养成良好的无菌操作的习惯拿70%酒精擦手,擦超净台,擦培养瓶,擦培养基瓶,各种瓶子的口多拿火焰烧灼。就不再会发生细菌污染。
决定要进行细胞培养,首先一定要有强烈的无菌意识!操作中要求自己遵守严格的操作规程,不要怕麻烦,越细心越好,越“罗嗦”越好!
我发现在提取需要组织时,往往头会距离组织很近,所以带口罩很重要!还要换无菌衣(紫外照过的白大褂)
另外,每次开始实验前,先用紫外照无菌台和实验室20分,用酒精擦手,台面,不消毒的器械(如移液枪,冰块等);实验中,如允许,尽量多过火,开起或盖盖都靠近火焰或在无菌台深处进行;使用无菌台后,再用酒精擦全台面,紫外照20分!
还有,做到绝对无菌,那不可能!但我们可以做到最大限度的减少含菌量! 使用完的东西尽快移出无菌台!另外无菌台上的器械,试剂摆放,也尽量遵循一定的顺序!依污染可能程度依次向外摆。
1. 滴管不要接触瓶口,吸取废液及加入新鲜培养基时都要注意不要滴在瓶口上等等。
2. 凡是接触瓶口后都要用酒精灯烧烧。
3. 初学者一般可以用培养瓶养细胞,个人认为瓶污染的机率要比皿小。
4. 注意配制完全培养基时不要发生污染,在使用前一定要做无菌培养,因为一般应用污染后的培养基培养细胞后,很快就会发生特别严重的污染。
2. 1. 注意喷酒精装置的应用:制作很简单,用过的化妆品,理发店理发前往头发上喷 水的瓶子及其他一些有喷水功能的瓶子,经过处理装上百分之75的酒精就可以了(我不知道有没有实验专用喷洒酒精的瓶子,如果有那就更好了)。我用的是师姐留下来的一种护肤品的瓶子。常常往超净台台面,手上喷洒酒精,效果很好。
2。我进入细胞培养室就戴上PE 手套(一次性塑料薄膜手套),当在超净台操作时戴上一次性橡胶手套。
3。培养箱内水盘里的水,用灭菌的超净水,每周更换一次(至少也要两周换一次)。换水前要用百分之75酒精消毒。水浴箱也要定期消毒(用百分之75酒精)换双蒸水。
4。从培养箱内取东西前手一定要喷酒精,动作要快,可以先看好了,要取的东西在那里,然后快取。显微镜下观看细胞时间也不要过久,否则会对细胞有不利影响。
5。很多人喜欢常规用抗生素,其实除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基