2 01 3年第 三 届 长 三 角 地 区 病 理技 术 新 进展 研讨会 暨 浙江省 第 八 次 病 理技术会议迩三、讨论脂 肪 组 织 由于 自 身 的 组织结 构 特 点,是 冷冻 切片的 难 点,要 做好 脂肪 组 织 的 冷冻 切 片,需要把 握好 以 下 几 个 要 点。1.迅 速 冷冻把握最佳 切 片 温度。脂 肪 组 织 的 冷冻 时间 相 对较长些有利于 切 片,一 般 将 组 织 块放 入一1 % ℃ 的 液氮罐 内 30 一书 O 秒使组 织急速 冷 冻 ( 一 般 组 织 15 一 2 0 秒 即 可 ),这 样组织 块 比 较 坚硬,能 保证 切 片完整成形。而 冷 冻时 间不 够 的 话 组 织块 比 较软,往往 造成 切 片 皱 褶、不 完整,甚 至 缩成一 堆 油。如 果 冷冻 时 间 过长,组 织 温 度 过低,切 片时 呈 粉 末 状,则用手轻 压 组织块 周 围 的 胶 水部分回 温,再 行切 片。2.把 握 合适 的切 片厚度。一 般 的 组织切片厚 度 为7 u m左 右,但 脂肪 组 织在 一 般厚度 下切 出 来 的 片子 往往组织 缺 损 不 完整,经过我 们 反 复摸 索发 现 切片厚 度在 2 0一 2 5u m的 情况 下 能 切 出 较 完整 的 脂肪 组织 切 片。3.及 时固定,防 止 切 片脱落。切 片后应立 即浸 入 9 5 % 酒 精固定,在 空 气 中停 留过 久 会造 成细 胞核染色 不 清晰、细 胞退变等现象。固定后水 洗时 不 能直接流水冲 洗,以 免 组 织脱片,必 要时可使 用 免疫组 化防脱载玻片 进 行贴片。封 片 过 程 中树胶 量 适中,避免封入气 泡,切 忌 推拉造成 组 织挤压、划痕等现 象。脂 肪 组 织的 冷 冻 切片 向来是病 理 技术 工 作 的难点,国 内有关脂肪 组 织冷冻 切 片制作方面的 文 献 不多,有的 用 加热 去 脂滴方法制作,有的用 两张 玻片 平行覆盖 压 片 方法 制作。比 较 已 有 的 少量有关 脂 肪冷 冻 切 片的 报道,我们 的方法 有 以下 优 点:( 1 )组 织结构更加清 晰。( 2 ) 方 法 简 单易操作。( 3 )用 液氮冷 冻节约 冷 冻 时间。总 之,要 制作 出 一 张 高质 量的 脂 肪 组 织 冷 冻 切 片,必