高压灭　菌的湿热法则最为有效。　煮沸并不一定能杀死所有的微生物或病原体,但如果其他方法(化学杀菌、清除污染、高压　灭菌)不可行或没有条件时,也可以作为一种最起码的消毒措施。　灭菌后的物品必须小心操作并保存,以保证在使用之前不再被污染。　高压灭菌　压力饱和蒸汽灭菌(高压灭菌)是对实验材料进行灭菌的最有效和最可靠的方法。对于大　多数目的,下列组合可以确保正确装载的高压灭菌器的灭菌效果:　第14　章　消毒和灭菌　77　1、134℃、3min　2、126℃、10min　3、121℃、15min　4、115℃、25min　下面是不同高压灭菌器的例子。　重力置换式(　“下排气式”　)高压灭菌器　图10　是重力置换高压灭菌器的整体构造。蒸汽在　压力作用下进入灭菌器,由上而下置换较重的空气并通过灭菌器的排气阀(装有　HEPA　过滤器)　排出。　预真空式高压灭菌器　这样的灭菌器可以在蒸汽进入前使空气从灭菌器排出。气体是通过一　个装有　HEPA　过滤器的排气阀排出。在灭菌结束时,蒸汽自动排出。这种高压灭菌可以在　134℃　下进行,因此灭菌周期可以缩短至　3min。预真空式高压灭菌器对于多孔性物品的灭菌很理想,但　由于要抽真空而不能用于液体的高压灭菌。　燃料加热压力锅式高压灭菌器　只有在没有重力置换式高压灭菌器的情况下才使用这一种灭　菌器。从其顶部装载物品,通过燃气、电力或其他燃料来加热。通过加热容器底部的水来产生蒸　汽,由下而上置换空气并经排气孔排出。当所有的空气排出后,关闭排气孔的阀门,缓慢加热　使压力和温度上升到安全阀预置的水平。此时记为灭菌开始时间。灭菌结束后停止加热,让温度　下降到　80℃以下再打开盖子。　图10　重力置换高压灭菌器　高压灭菌器的装载　为了利于蒸汽的渗透和空气排出,高压灭菌物品应松散包装放置在灭菌器内。要使蒸汽能够　实验室生物安全手册　78　作用到其内容物。　高压灭菌器使用注意事项　下列规定能够减小操作压力容器时会发生的危害:　1、应由受过良好培训的人员负责高压灭菌器的操作和日常维护。　2、预防性的维护程序应包括:由有资质人员定期检查灭菌器柜腔、门的密封性以及所有的　仪表和控制器。　3、应使用饱和蒸汽,并且其中不含腐蚀性抑制剂或其他化学品,这些物质可能污染正在灭　菌的物品。　4、所有要高压灭菌的物品都应放在空气能够排出并具有良好热渗透性的容器中;灭菌器柜　腔装载