Silviase/jgov_v1.4_full_ann huggingface dataset:
に負の関連性が再確認され、PCB濃度が上昇すると精子数x運動率が減少することが確認された。血中PCB濃度が高い場合にメチル化異常が増えると予想したものの、実際には負の関連性が認められた。化学物質ばく露とメチル化制御の間に密接な関係があることが示唆されたものの、メチル化異常と精子数x運動率の間には有意な関連性は認められなかった。年齢が上がると精子数x運動量が減少すると考えられたが、本研究の結果によると、年齢が上がると血中PCB濃度が高くなり、そのために精子数x運動量が減少すると解釈され、年齢が直接的に精子数x運動量に影響を与えるというよりはPCBを介した場合に影響力が大きいことがわかり、間接的な影響を示唆した。喫煙に着目すると、教育歴が高い場合に喫煙している人の割合は少なく、喫煙をしている場合に精子数x運動量が減少することが示された。ところが、喫煙の有無はメチル化異常には影響をおよぼさない可能性が示された。図(4)-3ではメチル化異常を説明する変数としてH19およびGNAS1Aが選択された。ただし、重相関係数の平方（R2）が0.08と小さい値であることから説明はほぼ出来ていないことがわかる。そのため、メチル化異常を説明するために他の変数を投入したモデルも作成したが、モデルの適合度が適合しなかった。今後、サンプル数を増やして、再度解析を行う必要があると考える。それにより、メチル化異常と精子数x運動量の関係やPCBや喫煙がメチル化異常に及ぼす影響をさらに明確に説明することが可能となると期待される。

図4-3 共分散構造分析（SEM）
本研究を解析する上で、以下の点は今後の課題と考えられる。PCB分析を実施できたのはまだ90件にとどまっており、統計学的な解析を行う上でサンプル数をさらに増やすことが必要と考えられた。喫煙習慣に関するデータが一部欠落しており、サンプル数が減少した。また、不妊と診断されたのちに生体試料の採取を行った。もし調査協力者が受胎のため夫婦で食生活などの変更を行い、魚摂取量などを増加させていた場合には血中PCB濃度が増加する可能性があり、因果の逆転などを考慮すべきとも考えられる。横断調査で検証する上での大きな制約の一つと考えられた。PCB濃度が増加すると、メチル化異常も増加するものと推測されたが、結果は逆転した。このメカニズムについては明らかではない。

今回の統計学的な解析では、GC-TOFMSにて化学物質の測定を実施したが、ピークを同定でき、また測定値として比較的高い値が得られたPCBのみを用いて解析を実施した。今後、未同定のピークまたはPCB以外についても同様な解析を行うことが必要と推測された。ただ、やはりサンプル数が大きな制限であると考えられた。

## （1） 科学的意義

## 1 ）精子所見とエピゲノム解析と化学物質の測定の関連

不妊，特に男性不妊に関連する環境由来化学物質の関与について、まだ PCB に関するものであるが、実証的なデータを提出することができた。我が国では PCB と男性不妊に関する知見はまだ多くはない。PCB ばく露が不妊に関連することをあらためて示す結果と考えられた。PCB については、小児への影響がクローズアップされているが、成人でもリスク管理が必要となるものと推測された。

## 2 ）（食）生活習慣との関連性

今回の調査では、喫煙や加齢の影響を明示することはできなかった。特に、加齢はPCB濃度の増加を介して精子性状に影響するという結果が示唆された。PCBは主に魚介類の摂取を介して体内に取り込まれる化学物質である。化学物質ばく露回避のための食行動について、特に、成人男性への食育に資する情報がさらに必要になるものと考えられた。

## （２）環境政策への貢献

## ＜行政が既に活用した成果＞

特に記載すべき事項はない

## ＜行政が活用することが見込まれる成果＞

特定の化学物質の同定は、曝露回避に必要な行政的な基礎資料として、国民に提示することができ、このことにより、行政はリスク管理が可能となる。また、少子化対策、不妊娠治療の技術向上と医療行政に貢献できる。また、化学物質曝露回避のための食行動について、実証的なデータを添えて国民に提示可能となる。不妊娠および、成人男性への食育に有用な情報を提供できる。
## 6 ．国際共同研究等の状況

特に記載すべき事項はない

### 7. 研究成果の発表状況

（1）誌上発表

<論文（査読あり）>

特に記載すべき事項はない

<査読付論文に準ずる成果発表>

特に記載すべき事項はない

くその他誌上発表（査読なし）>

特に記載すべき事項はない

（2）口頭発表（学会等）

特に記載すべき事項はない

（3）出願特許

特に記載すべき事項はない

（４）シンポジウム、セミナーの開催（主催のもの）

特に記載すべき事項はない

（５）マスコミ等への公表・報道等

特に記載すべき事項はない

(6) その他

特に記載すべき事項はない

### 8 \. 引用文献

1) Hauser R. Semin Reprod Med, 24, 156-67 (2006)

“The environment and male fertility: recent research on emerging chemicals and semen quality”

2) Jurewicz J, Hanke W, Radwan M, and Bonde JP: Int J Occup Med Environ Health, 22, 305-29 (2009) "Environmental factors and semen quality"

3) Hauser R, Chen ZY, Pothier L, Ryan L. and Altshul L: Environ Health Perspect, 111, 1505–11 (2003) "The relationship between human semen parameters and environmental exposure to polychlorinated biphenyls and p,p'-DDE"
4) Pant N, Mathur N, Banerjee AK, Srivastava SP. And Saxena DK: Reprod Toxicol, 19, 209–214 (2004) "Correlation of chlorinated pesticides concentration in semen with seminal vesicle and prostatic markers"

7) McAuliffe ME, Williams PL, Korrick SA. And Altshul LM: Environ Health Perspect, 120, 535-40 (2012)

“Perry MJ, Environmental exposure to polychlorinated biphenyls and p,p'-DDE and sperm sex-chromosome disomy”
# Case-control Study on Epigenetic Alteration of Human Sperm of Environmental Chemical Disrupters

Principal Investigator: Takahiro ARIMA

Institution: Department of Informative Genetics, Environment and Genome Research Center, Tohoku University, Graduate School of Medicine

2-1 Seiryo-machi, Aoba-ku, Sendai-City 980-8575, JAPAN

Tel: 022-717-7844 / Fax: 022-717-7063

E-mail: tarima@med.tohoku.ac.jp

Cooperated by: St, Luke Clinic, IDEA Consultants, Inc.

## [Abstract]

Key Words: Human sperm, Epigenetics, DNA methylation, Environmental chemical disrupters, Genomic imprinting

Male factors are associated with infertile in about 40% frequency. Epigenetic modification, especially during germ cell is vulnerable and influenced to the environment and chemical disrupters. Genomic imprinting is regulated with epigenetic DNA methylation and the allele-specific expression of certain genes accounts for the requirement for both maternal and paternal genomes in normal development. This DNA methylation, the aberrant expression of several imprinted genes has been linked to a number of diseases, developmental abnormalities, malignant tumors, the life-style disease, mental diseases and the male sterility in humans. Recent studies have identified a small amount of chemical substance(s) by the methods of combination of TOF-MS and the Comprehensive GCxGC method. With these methods, we identified some chemical substances in the patients of infertile male. We found PCB (poly chlorinated biphenyl) and PCB isoforms.

DNA methylation analyses have largely been superceded by the methods involving the sodium bisulphite treatment of genomic DNA which converts unmethylated cytosine to uracil leaving the methylated cytosines unconverted. Recently, we have developed as a high-throughput, high-resolution PCR-Luminex method to be applied to the measurement of DNA methylation ratio. We found abnormal methylation in the sperms in severe oligospermia, 74.1% (20/27) showed the methylation imprint errors.

In this research, we aim to clarify the effects of chemical substance(s) exposure on
genomic imprinting in human sperm by the new technologies, a combination of TOF-MS and the Comprehensive GCxGC method to analyze chemical substance(s) and new PCR-Luminex methylation analyses method. We confirmed these technologies and analyzed the blood and sperm in the infertile men. We found the patient of oligospermia is associated with the higher concentration of PCB and PCB isoforms than that of normal sperm. This tendency does not have effect on the age, the history of smoking and education etc.

The result is expected to contribute to the prevention and the development of the new treatment methods of many diseases in adults (cancers, mental diseases, male infertility and life-style diseases) in the future.
健康と日常生活についてのアンケート 記入日 年 月 日

居住地 ___ 县 ___ (市·町·村)

あなた自身の一般的な事柄についてお聞きします。以下の質問に順番に答えてください。答えは当てはまるものに〇をつけるか、必要なところは数字を記入してください。

身長は？

( ) cm

( ) kg

年齢は？

一日の平均睡眠時間は？

( ) 歳

( ) 時間

最終学歴は？

( )

(___) 業は？(仕事は？)〈詳細に…仕事内容がわかるように書いてください。) (

年収は？(だいたいで良いです。)

( )

趣味は？ 1.ある（（）内に記入してください。） 2.なし

(

習慣は？1.ある〈（ ）内に記入してください。2.なし

( )

軽く汗をかく運動をしますか？

1.はい

2.いいえ

1.はいと答えた方、週に運動量はどのくらいですか？

週（　）回、（　）分程度

れやすいですか？

1.はい 2.いいえ 3.わからない

農薬（殺虫剤を含む）を扱う職業に携わったことがありますか？

1.はい 2.いいえ 3.わからない

ポリ塩化ビフェニルなどダイオキシンを扱う職業に携わったことがありますか?

1.はい

2.いいえ

3.わからない

放射線を扱う職業に携わったことがありますか？

1.はい 2.いいえ 3.わからない

これまでに一番長く住んだことのある場所は？

1. 工場街 2. 商店街 3. 住宅街 4. 農漁村 5. その他（）

乳児期の栄養摂取は？

1. 母乳 2. 人工乳 3. 混合乳 4. 不明

現在、たばこを吸っていますか？

1.はい 2.いいえ 3.やめた

1.はいと答えた方、何歳の時から吸っていますか？( )歳一日何本吸いますか？( )本
3. やめたと答えた方、何歳の時やめましたか？( )歳

何歳から吸っていましたか？( )歳

一日何本吸っていましたか？( )本

毎月1回以上、次のもの（a.～u.）をご自分で扱いましたか？半日以上かけて扱った回数を教えてください。例にしたがって、あてはまる番号1つに0をつけてください。

1
いいえ	2
月1回～月2、
3回程度	3
週に1回以上	4
毎日
例) 灯油・石油・ベンジン・ガソリン	1	2	③	4
a. 灯油・石油・ベンジン・ガソリン	1	2	3	4
b. 塩素系漂白剂・殺菌剤(「混ぜるな危険」の表示のあるもの)	1	2	3	4
c. 医療用消毒殺菌剤	1	2	3	4
d. 油性マジック	1	2	3	4
e. 水性ペイント・インクジェットプリンタ	1	2	3	4
f. 有機溶剂(シンナー、試験・分析・抽出用溶剂、ドライクリーニング用洗净剤、染み抜き溶剂、ペイント塗料、除光液(リムーパー)など)	1	2	3	4
g. コピー機、レーザープリンタ	1	2	3	4
h. エンジンオイル	1	2	3	4
i. ホルマリン・ホルムアルデヒド	1	2	3	4
j. 抗がん剤(自分の治療薬は除く)	1	2	3	4
k. 病院で手術や検査に用いる全身麻酔薬	1	2	3	4
l. 殺虫剤	1	2	3	4
m. 除草剤	1	2	3	4
n. 上記以外の、または種類がわからない農薬
*名前がわかれば教えてください
(→ )	1	2	3	4
o. 放射線・放射性物質・アイソトーブ	1	2	3	4
p. 微生物	1	2	3	4
q. はんだなど鉛を含む製品	1	2	3	4
r. 無鉛はんだ(鉛フリーはんだ)	1	2	3	4
s. クロム、ヒ素、カドミウム	1	2	3	4
t. 水銀	1	2	3	4
u. 染料 (毛髪染め)	1	2	3	4
v. そのほか化学質などの名前がわかれば教えてください。(→ )	1	2	3	4

これからあなたの食生活についておたずねします。

食事は一日何回摂りますか？ ___ 回

朝、昼、晩規則正しく摂りますか？ 1. はい 2. いいえ

ご飯についておたずねします。

どのくらいの茶碗で食べますか？

1. 小さな茶碗 2. ふつうの茶碗 3. どんぶり 4. 食べない

(均一日におよそ何杯食べますか?

1. 1 杯未満 2. 2~3 杯 3. 4~5 杯 4. 6 杯以上

みそけについておたずねします。

どのくらいの頻度で飲みますか？

1. 飲まない 2. 月に1~3日 3. 週に1~2日 4. 週に3~4日

5. 週に5~6日 6. 毎日飲む

飲む方は、平均一日におよそ何杯飲みますか？

1. 1杯未満 2. 2~3杯 3. 4~5杯 4. 6杯以上

どのような味付けですか？

1. うすめ 2. ふっう 3. 濃いめ

みそけの具で一番食べたものを1つだけ選んでください。

1. とうふ、油揚げ 2. 海藻（わかめなど） 3. 野菜 4. いも

5. 卵 6. 魚や貝 7. その他（）

酒についておたずねします

お酒は飲みますか？

1. はい

2. いいえ

1. はい と答えた方、一回に飲む量と種類は？

ビール 大瓶（633ml）で

1. 飲まない 2. 1 本未満 3. 2～3 本 4. 4～5 本 5. 6 本以上

*中瓶または500ml 缶は0.8本、小瓶または350ml 缶は0.6本と換算してください。

日本酒 1合（180ml）で

1. 飲まない 2. 1合未満 3. 2～3合 4. 4～5合 5. 6合以上

焼酎 1合（180ml）で

1. 飲まない 2. 1合未満 3. 2～3合 4. 4～5合 5. 6合以上

ウイスキー シングル（30ml）で

1. 飲まない 2. 1杯未満 3. 2～3杯 4. 4～5杯 5. 6杯以上

1. 飲まない 2. 1杯未満 3. 2～3杯 4. 4～5杯 5. 6杯以上

ワイン グラス（60ml）で

1. 飲まない 2. 1杯未満 3. 2~3杯 4. 4~5杯 5. 6杯以上

その他 ( )を コップ ( )杯程度
以下の食べ物はどのくらいの頻度で食べていますか?〇で囲ってください。

食品名	ほとんど食べない	月に1～3回	週に1～2回	週に3～4回	週に5～6回	毎日
お菓子	1	2	3	4	5	6
肉	1	2	3	4	5	6
魚	1	2	3	4	5	6
野菜	1	2	3	4	5	6
くだもの	1	2	3	4	5	6
揚げ物	1	2	3	4	5	6
外食買ったおにぎりや弁当含	1	2	3	4	5	6
インスタント食品(カップ類、カレー)	1	2	3	4	5	6
大豆製品(豆腐、納豆、豆乳など)	1	2	3	4	5	6

焼き肉や焼き魚などを食べたとき焦げた部分は食べますか？

1. ほとんど食べない 2. 3分の1くらい食べる 3. 半分くらい食べる

4. 3分の2くらい食べる 5. ほとんど全部食べる

料理に塩やしようゆをかけることがありますか？

1. ほとんどない 2. ときどきある 3. しょっちゅうある

ラーメン、そば、うどんなどの汁はどれくらい飲みますか？

1. ほとんど飲まない 2. 3分の1くらい飲む 3. 半分くらい飲む

4. 3分の2くらい飲む 5. ほとんど全部飲む

週に１回以上飲んでいるビタミン剤はありますか？

1. はい

2. いいえ

1. はいと答えた方は商品名と飲んでいる頻度、期間を書いてください。

商品名（）を週／日に（）錠（）年

以下の飲み物はどれくらいの頻度で飲んでいますか？〇で囲ってください。

飲料名	ほとんど飲まない	月に1～3回	週に1～2回	週に3～4回	週に5～6回	毎日
低脂肪乳	1	2	3	4	5	6
ふつうの牛乳	1	2	3	4	5	6
緑茶	1	2	3	4	5	6
ウーロン茶	1	2	3	4	5	6
果汁100%ジュース	1	2	3	4	5	6
野菜ジュース	1	2	3	4	5	6
乳酸菌飲料(ヤクルトなど)	1	2	3	4	5	6
スポーツ飲料
(ポカリスエットなど)	1	2	3	4	5	6
コーヒー
(岳コーヒー含む)	1	2	3	4	5	6
炭酸飲料	1	2	3	4	5	6

飲むものがある方は一回の飲む量はどれくらいですか？〇で囲ってください。

飲料名	コップ1杯	コップ2～3杯	コップ4～6杯	コップ7～9杯	コップ10杯以上
低脂肪乳	1	2	3	4	5
ふつうの牛乳	1	2	3	4	5
緑茶	1	2	3	4	5
ウーロン茶	1	2	3	4	5
果汁100%ジュース	1	2	3	4	5
野菜ジュース	1	2	3	4	5
乳酸菌飲料(ヤクルトなど)	1	2	3	4	5
スポーツ飲料(ポカリスエットなど)	1	2	3	4	5
コーヒー(伍コーヒー含む)	1	2	3	4	5
炭酸飲料	1	2	3	4	5

ご協力ありがとうございました
精子番号	濃度	運動率(%)	奇形率(%)	禁欲期間(日)	身長	体重	BMI	年齡	平均睡眠時間	趣味	習慣	運動	転れやすい	農業	PCBorタイオキシン	放射線	一番長くほんだ場所	乳児期の実業摂取	吸引(1)或わたい(2)やめた(3)
あり(1なし(2	ある場合何か?	あり(1なし(2	ある場合何か?	する(1しない(2	なる場合何か?	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分	何分
1	18.7	63	57	5	175	70	22.9	37	8	1	ゴルフ	2	2	1	2	2	2	2	3	3	1
2	3.3	17	83	5	174	67	22.1	30	6	1	テレビ、スポーツ報噴	2	2	1	2	3	2	3	4	3
3	15.3	37	68	2	158	60	24.0	40	6	1	ドライブ	2	1	2	1	2	2	2	3	3	1	2
4	55.5	45	44	3	181	87	26.6	36	5	1	鯨馬、グルメツアー	2	1	2	120	3	2	2	2	3	3	1
5	0.1	17	75	4	182	68.5	20.7	34	7	1	コルフ	2	2	1	2	2	2	3	3	1
6	65.3	62	55	4	161	55	21.2	36	6.5	1	読書	2	2	1	2	2	2	2	1	2	3
7	23.3	25	75	10	174	78	25.8	48	6	1	サーフイン	2	2	3	2	2	1	3	1	3
8	0.1	6	168	75	26.6	33
9	88.4	66	58	4	178	60	18.9	30	7	2	2	2	1	2	2	3	4
10	32.3	39	48	5	178	76	24.0	38	7	2	1	ジム	1	4	50	1	2	2	2	3	3
11	10.1	24	83	7	175	71	23.2	44	7	1	ゴルフ、木工	2	1	1	30	1	2	3	1	4	4
12	2.9	34	71	10	173	85	28.4	28	6	1	読書	2	2	3	2	1	2	3	3
13	162.0	40	56	4	147	57	26.4	42	6.5	1	滝釣り	2	1	3	30	2	2	2	2	3	4
14	0.2	6	81	3	173	64	21.4	38	6	1	ゴルフ	2	1	1	30	2	2	2	2	3	2
15	5.0	13	81	5	168	73	25.9	40	5	1	スポーツ報戦	2	1	1	30	1	2	2	2	3	1
16	0.2	67	67	6	183	77	23.0	33	5	1	スポーツ報戦	2	2	2	2	2	2	3	1
17	48.4	54	47	5	165	55	20.2	36	7	2	2	1	2	2	2	3	1
18	0.8	29	71	1	165	68	25.0	29	6	1	パチンコ	2	2	3	2	3	3	3	3
19	7.0	29	54	4	163	65	24.5	33
20	11.4	51	45	5	182	86	26.0	35
21	33.7	79	52	2	165	93	34.2	41	6	1	ネットゲーム、家庭菜園	2	2	2	2	2	2	3	4
22	4.4	27	67	3	167	67	24.0	45
23	128.8	70	50	7	171	73	25.0	32	7	1	レシングラート	2	1	4	30	1	2	2	2	4	4
24	110.2	58	42	5	170	61	21.1	34	7	2	2	1	3	60	1	2	2	2	3	4
25	0.8	17	83	5	170	70	24.2	52	7	1	テニス	1	1	2	2	2	2	2	3	1
26	19.8	33	47	3	180	94	29.0	36	6	1	読書	2	2	1	2	2	2	2	4
27	52.5	52	40	3	168	62	22.0	28	8	1	スポーツ報戦、パチンコ	2	2	2	2	2	2	3	4
28	4.7	37	71	4	164	60	22.3	35	6	2
29	7.8	57	58	2	171	65	22.2	28	6	1	スノーボード、漫画、ゲーム	2	1	5	25	3	2	3	3	3	3
30	41.4	63	61	5	177	68	21.7	34	6	2	2	2	2	1	2	2	3	4
31	0.1	2	174	56	21.8	28	6	1	カラオケ、絵、料理	2	2	1	2	2	2	3	4
32	0.1	7	170	85	29.4	38	7	1	魚釣り、パチンコ	2	2	1	2	2	2	4	4
33	0.0	0.1	58	7	165	73	26.8	29	9	1	魚釣り	2	1	2	120	3	2	2	4	4
34	34.2	18	55	7	174	78	25.8	51	8	1	ゴルフ、テニス	2	1	1	60	2	2	2	2	4	2
35	39.0	54	48	8	170	70	24.2	34	7	2	2	2	3	2	2	2	1	3	4
36	30.6	41	59	4	173	65	21.7	35	7	2	2	2	1	2	2	2	4	3
37	35.6	55	53	4	173	69	23.1	37
38	15.8	38	53	4	172	82	27.7	35
39	36.1	57	74	4	168	73	25.9	41	8	2	2	2	2	2	2	2	3	1
40	6.7	63	75	4	178	82	25.9	36	7	1	音楽	2	2	1	2	2	2	3	1
41	22.4	85	61	3	166	80	29.0	34	5	1	スキー	2	1	2	60	1	2	2	2	3	1
42	39.1	63	42	4	177	80	25.5	38	6	1	サッカー	2	2	3	2	2	2	3	3
43	72.3	51	53	10	173	67	22.4	28	8	1	カメラ	2	2	3	2	2	2	3	4
44	84.9	38	54	4	182	75	22.6	39	5	1	パイクツーリング	2	2	1	2	2	2	4	1
45	78.9	45	56	7	168	85	30.1	37	8	1	読書	2	1	3	40	1	2	2	2	3	2
46	86.0	62	58	5	163	64	24.1	33	8	1	サッカー、読書、旅行	1	1	120	2	2	2	2	3	2
47	35.2	40	55	3	175	76	24.8	33	5	1	業器演奏	2	2	1	2	2	2	3	1
48	0.4	1	67	5	185	74	21.6	37	6	2	2	1	1	120	3	2	2	2	3	4
49	8.4	32	65	4	180	70	21.6	33	6.5	1	音楽箜篌	2	2	1	2	2	2	4	3
50	62.1	38	54	5	170	67	23.2	35	9.5	1	魚釣り	2	2	2	2	2	2	3	4
51	22.7	52	59	14	170	75	26.0	34	7	1	ドライブ	2	2	2	2	2	2	3	1
52	190.8	72	57	7	174	67	22.1	34	8	1	野球	<ecel>
毎月1回以上自分で扱うもの
精子番号	己酸	呋喃汁	酒	强度
精子番号	飲み物癇度
櫛子番号	タバロ	タバロやめた人	每月1回以上自分で扱うもの
精子番号	己酸	喹喹汁	酒	强度
精子番号	頻度(日)	鍍	分月	低脂肪乳	普通の牛乳	緑茶	ウーロン茶	果汁100%ジュース	野菜ジュース	乳酸菌飲料	スポーツパリンク	コービー	炭酸飲料	低脂肪乳	普通の牛乳	緑茶	ウーロン茶	果汁100%ジュース	野菜ジュース	乳酸菌飲料	スポーツパリンク	コービー	酸飲料
55	1	2	3	3	1	2	1	2	5	2	1	1	2	1	1
56	1	3	4	1	1	1	1	1	4	6	3	1	1	2	1	2
57	1	1	6	1	1	1	3	1	6	1	3	1	3
58	1	3	6	1	2	1	1	1	1	2	2	3	1	2
59
60	1	4	3	4	3	2	2	1	4	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
61	1	4	4	2	1	1	2	2	5	2	1	1	1	1	1	3	1
62	1	2	5	4	3	1	2	2	3	3	1	1	1	1	1	1	1	1
63	4	2	6	2	3	2	2	2	4	2	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
64	4	3	4	3	4	3	1	2	3	3	1	1	1	1	1	1	1	1	1
65	1	1	4	3	2	1	2	2	2	3	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
66
67
68	3	3	1	6	3	1	1	3	6	6	1	5	2	4	2
69	1	1	4	3	1	1	2	3	4	2	2	2	1	3	2	1
70	4	6	1	1	1	1	1	1	6	1	1	1	1	1
71	2	4	4	2	3	3	3	3	5	3	1	1	1	1	1	1	1	1	2	2	1
72	1	6	6	1	2	6	3	2	1	1	6	2	1	1	1	1	2	1
73
74
75
76	1	2	6	2	2	2	1	2	3	1	2	1
77	1	2	2	2	2	2	2	2	4	3	2	2	2	2	2	2	1	2	2	2
78	1	3	3	1	1	1	2	3	6	3	2	1	2	3	2
79	1	2	6	1	1	2	4	1	4	1	1	2	1	1	2
80	1	6	120	1	1	4	1	1	1	5	1	6	1	2	1	2
81	1	1	3	3	1	1	1	2	6	2	1	1	3	3	1	1	1	3	3	1
82
83	1	3	6	3	3	1	3	3	6	3	1	2	1	1	2	1	1
84	1	1	2	6	1	1	1	2	4	2	1	1	1	1	1
85	1	6	2	6	2	2	1	1	1	1	1	3	5	1	1
86
87	1	2	2	1	1	1	3	1	4	1	1	1	1	1
88	1	1	6	1	6	6	2	2	2	2	6	2	2	2	2	2	2	2	1	2	2	2
89
90
92	1	2	4	1	2	2	1	4	4	4	1	1	1	1	1	1	1	1	2	1	1
93	1	2	4	1	2	2	5	1	5	2	1	1	1	1	2	1	1	1
94	1	1	5	2	1	1	1	1	6	1	1	1
95	1	1	6	1	1	1	1	6	6	6	2	4	1	5
96
97	1	3	36	1	3	6	2	3	1	1	1	6	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
98	1	1	4	1	3	3	6	3	2	3	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
99	1	2	5	3	2	3	1	2	6	5	1	1	1	1	1	1	1	1	3	1
100
101	6	1	6	1	1	1	1	1	2	1	1	2	2
102	1	6	6	1	2	2	3	4	6	2	1	3	1	1	1	2	2	1
103	1	6	6	2	2	2	2	3	5	2	2	1	2	1	1	1	2	1	1
104
105	1	1	6	2	1	1	5	1	6	3	2	1	1	2	1
106	2	3	2	4	1	1	1	1	6	2	1	2	1	4	2	2
107	1	2	6	2	2	2	2	1	6	1	1	1	1	1	1	2	2
108	1	1	5	1	2	1	1	1	5	1	1	1	1
109	1	6	6	2	2	1	2	2	2	1	1	2	1	1	1	1	1	2	1	1
精子番号	濃度	運動率(%)	奇形率(%)	禁欲期間(日)	身長	体重	BMI	年齡	平均睡眠時間	趣味	習慣	運動	転れやすい	農業	PCBorダイオキシシ	放鬥線	一番長<註号の業務摂取	吸う(1或わたい)2やめ(3
あり(1なし(2	ある場合何か?	ある場合何か?	する(1しない(2	なる	何回	何分	何分	1	2	2	2	3	4	3
110	71.0	75	44	4	164	64	23.8	46	6	1	スホーツする、観観
111	4.6	16	80	4	173	76	25.4	32	7	1	魚釣り	2
112	118.6	80	61	3	170	55	19.0	32	6	1
113	21.9	58	74	9	168	68	24.1	31
114	31.4	53	40	2	178	79	24.9	44	6	2
115	54.1	28	70	3	170	68	23.5	30
116	24.3	35	65	4	163	54	20.3	38	6	2
117	51.7	68	58	5	169	90	31.5	33	8	2
118	46.3	75	52	6	172	72	24.3	32	7	1	ゴルフ	2
119	104.4	58	56	3	168	58	20.5	29	7	1	选書	2
120	0.2	20	80	7	162	68	25.9	40	6	1	ドライブ	2
121	68.4	19	60	9	173	104	34.7	38	7	1	ドライブ、写真、音楽鑑賞	2
122	0.7	46	47	5	181	80	24.4	45	6	2
123	21.2	25	58	5	164	60	22.3	36	5	2
124	26.2	64	59	5	171	72	24.6	31	6	2
125	38.9	66	53	7	168	82	29.1	38	6	1	映画	2
126	14.8	15	73	10	173	87	29.1	36	6	1	魚釣り	1	ウォーキング	1	3	60	2	1	2	2	2	3	4	4	2
127	23.6	68	49	1	185	82	24.0	31	9	1	サッカー	2
128	1.6	40	80	7	178	62	19.6	43
129	39.2	63	67	5	170	70	24.2	30	7	1	パチンコ	2
130	14.0	32	64	3	171	76	26.0	34	6.5	2
131	30.9	47	67	2	172	69	23.3	28
132	54.0	60	40	3	159	48	19.0	38
133	53.8	74	43	5	178	110	34.7	31	6	1	魚釣り	2
134	41.1	62	45	4	165	75	27.5	40
135	88.4	51	46	4	175	70	22.9	36	6	2
136	161.3	75	37	4	170	80	27.7	48
137	10.8	36	77	5	170	56	19.4	30	7	1	フットサル	2
138	2.8	41	59	7	176	67	21.6	28	7.5	1	ゴルフ	2
139	5.0	35	67	1	172	85	28.7	40	7	2
140	16.1	32	46	3	155	57	23.7	48	8	2
141	10.8	31	72	3	171	67	22.9	35
142	33.3	42	58	5	165	72	26.4	41	7	2
143	152.4	72	57	5	170	74	25.6	41	7	1	ゴルフ、写真	1	ウォーキング	1	5	60	2	2	2	2	2	3	1	3	1
144	32.8	80	54	3	173	80	26.7	35	8	2
145	35.2	70	60	3	176	54	17.4	37
146	26.0	50	65	3	180	78	24.1	41
147	17.2	39	61	2	174	63	20.8	37	6	1	木工、音楽	2
148	121.9	55	59	4	165	80	29.4	40	6	1	スキー、サイクリング	1	2	150	2	2	2	2	2	2	3	4	2	2
149	89.6	64	57	3	175	55	18.0	36	8	1	サッカー	1	サッカー	1	2	120	2	2	2	2	2
150	49.9	52	58	7	170	65	22.5	47	7	1	ドライブ	2
151	101.2	74	59	10	178	60	18.9	34	8	1	スノーボード	2
152	12.0	48	60	4	170	74	25.6	33	5	1	サウナ	2
153	0.1	12	166	61	22.1	27
154	32.0	68	49	8	164	68	25.3	36	6	2
155	29.7	34	73	10	175	65	21.2	33	8	1	読書、パソコン	2
156	16.4	22	62	14	169	56	19.6	35	8	1	スポーツ	2
157	8.5	29	65	3	167	81	29.0	36
158	0.1	5	167	55	19.7	31	6	2
159	28.1	52	52	5	164	71	26.4	38	6	2
160	28.7	76	72	7	170	63	21.8	31
161	23.9	56	56	5	171	60	20.5	24
162	4.1	67	46	3	169	73	25.6	38
163	82.8	58	39	5	35
精子番号	タバコ	タバコセゾゾ人	毎月1回以上自分で扱うもの
精子番号	己酸	喹喹汁
精子番号	鈴度(日)	錠	低脂肪乳	普通の牛乳	緑茶	ウーロン茶	果汁100%ジュース	野菜ジュース	乳酸菌飲料	スポーツリンク	コーヒー	炭酸飲料	低脂肪乳	普通の牛乳	緑茶	ウーロン茶	果汁100%ジュース	野菜ジュース	乳酸菌飲料	スポーツリンク	コーヒー	酸飲料
110	1	2	12	1	1	6	1	2	2	2	2	4	2	1	1	1	1	2	1	2
111	1	6	1	1	1	1	6	1	6	5	1	1	2	1
112	1	2	12	1	1	2	2	2	2	1	3	6	3	1	1	1	1	1	1	2	1	1
113
114	1	2	2	2	2	2	1	2	6	3	1	1	1	1	1	1	1	2	1
115
116	1	1	1	2	3	1	1	1	6	4	1	1	2	2
117	1	2	6	2	2	2	2	2	6	2	1	2	1	1	1	1	1	1	2
118	1	3	6	3	2	2	2	1	4	4	1	1	1	1	1	1	1	1	1
119	1	5	5	1	1	1	1	1	6	1	1	1	3	1
120	2	2	6	4	3	2	3	3	6	3	1	1	2	2	1	1	1	1	2	1
121	1	1	1	4	4	3	1	1	6	1	2	2	1	1	2
122	1	1	4	4	3	2	1	6	1	1
123	1	5	6	2	2	2	2	2	4	2	1	2	1	1	1	1	1	1	1
124	3	3	6	3	2	2	2	2	1	4	1	1	3	2	2	1	1	2	2
125	1	3	6	1	1	1	1	1	4	2	1	1	1	1
126	1	2	4	1	1	2	3	2	6	2	1	2
127	2	1	6	1	1	1	1	2	6	5	1	3	2	2
128
129	1	1	4	4	2	1	2	2	5	2	1	1	1	2
130	1	1	6	6	2	2	5	1	6	3	1	1	1	2	1	1	1	1	2	2
131
132
133	1	3	6	1	1	1	5	1	6	2	2	2
134
135	1	1	2	1	1	1	1	1	6	4	4
136
137	6	2
138	1	1	6	1	2	1	2	2	6	3	2	2
139	5	2	2	1	1	1	1	2	2	1	3	2	2
140	1	1	6	1	1	1	1	1	1	1	1
141
142	2	2	2	1	1	1	1	6	1
143	1	3	4	2	2	1	2	2	6	2	1	2	3	1	1	1	1	2	2	1
144	1	3	3	2	2	2	2	4	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
145
146
147	1	2	6	1	1	2	1	1	1	3	1	2
148	1	2	36	1	1	4	1	2	2	2	3	2	2	1	1	1	1	1	1
149	1	6	1	1	3	3	1	3	5	5	1	1	1	2	1	2
150	1	3	6	1	3	3	3	1	6	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
151	3	1	1	6	2	1	1	2	1	3	1	3	1
152	7	1	1	1	6	4	2	1	2	2	6	2	2	22	1	1	2
153	1	5	4	3	2	2	1	1	1	1	1	1	1	1	1
154	1	1	1	3	3	2	2	3	3	5	1	1	1	1	1	1	1	1	1
155	1	3	12	1	1	3	3	2	2	3	3	5	1	1	1	2
156	1	1	1	2	3	3	1	3	1	2	1	1	2
157	1	1	2	1	1	1	2	5	2	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
158	1	1	6	2	1	2	1	2	4	3	2	2	1	2	2	2
159	1	1	6	2	1	2	1	2	4	3	2	2	1
160
161
162
163
精子番号	濃度	運動率(%)	奇形率(%)	禁欲期間(日)	身長	体重	BMI	年齡	平均睡眠時間	趣味	習慣	短札やすい	農薬	PCBor ダイオキシン	放射線	一番長 <住ん だ場所	乳児期の業務摂取	頻引(1) 2	2	2	2	2	3	3	1	3
あり(1なし(2	2	2	2	2	2	2	2	2	2	2	2	2	2	2	3	3	3	1	3
精子番号	タバコ	タバコのめぐ人	每月1回以上自分で扱うもの
糧子番号	己酸	味噌汁	酒	强度
精子番号	頻度(日)	綻	り月	低脂防乳	普通の牛乳	綠茶	ウーロン茶	果汁100%ジュース	野菜ジュース	乳酸菌飲料	スポーツリンク	コーヒー	炭酸飲料	低脂防乳	普通の牛乳	綠茶	ウーロン茶	果汁100%ジュース	酸菜ジュース	乳酸菌飲料	スポーツリンク	コーヒー	酸飲料
164
165	1	1	5	6	2	1	1	1	1	6	2	1	1	3	3	1	1	1	1	2	1
166	1*1	1*5	1*12	2	2	4	4	1	1	1	4	4	1	1	1	1	4	3	2
167	7	5	12	1	2	6	1	1	4	1	2	6	5	3	1	3	1
168	2	2	3	3	1	1	1	3	6	3	1	1	2	1	1	1	3	2	2
169	1	3	2	1	3	2	2	2	3	6	4	1	1	1	1	1	2	1	2
170	1	2	0.5	2	3	2	2	2	2	1	5	2	3	1	1	1	1	1	1	1	2	1	1
171	7	1	12	1	6	4	4	2	2	5	4	5	5	1	2	2	1	1	1	3	2	3
172	1	6	6	2	1	3	1	5	4	1	1	1	1	1	2	1
173	1	4	6	3	3	6	3	3	5	3	1	2	2	1	1	1	1	1	1
174
175	1	1	6	1	4	1	1	1	3	5	4	2	1	3	2	2
176	1	5	6	4	1	1	2	4	4	2	1	6	4	1	1	1	4	2	2	2
177	1	1	6	1	2	1	1	2	5	5	3	2	1	1	1
178	1	3	4	1	5	5	4	4	1	1	1	1	1	1	1	1
179	1	1	6	2	1	1	1	1	6	2	3	1	3
180	1	1	1	1	6	1	2	2	1	2	1	1	1	2	2
181
182
183	4	1	6	6	1	1	1	1	2	1	1	2	2
184	1	2	3	5	2	2	2
185	1	1	6	6	2	1	1	2	3	2	2	2	1	1	1	1	1
186
187	7	2	24	1	1	4	6	3	2	5	3	4	4	1	2	2	1	1	2	1	1	1
188	1	4	1	1	1	1	1	2	6	3	2	2	2	2	2
189	1	1	6	1	3	3	1	2	6	3	2	2	1	2	1
190	1	2	4	4	2	3	5	4	4	4	1	1	2	2	1	1	1	2	1	1	1
191	1	6	6	6	2	3	3	5	6	5	1	2	2	2	2	1	1	2	1	1
192	1	4	4	4	4	4	4	4	5	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
193	1	2	6	2	2	2	5	2	6	3	1	1	1	1	1	1	1	1	2	1	1
194	2	2	4	2	2	4	2	2	2	4	1	1	2	1	1	2	1	1	1	1	2
195	1	1	6	6	2	1	2	2	6	5	1	1	1	1	1	1	1	1
196	1	1	3	3	1	1	2	3	2	2	2	2	1	1	1	1	1
197	1	1	2	2	1	1	1	4	6	3	1	1	1	1	1	1	1	1	2	3	2
198	1	1	6	2	2	1	2	1	4	1	1	1	1	1	1	1	1	1
199	3	6	2	1	1	1	1	2	1	1	1	1	1	2	2
200
201	1	1	6	4	3	3	1	1	6	4	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
202	1	2	3	1	2	1	2	2	3	3	1	1	1	1	1	1	1	1
203	1	2	6	2	3	3	2	3	5	5	2	2	2	1	1	2	1	2	2
204	6	1	6	3	1	1	1	4	4	4	1	1	1	1	1	1	1	1
205
206	5	1	4	4	5	5	1	2	6	3	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
207	3	1	4	4	1	1	1	2	6	3	2	2	2	2	3	2	2	2
208	1	1	2	6	1	1	1	2	6	4	1	1	1	1	1	1	1
209	1	1	2	2	2	1	1	1	4	2	1	1	1	1	1	1
210	1	6	6	3	2	6	2	2	5	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
211	6	6	6	2	1	6	1	6	5	1	2	2	2	1	2	1	2	1
212	1	4	6	3	1	1	1	3	6	3	2	5	2	1	2	1	1
213	2	3	6	2	3	3	3	2	6	3	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1	1
214	1	2	1	2	3	1	1	2	6	4	1	1	1	1	1	1
215
216
217	1	1	2	2	2	3	4	4	6	3	1	1	2	1	1
精子番号	タバロ	タバロの人	每月1回以上日分で扱うもの
精子番号	己酸	味噌汁	酒	维度
精子番号	飯み物頻度	飲み物一回量
## (A) Paternal DMRs

(a) H19 (AF125183)

(b) GTL2 (AL117190)

(c) ZDBF2 (AC007383)

(B) Maternal DMRs

(d) DIRAS3 (AF202543)

(e) NAP1L5 (AC108065)

(f) FAM50B (Y18504)

(g) ZAC (AL109755)

(h) GRB10 (AC004920)

(i) PEG1 (AB045582)

(m) RB1 (AL392048)

(n) SNRPN (U41384)

(o) ZNF597 (AC025283)
(p) ZNF331 (AC011487)

(r) PSIMCT-1 (AL110115)

(s) NNAT (AL109614)

(t) L3MBTL (AL031681)

(u) NESPAS (AJ251760)

(v) GNAS1A (AF246983)

(C) Non-imprinted regions
参考資料(2)-3 PCR-Luminex法で用いたオリゴプローブの塩基配列

Target genes	Sequence (5'—3')
H19	probe (CpG 9)	Me	TTATAGTTCGAGTTCGTTT
Un	ATTATAGTTTGAGTTTGTTT
probe (CpG 16)	Me	AGTTACGCGTCGTAGG
Un	AGTTATGTGTTGTAGGG
GTL2	probe (CpG 4)	Me	CCTAATAAATCGCGAACAA
Un	CCTAATAAATCACAAACAA
probe (CpG 8)	Me	GTTGTCGAGGTTTATAG
Un	CTATAAACCTCAAACAACT
ZDBF2	probe (CpG 1)	Me	ATTCAAAACCGCAATAAACT
Un	ATTCAAAACCACAATAAACTA
probe (CpG 4)	Me	CAACTACTCGAATAACTAAA
Un	CAACTACTCAAATAACCTAAA
PEG1	probe (CpG 15)	Me	TTATGGTGCGTCGAGAT
Un	GGTTATGGTGTGTTGAGAT
LIT1	probe (CpG 5)	Me	GTTATTGGTCGAAAGAGTT
Un	GTTATTGGTTGAAAGAGTT
probe (CpG 17)	Me	TGTTTTCGTCGTTGTCGAT
Un	TTGTTTTTGTTGTTGAT
probe (CpG 19)	Me	TGCGGTAGCGTTCGAT
Un	ATTGTGGTAGTGTTTTGATT
ZAC	probe (CpG 8)	Me	GGTACGTTCGAGCGGT
Un	GGTATGTTTGAGTGGTT
SNRPN	probe (CpG 16)	Me	AGGTTGGCGCGTATGTT
Un	AGGTTGGCGCGTATGTT
probe (CpG 19)	Me	AGGTTGGCGCGTATGTT
Un	AGGTTGGCGCGTATGTT
PEG3	probe (CpG 20)	Me	GCGGTCGAAGGCGTATTTA
Un	GTGGTTGAAGGTGTATTTA
## 参考资料(4) 血液 GCxGC 测定结果

ここでは、本研究における被験者血液試料のGCxGC-TOF-MSの測定結果であるクロマトグラムを、いくつか示す。全ての図において、横軸はGCxGCにおける1stカラムのリテンションタイム、縦軸は2ndカラムのリテンションタイムで、対応するリテンションタイムにおける応答（レスポンス）を色で表現してある（青：応答小→赤：応答大）。

## 参考资料4-1

GCxGC-TOF-MSにおけるトータルイオンクロマトグラムである。全測定質量数を積算して応答を表示してある。非常に多くの化合物が検出されていることがわかる。使用した2種類のGCカラム（1st及び2nd）及び装置設定条件において、標準物質で出現位置を確認できていない物質はUSM（unresolved complex mixtures）と表現されることがあるが、ほとんどの化合物はUCMである。中央付近に出現している化合物は、ステロイド系化合物であると考えられる。
## 参考资料4-2

試料測定と同一の装置設定条件においてPCBの標準物質を測定したクロマトグラムを示す。Mono～deca CBが高分離能で検出されていることがわかる。この情報及び質量数並びにフラグメントの情報により、PCBsを同定定量可能となった。上図はトータルイオンクロマトグラム、下図はPCBの各同族体に該当する質量数にてフィルタリングを行ったクロマトグラムである。

13.016 15.016 17.016 19.016 21.016 23.016 25.016 27.016 29.016 31.016 33.016 35.016 37.016 39.016 41.016 43.016 45.016 47.016 49.016 51.016 53.016
## 参考资料4-3

PCB各同族体（mono～octa）に含まれる各異性体に対するクロマトグラムを示す（参考資料(4)-3下図の拡大図に相当）。通常の一次元GCでは分離不可能である異性体（横軸の値が同じである物質）の一部が分離していることがわかる。
## 参考资料4-4

試料測定と同一の装置設定条件においてPOPsの標準物質を測定したクロマトグラムを示す。POPs化合物が高分離能で検出されていることがわかる。この情報及び質量数並びにフラグメントの情報により、POPsを同定定量可能となった。上図はトータルイオンクロマトグラム、下図はPOPsの各同族体に該当する質量数にてフィルタリングを行ったクロマトグラムである。
## 参考资料(4)-5

試料測定と同一の装置設定条件においてPCNsの標準物質を測定したクロマトグラムを示す。PCNs化合物が高分離能で検出されていることがわかる。この情報及び質量数並びにフラグメントの情報により、PCNsを同定定量可能となった。上図はトータルイオンクロマトグラム、下図はPCNsの各同族体に該当する質量数にてフィルタリングを行ったクロマトグラムである。
## 参考资料4-6

被験者のクロマトグラム一例である。Te～HpCBsが検出可能であった。

13.014 15.014 17.014 19.014 21.014 23.014 25.014 27.014 29.014 31.014 33.014 35.014 37.014 39.014 41.014 43.014 45.014 47.014 49.014 51.014 53.014

## 参考资料4-7

被験者のクロマトグラム一例である。PCBsに関しては同位体希釈法を用いた。内標準として添加した13C-Labeled-PCBsは問題なく検出可能であった。

13.014 15.014 17.014 19.014 21.014 23.014 25.014 27.014 29.014 31.014 33.014 35.014 37.014 39.014 41.014 43.014 45.014 47.014 49.014 51.014 53.014
## 参考资料(4)-8

被験者のクロマトグラム一例である。POPsに関しては、HCB、trans-nonachlor及びp,p'-DDEが検出された。

13.014 15.014 17.014 19.014 21.014 23.014 25.014 27.014 29.014 31.014 33.014 35.014 37.014 39.014 41.014 43.014 45.014 47.014 49.014 51.014 53.014

## 参考资料(4)-9

被験者のクロマトグラム一例である。マススペクトルパターンからテトラブロモベンゼンと推測された化合物が存在した。標準物質を用いて確認し、テトラブロモベンゼンであるとアサインされた。

13.014 15.014 17.014 19.014 21.014 23.014 25.014 27.014 29.014 31.014 33.014 35.014 37.014 39.014 41.014 43.014 45.014 47.014 49.014 51.014 53.014