猫头鹰通常一雄一雌配对,但个别种类如鬼鸮的配对是一雄多雌和一雌多雄。猫头鹰的繁殖一般从3月至5~6月,有的种类较早,1月就已经开始繁殖。除个别种类之外,猫头鹰在繁殖过程中不营巢,而是利用树洞、岩穴或其他鸟类合适的弃巢孵卵育雏。猫头鹰一窝产卵数量不定,体形较大者产卵较少,而体形较小的种类产卵通常较多。孵化期约一月左右。孵卵一般仅由雌鸟完成,育雏则雄雌共同承担。猫头鹰均为完成雏,孵化后体被绒羽,耳目紧闭。鸮类产卵孵卵周期较长,在同一个巢内由于产卵时间和孵化时间的差异,雏鸟体形大小常有巨大的差异,个别种类如雪鸮在食物萧条的年景会出现较大雏鸟残食幼小雏鸟的现象,但这种现象并不普遍。野生猫头鹰寿命不长,如仓鸮平均寿命三年半左右,只有少数鸟类能够达到11年。