1.认识酵母菌的个体形态及死活鉴别; 2.掌握好插片法观察放线菌形态的具体操作方法, 认识放线菌个体形态及无性孢子; 3.掌握细菌运动性。 用美蓝染色液制成水浸片,来对酵母菌进行死 活染色鉴别。美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型 是蓝色的,而还原型是无色的,用它来对酵母菌进 行染色时,由于活的酵母细胞体内不断进行新陈代 谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,而在酵 母细胞内能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原 型,所以染色后酵母的活细胞无色;而对于死细胞 或新陈代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力 或还原能力极弱,而被美蓝染成兰色或淡兰色。 放线菌为单细胞的分枝丝状体,其一部分菌丝伸入培养 基中为基内菌丝,另一部分生长在培养基表面称气生菌丝,气 生菌丝的顶端分化为孢子丝,孢子丝星螺旋状,渡浪状或直线 状等。孢子丝可产生成串或单个的分生孢子。孢子丝及分生孢 子的形状、大小因随放线菌种不同而异,是放线菌分类的重要 依据之一。培养放线菌的方法最常用的有插片法、搭片法、载 片培养法,本实验采用插片法来观察放线菌的形态特征。 鞭毛是细菌的运动器官,有鞭毛的细菌在水中能定向地 由一个地方较快速地游到另一个地方。因而采用水浸片法、悬 滴法、半固体培养法和暗视野显微镜法等可观察到鞭毛细菌的 运动状况,从而得知该细菌有否鞭毛。 器材:无菌平皿、接种环、酒精灯、火柴、恒温培养箱,显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸。 2.培养基:灭菌麦芽汁琼脂培养基(三角瓶装),无 菌马铃薯蔗糖琼脂培养基、营养琼脂培养基。 3.试剂及染色液:美蓝染色液、石炭酸复红染色液、 结晶紫染色液、蒸馏水。 4.菌种:啤酒酵母、“5406”链霉菌、枯草芽孢细 酵母菌个体形态观察(水浸片法)在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水,按无 菌操作要求,用接种环在上述培养的平皿表面挑 取少许被试酵母菌培养物于蒸馏水中混匀,使呈 轻度混浊。加盖一块洁净盖玻片,注意切勿产生 气泡,制成水浸片(用滤纸吸干多余水分),稍静 置后,放在显微镜高倍物镜下观察酵母菌的个体 形状,大小及出芽情况等..\视频\酵母菌[1].flv。 2.酵母菌死活细胞鉴别及繁殖方式观察 在干净的载玻片中央滴加一滴吕氏美蓝染色 液,按无菌操作要求,用接种环挑取少许酿酒酵 母培养物于美蓝染色液中混匀,加盖一块洁净的 盖玻片,注意不要产生气泡,在高倍镜下观察鉴 别酵母细胞