实验原理 自然界中各种微生物混杂生活在一起,即 使取很少量的样品也是许多微生物共存的群体。 人们要研究各种微生物的特性,首先需使 该微生物处于纯培养状态。也就是说培养物中 所有细胞只是微生物的某一种或株,他们有着 共同的来源,是同一细胞的后代。 为了获得单菌落,实验室常用的方法是平板划线分 离法。平板划线分离法可分为连续划线和分区划线,但两 种方法的主导思想都是将样品由浓变稀,从多组分的混合 样品最后得到较纯的单菌落。 将平板划线分离得到的单菌落接种到斜面上,可进一 步观察其生长特征。微生物在斜面培养基上生长,可以呈 丝线状、刺毛状、念珠状、舒展状、树枝状、或假根状。 培养特征可以作为微生物分类鉴定的指征之一,并能为识 别纯培养是否被污染作为参考。 平板划线分离 b.分区划线 a.连续划线 接种工具 酒精灯 接种棒(接种环) 酒精灯火焰外焰灼烧接种棒金属部 (接种棒其他部分用酒精棉擦过)灭菌并冷却的接种环蘸取少量微生 物接种到新鲜培养基 1、灼烧接种棒灭菌,在酒精中冷却 2、挑取一环细菌(少量) 3、连续划线培养 右手持接种环,在火焰上灭菌,待稍冷却后挑取样品,左手拿皿底, 右手控制接种环以一定倾角与培养基接触,连续地在培养基上来回划 线,从培养基的一端到另一端。在末端处划线时可将平皿作一定角度 的倾斜,使接种环接触到培养基。 4、分区划线培养法 每次划线后灼 烧接种环灭菌 第三区出现单 菌落 5、插片法(产孢微生物) 插片:用无菌镊子将灭菌盖玻片以约45角扦入琼脂内,扦片数量4片。