配制 100ml: 加1.4ml 14.8mol/L 氢氧化铵到100ml 水中,再加入190ul 10mol/L 氢氧化钠;放置涡旋器 上缓缓加入1ml 新鲜配制的硝酸银溶液(0.8g 硝酸银/ml 水),直至出现沉淀物,但很快溶 去除氨水/银溶液,用去离子水清洗凝胶20min以上,其间更换水数次; 10) 去除水,加入5 倍体积新鲜配制的0.005%柠檬酸,0.019%的甲醛。轻柔混匀,数分钟 内条带即显现出。当背景开始变化时,去除显影剂,用用去离子水清洗凝胶。在10%乙酸 和20%乙醇中温育凝胶,以终止反应。灵敏度为1-10ng 蛋白/每条带。 注:操作时,应戴手套并使用洁净的玻璃器皿,以免污染,影响反应的灵敏度。 倍于凝胶体积的30%乙醇和10%乙酸,振摇30min 至过夜; 去除乙醇/乙酸溶液,加入5倍体积的30%乙醇, 室温振摇30min; 去除乙醇,再加5倍体积的30%乙醇,室温振摇30min; 去除乙醇,加入10倍体积的去离子水,室温振摇10min;重复用去离子水清洗两次; 去除去离子水,加入4倍体积新鲜配制的0.1%硝酸银溶液(用室温下贮存于棕色瓶内的 20%原液稀释而得),室温振摇30min; 去除水,加入5倍体积的2.5%碳酸钠和 0.02%的甲醛(pH