药物抗缺氧、抗疲劳的设计性实验 组员: 1111081 蒋云仙 1111083 王 智 1111085 唐正秀 1111082 陈莉莉 1111084 蒋微萍 红景天 多年生草本,高10-20厘米。根粗壮,圆锥 形,肉质褐黄色,根颈部具多数须根。 我国古代第一部医学典籍《神农本草经》,将红景天列为药 中上品,服 高山红景天用红景天轻身益气,不老延年,无毒 多服,久服不伤人。 我们实验所选择药物是? 2017/8/5 实验目的: 1.研究红景天让机体产生的抗疲劳性和抗缺氧性。 2.研究不同浓度的红景天对机体产生抗疲劳和抗缺氧 的影响。 3.学习复制动物缺氧病理模型的方法,探究红景天可 抗哪种类型的缺氧。 2017/8/5 实验原理 ? 血液中的血氧含量过低或呼吸、血液、循环等多 系统器官的功能障碍引起供氧不足,组织中毒或 损伤引起用氧障碍。 ? 大气中的氧通过呼吸血红蛋白结合,由血液循环输 送到全身,被组织细胞摄取利用。在缺氧的情况下, 红景天能迅速提高血红蛋白与氧的结合能力,增加 血氧容量,提高血氧饱和度,从而降低机体的耗氧 量,增加运动耐力,恢复运动后疲劳。 ? 红景天能刺激细胞内线粒体中腺三磷(ATP)之合 成或再合成, 减少乳酸的生成,从而有助增强体能 以及促进剧烈运动后身体的恢复 2017/8/5 实验动物 洁净级 KM 小鼠, 质量20g左右, 数量为30只。 实验器械、仪器、药品 ? 药品:红景天提取物稀释液 ? 钠石灰、小鼠灌胃针、CO发生器、生 理盐水、天平称、手术器械一套、5ml 注射器、250mL广口瓶,恒温小鼠游泳 盒,保险丝。 2017/8/5 实验药品的剂量 1.1 实验药品的剂量设置 红景天用量确定人用剂量0.1 g/kg。 小鼠红景天实验用量分别定为0.05 g/kg,0.1g/kg, 0.5 g/kg,1.0 g/kg四种, 为正常用量0.5、1、5、10、倍。 因此药品的稀释浓度分别为: 5g/L,10g/L,50g/L,100g/L 每只小鼠都为0.2ml,对照组为同剂量生理盐水 2017/8/5 实验方法和步骤 实验准备和分组: 取小鼠10只, 随机分为5 组(做好标记), 即空白对照 一组, 由低至高剂量共四组。给药剂量见1.1,每日灌胃 给药三次,连续5 d, 空白对照组给予等容积的蒸馏水。 ? 1.2 小鼠低张性耐缺氧实验 实验步骤: 末次给药1 h后,将小鼠分别放入盛有5 g钠石灰的250mL广 口瓶中( 每瓶2只) , 用凡士林涂抹瓶口, 密封, 立即计时, 直至 小鼠 呼吸停止。以小鼠在密闭广口瓶内存活平均时间为指 标, 比较各组小鼠的耐缺氧时间。 动物尸体留待其他实验完成后,再依次打开腹腔,观察和 比较血液和肝脏颜色。 2017/8/5 实验方法和步骤 ? 1.3 小鼠血液性耐缺氧实验 ? 实验步骤:末次给药1 h后,将小鼠分别放入 250mL广口瓶中( 每瓶2只),缓慢通入CO,立即 计时, 直至小鼠 呼吸停止。以小鼠在密闭广口瓶 内存活平均时间为指标, 比较各组小鼠的耐缺氧 时间。 2017/8/5 实验方法和步骤 ? 1.4 小鼠抗疲劳实验 实验步骤: 末次给药后1 h,称体质量,各鼠负重质量为体 质量的10%的保险丝,然后将五组小鼠,每组2只 分别放入水深30 cm、水温25度的塑料长方形盒中 进行游泳,记录自落水开始至小鼠沉入水底10秒 的时间。以小鼠负重力竭游泳存活平均时间为指 标, 比较各组小鼠的耐疲劳时间。 2017/8/5 实验检测指标 ? 动物一般状况,呼吸频率和深度,存活时间, 皮肤粘膜和肝脏颜色改变。 ? 观察指标的结果比较: 对照组 低张性缺氧 0.05 g/kg 0.1g/kg 0.5g/kg 1.0g/kg 血液性缺氧 抗疲劳 2017/8/5 预期结果 ? 红景天有抗缺氧、抗疲劳功效。 ? 不同剂量的红景天对小鼠的作用不同,服用1倍 剂量的小鼠抗缺氧、抗疲劳能力最强。随着剂量 的增大,小鼠过于兴奋,抗缺氧、抗疲劳能力反 而下降,所以抗缺氧、抗疲劳能力为:1倍剂量 >0.5倍剂量>对照组>5倍剂量>10倍剂量。 ? 红景天只对低张性缺氧有效果,对血液性缺氧不 但没效果还会加速小鼠的死亡。 2017/8/5 可行性分析 · ? 1.实验中所需红景天的应用历史悠久,易于获取,市场上一盒 红景天胶囊的价格约为40元。主要功效为:活血止血,清肺 止咳。具有抗疲劳、抗衰老、耐缺氧、抗寒冷、抗微波辐射 等多种功能,而且有提高工作效率、延缓机体衰老等作用 ? 2.实验所需仪器小鼠灌胃针、CO发生器、天平称、手术器械 一套、5ml注射器、250mL广口瓶均为实验室常见仪器,易获 取,操作简单,可执行性强。 ? 3.关于红景天抗缺氧、抗疲劳的动物实验经上网搜索已有许多 学者进行过研究,其在抗疲劳、抗缺氧方面的功效是已经得 到认可的,因此,本实验是具有一定的可行性的。 ? 4.本实验的优点在于通过对比不同浓度红景天对小鼠抗缺氧、 抗疲劳的影响,可测出其最适浓度。并通过对比红景天对低 张性缺氧和血液性缺氧,可验证红景天抗缺氧的机制。 2017/8/5 可能遇到的问题 1.由于实验中要用到CO ,因此因注意实验室里的通风 情况。 2.个别小鼠状态不好,影响实验结果,应逐个检查 没有明显异常后再用。 3.个别小鼠实验结果和大多数相差太大,应考虑实 际情况进行取舍。 4.在缺氧实验中,小鼠接近死亡状态不好时,应敲 响桌子给予老鼠一定刺激,一遍判断小鼠是否真 正死亡。 2017/8/5 Thank You Thank you 灌胃 一般灌胃针插入深度为, 小鼠:2-3cm,大鼠:4-6cm。 常用一次灌胃量为, 大鼠:1-2ml/100g体重。 小鼠:0.1ml-0.3ml/10g体重, 大、小鼠灌胃 2017/8/5