现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2011, Vol.27, No.12 复合乳酸菌粉调节肠道菌群作用的研究 朱韶娟 (广州雅芳保健品制造有限公司,广东广州 510900) 摘要:研究复合乳酸菌粉(嗜酸乳杆菌+乳双歧杆菌)及低聚木糖的益生菌冲剂在调节儿童肠道菌群方面的作用,研究方法依照 《保健食品检验与评价技术规范-2003版》之“调节肠道菌群作用检验方法”。结果表明,该复合益生菌产品,在14 d动物实验和15 d人 体实验中,双歧杆菌和乳杆菌数量均有极显著增加,摄入该复合益生菌产品具有调节肠道菌群的保健作用。 关键词:复合乳酸菌;低聚木糖;肠道菌群 文章篇号:1673-9078(2011)12-1451-1453 Regulating Effect of Complex Probiotics Granules on Intestinal Flora Abstract: The effect of the probiotics (Lactobacillus acidophilus + Bifidobacterium lactis) and xylooligosaccharide complex granules on “ Technical standards for testing & assessment of health food (2003)”. The product can significantly enlarge the quantity number of the intestinal Lactobacillus and bifidobacterium lactis. Key words: probiotics complex; xylooligosaccharide; gastrointestinal tract flora 腹泻是导致儿童发病率和死亡率居高不下的主要 原因,而肠道菌群失调是导致腹泻的主要原因之一。 益生菌和益生元能通过有效调节肠道菌群减少腹泻发 生风险,促进儿童健康。研究指出,复合乳酸菌与低 聚木糖能有效抑制肠道腐败菌的繁殖和腐败作用,阻 止有毒物质的形成,并能合成多种维生素,对肠道菌 群有很好的调节作用[1]。 嗜酸乳杆菌和乳双歧杆菌存在 互生关系,嗜酸乳杆菌的生长中需要醋酸盐、维生素 B2和叶酸等作为营养物质,而乳双歧杆菌作为双歧杆 菌的一种,在发酵中除能生成醋酸外,还能合成维生 素B1、B2、B12和叶酸等多种维生素,可以满足嗜酸 杆菌的需要,促进嗜酸杆菌的生长增殖;嗜酸乳杆菌 在微含氧的乳基质中生长快,可以逐步降低乳基质中 的氧化还原电位,并提供各种已分解的容易利用的物 质,促进乳双歧杆菌的生长。低聚木糖作为一种效果 显著、优质的益生元,在较低剂量下即可使乳双歧杆 菌成倍增加,较其他低聚糖其有效用量低很多,但效 果却更明显[2],且低聚木糖水分活度较其他益生元更 低,能更好地与益生菌复配,保障益生菌在较长保质 期内保持活性。本报道旨在研究一种复合乳酸菌粉与 低聚木糖的产品在调节儿童肠道菌群方面的作用,并 探讨其作用机理。 收稿日期:2011-09-21 作者简介:朱韶娟(1972-),女,工程师,在读硕士,研究方向:保健食品 ww w. mo de rn foo d regulating intestinal flora was tested according to “the method for the assessment of regulating gastrointestinal tract flora function” established in 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 益生菌冲剂, 自制, 主要原料为复合乳酸菌粉 (嗜 酸乳杆菌+乳双歧杆菌,丹尼斯克菌种)和低聚木糖。 1.5 g/袋的铝箔袋装,推荐食用方法为每天1次,每次1 袋,温开水冲饮。 超净工作台,电子天平,培养箱,酒精灯,消毒 吸管,平皿,试管等。 1.2 实验方法[3] 1.2.1 培养基和肠道菌群检验方法 动物实验及人体试食实验:双歧杆菌:BBL培养 基, 37 ℃/48 h厌氧培养; 乳杆菌: LBS培养基, 37 ℃/48 h培养; 肠杆菌: EMB培养基, 37 ℃/24 h培养; 肠球菌: 叠氮钠-结晶紫-七叶苷培养基, 37 ℃/48 h培养; 产气荚 膜梭菌:TSC培养基,37 ℃/24 h厌氧培养。 人体试食实验:拟杆菌:实验室配制改良GAM培 养基,37 ℃/48 h厌氧培养; 1.2.2 动物实验方法 1.2.2.1 实验动物 选用SPF级昆明种雌性小白鼠48只,体重18~22 g。 1.2.2.2 剂量与分组 实验按人体每日推荐量(以儿童体重30 kg计, 推荐 量为0.05 g/kg·bw)的5倍(0.25g/kg·bw)、 10倍(0.5 g/kg·bw) 1451 .co ZHU Shao-juan (Avon Healthcare Products Manufacturing (Guangzhou) CO., Ltd, Guangzhou 510900, China) m. cn 现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2011, Vol.27, No.12 和30倍(1.5 g/kg·bw)分成对照组和低、中、高剂量组共 四组,每组12只。 1.2.2.3 实验方法 实验时分别称取样品0.50、1.00、3.00 g,用纯净 水配制成40 mL的样液,分别供低、中、高三个剂量组 动物灌胃使用,每日给予受试物灌胃,给样量根据每 周体重增减调整,连续灌胃14 d。对照组灌服无菌纯净 水。在给予受试物之前和末次给予受试物后24 h,每组 无菌采取其中10只小鼠粪便。置已称重的装有玻璃珠 的干燥灭菌小试验管中,再称重,计算出小鼠粪便重 量,以灭菌稀释液稀释10倍,制成均匀悬液,再现依 次进行10倍系列稀释,选择合适的稀释度,分别接种 在各培养基上,按要求进行培养。培养后,计算每克 湿便中的菌数,取对数后进行统计处理。比较实验前 后自身及组间双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌、 产气荚膜梭菌的变化情况。 1.2.3 人体实验方法 1.2.3.1 受试人群要求 受试人群选择近一个月内未患过胃肠疾病、未服 用过抗生素、年龄在6~14岁、体检指标全部正常的志 愿者104名。 1.2.3.2 剂量与分组 将志愿者随机分成试验组和对照组,每组52人, 男女各半。 1.2.3.3 实验方法 试验组按样品的推荐剂量和方法服用受试样品。 对照组服用安慰剂。 每日1次, 每次1袋, 连续服用15 d。 由专人负责发样品并监督服用,试验期间不改变原来 的饮食习惯,正常饮食。试验组于试食受试物前和连 续服用受试物15 d后, 对照组则同时与试验组分别无菌 采集粪便进行10倍系列稀释,选择合适的稀释度,分 别接种在各种培养基上,按要求进行培养,然后对培 养物进行菌落计数。 1.3 实验数据统计 动物实验数据用SPSS 10.0软件包进行统计分析; 人体试食实验数据为计量资料,采用t检验进行分析。 自身对照资料采用配对t检验,两组均数比较采用成组t 检验分析。功效性指标经对数转换后,经方差齐性检 验满足正态方差齐性要求,采用t检验进行分析。