金黄色葡萄球菌的表明存在有蛋白A,与人类、兔等多种动物的IgC抗体Fc部分具有很强的结合能力,而蛋白A琼脂糖凝胶是将蛋白A与琼脂共价结合形成的。使用这种方法时不需要考虑抗原和抗体的比例问题。
进行凝胶内沉淀反应时,首先将抗原和抗体分别注入琼脂凝胶内的小孔里,由于大多数蛋白质可以在琼脂凝胶内自由移动,所以当抗体与抗原相遇时,会在等浓度线处生成肉眼可见的沉降线。这个方法分为两种,单纯扩散法中,只令抗原或抗体的一种进行扩散反应;二重扩散法中,抗原和抗体同时进行扩散反应。在后者中,沉降线会形成于各个小孔的中间位置,并且形态会依据抗体及抗原的成分组成分为几种情况。如果抗体和抗原各只含一种,那么小孔间沉降线只有一条,如果将两种不同抗体混合在一起,那么沉降线是平行的两条;当向两个小孔内注入不同的抗原时,如果两种抗原相同,那么沉降线会融合(1),如果两种抗原拥有相同的抗原决定基,但是B抗原还拥有另一种能够被抗体识别的抗原决定基,那么B抗原的沉降线会略长一点(2),如果两种抗原完全不同,那么两条沉降线会交叉(3).
通过分析沉降线的模式可以检验抗原决定基的同一性。
单种抗体与相同抗原A有一种可被识别的决定基,B有两种可被识别的决定基AB各有一个可被识别的决定基
除此以外,还有Western印迹法用以检出抗原,ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay;酶免疫测定法)用以测定抗原或抗体的含量,流式细胞术用以检测含有某种抗原的细胞的占比或其含有的抗原量,具体操作在此不作叙述。
章末习题:
一、判断题
1.IgM的抗原结合部位有5个
2.能够成为抗原的只有蛋白质
3.将不完全抗原投入动物体内时不会产生抗体
4.花粉过敏患者的血清中含有大量对花粉的IgE抗体
5.分娩后的第一次母乳中含有大量IgG因此新生儿饮用有好处
6.使用一般方法制备抗体时需要对抗原进行精制,但单克隆抗体法则不需要
7.可以借助由兔产生的抗体使用ELISA检出抗原(超纲)
8.可以使用ELISA测定过敏患者血清中的IgE含量(超纲)
二、选择题
为了检测二次皮下抗原注射试验中动物血液内抗体的浓度变化情况,可以使用以下的何种检测手段(超纲)
a.ELISA
b.凝胶内沉淀
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