2015年TBS报告指南指出“在检测高度病变中,p16/Ki-67双染与细胞学检测的特异性相当,且具有高敏感性”推荐免疫细胞化学可辅助细胞学诊断;
在2018年5月第十六次全国子宫颈癌协作组工作会议中,我国著名的宫颈癌筛查专家赵更力将双染引入宫颈癌筛查全程解决方案,作为HPV初筛,细胞学初筛和HPV联合细胞学检测的分流措施及临床处理指南。
适合中国农村地区宫颈癌筛查技术与示范研究项目
2015年4月~2016年5月重庆万州和四川双流4070名妇女
年龄35岁~64岁 平均47.5岁
研究发现329例HPV阳性妇女的p16/ki-67双染的阳性率为45.6%,检测CIN2和CIN3的灵敏度分别为91.7%和93.8%,显著高于细胞学检查和HPV16/18分型。这说明p16/ki-67检测可以检测出大部分的癌前病变患者同时又可以降低至少一半的阴道镜转诊率。
我们在255例HPV阳性且细胞学阴性的样本中,发现双染在≥CIN2,≥CIN3的的敏感性为分别为90%和100%。阳性检出率为29.8%。p16/Ki-67免疫细胞化学染色可以检测出被细胞学检查所漏掉的近乎于30%的CIN2+患者,包含5例CIN2、5例CIN3、1例宫颈腺癌。从而弥补了细胞学检查的不足。
对于以HPV为初筛手段的情况,双染阴性可以减少HPV16/18阳性及其他HPV阳性组49%~65%的阴道镜转诊率,使大部分病人回归随访。同时双染阳性可以提高8.9%HPV阴性中阳性检出率,避免漏诊。
鉴别细胞学中常见的不成熟磷化,萎缩,化生,修复性上皮增生及人工操作所致的假象,在其中寻找存在的高度病变,是一个细胞学医生的基本功,即便对经验丰富的医生来讲,也并非易事。
对于不能鉴别的非肿瘤性病变,双染可以快速便捷的提供可靠客观的意见,双染阳性提示高度病变,转化性HPV感染,立即阴道镜管理。阴性病人定期随访。需要强调的是P16的过度表达也存在正常的子宫内膜细胞、萎缩细胞,化生细胞和正常柱状细胞,p16单染阳性会降低诊断的特异性,导致大量的假阳性,增加阴道镜活检,并需要形态学来辅助诊断。
单独P16染色阳性——不能作为宫颈癌前病变的依据
p16/Ki-67 免疫双染技术可以仅根据颜色辨别出异常细胞,潜在地消除了对细胞形态学的依赖。它不仅可以弥补细胞学检查灵敏度的缺陷,还可以提供比HPV更高的特异度。图中数据表示针对细胞学灰色地带ASC-US与LSIL具有良好的分流作用,使得超过90%的正常患者回归健康回访,免于阴道镜及不必要的后续治疗。同时针对高度病变、鳞癌和腺癌的检出率分别达到95.7、100%和100%。
p16/Ki-67 双染可由经过短期培训的技术人员操作,并且重现性良好,这使得他们有望成为很好的分流方法,尤其适用于细胞病理医生和医疗资源缺乏的地区。
单纯的Ki-67胞核着色表达细胞周期增殖,单独的p16胞核胞浆着色表达细胞周期阻滞,判读为阴性。而在同一细胞胞浆p16着红色,胞核Ki-67着棕色,即细胞浆红染,胞核棕染即为阳性。强烈提示高度病变,≥CIN2,转化性HPV感染。
基于p16/ki-67检测对实验室设备、环境、人员要求较低,可以作为农村妇女宫颈癌初筛手段。双染阳性:强烈提示CIN2+病变,转化性HPV感染,立即阴道镜活检 ;双染阴性:随访一年后复查,尤其适用于细胞病理医生和医疗资源缺乏的地区。
针对年轻或HPV16/18阴性以及其他12型别HPV阳性,而细胞学诊断为ASC-US/LSIL的妇女。双染阳性则立即进行阴道镜管理,阴性则定期随访。
三年磨一剑,今日指示君
迈新从2014年针对p16/Ki-67双染项目成立免疫细胞化学事业部,开展免疫细胞化学双染的实验室验证及临床研究,并与2015年加入中国医科院肿瘤医院/协和医院“适合中国农村地区宫颈癌筛查技术与示范研究项目”于2017年结题并分别发表在美国的肿瘤预防杂志,中华流行病学杂志,中华肿瘤学杂志、中华病理学杂志等国内外核心期刊。