法多数菌株存活时间不长 ,而且不适于营养要求高的细菌[3 ,4];脱纤维羊血冷冻保存法使用的羊血对一般实验室来说来源困难[5 ];甘油原液保存法因甘油的脱水作用使其保存菌种效果不佳 ,某些菌株容易死亡[6 ,7 ]。 结果表明 ,我室用甘油 - 生理盐水保存法保存菌种适用于一般细菌的保存 ,同时也适用于链球菌、奈瑟氏菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种 ,适用范围广 ,操作简便 ,效果好 ,无变异现象发生 ,为微生物实验教学和有关科研工作的开展提供了保证 ,对基层医院和科研单位也极具推广价值。 甘油 - 生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液的原因可能是加入生理盐水适当降低了 甘油的高渗作用 ,且用肉汤培养物加入甘油 - 生理盐水保存液中 ,又适量增加了 保存液的营养成分 ,从而更好地保护了 待保存的菌株[6 ]。 将链球菌、奈瑟氏菌和水弧菌在 - 80 ℃冻存和 37 ℃水浴中快速解冻 ,减少了冻结和解冻过程中形成冰晶对细菌产生损伤 ,能更好地保存链球菌、奈瑟氏菌、弧菌等需特殊方法保存的细菌[1 ]。 经过我室反复进行实验 ,此方法保存菌种最好采用幼龄肉汤培养物 ,采用 24 h 肉汤培养物冻存结果无明显差异 ,但如果使用陈旧培养物或将固体培养物直接洗入保存液 , 链球菌、奈瑟氏菌、弧菌等需特殊方法保存的细菌 ,冻存 3 个月 后细菌基本死亡 ,这可能是因为陈旧培养物中细菌自身所产生的有害代谢产物过多 ,使其在保存过程中容易死亡[2]。[参考文献][1 ] 邱波 ,姚斐. 低温对常见致病弧菌菌种保存的影响[J ] . 职业与健康 ,2003 ,19(9) :531[2] 中国科学院微生物研究所编著组. 菌种保藏手册[ M] . 北京 :科学出版社 ,1980. 11[3 ] 微生物学及检验技术[ M] . 广东 :人民出版社 ,1979. 3911[4] 陈秀英. 菌种保存方法的比较[J ] . 中国卫生检验杂志 ,2002 ,12(2) :2311[5 ] 尹洪萍 ,蔡玲斐. 一种脱纤维血冷冻菌种保存法[J ] . 杭州医学高等专科学校学报 ,2003 ,24(1) :251[6] 尤敏 ,管福来 ,王萍 ,等. 医学微生物教学用菌种保存方法的比较[J ] . 淮坊医学院学报 ,2004 ,26(1) :27 - 281[7 ] 俞利平 ,蔡玲斐. 介绍二种简便的菌