分析物包括酸性、中性以及碱性化　合物。为了评估来自不同制造商的色谱柱,采用了常规的压力梯　度,通过改变分析物来适应选择性方面的差异。在所有情况下,　至少使用了两种酸、碱以及中性化合物。　此处讨论的方案评估了流动相改性剂对色谱柱稳定性的影响　[11]。　样品溶液的影响可忽略不计,因为样品的上样量只有几　µg。所选　择的测试混标用于评价色谱柱性能,而不是评价测试样品本身对　色谱柱稳定性的影响。开发过程中,为了最大限度减少来自柱床　稳定性的问题,采用了低的流速。如图　5A　所示,除了去甲替林　外,进样　2000　次期间,其他所有化合物的保留时间均相当稳定。　去甲替林的　pKa　非常接近流动相的　pH,保留时间变得越来越长。　在同样的实验条件下对其他品牌的另一根色谱柱进行了测试。在　进样　2000　次期间,大部分分析物的保留时间保持不变。去甲替　林的洗脱时间迅速变得越来越晚。进样在　500　次以内时,去甲替　林与邻近的中性化合物苯己酮开始共流出。峰继续向苯己酮峰移　动,在进样　2000　次后完全共流出。这一实验表明与　Poroshell　HPH　C18　色谱柱相比,非安捷伦的色谱柱恶化程度更大。随着样　品的改变,峰高也会发生变化。　6　min　2　4　6　8　10　0　20　40　60　80　100　6.497　min　2　4　6　8　10　0　20　40　60　80　100　4.151　×105　×105　้क़　%B　0　10　10　90　12　90　0.5　mL/min　2.1　×　100　mm　Agilent　Poroshell　HPH-C18　10　mM　NH4　HCO3　/ᅚ᪜　0.1%　ो໗/ᅚ᪜　pH　10　pH　2.8　‫ރ‬௬ओ　=　2.85　×　107　‫ރ‬௬ओ　=　2.74　×　107　‫଼ܻں‬ጝ　pKa　=　8.91　log　P　=　2.70　图4C.　使用正离子电喷雾模式时高　pH　及低　pH　条件下碱(地尔硫卓)的LC/MS　分析结果的对比,　pKa　8.91,logP　2.70。Agilent　Poroshell　HPH-C18,　2.1　×　100　mm　7　图5A.　即使在高　pH　碳酸氢铵条件下　Agilent　Poroshell　HPH-C18,　2.1　×　50　mm,　2.7　µm　色谱柱也获得了出　色的保留(方法总运行时间　=