Jurnal Nukleus Peternakan (Desember 2020) Volume 7, No. 2:109-117                     pISSN : 2355-9942,    eISSN:2656-792X Barek et al .: Pengaruh Penambahan Sari Wortel ........................

## PENGARUH PENAMBAHAN  SARI  WORTEL DALAM PENGENCER SITRAT KUNING TELUR  TERHADAP KUALITAS  SPERMATOZOA  KAMBING BLIGON

## (THE EFFECT OF CARROT JUICE SUPPLEMENTATION IN CITRATE - EGG
YOLK EXTENDER ON SPERMATOZOA QUALITY OF BLIGON GOAT)
Maria E. Barek, Kirenius Uly, Wilmientje M. Nalley, H.L.L. Belli, Thomas M. Hine* Fakultas Peternakanan - Universitas Nusa Cendana, Jln.Adisucipto, Penfui.
*Correspondence author, email: thomasmatahine@staf.undana.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk    menguji  pengaruh  penambahan  berbagai  dosis  sari  wortel  ke  dalam  pengencer sitrat-kuning telur (S-KT) terhadap kualitas spermatozoa kambing Bligon. Semen ditampung dua kali seminggu menggunakan metode vagina buatan dari 3 ekor kambing pejantan dengan kondisi tubuh dan organ reproduksi yang  normal.  Semen  yang  memiliki  motilitas  diatas  70%,  konsentrasi  ≥1000x10 6 mL  dan  abnormal  ≤  15% selanjutnya diencerkan dengan S-KT yang ditambahkan dengan sari wortel pada konsentrasi: 0% (SW-0), 10% (SW-10), 12,5% (SW-12,5), 15% (SW-15), 17,5% (SW-17,5), dan 20% (SW-20). Semen yang telah diencerkan disimpan di dalam lemari  pendinginan pada suhu 3-5 o C. Evaluasi dilakukan setiap 24 jam terhadap  motilitas, viabilitas  dan  abnormalitas  spermatozoa.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa    spermatozoa  yang  diencerkan dengan  S-KT  yang  disuplementasi  dengan  sari  wortel  17,5%  (P4)  mempunyai  kualitas  lebih  tinggi  (P<0,05) dibandingkan  dengan  ke  empat  perlakuan  lainnya,  yaitu  dengan  motilitas  (49,04%),  viabilitas  (55,70%),  dan abnormalitas  (4,57%)  dengan  lama  penyimpanan  selama  4  hari.  Disimpulkan  bahwa  penambahan  sari  wortel sebanyak  17,5%  ke  dalam  pengencer  sitrat  kuning  telur  dapat  meningkatkan  kualitas  spermatozoa  kambing bligon.
Kata kunci: sitrat kuning telur, sari wortel, spermatozoa, kambing bligon.

## ABSTRACT
This study aims to determine the effect of adding various doses of carrot juice into citrate-egg yolk diluents (C- EY) on bligon buck semen quality. Semen was collected twice a week using an artificial vaginal method of three buck  with  normal  body  condition  and  reproductive  organs.  Semen  was  70%  of  motility,  konsentration ≥1000x10 6 mL and abnormality ≤ 15 diluted with C-EY added with carrot juice at a concentrations: 0% (CJ-0), 10% (CJ-10), 12.5% (CJ-12,5), 15% (CJ-15), 17.5% (CJ-17,5), and 20% (CJ-20), and stored in a refrigerator at 3-5 o C.  The  quality  of  spermatozoa  was  evaluated  every  24  hours.  The  Variables  measured  were  spermatozoa motility, viability, and abnormalities. The results showed that spermatozoa preserved by C-EY supplemented by 17.5% carrot juice (CJ-17.5) had a higher quality (P<0.05) compared to the other four treatments, with motility (49.04  ±  1.0 % ),  viability  (55.70  ±  1.22%),  dan  abnormalities  (4.57  ±  0.88  %)  on  the  4th  day  of  storage.  This study concludes that 17.5% carrot juice into citrate eggyolk extender improves the bligon buck semen
Keywords: citrate egg yolk, carrot juice, spermatozoa, bligon goat

## PENDAHULUAN
Kambing  Bligon  (Jawa  Randu)  merupakan kambing  hasil  persilangan  kambing  kacang dengan  kambing  Peranakan  Ettawa  (PE). Kambing  Bligon  merupakan  kambing  lokal Indonesia  yang  mempunyai  keistimewaan  dari segi  reproduksinya  yaitu  mampu  memproduksi cempe  sepanjang  tahun,  tidak  dipengaruhi musim, dan mempunyai tingkat prolifikasi yang relatif tinggi (Basbeth et al ., 2015).
Penggunaan    spermatozoa  pejantan  unggul untuk meningkatkan mutu genetik  ternak dapat dilakukan  melalui  teknologi  inseminasi  buatan
(IB).  Keberhasilan  IB  antara  lain  terbergantung pada  kualitas  spermatozoa  yang  digunakan,  di mana semakin tinggi kualitas spermatozoa maka tingkat  keberhasilan  IB  akan  semakin  tinggi. Pejantan  penghasil  spermatozoa  perlu  diseleksi, dan  selanjutnya  spermatozoa  yang  diperoleh dipreservasi  dalam  medium  pengencer  yang dapat  menyediakan  kebutuhan  zat-zat  nutrisi bagi  kebutuhan  fisik  dan  kimiawi  spermatozoa selama penyimpanan (Tambing dkk ., 2003 ).
Sitrat  berperan  sebagai buffer yang berfungsi untuk mempertahan pH selama proses
Jurnal Nukleus Peternakan (Desember 2020) Volume 7, No. 2:109-117                     pISSN : 2355-9942,    eISSN:2656-792X Barek et al .: Pengaruh Penambahan Sari Wortel ........................
penyimpanan suhu dingin untuk preservasi daya tahan  hidup  dan  fertilitas  spermatozoa  (Hafez, 2000),  sedangkan  kuning  telur  mengandung lipoprotein  dan  lesitin  yang  dapat  mengurangi efek cold  shock bagi  spermatozoa,  sehingga kerusakan  pada  saat  pengenceran,  pendinginan dan pembekuan berkurang.
Kuning telur dapat menyebabkan ketidakstabilan  pada  membran  dan  perubahan pada  konsentrasi  struktur  matrik  lipid  akibat terjadi  hidrolisis  lesitin  kuning  telur  menjadi isolilesitin  dan  asam  lemak  yang  dikatalis  oleh enzim fosfolipase A yang disekresi oleh kelenjar bulbouretralis (Hartono, 2008). Untuk mempertahankan  kualitas  spermatozoa  yang dihasilkan,  maka  petambahan  antioksidan  dan nutrisi  yang  dapat  melindungi  spermatozoa  dari radikal  bebas  dan  zat  tersebut  terdapat  pada
wortel.  Wortel  merupakan  salah  satu  jenis sayuran  yang  mudah  ditemui  dan  mengandung zat-zat  penting  yang  dibutuhkan  oleh  sel. Kandungan nutrisi didalamnya seperti karbohidrat yang dapat digunakan oleh spermatozoa  sebagai  sumber  energi,  vitamin  C dan β-karoten sebagai senyawa antioksidan, dan berbagai mineral (Yulnawati, 2005). Pemanfaatan sari wortel sebagai bahan pengencer  telah  dilaporkan  dengan  hasil  yang baik  dalam  proses  preservasi  spermatozoa domba  garut  (Parera et  al., 2009),  dan  sapi  bali (Yendraliza et  al. ,  2018).  Penelitian  ini bertujuan  untuk  menguji  pengaruh  penambahan berbagai  konsentrasi  sari  wortel  ke  dalam pengencer  sitrat-kuning  telur  (S-KT)  terhadap kualitas spermatozoa kambing bligon.

## METODE PENELITIAN

## Materi  Penelitian
Penelitian  menggunakan  semen  segar  dari 3  ekor  ternak  kambing  bligon  jantan  yang berada  dalam  kondisi  sehat,  mempunyai  organ reproduksi  normal  dan  telah  terlatih  untuk penampungan semen. Ternak tersebut dipelihara dalam kandang individu yang dilengkapi dengan tempat  pakan  dan  minum.  Pakan  hijauan diberikan  10  %  dari  berat  badan  ternak  serta penambahan  konsentrat  0,5  kg/ekor/hari  dan  air minum secara ad libitum .

## Metode  Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode eksperimen dengan rancangan percobaan adalah Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL),  terdiri  atas perlakuan  dan  5  ulangan  sehingga  terbentuk  30 unit  percobaan.  Ke  enam  perlakuan  tersebut adalah: S-KT + sari wortel 0% (SW-0), S-KT + sari  wortel  10  %  (SW-10),  S-KT  +  sari  wortel 12,5%  (SW-12,5),  S-KT  +  sari  wortel  15% (SW-15), S-KT + sari wortel 17,5% (SW-17,5), S-KT + sari wortel 20% ( SW-20).

## Pembuatan Bahan Pengencer
Sodium  sitrat  ditimbang  sebanyak  2,9  g dan  dilarutkan  dengan    aquabidest  hingga
mencapai 100 ml. Penyiapan kuning telur yaitu : (1)  Telur  dibersihkan  dengan  alkohol  70%  lalu dipecahkan pada bagian yang lancip dan kuning telur dipisahkan dengan putih telur menggunakan  kertas  saring  (2)  Kuning  telur yang  masih  terbungkus  selaput vitelin diletakan pada kertas saring agar menyerap sisa putih telur yang  ada.  (3)  Kuning  telur  dipecahkan  dengan cara  menyobek  selaput vitelin ,  lalu  secara perlahan kuning telur dituangkan ke dalam gelas ukur.
Larutan  sitrat  80  mL  tambahkan  20  mL kuning telur, homogenkan selanjutnya tambahkan  1  IU/mL  penisilin  dan  1  mg/mL streptomisin antibiotik guna manghambat pertumbuhan kuman selama preservasi.
Penyiapan  sari  wortel  :  Wortel  yang  segar kemudian  dicuci  sampai  bersih,  diiris  tipis-tipis lalu  dikeringkan  menggunakan  oven  dengan suhu  105 o C  selama  24  jam.  Wortel  yang  telah kering dihaluskan menggunakan blender menjadi  bubuk,  kemudian  ditimbang  dan disesuaikan dengan perlakuan. Wortel dilarutkan dengan  aquabides  kemudian  dicentrifuge,  sari wortel siap digunakan (Yendraliza et al. , 2018).
Tabel 1. Komposisi Bahan Pengencer
Bahan P0 P1 P2 P3 P4 P5 Sitrat – Kuning Telur (%) 100 90 87,5 85 82,5 80 Sari wortel (%) 0 10 12,5 15 17,5 20 Total 100 100 100 100 100 100

## Penampungan dan Evaluasi Semen
Penampungan  semen  dilakukan  dengan metode vagina  buatan dengan  suhu  42-44 o C. Penampungan  semen  dilaksanakan  2  kali seminggu  menggunakan  vagina  buatan  dan kambing  betina  berahi  sebagai  pemancing.  Air panas  bersuhu  50-55 o C  dimasukkan  pada  klep vagina  buatan  kemudian  periksa  suhu  bagian dalam  vagina  buatan  dengan  thermometer,  klep ditutup  dan  diberi  pelicin  pada  bagian  depan vagina buatan. Selanjutnya dilakukan penampungan.
Semen segar dievaluasi secara makroskopis meliputi : 1) volume semen: dapat dibaca secara langsung  pada  tabung  penampung  semen,  2) konsistensi semen diukur dengan cara memiringkan  tabung  penampung  semen  secara perlahan-lahan sambil melihat gerakan perpindahan semen keposisi semula. Pergerakan semen  yang  lambat  menunjukkan  konsistensi kental, pergerakan yang agak cepat menununjukkan  konsistensi  sedang,  sedangkan pergerakan  yang  sangat  cepat  menunjukkan konsistensi  encer,  3)  pH  semen  diukur  dengan menggunakan  kertas  indicator  pH.  pH  semen diketahui  berdasarkan  perubahan  warna  pada kertas  pH  tersebut  dan  disesuaikan  dengan standar warna pada kertas indikator pH.
Evaluasi kualitas semen secara mikroskopis  dilakukan  dengan  menggunakan mikroskop  yang  meliputi:  1)  gerakan  massa spermatozoa,  dikelompokkan  dalam  3  golongan yaitu  gerakan  cepat  berpindah  dan  berbentuk awan  tebal  dan  gelap  (+++),  gerakan  cepat  dan berbentuk  awan  tipis  (++),  terlihat  gerakan sperma  secara individu dan  tidak  ada  gumpalan awan (+). 2) konsentrasi spermatozoa menunjukkan  jumlah  sel  spermatozoa  tiap satuan volume semen diukur dengan menggunakan haemocytometer ,  dan  diamati  di bawah  mikroskop    pada  pembesaran  40×10.  3) persentase  motilitas  spermatozoa  ditentukan melalui  pengamatan  spermatozoa  di  bawah mikroskop  dengan  pembesaran  lensa  objektif 40×10. Penilaian terhadap persentase spermatozoa  motil  adalah  spermatozoa  yang bergerak  progresif  ditentukan  secara  subjektif pada  sepuluh  lapang  pandang  yang  berbeda, nilai  yang  diberikan  berkisar  antara  0%  dan 100% dengan skala 5%, 4) viabilitas spermatozoa  diketahui  melalui  pengamatan mikroskop pada pembesaran 40x10. Pengukuran
dilakukan  setelah  spermatozoa  diwarnai  dengan eosin-negrosin.  Spermatozoa  hidup  berwarna bening  atau  putih,  sedangkan  spermatozoa  mati berwarna merahkeunguan. Perhitungan viabilitas  spermatozoa  diperoleh  sesuai  rumus  :
Viabilitas = , 5)
abnormalitas  spermatozoa  berdasarkan  jumlah spermatozoa  yang  memiliki  bentuk  yang  tidak normal  menggunakan  rumus:  abnormalitas  =
.

## Pengenceran dan Penyimpanan Semen
Semen yang digunakan dalam penelitian ini memiliki  motilitas  >70%,  konsentrasi  >  1000  × 10 6 ,  dan  abnormalitas  <  15%  (Jhonson et  al ., 2000).  Pengenceran  semen  dilakukan  dengan menggunakan  S-KT  yang  disuplementasikan dengan  sari  wortel  pada  berbagai  konsentrasi yaitu,  0,  10,  12,5,  15,  17,5,  dan  20%.  Semen yang telah diencerkan disimpan di dalam lemari pendingin  pada  suhu  3-5 o C.  Evaluasi  kualitas semen cair dilakukan setiap 24 jam.

## Variabel Penelitian
Variabel  yang  diukur  dalam  penelitian adalah: (1) motilitas spermatozoa (%), ditentukan  melalui  pengamatan  di  bawah mikroskop  pada  pembesaran  40x10.  Penilaian dilakukan  secara  pada  5  lapang  pandang mikroskop yang berbeda; (2) Viabilitas spermatozoa (%), ditentukan melalui pengamatan mikroskop pada pembesaran 40×10. Sperma  yang  mati  menyerap  warna  (berwarna merah) sedangkan sperma hidup tidak menyerap zat  warna  (berwarna  bening  atau  putih). Perhitungan  viabilitas  spermatozoa  dilakukan terhadap  ≥  1000  spermatozoa  pada  10  lapang pandang  yang  berbeda;  (3)  Abnormalitas spermatozoa  (%),  dilihat  dengan  mikroskop pada pembesaran 40×10. Sperma yang abnormal memiliki  bentuk  kepala  atau  ekor  yang  tidak normal.

## Analisis Data
Data  yang  terkumpul  dianalisis  dengan Analysis  of  variance (Anova)  dan  dilanjutkan dengan  uji  Duncan.  Analisis  menggunakan software SPSS 22.0 for windows .
Jurnal Nukleus Peternakan (Desember 2020) Volume 7, No. 2:109-117                     pISSN : 2355-9942,    eISSN:2656-792X Barek et al .: Pengaruh Penambahan Sari Wortel ........................

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kualitas Semen Segar
Pengamatan  semen  segar  bertujuan  untuk mengetahui kelayakan dari semen tersebut untuk diproses  lebih  lanjut  menjadi  semen  beku.
Pengamatan dan evaluasi semen segar dilakukan secara makroskopis dan mikroskopis. Karakteristik semen segar kambing Bligon dapat dilihat pada Table 2.
Tabel 2. Karakteristik Semen Segar Kambing Bligon Karakteristik semen Rerata ± standar deviasi Volume semen 0,60 ± 0,45 Warna semen Krem Konsistensi semen Kental pH semen 6,4 ± 0,0 Gerakan massa spermatozoa +++ Konsentrasi spermatozoa (x 10 6 sel/ml) 1.620 ± 164,11 Motilitas spermatozoa (%) 79,38 ± 1,25 Viabilitas spermatozoa (%) 86,70 ± 1,54 Abnormalitas spermatozoa (%) 2,50 ± 0,29
Rerata  volume  semen  segar  kambing Bligon adalah 0,60 ± 0,45 ml dengan kisaran 0,5 -  1,2,  nilai  yang  diperoleh  masih  dalam  kisaran normal. Menurut  Feradis (2010) kisaran normal semen  kambing  adalah  0,5-  2,5  mililiter  per ejakulasi. Volume semen dapat dipengaruhi oleh berbagai  faktor  yaitu  umur,  suhu  lingkungan setempat,  bangsa,  frekuensi  penampungan, pakan  ,  ukuran  testis  dan  badan.  Umur mempunyai  hubungan  yang  signifikan  dengan musim  sehingga  dapat  memengaruhi  volume ejakulat  dan  persentase  motil  spermatozoa (Ihsan, 2009).
Warna  semen  segar  kambing  Bligon  hasil penelitian  adalah  krem.  Warna    warna  semen kambing  bligon  sesuai  warna  semen  kambing menurut  Suyadi et  al .(2012)  yaitu  seperti  susu atau  krem  keputih-putihan  dan  jika  berwarna kekuning-kuningan, disebabkan pengaruh pigmen  riboflavin  yang  dibawah  oleh  satu  gen autosomal  resesif.  Warna,  konsistensi,  gerakan massa,  dan  konsentrasi  mempunyai  kaitan  satu sama  lain,  karena  warna  semen  ditentukan  oleh konsentrasi  sperma,  bila  warna  semakin  pudar maka  konsentrasi  spermatozoa  rendah  dan konsistensi encer (Kostaman dan Sutama, 2006).
Konsistensi semen hasil penelitian termasuk kategori kental. Menurut Tambing dkk. (2000),  semen  kambing  memiliki  konsistensi kental.  Semen  dengan  konsistensi  kental mempunyai  konsentrasi  yang  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  konsistensi  encer  (Lestari dkk ., 2014).
Gerakan  massa  memberikan  gambaran tentang  daya  gerak  spermatozoa,  dimana semakin  tebal  dan  besar  gelombang  serta pergerakannya yang semakin cepat menandakan kualitasnya  baik  (Tambing et  al .,  2000).  Hasil pengamatan menunjukkan bahwa gerakan massa spermatozoa    kambing  Bligon  mempunyai kualitas  sangat  baik  (+++).  Gerak  massa  (+++) dan  (++)  dapat  diproses  lebih  lanjut  untuk dijadikan semen beku (Tambing dkk ., 2000).
Konsentrasi  semen  segar  kambing  Bligon dalam  penelitian  sebanyak  1.620  ±  164,11 juta/ml. Konsentrasi spermatozoa hasil penelitian  ini  lebih  tinggi  dari  yang  dilaporkan oleh  Pratama  (2000)  yaitu  1.471,11  x  10 6 /ml. Perbedaan  konsentrasi  spermatozoa  dipengaruhi oleh  umur,  bangsa  ternak,  bobot  badan, frekuensi penampungan dan waktu penampungan (Yotov dkk ., 2011). Hastono dkk . (2013) menyatakan bahwa konsentrasi spermatozoa  dipengaruhi  oleh  managemen  dan pemberian  pakan  yang  pada  akhirnya  akan berpengaruh kepada konsistensi semen.
Motilitas  adalah  daya  gerak  spermatozoa yang  dapat  dijadikan  sebagai  patokan  dalam penilaian  kualitas  spermatozoa  untuk  iseminasi buatan  (Bintara,  2011).  Kualitas  semen  dapat dikatakan baik apabila  memiliki motilitas lebih dari  70%  (Kostaman  dan  Sutama,  2006).  Hasil penelitian  didapatkan  motilitas  spermatozoa kambing  Bligon  adalah  79,38  ±  1,25  %,  lebih tinggi  dari  yang  dilaporkan  Tambing et  al.
(2001) yaitu 72,79%.
Jurnal Nukleus Peternakan (Desember 2020) Volume 7, No. 2:109-117                     pISSN : 2355-9942,    eISSN:2656-792X Barek et al .: Pengaruh Penambahan Sari Wortel ........................
Viabilitas  merupakan  salah  satu  indikator penentu  kualitas  semen  karena  berhubungan dengan  daya  hidup  spermatozoa.  Persentase viabilitas semen segar kambing Bligon diperoleh rata-rata  86,70  ±  1,54%.  Hal  ini  menunjukkan semen  tersebut  memiliki  kualitas  yang  baik. Nugroho et al .  (2015)  menjelaskan  bahwa  rata- rata  viabilitas  spermatozoa  pada  semen  segar adalah 83,09±2,22%.
Persentase sperma abnormal pada penelitian  adalah  2,50 ±  0,29%.  Nilai  ini sesuai dengan  standar  inseminasi  buatan  menurut Kartasudjana  (2001),  yang  menyatakan  bahwa semen  untuk  keperluan  inseminasi  buatan
sebaiknya  tidak  mengandung  sperma  abnormal lebih  dari  20%.  Semen  dengan  nilai  sperma abnormal  2,50  ±  0,29%  dianggap  mempunyai kualitas  baik  karena  hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Arifiantini  dan  Purwantara  (2010), yang  menyatakan  bahwa  pada  umumnya  bila terlihat  sel  dengan  bentuk  abnormal  berjumlah 20%  atau  lebih  maka  kualitas  semen  itu dianggap jelek.

## Pengaruh  Perlakuan  Terhadap  Kualitas Spermatozoa
Evaluasi  kualitas  spermatozoa  kambing Bligon  selama  preservasi  ditampilkan  pada Table 3.
Tabel 3.  Kualitas spermatozoa kambing bligon (%) yang dipreservasi dalam pengencer sitrat-kuning telur yang disuplementasi dengan berbagai level sari wortel
Hari preservasi ke- 0 1 2 3 4 Motilitas spermatozoa SW-0 79,50±1,3 a 70,84±0,8 b 60,55±0,3 b 50,10±1,5 b 40,47±0,9 b SW-10 79,65±1,7 a 70,80±1,2 b 60,71±0,3 b 50,76±1,6 b 40,94±0,5 b SW-12,5 80,16±2,2 a 71,13±0,5 b 61,41±0,9 b 51,53±1,7 b 40,67±0,6 b SW-15 79,79±1,6 a 71,83±0,8 b 62,09±0,5 b 52,22±1,7 b 42,03±0,7 b SW-17,5 79,80±1,3 a 74,99±0,8 a 67,16±1,1 a 58,00±0,6 a 49,04±1,0 a SW-20 80,06±1,8 a 71,19±2,8 b 62,55±3,4 b 51,72±5,5 b 42,00±5,3 b Viabilitas spermatozoa SW-0 85,74±1,74 a 74,79±0,76 b 65,09±0,65 b 54,26±1,73 b 44,64±1,34 b SW-10 85,96±1,74 a 74,96±1,30 b 64,83±0,89 b 54,86±1,67 b 45,41±1,07 b SW-12,5 86,00±1,70 a 75,15±0,43 b 66,05±0,84 b 56,00±1,74 b 45,26±0,51 b SW-15 85,91±1,77 a 76,72±0,80 b 66,92±0,47 b 57,03±1,75 b 47,17±0,73 b SW-17,5 86,10±1,59 a 82,06±1,15 a 73,54±1,83 a 64,00±1,25 a 55,70±1,22 a SW-20 85,85±1,97 a 75,52±2,14 b 66,12±2,77 b 57,09±6,36 b 46,85±4,88 b Abnormalitas spermatozoa SW-0 2,84±0,44 a 3,45±0,34 a 3,82±0,35 a 4,27±0,42 a 4,90±0,60 a SW-10 2,49±0,42 a 3,38±0,36 a 3,67±0,53 a 4,37±0,68 a 5,04±0,87 a SW-12,5 2,78±0,44 a 3,57±0,26 a 3,96±0,43 a 4,30±0,56 a 4,83±0,80 a SW-15 2,58±0,48 a 3,07±0,37 a 3,64±0,25 a 4,38±0,55 a 4,77±0,73 a SW-17,5 2,65±0,53 a 3,12±0,38 a 3,56±0,45 a 3,89±0,63 a 4,57±0,88 a SW-20 2,84±0,29 a 3,27±0,44 a 3,96±0,56 a 4,27±0,84 a 5,02±1,02 a a,b Superskrip  dengan  huruf  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama  menunjukkan  perbedaan  yang  nyata        (P  < 0,05).  SW-0:  sari  wortel  0%,  SW-10:  sari  wortel  10%,  SW-12,5:  sari  wortel  12,5%,  SW-15:  sari  wortel  15%, SW-17,5: sari wortel 17,5%, SW-20: sari wortel 20%.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa penambahan  sari  wortel  dalam  pengencer  sitrat kuning  telur  tidak  mampu  meningkatkan motilitas  dan  viabilitas  spermatozoa  (p>0,05) pada hari ke-1 preservasi. Sejak hari ke-2 hingga ke-4  preservasi,  terjadi  peningkatan  motilitas dan viabilitas yang signifikan pada spermatozoa yang dipreservasi dalam pengencer sitrat kuning
telur  yang  disuplementasi  sari  wortel  17,5% (p<0,05)  sedangkan  pada  level  sari  wortel lainnya tidak terjadi peningkatan yang signifikan (p>0,05).  Abnormalitas  spermatozoa  teramati cukup  rendah  pada  semua  perlakuan  yakni  di bawah  6%,  dan  tidak  ada  perbedaan  yang signifikan  (p>0,05)  antara  perlakuan  selama  4 hari preservasi (Tabel 2).
Jurnal Nukleus Peternakan (Desember 2020) Volume 7, No. 2:109-117                     pISSN : 2355-9942,    eISSN:2656-792X Barek et al .: Pengaruh Penambahan Sari Wortel ........................
Hasil penelitian ini mengindikasikan adanya  pengaruh  yang  positif  dari  sari  wortel terhadap  motilitas  dan  viabilitas  spermatozoa kambing bligon. Menurut Thamburaj dan Singh (2005),  wortel  memiliki  nilai  gizi  yang  baik dengan  kandungan  energi  mencapai  42  kkal, 1.1g  protein,  1.100  IU  vitamin  A,  8  mg  asam askorbat,  tiamin  0,06  mg,  Ca  37  mg,  P  36  mg dan  zat  besi  0,7  mg  per  100  g  sampel  segar. Wortel mengandung protein (0,7 - 0,9%), lemak (0,2  –  0,5%),  karbohidrat  (6,0  -  10,6%) (Gopalan et  al .,  1991);  Holland et  al .,  1991), total gula (5,6%), karoten (5,33mg / 100 g), dan vitamin C (4 mg / 100 g).
Wortel  adalah  merupakan  sumber  penting fitonutrien  termasuk  fenolat  (Babic dkk .,  1993), poliasetilen  (Hansen dkk .,  2003;Kidmose et  al ., 2004).  Wortel  juga  kaya  akan  β-karoten,  asam askorbat  dan  tokoferol  dan  diklasifikasikan sebagai  makanan  bervitamin  (Hashimoto  dan Nagayama, 2004).
Motilitas dan viabilitas spermatozoa sangat dipengaruhi  oleh  zat  nutrisi  yang  terkandung didalam sari wortel (Herdis et al ., 2003). Wortel memiliki  kandungan  karbohidrat  yang  cukup tinggi. Ketersediaan sumber energi yang berasal dari karbohidrat merupakan salah satu prasyarat untuk  pengencer  semen  yang  baik.  Kandungan karbohidrat  dalam  wortel  berperan  sebagai substrat  energi  bagi  spermatozoa  selama inkubasi,  membantu  mempertahankan  motilitas dan  daya  hidup  spermatozoa  serta  memelihara tekanan  osmotik  cairan  dan  dapat  bertindak sebagai  krioprotektan  (Herdis et  al .,  2003). Wortel  mengandung  karbohidrat  yang  terdiri atas  pati  dan  gula  seperti  sukrosa,  glukosa, fruktosa dan maltosa (Rubatzky dan Yamaguchi, 1997). Fruktosa menghasilkan ATP yang sangat penting  untuk  kontraksi  fibril-fibril  pada  ekor sperma  yang  berfungsi  untuk  menimbulkan pergerakan (motilitas) pada spermatozoa (Rizal, 2008).  Glukosa  dan  fruktosa  yang  berupa monosakarida  (C 6 H 12 O 6 )  akan  lebih  mudah diolah  dalam  sel  spermatozoa  menjadi  energi. Sukrosa  berupa  disakarida  (C 12 H 22 O 11 )  harus diubah  menjadi  fruktosa  atau  glukosa  terlebih dahulu  dan  membutuhkan  waktu  yang  lebih lama untuk menghasilkan energi yang dibutuhkan,  sehingga  kurang  mempertahankan motilitas spermatozoa (Hammersted, 1993).
Kandungan  vitamin  A  dalam  wortel  juga juga  berperan  sebagai  antioksidan  yang  larut dalam lemak yang berperan dalam menghambat peroksidasi  lipid  dan  meningkatkan  aktivitas
berbagai  antioksidan  yang  dapat  mengikat radikal  bebas  yang  dihasilkan  selama  reduksi molekul  oksigen  dan  selama  aktivitas  oksidatif enzim. Vitamin A dapat meningkatkan motilitas dan  viabilitas  spermatozoa  dan  berperan  dalam mengurangi  fragmentasi  DNA  spermatozoa (Agarwal  dan  Sekhon,  2010).  Vitamin  C merupakan  vitamin  yang  larut  dalam  air  yang dapat  melindungi  spermatozoa  dari  kerusakan oleh  stres  oksidatif  dengan  cara  menetralkan hidroksil,  superoksida  dan  radikal  hidrogen peroksida serta mencegah aglutinasi spermatozoa (Agarwal dan Sekhon, 2010; Fraga et  al .,  1991).  Vitamin  C  dan  β-karoten  pada wortel bersifat sebagai senyawa antioksidan dan berpengaruh  positif  dalam  memelihara  struktur dan perkembangan serta fungsi sel-sel spermatozoa.  Sehingga  dengan  adanya  zat  aktif tersebut,  jumlah  spermatozoa  yang  mengalami kematian  akibat  radikal  bebas  dapat  ditekan. Yulnawati (2002) menyatakan bahwa kandungan  vitamin  C  dan  β-karoten  pada  sari wortel dapat bertindak sebagai senyawa antioksidan  yang  akan  mengikat  radikal  bebas yang  terdapat  didalam  sel  yang  dapat  merusak keutuhan membran yang terbentuk sebagai hasil metabolisme spermatozoa selama penyimpanan. Vitamin  C  dan  β-karoten  juga  berperan  penting dalam  melindungi  lipid  pada  membran  plasma sperma  dari  reaksi  oksidasi  yang  akan menurunkan motilitas dan viabilitas spermatozoa.  Vitamin  C  mampu  menangkap aktivitas radikal bebas dan mencegah terjadinya reaksi  berantai,  sehingga  dapat  menghindari kerusakan peroksidatif yang berpengaruh terhadap  viabilitas  dan  fertilitas  spermatozoa (Aslam, et al., 2014; Lubis dkk ., 2013).
Menurut  Halliwell  dan  Gutteridge  (1990), antioksidan  merupakan  suatu  senyawa  yang pada  konsentrasi  rendah  dihadapkan  pada substrat  yang  dapat  dioksidasi  dan  secara  nyata menunda  atau  menghambat  oksidasi  dari substrat tersebut (Lenzi et al ., 2002). Antioksidan  adalah  senyawa  nukleofilik  atau yang  mempunyai  kemampuan  mereduksi,  atau menekan reaksi radikal bebas yang berpengaruh terhadap  daya  hidup  spermatozoa.  Berdasarkan dua  mekanisme  pencegahan  dampak  negatif senyawa  oksidan,  senyawa  antioksidan  dapat dibagi menjadi dua golongan, yakni antioksidan pencegah  timbulnya  senyawa-senyawa  oksidan secara  berlebihan  dan  antioksidan  pemutus rantai  reaksi  untuk  mencegah  reaksi-reaksi berlanjut.  Senyawa  antioksidan  yang  tergolong
sebagai  pencegah  reaksi  adalah  katalase, glutation  peroksidase,  glutation,  dan  sistein, sedangkan  yang  berfungsi  sebagai  antioksidan pemutus  reaksi  rantai  adalah  vitamin  E (tokoferol),  vitamin  C  (asam  askorbat),  β- karoten,  glutation,  dan  sistein  (Suryohudoyo, 2000).
Wortel  juga  mengandung  kalium,  kalsium dan  fosfor.  Kalsium  berfungsi  memberikan energi  bagi  spermatozoa  serta  merangsang pergerakan  spermatozoa.    Kalsium  di  dalam  sel berperan  sebagai  kofaktor  reaksi  biologi, terutama  metabolisme  energi  dan  sintesis glikogen  dan  protein  untuk  pertumbuhan  sel. Kalium  berfungsi  meningkatkan  metabolisme spermatozoa  selama  penyimpanan.  Keberadaan kalium  dan  kalsium  sangat  memengaruhi motilitas  daya  hidup  spermatozoa.  Daya  tahan hidup  spermatozoa  rendah,  yang  diakibatkan tingginya kadar alkaloid dalam pengencer semen dapat  mengganggu  aktivitas  enzim  ATP-ase pada  membran  sel  spermatozoa  dibagian  ekor. Enzim ATP-ase tersebut berfungsi mempertahankan  homeostatis  ion  natrium  dan kalium.  Aktifitas  enzim  ATP-ase  terganggu, maka  homeostatis  ion  natrium  dan  kalium  akan terganggu  sehingga  konsentrasi  Na + intrasel meningkat,  gradient  Na + melintasi  membran  sel akan  mengalami  penurunan  (Ganong,  2001). Apabila kalsium berkurang maka Membran akan kehilangan  kemampuannya  untuk  mengangkut bahan-bahan  terlarut  kedalam  sitoplasma  apa bila  kalsiun  kurang.    Permeabilitas  membran spermatozoa  jika  terganggu  akan  menyebabkan
terganggunya  transport  nutrisi  yang  diperlukan oleh  spermatozoa  untuk  bertahan  hidup  dan pergerakannya (Salisbury dan Ros, 1995).
Konsentrasi  kalsium  yang  tinggi  menurut Fuller  dan  Shields  (1998)  juga  memmengaruhi sensitivitas  spermatozoa  terhadap cold  shock karena  menyebabkan  kerusakan  dan  perubahan membran  sel  yaitu  fosfolipid,  kolesterol  dan protein.  Meningkatnya  konsentrasi  ion  kalsium bebas  dalam  sel  akan  menyebabkan  kematian sel,  karena  keberadaan  kalsium  bebas  ini  akan mengaktifkan  enzim-enzim  penyebab  kematian sel seperti, endonuklease yang akan menghancurkan  DNA  dalam  inti  spermatozoa dan  transglutaminase  yang  berikatan  secara kovalen  dengan  protein  membran  melalui pembentukan ikatan isopeptida yang mematikan sel.
Fosfor  berfungsi  untuk  mempertahankan keseimbangan  pH  dalam  sel.  Fosfor  juga merupakan  mineral  penting  yang  ditemukan  di setiap  sel  tubuh  yang  berperan  utama  dalam pembentukan  DNA  dan  RNA.  Fosfor  memiliki manfaat dalam proses metabolisme sel. Keberadaan  Phosphore  berperan  dalam  proses pemecahan  karbohidrat  dan  lemak  didalam sistem  pencernaan,  sehingga  lemak  dapat terdistribusi  dalam  tubuh  untuk  pembentukan sel. Phosphore dalam bentuk fosfolipid membantu protein dan lemak untuk didistribusikan  dalam  tubuh  dan  membentuk membran sel (Ganong, 2001).

## SIMPULAN
Penambahan sari wortel ke dalam pengencer  S-KT  dapat  meningkatkan  kualitas
spermatozoa  kambing  bligon,  dengan  level  sari wortel terbaik adalah 17,5%.

## DAFTAR PUSAKA
Alextriston KN, Henderiana LLB, Uly K. 2015. Pengaruh  sari  wortel  dengan  level  yang berbeda  pada  pengencer  sitrat  kuning  telur terhadap motilitas, viabilitas, derajat keasaman  spermatozoa  babi  Landrace. Jurnal Nukleus Peternakan .  2(2): 117-128. Arifiantini RI, Purwantara B. 2010. Motility and viability  of  Friesian  Holstein spermatozoa in  three  different  extender  stored  at  5 o C.
Jurnal  of  the Indonesian  Tropical  Animal Agriculture . 35(4): 222-226.
Agarwal  A,  Sekhon  LH.  2010.  The  role  of antioxidant therapy in the treatment of male infertility. Human Fertility . 13(4): 217-25. Babic  I,  Amiot  MJ,  Ngugen  The  C,  Aubert  S. 1993.  Changes  in  phenolic    content    in fresh,    ready-to-use    and    shredded  carrots during  storage. Journal  of  Food Science . 58(2): 351- 356.
Basbeth  AH,  Dilaga  WS,  Purnomoadi  A.  2015. Hubungan antara ukuran-  ukuran tubuh terhadap bobot bada kambing bligon jantan umur  muda  di  Kabupaten  Kendal,  Jawa
Jurnal Nukleus Peternakan (Desember 2020) Volume 7, No. 2:109-108                     pISSN : 2355-9942,    eISSN:2656-792X Adjam et al .: Kualitas Organoleptic Daging Se’i........................
Tengah. Animal  Agriculture . Journal .  4 (1): 35 - 40.
Block G. 1994. Nutrient source of pro-vitamin a carotenoids  in  American  diet. Am  J Epidemiol . 13(9): 290-293.
Bintara  S.  2011.  Rasio  spermatozoa  X  :  Y  dan kualitas  sperma  kambing  Kacang  dan Peranakan  Ettawa. J . Sains  Peternakan . Vol. 9(2): 65-71.
Fraga  CG,  Motchnik  PA,  Shigenaga  MK,
Helbock  HJ,  Jacobs  RA,  Ames  BN.  1991. Ascorbic  acid  protects  against  endogenous oxidative  DNA  damage  in  human  sperm. Medical Sciences . 88(24): 11003-11006.
Fuller  GM, Shields D. 1998. Molecular basis of medical  cell  biology. Prentice  Hall International , Inc. USA.
Gopalan  C, Ramasastry   BV,  Balasubramanian SC.  1991.  Nutritive  value  of  Indian  foods. National  Institute of Nutrition . Hyderabad. Ganong  WF.  2001. Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran . Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Garner DL,  Hafez ESE. 2000. Spermatozoa and seminal plasma. In : Hafez ESE and Hafez  B  (Eds). Reproduction  In  Farm  Animals .
7 th Ed.  Lippincott  Williams  and  Wilkins, Philadelphia. pp : 96-109.
Hansen  SL,  Purup  S,  Christensen  LP.  2003.
Bioactivity  of  falcarinol and the influence of processing and storage on its  content  in carrots  ( Daucus  carota L ). Journal    of Science and Food Agriculture .
83(10):1010-1017.
Hashimoto   T,    Nagayama    T.   2004.  Chemical composition  of  ready-to-eat  fresh  carrot . J . Food  Hyg Soc  Japan . 39(1):324-328. Hammersted R. 1993. Maintenance of bioenergetic  in  sperm  and  prevention  of lipid peroxidation.  A  review  of  the effect  on  design  of  storage  preservation systems.   Australia. Reprod  Fertil  Dev 5(2): 675-690.
Herdis, Yulnawati, Setiadi MA. 2003. Pemanfaatan  buah  wortel  sebagai  media pengencer semen cair alternatif spermatozoa  domba  Garut. Jurnal  Sains dan Teknologi  Indonesia .  5(1):  126-
131. Halliwell  B,  Gutteridge  JMC.  1990.  Free radicals in biology and
medicine. Clarendon Press . Oxford. Holland  B,  Unwin  JD,  Buss  DH.  1991. Vegetables, herbs and spices. Fifth
supplement to mc cance and widdowson’s.  London.
Hartono  M.  2008.  Optimalisasi  penambahan vitamin  c  dalam  pengencer  sitrat  kuning telur  untuk mempertahankan  kualitas semen  kambing  boer. J  Indon  Trop  Anim Agric . 33(1):11-19.
Hastono,  Adiati  U,  Praharani  L.  2013.  Libido, kemampuan  kawin  dan  kualitas  sperma kambing dari tiga bangsa. Seminar
Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner . Balai Penelitian Ternak.
Ihsan  NM.  2009. Bioteknologi  Reproduksi Ternak . Universitas Brawijaya. Malang.
Johnson  LA,  Weitze  KF,  Fiser  P,  Maxwell WMC.  2000.  Storage  of  Boar  Semen. J. Anim. Sci. 62(1): 143-172.
Kidmose  U,    Hansen  SL,    Christensen  LP, Edelenbos  M,  Larsen    M,  Norback    R. 2004.  Effects    of    genotypes,    root  size, storage    and    processing    on    bioactive compounds    in  organically  grown    carrots ( Daucus  carota  L ). Journal  of    Food Science . 69(1):388-394. Kartasudjana  R.  2001. Teknik  Inseminasi Buatan . Jakarta: Departemen
Pendidikan Nasional.
Kostaman  T,  Sutama  IK.  2006.  Studi  motilitas dan daya hidup spermatozoa kambing Boer pada  pengencer  tris-sitrat-fruktosa. J . Sain Veteriner . 24(1):58-63.
Lenzi  A,  Gandini  L,  Lombardo  F,  Picardo  M,
Maresca V, Panfili E, Tramer F, Boitani C,  Dondero  F.  2002.  Polyunsaturated  fatty acids  of  germ  cell  membranes,  glutathione and glutathione-dependent enzyme- PHGPx: from basic to clinic.
Contraception. 65(1): 301-304.
Lestari  TPS,  Ihsan  MN,  Isnaini  N  2014. Pengaruh  waktu  simpan  semen  segar dengan  pengencer  andromed  pada  suhu ruang  terhadap  kualitas  semen  kambing Boer. Jurnal Ternak Tropika . 15(1):43-50). Nugroho  Y,  Susilawati  T,  Wahjuningsih  S. 2015.  Kualitas  semen  sapi  Limousin selama pendinginan menggunakan pengencer  cep-2  dengan  penambahan berbagai  konsentrasi  kuning  telur  dan  sari buah jambu biji ( Psidium guajava ). Jurnal. Ternak Tropika . 15(1):31-42. Partama  IBG.  2000.  Kebutuhan  energi  dan protein kambing Peranakan Etawah calon pejantan. Disertasi .
Program  Pascasarjana.  Institut  Pertanian Bogor, Bogor.
Parera  FZ,  Prihatiny  DF,  Souhoka,  Rizal  M. 2009.  pemanfaatan  sari  wortel  sebagai pengencer alternative
spermatozoa epididimis  sapi  Bali. Indonesia  Tropical Animal Agriculture . 34(1):50-56. Rizal M. 2008. Peningkatan kualitas spermatozoa  epididimis  kerbau  belang yang dikriopreservasi
dengan beberapa  konsentrasi  sukrosa. Jurnal  Ilmu Ternak dan Veteriner 8(4):188-183.
Rubatzky  E,  Yamaguchi  M.  1997.  World Vegetables:  Principles,  Production,  and Nutritive Value. A Division of International Thomson Publishing Inc. 320 pp. Suryohudoyo P. 2000. Oksidan, antioksidan, dan radikal  bebas.  Dalam:  Kapita  Selekta Ilmu Kedokteran Molekuler.
Suryohudoyo, P. CV Sagung Seto, Jakarta.
hlm . 31-47.
Salisbury  B,  Ross  CW.  1995.  Fisiologi Tumbuhan. Jilid 1.  Edisi  IV.  ITB, Bandung.
Suyadi  A,  Rachmawati  N,  Iswanto.  2012.
Pengaruh  α-Tocopherol  yang  berbeda dalam pengencer dasar tris aminomethane kuning telur terhadap kualitas  semen  kambing  Boer  yang disimpan  pada  suhu  5 0 c. Jurnal  Ilmiah Ilmu-ilmu  Peternakan . 22(3): 1-8.
Tambing SN, Toelihere MR, Yusuf TL, Sutama
IK. 2000. Pengaruh gliserol dalam
pengencer  tris  terhadap  kualitas  semen beku kambing Etawah. J. Ilmu Ternak Vet . 5(2): 1-8.
Tambing  SN,  Sutama  IK,  Arifiantini  RI.  2003. Efektevitas  berbagai  konsentrasi  laktosa dalam  pengencer  tris  terhadap  viabilitas semen  cair  kambing  Saanen. JITV .  8(2):
84-90
Thamburaj    S,    Singh    N.    2005.  Textbook    of Vegetables,  Tuber  Crops  And  Spices. Indian  Council  of  Agriculture  Research .
New Delhi.
Tambing  NS,  Gazali  M,  Purwantara  B.  2001.
Pemberdayaan teknologi inseminasi buatan pada ternak kambing. Wartazoa . 11(1): 1 -
6. Yulnawati MA, Setiadi, Herdis. 2005.
Pemanfaatan  sari  buah  melon  dan  sari wortel  sebagai  media  pengencer  alternatif semen cair domba Garut. Protein 1(2): 151- 160.
Yendraliza,  Musyrifin  M,  Elviriadi,  Zumarni, Rodiallah  M.  2018. Viabilitasspermatozoa sapi bali menggunakan pengencer andromed dengan  penambahan  konsentrasi sari  wortel  yang  berbeda. Jurnal  Ilmu  dan Teknologi  Peternakan  Tropis .  6(2):  239- 245.
Yotov  SI,  Fasulkovand  N,  Vassilev.  2011. Effect of ejaculation frequency onspermatozoa  survival  in  diluted  semen from  pleven  blackhead  rams. Turk.  J.  Vet. Anim. Sci . 35(2): 117-122.