## Evaluasi Pemeriksaan Imunoglobulin E Spesifi k Menggunakan Immunoblot Assay dengan Baku Emas Skin Prick Test
Yudhistira, 1 Ninik Sukartini, 2 Suzanna Immanuel, 2 Iris Rengganis 3
1 Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Klinik, 2 Departemen Patologi Klinik, 3 Departemen Ilmu Penyakit Dalam, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia/Rumah Sakit Umum Pusat Nasional Dr Cipto Mangunkusumo, Jakarta, Indonesia

## ABSTRAK
Pendahuluan. Skin Prick Test (SPT)  merupakan  pemeriksaan  baku  emas  diagnosis  alergi,  tetapi  tidak  dapat  dilakukan  pada  kondisi  tertentu seperti dermatografisme, hamil, tidak dapat lepas obat antialergi, sehingga pemeriksaan IgE spesifik menjadi pilihan. Di Indonesia belum ada data perbandingan pemeriksaan IgE spesifik dengan SPT. Penelitian ini dilakukan untuk menentukan sensitivitas, spesifisitas, PPV, NPV, LR+, dan LR- pemeriksaan IgE spesifik menggunakan analisis immunoblot. Metode. Penelitian menggunakan desain potong lintang. Subjek penelitian adalah pasien poliklinik alergi imunologi. Pengambilan sampel dengan metode non-probability sampling dengan teknik consecutive sampling . Analisis  dilakukan  terhadap  alergen  tungau  debu  rumah (Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Blomia tropicalis) dan kecoa. Hasil. Seratus subjek yang memenuhi kriteria masukan dan tolakan (76% perempuan, rerata usia 38,9 tahun) ikut serta dalam penelitian ini. Sensitivitas empat alergen bervariasi dengan rentang 32,4%-76,8%, spesifisitas 68,0%-85,7%, PPV 54,5%-94,5%, NPV 46,2%-65,3%, LR+ 1,8-5,0, dan LR- 0,3-0,8. Sensitivitas pemeriksaan IgE spesifik cukup baik pada tiga tungau debu rumah tetapi rendah pada kecoa; spesifisitas dan PPV bervariasi cukup sampai baik; NPV cukup baik. Simpulan dan Saran. Uji diagnostik IgE spesifik tungau debu rumah menunjukkan hasil cukup baik. Pemeriksaan IgE spesifik tidak dapat digunakan untuk skrining alergi kecoa.
Kata kunci: Alergi, IgE spesifik, skin prick test

## ABSTRACT
Background. Skin Prick Test (SPT) is considered as gold standard for diagnosis of allergy, but cannot be performed in some conditions such as dermatographism, pregnancy, and unable to abstain from antiallergy drugs. In these conditions, specific-IgE test is a test of choice. But there is no comparison data on specific IgE test with SPT in Indonesia. This study was to investigate sensitivity, specificity, PPV, NPV, LR+, and LR- of specific- IgE test of immunoblot assay kit. Method. The study was cross-sectional. Subjects were patients from allergy-immunology clinic who fulfilled inclusion and exclusion criteria. Sampling was performed using non-probability sampling method with consecutive technique. Analysis was performed for house dust mite allergen (Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Blomia tropicalis) and cockroach. Result. Hundred subjects (76% was female, average age of 38.9 years) were involved. Sensitivity of four allergens were varied with range 32.4%-76.8%, specificity 68.0%-85.7%, PPV 54.5%-94.5%, NPV 46.2%-65.3%, LR+ 1.8-5.0, and LR- 0.3-0.8. Sensitivities of specific-IgE for three species of house dust mite were moderate, but low for cockroach; specificities and PPVs were moderate to high; NPVs were moderate. Conclusion. Diagnostic test of specific-IgE with house dust mite allergen shows adequate result. Specific IgE test cannot be utilized for screening of cockroach allergy. Yudhistira, Ninik Sukartini, Suzanna Immanuel, Iris Rengganis. Evaluation of Specifi c Immunoglobulin E Immunoblot Assay with Skin Prick Test as Gold Standard
Keywords: Allergy, skin prick test, specific-IgE

## PENDAHULUAN
Prevalensi  penyakit  alergi  cukup  tinggi  di seluruh  dunia.  Penyakit  ini  meliputi  asma, rinitis alergi, anafilaksis, urtikaria, angioedema, alergi terhadap obat, makanan, dan serangga. Rinitis  alergi  terdapat  pada  10-30%  populasi dunia. 1 Sekitar  240-550  juta  orang  memiliki alergi  terhadap  makanan. 1 Riskesdas  (Riset
Kesehatan Dasar) 2013 melaporkan prevalensi asma  di  Indonesia  berdasarkan  wawancara adalah  4,5%. 2 Penelitian  terhadap  208 responden di RSCM tahun 2007 menemukan 49%  responden  sensitif  terhadap  alergen makanan berdasarkan skin prick test . 3 Prevalensi alergi makanan pada anak usia kurang dari 3 tahun di Jakarta dengan metode survei adalah
10,5%. 4 Penelitian di Semarang pada anak usia 6-7  tahun  menemukan  angka  kejadian  asma sebesar 8,1%, rinitis 11,5%, dan eksim 8,2%. 5
Selain  itu,  terdapat  beban  ekonomi  akibat penyakit ini. Di Amerika Serikat, dilaporkan 3,5 juta hari absen kerja dan dua juta hari absen sekolah per tahun akibat penyakit rinitis alergi. 1
Biaya  langsung  yang  dibutuhkan  di  negara tersebut  untuk  menangani  penyakit  rinitis alergi sebesar 2,7 miliar US  pada tahun 1995, dan  meningkat  menjadi  7,3  miliar  US   pada 2002. 1 Australia  pada  tahun  2007  mengalami kerugian finansial sebesar 7,8 miliar AU  akibat penyakit alergi. 6
Di  negara  beriklim  tropis  seperti  Indonesia, paparan  tungau  debu  rumah  merupakan faktor  paling  penting  pada  perkembangan penyakit  alergi  terutama  alergi  pernapasan. 7 Baratawidjaja, et al, (1999) melaporkan sumber alergen pada 107 penderita rinitis alergi dan/ asma  anak  dan  dewasa  di  Jakarta  adalah Dermatophagoides pteronyssinus (77,57%) dan Blomia tropicalis (71,96%) . 7 Sundaru  (2006) melaporkan  sensitisasi  alergen  terbanyak pada  penderita  asma  berusia  13-14  tahun adalah  dari Dermatophagoides pteronyssinus
(77,29%) , Dermatophagoides farinae (69,57%), dan  kecoa  (44,93%). 8 Sukamto  (2004) mendapatkan prevalensi asma sebesar 24,4% pada usia 13-14 tahun di Kabupaten Subang dan  alergen  terbanyak  adalah  tungau  debu rumah  dan  kecoa. 9 Novitasari, et al, (2013) juga  melaporkan  bahwa  dari  uji  tusuk  kulit pada  136  penderita  alergi,  alergen  tungau debu  rumah  ditemukan  positif  pada  30,15% subjek. 10
Pendekatan diagnosis alergi didasarkan pada anamnesis dan pemeriksaan fisik. Bila terdapat bukti  klinis  yang  cukup  untuk  mendukung diagnosis  alergi,  diperlukan  konfirmasi pemeriksaan in vivo dan in vitro . Pemeriksaan in vivo yang paling sering adalah skin prick test (SPT),  sedangkan  pemeriksaan in vitro paling penting  adalah  pemeriksaan  antibodi  IgE spesifik-alergen. 1
Skin prick test berperan  untuk  identifikasi alergen penyebab sehingga penting dalam  penentuan  terapi,  termasuk  kontrol lingkungan dan imunoterapi. SPT merupakan metode  diagnostik  paling  akurat  untuk menunjukkan  bahwa  alergen  spesifik  telah menginduksi  respons  spesifik  antibodi  IgE, sehingga  dianggap  sebagai  baku  emas deteksi antibodi IgE. 1 Namun pemeriksaan SPT memiliki  beberapa  kelemahan,  di  antaranya tidak  dapat  dilakukan  pada  pasien  dengan dermatografisme,  hamil,  bayi  dan  balita,  dan sedang menjalani terapi obat tertentu seperti antihistamin  dan  beta  bloker.  Pemeriksaan antibodi  IgE  spesifik  alergen  menjadi  pilihan
Tabel 1. Obat yang mempengaruhi hasil skin prick test 11
Obat Abstinens sebelum Pemeriksaan Skin Prick Test
Antihistamin :
H1 -blocker generasi pertama: hydroxyzine > 2 hari H1 -blocker generasi kedua: cetirizine, loratadine 7 hari Ketotifen > 5 hari H2-blocker Glukokortikoid : Topikal (pada bagian tubuh yang diperiksa) >1 minggu Nasal - Hirup - Sistemik/jangka pendek (<10 hari) <50 mg/hari prednisolone-equivalent >3 hari >50 mg/hari prednisolone-equivalent >1 minggu Sistemik/jangka panjang (>10 hari) <10 mg/hari prednisolone-equivalent - >10 mg/hari prednisolone-equivalent >3 minggu Inhibitor calcineurin topikal >1 minggu Obat Sistemik Lain : Omalizumab >4 minggu Leukotriene receptor antagonist - Cyclosporin A - Theophylline - Antidepresan : Doxepin 7 hari Desipramin 3 hari SSRI: Citalopram, Fluoxetin, Sertralin - Β -adrenergic agonist -
Tabel 2. Kit pemeriksaan immunoblot
Komponen Isi Strip tes yang tersimpan pada plastic reaction trough , membran nitroselulosa yang dilapisi alergen 1 x 12 Konsentrat washing buffer (TRIS/NaCl, mengandung 0,099% NaN3), dapat dibuat menjadi 1 x 500 mL washing buffer , pH 7,5 20 mL Antibodi detektor (botol dengan tutup putih), siap digunakan, mengandung antibodi anti-human IgE terkonjugasi dengan biotin, mono/polyclonal mengandung 0,099% NaN3
8 mL
Konjugat  streptavidin  (botol  dengan  tutup  merah),  siap  digunakan,  mengandung  streptavidin  yang dikonjugasikan dengan alkalin phosphatase , 0,02% methylisothiazolone, dan 0,02% bromonitrodioxane 8 mL
Substrat  (botol  dengan  tutup  hitam),  siap  digunakan,  BCIP/NBT  ( bromochloroindolyl phosphate / Nitro
Blue Tetrazolium ) 8 mL Tabel 3 . Karakteristik subjek penelitian (n=100) Karakteristik N % Jenis Kelamin Perempuan 76 76,0 Laki-Laki 24 24,0 Kelompok Usia < 20 tahun 4 4,0 20 – 29 tahun 27 27,0 30 – 39 tahun 20 20,0 40 – 49 tahun 24 24,0 50 – 59 tahun 25 25,0 Diagnosis Asma 20 20,0 Asma dan rinitis alergi 62 62,0 Rinitis alergi 18 18,0
jika terdapat kondisi seperti tersebut di atas. 1
Sampai saat ini, belum ada data di Indonesia mengenai  perbandingan  pemeriksaan  IgE spesifik  dengan  SPT.  Salah  satu  pemeriksaan IgE spesifik yang tersedia di Indonesia adalah dengan immunoblot. Penelitian ini dilakukan untuk  menentukan  sensitivitas,  spesifisitas, positive predictive value (PPV), negative predictive value (NPV), positive likelihood ratio (LR+),  dan negative likelihood ratio (LR-)  dari pemeriksaan  immunoblot  dibandingkan terhadap SPT sebagai baku emas.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  desain  potong lintang  dan  dilaporkan  dalam  bentuk deskriptif  dan  analitik.  Subjek  penelitian adalah  pasien  poliklinik  alergi  imunologi Departemen Ilmu Penyakit Dalam RSUPN Dr. Cipto  Mangunkusumo.  Pengambilan  sampel dilakukan  dengan  metode non-probability sampling dengan teknik consecutive sampling .
Penilaian  dan  analisis  dilakukan  terhadap tungau  debu  rumah (D. pteronyssinus, D. farinae, B. tropicalis )  dan  kecoa.  Penelitian ini  telah  mendapatkan  persetujuan  kaji  etik dari  Komite  Etik  Penelitian  Kedokteran  FKUI, Jakarta dengan nomor 975/UN2.F1/ETIK/2016 dan  dilakukan  November  2016  s.d.  Februari 2017.
Besar sampel dihitung menggunakan rumus: n = Z α 2 Sen (1 - Sen)/d 2 P Keterangan :
 n = jumlah sampel minimal
 Z α = deviat baku dari tingkat kesalahan, α = 5%, maka Z α = 1,96
 Sen = sensitivitas yang diharapkan, ditentukan oleh peneliti= 90%
 P  =  Prevalensi  penyakit  dari  pustaka  untuk D. pteronyssinus (77,29%) , D. farinae (69,57%) , B. tropicalis (71,96%) , dan kecoa = 44,93% .
 d  =  penyimpangan  yang  dapat  diterima  (d) sebesar ± 10% atau 0,1.
Besar  sampel  untuk  masing-masing  alergen adalah:
 D. pteronyssinus : n = (1.96) 2 90% (1 – 90%)/
(10%) 2 (77.29%) = 44.8   45
 D. farinae : n  =  (1.96) 2 90%  (1  –  90%)/
(10%) 2 (69.57%) = 49.7   50
 B. tropicalis : n  =  (1.96) 2 90%  (1  –  90%)  /
(10%) 2 (71.96%) = 48
 Kecoa  :  n  =  (1.96) 2 90%  (1  –  90%)/
(10%) 2 (44.93%) = 76.8   77
Berdasarkan  perhitungan  di  atas  ditetapkan besar  sampel  minimal  adalah  sebanyak  77 orang.
Kriteria  masukan  adalah  pasien  poliklinik alergi-imunologi  Departemen  Ilmu  Penyakit Dalam  RSUPN  Dr.  Cipto  Mangunkusumo, berusia  18-59  tahun  yang  diduga  rinitis alergi  dan  asma  oleh  dokter  dan  bersedia mengikuti  penelitian.  Kriteria  tolakan  adalah hamil,  menyusui,  penyakit  ginjal  kronis, keganasan, sedang menggunakan obat yang mempengaruhi  hasil  SPT, (Tabel 1) ,  sedang dalam  serangan  asma,  neuropatik  diabetes, kelumpuhan, dan kelainan neurogenik.
Bahan  pemeriksaan  berupa  serum  harus diperiksa  dalam  24  jam.  Jika  tidak  langsung diperiksa,  serum  dapat  disimpan  pada  suhu 2-8 0 C  sampai  satu  minggu  atau  dalam keadaan beku (< -20 0 C).

## Prinsip Pemeriksaan
Ekstrak  alergen  dilapiskan  pada  membran nitroselulosa.  Serum  ditambahkan  pada lubang  reaksi  dan  diinkubasi  pada  suhu ruangan.  Bila  terdapat  antibodi  IgE  spesifik pada serum, antibodi tersebut terikat dengan alergen.  Komponen  serum  yang  tidak  terikat akan  terbuang  saat  pencucian.  Setelah itu  ditambahkan  antibodi  anti-human  IgE berlabel  biotin  dan  diinkubasi  pada  suhu ruangan.  Antibodi anti-human IgE berikatan dengan IgE spesifik dan yang tidak berikatan akan  terbuang  saat  pencucian.  Setelah  itu ditambahkan streptavidin yang dikonjugasikan dengan alkaline phosphatase dan  diinkubasi pada  suhu  ruangan.  Streptavidin  yang  tidak berikatan  akan  terbuang  saat  pencucian. Setelah  ditambahi  substrat  dan  diinkubasi pada  suhu  ruangan,  akan  terjadi  reaksi enzimatik  yang  menghasilkan  presipitasi warna  pada  strip  pemeriksaan.  Intensitas warna proporsional dengan kadar antibodi IgE spesifik pada serum. Strip tes dipindai dengan alat Scanner dan menghasilkan konversi kadar antibodi IgE spesifik. 12
Alat dan Reagensia Kit pemeriksaan  immunoblot  dapat  dilihat pada Tabel 2 . 12
Bahan dan alat lain yang diperlukan adalah air destilasi, vortex mixer , botol dengan kapasitas 500 mL, washing retainer , kotak inkubasi untuk inkubasi  di  ruang  gelap,  ScreenShaker,  dan
alat Scanner.
Cara Pemeriksaan: 12 1.  Reagen dibiarkan pada suhu ruangan 2.  Konsentrat washing buffer pada  alat pemeriksaan  immunoblot  diencerkan dengan perbandingan 1:25
3.  Membran  pada  lubang  reaksi  dibasahi dengan washing buffer .  Pada  setiap lubang reaksi dimasukkan serum 2x300 μ l, kemudian  inkubasi  dilakukan  pada  suhu ruangan selama 45 menit.
4.  Pencucian  dengan  cara washing buffer dituangkan  dari  botol  ke  strip  tes beberapa kali sambil memiringkan lubang reaksi. Lubang diisi beberapa kali dengan buffer dan dikocok selama beberapa detik.
5.  Detektor  antibodi  pada  alat  pemeriksaan immunoblot  ditambahkan  sebanyak 2x300 μ l,  lalu  diinkubasi  pada  suhu ruangan selama 45 menit.
6.  Pencucian dilakukan seperti pada poin 4.
7.  Konjugat streptavidin pada alat pemeriksaan immunoblot sebanyak 2x300 μ l  ditambahkan  dan  diinkubasi pada suhu ruangan selama 20 menit.
8.  Pencucian dilakukan seperti pada poin 4.
9.  Substrat  alat  pemeriksaan  immunoblot sebanyak  2x300 μ l  ditambahkan  dan diinkubasi  pada  suhu  ruangan  selama 20  menit.  Inkubasi  harus  dilakukan  di ruangan gelap.
10.  Pencucian dilakukan seperti pada poin 4.
11.  Reaksi  substrat  dihentikan  dengan membilas di bawah air mengalir
12.  Membran  dikeringkan  dan  dipindai dengan alat Scanner.
Hasil pemeriksaan dikatakan positif bila kadar IgE spesifik >0,35 IU/mL

## Skin Prick Test
Bahan dan alat yang diperlukan adalah ekstrak alergen, jarum khusus SPT, kapas dan alkohol 70%, dan kit anafilaktik. Cara pemeriksaan SPT yang dilakukan di RS Dr. Cipto Mangunkusumo antara lain: 13
1.  Tes  dilakukan  di  bagian  volar  lengan bawah.  Bagian  kulit  yang  akan  dites dibersihkan dengan alkohol 70%, kemudian ditunggu sampai kering.
2.  Batas  tiap  alergen  digambarkan  dengan pulpen  sebanyak  jumlah  alergen  yang akan dites.
3.  Alergen  diteteskan  di  tempat  yang  telah ditandai.  Jarak  tiap  tetesan  alergen  2-3
cm untuk menghindari dua alergen yang kemungkinan  bereaksi  positif.  Kontrol positif  (larutan  histamin  fosfat  0,1%) dan  kontrol  negatif  (larutan phosphate- buffered saline dengan  fenol  0,4%)  juga diteteskan.
4.  Dilakukan tusukan dangkal dengan jarum khusus pada masing-masing alergen yang telah  diteteskan.  Jarum  yang  digunakan harus  baru  pada  tiap  tusukan  untuk masing-masing  tetesan.  Tusukan  dijaga jangan sampai menimbulkan perdarahan.
5.  Tes  dibaca  setelah  15-20  menit.  Hasil dikatakan  sahih/ valid bila  diameter kontrol positif >3 mm dan kontrol negatif <3 mm. Hasil pemeriksaan SPT yang tidak sahih tidak dimasukkan pada analisis hasil penelitian.
6.  Reaksi  uji  tusuk  kulit  terhadap  alergen dianggap  positif  bila  terbentuk  indurasi berukuran  3  mm  atau  lebih  dengan catatan  kontrol  positif  dan  negatif  harus sahih.
Hasil  positif  berarti  alergen  tersebut  bereaksi dengan IgE spesifik pada permukaan sel mast kulit.  Interpretasi  tes  kulit  positif  tergantung dari  riwayat  pasien  dan  gejala  klinis  yang dipacu  pajanan  dengan  alergen.  Komplikasi harus  diwaspadai,  misalnya  asma,  rinitis, urtikaria, syok anafilaksis.
Analisis  statistik  menggunakan  SPSS  ver.  20 dan Microsoft Excel.

## HASIL

## Karakteristik Subjek Penelitian
Sebanyak 100 subjek yang memenuhi kriteria masukan  dan  tolakan  dilibatkan  dalam penelitian ini; 76 (76,0%) di antaranya adalah perempuan.  Rerata  usia  pasien  adalah  38,9 tahun  dengan  rentang  usia  19  sampai  59 tahun (Tabel 3) .  Sebagian  besar  diagnosis pasien  adalah  asma  dan  rinitis  alergi,  yaitu sebesar 62%.

## Hasil Pemeriksaan SPT
Analisis hasil SPT dilakukan pada tiga alergen hirup tungau debu rumah dan alergen kecoa. Enam  subjek  penelitian  hasilnya  tidak  sahih, yaitu satu karena diameter kontrol positif tidak memenuhi  syarat  dan  lima  karena  diameter kontrol negatif tidak memenuhi syarat. Enam subjek  penelitian  tersebut  tidak  dianalisis lebih  jauh.  Sebagian  besar  subjek  penelitian bereaksi  positif  terhadap Blomia tropicalis
(Tabel 4) .
Tabel 4 . Hasil Pemeriksaan SPT (n=94) Alergen n % D. pteronyssinus Positif 69 73,4 Negatif 25 26,6 D. farinae Positif 67 71,3 Negatif 27 28,7 B. tropicalis Positif 73 77,7 Negatif 21 22,3 Kecoa Positif 37 39,4 Negatif 57 60,6

## Hasil Pemeriksaan IgE Spesifik Serum
Sensitisasi  terhadap D. pteronyssinus paling banyak  dijumpai,  yaitu  sebesar  64,9%, sedangkan B. tropicalis 58,5%  dan D. farinae 51,1% (Tabel 5).
Tabel 5 . Hasil pemeriksaan IgE spesifik serum (n=94) Alergen n % D. pteronyssinus Positif 61 64,9 Negatif 33 35,1 D. farinae Positif 48 51,1 Negatif 46 48,9 B. tropicalis Positif 55 58,5 Negatif 39 41,5 Kecoa Positif 22 23,4 Negatif 72 76,6

## Uji Diagnostik IgE Spesifik Serum
Alergen D. pteronyssinus
Pada  analisis  hasil  uji  tusuk  kulit  dan pemeriksaan IgE spesifik serum D. pteronyssinus didapatkan  persentase  negatif  palsu  sebesar 23,2% dan positif palsu sebesar 32% (Tabel 6).
Hasil  uji  diagnostik  pemeriksaan  IgE  spesifik D. pteronyssinus menemukan  sensitivitas  dan spesifisitas  76,8%  dan  68,0%  serta  PPV  86,9% (Tabel 7).
Alergen D. farinae
Pada  analisis  hasil  uji  tusuk  kulit  dan pemeriksaan  IgE  spesifik  serum D. farinae didapatkan  persentase  negatif  palsu  sebesar 34,3%, sedangkan positif palsu sebesar 14,8% (Tabel 8).
Hasil  uji  diagnostik  pemeriksaan  IgE  spesifik
D. farinae mendapatkan  spesifisitas  sebesar 85,2%,  sedangkan  PPV  sebesar  91,7% (Tabel 9).
Alergen B. tropicalis
Pada  analisis  hasil  uji  tusuk  kulit  dan pemeriksaan  IgE  spesifik  serum B. tropicalis didapatkan  persentase  negatif  palsu  sebesar 28,8%, sedangkan positif palsu sebesar 14,3% (Tabel 10).
Hasil  uji  diagnostik  pemeriksaan  IgE  spesifik B. Tropicalis mendapatkan  spesifisitas  sebesar 85,7%,  sedangkan  PPV  sebesar  94,5% (Tabel 11).

## Alergen Kecoa
Pada  analisis  hasil  uji  tusuk  kulit  dan pemeriksaan  IgE  spesifik  serum  didapatkan persentase  negatif  palsu  sebesar  6,.6%, sedangkan positif palsu sebesar 17,5% (Tabel 12).
Hasil  uji  diagnostik  pemeriksaan  IgE  spesifik kecoa  mendapatkan  sensitivitas  sebesar 32,4%, tetapi spesifisitas sebesar 82,5% (Tabel 13).

## Rekapitulasi Uji IgE Spesifik Serum
Pada  penelitian  ini,  pemeriksaan  IgE  spesifik menghasilkan sensitivitas bervariasi terhadap masing-masing  alergen  dengan  persentase 32,4%-76,8%,  spesifisitas  68,0%-85,7%,  PPV 54,5%-94,5%,  NPV  46,2%-65,3%,  LR+  1,8-5,0, dan LR- 0,3-0,8 (Tabel 14).

## PEMBAHASAN
Uji  IgE  spesifik  serum  untuk  mendeteksi sensitisasi  alergen D. pteronyssinus pada penyakit asma dan/ rinitis alergi mendapatkan sensitivitas  dan  spesifisitas  yang  cukup baik,  yaitu  76,8%  dan  68,0%.  Hal  tersebut menunjukkan  uji  IgE  spesifik  serum  mampu mendeteksi  76,8%  pasien  yang  benar tersensitisasi alergen D. pteronyssinus . Selain  itu,  uji  IgE  spesifik  dapat  mendeteksi 68%  pasien  yang  benar  tidak  tersensitisasi terhadap  alergen D. pteronyssinus .  Penelitian ini  mendapatkan  PPV  untuk  alergen D. pteronyssinus sebesar  86,9%  dan  NPV  51,5%. Hal  tersebut  menunjukkan  hasil  IgE  spesifik serum  positif  menunjukkan  kemungkinan 86,9%  seorang  pasien  benar  tersensitisasi terhadap D. Pteronyssinus, sedangkan  hasil negatif  menunjukkan  kemungkinan  51,5% pasien  tidak  tersensitisasi  alergen  tersebut.
Namun,  harus  diingat  bahwa  penerapannya sangat  dipengaruhi  oleh  prevalensi  penyakit asma  dan/  rinitis  alergi;  jadi  PPV  dan  NPV pada  penelitian  ini  tidak  dapat  diterapkan di  tempat  dengan  prevalensi  penyakit  asma dan/ atau rinitis alergi yang jauh lebih rendah. LR+  sebesar  2,4  menunjukkan  hasil  positif pada  pemeriksaan  IgE  spesifik  meningkatkan kemungkinan  diagnosis  sensitisasi  terhadap alergen D. pteronyssinus sebesar 2,4 kali lipat.
Uji  IgE  spesifik  serum  untuk  mendeteksi sensitisasi  alergen D. farinae pada  subjek dengan  penyakit  asma  dan/  rinitis  alergi mendapatkan  sensitivitas  dan  spesifisitas sebesar  65,7%  dan  85,2%.  Hal  tersebut menunjukkan  uji  IgE  spesifik  serum  mampu mendeteksi  65,7%  pasien  yang  benar tersensitisasi  alergen D. farinae .  Selain  itu, uji  IgE  spesifik  dapat  mendeteksi  85,2% pasien  yang  benar  tidak  tersensitisasi terhadap  alergen D. pteronyssinus .  PPV  pada penelitian  ini  tinggi,  yaitu  91,7%,  tetapi  NPV 50,0%,  sehingga  bila  didapatkan  hasil  IgE spesifik  yang  positif,  kemungkinan  91,7% pasien  memang  tersensitisasi  alergen D. farinae, tetapi  bila  hasil  IgE  spesifik  negatif maka  kemungkinannya  50%  bahwa  pasien tidak  tersensitisasi  terhadap D. farinae .  LR+ sebesar  4,4  menunjukkan  hasil  positif  pada pemeriksaan  IgE  spesifik  meningkatkan kemungkinan  sensitisasi  terhadap  alergen D. farinae sebesar 4,4 kali.
Uji  IgE  spesifik  serum  untuk  mendeteksi sensitisasi  alergen B. tropicalis pada  subjek dengan  penyakit  asma  dan/  atau  rinitis alergi mendapatkan sensitivitas dan spesifisitas  sebesar  71,2%  dan  85,7%.  Hal tersebut  menunjukkan  uji  IgE  spesifik  serum mampu  mendeteksi  71,2%  pasien  yang benar  tersensitisasi  alergen B. tropicalis . Selain  itu,  uji  IgE  spesifik  dapat  mendeteksi 85,7%  pasien  yang  benar  tidak  tersensitisasi alergen B. tropicalis . PPV 94,5% dan NPV 46,2% menunjukkan  apabila  hasil  uji  IgE  spesifik serum  positif  berarti  kemungkinan  94,5% benar  tersensitisasi  alergen B. tropicalis dan hasil negatif berarti kemungkinan 46,2% benar tidak tersensitisasi alergen tersebut. Hasil PPV yang tinggi pada penelitian ini menunjukkan uji  IgE  spesifik  serum  positif  kemungkinan besar menunjukkan seorang pasien memang memiliki alergi B. Tropicalis, tetapi hasil negatif tidak  menunjukkan  kemungkinan  besar bahwa  pasien  tidak  alergi  terhadap  alergen
Tabel 6 . Kesesuaian antara pemeriksaan IgE spesifik dan SPT terhadap alergen D. Pteronyssinus
IgE Spesifik Serum Skin Prick Test Total Positif Negatif Positif 53 (76,8%) 8 (32%) 61 (64,9%) Negatif 16 (23,2%) 17(68%) 33 (35,1%) Total 69 (100%) 25 (100%) 94 (100%) Tabel 7 . Hasil uji diagnostik pemeriksaan IgE spesifik D. pteronyssinus Alergen Sen Spes PPV NPV LR+ LR- D. pteronyssinus 76,8% 68,0% 86,9% 51,5% 2,4 0,3
Ket.: Sen: sensitivitas; Spes: spesifisitas; PPV: positive predicitive value ; NPV: negative predictive value ; LR: likelihood ratio
Tabel 8 . Kesesuaian antara pemeriksaan IgE spesifik dan SPT terhadap alergen D. farinae
IgE Spesifik Serum Skin Prick Test Total Positif Negatif Positif 44 (65.7%) 4 (14.8%) 48 (49.5%) Negatif 23 (34.3%) 23 (85.2%) 46 (50.5%) Total 67 (100%) 27 (100%) 94 (100%) Tabel 9 . Hasil uji diagnostik pemeriksaan IgE spesifik D. farinae Alergen Sen Spes PPV NPV LR+ LR- D. farinae 65,7% 85,2% 91,7% 50,0% 4,4 0,4
Ket.: Sen: sensitivitas; Spes: spesifisitas; PPV: positive predicitive value ; NPV: negative predictive value ; LR: likelihood ratio
Tabel 10 . Kesesuaian antara pemeriksaan IgE spesifik dan SPT terhadap alergen B. tropicalis
IgE Spesifik Serum Skin Prick Test Total Positif Negatif Positif 52 (71,2%) 3 (14,3%) 55 (58,5%) Negatif 21 (28,8%) 18 (85,7%) 39 (41,5%) Total 73 (100%) 21 (100%) 94 (100%) Tabel 11 . Hasil uji diagnostik pemeriksaan IgE spesifik B. tropicalis Alergen Sen Spes PPV NPV LR+ LR- B. tropicalis 71,2% 85,7% 94,5% 46,2% 5,0 0,3
Ket.: Sen: sensitivitas; Spes: spesifisitas; PPV: positive predicitive value ; NPV: negative predictive value ; LR: likelihood ratio
Tabel 12 . Kesesuaian antara pemeriksaan IgE spesifik dan SPT terhadap alergen kecoa
IgE Spesifik Serum Skin Prick Test Total Positif Negatif Positif 12 (32,4%) 10 (17,5%) 22 (23,4%) Negatif 25 (67,6%) 47 (82,5%) 72 (76,6%) Total 37 (100%) 57 (100%) 94 (100%) Tabel 13 . Hasil uji diagnostik pemeriksaan IgE spesifik kecoa Alergen Sen Spes PPV NPV LR+ LR- Kecoa 32,4% 82,5% 54,5% 65,3% 1,8 0,8
Ket.: Sen: sensitivitas; Spes: spesifisitas; PPV: positive predicitive value ; NPV: negative predictive value ; LR: likelihood ratio
Tabel 14 . Hasil uji diagnostik pemeriksaan IgE spesifik serum dengan baku emas SPT
Alergen Sen (%) Spes (%) PPV (%) NPV (%) LR+ LR- D. pteronyssinus 76,8 68,0 86,9 51,5 2,4 0,3 D. farinae 65,7 85,2 91,7 50,0 4,4 0,4 B. tropicalis 71,2 85,7 94,5 46,2 5,0 0,3 Kecoa 32,4 82,5 54,5 65,3 1,8 0,8
Ket.: Sen: sensitivitas; Spes: spesifisitas; PPV: positive predicitive value ; NPV: negative predictive value ; LR: likelihood ratio
tersebut . LR+  5,0  menunjukkan  hasil  uji  IgE spesifik  serum  positif  berarti  meningkatkan kemungkinan  diagnosis  alergi  terhadap B. tropicalis sebanyak 5,0 kali lipat.
Uji  IgE  spesifik  serum  untuk  mendeteksi sensitisasi  alergen  kecoa  pada  subjek dengan penyakit asma dan/ atau rinitis alergi mendapatkan  sensitivitas  dan  spesifisitas sebesar  32,4%  dan  82,5%.  Hal  tersebut menunjukkan  uji  IgE  spesifik  serum  mampu mendeteksi  32,4%  pasien  yang  benar tersensitisasi alergen kecoa. Selain itu, uji IgE spesifik dapat mendeteksi 82,5% pasien yang benar  tidak  tersensitisasi  terhadap  alergen kecoa.  Ini  menunjukkan  bahwa  pemeriksaan IgE  spesifik  serum  terhadap  alergen  kecoa tidak  dapat  digunakan  untuk  skrining  pasien alergi  kecoa  pada  populasi.  PPV  IgE  spesifik serum  54,5%  dan  NPV  cukup  baik,  yaitu 65,3%. Hasil positif pada IgE spesifik terhadap alergen  kecoa  menunjukkan  kemungkinan 54,5%  pasien  memang  benar  tersensitisasi terhadap alergen kecoa. Hasil negatif pada IgE spesifik terhadap alergen kecoa menunjukkan kemungkinan  65,3%  pasien  benar  tidak tersensitisasi terhadap alergen kecoa. LR+ 1,8 merupakan LR+ paling rendah dibandingkan LR+ pada ketiga IgE spesifik alergen lain. Hal tersebut  menunjukkan  bahwa  hasil  positif pada  pemeriksaan  IgE  spesifik  alergen  kecoa tidak  meningkatkan  kemungkinan  diagnosis alergi kecoa sebaik ketiga IgE spesifik alergen yang lain.
Belum  ada  penelitian  lain  yang  meneliti sensitivitas  dan  spesifisitas  pemeriksaan
immunoblot  dibandingkan  dengan  SPT. Penelitian  lain  yang  membandingkan pemeriksaan  IgE  spesifik  dan  SPT  dapat dilihat pada tabel 15. Dua penelitian tersebut menggunakan alat pemeriksaan lain.
Perbedaan  hasil  yang  didapat  pada penelitian ini dengan penelitian Jiang, et al, 14 dan  Herzum, et al, 15 mungkin  disebabkan perbedaan  populasi  penelitian.  Perbedaan hasil penelitian ini dengan penelitian Ash’ari, et al, 16 mungkin  disebabkan  oleh  perbedaan metode  pemeriksaan  IgE  spesifik  yang menggunakan teknik chemiluminescence.
Penelitian Kim, et al, 17 terhadap subjek berusia 6-77  tahun  (rerata  usia  30,08  tahun)  dengan rinitis alergi menemukan sensitivitas terhadap alergen D. farinae 59,38%  dan  spesifisitas 83,5%,  sedangkan  sensitivitas  terhadap alergen kecoa 0% dan spesifisitas 94,62% yang dapat dilihat pada tabel 15. Hasil yang didapat pada penelitian Kim, et al, memiliki kemiripan dengan penelitian ini, meskipun pada alergen D. pteronyssinus terdapat perbedaan hasil.
Hasil penelitian ini berbeda dengan penelitian Kumar, et al, 18 di  India  yang  mendapatkan sensitivitas uji IgE spesifik serum kecoa sangat tinggi  (92,8%)  dan  spesifisitas  66,6% (Tabel 15).
Belum  ada  publikasi  lain  yang  melaporkan hasil  uji  diagnostik  IgE  spesifik  alergen B. tropicalis dibandingkan  dengan  baku  emas SPT  pada  pasien  asma  dan/  rinitis  alergi.  Hal tersebut menyebabkan tidak dapat dilakukan
perbandingan  antara  hasil  penelitian  ini dengan penelitian lain.
Hasil uji diagnostik memperlihatkan sensitivitas tertinggi  pemeriksaan  IgE  spesifik  serum dicapai  oleh  alergen D. pteronyssinus, yaitu sebesar  76,8%.  Pada  umumnya,  spesifisitas menunjukkan angka yang baik, yaitu 68,0% - 85,7%, dengan spesifisitas tertinggi, yaitu IgE spesifik  terhadap  alergen B. tropicalis .  Angka PPV  didapatkan  tinggi  pada  ketiga  alergen tungau  debu  rumah,  tetapi  rendah  pada alergen  kecoa.  Angka  NPV  menunjukkan hasil  yang  moderat,  berkisar  46,2%-65,3%. Perhitungan  LR  positif  memperlihatkan bahwa B. tropicalis memiliki  angka  tertinggi. Perhitungan  LR  negatif  menunjukkan  angka terendah  untuk  alergen D. pteronyssinus dan B. tropicalis.

## SIMPULAN DAN SARAN
Penyebab  alergi  terbanyak  berdasarkan uji  tusuk  kulit  adalah  tungau  debu  rumah B. tropicalis ,  disusul D. pteronyssinus dan D. farinae .  Hasil  uji  diagnostik  IgE  spesifik serum  terhadap  alergen D. pteronyssinus, D. farinae, B. Tropicalis, dan  kecoa  mendapatkan sensitivitas  cukup  baik  untuk  tiga  tungau debu  rumah  dan  sensitivitas  rendah  untuk kecoa; spesifisitas cukup sampai baik; PPV baik untuk ketiga alergen tungau debu rumah dan sedang untuk kecoa; dan NPV cukup baik.
Pemeriksaan  IgE  spesifik  tidak  dapat digunakan untuk skrining alergi kecoa karena sensitivitas yang rendah.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Pawankar R, Holgate ST, Canonica GW, Lockey RF, Blaiss MS. WAO white book on allergy. Wisconsin: World Allergy Organization; 2013. p. 27 2.  Badan Penelitian dan Pengembangan Kementerian Kesehatan. Riset kesehatan dasar. Jakarta: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia; 2013.
Tabel 15. Perbandingan dengan hasil penelitian lain
Jiang, et al. 14 Herzum, et al. 15 Ash’ari, et al. 16 Kim, et al. 17 Kumar, et al. 18 Penelitian ini Alat Pemeriksaan IgE Spesifik AllergyScreen AllergyScreen CLA Allergen Specific Advansure Alloscreen ImmunoCAP AlleisaScreen Tempat Penelitian Cina Jerman Malaysia Korea Selatan India Indonesia Besar Sampel 158 124 90 193 20 94 Alergen D. pteronyssinus Sensitivitas (%) 65,9 97,8 86 42,22 76,5 Spesifisitas (%) 94,9 83,5 45,5 91,26 70,4 Alergen D. farinae Sensitivitas (%) 91,8 59,38 63,2 Spesifisitas (%) 84,0 89,69 85,2 Alergen kecoa Sensitivitas (%) 0 92,8 30 Spesifisitas (%) 94,62 66,66 83,6
3.  Candra Y, Setiarini A, Rengganis I. Gambaran sensitivitas terhadap alergen makanan.  Makara. 2011;15(1): 44-50.
4.  Tanakusumah M, Kurniati N, Amelia N. Prevalensi alergi makanan pada anak usia kurang dari 3 tahun di Jakarta berbasis survey dalam jaringan/online. Sari Pediatri. 2015;16(5): 365-74.
5.  Nency YM. Prevalensi alergi dan faktor risiko pada anak usia 6-7 tahun di Semarang [Thesis]. [Internet]. 2005 [cited 2017 July 10]. Available from: http://eprints.undip. ac.id/12552/1/2005PPDS3640.pdf
6.  Access Economics. The economic impact of allergic disease in Australia: Not to be sneezed at [Internet]. 2007 [cited 2017 July 10]. Available from: https://www. allergy.org.au/images/stories/pospapers/2007_economic_impact_allergies_report_13nov.pdf
7.  Baratawidjaja  IR,  Baratawidjaja  PP,  Darwis  A,  Soo-Hwee  L,  Fook-Tim  C,  Bee-Wah,  et  al.  Prevalence  of  allergic  sensitization  to  regional  inhalants  among  allergic patients in Jakarta, Indonesia. Asian Pac J Allerg Immunol. 1999; 17: 9-12.
8.  Sundaru H. House dust mite allergen level and allergen sensitization as risk factors for asthma among student in Central Jakarta. Med J Indones. 2006; 15: 55-9.
9.  Sukamto. Prevalensi asma pada usia 13-14 tahun dan faktor risikonya di Kabupaten Subang tahun 2004 [Thesis]. Jakarta: Universitas Indonesia; 2004.
10.  Novitasari, Sorisi A, Wahongan GJP. Profil penderita alergi dengan hasil skin prick test TDR positif di poliklinik alergi-imunologi RSUP Prof. Dr. RD Kandou Manado periode 2007-2009.  Jurnal e-Biomedik. 2013; 1(2): 1014-8.
11.  Heinzerling L, Mari A, Bergmann KC, Bresciani M, Burbach G, Darsow U, et al. The skin prick test – European standards. Clin Translat Allerg. 2013; 3: 3.
12.  MEDIWISS Analytic GmbH. AlleisaScreen immunoblot for analysing specific IgE in human serum. Moers: MEDIWISS Analytic GmbH; 2013.
13.  Departemen Ilmu Penyakit Dalam FKUI-RSCM. Pedoman pelayanan unit kerja ruang prosedur invasif alergi-imunologi klinik RSUPN Dr. Cipto Mangunkusumo. Jakarta: Departemen Ilmu Penyakit Dalam FKUI-RSCM; 2015.
14.  Jiang XD, Li GY, Dong Z, Zhu DD. Correlation analysis of two serum-specific immunoglobulin E test systems and skin-prick test in allergic rhinitis patients from northeast China. Am J Rhinol Allerg. 2011; 25: 116-9.
15.  Herzum I,  Blumer N, Kersten W, Renz H. Diagnostic and analytical performance of a screening panel for allergy. Clin Chem Lab Med.2006; 43(9):963-6.
16.  Asha’ari ZA, Suhaimi Y, Yusouf RA, Rushdan I, Maraina CHC. Comparison of serum specific IgE with skin prick test in the diagnosis of allergy in Malaysia. Med J Malaysia. 2011; 66(1): 202-6.
17.  Kim YH, Yu BJ, Kim WJ, Kim JE, Lee GH, Lee KA, et al.  Correlation between skin prick test and MAST-immunoblot results in patients with chronic rhinitis. Asian Pac J Allergy Immunol. 2012; 31: 20-5.
18.  Kumar R, Gupta N, Kanuga J, Kanuga M. A comparative study of skin prick test versus serum-specific IgE measurement in Indian patients with bronchial asthma and allergic rhinitis. Indian J Chest Dis Allied Sci. 2015; 57: 81-5.