基金 项 目 : 国家 自然 科 学 基 金 项 目(编 号 30960430/ H 1601) ·综 述· 堆 积 ,维 持 基 因 组 的 稳 定 性 以及 调 节 细胞 的 分 化 与 衰 老 . 抑 制肿瘤血管增 生等有“分子警 察”之称 正常 D53 基 因编码 的 p53 蛋 白因其 半衰期短 . 含量低 , 用免 疫组织 化学方法 很 难 检 测 到 . 用 免 疫 组 织 化 学 方 法 检 测 到 的 多 为 突 变 型 D53 蛋 白 . 这 是 因 为 突 变 型 p53 基 因 编码 p53 蛋 白 因 其 分 子 构 象 发 生 改 变 , 稳 定 性 增 加 , 半 衰期 延 长 , 容 易 检 测删。突 变 型 p53 基 因 , 不仅失 去了对细胞的监视功能 且本 身还有促进恶化 的活 性 , 抑制细胞 的凋亡 , 使 细胞 无限制的生长 . 对肿瘤的发生发 展 和 预 后 有 重 要 的影 响 。另外 突变 的 p53 蛋 白能 和野 生 型 的 亚 单 位 结 合 形 成 寡 聚 复 合 物 , 当突 变 型 的 D53 蛋 白过 量 形 成 时 , 野生型 的亚单位都被 结合成了寡聚复合物而 阻止 了其抑 制 肿 瘤 发 生 的作 用 I 3 p53 基 因 在 肿 瘤 发 展 中 的 作 用 肿瘤 的发生是一·个 复杂的生物学过程 . 有许多癌 基因和 抑癌基 因参 与了这 个过程 . 抑癌基因的突变是一个很 重要的 因素 , 突 变 的 抑 癌 基 因失 去 了 其 野 生 型 的生 物 学 功 能 。f11野 生型的 p53 基因可以参与细胞周期的调节 p53 激活其 下游 靶 基 因 p21 , p21 能 抑 制 cyclin— CDK 2 及 cvclin— CDK 4 而 引 起细胞周期阻滞 , 把细胞阻滞在 G 1 期 。 突变型的 p53 基因则 丧失 了这 种生 物学 功能。当基因受到缺氧 、 损伤等 的刺激时 , 就会 引起 D53 在细胞核 内的聚集 , 从而 引发 了至少 300 种 不 同的基因调节过程 比如周期 抑制 、 细胞 凋亡 、 基 因修 复 、 血 管 发生 等。 (2)野生型的 p53 蛋 白可以通过抑制抗凋亡蛋 白 Bcl一 2 的表达而诱导肿瘤 细胞发生 凋亡 ,最新发现 的 D53 诱导 细 胞 凋亡机 制[1l1: 通过对 TIGAR(TP53 诱导 糖酵解 和凋 亡调节 因子)的表达负性调 节 , 使 细胞 中果糖~ 2 . 6一 磷酸盐 的水平上 升 , 以至糖酵解过 多细胞内活性氧总体水平上升 发生 D53 诱 导 的死亡 : 通过诱 导 自我吞 噬调节基 因 DRAM 的表达编码产 生一种诱导细胞吞噬的溶酶体蛋 白引发细胞凋亡[1 2 J f31抑制 肿 瘤 细胞 与 其 他 周 围细 胞 之 间 的粘 附 . 以及 抑 制 肿 瘤 的 早 期 浸润转移 激 活 , p53 蛋 白抑 制 介 导 细 胞 粘 附 的 Cadherin 分 子 的表 达 , 有研究表明通过抑制 Wnt一 / 3- catenin 信号途径的 并 降 解 参 与 这 一 粘 附 过 程 的 B— catenin , 从 而 抑 制 肿 瘤 细 胞 与 周 围其他 细胞 之间的粘附和相互通讯 .使其 生存 环境恶化 。 f41 肿 瘤 的发 生 和转 移 一个 很 重 要 的 生 物 学 现 象 是 血 管 的 发 生 , 而 D53 基 因可 以抑 制肿瘤 血管 的生 成 , 近三十 年的研究 表 明 实 体 肿 瘤 的生 长 和 转 移 有 赖 于 肿 瘤 血 管 的 营养 供 应 . 而 阻 断 肿 瘤 的 血 管 生 成 必将 抑 制 肿瘤 的生 长 Teodoro et a1 1 1 >t · 5 8 · 第 29 卷 第 1 期 2011 年 2 月 实 验 与 检 验 医 学 E X PE R IM E NT A L A ND L A B0 R AT 0 R Y M E D ICINE V o l_29 No 。 1 Fe b. 20 1 1 的 研 究 认 为 D53 主要 是 通 过 激 活 胶 原 蛋 白的 脯 氨 酰 羟 化 酶 (PHDs) . 该酶具有抑 制血 管再 生的特性 , 又根据肿瘤 血管再 生 所需 耍 的调 控 因子 方 面 的 研 究 . 认 为 p53 主 要 是 通 过 三 种 途径抑制肿瘤血管 的再生 : 通过抑制肿瘤缺氧诱导 因子(HIF1 的 形 成 : 通 过 抑 制 血 管 生 成 前 因 子 的 合 成 . 如 血 管 内 皮 生 长 因子ⅣE Gn 、 成纤维生长因-~ (bFGF)等 ; 通过增加内源性血管 再生抑制因子的量或激活一些抑制血管再生的酶 。f5)p53 基 因可 以抑 制 多 重耐 药 基 因(MDR )的转 录 。而 突变 的 p53 基 因 其肿瘤 的耐药性增加 . 对化疗效果 的敏感性下降。f61最近的 研究发现 【 起 作 用 的 , 而是 有 一 个 由 1 053 , mdm2 , mdm4 , bcl2 和 p21 五 个 基 因 所 表 达 的 蛋 白 组 成 的 网 络 共 同 调 控 其 抑 癌 作 用 的 . 而 53 基 因的肿瘤抑 制作用不是通过 p53 基 因单独 D53 基 因是 在 这 个 网 络 中起 关 键 性 的基 因 。 4 p53 基 因与乳腺 癌的发展 p53 基 因 自身 结 构 的 改变 是 D53 基 因 抑 癌 功 能 丧 失 的 主 要 机 制 的发生密切相关 如果良性组织中发生了 p53 基因的突变则 其 发 生 乳 腺 癌 的 概 率 大 大 增 加 .认 为 一 旦 发 生 p53 基 因突 研 究 发 现 乳 腺 良性 组织 中 p53 基 因 突变 与乳 腺 癌 变 . 细胞便不可能 圆满修 复损伤的 DNA. 不 稳定 的染 色体将 导致 细胞无限增殖而发生癌变 M0ttolese 等对 72 例乳腺癌 和 44 例 良性乳腺 肿瘤 患者 的研究显示 .良性乳腺肿瘤或肿 瘤周 围正常组织 中 p53 阳性 患者 的比例 I : L~L腺癌患者低 , 并 且 在 良性乳腺肿瘤 或肿 瘤周围正常组织 中 p53 阳性更 有可 能发展成乳腺癌。 国内研究 也发 现 p53 表达与病人年龄 , 肿 瘤 大 小 . 组 织 学 类 型 无 明显 相 关 性 . 而 与 肿 瘤 病 理 组 织 分 级 和淋巴结转移有明显的相关性 ,病理组织学 Ⅲ级分化组 p53 蛋 白阳性表达率明显高于 I ~ Ⅱ级分化组 。张海英 , 郭彦伟 ㈣ 等发现 p53 蛋 白阳性在腋窝淋 巴结阳性组明显高于阴性组 . 说明 p53 基 因突变不仅参与细胞癌变 . 同时还可能促进癌细 胞 的 浸润 转 移 . 与 乳 腺 癌 的恶 性 程 度 密 切相 关 。 5 p53 基 因对于乳腺癌预后评估 的意义 p53 基 因对 于 乳 腺 癌是 一 项 独 立 的 预 后研 究 因素 用 分 子生物学方法检测 p53 基因突变 , 发现突变阳性组和阴性组 患者 的无病生存期差异有显著性㈣ Dookemn KA 等人【 删的研 究证实 p53 蛋白阳性 的乳腺癌患者五年无瘤生存率 f54. 7%1 明显低于 p53 阴性(66. 7%)的乳腺癌患者。目前多数学者认为 p53 抑癌基 因突变或蛋白过度表达与乳腺癌患者预后不 良有 关 , p53 表达阳性的乳腺 癌更具有侵袭性 ,恶性度 高 , p53 阳 性 的肿瘤细胞增殖 活力强 . 分化差 . 恶性度 高 , 侵袭性 强 . 淋 巴结转移早 , 淋 巴结转 移率高 , 生存质量差 , 生存期短 , 突变 型 p53 基因产物的聚集 . 可影响化疗效果较易产生耐药 [2H p53 基 因 的 肿 瘤 抑 制 作 用 在 很 多 动 物 模 型 中 已 经 被 证 实 . p53 基 因发 生 丢 失或 者 突 变 的 动 物虽 然 能 存 活 . 但 有 容 易 发生肿瘤的倾 向, 九十年代末期人们发现 了与 p53 基 因具有 高 度 同源 性 的抑 癌 基 因 家 族 的新 成 员 p63 和 p73 基 因 [2 2, 2 3 ], 人们期 望 p63 和 p73 基因在细胞生物学方 面 , 具有与 D53 基 因相似的功能 . 以便 于人们揭示肿瘤 的发病机制 的 结 构 与 p53 相 似 外 , p73 能 进 行 特 定 的 “D53 样 活 动 ” 形 成 除 了他们 同型寡聚物 、 结合 DNA 、 对 p53 反应的基 因如 p21 等进行 活 化及引发细胞凋亡。 另外 p73在 神经发生 , 感觉传导, 以及保 持内环境的稳定 等方 面发挥重要作用 。 p63 主要作用 于组 织分层方面 . 比如表皮组织 . 乳腺 . 前列腺等。 6 o53 基 因对 于乳 腺 癌 治 疗 的 意 义 乳腺癌 的治疗 . 现在大 多仍采用传统 的治疗手段 即手术 治疗后 再进 行化疗或放射治疗 . 对于乳腺 癌的晚期治疗逐渐 兴起一种“新辅助化疗”手段[2 5 1 新辅助化疗即手术前先进行 化疗 . 可以降低肿瘤 的临床分期 . 为乳腺癌 患者争取保乳手 术 的机会 . 并且可以通过疗 效的评价来测试肿瘤对化疗方案 的 敏感 性 . 从 而 为 术 后 进 一 步 治疗 提 供 指 导 。