表1 样品来源信息Table 1 Information of samples from different sources
2 方法与结果2.1 定量测定方法建立及方法学考察2.1.1 色谱条件
色谱柱为DIKMA Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(60:40);检测波长270 nm;体积流量1 mL/min;柱温30 ℃;进样量20 μL。在上述色谱条件下,4种成分的色谱峰分离度良好,见图1。
图1 混合对照品(A)、丹参片(D1, B)、复方丹参片(F1, C)、冠心丹参胶囊(G1, D)、复方丹参片阴性样品(E)和冠心丹参胶囊阴性样品(F)的HPLC图Fig.1 HPLC of mixed reference substances (A), Danshen Tablet (D1, B), Compound Danshen Tablet (F1, C), Guanxin Danshen Capsule (G1, D), negative sample of Compound Danshen Tablet (E) and negative sample of Guanxin Danshen Capsule (F)
2.1.2 对照品溶液的制备
分别取DTI、CT、TI和TIIA对照品适量,精密称定,加甲醇配制成质量浓度分别为100.8、102.0、94.4、98.8 μg/mL的对照品储备液。
分别精密吸取DTI对照品储备液(质量浓度100.8 μg/mL)0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2 mL,CT、TI和TIIA对照品储备液(质量浓度分别为102.0、94.4、98.8 μg/mL)0.1、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6 mL置10 mL量瓶中,甲醇定容制成6个不同质量浓度的混合对照品溶液。
2.1.3 供试品溶液的制备
取丹参不同制剂粉末约0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20 mL,称定质量,超声处理(功率200 W,工作频率40 kHz)20 min,放至室温后,再称定质量,用甲醇补足减失质量,摇匀,13 000 r/min离心10 min,取上清液,即得。
2.1.4 阴性样品溶液的制备<