方法原理: 供试品经甲醇定量稀释并加入内标后,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长240nm处检测丙酸氯倍他索的峰面积,计算出其含量。试剂: 1. 甲醇2. 0.05mol/L磷酸二氢钠溶液3. 乙腈仪器设备: 1. 仪器1.1 高效液相色谱仪1.2 色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按丙酸氯倍他索峰计算应不低于5000。1.3 紫外吸收检测器2. 色谱条件2.1 流动相:0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(用85%磷酸调节pH值至2.5) :乙腈:甲醇=425:475:1002.2 检测波长:240nm2.3 柱温:室温试样制备: 1. 内标溶液的制备精密称取丙酸倍氯米松适量,加甲醇制成每1mL中约含0.40mg的溶液,即为内标溶液。2. 对照品溶液的制备精密称取丙酸氯倍他索对照品适量,加甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.20mg的溶液,精密量取该溶液与内标溶液各5mL,置25mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即为对照品溶液。注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长240nm处测定丙酸氯倍他索(C25H32ClFO5)的峰面积,计算出其含量。