丁香 别名:公丁香(花蕾)、母丁香(果实)。为桃金娘科植物丁香Eugenia caryophyllata Thunb.的干燥花蕾及果实。原产于非洲摩洛哥,现我国广东亦有种植。丁香花蕾含挥发油(即丁香油)14%~20%,油中主要成分丁香酚,约78%~95%,乙酰丁香酚约3%及少量的丁香烯、甲基正戊酮、甲基正庚酮、香荚兰醛等。另尚含齐墩果酸、鞣质、脂肪油及蜡。果实含丁香油2%~9%。
丁香酚(eugenol) 分子式C10H12O2,分子量164.20。无色或苍黄色液体,bp.225℃。几不溶于水,与乙醇、乙mi、氯fang可混溶。
(一)提取原理
本实验用水蒸气蒸馏法提取丁香挥发油。利用丁香酚为苯丙素类衍生物,具有酚羟基,遇到氢氧化钠水溶液即转为钠盐而溶解,酸化时又可游离的性质将丁香酚从挥发油中分离出来。并利用可与三氯化铁试剂发生反应的性质进行检识,也可进行薄层色谱检识。
(二)实验内容
1.丁香油的提取 取丁香50g,捣碎,置于烧瓶中,加适量水浸泡湿润,按一般水蒸气蒸馏法进行蒸馏提取。也可将捣碎的丁香置于挥发油测定器的烧瓶中,加蒸馏水300ml与数粒玻璃珠,连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部分,并溢流入烧瓶时为止,加入1ml二甲苯,然后连接回流冷凝管。加热蒸馏30分钟后,停止加热,放置15分钟以上,读取测定器中二甲苯油层容积,减去开始蒸馏前加入二甲苯的量,即为挥发油的量,再计算出丁香中挥发油的含量。
2.丁香酚的分离 将所得的丁香油置于分液漏斗中,加10%氢氧化钠溶液80ml提取,并加150ml蒸馏水稀释,分取下层水溶液,用10%盐酸酸化使丁香酚呈油状液体,分取油层,用无水硫酸钠脱水干燥,得纯品丁香酚。
3.检识 取少许丁香酚置于试管中,加1ml乙醇溶解,加2~3滴三氯化铁试剂,显蓝色。
4.薄层色谱检识 将提取得到的丁香油用乙mi配制成每1ml含0.02ml丁香油的供试液。另取丁香酚对照品,加乙mo制成每1ml含20微升的对照品溶液,吸取上述两种溶液各5微升,分别点于同一硅胶G薄层色谱板上,以石油醚(60~90℃)-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷洒5%香草醛硫酸溶液,于105℃加热烘干。在供试品色谱与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(三)实验说明及注意事项
1.采用挥发油含量测定器提取挥发油,可以初步了解该药材中挥发油的含量,但所用的药材量应使蒸出的挥发油量不少于0.5ml为宜。
2.挥发油含量测定装置一般分为两种,一种适用于相对密度小于1.0的挥发油测定。另一种适用于测定相对密度大于1.0的挥发油。《药典》规定,测定相对密度大于1.0的挥发油,也在相对密度小于1.0的测定器中进行,其作法是在加热前,预先加入1ml二甲苯于测定器内,然后进行水蒸气蒸馏,使蒸出的相对密度大于1.0的挥发油溶于二甲苯中。由于二甲苯的相对密度为0.8969,一般能使挥发油与二甲苯的混合溶液浮于水面。由测定器刻度部分读取油层的量时,扣除加入二甲苯的体积即为挥发油的量。
3.用挥发油测定器提取挥发油,以测定器刻度管中的油量不再增加作为判断是否提取完全的标准。