pcr扩增产物的特异性与哪些因素有关
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失. 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件.寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。
PCR非特异性扩增指的是你进行PCR所扩增出来的条带不是所要的,引物与模板在非目的条带处有错配,导致延伸产物不是目的条带。非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带。
引起非特异性扩增的原因有很多,Mg2+浓度过高、退火温度太低、引物特异性不好等等原因