171一般在注射后6 12小时局部出现红斑和硬结 24 48小时达高峰 通常以硬结大于15mm者为阳性。本法敏感性高 比较安全可靠 临床常用于检测机体的细胞免疫水平。 淋巴细胞转化试验【原理】 由于T淋巴细胞在体外受到特异性抗原和非特异性分裂因子刺激后 能转化为体积较大、代谢旺盛、并能进行分裂增殖的淋巴细胞 所以根据形态学指标或同位素3H胸腺嘧啶核苷掺入量 可以检测淋巴细胞的转化能力 从而判断机体免疫功能状态。 非特异性转化试验是由有丝分裂素如血凝素、刀豆蛋白A和美洲商陆 PWM 等刺激多克隆T淋巴细胞转化为淋巴母细胞。转化率的高低可反应人体细胞免疫功能的水平。 特异性转化试验是用特异性抗原作刺激物 使已被相应抗原致敏的T细胞克隆发生母细胞转化。例如结核菌素或结核菌素纯蛋白衍生物只能使已被结核菌抗原致敏的T细胞克隆发生母细胞转化 而不能使与之无关的其他T细胞克隆发生母细胞转化 故而其转化率比非特异性转化率低得多 一般在5 30 左右。特异性转化率可反映机体总的细胞免疫状态及机体对某种抗原特异的细胞免疫水平。 【操作方法】 形态学方法在全血或分离的淋巴细胞培养液中 加入一定量的促有丝分裂素 37 孵育3天后 涂片染色 观察淋巴细胞的形态学变化 并从中计算出转化为母细胞的百分率。计算如下 淋巴细胞转化率 转化的淋巴细胞数 100 计算的淋巴细胞总数 正常参考值为50 70 3H胸腺嘧啶核苷掺入法在淋巴细胞接受促有丝分裂素刺激发生转化过程中 细胞内DNA合成大量增多 此时如将3H胸腺嘧啶核苷加入培养液中 则后者被作为合成DNA的原料摄入转化细胞内。培养结束时测定细胞内放射性物质的相对活性 以cpm表示 就能较客观地反映淋巴细胞对刺激物的应答水平。 E玫瑰花结试验