高温灭菌法原理:高温可引起菌体蛋白质核酸、酶系统等活性大分子氧化或变性失活导致微生物死亡。
㈠干热灭菌法
⑴火焰烧灼法(简单彻底,对物品破坏大)
原理:将被灭面物品在火焰中燃烧,使所有生物碳化
适用于:无经济价值物灭菌,不怕烧实验品具,如 接种环,镊子,试管,刀片等的灭菌
⑵热空气灭菌法(由于空气传热穿透力差,菌体在脱水状态下不易)
原理:将物品放入烘箱内,然后升温至150°C- -170℃,维持2小时。
杀死,所以温度高、时间长。
适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌,不适合液体样品,及棉花、纸张、纤维和橡胶类物质的灭菌。
㈡湿热灭菌法
(1) 煮沸消毒法
将水加热至100°C,煮沸15- -30min,可杀死所有营养细胞和部分芽胞,达到消毒的目的。
外科手术器械、注射器、针头、玻璃容器等,经煮沸15~30min可杀死细菌的繁殖体;
水中加入2%~5%石炭酸,能增强杀菌力,经15min的煮沸可杀死炭疽的芽胞;
若水中加入1%碳酸钠,可使溶液pH偏碱性,也可增强杀菌力,同时还具有减缓金属氧化的防锈作用。
(2) 间歇灭菌法(流通蒸汽灭菌法):
将待灭菌物品在80-100°C蒸煮15-60min,冷却后搁置室温(28-37°C) 下过夜,并重复以上过程三遍以上。
原理:其蒸煮过程可杀死微生物的营养体,但不能杀死芽胞,室温过夜促使残留的芽胞萌发成营养体,再经蒸煮过程可杀死新的营养体;循环三次以上可保证彻底灭菌的目的。
适用于:不耐高温的物品灭菌,而不适于高压灭菌的 特殊培养基、药品的灭菌。缺点是麻烦、费时。
(3) 巴氏消毒法
低温长时法:
62.9°C 30min处理牛奶
高温短时法:
71.6°C 15s处理牛奶
超高温瞬时法:
让液体食品在132C左右1-2s,急剧冷却至75°C, 经匀质化后冷却至20°C,保存期可达半年。
(4)高压蒸汽灭菌法
利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升,以达到100 C以-上高温灭菌的方法。
方法: 121°C (103.4kPa) 维持1 5-20min。
适用:耐高温物品,玻璃仪器、含水或不含水的物品。
湿热灭菌与干热灭菌的比较
㈢同一温度下,湿热灭