实验报告实验项目编号:实验二 实验名称:美拉德反应初始反应阶段的测定 实验学时:3 实验日期:暂时不写 实验地点:格致楼 A415 了解美拉德反应的基本原理和测定方法。二、实验原理 美拉德反应即蛋白质、氨基酸或胺与碳水化合物之间的相互 作用。美拉德反应开始,以无紫外吸收的无色溶液为特征。随着 反应不断进行,还原力逐渐增强,溶液变成黄色,在近紫外区吸 收增大,同时还有少量糖脱水变成5-羟甲基糖醛(HMF),以及发 生健断裂形成二羰基化合物和色素的初产物,最后生成类黑精色 素。本实验利用模拟实验:即葡萄糖与甘氨酸在一定pH 缓冲液中 加热反应,一定时间后测定 HMF 的含量和在波长为 285nm 紫外吸光值。HMF 的测定方法是根据 HMF 与对一氨基甲苯和巴比妥酸在 酸性条件下的呈色反应。此反应常温下生成最大吸收波长的 550nm 的紫红色。因不受糖的影响,所以可直接测定。这种呈色 物对光、氧气不稳定,操作时要注意。 三、实验材料和试剂 试剂1.巴比妥酸溶液:称取巴比妥酸500 mg,加约70 mL 水浴加热使其溶解,冷却后转移入100mL 容量瓶中,定容。 2.对甲基苯氨溶液:称取对甲基苯氨 l0.0 g,加50 mL 异丙醇 在水浴上慢慢加热使之溶解,冷却后移入100 mL 容量瓶中,加冰 醋酸l0 mL,然后用异丙醇定容。溶液置于暗处保存24 小时后使 用。保存4-5 天后,如呈色度增加,应重新配制。 1.0mo1/L 葡萄糖溶液。 0.1mol/L 甘氨酸溶液。 10%NaOH溶液。 20%亚硫酸钠溶液。四、实验步骤 支试管,分别加入5mL 1.0 mo1/L 葡萄糖溶液和0.1 mol/L 甘氨酸溶液,编号为 A1,A2,A3,A4,A5。A2,A4 pH到9.0,A5 加亚硫酸钠溶液5 mL。5 支试管置于90 水浴锅 内并记时,反应1 h,取A1,A2,A5 管,冷却后测定它们的285 nm紫外吸收和 HMF HMF的测定:A1,A2,A5 各取2.0 mL 于三支试管中,加 对甲基苯氨溶液5 mL。然后分别加入巴比妥酸溶液 mL,另取一支试管加A1 mL对甲基苯氨溶液,但不加巴比妥酸 mL水,将试管充分振动。试剂的添加要连续进行,在1-2 min 内加完,以加水的试管作参比,测定在550 nm处吸光度,通 过吸光度比较A1,A2,A5 HMF的含量可看出美拉德反应与哪 些因素有关。 A3,A4两试管继续加热反应,直到看出有深颜色为止,记 下出现颜色的时间。 五、注意事项 HMF 显色后会很快褪色,比色时一定要快。 六、实验结果 (实验报告记录相关数据(见下表)及解释原因)。 A1 A2 A5 285nm A1 A1 A2 A5 反应液体积数 mL对甲基苯氨溶 mL巴比妥酸溶液 mL蒸馏水 550nm 1、在你发怒的时候,要紧闭你的嘴,免得增加你的怒气。——苏格拉底2、生气是拿别 人做错的事来惩罚自己。3、生活中若没有朋友,就像生活中没有阳光一样。4、明天的希望会让我们忘了今天的痛苦。5、生活若剥去了理想、梦想、幻想, 那生命便只是一堆空架子。6、发光并非太阳的专利,你也可以发光,真的。7、愚者用肉体监视心灵,智者用心灵监视肉体。8、获致幸福的不二法门是珍 视你所拥有的、遗忘你所没有的。9、贪婪是最真实的贫穷,满足是最真实的财富。10、你可以用爱得到全世界,你也可以用恨失去全世界。11 、人的价值, 在遭受诱惑的一瞬间被决定。12、年轻是我们唯一拥有权利去编织梦想的时光。13、青春一经“典当”,永不再赎。14、没有了爱的语言,所有的文字都是 乏味的。15、真正的爱,应该超越生命的长度、心灵的宽度、灵魂的深度。17 、人一旦觉悟,就会放弃追寻身外之物,而开始追寻内心世界的真正财富。18、 只要有信心,人永远不会挫败。19、不论你在什么时候开始,重要的是开始之后就不要停止。20、不论你在什么时候结束,重要的是结束之后就不要悔恨。 21、人若软弱就是自己最大的敌人。22、人若勇敢就是自己最好的朋友。23、“不可能”只存在于蠢人的字典里。24、抱最大的希望,为最大的努力,做最 坏的打算。25、家!甜蜜的家!!天下最美好的莫过于家!26 、游手好闲会使人心智生锈。27、每一件事都要用多方面的角度来看它。28、有理想在的地方, 地狱就是天堂。29、有希望在的地方,痛苦也成欢乐。31 、所有的失败,与失去自己的失败比起来,更是微不足道。32、上帝从不埋怨人们的愚昧,人们却 埋怨上帝的不公。33、美好的生命应该充满期待、惊喜和感激。34、世上最累人的事,莫过于虚伪的过日子。35、觉得自己做的到和做不到,其实只在一念 之间。36、第一个青春是上帝给的;第二个的青春是靠自己努力的。37 、少一点预设的期待,那份对人的关怀会更自在。38、思想如钻子,必须集中在一点 钻下去才有力量。39、人只要不失去方向,就不会失去自己。40 、如果你曾歌颂黎明,那么也请你拥抱黑夜。41、问候不一定要慎重其事,但一定要真诚感 人。42、未经一番寒彻骨,哪得梅花扑鼻香。43、当你能飞的时候就不要放弃飞。44 、当你能梦的时候就不要放弃梦。46、生命太过短暂,今天放弃了明天 不一定能得到。47、天才是百分之一的灵感加上百分之九十九的努力。48、人总是珍惜未得到的,而遗忘了所拥有的。49、快乐要懂得分享,才能加倍的快 乐。50、自己要先看得起自己,别人才会看得起你。51、一个今天胜过两个明天。52 、要铭记在心:每天都是一年中最美好的日子。53、乐观者在灾祸中看 到机会,悲观者在机会中看到灾祸。54、有勇气并不表示恐惧不存在,而是敢面对恐惧、克服恐惧。55、肯承认错误则错已改了一半。56、明天是世上增值 最快的一块土地,因它充满了希望。57、理想的路总是为有信心的人预备着。58、所有欺骗中,自欺是最为严重的。59、人生最大的错误是不断担心会犯错。 61、经验是由痛苦中粹取出来的。62、用最少的悔恨面对过去。63、用最少的浪费面对现在。64、用最多的梦想面对未来。65、快乐不是因为拥有的多而是 计较的少。66、你的选择是做或不做,做不一定会成功,但不做就永远不会有机会。67、如你想要拥有完美无暇的友谊,可能一辈子找不到朋友。68、不如 意的时候不要尽往悲伤里钻,想想有笑声的日子吧!69、把自己当傻瓜,不懂就问,你会学的更多。70、要纠正别人之前,先反省自己有没有犯错。71、因 害怕失败而不敢放手一搏,永远不会成功。72、要克服生活的焦虑和沮丧,得先学会做自己的主人。73、你不能左右天气,但你能转变你的心情。74、孤单 寂寞与被遗弃感是最可怕的贫穷。76、漫无目的的生活就像出海航行而没有指南针。77、好好扮演自己的角色,做自己该做的事。78、一切伟大的行动和思 想,都有一个微不足道的开始。79、得意时应善待他人,因为你失意时会需要他们。80、学做任何事得按部就班,急不得。81、勿以恶小而为之,勿以善小 而不为。82、道德修养能达到的最高价段,是认识到我们应该控制我们的思想。- -达尔文83、多行不义,必自毙。——《左传》84、知者不惑,仁者不忧, 勇者不惧。——《 论语》85、君子坦荡荡,小人常戚戚。——《 论语》86、知人者智,自知者明。——《 老子 》87、诚无悔,恕无怨,和无仇,忍无辱。 ——宋《省心录 》88、君子成人之美,不成人之恶。——《论语》89 、利人乎即为,不利人乎即止。——《 墨子》 91、阴谋陷害别人的人,自己会首先 遭到不幸。——伊索 92、静以修身,俭以养德。——诸葛亮93 、夫妇和,而后家道成。——清•程允中94、最可怕的敌人,就是没有坚强的信念。——罗曼•罗兰95、你若要喜爱你自己的价值,你就得给世界创造价值。 ——歌德96、君子赠人以言,庶人赠人以财。——荀况97、受惠的人,必须把那恩惠常 藏心底,但是施恩的人则不可记住它。- -西塞罗 98、应当在朋友正是困难的时候给予帮助,不可在事情无望之后再说闲话。伊索 99、谁若游戏人生,他就 一事无成;谁不主宰自己,永远是一个奴隶。——歌德100、每天告诉自己一次,“我真的很不错” A3 A4 反应总时间 七、思考题