庆大霉素属氨基糖苷类抗生素,无特征紫外吸收,不适合紫外检测。硫酸庆大霉素片含有淀粉、硬脂酸镁、蔗糖和糊精等众多辅料,采用蒸发光散射检测器检测时,易污染该检测器的喷雾嘴和漂移管,导致背景噪音增加,灵敏度降低,需要清洗检测器。本文在参考国外药典离子色谱法测定硫酸庆大霉素原料的基础上,建立了离子色谱测定硫酸庆大霉素片的C组分及有关物质的方法,并对11个企业共156批硫酸庆大霉素片进行了C组分及有关物质的测定。该方法准确,重复性好,灵敏度高,可为硫酸庆大霉素片的质量控制提供参考。
1 仪器与试药
DIONEX ISC-5000+离子色谱仪(泵:ICS 5000 DP;进样器:DIONEX AS-AP;柱温箱:ICS 5000 DC;安培检测器:ICS 5000 ED;Chromeleon 6.8色谱工作站;Thermo公司),ThermoAcclaimTMAmG C18(4.6 mm×150 mm,3 μ m;填料:十八烷基硅烷键合硅胶;Thermo公司);Sartorius BP211D电子天平(Sartorius公司);Millpore去离子水发生装置(Merck Millipore公司);Orion Star pH计(Thermo公司)。
对照品硫酸庆大霉素(批号130635-201301,含量为C114.7%,C1a15.3%,C2a8.5%,C218.5%)、西索米星(批号130635-201301,含量56.0%)、小诺霉素(批号130342-201404,含量51.8%)均购自中国食品药品检定研究院;156批硫酸庆大霉素片分别来自11家企业,其中12批素片,27批薄膜衣片,117批糖衣片,规格均为40 mg;三氟乙酸、五氟丙酸及乙腈均为色谱纯,50%氢氧化钠溶液为优级纯,水为Mill-Q去离子水。
2 方法 2.1 色谱条件
采用ThermoAcclaimTMAmG C18(4.6 mm×150 mm,3 μ m)色谱柱,流动相为0.7%三氟乙酸(含0.025%五氟丙酸,50%氢氧化钠4 mL,用50%氢氧化钠溶液调节pH至2.6)-乙腈(96.5:3.5),流速1.0 mL·min-1,柱后溶液为2%的氢氧化钠溶液,柱后流速为0.3 mL·min-1;脉冲安培电化学检测器,工作电极为金电极(直径3 mm),参比电极为Ag-AgC