酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000~2.000,新型号的酶标仪上限拓宽达2.900,甚至更高。超出可测上限的A 值常以"*"或"over"或其它符号表示。应注意可测范围与线性 范围的不同,线性范围常小于可测范围,比如某一酶标仪的可测范围为0.000~2.900,而其线性范围仅 0.000~2.000,这在定量ELISA 中制作标准曲线时应予注意。 酶标仪不应安置在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15~30,使用前先预热仪器15-30 分钟,测读 结果更稳定。测读 值时,要选用产物的敏感吸收峰,如OPD用492nm 波长。有的酶标仪可用双波 长式测读,即每孔先后测读两次,第一次在最适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定 间不移动ELISA 板的位置。例如OPD 用492nm 为W1,630nm 2,最终测得的A值为两者之差 (W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。各种酶标仪性能有所不同, 使用中应详细新闻记者说明书。 结果判断7.1 定性测定 定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出 "有"或"无"的简单回答,分别用" 性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本 作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的最高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性 的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。 在间接法和夹心法 ELSIA 中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA 中则相反,阴性孔呈色深于 阳性孔。两类反应的结果判断方法不同,分述于下。 间接法和夹心法这类反应的定性结果可以用肉眼判断。目视标本也无色或近于无色者判为阴性,显色清晰者为阳性。但ELSIA中,正常人血清反应后常可出现呈色的本底,此本底的深浅因试剂的组成和实验的条件不同 而异,因此实验中必须加测阴性对照。阴性对照的组成应为不含受检物的正常血清或类似物。在用肉眼 判断结果时,更宜用显色深于阴性对照作为标本阳性的指标。 目视法简捷明了,但颇具主观性。在条件许可下,应该用比色计测定吸光值,这样可以得到客观的数据。 先读出标本( sample,S)、