前言多孔羟基磷灰石(coralporoushydroxyapatite,HA)义眼台作为理想的眶内植入物已被广泛接受和采用。羟基磷灰石的分子式为Ca10(PO4)6(OH)2,与人体骨无机盐理化特性相似,具有高度的组织相容性及内联微孔结构,既减轻了重量,又有利于周围组织血管的长入,使义眼台植入物迅速纤维血管化[1]。HA义眼台能预防囊形成,允许新的纤维、血管长入植入物中,使HA义眼座成为机化植入物。Perry等[2]认为HA义眼台纤维血管化重要性有3个理论:(1)植入物纤维血管化后,将含有被植入个体的免疫功能,这就使它发生感染的机会大大减少;(2)纤维血管化后,植入物与眶内软组织的生物相容性更好,减少了被排斥的可能;(3)植入物血管化后,允许与被植入个体及HA不同类型的栓钉的植入。故正确和尽早地评价植入物的血管化是至关重要的。围绕HA义眼台血管化,国内外学者曾进行了大量研究,目前主要集中在如何观察、判断和评价HA义眼台血管化的程度以及如何提高HA义眼台血管化的速度等方面。眼科临床中许多因素,如患者的原发疾病、眼部条件、HA义眼台材料、HA义眼台直径、植入手术方式以及HA是否发生感染等,均会影响HA义眼台纤维血管化的过程。所以不同HA义眼台植入后,纤维血管化完成的时间也有较大差别,且很难对手术后完成时间进行准确估计。通过MRI动态显像监测HA义眼台完成纤维血管化的时间,简便、安全、有效,并且可及时得到HA血管化直观、准确的信息和精确的量化数据。目前国外有学者如JordanDR等[3]进行了动物实验研究,结果认为直径12mm植入物血管化完成于植入后4周,MRI结果与组织病理学观察结果一致,但他未报道MRI在眼科临床病例中的运用研究情况。而国内更是鲜有关于动物模型和临床病人在这方面的研究报告。本组研究是我们所进行的有关义眼台的系列研究中的一部分,利用MRI对兔眼眶内多孔巩膜壳内植入的HA的血管化过程进行动态观测,并行相应的时间点的病理组织切片检查进行对照,以了解MRI这一检测技术在义眼台血管化过程中的作用、特点和规律性。并以此为依据对临床中多孔巩膜壳内植入HA术后患者进行不同时期的MRI检查,从而明确HA义眼台血管化更加细致、精确的变化发展过程,客观评价多孔巩膜壳内植入HA这一手术方式。材料与方法一、实验对象和材料实验动物:健康清洁级新西兰大白兔30只,随机分为6组,每组5只,体重2.0—2.50kg,均无眼疾,雌雄不限,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。临床病例:收集在2005年9月~2006年3月期间,同济医院眼科行HA义眼台植入手术的患者15例15眼,其中男性12例,女性3例,年龄15~65岁。原发疾病:眼外伤致眼球萎缩10例,角巩膜葡萄肿3例,视网膜脱离术后眼球萎缩1例,继发性青光眼绝对期1例。均行眼内容物剜除术及一期义眼台植入术。采用北京康菲特尔公司生产的天然珊瑚羟基磷灰石义眼台,为便于观察和统计,统一选用直径12mm的兔眼HA及直径20mm的人眼HA,微孔直径500μm,互通率100%,消毒无菌包装。二、主要实验仪器和药品MRI设备为德国产Siemans1.5T超导型MRI机;德国Leica公司DM-LB2型显微镜;日本Nikon公司数码照相机;同济医院病理科提供的Leica石蜡切片机;由同济医院中心药库提供的动物实验药品:盐酸氯胺酮50mg/支,盐酸氯丙嗪50mg/支,2%利多卡因5ml/支,0.3%诺氟沙星滴眼液8ml/支,庆大霉素注射液8万u/支,地塞米松注射液5mg/支,四环素可的松眼膏2.5g/支。三、手术方式手术由同一研究者完成。(1)动物全身麻醉(氯胺酮30mg/kg,氯丙嗪15mg/kg,混合肌肉注射),剪去左眼周围3cm范围毛发,0.3%诺氟沙星滴眼液充分冲洗左眼结膜囊。均行多孔巩膜壳(或称镂空巩膜壳)植入术式:沿角膜缘环形剪开球结膜,分离并暴露4条眼外直肌,套线固定。剪除角膜,行眼内容物剜出术,充分止血,不剪断视神经,在每2条直肌间各造一菱形巩膜窗孔。植入HA后,间断缝合所剪下的巩膜片于原角膜所在位置,分层缝合眼球筋膜囊及球结膜。(2)病人均采用多孔(全镂空)巩膜壳内植入式:沿角巩缘360°剪开球结膜,向球后分离、暴露巩膜,直到赤道部后,再沿角巩缘剪除角膜,彻底剜除眼内容物。在4条直肌和视神经间作4个圆形巩膜切口。角巩缘口作数条放射状切口,植入HA义眼台后,取自身巩膜修补、缝合角膜缺损口,分层缝合筋膜及球结膜。四、术后处理及观察1、术后常规每日滴0.3%诺氟沙星(兔)或0.3%泰利必妥滴眼液(人);涂典必舒眼膏。定期在裂隙灯显微镜下观察结膜切口愈合情况,例如结膜有无充血、水肿、糜烂、肉芽肿,结膜囊分泌物多少、有无义眼台暴露及其他并发症。所有实验动物和病人均顺利进行了眼内容物剜出术及多孔巩膜壳内HA义眼台植入术,手术后均未出现义眼台暴露、脱出、感染等严重并发症。2、动物取材、切片的制作及病理组织学观察:所有的兔于1、2、3、4、5、6周时分别行MRI扫描完毕后,在各相应时间点选出1组兔,采用兔耳缘静脉注气法处死后取出义眼台。首先大体观察义眼台周围结缔组织情况及巩膜壳在位情况;然后用10%中性福尔马林液固定24小时,5%硝酸进行脱钙处理48小时,常规石蜡包埋切片,切片厚度5μm,HE染色;应用光学显微镜观察切片上义眼台周边区域(包括自体巩膜组织)至义眼台中心的新生组织结构,观察毛细血管长入、炎症细胞浸润以及胶原纤维成熟程度。五、MRI的检查及图像采集方法MRI设备为Siemans1.5T超导型MRI机,SE序列扫描。层厚3mm,Flash2d序列3mm,层间隔0.2mm。MRI分别行SE序列T1WI、T2WI以及Flash2d序列成像。SE序列和Flash2d序列均有横轴面和冠状面。增强造影剂用的是二乙烯三胺五乙酸钆(gadoliniumdiethyltriamine-pentoaceticacid,Gd-DTPA)。兔术后第1、2、3、4、5、6周由同放射科医师进行增强MRI的相关检查和资料收集。病人行HA植入术后自第1月开始,每月1次,连续7次均由放射科医师进行增强MRI的相关检查和资料收集。15例患者均能坚持随访并获得了MRI图像数据。六、统计学分析方法本研究采用spss12.0forwindows统计软件包,MRI平均计数比值结果以x±s表示,对不同时间点的研究数据采用单因素方差分析。P