麦蓝菜多糖或麦蓝菜多糖水解物中的多糖含量=CA-CB。
1.4分子量范围测定
用分子排阻高效液相色谱法(HPGPC)测定麦蓝菜多糖和麦蓝菜多糖水解物的分子量。
2、实验结果
含量测定结果和分子量范围测定结果如下表。
实施例3:麦蓝菜多糖水解物的制备
1、实验方法
1.1多糖提取
采用热水浸提法提取麦蓝菜多糖,提取条件为:提取温度100℃,提取时间2h,水料比10mL/g,提取3次,100目滤布过滤,合并提取液,浓缩至浸膏密度为1.05-1.15g/mL,加无水乙醇至浓度约80%,醇沉12h,倾出上清液,再向沉淀中加85%乙醇适量,醇沉8h,5000r/min离心,沉淀经60℃减压干燥后研磨,得麦蓝菜多糖。
1.2多糖水解
将上述麦蓝菜多糖溶解于适量pH值为1的盐酸溶液中,于37℃搅拌水解30min后加入氢氧化钠溶液中和至中性,离心取上清液。上清液减压浓缩后经纳滤机过滤除盐后减压浓缩至干,得浅灰色固体粉末;或上清液浓缩至干,加入甲醇溶解,离心,沉淀复以甲醇溶解,离心,沉淀减压烘干,得浅灰色固体粉末。采用上述水解方法即得麦蓝菜多糖水解物。
1.3多糖含量测定
精确称取麦蓝菜多糖或麦蓝菜多糖水解物100mg于安瓿瓶中,加15mL 2mol/L TFA,充氮气封口后120℃水解4h。取出冷却后,水解液旋转蒸发至干,加约2mL甲醇,再蒸干,如此重复多次,以除去TFA。加少量去离子水,超声溶解,转移至10mL容量瓶中,多次清洗转移,定容,摇匀,经0.45μm微孔滤膜过滤,得酸水解待测液。