内生真菌菌丝生长和多糖等代谢物的产生等生理生化过程均需在一定时间完成。不同培养时间,对PSEF产量、水提物中多糖含量、蛋白质含量、多糖类型和多糖生物活性均有不同影响。例如,分离自胡椒健康叶片中的内生真菌Diaporthesp. JF766998在培养了72、96和168 h后,其粗多糖产量分别为3.0、15.4和14.8 mg/100 mL发酵液;而且随着时间增加,总多糖含量从71%增加到99.8%,蛋白质含量也从28.5%下降到0%;对于单糖组成,在培养72 h时,葡萄糖占84%,随着时间增加,其下降到30%,而半乳糖和甘露糖的含量明显增加[34]。一般发酵时间在4-30 d之间。通常,为提高发酵效率,降低发酵时间,先通过小规模发酵,在真菌生长对数期转接到大规模发酵瓶中,此时,内生真菌生长活力较强,繁殖迅速,可缩短后期发酵所需时间。培养温度可通过影响酶活性,改变内生真菌代谢速率,甚至导致某些代谢过程出现或终止,影响多糖产生,所以合适的培养温度非常重要。由表1可见,尽管不同内生真菌发酵温度略有不同,但是大多数基本处于20-28 ℃之间,温度过低或者过高均不利于内生真菌的生长和多糖积累[26]。
总之,影响内生真菌生长和PSEF产量的因素存在差异,不同内生真菌受不同因素影响大小有所区别。例如,对内生真菌Berkleasmiumsp. Dzf12 EPS培养基研究发现,葡萄糖、蛋白胨和MgSO4·7H2O浓度是影响EPS产生的关键因子[35]。