温度探测器和银/氯化银接地电极到样品表安装持有者。这是必要的,以允许探针和电极样品在室中的浴。对于神经元的切片准备了良好的知名度,在显微镜下用红外线照射。这减少了光的衍射,因此图像模糊。确保该显微镜配备有微分干涉对比光学实现了“3D'状可视化。这将有助于修补神经元,并允许针对神经元深埋在片(60微米或更深)。在实验过程中,保持脑切片在实验室中与在底部的玻璃盖玻片。发布一条“铂竖琴”片上的顶部,以防止片浮动。铂竖琴从U形,扁平铂丝制成与牙线串粘在上面。保持ACSF灌注切片在32的温度下 - 35℃,以确保选择进制控制氧化和pH值。这可以通过加热与安装在靠近ACSF流入浴室中的珀尔帖装置的溶液来完成。
注意:使用超薄盖玻片使得即使显微镜冷凝器具有高数值孔径和工作距离短可以聚焦在试样上。这是必要的切片的最佳照明。
对于图像和一个电设置了配对录音优化大脑切片准备的说明见参考文献34图4。
2.脑切片准备
轻度麻醉从中脑组织应采取用异氟烷(最终浓度