表明它是一种安全的绿色的多3 　 芦荟有效成分的提取和分离提纯芦荟的某些药理生理活性是基于多种组分的协同作用 ,但起主要作用的只是其中的某一种或某一类 ,其它的组分只是起增效的作用。要找出具有药理活性的物质 ,就必须对芦荟化学成分进行分离提纯。芦荟有效成分的提取 ,一般采用水提法或醇提法。这两种方法各有优缺点 ,水提法可以把水溶性的成分与脂溶性的成分(如叶绿素) 分开 ,从而简化了后处理 ,但得到的提取液很容易变质。醇提法(常用甲醇和乙醇)对脂溶性成分的提取效果良好 ,而且提取液不易变质 ,但对其中的多糖等水溶性的有效成分的提取效果不佳。采用不同浓度的醇溶液为提取剂 ,则可以有很好的提取效果。文献资料表明甲醇的提取效果比乙醇为佳。最初芦荟有效成分的提取是用煎煮的手段从鲜芦荟叶片中得到浸膏 ,但这种方法对芦荟有效成分的破坏很大 ,长时间的加热会使它们失去原有的药理生理活性。而 Mcanalley 和 Coats 提出的冷处理方法由于可以很好地保留芦荟有效成分的活性而成为后人进行提取和分离提纯所遵循的一条基本原则。为避免芦荟体内的有效成分被自然分解破坏 ,要尽可能缩短从收割到提取分离的时间。因而对芦荟的稳定化研究也是一个非常必要而且迫切的课题。由于芦荟化学成分的多样性复杂性 ,而且很多化学成分的性质是非常相近的 ,因而分离的难度较大 ,经典的分离方法如有机溶剂分级沉淀法、 有机溶剂萃取法等很难分离得到纯净的物质。现代分离技术如膜技术得芦荟有效成分的深度分离成为可能 ,如 WengWC酸钠2乙腈缓冲溶液和含有磷酸二氢钾和甲醇的线性梯度溶液为流动相分离并鉴定了 12 种蒽醌类化合物。谢光麟液为流动相分离得到蒽的衍生物。 Lee KY用柱色谱和薄层色谱联用的方法从巴巴多斯芦荟的甲醇提取液中分离得到一种具有抗氧化性的化合物 ,并用反相高效液相色谱和质谱鉴定了它的结构。Saleem R法从巴巴多斯芦荟根的甲醇提取液中分离并用二维质谱证明其结构是二苯并芘。对于芦荟体内的生物大分子化合物如多糖和酶类的分离 ,普遍采用的是凝胶色谱法。如 QiuZH凝胶色谱法从巴巴多斯芦荟中分离纯化得到一种具有抗辐射功效的多糖。Sabeh F换色谱和凝胶过滤色谱分离纯化得到谷2胱2甘肽过氧化物酶。Yagi25、 Sepharose 6B 和 Sephadex G- 50 为填料的凝胶[9]、 色谱方法、 电泳法等的出现 ,使[10]等利用毛细管电泳法和高效液相色谱法以碳[11]等用凝胶色谱柱以 70 %的乙醇溶[12]等利[13]等用化学沉淀法和真空流体色谱[14]等通过纤维素酶酶解、 透析、 乙醇分步沉淀、[15]等用离子交[16]等用以 DEAE SePhadex A -431化 学 研 究 与 应 用 　　　　　　　 　　　　　　 第 14 卷 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net过滤色谱制备得到糖蛋白和中性多糖等多种芦荟组分。作者利用本实验室自行研制成功的树脂为填料 ,以不同极性的溶液为流动相的低压液相色谱对巴巴多斯芦荟的化学成分进行分离纯化 ,发现对芦荟的醇提液具有良好的分离效果 ,可以分离得到二十多个具有不同紫外吸收峰的组分(有关文章待发表) 。这种方法操作简单、 省时、 分离效果良好 ,而且树脂可以反复再生利用。4 　 芦荟化学成分的定性定量方法现在国际芦荟科学协会(IASC) 把流体的 pH值、 总固形物的含量、 镁和钙的含量、 比重、 Brix 值和 HPLC 的 “ E 峰” 作为鉴定芦荟质量的必检项目 ,其中 “ E 峰”法谱中的第五个主要的吸收峰 — “ E峰”的普遍存在性( “ E峰”是L2苹果酸的吸收峰) 。在定性方面 ,常规的波谱分析(紫外2可见光光谱法、 红外光谱法、 质谱法和核磁共振) 是最基本的方法 ,在没有标准品的情况下这是唯一可行的。在有标准品时 ,最常用的是高效液相色谱法和薄层色谱法。Umano K术分离鉴定了木立芦荟鲜叶的二氯甲烷提取物的123 种化合物 ,包括 42 种醇类 ,23 种萜类 ,21 种醛类 ,9 种醚类 ,8 种酮类 ,6 种酸类 ,5 种酚类和 9 种[17]是基于芦荟样品的 HPLC 图[18]等用气相色谱法和气2质联用技其它化合物。郭素华了芦荟原胶中芦荟甙的含量。赵慧春芦荟甙在硼砂介质中与硼砂发生化学反应使体系的荧光强度增强的原理 ,采用薄层分离并用荧光光度法对芦荟中芦荟甙的含量进行了检测。邓郁琼荟大黄素的含量进行了测定。黄宏南高效液相色谱法测定了芦荟食品中芦荟甙的含量。陈丹荟中芦荟苷的含量。张永文相色谱法测定了芦荟中芦荟苷的含量。王德先芦荟大黄素进行了测定 ,该法具有与薄层法和高效液相色谱法相当的准确性。对芦荟中的蒽醌衍生物的鉴定一般采用醋酸镁和蒽醌衍生物形成配合物 ,该配合物在可见光区 510nm左右有一吸收峰 ,可以作为定性判据。而对于芦荟中的无机物质 ,一般采用无机方法测定 ,如微量元素的检测采用原子吸收分光光度法[19]等用薄层层析和薄层扫描法测定[20]等利用[21]等采用薄层扫描法对市场上芦荟产品中芦[22]等则用[23]等用高效液相色谱法测定了斑纹芦[24]等用反相高效液[25]等利用毛细管区带电泳法同时对芦荟甙和[26 ,27]。5 　 结语对芦荟复杂多样的化学成分进行分离和纯化是非常必要的 ,如能将这些方法应用于工业化生产 ,则更具广阔的发展前景。参考文献:[1]倪同汉 1 中国民族民间医药杂志[J ] ,1999 ,(37) :71 —771[2]邓军文 1 佛山科学技术学院学报 (自然科学版) [J ] ,2000,18(2) :5 — 71[3]万金志 ,乔悦昕 1 中草药[J ] ,1999,30(2) :151 — 1531[4]Sabeh F,Wright T,Norton SJ. Enzyme & Protein[J ] ,1996,49(4) :212 - 221.[5]Winters W D ,Yang P B. Phytotherapy Research[J ] ,1996,10(7) :573 - 576.[6]Winters W D ,Bouthet C. Phytotherapy Research[J ] ,1995,9(6) :395 - 400.[7]简洁莹 ,何其敏 ,胡少明 ,等 1 卫生研究[J ] ,1995,24(特辑) :57 — 601[8]包国荣 ,林超英 ,曾道华 ,等 1 福建中医学院学报[J ] ,1994,4(4) :25 — 271[9]林翔云 1 中国民族民间医药杂志[J ] ,2000 ,(44) :174 —1751[10] Weng W C, Sheu S J. HRC2Journal of High ResolutionChromatography[J ] ,2000,23(2) :143 - 148.[11]谢光麟 ,赫生 生 ,吕昌龙 ,等 1 中国医科大学学报[J ] ,1998,27(6) :571 — 5731[12]Lee K Y,Weintraub S T,Yu B P. Free Radical Biology andMedicine[J ] ,2000,28(2) :261 - 265.[13]Saleem R ,Faizi S,Deeba F,et al. Planta Medica[J ] ,1997,531第 2 期 　　　 　　　　　　 陈国和等:芦荟的化学成分及其分离和分析 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net63(5) :454 - 456.[14]Qiu Z H,Jones K,Wylie M,et al. Planta Medica[J ] ,2000,66(2) :152 - 156.[15]Sabeh F,Wright T,Norton SJ. Enzyme & Protein[J ] ,1993,47(2) :92 - 98.[16]Yagi A ,Egusa T,Arase M,et al. Planta Medica[J ] ,1997,63(1) :18 - 21.[17]张小华 ,叶伊兵 ,李涵 1 香料香精化妆品[J ] ,1999 ,(1) :34 — 381[18]Umano K,Nakahara K,Shoji A ,et al. Journal of Agricultur2al and Food Chemistry[J ] ,1999,47(9) :3702 - 3705.[19]郭素华 ,邓思珊 ,齐一萍 ,等 1 福建中医学院学报[J ] ,1994,4(1) :37 — 381[20]赵慧春 ,冯瑞琴 ,邓孝光 ,等 1 北京师范大学学报(自然科学版) [J ] ,1997,33(2) :231 — 2341[21]邓郁琼 ,覃文 1 食品科学[J ] ,1999 ,(10) :57 — 591[22]黄宏南 ,金乐君 1 中国食品卫生杂志[J ] ,19...