Silviase/jgov_v1.4_full_ann huggingface dataset:
ppm-cntrシナリオで約0.2 W m^{-2}と大きく見積もられ、これらを足し合わせるとSLCPの減少によるRFへの影響はほとんどゼロとなってしまう。また、エアロゾルの間接効果(図の右端)を考慮すると非常に大きなRFの増加が示唆されるが、これらは不確定性が大きいこともあり、SLCPコベネフィットアプローチの議論では当面考慮しない方が良いと思われる。またSO_{2}の排出削減は温暖化を促進するが、SO_{2}削減はCO_{2}削減同様SLCPコベネアプローチとしては外的シナリオと考え、SLCPの一部としては取り扱わないものとする。従ってSO_{2}とCO_{2}の排出のトレードオフは考えず、SO_{2}の減少によるRFの増加を補填するためにも、O_{3}、BCのより大きな減少を目指すべきであると考える。

最後に、コベネフィット・アプローチの眼目である大気汚染対策と気候変動対策を個別に施行するより、これらを同時に施行する方が経済的に有利であることの、GAINSモデルによる試算を示す。図(6)-12は450ppm、450 ppm-cntrシナリオみよる削減対策コストの2005年をレファレンスとした削減コストとの比較である。図に示されるように450 ppmシナリオによる大気汚染物質の削減コストは2005年の対策コストに比較して21%低下することが示されている。一方、450 ppm-cntrシナリオによる大気汚染対策コストは純粋に450 ppmシナリオに大気汚染対策を上乗せしたものなので、2005年に比して13%の増加となっているが、単純に2005年の排出からNOx、VOC、SO₂をの70-80%削減するコストに比較すれば、450 ppmシナリオを併用することにより、はるかに費用の増加は小さいことが明らかである。

図(6)-12 GAINSモデルによる450ppm, 450ppm-cntrシナリオによる2030年の大気汚染対策コストの2005年をレファレンスとした削減コストの比較（単位M€）

## 5 ．本研究により得られた成果

## （1） 科学的意義

対流圏オブン、ブラックカーボンを対象としたSLCPコベネフィットシナリオについて気候変動影響を全球化学気候モデルによる全球年平均圏界面放射強制力により、大気質変動影響を領域科学輸送モデルによる北東アジア境界層オブン濃度、PM_{2.5}濃度により評価することが出来た。これら気候影響・大気影響を同時に東アジアの政策的視点に立って科学的に解析した研究としては本研究が初めてである。

## （２）環境政策への貢献

## ＜行政が既に活用した成果＞

2012年3月バンコクにおけるSLCP/CCAC Sub-regional Meetingにおいて、SLCPとしての対流圏オゾン提言に対してアジアではNOx/VOCの排出削減が優先さるべきという本研究の提言が、環境省によるプレゼンにおいて活用された。
## ＜行政が活用することが見込まれる成果＞

次回のSLCP/CCAC Sub-regional Meetingが2014年の夏期に開催される予定であり、そこでは本研究の成果がよりまとまった形で報告される予定である。

SLCPに関して欧米からはブラックカーボンと対流圏オゾン低減のための $ CH_{4} $ の排出削減が提案されているが、東アジアの途上国における気候変動対策は大気汚染抑止とのコベネフィットを前面に打ち出すことにより、初めてインセンティブを得ることが出来る。東アジアにおける大気汚染対策、特に $ O_{3} $ 、 $ PM_{2.5} $ 対策のためには、 $ NO_{x}/VOC $ の排出削減が急務であり、これを $ CH_{4} $ の排出削減と組み合わせることによって $ CO_{2} $ の削減対策のみでは成し得ない中期未来（2030-2050頃）における気候変動抑制にも貢献するという主張を我が国がなし、東南アジアなどに対するSLCP削減の技術的・資金的支援がこうした考え方に沿ってなされることが期待される。

## 6 ．国際共同研究等の状況

国際応用システム研究所(IIASA)のマーカス・アーマン(Makus Amann)、ジーク・クリモント(Zig Klimont)の両氏とアジア大気汚染研究センター(ACAP)の秋元肇、黒川純一を直接的カウンターパートとしてS-7-3の下での共同研究を行った。IIASAよりGAINSモデルの基準シナリオおよび、東アジアにおいて大気汚染対策を強化したシナリオの提供を受け、S-7-3-(6)研究チームとして須藤健悟・竹村俊彦氏による全球化学気候モデルを用いた気候変動影響評価、永島達也氏による領域科学輸送モデルを用いた大気質変動評価を行い、IIASA側にフィードバックした。これらの共同研究は、欧米と異なる東アジアにおけるSLCPコベネフィットアプローチに対する考え方の検討に関する両者の共通の科学的・政策的関心から、研究資金の移動を伴うことなく行われた。共同研究の結果はS-7-3-(6)チーム研究者の共同執筆論文として学術誌に投稿の予定である。

### 7. 研究成果の発表状況

## （1） 誌上発表

## <論文（査読あり）>

1) T. NAGASHIMA, T. OHARA, K. SUDO, H. AKIMOTO: Atmos. Chem. Phys., 10, 11305–11322, (2010)

“The relative importance of various source regions on East Asian surface ozone”

2）大泉毅、秋元肇、金谷有剛、永島達也、櫻井達也、大原利真、佐藤啓市：大気環境学会誌，48，181-187，(2013)

「我が国の光化学オゾン汚染の8時間平均値による評価」

3) A. NAWAHDA, K. YAMASHITA, T. OHARA, J. KUROKAWA, T. OHIZUMI, F. CHEN, H. AKIMOTO: Atmos. Environ., 81, 538-545, (2013)

“Premature mortality in Japan due to ozone”

4) J. KUROKAWA, T. OHARA, T. MORIKAWA, S. HANAYAMA, J.-M. GREET, T. FUKUI, K. KAWASHIMA, H. AKIMOTO: Atmos. Chem. Phys., 13, 11019-11058, (2013)

“Emissions of air pollutants and greenhouse gases over Asian regions during 2000–2008: Regional Emission inventory in ASia (REAS) version 2”
## <査読付論文に準ずる成果発表>

特に記載すべき事項はない。

## くその他誌上発表（査読なし）>

1) 秋元 肇：遺伝, 65, 27-33 (2011)

「アジア広域大気汚染と東アジア酸性雨モニタリングネットワークの進展」

2) 秋元 肇：環境情報科学, 42, (2014)

「越境大気汚染・酸性雨への先行的取り組みとオゾン・PM_{2.5}などへの最近の展開」

## （2） 口頭発表（学会等）

1) H. AKIMOTO: IIASA-Japan Seminar, Laxenburg, Austria (2011)

“Evaluation of Co-benefit for Ozone and Black Carbon Reduction and Global Warming Measures”

2) H. AKIMOTO: $ 3^{rd} $ International Workshop on Atmospheric Modeling Research in East Asia, September 24-25, Chengdu, China (2011)

“Modeling approach for co-benefit, co-control strategy for air pollution and climate change mitigation in East Asia”

3) 秋元 肇、金谷有剛、大原利真、鈴木克徳：第17回大気化学討論会，京都 (2011)

「東アジアにおける広域大気汚染と共便益を考慮した大気環境管理 —環境省 S-7 戦略推進費による大気化学に基づいた大気環境政策研究—」

4) H. AKIMOTO: Third International Workshop on Emission Inventory in Asia, Yokohama (2012)

“ERTDF S-7 Project: Scientific Analysis of Regional Air Pollution and Promotion of Air Pollution Management in East Asia Considering Co-benefits”

5) 秋元 肇：環境経済・政策学会, 仙台, (2012)

「科学的観点から見た SLCF の重要性」

6) H. AKIMOTO, J. KUROKAWA, K. SUDO T. TAKEMURA, T. NAGASHIMA, et al.: IGAC 2012 Conference, Beijing (2012)

“SLCF Co-benefit Scenario in East Asia”

7) 秋元 肇、黒川純一、須藤健悟、竹村俊彦、永島達也他：第18回大気化学討論会，福岡 (2012)

「東アジアにおける大気汚染・気候変動コベネベネシナリオ提言へむけて」

8) H. AKIMOTO, J. KUROKAWA, K. SUDO, T. TAKEMURA, T. NAGASHIMA, et al.: $ 4^{th} $ International Workshop on Atmospheric Modeling Research in East Asia, Kunming, China (2012) "Recent Scientific Input on Short-lived Climate Pollutants (SLCPs)"

9) H. AKIMOTO, J. KUROKAWA, K. SUDO, T. TAKEMURA, T. NAGASHIMA, et al.: The $ 12^{th} $ International Conference on Atmospheric Sciences and Application to Air Quality (ASAAQ), Seoul (2013)

10) 秋元 肇、黒川純一、須藤健悟、竹村俊彦、永島達也他: 第19回大気化学討論会, 七尾 (2013)

「東アジアにおける大気汚染・気候変動: コベネシナリオ提言へむけて (2)」

11) H. AKIMOTO, J. KUROKAWA, K. SUDO et al.: 4th International Workshop on Regional Air
Quality Management in Rapidly Developing Economic Regions, Hong Kong (2014)

“SLCP Co-benefit Strategy on Air Quality and Climate in East Asia”

## （3） 出願特許

特に記載すべき事項はない。

## （４）シンポジウム、セミナー等の開催

S-7 プロジェクトとしての一般公開シンポジウム「越境大気汚染への挑戦 —最新の知見最近の動向—」を 2011 年.10 月 28 日に東京で開催、その中で本テーマの成果を発表した。

秋元 肇：「グローバル大気汚染とコベネフィット」

また、S-7プロジェクトとしての第2回目の一般公開シンポジウム「越境大気汚染への挑戦2013—国際協調による取組に向けて—」を2013年11月1日に東京で開催、その中で本テーマの成果を発表した。

秋元 肇：「大気汚染対策の気候変動対策との関わりとコベネフィットアプローチ」

## （５）マスコミ等への公表・報道等

特に記載すべき事項はない。

## （6） その他

特に記載すべき事項はない。

### 8 \. 引用文献

1) UNEP/WMO: “Integrated Assessment of Black Carbon and Tropospheric Ozone” (2011)

2) UNEP: “Near-term Climate Protection and Clean Air Benefits: Actions for Controlling Short-Lived Climate Forcers” (2011)

3) US Department of States: “Climate and Clean Air Coalition to Reduce Short-Lived Climate Pollutants Initiative: CCAC” (2012)

4) T. Nagashima, T. Ohara, K. Sudo, and H. Akimoto, The relative importance of various source regions on East Asian surface ozone, Atmos. Chem. Phys., 10, 11305–11322, (2010)
# Research on International Framework toward Promotion of Air Pollution Measures and Co-benefit Approach

Principal Investigator: Katsunori SUZUKI

Institution: Kanazawa University

Kakuma-machi, Kanazawa-shi, Ishikawa 920-1192,

Japan

Tel: +81-76-234-6899 / Fax: +81-76-234-6899

E-mail: suzukik@staff.kanazawa-u.ac.jp

Cooperated by: Institute for Global Environmental Studies (IGES), Asia Center for Air Pollution Research (ACAP), Tokyo Institute of Technology, Tohoku University

## [Abstract]

Key Words: Transboundary air pollution, Regional framework on air pollution, Epistemic community of scientist, Asia Science Panel on Air and Climate (ASPAC), Environmental impacts of air pollution, Co-benefits approach, Short-lived climate pollutants (SLCP)

This research aims to review current regional/sub-regional air pollution frameworks on air pollution in East Asia and develop appropriate options to strengthen regional cooperation. It also aims to analyze potential impacts of air pollution, especially ozone and PM, on human health and agricultural crops, assess the potential effectiveness of a co-benefits approach and consider Asian implications of mitigation measures for short-lived climate pollutants (SLCP).

Impacts of ozone on human health and agricultural products, and impacts of PM on human health were analyzed using quantitative models for atmospheric concentrations in 2000, 2005 and 2020 based on three emission scenarios for 2020. The results showed significant impacts and economic losses caused by air pollution, which justify the need to take mitigation actions.

Economic analyses of co-benefits of air pollution control and GHG mitigation measures using the Asia MERGE Model demonstrated that air pollution benefits should be considered to justify mitigation actions, especially in China.

For ozone reduction, the research demonstrated that NOx/VOC reduction actions are more important in Asia, compared to Europe and North America where methane reduction is considered more important. In order to prevent damage by ozone at the ground level, reduction of NOx/VOC is much more effective than methane, while methane reduction is more effective to reduce radiative forcing. Simultaneous reduction of both
NOx/VOC and methane is therefore recommended in East Asia.

There are various regional/sub-regional initiatives related to air pollution problems in East Asia, but none of them could adequately respond to emerging issues, such as the need for a hemispheric approach to transboundary air pollution, growing importance of the linkage between air pollution and climate change, the need to streamline duplicating initiatives, and the need for an effective cooperative framework to address PM and ozone. Based on the review, the research identified major factors to be considered to strengthen regional cooperation and outlined possible options.

Due to a lack of common understanding of air pollution problems in the region, the most important first step to effectively promote regional cooperation on air is to create an epistemic community of Asian scientists. It is proposed to establish an Asia Science Panel on Air and Climate (ASPAC), and specific options for its major functions and components were developed. As a first step, it is proposed to convene an Ad-hoc High-level Scientists Meeting on Air Pollution in Asia, to be composed of eminent Asian scientists.
# Proposal for Asia Science Panel for Air and Climate (ASPAC)

### 1. OBJECTIVE

Accompanied with rapid economic growth, emissions of air pollutants e.g. $ NO_{x} $ and climate pollutants e.g. $ CO_{2} $ in East Asia (covering Northeast and Southeast Asia) have already exceeded each of those in European and North American continents. This situation apparently brings about serious urban and regional air pollution in this area, and also prompted international concerns from the point of hemispherical air pollution and global climate change. The concerned air pollutants would consist of air toxicants such as photochemical oxidants and particulate matter ( $ PM_{2.5} $ ), biogeochemically active species such as acidic and nitrogenous compounds, and short-lived climate pollutants (SLCPs) such as black carbon and tropospheric ozone. Those atmospheric species are inter-wound each other through common precursors, chemical and physical transformations and depositions.

Since the overall issues are very complicated, and there is a strong need to consider such issues from a scientific viewpoint and to give clear message and make suggestions from scientific community to policy makers to take actions. However, the situation in Asia is different from Europe and North America where regional cooperation on air pollution mitigation based on scientific knowledge has been well developed under the Convention on Long-range Transboundary Air Pollution (CLRTAP). Asia does not have an adequate scheme under which a framework for scientific discussion for international atmospheric management to be conveyed into policy makers can readily be formed. Meanwhile, it is now very important to input the views of Asian scientists to those of European and North American scientists, since sometimes their understanding on Asian situation might be different from views of Asian scientists.

On the basis of the above considerations, Asia Science Panel on Air and Climate (ASPAC) is proposed aiming to synthesize scientific knowledge on air pollution and its relation to climate in the Asian region to reach a common understanding among scientists and policy makers, and to develop an international initiative for an integrated approach to air pollution and climate change mitigation in the context of sustainable development.

### 2. CONTENTS

ASPAC would be constituted of scientists related to air pollution and relevant climate research. It would review the existing latest scientific knowledge periodically, and prepare reports based on a consensus of research scientists on the issues of air pollution and its relation to climate change in the Asian region.

While the concept of ASPAC is still in the discussion stage, preliminary discussions suggested the following issues to be considered:
(i) What should be the major functions?

ASPAC may review newly emerging scientific findings on air pollution, its linkage with climate and their implication to Asia for consensus building among scientists. The scope of ASPAC could cover the field of: (1) atmospheric science, (2) impact studies, and (3) clean air technology and mitigation measures. In order to make the input to policy makers more effective, inclusion of economic and social considerations may be necessary.

The broader activities such as capacity building of scientists may strengthen ASPAC.

(ii) What should be the geographical scope?

Northeast, Southeast and South Asia

(iii) How ASPAC members should be selected?

National nomination and selection by science advisory body?

(iv) What should be the organizational structure?

It could be established under UNEP so as to be internationally recognized by policy makers and preferably supported by CAA and other relevant bodies, Future Earth/ICSU to be well recognized by other stakeholders and science community, respectively. Since there are several international activities under UNEP/ROAP, e.g. ABC-Asia, EANET, CCAC, Joint Forum, etc. the link with those activities will be explored.

(v) What should by funding sources?

Voluntary contribution by countries and/or any international bodies?
# Ad-hoc High-level Scientists Meeting on Air Pollution and Climate in Asia (Proposal)

### 1. Scope

An ad hoc High-level Scientists Meeting for Air Pollution and Climate in Asia is proposed for the purpose of discussing importance of Asian air pollution in regional and global perspectives, and the best way of synthesizing scientific knowledge on relevant issues reflecting the views of Asian scientists and conveying them to policy makers inside and outside the region.

The participants of theadhoc high-level scientists meeting may consist of Nobel Prize Laureates, eminent scientists in this field in Asia and some from outside regions. Policy makers and other scientists in Asia will be invited as observers. The meeting will be convened by UNEP with support from other stakeholders such as relevant Asian initiatives like CAA and possibly ICSU.

### 2. Possible candidate members

Possible candidate members of this ad-hoc Scientists Meeting might include:

Yuan Tee Lee 1986 Nobel Prize Laureate in Chemistry, Academia Sinica

President of ICSU (International Council of Science Union)

Jiming Hao School of Environment, Tsinghua University, Academician, The Chinese Academy of Engineering

Xiaoyan Tang College of Environmental Science and Engineering, Peking University Academician, The Chinese Academy of Engineering

Shaw C. Liu Research Center for Environmental Changes, Academia Sinica

Academician, Academia Sinica

Young-Joon Kim Gwangju Institute of Science and Technology (GIST), President

Soon-Chang Yoon Seoul National University, School of Earth and Environmental Sciences

Hajime Akimoto Asia Center for Air Pollution Research, Director General

Teruyuki Nakajima Atmospheric and Ocean Research Institute, The University of Tokyo

Ibrahim Rehman Social Transformation Division, Director, The Energy and Resources Institute, TERI

J. Srinivasan Divecha Center for Climate Change, Chairman, Indian Institute of Science, Bangalore

Marcus Amann International Institute for Applied System Analysis (IIASA), Program Leader

Greg Carmichael Iowa State University, Associate Dean

Invited observers: policy makers, other scientists
課題名 5C-1252 妊娠中及び胎児期における内分泌攪乱物質が性分化

および性腺機能に及ぼす影響について

課題代表者名 野々村 克也 （北海道大学 名誉教授）

研究实施期间 平成24～26年度

累計予算額 153,990千円（うち26年度52,200千円）予算額は、間接経費を含む。

本研究のキーワード

環境科学物質、胎児期曝露、性分化、性腺機能、性ホルモン、2D/4D、

性役割行動、一塩基多型(SNP)、ゲノムワイド関連研究(GWAS)、

遺伝・環境交互作用

研究体制

（１）陰茎長・肛門性器間距離・精巣体積および第２指(2D)/第４指(4D)比と環境化学物質の関係（北海道大学大学院　医学研究科）

（２）環境化学物質が胎内ホルモン環境および性向行動に及ぼす影響

(北海道大学 環境健康科学研究教育センター)

（３）異物・ステロイド代謝酵素やホルモンレセプター等の遺伝子多型によるリスク発現の感受性の差とメチル化との交互作用（国立保健医療科学院）

## 研究概要

### 1. はじめに（研究背景等）

機能に関連する異常（停留精巣や尿道下裂など）の発生数は欧米で増加傾向にある。これらの原因として、胎児期の環境化学物質曝露や性ステロイド産生などの胎内でのホルモン環境の変化が、出生後の発育や男児での精巣形成不全症候群や女児での遊び方や思春期発来の早期化など、性分化に影響を与えていると考えられている。さらに、その影響には一塩基多型などの遺伝子型による化学物質曝露修飾も関連していると考えられている。このように、妊娠中および胎児期の環境化学物質曝露がこれらの背景に影響していると考えられており、実際に環境化学物質曝露による性ホルモンや性腺機能への影響については、動物を用

胎児期の環境化学物質曝露が性分化および性腺機能に与える影響とその機序について明らかにする

図1 本研究の流れ

いた実験データは数多く報告されている。しかし、現状ではヒトのデータは散見されるのみである $ ^{[1,2]} $ 。

本研究は、母への環境化学物質の濃度を曝露因子とし、化学物質濃度と胎内のホルモン環境、胎児の性分化および性腺機能との関連について検討を行った（図1）。

## 2 ．研究開発目的

北海道大学では全国に先駆け、環境化学物質が次世代に与える影響について明らかにしてきた（北海道スタディ）。また、平成22年度より環境省「子どもの健康と環境に関する全国調査（エコチル調査）」では、北海道全域で8250人の妊婦を調査対象として子どもが13歳になるまでの出生コホート調査を展開している。本研究では、すでに先行している北海道スタディのデータを解析し、その成果をエコチル調査のデータ解析に活用していくことができる。

このように、北海道スタディおよびエコチル調査で得られた検体および身体所見のデータを用いて、母が曝露した血液中のPCB・ダイオキシン類や有機フッ素化合物PFOS・PFOA、フタル酸エステルなどの環境化学物質が胎児に与える影響について検討を行い、妊娠中および胎児期の環境化学物質が性分化および性腺機能におよぼす影響と機序について科学的に明らかにすることを目的とする。将来的には、今回の研究をもとに、ライフコース・アプローチで対象となった児を思春期まで長期に経過観察し、外性器の状態および性腺機能における胎生期の環境化学物質の曝露が与える長期間の影響につ
## 3 ．研究開発の方法

## （１）陰茎長・肛門性器間距離・精巣体積および第2指(2D)/第4指(4D)比と環境化学物質の関係

## 1 ）エコチル追加調査

環境省「子どもの健康と環境に関する全国調査（エコチル調査）」の本調査に加えて、札幌市内の12施設で本研究は追加調査として行った。エコチル追加調査への参加に同意をいただいた12施設に通院中で札幌市在住のエコチル本調査への参加者に対して、妊娠中期にエコチル追加調査の説明文書を発送した。対面説明の後にエコチル追加調査への同意が得られた妊娠を対象に、出産時に臍帯血の採取、入院中の母体血の採取（各3ml）、さらに出生児の肛門性器間距離、第2指、第4指の長さ、男児の陰茎長、精巣体積の測定を行った。

## 2 ）北海道スタディ

小規模コホートは、北海道札幌市の一座科病院を受診した妊婦とその児を対象に出生前向きコホート研究「環境と子どもの健康に関する北海道スタディ」を実施した。すでに環境化学物質濃度の測定が終了している小規模コホートに登録されており、追跡可能な349人を対象に2D/4D比の測定を行うことの説明文を郵送して、同意書および両手のコピーの返送を持って研究への参加とした。返送された両手のコピーより2D/4D比の測定を行い、母体血中の環境化学物の濃度と臍帯血中のホルモン濃度との関連について検討を行った。

環境化学物質は、妊娠後期の母体血で426名のポリ塩化ビフェニル（PCB）・ダイオキシン類を高分解能ガスクロマトグラフィー・高分解能マススベクロトメーター（HRGC/HRMS）法（福岡県保健環境研究所）、447名のパーフルオロオクタンスルホン酸・ペルフルオロオクタン酸（PFOS・PFOA）を液体クロマトグラフィー・タンデム型質量分析（LC/MS/MS）法（星薬科大学）、および487名のDEHP代謝物Mono-(2-ethylhexyl) phthalate (MEHP)をガスクロマトグラフ質量分析（GC/MS）法（名古屋大学）で測定済みのデータを用いた。

大規模コホートは、北海道内全域の産科30 施設で2003年に開始し、2013年3月までに妊婦20,823人が登録した大規模出生コホート「環境と子どもの健康に関する北海道スタディ」である。大規模コホートでは、調査段階で7歳となる5044人を対象に同様に北海道スタディの詳細調査として2D/4D比の測定を行うことの説明文を郵送して、返送された両手のコピーより2D/4D比の測定を行い、臍帯血中性ホルモン濃度および性役割行動（J-PSAI）との関連について検討を行った。

## （２）環境化学物質が胎内ホルモン環境および性向行動に及ぼす影響

北海道スタディ小規模コホートでは、514人のうち、保存してあった全臍帯血295検体を用いて、臍帯血中の性ホルモン濃度の測定を行い、母の環境化学物質曝露との関連、について解析した。性ステロイドホルモンであるテストステロン（T）、エストラジオール(E2)、プロゲステロン（P4）、デヒドロエピアンドロステロン（DHEA）、アンドロステネジオン（A-dione）をLC-MS/MS法で、黄体形成ホルモン（LH）、卵胞刺激ホルモン（FSH）、性ホルモン結合グロブリン（SHBG）、およびプロラクチン(PRL)を免疫放射定量測定(IRMA)法で、InhibinBをELISA法で、insulin-like factor 3（INSL3）をEIA法で測定した。また、7歳で実施済みのJ-PSAIとの関連についても解析した。

大規模コホートでは、全参加者20,823人の中で2013年までに8歳になった（2003年～2005年生まれ）7632人のうち臍帯血検体を保有、かつ妊娠中のベースライン調査票および出産時の新生児個票がそろう単胎、かつ2D/4Dのデータがそろう男児608人および女児583人を対象とした。このうち、サブコホートとして抽出した男児114人および女児93人の全員、加えて無作為抽出した男児336人および女児357人、最終的に男児女児それぞれ450人を性ホルモン測定対象者とした。保存してあった臍帯血を用いて900名のE2、T、P4を測定した。加えて、男児のみ高感度LH、高感度FSH、Inhibin B、およびINSL3を測定した。測定は全てあすか製薬メディカル(株)で実施した。8歳で実施済みのJ-PSAIとの関連についても解析した。

## （３）異物・ステロイド代謝酵素やホルモンレセプター等の遺伝子多型によるリスク発現の感受性の差とメチル化との交互作用

北海道スタディから得られた261名の臍帯血よりQIAamp DNA Blood Mini kit (Qiagen)を用いてゲノムDNAを抽出した。これらのゲノムDNA上の多型を解析するため、まず、異物・ステロイド代謝酵素遺伝子等の一塩基多型（SNP）に着目した。ジェノタイピングには、BioMark（Fluidigm社）を用い、Fluidigm 48.48 Dynamic Array biochip（Fluidigm社）上で行った。解析する多型は、最近のGWASの結
果等から、T、E2及びSHBGとの関連が報告されたもののうち、日本人における出現頻度等をSNPデータベースで検索、確認の上、選択した46SNPに加え、出生時体重・BMI等の発育・肥満関連46SNPを追加した92SNPを検討した。ジェノタイピングの結果は、Fluidigm SNP Genotyping Analysis ソフトウェアを用いて解析した。ジェノタイピングの結果と、ジェノタイピングの結果と、子宮内胎児発育遅延（SGA：出生時体重＜10パーセンタイル）、低出生体重（出生時体重＜2,500g）及び早産（在胎週数＜37週）との関連を、母親の出産時年齢、出産歴、妊娠中の喫煙及び飲酒歴、児の性別で調整した多重ロジスティック回帰分析により解析した。また、出生時体重、身長、頭囲、胸囲、在胎週数、BMI及びPonderal Index（PI）との関連を母親の出産時年齢、出産歴、妊娠中の喫煙及び飲酒歴、児の性別で調整した直線回帰モデルにより解析した。次に、ジェノタイピングの結果と、臍帯血中のT、E2、T・E2比（T/E2）、LH、FSH、P4、SHBG、PRL、Inh-B及びINSL3の濃度との関連を検討した。まず、遺伝子型（Genotype model）とホルモン濃度との関連をKruskal Wallis検定により解析した。Kruskal Wallis検定で有意差がみられたSNPにおいては、各遺伝子型間の濃度差を多重比較（Bonferroni補正Mann-Whitney検定）により検定した。さらに、優性遺伝モデル（dominant model）または劣性遺伝モデル（recessive model）を用いて、ホルモン濃度との関連をMann-Whitney検定により解析した。また、遺伝子型と2D/4D比との関連は、優性遺伝モデルまたは劣性遺伝モデルを用いて、重回帰モデルにより解析した。環境化学物質濃度に関しては、遺伝子型との関連をKruskal Wallis検定により、MEHP濃度に関しては、底10の常用対数変換を行い、重回帰モデルにより解析した。

## 4 ．結果及び考察

## （１）陰茎長・肛門性器間距離・精巣体積および第２指(2D)/第４指(4D)比と環境化学物質の関係 １）エコチル追加調査

パンフレットを送付および電話連絡を行った後に、対面説明を行うことができたのは1622例で、そのうち1601例でエコチル追加調査への参加の同意が得られた（同意率：98.7%）。脱落が51例あり、最終的に1550例で出生児の身体測定（肛門性器間距離、第2指・第4指の長さ、陰茎長、精巣体積）が行われた。母体血および臍帯血の採取は、それぞれ1505例、431例で行うことができた。

2D/4Dは女児に比べ男児で有意に低い値であった。肛門性器間距離(AGD)は、女児に比べて男児で有意に長かった。陰茎長の平均は25.4 mmであり、多くの男児は20－30 mmの間に分布していた。精巣体積については、約8割で過去の報告通り0.7-1.5 mlの間に分布していた。その一方で、0.7ml未満や精巣が触知できない男児も一部に見られたことから、今後の経過観察が必要であると考えられた。

図 2 2D/4D, AGD

図 3 陰茎長、精巣体積

本研究では同意率が高率であり、新生児の身体測定という貴重なデータを得ることができた。この身体測定のデータをもとに、今後エコチル本調査で得られる環境化学物質や生活環境などのデータから、環境因子が身体の変化に与える影響について今後明らかにしていきたい。

## 2 ）北海道スタディ

小規模コホートで得られた結果として、2D/4Dと環境化学物質曝露との関係は、Total PCBs、Total Dioxin、PFOS、PFOA、MEHPなどの環境化学物質について検討したが、2D/4Dの全体、男女別の値と母の環境化学物質曝露との間に有意な相関があるものは認められなかった。母における低濃度の環境化学物質の曝露では、児の身体的変化までは影響を及ぼさないものと考えられた。2D/4Dと胎内ホルモ
ン環境の関係については、臍帯血中のINSL3濃度と2D/4D比有意に関連しており、胎生期のLeydig細胞の機能低下が示唆されるINSL3濃度の低下が診られた症例で、2D/4Dが有意に高く、女児に近い表現型を示した。また、胎生期の副腎由来のアンドロゲンも関連していることも明らかとなった。

大規模コホートで得られた結果として、2D/4Dと学童期のJ-PSAIについては、Composite scoreでは、女児では、2D/4DとJ-PSAIの間に有意な相関は認められなかったが、男児では2D/4DとJ-PSAIの間に有意な負の相関を認めた。一方、feminine scoreでは、男児、女児ともに2D/4Dとの間に有意な相関を認めなかったが、masculine scoreでは、男児、女児ともに2D/4Dとの間に有意な関連を認めた。一方、兄弟、姉妹の有無についても、学童期のJ-PSAIに影響を与えていた。アンドロゲンへの曝露が強い（2D/4Dが低い）児では、男女ともにmasculine scoreは高くなっていた。また、Composite scoreでも、男児のみではあるがアンドロゲンへの曝露が強い児で、より高い値となっていた（男性化が強い）。このように、胎生期のアンドロゲンへの曝露が、その後の脳の性分化に影響を与えていると考えられた。学童期におけるJ-PSAIと臍帯血中の性ホルモン濃度については、男児では、J-PSAIと臍帯血中の性ホルモン濃度の間に有意な関連を認めることができなかったが、女児においては、composite scoreではPとの間に負の関連を、feminine scoreでは、エストラジオール(E)、プロゲステロン(P)との間に正の関連を認め、臍帯血中のE、Pが性役割行動における女性化に関連していることが示唆された。胎生期の男性ホルモンへの曝露が、性役割行動における男性化に関与していることが報告されているが、今回の結果は、臍帯血中の男性ホルモン濃度が必ずしも性分化に関わる時期のアンドロゲンへの曝露を反映していないためと考えられた。一方、今回の結果は女性化にE、P関与していることを示唆しており、新たな知見となりうると考えられた。更なる検討が必要である。

## （２）環境化学物質が胎内ホルモン環境および性向行動に及ぼす影響

## 環境化学物質曝露による性ホルモンへの影響

男児のホルモン濃度は女児よりもT、LH、FSH、Inhibin B、INSL3、T/E2、およびT/SHBGが有意に高かった。一方、DHEAは女児の方が有意に濃度が高かった。

PCB・ダイオキシン類：連続数のモデルでは男児でPCB濃度が高いほどとT/E2が有意に低かった。また、ダイオキシン類濃度が高いほどDHEA濃度は有意に高く、SHBGおよびPRL濃度が有意に低かった。ダイオキシン類濃度が高いほどT/E2の低下傾向が認められた（p=0.055）。男児の四分位のモデルでは、PCB濃度の第1四分位から第4四分位にかけてT/E2比が低下する傾向が認められた。ダイオキシン類濃度の第1四分位から第4四分位にかけて、T/E2比、SHBG、PRLが有意に低下した（図3）。一方の女児では、PCB/ダイオキシン類濃度といずれの性ホルモンとの関連も見られなかった。

図３ ダイオキシン類（TEQ）濃度と性ホルモン(男児)

有機フッ素化合物：PFOS濃度が高いと、男児ではT/E2、LH、Inhibin Bは有意に下がり、一方女児ではP4およびPRL濃度が有意に低下した。PFOA濃度が高いと、男児ではP4およびInhibin Bが高かった

図 4 PFOS濃度と性ホルモン(男児)

図 5 PFOS濃度と性ホルモン(女児)
図 6 PFOA濃度と性ホルモン(男児)

が、女児では有意な関連はなかった。次いで、PFOS/PFOAを四分位にすると男児では、PFOS濃度が高いほどT/E2比が有意に小さくなった。また、Inhibin Bは第1四分位と比較して第3四分位、第4四分位で有意に低く、p-for trendも有意だった（図4）。女児では、P4、PRLともに第1四分位と比較して第4四分位が有意に低く、p-for trendも有意であった（図5）。一方PFOAは、男児で第1四分位と比較して第3および第4四分位のInhibin Bレベルが有意に高く、p-for trendも有意だった（図6）。

フタル酸エステル：全体では、連続数のモデルではMEHP濃度が高いと、T/E2、P4、A-dione、InhibinBは有意に下がり、DEHPは有意に上昇した。MEHPと性に交互作用はなかった。次いで、MEHPを四分位とすると、T/E2は第1四分位と比較して第2四分位は有意に高く、第4四分位は有意に低かった。P-for trendも有意だった。P4は第1四分位と比較して第4四分位が有意に低く、p-for trendも有意であった。Inhibin Bは、第1四分位と比較して第3および第4四分位が有意に低く、p-for trendおよび男女交互作用も有意だった。一方、男女別でみると、連続数のモデルでは男児でMEHP濃度が高いとT/E2、P4、Inhibin B、およびINSL3濃度が有意に低く、DHEA濃度は有意に高かった。四分位のモデルでは、MEHP濃度の第1四分位と比較して、P4、InhibinB、INSL3はいずれも第4四分位のホルモン濃度が有意に低く、p-for trendも有意だった（図7）。一方の女児では、MEHP濃度といずれの性ホルモンとの関連も見られなかった。

図 7 MEHP濃度と性ホルモン(男児)

## 環境化学物質曝露によるJ-PSAIへの影響

交絡要因を調整した重回帰分析において、男児(n=54)のみで母体血中ダイオキシン類が高いほどJ-PSAI Scaleが低下する、つまり女児傾向が認められた（B(95%CI)=-14(-178,-0.68)）。男児傾向と女児傾向の得点別の解析では、母体血中ダイオキシン類濃度が高いほど男児傾向得点が低下する傾向が認められた（B(95%CI)=-13.9(-28.8,1.06)）が、女児傾向得点への影響は少なく有意ではなかった（B(95%CI)=-0.89(-11.9,10.1)）。一方、PFOS、PFOA、MEHPは本研究ではJ-PSAIと有意な関連が認められなかった。また、男児傾向得点および女児傾向得点とも有意な関連は認められなかった。

本研究の限界としてサンプル数が男児54人、女児48人と少なかったため、統計学的に有意な結果が得られなかった可能性がある。より大きなサンプルサイズでの検討が必要である。

## 大規模コホート胎内ホルモン環境と母児の基本的属性との関連

男女別に臍帯血中の性ホルモンと母児の属性との関連を検討したところ、母親の年齢が高いほど男児でE2,P4は低下しT/Eは増加し、女児でE2が低下した。母親の非妊娠時体重が増加するほど女児でP4が低下した。母親が初産では、男児でE2,T,P4が高く、T/E2比が低下し、女児でE2,P4が増加し、T/E2