1、核酸检测试剂盒原理?
以病毒独特的基因序列为检测靶标,通过PCR扩增,使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加,每一个扩增出来的DNA序列,都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的靶基因越多,累积的荧光信号就越强。而没有病毒的样本中,由于没有靶基因扩增,因此就检测不到荧光信号增强。所以,核酸检测其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。
2、核酸检测样本类型有哪些?
一般为鼻拭子、咽拭子、鼻咽拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。
3、五个步骤检测新型冠状病毒
检测程序需要经过五个步骤,取样、留样、保存、核酸提取、上机检测,这需要严谨的科学实验才能完成。
1. 用咽拭子擦拭咽后壁及双侧咽扁桃体处各5-10次,且不断旋转拭子;
2. 需要医务人员进行留样,将拭子头浸入细胞保存液中,折断尾部后立即旋紧管盖;
3. 保存,将样本管放入密封袋中及时送检,而送检过程中需要严格的运输环境,2-8摄氏度保存。
4. 操作核酸提取,将灭活病毒后的样本进行核酸提取,用于后续检测,可以采用自动化的设备,如核酸提取仪等。
5. 荧光PCR核酸检测,也就是上机器检测,将提取物进行荧光PCR扩曾反应,需要70—80分钟。
4、核酸检测存在哪些问题?
假阴性,由于采样不当、标本保存不当、采用不同类型的标本以及使用不同厂家试剂都可能造成核酸检测结果“假阴性”而出现漏诊;
对检测设备或平台要求较高,高灵敏度的RT-PCR仪价格不菲,对实验室的洁净度和操作人员要求也较高;
核酸检测耗时较长,完成一个RT-PCR的检测通常需要4-6个小时,然而考虑到样本运输、大量样本积压的情况,通常最快24小时才可以报告结果。
因此当核酸检测阴性时,将IgM和IgG抗体检测增加进去,可以弥补核酸检测容易造成漏诊的缺点。
新型冠状病毒血清抗体检测
新型冠状病毒肺炎发病7天后,血清特异性抗体逐渐产生,首先出现的是免疫球蛋白IgM抗体,然后出现IgG抗体。因此,IgM抗体增高提示近期急性感染,IgG抗体增高提示既往感染。
血清学检测最大的优势在于方便快捷,检测时间较短,能够有效突破现有检测技术对人员、场所的限制,缩短检测用时,被写进了《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七