一、?实验设备与方法?。培养基、原料、辅料种子培养基、生产培养基和解脂假丝酵收稿日期???? ?年?。月? ? 日? ???? ? 升种子发酵罐?搅拌 转速?? ?转? 分,功率?? ?瓦。???种 子培养方法? ? ?一 级种 子用? ??? ?三角瓶,装?? ?? ?种 子培养 基。以 ? ?????“蒸 汽 在?? ? ℃下灭菌? ? 分钟,冷却后接入斜面 菌 种一 环,置旋转摇床常温培养? ?小时? ??二级种子用? ? ? ?? ?三角烧 瓶。,装? ?? ?? ?种子培养基,按一 级种子方 法 灭菌后,接入一瓶一 级种子,置往复式摇床常温培养? ?小时? ?。? 三 级种子用 ? ? ?升种子发酵 罐装? ? 升种子培养基接入? 一 ?瓶二 级种子,,按上述条件 灭 菌 冷 却后,,常温连续通气培养? ?小时。??生 产条件和 方法注?由于本项目的保密性,培养基配方等数据与实际有差异,请谅 解。 ·??。腐? ? ? ?年???没备凌?分析测 定? ? ?固凝物含量侧定? ? ? ? ? ? ?升标准发酵罐,搅 拌转 效?吸 取 肠? ?培? ? 转? 分,功 率???甩。养液,注入已称重的平皿中,? ??℃烘 干 称? ? ? ? ? ? ?升标准发酵罐玲?转? 分功率 ? ? 肚,搅 拌 转 数重。,。? ? ?菌数测定?采用稀释 平 板 培 养???生产条件法。? ? ?培养基?按上述生产培养基。? ? ?总氮及游离氮侧定?采 用 凯 氏? ??培养容量?发酵罐装 料 系 数 为法。???。? ??蛋白测定?采用? ?? ? ? ?一? ?测? ? ? 灭菌条件?? ?? ???“蒸 汽 在定。? ? ℃下,灭菌? ? 分钟。? ??腐植酸 测定?采用重量 法。? ?‘? ??接种比、、‘。 。?培养温度? ? ?罐压?? ?。。刁。二? ?℃二一、、试验及结果二, ??。二 不???? ?????”。??摇床培养试验? ? ? 通气比? ? ?培养方法???。??。探索在摇床上连续振动通气培养 菌种生?连续搅拌通气保温培长情况,为上罐培养做准备。结果如表?、? ?养。??? ? ? ?升 发酵罐单罐培养试验?见表? ?表?不 同培养时间 试验结 果培养时间 ?小时 ???镜检情况????。? ?? ?? ?正常正常正常有芽状分枝菌数?个?? ? ???? ? ? ????? ? ? ???。? ?? ???。? ?? ??表?不 同培养液量培养试验结 果培养时间 ?小时 ?培养液量?? ? ?镜检情况? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? ?? ??静止 ?正常正常正常正常正常菌量 ?个??? ??。? ? ? ?????? ? ????? ? ? ???。??????。? ? ? ????? ? ? ? 升 发酵罐半连 续培养试 验试验 目的?培养,时间?一? ? 小时,采取定时放料,定时定量加料方法,探索半连续培养工业化生产的可行性。从上述 几批试验 得出 以下结果???采用低于常规接种量,培养时 间可从原试验? ? 小时缩短为?一? ?小时?。?培养? ? 小时后采用定时放料和定量 补 第?期赵洪滨 等?? ? ? ?升发酵 罐半连 续发酵生 产工 艺」二 业性试 验表?,?? ? 升 发酵罐 单罐培 养试验??乡养’ ?主??旦????? ?? ?一?扁三 竺拜…价? ? ? ?升 发酵罐半连 续 发酵培养结 果????? ???一鱼 塑二 竺少”???表 ?批次放料次数一一 接乖缎? ? ?培养时 间 ? 刁、日、·??菌数?个,? ? ??生。? ? ? ????? 又 ? ???。?火? ?咬 ,? ?? 任?? 孔刘? 又 ? ????? ??? ????? ????凡???。? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ?表?? ? ? ?升发酵罐半连续 发酵培养成品 分析批?放料次系数??固凝物刘一腐植酸对? 培养 液 ? ? ?凋凝物 ? ? ?总氮对固凝物???氨基氮对固凝物? ? ?蛋 白含量刘固凝物?? ??了尸??门 了臼曰曰心只.护.曰月J11 Je e 一38。7937。3134。9232。工 73 8。6037。6635。4938。956。478。078。1 77。955。866。256。596。239.5 谨9。7210。239。468 7 7 1 7 1 7 1 7 11],...土J.料,连 续三次两批试验比原试验最 高菌 数1.6X1 0,活菌数为2.5一落.5X1 0。 ,“至少 多10倍。3.培养基多批 灭菌后pH 均升 高,可能受此影响,使总氮和氨基氮的分 析 数据 偏低。4.由于受当地原料来源及设 备 条 件 所限,原生产培养基是使用酒糟渣i式验中改用蔗糖代替,在半连续,因此估计固凝物会比原试验结果偏低。5.试验证明,半连续发酵生产工艺工业化是可行的。