非竞争性抑制剂与酶活性中的以外的基团结合,其结构可能与底物无关。酶可以同时与底物及抑制剂结合。但是,中间产物ESI不能进一步分解为产物,因此,酶的活性降低。
非竞争性抑制剂多是与酶活性中心之外的巯基可逆结合,包括某些含金属离子的化合物(Cu2+、Hg2+、Ag+)和EDTA等。
典型的非竞争性抑制剂不影响酶与底物的亲和力,也就不改变酶的Km。但这样的非竞争性抑制剂较为少见,更多的是会降低酶与底物的亲和力,从而导致Km升高。鉴于后者同时具有竞争性和非竞争性的部分性质,这样的非竞争性抑制剂又称为混合型抑制剂(mixed inhibitors)。
不论是典型的非竞争性抑制剂,还是混合型抑制剂,它们在任何底物浓度下都有抑制作用,因此都会降低Vmax。
由于和底物之间无竞争的关系,非竞争性抑制剂既可以结合游离的 酶,也可以结合酶与底物的复合物(There is no competition between noncompetitive inhibitors and substrates, so noncompetitive inhibitors can bind to both free enzymes and the ES complex)