Jumlah Koloni pada Media Kultur Bakteri yang Berasal dari Thallus DAN Perairan Sentra Budidaya Kappaphycus Alvarezii di Sumenep
Apri Arisandi 1 , Badrud Tamam 2 , Raini Yuliandari 3
1 Program Studi Ilmu Kelautan, Universitas Trunojoyo Madura
2 Program Studi Pendidikan IPA, Universitas Trunojoyo Madura
1 apri_unijoyo@yahoo.com

## ABSTRAK
Kappaphycus  alvarezii  merupakan  salah  satu  rumput  laut  yang  banyak  diminta oleh pasar internasional, tetapi saat itu terjadi kegagalan budidaya akibat bakteri pathogen.  Penelitian  ini  berjutuan  untuk  mengetahui  kelompok  bakteri  apa  yang menginfeksi rumput laut (Kappaphycus alvarezii). Penelitian ini dilakukan dengan kultur bakteri yang berasal dari thallus dan perairan pada media PCA, selanjutnya dilakukan pengujian angka lempeng total (ALT).  ALT menunjukkan jumlah koloni bakteri yang mendominasi pada suatu media kultur.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa jumlah koloni bakteri yang berasal dari media perairan lebih tinggi dibanding yang berasal dari thallus Kappaphycus alvarezii
Kata Kunci : bakteri, kappaphycus

## PENDAHULUAN
Pertumbuhan  rumput  laut dipengaruhi  oleh  dua  faktor  yaitu faktor internal dan eksternal.  Faktor internal berpengaruh terhadap jenis, galur,  bagian  thallus  dan  umur rumput  laut.    Faktor  eksternal berpengaruh terhadap keadaan fisik dan  kimiawi  perairan.    Faktor  lain yang dapat mempengaruhi keberhasilan  pertumbuhan  rumput laut yaitu pengelolaan yang dilakukan manusia. Faktor pengolahan yang perlu diperhatikan seperti  substrat  perairan  dan  jarak tanam  bibit  dalam  satu  rakit  apung (Soenardjo 2003).
Laju  pertumbuhan  rumput laut  berkisar  antara  2-3%  per  hari.
Penelitian penanaman menggunakan  rak  terapung  pada tiga lapisan kedalaman yang berbeda, menunjukkan semakin
kepermukaan  maka  pertumbuhan lebih  baik.    Hal  tersebut  karena cahaya  matahari  merupakan  salah satu
faktor penting untuk
pertumbuhan  rumput  laut.    Rumput laut  tidak  dapat  tumbuh  baik  jika kedalaman perairan tidak terjangkau cahaya,  selain  itu  iklim,  letak geografi dan faktor oceanografi juga menentukan  pertumbuhan  rumput laut (Aslan 2006).
Kappaphycus  alvarezii  pada musim-musim tertentu dapat mengalami kerusakan, akibat infeksi bakteri sehingga
mengurangi biomass  yang  dihasilkan.    Infeksi penyakit  yang  terjadi  di  perairan Sumenep  biasanya  terjadi  sekitar bulan  Mei  sampai  Juli.    Penyakit pada  rumput  laut  dipicu  oleh perubahan  lingkungan  yang ekstrim akibat perubahan iklim global sehingga  suhu,  pH  dan  salinitas menjadi  sangat  fluktuatif.    Rumput laut  yang stress  lebih memudahkan terjadinya infeksi bakteri pada thallus. Bakteri merupakan mikroorganisme bersel tunggal dengan  ukuran  panjang  0,5-10  µ dan  lebar  0,5-2,5  µ.  Karakteristik bakteri dilihat dari bentuknya, seperti bulat  (cocci),  batang  (spirilli),  koma (vibrios).  Tambahan  struktur  bakteri yang  terpenting  diketahui  cambuk (flagella),  kapsul  (capsule)  dan endospora  (endospore).  Flagella merupakan struktur tambahan diluar sel  yang  berbentuk  cabuk  halus yang tidak terlihat di bawah miskroskop  kecuali  menggunakan teknik perwarnaan khusus. Susunan flagella pada sel yang untuk diidentifikasi  dan  dikelompokkan menjadi  2  golongan,  yaitu  flagella peitrichous dan flagella polar (Ansori 2007). Kapsul diperoleh dari gugusan kompleks polisakarida atau polipeptida.  Kapsul  membuat  sel lebih tahan terhadap tekanan lingkungannya  seperti  panas  dan bahan-bahan  kimia  anti  mikroba, dan  juga  membantu  sel  melekat pada  bahan makanan  atau alat-alat pengolahan suatu makanan. Endospora  secara  umum  terbentuk tunggal dalam sel, berfungsi menjaga  keadaan  lingkungan  yang kurang  baik.  Spora  yang  sudah masak  dilepas  oleh  sel  ke  alam sekitarnya, sehingga spora-spora ini bertahan  dalam  keadaan  fisik  dan kimiawi  yang  esktrim  seperti  suhu, kekeringan, dan bahan-bahan kimia pembasmi kuman dan dpat bertahan dalam keadaan tidur untuk beberapa tahun (Andrito, 2007).
Bakteri  memiliki  struktur  dan organisasi dasar yang sama
meskipun  dengan  bentuk  yang berbeda, sel yang terdiri atas lapisan dinding sebagai luar  yang kaku dan di  bawahnya  terdapat  membran  sel semipermiabel.  Di  dalam  membran sel  terdapat  suatu  isi  sitoplasma yang termasuk dalam bahan inti dan
berbagai  komponen  serta  enzim yang dibutuhkan untuk metabolisme dan  pertumbuhan,  tergantung  pada jenisnya. Bakteri  terkadang memiliki struktur tambahan, yaitu diantaranya yang penting adalah cambuk (flagella),  kapsul  (capsules)  dan endospora  (endospores),  struktur tersebut berpengaruh penting untuk pengenalan  dan  identifikasi  bakteri (Buchanah dan Gibbons, 1974).

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan bulan  Juli-Agustus  2015  dengan melakukan  pengambilan  sampel  di sentra budidaya rumput laut Kecamatan  Dungkek,  Saronggi  dan Bluto Kabupaten Sumenep. Pengambilan sampel dilakukan pada lokasi  yang  berbeda  sekitar  pukul
12.00 wib. Mengambil sampel air laut dan Kappaphycus alvarezii sebanyak tiga  sampel  pada  masing-masing lokasi.    Sampel  yang  diteliti  adalah thallus  Kappaphicus  alvarezii  yang terinfeksi ice-ice dan air laut di lokasi penelitian.    Sampel  selanjutnya  diuji di  laboratorium,  Pengujian  Angka Lempeng  Total  (ALT)  dan  tahapan- tahapan pengujiannya mengikuti panduan  yang  mengacu  pada  SNI. 01-2332.3-2006,  proses  pengujian memerlukan  waktu  yang  cepat  dan teliti  saat  proses  pengujian,  apabila pada  saat  pengujian  tidak  dilakukan dengan  cepat  dan  teliti  maka dikhawatirkan sampel akan terkontaminasi  dengan  bakteri  yang ada  di  lingkungan  luar.    Sampel rumput  laut  didapat  dari  lapang dilakukan pengkodean sesuai
dengan  standart  yang  diberlakukan dibalai karantina dan pengujian mutu hasil perikanan Surabaya II (Tabel 1).
Tabel 1.  Kodel sampel LOKASI RUMPUT LAUT AIR LAUT 1. Saronggi  1389A 1389B 1390A 1390B 1391A 1391B 2. Dungke' 1501A 1501B 1502A 1502B 1503A 1503B 3. Bluto 1613A 1613B 1614A 1614B 1615A 1615B Sampel yang terindikasi terinfeksi  bakteri  dipotong  kecil-kecil kemudian  ditimbang  sebanyak  1  gr dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi  yang  berisi  cairan  BFP (Butterfields  Phosphat)  sebanyak  9 ml.  Sampel air laut diambil 1 ml dan dimasukkan ke  dalam tabung reaksi yang  berisi  larutan  BFP  sebanyak  9 ml.    Metode  kerja  pada  tahap  awal penyiapkan  tabung  reaksi  yang sudah  berisi  larutan  BFP,  pada sampel air laut dimulai dari pengenceran  10-0  yang  sudah  terisi sampel  air  laut,  kemudian  diambil  1 ml  dan  diletakkan  ke  pengenceran 10-1  dan  dihomogenkan,  setelah  itu diambil  menggunakan  pipet  kembali 1  ml  memasukkan  ke  pengenceran 10-2, dihomogenkan.
Diambil kembali  menggunakan  pipet  dari pengenceran  10-2  dan  diletakkan  di cawan petri, dilakukan secara duplo. Pengenceran 10-3 dan pengenceran 10-4  dilakukan  proses  yang  sama seperti  pengenceran  10-2.  Sampel rumput laut dimulai dari pengenceran 10-1  yang  sudah  berisi  sampel rumput  laut,  diambil  menggunakan pipet  1  ml  dan  dimasukkan  pada pengenceran  10-2  dihomogenkan, diambil  1  ml  dari  pengenceran  10-2 kemudian  diletakkan  pada  cawan petri secara duplo. Diambil
menggunakan  pipet  1  ml  pengencer 10-2 dan diletakkan pada pengenceran 10-3 dan dihomogenkan, kemudian dari pengencer 10-3 diambil menggunakan  pipet  1  ml  dan diletakkan  pada  cawan  petri,  secara duplo.  Proses  ini  dilakukan  secara sama sampai pada pengenceran 10- 4.    Menuangkan  media  PCA  ke dalam cawan petri yang berisi sampel dan larutan BFP dari proses pengenceran sebelumnya.
Menuangkan  larutan  PCA  pada masing-masing  cawan  petri  dan dihomogenkan  agar  media  PCA dengan  sampel  tercampur  rata. Ditunggu  sampai  PCA  padat,  pada saat  PCA  sudah  padat maka  cawan petri  dibalik,  dan  diletakkan  dalam inkubator  selama  24-48  jam  dengan suhu  370C  (Rasika,  et  al.,  .2012). Data hasil uji-uji tersebut selanjutnya dianalisis secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Angka  Lempeng  Total  (ALT) merupakan  salah  satu  cara  untuk mempermudah dalam pengujian mikroorganisme  dari  suatu  produk, dan  Angka  Lempeng  Total  (ALT) menunjukan adanya mikroorganisme pathogen  atau  non  pathogen  yang dilakukan pengamatan secara visual atau  dengan  kaca  pembesar  pada media  penanaman  yang  diteliti, kemudian dihitung berdasarkan lempeng  dasar  untuk  standart  test terhadap bakteri (BPOM 2008).
Hasil  dari  perhitungan  Angka Lempeng  Total  (ALT)  pada  sampel rumput  laut  dan  sampel  air  laut diperoleh  nilai  ALT;  Desa  Tanjung Kecamatan  Saronggi  hasil  ALT tertinggi  pada  sampel  rumput  laut 1389  A  (Saronggi)  dan  sampel  air 1389  B  (Saronggi)  dengan  nilai  ALT sebesar  1,9.  104  kol/gram,  dan 1,8.105  kol/gram.    Angka  terkecil
pada  sampel  rumput  laut  1390  A (Saronggi) dengan hasil ALT sebesar 1,3.  104  kol/gram.  Lokasi  kedua  di Desa  Dungke’  Kecamatan  Dungke’ didapatkan  hasil  perhitungan  jumlah koloni  ALT  terbesar  terdapat  pada sampel  rumput  laut  1503  A  dengan hasil 2,6. 106 kol/gram, dan nilai ALT yang terkecil 3,2. 105 kol/gram pada sampel rumput laut 1501 A, kemudian  pada  sampel  air  di  lokasi Dungke’ perhitungan koloninya mengalami  TBUD  (tidak  bisa  untuk dihitung).  Data  terakhir  pada  lokasi pengambilan sampel di Desa Aengdakeh Kecamatan Bluto diperoleh  hasil  perhitungan  ALT tertinggi  yaitu  1,4.  107  kol/gram dengan  sampel  rumput  laut  1614  A, sedangkan perolehan hasil terendah pada sampel rumput laut 1613 A dan nilai  ALT  yaitu  1,9.  104  kol/gram (Gambar 1).
Teurupun  et  al.    (2013) menyatakan  bahwa  hasil  suatu perhitungan  koloni  kapang  pada rumput  laut  kering  yang  diinkubasi selama 7 hari dengan menggunakan suhu inkubator 300C selama 3, 5 dan 7  hari  dapat  diperoleh  data  jumlah hasil koloni kapang pada rumput laut kering.  Hasil  data  perhitungan  total koloni  yang  diperoleh  antara  2,0  x
Gambar 1.  Koloni bakteri.
103 – 3,0 x 103 kol/gram, kemudian total koloni tertinggi diperoleh sebesar 3,0 x 103 kol/gram.
Hasil perhitungan ALT sesuai dengan  hasil  perhitungan  pada sampel air laut dan rumput laut yang terjangkit  ice-ice  yaitu  hasil  ALT tertinggi  diperoleh  pada  sempel rumput laut 1501 A, 1390 A dan 1614 A yang berada pada masing-masing lokasi sebesar 1,3.104-1,4.107 kol/gram, sedangkan pada sampel air laut nilai ALT tertinggi antara kisaran 1,8.105-2,5.106 kol/gram pada masing-masing lokasi. Berbeda dengan  hasil  pada  sampel  air  laut yang  terdapat  beberapa  sampel
TBUD,  hal  tersebut  dimaksudkan hasil  perhitungan  melebihi  batas maksimum ±350 koloni/jumlah koloni bakteri  yang  tak  hingga.  Hasil perhitungan koloni ditemukan jumlah koloni yang sama antara bakteri yang terdapat  di  rumput  laut  dan  di  air lautnya  pada  sampel  1389  di  Desa Saronggi  sebesar  1,8.105  kol/gram. Sedangkan  jumlah  koloni  di  rumput laut  lebih  banyak  dari  pada  di  air lautnya  ditemukan  pada  sampel dilokasi Bluto, dengan nilai di rumput laut sebesar 1,4.107 kol/gram, sedangkan  di  air  lautnya  sebesar 2,2.105 kol/gram. Hal ini menunjukkan  tingkat  infeksi  dari bakteri  yang  ada  disampel  rumput laut lebih besar dibandingkan dengan jumlah  bakteri  dimedia  hidupnya, yaitu diperairan.
Lokasi Dungke’ terdapat nilai ALT  yang sampai hasil perhitungan melebihi  batas  maksimum  ±350 koloni/jumlah koloni bakteri yang tak hingga,  pada  sampel  air  laut, sedangkan  untuk  nilai  terkecil  pada sampel rumput laut dengan nilai ALT yaitu  3,2.105  kol/gram.  Tetapi  pada lokasi  Saronggi  dan  Bluto  terdapat pula  jumlah  koloni  tertinggi  pada sampel air laut dibandingkan dengan sampel  rumput  laut  yang  lebih kecil.
Hal tersebut sesuai dengan pernyataan  dari  Irianto  (2003)  yang menjelaskan  bahwa  hal  ini  dapat terjadi dikarenakan adanya kompetisi nutrisi  dan  tempat  perlekatan  pada dinding intestinum. Sehingga adanya aktifitas  kompetisi  dan  penekanan pada mikroorganisme yang disebabkan  bakteri  memiliki  sifat antagonis  terhadap  yang  berada  di dalam perairan dengan menghasilkan  suatu  enzim  protease (Gusminarni 2009). Infeksi bakteri akan bertambah  berat  akibat  serangan epifit  yang  menghalangi  penetrasi sinar matahari, sehingga tidak memungkinkan  thallus  rumput  laut melakukan  fotosintesis.    Menurut
Yulianto  (2002)  rumput  laut  yang terserang  bakteri  ditandai  dengan: Memutihnya atau memudarnya warna  batang  (thallus);  Berlendir yang  diselimuti  oleh  kotoran  seperti tepung putih; Kulit luar atau epidermisnya  terkelupas  pada  yang terinfeksi  sehingga  terlihat  jaringan dalam atau medula pada thallus.
Awal  terinfeksi  pada  thallus dimulai  dari  bagian  tertentu,  yaitu: Infeksi bermula dari bagian luka pada pangkal  stek  akibat  dari  pemetikan; Infeksi bermula dari bagian yang luka pada  bekas  gigitan  predator  ikan; Infeksi dimulai dari bagian yang luka karena gesekan yang terlalu erat dan mengikat  rumput  laut;  Infeksi  akibat tertularnya bagian batang yang sehat oleh  bagian  batang  yang  terinfeksi dari  satu  rumpun  atau  rumpun berasal dari rumpun yang lain.
Menurut Ansori (2007), pengaruh  terhadapat  pertumbuhan mikroorganisme untuk hidup dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor, yaitu: a)  Suplai gizi Suatu mikroorganisme membutuhkan  suplay  makanan yang  menjadikannya  sumber
energi  dan  menjadikan  unsur- unsur  kimia dasar  sebagai pertumbuhan selnya. Unsur- unsur  tersebut  adalah  karbon,
hydrogen, oksigen, sulfur, fosfor, magnesium, zat besi, dan sejumlah logam kecil lainya. b)  Temperatur Temperatur  merupakan  faktor penting  untuk  kehidupan,  ada beberapa  jenis  mikroba  yang dapat hidup di daerah temperatur yang luas, dan sebagian mikroba lainnya berada  pada  temperatur  yang terbatas.  Mikroba  hidup  pada kisaran  temperatur  0-90  ºC.
Hubungan  antara  suhu  dan mikroorganisme digolongkan menjadi 3 golongan utama, yaitu; Kelompok Psikofilik (oligotermik).  Mikroba psikofrolik adalah mikroba yang bisa tumbuh  pada  kisaran  suhu antara 0-30 ºC, dengan temperatur  optimum  antara  10- 15  ºC,  dari golongan  ini tumbuh pada  tempat  dingin,  antara daratan maupun lautan; Kelompok Mesofilik (mesotermik).    Mikroba  mesofil adalah  mikroba  yang  dapat hidup dengan baik pada temperatur  5-60  ºC,    kemudian pada temperatur optimum berkisar  25-40  ºC,  dan  dapat hidup dalam
pencernaan;
Kelompok  Thermofilik.    Mikroba thermofil  adalah  mikroba  yang dapat  tumbuh  pada  temperatur 40-80 ºC, sedangkan temperatur optimumnya  antara  25-65  ºC. Golongan thermofil terdapat pada tempat sumber-sumber air panas dan tempat yang bertemperatur tinggi.

## c)  pH (potensial Hidrogen)
Mikroorganisme  bisa  tumbuh pada pH antara 6,0 - 8,0 dan nilai pada pH diluar kisaran 2,0 – 10,0 yang  bersifat  merusak.  Menurut Dewiana  (2008),  dasar-dasar daerah  pH  untuk  kehidupan mikroorganisme  dibedakan  3 golongan besar, antaranya; Mikroorganisme asidofilik, mikroba  yang  tumbuh  pada  pH 2,0 –  5,0;  Mikroorganisme mesofilik,  mikroba  yang  tumbuh pada pH 5,5-8,0; Mikroorganisme alkalifilik, mikroba yang tumbuh antara pH 8,4 – 9,5.

## SIMPULAN
Jumlah  koloni  bakteri  yang berasal  dari  media  perairan  lebih tinggi  dibanding  yang  berasal  dari thallus Kappaphycus alvarezii.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Direktorat Pendidikan Tinggi Kementerian Riset Teknologi  dan  pendidikan  Tinggi yang telah memberikan dana penelitian  fundamental  tahun  2016 sehingga artikel ini dapat terselesaikan.

## DAFTAR PUSTAKA
Andrito, W., 2007. Karaterisasi molekuler bakteri probiotik pada saluran skrining bakteri Vibrio Sp asli Indonesia. Pencernaan ikan kerapu bebek (Chromileptes altivelis) Berbasis Teknik 16 S rDNA. Skripsi, Faperika Universitas Riau.
Ansori M. 2007. Analisa Jumlah Bakteri dan Keberadaan Esoherichis Coli Pada pengolahan ikan teri nasi
Stolephosus spp di PT.
Kelola Mina Laut Unit
Sumenep. Universitas Trunojoyo Madura. Aslan LM. 2006. Budidaya Rumput Laut. Konisius. Yogyakarta. 97 hal. Buchanah, R.E. and Gibbons, N.E. 1974., Bergey's manual of determinative bacteriology 8th edition. Baltimore: The Williams and Wilkins Company.
[BPOM]. Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2008. Angka
Lempeng Total (ALT).www.pom.go.id/ Diakses [14 Desember 2014]. Irianto A. 2003. Probiotik
Akuakultur.Cetakan
I.Penerbit Gadjah Mada University  Press. Yogyakarta. 125 hal. Rasika, C., Torane, Gayatri, S., Kamble,Swati, M., Devare, Usha, D., Phalgune, Nirmala, R., Deshpande., .2012.
Isolation and characterisation of 1, 2 benzenedicarboxylic acid, bis (2 ethylhexyl) ester dioctyl phthalate, a bioactive compound from Ehretia laevis. Jof Pharma Research, 5(6), 3251-3252. Soenardjo. 2003. Membudidayakan Rumput Laut. Balai Pustaka Semarang. Teurupun A, Samuel M, Timbowo,
Joyce. 2013. Identifikasi Kapang Pada Rumput Laut
(Kappaphycus alvarezii) Kering Dari Desa Rap Rap Arakan Kecamatan Tatapan
Kabupaten Minahasa
Selatan. Universitas Sam Ratulangi. Perikanan dan Ilmu Kelautan. Manado. Vol 1(1). Hal (14-15). Yulianto K. 2002., Pengamatan penyakit ice-ice dan alga kompetitor Fenomena kegagalan panen pada rumput laut di Pulau Pari dan Kabupaten Seribu. Tahun 2000 dan 2001. Pusat Penelitian Oseanografi Lipi. Jakarta. Hal 2-4.