因母驴多在晚上和黎明时排卵,因而交配时间最好安排在早晨或傍晚。配种前,先将母驴保定好,用布条将尾巴缠好并拉于一侧,洗净、消毒、擦干外阴。公驴的阴茎最好也用温开水擦洗。配种时,先牵公驴转1~2圈,促进性欲,然后使公驴靠近母驴后躯,让它嗅闻母驴阴部,待公驴性欲高涨,阴茎充分勃起后,要及时放松缰绳,让它爬跨到母驴背上,辅助人员迅速而准确地把公驴阴茎轻轻导入母驴阴道,使其交配。当观察到公驴尾根上下翘动,臀部肌肉颤抖,表明在射精。交配时间一般1~1.5分钟。射完精后公驴一般伏在母驴背上不动,可慢慢将它拉下,用温开水冲洗阴茎,慢慢牵回厩舍休息。如不进行滤泡直肠检查,人工辅助交配,要在母驴外观发情旺盛时配种,可采用隔日配种的方法,配种2~3次即可。