GD2的免疫组化染色这种方法实际也很简单:取3毫升骨髓后通过离心,把单个核细胞层(因为神经母细胞聚集在单个核细胞层)浓缩了之后甩片,一般甩6张片子,每张片子保证5×105细胞,然后进行GD2的染色。这个检测率和分辨率能达到百万分之一,可以达到微病灶检测的数量级。我们做了很多年,觉得这个灵敏度还是很高的。在甩片时,我们还会多留出两到三张空白片子,如果发现这里面有大量的瘤细胞的话,我们还会做进一步的MYCN检测,就是基因检测。当组织标本拿不到时,可以用骨髓去获得MYCN是否发生扩增的相关信息。
基因检测
从对治疗有指导作用这方面考虑时,我们要求做两个:一个是MYCN扩增,一个是DNA倍性。MYCN扩增,国内主要还是采用“FISH”(注:荧光原位杂交)来做检测,一般规定扩增大于10个拷贝时才算阳性,比如说5、6个都不算阳性。DNA倍性我们用的是“流式”,就是说二倍体中,整二倍体是不好的,超二倍体是预后比较好的。
检查的结果解读和判断
如何解读、判断检查的结果
这些检查结果出来之后,我们需要解读,要汇总,要判断这个病人处于什么样的情况,包括他的病理、分子、分期、危险度分组、预后,要给他下一个定义,需要跟家属交待你的孩子目前处于什么情况。下面,把如何解读这些结果的有关细节跟大家简单介绍一下。
神经母细胞瘤的诊断标准,组织学是金标准,这是必须的,如果有它就可以诊断。有时患儿比较急,或者对于一些基层医院拿不到组织学的,可以通过骨髓,如果有典型的GD2染色的神经母细胞,24小时尿VMA又是很高的,也可以作为确定诊断。还有对有些比如说横断性截瘫、呼吸困难、需要紧急上化疗的患儿,这个时候组织学证据没有拿到,即标本没有拿到,我们可以根据影像学结合24小时尿VMA,也可以做出一个临床诊断,积极给予治疗,避免神经长时间压迫不能恢复,还有呼吸窘迫,先救命。
病理学上诊断神经母细胞瘤,很多家属就问,我到底是哪个亚型,这个病理结果好不好。实际我们在神经母的定义上有两种特别严格的分类规则:一个是形态学分类,就是我们常说的神经母细胞瘤有哪些亚型;还有一个是预后分类,你是好的还是不好的。
形态学分类
形态学分类是依据细胞的形态和间质,即雪旺氏(注:Schwannian,又称施旺)细胞的多少来分。大概分以下四种,就是四大类。第一个就是神经母细胞瘤,形态