# Korespondensi:  Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan.
Jl.  Singaraja  -  Gilimanuk,  Banjar  Dinas  Gondol,  Penyabangan, Gerokgak,  Penyabangan,  Gerokgak,  Kabupaten  Buleleng,  Bali 81155,  Indonesia E-mail:  mastuti_indah@yahoo.com
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/ma

## PERKEMBANGAN  JUMLAH  EKTOPARASIT  Pseudorhabdosynochus  spp.  PADA  INSANG KERAPU HIBRIDA CANTIK (Epinephelus fuscoguttatus x E. polyphekadion) MELALUI  METODE  KOHABITASI
Indah  Mastuti # ,  Zafran,  dan  Ketut  Mahardika
Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Jl. Singaraja - Gilimanuk, Banjar Dinas Gondol, Penyabangan, Gerokgak Kabupaten Buleleng, Bali 81155
(Naskah diterima: 6 Agustus 2020; Revisi final: 7 Juni 2021; Disetujui publikasi: 7 Juni 2021)

## ABSTRAK
Genus  Pseudorhabdosynocus  merupakan  Monogenea  yang  sering  menginfeksi  ikan  kerapu.  Pengaruh perbedaan  jarak  antara  ikan  sakit  dengan  ikan  sehat  terhadap  perkembangan  jumlah Pseudorhabdosynochus  spp.  pada  ikan  kerapu  hibrida  “cantik”  dipelajari  dalam  penelitian  ini  melalui metode kohabitasi. Kohabitasi dilakukan dengan dua metode yaitu (a) menempatkan lima ekor ikan sakit ke dalam keranjang dengan jarak 25 cm dari dasar bak, dan (b) menempatkan lima ekor ikan sakit ke dalam keranjang dengan jarak 10 cm dari dasar bak. Kedua keranjang tersebut diapungkan ke dalam bak plastik berbeda  dengan  volume  100  L  air  laut  (33  ppt)  yang  masing-masing  telah  berisi  30  ekor  ikan  kerapu hibrida “cantik” sehat. Masing-masing lima ekor ikan dari kedua metode kohabitasi diambil pada hari ke-2, 4,  6,  8,  10,  dan  15  pemeliharaan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa infeksi  buatan  menggunakan metode kohabitasi (b) lebih cepat menyebarkan Pseudorhabdosynochus spp. dari ikan sakit ke ikan sehat dibandingkan  dengan  metode  kohabitasi  (a).  Perkembangan  populasi Pseudorhabdosynochus  spp.  dan telurnya pada metode kohabitasi (b) lebih tinggi yaitu 1.495 ± 206,3 ekor/ikan dan 18,6 ± 3,8 telur/ikan dibandingkan dengan metode kohabitasi (a) yaitu 163,2 ± 16,3 ekor/ikan dan 3,8 ± 0,7 telur/ikan pasca 15 hari  kohabitasi.  Secara  histopatologi,  lamela  insang  yang  terinfeksi  Pseudorhabdosynochus  spp. menunjukkan  adanya  hyperplasia  epitel  sel  filamen  insang  yang  menimbulkan  fusi  filamen.  Kerusakan filamen di hampir semua lamela insang menyebabkan terganggunya sistem pernapasan ikan kerapu. Hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa penyebaran Pseudorhabdosynochus spp. semakin cepat dengan semakin dekat jarak kontak antara ikan sakit dengan ikan sehat.
KATA KUNCI: metode kohabitasi; kerapu hibrida “cantik”; keranjang kecil; keranjang besar; Pseudorhabdosynochus spp.
ABSTRACT: Changes in density patterns of Pseudorhabdosynochus spp. parasite in hybrid grouper (Epinephelus  fuscoguttatus  x  E.  polyphekadion)  gill  through  cohabitation  method. By: Indah Mastuti, Zafran, and Ketut Mahardika
Pseudorhabdosynocus is a genus of Monogenea that frequently infect grouper fish. This study aimed to observe the changes of density patterns of Pseudorhabdosynochus spp. in hybrid  grouper gill through cohabitation. Two cohabitation methods were applied to understand the effects of distance between sick and healthy fish in terms of parasite infection. The cohabitation methos were arranged as follows: (a) five fish infected with Pseudorhabdosynochus spp. were placed into a basket at a distance of 25 cm from the bottom of the tank, and (b) five fish infected with Pseudorhabdosynochus spp. were placed into a basket at a distance of 10 cm from the bottom of the tank. The two baskets were floated into different plastic tanks of 100 L of seawater (33 ppt), each of which contained 30 healthy hybrid groupers. Each of the five fish from  the  two cohabitation  methods  was  sampled  on  day 2,  4,  6,  8,  10,  and 15  after  cohabitation.  The results  showed  that  the  spread  of  Pseudorhabdosynochus  spp.  from  sick  fish  to  healthy  fish  with  the
cohabitation  method  b  was  faster  than  the  cohabitation  method  a.  The  development  number  of Pseudorhabdosynochus spp.  and its eggs in  the cohabitation method  b were higher, reaching  1,495 ± 206.3 parasite/fish and 18.6 ± 3.8 eggs/fish than the cohabitation method a, 163.2 ± 16.3 parasite/fish and  3.8  ±  0.7  eggs/fish  after  15  days  of  cohabitation.  Histopathologically,  gill  lamella  infected  with Pseudorhabdosynochus spp. showed the presence of epithelial hyperplasia of gill filament cells causing fusion. Damage of the gill filament in all of gill lamella has caused disruption of the grouper breathing system. From these findings, it can be concluded that the spread of Pseudorhabdosynochus spp. was faster if the distance of direct contact between sick and healthy fish was closer.
KEYWORDS: cohabitation method; hybrid grouper; small basket; large basket; Pseudorhabdosynochus spp.
Salah  satu  metode  infeksi  buatan  melalui kohabitasi  dilaporkan  efektif  dalam  transmisi monogenea dari ikan sakit ke ikan sehat (Hutson et al.,  2018).  Transmisi  Pseudorhabdosynochus  spp. dilaporkan dapat menyebar dengan cepat dari ikan sakit ke ikan sehat yang ditunjukkan dengan peningkatan intensitas Pseudorhabdosynochus spp. sejak minggu pertama  hingga  kedua  dan  menurun  pada  minggu ketiga (Mahardika et al., 2018).
Juvenil  ikan  kerapu  memiliki  kebiasaan bergerombol  di  dasar  bak  dan  aktif  berenang  pada saat  mengejar  makanan.  Juvenil  ikan  kerapu  yang dipelihara  dalam  bak  biasanya  dipelihara  dengan kepadatan  500-700  ekor/m 3 .  Sehingga  pergerakan normal ikan  kerapu berkisar antara 10-25  cm. Oleh karena  itu,  penelitian  metode  kohabitasi  dilakukan dengan  pembatasan  jarak  (sekat)  antara  ikan  sakit dengan ikan sehat untuk mengetahui pola penyebaran Pseudorhabdosynochus spp. Tujuan dari penelitian ini adalah  untuk  mengetahui  perkembangan  jumlah Pseudorhabdosynochus spp. pada insang ikan kerapu hibrida “cantik” melalui metode kohabitasi.

## BAHAN DAN METODE

## Ikan Uji
Ikan uji yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari  hatchery  swasta  di  sekitar  Balai  Besar  Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan (BBRBLPP), Gondol, Bali. Sebanyak 85 ekor ikan kerapu hibrida “cantik”  (Epinephelus  fuscoguttatus  x  E. polyphekadion) (panjang total 8,2 ± 0,8 cm) terlebih dahulu di desinfeksi melalui perendaman dengan 150 mg/L formalin dalam air tawar selama satu jam dengan aerasi kuat. Ikan-ikan tersebut diaklitimasi dalam bak fiber 500 L sampai digunakan untuk uji kohabitasi.

## Pseudorhabdosynochus  spp.
Pseudorhabdosynochus  spp.  dikoleksi  dari  tiga ekor ikan kerapu hibrida “cantik” sakit (panjang to- tal: 15,5 ± 1,7 cm) yang berasal dari keramba jaring apung di Teluk Kaping Desa Sumberkima Kabupaten

## PENDAHULUAN
Parasit  ikan  merupakan  kelompok  beragam organisme uniseluler dan multiseluler. Beberapa taksa parasit dapat menjadi patogen serius dalam budidaya ikan  laut  (Ogawa,  2011).  Sebanyak  10  spesies ektoparasit dan 18 spesies endoparasit ditemukan pada ikan kerapu macan, Epinephelus fuscoguttatus yang dipelihara di karamba jaring apung (KJA) di Kepulauan Seribu,  Jakarta.  Parasit  yang  dominan  ditemukan adalah monogenea Pseudorhabdosynochus spp. (Palm et  al.,  2011).  Pseudorhabdosynochus  spp.  juga dilaporkan  selalu  teramati menginfeksi  ikan  kerapu hibrida dan kakap putih di KJA sepanjang tahun 2018 di Teluk Kaping, Desa Sumberkima, Bali (Zafran et al., 2018;  Mahardika  et  al.,  2019;  2020).  Trematoda monogenea  insang  dapat  menempel  pada  ikan menggunakan organ perlekatan yaitu opisthaptor yang dilengkapi dengan dua kait tajam yang diposisikan di tengah yang disebut hamuli dan susunan 16 kait yang didistribusikan  secara  perifer  (Grano-Maldonado  et al.,  2018a).  Lebih  jauh  dilaporkan  bahwa  adanya monogenea  yang  menempel  pada  filamen  insang menyebabkan  terjadinya  hiperplasia.  Monogenea dalam  jumlah  banyak  pada  filamen  insang  dapat mengurangi  kemampuan  ikan  untuk  mengambil oksigen.
Beberapa spesies Pseudorhabdosynochus spp. yang menginfeksi  ikan  laut  seperti:  P.  regius  n.  sp. ditemukan  menginfeksi  insang  ikan  kerapu Mycteroperca  rubra  (Chaabane  et  al.,  2015),  P. yamaguti (1958) dilaporkan populasinya berlimpah di perairan  dengan  suhu  hangat  dan  ditemukan menginfeksi  insang  ikan  kerapu  (Epinephelidae) (Chaabane  et  al.,  2016a).  Infeksi  P.  yamaguti  pada berbagai jenis ikan kerapu juga ditemukan di perairan Atlantik bagian barat (Kritsky, 2015). Pada ikan kerapu juga  ditemukan  P.  sulamericanus  Santos  ditemukan menginfeksi  ikan  kerapu  Hyporthodus  haifensis (Chaabane  et  al.,  2016b),  P.  nhatrangensis  n.  sp.,  P. vietnamensis  n.  sp.,  dan  P.  brunei  n.  sp.  ditemukan pada  ikan  kerapu  E.  coioides,  E.  bleekeri,  dan  E. bruneus (Dang et al., 2013).
Buleleng, Bali. Tahap awal untuk perbanyakan ikan sakit dilakukan mengikuti metode Mahardika et al. (2018) yaitu  dengan  memelihara  bersama  tiga  ekor  ikan kerapu hibrida yang terinfeksi Pseudorhabdosynochus spp. dengan 15 ekor ikan kerapu hibrida “cantik” sehat dalam  bak  plastik  volume  130  L  dengan  sistem  air diam yang dilengkapi dengan aerasi. Ikan-ikan tersebut diberi pakan pelet komersial dua kali sehari ad libi- tum. Air pemeliharaan dibersihkan dan diganti hingga 70%  setiap  dua  hari  sekali.  Setelah  dua  minggu kohabitasi, dilakukan pemeriksaan insang pada dua ekor  ikan  di  bawah  mikroskop.  Identifikasi ektoparasit  menggunakan  metode  pengamatan morfologi dengan rujukan gambar taksa dari Justine (2005).
Hasil pengamatan menunjukkan bahwa ikan sudah terinfeksi Pseudorhabdosynochus spp. (Tabel 1). Ikan- ikan  tersebut  selanjutnya  digunakan  untuk  uji
perkembangan populasi Pseudorhabdosynochus spp. secara kohabitasi dengan pembatasan jarak antara ikan yang terinfeksi dengan ikan sehat.

## Metode  Kohabitasi
Kohabitasi dilakukan dengan dua metode yaitu (a) menempatkan  lima  ekor  ikan  terinfeksi Pseudorhabdosynochus spp. ke dalam keranjang kecil ukuran 30 cm x 20 cm x 10 cm yang diapungkan ke dalam bak plastik volume 126,7 L (66 cm x 48 cm x 40 cm) dan telah diisi dengan 30 ekor ikan kerapu hibrida “cantik” sehat. Metode (b) dengan menempatkan lima ekor ikan terinfeksi Pseudorhabdosynochus spp. ke dalam keranjang besar ukuran 50 cm x 35 cm x 25 cm yang diapungkan ke dalam bak plastik volume 126,7 cm 3 (66 cm x 48 cm x 40 cm) dan telah diisi dengan 30 ekor ikan  kerapu hibrida “cantik” sehat.  Kedua bak plastik tersebut diisi air laut (salinitas 33 ppt) dengan
Gambar 1. (a) Pseudorhabdosynochus hirundineus n. sp. berdasarkan Justine
(2005),  (b)  Pseudorhabdosynochus  spp.  yang  menginfeksi  insang kerapu hibrida “cantik”.
Figure  1. (a)  Pseudorhabdosynochus  hirundineus  n.  sp.  based  on  Justine (2005),  (b)  Pseudorhabdosynochus  spp.  that  infects  the  gills  of the hybrid grouper. a b
Tabel 1. Intensitas Pseudorhabdosynochus spp. pada lamela insang (kanan dan kiri) dari ikan uji selama tiga minggu kohabitasi dengan ikan yang terinfeksi parasit insang secara alami
Table 1. Intensity of Pseudorhabdosynochus spp.  in the  gill lamella  of healthy  hybrid grouper  after three weeks cohabited with naturally infected hybrid grouper
1 2 3 4 Pseudorhabdosynochus  spp. 15 33 50 81 179 Telur Pseudorhabdosynochus  spp. Egg of  Pseudorhabdosynochus  spp. 0 0 3 11 14 Pseudorhabdosynochus  spp. 36 27 46 51 160 Telur Pseudorhabdosynochus  spp. Egg of  Pseudorhabdosynochus  spp. 0 2 4 3 9 Total parasit insang Total of gill parasite
1 2

## Jumlah parasit pada setiap lembar lamela insang ikan
Number of gill parasite in the each sheet of gill lamela Parasit insang (Gill parasite )
Nomor ikan
Number of  fish
volume  ±  100  L  (ketinggian  air  hingga  31,5  cm). Masing-masing keranjang dilengkapi dengan styrofoam dengan ukuran 20  cm x 1 cm x 3,5  cm pada kedua sisinya. Jarak antara dasar keranjang dengan dasar bak pada perlakuan (a) yaitu 25 cm dan (b) yaitu 10 cm (Gambar  2).  Pada  perlakuan  kontrol,  untuk memastikan  bahwa  tidak  terjadi  infeksi Pseudorhabdosynochus  dari  air  pemeliharaan, digunakan 10 ekor ikan sehat yang dipelihara dalam bak plastik dengan volume yang sama tanpa kohabitasi. Pemeliharaan  dilakukan  dengan  sistem  air  tidak mengalir yang dilengkapi dengan aerasi. Pakan pelet komersial diberikan dua kali sehari secara ad libitum. Pembersihan dan penggantian air dilakukan setiap tiga hari sekali.

## Perkembangan  Jumlah

## Pseudorhabdosynochus  spp.
Masing-masing lima ekor ikan dari kedua perlakuan diambil  pada  hari  ke-2,  4,  6,  8,  10,  dan  15  setelah kohabitasi.  Lama  pengamatan  tersebut  (15  hari) dilakukan  berdasarkan  hasil  penelitian  sebelumnya menunjukkan  bahwa  kohabitasi  antara  ikan  sakit terinfeksi  Pseudorhabdosynochus  spp.  dengan  ikan yang  sehat  menunjukkan  intensitas  maksimal  pada minggu  kedua  pasca-kohabitasi  (Mahardika  et  al., 2018). Lima ikan pada perlakuan kontrol juga diambil pada hari ke-6 dan 15. Ikan-ikan tersebut dibius dengan cairan eugenol. Setiap lembar lamela kanan dan kiri (masing-masing empat lembar) dari ikan uji dipotong dengan  gunting  steril  dan  ditempatkan  pada  kaca- objek (object glass/slide glass) mengikuti metode yang dilaporkan sebelumnya oleh Mahardika et al. (2018). Pengamatan perkembangan populasi Pseudorhabdosynochus  spp.  dilakukan  di  bawah mikroskop  dengan  pembesaran  100x  populasi
Pseudorhabdosynochus spp. pada satu ekor ikan uji dihitung dengan rumus:
di mana: P = populasi Pseudorhabdosynochus spp. atau telur
 P = jumlah Pseudorhabdosynochus spp.
 TP = telur dari Pseudorhabdosynochus spp.
N = jumlah ikan yang diamati
Analisis
perkembangan populasi Pseudorhabdosynochus  spp.  dilakukan  secara deskriptif dalam bentuk tabel dan grafik.

## Histologi  Lamela  Insang
Lamela-lamela  insang  dari  kedua  perlakuan  dan kontrol setelah pengamatan populasi Pseudorhabdosynochus spp. dan telurnya dimasukkan ke dalam larutan bouin selama tiga hari. Lamela-lamela insang  tersebut  selanjutnya  di  histologi  mengikuti metode yang dilaporkan sebelumnya oleh Mahardika et  al.  (2015).  Pengamatan  perkembangan  jumlah individu dilakukan menggunakan mikroskop (Nikonn E600) pada perbesaran 100x.

## HASIL DAN BAHASAN

## Perkembangan  Jumlah

## Pseudorhabdosynochus  spp.  dan  Telurnya
Ikan-ikan sakit di kedua keranjang kecil dan besar mengalami  kematian  mulai  hari  kelima  pasca- kohabitasi (20% di keranjang kecil dan 40% di keranjang besar).  Mortalitas  ikan  mencapai  100%  di  kedua keranjang tersebut pada hari ketujuh pasca-kohabitasi. Keranjang-keranjang tersebut dibiarkan berada dalam
Gambar 2. Desain  infeksi buatan  Pseudorhabdosynochus  spp.  melalui  metode  kohabitasi  dengan perbedaan jarak antara ikan sakit dengan ikan sehat. (a) 25 cm dan (b) 10 cm.
Figure  2. Design of the artificial infections through cohabitation methods with different distances between sick and healthy fish. (a) 25 cm and (b) 10 cm.
66 cm 31.5 cm 25 cm 48 cm 4 0 c m 66 cm 4 0 c m 31.5 cm 10 cm 48 cm
N TP atau P P   
(a)                                                                           (b)
bak  untuk  memberi  kesempatan  jika  kemungkinan terdapat  oncomiracidia  yang  masih  tersisa  dalam keranjang untuk menyebar dan menginfeksi ikan uji.
Hasil pengamatan pada masing-masing lima ekor ikan  uji  setelah  dilakukan  kohabitasi  menunjukkan bahwa Pseudorhabdosynochus spp. dapat menyebar dari ikan yang sakit ke ikan sehat. Metode kohabitasi dengan  keranjang  besar  (metode  (b))  menghasilkan perkembangan populasi Pseudorhabdosynochus spp. dan telurnya lebih banyak dibandingkan dengan metode kohabitasi dengan keranjang kecil (metode (a)) (Tabel 2). Jumlah Pseudorhabdosynochus spp. pada metode (b) pada hari kedua pasca-kohabitasi telah mencapai 36,8  ±  5,1  ekor/ikan  dan  mengalami  pertambahan jumlah  dengan  sangat  cepat hingga  1.495  ±  206,3 ekor/ikan pasca 15 hari kohabitasi, sedangkan jumlah Pseudorhabdosynochus spp. pada metode (a) pada hari kedua  hanya  ditemukan  5  ±  1,5  ekor/ikan  dan mengalami pertambahan jumlah hingga 163,2 ± 16,3 ekor/ikan pasca 15 hari kohabitasi. Lamela insang ikan kontrol  yang  diamati  pada  hari  keenam  dan  ke-15 pasca  pemeliharaan  tidak  ditemukan  adanya Pseudorhabdosynochus spp. dan telurnya. Perbedaan perkembangan  jumlah  Pseudorhabdosynochus  spp. antara  metode  (a)  dengan  metode  (b)  disebabkan karena jarak yang berbeda antara ikan sakit dengan ikan  sehat,  metode  (a)  memiliki  jarak  antara  dasar keranjang dengan dasar bak sekitar 25 cm lebih tinggi dibandingkan  dengan  jarak  antara  dasar  keranjang dengan  dasar  bak  pada  metode  (b)  yaitu  10  cm. Transmisi  monogenea  terjadi  ketika  ikan  sehat berenang di dekat ikan sakit. Selain itu, pergerakan parasit  sesuai dengan  arah  pusaran yang  dihasilkan oleh  ikan  atau  pelepasan  parasit  diperantarai  oleh turbulensi air Grano-Maldonado et al. (2018b). Sifat ikan  kerapu  yang  diam  dan  berenang  di  dasar  bak memungkinkan  penyebaran  Pseudorhabdosynochus spp. lebih  cepat jika  jarak antara  ikan sakit  dengan ikan  sehat  semakin  dekat.  Hal  tersebut  diperkuat dengan hasil penelitian sebelumnya oleh Mahardika et  al.  (2018)  bahwa  metode  kohabitasi  dengan pemeliharaan bersama antara ikan sakit dan ikan sehat dalam satu bak mampu menyebarkan Pseudorhabdosynochus  spp.  dari ikan  sakit  ke  ikan sehat  secara  cepat  hingga  intensitas  2.214  ±  65,9 ekor/ikan pasca dua minggu kohabitasi.
Tabel  2  juga  menunjukkan  bahwa  telur  dari Pseudorhabdosynochus spp. sudah teramati pada hari kedua pasca-kohabitasi di kedua metode kohabitasi. Jumlah  telur  dari  Pseudorhabdosynochus  spp.  pada metode  kohabitasi  (a)  terlihat  lebih  sedikit dibandingkan  dengan  jumlah  telur  dari Pseudorhabdosynochus spp. pada metode kohabitasi (b). Jumlah telur dari Pseudorhabdosynochus spp. pada
metode kohabitasi (a) teramati sampai hari kedelapan pasca-kohabitasi  dengan  jumlah  tertinggi  pada  hari keenam yaitu 3,8 ± 0,7 telur/ikan. Pertambahan jumlah telur dari Pseudorhabdosynochus spp. pada metode kohabitasi  (b)  terlihat  meningkat  dan  mencapai puncaknya pada hari kedelapan pasca-kohabitasi (18,6 ± 3,8 telur/ikan), dan jumlahnya menurun di hari ke- 10  dan  15  pasca-kohabitasi.  Jumlah  telur  dari Pseudorhabdosynochus spp. pada penelitian ini lebih sedikit  dan  lebih  cepat  menurun  jumlahnya dibandingkan dengan penelitian sebelumnya dengan metode penempelan insang ikan sakit ke ikan sehat maupun metode kohabitasi (Mahardika et al., 2018). Hasil tersebut menunjukkan bahwa penyebaran dan perkembangan  jumlah  Pseudorhabdosynochus  spp. lebih cepat terjadi dengan kontak langsung antara ikan sakit dengan ikan sehat. Sebagian besar monogenea menyebar  melalui  telur  dan  larva  infektif  yang berenang bebas (oncomiracidia). Telur-telur monogea memiliki  pergerakan  yang  lambat  di  kolom  air  dan memungkinkan  dengan  mudah  terperangkap  dalam lendir  atau  bahan  organik  lainnya.  Ketika oncomiracidia  muncul  dari  telur,  mereka  dibawa  ke inang baru oleh arus air atau oleh gerakannya sendiri (Reed et al., 2012). Monogenea genus Gyrodactylus menyebar terutama melalui kontak langsung antara inang sakit ke inang sehat, meskipun parasit ini juga dapat menyerang inang baru dengan mengikuti arus air atau mengapung di permukaan air. Monogenea juga dapat tetap hidup dan infektif pada inang yang mati untuk  beberapa  hari.  Siklus  hidup  sederhana  ini mengindikasikan  bahwa  jumlah  monogenea  dapat berlipat ganda di lingkungan budidaya (Rubio-Godoy, 2007).

## Jumlah  Pseudorhabdosynochus  spp.  dan Telunya  per Lamela  Insang
Pertambahan jumlah Pseudorhabdosynochus spp. dari masing-masing lembar lamela insang juga terlihat sama pada kedua metode kohabitasi (Gambar 3). Hasil tersebut menunjukkan bahwa Pseudorhabdosynochus spp.  menginfeksi  lamela  insang  luar  sampai  dalam (lamela-1-4).  Menurut  Mahardika  et  al.  (2018), intensitas Pseudorhabdosynochus spp. lebih banyak berada pada lamela insang tengah (lamela-2 dan 3) dan lembar lamela insang dalam (lamela-4). Hal tersebut diduga  karena  Pseudorhabdosynochus  spp.  lebih nyaman berada dan menginfeksi lamela insang tengah dan  dalam.  Namun  demikian,  perbedaan  jumlah Pseudorhabdosynochus spp. per lembar lamela insang kemungkinan tergantung di mana Pseudorhabdosynochus spp. melekat untuk pertama kalinya  pada  lamela  insang  ikan  sehat. Pseudorhabdosynochus  spp.  dewasa  selanjutnya bertelur dan akan menambah jumlah
Ta b el 2 . Pe rk em b an g an j u m la h P se u d o rh ab d o sy n o ch u s sp p . d an t el u rn ya p ad a ik an k er ap u h ib ri d a “c an ti k” s el am a 1 5 h ar i p em el ih ar aa n p ad a d u a m et o d e ko h ab it as i
Ta b le 2 . D ev el o p m en t n u m b er o f P se u d o rh ab d o sy n o ch u s sp p . an d t h ei r eg g s in h yb ri d g ro u p er “ ca n ti k” f o r 1 5 d ay s in t w o e xp er im en ta l co h ab it at io n
m et h o d s
Pseudorhabdosynochus spp. generasi selanjutnya pada lembar lamela insang yang ditempatinya. Kebanyakan monogea  berukuran  kecil  (0,3-20  mm)  pada  ujung anterior tubuhnya memiliki prohaptor sebagai tempat masuknya makanan dan perekat ke lamela insang dari inang  (Rubio-Godoy,  2007).  Distribusi  monogenea, (termasuk Pseudorhabdosynochus) ke lembar lamela insang  tertentu  erat  kaitannya  dengan  perbedaan dalam kekuatan aliran air yang melewati setiap lembar lamela insang ikan (Gutiérrez & Martorelli, 1999). Lebih jauh  dilapokan  bahwa  luas  permukaan  insang  yang tersedia (ukuran lamela anterior/lamela-1 yang lebih besar) dan aliran air yang lebih besar di lamela tengah (lamela-2 dan 3) dapat memengaruhi pola distribusi monogenea.  Distribusi  dapat  pula  terjadi  melalui perpindahan parasit, walaupun monogenea tersebut relatif  tidak  bergerak  pada  lamela  insang  (Rubio- Godoy, 2007).
Hasil
pengamatan telur dari Pseudorhabdosynochus spp. pada metode kohabitasi (a) menunjukkan jumlahnya lebih banyak pada lembar lamela-1,  sedangkan  pada  metode  kohabitasi  (b), jumlah  telur  dari  Pseudorhabdosynochus  spp.  pada enam  hari  pertama  terlihat  lebih  banyak  pada  dua lembar lamela yaitu hari kedua pada lembar lamela-1 dan 2, hari keempat pada lembar lamela-1 dan 4, dan hari keenam pada lembar lamela-1 dan 3 (Gambar 4). Jumlah  telur  dari  Pseudorhabdosynochus  spp.  pada hari berikutnya yaitu hari kedelapan dan ke-10 teramati lebih banyak pada lembar lamela-3 dan 4. Demikian pula ketika jumlah telur dari Pseudorhabdosynochus spp. menurun pada kedua metode kohabitasi terlihat hanya  tersisa  pada  lembar  lamela-3  dan  4.  Pola keberadaan  telur  dari  Pseudorhabdosynochus  spp. tersebut  kemungkinan  mengikuti  pola  distribusi oncomiracidium ke dalam lamela insang, pada lembar
Gambar 3. Rata-rata jumlah Pseudorhabdosynochus spp. pada metode kohabitasi yang berbeda dari setiap lembar lamela insang ikan selama 15 hari pemeliharaan.
Figure  3. Average number of Pseudorhabdosynochus spp. at different cohabitation methods from each lamella sheet of test fish for 15 days observations. 0,0 20,0 40,0 60,0 2 4 6 8 `10 15 R at a- ra ta j u m la h
Ps eu d o rh ab d o sy n o ch u s sp p .
A ve ra g e n u m b er o f P se u d o rh ab d o sy n o ch u s sp p . Waktu pengamatan (hari) Observation (days) lamella 1 lamella 2 lamella 3 lamella 4 0,0 100,0 200,0 300,0 400,0 500,0 2 4 6 8 `10 15 R at a- ra ta j u m la h
Ps eu d o rh ab d o sy n o ch u s sp p .
A ve ra g e n u m b er o f Ps eu d o rh ab d o sy n o ch u s sp p . Waktu pengamatan (hari) Observation (days) lamella 1 lamella 2 lamella 3 lamella 4
Waktu pengamatan (hari) pada metode A Observation time (days) on A methode
Waktu pengamatan (hari) pada metode B Observation time (days) on B methode
lamela tertentu oncomeracidia berkembang dengan cepat  menjadi  dewasa  dan  bertelur.  Perkembangan cepat  dari  Pseudorhabdosynochus  spp.  ini  ditandai dengan  ditemukannya  telur  setelah  dua  hari  pasca- kohabitasi  dan  jumlah  telur  tersebut  dengan  cepat bertambah  seiring  bertambahnya  waktu  kohabitasi. Waktu yang diperlukan untuk perkembangan dari telur hingga menjadi monogenea dewasa tergantung suhu. Siklus hidup monogenea terjadi beberapa hari pada suhu  air  72°C-75°F  (22°C-25°C).  Siklus  hidup monogenea yang cepat ini dapat menyebabkan ledakan populasi dalam sistem akuakultur, yang mengakibatkan penyakit  klinis  (Reed  et  al.,  2012).  Lebih  jauh dilaporkan bahwa telur semua monogea tahan terhadap pengobatan, sehingga pengobatan ikan dan desinfeksi fasilitas budidaya  secara berulang  diperlukan untuk membunuh larva yang menetas.

## Histologi  Lamela Insang  yang  Terinfeksi
Pseudorhabdosynochus  spp.
Hasil pengamatan histopatologi lamela insang ikan kerapu  hibrida  “cantik”  pada  delapan  hari  pasca- kohabitasi  pada  metode  (a)  menunjukkan  adanya beberapa  Pseudorhabdosynochus  spp.  di  sela-sela filamen insang (Gambar 5a). Pseudorhabdosynochus spp.  terlihat  menempel  pada  epitel  inter-filamen dengan  episthaptor.  Filamen-filamen  dari  lamela sekunder  insang  di  sekitar  Pseudorhabdosynochus spp.  menunjukkan  bentuk  tak  beraturan.  Beberapa lembar filamen tampak menyatu (Gambar 5b). Semakin banyak  jumlah  Pseudorhabdosynochus  spp.  yang menginfeksi  lamela  insang  pada  10  hari  pasca- kohabitasi  dengan  metode  (b)  menyebabkan  fusi filamen  di  sekitar  Pseudorhabdosynochus  spp.  dan gangguan peredaran darah pada arteri filamen (Gambar
Gambar 4. Rata-rata  jumlah  telur  dari  Pseudorhabdosynochus  spp.  pada  metode kohabitasi yang berbeda dari setiap lembar lamela insang ikan selama 15 hari pemeliharaan.
Figure  4. Average number of Pseudorhabdosynochus spp. eggs in different cohabi- tation  methods  from  each  lamella  sheet  of  test  fish  for  15  days observations. 0,0 1,0 2,0 3,0 2 4 6 8 `10 15 R at a- ra ta j u m la h t el u r Ps eu d o rh ab d o sy n o ch u s sp p . A ve ra g e n u m b er o f eg g o f P se u d o rh ab d o sy n o ch u s sp p . Waktu pengamatan (hari) Observation (days) lamella 1 lamella 2 lamella 3 lamella 4 0,0 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 12,0 2 4 6 8 `10 15 R at a- ra ta j u m la h t el u r Ps eu d o rh ab d o sy n o ch u s sp p .
A ve ra g e n u m b er o f eg g o f P se u d o rh ab d o sy n o ch u s sp p . Waktu pengamatan (hari) Observation (days) lamella 1 lamella 2 lamella 3 lamella 4 Waktu pengamatan (hari) pada metode A Observation time (days) on A methode
Waktu pengamatan (hari) pada metode B Observation time (days) on B methode
5c).  Banyaknya  jumlah  Pseudorhabdosynochus  spp. menyebabkan  hyperplasia  epitel  dan  menyatu  satu dengan  lainnya  membentuk  fusi.  Hampir  semua filamen dari lamela sekunder menyatu, dan beberapa Pseudorhabdosynochus spp. tampak di sela-sela fusi filamen tersebut (Gambar 5d).
Kerusakan lamela sekunder insang seperti hyper- plasia,  edema  sub-epitel,  fusi  lamela  sekunder, nekrosis fokal, dan multifokal juga dilaporkan pada ikan  Piaractus  mesopotamicus  yang  diinfeksi  oleh monogenea  Dactylogyrus  (Jerônimo  et  al.,  2014). Infeksi  monogenea menyebabkan  kerusakan  insang seperti  kongesti,  pendarahan,  penyatuan  lamela sekunder,  dan  pelepasan  epitel.  Erosi  insang  dan sekresi  lender  berlebih  merupakan  penyebab
menurunnya  kesehatan  bahkan kematian  pada  ikan (Suliman  et  al.,  2021).  Luka  yang  ditimbulkan  oleh monogenea  dapat  memengaruhi  respons  inang, menyebabkan  nekrosis  multifokal.  Selain  itu,  dapat memicu respons inflamasi dengan migrasi trombosit, makrofag, limfosit, dan granulosit eosinofilik ke area hiperplasia sel epitel, sel goblet, dan sel klorida yang mengakibatkan terjadinya fusi lamela sekunder (Rio- Zaragoza et al., 2010; Jerônimo et al., 2014). Infeksi parasit  pada  insang  juga  dapat  menimbulkan proliferasi  ujung  bronkial,  pemendekan,  penipisan, dan fusi lamela insang. Penyatuan dan deskuamasi epitel fiamen  dari  lamela  sekunder  insang.  Peningkatan dinding epitel pernapasan dan kerusakan sel-sel pilar lamela  (Singh  &  Kaur,  2014).  Menurut  Reed  et  al.
Gambar 5. Irisan melintang dari lamela insang ikan kerapu hibrida “cantik”, (a) filamen dari lamela sekunder insang yang diinfestasi oleh beberapa Pseudorhabdosynochus spp. tampak tidak beraturan (tanda panah) (sb: 1.000 µm); (b) Pseudorhabdosynochus spp. terlihat menempel pada epitel inter-filamen dengan episthaptor (tanda panah) (sb: 700 µm); (c) lamela insang yang diinfeksi oleh Pseudorhabdosynochus spp. dalam jumlah  banyak  menyebabkan  terjadinya  fusi  filamen  dari  lamela sekunder  insang  (tanda  lingkaran)  (sb:  1.500  µm);  (d).
Pseudorhabdosynochus  spp.  terlihat  berada  di  sela-sela  lamela sekunder insang yang mengalami fusi (tanda lingkaran) (sb: 500 µm). Figure  5. Photomicrographs of gills lamella of parasitized fish, (a) gills lamella infested by some Pseudorhabdosynochus spp. causing the irregular shape  of  gill  filaments  (arrow)  (sb:  1,000  µm);  (b) Pseudorhabdosynochus spp. seen attached to the inter-filament epi- thelium  with episthaptor  (arrow) (sb:  700  µm); (c)  gill lamella  with heavy  infection  of  Pseudorhabdosynochus  spp.  show  filaments  fu- sion around Pseudorhabdosynochus spp. (oval round) (sb: 1,500 ¼m); (d) detail of figure c, heavy infection of Pseudorhabdosynochus spp. causing  multifocal  necrosis  and  bleeding  in  the  pillar  lamella  (oval round) (sb: 500 ¼m).
a                                      b

## c                                      d
(2012),  infestasi  monogenea  pada  lamela  insang menyebabkan  penyakit  pernapasan.  Lamela  insang menjadi  bengkak  dan  pucat,  laju  respirasi  dapat meningkat,  dan  ikan  akan  kurang  toleran  terhadap kondisi rendah oksigen. Ikan tampak berenang lemah di  permukaan  air.  Sejumlah  besar  monogenea  pada insang dapat menyebabkan kerusakan dan kematian yang signifikan.

## KESIMPULAN
Metode  kohabitasi  dengan  jarak  yang  dekat menghasilkan perkembangan populasi Pseudorhabdosynochus spp. dan telurnya pada insang ikan kerapu hibrida “cantik” yang lebih banyak selama 15  hari.  Lamela  insang  yang  terinfeksi Pseudorhabdosynochus spp. menunjukkan hyperpla- sia epitel sel filamen insang yang menimbulkan fusi. Kerusakan lamela insang menyebabkan terganggunya sistem pernapasan ikan kerapu.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada teknisi litkayasa  pada  Laboratorium  Patologi,  BBRBLPP, Gondol  yang  telah  membantu  dalam  pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR  ACUAN
Chaabane,  A.,  Neifar,  L.,  &  Justine,  J-L.  (2015). Pseudorhabdosynochus regius n. sp. (Monogenea, Diplectanidae)  from  the  mottled  grouper Mycteroperca rubra (Teleostei) in the Mediterra- nean Sea and Eastern Atlantic. Parasite, 22(9), 1- 10.
Chaabane, A., Neifar, L., Gey, D., & Justine, J-L.  (2016a). Species of  Pseudorhabdosynochus  (Monogenea, Diplectanidae) from Groupers (Mycteroperca spp., Epinephelidae) in the Mediterranean and Eastern Atlantic  Ocean,  with  special  reference  to  the ‘Beverleyburtonae Group’ and description of two new species. PLos One, 11(8), 1-24.
Chaabane, A., Justine, J-L., Gey, D., Bakenhaster, M.D.,
&  Neifar,  L.  (2016b).  Pseudorhabdosynochus sulamericanus (Monogenea, Diplectanidae), a para- site  of  deep-sea  groupers  (Serranidae)  occurs transatlantically  on  three  congeneric  hosts (Hyporthodus spp.), one from the Mediterranean Sea and two from the western Atlantic. Peer J., p. 1-27.
Dang, B.T., Bristow, G.A., Schander, C., & Berland, B.
(2013).
Three new
species of Pseudorhabdosynochus
(Monogenea:
Diplectanidae)  from  Vietnamese  grouper (Epinephelus  spp.)  (Perciformes:  Serranidae).  In- ternational  Journal  of  Aquatic  Science,  4(2), 44-58.
Grano-Maldonado,  M.I.,  Rodríguez-Santiago,  M.A., García-Vargas,  F.,  Nieves-Soto,  M.,  &  Soares,  F. (2018a).  An  emerging  infection  caused  by Gyrodactylus  cichlidarum  Paperna,  1968 (Monogenea:  Gyrodactylidae)  associated  with massive mortality on farmed tilapia Oreochromis niloticus  (L.)  on  the  Mexican  Pacific  coast.  Lat. Am. J. Aquat. Res., 46(5), 961-968.
Grano -Maldonado,  M.I.,  Moreno -Navas,  J.,  & Rodriguez-Santiago,  M.A.  (2018b).  Transmission strategies  used  by  Gyrodactylus  gasterostei (Monogenea) on its host, the three-spined stick- leback  Gasterosteus  aculeatus.  Fishes,  3(20),  1- 11.
Gutiérrez,  P.A. &  Martorelli.  S.R.  (1999). Niche  pref- erences and spatial distribution of Monogenea on the gills of Pimelodus maculatus in Rio de la Plata (Argentina). Parasitology, 119, 183-188.
Hutson, K.S., Brazenor, A.K., Vaughan, D.B., & Trujillo- González,  A.  (2018).  Monogenean  parasite  cul- tures:  Current  techniques  and  recent  advances. Advances in  Parasitology,  99(chapter three),  61- 97.
Jerônimo,  G.T.,  Pádua,  S.B.,  Bampi,  D.,  Gonçalves, E.L.T., Garcia, P., Ishikawa, M.M., & Martins, M.L. (2014).  Haematological  and  histopathological analysis  in  South  American  fish  Piaractus mesopotamicus  parasitized  by  monogenean (Dactylogyridae). Braz. J. Biol., 74(4), 1000-1006.
Justine,  J.-L.  (2005).  Pseudorhabdosynochus hirundineus  n.  sp.  (Monogenea:  Diplectanidae) from  Variola  louti  (Perciformes:  Serranidae)  off New Caledonia. Systematic Parasitology, 62, 39- 45.
Kritsky, D.C, Bakenhaster, M.D., & Adam, D.H. 2015. Pseudorhabdosynochus species (Monogenoidea, Diplectanidae) parasitizing groupers (Serranidae, Epinephelinae,  Epinephelini)  in  the  western  At- lantic  Ocean  and  adjacent  waters,  with  descrip- tions of 13 new species. Parasite, 22(24), 44.
Mahardika, K., Zafran, Yamamoto, A., & Miyazaki, T. (2015). The effect of crude recombinant viral pro- tein  vaccine  against  grouper  sleepy  disease iridovirus  (GSDIV)  on  humpback  grouper (Cromileptes  altivelis).  Indonesian  Aquaculture Journal, 10(2), 163-172.  http://dx.doi.org/10.15578/ iaj.10.2.2015.163-172.
Mahardika, K., Mastuti, I., & Zafran (2018). Intensitas parasit  insang  (trematoda  monogenea: Pseudorhabdosynochus  sp.)  pada  ikan  kerapu hibrida  melalui  infeksi  buatan.  Jurnal  Riset Akuakultur,  13(2),  169-177.http://dx.doi.org/ 10.15578/jra.13.2.2018.169-177.
Mahardika,  K.,  Mastuti,  I.,  &  Sutarmat,  T.  (2019). Kematian ikan kerapu hibrida cantik (kerapu macan >< kerapu batik) dan cantang (kerapu macan >< kerapu kertang) di keramba jaring apung di Teluk Kaping,  Buleleng-Bali  akibat  infeksi  ektoparasit. Jurnal Sains Teknologi Akuakultur, 3(1), 10-18.
Mahardika,  K.,  Mastuti,  I.,  Roza,  D.,  Syahidah,  D., Astuti,  N.W.W.,  Ismi,  S.,  &  Zafran  (2020). Pemantauan insidensi penyakit pada ikan kerapu dan  kakap  di  pembenihan  dan  keramba  jaring apung di Bali Utara. Jurnal Riset Akuakultur, 15(2), 89-102. http://dx.doi.org/10.15578/ jra.15.2.2020.89-102.
Ogawa, K. (2011). Significant and emerging parasitic diseases of finfish. p. 03-12. In Bondad-Reantaso, M.G., Jones, J.B., Corsin, F., & Aoki, T. (Eds.). Dis- eases in  Asian Aquaculture  VII.  Fish Health  Sec- tion, Asian Fisheries Society, Selangor, Malaysia. 385 pp.
Palm, H.W. (2011). Fish parasites as biological indica- tors in  a changing world:  Can we  monitor envi- ronmental  impact  and  climate  change?.  p.  223- 250. In Mehlhorn H. (Ed.). Progress in Parasitol- ogy. Parasitology Research Monographs 2.
Reed, P., Floyd, R.F., Klinger, R.E., & Petty, D. (2012).
Monogenean parasites of fish. Florida: University of Florida, F28, 1-10.
Rio-Zaragoza,  D.O.B.,  Fajer-Avila,  E.J.,  & Almazánrueda, P. (2010). Haematological and gill responses  to  an  experimental  infection  of dactylogyrid  monogeneans  on  the  spotted  rose snapper Lutjanus  guttatus  (Steindachner,  1869). Aquaculture and Research, 41(11), 1592-1601.
Rubio-Godoy, M. (2007). Fish host-monogenean para- site  interactions,  with  special  reference  to Polyopisthocotylea. Advances in the Immunobiology of Parasitic Diseases, p. 91-109.
Singh, S. & Kaur, P. (2014). Histology of gills of Labeo rohita and Hypophthalmichthys molitrix infested by monogenean and copepod parasites. Interna- tional  Journal  of  Fisheries  and  Aquatic  Studies, 1(6), 1-6.
Suliman, E.M., Osman, H.A., & Al-Deghayem, W.A-A. (2021).  Histopathological  changes  induced  by ectoparacites  on  gills  and  skin  of  Oreochromis niloticus (Burchell 1822) in fish ponds. Journal of Applied Biology & Biotechnology, 9(1), 68-74.
Zafran, Roza, D., & Mahardika, K. (2018). Prevalensi ektoparasit pada ikan budidaya di keramba jaring apung  di Teluk  Kaping,  Buleleng, Bali.  Prosiding Ikatan Sarjana Oseanologi Indonesia (ISOI), Ilmu &  Teknologi  Kelautan  untuk  Pembangunan Berkelanjutan.  Yogyakarta,  1-3  November  2018, hlm. 100-108.