10%福尔马林(4%甲醛)或10%磷酸缓冲福尔马林是病理切片常规使用的固定液,不仅适用于常规H精-伊红)染色,还可以用于组织学有关的其他技术的切片染色。固定液的用量通常为材料块的20倍左右,固定时间则根据材料块的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定,可以从1小时至数天,通常为1小时至24小时。洗涤与脱水固定后的组织材料需除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀,否则会影响后期的染色效果。该步骤称作洗涤多数用流水冲洗;使用含有苦味酸的固定液固定的则需用酒精多次浸洗;使用酒精或酒精混合液固定的组织,则不必洗涤,可直接进行脱水。固定后或洗涤后的组织内充满水分,若不除去水分则无法进行以后的透明、浸蜡与包埋处理,原因在于透明剂多数是苯类,苯类和石蜡均不能与水相溶合,水分不能脱尽,苯类无法浸入。酒精为常用脱水剂,它既能与水相混合,又能与透明剂相混。为了减少组织材料的急剧收缩,应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行,通常从30%或50%酒精开始,经70%、85%、95%直至纯酒精(无水乙醇),每次时间为1~数小时,如不能及时进行各级脱水,材料可以放在70%酒精中保存,因高浓度酒精易使组织收缩硬化,不宜处理过久。正丁醇、叔丁醇、丙酮及二氧陆环等也可做脱水剂。透明纯酒精不能与石蜡相溶,还需用能与酒精和石蜡相溶的媒浸液,替换出组织内的酒精。材料块在这类媒浸液中浸渍,出现透明状态,此液即称透明剂,透明剂浸渍过程称透明。