健那绿要溶解在生理盐水中使用,而实际操作中,它的溶解度并不大,溶解速度也非常磨叽,所以要对溶液加热使得健那绿燃料能够快速、充分地溶解在生理盐水中。温度超过50度,健那绿就可能发生水解导致不能染色,所以推荐加热温度30-40度。这同时也是大多数生物的体温。使用30-40度的染料对活细胞进行染色,也有助于提高细胞代谢水平,加快染色进度。