maserasi  untuk  membasahkan, didiamkan  beberapa  menit  hingga  terbasahi semua, ditambahkan kembali etanol 2 L 70 %, biarkan selama 2×24 jam dilakukan pengadukan  sesekali.  Selanjutnya  masing – masing ekstrak disaring dengan menggunakan kertas  saring,  diperoleh  ekstrak  cair  dan ampasnya  diremaserasi  dengan  menggunakan pelarut  yang  sama  sebanyak  2  kali,  masing- masing  dengan  2  L  etanol  70%.  Ekstrak  cair yang  diperoleh  kemudian  dikumpulkan  dan diuapkan  dengan rotary  evaporator hingga
diperoleh ekstrak kental, lalu di timbang dan di hitung rendemennya.
Skrining Fitokimia Ekstrak  Daun Kelor  dan Daun Kemangi
Uji Alkaloid Sebanyak  100  mg  masing-masing  ekstrak kental  daun  kelor  dan  daun  kemangi ditambahkan 5 mL HCl 2 N selanjutnya dibagi ke dalam  2  tabung  reaksi.  Tabung  pertama ditambahkan  3  tetes  reagen  Dragendorff  dan tabung  kedua  3  tetes  reagen  Mayer.  Jika terbentuk endapan jingga pada tabung pertama dan  endapan  kuning  pada  tabung  kedua, menunjukkan adanya alkaloid (Rahman Wahid & Safwan, 2020)

## Uji Flavonoid
Sebanyak  masing-masing  100  mg  ekstrak kental  daun  kelor  dan  daun  kemangi ditambahkan  2  mL  etanol,  kocok  hingga homogen  kemudian  ditambahkan  serbuk  Mg dan  5  tetes  HCl  pekat.  Bila  terbentuk  warna merah, kuning atau jingga menunjukkan positif adanya flavonoid (Marjoni, 2016).

## Uji Saponin
Ekstrak kental daun kelor dan daun kemangi masing-masing 100 mg ditambahkan etanol 70 % sebanyak 2 mL, kocok kemudian tambahkan serbuk Mg dan HCl pekat sebanyak 5 tetes. Bila terbentuk larutan berwarna kuning, jingga atau merah menunjukkan adanya flavonoid (Marjoni, 2016).

## Uji Tanin
Sebanyak  masing-masing  100  mg  ekstrak kental daun kelor dan daun kemangi di didihkan dengan  20  mL  air,  selanjutnya  disaring kemudian  ditambahkan  3  tetes  FeCl 3 .  Adanya tanin  ditandai  dengan  pembentukan  biru  atau hijau kehitaman (Ikalinus, dkk., 2015).

## Uji Aktivitas Antioksidan
Pembuatan Larutan Induk DPPH DPPH  ditimbang  0,0157  g  kemudian dimasukkan  dalam  labu  tentukur  100  mL  dan dilarutkan  menggunakan  metanol  p.a,  sampai tanda  batas  sehingga  diperoleh  konsentrasi larutan DPPH 0,4 mM.

## Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum
Larutan  DPPH  0,4  mM  sebanyak  1  mL dimasukkan  ke  dalam  labu  tentukur  dan dicukupkan  volumenya  dengan  metanol  p.a hingga 10 mL, kocok sampai larutan homogen.
Labu  tentukur  ditutup  dengan  aluminium  foil, didiamkan selama 30 menit, selanjutnya diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimum, sehingga diperoleh absorbansi blanko.
Pembuatan  Larutan  Induk  Ekstrak  Daun Kelor dan Daun Kemangi 500 ppm
Ekstrak  daun  kelor  dan  daun  kemangi ditimbang  sebanyak  0,005  g  kemudian ditambahkan dengan metanol p.a dalam  labu tentukur  10  mL,  dicukupkan  volumenya sampai tanda batas sebagai larutan stok 500 ppm.
Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Daun  Kelor dan  Ekstrak  Daun  Kemangi dengan Metode DPPH
Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Daun kelor
Larutan stok 500 ppm dipipet 0,1 mL; 0,2 mL;  0,4  mL,  0,8  mL  dan  1,6  mL  kemudian dimasukkan  ke  dalam  labu  tentukur  yang terbungkus aluminium foil kemudian ditambahkan    DPPH  0,4    mm    sebanyak    1 mL.  Dicukupkan      volumenya            dengan metanol p.a,
sehingga didapatkan konsentrasi  sebanyak  10  ppm,  20  ppm,  40 ppm,  80  ppm  dan  160  ppm.  Selanjutnya disatukan lalu ditutup dan didiamkan selama 30  menit.  Ukur  absorbannya  dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang maksimum.
Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Daun kemangi
Pengujian  dilakukan  dengan  memipet  0,1 mL;  0,2  mL;  0,4  mL,  0,8  mL  dan  1,6  mL  dari larutan stok 500 ppm kemudian dimasukkan ke labu tentukur yang terbungkus aluminium foil. Larutan 1 mL DPPH 0,4 mM ditambahkan dan dicukupkan  volumenya  dengan  metanol  p.a, sehingga  diperoleh  konsentrasi  10  ppm,  20 ppm, 40 ppm, 80 ppm dan 160 ppm. Campuran disatukan  kemudian  ditutup  dan  didiamkan selama 30 menit. Selanjutnya diukur absorbannya  dengan  spektrofotometer  UV-Vis pada panjang gelombang maksimum.
Pengukuran Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Kelor dan Daun Kemangi Kombinasi ektrak dilakukan dengan perbandingan  15:35  mg;  25:25  mg  dan  35:15 mg.  Masing-masing  perbandingan  dilarutkan dengan  50  mL  metanol  sehingga  diperoleh
larutan stok 500 ppm. Memipet  0,1 mL; 0,2 mL; 0,4  mL;  0,8  mL;  1,6  mL  dimasukkan  kedalam tentukur  5  mL  yang  telah  terbungkus aluminium  foil.  Larutan    1  mL  DPPH  0,4  mM ditambahkan  dan  dicukupkan  volumenya dengan  methanol  p.a  sehingga  diperoleh konsentrasi 10 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 80 ppm dan  160  ppm.  Campuran  di  gojog  kemudian ditutup  dan  didiamkan  selama  30  menit, selanjutnya  diukur  absorbannya  dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang maksimum.
Pembuatan  Larutan  Induk  Asam  Askorbat Konsentrasi 500 ppm
Asam  askorbat  sebanyak  0,005  g dilarutkan  dengan  metanol  p.a  dalam  labu tentukur,  dicukupkan  volumenya  dengan metanol p.a sehingga diperoleh larutan asam askorbat  500  ppm.  Larutan  induk  500  ppm sebanyak  1  mL  dimasukkan  ke  dalam  labu tentukur  lalu  dicukupkan  volumenya  dengan metanol p.a hingga 10 mL untuk mendapatkan konsentrasi 50 ppm.
Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Larutan Pembanding Asam Askorbat
Asam  askorbat  50  ppm  dipipet  dengan volume 0,025 mL; 0,05 mL; 0,1 mL; 0,2 mL; dan 0,4 mL kemudian dimasukkan 1 mL DPPH 0,4 mM  kedalam  labu  tentukur  yang  telah dibungkus  dengan  aluminium  foil  dan dicukupkan  volumenya  hingga  5  mL dengan pelarut  metanol  p.a  sehingga  diperoleh konsentrasi  asam  askorbat  berturut-turut 0,25 ppm, 0,5 ppm, 1 ppm, 2 ppm dan 4 ppm. Campuran  dihomogenkan  kemudian  tutup dan didiamkan selama 30 menit, selanjutnya diukur
absorbannya dengan spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang gelombang maksimum.

## Analisis Data
Pada penelitian ini, data yang dikumpulkan berupa  persentase  aktivitas  antioksidan  yang dihitung berdasarkan persamaan berikut:
% Antioksidan  = 𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐴 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 𝑥100 Selanjutnya dilihat tingkat kekuatan antioksidan  dengan  mengunakan  parameter Inhibitor  Concentration 50  (IC 50 )  untuk menginterpretasikan  hasil  pengujian  dari metode DPPH (Tabel 1).
Tabel 1. Tingkat Kekuatan Antioksidan dengan
Metode DPPH ( Molyneux, 2004) Intensitas Nilai IC 50 Sangat kuat < 50 ppm Kuat 50 ppm - < 100 ppm Sedang 100 ppm - < 150 ppm Lemah 150 ppm - < 200 ppm Sangat lemah >200 ppm

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  pertama  diawali  dengan  ekstraksi secara  maserasi.    Hasil  ekstraksi  ditunjukkan pada  Tabel  2.  Hasil  ekstraksi  selanjutnya dilakukan skrining fitokimia untuk mengetahui golongan  senyawa  yang  terkandung  dalam tanaman melalui pengujian warna menggunakan  suatu  pereaksi  yang  mampu memberikan  ciri  khas  dari  setiap  golongan metabolit sekunder (Harborne, 1987).
Tabel  2. Hasil  perhitungan  rendamen  Ekstrak Etanol Daun Kelor ( M. oleifera L) dan Daun Kemangi ( O. sanctum L)
Identifikasi  pertama  dilakukan  dengan tujuan  menentukan  adanya  senyawa  alkaloid menggunakan  dua  jenis  reagen  yaitu  reagen Mayer dan reagen Dragendorff. Ekstrak terlebih dahulu ditambahkan dengan HCl pekat sebelum ditambahkan pereaksi agar dapat meningkatkan kelarutan alkaloid. Prinsip pada analisis  ini  yaitu  terjadinya  pengendapan karena  adanya  penggantian  ligan.  Atom nitrogen  yang  mempunyai  pasagan  elektron bebas  pada  alkaloid  dapat  menganti  ion  iodo dalam reagen. Hasil pengujian dengan pereaksi Dragendroff (kalium tetraiodobismutat) menghasilkan endapan jingga yang merupakan kompleks kalium-alkaloid dari kalium tetraiodobismutat (Hardiyanthi, 2015). Identifikasi senyawa selanjutnya uji flavonoid  dengan  menambah  serbuk  Mg  dan HCl pekat pada sampel. Penambahan HCl pekat digunakan  untuk  menghidrolisis  flavonoid menjadi  aglikon,  yaitu  dengan  menghidrolisis O-glikosil. Glikosil akan tergantikan oleh H + dari asam  karena  sifatnya  yang  elektofilik.  Hasil identifikasi  menunjukkan  larutan  berwarna
Sampel Berat Sampel (g) Berat Ekstrak (g) Rendamen (%) Daun Kelor 300 71,49 23,83 Daun Kemangi 300 84,64 16,92
merah  jingga  disebabkan  adanya  reduksi dengan Mg dan HCl pekat (Robinson, 1995).
Identifikasi  senyawa  tanin  menujukkan terbentuk larutan warna hijau kehitaman pada sampel  setelah  ditambahkan  FeCl 3 hal  ini dikarenakan  tanin  akan  membentuk  senyawa kompleks dengan ion Fe 3+ (Harbone, 1987). Indentifikasi  senyawa  selanjutnya  adalah saponin yang mempunyai gugus hidrofilik dan hidrofob.  Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh pada  ekstrak  etanol  daun  kelor  dan  daun kemangi  dengan  penambahan  air  suling  tidak terbentuk  buih  yang  stabil  selama  10  menit setelah  dilakukan  pengocokan  secara  vertikal yang  menunjukkan  sampel  tidak  memiliki saponin  karena  tidak  memiliki  kemampuan untuk membentuk busa.
Tabel 3. Hasil Identifikasi Senyawa Kimia Ekstrak Etanol Daun Kelor ( Moringa oleifera L)
Keterangan: +   =  Adanya kandungan senyawa
-   =  Tidak adanya kandungan senyawa Tabel 4. Hasil  Identifikasi  Senyawa  Kimia Ekstrak Etanol Daun Kemangi ( Ocimum sanctum L) Senyawa Kimia Pereaksi Pengamatan  Ket. Alkaloid Mayer Endapan kuning + Dragendorff Endapan jingga + Flavonoid Serbuk Mg dan HCl p Merah + Tanin FeCl 3 1% Hijau Kehitaman + Saponin Air Panas Tidak berbusa - Keterangan: + = Adanya kandungan senyawa - =  Tidak  adanya  kandungan senyawa
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  identifikasi golongan senyawa menunjukkan bahwa ekstrak etanol  daun  kelor  dan  daun  kemangi  (Tabel  3 dan  Tabel  4)  positif  mengandung  senyawa flavonoid,  alkaloid  dan tanin.  Pada  uji  alkaloid dengan  pereaksi  Mayer  tidak  membentuk endapan  putih  dan  pada  pereaksi  Dragendroff terbentuk endapan merah.
Adanya  beberapa  senyawa  aktif  yang terkandung  pada  sampel  salah  satunya flavonoid  memberikan  pengaruh  terhadap aktivitas antioksidan. Flavanoid akan mendonorkan  hidrogen  kepada  radikal  bebas untuk menstabilkan senyawa radikal, sehingga semakin  tinggi  kandungan  flavanoid  dalam ekstrak,  aktivitas  antiokisidanya  juga  akan semakin tinggi.
Pengujian  antioksidan  dengan  metode difenilpikrilhidrazil (DPPH)  merupakan  salah satu  pengujian  untuk  menentukan  altivitas antioksidan  penangkap  radikal.  Metode  DPPH memberikan  informasi  reaktivitas  senyawa yang  diuji  dengan  suatu  radikal  stabil.  DPPH memberikan  serapan  kuat  pada  panjang gelombang 515 nm dengan warna violet gelap. Penangkapan  radikal  bebas  menyebabkan elektron  menjadi  berpasangan  yang  kemudian menyebabkan penghilang warna yang sebanding  dengan  jumlah  elektron  yang diambil. Metode DPPH merupakan metode yang sederhana,  cepat,  mudah,  untuk  skrining aktivitas penangkap radikal. Selain itu, metode ini terbukti akurat, reliabel dan praktis (Sayuti & Yenrina, 2015).
Parameter yang digunakan untuk menunjukkan  aktivitas  antioksidan  adalah inhibition concentration (IC 50 ) yaitu konsentrasi suatu antioksidan yang dapat menyebabkan 50 %  DPPH  kehilangan  konsentrasi  suatu  zat antioksidan yang memberikan persen penghambatan  50  %.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 berarti aktivitas antioksidanya semakin tinggi.
Tabel 5. Hasil Aktivitas Antioksidan dan Nilai
IC 50 Ekstrak Daun Kelor Konsentrasi Aktivitas antioksidan (%) IC 50 10 40,62 34,663 20 46,58 40 53,19 80 63,37 160 86,09 Hasil  pengujian  tunggal  tanpa  kombinasi aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH Senyawa Kimia Pereaksi  Pengamatan  Ket. Alkaloid Mayer Endapan kuning + Dragendorff  Endapan jingga + Flavonoid Serbuk Mg dan HCl p Merah + Tanin FeCl 3 1% Hijau Kehitaman + Saponin Air Panas Tidak berbusa -
menggunakan  instrumen UV-Vis  menunjukkan bahwa ekstrak daun kelor ( Moringa oleifera L.) memiliki  IC 50 sebesar  69,474  ppm  (Tabel  5) tergolong  dalam  kategori  kuat  sedangkan ekstrak etanol daun kemangi ( Ocimum sanctum L.) memiliki IC 50 sebesar 34,663 ppm (Tabel 6) tergolong  dalam  kategori  sangat  kuat,  karena memiliki nilai IC 50 < 50 ppm.
Tabel 6. Hasil Aktivitas Antioksidan dan Nilai IC 50 Ekstrak Daun Kemangi Konsentrasi Aktivitas antioksidan (%) IC 50 10 28,75 69.474 20 34,62 40 41,82 80 55,77 160 77,24 Tingginya aktivitas antioksidan ekstrak daun kemangi  dibandingkan  daun  kelor  dapat disebabkan  karena  tingginya  kadar  flavanoid. Hasil  penelitian  Prasetyo (2021)  tentang pengaruh  metode  ekstraksi  terhadap  kadar flavonoid  ekstrak  etanol  daun  kemangi diperoleh  kadar  flavanoid  daun  kemangi sebesar 9,31 % sedangkan kadar flavanoid daun kelor  5,17  %  (Faroh,2020).  Hasil  tersebut menunjukkan  kadar  flavanoid  daun  kemangi lebih besar dibandingkan daun kelor.
Pengujian  selanjutnya  dilakukan  dengan mengkombinasikan  ekstrak  etanol  daun  kelor ( Moringa  oleifera L.)  dan  daun  kemangi ( Ocimum  sanctum L.).  Kombinasi  dilakukan dengan  berbagai  perbandingan  konsentrasi, tujuannya  agar  diperoleh  optimum  serta mengetahui  kekuatan  aktivitas  antioksidan setelah dikombinasikan.
Tabel 7. Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Kelor dan Daun Kemangi Kombinasi Replikasi Konsentrasi (ppm) Absorbansi λ = 515 nm Persamaan Regresi Linier
25:25
1
10 0,475 y = 0,3258x + 32,761
r = 0,9934 20 0,469 40 0,390 80 0,319 160 0,111 Kontrol 0,750 2 10 0,475
y = 3270x + 32,8222
r = 0,9954 20 0,467 40 0,392 80 0,315 160 0,110 Kontrol 0,750 3 10 0,472 20 0,464 y = 0,3220x + 33,1278 r = 0,9972 40 0,396 80 0,313 160 0,114 Kontrol 0,750 15:35 1
10 0,451
y = 0,2936x + 37,078 r = 0,9852 20 0,427 40 0,366 80 0,322 160 0,111 Kontrol 0,750 2 10 0,450 y = 0,2930x + 37,6500 r = 0,9956 20 0,425 40 0,366 80 0,302 160 0,114 Kontrol 0,750
Kombinasi Replikasi Konsentrasi (ppm) Absorbansi λ = 515 nm Persamaan Regresi Linier 3
10
0,451
y = 0,2923x + 37,7444
r = 0,9936 20 0,422 40 0,364 80 0,305 160 0,113 Kontrol 0,750 35:15 1
10 0,493 y = 0,3351x + 31,089
r = 0,9903 20 0,469 40 0,397 80 0,338 160 0,108 Kontrol 0,750 2 10 0,499
y = 0,3374x + 30,761
r = 0,991 20 0,469 40 0,398 80 0,337 160 0,109 Kontrol 0,750 3 10 0,500
y = 0,3382x + 30,444
r = 0,9918 20 0,471 40 0,402 80 0,339 160 0,110 Kontrol 0,750
Berdasarkan  hasil  pengukuran  aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun kelor dan daun kemangi kombinasi yang dilakukan dengan tiga kali  replikasi  menunjukkan  bahwa  semakin besar konsentrasi larutan yang diberikan , maka nilai  absorbansi  akan  semakin  menurun.  Data persamaan  regresi  linier  dapat  dilihat  bahwa yang  memiliki  koefisien  korelasi  yang  baik adalah yang mendekati 1 yaitu pada kombinasi dengan  perbandingan  jumlah  ekstrak  etanol daun  kelor  dan  daun  kemangi  sama  banyak (25:25) dengan persamaan regresi y = 0,3220x + 33,1278 dan r = 0,9972.
Tabel 8. Tabel Nilai IC 50 Kombinasi Ekstrak Daun Kelor dan Daun Kemangi
Berdasarkan  nilai  IC 50 (Tabel  8)  diperoleh aktivitas antioksidan kombinasi ekstrak etanol daun  kelor  ( Moringa  oleifera L.)  dan  daun kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  dengan
perbandingan  25:25  mg  sebesar  51,589  ppm dan  perbandingan  35:15  mg  sebesar  57,009 ppm dikategorikan kuat sedangkan perbandingan 15:35 mg merupakan perbandingan  optimum  sebesar  42,714  ppm karena dikategorikan sangat kuat. Perbandingan 15:35 mg merupakan
perbandingan  dengan  jumlah  ekstrak  etanol daun kemangi lebih banyak dari daun kelor.
Hasil  ini  menunjukkan  ekstrak  etanol  daun kemangi lebih memberikan pengaruh terhadap aktivitas  antioksidan  dibandingkan  ekstrak etanol  daun  kelor.  Hal  ini  juga  sesuai  dengan hasil  pengujian  tunggal  ekstrak  daun  kemangi mempunyai  antioksidan  lebih  besar  dari ekstrak daun kelor.

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol daun kelor dan daun kemangi positif mengandung senyawa alkaloid, flavanoid dan tanin. Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun kelor diperoleh hasil IC 50 sebesar  69,447 ppm  dikategorikan  sebagai  antioksidan  kuat dan daun kemangi ( Ocimum sanctum L.) sebesar 34,655 ppm dikategorikan sebagai antioksidan sangat  kuat.  Aktivitas  antioksidan  kombinasi ekstrak  etanol  daun  kelor  dan  daun  kemangi dengan  perbandingan  15:35  mg  merupakan Pengujian sampel kombinasi daun kelor : daun kemangi (mg) Nilai IC 50 (ppm) 15 : 35 42,714 25 : 25 51,589 35 : 15 57,009
perbandingan optimum karena diperoleh hasil nilai  IC 50 sebesar  42,714  ppm  yang dikategorikan sangat kuat.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada LP2M  Universitas  Islam  Makassar  atas bantuannya  dalam  pelaksanaan  penelitian  ini. Juga ucapan terima kasih kepada Program Studi Kimia  Fakultas  Mipa  UIM  atas  bantuan tekniksnya pada pengujian di laboratorium.

## REFERENSI
Alimsyah,  F.,  Sugihartini,  N.,  &  Susanti,  H.
(2020). Optimasi campuran ekstrak etanol buah pepaya (Carica papaya L.)
dan ekstrak  etanol  daun  kelor  (Moringa oleifera)  dalam  krim  sebagai  antiaging.
Jurnal Darul Azhar , 9 (1), 23 – 29. Bimakra, M., Rahmana, A., Taip, F. S., Ganjloo, A., Salleh, L. M., Selamat, J., Hamid, A., & Zaidul, I.  S.  M.  (2011).  Comparison  of  different extraction  methods  for  the  extraction  of major bioactive flavonoid compounds from spearmint. Food and Bioproducts Processing , 89 (1), 67 – 72. https://doi.org/https://doi.org/10.1016/j
.fbp.2010.03.002 Faroh,  M.  Z.  U.  (2020). Isolasi  dan  identifikasi senyawa  flavonoid  dari  daun  kelor (Moringa  oleifera)  dan  uji  aktivitasnya sebagai  antioksidan .  Universitas  Negeri Semarang. Harborne, J. B. (1987). Metode fitokimia :penuntun cara modern menganalisis tumbuhan . ITB Press. Hardiyanthi,  F.  (2015). Pemanfaatan  aktivitas antioksidan  ekstrak  daun  kelor  (Moringa oleifera)  dalam  sediaan  hand  and  body cream . UIN Syarif Hidayatullah Ikhlas,  N.  (2013). Uji  aktivitas  antioksidan ekstrak herba kemangi (Ocimum americanum  Linn)  dengan  metode  DPPH
92,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil) .
Ikalinus, R., Widyastuti, S. K., Luh, N., & Setiasih,
E. (2015). Skrining fitokimia ekstrak etanol kulit  batang  kelor  (Moringa  oleifera). Indonesia Medicus Veterinus , 4 (1), 71 – 79. Karadag,  A.,  Ozcelik,  B.,  &  Saner,  S.  (2009).
Review  of  methods  to  determine antioxidant  capacities. Food  Analytical Methods , 2 (1), 41 – 60. https://doi.org/10.1007/s12161-008-
9067-7
Khor, K. Z., Lim, V., Moses, E. J., & Abdul Samad,
N.  (2018).  The  in  vitro  and  in  vivo
anticancer  properties  of  Moringa  oleifera.
Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine , 2018 . https://doi.org/10.1155/2018/1071243
Langi,  P.,  Yudistira,  A.,  &  Mansauda,  K.  L.  R. (2020).  Uji  aktivitas  antioksidan  karang lunak  (nepthea  sp.)  dengan  menggunakan metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) antioxidant  activity  test  of  soft  coral (nepthea sp.) using the DPPH method (1,1- diphenyl-2-picrylhydrazyl). PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi-UNSRAT , 9 (3). Lingga,  L.  (2012). The  healing  power  Of antioxidant :  Mengenal  lebih  jauh  sumber antioksidan unggulan . Elex Media Komputindo.
Marjoni, R. (2016). Dasar-dasar fitokimia untuk diploma III farmasi . CV TRANS INFO MEDIA. Molyneux,  P.  (2004).  The  Use  of  Stable  Free Radikal  Diphenylpicrilhidrazyl  (DPPH)  for Estimating  Antioxidant  Activity. Journal Science of Technology , 26(2), 211-219. Pandey,  A.  (2012).  Moringa  Oleifera  Lam. (Sahijan)  -  A  plant  with  a  plethora  of diverse  therapeutic  benefits:  An  updated retrospection. Medicinal & Aromatic Plants ,
01 (01). https://doi.org/10.4172/2167-
0412.1000101
Rahman Wahid, A., & Safwan. (2020).  Skrining fitokimia  senyawa  metabolit  sekunder terhadap  ekstrak  tanaman  ranting  patah tulang (Euphorbia tirucalli L.). Jurnal Ilmu Kefarmasian , 1 (1). Robinson,  T.  (1995). Kandungan  organik tumbuhan tinggi (K. Padmawinata, Ed.; 6th ed.). ITB Press.
Prasetyo,  A.  B.  (2021). Pengaruh  metode ekstraksi terhadap kadar flavonoid ekstrak etanol daun kemangi (Ocimum basilicum L.) . Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Santoso U. (2021). Antioksidan pangan. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.
Sayuti,  K.,  &  Yenrina,  R.  (2015). Antioksidan alami dan sintetik . Andalas University Press.
Tristantini, D., Ismawati, A., Tegar Pradana, B., &
Gabriel  Jonathan,  J.  (2016).  Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan metode  DPPH  pada  daun  tanjung (Mimusops  elengi  L). Prosiding  Seminar Nasional Teknik Kimia “Kejuangan” . Toripah,  S.  S.,  Abidjulu,  J.,  &  Wehantouw,  F. (2014).  Ekstrak  daun  kelor  (MORINGA OLEIFERA LAM).
PHARMACONJurnal
Ilmiah Farmasi-UNSRAT , 3 (4).