对阻断或治疗 SARS-CoV-2 感染的研究激起了业界对开发靶向单克隆抗体 (mAbs) 的兴趣,单克隆抗体是人体为抵御病毒而产生的一种关键武器。要想开发靶向 mAbs,就需要对成百上千种变体进行筛选,选出候选变体进行进一步研究。
抗体聚集研究
在选择候选 mAb 的过程中,研究人员会检查 mAbs 的聚集趋势。聚集体是一种有害副产物,一旦注入患者体内会导致严重疾病,聚集体的形成还会阻断抗体抵抗感染所需的活性部分。发生聚集的候选 mAb 通常会被排除,不会用于进一步研究。
目前,研究人员使用体积排阻色谱 (SEC) 筛选可能发生聚集的 mAbs。使用 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色谱和 AdvanceBio SEC 色谱柱,每个样品的分析时间低至三分钟。而面对数千个样品时,单单使用 SEC 的分析过程依然非常缓慢。
通过添加三秒预筛选步骤加快 mAb 筛选
Agilent Cary Eclipse 光谱产品经理 Matt Quinn 介绍了一种快速筛选 mAbs 聚集趋势技术的开发过程。
“在一月份疫情爆发时,分析数千个样品的需求迅速增加。当时,我们正在利用现有技术设计三秒预筛选步骤。
我们将Agilent Cary Eclipse 荧光分光光度计与荧光染料相结合,开发出了一种快速预筛选技术。只要将荧光染料添加到候选 mAb 中,研究人员即可迅速确定抗体是否有聚集趋势。这种染料与 mAb 聚集体特异性结合,聚集度越高,测得的荧光信号越强。”
那么,增加一个步骤为何反而能缩短整体分析时间呢?因为这个步骤能够减少候选 mAbs 的数量,从而缩短更加耗时的 SEC 筛选所需的时间。Cary Eclipse 系统可以在大约三秒内筛选出一个样品是否会发生聚集。因此,这种方式筛选出的每种候选抗体可以节省接近五分钟的 SEC 分析时间。研究人员可以将最多 96 个样品批量加载至 Cary Eclipse 微孔板检测仪中;样品前处理快速简便,几乎无需对操作人员进行系统操作培训。
分析显示,如需筛选一批数量为 24 的样品,添加该步骤后所需的时间要比仅使用 SEC 所需的时间缩短 70% 以上。
应对时间紧迫的情形
使用基于荧光的高通量 mAb 聚集分析解决方案进行预筛选,可补充使用