·中药与天然药物· 江苏药学与临床研究 2004 年第 12 卷第 3 期 水提法与醇提法对骨碎补中总黄酮含量的影响比较 张 琳 杨中林 中国药科大学 (南京 210009) 摘 要 :目的 考察水提法及醇提法对骨碎补中总黄酮含量的影响 。方法 采用 752 分光光度法测定样品中总黄酮的含 量 ,以便比较不同提取方法对总黄酮提出量的影响 。结论 用水提取骨碎补中总黄酮含量与醇提法相差不多 ,从经济实用的 角度出发 ,宜采用水提法 。 关键词 :骨碎补 ;总黄酮 ;提取方法 中图分类号 R927. 2 文献标识码 A 文章编号 100072306 (2004) 03230202 骨碎补是较常用中药 ,具有补肾强骨 、养伤止痛 之功效 。用于肾虚腰痛 、耳鸣耳聋 、牙齿松动 、跌扑 闪挫 、筋骨伤折等症[1 ] 。据文献报道[2 ,3 ] 其活性成 分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物 。长期以来人们习 惯以水为溶媒煎煮汤方 ,为考察骨碎补之水提法 、醇 提法何种更为合理 ,我们用分光光度法测定了两种 提取方法对生品骨碎补 、砂烫骨碎补中总黄酮含量 的影响 ,以期找到合理经济的提取方法 。 A = 010381C - 010472 , r = 019991 ,线性范围为 419~ 2914μg/ ml1 212 加样回收率试验 精密称取柚皮苷标准品 320 mg ,置 10 ml 容量 瓶中 ,甲醇定容至刻度 ,作为对照品溶液 。精密称取 5 份已知含量的生品骨碎补粉末 015 g ( 含柚皮苷 12146 mg) ,分别加入对照品溶液 015 ml ,按照样品测 定方法操作 ,计算回收率 ,结果见表 1 。 1 实验材料 111 仪 器 752 紫外光栅分光光度计 (上海第三分析仪器 厂) ;LA204 型电子天平 (常熟市衡器厂) 。 112 药 品 骨碎补 (购于本草药店 ,经本校专家鉴定确认为 水龙骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei ( Kunze) J 1Sm1 的干燥根茎 ; 柚皮苷 (中国药品生物制品检定所) ; 95 %乙醇 、甲醇均为 AR 级 。 113 炮制品 生品骨碎补 、砂烫骨碎补 ,均按《中国药典》一部 方法制备[1 ] 。 2 方法与结果 211 标准曲线制备 精密称取柚皮苷标准品 419 mg ,置 50 ml 容量 瓶中 ,以甲醇定容至刻度 ; 分别吸取 015 、110 、115 、 210 、215 、310 ml 置于 10 ml 容量瓶中 ,分别以甲醇定 容至刻度 。以甲醇为空白 ,在 283 nm 处测定吸收 度 ,以吸收值 ( A) 为纵坐标 ,浓度 ( C) 为横坐标 ,绘制 标准曲线 。将所得数据进行统计处理 ,得回归方程 : ·30 · 表 1 骨碎补样品中柚皮苷的回收率测定结果 加入量 (mg) 16 16 16 16 16 测得量 (mg) 28143 28189 28143 28103 28110 回收率 ( %) 99113 101163 99119 96150 96181 平均回收率 RSD ( %) ( %) 98165 2109 213 样品溶液制备方法 21311 乙醇提取骨碎补液的制备 采用醇提方法制备醇提样品待测液[4] ,即将生 品骨碎补及砂烫品粗粉于 80 ℃干燥 8 h ,各精密称 取 110 g ,分别置索氏提取器中 ,用 95 %乙醇 80 ml 回流提取 12 h (直至提取液检测无黄酮反应) ,回收 乙醇 , 残渣以甲醇溶解 , 滤过后以甲醇定容至 100 ml ,精密吸取 1 ml ,置于 25 ml 容量瓶中 ,甲醇定容至 刻度 ,此为乙醇提取待测液 。 21312 水提取骨碎补液的制备 为了寻找水提取的最佳方法 ,以便与醇提法进 行比较 ,采用正交设计法对砂烫骨碎补之水煎煮次 数 、煎煮时间及加水倍数等不同因素的相关水平进 行筛选 ,其筛选的各因素水平设计见表 2 、表 3 。 江苏药学与临床研究 2004 年第 12 卷第 3 期 为了验证筛选出的最佳因素是否正确合理 ,对 筛选结果进行了验证 。