Silviase/jgov_v1.4_full_ann huggingface dataset:
しては、保護者からも書面による同意を得て進めた。なお、本研究は東北大学大学院医学系研究科倫理委員会に研究計画を提出し、その承認を得て実施した。生体試料を本サブテーマ担当の分析機関に移動する場合には、連結可能匿名化処理した上で、数字からなるIDによってのみ個人を識別した。

## （２）赤血球膜リン脂質中PUFA予備分析

疫学調査では、血液を採取後に分析機関まで送付する必要がある。少なくとも、不飽和脂肪酸の場合は、赤血球のまま冷凍保管した場合、過酸化などによりPUFAの分解が強く懸念された。このため、末梢血をEDTA採血した後の赤血球膜リン脂質中PUFAの安定性を確認するため、サブテーマ1と連携し6名のボランティアより末梢血を採血し、以下の7つの方法で赤血球膜PUFAの分析を行って比較した。赤血球膜成分から脂肪酸を抽出する際には、全血の遠心処理、赤血球画分の洗浄、赤血球の溶血、超遠心処理による赤血球膜の精製、脂質抽出といった過程がある。そこで、1）採血当日中に脂質抽出まで実施し、脂肪酸画分を凍結した場合、2）遠心処理後、赤血球層のまま24時間冷蔵保存し、その後に処理した場合、3）同様に3日間冷蔵保存し処理した場合、4）遠心処理後に生理食塩水で洗浄後、24時間冷蔵保存し処理した場合、5）洗浄処理後に0.01M Tris緩衝液で溶血し24時間冷蔵保存後に処理した場合、6）溶血液をさらに超高速遠心処理によりヘモグロビン成分を洗浄した精製膜画分を冷凍保存、7）遠心処理後の赤血球画分をそのまま3週間冷凍保存し、解凍後に脂質抽出した場合。以上の方法についてそれぞれよりPUFAの分析を行った。なお、採血は、午前中に空腹時採血として実施した。赤血球膜リン脂質中の脂質との比較のため、上記の1)の血漿成分についてもPUFAの分析を実施した。

## （3） 脂肪酸分析

採血に際しては、前夜における飲酒を控えるよう依頼し、採血は午前中に空腹時採血として実施した。抗凝固剤としてEDTA-2Naを含む真空採血管で採血を行い、1600xg、10分間遠心分離を行い、血漿と血球に分離した。血漿は生化学検査などに利用し、血球画分は採取後3日以内に分析機関に届くよう冷蔵で送付した。

赤血球膜リン脂質中脂肪酸分析については、既報 $ ^{5)} $ に基づいて分析を実施した。簡単には、赤血球層を生理食塩水で洗浄、バッフィーコートを除去後、0.01M-トリス塩酸バッファー(pH7.4)を加え溶血、超遠心による洗浄を5回繰り返して赤血球膜成分を取り出した。膜脂質はさらに脂質抽出後、薄層クロマトグラフィーによってリン脂質画分を得た。脂肪酸をメチル化後、ヘキサンで抽出、日立G-5000ガスクロマトグラフィーで分析した。得られたクロマトグラフは日立クロマトグラフィー、データステーションによって解析した。

解析は赤血球膜リン脂質中AA、EPA、DHA、ドコサペンタエン酸（DPA；22:5n-3）、EPA/AA比、DHA/AA比および(EPA+DHA)/AA比の各指標について実施した。統計解析については、正規分布を示さない指標の場合は、対数変換後に解析を行った。

予備検討では血漿中PUFAについても、同様な方法にて分析を行った。血漿中のPUFAは直前の食事の影響を受けると懸念され、赤血球膜を用いた方が適切と考えられる。しかしながら、血漿でのPUFA分析は赤血球膜処理などの煩雑な前処理を省略でき、血液を遠心処理後に冷凍保管が可能である。多数検体を扱う疫学では試料の前処理が困難となると不利であることから、血漿は有用
な試料とも考えられた。このため本予備検討でも、あらためて血漿中PUFAが利用できるのかを比較した。

## （４）基本属性の測定

基本属性の調査方法はサブテーマ1に詳細に記載したが、このうち食物摂取については、自記式食事歴法質問票であるDHQLおよびその簡易版であるBDHQにより実施した。本サブテーマでは、採血に合わせて実施したDHQLおよびBDHQから算出した栄養摂取状況と赤血球膜リン脂質PUFAとの関連性を検討した。

## （５）調査結果の返却

得られた測定結果については、サブテーマ1を介して、研究協力者本人に返却することとした。その詳細についてはサブテーマ1にて報告したが、結果返却時には、n-3PUFAおよびn-6PUFAの脂肪酸の機能の差異について、アラキドン酸代謝の視点から講義資料を準備し情報提供を行った。さらに、介入群ではn-3PUFAのレベルが高い場合、血漿中PCBレベルも高くなる傾向があることを資料により示した。

## 4 ．結果及び考察

## （１）試料の安定性に関する予備検討

PUFA 摂取量を推定するため、赤血球膜リン脂質中の PUFA 分析を行った。ヘモグロビンなどを含む赤血球成分中の PUFA については冷凍保存が難しく、化学分析を担当する分析機関への試料の送付方法について、本調査に先立ち予備検討を行った。その結果、冷凍保存以外のいずれの方法でも良好な結果が得られた（EPA について図（3）-1 に示す）。一方、赤血球をそのまま冷凍保管後に膜脂質を抽出した方法では、EPA の減少が観察され、過酸化などの変性が起きていることが示唆された。同様な傾向は AA および DHA でも観察された。このことから、赤血球試料については、EDTA 採血後に遠心処理で得た赤血球画分を 3 日以内に分析機関に送付し、その後にリン脂質中脂肪酸抽出・精製しガスクロマトグラフィー分析を行うことが適当と結論された。

次に、研究協力者のPUFA摂取レベルの推定を、血漿を用いて行うことが可能か、それとも赤血球膜構成リン脂質の分析が必須かを検討した。図（3）-2に、AA、EPAおよびDHAについて、血漿と赤血球膜リン脂質中の各脂肪酸の存在割合の関連性を示したが、いずれも統計学的に有意な相関が示された。EPAおよびDHAは比較的高い相関係数が示されたものの、AAにおいては関連性がやや低い値にとどまった。

栄養疫学分野では、PUFA摂取レベルを推定する指標として、直近の食事の影響を受けにくい赤血球膜中リン脂質PUFAの利用が適切と考えられている。このため、赤血球膜リン脂質中PUFAを基準として設定し、赤血球膜リン脂質中PUFAで研究協力者を4分位に分割した場合と、血浆中PUFAに基づいて4分位に分割した場合の、PUFA高濃度群を推定する的中率を計算した（表（3）-1）。その結果、AAでは的中率は0.43にとどまり、EPAおよびDHAではそれぞれ0.70と0.55であった。いずれも比較的高い値とは考えられたものの、血浆中PUFAによりPUFA高摂取群を推定すると多くの偽陽性が含まれることが示唆され、解析時の精度としては十分ではなく、血浆ではなく赤血球膜中リン脂質PUFA解析が必要であると判断された。
図（3）-1 保存方法による赤血球膜リン脂質中EPAの安定性。さまざまな方法で赤血球試料を冷蔵保管しPUFAを測定した。本図には、不安定なPUFAの一つであるEPAについて、総脂肪酸中の存在割合の変化を、赤血球試料の冷蔵保管（0～3日）または冷凍保管で比較した。

図（3）-2 血漿中脂肪酸値と赤血球膜リン脂質中脂肪酸の割合の関連性

表（3）-1 血漿中 PUFA に基づいて研究協力者を 4 分位に分割し、赤血球膜リン脂質中 PUFA で 4 分位に分割した時の PUFA 高濃度群を推定した時の感度、特異性および的中率
Cutoff	Sensitivity	Specificity	Prediction value
AA%	9.7	0.42	0.81	0.43
EPA%	1.9	0.70	0.90	0.70
DHA%	7.0	0.55	0.85	0.55
EPA/AA ratio	0.22	0.64	0.88	0.64
DHA/AA ratio	0.81	0.67	0.84	0.67
EPA+DHA/AA ratio	1.03	0.61	0.87	0.61

Predictive value (%)

= Probability x Sensitivity/100/(Probability x Sensitivity/100 + (100 - Probability) x (100 - Specificity)/100)

## （２）ベースライン調査および介入後の赤血球膜リン脂質中脂肪酸の全般的推移

ベースライン調査時、介入後1年目および2年目における赤血球膜リン脂質中脂肪酸組成の全般的な推移を表（3）-2および図（3）-3に示した。表（3）-2では、介入群または対照群の中での変化に加え、介入の効果について二元配置分散分析の結果を示した。図（3）-3では、各時期における介入群と対照群との2群の平均値の差を図中に示した。

赤血球膜リン脂質中の飽和脂肪酸（SFA）、一価不飽和脂肪酸（MUFA）、PUFA、n-6PUFAおよびAAなどについては、ベースライン調査時から介入1年目、2年目にかけて、介入群および対照群のいずれでも変化は観察されず、群間に差は観察されなかった。一方、n-3PUFA、EPA、DPA、DHA、(EPA+DHA)、DHA/AAおよび(EPA+DHA)/AAについては、介入に伴い減少する傾向が観察され、介入の有無と、介入開始からの時間との間に交互作用が認められた（表（3）-2では、交互作用の項は「指導x時間」と表記した）。n-3PUFAではEPA/AAのみ有意差が認められなかったが、全般的な傾向として、介入群において魚介類から主に摂取されるn-3PUFAの赤血球膜リン脂質中脂肪酸に占める割合が介入により減少し、AAに対する存在比も小さくなる傾向が観察された。以下、EPAとDHAに分けて述べる。

介入によって、赤血球膜リン脂質中のEPA組成は介入1年目で有意に減少（1.3%→1.1%）した（表（3）-2、図（3）-3）。しかし、介入1年目から2年目にかけての減少（1.1%→1.1%）は認められなかった。群間比較においては、対照群に比べて介入群では、ベースライン調査時のEPA組成は有意に高値であった。しかし、介入1年目および2年目のいずれの時点においても、両群間の有意差は認められなかった。我々のこれまでの研究において、魚介類由来のn-3PUFA摂取量を最も鋭敏に反映する指標は、赤血球膜リン脂質中のEPA組成であることが示されている $ ^{6} $ 。従って、介入群では、ベースライン調査時から介入1年目にかけて魚介類摂取量が減少し、EPA組成も減少したものの、介入1年目から2年目にかけてのさらなる減少はほとんどなかったと推察された。

赤血球膜リン脂質中DHAもEPA同様、介入1年目で有意に減少（7.4%→7.1%）し、介入1年目から2年目にかけては有意ではないものの減少傾向（7.1%→6.9%）が認められた。対照群と介入群間の比較においては、いずれの時点においても両群間の有意差は認められなかった。介入1年目から2年目にかけての赤血球膜リン脂質中のEPAおよびDHAの両者の差は、食事中EPAおよびDHAの生体に与える挙動の違いがそれぞれ影響したと考えられた。食事中EPAはすばやく赤血球膜リン脂質に反映されるのに対して、食事中DHAは赤血球のターンオーバーに伴ってゆっくり膜リン脂質に反映する $ ^{7} $ 。すでに述べたとおり、介入群ではベースライン調査時から介入1年目にかけて魚介類摂取量が減少したと推測されるが、その魚介類摂取量の変化に伴う赤血球膜リン脂質中DHAの変化が、介
入1年目から2年目にかけて現れたと考えられた。胎児期から乳児期においては、DHAが脳神経細胞に急速に蓄積され $ ^{1} $ 、出産を控えた若年女性では、体内DHA量を十分に蓄えておくことが大切と考えられている $ ^{8} $ 。介入に伴う赤血球膜リン脂質中DHA組成の減少傾向がいつまで続くかについては、今後さらに観察が必要と考えられた。

## （３）ベースライン調査時における赤血球膜リン脂質中脂肪酸と基本属性

赤血球膜リン脂質中脂肪酸組成に影響を与える要因を検索するため、ベースライン調査時に観察された赤血球膜リン脂質中脂肪酸組成のうちEPA、DHA、EPA/AAおよびDHA/AAに着目し、食物摂取頻度調査から算出されたエネルギー摂取および各栄養素摂取量との関連を検討した。食物摂取については、自記式食事歴法質問票（DHQL）およびその簡易版（BDHQ）を用いたので、それぞれについて記載した（表（3）-3および4）。

DHQL（表（3）-3）では、EPA、DHA、EPA/AAおよびDHA/AAのいずれも概ね同じ傾向が観察され、たんぱく質摂取量および炭水化物摂取量が増加するとn-3PUFAの割合が増加した。食事中のn-3PUFAが増えた場合、または魚介類摂取量が増えた場合に、n-3PUFAの割合が増加し、特に、干物、白身の魚、背が青い魚、赤身の魚、牡蛎および魚卵の摂取量が多いと赤血球膜リン脂質中n-3PUFAが増加した。DHQLに対して、その簡易版であるBDHQにおいても、ほぼ同様の傾向が観察された（表（3）-4）。

魚介類摂取については、DHQLとは別に魚介類の摂取頻度を6件法にて調査した。「月に1回食べる」と「ほとんど食べない」をまとめて5件法で解析した結果を表（3）-5に示した。SFAおよびPUFAには魚介類の摂取頻度との間に関連性は認められなかったが、MUFA、n-6PUFAおよびAAは魚介類摂取頻度が増えると減少し、一方でn-3PUFAに関連する指標は魚介類摂取頻度が増えると増加した。このうち、DHAおよびDHA/AAについて、それぞれ図（3）-4に示した。

n-3PUFAは主に海産物から摂取することがわかっており、この結果は予想されたものであるが、魚摂取量が高い群で赤血球膜中リン脂質脂肪酸におけるn-3PUFAの割合が高いことがあらためて確認された。また、DHQLおよびBDHQLの有用性についても確認することができ、特に簡易版であるBDHQでもDHQLとほぼ同等の精度であることが示唆された。DHQL及びBDHQとの相関係数は、赤血球膜リン脂質中EPA組成とEPAエネルギー比率間において高値であった（表（3）-2と表（3）-3、図（3）-2）。質問票調査から計算したEPAおよびDHA摂取量の推計値と血液脂肪酸EPAおよびDHA組成との相関係数は0.43であることが報告されている $ ^{9} $ 。本研究では、両者の相関係数は0.50とそれより高く、DHQLの妥当性は良好であったと考えられた。同様に、魚介類摂取を6件法で聞き取る質問項目の有用性も確認することができた。

なお、年齢、身長およびBMIと、赤血球膜リン脂質中脂肪酸の構成との関連について、介入群および対照群別に、介入期間中の関連性を表（3）-6に整理した。系統的な関連性は見いだされなかったものの、年齢については、n-6PUFAとの間に負の相関係数が観察され、一方、n-3PUFAについては年齢との間に正の関連性が観察された。年齢とともに生活様式などが推移するためではないかと推測された。
表(3)-2 赤血球膜PL中脂肪酸の割合

Intervension	Control	指導×時間p1)
Mean	SD	Median	Mean	SD	Median
SFA(%)	Baseline	44.2	2.1	44.5	44.4	1.7	44.6	ns
1yr	44.0	1.1	43.8	44.2	1.1	44.2
2yr	43.7	1.1	43.6	43.5	1.3	43.5
MUFA(%)	Baseline	19.0	1.0	19.0	18.8	1.0	18.9	ns
1yr	19.6	0.9	19.6	19.3	0.7	19.3
2yr	20.6	0.8	20.6	20.4	0.9	20.4
PUFA(%)	Baseline	36.8	2.2	36.6	36.7	1.9	36.4	ns
1yr	36.4	1.4	36.4	36.5	1.3	36.4
2yr	35.7	1.1	35.8	36.2	1.3	36.1
total LCPUFA(%)	Baseline	27.0	2.1	26.5	26.7	1.7	26.5	ns
1yr	26.3	1.6	26.2	26.8	1.2	26.8
2yr	25.9	1.6	25.6	26.5	1.3	26.5
n-6 PUFA(%)	Baseline	25.7	1.9	25.6	26.1	1.9	26.2	ns
1yr	25.8	1.5	25.9	25.7	1.6	26.0
2yr	25.3	1.3	25.5	25.5	1.7	25.8
n-6LCPUFA(%)	Baseline	16.0	1.5	16.0	16.2	1.6	16.0	ns
1yr	15.9	1.4	15.7	16.2	1.4	16.3
2yr	15.8	1.2	15.9	16.0	1.3	16.3
20:4n-6(AA)(%)	Baseline	12.6	1.0	12.8	12.8	1.0	12.8	ns
1yr	12.6	1.0	12.7	12.9	0.9	13.1
2yr	12.4	0.9	12.6	12.6	0.9	12.7
n-3 PUFA(%)	Baseline	11.1	1.9	11.0	a	10.6	1.5	10.9	b	***
1yr	10.6	1.5	10.4	b	10.9	1.8	10.9	ab
2yr	10.4	1.6	10.1	b	10.7	1.6	10.4	ab
n-3LCPUFA(%)	Baseline	11.0	1.9	11.0	a	10.5	1.5	10.7	b	***
1yr	10.4	1.5	10.2	b	10.6	1.8	10.7	ab
2yr	10.1	1.6	9.9	b	10.4	1.6	10.1	b
20:5n-3(EPA)(%)	Baseline	1.3	0.5	1.2	a	1.1	0.4	1.1	b	*
1yr	1.1	0.4	1.0	b	1.1	0.5	1.0	b
2yr	1.1	0.5	1.0	ab	1.1	0.5	0.9	ab
22:5n-3(DPA)(%)	Baseline	2.3	0.3	2.2	a	2.2	0.2	2.2	b	***
1yr	2.2	0.2	2.2	bc	2.2	0.3	2.1	bc
2yr	2.1	0.2	2.1	c	2.1	0.3	2.1	bc
22:6n-3(DHA)(%)	Baseline	7.4	1.2	7.4	a	7.2	1.0	7.3	abc	**
1yr	7.1	1.0	7.1	bc	7.4	1.2	7.4	ab
2yr	6.9	1.0	6.7	c	7.2	1.0	7.1	abc
(EPA+DHA)(%)	Baseline	8.7	1.6	8.6	a	8.3	1.3	8.5	ab	**
1yr	8.2	1.3	8.1	b	8.5	1.5	8.5	ab
2yr	8.0	1.5	7.6	b	8.3	1.4	8.0	ab
EPA/AA	Baseline	0.10	0.04	0.09	0.09	0.04	0.08	ns
1yr	0.09	0.04	0.08	0.09	0.04	0.08
2yr	0.09	0.05	0.08	0.09	0.04	0.08
DHA/AA	Baseline	0.6	0.1	0.6	a	0.6	0.1	0.6	ab	**
1yr	0.6	0.1	0.6	ab	0.6	0.1	0.6	ab
2yr	0.6	0.1	0.5	b	0.6	0.1	0.5	ab
(EPA+DHA)/AA	Baseline	0.7	0.1	0.7	a	0.7	0.1	0.7	b	**
1yr	0.7	0.1	0.6	b	0.7	0.2	0.6	ab
2yr	0.6	0.1	0.6	b	0.7	0.1	0.6	ab

PL：リン脂質。 $ ^{1)} $ 検定は反復測定のある二元配置分散分析によって行い、「指導」×「時間」に交互作用のある場合にTukeyのHSD検定を行った。異なるアルファベット間に有意差あり。（正規性および等分散性を確認し、必要に応じて対数変換あるいは外れ値処理を行った。）
図(3)-3 赤血球膜リン脂質中脂肪酸の変化
表（3）-3 ベースライン調査時のエネルギーおよび各栄養素摂取量（DHQLによる）と赤血球膜リン脂質中脂肪酸との相関係数（Spearmanの順位相関係数 *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001）

摂取量	赤血球膜PL中脂肪酸
EPA	DHA	EPA/AA	DHA/AA
エネルギー-kcal	0.141	0.133	0.124	0.126
たんぱく質g	0.057	0.016	0.064	0.041
たんぱく質En%	0.378 ***	0.262 **	0.352 ***	0.281 **
脂質g	0.040	0.038	0.028	0.029
脂質En%	0.030	0.007	0.018	0.001
炭水化物g	0.193 *	0.205 *	0.166	0.175 *
炭水化物En%	0.110	0.068	0.086	0.047
SFAg	0.064	0.102	0.044	0.066
SFA En%	0.005	0.103	0.005	0.044
SFAg/脂質g	0.097	0.206 *	0.065	0.117
MUFAg	0.034	0.000	0.026	0.003
MUFA En%	0.037	0.071	0.023	0.044
MUFA g/脂質g	0.007	0.139	0.014	0.087
PUFAg	0.015	0.049	0.015	0.032
PUFA En%	0.160	0.199 *	0.129	0.146
PUFA g/脂質g	0.182 *	0.222 *	0.148	0.153
n-3PUFA g	0.128	0.135	0.121	0.122
n-3PUFA En%	0.288 ***	0.273 **	0.262 **	0.248 **
n-3PUFA g/脂質g	0.362 ***	0.318 ***	0.332 ***	0.296 ***
n-6PUFA g	0.025	0.025	0.028	0.003
n-6PUFA En%	0.103	0.157	0.072	0.102
n-6PUFA g/脂質g	0.078	0.158	0.039	0.064
C20:5n-3 g	0.474 ***	0.324 ***	0.473 ***	0.396 ***
C20:5n-3 En%	0.549 ***	0.404 ***	0.540 ***	0.464 ***
C20:5n-3 g/脂質g	0.519 ***	0.370 ***	0.511 ***	0.434 ***
C22:6n-3 g	0.423 ***	0.279 **	0.423 ***	0.350 ***
C22:6n-3 En%	0.524 ***	0.384 ***	0.513 ***	0.440 ***
C22:6n-3 g/脂質g	0.515 ***	0.359 ***	0.504 ***	0.418 ***
動物性油脂g	0.002	0.150	0.020	0.155
植物性油脂g	0.039	0.029	0.043	0.054
魚介類g	0.459 ***	0.299 ***	0.458 ***	0.368 ***
肉類g	0.029	0.074	0.009	0.025
卵類g	0.020	0.055	0.015	0.059
乳類g	0.044	0.130	0.077	0.016
バター	0.002	0.150	0.020	0.155
ソフマーカリン	0.059	0.022	0.047	0.003
マヨネ-ズ	0.047	0.031	0.047	0.034
ドレッシング	0.147	0.235 **	0.145	0.227 **
調理油(サラダオイル)	0.034	0.070	0.023	0.045
干物鯖	0.427 ***	0.308 ***	0.408 ***	0.319 ***
骨ごと	0.234 **	0.098	0.251 **	0.178 *
ツサ缶	0.035	0.038	0.044	0.015
うなぎ	0.054	0.006	0.073	0.060
白身	0.380 ***	0.268 **	0.388 ***	0.353 ***
青身	0.357 ***	0.230 **	0.364 ***	0.307 ***
赤身	0.314 ***	0.171 *	0.312 ***	0.219 *
練り製品	0.146	0.153	0.164	0.201 *
えび	0.146	0.136	0.130	0.101
イカ蛸	0.197 *	0.011	0.196 *	0.060
牡蛎(かき)	0.278 **	0.124	0.277 **	0.196 *
他の貝類	0.183 *	0.109	0.153	0.071
魚のたまご	0.243 **	0.262 **	0.216 *	0.223 **
表（3）-4 ベースライン調査時のエネルギーおよび各栄養素摂取量（BDHQによる）と赤血球膜リン脂質中脂肪酸との相関係数（Spearmanの順位相関係数 *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001）

摂取量	赤血球膜P L中脂肪酸
EPA	DHA	EPA/AA	DHA/AA
エネルギー-kcal	0.023	0.072	0.022	0.057
たんぱく質g	0.206 *	0.212 *	0.202 *	0.235 **
たんぱく質En%	0.345 ***	0.258 **	0.339 ***	0.320 ***
脂質g	0.076	0.135	0.068	0.120
脂質En%	0.098	0.092	0.088	0.099
炭水化物g	-0.065	-0.032	-0.058	-0.034
炭水化物En%	-0.157	-0.144	-0.143	-0.150
SFAg	0.072	0.078	0.069	0.089
SFA En%	0.075	-0.013	0.072	0.028
SFAg/脂質g	-0.065	-0.198 *	-0.057	-0.135
MUFAg	0.059	0.136	0.048	0.108
MUFA En%	0.057	0.104	0.044	0.083
MUFA g/脂質g	-0.094	0.080	-0.111	-0.008
PUFAg	0.081	0.159	0.070	0.125
PUFA En%	0.081	0.159	0.070	0.125
PUFA g/脂質g	0.081	0.159	0.070	0.125
n-3PUFA g	0.181 *	0.198 *	0.179 *	0.198 *
n-3PUFA En%	0.253 **	0.237 **	0.253 **	0.253 **
n-3PUFA g/脂質g	0.225 **	0.155	0.227 **	0.170 *
n-6PUFA g	0.045	0.135	0.033	0.094
n-6PUFA En%	0.035	0.133	0.021	0.086
n-6PUFA g/脂質g	-0.118	0.024	-0.127	-0.050
C20:5n-3 g	0.407 ***	0.260 **	0.416 ***	0.339 ***
C20:5n-3 En%	0.434 ***	0.249 **	0.444 ***	0.331 ***
C20:5n-3 g/脂質g	0.373 ***	0.177 *	0.384 ***	0.259 **
C22:6n-3 g	0.381 ***	0.260 **	0.388 ***	0.334 ***
C22:6n-3 En%	0.425 ***	0.259 **	0.431 ***	0.330 ***
C22:6n-3 g/脂質g	0.363 ***	0.183 *	0.370 ***	0.255 **
いか・たこ・えび・貝g	0.234 **	0.171 *	0.205 *	0.157
骨ごと魚g	0.225 **	0.097	0.242 **	0.164
ツナ缶g	0.020	-0.069	0.010	-0.072
干物g	0.350 ***	0.328 ***	0.341 ***	0.349 ***
脂がのった魚g	0.304 ***	0.218 *	0.317 ***	0.281 **
脂が少ない魚g	0.261 **	0.231 **	0.252 **	0.233 **
生魚g	0.173 *	0.183 *	0.176 *	0.206 *
焼き魚g	0.417 ***	0.325 ***	0.413 ***	0.364 ***
煮魚g	0.232 **	0.162	0.235 **	0.198 *
てんぷら・揚げ魚g	0.165	0.119	0.147	0.097
表(3)-5 魚介類の摂取頻度と赤血球膜リン脂質中脂肪酸との関係（ベースライン調査時）

毎日1回以上食べる	週に3から5回食べる	週に1～2回食べる	月に2～3回食べる	月に1回食べる(ほとんど食べないを含む)
n	6	38	57	23	9
SFA %	44.4	44.5	44.1	44.1	44.7
MUFA %	17.9	b	18.9	ab	18.9	ab	19.7	a	<0.05
PUFA %	37.7	36.6	36.9	37.0	35.6
n-3PUFA %	13.3	a	11.6	b	10.2	b	9.2	b	<0.001
n-6PUFA %	24.3	bc	24.9	b	26.2	ac	26.8	a	abc	<0.001
AA %	12.1	a	12.4	a	12.9	a	13.1	a	12.8	a
log EPA %	0.3	a	0.2	a	0.0	b	0.0	bc	-0.2	c
DPA %	2.5	a	2.3	ab	2.2	ab	2.2	ab	2.0	b
DHA %	8.6	a	7.7	ab	7.2	bc	6.9	c	6.3	c
log (EPA/AA)	-0.8	a	-0.9	a	-1.1	b	-1.2	b	-1.3	b
DHA/AA	0.7	a	0.6	a	0.6	b	0.5	b	0.5	b

平均值を表示。

一元配置分散分析で有意差の見られた場合、TukeyのHSD多重比較検定を行った。異なるアルファベット間に有意差有り。

魚介類摂取頻度（ベースライン調査時調査）

図（3）-4 赤血球膜リン脂質中DHAおよびDHA/AAと、ベースライン調査時における魚介類摂取頻度の関連性。魚介類摂取頻度は「1：毎日一回以上食べる」～「5：月に一回食べるか、またはほとんど食べない」の5件法とした。
表（3）-6年齢、身体計測値と赤血球膜リン脂質中脂肪酸(%)との相関（Spearmanの順位相関係数*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001）

RBC-PL	Baseline	1yr	2yr
介入群	对照群	介入群	对照群	介入群	对照群
Age
SFA	0.076	0.101	0.228	0.087	-0.098	0.015
MUFA	-0.089	0.218	0.008	0.287	-0.143	0.168
PUFA	-0.009	-0.225	-0.111	-0.198	0.202	-0.193
n-3PUFA	0.216	0.036	0.263	0.100	0.393	**	0.123
n-6PUFA	-0.275	*	-0.412	***	-0.226	-0.214
AA	-0.179	-0.078	-0.258	0.037	-0.196	0.037
EPA	0.220	0.034	0.316	0.096	0.333	**	0.040
DPA	0.046	0.100	0.121	0.089	0.166	0.140
DHA	0.221	0.088	0.207	0.143	0.372	**	0.172
EPA/AA	0.261	*	0.370	0.069	0.348	**	0.020
DHA/AA	0.300	*	0.327	0.104	0.397	**	0.071
Height
SFA	0.225	0.244	*	0.241	0.131	0.309	*
MUFA	-0.103	-0.117	0.028	-0.047	-0.114	-0.185
PUFA	-0.171	-0.257	*	0.232	-0.020	-0.206
n-3PUFA	0.034	-0.318	**	0.005	0.017	-0.150
n-6PUFA	-0.236	0.068	-0.176	0.171	-0.115	0.030
AA	-0.141	0.087	-0.141	0.214	-0.064	0.094
EPA	0.103	-0.248	*	0.047	0.018	-0.199
DPA	0.079	-0.197	0.154	0.008	0.112	-0.112
DHA	-0.001	-0.296	*	-0.020	0.019	-0.103
EPA/AA	0.116	-0.237	0.077	-0.143	0.033	-0.202
DHA/AA	0.071	-0.284	*	0.066	-0.073	-0.135
Weight
SFA	-0.030	0.242	*	0.064	-0.208	0.056	0.315	*
MUFA	-0.023	-0.264	*	-0.065	-0.094	-0.082	-0.221
PUFA	-0.044	-0.158	0.005	0.223	0.048	-0.118
n-3PUFA	-0.084	-0.183	-0.151	0.016	-0.282	*	-0.170
n-6PUFA	0.069	0.055	0.117	0.144	0.296	*	0.105
AA	0.068	0.039	0.104	0.114	0.231	0.100
EPA	-0.092	-0.032	-0.158	-0.010	-0.209	-0.089
DPA	0.088	-0.073	0.065	0.116	-0.012	-0.105
DHA	-0.113	-0.257	*	0.042	-0.244	-0.169
EPA/AA	-0.115	-0.037	-0.183	-0.045	-0.217	-0.088
DHA/AA	-0.138	-0.224	-0.161	-0.015	-0.327	*	-0.191
BMI
SFA	-0.121	0.158	-0.010	-0.054	0.070	0.161
MUFA	0.020	-0.202	-0.089	-0.075	-0.018	-0.130
PUFA	0.029	-0.073	0.055	0.065	-0.011	-0.019
n-3PUFA	-0.178	-0.060	-0.192	-0.005	-0.401	**	-0.090
n-6PUFA	0.261	*	0.237	0.077	0.451	***	0.091
AA	0.207	0.007	0.198	0.011	0.344	**	0.017
EPA	-0.231	0.098	-0.194	-0.003	-0.302	*	0.006
DPA	0.018	-0.026	0.012	0.063	-0.139	-0.036
DHA	-0.187	-0.146	-0.209	-0.001	-0.366	**	-0.103
EPA/AA	-0.267	*	0.086	-0.239	-0.324	*	0.017
DHA/AA	-0.273	*	-0.123	-0.245	-0.015	-0.465	***	-0.099
表(3)-7 ベースライン調査時の魚摂取頻度別による赤血球膜PL中脂肪酸の変化(%)

毎日1回以上食べる	週に3から5回食べる	週に1～2回食べる	月に2～3回食べる	月に1回食べる(ほとんど食べないを含む)	p
介入群
log EPA	Baseline	5	0.27	a	19	0.18	a	25	0.04	b	12	-0.04	b	5	-0.14	b	<0.001
1yr	5	0.10	a	19	0.07	a	24	0.00	a	10	-0.09	a	5	-0.09	a	<0.05
2yr	4	0.12	ab	18	0.13	a	20	-0.03	b	12	-0.09	b	5	-0.09	ab	<0.01
DHA	Baseline	5	8.41	a	19	7.82	a	25	7.50	ab	12	6.86	ab	5	6.17	b	<0.01
1yr	5	7.55	19	7.40	24	7.00	10	6.77	5	6.86	NS
2yr	4	7.69	a	18	7.30	a	20	6.76	a	12	6.44	a	5	6.19	a	<0.05
log EPA/AA	Baseline	5	-0.82	a	19	-0.91	a	25	-1.07	b	12	-1.15	b	5	-1.22	b	<0.001
1yr	5	-0.98	19	-1.03	24	-1.11	10	-1.19	5	-1.18	NS
2yr	4	-0.97	ab	18	-0.96	a	20	-1.13	ab	12	-1.19	b	5	-1.17	ab	<0.01
DHA/AA	Baseline	5	0.68	a	19	0.64	a	25	0.58	ab	12	0.53	b	5	0.52	ab	<0.01
1yr	5	0.63	19	0.59	24	0.55	10	0.54	5	0.57	NS
2yr	4	0.63	18	0.60	20	0.54	12	0.51	5	0.51	NS
対照群
log EPA	Baseline	1	0.40	ab	19	0.13	a	32	-0.02	bc	11	-0.06	c	4	-0.17	c	<0.001
1yr	1	0.43	a	16	0.09	a	29	-0.03	a	10	-0.02	a	3	-0.10	a	<0.05
2yr	1	0.40	a	17	0.09	ab	30	-0.02	ab	11	0.00	ab	4	-0.13	b	<0.01
DHA	Baseline	1	9.77	a	19	7.63	ab	32	7.04	ab	11	7.01	ab	4	6.50	b	<0.05
1yr	1	8.47	16	7.72	29	7.34	10	7.06	3	6.16	NS
2yr	1	9.22	17	7.38	30	7.05	11	7.18	4	6.61	NS
log EPA/AA	Baseline	1	-0.64	ab	19	-0.97	a	32	-1.12	bc	11	-1.18	c	4	-1.31	c	<0.001
1yr	1	-0.59	a	16	-1.02	ab	29	-1.14	b	10	-1.13	ab	3	-1.20	b	<0.05
2yr	1	-0.62	a	17	-1.02	ab	30	-1.11	ab	11	-1.10	ab	4	-1.25	b	<0.05
DHA/AA	Baseline	1	0.89	a	19	0.61	b	32	0.55	b	11	0.54	b	4	0.48	b	<0.001
1yr	1	0.82	16	0.60	29	0.57	10	0.55	3	0.48	NS
2yr	1	0.87	a	17	0.58	ab	30	0.57	ab	11	0.56	ab	4	0.50	b	<0.05

ベースライン調査時の魚摂取頻度別の群間の比較を行った。一元配置分散分析で有意差の見られた場合、TukeyのHSD多重比較検定を行った。異なるアルファベット間に有意差有り。
図(3)-5 ベースライン調査時における魚介類摂取頻度別の赤血球膜リン脂質中PUFAの変化
## （４）魚摂取頻度別の赤血球膜中脂肪酸組成の推移

介入効果については、介入群の魚介類多食群で効果が期待される一方、もともと魚介類を食べていない少食群では効果はあまり期待できない。このため、ベースライン調査時の魚介類摂取頻度（6件法で聞き取り、「月に1回食べる」と「ほとんど食べない」を合わせて5件法で解析）ごとに、赤血球膜中リン脂質脂肪酸の組成の推移を比較した（表（3）-7および図（3）-5）。

すでに述べたように、介入群全体でn-3PUFAの割合が減少する傾向が観察されたが、魚介類多食群でベースライン調査時から介入1年目にかけての減少が顕著であった。一方、魚介類少食群に関しては、介入期間を通してn-3PUFAに大きな変動はなく、また対照群の少食群と比較しても、n-3PUFAの欠乏を示唆するような結果は観察されなかった。さらに、介入群の魚介類多食群における赤血球膜n-3PUFAのレベルは、介入期間のいずれにおいても少食群より高いレベルを維持していることが確認された。以上の結果から、介入により、魚介類多食群では介入効果が観察されたこと、しかしもともと魚介類を食べない群では、それ以上に赤血球膜n-3PUFAが減少することはないことが示された。

## （5） まとめ

本介入研究では、POPs汚染度の高い魚介類の摂取を抑制する一方で、栄養学的にベネフィットと考えられるn-3PUFAの摂取量を維持することが望ましいと考え、魚介類の摂取に関する情報提供を行った。その際に、POPs汚染度の高い魚ばかりではなく、魚介類全般の摂取量の著しい抑制が起こることを懸念し、赤血球膜中リン脂質脂肪酸の測定を行った。その結果、介入群ではベースライン調査時から比較して、介入1年目にかけて赤血球膜中リン脂質脂肪酸EPAおよびDHAが減少し、DHAは介入2年目にかけても減少する傾向が観察された。介入群におけるこのn-3PUFAの減少が栄養学的に問題となるレベルであるかどうかについて、検討が必要となる。まず、介入群と対照群との間に、群間では統計学的な差は観察されなかった。さらに、EPAおよびDHAの血中レベルについて、基準値となるような指標はなく、欠乏の有無を厳密に判断することは難しい。ただし、魚介類少食群において、介入群および対照群ともにEPAおよびDHAのレベルは相対的に低いレベルであったが、その集団においてn-3PUFA欠乏に起因した健康影響がないと仮定した場合、介入群多食群の血中n-3PUFAのレベルは、介入後であっても少食群のレベルよりも高い値であった。以上から、魚介類由来のn-3PUFA摂取について、介入に伴う栄養学的な問題は、起きてはいないと判断された。

今後の課題として、n-3PUFA摂取の観点からは2点が指摘される。まず第1に、上記のように介入に伴うn-3PUFAの欠乏は起きていないと考えられるものの、一般に、若年女性のEPAおよびDHA摂取量は中高年者に比べて少なく、胎児や乳児の発達を考慮すれば、若年女性のn-3PUFAの積極的な摂取が推奨されている。n-3PUFAの摂取量を維持しながら、POPs体内負荷量を軽減する方法の開発が必要と考えられた。ただし、このあたりの議論を進めるには、エビデンスに基づいたn-3PUFA、特にEPAおよびDHA摂取量に関する知見が必要と考えられた。第2に、赤血球膜リン脂質中DHA組成は介入開始から介入2年目にいたっても、減少傾向が続いている。この減少傾向がいつまで持続するのかを検証する必要があると考えられた。
## 5 ．本研究により得られた成果

## （1） 科学的意義

魚介類摂取には、POPsばく露というリスクがある一方で、n-3PUFAをはじめとする栄養素の摂取というベネフィットの両面性がある。POPs体内負荷量低減の介入調査を進めて行く上で、リスクとベネフィットのバランスが重要と考えられた。そこで本サブテーマは、魚介類摂取のベネフィット、特にn-3PUFAの摂取を正確に推定することを担当した。その結果、介入群、特に魚介類多食群で赤血球膜中リン脂質脂肪酸に占めるn-3PUFAのレベルが低下することが示され、介入の影響を脂質摂取からも確認するとともに、リスクとベネフィットが表と裏の関係にあることをあらためて示す結果となった。n-3PUFAといった魚介類由来の脂肪酸の利用については、まだまだ未解決の課題があるものの、今後もその有効利用を検討すべきと考えられる。介入に伴うn-3PUFA摂取量の減少に満足せず、その解決法の立案が必要であろう。さらに、市民へのリスク情報提供を考えた場合に、リスクに関する情報のみではなく、魚介類摂取のベネフィットを考慮に入れた研究の結果を示すことが重要と考えられた。

## （２）環境政策への貢献

POPs体内負荷量を軽減するための介入研究において、魚介類摂取の行き過ぎた抑制が、魚介類から供給される栄養素であるn-3PUFAの深刻な欠乏を招くことが懸念された。このため本サブテーマでは、研究協力者のn-3PUFA摂取量を把握するため赤血球膜中リン脂質脂肪酸の解析を行った。その結果、介入群のいずれの群でも、赤血球膜中リン脂質n-3PUFAレベルの過剰な減少はないことを確かめ、介入研究の安全性を確認することができた。ただし、若年女性のオメガ3インデックス（すなわり、n-3PUFAとn-6PUFAのバランス）の適正值に関する知見は乏しく、栄養学的な欠乏の有無についての議論は難しい。若年女性におけるn-3PUFA摂取量に関する基準値について今後の研究が必要であることが強く示唆された。

## 6 ．国際共同研究等の状況

特に記載すべき事項はない。

## 7 ．研究成果の発表状況

## （1） 誌上発表

1）川端輝江、仲井邦彥、萩原千絵、黒川修行、村田勝敬、柳沼 梢、佐藤 洋．日衛誌 2011:66, 108-114.

「生物学的モニタリングのための血漿および赤血球膜リン脂質中長鎖多価不飽和脂肪酸の比較」

## （2） 口頭発表（学会等）

1）川端輝江、仲井邦彦、萩原千絵、金子愛、木村佳奈、小谷ひかり、佐々木友紀、富岡恵、土屋日登美、根岸清香、長谷川恵那、黒川修行、村田勝敬、柳沼梢、佐藤洋．日本脂質栄養学会第19回大会（2010年9月3～4日、犬山市）．（示說）
「疫学調査における多価不飽和脂肪酸の生物学的モニタリング法」

2）白石彩、Yueying He、佐々木裕子、川端輝江、柳沼梢、島田美幸、黒川修行、中塚晴夫、仲井邦彦、八重樫伸生、村田勝敬、佐藤洋．第44回日本栄養・食糧学会東北支部大会（2010年11月6日、仙台市）．（口演）

「若年女性のn3系不飽和脂肪酸摂取と環境由来化学物質ばく露」

3）仲井邦彦、黒川修行、川端輝江、佐々木裕子、柳沼梢、島田美幸、白石彩、中塚晴夫、村田勝敬．第81回日本衛生学会学術総会（2011年3月25～28日、東京都）．（口演、ただし東日本大震災で誌上発表に変更）

「環境由来化学物質ばく露の体内蓄積量低減を目指した介入研究」

4）仲井邦彦、黒川修行、佐々木裕子、川端輝江、中塚晴夫、村田勝敬．第65回日本栄養・食糧学会大会（2011年5月13～15日、東京都）．（口演）

「環境由来化学物質ばく露低減の介入研究－研究デザインについて」

5）白石彩、仲井邦彦、佐々木裕子、川端輝江、柳沼梢、島田美幸、龍田希、黒川修行、中塚晴夫、八重樫伸夫、村田勝敬．第65回日本栄養・食糧学会大会（2011年5月13～15日、東京都）．（口演）

「環境由来化学物質ぼく露低減の介入研究－ベースライン調査結果から」

6）佐々木裕子、白石彩、仲井邦彦、黒川修行、川端輝江、中塚晴夫、村田勝敬．第65回日本栄養・食糧学会大会（2011年5月13～15日、東京都）．（口演）

「環境由来化学物質ばく露低減の介入研究－魚介類制限による鉄欠乏への影響」

7）仲井邦彦、白石彩、黒川修行、佐々木裕子、川端輝江、中塚晴夫、柳沼梢、龍田希、八重樫伸生、村田勝敬．日本脂質栄養学会第20回大会（2011年9月2-3日、坂戸市）（示説）「環境由来化学物質のばく露回避を意図した介入研究について－研究デザイン」

8）白石彩、仲井邦彦、佐木裕子、川端辉江、柳沼梢、島田美幸、黒川修行、中塚晴夫、八重樫伸生、村田勝敬．日本脂質栄養学会第20回大会（2011年9月2-3日、坂戸市）（示説）

「環境由来化学物質のばく露回避を意図した介入研究について- ベースライン調査結果」

「環境由来化学物質のばく露回避を意図した介入研究について—介入を伴う赤血球膜リン脂質中の脂肪酸の変化—」

## （3） 出願特許

特に記載すべき事項はない。

## （４）シンポジウム、セミナーの開催（主催のもの）

特に記載すべき事項はない。
## （５）マスコミ等への公表・報道等

特に記載すべき事項はない。

## (6) その他

特に記載すべき事項はない。

### 8 \. 引用文献

1) Martinez M. Tissue levels of polyunsaturated fatty acids during early human development.

J Pediatr. 1992, 120: S129-S138.

2) Birch EE, Garfield S, Hoffman DR, Uauy R, Birch DG. A randomized controlled trial of early dietary supply of long-chain polyunsaturated fatty acids and mental development in term infants. Dev Med Child Neurol. 2000, 42: 174-81.

3) Arab L, Akbar J. Biomarkers and the measurement of fatty acids. Public Health Nutr. 2002, 5: 865-871.

4) Sarkadi-Nagy E, Wijendran V, Diau GY, Chao AC, Hsieh AT, Turpeinen A, Lawrence P, Nathanielsz PW, Brenna JT. Formula feeding potentiates docosahexaenoic and arachidonic acid biosynthesis in term and preterm baboon neonates. J Lipid Res. 2004, 45:71-80.

5) Hirota S, Adachi N, Gomyo T, Kawashima H, Kiso Y, Kawabata T. Low-dose arachidonic acid intake increases erythrocytes and plasma arachidonic acid in young women. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids. 2010, 83: 83-8.

6) Kawabata T, Hirota S, Hirayama T, Adachi N, Kaneko Y, Iwama N, Kamachi K, Araki E, Kawashima H, Kiso Y. Associations between dietary n-6 and n-3 fatty acids and arachidonic acid compositions in plasma and erythrocytes in young and elderly Japanese volunteers. Lipids Health Dis. 2011, 10: 138.

7) Brown AJ, Pang E, Roberts DC. Persistent changes in the fatty acid composition of erythrocyte membranes after moderate intake of n-3 polyunsaturated fatty acids: study design implications. Am J Clin Nutr. 1991, 54:668-73.

8) Bourre J. Dietary omega-3 fatty acids for women. Biomedicine & Pharmacotherapy 2007;61:105-112.

9) Kobayashi M, Sasaki S, Kawabata T, Hasegawa K, Tsugane S. JPHC. Validity of a self-administered food frequency questionnaire used in the 5-year follow-up survey of the JPHC Study Cohort I to assess fatty acid intake: comparison with dietary records and serum phospholipid level. J Epidemiol. 2003, 13: S64-S81.
# (4) 食品および栄養素摂取の評価に関する研究

宮城大学看護学部看護学科

中塚晴夫

平成22～23年度累計予算額：1，620千円（うち、平成23年度予算額：406千円）

予算額は、間接経費を含む。

[要旨] 難分解性有機污染物質（POPs）の体内負荷量の低減を目的として、介入群と対照群からなる介入研究を実施した。介入は、POPsの汚染源となる魚介類の種類を中心に情報提供する方法とした。介入効果は末梢血PCB濃度で検証が行われるが、POPs汚染度が高い魚介類には、多価不飽和脂肪酸（PUFA）をはじめ様々な栄養素が含まれており、介入に伴う栄養学的なデメリットについても正確な把握が必要となる。そこで本サブテーマでは、介入に伴う栄養学的な偏りが起きていないかを検証するため、24時間の自記式食物摂取調査による栄養調査を実施し、食物摂取の推定精度を上げるため携帯電話による食事のカメラ画像も収集し解析に用いた。

介入群では、介入後に食塩摂取量が低下し、魚介類摂取の低下に対応して肉類の摂取が増加した。魚介類と肉類の間で動物性食品の交換が起こったと考えられたが、肉類の消費量の増加に伴う飽和脂肪酸やPUFAの増加は観察されておらず、動物性食品の交換は栄養学的には問題ない範囲内でとどまっているものと判断された。

なお、ベースライン調査の結果は、現在の若年女性の食事実態をよく反映しており、熱量およびタンパク質を除き、鉄、ビタミンC、カルシウム、繊維総量など多くの栄養素で必要量を摂取していない状況が示された。介入を行う際に、対照群を含めて一般的な栄養学的指導を追加することの必要性が強く示唆された。

[キーワード] 難分解性有機汚染物質、体内負荷量低減、介入調査、層別ランダム化比較試験、栄養調査

### 1. はじめに

本研究は、若年女性の体内に蓄積しているPOPsなどの負荷量低減を目指す介入研究であり、その介入として、POPs汚染度が高い魚介類に関する情報を提供するとともに、デトックスを意図しアプラナ科野菜の利用を促すことを目指した。魚介類の摂取に関しては、魚介類全般に関する摂取の抑制ではなく、食物連鎖上位にある捕食者に相当する魚の摂取などの抑制が中心となると思われるものの、栄養学的な視点からは、魚介類にはn-3PUFAを筆頭に有用な栄養素が含まれていることから、魚介類全体の摂取量の機械的な削減が生じた場合に、摂取する栄養素の偏りが生じるとともに、魚介類の代わりに摂取される食材の成分について検討が必要と考えられた。このため介入調査を開始するにあたり、食物摂取に関する詳細な栄養調査が必要と考え、介入の実施とは別に2つのサブテーマを構成し、24時間自記式食事調査ならびに食物摂取頻度調査を行うこととした。このうち、本サブテーマでは24時間自記式食事調査を担当した。

自記式記録法の利点は比較的定量的な取扱が可能であり、食事の写真などを用いて栄養士など