色谱条件色谱柱C,mm×mm粒度μm不锈钢色谱柱也可使用分离效果相当的其他不锈钢柱。流动相流动相A:乙腈()。流动相B:磷酸水溶液(pH=)()。梯度洗脱条件见表。时间min流动相A流动相B流速:mLmin。波长:nm。进样量:μL。柱温:℃。测定定性分别将大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素、染料木素的标准贮备溶液()稀释倍后按色谱条件()进行测定依据单一标准样品的保留时间对样品溶液中的组分进行定性定性色谱图参见附录A。定量将大豆异黄酮混合标准使用溶液()在色谱条件()下进行测定绘制以峰面积为纵坐标、混合标准使用溶液浓度为横坐标的标准曲线。将制备的样品溶液注入高效液相色谱仪中保证样品溶液中大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素和染料木素的响应值均在工作曲线的线性范围内由标准曲线差得样品溶液中大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、大豆素、大豆黄素和染料木素的浓度。