组织包埋及其相关问题 蔡俊杰 南方医科大学基础医学院病理系 南方医院病理科 (五)、组织包埋。 1、石蜡包埋机包埋法 。 (1)、打开电源总开关,让包埋机处于工作状态。 (2)、调高温度,让包埋组织块的用蜡的温度在65OC左右。这一温度的调节和设定都必须在包埋组织块的工作前就进行,否则临时打开是来不及的。 (3)、打开包埋机冷冻台。包埋机附带的冷冻平台的开关的打开应在包埋前的一个小时打开才合适,如此才能有足够的冷冻度来更好的冰冻包埋好的蜡块,加速制块的完成。 (4)、打开脱水盒的盖,打开盒盖时,应将食指按压在盒盖的上面,以防组织块的弹出。随后将组织块和脱水盒一起放入机器中的热盒中,使组织块在没有包埋前始终保持熔解状态,这有利于包埋出高质量的蜡块。 (5)、取出包埋模具,用脚踩踏或手控出蜡按键,注入少量的石蜡,夹入熔化的组织块放入模具内,摆放于中间的位置。多块的小的组织应集中放在一起,处于一个水平面上,管状的组织如血管、气管,另有组织如阑尾,胃肠道的切块组织,囊肿壁等,都必须立起来包埋,然后压上塑料盒,再注入少量的石蜡液,包埋就算完成,将其移放在冷冻台上,待其表面出现凝结时,快速将其放入冷水中加速凝固,然后取出蜡块,修切去包埋盒周边的余蜡。按顺序排好后放入冰格中冻起来,20分钟左右就可切片。 (6)、包埋机一般都带有冷冻台,当把熔化的石蜡注入包埋模具后,将模具放于冷冻台上,让模具底部的石蜡有轻微凝固,然后放上组织块,如此组织块不会晃动浮起,这样可减少切片时蜡块的修切程度,增进切片的速度。 (7)、包埋机都有插包埋用的小镊子的小孔,应该备有多把的小镊子轮流使用,每次应用时,小镊子都应该处于熔解石蜡的状态,如果小镊子上的余蜡处于凝固的状态,必须插入小孔内,待小镊子上的石蜡熔解后,才可夾组织块进行包埋,小镊子达不到熔解石蜡的状态时,用其去夾组织块,当夹细小的多块组织块时,很容易将小组织块粘于小镊子上,造成差错,或者张冠李戴,应特别注意。 (8)、没有打开的组织包埋盒,从自动组织脱水机取出后,可存放于恒温箱中保暖,使包埋盒保存一定的温度,使其中的组织处于熔蜡的状态,如果盒上的石蜡凝固了,应该将其重新放入熔解的石蜡中,然后才可继续使用。 2、手工组织块包埋法。 (1)、将包埋框合成模型槽,注入石蜡。 (2)、打开组织脱水盒,取出组织块,把平整的一面朝下,用镊子轻压,保持整个组织块都在一个水平面上。 (3)、每包埋完成一块组织后,即刻贴上标签,以防出错或张冠李戴。如用的是塑料包埋盒,盒上都打上检查号码,可少此步骤。 3、组织块包埋时的注意事项。 (1)、传统包埋使用的镊子、包埋框,都必须放于40OC的恒温箱中,否则在寒冷的冬天,熔化的石蜡遇到冰冷的包埋框就会快速凝固起来,影响包埋。 (2)、传统的包埋法所使用的包埋框有铜和铝制品,但以铜制品为好,因其散热较快。 (3)、传统包埋的石蜡温度不能太高,否则注入蜡模时,会四处溢流。 (4)、被包埋的组织块自身的蜡绝不能处于凝固状态,尤其在冬天,当把包埋盒盖打开后,组织块马上就可出现凝固,应让这些组织块在包埋前都处于熔化的状态,如果凝固了,应放回熔化的蜡液中让其重新熔化,使组织块的温度与包埋蜡的温度基本一样。 如果需要包埋的组织块在包埋前就凝固了,不将其熔化就包埋,它就与包埋蜡不能融合在一起,没有成为一个整体,切片时组织块和包埋上的蜡就容易分开,影响切片质量,切片不完整,不能产生连续切片。当切片放入水中时,就可出现组织块与周边石蜡分离的现象。 如果较为严重的可发生整块或片块崩下来,应引起高度重视。 (5)、包埋时,最好是先将蜡注入模具,再放入组织块,这样就可摆正组织块,使组织块周边保持有一定的蜡边,如此有利于切片。如果先放入组织块,再注入蜡液,蜡液可将放好的组织块冲至一边,特别是多块的小组织,会被冲得七零八落,不在一水平面上,如此于切片不利。 (6)、包埋完成后,要等到包埋好蜡块的面凝固后才能放入水中。如果未凝固就放入水中,包埋块中还处于液态的蜡就会被水冲走或挤压至一边,造成蜡块中的空洞。组织块周边没有足够的石蜡将组织块包埋起来,此时进行切片,将无法进行下去,唯一的办法,就是重新将组织块放入熔解的石蜡液中,待组织块的温度与熔解的蜡液持平时,方可包埋。 (7)、小块且多块的组织,应将其包埋在同一水平面上,如果深浅不一,切片就很困难,切了表面的深部没切到,要切深部的,表面被修切掉,造成差错。要做到送检有多少块组织,就必须显示有多少块切出的组织的切面,因此包埋是关键。对于此类标本,可以先将熔化的石蜡注入包埋框,令其底部有少许的凝结后,将多块的小组织直接插入已稍为凝固的石蜡中直至包埋框底部,如此组织块也不会随意晃动更改位置,基本上保证被包埋在一水平面上。 (9)、现使用的组织脱水盒,一般为带盖的塑料盒,包埋时打开脱水盒后,必须观看盒盖上有没有粘上组织块,如有需马上将其取下,以免造成差错。使用过的塑料盖应将其丢弃,如想要继续使用必须彻底清除盖上含有的石蜡,否则塑料盖上含有的石蜡,会在后来的二甲苯透明组织时,把石蜡溶于二甲苯中,造成二甲苯的使用寿命缩短,石蜡过多,还会堵塞脱水机,必须注意。 (10)、使用的包埋框每次用完后,放入700C 左右的烤箱中烘烤,使粘于包埋框上的余蜡熔化,有利于清洁,可为第二天的工作准备好物质。 (11)、合格的蜡块必须是蜡面平整,无塌陷,无缺损,无针孔状,无空洞状,组织块的周边有一定的石蜡,石蜡细腻,标签或者号码清晰。 12、有问题不完整的蜡块。 (1)、蜡块塌陷。 原因:组织块取材超大过厚,导致组织没有彻底脱水,包埋后的蜡块里面的组织块水分挥发,造成蜡块的塌陷。 (2)、蜡块有缺口。 原因:包埋底座没有处理干净,存留余蜡等。 (3)、蜡块中间有空洞。 原因:包埋蜡块还没有冷凝前过早投入水中,由于水的挤压造成空洞。 * *