ABO血型鉴定的应用价值主要在于:
(1)在输血中寻找合适供体;
(2)在皮肤及肾移植上的供体选择;
(3)在不孕症和新生儿溶血症病因研究中的应用;
(4)ABO血型检测还可用于亲子鉴定、可疑血迹、精斑、毛发等的鉴定,以及与某些疾病相关的调查等。
另外,在ABO血型系统中尚存在一些变异型,简称之为亚型。如A型中的A
2、A
3、Ax、Am等;在B型中的B
2、B
3、Bx、Bm等。它们共同的规律是红细胞上的抗原较弱,少数个体尚存在有不规则的同种抗体。有些亚型抗原甚至弱到与抗血清的反应难以用肉眼观察的地步,必须用吸收和放散的方法证实其抗原抗体反应的存在。
了解亚型的重要性在于:
(1)易造成误定血型,可使配血不合;
(2)有额外抗体(如抗A、抗B)者常使同型间配血发生困难;
(3)误输入不相合的亚型血(抗原),可使缺乏此抗原的受血者产生免疫性血型抗体,造成溶血的潜在威胁。 Rh血型系统
Rh血型常见的抗原(又称因子)有5种(理论上推测有6种),分别是D、C、E、c、e(d未能证实)。尚有一些变异型,如Du、Cw、En等。目前能识别的Rh系统抗原共4 3种。与ABO系统不同的是此系统很少有天然抗体,大部分抗体均由免疫刺激产生。
Rh系统中D抗原的免疫性最强,正常D阴性受血者接受一次D阳性红细胞输血后,产生抗体的机率>50%。因此,临床上往往以D抗原的存在与否定为Rh阳性或阴性。我国汉族人D阴性的比率较低,约占人群的0.2%~0.4%。因而Rh系统抗D所致的溶血反应与新生儿溶血病的比率远低于白种人,但输血和妊娠中不相合抗原所致的抗E、抗C、抗Ce、抗cE并非少见,应引起临床医生的高度重视。
2 由免疫刺激而产生的抗体多为小分子IgG类,在盐水介质配血试验中,与相应抗原的反应仅表现为“致敏”,肉眼见不到凝集现象,必须选用木瓜酶(菠萝酶)或抗人球蛋白介质等检测手段才能发现不相合抗体。 Rh血型检测在临床上的意义
1.Rh血型与输血的关系
因为正常人血中一般不存在Rh天然抗体,所以在第一次输血时,往往不会发现Rh血型的不合。Rh阴性的病人输受了Rh阳性的血液后,可产生免疫的抗Rh抗体,当病人再次输受Rh阳性的血液时,就可以出现溶血性输血反应,如果将此病人的血液再输给另外一个Rh阳性的人,由于免疫性抗体不能被中和,也可以致敏受血者的红细胞而产生溶血,在西欧各国大部分输血反应都是由抗D抗体引起。
2.与妊娠及新生儿溶血病的关系
Rh阴性的妇女如孕育Rh阳性的胎儿,胎儿的红细胞可经过有损伤的胎盘进人母体,刺激母体产生免疫性抗Rh抗体。此抗体可以通过胎盘进入胎儿血液循环,与胎儿的Rh阳性红细胞产生抗原抗体反应,破坏胎儿红细胞,甚至毒害中枢神经细胞(核黄疸),造成新生儿溶血性贫血、流产或死产;如果孕妇需要输血,又不慎输给了Rh阳性血,也能造成严重的溶血反应。由于Rh系统存在天然抗体的机率很低,如果孕妇在受孕Rh阳性胎儿前,没有输过Rh阳性的血液,也没有注射过含有Rh抗原的血清、全血或血液制品,在第一胎时由于体内抗体效价不高,一般可以正常分娩、存活。如果孕前接受过含Rh抗原的注射或输血,第一胎就可以出现新生儿溶血病(也有少数人没有Rh抗原的接触史,而第一胎就发病)。一般胎次越多,孕妇血中的免疫性抗体效价也越高,对胎儿的损害也越严重。但是也有Rh阴性妇女,妊娠多次,没有一个胎儿出现新生儿溶血病。因此,母体在什么情况下才能产生免疫性抗体,至今还不完全明了。
3.Rh抗体可以出现在乳汁、腹水、羊水等体液中,如果羊水中抗体的滴度达到1:64时,说明胎儿有受到Rh抗体严重侵犯的危险,所以检查羊水中的Rh抗体,可以作为了解胎儿现状的一种指标。
血小板血型
血小板血型抗原有两大类:一类主要存在于血小板膜糖蛋白上的特异性抗原;另一类是与其它血细胞所共有,包括HLA I类抗原和A、B、H、Le、I及P抗原。
已报道的血小板特异性同种抗原(血小板特异性抗原)系统至少有11个。按发现的时间顺序排列如下:Duzo、PIA(ZW)、PIE、Ko(Sib)Bak(Lek)、Yuk(Perl)、Br(Hc、Zav)、PLT、Nak、GoV和Sr。其中Duzo自首次报道后未再有进一步研究。而PIE和Nak抗体的先证者已被发现分别是血小板糖蛋白(GP)Ib缺陷的巨血小板综合征患者或GPⅣ缺陷者,因此这两种抗原应列入同族抗原的范围。PLA、Ko 、Bak、Yuk、Br、GoV等系统都已被证实由常染色体双等位基因以共显性模式控制。其余抗原系统也为常染色显性遗传,但是否为双等位共显性模式有待证实。
检测血小板抗原抗体反应的方法有血小板凝集试验、补体结合试验、抗人球蛋白消耗试验、免疫荧光试验等。
血小板抗体多为获得性免疫抗体、这种抗体会导致许多免疫性血小板疾病的发生,如原发性血小板减少性紫癜、新生儿血小板减少性紫癜、自身免疫性贫血伴血小板减少症综合征)、输血后紫癜、药物免疫性血小板减少性紫癜等。多次输注抗原不同血小板时所产生的抗血小板抗体,也可导致输人血反应、血小板输注无效和血小板减少症等。
输血前相容性检查
血型是一个非常庞大而又复杂的系统,加之某些疾病过程中还会出现血型暂时性变异,为了防止输入血型不合的血液,在输血前作相容性检查,常规须作交叉配血试验,即将供血
3 者的血球和血清分别与受血者血清和血球进行交容反应,观察他们之间的相容性。 交叉配血试验的目的在于: 1.发现ABO血型鉴定的错误
如将A型或A亚型献血员误定为O型,当与O型病人交叉配血时,患者血清与献血员红细胞即可出现凝集,从而避免严重的溶血性输血反应。
2.发现不规则凝集素
如含抗A 1不规则凝集素的A 2型血清,与A 1型献血员红细 胞配血时,可出现凝集,这种不规则凝集一般为冷凝素,如效价不高影响不大,但若为免疫性抗体,3 7℃条件下效价较高,就必须选用亚型相同的血液,否则可产生溶血性输血反应。 3.发现其他血型抗体
如抗P
1、抗H等天然抗体和抗Rh等免疫性抗体,虽然输人的血液ABO血型相同,但Rh或其他血型不同,同时能引起严重的溶血性输血反应。 交叉配血的方法:
1.无输入史及异常妊娠史者,可只作盐水配血。
2.凡有输血反应史和原因不明的流产史或生育过有新生儿溶血病婴儿的妇女,皆可有免疫性抗体。应用木瓜酶、抗人球蛋白法等不完全抗体配血法。
3.病人在48小时内输入5L或更多血时,叫做大量输血,此时要多个献血员供给血液,如果献血员之间有不规则抗体或ABO系统以外的抗体,也能互相作用,引起不良输血反应,此时应作大量输血的平板配血法。
4.对多发性骨髓瘤、进行性结核病、肝病及输受过右旋糖酐的病人,避免假阳性,最好也作抗人球蛋白配血。
同型之间交叉配血不合时的处理:
1.与个别同型献血员不能配合,可另选同型献血员进行配血。
2.当病人与多个献血员配血不合时,如为盐水介质配血不合,应考虑到:
(1)ABO血型错误,须用正规方法复查血型;
(2)是否ABO亚型不合,并含有不规则凝集素,应作亚型和不规则抗体的检定;
(3)是否有非特异性凝集,如红细胞线串状形成、寒冷凝集、自身免疫性温性抗体凝集、T凝集与H凝集、类B抗原凝集等,用相应方法进行确证。如为不完全抗体配血法阳性,应考虑Rh血型不同或其他系统免疫性抗体的存在。

第五篇:血型原理,鉴定及交叉合血注意事项

血型原理,鉴定及交叉合血注意事项 医讯网
1 凝集原和凝集素
A型血 红细胞上只有凝集原A 血清里有凝集素B B型血 红细胞上只有凝集原B 血清里有凝集素A AB型血 红细胞上有凝集原A和B 血清里无凝集素 O型血 红细胞上无凝集原 血清里有凝集素A和B
2.凝集反应
当B型的红细胞(含B凝集原)与A型血清(含抗B凝集素)混合时,B型红细胞就发生凝集反应;同样,A型红细胞可被B型血清所凝集;AB型红细胞可被O、A和B血清所凝集;而O型红细胞因不含凝集原,它与AB、A和B血清混合时,都不发生凝集。
你要记住的是,A凝集原和抗A凝集素在一起会溶血,B凝集原和抗B凝集素在一起会溶医讯网:http://www.xiexiebang.com/
血,输血输的是红细胞,所以A型(A凝集原)不能输给B型(抗A凝集素)和O型(抗A凝集素),B型(B凝集原)不能输给O型(抗B凝集素)和A型(抗B凝集素),AB型的(A凝集原,B凝集原)不能输给A型(抗B凝集素),B型(抗A凝集素),O型(抗A凝集素,抗B凝集素)。其实就是抗原不能和相同的凝集素在一起。
3.试题
用A型标准血清和B型标准血清对10人进行血型鉴定,其中6人与A型标准血清发生凝集反应,有2人与两种标准血清都有凝集反应,有1人与良种标准血清都不发生凝集反应.那么,血型为A, B, AB,
O 型的人数依次为???为什么? 4.分析:
当B型的红细胞(含B凝集原)与A型血清(含抗B凝集素)混合时,B型红细胞就发生凝集反应;同样,A型红细胞可被B型血清所凝集;AB型红细胞可被O、A和B血清所凝集;而O型红细胞因不含凝集原,它与AB、A和B血清混合时,都不发生凝集。 有1人与良种标准血清都不发生凝集反应,就是有一个O 有2人与两种标准血清都有凝集反应,就是有2个AB 6人与A型标准血清发生凝集反应,其中AB占2个,即剩余4个为B 除去以上7人,还剩3个,为A.
5.交叉配血注意事项有哪些? (1)受血者配血试验血样必须是输血前3天之内的血,这样才能代表患者当前的免疫状况。 (2)血库要逐项核对输血申请单,受血者和供血者血标本,复查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型,急诊抢救患者紧急输血时Rh(D)血型检查可以除外。 (3)要防止血标本的稀释和溶血,以免影响交叉配血的判断的准确性,其原因是溶血后的血红蛋白可以掩盖抗体引起的溶血。
(4)交叉配血不合时,对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者必须按《全国临床检验操作规程》有关规定作不规则抗体筛选试验 。
6.血型鉴定注意事项:
1.细胞自凝: 在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动,观察结果。
2 .若病人血清(血浆)含有肝素,如洗肾患者能影响配血,须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。
3 .红细胞悬液为5%为宜,过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当,反应不明显易误判。
4 .各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。
5. 方法局限性:
6.试管,滴管吸头和玻片必须清洁干燥,防止溶血。
7.操作方法应按规定,先加血清,然后再加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。
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8.离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结果。
9.观察时应注意红细胞呈特异性凝集,继发性凝固及线状排列的区别。
, 交叉配血原则:
R 除非极为紧急情况,输血前患者与献血者必须进行交叉配血
R 受血者血清中无即刻或迟发性地凝集和(或)溶解所输入的红细胞的抗体 R 献血者血清中无即刻或迟发性地凝集和(或)溶解受血者红细胞的抗体
A:血型鉴定错误:出现问题最多的是受血者、献血者红细胞ABO血型不相容,其次才是技术错误。复查血型
(责任错误)
B:患者存在冷反应自身抗体:采用自身对照和37 ℃水浴以及递增盐水温度洗涤患者红细胞等方法排除非特异性凝集的干扰 C:患者存在温反应自身抗体:采用吸收放散试验后取患者的红细胞与血清和同型的洗涤红细胞进行交叉配血。
D:血清蛋白紊乱及白球蛋白比例倒置引起的假凝集:如多发性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表现为主侧凝集
E:ABO 以外的其它血型系统引起的交叉配血不合:常发生于有输血史、妊娠史的患者,产生主侧凝集。如抗-D、抗-E 、抗-C 、抗-c、抗-I、抗-e和抗-Fyb等 ,用经筛选的不含相应抗原的血液进行交叉配血即可消除。
F:献血者红细胞DAT阳性:大约万分之一健康人包被了IgG或补体的红细胞,不应输用此类细胞。
G: 献血者红细胞是多凝集红细胞:正常人血清中可含有非红细胞刺激而产生的自然发生的抗体,如抗-T、抗-Tn等。应筛选低水平抗-T、抗-Tn的血液
四、意外抗体筛选的意义和方法
意外抗体:是指除ABO血型系统抗体以外的其他抗体,如抗-D、抗-E等。主要经输血或妊娠等免疫刺激产生,人群检出率为0.3%~2.0%,是引起迟发性免疫反应的主要原因。 临床有意义抗体:引起新生儿溶血病、溶血性输血反应,或者使输入的红细胞存活期减少的、在37℃反应的同种异型抗体。(IAT阳性!)
临床无意义抗体: 室温或低温反应的抗体,但抗-Vel,抗-P等,在体内引起明显的红细胞破坏。
筛选方法要求:1.选择敏感的技术检测出受血者血清中非常低水平的临床有意义抗体。高度注意!即使受血者血清中抗体对输入的不相容红细胞抗原呈弱反应,但也能够发生快速的强的回忆反应,增加抗体产生,破坏红细胞
2. 每一试剂瓶中只能有一人份的试剂红细胞,不可将多人份红细胞混合,以避免红细胞混合后对弱抗原红细胞的稀释。
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附:交叉合血报告单
附: 什么是疑难交叉配血?
交叉配血是输血前受血者与供血者抗原、抗体的相容性实验,是临床输血的最后一道关口,分为主侧配血、次侧配血、自身对照三个实验。主测为受血者血清+供血者红细胞;次侧为供血者血清+受血者红细胞;自身对照为受血者血清+受血者红细胞。当受血者、供血者ABO血型相符,而交叉配血主侧或者次侧出现凝集时,需要进一步查找原因及做有关实验进行鉴定,这种情况通常称之为疑难交叉配血。
大家都知道,血型与输血有着密切的关系。血型除了可提供输血和受血的依据之外,大量临床实践证明,不同血型的人,各种疾病的发生率也不一样。下面是A、B、AB、O型血的人与一些常见疾病的关系。 血型是饮食结构决定的?
美国科学家皮特·达达莫博士认为,人类的血型是由进化决定的。
人类的4种血型——O型、A型、B型和AB型——并不是在所有的人身上同时出现,而是由于不断进化和人们在不同气候地区定居下来后逐渐形成。 在寒冷的年代,由于草原上可供吃用的东西匮乏,游牧部落不得不去适应新地形所能提供的新食物。由于新的饮食结构出现,人的消化系统和免疫系统也会随之有所变化,紧接着血型也会有所变化。
O型血的历史最为悠久。它大约出现于公元前6万至4万年之间,当时的尼安德特人吃的是医讯网:http://www.xiexiebang.com/
简单的饭食:野草、昆虫和从树上掉下来猛兽吃剩下的果实。而4万年前出现了克鲁马侬人,他们以狩猎为生。在猎光了所有的大野兽后,他们从非洲向欧洲和亚洲转移。
A型血出现在公元前2.5万年至1.5万年之间。当时,我们的以果实为生的祖先逐渐变成杂食。随着时间的推移,农耕成为住在现今欧洲土地上的人们的主要生产式,野禽野兽开始接受驯养,人的饮食结构随之发生变化。就是现在,绝大多数A型血的人都居住在西欧和日本。
B型血出现在约公元前1.5万年至新纪元之间。当时东非的一部分人被迫从热带稀树干草原迁徙到寒冷而贫瘠的喜马拉雅山一带。气候的变化便成了催生B型血的主要因素。这种血型一开始出现在蒙古人种身上,随着他们后来不断向欧洲大陆迁徙,结果今天有很多东欧人都是这个血型。
人体的4种血型中最后出现的为AB型,它的出现还不到1000年的时间,是比较现代的血型。主要是由“携带”A型血的印欧语民族和“携带”B型血的蒙古人融合在一起后产生的。AB血型的人继承了耐病的能力,他们的免疫系统更能抵抗细菌,但他们易患恶性肿瘤。
很快会出现第5种血型。完全有可能出现一种新血型,比如说C型。只有这种有新血型的人才能在人口过于稠密、自然资源所剩无几的严重污染世界上生存下来,因为这时原先那4种血型,也就是说,有好几十亿甚至上百亿的人将抵挡不住这种日益加剧的生态灾难,他们会很快消失,这就是皮特血型的性格在幼儿期、少年期、青春期、中年期、老年期各有不同。
A型:忍耐力较强,但脑血管疾病发生率较高
A型人身体较灵巧,忍耐力较强,平时不常生病,但与脑血管疾病较有缘,尤其脑梗塞病人,为各血型之首。这是因为A型血对血液黏稠度升高有较大的易感染性,而血液黏稠度升高则是脑梗塞的重要发病因素之一。偏头痛病患者中A型血的血小板黏附率也明显高于正常对照组。此外,A型血的人较易患中风、癌症等多种致命性疾病。另外,临床资料统计,1/3的癌症病人是A型血,A型血的人常易患的癌症有肉瘤、胃癌、舌癌、食道癌等。特别是胃癌,A型血者明显居多,且病变多发生在胃部,因此A型血的人,如有上腹痛、饱胀不适、消瘦、食欲减退、呕吐、便血等症状,尤其是萎缩性胃炎者,应及早就医诊治。
B型:比其他血型更健康,但更容易患结核病
B型人动作灵活性颇佳,创造力强,具有好胜心。在疾病方面,除了容易患龋齿之外,其患结核病、口腔癌、乳腺癌和白血病的比例也普遍高于其他血型的人。但相比之下,B型血的人是人群中最健康的人,需要提醒的是,B型血的人器官移植的排异率比其他血型的人高2倍,与疾病相关的死亡率高达28%,为A型血者的2倍、O型血者的4倍。
AB型:反应比较敏捷,但患精神分裂症几率比其他血型高AB型人个性较冷静沉着,神经反应也较敏捷,据统计其患精神分裂症几率比其他血型高出3倍多,且有明显的遗传倾向,在缺血性心脏病病人中,也以AB型者居多。但AB型者患结核病、妊娠贫血的比率,则比其他血型的人低很多。
AB型血的人遭受癌症及中风侵袭的可能性虽然小,但有人类“第一杀手”之称的冠心病却易光顾其身,而且一旦心脏受害,症状多较重,发生心肌梗塞的比例也明显较高。此外,医讯网:http://www.xiexiebang.com/
AB型血的女性最易患宫颈癌。
O型:新陈代谢旺盛,要学会控制自己的情绪
O型人强劲的生命力是你最大的资本,喜怒分明、个性率直导致新陈代谢旺盛,有如好劲动儿般的健康宝宝,可是过度的疲劳会慢慢的损耗你的健康唷!必须试着让自己沉稳温和一点,毕竟人只是血肉之躯,虽然运动有助于身体健康,但是适度的休息和睡眠一样不可缺少。
以下内容供研究专用:
血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理包括:
一、血型相容性检测
二、ABO血型正反定型型不一致的原因分析及处理
三、交叉配血中常见问题分析及处理
四、意外抗体筛选的意义和检测方法
五、弱D检测的的意义和检测方法
一、血型相容性检测
1、受血者和供血者AB0血型是否相容。
2、受血者和供血者RhD血型是否相容。
3、主次侧交叉配血是否相容。
4、受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体。
二、ABO正反定型不符的原因分析和处理
(一)原因
1.实验者操作技术的错误:
导致假阴性的有:①未加入抗体或血清。②未识别溶血。③血清与红细胞比例不当 ④离心速度或时间不够。⑤使用失效或错误试剂。⑥实验结果记录或解释错误
导致假阳性的有:①离心速度过大或时间过长、②使用了受到细菌污染的试剂、③试验器皿不干净、④实验结果记录或解释错误
2、红细胞标本问题:①患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞,如骨髓移植患者,或非O型人接受O型红细胞
②某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞,一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱,应用抗-A、抗-B试剂未能出现预期的凝集反应
③红细胞获得性或遗传性的异常,如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞,人血清抗-A、抗-B试剂可能与这些异常的红细胞反应
④使用未洗涤的红细胞标本,其表面黏附的血浆或血清中含针对抗-A、抗-B试剂中染色剂或其他成分的抗体,出现假阳性反应
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⑤患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏(包被)自身红细胞,以至自发地发生凝集,而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致 ⑥红细胞表面包被IgG类抗体
3、血清标本的问题:①小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集,如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。
②免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老年人ABO抗体减弱 ③4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱,一般只测正定型
④血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非特异凝集,如缗钱状红细胞的非特异凝集
⑤血清中含抗-A、抗-B以外的其他红细胞抗体,如抗-M、抗-I等。 ⑥患者接受了ABO血型不同的骨髓移植 ⑦患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体
⑧大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗-A、抗-B作用,结合到红细胞膜上,遮蔽了A、B抗原位点,不发生凝集
(二)、分析和处理
基本程序:1.重新采集标本,以避免采集、标记、污染等错误 2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史 3.彻底洗涤标本或试剂红细胞
4.应用抗-AB、抗-A
1、或抗-H检测红细胞
5.分析抗筛结果,确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰 6.室温孵育30min后,离心观察结果,以检测弱的抗原抗体反应 7. 做自身红细胞做对照,以确定自身抗体的干扰 ABO正反定型型不符的分类:
1.抗原表达减弱所致的ABO正反定型型不符
2.抗-A、抗-B血清的意外反应所致的ABO正反定型型不符 3.意外的血清学反应所致的ABO正反定型型不符 1.抗原表达减弱所致的ABO正反定型型不符: ①血型抗原表达减弱的常见原因: ↑ABO亚型红细胞
↑白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱,应用抗-A、抗-B试剂未能出现预期的凝集反应 ↑新生儿
②抗原表达减弱所致ABO正反定型型不符的处理: ↑将抗-A、抗-B和抗-A,B试剂与洗涤过的红细胞在室温或4℃孵育30min,以增强抗原、抗体的结合
↑用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞,以增强抗原、抗体的结合 ↑应用抗-AB、抗-A
1、或抗-H检测红细胞
↑用人血清抗-A、抗-B进行吸收放散试验,检测弱A、B抗原,但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸收放散试验,单克隆抗-A、抗-B必须经过系统验证,且同时要做O型血吸收放散试验作对照
↑检测唾液中A、B和H血型抗原物质
2.抗-A、抗-B血清的意外反应所致的ABO正反定型型不符 ①引起抗-A、抗-B血清意外反应的因素: 获得性B红细胞:获得性B红细胞(特征) 医讯网:http://www.xiexiebang.com/
↗常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病,也可发生在正常人 ↗通常只有A 型人能出现获得性B抗原
↗常伴有T和T n多凝集红细胞出现(细菌感染时) ↗自身抗-B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象) 获得性B红细胞(鉴定) ↗调整人血清抗-B试剂pH至6.0时,即不与获得性B细胞反应 ↗分泌型者唾液中无B血型物质
↗乙酸酐处理能明显减弱其反应,但正常B细胞不受影响
获得性类A抗原
↗ 造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性Tn抗原激活,类同A抗原
↗ Tn和T一样属隐蔽行院抗原,激活暴露后与所有血型的血清和人血清血型抗体出现凝集反应(全凝后多凝) ↗蛋白酶能降解Tn分子,消除与抗A凝集反应性,而正常A抗原不受影响,也可通过AB血清证实
混合视野凝集
↗非O型人近期输用O型血 ↗骨髓移植后
↗A3细胞与抗-A呈典型的混合视野凝集现象 ↗单合子的镶嵌红细胞后双合子的交移体红细胞 抗体包被红细胞
↗患HDN婴儿,存在自身免疫或同种异体免疫的成人,其红细胞严重包被IgG抗体分子 ↗与含一定蛋白质浓度的试剂(抗-D、抗-A、抗-B)产生凝集 ↗45 ℃放散后,抗体解离,即可准确定型
3.意外的血清学反应所致的ABO正反定型型不符 引起意外血清学反应的因素 ↑抗体太弱或消失
↑非正常高浓度的抗-A、抗-B可引起前带现象 ↑A
2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗-A1 ↑患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因,可发生类似凝集现象,如缗钱状凝集
↑冷自身抗体,如抗-I、抗-IH、抗-IA等 ↑自身免疫性温型抗体 ↑同种抗体/意外抗体
意外的血清学反应所致的ABO正反定型型不符及其处理
抗体太弱或消失,如新生儿、老年人、免疫抑制患者,应注意患者的年龄和诊断
非正常高浓度的抗-A、抗-B可引起前带现象,导致假阴性,将血清稀释或用EDTA(2.5%)处理可消除
A
2、A2B或其他ABO亚型人血清中可能有抗-A1, 抗-A1只凝集A1型红细胞而不凝集A
2、O型红细胞
患者血浆蛋白浓度过高或静脉输用了大量大分子药物等原因,可发生类似凝集现象,如缗钱状凝集,将血清用生理盐水稀释3倍或用盐水替换技术可消除 冷自身抗体,如抗-I、抗-IH、抗-IA等(自凝), a.所有试剂及细胞37℃孵育, 37℃下判读结果 b.将冷自身抗体吸收
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c.将血清用0.01mol/L DTT处理和再定型 自身免疫性温型抗体
↑自身免疫性溶血性贫血病人血清中可有温型自身抗体 ↑37℃反应比室温强
↑血清能凝集自身和其他各型红细胞
↑若红细胞上吸附有这种自身抗体,在自身或他人血清中均可出现凝集 自身免疫性温型抗体
↑正定型被误认为AB型,反定型被误认为O型:用递增温度(22℃,37℃,45℃)洗涤红细胞后再做血型鉴定
同种抗体/意外抗体:室温下抗-P、抗-M、抗E等,可能出现意外反应,干扰ABO血型鉴定,抗体特异性抗体鉴定,选择抗原阴性的红细胞做反定型 应用举例
多发性骨髓瘤致ABO血型鉴定困难1例 多发性骨髓瘤(MM):一种恶性浆细胞疾病,大量分泌异常的单克隆免疫球蛋白(M 蛋白) ,影响红细胞表面负电荷状态,血清蛋白浓度和比例异常, A/G比例失调,红细胞呈缗钱状非特异性聚集,给血型鉴定带来一定的困难。
病情简介:患者,女,38岁,因骨痛、贫血 2个月入院;Hb 65 g/L ,WBC 6.4 ×109/L,PLT 90×109 /L, 尿本周蛋白阳性,BUN、Cr 均异常;骨髓象示:浆细胞37% 。诊断:多发性骨髓瘤。有既往输血史。
血型血清学检查:正定型: A型,RhD(+),反定型: O型,
直抗:(-),
抗筛:(+)
处理:1.吸收试验:6次洗涤后的患者RBC+等量的抗-A、抗-血清(1:128), 4℃孵育1h →
离心,取上清,测吸收液的抗-A、抗-B效价
抗-A降低明显,抗-B 1:128 2.放散试验:吸收后的患者RBC用NS洗涤6次(彻底洗涤)+等量的NS56℃孵育10~15min →
放散液与5%标准 A、B型RBC反应
Ac:++, Bc: -
吸收放散试验证明:患者RBC上有A抗原,无B抗原,为A型
3.将患者血清用O型标准RBC吸收:等份血清+等份O细胞 ,室温 振荡15~30min →
离心,取上清,转移到另一等份O细胞中
吸收后的血清与标准A、B红细胞反应
Ac: -,Bc: ++(患者血清中有抗-B,无抗-A) 患者血型最终确定为A型RhD(+),输注2U 经过筛选的A型悬浮RBC后,未见任何不良反应
三、交叉配血试验中常见问题分析和处理 交叉配血原则:
R 除非极为紧急情况,输血前患者与献血者必须进行交叉配血
R 受血者血清中无即刻或迟发性地凝集和(或)溶解所输入的红细胞的抗体 R 献血者血清中无即刻或迟发性地凝集和(或)溶解受血者红细胞的抗体 交叉配血方法:
A:盐水介质交叉配血:只能检出IgM类抗体(主为ABO血型系统抗体),无法检出IgG,具有很大的危险性,只能在受血者血清中不含临床有意义抗体的情况下进行。
B:检测不完全抗体的交叉配血:
①临床最常见的迟发型输血反应——ABO系统以外的其他血型(如Rh)的IgG类抗体导致的血型不相容
②有输血史、妊娠史或血清中有意外抗体的患者必须进行不完全抗体的交叉配血试验 ③包括抗人球蛋白法、蛋白酶法、促凝剂法等
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C:抗人球蛋白法: 鉴定不完全抗体最可靠的方法,传统的抗人球法不能成为临床输血的常规检验。1986年, Lapierre发明的微柱凝胶抗球蛋白试验准确、可靠、不需洗涤,可方便的应用于抗体筛检和交叉配血试验 交叉配血不相容的原因及解决办法
A:血型鉴定错误:出现问题最多的是受血者、献血者红细胞ABO血型不相容,其次才是技术错误。复查血型
(责任错误)
B:患者存在冷反应自身抗体:采用自身对照和37 ℃水浴以及递增盐水温度洗涤患者红细胞等方法排除非特异性凝集的干扰 C:患者存在温反应自身抗体:采用吸收放散试验后取患者的红细胞与血清和同型的洗涤红细胞进行交叉配血。
D:血清蛋白紊乱及白球蛋白比例倒置引起的假凝集:如多发性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表现为主侧凝集
E:ABO 以外的其它血型系统引起的交叉配血不合:常发生于有输血史、妊娠史的患者,产生主侧凝集。如抗-D、抗-E 、抗-C 、抗-c、抗-I、抗-e和抗-Fyb等 ,用经筛选的不含相应抗原的血液进行交叉配血即可消除。
F:献血者红细胞DAT阳性:大约万分之一健康人包被了IgG或补体的红细胞,不应输用此类细胞。
G: 献血者红细胞是多凝集红细胞:正常人血清中可含有非红细胞刺激而产生的自然发生的抗体,如抗-T、抗-Tn等。应筛选低水平抗-T、抗-Tn的血液
四、意外抗体筛选的意义和方法
意外抗体:是指除ABO血型系统抗体以外的其他抗体,如抗-D、抗-E等。主要经输血或妊娠等免疫刺激产生,人群检出率为0.3%~2.0%,是引起迟发性免疫反应的主要原因。 临床有意义抗体:引起新生儿溶血病、溶血性输血反应,或者使输入的红细胞存活期减少的、在37℃反应的同种异型抗体。(IAT阳性!)
临床无意义抗体: 室温或低温反应的抗体,但抗-Vel,抗-P等,在体内引起明显的红细胞破坏。
筛选方法要求:1.选择敏感的技术检测出受血者血清中非常低水平的临床有意义抗体。高度注意!即使受血者血清中抗体对输入的不相容红细胞抗原呈弱反应,但也能够发生快速的强的回忆反应,增加抗体产生,破坏红细胞
2. 每一试剂瓶中只能有一人份的试剂红细胞,不可将多人份红细胞混合,以避免红细胞混合后对弱抗原红细胞的稀释。
FDA对试剂红细胞抗原表达的要求:D,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le, Lea, Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka, Jkb. 筛选方法实验方法:1.盐水直接凝集试验: 是最简单的血型血清学方法,紧急情况下可在室温下立即离心。可检出室温或低于室温反应的临床意义不大的抗体如抗-M、抗-N、抗-P、抗-Lea等
2.球蛋白试验: 可检出绝大部分临床有意义的不完全抗体,抗球蛋白试剂要有多特异性抗球蛋白抗体,其中含有抗-IgG和抗-C3d。含抗补体的球蛋白也能够检出结合补体的无临床意义的冷抗体,如抗-I、抗-HI等
3.其他试验:蛋白酶试验、聚乙二醇试验、LISS和微柱凝胶试验等
各种试验都有其本身的特点,适用不同范围,实验室应根据自己的条件,建立实验室常规试验程序和规程
抗体特异性鉴定:血清标本,EDTA抗凝(避免补体体外致敏红细胞)血浆标本 病史:输血、妊娠、用药
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试剂:谱细胞、增强介质,抗人球蛋白试剂 自身对照
对谱细胞的要求A:不少于8人份的O型红细胞 B:血型系统包括: Rh,Kell,Duffy,Kidd,P,Lewis,MNS 自身对照的意义:阴性:血清只与试剂红细胞反应,只有同种抗体存在 阳性:有自身抗体存在,或与同种抗体并存 自身吸收后鉴定同种抗体!
抗体筛选的意义
A:发现临床有意义的抗体 B:减少溶血性输血反应的发生 C:有利于免疫溶血性疾病的诊断
D:有利于提前选择和准备相合的血液 E:确保临床输血安全、及时、有效
1.抗体筛选阴性,盐水介质交叉配血不相容 A:供受血者ABO血型不相容
B:受血者A2或A2B亚型,血清中抗A1与供血者A1或AB型红细胞凝集 C:存在室温反应的同种抗体,如抗-M等
D:献血者是多凝红细胞,隐蔽抗原T、Tn等暴露
2.抗体筛选阴性,检测不完全抗体的交叉配血不相容
献血者是红细胞DAT阳性 万分之一健康人红细胞表面包被IgG或补体,不应该输此类红细胞
#抗体与低频抗原反应 人群1%血清中含有针对低频抗原的抗体 筛选细胞一般缺少低频抗原
3.抗体筛选阳性,交叉配血相容
A:自身抗-H, O型红细胞含有大量H抗原,而A
1、A1B含量很低。室温反应,37℃无反应,无临床意义
B:献血者红细胞正好不含对应的抗原
C:抗-Lebh 只与O型Le(a-b+)反应,不与A
1、A1B Le(a-b+)反应,室温反应,37℃无反应,临床意义不大
4.抗体筛选阳性,交叉配血不相容
①、同种抗体存在,自身对照阴性 选择对应抗原阴性的血做交叉。如抗体是抗-M、抗N、抗-P
1、抗-Lea等就无须确认对应抗原缺失,但需37℃交叉配合 ②、同种抗体存在,自身对照阳性
↑近期(2-3月)接受过输血的患者体内的同种抗体可引起自身对照阳性 ↑循环中的自身抗体可引起自身对照阳性 ↑区别两者很重要(很难),因选择红细胞程序不同
↑可用对应抗原阳性的细胞做吸收放散实验来证实同种抗体存在 ↑患者血清中的同种抗体可与输入的红细胞起反应 ↑如是有意义的抗体,应选择抗原阴性红细胞输血 ↑37度抗人球交叉配血相合是必须的 ③、冷反应自身抗体
↑强反应冷抗体(疾病)引起血型鉴定和交叉配血困难,临床意义不大 ↑37℃抗人球交叉配血相合是必须的
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④、温反应自身抗体
↑抗体筛选阳性,交叉配血不相容
↑必须分析血清中是否含有有意义的抗体 ↑造成输血困难,可经放散后配血
↑37度抗人球交叉配血最低血清学不相容原则
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