三羟甲基氨基甲烷Tris,CAS是77-86-1,它是应用最广泛的缓冲液,其溶液呈弱碱性,25℃下的pKa为8.06,pH缓冲范围:7.0-9.0,广泛应用于生物化学、分子生物学、涂料等领域。
储存方法:Tris缓冲液容易吸收空气中的二氧化碳,储存时需要密封。
三羟甲基氨基甲烷盐酸Tris-HCl,CAS是1185-53-1,是Tris的盐酸盐形式,其溶液呈酸性。
Tris缓冲液表 - pH与温度的关系
3-吗啉丙磺酸MOPS,CAS是1132-61-2,是生物化学和分子生物学中常用的一种两性离子缓冲液,结构类似于 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES),同样属于1966年由Dr.Norman Good及其同事归类的“Good”缓冲液之一。MOPS 的有效 pH 缓冲范围为 6.5-7.9,pKa=7.2(25℃),其pKa 比MES(pKa=6.1)更接近生理 pH7.4,因此更适合用做生理相关的缓冲液,如用于哺乳动物细胞的培养(建议使用浓度应≤20 mM)、RNA 变性琼脂糖凝胶电泳实验(以20 mM 的浓度使用于甲醛凝胶效果较好)、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳实验等。MOPS会干扰Folin蛋白分析,含葡萄糖的MOPS溶液经高压灭菌会导致其部分失活。
粉末可于室温保存数年。不过一经静置,散装粉末可能聚集在一起,形成硬块,但是不会影响其化学性质。
储存方法:MOPS粉末可以室温稳定保存数年。长时间放置可能会结块,不影响其使用和化学性质。
注意事项:MOPS 缓冲液可于2~8℃保存至少 6 个月,用0.2 μm滤膜过滤除菌,不推荐高压灭菌。如需配制无核酸酶的MOPS 溶液,可先对水进行高压灭菌后,再加入粉末溶解。
4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES,CAS是7365-45-9,是可满足于所有生物学研究的最佳缓冲液之一,是一种两性离子有机化学缓冲液,和MES、MOPS一样都属于“Good”缓冲液。PH缓冲范围为6.8-8.2。
HEPES缓冲液常用于细胞培养的缓冲体系,常用工作浓度为10-25mM;与无机碳酸氢盐缓冲液相比,在组织或者器官培养中表现出更好的pH控制能力。它还用于等电聚焦电泳实验。用作电镜观察蛋白沉积技术合适的缓冲体系,它不会对金属基板造成负面影响。用作定量和选择性测定抗原-抗体反应的缓冲液,不适合用在福林酚蛋白测定,但不会影响Biuret蛋白定量分析。
储存方法:HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。
注意事项:HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻,否则会有盐类物质析出。
N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine,CAS是5704-04-1,是一种两性离子缓冲液,名字由Tris和glycine衍生而来,结构类似于Tris,但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性,也是“Good”缓冲液之一,最初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8,pKa=8.1(25 ℃),常用做电泳缓冲液,以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性,非常适用于电泳分离1~100 kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中,比较10种常见的缓冲液,Tricine(25 mM)表现出最好的检测效果。另外,在自由基诱导的膜损伤实验中,Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。