Abstract
的膜片钳记录,从急性脑切片制剂与同时细胞内生物胞素填充两个(或多个)耦合突触神经元(配对记录)的组合允许它们的结构和功能特性的相关分析。用这种方法,可以通过它们的形态和电生理反应模式来识别和表征前和突触后神经元。配对录音允许研究这些神经元之间的连接模式,以及化学和电突触传递的属性。在这里,我们得到,以获得可靠的配对记录连同神经元形态学的最佳恢复所需的步骤的一步一步的描述。我们将描述如何对经由化学突触或间隙连接连接的神经元在大脑切片制剂被识别。我们将阐述如何神经元被重建,以获得dendrit自己的3D形态IC和轴突域以及如何突触联系的识别和本地化。我们还将讨论配对记录技术的警告和限制,尤其是脑片的制备过程中与树突和轴突截断相关,因为这些强烈地影响连接的估计。因为配对记录方法的多功能性。然而,它会留在在大脑中的神经元鉴定微电路表征突触传递的不同方面的宝贵工具。
Introduction
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2突触耦合的神经元之间的神经元微电路是在大脑中的大型网络的积木并且突触信息处理的基本单位。一个先决条件,例如神经元微电路的特征是知道的形态和两个前和突触后神经元的伙伴的功能特性,突触连接(S)和它的结构和功能的机制的类型。然而,在突触连接的许多研究中的至少一个在微电路中的神经元的是不是很好的特点。这导致从通常的突触连接研究中使用的相对非特异性的刺激协议。因此,突触前神经元的结构和功能特性要么根本不或仅到一个相当小的范围内确定的(即,标记蛋白质的表达等 )。在组合配对录音与细胞内染色用标志sUCH作为生物胞素,neurobiotin或荧光染料更适合用于研究小神经微电路。这种技术允许一个调查的同时一个形态鉴定突触连接的许多结构和功能参数。
所谓的“单一”突触两个神经元之间的联系进行了研究使用急性切片准备两种皮层和皮层下大脑区域1-10。最初,尖锐的微电极在这些实验中使用;之后,膜片钳记录是采用为了获得突触信号记录具有较低噪声电平以及一个改进的时间分辨率。
一个显著的技术进步是利用红外微分干涉对比(IR-DIC)的光学11-14,微观技术,显著改善神