国内已出现多种检测系统,以下就不同的原理分述之。
1 放射性变应原吸附试验(radio allergo sorbent test, RAST)
【原理及结果】 以瑞典Pharmacia 公司生产的Uni- CAP 系统最有代表性,它的基本原理是将变应原吸附在一种称作immuno CAP 的新型固体上,后者是装在小胶囊中的亲水性载体聚合物,由活化的纤维素衍生物合成,与变应原有极高的结合能力。每个固相载体CAP均包被了不同的变应原,如患者血清中有针对该变应原的IgE,即可与变应原特异性结合,再加入酶标记的兔抗人抗IgE 血清(酶标二抗),即可形成固相载体—变应原—IgE—酶标二抗的复合物,经过洗涤及加入基质,最后加入发展液,发出荧光,根据荧光吸光度换算IgE含量,待测血清的荧光吸光度大于参考品为阳性,小于参考品为阴性,主要操作程序由仪器自动完成,并由仪器自动打印出结果。
【适应症】适用于皮试呈现假阳性的划痕症患者、严重过敏状态发作者、严重皮炎不能作皮试者以及皮肤反应差的老年人及3岁以下儿童,没有用昆虫、动物皮屑等变应原作皮试时产生的全身不适感,对过敏严重度评估,拟行特异性免疫治疗者用药前评估。
【禁忌症】安全无副反应及禁忌证
【优点】灵敏度高、特异性高,一种过敏原一个反应帽,临床选择余地大,可多可少,任意组合。最多可以查600种过敏原。抽血量少,痛苦小。不受对症治疗用药的影响,也不受过敏症状的干扰。全自动出结果,客观性强。被誉为过敏原体外检测的“金标准”。
【缺点】价格高。
2 酶联免疫法(ELISA)
【检测原理及结果】 以美国ASI公司过敏原体外检测试剂盒为例,它的基本原理是:当具有过敏抗原固化于表面的载体与病人血清培养在一起后,血清中特异性IgE就会特异地结合到抗原上,此特异结合的抗体可被酶联的二抗所识别,加入显色剂后,二抗所联的酶使显色剂由橘黄色变为蓝色。显色的深度与血清中特异性IgE成正比;能定性/半定量地检测血清中特异性IgE的浓度。结果判定:根据显色的不同,可鉴定为5个等级(0~4级)。
3、免疫印迹法
【检测原理及结果】 以德国MEDIWISS公司生产的AlleryScreen过敏原检测系统为例。特异性过敏原被吸附于硝酸纤维素膜表面,加入患者血清后孵育,标本中的特异性IgE与过敏原发生反应,结合