For　improved　detection　sensitivity,　steptavidin-based　amplification　techniques　are　widely　used　in　fluorescence　imaging　to　detect　biotinylated　biomolecules　such　as　primary　and　secondary　antibodies,　ligands　and　toxins,　or　DNA　probes　for　in　situ　hybridization.　Streptavidin-based　detection　provides　signal　amplification　for　medium-　and　low-abundance　targets　with　a　simple　workflow.　为了进一步提高检测灵敏度,基于链霉亲和素的信号放大技术广泛应用于荧光成像实验,以检测生物素化的生物分子,例如一抗和二抗、配体和毒素、或原位杂交中的DNA探针。　基于链霉亲和素的检测技术通过一个简单的操作步骤,为中等丰度和低丰度的靶标提供了有效的信号放大作用。　生物素结合的蛋白家族包括链霉亲和素(streptavidin)、亲和素(avidin)和NeutrAvidin蛋白,每个蛋白都能够以高度的亲和力和特异性结合四个生物素分子。其中最常使用的是链霉亲和素,它未经糖基化且具有很低的非特异性结合水平。亲和素则是一种高度阳离子化的糖蛋白,等电点在10.5左右,它的正电荷残基和低聚糖成份能够介导非特异性结合,从而在某些应用中导致本底过高的问题。NeutrAvidin蛋白经过去糖基化处理和降低等电势点,从而减少了其背景着色。　何种情况下适合使用基于链霉亲和素的放大技术?　Life　Technologies提供了最为完整的荧光成像检测技术。通过使用这些工具套装,您可以针对您的靶标丰度选择最佳的检测技术,并通过使用波长兼容的染料实现多色检测实验。　高丰度靶标——一级偶联物,无需进行信号放大　中等丰度靶标——二级偶联物,适度信号放大　中低丰度靶标——链霉亲和素偶联物,需要显著增强信号　低丰度靶标——酶学放大,以获得最大的信号增强效果　封闭内源性生物素　哺乳动物细胞和组织中包含依赖生物素的羧化酶,它们为多种代谢功能所需。这些包含生物素的酶类