前面是猜想的是电泳问题 现在关于转膜这个步骤:小分子量的蛋白你可以用3.03克的tris 15.15克的甘氨酸 外加20%的甲醇 添水到一升的转移液的配方,不要加入SDS。SDS的作用是是蛋白带电 尤其是针对大分子的蛋白的 想想在上样缓冲液中为什么要加入SDS???呵呵 中和各个蛋白自身的电荷 包裹成火柴棍状 然后大家蛋白的电荷差异基本没有 就只有分子量这个因素了 所以转小分子量蛋白时候 不要加入SDS。我只是有个经验值:分子量在25---100KD以内的 电压100V 湿法 转移45分钟效率是很高的。 当然我也有发飙的时候 200V转移10分钟 效果一样的好。 我建议你转移条件是 湿法 电压100V 时间20分钟左右吧。当然你要先解决前面可能的电泳问题哈 谢谢 在叩首
细胞海洋+ 10+ 20欢迎参与讨论
回复4#franklinhg
! q6 D6 r" K3 E# e1 ]
% V) l7 d& H" i+ g% B+ V
谢谢,回去好好试一下
威望包包
学习了,谢谢!