内源性凝血途径 ? 定义:参与凝血的因子全部来自血液。 ? 表面激活:血液与带负电荷的异物表面 接触而启动凝血的过程。 凝血使动因子为 Ⅻ 1、静脉采血 2、活化部分凝血活酶时间测定(APTT) ? ? 【实验原理】 在抗凝血中,加入足够量的活化接触因子激活剂( 如白陶土)和部分凝血活酶(代替血小板的磷脂) ,再加入适量的钙离子即可满足内源凝血的全部条 件。从加入钙离子到血浆凝固所需的时间即称为活 化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)。 APTT的长短反映了血浆中内源凝血系统凝血 因子(Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ)、共同途径中凝血 酶原、纤维蛋白原和因子Ⅴ、Ⅹ的水平。 ? 本试验是目前最常用的检查内源凝血系统敏 感的筛选试验。 ? 【试剂】 ? 1.受检血浆 以0.109mol/L枸橼酸钠溶液1:9 抗凝,3000r/min,离心5~10min,获贫血小 板血浆。 ? 2.4%白陶土-脑磷脂悬液(同ACT)。 ? 3.0.025mol/L氯化钙溶液。 ? 【操作方法】 ? 1.受检血浆、白陶土-脑磷脂悬液各0.1ml, 混匀,37οC水浴3min,其间轻轻振摇数次。 ? 2.加入0.025mol/L氯化钙溶液0.1ml,立即 启动秒表,不停振摇并观察出现纤维蛋白丝 的时间。重复2次,取平均值,同时作正常对 照。 ? 【参考值】 ? 男性:37±3.3(31.5~43.5)s。 ? 女性:37.5±2.8(32~43)s。 ? 受检者的测定值较正常对照延长超过10s以上 才有病理意义。 ? ? ? ? ? 【质量控制】 1.抗凝剂与血液的比例要准确。 2.标本放置不宜超过3h,温育时间不宜少于3min。 3.分离血浆时,离心速度和时间要够,务必除去血小板, 特别是用于肝素治疗监测时。 4.若正常对照延长,应重新配制试剂。 5.APTT测定因所用的激活剂不同,以及部分凝血活酶来源 及制备的不同,均可影响测定结果。 6.用自动血液凝固仪测定APTT,可提高检测速度和结果精 确性,但仪器本身也会产生一定误差, 1995年国际血栓与 止血委员会(International Committee of Thrombosis and Haemostasis,ICTH)和ICSH已开始合作研究应用APTT监 测肝素治疗时的标准化问题。 ? ? ? ? ? 【临床意义】 基本与凝血时间意义相同,但敏感性高。