1、资料与方法1.1一般资料病例取自河南驻马店和开封两地区某县的农村地区。在当地选择HIV/AIDS300例,所有HIV感染者均在2004年河南省有偿献血人群艾滋病普杏中被确诊,感染途径均为1989~1995年之间的有偿献血感染。对300例患者进行再次筛选,选取105例患者。其中男女比例为8:6。年龄18—65岁,平均(33.6±9.3)岁,CD4值均小于400。通过中药(益艾康胶囊、克艾特胶囊)干预前后两次抽血人数为164例。1.2观察项目及方法所有病例均用流式细胞仪进行外周血的CD4、CD8T淋巴细胞百分率检测。主要试剂为CD4、CD8等(美国B.D公司生产)。所用仪器为COUNTEREPICSXL流式细胞仪(美国COUNTER公司)。用MEK-6108白细胞分类计数仪,对外周血进行白细胞计数和淋巴细胞分类的百分率测定,计算出淋巴细胞数,与通过流式细胞仪检测得到的双阳性细胞占淋巴细胞的百分率相乘得出各双阳性细胞的绝对计数。血浆的病毒载量由北京302医院协助检测,采用德国BAYRE公司生产的b—DNA定量检测仪,型号为VERSANTHIV-1RNA3.0Assay(b—DNA)。1.3统计学方法采用SPSS13.0软件进行数据的统计分析。计量资料均数±标准差(x±8)描述。2、结果2.1CD4与病毒载量的相关分析经过药物干预前后共检测CD4、病毒载量164例血样,结果显示:在CD4400的区间内病毒载餐再次出现下降趋势。总体上显示病毒载量在CD4的200~400的区间处于一个繁殖抑制期,见表1。2.2经过药物干预前后共检测CD4、病毒载量164例血样,结果显示:CD4在0~100,100~200,200~300,300~400及>400五个不同的区间的数值分别为58.26,149.51,254.38,343.71,547.18;相对应CD8的五个区间的数值分别为584.79,707.51,917.19,909.68,1146.75。从总体上观察CD4、CD8表现为正相关性,但是在CD4的200—400的区间CD8没有表现出明显的上升趋势。见表2。2.3经过药物干预前后共检测CD4、病毒载量162例血样,结果显示:在小于600的区间CD8均值(309.48,505.12)与对应的病毒载量(790947,658128)呈负相关;在CD4的600~800的区间内病毒载量(1468193拷贝/ml)呈上升趋势;在大于800的区间内CD8的均值(878.83,1390.4)与对应的病毒载量(584090,251418)呈负相关,见表3。
3、讨论在艾滋病临床治疗中,将外周血CD4+T细胞计数和血浆LV作为评估HIV感染后疾病进展及疗效评价的重要指标。CD4+T细胞代表T辅助细胞亚群(Th),Th细胞具有辅助B细胞及其他T细胞活性的作用。此外,它除了表现促进免疫应答的作用外,也能诱导其他T细胞亚群的活化。在免疫调节中,特别是对细胞免疫和体液免疫平衡的维持具有枢纽的功能。CD4+T淋巴细胞数量迅速下降为HIV-1感染进一步发展成为艾滋病的突出表现。在HIV-1病毒急性感染进入潜伏期后,病毒活化是造成CD4细胞死亡的直接原因。未激活的CD4+T细胞即没有进入细胞周期(G0期)的细胞能存活较长时间,因而成为体内的重要病毒源。HIV感染除了引起CD4+T细胞的减少外,CD4+T细胞的功能也受到限制,这种功能障碍甚至在细胞数量减少之前就以表现出来。因此可以认为,CD4+T细胞是HIV感染的主要靶细胞,但HIV并不感染CD8+T细胞或其他组织细胞。HIV感染宿主免疫细胞后以每天产生109~1010颗粒的速度繁殖,并直接使CD4+T细胞破坏。HIV-1发病机制的研究显示了体内病毒含量的增加与外周血中的CD4淋巴细胞的缺失和疾病的进展呈正相关。从本次实验结果表明随着CD4计数的上升病毒载量是下降的,但是在CD4数值在200~400之间的区间内LV与CD4程正比,说明LV除与CD4外还与其他免疫细胞存在密切相关性。CD8+T淋巴细胞在机体抗病毒过程中发挥重要的作用,在HIV感染的早期,其数量往往高于正常,这可能由于体内抗HIV细胞毒T细胞增生的结果。和CD4+T细胞一样,HIV感染患者体内的CD8+T细胞功能也有异常。正常人的CD4+T淋巴细胞约占总的T淋巴细胞的65%,CD8+T淋巴细胞约占35%。人体感染了HIV后,涉及的主要病理过程就是免疫系统的损害,主要表现为:CD4+T淋巴细胞的丢失,绝对数量的减少,同时CD8+T淋巴细胞数量增加,CD4和CD8的比例失调。但是本研究初筛患者CD4小于400的AIDS,结果显示CD4与CD8在AIDS期同步减少,但是比值是与CD4呈正比。在CD4的200~400的区间CD8没有表现出明显的上升趋势。研究发现HIV的感染能导致CD8+T细胞上CD38和HLA-DR分子的表达比例显着增高,是反映HIV/AIDS患者异常免疫改变的主要指标之一;由于从初期感染到临床发病一般要经历2-8年的无症状期。HIV不断地刺激CD4+T、CD8+T等免疫细胞异常活化,导致淋巴细胞的高易感性和易耗竭,表现免疫缺陷,并且这种异常的高表达和血浆LV的改变有一定的相关性。HIV进入人体后会导致CD8数值的增高,但是从本实验的结果显示这种变化仅仅表现在CD8数值的400~800的某一区间段,在CD8数值大于800的区间内病毒载量表现为下降趋势,在CD8数值小于400的区间内病毒载量有表现为下降趋势,其变化十分复杂。【E-HIV无法理解此处的表述,不知是刊登有误还是作者表述有问题】综上所述,本研究验证了在艾滋病的发病过程中与CD4、CD8及病毒载量密切相关,但是在疾病的发展不同阶段,其间的表现的规律各异。特别在CD4数值的200~400区间内,CD8与LV均表现为与其他区间不同变化规律。这种规律表明在疾病的发生、发展过程中由于HIV引起的宿主免疫激活的过程往往是多因素的结果,它们之间的具体相关性,还有待于深入研究。