两种检测HER2的方法
检测HER2的表达水平有两种方法:一种是免疫组织化学法(IHC),检测的是HER2蛋白的表达水平,另一种则是原位杂交法(ISH),检测的是HER2基因的扩增水平,其中以荧光原位杂交(FISH)技术最为常见。
一般来说,手术切除后的乳腺癌标本,先做IHC,然后再根据实际情况,对需要进一步精确检测结果的标本进行FISH检测。
01、免疫组织化学法(IHC)
IHC就是通过抗原和抗体结合的原理来检测细胞蛋白质等大分子物质的分布情况。
在用IHC进行检测时,标本中HER2蛋白表达水平越高,其结合的HER2抗体会更多,那么标本切片显示的染色也就越深、越完整!这时,我们就可以根据标本染色后的情况,来判断标本中HER2蛋白的表达水平。
根据切片IHC染色情况的不同,会出现4种不同的检测结果:
IHC 0
无染色或≤10%的浸润癌细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色。
IHC 1+
>10%的浸润癌细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色。
IHC 2+
>10%的浸润癌细胞呈现弱-中等强度的、完整细胞膜染色或≤10%的浸润癌细胞呈现强而完整的细胞膜染色。
IHC 3+
>10%的浸润癌细胞呈现强、完整、均匀的细胞膜染色。
当出现IHC 0或IHC 1+,免疫组化报告显示:HER2(阴性);
当出现IHC 3+,免疫组化报告显示:HER2(阳性);
而当出现IHC 2+的时候,则说明通过IHC无法明确HER2表达的情况,此时就需要“追根溯源”,从源头开始检测,看看HER2基因是否存在异常。
我们都知道HER2是HER2基因表达的产物,细胞内的HER2基因越多,那么表达出来的HER2数量也会随着增加,而“基因扩增”是基因实现数量增加的手段。
目前,我们主要通过荧光原位杂交(FISH)等原位杂交技术来检测细胞内HER2基因的扩增情况。
02、荧光原位杂交(FISH)技术
FISH技术通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交,在荧光显微镜下观察并分析细胞核内杂交于DNA靶序列的探针信号,来获得细胞核内染色体(或染色体片段)上基因状态的信息。
FISH的检测结果如下:
HER2基因存在扩增
满足下面其中一条,则可认为HE