1. 2主要试剂一抗是小鼠抗人 BRAF V600E 单克隆抗体( IgG,美国 NewEast 公司, 产品编号:26039) ; 生物素标记羊抗小鼠二抗, SABC 即用型试剂盒, 二氨基联苯胺( DAB) 显色剂均购自 武汉博士德生物工程有限公司。1. 3方法采用免疫组化 SABC 法, 按照试剂公司提供的操作流程进行:4 μm 厚组织切片经二甲 苯, 酒精依次梯度脱蜡、水化;用蒸馏水配置新鲜的 3% H2O2室温作用 10 min 以消除内源性过氧化氢酶;用 pH 值 6. 0的枸橼酸缓冲液进行高压抗原修复 10 min; 正常山羊血清封闭液,室温 20 min,甩去多余液体,滴加一抗( 稀释度为 1∶ 80) ; 4℃ 过夜后在 37℃ 温箱复温 45 min, 滴加生物素化二抗, 室温 20 min; 滴加 SABC 液, 室温 20min; DAB 显色 1 min 左右; 自 来水冲洗, 苏木精复染,通透、脱水,中性树胶封片, 显微镜下观察结果。 由试剂公司 提供阳 性 对照 片, 以 PBS 代替一 抗作 阴 性对照。