将20~40 个鲜鸡蛋煮熟,取蛋黄捣碎,放入铁锅翻炒至油出渣黑后关火静置,用无菌纱布过滤,即得。 这种方法出油率极低,难以进行工业化生产,且油的色泽、气味差,磷脂含量低,可能含有致癌物苯并芘。所以,一般只作为小量的临床使用,不作为大量提取的方法。
2. 烘焙法:将煮熟的卵黄研碎后放入烘箱,在60 ℃鼓风干燥 8~10 h,放入预热后的耐高温容器内文火加热至 100 ℃,再调到武火,在密闭条件下继续加热,直至卵黄变黏稠并有油状液体析出,将液体倾出,放凉,即得。该方法出油率为 26.95%,出油率也较低,且含有大量杂质,工艺不规范,质量难控制,颜色、气味较差。
3. 减压蒸馏法:取煮熟的卵黄,研碎后在 60 ℃鼓风干燥 6 h,装入三颈瓶,在电热套中常压蒸馏至沙浴温度 250 ℃,卵黄 100 ℃时开始减压,在压强 0.05~0.06 MPa、卵黄蒸气温度280±5℃减压蒸馏 4 h。该法出油率达 55.89%,且脱色脱臭,有增效减毒效果。
4. 溶剂提取法:工业上提取蛋黄油常用溶剂法,利用蛋黄油不溶于水、溶于有机溶剂乙醇、乙醚、三氯甲烷等的性质,将蛋黄中的油脂提取出来,即油脂的萃取。 将熟蛋黄切碎,置索氏提取器,用三氯甲烷 60 ℃水浴加热回流提取至蛋黄呈白色,回收三氯甲烷,得桔红色油状液体。平均收率为 35%,其中脂肪油含量为 88.9%。 取出生 7 d 以内的鸡蛋,离心分离得到卵黄,30~50 ℃干燥。以干卵黄∶乙醇=1∶4 的萃取比,在30~50 ℃温度下萃取 1~2 h,真空抽滤,减压蒸馏得蛋黄油。
5. 酶法提取:取蛋黄粉加水配成蛋黄液20 g/d L,调适宜 pH 及温度,以100∶1 的比例加入蛋白酶 A 水解 2 h,再以 100∶1.5 的比例加入蛋白酶 B 水解 2 h,90 ℃灭酶 30 min,然后以 4 000 r/min的转速离心 15 min,得到上层蛋黄油。此法得油率 58.89%,不含磷脂成分,但脂肪酸含量高。 新鲜鸡蛋经打蛋分离得到蛋黄液,加入去离子水,调节pH、温度为酶作用最适值,以1.5 g/100 g 加蛋白酶 A、B 水解,分别水解 2、3 h,水解结束后的酶解蛋黄液,调pH5、90 ℃加热保温进行破乳,离心分离,4 000 r/min,15 min。得上层流动状蛋黄油I(甘油三酸酯)、第二层胶状蛋黄油II(富含磷脂)等。总磷脂提取率达 89.86%,将甘油三酸酯与磷脂较好的分开,胶状部分的卵磷脂含量达 37.09%。这种方法可简化提取工序、减少污染、增加提取率。
6. 亚临界丙烷萃取:将蛋黄粉原料装入萃取釜,丙烷加热到 50~70 ℃后从萃取釜底部向上流过原料床层,将蛋黄油萃取出,再经压力控制阀减压至丙烷的饱和蒸汽压,在分离器中将丙烷与蛋黄油。获得的蛋黄油含甘油三酸酯 79.8%、胆固醇 15.0%、卵磷脂 1.1%、脑磷脂 4.1%。该法操作简单,萃取时压力低,丙烷可循环使用,溶剂消耗低,且萃取效率高。但是,丙烷易燃易爆,需要采取一定的安全措施,萃取出的蛋黄油不仅磷脂含量低,还含有蛋白质,需要用三氯甲烷-甲醇混合液溶解去除。
7. 超临界 CO2萃取法: 将蛋黄粉投入萃取缸中,加热或冷却萃取缸、分离器I、分离器II使温度达55 ℃,开启CO2纯度钢瓶,CO2流量为10 kg/h,调节萃取压力 30 MPa,萃取 4 h。萃取率达 81.26%,气相色谱分析表明,其中总不饱和脂肪酸含量达 67.25%。通过正交试验发现,对蛋黄油萃取率影响由大到小的因素依次是萃取压力、CO2流量、萃取温度。 取在 50 ℃,真空度 0.9 MPa 的真空干燥箱干燥 4 h 的蛋黄粉,进行超临界 CO2萃取,萃取压力 32 MPa,萃取温度 49 ℃,萃取 5 h,得到蛋黄油的萃取率为 97.52%。
8. 其他:酶水解-溶剂萃取法:以鲜蛋黄为原料加水配制蛋黄液,加蛋白酶水解,离心,用乙醇萃取,再进行脱溶剂处理,得到富含磷脂的蛋黄油。本法总出油率高,且将蛋白油脂分成中性脂和富含磷脂两部分。
【药理作用】[2]