酶的催化机制酶的催化机制酶催化机理研究的主要方法酶催化机理研究的主要方法()找出保守性的氨基酸残基()三维结构的研究()定点突变()动力学分析()化学修饰过渡态稳定学说过渡态稳定学说根据过渡态理论在任何一个化学反应体系中反应物需要到达一个特定的高能状态以后才能发生反应。这种不稳定的高能状态被称为过渡态。达到过渡态要求反应物必须含有足够的能量以克服活化能然而一个反应系统中各反应物分子具有不同的能量只有某些反应物才含有足够的能量去进行反应。年Pauling提出酶与过渡态的亲和力要比对基态(底物)的亲和力高得多酶的催化源于其对过渡态的稳定作用。化学反应的过渡态及其前后的自由能变化HAHBHC→HAHBHC(过渡态)→HBHCHA酶促反应和非酶促反应过程的自由能变化支持过渡态稳定学说的证据支持过渡态稳定学说的证据根据中间物的结构设计一种稳定的过渡态类似物以检测它能否作为酶的抑制剂以及抑制效果是不是比竞争性抑制剂强。因为如果酶促反应中的确存在所谓过渡态的中间物那么由此人工设计得到的过渡态类似物只要遇到酶就会与活性中心紧密地结合会牢牢地卡住酶的活性中心使之无法完成反应即成为酶的强抑制剂。进一步证明过渡态类似物参与催化的证据是利用过渡态类似物作为抗原或半抗原去免疫动物由此产生的抗体可能有类似酶的催化作用。