## Borneo Journal Of Medical Laboratory Technology

## PENDAHULUAN
Darah merupakan komponen esensial makhluk hidup  yang  berada  dalam  ruang  vaskuler,  karena perannya  sebagai  media  komunikasi  antar  sel  ke berbagai  bagian  tubuh  dengan  dunia  luar.  Fungsinya yaitu  membawa  oksigen  dari  jaringan  ke  paru-paru untuk  dikeluarkan,  membawa  zat  nutrien  dari  saluran cerna  ke  jaringan  kemudian  menghantarkan  sisa
metabolisme  melalui  organ  sekresi  seperti  ginjal, menghantarkan hormon dan materi-materi pembekuan darah (Tarwoto & Wartonah, 2008).
Sel  darah  merah  atau  eritrosit  merupakan  sel darah  dengan  jumlah  paling  banyak  dalam  tubuh manusia (Wahyudi, et.al , 2020). Fungsi utamanya adalah sebagai  tempat  metabolisme  makanan  untuk  dapat menghasilkan  energi  serta  mengangkut  oksigen  (O2) dan  Karbon  dioksida  (CO2)  (Mahmood  &  Mansor,
ANALISIS KUALITATIF MORFOLOGI ERITROSIT PADA APUSAN DARAH EDTA ( ETHYLENE DIAMINE TETRAACETIC ACID ) UNTUK PEMERIKSAAN SEGERA (0 JAM) DAN PEMERIKSAAN DITUNDA (2 JAM)
Qualitative Analysis of Erythrocyte Morphology in EDTA (Ethylene Diamine Tetraacetic Acid) Blood Smears For immediate examination (0 hours) and delayed examination (2 hours)
Reni Yunus 1*
Fina Astina 2
Fonnie E. Hasan 3
*1 Poltekkes Kemenkes Kendari, Kota Kendari, Indonesia
2 Poltekkes Kemenkes Kendari, Kota Kendari, Indonesia
3 Poltekkes Kemenkes Kendari, Kota Kendari, Indonesia
*email: reniyunus82@gmail.com

## Abstrak
Pemeriksaan  preparat  apus  darah  tepi  merupakan  bagian  yang  penting  dari rangkaian  pemeriksaan  hematologi.  Keunggulan  dari  pemeriksaan  apus  darah tepi  ialah  mampu  menilai  berbagai  unsur  sel  darah  tepi  seperti  morfologi  sel (eritrosit,  leukosit,  dan  trombosit.Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengetahui analisis  morfologi eritrosit pada apusan darah EDTA  pada penyimpanan 0 jam (segera)  dan  penyimpanan  2  jam.  Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian  Quasi  eksperimental  design.  Penelitian  ini  tidak  memberikan  variasi perlakuan  ataupun  pengukuran  berulang  sebelum  dan  sesudah  perlakuan, melainkan hanya memberikan variasi waktu penundaan pengecatan pada sampel. Populasi dalam penelitian ini adalah Mahasiswa Jurusan Teknologi Laboratorium Medis  Tingkat  III    Poltekkes  Kemenkes  Kendari  yaitu  sebanyak  48  orang, sedangkan sampel dalam penelitian sebanyak 12 responden. Terdapatperbedaanjumlahsampel  yang  normal  dan  tidak  pada  pengamatan morfologi eritrosit untuk pengamatan berdasarkan ukuran dan pewarnaan, baik pada penyimpanan 0 jam maupun 2 jam.
Kata Kunci:
eritrosit, EDTA ,penyimpanan
Keywords: erythrocytes, EDTA, storage

## Abstract
Examination of peripheral blood smear preparations is an important part of a series of hematological examinations. The advantage of peripheral blood smear examination is  that  it  is  able  to  assess  various  elements  of  peripheral  blood  cells  such  as  cell morphology (erythrocytes, leukocytes, and platelets). The research used was a quasi- experimental  design  study.  This  study  did  not  provide  variations  in  treatment  or repeated  measurements  before  and  after  treatment,  but  only  provided  variations  in the delay time of painting on the sample. The population in this study were students of  the  Department  of  Medical  Laboratory  Technology  Level  III  Poltekkes  Kemenkes Kendari,  namely  as  many  as  48  people,  while  the  sample  in  the  study  was  12 respondents.There were differences in the number of samples that were normal and not on the observation of erythrocyte morphology for observations based on size and staining, both at 0 hours and 2 hours storage.
Reni Yunus, Fina Astina, Fonnie E. Hasan. 2022. Qualitative Analysis of Erythrocyte Morfology In EDTA (Ethylene Diamine Tetraacetic Acid) Blood Smears for Immediate Examinatio (o Hours) and Delayed Examination (2 Hours).
2012).  Sel  darah  merah  normal  selalu  berbentuk bikonkaf,  tidak  memiliki  inti,  dan  mengandung hemoglobin yang merupakan representasi warna merah di dalam darah. Kelainan pada eritrosit di mana keadaan pada eritrosit atau masa hemoglobin yang beredar tidak memenuhi  fungsinya  untuk  menyiapkan  oksigen  pada jaringan  tubuh  (wahyudi, et.al ,  2020).  Eritrosit merupakan  suatu  komponen  utama  darah  setelah leukosit, trombosit dan plasma (Daulay, et.al , 2013).
Berdasarkan American Cancer Society (2009) sel darah merah normal pada tubuh kita dibagi menjadi 4 kategori umur yaitu : bayi, anak-anak, wanita dan pria. Rata-rata  jumlah  sel  darah  merah pada  setiap  kategori adalah  4,8-7,2  juta/kubik  mm  untuk  bayi,  3,8-5,5 juta/kubik  mm  pada  anak-anak,  4,2-5  juta/kubik  mm pada wanita dan 4,6-6 juta/kubik mm pada pria. Jumlah sel  darah  merah  berpengaruh  terhadap  kesehatan manusia  (Mahmood  &  Mansor,  2012).  Perubahan bentuk  eritrosit  dapat  disebabkan  berkurangnya  ATP ( Adenosina  trifosfat )  pada  eritrosit.  Perubahan  ATP ( Adenosina  trifosfat )  pada  eritrosit  dapat  menurun hingga  80-90%  selama  penyimpanan  dan  menyebabkan perubahan morfologi (Isti, 2018).
Pemeriksaan hematologi merupakan pemeriksaan  yang  sering  diminta  Klinisi.  Pemeriksaan hematologi  ini  digunakan  oleh  klinisi  sebagai  dasar untuk  penanganan  penderita.  Oleh  karena  itu pemeriksaan  hematologi  ini  harus  dikerjakan  dengan baik  dan  benar  sehingga  memberikan  hasil  yang  teliti dan akurat dengan validasi yang baik (Nurzanah, 2016). Dalam pemeriksaan hematologi, antikoagulan ditambahkan  kedalam  darah  dengan  tujuan  untuk menghambat  atau  mencegah  proses  pembentukan bekuan darah dengan cara mengikat atau mengendapkan  ion  kalsium  dan  menghambat pembentukan trombin dari prothrombin. Antikoagulan diberikan  berdasarkan  keperluan  pemeriksaan  karena sifat dari zat aditif yang ditambahkan memiliki pengaruh yang  berbeda  terhadap  spesimen  darah  (Nugraha, 2015).
Pemeriksaan sampel darah yang baik dilakukan segera setelah pengambilan spesimen darah. Pemeriksaan  harus  dilakukan  sebelum  2  jam  setelah pengambilan  sampel.  Setelah  pengambilan  spesimen darah,  spesimen  yang  disimpan  dalam  beberapa  jam sebelum  pemeriksaan  akan  terjadi  lisis  sel,  dan pertumbuhan  bakteri.  Hal  tersebut  dapat  terjadi tergantung  pada  lama  waktu  penyimpanan  dan  suhu penyimpanan (Utami, et.al , 2019).
Pemeriksaan  dengan  memakai  darah  EDTA sebaiknya  dilakukan  segera,  hanya  kalau  perlu  boleh disimpan  dalam  lemari  es  (4°C).  Darah  EDTA  yang disimpan  pada  4°C  selama  24  jam  memberikan  nilai hematokrit  yang  lebih  tinggi.  Untuk  membuat  sediaan apus  darah  tepi  dapat  dipakai  darah  EDTA  yang disimpan  paling  lama  2  jam.  Pada  umumnya,  darah EDTA dapat disimpan 24 jam di dalam lemari es tanpa mendatangkan  penyimpangan  yang  bermakna,  kecuali untuk  jumlah  trombosit  dan  nilai  hematokrit. Penyimpanan  darah  EDTA  pada  suhu  kamar  yang terlalu lama dapat menyebabkan terjadinya serangkaian perubahan  pada  eritrosit  seperti  pecahnya  membran eritrosit  (hemolisis)  sehingga  hemoglobin  bebas  ke dalam medium sekelilingnya (plasma) yang menyebabkan  kadar  Hb  menurun  (Gandosoebrata, 2010).
Di  Indonesia,  pewarnaan  yang  umum digunakan  ialah  pewarnaan  giemsa  sebab  giemsa  lebih tahan  lama  dalam  iklim  tropis.  Beberapa  rumah  sakit dan  klinik  bahkan  puskesmas  juga  menggunakan pewarna giemsa dalam mewarnai sediaan apusan darah tepi, karena giemsa memberi hasil representatif dengan warna  granula  orange-merah  dan  preparat  apusan darah  tepi  juga  dapat bertahan  dengan  baik (Ardina  & Rosalinda, 2018).
Pemeriksaan  preparat  apus  darah  tepi merupakan  bagian  yang  penting  dari  rangkaian pemeriksaan hematologi. Keunggulan dari pemeriksaan apus darah tepi ialah mampu menilai berbagai unsur sel darah tepi seperti morfologi sel (eritrosit, leukosit, dan
trombosit),  menentukan  jumlah  dan  jenis  leukosit, mengestimasi  jumlah  trombosit  dan  mengidentifikasi adanya parasit (Riswanto,2013).
Berdasarkan    penelitian  yang  dilakukan    oleh Risma  Isti,  et.  al  (2018)  mengenai  Morfologi  Eritrosit Packed  Red  Cell  Berdasarkan  Waktu  Penyimpanan, dilaporkan  7  sampelmengalami  perubahan  bentuk eritrosit.
Berdasarkan  hal  tersebut  maka  peneliti tertarik  untuk  melakukan  penelitian  mengenai Morfologi Eritrosit pada Apusan Darah EDTA ( Ethylene Diamine Tetraacetic Acid ) menurut waktu penyimpanan”
Tujuan penelitian ini adalah mengetahui analisis morfologi  eritrosit  padaapusandarah  EDTA    pada penyimpanan 0 jam (segera) dan penyimpanan 2 jam.

## METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian  Quasi  eksperimental  design,  dimana penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  gejala  atau pengaruh  yang  timbul  sebagai  akibat  dari  adanya perlakuan  tertentu.  Penelitian  ini  tidak  memberikan varias  iperlakuan  ataupun  pengukuran  berulang sebelum  dan  sesudahperlakuan,  melainkan  hanya memberikan variasi waktu penundaan pengecatan pada sampel.
Populasi dalam penelitian ini adalah Mahasiswa Jurusan  Teknologi  Laboratorium  Medis  Tingkat  III Poltekkes Kemenkes Kendari yaitu sebanyak 48 orang. Berdasarkan  besar  sampel  yang  diambil  dalam penelitian  ini  yaitu  25%  karena  jumlah  populasi  <100 (Primasari, 2018).
Jumlah  Sampel  (n)  =  Jumlah  Populasi  (N)    x 25% n = N × 25%
n = 48 × 25%
n = 12
Sampel  dalam  penelitian  ini  adalah  darah  yang diambil dari mahasiswa jurusan Teknologi
Laboratorium  Medis  TK  III  Poltekkes  Kemenkes Kendari yang berjumlah 12 orang.
Teknik pengambilan sampel dilakukan dengan menggunakan Simple Random Sampling yaitu pengambilan  sampel  anggota  populasi  dilakukan  secara acak  tanpa  memperhatikan  strata  yang  ada  dalam populasi.
Pengambilan sampel dilakukan dengan menetapkan  criteria  criteria  inklusi  dan  eksklusi. Kriteria  Inklusi  dalam  sampel  ini  adalah  morfologi eritrosit sampel darah EDTA yang dibuat apusan darah tepi.  Kriteria  Ekslusi  dalam  sampel  ini  adalah  Leukosit dan Trombosit.
Prosedur pengumpulan data pada penelitian ini dilakukan  dengan  mengambil  darah  vena    dari mahasiswa  tingkat  3  Jurusan  Teknologi  Laboratorium Medis  Poltekkes  Kendari.  Darah  yang  terpilih  menjadi sampel  dalam  penelitian  ini  dijadikan  sebagai  bahan pengujian dan dibawa keruang laboratorium. Kemudian, dilakukan  pemeriksaan  uji  kualitatif  morfologi  eritrosit pada  apusan  darah  EDTA  berdasarkan  waktu penyimpanan sampel 0 jam (segera), 2 jam, dan 3 jam.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penelitian morfologi eritrosit berdasarkan bentuk dan  ukuran  berdasarkan  darah  EDTA  berdasarkan waktu  penyimpanan  dapat  dilihat  pada  tabel  dibawah ini.
1) Karakteristik responden berdasarkan umur
Tabel 1 Distribusi karakteristik responden berdasarkan umur No Umur Frekuensi  Persentase (%) 1. ≤ 21 Tahun 5 41,70% 2. ≥ 21 Tahun 7 58,3% Jumlah 12 100%
Reni Yunus, Fina Astina, Fonnie E. Hasan. 2022. Qualitative Analysis of Erythrocyte Morfology In EDTA (Ethylene Diamine Tetraacetic Acid) Blood Smears for Immediate Examinatio (o Hours) and Delayed Examination (2 Hours).
BerdasarkanTabel  1  dapat  diketahui  bahwa  sebagian besar  responden  ada  yang  berumur  ≤  21  tahun sebanyak  5  dengan  peresentase  41,70%  dan  sebagian respon nyalagiada yang berumur ≥ 21 tahun sebanyak 7 dengan Persentase 58,3%.
Karakteristik responden berdasarkan riwayat penyakit Tabel  2 . Distribusi  karakteristik  responden berdasarkan riwayat penyakit No Riwayat Penyakit Frekue nsi Persenta se (%) 1. Normal 8 66,70% 2. Maag (gastritis) danTipes 3 25% 3. Asma 1 8,3% Jumlah 12 100%
Tabel  2  menunjukkan  bahwa hampir  seluruh responden  tidak  mempunyai  riwayat  penyakit (Normal)  yang  berjumlah  8  responden  dengan persentase  66,70%.  Tetapi  responden  lainnya mempunyai riwayat penyakit maag (gastritis) dan tipes sebanyak  3  responden  dengan  persentase  25%. Sedangkan  untuk  riwayat  penyakit  asma  sebanyak  1 responden dengan persentase 8,3%.
Tabel  3.Hasil  pengamatan  morfologi  eritrosit berdasarkan  Size  (Ukuran)  pada penyimpanan 0 jam
NO MORFOLOGI FREKUENSI PERSE NTASE (%) 1. Anisositosis Normal 12 100% Tidak Normal - - 2 Dimorfisme Normal 12 100% Tidak Normal - - 3 Makrosit Normal 4 33,3% Tidak Normal 8 66,70%
4 Mikrosit Normal 11 91,79% Tidak Normal 1 8,3% 5 Polikromasia Normal 12 100% Tidak Normal - -
Berdasarkan  tabel  3  hasil  pengamatan morfologi  eritrosit  pada  0  jam  (segera)  berdasarkan size  (ukuran)  terhadap  12  sampel  ditemukan  bahwa dalam  size  (ukuran)  Anisositosis,  Dimorfisme  dan Polikromasia  hasil  size  (ukuran)  ditemukan  hasil  size (ukuran)  normal  dengan  masing-masing  persentase 100%.  Sedangkan  pada  size  (ukuran)  Makrosit ditemukan  size  (ukuran)  normal  sebanyak  4  sampel dengan  persentase  33,3%  dan  size  (ukuran)  tidak normal sebanyak 8 sampel dengan persentase 66,70%, serta  pada  size  (ukuran)  mikrosit  ditemukan  hampir seluruh  sampel  ditemukan  hasil  size  (ukuran)  normal sebanyak  11  sampel  dengan  persentase  91,79%  dan size (ukuran) tidak normal sebanyak 1 sampel dengan persentase 8,3%.
Tabel  4. Hasil  pengamatan  morfologi  eritrosit berdasarkan Staining warna  )pada penyimpanan 0 jam (segera) NO MORFOLOGI FREKUENSI  PERSENTASE (%) 1. Hip okr om
Normal 1
1
91,79%
Tidak Normal 1 8,3% 2. Hip erk ro m Normal 7 58,3% Tidak Normal 5 41,70%
Berdasarkan tabel 4  hasil morfologi eritrosit pada 0 jam (segera) berdasarkan staining (warna) terhadap 12 sampel  ditemukan  bahwa  dalam  staining  (warna) Hipokrom  hampir  seluruh  sampel  ditemukan  hasil staining  (warna)  normal  sebanyak  11  sampel  dengan
persentase  91,79%  dan  staining  (warna)  tidak  normal sebanyak 1 sampel dengan persentase 8,3%. Sedangkan staining (warna) Hiperkrom ditemukan staining (warna) normal  sebanyak  7  sampel  dengan  persentase  58,3% dan  staining  (warna)  tidak  normal  sebanyak  5  sampel dengan persentase 41,70%.
Tabel  5. Hasil  pengamatan  morfologi  eritrosit  pada  2 jam berdasarkan Size (Ukuran)
No Morfologi Frekuensi Persentase (%) 1. Anisositosis Normal 12 100% Tidak Normal - - 2. Dimorfisme Normal 12 100% Tidak Normal - - 3. Makrosit Normal 7 58,3% Tidak Normal 5 41,70% 4. Mikrosit Normal 3 25% Tidak Normal 9 75% 5. Polikromasia Normal 12 100% Tidak Normal - - Berdasarkan  tabel  5  hasil  pengamatan morfologi  eritrosit  pada  2  jam  berdasarkan  size
(ukuran)  terhadap  12  sampel  ditemukan  bahwa  dalam size (ukuran) Anisositosis, Dimorfisme, dan Polikromasia  ditemukan  hasil  size  (ukuran)  normal dengan  masing-masing  persentase  100%.  Sedangkan pada  size  (ukuran)  Makrosit  ditemukan  hasil  size (ukuran)  normal  sebanyak  7  dengan  persentase 58,3% dan  size  (ukuran)  tidak  normal  sebanyak  5  sampel dengan persentase 41,70%. Pada size (ukuran) Mikrosit ditemukan  hasil  size  (ukuran)  normal  sebanyak  3 sampel dengan persentase 25% dan size (ukuran) tidak normal sebanyak 9 sampel dengan persentase 75%.
Tabel  6. Hasil  pengamatan  morfologi  eritrosit berdasarkan  Staining  (warna)  pada penyimpanan 2 jam No Morfologi Fre kue nsi Persentase (%) 1. Hipokrom Norma l 10 83,3% Tidak
Norma
l 2 16,70% 2. Hiperkrom  Norma l 7 58,3% Tidak Norma l 5 41,70% Berdasarkan  tabel  6  hasil  pengamatan
morfologi  eritrosit  pada  2  jam  berdasarkan  staining (warna)  terhadap  12  sampel  ditemukan  bahwa  dalam staining  (warna)  Hipokrom  hampir  seluruh  sampel ditemukan  hasil  staining  (warna)  normal  sebanyak  10 sampel  dengan  persentase  83,3%  dan  staining  (warna) tidak  normal  sebanyak  2  sampel  dengan  persentase 16,70%.  Sedangkan  pada  staining  (warna)  Hiperkrom ditemukan  hasil  staining  (warna)  normal  sebanyak  7 sampel  dengan  persentase  58,3%  dan  staining  (warna) tidak  normal  sebnyak  5  sampel  dengan  persentase 41,70%.
Pemeriksaan  dengan  memakai  darah  EDTA sebaiknya  dilakukan  segera,  bila  terpaksa  ditunda sebaiknya  memperhatikan  batas  waktu  penyimpanan untuk  masing-masing  pemeriksaan  hanya  kalau  perlu boleh  disimpan  dalam  lemari  es  (4 0 C).  Darah  EDTA yang  disimpan  pada  4 0 C  selama  24  jam  memberikan nilai  hematokrit  yang  lebih  tinggi.  Untuk  membuat sediaan apus darah tepi dapat dipakai darah EDTA yang disimpan  paling  lama  2  jam.  Pada  umumnya,  darah EDTA dapat disimpan 24 jam di dalam lemari es tanpa mendatangkan  penyimpangan  yang  bermakna,  kecuali
untuk  jumlah  trombosit  dan  nilai  hematokrit. Penyimpanan  darah  EDTA  pada  suhu  kamar  yang terlalu lama dapat menyebabkan terjadinya serangkaian perubahan  pada  eritrosit  seperti  pecahnya  membran eritrosit  (hemolisis)  sehingga  hemoglobin  bebas  ke dalam medium sekelilingnya (plasma) yang menyebabkan  kadar  Hb  menurun  (Gandosoebrata, 2010). Pemeriksaan hitung jumah leukosit bila disimpan pada kamar harus diperiksa dalam waktu kurang dari 2 jam  karena  leukosit  mengalami  perubahan  morfologi. Pemeriksaan  apus  darah  tepi  harus  diperiksa  dalam waktu  kurang  dari  1  jam.  Sel  aktif  masih  melakukan metabolisme  walaupun  sudah  berada  diluar  organ sehingga  batas  waktu  kurang  dari  6  jam  dan  jumlah trombosit kurang dari 1 jam (Cinthia, 2018).
Antikoagulan  adalah  zat  yang  ditambahkan kedalam  darah  dengan  tujuan  untuk  menghambat  atau mencegah  proses  pembentukan  bekuan  darah  dengan cara  mengikat  atau  mengendapkan  ion  kalsium  dan menghambat  pembentukan  trombin  dari  prothrombin. Antikoagulan diberikan berdasarkan keperluan pemeriksaan  karena  sifat  dari  zat  aditif  yang ditambahkan memiliki pengaruh yang berbeda terhadap spesimen  darah  (Nugraha,  2015).  EDTA  adalah  asam karboksilat  poliamino  dan  berwarna,  larut  pada  air (Sari, et.al ,  2016).  Antikoanggulan Ethylene  Diamine Tetraacetic  Acid (EDTA)  [CH 2 N(CH 2 CO 2 H) 2 ] 2 )  ini umumnya  tersedia  dalam  bentuk  garam  sodium (natrium) atau potassium (kalium), mencegah koagulasi dengan cara mengikat atau mengkhelasi kalsium ( Ca 2+ ) dalam  darah.  EDTA  disini  berfungsi  sebagai  chelating agent yang dapat mengikat ion Ca 2 + yang bebas dalam darah sehingga tidak dapat berperan aktif dalam proses selanjutnya, pemakaian  1-1,5  mg/ml,  10  uL  EDTA 10% untuk  1  ml  darah.  Bila  jumlah Ethylene  Diamine Tetraacetic Acid (EDTA) kurang, darah dapat mengalami pembekuan (Riswanto, 2013).
Eritrosit  adalah  sel  darah  merah  yang  paling mudah  mengalami  kerusakan  ini.  Konsentrasi antikoagulan  yang tidak  tepat  juga  dapat  menyebabkan
pembengkakan  sel,  hemolisis,  atau  krenasi.  Krenasi adalah  bentuk  eritrosit  yang  mengkerut  dan  timbul tonjolan-tonjolan pada permukaannya. Krenasi biasanya terbentuk  pada  darah  yang  dibiarkan  dalam  waktu cukup  lama  yang  berarti  juga  semakin  lama  terpapar dengan  antikoagulan.  Perubahan  bentuk  eritrosit  ini dapat disebabkan oleh pengaruh faktor intrinsik seperti berkurangnya adenosin triphosphate (ATP) atau karena faktor  ekstrinsik  seperti  peningkatan  pH  antikoagulan. Selain  itu,  antikoagulan  akan  menyebabkan  penurunan tegangan  permukaan  membran  eritrosit  sehingga membran  eritrosit  menjadi  lemah  dan  tidak  stabil, eritrosit  akan  membengkak  dan  terbentuk  tonjolan- tonjolan  dipermukaannya  sehingga  menyebabkan perubahan  bentuk  dari  discoid  menjadi  echinocyte (Cinthia, 2018).
Pada  penelitian  yang  dilakukan  sebelumnya oleh Risma Isti, et.al (2018), dibuktikan bahwa sampel yang  diperiksa  mengalami  perubahan  bentuk  eritrosit abnormal,  yang  semakin  meningkat  seiring  dengan pertambahan waktu penyimpanan. Perubahan eritrosit dinilai  pada  hari  ke-0,  ke-7,  ke-14,  ke-21,  dan  ke-28 penyimpanan.  Menurut  penelitian  yang  dilakukan  juga sebelumnya  oleh  Agnes  Cinthia  (2018),  dilaporkan bahwa  hasil  dengan  pemeriksaan  segera  18,8% memiliki  kriteria  baik  dan  81,3%  memiliki  kriteria buruk  dan  untuk  pemeriksaan  ditunda  selama  3  jam 12,5%  memiliki  kriteria  baik  dan  87,5%  memiliki kriteria  buruk.  Berdasarkan  hasil  analisis  uji  Chi- square, nilai p-value 0,025 < (0,05), maka disimpulkan bahwa  ada  perbedaan  morfologi  eritrosit  pada specimen  darah  K3EDTA  yang  segera  diperiksa  dan ditunda selama 3 jam.
Dari  hasil  pemeriksaan  gambaran  morfologi eritrosit pada apusan darah EDTA berdasarkan waktu penyimpanan ditemukan bahwa berdasarkan makroskopis  sediaan  apus  darah  tepi  berdasarkan waktu  penyimpanan  tidak  mengalami  kerusakan  pada sediaan apus darah tepi baik 0 jam (segera) dan 2 jam. Hasil  pemeriksaan    memperlihatkan    sediaan  apus
darah tepi masih dalam kondisi yang baik artinya tidak terjadi  perubahan  makroskopis  pada  sediaan  apus darah  tepi,  berdasarkan  waktu  penyimpanan  0  jam (segera) dan  2 jam.
Hasil  pemeriksaan  mikroskopis  pada  gambaran morfologi  eritrosit  pada  apusan  darah  EDTA berdasarkan  waktu  penyimpanan  di  dapatkan  hasil bahwa gambaran morfologi eritsosit pada apusan darah EDTA berdasarkan waktu penyimpanan 0 jam (segera) mengalami  beberapa  kelainan  morfologi  eritrosit  pada Size  (ukuran),  hal  ini  dapat  dilihat  pada  tabel  3  hasil pengamatan  morfologi  eritrosit  pada  0  jam  (segera) berdasarkan  size  (ukuran)  didapatkan  hasil  morfologi eritrosit  tidak  normal  sebanyak  8  sampel  dengan persentase 66,70%. Pada hasil pemeriksaan mikroskopis pada  gambaran  morfologi  eritosit  pada  apusan  darah EDTA berdasarkan waktu penyimpanan 0 jam (segera) berdasarkan  Stainning  (warna)  didapatkan  hasil morfologi  eritrosit  tidak  normal  sebanyak  6  sampel dengan persentase 50%, hal ini dapat dilihat pada tabel 4  hasil  pengamatan  morfologi  eritrosit  pada  0  jam (segera)  berdasarkan  Stainning  (warna).  Pada  hasil pemeriksaan  mikroskopis  pada  gambaran  morfologi eritosit  pada  apusan  darah  EDTA  berdasarkan  waktu penyimpanan  0  jam  (segera)  berdasarkan  Shape (bentuk)  didapatkan  hasil  morfologi  eritrosit  tidak normal  sebanyak  12  sampel  dengan  persentase  100%, hal  ini  dapat  dilihat  pada  tabel  5  hasil  pengamatan morfologi  eritrosit  pada  0  jam  (segera)  berdasarkan Shape  (bentuk).  Sedangkan  pada  hasil  pemeriksaan mikroskopis  pada  gambaran  morfologi  eritosit  pada apusan darah EDTA berdasarkan waktu penyimpanan 0 jam (segera) berdasarkan benda inklusi didapatkan hasil morfologi  eritrosit  tidak  normal  sebanyak  3  sampel dengan persentase 25%, hal ini dapat dilihat pada tabel 6  hasil  pengamatan  morfologi  eritrosit  pada  0  jam (segera) berdasarkan benda inklusi.
Hasil pemeriksaan mikroskopis pada gambaran morfologi  eritrosit  pada  apusan  darah  EDTA berdasarkan  waktu  penyimpanan  di  dapatkan  hasil
bahwa gambaran morfologi eritsosit pada apusan darah EDTA  berdasarkan  waktu  penyimpanan  2  jam mengalami  beberapa  kelainan  morfologi  eritrosit  pada Size  (ukuran),  hal  ini  dapat  dilihat  pada  tabel  7  hasil pengamatan morfologi eritrosit pada 2 jam berdasarkan size (ukuran) didapatkan hasil morfologi eritrosit tidak normal  sebanyak  8  sampel  dengan  persentase 66,70%. Pada  hasil  pemeriksaan  mikroskopis  pada  gambaran morfologi  eritosit  pada  apusan  darah  EDTA berdasarkan  waktu  penyimpanan  2  jam  berdasarkan Stainning  (warna)  didapatkan  hasil  morfologi  eritrosit tidak  normal  sebanyak  7  sampel  dengan  persentase 58,3%,  hal  ini  dapat  dilihat  pada  tabel  8  hasil pengamatan  morfologi  eritrosit  pada  jam  berdasarkan Stainning (warna).  Pada  hasil  pemeriksaan  mikroskopis pada  gambaran  morfologi  eritosit  pada  apusan  darah EDTA  berdasarkan  waktu  penyimpanan  2  jam berdasarkan Shape (bentuk) didapatkan hasil morfologi eritrosit  tidak  normal  sebanyak  12  sampel  dengan persentase 100%, hal ini dapat dilihat pada tabel 9 hasil pengamatan morfologi eritrosit pada 2 jam berdasarkan Shape  (bentuk).  Sedangkan  pada  hasil  pemeriksaan mikroskopis  pada  gambaran  morfologi  eritosit  pada apusan darah EDTA berdasarkan waktu penyimpanan 2 jam  berdasarkan  benda  inklusi  didapatkan  hasil morfologi  eritrosit  tidak  normal  sebanyak  1  sampel dengan persentase 8,3%, hal ini dapat dilihat pada tabel 10  hasil  pengamatan  morfologi  eritrosit  pada  2  jam berdasarkan benda inklusi.
Dari  hasil  pengamatan  mikroskopis  terhadap  12 sampel pada gambaran morfologi eritrosit pada apusan darah  EDTA  berdasarkan  waktu  penyimpanan ditemukan  bahwa  preparat  apusan  darah  tepi  dengan cara  pemeriksaan  0  jam  (segera),  2  jam  dan  3  jam menunjukkan  hasil  yang  berbeda,  yaitu  pada  0  jam (segera)  yang  tidak  mengalami  perubahan  morfologi eritrosit sebanyak 3 sampel (25%) dan yang mengalami perubahan  morfologi  eritrosit  sebanyak  9  sampel (75%), hal ini menunjukkan masih memiliki kriteria baik. Pada 2 jam yang tidak mengalami perubahan morfologi
eritrosit  sebanyak  2  sampel  (16,70%)  dan  yang mengalami  perubahan  morfologi  eritrosit  sebanyak  10 sampel  (83,3%),  hal  ini  menunjukkan  kriteria  mulai memburuk.  Sedangkan  pada  3  jam  yang  mengalami morfologi  eritrosit  sebanyak  12  sampel  (100%) menunjukkan kriteria buruk, karena selama penyimpanan  sel-sel  darah  mengalami  perubahan biokimiawi,  biomekanis,  dan  reaksi  imunologis, menyebabkan terjadinya kerusakan struktural/ morfologis  yang  dikenal storage  lesion .  Variasi  warna menunjukkan  kandungan  sitoplasma  yang  dapat disebabkan  kurangnya  besi  atau  menggambarkan ketidak  matangan  sel.  Sedangkan  perubahan  ukuran eritrosit  dapat  disebabkan  oleh  terganggunya  proses mitosis,  sintesis  hemoglobin,  kelainan  organel  sel  dan lainnya (Nugraha, 2015).

## KESIMPULAN
Analisis  morfologi  eristrosit  berdasarkan ukuran pada penyimpanan 2 jam adalah pada morfologi anisositosis,  dimorfisme  dan  polikromasia  terlihat  2 sampel  normal,  sedangkan  untukmorfologi  Makrosit terdapat  7  sampel  normal  dan 5  sampel  tidak  normal. Pada morfologimik rositter dapat 3 sampel normal dan 9 sampel tidak normal.
Saran  untuk  penelitian  selanjutnya  sebaiknya melakukan    pengukuran  morfologi  eritrosit  pada apusan darah EDTA berdasarkan waktu penyimpanan.

## DAFTAR PUSTAKA
Ardhea,  Jalu et.al. 2016. Modul  Praktikum  Hematologi 111. Semarang : Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes semarang.
Ardina,  Rinny  &  Sherly  Rosalinda.  2018. Morfologi Eosinofil Pada Apusan Darah  Tepi Menggunakan Pewarnaan  Giemsa,  Wright,  Dan  Kombinasi Wright-Giemsa. Jurnal  Surya  Medika.  Fakultas Ilmu  Kesehatan  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya. vol 3 no 2. 5-12
Cinthia, Agnes. 2018. Perbedaan Morfologi Eritrosit Pada Spesimen Darah K3EDTA Yang Segera Di Periksa Dan  Di  Tunda  Selama  3  Jam .  [Skripsi].
Semarang: Universitas Muhammadiyah
Semarang.
Daulay,  Muhammad  Chalid  G;  et.al.  2013. Morfologi
Eritrosit Pada Sediaan Apusan Darah Tepi (SADT) Sampel  Dengan  Hasil  Pemeriksaan  One  Tube Osmotic Fragility Test (OTOFT) Positif. Bandung : Doctoral  dissertation,  Universitas  Kristen Maranatha. http://repository.maranatha.edu/id/eprint/1222 4
Diana,  Ida  Nurlisa.  2018. Gambaran  Morfologi  Eritrosit Pada  Penderita  Tuberkulosis  Di  BALKESMAS wilayah  Semarang .  [Karya  Tulis  Ilmia].
Semarang:  Politeknik  Kesehatan  Semarang Jurusan DIII Analis Kesehatan.
Gandasoebrata, R., 2010, Penuntun Laboratorium Klinik, Cetakan ke-16, Dian Rakyat, Jakarta.
Isti, Risma; Zelly Dia Rofinda; & HusnI. 2018. Gambaran
Morfologi  Eritrosit  Packed  Red  cell  Berdasarkan Waktu  Penyimpanan  Di  Bank  Darah  RSUD  Dr. M. Djamil Padang. Jurnal Kesehatan Andalas,17-20. https://doi.org/10.25077/jka.v7i0.819
Kurniawan,  Fajar  Bakti.  2018. Hematologi  Praktikum analis  Kesehatan. Jakarta  :  Buku  Kedokteran EGC.
Mahmood,  N.H.;  Mansor,  M.A.  2012. Red  Blood Estimation  Using  Hough  Transform  Technique. Signal&  Image  Processing:  An  International Journal (SIPIJ). Vol.3, No. 2, hal 53-64.
Malau.  E.  D.  (2016). Perbedaan  Jumlah  dan  Morfologi Neutrofil  pada  Penggunaan  EDTA  Konvensional dan  EDTA  vacutainer .  [Karya  Tulis  Ilmiah]. Fakultas  Kedokteran  Universitas  Diponegoro. Semarang
Mehta,  Atul;  Victor  Hoffbrand.  2008. At  a  Glance Hematologi. Edisi II. Jakarta: Erlangga
Nugraha,  Gilang. 2015. Panduan Pemeriksaan
Laboratorium  Hematologi  Dasar. Catakan  1. Jakarta : CV. Trans Info Media
Nurdiansyah, Ipung. 2018. Gambaran Morfologi Eritrosit Pada  Juru  Parkir  (Studi  di  Jalan  Ahmad  Yani Kecematan  Jombang  Kabupaten  Jombang . [Karya  Tulis  Ilmiah].  Jombang  :  DIII  Analis Kesehatan  Sekolah  Tinggi  Ilmu  Kesehatan
Insan Cendekia Medika Jombang. http://repo.stikesicme-jbg.ac.id/id/eprint/462
Nurzanah,  Desi.  2016. Perbandingan  jumlah  Trombosit pada  Penggunaan  Antikoagulan  Na2EDTA Manual  dan  K3EDTA  Vacutainer .  [karya  Tulis Ilmiah]. Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes. Bandung
Palmer, L; C. Briggs; S.Mcfadden; G.Zini; J.Burthem; G. rozenberg;  M.Proytcheva;  S.  J.  Machin.  2015. ICSH  for  the  standardization  of  periferal  blood cell morphological features. International Journal Of Laboratory hematology. 37, 287-303 . Primasari, Nova. 2018. Gambaran Morfologi Sel Eosinofil Dan  Limfosit  Pada  Sediaan  Apusan  Darah  Tipis Dalam  Pewarnaan  Giemsa  Yang  Diencerkan Menggunakan  NaCl  Fisiologis  Dan  Aquades. [Karya  Tulis  Ilmiah].  Kendari:  Poltekkes Kendari DIII Analis Kesehatan.
Ria,  Jumiati.  2016. Gambaran  Pemeriksaan  Laju  Endap Darah  Menggunakan  Antikoagulan  Ethylene Diamine  Tetra-Acetat  Acid  (Edta)  Dan  Natrium Sitrat  Pada  Pasien  Rawatinap  Di  Rumah  Sakit Santa  Anna  Kota  Kendari  Provinsi  Sulawesi Tenggara . Karya Tulis Ilmiah. Kendari: Poltekkes Kendari DIII Analis Kesehatan.
Riswanto.  2013. Pemeriksaan  Laboratorium  Hematologi . Yogyakarta : Alfamedia dan Kanal Medikal.
Sari,  Maya  Indah.  2019. Gambaran  Nilai  Eritrosit  Rata- Rata  Pada  Pasien  Tuberkulosis  Paru  Di  RSU Mayjen H.A Thalib Kerinci . [Karya Tulis Ilmiah]. Padang: Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Perintis Padang DIII Teknologi Laboratorium Medik
Sari,  Rahma  Juwita,  Aman  Sentosa  Panggabean,  & Erwin.  2016. Pemanfaatan  Resin  Ca-Alginat Termodifikasi Dengan Etilena Diaminena Tetraasetat (EDTA) Dalam Tahapan Prakonsentrasi  Ion  Mn  (II)  Berbasis  Metode
Kolom .  Jurnal  Atomik.  Jurusan  Kimia  Fakultas MIPA Universitas Mulawarman. 01 (1) hal 28- 35. http://jurnal.kimia.fmipa.unmul.ac.id/index.php/J A/article/view/181
Tarwoto  &  Wartonah.  2008. Keperawatan  Medikal Bedah  Gangguan  Sistem  Hematologi. Jakarta  : Trans Info Media.
Utami,  Ayu  Putri; Durachim;  Adang; Nurhayati;  Betty; Noviar;  &  Ganjar.  2019. Waktu  Simpan Darah  Antikoagulan  K2edta  Dan  K3edta Terhadap  Parameter  Eritrosit .  Jurnal  Riset Kesehatan  Poltekkes  Depkes  Bandung.  Vol 11 No 2, 175-189. https://doi.org/10.34011/juriskesbdg.v11i2
Wahyudi,Nur Ihsan, Subakir Salnus , dan Fitriani. 2020. Gambaran  Eritrosit  Pada  Apusan  Darah  Tepi
Menggunakan  Pewarna  Alami  Ubi  Ungu (Ipomoea Batatas L). Jurnal TLM Blood Smear, 1 (1), 12-17.