(1号病为鼠疫) 霍乱的流行史 霍乱的流行史 1917-1923 印度恒河三角洲古典生物型 1961 印度尼西亚Eltor 1992.10 马德拉斯、孟加拉湾 139O139群霍乱弧菌在亚洲的流行(1991.1-1994.11) 霍乱的流行史 霍乱的流行史 霍乱弧菌的运动模式图 生物学性状 生物学性状 (米泔水样便) 描述: 穿梭或 流星样 动力 霍乱弧菌的革兰染色结果 生物学性状 生物学性状 (纯培养革兰染色) 描述: 革兰阴性, 弯曲弧形 或逗点状, 首尾相接 鱼群样平 行排列 霍乱弧菌的扫描电镜图(金属镀膜) 生物学性状 生物学性状 (纯培养扫描电镜) 描述: 弯曲弧 霍乱患者小肠粘膜上皮局部平切电镜图 霍乱弧菌扫描电镜图 (金属镀膜) 生物学性状 生物学性状 (电镜) 霍乱弧菌的糖原颗粒(*)超薄切片,105 000 生物学性状 生物学性状 (电镜) 霍乱弧菌的质周体()冰冻蚀刻,负染,68 000 生物学性状 生物学性状 (电镜) T株霍乱弧菌的增生膜,从一端向外卷成多层泡(*) 超薄切片,140 000 生物学性状 生物学性状 (电镜) T株霍乱弧菌增生的多层外膜泡(*) 超薄切片,193 000 生物学性状 生物学性状 (电镜) T株霍乱弧菌局部外膜上的许多增生层() 超薄切片,160 000 生物学性状 生物学性状 (电镜) 霍乱弧菌的鞭毛()和它可溶解的鞘膜() 100生物学性状 生物学性状 (电镜) 霍乱弧菌的鞭毛染色 生物学性状 生物学性状 (特殊染色10,000) 生物学性状 生物学性状 (培养特性) pH7.6~8.2Max:9.2 (耐碱怕酸) 初次分离用pH8.5碱性蛋白胨水 经6~9小时液体表面大量繁殖,形成菌膜 选择性培养基: TCBS(硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板) 含亚碲酸钾的培养基:糖双洗琼脂 庆大霉素琼脂 Eltor生物型在血平板上可形成β-溶血 生物学性状 生物学性状 (培养特性) 霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成 发酵蔗糖的较大的黄色菌落 生物学性状 生物学性状 (培养特性) 霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还 原成原子态的碲,形成有灰褐色中心的菌落 生物学性状 生物学性状 (重要的生化反应) 霍乱弧菌 副溶血弧菌 拟态弧菌 麦氏弧菌氧化酶 硝酸盐还原 生物学性状生物学性状 (重要的生化反应) 霍乱弧菌 拟态弧菌 副溶血弧菌 耐盐试验(%NaCl) 0% 1% 7% 10% 生物学性状生物学性状 (生物型:根据生化反应分型) character Classical biotype E1-tor biotype 溶血(羊RBC) V-P试验 多粘菌素B敏感试验 第IV组噬菌体裂解试验 生物学性状生物学性状 (血清型:根据抗原分型) 是否与O1 抗血清凝集 O1 (Hikojima)根据O 抗原组成不同 AC AB ABC 生物学性状 生物学性状 (变异性) H-O变异:培养稍久弧形可变成直杆状,也可发生鞭毛丢失 S-R变异:光滑型-粗糙型菌落变异,或产生L型变异 溶血性变异:Eltor biotype传代培养后可由非溶血株变成 溶血株,也可由溶血株变成非溶血株 毒力变异:当菌落发生S-R变异时,常伴有毒力的减弱或消失 生物学性状 生物学性状 (抵抗力) 河水中:20天 蔬菜水果上:1周 耐碱怕酸:胃酸中存活4分钟 pH8.2~9.2仍能生长 对庆大霉素耐药:用于制作选择性培养基 多粘菌素B(50u/ml):Eltro biotype对耐药, Classic biotype敏感,可作为分型依据 对热、干燥、日光和常用消毒剂敏感, 1001~2min即可杀死 临床意义 临床意义 (致病因素) 进入小肠,动力、菌毛、分泌粘液 穿过小肠粘膜表面粘液层 粘附于小肠粘膜上皮细胞刷 状缘的微绒毛上大量繁殖 侵袭力 霍乱弧菌肠毒素(CE, chloera enterotoxin) A1:活性亚单位 23000 A2:连接亚单位 5000 B:结合亚单位 MW:80000-90000 临床意义 临床意义 (致病因素) 霍乱肠毒素 霍乱弧菌肠毒素 临床意义 临床意义 (致病因素) 霍乱肠毒素 发病 发病 临床意义 临床意义 发病 发病 临床意义 临床意义 发病 发病 临床意义 临床意义 发病 发病 临床意义 临床意义 发病 发病 临床意义 临床意义 演示 演示 发病 发病 临床意义 临床意义 霍乱弧菌的致病过程 发病 发病 临床意义 临床意义 霍乱弧菌的致病(12000ml 2-3days) 12000-30000ml 1/h*24h或 1/h*72h*3 临床表现 临床表现 临床意义 临床意义 剧烈上 吐下泻,严 重脱水、酸 中毒、痉挛、 尿闭、休克、 死亡。 发病机理 发病机理 临床意义 临床意义 发病机理 发病机理 临床意义 临床意义 发病机理 发病机理 临床意义 临床意义 发病机理 发病机理 临床意义 临床意义 发病机理 发病机理 临床意义 临床意义 演示 演示 发病机理 发病机理 临床意义 临床意义 霍乱弧菌在小肠粘膜部位的致病机理 发病机理 发病机理 临床意义 临床意义 临床分期 临床分期 临床意义 临床意义 1、前驱期: 无明显前驱症状,或轻度腹 鸣、腹胀和不适。 临床分期 临床分期 临床意义 临床意义 2、吐泻期: 持续2~3天,因剧烈吐泻造 成大量水分和电解质丧失。 临床分期 临床分期 临床 临床意义 意义 3、脱水虚脱期: 脱水貌,洗衣工手; 循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰; 水电解质平衡紊乱导致肌肉痉挛。 4、恢复期: 各种症状趋于缓解,但可出现发热 微生物学检验微生物学检验 患者的米泔水样便、呕吐物、尸检肠内容物 或携带有病原菌的海产品和污染的水源等 检验方法 检验方法 (1)直接镜硷:取标本涂片2张,乙醇或甲醇 固定,革兰染色,油镜观察。 (2)动力和制动试验:水佯便,悬滴(压滴); 高倍镜、暗视野观察动力:穿梭似流星状。同 法制备另一标本,加入1滴不含防腐剂的霍乱多 价诊断血清(效价>1:64);可见运动活泼的细 菌运动停止并发生凝集,为制动试验阳性。 (3)分离培养:常用TCBS琼脂,菌落形态和蔗 糖发酵菌落,进一步鉴定。 微生物学检验 微生物学检验 检验方法 检验方法 l)初步鉴定:与01群和O139群抗血清(多价和 单价)凝集,菌落和菌体形态、氧化酶试验等 作出初步报告。 2)最后鉴定:根据纯培养后全面生化反应、血 清学分群及分型。 微生物学检验 微生物学检验 检验方法 检验方法 初筛试验 初筛试验: (1)霍乱红试验 (2)O/129敏感试验 鉴别试验: 鉴别试验: a.多粘菌素B敏感试验 b.鸡红细胞凝集试验 c.第IV组霍乱弧菌噬菌体裂解试验 微生物学检验 微生物学检验 副溶血弧菌 副溶血弧菌 副溶血弧菌培养于TCBS中,显示绿色(蔗糖不发酵)菌落。 (TCBS琼脂,18小时,37) 11111111144487看看 和呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较 5666 66 66 66 66 66 66 66 55 55 55 55 55 55 55 55 55 56 55 88 88 4555 55 55 55 55 55 4555 55 55 55 55 55 55 5466 66 66 66 5444 44 44 44 5545 45 45 1111 11 11 11 11 22 22 22 22 和环境和换机及环境和交换机 4444 48 88