1、 薄层层析: 原理; 定性和定量分析时的区别。 2、 VC 测定原理; 加入活性炭的目的? 实验所用的活性炭进行预处理的目的是什么? 应该怎样进行预处理? 怎样检测预处理是否成功? 加入草酸和硫脲的目的? 加入硫酸的目的? 加入硫酸时操作过程中需注意的问题? 为什么加硫酸 30min 后方可比色? 3、 分光光度计的结构, 使用。 4、 标准曲线的制作。 校准曲线分两种: 工作曲线和标准曲线 工作曲线即曲线和样品的测定步骤完全一样, 即需要预处理。 标准曲线与样品的测定步骤不一样, 即不需要做预处理。 使用校准曲线时的一些注意事项: (1 ) 校准曲线包括“标准曲线”和“工作曲线”。 应用标准溶液制作校准曲线时, 如果分析步骤与样品的分析步骤相比有某些省略时, 则制作的校准曲线称为标准曲线。 如果模拟被分析物质的成分, 并与样品完全相同的分析处理, 然后绘制的校准曲线称为工作曲线。 因此, 如果基体效应对分析方法至关重要时, 应使用含有与实际样品类似基体的标准溶液系列进行校准曲线的绘制。 如有可能, 也可用与试样成分相近的标准参考物质制作校准曲线。 (2) 校准曲线的点数: 光谱分析中, 一般至少为 3 个点(不包括空白), 在新版的《全国疾病预防规范》 中, 新方法的研制要求校准曲线至少 5 个点(不包括空白)。 因此, 日常工作中, 校准曲线应选择 3~5 个点(不包括空白)。 (3) 校准曲线的各点应尽量等距离分布在曲线上, 最低点与最高点相差约一个数量级。 (4) 当样品中基体不明或基体浓度很高、 变化大, 很难配制相类似的标准溶液时, 应使用标准加入法。 5、 参比溶液又称空白溶液。 在分光光度测定中, 常使用参比溶液, 其作用不仅是调节仪器的零点, 还可以消除由于比色杯、 溶剂、 试剂、 样品基底和其他组分对于入射光的反射和吸收所带来的影响。 因此, 正确选用参比溶液, 对提高分析的正确性有重要的作用。 选择参比溶液的一般原则如下。 (1) 如果试液和显色剂均无色, 可用蒸馏水作参比溶液。 (2) 如果显色剂或其他试剂是有色的, 应选用试剂(不加试液) 作参比溶液。 (3) 如果显色剂为无色, 而被测试液中存在其他有色离子, 可采用不加显色剂的被测试液作参比溶液。 (4) 如果显色剂和被测试液均有颜色, 则应采用褪色参比。 即在一份试液中, 加入适当的掩蔽剂, 以掩蔽被测组分, 使它不再与显色剂作用, 而显色剂及其试剂均仍按试液测定方法加入作为参比溶液来消除干扰。 6、 介绍几种常用空白溶液。 a.溶剂空白: 当溶液中只有待测化合物在测定波长下有吸收, 试剂(包括显色剂) 和样品中其他成分均无吸收时, 可用溶剂作空白溶液, 简称溶剂空白。 b.试剂空白: 如果除被测组分外只有显色剂在测定波长下对光有吸收, 而其他均没有或吸收很小时, 可按照与显色反应相同的条件(不加样品), 同样加入各种试剂和溶剂作为空白溶液, 称为试剂空白。 c.平行操作空白: 用不含待测组分的样品, 按照与样品分析相同的条件与样品平行操作,称为平行操作空白。 这种空白常被当作一个样品来处理, 分析结果应从样品值中减去该空白值。 d.样品空白: 按照与显色反应相同的条件, 取同样重的样品溶液, 但不加显色剂, 这种空白溶液称为样品空白。 适用于样品有底色, 而显色剂无色的情况。