实验目的
1.观察霉菌菌落特征。
2.学习并掌握霉菌的制片方法。
3.了解四类常见霉菌的基本形态特征。
实验内容
1.霉菌菌落特征的观察;
2.霉菌的水浸片观察。
实验原理
霉菌可产生分枝的菌丝体,分为基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多 (约为 3~10μm),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。菌落形态较大,质地较疏松,颜色各异。菌丝体经制片后可用低倍显微镜或高倍镜观察。
霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,且孢子容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特点是:细胞不变形,具有杀菌防腐作用,且不易干燥,能保持较长时间,溶液本身呈蓝色,有一定染色效果。
实验器材
曲霉(Aspergillus sp.),青霉,根霉(Rhizopus sp.)和毛霉(Mucor sp.)培养 2~5d的马铃薯琼脂平板培养物。
乳酸石炭酸棉蓝染色液。
载玻片、盖玻片、接种针、显微镜等。
实验步骤
1.霉菌菌落特征的观察:观察曲霉,青霉,根霉和毛霉平板中的菌落,描述述其菌落特征。注意菌落形态的大小,菌丝的高矮,生长密度,孢子颜色和菌落表面等状况。并与细菌、放线菌、酵母菌菌落进行比较。
2.制水浸片观察:于洁净的载片中央,滴加一小滴乳酸石炭酸溶液,然后用接种针从菌落边缘挑取少许菌丝体置于其中,使其摊开,轻轻盖上盖片(注意勿出现气泡),置于低倍镜、高倍镜下观察。
(1) 曲霉:
观察菌丝体有无横隔、足细胞,注意分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子着生状况及形状。
(2) 青霉:
观察菌丝体的分枝状况,有无横隔。分生孢子梗及其分枝方式、梗基、小梗、分生孢子的形状以及分生孢子穗,帚状分枝的层次状况。
(3) 根霉:
观察菌丝是否有横隔、假根、匍匐枝、孢子囊梗、孢子梗及孢囊孢子。观察孢囊破裂后的囊托及囊轴。
(4) 毛霉:
观察菌丝是否有横隔、菌丝的分枝情况以及孢囊孢子。
实验结果及讨论
1.实验结果
(1) 曲霉、青霉、根霉和毛霉的菌落颜色及特征。