不需添 加任何抗凝剂或进行预处理。避免使用溶血标本,脂质标本或微生物污染的血清。 室温(20-25℃)下保存标本不要超过 8 小时。2-10℃保存血清,不超过 48 小时。 如耽搁的时间更长,请在-20℃或更低的温度下保存标本。标本避免多次冻融,这样 可能会损失抗体活性,产生错误结果。 准备工作: 提前 20 分钟重建标准品:每瓶标准品加入 1ml 双蒸水,轻轻混匀。 操作步骤: 试剂盒应平衡至室温再试验。 取出所需反应板。 1. 分别加入 100ul 标准品(Standards)、100ul 血清于反应板孔中。 2. 每孔加入 100ul 酶联物。轻轻混匀 30 秒。室温温育 90 分钟。 3. 洗板:甩尽板内液体,用蒸馏水或者洗涤液(普通洗涤液,自配)洗涤反应板,并 去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干);这样反复洗涤 5 次。 4. 每孔加入 100ulTMB 显色液,轻轻混匀 10 秒钟,室温温育 20 分钟。 5. 每孔加入 100ul 终止液(Stop Solution)。轻轻混匀 30 秒;确定兰色变为黄色(重 要!)。15 分钟内在 450nm 处读 OD 值。 以 OD 值为纵坐标,以标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。根据血清样品的 OD 值可在 标准曲线上查出其浓度。 举例: cTnI (ng/ml) 0 2.0 7.5 30 75 3 Absorbance (450 nm) 0.048 0.110 0.307 1.357 2.853 Absorbance (450nm) 2.5 2 1.5 1 0.5 0 0 20 40 60 80 Troponin I Conc. (ng/ml) 预期值: Cutoff: 1.5ng/ml 本试剂盒的灵敏度:0.5ng/ml。