流式细胞仪是最常用的设备,文章里也会比较常见流式的结果,但流式结果怎么来分析呢?
四张图告诉你基本的流式结果分析方法!
DNA含量直方图
细胞中DNA的倍体变化,代表的细胞周期的变化,故可以用DNA含量直方图解释细胞周期的结果。哪块阴影部分面积大,就说明哪个细胞周期受到了阻滞,碎片面积大的话,就说明细胞凋亡增加了。
设门
细胞有着不同的参数,要使用不同的参数,可以将不同的细胞进行分类,设门就是这样使用双参数进行对细胞分群,将细胞中需要检测的细胞群区分出来,更有针对性地进行分析。图中X轴作为一种细胞参数,而Y轴作为另一种细胞参数进行区分,圈出的R1即为接下去进行分析的范围。通过立体图可更直观了解。
单标抗原表达直方图
单标抗原表达,主要用于研究处理前及处理后的抗原表达高低的百分比差异。
双标抗原分析
在单标的基础上会有较多双标抗原检测的流式分析,例如Annexin V/PI双染色(“抗原1”替换为AnnexinV荧光强度,“抗原2”替换为PI荧光强度)检测早期凋亡,单标和双标究竟有什么差异,下面这张图可以更直观地告诉你。如果下图为,Annexin V/PI双染色,右上象限标示的即为已死亡的细胞,可以与右下象限中早期凋亡的细胞区分开了,单标是无法区分的。
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