色谱定量方法比较2006年12月20日 星期三 15:31定量分析常用术语: 样品(sample)含有带测物,供色谱分析的溶液。分为标样和未知样。 标样(standard)浓度已知的纯品。 未知样(unknow)浓度待测的混合物。 样品量(sample weight)待测样品的原始称样量。 稀释度(dilution)未知样的稀释倍数。 组分(componance)欲做定量分析的色谱峰,即含量未知的被测物。 组分的量(amount)被测物质的含量(或浓度)。 积分(integerity)由计算机对色谱峰进行的峰面积测量的计算过程。 校正曲线(calibration curve)组分含量对响应值的线性曲线,由已知量的标准物建立,用于测定待测物的未知含量。 常用的定量方法 标准曲线法,分为外标法和内标法。 外标法在液相色谱中用的最多。 内标法准确但是麻烦,在标准方法中用的最多。 外标法 用被测化合物的纯品作为标准样品,配制成一系列的已知浓度的标样。 注入色谱柱的到其响应值(峰面积)。 在一定范围内,标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系,即w=f×a,制成标准曲线。 在完全相同的实验条件下,注入未知样品,得到欲测组分的响应值。 根据已知的系数f,即可求出欲测组分的浓度 外标法的优点: 操作、计算简单,是一种常用的定量方法。 无需各组分都被检出、洗脱。 需要标样。 标样及未知样品的测定条件要一致。 进样体积要准确。 外标法缺点: 实验条件要求高,如检测器的灵敏度,流速、流动相组成的不能发生变化;每次进样体积要有好的重复性。 内标法 操作: 将已知量的内标样加入标准样品,制成混合标样,并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。 注入色谱柱,以(标样峰面积/内标样峰面积)为响应值。 根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系,即w=f×a,制成标准曲线。 将已知量的内标样加入未知样品,注入色谱柱,得到欲测组分的响应值。 根据已知的系数f,即可求出欲测组分的浓度 内标法的特点: 操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱的,因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定,上样体积的变化不会影响影响定量结果。 内标法抵消了上样体积,乃至流动相、检测器的影响,因此比外标法精确。