页码直达:
1楼
这个帖子发布于9年零231天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我是新手,刚刚开始做定量,搞不清楚相对定量中内参基因的作用,请教各位,内参基因应该是什么样的呢,不同处理的样品内参表达应该是差不多的吗,为什么选择不同的内参,我目的基因表达量会不一样呢?我的理解是内参基因应该是不一样的,这样选择内参基因校正我的目的基因的表达量才有意义,不知道我这样的理解对不对,如果不对,正确的理解应该是什么样的呢,求解,万分感激
搜索
不知道邀请谁?试试他们
换一换
广告宣传推广政治敏感、违法虚假信息恶意灌水、重复发帖违规侵权、站友争执附件异常、链接失效其他
常驻站友
2楼
内参基因是校正你不同样品的,不同样品的由于你转的mRNA量不同所以cDNA也不同,故要找一个每个细胞表达差不多的来反映你的目的基因平均带每个细胞的表达情况
广告宣传推广政治敏感、违法虚假信息恶意灌水、重复发帖违规侵权、站友争执附件异常、链接失效其他
3楼
我是按1ug的总RNA量来逆转录的,你的意思是定量应该是mRNA的量一样吗,所以说不同样品内参的表达量不一样也是正常的,这样定量数据结果是可以用的是吗?
广告宣传推广政治敏感、违法虚假信息恶意灌水、重复发帖违规侵权、站友争执附件异常、链接失效其他
4楼
用紫外分光测得的浓度,其实只具有参考作用,并不是非常准确。但qPCR是很灵敏的检测方法,怎么能允许如此不准确的初始浓度呢?
A样品比B样品的目的基因荧光值高,到底是因为A的目的基因表达高呢,还是因为A样品的RNA浓度高呢?
那就得用内参基因来校正了……
广告宣传推广政治敏感、违法虚假信息恶意灌水、重复发帖违规侵权、站友争执附件异常、链接失效其他