摘要:目的:建立丹参的反相高效液相色谱定性和定量分析方法。方法:RP-HPLC Planetsil C18分析柱(150mm×4.6mm,5um),流动相为甲醇-水(45:55),流速为1.0mL/min,检测波长为270nm,柱温为室温。对丹参有效部位(乙醚提取部位)进行指纹图谱定性分析,对丹参中的有效成分丹参酮IIA和隐丹参酮进行定量测定。结果:在色谱条件下,11份不同丹参药材中乙醚有效部位的RP-HPLC指纹图谱中可检出11个相对位置稳定的色谱峰,其中确定出9个共有峰作为定性鉴别的指标峰;丹参药材中丹参酮IIA和隐丹参酮的含量分别为$0.102%~0.494%和0.021%~0.139%。结论:丹参有效部位RP-HPLC指纹图谱定性和有效成分定量分析方法具有较强的针对性和准确性,可用于丹参及其制剂的质量控制。
关键词::丹参 丹参酮IIA 隐丹参酮 指纹图谱 反相高效液相色谱法
1 仪器与试药
Shimadzu LC-2010A高效液相色谱仪,Class-VP色谱工作站。色谱纯甲醇(美国Fisher公司);水为三重蒸馏水(自制);其余均为分析纯试剂。供含量测定用丹参酮IIA和隐丹参酮对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号分别为0766-200011,0852-9902)。
11份丹参药材(见表1)(略)2000年~2002年购自安徽、四川、陕西等6个省、市的丹参栽培地和中药店,经由西安交通大学药学院生药学教研室鉴定,来源、规格等属实。
2方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱:Planetsil C18分析柱(150mm×4.6mm,5um);流动相:甲醇-水(45:55);流速为1.0mL/min,检测波长为270nm,柱温为室温。理论塔板数按隐丹参酮计不得低于3000。
2.2分析溶液的制备
2.2.1 对照品溶液:精密称取丹参酮IIA和隐丹参酮对照品适量,分别用甲醇溶解并稀释成24ug/ml
与.23.5ug/ml的对照品储备液,对照品溶液由此稀释得到。
2.2.2供试品溶液:精密称取丹参药材细粉0.2,置具塞锥形瓶中,加乙醇50ml,放置过夜,超声提取30min,滤过,挥干后加水20ml转移至分液漏斗中分别用乙醚(20,20,10ml)萃取,萃取液挥干,加甲醇转移并定容至10ml,作为供试品溶