## PRODUKSI DAN PROFIL PROTEIN TANAMAN BAWANG MERAH AKIBAT PEMBERIAN BERBAGAI DOSIS PUPUK CAIR EKSTRAK KOTORAN AYAM

## Eko Juwaningsih
Jurusan Tanaman Pangan dan Hortikultura Politeknik Pertanian Negeri Kupang Jl. Adisucipto Penfui, P. O. Box. 1152, Kupang 85011

## ABSTRACT
The  aims  of  this  research,  are  want  to  know  about:  1)  Respond  extract  liquid  of chicken  feces  fermentation  by  production  shallots,  2)  Dosage  extract  liquid  of chicken feces fermentation by production shallots, 3) The protein profile of shallots, 4)  Forming  or  not  specific  protein  by  usage  extract  liquid  of  chicken  feces fermentation.
The result of the research analyzed by Rendomized Blok Design (RAK) have six (6) treatments  (extract  :  250  ml  water)  repeated  many  three  are:  A0  =  0  ml  (without fertilizer), A1 = 0,5 ml extract liquid, A2 =  1,0 ml extract liquid, A3 = 1,5 mls extract liquid,  A4  =  2,0  mls  extract  liquid,  A5  =  2,5  mls  extract  liquid,  A6  =  An-organic fertilizer standard.   If responded of treatments advanced  with honestly significant difference test (Uji Turkey) 5 %.  Measure highly is heavy wet umbi after grown.  The supporter  data  is  analysis  soil  before  grown,  and  after  grown  (in  plants  high production)  and  analysis  plants  towards  absorption  element  nutrion.  The  protein profile used SDS-PAGE analysis to get the protein band and compare  with protein marker. The samples for analyzis are shallots 1.5 months after planting. The  result  of  the  research  indicated:  1)  Usage  extract  liquid  of  chicken  faeces fermentation  influential  production  of  shallots,  2)  In  A5  treatments  giving  high weight  wet  (2872,5  gr/plot  atau  14,36  ton/ha),  3)  The  result  of  analyz  are found total 16 bands of profile protein.  Treatments A3, A4 and A5 have 16 bands protein. The different of has or no the band and thick or thin of the protein’s band depend on kind, number and sequence of amino acid, 4) There is a specific (band 15) only in treatment A3, A4 and A5 with weight of molecule are 27,5 KDa possibility equated respond plant by usage extract liquid of chicken faeces fermentation.
Key words: Extract liquid of chicken faeces fermentation, protein molecule of shallots

## PENDAHULUAN
Tanaman  bawang  merah  biasa  ditanam  di  dataran  rendah  dan  dataran tinggi. Produksi tanaman bawang merah umumnya relatif masih rendah yaitu 7- 9  ton/ha,  tidak  sebanding  dengan  meningkatnya  kebutuhan  penduduk (Kusumo,  1992). Sedangkan  produksi  bawang  merah  di  Nusa  Tenggara  Timur (NTT) pada umumnya hanya 46,99 kw/ha (BPS 2005). Produksi tersebut masih dapat ditingkatkan dengan penambahan unsur hara yang diperlukan tanaman. Pada  saat  ini  digalakkan  “Sistem  Pertanian  Organik  yang  akrab  dengan lingkungan”  guna  mengatasi  residu  penggunaan  bahan  kimia  baik  pada  tanah maupun tanaman.
Salah satu alternatif yang dapat dilakukan adalah pembuatan pupuk cair dari  ekstrak  kotoran  ternak  hasil  fermentasi  dengan  menggunakan  teknologi mikroorganisme dapat mempersingkat proses fermentasi pupuk cair tersebut (1- 2  minggu). Proses  fermentasi  tersebut  menghasilkan  senyawa  organik  (asam amino,  asam  laktat,  gula,  alkohol,  vitamin,  protein  dan  lain-lain)  yang  mudah
diserap  oleh  akar  tanaman. Hasil  proses  ini  tidak  meninggalkan  residu  negatif bagi tanaman (Higa, 1994).
Kotoran ternak yang dapat dijadikan pupuk organik adalah kotoran sapi, ayam, kambing, babi, kuda, dan lain-lain. Kotoran ayam mempunyai beberapa keunggulan dibandingkan dengan kotoran ternak lainnya, yaitu halus, kecil dan banyak mengandung unsur hara (Scott, at. al ., 1998).
Berdasarkan  hasil  penelitian  Tan,  dkk.,  (1992),  untuk  menghasilkan pupuk  cair  dari ekstrak  fermentasi  kotoran  ayam  dengan  teknologi  EM diperlukan komposisi campuran 14:14:0,42 (satuan liter), dan dengan dosis 1 ml ekstrak  cair  dalam  250  ml  air  dapat  meningkatkan  produksi  tanaman  melon sebesar 20%.
Keefektifan  pemberian  pupuk  cair  selain diketahui  melalui  produksi tanaman  dapat  juga  melalui  analisis  profil  protein. Hasil  dari  profil  protein menurut  Salisbury  dan  Ross  (1995b),  adalah  merupakan  hasil  dari  interaksi antara semua proses biokimia dengan lingkungan, menentukan fenotip (bentuk dan  fungsi)  tumbuhan  sebagai  hasil  dari  informasi  yang  disandi  dalam  urutan DNA genom dengan lingkungan (iklim, tanah dan biotik). Namun, aplikasi pupuk cair  dari  ekstrak  fermentasi  kotoran  ternak  tersebut  pada  sayuran  belum dilakukan,  demikian  juga  bagaimana  profil  protein  tanaman  bawang  merah tersebut  akibat  pemberian  pupuk  cair  dari  ekstrak  fermentasi  kotoran  ternak belum diketahui, untuk itulah dilakukan penelitian ini.
Penelilitian  bertujuan  untuk  mengetahui:  1)  pengaruh  pupuk  cair terhadap  produksi  bawang  merah,  2)  dosis  pupuk  cair  terhadap  produksi bawang merah, 3) profil protein tanaman bawang merah, 4) ada tidaknya protein spesifik yang terbentuk pada tanaman bawang merah akibat pemberian pupuk cair.

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan di Kebun Praktek Jurusan Tanaman Pangan dan Hortikultura,  dan  Laboratorium  Tanah  Politani  Negeri  Kupang  serta Laboratorium Biologi Molekuler Universitas Brawijaya, Malang. mulai akhir April hingga Nopember 2005.
Penelitian dilaksanakan dalam 3 tahap. Tahap I, yaitu pembuatan pupuk cair  dari  bahan  kotoran  ayam  yang  difermentasi  dengan  EM,  dan  dilakukan sesuai  dengan  prosedur  APNAN  (1995). Pupuk  cair  tersebut  sudah  dapat digunakan sampai  2  minggu  sejak  pembuatan.  Tahap  II,  yaitu aplikasi di Lapangan. Sedangkan tahap III, yaitu pengujian di Laboratorium yang meliputi analisis tanah dan analisis tanaman. Sampel  untuk  analisis  tanaman  diambil dari tanaman bawang merah yang telah berumur 1,5 bulan setelah tanam. a. Jaringan tanaman (analisis unsur hara).
b. Analisis profil protein dilakukan dengan analisis SDS-PAGE. Penelitian  ini menggunakan Rancangan  Acak  Kelompok  6  perlakuan (ekstrak: 250  ml  air)  yang  diulang  sebanyak  3  kali  yaitu  A0  =  0  ml;  A1  =  0,5 ml/250 ml air; A2 = 1,0 ml/250 ml air; A3 = 1,5 ml/250 ml air; A4 = 2,0 ml/250 ml air; A5 = 2,5  ml/250 ml air. Jika terdapat pengaruh perlakuan dilanjutkan dengan Uji Beda Nyata Jujur (HDS = Turkey 5%) (Gaspersz, 1995).
edangkan, untuk  melihat  profil  protein  dilakukan  dengan  analisis  SDS- PAGE untuk  mendapatkan  pita  protein  dan  membandingkan  dengan  protein penanda. Hasil  analisis  profil protein  kemudian  dihitung  berat  molekul  protein secara  estimasi  dengan  kalibrasi  menggunakan  standar  protein  yang  sudah diketahui  berat  molekulnya. Data  hasil  penelitian  dianalisis  secara  deskriptif. Band  atau  pita  yang  diperoleh  dianalisis  dengan  pendekatan  analisis  protein atau izosim.

## Peubah yang Diamati
1. Perubah yang diamati adalah berat basah umbi saat panen.
2. Sebagai data penunjang adalah:
a. Analisis tanah sebelum tanam, dan analisis tanah setelah tanam (khusus pada tanaman yang berproduksi tinggi) yaitu pH, C-organik, N-NH 4+ , P, K, Na, Ca, Mg dan Cu.
b. Analisis tanaman (A5) terhadap serapan unsur hara (N-NH 4+ , P, K, Na, Ca, Mg dan Cu).
3. Dari  hasil  analisis  profil  protein  kemudian  dihitung  berat  molekul  protein secara estimasi  dengan  kalibrasi  menggunakan  standar  protein yang sudah diketahui  berat  molekulnya. Penentuan  berat  molekul  dilakukan  menurut cara  Kurniati  dan  Wanandi  (2001)  yaitu  membandingkan  antara  mobilitas protein  sampel  dengan  protein penanda. Kurva  standar  protein  penanda dibuat pada kertas grafik semilog. Sumbu x adalah nilai mobilitas relative (Rf) dan sumbu y adalah berat molekul (BM) protein penanda. Nilai Rf ditentukan dengan mengukur jarak (cm) pita protein dari batas atas gel pemisah dengan jarak (cm) tracking dye . h gel pemisa atas atas dye dari b tracking Jarak (cm) emisah atas gel p ari batas protein d pita-pita Jarak (cm) Rf 

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Berat Basah Umbi Saat Panen
Hasil  analisis tanah sebelum  tanam,  sesudah  tanam pada  tanaman dan analisa  serapan  hara  pada  tananam yang  berproduksi  tinggi setelah  panen dapat dilihat pada Tabel 1 dan 2.
Tabel  1.  Hasil  Analisis  Tanah  Sebelum  Tanam  dan  Sesudah  Tanam pada  Tanaman  yang
Berproduksi Tinggi (A5) Hasil Analisis Tanah Sebelum Tanam Setelah Tanam pada Tanaman yang Berproduksi Tinggi (A5) pH 7,75 7,21 C organik (%) 0,30 2,81 N-NH4+ (mg/100 gr) 1,86 8,62 P (ppm) 165,86 564,02 K (me/100 gr) 0,02 0,03 K (me/100 gr) 0,10 0,14 Ca (me/100 gr) 0,23 tu Mg (me/100 gr) 0,09 0,07 Cu (ppm) 14,70 3,9
Keterangan: tu = tidak terukur (terlalu rendah)
Tabel 2. Hasil Analisis Serapan Hara Tanaman Bawang Merah Perlakuan P (ppm) K (me/100 gr) Na (me/100 gr) Ca (me/100 gr) Mg (me/100 gr) Cu (ppm) A0 133,24 tu 1,48 9,25 2,42 5,8 A1 646,26 tu 1,48 11,6 4,67 8 A2 658,09 tu 1,7 9,25 5,25 9,4 A3 765,08 6,95 1,96 11,6 5,58 10,9 A4 793,04 12,25 2,65 11,6 5,1 10,9 A5 876,4 12,25 2,87 16,25 5,1 10,9 A6 655,3 4,5 1,0 6,6 1,67 4
Keterangan: tu = tidak terukur (terlalu rendah)
Berdasarkan  hasil  analisis  berat  basah  umbi  bawang  merah  saat  panen dapat dilihat pada Tabel 3.

## Profil Protein
Tabel  3.  Berat  Basah  Umbi  Bawang  Merah  Saat
Panen per Plot Perlakuan Berat Basah Umbi (gram/plot) A0 885,40 a A1 1610,10 ab A2 1878,10 bc A3 2324,90 bcd A4 2514,70 cd A5 2872,50 de A6 939,80 a HSD 5% 821,88 Keterangan:  Angka-angka  didampingi  oleh  huruf yang  sama  tidak  berbeda  nyata  pada taraf 5% HSD
Hasil  analisis  molekul  protein  dengan  metode  SDS-PAGE  menggunakan Resolving gel 12 % dan Stacking gel 4 % diperoleh total 16 pita protein (Gambar 1 dan Tabel 4).
Tabel 4. Pengelompokan Berdasarkan Sebaran Pita Protein pada Gel dengan Metode SDS-PAGE
Jenis Perlakuan Jenis Pita Hadir Jenis Pita Absen A0 1, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 16 4, 14, 15 A1 1, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 16 4, 14, 15 A2 1, 2, 3, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 16 4, 14, 15 A3 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 16 - A4 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 16 - A5 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 16 - A6 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 16 15 Gambar 1. Profil Protein Tanaman Bawang Merah (A0 = tanpa pupuk, A1 = 0,5 ml, A2 = 1,0 ml, A3 = 1,5 ml, A4 = 2 ml, A5 = 2,5 ml, A6 = pupuk anorganik)

## Berat Molekul (BM) Protein
Tabel 5. Nilai Rf Protein Penanda ( Marker # SMO431, dari Bahan β-Galaktosa,  Bovine  Serum  Albumin, Ovalbumin, Lactate Degydrogenase, β- Laktoglobulin dan Lisozym) dengan Metode SDS- PAGE No Pita Protein (P) Rf BM (kDa) 1 P1 0,263 116 2 P2 0,434 66,2 3 P3 0,658 45 4 P4 0,789 35 5 P5 0,961 25 Keterangan: BM = Berat Molekul, kDa = kilo Dalton, Rf = Perbandingan  jarak  (cm)  pita  protein  dari batas  atas  gel  pemisah  ( Resolving  Gel ) dengan jarak (cm) tracking dye dari batas atas gel pemisah Tabel 6. Nilai Rf Pita Protein Tanaman Bawang Merah dan Estimasi Berat Molekul dengan Metode SDS-PAGE No Pita Protein (P) R Rf BM (kDa) 1 P1 1,20 0,158 TDE 2 P2 1,50 0,197 TDE 3 P3 2,30 0,303 105,5 4 P4 2,70 0,355 89,5 5 P5 3,15 0,414 73,5 6 P6 3,30 0,434 66,2 7 P7 3,65 0,480 62,0 8 P8 4,00 0,526 54,0 9 P9 4,50 0,592 51,5 10 P10 5,00 0,658 45,0 11 P11 5,40 0,711 41,0 12 P12 5,70 0,750 38,0 13 P13 6,15 0,809 33,6 14 P14 6,80 0,895 29,0 15 P15 7,00 0,921 27,5 16 P16 7,30 0,961 25,0 Keterangan:  BM  =  Berat  Molekul,  kDa  =  kilo  Dalton,  r  =  jarak  pita  protein  dari  batas  atas  gel pemisah,  Rf  =  Perbandingan  jarak  (cm)  pita  protein  dari  batas  atas  gel  pemisah (Resolving  Gel)  dengan  jarak  (cm)  tracking  dye  dari  batas  atas  gel  pemisah,  TDE  =

## Tidak terestimasi
Pita 4, 14 dan 15 merupakan pita tambahan yang terbentuk dengan berat molekul ± 89,5 kDa (4), 29,0 kDa (14) dan 27,5 kDa (15).

## Pembahasan

## Berat Basah Umbi Saat Panen
Dari hasil analisis tanah sebelum tanam dan sesudah tanam khususnya pada  perlakuan  A5  menunjukkan  bahwa  pemberian  pupuk  cair  berpengaruh positif  pada  tanah  sehingga  terjadi  peningkatan  pada  beberapa  unsur  yaitu unsur  C-organik,  N-NH 4+ ,  P,  K  dan Na,  tetapi  juga  menurunkan  unsur  Ca, Mg dan  Cu serta  dapat  menetralkan  pH  yang  semula  cenderung  basa. Sedangkan hasil analisis tanaman terhadap serapan hara yaitu unsur P, Na dan Ca tertinggi pada  perlakuan  A5,  unsur  K  tertinggi  pada  perlakuan  A4  dan  A5,  unsur  Mg
M   A1   A2   A3  A4  A0   A6  A5 25 kDa 45 kDa 35 kDa 66,2 kDa 116 kDa
Gambar 2. Profil Protein Bawang Merah dengan
Protein  Penanda  (Marker)  (M  =
Marker  (Protein  Penanda),  A0  = tanpa pupuk, A1 = 0,5 ml, A2 = 1,0 ml, A3 = 1,5 ml, A4 = 2 ml, P5 = 2,5 ml, A6 = pupuk anorganik)
tertinggi pada perlakuan A3, dan unsur Cu tertinggi pada perlakuan A3, A4, dan A5.
Unsur P dan K merupakan unsur penting dalam pembentukan umbi lapis disamping  unsur  hara  yang  lain. Hal  tersebut  terlihat  dari  hasil  serapan tanaman  terhadap  unsur  P  dan  K  (Tabel  2)  yang  mempengaruhi  berat  umbi bawang  merah  yaitu  pada  pemberian  pupuk  cair  2,5  ml  (perlakuan  A5)  dapat meningkatkan berat umbi sebesar 2872,5 gr/plot atau 14,28 ton/ha, sedangkan pada pemberian pupuk anorganik sesuai anjuran (perlakuan A6) hanya 939,8 gr per plot atau 46,99 kw/ha. Peningkatan berat umbi kemungkinan dipengaruhi oleh  sifat  dari  pupuk  cair  yang  terbuat  dari  bahan  kotoran  ayam  yang difermentasi  dengan  EM. Dimana  pupuk  tersebut  mampu  meningkatkan kemampuan tanah dalam mengikat air atau dapat menyimpan dan menahan air siraman sehingga  unsur  hara  yang  ada  dapat  termanfaatkan  oleh  tanaman secara  optimal  serta  dapat  meningkatkan  keragaman  dan  populasi mikroorganisme  tanah  sehingga  dapat  meningkatkan  kesehatan  dan pertumbuhan tanaman serta menambah hara dalam tanah (Higa Teruo, 1994a; Tirtawinata,  1998). Hal  senada  diungkapkan  oleh  Wididana  (1998)  bahwa ekstrak  cair  hasil  fermentasi  kotoran  ternak  dengan  EM  selain  sebagai  pupuk juga  dapat  mengusir  hama  tanaman  sehingga  mampu  menjamin  peningkatan produksi serta kelestarian lingkungan.

## Profil Protein
Identifikasi  molekul  protein  dilakukan  dengan  metode  SDS-PAGE menggunakan Resolving  gel 12  %  dan Stacking  gel 4  %  diperoleh  total  16  pita protein (Gambar 1 dan Tabel 4). Pada perlakuan A1, A2 dan A0 terdapat 13 pita protein  sehingga  terdapat  3  pita  absen  (4,  14  dan  15). Pada  perlakuan  A3,  A4 dan  A5  mempunyai  16  pita  protein. Pada  perlakuan  A6,  mempunyai  15  pita protein  sehingga  terdapat  1  pita  absen  (15). Pada  perlakuan  A3,  A4  dan  A5 ditemukan  kehadiran  3  pita  protein  baru  (4,  14  dan  15),  serta  mempertebal  8 pita (1, 2, 3, 6, 7, 8, 9, dan 11). Perlakuan A6 menghadirkan 2 pita protein baru (4  dan  14)  serta  mempertebal  5  pita  (1,  2,  3,  9,  dan  11). Pada  A0  tidak mempunyai  pita  protein  4,  14  dan  15,  sedang  keberadaan  6 pita  (1,  2,  6,  7,  8 dan 11) sangat tipis.
Terdapat  kehadiran  3  pita  baru  yaitu  pita  4,  14  dan  15. Pita  4  dan  14 merupakan pita baru hanya ada pada perlakuan A6. Sedangkan pita 15 terdapat pada perlakuan A3, A4 dan A5 dan pita tersebut merupakan pita yang spesifik yang hanya terdapat pada perlakuan A3, A4 dan A5, perlakuan yang lain tidak. Kehadiran  pita  4  dan  14  kemungkinan  merupakan  respon  tanaman  terhadap pemberian  unsur  hara  melalui  pupuk  anorganik. Sedangkan  kehadiran  pita spesifik  (pita  15)  juga  kemungkinan  merupakan  respon  tanaman  terhadap pemberian unsur hara melalui pupuk cair.
Pita protein tersusun dari satu atau lebih rantai polipeptida, yang terdiri dari  ratusan  asam  amino. Keberadaan  dan  tebal  tipisnya  pita  protein  yang terbentuk  tergantung  dari  jenis,  jumlah  dan  urutan asam  amino. Hal  tersebut yang  menyebabkan  adanya  perbedaan  dari  setiap  pita  protein  yang  terbentuk. Demikian  juga  pita  yang  baru  terbentuk  tersebut  merupakan  hasil  dari  reaksi atau proses biokimia yang terbentuk antara tanaman dengan pemberian pupuk baik ekstrak cair maupun pupuk anorganik (Salisbury dan Ross, 1995a). Proses biokimia inilah yang menentukan bentuk dan fungsi (fenotipe) tumbuhan, yang
merupakan hasil dari informasi yang disandi dalam urutan DNA-genom dan dari interaksinya dengan lingkungan (Salisbury dan Ross, 1995b).
Unsur  hara  diserap  dalam  bentuk  ion  yang  langsung  dapat  digunakan dalam sintesis protein. Misalnya; unsur hara N diserap dalam bentuk ion NO 3- direduksi menjadi NH 4+ ; unsur hara P diserap dalam bentuk ion H 2 PO 4- ; unsur hara K diserap dalam bentuk K + ; unsur-unsur tersebut selanjutnya digunakan dalam sintesis protein yang akan menghasilkan asam amino. Asam-asam amino yang  dihasilkan  akan  berfungsi  sebagai  enzim  dan  pembangun  dalam metabolisme sel (Lakitan, 1993; Nasir, 2002).

## Berat Molekul (BM) Protein
Berdasarkan sebaran pita protein pada gel (Gambar 1 dan 2), maka dapat diketahui  karakter  protein  dengan  cara  menentukan  berat  molekulnya. Menentukan berat molekul dilakukan dengan membandingkan antara mobilitas protein  sampel  dengan sampel  protein  penanda,  dimana  berat  molekul  protein sampel  secara  estimasi  ditentukan  dengan  kalibrasi  menggunakan  standar protein  yang  sudah  diketahui  berat  molekulnya  dan  kurva  standar  protein penanda dibuat pada kertas grafik semilog (Kurniati dan Wanandi, 2001). Karakter  protein  dari  setiap  pita  protein  yang  terbentuk  pada  gel tergantung  dari  jenis,  jumlah  dan  urutan  asam  amino,  sehingga  pita  protein yang  terbentuk dapat  berbeda  baik  keberadaannya  maupun  tebal  tipisnya  pita (Tabel  5  dan  ). Pada  pita  protein  yang  berbeda  jumlah  asam  amino,  akan mempunyai  berat  molekul  yang  berbeda. Misalnya  protein  yang  terlibat  dalam proses  fotosintesis  (feredoksin)  mempunyai  berat  molekul  sekitar  11,5  kDa (Salisbury dan Ross, 1995a).
Kehadiran 3 pita baru mempunyai berat molekul ± 89,5 kDa (4), 29,0 kDa (14)  dan  27,5  kDa  (15). Untuk  mengetahui  peran  pita  protein  yang  terbentuk perlu  dilakukan  pemetaan  asam-amino  terhadap  pita  protein  tersebut,  namun pada penelitian ini tidak dilakukan pemetaan asam-asam amino, sehingga tidak dapat menjelaskan peran dari pita protein.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Pemberian  ekstrak  fermentasi  kotoran  ayam  berpengaruh  terhadap produksi tanaman bawang merah. Pada perlakuan A5 memberikan berat basah tertinggi (2872,5 gr/plot atau 14,36 ton/ha). Berdasarkan hasil analisis molekul protein ditemukan total 16 profil pita protein yaitu pada perlakuan A3, A4 dan A5  mempunyai  16  pita  protein. Keberadaan  dan  tebal  tipisnya  pita  protein berbeda pada setiap perlakuan tergantung dari jenis, jumlah dan urutan asam amino. Terdapat  pita  spesifik  (pita  15)  hanya  terdapat  pada  perlakuan  A3,  A4 dan  A5  dengan  berat  molekul  27,5  kDa  kemungkinan  merupakan  respon tanaman terhadap pemberian pupuk cair.
Berdasarkan  simpulan  di  atas  dapat  disarankan  bahwa  perlu  dilakukan penelitian tentang  cara  menetralisir  bau  yang  tidak  sedap  pada  ekstrak  cair fermentasi  kotoran  ayam  dengan  EM-4. Pemetaan  terhadap  asam-asam  amino dari  masing-masing  pita  protein  yang  ditemukan  agar  diketahui  jenis  protein atau  enzim,  sehingga  dapat  menjelaskan  fungsi  dari  masing-masing  pita  guna memperbaiki sifat tanaman bawang merah.

## DAFTAR PUSTAKA
APNAN.1995. EM  Aplication  Manual  for  APNAN  Countries. The  First  Edition. Asia Pasific Natural Agriculture Network. Bangkok. Thailand. BPS-Badan  Pusat  Statistik. 2005. Nusa  Tenggara  Timur  dalam  Angka  Nusa Tenggara Timur in Figures 2004/2005 . Propinsi Nusa Tenggara Timur. Gaspersz,  V.1995. Teknik  Analisis  dalam  Penelitian  Percobaan. Tarsito.
Bandung.
Kurniati,  M.M.V.  dan  Wanandi,  S.I. 2001. Pemisahan  Protein  dengan Elektrophoresis  gel  Poliakrilamid-SDS. Dalam  Soewito,  H.,  Sodikin,  M., Kurniati, M.M.V. dan Wanandi, S.I., Retno, G.D., Abadi, S.P., Prijati, L.P. dan  Jusman,  S.W.A. Biokimia  Eksperimental  Laboratorium. Buku Kedokteran FKUI-EGC. Wigya Medika. Jakarta.
Kusumo,  S.  dan  Sunarjono,  H. 1992. Petunjuk  Bertanam  Sayuran. Proyek Pembangunan Penelitian Pertanian Nusa Tenggara. Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian Departemen Pertanian. Jakarta.
Lakitan,  Benyamin. 1993. Dasar-dasar  Fisiologi  Tumbuhan. PT Raja Grafindo Persada. Jakarta.
Nasir,  M.  2002. Bioteknologi  Potensi  dan  Keberhasilannya  dalam  Bidang Pertanian. PT Raja Grafindo Persada. Jakarta.
Rybicki, E. dan Purves M. 1996. “SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS- PAGE)”. In  Coyne,  James  Reid  and  Rybicki,  2003. Molecular  Technique Manual. Third Edition. Dept Microbiology, University of Cape Town (cited 2003 May, 18). http://web.vct.ac.za/microbiology/sdspage.htm Salisbury,  Frank  B.  and  Ross  C.W. 1995a. Fisiologi  Tumbuhan,Jilid  2. ITB.
Bandung.
Salisbury,  Frank  B.  and  Ross  C.W.,  1995b. Fisiologi  Tumbuhan,  Jilid  3. ITB.
Bandung.
Scott, M.L. Neshim, M.C., and Young, R.Y., 1976. Nutrion of Chicken. M.L. Scott Assoc. New York.
Tan,  B.K.,  Shahbuddin,  O.S.  dan  Shariffudin,  1994. The  use  of  Agriculture Wastes as Composting Materials (Using EM) for the Production of Mustard (Brassica rapa). Procerding of the Third Conference on EM Held at Kyusei Anature Farming Centre, Saraburi Thailand. 16-19 November 1994. Tirtawinata,  dan  Reza,  M.,  1998. Pupuk  Alam  untuk  Tanaman  Buah. Trubus Edisi Desember. Jakarta.
Wididana,  G.N.,  1998. Teknologi  EM  dalam  Berita. Institut  Pengembangan Sumber Daya Alam (IPSA), Jakarta.