药品质量控制包含鉴别、检查、含量测定三方面。鉴别是根据药物的物理、化学或生物学特性进行的试验,判断药物真伪。检查是对生产过程中和储藏过程中引入的杂质进行检查,以确保药物质量的安全、稳定、有效。目前,药典中的多糖鉴别主要采用化学法如苯酚硫酸法、蒽酮硫酸法进行鉴别,方法的专属性亟待提高。检查项则多为一般杂质检查,如干燥失重、酸碱度。多糖的检查如香菇多糖、黄芪多糖一般对干燥失重进行检查,缺少对特殊杂质的检查。
1.2 多糖鉴别方法概述
鉴别试验项目包括性状、一般鉴别试验和专属鉴别试验。多糖鉴别方法主要包括物理鉴别法、化学鉴别法、仪器鉴别法。
1.2.1 物理鉴别法
物理鉴别法指通过望闻摸尝等直观的方法对药物性状进行鉴别, *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: &351916072&
一般包括外观、溶解度和物理常数等。该方法操作简单、易行、快速、可靠。多糖的物理鉴别主要采用对溶解性、比旋光度、特性粘度等进行检测。李桂菊[1]通过观察黄芪多糖粉的颜色,闻黄芪多糖粉的味道,尝其口感,用手摸黄芪多糖粉,测定黄芪多糖粉的溶解性,鉴别黄芪多糖粉的真伪。刘德胜[2]等人观察樱桃叶多糖在水、丙酮、乙醚、无水甲醇、无水乙醇中的溶解性,对樱桃叶多糖进行了鉴别。
1.2.2 化学鉴别法
化学鉴别法是根据药物与化学试剂在一定条件下发生的化学反应所产生的颜色、沉淀、气体、荧光等现象,鉴别药物真伪的方法。化学鉴别法简称化学法,包括呈色反应鉴别法、荧光等。操作简便、快速、实验成本低、应用广。
1.2.2.1 呈色反应鉴别法
呈色反应鉴别法指供试品溶液中加入适当的试剂溶液,在一定条件下发生反应,生成容易观察的有色产物。多糖呈色反应鉴别一般采用蒽酮硫酸试剂反应、苯酚硫酸试剂反应、碘碘化钾反应、菲林试剂反应、茚三酮反应等。呈色反应鉴别操作简单、快速,但专属性差,只能鉴别是多糖成分。刘德胜,颜玲[2]等人在樱桃叶多糖的鉴别实验中采用ɑ萘酚试验、蒽酮-硫酸法试验、菲林试剂反应对其进行定性鉴定,经过鉴别可知,所提取的灰白色物质为多糖成分。陈新[3]等人通过ɑ萘酚试验、苯酚硫酸试验、碘反应、碘碘化钾反应等对米糠多糖进行了呈色反应鉴别。中国药典中记载,云芝采用酒石酸酮试剂反应进行鉴别[3];黄芪多糖采用ɑ萘酚法鉴别;香菇多糖提取物采用蒽酮硫酸法进行鉴别,溶液显蓝绿色[4]。
1.2.2.2 荧光反应鉴别法
荧光反应鉴别方法是将供试品溶解在适当的溶剂中,直接观察或加入试剂反应后观察荧光现象的鉴别方法。中国药典中记载,茜草多糖可进行荧光反应鉴别。取0.2 g茜草多糖粉末,加入乙醚5 mL,振摇数分钟后,过滤,滤液中加入氢氧化钠试液1 mL,振摇,静置使其分层,水层显红色;醚层无色,置紫外光灯(365 nm)下观察,显天蓝色荧光[5]。
1.2.3 仪器鉴别法
红外光谱法是多糖的专属性鉴别方法。红外光谱是研究糖结构的重要手段之一,可以用于不同糖的鉴别、糖苷键及构型的确定。用红外光谱进行分析,可以鉴别不同糖、确定糖的糖苷键及构型,确定多糖主要的峰位、峰形、峰强,分析特征官能团,与所鉴定多糖的标准品的结构进行比较,从而鉴别多糖的真伪。红外光谱具有测试时间短、快速,操作方便,重复性好,灵敏度高,专属性好,试样用量少,仪器结构简单等特点[6]。多糖红外光谱鉴别主要采用溴化钾压片法。
闫慧单[7]等人通过红外光谱法鉴别所获得的香菇多糖的糖苷键构型,表明了β吡喃糖基的存在,得到结果其分离纯化所得香菇多糖为β吡喃多糖。刘德胜,颜玲等人在樱桃叶多糖的鉴别实验中,取一定量樱桃叶多糖粉末,按照红外光谱样品制作要求制备样品,进行红外光谱扫描结果表明,樱桃叶所提取的灰白色物质中存在多糖化合物。夏朝红[8]等人研究了壳聚糖、葡聚糖等几种多糖的红外光谱,得出葡聚糖为ɑ多糖,其余为β多糖。由此可见,红外光谱专属性高,应用广泛。
1.3 多糖杂质检查方法概述
杂质检查是控制多糖质量一个非常重要的方面。多糖中含有杂质是影响其质量的主要因素,如果含有超过限量的杂质,可能引起理化性质发生变化、影响稳定性、多糖含量变低等。因此,对多糖进行杂质检查是多糖质量标准研究的一个重要方面[9]。
杂质检查包括一般杂质和特殊杂质检查。一般杂质包括干燥失重测定法、总灰分和酸不溶性灰分测定法、重金属检查法等,多糖一般进行干燥失重、总灰分和酸不溶性灰分测定。特殊杂质是基于药物的生产工艺、储藏等方面可能存在的有关杂质。