华 西 鹤 学 蔸}表 W C J · P S 地龙及几种含地理中便爵时 薄层层析鉴别 杨 胜 华 丁 世 全 ( 华西 医科 大学 药学 院 陈慧其 熊新科 成 都 610041) 摄耍 牢文对地龙及几种古地龙的中成药的薄层层析鉴别条件进行了研究。方法 筒 便、灵 敏、可 靠 , 重 现性 良好 并 出较 了国产 硅艘 薄 层扳 与进 口高效 薄层 扳 (HP T L~ P la~ ) 的 图谱 。 同 时聚 用 奉 _ 挂对 经 稳定 性试 验 (加 速试 验 ) 8 个 月后 的成 药进 行 了考 察, 结 果蒲 意. 关■ 两 地龙 中磺l 萄 薄层层析法 地龙 是鞔体动物 门,钜鲥科 动物参 环毛蚓 ( phoretima aspergi 1 l um perr ler) 或 缟蚯 _驾『的千爆体 ( 1) ,吉有地龙 燕耐 ( L umbri- febrlnc) 、花生四 烯酸 ( A r achi doni e ac id) 、 次黄 嘌呤 ( H y pox as th ine) , 地龙素 ( L um- berit in) 、地龙毒素及多种氨基酸 ( 2~8] 。 有 关地龙及其 复方制 剂 中地龙 的薄层层析 鉴别 未见报道。本文试验研究,建立了良好的薄层 色谱条件,对地龙及其成方制剂中地龙的薄层 层析 鉴别 、取得了满 意 的结果 ,方法简 便,可 靠 ,专属性,灵敏性及重现性均好。 实 :验 部 分 一、 仪器 与茹 吕 仪器 旋 转薄貘浓缩 器 Z F Q81型,上簿 蓝 械专机厂, 电热真空干燥 箱 402型,天津实 验 仪器厂, 旋涡混 合器 上海 医科大 学 仪 器 厂 {微量 进样器 10m l,上海 医用 激光仪器厂 ; 紫 外分析 仪 上海科艺光学 仪器厂。 试 剂 硅胶H 青 岛 海洋 化工厂, 有 机溶 剂及其它试 剂均为 分析纯。 对 照药 材 地龙 成都市 中药材 公 司 提 供 。 供试品 地龙 广东产,小 活络 丸 成都 呻 药厂 ,批号 8905f l 6,追风丸 按部颁 1989年 第 1 部标准配制} 朴用还五溺 c‘ ) 浸膏及制剂 四川华星中医药有限公司,实验所甩其它生 药均符台中国药典 (1990年版一部) . = 、方法与 螬暴 ( 一 ) 对 照液及供试掖 柏 制备 1.地龙 对照 液及供 试 液的制备 分 别称 取地 龙对照 品及供试 品各 2 g ,蚺 成碎粒 ,加水20~ 39mI,加 热微沸 回流 l h , 过滤或 离心,取清 液置 水 浴上蒸发成浸膏 ,加 入 甲醇 8.~19ml ,搅 拌,放置6Omin,用 脱脂 棉过 滤,水 浴浓缩 至 l ml ,转入 5 m1 具 塞 样 品管 中,加苯 0.6m1,振摇 ,待 分 层后 ,分取 苯层 即得地龙对 照液和供 试液。 2.空白对照液的制备 ( 1 ) 小 活络丸空 白对 照液 按 中国药 典90年版一 部处茄 除去地 龙, 称 取胆 南星 ,川乌等各味 药材,加练蜜适 量制 成丸剂 ,磨 细后 , .加水 60~70 1, 加热 回流, 按地龙 对照 液 的制 备祛 进行 即得。 ( 2 ) 追风丸空白对照液的制 备 按部颁 1989年第 l 部 标准,腺 去地龙 ,称 取荆芥,防风等各味药材,挪炼蜜适量,制成 丸剖,磨细,J 加水l 56~ 200ml,加热回流,按 地龙对 照液 秘备 法进行 ,即得 ( 3 ) 补 阳还五汤 空白对豫 液 的制 备 按清代名l 方 ( 1) ,除去地【 龙,称 取 1 /l 0 维普资讯 http://www.cqvip.com l 38 华 西 药 学 杂 志 e 嚣 日剂量 的黄芪 ,当归等药材 ,使成 碎粒,加水 5O~6Oml ,加热,按地龙对 厢液{lI 法进 行 鄂 得 。 3.复方制剂供试液的胡备 ( 1 ) 小 活络丸供试液 ‘ 取小活络丸 2 粒 ,研细,加水 50—60 l , 按 地龙对 照液制法进行 ,即得 . ( 2 ) 追 风丸供试液 取追风丸 3 粒 ,研细,加水约 150ml, 按 地龙对 照涟制 法进行, 即得 。 ( 3 ) 补 阳还 五汤 制剂 供试液 取本 品 2 g ,研 细,加水 约25ml,按地 龙 对 照液 制法进行 , 即得。 (二) 薄层层 析条 件 1.薄层板 称取 硅胶 H 6 g,加3倍 量 0.5 C MC - Na调匀,铺成 150 × 200 × 0.25r a m的薄 层板,105。C活化 1 h备用,高效薄层板(H P— T L C si U.ca gel 60 F 25 4,Merck 公司) 。 田 2 匿1.地龙的T 【 匿落 地龙对鼎 品 地盘供试 品 F lg 1. T L Chr om to~ am nf D llo喀 1. C o nt ru t nf D tl oug 2.T 鼬t s ol ut ion of Ⅸ lDnE 叠2.囊,i5构 田蕾 - 1. 追R 丸 2.追风丸空白对厢 4.小活络丸空 白对照 5.地龙对用品 5.小活络丸 F jg 2. T L C h rom a tog r a m of E x tr a c t 1.Z b‘lif en W an 2. B l a nk c ont m ! of Z h tl i ~ e n W e n ~ nt ro ! of m I on I 4.B la nk eq nt rol of X ia oh u ol u o W a n 5. x l a c bue l uo W a n 圈 8 圈3.硝卉薯的H PT L C 圈誊 1.地龙对蠕 晶 5.补 阳还五溺提蕈斯 2.补1日珏五涵空白对舜 4.斡1日证五酒皋I剂 F g 5. H PT L C C hr o ma t og r a m of pr e pa ra t l om 1.C o ntr as t o f D i long . 2. B lank ~ nt ro ] o f B ny a nghuanw u T ang E x t ra ct of B ny a ng hua n w u T a ng 4.P reI~ nat lon o f B uy an ghuanw tt T a n g 脚4.斜剂加速后的T I C 母誊 1.地尤对照品 4.制剂加速B十月 2.补阳迁五汤空 白对照 5.舒 室温存放s个 5.朴1日迁五酒毒蜻1 月 F ig 4.T L C hto ma t og ra m of a c eera ted pr e pa m ti on 1.C ont rus t ot 瑚 lo ng 2.B h 畦 con t rol of B uy a ng h ua nw tt T 舢堰 ;. P r e pex a t ton o f B uy an g h ua nw u T a n g ●.A c ee rat ed f o r s ix m on t hs 5. R OOm t e m per a t ur e f or si x m ont h s 2.展 开系统 苯一乙酸 乙酯 ( 9 :1 ) ,展 匿 14cm . 3.显色剂 10 硫酸 乙醇 溶 液 ,喷 雾 后 105。C 加热 , 3 ~ 6 r a in。 ( 三) 薄 层鉴别 分别在 薄层板 上点加地龙对 照渍 1Op l,空 白对照液及制搠供试液,各2 l按上述色谱条 件进行薄层 层析 和显色,结果 见图 1 ~ 4 。 讨 论 1.本文所建立的薄 色谱条件,地龙及含 维普资讯 http://www.cqvip.com 3 期 地龙的 复方制剂 ,均在 Rl值 约为0.32处呈 浅紫 红色斑 点 ,而空 白供试 液在相应 Rf 值 处,则 不 显 色斑 ,见 图 1 ~ 2 ,故可作为 地龙及其 复方 制 剂中地龙 的特 征斑 点 2.围 3 结果 表 明,采用Mer ck 公 司的高 效 薄层 预制板 与用 国产硅 胶铺制的 薄层板 ,在 相 同色谱条 件下,前 者的分离 效果好 ,能 出现 更 多的斑 点,但 两 种薄层 板均能很好 地鉴别 地龙 及其 复方制剂 中的地龙 。国产硅 胶价廉 ,易得 , 更为适宜 。 3.10 硫酸 乙醇 溶液显色后 ,可在 日光下 直接观察浅紫红色特征斑点 ( R l = 0.32) ,也 可在 365nrn. ~ 外灯 下观察, 在 相同 位置 显 摄红 色荧光斑 点。两法可 任意选用 。 4.从 图 4 可见, 制剂经 加速 6 个月 后,地 龙的特 征斑 点仍 然存在 ,可见 其稳定性 和T L C 鉴 别 重 现 性 良好 。 5.蜜丸及 含糖分较 多的制剂 ,采用极 性较 大的溶 剂提取 ,制备点 样液时 ,经 浓缩后溶液 很 粘稠, 给点样操 作造 成困难 ,故本文 采取先 用 甲醇提取 ,浓缩后 再用苯萃取的 方法 ,可除 去大量 的糖份,减小供试液的粘稠度,点样方 便 ,对 鉴别地龙无 影响 。 参 考 文 献 1 . 中茸药 典。一 郭。 1985:95。 2 .撩 茸锝 圭稿。 生药 学 f 第一 版) 北京t ^ 民 卫生 出版 社 , 19 87 ’ 50 2。 8 . 林启 寿橱。 中草药戚 丹 化学。科 学 出 版 社 , 2977: 79 g。 4 .李 向中主箱 。中 医学基 础。北 京t ^ 民卫生 出版社 , 19 86 :257。 ID E N T IF I C A T 10 N 0 F D IL 0 N G A N D I T S D E E lCT 10 N I N S E V E R A L 伽 N E S E T R A D I T 10 N A L P A T E N T M D IC I N E S Y a nk S he nh ua D i ng S h i q ua n C h en I-t u i zh en X io ng X i nk e (School of 0rmdq ,west Ch. ina University ol MedicaI ,~cie'nces Cher t gd“ ) A P,S T R A C T I d en t if iea t i on of D i— COI'IV ell ien t . s en s i t iv e a n d r e1ia b le T h e l on g an d i t s d e ~ec t J on in C h in es e t r ad i t i— r ep r od u c ib i l it y of th e m et h od is g o od o n al p al ertt m ed i c in e s w er e stu d i ed by T }Ie T L eh r om a to gn a m s oll s i l ica ge l p la T L C in t h is a r t ic l e T h e d ev e] o pin g s o l — t e p r o d u c ed i n d em s t ic a n d H P T L C p l a ~e v en t sy s t em is ben z en —et h y la c e t a t e ( 0:1j. i s c om p a re d. T h e f or m e r ea n b e u se d f o r F d of t h e ch a rac t e r is t ic sp ot of D i la n g i s t h i s p ar p o se an d m o r e ec on om ic a l t h an a b ou t 0. 32 .T h e m et h o d l s s im p le .eas y ,H P T L C. K ey W o rd s D il o n~ Ch in es e t rad i t ion a l pa ten t m ed i cin e s T L c h r o m ato gr am s · 蚰 ℃ ,R H 75~条 件下 维普资讯 http://www.cqvip.com