该网页用三种形式来显示blast的结果。　(1)图形格式:　图中①代表这些序列与上游引物匹配、并与下游引物互补的得分值都位于40~50分　图中②代表这些序列与上游引物匹配的得分值位于40~50分,而与下游引物不互补　图中③代表这些序列与下游引物互补的得分值小于40分,而与上游引物不匹配　通过点击相应的bar可以得到匹配情况的详细信息。　(2)结果信息概要:　从左到右分别为:　A、数据库系列的身份证:点击之后可以获得该序列的信息　B、系列的简单描述　C、高比值片段对(high-scoring　segment　pairs,　HSP)的字符得分。按照得分的高低由大到小排列。得分的计算公式=匹配的碱基×2+0.1。举例:如果有20个碱基匹配,则其得分为40.1。　D、E值:代表被比对的两个序列不相关的可能性。【The　E　value　decreases　exponentially　as　the　Score　(S)　that　is　assigned　to　a　match　between　two　sequences　increases】。E值最低的最有意义,也就是说序列的相似性最大。设定的E值是我们限定的上限,E值太高的就不显示了　E、最后一栏有的有UEG的字样,其中:　U代表:Unigene数据库　E代表:GEO　profiles数据库　G代表:Gene数据库　(3)结果详细信息:　①　圈出来的部分代表序列的信息　②　第一个大括号代表上游引物与该序列的正链【Plus/Plus】的匹配情况:　共有21个碱基匹配,得分42.1分【21×2+0.1=42.1】,E值为0.020　上游引物与序列的2143~2163位点匹配　③　第二个大括号代表下游引物与该序列的负链【Plus/Minus】的匹配情况:　共有20个碱基匹配,得分40.1分【20×2+0.1=40.1】,E值为0.077。　下游引物与该序列的29360~29379位点互补　注意点:　①上游引物为20个碱基,为什么会变成21个碱基呢?这是因为下游引物的第一个碱基为T,刚好与系列的2163位点的T匹配,因此下游引物的开头的第一个碱基被当成了上游引物了。同理,上游引物的最后一个碱基为G,被当成了下游引物了。通过寻找有没有与1~20位点、20~40位点完全匹配的序列,就可以避免这个因素的干扰了。　②为什么与上下游引物匹配的ABCG2序列有多种　A、　为同一个基因来源的不同的mRNA片段　B、　为该基因的DNA系列　C、　为同一个基因来源的不同的cDNA克隆片段　结果判断:　①验证文献报道的引物是否正确:如果你可以在所显示的结果中找出你的目的基因,一般说明你的引物正确性没问题。如果你blast后没有发现你的目的基因,或者分值很低,该引物就可能不适合用。　②检测该引物是否存有同源序列相匹配,造成PCR反应的非特异扩增。如果上游引物和下游引物都找到的相同的基因,并且分数非常高。这种结果表明所设计的引物序列特异性不高,最好重新设计引物,否则会得到非特异扩增的PCR产物。