细胞间总是有很多未解之谜。比如说同一个孵箱里的细胞,为什么别人的没死,我的却一直死?同一个孵箱里的同一种细胞,为什么别人养不死,我一碰就死?同一个孵箱里的细胞,为什么别人操作粗枝大叶,我操作小心翼翼,但还是养不活?今天,我带你走进细胞间未解之谜—我和细胞的水逆什么时候能结束?
首先贴出来两张实验室师妹培养的A549的镜下照片。这是A549复苏24小时后之后的样子,复苏12小时之后曾拿出孵箱镜下观察细胞状态,那时候的细胞基本上80%已经贴壁,本准备24小时后换液处理。
但是24小时之后再观察细胞状态,就变成下面的样子了,所有贴壁细胞都聚团漂浮起来,而且培养皿背景下还有很多细小的砂砾状黑色颗粒,是无法用PBS洗掉的那种。很明显这是细胞污染的表现。
一般情况下,如果你的细胞被细菌污染了,培养皿或瓶中的细胞状态很快就会发生变化,表现为胞浆中出现大量的颗粒,液体浑浊、培养基PH下降,变成黄色,贴壁细胞形态变圆、会脱壁死亡;而受到真菌污染的细胞,细胞状态并不会马上发生变化,培养3-4天后,你可能才会在培养皿中看到白色的漂浮物或者黑色的小点儿。所以很明显,这个A549是被细菌污染了。
但很奇怪的是,实验室里养这个细胞的并不是只有师妹一个人,其他人养的A549都坚挺的活着,而她的A549不管是复苏、传代亦或是从别人那里刚借来的细胞都死翘翘了,搞得她有一个月的时间不敢养任何细胞,所以整个实验室的人都在帮她找污染的原因。