养禽与禽病防治 !""! 年第 "# 期文 丽 方炳虎 ( 华南农业大学兽医学院 广东广州 510642 !摘 要" 研究鸡饮用地克珠利$%&’() # 连续自由饮水 * 天 + 后血浆$皮肤 , 脂肪$肝脏$肾脏$肌肉组织中的残留量%以便制定地克珠利溶液剂的休药期&用甲醇提取血浆中的药物%用乙睛提取组织中的药物%利用高效液相色谱法测定组织中地克珠利的浓度& 试验结果表明%饮水中按 %&’-) 的浓度添加地克珠利在鸡体内休药期为 % 天&关键词"地克珠利’鸡’组织残留地克珠利 $./0)1234/) ! 属三嗪苯乙腈化合物%于"*56 年由比利时 71899:8 公司研究开发% 是一种高效$低毒的广谱驱球虫药%主要抑制子孢子的裂殖增殖%对球虫的活性峰期随球虫的不同种属而异%对柔嫩艾美耳球虫主要作用点在第 ; 代裂殖体球虫的有性周期% 对巨型艾美耳球虫作用点在球虫的合子阶段%对布氏艾美耳球虫小配子体阶段有高效& 为了较全面地了解国产地克珠利饮水剂在鸡组织中的残留状况%制定相应的休药期%特进行了该研究&1 材料与方法"<" 主要仪器高效液相色谱仪%型号 ;6*= ’紫外检测器%美国>?@ABC 公司’ D7E;## 型高速分散均匀机% 上海标本模型厂’ FC ;=*G 型摇床% 马来西亚 HI? 公司’离心机’电子分析天平等&"<; 主要试剂地 克 珠 利 标 准 品 % 含 量 为 **<6# % 批 号 为F#!#*#J %购自中国兽医药品监察所’ "K 地克珠利饮水剂% 批号为 #=";#" % 华南农业大学实验兽药厂赠送’乙腈$甲醇$磷酸$正已烷$正丙醇$磷酸均为分析纯&"<% 试验方法=# 只 %# 日龄快大型黄羽肉鸡%公母兼有& " 日龄时购于广东省农科院%笼养%自由饮水和采食%饲料为不添加任何药物的全价日粮&"<%<" 给药剂量及方法" 配制浓度为 %&’-) 的地克珠利水溶液%随机选 J; 只鸡连续饮水给药 * 天& 剩下 5只做空白对照&"<%<; 组织样品采集" 停药后分别于 # $ " $ ; $ % $ J $ = $6 天%各点以颈静脉放血处死 6 只鸡& 每只鸡宰杀后立即取血液$肌肉$皮肤 , 脂肪$肾脏$肝脏%血液置于含肝素钠的离心管中% 混匀% J ###4-&/8 离心 "#&/8 %取血浆% 所采组织用滤纸吸干血后放入自封袋中%E;#$ 冰箱保存至测定&"<%<% 样品前处理 ""<%<%<" 从冰箱取出血浆样品% 在室温中自然解冻&摇匀% 准确吸取 #<=##&) 于 "<=&) 离心管中% 加入"<###&) 甲醇% 充分振荡 ;&/8 % 以 "; ###4-&/8 离心"=&/8 %取上清液至自动进样瓶中%自动进样测定%每次进样 ;#!) &"<%<%<; 组织样品于室温自然解冻% 准确称取 %<##’组织% 置于 =#&) 聚丙烯离心管中% 加入 "#&) 乙腈%" ###4-&/8 匀浆 "&/8 %另取 =#&) 聚丙烯离心管%加入"#&) 乙腈%洗涤匀浆后%并入第一支试管中%加入正己烷 =&) %盖严%置摇床震摇 "=&/8 % 5 ###4-&/8 离心"=&/8 %弃去己烷层%用 "##&) 梨形瓶收集乙腈提取液% 加入正丙醇 =&) % 于 =#$ 减压旋转蒸干% 加入"<###&) 流动相溶解% "; ###4-&/8 离心 "=&/8 %取上清液至自动进样瓶中%自动进样测定%每次进样 ;#!) &"<%<J FLMN 条件与标准曲线的制作""<%<J<" 色谱条件" 流动相为乙睛" #<;K 磷酸( =!OJ%PQ-Q !’ 流 速 "&)-&/8 ’ 柱 温 %#$ ’ 紫 外 检 测 波 长;!58& ’进样量为 ;#!) &在上述条件下%将地克珠利用乙腈溶解后%测得其保留时间为 R5<*%#<;S&/8 %而空白组织的提取液在上述保留时间无色谱峰%见图 " &"<%<J<; 标准曲线制作" 精确称取地克珠利对照品#<#"##’ %置于 "##&) 棕色容量瓶中%用 T % TE 二甲基甲酰胺定容至刻度% 即成 "##!’-&) 的地克珠利储备液& 以流动相稀释分别配制成 =# $ "## $ "=# $ %## $ =## $" ### $ ; ### $ % ### $ = ###8’-&) 的地克珠利标准液%用FLMN 按上述操作条件测定各标准液的吸收峰面& 以标准液的浓度为横坐标%样品吸收峰面积为纵坐标%绘制标准曲线%每一水平重复进样测定 % 次&"<%<= 回收率的测定" 精确量取一定量的地克珠利储备液%加入空白组织中%分别配制成地克珠利浓度为 ;## $ " ### $ ; =##8’-’ 的标准添加样品%按 "<%<% 所述方法提取地克珠利%作 FLMN 分析&"<%<6 组织中地克珠利残留浓度测定" 将给药后各时间点采集的组织样品按 "<%<% 方法提取地克珠利%在上述色谱峰条件下%经 FLMN 分析获得地克珠利色谱峰面积% 从标准曲线算得组织中地克珠利残留量$ 浓度 S &2 结果与分析;<" 地克珠利标准曲线地克珠利在鸡组文 丽 方炳虎 ( 华南农业大学兽医学院 广东广州 510642 !