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D7027BeyoAP Alkaline Phosphatase200U177.00元
BeyoAP Alkaline Phosphatase,即BeyoAP碱性磷酸酶,是一种热敏感的,可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸水解释放5′或3′末端磷酸基团的酶,也可以脱去蛋白质丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上的磷酸基团。BeyoAP Alkaline
Phosphatase是一种新型碱性磷酸酯酶,在碧云天的各种内切酶和PCR缓冲液中可保持100%活性,对于各种类型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分钟即可完成,并且75℃孵育5分钟即可完全失活。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1),是一类水解酶,通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等,并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline
Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测,也常用于DNA或RNA 5'和3'末端的去磷酸化(去单磷酸化),特别是质粒的5'末端去磷酸化以避免质粒自连等。
经限制性内切酶酶切的质粒5′端带有磷酸基团,在进行基因克隆时为避免质粒自连,可以使用BeyoAP Alkaline
Phosphatase去除5′末端磷酸基团。脱去5′末端磷酸基团的质粒不能发生自连。
特点:快速去磷酸化,只需37℃孵育10分钟即可;快速失活,75℃孵育5分钟即可完全失活;使用方便,在各种内切酶和PCR缓冲液中保持100%活性,可以和质粒DNA的消化同时进行;操作步骤简单,对于5′或3′突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤;可直接用于连接反应,经BeyoAP Alkaline Phosphatase脱磷,并75℃孵育5分钟失活后可直接用于后续的连接反应。
用途:通过去除载体或DNA片段5′末端的磷酸基团,防止载体或DN