L鸟氨酸的检测方法一、检测试剂的配制:()mol/L磷酸溶液的配制:准确量取m%磷酸后以蒸馏水定容至ml。()混酸溶液的配制:mol磷酸与冰乙酸以:的体积比配制。()mg/ml茚三酮反应液的配制:准确称量.g茚三酮加人到装有ml混酸的烧杯中于℃水浴中使茚三酮完全溶解后定容至ml并转入棕色试剂瓶中。()L鸟氨酸单盐酸盐标准液的配制:准确称取.L鸟氨酸单盐酸盐加人装有ml蒸馏水的烧杯中充分溶解后定容至ml其浓度相当于.umol/ml。注意:以上溶液均需℃冷藏其中茚三酮反应液需避光冷藏L鸟氨酸盐酸盐标准品为℃避光冷藏。二、检测步骤分别取m的标准样稀释溶液依次加入ml的冰醋酸lml的混酸溶液于沸水浴中反应lh。等溶液自然冷却后用冰醋酸定容至ml以不含L鸟氨酸的空白溶液(蒸馏水)做参比在nm下测定吸光值。三、L鸟氨酸标准曲线的绘制分别吸取ml,ml,ml,ml,ml,ml,ml,ml,ml,ml,mlL鸟氨酸单盐酸盐标准液分别用适量蒸馏水稀释并定容ml,即umolmlumolmlumolmlumolml,umolml,umolml,umolml,umolml,umolml,umolml,umolml的L鸟氨酸单盐酸盐标准梯度溶液。分别取ml的标准梯度溶液,依次加入ml的冰醋酸,ml的混酸溶液,于沸水浴中反应h。等溶液冷却后用冰醋酸定容至ml,以不含L鸟氨酸的空白溶液(蒸馏水)做参比在nm波长下测定吸光值。绘制L鸟氨酸的标准曲线如图一所示。线性方程为Y=X因此C=(A)*M*N*其中c为一鸟氨酸浓度mgml,M为L鸟氨酸盐酸盐的相对分子质量,N为发酵液稀释的倍数。注意:操作过程中须戴橡胶手套以免茚三酮混酸溶液滴溅到皮肤或者仪器表面发生显色反应灼伤皮肤。