J舌急性髓系白血病( acutemyel oi dl eukemi a,AML) 是最常见的血液系统恶性肿瘤,占成人急性白血病的60%"-70%。近年来随着新的治疗药物的出现以及化疗方案的不断完善,急性髓系白血病的无病生存率及总体生存率不断提高,但是仍然要面对缓解后复发这一难题。AML患者初诊时约存在10屹的白血病细胞,而经过化疗达完全缓解( CR) 后仍存在相当数量( 可达10&10) 的白血病细胞。目前认为复发的主要原因是微小残留病( mi ni malresi dual di sease,MRD) 的存在,AML的MRD监测对于AML疗效评价,预后预测和指导个体化治疗具有重要意义。根据患者MRD水平的变化趋势,及时给予治疗干预,可以有效的避免或延迟复发,延长无复发生存时间,提高疗效。伴有t( 8;21) ( q22;q22) 易位的AML是较常见的一类AML,约占成人AML的10%。在该类患者中,位于21号染色体的AMLl ( RUNXl ) 基因与位于8号染色体的ETO( MTG8) 基因融合,产生AMLI/ETO( RUNXl /RLn慨1T1) 融合基因,成为该类型AML患者MRD检测的标志。在2008年WHO造血与淋巴组织肿瘤分类中被命名为急性髓系白血病伴有t( 8;21) ( q22;q22) 或RUNXl /RUNXl Tl ,FAB分型主要划分为AML.M2。伴t( 8;21) ( q22;q22) 的AML通常被认为预后较好,属于预后良好核型组[ 1】。但复发仍是该类AML治疗失败的主要原因,其MRD检测的意义尤为重要。既往大量应用各种PCR方法监测AMLl /ETO转录本的研究发现,经过化疗、自体干细胞移植、甚至异基因干细胞移植后持续缓解的患者中仍可检测到该转录本的存在[ 3.7] 。这提示了AMLl /ETO白血病的治愈并不一定要求融合基因转录本的彻底清除:但MRD水平及动态变化与预后仍具有显著相关性。因此对于MRD的监测及其预后意义的研究十分重要。为了探讨伴t(8;21)(q22;q22)的急性髓系白血病中,AMLl /ETO融合基因监测的意义,本研究分析了在疾病不同时间阶段,定性RT-PCR监测融合基因AMLl /ETO的转阴规律及其预后意义;同时分析了实时定量PCR定量监测融合基因AMLl /ETO拷贝数的变化及其预后意义。6 中国医学科学院北京协和医学院博士学位论文实验材料:材料与方法一、研究对象定性分析:2004年7月至2010年1月我院初诊的32例AML患者,其中男性15例,女性17例。采用MICM诊断模式,骨髓形态、免疫分型、细胞遗传学及分子生物学检查( 融合基因AMLl /ETO) ,明确诊断为急性髓系白血病伴t( 8;21) ( q22;q22) 。分析病例符合如下条件:( 1) 初诊时融合基因AMLl /ETO定性阳性;( 2) 融合基因监测时间:缓解后>12个月;( 3) 融合基因监测频率:每分析区间内( CR后1.3月,3-6月,6.12月,12.18月,18.24月,>24月) 至少完成1次融合基因AMLl /ETO定性检测。随访截止时间2012年3月31日,中位随访时间33.7个月(20.2.93.7个月)。定量分析:2010年8月至2011年3月我院初诊的20例AML患者,其中男性9例,女性11例。采用MICM诊断模式,骨髓形态、免疫分型、细胞遗传学及分子生物学检查(融合基因AMLl /ETO),明确诊断为急性髓系白血病伴t(8;21)(q22;q22)。初诊、治疗及随访过程中以定量PCR监测融合基因拷贝数,共20例患者。随访截止时间2012年3月31日,中位随访时间14.7个月( 10.0.19.3个月) 。表1-1.52例急性髓系白血病伴t( 8;21) ( q22;q22) 患者基本资料编号性别年龄初诊WBC*109/L诱导方案诱导疗效复发HADHADHADHAD由由中中HADCRCRCRCRCRHAA,MAC( 中) CRHAD( 中) CRHAD( 中)CRHAD( 中) CRHAD( 中)CRHAD( 中) CRHAD( 中)CR无无有无无无无有无有无有8972669462149&2■ 3Z石&L名i23王m2521151184r1岁岁岁岑箩岑岁岑岑岑咨岑一00713172367424l243223511女女男男男女女男女男女男O12123456789111 中国医学科学院北京协和医学院博士学位论文17岁47岁42岁34岁16岁17岁46岁41岁45岁41岁17岁54岁27岁53岁37岁39岁21岁57岁13岁15岁16岁18岁27岁19岁23岁22岁54岁17岁44岁47岁47岁21岁40岁56岁48岁28.1215.1911.8134.628.8372.2511.529.155.855.432.592.523.174.5210.762.7737.044.037.424.6330.411.6114.1610.0720.323.66.724.715.85.4515.1421.4410.9719.2629.888