经染色体　核型分析验证之后,　对于X增多的情况,　AMEL位点　能准确的给出提示,　但是,　对于AMEL提示的Y增多　或X减少,　只有　3　例(14.29%,　3/21)与核型分析的结　果相符,　其余　18　例患者性染色体未见异常,　推测可　能是AMEL-Y区域发生了微小重复突变。Murphy　等[20]　也曾有类似报道,研究中的兄弟二人AMEL-X/AMEL-Y比值均约为　1:2,　但为正常男性核　型,　表型也无特殊、　无不育的相关病史,　利用比较基　因组杂交技术(Comparative　genomic　hybridization,　CGH)验证发现Y染色体短臂发生　2.6~4　Mb区域的重　复突变,　该区域包括AMEL、PRKY和TBL1Y等基因。　但这一突变是否为多态或与男性不育是否有关还需　进行深入地研究,　但值得注意的是本研究发现　21　例AMEL-X/AMEL-Y约为　1:2　的患者中有　10　例患者发　生了AZFb区或AZFb,c区缺失。　与普通的PCR-琼脂糖凝胶电泳相比,多重QF-PCR　技术结合毛细管电泳筛查　Y　染色体　AZF　微　缺失具有以下优点:(1)一个反应即可检测样本的多　个位点,　凭借基因分析仪高通量的优势可同时进行　多个样本检测,　大大减少了劳动强度,　能更简便,　快速的分析各位点扩增情况;　(2)QF-PCR　利用荧光　标记引物以及扩增片段长度的不同,　可避免因非特　异性扩增或扩增不完全造成的假阳性和假阴性结果,　提高了检测的准确性和特异性;　(3)毛细管电泳的分　辨率可达　1　bp,　可清楚的区分　AMEL-X　与AMEL-Y　扩增片段,　有助于提示性染色体异常,　指导患者进　行染色体核型分析确诊并与核型分析的结果相互验　证,　这是普通　PCR-琼脂糖凝胶电泳无法完成的。不　足的是,　QF-PCR　与毛细管电泳技术所需检测设备及　相关试剂费用较高,　增加了检测成本,　因此限制了　它在临床上的广泛应用。另外,　对于本研究中　AZF　区微缺失样本,　均重提　DNA　进行重新检测,　并进行　缺失位点单独扩增检测,　各样本几次检测结果均显　第6期张媛媛等:　QF-PCR　筛查男性不育患者　Y　染色体无精子症因子微缺失　557　示一致,　说明　QF-PCR　的敏感性较高,　重复性较好;　QF-PCR　也能辅助核型分析诊断性反转患者,　区分