糖类的提取与澄清属于公共营养师考试二级中的知识点。
一、提取
常用溶剂有:水和乙醇,在提取糖类时,先将样品磨碎浸泡成溶液,若有脂肪的样品用石油醚提取,撤去其中的脂肪和叶绿素。
1.水作提取剂
用水作提取剂,温度控制在45-50℃,利用水作提取剂时,还有pro、氨基酸、多糖、色素干扰,影响过滤时间,所以用水作提取剂应注意:
1)温度过高:是可溶性淀粉及糊精提取出来 。
2)酸性样品:酸性使糖水解(转化),所以酸性样品用碳酸钙中和,提取但应控制在中性。
3)萃取的液体:有酶活性时,同样是使糖水解,加二氯化汞可防止(二氯化汞可抑制酶活性) 。
2. 乙醇(水溶液)作提取液
乙醇作提取液适用于含酶多的样品 ,这样避免唐被水解。乙醇的浓度70-80%。浓度过高,糖溶在乙醇中,用乙醇的目的,降低酶的作用,避免糖被酶水解。
二、澄清剂
1. 作用:
使沉淀一些干扰物质,是提取液清亮透明,达到准确的测量糖类。(常用澄清剂来澄清) 。
2.对澄清剂的要求:
1)除干扰物质完全,不吸附被侧物质糖
2)过量澄清剂不影响糖的测量
3)沉淀颗粒要小,操作简便
4)不改变糖类的比旋光度及理化性质
3.实验室常用的澄清剂
1)中性醋酸铅:适用于植物性的萃取液,它可除去蛋白质、丹宁、有机酸、果胶。
缺点:脱色力差,不能用于深色糖液的澄清,否则加活性炭处理。
2)碱性醋酸铅
适用深色的蔗糖溶液,可除色素,有机酸,蛋白质。
缺点:沉淀颗粒大,可带走果糖。
(3)醋酸锌和亚铁氰化钾
用于富含蛋白质的提取液,常用于沉淀蛋白质,对乳制品最理想。主要是生成的亚铁氰酸锌(白色沉淀)与蛋白质共同沉淀。所以使动物性样品的沉淀剂。
(4)AL(OH)3乳剂是辅助澄清剂。
(5)CuSO4-NaOH这种澄清剂用于牛乳等样品。
4.澄清剂的用量。
以上的澄清剂用于较少的中性硅酸铝和硅酸锌和亚铁氰化钾。在一般操作时,加澄清剂量多少一定要恰当,用量太少,达不到澄清的目的,用量太多使分析结果产生误差,不同的物质,因干扰物质种类和含量的不同,所以添加量也不同。过量以后,糖液中有Zn2+, Pb2+, 等。
过量的Pb+还原糖(果糖)生成铅糖。这样使测得