## Tinjauan Pustaka

## ABSTRAK
Penyakit  Kardiovaskular  (PKV)  masih  menjadi  penyebab  mortalitas  terbesar.  Pada  tahun  2008, diperkirakan  17.3  juta  jiwa  meninggal  akibat  PKV,  dan  lebih  dari  80%  kematian  akibat  PKV  berasal dari  Negara  berkembang.  Aterosklerosis  dilaporkan  sebagai  penyebab  utama  terjadinya  PKV. Modalitas  terapi  terbaru  untuk  aterosklerosis  dengan  menggunakan  agonis  dari  TRPV1  sudah ditemukan. Jing Feng Zhao (2013) melaporkan bahwa senyawa agonis TRPV1, yaitu Capsaicin, yang terkandung  dalam  Capsicum  spp;  rempah  termasyhur  di  Indonesia.  Waktu  paruh  Capsaicin  yang singkat  (24  jam)  dan  sifatnya  yang  tidak  spesifik  terhadap  lesi  aterosklerotik  dapat  diatasi  dengan mengenkapsulasi  Capsaicin  ke  dalam  polimerik  immunomicelle  PLGA-PEG-MCOOH  spesifik  VCAM- 1,  yang  dapat  meningkatkan  waktu  paruhnya  hingga  28  hari.  Aktivasi  TRPV1  oleh  Capsaicin  akan mengaktifkan  kompleks  LXRα -RXR-LXRE  yang  mengakibatkan  terjadinya  peningkatan  transporter ABCA1, ApoE, dan SOAT yang secara akumulatif akan meningkatkan plasma HDL dan menurunkan tingkat makrofag sel busa sebanyak empat kali (52,5%) dan delapan kali (70,13%). Hal tersebut juga mampu  menekan  jumlah  NF-kB  (81,37%)  dan  p65  (87,54%),  sehingga  meningkatkan  IkB  (72,57%). Penambahan  MCOOH  pada  immunomicelle  akan  menghambat  ambilan  oxLDL  sebanyak  88%. Modalitas terbaru ini dapat direkomendasikan karena memiliki efek kuratif dan kardio protektif dengan efikasi  tinggi,  hanya  memerlukan  sekali  injeksi,  dan  efek  samping  lebih  rendah  jika  dibandingkan dengan modalitas konvensional.
Kata kunci: Capsaicin , Immunomicelle, VCAM-1, Aterosklerosis.

## ABSTRACT
Cardiovascular diseases (CVDs) are still being major causes of mortality. In 2008, an estimated 17.3 million  people  died  from  CVDs,  and  over  80%  of  CVDs  deaths  take  place  in  developing  countries. Atherosclerosis  was  reported  to  be  the  leading  cause  of  CVDs.  A  new  treatment  modality  for atherosclerosis using agonist of TRPV1 has been found. Jing Feng Zhao (2013) reported that TRPV1 agonist compound, Capsaicin, contained in Capsicum spp; a well-known spice in Indonesia. The short half-life of Capsaicin (24 hours) and its unspecific properties to atherosclerotic lesions can  be solved by  encapsulating  it  into  immunomicelle  polymeric  PLGA-PEG-MCOOH  specific  VCAM-1,  that  will increase  its  half-life  until  28  days.  TRPV1-induced  activation  by  Capsaicin will  activate  LXRα -RXR- LXRE  complex  which  leads  to  increase  of  ABCA1  transporter,  ApoE,  and  SOAT that  accumulatively will upregulate plasma HDL and downregulate macrophage foam cells levels by 4-fold (52,5%) and 8- fold (70,13%). It also can suppress amount of NF-kB (81,37%) and p65 (87,54%), thus upregulate IkB (72,57%).  Addition  of  MCOOH  on  immunomicelle  will  inhibit  oxLDL  uptake  by  88%.  This  novel modality may give recommendation due to its curative and cardio protective effect with high efficacy, only needs one-time injection, and less side effect if compared with conventional modalities.
Keywords: Capsaicin , Immunomicelle, VCAM-1, Atherosclerosis.

## POTENSI IMUNOMICELLE POLIMERIK PLGA-PEG-MCOOH SPESIFIK VCAM-1 BERBASIS SENYAWA CAPSAICIN SEBAGAI MODALITAS MUTAKHIR DALAM PENATALAKSANAAN ATEROSKLEROSIS
I Made Yoga Prabawa 1 , Gede Febby Pratama Kusuma 1 ,
Tjokorda Istri Pramitasuri 1
1 Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Udayana
Email: yogaprabawa.bali@gmail.com

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit kardiovaskular adalah jenis penyakit yang menyerang jantung dan pembuluh  darah.  Hingga  saat  ini,  penyakit kardiovaskular  masih  menjadi  penyebab mortalitas  tertinggi  di  seluruh  dunia.  Pada tahun  2008  diperkirakan  17,3  juta  jiwa meninggal  akibat  penyakit  kardiovaskular. Berdasarkan  data  WHO,  lebih  dari  80% penyakit  kardiovaskular  terjadi  di  negara- negara  berkembang,  termasuk  Indonesia. Di  Indonesia  sendiri,  menurut  Survei
Kesehatan Rumah Tangga (SKIRT)
prevalensi penyakit jantung pada kelompok usia  15-24  tahun  adalah  18,3  per  100.000 penduduk. Sedangkan pada kelompok usia 45-54  tahun  dan  usia  55  tahun  ke  atas mencapai 174,6 per 100.000 penduduk dan 461,9 per 100.000 penduduk. Dari berbagai etiologi yang ada, aterosklerosis merupakan  penyebab  tertinggi  terjadinya penyakit kardiovaskular. 1-4
Aterosklerosis adalah penyakit inflamasi  yang  bersifat  progresif  dan menyerang  pembuluh  darah  arteri dengan karakteristik  disfungsi  endotel,  inflamasi vaskular,  penumpukkan  lemak,  kolesterol, serta  debris  seluler  pada  tunika  intima  di dinding  pembuluh  darah. 5-7 Prevalensi  dari aterosklerosis  sendiri  cukup  bervariasi, mulai dari 17% pada populasi yang berusia kurang  dari  20  tahun,  hingga  85%  pada populasi yang berusia lebih dari 50 tahun. 8
Perkembangan
aterosklerosis bermula ketika low density lipoprotein (LDL) terjebak  di  dalam  arteri  dan  mengalami oksidasi  oleh reactive  oxygen  species (ROS).  Beberapa  penelitian  menyebutkan bahwa  LDL  secara in  vivo mampu
teroksidasi  oleh  radikal  bebas  seperti radikal  superoksida,  nitrat  oksida,  dan hidrogen  peroksida  yang  terdapat  didalam tubuh,  sehingga  menghasilkan  oksida  LDL (oxLDL). 9 oxLDL  bersifat  imunogen  dan dapat  dikenali  oleh  makrofag  melalui reseptor scavenger pada makrofag, sehingga menyebabkan makrofag teraktivasi  dan  dapat  menginvasi  lesi aterosklerotik  untuk  memfagosit  oxLDL. Mekanisme ini menyebabkan
terakumulasinya  lipid  di  dalam  makrofag dan  memicu  terbentuknya  sel  busa  ( foam cells ). Sel busa kemudian mengekspresikan sitokin dan faktor pertumbuhan  seperti  IL-1  dan  TNF- α yang akan  menarik  makrofag  lainnya  ke  tempat lesi  sehingga  meningkatkan  progresivitas pembentukan  plak.  Lambat  laun  plak  akan berkembang menjadi  plak  yang matur  atau disebut ateroma.
Kestabilan ateroma dijaga oleh kap fibrosa  ( fibrous  cap )  yang  merupakan  hasil dari  perubahan  fenotip smooth  muscle  cell (SMC).  Kap  fibrosa  berperan  dalam menurunkan tegangan stres sirkumferensial dan  mencegah  kontak  antara  inti  nekrosis dengan darah. Namun, makrofag pada plak aterosklerosis  juga  menyekresikan  enzim proteolitik  yaitu matrix  metalloproteinases (MMPs)  maupun nitric  oxide (NO)  yang menghambat  proliferasi  sel  otot  polos, mendegradasi  berbagai  protein  dalam spektrum luas seperti: proteoglikan, kolagen  tipe  IV,  fibronektin,  laminin,  dan protein matriks dari kap, sehingga menyebabkan  ketidakseimbangan  antara proses  inflamasi  dan  reparasi  yang
berakibat  pada  penipisan  dinding  kap fibrosa.
Dalam  keadaan  kronis,  penipisan kap  fibrosa  meningkatkan  risiko  terjadinya ruptur-oklusi  trombotik  arteri,  aneurisma, dan  emboli.  Oleh  karena  itu,  aterosklerosis dapat menyebabkan terjadinya  infark miokard  dan  iskemia  di  berbagai  bagian tubuh  yang  merupakan  kegawatdaruratan di bidang kardiovaskuler. 3,10-12
Respon  inflamasi  yang  diperankan oleh  makrofag  derivat  monosit  dan  limfosit T  memiliki  andil  besar  dalam  menginisiasi aterosklerosis. 13 Monosit  yang  mencapai tunika  intima  akan  mengalami  perubahan yang  diakibatkan  oleh macrophage  colony- stimulating factor (M-CSF) dan faktor-faktor diferensiasi  lainnya  menjadi  2  jenis makrofag  mayor,  yaitu  M1  dan  M2  yang memiliki  peranan  antagonis  dalam  proses inflamasi. M1 bersifat pro inflamasi dengan menimbulkan  respon  peradangan  akibat lipopolisakarida, sedangkan M2 bersifat anti inflamasi  yang  peranannya  diperantarai oleh  keberadaan  IL-4,  IL-13,  IL-1,  atau vitamin D3 dan secara umum menghasilkan sejumlah besar IL-10 dan reseptor
scavenger, mannose ,  serta arginase . Menurut sebuah studi in vitro , dimana pada lesi aterosklerosis secara umum jumlah M1 lebih banyak dibandingkan dengan M2. 14 Makrofag juga
berkontribusi terhadap pembentukan plak, penipisan kap fibrosa,  dan  nekrosis  fokal  dimana  dalam hal ini mampu mensekresikan macrophage- derived  matrix  metalloproteinases (MMPs) yang  menyebabkan  terjadinya  degradasi jaringan  ikat  kolagen  pada  daerah  tunika intima  serta  mengurangi  jumlah intimal myofibroblast-like SMCs  yang  berujung
pada  penipisan  kap  fibrosa. 15 Jika  hal  ini terus  berlangsung,  dalam  keadaan  kronis dapat  memicu  terjadinya  ruptur  pada  plak sehingga  berimplikasi  pada  timbulnya trombosis.  Lokasi  trombosis  berkorelasi dengan efek yang ditimbulkan.
Penatalaksanaan aterosklerosis saat ini sebagian besar terkonsentrasi pada usaha untuk menurunkan kadar lipid dalam plasma yang dikombinasikan dengan terapi anti-inflamasi.
Metode ini dapat memperlambat progresivitas aterosklerosis, namun efikasi maksimal yang dapat dicapai dari  metode  ini  hanya  30%  -  40%. 16-20
Beberapa  metode  terapi  lainnya  yang sudah  diterapkan  seperti  penggunaan statin, anti- platelet,  antikoagulasi, - Blocker,  dan  ACE-inhibitor,  juga  memiliki kekurangannya masing-masing yang berujung pada penurunan angka
kesembuhan. 21-26 Terapi  bedah  juga  telah dilakukan, yaitu dengan metode angioplasti arteri  koroner. 27 Namun,  prosedur  kerja yang  sangat  berisiko  dan  buruknya komplikasi  pasca  operasi  menyebabkan metode  ini  tidak  sepenuhnya  aman  dalam menangani kasus aterosklerosis. 27,28
Merujuk  pada  belum  tersedianya metode terapi yang efektif dalam menangani aterosklerosis, maka diperlukan suatu  metode  terapi  baru  yang  memiliki tingkat  keberhasilan  tinggi  dengan  risiko komplikasi  seminimal  mungkin  dalam menangani  aterosklerosis.  Suatu  studi terbaru  menemukan  bahwa Transient Receptor Potential Vanilloid type 1 (TRPV1) memiliki  andil  besar  dalam  kejadian aterosklerosis. 29 Aktivasi dari TRPV1 secara umum dapat mempengaruhi
metabolisme  lipid  dan  respon  inflamasi
sel. 30 Hasil  studi in  vitro dan in  vivo
menunjukkan bahwa aktivasi TRPV1 secara signifikan dapat menurunkan akumulasi  dari  lipid  dan  lesi  aterosklerosis pada  pembuluh  darah melalui  jalur reverse cholesterol transport (RCT). 31 TRPV1 dapat diaktivasi  oleh  senyawa  agonis  seperti Capsaicin yang  melimpah  pada  tanaman cabai  ( Capsicum  spp .)  dan  di  Indonesia umum  digunakan  sebagai  bahan  rempah- rempah  dalam  masakan. 32,33 Capsaicin juga mampu bertaut pada protein IkB yang berfungsi  dalam  menghambat  translokasi NF-kB  kedalam  nukleus  sehingga  dapat menurunkan  respon  inflamasi  dan  molekul adhesi. 34,35 Capsaicin ( trans -8- methyl - N- vanillyl -6- nonenamide )  adalah  senyawa alkaloid yang bersifat lipofilik, tidak berwarna, dan tidak berbau, dengan rumus molekul  C 18 H 27 NO 3. Capsaicin menyusun 70% senyawa Capsaicinoid yang
terkandung  dalam  cabai,  yang  merupakan penyebab timbulnya rasa pedas atau panas pada  cabai. 36 Suatu  studi  menemukan bahwa  dalam  suatu  campuran  cabai  yang terdiri  atas  55%  cabai  rawit,  air,  gula, garam,  asam  asetat,  dan xanthan ternyata mengandung senyawa Capsaicin sebanyak 33 miligram per 30 gram campuran cabai. 37
Capsaicin akan  diserap  sebanyak  95% setelah  pemberian  per  oral  dan  mencapai konsentrasi  tertinggi  dalam  darah  selama satu jam setelah administrasi. 36 Kelemahan dari penggunaan
senyawa Capsaicin secara  langsung  yaitu memiliki waktu paruh yang singkat (24 jam), tidak bersifat spesifik pada lesi aterosklerosis, dan tidak mampu menghambat influx oxLDL kedalam
makrofag foam  cell . 33 Oleh  karena  itu diperlukannya  suatu  pembawa  yang  dapat menghantarkan senyawa Capsaicin tersebut langsung ke endotel yang mengalami  lesi  dan  mampu  mengurangi influks oxLDL sehingga mengurangi progresivitas aterosklerosis. Penelitian terkini menunjukkan bahwa  endotel  yang  mengalami  inflamasi pada aterosklerosis mengekspresikan berbagai  molekul  adhesi  seperti  VCAM-1 yang  tidak  terdapat  pada  pembuluh  darah lainnya  yang  tidak  mengalami  inflamasi. 38
Tidak  hanya  itu,  makrofag  teraktivasi  juga mengekspresikan  reseptor scavenger SR- A1  dan  CD36  yang  berperan  dalam influks oxLDL di tunika intima. 39,40 Oleh karena itu, antigen  VCAM-1  pada  endotel  serta reseptor  SR-A1  dan  CD36  pada  makrofag berpotensi  sebagai  target  terapi  spesifik dalam  tatalaksana  aterosklerosis.  Agen atau  pembawa  yang  dapat  memanfaatkan potensi  ini  adalah  imunomicelle  polimerik PLGA-PEG-MCOOH spesifik VCAM-1. 41
Imunomicelle  merupakan suatu micelle  polimerik  monolayer  yang  tersusun atas dua bagian, yaitu bagian inti semi-solid yang  bersifat  hidrofobik  dan  segmen pelindung  yang  bersifat  hidrofilik  pada bagian  luarnya,  sehingga  membentuk arsitektur core-shell . 42 Karakteristik  bentuk tersebut  menyebabkan  micelle  polimerik mampu berperan sebagai pembawa zat-zat bioaktif  ( bioactive  micelle ),  seperti  protein, asam  nukleat,  dan  obat-obatan  yang bersifat  hidrofobik. Bahkan  micelle  dapat dimodifikasi dengan tambahan ligan sehingga  dapat  dikirim  menuju  target  sel yang spesifik. 43 PLGA dan PEG merupakan komposisi  utama  dimana  berperan  dalam
endosomal  escape ,  menjaga  stabilitas
Capsaicin sebelum  mencapai  sel  target, dan melindungi dari fagositosis oleh sistem RES  dalam  plasma,  sedangkan  gugus karboksil  MCOOH  mampu  mengalami translokasi  menuju  reseptor  SR-A1  dan CD36  dalam  menghambat  influx  oxLDL. 41
Penambahan antibodi VCAM-1 pada segmen  distal  dari  polimerik juga  berfungsi untuk  mengenali  pembuluh  darah  yang mengalami  lesi  sehingga  modalitas  yang diberikan  dapat  beredar  secara  spesifik pada aterosklerosis. 41 Secara teoritis imunomicelle polimerik PLGA-PEG- MCOOH spesifik VCAM-1 memiliki efektivitas  dan  spesifisitas  yang  tinggi dalam  mengeradikasi  makrofag  teraktivasi sehingga dapat memutuskan rantai pembentukan plak aterosklerosis. Kombinasi ini memiliki potensi tinggi dalam penatalaksanaan aterosklerosis
dan nantinya  diharapkan  dapat  meminimalisir kasus kegawatdaruratan kardiovaskular.
Adapun  permasalahan  yang  dikaji
pada  karya  tulis  ini  yang  meliputi mekanisme konstruksi, sintesis, administrasi,  mekanisme  kerja,  efek  pasca terapi, dan analisis manfaat dari imunomicelle polimerik PLGA-PEG- MCOOH spesifik VCAM-1 berbasis senyawa Capsaicin akan dijelaskan
kemudian.
2. PEMBAHASAN
2.1 Mekanisme Konstruksi, Sintesis, dan Administrasi  Imunomicelle  Polimerik PLGA-PEG-MCOOH  Spesifik  VCAM-1
Berbasis Senyawa Capsaicin
2.1.1  Tahap  Preparasi  Nanopartikel Micelle Polimerik PLGA-PEG-MCOOH
Sebagai amphiphilic  block  co- polymer, Monomethoxypolyethylene  glycol- polylactide  dilarutkan  dalam  etanol  dengan suhu  60 o C  dan  ditambahkan  molekul PLGA. 47 Kemudian  dilakukan  sintesis PLGA- b -PEG Co-polymer dengan  gugus karboksil terminal, dalam hal ini menggunakan MCOOH. 46,47
Dari  proses  preparasi  ini,  hasil yang  didapat  adalah  nanopartikel  micelle polimerik
PLGA-PEG-MCOOH yang dienkapsulasi  dengan  senyawa  hidrofobik yang akan dihantarkan ke target menggunakan metode nanopresipitasi. 44-47 2.1.2 Tahap Sintesis Senyawa Capsaicin dari Capsicum spp
Proses  sintesis in  vitro diawali dengan  kultur  jaringan  plasenta Capsicum spp .  Bagian  yang  akan  disuspensi  adalah plasenta  karena  akumulasi Capsaicin pada plasenta Capsicum  spp sepuluh  kali  lebih banyak, yaitu 63,96 mg/g DW dibandingkan biji yang hanya 5,06 mg/g DW. 48-50 Setelah dibersihkan dengan air, plasenta Capsicum spp. dibersihkan  dengan  Labolene  2% selama  10  menit  dan  dibilas  dengan akuades,  kemudian  disterilkan  dengan HgCl 2 0,1%  selama  5  menit  dan  kembali dibilas  dengan  akuades. 48,49 Hasil  yang didapat kemudian dikultur dan disuspensi.
Dari proses kultur jaringan dan cell suspension ini, didapat sel-sel yang diambil dengan  cara  filtrasi,  kemudian  dikeringkan dengan  suhu  60 o C  hingga  didapat  massa sel  yang  konstan. 50 Sel-sel  ini  selanjutnya diekstraksi  dengan  10  ml  methanol, disaring  dengan  membran  Millipore  FH  0,5  m,  dan  terakhir  dipisahkan  dengan
Hewlett-Packard  cromatograph sehingga didapatkan  1.345  g Capsaicin per  1  gram
plasenta Capsicum  spp. pada  hari  ke- 14. 49,51
2.1.3  Enkapsulasi  Senyawa Capsaicin ke  dalam  Nanopartikel  Micelle  Polimerik PLGA-PEG-MCOOH serta Konjugasi Antibodi VCAM-1 Metode  yang  digunakan  untuk mengenkapsulasi Capsaicin ke  dalam Nanopartikel  Micelle  Polimerik  PLGA-PEG- MCOOH  adalah  nanopresipitasi  dengan prinsip direct  dissolution . 36,37 Inti  dari metode direct  dissolution adalah  ekuilibrasi substrat  dan  imunomicelle  polimerik  dalam bentuk  larutan . 52 PLGA-PEG-MCOOH  (10 mg/ml)  dan Capsaicin yang  tergolong
senyawa hidrofobik dilarutkan dalam pelarut  polar acetonitrile sehingga  didapat konsentrasi polimer 3,3 mg/ml. Nanopartikel kemudian diaduk selama satu jam,  disentrifugasi  selama  15  menit,  dan dicuci dengan air yang telah di- deionisasi. 36,37
Pemasangan Micelle Polimerik dengan  antibodi monoklonal  VCAM-1  yang diperoleh  dari  imunisasi  tikus  terhadap antigen  VCAM-1  mengikuti  prosedur  yang dipaparkan  oleh  Gosk. 53 Cyanur-PEG-PE dapat  digunakan  sebagai  pengait  antibodi monoklonal  VCAM-1.  Antibodi  monoklonal
Rat anti - mouse VCAM-1 (M/K-271) digunakan sebagai homing devices .
Pemasangan  dilakukan  dengan  rasio 1:1000  untuk  protein:  rasio  molar  lipid. 54
Antibodi monoklonal rat anti-mouse VCAM- 1  tersebut  kemudian  dimasukkan  dalam Micelle Polimerik pada borate buffer pH 8.8 dan diinkubasi dalam suhu ruangan selama 16 jam. 53,54
2.1.4 Administrasi Imunomicelle Polimerik PLGA-PEG-MCOOH spesifik VCAM-1 berbasis Senyawa Capsaicin Administrasi secara intravena dipilih  mengingat  bahwa  sasaran  dari modalitas  terapi  tersebut  adalah  lesi aterosklerosis  yang  bermanifestasi  pada endotel pembuluh darah. Metode administrasi  intra  subkutan,  intra  muskular, dan  intra  tumoral  tidak  digunakan  karena memicu  terjadinya  respon  pendarahan pada xenograft model tikus. 55
2.2  Mekanisme  Kerja  Imunomicelle Polimerik  PLGA-PEG-MCOOH  Spesifik VCAM-1 berbasis Senyawa Capsaicin
Setelah  diadministrasikan  secara IV, bagian antibodi VCAM-1 dari
imunomicelle  polimerik  tersebut  akan berikatan  dengan  reseptor  VCAM-1  yang terdapat pada endotel yang mengalami lesi, hal ini penting dikarenakan hanya pembuluh  darah  yang  mengalami  lesi mengekspresikan VCAM-1 (85-92%). 38 Pengikatan ini menginduksi pengorganisasian  kembali  filamen  aktin serta  peningkatan  Ca 2+ intrasel  sehingga terjadi endositosis yang diperantarai chlatrin . 56
Di  dalam  endotel,  antibodi  spesifik VCAM-1 pada imunomicelle polimerik akan didegradasi  oleh  enzim  protease  dan menyisakan  fragmen  micelle  poimerik PLGA-PEG-MCOOH dengan
basis
Capsaicin .  Selanjutnya  micelle  polimerik yang  telah  berada  pada  tunika  intima  akan menuju target spesifik pada makrofag foam cell yang mengekspresikan SR-A1 maupun CD36. 57,58 Internalisasi  modalitas  tersebut pada  makrofag  tidak  melibatkan  mediasi dari clathrin dan  setelahnya  dilanjutkan
dengan proses deprotonisasi micelle polimerik  akibat  fagositasi  PLGA-PEG- MCOOH  oleh  endosom  pada  pH  5,5. 58
Seiring  dengan  menurunnya  pH  endosom, muatan  polimer  PLGA  akan  berubah  dari negatif  menjadi  positif  (anionik  menjadi kationik)  yang  memungkinkan  terjadinya interaksi  antara  PLGA  dan  membran endosom. 59,60
Interaksi ini
menyebabkan terjadinya  instabilitas  lokal  pada  membran endosom  sehingga  memungkinkan  PLGA dalam  merusak  membran  endosomal sehingga  terjadi  pelepasan  gugus  MCOOH beserta  kompartemen  didalamnya  yakni senyawa Capsaicin . 59,60 Gugus  karboksil MCOOH  akan  mengalami  translokasi menuju  SR-A  (terutama  SR-A1)  dan  CD36 sedangkan senyawa Capsaicin akan menuju  reseptor  TRPV1  dan  protein  IkB untuk menjalankan aksinya. 2.2.1 Mekanisme Kerja Gugus Karboksil  MCOOH  dalam  Menghambat Ambilan oxLDL pada Makrofag Foam Cell Makromolekul  amphifilik Carboxy- terminated dengan gugus karboksil
MCOOH  pada  micelle  polimerik  tersebut akan  mampu  berikatan  dengan  SR-A1 maupun  CD36  dengan  ikatan  elektrostatik pada muatan positif di residu reseptornya. 61
Gugus  MCOOH  akan  berikatan  secara spesifik  pada  residu  kationik  Lys60,  Lys63 and  Lys66  pada  SR-A1  sedangkan  pada CD36  akan  bertautan  dengan  asam  amino pada  residu  155-183  (Cys243-  Cys311, Cys272-Cys333,  dan  Cys313-Cys322)  di bagian N-link  Glycosylation yang  disinyalir sebagai tempat pertautan spesifik oxLDL. 62
Pertautan  pada  daerah  spesifik pada  SR-A1  dan  CD36  secara  nyata
berfungsi untuk menghambat secara kompetitif tempat pertautan oxLDL
sehingga  berujung  terhadap  penurunan ambilan oxLDL pada tunika intima kedalam makrofag. 58,62
2.2.2  Mekanisme Capsaicin dalam Aktivasi TRPV1 terhadap Penurunan Makrofag Foam  Cell melalui  Peningkatan HDL Capsaicin mampu berikatan dengan transient receptor potential vanilloid type  1 (TRPV1)  yang  dikenal  sebagai reseptor  vaniloid. 63 TRPV1  umumnya banyak  terekspresi  pada  neuron  sensori nosiseptif  primer  dan  dapat  diaktivasi dengan  panas,  proton,  molekul  lipid endogen,  dan  stimulasi  oksidatif  serta beberapa agonis eksogen seperti Capsaicin yang  melimpah  keberadaannya  ditanaman cabai. 32-34 Setelah TRPV1 teraktivasi melalui  pertautan Capsaicin pada  domain N-terminal  melalui  residu  hidrofobik  TM2 dan  TM3,  maka  akan  terjadi  influx  Ca 2+ intraseluler dari retikulum endoplasma yang berujung  terhadap  aktivasi  gen Liver  X Receptor (LXR). 64-67
LXR  merupakan  faktor  transkripsi reseptor nuklear yang aktif dalam mentranskripsi  gen  spesifik  setelah  terjadi pertautan  dengan  agonis  LXR  seperti evodiamine , Capsaicin , maupun oksisterol . 64,66 Peran  LXR  sangatlah  vital dalam  meregulasi  kolesterol,  asam  lemak, serta homeostasis glukosa. LXR terdapat 2 jenis  isofo rm  diantaranya  LXRα  dan LXR . 68,69 LXR  banyak terekspresi secara luas  pada  sel  manusia  dan  terletak  pada kromosom 19q13. 68
Berbeda  halnya  dengan  LXR , LXRα  terdapat  pada  kromosom  11p11
serta  hanya  tereskpresi  pada  usus,  hati, dan  makrofag  yang  merespon  timbulnya akumulasi  dari  lemak. 69 LXRα  pada makrofag  yang  teraktivasi  akan  mengalami translokasi  untuk  membentuk  heterodimer dengan retinoid  X  receptor (RXR)  pada nukleus  dan  selanjutnya  kompleks  LXRα - RXR akan bertautan dengan LXR response element (LXRE). 70 Pertautan  kompleks tersebut  secara  aktif  akan  memicu  aktivasi 3  gen  dalam  meregulasi  kolesterol. 71-75
Pertama,  aktivasi  kompleks  LXRα -RXR- LXRE berperan dalam menginduksi ekspresi  transporter ATP  binding  cassete
(ABC). 71,72
ABCA1 merupakan suatu protein  regulator  efluks  kolesterol  (CERP) pada makrofag dan dikode pada kromosom 9.  Peran  kedua  adalah  aktivasi  dari kompleks  LXRα -RXR-LXRE  yang  dapat menginduksi
pembentukan protein apolipoprotein  E  (ApoE). 72,73 ApoE  pada manusia  mengandung  299  asam  amino dan  dengan  berat  molekul  34,1  kDa  serta ApoE  dalam  makrofag  berpotensial  dalam sebagai  akseptor  kolesterol  melalui  proses ABCA1-dependent . 73,74
Peran terakhir dari aktivasi kompleks  tersebut  adalah  menginduksi sintesis  dari  asam  lemak  yang  merupakan substrat penting dalam pembentukan SOAT pada reaksi esterifikasi kolesterol dari asam lemak  bebas  (ALB)  dengan  mengaktivasi sterol regulatory element-binding protein-1c gene (SREBP-1c). 76,77 Timbulnya  ABCA1 dan  SOAT  merupakan  hal  yang  relevan serta berperan dalam menurunkan kolesterol  bebas  dan  melindungi  sel makrofag dari efek sitotoksik. 77
Droplet asam lemak pada makrofag foam  cell kemudian  akan  mengalami
translokasi
kedalam ekstraseluler membentuk apoA-1 yang berujung terhadap pembentukan high density lipoprotein (HDL) melalui  mekanisme reverse cholesterol  transport (RCT). 77,78
Mekanismenya  diawali  dengan  efluks kolesterol  melalui  protein  ABCA1  akan memasuki  plasma  dan  kemudian  berikatan dengan  pre- 1  HDL,  suatu  HDL  plasma dengan  berat  molekul  60-70  kDa,  dan memiliki  diameter  5-6  nm  dengan  memiliki gugus  protein  apoA-1  yang  sebelumnya telah  terbentuk  melalui  SOAT. 77-79 pre- 1 HDL  yang  telah  bertaut  dengan  kolesterol akan  bertautan  pada  protein  apoE  yang telah terbentuk sebelumnya dan
membentuk nascent HDL. 78,80,81
Pada  tahap  tersebut,  pre- 1  HDL telah merubah konformasinya menjadi HDL cakram ( discoidal HDL) dengan penambahan  lecithin  dan  fosfat  oleh phospholipid  transfer  protein  (PTLP)  di plasma, sehingga berujung terhadap pembentukan  HDL  paling  awal  yang disebut nascent  HDL . 80,81 Keberadaan nascent HDL  akan  menarik  enzim lecithin- cholesterol  acyltransferase (LCAT)  pada residu  99-186  di  region  pusat  apoA-1 sehingga terjadi perpindahan ester kolesterol  dan  membentuk  HDL 3 yang  kini berbentuk  lebih  sferis  ( spherical  shape HDL)  dibandingkan  dengan nascent HDL.
Suatu  fakta  yang  menarik  menyebutkan bahwa  HDL 3 yang  telah  terbentuk  akan menuju  pada scavenger  reseptor B1  (SR- B1) pada makrofag foam cell untuk menarik kolesterol atau lemak lebih banyak sehingga menurunkan jumlah foam cell . 82-84
Hal  yang  sama  juga  terjadi  pada HDL 3 yang  telah  berataut  dengan  SR-B1,
enzim LCAT akan membantu meningkatkan
memindahkan ester kolesterol dan merubah HDL 3 menjadi HDL 2 . 81,84
Selanjutnya  HDL 2 dalam  plasma  akan menuju  hati  dan  akan  mengeliminasi  HDL 2 dalam bentuk feces melalui jalur empedu.
Hal ini secara jelas menguntungkan dimana  aktivasi  TRPV1  oleh Capsaicin berujung  terhadap  reduksi  makrofag foam cell dengan  meningkatkan  kadar  HDL dalam plasma.
2.2.3  Mekanisme Capsaicin dalam Inhibisi NF-kB terhadap Penurunan Ekspresi  VCAM-1,  ICAM-1,  dan  ELAM-1
sebagai Ateroprotektif
Terkait  dengan  aterosklerosis,  NF- kB  diaktivasi  oleh  oxLDL  yang  berujung terhadap  proses  inflamasi  dimana  terjadi pertautan nuclear  factor (NF)  dengan protein inhibitory  kappa  B (IkB)  pada sitoplasma  dan  mengalami  translokasi menuju nukleus. 85-87
Studi yang dilakukan oleh Oyagbemi  A et  al menyebutkan  senyawa Capsaicin ternyata  mampu  menghambat pertumbuhan sel kanker dengan memediasi inhibisi  translokasi  NF-kB.  Bukti  sinergis juga  diperlihatkan  oleh  Mourad  Z et  al bahwa  dengan  memediasi  inhibisi  NF-kB maka pembentukan molekul adhesi VCAM-
1, ICAM-1, dan ELAM-1 dapat diminimalisasi. 88 Mediasi pertautan
Capsaicin dengan  protein  IkB  berlangsung pada  residu  serin  32  dan  36. 34,35 Proses fosforilasi oleh pH rendah dalam sitoplasma makrofag foam  cell (pH  5,5)  melibatkan proses  metilisasi  dengan  mengirimkan gugus hidroksil fenolik pada residu tersebut. 34,35 Hal tersebut penting
dikarenakan  dengan  bertautan  pada  residu tersebut,  proses  ubikuinasi  oleh  proteosom tidak dapat terjadi, dengan demikian NF-kB tidak  mengalami  translokasi  ke  dalam nukleus ( Gambar 1 ). 34,35,89
Gambar  1. Mekanisme  Administrasi,  Distribusi,  Internalisasi,  dan  Mekanisme  kerja Imunomicelle  Polimerik  PLGA-PEG-MCOOH  Spesifik  VCAM-1  berbasis  Senyawa Capsaicin
2.3  Efek  Pasca  Terapi  Imunomicelle Polimerik PLGA-PEG-MCOOH Spesifik VCAM-1 berbasis Senyawa Capsaicin
2.3.1  Efek  Gugus  Karboksil  MCOOH dalam  Inhibisi  Uptake  OxLDL  serta  Reseptor SR-A1 dan CD36
Pada  hasil  penelitian  yang  dilakukan oleh  Evangelia  C .  et  al didapatkan  bahwa nanopartikel dengan gugus karboksil MCOOH menghambat  ambilan  oxLDL  sebanyak  75% dibandingkan  dengan  PCOOH  yang  hanya 34% ( p < 0,05 ) ( Gambar 2 ). 61
Kelebihan dari gugus karboksil
MCOOH  yakni  mampu  bertaut  dengan  ke-2 reseptor scavenger lebih  baik  dibandingkan dengan  makromolekul  lain  seperti  PEG- COOH dan PCOOH, yang hanya bertaut pada salah  satu  dari  2  reseptor scavenger telah terlaporkan  sebelumnya. 61 Hambatan  pada kedua  reseptor  meningkatkan  daya  hambat penyerapan  oxLDL  yang  mencapai  86%  oleh MCOOH  ( p  <  0,05 ). 61 Studi  lain  dari  Nicole  I. et  al juga  mendukung  bahwa  menghambat kedua  reseptor  terkait  proses  pengambilan oxLDL  mampu  menurunkan  penyerapan oxLDL mencapai 88%. 90
2.3.2  Efek Capsaicin terhadap  Aktivasi TRPV1 dalam Meningkatkan Efluks
Kolesterol,  Trigliserida,  apoA-1,  dan  Kadar
HDL dalam Plasma Pada penelitian oleh Jin-Feng Zhao et al dari Department  of  Physiology,  National
Yang-Ming University, Taiwan dengan menggunakan  media  kultur  sel Bone-marrow Derived Macrophage (BMDM) yang
diinkubasikan  dengan  agonis  TRPV1  seperti
evodiamine (0,5 µ M)  dan Capsaicin (10 µ M) serta  penambahan  antagonis  TRPV1  seperti capzasepine (10 µ M)  yang  disertai  dengan induksi  oxLDL  (50 µ g/mL)  menunjukkan perbedaan  hasil  yang  signifikan.  Induksi  dari evodiamine mampu  menurunkan  jumlah kolesterol  didalam  makrofag foam  cell sebesar  3-fold  (37,5%)  dan  7-fold  (58,33%) masing-masing  pasca  terpapar  hanya  oxLDL dan oxLDL beserta capzasepine . 29
Hasil  serupa  juga  ditunjukkan  oleh Capsaicin namun  memiliki  efek  yang  lebih kuat  jika  dibandingkan  dengan evodiamine . Capsaicin mampu  menurunkan  kolesterol sebesar  4-fold  (52,5%)  dan  8-fold  (70,13%) pasca  induksi  oxLDL  saja  atau  oxLDL  dan capzasepine (* p < 0,05 dibandingkan dengan oxLDL  saja  ;  # p <  0,05  dibandingkan  oxLDL dan capzasepine ) ( Gambar 3 ). Pada penelitian  yang  sama  juga  menunjukkan penurunan  jumlah  trigliserida  pada  makrofag foam  cell yang  sama  antara evodiamine dan Capsaicin sebesar  36,36%  setelah  terpapar oxLDL  atau  63,16%  setelah  terpapar  oxLDL dan capzasepine . 29
Penurunan  jumlah  kolesterol  dan trigliserida dalam makrofag foam cell memiliki arti  positif  dalam  peningkatan  jumlah  apoA-1 dan  HDL  dalam  plasma.  Seperti  yang  telah dipaparkan  sebelumnya  bahwa Capsaicin mampu  mereduksi  jumlah  foam  cell  dengan mengubah  kolesterol  beserta  trigliserida menjadi  HDL  dengan  memediasi  jalur  RCT. Bukti  mendukung  didapatkan  pada  penelitian yang dilakukan oleh Shing-Jong Lin et al yang menunjukkan hasil yang serupa.
Gambar 2 . Peran dari Gugus Karboksil pada Nanopartikel dalam Menghambat Uptake oxLDL
Suatu  uji  Dil-OxLDL  Binding  Assay dilakukan melalui inkubasi sel kultur BMDM dengan  evodiamine  (125  nM,  250  nM,  dan 500 nM) atau Capsaicin (2,5 µM, 5 µM, dan 10  µM)  selama  12  jam  dan  ditambahkan larutan  NBD-cholesterol  1  µg/mL  pada suhu  60  C  dalam  waktu  4  jam.  Pada  hasil didapatkan peningkatan kadar HDL maksimal  terdapat  pada  kadar  konsentrasi evodiamine  500  nM  (57,23%)  dan  pada Capsaicin lebih  tinggi  pada  konsentrasi  10 µM (60,62%) ( Gambar 4 ). 30,31
Peningkatan  HDL  berbanding  lurus dengan  efluks  apoA-1  sebagai  promotor terbentuknya  HDL.  Pemberian  agonis TRPV1  seperti evodiamine dan Capsaicin pada konsentrasi yang sama secara in vitro pada kultur sel BMDM terbukti meningkatkan  jumlah  apoA-1. 31 Pada penelitian  tersebut  didapatkan  hasil  yang sinergis  terhadap  peningkatan  konsentrasi evodiamine    paling  tinggi  pada  500  nM sedangkan Capsaicin pada  konsentrasi  10
µM.
2.3.3 Efek Capsaicin terhadap Peningkatan Ekspresi Protein ABCA1
Penelitian  in  vivo  oleh  Liqun  M. et al dari Chongqing Institute of Hypertension,
Republic  of  China pada  tikus  C57Bl/6J memberikan  bukti  relevan  bahwa  induksi Capsaicin dengan  konsentrasi  1  µmol/L selama  24  jam  mampu  meningkatkan ekspresi  protein  ABCA1  dibandingkan dengan  kontrol.  Pada  studinya  dijelaskan bahwa  aktivasi  TRPV1  secara  statistik meningkatkan  ekspresi  ABCA1  dari  1,00  ± 0,06  menjadi  2,18  ±  0,20  (p  <  0,05) ( Gambar 5 ). 91
Hal  serupa  didukung  pula  pada pemeriksaan dengan pewarnaan Oil Red O yang secara konsisten mendukung timbulnya  transporter  ABCA1  di  makrofag foam  cell  tikus  C57Bl/6J  pasca  aktivasi TRPV1.
Hasil studi serupa secara konsisten juga didapatkan oleh Martin Tepel et al dari Med.  Klinik  Nephrologie,  Charite  Campus Benjamin Franklin, Berlin, Germany dimana pemberian Capsaicin dengan  berbagai konsentrasi  (2,5  µM,  5  µM,  dan  10  µM) pada tikus C57Bl/6J secara in vivo mampu meningkatkan  3-fold  protein  transporter ABCA1  secara  signifikan  dan  peningkatan maksimal  terdapat  pada  dosis  10  µM. 92
Gambar  3 .  Efek Evodiamine dan Capsaicin dalam  Menurunkan  Jumlah  Kolesterol  dalam Makrofag Foam Cell
Gambar 4 . Agonis TRPV1 meningkatkan Jumlah HDL dari Makrofag Foam Cell
Gambar  5 .  Ekspresi  Transporter  ABCA1  pasca  Induksi Capsaicin pada  Makrofag Foam  Cell Tikus C57Bl/6J
Keuntungan pemberian
Capsaicin memiliki  efek  sinergis  dengan  gugus karboksil  MCOOH  pada  imunomicelle polimerik  PLGA-PEG-MCOOH  mengingat tidak  terjadi  peningkatan  ekspresi  reseptor SR-A dan CD36 sehingga tidak meningkatkan influx oxLDL pada makrofag. 2.3.4 Efek Senyawa Capsaicin terhadap Penurunan VCAM-1 akibat Inhibisi Pembentukan NF-kB dan p65 serta Peningkatan Ekspresi IkB
Studi  yang  dilakukan  oleh  Seong- Su Han et al pada kultur sel HL-60 (1 x 10 6 / ml) secara  in  vitro menyebutkan  bahwa pemberian  senyawa Capsaicin mampu menurunkan jumlah NF-kB. Pada sel HL-60 sebelumnya  telah  diinkubasi  dengan 12-
Otetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) 10
nM dengan durasi 1 jam untuk menginduksi
pembentukan NF-kB yang kemudian diberikan berbagai konsentrasi Capsaicin (2 µM,  5  µM,  dan  10  µM))  dengan menunjukkan  jumlah  tertinggi  nilai  hambat pembentukan  NF-kB  ada  pada  konsentrasi 10 µM (81,37%) pada  pemeriksaan EMSA. Hal  serupa  didukung  dengan  peningkatan protein  IkB  (72,57%)  pada  sitoplasma  dan penurunan  jumlah  gen  p65  (87,54%)  di nukleus  yang  bertanggung  jawab  dalam translokasi  NF-kB  pasca  induksi Capsaicin (10 µM). 34
Penurunan  NF-kB  dan  p65  serta peningkatan  protein  IkB  berujung  pada penurunan  VCAM-1,  ICAM-1,  dan  ELAM-1 yang  relevan  dengan  studi  dilakukan  oleh Charalambos T et al pada sel HL-60 pasca induksi TNF (10 ng/mL) dan capsaicin (0-50 µM) setelah 6 jam ( Gambar 6 ). 35
2.4 Analisis Manfaat Imunomicelle Polimerik  PLGA-PEG-MCOOH  Spesifik
VCAM-1  Berbasis  Senyawa Capsaicin dalam Penatalaksanaan Aterosklerosis
Modalitas  terapi  utama  dalam penatalaksanaan  aterosklerosis  saat  ini berfokus  dalam  mencegah  terbentuknya lesi  dengan  cara  menurunkan  kadar
kolesterol  dalam  darah  yang  bertujuan untuk  mencegah  terjadinya  kejadian fatty
streak akibat  hiperkolesterolemia  dan menurunkan risiko terkena penyakit kardiovaskuler. 93 Meskipun dapat menurunkan angka  kejadian  serangan  jantung  dan stroke, penggunaan medikamentosa belum
Median Flurescen ce Intensity (∆) Capsaicin (µM)
Gambar 6. Efek Senyawa Capsaicin dalam Menurunkan Ekspresi Molekul Adhesi VCAM-1, ICAM-1, dan ELAM-1
sepenuhnya menghambat progresivitas lesi aterosklerosis. 94
Salah  satu  contohnya  adalah medikamentos a  berbasis  agonis  PPAR , meskipun memiliki efek anti-aterogenik dan anti-inflamasi,  namun  dapat  meningkatkan kerentanan  pasien  mengidap  edema, peningkatan  bobot  tubuh,  dan  risiko  gagal jantung. 43,95-97
Selain hiperkolesterolemia, inflamasi  juga  memiliki  peran  utama terhadap progresivitas aterosklerosis. Penelitian menunjukkan bahwa penggunaan antagonis sitokin pro-inflamasi seperti antagonis TNF- α  dan  IL -1 menunjukkan hasil yang memuaskan Terhadap
penurunan progresivitas aterosklerosis. 98,99 Di  sisi  lain,  penelitian
yang  menguji  penggunaan  antagonis  pro- inflamasi yang bersifat sistemik meningkatkan kerentanan
terhadap komplikasi  infeksi  dikarenakan  sitokin  pro- inflamasi  tersebut  sangatlah  penting  dalam memicu respon imun terhadap agen infeksi, sehingga  sifat  tidak  spesifiknya  modalitas sistemik  ini  menyebabkan  penggunaannya juga menjadi terbatas. 100,101 Menilik kelemahan terapi aterosklerosis konvensional dari pemaparan  di  atas,  maka  Imunomicelle Polimerik PLGA-PEG-MCOOH spesifik VCAM-1  berbasis  senyawa Capsaicin sangat  berpotensi  sebagai  terapi  utama
dalam penatalaksanaan aterosklerosis secara kuratif maupun preventif.
Dalam  langkah  kuratif, Capsaicin dapat  menginduksi  aktivasi  TRPV1  lainnya adalah  peningkatan Reverse  Cholesterol Transporter ( RCT )- dependent  cholesterol efflux yang selanjutnya menekan akumulasi
lipid intraseluler, dimana peningkatan kadar HDL  maksimal  terdapat  pada  konsentrasi 10 µ M  secara in  vitro (60,62%). 29,31,55
Sedangkan sebagai upaya preventif diantaranya adalah dapat mencegah pembentukan foam  cell oleh  gugus MCOOH  yang  mengurangi  influks  oxLDL dan  menurunkan  ekspresi  molekul  adhesi dengan  inhibisi  degradasi  protein  IkB  oleh Capsaicin . 61
Penggunaan imunomicelle polimerik sebagai pembawa Capsaicin lebih stabil bila dibandingkan dengan
liposom. 102,103 Nanopartikel  basis  liposom juga  memiliki  kelemahan  dalam  kontrol kinetik  obat  pada  jaringan  yang  dituju, berbeda  dengan  imunomicelle  polimerik yang  memiliki  kontrol  pelepasan  obat  yang baik  dan  spesifik. 102,103 Penelitian in  vivo menunjukkan bahwa keunggulan
imunomicelle  polimerik  lainnya  adalah menjaga substrat dari inaktivasi hepatik dan degradasi  oleh  enzim  serta  memiliki kapasitas  pemuatan  obat  yang  lebih  tinggi 8%  dari  liposom.  Dari  segi  kontruksi, metode yang kami rekomendasikan memberikan beberapa keuntungan. Pertama,  nanopresipitasi direct  dissolution adalah metode paling sederhana dibandingkan  dengan  metode  enkapsulasi substrat hidrofilik lainnya seperti dialisis, oil- in-water emulsion atau emulsifikasi,
modifikasi film- method,  dan  kompleksasi, sehingga  biaya  yang  dibutuhkan  juga  lebih sedikit  dan  berpotensi  lebih  besar  untuk dikembangkan secara industrialisasi. 52
Kedua,  metode  nanopresipitasi direct dissolution tidak  menggunakan  pelarut toksik  sama  sekali  sehingga  aman  untuk diadministrasikan. 52
Potensi pengembangan imunomicelle polimerik PLGA-PEG- MCOOH spesifik VCAM-1 berbasis
Capsaicin di  Indonesia  dapat  ditinjau  dari empat  indikator  yaitu  harga,  durasi,  efek samping,  dan  keunggulan modalitas  terapi. Adapun  imunomicelle  polimerik  PLGA-
PEG-MCOOH spesifik VCAM-1 dibandingkan  dengan  Statin,  golongan terapi antiplatelet (Aspirin), dan immunomodulasi. Dua pembanding pertama  merupakan    terapi  aterosklerosis yang paling banyak diterapkan di Indonesia,  sedangkan  immunomodulasi dipilih karena merupakan terapi
aterosklerosis  yang  tergolong  baru  dan mulai  banyak  digunakan  oleh  masyarakat Eropa. 59,60
Biaya yang dikeluarkan untuk terapi aterosklerosis  berbasis  Statin  berkisar antara Rp 120.000,00 hingga Rp
5.000.000,00  setiap  bulan  dengan  durasi rata-rata  pengobatan  selama  6  bulan. 104
Keunggulan  dari  Statin  memang  dapat memperbaiki profil HDL dalam waktu relatif singkat  selama  1  bulan  namun  memiliki efek samping berupa gangguan penglihatan  dan  risiko  diabetes  dengan onset  yang  tergolong  lama  yaitu  4-6  tahun dan  hanya  terjadi  pada  3,6%  pasien  yang mengonsumsi Statin dengan durasi tersebut. 104 Kisaran  harga  terapi  Aspirin selama  satu  bulan  adalah  Rp  30.000,00 hingga  Rp  100.000,00.  Keunggulan  dari terapi aspirin adalah kemampuannya untuk mengencerkan  gumpalan  darah,  sehingga dapat menghindari pasien dari risiko stroke lebih  lanjut  namun  beberapa  kasus  dapat menimbulkan  pendarahan  internal  serta sindrom  Reye,  sehingga  tidak  boleh
dikonsumsi  oleh  pasien  asma  dan  anak  di bawah 16 tahun. 105 Sedangkan untuk terapi imunomodulasi berbasis dendritic cell (DC), biaya  yang  diperlukan  sekitar  US$  2.700 untuk  10  kali  injeksi  dalam  kurun  waktu  4 bulan. Keunggulan dari terapi imunomodulasi dibandingkan medika mentosa adalah dapat menginduksi antibodi  pasien  untuk  melawan  respon inflamasi  yang  menginduksi  aterosklerosis sehingga efek preventifnya lebih diunggulkan,  sedangkan  efek  samping yang  ditimbulkan  tidak  terlalu  signifikan seperti  demam  dan muscle  pain dengan durasi maksimum 48 jam. 12
Dibandingkan  dengan  ketiga  terapi sebelumnya, imunomicelle polimerik PLGA- PEG-MCOOH  spesifik  VCAM-1  berbasis Capsaicin hanya  memerlukan  sekali injeksi untuk  memberikan  efikasi  tata  laksana aterosklerosis yang signifikan, yaitu degradasi  trigliserida  pada  makrofag foam cell hingga  sebesar  63,16%  sehingga pembentukan foam  cell yang  berkontribusi besar  terhadap  progresivitas  aterosklerosis dapat dihindari pada uji coba in vitro dan in vivo .  Biaya  terapi  imunomicelle  yang diperlukan  berkisar  antara  $150  hingga $275,  terlepas  dari  jenis  modalitas  yang digunakan. 106,107 Adapun  kelemahan  dari modalitas  ini  yakni  waktu  paruh Capsaicin yang  relatif  singkat  (±  24  jam),  namun  hal tersebut dapat ditanggulangi dengan penambahan  PEG  sebagai stabilizer dan PLGA  yang  meningkatkan  waktu  paruhnya hingga  28  hari. 108 Selain  itu,  substrat  yang digunakan  sebagai  modalitas  terapi  yaitu Capsaicin terdapat  dalam genus Capsicum sp. jenis  tanaman  lokal  Indonesia  yang relatif murah, mudah didapat serta
dibudidayakan,  sehingga  prinsip cost- effectiveness dapat tercapai tanpa mengabaikan efektivitas dan efikasi pemberian modalitas

## 3. SIMPULAN
Konstruksi  imunomicelle  polimerik  PLGA- PEG-MCOOH  spesifik  VCAM-1  berbasis senyawa Capsaicin terdiri  dari  preparasi basis  nanopartikel  Micelle  Polimerik yang dimodifikasi  dengan  PLGA,  PEG,  dan gugus  MCOOH  serta  konjugasi  antibodi
VCAM-1,  sintesis  senyawa Capsaicin dari genus Capsicum spp , enkapsulasi Capsaicin dan  mengonjugasikan  antibodi
VCAM-1  pada  segmen  distal  ampifilik nanopartikel yang kemudian diadministrasikan secara intravena. Setelah bertautan  dengan  reseptor,    modalitas terapi  akan  didegradasi  oleh  endosom sehingga menyisakan MCOOH yang mengalami  translokasi  menuju  SR-A1  dan CD36  sedangkan  senyawa Capsaicin akan menuju  TRPV1  dan  protein  IkB  dalam menjalankan aksinya. Dibandingkan dengan terapi Statin, antiplatelet,
dan Dendritic  Cell  (DC) ,  modalitas  ini lebih direkomendasikan  secara  teoritis  meninjau dari  efek  terapi  yang  diberikan.    Selain  itu, modalitas  ini  hanya  memerlukan  sekali injeksi, lebih stabil, memberikan efek kuratif dan  kardioproteksi  yang memiliki  tingkat keberhasilan  tinggi  serta  minim  efek samping.

## 4. SARAN
Gagasan  kreatif  dalam  karya  ilmiah  ini masih  memerlukan  berbagai  pengkajian dan penelitian lebih lanjut mengenai potensi dan dosis mengenai
konsentrasi penggunaan imunomicelle polimerik PLGA-
PEG-MCOOH  spesifik  VCAM-1  berbasis capsaicin.  Hal  ini  penting,  mengingat pengobatan  konvensional  belum  mampu mengatasi  permasalahan  kardiovaskuler yang disebabkan oleh aterosklerosis.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Navas-Acien  A,  Sharrett  AR,  Silbergeld EK,  et  al.,  2005, Arsenic  Exposure  and Cardiovascular  Disease:  A  Systematic Review  of  The  Epidemiologic  Evidence , Am J Epidemiol, 162:1037-1049.
2.  Verschuren J, Trompet S, Wessels J, et al.,  2012, A  Systematic  Reviw  on Pharmacogenetics  in  Cardiovascular Disease:  Is  It  Ready  for  Clinical Application? ,  European  Heart  Journal,
3:165-175. 3.  Frostegard J, 2013, Immunity, Atherosclerosis and Cardiovascular Disease , BMC Medicine, 11:117. 4.  World Health Organization, 2011,
Cardiovascular  Disease  Fact  Sheet ,
World  Health  Organization,  Geneva, Switzerland.
5.  Alberts-Grill  N,  Denning  TL,  Rezvan  A, Jo  H,  2013, The  Role  of  The  Vascular Dendritic Cell Network in Atherosclerosis ,  Am  J  Physiol  Cell Physiol, 305:C1-C21.
6.  Kim  S,  Park  J,  Kim  K,  et  al.,  2012, The Protective Effect of Apamin on LPS/Fat- Induced Atherosclerotic Mice , Evidence- Based  Complementary  and  Alternative Medicine, 2012:1-10.
7.  Habets  K,  Puijvelde  G,  Duivenvoorde LM,  et  al.,  2010, Vaccination  Using Oxidized Low-Density Lipoprotein- Pulsed Dendritic Cells Reduces Atherosclerosis in LDL Receptor-
Deficient Mice . Cardiovascular Research, 85:622-630.
8.  Tuzcu  EM,  Kapadia  SR,  Tutar  R,  et  al.,
2001, High  Prevalence  of  Coronary Atherosclerosis in Asymptomatic Teenagers and Young Adults ,
Circulation, 103:2705-2710.
9.  Wang L, Bao Y, Yang Y, Wu Y, Chen X, Si  S,  Hong  B,  2010, Discovery  of Antagonists  for  Human  Scavenger
Receptor CD36 via an ELISA-Like High-
Throughput  Screening  Assay ,  J  Biomol Screen, 15(3):239 – 250.
10.  Ross  R,  1999, Atherosclerosis – An Inflammatory Disease , The New England Journal of Medicine, 340(2):115-126.
11.  Itabe  H,  Obama  T,  Kato  R,  2011, The
Dynamics  of  Oxidized  LDL  during Atherogenesis , Journal of Lipids, 1-9. 12.  Hansson GK, 2005, Inflammation, Atherosclerosis,  and  Coronary  Artery Disease , N Engl J Med, 352:1685-95.
13.  Schrijvers  DM,  De  Meyer  GR,  Herman AG,  Martinet  W,  2007, Phagocytosis  in atherosclerosis:  Molecular  mechanisms and  implications  for  plaque  progression and  stability ,  Cardiovasc  Res , 73:470 –
480.
14.  Wesemann  DR,  Benveniste  EN,  2003,
STAT- 1α  and  IFN - as  modulators  of
TNF- α  signaling  in  macrophages: regulation  and  functional  implications  of the  TNF  receptor  1:STAT- 1α  complex , Journal  of  Immunology,  171(10):5313 – 5319.
15.  Ahuja KDK, Robertson IK, Geraghty DP, Ball MJ, 2006, Effects of chili consumption  on  postprandial  glucose,
insulin,  and  energy  metabolism ,  Am  J
Clin Nutr, 84:63-9. 16.  Roche  LD,  Hernandez  DA,  2012, New Alternatives for Atherosclerosis Treatment Based on Immunomodulation , ISRN Vascular
Medicine, 1-6.
17. Baigent C, Keech A, Kearney PM, et al., 2005, Efficacy and safety of cholesterol- lowering  treatment:  prospective  meta- analysis of data from 90,056 participants in  14  randomised  trials  of  statins , Lancet, 366:1267 – 1278.
18. LaRosa  JC,  He  J,  Vupputuri  S,  1999, Effect  of  statins  on  risk  of  coronary disease:  a  meta-analysis  of  randomized controlled trials , JAMA, 282:2340 – 2346.
19. Kushner  FG,  Hand  M,  Smith  SC,  et  al., 2009, 2009  focused  updates:  ACC/AHA guidelines  for  the  management  of patients  with  ST-elevation  myocardial infarction  (updating  the  2004  guideline and 2007 focused update) and ACC/AHA/SCAI guidelines on percutaneous coronary intervention (updating  the  2005  guideline  and  2007 focused  update):  a  report  of  the American College of Cardiology Foundation/American  Heart  Association
Task  Force  on  Practice  Guidelines , Circulation, 120:2271 – 2306.
20. Van  de  Werf  F,  Bax  J,  Betriu  A,  et  al., 2008, Management  of  acute  myocardial infarction  in  patients  presenting  with persistent  ST-segment  elevation:  the Task  Force  on  the  Management  of  ST- Segment  Elevation  Acute  Myocardial Infarction  of  the  European  Society  of Cardiology , Eur Heart J, 29:2909 – 2945.
21. Pollack CV Jr, Braunwald E, 2008, 2007 update  to  the  ACC/AHA  guidelines  for the  management  of  patients  with unstable  angina  and  non-ST-segment elevation myocardial infarction:
implications  for  emergency  department practice , Ann Emerg Med, 51:591 – 606.
22. Rapezzi  C,  Biagini  E,  Branzi  A,  2008,
Guidelines  for  the  diagnosis  and treatment  of  non-ST-segment  elevation acute  coronary  syndromes:  the  task force  for  the  diagnosis  and  treatment  of non-ST-segment elevation acute
coronary  syndromes  of  the  European Society  of  Cardiology ,  Eur  Heart  J,
29:277 – 278.
23. Shimokawa T, Smith  WL, 1992,
Prostaglandin  endoperoxide  synthase.
The  aspirin  acetylation  region ,  J  Biol Chem, 267:12387 – 12392.
24. Halushka MK, Walker LP, Halushka PV, 2003, Genetic variation in cyclooxygenase  1:  effects  on  response
to aspirin , Clin Pharmacol Ther, 73:122 –
130.
25. Matetzky  S,  Shenkman  B,  Guetta  V,  et al.,  2004, Clopidogrel  resistance  is associated  with  increased  risk  of recurrent  atherothrombotic  events  in patients with acute myocardial infarction , Circulation, 109:3171 – 3175.
26. Snoep  JD,  Hovens  MM,  Eikenboom  JC,
van  der  Bom  JG,  Jukema JW,  Huisman
MV, 2007, Clopidogrel nonresponsiveness in patients undergoing percutaneous coronary intervention  with  stenting:  a  systematic review  and  meta-analysis ,  Am  Heart  J,
154:221 – 231.
27.  Nordmann  AJ,  Hengstler  P,  Leimenstoll
BM, Harr T, Young J, Bucher HC, 2004,
Clinical  Outcomes  of  Stents  Versus Balloon Angioplasty In Non-Acute Coronary  Artery  Disease ,  European Heart Journal, 25:69-80.
28.  Serruys P, Jaeger P, Kiemeneij F, et al., 1994, A Comparison of  Balloon- Expandable-Stent Implantation with Balloon  Angioplasty  In  Patients  with Coronary  Artery  Disease ,  The  New England Journal of Medicine,
331(8):489-495.
29.  Zhao  J,  Ching  L,  Kou  YR,  et  al.,  2013, Activation  of  TRPV1  Prevents  OxLDL- Induced  Lipid  Accumulation  and  TNF- α - Induced  Inflamation  in  Macrophages: Role of Liver X Receptor α , Mediators of Inflammation, 2013:1-14.
30. Zhang  LL,  Liu  DY,  Ma  LQ,  et  al.,  2007,
Activation  of  transient  receptor  potential vanilloid type-1 channel prevents adipogenesis  and  obesity ,  Circ  Res,
100:1063 – 1070.
31.  Ma  L,  Zhong  J,  Zhao  Z,  et  al.,  2011,
Activation  of  TRPV1  reduces  vascular lipid accumulation and attenuates atherosclerosis , Cardiovascular
Research, 92:504-513.
32.  Sanatombi  K,  Sharma  GJ,  2008, Capsaicin  Content  and  Pungency  of Different  Capsicum  spp.  Cultivars ,  Not Bot Hort Agrobot Cluj, 36(2):89-90.
33.  Bode  AM,  Dong  Z,  2011, The  Two Faces  of  Capsaicin ,  Cancer  Res,
71:2809-2814.
34.  Han SS, Keum YS, Seo HJ, Chun KS, Lee  SS, Surh  YJ,  2001, Capsaicin suppresses phorbol ester-induced activation  of  NF-kappaB/Rel  and  AP-1
transcription factors in mouse epidermis , Cancer Lett, 164(2):119-26. 35.  Seong-Su Han, Young-Sam Keum, Kyung-Soo Chun, Young-Joon Surh,  2002, Suppression  of  phorbol ester-induced NF- κB  activation  by Capsaicin in cultured human promyelocytic  leukemia  cells ,  Archives of Pharmacal Research, Volume 25. Issue 4. pp 475-479. 36.  Reyes-Escogido M, Gonzalez- Mondragon EG, Vazquez-Tzompantzi E, 2011, Chemical  and  Pharmacological
Aspects of Capsaicin , Molecules,
16:1253-1270.
37.  Napoli  C,  Ignarro  LJ.  2009. Nitric  oxide and  pathogenic  mechanisms  involved  in the  development  of  vascular  diseases .
Arch  Pharm  Res.  32:  1103-8.  D.  J. Preiss,
38.  N.  Sattar,  2007, Vascular  cell  adhesion molecule-1:  a  viable  therapeutic  target for  atherosclerosis? ,  Int  J  Clin  Pract,  pp 697 – 701.
39.  Kathryn  J.  Moore , Ira  Tabas , 2011,
Macrophages  in  the  Pathogenesis  of Atherosclerosis , Cell, 145 pp 1-5.
40.  Becker,  L.,  Gharib,  S.A.,  Irwin,  A.D., Wijsman, E., Vaisar, T., Oram, J.F., and Heinecke,  J.W.,  2010, A  macrophage
sterol-responsive  network  linked  to atherogenesis ,  Cell  Metab,  Vol  11.  pp
125 – 135.
41.  Iyer  AK,  Greish  K,  Seki  T,  Okazaki  S,
Fang  J,  Takeshita  K,  Maeda  H,  2007,
Polymeric micelles of zinc protoporphyrin for tumor targeted delivery based on EPR effect and singlet oxygen  generation ,  J  Drug  Target , 15:
496 – 506.
42.  Blanco  E,  Kessinger  CW,  Sumer  BD, Gao  J,  2009, Multifunctional  Micellar Nanomedicine  for  Cancer  Therapy ,  Exp
Biol Med, 234(2):123-131.
43.  Lewis DR, Kamisoglu K, York A, Moghe PV, 2011, Polymer-Based Therapeutics:
Nanoassemblies  and  Nanoparticles  for Management  of  Atherosclerosis ,  Wiley Interdiscip Rev Nanomed Nanobiotechnol, 3(4):400-420. 44.  Kamaly, et al., 2012, Targeted polymeric therapeutic nanoparticles: design, development,  and  clinical  translation ,
Chem Soc Rev,  41(7):2971-3010.
45.  Farokhzad  OC,  et  al.,  2006, Targeted nanoparticle-aptamer  bioconjugates  for cancer  chemotherapy  in  vivo ,  PNAS,
103(16):6315-6320.
46.  Jung  T,  Breitenbach  A,  Kissel  T,  2000, J. Controlled Release , 67:157-169.
47.  Blanco  E,  Kessinger  CW,  Sumer  BD, and Gao J, 2009, Multifunctional Micellar Nanomedicine  for  Cancer  Therapy ,  Exp
Biol Med (Maywood), 234(2):123-131. 48.  Pandhair V, Sharma S, 2008,
Accumulation  of  Capsaicin  in  Seed,
Pericarp  and  Placenta  of  Capsicum annuum  L  Fruit ,  Journal  of  Plant Biochemistry and
Biotechnology,
17(1):23-27.
49.  Arora  R,  Gill  N  S,  Chauhan  G,  Rana  A
C,  2011, An  Overview  about  Versatile
Molecule Capsaicin , Int Jour of Pharmaceutical  Sciences  and  Drug Research, 3(4): 280-286. 50.  Noichinda S., Bodhipadma K., Lerksasen P., Ketsa S., 2012, Difference in  Capsaicin  Content  among  Thai
Capsicum , The Jour App Sci, 11(1):1-4.
51.  Sudhakar Johnson, T. and Racishankar,
G. A. and Venkataraman, L. V., 1991, In vitro Capsaicin production by immobilized  cells  and  placental  tissues of  Capsicum  annuum  L.  grown  in  liquid medium , Plant Science, 70(2):223-229.
52.  Pepic et al., 2012, Polymeric Micelles in
Ocular Drug Delivery: Rationale, Strategies  and  Challenges ,  Chem. Biochem. Eng. Q., 26(4):365-377. 53.  Gosk S., 2007, VCAM-directed immunoliposomes loaded with vascular –
disrupting  agents  for  selective  targeting and occlusion of the tumor vasculature - as a novel therapeutic strategy ,
Dissertation  Universitaat  Bonn,  pp.39-
41.
54. Kang DI, Lee S, Lee JT, Sung BJ, Yoon JY,  Kim  JK,  Chung  J,  Lim  SJ,  2011, Preparation  and  in vitro  evaluation  of anti-VCAM-1-Fab'-conjugated  liposomes for  the  targeted  delivery  of  the  poorly water-soluble drug celecoxib , J Microencapsul, 28(3):220-7.
55.  Xu  X, Wang  P, Zhao  Z, Cao  T, He H, Luo  Z, Zhong  J  et  al.,  2011,
Activation  of  transient  receptor  potential vanilloid  1  by  dietary  Capsaicin  delays the  onset  of  stroke  in  stroke-prone spontaneously  hypertensive  rats ,  AHA
Journal, 42(11):3245-51.
56.  Mulder WJM,  Strijkers  GJ,  Briley-Saboe KC,  Frias  JC,  Aguinaldo  JGS,  Vucic  E, Amirbekian  V,  Tang  C,  Chin  PTK,
Nicolay  K,  Fayad  ZA,  2007, Molecular imaging of macrophages in atherosclerotic  plaques  using  bimodal PEG-micelles , Magn Reson Med, 58(6):1164 – 1170.
57.  Febbraio  M,  Sheibani  N,  Schmitt  D,
Silverstein  R,  Hajjar  D,  Cohen  P,  et  al., 2000, Targeted disruption of the class B scavenger  receptor  CD36  protects against atherosclerotic lesion
development  in  mice ,  J  Clin  Invest,
105:1095-1108.
58.  Manning-Tobin  JJ,  Moore  KJ,  Seimon TA, Bell SA, Sharuk M, Alvarez-Leite JI, et  al.,  2009, Loss  of  SR-A  and  CD36 activity  reduces  atherosclerotic  lesion complexity  without  abrogating  foam  cell formation in hyperlipidemic mice ,
Arterioscler  Thromb  Vasc  Biol,  29:19 –
26.
59.  Panyam  J,  Zhou  WZ,  Prabha  S,  Sahoo SK,  Labhasetwar  V,  2002, Rapid  endo- lysosomal  escape  of  poly(DL-lactide- coglycolide)  nanoparticles:  implications for  drug  and  gene  delivery ,  FASEB  J , 16:1217 – 1226. 60.  Panyam  J,  Labasethwar  V,  2003, Dynamics of Endocytosis and Exocytosis of Poly(D,L-Lactide-co-
Glycolide)  Nanoparticles  in  Vascular Smooth  Muscle  Cells ,  Pharmaceutical
Research, 20(2):212-220.
61.  Chnari  E,  Jessica  SN,  Wang  J,  Uhrich KE,  an  Moghe  PV,  2006, Engineered
Polymeric  Nanoparticles  for  Receptor- Targeted  Blockage  of  Oxidized  Low Density Lipoprotein Uptake and Atherogenesis in Macrophages ,
Biomacromolecules, 7:1756-1805.
62.  Kunjathoor  V,  Febbraio  M,  Podrez  E, Moore  K,  Andersson  L,  Koehn  S,  et  al., 2002, Scavenger  receptors  class  A-I/II and  CD36  are  the  principal  receptors responsible  for  the  uptake  of  modified low  density  lipoprotein  leading  to  lipid
loading  in  macrophages ,  J  Biol  Chem,
277:49982 – 49988.
63.  K. C. Thomas, M. Ethirajan, K. Shahrokh et al., 2011, Structureactivity relationship of  Capsaicin  analogs  and  transient receptor  potential  vanilloid  1-mediated human  lung  epithelial  cell  toxicity , Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, vol. 337, no.
2, pp. 400 – 410.
64.  Almasi R, Szoke E, Bolcskei K, Varga A, Riedl Z, et al., 2008, Actions of 3-methyl-
N-oleoyldopamine and 4-methyl-N- oleoyldopamine  on  the  rat  TRPV1 receptor in vitro and in vivo , Life Sci, pp
644 – 651.
65.  Zhong B,  Wang DH, 2008, N-
oleoyldopamine,  a  novel  endogenous Capsaicinlike  lipid,  protects  the  heart against  ischemia-reperfusion  injury  via activation of TRPV1 , Am J Physiol Heart Circ Physiol, H728 – 735.
66.  Wang  H,  Wang  DH,  Galligan  JJ,  2010, P2Y2  receptors  mediate  ATP-induced resensitization  of  TRPV1  expressed  by kidney projecting sensory neurons , Am J Physiol  Regul  Integr  Comp  Physiol,
R1634 – 1641.
67.  Szallasi  A,  Cortright  DN,  Blum  CA,  Eid SR, 2007, The vanilloid receptor TRPV1: 10  years  from  channel  cloning  to antagonist  proof-of-concept ,  Nat  Rev Drug Discov, pp 357 – 372.
68.  R.  Sorrentino,  S.  Morello,  S.  Chen,  E. Bonavita,  and  A.  Pinto,  2010, The activation  of  liver  X  receptors  inhibits toll-like  receptor-9-induced  foam  cell formation , Journal of Cellular Physiology, vol. 223. no. 1. pp. 158 – 167.
69.  L.-C.  Cheng,  K.-H.  Su, Y.  R.  Kou  et  al.,
2011, α -Lipoic  acid  ameliorates  foam cell  formation  via  liver  X  receptor  α - dependent  upregulation  of  ATP-binding cassette  transporters  A1  and  G1 ,  Free Radical  Biology  andMedicine,  vol.  50, no. 1, pp. 47 – 54.
70.  Joseph  SB,  Castrillo  A,  Laffitte  BA,
Mangelsdorf DJ, and Tontonoz P, 2003, Reciprocal  regulation  of  inflammation and  lipid  metabolism  by  liver  X receptors , Nature Medicine, vol. 9, no. 2, pp. 213 – 219. 71.  Bischoff,E.D.,  Daige,C.L.,  Petrowski,M., Dedman,H., Pattison,J., Juliano,J., Li,A.C.  and  Schulman,I.G.,  2010, Non- redundant  roles  for  LXRalpha  and LXRbeta in atherosclerosis susceptibility in  low  density  lipoprotein  receptor knockout mice , J. Lipid Res.
72.  Krasowski,M.D.,  Ni,A.,  Hagey,L.R.  and
Ekins,S., 2011, Evolution of promiscuous nuclear hormone receptors:  LXR,  FXR,  VDR,  PXR,  and CAR , Mol. Cell. Endocrinol, 334:39 – 48.
73.  Nedumaran,B., Kim,G.S., Hong,S., Yoon,Y.-S., Kim,Y.-H., Lee,C.-H., Lee,Y.C.,  Koo,S.-H.  and  Choi,H.-S., 2010, Orphan  nuclear  receptor  DAX-1 acts  as  a  novel  corepressor  of  liver  X receptor  alpha  and  inhibits  hepatic lipogenesis ,  J.  Biol.  Chem,  285:9221 – 9232.
74.  Chinetti GG, Baron M, Bouhlel MA et al., 2011, Human  Atherosclerotic  Plaque
Alternative  Macrophages  Display  Low Cholesterol Handling but High Phagocytosis Because of Distinct Activities  of  the  PPAR  and  LXR Pathways , Circ. Res, 108:985 – 995.
75.  Jakobsson T, Venteclef N, Toresson G., Damdimopoulos  AE.,  Ehrlund  A,  Lou,X, Sanyal,S, Steffensen KR,
Gustafsson,JA,  and  Treuter,E.,  2009,
GPS2  is  required  for  cholesterol  efflux by triggering histone demethylation, LXR recruitment,  and  coregulator  assembly at the ABCG1 locus , Mol. Cell . , 34:510 – 518.
76.  Laffitte,  B.A. et  al., 2001, LXRs  control lipid-inducible expression of the
apolipoprotein  E  gene  in  macrophages and  adipocytes ,  Proc.  Natl.  Acad.  Sci.
USA., 98:507 – 512.
77.  Repa,  J.J. et  al., 2000, Regulation  of mouse sterol regulatory element-binding protein-1c  (SREBP-1c)  by  oxysterol receptors  LXR- α  and  LXR - ,  Genes Dev, 14:2819 – 2830. 78.  Zhang  Y,  Zanotti  I,  Reilly  MP, Glick  JM, Rothblat GH, Rader DJ, 2003, Overexpression  of  apolipoprotein  A-I promotes reverse transport of
cholesterol  from  macrophages  to  feces in vivo , Circulation, 108:661-663.
79.  Yvan-Charvet,  L.,  Pagler,  T.A.,  Seimon, T.A.,  Thorp,  E.,  Welch,  C.L.,  Witztum, J.L.,  Tabas,  I.,  and  Tall,  A.R.,  2010, ABCA1  and  ABCG1  protect  against oxidative  stress-induced  macrophage apoptosis  during  efferocytosis ,  Circ.
Res, 106:1861 – 1869.
80.  Groen  AK,  Bloks  VW,  Bandsma  RH, Ottenhoff R, Chimini G, Kuipers F, 2001,
Hepatobiliary cholesterol transport is not impaired  in  Abca1-null  mice  lacking HDL , J Clin Invest, 108:843 – 850.
81.  Christopher  J.  Fielding;  and  Phoebe  E.
Fieldins,  1995, Molecular  physiology  of
reverse  cholesterol  transport ,  Journal  of Lipid Research, Volume 36 pp 1-18.
82.  Wang  X,  Collins  HL,  Ranalletta  M,  Fuki
IV,  Billheimer  JT,  Rothblat  GH, Tall  AR, Rader  DJ,  2007, Macrophage  ABCA1 and  ABCG1,  but  not  SR-BI,  promote macrophage reverse cholesterol transport  in  vivo ,  J  Clin  Invest,
117:2216-2224.
83.  El  Bouhassani  M,  Gilibert  S,  Moreau  M, Saint-Charles  F,  Treguier  M,  Poti  F, Chapman  MJ,  Le  Goff  W,  Lesnik  P, Huby T, 2011, Cholesteryl ester transfer protein  expression  partially  attenuates the  adverse  effects  of  SR-BI  receptor deficiency  on  cholesterol  metabolism and  atherosclerosis ,  J  Biol  Chem,
286:17227-17238.
84.  Zhang  Y,  Da  Silva  JR,  Reilly  M, Billheimer  JT,  Rothblat  GH,  Rader  DJ, 2005, Hepatic  expression  of  scavenger receptor  class  B  type  I  (SR-BI)  is  a positive regulator of macrophage reverse  cholesterol  transport  in  vivo ,  J Clin Invest, 115:2870-2874.
85. Chen  LW,  Egan  L,  Li  ZW,  Greten  FR, Kagnoff  MF,  Karin  M,  2003, The  two faces  of  IKK  and  NF-kB  inhibition: Prevention  of  systemic  inflammation  but increased  local  injury  following  intestinal ischemia-reperfusion ,  Nat  Med, 9 :575 –
581.
86. Correa  RG,  Matsui  T,  Tergaonkar  V, Rodriguez-Esteban  C,  Izpisua-Belmonte JC,  Verma  IM,  2005, Zebrafish  IkB kinase  1  negatively  regulates  NF-kB activity , Curr Biol, 15:1291 – 1295.
87. Gadjeva  M,  Tomczak  MF,  Zhang  M, Wang  YY,  Dull  K,  Rogers  AB,  Erdman SE,  Fox  JG,  Carroll  M,  Horwitz  BH,
2004, A role for NF-kB subunits p50 and p65 in the inhibition of lipopolysaccharide-induced shock , J Immunol, 173:5786 – 5793. 88.  Mourad Z, Yasuhiro S, Amarjit S. Naura, Chetan P. Hans, Charles
Nichols,  and Hamid  B,  2008, Nuclear Translocation  of  p65  NF-kB  is  Sifficient for VCAM-1: Differential Requirement for PARP-1 Expression and Interaction , Cell Signal, 20(1): 186-194.
89. Bonizzi  G,  Karin  M,  2004, The  two  NF- kB  activation  pathways  and  their  role  in innate  and  adaptive  immunity ,  Trends Immunol, 25:280 – 288.
90.  Nicole  Iverson1,  Nicole  M.  Plourde2, Sarah M. Sparks3 et al., 2011, Dual Use of  Amphiphilic  Macromolecules  As Cholesterol Efflux Triggers and Inhibitors of  Macrophage  Athero-inflammation , Biomaterials, 32(32):8319 – 8327.
91. Liqun M, Jian Z, Zhigang Z et al., 2011,
Activation  of  TRPV1  reduces  vascular lipid accumulation and attenuates atherosclerosis , Cardiovascular
Research, 92:504 – 513.
92.  Martin  T,  Tsagogiorgas  C,  Wedel  J,
Hottenrott  M,  Schneider  MO,  Binzen  U, et  al.,  2012, N-octanoyl-Dopamine  Is  an Agonist  at  the  Capsaicin  Receptor TRPV1  and  Mitigates  Is  Chemia- Induced  Acute  Kidney  Injury  in  Rat , PLoS ONE, 7(8): e43525.
93.  Lewington S, Whitlock G, Clarke R et al., 2007, Blood  cholesterol  and  vascular mortality  by  age,  sex,  and  blood pressure:  a  meta-analysis  of  individual data  from  61  prospective  studies  with
55,000 vascular deaths , Lancet,
370(9602):1829 – 39.
94.  Shah PK, et al., 2007, Apolipoprotein A- I/HDL  infusion  therapy  for  plaque stabilization-regression: a novel therapeutic approach , Current Pharmaceutical  Design,  13(10):1031 –
1038.
95.  Rubenstrunk  A,  Hanf  R,  Hum  DW, Fruchart  JC,  Staels  B,  2007, Safety issues and prospects for future generations of PPAR modulators ,
Biochim Biophys Acta, 1771(8):1065-81. 96.  Zinn A, Felson S, Fisher E, Schwartzbard A, 2008, Reassessing the cardiovascular  risks  and  benefits  of thiazolidindiones ,  Clinical  Cardiology,
31(9):397-403.
97.  Staels  B,  2005, Fluid  retention  mediate by  renal  PPAR- ,  Cell  Metabolism,
2(2):77-78.
98.  Jacobsson  LT,  Turesson  C,  Gulfe  A, Kapetanovic  MC,  Petersson  IF,  Saxne T,  Geborek  P,  2005, Treatment  with tumor  necrosis  factor  blockers  is associated with a lower incidence of first cardiovascular  events  in  patients  with rheumatoid arthritis , J Rheumatol,
32:1213 – 1218.
99.  Emsley  HC,  Smith  CJ,  Georgiou  RF, Vail  A,  Hopkins  SJ,  Rothwell  NJ, Tyrrell PJ,  2005, A  randomised  phase  II  study of  interleukin-1  receptor  antagonist  in acute stroke patients , J Neurol Neurosurg Psychiatry, 76:1366 – 1372.
100. Kim  SY,  Solomon  DH,  2010, Tumor necrosis factor blockade and the risk of viral  infection ,  Nat  Rev  Rheumatol,
6(3):165-74.
101. Prinz JC, 2011, Autoimmune-like
syndromes  during  TNF  blockade:  does
infection  have  a  role? ,  Nat  Rev Rheumatol, 29;7(7):429-34.
102. Kamaly  N,  Xiao  Z,  Valencia  PM,
Radovic-Moreno  AF,  Farokhzad  OC,
2012, Targeted  Polymeric  Therapeutic Nanoparticles:  Design,  Development, and  Clinical  Translation , Chem  Soc Rev, 41(7):2971-3010.
103. Pinto-Alphandary  H,  Andremont  A,
Couvreur P, 2000, Targeting delivery of
antibiotics using liposomes and nanoparticles: research and applications ,  Int  J  Antimicrob,  13:155-
168.
104. Schuffhan  et  al.,  2006, The  cost effectiveness  of  Fluvastatin  in  Hungary Following  Succesfull  PCI ,  Cardiovasc drugs ther, 13(4):309-317.
105. Jeremy  S,  Paikin,  and  John  W. Eikelboom,  2012, Aspirin ,  Circulation,
125:e439-e442. 106. Torchilin, Vladimir P, 2003, Immunomicelles: Targeted Pharmaceutical  Carriers  for  Poorly Soluble  Drugs ,  Proceeding  of  the National Academy of Science. 107. Peters, et al., 2009, Targeting atherosclerosis  by  using  modular, multifunctional micelles , PNAS, 106(24):9815-9819.
108. Ravivarapu HB, Burton K, De Luca PP, 2000, Polymer and microsphere
blending  to  alter  the  release  of  a peptide  from  PLGA  microsphere ,  Eur  J Pharm Biopharm, 50:263-70.