如黑 性痴呆病是 由于氨基己糖甘酶 A(Hex A)缺乏所致,过去使川荧光底物牛甲基-P-D-N-ZL酰葡胺(4MUG) 先测出Hex 总活性后再测 活性,并据此计算出Hex 活性。现在则使用4•甲基. B-D-N乙酰葡胺6硫酸 (4MUGS)作底物,可直接测出Hex A活性。又如MPS IV 由于半乳糖-6-硫酸脂酶缺陷所致,过去使用同位素标记底物,现用新荧光底物,省略了同 位素标记步骤。除芳棊硫酸酯酶 及B两种酶用成色底物外,其他均用荧光底物。每种酶活性测定方法用统一的步骤,即20 U1 细胞匀浆加入40 U1 底物,充分混匀,置37C水浴温浴1 小时后,加入400 0.5mol/L 碳酸钠与碳酸氢钠缓冲液(pH 10.7)终止反应,川荧光分光光度计测定酶活性,激发 波长为 365 um,发射波长为445 m。以上方法的改进,都为在孕早期取绒毛做产前诊断打下基础。 协和医科人学更学遗传室1991〜1997 年在90 例先证者的诊断基础上对28 例高危孕妇 进行 了产前诊断(表2),其中14 例是于孕早期取绒毛进行的。检出患病胎儿5 例,其中粘多 糖贮积 例,异染性脑门质营养不良、GM1、GM2神经节甘脂贮积症各1 例。新方法测 定的结果均 经羊水细胞及出生后胎儿检查验证证实。以上实践结果说明孕早期产询诊断的可 酶体贮积症的病例诊断及产前诊断例数(1991〜1997) 病名病例 诊断产前 诊断粘多糖贮积症459 戈谢病(高雪病)182 异染性脑口质营养不良105 脂质贮积症63GM1神经节甘脂贮积症23GM2 神经节苛脂贮积症42 球形细胞脑白质营养 不良2 合计9028 (五)诊断注意爭项:产前诊断的先决条件是对先证者弄清是哪一种酶缺 陷。做到这 一点需要临床与实验室紧密配合,先从临床表现分析最有可能是哪种酶缺陷病, 才能有目的地 测那种酶。虽然目前这组疾病的研究己达分子水平,但方法和步骤都比较复杂, 需要时间比较长。 因此基因诊断尚不能収代酶活性测定做产前诊断的位置。 值得注意的是部分病例相关的酶活性在正常范围,其致病原因是与酶活性有关的激活蛋 的缺陷,如异染性脑白质营养不良等。这种情况不能川测酶活性的方法做产前诊断。产询诊断可在孕中期17〜20 周做羊膜腔穿刺取羊水,用经培养的羊水细胞做酶活性测 35S掺入实验;近年来可于孕早期7〜12周取绒毛做酶活性测定,但不能完全取代羊 水细胞法。 因为某些酶在绒毛中不表达或受绒毛标本中其他因素干扰。 (收稿:1998-04-30)