【临床意义】 同VDRL。 荧光螺旋体抗体吸收试验【原理】 荧光螺旋体抗体吸收试验 FTA ABS 的原理是人体感染梅毒螺旋体后一定时间 血清中产生抗密螺旋体抗原的特异性抗体 可用免疫荧光方法检查。 【操作方法】 用白金耳取梅毒螺旋体Nichols株在玻片上涂4个直径为5mm的膜 凉干、丙酮固定、编号 吸取灭活被检血清50ml置于稀释板凹陷内 加吸收剂0 2ml 混匀后30 30分钟 再用PBS稀释成1 20、1 80、1 320、1 640 用微量移液器分别取不同稀释倍数的血清加至抗原涂膜上 置于带盖湿盒37 30分钟 再用PBS冲去膜上未与抗原结合的血清 并置PBS中浸泡15分钟旋转摇动3次 每次5分钟 更换PBS 洗去片上未与抗原结合的血清 取出玻片凉干 于每个膜上滴加10ul兔或羊抗人FITC IgG 再置37 30分钟 PBS冲洗、浸泡 吹干再加甘油封固液后镜检。 【结果】 微弱或无荧光螺旋体 可疑 较弱的荧光螺旋体 179 阳性强或中等度荧光螺旋体。 【临床意义】 该法既有较高的敏感性又有较高的特异性 被国内外学者认为是梅毒螺旋的权威性诊断方法。该试验一旦阳性 约95 患者终身不转阴 因此指标阳性只能说明患过梅毒 不能作为疗效观察及随访指征。 梅毒螺旋体血球凝集试验【原理】 梅毒螺旋体血球凝集试验 treponema pallidum hemagglutination assay TPHA 是以梅素螺旋体作为抗原的间接血球凝集试验 将经吸收剂吸收后的血清滴于血凝板上 再加上已吸附抗原的羊红细胞后出现凝集反应。 【操作方法】 用无菌水恢复冷冻干燥血球体积 置室温30分钟 倍比稀释血清 再稀释血球工作液 然后滴管加入混匀的致敏血球 滴加完毕后振荡1 2分钟或用手轻轻拍击 15 25 孵育4小时 图14 梅毒螺旋体TPHA试验【结果】 阴性 羊毛细胞环内少量细胞覆盖 或紧密沉于孔底中央 可疑阳性 细胞光滑铺盖 边缘有少量羊红细胞环 弱阳性羊红细胞形成光滑的薄底 边缘有少量的羊红细胞坏 中阳性羊红细胞光滑地铺于孔底部 强阳性羊红细胞光滑地铺盖于整个孔底 有时形成边缘折迭。 【临床意义】 同FTA ABS。 三、淋球菌检查 涂片检查法【原理】 急性淋菌性尿道炎、宫颈炎患者有大量黄白色脓性分泌物 涂片染色可见其白细胞胞浆内有淋球菌。 【操作方法】 用无菌生理盐水棉拭子 伸入男性尿道口内2cm 4cm处 轻轻转动取出分泌物 女性先用无菌的脱脂棉搽去阴道内粘液 用无菌的脱脂棉拭子插入宫颈口内2cm 4cm处旋转取出分泌物 淋菌性结膜炎者取结膜分泌物 淋病性关节炎时可取关节穿刺液 前列腺炎患者取前列腺液 盆腔炎者在腹腔镜下取材 青春期前女童可采取阴道标本 咽部感染者应从咽隐窝或咽后壁取材 若为直肠标本 将棉拭子伸入肛门2cm 3cm 轻轻拉动 停留数秒后取出 不沾粪便 。标本直接涂片2张 加热固定后作革兰、美兰或甲基绿染色 油镜下检查。 180 【结果与临床意义】 多形核粒细胞中可见G 、美兰染色呈深蓝色或甲基绿染色呈红色的细菌 菌体长约0 7μm、宽约0 呈肾形或马蹄形成对排列 两个凹面相对 像两粒黄豆并在一起。有的涂片见到的菌体并不都是肾形 而是单个、四联或八叠状 有时位于细胞外 图14 10 图1410 普通显微镜下淋球菌 细胞内 尿道或宫颈分泌物中找到细胞内淋球菌 可作为淋病的初步诊断依据 但该法敏感性不肯定 易漏诊。对于男性尿道标本 每高倍镜下多形核细胞大于4个 有细胞内双球菌可诊断 女性患者宫颈分泌物中杂菌较多 故其阳性结果仅供参考。涂片法不能用来判定淋病是否治愈以及诊断淋菌性直肠炎及口腔炎的依据。 淋球菌培养【操作方法】 取材后立即接种于培养基上 目前常用的培养基有血琼脂或巧克力琼脂培养基、T M、NYC及ML培养基等。培养温度以35 36 CO2环境下培养为好。