Hi,又见面了大家,最近不得不说的就是由新型冠状病毒引起的全国性疫情。本着“口罩带好,论文接稿”的态度,本人老老实实待在家中,躺在床上一动不动。可是我那上进的师妹看到新型冠状病毒的检测方法qPCR,想到了一些奇怪的实验数据,微信上发来好多问题,刚好趁此机会,我们就一起学习这个经典不可或缺的实验qPCR。最开始进入实验室时,就能听到一堆类似名词,RT-PCR、qPCR、real-time PCR。首先我们区分一下,qPCR(Quantitative Real-time PCR)一般认为是real-time PCR的简称,即为实时定量基因扩增荧光检测系统,可以对原始模板数量进行精准的检测。而RT-PCR是逆转录PCR(Reverse transcription PCR), 是将RNA模板反转录成DNA再进行扩增的实验。这里需要注意虽然real-time PCR和Reverse transcription PCR的前缀都可以缩写为RT,但是我们一般认为RT-PCR是逆转录PCR。首先我们要了解qPCR的实验原理,简单来说就是PCR扩增过程中,通过荧光信号的收集,以扩增和熔解曲线的方式对PCR进程进行实时检测。