Gorontalo Journal Health and Science Community P-ISSN (2614-8676), E-ISSN (2614-8676) https://ejurnal.ung.ac.id/index.php/gojhes/index

## AKTIVITAS Lactobacillus casei SEBAGAI PENURUN KADAR KOLESTEROL SECARA In Vitro

## LACTOBACILLUS CASEI ACTIVITY AS CHOLESTEROL REDUCTION IN VITRO
Lestina Ritonga 1 , Ria Natalia Saragih¹, Erida Novriani¹, Edy Fachrial 2,3
1 Program Studi Farmasi Klinis Fakultas Kedokteran, Kedokteran Gigi Dan Ilmu Kesehatan Universitas Prima Indonesia, Indonesia.
2 Fakultas Kedokteran, Kedokteran Gigi dan Ilmu Kesehatan Universitas Prima Indonesia, Indonesia.
3 Pusat Unggulan Iptek Diabetic Care and Tech, Universitas Prima Indonesia, Indonesia. email: fachrial_edy@yahoo.co.id
Abstrak
Hiperkolesterolemia adalah di mana keadaan tingkat kolesterol dalam darah melebihi batas normal yang ditetapkan, yaitu melebihi 200 mg/dL. Bakteri asam laktat dapat digunakan sebagai terapi alternatif kemampuan  untuk  menurunkan  kadar  kolesterol.  Kebaruan  dari  penelitian  ini  probiotik  bakteri  asam laktat  memiliki  manfaat  terapeutik  seperti  kadar  kolesterol  dalam  darah  menurun  dan  mencegah terjadinya kanker usus.  Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui apakah Lactobacillus casei dapat menurunkan kolesterol secara in vitro. Metode penelitian aktivitas antimikroba dilakukan dengan metode  disc  paper,  uji  ketahanan  terhadap  pH  asam,  garam  empedu  dan  pengurangan  kolesterol dilakukan dengan metode spektrofotometer. Hasil penelitian uji aktivitas antimikroba isolat Lactobacillus casei menunjukkan aktivitas zona hambat terhadap bakteri E. coli sebesar 28,5 mm dan S. aureus sebesar 33,2 mm. Uji ketahanan terhadap pH asam sebesar 45,42%. Uji ketahanan terhadap garam empedu yaitu 55,39%, penurunan kadar kolesterol secara in vitro cukup baik yaitu 82,20%. Kontrol positif pengurangan kolesterol oleh simvastatin adalah 56,89%. Kesimpulan yang diperoleh dari penelitian ini adalah probiotik isolat Lactobacillus casei dapat menurunkan kadar kolesterol secara In Vitro.
Kata kunci : Bakteri asam laktat; Kolesterol; Lactobacillus casei.

## Abstract
Hypercholesterolemia is a condition in which the level of cholesterol in the blood exceeds the established normal limit, which is over 200 mg/dL. Lactic acid bacteria can be used as an alternative therapy due to their ability to lower cholesterol levels. The novelty of this study is that probiotic lactic acid bacteria have therapeutic benefits such as preventing colon cancer and lowering cholesterol levels in the blood. The purpose of this study was  to  determine  whether  Lactobacillus  casei  can  lower  cholesterol  in  vitro.  The  research  method  for antimicrobial activity was conducted using the disc paper method, and the resistance tests to acidic pH, bile salts, and cholesterol reduction were performed using the spectrophotometer method. The antimicrobial activity test of the Lactobacillus casei isolate showed inhibition zone activity against E. coli bacteria at 28.5 mm and S. aureus at 33.2 mm. The resistance test to acidic pH was 45.42%. The resistance test to bile salts was 55.39%, and the reduction of cholesterol levels in vitro was quite good at 82.20%. The positive control for cholesterol reduction using simvastatin was 56.89%. The conclusion from this study is that the probiotic isolate Lactobacillus casei can reduce cholesterol levels in vitro.
Keywords: Cholesterol; Lactic Acid Bacteria; Lactobacillus cas.
Received: June 21 th , 2024; 1 st Revised July 5 th , 2024; 2 st Revised July 15 th , 2024;
Accepted for Publication : July 31 th , 2024
© 2024 Lestina Ritonga, Ria Natalia Saragih, Erida Novriani, Edy Fachrial Under the license CC BY-SA 4.0

## 1. PENDAHULUAN
Hiperkolesterolemia merupakan keadaan dimana  taraf  kolesterol  pada  darah.  Yang  akan terjadi pada penelitian yang dilakukan pada tahun 2018,  Riset  Kesehatan.  Dasar  prevalensi hiperkolesterolemia  ditemukan  kategori  border (kadar kadar kolesterol 200 – 239 mg/dl) 21,2%, pada  penduduk  Indonesia  usia  ≥  15  tahun kategori  tinggi  (kolesterol  total)  ≥  240  mg/dl 7,6%.  Melebihi  batas  normal  yang  ditetapkan, yakni  lebih  dari    200  mg/dL.  Kondisi  ini meningkatkan risiko terjadinya berbagai penyakit hiperkolesterolemia yang disebabkan oleh faktor keturunan,  konsumsi  makanan  berlemak  dan merokok.  Tingkat  kolesterol  dapat  dipengaruhi makanan yang merupakan sumber lemak terdapat pada  asupan  zat  gizi,  kenaikan  lemak  dapat meningkat sebesar 100 mg/hari bisa meningkatkan  kolesterol  sebesar  2-3  mg/dL. Kondisi  ini  dapat  mempengaruhi  biosintesis kolesterol  melalui  beberapa  faktor  yang  dapat menurunkan  sintesis  kolesterol  reduktase,  salah satunya  adalah  penurunan  aktivitas  HMG  CoA. Kadar  vitamin  yang  tinggi  dapat  menurunkan sintesis  kolesterol  sehingga  kadar  kolesterol menurun (1).
Penindakan yang usaha dampak mencegah terjadinya lebih lanjut hiperkolesterolemia
diperlukan untuk mengendalikan  kadar  kolesterol  dalam  darah yaitu Therapeutic Lifestyle Changes (TLC) yang melibatkan pemilihan bahan makanan yang dapat menurunkan  kadar  LDL,  mengurangi  lemak
jenuh  dan  kolesterol,  menurunkan  berat  badan dan meningkatkan olahraga teratur (2).
Gangguan  metabolisme  lemak  yang terjadi karena hiperkolesterolemia dapat menyebabkan  peningkatan  kadar  lemak  dalam darah adalah disebabkan oleh defisiensi reseptor Low Density Lipoprotein (LDL), defisiensi enzim lipoprotein dan lipase, dalam produksi kolesterol di hati atau penurunan kemampuan ketidaknormalan  disebabkan  oleh  genetik  yang menghasilkan kenaikan drastis (3).
Menurunkan  tingkat  kolesterol  dalam aliran  darah  merupakan  strategi  perawatan penting  untuk  mencegah  penyakit  jantung kolesterol  di  atas  200  mg/dL  dapat  ditangani dengan  dua  jenis  pengobatan,  yaitu  pengobatan farmakologis  dan  nonfarmakologis.  Salah  satu pengobatan farmakologis yang umum digunakan pada pasien hiperkolesterolemia adalah simvastatin.  Untuk  pengobatan  non  medis, dengan makan  sayur  dan  buah  yang tinggi  serat dan  antioksidan,  dengan  kolesterol  di  atas  200 mg/dL (1).
Hiperkolesterolemia  adalah  suatu  hal yang  dimana  konsentrasi  kolesterol  melebihi batas normal di dalam darah. Beberapa prevalensi untuk menurunkan kadar kolesterol (LDL) adalah memodifikasi  hidup  diet.  Diet  yang  disarankan ialah  dengan  mengkonsumsi  makanan  bersifat non hiperkolesterolemia misalnya mengkonsumsi yoghurt (4). Perawatan obat saat ini tidak efektif. Penderita  hiperkolesterolemia di Indonesia  hampir  70%  tidak  mencapai  target
kadar  kolesterol  yang  diinginkan  sesuai  anjuran medis.  Selain  itu  obat  yang  digunakan  untuk mengatasi  hiperkolesterolemia  harganya  relatif mahal,  menimbulkan  efek  samping  yang  lebih berbahaya dan seringkali menyebabkan kekambuhan. Pengobatan yang dilakukan dengan cara  teknik  reimprinting.  Reimprinting  dapat membantu  penderita  Reimprinting  memiliki potensi  untuk  mengubah  persepsi  individu  yang menderita hiperkolesterolemia, mendorong mereka  untuk  mengembangkan  pandangan positif  terhadap  kondisi  kesehatan  mereka. Dengan memperkuat keyakinan ini, mereka dapat termotivasi  untuk  secara  konsisten  mengikuti pengobatan  yang  diresepkan  oleh  profesional kesehatan  serta  mulai  menerapkan  pola  makan rendah kolesterol yang direkomendasikan (5).
BAL (Bakteri asam laktat) bisa dijadikan sebagai alternatif terapi kemampuan menurunkan kadar  kolesterol.  Adanya  kemampuan  BAL dalam  mengasimilasi  kolesterol  kemungkinan dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah, Kolesterol  bergabung  menjadi  satu  pada membran  sel,  kemudian  bakteri  asam  laktat mengambil  atau  menyerap  kolesterol  tersebut, sehingga  bakteri  tersebut  resisten  terhadap degradasi.  Kadar  kolesterol  juga  mengalami penurunan,  karena  berkurangnya  penyerapan kolesterol makanan dari saluran pencernaan (6). Ada beberapa BAL (Bakteri Asam Laktat) yang dinding  selnya  mampu  mengikat  kolesterol  di usus. Karena tindakan enzim Bile Salt Hydrolase (BSH)  terjadi  penurunan  kolesterol  melalui aktivitas  BAL.  Dapat  mengubah  struktur  garam
empedu  dengan  memisahkan  asam  amino  atau asam  2-  amino  metana  sulfonat  dari  steroid. Selama proses ini, garam asam empedu diperoleh dalam  bentuk  bebas  atau  terkonjugasi.  Enzim Bile Salt Hydrolase (BSH) terkonjugasi menjadi bentuk  bebas  asam  folat,  yang  diserap  dengan usus  kecil  dan  menghasilkan  garam  empedu. Selama  sirkulasi  garam  empedu  kembali  hati enterohepatic (EHC) menurun, sehingga kolesterol  total  tubuh  juga  bisa  berkurang  (7). Mengklaim  bahwa  BAL  dapat  membuat kolesterol  menurun  baik  secara in  vitro. Kemampuan  BAL  dapat  menurunkan  kolesterol disebabkan    kemampuan  BAL  dapat  menyerap garam  empedu. Kebaruan  dari  penelitian  ini adalah  bakteri  asam  laktat  probiotik  memiliki manfaat  terapeutik,  seperti  pencegahan  kanker. Usus  besar  juga  dapat  menurunkan  kolesterol. Tujuan penelitian ini ialah agar dapat mengetahui apakah Lactobacillus  casei menurunkan  kadar kolesterol secara in vitro.

## 2. METODE

## Alat dan bahan
Adapun  alat  yang  dibutuhkan  pada penelitian ini adalah, Tabung reaksi, Cawan petri, Erlenmeyer,  Pipet  tetes  kaca,  Gelas  ukur, Autoclave, Bunsen,  Kaca  objek,  Mikropipet, Mikroskop, Spektrofotometer Uv-Vis , Sentrifugasi,  Beaker  glass  Autoklaf,  Inkubator, Timbangan, Koloni Center, Syringe filter , Suntik plastik 20 ml, Spatula, Objek glass, Jarum ose.
Dalam  penelitian  ini  bahan  yang diperlukan  adalah  Isolat  bakteri  asam  laktat, Aquades,  Bakteri  Patogen Escherichia  coli ,
Bakteri  patogen Staphylococcus  aureus ,  Kertas cakram,  Kolesterol  ( Nippon  Fine  Chemical ),
Medium MRS Agar, Medium MRS Broth, NaCl fisiologis, Oxbile (0,30%), Phosphate  Buffer Saline, Simvastatin,  Alkohol,  Crystal  violet, gram iodine, Safranin, Tween 80.

## Isolasi Lactobacillus Casei
Isolasi  bakteri  ditumbuhkan  kembali dengan  MRS  agar  kemudian  diinkubasi  pada suhu 37℃ selama 48 jam.
Karakterisasi Gram Staining
Karakterisasi
Gram dilakukan menggunakan membersihkan kaca objek memakai  NaCl  fisiologis  0,9%.  Meneteskan garam fisiologis sekitar 1-2 tetes pada kaca objek. Disebarkan  bakteri  di  larutan  garam  fisiologi secara  aseptik,  melakukan  fiksasi  panas  dan teteskan  menggunakan kristal violet kurang lebih sekitar  2  menit.  Buang  sisa  zat  rona  serta bersihkan  mengenakan  aquadest.  Meneteskan lugol sekitar 1-2 tetes diamkan selama 45  detik, lalu bersihkan menggunakan aquadest.
Selanjutnya teteskan zat warna ke 2 yaitu safranin sebanyak 1-2 menit, lalu bilas memakai aquadest. Kemudian diamati menggunakan mikroskop (8).

## Aktivitas Antimikroba
Kultur  bakteri E.  coli dan S.  aureus patogen  dalam  NaCl  fisiologis  digunakan  untuk menguji aktivitas antimikroba. Kemudian kultur dianalisis  secara  spektrofotometri  pada  600  nm (OD 600 nm) hingga mencapai nilai serapan 0,1, sesuai  dengan  satu  jarum  tabung  BAL  yang diambil  dari  media  agar,  kemudian  dikultur dalam media kaldu MRS pada suhu 37°C selama
24  jam.  Untuk  menguji  efek  antibakteri, dituangkan  ke  dalam  cawan  Petri  media  nutrien agar  sehingga  memadat  Partikel  bakteri E.  coli dan S. aureus patogen larutan dari NaCl fisiologis kemudian dipindahkan ke cawan Petri menggunakan  metode  cotton  bud  spread  plate Isolat  bakteri  yang  dikultur  diuji  menggunakan metode  cakram.  Kertas  Whatman  berdiameter  1 sentimeter dicelupkan ke dalam suspensi bakteri. Tempatkan  pada  masing-masing  cawan  yang berisi E.  coli dan S.  aureus. Kertas  Whatman yang  dibasahi  dengan  antibiotik  amoksisilin ditempatkan  dalam  cawan  Petri.  Cawan  Petri diinkubasi  dalam  inkubator  terbalik  selama  24 jam pada suhu 37°C dilakukan pengamatan pada zona  hambat.  Setelah  inkubasi,  zona  hambat diukur dengan jangka sorong (9).
Karakterisasi  pH Asam dan Bile Salt
BAL yang terdapat dalam asam dilakukan  dengan  ketahanan  terhadap  pH  3  dan dilakukan  dengan  metode  spektrofotometri Diambil  1  ml  dari  masing-masing  BAL  yang berbeda dan kedalam 9 mililiter MRS broth yang telah  dibuat  pada  asam dengan  menambahkan HCl pekat, sampel diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37℃. kemudian diambil sampel sebanyak 1 mililiter  dengan  mikropipet  dan  dimasukkan  ke dalam media pengenceran, dilakukan pengenceran hingga 10 −6 di pengenceran 10 −4 , 10 −5 dan 10 −6 diambil  1  mililiter  BAL dipindahkan  ke  dalam  cawan  petri  kemudian ditambahkan media MRS agar dan dihomogenkan. Selama 24 jam sampel diinkubasi pada  suhu  37℃.  Kemudian  absorbansi  diukur
secara spektrofotometri dengan perlakuan pH 3. Semakin  kecil  perlakuan  asam  semakin  kecil selisih  jumlah  koloni  semakin  tahan  BAL  yang diuji terhadap pH rendah (10).
Menghitung  media  pH  asam  dan Bile Salt . Menggunakan rumus sebagai berikut : Laju pertumbuhan pH asam dihitung: % pertumbuhan =  absorbansi  pH  3  :  Absorbansi  pH  normal  × 100%. Laju pertumbuhan pH Bile Salt dihitung: % Pertumbuhan = Pertumbuhan pada Bile Salt :
Pertumbuhan pada normal × 100%.
Aktivitas Penurunan Kadar Kolesterol Secara

## In vitro
Penilaian Isolat BAL untuk menurunkan kolesterol dilakukan dalam medium MRSB yang mengandung 0,30% Oxbile dan 80 µg/ml larutan kolesterol  larut  air.  Larutan  kolesterol  yang disterilkan dengan membran filter selulosa asetat 0,22  µm  (10  mg/ml)  sebelumnya  dibuat  dalam medium  MRSB  yang  dilengkapi  dengan  0,3% Oxbile, 1% v/v kultur terisolasi BAL, berumur 24 jam. , telah menetas. Total BAL dihitung dengan cara mensentrifugasi kultur pada suhu 5000°C 10 menit dan kadar kolesterol diukur dalam medium (supernatan). Penurunan kolesterol dalam medium diukur pada panjang gelombang 500nm
menggunakan spektrofotometer. Penurunan kolesterol  ditentukan  dengan  membandingkan konsentrasi  kolesterol  awal  pada  medium sebelum  inkubasi  dengan  konsentrasi  kolesterol sisa setelah masa inkubasi (supernatan) (11).
(Kontrol  positif)  simvastatin  10  mg ditambahkan  5  ml  kedalam  larutan  kolesterol 1000  ppm  dicampur  oksibil  0,30%.  Campuran kemudian  dihomogenisasi  menggunakan  cara vorteks selama 30 detik dan diinkubasi selama 60 menit  pada  suhu  37°C  dan  disentrifugasi  pada kecepatan  10.000  selama  10  menit  pada  suhu 40°C.  Kadar  kolesterol  diukur    dalam  medium (supernatan)  menggunakan  metode  kolorimetri 550 nm (11).
Data yang diperoleh dalam penelitian ini akan dihitung menggunakan rumus = A = C–B: C ×  100%.  Keterangan  =  A  =  %  Penurunan Kolesterol, B = jumlah rata-rata kolesterol dalam supernatan  setelah  perlakuan,  C  =  jumlah  rata- rata kolesterol awal.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Dilihat  pada  tabel  1.  Hasil  dari    penelitian, karakterisasi  isolat lactobacillus  casei memiliki pewarnaan Gram yang bersifat basil, uji katalase positif dan tipe fermentasi homofermentatif.
Tabel 1. Karakterisasi isolat Lactobacillus casei Isolat Pewarnaan gram Uji katalase Tipe fermentasi Lactobacillus casei Basil Positif Homofermentatif Tabel 2 . Hasil Uji Aktivitas Antimikroba S.aureus dan E.coli Formulasi Diameter daerah hambatan (mm) S. aureus E.coli K (+) 33,2 28,5 Bakteri Lactobacillus casei 4 6,5
Keterangan (+) mengatakan bahwa antibiotik amoxicillin dapat menghambat bakteri E. coli dan S. Aureus .
Gambar A. Zona hambat aktivitas antimikroba isolate Lactobacillus casei Terhadap E. coli (Hasil penelitian Lestina dan Ria., 2024).
Gambar 4.3 Zona hambat aktivitas antimikroba isolat Lactobacillus casei Terhadap S. aureus (Hasil penelitian Lestina Ria.,2024).
Tabel 3. Hasil uji ketahanan Lactobacillus casei terhadap pH asam Isolat Absorbansi pH 3 Absorbansi pH 6,5 % Pertumbuhan Lactobacillus casei 0,497 1,094 45,42% Tabel 4. Hasil uji ketahanan Lactobacillus casei terhadap Bile salt Isolat Absorbansi Bile Salt Absorbansi tanpa Bile Salt % Pertumbuhan Lactobacillus casei 0,606 1,094 55,39% Tabel 5. Hasil penurunan Kadar Kolesterol oleh isolat Lactobacillus casei. Isolat Absorbansi kolesterol awal Absorbansi kolesterol setelah perlakuan % Penurunan kolesterol Lactobacillus casei K + 1,023 1,023 0,182 1,605 82,20% 56,89%
Keterangan (+) menyatakan bahwa simvastatin tidak dapat menurunkan kolesterol secara In Vitro.

## Pewarnaan Gram
Hal  pada  Tabel  1.  Dapat  dilihat  tujuan pewarnaan  gram  adalah  melihat  morfologi  sel bakteri secara mikroskopis dan untuk membedakan  gram  positif  dan  bakteri  gram negatif.  Yang  mempunyai  warna  sekunder  atau merah  bakteri  Gram  negatif  ,  sedangkan  primer atau  berwarna  ungu  bakteri  Gram  positif  di bawah mikroskop. Hasil penelitian ini menjelaskan bahwa pewarnaan BAL menunjukkan  morfologi  bakteri  dan  biasanya berbentuk  batang,  Gram  positif  ditunjukkan
dengan  warna  ungu  bakteri  pada  Gambar  1. Mikroorganisme mempunyai kandungan peptidoglikan  lebih  tinggi,  mikroorganisme negatif  memiliki  kandungan  lipid  yang  lebih tinggi (12).

## Aktivitas Antimikroba terhadap patogen
Dapat  dilihat  pada  tabel  2.  Aktivitas antimikroba memiliki suatu zat untuk menghambat  atau  membunuh  mikroorganisme patogen.  Mekanisme  aktivitas  antibakteri  BAL dapat melakukan penyebaran sel bakteri kedalam
patogen  dalam  bentuk  tak  terdisosiasi.  Untuk mengidentifikasi  aktivitas  antibiotik  dalam menghambat  pertumbuhan  mikroba,  digunakan metode difusi cakram. Isolat Lactobacillus casei Senyawa-senyawa tersebut memiliki kemampuan yang  berbeda  dalam  menghambat  pertumbuhan E. coli dan S. aureus . Kemampuan menghambat ini  ditunjukkan  oleh  terbentuknya  zona  hambat dengan diameter 4 mm terhadap bakteri S. aureus dan  6,5  mm  terhadap  bakteri E.coli .  Hasil penelitian menunjukan bahwa perlakuan kontrol positif  dan  bakteri  asam  laktat  memiliki kemampuan  menghambat S.aereus dan E.coli .
Perlakuan kontrol positif menggunakan amoxicillin zona hambat yang dapat pada E.coli sebesar  28,5  mm  dan  zona  hambat  yang  dapat pada S.aureus sebesar  33,2  mm  kontrol  positif memiliki  kemampuan  menghambat  bakteri S.aureus dan E.coli.
Berdasarkan  gambar  diatas  bakteri  yang diinkubasi  selama  8  jam,  terlihat  bahwa  bakteri E.coli yang  bersifat  gram  negatif  dan  bakteri S.
aureus yang  bersifat gram  positif mempunyai aktivitas  antimikroba  yang  terlihat  dari  adanya zona  bening  pada  media  agar  di  sekitar  kertas cakram,  dan  zona  hambat  yang  memiliki  zona bening  lebih  besar  terdapat  di  bakteri S.  aureus dengan ukuran 33,2 mm dan E. coli sebesar 28,5 mm.  Perbedaan  dalam  struktur  dinding  sel  dan mekanisme resistensi antara S. aureus dan E. coli menjelaskan mengapa S. aureus lebih rentan dan menunjukkan  ukuran  zona  hambat  yang  lebih besar  dalam  uji  antimikroba.  Beberapa  bakteri asam  laktat  memiliki  aktivitas  antimikroba
terhadap  L.  monocytogenes  dan  juga  memiliki potensi  probiotik.  Asam  organik  dan  hidrogen peroksida  yang  dihasilkan  oleh  laktobacillus dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  Gram Positif dan Gram negatif. Sedangkan bakteriosin lebih berpengaruh terhadap bakteri Gram positif (11).

## Ketahanan terhadap pH asam
Bahwa dari hasil penelitian pada Tabel 3, Meskipun pertumbuhannya tidak baik Lactobacillus  casei  menunjukan  ketahanan terhadap  pH  asam  dengan  nilai  45,42%. Lactobacillus  casei sangat  tahan  terhadap  pH asam. Sistem pertahanan utama pada kondisi pH rendah bakteri asam laktat dapat bertahan hidup adalah  sistem  glutamat  dekarboksilase  (GAD), sistem  deaminasi  arginin  (ADI)  dan  pompa proton  H+-ATPase.  Dengan  bantuan  salah  satu sistem  pertahanan  tersebut,  bakteri  asam  laktat dapat  bertahan  hidup  dalam  kondisi  keasaman tinggi (8).

## Ketahanan terhadap Bile Salt
Dapat  dilihat  pada  tabel  4.  Hasil penelitian, Lactobacillus casei memiliki ketahanan terhadap Bile Salt ialah dilihat dengan adanya viabilitas pertumbuhan yang cukup tinggi ialah  55,39%. Bakteri  asam  laktat  terhadap garam  empedu  berkaitan  dengan  meng dekonjugasi garam empedu. Terjadi dekonjugasi karena  bakteri  menghasilkan  enzim  hidrolase garam empedu ( 13 ). Dengan enzim BSH (BAL) dapat  mengubah  garam  empedu  terkonjugasi menjadi  garam  empedu  terkonjugasi  sehingga dapat menyebabkan penurunan .

## Penurunan kadar kolesterol secara in vitro
Bahwa dari hasil penelitian pada Tabel 5, isolat  BAL  menunjukkan  kemampuan  yang cukup baik dalam menurunkan kadar kolesterol, yaitu  sebesar  82,20%,  sementara  penurunan kadar kolesterol oleh simvastatin (kontrol positif) adalah sebesar 56,89 %.
Dari  hasil  penelitian  ini  diketahui  jika hasil BAL lebih tinggi dibandingkan dengan K+ dikarenakan BAL dapat meng dekonjugasi garam empedu dan mengasimilasi kolesterol Menurunkan  kolesterol  bisa  dilakukan  tiga  cara pertama BAL fermentasi menghambat kolesterol sintesis. Garam empedu dibuang melewati feses sehingga empedu tersebut tidak terkonjugasi dan empedu  yang  terdkonjugasi  lebih  mudah terbuang  garam  empedu  dibandingkan  dengan yang  terkonjugasi.  kemampuan  BAL  untuk mengikat kolesterol, sehingga mencegah penyerapan kembali kolesterol ke hati (14).
K+  lebih  rendah  dikarenakan  tidak optimalnya  cara  kerja  dari  HMGCR  dalam pengaturan  aktivitas  enzim,  saat  aktivitas HMGCR  diatur  secara  ketat  oleh  mekanisme umpan  balik  ( feedback) yang  melibatkan kolesterol  dan  produk  antara  dalam  jalur biosintesis  kolesterol  kemudian  ketika  kadar kolesterol dalam sel tinggi, kolesterol menghambat ekspresi gen HMGCR dan meningkat  degradasi  enzim  yang  sudah  ada. Selain  itu,  kolesterol  juga  meningkat  fosforilasi HMGCR  oleh  protein  kinase  tertentu  yang mengurangi aktivitas enzim. Mekanisme simvastatin  dengan  menghambat  enzim  3-
hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMGCR),  simvastatin  mengurangi  produksi kolesterol  intraseluler,  sehingga  mengakibatkan penurunan  kadar  kolesterol  dalam  darah  (15) ( 16 ) .

## 4. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  “Aktivitas Lactobacillus  casei Sebagai  penurun  Kadar Kolesterol  Secara In  vitro” penelitian  ini menunjukkan  bahwa  BAL  (bakteri  asam  laktat) dapat menurunkan kolesterol secara In Vitro.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulisan mengatakan terimakasih kepada  bapak  Edy  Fachrial  dan  kepada  semua pihak yang terkait dalam penelitian ini sehingga penelitian ini dapat berjalan dengan lancar.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Siti  Masruroh,  Restuti  ANS.  Pengaruh Kombinasi  Sari  Jambu  Biji  Merah  dan
Buah  Naga  Merah  terhadap  Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Hiperkolesterolemia.  HARENA    J  Gizi. 2023 Dec;4(1 SE-):40–55.
2. Siti  Harsianti  Dewi  Handayani,  Haniarti,
Fitriani  Umar. Pengaruh  Konsumsi Minuman  Berkarbonasi  Terhadap  Kadar Kolesterol Penderita Hiperkolesterolemia Di  Kelurahan  Lancirang.  J  Ilm  Mns  Dan Kesehat. 2021 May;4(2):172–80.
3. Rahmawati  Y,  Dwi  Ramadanty  D,
Rahmawati F, Perwitasari E.
Hiperkolesterolemia  Pada  Pasien  Lanjut Usia : Studi Kasus Puskesmas Seyegan. J Kesehat  Tambusai.  2022  Mar;3(1):157–
63.
4. Achirman  A,  Nur  Afrida  E.  Pengaruh
Pemberian  Jus  Apel  Hijau  (Malus Sylvestris  Mill)  Terhadap  Penurunan Kolesterol Darah Pada Penderita Hiperkolesterolemia.  Madago  Nurs  J. 2022 Jun;3(1):1–5. 5. Admin, Dedi Pahrul, Abdul Syafei. Terapi Bekam Basah Terhadap Kadar Kolerterol Pada  Penderita  Hiperkolesterolemia  di Klinik Holistic Centre Asy-Syafii Palembang. J Kesehat dan Pembang. 2021 Jul;11(22):15–9. 6. Anindita  NS.  Isolasi  Dan  Identifikasi
Fenotipik  Bakteri  Asam  Laktat  (BAL) Indigenous  Asal  Air  Susu  Ibu  (ASI).  J Teknol Pangan. 2022 Jan;5(1):18–23. 7. Puspawati.  Potensi  Isolat  Bakteri  Asam Laktat dari Kombucha Sebagai Antihiperkolesterol  Secara  In  Vitro.  J Ilmu  dan  Teknol  Pangan.  2022;(Vol  11 No 4 (2022): Jurnal ITEPA):731–43.
8. Manalu  RT,  Bahri  S,  Melisa,  Sarah  S.
Isolasi  dan  karakterisasi  bakteri  asam laktat asal feses manusia sebagai antibakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Sainstech Farma.
2020;13(1):55–9.
9. Putri  RA,  Simbala  HEI,  Mpila  DA.  Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol
Bawang  Dayak  (Eleutherine  Americana Merr)  Terhadap  Bakteri  Staphylococcus aureus,  Escherichia  coli  Dan  Salmonella Typhi. Pharmacon. 2020 Nov;9(4):525.
10. Finanda A, Hadari Nawawi JH, Barat K. Isolasi  Dan  Karakterisasi  Genus  Bakteri Asam  Laktat  Dari  Fermentasi  Daging Buah  Pisang  Kepok  (Musa  paradisiaca L.). Protobiont. 2021;10(2):37–41.
11. Imtihani  HN,  Permatasari  SN,  Prasetya RA.  In  Vitro  Evaluation  of  Cholesterol- Reducing  Ability  of  Chitosan  from Mangrove  Crab  (Scylla  serrata)  Shell Solid  Dispersion  using  PVP  K-30  as  a Carrier.  J  Farm  Galen  (Galenika  J Pharmacy). 2021 Oct;7(2):99–109. 12. Fachrial  E,  Harmileni,  Anggraini  S. Pengantar Teknik Laboratorium
Mikrobiologi  dan  Pengenalan  Bakteri Asam Laktat. Unpri Press. 2019. 1–88 p.
13. Risna  YK,  Harimurti  S,  Wihandoyo  W,
Widodo  W,  Sukarno  AS.  Aktivitas Antibakteri  Bakteri  Asam  Laktat  (BAL) yang  Diisolasi  dari  Saluran  Pencernaan Itik Lokal Asal Aceh terhadap Salmonella pullorum dan Escherichia coli. J Agripet. 2022 Oct;22(2):169–74.
14. Rinanti  RF,  Utomo  B,  Tribudi  YA.
Mekanisme Konsumsi Kefir Pada
Penurunan  Kolesterol  Darah.  J  Ilm  Fill Cendekia. 2022 Oct;7(2):166.
15. Budi  A,  Sijabat  RM.  Relationship Between  Level  of  Knowlegde  and Accuracy  of  Using  Simvastatin  in Hypercholesterolemic  Patients  at  Advent Medan  Hospital.  J  Pharm  Sci.  2023 Jun;6(2):437–44.
16. Inur Tivani KK. Uji Aktivitas Antibakteri
Granul Effervescent Ekstrak Kulit Nanas Madu  Dengan  Pemanis  Daun  Stevia Terhadap Escherichia Coli. 2024;110-120