称取样品　2　±　0.01　g,置50　mL　离心管中,加入　40　µL　混合内标溶液　(D15-金刚烷胺:200　μg/L,13　C5-利巴韦林:1000　μg/L),再加入　5　mL　0.5　mmol/L　乙酸　铵溶液　(pH　4.8)　和40　µL　0.25　U/µL　酸性磷酸酶溶液(购于　Sigma　公司)　,涡旋　30　秒,置　于摇床上,37　°C　恒温避光酶解　2　小时。　2　在酶解液中加入　4　mL　5%　三氯乙酸溶液,涡旋　30　秒,10000　r/min　低温离心　10　分钟,移取上清液于另一离心管中,用5%　氨水调　pH　至8.5　±　0.1,加水定容至　10　mL,再次离心,得到上层澄清提　取液。　取5mL　样品提取液经　Agilent　Bond　Elut　PBA/PCX　复合固相萃取　柱富集和净化后,使用配备　Agilent　Poroshell　120　SB-Aq　色谱柱的　Agilent　1290　Infinity　液相色谱系统/6470　三重四极杆液质联用系　统对目标物进行分析,图1为固相萃取操作流程,表1–3　为液相　色谱、质谱分析条件。　化合物名称　母离子　(m/z)　子离子　(m/z)　碎裂电压　(V)　碰撞能量　(eV)　13　C5　-利巴韦林　250.1　113　70　5　D15　-金刚烷胺　167.2　150.1　100　20　利巴韦林　245.1　113　96　70　70　5　30　金刚烷胺　152.2　135　93　100　100　18　30　液相色谱　1290　Infinity　液相色谱系统　色谱柱　Poroshell　120　SB-Aq,2.1×100m,2.7μm(部件号　685775-914)　流速　0.4　mL/min　柱温　35　°C　进样量　5　µL　流动相　A　0.1%　甲酸、0.5　mmol/L　乙酸铵的水溶液　流动相　B　乙腈　洗脱程序　时间(min)　B(%)　0　0　2.0　0　4.0　12　5.0　12　5.01　98　9.0　98　9.1　0　后运行　3　min　质谱　6470　三重四极杆液质联用系统　离子源　ESI+　监测方式　MRM　喷嘴电压　0　V　毛细管电压　3000　V　雾化气压力　35　psi　鞘气温度　275　°C　鞘气流量　10　mL/min　干燥气温度　250　°C　干燥气流量