## KARAKTERISTIK KOLAGEN GELEMBUNG RENANG IKAN LENCAM ( Lethrinus lentjan )
Aula Sakinah*, Wini Trilaksani, Tati Nurhayati
Departemen Teknologi Hasil Perairan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB University Jalan Agatis, Lingkar Kampus IPB Dramaga, Bogor, Indonesia 16680
Diterima: 15 Januari 2023/Disetujui: 2 Juni 2023 *Korespondensi: aulasakinah@apps.ipb.ac.id
Cara sitasi (APA Style 7 th ) : Sakinah, A., Trilaksani, W.,  & Nurhayati, T. (2023). Karakteristik kolagen gelembung renang ikan lencam ( Lethrinus lentjan ). Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 26(3), 571-585. http://dx.doi.org/10.17844/jphpi.v26i3.45529
Abstrak
Ekspor filet ikan lencam yang terus meningkat di Indonesia menyebabkan peningkatan pada jumlah hasil samping produksi, salah satunya gelembung renang. Gelembung renang ikan merupakan sumber alternatif kolagen yang telah menarik minat ilmuwan dan industri untuk diaplikasikan di berbagai sektor kesehatan, farmasi, dan kosmetik. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan rasio bahan dan pelarut serta waktu yang optimal pada tahap praperlakuan dalam ekstraksi kolagen gelembung renang ikan lencam. Penelitian dibagi menjadi tiga tahapan, yaitu optimasi praperlakuan sampel menggunakan larutan NaOH dengan lama waktu yang berbeda, ekstraksi dengan rasio bahan dan pelarut asam asetat dan penambahan enzim papain, dan karakterisasi kolagen. Analisis komponen gelembung renang ikan lencam meliputi proksimat, asam amino, dan protein terlarut. Analisis kualitas kolagen meliputi proksimat, asam amino, pengukuran warna, derajat putih, pH, pita protein, dan gugus fungsi. Kondisi praperlakuan terbaik didapat pada gelembung renang ikan lencam yang direndam NaOH 0,1 M selama 8 jam. Rasio bahan dan pelarut asam asetat terbaik, yaitu 1:30 (b/v) larut enzim papain (PaSC) dengan rendemen 28,88±0,71%. Kandungan protein mencapai 92,56±0,12%, derajat putih 97,86%, nilai pH 6,64, kandungan hidroksiprolina sebesar 79,32 mg/g, glisina 293,35 mg/g, dan prolina 102,57 mg/g sebagai asam amino penciri kolagen. Hasil deteksi gugus fungsi menunjukkan adanya gugus fungsi amida I, II, III, A, dan B serta rantai α1 dan α2.
Kata kunci: ekstraksi, enzim papain, hidroksiprolina, rendemen

## Characteristics of Swim Bladder Collagen
in Pink Ear Emperor Fish ( Lethrinus lentjan )
Abstract The upswing in the exportation of Lethrinus lentjan fillets in Indonesia has resulted in a concomitant increase in the quantity of production by-products, including swim bladder. Fish swim bladders possess collagen, which has garnered interest from both the scientific and industrial communities for potential applications in healthcare, pharmaceuticals, and cosmetics. The primary objective of this study was to ascertain the most suitable ratio of materials and solvents, as well as the optimal duration of pretreatment, for the effective extraction of collagen. The study was conducted in three distinct stages: pretreatment of the sample with NaOH solutions of varying durations, extraction of collagen using papain enzyme and varying ratios of materials and acetic acid, and characterization of the extracted collagen. Examination of the swim bladder constituents of pink ear emperor fish encompasses proximate, amino acid, and dissolved protein analyses. Quality analysis of collagen encompasses various techniques, including proximate analysis, amino acid analysis, color measurement, whiteness degree assessment, pH determination, protein band analysis, and functional group detection. The optimal pretreatment conditions involved soaking pink ear emperor fish swim bladders in 0.1 M NaOH for 8 h, and the highest yield of collagen was attained using a soluble papain enzyme ratio of 1:30 (w/v) for 48 h, resulting in a collagen output of 28.88±0.71%.The extracted collagen possessed a protein content of 92.56±0.12%, a whiteness degree of 97.86%, a pH value of 6.64, a hydroxyproline content of 79.32 mg/g, a glycine content of 293.35 mg/g, and a proline content of 102.57
Available online: journal.ipb.ac.id/index.php/jphpi
Karakteristik kolagen gelembung renang, Sakinah et al.
mg/g. These values are characteristic of the amino acids found in collagen. The results of functional group detection experimentally confirmed the presence of amide I, II, III, A, and B functional groups, as well as α1 and α2 chains.
Keywords: extraction, hydroxyproline, papain enzyme, yield
PENDAHULAN Kolagen adalah protein struktural utama jaringan ikat pada tubuh hewan vertebrata yang keberadaannya mencapai 25-30% dari total protein hewani (Walters & Stegemann, 2014; Pal et al. , 2015). Kolagen memiliki biokompatibilitas yang sangat baik, biodegradabilitas dan antigenisitas yang rendah, sehingga dapat diaplikasikan pada industri makanan, kosmetik, biomedis, dan farmasi (Chen et al., 2019). Kolagen berperan penting dalam mencegah pembentukan kerutan dan tanda penuaan pada lapisan dermis kulit (Zhao et al. , 2018). Sumber bahan baku kolagen pada umumnya berasal dari bahan baku tulang dan kulit mamalia di antaranya sapi dan babi. Kolagen terestrial saat ini dibatasi penggunaannya karena alasan sosial, budaya, dan agama (Liu et al. , 2015). Marine collagen merupakan sumber bahan baku kolagen dari hewan laut yang dalam dua dekade terakhir telah mendapat perhatian yang meningkat karena memiliki keunggulan jika dibandingkan dengan kolagen terestial. Pasar marine collagen diperkirakan akan mencapai sebesar USD 983,84 juta pada tahun 2025, dengan tingkat pertumbuhan tahunan gabungan sebesar 7,4% (Coppola et al., 2021).
Ikan lencam merupakan salah satu jenis ikan laut yang memiliki nilai ekonomis penting dan salah satu biota perairan yang dapat dijadikan sumber bahan baku marine collagen . Angka produksi ikan lencam di Indonesia pada tahun 2021, yaitu 104 ribu ton (Kementerian Kelautan dan Perikanan [KKP], 2021). Produksi filet daging ikan lencam yang tinggi berpotensi menghasilkan limbah yang signifikan contohnya gelembung renang. Gelembung renang ikan berpotensi sebagai sumber kolagen. Proporsi gelembung renang sebagai limbah dari filet ikan lencam berkisar sekitar 2% dari total berat ikan. Gelembung renang ikan memiliki kandungan protein yang tinggi. Gelembung renang ikan cunang ( Muarenesox talabon )
memiliki kandungan protein berturut- turut 93,39%, 96,16%, dan 96,2% (Kartika et al. , 2016; Djailani et al. , 2016; Gadi, 2017). Gelembung renang ikan tuna sirip kuning memiliki  kadar  protein  sebesar  72,53%
(Kaewdang et al. , 2014). Pemanfaatan gelembung renang sebagai sumber kolagen dapat dilakukan melalui metode asam dan enzimatis. Ekstraksi kolagen dari gelembung renang ikan patin menggunakan metode asam  menghasilkan  rendemen  sebesar  16% (Sitepu et al ., 2019), sementara metode enzimatis dengan papain soluble collagen menghasilkan rendemen sebesar 27% (Simamora et al ., 2019). Metode ekstraksi kolagen secara enzimatis terbukti meningkatkan hasil rendemen. Peningkatan ini dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu bahan baku, pre treatment , waktu ekstraksi, dan metode ekstraksi (Ahmed et al ., 2020). Oleh karena itu, penelitian ini dilakukan menggunakan metode ekstraksi asam dan enzimatis menggunakan enzim papain. Rasio dan volume larutan asam yang digunakan perlu diteliti lebih lanjut. Proses ekstraksi kolagen dimulai dari tahap praperlakuan menggunakan larutan alkali untuk menghilangkan protein nonkolagen (Gaurav et al ., 2017). Alkali yang paling umum digunakan dalam proses praperlakuan adalah NaOH, namun penggunaan NaOH dengan konsentrasi di atas 0,1 M secara signifikan dapat melarutkan kolagen dan membentuk residu garam natrium dalam jumlah yang besar (Liu et al ., 2015). Penelitian ini bertujuan untuk menentukan rasio bahan dan pelarut serta waktu yang optimal pada tahap praperlakuan dalam ekstraksi kolagen gelembung renang ikan lencam.

## BAHAN DAN METODE
Preparasi Bahan Baku Preparasi sampel dilakukan sesuai dengan metode Liu et al. (2015). Sampel
gelembung renang ikan lencam dicuci menggunakan air dingin (±4°C) dan direndam dalam larutan NaOH 0,1 M dengan perbandingan sampel 1:10 (b/v) selama 24 jam.
Larutan NaOH digantikan setiap 2 jam untuk menghilangkan protein non-kolagen. Setelah itu, sampel dibilas dengan air suling hingga mencapai pH mendekati netral. Analisis komponen gelembung renang ikan lencam meliputi analisis proksimat (Association of Official Analytical and Chemistry [AOAC], 2005), asam amino (Nollet, 1996), dan protein terlarut (Bradford, 1976).

## Ekstraksi Kolagen
Sampel yang telah dideproteinasi diekstrak menggunakan CH 3 COOH dan enzim papain 5.000 U/g. Ekstraksi kolagen metode asam dan enzim papain dilakukan dengan merendam sampel yang telah dideproteinasi dalam larutan asam asetat dengan perbandingan 1:10, 1:20, 1:30 (b/v) 0,5
M selama 48 jam (modifikasi Tabarestani et al. , 2012). Supernatan kemudian diendapkan menggunakan NaCl 1,8 M. Hasil presipitasi dengan NaCl 1,8 M dipisahkan melalui sentrifugasi dengan kecepatan 10.000 rpm selama 30 menit. Pelet yang dihasilkan dari sentrifugasi dilarutkan dalam asam asetat 0,3 M dengan perbandingan 1:2 (b/v), kemudian didialisis menggunakan kantong dialisis berpori 14 KDa terhadap akuades. Pelet selanjutnya dikeringkan dengan freeze dryer untuk mendapatkan kolagen kering. Analisis kualitas kolagen meliputi analisis proksimat (AOAC, 2005), analisis asam amino, pengukuran warna dan derajat putih, analisis pH, analisis pita protein (Laemmli, 1970), dan analisis gugus fungsi (Yan et al., 2008).

## Analisis Data
Rancangan percobaan menggunakan Rancangan Acak Lengkap Faktorial (RALF) dengan dua faktor, yaitu metode pembuatan kolagen dan rasio pelarut (1:10, 1:20, 1:30).
Data dianalisis tiga kali ulangan. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA dengan selang kepercayaan 95% (α= 0,05) dan dilakukan uji lanjut Duncan’s Multiple Range
Test (DMRT) pada taraf kepercayaan 95% (Mattjik & Sumertajaya, 2002).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Komposisi Kimia Gelembung
Renang Ikan Lencam
Penentuan komposisi kimia gelembung renang ikan lencam bertujuan untuk mengetahui karakteristik gelembung renang ikan lencam yang akan dijadikan sebagai bahan baku kolagen. Analisis ini dilakukan untuk mengetahui proporsi protein awal dari gelembung renang ikan lencam sebagai bahan baku pembuatan kolagen. Komposisi kimia gelembung renang ikan dapat dilihat pada
Table 1 . Kadar air memiliki persentase tertinggi dibandingkan parameter lainnya.
Air berfungsi menjaga kelenturan dan tekstur gelembung renang. Fungsi lainnya adalah untuk menyeimbangkan pH (Chen et al.,
2016). Hasil pengujian menunjukkan bahwa gelembung renang ikan lencam dalam kondisi segar. Jumlah molekul air dalam jaringan gelembung renang akan berpengaruh terhadap kadar abu, lemak dan protein. Oleh karena itu, fluktuasi kandungan air selama proses, penyimpanan, pengolahan, dan pengeringan jaringan akan mengubah komposisi biokimia yang lain. Komposisi tertinggi berikutnya adalah kadar protein. Kadar protein gelembung renang ikan lencam lebih tinggi dibandingkan dengan protein ikan manyung, ikan kerapu, dan ikan patin. Pemurnian kolagen yang berupa jaringan ikat protein dan umumnya berbentuk fibril sangat tergantung pada komposisi protein dari bahan baku yang digunakan (Gaurav et al., 2017). Kandungan dominan pada gelembung renang adalah protein kolagen, sehingga gelembung renang ikan lencam dengan kandungan protein yang tinggi lebih berpotensi dijadikan sebagai sumber alternatif kolagen (Gadi, 2017).

## Komposisi Asam Amino Gelembung Renang Ikan Lencam
Asam amino merupakan senyawa yang memiliki peranan penting dalam pembentukan protein. Asam amino penciri utama pembentuk protein kolagen terdiri atas glisina, alanina, prolina, dan hidroksiprolina (Liu et al., 2012). Table 2 menampilkan
Karakteristik kolagen gelembung renang, Sakinah et al.
keragaman asam amino kolagen gelembung renang ikan lencam. Asam amino yang tinggi ditemukan pada gelembung renang ikan lencam di antaranya glisina, prolina, alanina, dan asam glutamat. Komposisi asam amino penciri kolagen yang cukup tinggi adalah glisina sebesar 94,81 mg/g, prolina sebesar 42,79 mg/g, alanina sebesar 40,05 mg/g dan asam glutamat sebesar 34,12 mg/g. Kandungan asam amino penciri pada bahan baku diduga meningkatkan rendemen ekstrak kolagen.
Parameter (%) Pink ear emperor Ariid catfish* Pangas catfish**  Grouper ^ Moisture - - - - Ash 0.75 0.22 2.01 0.52 Lipid 1.42 1.33 2.13 4.48 Protein 94.32 93.75 85.22 89.88 Carbohydrates 3.51 4.7 10.64 5.12
Table 1 Chemical composition of fish swim bladders dry weight from pink ear emperor fish
Tabel 1 Komposisi kimia berat kering gelembung renang ikan lencam
*( Utami, 2021), ** ( Sitepu et al., 2019), ^ (Trilaksani et al. , 2019)
Type of amino acid (mg/g) Pink ear emperor Yellow- pike fish* Pangas catfish** Ariid catfish ^ Grouper ^^ Non-essential Glisine 94.81 56.36 56.85 86.70 47.19 Proline 42.79 24.48 31.03 26.20 23.71 Alanine 40.05 23.21 23.85 28.90 22.02 Glutamic acid 34.12 20.21 17.31 27.10 20.53 Aspartic acid 20.35 11.40 12.31 14.80 11.61 Serine 13.37 6.50 8.16 9.00 7.89 Tyrosine 4.4 1.31 3.07 4.00 1.88 TOTAL 249.89 143.47 152.58 196.7 134.83 Essential Phenylalanine 11.05 5.12 6.82 7.40 4.97 Valine 9.56 6.05 7.19 8.50 4.94 Isoleucine 5.41 2.91 5.26 5.10 - Lysine 11.94 10.41 12.2 10.50 6.93 Isoleucine 12.63 6.05 9.00 9.30 6.27 Histidine 3.58 2.60 2.30 5.60 1.55 Arginine 37.42 19.27 21.61 22.90 18.54 Threonine 14.59 7.24 7.38 8.90 6.89 TOTAL 106.18 59.65 71.76 78.2 50.09 Table 2 Amino acid profile of fish swim bladders from pink ear emperor fish Tabel 2 Profil asam amino gelembung renang ikan lencam
*(Kartika et al., 2016), ** ( Sitepu et al., 2019), ^ ( Utami, 2021), ^^ (Trilaksani et al. , 2019)
Efek Praperlakuan Gelembung Renang Ikan Lencam terhadap Kadar Protein Terlarut Proses praperlakuan dilakukan sebelum ekstrasi kolagen yang bertujuan membuka matriks gelembung renang dan menghilangkan protein nonkolagen, lemak, pigmen serta mineral pada bahan baku. Praperlakuan menggunakan larutan natrium hidroksida (NaOH) memerlukan variasi waktu dari beberapa jam hingga beberapa hari (Schmidt et al., 2016). Praperlakuan yang terlalu lama akan menghilangkan protein kolagen serta mengurangi efisiensi proses. Konsentrasi NaOH yang efektif dapat menghilangkan protein non-kolagen tanpa kehilangan kolagen dan strukturnya. Konsentrasi protein terlarut NaOH selama praperlakuan dapat dilihat pada Figure 1 . Kandungan protein terlarut pada filtrat NaOH sisa perendaman gelembung renang ikan lencam semakin menurun dari perendaman jam ke-2 hingga jam ke- 8. Hal ini menunjukkan adanya pelepasan protein yang dimulai dari 2 jam pertama perendaman gelembung renang hingga durasi perendaman selanjutnya. Meng et al. (2019) menyatakan bahwa penggunaan larutan alkali, dalam hal ini natrium hidroksida (NaOH), efektif digunakan dalam mereduksi
Figure 1 The concentration of soluble protein in 0.1 M NaOH with a soaking duration of 14
Gambar 1 Konsentrasi protein terlarut dalam NaOH 0,1 M dengan durasi perendaman selama hours and solution replacement every 2 hours
14 jam dan penggantian larutan setiap 2 jam
protein nonkolagen. Penggantian larutan NaOH dilakukan secara bertahap setiap 2 jam untuk mengetahui degradasi antara protein nonkolagen dengan protein kolagen. Kandungan protein terlarut mengalami fluktuasi kenaikan pada lama perendaman 10 jam dan terus mengalami peningkatan hingga 14 jam.

## Komposisi Kimia Kolagen Gelembung Renang Ikan Lencam
Kualitas kolagen yang dihasilkan dapat dilihat dengan mengacu kepada standar kolagen yang sudah ada. Kesesuaian kolagen dilakukan dengan membandingkan karakteristik kimia kolagen gelembung renang ikan manyung dengan standar kolagen, yaitu berdasarkan SNI 8076-2014 mengenai kolagen kasar dari sisik ikan. Table 3 menampilkan komposisi kimia kolagen gelembung renang ikan. Kadar air dipengaruhi oleh lamanya ekstraksi, konsentrasi asam asetat yang digunakan, serta interaksi antara konsentrasi asam asetat dan lama ekstraksi. Penetrasi air ke dalam jaringan kolagen melalui suatu ikatan hidrogen atau gaya elektrostatik antara gugus polar menyebabkan ditemukannya kandungan air pada kolagen (Romadhon et al ., 2019). Kadar air dipengaruhi oleh kehilangan
Karakteristik kolagen gelembung renang, Sakinah et al.
lebih tinggi dibandingkan dengan ikan patin dan kerapu. Syarat mutu kadar protein kolagen ikan lencam memenuhi syarat berdasarkan SNI yaitu >75%. Kadar protein menunjukkan kemurnian kolagen yang diperoleh. Menurut Jafari et al . (2020), kolagen adalah protein struktural utama yang ditemukan dalam matriks ekstraseluler dan membentuk sekitar 25-35% dari total kandungan protein tubuh.

## Rendemen Kolagen Gelembung
Renang Ikan Lencam Efektivitas ekstraksi dapat dilihat dari hasil rendemen kolagen. Metode ekstraksi pada penelitian ini menggunakan asam asetat dan enzim papain aktivitas 5.000 U/g, dengan perlakuan rasio sampel dan pelarut 1:10, 1:20, dan 1:30 (b/v). Menurut Skierka & Sadowska (2007), penggunaan larutan asam dapat memutus ikatan garam antarmolekul dan basa schiff serta meningkatkan muatan yang berlawanan pada triple heliks untuk proses swelling serat kolagen. Proses ekstraksi dilakukan pada suhu rendah agar kolagen tidak mudah rusak. Perlakuan terpilih ditentukan berdasarkan parameter rendemen ekstrak kolagen terbaik. Enzim yang digunakan pada penelitian ini adalah enzim papain. Enzim papain merupakan enzim protease yang diisolasi dari tumbuhan pepaya. Enzim papain stabil dan aktif dalam berbagai kondisi, bahkan pada suhu tinggi (Amri & Mamboya, 2012). Hasil perhitungan rendemen menunjukkan bahwa perbedaan bahan baku berpengaruh terhadap rendemen kolagen ( p <0,05). Hal ini sesuai dengan pernyataan Suptijah et al. (2018) bahwa
air yang terjadi selama proses pengeringan dan penyerapan air pada saat perendaman (Azara, 2017).
Kadar abu suatu bahan menunjukkan kuantitas keberadaan mineral dalam bahan tersebut. Hasil analisis kadar abu kolagen ikan lencam, yaitu 0,49±0,01%. Tinggi atau rendahnya kadar abu disebabkan karena adanya mineral yang terikat pada kolagen. Kadar lemak yang diperoleh yaitu 0,35±0,007%. Salah satu persyaratan penting kolagen adalah kadar lemak <1%  (SNI 8076- 2014). Sisa lemak pada kulit dapat menurunkan kadar kemurnian kolagen (Nilsuwan et al ., 2022). Oksidasi lemak yang terdistribusi pada matriks kulit ikan dapat menyebabkan aroma dan rasa yang tidak diharapkan pada kolagen. Praperlakuan menggunakan NaOH dapat dilakukan untuk mengeliminasi pengotor meliputi lemak, mineral, aroma, dan protein nonkolagen. Kadar lemak kolagen ikan lencam paling rendah dibandingkan ikan manyung, patin dan kerapu. Kadar lemak pada kolagen bergantung pada perlakuan selama proses pembuatan kolagen, baik pada tahap pembersihan maupun proses degreasing hingga pada tahap penyaringan filtrat hasil ekstraksi. Perlakuan defating akan mengurangi kandungan lemak yang ada dalam bahan baku sehingga produk yang dihasilkan memilki kadar lemak yang rendah. Protein merupakan kandungan tertinggi dalam kolagen. Kadar protein kolagen ikan lencam yaitu 92,59±0,12%. Kadar protein merupakan salah satu parameter karakteristik kolagen. Kadar protein kolagen ikan lencam Parameter (%) Pink ear emperor  Ariid catfish*  Pangas catfish**  Grouper ^ SNI 8076- 2014 (Collagen) Moisture 4.82±0.12 3.62±0.34 10.76±1.6 10.31±0.00 <12 Ash 0.49±0.01 0.51±0.06 1.01±0.6 5.1±7.07 <1.0 Lipid 0.35±0.01 1.24±0.04 0.67±0.02 5.99±7.07 <1.0 Protein 92.59±0.12 94.12±1.1 87.66±0.66 75.2±0.00 >75 Table 3 Chemical composition of fish swim bladders collagen from pink ear emperor fish
Tabel 3 Komposisi kimia kolagen gelembung renang ikan lencam
*( Utami, 2021), ** ( Simamora et al., 2019), ^ (Trilaksani et al. , 2019)
salah satu faktor yang dapat memengaruhi nilai rendemen kolagen yang dihasilkan adalah jenis bahan yang digunakan. Enzim dapat digunakan dikombinasikan dengan asam untuk mendapatkan hasil kolagen yang lebih tinggi. Enzim papain (EC 3.4.22.2) terdiri dari 212 residu asam amino yang tersusun dalam rantai polipeptida tunggal.
Enzim papain adalah kelas endopeptidase yang memutus ikatan peptida di pusat rantai protein (Grzonka et al. , 2007). Rendemen kolagen gelembung renang ikan lencam semakin meningkat dengan peningkatan rasio sampel dan pelarut. Pada perbandingan 1:10 (b/v), diperoleh nilai rendemen sebesar 18,64±1,19% (ASC) dan 25,52±0,94% (PaSC). Pada perbandingan 1:20 (b/v), diperoleh rendemen sebesar 20,06±0,59% (ASC) dan 27,29±0,40% (PaSC). Pada perbandingan 1:30 (b/v), mencapai nilai maksimum dengan nilai rendemen 21,54±0,95% (ASC) dan 28,88±0,75% (PaSC). Rendemen terbaik dari penelitian ini diperoleh pada perbandingan 1:30 (b/v) dengan metode PaSC. Hasil analisis rendemen ekstrak kolagen gelembung renang ikan lencam dan beberapa jenis ikan lainnya dapat dilihat pada Table 4. Rendemen merupakan salah satu parameter penting yang digunakan dalam produksi kolagen dan semakin tinggi nilainya menunjukkan bahwa perlakuan yang diberikan selama proses tersebut efektif dan efisien. Rendemen kolagen gelembung renang ikan lencam semakin meningkat dengan peningkatan rasio sampel dan pelarut dan mencapai nilai maksimum. Pembengkakan yang dihasilkan pada proses praperlakuan
dapat memfasilitasi ekstraksi asam dengan meningkatkan kecepatan transfer massa dari matriks jaringan (Liu et al., 2015). Peningkatan jumlah pelarut dapat meningkatkan interaksi antara proton bebas dan asam amino rantai kolagen, sehingga meningkatkan pemutusan ikatan silang yang ada dalam heliks kolagen (Jafari et al., 2020). Interaksi antara asam dan molekul kolagen dapat memutus ikatan silang pada heliks kolagen dan meningkatkan efisiensi ekstraksi. Penelitian mengenai efisiensi ekstraksi menggunakan rasio pelarut dan metode yang berbeda penting dilakukan untuk memaksimalkan kemurnian dan rendemen dari kolagen.

## Profil Asam Amino Kolagen Gelembung Renang Ikan Lencam
Delapan asam amino berkontribusi pada stabilitas struktur heliks kolagen dan merupakan salah satu sifat utama yang menentukan  aplikasi  potensial  kolagen (Zhao et al ., 2018). Asam amino esensial dalam kolagen di antaranya ialah isoleusina, leusina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, valina, dan arginina. Indikasi ketersediaan kolagen dapat dilihat dari proporsi kandungan asam amino dan protein penyusunnya. Kolagen yang digunakan untuk uji asam amino merupakan kolagen terbaik hasil ekstraksi. Profil asam amino kolagen pada gelembung renang ikan lencam dapat dilihat pada Table 5. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak protein yang dihasilkan dari gelembung  renang ikan lencam merupakan kolagen yang berkualitas. Kolagen ini Sample Extraction method Yield (%) Pink ear emperor ASC 21.54±0.95 PaSC 28.88±0.78 Pangas catfish PaSC 1 27.00±0.08 ASC 2 16.04±0.60 Tuna fish PaSC 3 1.11±0.057
Table 4 Yield of fish swim bladders collagen from pink ear emperor fish species Tabel 4 Rendemen kolagen gelembung renang ikan lencam dan ikan lainnya
1 Simamora et al . (2019); 2 Sitepu et al . (2019); 3 Kaewdang et al. (2014); ASC (Acetic acid method); PaSC (Papain enzyme method)
Karakteristik kolagen gelembung renang, Sakinah et al.
terindikasi memiliki komposisi asam amino utama penyusun kolagen, yaitu glisina, alanina, dan prolina, dalam jumlah yang tinggi. Tidak terdapat perbedaan substansial antara profil asam amino kolagen yang diekstraksi dengan metode yang berbeda. Metode ekstraksi asam atau enzim dapat digunakan untuk isolasi kolagen tipe I (Jafari et al ., 2020). Kolagen yang berasal dari jenis ikan yang berbeda hanya menunjukkan sedikit perbedaan dalam komposisi asam aminonya (Tang et al ., 2015). Perbedaan asam amino secara total dapat berhubungan dengan jenis ikan dan berkorelasi dengan suhu habitat jenis ikan (Chen et al ., 2019). Asam amino dominan pada kolagen adalah glisina, prolina, alanina, hidroksiprolina, asam glutamat, dan arginina (Sinthusamran et al ., 2013).
Kandungan asam amino juga diduga berperan  dalam  stabilitas  termal  kolagen. Kittiphattanabawon et al . (2005) menyatakan bahwa asam amino hidroksiprolina berperan dalam menstabilkan struktur rantai triple helix melalui ikatan hidrogen. Hidroksiprolina, yang merupakan asam amino khas kolagen, terbentuk melalui proses oksidasi prolina yang dikatalis oleh prolin hidroksilase. Keberadaan hidroksiprolina dalam struktur kolagen dapat meningkatkan elastisitas kolagen serta berkontribusi pada stabilitas struktur triple helix melalui formasi ikatan hidrogen antar rantai melalui gugus hidroksil (Ghanaeian & Soheilifard, 2018). Kandungan hidroksiprolina pada gelembung renang ikan lencam lebih rendah dibandingkan dengan ikan manyung. Perbedaan kandungan hidroksiprolina dapat
Amino acid (mg/g) Pink ear emperor fish Tuna (Kaewdang et al., 2014) Red snapper ( Jamilah et al., 2013) Ariid catfish ( Utami, 2021) Pangas catfish (Sitepu et al. , 2019) Non-essential Glisine 293.35 225 326 232.72 266.06 Proline 102.57 80 11 110.51 108.96 Alanine 114.26 102 134 97.32 112.92 Glutamic acid 79.32 48 83 83.36 - Aspartic acid 80.37 91 71 95.98 - Serine 45.52 69 46 48.33 - Hydroxyproline 26.24 50 27 38.44 40.78 Tyrosine 7.32 15 5 14.57 8.17 TOTAL 748.95 680 703 721.23 536.89 Essential Phenylalanine 24.40 22 13 25.96 22.68 Valine 25.58 38 22 27.90 24.25 Isoleucine 15.51 25 9 17.06 9.33 Lysine 28.54 44 25 33.71 37.91 Isoleucine 31.66 47 23 31.57 21.57 Histidine 7.39 12 5 17.95 18.16 Arginine 81.00 56 53 85.25 125.84 Threonine 26.92 42 24 14.57 34.08 TOTAL 241 286 174 253.97 293.82 Table 5 Amino acid profile of fish collagen from swim bladders from pink ear emperor fish Tabel 5 Profil asam amino kolagen dari gelembung renang ikan lencam
dipengaruhi oleh spesies, lingkungan, dan suhu tubuh ikan (Lin et al ., 2020). Kandungan glisina yang tinggi penting karena glisina adalah asam amino yang menyusun sekuens dasar kolagen Gly-X-Y dalam pembentukan tropokolagen (Cherim et al ., 2016). Asam amino penyusun kolagen lainnya ialah prolina dan alanina. Asam amino prolina adalah asam amino esensial dengan cincin pirolidin untuk memperkuat struktur triple helix (Gaurav et al ., 2017).
Gugus Fungsi Kolagen Gelembung Renang Ikan Lencam Kolagen terdiri dari dua rantai α1 dan rantai α2 yang membentuk pola triple helix . Rantai alfa terdiri atas sekuens asam-asam  amino dengan pola tertentu yang dihubungkan oleh ikatan peptida, jembatan garam, ikatan antar-dipol, ikatan kovalen, ikatan ionik, dan ikatan hidrogen.
Karakteristik utama yang membedakan kolagen dengan protein lainnya terletak pada gugus fungsional. Kong & Yu (2007) menyebutkan bahwa rantai polipeptida memiliki sembilan pita karakteristik serapan, yaitu amida A, amida B, dan amida I-IV. Puncak serapan gugus fungsi kolagen pada gelembung renang ikan lencam dapat dilihat pada Table 6.
Analisis spektral kolagen memberikan wawasan struktural berdasarkan pita getaran yang dihasilkan oleh tulang punggung polipeptida (amida). Penentuan gugus fungsi kolagen dan nonkolagen dilakukan dengan spektrofotometer FTIR melalui pendeteksian sinar inframerah sebagai sumber elektromagnetik. Analisis FTIR ini bertujuan untuk memastikan senyawa yang dihasilkan merupakan kolagen berdasarkan gugus-gugus fungsi penyusunnya. Prinsip dari spektroskopi FTIR adalah dengan mengukur panjang gelombang dan intensitas penyerapan radiasi inframerah.
Gugus amida A merupakan gugus khas kolagen yang menunjukkan NH stretching , dengan wilayah serapan amida A berada pada kisaran 3.300-3.325 cm -1 . Gugus amida B kolagen pada gelembung ikan lencam mendekati wilayah serapan 2.943 cm -1 . Puncak serapan gugus amida B mendekati wilayah nilai 3.100 yang terbentuk dari asimetrikal streching CH 2 Gugus amida I pada kolagen gelembung renang ikan lencam berada pada puncak 1.662 cm -1 . Amida I menunjukkan vibrasi stretching dari gugus karbonil (C=O) yang berada disepanjang polipeptida yang merupakan ciri khas struktur sekunder dari peptida dengan puncak serapan 1600-1690 cm -1 . Komponen α -helix ditunjukkan pada wilayah serapan antara 1.654 cm -1 dan 1.658 cm -1 , β-sheet dengan wilayah serapan antara 1.624-1.642 cm -1 , β-turn dengan wilayah serapan 1.666, 1.672, 1.680, dan 1.688 cm -1
serta random oil dengan wilayah serapan 1.648 cm -1 . Spektrum gugus fungsi kolagen gelembung renang ikan lencam dilihat pada
Figure 2 . Berdasarkan puncak serapan, amida I pada kolagen gelembung renang ikan
Wavenumber (cm -1 ) Functional groups Pink ear emperor fish The standard of absorbtion region Vibration Amida A 3,300 3,300-3,325 NH stretching is associated with hydrogen bonding Amida B 2,943 3,100 Stretching CH 2 Amida I 1,662 1,630-1,695 Stretching C=O Amida II 1,548 1,480-1,575 CN stretching Amida III 1,455 1,200-1,400 NH binding Table 6 Functional groups profile collagen from the swim bladders of pink ear emperor fish Tabel 6 Profil gugus fungsi kolagen gelembung renang ikan lencam
Karakteristik kolagen gelembung renang, Sakinah et al.
lencam memiliki struktur α-heliks. Frekuensi gelombang amida I berhubungan dengan struktur sekunder protein. Gugus amida II dan amida III pada kolagen gelembung renang ikan lencam memiliki puncak serapan wilayah 1.548 cm -1 dan 1.455 cm -1 . Gugus amida II dan amida III menunjukkan interaksi intermolekuler pada kolagen dengan adanya gugus stretching CN dan binding NH. Gugus amida II dan amida III merupakan bagian dari struktur triple helix . Struktur triple helix ini terbentuk oleh tiga asam amino, yaitu glisina, prolina, dan hidroksiprolina.

## Ketampakan Visual, Derajat putih,
Nilai pH Kolagen Gelembung Renang Ikan Lencam Kolagen berkualitas baik memiliki warna dasar putih dengan derajat putih mendekati 100%. Pengukuran ini bertujuan untuk mengetahui warna dominan sampel kolagen yang dihasilkan. Alat yang bisa digunakan untuk pengukuran ini adalah RGB- 1002, yang dilengkapi dengan sensor eksternal dan menggunakan geometri pengukuran warna 45 o C/0. Derajat putih kolagen gelembung renang ikan lencam yaitu sebesar 97,86%. Hasil ini lebih tinggi dibandingkan dengan kolagen dari ikan manyung sebesar 90,63% (Utami, 2021), ikan kerapu sebesar
90,58% (Trilaksani et al ., 2019), ikan patin sebesar 90,99% (Simamora et al ., 2019) dan
ikan kakap sebesar 44,76% (Jamilah et al,.
2013). Perbedaan derajat putih kolagen dapat disebabkan oleh kurang maksimalnya pemisahan sampel dari gelembung renang ikan selama proses persiapan. Derajat putih kolagen yang rendah dapat dipengaruhi oleh efektivitas dalam melarutkan pigmen selama tahap praperlakuan. Perendaman dalam larutan basa menyebabkan pengembangan pada gelembung renang ikan, sehingga pigmen dalam gelembung renang ikan dapat dengan mudah dihilangkan dan dikeluarkan. Nilai pH kolagen ikan lencam 6,64±0,293 telah sesuai dengan standar kolagen berdasarkan SNI 8076:2015, yaitu berkisar antara 6,5 hingga 8. Hasil pH kolagen gelembung ikan lencam lebih tinggi daripada kolagen ikan patin (Simamora et al., 2019), ikan cunang (Gadi, 2017), dan ikan kerapu (Safithri et al ., 2019), serta lebih tinggi dibandingkan ikan manyung (Utami,
2021). Nilai pH kolagen yang rendah dapat disebabkan oleh proses netralisasi yang tidak sempura. Proses penetralan setelah ekstraksi kolagen menggunakan asam yang dapat memengaruhi pH akhir kolagen. Proses penetralan residu yang sempurna dapat mengurangi residu asam sehingga kolagen memiliki pH mendekati netral. Faktor lain yang memengaruhi nilai pH adalah perbedaan metode ektraksi. Menurut Jamilah et al . (2013)
Figure 2 Functional group spectrum from the swim bladders of pink ear emperor fish Gambar 2 Spektrum gugus fungsi kolagen gelembung renang ikan lencam
kolagen yang diekstrak dengan enzim papain cenderung memiliki pH asam.
Pola Protein Kolagen Gelembung Renang Ikan Lencam
Sodium deodecyl sulfate polycrilamide gel electroforesis (SDS-PAGE) adalah teknik pemisahan protein standar berdasarkan kemampuan untuk bergerak terhadap muatan listrik. Protein terpisah berdasarkan ukuran molekul dan interaksinya terhadap muatan listrik. Penentuan tipe kolagen dengan membandingkan kolagen yang diperoleh dengan sumber lain yang memiliki pita kolagen serupa sebagai referensi (Silva et al., 2014). Kolagen terdiri tiga rantai α dapat berupa rantai α yang sama atau berbeda tergantung pada tipe kolagennya.
Ketebalan intensitas pita pada protein menunjukkan tingginya jumlah kolagen yang mengalami cross linking . Perbedaan tipe kolagen ditandai dengan kompleksitas yang cukup besar dan keseragaman struktur, varian sambungan, non hiliks domain, perakitan kolagen gelembung renang ikan lencam.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pola elektroforesis yang terdeteksi pada kolagen gelembung renang ikan lencam terdiri atas dua rantai alpha yang berupa (α 1 dan α 2 ) dan satu rantai beta (β). Keberadaan rantai β yang ditemukan pada pola protein kolagen mengindikasikan adanya komponen ikatan silang dan ketebalan pita protein struktur β menunjukkan tingginya cross linking pada
kolagen (Singh et al., 2011). Pola pita protein kolagen gelembung renang ikan lencam dapat dilihat pada Figure 3 .
Bobot molekul yang terdapat pada kolagen gelembung renang ikan lencam yang diekstrasi dengan metode PaSC memiliki pita utama yaitu α 1 140 kDa, α 2 100 kDa, dan β 250 kDa. Sedangkan dengan metode ekstrasi ASC memiliki pita utama yaitu α 1 130
kDa,  α 2 90 kDa, dan β  240 kDa. Hasil pola elektroforesis kolagen gelembung renang ikan lencam memungkinkan dapat diklasifikasikan sebagai kolagen tipe I karena terdiri dari dua rantai α 1 dan satu rantai α 2 (Bielajew et al ., 2020). Kolagen tipe I juga ditemukan pada gelembung renang lainnya, yaitu gelembung renang ikan tuna sirip kuning (Kaewdang et al., 2014) dan gelembung renang ikan kakap putih (Sinthusamran et al., 2013).

## KESIMPULAN
Proses praperlakuan kolagen mencapai waktu efektif pada lama perendaman 8 jam menggunakan larutan NaOH 0,1 M. Perlakuan terbaik diperoleh rasio bahan baku dan pelarut sebesar 1:30 (b/v) dengan ekstrasi kolagen PaSC.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmed, M., Verma, A. K., & Patel, R. (2020). Collagen extraction and recent biological activities of collagen peptides derived from sea-food waste: A review. Sustainable Chemistry and Pharmacy ,
Figure 3 Protein pattern of collagen from pink ear emperor fish
Gambar 3 Pola protein kolagen gelembung renang ikan lencam
15 25 37 50 75 100 150 250 250 100 140 1 2 240 90 130 1 2 M PaSC ASC
Karakteristik kolagen gelembung renang, Sakinah et al.
18, 100315. Amri, E., & Mamboya, F. (2012). Papain, a plant enzyme of biological importance: A review. American Journal of Biochemistry and Biotechnology , 8(2), 99–104. https:// doi.org/10.3844/ajbbsp.2012.99.104 Association of Official Analytical and Chemistry. (2005). Officials Methods of Analysis. Azara, R. (2017). Pembuatan dan analisis sifat fisikokimia gelatin dari limbah kulit ikan kerapu ( Ephinephelus sp.). Jurnal Rekapangan , 11(1), 62-69. Bradford, M. M. (1976). A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem , 72(1-2), 248-254. https:// doi.org/10.1016/0003- 2697(76)90527-3. Badan Standarisasi Nasional. (2014). SNI 8076:2014. Kolagen kasar dari sisik ikan – Syarat mutu dan pengolahan. Bielajew, B. J., Hu, J. C., & Athanasiou, K. A. (2020). Collagen: quantification, biomechanics and role of minor subtypes in cartilage. Nature Review Materials, . 1–18 Chen, J., Li, L., Yi, R., Xu, N., Gao, R., & Hong, B. (2016). Extraction and characterization of acid-soluble collagen from scales and skin of tilapia ( Oreochromis niloticus ). Lwt , 66, 453–459. https://doi. org/10.1016/j.lwt.2015.10.070 Chen, Y., Jin, H., Yang, F., Jin, S., Liu, C., Zhang, L., Huang, J., Wang, S., Yan, Z., Cai, X., Zhao, R., Yu, F., Yang, Z., Ding, G., & Tang, Y. (2019). Physicochemical, antioxidant properties of giant croaker ( Nibea japonica ) swim bladders collagen and wound healing evaluation. International Journal of Biological Macromolecules , 138, 483–491. https:// doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2019.07.111 Cherim, M., Mustafa, A., Cadar, E., Lupașcu, N., Paris, S., & Sirbu, R. (2016). Collagen sources and areas of use. Europe Journal Interdiscip Study , 4(1), 122. https://doi. org/10.26417/ejis.v4i1.p122-128 Coppola, D., Lauritano, C., Esposito, F. P., Riccio, G., Rizzo, C., & de Pascale,
D. (2021). Fish waste: from problem to valuable resource. Marine Drugs , 19(2), 1–39. https://doi.org/10.3390/ MD19020116 Djailani, F., Trilaksani, W., & Nurhayati, T. (2016). Optimasi ekstraksi dan karakterisasi kolagen dari gelembung renang ikan cunang dengan metode asam-hidro- ekstraksi. Journal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 19(2), 156–167. https://doi. org/10.17844/jphpi.2019.19.2.156. Gadi, S. D. (2017). Kolagen larut asam dari gelembung renang Ikan cunang ( Muarenesox talabon) sebagai sediaan krim pelembab wajah [Tesis]. Institut Pertanian Bogor. Gaurav, Kumar, P., Nidheesh, T., Govindaraju, K., Jyoti, & Suresh, P. V. (2017). Enzymatic extraction and characterisation of a thermostable collagen from swim bladder of rohu ( Labeo rohita ). Journal of the Science of Food and Agriculture , 97(5), 1451–1458. https://doi.org/10.1002/ jsfa.7884 Ghanaeian, A., & Soheilifard, R. (2018). Mechanical elasticity of proline-rich and hydroxyproline-rich collagen-like triple- helices studied using steered molecular dynamics. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials , 86, 105–112. https://doi.org/10.1016/j. jmbbm.2018.06.021 Grzonka, Z., Kasprzykowski, F., & Wiczk.
(2007). Cysteine Proteases. Industrial Enzymes: Structure, Function and
Application. Springer. Jafari, H., Lista, A., Siekapen, M. M., Ghaffari- Bohlouli, P., Nie, L., Alimoradi, H., & Shavandi, A. (2020). Fish collagen: extraction, characterization, and applications for biomaterials engineering. Polymers (Basel) , 12(10), 1–37. https:// doi.org/10.3390/polym12102230 Jamilah, B., Umi Hartina, M. R., Mat Hashim, D., & Sazili, A. Q. (2013). Properties of collagen from barramundi ( Lates calcarifer ) skin. International Food Research Journal , 20(2), 791–798.
Kaewdang, O., Benjakul, S., Kaewmanee, T.,
& Kishimura, H. (2014). Characteristics of collagens from the swim bladders of yellowfin tuna ( Thunnus albacares ). Food Chemistry , 155, 264–270. https://doi. org/10.1016/j.foodchem.2014.01.076 Kartika, I. W. D., Trilaksani, W., & Adnyane, I. K. M. (2016). Karakterisasi kolagen limbah gelembung renang ikan cunang hasil ekstraksi asam dan hidrotermal. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 19(3), 222–232. https://doi. org/10.17844/jphpi.2016.19.3.222 Kementerian Kelautan dan Perikanan. (2018). Produksi Perikanan. Pusat Data Statistik dan Informasi Kementerian Kelautan dan Perikanan. Kementerian Kelautan dan Perikanan. (2021). Produksi perikanan tangkap laut jenis ikan tuna. Statistik KKP. Kittiphattanabawon, P., Benjakul, S., Visessanguan, W., Nagai, T., & Tanaka, M. (2005). Characterisation of acid- soluble collagen from skin and bone of bigeye snapper ( Priacanthus tayenus ). Food Chemistry , 89(3), 363–372. https:// doi.org/10.1016/j.foodchem.2004.02.042 Kong, J., & Yu, S. (2007). Fourier transform infrared spectroscopic analysis of protein secondary structures. Acta Biochimica et Biophysica Sinica , 39(8), 549–559. https://doi.org/10.1111/j.1745- 7270.2007.00320.x Laemmli, U. K. (1970). Cleavage of structural protein during the assembly of head of bacteriophage T4. Nature , 277(5259), 680-685. Li, J., Li, Y., Li, Y., Yang, Z., & Jin, H. (2020). Physicochemical properties of collagen from acaudina molpadioides and its protective effects against H 2 O 2 -induced injury in RAW264.7 cells. Marine Drugs , 18(7). https://doi.org/10.3390/ MD18070370 Lin, F., Rong, H., Lin, J., Yuan, Y., Yu, J., Yu, C., You, C., Wang, S., Sun, Z., & Wen, X. (2020). Enhancement of collagen deposition in swim bladder of Chu’s croaker ( Nibea coibor ) by proline: View from in-vitro and in-vivo study.
Aquaculture , 523, 735175. https://doi.
org/10.1016/j.aquaculture.2020.735175 Liu, D., Liang, L., Regenstein, J. M., & Zhou, P. (2012). Extraction and characterisation of pepsin-solubilised collagen from fins, scales, skins, bones and swim bladders of bighead carp ( Hypophthalmichthys nobilis ). Food Chemistry , 133(4), 1441–1448. https://doi.org/10.1016/j. foodchem.2012.02.032 Liu, D., Wei, G., Li, T., Hu, J., Lu, N., Regenstein, J. M., & Zhou, P. (2015). Effects of alkaline praperlakuans and acid extraction conditions on the acid-soluble collagen from grass carp
( Ctenopharyngodon idella ) skin. Food Chemistry , 172, 836–843. https://doi. org/10.1016/j.foodchem.2014.09.147 Mattjik A. A, & Sumertajaya, M. (2002). Perancangan Percobaan dengan Aplikasi SAS dan Minitab. Bogor (ID) :IPB Press. Meng, D., Tanaka, H., Kobayashi, T., Hatayama, H., Zhang, X., Ura, K., Yunoki, S., & Takagi, Y. (2019). The effect of alkaline praperlakuan on the biochemical characteristics and fibril-forming abilities of types I and II collagen extracted from bester sturgeon by-products. International Journal of Biological Macromolecules , 131, 572–580. https://doi.org/10.1016/j. ijbiomac.2019.03.091 Nilsuwan, K., Fusang, K., Pripatnanont, P., & Benjakul, S. (2022). Properties and characteristics of acid-soluble collagen from salmon skin defatted with the aid of ultrasonication. Fishes . 7(1), 1–14. https://doi.org/10.3390/fishes7010051 Nollet, L. M. L. (1996). Handbook of food analysis: physical characterization dan nutrient analysis. Edisi ke-2. CRC Press LLC. Pal, G. K., Nidheesh, T., & Suresh, P. V. (2015). Comparative study on characteristics and in vitro fibril formation ability of acid and pepsin soluble collagen from the skin of catla ( Catla catla ) and rohu ( Labeo rohita ). Food Research International , 76, 804–812. https://doi. org/10.1016/j.foodres.2015.07.018 Romadhon, R., Darmanto, Y. S., & Kurniasih, R. A. (2019). The difference
Karakteristik kolagen gelembung renang, Sakinah et al.
characteristics of collagen from tilapia
( Oreochromis niloticus ) bone, skin, and scales. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 22(2), 403–410. https://doi. org/10.17844/jphpi.v22i2.28832 Safithri, M., Tarman, K., Suptijah, P., & Widowati, N. (2019). Karakteristik fisikokimia kolagen larut asam dari kulit ikan parang-parang ( Chirocentrus dorab ). Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 22(3), 441- 452. https://doi.org/10.17844/jphpi. v22i3.28924 Schmidt, M. M., Dornelles, R. C. P., Mello, R. O., Kubota, E. H., Mazutti, M. A., Kempka, A. P., & Demiate, I. M. (2016). Collagen extraction process. International Food Research Journal , 23(3), 913-922. Silva, R. S. G., Bandeira, S. F., & Pinto, L. A. A. (2014). Characteristics and chemical composition of skins gelatin from cobia (Rachycentron canadum). LWT - Food Science and Technology , 57(2), 580–585. https://doi.org/10.1016/j. lwt.2014.02.026
Simamora, G. R. R., Trilaksani, W., & Uju.
(2019). Profiling kolagen gelembung renang ikan patin ( Pangasius sp.) melalui proses enzimatis. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan , 2(22), 299-310. https:// doi.org/10.17844/jphpi.v22i2.27717 Singh, P., Benjakul, S., Maqsood, S., & Kishimura, H. (2011). Isolation and characterisation of collagen extracted from the skin of striped catfish ( Pangasianodon hypophthalmus ). Food Chemistry , 124(1), 97–105. https://doi. org/10.1016/j.foodchem.2010.05.111 Singh, P., Benjakul, S., Maqsood, S., & Kishimura, H. (2011). Isolation and characterisation of collagen extracted from the skin of striped catfish ( Pangasianodon hypophthalmus ). Food Chemistry , 124, 97-105. Sinthusamran, S., Benjakul, S., & Kishimura, H. (2013). Comparative study on molecular characteristics of acid soluble collagens from skin and swim bladder of seabass ( Lates calcarifer ). Food
Chemistry , 138(4), 2435–2441. https://
doi.org/10.1016/j.foodchem.2012.11.136 Sitepu, G. S., Santoso, J., & Trilaksani, W. (2019). Kolagen gelembung renang ikan patin ( Pangasius sp.) hasil ekstraksi asam. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan , 22(2), 327-339. https://doi. org/10.17844/jphpi.v22i2.27781 Skierka, E., & Sadowska, M. (2007). The influence of different acids and pepsin on the extractability of collagen from the skin of Baltic cod ( Gadus morhua ). Food Chemistry , 105(3), 1302–1306. https:// doi.org/10.1016/j.foodchem.2007.04.030 Suptijah, P., Indriani, D., & Wardoyo, S. E. (2018). Isolasi dan karakterisasi kolagen dari kulit ikan patin ( Pangasius sp.). Jurnal Sains Natural , 8(1), 8. https://doi. org/10.31938/jsn.v8i1.106 Tabarestani, S. H., Maghsoudlou, Y., Motamedzadegan, A., Mahoonak, S. A. R., & Rostamzad H. (2012). Study on some properties of acid-soluble collagens isolated from fish skin and bones of rainbow trout ( Onchorhynchus mykiss ). International Food Research Journal , 19(1), 251-257. Tang, S., Chen, W., Su, W., Weng, K., & Osako, T. (2015). Physico chemical properties and film-forming ability of fish skin collagen extracted from different fresh water species. Process Biochem .
50(1).148–155. Trilaksani, W., Adnyane, I. K. M., Riyanto, B., & Safitri, N. (2020, 5-6 Agustus). Nano collagen of the grouper swim bladder in compliance with quality standard of cosmetics materials. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science, Volume 404, The 4th EMBRIO International Symposium and the 7th International Symposium of East Asia Fisheries and Technologists Association 5–6 August 2019, Bogor, Indonesia.
Utami R. (2021). Kolagen gelembung renang ikan manyung ( Arius thalassinus ) sebagai sediaan serum wajah. [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Walters, B. D., & Stegemann, J. P. (2014).
Strategies for directing the structure and function of three-dimensional collagen
biomaterials across length scales. Acta Biomaterialia , 10(4), 1488–1501. https:// doi.org/10.1016/j.actbio.2013.08.038 Yan, M., Li, B., Zhao, X., Ren, G., Zhuang, Y., Hou, H., Zhang, X., Chen, L., & Fan, Y. (2008). Characterization of acid- soluble collagen from the skin of walleye pollock ( Theragra chalcogramma ). Food Chemistryl , 107(4), 1581–1586. https:// doi.org/10.1016/j.foodchem.2007.10.027 Zhao, W. H., Chi, C. F., Zhao, Y. Q., & Wang, B. (2018). Preparation, physicochemical and antioxidant properties of acid and pepsin-soluble collagens from the swim bladders of miiuy croaker ( Miichthys miiuy ). Marine Drugs , 16(5). https://doi.
org/10.3390/md16050161