Agilent 2100实验标准操作规程 1. 2. 准备凝胶染料混合液Gel-Dye Mix 1. 2. 1. 取出Agilent DNA1000试剂盒中的DNA浓缩染料(蓝色) 和DNA凝胶(红色) ,平衡试剂到室温。 大约30min。 1. 2. 2. 涡旋DNA浓缩染料(蓝色) , 然后用移液器吸取25ul染料, 添加到一管DNA凝胶中(红色) 。 1. 2. 3. 充分涡旋混合液, 离心。 转移到过滤柱中。 1. 2. 4. 2240g±20%, 离心15min。 溶液避光保存在4°C。 1. 3. 加载凝胶染料混合液Gel-Dye Mix 1. 3. 1. 在实验操作前30min取出凝胶染料混合液室温平衡。 1. 3. 2. 取一块新的DNA芯片, 放在芯片注胶平台上。 1. 3. 3. 吸取9ul凝胶染料混合液加到标记有G的孔内。 1. 3. 4. 确保注射器柱塞定位在1ml然后关闭芯片注胶平台。 1. 3. 5. 按压柱塞, 直到被夹子卡住。 1. 3. 6. 等待计时60S, 然后松开夹子。 1. 3. 7. 等待5S, 然后拉回柱塞到1ml的位置。 1. 3. 8. 打开芯片注胶平台, 吸取9ul凝胶染料混合液加到其他标记有G的孔内。 1. 4. 加载标记物Markers 吸取5ul Marker(绿色) 加到12个样品孔内和Ladder孔内, 不要让任何孔空着。 1. 5. 加Ladder和加样 1. 5. 1. 吸取1ul DNA Ladder(黄色) 到标记有梯子的孔内。 1. 5. 2. 其他12个样品孔内, 需要使用的孔内添加1ul样品, 不需要使用的孔内, 添加1ul去离子水。 1. 5. 3. 将芯片水平的放在芯片涡旋振荡器上, 2400rpm涡旋1min(计时器计时) 。 1. 5. 4. 5min之内芯片必须放在Agilent 2100上, 按照软件提示进行DNA电泳操作。 1. 6. 上机 1. 6. 1. 打开电脑电源和仪器的电源。 1. 6. 2. 双击桌面上Agilent 2100 的软件图标, 进入系统。 1. 6. 3. 在实验开始之前, 先将清洗电极用的Cleaner Chip 注满超纯水, 放在芯片平台上, 盖上仪器的盖子, 清洗15s 左右, 打开仪器盖子, 取出Cleaner Chip。 、 1. 6. 4. 将之前加完样本的芯片放在仪器芯片平台上, 盖上仪器的盖子, 按照软件提示点击软件上的Start 按钮, 进行DNA 电泳操作。 2. 维护保养 2. 1. 实验结束后, 将芯片从仪器中取出, 换上注满超纯水的Cleaner Chip, 清洗电极15s, 然后打开仪器盖子, 取出Cleaner Chip。 2. 2. 关闭Agilent 2100 的软件, 关闭仪器电源, 电脑关机并拔出电源插头。 2. 3. 常规清洁。 用沾有纯化水的清洁布将仪器表面擦拭干净。 2. 4. 维护保养。 用清洁布将仪器表面擦拭干净; 再用沾有清洁剂的的清洁布将仪器擦拭一遍, 清洁剂用0. 05%84 消毒液或0. 1%新洁尔灭; 然后再用沾有纯化水的清洁布擦拭三遍; 最后用清洁白布擦干, 且无不洁痕迹。 必要时可用75%的乙醇对仪器的外壳、 芯片平台及电极进行消毒。 建议每月一次。 3. 参考资料 3. 1. 《Agilent 2100_UserGuide》