3.1 杂菌目标菌以外的菌视为杂菌。4 产品分类和代号产品分类和代号见表 1。表 1 产品分类和代号通用名称 商品名称 适用动物 Q/370125HEK 001-2018混合型饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 益太康 养殖动物混合型饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 益肽康 牛、羊混合型饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 益生泰 畜禽混合型饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 益奶安 奶牛混合型饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 益菌康 畜禽混合型饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 常康泰 畜禽混合型饲料添加剂 枯草芽孢杆菌 卫常清 畜禽5 要求5.1 感官指标浅灰色至灰色粉末,无变质、结块及异味、异嗅。5.2 水分不高于 12%。5.3 粉碎粒度全部通过 0.9mm 分析筛,0.45mm 分析筛筛上物不大于 10%。5.4 卫生指标卫生指标见表 2。表 2 卫生指标项目 指标黄曲霉素 B 1 ,µg/kg ≤ 10.0砷(以总砷计),mg/kg ≤ 2.0铅(以 Pb 计),mg/kg ≤ 5.0氟(以 F 计),mg/kg ≤ 800汞(以 Hg 计,mg/kg ≤ 0.1镉(以 Cd 计),mg/kg ≤ 0.5杂菌率,% ≤ 1.0大肠菌群,个/kg ≤ 1.0×105霉菌总数,个/kg < 2.0×107沙门氏菌(25 克) 不得检出致病菌 (肠道致病菌及致病性球菌) 不得检出5.5 技术指标技术指标见表 3。表 3 技术指标商品名称枯草芽孢杆菌,CFU/g ≥益太康 1.00×108益肽康 2.00×108益生泰 3.00×108益奶安 4.00×108益菌康 5.00×108 Q/370125HEK 001-2018常康泰 6.00×108卫常清 1.00×1095.6 净含量符合标签标注,偏差符合《定量包装商品计量监督管理办法》的规定。6 抽样6.1 组批原料不变,同一配方、同一工艺、同一生产日连续生产的产品为一个批次。6.2 采样按照 GB/T 14699.1 的规定执行。7 试验方法7.1 感官指标将样品放置在白瓷盘内,在非直射日光、光线充足、无异味的环境中,用眼观的方法观察其色泽、是否有霉变、结块。用鼻嗅的方法检查其气味。7.2 水分按 GB/T 6435 的规定执行。7.3 粉碎粒度按 GB/T 5917.1 的规定执行。7.4 砷方法一:按 GB/T 13079 规定执行(仲裁法)方法二:按《中华人民共和国兽药典》的规定执行。7.5 铅按 GB/T 13080 的规定执行。7.6 汞按 GB/T 13081 的规定执行。7.7 镉按 GB/T 13082 的规定执行。7.8 氟按 GB/T 13083 的规定执行。7.9 黄曲霉毒素 B 1按 GB/T 17480 的规定执行。7.10 大肠菌群 Q/370125HEK 001-2018按 GB 4789.3 的规定执行。7.11 霉菌总数按 GB/T 13092 的规定执行。7.12 沙门氏菌按 GB/T 13091 的规定执行。7.13 志贺氏菌按 GB 4789.5 的规定执行。7.14 金黄色葡萄球菌按 GB 4789.10 的规定执行。7.15 枯草芽孢杆菌按附录 A 的规定执行。7.16 净含量按 JJF 1070 的规定执行。8 检验规则8.1 检验分类检验分为出厂检验和型式检验。8.2 出厂检验8.2.1 混合型饲料添加剂枯草芽孢杆菌出厂检验项目为感官指标、水分、粉碎粒度、枯草芽孢杆菌活菌数。8.2.2 检验由本企业化验室进行。8.2.3 检验合格的,签发“产品质量检验合格证”。8.3 型式检验8.3.1 型式检验项目为本标准“要求”中的全部项目。8.3.2 型式检验每年至少进行一次。有下列情况之一必须进行型式检验:a) 主要原料变化及配方有较大改变,可能影响产品性能时;b) 工艺变化、设备改造后;c) 停产 6 个月以上,重新恢复生产时;d) 行业主管部门提出进行型式检验要求时;e) 主成分指标与上次型式检验有较大差异时。8.3.3 型式检验由本企业化验室检验或委托检验。8.4 判定规则8.4.1 按照本标准的规定执行。有一项指标不符合本规则要求,再从双倍量的包装中抽取样品进行复检,以复检结果为准。若仍有一项指标不合格,则判该批产品为不合格品。各项技术指标中的极限数值采用修约值比较法。8.4.2 若供需双方对产品质量发生争议时,可由双方协商,或选定法定饲料质检机构按照本标准进行检验和判定,予以仲裁。 Q/370125HEK 001-20189 标签符合 GB 10648 的要求。10 包装、运输、贮存和保质期10.1 包装采用铝塑袋进行包装,外用纸板箱包装。10.2 运输运输过程避免雨雪浸湿,受热受潮。搬运装卸时小心轻放。不与有毒、有害物质混装、混运。10.3 贮存存放在通风、阴凉、干燥、无污染的地方,避免与有毒、有害物质混合存放。10.4 保质期在符合运输、贮存条件的情况下,自生产之日起,原包装产品 12 个月。 Q/370125HEK 001-2018附 录 A(规范性附录)枯草芽孢杆菌的计数和杂菌率的测定A.1 仪器与设备A.1.1 天平:感量:0.01g。A.1.2 震荡器。A.1.3 高压灭菌器:>121℃。A.1.4 生化培养箱:厌氧培养的,具相应的功能。A.2 培养基除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合 GB/T 6682 规定的三级水。A.1.5 LB 培养基A.1.5.1 成分蛋白胨 10.0g酵母浸粉 5.0g氯化钠 10.0g琼脂 15.0gA.1.5.2 制法称取上述培养基 40.0g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装, 121℃高压灭菌 15min。A.1.6 稀释液A.1.6.1 成分氯化钠 8.5gA.1.6.2 制法取上述氯化钠,溶于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15min。A.3 样品制备按 GB/T 14699.1 的规定,采取有代表性的饲料样品 10g,放入装有 90ml 0.85%灭菌生理盐水并放有玻璃珠的 250ml 三角瓶中,用振荡器振荡 30 分钟,使微生物细胞充分分散,静置 20-30 秒钟,即 10-1 稀释液,备用A.4 测定步骤A.4.1 检品稀释吸取 1:10 的初始悬浮液 1ml,加入 9ml 0.85%灭菌生理盐水,充分振荡摇匀(或吹吸 3 次使之混匀)。即得 10-2 稀释液,再换一支无菌移液管,吸取 10 -2 稀释液 1mL,移入第二支装有 9mL Q/370125HEK 001-20180.85%灭菌生理盐水的刻度试管中,即得 10-3 稀释液,逐次类推,每次更换吸管连续稀释,则制成 10-4 、10 -5 、10 -6 、10 -7 、10 -8 、10 -9 等一系列样品稀释液供平板接种使用。A.4.2 接种和培养选择 2 个~3 个适宜的稀释度,80℃±1℃维持 10min,用无菌移液管分别吸取 0.1ml,接种到两个营养琼脂平板(3.2)上。使用涂布棒尽可能小心快速的涂布接种液于琼脂表面,涂布棒不得接触平皿边缘。每个平皿用一支无菌涂布棒。涂布好的平皿盖好,置室温中放置 15min 使接种物完全被琼脂吸收。翻转上述平皿置于 36~38℃下培养 20~24 小时,长出菌落后即可计数。A.4.3 菌落特征取菌体涂片染色,用光学显微镜观察菌体形态。细胞形态杆状,(2.0~3.0)µm×(0.7~0.8)µm,单个或链条排列;芽孢(1.0~1.5)µm×(0.6~0.9)µm,单个或链状排列,该菌落形态为白色、扁平状、边缘不整的中小型菌落。A.4.5 菌落计数A.4.5.1 计算公式每克样品的活菌数(CFU)=菌落平均数×稀释倍数×10。A.4.5.2 菌落计数办法只计算形态为白色、扁平状、边缘不整的中小型菌落。当只有一个稀释度,其菌落数在 30~300 之间时,则以该菌落数乘以稀释倍数。若有两个稀释度,其菌落数均在 30~300 之间,应按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2,计算两者的平均数乘以稀释倍数;若大于 2 则计数其中较小的菌落数乘以稀释倍数。若三个稀释度的菌落数均大于 300,则应按稀释度最高的菌落数乘以稀释倍数。若三个稀释梯度的平均菌落数均小于 30,则应按稀释度最低的菌落数乘以稀释倍数。结果表示:每克样品中的枯草芽孢杆菌数,单位为 CFU/g,保留两位有效数字。A.5 杂菌率在计算枯草芽孢杆菌的同时计算目标菌以外的菌落数。A.5.1 杂菌率计算公式杂菌率(%)=(杂菌数/枯草芽孢杆菌活菌数)×100