使用　Agilent　Captiva　EMR-Lipid　分析　生物样品中的维生素　D　代谢物　应用简报　作者　Derick　Lucas　和Limian　Zhao　安捷伦科技公司　临床研究　摘要　生物样品中的脂类会对　25-羟基维生素　D2　和D3　代谢物的分析产生不利影　响。传统的样品前处理技术(如蛋白质沉淀)无法去除脂质干扰,而固相　萃取则需要多个步骤以及方法开发。一种稳定可靠的样品前处理方法使用　Agilent　Captiva　EMR-Lipid　进行基于　96　孔板的原位蛋白质沉淀和通过型脂质净　化。创新的化学吸附剂能够选择性去除脂类,不会影响目标分析物。日内　准确度和日间准确度范围为　90%-110%,且所有　QC　浓度下的精密度均　　25。　图2.　50　ng/mL　人血浆经　Agilent　Captiva　EMR-Lipid　净化　(A)　和PPT　(B)　处理后得到的　1)　25-OH　D2　(m/z　313.3　>　295.3)　和2)　25-OH　D3　(m/z　303.3　>　265.3)　的MRM　叠加图　(n　=　4)　7　标样柱后注射　利用标样柱后注射作为定性分析方　法,评估对目标　25-OH　维生素　D　化合　物的基质效应。使用注射泵在液相色　谱方法运行的同时,将50　ng/mL　25-OH　D2　和D3　的溶液以　90　µL/h　的速度泵入　液相色谱柱后　T-in。然后注入空白血浆　样品,产生用于基质/脂类洗脱的抑制　区。图3显示出在图　3B　的叠加色谱图　中与抑制区共流出的　25-OH　D2　和D3。　图3A　叠加图显示出通过采用　Captiva　EMR-Lipid　除去抑制信号显著提高分析　物响应。　利用　Agilent　Captiva　EMR-Lipid　进　行的样品前处理　EMR-Lipid　板提供了简便易用的高效净　化方法,使维生素　D　代谢物获得了较　高的分析物回收率和精密度。在单独　的样品板中对血浆　QC　和校准品进行　前处理,确保实现充分混合、均匀转　移和完全　PPT。溶剂保留滤芯可保留　碰撞溶剂,并在　PPT　之后轻松实现真　空作用下的流动。可高效滤除蛋白质　而不发生堵塞,始终如一地提供用于　进样的洁净洗脱液。方法开发表明,　通过洗脱液蒸发和复溶可以提高分析　灵敏度,但这种方法并不可取,因为　不经浓缩以及优先选择快速