培养材料的消毒 　　从外界或室内选取的植物材料,都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带人培养基,便会造成培养基污染。因此,植物材料必须经严格的表面灭菌处理,再经无菌操作手续接到培养基上。 　　试剂:　　· 乙醇。 　　· 吲哚乙酸( IAA) 或 2 ,4 – D (生长素类似物)。 　　· 氯化汞(升汞)或次氯酸钠。 　　· 6- 苄基氨基腺嘌呤( 6-BA ) 　　· MS 培养基 　　·0.1 mol/L NaOH与 0.1 mol/L HCl 　　配制培养基:　　( 1 )愈伤组织诱导培养基: MS 培养基(蔗糖含量为 10 g/L , 2,4 – D 含量为 2 mg/L ,琼脂10 g/L )。 　　( 2 )试验培养基:在 MS 培养基中加入 IAA 和 6–BA 。 　　吲哚乙酸(IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解, 6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解,然后用蒸馏水稀释,再加入培养基中。 　　仪器设备:　　培养室,高压灭菌锅,水浴锅,解剖刀,三角烧瓶( 100mL ),烧杯,量筒,组培瓶,组培盖或封口膜,棉线,接种箱或超净工作台,分析天平,长镊子,剪刀,容量瓶,移液管,牛皮纸。 　　培养基灭菌:　　将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至 pH 5.8 ,趁热分装于 100 mL组培瓶中,每瓶约 20 mL 。待培养基冷却凝固后,盖上组培盖,或盖上封口膜并用棉线扎牢,然后在高压灭菌锅中 121 ℃( 1 kg/cm 2 )下灭菌 20 min 。取出组培瓶放在台子上,冷却后备用。接种操作所需的一切用具(如长镊子、解剖刀、剪刀等)及灭菌水,需同时灭菌。　　1、胚胎培养 　　指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。 　　2、器官培养 　　指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养,如根的根尖和切段,茎的茎尖、茎节和切段,叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶,花器的花瓣、雄蕊(花药、花丝)、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。 　　3、组织培养 　　指以分离出植物各部位的组织(如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等),或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的植物组织培养。 　　4、细胞培养 　　指以单个游离细胞(如用果酸酶从组织中分离的体细胞,或花粉细胞,卵细胞)为接种体的离体无菌培养。 　　5、原生质体培养。 　　指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。