Silviase/jgov_v1.4_full_ann huggingface dataset:
## 3 ）検量線

検量線は試料を蒸留水で希釈し6種類の濃度（0から1.0 μg/mL）を尿に添加して検量線（簡易標準添加法）の作成を行った。いずれも濃度に対応してArea/ISが増加した。図(1)-5に検量線を示す。

図(1)-5 フタル酸モノエステル8種類、リン酸ジエステル3種類の検量線

## 4 ）使用する容器等からの汚染の確認

採尿、尿保存容器からのフタル酸エステル類・リン系難燃剤代謝物の溶出を調べる目的で、8種類の当該物質の検出量を調べた。採尿カップ、保存容器には蒸留水50mLを注入、最終容器は15mL,ガラス容器で、前処理を行った際に保存したガラス管と同種類の10mLパイデックス製容器を用いた。これに、10mL蒸留水を注入した後、30分間超音波処理し、5日間室温で保存した。それぞれの容器の写真を図(1)-6に示す。採尿カップ、保存用に使用している採尿容器からの遊離状況を調べた。2cx-MMHPとMEHPが検出されているが、定量下限以下の濃度であった。以上の結果から、容器からのコンタミは、尿中代謝物の分析結果に影響を与える量は検出されていないと考えられる。同様に、DBP、DPhP、BEHPも分析結果に影響を与える量は検出されなかった。検出結果を表(1)-14に示す。
図(1)-6 尿カップ、捕集瓶、採尿・保存セット、保存試験管

表(1) - 14 尿カップ、捕集瓶、採尿・保存セット、保存試験管からの検出濃度

MiBP	2CX-MMHP	MnBP	MEHP	MBzP	5oxo-MEHP	MCPP	5ox-MEHP
尿カップ	—	1.8	—	1.9	—	—	—	—
捕集瓶	—	2.4	—	1.7	—	—	—	—
採尿・保存セット	—	1.2	—	1.7	—	—	—	—
保存試験管	—	1.7	—	1.6	—	—	—	—

単位は ng/mL

尿カップ、捕集瓶には蒸留水 50 mL を注入、採尿・保存セットには 7 mL, 保存試験管には 10 mL 注入後、30 分間超音波処理し、室温で 5 日間室温保存

## 5 ）尿から高濃度で検出された例

採尿された尿から高濃度で検出された代謝物のクロマト事例を図(1)-7に示す。リン酸代謝物も高濃度で検出されることが確認された。
MiBP 7.651 $ \mu $ g/mL

2cx-MMHFP 0.093 $ \mu $ g/mL

MEHP 0.127 $ \mu $ g/mL

MBZP 0.245 $ \mu $ g/mL

5oxo-MEHP 0.098 $ \mu $ g/mL

MCPP 0.016 $ \mu $ g/mL

図(1)-7 4人の尿からの測定事例と尿中濃度それぞれ代謝物のピーク強度は異なっている

## （３）無水フタル酸と２エチル－１-ヘキサノールの分析

## 1 ）フタル酸モノエステルから無水フタル酸への変換

生体内で抱合されていないフタル酸モノエステルはGC注入口で無水フタル酸とアルコールに変化する。図(1)-8にモデル図を示す。フタル酸エステル類は生体内でフタル酸モノエステルに代
謝され、GC/MSによる分析時に注入口で無水フタル酸とアルコールになる。注入口の温度は無水フタル酸の生成に対し、重要なパラメータとなる。図(1)-9のクロマトグラムは8種類のフタル酸モノエステル標準溶液がGC測定時に、無水フタル酸とアルコールになる事を示している。無水フタル酸の保持時間は10.3分である。

一方、5種類のフタル酸エステル類（DEHP、DBP、BBzP、DiBP、DnBP）はGC注入口の温度で無水フタル酸を検出しない。フタル酸エステル類濃度10 μg/mLまでは無水フタル酸にならないことをGC/MSで確認した。したがって、注入口付近で無水フタル酸に変化する反応は、フタル酸モノエステルの特徴的な反応で有ると考えられる。

図(1)-8 フタル酸モノエステルのGC注入口の変換モデル
図(1)−9 8種類のフタル酸モノエステルGC/MS分析(トータルイオン)における無水フタル酸とアルコール

保持時間10.3分が無水フタル酸,前方ピークは遊離したアルコールピーク、MEHPは無水フタル酸と2EHピークがみられている

## 2 ）GC注入口温度による無水フタル酸への変換率

図(1)-10はMEHPと8種類の混合フタル酸モノエステルのGC注入口温度変化による無水フタル酸の変化量を示した。GC.注入口の温度が上昇するにつれて無水フタル酸の変化量が増加し、GC注入口温度が280度を超えると変化量は一定となる。この実験はGC注入口温度300度の時の値を100%として計算している。フタル酸モノ2-エチルヘキシル（MEHP）からの2EHの遊離はMEHPの2-エチルヘキシル其はGC注入口の温度により遊離し、2EHになり、280℃を超えると遊離が一定となり、図(1)-10と類似した変化量を示す。2EHはDEHPが体内でMEHPになる時にも遊離され、尿中に存在している。
図(1)-10 GC注入口温度によるフタル酸モノエステルから無水フタル酸への変化300℃での無水フタル酸を100%とし他の温度での変換率を計算した

## 3 ）検量線と定量下限値および抽出率

無水フタルは10 μg/mLまで直線性を確認した。定量下限値は検量線を用いて0.01 μg/mLを添加した試料を5回測定し、標準偏差の3SDを検出下限値、10SDを定量下限値として求めた。計算による定量下限値は0.03 μg/mLが得られた。抽出率は8種類のフタル酸モノエステル混合物を酢酸エチルに溶解した時の測定値と、水に溶解し、酢酸エチルで抽出した時の測定値を比較した。それぞれ107％と95％を示した。表(1)-15に結果を示す。
表(1)-15 8種類のフタル酸モノエステルを用いた無水フタル酸の抽出率

濃度 1.51umol/L	濃度 15.1umol/L
平均濃度	偏差	平均濃度	偏差
標準溶液酢酸エチル溶解 (A)	0.350	0.044	3.617	0.142
標準水溶液の酢酸エチル抽出 (B)	0.375	0.066	3.437	0.169
抽出率 % (B/A*100)	107	95

8種類のフタル酸モノエステルを等量の酢酸エチルに混合し、GC上で無水フタル酸に変化させた濃度（A）と、同じく8種類のフタル酸モノエステルを水溶液に溶解し、酢酸エチルで抽出し、GC上で無水フタル酸濃度（B）の比を抽出率とした。

2EHの検量線は試料を水で希釈し6種類の濃度（0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 μg/mL）を作製した。定量下限値は、0.01 μg/mLを添加した試料を5回測定し、標準偏差の3SDを検出下限値、10SDを定量下限値として求めた。計算による定量下限値は0.02が得られた。2EHを直接酢酸エチルに溶解、測定した値と尿に2EHを添加し、酢酸エチルで抽出し測定した値の比を抽出率として計算すると、2EHの2種類の濃度（0.1 μg/mL, 1.0 g/mL）の抽出率は102％と86％であった。

## 4 ）酵素による加水分解の必要性

ラットにDEHPを投与し、その尿を用いて尿中2EHと無水フタル酸を分析した。酵素を添加し抱合を遊離（加水分解）した値と非酵素添加し分析した値とを比較すると、酵素を添加した試料では、数倍高い値を示した。尿中2EHはDEHPがMEHPになる時に遊離し、MEHPはGC注入口で2EHを遊離する。抱合をしている2EHはDEHPがMEHPになる時に遊離された物である。無水フタル酸が高値を示すのはDEHPの代謝物は抱合されおり、酵素で抱合を遊離することが分析時の無水フタル酸への変換の効率を高めているものと考えられる。（表(1)-16）。

表(1)-16 酵素による抱合遊離の必要性

非酵素 μg/mL	酵素添加 μg/mL
ラット 100	無水フタル酸	201.5	307.3
2 エチルヘキサノール	7.89	106.8
ラット 102	無水フタル酸	170.9	257.1
2 エチルヘキサノール	4.52	100.82

## 5 ）フタル酸モノエステルから無水フタル酸の生成

8種類のフタル酸モノエステル標準液が定量的に無水フタル酸へ変換されるかの確認を行った。表(1)-17に、フタル酸モノエステルの各濃度0.05, 0.1, 0.5, 1.0 $ \mu $ mol/Lと、変換された無水フタル酸濃度の関係を示す。いずれもフタル酸モノエステル濃度に対応し、直線的に無水スタル酸濃度が増加している。表中の傾きは、変換割合を示している。MEHPは傾きが0.523であり約半分が無水フタル酸になっていることを示している。フタル酸モノエステルの種類により変換割合が異なる。
表(1)-17 フタル酸モノエステルから無水フタル酸の生成

物質名	傾き	切片	相関係数
5oxo-MEHP	0.618	0.039	0.981
2cx-MEHP	0.323	-0.078	0.954
5ox-MMHP	0.662	-0.040	0.989
MEHP	0.523	-0.020	0.990
MnBP	0.122	0.077	0.900
MBzP	0.118	0.069	0.908
MiBP	0.503	0.049	0.990
MCPP	0.097	0.028	0.969
フタル酸	0.047	-0.022	0.922

モノフタル酸エステル類 $ \mu $ mol/L(X)から無水フタル酸 $ \mu $ mol/L (Y)

モノフタル酸エステル類濃度は0.05 $ \mu $ mol/Lから1.0 $ \mu $ mol/L

## 6 ）测定事例

6歳から8歳の児童185名の無水フタル酸と2エチル-1-ヘキサノールの分布を示す（図1-11）。幾何平均値はPHAが77.6 μg/gCr.、2EHは幾何平均値は57.5 μg/gCrで、どちらも対数正規分布を示した。
無水フタル酸 $ \mu $ g/gCr.

図(1)-11 無水フタル酸と2エチル-1-ヘキサノールの分布

無水フタル酸の幾何平均値77.6 μg/gCr.(GSD1.66)、2エチル-1-ヘキサノール幾何平均値57.5 μg/gCr.(GSD1.90) N:184名 6歳から12歳児（男女）

## （４）尿中代謝物、無水フタル酸、２エチル-１-ヘキサノールの関係とフタル酸エステル類曝露の指標値としての無水フタル酸濃度とDMHPの曝露指標としての２-エチル-１-ヘキサノール濃度１）測定事例

学童7-8歳（男子146名、女子101名）フタル酸代謝物とリン酸代謝物の平均値を表(1)-18に示す。DBPは男子が高値であるがその他は同じ値を示した。DEHP代謝物のMEHP、2cx-MEHP、5oxo-MEHP、5cx-MEHPとPHA、2EHの関係を相関係数で表(1)-19に示す。MEHP以外の代謝物はそれぞれ高い相関が見られる。特に5oxo-MEHP、と5cx-MEHPは高い相関を示している。PHAとDEHPの4種類の代謝物合計は男子、女子ともに、高い相関を示した。一方、2EHはいずれの代謝物とも、高い相関を示さなかった。各物質との濃度を比較する目的で濃度単位はmol/Lで示している。

フタル酸モノエステルは分析時に無水フタル酸になる事がわかった。このことからフタル酸エステル類5種類の代謝物質フタル酸モノエステル8種類の合計と尿中無水フタル酸濃度関係の関係を見ると男子では相関係数（r）0.631、回帰式$\mathrm{Y}=1.929\mathrm{X}+0.322$（X:無水フタル酸、Y:フタル酸）。
酸モノエステル合計）、女子r：0.774、$\mathrm{Y}=1.938\mathrm{X}+0.283$ が得られた（図(1)-12）。すなわち尿中のフタル酸モノエステルと高い相関を示し、男子、女子とも回帰式の傾きは同じであった。この結果は、フタル酸エステル類の総合曝露指標として、尿中の無水フタル酸濃度は有効な指標になり得ることを示している。

表(1)-18 7-8 歳児の男女別平均値

性別	男子(146名) 尿	女子(101名) 尿
平均值	算術平均	標準偏差	算術平均	標準偏差
クレアチニン(mg/100mL)	101.6	37.2	90.8	37.5
フタル酸エステル類代謝物
MEHP(μM/L)	0.128	0.077	0.092	0.108
2cx-MMHP(μM/L)	0.260	0.227	0.234	0.215
5oxo-MEHP(μM/L)	0.111	0.111	0.110	0.129
5cx-MEHP(μM/L)	0.173	0.146	0.142	0.204
2EH(μM/L)	0.387	0.379	0.281	0.421
MBzP(μM/L)	0.038	0.120	0.046	0.109
MCPP(μM/L)	0.016 未満	-	0.016 未満	-
MiBP(μM/L)	0.204	0.294	0.281	0.202
MnBP(MBP)(μM/L)	0.245	0.272	0.202	0.167
PHA(μM/L)	0.451	0.282	0.422	0.292
リン酸トリエステル類代謝物
DPhP(μM/L)	0.016	0.038	0.032	0.070
BEHP(μM/L)	0.061	0.108	0.040	0.056
DBP(μM/L)	0.229	0.209	0.058	0.119

表(1)-19 7-8 歳児の D E H P 代謝物の男女別相関

相関係数	MEHP	2cx-MEHP	5oxo-MEHP	5cx-MEHP	2EH	PHA	SUM
MEHP	0.203	0.103	0.100	0.299	0.056	0.344
2cx-MEHP	0.115	0.524	0.536	0.195	0.433	0.869
5oxo-MEHP	0.136	0.821	0.859	0.399	0.665	0.824
5cx-MPP	1.125	0.817	0.964	0.275	0.704	0.841
2EH	0.057	0.108	0.113	0.097	0.317	0.345
PHA	0.189	0.735	0.802	0.817	0.100	0.634
SUM	0.321	0.914	0.946	0.947	0.115	0.821

上段は男子 146 名、下段は女子 101 名の相関係数。PHA は無水フタル酸。単位は $ \mu $ mol/L SUM は MEHP + 2cx-MMHP + 5oxo-MEHP + 5cx-MEHP である。
図(1)-12 無水フタル酸とフタル酸モノエステル8種類合計との関連 男子146名、女子101名 年齢7-8歳

8種類：MEHP, 2cx-MMHP, 5oxo-MEHP, 5cx-MEPP, MiBP, MnBP, MBzP, MCPP

## 2 ）フタル酸エステル類曝露に対する尿中無水フタル酸の曝露指標値の提案

無水フタル酸はモノフタル酸類の合計と高い相関があることが明らかになった。この結果は、無水フタル酸がフタル酸エステル類の混合曝露の曝露指標になり得ることを示している。そこで、フタル酸モノエステルの、NOAEL値から、試行的に算出して求めた値を生物学的曝露指標値として提案する。DEHPのNOAEL値は環境省、厚生労働省、経済産業省とも同じでラットで3.7 mg/Kg/Day（精巣毒性で最も低い値）としている。基準マージンはラットとヒトの感受性の種間差を説明する3と個人差を説明する10の積30が妥当としている。環境省の報告では侵入経路は経口が98.80%、経口：5.60 μg/Kg/Day、吸入：0.07 μg/Kg/Day、経皮吸収はなしとしている。経口投与による吸収率はSchmidとSchlatter（1985）ら¹)によれば20から25％としている。高い吸収率を採用して25％とする。子ども体重は25Kg、マージンは30としてDEHPの体内への吸収量を計算すると、3.7 mg/Kg/Day×1/30×25Kg=3.083 mg/Dayが得られる。また子ども1日の尿量は成人の半分量0.75 L/Dayとすると、(3.08 mg/Day)/(0.75 L/Day)=4.11 mg/Lとなる。DEHP モル濃度：10.54 μmol/L、吸収率25％から10.54×0.25=2.635 μmol/Lが得られる。尿への代謝率65％とすると2.635×0.65=1.71 μmol/Lとなる。
モノ代謝物からGC.Injでの平均PHA変換率55%として求めるとPHAは1.71 μmol/L×0.55=0.94 μmol/Lとなる。PHA 0.94 μmol/Lは生物学的曝露指標値となる。これをμg/Lで表すと139.12 μg/Lとなり子どもクレアチニン平均：1.1g/Lで補正すると126.5=130 μg/gCrが得られる。これは今回の無水フタル酸の分布から見ると247名中約16名がこの生物学的曝露指標値を超えることが明らかとなった。

## 5 ．本研究により得られた成果

## （1） 科学的意義

1) 曝露レベルの定量的評価として、ダスト中フタル酸エステル類およびリン系難燃剤のGC/MSによる同時分析が可能となった。ダスト中に多くのフタル酸エステル類およびリン系難燃剤が含有されていることが明らかになった。

2) これまでフタル酸モノエステルとリン酸ジエステルの測定は異なる手順で別々に行われてきた。本測定方法の開発により、11種類の代謝物の一斉測定が可能となった。ヒトの尿に酵素（β-Glucuronidase/arylsulfatase）を添加し、抱合物質を遊離させることでより正確な代謝物量を得ることが可能となった。分析条件の開発により、フタル酸エステル類の尿中代謝物8化合物と3種類のリン酸ジエステルの同時分析が可能となり、簡易標準添加方法の開発により精度、感度よく低濃度（定量下限値は5-47 ng/mL）で評価可能となった。ヒトの曝露を評価できる。

3) 尿中無水フタル酸はフタル酸ジェステル類代謝物の総合計と高い相関を認めた。すなわち多種類のフタル酸エステル類の類の総合的な曝露指標となることがわかった。無水フタル酸の測定は、フタル酸エステル類の総曝露を調べるスクリーニングとして有用であることを示している。また日本で開発された新しい曝露評価手法として世界に発信が可能である。

4) フタル酸エステル類で最も低い値が示されているMEHPのNOAELから試行的に算出して求めた値を生物学的曝露指標値として提案する。無水フタル酸の生物学的曝露指標値は0.94μmol/L、これをμg/Lで示すと139.12μg/Lとなる。子どものクレアチニン平均：1.1g/Lで補正すると126.5=130μg/gCrが得られる。

## （２）環境政策への貢献

## ＜行政が既に活用した成果＞

特に記載すべき事項はない。

## ＜行政が活用することが見込まれる成果＞

1) 生物学的モニタリング検査は有害物質の体内への吸収量知る最も重要な手法検査の一つである。一つの方法で同時に多種類のフタル酸エステル類、リン酸トリエステル類の代謝物の分析が可能になるので混合曝露評価と混合生体影響評価が同時に可能になる。エコチル調査で行う予定の環境化学物質分析のフタル酸ジエステル、リン酸トリメチルの曝露評および健康影響評価に活用できる。
2) ヒトは多種類のフタル酸ジェステル類に曝露しており、生物学的モニタリングでは、それぞれのジェステル化合物に対応するモノエステル化合物の分析が必要である。すべてのモノエステルがGC分析時に無水フタル酸になることは、この無水フタル酸を測定することで生体中のフタル酸モノエステルの総量、言い換えると曝露されたフタル酸ジェステル類の総体内吸収量の指標となり得ることを示している。なお、水の存在下では無水フタル酸はフタル酸に変換するため、尿中に無水フタル酸は存在しない。フタル酸ジェステルはGC/MSで分析しても無水フタル酸にならず、またフタル酸そのものはGC/MSの分析ではmg以上なければ検出されないため、汚染の心配がない。またこの方法はエステル結合しているアルキル（アルコール類）を同時に分析することが可能である。本研究では、フタル酸ジェチルヘキシル（DEHP）の代謝物MEHPのアルキル基である2エチル-1-ヘキサノールを同時に分析した。この分析方法は多量検体の分析に適しており、エコチル調査で行う予定の環境化学物質分析のフタル酸ジェステル曝露評価に活用できると考える。

3) 生体中の物質を測定した場合、物質のリスク評価の許容基準値を決めるには2つの方法で行われている。①生体影響から決める場合、②環境の曝露濃度と対応して決める場合がある。一般には労働現場で生物学的許容値として多数の物質について公表されている。一般環境から曝露される物質の生体から排泄される物質を用いた許容基準値は少ない。高濃度の曝露を受ける可能性がある労働現場とは異なり、一般環境における曝露は低濃度であり、曝露に対する基準値を定めることは困難である。しかし、生体試料を測定して健康影響を調べる場合はなんらかの基準値を設定して用いること必要である。ところで、環境省の有害物質の評価書にはNOAEL値が決められている。NOEAL値は生体影響(主として動物のデータ)から求められており、NOAEL値を活用することは生物学的曝露指標を決めるうえで重要な評価値となりうる。そこで今回はフタル酸ジエチルヘキシルのNOAEL値を用いて、生体中から排泄される無水フタル酸の濃度を用いた、生物学的曝露指標となる評価値の決定を提案する。

## 6 ．国際共同研究等の状況

特に記載すべき事項はない。

### 7. 研究成果の発表状況

## （1） 誌上発表

## <論文（査読あり）>

特に記載すべき事項はない。

## くその他誌上発表（査読なし）>

特に記載すべき事項はない。

## （2） 口頭発表（学会等）

1）河合俊夫、坪井樹、乾谷正樹、荒木敦子、岸玲子、住野公昭：第84回産業衛生学会、東京
(2011)

「シックハウス症状解明のための超小型、軽量、拡散型サンプラーの開発—アルデヒド測定用サンプラー—」

2) 坪井樹、河合俊夫、乾谷正樹、荒木敦子、大前和幸、住野公昭、岸玲子：第84回産業衛生学会、東京（2011）

「シックハウス症状解明のための超小型、軽量、拡散型サンプラーの開発—VOC測定用サンプラー—」

3) T. Tsuboi, T. Kawai, A. Araki, Y. Ait Bamai and R. Kishi : International Society of Exposure Science 22nd Annual Meeting, Seattle, USA, 2012

“Determination of human urinary metabolites of five phthalate by gas chromatography-mass spectrometry - Exposure assessment to plastisizer and flame retardants and their risk on children $ (1) $ -”

4) T. Kawai, T. Tsuboi, A. Araki, Y. Ait Bamai and R. Kishi: International Society of Exposure Science 22 $ ^{nd} $ Annual Meeting, Seattle, USA, 2012

“Phthalic anhydride as a marker of total uptake of phthalate diesters -Exposure assessment to plastisizer and flame retardants and their risk on children (2)-”

5) 河合俊夫、坪井樹、荒木敦子、アイツバマイゆふ、岸玲子 : 第52回近畿産業衛生学会（2012）「可塑剤・難燃剤の曝露評価手法の開発と小児アレルギー・リスク評価への応用—尿中2-エチル-1-ヘキサノールの分析方法と測定事例—」

6) T. Tsuboi, T. Kawai, A. Araki, Y. Ait Bamai and R. Kishi: Environment and Health - Bridging South, North, East and West Conference of ISEE, ISES and ISIAQ. Basel, Switzerland (2013.08.19-23)

“Simultaneous analysis of phthalate and organophosphate triesters' metabolites in urine - Exposure assessment to plastisizer and flame retardants”

7) T. Kawai, T. Tsuboi, A. Araki, Y. Ait Bamai, S. Tajima, S. Cong and R. Kishi: Environment and Health - Bridging South, North, East and West Conference of ISEE, ISES and ISIAQ. Basel, Switzerland (2013.08.19-23)

“Biological monitoring of environments exposure to DEHP by urine analysis for 2-Ethyl-1-hexanol”

8) 坪井樹、河合俊夫、荒木敦子、アイツバマイゆふ、岸玲子：第83回日本衛生学会学術総会、金沢(2013.03.24-26)

「フタル酸エステル尿中代謝物の同時測定方法の開発：可塑剤、難燃剤の小児の健康影響1」

9) 河合俊夫、坪井樹、荒木敦子、アイツバマイゆふ、岸玲子：第83回日本衛生学会学術総会、金沢(2013.03.24-26)

「フタル酸ジエステル類評価としての無水フタル酸：可塑剤、難燃剤の小児への健康影響2」

10) 河合俊夫、坪井樹、荒木敦子、アイツバマイゆふ、岸玲子：第86回日本産業衛生学会、松山 (2013.05.14-17)
「GC / MSによるヒトの尿中2-エチルヘキサノールの定量フタル酸ジエステル類評価と

しての無水フタル酸可塑剤・難燃剤曝露と小児の健康影響」

## （3） 出願特許

特に記載すべき事項はない。

## （４）シンポジウム、セミナー等の開催（主催のもの）

特に記載すべき事項はない。

（５）マスコミ等への公表・報道等

特に記載すべき事項はない。

## (6) その他

特に記載すべき事項はない。

### 8 \. 引用文献

1) Schmid P, Schlatter Ch: Xenobiotica, 15, 251-256 (1985)

“Excretion and metabolism of di (2-ethylhexyl)-phthalate in man.”
# （２）学童を対象とした可塑剤・難燃剤曝露による小児アレルギーのリスク評価

北海道大学環境健康科学研究教育センター

岸 玲子、荒木 敦子、多島 秀司、

安住 薰（平成23-24年度）

〈研究協力者〉アイツバマイゆふ、叢石

平成23～25年度累計予算額：74,161千円（うち、平成25年度予算額：22,017千円）

予算額は、間接経費を含む。

## [要旨]

これまでに、可塑剤として広く使用されるフタル酸エステル類とアレルギーの関連が報告されているが、疫学研究は不足している。また、難燃性可塑剤として用いられるリン酸トリエステル類の曝露影響に関する科学的なデータはほとんどない。そこで、本研究では学童を対象とした疫学研究で自宅のダストと尿中のフタル酸エステル類・リン系難燃剤濃度とアレルギーとの関連について明らかにすることを目的とした。具体的には、①札幌市小学校に通う児童から収集保存済みのサンプルを用いて、ダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤濃度の分析、尿からの代謝物濃度の分析を実施し、ダスト中濃度と住環境、およびダスト中濃度・尿中代謝物濃度とISAAC調査票を用いたアレルギーとの関連を解析した。②北海道で実施している2万人規模の大規模出生コーホート登録者のうち7歳になる児童を対象に、自宅のダストと尿を収集し、ダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤濃度および尿中フタル酸エステル類代謝物・リン系難燃剤代謝物を分析し、アレルギーとの関連を解析した。

この結果、フタル酸エステル類のうち最も多く使用されているDEHPのダスト中濃度および尿中代謝物濃度は諸外国と比較して日本では同程度から高めであることが明らかになった。また、ダスト中DEHPやDnBP濃度が高いと学童や居住者のアレルギー症状のうち鼻結膜炎のリスクを有意にあげ、その関係は大人よりも子どもの方が大きかった。ダスト中DEHPやDiBP濃度は室内の内装材としてPVCやフローリングを利用していると有意に高いことが明らかとなった。尿中代謝物濃度は大人よりも学童や幼児の方が高かったが、アレルギーとの関連はなかった。ダスト中リン系難燃剤濃度は諸外国と比較して日本の方が高く、TDCPP濃度が高いことが学童および居住者のアトピ一性皮膚炎のリスクを有意にあげた。

[キーワード]

フタル酸エステル類、リン系難燃剤、ダスト、尿、学童

### 1. はじめに

第二次大戦後、合成化学物質の生産量は1959年の年間700万トンから2000年には2.5億トンと、飛躍的に増大した。この結果、これまでは環境中に全く存在しなかった化学物質が環境中に放出されるとともに、それらの曝露による健康への影響が懸念されるようになった。特に、近年増加
している小児のアレルギー増加の原因の一つとして、環境中の化学物質曝露の影響が懸念されている。そこで、本研究では工業的に生産量が近年著しく増加していて、かつ動物実験で感作性を有するとされる化学物質の中で、フタル酸エステル類やリン酸トリエステル類について注目した。

フタル酸エステル類はポリ塩化ビニル（PVC）の可塑剤として広く使用されてきた。このうちDEHPは内分泌かく乱物質としての生殖毒性などの影響が問題となり、日本でも経口摂取される油性食品に接触する器具・容器包装等、あるいは玩具などに関してはある程度の規制が行われた。しかし多くの建築資材、内装材、家庭用電化製品等にはこれら可塑剤が含まれているが規制は未だなされていない。動物実験では、マウスにおけるIgEまたはIgG1増加 $ ^{1-3} $ など、アレルゲンへの感作におけるフタル酸エステル類のアジュバント効果が報告されている。海外では、住宅内のプラスチック系内装材の使用、あるいは室内ダスト中フタル酸エステル類濃度と児童の気管支症状、喘鳴、喘息との関連が報告され $ ^{4-9} $ 、近年増加しているアレルギー症状の誘発と室内における可塑剤曝露との関連性が疑われている。しかし、世界的に見ても疫学研究とその基盤となる基礎研究は不足しており、早急に着手すべきことがWHO・IARC（国際がん研究機構）会議などで、喫緊の課題として要請されている（IARC-NIOSH:米国産業安全衛生研究所ジョイントミーティング、2009）。また、DEHPやDnBPの使用は最近、やや減少してきているが、その代替としてDiBP、DiNPが使用されているDEHPの分解物である2-Etylhexanol（2EH）はシックビルディング症候群の原因になりうることが報告されているが $ ^{10} $ 、2EHの室内環境濃度の指針値は未だ設定されておらず、室内および環境汚染に関しては放置されているのが現状である。

一方、難燃性可塑剤としては、わが国では従来からリン酸トリエステル類が主に用いられてきた。世界的にはこれまで臭素系難燃剤が主に使われてきたが、POPs（Persistent Organic Pollutants）条約による規制がかかり、最近はリン酸トリエステル類に移ってきている。しかし世界的にはリン酸系難燃剤の曝露影響に関する科学的なデータが未だほとんどないのが現状である。

このようにフタル酸エステル類およびリン酸系難燃剤の環境曝露影響が懸念されているが、個人の曝露評価としては室内濃度のみならず尿中代謝物量による評価系の確立が重要である。家庭環境のみならず、学校や公共施設など移動中も含めた1日の個人の総取込み量の指標として尿など生体試料を用いた代謝物濃度の測定からの曝露量推定は、子どもで大人より有意に高く $ ^{[11]} $ 、また妊婦の曝露量は先進国（ドイツ、ノルウェー、米国）の方が新興国（中国、ペルー）よりも多い可能性が示唆された $ ^{[12-14]} $ 。しかし、日本のデータはない。さらにリン酸トリエステル類については世界的に見ても尿中代謝物として4化合物を分析したという報告があるのみで $ ^{[15,16]} $ 、疫学的な健康リスク評価の報告は内外で未だ全く行われていない。

## 2 ．研究開発目的

学童を対象とした疫学研究で曝露とアレルギー症状へのリスクに関して明らかにすることを目的とする。

## 3 ．研究開発方法

（１）札幌市小学生を対象にしたアレルギーと自宅環境調査
平成20年から22年度に厚生労働科学研究 健康安全・危機管理対策総合研究事業「シックハウス症候群の原因解明のための全国規模の疫学研究-化学物質及び真菌・ダニ等による健康影響の評価と対策-」として収集済みのサンプル検体を用いて、ダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤、尿中フタル酸エステル類代謝物濃度の分析とアレルギー症状との解析を実施した。

## 1 ）収集済みの調査データおよびサンプル検体について

札幌市公立小学校 12校の学童128軒の訪問を実施し、2カ所に分けて採取したダスト（居間の床全面（以後、床ダスト）と床より上の棚、調度品、テレビセット、オーディオ機器、ドア枠、照明機器などの上に堆積したダスト（以後、棚ダスト））および家族全員の尿を-20℃で保存してあった。

## 2 ）ダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤と住環境との関連の解析

ハウスダストは、紙のダストバック(Nichinichi Pharmaceutical Co., Ltd., Mie, Japan)を取付けた同じハンディークリーナー(National HC-V15, Matsushita Electric Works, Ltd., Osaka, Japan; 145W)を用いて住居の居間を2カ所に分けて採取され、分析に不要な毛髪や紙屑、食べ物屑などをその場でピンセットを用いて取り除き、あらかじめアセトンでフタル酸エステルの汚染を除去した共栓付きガラス試験管に入れ、フッ素テープで口を塞ぎ、アルミホイルで包み、分析まで-20℃の冷凍庫で保管してあった。保存ダストにはアセトン1mLを加えて15分超音波抽出後、2,500 rpmで10分遠心分離を行い、上清をGC/MSにてフタル酸エステル7化合物：dimethyl phthalate (DMP)、diethyl phthalate (DEP)、di-n-butyl phthalate (DnBP)、di-iso-butyl phthalate (DiBP)、benzyl butyl phthalate (BBzP)、di(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP)、di-iso-nonyl phthalate (DINP)、およびリン系難燃剤11化合物：trimethyl phosphate (TMP)、triethyl phosphate (TEP)、tripropyl phosphate (TPP)、tris(2-cloro-iso-propyl) phosphate (TCIP)、tris(2-ethylhexyl) phosphate (TCEP)、tris(butoxyethyl) phosphate (TBEP)、tris(1,3-dicloro-2-propyl) phosphate (TDCPP)、triphenil phosphate (TPhP)、triclesyl phosphate (TCP)を測定した。測定済みの床ダストおよび棚ダスト中のフタル酸エステル・リン系難燃剤濃度を用いて住環境との関連を解析した。なお、一部の床ダスト（床ダスト80サンプル）については、厚生労働科学研究で分析済みであった。床ダスト中および棚ダスト中のフタル酸エステル・リン系難燃剤濃度比較は、Wilcoxon matched rank testを用いて行った。ダスト中のフタル酸エステル濃度と連続変数の住環境（築年、床面積、掃除頻度など）との関連は、Spearman’s rank correlation testを用いた。ダスト中のフタル酸エステル濃度と2値のカテゴリカル変数の住環境（住居の種類、構造など）との関連はMann-Whitney U test、3値以上のカテゴリカル変数（床材の種類、世帯収入など）はKruskal-Wallis testを用いて解析し、さらに多重比較を行い、Bonferroniで補正した。床材の種類と濃度との関連は、Kruskal-Wallis testで有意であった項目に対して豹変量を調整し、重回帰分析を行った。PVC内装材の数と濃度との関連は、Jonckheere-Terpstra testを用い、さらに多重比較を行った。多重比較の際には、「PVC指数=0」をレファレンスとして「PVC指数=1」、「PVC指数=2」、「PVC指数=3」についてそれぞれ解析を行った。交絡要因はダンプネスの5項目（結露、カビ発生、かび臭さ、風呂場のタオルの乾きにくさ、5年以内の水漏れ経験）を0-5のインデックス化した「ダンプネスインデックス」と世帯収入である。重回帰分析において各フタル酸エステル濃度は最小二乗平均
（Least Square Mean: LSM）で表記した。リン酸トリエステル類については、住居環境とリン酸トリエステル類の関係について、Mann-Whitney U testを行った。ダスト中のフタル酸エステル濃度と連続変数の住環境（築年、室温、掃除頻度など）との関連は、Spearman’s rank correlation testを用いた。

## 3 ）ダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤濃度とアレルギーとの関連の解析

床ダストおよび棚ダスト中のフタル酸エステル・リン系難燃剤濃度を用いてアレルギーとの関連を解析した。アレルギーについては世界的に用いられるISAAC（The International Study of Asthma and Allergy in Childhood）調査票を用いて過去1年以内に以下の質問項目いずれにも「はい」と回答した場合をそれぞれ喘息・アレルギー性鼻結膜炎、アトピー性皮膚炎ありと定義した $ ^{17,18} $ 。喘息

① 最近12か月間に、胸がゼーゼー、またはヒューヒューといったことがある

鼻綺膜炎：

② 最近12か月間にかぜやインフルエンザにかかっていないときに、くしやみ、鼻水、鼻づまりで困ったことがある

③ 最近12か月間に、これらの鼻症状に伴って目がかゆくなったり、涙が止まらなくなったりしたことがある

## アトピ一性皮膚炎

① 今までに6か月間でたり引っ込んだりするかゆみを伴った湿疹で困ったことがある

② 最近12か月間に、そのようなかゆみを伴う湿疹がでたことがある

それらのかゆみを伴った湿疹は次の箇所に起こった（ひじの屈曲面、ひざの裏側、足首の全面、臀部の下面、首や耳や目の周りなど）

ダスト中のフタル酸エステル類、リン酸トリエステル類濃度と児のアレルギー症状との関連は、ロジスティック解析によって濃度が10倍になるごとのオッズ比（95%信頼区間（CI））を求めた。調整因子は、性、学年、ダンプネスインデックス、親のアレルギー歴、世帯年収である。

## 4 ）ダストを介したリン酸トリエステル類の摂取量推定

ハウスダスト中のリン系難燃剤濃度を用いて、幼児および小学生が、ハウスダストを介したリン酸トリエステル類の1日の摂取量を以下の計算式を用いて推定した $ ^{[19]} $ 。

推定摂取量＝ダスト中濃度×ダスト摂取量(mg/day)／（体重(kg)×1000）

この摂取量とNOWELを基に計算されたReference does（以下RfD） $ ^{20} $ と比較した。

## 5 ）尿サンプルの分析

児童およびその家族全員のスポット尿を収集し-20℃で保管していた。この保存尿を用いて、個人曝露量評価としてサブテーマ（1）で確立したフタル酸エステル類代謝物8化合物を分析した。

## 6 ）尿中フタル酸エステル類代謝物濃度とアレルギーとの関連

尿中フタル酸代謝物濃度とアレルギー症状との関連は、ロジスティック解析によって濃度が10倍になるごとのオッズ比（95%信頼区間（CI））を求めた。調整因子は、性、学年、親のアレル
ギー既往、世帯年収で調整である。尿中フタル酸代謝物濃度とダスト中フタル酸エステル濃度との関連は、ダスト中濃度と尿中代謝物濃度の両方が揃う126名についてスペアマンの相関で求めた。全ての統計解析はp<0.05を統計学的有意差ありとし、統計ソフトはSPSS ver. 19 for Machintosh (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) を使用した。

## 7 ）倫理的配慮

本研究は、北海道大学大学院医学研究科・医学部の医の倫理委員会の承認を得て実施した。調査内容はすべて文書で説明し、調査票の回答をもって同意とみなした。

## （２）北海道スタディ大規模コーホートを用いた研究

「環境と子どもの健康に関する北海道研究（北海道スタディ）」は、平成15年に厚生労働科学研究費補助金・化学物質リスク研究事業として開始した全道規模の出生コーホート研究である。北海道内全域の産科37施設で2003年に開始し、2012年12月までに妊婦20,929人が登録している。このうち平成25年12月末までに7歳になった児童5,431名を対象に、7歳調査票を送付してアレルギーに関する調査を、厚生労働科学研究として実施している。

## 1 ）对象者

本研究では、7歳に調査票を送付する際にに自宅ダストおよび尿採取への協力可否を問い合わせた。調査票の返送があった3,059名のうち、自宅ダストおよび尿採取に協力しても良いと回答が得られた対象者1,633名（協力率53.3%）にダスト収集用のダストバッグ、尿カップ、住環境に関する調査票を送付、1,211名（回収率74.2%）から回収した（郵送によるサンプルの回収を以下、郵送法と記載）。

さらに、郵送法とは別途に札幌市およびその近郊に居住し、訪問調査に協力しても良いと回答が得られた対象者に、住宅訪問による室内環境調査を実施した。平成24年と25年の各10月から11月にかけて、訪問のアポイントが成立した91軒に訪問調査を実施した。ダストは居間および寝室から床ダストおよび棚ダストを採取した。なお、「床ダスト」「棚ダスト」の定義、および採取方法については（1）の札幌市小学生を対象にした自宅環境調査と同様である（訪問によるサンプルの回収を以下、訪問法と記載）。

## 2 ）調查票

住環境に関する調査票の記載項目は、自宅の種類、構造、築年、1年以内のリフォームの有無、掃除頻度、フローリング床材の有無、ダンプネスの有無（結露、カビ発生、カビ臭、5年以内の水漏れ経験）が含まれる。

なお、児の性別、身長、体重、食物アレルギー、ISAACのアレルギー症状、集団保育歴の有無、兄弟の数、両親のアレルギー歴、両親の喫煙状況、室内喫煙者の有無、世帯収入、ペットの飼育の有無、暖房設備の種類、絨毯敷詰めの有無、強制換気の有無は7歳調査票の回答を使用した。

## 3 ）ダストの採取方法

ハウスダストは送付したダスト収集用のダストバックを掃除機に取付けて、各家庭の居間と寝
室で採取するよう依頼した。採取したダストは、ダストバックごとアルミホイルで包み、チャック付きのビニール袋に入れ冷蔵にて返送された。返送されたダストは150μmの篩を用いてファインダストをふるい分け、フタル酸エステル類・リン系難燃剤測定用には、アセトン洗浄した共栓付ガラス管に分取後、フッ素テープを巻いて密閉し、ダニアレルゲン測定用にはマイクロチューブに分取し、これらのサンプルは全て分析時まで-20℃で保存した。ダスト中のダニアレルゲン量については、ダニ抗原Der f1、Der p1測定キットを用いてELISA法で分析した（ニチニチ製薬株式会社）。

## 4 ）尿の収集方法

児の朝一番のスポット尿のカップへの採取を保護者に依頼し、冷蔵にて返送された。返送された尿はアセトン洗浄した共栓付ガラス管に分取し、フッ素テープを巻いて密閉後、分析時まで-20℃で保存した。

## 5 ）コーホート内症例と対照の抽出

7歳調査票、郵送法にて回収したダスト、尿サンプル、住環境に関する調査票の全てが揃う者の中からISAAC調査票に基づく喘息、アレルギー性鼻結膜炎、アトピー性皮膚炎のいずれかのアレルギーがある児221名をケースとした。これらの症状がいずれも無い児をコントロールとし、男女、出生年、および両親いずれかのアレルギー有無の分布がケースと同じになるようにコントロール児221名を抽出した。コーホート内ケースとコントロール各221人、合計442人のダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤、尿中代謝物濃度を測定した。

## 6 ）ダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤の測定

ダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤の分析をサブテーマ（1）で実施した。ダストは25 mg分取してアセトン1 mLを加えて15分超音波抽出後、2,500 rpmで10分遠心分離を行い、上清をGC/MSにてフタル酸エステル7化合物：dimethyl phthalate (DMP)、diethyl phthalate (DEP)、di-n-butyl phthalate (DnBP)、di-iso-butyl phthalate (DiBP)、benzyl butyl phthalate (BBzP)、di(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP)、di-iso-nonyl phthalate (DINP)、およびリン系難燃剤11化合物：trimethyl phosphate (TMP)、triethyl phosphate (TEP)、tripropyl phosphate (TPP)、tris(2-cloro-iso-propyl) phosphate (TCIP)、tris(2-ethylhexyl) phosphate (TCEP)、tris(butoxyethyl) phosphate (TBEP)、tris(1,3-diclore-2-propyl) phosphate (TDCPP)、triphenyl phosphate (TPhP)、triclesyl phosphate (TCP)を測定した。なお、ダスト中の測定および前処理には、アセトンで15分超音波洗浄を行ったピンセットやガラス試験管などの機器を用いた。

## 7 ）尿中フタル酸エステル類・リン系難燃剤代謝物の測定

分析はサブテーマ（1）が実施した。

## 8 ）解析

フタル酸エステル類・リン系難燃剤のダスト中濃度および尿中代謝物濃度の検出下限値以下の値は、検出下限値の半値を代入した。アレルギー症状の有無と住居環境の関連はχ2検定、ダスト
中フタル酸エステル類およびリン酸トリエステル類濃度とアレルギー症状との関係は、多変量ロジスティック回帰分析を用いて解析した。交絡要因は、ダンプネスの有無、室内喫煙者の有無、ペットの飼育の有無、ダストサンプルの分析年度、世帯収入である。

郵送法と訪問法の調査協力住宅の特徴については、 $ \chi^{2} $ 検定、Mann-Whitney U 検定を用い解析した。全ての解析は、SPSS ver.19 を用いて、P<0.05 を統計学的有意性ありとした。

## 9 ）倫理的配慮

本研究は、北海道大学環境健康科学研究教育センター、および北海道大学大学院医学研究科・医学部の医の倫理委員会の承認を得て実施した。調査内容はすべて文書で説明し、調査票の回答をもって同意とみなした。

## 4 ．結果及び考察

## （１）札幌市小学生が居住する住宅環境とダスト中フタル酸エステル類・リン系難燃剤

## 1 ）ダスト中フタル酸エステル類濃度の分布

調査した128軒のうち、71.9％がフローリングの床材、88.3％がPVCの壁材、85.9％がPVCの天井材を使用していた。住宅の種類および構造は、一戸建と集合住宅、木造と鉄筋・コンクリートでほぼ同程度であった。

ダスト中フタル酸エステル類濃度の分布を表(2)-1に示す。床ダスト中および棚ダスト中のDEHPはともに最も高濃度に測定された。DEHPとDiNPがともに全ての床ダストサンプルから検出され、続いてDnBP (95.3%)、DiBP (93.0%)、BBzP (68.0%)の順で検出された。棚ダストサンプルでは、DiNPとDiBPが全てのサンプルから検出され、続いてDEHP (99.2%)、DnBP (97.7%)、BBzP (85.2%)の順で検出された。DMPとDEPは床および棚ダストサンプルのどちらからも、半数以上が検出されなかったため本研究の以後の解析からは除外した。床ダストと棚ダスト中のフタル酸エステル濃度との比較では、いずれの化合物においても床ダスト中濃度と比較して棚ダスト中濃度は有意に高濃度であった。この理由としては、①棚ダストは多くの種類のプラスチック製品（電化製品、収納棚、玩具など）や非プラスチック製品でも塗料や接着剤が施された製品などの表面からダストが採取されていること②床ダストに比べ棚ダストは、長期間物質表面に堆積している $ ^{21} $ ため多くのフタル酸エステルが含まれていることが考えられる。したがって、棚ダストのように高い場所より採取されたダスト中のフタル酸エステル濃度は長期間の曝露レベルを示し、床から採取したダストは短期間の曝露レベルを示すことが示唆され、ハウスダスト中の濃度を曝露評価として用いる際には、ダストがどこから採取されたのかということを考慮することが重要であると言える。
表(2)-1 ダスト中フタル酸エステル類濃度の分布 (n=128)

LOD	Floor
Min	25%	Med	75%	Max	Detection (%)
DMP	0.5	<LOD	<LOD	<LOD	<LOD	4.6	5.5
DEP	0.5	<LOD	<LOD	<LOD	<LOD	58.7	16.4
DiBP	0.5	<LOD	1.5	3.1	6.1	97.4	93
DnBP	2.0	<LOD	7.5	16.6	32.4	1670	95.3
BBzP	1.0	<LOD	<LOD	2	5.4	139	68
DEHP	1.0	213	786	1110	1740	7090	100
DINP	2.0	11.9	66.1	139	276	2100	100
DEHA	4.0	<LOD	4.6	8	13.6	1100	82.8

$ ^{b} $ Spearman’s rank correlation test between floor and multi-surface dust.

$ ^{a} $ Significant differences between floor and multi-surface dust were analyzed by Wilcoxon matched rank test.

$ ^{*}P<0.05,\ ^{**}P<0.01 $

Multi-surface	P^{a}	$ \rho^{b} $
Min	25%	Med	75%	Max	Detection (%)
<LOD	<LOD	<LOD	<LOD	4.15	5.47
<LOD	<LOD	<LOD	<LOD	9.76	11.7
0.6	1.8	2.5	3.6	26.6	100	0.009	0.293**
<LOD	17.2	34	75.2	1380	97.7	<0.001	0.206*
<LOD	1.76	3.9	10.5	267	85.2	<0.001	0.263**
<LOD	1140	2290	4460	44000	99.2	<0.001	0.097
18	99.7	203	443	15500	100	<0.001	0.258**
<LOD	13.7	25.9	42.2	1670	88.3	<0.001	0.233**

LOD: Limit of detection; Med: Median.

## 2 ）ダスト中のフタル酸エステル類濃度と住環境との関連

住環境と床ダスト中フタル酸エステル類濃度との関連を表(2)-2、棚ダスト中フタル酸エステル類濃度との関係を表(2)-3に示す。床材にフローリングを使用している住居では、床ダスト中のDiBP濃度が他の床材と比較して有意に高く、床材にPVCを使用している住居では、床ダスト中のDEHP濃度が他の床材と比較して有意に高濃度であった。一方で、壁材にPVCを使用している住居では、棚ダスト中のDEHPとDiNP濃度がその他の壁材と比較して有意に高濃度であった。また、一戸建の住居、および木造の住居は、棚ダスト中のDEHP濃度が集合住宅と鉄筋・コンクリートの住居と比較してそれぞれ有意に高かった。DnBPとDEHP濃度は床と棚ダストともに住居の築年と有意な正の相関を示した。住居のダンプネスと健康との関連を検討することを目的として行われたスウェーデンの横断研究では、築年の古い住居より採取したダストのDEHP濃度はより高濃度であったことが報告されている $ ^{4} $ 。日本では2000年にDnBP、2001年にDEHPの室内濃度指針値が設定されていることから（国立医薬品食品衛生研究所）、DnBPおよびDEHPの生産量、出荷量はともに減少傾向である。日本可塑剤工業会の年報によると、2008年度のDnBP出荷量は2,521トンであるのに対し、2011年度は1,531トン。2008年度のDEHP出荷量は162,520トンであるのに対し、2011年度は128,772トンであった。よって、新しい住居と比較し古い住居では、より高濃度のDnBPやDEHPが内装材や家具などに含まれている可能性が示唆された。その他、床面積、室内の平均気温、平均湿度とはいずれも有意な関連は見られなかった。

図(2)-1に床ダスト中の(a)DiBP、(b)DEHP 濃度と床材の種類との多変量回帰分析の結果を示す。床ダスト中のDiBP濃度はフローリングの床が他の床材と比較して有意に高かったが、ダンプネスインデックスと世帯収入で調整後、PVC床とフローリングの床が絨毯およびその他の床と比較して有意に高濃度となった。フローリングは4-5枚の薄い板を接着剤で貼付け、表面には光沢材などが施された住宅内装材である。これらの接着剤や光沢材等にはDiBPが含まれている $ ^{22} $ 。近年、日本の住居の床材はフローリングが主流となっているため、フローリングからのDiBPの曝露が寄与される。床ダスト中のDEHP濃度は、PVC床が他の床材と比較して有意に高く、それはダンプネスインデックスと世帯収入で調整後も変わらなかった。Bornehagらの研究でもPVCの床およびPVCの天井材を使用している住居でそれぞれ棚ダスト中のDEHP濃度が高かったことが認められている $ ^{41} $ 。フタル酸エステルは含まれている製品と化学結合をしておらず、DEHPはPVC製品内部から