牛羊布病平板凝集试验 一、试验原理: 该试验又称为板式孟加拉红平板凝集试验, 由于所用的抗原是酸 性(PH3.6--3.9)带色的抗原,该抗原与被检血清作用时能抑制血清 中的 IgMl 类抗体的凝集活性,检查出的抗体是 IgG 类,因此提高了 该项反应的特异性。血清的制备 一、血清制备 将血液采集与无抗凝的离心管中,温室静置 30 分钟,3000r/min l 离心 5--10min,吸出血清(切勿吸出红细胞成分) ,分装备用。要保 存的血清则分离后装入离心管与-- 2 0 ℃的冰箱内保存。 二、虎平平板凝集试验(RBPT) 将玻璃板清洗干净,划成 50 个方格(横 10x 纵 5) ,每格 4cm X 4 cm.每一格下再划 1cm 宽的小格,各格标上被检血清号,每一横行 做两份待检血清。在各方格中加入相应的被检血清 3 0 ul,,然后再 其旁加入 30ul 虎红平板凝集抗原,用牙签搅动被检血清和抗原使之 均匀混合, 形成直径约 2cm 的液区。 轻微摇动, 置室温条件下 0 ℃) (2 , 4min 内观察结果,同时设阳性血清和阳性血清对照。 方法二、在载玻片上加抗原 30UL,加入 30UL 被检测血清,混匀。在 5min 内观察结果,轻摇载玻片,出现凝集颗粒为阳性,否则为阴性。 三、结果观察 当阴性血清对照不出现凝集(—) ,阳性血清对照出现凝集(+) , 方可对代检血清进行判定。待检血清在 4min,内出现肉眼可见凝集现 象者判为阳性(+) ,无凝集现象,呈均匀粉红色者判为阴性(—) 四、注意 RBPT 操作简单、反应迅速,且对试验条件要求不高,但特异性不 高,易受试验温度和凝集时间等因素的影响,不易准确判定结果。应 用此法所得的阳性检出率为 70%,较 SAT(试管凝集试验) ELISA(酶 联免疫吸附试验)低。该方法主要用于初筛,对其阳性者,还必须经 SAT 检测为阳性后才能最终判定为阳性。