富血小板纤维蛋白(platelet-rich　fibrin,PRF)属于新一代血小板浓缩物,含丰富血小板和白细胞。近来,研究发现PRF可以显著促进ASCs的增殖、分化及旁分泌功能,可能成为进一步优化ASCs促自体脂肪移植成活的促进剂。本项目拟应用组织学、细胞生物学、分子生物学、干细胞移植、组织移植与再生医学的基本原理与方法,在传统ASCs辅助自体脂肪移植方法的基础上,使用自体改良型PRF干预ASCs,观察其对ASCs生物学功能的调控作用并探讨其分子机制;将改良型PRF干预后的ASCs与结构性脂肪移植至裸鼠体内,观察PRF干预后的ASCs对脂肪移植成活率的影响;并应用改良型PRF处理后的纳米脂肪联合自体结构性脂肪移植治疗颜面部、乳房等软组织缺损的患者,观察其临床应用的可行性并进行远期疗效评价。目的是进一步优化ASCs促进自体结构性脂肪移植存活及改善脂肪组织再生模式的方法,为临床应用提供实验依据与理论支持;同时,通过PRF调控ASCs的生长增殖、分化及旁分泌功能,为充分动员ASCs发挥促脂肪再生作用寻找新策略,对于ASCs广泛用于软组织创伤修复及细胞治疗具有重要的临床指导意义。　项目研究取得的成果与科学价值:1、本项目成功以非酶消化法从健康成人皮下脂肪组织中分离培养出脂肪干细胞(ASCs);并在前期研究成果基础上进一步优化了脂肪干细胞的分离培养和鉴定的方法。再次证实ASCs具有很强的生长增殖和自我更新能力,在体外培养过程中遗传背景稳定、不易衰老,ASCs具有向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞分化的潜能。2、体外实验证实在一定的浓度范围内,PRF能显著促进ASCs生长增殖分化及旁分泌功能并呈剂量依赖关系。3、体外实验证实PRF促进ASCs生长增殖分化及旁分泌功能的主要分子机制是通过激活HIF-1ɑ/VEGF信号通路实现的。4、动物体内移植实验证实PRF能显著促进自体结构性脂肪移植存活及质量保持,其主要分子作用机制是PRF优化了ASCs生长增殖分化及旁分泌功能后,对自体结构性脂肪移植物提供多种高效的细胞因子、加速移植物血动重建并优化体内生长微环境,通过激活HIF-1ɑ/VEGF信号通路实现PRF对ASCs的优化调控作用促进自体结构性脂肪移植的成活。5、通过HIF-1ɑ/VEGF基因沉默方法,再次从动物体内实验证实了HIF-1ɑ/VEGF信号通路在PRF干预ASCs促进自体结构性