(一)动物血液采集技术
实验动物的采血方法较多,按采血部位不同可分为:穿刺采血法(含剪、割法)、断头采血法、心脏采血法、颈动(静)脉采血法、腹主动脉采血法、股动脉采血法、耳静脉采血法等。不同动物采血部位与采血量的关系见表1。
1.穿刺采血 当所需采血量较少,或仅用于涂玻片检查红、自细胞数时多采用此方法。大鼠、小鼠的穿刺部位多在尾部和眼眶静脉丛。尾部穿刺时,用7号针头刺入尾静脉,拨出针头后,即有血滴出。若反复采血,可由尾远心端向近心端逐步穿刺(或剪断尾部)。眼眶静脉丛采血时,在左手保定的同时,压迫其颈部两侧,使眶后静脉丛充血,用7号针头(连接1ml的注射器)或者用长玻璃管(φ0.5~1mm)直接接入试管中。针头或玻璃管与鼠眼球侧面成45°,由眼内角刺入(针头斜面向眼球)后转180°。大鼠刺入深度4~5mm, 小鼠2~3mm, 当剌入后感到有阻力时停止推进,同时退针0.1~0.5mm, 边抽边退。采完后拨出针头或玻璃管,同时撤去颈部的压力,消毒穿刺孔即可。
豚鼠的穿刺法可改为耳缘剪口采血。消毒耳缘后,用二甲苯反复擦拭耳缘使血管充分充盈,然后用刀片或剪刀割(剪)破耳缘血管,抗凝血应在耳缘切口处涂20%拧檬酸纳液。此法采0.5ml血左右。
犬、羊、兔等动物穿刺方法采血同豚鼠相似。穿刺采血时应准确、迅速刺破血管,注意不可反复地戳刺同一针孔。穿刺时应注意无菌操作。表1:
不同动物采血部位与采血量的关系
采血量
采血部位
动物
取少量血
尾静脉大鼠、小鼠
耳静脉(穿刺)兔、犬、猫、猪、山羊、绵羊、
眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠
舌下静脉犬
腹壁静脉青蛙、蟾蜍
冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅
取中量血
后肢外侧皮下小隐静脉犬、猴、猫
前肢内侧皮下头静脉犬、猴、猫
耳中央动脉兔
颈静脉犬、猫、兔
心脏豚鼠、大鼠、小鼠
断头大鼠、小鼠
翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅
颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅
取大量血
股动脉、颈动脉犬、猴、猫、兔
心脏犬、猴、猫、兔、大鼠、小鼠
颈静脉马、牛、山羊、绵羊
摘眼球大鼠、小鼠
2.断头采血法 该方法是用利器(术剪或刀片)断离头颈部一次性采血,适用于大鼠、小鼠。采血时操作者左手拇、食指握住大、小鼠颈部