当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。 平末端连接可以加1ul酶,另外建议通过在 凝胶成像系统下对载体和插入片段定量,再根据载体和插入片段的分子量,计算出载体与插入片段的摩尔比为3:1时的体积比,载体和插入片段共8ul。