Silviase/jgov_v1.4_full_ann huggingface dataset:
比が低下した。妊娠初期に飲酒をしていた母親では、女児のT/E2比が飲酒をしていない母の児よりも低かった。母親の妊娠初期の喫煙とは関連が認められなかった。母親の学歴では、男児と性ホルモンに関連がなく、女児で学歴とE2、T/E2比の分布に差が見られた。世帯年収では男児でINLS3濃度に分布の差が認められたが、女児では性ホルモンと関連がなかった。児の在胎週数が増加するほど、男児でP4が増加し、LH,FSHが低下した。出生体重が増加するほど、男児でT,LH,インヒビンBが低下し、女児でP4が低下した。

## （３）異物・ステロイド代謝酵素やホルモンレセプター等の遺伝子多型によるリスク発現の感受性の差とメチル化との交互作用

優性遺伝モデル（例えば、rs402675におけるAA+AT型対TT型）により、出生時体格指標と血清性ホルモン濃度と関連のある一塩基多型との関連を検討した。rs402675（CNTN6遺伝子近傍）及びrs293428（UGT2B15遺伝子近傍）において平均出生時体重の低下、rs10454142（LHCGR遺伝子近傍）、rs2676531（HSD17B1遺伝子）、rs402675及びrs1641537（SHBG遺伝子近傍）において平均BMIの低下、rs10454142、rs2676531及びrs1641537において平均PIの低下がみられた。これらのSNPのうち、rs402675では平均出生時胸囲の低下、rs293428では平均出生時頭囲と出生時胸囲の低下も併せてみられた。

環境化学物質とホルモン濃度にともに有意な関連がみられたのが、ZBTB10遺伝子近傍のrs440837である。ZBTB10はzinc finger and BTB domain containing 10という性ホルモンの調節に関与するDNA結合タンパク質で、ZBTB10遺伝子近傍のrs440837を優性遺伝モデルで遺伝子型をAA型とAG/GG型に分けて検討すると、男女ともAG/GG型では、フタル酸エステルの代謝物MEHP濃度が有意に高く、SHBG、PRL及びInh-B濃度は有意に低く、男児でのみE2濃度が有意に高かった。常用対数変換した重回帰分析によっても、ZBTB10遺伝子近傍rs440837 AG/GG遺伝子型では、AA遺伝子型より、男女ともMEHP濃度が有意に高く、男児でInh-Bの分泌が抑制され、E2が上昇することが示唆された。また、AG/GG型の男児では、MEHP濃度は高いほうにシフトし、高濃度群でInhibin Bの分泌が抑制されることが示唆された（図8）。

PFOS濃度、Tdioxin TEQは、全員でZBTB10遺伝子近傍rs440837の遺伝子型と関連がみられ（p<0.01）、PFOA濃度は、男児でのみATF3遺伝子rs10475、FTO遺伝子rs1421084の遺伝子型と関連がみられ

図 8 MEHP濃度（4 分位）及びZBTB10 rs440837（AG/GG, AA）で層別化したE2, PRL及びInhibin B 濃度
図9 環境化学物質曝露、臍帯血ホルモン濃度及び発育指標と関連のみられる遺伝要因

（p<0.01）、MEHP濃度は、全員、男児、女児いずれもrs440837の遺伝子型と関連がみられ（p<0.001）、全員でTDGF3遺伝子近傍rs1573036の遺伝子型と関連がみられ（p<0.01）、TPCB（女児）、TNPCB TEG（全員、女児）及びTMPCB TEQ（女児）は、GNPDA2遺伝子近傍rs10938397の遺伝子型と関連がみられ（p<0.01）、TPCDD TEG、TPCDF TEQ、Tdioxin TEQは、全員で8q24領域rs1456310の遺伝子型と関連がみられ（p<0.01）（図9）。

### 5. 本研究により得られた主な成果

## （1） 科学的意義

胎児期と生後の両方の環境要因を詳細に分析した研究は国際的にも非常に少ない。本研究は世界的に見て最も精度の高い曝露評価により妊娠中や生後のPCB・ダイオキシン類、PFOS/PFOAなどの有機フッ素系化合物、フタル酸エステル類など環境化学物質曝露の測定を行うので、WHOなどで内分泌かく乱化学物質に対して最も感受性が高く重要なエンドポイントとされている胎内曝露や生後の環境による次世代影響、特に性腺機能についてリスク評価ができる。

PCB・ダイオキシン類曝露による性ホルモンへの影響は、中毒事故や油症患者による高濃度曝露、あるいは工業地域における比較的高濃度曝露の集団における報告はあったが、本研究では比較的曝露濃度が低い一般集団でも、胎児期曝露による出生直後および学童期の影響を示唆した。胎児期曝露による有機フッ素化合物PFC曝露による性ホルモンへの影響に関する報告は本研究が初めてである。胎児期のフタル酸エステルDEHP曝露は、動物実験で精巣のLeydig細胞およびSertoli細胞への生殖毒性を示すことが報告されていたが、ヒトでの胎児期曝露においても動物と同じく児の性腺機能、特に男児の精巣への影響が示唆された。

## （２）環境政策への貢献

## ＜行政が既に活用した成果＞

特に記載すべき事項はない。

## ＜行政が活用することが見込まれる成果＞

本研究は、環境省が主導しているエコチル調査の基本課題‘胎児から小児期にかけての化学物質曝露が、子どもの健康に大きな影響を与えているのではないか？’という中心仮説の解決に大きく貢献するものと考える。さらには、本研究は日本の妊婦や児のデータに基づく科学的な成果を提供できるものと考える。

また、第1回国際化学物質会議（ICCM，2006）では「国際的な化学物質管理のための戦略的アプローチ」が策定されたが、第2回ICCM(2009)に新規の課題として追加された「PFCの管理と安全な代替物質への移行」、第3回ICCM(2012)に追加された「内分泌かく乱物質の理解促進」への対策に直結する。

わが国では、既にPCBやダイオキシン類については対策がとられて曝露レベルは低下しているが生体内には長期間残存している。有機フッ素化合物のうち、胎児期のPFOS曝露による性腺機能への影響が見られた。PFOSやPFOAの代替物質として多くの有機フッ素化合物が生産されており、日本では
PFNAやPFDAの曝露濃度が増加している。フタル酸エステルDEHPは、油性の食品が接触する包装容器や乳幼児のおもちゃ、医療器具について規制があるが、その他の内装材や生活用品への規制はない。このように、物質によってこれまでの規制の状況、あるは現在の生産量や使用量は異なるものの、PCBやダイオキシン類、有機フッ素化合物類、フタル酸エステルのいずれとも胎児期曝露が児の性腺機能への影響を示唆したことから、今後はこれらの代替物質も含めてリスク評価を継続し、次世代影響へ対策を検討する必要性がある事を示した。

### 6. 研究成果の主な発表状況

## （１）主な誌上発表

## く査読付き論文>

1) R. Kishi, S. Kobayashi, T. Ikeno, A. Araki, C. Miyashita, S. Itoh, S. Sasaki, E. Okada, S. Kobayashi, I. Kashino, K. Itoh, S. Nakajima: The members of the Hokkaido Study on Environment and Children's Health: Environ Health Prev Med, 18, 6 (vol, issue), 429-450 (2013)

“Ten Years of Progress in the Hokkaido Birth Cohort Study on Environment and Children’s Health: Cohort Profile – Updated 2013.”

2) S. Kobayashi, F. Sata, S. Sasaki, S. Ban, C. Miyashita, E. Okada, M. Limpar, E. Yoshioka, J. Kajiwara, T. Todaka, Y. Saijo, R. Kishi: Toxicol Lett, 219, 3 (vol, issue), 269-278 (2013)

“Genetic association of aromatic hydrocarbon receptor (AHR) and cytochrome P450, family 1, subfamily A, polypeptide 1 (CYP1A1) polymorphisms with dioxin blood concentrations among pregnant Japanese women”

3) A. Araki, T. Mitsui, C. Miyashita, T. Nakajima, H. Naito, S. Ito, S. Sasaki, K. Cho, T. Ikeno, K. Nonomura, R. Kishi: PLOS ONE, 9, 10 (vol, issue), e109039 (2014)

“Association between maternal exposure to di(2-ethylhexyl) phthalate and reproductive hormone levels in fetal blood”

4) T. Mitsui, A. Imai., S. Sato, A. Araki, C. Miyashita, T. Kitta, K. Moriya, K. Cho, K. Morioka, R. Kishi, K. Nonomura: European Urology 13, 1 (vol, issue), e437 (2014)

“Effect of maternal exposure to endocrine-disrupting chemicals on sex hormone levels in cord blood and ratio of the second and fourth digit length in school children”

5) T. Mitsui, A. Araki, A. Imai, S. Sato, C. Miyashita, S. Ito, S. Sasaki, T. Kitta, K. Moriya, K. Cho, K. Morioka, R. Kishi, K. Nonomura: PLOS One, 10, 3 (vol, issue), e0120636 (2015)

“Effects of prenatal Leydig cell function on the ratio of the second to fourth digit lengths in school-aged children.”

## く査読付論文に準ずる成果発表>

1）佐田文宏：小児保健研究，73，6(巻，号）769-775（2014）「DOHaDの視点に立った生涯にわたるヘルスケア」

2）佐田文宏：日本周産期・新生児医学会雑誌，印刷中「出生ゲノムコホートの現状と展望」

3) 佐田文宏：最新医学，印刷中

「先制医療実現のための疫学研究：DOHaD学説に基づくライフコース疫学」

## （２）主な口頭発表（学会等）

1) 樫野いく子、岡田恵美子、松浦英幸、山本潤、佐々木成子、宮下ちひろ、松村徹、岸玲子：第21回環境化学討論会（松山,2012.7.11-13）「妊娠の血中PFOS/PFOA及び類縁化合物の定量法の確立」

2) 岡田恵美子、樫野いく子、松浦英幸、山本潤、佐々木成子、宮下ちひろ、松村徹、岸玲子：第21回環境化学討論会.（松山，2012.7.11-13）「北海道における妊婦の血中PFOS/PFOAおよび類縁化合物濃度」

3) Araki A, Miyashita C, Ikeno T, Sasaki S, Okada E, Ait Bamai Y, Tajima S, Cong S, Ukawa S, Kawai T, Tsuboi T, Kishi R. Birth cohort Consortium of Asia, (Taipei, Taiwan, 2012). "Research plan for 7-year old survey of the Hokkaido Study."

4) Okada E, Kashino I, Matsuura H, Yamamoto J, Sasaki S, Miyashita C, Matsuura T, Kishi R. Birth cohort Consortium of Asia, (Taipei, Taiwan, 2012). "Levels of perfluorinated chemicals in plasma samples of pregnant women from 2003-2011 in Hokkaido Japan."
Katsuya Nonomura(Boston, MA, USA, 2014.10.26-29) Perinatal PFAAs Exposure Cause Various Health Outcomes on Offspring Including Effects on Reproductive and Thyroid Hormones: The Hokkaido Study. PPTOX IV.

21) 三井貴彦、荒木敦子、宮下ちひろ、今井紋子、佐藤早基子、橘田岳也、守屋仁彦、長和俊、森岡圭太、伊藤佐智子、岸玲子、野々村克也:第102回日本泌尿器科学会（神戸、2014.4）「母体への環境化学物質曝露と胎児期ホルモン環境が身体的变化に与える影響：第2指／第4指比との関連性について」

22) Takahiko Mitsui, Ayako Imai, Sakiko Sato, Atsuko Araki, Chihiro Miyashita, Takeya Kitta, Kimihiko Moriya, Kazutoshi Cho, Keita Morioka, Reiko Kishi, Katsuya Nonomura: 62th Annual meeting, Society of Pediatric Urology (Orlando, USA, 2014.5) Effect of maternal exposure to endocrine-disrupting chemicals on sex hormone levels in cord blood and ratio of the second and fourth digit length in school-age children

23) 三井貴彦、橘田岳也、守屋仁彦、篠原信雄、野々村克也:第23回日本小児泌尿器科学会（2014.7）「胎児期ホルモン環境が身体的变化に与える影響：第2指：第4指比との関連性について」

24) Takahiko Mitsui, Atsuko Araki, Sachiko Ito, Chihiro Miyashita, Takeya Kitta, Kimihiko Moriya, Kazutoshi Cho, Keita Morioka, Nobuo Shinohara, Reiko Kishi, Katsuya Nonomura: 30^{th} Annual meeting, European Urological Association (Madrid, 2015.3) [Effect of prenatal androgen exposure on behavioral sexual dimorphism in school-aged children]

25) Sata F, Eto A, Kanatani Y, Araki A, Mitsui T, Kishi R, Nonomura K. (Seattle, Washington, USA, August 24-28, 2014) Associations between fetal genetic polymorphisms and cord blood sex hormone and protein levels. 26th Annual International Society for Environmental Epidemiology Conference.

26) 佐田文宏（岡山，2014年5月25～27日）DOHaDと疫学，第84回日本衛生学会学術総会.

27) 佐田文宏(舞浜，2014年7月13～15日)出生ゲノムコホートの現状と展望，第50回日本周産期・新生児医学会学術集会.

28) 佐田文宏，江藤亜紀子，金谷泰宏，三井貴彦，荒木敦子，岸玲子，野々村克也 (和歌山，2015年3月26～28日) 第2指・第4指比（2D/4D）に影響を及ぼす遺伝要因の検討，第85回日本衛生学会学術総会.

### 7. 研究者略壓

課題代表者：野々村 克也

北海道大学医学部卒業、医学博士、現在、北海道大学 名誉教授

## 研究分担者

1）三井貴彥

北海道大学大学院医学研究科修了、博士（医学）、現在、北海道大学病院 助教

## 2 ）水上 尚典

自治医科大学大学院医学研究科修了、博士（医学）、现在、北海道大学医学研究科教授

3）長 和俊

北海道大学大学院医学研究科修了、博士（医学）、現在、北海道大学病院准教授

## 4 ) 岸 玲子

北海道大学大学院医学研究科修了、医学博士

現在、北海道大学環境健康科学研究教育センター 特任教授

## 5 ）荒木 敦子

北海道大学大学院医学研究科修了、博士（医学）

現在、北海道大学環境健康科学研究教育センター 准教授

## 6 ）宮下ちひろ

北海道大学大学院医学研究科修了、博士（医学）

現在、北海道大学環境健康科学研究教育センター 特任講師

## 7 ) 伊藤 佐智子

北海道大学大学院歯学研究科修了、博士（医学）

現在、北海道大学環境健康科学研究教育センター 特任助教

## 8 ）佐田文宏

京都大学医学部卒業、博士（医学）、現在、国立保健医療科學院生活環境研究部 客員研究員
## 5 C-1252 妊娠中及び胎児期における内分泌攪乱物質が性分化および性腺機能に及ぼす影響について

（１）陰茎長・肛門性器間距離・精巣体積および第2指(2D)/第4指(4D)比と環境化学物質の関係

北海道大学 医学研究科：

（腎泌尿器外科学）野々村克也、三井貴彦

(産科学／周産期センター) 水上尚典、長 和俊

（研究協力者）今井紋子、佐藤早基子、橘田岳也、守屋仁彦、森岡圭太

平成24～26年度累計予算額：94,490千円

（うち、平成26年度予算額：32,030千円）

## [要旨]

母の環境化学物質への曝露が児の性腺機能、次世代の性分化や第二次性徵の発来などへ影響を与える懸念が、近年世界的に高まっている。実際に環境化学物質曝露による性ホルモンや性腺機能への影響については、動物を用いた実験データは数多く報告されている。しかし、現状ではヒトのデータは散見されるのみである。さらに、次世代の児における身体の変化については、未知な部分がほとんどである。本研究では、エコチル調査において、1500人を超える児の出生時の陰茎長、精巣体積、肛門性器間距離(AGD)、第2指/第4指比（2D/4D）について計測し、出生時のデータを得ることができた。女児に比べて男児ではAGDは延長し、2D/4Dは低値であった。男児において、陰茎長とAGDの間に正の相関を認め、胎生期のアンドロゲンへの曝露が関与していると考えられた。本研究の結果をもとにエコチル調査で得られる環境的要因が出生時の身体的変化におよぼす影響を明らかにできること、本研究に参加した児の経過を見ることで、胎生期および出生後の環境要因がその後の身体的変化にどのような影響を与えるか、について明らかにすることができる。一方、エコチル調査に先行している北海道スタディでは、学童期となった児を対象に2D/4Dを同様に行ったところ、男児では女児に比べて低値であった。2D/4Dと妊娠中の母の血液中環境化学物質と出生時の臍帯血中性ホルモン濃度との関連を検討したところ、男児において2D/4DとINSL3およびDEHAとの間に負の相関を認め、2D/4DにはLeydig細胞の機能および副腎由来のアンドロゲンとの関連が示唆された。一方、2D/4Dを性役割行動との関連については、男女ともに男性化スコアの間に有意な負の関連を認め、さらに男児では総合スコアについても負の相関を認めた。この結果から、学童期の脳の男性化に胎生期のアンドロゲンへの曝露が関連していることが示唆された。環境化学物質の胎児期曝露が児の性腺機能への影響を示唆したことから（サブ2）、今後はこれらの代替物質も含めてリスク評価を継続し、次世代影響へ対策を検討する必要性がある。

[キーワード]

環境化学物質、性分化、性腺機能、性ホルモン、2D/4D
### 1. はじめに

性機能に関連する異常（停留精巣や尿道下裂など）の発生数は欧米で増加傾向にある $$ 1-3 $$ 。これらの原因として、胎児期の環境化学物質曝露や性ステロイド産生などの胎内でのホルモン環境の変化が、出生後の発育や男児での精巣形成不全症候群や女児での遊び方や思春期発来の早期化など、性分化に影響を与えていると考えられている。実際に、両親の環境化学物質である内分泌かく乱物質(EDCs: endocrine disrupting chemicals)への曝露によって、児の停留精巣や尿道下裂の発生頻度が増加するという報告も多数みられる $$ 4-10 $$ 。

尿道下裂については、妊娠中の両親の職業や食事からのEDCsへの曝露によって、生まれてくる男児の尿道下裂の発生頻度が増加することが報告されている $ ^{[11]} $ 。農薬については、1966年から2008年までの9つの論文のメタアナリシスによると、両親の職業における母の農薬への曝露によって、尿道下裂の発生頻度が1.36倍となり、父の農薬への曝露でも1.19倍になると報告されている $ ^{[12]} $ 。Carboneらは、1998年から2002年の間に生まれた男児において、農薬の使用頻度に応じて尿道下裂の発生頻度が増すことを報告した $ ^{[4]} $ 。Christensenらによると尿道下裂で手術を行った306人の男児と健康な男児を比べた場合、妊娠中に有機栽培の食物を選ばなかった母が、尿道下裂に男児を生む可能性は2.18倍であったことから、尿道下裂の発生に農薬が関係していることを示唆している $ ^{[5]} $ 。一方、その他の化学物質などへの曝露についても、Ormondらのcase-control studyによると、471人の手術記録から、母の職業におけるフタル酸への曝露で3.12倍、ヘヤースプレーへの曝露で2.39倍の尿道下裂の発生頻度が増加していたと報告している。有機塩素剤への曝露については、尿道下裂の発生原因になりうると報告されている $ ^{[6]} $ 。さらに食事に関しては、妊娠中の植物性エストロゲンを多く摂取していると考えられるベジタリアンの母からは、ベジタリアンでない母に比べて尿道下裂の発生が4.99倍増加していたと報告されている。

停留精巣については、農薬への曝露が停留精巣の発生に関与していることが報告されている $ ^{[7]} $ 。また農業に携わる母に停留精巣の発生頻度が高いと報告されており $ ^{[8,9]} $ 、その背景には農薬への曝露が関与していると考えられている。また、男性ホルモン産生を抑制する作用のあるフタル酸ジブチルへの曝露によって、停留精巣の発生頻度の増加が観察されたと報告されている $ ^{[10]} $ 。

このように、妊娠中および胎児期の環境化学物質曝露が尿道下裂や停留精巣の発生原因のひとつとして影響していると考えられている。一方、母の環境化学物質であるEDCsへの曝露が児の性腺機能、次世代の性分化や第二次性徴の発来などへ影響を与える懸念が、近年世界的に高まっている $ ^{[13, 14]} $ 。実際にEDCsの曝露が、ヒトの体内におけるホルモン環境やホルモンが作用する過程に影響を与えていることについて、報告されている $ ^{[15]} $ 。さらに、その影響には一塩基多型などの遺伝子型による化学物質やステロイドへの感受性差、化学物質曝露によるゲノムへのエピジェネティックな修飾も関連していると考えられている。このように、妊娠中および胎児期の環境化学物質曝露がこれらの背景に影響していると考えられており、実際に環境化学物質曝露による性ホルモンや性腺機能への影響については、動物を用いた実験データは数多く報告されている。しかし、現状ではヒトのデータは散見されるのみである $ ^{[16, 17]} $ 。

この様な背景から、胎児期の環境化学物質曝露が、次世代の児の性分化や性腺機能に与える影響についての検討は、現在直面している重要な課題の一つである。
## 2 ．研究開発目的

北海道大学では全国に先駆け、環境化学物質が次世代に与える影響について明らかにしてきた（北海道スタディ）。また、平成22年度より環境省「子どもの健康と環境に関する全国調査（エコチル調査）」では、北海道全域で8250人の妊婦を調査対象として子どもが13歳になるまでの出生コホート調査を展開している。本研究では、すでに先行している北海道スタディのデータを解析し、その成果をエコチル調査のデータ解析に活用していくことができる。

このように、北海道スタディおよびエコチル調査で得られた検体および身体所見のデータを用いて、母が曝露した血液中のPCB・ダイオキシン類や有機フッ素化合物PFOS・PFOA、フタル酸エステルなどの環境化学物質が胎児に与える影響について検討を行い、妊娠中および胎児期の環境化学物質が性分化および性腺機能におよぼす影響と機序について科学的に明らかにすることを目的とする（図(1)-1）。また、エコチル調査では、まず出生時の身体計測を行い、本邦における貴重なデータを得ることを目的とした。

エコチル調査では、北海道スタディで得られた結果をもとに、出生時の身体計測のデータをエコチル調査で得られる環境要因が出生時の身体的变化に与える影響について明らかにしたい。さらに、将来的には今回の研究をもとに、ライフコース・アプローチで対象となった児を思春期まで長期に経過観察し、外性器の状態および性腺機能における胎生期の環境化学物質の曝露が与える長期間の影響についても知見を得たいと考えている。

胎児から小児期にかけての化学物質曝露が、子どもの健康に大きな影響を与えているのではないか？

環境化学物質の曝露

胎児期のホルモン環境

性分化に与える影響

次世代への健康影響

## 胎児期の環境化学物質曝露

胎児期環境

エピジェネティック

変化

遺伝子多型

発育・性分化の変化

胎児期の環境化学物質曝露が性分化および性腺機能に与える影響とその機序について明らかにする

## 図(1)-1 本研究の流れ
### 3. 研究開発方法

本研究では、北海道スタディ、エコチル調査において、環境化学物質濃度と出生時の外性器や精巣の異常、2D/4D比の異常、さらに胎生期ホルモン環境の異常との関連についてそれぞれ検討する。また、性ホルモン受容体遺伝子や異物ステロイド代謝酵素遺伝子等の多型を調べ、化学物質の内分泌かく乱作用を検討し、これまでヒトではほとんど科学的な知見がない性分化および性腺機能おける胎児期の環境化学物質曝露のリスクについて明らかにする。具体的には、3つのサブグループにおいて、第1に環境化学物質が男児の陰茎長・精巣体積および男児女児の肛門性器間距離、性ホルモンに関連した2D/4D比に与える影響を明らかにする。第2に北海道スタディにおける保存血で児の性腺機能に関連すると考えられるホルモン濃度を測定、8歳時点の性向行動調査を実施し、環境化学物質濃度レベルと性向行動、ホルモン環境の関係を解明する。第3に異物・ステロイド代謝酵素遺伝子多型等の遺伝子型と曝露濃度が胎内ホルモン環境に与える影響、母児の遺伝子型の組み合わせが性分化および性腺機能に及ぼす影響を検討し、同じ曝露濃度でも感受性の高いハイリスク群とその機序を明らかにする。最終的には、本研究成果により、妊娠中の環境化学物質が性分化および性腺機能におよぼす影響について明らかにすることができる（図2）。

本研究は、北海道大学医学研究科「医の倫理委員会」の承認を得て実施した。インフォームドコンセントは、全対象者から疫学研究に関する倫理指針およびヘルシンキ宣言に基づき実施した。

## (1) エコチル追加調査

北海道大学では、環境省「子どもの健康と環境に関する全国調査（エコチル調査）」に参加し、コホート研究を行っている。このエコチル調査の本調査に加えて、札幌市内の12施設で本研究は追加調査として行った。エコチル追加調査への参加に同意をいただいた12施設（表(1)-1）に通院中で札幌市在住のエコチル本調査への参加者に対して、妊娠中期にエコチル追加調査の説明文書を発送した。対面説明の後にエコチル追加調査への同意が得られた妊娠を対象に、出産時に臍帯血の採取（3 ml）、入院中の母体血の採取（3 ml）、さらに出生児の肛門性器間距離、第2指、第4指の長さ、男児の陰茎長、精巣体積の測定を行った（図(1)-2）。

表(1)-1 エコチル追加調査 参加施設

エコチル追加調査 参加施設(12施設)

医療機関名
北海道大学病院	札幌医科大学病院
朋佑会札幌産科婦人科	北海道社会保险病院
KKR札幌医療センター	田畑産婦人科
カワカミウィメンズクリニック	月寒グロリアクリニック
エナレディースクリニック	札幌マタニティ・ウィメンズホスピタル
手稲あけぼのレディースクリニック	清田ウィメンズクリニック
図(1)-2 エコチル調査の流れ

統計学的検討では、数値は平均±標準偏差で表し、男女差については、Student t-testで解析した。身体測定の相関については、スピアマンの順位相関分析で分析した。統計ソフトJMP10を用いて検討し、統計学的有意水準はp<0.05とした。

## (2) 北海道スタディ

## 1 ）小規模コホート

本研究では、すでに環境化学物質濃度の測定が終了している小規模コホートに登録されており、追跡可能な349人を対象に2D/4D比の測定を行うことの説明文を郵送して、同意書および両手のコピーの返送を持って研究への参加とした。返送された両手のコピーより2D/4D比の測定を行い、母体血中の環境化学物の濃度と臍帯血中のホルモン濃度との関連について検討を行った。

小規模コホートは、北海道札幌市の一産科病院を受診した妊婦とその児を対象に出生前向きコホート研究「環境と子どもの健康に関する北海道スタディ」を実施した。札幌市およびその周辺に住む日本人で、2002年7月から2005年9月に産科を受診した妊婦1796名に研究への参加を依頼した。依頼した妊婦のうち、日本臍帯血バンク登録者（22%）と里帰り分娩（3%）（他施設で分娩）予定者は研究対象から除外した。最終的に妊娠23週から35週の妊婦514名（28.6%）が研究参加に同意した。コホートのながれを図4に示す。妊娠中期から後期に妊婦と配偶者から、自記式調査
票により両親の既往歴、教育歴，世帯収入，妊娠中喫煙状況，妊娠中飲酒状況などの基本的情報を得た。医療診療録から母児の分娩・出生時所見を得た。妊娠中期から後期に妊婦から母体血40ml、および分娩時に臍帯血40mlを採取し、分析まで-80°Cで凍結保存した。（図(1)-3）

図1-3 小規模コホートの流れ

## a 母体血中の環境化学質の測定

妊娠後期の母体血で426名のポリ塩化ビフェニル（PCB）・ダイオキシン類を高分解能ガスクロマトグラフィー・高分解能マススベクロトメーター（HRGC/HRMS）法（福岡県保健環境研究所）、447名のパーフルオロオクタンスルホン酸・ペルフルオロオクタン酸（PFOS・PFOA）を液体クロマトグラフィー・タンデム型質量分析（LC/MS/MS）法（星薬科大学）、および487名のDEHP代謝物Mono-(2-ethylhexyl) phthalate（MEHP）をガスクロマトグラフ質量分析（GC/MS）法（名古屋大学）で測定済みのデータを用いた。

## b 臍帯血中のホルモン濃度の測定

臍帯血で295名の性ホルモンであるエストラジオール（E）、総テストステロン(T)、プロゲステロン(P)、デヒドロエピアンドロステロン(DHEA)、アンドロステネジオン(A-dione)をLC-MS/MS法、黄体形成ホルモン（LH）、卵胞刺激ホルモン（FSH）、性ホルモン結合グロブリン（SHBG）、およびプロラクチン(PRL)を免疫放射定量測定(IRMA)法、Inhibin BをELISA法で測定した。また、INSL3をEIA法で測定した。測定は全てあすか製薬メディカル(株)で実施した。

統計学的検討では、数値は、平均±標準偏差で表し、2D/4Dの男女差については、Student t-testで解析した。環境化学物質、ホルモン濃度の関連については、調整因子を加えて重回帰分析を行った。統計ソフトJMP10を用いて検討し、統計学的有意水準はp<0.05とした。
## 2 ）大規模コホート

大規模コホートでは、調査段階で7歳となる5044人を対象に同様に北海道スタディの詳細調査として2D/4D比の測定を行うことの説明文を郵送して、返送された両手のコピーより2D/4D比の測定を行った。

大規模コホートは、北海道内全域の産科30施設で2003年に開始し、2013年3月までに妊婦20,823人が登録した大規模出生コホート「環境と子どもの健康に関する北海道スタディ」である。コホートのながれを図5に示す。妊娠初期のベースライン調査票から、妊娠時の年齢、妊娠前の体格、既往歴、教育歴、妊娠前後の喫煙および飲酒、世帯収入などの情報を得た。出産時の医療機関カルテから在胎週数、児の性別、出生時体重などの情報を得た。出生後の調査で母乳栄養の有無、期間、乳児期以降の食事摂取、感染症り患の有無、気管支喘息(ISAAC Phase III)、アトピ一性皮膚炎、(ISAAC Phase III)、アレルギ一性鼻炎、食物アレルギ一、および両親のアレルギ一既往歴などの情報を得た。妊娠初期と後期の母体血、および分娩時の臍帯血を採取し、-80°Cで保存した。また7歳半の学童期に児の尿とハウスダストを採取、8歳児には軽度発達障害（ADHD）や性役割行動調査（J-PSAI）を実施している（図(1)-4）。

本研究では、2D/4D比の測定を行うことの説明文を郵送して、同意書および両手のコピーの返送を持って研究への参加とした。返送された両手のコピーより2D/4D比の測定を行い、臍帯血中性ホルモン濃度およびJ-PSAIとの関連について検討を行った。

図(1)-4 大規模コホートの流れ

## a 血中のホルモン濃度の測定

臍帯血で295名の性ホルモンであるエストラジオール（E）、総テストステロン(T)、プロゲステロン(P)をLC-MS/MS法で測定し、加えて男児では高感度LH、高感度FSH、Inhibin B、INSL3を測定した。測定は全てあすか製薬メディカル(株)で実施した。

統計学的検討では、数値は、平均±標準偏差で表し、2D/4Dの男女差については、Student t-testで解析した。ホルモン濃度、J-PSAIとの関連については、調整因子を加えて重回帰分析を行った。統計ソフトJMP10を用いて検討し、統計学的有意水準はp<0.05とした。
## 4 ．結果及び考察

## （１）エコチル追加調査

参加施設への説明、倫理委員会への申請・承認など準備を進め、平成24年9月より対象者にパンフレットの送付を行った。平成24年度から平成26年度までの最終結果を表(1)-2に示す。パンフレットを送付および電話連絡を行った後に、対面説明を行うことができたのは1622例で、そのうち1601例でエコチル追加調査への参加の同意が得られた（同意率：98.7%）。脱落が51例あり、最終的に1550例で出生児の身体測定（肛門性器間距離、第2指・第4指の長さ、陰茎長、精巣体積）が行われた。母体血および臍帯血の採取は、それぞれ1505例、431例で行うことができた。

身体測定の結果を図(1)-5に示す。出生児の身長、体重は、女児にくらべて男児で有意に大きかった（図7）。この結果は、従来報告されているものと矛盾しないものであった。

2D/4Dは右手、左手、左右の平均ともに女児に比べ男児で有意に低い値であった（左右の平均：p=0.0223）（図(1)-6）。従来の報告の通り、2D/4Dは女児に比べて男児で有意に低値となることが、出生時に同様に観察されたことからも、胎生期器官形成期におけるアンドロゲンへの曝露に関連したものであることを確認できた $ ^{[18-20]} $ 。しかし、後で述べる北海道スタディに比べて、男女差は少なく、出生後の影響も少なからず受けている可能性も示唆された。今後、エコチル追加調査に登録された児を経過観察することで、この点については明らかにできると考えられた。

また、肛門性器間距離(AGD)は、女児に比べて男児で有意に長かった(p<0.0001)（図(1)-6）。この結果は、以前に報告されている結果に矛盾しないものであり、胎児期のアンドロゲンへの曝露によってAGDが長くなると考えられた $ ^{[20,21]} $ 。

陰茎長の平均は25.4 mmであり、多くの男児は20−30 mmの間に分布していた（図(1)−7）。陰茎長は、他国の報告に比べ短い傾向にあるが、日本人における陰茎長のデータは散見されるのみであり、更なるデータの蓄積が必要である $ ^{[22]} $ 。

精巣体積については、約8割で過去の報告通り0.7-1.5 mlの間に分布していた。その一方で、0.7ml未満や精巣が触知できない男児も一部に見られたことから、今後の経過観察が必要であると考えられた（図(1)-7）。また、精巣体積が0.7mL未満または非触知であり精巣の異常が示唆される男児(2996.6±417.7g)では、精巣体積が正常であった男児(3163.8±395.5g)に比べて出生時体重が有意に低い結果であった(p=0.0003)。この結果は、従来の報告と同様の所見であった $ ^{[23]} $ 。
表(1)-2 エコチル追加調査 登録状況

目標登錄者数	登錄者数
平成24年度	400人	387人
平成25年度	1000人	904人
平成26年度	500人	310人
合計	1900人	1601人(84.3%)

对面說明者 (人)	同意取得者 (人)	同意率 (%)
1622	1601	98.7

出產·測定(人)	母体血(人)	臍帶血(人)
1550	1505	431

図(1)-5 身体測定：身長、体重
図（1）-6 2D/4D, AGD

肛門性器間距離 (AGD)

図(1)-7 陰茎長、精巣体積

精巢体積

左精巢
2D/4DとAGDとの関連の検討を行ったが、男児、女児ともに有意な相関を認めなかった（図（1）-8）。また、男児において、2D/4Dと陰茎長との間にも有意な相関を認めなかった（図（1）-9）。2D/4D、AGD、陰茎長はいずれも胎生期のアンドロゲンの曝露を受けるとされているが、2D/4Dとの間に有意な相関を認めなかったことから、2D/4Dについては、男性ホルモンへの曝露以外の因子も関与していることが示唆された。

一方、AGDと陰茎長との間には、有意な相関を認めた（r=0.1768, p<0.0001）（図(1)-9）。これらの結果を踏まえると、AGDおよび陰茎長は胎生期の男性ホルモンへの曝露の影響を直接受けていることが予想される。このことから、胎生期のアンドロゲンの曝露を見るより良い指標としては、AGDおよび陰茎長が良いと考えられた。しかし、幼児期、学童期、思春期と今後経過観察する際は、AGDおよび陰茎長を継時的に測定することは困難であることから、幼児期、学童期に改めて良い指標となる因子を検討する必要があると考えられた。

図(1)-8 2D/4DとAGDとの関連

女児(693人)

2D/4DとAGDの間に相関関係はない
図(1)-9 陰茎長と2D/4D、AGDとの関連

本研究では同意率が高率であり、新生児の身体測定という貴重なデータを得ることができた。これはエコチル本調査への参加者を対象にしているためであると考えられる。本研究で得られた新生児の身体測定の結果は貴重なデータをもとに、今後エコチル本調査で得られる環境化学物質や生活環境などのデータから、環境因子が身体的变化に与える影響について今後明らかにしていきたい。

## （２）北海道スタディ

倫理委員会への申請・承認など準備を進め、対象者に北海道スタディの詳細調査として2D/4D比の測定の説明したパンフレットの送付を行った。

## 1 ）小規模コホート

小規模コホートでは、対象者のうち現在も追跡可能な349人に送付を行い、平成25年3月上旬現在136例（男児：68例、女児：68例）から同意書および両手のコピーが返送された（同意率：39%）。これをもとに、2D/4D比の測定を行った。

## a 基本属性

小規模コホート参加者のうち臍帯血中ホルモンの分析を行った295名について、2D/4D比のデータを得ることができた対象者の基本属性について表(1)-3に示す。2D/4D比のデータを得ることができた対象者では、2D/4D比のデータを得ることができなかった対象者に比べて、出産時年齢、年収、学歴、非喫煙率の割合が有意に高かった。
表(1)-3 母児の基本的属性

Characteristics	2D/4D比なし	2D/4D比あり
N	Mean ±SD	N	Mean ±SD
Maternal characteristics
Age at delivery (years)	211	29.6±5.2	84	31.2±4.2	*
Pre-pregnancy BMI (m²/kg)	210	20.9±2.9	84	20.9±2.9
Parity (%)	0	Mean ±SD	46 (54.8)
≥1	38 (45.2)
Annual household income (%)	<5 million yen	106 (50.5)	27 (32.1)	**
≥5 million yen	104 (49.5)	57 (67.9)
Educational level (%)	≤12 years	159 (76.1)	47 (56.6)	**
≥13 years	50 (23.9)	36 (43.4)
Smoking during pregnancy (%)	Nonsmoker	161 (76.7)	77 (91.7)	**
Smoker	49 (23.3)	7 (8.3)
Alcohol drinking during pregnancy (%)	Nondrinker	138 (65.7)	55 (65.5)
Drinker	72 (34.3)	29 (34.5)
Infant characteristics
Gender (%)	Boy	98 (46.7)	37 (44.0)
Girl	112 (53.3)	47 (56.0)
Birth weight (g)	210	3129.3 ±347.5	84	3120.5 ±289.8
Gestational age (wks)	210	39.3 ±1.1	84	39.3 ±1.0

$ ^{*} $ p < 0.05, $ ^{**} $ p < 0.01 by the t-test, and chi-square test

## b 2D/4D比について

全体の2D/4D比は、右手94.2±3.3%、左手94.1±3.4%、右手と左手の平均（以下、平均）94.1±3.0%であった。男女間での2D/4Dの比較は、左手では有意差を認めないものの、右手と平均で男女間に有意差を認め、女児の方が男児に比べて2D/4D比の値は有意に高かった（図(1)-10）。この結果は、以前に報告されている結果に矛盾しないものであり、胎児期のアンドロゲンへの曝露によって2D/4Dが低下することが予想された $ ^{[18,19]} $ 。
## 第2指(2D)／第4指(4D)比

図(1)-10 2D/4D比の男女間の比較

## c 2D/4D比と環境化学物質曝露との関係について

Paired t 検定を行ったところ、右手、左手、平均の間に有意な差を認めなかったので、環境化学物質と2D/4D比との関係についての検討は、平均を2D/4D比の代表値として用いた。環境化学物質の内訳は、Total PCBs、Total Dioxin(TEQ)、Total Coplanar PCB(TEQ)、Total PCDD/PCDF(TEQ)、Total PCDD(TEQ)、Total PCDF(TEQ)、PFOS、PFOA、MEHPについて検討したが、2D/4D比の全体、男女別の値と母の環境化学物質曝露との間に有意な相関があるものは認められなかった（表(1)-4）。

これは、母の環境化学物質の曝露によって、胎生期のホルモン環境に影響を与えるものの（サブ2の結果）、児の身体的変化までは影響を及ぼさないものと考えられた。しかし、今回の検討では、環境化学物質やホルモン受容体の遺伝子多型、エピゲノム解析を行っていないことから、環境化学物質の曝露やホルモン環境の変化に対して脆弱な児に対する影響を検討できなかった。今後の課題であると考えられた。
表(1)-4 2D/4D比と環境化学物質との関係

環境化学物質	全体	男児	女児
相関係数	p值	相関係数	p值	相関係数	p值
PCBs
(ng/g lipid)	0.0549
(n=128)	0.5379	0.0848
(n=63)	0.5086	-0.04259
(n=65)	0.7362
Dioxins
(TEQ
lipid)	0.0110
(n=128)	0.9022	-0.0381
(n=63)	0.7668	0.0490
(n=65)	0.6983
PFOS
(ng/mL)	0.0047
(n=119)	0.9596	0.0285
(n=60)	0.8271	0.0006
(n=59)	0.9965
PFOA
(ng/mL)	-0.0091
(n=119)	0.9239	-0.0136
(n=63)	0.9198	0.0424
(n=59)	0.7562
MEHP
(nmol/mL)	-0.0659
(n=129)	0.4597	-0.0333
(n=66)	0.7925	-0.0954
(n=63)	0.4569

## d 第2指（2D）/第4指（4D）比と胎内ホルモン環境の関係

サブグループ（1）の2D/4D比の結果とサブグループ（2）の臍帯血中の性ホルモン濃度の結果をもとに2D/4D比と臍帯血中の性ホルモン濃度の両者の測定が可能であった男児45例、女児72例の合計117例について、2D/4D比と臍帯血中の性ホルモン濃度のとの関係についての検討を行った。2D/4D比は、平均を2D/4D比の代表値として用いた。

臍帯血中の性ホルモン濃度ついては、値が感度以下の場合、感度の半分の値を挿入して検討を行った。Insuline-like factor type 3(INSL3)については、過去の報告で女児では低値になると報告されているが $ ^{[24]} $ 、実際にランダムに抽出した女児20例のINSL3の測定値は、有意に低値であった(p<0.0001)ことから男児のみで検討を行った。

2D/4D比と臍帯血中の各種性ホルモンとの関係については、男女を合わせた全体および女児では2D/4Dと各種ホルモンとの間に有意な関連はなかった。一方、2D/4Dと男児のみで測定を行ったINSL3の間に有意な関連を認めた（B=-0.377、95% CI：-30.17，-2.318，p<0.05）（表(1)-5）。実際に、INSL3の高い群(0.32 ng/mL以上)と低い群(0.32 ng/mL未満)の2群で2D/4D比を比較してみるとINSL3の高い群では91.0%であったのに対し、INSL3の低い群では94.3%と有意に高かった（p<0.01）（図(1)-11）。また、同じく男児において主に副腎由来と考えられるDHEAと2D/4Dとの間に有意な負の関連を認めた（B=-0.361、95% CI：-8.862，-0.697，p<0.05）（表(1)-5）。このことから、2D/4Dは精巣由来のアンドロゲンのみならず副腎由来のアンドロゲンも反映していると考えられた。

胎生期の男性ホルモンへの曝露が関係していると考えられているが $ ^{[18]} $ 、今回の検討で臍帯血中のテストステロンとの間に有意な関連を認められなかった。これは、指の長さの比率は胎生期14週までに確立すると考えられており $ ^{[25]} $ 、臍帯血中のテストステロン濃度が必ずしも胎生期14週までのテストステロン濃度を反映していないためと考えられる $ ^{[26]} $ 。一方、Leydig細胞から産生されるINSL3は、精巣のLeydig細胞の機能を反映していると考えられており、INSL3の低下している例では性腺機能低下が示唆される $ ^{[24]} $ 。今回の検討では、臍帯血中のINSL3濃度と2D/4D比有
意に関連しており、胎生期のLeydig細胞の機能低下が示唆されるINSL3濃度の低下が診られた症例で、2D/4Dが有意に高く、女児に近い表現型を示した。また、胎生期の副腎由来のアンドロゲンも関連していることも明らかとなった。

表(1)-5 2D/4Dと性ホルモン濃度との関係

Hormone levels	Total	Males	Females
n	B (95%CI)	R²	n	B (95%CI)	R²	n	B (95%CI)	R²
T (pg/mL)	114	-0.021 (-2.449, 1.956)	0.113	45	-0.209 (-8.080, 1.754)	0.060	69	0.151 (-0.835, 3.909)	0.214
E (ng/mL)	117	-0.070 (-2.893, 1.257)	0.111	45	-0.051 (-4.956, 3.625)	0.022	72	-0.104 (-3.346, 1.219)	0.180
P (ng/mL)	117	0.036 (-1.323, 1.977)	0.107	45	-0.020 (-4.461, 3.971)	0.020	72	0.078 (-1.114, 3.647)	0.175
T/E	114	0.010 (-2.259, 2.514)	0.113	45	-0.138 (-6.331, 2.650)	0.036	69	0.200 (-0.440, 5.190)	0.228
LH (mIU/mL)	115	0.017 (-2.167, 2.610)	0.104	45	0.207 (-1.335, 5.346)	0.055	70	0.126 (-6.313, 21.64)	0.180
FSH (mIU/mL)	117	-0.038 (-3.696, 2.448)	0.105	45	0.180 (-2.162, 7.177)	0.048	N/A	N/A
INSL3 (ng/mL)	N/A	N/A	44	-0.377* (-30.17, -2.318)	0.145	N/A	N/A
Inhibin B (pg/mL)	116	-0.139 (-2.238, 0.331)	0.124	44	-0.068 (-5.877, 3.891)	0.024	72	-0.082 (-1.387, 2.732)	0.172
A-dione (ng/mL)	113	-0.076 (-2.870, 1.187)	0.112	44	-0.268 (-9.563, 0.840)	0.088	69	-0.028 (-2.302, 1.811)	0.167
DHEA (ng/mL)	113	-0.136 (-3.573, 0.533)	0.125	44	-0.361* (-8.862, -0.697)	0.141	69	-0.074 (-3.036, 1.594)	0.172
図(1)-11 2D/4DとINSL3との関係

## 2 ）大規模コホート

大規模コホートで、倫理委員会の承認のもと、対象者に北海道スタディの詳細調査として2D/4Dの測定の説明したパンフレットの送付を5044人に送付を行い、1903例（男児：982例、女児921例）から同意書および両手のコピーが返送された（同意率：37.7%）。これをもとに、2D/4Dの測定を行った。

全体の2D/4D比は、右手、左手、右手と左手の平均（以下、平均）ともに、女児の方に比べて男児で2D/4Dの値は有意に低かった（図（1）-12）。

この結果は、以前の小規模コホートの結果に矛盾しないものであり、今回はより大きなコホートでも同様な結果が得られており、胎児期のアンドロゲンへの曝露によって2D/4Dが低下することが予想された $ ^{[18, 19]} $ 。
## a 2D/4DとJ-PSAIの関係

サブ（1）とサブ（2）の結果からえられた胎生期のホルモン環境が影響を与えると考えられる身体的変化(2D/4D)と学童期のJ-PSAIについて相互間の関係について検討した。Composite scoreでは、女児では、2D/4D比とJ-PSAIの間に有意な相関は認められなかったが、男児では2D/4DとJ-PSAIの間に有意な負の相関を認めた。一方、feminine scoreでは、男児、女児ともに2D/4Dとの間に有意な相関を認めなかったが、masculine scoreでは、男児、女児ともに2D/4Dとの間に有意な関連を認めた（表(1)-6）。一方、兄弟、姉妹の有無についても、学童期のJ-PSAIに影響を与えていた（図(1)-12、13）。

2D/4D)と学童期のJ-PSAIの結果については、兄弟、姉妹を含めた調整因子を加えて多変量解析しても同様の関連を示唆する結果であった（表(1)-7）。これらの結果より、胎生期の男性ホルモンへの曝露に関連していると考えられる2D/4Dで男性化が強い（2D/4Dが小さい）ほど、性役割行動調査でも男性化を認めた（J-PSAIで高い点数）。

胎児期のアンドロゲンへの曝露によって2D/4Dが低下すると考えられているが $ ^{[18,19]} $ 、性役割行動調査でも男児のみでテストステロン濃度が増加するほど男性に関わる得点が増加する結果が得られ、乳幼児期におけるテストステロンはヒトの性分化的神経行動発達に影響する可能性が示唆されている。今回の我々のデータも、それを裏付けるものと考える。実際に、アンドロゲンへ
の曝露が強い（2D/4Dが低い）児では、男女ともにmasculine scoreは高くなっていた。また、Composite scoreでも、男児のみではあるがアンドロゲンへの曝露が強い児で、より高い値となっていた（男性化が強い）。このように、胎生期のアンドロゲンへの曝露が、その後の脳の性分化に影響を与えていると考えられた。

表(1)-6 J-PSAと2D/4Dの関係：Spearmann解析

Male	Female
J-PSAI	n	R	n	R
Composite	852	-0.1304	779	-0.0639
p=0.0001	p=0.0748
Masculine	872	-0.1257	779	-0.0951
p=0.0002	p=0.0079
Feminine	852	0.0242	779	-0.0075
p=0.4805	p=0.8352

図(1)-12 J-PSA：男児における兄弟、姉妹の有無の影響
図(1)-13 J-PSA：女児における兄弟、姉妹の有無の影響

表(1)-7 J-PSAと2D/4Dの関係：重回帰解析

Male	Female
J-PSAI	n	B (95%CI)	R²	n	B (95%CI)	R²
Composite	823	-0.122** (-0.492, -0.143)	0.048	738	-0.048 (-0.343, 0.069)	0.013
Masculine	823	-0.128** (-0.410, -0.111)	0.024	738	-0.094* (-0.302, -0.040)	0.021
Feminine	823	-0.019 (-0.075, 0.131)	0.021	738	-0.024 (-0.189, 0.095)	0.017

調整因子:出生時体重、飲酒歷、喫煙歷、兄弟、姉妹

$ ^{*} $ : p<0.05, $ ^{**} $ : p<0.01

## b J-PSAIと臍帯血中性ホルモン濃度の関係

学童期におけるJ-PSAIと臍帯血中の性ホルモン濃度について相互間の関係について検討した。