实验七丁香中挥发油的提取分离与检识 (一)目的要求 1.掌握挥发油的一般化学检识及薄层色谱检识方法。 2.熟悉挥发油中酸性成分的分离方法。 3.学会应用挥发油含量测定器提取药材中挥发油及含量测定的操作方法。 (二)主要化学成分的结构及性质 丁香 别名:公丁香(花蕾)、母丁香(果实)。为桃金娘科植物丁香Eugenia caryophyllata Thunb.的干燥花蕾及果实。原产于非洲摩洛哥,现我国广东亦有 种植。丁香花蕾含挥发油(即丁香油)14%~20%,油中主要成分丁香酚,约78%~95%,乙酰丁香酚约3%及少量的丁香烯、甲基正戊酮、甲基正庚酮、香 荚兰醛等。另尚含齐墩果酸、鞣质、脂肪油及蜡。果实含丁香油2%~9%。 丁香酚(eugenol) 分子式 ,分子量164.20。无色或苍黄色液体, bp.225。几不溶于水,与乙醇、乙醚、氯仿可混溶。 丁香酚(三)实验原理 本实验用水蒸气蒸馏法提取丁香挥发油。利用丁香酚为苯丙素类衍生物,具 有酚羟基,遇到氢氧化钠水溶液即转为钠盐而溶解,酸化时又可游离的性质将丁 香酚从挥发油中分离出来。并利用可与三氯化铁试剂发生反应的性质进行检识, 也可进行薄层色谱检识。 (四)实验内容 1.丁香油的提取 取丁香50g,捣碎,置于烧瓶中,加适量水浸泡湿润,按 一般水蒸气蒸馏法进行蒸馏提取。也可将捣碎的丁香置于挥发油测定器的烧瓶 中,加蒸馏水300ml 与数粒玻璃珠,连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充 满刻度部分,并溢流入烧瓶时为止,精确加入1ml 二甲苯,然后连接回流冷凝管。 加热蒸馏30 分钟后,停止加热,放置15 分钟以上,读取测定器中二甲苯油层容 积,减去开始蒸馏前加入二甲苯的量,即为挥发油的量,再计算出丁香中挥发油 的含量。 2.丁香酚的分离 将所得的丁香油置于分液漏斗中,加10%氢氧化钠溶液 80ml 提取,并加150ml 蒸馏水稀释,分取下层水溶液,用10%盐酸酸化使丁香 酚呈油状液体,分取油层,用无水硫酸钠脱水干燥,得纯品丁香酚。 取少许丁香酚置于试管中,加1ml乙醇溶解,加2~3 滴三氯化铁 试剂,显蓝色。 4.薄层色谱检识 将提取得到的丁香油用乙醚配制成每1ml 含0.02ml 丁香 油的供试液。另取丁香酚对照品,加乙醚制成每1ml 含20 微升的对照品溶液, 吸取上述两种溶液各5 微升,分别点于同一硅胶G 薄层色谱板上,以石油醚(60~ 90)-醋酸乙酯(91)为展开剂,展开,取出,晾干,喷洒5%香草醛硫酸 溶液,于105加热烘干。在供试品色谱与对照品色谱相应的位置上,显相同颜 色的斑点。 (五)实验说明及注意事项 1.采用挥发油含量测定器提取挥发油,可以初步了解该药材中挥发油的含 量,但所用的药材量应使蒸出的挥发油量不少于0.5ml 2.挥发油含量测定装置一般分为两种,一种适用于相对密度小于1.0的挥发 油测定。另一种适用于测定相对密度大于1.0 的挥发油。《药典》规定,测定相 对密度大于1.0 的挥发油,也在相对密度小于1.0 的测定器中进行,其作法是在 加热前,预先加入1ml 二甲苯于测定器内,然后进行水蒸气蒸馏,使蒸出的相对 密度大于1.0 的挥发油溶于二甲苯中。由于二甲苯的相对密度为0.8969,一般能 使挥发油与二甲苯的混合溶液浮于水面。由测定器刻度部分读取油层的量时,扣 除加入二甲苯的体积即为挥发油的量。 3.用挥发油测定器提取挥发油,以测定器刻度管中的油量不再增加作为判 断是否提取完全的标准。 (六)思考题 1.从丁香中提取分离丁香酚的原理是什么? 2.除可利用水蒸气蒸馏法提取挥发油外,还可采用什么方法提取挥发油? 原理是什么?