蛋白酶k 的主要作用并不是消化组蛋白,而是消化细胞,在动物细胞DNA 的提取也不加蛋白酶 的作用。protenaseK作用: 1、消化组蛋白,释放出DNA。 2、消化DNAse,提高DNA分子量。 建议还是加蛋白酶k 为好,这样提出来的DNA分子量会高一点,且更纯。 提白粉孢子的总DNA,白粉孢子比较小,直接在研磨中加液氮研磨可以吗? 参考见解:液氮研磨的方法应该可行的,做动物组织,植物组织多采用这种方法,植物 纤维一样可以用液氮研磨,要有耐心,边加液氮边研磨,研磨好后再抽提,应该是可以的。 在CTAB法提取DNA时,有一些品种没有DNA析出,是什么原因? 参考见解: 1、用预冷的异丙醇来沉淀试试,同时研磨的时候要研的非常非常的细。 2、没有看到析出物并不代表没有沉淀,可以继续下一步试验,溶解的时候少加一点儿。 3、高离子强度下DNA与CTAB能形成共沉淀。可能DNA就这样留在沉淀里了。 提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时,怎样更好的抑制内源核酸酶的活性? 参考见解:在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量, 细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。 用试剂盒对农田土壤的的微生物群落DNA进行提取,虽然总DNA提出来了,可是用 细菌的通用引物进行 PCR 的时候却怎么也扩不出来,请有没有什么好的办法可以解决这个 问题? 参考见解:环境特别是土壤的样品成分复杂,尤其是有腐殖酸具有和DNA类似的性质, 因此用一般的国内试剂盒无法提纯。