1.3 药敏试验方法 1.3.1 MGIT960 法 一线抗结核药物SM 和EMB 冻干药粉,药粉用4mL 无菌蒸馏水溶解,二线药物 CPM、KM、氧氟沙量(OFX)和乙硫异烟胺(ETH)药粉 配制同一线药物,每株结核杆菌需标记5 支MGIT 第35卷第12 GuangdongMedical Journal Jun.2014, Vol.35, No.12 分别为生长对照管和4 mLSIRE 加剂至每一试管,每个加药MGIT管加100 mL菌液至10 mL 无菌生理盐水,1100 mL稀释后的菌液至生长对照管,混匀,在加 药管中加入未稀释的菌液0畅5 mL,混匀。 将准备好的 MGIT 管按顺序放入标记好的AST 试管架,系统扫描 试管架条形码,按照仪器指示位置放入BACTEC MGIT 960 仪器。 各药物在培养基中的终浓度见表1。 1.3.2 L 法 选取罗氏培养阳性菌株,挑取培养基上菌落,用无菌0畅5%TWEEN80 生理盐水溶解、稀mg/mL 10倍稀释至0畅01 mg/mL,用灭菌吸管准确吸取0畅1 mL 菌液分别接种至对照及含药培养基斜面,每管接种量 为0畅001 mg。 各药物在培养基中的终浓度见表1。 表1 各药物在培养基中的终浓度 /mL方法 SM EMB CPM KM OFX ETH MGIT960 1.4 结果判定 MGIT960法结果:MGIT960 仪器会在 内,根据GU值报告实验结果,结果为定性的, 包括敏感(S)、耐药(R)、不确定(X)。 法结果:37温箱培养4 周后报告结果,在对照培养基上生长 旺盛的前提下,培养基斜面无菌落生长,耐药判定为敏 感(S),若含药培养基上生长菌落数大于20 个,则判定 为耐药(R),少于20 个,记录实际菌落数,重复试验。 1.5 统计学方法 采用SPSS 13畅0 统计软件,以L 法检测结果为判断标准,计算MGIT960 法的敏感度和 特异度,两种方法检测结果的一致性用 Kappa 检验判 别,Kappa 值0畅75,说明两种方法具有较好的一致性, 0畅4Kappa0畅05),见表1。