【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、 1.6gNaCl和0.027gNa 2HPO4,室温下用H Cl调节该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml, 用0.22μ m滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20。 9.1mol/LCaCl2溶液 【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54gCa Cl2? 6H2O,用0.22μ m滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮 存于-20。 【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器 (0.45μ m孔径)过滤除菌,然后骤冷至0 10.2.5mol/LCaCl2溶液【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5gCa Cl2? 6H2O,用0.22μ m滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮 存于-20。 11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液 【配制方法】用20ml0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5. 2)溶解3.09gDTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮 存于-20。 【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。 12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液 【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/lTris 碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适 当稀释,在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度 为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70。 碱基波长(nm)消化系数(ε )[L/(mol?c A2591.54104G2531.37104 C2719. 10103 T2607.40103 比色杯光径为1c m时,吸光度=ε 13.0.5mol/lEDTA(pH8.0)溶液