本发明涉及生物医药领域,具体涉及基因检测、临床检验领域。
背景技术:
循环游离dna(cfdna)是指凋亡或坏死的细胞进入血管中所释放的dna片段,多见于由坏死的肿瘤细胞分泌,主要存在于细胞外的环境中,呈游离状态。主要存在于血浆或血清、脑脊液、胃液、胆汁、淋巴液、尿液、滑膜液等体液中。游离dna因为检测方便快捷,而且具非侵入性等特点,那么,随着肿瘤分子生物学的深入研究,血液中游离dna结合各类分子生物学检测技术,有望成为具有一定敏感性及高特异性的肿瘤临床诊断方法。肿瘤细胞死亡后将释放自身的dna片段到血循环中,即循环肿瘤dna(ctdna)。多项研究显示,血液中的循环肿瘤dna可以作为一类特异性的分子标志物用于肿瘤的检测和预后监测。检测游离dna中肿瘤特异性的基因突变具有较好的临床价值,如egfr、kras和tp53基因等这些在多种类型肿瘤中具有高突变频率的基因其检测对肿瘤的早期诊断具有重要的临床意义。肿瘤cfdna片段大小在100-200bp,主要长度在166bp左右,浓度低。随着液体活检的应用,越来越多的检测试剂盒检测的样本类型为cfdna,因此模拟cfdna样本的短片段dna制备工艺变得尤为重要。此类短片段dna可以作为检测试剂盒的参考品和质控品,也可以作为一种标准品用于检测不同检测方的能力测试。