(1)单向免疫扩散法0.80~1.20g/L。 (2)火箭免疫电泳法:正常人血清87份(男56人、女31人),X±SD=1.2219±0.234g/L,范围0.9879~1.4559g/L。 1、补体动态变化在临床上越来越受到重视。抗原-抗体复合物引起的胃炎病人血清总补体和C3均明显下降。大多数全身性红斑狼疮患者血清补体的降低和病情恶化有关。活动性全身性红斑狼疮患者血清中C1、C4、C2和C3降低,病情缓解时血清补体水平恢复正常。肝脏疾病患者C3多为降低,肾移植病人C3的水平不稳定,C3在排异反应开始时升高,然后下降到正常以下。也有报道胰腺癌晚期与隐性淋巴细胞白血病患者C3降低。 2、传染病及组织损伤和急性炎症时,C2、C3、C4均增加,总补体活性正常或升高。但晚期则降低。肿瘤患者补体量升高,特别是肝癌,C3升高最为明显,具有诊断意义。 结果偏低可能疾病: 脂肪营养不良、系统性红斑狼疮所致脊髓病、风湿热、血管炎、血清病、类风湿性关节炎肾损害、小儿血清病、妊娠合并肾病综合征、小儿风湿热、强直性脊柱炎。 结果偏高可能疾病: 类风湿性关节炎的肾损害。 (1)单向免疫扩散法: ①浇琼脂板时注意避免产生气泡。 ②稀释血清、抗血清所使用的吸量管必须固定。稀释参考血清和患者血清皆用统一校正过的吸管,否则要用同一根吸管。其他器材也最好统一。 ③所用琼脂浓度一定要严格控制,分装后防止干燥,不要反复溶解。溶解时不要煮沸时间过长,以防水份蒸发。56℃温度要严格,太热会破坏血清,太冷易凝固。混合要迅速、充分。 ④加好血清后放的位置一定要保持水平,以防扩散圈变形。 ⑤受检者血清须新鲜。如条件不许可,可将血清冰冻保存或稀释后保存,数天之内影响不大,时间久后易使C3值增高。 (2)火箭免疫电泳法: ①试验前首先要找出合适的抗血清浓度,使沉淀峰高度适中,峰形清晰。做法是用参考标准物稀释几个浓度做实验,使峰高确定在一定范围(2~5cm)。以满意的峰高峰形将抗血清浓度确定下来。在此基础上,再用参考标准物稀释各种浓度作为抗原进行测定,以选择出最适血清标本稀释度,即选出其测定结果基本上与参考标准物含量一致的稀释度,作为血清标本的最适稀释度。 ②测定补体蛋白时,血清分离后应立即使用。 ③抗原用戊二醛醛化,在C3电泳中可促进负离子的泳动。 ④PEG可抑制免疫复合物解离,促进免疫复合物进一步聚合成更大的凝聚物而被沉淀,有助于提高试验的灵敏度。 ⑤本法灵敏度为5.65μg/ml,CV为1%。 ⑥其他同单向火箭免疫电泳。 稀释抗C3血清及制备含抗C3血清的琼脂板:先按要求的稀释度计算出稀释液的用量,其中的半量采用缓冲液。抗C3血清用缓冲液稀释后放56℃水浴预温。然后再加等量的、已预温的15.0g/L琼脂,使抗血清的最终稀释度达到要求。按单向免疫扩散法常规浇制含抗C3血清的琼脂板,冷却凝固后打孔(孔径3mm),孔距1.5cm以上。一般用1∶25,1∶50,1∶75,1∶100四个稀释度抗C3血清制板后,用微量注射器在孔中分别加入上述不同浓度的C3参考血清(每孔中加10μl),经37℃48h保温后,测得沉淀环直径。