向被检测者解释本操作的目的、方法等,消除顾虑;一般选取静脉血进行检测,采血前一天应清淡饮食、晚8点后避免进食和剧烈运动、避免饮酒以免影响结果,采血时避免情绪紧张。 1.免疫组织化学染色法 (1)免疫荧光显微技术:使荧光抗体与标本切片中细胞表面的CD4进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,在荧光显微镜下观察。 (2)免疫金银染色技术:利用胶体金标记CD4对应的特异性抗体,通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置,加入银显影液,用对苯二酚将银离子还原成银原子,被还原的银原子沉积在胶体金颗粒周围形成“银壳”,最终在光镜下就能看到被放大的黑褐色物质。易于辨别阳性物质,而且能检测微量的抗原。 2.流式细胞术 利用荧光素标记的CD4对应的单克隆抗体做分子探针,在流式细胞仪上检测CD4的表达,计数CD4阳性细胞的百分率。 使用免疫荧光法测定的正常值参考范围为55%~65%。