摸转膜时间是个很费时间的事情 建议大家贴出自己所做蛋白的分子量和时间以供后来者参考
如p53基因 长度 53 100A 60mins
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湿转
histone and HP1 10-30kD 90min 200mA
gst-set8 50-100kD 120min 200mA
hyuu
GAPDH 分子量 40左右,200ma,2h
zbboom
我发现 大家都可以用到 200ma ,
b-actin 43kd 100ma 1h
nn255
主要是湿转和半干转条件本身就不同吧。大家应该注明自己是湿转还是半干转这样才有参考价值。
湿转, 40kd 200mA 1h45'or 180mA 3h
110kd 200mA 2h30'
49888
260KD,300mA 2h
zhihui小新
1、湿转(恒压):时间是90min,电压根据胶的厚度调整,具体为0.75mm—80V,1mm—90V,1.5mm—100V;
2、半干转(恒流):时间30min,电流根据有效转膜面积调整,即电流=2.5mA*有效转膜面积,计算后所得的值稍微减去一些:减去0-5mA(面积小的话就少减一些,面积大的话就多减去一些)
本人所用的是BIO-RAD的仪器,做的分子量范围12-170,在同一块10%的胶上同时转过20和130的分子,6%-15%的胶转膜效率也均较高
fox_79
17kd-170kd, iBlot Dry Blotting system, invitrogen, 8-10min
xueyouzhang
50KD左右
250mA 1h
coolcool
湿转
27Kda-110Kda
100V,60min.
remonte
楼主的提议太棒了.
我希望知道120KD的湿转条件!!谢谢
我分享一下自己的实验体会:40-70KD 40v 3h
转得很好
sunnyB
半干转 伯乐
110kd 25v 30分钟
kuohao17
湿转 Biorad
40-120 KD
300V,1h
dongdongqiang
本人