虽然草酸测 定的方法很多,如比色法、色谱法、酶法、间接法等,但均因操作复杂、费时或需特 殊设备而无法被一般常规实验室所接受。我们根据在酸性环境中,草酸与高锰酸钾发 生化学反应使高锰酸钾溶液褪色。据此,建立了高锰酸钾褪色法测定尿液草酸的方 法。取得满意的结果。现报告如下。 1 试剂与仪器 1.1 试剂 1.1.1 100 ol/L高锰酸钾贮存液 称取高锰酸钾15.8g,溶解于1 000 l去离子水中,加file:///E|/qk/lcjyzz/lcjy99/lcjy9905/990503.htm 1/4页)2010-3-23 3:19:58 临床检验杂志990503 冰箱内避光,可保存三个月。1.1.2 1.0 冰箱至少可保存一周。1.1.3 0.1 )1.26g,溶解于100 离子水中。1.1.4 1 ol/ml草酸标准应用液 吸取草酸标准贮存液1.0 溶液 称取无水CaC 5.5g,溶于100 l去离子水中。1.1.6 0.02 ol/L乙酸溶液中平衡2小时左右。过滤除去沉淀物,备用。 所用试剂均为分析纯。 1.2 仪器 日立U -2001型分光光度计。 2 方法 2.1 尿液草酸沉淀 取新鲜尿液5 l,用精密pH试纸,以1 调pH至5.0。取该弱酸化的尿液0.5 冰箱静置3小时以上。取出3000 in,弃上清液。向沉淀物中加入0.02 in,弃上清液。再向试管中加入去离子水5 l,充分混匀,4000 in,小心弃上清液。将试管倒置于滤纸上,沥干水分,待测。 2.2 尿液草酸测定 向上述含草酸钙沉淀的试管中加入1 in,取上清液于525nm 比色。同时做空白及标准测定管。 2.3 尿液草酸浓度计算 3 实验与结果 3.1 吸收曲线 对空白管(高锰酸钾应用液)、测定比色液进行波长扫描,两者吸收曲 线完全相同。图1为高锰酸钾应用液和测定比色液吸收曲线。在525 nm 及545 nm 处分别 有一吸收峰,525 nm 处吸光度略高于545 nm ,故我们选择525 nm 作为测定波长。 file:///E|/qk/lcjyzz/lcjy99/lcjy9905/990503.htm 2/4页)2010-3-23 3:19:58 临床检验杂志990503 Figure bsorptioncurve potassiumperm anganate 图1 空白管和测定管光谱吸收曲线 3.2 标准曲线 取10支试管,分别加入草酸标准应用液0.05 l。各管换算为尿样品浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9及1.0 ol/ml。加高锰酸钾应用液3.0 l,接下按方法2.2操作。结果表明本法测定尿液草酸线性范围至少为0.1~1.0 ol/L)。相关系数r=0.9986,以Y表示吸光度差,X表示草酸浓度,直线回归方程Y=2.155X+0.038。 3.3 精密度和回收率 取2份健康体检者尿液样品,调pH 为5.0,置4C 冰箱保存。