产品简介:
EB染色液是EB的水溶液,浓度为10mg/ml。EB(溴化乙锭)能与核酸分子特异结合,用于观察琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中DNA或RNA分子。广泛应用于核酸电泳前后的染色以及流式细胞仪的样品染色处理等。溴化乙锭(Ethidium Bromide;C21H20N3Br;分子量为394.32)含有一个可以嵌入DNA 碱基的三环平面基团。它与DNA 的结合没有碱基序列特异性。大约每2.5 个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,紫外激发后呈现荧光,可以检测到10ng 的DNA 条带。
保存条件:
室温避光保存。
注意事项:
EB有一定毒性,使用时请使用一次性手套操作,注意防护!
使用说明:
使用前,先离心快甩EB溶液至管底,以防开盖后EB造成的污染。
琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(预染法):
1.按照所需浓度称取琼脂糖,加入TAE或TBE缓冲液,在微波炉中加热至彻底溶解。
2.等凝胶温度降至大约50-60℃以下时,加入10 mg/ml EB溶液至终浓度为0.5μg/ml (如100ml凝胶加入EB量为5μl);彻底摇匀后铺胶并插入梳子。
3.凝固后,将梳子轻轻拔出。
4.上样电泳,电泳结束后紫外观察。
琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(后染法):
1.按照所需浓度称取琼脂糖,加入TAE或TBE缓冲液,在微波炉中加热至彻底溶解。
2.等凝胶温度降至大约50-60℃以下时,不要加入EB溶液,直接铺胶并插入梳子。
3.凝固后,将梳子轻轻拔出。
4.上样电泳。
5.电泳结束后将凝胶浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中(染色液配制:100ml 缓冲液中加入150-200 μl EB溶液,混匀)染色15-20分钟;TAE或TBE缓冲液中脱色10-15分钟。
6.紫外观察结果。