引起手足口病的主要感染 病原体是人肠道病毒 71 型(human enterovirus 71, HEV71)和柯萨奇病毒 A16 型(coxsackievirus A16, CVA16),近年来 CVA6 CVA10感染也呈现上升趋 。本文对2014年郴州市手足口病病原谱进行分 实用预防医学2016 PractPrev Med,Jul. 2016,Vol. 23,No. 标本来源按照《湖南省手足口病预防控制工 作方案(2013 年版)》 的要求,采集郴州市手足口病的临床诊断病例标本。 核酸检测与基因分型核酸抽提采用西安天隆 的磁珠法全自动核酸抽提仪提取。人肠道病毒通用 型、HEV71 和CVA16 的检测,采用江苏硕世生物技术 有限公司的荧光 PCR 法试剂盒检测;CVA6 CVA10采用深圳易瑞生物技术有限公司的荧光 PCR 法试剂 盒检测;荧光PCR 法未能分型的其他 HEV 阳性标本, 采用大连宝生物技术有限公司的 RT-PCR 试剂盒扩 增核酸,引物参照文献 ,PCR产物送大连宝生物进 行双向测序,基因序列采用 NCBI 的在线 Blast 比对工 具鉴定型别。 CVA16基因序列分析 GenBank数据库中选 取22 个不同年份不同地区的CVA16 的VP1 序列作参 比序列,并以EV71 的原始株 BrCr(U22521)为组外对 照。采用 ClustalX 软件将检索下载的序列与测序所得的VP1 区核苷酸序列做多序列比对分析,然后导 入MEGA 软件进行手工整理,剔除目标区不完整或缺失序列。进化树图的建立采用最邻近法(Neighbor- joining),并作Bootstrap 检验,步长值1 000。 统计学处理运用 SPSS 17. 进行统计分析。构成比的比较采用卡方检验(取Fisher 的精确概率 01为差异有统计学意义。 HFMD病原谱构成 全年共检测手足口病标本 854 份,阳性标本475 份,阳性检出率为55. 62%;3 CVA24。病原谱构成见表1,全年以CVA16 HEV71为主,其构成比分别为28. 00%和25. 05%。 郴州市2014年手足口病病原谱构成 病原体 阳性数 构成比(%) CVA16 133 28. 00 HEV71 119 25. 05 其他HEV 98 20. 63 CVA6 66 13. 89 CVA10 59 12. 42 CVB5 84CVA24 42CVA5 21Echo11 21Echo16 21合计 475 100. 00 不同月份的病原体型别检测结果郴州市2014 年不同月份的病原体型别构成见表 2,其构成比差异 有统计学意义(Fisher 确切概率 01)。全年以CVA16 为主,其次为 HEV71;1-2 月和10-11 月份以 CVA6 为主;3-4 月份以CVA16为主;5-7 月份 以HEV71 为主;9、12 月份以其他HEV 为主。 2014年郴州市不同月份手足口病病原学检测结果 月份 检测数 阳性率 病原体型别构成[n(构成比,%)]CVA6 CVA10 CVA16 HEV71 其他HEV 5628. 57 5(31. 25) 2(12. 50) 2(12. 50) 4(25. 00) 3(18. 75) 5129. 41 5(33. 33) 3(20. 00) 4(26. 67) 67)2(13. 33) 5750. 88 8(27. 58) 3(10. 34) 13(44. 83) 3(10. 34) 9764. 95 52)26(41. 27) 17(26. 98) 10(15. 87) 11170. 27 85)9(11. 54) 27(34. 62) 34(43. 59) 13458. 21 41)24(30. 77) 34(43. 59) 13(16. 67) 7864. 10 00)13(26. 00) 8(16. 00) 14(28. 00) 12(24. 00) 5135. 29 3(16. 67) 5(27. 78) 8(44. 44) 6360. 32 00)4(10. 53) 9(23. 68) 89)22(57. 89) 10 50 74. 00 17(45. 95) 00)7(18. 92) 4(10. 81) 9(24. 32) 11 49 55. 10 15(55. 56) 70)4(14. 81) 5(18. 52) 41)12 57 33. 33 45)8(27. 59) 90)17(58. 62) 不同人群的病原体型别检测结果各年龄组和 男女性别病原体的检测结果见表3。按年龄组分类对 病原体型别的构成比进行比较,其差异有统计学意义 (Fisher 确切概率PFT3>TT4> TT3,阳性率分别为87. 1%>84. 6%>79. 1%>44. 0%;甲 减患者首选 sTSH,也是灵敏度最高,阳性率为 100. 0%,其次是 FT4 >TT4 >TT3 >FT3,阳性率分别为 93. 3%> 67. 3%> 38. 8%> 19. 2%。TT3、TT4、FT3、FT4 血清浓度水平对 TSH 的分泌具有敏感的负反馈作用, 且主要依赖FT3、FT4 血清浓度水平,当甲亢患者轻度 增高其分泌受抑制而降低,甲减患者轻度降低其分泌 增强而升高 [7-8] ,据此对于亚临床甲亢甲减患者可作出 诊断。 综上所述,对甲状腺功能异常患者进行血清甲状 腺激素的检测,可帮助临床医生诊断疾病,并对患者的 临床诊断和预后判断均具有重要的临床意义。 参考文献 北京:人民卫生出版社,2008:349-354. 北京:人民卫生出版社,1973:1894-1910. 新疆医学,2014,12(1):28-29.[4]中山医学院《内科疾病鉴别诊断学》编写组. 内科疾病鉴别诊断学 北京:人民卫生出版社,2014:634-642.[5]Chopra IJ. dailyproduction ,-triiodothyronine(reverse T3)in man[J]. ClinInvest,1976,58 (1):32-40. 浅论影响用放射免疫分析技术检测甲状腺激素准确性的因素和解决对策[J]. 当代医药论坛,2014,12(1):50-51. [7]李江宁. 全自动化发光免疫分析与放射免疫法测定血清促甲状腺 激素的对比观察[J]. 中国医药指南,2014,12(36):148-149. 孕期亚临床甲减大鼠模型的建立[J].实用预防医学,2015,22(6):686-689. 收稿日期:2015-11-30 (接818 包含的遗传信息量大,更能体现病毒变异的进化特征,因此本研究选用 VP1 区作为进化分析的参考指标。 本文从GenBank 数据库中选取了不同年份不同地区 的CVA16 的VP1 序列作参比序列,并以EV71 的原始 株BrCr(U22521)为组外对照,对2014 年郴州市的 CVA16 分离株进行基因分析,结果显示郴州市的6 分离株均为B1 基因亚型,与国内目前流行的基因亚 型一致。虽然 CVA16 在致死率上不如 HEV71 是从最近几年手足口病发病率居高不下的形势来看,由CVA16 而引起的疾病负担并不比 HEV71 小,仍然 需要对它进行重点关注。另外,本文中发现的一例 CVA24 感染的死亡病例,将在后续的研究中作深入分 参考文献[1]