作者:阿甘
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做过Western-Blot的童鞋知道,分子量小于30KDa的蛋白分子不容易做。做为一只电泳狗,我被小分子蛋白折磨的是遍体鳞伤。小分子蛋白虐我千百遍,我待小分子蛋白如初恋。抱怨是没用的,想方设法解决问题才是王道。
一次又一次的调整方案,一次又一次的徒劳无功。正当我感到绝望之时,正当老板对我叹息失望之时,我的小分子蛋白结果出来了。从此以后,我的小分子蛋白之路顺利许多。在此,我总结了我的小分子蛋白之路经验,供有需求的童鞋参考。
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提蛋白的过程在30分钟之内完成,提完蛋白立即加入上样缓冲液煮沸(煮沸的时间长一点,一般20分钟),准备好蛋白样品后立即电泳。(小分子蛋白容易形成多聚体,这样可以大大减少多聚体的形成)。