模板是否太多不好说,因为不知你作反转录时tRNA用了多少,所以不大同意上面几位战友的意见,我在其他的试剂盒说明书里曾看到每20体系里可以加入200ng tRNA,我认为扩增效率不高可能是因为你的tRNA提的不好,不知你目的基因的长度是多少,建议你重新提取RNA,再试试吧,这就是科学工作的意义。