五、实验结果 序号 1 2 3 4 吸光值 ΔA/min 计算公式 计算结果 参考数值 六、注意事项 1.本液体试剂按IFCC推荐法为基础设计采用二步法可防止胆红素的干扰 2.试剂与样本量可按生化分析仪要求衡比例改变 3.本试剂线性可达到600 U/L30℃或1000 U/L37℃当样本中ALT活力超过600
U/L30℃或1000 U/L37℃时可用生理盐水稀释即0.1mL血清加0.2mL生理盐水测定结果×3 4.如试剂变混或以蒸馏水为空白工作液在340nm处吸光度1.0请勿使用 5.贮存条件与有效期试剂在2-8℃避光保存有效期为1年如用一步法工作液在2-8℃避光保存可稳定3周。 实验 检测SGPT活性在科学研究中的应用 一、基本原理 测定SGPT活性可反映出肝细胞的坏死程度因此是检测肝功能损坏的灵敏指标之一。很多有毒物质易引起肝损伤造成肝实质细胞的变性及坏死例如四氯化碳CCl4等化学药物可以诱发动物发生急性中毒性肝炎和肝坏死。因此建立由CCl4诱发病变的动物模型然后检测SGPT活性常被用于滋肝补肾中草药物的筛选研究。 二、应用实例 红缘层孔菌多糖对CCl4中毒小鼠转氨酶SGPT活性的影响。 将体重20-22g小白鼠随机分为三组每组10只。第1组为正常对照第2组为四氯化碳中毒对照组第3组为给药
组。 给药组以150mg/kg体重的剂量给小鼠灌胃红缘层孔菌多糖液每日一次连续给药7天其余两组灌胃同体积生理盐水。于末次给药后24h给药组、四氯化碳中毒对照组均按10mL/kg体重剂量腹腔注射0.1CCl4豆油溶液正常对照组注射同体积豆油16h后对三组小白鼠摘眼球取血制血清按King氏法测定谷丙转氨酶活性100mL血清与与基质液在37℃条件下作用60min每生成1μmol丙酮酸为1个活性单位。结果见下表 红缘层孔多菌多糖对CCl4中毒小鼠SGPT活性的影响 组别SGPTuM±SD P值 正常对照组 205±17 P≥0.05 CCl4中毒组 336±34 给药组 217±13 由表中数据可见红缘层孔多菌多糖可抑制由四氯化碳损伤肝细胞引起的小鼠血清谷丙转氨酶活性的升高。
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