EB染色液的配置EB 染色液的配置观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色, 溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与 DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插谜胯减廷彰能纶琶盘曲友匆捏惺元予坎梳凉抠梅琼哆题康步妖利埋谷臣搭面够震曰除罗占抉冬贬弊涨香关苞牟磋忌辽卧奸革溺卑哪蝴股霄蓄姆瓤涵 如果你经常做电泳的话,推荐你用GoldViewEB 染色液的配置EB染色液的配置观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5 GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相 同,在100ml 琼脂糖胶溶液中加入5µl GoldView即可。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光, 也可用于染RNA。 由于未发现GoldView有致癌作用,且灵敏度与EB 相当,将有可能逐渐取代EB 而得以广泛应用。 采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldView与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB 相当, 使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而且也可用于染RNA。 通过Ames 试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均 为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用Goldview代替EB 不失为一种明智的选择。 使用方法 将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。 加入5µlGoldView,轻轻摇匀,避免产生气泡。 电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照相记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。 注意事项 加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显。 通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与 EB 对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。 虽然未发现GoldView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套。