AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI ALGA Turbinaria ornata (Turner) J.

## Agardh YANG DIPEROLEH DARI PERAIRAN TELUK MANADO
Nadia Adam 1) , Widya Astuty Lolo 1) , Sri Sudewi 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Marine biota such as algae has been developed to be used as a source of medicinal raw materials in the pharmaceutical industry. Extracs from Turbinaria ornata algae J. Agardh showed antibacterial activity. This study aims to determine the antibacterial activity of the Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh fraction obtained from the waters of the Manado Bay against the growth of Staphylococcus aureus and Escherichia coli  bacteria.  The  method  used  in  this  study  is  an  experimental  laboratory.  Turbinaria  ornata  (Turner)  J. Agardh  was  extracted  by  maceration  method  with  ethanol  96%  solvent  followed  by  fractionation  and antibacterial  activity  testing  with  diffusion  method.  Antibacterial  activity  was  determined  based  on  the results of the clear zone measurements formed around the disc paper. The results showed that the methanol at  a  concentration  of  10%,  20%,  30%,  fractions  of  30%  ethyl  acetate,  and  fractions  of  20%  and  30%  n- hexane, have antibacterial activity which is categorized strongly in both bacteria of S. aureus and E. coli, while  ethyl  acetate  fractions  with  a  concentration  of  10%  and  20%  againts  S.aureus  is  in  the  moderate category. Likewise the antibacterial activity of n-hexane fraction with a concentration of 10% againts E. coli was included in the medium category.
Keywords: Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh, antibacterial, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

## ABSTRAK
Biota laut seperti alga telah banyak dikembangkan untuk digunakan sebagai sumber bahan baku obat dalam industri farmasi. Ekstrak dari alga Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh menunjukan adanya aktivitas antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri fraksi Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh yang diperoleh dari perairan Teluk Manado terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococus aureus dan Escherichia  coli. Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  eksperimental  laboratorium. Turbinaria  ornata (Turner)  J.  Agardh  diekstraksi  dengan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96% dilanjutkan  dengan  tahap  fraksinasi  dan  pengujian  aktivitas  antibakteri  dengan  metode  difusi.  Aktivitas antibakteri  ditentukan  berdasarkan  hasil  pengukuran  zona  bening  yang  terbentuk  disekitar  kertas  cakram. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  fraksi  metanol  pada  konsentrasi  10%.  20%  ,30%,  fraksi  etil  asetat konsentrasi  30%,  dan  fraksi  n-heksana  pada  konsentrasi  20%,  30%  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang dikategorikan  kuat  pada  kedua  bakteri  yaitu S.  aureus dan E.  coli ,  sedangkan  fraksi  etil  asetat  dengan konsentrasi  10%  dan  20%  pada  bakteri S.  aureus termasuk  dalam  kategori  sedang.  Begitu  pula  aktivitas antibakteri fraksi n-heksan dengan konsentrasi 10% terhadap E. coli termasuk dalam kategori sedang.
Kata kunci : Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh , antibakteri, Staphylococus aureus , Escherichia coli.

## PENDAHULUAN
Indonesia mempunyai potensi yang baik untuk  mengembangkan  dan  memanfaatkan kekayaan  lautnya  termasuk  alga.  Berbagai penelitian  menunjukkan  bahwa  biota  laut memiliki  potensi  yang  sangat  besar  dalam menghasilkan  senyawa-senyawa  aktif  yang dapat  digunakan  sebagai  bahan  baku  obat. Biota  laut  seperti  alga  telah  banyak  diteliti dan  dikembangkan  untuk  digunakan  sebagai sumber  bahan  baku  obat  dalam  industri farmasi (Dali et al ., 2011).
Alga  merupakan  hasil  perairan  laut yang  memiliki  keanekaragaman  hayati  serta potensi yang tinggi, diantaranya menghasilkan  metabolit  sekunder  berupa senyawa  bioaktif  yang  beragam  dengan aktivitas yang sangat luas sebagai antibakteri, antivirus, anticendawan dan sitotoksik Potensi yang dimiliki oleh alga memungkinkan untuk dimanfaatkan dalam berbagai bidang, terutama bidang nutrasetika dan pengembangan senyawa  obat. Sebagian besar senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam  alga menunjukkan
aktivitas antibakteri (Rahaweman, 2016).
Pemanfaatan alga dalam bidang farmasi selama  ini  masih  terbatas,  sedangkan  potensi alga  laut  Indonesia  sangat  besar  untuk dikembangkan sebagai bahan baku obat  yaitu mengandung senyawa bioaktif yang memiliki banyak  manfaat  dibidang  farmasi  contohnya senyawa  obat  sebagai  antibakteri.  Turbinaria merupakan  rumput  laut  coklat  ( Phaeophyta ).
Warna cokelat pada thallus di pengaruhi oleh komposisi pigmen yang terkandung didalamnya,  yaitu  berasal  dari  golongan klorofil  dan  turunannya,  golongan  karotenoid polar  (xantofil),  serta  golongan  karotenoid nonpolar (karoten) (Islami et al ., 2014).
Penelitian  yang  dilakukan  Paul  (2014) terkait  identifikasi  senyawa  dari turbinaria ornata (Turner)  J.  Agardh  menunjukan adanya  senyawa  fenolik,  polifenol  dan  tanin
yang berkhasiat sebagai antibakteri. Penelitian yang  dilakukan  Vijayabaskar  dan  Shiyamala (2011)  menunjukan  bahwa  ekstrak  dari Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh terdapat senyawa  fenolik  yang  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli.
Bakteri  patogen  merupakan  salah  satu penyebab penyakit pada manusia dan makhluk  hidup  lainnya.  Banyak  usaha  yang telah dilakukan untuk mengantisipasi pengaruh  bakteri  patogen  tersebut  yaitu dengan  menemukan  senyawa  kimia  yang dapat menghambat pertumbuhan dan membunuh bakteri (Juariah, 2014). Antibakteri  diperlukan  untuk  mengobati infeksi yang disebabkan oleh bakteri.
Penelitian  ini  dilakukan  penentuan aktivitas  antibakteri  fraksi  alga Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh yang diperoleh dari perairan Teluk Manado. Uji aktivitas dilakukan  terhadap  dua  jenis  mikroba  yaitu Staphylococus aureus dan Escherichia coli.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan
November 2018 – April 2019 di
Laboratorium  Taksonomi  Jurusan  Biologi, Laboratorium  Farmakognosi  Fitokimia  dan Laboratorium  Mikrobiologi  Farmasi  Program Studi Farmasi Universitas Sam Ratulangi.

## Bentuk Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimental laboratorium .

## Alat dan Bahan
a. Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu,  jas  lab,    gunting,  alat Diving , kantong plastik, kamera bawah laut ( Xiomi ), zipper  bag , ice  packs, pisau, blender  ( Philips ),  Erlenmeyer  ( Pyrex ),
rotary  evaporator  ( Steroglass ),  timbangan analitik  ( Kern ),  gelas  ukur  ( Pyrex ),  gelas kimia  ( Pyrex ),  cawan  petri  ( Normax ), corong  pisah,  autoklaf  ( ALP ),  pinset, spatula, pembakar spritus, magnetic strirrer,  pipet  tetes,  jarum  ose,  L  glass, batang  pengaduk,  Laminar  air  flow (N
Biotek) ,  rak  tabung  reksi,  tabung  reaksi ( Pyrex ),  lemari  pendingin  ( Samsung ), inkubator  ( Ecocell ),  cakram  ( paper  disc ), mikropipet  ( Ecopipette ),  vial,  pot  salep, jangka sorong.
b. Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu alga Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh, bakteri  uji Staphylococcus  aureus ATCC 25923, Escherichia  coli ATCC  25922  , etanol,  metanol,  etil  asetat,  n-heksan, Larutan 1%,  Larutan .2H 2 O
1,75%,  NaCl  0,9%  ,  Nutrien  Agar,  kertas cakram  Kloramfenikol,  label,  alkohol, aquades, spidol permanen, tissue , aluminium foil , kertas saring, kapas, wadah maserasi,  plastik  wrap,    masker,  sarung tangan .
Prosedur Penelitian

## Ekstraksi
Sampel Turbinaria  ornata (Turner)  J.
Agardh sebanyak 1 kg diekstraksi menggunakan metode maserasi dengan pelarut  etanol  96  %  sebanyak  3  L  sampai sampel terendam secara keseluruhan selanjutnya  direndaman  selama  3  hari  dan sesekali  diaduk.  Sampel  yang  telah  direndam disaring  dengan  menggunakan  kertas  saring menghasilkan filtrat 1 dan debris 1.
Selanjutnya  proses  remaserasi  selama  2 hari  dengan  merendam  debris  1  dengan pelarut  etanol  96%  sebanyak  3  L.  Setelah  2 hari  sampel  tersebut  disaring  menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat 2 dan debris 2.  Filtrat  1  dan  2  dicampurkan  menjadi  satu
kemudian  disaring,  lalu  hasil  penyaringan kemudian diuapkan dengan rotary evaporator hingga  diperoleh  ekstark  kental Turbinaria ornata (Turner)  J.  Agardh  dan  disimpan dalam wadah gelas tertutup sebelum digunakan untuk pengujian.

## Fraksinasi
Fraksinasi  dilakukan  dengan  metode fraksinasi  cair-cair  menggunakan  corong pisah.  Sebanyak  10  g    ekstrak  etanol Turbinaria  ornata (Turner)  J.  Agardh dilarutkan dengan metanol sebanyak 100 mL. Setelah  sampel  larut  dimasukan  ke  dalam corong  pisah  dan  ditambahkan  pelarut  n- heksan  sebanyak  100  mL.  Sampel  kemudian dikocok berulangkali dalam corong pisah dan dibiarkan  hingga  membentuk  dua  lapisan yaitu  lapisan  metanol  dan  lapisan  n-heksan. Selanjutnya  masing-masing  lapisan  metanol dan  n-heksan  ditampung  dalam  wadah  yang berbeda. Lapisan n-heksan selanjutnya dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator hingga  kental  lalu  ditimbang  dan  diperoleh fraksi n-heksan.
Lapisan  metanol  dimasukan  kedalam corong  pisah  dan  ditambahkan  pelarut  etil asetat  sebanyak  100  mL.  Sampel  dibiarkan membentuk dua lapisan yaitu lapisan metanol dan  lapisan  etil  asetat.  Selanjutnya  masing  – masing  lapisan  metanol  dan  etil  asetat ditampung  dalam  wadah  yang  berbeda. Lapisan  etil  asetat  selanjutnya  dievaporasi menggunakan rotary  evaporator hingga kental lalu ditimbang dan diperoleh fraksi etil asetat,  lapisan  metanol  yang  telah  ditampung divaporasi  menggunakan rotary  evaporator hingga  kental  lalu  ditimbang  dan  diperoleh fraksi  metanol.  Ketiga  fraksi  yang  diperoleh selanjutnya digunakan dalam pengujian antibakteri.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  gelas  yang  digunakan  dalam
penelitian
ini disterilkan dengan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121  ºC selama 15 menit. Sedangkan pinset, jarum ose dan  L  glass  dipijarkan  diatas  api  bunsen (Ortez, 2005).

## Pembuatan Media NA
Ditimbang  sebanyak  10,08  g  kemudian dilarutkan  dengan  aquadest  dan  dicukupkan volumenya hingga 360 mL dan diaduk hingga homogen.  Media  yang  telah  homogen kemudian  disterilkan  dengan  menggunakan autoklaf  pada  suhu  121°C  selama  15  menit, dan  dibiarkan  sampai  media  cukup  dingin. Selanjutnya  media nutrien  agar dituang masing-masing sebanyak 20 mL ke dalam 18 cawan  petri  steril  dan  dibiarkan  hingga memadat.

## Pembuatan Media Agar Miring
Pembuatan  agar  miring nutrient  agar dilakukan dengan memasukkan 10 mL media yang  telah  disterilkan  dalam  tabung  reaksi selanjutnya  disumbat  dengan  kapas  steril  dan dimiringkan  sekitar  45 0 hingga  memadat  dan disimpan pada suhu 2 – 8 0 C.
Pembuatan  Larutan  Standar Mc.  Farland 0,5
Larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  9,95  mL dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 .2H 2 O 1,75%  sebanyak  0,05  mL  dalam  erlenmeyer, kemudian  dikocok  sampai  terbentuk  larutan yang  keruh.  Larutan  ini  dipakai  sebagai standar/  pembanding  kekeruhan  suspensi bakteri uji (Victor, 1980).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri uji yaitu Staphylococcus aureus dan Escherchia  coli yang  telah    diinokulasi diambil  ±  1  ose  dan  disuspensikan  kedalam tabung yang berisi 10 mL larutan NaCl 0,9%.
Selanjutnya dibandingkan kekeruhannya dengan larutan standar Mc farland 0,5.

## Kontrol Positif dan Kontrol Negatif
Kontrol positif untuk pengujian aktivitas  antibakteri  ini  menggunakan paper disc Kloramfenikol . Kontrol negatif menggunakan aquadest.

## Pembuatan Larutan Uji
Dibuat  larutan  stok  dengan  konsentrasi 100%  dengan  cara  menimbang  1  g  fraksi metanol, fraksi etil asetat dan fraksi n-heksan kemudian  masing-masing  dilarutkan  dengan aquadest hingga 1 mL
1. Larutan  uji  fraksi  metanol  10%,  20% dan 30% dibuat dengan cara mengambil masing-masing  sebanyak  0,1  mL,  0,2 mL dan 0,3 mL untuk setiap konsentrasi dan  dicukupkan  volumenya  dengan aquades hingga 1 mL
2. Larutan  uji  fraksi  etil  asetat  10%,  20% dan 30% dibuat dengan cara mengambil masing-masing  sebanyak  0,1  mL,  0,2 mL dan 0,3 mL untuk setiap konsentrasi dan  dicukupkan  volumenya  dengan aquades hingga 1 mL
3. Larutan  uji  fraksi  n-heksan  10%,  20% dan 30% dibuat dengan cara mengambil masing-masing  sebanyak  0,1  mL,  0,2 mL dan 0,3 mL untuk setiap konsentrasi dan  dicukupkan  volumenya  dengan aquades hingga 1 mL

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  agar  (d isc diffusion Kirby  dan  Bauer ).  Pengujian aktivitas  antibakteri  menggunakan  bakteri  uji Staphylococcus  aureus ATCC  25923  dan Escherichia  coli ATCC  25922.  Dalam pengujian digunakan kertas cakram berukuran 6  mm  dengan  daya  serap  50  µL  tiap  cakram.
Disiapkan  larutan  uji  fraksi  n-heksan,  fraksi etil  asetat  dan  fraksi  metanol  dengan konsentrasi  10%,  20%  dan  30%.  Selanjutnya media  NA  dituang  masing-masing  sebanyak 20  mL  ke  dalam  18  cawan  petri  hingga memadat. Pada permukaan media yang sudah memadat  dimasukan  suspensi  bakteri  uji, kemudian  kertas  cakram  dicelup  dengan larutan  uji  dan  diletakan  kertas  cakram  pada permukaan  media  bersama  dengan  kontrol positif  dan  dan  kontrol  negatif.  Selanjutnya diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37°C (Volk dan Wheeler, 1993).

## Pengamatan dan Pengukuran Zona Bening
Pengamatan  dilakukan  setelah  1  x  24 jam  masa  inkubasi.  Daerah  bening  pada sekitaran  cakram  menunjukan  kepekaan bakteri  terhadap  antibiotik  atau  aktivitas antibakteri  dari  bahan  uji  yang  digunakan dapat  ditentukan  berdasarkan  diameter  zona bening.  Diameter  zona  bening  diukur  dalam satuan  milimeter  (mm)  menggunkan  jangka sorong  dengan  cara  diukur  diameter  zona bening horizontal ditambahkan dengan diameter zona bening vertikal lalu dibagi dua. Kemudian  hasil  pengukuran  zona  bening, dibandingkan  berdasarkan  teori  menurut Davis and Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi dan Fraksinasi
Sampel Turbinaria  ornata (Turner)  J. Agardh  yang  telah  diambil  dari  perairan Teluk Manado dicuci bersih kemudian sampel dipotong  kecil-kecil  yang  bertujuan  untuk memperbesar luas permukaan sampel sehingga  proses  ekstraksi  berjalan  dengan optimal  karena  semakin  luas  permukaan sampel  maka  interaksi  antara  sampel  dan pelarut  akan  semakin  besar  (Mardiyah et  al , 2014). Metode ekstraksi yang digunakan ialah metode maserasi. Proses ekstraksi ini bertujuan  untuk  memisahkan  atau  menyari
senyawa  aktif  yang  ada  didalam  sampel, dengan  adanya  proses pemisahan  dua komponen  atau  lebih  yang  terkandung  dalam sampel oleh suatu pelarut (Suryanto, 2012).
Tujuan  pemilihan  metode  maserasi karena  cara  pengerjaan  dan  peralatan  yang digunakan  sederhana  serta  mudah  dilakukan dan  metode  ini  juga  dipilih  karena  tidak menggunakan  pemanasan  sehingga  sesuai untuk    golongan  senyawa  yang  tidak  tahan pemanasan.  Menurut  Harborne  (1987),  jenis dan mutu pelarut yang digunakan menentukan keberhasilan  proses  ekstraksi  dimana  pelarut yang  digunakan  harus  dapat  melarutkan  zat yang  diinginkan,  mempunyai  titik  didih  yang rendah,  murah,  tidak  toksik  dan  tidak  mudah terbakar.  Untuk  metode  maserasi  sendiri digunakan pelarut etanol 96%.
Pemilihaan  etanol  96%  dalam  proses maserasi ini adalah karena pelarut ini bersifat selektif,  ekonomis,  tidak  beracun,  bersifat universal  yang  cocok  untuk  mengekstrak semua  golongan  senyawa  metabolit  sekunder dan dapat mencegah pertumbuhan mikroorganisme  (Kristanti et  al., 2008). Etanol  96%  karena  lebih  mudah  berpenetrasi ke  dalam  simplisia  atau  sampel  dari  pada pelarut  etanol  dengan  konsentrasi  yang  lebih rendah  sehinga  ekstrak  yang  akan  dihasilkan akan pekat (Jusnita et al , 2017)
Maserat  yang  diperoleh  dari  proses maserasi  selanjutnya  dipekatkan  dengan menggunakan  alat rotary  evaporator. Prinsip kerja  dari  alat  ini  ialah  menggunakan  prinsip vakum  destilasi,  dimana  adanya  tekanan mengakibatkan  pelarut  menguap  pada  suhu dibawah  titik  didihnya,  sehingga  kandungan senyawa metabolit sekunder  yang terkandung di  dalam  pelarut  tidak  mengalami  kerusakan oleh  suhu  yang  tinggi  (Hermansah et  al, 2015)
Ekstrak kental yang diperoleh selanjutnya difraksinasi dengan metode fraksinasi  cair-cair.  Metode  fraksinasi  ini
menggunakan  variasi  pelarut  yang  memiliki kepolaran yang berbeda- beda, yaitu metanol, etil  asetat  dan  n-heksan,  pemilihan  ini  di karena  ketiga  pelarut  ini  suadah  mewakili kepolaran yang berbeda-beda dimana metanol bersifat  polar,  etil  aseat  bersifat  semi  polar dan  n-heksan  bersifat  non  polar  sehinnga senyawa-senyawa  yang  memiliki  kepolaran berbedah dapat terpisah kedalam pelarut yang sesuai (Voight, 1994).
Tujuan dilakukan proses fraksinasi yaitu untuk  memisahkan  golongan  senyawa    yang satu  dengan  golongan  senyawa  lainya berdasarkan  tingkat  kepolaran.  Fraksinasi dilakukan  secara  berkesinambungan  dimulai dengan  pelarut  non  polar  dilanjutkan  dengan semi  polar  dan  diakhiri  dengan  pelarut  polar. Masing-masing  pelarut  secara  selektif  akan memisahkan  kelompok  kandungan  kimia tersebut. Jumlah senyawa yang dapat dipisahkan  menjadi  fraksi  berbeda-beda tergantung  pada  kandungan  senyawa  di  tiap jenis  sampel.  Akhir  dari  proses  fraksinasi akan  didapatkan  berturut-turut  senyawa  non polar, semi polar dan polar (Purwanto, 2015).
Pengujian Aktivitas Antibakteri Turbinaria ornata (Turner) J. Agardh
Pengujian  aktivitas  antibakteri  fraksi metanol, fraksi etil asetat dan fraksi n-heksan pada  bakteri  uji Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli. Pengujian aktivitas antibakteri  menggunakan  metode  difusi  agar
(disc diffusion Kriby and Bauer ). Metode ini
dilakukan dengan menggunakan kertas cakram  yang  berisi  senyawa  antibakteri, kemudian  diletakkan  pada  media  padat  yang telah diinokulasi bakteri.
Senyawa  antibakteri  akan  berdifusi  ke dalam  media  padat  yang  diinokulasi  bakteri dan  menghambat  pertumbuhan  bakteri  yang ditandai  dengan  terbentuknya  daerah  bening di  sekeliling  kertas  cakram  (Brooks et  al., 2005).  Metode  ini  dipilih  karena  pengerjaan yang sederhana, mudah dikerjakan, ketelitian, tidak memerlukan  peralatan  yang  khusus,  metode serbaguna  bagi  semua  bakteri  patogen  yang tumbuh cepat dan sering digunakan dalam uji kepekaan antibiotik dalam program pengendalian mutu.
Hasil  pengujian  menunjukan  bahwa terbentuk zona bening disekitar kertas cakram yang  menunjukan  bahwa  adanya  aktivitas antibakteri  dari larutan uji dan kontrol positif yang  digunakan.  Pengamatan  dilakukan setelah di inkubasi pada suhu 37°C selama 1 x 24 jam serta dilakukan pengulangan sebanyak 3 kali. Pengulangan ini dilakukan untuk lebih mengakuratkan hasil yang akan diperoleh.
Hasil  pengujian  yang  didapat  dari pengukuran  rata-rata  diameter  zona  bening dari  antibakteri  fraksi  metanol,  fraksi  etil asetat,  fraksi  n-heksan,  kontrol  positif  dan kontrol negatif terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus dan Eschericia coli.
Tabel  1.  Hasil  rata-rata  pengujian  fraksi  metanol,  fraksi  etil  asetat,  fraksi  n-heksan,  kontrol positif dan kontrol negatif terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus Rata-rata diameter (mm) pada tiga konsentrasi 10% Kategori 20% Kategori 30% Kategori Fraksi matanol 11,25 Kuat 12,25 Kuat 12,58 Kuat Fraksi etilasetat 9,00 Sedang 9,75 Sedang 10,50 Kuat
Tabel 2. Hasil rata-rata pengujian fraksi metanol, fraksi etil asetat, fraksi n-heksan, kontrol positif dan kontrol negatif terhadap bakteri uji Eschericia coli
Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan  kontrol  positif    dan  kontrol negatif.  Kontrol  positif  digunakan  antibiotik kloramfenikol  karena  bersifat  menghambat pertumbuhan  bakteri  (bakteriostatik)  dan berspektrum luas dimana bisa digunakan pada bakteri  Gram  posif  maupun  bakteri  Gram negatif  (Katzung,  2004).  Kontrol  positif berfungsi sebagai pembanding antara antibakteri  yang  sudah  terstandarisasi  dengan larutan fraksi dalam hal ini Turbinaria ornata (Turner)  J.  Agardh . Kontrol  negatif  yang digunakan  yaitu  aquades.  Fungsi  dari  kontrol negatif  ini  untuk  mengetahui  ada  tidaknya pengaruh  pelarut  terhadap  pertumbuhan bakteri,  sehingga  dapat  diketahui  bahwa aktivitas  antibakteri  yang  dihasilkan  bukan berasal dari pelarut yang digunakan melainkan berasal dari aktivitas senyawa yang terdapat  dalam  sampel Turbinaria  ornata Turner) J. Agardh . Pada penelitian ini ketiga seri konsentrasi  baik  fraksi  metanol,  fraksi  etil asetat  dan  fraksi  n-heksan  menunjukan adanya aktivitas antibakteri dalam menghambat  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli ditunjukan  dengan
terb entu kny
a zon a
beni ng. Fra ksi met anol  dan  fraksi  n-heksan  memiliki  perbedaan diameter zona bening pada bakteri Staphylococcus aureus Gram positif dibandingkan Escherichia  coli Gram  negatif. Hasil yang
berbeda  dari  kedua  golongan  bakteri terhadap  senyawa  antibakteri  ini  dikarenakan adanya  perbedaan  kepekaan  pada  bakteri Gram  positif  dan  bakteri  Gram  negatif terhadap senyawa antibakteri yang terkandung  dalam  fraksi Turbinaria  ornata (Turner)  J.  Agardh . Hal  ini  dikarenakan adanya  perbedaan  struktur  dinding  sel  yang dimiliki oleh masing-masing bakteri.
Bakteri S.  aureus merupakan  bakteri Gram  positif  dimana  jenis  bakteri  ini
Fraksi n-heksan 12,25 Kuat 13,80 Kuat 14,16 Kuat Kontrol + 15,00 Kuat 15,50 Kuat 15,00 Kuat Kontrol - 0 0 0 Rata-rata diameter (mm) pada tiga konsentrasi 10% Kategori 20% Kategori 30% Kategori Fraksi matanol 10,30 Kuat 11,41 Kuat 12,60 Kuat Fraksi etilasetat 10,80 Kuat 12,83 Kuat 13,16 Kuat Fraksi n-heksan 9,75 Sedang 10,41 Kuat 11,58 Kuat Kontrol + 16,00 Kuat 17,00 Kuat 17,00 Kuat Kontrol - 0 0 0
memiliki struktur dinding sel yang terdiri dari lapisan  peptidoglikan  yang  tebal,  dinding  sel mengandung  polisakrida  (asam  teikoat)  dan sedikit  lipid  (Ibrahim,  2007).  Kerusakan  sel bakteri tersebut akan menyebabkan terhambatnya biosintesis enzim-enzim spesifik  yang  diperlukan  dalam  suatu  reaksi metabolisme.  Sedangkan E.  coli merupakan bakteri  Gram  negatif  memiliki  struktur dinding  sel  lebih  banyak  mengandung  lipid, sedikit  peptidoglikan  dan  memiliki  membran luar  berupa  bilayer  yang  berfungsi  sebagai pertahanan  selektif  untuk  senyawa-senyawa yang  keluar  dan  masuk  dalam  sel  bakteri (Pelczar, 1998).
Hasil yang diperoleh menunjukkan diameter  zona  bening  bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli yang  terbentuk pada  konsentrasi  fraksi  30%  lebih  besar dibandingkan  dengan  konsentrasi  fraksi  10% dan  20%.  Hal  ini  membuktikan  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  larutan  uji,  maka semakin  besar  diameter  zona  bening  yang terbentuk.  Menurut  Ajizah  (2004),  selain faktor  konsentrasi,  jenis  bahan  antibakteri juga  menentukan  kemampuan  menghambat pertumbuhan bakteri.
Penelitian yang dilakukan oleh Neelamathi dan  Kannan,  (2015)  mengenai skrining  fitokimia  dan  karakteristik  senyawa bioaktif  dari  ekstrak Turbinaria  ornata (Turner)  J.  Agardh  menunjukan  adanya senyawa  alkaloid,  fenolik,  tanin,  steroid, flavonoid  dan  terpenoid  yang  memiliki manfaat sebagai antibakteri. Beberapa penelitian yang telah dilakukan juga menunjukan  bahwa  senyawa  steroid  diduga memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli.
Penelitian  lain  yang  dilakukan  Vijayabaskar dan  Shiyamala,  (2011)  menunjukan  bahwa ekstrak  dari Turbinaria  ornata (Turner)  J. Agardh memiliki aktivitas antibakteri
terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli.
Hasil  yang  diperoleh  dari  uji  skrining fitokima menunjukan bahwa ekstrak Turbinaria  ornata (Turner)  J.  Agardh terkandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, steroid,  tanin  dan  fenolik.  Sehingga  dapat diketahui aktivitas antibakteri yang dihasilkan dari  fraksi Turbinaria  ornata (Turner)  J. Agardh  berasal  dari  senyawa  alkaloid, flavonoid, steroid, tanin dan fenolik.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  fraksi alga Turbinaria  ornata (Turner)  J.  Agardh yang  diperoleh  dari  Perairan  Teluk  Manado memiliki  daya  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Eschericia  coli. Fraksi  metanol  konsentrasi  10%.  20%  ,30%, fraksi  etil  asetat  konsentrasi  30%,  dan  fraksi n-heksana  konsentrasi  20%,  30%  memiliki aktivitas  antibakteri  yang  dikategorikan  kuat pada  kedua  bakteri  yaitu S.  aureus dan E. coli.
Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk identifikasi senyawa aktif pada fraksi n- heksan  yang  menampakan  fraksi  dengan aktivitas antibakteri terbesar.

## DAFTAR PUSTAKA
Books,  G.F.,  Butel,  J.S.,  More,  S.A.  2008. Mikrobiologi  Kedokteran Jawetz, Melnick  and  Adelbreg.  Edisi  23. Terjemahan  Hartanto,  H.,  Rachman, C.,  Damanti,  D.,  Dani,  Aryana,  D. EGC, Jakarta.
Cowan,  M.  M.  1999.  Plant  Products  as
Antimicrobial Agents. Clinical Microbiology Reviews. 12: 564 – 582
Dali,  S.,  Natsir,  H.,  Usman,  H.,  Ahmad,  A ..
2011 . Bioaktivitas Antibakteri Fraksi
Protein Alga Merah Gelidium Amansii  Dari  Perairan  Cikoang Kabupaten Takalar Sulawesi Selatan. Fakakultas MIPA Universitas Hasanuddin, Makassar Davis, W.W and Stout, T.R. 1971. Disc Plate Methods of Microbiological
Antibiotic Assay. Microbiology.
22(4): 659-665.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia . Edisi ke-2. ITB. Bandung.
Ibrahim  M,  2007. Mikrobiologi:  Prinsip  dan Aplikasi .  Unesa  University  Press, Surabaya.
Islami,  F.,  Ridho,  A.,  Pramesti,  R.  2014.
Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Rumput  Laut  Turbinaria  Decurrens
Bory  De  Saint-Vincent  Dari  Pantai
Krakal,  Gunung  Kidul,  Yogyakarta.
Journal  of  Marine  Research. 3(4): 605-616.
Jawetz,  E.,  Melinick,  J.  L.,  Adelbreg,  F.A.
1986 . Mikrobiologi Kedokteran , Penerbit  BK.  Kedokteran.  EGC, Jakarta,  :  609-610,  627-629,  638- 639.
Juariah, S. 2014. Aktivitas Senyawa Antibakteri  Bintang  Laut  (Asterias forbesii)  Terhadap  Beberapa  Jenis Bakteri  Patogen. [Tesis]. Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam,  Universitas  Sumatera  Utara, Medan.
Katzung,  Betram  G.  2004. Farmakologi Dasar  dan  Klinik  edisi  4. Alih Bahasa  :  Staf  Dosen  Farmakologi
Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya. EGC, Jakarta. 709-719.
Kristanti,  A.N., Aminah,  N.S.,Tanjung,  B.K . 2008. Buku Ajar Fitokimia . Universitas Airlangga Press, Surabaya. Mardiyah, U., Fasya, G. A. Fauziyah, B., dan Amalia,  S.  2014.  Ekstraksi  Uji Aktivitas Antioksidan dan
Identifikasi Golongan Senyawa Aktif Alga  Merah Eucheuma  spinosum dari  Perairan  Banyuwangi. Jurnal Achemy. 3(1):42
Maulida  D.  dan  Naufal  Z.  2010. Ekstraksi Antioksidan  (Likopen)  Dari  Buah Tomat Dengan Menggunakan Solvent Campuran, N-heksana, Aseton dan Etanol. [Skripsi]. Universitas Dipenegoro.
Neelamathi,  E.  I  and  Kannan,  R.  2015. Screening  and  Characterization  of Bioactive  Compounds  of  Turbinaria Ornata  from  the  Gulf  of  Mannar. International  Advanced  Research Journal  in  Science,  Engineering  and Technology 2(11)
Pankey,  G.  A.,  dan  Sabbath,  L.  D.,  2004,
Clinical  Relevance  of  Bacteriostatic Versus  Bactericidal  Mechanism  of Action  in  the  Treatment  of  Gram Positive  Bacterial  Infections, Clin. Infec . 38: 864- 870.
Paul,  J.  P.  2014.    Histochemistry  And Fluorescence  Analysis  Turbinaria Ornata  (Turner)  J.Ag.  -  A  Brown ImportantSeaweed  (Phaeophyceae).
Journal of Indian Plant Sciences 3(1) Pelczar, J.M. 1998. Dasar-Dasar
Mikrobiologi  Jilid  2 .  Alih  Bahasa:
Ratna  Ratna  Siri  Hadiotomo.  UI Press, Jakarta.
Pramono,  S.  2013. Teknologi  Fitofarmasetik (Proses  Produksi  Ekstark  untuk
Sediaan  Obat  Alam),  Bahan  Ajar Galenika. Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Purwanto,  S.  2015.  Uji  aktivitas  Antibakteri Fraksi  Aktis  Ekstark  Daun  Seggani (Melastoma malabathricum)
Terhadap  Escherichia  coli. Jurnal
Keperawatan Sriwijaya .  2(2).
Rahaweman, A.C. 2016. Aktivitas Antibakteri dan  Isolasi  Fraksi  Aktif  Kapang Endofit  Makroalga  Chlorophyta  dan Phaeophyta [Tesis]. Program  Studi
Teknologi  Hasil  Perairan,  Sekolah
Pascasarjana, Institut Pertanian
Bogor, Bogor.
Robinson,  T.  1995. Kandungan  Organik Tumbuhan Tinggi . Penerjemah: Padmawinata,  K.  Penerbit  ITB,
Bandung.
Varier,  K.M.,  Milton,  M.C.,  Arulvasu,  C.,
Gajendran,  B.  2013.  Evaluation  of Antibacterial    Properties  of  Selected
Red  Seaweeds  from  Rameshwaram
Tamil    Nadu  India .  Journal  of Acamedia and Industrial Research. 1 (1): 667-670.
Victor,  L.  1980. Antibiotics  Tradisional Sebagai Pengobatan Alternatif harus
Dilestarikan . Karya  Ilmiah. FKM
USU, Medan.
Vijayabaskar,  P.  and  Shiyamala,  V.  2011.
Antibacterial  Activities  of  Brown
Marine  Algae  (Sargassum  wightii and Turbinaria ornata) from the Gulf of Mannar Biosphere Reserve.
Advances  in  Biological  Research 5
(2): 99-102.
Volk, W.A. Wheeler, M.F. 1993. Mikrobiologi  Dasar .  Terjemahan
Markham. PT. Glora Aksara
Pratama, Jakarta.