由于新生组织蛋白质,多糖,色 素及酚类等杂质含量都很低,省去苯酚,氯仿抽提步骤,可在室温下进行,不使用液氮,对DNA质量要求不高时可使用此方法。提取液成分: 200mmolTris-Hcl(PH8.0) 250mmolNacl 25mmolEDTA (1)称取10mg 新生组织,置1.5mlEppendorf 管中,室温下用自制塑料小杆迅速研磨 成匀浆 (2)加入提取夜400ul,混匀后,12000rpm,离心5min (3)取上清300ul,转移置另一EP (4)加入等体积异丙醇,室温静置2min,12000rpm,离心5min(5)室温下开盖放置15min,异丙醇挥发 (6)加入20-100ul 重蒸水,使沉淀溶解,即得DNA粗提液 我这个方法只适合于新生组织,不知道在哪本书上看见的,我自己又改建了一下,如果 是新生组织,或是蛋白比较少的话,可以试一下,很简单 CTAB快速提DNA法溶剂:2*CTAB,酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),3M 的醋酸钠,无水乙醇 方法:取植物材料少量, 可用液氮冷冻, 没有的话不冻也可以, 材料粉碎后快速加入 CTAB100 微升,65 度3-5min,加入相同体积的酚氯仿,混匀,12000 转10 分钟,取上清至另一管 中(注意,一定不要带入酚氯仿,否则残留的酚会使TAQ 酶失活而导致PCR 结果假阴性),加入 十分之一体积的醋酸钠,再加入两倍体积的无水乙醇,冰上沉淀 10 分钟,离心,去上清,晾干或 DNA干燥仪干燥,加入水10-20 微升,取1-3 微升做PCR. 这种方法提取DNA比较稳定可靠,还有一个更快速的方法是碱提取法,直接用氢氧化钠, 但是我们试过不是很稳定,所以还用这个方法,也很快的.一次可以提几十个样没问题.