HBV-DNA的原位检测可以从肝组织上对HBV-DNA进行定位检测, 对乙肝的发病机制研究有重要意义, 且肝组织之HBV-DNA检测较血清敏感性高, 即血清标本HBV-DNA阴性的病例, 其肝组织亦不乏得以检出[13]. HBV-DNA的定量检测是指在传统的定性检测的基础上, 再进一步对HBV-DNA进行的量化检测, 主要是建立在定量分子杂交和定量PCR基础上. 近年迅速发展的HBV-DNA定量检测在判断HBV感染者的病情发展、决定抗病毒治疗方案及评估抗病毒药物疗效等方面有非常重要的意义. 但目前定量PCR的分辨率约为每毫升103-104拷贝, 尚达不到HBV零拷贝的鉴别, 所以定量PCR阴性并不能说明患者体内无HBV存在, 只能说明HBV的病毒载量很低.
2 肝脏酶类生化检测的意义
肝脏是重要的生化反应器官, 含有大量的酶类, 当其损伤时肝脏酶的释放是反映肝细胞损伤的重要指标.肝炎时常用于临床检测的酶有以下几类: (1)主要反映肝细胞损伤的酶如ALT、AST、LDH及ChE等; (2)反映胆汁淤积的酶如ALP、γ-GT及5'-NT等; (3)反映肝纤维化的酶如MAO等.此外ALP、γ-GT及LDH可能还与肝脏肿瘤有一定关系.
2.1 转氨酶
主要指丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST). ALT主要存在于肝细胞质内, 其他脏器如骨骼肌、心肌细胞内也含少量, 任何肝细胞损害(膜通透性增加或细胞死亡), 血清中酶活性将明显增高. AST的分布以心肌最多, 其次为肝脏和肾脏, 且其在细胞内有60%分布于胞质中, 40%于线粒体中. 因而, ALT的升高较AST更能特异性的表示肝细胞的损伤, 当有心肌、肾脏等损害时也常可引起AST的升高, 需注意与肝细胞的损害鉴别; 由于AST有40%存在于线粒体, AST线粒体同工酶的持续增高提示肝细胞损伤严重, 预后不良. ALT和AST在不同情况时升高幅度不同: (1)中毒、缺血和缺氧时升高最著, 可达1万IU/L; (2)急性病毒性肝炎次之, 约300-3000 IU/L; (3)慢性病毒性肝炎和自身免疫性肝炎一般在1000 IU/L以内; (4)酒精性肝病为轻、中度增高, 100-500 IU/L之间, 且常AST>ALT; (5)肝硬化患者正常或轻度增高, 常为正常值的2-4倍; (6