Primer-BLAST 有许多改进的功能,这样在选择引物方 面比单个的用Primer3和NCBI BLAST 更加准确。 Primer-BLAST 的输入 Primer-BLAST 界面包括了Primer3和BLAST 的功能。提交的界面主要包括三个部分:target template(模板区), primers(引物区),和specificity check(特异性验证区)。 跟其它的BLAST 一样,点击底部的“Advanced parameters”有更多的参数设置。 模板(Template) 在“PCR Template”下面的文本框,输入目标模板的序列,FASTA 格式或直接用Accession Number。如果你在这里输入了序列,是用于引物的设计。Primer-BLAST 就会根据你输入的 序列设计特异性引物,并且在目标数据库(在specificity check 区选择)是唯一的。 引物(Primers) 如果你已经设计好了引物,要拿来验证引物的好坏。可以在Primer Parameters 区填入你的 一条或一对引物。并且选择好验证的目标数据库(在specificity check 区选择)。