构建肌肉特异性启　动子可以显著提高蛋白表达水平,组织特异性肌启　动子的优势在于靶组织细胞不会产生免疫反应,同　时避免了部分启动子顺式元件的下调作用,与普通　的病毒启动子相比,组织特异性启动子蛋白表达有　其独特的优势。病毒启动子携带目的基阕导人后在　多种组织中均表达,所以目的基因不可避免地对于　靶外的组织产生免疫反应的组织抵抗,而人工启动　子工程叮以避免这一缺陷。不同肌细胞分化时期　dystrophin蛋白表达不同。尽管各种肌组织特异性　启动子已被应用,但基因在靶器官内表达水平、持续　时间及表达顺序等都需要更加精细的调控,需要对　DMD基因启动子转录调控元件之间的关系理解清　楚并应用于体外动物实验,使它为基因治疗进一步　实施开拓道路。　参考文献　RobertsRG,Gardner　IU,Bobrow　M.Searching　lin2400000:a　review　dystrophingene　point　mutations.Hum　Murat,　1994.4:I-11.　【2]Gualandi　F,Rimessi　P,Trabanelli　C,et　a1.Intronic　breakpoint　definition　transcriptionanalysis　DMD/BMDpatients　5’mutationhot　spot　dystrophingene.Gene,2006,370:26-33.　盛文利。陈汀英.朱良付,等.DMD基岗内含子重复序列与内含于不稳定性和基冈缺失的关联?中山大学学报(医学版),　2005,26:11—15.　[4]D&Jum　VN,Nguyen　TM,Morris　GE.et　a1.A　novel　dystrophin　isoform　normalretinal　electrophysiology.Hum　Mol　Genet.1995,4:837-842.　[5】Lidov　HG,Selig　S,Kunkel　LM.Dpl40:a　novel　140　kDa　CNS　transcript　from　dyslrophinlocus.Hum　Mol　Genel。1　995.4:　329-335.　ByemTJ,Lidov　HG。Kunkel　LM.An　ahemative　dystrophin　tran-　script　specific　Io　periphem　nerve.Nat　Gene,1　993,4:77-8　KarasgevaN.Tsika　G,ji　J,et　a1.Transcription　enhancer　faetor　lbinds　muhiple　nlnscle　MEF2　A/T-richelements　during　f矗I-to—　shw　skeletal　mu"le　fiber　type.transitions.Mol　Cell　Biol,2003,　23:5143-5164.　[8]Gilgenkrantz　H,Hugnot　jp,Lambert　M,et　a1.Positive　nega—live　regulatory　I)NA　elements　including　aCCArGG　box　am　celltype-specific　expression　humanmuscle　dyslrophin　gene.J　Biol　Chem,1992,267:10823-10830.　[9]Galvagni卜ltstingi　M.can…。i　E,el　a1.Serum　response　fac。Ior　protein-mediatedDNA　bending　contribule　dystrophinMuscle-Specific　Promoter.Mol　Cell　Biol,1997,　17:1731-1743.　‘[10]Winnard　AV,Mendell　JR,Prior　TW,et　a1.Fmmeshifi　deletions　exons3-7　revertantfibers　Duchennemuscular　dystro-　phy:mechanisms　dystmphinproduction.Am　JHum　Genet.　1995,56:158-166.　MalleiE.Corbi　N,Di　Certo　MG,et　a1.Utrophin　up—regulation　artificialtranscription　factor　transgeniemice.PL西　万方数据　ONE,2007.2:e774.[12]Kondoh　T,Fujishita　S.Shibuya　N.et　a1.Different　muscle　spe-　eifie　promoter　characteristics　twosibs　Duchennemuscular　dystrophy.J　Med　Genet,1995.32:325-326.　[13]“X.Eastman　EM.Schwartz　IU,et　a1.Synthetic　muscle　pro-　motet8:activities　exceeding　naturally　occurring　reguhtory　8e-　quences.Nat　Bioteehnol,1999,17:241-245.　【14]Anderson　cL.De　Repentiguy　Y.Cifetli　c,et　a1.The　mouse　dystrophin　muscIe　promoter/enhancer　drives　expression　mini—dystrophin　tranagenicmdx　mice　mice.MolTher。2006.14:724-734.　【15]Galvagni　F,Camci　E,Oliviem　s.The　dystrophin　promoter　negativelyregulated　undifferentiatedrflBscle　cetls.Bid　Chem。1998,273:33708-33713.　[16]Dunant　P,hhelle　N.Thirion　C,et　a1.Expression　dystro-phin　driven　1.35kb　MCK　promoter　ameliorates　muscular　dystrophy　slowmuscles　transgenicMDX　Mice.Moi　Ther。2003,8:80-90.　[17]Yeshimura　M-Sakamoto　M,lkemoto　M,et　a1.AAV　vector-me—　diated　microdystrophin　expression　mdxmyofibers　improved　mdxphenotype.Mol　Ther,2004,　lO:821.828.　[18]hI　Y,Tian　C。Danialou　G.et　a1.Targeting　Artificial　Transcfip-　tion　Factors　UtrophinAPromoter:effects　dystrophiepa-　tholngy　musclefuntion.J　Biol　Chem.2008,283:34720-　34727.　【19]Onori　A,Desantis　A,Buontempo　S,e1.a1.The　artificial　4-zinc-　fnger　protein　Bagly　binds　human　utrophin　promoter　Aat　en—dogenous　chromosomal　site　activatestranscription.Biochem　Cell　Bi01.2007,85:358-365.　【20]　Basu　U,Oyrd—Hansen　M.Baby　SM,el　a1.Heregulin—induced　epigenetic　regulation　promoter.FEBSLett,　2007,581:4153-4158.　[21]Foster　H.Sharp　PS,Athanaoopoulos　T,et　a1.Codon　mRNAsequence　optimization　microdystrophintransgenes　impmves　ex-　pression　physiologjicaloutcome　dystrophicmdx　mice　fol—　lowing　AAV2/8　gene　transfer.Mol　Ther.2008,16:1825　1832.　(收稿日期:2008—1卜12)　(上接336页)　[6]Gong　Y,aaln　CK,Holme　E.Interferonganana　tumornec—　rcsis　tactor　synergize　inducenitric　oxide　production　inhibitmitoohondrial　respiration　vascularsmooth　musclecells.Circ　Res,1998,71:1268.　【7】Tucker　AT,Pearson　RM,Cooke　ED,et　a1.Effect　nitricoxide　generating　system　microoirculatoryblood　flow　revereRaynards　syndrome:a　randomised　trila.Lancet,1999,　354:1670.1675.　[8]Globig　S,Wite　K.Lemmer　B.Urinary　excetion　ofnitric　oxide,ey　clic　gmp,and　catecholam　inesduring　rest　catecholaminesdur-　ing　rest　activityperiod　transgenichypertensive　rata.Chron—　biol　Int.1999.16:305.　-rol_J,Napoli　C,Loscalzo　J,et　a1.Nitric　oxide　donors　cardiovascularagents　modulating　nitricoxide.　Circulation　Res,2003,90:21-28.　[IO]鄢定红。程晓曙。苏海.等.一氧化氮缺乏在高血压及心血管　重构中的作用.高血压杂志,2000,8:349-354.　[11]　陈复辉,韩守信,吴晓梅.支气管哮喘血浆一氧化氮含量变化　及其临床意义.中围危重病急医学,1999.Il:125.　[12]　Yoneda　S,Suzuki　H.Nitric　oxide　inhibits　smooth　muscle　respon一[13]　[14]　[15]　[16]　[17]　[18]　[19]　mevoked　cholinregicnerve　stimulation　guineapig　gas-　tric　fundus.Jap　JPhysiol,2001,51:693-702.　Papapetropoules　A。Andreopoulos　S,Go　CY,et　a1.Regulation　nitricoxide　syhtasc-　nitric　oxide-　cGMP　pathway　ratmes　entericendothelial　cells.Appl　Physiol。2001,91:2553-2560.　马俊江。李圣爱.NO与胃溃疡.生理科学进展,1998,29:　260.　李力,陈竹钦.妊高征患者血浆一氧化氮变化的研究.中华　妇产科杂志,1999.3I:454-457.　Worrall　NK。Misko　TP,Sullivan　PM.et　a1.Carit　icesteroids　hibitexpression　induciblenitricoxide　synthesis　deting　acute　eardial　allograft　ragection.Transplantation.1999,61:324.　David　AW,Mitchell　JB.Nitric　oxide　Pathophysiolo矛cat　mocha-　nisms.Carcinogenesis,1999,19:711-72I.　Klotz　T,Bloch　W.Volberg　C,el　a1.Selective　expression　duciblenitric　oxide　synthasc　humanprostate　carcinoma.　Cancer,1998,82:1897　1903.　王吉云.一氧化氮病理生理作用的新视点.国外医学心血管　分册,2004.3I:33-35.　(收稿日期:2008439-09)　万方数据