## POTENSI MEDIA CAIR BERBAHAN ORGANIK SEBAGAI MEDIA ALTERNATIF UNTUK PERTUMBUHAN BAKTERI SEBAGAI PUPUK HAYATI
(Potential of Organic Liquid Media as an Alternative Media for Bacterial Growth for Biofertilizer)
* Nion, Y., A., 1,2) , Djaya, A., A., 1) , Handayani, N., 1) dan Neneng, L., 2)
1) Program studi Agroteknologi, Jurusan Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian,
Universitas Palangka Raya
2) Program Studi Pendidikan Biologi, Program Pascasarjana, Universitas Palangka Raya
Telp.  085249090376 *e-mail: yanetriasinion@agr.upr.ac.id
Diterima : 24/07/2016
Distujui : 20/10/2016

## ABSTRACT
Studies to evaluating various organic materials to propagation of bacteria as biofertilizer is still a few and  research to  obtain  a alternative  media  for  growing  bacteria  from  organic  materials  are  cheaper have been carried out in the laboratory Department of Agriculture, Faculty of Agriculture, University of  Palangkaraya  since  September  2014 to July  2015. This study  was  conducted  in  three  series  of studies,  such  as  at  the  first  experiment  knowing the  growth  of  soil  bacteria  on  the  type  of  media nutrient  broth  (NB),  coconut  water, mung bean  sprouts  wastewater, tofu wastewater,  rice washing water, boiled fish bones and boiled chicken bones up to 5 days after inoculation (dai), a second series knowing  the  growth  of  bacteria Burkholderia  nodosa G5.2rif1 up  to 14 dai in  NB  media, boiled shrimp shells, boiled snails meat and boiled catfish belly, a third series was to determine the growth of B. nodosa G5.2rif1 on media media NB, potato dextrose liquid, coconut water, tofu wastewater, and coconut oil. The conclusion is medium coconut water, mung bean sprouts waswater, tofu wastewater, rice washing water, boiled fish bones, boiled chicken bones, boiled shrimp shell, boiled a snails meat, boiled catfish  belly,  and potato dextrose  liquid  is  able  to  increase  the  growth  of  bacteria  higher compared than commercial media, as a alternative media substitute cheaper than commercial nutrient broth. Media alternatives that faster growth for soil bacteria is wastewater of mung bean sprouts and rice washing water while good media for faster promote growth of B. nodosa G5.2rif1 is boiled catfish belly, boiled snail meat, potato dextrose liquid, coconut water and tofu wastewater.
Keywords: bacteria, biofertilizer, liquid media, organic matter, potency.

## ABSTRAK
Penelitian  yang  mengkaji  berbagai  bahan  organik  untuk  perbanyakan bakteri  sebagai  pupuk  hayati masih sedikit dilakukan, dan penelitian untuk mendapatkan media alternatif cair untuk menumbuhkan bakteri  dari  bahan  organik  yang  lebih  murah  telah  dilaksanakan di  laboratorium  Jurusan  Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Palangka Raya sejak September 2014-Juli 2015. Penelitian dilakukan dengan 3 seri penelitian yaitu: seri kesatu mengetahui pertumbuhan bakteri tanah pada jenis media Nutrient broth (NB), air kelapa, air limbah kecambah kacang hijau, air limbah tahu, air cucian beras,  rebusan  tulang  ikan  dan  tulang  ayam  sampai  umur 5  hari  setelah  inokulasi  (hsi),  seri  kedua mengetahui  pertumbuhan  bakteri Burkholderia  nodosa  G5.2rif1 sampai  umur  14  hsi  pada  media media NB, kulit udang, daging siput, dan perut ikan patin, seri ketiga adalah mengetahui pertumbuhan B.  nodosa  G5.2rif1 pada  media  media NB, potato  dextrose cair,  air  kelapa, air limbah  tahu,  dan minyak  kelapa.  Kesimpulan  adalah  media  air  kelapa, air limbah  kecambah  kacang  hijau, air limbah tahu, air cucian beras, rebusan tulang ikan, rebusan tulang ayam, rebusan kulit udang, rebusan daging siput, rebusan perut ikan, dan Potato Dextrose cair mampu meningkatkan pertumbuhan bakteri lebih tinggi  dibanding  media  komersial NB dan    berpotensi  sebagai  pengganti  media komersial NB yang
lebih murah. Media alternatif yang  memacu pertumbuhan bakteri tanah lebih cepat adalah air limbah kecambah  kacang hijau dan air cucian beras, sedangkan  media yang baik untuk    memacu B. nodosa G5.2rif1 lebih tinggi  adalah rebusan perut ikan, rebusan daging siput, potato dextrose cair,  air kelapa dan air limbah tahu.
Kata kunci: bahan organik, bakteri, media cair, potensi, pupuk hayati.

## PENDAHULUAN
Berdasarkan  studi  pusaka  yang  telah dipelajari,  sudah  ada  beberapa  peneliti  yang menggali  kekayaan  mikroorganisme  isolat  asal Kalimantan Tengah  yang  bermanfaat  di  bidang pertanian  seperti  bakteri  agensia  hayati  yaitu Burkholderia  sacchari C13.1, B.  pyrrocinia G4.1,  B.  terricola G5.1, dan B.  nodosa G5.2 sebagai pengendali penyakit tanaman (Nion dan Toyota,  2008),  dan  bakteri  pelarut  phospat (Nion,  2008). Bakteri tersebut sangat menjanjikan  untuk  dijadikan  pupuk  hayati andalan  isolat  lokal  dari  tanah  gambut Kalimantan Tengah.
Perbanyakan bakteri dengan  media cair  mempunyai  keunggulan  yaitu  lebih  cepat memperbanyak  jumlah  sel  mikrob  dibanding dengan media padat, serta cara perbanyakannya lebih mudah dan praktis. Selama ini perbanyakan bakteri menggunakan  media
sintetik komersial  misalnya  menggunakan nutrient broth (NB), dimana harga harga media sintetik komersial setiap waktu semakin mahal. Oleh  sebab  itu  untuk  menggantikan  media sintetik  komersial  perlu  alternatif  penggunaan bahan  organik  yang  lebih  murah  dan  mudah sehingga masyarakat umum dapat
memanfaatkan bahan  organik  tersebut sebagai media  mikrob untuk  pembuatan  pupuk  hayati. Media  lain  seperti  air  kelapa  diketahui  dapat meningkatkan  pertumbuhan  bakteri  dibanding menggunakan  media  seperti  pepton,  ekstrak sapi  dan  yeast  (Seesuriyachan et  al.,  2011). Penelitian  yang  mengkaji  alternatif berbagai bahan  organik  sebagai  media  perbanyakkan bakteri untuk  pupuk hayati  menarik  diteliti. Tujuan  penelitian  adalah  mendapatkan  media cair  alternatif  yang  lebih  murah  dan  mudah didapatkan untuk menumbuhkan bakteri.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  di  laboratorium Jurusan Budidaya Pertanian,
Fakultas
Pertanian,  Universitas  Palangka  Raya sejak
September 2014-Juli 2015.

## Disain Penelitian
Penelitian dilaksanakan dalam 3 seri penelitian, yaitu:
I. Pertumbuhan bakteri tanah pada media NB, air  kelapa, air limbah kecambah kacang hijau, air limbah  tahu,  air  cucian  beras, kaldu rebusan tulang ikan dan tulang ayam
Bahan yang digunakan adalah aluminium foil, kapas, kertas tissue, media NB diencerkan 10x,  air  kelapa, air limbah  tahu, air limbah kecambah kacang hijau, air cucian beras, kaldu rebusan tulang  ikan, kaldu rebusan  tulang ayam, dan bakteri tanah yang belum diidentifikasi  (koleksi  laboratorium  Pendidikan Biologi,  Program  Pascasarjana  Universitas Palangka Raya).

## Cara kerja pembuatan media cair alternatif
Ada  7  jenis  media  yang  dibuat,  yaitu media NB (buatan pabrik) yang diencerkan 10x dan 6 media dari bahan organik yaitu limbah air kelapa, air limbah  tahu, air limbah kecambah kacang  hijau, air  cucian  beras, kaldu tulang ikan, kaldu tulang ayam.
Media kaldu tulang ayam dan ikan dibuat dengan  cara  menimbang  masing-masing  tulang tersebut  sebanyak  20 g  untuk  1  L  media kemudian  direbus  sekitar  15  menit  dan kaldunya diambil untuk media bakteri. Masing- masing  larutan  diambil  50  mL,  dimasukkan  ke botol.  Media  limbah  pertanian  seperti air limbah  kelapa, air limbah  tahu, air limbah kecambah  kacang  hijau, dan air  cucian  beras dapat  langsung  dipakai,  masing-masing  50  mL dimasukkan ke botol.
Sebagai  bahan  pembanding  media  dari bahan  organik, digunakan  media NB (buatan pabrik) dengan  cara  menimbang  0,18  g NB ditambah 100 mL air, kemudian dimasukkan ke botol.
Media  yang  telah  siap  disterilkan menggunakan  outoklaf,  pada  suhu  121  C selama  15  menit. Semua  perlakuan  dibuat  tiga ulangan.

## Pertumbuhan bakteri
Bakteri tanah dikulturkan satu hari pada media NB, kemudian diinokulasi menggunakan jarum ose pada  semua  media  cair steril. Pertumbuhannya  diukur  dengan  mengukur absorbansi  pada  panjang  gelombang  600  nm menggunakan spektrofotometer UV-VIS  pada umur 1, 2, 3, dan 5 hari setelah inokulasi (hsi).
II. Pertumbuhan  Burkholderia  nodosa  pada media  NB,  kaldu  kulit  udang,  daging  siput, dan perut ikan
Bahan yang digunakan adalah: media NB (dosis normal), NB diencerkan 10x, kaldu kulit udang, perut ikan dan daging siput, seperangkat bahan untuk isolasi dan sterilisasi di laboratorium  (alkohol,  spiritus,  kapas,  tissue, aluminium  foil,  aquades  steril), alkohol, B. nodosa G5.2rif1 (koleksi Yanetri Asi Nion).
Cara  pembuatan  media  cair  alternatif untuk  kulit  udang,  perut  ikan  patin  (Pangasius hypopthalmus) dan daging siput  hampir  sama dengan cara kerja penelitian pertama.

## Pertumbuhan bakteri
Bakteri B.  nodosa G5.2rif3  yang  telah ditumbuhkan satu hari, diinokulasi
menggunakan  jarum ose pada  semua  jenis media  cair steril yang  diujikan. Selanjutnya pertumbuhan bakteri diukur absorbansinya pada umur 0, 7 dan 14 hsi.
III. Pertumbuhan Burkholderia nodosa pada media NB, PD cair, air kelapa, air limbah tahu, dan minyak kelapa
Bahan  dan  alat  yang  digunakan  hampir sama dengan penelitian seri kedua, kecuali pada bahan  yang  untuk  pertumbuhan  bakteri  adalah
media NB, potato  dextrose cair, air  kelapa, air limbah tahu, dan minyak kelapa.

## Cara kerja Pembuatan media cair alternatif
Ada  5  jenis  media  yang  dibuat,  yaitu  1 media NB diencerkan  10x dan  4  media  dari bahan  organik  yaitu potato  dextrose cair, air limbah  kelapa, air limbah  tahu,  dan  minyak kelapa.
Media  minyak  kelapa, air limbah  kelapa dan air limbah  tahu  dapat  langsung  dipakai tanpa  harus  diolah  terlebih  dahulu,  masing- masing  cairan  tersebut  dimasukan  ke  dalam botol sebanyak 100 mL.
Cara    membuat  media potato  dextrose cair  adalah  dengan  menimbang  kentang  yang telah  dikupas  sebanyak  20  g,  diiris  kotak  dan direbus dengan  air  100  mL  sampai  empuk.  Air ekstrak kentang disaring kemudian ditambah air aquades  sampai  100  mL,  ditambah dextrose atau  gula  sebanyak  2  g  dan  dimasukkan  ke dalam botol.
Sebagai  bahan  pembanding  media  dari bahan  organik,  dibuat  media NB dengan  cara menimbang  0,18 g NB ditambah  air  100  mL, kemudian  dimasukkan  ke  botol. Semua  media yang  telah disiapkan disterilkan menggunakan outoklaf pada  suhu  121  C selama  15  menit. Semua perlakuan dibuat tiga ulangan.
Pertumbuhan bakteri B. nodosa sama perlakuannya  dengan  penelitian seri kedua. Pertumbuhannya  diukur  pada  umur 0,  15,  30, 45  dan  60 hsi kemudian  dikonversikan dalam pertumbuhan  bakteri yang  telah  dihitung  pada penelitian sebelumnya. Sebagai data pendukung juga  diukur  nilai  pH  dan  kadar  EC (Electrical Conductivity) setiap media

## HASIL DAN PEMBAHASAN
I. Pertumbuhan  Bakteri  Tanah  Pada  Media NB,  air  kelapa,  limbah air  limbah kacang hijau,  air  limbah  tahu,  air  cucian  beras, kaldu tulang ikan dan tulang ayam
Populasi bakteri konsisten selalu meningkat  pada  media  1/10 NB, air limbah kecambah  kacang  hijau  dan  kaldu  tulang  ikan, sedang    pada  media air limbah  tahu pertumbuhannya  optimal  pada  umur  2 hsi,
namun cenderung menurun setelah 3 dan 5 hsi, tetapi  pada  media  air  kelapa,  air  cucian  beras, dan  rebusan  tulang  ikan  tumbuh  optimal  pada umur 3 hsi namun semakin menurun pada umur 5 hsi (Gambar 1).
Hal  ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian Thakur et  al. (2009)  yang  menyatakan  bahwa jenis  nutrisi  dan  lingkungan  mempengaruhi pertumbuhan optimum suatu mikrob.
Semua  bahan  organik  yang digunakan dalam penelitian ini ternyata dapat dimanfaatkan untuk    menumbuhkan  bakteri tanah sebagai pengganti media komersial (NB). Pada  umumnya  untuk  keperluan  penggunaan bakteri  sebagai  bahan  inokulasi,  bakteri ditumbuhkan  sampai  umur  1  atau  2  hari  sudah dapat  digunakan.  Pada  hari  kedua,  populasi bakteri terbanyak didapat pada media air cucian beras (CB), diikuti air kelapa (K) dan air limbah kecambah  kacang  hijau  (KH),  bahkan  sampai hari  kelima,  populasi bakteri pada media KH tertinggi  dari  semua  jenis  media cair yang digunakan, setelah itu diikuti media air CB dan selanjutnya  rebusan  tulang  ayam  (TA),  dan  air kelapa.
Hidayatullah  (2012)  menyatakan  bahwa dalam  air  cucian  beras  memacu  pertumbuhan bakteri Acetobacter  xylinum untuk  membuat
nata  de  leri karena  mengandung  vitamin  dan gizi  yang  dibutuhkan  untuk  metabolisme mikrob.  Thiamin  membantu  pelepasan  energi, asam  amino  membantu  regulasi  metabolit, sedangkan lisin berperan dalam  oksidasi asam lemak  rantai  panjang  dan  merupakan  zat  yang essensial bagi semua makhluk hidup.
Sekar et  al. (2013), telah menggunakan media Tender  Coconut  Water (TCW) untuk media  bakteri Eschericia  coli rekombinan. Air kelapa mengandung air 95.5%, gula 4%, lemak 0.1%, kalsium 0.02%, fosfor 0.01%, besi 0.5%, beberapa  kandungan  lain  seperti  asam  amino, garam mineral, vitamin B kompleks, vitamin C, sitokinin dan lain-lain (Vigliar et al., 2006).
Penggunaan air limbah kecambah kacang  hijau  baik untuk pertumbuhan B. nodosa, hal ini  senada  dengan  hasil  penelitian
Ernawati (2012)
menyatakan bahwa penambahan  ekstrak  air  kecambah  dari  kacang hijau  dapat  meningkatkan  pertumbuhan  bakteri Acetobacter  xylinum untuk  membuat nata  de milko karena mengandung asam amino organik sebagai  sumber  nitrogen  untuk  pertumbuhan bakteri  tersebut sehingga menghasilkan  nata yang lebih baik.
Gambar. 1. Pertumbuhan  bakteri  tanah  pada  media NB yang  diencerkan  10x, air  kelapa  (K),  air limbah tahu (T), air limbah kecambah kacang hijau (KH), air cucian beras (CB), air kaldu tulang ikan (TI) dan air kaldu tulang ayam (TA) sampai umur 5 hsi.
II. Pertumbuhan  bakteri  Burkholderia  nodosa pada  media  kulit  udang,  daging  siput,  dan perut ikan
Pertumbuhan B.  nodosa pada  media organik seperti dari rebusan kulit udang, daging siput  dan  perut  ikan  ternyata  tidak  kalah bagusnya  dengan  pertumbuhan  bakteri  pada media NB komersial baik  dengan  dosis  normal maupun  yang  sudah  diencerkan  10 x.  Bakteri selalu  tumbuh  meningkat  dari  hari  pertama sampai  14  hsi  terdapat  pada  media  NB  yang diencerkan  10x,  kaldu  daging  siput  dan  kaldu kulit udang, sedang media NB dosis normal dan kulit  udang  tumbuh  optimal  pada  7  hsi  tetapi menurun setelah 14 hsi (Gambar 2).
Penggunaan  bahan  alternatif berupa kaldu  kulit  udang,  daging  siput  atau  perut  ikan dapat  diaplikasikan  tergantung  dengan  tujuan perbanyakan  bakteri  yang  akan  digunakan, apakah  digunakan  dalam  jangka  waktu  pendek atau  panjang.  Kalau  digunakan  dalam  jangka waktu pendek dapat digunakan media alternatif kulit  udang,  tetapi  apabila  digunakan  untuk jangka  waktu  panjang  dapat    dipilih  media daging siput atau perut ikan karena pertumbuhannya semakin meningkat setelah 14 his. Kulit  udang  banyak  mengandung  kitin yang  bermanfaat  sebagai  sumber  karbon  bagi bakteri.  Sorokulova et  al.  2009  menemukan bahwa bakteri Bacillus cereus dan
Exiguobacterium  acetylicum tumbuh  baik  dan dapat  mendegradasi  kitin  dari  cangkang  kulit udang.
Adegoke  et  al.  (2010)    menemukan bahwa  daging  siput  kaya  akan  nutrisi  dan mineral seperti Na, K, Fe dan P, protein, lemak dan  abu  yang  baik  buat  manusia  juga  buat mikroorganisme.  Mikrob  yang  berhasil  mereka isolasi  dari  daging  siput  adalah  bakteri  jenis Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Lactobacillus spp., Escherichia coli,
Micrococcus  luteus dan B.  cereus, dan  jamur jenis Aspergillus terrus, A. fumigatus, A. flavus, Absidia sp., dan Fusarium oxysporum, Eurotium sp.
Penggunaan  perut  ikan  patin  dalam penelitian  ini  sejalan dengan  hasil  penelitian Nurhayati dkk. (2013) yang menemukan bahwa ekstrak  jeroan  dari  ikan  tongkol  mengandung
banyak  pepton  yang  tumbuh  baik  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus lebih cepat pertumbuhannya dibanding menggunakan NB komersial, sedangkan  Laoli dkk. (2015)  menyatakan  ekstrak  pepton  dari perut ikan cunang (Congresox talabon) ternyata memacu  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli ATCC 8739 dan Staphylococcus aereus 6538.
III. Pertumbuhan Burkholderia nodosa pada media NB, PD cair, air kelapa, limbah cair tahu, dan minyak kelapa

## Pertumbuhan bakteri
Pengamatan dari hari pertama  sampai 60 hari pada umumnya terjadi peningkatan jumlah populasi bakteri pada semua jenis media kecuali air  limbah  tahu.  Jumlah  bakteri  paling  banyak terdapat  pada  media PD cair  diikuti  dengan media air kelapa (Gambar.3).
Hal  ini  menjadikan  penemuan  yang menarik  karena  media NB komersial yang relatif  mahal  dapat  digantikan  dengan  media yang  lebih  murah  seperti  air  limbah  tahu  dan juga air kelapa.
Media PD cair  umumnya  digunakan untuk  pertumbuhan  jamur  ternyata PD juga dapat dimanfaatkan untuk pertumbuhan bakteri. Media PD cair  mengandung  ekstrak  kentang dan  gula.  Beberapa  bahan  yang  dibutuhkan dalam  pertumbuhan  bakteri  seperti  air,  pepton, kasein,  hidrolisat,  ekstrak  daging,  ekstrak  ragi dan  sebagainya.  Diduga,  kandungan PD cair yang tinggi gula, serta mengandung protein dan kaya  akan  vitamin  menyebabkan  pertumbuhan bakteri meningkat dengan baik.
Limbah  air  tahu  mengandung  protein 40-60%
(N-total berkisar 226,06-434,78 mg/L), karbohidrat 25-50% dan lemak 10% (Herlambang, 2002). Diduga bahwa pertumbuhan  bakteri  masih  cukup  baik  pada limbah  air  tahu  karena  media  ini  banyak mengandung unsur hara N, disebabkan unsur N merupakan  unsur  yang  penting  dan  paling banyak  dimanfaatkan  dalam  pertumbuhan bakteri. Elsafie et al. (2012) menemukan bahwa faktor  nutrisi  seperti  karbon  dan  nitrogen berperan  penting  dalam  produksi  bahan antimikrob, dimana berdasarkan hasil penelitian mereka  bahwa  penambahan  ammonium  nitrat dan  laktosa  dapat  meningkatkan  produksi
senyawa  metabolit  sekunder  antimikrob  dari Burkholderia  gladioli pv. agaricicola. Apabila dilihat dari jumlah populasi bakteri pada semua media  dari  hari  pertama  sampai  hari  ke-60 masih normal (berkisar 0,4 x 10 8 - 6,7 x 10 8 cfu mL -1 ) dan dapat digunakan sebagai dosis pupuk atau pestisida hayati yang baik. Jumlah populasi ini termasuk kisaran yang masih normal senada seperti  yang  diungkapkan  oleh  Bhattacharjee and  Dey  (2014)  bahwa  umur  simpan  beberapa bakteri sebagai pestisida hayati pada Pseudomonas  fluorescens dan Bacillus  subtilis mempunyai  umur  simpan  4-8  bulan  dengan populasi  berkisar  1,0  x  10 6 cfu/g - 1,0  x  10 9
cfu/g.

## Perubahan pH dan EC pada media cair
Biosintesis bakteri dipengaruhi oleh lingkungan seperti pH. Pengaruh pH terhadap pertumbuhan bakteri  ini  berkaitan  dengan  aktivitas  enzim yang  dibutuhkan  oleh  beberapa  bakteri  untuk mengkatalis  reaksi-reaksi  yang  berhubungan dengan pertumbuhan bakteri. Apabila pH dalam suatu  medium  atau  lingkungan  tidak  optimal maka  akan  mengganggu  kerja  enzim-enzim tersebut dan akhirnya mengganggu pertumbuhan  bakteri  itu  sendiri  (Pelczar et  al., 1986).
Gambar. 2. Pertumbuhan B.  nodosa pada  media nutrient  broth komersial  dosis  normal  (NB),  dosis diencerkan 10x, kaldu kulit udang, kaldu daging siput, dan perut ikan patin sampai umur 14 hsi.
Gambar. 3. Pertumbuhan B.  nodosa (x  10 8 cfu  mL -1 pada    media potato  dextrose cair  (FLB1),  air kelapa  (FLB2), NB komersial  diencerkan  10x  (FLB3),  air  limbah  tahu  (FLB4),  dan minyak goreng (FLB5) sampai umur  60 hsi.

## Tabel 1.   Fluktuasi pH pada media sampai hari ke-60
Sampel Nilai Ph 0 Hari 15 Hari 30 Hari 45 Hari 60 Hari FLB1+ 5.08 4.65 4.7 4.7 4.77 FLB1- 5.08 5.9 4.7 5.72 5.76 FLB2+ 4.84 4.76 4.48 4.48 4.59 FLB2- 4.84 5.13 5.1 5.1 5.19 FLB3+ 8.13 8.43 8.19 8.19 8.3 FLB3- 8.13 6.1 5.8 5.8 5.96 FLB4+ 4.27 4.22 6.24 6.24 6.39 FLB4- 4.27 3.86 4.65 4.65 4.81 FLB5+ 4.78 3.83 5.34 5.34 5.02 FLB5- 4.78 4.45 4.48 4.48 4.48 *) FLB1= potato dextrose, FLB2 = air kelapa, FLB3 = nutrient broth pengenceran 10x,  FLB4 = limbah cair tahu, FLB5 = minyak goreng. Tanda + artinya dengan bakteri, tanda – artinya tanpa bakteri,
Tabel  2.  Fluktuasi EC pada media sampai
hari ke-60 Sampel EC (µm/S) 0 Hari 30 Hari 45 Hari 60 Hari FLB1+ 1.56 0.31 0.32 0.37 FLB1- 1.56 0.27 0.27 0.21 FLB2+ 6.17 1.41 1.41 1.48 FLB2- 6.17 2.03 2.03 2.04 FLB3+ 0.84 0.20 0.20 0.20 FLB3- 0.84 0.26 0.26 0.23 FLB4+ 1.38 0.38 0.38 0.37 FLB4- 1.38 0.48 0.48 0.45 FLB5+ 0.00 0.00 0.00 0.00 FLB5- 0.00 0.00 0.00 0.00 *) FLB1= potato  dextrose,  FLB2  =  air  kelapa, FLB3  = nutrient  broth  pengenceran  10x,    FLB4
=  limbah  cair  tahu,  FLB5  =  minyak  goreng. Tanda  +  artinya  dengan  bakteri,  tanda – artinya tanpa bakteri,
B. nodosa G5.2Rif1 dapat hidup pada media  asam  dan basa  seperti  pada  media  yang digunakan  pada  penelitian  ini  yang  berkisar antara  4.27-8.13,  tetapi  bakteri  ini  lebih menyukai pH yang agak asam. Pada media PD cair dan air kelapa pada hari ke-60 mempunyai jumlah  populasi  bakteri  yang  tinggi  dan mempunyai  nilai  pH  4,77  dan  4,59  (Tabel  1). Pada  kedua  media  ini  dalam  pengamatan terakhir  mempunyai  populasi  bakteri  tertinggi yaitu  pada  media PD cair  berjumlah  6,7  x  10 8
cfu mL -1 ,  sedangkan  pada  media  air  kelapa berjumlah 3,9 x 10 8 cfu mL -1 . Pada kondisi basa dalam  media NB yaitu  8,30  ternyata  populasi bakterinya hanya 0,7 x 10 8 cfu mL -1 atau enam kali  lebih  kecil  dibanding  pada  media PD cair (Gbr. 3).
B.  nodosa G5.2Rif1  mempengaruhi nilai pH media terlihat sejak hari ke-15 sampai ke-60.  Media PD cair, NB dan  air kelapa sampai pengamatan terakhir konsisten menunjukkan bahwa media yang ada bakterinya,  nilai  pH  lebih  rendah  dibanding tanpa  bakteri,  sebaliknya  air  limbah  tahu konsisten  sampai  pengamatan  terakhir  bahwa media  yang  ada  bakterinya  lebih  tinggi  pH dibanding tanpa bakteri. Hampir serupa dengan media  pada  air  limbah  tahu,  sejak  hari  ke-30 sampai  ke-60  nilai  pH  media  menjadi  lebih tinggi dibanding tanpa bakteri (Tabel.1).
Perubahan  nilai  pH  pada  media  cair yang  ditumbuhi  oleh B.  nodosa diduga dipengaruhi oleh konsentrasi unsur nutrisi yang berbeda  pada  media  cair.  Nutrisi  yang  berbeda mempengaruhi  metabolisme  yang  dilakukan oleh  bakteri  sehingga  menghasilkan  metabolit sekunder  dan  senyawa  ekresi  yang  berbeda. Senyawa-senyawa  yang  dikeluarkan  bakteri  ini menyebabkan  basa  dan  asam  pada  media  cair. Penurunan pH pada media terjadi karena bakteri B.  nodosa menghasilkan  banyak  asam  dari proses metabolismenya,  sedangkan  kenaikan pH  pada  media    limbah air tahu  dan  minyak diduga  karena B.  nodosa pada  media  ini
menghasilkan senyawa bersifat basa dan diduga karena bahan-bahan pembawanya mempengaruhi  metabolisme  bakteri  sehingga senyawa  yang  dihasilkan  dapat  meningkatkan pH. Kualitas  suatu  larutan  nutrisi  dapat diukur dengan menggunakan Electrical Conductivity  (EC) meter,  dimana  dua  buah probe  dihubungkan  ke  larutan  yang  akan diukur, kemudian dengan
rangkaian
pemprosesan sinyal diharapkan bisa mengeluarkan  output  yang  menunjukkan  besar konduktifitas  larutan  tersebut.  Nilai EC yang rendah  berarti  konduktifitas  atas  nutrisinya rendah. Nilai EC
pada media dapat mempengaruhi  jumlah  populasi  mikrob  yang tumbuh.  Air  kelapa  mempunyai  kandungan nutrisi  yang  paling  baik  karena  dari  hari pertama  sampai  terakhir  pengamatan  nilai EC lebih  tinggi  dibanding  media  cair  lainnya,  dan ini dibuktikan juga dengan jumlah bakteri yang tumbuh  juga  tertinggi  kedua,  dan  berbanding terbalik  dengan  minyak  goreng,  dimana nutrisinya lebih sedikit dan jumlah populasinya juga  lebih  sedikit  disbanding  pada  media  cair lainnya (Gbr. 3 dan Tabel 2).
Apabila  media  yang  berisi  bakteri diinkubasi  pada  waktu  lama  menyebabkan kandungan nutrisi pada media itu akan semakin berkurang.  Pada  pengamatan  ini  juga  terlihat bahwa  media  yang  menggunakan  bakteri,  nilai EC-nya lebih  rendah  dibanding  media  yang tidak  menggunakan bakteri.  Hal  ini  berarti bahwa bakteri B. nodosa yang dikulturkan telah menyerap  nutrisi  yang  terdapat  pada  media, melakukan  metabolisme dan  sintesis  pada tubuhnya  sehingga  kadar  nutrisi  pada  media sampai hari ke-60 menjadi semakin berkurang.
Pertumbuhan bakteri pada 60  hari masih memenuhi persyaratan minimal propagul sebagai  bahan  pembawa  pupuk atau  pestisida hayati    dengan  formulasi  terbaik,  maka  dari penelitian  seri  ketiga  ini diperoleh  media terbaik  untuk  pertumbuhan B.  nodosa adalah potato  dextrose, diikuti  air  kelapa  dan  air limbah tahu.

## KESIMPULAN
1. Media  air  kelapa,  limbah  kecambah  kacang hijau,  limbah  air  tahu,  air  cucian  beras, kaldu tulang ikan, kaldu tulang ayam, kaldu kulit  udang, kaldu daging  siput, kaldu perut ikan,  dan Potato  Dextrose cair  mampu meningkatkan  pertumbuhan  bakteri  lebih tinggi  dibanding  media  nutrient  broth komersial
2. Media alternatif yang  memacu pertumbuhan bakteri  tanah  lebih  cepat  adalah  limbah  air kecambah kacang hijau dan air cucian beras,
sedangkan media
yang memacu pertumbuhan  bakteri B.  nodosa G5.2rif1
lebih  tinggi  adalah kaldu perut  ikan, kaldu daging  siput, potato  dextrose cair,    air kelapa dan limbah air tahu.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis berterimakasih kepada Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi Indonesia, yang telah mendanai sebagian dari penelitian ini melalui proyek Hibah Bersaing dari dana DIPA PNBP  Universitas  Palangka  Raya  Tahun Anggaran 2014 No. Kontrak
2313/UN24/PL/2014,  Tanggal    1  September 2014. Penulis  juga  mengucapkan  terima  kasih atas  bantuan  Ramlan,  Reza  Septian,  Samaja Purba,  Triana  Gustiara, Herliani,  Mawaddah, Kasihani,  Khairun  Nisa,  Liqa  Mawaddah, Redie,  Siska  Yulita,  Sri  Widodo,  dan  Triosa Abel yang telah membantu selama penelitian

## DAFTAR PUSTAKA
Adegoke,  A.A, Adebayo-Tayo,  C.  Bukola, Inyang,  U.  Comfort,  Aiyegoro,  A. Olayinka, Komolafe, and O. Amos 2010. Snails as a meat source: Epidemiological and  nutritional  perspective. J.  Microbiol. Antimicrob.2:001-005.
Bhattacharjee,  R.  and  Dey,  U.  2014.  An overview of fungal and bacterial biopesticides to control plant pathogens/diseases. African J. of Microbiology Research. 8:1749-1762.
Elshafie,  H.S.,  Lacobellis, N.S., Racioppi, R., Lelario, F., Scrano,  L. and  Bufo,  S.A. 2012.  Influence  of  nutrient  media  on  the production  of  metabolites  produced  by Burkholderia  gladioli pv agaricicola.  7 th Eropean  conference  on  pesticides  and related  organic  micro-pollutants  in  the environment, 13 th symposium on chemistry  and  fate  of  modern  pesticide, Porto-Portugal, October 7-10, 2012. Herlambang. 2002. Pengaruh pemakaian biofilter struktur  sarang  tawon  pada pengolahan limbah organik sistem kombinasi  anaerobik aerobik.  Bogor. Institut Pertanian Bogor.
Hidayatullah,  R.  2012.  pemanfaatan  air  limbah cucian  beras  sebagai  substrat  pembuatan nata  de  leri  dengan  penambahan  substrat gula  pasir  dan  starter  berbeda.  Skrispsi. Program  Studi  Biologi.  Fakultas  Sains dan  Teknologi.  Universitas  Islam  Negri Sunan Kalijaga. Yogyakarta.
Laoli, B., Sukirno, dan Edison. 2015. Ekstraksi pepton dari limbah pengolahan ikan cunang (congresox talabon) sebagai nutrisi pada medium pertumbuhan mikroorganisme. JOM, Oktober. 1-12.
Nion.  Y.A.  2008.  Approach  to  the  best  control of soil-borne disease by a combination of biocontrol  agents  and  organic  matters (Disertasi  S3).  Graduate  school  of Bio- Applications  and  Systems  Engineering,
Tokyo  University  of  Agriculture  and Technology. Tokyo, Japan.
Nion,  Y.A.  and  Toyota,  K.  2008.  Suppression of  bacterial  wilt  and  Fusarium  wilt  by  a Burkholderia  nodosa strain  isolated  from Kalimantan  soils,  Indonesia.  Microbes Environ. 23: 134-141.
Nurhayati,  T.,  Desniar,    dan  Suhandana,  M. 2013. Pembuatan pepton secara enzimatis menggunakan  bahan  baku  jeroan  ikan tongkol. JPHPI. 16:1-11.
Pelczar,  M.J,  Chan, E.C.S.  and  Krieg, N.R.
1986. Microbiology, international student edition. McGraw-Hill. Michigan University. Seesuriyachan,  P.,.  Kuntiya, A., Hanmoungjai, P. and Techapun, C. . 2011. Exopolysaccharide production by Lactobacillus confusus TISTR 1498 using coconut  water  as  an  alternative  carbon source: the effect of peptone, yeast extract and beef extract. J. Sci. Technol. 33:379- 387.
Sekar, N., Veetil, S.K. and  Neerathilingam, M. 2013. Tender coconut water an economical  growth  medium  for  the production  of  recombinant  proteins  in Escherichia coli. Biotechnology. 13:70.
Sorokulova,  I.,  Krumnow,  A.,  Globa,  L.  And Vodyanoy, V. 2009. Efficient decomposition  of  shrimp  shell  waste using Bacillus cereus and
Exiguobacterium  acetylicum.  J.  Ind. Microb & Biotech. 36:1123-1126 Thakur,  D.,    Bora,  T.C.,  Bordoloi,  G.N.  and Mazumdar, S. 2009. Influence of nutrition and  culturing  conditions  for  optimum growth  and  antimicrobial  metabolite production by Streptomyces sp. 201. J. of Med. Mycol., 19:161-167
Vigliar R, Sdepanian, V.L., and Fagundes, N.U.
2006.    Biochemical  profile  of  coconut water  from  coconut  palms  planted  in  an inland  region.  J  Pediatr  (Rio  J)  82:308 – 312.